LT4790B - A NOVEL CRYSTALLINE FORM OF 6-HYDROXY-3(4-[2-PIPERIDIN-1-YL)ETHOXY]PHENOXY-2-(4-METHOXYPHENYL)BENZO[b]THIOPHENE HYDROCHLORIDE - Google Patents

Abstract

The present invention is directed to a novel crystalline hydrate of 6-hydroxy-3-(4-[2-(piperidin-1-yl)ethoxy]phenoxy)-2-(4-methoxyphenyl)benzo[b]thiophene hydrochloride and uses for same, including inhibition of disease states associated with estrogen deprivation including cardiovascular disease, hyperlipidemia, and osteoporosis; and inhibition of other pathological conditions such as endometriosis, uterine fibrosis, estrogen-dependent cancer (including breast and uterine cancer), prostate cancer, benign prostatic hyperplasia, CNS disorders including Alzheimer's disease, prevention of breast cancer, and up-regulating ChAT.

Description

Išradimo prielaidosPreconditions of the invention

6-Hidroksi-3-(4-[2-(piperidin-l-il)-etoksi]fenoksi)-2-(4-metoksifenil)benzoįb]tiofeno hidrochloridas (arzoksifenas) pirmą kartą buvo aprašytas JAV patente Nr. 5510357 ir tiksliai atskleistas JAV patente Nr. 5723474 (‘474) ir Europos patento paraiškoje Nr. 0729956. Arzoksifenas yra nesteroidinis mišrus estrogeno antagonistas/agonistas, galintis, be kita ko, pažeminti serumo cholesterolio lygį ir inhibuoti hiperlipidemiją, osteoporozę, nuo estrogeno priklausomą vėžį, įskaitant krūties ir gimdos vėžį, endometriozę, CNS susirgimus, įskaitant Alcheimerio ligą, aortos lygiųjų raumenų ląstelių proliferaciją ir restenozę.6-Hydroxy-3- (4- [2- (piperidin-1-yl) ethoxy] phenoxy) -2- (4-methoxyphenyl) benzo [b] thiophene hydrochloride (aroxyphen) was first described in U.S. Pat. No. 5,510,357, and is expressly disclosed in U.S. Pat. No. 5,723,474 ('474) and European Patent Application Serial No. 4,193,195. Arzoxifene is a non-steroidal mixed estrogen antagonist / agonist capable of, inter alia, lowering serum cholesterol levels and inhibiting hyperlipidemia, osteoporosis, estrogen-dependent cancers, including breast and uterine cancer, endometriosis, CNS disease, cell proliferation and restenosis.

Konkrečiai, arzoksifenas yra naudingas ir klinikiniu požiūriu įvertintas gydant metastazinį krūties vėžį; kaip pagalbinė priemonė gydant pacientus po tam tikras sisteminės arba vietinės terapijos; sumažinant invazinio ir neinvazinio krūties vėžio paplitimą; sumažinant invazinio krūties vėžio ir latakų karcinomos in situ paplitimą. Arzoksifenas taip pat naudingas kartu su radioterapija, aromatazės inhibitoriais, LHRH analogais ir acetilcholino esterazės (AChE) inhibitoriais.Specifically, aroxififen is useful and clinically evaluated in the treatment of metastatic breast cancer; as an aid in the treatment of patients after certain systemic or local therapies; reducing the incidence of invasive and non-invasive breast cancer; reducing the in situ prevalence of invasive breast cancer and ductal carcinoma. Aroxifene is also useful in combination with radiotherapy, aromatase inhibitors, LHRH analogs, and acetylcholine esterase (AChE) inhibitors.

Arzoksifeno, išskirto pagal metodikas, aprašytas ‘474, miltelių Rentgeno spinduliuotės difrakcija (XRD), termogravimetrija (TGA), protonų magnetinis rezonansas (¾ BMR) ir Kari Fischer (KF) analizė vėliau parodė, kad minėta medžiaga yra hidratuota, menkai kristalinė ir kristale turi įvairius kiekius organinių lakių medžiagų (etilo acetato).X-ray powder diffraction (XRD), thermogravimetry (TGA), proton magnetic resonance (¾ NMR) and Kari Fischer (KF) analysis of aroxifene, isolated according to the methods described in '474, subsequently revealed that the material was hydrated, poorly crystalline and crystalline. contains various amounts of organic volatile substances (ethyl acetate).

Kompozicijos sudaryme menkai kristalinės medžiagos paprastai mažiau pageidautinos nei gerai kristalinės. Be to, paprastai nepageidautina įtraukti į kompoziciją farmacines medžiagas, turinčias žymų organinio tirpiklio (pavyzdžiui, etilo acetato) kiekį dėl potencialaus tirpiklio toksiškumo kompozicijos vartotojui ir farmacinės medžiagos veikimo pakitimų dėl tirpiklio buvimo.In the formulation, poorly crystalline materials are generally less desirable than well crystalline materials. In addition, it is generally undesirable to include in the composition pharmaceuticals that contain significant amounts of an organic solvent (e.g., ethyl acetate) because of the potential toxicity of the solvent to the user of the composition and changes in the action of the pharmaceutical agent due to the presence of the solvent.

Nors arzoksifenas, pagamintas pagal ‘474 aprašytas metodikas, galėtų būti vartojamas kaip vaistinė medžiaga, būtų labai pageidautina ir naudinga turėti daugiau arzoksifeno kristalinių formų, kurios neturėtų kristalo viduje organinio tirpiklio ir būtų atsikartojančiai ir efektyviai gaminamos komerciniu mastu.Although aroxifene, prepared according to the methods described in '474, could be used as a drug, it would be highly desirable and useful to have more aroxifene crystalline forms which are free of organic solvent within the crystal and are reproducible and efficiently commercially available.

Išradimo santraukaSummary of the Invention

Šis išradimas susijęs su nauja 6-hidroksi-3-(4-[2-(piperidin-l-il)etoksi]fenoksi)-2-(4-metoksifenil)benzo[b]tiofeno hidrochlorido (F-I) nestechiometriškai hidratuota kristaline forma, turinčia Rentgeno spinduliuotės difrakcijos spektre, gautame su vario radiacijos šaltiniu, tokius maksimumus: 7,9± 0,2,10,7± 0,2,14,9± 0,2,15,9± 0,2,18,3+ 0,2 ir 20,6± 0,2, esant 20.This invention relates to a novel non-stoichiometrically hydrated crystalline form of 6-hydroxy-3- (4- [2- (piperidin-1-yl) ethoxy] phenoxy) -2- (4-methoxyphenyl) benzo [b] thiophene hydrochloride (FI), having an X-ray diffraction pattern obtained with a copper radiation source having the following maxima: 7.9 ± 0.2,10.7 ± 0.2.14.9 ± 0.2.15.9 ± 0.2.18.3 + 0.2 and 20.6 ± 0.2 at 20.

Šis išradimas dar susijęs su farmacine kompozicija, susidedančia iš F-I; vieno arba daugiau farmacinių nešiklių, skiediklių arba užpildų; pasirinktinai, estrogeno, pasirinktinai, progestino, pasirinktinai, aromatazės inhibitoriaus, pasirinktinai, LHRH analogo ir, pasirinktinai, acetilcholinesterazės (AChE) inhibitoriaus.The present invention further relates to a pharmaceutical composition comprising F-I; one or more pharmaceutical carriers, diluents or excipients; optionally, estrogen, optionally, progestin, optionally, an aromatase inhibitor, optionally an LHRH analog, and optionally an acetylcholinesterase (AChE) inhibitor.

Be to, šis išradimas yra susijęs su F-I panaudojimo inhibuoti patologines būkles, tokias kaip gimdos fibrozė, endometriozė, aortos lygiųjų raumenų ląstelių proliferacija, restenozė, krūties vėžys, gimdos vėžys, prostatos vėžys, gėrybinė prostatos hiperplazija, kaulų išretėjimas, osteoporozė, širdies ir kraujagyslių susirgimas, hiperlipidemija, CNS sutrikimai ir Alcheimerio liga, būdais ir su F-I panaudojimu gaminti medikamentus tų pačių būklių inhibavimui.The present invention further relates to the use of FI to inhibit pathological conditions such as uterine fibrosis, endometriosis, aortic smooth muscle cell proliferation, restenosis, breast cancer, uterine cancer, prostate cancer, benign prostatic hyperplasia, osteoporosis, osteoporosis. disease, hyperlipidemia, CNS disorders, and Alzheimer's disease, and methods and methods of using FI to inhibit the same conditions.

Šis išradimas dar susijęs su F-I panaudojimo cholino acetiltransferazės (ChAT) sureguliavimui būdais ir su panaudojimu gavimui medikamentų, skirtų šiam sureguliavimui.The present invention further relates to methods of using F-I for the adjustment of choline acetyltransferase (ChAT) and to the use of medicaments for this adjustment.

Trumpas brėžinių aprašymasBrief description of the drawings

Fig.l yra S-II diferencinės skanuojančios kalorimetrijos (DSC)/TGA vaizdas.Fig. 1 is an S-II differential scanning calorimetry (DSC) / TGA image.

Fig.2 yra F-I (DSC)/TGA vaizdas.Figure 2 is an F-I (DSC) / TGA view.

Fig.3 yra F-III (DSC)/TGA vaizdas.Figure 3 is an F-III (DSC) / TGA view.

Fig.4 vaizduoja F-I ir F-III drėgmės sugėrimo izotermas.Fig. 4 shows the moisture absorption isotherms of F-I and F-III.

Fig.5 vaizduoja S-II desolvatacijos priklausomybę nuo džiovinimo laiko ir temperatūros.Fig. 5 depicts the dependence of S-II desolvation on drying time and temperature.

Smulkus išradimo aprašymasDetailed Description of the Invention

Arzoksifenas, pagamintas pagal ‘474 aprašytą metodiką (41 pavyzdys, kristalinimas iš etanolio ir etilo acetato mišinio, filtravimas ir nufiltruotos medžiagos džiovinimas vakuume kambario temperatūroje iki pastovios masės), * buvo charakterizuotas XRD duomenimis ir nustatyta, kad medžiaga yra menkai kristalinė. BMR duomenys patvirtino, kad visoje medžiagoje yra 6 % dtilb acetato. Kristalinimo metodika, aprašyta ‘474, toliau modifikuota tokiu būdu,H&^ ® etanolis pridedamas j nevalyto arzoksifeno suspensiją verdančiame etilo aceOte^ T Atšaldžius ir nufiltravus vakuume, šioje modifikuotoje procedūroje gauta Įdėtai ⁵ medžiaga yra gerai kristalinis arzoksifeno mišrus solvatas su etilo acetatu i? ^! * vandeniu (toliau vadinamas S-II), kuris vėliau tapo pradine medžiaga F-I ¹ gamyboje.Aroxifene, prepared according to the procedure described in '474 (Example 41, crystallization from a mixture of ethanol and ethyl acetate, filtration and drying of the filtered material under vacuum at room temperature to constant weight), was characterized by XRD and found to be poorly crystalline. NMR data confirmed the presence of 6% dtilb acetate in the whole material. The crystallization procedure described in the '474, subsequently modified so H & ^ ® ethanol was added to the crude arzoxifene suspension boiling ethyl aceOte ^ T Upon cooling and vacuum filtration, this modified procedure get put ⁵ is a highly crystalline arzoxifene mixed solvate with ethyl acetate, i? ^! * water (hereinafter referred to as S-II) which later became the starting material for the production of FI ¹ .

F-I gali būti pagamintas pašalinat etilo acetatą iš S-II kristalų džiovinant S-II vakuume/atkaitinant paaukštintose temperatūrose. Laikas ir temperatūra, reikalingi atkaitinrti S-II, siekiant gauti F-I, skirsis įvairiuose mėginiuose, tačiau tipiškai yra 5 dienų ir maždaug 100 °C eilės. Kad S-II virstų šioje procedūroje į F-I, reikalingos aukštos temperatūros, kadangi S-II sumaišius su vandeniu kambario temperatūroje arba palaikius 3 savaites 98 % santykinio drėgnumo aplinkoje, negauta jokio virtimo į F-I. Be to, S-II džiovinimas konvekcinėje krosnyje aukštose temperatūrose taip pat nedesolvatuoja medžiagos, kas leidžia manyti, jog etilo acetato išstūmimui iš S-II kristalų reikalingas vakuumas.F-I can be prepared by removing ethyl acetate from S-II crystals by drying S-II under vacuum / annealing at elevated temperatures. The time and temperature required to anneal S-II to obtain F-I will vary from sample to sample, but typically is 5 days and approximately 100 ° C. High temperatures are required for the conversion of S-II to F-I in this procedure, since S-II does not convert to F-I when mixed with water at room temperature or maintained for 3 weeks at 98% RH. In addition, drying the S-II in a convection oven at elevated temperatures also does not dissolve the material, suggesting that a vacuum is required to displace the ethyl acetate from the S-II crystal.

Geriausia, F-I lengvai gaunamas ir išskiriamas kambario temperatūroje kristalinant arzoksifeną (arba bet kokį jo polimorfą/solvatą) iš tetrahidrofurano. Geriausia, kai šis kristalinimas vykdomas pradžioje ištirpinant arzoksifeną nedžiovintame tetrahidrofurane (1-10 tūrio % vandens, geriau 2,5-7,5 %, geriausiaPreferably, F-I is readily obtained and isolated by crystallization of aroxififene (or any polymorph / solvate thereof) from tetrahydrofuran at room temperature. Preferably, this crystallization is accomplished by initially dissolving aroxifene in non-dried tetrahydrofuran (1-10 volume% water, preferably 2.5-7.5%, preferably

4,5-5,5 %), po to pašalinant minėtą vandenį distiliuojant atmosfeos slėgyje. Šio kristalinimo pavyzdys atskleistas toliau 2 pavyzdyje. Kai F-I gaminamas pagal šią pagerintą kristalinimo metodiką, galima tikėtis, jog visas susijusios medžiagos (TRS) kiekis bus <0,5 %.4.5-5.5%) followed by removal of said water by atmospheric distillation. An example of this crystallization is disclosed below in Example 2. When F-I is produced according to this improved crystallization technique, the total amount of bound substance (TRS) can be expected to be <0.5%.

Šiam kristalinimui tinkama pradinė arzoksifeno medžiaga apima, bet neapsiriboja, S-II, F-II, pagal ‘474 metodikas pagamintą arzoksifeną, arba bet kokį jų mišinį. Nesvarbu, nuo kokios arzoksifeno formos pradedama, kadangi kristalinimas iš tetrahidrofurano pagal čia aprašytą metodiką duoda F-I kristalus. Komercinės apimties F-I sintezei gali būti naudinga inicijuoti kristalinimąsi F-I.Suitable starting materials for arsoxifene for this crystallization include, but are not limited to, S-II, F-II, arsoxifene prepared according to the '474 procedures, or any mixture thereof. It does not matter which form of aroxififene is started, since crystallization from tetrahydrofuran according to the procedure described herein gives F-I crystals. Commercial synthesis of F-I may be useful in initiating F-I crystallization.

Kitas arzoksifeno nestechiometrinis hidratas, F-III, lengvai gaunamas ir išskiriamas kambario temperatūroje kristalinat arzoksifeną (arba bet kokį jo polimorfą/solvatą) iš izopropilo alkoholio (IPA) ir vandens mišinio. Vandens santykis su IPA (t/t) paprastai yra maždaug 1:1 iki 9:1. Geriau, kai santykis yra tarpAnother non-stoichiometric hydrate of aroxifene, F-III, is readily obtained and is isolated at room temperature by crystallization of aroxifene (or any polymorph / solvate thereof) from a mixture of isopropyl alcohol (IPA) and water. The ratio of water to IPA (v / v) is usually about 1: 1 to 9: 1. Better when the ratio is between

2,5 ir 5,6:1. Geriausia, kai santykis yra tarp 3 ir 5,6:1. IPA santykis su vandeniu neturi lemiamos įtakos kristalinimuisi, tačiau jis įtakoja išeigą. Komercinės apimties F-III sintezei gali būti naudinga inicijuoti kristalinimąsi F-III. Šiam kristalinimui tinkama pradinė arzoksifeno medžiaga apima, bet neapsiriboja, S-II, F-I, pagal ‘474 metodikas pagamintą arzoksifeną, arba bet kokį jų mišinį.2.5 and 5.6: 1. Ideally, the ratio is between 3 and 5.6: 1. The ratio of IPA to water has no decisive influence on crystallization, but it does influence the yield. Commercial F-III synthesis may be useful for initiating F-III crystallization. Suitable starting materials for arsoxifene for this crystallization include, but are not limited to, S-II, F-I, aroxifene prepared according to the '474 procedures, or any mixture thereof.

S-II, F-I ir F-III charakterizavimas ir identifikavimasCharacterization and identification of S-II, F-I and F-III

S-II, F-I ir F-III charakterizuoti naudoti DSC/TGA ir XRD metodai. TGA dažnai gerai tinka skirtingų kietos medžiagos formų identifikavimui, kadangi temperatūra(os), kurioje vyksta medžiagos fizikiniai pokyčiai, paprastai yra polimorfinės formos arba solvato chrakteristika. DSC yra metodas, dažnai naudojamas atrinkti junginius pagal polimorfizmo ir solvato susidarymo požymį.DSC / TGA and XRD methods were used to characterize S-II, F-I and F-III. TGA is often well suited for the identification of different solid forms since the temperature (s) at which the material undergoes physical changes are usually polymorphic or solvate characteristics. DSC is a method often used to select compounds for polymorphism and solvate formation.

Be to, XRD metodas leidžia kristalinėje medžiagoje nustatyti dideles tvarkiąsias struktūras.In addition, the XRD method allows large ordered structures to be identified in the crystalline material.

Arzoksifenas, pagamintas pagal ‘474 aprašytas metodikas, duoda XRD spektrą su prastu signalo-triukŠmo santykiu ir aukšta fono linija, kas rodo esant menkai kristalinę medžiagą. Todėl atlikti F-I ir F-III palyginimai su medžiaga (SII), gauta pagal modifikuotą arzoksifeno kristalinimo metodiką (etanolio pridėjimas į virinamą arzoksifeno suspensiją etilo acetate).Aroxifene, prepared according to the procedures described in '474, gives an XRD spectrum with a poor signal-to-noise ratio and a high background line, which indicates a low crystalline material. Therefore, F-I and F-III comparisons were made with Substance (SII) obtained by a modified aroxifene crystallization procedure (addition of ethanol to boiling aroxififene suspension in ethyl acetate).

Charakterizuojančios S-II, F-I ir F-III DSC/TGA kreivės parodytos, atitinkamai, Fig. 1, 2 ir 3. S-II DSC kreivėje matyti plati endoterma, prasidedanti ties maždaug 62 °C, atitinkanti etilo acetato ir vandens pašalinimą iš kristalo, Endoterma, prasidedanti ties maždaug 152 °C, atspindi lydymąsi. Maždaug 2,5 % . ·* masės sumažėjimas pagal TGA vyksta kartu su pirmu perėjimu, tuo tarpu likę^S U · I % masės praradimas vyksta iki pat lydymosi pradžios, kas leidžia manyti, kacįikaįV £· i kurios tirpiklio molekulės yra tvirčiau surištos kristale. $$ $6The characteristic DSC / TGA curves of S-II, F-I, and F-III are shown in Figs. 1, 2, and 3. The S-II DSC curve shows a broad endotherm beginning at about 62 ° C, corresponding to the removal of ethyl acetate and water from the crystal, the endotherm beginning at about 152 ° C reflecting melting. About 2.5%. · * TGA weight loss occurs with the first transition, while the remaining mass of ^ S U · I% occurs prior to the onset of melting, suggesting that some of the solvent molecules are more strongly bound in the crystal. $$ 6

F-I DSC kreivėje matyti plati endoterma, prasidedanti ties maždaug 75 ⁰C,'ir« * - $'antra endoterma, prasidedanti ties maždaug 150 °C, kuri atspindi lydymąsi.-įF-J 5 IThe FI DSC curve shows a broad endotherm beginning at about 75 ^° C, 'and «* - $' a second endotherm beginning at about 150 ° C, which reflects melting. -F-J 5 I

TGA kreivė rodo tolygų masės mažėjimą 0,3 % su po to sekančiu staigiu masės < 3;The TGA curve shows a steady weight loss of 0.3% with a subsequent sudden weight loss <3;

sumažėjimu 1,5 %, kai abu mažėjimai rodo kristalo dehidrataciją. Pirmo perėjimo *·· DSC pradžia ir atitinkamas masės sumažėjimas TGA dėl skirtingų kaitinimo greičių yra menkai subalansuoti. Pradinis masės praradimas atspindi silpnai surištą hidratacinį vandenį, tuo tarpu antras masės prardimas susijęs su maždaug 0,5 molio vandens, esančio kristale prie labai mažo drėgnumo (mažiau 5 % - žiūr. drėgmės sugėrimo duomenis).decrease of 1.5%, where both decreases indicate crystal dehydration. The onset of the first transition * ·· DSC and the corresponding reduction in TGA mass due to different heating rates are poorly balanced. The initial weight loss reflects the weakly bound hydration water, while the second weight loss refers to about 0.5 mole of water in the crystal at very low humidity (less than 5% - see moisture absorption data).

F-III DSC kreivėje matyti plati žematemperatūrė endoterma ties maždaug 30 °C, po to antra plati ir santykinai silpna endoterma, prasidedanti ties maždaug 70 °C ir galutinis perėjimas, prasidedantis ties maždaug 146 °C, atitinkantis lydymąsi.The F-III DSC curve shows a broad low temperature endotherm at about 30 ° C, followed by a second wide and relatively weak endotherm beginning at about 70 ° C and a final transition beginning at about 146 ° C corresponding to melting.

Staigus 1,5 % (~ 0,5 molio) masės praradimas, TGA sutampantis su pirma endoterma, atitinka silpnai surištų vandens molekulių praradimą, tuo tarpu papildomas ~1,6 % masės praradimas virš 60 °C atspindi stipriau surištų vandens molekulių praradimą, t.y., tų, kurios yra esant labai mažam santykiniam drėgnumui. Masės praradimas, stebimas virš 170 °C, atitinka F-III skilimą.The abrupt loss of 1.5% (~ 0.5 moles) in TGA coinciding with the first endotherm corresponds to the loss of weakly bound water molecules, while the additional loss of ~ 1.6% above 60 ° C reflects the loss of more strongly bound water molecules, ie , such as those with very low relative humidity. The weight loss observed above 170 ° C is consistent with F-III degradation.

F-I ir F-III XRD spektre matyti ryškūs maksimumai ir žema bazinė linija, kas rodo gerai kristalinę medžiagą. Maksimumų kampo padėtys, esant 2Θ ir atitinkami I/Io duomenys F-I, F-III ir S-II pavyzdžiams pateikti 1 lentelėje. Nors daugelis intensyvių atspindžių paprastai turi panašius difrakcijos kampus, kiekviena iš formų duoda skirtingą miltelių spektrą, kas leidžia aiškiai atskirti S-II, F-I ir F-III.The F-I and F-III XRD spectra show pronounced maxima and a low baseline, which indicates a good crystalline material. The positions of the maximum angles at 2Θ and corresponding I / Io data for F-I, F-III, and S-II are shown in Table 1. While many intense reflections usually have similar diffraction angles, each of the shapes gives a different powder spectrum, allowing for a clear distinction between S-II, F-I and F-III.

Kristalografijoje gerai žinoma, kad bet kurios polimorfinės formos dfrakcijos maksimumų santykiniai intensyvumai gali skirtis dėl vyraujančios orientacijos, atsirandančios dėl tokių faktorių kaip kristalo morfologija. Ten, kur pasireiškia vyraujančios orientacijos efektas, maksimumų intensyvumas yra padidintas, bet charakteringų polimorfinės formos maksimumų padėtis lieka nepakitusi. Žiūr., pavyzdžiui, The United States Pharmacopeia # 23, National Formulary # 18, p.It is well known in crystallography that the relative intensities of the fractional maxima of any polymorph can vary due to the dominant orientation due to factors such as crystal morphology. Where the prevailing orientation effect occurs, the intensity of the maxima is increased, but the position of the characteristic polymorphic peaks remains unchanged. See, for example, The United States Pharmacopeia # 23, National Formulary # 18, p.

1843-1844,1995. Tokiu būdu, maksimumų intensyvumo ir jų padėties pagrindu F-I gali būti identifikuotas maksimumų ties 7,9±0,2; 10,7±0,2; 14,9±0,2; 15,9±0,2; 18,3+0,2 ir 20,6±0,2° , esant 20 , pagalba, kai spektras gautas su vario radijacijos šaltiniu.1843-1844,1995. Thus, based on the intensities of the maxima and their position, F-I can be identified at maxima at 7.9 ± 0.2; 10.7 ± 0.2; 14.9 ± 0.2; 15.9 ± 0.2; 18.3 + 0.2 and 20.6 ± 0.2 ° at 20 with the spectrum obtained with a copper radiation source.

LENTELĖTABLE

S-II S-II F-I F-I F- F- [II [II 20 (°) 20 (°) I/I_o(%)I / _O (%) 20 (°) 20 (°) I/Io (%) I / Io (%) 20 (°) 20 (°) I/Io (%) I / Io (%) 4,67 4.67 1,3 1.3 4,92 4.92 2,6 2.6 4,63 4.63 20,8 20.8 5,03 5.03 6 6th 7,69 7.69 34,6 34.6 7,82 7.82 100 100 6,83 6.83 5,8 5.8 7,91 7.91 100 100 9,29 9.29 16,9 16.9 7,17 7.17 16,1 16.1 9,89 9.89 2,5 2.5 10,16 10.16 22,7 22.7 7,73 7.73 100 100 10,22 10.22 2 2 10,35 10.35 5,4 5.4 9,03 9.03 1,3 1.3 10,74 10.74 7,4 7.4 13,77 13.77 10,7 10.7 9,31 9.31 1,7 1.7 14,86 14.86 9,1 9.1 13,97 13.97 15,2 15.2 9,66 9.66 2,4 2.4 15,45 15.45 2,3 2.3 15,06 15.06 6,9 6.9 10,27 10.27 1,6 1.6 15,92 15.92 15,9 15.9 15,71 15.71 22,3 22.3 10,47 10.47 2,2 2.2 16,67 16.67 1,7 1.7 15,87 15.87 7,4 7.4 10,91 10.91 6,3 6.3 16,98 16.98 3,1 3.1 16,35 16.35 34,5 34.5 13,63 13.63 2,1 2.1 18,28 18.28 17,8 17.8 16,77 16.77 12,3 12.3 14,09 14.09 4,6 4.6 18,56 18.56 7 7th 17,28 17.28 10 10th 15,10 15.10 4,1 4.1 20,58 20.58 13,1 13.1 17,62 17.62 47,9 47.9 15,52 15.52 10,5 10.5 20,85 20.85 8,8 8.8 18,09 18.09 43,9 43.9 16,45 16.45 9,1 9.1 21,64 21.64 3,9 3.9 20,43 20.43 42 42 16,67 16.67 7,6 7.6 22,19 22.19 4,8 4.8 20,80 20.80 33,6 33.6 17,21 17.21 4,9 4.9 22,65 22.65 2,9 2.9 21,31 21.31 42,7 42.7 17,53 17.53 2,4 2.4 23,28 23.28 3,4 3.4 21,71 21.71 13 13th 18,33 18.33 28,2 28.2 23,97 23.97 11,8 11.8 21,85 21.85 14,5 14.5 18,69 18.69 11,1 11.1 24,31 24.31 6,3 6.3 22,13 22.13 12,8 12.8 19,37 19.37 3,5 3.5 25,52 25.52 3,9 3.9 22,26 22.26 16,3 16.3 20,29 20.29 8,6 8.6 26,20 26.20 3,4 3.4 23,51 23.51 13,2 13.2 20,64 20.64 17,2 17.2 26,47 26.47 3,1 3.1 23,69 23.69 15,9 15.9 21,02 21.02 12,7 12.7 28,84 28.84 6,4 6.4 23,91 23.91 25,6 25.6 21,68 21.68 5,1 5.1 30,13 30.13 3,5 3.5 24,31 24.31 38,7 38.7 22,01 22.01 8,3 8.3 31,12 31.12 2,9 2.9 25,22 25.22 8 8th 22,29 22.29 8 8th 25,67 25.67 8,9 8.9 23,17 23.17 7,8 7.8 27,05 27.05 18,9 18.9 23,39 23.39 9,1 9.1 27,89 27.89 13,3 13.3 24,30 24.30 13,6 13.6 28,24 28.24 8,6 8.6 25,76 25.76 3,4 3.4 28,71 28.71 21,3 21.3 28,10 28.10 1,8 1.8 29,89 29.89 8,9 8.9 28,73 28.73 10,9 10.9 30,24 30.24 18,7 18.7 29,42 29.42 3,2 3.2 30,88 30.88 5,8 5.8 30,00 30.00 3,7 3.7 31,44 31.44 7,6 7.6 30,89 30.89 2,1 2.1 33,06 33.06 4,5 4.5 31,34 31.34 2,4 2.4 34,36 34.36 6 6th 31,70 31.70 1,1 1.1 32,81 32.81 1 1 32,91 32.91 0,8 0.8 33,48 33.48 2 2 26,05 26.05 4 4 26,63 26.63 5,5 5.5 27,01 27.01 3,1 3.1 27,49 27.49 2,8 2.8

Tolimesnis F-I ir F-III charakterizavimasFurther characterization of F-I and F-III

Ištirtas F-I ir F-III higroskopiškumas. F-I ir F-III drėgmės sugėrimo izotermos pateiktos Fig. 4. Pradžioje palaikius pavyzdžius 5 % santykinio drėgnumo aplinkoje, F-I ir F-III masė iškart nepadidėjo, palaikius atitinkamai 1,5 % ir 1,7 % santykinio drėgnumo aplinkoje, ekvivalentiškoje atitinkamai 0,5 molio vandens. Abiejų formų atveju stebimas tolygus drėgmės sugėrimas per visą drėgnumo intervalą, kas matyt susiję su vandens molekulių įtraukimu į kristalą.Hygroscopicity of F-I and F-III was investigated. The moisture absorption isotherms of F-I and F-III are presented in Figs. 4. Initially maintaining the samples in a 5% relative humidity environment did not immediately increase the mass of F-I and F-III at 1.5% and 1.7% relative humidity of 0.5 molar water, respectively. In both forms, uniform moisture absorption is observed throughout the humidity range, apparently related to the incorporation of water molecules into the crystal.

Skirtumas tarp dviejų formų drėgmės sugėrimo, matyti, atspindi kiekį vandens, kuris gali būti įtrauktas į kristalą (t.y., kristale esančios erdvės, kuri galėtų talpinti vandens molekules, kiekį). Histerezės nebuvimas F-I ir F-III sorbcijosdesorbcijos izotermose rodo, jog tarp kristalų formų greitai nusistovi pusiausvyra esant bet kokiam drėgnumui.The difference between the two forms of moisture absorption seems to reflect the amount of water that can be incorporated into the crystal (i.e., the amount of space in the crystal that could hold water molecules). The absence of hysteresis in the sorption desorption isotherms of F-I and F-III indicates that equilibrium between the crystal forms is rapidly established at any moisture.

F-I ir F-III drėgmės sugėrimo profiliai rodo, kad šios formos yra iš esmės nestechiometriniai hidratai. Esant įprastam santykiniam drėgnumui (apie 50 %), FI turi maždaug 1,7 % vandens, kas atitinka 0,5 molio vandens, tuo tarpu F-III yra sugėręs apie 3 % vandens, kas atitinka maždaug 0,85 molio vandens. Tarp F-I ir FIII bei atmosferos greitai nusistovi pusiausvyra, taigi vandens kiekis, stebimas analitiniais metodais, atspindi santykinį drėgnumą tyrimų momentu. Skirtumai tarp atskirų serijų DSC duomenų, matyti, kyla dėl to, kad atskiri pavyzdžiai dėl skirtingų laikymo sąlygų yra nevienodai hidratuoti.The moisture absorption profiles of F-I and F-III indicate that these forms are essentially non-stoichiometric hydrates. At normal relative humidity (about 50%), FI has about 1.7% water, equivalent to 0.5 moles of water, while F-III has absorbed about 3% water, equivalent to about 0.85 moles of water. The equilibrium between F-I and FIII and the atmosphere is rapidly established, so that the amount of water monitored by analytical methods reflects the relative humidity at the time of analysis. The differences between individual series DSC data appear to be due to the fact that individual samples are unevenly hydrated due to different storage conditions.

Gauti F-I ir F-III, laikytų skirtingose santykinio drėgnumo sąlygose (0, 22, 50 ir 80 %) XRD spektrai. Stebimas palaipsnis F-III maksimumų ties maždaug 13,8,X-D spectra of F-I and F-III stored under different relative humidity conditions (0, 22, 50 and 80%) were obtained. Observed gradual F-III maxima at about 13.8,

17,6, 18,0, 20,5 ir 24,0°, esant 20, pasislinkimas lyginant su pradiniais (0 % santykinio drėgnumo), taip pat didėjant santykiniam drėgnumui šiek tiek slenkasi mažiau intensyvūs maksimumai. Šie F-III XRD spektre stebimi pokyčiai rodo, jog didėjant santykiniam drėgnumui elementarios gardelės matmenys keičiasi, matyt, kad įjungtų silpnai surištas vandens molekules. Nuoseklus maksimumų pasislinkimas keičiantis drėgnumui gerai koreliuoja su sorbcijos duomenimis, kurie rodo laipsnišką masės didėjimą šiame santykinio drėgnumo intervale.At 17.6, 18.0, 20.5, and 24.0 ° at 20, the offset from the baseline (0% relative humidity) as well as the relative humidity increases slightly less intensive peaks. These changes observed in the F-III XRD spectrum indicate that as the relative humidity increases, the size of the elemental lattice changes, apparently to activate weakly bound water molecules. Consistent shift of maxima with changing humidity correlates well with sorption data, which show a gradual increase in mass within this relative humidity range.

Panašus eksperimentas atliktas su F-I, siekiant nustatyti, ar santykinio drėgnumo kitimai darys panašią įtaką jo kristalui (0, 25, 52, 73 ir 95 % santykinio drėgnumo). Didėjant santykiniam drėgnumui, stebimas labai mažas maksimumų esant 0 % santykinio drėgnumo ties maždaug 7,7; 18,3; 18,5; 20,5; 20,8°, esant 2Θ pasislinkimas. Maksimumai ties maždaug 7,7; 20,8 ir 24,1 esant didesniems drėgnumams taip pat tampa šiek tiek platesni ir silpniau išreikšti, kas rodo, jog vandenį sugeria amorfiniai komponentai (arba plastifikuoja kietą medžiagą), ypač esant 73 ir 95 % santykiniam drėgnumui. Maksimumų pasislinkimas F-I XRD spektre mažiau ryškus nei stebimas F-III atveju skirtinguose santykiniuose drėgnumuose. Tai leidžia manyti, kad F-I atveju nevyksta tokie kristalo išsiplėtimai ir/arba susitraukimai kaip F-III atveju.A similar experiment was conducted with F-I to determine whether changes in relative humidity would have a similar effect on its crystal (0, 25, 52, 73, and 95% relative humidity). With increasing relative humidity, very small maxima at 0% relative humidity of about 7.7 are observed; 18.3; 18.5; 20.5; 20.8 ° at 2Θ displacement. The maxima at about 7.7; 20.8 and 24.1 also become slightly broader and weaker at higher humidities, indicating that water is absorbed by amorphous components (or plasticizes solids), especially at 73 and 95% relative humidity. The shift of maxima in the F-I XRD spectrum is less pronounced than that observed for F-III at different relative humidities. This suggests that crystal expansion and / or contraction does not occur in F-I as in F-III.

Nustatyta, kad F-I ir F-III yra stabilūs visame santykinio drėgnumo intervale, nepaisant F-III sugebėjimo sugerti dukart tiek vandens. Nustatyta, kad abi formos $ turi palyginamus kristalų dydžius, morfologiją, tirpumą ir tirpimo greitį.F-I and F-III were found to be stable over the entire range of relative humidity, despite the ability of F-III to absorb twice as much water. Both forms of $ were found to have comparable crystal sizes, morphology, solubility, and dissolution rate.

W·-' - ^k i’⁵ W · - '- ^k i' ⁵

Atlikti džiovinimo eksperimentai, siekiant nustatyti S-II desolvatacijos priklausomybę nuo džiovinimo laiko ir temperatūros (žiūr. Fig.5). DesolvatacijosDrying experiments were performed to determine the dependence of S-II desolvation on drying time and temperature (see Fig.5). Desolvation

- -i. J eksperimento įvairiais momentais užrašyti XRD spektrai. S-II desolvatacijos v 4 >- -i. The XRD spectra are recorded at various points in Experiment J. S-II Desolvations v 4>

tyrimuose daugelis difrakcijos maksimumų yra prie tų pačių kampų, kaip ir F-I, kas patvirtina, jog S-II ir F-I kristalai yra labai panašūs. Tai, kad po minimalaus džiovinimo išnyksta difrakcijos maksimumai ties maždaug 6,8; 7,2 ir 14,0°, esant 2Θ, leidžia manyti, kad šie atspindžiai susiję su kristalografinėmis plokštumomis, turinčiomis dalį etilo acetato molekulių elektroninio tankio.In studies, many diffraction maxima are at the same angles as F-I, which confirms that S-II and F-I crystals are very similar. That the diffraction peaks at about 6.8 disappear after minimal drying; 7.2 and 14.0 ° at 2Θ suggest that these reflections are related to crystallographic planes containing a fraction of the electronic density of ethyl acetate molecules.

Solvatuotos medžiagos atkaitinimas vakuume aukštoje temperatūroje davė FI. Šiuo būdu gautas F-I pagal XRD duomenis pasižymi dideliu kristališkumu.The annealing of the solvated material under vacuum at high temperature gave the FI. The F-I obtained in this way exhibits high crystallinity according to XRD data.

Todėl medžiaga, gauta kristalinant iš etanolio ie etilo acetato ir po to džiovinta vakuume tik keletą valandų, kaip aprašyta ‘474, pasižymi labai menku kristališkumu, kadangi pagal šią procedūrą gaunamas dalinai desolvatuotas S-II.Therefore, the material obtained by crystallization from ethanol to ethyl acetate and then dried under vacuum for only a few hours, as described in '474, has very low crystallinity since this procedure yields partially desolvated S-II.

Palyginus su aukščiau aprašyta iš technikos lygio žinoma arzoksifeno forma,Compared with the prior art form of aroxifene,

F-I ir F-III turi keletą privalumų. Lyginant su pagal ‘474 metodikas gautu arzoksifenu, F-I ir F-III yra stabilesni aplinkos temperatūroje, todėl labiau pasiduodantis farmaciniams patobulinimams, t.y., dozuotų kompozicijų patobulinimams. Be to, F-I ir F-III yra labiau kristališki negu ‘474 aprašyta forma. Kristalinės medžiagos paprastai yra mažiau higroskopiškos ir stabilesnės (pavyzdžiui, mažiau linkusios chemiškai skilti, išlaiko pastovų veikimą) negu amorfinės medžiagos ir todėl geriau tinka kompozicijų sudarymui. Be to, priešingai negu pagal ‘474 metodikas pagamintas arzoksifenas, kuris savo kristaluose turi etilo acetato ir vandens, F-I ir F-III turi tik vandens.The F-I and F-III have several advantages. F-I and F-III are more stable at ambient temperature compared to arsoxifene obtained by the '474 methodologies, and are therefore more susceptible to pharmaceutical improvements, i.e., improvements in dosage formulations. In addition, F-I and F-III are more crystalline than the form described in '474. Crystalline materials are generally less hygroscopic and more stable (for example, less prone to chemical degradation, sustained action) than amorphous materials and are therefore better suited for formulation. In addition, in contrast to the aroxififene produced by the '474 method, which contains ethyl acetate and water in its crystals, F-I and F-III contain only water.

Charakterizavimo metodaiMethods of characterization

DSC matavimai atlikti TA Instruments 2920 Modulated DSC, sujungtu su Thermal Analyst 3100 ir turinčiu aušinimo sistemą. Mėginiai (3-5 mg) buvo kaitinami gofruotuose aliuminio tigliuose nuo 10 iki 240 °C, kaitinimo greičiui esant 2 °C/min.DSC measurements were performed on a TA Instruments 2920 Modulated DSC connected to a Thermal Analyst 3100 equipped with a cooling system. Samples (3-5 mg) were heated in corrugated aluminum crucibles at 10 to 240 ° C at a heating rate of 2 ° C / min.

TGA analizė atlikta TA Instruments 2050 termogravimetriniu analizatorium, sujungtu su Thermal Analyst 3100. Mėginiai (5-10 mg) kaitinti atviruose tigliuose nuo 25 °C iki 250 °C, kaitinimo greičiui esant 5 °C/min.TGA analysis was performed on a TA Instruments 2050 thermogravimetric analyzer coupled to Thermal Analyst 3100. Samples (5-10 mg) were heated in open crucibles at 25 ° C to 250 ° C at a heating rate of 5 ° C / min.

XRD spektrai gauti Siemens D5000 miltelių Rentgeno spinduliotės 20 difraktometru, turinčiu CuKa šaltinį (λ = 1,54056 A) ir Kevex kieto būvio detektoriumi, dirbančiu prie 50 kV ir 40 mA. Kiekvienas pavyzdys skanuojamas tarp 4° ir 35° su 20. Prieš registruojant duomenis, pavyzdžiams leidžiama pasiekti pusiausvyrą mažiausiai per 30 minučių norimoje temperatūroje ir/arba santykiniame drėgnume.XRD spectra were obtained on a Siemens D5000 powder X-ray diffractometer with a CuKa source (λ = 1.54056 A) and a Kevex solid state detector operating at 50 kV and 40 mA. Each sample is scanned between 4 ° and 35 ° with 20. Before recording, samples are allowed to equilibrate for at least 30 minutes at the desired temperature and / or relative humidity.

F-I ir F-III higroskopiškumo matavimai atlikti naudojant VTI metodą kaip aprašyta toliau. Kiekvienas mėginys džiovinamas vakuume 60 °C temperatūroje, kol masė nustoja mažėti ir tuo metu tyrimo kameroje padaromas 0 % santykinis drėgnumas. Drėgmės sugėrimo izotermos gautos 25 °C temperatūroje, naudojant VTI vakuumines drėgmės svarstykles, esant tokioms sąlygoms: pavyzdžio dydis 1011 mg, adsorbcijos/desorbcijos intervalas 0-95 %, santykinis drėgnumas, žingsnio intervalas 5 %, mėginio intervalas 10 minučių.F-I and F-III hygroscopicity measurements were performed using the VTI method as described below. Each sample is dried under vacuum at 60 ° C until the mass ceases, at which time a 0% relative humidity is set in the test chamber. Moisture absorption isotherms were obtained at 25 ° C using VTI vacuum humidity scales under the following conditions: sample size 1011 mg, adsorption / desorption range 0-95%, relative humidity, step interval 5%, sample interval 10 minutes.

Toliau pateikti pavyzdžiai iliustruoja hidratų gavimo būdą pagal šj išradimą. Pavyzdžiai jokiu požiūriu neriboja šių būdų apimties.The following examples illustrate a process for the preparation of hydrates according to the present invention. The examples in no way limit the scope of these techniques.

Gavimas sintezėObtaining Synthesis

S-IIS-II

Nevalytas arzoksifenas (1,58 g medžiagos, gautos pagal JAV patente Nr. 5723474, kurio metodikos čia pateikiamos kaip nuorodos, 41 pavyzdyje aprašytą metodiką) suspenduojamas 28 ml etilo acetato ir virinama su grįžtamu šaldytuvui Ištirpimo palengvinimui pridedama 18 ml etanolio. Leidžiama virti su grįžtamu*® šaldytuvu 20 minučių, po to paliekama atvėsti kambario temperatūroje. Iškritusio^' nuosėdos atskiriamos filtruojant vakuume, praplaunamos 30 ml etilo acetato gauna 1,05 g baltos miltelių pavidalo kietos medžiagos.Crude aroxifene (1.58 g of material obtained according to the procedure described in Example 41 of U.S. Patent No. 5,723,474, the disclosure of which is incorporated herein by reference) is suspended in 28 ml of ethyl acetate and refluxed in 18 ml of ethanol to facilitate dissolution. Allow to boil under reflux * ® for 20 minutes, then allow to cool at room temperature. The precipitate was separated by suction filtration and washed with 30 ml of ethyl acetate to give 1.05 g of a white powdery solid.

Pavyzdžiai pavyzdys F-I gavimas iš S-IIExamples Example Obtaining F-I from S-II

S-II džiovinamas vakuuminėje krosnyje (-0,863 kg/cm² = -25 coliai Hg) 100 °C temperatūroje 118 vai., ir gauna F-I.The S-II is dried in a vacuum oven (-0.863 kg / cm ² = -25 inches Hg) at 100 ° C for 118 h and obtains FI.

pavyzdysexample

Geresnė F-I gavimo iš arzoksifeno metodikaImproved methodology for obtaining F-I from aroxifene

Į trigurklę apvaliadugnę 1 1 kolbą su grįžtamu šaldytuvu ir maišymu iš viršaus sudedama 25,0 g arzoksifeno, 475 ml tetrahidrofurano ir 25 ml vandens. Tada prijungiamas distiliavimo perėjimas, reakcijos mišinys užvirinamas ir nudistiliuojama 250 ml. Kaitinimas staigiai nutraukiamas ir į kolbą pridedama 250 ml šviežio bevandenio tetrahidrofurano. Tęsiamas distiliavimas atmosferos slėgyje ir nudistiliuojama dar 250 ml. Vėl kaitinimas staigiai nutraukiamas ir į kolbą pridedama 250 ml šviežio bevandenio tetrahidrofurano. Tęsiamas distiliavimas atmosferos slėgyje ir nudistiliuojama dar 250 ml. Papildomai pridedama 250 ml tetrahidrofurano ir reakcijos mišinys virinamas su grįžtamu šaldytuvu. Po šio tetrahidrofurano pridėjimo susidaro baltos nuosėdos. Maišomas reakcijos mišinys paliekamas lėtai atvėsti per 3 vai., per tą laiką iškrenta daugiau nuosėdų ir tiršta suspensija atvėsta iki kambario temperatūros. Kristalinės nuosėdos nufiltruojamos ir išdžiovinamos vakuume 50 °C per 48 vai. po silpna azoto srove. Išeiga 22,50 g (90,0 %). XRD spektrų analizė parodė, kad drėgnos masės ir išdžiovintos kietos medžiagos spektrai.iš esmės yra identiški, ir iš esmės sutampa su anksčiau gauto F-I spektrais. DSC analizė duoda lydymosi temperatūrą 157 °C, tuo tarpu TGA analizė rodo 1,5 % masės praradimą kaitinant nuo kambario temperatūros iki 100 °C. Pagal HPLC duomenis medžiagos grynumas, perskaičiavus į gryną bazę, yra 88,1 %, teoriškai turėtų būti 92,9 %. HPLC duomenys parodė, kad bendras surištų medžiagų kiekis yra 0,44 %.In a triple-bottomed 1 L round bottom flask, reflux and stir, add 25.0 g of aroxifene, 475 ml of tetrahydrofuran and 25 ml of water. The distillation pass is then plugged, the reaction mixture is boiled and 250 ml is distilled off. Stop heating briefly and add 250 ml of fresh anhydrous tetrahydrofuran to the flask. Continue the distillation at atmospheric pressure and distill an additional 250 ml. Stop heating again and add 250 ml of fresh anhydrous tetrahydrofuran to the flask. Continue the distillation at atmospheric pressure and distill an additional 250 ml. An additional 250 mL of tetrahydrofuran was added and the reaction mixture was refluxed. A white precipitate forms upon addition of this tetrahydrofuran. The stirred reaction mixture is allowed to cool slowly over 3 hours, during which time more precipitate precipitates out and the slurry is cooled to room temperature. The crystalline precipitate is filtered off and dried under vacuum at 50 ° C for 48 hours. under a slight stream of nitrogen. Yield 22.50 g (90.0%). Analysis of the XRD spectra showed that the masses of the wet mass and of the dried solid were substantially identical and substantially in agreement with those of the previously obtained F-I. DSC analysis gave a melting point of 157 ° C, while TGA analysis showed a 1.5% loss in mass when heated from room temperature to 100 ° C. According to HPLC data, the purity of the material, when converted to a pure base, is 88.1% and should in theory be 92.9%. HPLC data showed a total binding content of 0.44%.

pavyzdysexample

F-I gavimas iš [6-benziloksi-3-[4-[2-(piperidin-l-il)etoksi)fenoksi]-2-(4metoksifenil)]benzo[b]tiofeno S-oksidoPreparation of F-I from [6-Benzyloxy-3- [4- [2- (piperidin-1-yl) ethoxy) phenoxy] -2- (4-methoxyphenyl)] benzo [b] thiophene S-oxide

Sumaišoma 261 ml tetrahidrofurano, 45 ml vandens, 6,14 g koncentruotos sulfato rūgšties ir [6-benziloksi-3-[4-[2-(piperidin-l-il)etoksi)fenoksi]-2-(4metoksifenil)]-benzo[b]tiofeno S-oksido (pagal HPLC duomenis grynumas 99 %, bendras surištų medžiagų kiekis 0,35 %) ir maišoma, kol pasidaro homogeniškas mišinys. Pridedama 10 % Pd/C (5,6 g suspensija 22 ml vandens) ir praplaunama 5 ml vandens. Susidariusi suspensija vakumuojama ir paleidžiama 60 psi (413,6 kPa) slėgio vandenilio srovė. Reakcijos temperatūra nustatoma 30 °C. Po 2 vai pridedama 10 % Pd/C (5,6 g) kartu su 30 ml vandens. Hidrinimas 60 psi (413,6 kPa) slėgyje ir 30 °C temperatūroje tęsiamas dar 22 vai. Papildomai pridedama 4,40 g 10 % Pd/C 30 ml vandens ir hidrinimas 60 psi (413,6 kPa) slėgyje ir 30 °C temperatūroje tęsiamas dar 2,5 vai. Katalizatorius atskiriamas filtruojant, filtrato pH nustatomas 7,24 50 % natrio hidroksido pagalba. Pridedama 8,66 g natrio chlorido, ištirpinto 18 ml vandens ir dvifazis tirpalas maišomas 30 minučių. Fazės atskiriamos, vandeninė fazė ekstrahuojama 50 ml tetrahidrofurano. Organinės fazės sujungiamos ir sukoncentruojamos distiliuojant atmosferos slėgyje iki 50 ml « tūrio. Į koncentratą per 1 vai 24 °C temperatūroje pridedama 180 ml metanolio? Susidariusi kristalinė suspensija 30 min. maišoma 24 °C temperatūroje, atšaldamas® iv mr: i iki 0 °C ir maišoma 1 vai. Kieta medžiaga atskiriama filtruojant ir nuosekliai®: . jfe i praplaunama 39 ml vandens ir 39 ml metanolio, po to džiovinama vakuume :per. . zt® i naktį 50 °C temperatūroje. Išeiga 15,52 g (67,8 %). ® sk i261 ml of tetrahydrofuran, 45 ml of water, 6.14 g of concentrated sulfuric acid and [6-benzyloxy-3- [4- [2- (piperidin-1-yl) ethoxy) phenoxy] -2- (4-methoxyphenyl)] - benzo are added. [b] Thiophene S-oxide (99% purity, 0.35% total bound material by HPLC) and stir until homogeneous. Add 10% Pd / C (5.6 g suspension in 22 mL water) and wash with 5 mL water. The resulting suspension is evacuated and a stream of hydrogen at 60 psi (413.6 kPa) is applied. The reaction temperature is set at 30 ° C. After 2 h, 10% Pd / C (5.6 g) was added along with 30 mL of water. Hydrogenation at 60 psi (413.6 kPa) and 30 ° C was continued for another 22 hours. An additional 4.40 g of 10% Pd / C in 30 mL of water is added and hydrogenation at 60 psi (413.6 kPa) and 30 ° C is continued for another 2.5 h. The catalyst is filtered off and the filtrate is adjusted to pH 7.24 with 50% sodium hydroxide. 8.66 g of sodium chloride dissolved in 18 ml of water are added and the biphasic solution is stirred for 30 minutes. The phases are separated and the aqueous phase is extracted with 50 ml of tetrahydrofuran. The organic phases are combined and concentrated by distillation at atmospheric pressure up to a volume of 50 ml. 180 ml of methanol is added to the concentrate over 1 hour at 24 ° C? The resulting crystalline suspension was stirred for 30 min. is stirred at 24 ° C, cooled to iv ° C to 0 ° C and stirred for 1 hour. The solids are separated by filtration and sequentially®:. Wash with 39 ml of water and 39 ml of methanol, then dry under vacuum:. . zt® overnight at 50 ° C. Yield: 15.52 g (67.8%). ® see i

Aukščiau aprašyto produkto 10 g porcija perkristalinama iš tetrahidrofurano r .av ir vandens, kaip aprašyta 2 pavyzdyje.A 10 g portion of the product described above is recrystallized from tetrahydrofuran r.av. and water as described in Example 2.

Parankiniai terminaiFavorite terms

Čia vartojamas terminas “efektyvus kiekis” reiškia tokį F-I kiekį, kuris sugeba inhibuoti čia aprašytas būkles arba jų neigiamą poveikį. Kai F-I skiriamas kartu su estrogenu, progestinu, aromatazės inhibitorium, LHRH analogu, AChE inhibitorium, terminas “efektyvus kiekis” taip pat reiškia tokio agento kiekį, kuris sukuria siekiamą efektą.As used herein, the term "effective amount" means an amount of F-I that is capable of inhibiting the conditions or adverse effects thereof described herein. When F-I is co-administered with estrogen, progestin, aromatase inhibitor, LHRH analog, AChE inhibitor, the term "effective amount" also refers to the amount of agent that produces the desired effect.

Terminai “inhibuojantis” ir “inhibuoti “ apima jų paprastai priimtas reikšmes, t.y., užkertantis kelią, sutrukdantis, apribojantis, palengvinantis, pagerinantis sulėtinantis, sustabdantis, sustabdantis progresavimą ar patologinės būklės rimtumą, ar jos pasekmes, čia aprašytus.The terms "inhibiting" and "inhibiting" include their commonly accepted meanings, i.e., preventing, disrupting, limiting, facilitating, slowing down, stopping, stopping the progression or severity of a pathological condition, or its consequences described herein.

Terminai “užkertantis kelią”, “prevencija”, “profilaktika”, “profilaktinis” ir “užkirsti kelią” čia vartojami kaip pakeičiantys vienas kitą ir reiškia sumažėjimą tikimybės, kad F-I recipientas susirgs arba jam išsivystys bet kokia patologinė būsena ar jos pasekmės, čia aprašytos.The terms "preventing", "prevention", "prophylaxis", "prophylactic" and "prevent" are used interchangeably herein and means to reduce the likelihood that the FI recipient will develop or have any pathological condition or sequelae described herein. .

Terminai “netekęs estrogeno” ir “estrogeno nepriteklius” reiškia būklę, tiek natūraliai atsiradusią, tiek kliniškai indukuotą, kai moters organizmas negali išskirti pakankamai endogeninių estrogeninių hormonų, kad palaikytų nuo estrogeno priklausančias funkcijas, pavyzdžiui, menstruacijas, kaulų masės homeostazę, neuronų funkcijas, širdies ir kraujagyslių būklę, ir t.t. Tokios estrogeno trūkumo situacijos kyla dėl menopauzės ir chirurginio ar cheminio kiaušidžių pašalinimo, įskaitant jų funkcinius ekvivalentus, pavyzdžiui, gydymą aromatazės inhibitoriais, GnRH agonistais arba antagonistais, ICI, ir panašiai, tačiau šiomis priežastimis neapsiriboja. Ligos būklės, susijusios su estrogeno nepriteklium, apima kaulų masės praradimą, osteoporozę, širdies ir kraujagyslių susirgimus ir hiperlipidemiją, tačiau tuo neapsiriboja.The terms "estrogen deprivation" and "estrogen deprivation" refer to a condition, both naturally occurring and clinically induced, in which a woman's body cannot secrete enough endogenous estrogenic hormones to support estrogen-dependent functions such as menstruation, bone mass homeostasis, neuronal function, cardiac function. and vascular condition, and so on Such estrogen deficiency situations result from, but are not limited to, menopause and surgical or chemical removal of the ovaries, including their functional equivalents, such as aromatase inhibitors, GnRH agonists or antagonists, ICI, and the like. Diseases associated with estrogen deprivation include, but are not limited to, bone loss, osteoporosis, cardiovascular disease, and hyperlipidemia.

Čia vartojamas terminas “estrogenas” apima steroidinius junginius, pasižyminčius estrogeniniu aktyvumu, tokie kaip, pavyzdžiui, 17p-estradiolis, etronas, konjuguotas estrogenas (Premarin®), serumo estrogenas 17βetinilestradiolis, ir pan. Geriausias junginys estrogeno pagrindu yra Premarin® ir noretilnodrelis.As used herein, the term "estrogen" includes steroidal compounds having estrogenic activity such as, for example, 17β-estradiol, etron, conjugated estrogen (Premarin®), serum estrogen 17β-ethinyl estradiol, and the like. The best estrogen based compound is Premarin® and norethylnodrel.

Čia vartojamas terminas “progestinas” apima junginius, pasižyminčius nėštumą išsaugančiu aktyvumu, tokius kaip, pavyzdžiui, progesteronas, noretilnodrelis, nongestrelis, megestrolio acetatas, noretindronas ir pan. Noretindronas yra geriausias agentas progestino pagrindu.As used herein, the term "progestin" includes compounds having pregnancy-preserving activity, such as, for example, progesterone, norethylnodrel, nongestrel, megestrol acetate, norethindrone, and the like. Norethindrone is the best progestin based agent.

Čia vartojamas terminas “aromatazės inhibitorius” apima junginius, gebančius inhibuoti aromatazę, pavyzdžiui, prekyboje esnačius inhibitorius, tokius kaip aminoglutemidas (CYTANDREN®) , Anastrazolis (ARIMIDEX@),As used herein, the term "aromatase inhibitor" includes compounds capable of inhibiting aromatase, such as commercially available inhibitors such as aminoglutemide (CYTANDREN®), Anastrazole (ARIMIDEX @),

Letrozolis (FEMARA®), Formestanas (LENATRON®), Eksemestanas (AROMASIN®) ir pan.Letrozole (FEMARA®), Formestane (LENATRON®), Exemestane (AROMASIN®) and the like.

Čia vartojamas terminas “LHRH analogas” reiškia liuteinizuojantį hormoną atlaisvinančio hormono analogą, kuris inhibuoja estrogeno gamybą moteriai premenopauzės būklėje, įskaitant, pavyzdžiui, goserliną (ZOLADEX®), leuprolidą (LUPRON®) ir pan.As used herein, the term "LHRH analog" refers to a luteinizing hormone releasing hormone analog that inhibits estrogen production in a premenopausal woman, including, for example, goserlin (ZOLADEX®), leuprolide (LUPRON®), and the like.

Čia vartojamas terminas “AChE inhibitorius” apima junginius, kurie inhibuoja acetilcholinesterazę, pavyzdžiui, fizostigmino salicilatą, takrino hidrochloridą, donepezilo hidrochloridą ir pan.The term "AChE inhibitor" as used herein includes compounds that inhibit acetylcholinesterase, such as physostigmine salicylate, tacrine hydrochloride, donepezil hydrochloride and the like.

Terminas “sureguliuoti ChAT” reiškia ChAT fermentinio aktyvumo padidinimą, t.y., cholino virtimo į acetilcholiną skatinimą. Šis skatinimas apima ChAT ir cholino reakcijos greičio ir/arba efektyvumo padidinimą ir/arba ChAT kiekio, esančio reakcijos vietoje, padidinimą. Šis reakcijos vietoje esančio fermento kiekio padidėjimas gali būti genų reguliavimo dėka arba dėka kitokio fermento susiformavimo sintezės žingsnio ir/arba dėl fermento deaktyvacijos sumažėjimo ir metabolizmo.The term "regulate ChAT" refers to increasing the enzymatic activity of ChAT, i.e., promoting the conversion of choline to acetylcholine. This promotion includes increasing the rate and / or efficiency of the ChAT and choline reaction and / or increasing the amount of ChAT present at the reaction site. This increase in the amount of enzyme present at the reaction site may be due to gene regulation, or due to another step in the synthesis of the enzyme, and / or due to a decrease in enzyme deactivation and metabolism.

Parinktos tyrimų metodikosSelected research methodologies

Bendra žiurkių paruošimo procedūra: septyniasdešimt penkių dienų amžiaus (jei nenurodyta kitaip) Sprague Dav/ley žiurkių patelės (masė nuo 200 iki 225 g) buvo gautos iš Charles River Laboratories (Portage, MI). Gyvuliukams arba pašalintos abi kiaušidės (OVX), arba jiems atlikta Sham chirurginė procedūra Charles River laboratorijoje, iš kur jie atvežti po savaitės. Atvežus, jie patalpinami metaliniuose kabančiuose narveliuose grupėmis po 3 arba 4 į narvelį ir vieną savaitę turi ad libitum priėjimą prie maisto (kalcio kiekis apie 0,5 %) ir vandens. Kambario temperatūra palaikoma 22,2 ± 1,7 °C, minimalus santykinis drėgnumas 40 %. Kambario fotoperiodas buvo 12 vai. šviesa ir 12 vai. tamsa.General Rat Preparation Procedure: Seventy-five days old (unless otherwise stated) Sprague Dav / ley female rats (weight 200 to 225 g) were obtained from Charles River Laboratories (Portage, MI). The animals were either ovariectomized (OVX) or subjected to a Sham surgical procedure at the Charles River Laboratory, where they were removed one week later. Upon arrival, they are placed in metal hanging cages in groups of 3 or 4 per cage and have ad libitum access to food (calcium content about 0.5%) and water for one week. The room temperature is maintained at 22.2 ± 1.7 ° C with a minimum relative humidity of 40%. The photoperiod of the room was 12 hours. light and 12 hours. darkness.

Dozavimo režimas ir audinių paėmimas: po vienos savaitės aklimatizacijos (taigi, po dviejų savaičių nuo OVX) pradedamas F-I kasdieninis dozavimas. 17a16 etinilestradiolis arba F-I įvedamas peroraliai, jei nenurodyta kitaip, suspensijos 1% karboksimetilceliuliozės pavidale arba ištirpintas 20 % ciklodekstrine. Gyvuliukams preparatas įvedamas kasdien 4 dienas. Baigus įvedimą, gyvuliukai pasveriami, anestezuojami ketamino:ksilazino mišiniu (2:1, t/t) ir paimamas kraujo mėginys padarant širdies punkciją. Tada gyvuliukai numarinami uždusinant CO2, gimda pašalinama per vidurio pjūvį, nustatomas šlapios gimdos masė. 17a-etinilestradiolis gautas iš Sigma Chemical Co., St. Louis, MO.Dosage regimen and tissue uptake: After one week of acclimatization (ie two weeks after OVX), daily dosing of F-I is initiated. 17a16 Ethinylestradiol or F-I is administered orally, unless otherwise stated, as a suspension in 1% carboxymethylcellulose or dissolved in 20% cyclodextrin. For animals, the product is administered daily for 4 days. At the end of the administration, the animals are weighed, anesthetized with ketamine: xylazine (2: 1, v / v) and a blood sample is taken for cardiac puncture. The animals are then euthanized by CO2 suffocation, the uterus removed mid-section, and the wet weight of the uterus determined. 17α-Ethynylestradiol was obtained from Sigma Chemical Co., St. Louis, MO.

Širdies ir kraujagyslių ligos/hiperlipidemijaCardiovascular disease / hyperlipidemia

Aukščiau aprašytiems kraujo mėginiams leidžiama krešėti kambario temperatūroje 2 vai., nucentrifugavus 10 min. 3000 aps/min greičiu, atskiriamas serumas. Serumo cholesterolis nustatomas naudojant Boehringer Mannheim Diagnostics didelio tikslumo cholesterolio tyrimo metodiką. Trumpai tariant, cholesterolis oksidinamas iki cholest-4-en-3-ono ir vandenilio peroksido. Tada vandenilio peroksidas reaguoja su fenoliu ir 4-aminofenazonu, dalyvaujant peroksidazei, kad susidarytų p-chinono imino dažas, kuris nuskaitomas spektrofotometriškai ties 500 nm. Choleterolio koncentracija apskaičiuojama pagal kalibracinę kreivę. Visas tyrimas yra automatizuotas Biomek Automated Workstation aparatūros pagalba.The blood samples described above were allowed to clot at room temperature for 2 hours after centrifugation for 10 minutes. 3000 rpm, serum separation. Serum cholesterol is determined using the Boehringer Mannheim Diagnostics high precision cholesterol assay. In short, cholesterol is oxidized to cholest-4-en-3-one and hydrogen peroxide. The hydrogen peroxide is then reacted with phenol and 4-aminophenazone in the presence of peroxidase to form a p-quinone imine dye, which is scanned spectrophotometrically at 500 nm. Calculate the cholesterol concentration from the calibration curve. The entire study is automated with Biomek Automated Workstation hardware.

Gimdos eozžnofilų peroksidazinis tyrimo metodas Aukščiau aprašyta gimda laikoma 4 °C temperatūroje iki tyrimo fermentiniu metodu laiko. Gimda homogenizuojama 50 tūrių 50 mM Tris buferio (pH 8,0), kuris turi 0,005 % Triton Χ-100. Pridėjus 0,01 % vandenilio peroksido ir 10 mM 025 fenilendiamino Tris-buferyje (galutinės koncentracijos), per vieną minutę matuojamas absorbcijos padidėjimas ties 450 nm. Eozinofilų buvimas gimdoje yra junginio estrogeninio aktyvumo matas. IŠ pradinės tiesialinijinės reakcijos kreivės atkarpos per 15 s nustatomas maksimalus reakcijos greitis.Peroxidase assay for uterine eosgnophils The uterus described above is stored at 4 ° C until the time of the enzyme assay. The uterus is homogenized in 50 volumes of 50 mM Tris buffer (pH 8.0) containing 0.005% Triton Χ-100. Addition of 0.01% hydrogen peroxide and 10 mM 025 phenylenediamine in Tris buffer (final concentration) measures the absorbance at 450 nm in one minute. The presence of eosinophils in the uterus is a measure of the compound's estrogenic activity. From the initial line of the linear reaction curve, the maximum reaction rate is determined within 15 s.

Kaulu masės praradimo (osteoporozės) tyrimasA study of bone loss (osteoporosis)

Po aukščiau parašytos pagrindinės paruošimo procedūros žiurkės kasdien trisdešimt penkias dienas gydomos (6 žiurkės vienoje gydymo grupėje) ir 36-tą dieną numarinamos uždusinant anglies dioksidu. Trisdešimt penkių dienų laikas yra pakankamas maksimaliam kaulų tankio sumažėjimui pasiekti, kuris matuojamas kaip čia aprašyta. Numarinimo mome ntu pašalinama gimda, nupjaustomi pašaliniai audiniai, prieš nustatant šlapią masę išpilamas skystas turinys, siekiant patvirtinti estrogenų trūkumą dėl pilno kiaušidžių pašalinimo. Paprastai dėl kiaušidžių pašalinimo gimdos masė būna sumažėjusi maždaug 75 %.Following the basic preparation procedure described above, rats are treated daily for thirty-five days (6 rats per treatment group) and sacrificed on carbon dioxide on day 36. Thirty-five days is sufficient to achieve maximal bone loss, as measured herein. Immediately after sacrifice, the uterus is removed, the adipose tissue is removed, and liquid contents are discharged prior to determination of wet weight to confirm estrogen deficiency due to complete ovarian removal. Usually, ovarian removal results in a reduction in uterine weight of about 75%.

Tada gimda patalpinama į neutralų formaliną iki tolimesnių histologinių tyrimų.The uterus is then placed in neutral formalin until further histological examination.

Išpjaunamas dešinysis šlaunikaulis ir tiriamas rentgeno spinduliais* generuojamais ir analizuojamais vaizdo anlizės programos pagalba (NIH vaizdas) prie distalinio metafizio. Šių gyvūnėlių blauzdikaulių proksimalūs vaizdai taip pat; buvo skanuojami skaitmeninės kompiuterinės tomografijos pagalba. Tiriamiem$,15 gyvuliukams pagal aukščiau aprašytas metodikas buvo peroraliai įvedama F-I arb% etinilestradiolio (EE2) 20 % hidroksipropil-p-ciklodekstrine. F-I taip pat? naudojamas deriniuose su estrogenu arba progestinu. .?.The right femur is dissected and examined by X-ray * generated and analyzed by an image analysis program (NIH image) at the distal metaphysis. Proximal views of the tibia of these animals, too; were scanned by digital computed tomography. $ 15 animals were dosed orally with F-I or% ethinylestradiol (EE2) in 20% hydroxypropyl-β-cyclodextrin according to the procedures described above. F-I too? used in combination with estrogen or progestin. .?.

MCF-7 proliferacijos tyrimasMCF-7 proliferation assay

MCF-7 krūties adenokarcinomos ląstelės (ATCC HTB 22) palaikomosMCF-7 breast adenocarcinoma cells (ATCC HTB 22) are maintained

MEM (minimalioje esminėje terpėje, neturinčioje fenolio raudonojo, Sigma, St.Louis, MO), papildytoje 10 % (t/t) fetalinio veršiuko serumo (FBS), L-glutaminu (2 mM), natrio piruvatu (1 mM), HEPES ({(N-[2-hidroksietil]piperazin-N’-[2etansulfonrūgštis] 10 mM}, pakeičiamosiomis aminorūgštimis ir jaučio insulinu (1 pg/ml) (palaikymo terpė). Dešimt dienų prieš tyrimus MCF-7 ląstelės perkeliamos į palaikymo terpę, papildytą 10 % dekstranu padengtų anglies strypelių su fetaliniu veršelių serumu (DCC-FBS tyrimo terpė) vietoje 10 % FBS siekiant išsemti vidines steroidų atsrgas. MCF-7 ląstelės pašalinamos iš palaikymo kolbų, naudojant ląstelių disocijacijos terpę (HBSS be Ca⁺⁺/Mg⁺⁺) , neturinčią fenolio raudonojo, papildytą 10 mM HEPES ir 2 mM EDTA. Ląstelės du kartus praplaunamos tyrimo terpe ir praskiedžiamos iki 80 000 ląstelių/ml. Maždaug 100 μΐ (8000 ląstelės) pridedama į plokščiadugnes mikrokultivavimo plokštelės duobutes (Costar 3596) ir inkubuojama 37 °C temperatūroje 5 % CO2 drėkinamame inkubatoriuje 48 vai. , kad ląstelės adsorbuotųsi ir nusistovėtų po pernešimo. Paruošiama serija vaistų arba DMSO, kaip kontrolės, praskiedimų tyrimo terpėje ir 50 μΐ perneštų mikrokultūrų, pridedant 50 μΐ tyrimo terpės, kad galutinis tūris būtų 200 μΐ. Po dar 48 vai. 37 °C temperatūroje 5 % CO2 drėkinamame inkubatoriuje, mikrokultūros švitinamos tričio timidinu (1 pCi/duobutei) 4 vai. Kultūros užšaldomos -70 °C temperatūroje 24 vai., po to atitirpinamos ir auginamos naudojant Skarton pusiauautomatinį ląstelių auginimo aparatą. Pavyzdžiai įvertinami skysčių scintiliacijos metodu, naudojant Wallac BetaPlace β skaitiklį.MEM (minimum essential medium free from phenol red, Sigma, St.Louis, MO) supplemented with 10% (v / v) fetal calf serum (FBS), L-glutamine (2 mM), sodium pyruvate (1 mM), HEPES ({(N- [2-Hydroxyethyl] piperazine-N '- [2-ethanesulfonic acid] 10 mM}), amino acid replacement and bovine insulin (1 pg / ml) (medium). MCF-7 cells are transferred to medium ten days prior to assays supplemented with 10% dextran-coated carbon rods with fetal calf serum (DCC-FBS assay medium) instead of 10% FBS to expel internal steroid deprivation. MCF-7 cells are removed from support flasks using cell dissociation medium (HBSS without Ca ⁺⁺ / Mg ⁺⁺ ) phenol red free supplemented with 10 mM HEPES and 2 mM EDTA Cells are washed twice with assay medium and diluted to 80,000 cells / ml Approximately 100 μΐ (8,000 cells) are added to flat bottom microculture plate wells (Costar 3596). and incubated at 37 ° C in a 5% CO2 humidified incubator for 48 hours. to allow the cells to adsorb and settle after transfer. Prepare a series of drug or DMSO as control dilutions in assay medium and 50 μΐ of the transferred micro-cultures by adding 50 μΐ of assay medium to a final volume of 200 μΐ. After 48 more hours. At 37 ° C in a 5% CO2 humidified incubator, microcultures are irradiated with tritium thymidine (1 pCi / well) for 4 hours. Cultures are frozen at -70 ° C for 24 hours, then thawed and grown using a Skarton semiautomatic cell growth apparatus. Samples are evaluated by liquid scintillation using a Wallac BetaPlace β counter.

DMBA indukuojamo krūties auglio inhibavimasInhibition of DMBA-Induced Breast Tumor

Sprague-Dawley žiurkių patelėms, gautoms iš Harlan Industries,Sprague-Dawley female rats from Harlan Industries,

Indianapolis, Indiana, sukeliami nuo estrogeno priklausomi krūties augliai. Sulaukus maždaug 55 dienų amžiaus, žiurkėms vieną kartą sumaitinama 20 mg 7,12-dimetilbenz[a]antraceno (DMBA). Po maždaug 6 savaičių nuo DMBA įvedimo pieno liaukos palpuojamos laukiant auglių pasirodymo. Kai atsiranda vienas ar keli augliai, kiekvieno jų ilgesnysis ir trumpesnysis diametrai išmatuojami matavimo šakute, išmatavimai užrašomi, o gyvuliukas atrenkamas eksperimentui. Stengiamasi tolygiai paskirstyti įvairių išmatavimų auglius gydymo ir kontrolinėje grupėse, kad vidutinio dydžio augliai vienodai pasiskirstytų tyrimo grupėse. Kiekviename eksperimente kontrolinėse ir tyrimo grupėse buvo 5-9 gyvuliukai.Estrogen-dependent breast tumors in Indianapolis, Indiana. At approximately 55 days of age, rats are given a single dose of 20 mg of 7,12-dimethylbenz [a] anthracene (DMBA). About 6 weeks after DMBA administration, the mammary glands are palpated in anticipation of the appearance of tumors. When one or more tumors occur, the longer and shorter diameters of each are measured with a measuring fork, the measurements recorded, and the animal selected for the experiment. Efforts are made to distribute tumors of various sizes evenly across treatment and control groups to ensure that medium-sized tumors are equally distributed across study groups. Each experiment contained 5-9 animals in the control and study groups.

F-I įvedamas arba intraperitoniniu injekcijų 2 % gumiarabike pavidale, arba peroraliai. Peroraliai įvedami junginiai ištirpinami arba suspenduojami 0,2 ml kukurūzų aliejaus. Kiekvienas gydymas, įskaitant kontrolinį veikimą gumiarabiku ir kukurūzų aliejumi, vyksta kasdien vieną kartą per dieną kikekvienam tiriamam gyvuliukui. Po pradinio auglių išmatavimo ir tiriamų gyvuliukų atrinkimo, augliai matuojami kas savaitę aukščiau aprašytu būdu. Gyvuliukų gydymas ir matavimas tęsiasi 3-5 savaites, po to nustatomas galutinis auglių plotas. Kontroliniam gydymui ir gydymui kiekvienu junginiu nustatomas vidutinio auglio ploto pokytis.F-I is administered either intraperitoneally by injection in 2% gum arabic or orally. Orally administered compounds are dissolved or suspended in 0.2 ml corn oil. Each treatment, including the control treatment with gum arabic and corn oil, is performed once a day for each animal tested. After initial tumor measurement and selection of test animals, tumors are measured weekly as described above. Treatment and measurement of the animals is continued for 3-5 weeks, after which the final tumor area is determined. For control and treatment with each compound, change in mean tumor area is determined.

Gimdos fibrozės tyrimo metodika bandymas: 3-20 moterų, kurioms pasireiškia gimdos fibrozė, skiriamas F-I.Testing Methods for Uterine Fibrosis Test: 3-20 women with uterine fibrosis are given F-I.

Skiriamas junginio kiekis yra 0,1-1000 mg/dienai, o vartojimo trukmė 3 mėn. Moterys stebimos vartojimo metu ir 3 mėn. nutraukus vartojimą gimdos fibrozės atžvilgiu.The dose is 0.1-1000 mg / day for 3 months. Women are monitored during use and for 3 months. discontinuation for uterine fibrosis.

2 bandymas : naudojama ta pati metodika kaip ir 1 bandyme, tik vaisto vartojimo trukmė yra 6 mėn.Test 2: Use the same procedure as in Test 1, except for 6 months.

bandymas: naudojama ta pati metodika kaip ir 1 bandyme, tik vaisto vartojimo trukmė yra 1 metai.Test 1: The same procedure as in Test 1 is used, except for 1 year.

bandymas: lytiškai subrendusių jūros kiaulyčių patelių lejomiomaL indukuoti naudojamas ilgalaikis stimuliavimas estrogenu. Gyvuliukai gauną*.Test: Long-term estrogen stimulation is used to induce leiomyomaL in sexually mature guinea-pigs. Animals get *.

estradiolio injekcijų pavidale 3-5 kartus per savaitę 2-4 mėn. arba kol atsiranda^ auglys. Vaistas, susidedantis iš F-I arba nešiklio, įvedamas kasdien 3-16 savaičių, po. to gyvuliukai numarinami, o gimda atskiriama ir nalizuojama auglio regresijos požiūriu.oestradiol injections 3-5 times a week for 2-4 months. or until the ^ tumor appears. The drug consisting of F-I or a carrier is administered daily for 3-16 weeks, followed by. the animals are killed and the uterus is isolated and analyzed for tumor regression.

5 bandymas: žmogaus lejomiomos audiniai implantuojami į lytiškai subrendusių kastruotų beplaukiu pelių patelių pilvo ertmę ir/arba gimdos raumeninį audinį. Duodama egzogeninio estrogeno, siekiant indukuoti eksplantuoto audinio augimą. Kai kuriais atvejais atskirtos auglio ląstelės prieš implantavimą auginamos in vitro. Vaistas, susidedantis iš F-I arba nešiklio, įvedamas kasdien 3-16 savaičių, implantai pašalinami ir išmatuojama, ar paaaugo, ar sumažėjo. Numarinus gyvuliukus, gimdos išimamos, kad būtų galima įvertinti organo būklę.Test 5: Human leukoma tissue is implanted into the abdominal cavity and / or uterine muscle tissue of sexually mature castrated female mice. Exogenous estrogen is administered to induce the growth of explanted tissue. In some cases, isolated tumor cells are grown in vitro before implantation. A drug consisting of F-I or a carrier is administered daily for 3 to 16 weeks, with implants removed and measured for growth or decrease. After killing animals, the uterus is removed to assess the condition of the organ.

bandymas: moters gimdos fibroidinio auglio audiniai atskiriami ir laikomi in vitro kaip pirminė netransformuota kultūra. Chirurginiai mėginiai praleidžiami per sterilų sietą, arba, alternatyviai, pašalinami aplinkiniai audiniai, kad gautume vienų ląstelių suspensiją. Ląstelės auginamos terpėje, turinčioje 10 % serumo ir antibiotiko. Nustatomas augimo greitis esant ir nesant estrogeno. Ląstelės tiriamos jų sugebėjimo gaminti komplemento komponentę C3 požiūriu ir pagal jų atsaką j augimo faktorių ir augimo hormoną. In vitro kultūra įvertinama pagal jos išvešėjimą paveikus progestinais, GnRH, F-I ir nešikliu. Steroidinio hormono receptorių kiekis įvertinamas kas savaitę, siekiant nustatyti, ar ši svarbi ląstelės savybė išlieka in vitro. Naudojami audiniai iš 5-25 pacientų.Test 1: Female uterine fibroid tumor tissue is isolated and stored in vitro as primary non-transformed culture. Surgical specimens are passed through a sterile sieve, or alternatively, surrounding tissue is removed to obtain a single cell suspension. Cells are grown in medium containing 10% serum and antibiotic. Growth rate in the presence and absence of estrogen is determined. Cells are tested for their ability to produce complement component C3 and their response to growth factor and growth hormone. In vitro culture is evaluated by expression of progestins, GnRH, F-I and vehicle. Steroid hormone receptor levels are evaluated weekly to determine if this important cell property remains in vitro. Tissues from 5-25 patients are used.

bandymas: F-I sugebėjimas inhibuoti estrogeno stimuliuojamą iš lejomiomos kilusių ELT ląstelių linijos proliferaciją išmatuojamas iš esmės taip pat kaip aprašyta Fuchs et ai., “Inhibition of Estrogen-Stimulated Grovvth of Uterine Leiomyomas by Selective Estrogen Receptor Modulators”, Mol. Car., 17(3):151159 (1996), kuris čia cituojamas.assay: The ability of F-I to inhibit estrogen-stimulated proliferation of a leukoma-derived ELT cell line is measured essentially as described by Fuchs et al., Inhibition of Estrogen-Stimulated Gravity of Uterine Leiomyomas by Selective Estrogen Receptor Modulators, Mol. Car., 17 (3): 151159 (1996), which is incorporated herein by reference.

Endometriozės tyrimo metodika bandymas: tirta 12-30 suaugusių CD kamieno žiurkių patelių. Jos po lygiai padalinamos į tris grupes. Stebimas visų gyvuliukų estrogeninis ciklas. Ovuliacijos dieną kiekvienai patelei atliekama chirurginė operacija. Kiekvienos grupės patelėms išpjaunamas kairysis gimdos ragas, supjaustomas smulkiais ploteliais, kurie laisvai prisiuvami įvairiose vietose, gretimose mezenterinei kraujo srovei. Be to, 2 grupės patelėms pašalintos kiaušidės. Kitą dieną po operacijos 1 ir 2 grupės gyvuliukai gavo intraperitonines vandens injekcijas 14 dienų, tuo tarpu 3 grupė gavo intraperitonines F-I 1,0 mg kilogramui kūno masės injekcijas. Po 14 dienų gydymo kiekviena patelė numarinama ir išimami gimdos gleivinės eksplantai, antinksčiai, likusi gimda ir kiaušidės, kur įmanoma, ir paruošiami histologiniam tyrimui. Kiaušidės ir antinksčiai pasveriami.Testing methodology for endometriosis test: 12-30 adult female CD strain rats. They are divided equally into three groups. The estrogenic cycle of all animals is monitored. On the day of ovulation, each female undergoes surgery. In each group of females, the left horn of the uterus is cut and cut into small areas, which are loosely sutured at various locations adjacent to the mesenteric blood stream. In addition, ovaries were removed from Group 2 females. The day after surgery, Group 1 and Group 2 animals received intraperitoneal injections of water for 14 days, whereas Group 3 received intraperitoneal F-I injections of 1.0 mg / kg body weight. After 14 days of treatment, each female is sacrificed and the explants, adrenal glands, remaining uterus and ovaries removed, where possible, and prepared for histological examination. The ovaries and adrenal glands are weighed.

bandymas: tirta 12-30 suaugusių CD kamieno žiurkių patelių. Jos po lygiai padalinamos į tris grupes. Stebimas visų gyvuliukų estrogeninis ciklas. Ovuliacijos dieną kiekvienai patelei atliekama chirurginė operacija. Kiekvienos grupės patelėms išpjaunamas kairysis gimdos ragas, supjaustomas smulkiais ploteliais, kurie laisvai prisiuvami įvairiose vietose, gretimose mezenterinei kraujo srovei. Po maždaug 50 dienų nuo operacijos 1 grupės gyvuliukai gavo vandens intraperitonines injekcijas 21 dieną, tuo tarpu 2 grupės gyvuliukai gavo intraperitonines F-I 1,0 mg kilogramui kūno masės injekcijas tokį pat laiką. Po 21 dienos gydymo patelės numarinamos, endometriumo eksplantai ir antinksčiai išimami ir pasveriami. Eksplantai išmatuojami augimo įvertinimui. Stebimas estrogeninis ciklas.Test: 12-30 adult female CD strain rats. They are divided equally into three groups. The estrogenic cycle of all animals is monitored. On the day of ovulation, each female undergoes surgery. In each group of females, the left horn of the uterus is cut and cut into small areas, which are loosely sutured at various locations adjacent to the mesenteric blood stream. About 50 days after surgery, Group 1 animals received intraperitoneal injections of water for 21 days, whereas Group 2 animals received intraperitoneal injections of 1.0 mg / kg F-I at the same time. After 21 days of treatment, females are sacrificed, endometrial explants and adrenal glands are removed and weighed. The implants are measured for growth evaluation. The estrogenic cycle is monitored.

bandymas: endometriumo audinių autografai naudojami endometriozės indukavimui žiurkėms ir/arba triušiams. Lytiškai subrendusioms patelėms pašalinamos abi kiaušidės, estrogenas tiekiamas egzogeniškai, tokiu būdu užtikrinant pastovų tam tikrą hormono lygį. 5-150 gyvuliukų į pilvo ertmę implantuojama endometriumo audinys, ir įvedama estrogeno eksplantuotų audinių augimui skatinti. Gydymo tikslais kasdien 3-16 savaičių per skrandžio zondą’ įvedama šio išradimo junginio, po to implantai pašalinami ir vertinamas jų augimaiar regresija. Numarinus, paimama likusi gimdos dalis endometriumo būklės³ įvertinimui.test: endometrial tissue autographs are used to induce endometriosis in rats and / or rabbits. In sexually mature females, both ovaries are removed and estrogen is delivered exogenously, thereby ensuring a certain level of the hormone. 5 to 150 animals are implanted in the abdominal cavity with endometrial tissue, and estrogen is introduced to stimulate the growth of explanted tissues. For therapeutic purposes, the compound of the invention is administered daily for 3 to 16 weeks through a gastric probe, after which the implants are removed and their growth regressed. After sacrifice, the remainder of the uterus is taken for assessment of endometrial status ³ .

bandymas: moters endometriumo audiniai implantuoti į lytiškai subrendusių kastruotų plikųjų pelių patelių pilvo retmę. Estrogenas tiekiamas egzogeniškai eksplantuotų audinių augimo skatinimui. Kai kuriais atvejais endometriumo ląstelės prieš implantavimą kultivuojamos in vitro. Gydymo tikslais kasdien 3-16 savaičių per skrandžio zondą įvedama šio išradimo junginio, po to implantai pašalinami ir vertinamas jų augimas ar regresija. Numarinus, paimama gimda nepaliesto endometriumo būklės įvertinimui.Test: Female endometrial tissue implanted into the abdominal wall of sexually mature castrated female mice. Estrogen is supplied to promote the growth of exogenously explanted tissues. In some cases, endometrial cells are cultured in vitro before implantation. For therapeutic purposes, the compound of the invention is administered daily for 3 to 16 weeks via a gastric probe, followed by removal of the implants and evaluation of growth or regression. At death, the uterus is taken for assessment of intact endometrial condition.

5 bandymas: paimami moters endometriumo audinių ir jie auginami in vitro kaip pirminės netransformuotos kultūros. Chirurginiai mėginiai praleidžiami per sterilų sietą, arba, alternatyviai, pašalinami aplinkiniai audiniai, kad gautume vienų ląstelių suspensiją. Ląstelės auginamos terpėje, turinčioje 10 % serumo ir antibiotiko. Nustatomas augimo greitis esant ir nesant estrogeno. Ląstelės tiriamos jų sugebėjimo gaminti komplemento komponentę C3 požiūriu ir pagal jų atsaką į augimo faktorių ir augimo hormoną. In vitro kultūra įvertinama pagal jos proliferaciją paveikus progestinais, GnRH, F-I ir nešikliu. Steroidinio hormono receptorių kiekis įvertinamas kas savaitę, siekiant nustatyti, ar ši svarbi ląstelės savybė išlieka in vitro. Naudojami audiniai iš 5-25 pacientų.Test 5: Female endometrial tissues are harvested and grown in vitro as primary non-transformed cultures. Surgical specimens are passed through a sterile sieve, or alternatively, surrounding tissue is removed to obtain a single cell suspension. Cells are grown in medium containing 10% serum and antibiotic. Growth rate in the presence and absence of estrogen is determined. Cells are tested for their ability to produce complement component C3 and for their response to growth factor and growth hormone. In vitro culture is evaluated for its proliferation by treatment with progestins, GnRH, F-I and vehicle. Steroid hormone receptor levels are evaluated weekly to determine if this important cell property remains in vitro. Tissues from 5-25 patients are used.

CNS susirgimai, įskaitant Alcheimerio ligaCNS diseases including Alzheimer's disease

Estrogenai, tokie kaip 17p-estradiolis, reguliuoja genų transkripciją susirišdami su estrogeno receptoriais (ER), kurių yra tam tikrų ląstelių populiacijų citoplazmoje. ER ligandų aktyvavimas yra būtina komplekso branduolių transporto sąlyga, kur susirišimas su 13 bazių porų pasikartojančia DNR seka (atsako į estrogeną elementas arba ERE) pradeda transkripcijos aparato sudarymą, kuris baigiasi atitinkamų tikslo genų aktyvavimu. Nustatyti įvairūs genai, kuriuos reguliuoja estrogenas. Jų tarpe yra citoskeleto baltymai, neurotransmiterių biosintetiniai ir metaboliniai fermentai ir receptoriai, taip pat kiti hormonai ir neuropeptidai. ERE buvo identifikuoti įvairiems nuo estrogeno priklausomiems genams, įskaitant vitelogeniną, c-fos, prolaktiną ir liuteinizuojantį hormoną.Estrogens, such as 17β-estradiol, regulate gene transcription by binding to estrogen receptors (ERs), which are found in the cytoplasm of certain cell populations. Activation of ER ligands is a prerequisite for nuclear transport of the complex, where binding to a 13 base pair repetitive DNA sequence (estrogen response element or ERE) begins the construction of a transcription apparatus that ends with the activation of the corresponding target genes. Various genes regulated by estrogen have been identified. These include cytoskeletal proteins, biosynthetic and metabolic enzymes and receptors on neurotransmitters, as well as other hormones and neuropeptides. EREs have been identified for a variety of estrogen-dependent genes, including vitelogenin, c-fos, prolactin, and luteinizing hormone.

ERE tipo sekos, reikšmingos centrinei nervų sistemai, buvo identifikuotos p75ngr ir trkA, abiem atvejais veikė kaip signalinės neurotropinų molekulės: nervų augimo faktoriaus (NGF), smegenų kilmės nervų augimo faktoriaus (BDNGF) ir neurotropino-3. Postuluojama, kad sąveika tarp neurotropinų ir estrogenų yra svarbi bazalinių priekinių smegenų neuronų (kurie degeneruoja esant Alcheimerio ligai) išsivystymui ir išgyvenimui, taigi, klinikinės sąlygos, kuriose pasireiškia estrogeno deficitas (kaip po menopauzės) gali prisidėti prie šių neuronų praradimo.ERE-like sequences important for the central nervous system were identified by p75ngr and trkA, both acting as signaling neurotropin molecules: nerve growth factor (NGF), brain-derived nerve growth factor (BDNGF), and neurotropin-3. Interactions between neurotropins and estrogens have been postulated to be important for the development and survival of basal forebrain neurons (which degenerate in Alzheimer's disease), and thus clinical conditions in which estrogen deficiency occurs (as in postmenopause) may contribute to the loss of these neurons.

Siekiant nustatyti panašumus ir/arba skirtumus tarp F-I ir estrogeno daromos įtakos genų ekspresijai įvairiose smegenų srityse, atliktas eksperimentas su žiurkėmis, kurioms pašalintos kiaušidės (paruoštomis kaip aprašyta aukščiau. Šešių savaičių amžiaus žiurkėms kasdien įvedama estradiolio benzoato (0,03 mg/kg), F-I arba nešiklio (kontrolė) dozuota subkutaninė i njekcija. Po penkių savaičių gydymo gyvuliukai numarinami, jų smegenys pašalinamos ir mikropjūvio pagalba atskiriamas hipokampas. Hipokampas iš karto atšaldomas skystu azotu ir laikomas -70 °C temperatūroje. Iš atitinkamą gydymą turėjusių ir kontrolinių grupių audinių išskiriama totalinė RNR, ir atliekama atvirkštinė transkripcija, naudojant 3’ oligonukleotidinj praimerį, kuris yra parinktas specifinėms iRNR (poly-A+) populiacijoms. Polimerazinė grandinės sintezė (PGS) vykdoma mišinyje, susidedančiame iš atsitiktinių 5’ oligonukleotidų (10 bazių porų ilgio; iš viso 150), reakcijos buferio, Taq polimerazės ir ³²PdTCP.To determine similarities and / or differences between FI and estrogen-mediated gene expression in various brain regions, an ovariectomized rat was prepared (as described above. Estradiol benzoate (0.03 mg / kg) was administered daily for six weeks in rats, Subcutaneous injection of FI or vehicle (control): After five weeks of treatment, the animals are sacrificed, their brains removed, and the hippocampus isolated by microvascularization, immediately cooled with liquid nitrogen and stored at -70 ° C. total RNA, and reverse transcription using a 3 'oligonucleotide primer selected for specific populations of iRNA (poly-A +) Polymerase chain synthesis (PGS) is performed in a mixture of random 5' oligonucleotides (10 base pairs in total; 150 ) , reaction buffer, Taq polymerase, and ³² PdTCP.

Po 40 amplifikacijos ciklų reakcijos produktai išskirstomi pagal dydį 6 % TBE-karbamido gelyje, išdžiovinami ir fotografuojami Rentgeno spinduliais. Gauti gydymo grupių iRNR vaizdai palyginami tarpusavyje.After 40 cycles of amplification, the reaction products are resolved on a 6% TBE-urea gel, dried and X-rayed. The resulting iRNA images of the treatment groups are compared with each other.

F-I naudojimas kartu su estrogenuUse of F-I with estrogen

Moterims peri- ir postmenopauzinėje fazėje dažnai skiriama pakaitinė hormonų terapija (PHT) negatyvių pasekmių, susijusių endogeninio estrogeno cirkuliacijos nutrūkimu, pavyzdžiui, karščio bangų, pašalinimui. Tačiau PHT siejasi su padidėjusia kai kurių vėžio rūšių, įskaitant gimdos ir krūties vėžį, rizika. F-I gali būti naudojamas kartu su PHT šios rizikos panaikinimui.Women in the peri- and post-menopausal phase are often prescribed hormone replacement therapy (HRT) to eliminate the negative consequences associated with interruption of endogenous estrogen circulation, such as hot flashes. However, HRT is associated with an increased risk of some cancers, including uterine and breast cancers. F-I can be used in combination with HRT to eliminate this risk.

F-I naudojimas kartu su aromatazės inhibitoiumiUse of F-I in combination with an aromatase inhibitor

Teoriškai moters postmenopauzėje kiaušidės nefunkcionuoja. Jos organizme vienintelis estrogeno šaltinis yra antinksčių androgenų virtimas į estrogenus, veikiant fermentui aromatazei, kuri randama periferiniuose audiniuose (įskaitant riebalus, raumenis ir patį auglį). Tokiu būdu, vaistai, inhibuojantys aromatazę (aromatazės inhibitoriai) išvalo moters postmenopauzėje organizmą nuo cirkuliuojančio estrogeno. Estrogeno pašalinimas inhibuojant aromatazę yra reikšmingas gydymo pasirinkimas pacientėms su metastaziniu krūties vėžiu. Gydant aromatazės inhibitoriumi, cirkuliuojančio estrogeno trūkumas gali sąlygoti negatyvius nepageidautinus pašalinius efektus, pavyzdžiui, serumo lipidų lygį. F-I galima naudoti šių negatyvių efektų inhibavimui.In theory, the ovaries do not function in postmenopausal women. In its body, the only source of estrogen is the conversion of adrenal androgens into estrogens by the enzyme aromatase found in peripheral tissues (including fat, muscle and the tumor itself). In this way, aromatase inhibitors (aromatase inhibitors) clear the circulating estrogen in the postmenopausal woman. Estrogen removal by aromatase inhibition is a significant treatment choice in patients with metastatic breast cancer. Circulating estrogen deficiency when treated with an aromatase inhibitor can lead to adverse side effects such as serum lipid levels. F-I can be used to inhibit these negative effects.

F-I naudojimas kartu su LHRH analoguUse of F-I with LHRH analog

Pastovus LHRH (liutenizuojantį hormoną atlaisvinantis hormonas) analogo naudojimas inhibuoja estrogeno gamybą premenopauzėje esančios moters organizme, desensibilizuodamas hipofizę, kuri tuomet nustoja stimuliuoti estrogeno gamybą kiaušidėse. Klinikinis efektas yra “farmacinė ovariektomija”, kuri yra grįžtama nutraukus LHRH naudojimą Gydant LHRH analogu, cirkuliuojančio estrogeno trūkumas gali sąlygoti negatyvius nepageidautinus pašalinius efektus, pavyzdžiui, serumo lipidų lygį. F-I galima naudoti šių negatyvių efektų inhibavimui.Constant use of the LHRH (lutenizing hormone releasing hormone) analogue inhibits estrogen production in the premenopausal woman by desensitizing the pituitary gland, which then stops stimulating estrogen production in the ovaries. The clinical effect is a "pharmaceutical ovariectomy" which is reversible upon discontinuation of LHRH Treatment with LHRH analogue may lead to negative undesirable side effects, such as serum lipid levels, due to the lack of circulating estrogen. F-I can be used to inhibit these negative effects.

Acetilcholino kiekio didinimasIncreasing acetylcholine content

Žinoma, kad pacientų, sergančių Alcheimerio liga, hipokampe yra žymiai mažesnis cholinerginių neuronų kiekis, lyginant su sveikais žmonėmis. Panašu, kad progresuojantis šių cholinerginių neuronų mažėjimas atspindi šių pacientų progresuojantį atminties ir pažinimo funkcijos praradimą. Manoma, kad šių neuronų kiekio mažėjimo viena iš priežasčių yra neurotransmiterio acetilcholino kiekio arba funkcijos sumažėjimas.The hippocampus of patients with Alzheimer's disease is known to have significantly lower levels of cholinergic neurons than healthy subjects. The progressive decline in these cholinergic neurons seems to reflect the progressive loss of memory and cognitive function in these patients. One reason for the decline in these neurons is that the amount or function of the neurotransmitter acetylcholine is reduced.

Acetilcholino kiekis neuronuose paprastai nustatomas pagal tai, kur pasistūmusi pusiausvyra tarp jo biosintezės ir biosuskaidymo. Fermentas cholino acetiltransferazė (ChAT) tiesiogiai atsako už jo sintezę, o acetilcholinesterazė (AChE) už suskilimą.Acetylcholine levels in neurons are usually determined by the equilibrium between its biosynthesis and biodegradation. The enzyme choline acetyltransferase (ChAT) is directly responsible for its synthesis, while acetylcholinesterase (AChE) is responsible for its degradation.

Siekiant įvertinti F-I įtaką ChAT kiekiui, atliktas toks eksperimentas:The following experiment was performed to evaluate the influence of F-I on ChAT content:

paruošus žiurkes pagal aukščiau aprašytą metodiką, 40 žiurkių kasdien subkutaninės injekcijos būdu arba per skrandžio zondą įvedama 3 mg/kg/per dieną F-I nešiklyje, turinčiame 10 % ciklodekstrino, 0,03-0,3 mg/kg/per dieną, arba nešiklio kaip kontrolės. Gyvuliukai veikiami 3-10 dienų. Kiekviename dozavimo režime buvo dvidešimt gyvuliukų . Tam tikrais laiko tarpais gyvuliukai numarinami ir smegenys išimamos. Hipokampas ir priekinės srities žievė homogenizuojama, ChAT aktyvumas nustatomas pagal acetilcholino biosintezę radioaktyvių žymių metodu. Ši metodika aprašyta Schoepp et ak, J. Neural Transmiss., 78:183-193,after preparation of the rats according to the procedure described above, 40 rats are dosed daily by subcutaneous injection or by gavage with 3 mg / kg / day in FI vehicle containing 10% cyclodextrin, 0.03-0.3 mg / kg / day or as vehicle. control. The animals are exposed for 3-10 days. There were twenty animals in each dosing regimen. At certain intervals, the animals are killed and the brain removed. The hippocampus and frontal cortex are homogenized and ChAT activity is determined by acetylcholine biosynthesis by radiolabeling. This procedure is described in Schoepp et al., J. Neural Transmiss., 78: 183-193.

1989, kuris čia cituojamas.1989, which is cited here.

Kaip ir buvo tikėtasi, OVX gyvuliukuose ChAT kiekis yra sumažintas >50 % (p<0,001), lyginant su kontrole.As expected, in OVX animals, ChAT levels were reduced by> 50% (p <0.001) compared to controls.

Kitame šio išradimo įgyvendinime F-I naudojamas derinyje su AChE inhibitoriumi. AChE inhibitoriaus naudojimas padidina acetilcholino kiekį, blokuodamas jo suskilimą per AChE inhibiciją.In another embodiment of the present invention, F-I is used in combination with an AChE inhibitor. The use of an AChE inhibitor increases acetylcholine levels by blocking its degradation through AChE inhibition.

Gėrybinė prostatos hiperplazija (BPH)Benign prostatic hyperplasia (BPH)

Ryšys tarp estrogeno veikimo ir BPH bei prostatos karcinomos gydymo bendrais bruožais aprašytas PCT paraiškoje Nr. WO 98/07274, tarptautinės;;The relationship between estrogen action and general treatment of BPH and prostate carcinoma is described in PCT application no. WO 98/07274, International ;;

publikacijos data 1998 spalio 15 d. ή.publication date October 15, 1998 ή.

Toliau aprašytuose eksperimentuose keliose žmogaus prostatos vėžio ląstelių* linijose įvertintas F-I sugebėjimas surišti estrogeno receptorius. yIn the experiments described below, several human prostate cancer cell lines * evaluated the ability of F-I to bind to estrogen receptors. y

Žmogaus prostatos vėžio ląstelių linijų LNCaP, DU-45 ir PC-3 lizatai pagaminti TEG terpėje, susidedančioje iš 50 nM Tris*HCl pH 7,4, 1,5 mM etilendiamino tetraacto rūgšties (EDTA) 0,4 M KCI, 10 % glicerolio, 0,5 mM 2-ME ir 10 mM natrio molibdato ir dar turinčioje proteazės inhibitorius pepstatiną (1 mg/ml), leupeptiną (2 mg/ml), aprotininą (5 mg/ml) ir fenilmetilsulfonilfluoridą (PMSF 0,1 mM) (TEGP).LNCaP, DU-45 and PC-3 lysates of human prostate cancer cell lines were prepared in TEG medium containing 50 nM Tris * HCl pH 7.4, 1.5 mM ethylenediamine tetraacetic acid (EDTA) 0.4 M KCl, 10% glycerol , 0.5 mM 2-ME and 10 mM sodium molybdate, and further containing the protease inhibitors pepstatin (1 mg / ml), leupeptin (2 mg / ml), aprotinin (5 mg / ml) and phenylmethylsulfonyl fluoride (PMSF 0.1 mM). (TEGP).

Ląstelių lizatai nucentrifuguojami, nuosėdos resuspenduojamos šaltameCell lysates were centrifuged and the pellet resuspended in cold

TEGP (1 ml TEGP/100 mg nuosėdų) ir 30 sekundžių veikiamos ultragarsu Branson Model 450 ultragarso aparatu. Lizatai nusodinami centrifuguojant 10000xG greičiu 15 minučių 4 °C temeperatūroje, po to supernatantai atskiriami ir arba naudojami iškart, arba laikomi -70 °C temperatūroje.TEGP (1 mL TEGP / 100 mg sediment) was exposed to ultrasound on a Branson Model 450 ultrasound machine for 30 seconds. The lysates are precipitated by centrifugation at 10000xG for 15 minutes at 4 ° C, after which the supernatants are separated and either used immediately or stored at -70 ° C.

Konkurencinio surišimo tyrimas: surišimo buferis yra TEG, kuriame 0,4 M KCI pakeistas 50 mM NaCi, ir į kurį dar pridėta 1 mg/ml ovalbumino (TEGO). F-I praskiedžiamas iki 20 nM TEGO, iš kurio paruošiamos triskartinio praskiedimo serijos. Analizė atliekama apvaliadugnėse polipropileno mikroplokštelės duobutėse, pakartojant tris kartus. Į kiekvieną duobutę įpilama 35 μΐ tričiu pakeisto 17p-estradiolio (0,5 nM, specifinis aktyvumas 60,1 Ci/mmol, DuPontNew England Nuclear, Boston, MA) ir 35 μΐ konkuruojančio tiriamojo junginio šalto tirpalo (0,1 nM - 5 mM) arba TEGO, ir po 5 min. inkubavimo 4 °C temperatūroje purtant pridedama 70 μΐ MCF-7 ląstelių linijos lizato.Competitive Binding Assay: The binding buffer is TEG with 0.4 M KCl replaced with 50 mM NaCl, to which 1 mg / ml ovalbumin (TEGO) has been added. F-I is diluted to 20 nM in TEGO to form a triplicate dilution. The analysis is carried out in round bottom wells of a polypropylene microplate, repeated three times. To each well was added 35 μΐ of tritiated 17β-estradiol (0.5 nM, specific activity 60.1 Ci / mmol, DuPontNew England Nuclear, Boston, MA) and 35 μΐ of a cold solution of the test compound (0.1 nM - 5 mM). ) or TEGO, and after 5 min. 70 μΐ MCF-7 cell line lysate was added by shaking incubation at 4 ° C.

Plokštelės 24 vai. inkubuojamos 4 °C temperatūroje, po to į kiekvieną duobutę pridedama 70 μΐ dekstranu padengtos anglies (DCC) ir 4 °C temperatūroje energingai purtoma 8 minutes. Po to plokštelės 10 min. centrifuguojamos 1500xG greičiu 4 °C temperatūroje. Iš kiekvienos duobutės supernatantas surenkamas į polistireno mikroplokštelę scintiliacijos matavimamsPlates for 24 hours. Incubate at 4 ° C, then add 70 μΐ of dextran-coated carbon (DCC) to each well and shake vigorously at 4 ° C for 8 minutes. Plates were then placed for 10 min. centrifuged at 1500xG at 4 ° C. Collect supernatant from each well in a polystyrene microplate for scintillation measurements

Wallac Microbeta Model 1450 skaitikliu. Įvedus pataisą nuskaitymo efektyvumui (35-40 %) ir fonui, radioaktyvumas išreiškiamas skilimais per minutę (DPM). Papildoma kontrolė yra visų impulsų skaičius ir visų impulsų + DCC skaičius, siekiant įvertinti apatinę DCC ištraukiamų impulsų ribą. Šių konkuruojančio surišimo tyrimų rezultatai išreiškiami vidutiniu procentiniu surišimu (surišimo % +/- standartinė paklaida, naudojant formulę:Wallac Microbeta Model 1450 counter. After adjusting for scanning efficiency (35-40%) and background, radioactivity is expressed in terms of Dissolution Per Minute (DPM). The additional control is the total number of pulses and the number of all pulses + DCCs to estimate the lower limit of the pulses drawn by the DCC. The results of the following competitive binding studies are expressed as the mean percentage binding (% binding +/- standard error, using the formula:

DPM tir.jung· ' DPM visi imp. + DCC surišimo % =--x 100DPM tir.jung · 'DPM all imp. + DCC binding% = - x 100

DPM be jokio tir.jung· ~ DPM visi imp. + DCCDPM without any solution Jung · ~ DPM all imp. + DCC

Krūties vėžio profilaktikaBreast Cancer Prevention

Šis išradimas taip pat susijęs su F-I skyrimu pacientams, turintiems de nuovo krūties vėžio išsivystymo rizikos faktorių. Čia vartojamas terminas de nuovo reiškia normalių krūties ląstelių transformacijos arba metamorfozės j vėžines ar piktybines ląsteles nebuvimą. Tokia transformacija gali atsirasti pirminės ar dukterinės ląstelės stadijoje evoliucinio proceso metu, arba gali būti vienintelis lemiamas įvykis. Šis de nuovo procesas skiriasi nuo jau transformuotų arba supiktybėjusių ląstelių metastazavimo, kolonizacijos ar paplitimo iš pirminio auglio vietos į naujas vietas.The present invention also relates to the administration of F-I to patients with risk factors for the development of de novo breast cancer. As used herein, the term de nuovo refers to the absence of normal breast cell transformation or metamorphosis into cancerous or malignant cells. Such transformation may occur at the primary or daughter cell stage during the evolutionary process, or may be the only decisive event. This de novo process is distinct from metastasis, colonization, or proliferation of already transformed or malignant cells from the primary tumor site to new sites.

Asmuo, neturintis konkretaus krūties vėžio išsivystymo rizikos faktoriaus, yra toks, kuriam gali atsirasti de nuovo krūties vėžys ir kuris neturi jokių įrodymų ar įtarimo dėl potencialios galimybės ligai atsirasti bei kuriam niekada nebuvo diagnozuotas šis susirgimas. Didžiausias rizikos faktorius, įtakojantis krūties vėžio atsiradimui, yra asmeninė susirgimo šia liga istorija arba ankstesnis šios ligos pasirodymas, net jeigu liga yra remisijoje be jokių jos buvimo įrodymų. Dar vienas rizikos faktorius yra ligos buvimas giminėje.A person without a specific risk factor for the development of breast cancer is one who is at risk of developing de novo breast cancer, has no evidence or suspicion of the potential for developing the disease, and has never been diagnosed with the condition. The greatest risk factor for the development of breast cancer is the personal history of the disease or the onset of the disease, even if the disease is in remission without any evidence of its presence. Another risk factor is the presence of the disease in the family.

Krūties auglių sukėlimas žiurkėms, įvedant joms karcinogeninio N-itrozo-Nmetilkarbamido yra plačiai priimtas krūties vėžio tyrimo gyvuliukuose modelis,' pripažintas tinkamu cheminių profilaktikos agentų įtakos tyrimui. ⁵ The induction of breast tumors in rats by the administration of the carcinogenic N-itroso-N-methylurea is a widely accepted animal model of breast cancer, recognized as being suitable for testing the influence of chemical prophylactic agents. ⁵

Dviejuose atskiruose tyrimuose 55 dienų amžiaus Sprague-Dawley žiurkės gavo intaveninę (1 tyrimas) arba intraperitoninę (2 tyrimas) 50 mg N-nitrozo-Nmetilkarbamido dozę kilogramui kūno masės savaitę prieš pašeriant ad libitum maistu, į kurį primaišyti įvairūs kiekiai F-I, (Z)-2-[4-(l,2-difenil-l-butenil)fenoksij20 Ν,Ν-dimetiletanamino bazės (tamoksifeno bazė) arba kontrolės.In two separate studies, 55-day-old Sprague-Dawley rats received an intravenous (study 1) or intraperitoneal (study 2) dose of 50 mg N-nitroso-Nmethylurea / kg body weight per week prior to ad libitum food supplemented with various amounts of FI, (Z). -2- [4- (1,2-Diphenyl-1-butenyl) phenoxy],? - dimethylethanamine base (tamoxifen base) or control.

tyrime maisto kiekis 60 mg/kg ir 20 mg/kg atitinka apytikriai palyginamas dozes 3 ir 1 mg/kg kūno masės tiriamiems gyvuliukams.in the study, food contents of 60 mg / kg and 20 mg / kg correspond to approximately comparable doses of 3 and 1 mg / kg body weight of the test animals.

tyrime maisto kiekis 20, 6, 2 mg/kg ir 0,6 mg/kg atitinka apytikriai palyginamas dozes 1,0,3,0,1 ir 0,03 mg/kg kūno masės tiriamiems gyvuliukams.in the study, food contents of 20, 6, 2 mg / kg and 0.6 mg / kg correspond to approximately comparable doses of 1.0,3,0.1 and 0.03 mg / kg body weight of the test animals.

vv

Žiurkės buvo stebimos dėl toksiškumo paisreiškimo ir kartą per savaitę sveriamos bei palpuojama laukiant auglio atsiradimo. Gyvuliukai numarinami po trylikos savaičių (1 tyrimas) arba aštuoniolikos savaičių (2 tyrimas) , augliai identifikuojami ir po autopsijos pasveriami.Rats were observed for signs of toxicity and weighed and palpated once a week in anticipation of tumor development. Animals are sacrificed at thirteen weeks (Study 1) or eighteen weeks (Study 2), tumors are identified and weighed after autopsy.

KompozicijosCompositions

Čia vartojamas būdvardžiu terminas “farmacinis” reiškia, kad tai yra iš esmės nekenksminga recipientui-žinduoliui. “Farmacinė kompozicija” reiškia, kad nešikliai, skiedikliai, užpildai ir aktyvus ingreedientas(ai) turi būti suderinami su kitais kompozicijos ingredientais ir nekenksmingi jos vartotojui.As used herein, the term "pharmaceutical" means that it is substantially harmless to the recipient mammal. "Pharmaceutical composition" means that the carriers, diluents, excipients and active ingredient (s) must be compatible with the other ingredients of the composition and not deleterious to the consumer.

Geriausia, kai F-I yra įjungiamas j kompoziciją prieš įvedimą. Vaisto formos parinkimas turėtų būti nuspręstas gydančio gydytojo, remiantis tais pačiais faktoriais, kaip ir apsprendžiant efektyvų kiekį.Ideally, F-I is incorporated into the composition prior to administration. The choice of dosage form should be decided by the attending physician based on the same factors as when determining the effective amount.

Visi aktyvūs ingredientai tokiose kompozicijose sudaro 0,01-99,9 % kompozicijos masės. Geriausia, kai minėtoje kompozicijoje yra ne daugiau kaip du aktyvūs ingredientai. Tai yra, teikiama pirmenybė sudaryti F-I kompoziciją su antru aktyviu ingredientų, parinktu iš estrogeno, progestino, aromatazės inhibitoriaus, LHRH analogo ir AChE inhibitoriaus. Geriausios kompozicijos yra tos, kuriose F-I yra vienintelis aktyvus ingredientas.All active ingredients in such compositions comprise from 0.01% to 99.9% by weight of the composition. Preferably, said composition contains no more than two active ingredients. That is, it is preferred to formulate a F-I composition with a second active ingredient selected from estrogen, progestin, aromatase inhibitor, LHRH analog and AChE inhibitor. The best compositions are those in which F-I is the only active ingredient.

Šio išradimo farmacinės kompozicijos sudaromos pagal metodikas, žinomas šioje srityje, naudojant gerai žinomus ir lengvai prieinamus ingredientus. Pavyzdžiui, F-I, tiek vienas, tiek derinyje su estrogenu, progestinu, aromatazės inhibitoriumi, LHRH analogu arba AChE inhibitoriumi, sudaro kompozicijas su įprastais užpildais, skiedikliais arba nešikliais kurios suformuojamos į tabletes, kapsules, suspensijas, tirpalus, injekuojamus tirpalus, aerozolius, miltelius ir pan.The pharmaceutical compositions of this invention are formulated according to techniques known in the art using well known and readily available ingredients. For example, FI, alone or in combination with an estrogen, a progestin, an aromatase inhibitor, an LHRH analogue or an AChE inhibitor, formulates with conventional excipients, diluents or carriers formulated into tablets, capsules, suspensions, solutions, injectables, aerosols, powders, and etc.

Šio išradimo farmacinės kompozicijos parenteraliniam įvedimui susideda iš sterilių vandeninių arba nevandeninių tirppalų, dispersijų, suspensijų arba emulsijų, taip pat iš sterilių miltelių, iš kurių prieš pat vartojimą pagaminamas sterilus tirpalas arba suspensija. Tinkamų vandeninių ir nevandeninių nešiklių, skiediklių, tirpiklių arba rišiklių pavyzdžiai apima vandenį, fiziologinį druskos tirpalą, etanolį, poliolius (tokius kaip glicerolis, propilenglikolis, polietilenglikolis) ir pan., bei tinkamus jų mišinius, augalinius aliejus (tokius kaip alyvų aliejus), ir injekuojamus organinius esterius, tokius kaip etiloleatas. Tinkamas takumas palaikomas, pavyzdžiui, naudojant padengiančias medžiagas, tokias kaip lecitinas, palaikant tinkamą dalelių dydį dispersijų ir suspensijų atveju, ir naudojant paviršiuje aktyvias medžiagas.Pharmaceutical compositions of the present invention for parenteral administration consist of sterile aqueous or nonaqueous solutions, dispersions, suspensions or emulsions, as well as sterile powders for reconstitution immediately before use. Examples of suitable aqueous and nonaqueous vehicles, diluents, solvents or binders include water, saline, ethanol, polyols (such as glycerol, propylene glycol, polyethylene glycol) and the like, and suitable mixtures thereof, vegetable oils (such as olive oil), and injectable organic esters such as ethyl oleate. Suitable fluidity is maintained, for example, by the use of coating materials such as lecithin, the maintenance of a suitable particle size for dispersions and suspensions, and the use of surfactants.

Parenterinės kompozicijos taip pat gali turėti pagalbinių medžiagų, tokių kaip prezervantai, drėkinimo agentai, emulsikliai ir disperguojantys agentai. Apsauga nuo mikroorganizmų poveikio užtikrinama įvedant antibakterinių ir priešgrybelinių agentų, pavyzdžiui, parabeno, chlorbutanolio, fenolio, sorbo rūgšties, ir pan. Taip pat gali būti naudinga įterpti izotoninius agentus, tokius kaip cukrai, natrio chloridas ir pan. Ištęsta injekuojamų kompozicijų absorbcija gali būti įgyvendinta įjungiant agentus, kurie sulėtina absorbciją, tokius kaip aliuminio monostearatas ir želatina.Parenteral compositions may also contain excipients such as preservatives, wetting agents, emulsifying agents, and dispersing agents. Antibacterial and antifungal agents such as paraben, chlorobutanol, phenol, sorbic acid, etc., provide protection against the action of microorganisms. It may also be useful to include isotonic agents such as sugars, sodium chloride, and the like. Prolonged absorption of the injectable compositions may be accomplished by the inclusion of agents which retard absorption, such as aluminum monostearate and gelatin.

Kai kuriais atvejais, siekiant prailginti vaisto veikimą, yra naudinga sulėtinti vaisto, įvesto po oda ar į raumenis, absorbciją. Tai gali būti įgyvendinta naudojant kristalinės medžiagos, mažai tirpstančios vandenyje, skystą suspensiją arba ištirpinant ar resuspenduojant vaistą abejingame nešiklyje. Injekuojant vaisto formos, pasižyminčios žemu tirpumu vandenyje, suspensiją po oda arba į raumenis, vaisto absorbcijos greitis priklauso nuo tirpimo greičio.In some cases, it may be useful to slow the absorption of the drug administered subcutaneously or intramuscularly to prolong the effect of the drug. This may be accomplished by the use of a liquid suspension of crystalline material which is sparingly soluble in water or by reconstitution or resuspension of the drug in an indifferent carrier. When injected into a subcutaneous or intramuscular suspension of a formulation with low water solubility, the rate of absorption is dependent on the rate of dissolution.

Injekuojama F-I “depo” kompozicija padaroma įterpiant vaistą į biosuskaidomo polimero, tokio kaip polipieno rūgštis, poliglikolio rūgštis, pieno ir glikolio rūgšties kopolimerai, medžiagų, žinomų šioje srityje, poliortoesteriai ir polianhidridai, mikrokapsules. Vaisto atpalaidavimo greitis gali būti parenkamas priklausomai nuo vaisto ir polimero santykio ir konkrečių naudojamų polimerų charakteristikų.The injectable F-I depot formulation is made by encapsulating the drug in microcapsules of a biodegradable polymer such as polylactic acid, polyglycolic acid, copolymers of lactic and glycolic acid, polyorthoesters and polyanhydrides known in the art. The release rate of the drug can be selected depending on the drug to polymer ratio and the particular characteristics of the polymers used.

Injekuojamos kompozicijos sterilizuojamos, pavyzdžiui, filtruojant per bakterijas sulaikantį filtrą, arba pasterizuojant komponentus preiš jų sumaišymą, arba gamybos metu, arba prieš pat įvedimą(kaip, pavyzdžiui, dviejų kamerų švirkšto pakuotėje).Injectable compositions are sterilized, for example, by filtration through a bacterial retention filter, or by pasteurisation of the components prior to mixing, either during manufacture or immediately prior to administration (as, for example, in a dual-chamber syringe package).

Kietos dozavimo formos peroraliniam įvedimui apima kapsules, tabletes, piliules, miltelius ir granules. Tokiose kietose dozavimo formose F-I sumaišomas su mažiausiai vienu inertišku farmaciniu nešikliu, tokiu kaip natrio citratas arba dikalcio fosfatas ir/arba a) užpildais, tokiais kaip krakmolai, cikrai, įskaitant laktozę ir gliukozę, manitolį ir silicio rūgštį, (b) rišikliais, tokiais kaip karboksimetilceliuliozė ir kiti celiuliozės dariniai, alginatai, želatina, polivinilpirolidonas, sacharozė ir gumiarabikas, (c) drėkikliais, tokiais kaip glicerolis, (d) dezintegruojančiais agentais, tokiais kaip agar-agaras, kalcio karbonatas, natrio bikarbonatas, bulvių arba tapijokos krakmolas, algino rūgštys, silikatai ir natrio karbonatas, (e) drėkinančiais agentais, tokiais kaip glicerolis, (f) tirpimą stbdančiais agentais, tokiais kaip parafinas, (g) absorbciją spartinančiais agentais, tokiais kaip ketvirtiniai amonio junginiai, (h) drėkinančiomis medžiagomis, tokiomis kaip cetilo alkoholis ir glicerolio monostearatas, (i) absorbentais, tokiais kaip kaolinas ir bentonitas ir (j) lubrikantais, tokiais kaip talkas, kalcio stearatas, magnio stearatas, kieti polietilenglikoliai, natrio laurilsulfatas, bei jų mišiniais. Kapsulių, tablečių ir piliulių atvejais dozuota forma gali turėti buferinių agentųSolid dosage forms for oral administration include capsules, tablets, pills, powders, and granules. In such solid dosage forms, FI is admixed with at least one inert pharmaceutical carrier such as sodium citrate or dicalcium phosphate and / or a) excipients such as starches, zinc, including lactose and glucose, mannitol and silicic acid, (b) binders such as carboxymethyl cellulose and other cellulose derivatives, alginates, gelatin, polyvinylpyrrolidone, sucrose and acacia; (c) wetting agents such as glycerol; (d) disintegrating agents such as agar-agar, calcium carbonate, , silicates and sodium carbonate, (e) wetting agents such as glycerol, (f) solubilizing agents such as paraffin, (g) absorption accelerating agents such as quaternary ammonium compounds, (h) wetting agents such as cetyl alcohol; and glycerol monostearate, (i) absorbents such as kaolin and b entonite; and (j) lubricants such as talc, calcium stearate, magnesium stearate, polyethylene glycols solid, sodium lauryl sulfate, and mixtures thereof. In the case of capsules, tablets, and pills, the dosage form may contain buffering agents

Panašaus tipo kietos kompozicijos taip pat gali užpildyti minkštą arba kietą želatininę kapsulę, naudojant užpildus, tokius kaip laktozė, o taip pat didelės molekulinės masės polietilenglikoliai, ir pan.Solid compositions of a similar type may also fill a soft or hard gelatin capsule using excipients such as lactose as well as high molecular weight polyethylene glycols and the like.

Tokios kietos dozavimo formos kaip tabletės, dražetės, kapsulės, piliulės ir 20 granulės taip pat gali būyti pagamintos su dangomis arba apvalkalais, tokiais kaip enterinė danga, arba kitomis farmacinių kompozicijų sudarymo srityje gerai žinomomis dangomis. Dangos gali savo sudėtyje tirėti drumstiklių arba agentų, atlaisvinančių aktyvų ingredientą(us) tam tikroje virškinamojo trakto dalyje, kaip, pavyzdžiui, rūgštyje tirpios dangos, atlaisvinančios aktyvų ingredientą(us) skrandyje, arba šarminėje terpėje tirpios dangos, atlaisvinančios aktyvų ingredientą(us) žarnyne.Solid dosage forms such as tablets, dragees, capsules, pills, and granules may also be formulated with coatings or coatings such as enteric coatings or other coatings well known in the art of pharmaceutical formulation. Coatings may contain opacifiers or agents that release the active ingredient (s) in a particular part of the gastrointestinal tract, such as acid-soluble coatings, which release the active ingredient (s) in the stomach, or alkaline-soluble coatings that release the active ingredient (s) in the gut. .

Aktyvus(ūs) ingredientas taip pat gali būti mikrokapsulėse po sulėtinto atpalaidavimo danga, kai mikrokapsulė yra kapsulės vaisto formos piliulė.The active ingredient (s) may also be contained in a microcapsule under a sustained release coating, the microcapsule being a capsule formulation.

Skystos F-I dozavimo formos peroraliniam vartojimui apima tirpalus, emulsijas, suspensijas, sirupus ir eliksyrus. Be aktyvių ingredientų skysta kompozicija gali taip pat apimti inertinius skiediklius, įprastus šioje srityje, tokius kaip vanduo arba kiti farmaciniai tirpikliai, tirpinančių agentų ir emulsiklių, tokių kaip etanolis, izopropanolis, etilkarbonatas, etilacetatas, benzilo alkoholis, benzilbenzoatas, propilenglikolis, 1,3-butilenglikolis, dimetilformamidas, aliejai (konkrečiai, medvilnės, žemės riešutų, kukurūzų, gemalų, alyvų, ricinos ir sezamo aliejai), glicerolis, tetrahidrofurfurilo alkoholis, polietilenglikoliai, sorbitolio riebalų rūgščių esteriai ir jų mišiniai.Liquid F-I dosage forms for oral administration include solutions, emulsions, suspensions, syrups and elixirs. In addition to the active ingredients, the liquid composition may also include inert diluents conventional in the art such as water or other pharmaceutical solvents, solubilizing agents and emulsifiers such as ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene glycol, 1,3-. butylene glycol, dimethylformamide, oils (specifically, cotton, peanut, corn, germ, olive, castor and sesame oils), glycerol, tetrahydrofurfuryl alcohol, polyethylene glycols, sorbitol fatty acid esters and mixtures thereof.

Be inertinių skiediklių, skystos peroralines kompozicijos gali apimti pagalbines medžiagas, tokias kaip drėkinantys agentai, emulsikliai ir suspenduojantys agentai, bei saldiklius ir kvapą bei skonį suteikiančias medžiagas.In addition to inert diluents, the liquid oral compositions may include excipients such as wetting agents, emulsifying and suspending agents, and sweetening and flavoring agents.

Skystos suspensijos be aktyvaus ingrediento(ų) gali turėti savyje suspenduojančius agentus, tokius kaip etoksilinti izostearilo alkoholiai;Liquid suspensions without the active ingredient (s) may contain suspending agents such as ethoxylated isostearyl alcohols;

polioksietileno sorbitolio ir sorbitano esteriai, mikrokristalinė celiuliozė, aliuminio metahidroksidas, bentonitas, agaras ir tragakantas, bei jų mišiniai.polyoxyethylene sorbitol and sorbitan esters, microcrystalline cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar and tragacanth, and mixtures thereof.

Kompozicijos rektaliniam arba intravaginaliniam įvedimui gaminamos sumaišant F-I su tinkamais nedirginančiais užpildais, tokiais kaip kakavos sviestas, polietilenglikolis arba bet koks žvakučių vaškas, kuris yra kietas kambario temperatūroje, bet suskystėja kūno temperatūroje ir todėl išsilydo tiesiojoje žarnoje arba makštyje, atlaisvindamas aktyvų komponentą(us). Junginiai ištirpinami išlydytame vaške, suteikiamas norimas pavidalas ir leidžiama sukietėti, sudarant išbaigtą žvakučių kompoziciją.Compositions for rectal or intravaginal administration are prepared by mixing F-I with suitable non-irritating excipients such as cocoa butter, polyethylene glycol or any suppository wax which is solid at room temperature but liquid at body temperature and therefore melts in the rectum or vagina, releasing the active ingredient. The compounds are dissolved in molten wax, given the desired form and allowed to solidify to form a complete suppository composition.

F-I taip pat gali būti įvedamas liposomų pavidale. Kaip yra žinoma šioje srityje, liposomos paprastai sudarytos iš fosfolipidų ir kitų lipidinių medžiagų. Liposomų kompozicijas sudaro mono- arba multisluoksniai hidratuoti skysti kristalai, kurie disperguojami vandeninėje terpėje. Liposomų suformavimui gali būti naudojami bet kurie netoksiški farmaciniai ir metabolizuojami lipidai. Šio išradimo kompozicijos liposomų pavidale be F-I gali turėti stabilizatorių, užpildų,F-I can also be administered in the form of liposomes. As is known in the art, liposomes are generally composed of phospholipids and other lipid materials. Liposome compositions consist of mono- or multilayer hydrated liquid crystals which are dispersed in an aqueous medium. Any non-toxic pharmaceutical and metabolizable lipids can be used to form liposomes. The compositions of the present invention in the form of liposomes may contain stabilizers, excipients,

Liposomų suformavimo metodai yra žinomi šioje srityje, kaip aprašyta, pavyzdžiui, Prescott, ed., Methods in Cell Biology, Vol. XIV, Academic Press, New York, N. Y (1976), p.33 etseų.Methods for liposome formation are known in the art as described, for example, in Prescott, ed., Methods in Cell Biology, Vol. XIV, Academic Press, New York, N.Y. (1976), p.

Toliau pateikiami kompozicijų pavyzdžiai yra tik iliustracinio pobūdžio ir 5 neriboja šio išradimo apimties.The following examples of compositions are illustrative only and are not intended to limit the scope of the present invention.

kompozicija: želatininė kapsulėcomposition: gelatin capsule

Kiekis (mg/kapsulei) Amount (mg / capsule) F-I F-I 0,1 -1000 0.1 to 1000 Krakmolas, NF Starch, NF 0-650 0-650 Krakmolo takūs milteliai Flowable starch powder 0-650 0-650 Silikono skystis, 350 centistoksai Silicone fluid, 350 centistokes 0-15 0-15 Aukščiau pateikta kompozicija gali keistis, atsižvelgiant į pateiktas pagrįstas variacijas. The above composition is subject to change based on the reasoning provided variations.

Tabletės kompozicija 2 kompozicija: tabletės Tablet composition Composition 2: Tablets gaminama naudojant žemiau išvardintus ingredientus: is made using the following ingredients: Ingredientas The Ingredient Kiekis (mg/tabletei) Amount (mg / tablet) F-I F-I 2,5 - 1000 2.5 - 1000 Celiuliozė, mikrokristalinė Cellulose, microcrystalline 200 - 650 200-650 Silicio dioksidas, išgarintas Evaporated silica 10 - 650 10-650 Stearato rūgštis Stearic acid 5-15 5-15

Komponentai sumaišomi ir suspaudžiami į tabletes.The components are mixed and compressed into tablets.

kompozicija: tabletės, turinčios maždaug 10 ir 50 mg, atitinkamai, F-I, gali būti pagamintos taip:Composition: Tablets containing about 10 and 50 mg of F-I, respectively, may be prepared as follows:

Ingredientas The Ingredient Kiekis (mg/tabletei) Quantity (mg / tablet) Kiekis (mg/tabletei) Quantity (mg / tablet) F-I F-I 11,3 11.3 56,5 56.5 Bevandenė laktozė Anhydrous lactose 176,8 176.8 128,2 128.2 Laktozė, džiovinta purškiant Lactose, spray dried 44,2 44.2 32,0 32.0 Povidonas Povidon 11,0 11.0 13,0 13.0 Polisorbatas 80 Polysorbate 80 2,5 2.5 2,6 2.6 Krospovidonas (viduje) Crospovidone (Inside) 6,25 6.25 6,24 6.24 Krospovidonas (išorėje) Crospovidone (outside) 6,25 6.25 6,5 6.5 Magnio stearatas Magnesium stearate 1,5 1.5 1,7 1.7 Mikrokristalinė celiuliozė (išorėje) Microcrystalline cellulose (outside) 0,0 0.0 13,0 13.0

Komponentai sumaišomi ir suspaudžiami į tabletes.The components are mixed and compressed into tablets.

Alternatyviai, tabletės, turinčios kiekviena 2,5-1000 mg F-I, gaminamos taip:Alternatively, tablets containing each 2.5-1000 mg F-I are prepared as follows:

kompozicija: tabletėscomposition: tablets

IngredientasThe Ingredient

F-IF-I

KrakmolasStarch

Celiuliozė, mikrokristalinėCellulose, microcrystalline

Polivinilpirolidonas (10 % tirpalas vandenyje)Polyvinylpyrrolidone (10% solution in water)

Natrio karboksimetilceliuliozėSodium carboxymethylcellulose

Magnio stearatasMagnesium stearate

TalkasTalk

Kiekis (mg/tabletei) 25 - 1000 45Amount (mg / tablet) 25 - 1000 45

4,54.5

0,50.5

F-I, krakmolas ir celiuliozė praleidžiami per 45 mešų (JAV) sietą ir kruopščiai išmaišomi. Polivinilpirolidono tirpalas sumaišomas su gautais milteliais, kurie po to praleidžiami per 14 mešų (JAV) sietą. Taip gautos granulės džiovinamos 50-60 °C temperatūroje ir praleidžiamos per 18 mešų (JAV) sietą. Karboksimetilnatrio krakmolas, magnio stearatas ir talkas pridedami j granules, prieš tai juos praleidus per 60 mešų (JAV) sietą, ir, sumaišius, suspaudžiama į tabletes tablečių presavimo mašina.Pass F-I, starch and cellulose through a 45 mesh U.S. sieve and mix thoroughly. The polyvinylpyrrolidone solution is mixed with the resulting powder, which is then passed through a 14 mesh U.S. sieve. The pellets thus obtained are dried at 50-60 ° C and passed through an 18 mesh U.S. sieve. Carboxymethyl sodium starch, magnesium stearate and talc are added to the granules after passing through a 60 mesh U.S. sieve and, after mixing, compressed into tablets by a tablet press.

Suspensijos, turinčios 0,1-1000 mg medikamento 5 ml dozėje, gaminamos taip:Suspensions containing 0.1 to 1000 mg of drug per dose of 5 ml are prepared as follows:

kompozicija: suspensijoscomposition: suspensions

Ingredientas The Ingredient Kiekis (mg/5 ml) Amount (mg / 5 ml) F-I F-I 0,1 - 1000 mg 0.1 to 1000 mg Natrio karboksimetilceliuliozė Sodium carboxymethylcellulose 50 mg 50 mg Sirupas Syrup 1,25 mg 1.25 mg Benzenkarboksirūgšties tirpalas Benzoic acid solution 0,10 ml 0.10 ml Kvapioji medžiaga Flavoring q.v. q.v. Dažiklis Coloring agent q.v. q.v. Valytas vanduo, iki Purified water, up to 5 ml 5 ml

Medikamentas praleidžiamas per 45 mešų sietą (JAV) ir sumaišomas su natrio karboksimetilceliulioze ir sirupu, kad susidarytų tolydi pasta. Benzenkarboksirūgšties tirpalas, kvapioji medžiaga ir dažiklis praskiedžiami tam tikru vandens kiekiu ir pridedami maišant. Tada pridedamas pakankamas reikalaujamam tūriui gauti vandens kiekis.The drug is passed through a 45 mesh U.S. sieve and mixed with sodium carboxymethylcellulose and syrup to form a continuous paste. The benzoic acid solution, the flavoring and the coloring agent are diluted with a certain volume of water and added with stirring. A sufficient quantity of water is then added to obtain the required volume.

Aerozolinis tirpalas, turintis šiuos ingredientus, gaminamas taip:An aerosol solution containing the following ingredients is prepared as follows:

kompozicija: aerozoliscomposition: aerosol

Ingredientas The Ingredient Kiekis (masės %) Content (% by weight) F-I F-I 0,25 0.25 Etanolis Ethanol 25,75 25.75 Disperguojanti medžiaga-22 (chlordifluormetanas) Dispersant-22 (Chlorodifluoromethane) 70,00 70.00

F-I sumaišomas su etanoliu ir mišinys pridedamas į dalį disperguojančiosF-I is mixed with ethanol and the mixture is added to a portion of the dispersant

medžiagos-22, atšaldomas iki 30 °C ir pernešamas į užpildymo įrenginį. Po to reikalingas kiekis supilamas į plieninį konteinerį ir praskiedžiamas likusiu disperguojančios medžiagos kiekiu. Po to prie konteinerio pritvirtinams vožtuvas. Žvakutės gaminamos taip: Materials-22, cooled to 30 ° C and transferred to a filling unit. The required quantity is then poured into a steel container and diluted with the remainder the amount of dispersant. The valve is then attached to the container. The candles are made as follows: 7 kompozicija: žvakutės Composition 7: suppositories Ingredientas The Ingredient Kiekis (mg/žvakutei) Amount (mg / suppository) F-I Sočiųjų riebalų rūgščių gliceridai F-I Saturated fatty acid glycerides 250 2000 250 2000 F-I praleidžiamas per 60 mešų sietą (JAV) ir suspenduojamas sočiųjų riebalų rūgščių gliceriduose, kurie prieš tai atsargiai išlydomi. Tada mišinys išpilamas į 2 g talpos liejimo formą ir atšaldomas. Intraveninė kompozicija gaminama taip: F-I is passed through a 60 mesh sieve (US) and suspended in saturated fat in acid glycerides that have been carefully melted beforehand. The mixture is then poured into 2 g capacitance mold and cooled. An intravenous composition is prepared as follows: 8 kompozicija: intraveninis tirpalas Composition 8: Intravenous Solution Ingredientas The Ingredient Kiekis Quantity F-I Izotoninis tirpalas F-I Isotonic solution 25 mg 1000 ml 25 mg 1000 ml

Aukščiau išvardintų ingredientų tirpalas intraveniniu budu įvedamas pacientui maždaug 1 ml per minutę greičiu.A solution of the above ingredients is administered intravenously to the patient at a rate of about 1 mL per minute.

kompozicija: derinio kapsulė Icomposition: combination capsule I

Ingredientas The Ingredient Kiekis (mg/kapsulei) Amount (mg / capsule) F-I F-I 50 50 Premarinas Premarin 1 1 Avicel pH 101 Avicel pH 101 50 50 Krakmolas 1500 Starch 1500 117,50 117.50 Silikoninė alyva Silicone oil 2 2 Tvveen 80 Tvveen 80 0,50 0.50 Cab-O-Sil Cab-O-Sil 0,25 0.25

kompozicija: derinio kapsulė IIcomposition: combination capsule II

Ingredientas The Ingredient Kiekis (mg/kapsulei) Amount (mg / capsule) F-I F-I 50 50 Noretilnodrelis Norethylnodrel 5 5 Avicel pH 101 Avicel pH 101 82,50 82.50 Krakmolas pH 101 Starch pH 101 90 90 Silikoninė alyva Silicone oil 2 2 Tvveen 80 Tvveen 80 0,50 0.50

kompozicija: derinio tabletėcomposition: combination tablet

Ingredientas The Ingredient Kiekis (mg/tabletei) Amount (mg / tablet) F-I F-I 50 50 Premarinas Premarin 1 1 Kukurūzų krakmolas, NF Cornstarch, NF 50 50 Povidonas K29-32 Povidone K29-32 6 6th Avicel pH 101 Avicel pH 101 41,50 41.50 Avicel pH 102 Avicel pH 102 136,50 136.50 Krospovidonas XL10 Crospovidone XL10 2,50 2.50 Magnio stearatas Magnesium stearate 0,50 0.50 Cab-O-Sil Cab-O-Sil 0,50 0.50

DozavimasDosage

Pagal šį išradimą specifinės įvedamo F-I dozės nustatomos pagal konkrečias aplinkybes kiekvienoje situacijoje. Šios aplinkybės apima įvedimo būdą, ankstesnę recipiento gydymo istoriją, patologinę būklę ar simptomą, kurią gydome, gydomos būklės/simptomo rimtumą ir recipiento amžių bei lytį.Specific doses of F-I administered according to the present invention are determined by the particular circumstances of each situation. These circumstances include the route of administration, the recipient's previous treatment history, the pathological condition or symptom we are treating, the severity of the condition / symptom being treated, and the age and sex of the recipient.

Efektyvi minimali F-I dienos dozė paprastai yra maždaug 1, 5, 10, 15 arba 20 mg. Tipiniu atveju maksimali efektyvi dozė yra maždaug 800,100, 60, 50, ar 40 mg. Tipiškiausiu atveju dozė svyruoja 15-60 mg ribose. Sutinkamai su standartine medicinos srityje “dozės titravimo” recipientui praktika gali būti nustatyta tiksli dozė; t.y., pradžioje paskyrus mažą junginio dozę, dozė palaipsniui didinama, kol pasiekiamas norimas terapinis efektas.The effective minimum daily dose of F-I is usually about 1, 5, 10, 15 or 20 mg. Typically, the maximum effective dose is approximately 800,100, 60, 50, or 40 mg. In the most typical case, the dose ranges from 15 to 60 mg. In accordance with standard medical practice, a "dose titration" can be used to determine the exact dose for the recipient; i.e., initially with a low dose of the compound, the dose is gradually increased until the desired therapeutic effect is achieved.

Nors aukščiau aptartos terapijos deriniais atveju gali reikėti dozę titruoti, tipiškos kitų aktyvių ingredientų, išskyrus F-III, dozės yra tokios: etinilestrogeno (0,01-0,03 mg/per dieną), mestranolio (0,05-0,15 mg/dieną), konjuguotų estrogeninių hormonų (pavyzdžiui., Premarin®, Wyeth-Aycrst; 0,3-2,5 mg/pcr dieną) medroksiprogesterono (2,5-10 mg/per dieną), noretilnodrelio (1,0-10,0 mg/per dieną), nonetindrono (0,5-2,0 mg/per dieną), aminoglutemido (250-1250 mg/per dieną, geriausia po 250 mg keturis kartus per dieną), anastrazolo (1-5 mg/per dieną, geriausia 1 mg vieną kartą per dieną), letrozolo (2,5-10 mg/per dieną, geriausia 2,5 mg vieną kartą per dieną), formestano (250-1250 mg/per savaitę, geriausia po 250 mg dukart per savaitę, eksemestano (25-100 mg/per dieną, geriausia 25 mg vieną kartą per dieną), goserlino (3-15 per tris mėnesius, geriausia 3,6-7,2 mg kartą per tris mėnesius) ir leuprolido (3-15 mg/per mėnesį, geriausiaAlthough dose combinations may be required for the combination therapies discussed above, typical doses of the active ingredients other than F-III are as follows: Ethinylestrogen (0.01-0.03 mg / day), Mestranol (0.05-0.15 mg) / day), conjugated estrogenic hormones (e.g. Premarin®, Wyeth-Aycrst; 0.3-2.5 mg / pcr / day), medroxyprogesterone (2.5-10 mg / day), norethylnodrel (1.0-10 , 0 mg / day), nonetindrone (0.5-2.0 mg / day), aminoglutemide (250-1250 mg / day, preferably 250 mg four times daily), anastrazole (1-5 mg / day) daily, preferably 1 mg once daily), letrozole (2.5-10 mg / day, preferably 2.5 mg once daily), formestane (250-1250 mg / week, preferably 250 mg twice daily) per week, exemestane (25-100 mg / day, preferably 25 mg once daily), goserlin (3-15 every three months, preferably 3.6-7.2 mg once every three months) and leuprolide (3- 15 mg / month, best

3,75-7,5 mg kartą per mėnesį).3.75-7.5 mg once a month).

Įvedimo būdasMethod of entry

F-I gali būti įvedamas įvairiais būdais, įskaitant peroralinį, rektalini, transderminj, subkutaninį, intraveninį, į raumenis ir intranazalinj. Kiekvieno agento estrogeno arba progestino pagrindu įvedimo būdas priklauso nuo to, kas žinoma šioje srityje. F-I, tiek vienas ar derinyje su estrogenu, progestinu arba AChE inhibitoriumi, paprastai skiriamas įprastinės kompozicijos pavidale.F-I can be administered by a variety of routes including oral, rectal, transdermal, subcutaneous, intravenous, intramuscular, and intranasal. The mode of administration of each agent based on estrogen or progestin depends on what is known in the art. F-I, either alone or in combination with an estrogen, a progestin, or an AChE inhibitor, is usually administered in the form of a conventional formulation.

Šio išradimo farmacinės kompozicijos gali būti įvedamos žmonėms ir kitiems žinduoliams (pavyzdžiui , šunims, katėms, arkliams, kiaulėm* ir pan.) peroraliniu, rektaliniu, intravaginaliniu, parenteraliniu, vietiniu būdu, per burną arba po liežuviu, arba per nosį. Terminas “parenteralinis įvedimas” reiškia įvedimo būdą, apimantį injekcijas arba infuzijas į veną, į raumenis, į pilvą, į krūtinkaulį, po oda, intraartikuliniu (į sąnario vidų) būdu.The pharmaceutical compositions of this invention may be administered to humans and other mammals (e.g., dogs, cats, horses, pigs, etc.) by the oral, rectal, intravaginal, parenteral, topical, oral or sublingual route, or nasal route. The term "parenteral administration" refers to a route of administration comprising injections or infusions by intravenous, intramuscular, intraperitoneal, subcutaneous, subcutaneous, intraarticular (intraarticular) route.

Įvedimo pobūdis ir trukmėNature and duration of entry

Daugeliu šio išradimo būdų F-I įvedamas pastoviai, nuo 1 iki 3 kartų per dieną, arba tokiu dažniu, kokio reikia įvesti recipientui efektyvų F-I kiekį. Ciklinė terapija gali būti ypač naudinga gydant endometriozę arba gali būti naudojama ūmiu skausmo priepuolio atveju. Restenozės atveju gydymas gali būti apribotas trumpais intervalais (1-6 mėn.) po kitų medicininių procedūrų, tokių kaip angioplastija.In many embodiments of the present invention, F-I is administered at a constant rate, 1 to 3 times daily, or at a frequency sufficient to provide the recipient with an effective amount of F-I. Cyclic therapy may be particularly useful in the treatment of endometriosis or may be used in the case of an acute pain attack. In the case of restenosis, treatment may be limited to short intervals (1-6 months) after other medical procedures such as angioplasty.

Claims (16)

IŠRADIMO APIBRĖŽTISDEFINITION OF INVENTION 1. Kristalinis 6-hidroksi-3-(4-[2-(piperidin-l-il)etoksi]fenoksi)-2-(4metoksifenil)benzo[b]tiofeno hidrochlorido hidratas (F-I), turintis RentgenoCrystalline 6-hydroxy-3- (4- [2- (piperidin-1-yl) ethoxy] phenoxy) -2- (4-methoxyphenyl) benzo [b] thiophene hydrochloride hydrate (F-I) containing X-ray 5 spinduliuotės difrakcijos spektrą, gautą su vario spinduliuotės šaltiniu, kuris susideda iš tokių maksimumų: 7,9 ± 0,2, 10,7 ± 0,2, 14,9 ± 0,2, 15,9 ± 0,2, 18,3 ± 0,2 ir 20,6 ± 0,2 °, esant 20.5 spectral diffraction spectra obtained with a copper source consisting of the following maxima: 7.9 ± 0.2, 10.7 ± 0.2, 14.9 ± 0.2, 15.9 ± 0.2, 18 , 3 ± 0.2 and 20.6 ± 0.2 ° at 20. 2. Farmacinė kompozicija, besiskirianti tuo, kad susideda iš2. A pharmaceutical composition comprising 10 kristalinio junginio pagal 1 punktą, vieno arba daugiau farmacinių nešiklių, skiediklių arba užpildų ir, pasirinktinai, estrogeno, pasirinktinai, progestino, pasirinktinai, aromatazės inhibitoriaus, pasirinktinai, LHRH analogo ir pasirinktinai, acetilcholino esterazės (AChE) inhibitoriaus.The crystalline compound of claim 1, one or more pharmaceutical carriers, diluents or excipients and optionally estrogen, optionally progestin, optionally an aromatase inhibitor, optionally an LHRH analog and optionally an acetylcholine esterase (AChE) inhibitor. 1515th 3. Farmacinė kompozicija pagal 2 punktą, besiskirianti tuo, kad susideda iš kristalinio junginio pagal 1 punktą, vieno arba daugiau farmacinių nešiklių, skiediklių arba užpildų ir estrogeno.Pharmaceutical composition according to claim 2, characterized in that it comprises a crystalline compound according to claim 1, one or more pharmaceutical carriers, diluents or excipients and estrogen. 4. Farmacinė kompozicija pagal 3 punktą, besiskirianti tuo, kad4. A pharmaceutical composition according to claim 3, characterized in that 20 estrogenas yra Premarin®.20 estrogen is Premarin®. 5. Farmacinė kompozicija pagal 2 punktą, besiskirianti tuo, kad susideda iš kristalinio junginio pagal 1 punktą, vieno arba daugiau farmacinių nešiklių, skiediklių arba užpildų ir progestino.5. A pharmaceutical composition according to claim 2, characterized in that it comprises a crystalline compound according to claim 1, one or more pharmaceutical carriers, diluents or excipients and progestin. 6. Farmacinė kompozicija pagal 5 punktą, besiskirianti tuo, kad progestinas yra parinktas iš grupės, susidedančios iš noretilnodrelio ir noretindrono.6. A pharmaceutical composition according to claim 5, wherein the progestin is selected from the group consisting of norethylnodrel and norethindrone. 7. Farmacinė kompozicija pagal 2 punktą, besiskirianti tuo, kad susideda iš kristalinio junginio pagal 1 punktą, vieno arba daugiau farmacinių nešiklių, skiediklių arba užpildų ir AChE inhibitoriaus.7. A pharmaceutical composition according to claim 2, comprising a crystalline compound according to claim 1, one or more pharmaceutical carriers, diluents or excipients and an AChE inhibitor. 55 8. Farmacinė kompozicija pagal 7 punktą, besiskirianti tuo, kad8. A pharmaceutical composition according to claim 7, wherein AChE inhibitorius yra parinktas iš grupės, susidedančios iš fizostigmino salicilato, takrino hidrochlorido ir donepezilo hidrochlorido.The AChE inhibitor is selected from the group consisting of physostigmine salicylate, tacrine hydrochloride and donepezil hydrochloride. 9. Farmacinė kompozicija pagal 2 punktą, besiskirianti tuo, kad 10 susideda iš kristalinio junginio pagal 1 punktą, vieno arba daugiau farmacinių nešiklių, skiediklių arba užpildų, estrogeno ir progestino.9. A pharmaceutical composition according to claim 2, wherein the crystalline compound according to claim 1 is one or more pharmaceutical carriers, diluents or excipients, estrogen and progestin. 10. Junginys pagal 1 punktą, skirtas patologinės būklės, parinktos iš grupės, susidedančios iš gimdos fibrozės, endometriozės, aortos lygiųjų raumenų ląsteliųA compound according to claim 1 for the treatment of a pathological condition selected from the group consisting of uterine fibrosis, endometriosis, aortic smooth muscle cells 15 proliferacijos, restenozės, krūties vėžio, gimdos vėžio, prostatos vėžio, gėrybinės prostatos hiperplazijos, kaulų išretėjimo, osteoporozės, širdies ir kraujagyslių susirgimo, hiperlipidemijos, CNS susirgimo ir Alcheimerio ligos, inhibavimui.15 inhibition of proliferation, restenosis, breast cancer, uterine cancer, prostate cancer, benign prostatic hyperplasia, bone thinning, osteoporosis, cardiovascular disease, hyperlipidemia, CNS disease and Alzheimer's disease. 11. Junginys pagal 10 punktą, skirtas krūties vėžio inhibavimui.The compound of claim 10 for inhibiting breast cancer. 12. Junginys pagal 11 punktą, besiskirianti tuo, kad inhibavimo pobūdis yra profilaktinis.12. The compound of claim 11, wherein the inhibitory nature is prophylactic. 13. Junginys pagal 10 punktą, skirtas kiaušidžių vėžio inhibavimui.The compound of claim 10 for inhibiting ovarian cancer. 14. Junginys pagal 10 punktą, skirtas gimdos gleivinės vėžio inhibavimui.A compound according to claim 10 for inhibiting endometrial cancer. 15. Junginys pagal 1 punktą, skirtas cholinacetiltransferazės (ChAT) sureguliavimui žinduoliuose.A compound according to claim 1 for the regulation of cholinacetyltransferase (ChAT) in mammals. 16. Junginio pagal 1 punktą gavimo būdas, besiskiriantis tuo, kad susideda iš 6-hidroksi-3-(4-[2-(piperidin-l-il)etoksi]fenoksi)-2-(4metoksifenil)benzo[b]tio-feno hidrochlorido iškristalinimo iš tetrahidrofurano.16. A process for the preparation of a compound according to claim 1, which comprises 6-hydroxy-3- (4- [2- (piperidin-1-yl) ethoxy] phenoxy) -2- (4-methoxyphenyl) benzo [b] thio- crystallization of phenol hydrochloride from tetrahydrofuran. DSC šilumos srautas (mW)DSC heat flux (mW)