MX2008011828A - Metodo para la prevencion y el tratamiento de enfermedad hepatica utilizando antagonistas del receptor de adenosina a2b. - Google Patents

Abstract

La invención se refiere a métodos para prevenir y tratar fibrosis hepática utilizando antagonistas del receptor de adenosina A2B, y a la utilidad en el tratamiento y la prevención del daño hepático causado por abuso de alcohol, intervención quirúrgica, hepatitis viral, la ingestión de fármacos hepatotóxicos, u otras enfermedades hepáticas. La invención también se refiere a composiciones farmacéuticas para utilizarse en el método.

Description

MÉTODO PARA LA PREVENCIÓN Y EL TRATAMIENTO DE ENFERMEDAD HEPÁTICA UTILIZANDO ANTAGONISTAS DEL RECEPTOR DE ADENOSINA A2B Esta solicitud reivindica prioridad de la Solicitud de Patente Provisional de los Estados Unidos de Norteamérica con Número de Serie 60/783,575, presentada el 17 de marzo de 2006, la totalidad de la cual se incorpora a la presente como referencia. Campo de la Invención La presente invención se refiere a métodos para la prevención y el tratamiento de una enfermedad hepática utilizando antagonistas del receptor de adenosina A2B- Esta invención encuentra utilidad en el tratamiento y la prevención de daño hepático causado por abuso de alcohol, intervención quirúrgica, hepatitis viral, la ingestión de fármacos hepatotóxicos, u otras enfermedades hepáticas. La invención también se refiere a composiciones farmacéuticas para utilizarse en el método. Antecedentes La enfermedad hepática puede tomar una amplia variedad de formas, incluyendo, pero no limitándose a, necrosis, esteatosis, fibrosis, y colestasis. Otras formas de enfermedad hepática pueden resultar de la ingestión de medicamentos hepatotóxicos, tales como quimioterapia y fármacos para el cáncer, antibióticos, analgésicos, antieméticos, y otros medicamentos. También, el abuso de alcohol y drogas son causas bien conocidas de enfermedad hepática. Las causas típicas de la enfermedad hepática incluyen , pero no se limitan a , hepatitis viral y alcohólica, enfermedad de Wilson , hemocromatosis, esteatosis, y esteatohepatitis no alcohólica ( NASH ). La fibrosis hepática es un aspecto común de muchas , si no es que todas las, enfermedades hepáticas, y se define como la formación de tejido cicatricial en el h ígado. La cicatrización se desarrolla cuando el h ígado trata de reparar el daño celular inducido por la ingestión de hepatotoxinas, como una consecuencia de inflamación crónica del h ígado , o como una consecuencia de agresión física. La fibrosis hepática también puede resultar como una consecuencia de intervención quirúrgica y terapia con fármacos hepatotóxicos, es decir, reemplazo o reparación de hígado , o quimioterapia . En muchos casos, la fibrosis hepática produce cicatrización permanente del tejido hepático , una condición comúnmente referida como cirrosis. Los estudios recientes han dado a conocer que la adenosina tiene un papel en el desarrollo y progreso de la fibrosis hepática . Chunn y colaboradores (2006) Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. , 290(3): L579-87, detectaron una mayor fibrosis hepática en los ratones deficientes en desaminasa de adenosina (ADA). Los ratones utilizados por Chunn y colaboradores, están genéticamente diseñados para poseer una actividad parcial de la enzima desaminasa de adenosina, y de esta manera , acumulan adenosina de un período de tiempo prolongado. La adenosina es un nucleósido que se presenta naturalmente, que ejerce sus efectos biológicos mediante su interacción con una familia de receptores de adenosina conocidos como A1p A2A, A2B, y A3, todos los cuales modulan importantes procesos fisiológicos. De los diferentes receptores, se ha demostrado que los receptores de adenosina A2B modulan la síntesis y liberación de los factores angiogénicos y de la citoquina inflamatoria y quimiocinas, y se cree que están más significativamente involucrados en las condiciones inflamatorias por medio de su conexión con la activación de los mastocitos, vasodilatación, y regulación del crecimiento celular (véase: Adenosine A2B Receptors as Therapeutic Targets, Drug Dev. Res. 45:198; Feoktistov y colaboradores, Trends Pharmacol. Sci. 19:148-153). De una manera sorprendente, ahora se ha encontrado que los antagonistas del receptor de adenosina A2B también son útiles en la prevención y el tratamiento de enfermedad hepática. De conformidad con lo anterior, se desea proporcionar un método para el tratamiento y/o la prevención de enfermedad hepática mediante la administración de compuestos que sean antagonistas de A2B potentes, total o parcialmente selectivos, es decir, compuestos que inhiban al receptor de adenosina A2B. BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN En una modalidad de la invención, se proporciona un método para el tratamiento y la prevención de enfermedad hepática mediante la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de un antagonista del receptor de adenosina A2B, a un mamífero que lo necesite. La enfermedad hepática puede tomar la forma de necrosis, fibrosis, colestasis, cirrosis, hepatitis viral y alcohólica , enfermedad o de Wilson, hemocromatosis, esteatosis, y esteatohepatitis no alcohólica ( NAS H ) , o la enfermedad hepática puede ser la consecuencia de intervención quirúrgica o terapia de fármacos con un agente hepatotóxico, es decir, reemplazo o reparación de h ígado, o quimioterapia . En una segunda modalidad de la invención , se proporciona un método para disminuir los efectos secundarios hepatotóxicos de la quimioterapia o de la radiación , mediante la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de un antagonista del receptor de adenosina A2B a un mamífero que se someta a dicho tratamiento . En otra modalidad de la invención , se proporciona un método para el tratamiento y la prevención de enfermedad hepática mediante la administración a un mam ífero que lo necesite, de una cantidad terapéuticamente efectiva de un antagonista del receptor de adenosina A2 B que tiene la estructura de la Fórmula I o de la Fórmula I I : Fórm ula I Fórmula I I en donde: R1 y R2 se seleccionan independientemente a parti r de hidrógeno , alquilo opcionalmente sustituido , o un grupo -D-E , en donde D es un enlace covalente o alquileno, y E es alcoxilo opcionalmente sustituido , cicloalquilo opcionalmente sustituido , arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, o alquinilo opcionalmente sustituido, con la condición de que, cuando D es un enlace covalente, E no puede ser alcoxilo; R3 es hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido, o cicloalquilo opcionalmente sustituido; X es arileno opcionalmente sustituido o heteroarileno insustituido o sustituido; Y es un enlace covalente o alquileno , en donde un átomo de carbono puede ser opcionalmente reemplazado por -O-, -S-, ó -N H-, y está opcionalmente sustituido por hidroxilo, alcoxilo, amino opcionalmente sustituido, ó -COR, en donde R es hidroxilo, alcoxilo, o amino; y Z es arilo monocíclico opcionalmente sustituido, o heteroarilo monocíclico opcionalmente sustituido; o Z es hidrógeno cuando X es heteroarileno opcionalmente sustituido e Y es un enlace covalente. En todavía otra modalidad de la invención , se proporcionan formulaciones farmacéuticas, las cuales comprenden una cantidad terapéuticamente efectiva de un antagonista del receptor de adenosina A2B. y cuando menos un vehículo farmacéuticamente aceptable. La formulación de preferencia es para administración oral.

Un grupo preferido de compuestos de las Fórmulas I y II es el de aquéllos en donde R1 y R2 son independientemente hidrógeno, alquilo inferior opcionalmente sustituido, o un grupo -D-E, en donde D es un enlace covalente o alquileno, y E es fenilo opcionalmente sustituido, cicloalquilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, o alquinilo opcionalmente sustituido, en particular aquéllos en donde R3 es hidrógeno. Dentro de este grupo, una primera clase preferida de compuestos incluye aquéllos en donde R1 y R2 son independientemente alquilo inferior opcionalmente sustituido por cicloalquilo, de preferencia propilo normal, y X es fenileno opcionalmente sustituido. Dentro de esta clase, una subclase preferida de compuestos es la de aquéllos en donde Y es alquileno, incluyendo alquileno en donde un átomo de carbono es reemplazado por oxigeno, de preferencia -0-CH2-, más especialmente en donde el oxígeno es el punto de unión con fenileno. Dentro de esta subclase, se prefiere que Z sea oxadiazol opcionalmente sustituido, en particular [ ,2,4]-oxadiazol-3-ilo opcionalmente sustituido, especialmente [1 ,2,4]-oxadiazol-3-ilo sustituido por fenilo opcionalmente sustituido o por piridilo opcionalmente sustituido. Una segunda clase preferida de compuestos incluye aquéllos en donde X es 1 ,4-pirazoleno opcionalmente sustituido. Dentro de esta clase, una subclase preferida de compuestos es la de aquéllos en donde Y es un enlace covalente o alquileno, en especial alquileno inferior, y Z es hidrógeno, fenilo opcionalmente sustituido, piridilo opcionalmente sustituido, u oxadiazol opcionalmente sustituido . Dentro de esta subclase, una modalidad preferida incluye los compuestos en donde R es alquilo inferior opcionalmente sustituido por cicloalquiio, y R2 es hidrógeno. Una modalidad más preferida incluye los compuestos en donde Y es -(CH2)-ó -CH(CH3), y Z es fenilo opcionalmente sustituido, o Y es -(CH2)- ó -CH(CH3)-, y Z es oxadiazol opcionalmente sustituido, en particular 3,5-[1 ,2 ,4]-oxadiazol , o Y es -(CH2)- ó -CH(CH3)-, y Z es piridilo opcionalmente sustituido. Dentro de esta subclase, también se prefieren los compuestos en donde R y R2 son independientemente alquilo inferior opcionalmente sustituido por cicloalquiio , en especial propilo normal . Se prefieren más los compuestos en donde Y es un enlace covalente, -(CH2)- ó -CH(CH3), y X es hidrógeno, fenilo opcionalmente sustituido, o piridilo opcionalmente sustituido, en particular en donde Y es un enlace covalente y Z es hidrógeno. Un subgrupo adicional de compuestos preferidos es el de aquéllos en donde R3 es un grupo alquilo sustituido de la fórmula -CHR4OR5, de tal manera que los compuestos tienen la estructura de la Fórmula I I I : en donde: R4 es hidrógeno o metilo; u R5 es -C(0)R, en donde R es independientemente alquilo inferior opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, o heteroarilo opcionalmente sustituido; o R5 es -P(0)(OR6)2, en donde R6 es hidrógeno o alquilo inferior opcionalmente sustituido por fenilo o heteroarilo; y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. En el presente, los compuestos preferidos para utilizarse en la invención incluyen, pero no se limitan a: 1-propil-8-(1-{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 1 -propil-8-[1 -bencil-pirazol-4-il]-l,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 1-butil-8-(1-{[3-fluoro-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 1 -propil-8-[1 -(-fenil-eti I )-pirazol-4-il]-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 8-(1-{[5-(4-cloro-fenil)-(1 ,2,4-oxadiazol-3-il)]-metil}-pirazol-4-il)-1 -propil-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 8-(1-{[5-(4-cloro-fenil)-(1 ,2,4-oxadiazol-3-il)]-metil}-pirazol-4-il)-1 -butil-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 1 ,3-dipropil-8-pirazol-4-il-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 1 -metil-3-sec-butil-8-pirazol-4-il-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 1-ciclopropil-metil-3-metil-8-{1 -[(3-trifluoro-metil-fenil)-metil]-pirazol-4-il}-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 1 ,3-dimetil-8-{1-[(3-fluoro-fenil)-metil]-pirazol-4-il}-1 ,3,7-trihidro-pur¡na-2,6-diona; 3-metil-1 -propil-8-{1 -[(3-trifluoro-metil-fenil)-metil]-pirazol-4-il}-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 3-etil-1 -propil-8-{1 -[(3-trifluoro-metil-fenil)-metil]-pirazol-4-il}- 1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 1 ,3-dipropil-8-(1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 1 ,3-dipropil-8-{1-[(3-fluoro-fenil)-metil]-pirazol-4-il}-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 1-etil-3-metil-8-{1-[(3-fluoro-fenil)-metil]-pirazol-4-il}- ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 1 ,3-dipropil-8-{1-[(2-metoxi-fenil)-metil]-pirazol-4-il}-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 1 ,3-dipropil-8-(1-{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-etil}-pirazol-4-il)- 1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 1 ,3-dipropil-8-{1 -[(4-carboxi-fenil)-metil]-pirazol-4-il}-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; ácido 2-[4-(2,6-dioxo-1 ,3-dipropM-(1 ,3,7-trihidro-purina-8-il))-pirazolil]-2-fenil-acético; 8-{4-[5-(2-metoxi-fenil)-[1 ,2,4]-oxadiazol-3-il-metoxi]-fenM}-1 ,3-dipropil-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 8-{4-[5-(3-metoxi-fenil)-[1 ,2,4]-oxadiazol-3-il-metoxi]-fenil}- ,3-dipropil-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 8-{4-[5-(4-fluoro-fenil)-[ ,2,4]-oxadiazol-3-il-metoxi]-fenil}-1 ,3- di'propi'l-1 ,3,7-tr¡h¡dro-purina-2,6-diona; 1 -(ciclopropil-metil)-8-[1 -(2-piridil-metil)-pirazol-4-il]-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-d¡ona; 1 -n-butil-8-[1-(6-trifluoro-met¡l-piridin-3-il-met¡l)-pirazol-4-il]-1 ,3,7-tr¡hidro-purina-2,6-d¡ona; 8-(1-{[3-(4-cloro-fenil)-(1 ,2,4-oxadiazol-5-il)]-metil}-p¡razol-4-il) 1 ,3-dipropil-1 ,3,7-trihidro-pur¡na-2,6-diona; 1 ,3-dipropil-8-[1 -({5-[4-(trifluoro-met¡l)-fenil]-isoxazol-3-¡l}-metil)-pirazol-4-il]-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-d¡ona; 1 ,3-dipropil-8-[1-(2-piridil-metil)-p¡razol-4-¡l]-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; ácido 3-{[4-(2,6-d¡oxo-1 ,3-diprop¡l-1 ,3,7-tr¡h¡dro-purin-8-il)-p¡razolil]-met¡l}-benzoico; 1 ,3-dipropil-8-(1 -{[6-(trifluoro-metil)-(3-piridil)]-metil}-pirazol-4-il)-1 ,3,7-trih¡dro-purina-2,6-diona; 1,3-dipropil-8-{1-[(3-(1H-1 ,2,3,4-tetra-azol-5-il)-fenil)-met¡l]-pirazol-4-¡l}-1 ,3,7-trih¡dro-pur¡na-2,6-diona; ácido 6-{[4-(2,6-d¡oxo-1 ,3-dipropil-1 ,3,7-trih¡dro-purin-8-¡l)-pirazol¡l]-metil}-p¡r¡d¡n-2-carboxílico; 3-etil-1-prop¡l-8-[1-(2-p¡ridil-metil)-pirazol-4-il]-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 8-(1-{[5-(4-cloro-fenil)-isoxazol-3-¡l]-met¡l}-pirazol-4-il)-3-etil-1 -propil-1 ,3,7-tr¡hidro-purina-2,6-d¡ona; 8-(1-{[3-(4-cloro-fenil)-(1 ,2,4-oxadiazol-5-il)]-metil}-pirazo!-4-¡l) 3-etil-1 -propil-1 ,3,7-trihidro-pur¡na-2,6-diona; 3-etil-1-propil-8-(1 -{[6-(trifluoro-metil)-(3-piridil)]-metil}-pirazol-4-il)-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 1-(ciclopropil-metil)-3-etil-8-(1-{[6-(trifluoro-metil)-(3-piridil)]-metil}-pirazol-4-il)-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 3-etil-1-(2-metil-propil)-8-(1-{[6-(trifluoro-metil)-(3-piridil)]-metil}-pirazol-4-il)-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; acetato de [3-etil-2,6-dioxo- -propil-8-(1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-1 ,3,7-trihidro-purin-7-il]-metilo; 2,2-dimetil-propanoato de [3-etil-2,6-dioxo-1 -propil-8-(1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-1 ,3,7-trihidro-purin-7-il]-metilo; butanoato de [3-etil-2,6-dioxo-1 -propil-8-(1 -{[3-trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-1 ,3,7-trih¡dro-pur¡n-7-il]-metilo; y fosfato diácido de [3-etil-2,6-dioxo-1 -propil-8-(1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-(1 ,3,7-trihidro-purin-7-il)]-metilo. BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS La Figura 1 ilustra gráficamente los niveles de ARNm de los subtipos AdoR en las HHSCs. El ARN total aislado de las HHSCs se sometió a análisis de reacción en cadena de la polimerasa con transcripción inversa en tiempo real. Los niveles relativos de las transcripciones de AdoR se presentan como porcentajes de la transcripción de ß-actina. Los datos mostrados son promedios + SEM (n=4). Nd denota no detectado. La Figura 2 muestra los efectos de los agonistas y antagonistas de AdoR sobre la acumulación de cAMP celular en las HHSCs. (A) Curvas de respuesta a la concentración de CGS-21680 (CGS, círculo), y ÑECA en ausencia (cuadrado) o en la presencia (triángulo) del antagonista del receptor A2B de 8-(1 -{[5-(4-cloro-fenil)-(1 ,2,4-oxadiazol-3-il)]-metil}-pirazol-4-il)-1-propil-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona (compuesto (1)) (1 µ?). (B) Falta de efecto de CPA (1 µ?) y de IB-MECA (IM, 1 µ?) sobre la acumulación de cAMP inducida por forscolina (Fsk, 10 µ?). Los datos mostrados son promedios ± SEM (n = 6 en A, y n = 5 en B). La Figura 3 gráfica los efectos de la adenosina (A) y de ÑECA (B) sobre la liberación de IL-6 por parte de las HHSCs. Las células se trataron con vehículo, adenosina, y ÑECA en ausencia o en la presencia del compuesto (1) durante 24 horas. Se recolectó el medio de las células tratadas, y se determinaron las concentraciones de IL-6 utilizando un ELISA. Los datos mostrados en los promedios + SEM (n=3). *: p<0.05, comparándose con el control; #: p<0.05, comparándose con las células tratadas con ÑECA (10 µ?) en B. La Figura 4 muestra los efectos de ÑECA sobre los niveles de ARNm de actina de músculo liso-a 8A) y de pro-colágeno a-1 (B), determinados utilizando reacción en cadena de la polimerasa con transcripción inversa en tiempo real. Las HHSCs se incubaron con ÑECA (10 µ?) durante 1 hora. Las células incubadas con vehículo se utilizaron como control. Los niveles de expresión del ARNm objetivo se normalizaron con aquél de ß-actina. Los datos mostrados son promedios + SEM (n = 4 en A, y n = 5 en B). *: p<0.05, comparándose con el control.

La Figura 5 ilustra los efectos de ÑECA sobre la producción de colágeno por parte de las HHSCs. Las células se trataron con vehículo, ÑECA en ausencia o en la presencia del compuesto (1), o del anticuerpo anti-IL-6, durante 24 horas. Se recolectó el medio de las células tratadas, y se determinaron las concentraciones de colágeno utilizando el ensayo de colágeno Sircol. Los datos mostrados son los promedios + SEM (n=4-6). *: p<0.05, comparándose con el control; #: p<0.05, comparándose con las células tratadas con ÑECA (10 µ?). La Figura 6 ilustra los efectos del antagonismo del receptor A2B sobre los niveles en plasma de AST en ratones ADA'''. El plasma de ratón se recolectó en EDTA, y se determinó la actividad de AST utilizando el ensayo de AST lnfinityMR. Los datos mostrados son los promedios + SEM (n=6-8). *: p<0.05, comparándose con ADA* tratados con vehículo (ADA+ v); #: p<0.05, comparándose con los ratones ADA'1' tratados con vehículo (ADA-/- V). DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Definiciones y Parámetros Generales Como se utilizan en la presente memoria descriptiva, las siguientes palabras y frases pretenden en general tener los significados estipulados en seguida, excepto hasta el grado en el que el contexto en el que se utilicen lo indique de otra manera. El término "alquilo" se refiere a un mono-radical de una cadena de hidrocarburo saturada, ramificada o no ramificada, que tiene 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 ó 20 átomos de carbono. Este término es ejemplificado por grupos tales como metilo, etilo, propilo normal , isopropilo, butilo normal , isobutilo , butilo terciario, hexilo normal , decilo normal , tetradecilo, y similares. El término "alquilo sustituido" se refiere a : 1 ) Un grupo alquilo como se define anteriormente, que tiene 1 , 2 , 3, 4, ó 5 sustituyentes, de preferencia de 1 a 3 sustituyentes, seleccionados a partir del grupo que consiste en alquenilo, alquinilo , alcoxilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, acilo, acil-amino , aciloxilo, amino , amino-carbonilo, alcoxi-carbonil-amino, azido , ciano, halógeno, hidroxilo, queto, tiocarbonilo, carboxilo, carboxi-alquilo, tioarilo, hetero-tioarilo , hetero-tiociclilo, tiol , tioalquilo, arilo, ariloxilo, heteroarilo, amino-sulfonilo, amino-carbonil-ami no, hetero-ariloxilo , heterociclilo, heterociclo-oxilo , hidroxi-amino , alcoxi-amino, nitro, -SO-alquilo, -SO-arilo, -SO-heteroarilo, -S02-alquilo , S02-arilo, y -S02-heteroarilo. A menos que sean limitados de otra manera por la definición , todos los sustituyentes pueden estar opcionalmente sustituidos adicionalmente por 1 , 2 , ó 3 sustituyentes seleccionados a partir de alquilo, carboxilo, carboxi-alquilo , amino-carbonilo, hidroxilo, alcoxilo, halógeno , CF3, amino, amino sustituido, ciano , y -S(0)nR, en donde R es alquilo, arilo, o heteroarilo, y n es 0, 1 , ó 2 ; o 2) Un grupo alquilo como se define anteriormente, que está interrumpido por 1 a 1 0 átomos independientemente seleccionados a partir de oxígeno, azufre, y N Ra-, en donde Ra se selecciona a partir de hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, alquenilo, cicloalquenilo, alquinilo, arilo, heteroarilo, y heterociclilo. Todos los sustituyentes pueden estar opcionalmente sustituidos adicionalmente por alquilo, alcoxilo, halógeno, CF3,amino, amino sustituido, ciano, o -S(0)nR, en donde R es alquilo, arilo, o heteroarilo, y n es 0, 1 , ó 2 ; o 3) Un grupo alquilo como se define anteriormente, que tiene 1 , 2 , 3, 4, ó 5 sustituyentes como se define anteriormente, y que también está interrumpido por 1 a 1 0 átomos como se define en lo anterior. El término "alquilo inferior" se refiere a un mono-radical de una cadena de hidrocarburo saturada , ramificada o no ramificada, que tiene 1 , 2 , 3, 4, 5, ó 6 átomos de carbono. Este término es ejemplificado por grupos tales como metilo, etilo, propilo normal , isopropilo, butilo normal , isobutilo, butilo terciario , hexilo normal , y similares. El término "alquilo inferior sustituido" se refiere a alquilo inferior como se define anteriormente, que tiene de 1 a 5 sustituyentes, de preferencia 1 , 2, ó 3 sustituyentes, como se define para alquilo sustituido, o un grupo alquilo inferior como se define anteriormente, que está interrumpido por 1 , 2 , 3, 4, ó 5 átomos como se define para alquilo sustituido , o un grupo alquilo inferior como se define anteriormente, que tiene 1 , 2 , 3, 4, ó 5 sustituyentes, como se define anteriormente, y que también está interrumpido por 1 , 2, 3 , 4 , ó 5 átomos como se define en lo anterior. El término "alquileno" se refiere a un di-radical de una cadena de hidrocarburo saturada ramificada o no ramificada que tiene 1 , 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 ó 20 átomos de carbono, de preferencia de 1 a 10 átomos de carbono, más preferiblemente, 1, 2, 3, 4, 5, ó 6 átomos de carbono. Este término es ejemplificado por grupos tales como metileno (-CH2-), etileno (-CH2CH2), los isómeros de propileno (por ejemplo, -CH2CH2CH2-, y -CH(CH3)CH2-), y similares. El término "alquileno inferior" se refiere a un di-radical de una cadena de hidrocarburo saturada ramificada o no ramificada que tiene de preferencia 1, 2, 3, 4, 5, ó 6 átomos de carbono. El término "alquileno inferior" se refiere a un di-radical de una cadena de hidrocarburo saturada ramificada o no ramificada que tiene de preferencia 1, 2, 3, 4, 5, ó 6 átomos de carbono. El término "alquileno sustituido" se refiere a: (1) Un grupo alquileno como se define anteriormente, que tiene 1, 2, 3, 4, ó 5 sustituyentes seleccionados a partir del grupo que consiste en alquilo, alquenilo, alquinilo, alcoxilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, acilo, acil-amino, aciloxilo, amino, amino-carbonilo, alcoxi-carbonil-amino, azido, ciano, halógeno, hidroxilo, queto, tiocarbonilo, carboxilo, carboxi-alquilo, tioarilo, hetero-tioarilo, hetero-tiociclilo, tiol, tioalquilo, arilo, ariloxilo, heteroarilo, amino-sulfonilo, amino-carbonil-amino, heteroariloxilo, heterociclilo, heterociclo-oxilo, hidroxi-amino, alcoxi-amino, nitro, -SO-alquilo, -SO-arilo, -SO-heteroarilo, -S02-alquilo, S02-arilo, y -S02-heteroarilo. A menos que sean limitados de otra manera por la definición, todos los sustituyentes pueden estar opcionalmente sustituidos adicionalmente por 1 , 2 , ó 3 sustituyentes seleccionados a partir de alquilo, carboxilo, carboxi-alquilo , amino-carbonilo , hidroxilo, alcoxilo, halógeno, CF3, amino, ami no sustituido, ciano , y S(0)nR, en donde R es alquilo, arilo, o heteroarilo, y n es 0, 1 , ó 2 ; o (2 ) Un grupo alquileno como se define anteriormente, que está interrumpido por 1 a 20 átomos independientemente seleccionados a partir de oxígeno, azufre, y N Ra-, en donde Ra se selecciona a partir de hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido, cicloalquilo, cicloalquenilo, arilo, heteroarilo, y heterociclilo, o de los grupos seleccionados a parti r de carboxilo , carboxi-éster, carboxi-amida, y sulfonilo; o (3) Un grupo alquileno como se define anteriormente, que tiene 1 , 2 , 3, 4, ó 5 sustituyentes como se define anteriormente, y que también está interrumpido por 1 a 20 átomos como se define en lo anterior. Los ejemplos de los alquílenos sustituidos son cloro-metileno (-CH(CI )-), amino-etileno (-CH(N H2)CH2-), metíl-amino-etileno (-CH(N H e)CH2-), los isómeros de 2-carboxi-propileno (-CH2CH(C02H )CH2-), etoxí-etilo (-CH2CH20-CH2CH2-), etil-metil-amino-etilo (-CH2CH2N(CH3)CH2CH2-), 1 -etoxi-2-(2-etoxí-etoxi )-etano (-CH2CH20-CH2CH2-OCH2CH2-OCH2CH2-), y similares. El término "aralquilo" se refiere a un grupo arilo covalentemente enlazado con un grupo alquileno, en donde arilo y alquileno se definen en la presente. "Aralquilo opcionalmente sustituido" se refiere a un grupo arilo opcionalmente sustituido covalentemente enlazado con un grupo alquileno opcionalmente sustituido. Estos grupos aralquilo son ejemplificados por bencilo , fenil-etilo, 3-(4-metoxi-fenil )-propilo, y similares. El término "alcoxilo" se refiere al grupo R-O-, en donde R es alquilo opcionalmente sustituido o cicloalquilo opcionalmente sustituido, o R es un grupo -Y-Z, en donde Y es alquileno opcionalmente sustituido y Z es alquenilo opcionalmente sustituido , alquinilo opcionalmente sustituido; o cicloalquenilo opcionalmente sustituido, en donde alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, y cicloalquenilo son como se defi nen en la presente. Los grupos alcoxilo preferidos son alquil-O- opcionalmente sustituido, e incluyen , a manera de ejemplo , metoxilo, etoxilo, propoxilo normal , isopropoxilo, butoxilo normal , butoxilo terciario, butoxilo secundario, pentoxilo normal , hexoxilo normal , 1 ,2-dimetil-butoxilo, trifluoro-metoxilo , y similares. El término "tioalquilo" se refiere al grupo R-S-, en donde R es como se define para alcoxilo . El término "alquenilo" se refiere a un mono-radical de un grupo hidrocarburo insaturado ramificado o no ramificado que tiene de preferencia de 2 a 20 átomos de carbono, más preferiblemente de 2 a 1 0 átomos de carbono, y todavía de una manera muy preferible de 2 a 6 átomos de carbono, y que tiene de 1 a 6 , de preferencia un doble enlace (vinilo). Los grupos alquenilo preferidos incluyen etenilo o vinilo (-CH = CH2), 1 -propileno o alilo (-CH2CH = CH2), isopropileno (-C(CH3)=CH2), biciclo-[2.2.1 ]-hepteno , y similares. En el caso de que el alquenilo esté unido al nitrógeno, el doble enlace no puede ser alfa en relación con el nitrógeno. El término "alquenilo inferior" se refiere a alquenilo como se refiere anteriormente, que tiene de 2 a 6átomos de carbono. El término "alquenilo sustituido" se refiere a un grupo alquenilo como se define anteriormente, que tiene 1 , 2, 3, 4, ó 5 sustituyentes, y de preferencia 1 , 2 , ó 3 sustituyentes, seleccionados a partir del grupo que consiste en alquilo, alquenilo, alquinilo , alcoxilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, acilo, acil-amino, aciloxilo, amino, amino-carbonilo, alcoxi-carbonil-ami no, azido, ciano, halógeno, hidroxilo,t: queto, tiocarbonilo, carboxilo, carboxi-alquilo, tioarilo , hetero-tioarilo, hetero-tiociclilo, tiol , tioalquilo, arilo , ariloxilo, heteroarilo, amino-sulfonilo, amino-carbonil-amino, heteroariloxilo, heterociclilo, heterociclo-oxilo, hidroxi-amino , alcoxi-amino, nitro, -SO-alquilo, -SO-arilo, -SO-heteroarilo, -S02-alquilo, -S02-arilo, y -S02-heteroarilo . A menos que sean limitados de otra manera por la definición , todos los sustituyentes pueden estar opcionalmente sustituidos adicionalmente por 1 , 2 , ó 3 sustituyentes seleccionados a partir de alquilo, carboxilo , carboxi-alquilo , amino-carbonilo , hidroxilo, alcoxilo, halógeno, CF3, amino, amino sustituido, ciano, y -S(0)nR, en donde R es alquilo, arilo , o heteroarilo, y n es 0, 1 , ó 2. El término "alquinilo" se refiere a un mono-radical de un hidrocarburo insaturado, que tiene de preferencia de 2 a 20 átomos de carbono, más preferiblemente de 2 a 1 0 átomos de carbono, y todavía de una manera muy preferible de 2 a 6 átomos de carbono, y que tiene cuando menos 1 , y de preferencia de 1 a 6 sitios de insaturación de acetileno (triple enlace). Los grupos alquinilo preferidos incluyen etinilo (-C=CH), propargilo (o prop-1 -in-3-ilo, -CH2C=CH ), y similares. En el caso de que el alquinilo esté unido a nitrógeno, el triple enlace no puede ser alfa en relación con el nitrógeno. El término "alquinilo sustituido" se refiere a un grupo alquinilo como se define anteriormente, que tiene 1 , 2, 3, 4, ó 5 sustituyentes, y de preferencia 1 , 2, ó 3 sustituyentes, seleccionados a partir del grupo que consiste en alquilo , alquenilo, alquinilo, alcoxilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, acilo, acil-amino , aciloxilo, amino, amino-carbonilo, alcoxi-carbonil-amino, azido, ciano, halógeno, hidroxilo, queto, tiocarbonilo, carboxilo, carboxi-alquilo, tioarilo, hetero-tioarilo, hetero-tiociclilo , tiol , tioalquilo, arilo, ariloxilo, heteroarilo, amino-sulfonilo, amino-carbonil-amino, heteroariloxilo , heterociclilo, heterociclo-oxilo, hidroxi-amino, alcoxi-amino, nitro , -SO-alquilo, -SO-arilo, -SO-heteroarilo, -S02-alquilo, -S02-arilo, y -S02-heteroarilo. A menos que sean limitados de otra manera por la definición, todos los sustituyentes pueden estar opcionalmente sustituidos adicionalmente por 1 , 2 , ó 3 sustituyentes seleccionados a partir de alquilo, carboxilo, carboxi-alquilo, amino-carbonilo , hidroxilo, alcoxilo, halógeno , CF3 l amino, amino sustituido, ciano , y -S(0)nR, en donde R es alquilo, arilo , o heteroarilo, y n es 0, 1 , ó 2.

El término "amino-carbonilo" se refiere al grupo -C(0)N RR, en donde cada R es independientemente hidrógeno, alquilo, arilo , heteroarilo, heterociclilo, o en donde ambos grupos R están unidos para formar un grupo heterocíclico (por ejemplo, morfolino). A menos que sean limitados de otra manera por la definición , todos los sustituyentes pueden estar opcionalmente sustituidos adicionalmente por 1 a 3 sustituyentes seleccionados a partir de alquilo, carboxilo, carboxi-alquilo, amino-carbonilo, hidroxilo , alcoxilo, halógeno , CF3, amino, amino sustituido, ciano, y -S(0)nR, en donde R es alquilo, arilo , o heteroarilo, y n es 0, 1 , ó 2. El término "acil-ami no" se refiere al grupo -N RC(0)R , en donde cada R es independientemente hidrógeno, alquilo, arilo, heteroarilo, o heterociclilo. A menos que sean limitados de otra manera por la definición , todos los sustituyentes pueden estar opcionalmente sustituidos adicionalmente por 1 a 3 sustituyentes seleccionados a partir de alquilo , carboxilo, carboxi-alquilo, amino-carbonilo, hidroxilo, alcoxilo, halógeno , CF3, amino, amino sustituido, ciano , y -S(0)nR, en donde R es alquilo, arilo , o heteroarilo, y n es 0, 1 , ó 2.

El término "aciloxilo" se refiere a los grupos -0(0)C-alquilo, -0(0)C-cicloalquilo, -0(0)C-arilo, -0(0)C-heteroarilo, y -0(0)C-heterociclilo . A menos que sean limitados de otra manera por la definición , todos los sustituyentes pueden estar opcionalmente sustituidos adicionalmente por alquilo , carboxilo , carboxi-alquilo, amino-carbonilo, hidroxilo, alcoxilo, halógeno , CF3, amino, amino sustituido, ciano, y -S(0)nR, en donde R es alquilo , arilo , o heteroarilo, y n es 0, 1 , ó 2. El término "arilo" se refiere a un grupo carbocíclico aromático de 6 a 20 átomos de carbono, que tiene un solo anillo (por ejemplo , fenilo), o múltiples anillos (por ejemplo, bifenilo), o múlti ples anillos condensados (fusionados) (por ejemplo, naftilo o antrilo). Los arilos preferidos incluyen fenilo, naftilo, y similares. El término "arileno" se refiere a un di-radical de un grupo arilo como se define anteriormente. Este término es ejemplificado por grupos tales como 1 ,4-fenileno , 1 ,3-fenileno, 1 ,2-fenileno, 1 ,4'-bifenileno, y similares. A menos que sean limitados de otra manera por la definición para el sustituyente de arilo o arileno, estos grupos arilo o arileno pueden estar opcionalmente sustituidos con de 1 a 5 sustituyentes, de preferencia de 1 a 3 sustituyentes, seleccionados a partir del grupo que consiste en alquilo, alquenilo, alquinilo, alcoxilo, cicloalqúílo, cicloalquenilo, acilo, acil-amino , aciloxilo, amino, amino-carbonilo, alcoxi-carbonil-amino, azido, ciano, halógeno , hidroxilo, queto, tiocarbonilo, carboxilo, carboxi-alquilo, tioarilo , hetero-tioarilo, hetero-tiociclilo, tiol , tioalquilo, arilo, ariloxilo, heteroarilo, amino-sulfonilo, amino-carbonil-amino, heteroariloxilo, heterociclilo, heterociclo-oxilo, hidroxi-amino , alcoxi-amino, nitro, -SO-alquilo, -SO-arilo, -SO-heteroarilo, -S02-alquilo, -S02-arilo , y -S02-heteroarilo. A menos que sean limitados de otra manera por la definición, todos los sustituyentes pueden estar opcionalmente sustituidos adicionalmente por 1 a 3 sustituyentes seleccionados a partir de alquilo, carboxilo, carboxi-alquilo, amino-carbonilo, hidroxilo, alcoxilo, halógeno , CF3, amino, amino sustituido, ciano , y -S(0)nR, en donde R es alquilo, arilo, o heteroarilo, y n es 0, 1 , ó 2.

El término "ariloxilo" se refiere al grupo aril-O-, en donde el grupo arilo es como se define anteriormente , e incluye los grupos arilo opcionalmente sustituidos también como se definen en lo anterior. El término "tioarilo" se refiere al grupo R-S-, en donde R es como se define para arilo. El término "amino" se refiere al grupo -N H2. El término "amino sustituido" se refiere al grupo -N RR, en donde cada R se selecciona independientemente a partir del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, carboxi-alquilo (por ejemplo, benciloxi-carbonilo), arilo, heteroarilo, y heterociclilo, en el entendido de que ambos grupos R no son hidrógeno, o un grupo -Y-Z, en donde Y es alquileno opcionalmente sustituido y Z es alquenilo, cicloalquenilo, o alquinilo. A menos que sean limitados de otra manera por la definición, todos los sustituyentes pueden estar opcionalmente sustituidos adicionalmente por 1 a 3 sustituyentes seleccionados a partir de alquilo , carboxilo , carboxi-alquilo , amino-carbonilo , hidroxilo, alcoxilo, halógeno, CF3, amino, amino sustituido, ciano, y -S(0)nR, en donde R es alquilo, arilo, o heteroarilo, y n es 0, 1 , ó 2. El término "carboxi-alquilo" se refiere a los grupos -C(0)0-alquilo o -C(0)0-cicloalquilo, en donde alquilo y cicloalquilo son como se definen en la presente, y pueden estar opcionalmente sustituidos adicionalmente por alquilo, alquenilo, alquinilo, alcoxilo, halógeno , CF3, amino, amino sustituido, ciano, o -S(0)nR, en donde R es alquilo, arilo , o heteroarilo , y n es 0, 1 , ó 2.

El término "cicloalquilo" se refiere a grupos carbocíclicos de 3 a 20 átomos de carbono que tienen un solo anillo cíclico o múltiples anillos condensados. Estos grupos cicloalquilo incluyen , a manera de ejemplo, estructuras de anillos individuales, tales ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclo-octilo, y similares, o estructuras de anillos múltiples, tales como adamantanilo , biciclo-[2.2.1 ]-heptano, 1 ,3, 3-trimetil-biciclo[-2.2.1 ]-hept-2-ilo, (2 ,3,3-trimetil-biciclo-[2.2.1 ]-hept-2-il ), o grupos carbocíclicos con los que está fusionado un grupo arilo, por ejemplo , indano, y similares. El término "cicloalquilo sustituido" se refiere a grupos cicloalquilo que tienen 1 , 2 , 3, 4, ó 5 sustituyentes , y de preferencia 1 , 2 , ó 3 sustituyentes, seleccionados a partir del grupo que consiste en alquilo, alquenilo, alquinilo, alcoxilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, acilo, acil-amino, aciloxilo, amino, amino-carbonilo, alcoxi-carbonil-amino , azido, ciano, halógeno, hidroxilo , queto, tiocarbonilo, carboxilo, carboxi-alquilo, tioarilo , hetero-tioarilo, hetero-tiociclilo, tiol , tioalquilo, arilo, ariloxilo, heteroarilo, amino-sulfonilo, amino-carbonil-amino, heteroariloxilo , heterociclilo , heterociclo-oxilo, hidroxi-amino , alcoxi-amino, nitro, -SO-alquilo , -SO-arilo, -SO-heteroarilo, -S02-alquilo, -S02-arilo, y -S02-heteroarilo. A menos que sean limitados de otra manera por la definición , todos los sustituyentes pueden estar opcionalmente sustituidos adicionalmente por 1 , 2, ó 3 sustituyentes seleccionados a parti r de alquilo , carboxilo, carboxi-alquilo, amino-carbonilo, hid roxilo, alcoxilo, halógeno, CF3, amino, amino sustituido, ciano, y -S(0)nR, en donde R es alquilo, arilo, o heteroarilo, y n es 0, 1, ó 2. El término "halógeno" o "halo" se refiere a flúor, bromo, cloro, y yodo. El término "acilo" denota un grupo -C(0)R, en donde R es hidrógeno, alquilo opcionaimente sustituido, cicloalquilo opcionaimente sustituido, heterociciilo opcionaimente sustituido, arilo opcionaimente sustituido, y heteroarilo opcionaimente sustituido. El término "heteroarilo" se refiere a un radical derivado a partir de un grupo cíclico aromático (es decir, completamente insaturado) que tiene 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, ó 15 átomos de carbono, y 1, 2, 3, ó 4 heteroátomos seleccionados a partir de oxígeno, nitrógeno, y azufre dentro de cuando menos un anillo. Estos grupos heteroarilo pueden tener un solo anillo (por ejemplo, piridilo o furilo), o múltiples anillos condensados (por ejemplo, indolizinilo, benzotiazolilo, o benzotienilo). Los ejemplos de los heteroarilos incluyen, pero no se limitan a, [1 ,2,4]-oxadiazol, [1 ,3,4]-oxadiazol, [1 ,2,4]-tiadiazol, [1 ,3,4]-t¡adiazol, pirrol, imidazol, pirazol, piridina, pirazina, pirimidina, piridazina, indolizina, isoindol, indol, indazol, purina, quinolizina, isoquinolina, quinolina, ftalazina, naftil-piridina, quinoxalina, quinazolina, cinolina, pteridina, carbazol, carbolina, fenantridina, acridina, fenantrolina, isotiazol, fenazina, isoxazol, fenoxazina, fenotiazina, imidazolidina, imidazolina, y similares, así como los derivados de N-óxido y N-alcoxilo de los compuestos de heteroarilo que contienen nitrógeno, por ejemplo los derivados de N-óxido de piridina.

El término "heteroarileno" se refiere a un di-radical de un grupo heteroarilo como se define anteriormente. Este término es ejemplificado por grupos tales como 2 , 5-imidazoleno, 3,5-[1 ,2 ,4]- oxadiazoleno, 2,4-oxazoleno, 1 ,4-pi razoleno, y similares. Por ejemplo, el 1 ,4-pirazoleno es: en donde A representa el punto de unión. 10 A menos que sean limitados de otra manera por la definición para el sustituyente de heteroarilo o heteroarileno, estos grupos heteroarilo o heteroarileno pueden estar opcionalmente sustituidos con 1 a 5 sustituyentes, de preferencia con 1 a 3 sustituyentes seleccionados a partir del grupo que consiste en alquilo, alquenilo, 15 alquinilo, alcoxilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, acilo, acil-amino, aciloxilo, amino, amino-carbonilo, alcoxi-carbonil-amino, azido, ciano, halógeno, hidroxílo, queto, tiocarbonilo, carboxilo, carboxi- alquilo, tioarilo, hetero-tioarilo, hetero-tiociclilo, tiol , tioalquilo, arilo, ariloxilo , heteroarilo , amino-sulfonilo, amino-carbonil-amino, 20 heteroariloxilo, heterociclilo, heterociclo-oxilo, hidroxi-amino, alcoxi- amino, nitro, -SO-alquilo, -SO-arilo, -SO-heteroarilo, -S02-alquilo, -S02-arilo, y -S02-heteroarilo. A menos que sean limitados de otra manera por la definición, todos los sustituyentes pueden estar opcionalmente sustituidos adicionalmente por 1 a 3 sustituyentes seleccionados a partir de alquilo, carboxilo, carboxi-alquilo, amino- carbonilo, hidroxilo , alcoxilo, halógeno, CF3, amino, amino sustituido, ciano, y -S(0)n , en donde R es alquilo, arilo, o heteroarilo, y n es 0, 1 , ó 2. El término "heteroaralquilo" se refiere a un grupo heteroarilo covalentemente enlazado con un grupo alquileno, en donde el heteroarilo y el alquileno se definen en la presente. "Heteroaralquilo opcionalmente sustituido" se refiere a un grupo heteroarilo opcionalmente sustituido covalentemente enlazado con un grupo enlazado opcionalmente sustituido . Estos grupos heteroaralquilo son ejemplificados por 3-piridil-metilo, quinolin-8-il-etilo, 4-metoxi-tiazol-2-il-propilo, y similares. El término "heteroariloxilo" se refiere al grupo heteroaril-O-. El término "heterociclilo" se refiere a un mono-radical de un grupo saturado o parcialmente saturado que tiene un solo anillo o múltiples anillos condensados, que tiene de 1 a 40 átomos de carbono y de 1 a 1 0 heteroátomos, de preferencia 1 , 2 , 3, ó 4 heteroátomos, seleccionados a partir de nitrógeno, azufre, fósforo, y/u oxígeno dentro del anillo. Los grupos heterocíclicos pueden tener un solo anillo o múltiples anillos condensados, e incluyen tetrahidro-furanilo , morfolino, piperidinilo, piperazino, dihidro-piridi no, y similares. A menos que sean limitados de otra manera por la definición para el sustituyente heterocíclico, estos grupos heterocíclicos pueden estar opcionalmente sustituidos con 1 , 2, 3, 4, ó 5, y de preferencia con 1 , 2 , ó 3 sustituyentes seleccionados a partir del grupo que consiste en alquilo, alquenilo, alquinilo, alcoxilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, acilo, acil-amino, aciloxilo, amino, amino-carbonilo, alcoxi-carbonil-amino, azido, ciano, halógeno, hidroxilo, queto, tiocarbonilo, carboxilo, carboxi-alquilo, tioarilo, hetero-tioarilo, hetero-tiociclilo, tiol , tioalquilo, arilo, ariloxilo, heteroarilo, amino-sulfonilo , amino-carbonil-amino, heteroariloxilo, heterociclilo, heterociclo-oxilo, hidroxi-amino , alcoxi-amino, nitro, -SO-alquilo, -SO-arilo, -SO-heteroarilo, -S02-alquilo, -S02-arilo, y -S02-heteroarilo. A menos que sean limitados de otra manera por la definición , todos los sustituyentes pueden estar opcionalmente sustituidos adicionalmente por 1 a 3 sustituyentes seleccionados a partir de alquilo, carboxilo , carboxi-alquilo , amino-carbonilo, hidroxilo, alcoxilo, halógeno, CF3, amino, amino sustituido, ciano , y -S(0)nR, en donde R es alquilo, arilo , o heteroarilo , y n es 0, 1 , ó 2. El término "tiol" se refiere al grupo -SH . El término "tioalquilo sustituido" se refiere al grupo alquilo -S-sustituido. El término "heteroaril-tiol" se refiere al grupo -S-heteroarilo, en donde el grupo heteroarilo es como se define anteriormente, incluyendo los grupos heteroarilo opcionalmente sustituidos también como se definen en lo anterior. El término "sulfóxido" se refiere a un grupo -S(0)R, en donde R es alquilo, arilo, o heteroarilo . "Sulfóxido sustituido" se refiere a un grupo -S(0)R, en donde R es alquilo sustituido, arilo sustituido, o heteroarilo sustituido, como se definen en la presente.

El término "sulfona" se refiere a un grupo -S(0)2R, en donde R es alquilo, arilo, o heteroarilo. "Sulfona sustituida" se refiere a un grupo -S(0)2R, en donde R es alquilo sustituido, arilo sustituido, o heteroarilo sustituido, como se definen en la presente. El término "queto" se refiere a un grupo -C(O)-. El término "tiocarbonilo" se refiere a un grupo -C(S )-. El término "carboxilo" se refiere a un grupo -C(0)-OH . "Opcional" u "opcionalmente" significa que el evento o la circunstancia subsiguientemente descrita puede ocurrir o no, y que la descripción incluye los casos en donde este evento o circunstancia ocurre, y los casos en donde no ocurre. El término "compuesto de la Fórmula I y de la Fórmula I I" pretende abarcar los compuestos de la invención como se dan a conocer, y las sales farmacéuticamente aceptables, los ésteres farmacéuticamente aceptables , pro-fármacos, hidratos, y polimorfos de estos compuestos. Adicionalmente, los compuestos de la invención pueden poseer uno o más centros asimétricos, y se pueden producir como una mezcla racémica o como los enantiómeros o diaestereoisómeros individuales. El número de estereoisómeros presentes en cualquier compuesto dado de la Fórmula I depende del número de centros asimétricos presentes (hay 2n estereoisómeros posibles, en donde n es el número de centros asimétricos). Los estereoisómeros individuales se pueden obtener mediante la resolución de una mezcla racémica o no racémica de un intermediario en alguna etapa apropiada de la síntesis, o mediante la resolución del compuesto de la Fórmula I por medios convencionales. Los estereoisómeros individuales (incluyendo los enantiómeros y diaestereoisómeros), así como las mezclas racémicas y no racémicas de estereoisómeros, están abarcados dentro del alcance de la presente invención , todos los cuales pretenden ser ilustrados por las estructuras de esta memoria descriptiva, a menos que se indique específicamente de otra manera.

Los "isómeros" son compuestos diferentes que tienen la misma fórmula molecular. Los "estereoisómeros" son isómeros que difieren solamente en la manera en que están configurados los átomos en el espacio. Los "enantiómeros" son un par de estereoisómeros que no son imágenes de espejo que se puedan sobreponer uno del otro. Una mezcla de 1 : 1 de un par de enantiómeros es una mezcla "racémica". El término "(+ )" se utiliza para designar una mezcla racémica donde sea apropiado. Los "diaestereoisómeros" son estereoisómeros que tienen cuando menos dos átomos asimétricos, pero que no son imágenes de espejo uno del otro. La estereoqu ímica absol uta se especifica de acuerdo con el sistema Cahn-Ingold-Prelog R-S . Cuando el compuesto es un enantiómero puro , la estereoqu ímica en cada átomo de carbono quiral se puede especificar por cualquiera de R ó S . Los compuestos resueltos cuya configuración absoluta se desconozca, se designan como ( + ) o (-) dependiendo de la dirección (dextrógira o levógira) en la que giren en el plano de la luz polarizada ala longitud de onda de la línea de sodio D. "Administración tópica" se definirá como el suministro del agente terapéutico a la superficie de la herida y al epitelio adyacente. "Administración parenteral" es el suministro sistémico del agente terapéutico mediante inyección al paciente. El término "cantidad terapéuticamente efectiva" se refiere a la cantidad de un compuesto de la Fórmula I que es suficiente para efectuar el tratamiento, como se define más adelante, cuado se administra a un mam ífero que necesite tratamiento. La cantidad terapéuticamente efectiva variará dependiendo de la actividad específica del agente terapéutico que se esté utilizando, y de la edad , condición física , existencia de otros estados de enfermedad , y estado nutricional del paciente. Adicionalmente, otro medicamento que pueda estar recibiendo el paciente afectará a la determinación de la cantidad terapéuticamente efectiva del agente terapéutico que se vaya a administrar. El término "tratamiento" o "tratar" significa cualquier tratamiento de una enfermedad en un mamífero, incluyendo: (i ) la prevención de la enfermedad , es decir, que se provoca que no se desarrollen los síntomas cl ínicos de la enfermedad ; (ii) la inhibición de la enfermedad , es deci r, que se detiene el desarrollo de los síntomas cl ínicos; y/o (iü ) el alivio de la enfermedad , es decir, que se provoca la regresión de los síntomas cl ínicos. En muchos casos, los compuestos de esta invención son capaces de formar sales de ácido y/o de base en virtud de la presencia de grupos amino y/o carboxilo, o grupos similares a los mismos. El término "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a las sales que retienen la efectividad biológica y las propiedades de los compuestos de la Fórmula I , y que no son biológicamente o de otra manera indeseables. Las sales de adición de base farmacéuticamente aceptables se pueden preparar a partir de bases inorgánicas y orgánicas. Las sales derivadas a partir de bases inorgánicas incluyen, a manera de ejemplo solamente, las sales de sodio , potasio , litio , amonio , calcio , y magnesio . Las sales derivadas a partir de bases orgánicas incluyen , pero no se limitan a, las sales de aminas primarias, secundarias, y terciarias, tales como alquil-aminas, dialquil-aminas, trialquil-aminas, alquil-aminas sustituidas, di-(alquilo sustituido)-aminas, tri-(alquilo sustituido)-aminas , alquenil-aminas, dialquenil-aminas, trialquenil-aminas, alquenil-aminas sustituidas, di-(alquenilo sustitu¡do)-aminas, tri-(alquenilo sustituido)-aminas, cicloalquil-aminas, di-(cicloalquil )-aminas, tri-(cicloalquil)-aminas, cicloalquil-aminas sustituidas, cicloalquil-aminas disustituidas, cicloalquil-aminas trisustituidas , cicloalquenil-aminas, di-(cicloalquenil )-aminas, tri-(cicloalquenil )-aminas, cicloalquenil-aminas sustituidas, cicloalquenil-aminas disustituidas, cicloalquenil-aminas trisustituidas, aril-aminas, diaril-aminas, triaril-aminas, heteroaril-aminas, diheteroaril-aminas, triheteroaril-ami nas, aminas heterocíclicas, aminas diheterocíclicas, aminas triheterocíclicas, di- y tri-aminas mixtas en donde cuando menos dos de los sustituyentes sobre la amina son diferentes y se seleccionan a partir del grupo que consiste en alquilo, alquilo sustituido, alquenilo , alquenilo sustituido, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido , cicloalquenilo, cicloalquenilo sustituido, arilo, heteroarilo, heterocíclico, y similares. También se incluyen las aminas en donde los dos o tres sustituyentes, junto con el nitrógeno de amino, forman un grupo heterocíclico o heteroarilo. Los ejemplos específicos de las aminas adecuadas incluyen , a manera de ejemplo solamente, isopropil-amina, trimetil-amina, dietil-amina , tri-(isopropil )-amina, tri-(n-propil)-amina , etanol-amina, 2-dimetil-amino-etanol , trometamina, lisina, arginina, histidina, cafeína , procaína, hidrabamina , colina , betaina , etilendiamina, glucosamina , N-alquil-glucamina , teobromina , purinas, piperazina , piperidina , morfolina, N-etil-piperidina , y similares. Las sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables se pueden preparar a partir de ácidos inorgánicos y orgánicos. Las sales derivadas a partir de ácidos inorgánicos incluyen ácido clorhídrico, ácido bromh ídrico, ácido sulfúrico , ácido n ítrico, ácido fosfórico, y similares. Las sales derivadas a parti r de ácidos orgánicos incluyen ácido acético, ácido propiónico , ácido glicólico, ácido pirúvico, ácido oxálico, ácido mélico, ácido malónico, ácido succínico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico , ácido benzoico, ácido cinámico, ácido mandélico, ácido metan-sulfónico, ácido etan-sulfónico, ácido p-toluen-sulfónico, ácido salicílico, y similares. Como se utiliza en la presente, "vehículo farmacéuticamente aceptable" incluye cualquiera y todos los solventes , medios de dispersión, recubrimientos, agentes anti-bacterianos y anti-fúngicos, agentes isotónicos y retardantes de absorción , y similares . El uso de estos medios y agentes para sustancias farmacéuticamente activas es bien conocido en este campo. Excepto hasta donde cualquier medio o agente convencional sea incompatible con el ingrediente activo, se contempla su uso en las composiciones terapéuticas. También se pueden incorporar ingredientes activos complementarios en las composiciones. Nomenclatura El nombramiento y la numeración de los compuestos de la invención se ilustra con un compuesto representativo de la Fórmula I , en donde R1 es propilo normal , R2 y R3 son hidrógeno , X es pirazol-4-ileno, Y es metileno, y Z es 5-(4-cloro-fenil)-( 1 ,2,4-oxadiazol-3-ilo): el cual se nombra como: 8-( 1 -{[5-(4-cloro-fenil)-( 1 ,2,4-oxadiazol-3-il )]-metil}-pirazol-4-il)-1 pro p¡ 1-1 ,3,7-tr¡hidro-purina-2,6-d¡ona. El Método de la Invención La presente invención se refiere a métodos para prevenir y/o tratar una enfermedad hepática, mediante la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de un antagonista del receptor de adenosina A2B a un mamífero que lo necesite. Aunque no deseamos obligarnos por la teoría, se cree que la capacidad del antagonista del receptor de adenosina A2B para prevenir la fibrogénesis, proporciona a estos compuestos la capacidad para prevenir y tratar una enfermedad hepática. Debido a que la fibrogénesis hepática es un componente significativo de la hepatitis viral y alcohólica, de la enfermedad de Wilson, hemocromatosis, esteatosis, y esteatohepatitis no alcohólica, y puede ser el resultado de una agresión quirúrgica, es decir, reemplazo o reparación del hígado, o de un tratamiento médico hepatotóxico, es decir, radiación, fármacos de quimioterapia, antibióticos, antiheméticos, y similares, el método de la invención involucrará en general la administración de un antagonista del receptor de adenosina A2B a un paciente que sufra de una de las condiciones anteriormente mencionadas, o que se someta a un tratamiento hepatotóxico. La quimioterapia y la terapia de radiación en el tratamiento de cáncer son dos de los tipos más comunes de tratamiento hepatotóxico. Los fármacos hepatotóxícos utilizados para tratar cáncer incluyen, pero no se limitan a, adriamicina, metotrexato, 6- mercapto-purina, carboplatina, DTIC (dacarbacina), BiCNU, L-asparaginasa, y pentostatina. Otros fármacos que se sabe que tienen efectos secundarios hepatotóxicos incluyen, pero no se limitan a, acebutolol; acetaminofeno; actinomicina d; esteroides adrenocorticales; adriamicina; alopurinol; amoxicilina/clavulanato; esteroides anabólicos; fármacos anti-inflamatorios; fármacos anti-tiroides; aspirina; atenolol; azatioprina; captopril; carbamazepina; carbimazol; carmustina; cefalosporinas; clordiazepóxido; clorpromazina; clorpromazina/ácido valproico; clorpropamida; clorpropamida/ eritromicina (combinación); cimetidina; cloxacilina; flecainida; ciclofosfamida; ciclofosfamida/ciclosporina; ciclosporina; dacarbazina; danazol; dantroleno; diazepam; diclofenaco; diitiazem; disopiramida; enalapril; enflurano; eritromicina; etambutol; etionamida; flurazepam; flutamida; gliburida; oro; griseofulvina; haloperidol; halotano; hidralazina; ¡buprofeno; imipramina; indometacina; isoniazida; quetoconazol; labetalol; maprotilina; mercapto-purina; metotrexato; metildopa; metil-testosterona; metoprolol; mianserina; mitomicina; naproxeno; ácido nicotínico; nifedipina; nitrofurantoína; no esteroideo; noretandrolona; anticonceptivos orales; oxacilina; ácido para-amino-salicílico; penicilamina; penicilina; penicilinas; fenelzina; fenindiona; fenobarbital; fenotiazinas; fenil-butazona; fenitoína; fenitoína-troleandomicina; piroxicam; probenecid; procainamida; propoxifeno; pirazinamida; quinidina; quinina; ranitidina; salicilatos; sulfonamidas; sulindac; tamoxifeno; terbinafina HCI (Lamisil, Sporanox); testosterona; tetraciclinas; tiabendazol; tioguanina; torotrast; tolbutamida; antidepresivos tricíclicos; ácido valproico; verapamil; vincristina; y vitamina A. El establecimiento de la fibrogénesis hepática empieza con la activación de las células estrelladas hepáticas humanas (HHSC). Después de la activación, las células estrelladas hepáticas humanas empiezan a sintetizar una matriz fibrótica que es rica en colágeno tipo 1. Esta matriz fibrótica finalmente da como resultado la cicatrización tradicionalmente referida como fibrosis hepática. Los solicitantes han descubierto de una manera sorprendente que el receptor de adenosina A2B está involucrado en el desarrollo de la fibrosis hepática, debido a que la activación del receptor A2B en las células estrelladas hepáticas humanas induce la liberación de IL-6 y la expresión de actina de músculo liso-a, un marcador para la activación de las células estrelladas hepáticas humanas. Se ha demostrado que la liberación de IL-6, a su vez, estimula la producción de colágeno. Se ha descubierto que la inhibición del receptor A2B reduce la liberación de IL-6 inducida por ÑECA y la producción de colágeno. El antagonista del receptor de adenosina A2B se administra sistémicamente ya sea como una formulación oral o intravenosa, pero también se puede administrar directamente al tejido hepático por medio de inyección. Esta administración puede ser como una sola dosis o como dosis repetidas dadas en múltiples intervalos designados. Será fácilmente apreciado por los expertos en este campo que el régimen de dosificación preferido variará con el paciente y con la severidad de la condición que se esté tratando. Composiciones Farmacéuticas Cuando se seleccionan como el antagonista del receptor de adenosina A2B, los compuestos de la Fórmula I normalmente se administran en la forma de composiciones farmacéuticas. Por consiguiente, esta invención proporciona composiciones farmacéuticas que contienen , como el ingrediente activo , uno o más de los compuestos de la Fórmula I o de la Fórmula I I , o una sal farmacéuticamente aceptable o éster de los mismos, y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables, vehículos, incluyendo diluyentes y rellenos sólidos inertes, diluyentes , incluyendo solución acuosa estéril y diferentes solventes orgánicos, solubilizantes y adyuvantes. Los compuestos de la Fórmula I y/o de la Fórmula I I se pueden administrar solos o en combinación con otros agentes terapéuticos. Estas composiciones se preparan de una manera bien conocida en la técnica farmacéutica (véase, por ejemplo, Remington's Pharmaceutical Sciences, Mace Publishing Co. , Filadelfia , PA, 1 7A Edición ( 1 985 ) , y "Modern Pharmaceutics", Marcel Dekker, Inc. 3A Edición (G . S . Banker & CT. Rhodes, Editores). Los Antagonistas del Receptor de Adenosina A?B Se puede utilizar cualquier antagonista del receptor de adenosina A2B en el método de la invención . Numerosos compuestos que antagonizan al receptor A2B se conocen en la materia, así como los métodos para determinar si un compuesto específico tiene dicha actividad. Por ejemplo, un artículo de revisión por Feoktistov y Baggioni, ((1997) Pharmacological Reviews 49:381-402), reporta la afinidad de enlace de 8 agonistas y 8 antagonistas del receptor de adenosina para los cuatro subtipos de receptores de adenosina. Las referencias citadas en el mismo proporcionan descripciones detalladas de los procedimientos empleados. (Robeva y colaboradores (1996) J. Drug Dev. Res 39:243-252; Jacobson y colaboradores (1996) Drug Dev. Res. 39:289-300; Feoktistov y Baggioni (1993) Molecular Pharmacology 43:909-914). Los métodos efectivos para determinar la afinidad de enlace de un compuesto para un receptor, utilizan un agonista o antagonista radiomarcado, y la correlación del enlace de este compuesto con una fracción de membrana que se sepa que contiene a ese receptor; por ejemplo, para determinar si un compuesto es un antagonista de A2B, la fracción de membrana contendría al receptor de adenosina A2B. Otro procedimiento particularmente efectivo para determinar si un compuesto es un antagonista de A2B se reporta en la Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número 5,854,081. Por consiguiente, se prefieren los compuestos selectivos para el subtipo del receptor A2B para los presentes métodos. Un ejemplo, pero no una limitación, de este compuesto, es la 3-n-propil-xantina (enprofilina). Los compuestos adecuados también se dan a conocer en la Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número 6,545,002. Los compuestos que antagonizan otros receptores en adición al receptor A2B también son adecuados para utilizarse en la presente invención. Un ejemplo de estos compuestos es la 1,3-dipropil-8-(p-acrílico)-fenil-xantina. Una clase particularmente preferida de antagonistas del receptor de adenosina A2B es la de aquéllos que se dan a conocer en la Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Pendiente y Comúnmente Cedida con Número de Serie 6,825,349, en la Solicitud de Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Pendiente y Comúnmente Cedida con Número de Serie 10/719,102, la cual se publicó como la Publicación de Solicitud de Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número 20040176399, y en la Solicitud de Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Pendiente y Comúnmente Cedida con Número de Serie 11/453,414, la cual se publicó como la Publicación de Solicitud de Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número 20060293283. Los compuestos que se dan a conocer en estas solicitudes, tienen la estructura de las Fórmulas I, II, y III, como se presentan en la Breve Descripción de la Invención anteriormente, y se pueden sintetizar como se describe en las referencias o como se detalla más adelante. Parámetros de la Reacción Sintética Los términos "solvente", "solvente orgánico inerte", o "solvente inerte", significan un solvente inerte bajo las condiciones de la reacción que se está describiendo en conjunto con la misma [incluyendo, por ejemplo, benceno, tolueno, acetonitrilo, tetrahidrofurano ("THF"), dimetil-formamida ("DMF"), cloroformo, cloruro de metileno (o dicloro-metano), dietil-éter, metanol , piridina, y similares]. A menos que se especifique lo contrario, los solventes utilizados en las reacciones de la presente invención son solventes orgánicos inertes, y las reacciones se llevan a cabo bajo un gas inerte, de preferencia nitrógeno. El término "c. s." significa agregar una cantidad suficiente para alcanzar una función mencionada, por ejemplo, para llevar una solución hasta el volumen deseado (es decir, el 1 00 por ciento). Síntesis de los Compuestos de las Fórm u las I y II Un método preferido para preparar los compuestos de la Fórmula I ó I I , en donde R3 es hidrógeno, se muestra en el Esquema de Reacción I .

Paso 1 - Preparación de la Fórmula (2 ) El compuesto de la Fórmula (2) se hace a partir del compuesto de la Fórmula ( I ) mediante un paso de reducción . Se pueden emplear las técnicas de reducción convencionales, por ejemplo, utilizando ditionita de sodio en una solución acuosa de amoniaco; de preferencia, la reducción se lleva a cabo con hidrógeno y un catalizador de metal . La reacción se lleva a cabo en un solvente inerte, por ejemplo metanol , en la presencia de un catalizador, por ejemplo un catalizador de paladio al 1 0 por ciento sobre carbón , bajo una atmósfera de hidrógeno, de preferencia bajo presión , por ejemplo a aproximadamente 30 psi (2.1 kg/cm2) durante aproximadamente 2 horas. Cuando la reacción está sustancialmente completa, se a isla el producto de la Fórmula (2) por medios convencionales , para proporcionar un compuesto de la Fórmula (2 ). Paso 2 - Preparación de la Fórmula (3) El compuesto de la Fórmula (2) se hace reaccionar entonces con un ácido carboxílico de la fórmula Z-Y-X-C02H , en la presencia de una carbodi-imida, por ejemplo clorhidrato de -(3-dimeti)-amino-propil)-3-etil-carbod ¡-imida. La reacción se conduce en un solvente prótico, por ejemplo metanol , etanol , propanol , y similares, de preferencia metanol , a una temperatura de aproximadamente 20°C a 30°C, de preferencia a aproximadamente la temperatura ambiente, durante aproximadamente 1 2 a 48 horas, de preferencia durante aproximadamente 1 6 horas. Cuando la reacción está sustancialmente completa , se aisla el producto de la Fórmula (3) convencionalmente, por ejemplo, mediante la remoción del solvente bajo presión reducida , y lavando el producto . De una manera alternativa, el siguiente paso se puede llevar a cabo sin ninguna purificación adicional . Preparación Alternativa de un Compuesto de la Fórmula (3) De una manera alternativa , el ácido carboxílico de la fórmula Z-Y-X-C02H se convierte primero hasta un haluro de ácido de la fórmula Z-Y-X-C(0)L, en donde L es cloro o bromo , mediante la reacción con un agente halogenante, por ejemplo cloruro de tionilo o bromuro de tionilo, de preferencia cloruro de tionilo. De una manera alternativa, se puede utilizar cloruro de oxalilo, pentacloruro de fósforo, u oxicloruro de fósforo. La reacción de preferencia se conduce en ausencia de un solvente, utilizando un exceso de agente halogenante , por ejemplo a una temperatura de aproximadamente 60°C a 80°C, de preferencia de aproximadamente 70°C, durante aproximadamente 1 a 8 horas, de preferencia durante aproximadamente 4 horas. Cuando la reacción está sustancialmente completa , se aisla el producto de la fórmula Z-Y-X-C(0)L convencionalmente, por ejemplo mediante la remoción del exceso de agente halogenante bajo presión reducida. Entonces el producto se hace reaccionar con un compuesto de la Fórmula (2) en un solvente inerte, por ejemplo acetonitrilo, en la presencia de una base terciaria , por ejemplo trietil-amina. La reacción se conduce a una temperatura inicial de aproximadamente 0°C, y luego se deja calentar hasta 20-30°C, de preferencia hasta aproximadamente la temperatura ambiente , durante aproximadamente 1 2 a 48 horas, de preferencia durante aproximadamente 1 6 horas. Cuando la reacción está sustanciaimente completa , se aisla el producto de la Fórmula (3) convencionalmente, por ejemplo diluyendo la mezcla de reacción con agua , filtrando el producto, y lavando el producto con agua seguida por éter. Paso 3 - Preparación de la Fórmula I El compuesto de la Fórmula (3) se convierte entonces en un compuesto de la Fórmula I mediante una reacción de ciclación. La reacción se conduce en un solvente prótico, por ejemplo metanol , etanol , propanol , y similares, de preferencia metanol , en la presencia de una base, por ejemplo hidróxido de potasio, hidróxido de sodio, metóxido de sodio, etóxido de sodio , terbutóxido de potasio , de preferencia hidróxido de sodio acuoso, a una temperatura de aproximadamente 50°C a 80°C, de preferencia de aproxi madamente 80°C, durante aproximadamente 1 a 8 horas, de preferencia durante aproximadamente 3 horas . Cuando la reacción está sustanciaimente completa, se aisla el producto de la Fórmula I convencionalmente, por ejemplo mediante la remoción del solvente bajo presión reducida, la acidificación del residuo con un ácido acuoso, la filtración del producto, y luego el lavado y el secado del producto. El compuesto de la Fórmula ( 1 ) se puede preparar mediante diferentes métodos. Un método preferido se muestra en el Esquema de Reacción I I .

ESQU E MA D E REACC IÓN I I Paso 1 - Preparación de la Fórmula (5) El compuesto de la Fórmula (4) está comercialmente disponible, o bien se prepara por medios bien conocidos en la materia . Se hace reaccionar con cianoacetato de etilo en un solvente prótico, por ejemplo etanol , en la presencia de una base fuerte, por ejemplo etóxido de sodio. La reacción se lleva a cabo a aproximadamente la temperatura de reflujo, durante aproximadamente a aproximadamente 24 horas. Cuando la reacción está sustancialmente completa, se aisla convencionalmente el compuesto de la Fórmula (5) así producido. Paso 2 y 3 - Preparación de la Fórmula (7) El compuesto de la Fórmula (5) se hace reaccionar con el dimetil-acetal de ? ,?-dimetil-formamida en un solvente polar, por ejemplo ? , ?-dimetil-formamida. La reacción se lleva a cabo a aproximadamente 40°C durante aproximadamente 1 hora . Cuando la reacción está sustancialmente completa, se hace reaccionar el compuesto de la Fórmula (6) así producido con un compuesto de la Fórmula R1 Hal , en donde Hal es cloro , bromo , o yodo, en la presencia de una base, por ejemplo carbonato de potasio. La reacción se lleva a cabo a aproximadamente 80°C, durante aproximadamente 4 a 24 horas. Cuando la reacción está sustancialmente completa , se aisla el producto de la Fórmula (7) convencionalmente, por medio mediante la evaporación de los solventes bajo presión reducida , y el residuo se utiliza en la siguiente reacción sin mayor purificación . Paso 4 - Preparación de la Fórmula (8) El compuesto de la Fórmula (7) se hace reaccionar con amoniaco acuoso en un solvente polar, por ejemplo suspendido en metanol . La reacción se lleva a cabo aproximadamente la temperatura ambiente, durante aproximadamente 1 a 3 d ías. Cuando la reacción está sustancialmente completa, se aisla el producto de la Fórmula (8) convencionalmente, por ejemplo mediante cromatografía sobre una columna de gel de sílice, eluyendo, por ejemplo, con una mezcla de dicloro-metano/metanol . Paso 5 - Preparación de la Fórmula ( 1 ) Entonces se mezcla el compuesto de la Fórmula (8) con nitrito de sodio en un solvente ácido acuoso, de preferencia ácido acético y agua , por ejemplo ácido acético al 50 por ciento/agua . La reacción se lleva a cabo a una temperatura de aproximadamente 50°C a 90°C, de preferencia de aproximadamente 70°C, durante aproximadamente 1 hora . Cuando la reacción está sustancialmente completa , se aisla el producto de la Fórmula ( 1 ) por medios convencionales. De una manera alternativa, la reacción se puede conducir en un solvente acuoso, por ejemplo dimetil-formamida y agua, y se hace reaccionar con un ácido fuerte, por ejemplo ácido clorh ídrico. Un compuesto de la Fórmula (8) se puede preparar a partir de un compuesto de la Fórmula ( 1 0), empleando un método similar, como se muestra en el Esquema de Reacción HA.

ESQUEMA DE REACCIÓN HA Pasos 2 y 3 - Preparación de la Fórmula (7) El compuesto de la Fórmula ( 1 0) se hace reaccionar con el dimetil-acetal de ? ,?-dimetil-formamida en un solvente polar, por ejemplo ? , ?-dimetil-formamida . La reacción se lleva a cabo a aproximadamente 40°C, durante aproximadamente 1 hora. Cuando la reacción está sustancialmente completa , se hace reaccionar el compuesto de la Fórmula (6a) así producido con un compuesto de la Fórmula R2Hal , en donde Hal es cloro, bromo , o yodo, en la presencia de una base, por ejemplo carbonato de potasio. La reacción se lleva a cabo aproximadamente 80°C, durante aproximadamente 4 a 24 horas. Cuando la reacción está sustancialmente completa, se a isla el producto de la Fórmula (7) convencionalmente, por ejemplo mediante la evaporación de los solventes bajo presión reducida , y el residuo se utiliza en la siguiente reacción sin mayor purificación .

Paso 4 - Preparación de la Fórmula (8 ) El compuesto de la Fórmula (7) se hace reaccionar con amoniaco acuoso en un solvente polar, por ejemplo suspendido en metanol . La reacción se lleva a cabo a aproximadamente la temperatura ambiente, durante aproximadamente 1 a 3 d ías. Cuando la reacción está sustancialmente completa, se aisla el producto de la Fórmula (8) convencionalmente, por ejemplo mediante cromatografía sobre una columna de gel de sílice, eluyendo , por ejemplo, con una mezcla de dicloro-metano/metanol . El compuesto de la Fórmula (3) también se puede preparar mediante diferentes métodos. Un método preferido se muestra en el Esquema de Reacción I I I .

ESQU EMA DE REACCIÓN I II («) (is) w Paso 1 - Preparación de la Fórmula ( 1 0 ) Primeramente se silila el compuesto de 6-amino-uracilo comercialmente disponible, por ejemplo , mediante su reacción con un exceso de hexametil-disilazano como un solvente, en la presencia de un catalizador, por ejemplo sulfato de amonio. La reacción se lleva a cabo a aproximadamente la temperatura de reflujo, durante aproximadamente 1 a 1 0 horas. Cuando la reacción está sustancialmente completa, el compuesto sililado así producido se aisla convencionalmente, y luego se hace reaccionar con un compuesto de la Fórmula R1 Hal , en donde Hal es cloro, bromo, o yodo, de preferencia en ausencia de un solvente. La reacción se lleva a cabo a aproximadamente la temperatura de reflujo, durante aproximadamente 4 a 48 horas, de preferencia durante aproximadamente 1 2 a 1 6 horas. Cuando la reacción está sustancialmente completa, se aisla el producto de la Fórmula (10) por medios convencionales.

Paso 2 - Preparación de la Fórmula (11) Entonces se disuelve el compuesto de la Fórmula (10) en un ácido acuoso, por ejemplo ácido acético acuoso, y se hace reaccionar con nitrito de sodio. La reacción se lleva a cabo a una temperatura de aproximadamente 20°C a 50°C, de preferencia de aproximadamente 30°C, durante aproximadamente 30 minutos. Cuando la reacción está sustancialmente completa, se aisla el producto de la Fórmula (11) por medios convencionales, por ejemplo mediante filtración.

Paso 3 - Preparación de la Fórmula (12) Luego se reduce el compuesto de la Fórmula (11) hasta un derivado de diamino. En general, el compuesto de la Fórmula (11) se disuelve en amoniaco acuoso, y entonces se agrega un agente reductor, por ejemplo hidrosulfito de sodio. La reacción se conduce a una temperatura de aproximadamente 70°C. Cuando la reacción está sustancialmente completa, se aisla el producto de la Fórmula (12) convencionalmente, por ejemplo mediante la filtración de la mezcla de reacción enfriada.

Paso 4 - Preparación de la Fórmula (13) Entonces se hace reaccionar el compuesto de la Fórmula (12) con un ácido carboxílico de la fórmula Z-Y-X-C02H , en la presencia de una carbodi-imida , por ejemplo clorhidrato de 1 -(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-carbodi-imida . La reacción se conduce a una temperatura de aproximadamente 20°C a 30°C, durante aproximadamente 1 2 a 48 horas. Cuando la reacción está sustancialmente completa, se aisla el producto de la Fórmula ( 1 3) convencionalmente, por ejemplo mediante la filtración de la mezcla de reacción enfriada. De una manera alternativa, el ácido carboxílico de la fórmula Z-Y-X-C02H se convierte hasta un haluro de ácido de la fórmula Z-Y-X-C(0)L, en donde L es cloro o bromo, mediante su reacción con un agente halogenante, por ejemplo cloruro de tionilo o bromuro de tionilo; de una manera alternativa , se puede utilizar pentacloruro de fósforo u oxicloruro de fósforo . La reacción de preferencia se conduce en ausencia de un solvente, utilizando un exceso de agente halogenante, por ejemplo a una temperatura de aproximadamente 60°C a 80°C, de preferencia de aproximadamente 70°C, durante aproximadamente 1 a 8 horas, de preferencia durante aproximadamente 4 horas. Cuando la reacción está sustancialmente completa, se aisla el producto de la fórmula Z-Y-X-C(0)L convencionalmente, por ejemplo mediante la remoción del exceso de agente halogenante bajo presión reducida . Entonces se hace reaccionar el producto de la fórmula Z-Y-X-C(0)L con un compuesto de la Fórmula ( 1 2) en un solvente inerte, por ejemplo acetonitrilo, en la presencia de una base terciaria, por ejemplo trietil-amina. La reacción se conduce a una temperatura inicial de aproximadamente 0°C, y luego se deja calentar hasta 20-30°C, de preferencia hasta aproximadamente la temperatura ambiente, durante aproximadamente 1 2 a 48 horas, de preferencia durante aproximadamente 1 6 horas. Cuando la reacción está sustancialmente completa , se a isla el producto de la Fórmula ( 1 3) convencionalmente, por ejemplo mediante la dilución de la mezcla de reacción con agua , la filtración del producto , y el lavado del producto con agua seguida por éter.

Paso 5 - Preparación de la Fórmula (3) El compuesto de la Fórmula ( 1 3) se hace reaccionar con un compuesto de la Fórmula R2Hal , en donde Hal es cloro, bromo, o yodo, en la presencia de una base, por ejemplo carbonato de potasio. La reacción se lleva a cabo a aproximadamente la temperatura ambiente, durante aproximadamente 4 a 24 horas, de preferencia durante aproximadamente 1 6 horas. Cuando la reacción está sustancialmente completa, se aisla el producto de la Fórmula (3) convencionalmente, por ejemplo mediante la evaporación de los solventes bajo presión reducida, y el residuo se puede purificar convencionalmente, o se puede utilizar en la siguiente reacción sin mayor purificación . Otro método para preparar un compuesto de la Fórmula (3) se muestra en el Esquema de Reacción IV.

ESQU EMA DE REACCIÓN IV Paso 1 - Preparación de la Fórmula ( 1 4) El compuesto de la Fórmula (5) se mezcla entonces con nitrito de sodio en un solvente ácido acuoso , de preferencia ácido acético y agua , por ejemplo ácido acético al 50 por ciento/agua. La reacción se lleva a cabo a una temperatura de aproximadamente 50°C a 90°C, de preferencia de aproximadamente 70°C, durante aproximadamente 1 hora . Cuando la reacción está sustancialmente completa, se a isla el producto de la Fórmula (1 4) por medios convencionales. De una manera alternativa , la reacción se puede conducir en un solvente acuoso, por ejemplo dimetil-formamida y agua, y se hace reaccionar con un ácido fuerte, por ejemplo ácido clorhídrico. Paso 3 - Preparación de la Fórmula ( 1 5) El compuesto de la Fórmula ( 14) se reduce entonces hasta un derivado de diamino. En general , el compuesto de la Fórmula ( 1 4) se disuelve en amoniaco acuoso, y luego se agrega un agente reductor, por ejemplo hidrosulfito de sodio. La reacción se conduce a una temperatura de aproximadamente 70°C. Cuando la reacción está sustancialmente completa, se aisla el producto de la Fórmula ( 1 5) convencionalmente, por ejemplo mediante filtración de la mezcla de reacción enfriada. Paso 4 - Preparación de la Fórmula ( 1 6) El compuesto de la Fórmula ( 1 5) se hace reaccionar entonces con un ácido carboxílico de la fórmula Z-Y-X-C02H , en la presencia de una carbodi-imida, por ejemplo clorhidrato de 1 -(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-carbodi-imida. La reacción se conduce a una temperatura de aproximadamente 20°C a 30°C, d urante aproximadamente 1 2 a 48 horas, en un solvente inerte, por ejemplo metanol . Cuando la reacción está sustancialmente completa , se a isla el producto de la Fórmula ( 1 6) convencionalmente, por ejemplo mediante la filtración de la mezcla de reacción enfriada . De una manera alternativa, el ácido carboxílico de la fórmula Z-Y-X-C02H se convierte hasta un haluro de ácido de la fórmula Z-Y-X-C(0)L, en donde L es cloro o bromo , mediante su reacción con un agente halogenante, por ejemplo cloruro de tionilo o bromuro de tionilo; alternativamente, se puede utilizar pentacloruro de fósforo u oxicloruro de fósforo. La reacción de preferencia se conduce en ausencia de un solvente, utilizando un exceso de agente halogenante, por ejemplo a una temperatura de aproxi madamente 60°C a 80°C, de preferencia de aproximadamente 70°C, durante aproximadamente 1 a 8 horas, de preferencia dura nte aproximadamente 4 horas. Cuando la reacción está sustancialmente completa , se aisla el producto de la fórmula Z-Y-X-C(0)L convencionalmente, por ejemplo mediante la remoción del exceso de agente halogenante bajo presión reducida. El producto de la fórmula Z-Y-X-C(0)L se hace reaccionar entonces con un compuesto de la Fórmula ( 1 5) en un solvente inerte, por ejemplo acetonitrilo, en la presencia de una base terciaria, por ejemplo trietil-amina. La reacción se conduce a una temperatura inicial de aproximadamente 0°C, y luego se deja calentar a 20-30°C, de preferencia a aproximadamente la temperatura ambiente, durante aproximadamente 1 2 a 48 horas, de preferencia durante aproximadamente 1 6 horas. Cuando la reacción está sustancialmente completa, se a isla el producto de la Fórmula ( 1 6) convencionalmente, por ejemplo mediante la dilución de la mezcla de reacción con agua, la filtración del producto, y el lavado del producto con agua seguida por éter.

Paso 5 - Preparación de la Fórmula (3) El compuesto de la Fórmula ( 1 6) se hace reaccionar con un compuesto de la fórmula R Hal , en donde Hal es cloro, bromo, o yodo, en la presencia de una base, por ejemplo carbonato de potasio. La reacción se lleva a cabo a aproximadamente 80°C, durante aproximadamente 4 a 24 horas, de preferencia durante aproximadamente 1 6 horas. Cuando la reacción está sustancialmente completa, se aisla el producto de la Fórmula (3) convencionalmente, por ejemplo mediante la evaporación de los solventes bajo presión reducida, y el residuo se puede purificar convencionalmente, o se puede utilizar en la siguiente reacción sin mayor purificación . Un ejemplo de una síntesis de un compuesto de Z-Y-X-C02H , en donde X es pirazol-1 ,4-ilo, Y es metileno, y Z es 3-trifluoro-metil-fenilo, se muestra en el Esquema de Reacción V.

ESQU E MA D E REACC IÓ N V El pirazol-4-carboxilato de etilo se hace reaccionar con 1 -(bromo-metil )-3-(trifluoro-metil )-benceno en acetona, en la presencia de carbonato de potasio . El producto de 1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-carboxilato de etilo se hidroliza entonces con hidróxido de potasio en metanol , para proporcionar el ácido 1 -{[3-(trifluoro-metil )-fenil]-metil}-pirazol-4-carboxílico.

Prueba de Utilidad y Admi nistración Utilidad General El método y las composiciones farmacéuticas de la invención son efectivos para la prevención y el tratamiento de una enfermedad hepática, tal como fibrosis hepática y/o inflamación hepática en un mamífero. Las causas típicas de la enfermedad hepática incluyen , pero no se limitan a, hepatitis viral y alcohólica, enfermedad de Wilson, hemocromatosis, esteatosis, y esteatohepatitis no alcohólica (NASH ). La enfermedad hepática también puede resultar como una consecuencia de una intervención quirúrgica , es decir, reemplazo o reparación de h ígado, o como una consecuencia del daño al h ígado inducido por fármacos. Prueba Se conduce la prueba de actividad como se describe en las patentes y solicitudes de patente referenciadas en lo anterior, y en los Ejemplos que se encuentran más adelante , y métodos evidentes para un experto en este campo. Adm inistración Los compuestos de la Fórmula I se pueden administrar en dosis individuales o múltiples, mediante cualquiera de los modos de administración aceptados de agentes que tengan utilidades similares, por ejemplo como se describe en las patentes y solicitudes de patente incorporadas como referencia , incluyendo la administración bucal , intranasal , inyección intra-arterial , i ntravenosa, intraperitoneal , parenteral , intramuscular, subcutánea, oral , o como un inhalante. La administración oral es la vía de administración preferida de los compuestos de la Fórmula I . La administración puede ser por medio de cápsulas o de tabletas con recubrimiento entérico , o similares. En la elaboración de las composiciones farmacéuticas que incluyan cuando menos un compuesto de la Fórmula I , el ingrediente activo normalmente se diluye con un excipiente y/o se encierra dentro de un portador que puede estar en la forma de una cápsula , bolsita, papel , u otro contenedor. Cuando el excipiente sirve como diluyente, puede ser un material sólido, semi-sólido , o l íquido (como anteriormente), que actúe como un veh ículo, portador, o medio para el ingrediente activo. Por consiguiente, las composiciones pueden estar en la forma de tabletas, pildoras, polvos, grageas, bolsitas, pastillas, el íxires, suspensiones, emulsiones, soluciones, jarabes, aerosoles (como un sólido o en un medio l íquido), ungüentos que contengan , por ejemplo, hasta el 1 0 por ciento en peso del compuesto activo , cápsulas de gelatina blanda y dura, soluciones inyectables estériles, y polvos empacados estériles. Algunos ejemplos de los excipientes adecuados incluyen lactosa, dextrosa , sacarosa, sorbitol , manitol , almidones, goma de acacia , fosfato de calcio, alginatos, tragacanto , gelatina, silicato de calcio, celulosa microcristalina, polivinil-pirrolidona , celulosa , agua estéril , jarabe, y metil-celulosa . Las formulaciones pueden i ncluir adicionalmente: agentes lubricantes, tales como talco, estearato de magnesio, y aceite mineral ; agentes humectantes; agentes emulsionantes y de suspensión; agentes conservadores, tales como hidroxi-benzoatos de metilo y de propilo; agentes edulcorantes; y agentes saborizantes. Las composiciones de la invención se pueden formular para proporcionar una liberación rápida, sostenida, o retardada del ingrediente activo después de su administración al paciente mediante el empleo de los procedimientos conocidos en la materia. Los sistemas de suministro de fármacos de liberación controlada para administración oral incluyen sistemas de bomba osmótica y sistemas de disolución que contienen depósitos recubiertos con polímero o formulaciones de matriz de fármaco-polímero. Los ejemplos de los sistemas de liberación controlada se dan en las Patentes de los Estados Unidos de Norteamérica Números 3,845,770; 4,326,525; 4,902514; y 5,616,345. Otra formulación para utilizarse en los métodos de la presente invención emplea dispositivos de suministro transdérmico ("parches"). Estos parches transdérmicos se pueden utilizar para proporcionar una infusión continua o discontinua de los compuestos de la presente invención en cantidades controladas. La construcción y uso de los parches transdérmicos para el suministro de agentes farmacéuticos es bien conocida en este campo. Véanse, por ejemplo, las Patentes de los Estados Unidos de Norteamérica Números 5,023,252, 4,992,445 y 5,001,139. Estos parches se pueden construir para el suministro continuo, pulsátil, o sobre demanda de agentes farmacéuticos. Los antagonistas del receptor de adenosina A2BI tales como los compuestos de la Fórmula I, son efectivos sobre un amplio intervalo de dosificación, y se administran en general en una cantidad farmacéuticamente efectiva. Típicamente, para administración oral, cada unidad de dosificación contiene de 1 miligramo a 2 miligramos de un antagonista del receptor de adenosina A2B, más comúnmente de 1 a 700 miligramos, y para administración parenteral, de 1 a 700 miligramos de un antagonista del receptor de adenosina A2B. más comúnmente de aproximadamente 2 a 200 miligramos. Sin embargo, se entenderá que la cantidad del antagonista del receptor de adenosina A2B realmente administrada será determinada por un médico, a la luz de las circunstancias relevantes, incluyendo la condición que se vaya a tratar, la vía de administración elegida, el compuesto real administrado y su actividad relativa, la edad, peso, y respuesta del paciente individual, la severidad de los síntomas del paciente, y similares. Para la preparación de composiciones sólidas, tales como tabletas, el ingrediente activo principal se mezcla con un excipiente farmacéutico con el fin de formar una composición de pre-formulación sólida que contenga una mezcla homogénea de un compuesto de la presente invención. Cuando se hace referencia a estas composiciones de pre-formulación como homogéneas, esto significa que el ingrediente activo se dispersa uniformemente a través de toda la composición, de tal manera que la composición se puede subdividir fácilmente en formas de dosificación unitaria igualmente efectivas, tales como tabletas, pildoras, y cápsulas.

Las tabletas o pildoras de la presente i nvención se pueden recubrir o mezclar de otra manera para proporcionar una forma de dosificación que proporcione la ventaja de una acción prolongada, o para protegerlas de las condiciones ácidas del estómago. Por ejemplo, la tableta o pildora puede comprender un componente de dosificación interno y un componente de dosificación externo, estando éste último en la forma de una envoltura sobre el primero . Los dos componentes se pueden separar mediante una capa entérica que sirva para resistir a la desintegración en el estómago, y para permitir que el componente interno pase intacto hasta el duodeno, o que se demore su liberación. Se pueden utilizar una variedad de materiales para estas capas o recubrimientos entéricos, incluyendo estos materiales un número de ácidos poliméricos y mezclas de ácidos poliméricos con materiales tales como shellac, alcohol cetílico, y acetato de celulosa. Las composiciones para inhalación o insuflación incluyen soluciones y suspensiones en solventes acuosos u orgánicos farmacéuticamente aceptables, o mezclas de los mismos, y polvos. Las composiciones l íquidas o sólidas pueden contener excipientes farmacéuticamente aceptables adecuados, como se describe anteriormente. De una manera preferible, las composiciones se administran mediante la vía respiratoria oral o nasal para el efecto local o sistémico. Las composiciones, de preferencia en solventes farmacéuticamente aceptables, se pueden nebulizar mediante el uso de gases inertes. Las soluciones nebulizadas se pueden inhalar directamente desde el dispositivo de nebulización , o el dispositivo de nebulización se puede conectar a una máscara para la cara , o a una máquina de respiración de presión positiva intermitente. Las composiciones en solución , suspensión , o en polvo, se pueden administrar de preferencia oralmente o nasalmente, desde dispositivos que suministren la formulación de una manera apropiada. Los siguientes Ejemplos se incluyen para demostrar las modalidades preferidas de la invención . Los expertos en este campo deben apreciar que las técnicas que se dan a conocer en los siguientes Ejemplos representan las técnicas descubiertas por el inventor por funcionar bien en la práctica de la invención , y por lo tanto, se puede considerar que constituyen los modos preferidos para su práctica. Sin embargo, los expertos en la técnica, a la luz de la presente divulgación , deben apreciar que se pueden hacer muchos cambios en las modalidades específicas que se dan a conocer, y todavía se puede obtener un resultado igual o similar, sin apartarse del espíritu y alcance de la i nvención . EJEMPLO 1 Preparación de un Compuesto de la Fórmula (5) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula (5), en donde R2 es etilo Se preparó una solución de etóxido de sodio a partir de sodio (4.8 gramos, 226 milimoles) y etanol seco (150 mililitros). A esta solución se le agregó amino-N-etil-amida (10 gramos, 113 milimoles) y ciano-acetato de etilo (12.8 gramos, 113 milimoles). Esta mezcla de reacción se agitó a reflujo durante 6 horas, se enfrió, y el solvente se removió de la mezcla de reacción bajo presión reducida. El residuo se disolvió en agua (50 mililitros), y el pH se ajustó a 7 con ácido clorhídrico. La mezcla se dejó reposar durante la noche a 0°C, y el precipitado se filtró, se lavó con agua, y se secó al aire, para proporcionar la 6-amino- -etil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona, un compuesto de la Fórmula (5). 1H RMN (DMSO-d6) d 10.29 (s, 1H), 6.79 (s, 2H), 4.51 (s, 1H), 3.74-3.79 (m, 2H), 1.07 (t, 3H, J = 7.03 Hz); MS m/z 155.98 (M + ), 177.99 (M+ +Na). B. Preparación de un compuesto de la Fórmula (5), en donde R2 es metilo De una manera similar, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1A, pero reemplazando la amino-N-metil-amida con la amino-N-metil-amida, se preparó la 6-amino-1 -metil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona. C. Preparación de un compuesto de la Fórmula (5) que varía R2 De una manera similar, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1A, pero reemplazando la amino-N-etil-amida con otros compuestos de la Fórmula (4), se preparan otros compuestos de la Fórmula (5).

EJEMPLO 2 Preparación del compuesto de la Fórmula (6) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula (6). en donde R2 es etilo Una suspensión de la 6-amino-1 -etil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2, 4-diona (0.77 gramos, 5 milimoles) en ?,?-dimetil-acetamida anhidra (25 mililitros) y dimetil-acetal de ?,?-dimetil-formamida (2.7mililitros, 20 milimoles), se calentó a 40°C durante 90 minutos. Entonces el solvente se removió bajo presión reducida, y el residuo se trituró con etanol, se filtró, y se lavó con etanol, para proporcionar la 6-[2-(dimetil-amino)- -azavinil]-1 -etil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona, un compuesto de la Fórmula (6). 1H RMN (DMSO-de) d 10.62 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 4.99 (s, 1H), 3.88-3.95 (m, 2H), 3.13 (s, 3H), 2.99 (s, 3H), 1.07 (t, 3H, J = 7.03 Hz); MS m/z 210.86 (M + ), 232.87 (M+ +Na). B. Preparación de un compuesto de la Fórmula (6), en donde R2 es metilo De una manera similar, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 2A, pero reemplazando la 6-amino-1 -etil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2, 4-diona con la 6-amino-1 -metil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona, se preparó la 6-[2-(dimetil-amino)-1 -azavinil]-1 -metil-1 ,3-dihidro- pirimidina-2 ,4-diona . C. Preparación de un compuesto de la Fórmula (6), variando R2 De una manera similar, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 2A, pero reemplazando la 6-amino-1 -etil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2 , 4-diona con otros compuestos de la Fórmula (5), se preparan otros compuestos de la Fórmula (6). EJEMPLO 3 Preparación de u n Com puesto de la Fórmu la (7) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula (7), en donde R1 es propilo normal y R2 es etilo Una mezcla de una solución de la 6-[2-(dimetil-amino)-1 -azavinil]-1 -etil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2 ,4-diona ( 1 .5 gramos, 7.1 milimoles) en dimetil-formamida (25 mililitros), carbonato de potasio ( 1 .5 gramos , 1 1 milimoles), y yoduro de propilo normal ( 1 .54 gramos , 1 1 milimoles), se agitó a 80°C durante 5 horas. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se filtró, los solventes se evaporaron , y se utilizó el producto de la Fórmula (7), 6-[2-(dimetil-amino)-1 -azavinil]-1 -etil-3-propil-1 ,3-dihidro-pir¡midina-2 ,4-diona, como tal en la siguiente reacción . B . Preparación de un compuesto de la Fórmula (7), variando R1 v R2 De una manera similar, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 3A, pero reemplazando la 6-[2-(dimetil-amino)-1 -azavinil]-1 -etil-1 ,3-dihidro-pírimidina-2,4-diona con otros compuestos de la Fórmula (6), se prepararon los siguientes compuestos de la Fórmula (7): 6-[2-(dimetil-amino)-1 -azavinil]-1-metil-3-propil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona; 6-[2-(dimetil-amino)-1 -aza inil]-1 -metil-3-ciclopropil-metil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona; 6-[2-(dimetil-amino)-1 -azavinil]-1 -etil-3-ciclopropil-metil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona; 6-[2-(dimetil-amino)-1 -aza inil]-1 -metil-3-(2-metil-propil)-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona; y 6-[2-(dimetil-amino)-1 -azavinil]-1 -etil-3-(2-metil-propil)-1 ,3-dih¡dro-pirimidina-2,4-d¡ona. C. Preparación de un compuesto de la Fórmula (7), variando R1 y Bi De una manera similar, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 3A, pero reemplazando la 6-[2-(dimetil-amino)- -azavinil]-1 -etil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona con otros compuestos de la Fórmula (6), se preparan otros compuestos de la Fórmula (7). EJEMPLO 4 Preparación de un Compuesto de la Fórmula (8) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula (8). en donde R1 es propilo normal, y R2 es etilo Una solución de la 6-[2-dimetil-amino)-1-azavinil]-1 -etil-3-propil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona (2.1 gramos) se disolvió en una mezcla de metanol (10 mililitros) y una solución acuosa de amoniaco al 28 por ciento (20 mililitros), y se agitó durante 72 horas a temperatura ambiente. El solvente se removió entonces bajo presión reducida, y el residuo se purificó mediante cromatografía sobre una columna de gel de sílice, eluyendo con una mezcla de dicloro-metano/metanol (15/1), para proporcionar la 6-amino-1 -etil-3-propil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona, un compuesto de la Fórmula (8). 1H RMN (DMSO-d6) d 6.80 (s, 2H), 4.64 (s, 1H), 3.79-3.84 (m, 2H), 3.63-3.67 (m, 2H), 1.41-1.51 (m, 2H), 1.09 (t, 3H, J = 7.03 Hz), 0.80 (t, 3H, J = 7.42 Hz); MS m/z 197.82 (M + ). B. Preparación de un compuesto de la Fórmula (8), variando R1 y R De una manera similar, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 4A, pero reemplazando la 6-[2-(dimetil-amino)-1 -azavinil]-1 -etil-3-propil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona con otros compuestos de la Fórmula (7), se prepararon los siguientes compuestos de la Fórmula (8): 6-am¡no-1 -metil-3-propil-1 ,3-dihidro-pir¡midina-2,4-d¡ona; 6-amino-1 -metil-3-ciclopropilmetil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona; 6-amino-1 -etil-3-ciclopropilmetil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona; 6-amino-1 -metil-3-(2-metil-propil)-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona; y 6-amino-1 -etil-3-(2-metil-propil)-1 ,3-d¡hidro-pirim¡dina-2,4-diona. C. Preparación de un compuesto de la Fórmula (7) variando R y De una manera similar, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 4A, pero reemplazando la 6-[2-(dimetil-amino)-1 -azavinil]-1 -etil-3-propil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona con otros compuestos de la Fórmula (7), se preparan otros compuestos de la Fórmula (8).

EJEMPLO 5 Preparación de un Compuesto de la Fórmula (1) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula (1), en donde R1 es propilo normal y R2 es etilo A una solución de la 6-amino-1 -etil-3-propil-1 ,3-dihidro- pirimidina-2,4-diona ( 1 .4 gramos, 7.1 milimoles) en una mezcla de ácido acético al 50 por ciento/agua (35 mililitros), se le agregó nitrito de sodio (2 gramos, 28.4 milimoles) en porciones, durante un período de 1 0 minutos. La mezcla se agitó a 70°C d urante 1 hora , y luego la mezcla de reacción se concentró hasta un bajo volumen bajo presión reducida. El sólido se filtró, y se lavó con agua , para proporcionar la 6-amino-1 -etil-5-nitroso-3-propil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2 ,4-diona , un compuesto de la Fórmula (1 ). MS m/z 227.05 (M + ), 249.08 (M + + Na). B . Preparación de un compuesto de la Fórmula ( 1 ), variando R1 y De una manera similar, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 5A, pero reemplazando la 6-amino-1 -etil-3-propil- 1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona con otros compuestos de la Fórmula (8 ), se prepararon los siguientes compuestos de la Fórmula (1 ): 6-amino-1 -metil-5-nitroso-3-propil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2 ,4-diona ; 6-amino-1 -metil-3-ciclopropil-metil-5-nitroso- 1 ,3-dihidro-pirimidina— 2,4-diona; 6-amino-1 -etil-3-ciclopropil-metil-5-nitroso-1 ,3-dihidro-pirimidi na— 2,4-diona; 6-am¡no-1 -metil-3-(2-metil-propil )-5-nitroso-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona ; y 6-amino-1 -etil-3-(2-metil-propil)-5-nitroso-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-d io n a .

C. Preparación de un compuesto de la Fórmula ( 1 ) variando R1 y Ri De una manera similar, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 5A, pero reemplazando la 6-amino-1 -etil-3-propil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona con otros compuestos de la Fórmula (8), se preparan otros compuestos de la Fórmula ( 1 ). EJ EMPLO 6 Preparación de un Compuesto de la Fórmula (2) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula (2), en donde R1 es propilo normal y R2 es etilo A una solución de la 6-amino-1 -etil-5-nitroso-3-propil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2 ,4-diona (300 miligramos) en metanol ( 1 0 mililitros), se le agregó un catalizador de paladio al 1 0 por ciento sobre carbón (50 miligramos), y la mezcla se hidrogenó bajo hidrógeno a 30 psi (2.1 kg/cm2) durante 2 horas. La mezcla se filtró a través de Celite, y el solvente se removió del filtrado bajo presión reducida, para proporcionar la 5,6-d¡amino-1 -etil-3-propil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona , un compuesto de la Fórmula (2). MS m/z 21 3.03 (M + ), 235.06 (M+ +Na). B . Preparación de un compuesto de la Fórmula (2 ), variando R1 y R2 De una manera similar, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 6A, pero reemplazando la 6-amino-1 -etil-5-nitroso-3-propil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona con otros compuestos de la Fórmula ( 1 ), se prepararon los siguientes compuestos de la Fórmula (2). 5,6-diamino-1 -metí l-3-propi 1-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona; 5,6-diamino-1 -metil-3-ciclopropil-metil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona; 5,6-diamino-1 -etil-3-ciclopropil-metil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona; 5,6-amino-1 -metí l-3-(2-met¡l -pro pil)-1 ,3-dihidro-piri midina-2,4-diona; y 5,6-amino-1 -etil-3-(2-metil-propil )- ,3-d ¡hidro-pirimidina-2 ,4-diona . C. Preparación de un compuesto de la Fórmula (2). variando R y Ei De una manera similar, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 6A, pero reemplazando la 6-amino-1 -etil-5-nitroso-6-propil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2 ,4-diona co otros compuestos de la Fórmula ( 1 ), se preparan otros compuestos de la Fórmula (2). EJEM PLO 7 Preparación de un Compuesto de la Fórmu la (3) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula (3), en donde R1 es propilo normal , R2 es etilo, X es 1 .4-pirazolilo. Y es metileno, y Z es 3-trifluoro-metil-fenilo A una mezcla de la 5,6-diamino-1-etil-3-propil-1 ,3-dihidro-pirim¡d¡na-2,4-d¡ona (100 miligramos, 0.47 milimoles) y el ácido 1-{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-carboxílico (0.151 gramos, 0.56 milimoles) en metanol (10 mililitros), se le agregó clorhidrato de 1 -(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-carbodi-imida (0.135 gramos, 0.7 milimoles), y la mezcla de reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. El solvente se removió bajo presión reducida, y el residuo se purificó utilizando Bistag, eluyendo con metanol al 10 por ciento/cloruro de metileno, para proporcionar la N-(6-amino-1 -etil-2,4-dioxo-3-propil-[1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il)-(1 -{[3-(tr¡fluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-carboxamida. 1H RMN (DMSO-d6) d 8.59 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.59-7.71 (m, 4H), 6.71 (s, 2H), 5.51 (s, 2H), 3.91-3.96 (m, 2H), 3.70-3.75 (m, 2H), 1.47-1.55 (m, 2H), 1.14 (t, 3H, J = 7.03 Hz), 0.85 (t, 3H, J = 7.42 Hz). B. Preparación de un compuesto de la Fórmula (3), variando R1, 2. X. Y. v Z De una manera similar, siguiendo el procedimiento de los Ejemplos 7A ó 7B, pero reemplazando opcionalmente la 5,6-diamino-1 -etil-3-propil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona con otros compuestos de la Fórmula (2), y reemplazando opcionalmente el ácido 1-{[3- (trifluoro-metil)-fen¡l]-met¡l}-pirazol-4-carboxíl¡co con otros compuestos de la fórmula Z-Y-X-C02H, se prepararon los siguientes compuestos de la Fórmula (3): N-(6-amino-1-metil-2,4-dioxo-3-propil-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))-(1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-carboxamida; N-(6-amino-1 -metil-2,4-dioxo-3-ciclopropil-metil-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))-(1-{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-carboxamida; N-(6-amino-1 -etil-2,4-dioxo-3-ciclopropil-metil-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))-(1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-carboxamida; N-(6-amino-1 -metil-2,4-dioxo-3-etil-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))-(1 -{[3-fluoro-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-carboxamida; N-(6-amino-1 -metil-2,4-dioxo-3-ciclopropil-metil-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))-(1 -{[3-fluoro-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-carboxamida; N-(6-amino-1 -etil-2,4-dioxo-3-ciclopropil-metil-( ,3-dihidro-pirimidin-5-il))-(1 -{[3-fluoro-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-carboxamida; N-[6-amino-3-(ciclopropil-metil)-1 -metil-2,4-dioxo(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il)]-[1 -bencil-pirazol-4-il]-carboxamida¡ N-(6-amino-1 -metil-2,4-dioxo-3-ciclopropil-metil-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))-(1 -{[3-ciano-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-carboxamida; [1-(2-(1H-1,2,3,4-tetra-azol-5-il)-etil)-pirazol-4-il]-N-[6-amino-3-(ciclopropil-metil)-l -metil-2,4-dioxo(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il)]-carboxamida; N-[6-amino-3-(ciclopropil-metil)-1 -etil-2,4-dioxo-(1 ,3-dihidro- pir¡midin-5-il)]-(1 -{[6-(trifluoro-metM)-(3-piridil)]-rnetil}-pirazol-4-il)-carboxamida; N-[6-amino-3-prop¡l)-1-et¡l-2,4-d¡oxo-(1 ,3-dihidro-p¡rimid¡n-5-il)]-(1 -{(2-pirid¡l)]-metil}-pirazol-4-¡l)-carboxamida; N-[6-amino-3-(2-metil-propil)-1 -metil-2,4-dioxo-(1 ,3-dihidro-p¡rimidin-5-M)]-[1 -bencil-pirazol-4-il]-carboxam¡da; N-[6-amino-3-(2-metil-prop¡l)-1-metil-2,4-d¡oxo-(1 ,3-dihidro-pirimid¡n-5-il)]-[1 -{[3-fluoro-fenil]-metil}-p¡razol-4-¡l]-carboxamida; N-[6-amino-3-(2-metil-propil)-1-etil-2,4-dioxo-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il)]-[1 -{[3-fluoro-fenil]-metil}-pirazol-4-il]-carboxamida; N-[6-amino-3-(2-metil-propil)-1 -metil-2,4-dioxo-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il)]-[1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-p¡razol-4-il]-carboxamida; y N-[6-amino-3-(2-metil-propM)-1-etil-2,4-dioxo-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il )]-( 1 -{[6-(trifluoro-metil)-(3-piridil)]-metil}-pirazol-4-il)-carboxamida. C. Preparación de un compuesto de la Fórmula (2), variando R v ñ! De una manera similar, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 7A, pero reemplazando opcionalmente la 5,6-diamino- -etil-3-propil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona con otros compuestos de la Fórmula (2), y reemplazando opcionalmente el ácido 1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-carboxílico con otros compuestos de la fórmula Z-Y-X-C02H, se preparan otros compuestos de la Fórmula (3).

EJEPLO 8 Preparación de la Fórmula I A. Preparación de un compuesto de la Fórmula I. en donde R1 es propilo normal, R2 es etilo, X es 1 ,4-pirazolilo, Y es metileno, y Z es 3-trifluoro-metil-fenilo Una mezcla de la N-(6-amino-1-etil-2,4-dioxo-3-propil-(1 ,3-dihidro-pirimid¡na-5-il))-( 1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-3-¡l)-carboxamida (80 miligramos, 0.17 milimoles), hidróxido de sodio acuoso al 10 por ciento (5 mililitros), y metanol (5 mililitros), se agitó a 100°C durante 2 horas. La mezcla se enfrió, el metanol se removió bajo presión reducida, y el residuo se diluyó con agua y se acidificó con ácido clorhídrico. El precipitado se filtró, se lavó con agua, luego con metanol, para proporcionar la 3-etil-1 -propil-8-(1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona, un compuesto de la Fórmula I. 1H RMN (DMSO-de) d 8.57 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.60-7.75 (m, 4H), 5.54 (s, 2H), 4.05-4.50 (m, 2H), 3.87-3.91 (m, 2H), 1.55-1.64 (m, 2H), 1.25 (t, 3H, J = 7.03 Hz), 0.90 (t, 3H, J = 7.42 Hz); MS m/z 447.2 (M + ). B. Preparación de un compuesto de la Fórmula I, variando R1, R2, X, Y, y Z De una manera similar, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 8A, pero reemplazando la N-(6-amino-1 -etil-2,4-dioxo-3-propil-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))-(1-{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-3-il)-carboxamida con otros compuestos de la Fórmula (3), se prepararon los siguientes compuestos de la Fórmula I: 1-ciclopropil-metil-3-metil-8-[1 -(fenil-metil)-pirazol-4-il]-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 1 -ciclopropil-metil-3-metil-8-{1 -[(3-trifluoro-metil-fenil)-metil]-pirazol-4-il}-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 1-ciclopropil-metil-3-etil-8-{1-[(3-trifluoro-metil-fenil)-metil]-pirazol-4-il}-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 1 -ciclopropil-metil-3-metil-8-{1 -[(3-fluoro-fenil)-metil]-pirazol-4-il}-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 1 -ciclopropil-metil-3-etil-8-{1 -[(3-fluoro-fenil)-metil]-pirazol-4-il}-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 1-ciclopropil-metil-3-etil-8-(1-{[6-(trifluoro-metil)-(3-piridil)]-metil}-pirazol-4-il)-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 3-({4-[1 -(ciclopropil-metil)-3-metil-2,6-dioxo-1 ,3,7-trihidro-purin-8-il]-pirazolil}-metil)-bencen-carbonitrilo; 8-[1-(2-(1 H-1 ,2,3,4-tetra-azol-5-il)-etil)-pirazol-4-il]-3-metil-1-ciclopropil-metil-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 1 -(2-metil-propil)-3-metil-8-[1 -benc¡l-pirazol-4-il]-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 1-(2-metil-propil)-3-etil-8-{1-[(3-fluoro-fenil)-metil]-pirazol-4-il}-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 1-(2-metil-propil)-3-metil-8-{1-[(3-trifluoro-metil-fenil)-metil]-pirazol-4-il}-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 1-(2-metil-propil)-3-metil-8-{1-[(3-fluoro-fenil)-metil]-pirazol-4-il}-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 3-etil-1-(2-metil-propil)-8-(1-{[6-(trifluoro-metil)-(3-piridil)]-metil}-pirazol-4-il)-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; 1-etil-3-metil-8-{1-[(3-fluoro-fenil)-metil]-pirazol-4-il}-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona; y 3-etil-1-propil-8-[1-(2-piridil-metil)-pirazol-4-il]-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona.

X, Y, Y Z De una manera similar, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 8A, pero reemplazando la N-(6-amino-1 -etil-2,4-dioxo-3-propil-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))-(1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-3-il)-carboxamida con otros compuestos de la Fórmula (3), se preparan otros compuestos de la Fórmula I. EJEMPLO 9 Preparación de un Compuesto de la Fórmula (10) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula (10), en donde R1 es propilo normal Una mezcla de 6-amino-uracilo (5.08 gramos, 40 milimoles), hexametil-disilazano (50 mililitros), y sulfato de amonio (260 miligramos, 1 .96 milimoles), se puso a reflujo d urante 1 2 horas. Después de enfriarse, el sólido se filtró, y el solvente se removió del filtrado bajo presión reducida, para proporcionar el derivado de 6-amino-6-amino-uracilo trimetil-sililado. El producto se disolvió en tolueno ( 1 .5 mililitros) y yodo-propano (7.8 mililitros, 80 milimoles), y se calentó en un baño de aceite a 1 20°C durante 2 horas. Luego la mezcla de reacción se enfrió a 0°C, y se agregó lentamente bicarbonato de sodio acuoso saturado. El precipitado resultante se filtró y se lavó en secuencia con agua , tolueno, y éter, para proporcionar la 6-amino-3-propil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2 ,4-diona, un compuesto de la Fórmula ( 1 0), el cual se utilizó en la siguiente reacción sin mayor purificación . 1 H RMN (D SO-d6) d 10.34 (s, 1 H), 6.1 6 (s, 2H), 4.54 (s, 1 H), 3.57- 3.62 (m, 2H ), 1 .41 -1 .51 (m, 2H), 0.80 (t, 3H , J = 7.43 Hz). B . Preparación de un compuesto de la Fórmula ( 1 0), variando R1 De una manera similar, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 9A, pero reemplazando el yodo-propano con otros haluros de alquilo de la fórmula R1 Hal , se preparan otros compuestos de la Fórmula ( 1 0), incluyendo: 6-amino-3-ciclopropil-metil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2 ,4-diona ; y 6-amino-3-(2-metil-propil)-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona .

EJEMPLO 10 Preparación de un Compuesto de la Fórmula (11) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula (11), en donde R1 es propilo normal A una solución de 6-amino-3-propil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona (5.6 gramos) en una mezcla de ácido acético al 50 por ciento/agua (160 mililitros), a 70°C, se le agregó nitrito de sodio (4.5 gramos) en porciones, durante un período de 15 minutos. La mezcla se agitó a 70°C durante 45 minutos, y luego la mezcla de reacción se concentró hasta un bajo volumen bajo presión reducida. El sólido se filtró y se lavó con agua, para proporcionar la 6-amino-5-nitroso-3-propil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona, un compuesto de la Fórmula (11). H RMN (DMSO-d6) d 11.42 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 3.77-3.81 (m, 2H), 3.33 (s, 1H), 1.55-1.64 (m, 2H), 0.89 (t, 3H, J = 7.43 Hz); MS m/z 198.78 (M + ), 220.78 (M+ +Na). B. Preparación de un compuesto de la Fórmula (11), variando R1 De una manera similar, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 10A, pero reemplazando la 6-amino-3-propil- ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona con otros compuestos de la Fórmula (10), se preparan otros compuestos de la Fórmula (11), incluyendo: 6-amino-5-nitroso-3-ciclopropil-metil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona; y 6-amino-5-nitroso-3-(2-metil-propil)-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona. EJEMPLO 11 Preparación de un Compuesto de la Fórmula (12) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula (12), en donde R es propilo normal A una solución de 6-amino-5-nitroso-3-propil- ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona (5.4 gramos, 27 milimoles) en amoniaco acuoso al 12.5 por ciento (135 mililitros) a 70°C, se le agregó ditionita de sodio (Na2S204, 9.45 gramos, 54 milimoles) en porciones durante 15 minutos, y la mezcla se agitó durante 20 minutos. La solución se concentró bajo presión reducida, se enfrió a 5°C, el precipitado se filtró y se lavó con agua fría, para proporcionar la 5,6-diamino-3-propil-1 ,3-dihidro-pirimidin-2,4-diona, un compuesto de la Fórmula (12). 1H RMN (DMSO-d6) d 0.81 (t, 3H, J = 7.43 Hz), 1.43-1.52 (m, 2H), 3.63-3.67 (m, 2H), 5.56 (s, 2H); MS m/z 184.95 (M + ), 206.96 (M + + Na). B. Preparación de un compuesto de la Fórmula (12), variando R1 De una manera similar, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1 1 A, pero reemplazando la 6-amino-3-propil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona con otros compuestos de la Fórmula ( 1 1 ), se preparan otros compuestos de la Fórmula (1 2), incluyendo: 5,6-diamino-3-ciclopropil-metil-1 , 3-dihidro-pirimidina-2 ,4-diona; 5,6-diamino-3-(2-metil-propil )-1 ,3-dihid ro-pirimidina-2,4-diona. EJEM PLO 12 Preparación de un Compuesto de la Fórm ula (1 2) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula ( 1 3), en donde R1 es propilo normal , X es 1 ,4-pirazolilo, Y es metileno, v Z es 3-trifluoro-metil-fenilo A una mezcla de la 5,6-diamino-3-propil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona (2.3 gramos, 1 26 milimoles) y ácido 1 -{[3-(trifluoro-metil )-fenil]-metil}-pirazol-4-carboxílico (3.79 gramos, 1 4 milimoles) en metanol (50 mililitros), se le agregó clorhidrato de 1 -(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-carbodi-imida (2.67 gramos, 1 4 milimoles), y la mezcla de reacción se agitó durante 3 d ías a temperatura ambiente (aunque es aceptable menos tiempo). El precipitado se filtró y se lavó en secuencia con agua y metanol . El producto se secó al vacío para proporcionar la N-(6-amino-2,4-dioxo-3-propil-( 1 ,3-dihidro- pirimidin-5-il))-(1-{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-carboxamida, un compuesto de la Fórmula (13). 1H RMN (DMSO-d6) d 10.44 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.56- 7.71 (m, 3H), 6.02 (s, 1H), 5.49 (s, 2H), 3.62-3.66 (m, 2H), 1.44-1.53 (m, 2H), 0.82 (t, 3H, J = 7.43 Hz)¡ MS m/z 458.92 (M + + Na). B. Preparación alternativa de un compuesto de la Fórmula (3), en donde R es propilo normal, X es 1 ,4-pirazolilo. Y es metileno, y Z es 3-trifluoro-metil-fenilo Una solución del ácido -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-carboxílico (1 gramo, 3.7 milimoles) en cloruro de tionilo (1 mililitro) se calentó a 70°C durante 4 horas. El exceso de cloruro de tionilo se destiló, y el residuo se trató con cloruro de metileno/hexanos. El solvente se removió bajo presión reducida, y el residuo se disolvió en acetonitrilo. Esta solución se agregó a una suspensión de la 5,6-diamino-3-propil- ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona (2.3 gramos, 126 milimoles) y trietil-amina (1 mililitro) en acetonitrilo (20 mililitros) a 0°C, y se agitó durante 16 horas. La mezcla de reacción se apagó con agua (5 mililitros), se acidificó con ácido clorhídrico, se agitó durante 30 minutos, y el precipitado se filtró. El producto se lavó con éter, para proporcionar la N-(6-amino-2,4-dioxo-3-propil-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il)-(1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-carboxamida, un compuesto de la Fórmula (13). C. Preparación de un compuesto de la Fórmula (13). variando R1. x, Y, ? z De una manera similar, siguiendo el procedimiento de los Ejemplos 12AÓ 12B, pero reemplazando opcionalmente la 6-amino-3-propil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona con otros compuestos de la Fórmula (12), y reemplazando opcionalmente el ácido 1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-carboxílico con otros compuestos de la fórmula Z-Y-X-C02H, se preparan otros compuestos de la Fórmula (13), incluyendo: N-(6-amino-2,4-dioxo-3-ciclopropil-metil-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))-(1-{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-carboxamida; N-(6-amino-2,4-dioxo-3-(2-metil-propil)-(1 , 3-dihidro-pirim ¡din-Sil ))-(1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-carboxamida; N-(6-amino-2,4-dioxo-3-propil-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))-(1 -{[3-fluoro-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-carboxamida; N-(6-amino-2,4-dioxo-3-ciclopropil-metil-(1 ,3-dihidro-pirimidin- 5-il))-(1 -{[3-fluoro-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-carboxamida; N-(6-amino-2,4-dioxo-3-(2-metil-propil)-(1 , 3-dihidro-pirim id i n-5-i'))-(1 -{[3-fluoro-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-carboxamida; N-(6-amino-2,4-dioxo-3-propil-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))-(1 -[1 -bencil]-pirazol-4-il)-carboxamida; N-íe-amino^^-dioxo-S-ciclopropil-metil-íl ,3-dihidro-pirimidin-5-il))-(1 -[1 -bencil]-pirazol-4-il)-carboxamida; N-(6-amino-2,4-dioxo-3-(2-metil-propil)-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))(1 -[1-bencil]-pirazol-4-il)-carboxamida; N-(6-amino-2,4-dioxo-3-propil-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))-(1 -{[3- ciano-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-carboxamida; N-(6-amino-2,4-dioxo-3-ciclopropil-metil-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))-(1 -{[3-ciano-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-carboxamida; N-(6-amino-2,4-dioxo-3-(2-metil-propil)-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))-(1 -{[3-ciano-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-carboxamida; N-(6-amino-2,4-dioxo-3-propil-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))-(1 -{[1 -(2-(1 H-1 ,2,3,4-tetra-azol-5-il)-etil)-pirazol-4-il}-carboxamida; N-(6-amino-2,4-dioxo-3-ciclopropil-metil-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))-(1-{[1-(2-(1H- ,2,3,4-tetra-azol-5-il)-etil)-pirazol-4-il)-carboxamida; N-(6-amino-2,4-dioxo-3-(2-metil-propil)-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))-(1-{[1-(2-(1H-1 ,2,3,4-tetra-azol-5-il)-etil)-pirazol-4-il)-carboxamida; N-(6-amino-2,4-dioxo-3-propM-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))(1 -{[6-( trif I uoro-meti I )-( 3-pi r¡d¡l)]-metil}-p¡ razo l-4-il)-carboxa mida; N-(6-amino-2,4-dioxo-3-ciclopropil-metil-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))-(1-{[6-(trifluoro-metil)-(3-piridil)]-metil}-pirazol-4-il)-carboxamida; y N-(6-amino-2,4-dioxo-3-(2-metil-propil)-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))(1 -{[6-(trifluoro-metil)-(3-piridil)]-metil}-pirazol-4-il)-carboxamida. EJEMPLO 13 Preparación de un Compuesto de la Fórmula (3) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula (3). en donde R1 es propílo normal, R2 es etilo, X es 1.4-pirazolilo, Y es metileno, v Z es 3-trifluoro-metil-fenilo Una mezcla de una solución de la N-(6-amino-2,4-dioxo-3-propil-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))-(1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-3-il)-carboxamida (872 miligramos, 2 milimoles) en dimetil-formamida (10 mililitros), carbonato de potasio (552 miligramos, 4 milimoles), y yoduro de etilo (0.24 mililitros, 3 milimoles), se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se filtró, y el solvente se evaporó a partir del filtrado bajo presión reducida. El residuo se agitó con agua durante 2 horas a temperatura ambiente, y el precipitado se filtró, se lavó con agua, y luego se disolvió en metanol. Entonces el solvente se removió bajo presión reducida para proporcionar la N-(6-amino-1 -etil-2,4-dioxo-3-propil-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))-(1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-carboxamida, un compuesto de la Fórmula (3). 1H RMN (DMSO-d6): d 8.58 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.72 -7.50 (m, 4H), 6.71 (s, 2H), 5.51 (s, 2H), 4.0 - 3.82 (m, 2H), 3.77 -3.65 (m, 2H), 1.60 - 1.50 (m, 2H), 1.13 (t, 3H, J = 6.8 Hz), 0.84 (t, 3H, J = 7.2 Hz); MS m/z 462.9 (M ). B. Preparación de un compuesto de la Fórmula (3), variando R1, X. Y. v Z De una manera similar, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 13A, pero reemplazando la N-(6-amino-2,4-dioxo-3-propil-(1 ,3- dihidro-p¡r¡mid¡n-5-il))-(1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-3-il)-carboxamida con otros compuestos de la Fórmula (13), se preparan otros compuestos de la Fórmula (3), incluyendo: N-(6-amino-1 -metil-2,4-dioxo-3-propil-(1 ,3-d¡hidro-pir'imidin-5-il))-(1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-met¡l}-pirazol-4-il)-carboxamida; N-(6-amino-1 -metil-2,4-dioxo-3-ciclopropil-metil-(1 ,3-dihidro-p¡r¡mid¡n-5-il))-(1-{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-carboxamida; N-(6-amino-1 -etil-2,4-d¡oxo-3-ciclopropil-metil-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))-(1-{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-¡l)-carboxamida; N-(6-amino-1 -metil-2,4-dioxo-3-etil-(1 ,3-d¡hidro-p¡rimidin-5-¡l))-(1 -{[3-fluoro-fenil]-metil}-p¡razol-4-il)-carboxamida; N-(6-amino-1 -met¡l-2,4-dioxo-3-ciclopropil-met¡l-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))(1 -{[3-fluoro-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-carboxam¡da; N-(6-amino-1 -etil-2,4-d¡oxo-3-ciclopropil-metil-(1 ,3-dihidro-pir¡mid¡n-5-il))-(1 -{[3-fluoro-fen¡ l]-metil}-pi razo l-4-M)-carboxa mida; N-[6-amino-3-(ciclopropil-metil)-1 -metil-2,4-dioxo-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il)]-[1 -bencil-pirazol-4-il]-carboxamida; N-(6-amino-1 -metil-2,4-dioxo-3-ciclopropil-metil-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))-(1 -{[3-ciano-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-carboxamida; [1-(2-(1H-1,2,3,4-tetra-azol-5-il)-etil)-pirazol-4-il]-N-[6-amino-3-(ciclopropil-metil)- -metí I-2, 4-dioxo-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il)]-carboxamida; N-[6-amino-3-(ciclopropil-metil)-1 -etil-2,4-dioxo-(1 ,3-dihidro- pirimidin-5-il)]-(1 -{[6-(trifluoro-metil)-(3-piridil)]-metil}-pirazol-4-il)-carboxamida; N-[6-amino-3-propil)-1 -etil-2,4-dioxo(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il)]-(1 -{(2-piridM)]-metil}-pirazol-4-il)-carboxamida; N-[6-amino-3-(2-metil-propil)-1 -metil-2,4-dioxo-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il)]-[1-bencil-pirazol-4-il] carboxamida; N-[6-amino-3-(2-metil-propil)-1-metil-2,4-dioxo-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il)]-[1-{[3-fluoro-fenil]-metil}-pirazol-4-il]-carboxamida; N-[6-amino-3-(2-metil-propM)-1-etil-2,4-dioxo-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il)]-[1-{[3-fluoro-fenil-metil}-pirazol-4-il]-carboxamida; N-[6-amino-3-(2-metil-propil)-1 -metil-2,4-dioxo-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il)]-[1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-il]-carboxamida; y N-[6-amino-3-(2-metil-propil)-1-etil-2,4-dioxo-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il)]-(1 -{[6-(trifluoro-metM)-(3-pindil)]-rnetil}-pirazol-4-il)-carboxamida. EJEMPLO 14 Preparación de un Compuesto de la Fórmula I A. Preparación de un compuesto de la Fórmula I, en donde R1 es propilo normal, R2 es etilo, X es 1 ,4-pirazolilo, Y es metileno, y Z es3-trifluoro-metil-fenilo Una mezcla de la N-(6-amino-1 -etil-2,4-dioxo-3-propil-(1 ,3-d¡hidro-p¡rimidin-5-il))-(1 -{[3-(tr¡fluoro-metil)-fenil]-metil}-p¡razol-3-¡l)-carboxamida (850 miligramos, 2.34 milimoles), hidróxido de sodio acuoso al 10 por ciento (10 mililitros), y metanol (10 mililitros), se agitó a 100°C durante 18 horas. La mezcla se enfrió, el metanol se removió bajo presión reducida, y la mezcla restante se acidificó con ácido clorhídrico a un pH de 2. El precipitado se filtró, se lavó con una mezcla de agua/metanol, para proporcionar la 3-eti I - 1 -propil-8-(1 -{[3-(trifluoro-metil)-fen¡l]-metil}-pirazol-4-il)-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona, un compuesto de la Fórmula I. 1H RMN (DMSO-d6) d 8.57 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.60-7.75 (m, 4H), 5.54 (s, 2H), 4.05-4.50 (m, 2H), 3.87-3.91 (m, 2H), 1.55-1.64 (m, 2H), 1.25 (t, 3H, J = 7.03 Hz), 0.90 (t, 3H, J = 7.42 Hz); MS m/z 447.2 (M + ). B. Preparación de un compuesto de la Fórmula I. variando R1, R2, X, Y, Y Z De una manera similar, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 14A, pero reemplazando la N-(6-amino-1 -etil-2,4-dioxo-3-propil-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))-(1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-3-il)-carboxamida con otros compuestos de la Fórmula (13), se preparan otros compuestos de la Fórmula I, incluyendo aquéllos enlistados en el Ejemplo 8. EJEMPLO 15 Preparación de un Compuesto de la Fórmula (14) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula (14), en donde R2 es etilo A una solución de la 6-amino-1 -etil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona (5.0 gramos, 32.3 milimoles) en una mezcla de ácido acético al 50 por ciento/agua (50 mililitros) a 70°C, se le agregó nitrito de sodio (4.45 gramos, 64.5 milimoles) en porciones, durante un período de 30 minutos. La mezcla se agitó a 70°C durante otros 30 minutos. La mezcla de reacción se enfrió, y el precipitado se filtró, y se lavó con agua, luego con metanol, para proporcionar la 6-amino-1 -etil-5-nitroso-1 ,3-dihidro-pirimidin-2,4-diona, un compuesto de la Fórmula (14). 1H RMN (DMSO-d6): d 11.52 (s, 1H), 9.16 (s, 1H), 3.83 (q, 2H, J = 7.0 Hz), 1.11 (t, 3H, J = 7.0 Hz). MS m/z 184.8 (M + ), 206.80 (M + + Na). B. Preparación de un compuesto de la Fórmula (14), variando R2 De una manera similar, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 15A, pero reemplazando la 6-amino-1 -etil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2, 4-diona con la 6-amino-1-metil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona, se preparó la 6-amino-1 -metil-5-nitroso-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona.

C. Preparación de un compuesto de la Fórmula (14), variando R2 De una manera similar, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 15A, pero reemplazando la 6-amino-1 -etil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4- diona con otros compuestos de la Fórmula (5), se preparan otros compuestos de la Fórmula (14). EJEMPLO 16 Preparación de un Compuesto de la Fórmula (15) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula (15), en donde R2 es etilo A una solución de 6-amino-1 -etil-5-nitroso-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona (3.9 gramos, 21.2 milimoles) en amoniaco acuoso al 14.5 por ciento (50 mililitros) a 50°C, se le agregó ditionita de sodio (Na2S204, 7.37 gramos, 42.4 milimoles) en porciones durante 15 minutos, y la mezcla se agitó durante 20 minutos. La solución se concentró bajo presión reducida hasta un volumen de 30 mililitros, se enfrió a 5°C, el precipitado se filtró, y se lavó con agua fría, para proporcionar la 5,6-diamino-1 -etil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona, un compuesto de la Fórmula (15). 1H RMN (DMSO-d6): d 10.58 (s, 1H), 6.18 (s, 2H), 3.83 (q, 2H, J - 7.2 Hz), 2.82 (s, 2H), 1.10 (t, 3H, J = 7.2 Hz). B. Preparación de un compuesto de la Fórmula (15), variando R2 De una manera similar, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 16A, pero reemplazando la 6-amino-1-etil-5-nitroso-1 ,3-dihidro- pirimidina-2,4-diona con la 6-amino- -metil-5-nitroso- ,3-dihidro-pirimid¡na-2,4-diona, se preparó la 5,6-diam¡no-1 -metil-1 ,3-dihidro-pir¡dina-2,4-diona. C. Preparación de un compuesto de la Fórmula (15). variando R2 De una manera similar, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 16A, pero reemplazando la 6-amino-1 -etil-5-nitroso-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona con otros compuestos de la Fórmula (14), se preparan otros compuestos de la Fórmula (15).

EJEMPLO 17 Preparación de un Compuesto de la Fórmula (16) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula (16), en donde R2 es etilo, X es 1 ,4-pirazolilo, Y es metileno, y Z es 3-trifluoro-metil-fenilo A una mezcla de la 5,6-diamino-1 -etil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona (2 gramos, 11.76 milimoles) y el ácido 1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-carboxílico (3.5 gramos, 12.94 milimoles) en metanol (50 mililitros), se le agregó clorhidrato de 1 -(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-carbodi-imida (2.47 gramos, 12.94 milimoles), y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. El solvente se removió bajo presión reducida, y el residuo se lavó con agua y metanol. El producto se secó al vacío para proporcionar la N-(6-amino-1 -etil-2,4-dioxo-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-¡l))-(1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-carboxamida, un compuesto de la Fórmula (16). 1H RMN (DMSO-de): d 10.60 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.72 - 7.50 (m, 4H), 6.69 (s, 2H), 5.50 (s, 2H), 3.87 (q, 2H, J = 7.2 Hz), 1.11 (t, 3H, 7.2 Hz); MS m/z 421 (M\ B. Preparación de un compuesto de la Fórmula (16), variando R2, X. Y. v Z De una manera similar, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 17A, pero reemplazando la 5,6-diamino-1 -etil- ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona con la 5,6-diamino-1 -metil-1 ,3-dihidro-pirimidina-2,4-diona, se preparó la N-(6-amino-1 -metil-2,4-dioxo-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))-(1 -{[3-(trifluoro-metil)-fen¡l]-metil}-pirazol-4-il)-carboxam¡da. C. Preparación de un compuesto de la Fórmula (16), variando R2, X. Y. v Z De una manera similar, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 16A, pero reemplazando la 5, 6-diamino-1 -etil- ,3-dihidro-pirimidin-2,4-diona con otros compuestos de la Fórmula (15), se preparan otros compuestos de la Fórmula (16). EJEMPLO 18 Preparación de un Compuesto de la Fórmula (3) A. Preparación de un compuesto de la Fórmula (3). en donde R1 es propilo normal, R2 es etilo. X es 1 ,4-pirazolilo, Y es metileno. v Z es 3-trifluoro-metil-fenilo Una mezcla de una solución de la N-(6-amino-1 -etil-2,4-dioxo- (1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))-(1-{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-3-il)-carboxamida (1.5 gramos, 3.55 milimoles) en dimetil-formamida (30 mililitros), carbonato de potasio (980 miligramos, 7.1 milimoles), y yoduro de propilo (724 miligramos, 4.26 milimoles), se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Se agregó agua, y el precipitado se filtró, para proporcionar la N-(6-amino-1 -etil-2,4-dioxo-3-propil-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))-(1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-carboxamida, un compuesto de la Fórmula (3), el cual se utilizó en la siguiente reacción sin mayor purificación. H RMN (DMSO-d6): d 8.58 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.72 -7.50 (m, 4H), 6.71 (s, 2H), 5.51 (s, 2H), 4.0 - 3.82 (m, 2H), 3.77 -3.65 (m, 2H), 1.60 - 1.50 (m, 2H), 1.13 (t, 3H, J = 6.8 Hz), 0.84 (t, 3H, J = 7.2 Hz); MS m/z 462.9 (M ). B. Preparación de un compuesto de la Fórmula (3). variando R1, R2. X. Y. v Z De una manera similar, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 18A, pero reemplazando la N-(6-amino-1-etil-2,4-dioxo-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))-(1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-3-il)-carboxamida con N-(6-amino-1 -metil-2,4-dioxo-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-ilo)), se preparó la N-(6-amino-1 -metil-2,4-dioxo-3-propil-(1 ,3- dihidro-pirim¡d¡n-5-¡l))-(1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-carboxamida. C. Preparación de un compuesto de la Fórmula (3), variando R1, R2. X. Y. v Z De una manera similar, siguiendo el procedimiento del Ejemplo 18A, pero reemplazando opcionalmente la N-(6-amino-1 -etil-2,4-dioxo-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))-(1-{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-3-il)-carboxamida con otros compuestos de la Fórmula (15), y reemplazando opcionalmente el yoduro de propilo con otros compuestos de la fórmula R1Hal, se preparan otros compuestos de la Fórmula (3). EJEMPLO 19 Preparación de un Compuesto de la Fórmula I A. Preparación de un compuesto de la Fórmula I, en donde R1 es propilo normal, R2 es etilo, X es ,4-pirazolilo, Y es metileno, y Z es 3-trifluoro-metil-fenilo Una mezcla de la N-(6-amino-1-etil-2,4-dioxo-3-propil-(1 ,3-dihidro-pirimidin-5-il))-(1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-3-il)-carboxamida (300 miligramos, 464 milimoles), hidróxido de sodio acuoso al 20 por ciento (5 mililitros), y metanol (10 mililitros), se agitó a 80°C durante 3 horas. La mezcla se enfrió, el metanol se removió bajo presión reducida, y la mezcla restante se acidificó con ácido clorhídrico a un pH de 2. El precipitado se filtró, se lavó con agua y metanol, para proporcionar la 3-etil-1-propil-8-(1-{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona, un compuesto de la Fórmula I. 1H RMN (DMSO-de) d 8.57 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.60-7.75 (m, 4H), 5.54 (s, 2H), 4.05-4.50 (m, 2H), 3.87-3.91 (m, 2H), 1.55-1.64 (m, 2H), 1.25 (t, 3H, J = 7.03 Hz), 0.90 (t, 3H, J = 7.42 Hz); MS m/z 447.2 (M + ). EJEMPLO 20 CARACTERIZACIÓN DE ANTAGONISTAS DE A,R Enlace de radioliqando para el receptor de adenosina A?R El ADNc del receptor de adenosina A2B humano se transfectó establemente en células HEK-293 (referidas como células HEK-A2B). Las monocapas de las células HEK-A2B se lavaron con suero regulado con fosfato una vez, y se cosecharon en un regulador que contenía HEPES 10 mM (pH de 7.4), EDTA 10 mM, e inhibidores de proteasa. Estas células se homogeneizaron en Polytron durante 1 minuto en la posición 4, y se centrifugaron a 29,000 g durante 15 minutos a 4°C. Los gránulos celulares se lavaron una vez con un regulador que contenía HEPES 10 mM (pH de 7.4), EDTA 1 mM, e inhibidores de proteasa, y se suspendieron en el mismo regulador complementado con sacarosa al 10 por ciento. Las alícuotas congeladas se guardaron a -80°C. Los ensayos de competencia se iniciaron mezclando 3H- ZM241385 (Tocris Cookson) con diferentes concentraciones de los compuestos de prueba, y 50 microgramos de proteínas de membrana en regulador de TE (Tris 50 mM, y EDTA 1 mM) complementado con 1 unidad/mililitro de desaminasa de adenosina. Los ensayos se incubaron durante 90 minutos, se detuvieron mediante filtración utilizando un Cosechador Packard, y se lavaron cuatro veces con regulador TM helado (Tris 10 mM, MgCI21 mM, pH de 7.4). El enlace no específico se determinó en la presencia de ZM241385 10 µ?. Las afinidades de los compuestos (es decir, los valores Ki) se calcularon utilizando el software GraphPad. Enlace de radioligando para otros receptores de adenosina Los ADNcs de los receptores de adenosina A t A2A, A3 humanos se transfectaron establemente en células CHO o bien HEK-293 (referidas como CHO-AL HEK-A2A- CHO-A3). Las membranas se prepararon a partir de estas células utilizando el mismo protocolo que se describe anteriormente. Los ensayos de competencia se iniciaron mezclando 3H-CPX 0.5 nM (para CHO-A , 3H-ZM214385 2 nM (HEK-A2A), ó 125I-AB-MECA 0.1 nM (CHO-A3)con diferentes concentraciones de los compuestos de prueba, y las membranas respectivas en regulador de TE (Tris 50 Mm, y EDTA 1 mM para CHO-?t y HEK-A2A), o regulador de TEM (Tris 50 mM, EDTA 1 mM, y MgCI2 10 mM para CHO-A3) complementado con 1 unidad/mililitro de desaminasa de adenosina. Los ensayos se incubaron durante 90 minutos, se detuvieron mediante filtración utilizando un Cosechador Packard, y se lavaron cuatro veces con regulador de TM helado (Tris 10 mM, MgCI2 1 mM, pH de 7.4). El enlace no específico se determinó en la presencia de CPX 1 µ? (CHO-A , ZM241385 1 µ? (HEK-A2A), e IB-MECA 1µ? (CHO-A3). Las afinidades de los compuestos (es decir, valores Ki) se calcularon utilizando el software GraphPadMR. Mediciones de cAMP La monocapa de las células transfectadas se recolectó en suero regulado con fosfato conteniendo EDTA 5 mM. Las células se lavaron una vez con DMEM, y se volvieron a suspender en DMEM conteniendo 1 unidad/mililitro de desaminasa de adenosina, a una densidad de 100,000 a 500,000 células/mililitro. Se mezclaron 100 microlitros de la suspensión celular con 25 microlitros conteniendo diferentes agonistas y/o antagonistas, y la reacción se mantuvo a 37°C durante 15 minutos. Al final de los 15 minutos, se agregaron 125 microlitros de HCI 0.2M para detener la reacción. Las células se centrifugaron durante 10 minutos a 1,000 revoluciones por minuto. Se removieron 100 microlitros del sobrenadante, y se acetilaron. Las concentraciones de cAMP en los sobrenadantes se midieron utilizando el ensayo de cAMP directo de Assay Design. Los receptores de adenosina A2A y A2B se acoplan con las proteínas Gs, y por lo tanto, los agonistas para el receptor de adenosina A2A (tal como CGS21680) o para el receptor de adenosina A2B (tal como ÑECA) aumentan las acumulaciones de cAMP, mientras que los antagonistas para estos receptores impiden el aumento en las acumulaciones de cAMP inducidas por los agonistas. Los receptores de adenosina A y A3 se acoplan con las proteínas Gi, y por lo tanto, los agonistas para el receptor de adenosina -¡ (tal como CPA) o para el receptor de adenosina A3 (tal como IB-MECA) inhiben el aumento en las acumulaciones de cAMP inducidas por forscolina. Los antagonistas para los receptores A-\ y A3 impiden la inhibición en las acumulaciones de cAMP. Se llevó a cabo la reacción en cadena de la polimerasa con transcripción inversa en tiempo real para determinar los niveles de expresión de los subtipos de receptores de adenosina (AdoR) sobre las células estrelladas hepáticas humanas cultivadas primarias (HHSCs). Entre los cuatro subtipos de AdoRs, el AdoR de A2B se expresó en el más alto nivel. En adición, utilizando la concentración celular de cAMP como una lectura funcional, nuestros resultados indicaron que los AdoRs de A2B se expresan funcionalmente en las células estrelladas hepáticas humanas, mientras que los AdoRs de AL A2A. Ó A3 no lo hacen. Se determinó el efecto de la adenosina o de ÑECA, un análogo estable de adenosina, sobre la expresión de las citoquinas inflamatorias, utilizando un ELISA. La adenosina y ÑECA aumentaron la liberación de IL-6 de una manera dependiente de la concentración, con un incremento máximo de 11.9 + 3.1 veces sobre el nivel basal. En adición, ÑECA aumentó la expresión de actina de músculo liso-a y de pro-colágeno a-1, y la producción de colágeno a partir de las células estrelladas hepáticas humanas. Los efectos de ÑECA se abolieron completamente mediante el antagonista AdoR de A2B, y se bloquearon parcialmente mediante un anticuerpo neutralizante de IL-6. EJEMPLO 21 EFECTO DEL ANTAGONISTA DE A,R SOBRE LAS CÉLULAS ESTRELLADAS HEPÁTICAS HUMANAS Abreviaturas Ab Anticuerpo. AdoR Receptor de adenosina. ADA Desaminasa de adenosina. ANOVA Análisis de variación. AST Amino-transferasa de aspartato. CPA N6-ciclopentil-adenosina. DMEM Medio de Eagle modificado por Dulbecco. DMSO Sulfóxido de dimetilo. ADNsa Desoxi-ribonucleasa. HEPES Ácido 4-(2-hidroxi-etil)-1 -piperazin-etan-sulfónico. HHSCs Células estrelladas hepáticas humanas. ÑECA 5'-(N-etil-carboxamido)-adenosina. Materiales y Métodos Materiales Los antagonistas selectivos del receptor A2B (8-(1 -{[5-(4-cloro-fenil )( 1 ,2,4-oxadiazol-3-il)]-metil}-pirazol-4-il)-1-propil-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona (compuesto (1)), y 3-eti I - 1 -propil-8-(1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil)-pirazol-4-il)-1 ,3I7-trihidro-purina-2,6-diona (compuesto (2)), fueron sintetizados por el Department of Bio-Organic Chemistry (Departamento de Química Bio-Orgánica) en CV Therapeutics Inc. (Palo Alto, CA), y se describió en nuestra publicación anterior de Zhong y colaboradores (2004) Am J. Respir Cell Mol. Biol.; 30(1 ): 1 1 8-1 25. Todos los demás reactivos , tales como rolipram , forscolina , Ñ ECA, y desaminasa de adenosina (ADA), etc. , se adquirieron en Sigma (St. Louis, MO), a menos que se mencione de otra manera. Cultivo Celu lar Las células estrelladas hepáticas humanas normales cultivadas primarias (H HSCs) se obtuvieron en ScienCell Research Laboratories (San Diego, CA), y se cultivaron utilizando el medio de cultivo de células estrelladas (ScienCell Research Laboratories). Las células estrelladas hepáticas humanas se cultivaron rutinariamente en una incubadora humidificada con C02 al 5 por ciento a 37°C, y se volvieron a sembrar cuando alcanzaron una confluencia de aproximadamente el 80 al 90 por ciento. Cada re-siembra se denomina como un pasaje. Las células de los pasajes 2 a 5 se utilizaron en los siguientes estudios. Estím ulo de las Células Estrelladas Hepáticas H u manas Las células estrelladas hepáticas humanas se sembraron en placas de cultivo de tejido de 1 2 pozos, a una densidad de 1 x1 05 células/pozo, en el medio de cultivo de células estrelladas, y se les permitió adherirse durante la noche y alcanzar una confluencia de aproximadamente el 90 por ciento . Las células se lavaron dos veces en suero regulado con H EPES, y se cultivaron en DMEM conteniendo diferentes agonistas o antagonistas de AdoRs durante 1 ó 24 horas.

Extracción de ARN v Reacción en Cadena de la Polimerasa con Transcripción Inversa en Tiempo Real El ARN total se extrajo de las células estrelladas hepáticas humanas utilizando el Kit de Minipreparación de Reacción en Cadena de la Polimerasa con Transcripción Inversa Stratagene Absolutely RNA R, seguido por el tratamiento de la ADNsa para eliminar la contaminación potencial del ADN genómico. La reacción en cadena de la polimerasa con transcripción inversa en tiempo real para los receptores de adenosina se llevó a cabo como fue previamente descrito en Zhong y colaboradores (2004) Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. ; 30( 1 ): 1 1 8- 25. Los cebadores específicos para la actina de músculo liso-a utilizados fueron: Hacia adelante: 5" TGGGAATGGGACAAAAAGACA3' (SEQ I D NO: 1 ); y En reversa: 5* CGGGTACTTCAGGGTCAGGAT3' (SEQ ID NO:2), mientras que los cebadores para el pro-colágeno a- 1 fueron: Hacia adelante: 5' CACCAATCACCTGCGTACAGA3' (SEQ I D NO:3); y En reversa: 5' CAGATCACGTCATCGCACAAC3' (S EQ I D NO. : 4), y cada uno de estos cebadores se diseñó utilizando el Primer Express 2.0 (Applied Biosystems), siguiendo los lineamientos recomendados, basándose en las secuencias de Genbank. Al final del ciclo de reacción en cadena de la poiimerasa , se generó una curva de disociación para asegurar la amplificación de un solo producto, y se determinó el tiempo del ciclo umbral (valor Ct) para cada gen. Los niveles relativos de ARNm se calcularon basándose en los valores Ct, se normalizaron a ß-actina en la misma muestra, y se presentan como porcentajes de ARNm de ß-actina. Med ición de la Acumulación de cAM P Las células se cosecharon utilizando tripsina al 0.0025 por ciento , y EDTA 2 mM en suero regulado con fosfato, se lavaron , y se volvieron a suspender en DM EM sin fenol hasta una concentración de 1 x1 06 células/mililitro, y luego se incubaron con 1 unidad/mililitro de ADA durante 30 minutos a temperatura ambiente. Luego las células se trataron con agonistas AdoR, antagonistas, y forscolina en la presencia de 50 µ? del inhibidor de fosfodiesterasa IV, rolipram . Después de incubar durante 1 5 minutos a 37°C, las células se lisaron, y se determinaron las concentraciones de cAM P utilizando el cAMP-Screen DirectMR System (Applied Biosystems), de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Medición de IL-6. Colágeno, y Ami no-transferasa de Aspartato (AST) Se determinó la concentración de I L-6 en el medio celular utilizando kits de ELISA obtenidos en Biosource (CamarMIo, CA), de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Los niveles de detección mínimos de IL-6 con estos kits fueron de 2 microgramos/mililitro. La concentración de colágeno soluble en el medio celular se midió utilizando el ensayo de colágeno Sircol (Biocolor Ltd . , Belfast N . , I rlanda) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. La actividad de AST en el plasma de ratón se determinó utilizando el ensayo de AST I nf i nityMR (Thermo Electron Corporation , Waltham , MA). Ratones Se generaron ratones deficientes en desaminasa de adenosina (ADA), y se genotipificaron como se describe en Blackburn y colaboradores ( 1 998), J. Biol. Chem. , 273(9):5093-51 00. Los ratones homocigóticos para el alelo Ada nulo se designaron como deficientes en ADA (ADA "), mientras que los ratones heterocigóticos para el alelo ADA nulo se designaron como los ratones de control de ADA [ADA*). Todos los ratones estuvieron sobre un fondo mixto de 1 29sv/C57/BL/6J , y todas las comparaciones fenotípicas se llevaron a cabo entre las carnadas. El cuidado del animal estuvo de acuerdo con los lineamientos institucionales y de N I H . Los ratones se alojaron en jaulas ventiladas equipadas con tapas microaislantes, y se mantuvieron bajo estrictos protocolos de contención . No se encontró evidencia alguna de infección bacteriana , parasitaria, o fúngica, y las serologías de las carnadas de las jaulas fueron negativas para 1 2 de los virus de murino más comunes. Tratamiento con Antagonista Los ratones ADA'1' se identificaron al nacer, rastreando para determinar la actividad enzimática de ADA en la sangre, como es descrito por Young y colaboradores (2004) J. Immunol, 1 73(2): 1 380- 1389. Los ratones ADA se mantuvieron con terapia enzimática de ADA desde el día 2 después del nacimiento hasta el día 21 después del nacimiento, también como se describe en Young y colaboradores (2004). En esta etapa, se iniciaron los tratamientos con el compuesto (2) (1 miligramo/kilogramo por inyección) o con vehículo (aceite de maíz/etanol/sulfóxido de dimetilo). Los tratamientos consistieron en una inyección intraperitoneal (i.p.) en la mañana y en la tarde durante 17 días. Los grupos de tratamiento incluyeron los ratones ADA''' ó ADA* que recibieron el compuesto (2), el vehículo, o ningún tratamiento. Todos los ratones fueron carnadas, y se incluyeron tanto machos como hembras en estos experimentos. Análisis Estadístico Los datos se presentaron como el promedio + SEM de cuando menos tres experimentos separados. El análisis estadístico se llevó a cabo utilizando una prueba-t de Student de dos colas, o ANOVA seguido por la prueba de Newman-Keuls para múltiples comparaciones. Un valor p de < 0.05 se consideró significativo. Resultados Expresión de los Subtipos AdoR en Células Estrelladas Hepáticas Humanas Se llevó a cabo la reacción en cadena de la polimerasa con transcripción inversa en tiempo real para cuantificar los niveles de transcripciones para los AdoRs. Entre los cuatro subtipos, el receptor A2B tuvo el nivel de transcripción más alto (Figura 1). También se detectaron niveles más bajos de transcripciones de los receptores ?t y A2A> mientras que la transcripción para los receptores A3 estuvo debajo del nivel de detección. Por consiguiente, el orden de clasificación de los niveles de ARNm de AdoR fue A2B>>A2A>A >>A3. En muchos tipos de células, la activación de los receptores A2A ó A2B conduce a incrementos en la acumulación de cAMP celular, mientras que la activación de los receptores A-¡ ó A3 disminuye la acumulación de cAMP celular causada por el activador de ciclasa de adenilato, forscolina. Para identificar los subtipos de AdoR que se expresan funcionalmente en las células estrelladas hepáticas humanas, se determinaron los efectos de un ÑECA agonista no selectivo y otros diferentes agonistas selectivos sobre la acumulación de cAMP celular. ÑECA es un análogo estable de adenosina, y activa los cuatro subtipos AdoR, incluyendo los receptores A2B. Como se muestra en la Figura 2A, NEVA aumentó la acumulación de cAMP celular de una manera dependiente de la concentración. En contraste, el agonista selectivo de A2A, CGS-21680 (< 10 µ?) no provocó un incremento significativo en la concentración de cAMP celular. En adición, el agonista selectivo de AL CPA (1 µ?), y el agonista selectivo de A3, IB-MECA (1 µ?), fracasaron para inhibir la acumulación de cAMP celular causada por forscolina (10 µ?, Figura 2B). Debido a que no hay un agonista selectivo para los receptores A2B, se determinó el efecto de un antagonista selectivo para los receptores A2B, el compuesto (1), sobre la acumulación de cAMP celular inducida por ÑECA. El compuesto (1) tiene una alta afinidad por el receptor A2B ( ¡ = 7 nM), y una afinidad muy baja por los otros tres subtipos AdoR (los valores Ki son mayores de 5 µ? para los receptores A,, A2A. y A3) (Zhong y colaboradores, (2004) y Zhong y colaboradores (2005) Am. J. Respir. Cell Mol. Biol., 32(1):2-8). Como se muestra en la Figura 2A, el compuesto (1) (1 µ?) atenuó de una manera significativa la acumulación de cAMP celular inducida por ÑECA. Por consiguiente, utilizando la concentración de cAMP celular como la lectura para la expresión funcional de los AdoRs, los resultados indican que los receptores A2B se expresan funcionalmente en las células estrelladas hepáticas humanas, mientras que los receptores A^ A2A, Ó A3 no lo hacen. La Activación del Receptor A7R Aumentó la Liberación de IL-6 a partir de las Células Estrelladas Hepáticas Humanas Se midieron las concentraciones de IL-6 en el medio de cultivo de células tratadas con adenosina y ÑECA, utilizando un ELISA. Como se muestra en la Figura 3, tanto la adenosina como ÑECA aumentaron la liberación de IL-6 de una manera dependiente de la concentración. ÑECA (100 µ?) provocó un incremento de 11.9 + 3.1 veces de liberación de IL-6, comparándose con las células tratadas con vehículo. Con el objeto de determinar el papel de los receptores A2B en la producción de IL-6 inducida por ÑECA, las células se incubaron con el compuesto (1) (1 µ?) junto con ÑECA (10 µ?). El antagonista del receptor A2B- el compuesto (1) (1 µ?) redujo la liberación de IL-6 incrementada por ÑECA por el 90.7 + 0.1 por ciento (Figura 3B). Estos resultados confirmaron que la liberación de IL-6 inducida por ÑECA es mediada por el subtipo del receptor A2B-Efecto de ÑECA sobre la Expresión de Actina de Músculo Liso-a y de Pro-colágeno a- 1 La activación de las células estrelladas hepáticas humanas con la acumulación de colágenos intersticiales es una indicación de fibrosis de hígado. La actina de músculo liso-a es un marcador para el miofibroblasto, y por consiguiente, la mayor expresión de actina de músculo liso-a es un indicador para la diferenciación de las células estrelladas hepáticas humanas en miofibroblastos. Se determinó el efecto de ÑECA sobre la expresión de actina de músculo liso-a y de pro-colágeno a-1 utilizando reacción en cadena de la polimerasa con transcripción inversa en tiempo real. Como se muestra en la Figura 4, ÑECA aumentó de una manera significativa la expresión tanto de actina de músculo liso-a (Figura 4A) como de pro-colágeno a-1 (Figura 4B). Estos resultados sugirieron que ÑECA puede promover la activación de las células estrelladas hepáticas humanas y la producción de colágeno. La Mayor Producción de Colágeno Mediante la Activación del Receptor A?R es Parcialmente Mediada por IL-6 Con el fin de confirmar el papel de ÑECA en la producción de colágeno, se midieron las concentraciones de colágeno soluble en el medio de cultivo de células tratadas con ÑECA. ÑECA provocó un incremento significativo en la liberación de colágeno (Figura 5). Este efecto de ECA fue abolido por el antagonista de A2B. el compuesto (1). Con el objeto de determinar si el efecto de ÑECA sobre la producción de colágeno dependía de la liberación de IL-6, se agregó el anticuerpo neutralizante de IL-6 al medio celular durante el tratamiento con ÑECA. El anticuerpo neutralizante de IL-6 disminuyó de una manera parcial y significativa el efecto de ÑECA. Estos resultados demuestran que la activación del receptor A2B conduce a una mayor producción de colágeno, y este efecto es parcialmente mediado por la IL-6 liberada desde las células estrelladas hepáticas humanas. Efecto del Antagonismo del Receptor A?R Sobre los Niveles de AST en Ratones Deficientes en ADA ADA metaboliza la adenosina; por consiguiente, los niveles elevados de adenosina están ampliamente extendidos entre los tejidos, incluyendo el hígado de los ratones deficientes en ADA, véase Blackburn y colaboradores (1998), J. Biol. Chem., 273(9):5093-5100. Se examinaron los niveles de AST en plasma en los ratones ADA* y ADA'1' tratados con vehículo o con el compuesto (2). Los niveles de ASTM estuvieron elevados en los ratones ADA'1' comparándose con los ratones ADA*. El tratamiento de los ratones ADA''' con el compuesto (2) dio como resultado una reducción significativa en los niveles de AST (Figura 6). Estos resultados sugieren que el antagonismo del receptor A2B puede impedir la elevación de AST en los ratones ADA'''.

Claims (12)

REIVIN DICACIONES

1 . Un método para el tratamiento y la prevención de enfermedad hepática mediante la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de un antagonista del receptor de adenosina A2B, a un mam ífero que lo necesite.

2. El método de la reivindicación 1 , en donde la enfermedad hepática se selecciona a partir del grupo que consiste en necrosis, fibrosis, colestasis, cirrosis, hepatitis viral y alcohólica, enfermedad de Wilson , hemocromatosis, esteatosis, y esteatohepatitis no alcohólica ( NAS H ) .

3. El método de la reivindicación 1 , en donde la enfermedad hepática es la consecuencia de una intervención quirúrgica.

4. El método de la reivindicación 1 , en donde la enfermedad hepática es la consecuencia de un tratamiento hepatotóxico.

5. El método de la reivindicación 4, en donde el tratamiento hepatotóxico comprende la administración de un fármaco hepatotóxico.

6. El método de la reivindicación 5, en donde el fármaco hepatotóxico es un fármaco hepatotóxico dependiente de la dosis.

7. El método de la reivindicación 5, en donde el fármaco hepatotóxico se selecciona a partir del grupo que consiste en acebutolol ; acetaminofeno; actinomicina d ; esteroides adrenocorticales; adriamicina; alopurinol ; amoxicilina/clavulanato; esteroides anabólicos; fármacos anti-inflamatorios; fármacos anti- tiroides; aspirina; atenolol ; azatioprina ; captopril ; carbamazepina; carbimazol ; carmustina; cefalosporinas; clordiazepóxido; clorpromazina ; clorpropamida ; cimetidina; cloxacilina; flecainida; ciclofosfamida; ciclofosfamida/ciclosporina; ciclosporina ; dacarbazina; danazol ; dantroleno; diazepam ; diclofenaco; diltiazem ; disopiramida; enalapril ; enflurano; eritromicina; etambutol ; etionamida; flurazepam ; flutamida; gliburida; oro; griseofulvina; haloperidol ; halotano; hidralazina; ibuprofeno; imipramina ; indometacina; isoniazida; quetoconazol ; labetalol ; maprotilina ; mercapto-purina; metotrexato; metildopa; metil-testosterona; metoprolol ; mianserina; mitomicina; naproxeno; ácido nicotínico; nifedipina; nitrofurantoína; no esteroideo; noretandrolona; anticonceptivos orales; oxacilina; ácido para-amino-salicílico; penicilamina; penicilina; penicilinas; fenelzina; fenindiona; fenobarbital ; fenotiazinas; fenil-butazona ; fenitoína; fenitoína-troleandomicina; piroxicam ; probenecid ; procainamida; propoxifeno; pirazinamida; quinidina; quinina; ranitidina; salicilatos; sulfonamidas; sulindac; tamoxifeno; terbinafina HCI (Lamisil , Sporanox); testosterona; tetraciclinas; tiabendazol ; tioguanina; torotrast; tolbutamida; antidepresivos tricíclicos; ácido valproico; verapamil ; vincristina; vitamina A; y combinaciones de los mismos.

8. El método de la reivindicación 4, en donde el tratamiento hepatotóxico comprende terapia de radiación.

9. Un método para disminuir los efectos secundarios hepatotóxicos de la quimioterapia o de la radiación , mediante la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de un antagonista del receptor de adenosina A2B a un mamífero que se someta a dicho tratamiento.

10. El método de la reivindicación 9, en donde el antagonista del receptor de adenosina A2B se administra antes de iniciarse el tratamiento quimioterapéutico o de radiación.

11. El método de la reivindicación 9, en donde el antagonista del receptor de adenosina A2B se administra de una manera concurrente con la administración del agente quimioterapéutico.

12. El método de la reivindicación 1, en donde el antagonista del receptor de adenosina A2B tiene la estructura de la Fórmula I o de la Fórmula II: Fórmula I Fórmula II en donde: R1 y R2 se seleccionan independientemente a partir de hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido, o un grupo -D-E, en donde D es un enlace covalente o alquileno, y E es alcoxilo opcionalmente sustituido, cicloalquilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, o alquinilo opcionalmente sustituido, con la condición de que, cuando D es un enlace covalente, E no puede ser alcoxilo; R3 es hidrógeno , alquilo opcionalmente sustituido, o cicloalquilo opcionalmente sustituido; X es arileno o heteroarileno opcionalmente sustituido ; Y es un enlace covalente o alquileno, en donde un átomo de carbono puede ser opcionalmente reemplazado por -O-, -S-, ó -N H-, y está opcionalmente sustituido por hidroxilo, alcoxilo, amino opcionalmente sustituido , ó -CO R , en donde R es hidroxilo, alcoxilo, o amino; y con la condición de que, cuando la sustitución opcional es hidroxilo o amino, esta sustitución no puede estar presente sobre un átomo de carbono adyacente a un heteroátomo; y Z es hidrógeno, arilo monocíclico opcionalmente sustituido, o heteroarilo monocíclico opcionalmente sustituido; con la condición de que: (a) Z es hidrógeno solamente cuando Y es un enlace covalente y X es 1 , 4-pirazoleno opcionalmente sustituido unido al anillo de purina por un átomo de carbono; y (b) cuando X es arileno opcionalmente sustituido, Z es un heteroarilo monocíclico opcionalmente sustituido diferente de imidazol opcionalmente sustituido . 1 3. El método de la reivindicación 1 2 , en donde el antagonista del receptor de adenosina A2 B se selecciona a partir del grupo que consiste en: 3-etil-1-propil-8-(1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-p¡razol-4-¡l)- 1,3,7- tr¡hidro-purina-2,6-diona, acetato de [3-etil-2,6-dioxo-1-propil-8-(1-{[3-(trifluoro-met¡l)-fen¡l]-metil}-p¡razol-4-il)-1 ,3,7-trihidro-purin-7-il]-met¡lo, butanoato de [3-etil-2,6-dioxo-1 -propil-8-(1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-¡l)-1 ,3,7-trihidro-pur¡n-7-il]-metilo, 2,2-dimetil-propanoato de [3-etil-2,6-dioxo-1-propil-8-(1 -{[3-(tr¡fluoro-metil)-fenil]-metil}-p¡razol-4-il)-1 ,3,7-trihidro-purin-7-il]-metilo, fosfato diácido de [3-etil-2,6-dioxo-1 -propil-8-(1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-(1 ,3,7-trihidro-purin-7-il)]-metilo, y las sales farmacéuticamente aceptables y solvatos de los mismos. 14. El método de la reivindicación 1, en donde el antagonista del receptor de adenosina A2B se administra oralmente. 15. El método de la reivindicación 1, en donde el antagonista del receptor de adenosina A2B se administra intravenosamente. 16. El método de la reivindicación 1, en donde el mamífero es un ser humano. 17. El método de la reivindicación 9, en donde el antagonista del receptor de adenosina A2B tiene la estructura de la Fórmula I o de la Fórmula II: Fórmu la I Fórmu la II en donde: R1 y R2 se seleccionan independientemente a partir de hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido, o un grupo -D-E , en donde D es un enlace covalente o alquileno, y E es alcoxilo opcionalmente sustituido, cicloalquilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, alquenilo opcionalmente sustituido, o alquinilo opcionalmente sustituido, con la condición de que, cuando D es un enlace covalente, E no puede ser alcoxilo; R3 es hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido, o cicloalquilo opcionalmente sustituido; X es arileno o heteroarileno opcionalmente sustituido; Y es un enlace covalente o alquileno, en donde un átomo de carbono puede ser opcionalmente reemplazado por -O-, -S-, ó - N H-, y está opcionalmente sustituido por hidroxilo, alcoxilo, amino opcionalmente sustituido, ó -COR, en donde R es hidroxilo, alcoxilo, o amino; y * con la condición de que, cuando la sustitución opcional es hidroxilo o amino, esta sustitución no puede estar presente sobre un átomo de carbono adyacente a un heteroátomo; y Z es hidrógeno, arilo monocíclico opcionalmente sustituido, o heteroarilo monocíclico opcionalmente sustituido; con la condición de que: (a) Z es hidrógeno solamente cuando Y es un enlace covalente y X es 1 , 4-pirazoleno opcionalmente sustituido unido al anillo de purina por un átomo de carbono; y (b) cuando X es arileno opcionalmente sustituido, Z es un heteroarilo monocíclico opcionalmente sustituido diferente de imidazol opcionalmente sustituido. 1 8. El método de la reivindicación 9 , en donde el antagonista del receptor de adenosina A2 B se selecciona a partir del grupo que consiste en: 3-etil-1 -propil-8-( 1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-1 ,3,7-trihidro-purina-2,6-diona ; acetato de [3-et¡l-2 ,6-dioxo-1 -prop¡l-8-( 1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-il)-1 ,3, 7-trihidro-purin-7-il]-metilo, butanoato de [3-etil-2,6-dioxo-1 -propil-8-( 1 -{[3-(trifluoro-metil)-fenil]-metil}-pirazol-4-il )-1 ,3,7-trihidro-purin-7-il]-metilo, 2,2-dimetil-propanoato de [3-etil-2,6-dioxo- 1 -propil-8-( 1 -{[3-(trifluoro-metil )-fenil]-metil}-pirazol-4-il )-1 ,3,7-trih¡dro-purin-7-il]-metilo, fosfato diácido de [3-etil-2,6-dioxo-1 -propil-8-( 1 -{[3-(trifluoro-metil )-fenil]-metil}-pirazol-4-il )-( 1 ,3,7-trihidro-purin-7-il)]- metilo, y las sales farmacéuticamente aceptables y solvatos de los mismos. 19. El método de la reivindicación 9, en donde el antagonista del receptor de adenosina A2B se administra oralmente. 20. El método de la reivindicación 9, en donde el antagonista del receptor de adenosina A2B se administra intravenosamente. 21. El método de la reivindicación 9, en donde el mamífero es un ser humano.