MX2008012791A - Terapia de combinacion de (2r,z)-2-amino-2-ciclohexil-n-(5-(1-meti l-1h-pirazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1h-[1,2]diazepinos[4,5,6-cd[ indol-8-il)acetamida. - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a terapias de combinación nuevas de (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-1-ox o-2,6-dihidro-1H-[1,2]diazepino{4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida (compuesto 1), una sal o solvato farmacéuticamente aceptable de la misma, o una mezcla de los mismos, en combinación con un agente anticancerígeno o terapia de radiación. (ver fórmula (1)).

Description

TERAPIA DE COMBINACION DE (2R,Z)-2-AMINO-2-CICLOHEXIL-N-(5-(1-METIL-1 H-PIRAZOL-4-ILH -OXO-2.6-DIHIDRO-1 ?-G1 ,21DIAZEPINOSr4.5.6- CDflNDOL-8-IÜACETAMIDA CAMPO DE LA INVENCION La presente invención se dirige a procedimientos para usar (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1 -metil-1 H-pirazol-4-il)-1 -oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, en combinación con un agente anticancerígeno o terapia de radiación para tratar cáncer en un mamífero.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION El compuesto (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-( -metil-1 H-pirazol-4-il)-1 -oxo-2, 6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetam¡da (también denominado "Compuesto 1"), asi como las sales farmacéuticamente aceptables del mismo, se describe en la Patente de Estados Unidos n° 6.967.198, publicada el 22 de noviembre de 2005, cuya descripción se incorpora en el presente documento mediante referencia. Muchos agentes anticancerígenos, así como terapia de radiación, provocan daños en el ADN a las células, en especial células cancerígenas. La inhibición de la CHK1 potencia el efecto anticancerígeno de estos agentes anticancerígenos o terapia de radiación, invalidando la detención en S y G2 de estas células con ADN dañado y dirigiéndose así a la catástrofe mitótica y muerte celular de estas células. La (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida es un potente inhibidor de la proteína quinasa CHK1. El uso de (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1H[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida, una sal o un solvato farmacéuticamente aceptable de la misma, o una mezcla de los mismos, en combinación con un agente anticancerígeno o terapia de radiación potenciará en gran medida el efecto anticancerígeno del agente anticancerígeno o terapia de radiación.

BREVE DESCRIPCION DE LA INVENCION En una realización, la invención proporciona un procedimiento para tratar un trastorno hiperproliferativo en un mamífero que comprende la administración al mamífero de una cantidad terapéuticamente efectiva de (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida, una sal o solvato farmacéuticamente aceptable de la misma, o una mezcla de los mismos, en combinación con una cantidad terapéuticamente efectiva de un tratamiento anti-hiperproliferativo seleccionado de un agente anti-hiperproliferativo y terapia de radiación. En un aspecto particular de esta realización, el agente anti-hiperproliferativo se selecciona de inhibidores de la enzima farnesil proteína transferasa e inhibidores del receptor de la tirosina quinasa PDGFr. Preferiblemente, el agente anti-hiperproliferativo es un compuesto descrito y reivindicado en los siguientes documentos: Patente de Estados Unidos 6.080.769; Patente de Estados Unidos 6.194.438; Patente de Estados Unidos 6.258.824; Patente de Estados Unidos 6.586.447; Patente de Estados Unidos 6.071.935; Patente de Estados Unidos 6.495.564; y Patente de Estados Unidos 6.150.377; Patente de Estados Unidos 6.596.735; Patente de Estados Unidos 6.479.513; documento WO 01/40217; documento U.S. 2003-0166675. Cada una de las patentes y solicitudes de patentes anteriores se incorporan en su totalidad mediante referencia en el presente documento.

En un aspecto particular de esta realización, el agente anti-hiperproliferativo es un inhibidor de PDGRr. El inhibidor de PDGRr incluye pero no se limita a los descritos en la publicación de solicitud de patente internacional números WO01/40217 y WO2004/020431 , cuyos contenidos se incorporan en su totalidad a todos los efectos. Los inhibidores de PDGFr preferidos incluyen CP-673.451 y CP-868.596 de Pfizer y sus sales. En otra realización, la invención proporciona un procedimiento para tratar cáncer en un mamífero, que comprende la administración al mamífero de una cantidad terapéuticamente efectiva de (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1 -metil-1 H-pirazol-4-il)-1 -oxo-2,6-dihidro-1 H- [1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida, una sal o solvato farmacéuticamente aceptable de la misma, o una mezcla de los mismos, en combinación con una cantidad terapéuticamente efectiva de un tratamiento anticancerígeno seleccionado de un agente anticancerígeno y terapia de radiación. En un aspecto particular de esta realización, y en combinación con cualquier otro aspecto particular no inconsistente, el procedimiento potencia el efecto terapéutico del tratamiento anticancerígeno. En otro aspecto particular de esta realización, y en combinación con cualquier otro aspecto particular no inconsistente, el procedimiento muestra un efecto terapéutico sinérgico de (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]¡ndol-8- il)acetamida, una sal o solvato farmacéuticamente aceptable de la misma, o una mezcla de los mismos, y el tratamiento anticancerígeno. En otro aspecto particular de esta realización, y en combinación con cualquier otro aspecto particular no inconsistente, el cáncer se selecciona de cáncer de colon, cáncer de próstata, cáncer de mama y leucemia. Todavía más preferiblemente, el cáncer es cáncer de colon. En otro aspecto particular de esta realización, y en combinación con cualquier otro aspecto particular no inconsistente, el tratamiento anticancerígeno es un agente anticancerígeno. Preferiblemente, el agente anticancerígeno es una sustancia química o biológica que muestra clínicamente que trata el cáncer. Más preferiblemente, el agente anticancerígeno se selecciona del grupo que está constituido por actinomicina D, adriamicina, amsacrina, ara-C, 9-(3-D-arabinosil-2-fluoroadenina, BCNU, bleomicina, camptotecina, carboplatino, 2-cloro-2-desoxiadenosina, CPT-11 , ciclofosfamida, docetaxel, doxorubicina, edotecarina, etopósido, fludarabina, 5-fluorouracilo (5-FU), gemcitabina, HU-Gemzar, Irinotecán, metotrexato, 6-Mpurina, mitomicina-C, paclitaxel, cis-platíno, SN-38, taxol, tiotepa, 6-tioguanina, trimetrexato vinblastina, vincristina, y VP-16. Todavía más preferiblemente, el agente anticancerígeno se selecciona del grupo que está constituido por gemcitabina, irinotecán, docetaxel, SN-38, carboplatino, doxorubicina y mitomicina C. Todavía más preferiblemente, el agente anticancerígeno es gemcitabina. Todavía más preferiblemente, el agente anticancerígeno es irínotecán. Todavía más preferiblemente, el agente anticancerígeno es docetaxel. En otro aspecto particular de esta realización, y en combinación con cualquier otro aspecto particular no inconsistente, el agente anticancerígeno es un agente dañino para el ADN. Preferiblemente, el "agente dañino para el ADN" es una sustancia química o biológica que muestra clínicamente que trata el cáncer. Más preferiblemente, el agente dañino para el ADN se selecciona del grupo que está constituido por agentes alquilantes, antimetabolitos, antibióticos antitumorales, análogos de platino, inhibidores de topoisomerasa I e inhibidores de topoisomerasa II. En otro aspecto particular de esta realización, y en combinación con cualquier otro aspecto particular no inconsistente, el agente antícancerígeno es un agente alquilante. Preferiblemente, el agente alquilante se selecciona del grupo que está constituido por apazicuona, altretamina, brostalicina, bendamustina, busulfán, carbocuona, carmustina, clorambucil, clormetina, ciclofosfamida, estramustina, fotemustina, glufosfamida, ifosfamida, lomustina, mafosfamida, óxido de mecloretamina, mecilinam, melfalán, mitobronitol, mitolactol, nimustina, N-óxido de mostaza de nitrógeno, pipobromán, ranimustína, temozolomida, tíotepa, treosulfán, y trofosframida. Todavía más preferiblemente, el agente alquilante es ciclofosfamida. En otro aspecto particular de esta realización, y en combinación con cualquier otro aspecto particular no inconsistente, el agente anticancerigeno es un antimetabolito. Preferiblemente, el antimetabolito se selecciona del grupo que está constituido por Alimta, Ara-C, 5-azacitidina, capecitabina, carmofur, cladribina, clofarabina, citarabina, citosina arabinosida, decitabina, premetrexed disódico, doxifluridina, eflornitina, enocitabina, etinilcitidina, floxuridina, fludarabina, 5-fluorouracilo (5-FU), gemcitabina, hidroxiurea, leucovorina, melfalán, 6-mercaptopurina, metotrexato, mitoxantrona, 6-Mpurina, pentostatina, pelitrexol, raltitrexed, ribosida, metotrexato, mercaptopurina, nelarabina, nolatrexed, ocfosfato, tegafur, 6-tioguanina (6-TG), tioguanina, triapina, trimetrexato, vidarabina, vincristina, vinorelbina y UFT. Más preferiblemente, el antimetabolito se selecciona de 5-fluorouracilo y gemcitabina. Todavía más preferiblemente, el antimetabolito es gemcitabina. En otro aspecto particular de esta realización, y en combinación con cualquier otro aspecto particular no inconsistente, el agente anticancerígeno es un antibiótico antitumoral. Preferiblemente, el antibiótico antitumoral se selecciona del grupo que está constituido por aclarubicina, actinomícina D, amrubicina, annamicina, adriamicina, bleomicina, dactinomicina, daunorubicina, doxorubicína, elsamitrucína, epirubicína, galarubicina, idarubicina, mitomicina C, ácido micofenólíco, nemorubicina, neocarzinostatina, pentostatina, peplomicina, pirarubicina, rebeccamicina, estimalámero, estreptozocina, valrubicina y zinostatina. Más preferiblemente, el antibiótico se selecciona del grupo que está constituido por actinomicina D, bleomicina, doxorubicina y mitomicina-C. Todavía más preferiblemente, el antibiótico antitumoral se selecciona de mitomicina-C y doxorubicina. En otro aspecto particular de esta realización, y en combinación con cualquier otro aspecto particular no inconsistente, el agente anticancerígeno es un análogo de platino. Preferiblemente, el análogo de platino se selecciona del grupo que está constituido por carboplatino (Paraplatin), cisplatino, Eloxatin (oxaliplatino, Sanofi) eptaplatino, lobaplatino, nedaplatino y satrplatino. Más preferiblemente, el análogo de platino se selecciona de cisplatino, carboplatino y Eloxatin (oxaliplatino). Todavía más preferiblemente, el análogo de platino es carboplatino. En otro aspecto particular de esta realización, y en combinación con cualquier otro aspecto particular no inconsistente, el agente anticancerígeno es un inhibidor de topoisomerasa I. Preferiblemente, el inhibidor de topoisomerasa I se selecciona del grupo que está constituido por BN-80915 (Roche), camptotecina, CPT- 1 , edotecarina, exatecán, irinotecán, oratecina (Supergen), SN-38, y topotecán. Más preferiblemente, el inhibidor de topoisomerasa I se selecciona de irinotecán, SN-38 y topotecán. Todavía más preferiblemente, el inhibidor de topoisomerasa I es irinotecán. En otro aspecto particular de esta realización, y en combinación con cualquier otro aspecto particular no inconsistente, el agente anticancerígeno es un inhibidor de topoisomerasa II. Preferiblemente, el inhibidor de topoisomerasa II se selecciona de amsacrina, etopósido, fosfato de etopósido y epirubicina (Ellence).

En otro aspecto particular de esta realización, y en combinación con cualquier otro aspecto particular no inconsistente, el agente anticancerígeno incluye uno o más agentes seleccionados del grupo que está constituido por aclarubicina, amonafida, belotecán, camptotecina, 10-hidroxicamptotecina, 9-aminocamptotecina, diflomotecán, irinotecán HCI (Camptosar), edotecarina, epirubicina (Ellence), etopósido, exatecán, gimatecán, lurtotecán, mitoxantrona, pirarubicina, pixantrona, rubitecán, sobuzoxano, SN-38, taflupósido, topotecán. Preferiblemente, el agente anticancerígeno incluye uno o más agentes seleccionados del grupo que está constituido por camptotecina, 10-hidroxicamptotecina, 9-aminocamptotecina, irinotecán HCI (Camptosar), edotecarina, epirubicina (Ellence), etopósido, SN-38, topotecán, y combinaciones de los mismos. En otro aspecto particular de esta realización, y en combinación con cualquier otro aspecto particular no inconsistente, el agente anticancerígeno es un inhibidor mitótico. Preferiblemente, el inhibidor mitótico se selecciona del grupo que está constituido por docetaxel (Taxotere), estramustina, paclitaxel, razoxano, taxol, tenipósido, vinblastina, vincristina, vindesina y vinorelbina. Más preferiblemente, el inhibidor mitótico se selecciona de docetaxel, vincristina, vinblastina y taxol. Todavía más preferiblemente, el inhibidor mitótico es docetaxel. En otro aspecto particular de esta realización, y en combinación con cualquier otro aspecto particular no inconsistente, el tratamiento anticancerígeno es terapia de radiación.

En otro aspecto particular de esta realización, y en combinación con cualquier otro aspecto particular no inconsistente, al menos una dosis, preferiblemente al menos el 20% de todas las dosis, más preferiblemente al menos el 50% de todas las dosis, todavía más preferiblemente al menos el 90% de todas las dosis, todavía más preferiblemente cada dosis individual, de (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida, una sal o solvato farmacéuticamente aceptable de la misma, o una mezcla de los mismos, se administra de 1 a 48 horas, más preferiblemente de 2 a 40 horas, más preferiblemente de 4 a 32 horas, más preferiblemente de 8 a 28 horas, todavía más preferiblemente de 16 a 26 horas, todavía más preferiblemente de 23 a 25 horas, todavía más preferiblemente, aproximadamente 24 horas después de que se administre una dosis del tratamiento anticancerígeno. En otro aspecto particular de esta realización, y en combinación con cualquier otro aspecto particular no inconsistente, al menos una dosis, preferiblemente al menos el 20% de todas las dosis, más preferiblemente al menos el 50% de todas las dosis, todavía más preferiblemente al menos el 90% de todas las dosis, todavía más preferiblemente cada dosis individual, de (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1H^ [1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida, una sal o solvato farmacéuticamente aceptable de la misma, o una mezcla de los mismos, se administra simultáneamente con una dosis del tratamiento antícancerígeno. "Simultáneamente" usado en la presente memoria descriptiva se refiere a dentro de 4 horas, preferiblemente dentro de 2 horas, preferiblemente dentro de 1 hora, todavía más preferiblemente dentro de 30 minutos, 15 minutos ó 5 minutos, antes o después. En otro aspecto particular de esta realización, y en combinación con cualquier otro aspecto particular no inconsistente, el procedimiento fija como diana de forma selectiva células defectivas en p53 mientras que tiene efectos citotóxicos mínimos sobre las células normales (competentes en p53). En otro aspecto particular de esta realización, y en combinación con cualquier otro aspecto particular no inconsistente, el agente anticancerígeno es un agente anti-angiogénesis. Preferiblemente el agente anti-angiogénesis se selecciona de inhibidores de EGF, inhibidores de EGFR, inhibidores de VEGF, inhibidores de VEGFR, inhibidores de TIE2, inhibidores de IGF1 R, inhibidores de COX-II (ciclooxigenasa II), inhibidores de MMP-2 (metaloproteinasa de matriz 2), e inhibidores de MMP-9 (metaloproteinasa de matriz 9). Los inhibidores de VEGF preferidos incluyen, por ejemplo, Avastin (bevacizumab), un anticuerpo monoclonal anti-VEGF de Genentech, Inc. de South San Francisco, California. Otros inhibidores de VEGF incluyen CP-547.632 (Pfizer Inc., NY, EE. UU.), AG13736 (Pfizer Inc.), ZD-6474 (AstraZeneca), AEE788 (Novartis), AZD-2171 , VEGF Trap (Regeneron/Aventis), Vatalanib (también conocido como PTK-787, ZK-222584: Novartis & Schering AG), Macugen (pegaptanib de octasodio, NX-1838, EYE-001 , Pfizer Inc./Gilead/Eyetech), IM862 (Cytran Inc. de Kirkland, Washington, EE. UU.); y angiozima, una ribozima sintética de Ribozyme (Boulder, Colorado) y Chiron (Emeryville, California) y combinaciones de los mismos. Los inhibidores de VEGF útiles en la práctica de la presente invención se describen en la Patente de Estados Unidos n° 6.534.524 y 6.235.764, que se incorporan ambas en su totalidad a todos los efectos. Otros inhibidores de VEGF se describen, por ejemplo, en el documento WO 99/24440, en el documento WO 95/21613, documento WO 99/61422, Patente de Estados Unidos 5.834.504, documento WO 98/50356, Patente de Estados Unidos 5.883. 13, Patente de Estados Unidos 5.886.020, Patente de Estados Unidos 5.792.783, Patente de Estados Unidos 6.653.308, documento WO 99/10349, documento WO 97/32856, documento WO 97/22596, documento WO 98/54093, documento WO 98/02438, documento WO 99/16755, y documento WO 98/02437, todos los cuales se incorporan en su totalidad en el presente documento mediante referencia. Los inhibidores preferidos de EGRF incluyen, pero no se limitan a Iressa (gefitinib, AstraZeneca), Tarceva (erlotinib ó OSI-774, OSI Pharmaceuticals Inc.), Erbitux (cetuximab, Imclone Pharmaceuticals, Inc.), EMD-7200 (Merck AG), ABX-EGF (Amgen Inc. y Abgenix Inc.), HR3 (Gobierno de Cuba), anticuerpos IgA (Universidad de Erlangen-Nuremberg), TP-38 (IVAX), proteína de fusión de EGFR, vacuna EGF, inmunoliposomas anti-EGFr (Hermes Biosciences Inc.) y combinaciones de los mismos. Todavía más preferiblemente, el inhibidor de EGFR se selecciona de Iressa, Erbitux, Tarceva y combinaciones de los mismos.

Otros agentes anti-angiogénicos incluyen acitretina, fenretinida, talidomida, ácido zoledrónico, angiostatina, aplidina, cilengtida, combretastatina A-4, endostatina, halofuginona, rebimastat, removab, Revlimid, escualamina, ukrain, Vitaxin y combinaciones de los mismos. En otro aspecto particular de esta realización, y en combinación con cualquier otro aspecto particular no inconsistente, el agente anticancerígeno es un inhibidor de la pan quinasa. Los inhibidores preferidos de la pan quinasa incluyen Sutent™ (sunitinib), descrito en la Patente de Estados Unidos n° 6.573.293 (Pfizer, Inc, NY, EE. UU.). En otro aspecto particular de esta realización, y en combinación con cualquier otro aspecto particular no inconsistente, el agente anticancerígeno se selecciona de inhibidores del receptor de pan Erb o inhibidores del receptor ErbB2, tal como CP-724,714 (Pfizer, Inc.), CI-1033 (canertinib, Pfizer, Inc.), Herceptin (trastuzumab, Genentech Inc.), Omitarg (2C4, pertuzumab, Genentech Inc.), TAK- 65 (Takeda), GW-572016 (lonafarnib, GlaxoSmithKIine), GW-282974 (GlaxoSmithKIine), EKB-569 (Wyeth), PKI-166 (Novartis), dHER2 (Vacuna HER2, Corixa and GlaxoSmithKIine), APC8024 (Vacuna HER2, Dendreon), anticuerpo biespecífico anti-HER2/neu (Decof Cáncer Center), B7.her2.lgG3 (Agensys), AS HER2 (Research Institute for Rad Biology & Medicine), anticuerpos biespecíficos trifuncionales (Universidad de Munich) y mAB AR-209 (Aronex Pharmaceuticals Inc) y mAB 2B-1 (Chiron) y combinaciones de los mismos.

En otro aspecto particular de esta realización, y en combinación con cualquier otro aspecto particular no inconsistente, el agente anticancerígeno se selecciona del inhibidor MEK1/2 PD325901 de Pfizer, inhibidor MEK ARRY-142886 de Array Biopharm, inhibidor CDK2 BMS-387.032 de Bristol Myers, inhibidor CDK PD0332991 de Pfizer y AXD-5438 de AstraZeneca, y combinaciones de los mismos. En otro aspecto particular de esta realización, y en combinación con cualquier otro aspecto particular no inconsistente, el agente anticancerígeno se selecciona de celecoxib (Patente de Estados Unidos n° 5.466.823), valdecoxib (Patente de Estados Unidos n° 5.633.272), parecoxib (Patente de Estados Unidos n° 5.932.598), deracoxib (Patente de Estados Unidos n° 5.521.207), SD-8381 (Patente de Estados Unidos n° 6.034.256, Ejemplo 175), ABT-963 (documento WO 2002/24719), rofecoxib (CAS No. 162011-90-7), MK-663 (o etoricoxib) como se describe en el documento WO 1998/03484, COX-189 (Lumiracoxib) como se describe en el documento WO 1999/11605, BMS-347070 (Patente de Estados Unidos 6.180.651), NS-398 (CAS 123653-11-2), RS 57067 (CAS 17932-91-3), 4-Metil-2-(3,4-dimetilfenil)-1 -(4-sulfamoil-fenil)-1 H-pirrol, 2-(4-Etoxifenil)-4-metil-1 -(4-sulfamoilfenil)-1 H-pirrol, y meloxicam. En otro aspecto particular de esta realización, y en combinación con cualquier otro aspecto particular no inconsistente, el agente anticancerígeno se selecciona de Genasense (augmerosen, Genta), Panitumumab (Abgenix/Amgen), Zevalin (Schering), Bexxar (Corixa/GlaxoSmithKline), Abarelix, Alimta, EPO 906 (Novartis), discodermolida (XAA-296), ABT-510 (Abbott), Neovastat (Aeterna), enzastaurin (Eli Lilly), Combrestatin A4P (Oxigene), ZD-6126 (AstraZeneca), flavopiridol (Aventis), CYC-202 (Cyclacel), AVE-8062 (Aventis), DMXAA (Roche/Antisoma), Thymitaq (Eximias), Temodar (temozolomide, Schering Plough) y Revilimd (Celegene) y combinaciones de los mismos. En otro aspecto particular de esta realización, y en combinación con cualquier otro aspecto particular no inconsistente, el agente anticancerígeno se selecciona de CyPat (acetato de ciproterona), Histerelin (acetato de histrelina), Plenaixis (abarelix depot), Atrasentan (ABT-627), Satraplatin (JM-216), talomida (Thalidomide), Theratope, Temilifene (DPPE), ABI-007 (paclitaxel), Evista (raloxifeno), Atamestane (Biomed-777), Xyotax (poliglutamato de paclitaxel), Targetin (bexarotina) y combinaciones de los mismos. En otro aspecto particular de esta realización, y en combinación con cualquier otro aspecto particular no inconsistente, el agente anticancerígeno se selecciona de Trizaone (tirapazamina), Aposyn (exisulind), Nevastat (AE-941), Ceplene (diclorhidrato de histamina), Orathecin (rubitecán), Virulizin, Gastrimmune (G17DT), DX-8951f (mesilato de exatecán), Onconase (ranpirnasa), BEC2 (mitumoab), Xcytrin (gadolinio motexafina) y combinaciones de los mismos. En otro aspecto particular de esta realización, y en combinación con cualquier otro aspecto particular no inconsistente, el agente anticancerígeno se selecciona de CeaVac (CEA), NeuTrexin (glucuronato de trimetresato) y combinaciones de los mismos. Otros agentes antitumorales se pueden seleccionar de los siguientes agentes, OvaRex (oregovomab), Osidem (IDM-1 ), y combinaciones de los mismos. Otros agentes antitumorales se pueden seleccionar de los siguientes agentes, Advexin (ING 201), Tirazone (tirapazamina), y combinaciones de los mismos. Otros agentes antitumorales se pueden seleccionar de los siguientes agentes, RSR13 (efaproxiral), Cotara (1311 chTNT 1/b), NBI-3001 (IL-4) y combinaciones de los mismos. Otros agentes antitumorales se pueden seleccionar de los siguientes agentes, Canvaxin, vacuna GMK, PEG Interon A, Taxoprexin (DHA/paciltaxel), y combinaciones de los mismos. Los términos "agentes alquilantes", "antimetabolitos", "antibióticos antitumorales", "análogos de platino", "inhibidores de topoisomerasa I", "inhibidores de topoisomerasa II", e "inhibidores mitóticos" usados en la presente memoria descriptiva, se refieren a las clases de agente anticancerígeno clínicamente usado, químico o biológico. Cada uno de estos términos incluye cualquiera de los agentes anticancerígenos clínicamente usados en la actualidad que se sitúa dentro de la clase particular, así como cualquier agente anticancerígeno clínico futuro no inventado todavía pero que se situará en la clase particular. Para ejemplos de cada una de estas clases de agente anticancerígeno, véase Physician's Cáncer Chemotherapy Drug Manual, 2006, ISBN 0-7637-4019-5. Para listas más exhaustivas de cada una de estas clases de agente anticancerígeno, véase Martindale's Complete Drug Reference, Edición 34. El término "tratamiento anticancerígeno" se refiere a un "agente anticancerígeno" o "terapia de radiación", como se define en la presente memoria descriptiva. El término "agente anticancerígeno" se refiere a cualquier sustancia, química o biológica, que se puede usar para tratar cáncer. El término "agente dañino para el ADN" se refiere a cualquier agente anticancerígeno, químico o biológico, que previene directa o indirectamente la replicacíón normal o función normal del ADN en un mamífero. Los ejemplos de "agente dañino para el ADN" incluyen, pero no se limitan a, agentes alquilantes, antimetabolito, antibióticos anticancerígenos, análogos de platino, inhibidores de topoisomerasa I e inhibidores de topoisomerasa II, como se define en la presente memoria descriptiva. El término "en combinación con" se refiere a la programación relativa de la administración de un tratamiento terapéutico, tal como (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida, una sal o solvato farmacéuticamente aceptable de la misma, o una mezcla de los mismos, a un mamífero que necesita de la misma, a la de otro tratamiento terapéutico, tal como un agente anticancerígeno o terapia de radiación, siendo la programación relativa las usadas normalmente en el campo de la medicina para terapia de combinación. En particular, la programación relativa puede ser secuencial o simultánea. Una realización preferible de administración secuencial es administrar primero el agente anticancerígeno o terapia de radiación seguido de la administración de (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1 H-[ ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetam¡da, una sal o solvato farmacéuticamente aceptable de la misma, o una mezcla de los mismos, en 24 horas. El término "trastorno hiperproliferativo" se refiere al crecimiento anormal de células que es independiente de los mecanismos reguladores normales (por ejemplo, pérdida de inhibición de contacto), incluyendo el crecimiento anormal de células normales y el crecimiento de células anormales. Esto incluye, pero no se limita a, el crecimiento anormal de células tumorales (tumores), tanto benignas como malignas. Ejemplos de tales enfermedades proliferativas benignas son soriasis, hipertrofia prostética benigna, virus del papiloma humano (HPV), y reestenosis. El término "cáncer" incluye, pero no se limita a, cáncer de pulmón, cáncer de huesos, cáncer pancreático, cáncer de piel, cáncer de cabeza o cuello, melanoma cutáneo o infraocular, cáncer uterino, cáncer de ovario, cáncer rectal, cáncer de la región anal, cáncer de estómago, cáncer de colon, cáncer de mama, cáncer uterino, carcinoma de las trompas de Falopio, carcinoma del endometrio, carcinoma cervical, carcinoma de la vagina, carcinoma de la vulva, Enfermedad de Hodgkin, cáncer de esófago, cáncer de intestino delgado, cáncer del sistema endocrino, cáncer de la glándula tiroides, cáncer de la glándula paratiroides, cáncer de la glándula suprarrenal, sarcoma de tejidos blandos, cáncer de uretra, cáncer de pene, cáncer de próstata, leucemia crónica o aguda, linfomas linfocíticos, cáncer de vejiga, cáncer de riñon o de uréter, carcinoma renal celular, carcinoma de la pelvis renal, cánceres del sistema nervioso central (SNC), linfoma primario del SNC, tumores de la médula espinal, glioma del tronco cerebral, adenoma pituitario, o una combinación de uno o más de los cánceres anteriores. En otra realización de dicho procedimiento, dicho crecimiento anormal de células es una enfermedad proliferativa benigna, que incluye, pero no se limita a, soriasis, hipertrofia prostática benigna o reestenosis. El término "mediado por la actividad de la proteína quinasa CHK1 " se refiere a los procedimientos biológicos o moleculares que se regulan, modulan o inhiben por medio de la actividad de la proteína quinasa CHK1. El término "sal(es) farmacéuticamente aceptable(s)" se refiere a sales de grupos ácidos o básicos que pueden estar presentes en un compuesto. Los compuestos que son básicos por naturaleza son capaces de formar una amplia variedad de sales con diversos ácidos orgánicos e inorgánicos. Los ácidos que se pueden usar para preparar sales de adición de ácidos farmacéuticamente aceptables de tales compuestos básicos son aquellos que forman sales de adición de ácidos no tóxicas, esto es, sales que contienen aniones farmacológicamente aceptables, tales como las sales de acetato, bencenosulfonato, benzoato, bicarbonato, bisulfato, bitartrato, borato, bromuro, edetato de calcio, camsilato, carbonato, cloruro, clavulanato, citrato, diclorhidrato, edetato, edisilato, estolato, esilato, etilsuccinato, fumarato, gluceptato, gluconato, glutamato, glicolilarsanilato, hexilresorcinato, hidrabamina, bromhidrato, clorhidrato, yoduro, isotionato, lactato, lactobionato, laurato, malato, maleato, mandelato, mesilato, metilsulfato, mucato, napsilato, nitrato, oleato, oxalato, pamoato (embonato), palmitato, pantotenato, fosfato/difosfato, poligalacturonato, salicilato, estearato, subacetato, succinato, tannato, tartrato, teoclato, tosilato, trietioduro, y valerato. Preferiblemente, las sales preferidas incluyen sales de fosfato y gluconato. El término "composición farmacéutica" se refiere a una mezcla de uno o más compuestos descritos en la presente memoria descriptiva, o sales o solvatos fisiológicamente / farmacéuticamente aceptables de los mismos, con otros componentes químicos, tales como vehículos y excipientes fisiológicamente / farmacéuticamente aceptables. El propósito de una composición farmacéutica es facilitar la administración de un compuesto a un organismo. El término "terapia de radiación" se refiere al uso médico de radiación para controlar las células malignas. El término "cantidad terapéuticamente efectiva" generalmente se refiere a una cantidad de un compuesto, una sal o un solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, o una mezcla de los mismos, que se administra, que aliviará en cierta medida uno o más síntomas del trastorno que se está tratando. En particular, cuando se usa el término para describir una terapia de combinación, la "cantidad terapéuticamente efectiva" se refiere a la cantidad de un agente terapéutico particular que 1) potenciará el efecto terapéutico de otro producto terapéutico tal como un agente anticancerígeno o terapia de radiación, ó 2) en combinación con el otro producto terapéutico, aliviará en cierta medida uno o más síntomas del trastorno que se está tratando. De acuerdo con el tratamiento de cáncer, el alivio de síntomas de la enfermedad que se está tratando incluye a) reducir el tamaño del tumor; b) inhibir (esto es, ralentizar en cierta medida, preferiblemente detener) la metástasis del tumor; y c) inhibir en cierta medida (esto es, ralentizar en cierta medida, preferiblemente detener) el crecimiento del tumor. El término "tratar", como se usa en la presente memoria descriptiva, a menos que se indique lo contrario, se refiere a revertir, aliviar, inhibir el progreso de, o prevenir el trastorno o afección a la que se aplica el término, o uno o más síntomas de tal trastorno o afección. El término "tratamiento", como se usa en la presente memoria descriptiva, a menos que se indique lo contrario, se refiere al acto de tratar como se define "tratar" inmediatamente antes.

DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION Como se usa solamente en este apartado, el término "compuesto 1" se refiere a (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil- H-pirazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida, una sal o un solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, o una mezcla de los mismos; "MTD" se refiere a la dosis máxima tolerada; Q3d x4 se refiere a un programa de dosificación de una vez cada 3 días para 4 tratamientos; Q1w x 3 se refiere a un programa de dosificación de una vez por semana para 3 tratamientos. La (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-1 -oxo-2, 6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida se ha estudiado en una diversidad de sistemas in vitro e in vivo para determinar la potencia contra su diana molecular, selectividad de la quinasa, mecanismo de acción, relación PK/PD, y quimiopotenciación de la eficacia antitumoral.

I. Selectividad por quinasa La (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil- H-pirazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida es un inhibidor potente, competitivo del ATP, de CHK1. El valor Ki de (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-( 1 -metil-1 H-pirazol-4-il)-1 -oxo-2,6-dihidro-1 H- [1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida contra el dominio catalítico de CHK1 (1-289) fue de 0.49±0.29 nM. La selectividad por quinasa de (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1 -metil-1 H-pirazol-4-il)-1 -oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida relativa a Chk1 se evaluó en análisis bioquímicos de rastreo de quinasa frente a un grupo de más de 100 proteínas quinasas. Ocho quinasas mostraron una relación del CI5o ó Ki de la quinasa que se está rastreando superior al K¡ del dominio catalítico de CHK1 , inferior a o aproximadamente 100 veces. Estas ocho quinasas son Aurora-A, FGFR3, Flt3, Fms (CSF1 R), Ret, VEGFR2, Yes y CHK2. (Cuadro 1). Las quinasas que son más relevantes farmacológicamente para un inhibidor de CHK1 a efectos de selectividad son aquellas para las que la inhibición intermitente transitoria influiría en la progresión del ciclo celular (por ejemplo, CDK, quinasas mitóticas), control de los puntos de control (por ejemplo, CHK2, ATM, ATR), o actuación sobre las rutas apoptóticas (por ejemplo, AKT, p38). En base a esto, VEGFR2, Fms/CSF1 R, FGFR2, Flt3, y Ret no se consideran relevantes ya que se necesita una inhibición prolongada para suscitar la farmacología observable de estas RTK. De forma similar, no se espera ningún efecto de la inhibición transitoria de la quinasa Yes, ya que el ratón inactivado para Yes no presenta ningún fenotipo significativo. Aurora-A es una quinasa relevante, pero se ha descubierto que el análisis de enzimas no se correlaciona bien con la actividad celular. En un análisis funcional basado en células, (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-1 -oxo-2, 6-dihidro-1 H- [1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida mostró una selectividad superior a 100 veces frente a la quinasa Aurora. Finalmente, la relación de selectividad sobre CHK2 es esencialmente igual a 100 veces, y no se ha observado ninguna prueba de que la actividad de CHK2 se module por medio de la (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida en análisis basados en células o ex vivo. El cuadro 1 muestra el valor CI50 ó K¡ de la (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1 -metil-1 H-pirazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1 H- [1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida frente a quinasas seleccionadas y la relación entre el Cl50 ó K¡ de la quinasa seleccionada sobre Ki de CHK1 .

CUADRO 1 frente a quinasas seleccionadas II. Efecto que potencia la citotoxicidad en análisis funcionales basados en células La detención del ciclo celular mediado por puntos de control es una respuesta típica al daño al ADN inducido por agentes de quimioterapia o radiación. En combinación con agentes de quimioterapia comúnmente usados como gemcitabina, irinotecán, y doxorubicina, la (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-( 1 -metil-1 H-pirazol-4-il)-1 -oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida invalida los puntos de control S y G2 inducida por agentes que dañan el ADN y potencia la citotoxicidad. Esta actividad que invalida los puntos de control y actividad citotóxica potenciada muestra selectividad para líneas celulares cancerígenas defectivas en p53 sobre células normales competentes en p53. La invalidación de los puntos de control se caracteriza por la desfosforilación de treonina-14 y tirosina-15 y la activación de la proteína quinasa mitótica CDK1 , mitosis prematura, catástrofe mitótica, y finalmente muerte celular apoptótica. Se realizaron una serie de experimentos para 1) demostrar la invalidación del punto de control del ciclo celular inducida por el daño al ADN; 2) evaluar la actividad de quimiopotenciación de la (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1 -metil-1 H-pirazol-4-il)-1 -oxo-2, 6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida en combinación con algunos agentes quimioterapéuticos; y 3) demostrar la selectividad para células cancerígenas deficientes en p53.

Actividad de invalidación de los puntos de control El análisis de fosforilación de la Histona H3 detecta las células que entran en mitosis y representa el análisis primario in vitro basado en células usado para medir la potencia celular de la (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida en la invalidación del punto de control G2 inducida por camptotecina. El valor CE50 era 45 nM, según se midió por medio de un aumento en la fosforilación de la Histona H3 sobre Ser10, un marcador de entrada en mitosis. En ausencia de daño al ADN, la (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1 -metil-1 H-pirazol-4-il)-1 -oxo-2,6-dihidro-1 H- [1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida no tenía efecto sobre el ciclo celular. Tras la combinación con gemcitabina, el análisis de citometría de flujo muestra la invalidación de la detención de la Fase S inducida por la gemcitabina con la (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1 -metil-1 H-pirazol-4-il)-1-oxo-2, 6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida. La disminución dependiente del tiempo en las células de la Fase S inducida por la (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1 -metil-1 H-pirazol-4-il)-1 -oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida corresponde a un aumento en las poblaciones de células G2-M y G0-G1 , demostrando que las células están entrando en mitosis e intentando volver a entrar en el ciclo celular. El análisis de citometría de flujo confirmó un aumento significativo en las células apoptóticas en el tratamiento de combinación de gemcitabina y (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil- H-pirazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1 H- [1 ,2]diazep¡no[4,5,6-cd]indol-8-il)acetam¡da, en comparación con el tratamiento de gemcitabina sola.

Quimiopotenciación: Se realizaron análisis de supervivencia celular y MTT (análisis de bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio) en un grupo de líneas celulares cancerígenas humanas defectivas en p53 para caracterizar la actividad de la (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida en la potenciación del efecto citotóxico de gemcitabina, irinotecán, carboplatino, doxorubicina, y mitomicina C. La (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida sola no provocó ningún efecto significativo sobre la viabilidad celular en comparación con las células de control (no tratadas). En combinación con la gemcitabina, la ((2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida indujo una potenciación significativa (89%) de la citotoxicidad de la gemcitabina en comparación con la gemcitabina sola. La (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-1 -oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida indujo una potenciación robusta y consistente con la mayor parte de los agentes, con alguna variabilidad observada entre las líneas celulares (Cuadro 2). En El Cuadro 2, la Gemcitabina se usó en una concentración que induce una toxicidad mínima (<10%) o ninguna, en ausencia de (2R,Z)-2-amino-2- ciclohexil-N-(5-(1 -metil-1 H-pirazol-4-il)-1 -oxo-2,6-dihidro-1 H- [1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida: 5 nM (células Colo205), (células MDA-MB-231 , HT29, y K562) ó 20 nM (células PC-3).

CUADRO 2 Citotoxicidad de combinación in vitro en líneas celulares seleccionadas Línea celular HT29 Colo205 PC-3 MDA-MB- K562 (Tipo de tumor) (Colon (Colon) (Próstata) 231 (Leucemia) ) (Mama) Cl50 (µ?)3 1.8 1.3 1.6 1.4 0.42 OTSIb 8.5 14 13.2 2.1 9.3 Agente dañino para el ADN PF50C Gemcitabina 9 11.3 12.2 3.6 5.6 SN-38 3.7 2.1 1.3 2.4 1.9 Carboplatino 3 5.4 3.1 2.55 1.9 Doxorubicina 2.2 1.1 1.5 2.25 1.1 Mitomicina C 3.7 5.3 NDd 1.2 NDC a La (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-1 -oxo-2,6-dihidro-1 H- [1 ,2]d¡azepino[4,5,6-cd]¡ndol-8-¡l)acetam¡da se usó en ausencia de otro agente citotóxico. b El OTSI (Índice de Selectividad en Diana) se calculó como el Cl50 de la (2R,Z)-2-amino-2- ciclohexil-N-(5-(1 -metil-1 H-pirazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4, 5, 6-cd]indol- 8-il)acetamida sobre el Cl50 del tratamiento de combinación. c El PF50 (Factor de Potenciación 5o) se calculó como el Cl50, (agente c¡totóx¡8 solo) / Cl50, (tratamiento de combinación) La (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1 -metil-1 H-pirazol-4-il)-1 -oxo-2,6-dihidro- 1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida se usó a 8? CE50 (360 nM) en todas las lineas celulares, excepto en las células -562, en las que se usó a 4* CE50 (180 nM). d No determinado; en estos análisis el perfil de las curvas no permitió el cálculo de un PF50 exacto.

Selectividad para células defectivas en p53 Se espera que la (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1 -metil-1 H- pirazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida en combinación con quimioterapia dirigida por ADN fije como diana de forma selectiva células cancerígenas defectivas en p53, mientras que tiene efectos citotóxicos mínimos sobre las células normales (competentes en p53). Con el fin de evaluar el efecto citotóxico de la (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-1 -oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida en combinación con los agentes de quimioterapia en células normales, se realizó un análisis de supervivencia en células HUVEC. La (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida se usó en combinación con gemcitabina o camptotecina, ambas usadas en una concentración fija que induce una toxicidad celular mínima (<10%). La concentración más elevada (12* CE50, 540 nM) de (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-1 -oxo-2, 6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida en combinación provoca un aumento del 31.2% ó 21.7% en matanza celular en comparación con la gemcitabina o camptotecina sola, respectivamente. El efecto citotóxico inducido por el tratamiento de combinación en las células HUVEC es insignificante en comparación con la citotoxicidad inducida por el mismo tratamiento en células tumorales. La toxicidad mínima inducida por la (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1 -metil- H-pirazol-4-il)-1 -oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida en células no tumorales competentes en p53 en combinación con quimioterapia demuestra que apoya su selectividad para las células cancerígenas defectivas en p53 y potencial para tener los efectos secundarios mínimos en las células normales. También se realizó un análisis de supervivencia celular en células HTC116 (carcinoma de colon humano) que se trasfectaron transitoriamente con un plásmido que contiene p53 de tipo salvaje o mutante. En las células HCT1 16 con p53 mutante, la combinación de (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-¡l)acetamida y gemcitabina indujo la inhibición del crecimiento celular al 44% en comparación con la gemcitabina sola, mientras que en las células HCT116 con p53 de tipo salvaje, el mismo tratamiento de combinación indujo solamente la inhibición del crecimiento celular al 15%, en comparación con la gemcitabina sola. Estos resultados confirmaron que las células cancerígenas defectivas en p53 son más vulnerables a la inhibición de Chk1 que sus equivalentes competentes en p53.

III. Efecto de quimiopotenciación en estudios in vivo El estudio de combinación de (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1 -metil-1 H-pirazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida con un agente citotóxico se realizó en xenoinjertos HT29 y Colo205 de carcinoma de colon humano. Los experimentos 1 a 39 se llevaron a cabo en xenoinjertos de ratones. Los experimentos 40-42 se llevaron a cabo en xenoinjertos de ratas. Específicamente, los estudios de combinación de irinotecán se llevaron a cabo en HT29 y Colo205. Los estudios de combinación de Gemcitabina se llevaron a cabo en Colo205. Los estudios de combinación de Docetaxel se llevaron a cabo en Colo205. La quimiopotenciación de la (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol- 4-¡l)-1 -oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazep¡no[4,5,6-cd]¡ndol-8-il)acetamida se demostró en todos los estudios de combinación anteriores. La Gemcitabina e irinotecán son citotóxicos dirigidos por ADN conocidos por inducir la activación de los puntos de control y detención subsiguiente de la fase S/G2M. Por lo general, la (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida se administró 24 horas después de la dosis previa de Gemcitabina o Irinotecán. El Docetaxel es un antimitótico en el que los nuevos descubrimientos describen una función nueva para CHK1 en el punto de control mitótico. La (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida se administró simultáneamente con Docetaxel. En cada uno de estos estudios, la (2R,Z)-2-amino-2-c¡clohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]¡ndol-8-il)acetamida se administró en acetato de sodio y solución de dextrosa al 4%/agua en 5 ml/kg. Los resultados se resumen en el Cuadro 3.

CUADRO 3 Quimiopotenciación in vivo de la actividad antitumoral Usado en el Cuadro 3, "Ej. N°" se refiere a Ejemplo N°; "Cant. A" refiere a la cantidad del agente citotóxico que se administra al xenoinjerto (5-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-¡l)acetamida que se administra al xenoinjerto por dosis; %TGI (inhibición del crecimiento del tumor) se calculó como 100x[1-(TVf-Tv¡)Tratado/( Vf-Tv¡)vehicuio]> en el que TVf y Tv¡ son la dosis final + 2 días y el volumen medio de tumor inicial de un grupo respectivamente; El % TGI Potenciado se calculó como 1 00x[1-(TVf-Tv¡)combinación /(TVf-Tv¡)c¡totóx¡co soio], en el que TVf y Tv¡ son la dosis final + 2 días y el volumen medio de tumor inicial de un grupo respectivamente; el retraso del crecimiento se calculó como Tratamiento-Vehículo (T-C) para que los días medianos alcanzaran 2 duplicaciones (800 mm3); %TTP ER (relación de potenciación tiempo a progresión) se calculó como Retraso [(combinación) / Retraso (citotóxico solo) * 100 - 100)]. En los Ej. N° 1 a 17, el Irinotecán o gemcitabina, según convenga, se administró por vía intraperítoneal (IP) de acuerdo con Q3d ? 4, la (2R,Z)-2-amino-2-cíclohexil-N-(5-(1-met¡l-1 H-pirazol-4-¡l)-1 -oxo-2, 6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]índol-8-il)acetam¡da se administró por vía IP de acuerdo con Q3d ? 4 comenzando 24 horas después del irinotecán o gemcitabina. En los Ej. N° 18 a 25, el Docetaxel y la (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-( 1 -metil-1 H-pirazol-4-il)-1 -oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida se administraron por vía intraperítoneal (IP) simultáneamente de acuerdo con un programa de Q1w x3. En el Ej. 25, la (2R,Z)-2-amino-2-cíclohexil-N-(5-(1-metíl-1 H-p¡razol-4-il)-1-oxo- 2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida se administró durante dos ciclos para una dosis total de 120 mg/kg. En los Ej. N° 26 a 35, el Irinotecán se administró por vía intraperitoneal (IP) de acuerdo con Q3d * 4, y la (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida se administró por vía IP de acuerdo con Q3d * 4 comenzando 24 horas después del irinotecán o gemcitabina. En los Ej. N° 36-39, el Irinotecán se administró por vía IP Q1w x 3, y la (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-¡l)-1-oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida se administró por vía IP dos veces por semana, 24 y 72 horas después de la administración de Irinotecán, durante tres semanas. En los Ej. N° 40 a 42, el Irinotecán se administró por vía IP de acuerdo con Q3d , y la (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-1 -oxo-2, 6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd)indol-8-il)acetamida se administró a través de la infusión IV durante dos horas de acuerdo con Q3dx4 comenzando 24 horas después de la administración de Irinotecán. Se decidió que la MTD de la (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-¡l)acetam¡da fuera 40mg/kg Q3d x4 ó 60mg/kg Q1w x 3 evaluada por la aparición de la pérdida del peso corporal medio del 10% al 20%.

IV. Estudios in vivo del efecto de radiosensibilización del Compuesto 1 Los ratones desnudos hembra Balb/c (6 semanas de edad) se inocularon en la extremidad posterior derecha con 3 x 106 células A431 en PBS y se dejó que creciera el tumor hasta un volumen medio de tumor de -100 mm3. Los ratones se distribuyeron aleatoriamente en grupos de 10 animales cada grupo. Los ratones no anestesiados se sometieron después a radiación. La radiación se suministró usando un haz de electrones con alta tasa de dosis de 6 MeV a partir de un Acelerador Lineal Vanan 2100 (Palo Alto, CA). La tasa de dosis usada fue de 20 Gy/min. Las características de la dosis en profundidad del haz de electrones eran tales que se obtuvo la uniformidad de la dosis hasta en el ± 5 % sobre una profundidad de tejido de 10 mm. Esto fue suficiente para cubrir todo el tumor irradiado. El tumor se irradió a través de un colimador cuadrado de 25 mm cortado a partir de una lámina de plomo de 3 mm de espesor unido a una lámina de Perpex de 6 mm de espesor. La separación entre el tumor y la parte inferior (Perspex) de la superficie del colimador era de aproximadamente 25 mm. El aparato estaba apoyado sobre una placa calentada a 37°C con el fin de reducir los efectos de pérdida térmica en los ratones. Las dosis de radiación se calcularon y fueron suministradas por un físico radiólogo cualificado. La radioterapia se proporcionó como se describe anteriormente en los Días 0 - 4 en forma de fracciones de 2, 3 ó 4 Gy diarias.

La (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-p¡razol-4-¡l)-1-oxo-2,6-d¡h¡dro-1 H-[1 ,2]d¡azepino[4,5,6-cd]indol-8-il) acetamida (Compuesto 1) se preparó en forma de una solución acuosa tamponada a un pH. La solución se preparó inmediatamente antes de administrar la dosis y (15 mg/kg) se administró por medio de una inyección intraperitoneal a 15mg / kg en los Días 0-4 inmediatamente después de la radioterapia. La solución anterior que no contiene el Compuesto 1 se considera como el "vehículo del fármaco" o "vehículo". El vehículo del fármaco se administró en 0,1 mi/ 10 g de peso corporal en el mismo programa. Cada grupo de ratones se trató solamente con el Compuesto 1 , sólo radiación, o la combinación del Compuesto 1 y radiación. Los animales se sacrificaron cuando la Relación de Volumen del Tumor (abreviadamente en inglés TVR) alcanzó o superó 4 o si el ratón había perdido más del 15% de su peso corporal inicial en el Día 0. La Relación de Volumen del Tumor se define como la relación entre el volumen de los tumores en un momento particular y el volumen del tumor inicial, que es el volumen del tumor en el Día 0. El volumen del tumor se midió tres veces por semana desde el día 0 hasta el día 11 e incluso adicionalmente hasta el día 23. El volumen del tumor se midió usando calibradores electrónicos y se calculó como largo/2 x ancho2. El volumen medio del tumor se calculó para cada grupo de ratones. El cuadro 4 muestra el volumen medio del tumor de cada grupo de ratones que no se trataron, tratados con el vehículo del fármaco, Compuesto 1 , radiación o la combinación del Compuesto 1 y radiación.

CUADRO 4 Eficacia antitumoral de la terapia de radiación en combinación con el Compuesto 1 en xenoinjertos A431 de ratones El cuadro 5 muestra el Retraso del Crecimiento del Tumor y la relación de Potenciación, en base a la información del volumen del tumor mostrada en el cuadro 4. El retraso del crecimiento del tumor se define como el tiempo mediano en días necesario para que los tumores alcancen una TVR de 4 menos el tiempo para que los tumores de control en vehículo alcancen el mismo tamaño. El retraso del crecimiento normalizado se define como el tiempo en días para que los tumores en ratones tratados con la combinación alcancen la TVR de 4 menos el tiempo en días para que los tumores en ratones tratados con el fármaco solo alcancen el mismo tamaño. La relación de Potenciación se define como el retraso del crecimiento del tumor normalizado en ratones tratados con fármaco y radiación dividido por el retraso del crecimiento del tumor en ratones tratados con la radiación sola.

CUADRO 5 Estudio in vivo del efecto de radiosensibilización del compuesto 1 en xenoinjertos A431 del tumor

Claims (16)

NOVEDAD DE LA INVENCION REIVINDICACIONES

1.- Uso de una cantidad terapéuticamente efectiva de (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-1 -oxo-2, 6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida, una sal o solvato farmacéuticamente aceptable de la misma, o una mezcla de los mismos, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de un cáncer en un mamífero, en donde el compuesto es administrable en combinación con una cantidad terapéuticamente efectiva de un tratamiento anticancerígeno seleccionado de un agente anticancerígeno y una terapia de radiación.

2. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 1 , en donde (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida, una sal o solvato farmacéuticamente aceptable de la misma, o una mezcla de los mismos, es administrable secuencialmente desde o simultáneamente con el tratamiento anticancerígeno.

3. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 1 ó 2, en donde el cáncer se selecciona de cáncer de colon, cáncer de próstata, cáncer de mama y leucemia.

4. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 3, en donde el cáncer es cáncer de colon.

5. - El uso como el que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde el tratamiento anticancerígeno es una cantidad terapéuticamente efectiva de un agente anticancerígeno.

6. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 5, en donde el agente anticancerígeno se selecciona del grupo que está constituido por actinomicina D, adriamicina, amsacrina, ara-C, 9-(3-D-arabinosil-2-fluoroadenina, BCNU, bleomicina, camptotecina, carboplatino, 2-cloro-2-desoxiadenosina, CPT-11 , ciclofosfamida, Docetaxel, doxorubicina, edotecarina, etopósido, fludarabina, 5-fluorouracilo (5-FU), gemcitabina, HU-Gemzar, Irinotecán, metotrexato, 6-Mpurina, mitomicina-C, paclitaxel, cis-platino, SN-38, taxol, tiotepa, 6-tioguanina, trimetrexato vinblastina, vincristina, y VP-16.

7. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 6, en donde el agente anticancerígeno se selecciona del grupo que está constituido por gemcitabina, irinotecán, docetaxel, SN-38, carboplatino, doxorubicina y mitomicina C.

8. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 7, en donde el agente anticancerígeno es gemcitabina.

9. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 7, en donde el agente anticancerígeno es irinotecán.

10. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 7, en donde el agente anticancerígeno es docetaxel.

11. - El uso como el que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde el agente anticancerígeno es un agente dañino para el ADN.

12. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 11 , en donde el agente dañino para el ADN se selecciona de agentes alquilantes, antimetabolitos, antibióticos antitumorales, análogos de platino, inhibidores de topoisomerasa I e inhibidores de topoisomerasa II.

13. - El uso como el que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que el agente anticancerígeno es un inhibidor mítótico.

14. - El uso como el que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, en donde al menos una dosis de (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pírazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1 H-[1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamida, una sal o solvato farmacéuticamente aceptable de la misma, o una mezcla de los mismos, es administrable de 1 a 48 horas después de que se administre la dosis previa de tratamiento anticancerígeno.

15. - El uso como el que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, en donde al menos una dosis de (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-1-oxo-2,6-dihidro-1H- [1 ,2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-il)acetamída, una sal o solvato farmacéuticamente aceptable de la misma, o una mezcla de los mismos, es administrable simultáneamente con una dosis del tratamiento anticancerígeno.

16.- Un producto que comprende (2R,Z)-2-amino-2-ciclohexil-N-(5-(1-metil-1 H-pirazol-4-¡l)-1 -oxo-2, 6-dih¡dro-1 H-[1 , 2]diazepino[4,5,6-cd]indol-8-¡l)acetam¡da, una sal o solvato farmacéuticamente aceptable de la misma, o una mezcla de los mismos, y un agente anticancerígeno, como una preparación combinada para el uso simultáneo o secuencial en el tratamiento de cáncer en un mamífero.