KR980009274A - Method for producing 8-substituted-adenosine 3 ', 5'-cyclic monophosphate metal salt - Google Patents

Abstract

본 발명은 차기 화학식 4의 아데노신 3',5'-사이클릭일인산을 (α) 하기 화학식 5 로 표시되는 4-몰포린-N,N'_이치환된 카복시아미딘과 반응시킨 다음, 생성된 중간체를 계속해서 할로겐화제와 반응시키거나, (β) 아세트산 또는 아세트산과 물의 혼합물중에서 촉매의 존재하에 할로겐화제와 반응시키고, (α) 또는 (β)의 반응생성물을 금속화합물로 처리함을 특징으로 하여 하기 화학식 1의 8-치환-아데노신 3',5'_사이클릭일인산 금속염을 제조하는 개선된 방법에 관한 것이다.The present invention relates to a process for producing adenosine 3 ', 5'-cyclic monophosphate of the following formula (4) with (α) 4-morpholine-N, N'_ disubstituted carboxyamidine represented by the following formula Characterized in that the intermediate is subsequently reacted with a halogenating agent or (β) is reacted with a halogenating agent in the presence of a catalyst in acetic acid or a mixture of acetic acid and water, and the reaction product of (α) or (β) is treated with a metal compound Substituted adenosine 3 ', 5 ' cyclic monophosphate metal salt of formula < RTI ID = 0.0 > 1. < / RTI >

[화학식 1][Chemical Formula 1]

[화학식 4][Chemical Formula 4]

[화학식 5][Chemical Formula 5]

상기 식에서, X는 할로겐을 나타내며; M은 금속 원자를 나타내고; R1 및 R2는 각각 독립적으로 저급알킬 또는 사이클로알킬을 나타낸다.Wherein X represents halogen; M represents a metal atom; R1 and R2 each independently represent lower alkyl or cycloalkyl.

Description

8-치환-아데노신 3', 5'-사이클릭일인산 금속염의 제조방법Method for producing 8-substituted-adenosine 3 ', 5'-cyclic monophosphate metal salt

본 발명은 다음 화학식 1로 표시되는 악성종양 치료제인 8-치환-아데노신 3',5'-사이클릭일인삼 금속염의 개선된 제조방법에 관한 것이다.The present invention relates to an improved preparation method of 8-substituted-adenosine 3 ', 5'-cyclic-ginseng metal salt, which is a malignant tumor therapeutic agent represented by the following formula (1).

[화학식 1][Chemical Formula 1]

상기 식에서, X는 할로겐을 나타내며; M은 나트륨, 칼륨, 마그네슘 또는 칼슘과 같은 금속 원자를 나타낸다.Wherein X represents halogen; M represents a metal atom such as sodium, potassium, magnesium or calcium.

상기 화학식 1로 표시되는 8-치환-아데노신 3',5'-사이클릭일인산 금속염은 1974년에 알.케이. 로빈스(R.K. Robins) 등에 의해 처음 보고된 공지의 화합물로서[참조: R.K. Robins, K. Muneyama, J. Carbohyd. Nucleosides Nucleotides, 1, 55, 1974], 인체내에서 항종양 활성을 나타내는 것으로 밝혀진 이래 이에 대한 다양한 연구가 진행되고 있다. 이들 화합물 중에서 특히 다음 화학식 2로 표시되는 8-플로로아데노신3',5'-사이클릭일인산 금속염 및 이와 유사한 구조를 갖는 화합물인 다음 화학식 3으로 표시되는 8-아미노아데노신 3',5'-사이클릭일인산 금속염이 악성종양에 대하여 강력한 억제효과를 나타내는 것으로 밝혀져 있다.The 8-substituted-adenosine 3 ', 5'-cyclic sodium phosphate represented by the above formula (1) As a known compound which was first reported by R. K. Robins et al. Robins, K. Muneyama, J. Carbohyd. Nucleosides Nucleotides, 1, 55, 1974], have been shown to exhibit antitumor activity in the human body. Among these compounds, 8-hydroxyadenosine 3 ', 5'-cyclic acylphosphate represented by the following formula (2) and 8-aminoadenosine 3', 5'- It has been found that cyclic monophosphate is a potent inhibitor against malignant tumors.

[화학식 2](2)

[화학식 3](3)

상기 식에서 M 은 나트륨, 칼륨, 마그네슘 또는 칼슘과 같은 금속 원자이다.Wherein M is a metal atom such as sodium, potassium, magnesium or calcium.

상기 화학식 1로 표시되는 8-치환-아데노신 3',5'-사이클릭일인산 금속염의 공지의 제조방법은 크게 두 가지로 나눌 수 있는데, 즉 X 가 클로로를 나타내는 화학식 1의 화합물의 경우에는 첫째로 화학식 4로 표시되는 아데노신 3',5'-사이클릭일인산에 치환기를 직접 도입시키는 방법(경로 1)(참조: WO 89/05648), 둘째로는 화학식 4로 표시되는 아데노신 3',5'-사이클릭일인산을 보호기로 보호차고 치환기를 도입하거나 8-위치에 브롬을 도입하여 화학식 7로 표시되는 브롬 중간체를 생성시킨 다음(경로 2)[참조: R.K. Robins, K. Muneyama, J. Carbohyd. Nucleosides Nucleotides, 1, 55, 1974], 치환기를 도입하는 방법(경로 3)[참조: 일본국공개특허공보 제(평)3-291297 호1에 의해 제조할 수 있다.The known process for preparing 8-substituted-adenosine 3 ', 5'-cyclic sodium phosphate represented by the above formula (1) can be roughly divided into two methods. Namely, in the case of the compound of formula (1) in which X represents chloro, (Route 1) (see WO 89/05648), and secondly, a method of directly introducing a substituent to adenosine 3 ', 5' -cyclic anhydride represented by the general formula (4) '-Cyclic monophosphoric acid as a protecting group or introducing bromine at the 8-position to produce the bromine intermediate represented by formula (7) (route 2) (see RK Robins, K. Muneyama, J. Carbohyd. Nucleosides Nucleotides, 1, 55, 1974], a method of introducing a substituent (route 3) (see Japanese Patent Application Laid-Open No. 3-291297,

[화학식 4][Chemical Formula 4]

[화학식 7](7)

상기 식에서, R3, R4 및 R5 는 각각 독림적으로 Y3Si로 표시되는 보호기이며, Y는 메틸, 에틸, t-부틸, 페닐 등을 나타내고, Z는 브롬을 나타내며, M은 나트륨, 칼륨, 마그네슘 또는 칼슘과 같은 금속 원자를 나타낸다.Y is methyl, ethyl, t-butyl, phenyl, etc. Z is bromine, M is sodium, potassium, magnesium or calcium ≪ / RTI >

상기 경로 1에 따르는 방법은 일반적으로 2가지 방법으로 나눌 수 있는데, 첫째로는 화학식 4로 표시되는 아데노신 3',5'-사이클릭일인산을 적당한 용매중에서 염소기 도입시약인 N-클로로숙신이미드, 및 아세트산과 같은 적당한 약산으로 처리하는 방법이며, 두번째로는 화학식 4로 표시되는 아데노신 3',5'-사이클릭일인산을 N,N'-디메틸아세트아미드 및 N,N'-디메틸포름아미드와 같은 용매의 존재하에서 염소가스 및 m-클로로퍼옥시벤조산으로 처리하는 방법이다.The method according to Route 1 can be generally divided into two methods. First, the adenosine 3 ', 5'-cyclic monophosphate represented by the formula 4 is reacted with a chlorinating agent such as N-chlorosuccin Amide, and acetic acid. Second, adenosine 3 ', 5 ' -cyclic anhydride represented by Formula 4 is reacted with N, N'-dimethylacetamide and N, Amide in the presence of a solvent such as chlorine gas and m-chloroperoxybenzoic acid.

경로 2 및 3에 따르는 방법도 또한 일반적으로 두가지 방법으로 나눌 수 있는데, 첫째로는 화학식 4로 표시되는 아데노신 3',5'-사이클릭일인산의 6-위치 아미노기와 당부분의 하이드록시기를 실릴 보호기 Y3Si 로 보호한 다음 유기용매에 용해시키고 염소기를 도입한 다음에 보호기를 제거하는 방법이고, 두번째로는 화학식 4로 표시되는 아데노신 3',5'-사이클릭일인산으로 부터 중간체인 화학식 7의 8-브로모아데노신 3',5'-사이클릭일인산을 경유하여 목적하는 화학식 1의 화합물을 제조하는 방법이다.The method according to Routes 2 and 3 can also be generally divided into two methods. First, the 6-position amino group of adenosine 3 ', 5'-cyclic-1-naphthoic acid represented by Chemical Formula 4 and the hydroxy group A protecting group Y3Si, dissolving in an organic solvent, introducing a chlorine group, and then removing a protecting group, and secondly, a method of removing the protective group from the adenosine 3 ', 5'-cyclic di- 8-bromo-adenosine 3 ', 5'-cyclic monophosphate to give the desired compound of formula (1).

상기한 공지의 방법들은 다음과 같은 여러 가지 문제점을 가지고 있는데, 즉 화학식 4로 표시되는 아데노신 3',5'-사이클릭일인산이 일반적으로 유기용매에는 잘 녹지 않아 반응성이 없고, 용매로서 물과 염기를 함께 사용할 결우에만 물에 용해되어 염소도입시약과 반응하게 된다. 그런데, 이러한 염소도입시약들 대부분이 상기 조건에서는 상당히 불안정하여 반응이 용이하지 않을 뿐 아니라 수율이 떨어지는 단점이 야기된다. 또한 pH 4 이하의 조건에서 반응을 수행하는 경우에는 생성물의 안정도가 낮아 분해산물이 다량 생성되어 수율이 낮아질 수 있고, N-클로로숙신이미드를 사용할 경우에는 부산물로서 다량의 카복실산아미드가 생성되어 반응물의 정제에 어려움이 많다는 단점이 있다. 또한, 염소도입시약으로 염소가스를 사용할 경우에는 염소가스 자체가 유독성과 부식성이 강하고 pH 4 이하의 조건이 되므로 생성물의 분해 산물이 다량 생산되며, 또한 이 경우에는 m-클로로퍼옥시벤조산을 같이 사용해야 하는데, 이에 의한 부산물인 벤조산을 처리해야 하는 번거로움이 있다. 한편, 화학식 4로 표시되는 아데노신 3',5'-사이클릭일인산에 보호기를 도입하여 반응시키는 경우에는, 보호기 도입시에 알킬리튬과 같은 매우 활성이 크고, 인화성이 강한 시약을 사용해야 한다는 점과 반응을 반드시 불활성 기체인 질소, 헬륨 등의 존재하에서 수행하여야 한다는 점 및 반응이 종결된 추에 보호기를 제거해야 하는 불편함과, 단계가 늘어나 경제적인 잇점이 소멸된다는 단점이 있다. 그리고, 브롬화된 중간체를 거쳐서 치환반응을 수행하는 경우에는, 중간체인 화학식 7의 8-브로모아데노신 3',5'-사이클릭일인산을 합성하는 과정이 더 있어 비경제적이고, 또한 중간체인 8-브로모아데노신 3',5'-사이클릭일인산을 합성하기 위해서 반응물로서 브롬을 사용하여야 하기 때문에 이를 대량 합성하는데 있어서 위험하며, 브롬화수소와 같은 유독성 가스를 발생시키기 때문에 제조공정상 상당한 위험부담이 따른다.The known methods have the following problems. That is, the adenosine 3 ', 5'-cyclic monophosphate represented by the general formula (4) is generally insoluble in an organic solvent and is not reactive. Only when the base is used together, it is dissolved in water and reacts with the chlorine-introducing reagent. However, most of these chlorine-introducing reagents are unstable under the above-mentioned conditions, and thus the reaction is not easy and the yield is low. In addition, when the reaction is carried out under the condition of pH 4 or lower, the stability of the product is low, so that a large amount of decomposition products can be produced and yield can be lowered. When N-chlorosuccinimide is used, a large amount of carboxylic acid amide is produced as a by- There are disadvantages in that there are many difficulties in refining. In addition, when chlorine gas is used as a chlorine-introducing reagent, the chlorine gas itself is highly toxic and corrosive and has a pH of 4 or less. Therefore, the decomposition product of the product is produced in a large amount. In this case, m-chloroperoxybenzoic acid However, it is troublesome to process the by-product benzoic acid by this. On the other hand, when the adenosine 3 ', 5'-cyclic phosphate represented by the general formula (4) is reacted by introducing a protective group, it is necessary to use a highly active reagent such as alkyllithium, The reaction must be carried out in the presence of an inert gas such as nitrogen or helium and the disadvantage that the protecting group is removed at the end of the reaction and the economical advantage is extinguished due to an increase in the number of steps. When a substitution reaction is carried out via a brominated intermediate, there is a further step of synthesizing 8 - bromo adenosine 3 ', 5' - cyclic monophosphate of formula (7), which is an intermediate, Bromo-adenosine 3 ', 5'-cyclic monophosphate, it is dangerous to mass-synthesize it, and toxic gas such as hydrogen bromide is generated. .

이에 본 발명자들은 상기한 바와 같은 공지 기술의 문제점을 해결하고 경제적으로 안전하게 화학식 1의 8-치환-아데노신 3',5'-사이클릭일인산 금속염을 제조할 누 있는 방법을 집중적으로 연구하였으며, 그 결과 후술하는 바와 같은 본 발명의 방법에 의해 이러한 목적이 달성되어 목적하는 화학식 1의 8-치환-아데노신 3',5'-사이클릭일인산 금속염을 간단한 방법에 의해 고수율로 안전하게 제조한 수 있음을 밝혀내고 본 발명을 완성하게 되었다.Accordingly, the present inventors have intensively studied a method for depositing a metal salt of 8-substituted-adenosine 3 ', 5'-cyclic sodium phosphate of formula (1) in a cost-effective manner and solving the problems of the prior art as described above. As a result, this object can be achieved by the method of the present invention as described below, whereby the objective metal salt of 8-substituted-adenosine 3 ', 5'-cyclic monophosphate of formula 1 can be safely prepared at a high yield by a simple method. And completed the present invention.

따라서, 본 발명은 새로운 악성종양 치료제로 개발된 다음 화학식 1로 표시되는 8-치환-아데노신 3',5'-사이클릭일인산 금속염의 개선된 제조방법에 관한 것이다.Accordingly, the present invention relates to an improved method for preparing 8-substituted-adenosine 3 ', 5'-cyclic monophosphate represented by the following formula 1, which has been developed as a new malignant tumor therapeutic agent.

[화학식 1][Chemical Formula 1]

상기 식에서, X는 할로겐을 나타내고; M은 금속 원자를 나타낸다.Wherein X represents halogen; M represents a metal atom.

본 발명의 방법에 따르면 화학식 4로 표시되는 아데노신 3',5'-사이클릭일인산을 (α) 화학식 5로 표시되는 4-몰포린-N,N'-이치환된 카복시아미딘과 반응시키고, 생성된 중간체를 계속해서 할로겐화제와 반응시키거나, (β) 아세트산 또는 아세트산과 물의 혼합물 중에서 촉매의 존재하에 할로겐화제와 반응시키고, (α) 또는 (β)의 반응생성물을 금속화합물로 처리함을 특징으로 하는 방법에 의해 목적하는 화학식 1의 8-치환-아데노신 3',5'-사이클릭일인산 금속염을 제조할 수 있다.According to the method of the present invention, adenosine 3 ', 5'-cyclic monophosphoric acid represented by the formula (4) is reacted with (α) 4-morpholine-N, N'-disubstituted carboxyamidine represented by the formula (5) The resulting intermediate is subsequently reacted with a halogenating agent or (b) reacting with a halogenating agent in the presence of a catalyst in acetic acid or a mixture of acetic acid and water, and treating the reaction product of (?) Or (?) With a metal compound The desired 8-substituted-adenosine 3 ', 5'-cyclic monophosphate metal salt of formula (1) can be prepared.

[화학식 4][Chemical Formula 4]

[화학식 5][Chemical Formula 5]

상기 식에서, Rl 및 R2는 각각 독립림적으로 저급알킬 또는 사이클로알킬을 나타내며: M은 금속 원자를 나타낸다.Wherein R 1 and R 2 are each independently lower alkyl or cycloalkyl, and M represents a metal atom.

본 명세서에 언급된 치환체의 정의 중에서 용어 "저급알킬"은 탄소수 1 내지 4의 직쇄 또는 측쇄 포화 탄화수소 래디칼, 예를 들면 메틸, 에틸, 프로필 등을 의미하며, 용어 "사이클로알킬"은 탄소수 2 내지 6의 환상 알킬 그룹으로, 예를들면 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실 등을 나타내고, 용어 "금속 원자'는 바람직하게는 나트륨, 칼륨, 마그네슘 또는 칼슘 등의 금속 원자, 특히 바람직하게는 나트륨을 의미한다.The term "lower alkyl" in the definition of substituents referred to herein means a straight or branched chain saturated hydrocarbon radical having from 1 to 4 carbon atoms, such as methyl, ethyl, propyl and the like, Cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl and the like, and the term "metal atom" is preferably a metal atom such as sodium, potassium, magnesium or calcium, particularly preferably sodium .

이하에서는 본 발명의 방법에 대해 구체적으로 설명하고자 한다.Hereinafter, the method of the present invention will be described in detail.

본 발명의 방법 (α)에 따르면 우선, 화학식 4로 표시되는 아데노신 3',5'-사이클릭일인산을 화학식 5로 표시되는 4-몰포린-N,N'-이치환된 카복시아미딘과 반응시켜 유기용매에 잘 용해되는 중간체를 수득한다. 이 반응에서 화학식 5의 화합물은 화학식 4의 화합물에 대하여 동몰량 내지 약간 과량, 바람직하게는 동몰량으로 사용하여 반응을 수행한다.According to the method (?) Of the present invention, adenosine 3 ', 5'-cyclic monophosphoric acid represented by the general formula (4) is reacted with 4-morpholine-N, N'-disubstituted carboxyamidine represented by the general formula To obtain an intermediate that is well dissolved in an organic solvent. In this reaction, the compound of formula (5) is used in an equimolar to slightly excess amount, preferably an equimolar amount, relative to the compound of formula (4).

이 반응은 반응에 악영향을 미치지 않는 용매의 존재하에서 수행하는데, 바람직하게는 피리딘과 물의 혼합용매, 특히는 피리딘과 물의 5;1(v/v) 혼합용매의 존재하에서 반응을 수행하는 것이 바람직하다.This reaction is carried out in the presence of a solvent which does not adversely affect the reaction. It is preferable to carry out the reaction in the presence of a mixed solvent of pyridine and water, especially a mixed solvent of 5: 1 (v / v) of pyridine and water .

이 반응에 의해 생성된 중간체 화합물은 계속해서 용매의 존재하에서 할로겐화제와 반응시킴으로서 목적하는 화학식 1의 8-치환 아데노신 3',5'-사이클릭일인산 금속염을 제조할 수 있다. 이 반응에서 사용되는 용매는 반응에 악영향을 미치지 않는 유기용매이면 어느 것이나 사용할 수 있으며, 바람직하게는 N,N'-디메틸포름아미드, N,N'-디메틸아세트아미드, 디메틸설폭사이드와 같은 용매, 특히는 N,N'-디메틸포름아미드가 사용된다.The intermediate compound produced by this reaction is subsequently reacted with a halogenating agent in the presence of a solvent to produce the desired 8-substituted adenosine 3 ', 5'-cyclic acylphosphate metal salt of formula (1). The solvent used in this reaction may be any organic solvent that does not adversely affect the reaction, and preferably a solvent such as N, N'-dimethylformamide, N, N'-dimethylacetamide, dimethylsulfoxide, Particularly, N, N'-dimethylformamide is used.

이러한 본 발명의 목적을 위해 사용되는 할로겐화제는 화학식 1의 목적화합물에 할로겐 원자(X)를 도입시킬 수 있는 것이면 어느 것이나 사용한 수 있으나, 바람직하게는 다음 화학식 6의 할로겐화를 사용한다.The halogenating agent used for the purpose of the present invention may be any halogenating agent as long as it can introduce a halogen atom (X) into the target compound of the formula (1).

식에서, R은 저급알킬을 나타내며, X는 할로겐을 나타낸다.In the formula, R represents lower alkyl and X represents halogen.

상기 화학식 6에서 R은 바람직하게는 탄소수 1 내지 4의 알킬기 예를들면 n-부틸, 메틸, 에털, 프로필 또는 이소프로필 등을 나타낸다. 본 발명의 방법 (α)에서 바람직하게 사용될 수 있는 할로겐화제의 구체적인 예로는 n-테트라알킬암모늄요오드테트라클로라이드, 헥사클로로-2,4-헥사디엔-1-온, 트리클로로이소무린산, 트리플루오로설포닐클로라이드 등이 있으며, 바람직하게는 n-테트라부틸암모늄요오드테트라클로라이드를 사용한다.In the above formula (6), R preferably represents an alkyl group having 1 to 4 carbon atoms, for example, n-butyl, methyl, ethers, propyl or isopropyl. Specific examples of the halogenating agent that can be preferably used in the method () of the present invention include n-tetraalkylammonium iodide tetrachloride, hexachloro-2,4-hexadiene-1-on, trichloroisomalic acid, Sulfonyl chloride, and the like, preferably, n-tetrabutylammonium iodide tetrachloride is used.

이 할로겐화반응에서 할로겐화제의 사용량은 사용된 할로겐화제의 종류에 따라 상이하나, 일반적으로는 출발물질로 사용된 화학식 4의 화합물 1 몰에 대하여 1 내지 2 몰, 바람직하게는 1.5 몰의 비로 사용한다.In this halogenation reaction, the amount of the halogenating agent to be used varies depending on the kind of the halogenating agent used, but generally it is used in a ratio of 1 to 2 mol, preferably 1.5 mol to 1 mol of the compound of the formula (4) used as a starting material .

본 방법 (α)의 반응은 바람직하게는 상온에서 5 내지 24 시간, 바람직하게는 10 내지 15 시간 동안 수행한다.The reaction of the present process (a) is preferably carried out at room temperature for 5 to 24 hours, preferably 10 to 15 hours.

상기 방법에서, 화학식 4의 화합물과 화학식 5의 화합물의 반응에 의해 중간체로 생성되는 염은 수율의 저하를 막기 위해 완전히 건조시킨 다음에 할로겐화제와의 후속반응에 사용하며, 반응을 무수조건하에서 수행하기 위해 반응시 사용되는 용매는 증류하여 사용하친, 처리과정에서 반응혼합물의 농축시에는 화합물의 열분해를 방지하기 위해 항온조가 40℃ 이상으로 올라가지 않게 주의하여야 한다.In the above process, the salt formed as an intermediate by the reaction of the compound of the formula (4) and the compound of the formula (5) is used for the subsequent reaction with the halogenating agent after completely drying in order to prevent the yield from being lowered. In order to prevent pyrolysis of the compound during the concentration of the reaction mixture in the process of distillation, the solvent used in the reaction should be carefully controlled so that the temperature of the reaction chamber does not rise above 40 ° C.

또한, 본 발명의 목적화합물인 화학식 1의 8-치환-아데노신 3',5'-사이클릭일인산 금속염 화합물은 화학식 4의 아데노신 3',5'-사이클릭일인산을 직접 할로겐화시키는 방법 (β)에 의해서 제조할 수도 있다.The 8-substituted-adenosine 3 ', 5'-cyclic monophosphate metal salt compound of formula (1) of the present invention can be obtained by directly halogenating adenosine 3', 5'- ). ≪ / RTI >

본 발명의 방법 (β)에 따르면, 화학식 4로 표시되는 아데노신 3',5'-사이클릭일인산을 아세트산 또는 아세트산과 물의 혼합물, 바람직하게는 아세트산과 물의 60:40(v/v) 혼합용매 중에서 촉매의 존재하에 할로겐화제와 반응시킨다.According to the method (?) Of the present invention, the adenosine 3 ', 5'-cyclic monophosphoric acid represented by the general formula (4) is dissolved in a mixture of acetic acid or acetic acid and water, preferably acetic acid and water in a 60:40 In the presence of a catalyst.

이러한 목적에 적합하게 사용될 수 있는 촉매의 예로는 나트륨아세테이트, 또는 보론트리플루오라이드 에테레이트와 같은 루이스산이 있다. 본 방법 (β)의 반응에서 사용되는 할로겐화제는 방법 (α)에서 사용되는 할로겐화제와 동일한 것을 사용할 수 있으며, 바람직하게는 N-클로로몰포린, 트리클로로이소시아무린산, 헥사클로로-2,4-사이클로헥사디엔-1-온, 트리플루오로설포닉클로라이드 등과 같은 적당한 할로겐 도입시약, 특히는 트리클로로이소시아무린산을 사용한다. 할로겐화 반응에서 할로겐화제의 사용량은 사용된 할로겐화제의 종류에 따라 상이하나, 일반적으로는 출발물질로 사용된 화학식 4의 화합물 1 몰에 대하여 1 내지 3 물, 바람직하게는 1.5 내지 2 몰의 비로 사용한다.Examples of catalysts that may be suitably used for this purpose include Lewis acids such as sodium acetate, or boron trifluoride etherate. The halogenating agent used in the reaction of the present process () may be the same as the halogenating agent used in the method (), preferably N-chloromorpholine, trichloroisocyanuric acid, hexachloro-2,4 -Cyclohexadien-1-one, trifluorosulfonic chloride, and the like, in particular trichloroisocyanuric acid. The amount of the halogenating agent to be used in the halogenation reaction varies depending on the kind of the halogenating agent used, but is generally 1 to 3 moles, preferably 1.5 to 2 moles, per mol of the compound of the formula (4) used as the starting material do.

방법 (α) 및 (β) 의 반응이 완결된 후에 생성된 유리산 화합물은 통상의 방법에 의해 목적하는 화학식 1의 화합물의 금속원자(X)에 상응하는 금속화합물로 처리하여 화학식 1의 화합물로 전환시킬 수 있다. 금속화합물에 의한 처리는 통상적인 방법에 의해 수행하는데, 예를 들면 생성된 유리산 화합물을 금속화합 물의 수용액에 용해시켜 칼럼크로마토그라피 시킴으로써 목적화합물을 분리 및 정제할 수 있다. 이 경우에 칼럼크로마토그라피 과정에 사용하는 칼림에는 RP-8, RP-18 등의 충진제를 사용하며, 전개용매로는 물, 메탄올 및 아세트산중의 2 종 이상의 성분의 혼합물, 바람직하게는 물:메탄올:아세트산=89.9:1:0.1(v/v) 또는 물:메탄올=95:5 (v/v)치 혼합용매, 또는 완충용액을 사용하게 되는데, 완충용액으로는 0.1∼5N 트리에틸암오늄바이카보네이트(pH 7.5)에 물과 메탄올을 적당한 비율로, 바람직하게는 물:메탄을=9:1(v/v)을 사용하여 역상 액체크로마토그래피한 다음 수용액을 동결건조시킴으로써 목적하는 상기 화학식 1로 표시되는 8-치환-아데노신 3',5'-사이클릭일인산 금속염을 수득할 수 있다.After the completion of the reaction of (a) and (b), the resulting free acid compound is treated with a metal compound corresponding to the metal atom (X) of the desired compound of the formula (1) Can be switched. The treatment with a metal compound is carried out by a conventional method. For example, a desired free acid can be isolated and purified by subjecting the resulting free acid compound to an aqueous solution of a metal compound and subjecting the resultant to column chromatography. In this case, fillers such as RP-8 and RP-18 are used for the column chromatography used in the column chromatography, and as the developing solvent, a mixture of two or more components in water, methanol and acetic acid, preferably water: methanol A mixed solvent of water and acetic acid = 89.9: 1: 0.1 (v / v) or water: methanol = 95: 5 (v / v), or a buffer solution is used. Reverse phase liquid chromatography using water and methanol in a suitable ratio, preferably water: methane = 9: 1 (v / v), to the carbonate (pH 7.5) Substituted 8-substituted-adenosine 3 ', 5'-cyclic monophosphate can be obtained.

반응이 완결된 후에 생성물은 통상의 방법에 의해 분리 및 정제할 수 있으며, 바람직하게는 상기 방법(α)에서 설명한 바와 같은 칼럼크로마토그라피 방법을 사용하여 정제한다.After completion of the reaction, the product can be isolated and purified by a conventional method, and preferably purified using a column chromatography method as described in method (a) above.

본 발명의 방법에 따르면, 반응에 사용되는 할로겐화제의 가격이 싸서 경제적인 잇점이 있고, 유기용매에 잘 용해되지 않아 반응성이 약한 화학식 4의 아데노신 3',5'-사이클릭일인산을 화학식 5의 4-물포린-N,N'-이치환된 카복시아미딘과 반응시킴으로서 유기용매에서의 반응성을 증가시켜 반응성을 극대화하였으며, 반응 후 처리시에도 부산물의 제거가 용이하고, 수율이 높아지는 잇점이 있다. 또한, 반응을 pH 4 이상의 산도에서 수행하므로 산을 사용하여 pH 4 이하에서 반응을 수행하는 선행기술의 방법에 비해 분해 산물의 생성이 감소되고, 유독한 시약을 사용하지 않고 반응을 진행시킬 수 있으며, 방법 (β)에 의해 반응을 수행하는 경우에는 중간체를 거치지 않고 한 반응용기에서 직접 할로겐 원자를 도입시킬 수 있으므로 공정을 간단하게 수행할 수 있는 잇점이 있다.According to the method of the present invention, the adenosine 3 ', 5'-cyclic monophosphate of formula (4), which is economically advantageous because of the low cost of the halogenating agent used in the reaction and poorly soluble in the organic solvent, By reacting with 4-hydroxy-N, N'-disubstituted carboxyamidine, the reactivity in the organic solvent is increased to maximize the reactivity, and the by-products can be easily removed even after the reaction, and the yield is increased . Further, since the reaction is carried out at an acidity of pH 4 or higher, the production of decomposition products is reduced and the reaction can proceed without the use of toxic reagents as compared with the prior art method in which the reaction is carried out at pH 4 or lower using an acid , When the reaction is carried out by the method (?), The halogen atom can be directly introduced into a reaction vessel without passing through an intermediate, so that the process can be easily performed.

본 발명은 이하의 실시예에 의해 더욱 상세히 설명되나, 본 발명이 이들 실시예에 의해 어떤 식으로든 제한되는 것은 아니다.The present invention is explained in more detail by the following examples, but the present invention is not limited in any way by these examples.

[실시예 1][Example 1]

8-클로로아데노신 3',5'-사이클릭일인산 나트륨염8-chloroadenosine 3 ', 5'-sodium cyclic phosphate

방법 1:Method 1:

500㎖ 둥근 플라스크에 아데노신 3',5'-사이클릭일인산(5.0g,15.2 밀리몰)과 4-몰포린-N,N'-디사이클로 헥실카복시아미딘(4.46g, 15.2 밀리몰)를 넣고 피리딘(250㎖)과 물(50㎖)을 가하여 용해시킨 후에 감압하에서 농축시켰다. 농축물에 다시 피리딘(250㎖)을 가하여 감압하에서 농축시키고 농축물을 완전히 건조시켜 흰색의 결정을 수득하였다. 수득된 결정을 500㎖ 삼구 플라tm크에 넣고 N,N'-디메틸포름아미드(140㎖)를 가하여 용해시키고 n-테트라부틸암모늄테트라클로라이드(11.66g, 22.8 밀리몰)를 N,N'-디메틸포름아미드(140㎖)에 용해시켜 천천히 적가하였다.(5.0 g, 15.2 mmol) and 4-morpholine-N, N'-dicyclohexylcarboxyamidine (4.46 g, 15.2 mmol) were added to a 500 mL round-bottomed flask, (250 ml) and water (50 ml) were added to dissolve and then concentrated under reduced pressure. To the concentrate again pyridine (250 ml) was added and the mixture was concentrated under reduced pressure, and the concentrate was completely dried to obtain white crystals. N, N'-Dimethylformamide (140 ml) was added to dissolve the obtained crystals in a 500 ml three-necked flask, and n-tetrabutylammonium tetrachloride (11.66 g, 22.8 mmol) Amide (140 ml) and slowly added dropwise.

반응혼합물을 실온에서 12 시간 동안 교반한 후에 물(200㎖)을 가하고 클로로포름(500㎖X3)으로 세척한 후, 수층을 40℃ 이하의 온도에서 감압하에 농축시켰다. 석출된 결정을 여과하고 아세톤(100㎖)으로 세척하여 노란색 결정(3.59g, 65%(HPLC=98%))을 수득하였다. 수득된 결정에 0℃ 이하의 온도에서 0.5N NaOH 용액(15㎖)을 천천히 가하여 완전히 용해시킨 후, C18 역상 크로마토그라피를 이용하여 정제하였다. 칼럼 분리시에 충진제는 RP-18 충진제(30g)를 사용하고 이동상(mobile phase)으로는 5% 메탄올 수용액(1500㎖)을 사용하여 1㎖/분의 속도로 시험관 1 개당 8㎖씩 받아 UV(261㎚)와 HPLC로 확인한 후, 25-100번의 시험관을 모아 메탄올을 감압하에서 농축하여 제거하고 수용액을 동결건조하여 표제화합물 2.93g(50%)을 수득하였다.After the reaction mixture was stirred at room temperature for 12 hours, water (200 ml) was added, and the mixture was washed with chloroform (500 ml × 3), and the aqueous layer was concentrated under reduced pressure at a temperature of 40 ° C. or lower. The precipitated crystals were filtered and washed with acetone (100 ml) to give yellow crystals (3.59 g, 65% (HPLC = 98%)). To the obtained crystals, 0.5N NaOH solution (15 ml) was added slowly at a temperature of 0 ° C or lower to completely dissolve the crystals, and then purified using C 18 reverse phase chromatography. For column separation, the filler is RP-18 (30 g) and mobile phase is 5 ml of methanol (1500 ml) at a rate of 1 ml / min. 261 nm) and HPLC. 25-100 test tubes were collected, methanol was concentrated under reduced pressure, and the aqueous solution was lyophilized to obtain 2.93 g (50%) of the title compound.

mp : ＞237℃(분해)mp:> 237 ° C (decomposition)

1H NMR(D2O) : δ = 4.25(m, 2H, C'5H), 4.47(m, 1H, C'4H), 5.02(d, 1H, C'2H), 5.24(m, 1H, C'3H), 6.17(s, 1H, C'1H), 8.24(s, 1H, C2H)1H NMR (D2O):? = 4.25 (m, 2H, C'5H), 4.47 (m, 1H, C'4H), 5.02 ), 6.17 (s, IH, C'1H), 8.24 (s, IH, C2H)

UV : λmax 261㎚ (ε5,700, pH 7.5)UV:? Max 261 nm (? 5,700, pH 7.5)

방법 2:Method 2:

아세트산(3㎖)에 보론트리클로라이드에테레이트(2.8㎎, 0.02 밀리몰)와 아데노신 3',5'-사이클릭일인산(20.0㎎, 0.06 밀리몰) 및 트리클로로이소시아무린산(4.7㎎, 0.02 밀리몰)의 혼합물을 가하여 상온에서 7 시간 동안 교반하고, 농축한 후에 잔류물에 수산화나트륨 수용액을 가하고 메탄올:아세트산:물(10:0.1:89.9,v/v)의 조건하에서 상기 1에서 사용한 방법과 동일한 방법에 따라 HPLC 로 분리하여 표제화합물 1.2㎎(16%)을 수득하였다. 생성물의 물리화학적 성질을 상기 방법 1에 따라 제조한 화합물의 물성치와 동일하였다.To acetic acid (3 ml) was added boron trichloride ethereate (2.8 mg, 0.02 mmol), adenosine 3 ', 5'-cyclic iodic acid (20.0 mg, 0.06 mmol) and trichloroisocyanuric acid (4.7 mg, 0.02 mmol ) Was added and the mixture was stirred at room temperature for 7 hours. After concentration, an aqueous solution of sodium hydroxide was added to the residue, and the solution was treated under the conditions of methanol: acetic acid: water (10: 0.1: 89.9, v / v) The separation by HPLC according to the method gave 1.2 mg (16%) of the title compound. The physical and chemical properties of the product were the same as those of the compound prepared according to Method 1 above.

방법 3:Method 3:

60% 아세트산 용매에 아데노신 3',5'-사이클릭일인산(50.0㎎, 0.15 밀리몰)과 나트륨아세테이트(69.0㎎, 0.84 밀리몰)을 용해시키고 트리클로로이소시아무린산(87.0㎎, 0.38 밀리몰)을 가하였다. 반응용액을 3 시간 동안 상온에서 교반한 후에 농축하고 잔류물에 수산화나트륨 수용액을 가하여 메탄올:아세트산:물(10:0.1:89.9, v/v)의 조건하에서 상기 방법 1에서 사용한 방법과 동일한 방법에 따라 HPLC로 분리하여 표제 화합물 13.1㎎(24%)을 수득하였다. 생성물의 물리화학적 성질은 상기 방법 1에 따라 제조한 화합물의 물성치와 동일하였다.(50.0 mg, 0.15 mmol) and sodium acetate (69.0 mg, 0.84 mmol) were dissolved in a 60% acetic acid solvent and trichloroisocyanuric acid (87.0 mg, 0.38 mmol) Respectively. The reaction solution was stirred for 3 hours at room temperature and then concentrated. To the residue was added an aqueous solution of sodium hydroxide and subjected to the same procedure as in Method 1 under the conditions of methanol: acetic acid: water (10: 0.1: 89.9, v / v) Which was separated by HPLC to give 13.1 mg (24%) of the title compound. The physical and chemical properties of the product were the same as those of the compound prepared according to Method 1 above.

내용없음No content

Claims (13)

하기 화학식 4로 표시되는 아데노신 3',5'-사이클릭일인산을 (α) 하기 화학식 5로 표시되는 4-몰포린-N,N'-이치환된 카복시아미딘과 반응시키고, 생성된 중간체를 계속해서 할로겐화제와 반응시키거나, (β) 용매로서 아세트산 또는 아세트산과 물의 혼합물 중에서 촉매의 존재하에 할로겐화제와 반응시키고, (α) 또는 (β)의 반응생성물을 금속화합물로 처리함을 특징으로 하여 하기 화학식 1로 표시되는 8-치환 아데노신 3',5'-사이클릭일인산 금속염을 제조하는 방법:Reacting adenosine 3 ', 5'-cyclic monophosphate represented by the following formula 4 with (?) 4-morpholine-N, N'-disubstituted carboxyamidine represented by the following formula 5, (Β) is reacted with a halogenating agent in the presence of a catalyst in acetic acid or a mixture of acetic acid and water as a solvent, and the reaction product of (α) or (β) is treated with a metal compound Substituted adenosine 3 ', 5'-cyclic monophosphate represented by the following formula 1: [화학식 1][Chemical Formula 1] [화학식 4][Chemical Formula 4] [화학식 5][Chemical Formula 5] 상기 식에서. X는 할로겐을 나타내며, M은 금속 원자를 나타내고; Rl 및 R2는 각각 독립적으로 저급 알킬 또는 사이클로알킬을 나타낸다.Gt; X represents a halogen, M represents a metal atom; R 1 and R 2 each independently represent lower alkyl or cycloalkyl. 제1항에 있어서, 방법 (α)에서 화학식 5의 화합물로 4-몰포린-N,N'-디사이클로헥실카복시아미딘을 사용함을 특징으로 하는 방법.The method according to claim 1, wherein 4-morpholine-N, N'-dicyclohexylcarboxyamidine is used as the compound of formula (5) in method (a). 제1항에 있어서, 방법 (α)에서 화학식 4의 화합물과 화학식 5의 화합물의 반응을 피리딘과 물의 혼합용매의 존재하에서 수행함을 특징으로 하는 방법.The method according to claim 1, wherein the reaction of the compound of formula (4) and the compound of formula (5) is carried out in the presence of a mixed solvent of pyridine and water. 제7항에 있어서, 방법 (α)에서 화학식 4의 화합물과 화학식 5의 화합물의 반응을 피리딘과 물의 5:1(v/v) 혼합용매의 존재하에서 수행함을 특징으로 하는 방법.The method according to claim 7, wherein the reaction of the compound of the formula (4) and the compound of the formula (5) in the method (a) is carried out in the presence of a 5: 1 (v / v) mixed solvent of pyridine and water. 제1항에 있어서, 할로겐화제로 하기 화학식 7의 화합물을 사용함을 특징으로 하는 방법.The method according to claim 1, wherein the halogenating agent is a compound represented by the following formula (7). 상기 식에서, X 는 할로겐을 나타내며, R은 저급알킬을 나타낸다.Wherein X represents halogen and R represents lower alkyl. 제5항에 있어서, 방법 (α)에서 할로겐화제로서 H-테트라알킬암모늄요오드테트라클로라이드, 헥사클로로-2.4-사이클로헥사디엔-1-온, 트리클로로이소무린산 또는 트리플루오로설포닐클로라이드를 사용함을 특징으로 하는 방법.6. The process according to claim 5, which comprises using H-tetraalkylammonium iodide tetrachloride, hexachloro-2,4-cyclohexadien-1-one, trichloroisomalic acid or trifluorosulfonyl chloride as halogenating agent in process (a) Lt; / RTI > 제7항에 있어서, 방법 (α)에서 할로겐화제로 n-테트라부틸암모늄요오드테트라클로라이드를 사용함을 특징으로 하는 방법.8. A process according to claim 7 characterized in that n-tetrabutylammonium iodide tetrachloride is used as halogenating agent in process (a). 제1항에 있어서, 방법 (α)에서 용매로서 아세트산과 물의 60:40(v/v) 혼합물을 사용함을 특징으로 하는 방법.A process according to claim 1, characterized in that a mixture of acetic acid and water in a ratio of 60:40 (v / v) is used as solvent in process (a). 제1항에 있어서, 방법 (β)에서 촉매로서 나트륨아세테이트 또는 루이스산을 사용함을 특징으로 하는 방법.A process according to claim 1, characterized in that sodium acetate or a Lewis acid is used as catalyst in the process (?). 제9항에 있어서, 루이스산으로서 보론트리플루오라이드에테레이트를 사용함을 특징으로 하는 방법.10. A process according to claim 9, characterized in that boron trifluoride etherate is used as the Lewis acid. 제1항에 있어서, 방법 (β)에서 할로겐화제로서 N-클로로몰포린, 헥사클로로-2,4-사이클로헥사디엔-1-온, 트리클로로이소무린산 또는 트리플루오로설포닐클로라이드를 사용함을 특징으로 하는 방법.The method according to claim 1, characterized in that in the process (β), N-chloromorpholine, hexachloro-2,4-cyclohexadien-1-one, trichloroisomalic acid or trifluorosulfonyl chloride is used as a halogenating agent Lt; / RTI > 제11항에 있어서, 방법 (β)에서 할로겐화제로서 트리클로로이소시아무린산을 사용함을 특징으로 하는 방법.12. The method according to claim 11, wherein trichloroisocyanuric acid is used as the halogenating agent in the method (?). 제1항에 있어서, 금속화합물에 의한 처리를 방법 (α) 또는 (β)의 생성물을 금속화합물의 용액에 용해시키고 칼럼크로마토그라피시켜 수행함을 특징으로 하는 방법.The method according to claim 1, wherein the treatment with the metal compound is carried out by dissolving the product of the method (?) Or (?) In a solution of the metal compound and performing column chromatography. ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.※ Note: It is disclosed by the contents of the first application.