KR950003313A - 인간 표피 성장 인자의 정제방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 인간 표피 성장 인자(EGF)의 정제방법에 관한 것이며, 보다 상세하게는 유전공학적인 방법에 의해 효모에서 발현되어 배양액으로 분비된 순도가 낮은 인간 표피 성장 인자를 음이온 교환 크로마토그래피 및 역상 소수성 실리카-MC 크로마토그래피로 정제하여 고활성 및 고순도의 EGF를 대량으로 얻을 수 있는 EGF의 정제방법에 관한 것이다.
Description
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 배양시간에 따른 인간 표피 성장 인자(EGF)의 발현 정도를 15% SDS-PAGE로 확인한 결과를 나타낸 것이고, 제2도는 배양액을 역상 HPLC 크로마토그래피 한 결과를 나타낸 것이며, 제3도는 음이온 교환 크로마토그래피하여 얻은 용출 수집액을 역상 HPLC 크로마토그래피한 결과를 나타낸 것이며, 제4도는 역상 실리카-MG 크로마토그래피하여 얻은 용출수집액을 투석 처리한 후 역상 HPLC 크로마토그래피한 결과를 나타낸 것이며, 제5도는 농축된 EGF 용액을 역상 HPLC 크로마토그래피한 결과를 나타낸 것.
Claims (6)
- (가) 인간 표피 성장 인자(EGF)가 발현, 분비된 효모배양액을 원심분리하여 세포 침전물을 제거한 배양액을 얻고; (나) 상기 배양액을 음이온 교환 크로마토그래피로 분리시켜 인간 EGF 단백질을 포함하는 분획을 수집하고; (다) 상기 (나)에서 수집한 단백질 용액을 역상 실리카 크로마토그래피로 분리시켜 인간 EGF 단백질을 포함하는 분획을 수집하고; (라) 상기 (다)에서 수집한 단백질 용액을 투석한 후 한외 여과막으로 농축시킴을 포함하는 인간 EGF 단백질의 정제방법.
- 제1항에 있어서, 상기 (나)단계의 음이온 교환 크로마토그래피의 수지로서 DE-53(Whatman사 제품)을 사용하는 방법.
- 제1항에 있어서, 상기 (나)단계에서 pH 5.3의 암모늄 아세테이트 완충 용액을 가하여 단백질을 용출 시키는 방법.
- 제3항에 있어서, 용출시 0.03M-0.3M 선형 농도 구배를 사용하고, 0.3M에 도달한 후에는 동일 농도로 계단 구배시키는 방법.
- 제1항에 있어서, 상기 (다)단계에서 시료를 컬럼에 흡착시킨 후 1차로 pH 7.0의 50mM 트리스 완충 용액, 2차로 pH 7.0의 20% 에탄올을 함유하는 50mM 트리스 완충 용액을 가하여 컬럼을 세척하는 방법.
- 제1항에 있어서, 상기 (라)단계에서 단백질 용액을 증류수 또는 pH 7.0의 10mM PBS 완충용액으로 투석시키는 방법.※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1019930013368A KR950003313A (ko) | 1993-07-15 | 1993-07-15 | 인간 표피 성장 인자의 정제방법 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1019930013368A KR950003313A (ko) | 1993-07-15 | 1993-07-15 | 인간 표피 성장 인자의 정제방법 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR950003313A true KR950003313A (ko) | 1995-02-16 |
Family
ID=67142697
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1019930013368A KR950003313A (ko) | 1993-07-15 | 1993-07-15 | 인간 표피 성장 인자의 정제방법 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR950003313A (ko) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100436655B1 (ko) * | 2001-07-25 | 2004-06-22 | (주)엘피스바이오텍 | 광범위한 단백질에 적용할 수 있는 단백질의 농축 및정제 방법 |
-
1993
- 1993-07-15 KR KR1019930013368A patent/KR950003313A/ko not_active Application Discontinuation
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100436655B1 (ko) * | 2001-07-25 | 2004-06-22 | (주)엘피스바이오텍 | 광범위한 단백질에 적용할 수 있는 단백질의 농축 및정제 방법 |
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