LU85512A1 - PREPARATION OF AEROSOL COMPOSITIONS - Google Patents

Description

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La présente invention concerne la préparation de compositions d*aérosols et, de manière plus particulière, la préparation in situ de liposomes en se servant d’un système d’aérosol sous pression.The present invention relates to the preparation of aerosol compositions and, more particularly, the in situ preparation of liposomes using a pressurized aerosol system.

5 Certains composés à activité thérapeutique s'ad ministrent à des patients par inhalation, c’est-à-dire que ces substances sont introduites dans les voies respiratoires par le nez ou la bouche sous la forme d'une vapeur ou d’un gaz, ou sous la forme d'un brouillard, 10 en même temps qu'une matière servant de support ou de véhicule qui se présente sous la forme d'une vapeur ou d'un gaz. De manière similaire, pour certains traitements de la peau, par exemple, pour le traitement de plaies ouvertes ou de foulures ou d'entorses, pour le 15 traitement de troubles dermatologiques, ou à des fins cosmétiques, il-peut être souhaitable d'administrer un composé actif par pulvérisation, sous la forme d'un gaz, d'une vapeur ou d'un brouillard. Dans chaque circons-* “tance, il est souhaitable qu'une proportion aussi élevée 20 que possible du composé actif intact atteigne l'endroit où l'on attend qu'il exerce son action et, dans ce cas, il arrive quelquefois que le composé actif doive demeurer _ intact pendant une certaine période à l'endroit où l'on attend qu'il exerce son action. Cela revient à dire que 25 le composé actif doit être administré sans qu'il se décompose, que ce soit au cours de son transit ou immédiatement lors de son entrée en contact avec le patient.5 Certain compounds with therapeutic activity are administered to patients by inhalation, that is to say that these substances are introduced into the respiratory tract by the nose or the mouth in the form of a vapor or a gas. , or in the form of a mist, together with a carrier or carrier material which is in the form of a vapor or a gas. Similarly, for certain skin treatments, for example, for the treatment of open wounds or sprains or sprains, for the treatment of dermatological disorders, or for cosmetic purposes, it may be desirable to administer an active compound by spraying, in the form of a gas, a vapor or a mist. In each circumstance, it is desirable that as high a proportion as possible of the intact active compound reach the place where it is expected to exert its action and, in this case, it sometimes happens that the active compound must remain intact for a certain period at the place where it is expected to exert its action. This is to say that the active compound should be administered without breaking down, either during transit or immediately upon coming into contact with the patient.

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Ainsi, par exemple, lors de l'administration du composé bronchodilatateur anti-asthmatique connu sous le nom de bitoltérol (décrit dans la description du brevet britannique N° 1 298 771), il est souhaitable 5 d'administrer le composé en manière telle que l'on obtienne une pénétration maximale des bronches par la substance active, de façon à parvenir à des taux de composé actif des plus efficaces aux endroits d'action nécessaires.Thus, for example, when administering the anti-asthmatic bronchodilator compound known as bitolterol (described in the description of British Patent No. 1,298,771), it is desirable to administer the compound such that maximum penetration of the bronchi by the active substance is obtained, so as to achieve the most effective levels of active compound at the necessary places of action.

10 Dans le passé, on a suggéré de produire des compo sitions de liposomes contenant des substances biologiquement actives et des compositions de ce genre sont décrites, par exemple, dans les descriptions des brevets britanniques N° 1 575 343, 1 575 344 et 2 013 609 A.In the past, it has been suggested to produce liposome compositions containing biologically active substances and such compositions are described, for example, in the descriptions of British Patents 1,575,343, 1,575,344 and 2,013 609 A.

5 15 Cependant, dans des compositions connues de ce type, la -p matière liposomique en est une qui est préparée au pré- ; alable et séchée, typiquement par lyophilisation (séchage par congélation). On reconstitue ensuite la matière liposomique par mélange à l'eau.However, in known compositions of this type, liposomal material is one which is prepared in advance; alable and dried, typically by lyophilization (freeze drying). The liposomal material is then reconstituted by mixing with water.

20 De même, on connaît des compositions d'aérosols contenant diverses matières cosmétiques et thérapeutiques -voir par exemple les descriptions des brevets britanniques N° 780 885 , 993 702, 1 302 671, 1 381 184, 1 516 195 - s____et 2 001 334 A. Cependant, bien que des compositions 25 d’aérosols de cette nature puissent contenir certains ingrédients lipidiques, ces ingrédients sont invariablement présents simplement en tant qu'agents de dispersion, de suspension, d'émulsion et analogues. Au surplus, ces î compositions sont destinées à produire soit un spray sec, 30 si bien qu'aucune formation liposomique n'est possible, soit comme dans le cas de la crème de base de la description du brevet britannique 780 885, présentées sous forme d'un prémélange émulsionné de n'importe auel / “ " “ * , · 3 ,· Au surplus, comme décrit dans le mémoire descriptif du brevet des E.U.A. N° 3 594 476, il a été proposé de préparer des aérosols de lécithine, intéressants pour le traitement de troubles pulmonaires, qui peuvent faculta-5 tivement contenir d’autres agents thérapeutiques, comme des antibiotiques. Suivant le procédé de préparation . décrit, on prépare d’abord une suspension de DL- dipalmitoyl-a-lécithine dans de l’eau (ou une solution saline), tout médicament étant dissous dans l'eau ou la 10 solution saline, la suspension étant ensuite nébulisée, c’est-à-dire transformée en un aérosol, dans un générateur a ultrasons alimenté en un courant d'air servant de véhicule ou support. Par conséquent, le procédé décrit repose sur le recours à un équipement à ultrasons rela- * 15 tivement coûteux pour produire le mélange final néces- Γ saire de lécithine et d'eau, comme aussi sur l'emploi ς d’un mélange initial constitué de lécithine en suspension dans de l'eau. De même l'équipement ultrasonique peut être bruyant et ne conviendrait pa^'de ce fait, à l'utilisa- 20 tion sur une base générale.Likewise, aerosol compositions containing various cosmetic and therapeutic materials are known - see, for example, the descriptions of British Patents Nos. 780,885, 993,702, 1,302,671, 1,381,184, 1,516,195 - s____and 2,001,334 A. However, although aerosol compositions of this nature may contain certain lipid ingredients, these ingredients are invariably present simply as dispersants, suspensions, emulsions and the like. In addition, these compositions are intended to produce either a dry spray, so that no liposomal formation is possible, or as in the case of the base cream from the description of British patent 780 885, presented in the form of a premix emulsified from any other / “" “*, · 3, · In addition, as described in the specification of US Pat. No. 3,594,476, it has been proposed to prepare lecithin aerosols, useful for the treatment of pulmonary disorders, which may optionally contain other therapeutic agents, such as antibiotics. According to the preparation method described, a suspension of DL-dipalmitoyl-a-lecithin is first prepared in water (or saline), any drug being dissolved in water or saline, the suspension then being nebulized, i.e. transformed into an aerosol, in an ultrasonic generator fed with a air flow serving as a vehicle or support. Consequently, the process described relies on the use of relatively expensive ultrasonic equipment to produce the necessary final mixture of lecithin and water, as also on the use of an initial mixture consisting of lecithin suspended in water. Likewise, the ultrasonic equipment may be noisy and therefore would not be suitable for use on a general basis.

Au surplus, ainsi que le décrit le mémoire descriptif du brevet des E.U.A. 4 371 451, il a été proposé de produire des compositions de démoulage d'ustensiles de cuisson à base de lécithine, constituées d'eau, de 25 lécithine et d'éther diméthylique servant de propulseur. Bien que dans cette description, les solutions soient * distribuées à partir d'un récipient à aérosol, ici encore, le procédé décrit reposé sur l'emploi d'un mélange ini- ç. tial de lécithine dispersée dans de l’eau. Au surplus, 30 ce que l'on recherche dans ce cas est un séchage rapide et l'obtention d'un mince revêtement de lécithine qui ne mousse pas, plutôt qu'une matière liposomique en tant que telle.In addition, as described in the specification of the US patent. 4,371,451, it has been proposed to produce mold release compositions for lecithin-based cookware, consisting of water, lecithin and dimethyl ether as propellant. Although in this description, the solutions are * dispensed from an aerosol container, here again, the process described relies on the use of an inic mixture. tial of lecithin dispersed in water. Furthermore, what is sought in this case is rapid drying and obtaining a thin coating of lecithin which does not foam, rather than a liposomal material as such.

in La demanderesse a découvert à présent, non sans /J 35 surprise, qu'en utilisant un système à aérosol sous M pression, une matière liposomique pouvait être formée * * * 4 * de manière extemporanée à partir de composants lipidiques ^ et aqueux séparés et que des matières actives de diverses â natures pouvaient être administrées avec un effet amélio ré en les dispensant sous forme d’un mélange pulvérisé 5 avec un véhicule ou support liposomique formé in situ au * moment de débiter 1 e mélange de pulvérisation. De même, une telle matière liposomique formée in situ au moment de débiter 1 e mélange de pulvérisation est en soi intéressante, par exemple, pour le traitement de 10 troubles pulmonaires bien connus des spécialistes.in We have now discovered, not without surprise, that by using an aerosol system under M pressure, liposomal material could be formed * * * 4 * extemporaneously from separate lipid and aqueous components. and that active ingredients of various natures could be administered with an improved effect by dispensing them as a spray mixture with a liposomal carrier or carrier formed in situ when dispensing the spray mixture. Likewise, such a liposomal material formed in situ when dispensing the spray mixture is in itself advantageous, for example, for the treatment of pulmonary disorders well known to specialists.

Par conséquent, la présente invention a pour objet un procédé de préparation de liposomes, procédé qui se caractérise en ce que l’on rassemble sous pression au moins deux constituants séparés, à savoir un premier 15 constituant formé d'eau et un second constituant formé d'une matière lipidique et en ce que l'on fait passer le mélange sous pression à travers un ajutage ou tout autre dispositif de façon à engendrer un spray du type aérosol contenant des liposomes.Consequently, the subject of the present invention is a process for the preparation of liposomes, a process which is characterized in that at least two separate constituents are brought together under pressure, namely a first constituent formed from water and a second constituent formed of a lipid material and in that the mixture is passed under pressure through a nozzle or any other device so as to generate a spray of the aerosol type containing liposomes.

20 Le procédé suivant la présente invention assure la préparation in situ ou extemporanée de liposomes en utilisant un système d'aérosol sous pression. Suivant la présente invention, un premier constituant et un second constituant formés d'une matière lipidique sèche sont t ---- ' ' 25 mélangés de façon à obtenir un spray dans lequel les , liposomes peuvent être présents tels quels ou sous forme d'un véhicule ou support liposomique pour une ou plusieurs autres matières. Par conséquent, selon une caractéris-^ tique préférée de la présente invention, cette dernière a 30 pour objet un aérosol liposomique comprenant un véhicule ou support liposomique et une matière active séparée qui, en général, est une substance à activité biologique et/ou intéressante pour le traitement ou les soins f, du corps humain ou animal. Une telle matière active sera // ifThe process according to the present invention provides for the in situ or extemporaneous preparation of liposomes using a pressurized aerosol system. According to the present invention, a first component and a second component formed from a dry lipid material are mixed in order to obtain a spray in which the liposomes can be present as such or in the form of a liposomal vehicle or support for one or more other materials. Consequently, according to a preferred characteristic of the present invention, the latter relates to a liposomal aerosol comprising a liposomal vehicle or support and a separate active material which, in general, is a substance with biological activity and / or advantageous for the treatment or care of the human or animal body. One such active ingredient will be // if

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5 généralement aussi une matière non lipidique, bien que.dans certaines circonstances, on puisse utiliser un lipide pour véhiculer ou supporter une partie active, par exem- •.w * pie, qui y est attachée.5 generally also a non-lipid material, although under certain circumstances, a lipid can be used to transport or support an active part, for example, which is attached thereto.

5 On peut aussi mettre la présente invention en oeuvre pour préparer et fournir un aérosol liposomique tel quel, c’est-à-dire sans autre matière ou composé actif séparé. De tels aérosols trouvent application de * diverses manières, que ce soit pour préparer des lipo-10 somes per se destinés à diverses applications ou que ce soit dans le domaine thérapeutique. Plus particulièrement, ils se révèlent intéressants dans le domaine de la parturition ou des enfants nouveaux-nés soumis à des difficultés respiratoires (syndrome de détresse respira-15 toire) peuvent être assistés afin de respirer plus normalement par l’administration d'une matière lipidique à leurs régions bronchiques pour augmenter les faibles taux de surfactif pulmonaire naturellement présent constatés ^ chez ces enfants.The present invention can also be used to prepare and provide a liposomal aerosol as it is, that is to say without any other separate active ingredient or compound. Such aerosols find application in various ways, whether for preparing liposomes per se intended for various applications or whether in the therapeutic field. More particularly, they prove to be interesting in the field of parturition or newborn children subjected to breathing difficulties (respiratory distress syndrome) can be assisted in order to breathe more normally by the administration of a lipid material. to their bronchial regions to increase the low levels of naturally present pulmonary surfactant found in these children.

20 De préférence, cependant, on fournit une matière active séparée qui peut initialement être présente dans le premier ou, plus avantageusement, le _______second constituant. Une telle matière active peut être présente sous la forme d'une suspension, pour ne la citer 25 qu’en exemple une poudre sèche, dans le premier ou le • ---“—second constituant, mais se trouve, de préférence, en solution dans l’un des constituants. En utilisant une solution de matière active, il est possible d'éviter une quelconque décantation ou un quelconque dépôt comme ce 30 serait le cas avec une suspension et toute variation consé-~ cutive de la dose administrée due à la décantation ou au dépôt.Preferably, however, a separate active material is provided which may initially be present in the first or, more preferably, the _______ second constituent. Such an active ingredient may be present in the form of a suspension, to cite it only as an example, a dry powder, in the first or the second constituent, but is preferably found in solution in one of the constituents. By using a solution of active material, it is possible to avoid any decantation or any deposit as would be the case with a suspension and any subsequent variation of the administered dose due to decantation or deposition.

Dans le procédé suivant la présente invention, l’action de formation et/ou de pulvérisation du mélange 35 conduit à la préparation d’une matière liposomiaue. Par / // * , · 6 conséquent, la demanderesse suppose que lorsque le me- ‘ Γ lange est formé, il se produit une émulsion comprenant des micelles lipidiques en suspension dans de l’eau, qui engendre ensuite des liposomes lors de la pulvérisation.In the process according to the present invention, the action of forming and / or spraying the mixture 35 leads to the preparation of a liposomal material. Par / // *, · 6 Consequently, the Applicant assumes that when the mixture is formed, an emulsion is produced comprising lipid micelles suspended in water, which then generates liposomes during spraying. .

5 Au surplus, lorsqu’une matière active est présente, la matière liposomique comprend de la substance active sup-* portée ou véhiculée par un milieu aqueux, soit emprisonnée sous forme encapsulée, entre3es couches lipidiques, soit prise en sandwich entre des molécules de lipides. En fai-10 sant varier les conditions dans lesquelles les deux constituants sont mélangés et/ou pulvérisés, on peut faire varier le calibre des liposomes et les proportions relatives de matière active libre et incorporée entre de très larges limites, la limite supérieure allant jusqu’à une 15 incorporation d’environ 100 Ainsi, par exemple, en * formant et/ou pulvérisant le mélange d'aérosol sous divers degrés d’activité de mélange, par exemple, comme cela se ! .. produit dans des conditions turbulentes créées notamment dans une chambre de mélange et/ou les moyens d'alimenta-20 tion qui y sont associés et/ou dans un ajutage de pulvérisation, on peut former un spray, soit sous forme d’un spray possédant une proportion élevée de matière active “libre -donnant une action rapide avec une réserve de matière active à libération lente- soit sous forme d'un 25_spray possédant une faible proportion de matière active libre -donnant une action plus lente avec une libération , plus maîtrisée ou réglée et plus prolongée de la matière « active. Ainsi, dans le dernier cas, on peut produire une composition comprenant une matière active, dans laquelle 3° on permet à une proportion élevée de la matière d’âtre véhiculée sous une forme ’’protégée'' vers l’endroit souhaité de l’action et/ou d'agir autrement d'une manière à libération soutenue du principe actif.Furthermore, when an active material is present, the liposomal material comprises active substance supported or transported by an aqueous medium, either trapped in encapsulated form, between the lipid layers, or sandwiched between lipid molecules. . By varying the conditions under which the two constituents are mixed and / or sprayed, the size of the liposomes and the relative proportions of free and incorporated active material can be varied between very wide limits, the upper limit going up to to an incorporation of about 100 Thus, for example, by forming and / or spraying the aerosol mixture under varying degrees of mixing activity, for example, as is! .. produced in turbulent conditions created in particular in a mixing chamber and / or the supply means associated with it and / or in a spray nozzle, a spray can be formed, either in the form of a spray with a high proportion of free active ingredient - giving rapid action with a reserve of slow-release active ingredient - either in the form of a 25_spray having a low proportion of free active ingredient - giving a slower action with release, more controlled or regulated and more prolonged with the "active" material. Thus, in the latter case, a composition can be produced comprising an active material, in which 3 ° a high proportion of the hearth material conveyed is allowed in a "protected" form towards the desired location of the action and / or act otherwise in a sustained release manner of the active ingredient.

Le procédé selon la présente invention est appli-35 cable à la préparation, sous une forme convenant à l'ad- / i 7 ministration immédiate, de compositions comprenant une large gamme de matières biologiquement actives et/ou de Γ matières intéressantes pour le traitement ou les soins du corps humain ou animal. De manière typique, on peut 5 mettre le procédé suivant l’invention en oeuvre en vue de la préparation de compositions comprenant des composés , thérapeutiquement actifs, y compris ceux utilisés pour les traitements appliqués en médecine vétérinaire, tout » aussi bien que des réactifs à activité biologique, des 10 matières actives du point de vue cosmétique, des composés possédant une valeur nutritive et d’autres substances employées pour traiter ou soigner le corps humain ou animal.The process according to the present invention is applicable to the preparation, in a form suitable for immediate administration, of compositions comprising a wide range of biologically active materials and / or of materials of interest for treatment. or the care of the human or animal body. Typically, the process according to the invention can be carried out for the preparation of compositions comprising therapeutically active compounds, including those used for treatments applied in veterinary medicine, as well as reagents to biological activity, cosmetically active materials, compounds of nutritional value and other substances used to treat or care for the human or animal body.

Les matières à activité cosmétique appropriées 15 comprennent des produits destinés aux soins de la peau et aux soins capillaires, par exemple des agents humectants, des agents tannants artificiels (éventuellement en Ç. association à des colorants), des agents qui s’opposent aux brûlures solaires^solubles dans l’eau, des antidia-20 phorétiques, des déodorants, des astringeants et des produits de rafraîchissement, de tonification, de cicatrisation, de kératolyse et de dépilation, des eaux par- _______fumées, des extraits de tissus animaux ou végétaux, des colorants capillaires solubles dans l’eau, des agents 25 antipellicules, des agents antiséborrhée , des agents .·.........oxydants, par exemple des agents de blanchiment et des agents réducteurs.Materials with suitable cosmetic activity include products intended for skin care and hair care, for example humectants, artificial tanning agents (possibly in combination with dyes), agents which prevent burns. water-soluble sunscreens, anti-phoretics, deodorants, astringants and refreshments, toning, scarring, keratolysis and depilation, water fumes, animal or plant extracts , water-soluble hair dyes, dandruff agents, antiseborrhea agents, oxidizing agents, eg bleaches and reducing agents.

1 Les composés à activité thérapeutique que l’on peut mentionner comprennent les vitamines, les stéroïdes, les hor-30 mones, les peptides actifs, les enzymes, les vaccins, les agents * anti-inflammatoires, les antibiotiques et les bactéricides.1 Therapeutically active compounds that may be mentioned include vitamins, steroids, hormones, active peptides, enzymes, vaccines, anti-inflammatory agents *, antibiotics and bactericides.

Cependant, le procédé suivant la présente invention est tout particulièrement applicable à l’administration de composés thérapeutiquement actifs utilisés en thérapie 35 par inhalation, comme des bronchodilatateurs et des λ composés anti-asthme, comme aussi des agents antitumoraux.However, the method according to the present invention is particularly applicable to the administration of therapeutically active compounds used in inhalation therapy, such as bronchodilators and anti-asthma compounds, as also anti-tumor agents.

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De "tels composés, inclus dans ou avec le véhicule ou support liposomique, sont capables de pénétrer dans 1*arbre bronchique, permettant ainsi de modifier avantageusement l'efficacité du traitement thérapeutique. De manière » 5 similaire, pour le traitement de plaies cutanées ou d'autres traitements dermatologiques, ou pour un traite-* ment cosmétique, on peut utiliser le véhicule ou support liposomique en vue de produire (de manière bénéfique) un effet modifié, par exemple un effet de libération soute-10 nue, permettant ainsi de maintenir un niveau de traitement particulier pendant une plus longue période de temps.Such compounds, included in or with the liposomal vehicle or carrier, are capable of penetrating the bronchial tree, thereby advantageously modifying the efficacy of the therapeutic treatment. Similarly, for the treatment of skin wounds or other dermatological treatments, or for a cosmetic treatment, the liposomal vehicle or support can be used in order to produce (in a beneficial manner) a modified effect, for example a bare-hold release effect, thus making it possible to maintain a particular level of treatment for a longer period of time.

Conformément à ce qui précède et à titre d'exemple uniquement, on peut mentionner les composés spécifiques et les modes d'administration qui suivent : 15In accordance with the above and by way of example only, the following specific compounds and modes of administration may be mentioned:

Composé actif . Classe de Mode d’adminis- __composé__tration_Active compound. Admin Mode Class - __composed__tration_

Stanozolol Stéroïde anaboUque TopiqueStanozolol Anabolic Steroid Topical

Hydrocortisone (et Stéroïde anti-in- Topique ses esters) flammatoireHydrocortisone (and anti-topical steroid its esters) flammatory

Betaméthasone (et Stéroïde anti-in- Topique 20 Ses esters, e.g. son flammatoire valérate)Betamethasone (and anti-topical steroid 20 Its esters, e.g. its flammatory valerate)

Bitoltérol (et ses Catécholamine bron- Inhalation esters e.g. son mé- chodilatateur " sylate)____ 25 Salbutamol Catécholamine bron- Inhalation chodilatateurBitolterol (and its catecholamine bron- Inhalation esters e.g. its mechodilator "sylate) ____ 25 Salbutamol Catecholamine bron- Inhalation chodilator

Théophylline Xanthène broncho- Inhalation dilatateurTheophylline Xanthene broncho- Inhalation dilator

Chromoglycate de Anti-asthme non Inhalation * 30 sodium stéroïdique n-Acétylmuramyl-1- Agent activant ma- Inhalation/ alanyl-d-isogluta- crophage (dipeptide intranasale mine (dipeptide ad- anti-tumoral) juvant) 55 Propranolol Agent B-bloqueur et Intravaginal contraceptif i I , 9Non-Inhalation Anti-Asthma Chromoglycate * 30 steroid sodium n-Acetylmuramyl-1- Activating agent ma- Inhalation / alanyl-d-isogluta- crophage (intranasal dipeptide mine (anti-tumor dipeptide) juvenile) 55 Propranolol B-blocking agent and Intravaginal contraceptive i I, 9

Bien entendu, il sera parfaitement compris des ~ spécialistes de la technique que l’on peut mettre en ^ oeuvre une très large gamme d’autres matières actives, i comme aussi d’autres modes d’administration. Par exemple, 5 des compositions produites par mise en oeuvre du procédé suivant la présente invention et contenant des matières * actives appropriées, pourraient être administrées directement, c'est-à-dire appliquées à l’oeil ou même ad- * ministrées par la voie intraveineuse.Of course, it will be perfectly understood by those skilled in the art that a very wide range of other active ingredients can be used, as well as other modes of administration. For example, compositions produced by carrying out the process according to the present invention and containing suitable active ingredients could be administered directly, i.e. applied to the eye or even administered by the intravenously.

10 Au surplus, on peut faire mention de matières à activité biologique qui peuvent également être thérapeutiquement actives, comme des vaccins, ou d'autres matières à activité biologique intéressante , comme des réactifs, tels que des antigènes et/ou des anticorps, par exemple 15 l'IgG anti-lapin. Les réactifs de cette nature peuvent être intéressants comme marqueurs, plus particulièrement pour tester des échantillons de sang, typiquement en présence ou en l'absence de maladies. La matière liposomique produite conformément à la présente invention peut être 20 une substance qui est chargée positivement ou négativement ou qui est neutre. La matière comprend une substance lipidique particulaire, existant en dispersion ou en sus-pension aqueuse et peut inclure une “ou plusieurs autres matières actives. Au surplus, la matière lipidique peut 25 se présenter sous la forme de bi-couches lipidiques uni-f lamellaires et/ou multilamellaires qui peuvent entraîner ou véhiculer en association avec elles, n’importe quelle autre matière active précitée.In addition, mention may be made of materials with biological activity which may also be therapeutically active, such as vaccines, or other materials with biological activity of interest, such as reagents, such as antigens and / or antibodies, for example. 15 anti-rabbit IgG. Reagents of this nature may be of interest as markers, more particularly for testing blood samples, typically in the presence or absence of disease. The liposomal material produced in accordance with the present invention may be a substance which is positively or negatively charged or which is neutral. The material comprises a particulate lipid substance, existing in aqueous dispersion or suspension and may include one or more other active ingredients. In addition, the lipid material can be in the form of uni-lamellar and / or multilamellar lipid bilayers which can cause or convey, in association with them, any other aforementioned active material.

La matière liposomique comprend, de manière typique, 30 un phospholipide et est, de préférence, un phospholipide qui est constitué par une phosphatidyl choline, par exemple la dipalmitoyl phosphatidyl choline, telle quelle ou sous la forme de lécithine; une phosphatidyl éthanol-amine; ou une phosphatidyl sérine. La matière liposomique 35 peut être formée à partir d'un phospholipide seul ou en- jj semble avec du cholestérol et/ou au moins un composé qui fl t 10 ί , est susceptible de conférer une charge à la matière liposomique. Ainsi, par exemple, une charge peut être C conférée à la matière liposomique en utilisant du dicétyl phosphate ou de l’acide phosphatidique, qui peut donner 5 une matière lipidique négativement chargée, ou de la stéarylamine qui peut donner une matière lipidique positi-' vement chargée.The liposomal material typically comprises a phospholipid and is preferably a phospholipid which is constituted by a phosphatidyl choline, for example dipalmitoyl phosphatidyl choline, as such or in the form of lecithin; a phosphatidyl ethanol-amine; or a phosphatidyl serine. The liposomal material can be formed from a phospholipid alone or together with cholesterol and / or at least one compound which is 10 ί capable of imparting a charge to the liposomal material. Thus, for example, a charge can be imparted to the liposomal material using diketyl phosphate or phosphatidic acid, which can give a negatively charged lipid material, or stearyline which can give a positive lipid material. highly charged.

L’utilisation des matières susmentionnées ainsi que leurs proportions, comme aussi le très large choix de 10 matières et les variations des proportions que l’on peut mettre en oeuvre, sont bien connus des spécialistes de la technique. Cependant, à titre d’exemple uniquement, selon une forme de réalisation préférée suivant la présente invention, le second constituant peut comprendre 15 un phospholipide constitué d'une phosphatidyl choline et de cholestérol, typiquement en des proportions molaires relatives d'environ 8 : à partir d'environ 1 à environ 2, par exemple environ 8,5 : 1.The use of the abovementioned materials as well as their proportions, as well as the very wide choice of 10 materials and the variations in the proportions which can be used, are well known to those skilled in the art. However, by way of example only, according to a preferred embodiment according to the present invention, the second component may comprise a phospholipid consisting of a phosphatidyl choline and cholesterol, typically in relative molar proportions of about 8: from about 1 to about 2, for example about 8.5: 1.

Selon une autre forme de réalisation préférée sui-20 vant la présente invention, le second constituant peut comprendre un phospholipide constitué d'une phosphatidyl choline, de cholestérol et de dicéthyl phosphate, typiquement en-des proportions molaires relatives d'environ 8 : à partir d'environ 1 à environ 2 : à partir d'environ 25 1 a environ 0,05, par exemple environ 8,5:1 : à partir d'environ 0,7 à environ 0,07.According to another preferred embodiment according to the present invention, the second component may comprise a phospholipid consisting of a phosphatidyl choline, cholesterol and dicethyl phosphate, typically in relative molar proportions of approximately 8: from from about 1 to about 2: from about 25 1 to about 0.05, for example about 8.5: 1: from about 0.7 to about 0.07.

Selon une autre forme de réalisation préférée suivant la présente invention, le second constituant peut comprendre un phospholipide constitué d'une phos-30 phatidyl choline, de cholestérol et d'acide phosphati- dique, typiquement en des proportions molaires relatives d'environ 8 : à partir d’environ 1 à environ 2 : à partir d’environ 1 à environ 0,01, par exemple environ 8,5:1 : environ 0,1.According to another preferred embodiment according to the present invention, the second component can comprise a phospholipid consisting of a phos-phatidyl choline, cholesterol and phosphatidic acid, typically in relative molar proportions of approximately 8: from approximately 1 to approximately 2: from approximately 1 to approximately 0.01, for example approximately 8.5: 1: approximately 0.1.

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Selon encore une autre forme de réalisation préfé-rée suivant la présente invention, le second constituant peut comprendre un phospholipide constitué d'une phospha-* ticfyl— choline , de cholestérol et de stéarylamine, 5 typiquement en des proportions molaires relatives d’environ 8 : à partir d'environ 1 à environ 2 : à partir d’environ à environ 0,05» par exemple environ 8,5 : 1 : à environ 0,06.According to yet another preferred embodiment according to the present invention, the second component may comprise a phospholipid consisting of a phospha- * ticfylcholine, cholesterol and stearylamine, typically in relative molar proportions of about 8 : from about 1 to about 2: from about to about 0.05 "for example about 8.5: 1: to about 0.06.

« · D'autre part, le second constituant peut aussi 10 comprendre, par exemple : un mélange d'une phosphatidyl choline, par exemple la lécithine et de l'acide phosphatidique, par exemple en un rapport d'environ 60 : à environ 1; ou un mélange d'une phosphatidyl choline, par exemple 15 la lécithine et de dicétyl phosphate, par exemple en un rapport d'environ 15 : à environ 1."On the other hand, the second component may also include, for example: a mixture of a phosphatidyl choline, for example lecithin and phosphatidic acid, for example in a ratio of about 60: to about 1 ; or a mixture of a phosphatidyl choline, for example lecithin and diketyl phosphate, for example in a ratio of about 15: to about 1.

^ La matière liposomique aqueuse produite conformé ment à la présente invention doit, de préférence, posséder un pH dont la valeur se situe dans la gamme phy-20 siologique et, par conséquent, de préférence, dans la gamme d’environ 6,8 à environ 7»4, plus avantageusement d’environ 7 à environ 7»4. A cette fin, elle peut également contenir un tampon ou un système de tamponnement, en une quantité appropriée à l’établissement et au main-25 tien de la valeur souhaitée du pH et, à cette fin, convient parfaitement un tampon au phosphate qui peut comprendre, de manière typique, du phosphate dihydrogéné de sodium et ί du phosphate hydrogéné disodique. Au surplus, un tel tampon peut de préférence être inclus dans le premier ~ 50 constituant aqueux. Cependant, dans certaines circons tances, par exemple lorsque la matière active comprend un réactif, tel qu’un marqueur d'essai, le pH peut se situer en dehors des limites physiologiques.The aqueous liposomal material produced in accordance with the present invention should preferably have a pH whose value is in the physiological range and therefore preferably in the range of about 6.8 to about 7 ”4, more preferably about 7 to about 7” 4. For this purpose, it can also contain a buffer or buffering system, in an amount suitable for establishing and maintaining the desired pH value, and for this purpose is perfectly suitable a phosphate buffer which can typically comprise dihydrogenated sodium phosphate and ί disodium hydrogenated phosphate. In addition, such a buffer can preferably be included in the first ~ 50 aqueous component. However, in certain circumstances, for example when the active ingredient comprises a reagent, such as a test marker, the pH may be outside physiological limits.

ni // 12 fl *ni // 12 fl *

En fonction des ingrédients du second constituant, il peut être nécessaire ou préférable d’inclure un véhicule liquide physiologiquement acceptable, de préférence, un liquide dans lequel à la fois la matière lipidique et 5 n’importe quel autre matière active sont solubles. A ce point de vue, les véhicules liquides préférés sont des solvants organiques relativement volatils, par exemple * l'éhtanol, le chloroforme (sujet à des règles d'emploi 10 locales), l'éther et l’alcool isopropylique.Depending on the ingredients of the second constituent, it may be necessary or preferable to include a physiologically acceptable liquid vehicle, preferably a liquid in which both the lipid material and any other active material are soluble. From this point of view, the preferred liquid vehicles are relatively volatile organic solvents, for example * ethanol, chloroform (subject to local rules of use), ether and isopropyl alcohol.

Au surplus, le premier constituant peut également comprendre un véhicule liquide physiologiquement acceptable, outre l’eau. Un tel véhicule peut être un solvant organique, de préférence^ un solvant organique miscible à 15 l'eau, volatil, dont l’éthanol constitue un exemple préféré.In addition, the first component can also comprise a physiologically acceptable liquid vehicle, in addition to water. Such a vehicle can be an organic solvent, preferably a volatile water-miscible organic solvent, of which ethanol is a preferred example.

Selon une forme de réalisation préférée de l’inven-/ tion, on mélange les premier et second constituants sous 5 pression par l'emploi d’un ou plusieurs propulseurs pour aérosols, qui peuvent être un ingrédient de l'un ou de 20 deux constituants et/ou être fournis séparément. De préférence cependant, un propulseur est un ingrédient du second constituant et la pression est appliquée au pre-inier constituant par l'intermédiaire d’un propulseur qui en est maintenu séparé.According to a preferred embodiment of the invention, the first and second constituents are mixed under pressure by the use of one or more aerosol propellants, which may be an ingredient of one or two components and / or be supplied separately. Preferably, however, a propellant is an ingredient of the second component and pressure is applied to the pre-inier component via a propellant which is kept separate therefrom.

25 De manière typique, le propulseur ou chaque pro pulseur peut être constitué d’un hydrocarbure ou un hydrocarbure halogéné ou un mélange de tels hydrocarbures, i A titre d'exemples de propulseurs de ce genre, on peut citer le propane, le butane, l'éther diméthylique et le 30 propulseur 11 ( dichlorofluorométhane ), bien que le di-chlorodifluorométhane ou le dichlorotétrafluoréthane ou leurs mélanges soient préférés. Le propulseur peut 01 Û if . /v/f I tTypically, the propellant or each propellant may consist of a hydrocarbon or a halogenated hydrocarbon or a mixture of such hydrocarbons, as examples of propellants of this kind, mention may be made of propane, butane, dimethyl ether and propellant 11 (dichlorofluoromethane), although dichlorodifluoromethane or dichlorotetrafluoroethane or mixtures thereof are preferred. The propellant can 01 Û if. / v / f I t

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I 0 être un composé considéré comme étant un propulseur à basse pression, développant des pressions allant jusqu’à environ 1,72 à environ 2,07 bars, comme un mélange 20 : 80 p/p de dichlorodifluorométhane et de dichlorotétrafluor-5 éthane, ou bien le propulseur peut être un propulseur à pression relativement élevée, développant des pressions allant jusqu’à environ 4,83 bars, comme un mélange 80 : 20 p/p de dichlorodifluorométhane et de dichlorotétrafluoro-méthane. Il faut bien évidemment comprendre que les taux 10 de dosage relatifs^comme entre les constituantSj peuvent être réglés et être ameéns à varier, entre autres, en fonction de la pression de propulseur utilisée pour chaque constituant.I 0 be a compound considered to be a low pressure propellant, developing pressures up to approximately 1.72 to approximately 2.07 bars, as a 20:80 w / w mixture of dichlorodifluoromethane and 5-dichlorotetrafluorethane, or the propellant may be a relatively high pressure propellant, developing pressures up to about 4.83 bar, such as an 80:20 w / w mixture of dichlorodifluoromethane and dichlorotetrafluoro-methane. It should of course be understood that the relative dosage rates, such as between the components, can be adjusted and be subject to variation, inter alia, depending on the propellant pressure used for each component.

15 Dans le procédé conforme à la présente invention, il est préférable que les premier et second constituants soient chacun amenés isolément par rapport à l’autre, que chacun des constituants soit amené en doses distinctes réglées dans une chambre de mélange sous leur 20 propre pression de propulseur et que le mélange ainsi engendré soit débité à partir de la chambre de mélange à travers un orifice sous la pression provenant d’au moins l’un des propulseurs précités. De préférence éga-__ lement, le premier et le second constituants sont mélangés 25 en manière telle que l’on débite une dose mesurée de n’importe quelle matière active précitée. î Plus avantageusement encore, le second constituant est amené sous forme de dose mesurée à une dose mesurée du premier, constituant et est, de préférence, adg en 30 contact avec au moins la plus grosse part du premier constituant en de multiples endroits dans ladite dose mesurée, ainsi, plus spécialement, le procédé selon l'invention se caractérise des plus avantageusement par la suite des étapes opératoires qui suivent, à savoir; r · 14 le premier constituant est amené dans une chambre de mélange en une quantité dosée; une quantité dosée du second constituant est amenée * dans la chambre de mélange de manière à engendrer un mé-5 lange turbulent de deux constituants, de préférence en , amenant le second constituant dans la chambre de mélange en une multiplicité d’endroits; et le mélange est déchargé de la chambre de mélange. Commodément, la quantité dosée du premier consti-10 tuant est réglée en amenant le premier constituant dans la chambre de mélange en une quantité telle qu’elle remplisse la chambre et en choisissant le volume de la chambre de façon à obtenir la quantité dosée souhaitée du premier constituant.In the process according to the present invention, it is preferable that the first and second constituents are each brought in isolation from the other, that each of the constituents is brought in separate doses regulated in a mixing chamber under their own pressure. of propellant and that the mixture thus generated is delivered from the mixing chamber through an orifice under pressure from at least one of the aforementioned propellants. Preferably also the first and second constituents are mixed in such a way that a measured dose of any of the above-mentioned active ingredients is delivered. Even more advantageously, the second component is brought in the form of a measured dose to a measured dose of the first, component and is preferably adg in contact with at least the largest part of the first component in multiple locations in said dose. measured, thus, more specifically, the method according to the invention is most advantageously characterized by the following operational steps, namely; r · 14 the first component is brought into a mixing chamber in a metered amount; a metered amount of the second component is brought * into the mixing chamber so as to generate a turbulent mixture of two components, preferably by bringing the second component into the mixing chamber in a multiplicity of places; and the mixture is discharged from the mixing chamber. Conveniently, the metered quantity of the first constituent is killed by bringing the first constituent into the mixing chamber in an amount such that it fills the chamber and by choosing the volume of the chamber so as to obtain the desired metered quantity of first constituent.

15 La présente invention concerne également un embal lage à utiliser pour la préparation d’un aérosol liposo-^ inique, lequel emballage comprend au moins une première et une second chambres, une chambre contenant un premier constituant comprenant de l’eau, qui peut être une ma-20 tière aqueuse tamponnée et l'autre chambre contenant un second constituant comprenant une matière lipidique, l'un des-constituants incluant facultativement, de préférence en suspension ou en solution dans ce constituant, ~une matière active précitée, par exemple, pour l’utili- 25 sation en vue du traitement ou des soins du corps humain ou animal et l’une des ou les deux chambres, et/ou un troisième chambre, comprenant une matière servant de propul- it seur, l’emballage étant pourvu d'un agencement pour débiter; sous la forme d'un spray, un mélange des premiers 30 et second constituants débités depuis leurs chambres respectives, sous l'effet de la pression développée par. la ou les matières servant de propulseurs.The present invention also relates to a packaging to be used for the preparation of a liposonic aerosol, which packaging comprises at least first and second chambers, a chamber containing a first component comprising water, which can be an aqueous buffered substance and the other chamber containing a second constituent comprising a lipid material, one of the constituents optionally including, preferably in suspension or in solution in this constituent, ~ an abovementioned active material, for example, for use in the treatment or care of the human or animal body and one or both chambers, and / or a third chamber, comprising a material serving as propellant, the package being provided with an arrangement for debiting; in the form of a spray, a mixture of the first 30 and second constituents delivered from their respective chambers, under the effect of the pressure developed by. the substance or substances used as propellants.

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1515

De préférence, l'agencement distributeur ou de débit est tel que le rapport de mélange des constituants soit réglé (c'est-à-dire amené à un niveau mesuré ou dans une étroite plage mesurée de rapports), si bien que 5 la dose mesurée souhaitée de n'importe quelle matière active précitée puisse être débitée.Preferably, the distributor or flow arrangement is such that the mixing ratio of the constituents is adjusted (i.e. brought to a measured level or within a narrow measured range of ratios), so that the dose desired measurement of any of the above active material can be charged.

Une fois encore, il est préférable que la matière active soit en suspension ou en solution dans le second constituant comprenant une matière lipidique et, plus 10 avantageusement, le composé actif doit être en solution, afin d'éviter une décantation ou un dépôt. En général, la matière active, le premier et le second constituant et le propulseur sont tels que décrits plus haut à.propos du procédé suivant l’invention.Once again, it is preferable that the active material is in suspension or in solution in the second component comprising a lipid material and, more advantageously, the active compound must be in solution, in order to avoid decantation or deposition. In general, the active material, the first and the second constituent and the propellant are as described above à.propos of the process according to the invention.

15 De préférence, l'emballage conforme à la présente invention comprend un orifice de décharge et une chambre de mélange et un dispositif à soupape pour permettre aux premier et second constituants précités d'être débités depuis leurs chambres respectives sous l'effet de la pres-20 sion développée par un ou plusieurs propulseurs dans la chambre de mélange et de régler2e rapport des constituants (c'est-à-dire τι un niveau mesuré ou dans une étroite plage mesurée de rapports), de façon que la dose mesurée souhaitée de mélange, c'est-à-dire la matière active plus £5 ïè véhicule ou support liposomique ou le liposome per se, puisse être débitée à travers l'orifice de décharge.Preferably, the packaging according to the present invention comprises a discharge orifice and a mixing chamber and a valve device to allow the aforementioned first and second constituents to be delivered from their respective chambers under the effect of the pres -20 sion developed by one or more propellants in the mixing chamber and adjust2e ratio of the constituents (that is to say τι a measured level or in a narrow measured range of ratios), so that the desired measured dose of mixture, ie the active ingredient plus £ 5 the liposomal vehicle or carrier or the liposome per se, can be delivered through the discharge port.

^ De préférence, ledit dispositif à soupape comprend un agencement (à savoir deux valves ou soupapes) qui permettent, en série, de débiter le premier constituant dans 30 la chambre de mélange de façon à remplir la chambre, de débiter une dose mesurée du second constituant dans la chambre de mélange, de manière à engendrer un mélange turbulent des deux constituants et de décharger le mélange /! à travers l'orifice de décharge. De préférence également, fil 35 le dispositif à soupape comprend un agencement pour per- * * -¾ 16 ’ « mettre de débiter le second constituant dans la chambre de mélange à plusieurs endroits dans la chambre.Preferably, said valve device comprises an arrangement (namely two valves or valves) which make it possible, in series, to deliver the first component into the mixing chamber so as to fill the chamber, to deliver a measured dose of the second constituent in the mixing chamber, so as to generate a turbulent mixture of the two constituents and to discharge the mixture /! through the discharge port. Also preferably, wire 35 the valve device includes an arrangement for permitting the delivery of the second component into the mixing chamber at several locations in the chamber.

Si on le souhaite, des moyens de mélange supplémentaires peuvent également être prévus, que ce soit en 5 amont ou en aval de la chambre de mélange, pour créer des conditions de mélange intime et/ou turbulent supplémentaires, de façon à promouvoir la formation liposomique préalablement à la décharge à travers 1*orifice de décharge. Ainsi, par exemple, l'agencement de l'ori-"ÎO fice de décharge peut, lui-même, comprendre une chambre de mélange secondaire dans laquelle on amène le mélange de façon à créer des conditions de turbulence , par exemple, en l'introduisant tangentiellement dans la chambre par l’intermédiaire d'une ou plusieurs entées avant la > 'décharge.' 15 Dans l'emballage suivant la présente invention, la première chambre peut être un premier sac ou boîte pour aérosol, la seconde chambre peut être un second sac ou boîte pour aérosol et les boîtes ou autres premières et secondes chambres fermées peuvent être agencées : 20 bout à bout avec dispositif à soupape respectif et la chambre de mélange disposés, entre ou au-dessus des boîtes ou autres chambres; côte à côte avec le dispositif à soupape respectif £ula_chambre ch mélange disposés entre ou au-dessus des 25 boîtes ou autres chambres; ou la première dans la seconde (ou vice-versa) avec le dispositif à soupape et la chambre de mélange disposés dans ou au-dessus de la boîte ou autre chambre externe. Des récipients pour aérosols utilisant ce type 30 d’agencement sont décrits par exemple, dans les mémoires descriptifs des brevets des E.U.A. N® 3 325 056 et 3 326 416.If desired, additional mixing means can also be provided, either upstream or downstream of the mixing chamber, to create additional intimate and / or turbulent mixing conditions, so as to promote liposomal formation prior to discharge through the discharge port. Thus, for example, the arrangement of the discharge orifice may itself include a secondary mixing chamber into which the mixture is brought so as to create conditions of turbulence, for example in l 'introducing tangentially into the chamber via one or more inlets before>' discharge. ' In the packaging according to the present invention, the first chamber can be a first bag or box for aerosol, the second chamber can be a second bag or box for aerosol and the boxes or other first and second closed chambers can be arranged: end to end with respective valve device and mixing chamber arranged between or above the boxes or other chambers; side by side with the respective valve device £ ula_chambre ch mixture arranged between or above the boxes or other chambers; or the first in the second (or vice versa) with the valve device and the mixing chamber arranged in or above the can or other external chamber. Aerosol containers using this type of arrangement are described for example in the descriptive memories of the patents of EUA N® 3,325,056 and 3,326,416.

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Dans l’emballage suivant la présente invention, peut être prévu un boîtier externe, par exemple une boîte ÎSi en fer blanc, dans lequel les chambres fermées peuvent * être disposées et à travers lequel le dispositif à soupape 5 peut être mis en fonctionnement. Dans un tel emballage, il est préférable que le second constituant inclue un propulseur et soit disposé dans une chambre fermée interne à parois rigides, le second constituant soit disposé dans une chambre fermée externe à parois souples, 10 enveloppant de préférence la chambre interne, le boîtier soit un boîtier à parois rigides et l’espace entre la chambre fermée externe et le boîtier enveloppant inclue un propulseur. Un agencement particulièrement préféré d’un emballage à deux constituants pour parvenir à ces 15 caractéristiques est celui décrit dans la demande de brevet européen N° 84-10-4589.1 »basée sur la demande de c brevet suisse 4450/83, déposée le 16 août 1983. Cependant, si on le souhaite, l’agencement de la chambre interne peut être le même que l’agencement de la chambre externe, 20 c'est-à-dire un agencement conformément auquel la chambre interne est réalisée sous forme de chambre à parois souples, entourée d’une chambre à parois rigides contenant un propulseur.In the packaging according to the present invention, an external casing can be provided, for example a tin box, in which the closed chambers can * be arranged and through which the valve device 5 can be operated. In such packaging, it is preferable that the second component includes a propellant and is arranged in an internal closed chamber with rigid walls, the second component is arranged in an external closed chamber with flexible walls, preferably enveloping the internal chamber, the case is a case with rigid walls and the space between the external closed chamber and the enveloping case includes a propellant. A particularly preferred arrangement of a two-component package for achieving these characteristics is that described in European patent application No. 84-10-4589.1 "based on Swiss patent application 4450/83, filed August 16 1983. However, if desired, the arrangement of the internal chamber can be the same as the arrangement of the external chamber, i.e. an arrangement in accordance with which the internal chamber is formed as a chamber. with flexible walls, surrounded by a chamber with rigid walls containing a propellant.

__Ainsi qu’on le comprendra parfaitement à la lecture 25 de la description qui suit, lors de la mise en pratique de la présente invention, la dose de la matière active ; débitée au cours de chaque fonctionnement de l’emballage / » » 18 peut être amenée à varier fortement en fonction de toute une série de facteurs, parmi lesquels on peut plus particulièrement citer : 1. la concentration de la matière active dans 5 le premier et/ou le second constituants; et 2. le rapport de mélange des premier et second constituants.__As will be perfectly understood on reading the following description, when practicing the present invention, the dose of the active ingredient; charged during each operation of the packaging / »» 18 may vary greatly depending on a whole series of factors, among which we can more particularly cite: 1. the concentration of the active ingredient in the first and / or the second constituents; and 2. the mixing ratio of the first and second components.

Dans le cas du rapport de mélange des constituants, celui-ci dépend de l’ampleur des quantités dosées du pre-10 mier et du second constituants débités pour le mélange, qui dépendra son tornades dispositifs de mélange et/ou à soupape particuliers mis en oeuvre. Dans 3e cas particuiier cfe l'agencement spécialement préféré mentionné plus haut, la chambre de mélange possède, de préférence, un volume ^ d'environ 50 à environ 100, par exemple 75 à 100, microlitres et la soupape qui règle la dose du second constituant en débite, de préférence, d'environ 50 à environ 100 microlitres dans la chambre de mélange par mise en fonctionnement. Dans le cas du calibre des liposomest \ 20 ia demanderesse suppose que celui-ci est réglé principa- | lement par la pression engendrée par le propulseur ouIn the case of the mixing ratio of the constituents, this depends on the magnitude of the metered quantities of the pre-10 mier and of the second constituents delivered for the mixing, which will depend on its particular tornado mixing and / or valve devices artwork. In the third particular case, see the especially preferred arrangement mentioned above, the mixing chamber preferably has a volume of about 50 to about 100, for example 75 to 100 microliters, and the valve which regulates the dose of the second. constituting a flow rate, preferably from about 50 to about 100 microliters in the mixing chamber by operation. In the case of the caliber of liposomest \ 20 the plaintiff assumes that it is mainly regulated | by the pressure generated by the propellant or

Tes'propulseurs et/oü par la viscosité des constituants.Your propellants and / or by the viscosity of the constituents.

De manière générale, plus les constituants sont vigoureusement mélangés, plus faible sera le calibre des 25 liposomes. Le calibre de l'orifice de décharge ou de distribution cfe 3a soupape que l'on utilise pour débiter I i 3es constituants mélangés peut également affecter 3e calibre des liposomes produits et, de préférence , un tel orifice de décharge possède un calibre d'environ 30 350 à environ 450 microns.Generally, the more vigorously the components are mixed, the lower the size of the liposomes. The size of the discharge or distribution orifice of the 3a valve which is used to deliver the mixed constituents can also affect the 3rd size of the liposomes produced and, preferably, such a discharge orifice has a size of approximately 30,350 to about 450 microns.

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t t v 19 D’autre part, une fois que les paramètres susmentionnés ont été fixés, on peut aisément assurer la proportion de -s- dosage qui en résulte, tout comme on peut déterminer le degré d’incorporation de n’importe quelle matière active, 5 ainsi que le calibre des liposomes produits.ttv 19 On the other hand, once the aforementioned parameters have been set, it is easy to ensure the proportion of -s- dosage which results therefrom, just as one can determine the degree of incorporation of any active material, 5 as well as the size of the liposomes produced.

Ainsi que les personnes familières avec la mise en composition de matières actives avec des substances • servant de supports ou de véhicules le comprendront parfaitement, conformément à la présente invention, la 10 proportion d’incorporation de la matière active dans le véhicule ou support liposomique peut avoir un effet prononcé sur le niveau de la dose de base choisi pour la composition globale. Par conséquent, un tel niveau de dose de base sera une question de choix de composi-15 tion ou de formulation dépendant des critères envisagés auxquels une quelconque composition doit répondre.As people familiar with the composition of active materials with substances serving as carriers or vehicles will understand it perfectly, in accordance with the present invention, the proportion of incorporation of the active material in the liposomal vehicle or carrier can have a pronounced effect on the level of the basic dose chosen for the overall composition. Consequently, such a basic dose level will be a question of choice of composition or formulation depending on the criteria envisaged with which any composition must meet.

* La présente invention concerne, au surplus, une matière liposomique ou une composition liposomique, lorsqu'elle est préparée sous la forme d’un spray, par 20 mise en oeuvre d'un procédé tel que décrit dans le présent mémoire ou par l'utilisation d’un emballage tel que •-décrit dans le présent mémoire.* The present invention relates, moreover, to a liposomal material or a liposomal composition, when it is prepared in the form of a spray, by carrying out a process as described in the present specification or by use of packaging such as • -described in this memo.

Les exemples qui suivent illustrent le procédé et l'emballage pour aérosols suivant la présente invention.The following examples illustrate the process and packaging for aerosols according to the present invention.

’ Dans les exemples spécifiques donnés, la plupart des compositions comprennent du molybdate d'ammonium àti- * tre (h matière dense sur 3e plan ces électrons, qji fut simplement incorporé à titre ch marqueur pour faciliter 3a détection des liposomes et 3a mesure ch leur diamètre en utilisant 30 un microscope électronique. Les personnes familières avec les compositions pharmaceutiques comprendront bien évidemment que le molybdate d'ammonium qui est modérément toxique, ne peut faire partie d'une composition de mise en oeuvre réelle destinée à être administrée à un / p jf 35 patient. Ainsi que le permet d’établir une comparaison, // par exemple de l’exemple 19 et de l'exemple 20 qui sui- 20 vent, l’omission du molybdate d’ammonium n’a pas d'effet nuisible sur le taux d’incorporation d'ingrédient actif et, en fait, le taux d’incorporation est même légèrement supérieur dans l'exemple 20. Par conséquent, dans n'im-5 porte lesquelles des compositions illustrées dans les exemples, le marqueur au molybdate peut être omis sans effet préjudiciable et les résultats indiqués peuvent . être obtenus en son absence.In the specific examples given, most of the compositions comprise ammonium molybdate in title (with dense material on the third plane these electrons, which was simply incorporated as a marker to facilitate the detection of the liposomes and the measurement of their diameter using an electron microscope 30. Those familiar with pharmaceutical compositions will understand, of course, that ammonium molybdate which is moderately toxic, cannot be part of an actual processing composition intended for administration to a / p As a comparison, for example Example 19 and Example 20 below, the omission of ammonium molybdate has no effect. detrimental to the rate of incorporation of active ingredient and, in fact, the rate of incorporation is even slightly higher in Example 20. Therefore, in any one of the compositions illustrated in the examples, the marker pen with molybdate can be omitted without detrimental effect and the results shown may. be obtained in his absence.

De même, bien que diverses proportions d'ingrédients 10 actifs soient indiquées dans les exemples et bien que celles-ci, à leur tour, donnent diverses proportions d’ingrédients actifs libres et incorporés par fonctionnement, ici encore, le spécialiste de ce genre de compositions comprendra facilement que la proportion de la dose et la 15 nature de la composition choisies pour n'importe quel ^ emballage de mise en oeuvre particulier dépendront du régime de dosage particulier auquel on souhaite parvenir, comme aussi de n'importe quel équilibre nécessaire ou souhaité entre une matière active non incorporée et incor-20 porée.Likewise, although various proportions of active ingredients are given in the examples and although these, in turn, give various proportions of free active ingredients incorporated by operation, again, those skilled in this kind of compositions will readily understand that the proportion of the dosage and the nature of the composition chosen for any particular processing package will depend on the particular dosage regimen one wishes to achieve, as well as on any necessary balance or desired between an unincorporated and incorporated porous active ingredient.

Par exemple, en présumant qu’une personne moyenne applique en.moyenne une composition de crème sur sa peau à la dose de 2,2 mg/cm et, dans la supposition qu’un fonctionnement unique de l'aérosol ou " coup’' »-'25 couvre 25 cm— de peau, on peut établir la comparaison suivante entre les compositions illustrées et standard :For example, assuming that an average person applies a cream composition to their skin on average at a dose of 2.2 mg / cm and, assuming that the aerosol or "blow" works only once -'25 covers 25 cm of skin, the following comparison can be made between the illustrated and standard compositions:

Composition Dose appliquée (microgrammes/ __ cm2) _ 30 Crème de stanozolol (0,1 9») 2,3 Aérosol de stanozolol l'exemple 21 4,0Composition Applied dose (micrograms / __ cm2) _ 30 Stanozolol cream (0.1 9 ") 2.3 Stanozolol aerosol example 21 4.0

Crème d’hydrocortisone (1,0 %) Z3 Aérosol d’hydrocortisone cfe l'exemple 25 4,8Hydrocortisone cream (1.0%) Z3 Hydrocortisone aerosol see example 25 4.8

Crème de bêtaméthasone (0,1 %) 2,5 /7 35 Aérosol de bêtaméthasone de l’exemple 27 0,64Betamethasone cream (0.1%) 2.5 / 7 35 Betamethasone aerosol of example 27 0.64

IIII

r» λ d- ir »λ d- i

Ainsi, la matière active peut être débitée en une dose globale supérieure ou inférieure (ou même à) la dose c standard connue, de façon à obtenir toute variation sou haitée de l’effet, cette variété de l’effet étant augmen-5 tée par le degré d’incorporation choisi. De manière similaire, dans le cas de compositions destinées à l’inhalation, la dose globale peut varier en fonction de l’effet , recherché. Ainsi, par exemple, ainsi que l’exemple 31 l'illustre, le salbutamol peut être débité par mise en ^ action, effectivement sous forme de 125 microgrammes de matière à libération lente et de 125 micro gramme s de matière libre que l'on peut comparer aux 100 microgrammes par mise en action à partir d'un distributeur standard.Thus, the active ingredient can be delivered in an overall dose greater or less (or even at) the known standard dose c, so as to obtain any desired variation of the effect, this variety of the effect being increased. by the degree of incorporation chosen. Similarly, in the case of compositions intended for inhalation, the overall dose may vary depending on the desired effect. Thus, for example, as example 31 illustrates, salbutamol can be delivered by actuation, effectively in the form of 125 micrograms of slow-release material and of 125 micro grams of free material which is can compare to 100 micrograms per actuation from a standard dispenser.

Au surplus, ainsi que les exemples 29 et 30 l'illustrent ^ respectivement, la matière active peut être administrée en des doses bien supérieures ou bien inférieures par mise en action que dans le cas du distributeur standard -3r' -c’est-à-dire 933 microgrammes vis-à-vis de 200 micro-grammes (standard) dans le cas du bitoltérol de l’exemple 20 29 et 200 microgrammes vis-à-vis de 2 mg (standard) dans le cas du chromoglycate de sodium de l'exemple 30- bien que, dans les deux cas, la dose puisse être ajustée à la dose standard, en modifiant la quantité globale de matière active supportée ou véhiculée par le second ou le 25 premier constituant respectivement.Furthermore, as Examples 29 and 30 illustrate, respectively, the active ingredient can be administered in much higher or much lower doses by actuation than in the case of the standard dispenser -3r '-that is say 933 micrograms vis-à-vis 200 micro-grams (standard) in the case of bitolterol from Example 20 29 and 200 micrograms vis-à-vis 2 mg (standard) in the case of sodium chromoglycate Example 30- although, in both cases, the dose can be adjusted to the standard dose, by modifying the overall quantity of active material supported or transported by the second or the first constituent respectively.

EXEMPLE 1EXAMPLE 1

On a dissous 240 mg de lécithine d’oeuf et 28 mg de cholestérol dans 4 ml d'éthanol et on a ajouté la solution ainsi obtenue à 25 g d’un mélange 20 : 80 p/p de dichlorodifluorométhane et de dichlorotétrafluor-éthane servant de propulseur. On a ensuite enfermé hermétiquement le mélange dans un premier récipient muni d'une soupape. On a introduit 25 ml d’une solution /p5 aqueuse de phosphate de sodium 3,3 mM, pH 7,2, dans un y sac en aluminium qui fut ensuite hermétiquement enfermé 22 dans un récipient séparé équipé d’une soupape et contenant 25 g du propulseur précité. On a raccordé les " récipients par l’intermédiaire d'une chambre de mélange et chaque mise en action du mécanisme à soupape libéra 5 une faction aliquote de la solution lipidique et une fraction aliquote de la solution de phosphate dans la chambre de mélange et ensuite dans l'atmosphère interne en passant par un étroit orifice. L'aérosol ainsi obtenu . contenait des liposomes multilamellaires et unilamellaires 10 possédant un diamètre moyen de 40 nm à 1000 nm.240 mg of egg lecithin and 28 mg of cholesterol were dissolved in 4 ml of ethanol and the solution thus obtained was added to 25 g of a mixture 20: 80 w / w of dichlorodifluoromethane and dichlorotetrafluorethane serving propellant. The mixture was then sealed in a first container with a valve. 25 ml of an aqueous solution / p5 of 3.3 mM sodium phosphate, pH 7.2, were introduced into an aluminum bag which was then hermetically sealed 22 in a separate container fitted with a valve and containing 25 g of the above-mentioned propellant. The containers were connected via a mixing chamber and each actuation of the valve mechanism released an aliquot of the lipid solution and an aliquot of the phosphate solution into the mixing chamber and then into the internal atmosphere passing through a narrow orifice. The aerosol thus obtained contained multilamellar and unilamellar liposomes 10 having an average diameter of 40 nm to 1000 nm.

EXEMPLE 2EXAMPLE 2

On a répété le mode opératoire décrit à l'exemple 1, si ce n'est que le premier récipient muni d'une soupape contenait un mélange de 240 mg de lécithine d'oeuf, de 15 28 mg de cholestérol et de 4 mg d'acide phosphatidique dissous dans 4 ml d’éthanol, en même temps que 25 g d'un ^ mélange 40 : 60 p/p de dichlorodifluorométhane et de dichlorotétrafluorométhane servant de propulseur.The procedure described in Example 1 was repeated, except that the first container fitted with a valve contained a mixture of 240 mg of egg lecithin, 28 mg of cholesterol and 4 mg of phosphatidic acid dissolved in 4 ml of ethanol, together with 25 g of a mixture 40: 60 w / w of dichlorodifluoromethane and dichlorotetrafluoromethane serving as propellant.

On a pu utiliser l'agencement ainsi obtenu pour 20 produire un aérosol qui contenait des liposomes unilamellaires et multilamellaires chargés négativement avec un diamètre moyen de 40 nm à 1000 nm.The arrangement thus obtained could be used to produce an aerosol which contained negatively charged unilamellar and multilamellar liposomes with an average diameter of 40 nm to 1000 nm.

EXEMPLE 5 ____ _____ ______On a répété le mode opératoire décrit à l’exemple 25 1, à l'exception que le premier récipient muni d'une sou- - pape contenait un mélange de 240 mg de lécithine d'oeuf, de 28 mg de cholestérol et de 1,6 g de stéré-J lamine en solution dans 4 ml d'éthanol, en même temps : que 25 g d'un mélange 20 : 80 p/p de dichlorodifluoro- 30 méthane et de dichlorotétrafluoréthane servant de propulseur.EXAMPLE 5 ____ _____ ______ The procedure described in Example 25 1 was repeated, except that the first container fitted with a valve contained a mixture of 240 mg of egg lecithin, 28 mg of cholesterol and 1.6 g of stere-J laminated in solution in 4 ml of ethanol, together with: 25 g of a mixture 20: 80 w / w of dichlorodifluoromethane and dichlorotetrafluoroethane as propellant.

L'agencement ainsi obtenu put être utilisé pour produire un aérosol qui contenait des liposomes uni-. / lamellaires et multilamellaires chargés positivement hf 35 avec un diamètre moyen de 40 nm à 1000 nm.The arrangement thus obtained could be used to produce an aerosol which contained uni- liposomes. / lamellar and multilamellar positively charged hf 35 with an average diameter of 40 nm to 1000 nm.

λ yλ y

VV

23 EXEMPLE 4 _ On a répété le mode opératoire décrit à l'exemple 1, V· si ce n’est que le premier récipient muni d’une soupape contenait un mélange de 240 mg de lécithine d'oeuf et de 5 4 mg d'acide phosphatidique en solution dans 4 ml d’étha nol, en même temps que 25 g d’un mélange 20 : 80 p/p de dichlorodifluorométhane et de dichlorotétrafluoréthane * servant d’agent propulseur.23 EXAMPLE 4 The procedure described in Example 1 was repeated, except that the first container fitted with a valve contained a mixture of 240 mg of egg lecithin and 5 4 mg of phosphatidic acid in solution in 4 ml of ethanol, together with 25 g of a mixture 20: 80 w / w of dichlorodifluoromethane and dichlorotetrafluoroethane * as propellant.

L’agencement ainsi obtenu put être utilisé pour 10 produire un aérosol qui contenait des liposomes unilamel-1aires et multilamellaires chargés négativement avec un diamètre moyen de 40 nm à 1000 nm.The arrangement thus obtained could be used to produce an aerosol which contained negatively charged unilamel-1 and multilamellar liposomes with an average diameter of 40 nm to 1000 nm.

EXEMPLE 5EXAMPLE 5

On a répété le mode opératoire décrit à l’exemple 1, 15 à l’exception que le premier récipient équipé d’une sou-i pape contenait un mélange de 24 mg de dipalmitoylphos- phatidyl choline, de 2,8 mg de cholestérol, de 2 mg de dicétylphosphate et de 2 mg de bitoltérolmésylate en solution dans 4 ml d’éthanol, en même temps que 25g d’un 20 mélange 40 : 60 p/p de dichlorodifluorométhane et de dichlorotétrafluoréthane. servant de propulseur.The procedure described in Example 1 was repeated, except that the first container fitted with a pope contained a mixture of 24 mg of dipalmitoylphosphatidyl choline, 2.8 mg of cholesterol, 2 mg of diketylphosphate and 2 mg of bitolterolmesylate in solution in 4 ml of ethanol, together with 25g of a mixture 40: 60 w / w of dichlorodifluoromethane and dichlorotetrafluoroethane. serving as a propellant.

L’agencement ainsi obtenu put être utilisé pour produire un aérosol qui contenait des liposomes unilamel-— - laire-s-et multilamellaires chargés négativement avec un 25 diamètre moyen de 40 nm à 1000 nm. Au surplus, plus de 50 % du bitoltérolmésylate furent incorporés aux lipo- * somes.The arrangement thus obtained could be used to produce an aerosol which contained negatively charged unilamel-— - laire-s- and multilamellar liposomes with an average diameter of 40 nm to 1000 nm. In addition, more than 50% of the bitolterolmesylate was incorporated into the liposomes.

. 1 EXEMPLE 6. 1 EXAMPLE 6

On a répété le procédé décrit à 1’exemple 1, si ce 30 n’est que le premier récipient équipé d’une soupape contenait un mélange de 240 mg de lécithine d’oeuf, de 28 mg de cholestérol, de 2 mg de dicétylphosphate et * « ' 24 - de 20 mg de bitoltérolmésylate en solution dans 4 ml i d'éthanol, en même temps que 25 g d'un mélange 40 : 60 ;r p/p de dichlorodifluorométhane et de dichlorotétrafluor- éthane servant d'agent propulseur.The process described in Example 1 was repeated, except that the first container fitted with a valve contained a mixture of 240 mg of egg lecithin, 28 mg of cholesterol, 2 mg of diketylphosphate and * "'24 - of 20 mg of bitolterolmesylate in solution in 4 ml of ethanol, together with 25 g of a 40:60 mixture; rp / w of dichlorodifluoromethane and dichlorotetrafluoroethane as propellant .

5 L'agencement ainsi obtenu put être utilisé pour produire un aérosol qui contenait des liposomes uni-lamellaires et multilamellaires possédant un diamètre de « 40 nm à 1000 nm. En outre, plus de 50 % de bitoltérol mésylate furent incorporés aux liposomes.The arrangement thus obtained could be used to produce an aerosol which contained uni-lamellar and multilamellar liposomes having a diameter of "40 nm to 1000 nm. In addition, more than 50% of bitolterol mesylate was incorporated into the liposomes.

1° EXEMPLE 71 ° EXAMPLE 7

On a dissous 50 mg de lécithine d’oeuf dans de l'alcool éthylique (96 % BP) (BP = pharmacopée britannique) et on a amené le volume à 1 ,0 ml à 1 * aide d'alcool éthylique de façon à obtenir un constituant lipidique.50 mg of egg lecithin was dissolved in ethyl alcohol (96% BP) (BP = British Pharmacopoeia) and the volume was brought to 1.0 ml using ethyl alcohol so as to obtain a lipid constituent.

" 15 On a transféré la solution ainsi obtenue dans un réci pient en verre et on y a ensuite ajouté 7,0 g de dichlorodifluorométhane. On a alors hermétiquement fermé le récipient en verre avec une soupape mesurant des doses de 65 microlitres, associée à une chambre de mélange de 20 75 microlitres, agencée pour recevoir le constituant lipidique déchargé à travers la soupape doseuse et faisant elle-même partie d'un second système à soupape."15 The solution thus obtained was transferred to a glass container and then 7.0 g of dichlorodifluoromethane was added thereto. The glass container was then hermetically closed with a valve measuring doses of 65 microliters, associated with a 75 microliters mixing chamber, arranged to receive the lipid component discharged through the metering valve and itself forming part of a second valve system.

On a placé l'ensemble ainsi formé dans un second récipient souple (un sac tubulaire) contenant 40 ml 25 d'une solution de molybdate d’ammonium (0,5 % p/v dans de l'eau désionisée) de façon à obtenir un'constituant - aqueux, ce constituant étant en communication avec la chambre de mélange, la seconde soupape se trouvant dans sa position fermée. On a ensuite serti le second réci-30 pient dans une boite contenant 2,0 g de dichlorodifluoro-méthane servant de propulseur, en manière telle que le second système à soupape, associé au sac et à la chambre /The assembly thus formed was placed in a second flexible container (a tubular bag) containing 40 ml of an ammonium molybdate solution (0.5% w / v in deionized water) so as to obtain un'constituant - aqueous, this component being in communication with the mixing chamber, the second valve being in its closed position. The second container was then crimped into a box containing 2.0 g of dichlorodifluoro-methane serving as a propellant, such that the second valve system, associated with the bag and the chamber /

UU

25 ' I * de mélange, pût, lorsqu’il fut lui-même mis en action, - également faire fonctionner la première soupape en vue de décharger le constituant lipidique dans la chambre de mélange et a ainsi obtenir une décharge des cons-5 tituants mélangés à partir de l’ensemble à boîte d’aérosol global, par exemple de la manière décrite dans la demande de brevet suisse susmentionnée N° 4450/83.25 'I * of mixture, could, when it was itself put into action, - also operate the first valve in order to discharge the lipid constituent in the mixing chamber and thus obtain a discharge of the constituents mixed from the overall aerosol can assembly, for example as described in the aforementioned Swiss patent application No. 4450/83.

I ' On a ensuite équipé le second système à soupape d'un i bouton d’actionnement standard avec un orifice de 450 10 microns.The second valve system was then fitted with a standard actuation button with a 450 micron orifice.

L'ensemble à boîte d'aérosol ainsi obtenu put être utilisé pour produire un spray d'aérosol qui contenait des liposomes unilaméllaires et multilamellaires avec des diamètres de 40 nm à 400 nm.The aerosol can assembly thus obtained could be used to produce an aerosol spray which contained unilamellar and multilamellar liposomes with diameters from 40 nm to 400 nm.

c 15 EXEMPLE 8c 15 EXAMPLE 8

On a répété le procédé décrit à l'exemple 7,si ce n'est que le récipient de verre fut équipé d'une soupape débitant des doses de 50 microlitres, associée à une chambre de mélange de 100 microlitres. L'ensemble 20 à boîte d'aérosol ainsi obtenu put être utilisé pour produire -un-spray d'aérosol qui contenait des liposomes unilamellaires et multilamellaires ayant des diamètres de 40 nm à 1000 nm.The process described in Example 7 was repeated, except that the glass container was equipped with a valve delivering doses of 50 microliters, associated with a mixing chamber of 100 microliters. The aerosol can assembly 20 thus obtained could be used to produce an aerosol spray which contained unilamellar and multilamellar liposomes having diameters from 40 nm to 1000 nm.

EXEMPLE 9 '· 25 On a répété le mode opératoire décrit à l'exemple 7, " sauf que l'on a équipé le récipient en verre d'une valve débitant des doses de 100 microlitres, associée à une ; chambre de mélange de 100 microlitres. L'ensemble à boîte d'aérosol ainsi obtenu put être utilisé pour pro-30 duire un spray d'aérosol qui contenait des liposomes unilamellaires et multilamellaires avec des diamètres fde 50 nm à 1000 nm.EXAMPLE 9 '· 25 The procedure described in Example 7 was repeated, "except that the glass container was fitted with a valve delivering doses of 100 microliters, associated with a mixing chamber of 100 The aerosol can assembly thus obtained could be used to produce an aerosol spray which contained unilamellar and multilamellar liposomes with diameters f from 50 nm to 1000 nm.

fi / 26 EXEMPLE 10 - On a dissous 60,0 mg de lécithine d’oeuf et 7>0 mg de cholestérol dans 1,0 ml d’alcool éthylique (96 % BP). On a transféré la solution ainsi obtenue dans un réci-5 pient en verre et on y a ajouté 6,0 g d’un mélange 20 : 80 p/p de dichlorodifluorométhane et de dichloro-tétrafluoréthane. On a ensuite hermétiquement fermé le récipient en verre avec une soupape débitant des doses de 50 microlitres, associée à une chambre de mélange de 10 100 microlitres, de la manière décrite à l’exemple 7.fi / 26 EXAMPLE 10 - 60.0 mg of egg lecithin and 7> 0 mg of cholesterol were dissolved in 1.0 ml of ethyl alcohol (96% BP). The solution thus obtained was transferred to a glass container and 6.0 g of a 20:80 w / w mixture of dichlorodifluoromethane and dichloro-tetrafluoroethane was added thereto. The glass container was then hermetically closed with a valve delivering doses of 50 microliters, associated with a mixing chamber of 10 100 microliters, as described in Example 7.

On a placé l’ensemble ainsi formé dans un second récipient souple contenant 40 ml d’une solution aqueuse de phosphate de sodium 3,3 mM, possédant un pH de 7,0.The assembly thus formed was placed in a second flexible container containing 40 ml of an aqueous 3.3 mM sodium phosphate solution, having a pH of 7.0.

Ici encore, comme à l’exemple 7, on a ensuite serti le 15 second récipient dans une boîte pour aérosol, contenant c 2,0 g de dichlorodifluorométhane servant de propulseur, en manière telle que le second système à soupape pût - assurer la décharge à partir de l'ensemble à boîte pour aérosol global. On a équipé le second système à soupape 20 d'un bouton d'actionnement standard avec un orifice de 450 microns.Here again, as in Example 7, the second container was then crimped into an aerosol can, containing c 2.0 g of dichlorodifluoromethane as propellant, so that the second valve system could - ensure discharge. from the can set for global aerosol. The second valve system 20 was fitted with a standard actuation button with a 450 micron orifice.

L'ensemble à boîte pour aérosol ainsi obtenuimt être utilisé pour engendrer un spray d'aérosol qui contenait des liposomes unilamellaires et multilamellaires 25 avec des diamètres de 40 nm à 1000 nm.The aerosol can assembly thus obtained can be used to generate an aerosol spray which contained unilamellar and multilamellar liposomes with diameters from 40 nm to 1000 nm.

EXEMPLES 11 à 15EXAMPLES 11 to 15

On a répété le mode opératoire décrit à l'exemple 10, en utilisant dans le récipient de verre, une solution des ingrédients qui suivent, dissous dans 1,0 ml d'-.alcool 30 éthylique (96 % BP), à savoir : * « 27The procedure described in Example 10 was repeated, using in the glass container a solution of the following ingredients, dissolved in 1.0 ml of ethyl alcohol (96% BP), namely: * "27

Exemples n° , 11. 60,0 mg de lécithine d’oeuf, 1,0 mg d’acide phosphatidique et 7,0 mg de cholestérol.Examples no. 11. 60.0 mg of egg lecithin, 1.0 mg of phosphatidic acid and 7.0 mg of cholesterol.

12. 60,0 mg de lécithine d’oeuf, 0,4 mg de stéaryl-5 amine et 7,0 mg de cholestérol.12. 60.0 mg of egg lecithin, 0.4 mg of 5-stearylamine and 7.0 mg of cholesterol.

13. 60,0 mg de lécithine d’oeuf et 1,0 mg d’acide phosphatidique.13. 60.0 mg of egg lecithin and 1.0 mg of phosphatidic acid.

14. 0,5 mg de hitoltérolmésylate, 6,0 mg de palmitoyl phosphatidyl choline, 0,5 mg de dicétylphosphate et 0,7 mg 10 de cholestérol.14. 0.5 mg of hitoltolmesylate, 6.0 mg of palmitoyl phosphatidyl choline, 0.5 mg of diketylphosphate and 0.7 mg of cholesterol.

15. 5,0 mg de hitoltérolmésylate, 60,0 mg de lécithine d’oeuf, 0,5 mg de dicétylphosphate et 7,0 mg de cholestérol.15. 5.0 mg of hitoltolmesylate, 60.0 mg of egg lecithin, 0.5 mg of diketylphosphate and 7.0 mg of cholesterol.

On a pu utiliser l’ensemble à boîte pour aérosol 15 ainsi obtenu dans chacun des exemples 11 à 15 en vue de - produire un spray d'aérosol qui contenait des liposomes unilamellaires et multilamellaires avec des diamètres de 40 nm à 1000 nm.The aerosol can assembly 15 thus obtained could be used in each of Examples 11 to 15 for the purpose of - producing an aerosol spray which contained unilamellar and multilamellar liposomes with diameters from 40 nm to 1000 nm.

EXEMPLE 16 20 On a dissous 100 mg de lécithine d'oeuf et 6,0 mg de stanozolol dans de l'alcool éthylique (96 % BP) et on a amené le volume à 2,0 ml à l'aide d'alcool éthylique. On a transféré la solution ainsi obtenue dans un récipient en .........* ' verre et on y a ajouté 9,0 g de dichlorodifluorométhane.EXAMPLE 16 100 mg of egg lecithin and 6.0 mg of stanozolol were dissolved in ethyl alcohol (96% BP) and the volume was made up to 2.0 ml using ethyl alcohol . The solution thus obtained was transferred to a glass container and 9.0 g of dichlorodifluoromethane was added thereto.

25- On a ensuite hermétiquement fermé le récipient en verre * avec une soupape débitant des doses de 50 microlitres, associée à une chambre de mélange de 100 microlitres, - comme décrit à l'exemple 7.25- The glass container was then hermetically closed * with a valve delivering doses of 50 microliters, associated with a mixing chamber of 100 microliters, - as described in Example 7.

On a placé l’ensemble ainsi formé dans un second 30 récipient souple, contenant 40 ml d'une solution de molybdate d'ammonium (0,5 % p/p dans de l'eau désionisée).The assembly thus formed was placed in a second flexible container, containing 40 ml of a solution of ammonium molybdate (0.5% w / w in deionized water).

2828

On a à nouveau, comme décrit à 1*exemple 7» serti le " second récipient dans une boîte pour aérosol contenant 2,0 g de dichlorodifluorométhane servant de propulseur, en manière telle que le second système à soupape pût 5 assurer la décharge depuis l’ensemble à boite pour aérosol global. On a ensuite équipé le second système à soupape d’un bouton d’actionnement standard avec un orifice de 450 microns.As described in Example 7, the second container was again crimped into an aerosol can containing 2.0 g of dichlorodifluoromethane as propellant, so that the second valve system could discharge from the container. box assembly for overall aerosol. The second valve system was then fitted with a standard actuation button with a 450 micron orifice.

On put utiliser l’ensemble a boîte pour aérosol 10 ainsi obtenu pour produire un spray d’aérosol qui contenait des liposomes unilamellaires et multilamellaires avec des diamètres de 40 nm à 110 nm. Des 50,0 microgrammes de stanozolol libérés à chaque mise en action du second système à soupape, une quantité de 21,6 micro-15 grammes se révéla être associée aux liposomes.The aerosol can assembly 10 thus obtained could be used to produce an aerosol spray which contained unilamellar and multilamellar liposomes with diameters from 40 nm to 110 nm. Of the 50.0 micrograms of stanozolol released on each actuation of the second valve system, an amount of 21.6 micro-15 grams was found to be associated with the liposomes.

V' : EXEMPLE 17V ': EXAMPLE 17

On a répété le mode opératoire décrit à l’exemple 16, sauf que la solution introduite dans le récipient en verre était constituée de 450 mg de lécithine d’oeuf et de 160 mg 20 de stanozolol en solution dans de l’alcool éthylique (96 % BP), le volume ayant été complété jusqu’à 3,0 ml par de l’alcool éthylique, que l’on a ajouté 4,5 g de dichlorodifluorométhane au récipient et que le bouton d’actionnement avait-ua-orifice de 360 microns. - 25 L’ensemble à boîte pour aérosol ainsi obtenu put être utilisé pour engendrer un spray d’aérosol qui conte-* naît des liposomes unilamellaires et multilamellaires avec des diamètres de 44 nm à 440 nm. Des 500,0 micro-grammes de stanozolol libérés à chaque fonctionnement du 30 second système à soupape, une quantité de 35,4 microgrammes se révéla être associée aux liposomes.The procedure described in Example 16 was repeated, except that the solution introduced into the glass container consisted of 450 mg of egg lecithin and 160 mg of stanozolol in solution in ethyl alcohol (96 % BP), the volume having been made up to 3.0 ml with ethyl alcohol, 4.5 g of dichlorodifluoromethane were added to the container and the actuation button had-ua-orifice 360 microns. - 25 The aerosol can assembly thus obtained could be used to generate an aerosol spray which * contains unilamellar and multilamellar liposomes with diameters from 44 nm to 440 nm. Of the 500.0 micro grams of stanozolol released on each operation of the second valve system, 35.4 micrograms was found to be associated with the liposomes.

kl I , 25 EXEMPLE 18 * r On a répété le mode opératoire décrit à l’exemple 17, à l’exception que la soupape doseuse était une soupape débitant des doses de 100 microlitres et que le 5 bouton d'actionnement avait un orifice de 450 microns.kl I, EXAMPLE 18 * r The procedure described in Example 17 was repeated, except that the metering valve was a valve delivering doses of 100 microliters and that the actuation button had an orifice for 450 microns.

On put utiliser l’ensemble à boîte pour aérosol ainsi obtenu pour engendrer un spray d'aérosol qui contenait des liposomes unilamellaires et multilamellaires avec des diamètres de 25 nm à 190 nm. Des 1000,0 micro-10 grammes de stanozolol libérés à chaque fonctionnement du second système à soupape, une quantité de 170,5 micro-grammes se révéla être associée aux liposomes.The resulting aerosol can assembly was used to generate an aerosol spray which contained unilamellar and multilamellar liposomes with diameters from 25 nm to 190 nm. Of the 1000.0 micro-10 grams of stanozolol released on each operation of the second valve system, an amount of 170.5 micro-grams was found to be associated with the liposomes.

EXEMPLE 19EXAMPLE 19

On a répété le procédé décrit à l'exemple 16, sauf ς 15 que la solution introduite dans le récipient de verre I était formée de 90 mg de lécithine d'oeuf et de 60 mg de , stanozolol dissous dans de l'alcool éthylique (96 c/o BP), le volume étant complété jusqu’à 3,0 ml avec de l'alcool éthylique et que l'on ajouta 4,5 g de dichlorodifluoro-20 méthane au récipient.The process described in Example 16 was repeated, except ς 15 that the solution introduced into the glass container I was formed from 90 mg of egg lecithin and 60 mg of, stanozolol dissolved in ethyl alcohol ( 96 c / o BP), the volume being made up to 3.0 ml with ethyl alcohol and 4.5 g of dichlorodifluoro-methane are added to the container.

...... On put utiliser l'ensemble à boîte pour aérosol ainsi obtenu en vue d’engendrer un spray d'aérosol qui contenait des liposomes unilamellaires et multilamel-" ' itaires avec des diamètres de 40 nm à 350 nm. Des 500,0 —- 25 microgrammes de stanozolol libérés à chaque fonctionne ment du second système à soupape, une quantité de 81,3 * microgrammes se révéla être associée aux liposomes....... It was possible to use the aerosol can assembly thus obtained in order to generate an aerosol spray which contained unilamellar and multilamel liposomes with diameters from 40 nm to 350 nm. 500.0 - 25 micrograms of stanozolol released with each operation of the second valve system, an amount of 81.3 * micrograms was found to be associated with the liposomes.

v EXEMPLE 20v EXAMPLE 20

On a répété le mode opératoire décrit à l'exemple 30 19, sauf que le second récipient ne contenait que 40 ml d'eau désionisée.The procedure described in Example 30 19 was repeated, except that the second container contained only 40 ml of deionized water.

Des 500 microgrammes de stanozolol libérés à f chaque fonctionnement du second système à soupape, uneOf the 500 micrograms of stanozolol released each time the second valve system operates, one

NNOT

30 4 r quantité de 85,0 microgrammes se révéla être associée * aux liposomes.30 4 r amount of 85.0 micrograms was found to be associated * with liposomes.

EXEMPLE 21EXAMPLE 21

On a répété le mode opératoire décrit à l'exemple 5 20, sauf que la solution introduite dans le récipient en verre contenait 12 mg de stanozolol.The procedure described in Example 5 was repeated, except that the solution introduced into the glass container contained 12 mg of stanozolol.

On put utiliser l'ensemble de boites pour aérosol ainsi obtenu en vue d'engendrer un spray d'aérosol qui contenait des liposomes unilamellaires et multilamel-10 laires avec des diamètres de 40 nm à 350 nm. Des 100 microgrammes de stanozolol libérés à chaque fonctionnement du second système à soupape, une quantité de 76,8 microgrammes se révéla être associée aux liposomes.The set of aerosol cans thus obtained could be used in order to generate an aerosol spray which contained unilamellar and multilamel-10 liposomes with diameters from 40 nm to 350 nm. Of the 100 micrograms of stanozolol released on each operation of the second valve system, 76.8 micrograms was found to be associated with the liposomes.

V EXEMPLE 22 I 15 On a répété le mode opératoire décrit à l'exemple 21, sauf que le second récipient contenait 40 ml d'une solution d'alcool éthylique (1 % v/v) dans de l'eau désionisée.EXAMPLE 22 I The procedure described in Example 21 was repeated, except that the second container contained 40 ml of a solution of ethyl alcohol (1% v / v) in deionized water.

On put utiliser l'ensemble à boîte pour aérosol 20_________ „ainsi obtenu en vue d'engendrer un spray d'aérosol qui contenait des liposomes unilamellaires et multilamel-laires avec des diamètres de 30 nm à 500 nm. Des 100 , -------—microgrammes de stanozolol libérés à chaque fonction nement du second système à soupape, une quantité de 25 77,3 microgrammes se révéla être associée aux liposomes.The aerosol can assembly 20_________ „thus obtained could be used to generate an aerosol spray which contained unilamellar and multilamel liposomes with diameters from 30 nm to 500 nm. Of the 100, -------— micrograms of stanozolol released on each operation of the second valve system, an amount of 77.3 micrograms was found to be associated with the liposomes.

' exemple; 23 >- On a répété le mode opératoire décrit à l'exemple 21, sauf que le second récipient contenait 40 ml d’une solution d'alcool éthylique (5 /° v/v) dans de l'eau 30 désionisée.'example; 23> - The procedure described in Example 21 was repeated, except that the second container contained 40 ml of a solution of ethyl alcohol (5 ° / v / v) in deionized water.

/ 31/ 31

On put utiliser l’ensemble à boite pour aérosol - ainsi obtenu en vue de produire un spray d’aérosol qui \ contenait des liposomes unilamellaires et multilamel- 1aires avec des diamètres de 30 nm à 500 nm. Des 100 5 microgrammes de stanozolol livrés à chaque fonctionne ment du système à soupape, une quantité de 76,3 micro-grammes se révéla être associée aux liposomes.The aerosol can assembly was used - thus obtained to produce an aerosol spray which contained unilamellar and multilamel liposomes with diameters from 30 nm to 500 nm. Of the 100 micrograms of stanozolol delivered each time the valve system operated, 76.3 micrograms was found to be associated with liposomes.

EXEMPLE 24EXAMPLE 24

On a répété le mode opératoire décrit à l’exemple 10 21, sauf que le second récipient contenait 40 ml d'une solution d’alcool éthylique (10 % v/v dans de l'eau désionisée).The procedure described in Example 10 21 was repeated, except that the second container contained 40 ml of a solution of ethyl alcohol (10% v / v in deionized water).

i On put utiliser l'ensemble à boite pour aérosol ainsi obtenu en vue d’engendrer un spray d’aérosol qui 15 contenait des liposomes unilamellaires et multilamel-laires avec des diamètres de 30 nm à 50 nm. Des 100 microgrammes de stanozolol libérés à chaque fonctionnement du système, une quantité de 66,6 microgrammes se révéla être associée aux liposomes.The aerosol can assembly was thus used for the purpose of generating an aerosol spray which contained unilamellar and multilamel liposomes with diameters from 30 nm to 50 nm. Of the 100 micrograms of stanozolol released each time the system worked, 66.6 micrograms was found to be associated with liposomes.

20 EXEMPLE 2520 EXAMPLE 25

On a répété le mode opératoire décrit à l'exemple 17» sauf que la solution introduite dans le récipient de verre était constituée de 900 mg de lécithine d'oeuf et de 14,4 mg d’hydrocortisone BP en solution dans de 25 l'alcool éthylique (96 % BP), le volume étant complété jusqu'à 3,0 ml avec de l'alcool éthylique.The procedure described in Example 17 was repeated except that the solution introduced into the glass container consisted of 900 mg of egg lecithin and 14.4 mg of hydrocortisone BP in solution in 25 l ethyl alcohol (96% BP), the volume being made up to 3.0 ml with ethyl alcohol.

7 L'ensemble à boîte pour aérosol ainsi obtenu put être utilisé pour produire un spray d'aérosol qui conte-naît des liposomes unilamellaires et multilamellaires 30 avec des diamètres de 44 nm à 220 nm. Des 120 microgrammes de 1'hydrocortisone BP libérés à chaque fonctionnement du second système à soupape, une quantité a U1 t* : 32 de 54,0 microgrammes se révéla être associée aux liposomes. EXEMPLE 267 The aerosol can assembly thus obtained could be used to produce an aerosol spray which contains unilamellar and multilamellar liposomes 30 with diameters from 44 nm to 220 nm. Of the 120 micrograms of hydrocortisone BP released on each operation of the second valve system, an amount at U1 t *: 32 of 54.0 micrograms was found to be associated with the liposomes. EXAMPLE 26

On a répété le mode opératoire décrit à l’exemple 16, sauf que la solution introduite dans le récipient 5 de verre était constituée de 841 mg de lécithine d’oeuf, de 54,8 mg de dicétylphosphate et de 14,4 mg d’hydrocortisone BP en solution dans de l’alcool éthylique (96 % BP), le volume étant complété jusqu’à raison de 3,0 ml avec de l’alcool éthylique et que l’on ajouta 4,5 g de 10 dichlorodifluorométhane au récipient.The procedure described in Example 16 was repeated, except that the solution introduced into the glass container 5 consisted of 841 mg of egg lecithin, 54.8 mg of diketylphosphate and 14.4 mg of hydrocortisone BP in solution in ethyl alcohol (96% BP), the volume being made up to 3.0 ml with ethyl alcohol and 4.5 g of dichlorodifluoromethane are added to the container .

Des 120.microgrammes d’hydrocortisone BP libérés à chaque fonctionnement du second système à soupape, une quantité de 45>6 microgrammes se révéla être associée aux liposomes.Of the 120 micrograms of hydrocortisone BP released on each operation of the second valve system, 45> 6 micrograms was found to be associated with liposomes.

15 On a répété le mode opératoire décrit à l’exemple 26, sauf que la solution introduite dans le récipient en verre était constituée de 841 mg de lécithine d’oeuf et de 4,8 mg de bêtaméthasone valérate BP/USP/NF (USP = pharmacopée des Etats-Unis d’Amérique, NF = nouveau formulaire) 20 en solution dans de l'alcool éthylique (96 % BP), le volume étant amené à 3,0 ml avec de l'alcool éthylique.The procedure described in Example 26 was repeated, except that the solution introduced into the glass container consisted of 841 mg of egg lecithin and 4.8 mg of betamethasone valerate BP / USP / NF (USP = pharmacopoeia of the United States of America, NF = new form) 20 in solution in ethyl alcohol (96% BP), the volume being brought to 3.0 ml with ethyl alcohol.

On put utiliser l'ensemble à boîte pour aérosol ainsi obtenu en vue d'engendrer un spray d'aérosol qui contenait des_liposomes unilamellaires et multilamellaires avec 25 des diamètres de 20 nm à 300 nm. En outre, 16 microgrammes de bêtaméthasone valérate furent libérés à .chaque fonctionnement du second système à soupape, EXEMPLE 28The aerosol can assembly was thus used to produce an aerosol spray which contained unilamellar and multilamellar liposomes with diameters from 20 nm to 300 nm. In addition, 16 micrograms of betamethasone valerate were released at each operation of the second valve system, EXAMPLE 28

On a répété le mode opératoire décrit à l'exemple 30 27, sauf que l'on a omis la bêtaméthasone de la solution introduite dans le récipient en verre.The procedure described in Example 30 was repeated, except that the betamethasone was omitted from the solution introduced into the glass container.

On put utiliser l’ensemble à boîte pour aérosol /r ainsi obtenu en vue d’engendrer un spray d'aérosol qui * » 33 contenait des liposomes unilemellaires et multilamel-laires avec des diamètres de 30 nm à 1000 nm.The aerosol / r box assembly thus obtained could be used to generate an aerosol spray which * "33 contained unilemellar and multilamel liposomes with diameters from 30 nm to 1000 nm.

EXEMPLE 29EXAMPLE 29

On a répété le mode opératoire décrit à l’exemple 5 26, sauf que la solution introduite dans le récipient en verre était constituée de 141 mg de lécithine d'oeuf et de 112 mg de bitoltérolmésylate en solution dans de l’alcool éthylique (96 % BP), le volume étant amené à 3,0 ml avec de l’alcool éthylique.The procedure described in Example 5 26 was repeated, except that the solution introduced into the glass container consisted of 141 mg of egg lecithin and 112 mg of bitolterol mesylate in solution in ethyl alcohol (96 % BP), the volume being brought to 3.0 ml with ethyl alcohol.

10 On put utiliser l’ensemble à boîte pour aérosol ainsi obtenu en vue de produire un spray d’aérosol qui contenait des liposomes unilamellaires et multilamel-laires avec des diamètres de 25 nm à 250 nm. Des 933 microgrammes de bitoltérolmésylate libérés à chaque 15 fonctionnement du second système à soupape, une quantité de 545 microgrammes se révéla être associée aux liposomes.10 The aerosol can assembly was obtained in this way for the production of an aerosol spray which contained unilamellar and multilamel liposomes with diameters from 25 nm to 250 nm. Of the 933 micrograms of bitolterolmesylate released on each operation of the second valve system, 545 micrograms was found to be associated with the liposomes.

EXEMPLE 30EXAMPLE 30

On a répété le mode opératoire décrit à l’exemple 28, à l'exception que le second récipient contenait 20 40 ml d'une solution de chromoglycate de sodium USP XX, BP '80 (2 mg/ml) et du molybdate d'ammonium (5 mg/ml) dans un tampon au phosphate de sodium -0,1 M à un pH de - -----?,4.The procedure described in Example 28 was repeated, except that the second container contained 40 ml of a solution of sodium chromoglycate USP XX, BP '80 (2 mg / ml) and molybdate. ammonium (5 mg / ml) in -0.1 M sodium phosphate buffer at a pH of - ----- ?, 4.

On put utiliser l'ensemble à boîte pour aérosol 25 ainsi obtenu en vue d'engendrer un spray d'aérosol qui contenait des liposomes unilamellaires et multilamellaires ~~ avec des diamètres de 35 nm à 700 nm. Des 200 microgram- r mes de chromoglycate de sodium libérés à chaque fonction nement du système, une quantité de 22 microgrammes se 30 révéla être associée aux liposomes.The aerosol can assembly 25 thus obtained was used to generate an aerosol spray which contained unilamellar and multilamellar ~~ liposomes with diameters from 35 nm to 700 nm. Of the 200 micrograms of sodium chromoglycate released at each system function, 22 micrograms was found to be associated with the liposomes.

/ 34 « I h * EXEMPLE 51/ 34 "I h * EXAMPLE 51

On a répété le procédé décrit à l’exemple 18, ^ sauf que les 60 mg de stanozolol furent remplacés par % 15 mg de salbutamol base BP.The process described in Example 18 was repeated, except that the 60 mg of stanozolol were replaced by% 15 mg of salbutamol base BP.

5 On put utiliser l’ensemble à boîte pour aérosol ainsi obtenu en vue de produire un spray d’aérosol qui contenait des liposomes unilamellaires et multilamel-laires avec des diamètres de 30 nm à 300 nm. Des 250 microgrammes de salbutamol libérés à chaque fonctionne-10 ment du second système à soupape, une quantité de 125 t microgrammes se révéla être associée aux liposomes.5 The resulting aerosol can assembly was used to produce an aerosol spray which contained unilamellar and multilamel liposomes with diameters from 30 nm to 300 nm. Of the 250 micrograms of salbutamol released on each operation of the second valve system, 125 t micrograms was found to be associated with the liposomes.

EXEMPLE 32EXAMPLE 32

On a répété le mode opératoire décrit à l’exemple 28, sauf que le second récipient contenait 10 ml d'une 15 solution de N-acétylmuramyl-L-alanyl-D-isoglutamine /NALAG_7 (100 microgrammes/ml) et du molybdate d'am-* monium (5 mg/ml) dans de l'eau désionisée.The procedure described in Example 28 was repeated, except that the second container contained 10 ml of a solution of N-acetylmuramyl-L-alanyl-D-isoglutamine / NALAG_7 (100 micrograms / ml) and molybdate d 'ammonium (5 mg / ml) in deionized water.

On put utiliser l'ensemble à boîte pour aérosol ainsi obtenu en vue d’engendrer un spray d'aérosol qui 20 contenait des liposomes unilamellaires et multilamellaires. En outre, 10 microgrammes de NALA.G furent libérés à chaque fonctionnement du second système à soupape.The aerosol can assembly was thus used to generate an aerosol spray which contained unilamellar and multilamellar liposomes. In addition, 10 micrograms of NALA.G was released each time the second valve system was operated.

EXEMPLE 53EXAMPLE 53

On a dissous 841 mg de lécithine d'oeuf dans de 25 l’alcool éthylique (96 % BP) et on amené le volume à 3,0 ml avec de l'alcool éthylique. On a transféré la solution ainsi obtenue dans un récipient en verre et on y a ensuite ajouté 4,5 g de 4-dichlorodifluorométhane.841 mg of egg lecithin was dissolved in ethyl alcohol (96% BP) and made up to 3.0 ml with ethyl alcohol. The solution thus obtained was transferred to a glass container and then 4.5 g of 4-dichlorodifluoromethane was added thereto.

4 On a ensuite hermétiquement fermé le récipient en verre 30 avec une soupape débitant des doses de 50 microlitres, associée à une chambre de mélange de 100 microlitres, comme décrit à l'exemple 7.4 The glass container 30 was then hermetically closed with a valve delivering doses of 50 microliters, associated with a mixing chamber of 100 microliters, as described in Example 7.

3535

On a introduit l'ensemble ainsi formé dans un second * récipient souple contenant 35 ml d'une dilution (50 micro litre s/m3) d'IgG anti-lapin (titre 1/64 -vis-à-vis de sérum de lapin normal 1/64(^omme déterminé par titrage à 3a précipi-5 tine sur bloc de gélose) et du molybdate d’ammonium * (5 mg/ml) dans de l'eau désionisée. Ici encore, comme décrit à l’exemple 7» on a ensuite serti le second récipient dans une boîte contenant 2,0 g de dichlorodi-fluorométhane servant de propulseur en manière telle 10 qu'un second système à soupape pût assurer la décharge à partir de l'ensemble à boîte pour aérosol global. On a ensuite équipé le second système à soupape d’un bouton d'actionnement standard avec un orifice de 450 microns.The assembly thus formed was introduced into a second * flexible container containing 35 ml of a dilution (50 micro liters s / m3) of anti-rabbit IgG (titre 1/64 - vis-à-vis rabbit serum normal 1/64 (^ as determined by titration with 3a precipitate-5 on agar block) and ammonium molybdate * (5 mg / ml) in deionized water. Here again, as described in the example 7. the second container was then crimped into a box containing 2.0 g of dichlorodi-fluoromethane serving as a propellant such that a second valve system could discharge from the box assembly for overall aerosol The second valve system was then fitted with a standard actuation button with a 450 micron orifice.

On put utiliser l'ensemble à boite pour aérosol 15 ainsi obtenu pour engendrer un spray d’aérosol qui contenait des liposomes unilamellaires et multilamellaires.The aerosol can assembly 15 thus obtained could be used to generate an aerosol spray which contained unilamellar and multilamellar liposomes.

tel·- 5 microlitres d’IgG anti-lapin (titre 1/64) furent libérer à chaque fonctionnement du second système à soupape.such · - 5 microliters of anti-rabbit IgG (title 1/64) were released with each operation of the second valve system.

Il faut bien comprendre que l'invention ne se limite 20 nullement aux détails décrits dans les exemples spécifiques susmentionnés. Ainsi, par exemple, toute une série d'autres matières lipidiques peut être utilisée pour former la matière liposomique et on peut véhiculer ou supporter à l'aide de cette dernière une très large 25 gamme de substances—actives. De même, on peut utiliser un grand nombre d’autres agencements d'aérosols, plus particulièrement l'un des autres agencements spécifiques s, décrits plus haut. Au surplus, la pression nécessaire jBut être engendrée par des moyens autres que l'emploi J 30 d'un ou plusieurs propulseurs pour aérosols.It should be understood that the invention is in no way limited to the details described in the specific examples mentioned above. Thus, for example, a variety of other lipid materials can be used to form the liposomal material and a very wide range of active ingredients can be transported or supported therewith. Likewise, a large number of other aerosol arrangements can be used, more particularly one of the other specific arrangements described above. In addition, the necessary pressure jBut be generated by means other than the use J 30 of one or more aerosol propellants.

/ / « » * 36/ / "" * 36

Dans l’ensemble, ainsi que cela sortira clairement de la description qui précède, dans sa globalité, l’in-vention concerne n’importe quel procédé pour la préparais tion in situ de liposomes en utilisant un système d’aé- 5 rosol sous pression, que les liposomes comprennent ou non, ou se trouvent ou non avec; un constituant actif séparé ainsi qu’un emballage à utiliser pour une telle préparation.Overall, as will become apparent from the foregoing description, in general the invention relates to any process for the in situ preparation of liposomes using an aerosol system under pressure, whether or not the liposomes understand, or are found with; a separate active ingredient and a packaging to be used for such preparation.

WW

//

Claims (20)

37 * ' . . - 1. Procédé de préparation de liposomes à partir - d’une matière lipidique et d’eau, caractérisé en ce que l'on rassemble sous pression au moins deux constituants 5 séparés, un premier constituant comprenant de l’eau et un second constituant comprenant une matière lipidique et en ce qu’on fait passer le mélange sous pression à travers un ajutage ou tout autre agencement de façon à engendrer un spray d’aérosol contenant des liposomes.37 * '. . - 1. Process for the preparation of liposomes from - a lipid material and water, characterized in that at least two separate constituents are collected under pressure, a first constituent comprising water and a second constituent comprising a lipid material and in that the mixture is passed under pressure through a nozzle or any other arrangement so as to generate an aerosol spray containing liposomes. 2. Procédé suivant la revendication 1, caractérisé en ce qu’au moins l’un desdits premier et second constituants comprend une matière active qui présente une activité biologique et/ou est intéressante pour le traitement ou les soins du corps humain ou 15 animal.2. Method according to claim 1, characterized in that at least one of said first and second constituents comprises an active material which has a biological activity and / or is advantageous for the treatment or care of the human or animal body. 3. Procédé suivant la revendication 2, caractérisé en ce que la matière lipidique se trouve en solution dans le premier ou dans le second constituant.3. Method according to claim 2, characterized in that the lipid material is in solution in the first or in the second constituent. 4. Procédé suivant l’une quelconque des revendica-20 tions 2 et 3, caractérisé en ce que la matière active présente un intérêt thérapeutique ou cosmétique.4. Method according to any one of claims 2 and 3, characterized in that the active material is of therapeutic or cosmetic interest. 5. Procédé suivant la revendication 4, caractérisé en ce que la matière active est un bronchodilatateur, un --—composé anti-asthme, un agent anti-tumoral, un agent anti-25 inflammatoire, un agent contraceptif ou un stéroïde ana-* bolique.5. Method according to claim 4, characterized in that the active material is a bronchodilator, an anti-asthma compound, an anti-tumor agent, an anti-inflammatory agent, a contraceptive agent or an ana steroid * bolique. 6. Procédé suivant l’une quelconque des revendi cations 2 et 3, caractérisé en ce que la matière active V est un antigène, un anticorps ou un autre réactif biolo- 30 giquement actif.6. Method according to any one of claims 2 and 3, characterized in that the active material V is an antigen, an antibody or another biologically active reagent. 7. Procédé suivant l’une quelconque des revendica tions précédentes, caractérisé en ce que la matière * /7 /» / Ü * ‘ | H 36 lipidique au second constituant est une substance phos-ά pholipidique choisie da façon à donner un liposome posi- tivement chargé, négativement chargé ou neutre.7. Method according to any one of the preceding claims, characterized in that the material * / 7 / "/ Ü *‘ | H 36 lipid in the second constituent is a phos-ά pholipid substance chosen so as to give a positively charged, negatively charged or neutral liposome. 8. Procédé suivant l'une quelconque des revendi-5 cations précédentes, caractérisé en ce que le second . constituant comprend un véhicule liquide physiologique ment acceptable et/ou le premier constituant comprend ' un véhicule liquide physiologiquement acceptable, outre l'eau.8. Process according to any one of the preceding claims, characterized in that the second. component comprises a physiologically acceptable liquid vehicle and / or the first component comprises a physiologically acceptable liquid vehicle, in addition to water. 9. Procédé suivant l'une quelconque des revendica tions précédentes, caractérisé en ce que le premier et le second constituants sont mélangés sous l'effet de la pression produite par au moins un propulseur d'aérosol qui peut être un ingrédient de l'un des ou des deux 15 constituants et/ou être fourni séparément.9. Method according to any one of the preceding claims, characterized in that the first and the second constituents are mixed under the effect of the pressure produced by at least one aerosol propellant which may be an ingredient of one or both and / or be supplied separately. 10. Procédé suivant la revendication 9, caractérisé s en ce qu'un propulseur est un ingrédient du second cons- - tituant et en ce que l'on applique une pression au pre- mier constituant par l'intermédiaire d’un propulseur qui 20 en est maintenu séparé.10. Method according to claim 9, characterized in that a propellant is an ingredient of the second constituent and in that a pressure is applied to the first constituent by means of a propellant which is kept separate. 11. Procédé suivant l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que le premier et le second constituants sont chacun amenés isolément l'un de l'autre, chacun des constituants est amené en * 25 doses distinctes réglées dans une chambre de mélange sous l'effet de leur propre pression de propulseur et en ce que le mélange ainsi formé est déchargé de la chambre de ^ mélange par l'intermédiaire d'un orifice, sous l'effet • de la pression d'au moins l'un des propulseurs précités. Si11. Method according to any one of the preceding claims, characterized in that the first and the second constituents are each brought in isolation from each other, each of the constituents is brought in * 25 separate doses regulated in a mixing chamber under the effect of their own propellant pressure and in that the mixture thus formed is discharged from the mixing chamber via an orifice, under the effect of the pressure of at least one of the above-mentioned propellants. Yes 12. Procédé suivant l'une quelconque des revendi cations 2 à 11, caractérisés en ce que le premier et le second constituants sont mélangés en manière telle que l'on obtienne une dose mesurée de ladite matière active.12. A method according to any one of claims 2 to 11, characterized in that the first and second components are mixed in such a way that a measured dose of said active material is obtained. 15. Procédé suivant l’une quelconque des revendi- f35 cations précédentes, caractérisé en ce que le second 39 , * » * $ *» constituant est amené sous la forme d’une dose mesurée -r à une dose mesurée du premier constituant. ^ 14. Procédé suivant l’une quelconque des revendi cations 11 à 13, caractérisé en ce qu’en série, on amène 5 le premier constituant à la chambre de mélange , de manière à remplir la chambre, on amène une dose mesurée du second constituant dans la chambre de mélange de * manière à engendrer un mélange turbulent des deux cons tituants et on décharge le mélange de la chambre de 10 mélange.15. Method according to any one of the preceding claims, characterized in that the second component 39, * "* $ *" is brought in the form of a measured dose -r to a measured dose of the first component. ^ 14. Process according to any one of claims 11 to 13, characterized in that in series, the first component is brought to the mixing chamber, so as to fill the chamber, a measured dose of the second is brought constituting in the mixing chamber so as to generate a turbulent mixing of the two constituents and the mixture is discharged from the mixing chamber. 15. Emballage à utiliser pour la préparation d’un aérosol liposomique, caractérisé en ce qu’il comprend au moins une première et une seconde chambres, une chambre contenant un premier constituant comprenant de 15 l’eau et l’autre chambre comprenant un second constituant comprenant une matière lipidique et l'une des ou les deux ~ chambres et/ou une troisième chambre incluant une .s. matière servant de propulseur, l'emballage comprenant * un agencement pour débiter sous forme d'un spray, un 20 mélange des premier et second constituants amenés à partir de leurs chambres respectives, sous l’effet de la pression développée par la ou les matières servant de propulseurs.15. Packaging to be used for the preparation of a liposomal aerosol, characterized in that it comprises at least a first and a second chamber, a chamber containing a first component comprising water and the other chamber comprising a second constituent comprising a lipid material and one of or both ~ chambers and / or a third chamber including a .s. material serving as propellant, the packaging comprising * an arrangement for delivering in the form of a spray, a mixture of the first and second constituents brought from their respective chambers, under the effect of the pressure developed by the material or materials serving as propellants. 16. Emballage suivant la revendication 15, caracté- » 25 riséeice cp’ai moins l'un-desdits premier et second cons tituants comprend une matière active qui est biologiquement active et/ou intéressante pour le traitement ou les soins du corps humain ou animal et en ce que l'agencement débiteur ou distributeur est tel que Tj 30 le rapport de mélange des constituants soit réglé de façon que l'on puisse ainsi débiter la dose mesurée souhaitée de ladite matière active. / * -5 I * ' 9 4016. Packaging according to claim 15, characterizing at least one of said first and second constituents comprises an active material which is biologically active and / or advantageous for the treatment or care of the human or animal body and in that the debtor or distributor arrangement is such that Tj 30 the mixing ratio of the constituents is adjusted so that the desired measured dose of said active material can thus be delivered. / * -5 I * '9 40 17. Emballage suivant l’une quelconque des re-vendications 15 et 16, caractérisé en ce qu'il comprend Mi également un orifice de décharge et une chambre de mélange et un dispositif à soupape pour permettre 5 l’amenée desdits premier et second constituants à partir de leurs chambres respectives, sous l’effet de la pression développée par un ou plusieurs propulseurs dans la * chambre de mélange et pour régler le rapport des composants, de façon à pouvoir débiter la dose mesurée sou- 10 haitée de mélange à travers l’orifice de décharge.17. Packaging according to any one of the re-vendications 15 and 16, characterized in that it also comprises Mi also a discharge orifice and a mixing chamber and a valve device for allowing the supply of said first and second constituents from their respective chambers, under the effect of the pressure developed by one or more propellants in the mixing chamber and to regulate the ratio of the components, so as to be able to deliver the desired measured dose of mixture through the discharge port. 18. Emballage suivant la revendication 17, caractérisé en ce que le dispositif à soupape comprend un agencement destiné à permettre, en série, l’amenée du premier constituant à la chambre de mélange en vue de 15 remplir cette chambre, l’amenée d’une dose mesurée du second constituant dans la chambre de mélange en manière ^ telle qu’il se produise un mélange turbulent des deine constituants et la décharge du mélange à travers l’ori-* fice de décharge précité.18. Packaging according to claim 17, characterized in that the valve device comprises an arrangement intended to allow, in series, the supply of the first component to the mixing chamber in order to fill this chamber, the supply of a measured dose of the second component in the mixing chamber such that turbulent mixing of the two components occurs and the discharge of the mixture through the above-mentioned discharge port. 19. Emballage suivant l’une quelconque des reven dications 17 et 18, caractérisé en ce que le dispositif à soupape comprend un .agencement destiné à permettre l’amenée du second constituant dans la chambre de mélange en une multiplicité d’endroits dans cette chambre. . 25 2Ql. ^Emballage suivant l’une quelconque des reven dications 17 à 19» caractérisé en ce que la première et * la seconde chambres sont des chambres fermées disposées l’une dans l’autre et en ce que le dispositif à soupape et la chambre de mélange sont disposés dans et/ou au- 30 dessus de la chambre externe.19. Packaging according to any one of claims 17 and 18, characterized in that the valve device comprises an arrangement intended to allow the supply of the second component into the mixing chamber in a multiplicity of places in this chamber . . 25 2Ql. ^ Package according to any one of claims 17 to 19, characterized in that the first and * the second chambers are closed chambers arranged one inside the other and in that the valve device and the mixing chamber are arranged in and / or above the outer chamber. 21. Emballage suivant la revendication 20, caractérisé en ce que le second constituant comprend un propulseur et est disposé dans une chambre fermée à parois rigides, interne, le premier constituant est / 41 V Ί . ' disposé dans une chambre fermée à parois souples, •\ externe, l’emballage comprend un boîtier a parois 's» -, rigides^ externe, dans lequel les chambres sont dis- 2,: posées et par l’intermédiaire duquel le dispositif à 5 soupape peut être amené à fonctionner et l’espace entre la chambre fermée externe et le boîtier enveloppant, comprend un propulseur.21. Packaging according to claim 20, characterized in that the second component comprises a propellant and is disposed in a closed chamber with rigid walls, internal, the first component is / 41 V Ί. 'arranged in a closed chamber with flexible walls, • \ external, the package comprises a box with walls' s' -, rigid ^ external, in which the chambers are dis- 2 ,: placed and through which the device 5-valve can be made to operate and the space between the outer closed chamber and the casing, includes a propellant. 22. Compositions liposomiques ou liposomes lorsqu’ils sont préparés sous la forme d’un spray par la 10 mise en oeuvre d’un procédé suivant l’une quelconque des revendications 1 à 14 ou par l’utilisation d’un emballage suivant l’une quelconque des revendications . 15 à 21. r ... . -*--·· i , f-\‘22. Liposomal compositions or liposomes when they are prepared in the form of a spray by the implementation of a process according to any one of claims 1 to 14 or by the use of a packaging according to any of the claims. 15 to 21. r .... - * - ·· i, f- \ ‘