MX2008005115A - Cassette para preparacion de muestra - Google Patents

Abstract

Un casete para preparar una muestra incluye una cámara de mezclado para recibir una muestra de células;una cámara de contención y una enzima en la cámara de contención. La enzima es transferible a una cámara de mezclado para romper las células y liberarácido nucleico de las células para crear un material suelto y elácido nucleico en el material suelto. Una segunda cámara de contención tiene partículas magnéticas, siendo las partículas magnéticas transferibles a la cámara de mezclado para unirse con elácido nucleico:y un imán para atraer las partículas magnéticas junto con elácido nucleico, y para separar elácido nucleico del material suelto en la cámara de mezclado.

Description

CÁSETE PARA PREPARACIÓN DE MUESTRA ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN 1. Campo de la Invención La presente invención se relaciona con el campo de los dispositivos de biotecnología y en particular con dispositivos y métodos para preparar muestras. 2. Discusión de la Técnica Relacionada El ADN puede ser usado para desarrollar nuevos fármacos o para ligar a alguien con un crimen. Sin embargo, antes de que pueda hacerse esto, el ADN debe ser aislado de una muestra. Esas muestras incluyen, por ejemplo, sangre, orina, células humanas, cabello, bacterias, levaduras y tejido. Cada una de esas muestras incluye células, las cuales incluyen ácido nucleico. El ácido nucleico es una cadena nucleotídica, la cual lleva información genética. Las formas más comunes de los ácidos nucleicos son ADN y ARN. Para aislar el ácido nucleico de las muestras, los dispositivos de la técnica anterior usan una bandeja que tiene varias cavidades expuestas. La muestra es colocada en una de las cavidades y se usan pasos de procesamiento convencionales para aislar el ADN de la muestra. Este sistema de la técnica anterior tiene varias desventajas, incluyendo la contaminación. Puesto que las cavidades están expuestas, los contaminantes pueden afectar fácilmente al ADN. Además, el sistema de la técnica anterior requiere la preparación de varias muestras a la vez. Es difícil preparar una o dos muestras a la vez usando los dispositivos de la técnica anterior.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN Se describe aquí un cásete para preparar una muestra. El cásete incluye al menos una cámara de mezclado para recibir una muestra de células; una primera cámara de contención; una enzima en la primera cámara de contención, siendo la enzima transferible a al menos una cámara de mezclado para romper las células y liberar el ácido nucleico de las células para crear un material suelto y el ácido nucleico en el material suelto; una segunda cámara de contención; partículas magnéticas en la segunda cámara de contención, siendo las partículas magnéticas transferibles a al menos una cámara de mezclado para unirse con el ácido nucleico; y al menos un imán, colocable para atraer las partículas magnéticas junto con el ácido nucleico y separar al menos parcialmente el ácido nucleico del material suelto en al menos una cámara de mezclado. La cámara de mezclado tiene una superficie superior, teniendo la superficie superior una abertura en ella. También se proporciona una tapa removible para tener acceso a la abertura de la cámara de mezclado. La enzima puede ser proteinasa K. También pueden proporcionarse primer y segundo pistones en la primera cámara de contención y la segunda cámara de contención, siendo cada pistón móvil para transferir la enzima y partículas magnéticas, respectivamente, en la cámara de mezclado. También puede proporcionarse una película delgada que se rompa para transferir la enzima y partículas magnéticas a través de las aberturas respectivas en la película delgada hacia la cámara de mezclado. También pueden proporcionarse primero y segundo pistones en la primera cámara de contención y la segunda cámara de contención, siendo cada pistón móvil para romper la película delgada y transferir la enzima y partículas magnéticas, respectivamente a la cámara de mezclado. También puede proporcionarse una tercera cámara de contención y una solución de lisis en la tercera cámara de contención, siendo la solución de lisis transferible a la cámara de mezclado para solubilizar el material suelto. También puede proporcionarse una cuarta cámara de contención y una solución de unión en la cuarta cámara de contención, siendo la solución de unión transferible hacia la cámara de mezclado para unir el ácido nucleico en las partículas magnéticas. También puede proporcionarse un elemento de calentamiento para calentar la cámara de mezclado. El cásete también puede incluir una primera pieza de separación que tenga una superficie; una primera pieza de transferencia que tenga una superficie con una cavidad en ella, al menos un imán que transfiera las partículas magnéticas junto con el ácido nucleico a la cavidad en la superficie de la primera pieza de transferencia, siendo la primera pieza de transferencia móvil con relación a la primera pieza de separación, de modo que las partículas magnéticas junto con el ácido nucleico se muevan hacia fuera de la cámara de mezclado y pasen a la superficie de la primera pieza de separación; y una primera cámara de recepción la cual recibe las partículas magnéticas y el ácido nucleico después de moverse a lo largo de la superficie de la primera pieza de separación. El cásete puede incluir además una segunda pieza de separación que tenga una superficie; una segunda pieza de transferencia que tenga una superficie con una cavidad en ella, siendo la segunda pieza de transferencia móvil con relación a la segunda pieza de separación, de modo que las partículas magnéticas junto con el ácido nucleico se muevan hacia fuera de la primera cámara de recepción y a lo largo de la superficie de la segunda pieza de separación; y una segunda cámara de recepción la cual recibe las partículas magnéticas y el ácido nucleico después de que se muevan a lo largo de la superficie de la segunda pieza de separación. El cásete puede incluir además una tercer pieza de separación que tenga una superficie; una tercer pieza de transferencia que tenga una superficie con una cavidad en ella, siendo la tercer pieza de transferencia móvil con relación a la tercera pieza de separación, de modo que las partículas magnéticas junto con el ácido nucleico se muevan hacia fuera de la segunda cámara de recepción y a lo largo de la superficie de la tercera pieza de separación; y una tercera cámara de recepción la cual recibe las partículas magnéticas y el ácido nucleico después de que se muevan a lo largo de la superficie de la tercera pieza de separación. La primera cámara de recepción puede ser una cámara de lavado y el cásete puede incluir además una solución de lavado en la cámara de lavado. La segunda cámara de recepción puede ser una cámara de lavado, y el cásete puede incluir además una solución de lavado en la cámara de lavado. La tercera cámara de recepción puede ser una cámara de elución, y el cásete puede incluir además un amortiguador de elución en la cámara de elución para separar las partículas magnéticas y el ácido nucleico. Se describe aquí un cásete para preparar una muestra. El cásete incluye al menos una cámara de mezclado para recibir una muestra de células, siendo agregada una enzima en la cámara de mezclado para romper las células y liberar el ácido nucleico de las células para crear material suelto y ácido nucleico en el material suelto, siendo las partículas magnéticas agregadas a la cámara de mezclado para unirse con el ácido nucleico; una primera pieza de separación que tiene una superficie; una primera pieza de transferencia que tenga una superficie con una cavidad en ella; un imán, colocable para atraer las partículas magnéticas junto con el ácido nucleico y separar al menos parcialmente el ácido nucleico del material suelto en al menos una cámara de mezclado y para transferir las partículas magnéticas junto con el ácido nucleico en la cavidad de la superficie de la primera pieza de transferencia, siendo la primera pieza de transferencia móvil con relación a la primera pieza de separación de modo que las partículas magnéticas junto con el ácido nucleico se muevan fuera de la cámara de mezclado y a lo largo de la superficie de la primera pieza de separación; y una primera cámara de recepción la cual recibe las partículas magnéticas y el ácido nucleico después de moverse a lo largo de la superficie de la primera pieza de separación. La segunda pieza puede ser giratoria con relación a la primera pieza. La primera cámara de recepción puede ser una cámara de lavado, y el cásete puede incluir además una solución de lavado en la cámara de lavado. El cásete también puede incluir una cámara de elución, y un amortiguador de elución en la cámara de elución para separar las partículas magnéticas y el ácido nucleico. El cásete puede incluir también una segunda pieza de separación que tenga una superficie, una segunda pieza de transferencia que tenga una superficie, una cavidad en ella, siendo la segunda pieza de transferencia móvil con relación a la segunda pieza de separación, de modo que las partículas magnéticas junto con el ácido nucleico se unen hacia fuera de la primera cámara de recepción y a lo largo de la superficie de la segunda pieza de separación, recibiendo la cámara de elución las partículas magnéticas y el ácido nucleico después de moverse a lo largo de la superficie de la primera pieza de separación. La segunda pieza de transferencia puede ser móvil con relación a la segunda pieza de separación de modo que las partículas magnéticas se mueven hacia fuera de la cámara de elución, dejando el ácido nucleico en la cámara de elución. La cámara secundaria puede ser una cámara de elución y el cásete puede incluir además un amortiguador de elución en la cámara de elución para separar las partículas magnéticas y el ácido nucleico. El cásete también puede incluir una segunda pieza de separación que tenga una superficie, una segunda pieza de transferencia que tenga una superficie con una cavidad en ella, siendo la segunda pieza de transferencia móvil con relación a la segunda pieza de separación, de modo que las partículas magnéticas junto con el ácido nucleico se muevan hacia fuera de la primera cámara de recepción y a lo largo de la superficie de la segunda pieza de separación, y una segunda cámara de recepción la cual recibe las partículas magnéticas y el ácido nucleico después de moverse a lo largo de la superficie de la segunda pieza de separación. El cásete puede incluir además una tercera pieza de separación que tenga una superficie, una tercera pieza de transferencia que tenga una superficie con una cavidad en ella, siendo la tercera pieza de transferencia móvil con relación a la tercera pieza de separación, de modo que las partículas magnéticas junto con el ácido nucleico se muevan hacia fuera de la segunda cámara de recepción y a lo largo de la superficie de la tercera pieza de separación, y una tercera pieza de separación al cual recibe las partículas magnéticas y el ácido nucleico después de moverse a lo largo de la superficie de la tercera pieza de separación. La segunda pieza de recepción puede ser una cámara de lavado, y el cásete puede incluir además una solución de lavado en la cámara de lavado. La tercera cámara de recepción puede ser una cámara de elución, y el cásete puede incluir además un amortiguador de elución en la cámara de elución para separar as partículas magnéticas y el ácido nucleico. Se describe aquí un cásete para preparar muestras.

El cásete incluye un recinto, comprendiendo el recinto una cámara de mezclado, incluyendo la cámara de mezclado una abertura para recibir una muestra de células que tengan ácido nucleico; una pluralidad de cámaras de contención que tienen contenido, comprendiendo el contenido de una de la pluralidad de cámaras de contención partículas magnéticas, y el contenido de una de la pluralidad de cámaras de contención comprendiendo una solución de proteinasa K; una pluralidad de pistones, correspondiendo cada una de la pluralidad de pistones a uno de la pluralidad de cámaras de contención, para transferir el contenido de la pluralidad de cámaras de contención a la cámara de mezclado, rompiendo la solución de proteinasa K las células para liberar el ácido nucleico y uniendo el ácido nucleico a las partículas magnéticas en la cámara de mezclado; una primera válvula, acoplada a la cámara de mezclado, incluyendo la primera válvula un imán posicionable para atraer las partículas magnéticas; una cámara de lavado, acoplada a la primera válvula; una segunda válvula, acoplada a la primera cámara de lavado, incluyendo la segunda válvula un imán posicionable para atraer las partículas magnéticas; y una cámara de elución, acoplada a la segunda válvula, incluyendo la cámara de elución una abertura para remover el ácido nucleico de la cámara de elución. Una de la pluralidad de cámaras de contención puede incluir una solución de unión y una de la pluralidad de cámaras de contención puede incluir una solución de lisis, y donde uno de la pluralidad de pistones puede transferir la solución de unión en la cámara de mezclado y donde uno de la pluralidad de pistones puede transferir además la solución de lisis a una cámara de mezclado.

Se describe aquí un cásete para preparar una muestra. El cásete incluye una cámara de reacción para recibir una muestra de células; una primera cámara de contención; una enzima en la primera cámara de contención, siendo la enzima transferible a la cámara de reacción para romper las células y liberar el ácido nucleico de las células para crear material suelto y el ácido nucleico en el material suelto; una cámara de partículas; partículas para unirse con el ácido nucleico en la cámara de partículas; una segunda cámara de contención; un amortiguador de elución en la segunda cámara de contención para liberar el ácido nucleico de las partículas; y una cámara de elución para recibir el amortiguador de elución y liberar el ácido nucleico, donde el amortiguador de elución es transferible de la cámara de contención a la cámara de reacción, a través de la cámara de partículas, y hacia la cámara de elución. El cásete puede incluir una tercera cámara de contención y una solución de lisis en la tercera cámara de contención, siendo la solución de lisis transferible a la cámara de reacción para solubilizar el material suelto. El cásete puede incluir una cuarta cámara de contención y una solución de unión en una cuarta cámara de contención, siendo la solución de unión transferible a la cámara de reacción para unir el ácido nucleico a las partículas.

La cámara de reacción puede ser alineada con la cámara de partículas y la cámara de elución puede ser alienable con la cámara de partículas. El cásete puede incluir una cámara de residuos para recibir la enzima del material suelto. El cásete puede incluir un pistón para transferir el contenido de la cámara de reacción a través de la cámara de partículas y hacia la cámara de residuos. El cásete puede incluir un pistón para transferir el contenido de la cámara de reacción a través de la cámara de partículas y hacia la cámara de elución. El cásete puede incluir una válvula en cada una de la primera y segunda cámaras de contención para transferir el contenido de cada una de la primera y segunda cámaras de contención a la cámara de reacción. La válvula puede incluir un pistón para transferir el contenido de la válvula en la cámara de reacción. También se describe aquí otro cásete para preparar muestras. El cásete incluye un recinto, incluyendo el recinto una cámara de reacción, incluyendo la cámara de reacción una abertura para recibir una muestra de células que tienen ácido nucleico. Una pluralidad de cámaras de contención; una enzima en una de la pluralidad de cámaras de contención; un amortiguador de lisis en una de la pluralidad de cámaras de contención; un amortiguador de unión en una de la pluralidad cámaras de contención; un amortiguador de elución en una pluralidad de cámaras de contención; una cámara de partículas; partículas en la cámara de partículas; las partículas para unirse de manera liberable con el ácido nucleico; y una cámara de elución para recibir el ácido nucleico liberado; incluyendo la cámara de elución una abertura para remover el ácido nucleico del recinto. El recinto puede incluir una cámara de residuos. Cada una de la pluralidad de cámaras de contención puede incluir un pistón para transferir el contenido de la pluralidad de cámaras de contención a la cámara de reacción. El cásete puede incluir uno o más amortiguadores de lavado en una o más de la pluralidad de cámaras de contención . La cámara de contención puede ser alineada con la cámara de partículas y donde la cámara de elución puede ser alineable con la cámara de partículas. También se describe aquí un cásete adicional para preparar una muestra. El cásete incluye una cámara de reacción para recibir una muestra de células; una primera cámara de contención; una enzima en la primera cámara de contención, siendo la enzima transferible a la cámara de reacción para romper las células y liberar el ácido nucleico de las células para crear el material disuelto y el ácido nucleico en el material suelto; una cámara de partículas; partículas para unirse con el ácido nucleico en la cámara de partículas; una segunda cámara de contención; un amortiguador de elución en la segunda cámara de contención para liberar el ácido- nucleico-? de las partículas; y una cámara de elución para recibir el amortiguador de elución y el ácido nucleico liberado, donde cada una de las cámaras de contención comprende un alojamiento externo que tiene una primera cámara en el y al menos una abertura, al menos recibiendo la primera cámara una válvula, comprendiendo la válvula: un alojamiento interno que tiene una segunda cámara en él y al menos una abertura, en el alojamiento interno y giratorio con relación al alojamiento externo, al menos una abertura del alojamiento interno alineable con al menos una abertura del alojamiento externo, teniendo la segunda cámara un contenido; y un pistón en la segunda cámara para transferir el contenido de la segunda cámara a través de al menos una abertura del alojamiento interno y al menos una abertura del alojamiento externo cuando al menos una abertura del alojamiento interno y al menos una abertura del alojamiento externo están alineadas. El cásete puede incluir una tercera cámara de contención y una solución de lisis en la tercera cámara de contención, siendo la solución de lisis transferible a la cámara de reacción para solubilizar el material suelto. El cásete puede incluir una cuarta cámara de contención y una solución de unión en la cuarta cámara de contención, siendo la solución de unión transferible a la cámara de reacción para unir el ácido nucleico a las partículas . El cásete puede incluir una cámara de residuos para recibir la enzima y el material suelto. El cásete puede incluir un pistón para transferir el contenido de la cámara de reacción a través de la cámara de partículas y hacia la cámara de residuos. El cásete puede incluir un pistón para transferir el contenido de la cámara de reacción a través de la cámara de partículas y hacia la cámara de elución. La cámara de reacción puede ser alineada con la cámara de partículas y donde la cámara de elución puede ser alineable con la cámara de partículas.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La invención es descrita a manera de ejemplo con referencia a los dibujos acompañantes, donde: La FIGURA 1 es una vista lateral en corte transversal de un cásete para preparar muestras de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 2 es una vista en perspectiva de un cásete para preparar muestras de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 3 es una vista lateral en corte transversal que muestra una muestra siendo colocada en el cásete usando una pipeta, de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 4 es una vista en perspectiva de un alimentador, en el cual el cásete de la FIGURA 1 es usado, de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 5 es una vista en perspectiva de un instrumento, en el cual es usado el alimentador de la FIGURA 4, de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 6 es una vista lateral en corte transversal del cásete de la FIGURA 1, que muestra la transferencia de una solución de PK en una cámara de mezclado, de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 7 es una vista lateral en corte transversal del cásete de la FIGURA 1, que muestra la transferencia de una solución de lisis en una cámara de mezclado, de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 8 es una vista lateral en corte transversal del cásete de la FIGURA 1, que muestra la transferencia de una solución de unión a una cámara de mezclado, de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 9 es una vista lateral en corte transversal del cásete de la FIGURA 1, que muestra la transferencia de perlas metálicas a la cámara de mezclado, de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 10 es una vista lateral en corte transversal del cásete de la FIGURA 1, que muestra la perlas metálicas unidas a una primera válvula, de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 11 es una vista lateral en corte transversal del cásete de la FIGURA 1, que muestra la transferencia de perlas metálicas de una cámara de mezclado, a una cámara de lavado, de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 12 es una vista en perspectiva desde un extremo de una válvula para usarse en el cásete de la FIGURA 1, de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 13 es una vista lateral en corte transversal del cásete de la FIGURA 1, que muestra perlas metálicas unidas a una segunda válvula, de acuerdo a una segunda modalidad de la invención; La FIGURA 14 es una vista lateral en corte transversal del cásete de la FIGURA 1, que muestra la transferencia de perlas metálicas de la primera cámara de lavado a una segunda cámara de lavado, de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 15 es una vista lateral en corte transversal del cásete de la FIGURA 1, que muestra perlas metálicas unidas a una tercera válvula, de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 16 es una vista lateral en corte transversal del cásete de la FIGURA 1, que muestra la transferencia de perlas metálicas de una segunda cámara de lavado a una cámara de elución, de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 17 es una vista lateral en corte transversal del cásete de la FIGURA 1, que muestra la transferencia de perlas metálicas de una cámara de elución a una segunda cámara de lavado, de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 18 es una vista lateral en corte transversal del cásete de la FIGURA 1, que muestra la remoción de una muestra preparada de una cámara de elución de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 19 es una vista en perspectiva de un alimentador en el cual se usa una pipeta multicanal para tener acceso a una pluralidad de muestras desde una pluralidad de casetes. La FIGURA 20 es una vista en perspectiva en corte transversal de una modalidad alternativa del cásete de la FIGURA 1, de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 21 es una vista en perspectiva detallada de un componente del montaje del cásete de la FIGURA 20, de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 22 es una vista en perspectiva detallada de un pistón del cásete de la FIGURA 20, de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 23 es una vista en perspectiva detallada de una válvula del cásete de acuerdo a una modalidad de la invención; y La FIGURA 24 es una vista en perspectiva detallada de la válvula de la FIGURA 23, de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 25 es una vista en perspectiva de un cásete para preparar muestras, de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 26 es una vista en corte transversal parcial del cásete de la FIGURA 25; La FIGURA 27 es una vista en perspectiva en corte transversal, parcial de una válvula para usarse en el cásete de la FIGURA 25; La FIGURA 28 es una vista lateral en corte transversal, parcial de la válvula de la FIGURA 25; La FIGURA 29 es una vista en perspectiva en corte transversal, del cásete de la FIGURA 25, que muestra la adición de una muestra a una cámara de mezclado, de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 30 es una vista en perspectiva en corte transversal del cásete de la FIGURA 25, que muestra la transferencia de una solución de PK en una cámara de mezclado, de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 31 es una vista en perspectiva en corte transversal del cásete de la FIGURA 25, que muestra la transferencia de una solución de lisis a una cámara de mezclado, de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 32 es una vista en perspectiva en corte transversal del cásete de la FIGURA 25, que muestra la transferencia de una solución de unión a una cámara de mezclado, de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 33 es una vista en perspectiva en corte transversal del cásete de la FIGURA 25, que muestra la transferencia de una muestra a través de partículas y hacia una cámara de residuos, de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 34 es una vista en perspectiva en corte transversal del cásete de la FIGURA 25, que muestra el bombeo de un amortiguador de lavado hacia la cámara de mezclado, de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 35 es una vista en perspectiva en corte transversal del cásete de la FIGURA 25, que muestra el bombeo del amortiguador de lavado a través de las partículas, de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 36 es una vista en perspectiva en corte transversal del cásete de la FIGURA 25, que muestra el bombeo de un segundo amortiguador de lavado a la cámara de mezclado, de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 37 es una vista en perspectiva en corte transversal del cásete de la FIGURA 25, que muestra el bombeo del segundo amortiguador de lavado a través de las partículas, de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 38 es una vista en perspectiva en corte transversal del cásete de la FIGURA 25, que muestra el bombeo de un amortiguador de elución a la cámara de mezclado, de acuerdo a una modalidad de la invención; La FIGURA 39 es una vista en perspectiva en corte transversal del cásete de la FIGURA 25, que muestra el bombeo del amortiguador de elución a través de las partículas y a la cámara de elución, de acuerdo a una modalidad de la invención; y La FIGURA 40 es una vista en perspectiva en corte transversal del cásete de la FIGURA 25, que muestra la remoción de la muestra de la cámara de elución, de acuerdo a una modalidad de la invención.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La Figura 1 ilustra un cásete 10, el cual puede ser usado para preparar muestras de células. El cásete 10 incluye un alojamiento 12, una cámara de mezclado 14, primera, segunda, tercera y cuarta, cámaras de contención 16, 18, 20, 22, primero, segundo, tercero y cuarto pistones 24, 26, 28 y 30, primera, segunda y tercera válvulas 32, 34 y 36, primera y segunda cámaras de lavado 38 y 40, una cámara de elución 42, primera, segunda, tercera y cuarta bombas 44, 46, 48 y 50, primera y segunda tapas 52 y 54, primero y segundo elementos de calentamiento 56 y 58 y un imán 60. Cada una de las cámaras 14, 16, 18, 20, 22, 38, 40 y 42, pistones 24, 26, 28 y 30, válvulas 32, 34 y 36, bombas 44, 46, 48 y 50, y elementos de calentamiento 56 y 58 están encerrados dentro del alojamiento. Las tapas 52 y 54 están unidas de manera móvil al alojamiento 12. El imán 60 es posicionado de manera removible en la primera válvula 32, la segunda válvula 34 y la tercera válvula 36. La cámara de mezclado 14 tiene una superficie superior 62, una superficie inferior 64 y superficies laterales opuestas 66, 68. La superficie superior 62 de la cámara de mezclado incluye una abertura 70 en ella. La primera tapa 52 está configurada para proporcionar acceso a la abertura 70 en la superficie superior 62 de la cámara de mezclado. La primera tapa 52 y la abertura 70 son coaxiales. La primera tapa 52 se muestra estando unida de manera móvil al alojamiento 12, de modo que cuando la tapa 52 esté abierta o apagada, la abertura 72 es accesible si la tapa 52 está cerrada o encendida, la abertura 70 no es accesible.

Una película delgada 74 forma una pared en la cámara de mezclado 14. La película delgada 74 es rompible, de modo que la cámara de mezclado 14 es accesible cuando la película delgada 74 ha sido rota o perturbada. La primera cámara de contención 16, la segunda cámara de contención 18, la tercera cámara de contención 20 y la cuarta cámara de contención 22 se muestran localizadas a continuación de la cámara de mezclado 14 y alineados verticalmente entre sí. Cada una de las cámaras de contención 16, 18, 20, 22 tiene una abertura 76 a continuación de la película delgada 74 de la cámara de mezclado 14. El cásete 10 puede incluir además partículas magnéticas de hierro en forma de perlas magnéticas de hierro en la primera cámara de contención 16. El cásete 10 incluye además una solución de unión en la segunda cámara de contención 18. El cásete 10 incluye además una solución de lisis en la tercera cámara de contención 20. El cásete 10 incluye además una solución de proteinasa K (PK) en la cuarta cámara de contención 22. El primero, segundo, tercero y cuarto pistones 24, 26, 28 y 30 se localizan en la primera, segunda, tercera y cuarta cámaras de contención 16, 18, 20 y 22, respectivamente . Cada uno de los pistones 16, 18, 20, 22 incluye la base 78, un eje 80 y un elemento de perforación 82. El eje 80 se extiende desde la base 78. El elemento de perforación 82 está en el extremo del eje 80 opuesto a la base 78 y está puntiagudo. El elemento de perforación 82 está configurado para romper o irrumpir en la película delgada 74 de la película de mezclado 14. La primera bomba 44 es una bomba de fuelle que tiene una porción de bombeo y una porción de boquilla. La porción de boquilla de la primera bomba 44 se localiza dentro de la cámara de mezclado 14. La porción de bombeo de la primera bomba 44 se localiza fuera de la cámara de mezclado, de modo que la porción de bombeo es accionable. Se proporciona un elemento de calentamiento 56 en la superficie inferior 64 de la cámara de mezclado 14 para calentar el contenido de la cámara de mezclado 14. El elemento de calentamiento 56 puede ser un elemento de calentamiento variable. La superficie lateral opuesta 68 de la cámara de mezclado 14 también incluye una abertura 84. Se proporciona una primera válvula 32 entre la abertura 84 y el lado 68 de la cámara de mezclado 14 y la primera cámara de lavado 38. La primera válvula 32 tiene una primera pieza estacionaria 86, y una segunda pieza móvil 88, siendo la segunda pieza 88 móvil con relación a la primera pieza 86. La primera pieza estacionaria 86 incluye una primera abertura 90 y una segunda abertura 92 y tiene una superficie 94. La segunda pieza 88 tiene una abertura 94 en ella para recibir el imán 60. La segunda pieza 88 tiene una superficie 96 con una cavidad 98 en ella. El imán 60 está formado para corresponder a la abertura 94 en la segunda pieza 88. El imán 60 se mueve en la abertura 94 de la segunda pieza 88, y es removible de la segunda pieza 88. El cásete 10 incluye una solución de lavado en la primera cámara de lavado 38. La segunda bomba 46 es también una bomba de fuelles, y la porción de la boquilla de la segunda bomba 46 se localiza en la primera cámara de lavado 38. La segunda válvula 34 se proporciona entre la primera cámara de lavado 38 y la segunda cámara de lavado 40. La segunda válvula 34 es estructural y funcionalmente la misma que la primera válvula 43, y también incluye una primera pieza estacionaria 86 y una segunda pieza móvil 88. La primera pieza estacionaria 86 incluye una primera abertura 90 y una segunda abertura 92 y tiene una superficie 94. La segunda pieza móvil 88 tiene una superficie 96 con una cavidad 98 en ella. El cásete 10 incluye una solución de lavado en la segunda cámara de lavado 40. La tercera bomba 48 también es una bomba de fuelles, y la porción de boquilla de la tercera bomba 48 se localiza en la segunda cámara de lavado 40. La tercera válvula 36 se proporciona entre la segunda cámara de lavado 40 y la cámara de elución 42. La tercera válvula 36 es estructural y funcionalmente la misma que la primera válvula 32 y la segunda válvula 34, y también incluye una primera pieza estacionaria 86 y una segunda pieza móvil 88. La primera pieza estacionaria 86 incluye una primera abertura 90 y una segunda abertura 92 y tiene una superficie 94. La segunda pieza móvil 88 tiene una superficie 96 con una cavidad 98 en ella. El cásete 10 incluye una solución de lavado en la cámara de elución 42. La cuarta bomba 50 es también una bomba de fuelles, y la porción de boquilla de la cuarta bomba 50 se localiza en la cámara de elución 42. Se proporciona un elemento de calentamiento 58 en la superficie inferior de la cámara de elución 42 para calentar el contenido de la cámara de elución 42. El elemento de calentamiento 58 puede ser un elemento de calentamiento variable. La cámara de elución 42 incluye una abertura 100 en su superficie superior para tener acceso al contenido de la cámara de elución 42. La segunda tapa 54 está configurada para proporcionar acceso a la abertura 100 en la superficie superior de la cámara de elución 42. La segunda tapa 54 es coaxial con la abertura 100. La segunda tapa 54 se muestra estando unida de manera móvil al alojamiento 12, de modo que cuando la tapa 54 sea abierta o apagada, la abertura 100 es accesible y si la primera tapa 54 está cerrada o encendida, la abertura 100 no es accesible. Con referencia a la Figura 2, como se describió anteriormente, el cásete 10 incluye un alojamiento 12. El alojamiento 12 incluye un primer componente de montaje 102, un segundo componente de montaje 104 y un tercer componente de montaje 106. El primer componente de montaje 102 incluye la cámara de mezclado 14, las cámaras de lavado 38 y 40, la cámara de elución 42 y la primera pieza estacionaria 86 de cada una de las válvulas 32, 34 y 36. El primer componente de montaje 102 también incluye partes de unión 108, 110 (véase la Figura 1) en uno de sus extremos y una pieza de unión 112 (véase la Figura 1) . El segundo componente de montaje 104 incluye las cámaras de contención 16, 18, 20 y 22 y una abertura para recibir la primera bomba 44. El segundo componente de montaje 104 también incluye partes de recepción de unión 114, 116, (véase la Figura 1) . El tercer componente de montaje 106 incluye aberturas para recibir la segunda, tercera y cuarta bombas 46, 48 y 50, respectivamente, e incluye tapas 52 y 54. El cásete 10 es montado insertando los componentes de unión 108, 110 del primer componente de montaje 102 en los componentes de recepción de unión 114, 116 del segundo componente de montaje 104, respectivamente. El tercer componente de montaje 106 es entonces asegurado al primer componente de montaje usando la pieza de unión 112, formando por lo tanto el cásete montado 10, como se ilustra en la Figura 2. Los pistones 24, 26, 28 y 30, las bombas 44, 46, 48 y 50 y la segunda pieza móvil 88 de cada una de las válvulas 32, 34 y 36, son insertados en el cásete 10. En uso, como se muestra en la Figura 3, la primera tapa 52 es removida para proporcionar acceso a la abertura 70 de la cámara de mezclado 14. Una muestra de células se coloca en un cásete montado 10 usando una pipeta 118. Las células en la muestra incluyen ácido nucleico. La pipeta 118 que tiene la muestra en ella es colocada en la cámara de mezclado 14. La muestra es liberada de la pipeta 118. Como se muestra en la Figura 4, el cásete 10 es cerrado cerrando la primera tapa 52. El cásete 10 es entonces colocado junto con casetes similares 10 en un alimentador 120, o soporte, para contener una serie de casetes 10. Como se muestra en la Figura 5, el alimentador 120 es colocado en un instrumento 122. Puede ser seleccionado un protocolo para preparar la muestra en el cásete 10 en el instrumento 122. Como se muestra en la Figura 6, la solución de PK es agregada a la muestra. La solución de PK es agregada moviendo el pistón 30 en la cuarta cámara de contención 22.

Se aplica una fuerza a la base 78 del pistón 30 para mover el pistón. Cuando el elemento de perforación 82 del pistón 30 avanza hacia la cámara de mezclado 14, el elemento de perforación 82 perfora y rompe la película delgada 74. El rompimiento en la película delgada 74 proporciona acceso a la cámara de mezclado 14. El movimiento continuo del pistón 30 transfiere el contenido (por ejemplo, la solución de PK) de la primera cámara de contención 22 hacia la cámara de mezclado 14. La solución de PK es mezclada con la muestra bombeando la mezcla con la primera bomba 44. La solución de PK destruye las paredes de las células de la muestra, creando un material suelto y ácido nucleico y el material suelto. Como se muestra en la Figura 7, la solución de lisis es agregada a la muestra. El pistón 28 opera de la misma manera que el pistón 30 para transferir la elución de lisis en la tercera cámara de contención 20 a la cámara de mezclado 14. La muestra es bombeada para mezclar el amortiguador de lisis en la solución de PK y la muestra de células. La solución de lisis es típicamente una sal o detergente. La solución de lisis es usada para solubilizar el material suelto. La solución de lisis típicamente no solubiliza proteínas. El elemento de calentamiento 56 puede ser usado para calentar la solución de lisis y la muestra. El elemento de calentamiento 56 puede ser controlado por el instrumento 122. Como se describió aquí anteriormente, la temperatura del elemento de calentamiento 56 puede ser variable, y se selecciona para optimizar la efectividad de la solución de lisis. Como se muestra en la Figura 8, la solución de unión es agregada a la muestra, la solución de PK y la solución de amortiguador de lisis. El pistón 26 opera de la misma manera que el pistón 30 para transferir la solución de unión en la segunda cámara de contención 18 a la cámara de mezclado 14. La solución es bombeada para mezclar la solución de unión con la solución de PK, solución de lisis y muestra. La solución de unión es típicamente hidrofóbica e incrementa la sal en la solución. La solución de unión hace que el ácido nucleico se cargue magnéticamente. Como se muestra en la Figura 9, las perlas magnéticas son agregadas a la solución y bombeadas durante aproximadamente dos minutos. El pistón 24 opera de la misma manera que el pistón 30 para transferir la solución de lisis en la primera cámara de contención 18 en la cámara de mezclado 14. Las perlas magnéticas se unen al ácido nucleico cargado magnéticamente. Como se muestra en la Figura 10, las perlas magnéticas, junto con el ácido nucleico, se unen a la primera válvula 32. El imán posicionable de manera removible 60 es colocado en la primera válvula 32 y se desliza hacia una posición en la primera válvula 32 para atraer las perlas magnéticas, las cuales se unen al ácido nucleico, de la cámara de mezclado 14 a la primera válvula 32. Como se muestra en la Figura 11, las perlas magnéticas, junto con el ácido nucleico, se mueven entonces de la cámara de mezclado 14 y son recibidas en la primera cámara de lavado 38. La Figura 12 es una vista detallada de las válvulas 32, 34 36, 36, que ilustra el movimiento de las perlas magnéticas de la cámara de mezclado 14 a la primera cámara de lavado 38. Como se discutió anteriormente, cada una de las válvulas 32, 34 y 36 incluye una primera pieza estacionaria 86 y una segunda pieza móvil 88, siendo la primera pieza móvil 88 un móvil con relación a la primera pieza 86. El imán 60 es insertado en la abertura 94 de la segunda pieza 88. El imán 60 es insertado en una posición correspondiente a las aberturas 90 y 92 de la primera pieza 86. El imán 60 atrae las perlas magnéticas de la cámara de mezclado 14 a través de la abertura 90 a la primera pieza 86 ya sea la cavidad 98 en la segunda pieza 88. La segunda pieza 88 gira de modo que las perlas magnéticas son selladas en la actividad 98 de la segunda pieza 88, entre las superficies de la segunda pieza 88 y la primera pieza 86. La segunda pieza 88 gira a lo largo de la superficie 94 de la primera pieza 86, de modo que la cavidad 98 es accesible a la abertura 92 de la primera pieza 86. El imán 60 es entonces removido de la abertura 94 en la segunda pieza 88 para liberar las perlas magnéticas de la cavidad 98 en la segunda pieza 88. Como se muestra en la Figura 13, las perlas magnéticas y el ácido nucleico son entonces lavados con la solución de lavado bombeando la solución con la segunda bomba 46. Las perlas magnéticas, junto con el ácido nucleico, son entonces unidas a la segunda válvula 34 insertando el imán 60 en la segunda válvula 34, como se describió anteriormente con referencia a la Figura 12. Como se muestra en la Figura 14, las perlas magnéticas, junto con el ácido nucleico, se mueven entonces de la primera cámara de lavado 38 a la segunda cámara de lavado 40 usando la segunda válvula 34. La segunda válvula 34 transfiere las perlas magnéticas y ácido nucleico de la primera cámara de lavado 38 a la segunda cámara de lavado 40, como se describió anteriormente con referencia a la Figura 12. Como se muestra en la Figura 15, las perlas magnéticas y el ácido nucleico son entonces lavados con la solución de lavado una segunda vez bombeando la solución con la tercera bomba 48. Las perlas magnéticas, junto con el ácido nucleico, son entonces unidas a la tercera válvula 36 colocando el imán 60 a la tercera válvula 36, como se describió anteriormente con referencia a la Figura 12.

Como se muestra en la Figura 16, las perlas magnéticas y el ácido nucleico se vuelven entonces de la segunda cámara de lavado 40 a la cámara de elución 42. Las perlas magnéticas y el ácido nucleico son transferidos de la segunda cámara de lavado 40 a la cámara de elución 42 usando el procedimiento descrito anteriormente con referencia a la Figura 12. Una solución amortiguadora de elución es entonces mezcladas con las perlas magnéticas y el ácido nucleico bombeando la solución con la cuarta bomba 50. El elemento de calentamiento 58 puede ser usado para calentar el amortiguador de elución, las perlas magnéticas y el ácido nucleico. El elemento de calentamiento 58 puede ser controlado por el instrumento 122. La temperatura puede ser variable y puede ser seleccionada para optimizar la liberación del ácido nucleico de las perlas magnéticas. Las perlas magnéticas solas son entonces unidas nuevamente a la tercera válvula 36 colocando el imán 60 en la tercera válvula 36 como se describió anteriormente con referencia a la Figura 12. Como se muestra en la Figura 17, las perlas magnéticas solas se mueven entonces de la cámara de elución 42 nuevamente hacia la segunda cámara de lavado 40, dejando el ácido nucleico en la cámara de elución 42. Las perlas magnéticas son transferidas de una cámara de elución 42 a la segunda cámara de lavado 40 usando el procedimiento descrito anteriormente con referencia a la Figura 12. Como se muestra en la Figura 18, la muestra preparada de ácido nucleico puede ser accesible usando una segunda pipeta 124. La segunda tapa 54 es removida para proporcionar acceso a la abertura 100 en la cámara de elución 42. La pipeta 124 es insertada a la abertura 100 y la muestra preparada de ácido nucleico es retirada. Como se muestra en la Figura 19, puede usarse una pipeta multicanal 126 para tener acceso a una pluralidad de muestras desde una pluralidad de casetes 10. La Figura 20 ilustra una modalidad alternativa del cásete 10. El cásete 10a ilustrado en la Figura 20 difiere del cásete 10 ilustrado en la Figura 1 en que el componente de montaje 104a incluye un sello 130, los pistones 24a, 26a, 28a y 30a cada uno incluyen sellos 132, 134, 136 y 138, respectivamente, y las válvulas 32a, 34a, y 36a tienen arreglo diferente, como se discute aquí posteriormente. La Figura 21 ilustra el componente de montaje 104a con mayor detalle. El componente de montaje 104a incluye un sello 130. El sello ilustrado 130 es un elastómero doble, el cual se extiende a lo largo de la circunferencia del componente de montaje 104a. La Figura 22 ilustra el pistón 24a de manera más detallada. El pistón 24a incluye un sello 132. El sello ilustrado 132 es también un elastómero doble, el cual se extiende a lo largo de la circunferencia del pistón 24a. Se apreciará que cada uno de los pistones 26a, 28a y 30a también podría tener un arreglo similar. Las Figuras 23 y 24 ilustran la válvula 32a con mayor detalle. Se apreciará que las válvulas 34a y 36a también tienen un arreglo similar. La válvula 32a incluye un imán 60a, un alojamiento 142, y un eje 144. El alojamiento 142 incluye una primera abertura (no mostrada) para recibir el imán 60a y una segunda abertura 148 para exponer el imán 60a y recibir las partículas 146. El imán 60a está formado para corresponder a la abertura 148 y se selecciona para atraer las partículas 146. El alojamiento 142 también incluye una tercera abertura (no mostrada) para recibir el eje 144. Como se muestra en la Figura 24, el eje 144 puede incluir un elemento acuñado 150. El elemento acuñado 150 está formado para acoplarse al cásete 10a. Se apreciará que el eje puede ser un elemento removible o integrado de la válvula 32a. También se apreciará que el alojamiento 142 puede, de manera alternativa, incluir el elemento acuñado. El eje 144 es acoplable con el alojamiento 142 y el imán 60a para hacer girar el alojamiento 142 y el imán 60a con relación al cásete 10a para mover las partículas 146 de la cámara de mezclado 14a a la cámara de lavado 38a. Se apreciará que las válvulas 34a y 36a operan en una forma similar para transferir las partículas 146 de la cámara de lavado 38a a la cámara de lavado 40a y de la cámara de lavado 40a a la cámara de elución 42a, respectivamente. En una modalidad, se coloca un total de aproximadamente 200 µl de muestra en el cásete. La muestra es mezclada con un total de aproximadamente 50 µL de la solución de PK bombeando la mezcla de la muestra y solución de PK durante aproximadamente 1 minuto. Se agrega un total de aproximadamente 200 µL de solución de lisis a la muestra y solución de PK, y las soluciones son bombeadas durante aproximadamente 1 minuto para mezclar las soluciones. La mezcla es entonces calentada a aproximadamente 60°C durante aproximadamente 10 minutos, y la mezcla se deja enfriar durante aproximadamente 5 minutos. La mezcla es bombeada adicionalmente mientras se enfria. Se agrega un total de aproximadamente 500 µL de solución de unión a la mezcla. Las soluciones son bombeadas durante aproximadamente 1 minuto. Las perlas magnéticas son agregadas a la solución y bombeadas durante aproximadamente dos minutos. Las perlas magnéticas son transferidas y lavadas como se describió anteriormente. Se proporciona un total de aproximadamente 700 µL de solución de lavado en cada una de las cámaras de lavado. Se proporciona un total de aproximadamente 200 µL de solución de elución en la cámara de elución. Las perlas magnéticas son mezcladas con la solución de elución bombeando la mezcla durante aproximadamente 1 minuto. La mezcla es entonces calentada durante aproximadamente 90 CC durante aproximadamente 2 minutos. El proceso continua como se describió anteriormente. Aunque el cásete 10 ha sido descrito como si tuviera la cámara de mezclado 14, dos cámaras de lavado 38 y 40 y una cámara de elución 42, se contempló que podría proporcionarse, de manera alternativa, solo una cámara de lavado o ninguna cámara de lavado. Aunque el cásete ha sido descrito como si usara un solo imán móvil 60, se contempló que cada válvula puede incluir un imán posicionable, de modo que el imán no necesite ser removido. El imán 60 puede ser giratorio, y usado para hacer girar la segunda pieza de las válvulas . De manera alternativa, el imán puede solo deslizarse dentro de cada una de las válvulas, y la segunda pieza se hace girar independiente del imán. Se contempló que puede ser usado aquí un cásete 10 que no use válvulas como se describe aquí para transferir las partículas magnéticas de la cámara de mezclado a la cámara de elución. En esa modalidad, puede proporcionarse un imán deslizable para transferir las partículas magnéticas de una cámara a la siguiente. Aunque el cásete 10 ha sido descrito como si usara una solución de PK, solución de lisis, solución de unión y perlas magnéticas para liberar el ácido nucleico y las perlas magnéticas, se contempló que puede ser posible practicar la invención sin usar cada una de las soluciones anteriores . Además, aunque la solución fue descrita como si usara una solución de PK para romper las células; se contempló que puede ser usada una enzima que haga que las células se rompan para liberar el ácido nucleico en la invención. Se contempló que el alojamiento 12 puede ser transparente, de modo que pueda ser visto el procedimiento. En una modalidad, la película delgada 74 es una laminación . En una modalidad, las tapas 52 y 54 pueden ser tapas superiores roscadas. En una modalidad, las tapas 52, 54 incluyen una membrana hidrofóbica, la cual permite que los gases sean ventilados a través de la tapa, pero no permite que los líquidos se escapen del cásete 100. En una modalidad, la bomba 50 es insertable en la abertura 100. En una modalidad, la bomba 50 también puede ser usada como una pipeta para remover la muestra del cásete 10. También se contempló que la cámara de mezclado 14 puede ser provista sin una película delgada perforable 74, En esa modalidad, los pistones 24, 26, 28 y 30 no necesitarían un elemento de perforación 82. En su lugar, los pistones 24, 26, 28 y 30 tendrían un elemento de sellado para evitar la fuga del contenido de la cámara de contención 16, 18, 20 y 22, asociada con cada pistón 24, 26, 28 y 30, respectivamente, hasta que el pistón fuese movido. La figura 25 ilustra un cásete 200, el cual puede ser usado para preparar muestras de células. El cásete 200 incluye un alojamiento 210, primera, segunda, tercera, cuarta, quinta, sexta, séptima, y octava cámaras de contención 204a-h, respectivamente. Cada una de las cámaras de contención 204a-h, incluye una válvula de montaje 206a-h en ella. También puede proporcionarse un elemento de bloqueo 207. La figura 26 ilustra el cásete 200 con mayor detalle. El cásete 200 incluye además una cámara de reacción 208, una cámara de partículas 210, una cámara de residuos 212, una cámara de desbordamiento de residuos 214, una cámara de elución 216, un pistón 218, y primer y segunda tapas 220 y 222, respectivamente. El cásete 200 también puede incluir uno o más elementos de calentamiento (no mostrados) . Cada una de las cámaras de contención 204a-h, montajes de válvula 206a-h, cámara de reacción 208, cámara de partículas 210, cámara de residuos 212, cámara de desbordamiento de residuos 214, y pistón 218 están encerrados dentro del alojamiento 202. Las tapas 222, 224 se unen de manera móvil y removible al alojamiento 202. La cámara de reacción 208 tiene una superficie superior 226, una superficie inferior 228 y superficies laterales opuestas 230, 232. La superficie superior 226 de la cámara de reacción 208 incluye una abertura 234 en ella. La primera tapa 222 está configurada para proporcionar acceso a la abertura 234 en la superficie superior 226 de la cámara de reacción 208.

La tapa ilustrada 222 es una tapa superior roscada; sin embargo, cualquier otra tapa que proporcione (de manera removible) acceso a la abertura 234. La superficie inferior 228 de la cámara de reacción 208 incluye una abertura 236 en ella. La abertura 236 permite que una cámara de reacción 208 esté en comunicación fluídica con la cámara de partículas 210. La superficie lateral 232 incluye aberturas 238a-h en ella. Las aberturas 238a-h permiten que la cámara de reacción 208 esté en comunicación fluídica con la cámara de contención 204-h, respectivamente. El cásete 200 incluye una solución de unión en una cámara de unión 204a. El cásete 200 incluye una solución de lisis en una cámara de contención 204b. El cásete 200 incluye además una solución de proteinasa K (PK) en una cámara de contención 204c. El cásete 200 incluye además una solución de lavado en una o más cámaras de contención 240d-e. El cásete 200 incluye además una solución de elución en una cámara de contención 204f. El pistón 218 y la primera tapa 222 se muestran unidas entre sí para formar un sistema de pistones integral. El pistón 218 es compresible para bombear el contenido de la cámara de reacción 208. De manera alternativa, puede proporcionarse una bomba separada para bombear el contenido de la cámara de reacción 208. El pistón 218 también se mueve dentro de la cámara de reacción 208 para empujar el contenido de la cámara de reacción 208 a través de la cámara de partículas 210. Las cámaras de contención 204a-h se forman en un alojamiento 202 del cásete 200. Cada una de las cámaras de contención 204a-h incluye una guía 240a-h acoplable con la ranura correspondiente en el montaje de válvula 206. Las cámaras de contención 204a-h también incluyen al menos una abertura 242a-h, acoplable con las aberturas correspondientes en el montaje de válvula 206a-h. El alojamiento 202 también incluye ranuras 244a-h, acoplables con las guías correspondientes en el montaje de válvula 206a-h. La cámara de partículas 210 incluye un cuerpo 250, que tenga una primera abertura 252, una segunda abertura 254, y una pluralidad de partículas 256 en ella. Las partículas pueden ser magnéticas o no magnéticas, dependiendo de la aplicación del cásete 200. Las partículas pueden ser, por ejemplo, de celulosa, plástico o hierro. La cámara de partículas 210 se muestra alineada con una cámara de reacción 208.

La cámara de residuos 212 y la cámara de elución 216 se integran entre sí y giran con relación al alojamiento 202. La cámara de desbordamiento de residuos 214 se coloca cerca de la cámara de residuos 212 y puede estar en comunicación fluídica con la cámara de residuos 212. La cámara de residuos 212 y la cámara de elución 216 son alineables con la cámara de partículas y pueden estar en comunicación fluídica con la cámara de partículas 210. La cámara de residuos 212 para una superficie superior 270, la superficie inferior 272, una superficie interna 274 y una superficie externa 276. La cámara de desbordamiento de residuos 214 tiene una superficie superior 278, una superficie inferior 280 y superficie laterales opuestas 282, 284. La cámara de elución 216 también tiene una superficie superior 286, una superficie inferior 288, una superficie interna 290 y una superficie externa 292. Se apreciará que la superficie externa 276 de la cámara de residuos 212 y la superficie externa 292 de la cámara de elución 216 se integran entre sí. También se apreciará que la superficie interna 274 de la cámara de residuos 212 es la misma que la superficie interna 290 de la cámara de elución 216. La superficie superior 270 de la cámara de residuos 212 y la superficie superior 286 de la cámara de elución 216 tienen cada una abertura 294, 296 respectivamente. Esas aberturas 294, 296 son alineables con la abertura 252 en la cámara de partículas 210 para proporcionar una ruta de comunicación fluídica entre la cámara de partículas 210 y la cámara de residuos 212 y la cámara de elución 216. La superficie externa 276 de la cámara de residuos 212 incluye una abertura 298 en ella. Una de las superficies laterales 282, 284 de la cámara de desbordamiento de residuos 214 incluye una abertura 300 en ella. La abertura 298 y la abertura 300 son alineables, de modo que el fluido que fluye hacia la cámara de residuos 212 puede fluir de la cámara de residuos y hacia la cámara de desbordamiento de residuos 214. La superficie inferior 288 de la cámara de elución 216 incluye una abertura 302 en ella. La segunda tapa 224 está configurada para proporcionar acceso a la abertura 302 en la superficie inferior 288 de la cámara de elución 216. La tapa ilustrada 224 es una tapa superior roscada. Sin embargo, cualquier otra tapa (removible) proporciona acceso a la abertura 302. Las figuras 27 y 28 ilustran un montaje de válvula 206 con mayor detalle. El montaje de válvula 206 incluye un alojamiento 310. El alojamiento 310 incluye una cámara 312 en ella, una ranura 314 y proyecciones 316 que se extienden sobre ella. La cámara 312 incluye una bomba 318 en ella. Se proporciona una tapa 320 en un extremo del alojamiento para sellar la cámara 310. La tapa incluye primera y segunda aberturas 322, 324, que se extienden a su través y proporcionan comunicación fluídica con una cámara 312. Cuando las aberturas 322, 324 no se alinean con las aberturas 238a-h, el contenido de la cámara 312 es sellado dentro del montaje de válvula; sin embargo, cuando las aberturas 322, 324 no se alinean con las aberturas 238a-h, el contenido de la cámara 312 es liberable de la cámara 312. La ranura 314 es usada para guiar las aberturas 322, 324 al lugar donde las aberturas 322, 324 se alinean con las aberturas 238a-h. La bomba 318 se usa para transferir el contenido de la cámara 312 y hacia la cámara de reacción 214 a través de las aberturas 322, 324. El cásete 200 se monta insertando los montajes de válvula 206a-h en las cámaras de contención 204a-h del alojamiento. El elemento de bloqueo 207 puede ser conectado al alojamiento para asegurar los montajes de válvula 206a-h en las cámaras de contención 204a-h. El montaje de cámara de residuos y la cámara de elución 216 es insertado en el alojamiento 202 y la tapa 224 es asegurada al alojamiento 202. El pistón 218 también es insertado en la cámara de reacción 208 y la tapa 222 es asegurada al alojamiento. En uso, como se muestra en la Figura 29, la primera tapa 222 es removida para proporcionar acceso a la abertura 234 de la cámara de reacción 208. Una muestra de células 350 es colocada en el cásete 200 usando una pipeta 352. Las células en la muestra incluyen ácido nucleico. La pipeta 352 que tiene la muestra en ella es colocada a la cámara de reacción 208. La muestra es liberada de la pipeta 352. Como se muestra en la Figura 30, la solución de PK es agregada a la muestra. La solución de PK es agregada haciendo girar el montaje de válvula 206c con relación al alojamiento 202. Al menos una de las aberturas 322, 324 del montaje de válvula 206c que se alinea con la abertura 242c en la cámara de contención 204c para liberar la solución de PK de la cámara de contención 204c y hacia la cámara de reacción 208 a través de la abertura 238c en el alojamiento 202. La solución de PK es mezclada con la muestra bombeando la mezcla con el pistón 218. Como se describió aquí anteriormente, la solución de PK destruye a la pared de las células de la muestra, creando material suelto y ácido nucleico en el material suelto. Como se muestra en la Figura 31, la solución de lisis es agregada a la muestra. El montaje de válvula 206b opera de la misma manera que el montaje de válvula 206c para transferir la solución de lisis en la cámara de contención 204b a la cámara de reacción 208. La muestra es bombeada típicamente para mezclar la solución de lisis con la solución de PK y muestra mezcladas. La solución de lisis es típicamente una sal o detergente, y se usa para solubilizar el material suelto, como se discutió aquí anteriormente.

Como se muestra en la Figura 32, se agrega una solución de unión a la muestra, la solución de PK y solución de lisis. El montaje de válvula 206a opera de la misma manera que el montaje de válvula 206c para transferir la solución de unión en una cámara de contención 204a a la cámara de reacción 208. La solución es bombeada para mezclar la solución de unión con la solución de PK, la solución de lisis y la muestra. La solución de unión es típicamente hidrofóbica e incrementa la solución. Como se muestra en la Figura 33, la solución es bombeada a través de las partículas en la cámara de partículas 210. El ácido nucleico se une a las partículas en la cámara de partículas, mientras que la solución restante fluye hacia la cámara de residuos 212, y si es necesario, la cámara de desbordamiento de residuos 214. Como se describió anteriormente, cando la abertura 298 en la cámara de residuos 212 está alineada con la abertura 300 en la cámara de desbordamiento de residuos 214, la solución puede fluir hacia la cámara de desbordamiento de residuos 214 de la cámara de residuos 212. Como se muestra en la Figura 34, la solución de lavado es agregada a la cámara de reacción 208 operando el montaje de válvula 206d de la misma manera que el montaje de válvula 206c para transferir la solución de lavado de la cámara de contención 204d hacia la cámara de reacción 208.

Como se muestra en la Figura 35, la primera solución de lavado es bombeada a través de la cámara de partículas 210 y hacia la cámara de residuos 212, y si es necesario, a la cámara de desbordamiento de residuos 214. Como se muestra en la Figura 36, se agrega una segunda solución de lavado en la cámara de reacción 208 operando un montaje de válvula 206c de la misma manera que el montaje de válvula 206c para transferir la solución de lavado de la cámara de contención 204e a la cámara de reacción 208. Como se muestra en la Figura 37, la segunda solución de lavado es bombeada a través de la cámara de partículas 210 y hacia la cámara de residuos 212, y si es necesario, la cámara del desbordamiento de residuos 214. Como se muestra en la Figura 38, se agrega una solución de elución a la cámara de reacción 208 operando un montaje de válvula 206f de la misma manera que el montaje de válvula 206c para transferir la solución de elución de la cámara de contención 204f hacia la cámara de reacción 208. El montaje de cámara de residuos y cámara de elución se hace girar para alinear la abertura 296 de la cámara de elución 216 con la abertura 252 de la cámara de partículas 210, de modo que la solución de elución sea transferible hacia la cámara de elución 216. Se apreciará que la abertura 296 puede ser alineada con la abertura 252 antes o después de que la solución de elución sea agregada a la cámara de reacción 208. Como se muestra en la Figura 39, la solución de elución es bombeada a través de la cámara de partículas 210 para eluir el ácido nucleico unido. El ácido nucleico y la solución de elución fluyen hacia la cámara de elución 216. Como se muestra en la Figura 40, la muestra preparada de ácido nucleico puede ser accesible usando una pipeta 354. La segunda tapa 224 es removida para proporcionar acceso a la abertura 302 en la cámara de elución 216. La pipeta 354 es insertada en la abertura 302 y la muestra preparada de ácido nucleico retirada. Se apreciará que el cásete 200 puede ser colocado con casetes similares en un alimentador o soporte para contener una serie de casetes. El alimentador o soporte puede ser colocado en un instrumento, o puede seleccionarse un protocolo para preparar la muestra en el cásete 200 en el instrumento. El cásete 200 puede incluir uno o más elementos de calentamiento como se describió aquí posteriormente con respecto al cásete 100. Los casetes 100, 200 pueden ser desechables. Se apreciará que aunque los casetes 100, 200 han sido descritos con respecto al rompimiento de células para extraer ácido nucleico, los casetes 100, 200, pueden ser usados para romper células para extraer otros componentes celulares como, por ejemplo, proteína. También, aunque ha sido descrita una solución de lisis como la usada para romper las células, se apreciará que cualquier sustancia que pueda romper células, como, por ejemplo, reactivos, enzimas, sales catatrópicas, otras soluciones de lisis y similares. Los casetes descritos aquí son ventajosos debido a que están cerrados. No existe contaminación de la muestra durante el proceso. Además, puede prepararse un menor número de muestras, incluyendo tan pocas como una muestra. La descripción anterior con los dibujos anexos es solo ilustrativa de posibles modalidades del método descrito y no deberá constituirse en tal. Otros expertos en la técnica comprenderán que son posibles muchas otras modalidades específicas que caigan dentro del alcance y espíritu de la presente idea. El alcance de la invención es indicado por las siguientes reivindicaciones más que por la descripción anterior. Cualesquiera y todas las modificaciones que entren dentro del significado y alcance de equivalencia de las siguientes reivindicaciones se consideran dentro de su alcance. Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (56)

1. REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones . 1. Un cásete para preparar una muestra, caracterizado porque comprende: al menos una cámara de mezclado para recibir una muestra de células; una primera cámara de contención; una enzima en la primera cámara de contención, siendo la enzima transferible a al menos una cámara de mezclado para romper las células y liberar el ácido nucleico de las células para crear material suelto y el ácido nucleico en el material suelto; una segunda cámara de contención; partículas magnéticas en la segunda cámara de contención, siendo las partículas magnéticas transferibles a al menos una cámara de mezclado para unirse con el ácido nucleico; y al menos un imán, colocable para atraer las partículas magnéticas junto con el ácido nucleico y separar al menos parcialmente el ácido nucleico en el material suelto en al menos una cámara de mezclado.
2. 2. El cásete de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la cámara de mezclado tiene una superficie superior, teniendo la superficie superior una abertura en ella.
3. 3. El cásete de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque comprende además una tapa removible para tener acceso a la abertura de la cámara de mezclado.
4. 4. El cásete de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la enzima comprende proteinasa K.
5. 5. El cásete de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque comprende además primero y segundo pistones en la primera cámara de contención y la segunda cámara de contención, siendo cada pistón móvil para transferir la enzima y partículas magnéticas, respectivamente, a la cámara de mezclado.
6. 6. El cásete de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la cámara de mezclado comprende una película delgada que se rompe para transferir la enzima y partículas magnéticas a través de las rupturas respectivas en la película delgada hacia la cámara de mezclado.
7. 7. El cásete de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque comprende además primer y segundo pistones a la primera cámara de contención y la segunda cámara de contención, siendo cada pistón móvil para romper la película delgada y transferir la enzima en partículas magnéticas, respectivamente a la cámara de mezclado.
8. 8. El cásete de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque los pistones comprende un elemento de perforación para romper la película delgada.
9. 9. El cásete de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque comprende una tercera cámara de contención y una solución de lisis en la tercera cámara de contención, siendo la solución de lisis transferible a la cámara de mezclado para solubilizar el material suelto.
10. 10. El cásete de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque comprende una cuarta cámara de contención y una solución de unión en la cuarta cámara de contención, siendo la solución de unión transferible a la cámara de mezclado para unir el ácido nucleico a las partículas magnéticas.
11. 11. El cásete de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque comprende además un elemento de calentamiento para calentar la cámara de mezclado.
12. 12. El cásete de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque comprende además: un primera pieza de separación que tiene una superficie; una primera pieza de transferencia que tiene una superficie con una cavidad en ella, transfiriendo al menos un imán y las partículas magnéticas junto con el ácido nucleico en la cavidad con la superficie de la primera pieza de transferencia, siendo la pieza de transferencia móvil con relación a la primera pieza de separación, de modo que las partículas magnéticas junto con el ácido nucleico se muevan hacia fuera de la cámara de mezclado y a lo largo de la superficie de la primera pieza de separación; y una primera cámara de recepción la cual recibe las partículas magnéticas y el ácido nucleico después de moverse a lo largo de la superficie de la primera pieza de separación .
13. 13. El cásete de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado porque la primera pieza de transferencia gira con relación a la primera pieza de separación.
14. 14. El cásete de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado porque comprende además: una segunda pieza de separación que tiene una superficie; una segunda pieza de transferencia que tiene una superficie con una cavidad en ella, siendo la segunda pieza de transferencia móvil con relación a la segunda pieza de separación, de modo que las partículas magnéticas junto con el ácido nucleico se muevan hacia fuera de la primera cámara de recepción y a lo largo de la superficie de la segunda pieza de separación; y una segunda cámara de recepción la cual recibe partículas magnéticas y ácido nucleico después de moverse a lo largo de superficie de la segunda pieza de separación.
15. 15. El cásete de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque la segunda pieza de transferencia gira con relación a la segunda pieza de separación.
16. 16. El cásete de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque comprende además: una tercera pieza de separación que tiene una superficie; una tercera pieza de transferencia que tiene una superficie con una cavidad en ella, siendo la tercera pieza de transferencia móvil con relación a la tercera pieza de separación, de modo que las partículas magnéticas junto con el ácido nucleico se muevan hacia fuera de la segunda cámara de recepción y a lo largo de la superficie de la tercera pieza de separación; y una tercera cámara de recepción la cual recibe las partículas magnéticas y el ácido nucleico después de moverse a lo largo de superficie de la tercera pieza de separación.
17. 17. El cásete de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque la tercera pieza de transferencia gira con relación a la tercera pieza de separación.
18. 18. El cásete de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado porque la primera cámara de recepción es una cámara de lavado, y porque comprende además una solución de lavado en la cámara de lavado.
19. 19. El cásete de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque la segunda cámara de recepción es una cámara de lavado, y porque comprende además una solución de lavado en la cámara de lavado.
20. 20. El cásete de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque la tercera cámara de recepción es una cámara de elución, y porque comprende además un amortiguador de elución en la cámara de elución para separar las partículas magnéticas y el ácido nucleico.
21. 21. El cásete de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque comprende además un elemento de calentamiento para calentar la cámara de elución.
22. 22. Un cásete para preparar una muestra, caracterizado porque comprende: al menos una cámara de mezclado para recibir una mezcla de células, siendo agregada una enzima a la cámara de mezclado para romper las células y liberar el ácido nucleico de las células para crear material suelto y el ácido nucleico en el material suelto, siendo las partículas magnéticas agregadas a la cámara de mezclado para unirse con el ácido nucleico; una primera pieza de separación que tiene una superficie; una primera pieza de transferencia que tiene una superficie con una cavidad en ella; un imán, colocable para atraer las partículas magnéticas junto con el ácido nucleico y separar al menos parcialmente el ácido nucleico del material suelto en al menos una cámara de mezclado para transferir las partículas magnéticas con el ácido nucleico en la cavidad en la superficie de la primera pieza de transferencia, siendo la primera pieza de transferencia móvil con relación a la primera pieza de separación, de modo que las partículas magnéticas junto con el ácido nucleico se muevan hacia fuera de la cámara de mezclado y a lo largo de la superficie de la primera pieza de separación; y una primera cámara de recepción la cual recibe las partículas magnéticas y el ácido nucleico después de moverse a lo largo de la superficie de la primera pieza de separación .
23. 23. El cásete de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado porque la primera pieza de transferencia gira con relación a la primera pieza de separación.
24. 24. El cásete de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado porque la primera cámara de recepción es una cámara de lavado, y porque comprende además una solución de lavado en la cámara de lavado.
25. 25. El cásete de conformidad con la reivindicación 24, caracterizado porque comprende además una cámara de elución, un amortiguador de elución en la cámara de elución para separar las partículas magnéticas y el ácido nucleico, una segunda pieza de separación que tiene una superficie, una segunda pieza de transferencia en una superficie con una cavidad en ella, siendo la segunda pieza de transferencia móvil con relación a la segunda pieza de separación, de modo que las partículas magnéticas junto con el ácido nucleico se muevan hacia fuera de la cámara de recepción y a lo largo de la superficie de la segunda pieza de separación, recibiendo la cámara de elución las partículas magnéticas y el ácido nucleico después de moverse a lo largo de la superficie de la primera pieza de separación.
26. 26. El cásete de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado porque la segunda pieza de transferencia gira con relación a la segunda pieza de separación, de modo que las partículas magnéticas se mueven hacia fuera de la cámara de elución, dejando el ácido nucleico en la cámara de elución .
27. 27. El cásete de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado porque la primera cámara de recepción es una cámara de elución y porque comprende además un amortiguador de elución en la cámara de elución para lubricar las partículas magnéticas y el ácido nucleico.
28. 28. El cásete de conformidad con la reivindicación 24, caracterizado porque comprende además una segunda pieza de separación que tiene una superficie, una segunda pieza de transferencia que tiene una superficie con una cavidad en ella, siendo la segunda pieza de transferencia móvil con relación a la segunda pieza de separación, de modo que las partículas magnéticas junto con el ácido nucleico se muevan hacia fuera de la primera cámara de recepción y a lo largo de la superficie de la segunda pieza de separación, y una segunda cámara de recepción la cual recibe las partículas magnéticas y el ácido nucleico después de moverse a lo largo de la superficie de la segunda pieza de separación.
29. 29. El cásete de conformidad con la reivindicación 28, caracterizado porque la segunda pieza de transferencia gira con relación a la segunda pieza de separación.
30. 30. El cásete de conformidad con la reivindicación 28, caracterizado porque comprende además una tercera pieza de separación que tiene una superficie, una tercera pieza de transferencia que tiene una superficie con una cavidad en ella, siendo la tercera pieza de transferencia móvil con relación a la tercera pieza de separación, de modo que las partículas magnéticas junto con el ácido nucleico se muevan hacia fuera de la segunda cámara de recepción y a lo largo de la superficie de la tercera pieza de separación, y una tercera cámara de recepción la cual recibe las partículas magnéticas y el ácido nucleico después de moverse a lo largo de la superficie de la tercera pieza de separación.
31. 31. El cásete de conformidad con la reivindicación 30, caracterizado porque la tercera pieza de transferencia gira con relación a la tercera pieza de separación.
32. 32. El cásete de conformidad con la reivindicación 28, caracterizado porque la segunda cámara de recepción es una cámara de lavado, y porque comprende además una solución de lavado en la cámara de lavado.
33. 33. El cásete de conformidad con la reivindicación 30, caracterizado porque la tercera cámara de recepción es una cámara de elución, y porque comprende además un amortiguador de elución en la cámara de elución para separar las partículas magnéticas y el ácido nucleico.
34. 34. Un cásete para preparar muestras, caracterizado porque comprende: un recinto, comprendiendo el recinto: una cámara de mezclado, incluyendo la cámara de mezclado una abertura para recibir una muestra de células que tienen ácido nucleico; una pluralidad de cámaras de contención que tienen contenido, comprendiendo el contenido de una de la pluralidad de cámaras de contención partículas magnéticas, y comprendiendo el contenido de una de la pluralidad de cámaras de contención una solución de proteinasa K; una pluralidad de pistones, correspondiendo cada una de la pluralidad de pistones a una de la pluralidad de cámaras de contención, transferir el contenido de la pluralidad de cámaras de contención a la cámara de mezclado, rompiendo la solución de proteinasa K a las células para liberar el ácido nucleico y el ácido nucleico que se une a las partículas magnéticas a la cámara de mezclado; una primera válvula, acoplada a la cámara de mezclado, incluyendo la primera válvula, un imán posicionable para atraer ' las partículas magnéticas; una cámara de lavado, acoplada a la primera válvula; una segunda válvula, acoplada a la primera cámara de lavado, incluyendo la segunda válvula un imán posicionable para atraer las partículas magnéticas; y una cámara de elución, acoplada a la segunda válvula, incluyendo la cámara de elución una abertura para remover el ácido nucleico de la cámara de elución.
35. 35. El cásete de conformidad con la reivindicación 34, caracterizado porque una de la pluralidad de cámaras de contención comprende una solución de unión y una de la pluralidad de cámaras de contención comprende una solución de lisis, y donde una de la pluralidad de pistones transfiere la solución de unión a la cámara de mezclado y donde uno de la pluralidad de pistones transfiere la solución de lisis a la cámara de mezclado.
36. 36. Un cásete para preparar una muestra que comprende : una cámara de reacción para recibir una muestra de células; una primera cámara de contención; una enzima en la primera cámara de contención, siendo la enzima transferible a la cámara de reacción para romper las células y liberar el ácido nucleico de las células para crear material suelto y el ácido nucleico en el material suelto; una cámara de partículas; partículas para unirse con el ácido nucleico en la cámara de partículas; una segunda cámara de contención; un amortiguador de elución en la segunda cámara de contención para liberar el ácido nucleico de las partículas; y una cámara de elución para recibir el amortiguador de elución y el ácido nucleico liberado; donde el amortiguador de elución es transferible de la cámara de contención a la cámara de reacción, a través de la cámara de partículas, y a la cámara de elución.
37. 37. El cásete de conformidad con la reivindicación 36, caracterizado porque comprende además una tercera cámara de contención y una solución de lisis en la tercera cámara de contención, siendo la solución de lisis transferida a la cámara de reacción para solubilizar el material suelto.
38. 38. El cásete de conformidad con la reivindicación 36, caracterizado porque comprende además una cuarta cámara de contención y una solución de unión en la cuarta cámara de contención, siendo la solución de unión transferible a la cámara de reacción para unir el ácido nucleico a las partículas .
39. 39. El cásete de conformidad con la reivindicación 36, caracterizado porque la cámara de reacción se alinea con la cámara de partículas y donde la cámara de elución es alineable con la cámara de partículas.
40. 40. El cásete de conformidad con la reivindicación 36, caracterizado porque comprende además una cámara de residuos para recibir la enzima y el material suelto.
41. 41. El cásete de conformidad con la reivindicación 40, caracterizado porque comprende además un pistón para transferir el contenido de la cámara de reacción a través de la cámara de partículas y hacia la cámara de residuos.
42. 42. El cásete de conformidad con la reivindicación 36, caracterizado porque comprende además un pistón para transferir contenido de la cámara de reacción a través de la cámara de partículas y hacia la cámara de elución.
43. 43. El cásete de conformidad con la reivindicación 36, caracterizado porque comprende además una válvula en cada una de la primera y segunda cámaras de contención para transferir el contenido de cada una de la primera y segunda cámaras de contención a la cámara de reacción.
44. 44. El cásete de conformidad con la reivindicación 43, caracterizado porque la válvula comprende un pistón parta transferir el contenido de la válvula hacia la cámara de reacción.
45. 45. Un cásete para preparar muestras, caracterizado porque comprende: un recinto, comprendiendo el recinto: una cámara de reacción, incluyendo la cámara de reacción la abertura para recibir una mezcla de células que tienen ácido nucleico; una pluralidad de cámaras de contención; una enzima en una de la pluralidad de cámaras de contención; un amortiguador de lisis en uno de la pluralidad de cámaras de contención; un amortiguador de unión en una de la pluralidad de cámaras de contención; un amortiguador de elución en una de la pluralidad de cámaras de contención; una cámara de partículas; partículas en la cámara de partículas, las partículas para unirse de manera liberable con el ácido nucleico; y una cámara de elución para recibir el ácido nucleico liberado, incluyendo la cámara de elución una abertura para remover el ácido nucleico del recinto.
46. 46. El cásete de conformidad con la reivindicación 45, caracterizado porque el recinto comprende además una cámara de residuos.
47. 47. El cásete de conformidad con la reivindicación 45, caracterizado porque cada una de la pluralidad de cámaras de contención comprende un pistón para transferir el contenido de la pluralidad de cámaras de contención a la cámara de reacción.
48. 48. El cásete de conformidad con la reivindicación 45, caracterizado porque comprende además uno o más amortiguadores de lavado en una o más de la pluralidad de cámaras de contención.
49. 49. El cásete de conformidad con la reivindicación 45, caracterizado porque la cámara de reacción se alinea con la cámara de partículas y donde la cámara de elución es alineable con la cámara de partículas.
50. 50. Un cásete para preparar una muestra, caracterizada porque comprende: una cámara de reacción para recibir una muestra de células; una primera cámara de contención; una enzima en la primera cámara de contención, siendo la enzima transferible a la cámara de reacción para romper las células y liberar el ácido nucleico de las células para crear material suelto y el ácido nucleico en el material suelto; una cámara de partículas; partículas para unirse con el ácido nucleico en la cámara de partículas; una segunda cámara de contención; un amortiguador de elución en la segunda cámara de contención para liberar el ácido nucleico de las partículas; y una cámara de elución para recibir el amortiguador de elución y el ácido nucleico liberado, donde cada una de las cámaras de contención comprende un alojamiento externo que tiene una primera cámara en él y al menos una abertura, recibiendo la primera cámara una válvula, comprendiendo la válvula: un alojamiento interno que tiene una segunda cámara en él y al menos una abertura, el alojamiento interno giratorio con relación al alojamiento externo, al menos una abertura del alojamiento interno alineable con al menos una abertura del alojamiento externo, teniendo la segunda cámara contenido; y un pistón en la segunda cámara para transferir el contenido de la segunda cámara a través de al menos una abertura del alojamiento interno y al menos una abertura del alojamiento externo cuando al menos una abertura del alojamiento interno y al menos una abertura del alojamiento externo estén alineadas.
51. 51. El cásete de conformidad con la reivindicación 50, caracterizado porque comprende además una tercera cámara de contención y una solución de lisis en la tercera cámara de contención, siendo la solución de lisis transferible a la cámara de reacción para solubilizar el material suelto.
52. 52. El cásete de conformidad con la reivindicación 50, caracterizado porque el comprende además una cuarta cámara de contención y una solución de unión en la cuarta cámara de contención, siendo la solución de unión transferible a la cámara de reacción para unir el ácido nucleico a las partículas .
53. 53. El cásete de conformidad con la reivindicación 50, caracterizado porque comprende además una cámara de residuos para recibir la enzima y el material suelto.
54. 54. El cásete de conformidad con la reivindicación 53, caracterizado porque comprende además un pistón para transferir el contenido de la cámara de reacción a través de la cámara de partículas y a la cámara de residuos.
55. 55. El cásete de conformidad con la reivindicación 50, caracterizado porque comprende además un pistón para transferir el contenido de la cámara de reacción a través de la cámara de partículas y hacia la cámara de elución.
56. 56. El cásete de conformidad con la reivindicación 50, caracterizado porque la cámara de reacción se alinea con la cámara de partículas y donde la cámara de elución es alineable con la cámara de partículas.