MX2010008897A - Tratamiento de hiperglicemia con 25-hidroxi-vitamina d3. - Google Patents

Abstract

Se describe el tratamiento de hiperglicemia con 25-hidroxi-vitamina D3 (calcifediol). La glucosa sanguínea se reduce a un nivel que está más próximo al normal que el de referencia. La vitamina D3 (coleocalciferol) puede ser usada, opcionalmente junto con 25-hidroxi vitamina D3. Se describen también formas y dosificaciones de una composición farmacéutica, así como también procesos para la fabricación de medicamentos.

Description

TRATAMIENTO DE HIPERGLICEMIA CON 25-HIDROXI-VITAMINA D3 CAMPO DE LA INVENCION La presente invención concierne Al tratamiento de hiperglicemia en un humano con 25-hidroxi- Vitamina D3 (calcifediol) , La glucosa en sangre es reducida a un nivel que es más próximo al normal que la referencia. Opcionalmente, la Vitamina D3 puede ser usada junto con 25-hidroxi-Vitamina D3.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La vitamina D (por ejemplo, ergocalciferol y colecalciferol) es un grupo de compuestos solubles en grasa definidos por su actividad biológica. Una deficiencia de vitamina D causa raquitismo en niños y osteomalacia en adultos. Pero puede tener lugar toxicidad después de ingesta crónica de más de 100 veces la ración diaria recomendada (RDA, siglas del- ingles Recommended Daily Allowance) (es decir, 5 - 15 9 o 200-600 UI de vitamina D) por varios meses. Para la vitamina D, "El umbral para toxicidad es de 500 a 600 mcg/kg de peso corporal por día. En general, los adultos no deben de consumir más de tres veces la RDA por periodos de tiempo prolongados" (Garrison y Somer, The Nutrition Desk Reference, Tercera Ed. , Mc-Graw-Hill , pág. 82, 1997) . Puede tener lugar la hipercalcemia a una concentración sanguínea de 25- hidroxi- vitamina D mayor que 375 nmoles/L. Más recientemente, se identificó que un nivel superior seguro de Vitamina D es al menos 250 µg/día (10?00 UI) (Hathcock y colaboradores, Am. J. Clin. Nutr. 85:6-18, 2007). Se ha mostrado que la ingestión de ésta como un suplemento dietético da como resultado una concentración sanguínea de aproximadamente 200 nmoles/L de 25-hidroxi- vitamina D. La vitamina D es una pro-hormona que se ha hidroxilado en el hígado para producir 25-hidroxi-vitamina D (calcifediol ; 25-OH vitamina D; 25-OH D) , la cual luego sufre otra hidroxilación en el riñon y otros tejidos para producir 1, 25- dihidroxi- vitamina D, la forma hormonal activa de la vitamina D. 1, 25- dihidroxi- Vitamina D es liberada en la sangre, enlaza a la proteína que enlaza a la vitamina D (DBP) , y es transportada a tejidos objetivo. El enlace entre 1, 25- dihidroxi-vitamina D y el receptor de la vitamina D permite al complejo actuar como un factor de transcripción en los núcleos de las células. La deficiencia de vitamina D puede promover la resorción ósea. Puede también modular la función de los sistemas cardiovascular, inmune, y muscular. Estudios epidemiológicos encontraron asociación entre la ingesta de vitamina D y su efecto sobre la presión sanguínea o el metabolismo de glucosa. La actividad de la vitamina D está bajo control retroalimentario negativo por medio de la hormona de la paratiroides . Se han administrado ambas, la vitamina D y la 25-OH D3 como productos farmacéuticos en el pasado, la vitamina D, está, por supuesto, ampliamente disponible; 25-OH D3 fue previamente comercializada en U.S. A. por Organon USA bajo el nombre "CALDEROL", pero actualmente está en la lista de fármacos discontinuados de la FDA. Era una cápsula de gelatina que contenia aceite de maíz y 25-OH D3. Una forma liquida de 25-OH D3 es actualmente comercializada en España por FAES Farma bajo el nombre de "HI DROFEROL" en una solución oleosa. Se ha usado en la alimentación animal la combinación de vitamina D y 25-OH D3. 25-OH D3 para uso en la alimentación está comercialmente disponible de DSM bajo el nombre "ROVIMIX HY-D". Tritsch y colaboradores (US 2003/0170324) describe una composición en pre-mezcla alimentaria de al menos 25-OH D3 en una cantidad entre 5 % y 50 % (en peso) disuelta en aceite y un antioxidante, un agente encapsulador de goticulas de 25-OH D3 y aceite, y un aditivo nutritivo (por ejemplo, Vitamina D3) . La pre-mezcla puede ser añadida a alimentos aviar, porcino, canino o felino. Esta composición estabiliza 25-OH D3 contra la oxidación.

Simoes-Nunes y colaboradores (US 2005/0064018) describen la adición de una combinación de 25-OH vitamina D3 y Vitamina D3 a la alimentación animal. En particular, aproximadamente 10 µg/kg a aproximadamente 100 µg/kg de 25-OH Vitamina D3 y aproximadamente 200 Ul/kg a aproximadamente 4,000 Ul/kg de Vitamina D3 son añadidos a alimento porcino. Esta adición mejora la resistencia ósea del cerdo. Stark y colaboradores (US 5,695,794) describieron la adición de una combinación de 25-OH Vitamina D3 y Vitamina D3 a alimento aviar para mejorar los efectos de dicondroplasia tibiana. Borestein y colaboradores, US 5,043,170 describen la combinación de Vitamina D3 y ya sea 1- alfa- hidroxi-colecalciferol o 1-alfa, 25- dihidroxi-colecalciferol para mejorar la resistencia del huevo y la resistencia de las patas en gallinas ponedoras y en gallinas de edad avanzada. Chung y colaboradores, WO 2007/059960 describen que marranas alimentadas con una dieta que contenga tanto Vitamina D3 como 25- hidroxi- Vitamina D3 habían mejorado el status de salud general, estructura corporal, tamaño y salud de las carnadas, y otros parámetros de producción. También se describe un suplemento alimenticio humano con 25-OH D3, pero su intervalo de dosificación, 5 - 15 microgramos por kg de peso corporal, el cual iguala a una dosificación diaria extremadamente alta de 300-900 microgramos por humano es muy alto. A nuestro conocimiento el arte previo no expone o sugiere el uso de 25-OH D3 como un medicamento para tratar hiperglicemia . Formas y dosificaciones de una composición proporcionan efectos deseables cuando el humano es tratado con cantidades efectivas de Vitamina D3 y 25-Hidroxi-Vitamina D3 para normalizar la glucosa en sangre. Se describen posteriormente otras ventajas y mejoras o serán obvias a partir de la presente descripción.

SUMARIO DE LA INVENCION Se ha encontrado que 25-hidroxi-vitamina D3 ( calcifediol ) puede ser usada como un medicamento para reducir la alta glucosa en sangre o para mantener la glucosa en sangre en un nivel normal en un humano. El medicamento adicionalmente puede comprender opcionalmente vitamina D3 (colecalciferol) . El humano puede ser de cualquier edad, incluyendo niños y jóvenes, iniciando desde el nacimiento hasta la adultez, y desde 18 años a 80 años de edad, o más de 80 años de edad. Se describen también formas y dosificaciones de una composición farmacéutica, asi como también procesos para fabricar medicamentos. En un primer aspecto, se proporciona un método de administrar al menos 25-hidroxi-vxtamina D3 a un humano. Esta permite que la glucosa sanguínea pueda ser reducida a o mantenida en un nivel el cual está más próximo a un nivel normal (por ejemplo, menos de 7 inmoles de glucosa por litro de plasma para un adulto en ayunas) . Opcionalmente, la Vitamina D3 puede ser administrada junto con o separadamente de 25-hidroxi-vitamina D3. Pueden ser administradas una vez por día, una vez por semana, o una vez por mes. En otro aspecto, se proporciona una composición farmacéutica adecuada para uso humano, que comprende vitamina D3, 25-hidroxi-vitamina D3, y un portador aceptable farmacéuticamente para reducir los niveles de glucosa en sangre en un humano. Aspectos adicionales serán obvios a partir de la siguiente descripción y reivindicaciones, y generalizaciones en la misma.

DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION Como se usa en el transcurso de la especificación y reivindicaciones, aplican las siguientes definiciones: "Vitamina D", significa ya sea la Vitamina D3 (colecalciferol) y/o la Vitamina D2 (ergocalciferol ) . Los humanos son incapaces de elaborar la Vitamina D2 (ergocalciferol) , pero son capaces de usarla como una fuente de Vitamina D. La Vitamina D2 puede ser sintetizada por varios vegetales y a menudo es usada en suplementos con Vitamina D como un equivalente a la Vitamina D. "Metabolito de Vitamina D", significa cualquier metabolito de Vitamina D diferente de 25-Hidroxi-vitamina D3. "25-OH D3", se refiere específicamente a 25-hidroxi-vitamina D3. "25-OH D", se refiere al metabolito 25-hidroxilado ya sea de la Vitamina D2 o bien de la Vitamina D3, la cual es la forma circulante principal encontrada en plasma. "Prevenir", incluye el mejoramiento de la enfermedad, aminoración de la severidad de los síntomas, intervención anticipada, y prolongación de la duración del principio de la enfermedad, y no está previsto para limitar una situación donde el paciente no es capaz por mas tiempo de contraer la enfermedad ni experimentar cualquier síntoma. La Vitamina D y 25-OH D3 pueden ser obtenidas a partir de cualquier fuente, y una composición de éstas puede ser preparada usando tecnología convencional. En general, cristales de Vitamina D3, 25-OH D3, o ambas (separadamente o juntas) son disueltos en un aceite con calentamiento y agitación. Preferiblemente, el aceite es transferido en un recipiente y calentado. Después, se añade al recipiente la vitamina D3, 25-OH D3 o ambas, mientras se mantiene la temperatura de aceite o incrementándola con el tiempo. La composición es agitada para disolver los cristales de Vitamina D3, 25-Hidroxi-vitamina D3, o ambas. Antes de adición del aceite, los cristales pueden ser reducidos de tamaño por molienda y/o tamizado para mejorar la disolución. La composición puede ser agitada por movimiento, rotación del recipiente, mezclado, homogeneización, recirculación, o ultrasonicación . Preferiblemente, el aceite puede ser calentado en el recipiente a una temperatura desde aproximadamente 80 °C a aproximadamente 85 °C, los cristales calibrados son introducidos en el recipiente y el contenido de éste es agitado para disolver los cristales en el aceite. El "aceite" puede ser cualquier aceite, lipido o grasa comestible adecuados: por ejemplo aceite de babasú, aceite de coco, aceite de corozo, sebo de murumiru, aceite de corazón de palma, o aceite de tucum. El aceite puede ser natural, sintético, semi-sintético, o cualquier combinación de éstos. El aceite natural puede ser derivado de cualquier fuente (por ejemplo, animal, vegetal, fúngica, marina); el aceite sintético o semisintético puede ser producido por medio de tecnologías convenientes. Preferiblemente, el aceite es una mezcla de triglicéridos vegetales de cadena media, principalmente ácidos cáprico y caprílico. La composición puede contener opcionalmente uno o más ingredientes adecuados tal como, por ejemplo, antioxidantes, conservadores, agentes de disolución, tensoactivos, agentes ajustadores o reguladores de pH, humectantes aceptables farmacéuticamente, y cualquier combinación de éstos. Los anteriormente mencionados son ejemplos de portadores aceptables farmacéuticamente . Los antioxidantes adecuados incluyen tocoferol, tocoferoles mezclados, tocoferoles de fuentes naturales o sintéticas, hidroxi-tolueno butilado (BHT) , hidroxi-anisol butilado (BHA) , antioxidantes naturales como extracto de romero, galato de propilo, y cualquier otro usado en la fabricación de productos farmacéuticos para humanos. Preferiblemente, el antioxidante es tocoferol. Los conservadores adecuados incluyen metil parabeno, propil parabeno, sorbato de potasio, benzoato de sodio, ácido benzoico, y cualquier combinación de éstos. Los agentes de disolución adecuados incluyen solventes orgánicos o inorgánicos: por ejemplo, alcoholes, hidrocarburos clorados, y cualquier combinación de éstos. Los tensoactivos adecuados pueden ser aniónicos, catiónicos, o no iónicos: por ejemplo, palmitato de ascorbilo, polisorbatos , polietilenglicoles , y cualquier combinación de éstos. Agentes ajustadores de pH adecuados o reguladores incluyen ácido citrico-citrato de sodio, ácido fosfórico-fosfato de sodio, ácido acético- acetato de sodio, y cualquier combinación de éstos. Los humectantes adecuados incluyen glicerol, sorbitol, polietilenglicol , propilenglicol, y cualquier combinación de éstos . Una vez formada, la composición oleosa puede ser incorporada en varias composiciones diferentes útiles, algunas de las cuales se discuten posteriormente. Por ejemplo, pueden formarse emulsiones, las cuales pueden ser opcionalmente encapsuladas o secadas por aspersión. Una variedad de emulsiones puede ser preparada combinando las composiciones no acuosas descritas anteriormente con una composición acuosa. La emulsión puede ser de cualquier tipo. Las emulsiones adecuadas incluyen emulsiones de aceite en agua, emulsiones de agua en aceite, emulsiones anhidras, emulsiones sólidas, y micro-emulsiones. Las emulsiones pueden ser preparadas por medio de cualquier tecnología conveniente. La emulsión contiene una composición acuosa y una composición no acuosa (por ejemplo, aceite) en donde ésta última comprende Vitamina D, 25-OH D3, o ambas (separadamente o juntas) disueltas en un aceite en una cantidad de entre aproximadamente 3 % y aproximadamente 50 % en peso con base en el peso total de la composición oleosa. Como se usa en la presente, "composición acuosa" y "fase acuosa" son usadas indistintamente. Generalmente, la emulsión puede contener desde aproximadamente 20 % a aproximadamente 95 % de una composición acuosa, y desde aproximadamente 5 % a aproximadamente 80 % de una composición no acuosa. Preferiblemente, no obstante, la emulsión contiene desde aproximadamente 85 % a aproximadamente 95 % (en volumen) de una composición acuosa, y desde aproximadamente 5 % a aproximadamente 15 % (en volumen) de una composición no acuosa. De manera conveniente, la composición no acuosa puede estar dispersa como goticulas en la composición acuosa. Por ejemplo, las goticulas pueden tener un diámetro medio de menos de aproximadamente 500 nm en la composición acuosa. De manera conveniente, las goticulas tienen un diámetro medio de entre aproximadamente 100 nm y aproximadamente 200 nm. En una modalidad particularmente ventajosa, la emulsión contiene un agente encapsulador, el cual facilita la encapsulación de la composición oleosa después de procesamiento adicional de la emulsión (por ejemplo, por secado por aspersión) . El agente encapsulador puede ser cualquier sustancia comestible capaz de encapsular la composición oleosa. Preferiblemente el agente encapsulador es predominantemente un material coloidal. Dichos materiales incluyen almidones, proteínas de fuentes animales (incluyendo gelatinas) , proteínas de fuentes vegetales, caseína, pectina, alginato, agar, maltodextrinas , sulfonatos de lignina, derivados de celulosa, azúcares, sacáridos, sorbitoles, gomas, y cualquier combinación de éstas. Los almidones adecuados incluyen: almidones vegetales (por ejemplo, CAPSUL® o HI-CAP® de National Starch & Chemical Corp., New York, NY) , otros almidones alimenticios modificados, y cualquier combinación de éstos.

Preferiblemente, el almidón es el almidón vegetal modificado CAPSUL®. Las proteínas adecuadas de fuentes animales incluyen: gelatinas (por ejemplo gelatinas bovinas, gelatinas porcinas (Tipo A o Tipo B) con diferentes números de Bloom, gelatinas de pescado) , proteína de leche descremada, caseínato, y cualquier combinación de éstas. Preferiblemente, la proteína animal es una gelatina. Las proteínas de fuentes vegetales adecuadas incluyen: proteína de papa (por ejemplo, ALBUREX® de Roquette Preres Societé Anonyme, Lestrem, Francia) , proteína de guisante, proteína de soya, y cualquier combinación de éstas. Preferiblemente, la proteína vegetal es la proteína de papa ALBUREX®. Las maltodextrinas adecuadas con un equivalente de dextrosa diferente incluyen: maltodextrina 5, maltodextrina 10, maltodextrina 15, maltodextrina 20, maltodextrina 25, y cualquier combinación de éstas. Preferiblemente, la maltodextrina es maltodextrina 15. Los derivados de celulosa adecuados incluyen: etil celulosa, metiletil celulosa, hidroxi-propil celulosa, hidroxi-propilmetil celulosa, carboximetil celulosa, y cualquier combinación de éstas. Los sacáridos adecuados incluyen lactosa, sacarosa, o cualquier combinación de éstas. Preferiblemente, el sacárido es sacarosa. Las gomas adecuadas incluyen: goma arábiga, goma de algarrobilla, goma de carragenano, y cualquier combinación de éstas. Preferiblemente la goma es goma arábiga. Cuando la emulsión contiene un agente encapsulador, el agente encapsulador puede estar disperso en agua por medio de cualquier tecnología conveniente para formar una fase acuosa. La fase acuosa puede ser una solución o una mezcla dependiendo de las propiedades de los componentes seleccionados. Los componentes seleccionados pueden ser dispersos por medio de cualquier tecnología conveniente incluyendo: homogeneización, mezclado, emulsificación, recirculación, mezclado estático, ultrasonicación, agitación, calentamiento, o cualquier combinación de éstas. La viscosidad de la fase acuosa resultante puede ser entonces ajustada, según se desee, por medio de la adición de agua. La composición acuosa de la emulsión puede contener opcionalmente cualquier otro material adecuado incluyendo, pero no limitándose a, aquellos discutidos anteriormente con referencia a la composición no acuosa. Preferiblemente, la composición acuosa puede incluir, un agente encapsulador, un agente formador de película, un plastificante, un conservador, un antioxidante, o cualquier combinación de éstos. Los conservadores adecuados incluyen metilparabeno, propilparabeno, ácido sórbico, sorbato de potasio, benzoato de sodio, y cualquier combinación de éstos. Los antioxidantes adecuados incluyen ascorbato de sodio, ácido ascórbico, ácido cítrico, y cualquier combinación de éstos. Preferiblemente, la fase acuosa contiene un almidón alimenticio modificado, tal como octenil succinil almidón (CAPSUL®) , maltodextrina, y ascorbato de sodio. Otra fase acuosa preferida contiene proteína de papa (ALBUREX®) , maltodextrina 20, y ascorbato de sodio. Los componentes seleccionados pueden ser disueltos en agua por medio de cualquier tecnología conveniente, preferiblemente agitación. La mezcla es preferiblemente homogeneizada hasta que está uniforme y libre de grumos. Preferiblemente, la homogeneización es llevada a cabo a una temperatura entre aproximadamente 50 °C y aproximadamente 80 °C . La viscosidad final de la fase acuosa resultante puede entonces ser ajustada a la viscosidad deseada, preferiblemente a aproximadamente 250 cps a aproximadamente 450 cps, más preferiblemente desde 300 cps a aproximadamente 400 cps, aún más preferiblemente aproximadamente 385 cps. La emulsión puede ser formada emulsificando la composición no acuosa y la fase acuosa por cualquier medio, incluyendo homogeneización, esfuerzo cortante rotor-estator, esfuerzo cortante a alta presión y cavitación, agitación de alta velocidad o por esfuerzo cortante, o cualquier combinación de éstos. El volumen y la viscosidad de la emulsión pueden ser ajustados preferiblemente por medio de la adición de agua después de emulsificación . Preferiblemente, composiciones no acuosas y acuosas son emulsificadas por homogeneización. Preferiblemente, la emulsión no deberá contener algún mineral, metal de transición, o peróxido. Como se indicó anteriormente, la emulsión puede ser incorporada o empleada al producir otras composiciones útiles, especialmente aceites encapsulados , por ejemplo, polvos secados por aspersión. Generalmente, el aceite encapsulado comprende una composición oleosa y un agente de encapsulación que encapsula la composición oleosa, en donde la composición oleosa contiene Vitamina D, 25-OH D3, o ambas disueltas en el aceite en una cantidad entre aproximadamente 5 % y aproximadamente 50 % en peso con base en el peso total de la composición oleosa. El aceite encapsulado puede ser producido por medio de la tecnología conveniente: por ejemplo, secando una emulsión descrita anteriormente por medio de cualquier tecnología convencional, incluyendo secado por aspersión, secado por congelación, secado en lecho fluidizado, secado en bandejas, adsorción, y cualquier combinación de éstos. Preferiblemente, el aceite encapsulado es producido por secado por aspersión de una emulsión que tenga una fase acuosa descrita anteriormente que contenga un agente encapsulador ; los parámetros de secado por aspersión son dictados por las características físicas deseadas en el aceite encapsulado final. Dichos parámetros físicos incluyen tamaño de partícula, forma y fluencia del polvo, y contenido de agua. Preferiblemente, el aceite está en una cantidad de menos de aproximadamente 30 %, menos de aproximadamente 20 %, menos de aproximadamente 10 %, o menos de aproximadamente 5 % en peso con base en el peso total del aceite encapsulado. El aceite encapsulado deberá tener buena fluencia y la Vitamina D y/o 25-OH D3 deberá estar distribuida homogéneamente en toda la composición. Convenientemente, el aceite encapsulado es un polvo. Cualquier otro aditivo adecuado puede ser añadido al aceite encapsulado. Un aditivo tal puede ser un agente de fluencia tal como dióxido de silicio, para incrementar la fluencia del aceite encapsulado. Dosificaciones Diariamente. Una composición de conformidad con la invención en la cual los dos ingredientes activos son para ser administrados separadamente, contiene Vitamina D o 25-OH D3 en una cantidad desde aproximadamente 1 µg a aproximadamente 50 µg, preferiblemente aproximadamente 5 µ? y 25 µg. Alternativamente, una dosificación individual diariamente que tenga tanto Vitamina D como 25-OH D3 contiene cada ingrediente activo en una cantidad desde aproximadamente 1 a aproximadamente 50 g, preferiblemente 5 ? y 25 ?. La proporción de la dosificación de la Vitamina D a 25-OH D3 puede ser desde aproximadamente 50:1 a aproximadamente 1:50, más preferiblemente desde aproximadamente 25:1 a aproximadamente 1:25, y aún más preferiblemente desde aproximadamente 6:1 a aproximadamente 1:6. Las dosificaciones separadas, múltiples, pueden ser empacadas en un equipo (o contenedor) individual. Por ejemplo, el equipo puede consistir de treinta dosificaciones diarias separadas de ambos ingredientes activos separadamente (es decir, sesenta dosificaciones separadas), o combinadas (es decir, treinta dosificaciones que contengan ambos ingredientes activos). Pueden incluirse en el equipo instrucciones para administrar las dosificaciones a un humano . Semanalmente . Una dosificación individual semanal contiene Vitamina D o 25-OH D3 en una cantidad desde aproximadamente 7 µg a aproximadamente 350 µg, y preferiblemente desde aproximadamente 35 a 175 µ? . Alternativamente, una dosificación semanal individual puede contener tanto Vitamina D como 25-OH D3, cada una en una cantidad desde aproximadamente 7 µg a aproximadamente 350 µg , y preferiblemente desde aproximadamente 35 a 175µ?. La proporción de la dosificación de Vitamina D a 25-OH D3 puede ser desde aproximadamente 50:1 a aproximadamente 1:50, más preferiblemente desde aproximadamente 25:1 a aproximadamente 1:25, y aún más preferiblemente desde aproximadamente 6:1 a aproximadamente 1:6. Mensualmente . Una dosificación individual mensualmente contiene Vitamina D o 25-OH D3 en una cantidad desde 30 µg a aproximadamente 1500 µg, preferiblemente aproximadamente 75 µg a aproximadamente 500 µq . Alternativamente, una dosificación individual mensualmente puede contener tanto Vitamina D como 25-OH D cada una en una cantidad desde 30 µq a aproximadamente 1500 q, preferiblemente aproximadamente 75 µg a aproximadamente 500 µg. Un equipo puede contener uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho, nueve, diez, once o doce dosificaciones semanales o mensuales. Las proporciones de las dosificaciones de Vitamina D a 25-OH D3 deben variar entre 50:1 a aproximadamente 1:50, más preferiblemente desde aproximadamente 25:1 a aproximadamente 1:25, y aún más preferiblemente desde aproximadamente 6:1 a aproximadamente 1:6. La glucosa sanguínea puede ser medida convenientemente usando un ensayo ligado con enzimas para determinar la cantidad de glucosa en sangre o en fracciones de ésta (por ejemplo, plasma o suero) . Muchos ensayos y dispositivos diferentes están disponibles para monitorear la glucosa sanguínea en humanos diabéticos. La hemoglobina glicosilada puede ser medida para monitorear hiperglicemia crónica porque la hemoglobina es glicosilada cuando es expuesta a altos niveles de glucosa durante un período de tiempo prolongado. La hiperglicemia puede dar como resultado síntomas tales como hambre (polifagia) , sed excesiva (polidipsia) , urinación excesiva (poliuria) , fatiga, pérdida de peso, y pobre cicatrización de heridas en humanos diabéticos. Un nivel normal de glucosa sanguínea se considera desde aproximadamente 4 mmoles/L a aproximadamente 7 mmoles/L en adultos en ayunas. Hay una escasez de datos sobre la relación entre 25-hidroxi-vitamina D3 administrada oralmente y su concentración generalizada en humanos, en comparación con la Vitamina D3 administrada oralmente. El análisis más comprensivo a la fecha de las cinéticas de la Vitamina D3 y 25-hidroxi-vitamina D3 fue conducido por Barger-Lux y colaboradores (Osteoporosis 8:222-230, 1998). A hombres saludables se les administró hasta 1250 µg/dia de vitamina D3 durante un periodo de 8 semanas, y hasta 50 µg/dia de 25-hidroxi-vitamina D3 durante un periodo de cuatro semanas. Las cinéticas curvilineales fueron demostradas para la relación déla vitamina D3 y 25-hidroxi-vitamina D3 en plasma, y se sugirió que esto puede ser debido a la saturación de la actividad hidroxilasa en el hígado. Esto fue apoyado porque no se reportó que la dosificación con 25-hidroxi-vitamina D3 produjera cinéticas curvilineales (Barger-Lux y colaboradores, 1998). Aunque los datos sobre 25-hidroxivitamina D3 no mostraron cinéticas curvilineales, es solamente evidente cuando la dosis es prolongada pasado el nivel considerado para dar como resultado el beneficio fisiológico máximo, lo cual puede indicar que la actividad de un mecanismo homeostático que es sobredirigido a muy altas dosis. En el intervalo fisiológico, la relación parece lineal y comparable a Barger-Lux y colaboradores. Estos datos indican que se requiere una dosis diaria de entre 10 µg y 60 µg de 25-hidroxi-vitamina D para beneficio a la salud máximo. Se inició un estudio de las farmacocinéticas en humanos de vitamina D3 secada por aspersión, 25-hidroxi- vitamina D3 secada por aspersión administradas oralmente, o ambas para investigar sus interacciones fisiológicas. En particular las formas de sus curvas de respuesta a la dosis (las cuales indican las concentraciones de vitamina D3 y de 25-hidroxi-vitamina D3 en la circulación durante un recorrido con tiempo de fijación, no simplemente la concentración promedio o máxima lograda) y las cinéticas en estado estacionario fueron de interés. Con respecto al punto anterior, es importante investigar el cambio en la conformación de las curvas de respuesta a la dosis cuando la exposición es a ambas Vitamina D3 y 25-OH D3. Con respecto a este último punto, es también necesario investigar sus cinéticas en estado estacionario cuando la dosificación es menos frecuente que diariamente porque éste es el régimen preferido para grupos que pueden tener baja aceptación con tomar suplementos diariamente (tal como los de edad avanzada) . Se presentan los siguientes Ejemplos no limitantes para ilustrar mejor la invención. EJEMPLOS EJEMPLO 1 ENSAYO CLINICO Formulación Materiales y Métodos Se proporcionaron formulaciones de 25-OH D3 secadas por aspersión como un polvo. Resumiendo, se disolvieron 25-OH D3 y DL-a-tocoferol en un aceite de triglicéridos de cadena media, luego se emulsificaron en una solución acuosa de almidón modificado, sacarosa y ascorbato de sodio. La emulsión fue rociada en un secador por aspersión en la presencia de dióxido de silicio. El polvo resultante fue colectado cuando el contenido de agua (LOD) fue inferior a 4 % y se tamizó a través de 400 µp?. Se empacó y selló en bolsas de aluminio, luego se almacenó en un área seca con temperatura inferior a 15 °C y se usó en 12 meses de su fabricación . Se fabricaron tres lotes separados. En detalle, se produjo una matriz mezclando por 120 minutos en una unidad procesadora FRYMIX con un agitador de ancla a 70 °C bajo vacio y que consistió de: ? 17.300 kg de agua (WBI) ? 13.460 kg de almidón alimenticio modificado (CAPSUL HS) ? 3.270 kg de sacarosa ? 0.730 kg de ascorbato de sodio Se preparó una fase oleosa mezclando por 35 minutos en un reactor de doble pared con propulsor agitador a 82 °C y que consistió de: ? 0.550 kg de aceite BERGABEST MCT 60/40 ? 0.049 kg de calcifediol (HY-D USP) ? 0.183 kg de DL-a-tocoferol La fase oleosa fue transferida a la matriz en la unidad procesadora FRYMIX y fue pre-emulsificada con su molino coloidal interno (60 min, 70 °C) . La pre-emulsión fue circulada a través de un homogeneizador de alta presión (20 min) . La emulsión con una viscosidad de 60 mPa · s a 90 mPa · s a 70 °C fue transferida sobre la bomba de alta presión a la tobera de aspersión. Como agente fluidizante, se alimentó en la torre dióxido de silicio (SIPERNAT 320 DS) . Los parámetros de aspersión y secado se enlistan a continuación.

Parámet ro Aspersión Secado Posición del aire Parte Parte superior entrante superior de de la torre la torre Aire entrante 1500 m3/ 1400 m3/h a 1 iment ado Temperatura del aire 170 °C Calentador entrante apagado Aire entrante a IFB 500 m3/h 500 m3/n a 1 iment ado Temperatura del aire 65 °C 50 °C entrante a IFB Posición del aire de Fondo de la Fondo de la escape torre torre Recirculación del A IFB A IFB polvo fino Velocidad de 50 kg/h Alimentación de alimentación de la la emulsión emul s ión detenida Posición de la Parte Alimentación de alimentación de Si02 superior de Si02 detenida la torre Velocidad de 100 g/h Alimentación de alimentación del S1O2 S1O2 detenida ácido Para cada uno de los tres lotes de 25-Hidroxivitamina D3, se obtuvo un promedio de 8.4 kg de polvo secado por aspersión con aproximadamente 0.25 % de contenido de 25-OH D3. Los otros componentes de la formulación son: 73.2 % de almidón alimenticio modificado, 17.6 % de sacarosa, 4.0 % de ascorbato de sodio, 3.0 % de triglicéridos de cadena media, 1.0 % de dióxido de silicio, y 1.0 % de DL- -tocoferol . Se proporcionó la formulación de Vitamina D3 secada por aspersión como un polvo. Resumiendo, La Vitamina D3 y DL-ct-tocoferol se disolvieron en un aceite de triglicéridos de cadena media, luego se emulsificaron en solución acuosa de almidón modificado, sacarosa, y ascorbato de sodio. La emulsión fue atomizada en un secador por aspersión en la presencia de dióxido de silicio. El polvo resultante fue colectado cuando el contenido de agua (LOD) fue inferior a 4 % y fue tamizado para remover los grumos grandes. Fue almacenado en un área seca con temperatura inferior a 15 °C . La estabilidad fue buena, y la vida de anaquel puede ser prolongada durante 12 meses. Ensayo Clínico Sujetos Se reclutaron mujeres post-menopáusicas (50 a 70 años de edad) , saludables, usando el consentimiento declarado y seleccionadas usando el criterio siguiente: 25-Hidroxi-vitamina D3 en suero entre 20 nmoles/L y 50 nmoles/L, índice de masa corporal entre 18 kg/m2 y 27 kg/m2, presión sanguínea inferior a 146/95 mm de Hg, calcio en suero inferior a 2.6 nmoles/L, glucosa en ayunas inferior a 100 mg/dl, ningún ejercicio de alta intensidad más de tres veces por semana, ningún tratamiento para hipertensión, sin uso de altas dosis de vitamina D o suplemento de calcio o fármaco que afecte el metabolismo óseo (por ejemplo, bifosfonato, calcitonina, moduladores del receptor de estrógeno, terapia de reemplazo hormonal, hormona paratiroidea) , y sin visitar lugares "soleados" durante el estudio. Los sujetos fueron asignados aleatoriamente a uno de siete grupos de tratamiento (es decir, bolus como dosis individual, y bolus como dosis en combinación, diariamente, semanalmente) . Cada grupo incluyó cinco sujetos. Fueron seguidos por cuatro meses en Zürich, Suiza durante el invierno . Diseño El objetivo fue estudiar y comparar las características farmacocinéticas de la Vitamina D3 y de 25-Hidroxi-vitamina D3 administradas a humanos. Se investigaron cantidades equimolares de ambas sustancias. El régimen se basó en 20 µg/día (o su equivalente sobre una base semanal) de 25-Hidroxi-vitamina D3. Para propósitos comparativos, es necesario administrar cantidades equimolares ya sea de Vitamina D3 o bien de 25-OH D3. Con respecto a la administración de Vitamina D3, la dosis se consideró que fue suficiente para superar la variación de fondo y proporcionar la dosis eficiente a los participantes. Diariamente: 120 administraciones 1. 25-Hidroxi-vitamina D3 20 g 2. Vitamina D3 20 µg (800 UI) Semanalmente : 16 administraciones 3. 25-Hidroxi-vitamina D3 140 µg 4. Vitamina D3 140 (5600 UI) Bolus: administración individual 5. 25-Hidroxi vitamina D3 140 µ9 6. Vitamina D3 140 µg (5600 UI) Bolus: administración combo 7. D3 y 25(OH)D3 140µg (5600 UI)+140 µq Cápsulas de gelatina dura, las cuales fueron empacadas en botellas, contenían ya sea 20 µg o 140 µg de Vitamina D3 o bien de 25-Hidroxi-vitamina D3 secadas por aspersión por cápsula. Cada dosificación es consumida oralmente en el desayuno. La duración del estudio es cuatro meses para los grupos "Diariamente" y "Semanalmente". Los sujetos enrolados en el grupo de "Bolus" consumieron oralmente una dosificación individual en la segunda visita del estudio. Se determinaron concentraciones plasmáticas de 25-hidroxi-vitamina D3 (por ejemplo pico y estado estacionario) , obteniendo muestras de los sujetos a varios tiempos después de que la dosificación fuera ingerida. Para propósitos de selección y para establecer valores de referencia, se obtuvo una muestra de sangre antes del enrolamiento en el estudio y el laboratorio clínico midió Vitamina D3, 25-Hidroxi-vitamina D3, calcio, creatinina, albúmina, y glucosa en ayunas en el suero. El lunes de la Semana 1 del estudio, se evaluaron durante 24 horas: la farmacocinética de Vitamina D3, 25-hidroxi-vitamina D3, y 1, 25- dihidroxi- Vitamina D3 en suero; marcadores en suero (es decir, Vitamina D3, 25-Hidroxi-vitamina D3, calcio, creatinina, albúmina, PTH, GOT, GPT, ALP, triglicéridos , HDL, LDL, colesterol total, bALP, y glucosa en ayunas); y marcadores en orina (es decir, calcio, creatinina, y DPD) . Se tomaron muestras diarias por los días restantes de la Semana 1 y el Lunes de la Semana 2, para evaluar Vitamina D3, 25-Hidroxi-vitamina D3 en suero; marcadores en suero (es decir, calcio, creatinina, albúmina; y marcadores en orina (es decir, calcio, creatinina) . Las evaluaciones continuaron los Lunes de las Semanas 3, 5, 7, 9, 11, 13, y 15. El Lunes de la Semana 16, se tomaron muestras para evaluar las farmacocinéticas de Vitamina D3, 25-Hidroxi-vitamina D3, y 1, 25- dihidroxi- Vitamina D3 en suero; marcadores en suero (es decir, Vitamina D3, 25-Hidroxi-vitamina D3, calcio, creatinina, albúmina, PTH, GOT, GPT, ALP, triglicéridos, HDL, LDL, colesterol total, bALP, y glucosa en ayunas) ; y marcadores en orina (es decir, calcio, creatinina, y DPD) . RESULTADOS No pudo efectuarse el análisis estadístico riguroso de los resultados obtenidos por dos razones. Primero, a partir délos datos a la vista (no a-ciegas) se descubrió que hubo una diferencia entre los niveles de referencia de glucosa de los grupos, y que esta diferencia continuó a través de todo el estudio. En segundo término, después de examinar los niveles de insulina de los individuos, se hizo notar que un número de ellos fueron registrados como "0.0" en al menos una visita. Esto indica que hubo ya sea problemas con los analíticos, la muestra, el método o la combinación. No obstante, a pesar de los problemas anteriores se hicieron las siguientes observaciones. Niveles de glucosa: De los diez individuos que recibieron diaria o semanalmente Vitamina D3, 7 tuvieron niveles de glucosa más bajos en la semana 15, en comparación con la semana 2. Para 25-OH D3, 6 de 10 tuvieron niveles de glucosa más bajos. Por consiguiente, parece que ambas Vitamina D3 y 25-OH D3 pueden abatir los niveles de glucosa. Niveles de Insulina: De los diez individuos que recibieron diaria o semanalmente la Vitamina D3, solamente cuatro tuvieron niveles de insulina que no incluyeron un resultado "0.0" en alguna visita. De estos cuatro, tres tuvieron niveles insulina más altos en la semana 15 que en la semana 2; y solamente uno tuvo un valor más bajo. De los diez individuos que recibieron diaria o semanalmente 25-OH D3, cinco tuvieron niveles de insulina que no incluyeron el resultado "0.0" en alguna visita. De estos cinco, uno tuvo un nivel de insulina más bajo en la semana 15 que en la semana 2; pero cuatro tuvieron un nivel más bajo. Un nivel de insulina más bajo es un resultado deseado, como lo indica que la sensibilidad a la insulina sea mejorada. Por consiguiente, parece que 25-OH-D3 tiene una habilidad mejor para mejorar la sensibilidad a la insulina que la Vitamina D3. EJEMPLO 2 Estudio en Ratón Se probaron los efectos de 25-OH D3 o de la combinación de 25-OH D3 y Vitamina D3 sobre glucosa sanguínea en dos estudios en ratones. En el primer estudio, se determinaron los efectos de 25-OH D3 sobre glucosa sanguínea en un modelo de hipertrofia de músculo. Resumiendo, dos grupos de 10 animales fueron anestesiados y la pata trasera izquierda de los animales fueron fijadas. Todos los animales recibieron un analgésico. Se hizo una pequeña incisión a través de la piel sobre el músculo gastrocnemius . Fueron expuestos el músculo gastrocnemius y sus tendones. Ambas cabezas del músculo gastrocnemius fueron cuidadosamente disectadas desde los músculos subyacentes intactos y se tuvo cuidado de no romper los nervios y vasos sanguíneos. La piel fue cerrada con una sutura de seda y los animales fueron regresados a sus jaulas. Después de recuperación de la anestesia los animales pudieron moverse directamente sin problemas en sus jaulas. Los animales fueron tratados por tres semanas por sonda con 25-OH D3 a una dosificación diaria de 50 µg/kg y el grupo control recibió vehículo. Al final del estudio, se tomó sangre y se analizó la concentración de glucosa en plasma por medio de un analizador Hitachi 912 Automático. En el segundo estudio, se probaron los efectos de 25-OH D3 o de la combinación de 25-OH D3 y Vitamina D3 sobre la glucosa sanguínea en un modelo de atrofia de músculo.

Resumiendo, animales de 9 meses de edad fueron aleatorizados al comienzo del estudio en cinco grupos con diez animales por grupo. Los animales fueron colocados en jaulas especiales por duración de tres semanas y sus colas fueron suspendidas, lo cual conduce a atrofia del músculo esquelético de las patas traseras sin carga. Un grupo adicional sin cargar las patas traseras fue colocado en jaulas idénticas a fin de detectar los efectos de sin-carga. Todos los ratones fueron alojados separadamente y tuvieron libre acceso a alimentación y agua ad libitum. Todos los animales fueron tratados diariamente por sonda durante el transcurso de las 3 semanas del experimento : 1. Grupo control sin descargar recibieron vehículo (gelatina) 2. Grupo control con descarga recibieron vehículo (gelatina) 3. El grupo de vitamina D3 con descarga recibió Vitamina D3 (50 µg/kg de peso vivo) 4. El grupo de 25-OH D3 con descarga recibió 25-OH D3 (50 µg/kg de peso vivo 5. El grupo de 25-OH D3 más Vitamina D3 con descarga recibió Vitamina D3 + 25-OH D3 (50 + 50 µg/kg de peso vivo) La Tabla 1 muestra los valores de glucosa en plasma después de terminación del estudio 1 TABLA 1 La Tabla 2 muestra los valores de glucosa plasmática después de la terminación del estudio 2. TABLA 2 Los resultados de la Tabla 1 indican que el tratamiento con 25-OH D3 dio como resultado un decremento en la glucosa plasmática en comparación con el grupo control no tratado. Los resultados de la Tabla 2 demuestran que patas traseras descargadas dan como resultado un incremento en los niveles de glucosa sanguínea (grupo control sin descarga versus grupo control con descarga) . El tratamiento con Vitamina D3 o 25-OH D3 dio como resultado una disminución moderada en los niveles de glucosa sanguínea. No obstante, el tratamiento con la combinación de Vitamina D3 y 25-OH D3 dio como resultado una disminución sinérgica en los niveles de glucosa plasmática los cuales casi alcanzaron el nivel de los animales control sin descarga, por consiguiente el mejoramiento del efecto de la descarga. Por consiguiente, nuestros datos muestran que la combinación de Vitamina D3 y 25-OH D3 disminuyen sinérgicamente niveles de glucosa sanguínea elevados y normalizan los niveles de glucosa cambiados patológicamente.

Claims (5)

NOVEDAD DE LA INVENCION Habiendo descrito la presente invención, se considera como novedad y por lo tanto se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes: REIVINDICACIONES

1. - Un método de tratar a un humano, caracterizado porque comprende administrar 25-hidroxi-vitamina D3 (25-OH D3) al humano en una cantidad suficiente para reducir o mantener la glucosa de plasma sanguíneo a un nivel entre 4 mmoles/L y 7 mmoles/L.

2. - Un método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque comprende adicionalmente administrar Vitamina D.

3. - Uso. de 25-OH D3 para mantener los niveles de glucosa de plasma sanguíneo saludables o para reducir los niveles de glucosa sanguínea a niveles saludables. 4.- Uso de conformidad con la reivindicación 3, en combinación con el uso de Vitamina D. 5.- Una composición caracterizada porque comprende (i) vitamina D y 25-hidroxi-vitamina D3 en cantidades suficientes para reducir o mantener la glucosa de plasma sanguíneo a un nivel entre 4 mmoles/L y 7 mmoles/L y (ii) un portador aceptable farmacéuticamente.