MX2014006812A - [1,2,4] triazolopiridinas y su uso como inhibidores de fosfodiesterasa. - Google Patents

Abstract

La presente invención se relaciona con compuestos de [1,2,4]triazolopiridina nuevos con actividad inhibidora de fosfodiesterasa, así como su uso como agentes terapéuticos en el tratamiento de enfermedades y afecciones.

Description

[1,2,4] TRIAZOLOPIRIDINAS Y SU USO COMO INHIBIDORES DE FOSFODIESTERASA Campo de la invención La presente invención se refiere a compuestos de [1 , 2 , 4] triazolopiridina nuevos con actividad inhibitoria de fosfodiesterasa, así como a su uso como agentes terapéuticos en el tratamiento de enfermedades y afecciones inflamatorias.

Antecedentes de la invención Las fosfodiesterasas son enzimas que catalizan la hidrólisis de AMP cíclico y/o GMP cíclico en células a 5-AMP y 5 -GMP, respectivamente, y, como tales, son críticos para la regulación celular de los niveles de cAMP o cGMP. De las 11 fosfodiesterasas identificadas hasta el momento, la fosfodiesterasa (PDE) 4, PDE7 y PDE8 son selectivos para cAMp. PDE4 es el más importante modulador de cAMP expresado en células inmunes e inflamatorias tales como neutrófilos, macrófagos y linfocitos T (Z. Huang and J.A. Mancini, Current Med. Chem. 13, 2006, pp 3253 hasta 3262) . Como cAMP es un segundo mensajero clave en la modulación de las respuestas inflamatorias, PDE4 se ha encontrado que regula las respuestas inflamatorias de células inflamatorias mediante la modulación de citoquinas proinflamatorias tales como TNF-a, IL-2, IFN-?, GM-CSF y LTB4. Por lo tanto, la inhibición de PDE4 se ha convertido en un objetivo atractivo para la Ref.: 248629 terapia de enfermedades inflamatorias tales como asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD) , artritis reumatoide, dermatitis atópica, enfermedad inflamatoria del intestino tal como enfermedad de Crohn etc. (MD Houslay et al . , Drug Discovery Today 10 (22) , 2005, pp 1503-1519) . Como los pacientes de dermatitis atópica (AD) han aumentado la actividad de PDE, la inhibición de EDE4 también parece ser un tratamiento viable de AD (Journal of Investigative Dermatology (1986), 87 (3), 372-6).

La familia de genes de PDE4 consiste por lo menos de cuatro genes, A, B, C y D, que tienen un alto grado de homología (V. Boswell Smith y D. Spina, Curr. Opinión Investig. Drugs 6 (11) , 2006, pp. 1136-1141) . Las cuatro isoformas de PDE4 se expresan diferencialmente en diferentes tejidos y tipos de células. Por lo tanto, PDE4B se expresa predominantemente en monocitos y neutrófilos, pero no en células de la corteza y epiteliales, mientras que PDE4D se expresa en el pulmón, corteza, cerebelo y células T (C. Kroegel and M. Foerster, Ex . Opinión Investig. Drugs 16(1), 2007, pp 109-124) . Se ha especulado que la inhibición de PDE4D en el cerebro se asocia con los efectos adversos encontrados cuando se administran inhibidores de PDE4 clínicamente, principalmente náuseas y emesis, mientras que la inhibición de PDE4B está asociada con efectos antiinflamatorios (B. Lipworth, The Lancet 365, 2005, pp 167-175) . Sin embargo, los inhibidores de PDE desarrollados hasta el momento no se cree que sean específicos para cualquiera de las cuatro isoformas de PDE .

Numerosos inhibidores de PDE4 han sido estudiados por su efecto terapéutico en enfermedades inflamatorias, principalmente asma y EPOC.

El primero de estos, teofilina, es un inhibidor de fosfodiesterasa no selectivo débil, utilizado en el tratamiento de enfermedades respiratorias tales como asma y COPD. El tratamiento con teofilina puede, sin embargo, dar lug^r a dos efectos adversos ligeros y graves, por ejemplo, arritmia y convulsiones, restringir la utilidad clínica de teofilina (Kroegel and Foerster, supra) . Puesto que la fosfodiesterasa ha seguido siendo un objetivo atractivo para la terapia antiinflamatoria, varios otros inhibidores de PDE4, más selectivos se han investigado y desarrollado en un entorno clínico. El desarrollo clínico de muchos de los inhibidores de PDE4 de primera generación tales como rolipram se descontinuó debido a los efectos secundarios limitantes de la dosis, principalmente náuseas y emesis. Sin embargo, roflumilast fue aprobado en 2010 para COPD severa asociada con bronquitis crónica después de que se minimizan los efectos secundarios limitantes de la dosis, náuseas, diarrea y dolor de cabeza. Inhibidores de PDE4 de segunda generación con efectos adversos aparentemente menos pronunciados están actualmente en ensayos clínicos (Houslay, supra) . Inhibidores de PDE4 se describen por ejemplo en EP 0771794 y EP 0943613.

O 2008/125111, LEO Pharma A/S, describe compuestos de triazolopiridina con una potente actividad de inhibición de PDE . Estos compuestos incluyen un enlace que incluye un grupo carbonilo entre un sistema de anillo heterocíclico, bicíclico y un sistema de anillo monocíclico. Se ha mostrado para un compuesto relacionado, piclamilast, que el enlace es extremadamente importante para el posicionamiento del anillo monocíclico de tal manera que puede interactuar con la enzima PDE4 (Card G.L., et al, "Structural basis for the activity of drugs that inhibit phosphodiesterases" , Structure 2004 Dic; 12 ¡(12) ; 2233-47) , para dar el efecto inhibidor deseado.

WO 2010/069322, LEO Pharma A/S, describen compuestos de tri&zolopiridina, sin un enlace carbonilo entre el sistema de anillo bicíclico y monocíclico. Se han encontrado los compuestos que presentan actividad inhibidora de PDE4.

Hay una continua necesidad para el desarrollo de nuevos inhibidores de PDE4 que tienen una ventana terapéutica más favorable, en este caso, menos efectos adversos, al tiempo que conserva su efecto anti-inflamatorio terapéutico.

Sumario de la invención Es un objeto de la presente invención proporcionar nuevos compuestos que son potentes inhibidores de PDE4 que tienen un perfil de estabilidad en el tejido biológico que implica que solamente una muy baja exposición sistémica de los compuestos se observa en por ejemplo, administración tópica. Más precisamente, los compuestos de la presente invención tienen un alto aclaramiento en microsomas de hígado humano. Se hidrolizan rápidamente en la sangre entera humana, pero al mismo tiempo exhiben estabilidad hacia la hidrólisis enzimática en los queratinocitos humanos.

En un aspecto, la invención proporciona un compuesto de Fórmula (I) (i) en donde R es como se define a continuación.

En otro aspecto, la invención proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de fórmula general (I) como se definió anteriormente junto con un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable o portador farmacéuticamente aceptable, opcionalmente junto con uno o más compuestos terapéuticamente activos.

En otro aspecto, la invención proporciona el uso de un compuesto de la invención, para la fabricación de compiosiciones farmacéuticas para la profilaxis, tratamiento, prevención o mejora de una enfermedad, trastorno o afección sensible a la actividad inhibidora de PDE .

En aún otro aspecto, la invención proporciona un método para la profilaxis, el tratamiento, la prevención o alivio de enfermedades, trastornos o afecciones que responden a la actividad inhibidora de PDE4 , y cuyo método comprende el paso de administrar a un cuerpo animal vivo una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto de fórmula (I) de la invención .

Otros objetos de la invención serán evidentes para la persona experimentada en la técnica a partir de la siguiente descripción detallada y ejemplos.

Descripción detallada de la invención En un aspecto, la invención proporciona un compuesto de Fórimula (I) (I) cualquiera de sus estereoisómeros o cualquier mezcla de sus estereoisómeros o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde R es butilo ramificado.

En una modalidad de la presente invención, R es 1-metilpropilo, 2 -metilpropilo o ter-butilo.

En otra modalidad R es 1-metilpropilo .

En otra modalidad R es 2-metilpropilo.

En otra modalidad R es tere-butilo.

Los ejemplos específicos de compuestos de fórmula (I) se pueden seleccionar del grupo que consiste de: 1- [8-metoxi-5- (l-oxo-3H-isobenzofuran-5-il) - [1, 2,4] triazolo- [1, 5-a] piridin-2 - il] ciclopropanecacarboxilato de [ (1S) -1-metilpropilo] ; 1- [8-metoxi-5- (l-oxo-3H-isobenzofuran-5-il) - [1,2,4] triazolo [ , 5-a] piridin-2-il] cyclopropanecacarboxilato de [ (IR) -1-metilpropilo] ; 1- [8-metoxi-5- (l-oxo-3H-isobenzofuran-5-il) - [1,2,4] triazolo [ , 5-a] piridin-2-il] ciclopropanecacarboxilato [2 -Metilpropilo] ; 1- [8-Metoxi-5- (l-oxo-3H-isobenzofuran-5-il) - [1, , 4] triazolo [, 5-a] iridin-2-il] ciclopropanocarboxilato de tere-butilo; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

Definiciones Tal como se utiliza a través de la presente especificación y reivindicaciones anexas, los siguientes términos tienen el significado indicado: El término "tratamiento" tal como se utiliza aquí, significa el manejo y cuidado de un paciente con el propósito de combatir una enfermedad, trastorno o afección. El término pretende incluir el retraso de la progresión de la enfermedad, trastorno o afección, el alivio o mitigación de síntomas y complicaciones, y/o la cura o eliminación de la enfermedad, trastorno o afección. El paciente a tratar es preferiblemente un mamífero, en particular un ser humano.

Los términos "enfermedad" , "condición" y "trastorno" como se usa en el presente documento se utilizan indistintamente para especificar un estado de un paciente que no es el estado fisiológico normal del hombre.

El término "medicamento" como se usa en el presente documento significa una composición farmacéutica apropiada para administración del compuesto farmacéuticamente activo a un jpaciente.

El término "farmacéuticamente aceptable" tal como se utiliza en este documento significa apropiado para aplicaciones farmacéuticas normales, en este caso, no dando lugar a ningún evento adverso en pacientes, etc.

El término "sal farmacéuticamente aceptable" pretende indicar sales preparadas por reacción de un compuesto de fórmula I con un ácido inorgánico u orgánico apropiado, tal como ácido clorhídrico, bromhídrico, yodhídrico, sulfúrico, nítrico, fosfórico, fórmico, acético, 2 , 2 -dicloroacético, adípico, ascórbico, L-aspártico, L-glutámico, galactárico, láctico, maleico, L-málico, ftálico, cítrico, propiónico, benzoico, glutárico, glucónico, D-glucurónico, metanosulfónico, salicílico, succínico, malónico, tartárico, bencenosulfónico, etano-1, 2-disulfónico, ácido 2-hidroxi eta osulfónico, ácido toluenosulfónico, sulfámico o fumárico.

Los compuestos de la invención se pueden obtener en forma cristalina, ya sea directamente por la concentración de un solvente orgánico o por cristalización o recristalización en ün solvente orgánico o una mezcla del solvente y un co-solvente que puede ser orgánico o inorgánico, tal como agua. Los cristales se pueden aislar en forma esencialmente libre de solvente o como un solvato, tal como un hidrato. La invención cubre todas las modificaciones y formas cristalinas y también mezclas de los mismos.

Los compuestos de fórmula (I) pueden o no pueden comprender átomos de carbono sustituidos asimétricamente (quirales) que dan lugar a la existencia de formas isoméricas, por ejemplo enantiómeros . La presente invención se refiere a todos estos isómeros, ya sea en forma pura o como mezclas de los mismos (por ejemplo, racematos) . Las formas estereoisoméricas puras de los compuestos y los intermediarios de esta invención se pueden obtener por la aplicación de procedimientos conocidos en el arte previo. Las diferentes formas isoméricas se pueden separar por métodos de separación físicos tales como cristalización selectiva y técnicas cromatográficas , por ejemplo cromatografía líquida utilizando fases estacionarias quirales. Las formas estereoisoméricas puras también se pueden derivar de las fortnas correspondientes estereoisoméricas puras de los materiales de partida apropiados, siempre que la reacción se produzca de manera estereoselectiva o estereoespecífica . Preferiblemente, si se desea un estereoisómero específico, el compuesto será sintetizado por métodos estereoselectivos o estereoespecíficos de preparación. Estos métodos emplearán ventajosamente materiales de partida puros quirales.

Uso médico Como los compuestos de la invención exhiben actividad inhibidora de PDE4 , los compuestos pueden ser útiles como agentes terapéuticos para enfermedades alérgicas inflamatorias tales como asma bronquial, COPD, rinitis alérgica, y nefritis; enfermedades autoinmunes tales como artritis reumatoide, esclerosis múltiple, enfermedad de Crohn, y lupus eritematoso sistémico; trastornos de heridas cutáneas agudas o crónicas; enfermedades del sistema nervioso central tales como depresión, amnesia y demencia; organopatía asociada con reflujo isquémico causado por la insuficiencia cardíaca, shock y enfermedades cerebrovasculares, y similares; diabetes resistente a la insulina; heridas; SIDA, y similares.

En una modalidad, los compuestos de la presente invención se consideran útiles para el tratamiento, prevención o alivio de enfermedades o afecciones dérmicas.

En otra modalidad, los compuestos de la presente invención se consideran útiles para el tratamiento, prevención o alivio de enfermedades o afecciones dérmicas seleccionadas del grupo que consiste de trastornos proliferativos e inflamatorios de la piel, dermatitis, dermatitis atópica, dermatitis seborreica, dermatitis por contacto, psoriasis, cáncer, inflamación de la epidermis, alopecia, atrofia de la piel, atrofia de la piel inducida por esteroides, envejecimiento de la piel, fotoenvejecimiento de la piel, acné, urticaria, prurito y eczema.

En otra modalidad, los compuestos de la presente invención se consideran útiles para el tratamiento o alivio de la dermatitis atópica.

En otra modalidad, los compuestos de la presente invención se consideran útiles para el tratamiento o alivio de psoriasis.

Los compuestos de la invención, opcionalmente en combinación con otros compuestos activos, pueden ser útiles para el tratamiento de enfermedades o afecciones dérmicas, en particular para el tratamiento de trastornos proliferativos e inflamatorios de la piel, dermatitis, dermatitis atópica, dermatitis seborreica, dermatitis de contacto, psoriasis, cáncer, inflamación de la epidermis, alopecia, atrofia de la piel, atrofia de la piel inducida por esteroides, envejecimiento de la piel, fotoenvej ecimiento de la piel, acné, urticaria, prurito y eczema.

Además de ser útiles para el tratamiento humano, los compuestos de la presente invención también pueden ser útiles para el tratamiento veterinario de animales, incluyendo mamíferos tales como caballos, ganado, ovejas, cerdos, perros, y gatos.

Para uso en terapia, los compuestos de la presente invención están típicamente en la forma de una composición farmacéutica. Por lo tanto, la invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I) , opcionalmente junto con uno o más otro compuesto terapéuticamente activo, junto con un excipiente o vehículo farmacéuticamente aceptable. El excipiente debe ser "aceptable" en el sentido de ser compatible con los otros ingredientes de la composición y no perjudiciales para el receptor de los mismos.

En la forma de una unidad de dosificación, el compuesto se puede administrar una o más veces al día en intervalos apropiados, siempre dependiendo, sin embargo, de la condición del paciente, y de acuerdo con la prescripción hecha por el médico facultativo. Convenientemente, una unidad de dosificación de una formulación tópica contiene entre 0.1 mg y 1000 mg, preferiblemente entre 1 mg y 100 mg, tal como 5-50 mg de un compuesto de fórmula (I) .

Una dosificación apropiada del compuesto de la invención dependerá, entre otras cosas, de la edad y condición del paciente, la gravedad de la enfermedad a tratar y otros factores bien conocidos para el médico en ejercicio. El conipuesto se puede administrar por vía oral, parenteral o tópica de acuerdo con diferentes programas de dosificación, por ejemplo, diariamente o con intervalos semanales. En general una dosis única estará en el intervalo de 0.001 a 10 mg/kg de peso corporal, por ejemplo, en el intervalo de 0.01 a 1 mg/kg de peso corporal. El compuesto se puede administrar como un bolo (en este caso, toda la dosis diaria se administra de una sola vez) o en dosis divididas dos o más veces al día.

En el contexto del tratamiento tópico que puede ser más apropiado para referirse a una "unidad de uso" , que significa unitaria, es decir, una dosis única que es capaz de ser administrada a un paciente, y que puede manejarse y envasarse fácilmente, permaneciendo como una dosis unitaria físicamente y químicamente estable que comprende el material activo como tal o una mezcla de éste con diluyentes o portadores farmacéuticos sólidos o líquidos. Una "unidad de uso" es capaz de ser administrada por vía tópica a un paciente en una aplicación por centímetro cuadrado de la piel desde 0.1 mg hasta 50 mg y preferiblemente de 0.2 mg hasta 5 mg de la formulación final en cuestión.

También se prevé que en ciertos regímenes de tratamiento, la administración con intervalos más largos, por ejemplo, cada dos días, cada semana, o incluso con intervalos más largos puede ser beneficiosa.

Si el tratamiento consiste en la administración de otro compuesto terapéuticamente activo, se recomienda consultar Goodman & Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 9th Ed. , J.G. Hardman and L.E. Limbird (Eds.), McGraw-Hill 1995, para dosificaciones útiles de tales compuestos.

La administración de un compuesto de la presente invención con uno o más de otros compuestos activos puede ser secuencialmente o concomitantemente .

Las formulaciones incluyen, por ejemplo, aquellas en una forma apropiada para administración oral (incluyendo liberación sostenida o temporizada), rectal, parenteral (incluyendo subcutánea, intraperitoneal , intramuscular, intraarticular e intravenosa) , transdérmica, oftálmica, tópica, dérmica, nasal o administración bucal. La administración tópica de la formulación reivindicada es particularmente apropiada.

Las formulaciones pueden presentarse convenientemente en forma de dosificación unitaria y pueden ser preparadas por cualquiera de los métodos bien conocidos en la técnica de la farmacia, por ejemplo como se describe en Remington, The Science and Practice of Pharmacy, 20th ed. , 2000. Todos los métodos incluyen el paso de poner el ingrediente activo en asoaiación con el portador, que constituye uno o más ingredientes accesorios. En general, las formulaciones se preparan asociando uniformemente e íntimamente el ingrediente activo en asociación con un portador líquido o un portador sólido finamente dividido o ambos, y después, si es necesario, dar forma al producto en la formulación deseada.

Las formulaciones de la presente invención apropiadas para administración oral pueden estar en forma de unidades discretas como cápsulas, sobres, tabletas o pastillas, conteniendo cada uno una cantidad predeterminada del ingrediente activo; en forma de un polvo o gránulos; en forma de una solución o una suspensión en un líquido acuoso o líquido no acuoso, tal como etanol o glicerol; o en la forma de una emulsión de aceite en agua o una emulsión de agua en aceite. Tales aceites pueden ser aceites comestibles, tales como aceite de semilla de algodón, por ejemplo, aceite de ajonjolí, aceite de coco o aceite de cacahuete. Los agentes dispersantes o de suspensión apropiados para suspensiones acuosas incluyen gomas sintéticas o naturales tales como tragacanto, alginato, goma arábiga, dextrano, carboximetilcelulosa de sodio, gelatina, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa , hidroxipropilcelulosa, carbómeros y polivinilpirrolidona . Los ingredientes activos también se pueden administrar en forma de un bolo, electuario o pasta.

Una tableta puede fabricarse comprimiendo o moldeando el ingrediente activo opcionalmente con uno o más ingredientes accesorios . Las tabletas comprimidas se pueden preparar comprimiendo, en una máquina apropiada, el ingrediente activo en una forma de flujo libre tal como un polvo o gránulos, opaionalmente mezclados por un aglutinante, tal como por ejemplo, lactosa, glucosa, almidón, gelatina, goma arábiga goma de mascar, goma de tragacanto, alginato de sodio, carboximetilcelulosa, metilcelulosa, hidtcoxipropilmetilcelulosa, polietilenglicol , ceras o similares; un lubricante tal como por ejemplo oleato de sodio, estearato de sodio, estearato de magnesio, benzoato de sodio, acetato de sodio, cloruro de sodio o similares; un agejite desintegrante tal como por ejemplo, almidón, metilcelulosa, agar, bentonita, croscarmelosa de sodio, almidón glicolato de sodio, crospovidona o similares, o un agente dispersante, tal como polisorbato 80. Las tabletas moldeadas se pueden hacer por moldeado, en una máquina apropiada, una mezcla del ingrediente activo en polvo y portador apropiado humedecido con un diluyente líquido inerte .

Las formulaciones para administración rectal pueden estar en la forma de supositorios en los que el compuesto de la presente invención se mezcla con sólidos solubles o insolubles en agua de bajo punto de fusión, tales como manteca de cacao, aceites vegetales hidrogenados, polietilenglicol o ásteres de ácidos grasos de polietilenglicoles , mientras que los elixires se pueden preparar usando palmitato de miristilo.

Las formulaciones apropiadas para administración parenteral comprenden convenientemente una preparación oleosa o acuosa estéril de los ingredientes activos, que preferiblemente es isotónica con la sangre del receptor, por ejemplo, solución salina isotónica, solución isotónica de glucosa o solución amortiguadora. La formulación puede ser convenientemente esterilizada mediante, por ejemplo, filtración a través de un filtro que retiene bacterias, adición de agente esterilizante a la formulación, irradiación de ! la formulación o calentamiento de la formulación. Forijnulaciones liposomales como las descritas en, por ejemplo Enciclopedia of Pharmaceutical Technology, vol.9, 1994, también son apropiados para administración parenteral.

Alternativamente, los compuestos de fórmula (I) se pueden presentar como una preparación sólida estéril, por ejertplo, un polvo liofilizado, que se disuelve fácilmente en un solvente estéril inmediatamente antes de su uso.

Las formulaciones transdérmicas pueden estar en la forma de un emplasto o un parche.

Las formulaciones apropiadas para administración oftálmica pueden estar en la forma de una preparación acuosa estéril de los ingredientes activos, que puede estar en forma microcristalina, por ejemplo, en forma de una suspensión microcristalina acuosa. Formulaciones liposomales o sistemas de polímeros biodegradables , por ejemplo como se describe en Enctyclopedia of Pharmaceutical Technology, Vol . 2, 1989, también se pueden usar para presentar el ingrediente activo para administración oftálmica.

Las formulaciones apropiadas para la administración tópica u oftálmica incluyen preparaciones líquidas o semi-líquidas tales como linimentos, lociones, geles, aplicaciones, emulsiones aceite en agua o agua en aceite tales como cremas, ungüentos o pastas; o soluciones o suspensiones tales como gotas. Las composiciones para tratamiento oftálmico pueden contener, además, preferiblemente una ciclodextrina .

Para la administración tópica, el compuesto de fórmula (I) típicamente puede estar presente en una cantidad de 0.01 hasta 5% en peso de la composición, por ejemplo, de 0.01% hasta 1% en peso de la composición.

Las formulaciones apropiadas para administración nasal o bucal incluyen polvo, autopropelentes y formulaciones de espray, tales como aerosoles y atomizadores. Tales formulaciones se describen en mayor detalle en por ejemplo, Modern Pharmaceutics , 2nd ed. , G.S. Banker and C.T. Rhodes (Eds.), page 427-432, Marcel Dekker, New York; Modern Pharmaceutics, 3th ed. , G.S. Banker and C.T. Rhodes (Eds.), páginas 618-619 y 718-721, Marcel Dekker, New York and. Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, vol. 10, J. Swarbrick and J.C. Boylan (Eds), páginas 191-221, Marcel Dekker, New York.

Además de los ingredientes anteriormente mencionados, las formulaciones de un compuesto de fórmula (I) pueden inaluir uno o más ingredientes adicionales tales como di]-uyentes, soluciones amortiguadoras, agentes aromatizantes, colorantes, agentes activos superficiales, espesantes, conservadores, por ejemplo, hidroxibenzoato de metilo (incluyendo antioxidantes), agentes emulsionantes y similares.

La composición farmacéutica puede comprender adicionalmente uno o más de otros componentes activos utilizados convencionalmente en el tratamiento de la enf rmedades o condiciones dérmicas, por ejemplo, seleccionado del grupo que consiste en glucocorticoides, vitamina D y análogos de vitamina D, antihistamínicos , antagonistas del factor activador de plaquetas (PAF) , agentes anticolinérgicos , metilxantinas , agentes ß-adrenérgicos , inhibidores de COX-2, salicilatos, indometacina, flufenamato, naproxeno, timegadina, sales de oro, penicilamina, agentes reductores del colesterol de suero, retinoides, sales de cinc, salicilazosulfapiridina e inhibidores de calcineurina . MÉTODOS DE PREPARACIÓN Los compuestos de la presente invención se pueden preparar en un número de maneras bien conocidas por las personas experimentadas en la técnica de síntesis. Los compuestos de fórmula (I) pueden por ejemplo ser preparados utilizando las reacciones y técnicas descritas a continuación, junto con métodos conocidos en el arte previo de la química orgánica sintética, o variaciones de los mismos como apreciarán las personas experimentadas en la técnica. Los métodos preferidos incluyen, pero no se limitan a, los descritos a continuación. Las reacciones se llevan a cabo en solventes apropiados para los reactivos y materiales empleados y apropiados para las transformaciones efectuadas. También, en los métodos sintéticos descritos a continuación, es de entenderse que todas las condiciones de reacción propuestas, incluyendo la elección del solvente, atmósfera de reacción, temperatura de reacción, duración de los procedimientos experimentales y de trabajo, se eligen para ser condiciones estándar para esa reacción, que deberían ser reconocidas fácilmente por una persona experimentada en la técnica de la síntesis orgánica. No todos los compuestos que caen dentro de una clase dada pueden ser compatibles con algunas de las condiciones de reacción requeridas en algunos de los métodos descritos. Tales restricciones a los sustituyentes que son compatibles con las condiciones de reacción serán fácilmente evidentes para una persona experimentada en la técnica y métodos alternativos pueden ser utilizados.

Los materiales de partida son conocidos o compuestos disponibles en el comercio o se pueden preparar por métodos sintéticos de rutina bien conocidos para una persona experimentada en la técnica.

Método LCMS "Método XE 7 CM" Un control de calidad se llevó a cabo en un instrumento Waters LCT Premier MS y un Waters Aquity UPLC.

Columna: Waters Aquity UPLC HSS T3 1.8 um, 2.1 x 50 mm, a 40°C.

Solventes: A = 10 mM de acetato de amonio + HCOOH al 0.1¡%, B = MeCN + HCOOH al 0.1%.

Flujo: 0.7 ml/min. Volumen de inyección 2 µ? . Intervalo de detección UV 240-400 nm. 1.00 min 94 6 2.60 min 5 95 3.80 min 5 95 3.81 min 99 1 4.80 min 99 1 La confirmación MW y la pureza fue extraída y comprobada con OpenLyn .

Espectros de resonancia magnética nuclear 1H (RMN) se registraron a 400 MHz o 600. Los valores de desplazamiento químico (d, en ppm) se cotizan en el solvente especificado en relación al tetrametilsilano interno (d = 0.00) o cloroformo (d ¡= 7.25). El valor de un multiplete, ya sea definido (doblete (d) , triplete (t) , cuarteto (q) ) o no (m) en el purtito medio aproximado se da a menos que se indique un intervalo, (bs) indica un singlete amplio. Los solventes orgánicos utilizados fueron generalmente anhidros. La cromatografía se realizó en gel de sílice Merck 60 (0.040 - 0 a 063 mm) . Las proporciones de solventes indicadas se refieren a v:v a menos que se indique lo contrario.

Se han utilizado las siguientes abreviaturas: DBU 1 , 8-diazabiciclo [5.4.0] undec-7-eno DCE 1, 2-dicloroetano DCM diclorometano DIAp Azodicarboxilato de diisopropilo DMAÍ> N, N-dimetilpiridin-4 -amina DMF N, N-dimetilformamida DMSO Dimetilsulfóxido EDCI (3-dimetilamino-propil) -etil-carbodiimida EtOH Etanol MeOH metanol EtOAc acetato de etilo L litros Me metilo RMN Resonancia magnética nuclear RT Temperatura ambiente THF tetrahidrofurano Pet . Petróleo Métodos generales Los compuestos de la invención pueden por ejemplo ser preparados de acuerdo a los métodos y ejemplos generales no limitantes. R es previamente definido para los compuestos de Fórmula (I) : Preparación 1 Hidroxicarbamato de ter-butilo A una suspensión agitada de hidroxilamina-HCl (150 g, 2.17 mol) y K2C03 (150 g, 1.09 mol) en dietil éter (940 mi) y agua (30 mi) a 0°C, se agregó una solución de dicarbonato de di-ter-butilo (308 g, 1.41 mmol) en dietil éter (600 mi) lentamente durante 15 min. Después de la adición la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se secó sobre Na2S04 anhidro y se concentró. El crudo obtenido se lavó con ciclohexano (50 mi x 3) y se secó para dar el compuesto del título (150 g, 52%, sólido blanco) . RMN ¾ (400 MHz , CDCl3) : d = 7.18 (br, 2H) , 1.47 (s, 9H) ppm.

Preparación 2 4 -Nlitrobenzoiloxicarbamato de ter-butilo A una solución agitada de hidroxil carbamato de ter-butilo (150 g, 1.128 mol) en diclorometano (2 1) a 0°C, se agregó trietilamina (174 mi, 1.24 mol) seguida de cloruro de 4-nitrobenzoílo (205 g, 1.105 mol) en porciones iguales.

De$pués de que se completó la adición, la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla de reacción se inactivo con agua (500 mi) y se extrajo. La capa de diclorometano separada se lavó con salmuera (200 mi) , se seaó sobre Na2S0 anhidro y se concentró. El crudo obtenido se lavó con hexano (100 mi x 2) y se secó para dar el compuesto del título (300 g, 94%, sólido amarillo). RMN 1H (400 MHz, CDC13) : d = 8.34-8.27 (m, 4H) , 2.97-2.92 (m, 1H) , 1.53 (s, 9H) ppm.

Preparación 3 O- ( -nitrobenzoil ) hidroxilamina una solución agitada de 4-nitrobenzoiloxi carbamato ter+butilo (300 g, 1.06 mol) en diclorometano (2 1) a 0°C, ácido metanosulfónico (69 mi, 1.06 mol) se agregó lentamente. Después de que se completó la adición, la mezcla de reacción se 4ejó en agitación a temperatura ambiente durante 16 horas. La mezcla de reacción se diluyó con diclorometano (1 1) , se lavó con NaHC03 ac . al 10% (300 mi), agua (200 mi), salmuera (200 mi) , se secó sobre Na2S0 y se concentró. El crudo obtenido se lavó con hexano (100 mi x 2) y se secó para dar el compuesto del título (150 g, 77%, sólido de color amarillo pálido). RMN 1H (400 MHz, CDCl3) : d = 8.33-8.30 (m, 2H) , 8.22-8.19 (m, 2H) , 6.73 (s ancho, 2H) ppm.

Preparación 4 Etil éster del ácido 1-hidroximetil-ciclopropanocarboxílico A una solución agitada ciclopropano-1, 1-dicarboxilato de diátilo (2.13 g, 11.4 mmol) en THF (80 mi) a temperatura ambiente, tri-ter-butoxihidruro de aluminio y litio (38.76 mi, 38.76 mmol, solución 1.0 M en THF) se agregó lentamente. Desjpués de que se completó la adición, la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo (100 mi) , se lavó con HCl acuoso 1N (20 mi) , agua (20 mi) , NaHC03 acuoso al 5% (25 mi) , salmuera (20 mi) , se secó sobre Na2S04 anhidro, se filtró y se concentró para proporcionar el compuesto del título (1.3 g, 79%, aceite amarillo). RM ?? (400 MHz, CDC13) : d =? 4.20 a 4.13 (m, 2H) , 3.62 (m, 2H) , 2.61 (m, 1H) , 1.29-1.24 (m, 5H) , 0.88-0.85 (m, 2H) ppm.

Preparación 5 Etil éster del ácido 1-formil-ciclopropanocarboxílico una solución agitada de etil éster del ácido hidroximetil-ciclopropano-carboxílico (1.1 g, 7.63 mmol) en diclorometano (45 mi), se agregaron NaHC03 (2.5 g, 29.76 mmol) y peroodinano de Dess-Martin (6.46 g, 15.23 mmol). La suspensión se agitó a temperatura durante 30 min. La mezcla de reacción se inactivo con una solución 1:1 de Na2S203 ac . al 10% y NaHC03 ac. al 10% (20 mi) manteniendo la temperatura por debajo de 20°C, se agitó durante 30 minutos. La mezcla de reacción se diluyó con diclorometano (100 mi) y se extrajo. La capa orgánica se lavó con salmuera (30 mi) , se secó sobre Na2S0 anhidro, se filtró y se concentró. El crudo se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice (0 a 10% de EtOAc en pet . Éter como elüyente) para dar el compuesto del título (800 mg, 76%, aceite amarillo). RMN 1H (400 MHz , CDC13) : d = 10.40 (s, 1H) , 4.25 (m, 2H) , 1.68-1.65 (m, 2H) , 1.62-1.59 (m, 2H) , 1.33-1.26 (m, 3H) ppm.

Preparación 6 3 -Metoxi -piridin-2 - ilamina Una suspensión de 3-metoxi-2-nitropiridin (30 g, 194.8 mmol) y Pd/C al 10% (10 g) en etanol (1 1) se hidrogenó en un hidrogenador par (H2, presión 2.81 kg/cm2 (40 psi)) a temperatura ambiente durante 4 horas. La mezcla de reacción se filtró a través de celita y el filtrado se concentró para dar el compuesto del título (22 g, 91%, sólido de color marrón). RMN 1H (400 MHz, CDC1 3): d = 7.66 (d, 0.7 = 5.2 Hz ; 1 H) , 6.91 (d, J = 7.6 Hz, 1 H) , 6.63-6.60 (m, 1 H) , 4.65 (br, 2H) , 3.84 (s, 3H) ppm.

Preparación 7 Sal de 1, 2-diamino-3-metoxi-piridinio del ácido 4-nitrobenzoico A una solución agitada de 3-metoxi-piridin-2-ilamina (30 g, 164.8 mmol) en diclorometano (400 mi), se agregó 0-(4-nitrobenzoil) hidroxilamina (13.2 g, 214.2 mmol) a 10°C. Después de la adición la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. El precipitado resultante se filtró, se lavó con diclorometano (25 mi x 2) y se secó para dar el compuesto del título (40 g, 91%, sólido marrón) (PRECAUCIÓN: La sal es térmicamente inestable) . RMN 1H (400 MHz, DMSO ): d = 8.53 (br, 2H) , 8.12 (d, J = 8 Hz ; 2H) , 8.01 (d, J = 8.8 Hz; 2H) , 7.73 (d, J = 6.4 Hz ; 1 H) , 7.33 (d, J = 7.2 Hz; 1H) , 7.17 (ancho, 2H) , 6,77 (t, J = 6.8 Hz; 1 H) . , 3.93 (s, 3H) ppm.

Preparación 8 Etil éster del ácido 1- ( 8 -metoxi- [1 , 2 , 4] triazolo [1 , 5-a] iridina-2-il) -ciclopropanocarboxílico A una solución agitada de sal de diamino-3-metoxi-piriidinio del ácido -nitrobenzoico (1 g, 7.14 mmol) en etanol (10 mi) a 0°C, se agregó DBU (2.1 mi) seguido de etil éster del ácido 1-formil-ciclopropanocarboxílico (1.5 g, 10.71 mmol). Después de la adición la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se concentró, el residuo obtenido se diluyó con EtOAc (100 mi) , se lavó con agua (20 mi x 2) , salmuera (20 mi), se secó sobre Na2S04 anhidro, se filtró y se concentró. El producto crudo se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice (usando de 0 a 15% de EtOAc en CH2C12 como eluyente) para dar el compuesto del título (800 mg, 53%, sólido blanco). RMN 1H (400 MHz, CDCl3) : d = 8.18 a 8.16 (d, J = 6, Hz; 1H) , 6.89 (t, J = 7.2 Hz , 1H) , 6.76 (d, J = 8 Hz ; 1H) , 4.20 a 4.14 (m, 2H) , 4.03 (s, 3H) , 1.73-1.70 (m, 2H) , 1.59-1.56 (m, 2H) , 1.20 (t, J = 6.8 Hz; 3H) ppm.

Preparación 9 Etil éster del ácido 1- (5-bromo-8-metoxi- [1 , 2 , 4] triazolo [1, 5-a] piridin-2 - il ) -ciclopropanocarboxílico A una solución agitada de etil éster del ácido 1- (8-metoxi - [1,2,4] triazolo[l,5-a] piridina-2 -il) -ciclopropanocarboxílico (25 g, 95.7 mmol) en acetonitrilo (300 mi) a temperatura ambiente, se agregó N-bromosuccinimida (34 g, 191.5 mmol) en porciones. Después de la adición la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 6 horas. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (600 mi), se lavó con agua (100 mi x 2) , salmuera (50 mi) , se secó sobre Na2S0 anhidro, se filtró y se concentró. El crudo se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice (0 a 10% de EtQAc en diclorometano como eluyente) para dar el compuesto del título (25 g, 77%, sólido incoloro) . RMN 1 H (400 MHz, DMSO) : d = 7.44 (d, J = 8.4 Hz ; 1H) , 7.07 (d, J = 8 Hz ; 1H) , 4.13-4.8 (m, 2H) , 3.97 (s, 3H) , 1.60-1.57 (m, 2H) , 1.48-1.45 (m, 2H) , 1.13 (t, J = 7.4 Hz; 3H) ppm.

Preparación 10 Acido 1- (5-bromo-8-metoxi- [1,2,4] triazolo [1 , 5-a] piridin-2 -il) ciclopropanocarboxílico A una solución de 1- (5-bromo-8-metoxi- [1,2,4] triazolo [1, 5-a] piridin-2 - il ) ciclopropanecarboxilato de etilo (3.00 g, 8.82 mmol) en THF (25 mi) se agregó una solución acuosa 1 M de LiOH (25 mi) . La mezcla se agitó a 80CC durante 30 minutos, se enfrió a temperatura ambiente y se diluyó con EtOAc (50 mi) y agua (50 mi) . La fase orgánica se extrajo con una solución acuosa 0.1 M de NaOH (25 mi) y lag fases acuosas combinadas se acidificaron con HC1 conc . a pH 0-1, y se extrajo cuatro veces con DCM (30 mi) . La evaporación hasta sequedad de las fases orgánicas combinadas proporcionó el compuesto del título (2.54 g, 94%). RM 1 H (DMSO, 400 MHz) : d = 12.61 (s, 1H) , 7.42 (d, 1H, J = 8.3 Hz), 7.06 (d, 1H, J = 8.3 Hz) , 3.97 (s, 3H) , 1.53 (q, 2H, Hz) , 1.40 (q, 2H, J = 3.9 Hz) ppm.

Preparación 11 Acido 1- [8-metoxi-5- (l-oxo-3H-isobenzofuran-5-il) - [1,2,4] triazolo [1, 5-a] piridin-2 - il] ciclopropanocarboxílico Acido 1- (5-bromo-8-metoxi- [1,2,4] triazolo [ , 5-a] piridin-2 -il) ciclopropanocarboxílico (1.00 g, 3.20 mmol) y 5- (4,4,5 , 5-tetrametil-l , 3 , 2 -dioxaborolan-2 - il ) -3H-isdbenzofurano-l-ona (Preparación del boronato se describe en WO2011/134468) (1.67 g, 6.40 mmol) se disolvieron en dioxano desgasificado (16 mi). Pd2(dba)3 (29 mg, 32 µp???) , ?0?3 (18 mg, 64 µ????) y K3P04 (2.38 g, 11.2 mmol) se mezclaron en agua desgasificada (10 mi) . Las dos soluciones se mezclaron y posteriormente se calentaron en un horno de microondas a 110°C durante 10 minutos, se enfrió a temperatura ambiente y se diluyó con EtOAc (40 mi) . La fase orgánica se extrajo con agua (25 mi) y una solución acuosa 0.1 M de NaOH (25 mi) y las fases acuosas combinadas se acidificaron con HCl conc . a pH 0-1, y se extrajo con DCM (30 mi x 4) . Después de la evaporación de las fases orgánicas combinadas el compuesto del título se cristalizó (746 mg, 64%) . Tiempo de retención de HPLC (Método XE 7 CM) : 1.97 minutos. Masa detectada "M + 1": 366.11. Masa calculada "M + 1": 366.11. MN ¾ (DMSO, 300 MHz) : d = 8.25 a 8.20 (m, 1H) , 8.13 (dd, 1H, J = 8.2, 1.4 Hz) , 8.00 (d, 1H, J = 8.0 Hz) , 7.40 (d, 1H, J = 8.2 Hz) , 7.24 (di 1H, J = 8.3 Hz) , 5.51 (s, 2H) , 4.04 (s, 3H) , 1.58-1.48 (m, 2H) , 1.48-1.39 (m, 2H ) ppm.

Ejemplo 1 1- [8-metoxi-5- (l-oxo-3H-isobenzofuran-5-il) - [1,2,4] triazolo- [1, 5-a] piridin-2 - il] ciclopropanocarboxilato de [ (1S) -1-metilpropilo] (Compuesto 1) de ácido 1- [8-metoxi-5- (l-oxo-3H-isobenzofuran-5-il) - [l,2,4]triazolo[l,5-a] piridin-2 -il] ciclopropanocarboxílico (10 mg, 27 µp???) , (1S) -1-metilpropanol (10 µ?, 108 mol), DMAP (6.7 mg, 54 pmol) y EDCI-HC1 (10.5 mg, 54 µt???) en DCM (0.5 mi) se agitó en un vial sellado a temperatura ambiente durante la noche antes se agregó más ( 1S) - 1-metilpropanol (10 µ?^ 108 µp???) y DMAP (6.7 mg, 54 µp???) y la mezcla se calentó a 50°C durante 3 horas. Se evaporó hasta sequedad y purificación por HPLC prep. ácida produjo el compuesto del título. El tiempo de retención de HPLC (Método XE 7 CM) : 2.35 minutos. Masa detectada "M + 1" : 422 , 16. Masa calculada "M + 1": 422.17. RMN ?. (DMSO, 600 MHz): d = 8.25 -8.21 (m, 1H) , 8.14 (dd, 1H, J = 8.0, 1.2 Hz), 8.01-7.97 (m, 1H) , 7.41 (d, 1H, J = 8.2 Hz) , 7.23 (d, 1H, J = 8.2 Hz) , 5.51 (s, 2H) , 4.78 (h, 1H, J = 6.3 Hz) , 4.04 ( s, 3H) , 1.61 -1.40 (m, 6H) , 1.13 (d, 3H, J = 6.2 Hz) , 0.78 (t, 3H, J = 7.4 Hz) ppm.

Ejemplo 2 1- [8-metoxi-5- (l-oxo-3H-isobenzofuran-5-il) - [1,2,4] triazolo- [1 , 5-a] piridin-2 - il] ciclopropanocarboxilato de [ (IR) -1-metilpropilo] (Compuesto 2) Una mezcla de ácido 1- [8-metoxi-5- (l-oxo-3H-isdbenzofuran-5-il) - [l,2,4]triazolo[,5-a] piridin-2-il] ciclopropanocarboxílico (400 mg, 1.095 mmol) , (2R) -butan-2-ol (122 mg, 1.64 mmol), DMAP (147 mg, 1.20 mmol) y EDCI-HCl (231 mg, 1.20 mmol) en DCM (10 mi) se agitó a temperatura ambiente durante una noche antes de que se evaporara a sequedad. La cromatografía en columna (gradiente de MeOH al 0 a 5% en DCM) seguida de recristalización en EtOH y liofilización proporcionó el compuesto del título como polvo incoloro (138 mg, 30%) . Tiempo de retención de HPLC (Método XE 7 CM) : 2.33 minutos. Masa detectada "M + 1": 422.15. Masa calculada "M + 1": 422.17 RMN 1H (DMSO, 400 MHz) : d = 8.23 (s ancho, 1H) , 8.14 (dd, 1H, J = 8.0, 1,6 Hz) , 7.99 (d, 1H , J = 8.0 Hz), 7.41 (d, 1H, J = 8.2 Hz) , 7.24 (d, 1H, J = 8.2 Hz) , 5.51 (S, 2H) , 4.78 (h, 1H, J = 6.3 Hz) , 4.04 (s, 3H) , 1.62-1.38 (m, 6H) , 1.13 (d, 3H, J = 6.3 Hz) , 0.78 (t, 3H, J = 7.4 Hz) ppm.

Ejemplo 3 1- [8-metoxi-5- (l-oxo-3H-isobenzofuran-5-il) - [1,2,4] triazolo [ , 5-a] iridin-2-il] ciclopropanocarboxilato de [2-Metilpropilo] (Compuesto 3) Una mezcla de ácido 1- [8-metoxi-5- (l-oxo-3H-isqbenzofuran-5-il) - [1,2,4] triazolo [ , 5-a] piridin-2 -il] ciclopropanocarboxílico (250 mg, 685 µp???) , isobutanol (100 µ?, 1.37 mmol), DMAP (250 mg, 2.05 mmol) y EDCI-HCl (262 mg, 1.37 mmol) en DCM (14 mi) se agitó a 50°C durante 2 horas en un vial sellado, antes de que se diluyera con DCM (80 mi) , se lavó con una solución acuosa 1M de HCl (40 mi) y se evaporó a sequedad. La mezcla cruda se disolvió de nuevo en MeCN (~2 mi) y el producto crudo se cristalizó después de la adición de agua (~ 2 mi) . La cromatografía en columna (gradiente de EtOAc al 20 a 100% en éter de pet . ) y la posterior recristalización en MeCN y agua, produjo el compuesto del título como cristales incoloros (178 mg, 62%) . Tiempo de retención de HPLC (Método XE 7 CM) : 2.34 minutos.

Masa detectada "M+l" : 422.16. masa calculada "M+l": 422.17 RMN XH (DMSO, 600 MHz) : d = 8.22 (s ancho, 1H) , 8.13 (dd, 1H, J = 8.1 Hz, 1.5 Hz) , 8.00 (d, 1H, J = 8.0 Hz) , 7.40 (d, 1H, J = 8.2 Hz) , 7.24 (d, 1H, J = 8.2 Hz) , 5.51 (s, 2H) , 4.04 (s, 3H) , 3.84 (d, 2H, J = 6.5 Hz) , 1.79 (m, 1H) , 1.61-1.54 (m, 2H) , 1.54-1.46 (m, 2H) , 0.78 (d, 6H, J = 6.7 Hz) ppm.

Ejemplo 4 1- [8-Metoxi-5- (l-oxo-3H-isobenzofuran-5-il) - [1,2,4] triazolo [1 , 5-a] piridin-2 - il] ciclopropanocarboxilato de ter-butilo (Compuesto 4) Una suspensión de ácido 1- [8-metoxi-5- (l-oxo-3H-isobenzofuran-5-il) - [1,2,4] triazolo [1 , 5-a] piridin-2 -il] ciclopropanocarboxílico (30 mg, 83 µ????) y cloruro de benciltrietilamonio-amonio (19 mg, 83 pmol) en DMF (1.0 mL) se calentó suavemente hasta que se convirtió en una solución. Se lagregó bromuro de ter-butilo (297 µ?, 2.64 mmol) y K2C03 (171 mg, 1.24 mmol) y la mezcla se agitó a 55°C durante tres días. Se agregaron bromuro de ter-butilo adicional (139 µ?, 1.24 mmol) y K2C03 (171 mg, 1.24 mmol) y la mezcla se agitó a 55 °C durante un día más. Purificación por HPLC prep. proporcionó el compuesto del título. Tiempo de retención de HPLC (Método XE 7 CM) : 2.29 minutos. Masa detectada "M + 1" : 422.18. Masa calculada "M + 1": 422.17 RMN ¾ (DMSO, 300 Hz) : d = 8.27 -8.22 (m, 1H), 8.16 (dd, 1H, J = 8.0, 1.5 Hz) , 8.00 (d, 1H, J = 8.2 Hz) , 7.40 (d, 1H, J = 8.2 Hz) , 7.22 (d, 1H, J = 8.3 Hz) , 5.51 (s, 2H) , 4.04 (s, 3H) , 1.54-1.40 (m, 4H) , 1.38 (s, 9H) ppm.

ENSAYOS Ensayo de PDE4 PDE4 recombinante humano (GenBank No de acceso NM^006203) se incubó durante 1 hora con el compuesto de ensayo en concentraciones de hasta 10 µ?, con cAMP (1?10-5?) , y con una cantidad baja (0.021 MBq) de cAMP marcado radiactivamente. Al final de la incubación, la división del sustrato se evaluó mediante la unión del producto AMP a raicroesferas de SPA, que genera quimioluminiscencia cuando se une a la sustancia radiactiva. El producto AMP inhibió la unión del trazador radiactivo a las microesferas , y la señal luminiscente fue competida.

Los resultados se calcularon como las concentraciones molares que resultan en la inhibición del 50% de la división de sustrato en comparación con las muestras de control, y se expresan como un rango de IC50 (nM) .

Los compuestos de la presente invención se probaron en el ensayo de PDE4 , IC50 (nM) : Compuesto 1, 10.6 nM; Compuesto 2, 13.0 nM; Compuesto 3, 12.3 nM; Compuesto 4, 20.7 nM (basado en un valor promedio de entre 2 y 5 pruebas para cada compuesto) .

Liberación de TNF-a Células mononucleares de sangre periférica humana (PBMC) se aislaron de capas leucocitarias . La sangre se mezcló con solución salina en una proporción de 1:1, y las PBMC se aislaron utilizando tubos Lymphoprep TM (Nycomed, Noruega) . Las PBMC se suspendieron en RPMI1640 con albúmina de suero huflnana al 0.5%, pen/estrep y 2 mM de L-glutamina a una concentración de 5 x 105 c/ml . Las células se pre-incubaron durante 30 minutos con los compuestos de prueba en placas de cultivo de tejido de 96 pozos y se estimularon durante 18 mg/ml (Sigma) . La concentración s se midió utilizando resonancia de i fluorescencia homogénea resuelta en el tiempo (TR-FRET) . El ensayo se cuantifica midiendo la fluorescencia a 665 nm (proporcional a concentración TNF-a) y 620 nm (control) .

Los resultados se expresan como valores IC50 (nM) calculados de curvas de inhibición utilizando como controles positivos en la secreción en pozos estimulados con LPS y como controles negativos la secreción en las células no estimuladas.

Los compuestos de la presente invención se probaron en el ensayo de liberación de TNF-OÍ, IC50 (nM) : Compuesto 1, 12.8 nM; Compuesto 2, 15.7 nM; Compuesto 3, 14.6 nM; Compuesto 4, 15.3 nM (basado en un valor promedio de entre 2 y 5 pruebas para cada compuesto) .

Ensayo de HLM (mierosomas hepáticos humanos) Las incubaciones de los compuestos de prueba en DMSO, diluidas con solución amortiguadora de fosfato, pH 7.4, a 0.5 µ? se llevaron a cabo con microsomas de hígado humano (0.5 mg/ml) . El porcentaje de solvente orgánico en las incubaciones era 1%. La suspensión microsomal de hígado humano en solución amortiguadora de fosfato se mezcló con NADPH (1 mM) y se precalento a 37°C antes de que se agregara compuesto de prueba. Se tomaron alícuotas a los 0, 5, 10, 20 se terminaron mediante la estándar interno analítico Los resultados se expresaron como el aclaramiento aparente (Clapp) (ml/min/kg) y la proporción de extracción hepática (Eh) (%) calculado de la constante de velocidad (k) (min"1) de disminución de compuesto de prueba.

Los compuestos de la presente invención se probaron en el ensayo de HLM, Eh (%) : Compuesto 1, > 91%; Compuesto 2, > 91%; Compuesto 3, > 91%; Compuesto 4, > 91% (basado en un valor promedio de 2 a 3 pruebas para cada compuesto) .

Ensayo de sangre completa humana ( B) Las incubaciones de los compuestos de prueba en DMSO, se diluyeron con solución amortiguadora de fosfato, pH 7.4, en 1 µ? se llevaron a cabo con sangre entera humana. El porcentaje de solvente orgánico en las incubaciones era 1%. Las incubaciones se realizaron a 37°C con alícuotas tomadas en 0, 15, 30, 60 y 120 minutos, y las reacciones se terminaron mediante la adición de metanol que contiene estándar interno analítico (IS) .

Los resultados se expresaron como media-vida (??/2) en minutos calculados de la constante de velocidad (k) (min-1) de disminución de compuesto de prueba.

Los ejemplos de la presente invención se probaron en el ensayo KC, T 1/2 (minutos): Compuesto 1, 10.7 minutos; Compuesto 2, 12.6 minutos; Compuesto 3, 16.6 minutos; Compuesto 4, <11.2 minutos (sobre la base de un valor promedio de desde 2 hasta 4 pruebas para cada compuesto) .

Ensayo de estabilidad de Keratinocito (KC) Las incubaciones de los compuestos de prueba en DMSO, se diluyeron con medio de cultivo, pH - 7.4, a 1 µ? se llevaron a cabo con queratinocitos humanos en placas. El porcentaje de solvente orgánico en las incubaciones era 0.5%. Las incubaciones se realizaron a 37°C con alícuotas tomadas en 0, 60, 120, 240 y 1440 minutos, y las reacciones se terminaron mediante la adición de metanol que contiene estándar interno analítico (IS) .

Los resultados se expresaron como media-vida (Tl/2) en minutos calculados a partir de la constante de velocidad (k) (min-1) de reducción de compuesto de ensayo.

Los ejemplos de la presente invención se probaron en el ensayo de KC, Tl/2 (minutos): Compuesto 1,> 720 minutos; Compuesto 2,> 720 minutos; Compuesto 3,> 720 minutos; Compuesto 4,> 720 minutos (con base en un valor promedio desde 2 hasta 4 pruebas para cada compuesto) .

Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por el solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (19)

1. REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones : Un compuesto de fórmula general (I) cualquiera de sus estereoisómeros o cualquier mezcla de sus estereoisómeros o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, caracterizado porque R es butilo ramificado.
2. 2. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, cualquiera de sus estereoisómeros o cualquier mezcla de sus estereoisómeros o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo caracterizado porque R es 1-metilpropilo, 2-metilpropilo, o ter-butilo.
3. 3. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque es 1- [8-metoxi-5- (l-oxo-3H-isobenzofuran-5-il) - [1,2,4] triazolo- [1, 5-a]piridin-2-il] ciclopropanocarboxilato de [(1S)-1-metilpropilo] , base libre.
4. 4. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque es 1- [8-metoxi-5- (l-oxo-3H-isobenzofuran-5-il) - [1,2,4] triazolo [1, 5-a]piridin-2-il] ciclopropanocarboxilato de [ (IR) -1-metilpropil] , base libre.
5. 5. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque es 1- [8-metoxi-5- (l-oxo-3H-isobenzofuran-5-il) - [l,2,4]triazolo[l,5-a] iridin-2-il] ciclopropanocarboxilato de [2 -metilpropilo] , base libre.
6. 6. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque es 1- [8-metoxi-5- (l-oxo-3H-isobenzofuran-5-il) - [1,2,4] triazolo [1, 5-a] iridin-2-il] ciclopropanocarboxilato de ter-butilo, libre de base.
7. 7. Una composición farmacéutica caracterizada porque comprende un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-6 junto con un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable o portador farmacéuticamente aceptable.
8. 8. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 7, caracterizada porque comprende además uno o más compuestos terapéuticamente activos.
9. 9. El uso del compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-6, para la fabricación de una composición farmacéutica.
10. 10. El uso de un compuesto de conformidad la reivindicación 9, en la fabricación de una composición farmacéutica para el tratamiento o mejoramiento de una enfermedad, trastorno o afección sensible a la actividad inhibidora de PDE .
11. 11. El uso de conformidad con la reivindicación 10, en donde la enfermedad, trastorno o afección es enfermedad o afección dérmica.
12. 12. El uso de acuerdo con la reivindicación 11, en donde la enfermedad, trastorno o afección es proliferativa inflamatoria y trastornos de la piel, dermatitis, dermatitis atópica,' dermatitis seborreica, dermatitis de contacto, psoriasis, cáncer, inflamación epidérmica, alopecia, atrofia de la piel, atrofia de la piel inducida por esteroides, envejecimiento de la piel, fotoenve ecimiento de la piel, acné, urticaria, prurito y eczema.
13. 13. El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-6, caracterizado porque es para su uso como un medicamento.
14. 14. El compuesto de conformidad la reivindicación 13, caracterizado porque es para uso en el tratamiento o mejora de j una enfermedad, trastorno o afección sensible a la actividad inhibidora de PDE4.
15. 15. El compuesto de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado porque es para uso en el tratamiento o mejora de enfermedades o afecciones dérmicas .
16. 16. El compuesto de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado porque es para uso en el tratamiento de trastornos de la piel proliferativos e inflamatorios, dermatitis, dermatitis atópica, dermatitis seborreica, dermatitis de contacto, psoriasis, cáncer, inflamación epidérmica, alopecia, atrofia de la piel, atrofia de la piel inducida por esteroides, envejecimiento de la piel, fotoenvejecimiento de la piel, acné, urticaria, prurito y eczema.
17. 17 Un método para el tratamiento o alivio de una enfermedad o un trastorno o una afección sensible a la actividad inhibidora de PDE4 , caracterizado porque comprende el paso de administrar a un cuerpo de animal vivo una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-6.
18. 18. Un método de tratar o mejorar enfermedades o afecciones dérmicas, caracterizado porque comprende administrar a una persona que sufre de por lo menos una de las enfermedades una cantidad eficaz de uno o más compuestos de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-6, opcionalmente junto con un vehículo farmacéuticamente aceptable o uno o más excipientes, opcionalmente en combinación con otros compuestos terapéuticamente activos.
19. 19. El método de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado porque la enfermedad o afección dérmica es seleccionada del grupo que consiste de trastornos proliferativos e inflamatorios de la piel, dermatitis, dermatitis atópica, dermatitis seborreica, dermatitis de contacto, psoriasis, cáncer, inflamación epidérmica, alopecia, atrofia de la piel, atrofia de la piel inducida por esteroides, envejecimiento de la piel, foto envejecimiento de la piel, acné, urticaria, prurito y eczema.