KR830001612B1 - The production of a selectively protected n-acylated derivative of an amino glycoside - Google Patents

Abstract

1-N-(α-hydroxy-w-aminoalkanoyl)-aminoglycoside were prepd. Thus, 504 mg 3,6'-di-N-benzyloxycarbonyl kanamycine A in 4 ml dimethylsulfoxide was mixed with 220 mg ethyl trifluoroacetate and kept for 1 day at room temp. Small amount of trifluoroacetate was added to the mixt. The reactant put in a large quantity of ethylether and washed to give 640 g solid 3,6-d-N-benzyloxycarbonyl-3"-trifluoroacetyl kanamycine A.

Description

아미노글리코사이드 항생제의 선택적으로 보호된 N-아실화 유도체의 제조방법Method for preparing selectively protected N-acylated derivatives of aminoglycoside antibiotics

본 발명은 아미노글리코사이드 분자의 특별한 위치에 있는 아미노나 알킬아미노기를 아실기로 선택적으로 보호 또는 차단된 아미노 글리코사이드 항생제를 선택적으로 보호된 N-아실화 유도체의 새로운 제조방법에 관한 것이다. 그러므로 본 발명은 아미노글리코사이드 항생제의 특별한 위치에서 어떤 아미노나 알킬아미노를 선택적으로 보호하기 위한 새로운 방법에 관한 것이다.The present invention relates to a novel process for the preparation of N-acylated derivatives optionally protected with aminoglycoside antibiotics which are optionally protected or blocked with an acyl or aminoaminoalkylamino group at a particular position of the aminoglycoside molecule. The present invention therefore relates to a novel method for selectively protecting any amino or alkylamino at a particular position of an aminoglycoside antibiotic.

본 발명은 아미노글리코사이드 분자내 데옥시스트렙트 아민부분의 6-히드록실기와 연결된 3"-아미노글리코실기를 갖는 데옥시스트렙트아민 부분을 함유한 아미노글리코사이드 항생제를 선택적으로 보호된 N-아실화 유도체의 제조에 유용하다. 본 발명에 사용할 수 있는 아미노글리코사이드 항생제는 특히 4-0-(6'아미노글리코실)치환분을 임의로 갖는 6-0-(3"-아미노 또는 3''-알킬아미노-3"-데옥시글리코실)-2-데옥시스트렙트 아민으로 구성된 아미노 글리코사이드 항생제로서 정의되며, 대표적인 예로는 가나마이신, 젠타이신, 시소미신, 네틸미신 및 베르다미신이 있다. 본 발명은 또한 약-내성 박테리아에 대하여 활성을 갖는 유용한 반-합성 항균제로 공지된 1-N-(α-히드록시-ω-아미노알카노일)-아미노-글리코사이드 항생제의 제조에 대한 새로운 방법의 사용을 포함한다.The present invention provides an N-glycoside antibiotic selectively containing an N-glycoside antibiotic containing a 3 " -aminoglycosyl group linked to a 6-hydroxyl group of a deoxystrept amine moiety in an aminoglycoside molecule. Useful for the preparation of acylated derivatives. The aminoglycoside antibiotics which may be used in the present invention are particularly 6-0- (3 "-amino or 3 '' optionally having a 4-0- (6'aminoglycosyl) substitution. It is defined as an amino glycoside antibiotic consisting of -alkylamino-3 "-deoxyglycosyl) -2-deoxystrept amines, with representative examples being kanamycin, gentamicin, sisomicin, netylmycin and veramicin. The present invention also provides a novel method for the preparation of 1-N- (α-hydroxy-ω-aminoalkanoyl) -amino-glycoside antibiotics known as useful semi-synthetic antimicrobials having activity against drug-resistant bacteria.Including the dragon.

종래 가나마이신같은 아미노글리코사이드 항생제는 비교적 높고 다양한 활성을 가진 몇몇 아미노기능기 및 히드록시기능기를 함유하는 물질을 사용한다. 모체 아미노글리코사이드 항생제로 부터 유도된 많은 종류의 반합성 아미노글리코사이드 항생제를 합성했다. 이러한 유도체의 반-합성에서 출발 아미노글리코사이드 항생제에서 아미노 및 히드록실기는 하나나 그 이상의 적합한 보호기로 선택적으로 보호되거나 차단되는 것이 바람직하다.Conventional aminoglycoside antibiotics, such as kanamycin, use materials that contain several amino and hydroxy functional groups that are relatively high and have a variety of activities. Many kinds of semisynthetic aminoglycoside antibiotics derived from parent aminoglycoside antibiotics have been synthesized. It is preferred that the amino and hydroxyl groups in the starting aminoglycoside antibiotics in the semi-synthesis of such derivatives are selectively protected or blocked with one or more suitable protecting groups.

아미노글리코사이드 항생제에서 아미노기와 히드록실기의 선택적 보호를 위하여, 여러가지 성공적인 방법들이 개발되었으며 관련 히드록실기의 선택적 보호가 이용되고 있다. 그러나 아미노글리코사이드 항생제에 존재하는 많은 아미노 가운데 어떤 특별한 아미노기의 선택적 보호를 위하여 현재 이용하는 방법들은 실기하기 곤란하거나 또는 어떤 복잡한 조작을 요한다. 이것은 아미노글리코사이드 항생제내의 모든 아미노기들이 이들의 반응성에 큰 차이가 없기 때문이나, 가나마이신 A의 6'-아미노기를 예를들면 아미노 글리코사이드 분자에 단 한개의 탄소원자에 연결된 어떤 탄소원자와 결합된 아미노 또는 메틸아미노기는 이러한 아미노글리코사이드 분자에서 두개 또는 그 이상의 탄소원자에 연결된 어떤 탄소원자와 결합된 아미노 또는 메틸아미노기보다 높은 반응성을 나타낸다. 이러한 이유로 전자형 아미노나 메틸아미노기는 후자형 아미노나 메틸아미노기와 비교할 때 아미노-보호기로서 도입되는 아실기를 갖는 아실화제와 보다 잘 반응할 수 있으므로 아실기로 잘 보호된 전자형의 아미노나 메틸아미노기를 갖는 N-보호 유도체는 다른 N-보호 유도체보다 고수율로 생산될 수 있다. 수년전 본 발명인들은 아미노기와 히드록실기가 아미노글리코사이드 항생제분자의 입체배열에서 한쌍으로 상호 이웃에 있을때, 이 아미노와 히드록실기는 수소화 나트륨으로 처리하므로서 환상 카르바메이트의 형태로 상호 선택적으로 경합되어 아미노와 히드록실기의 쌍은 동일한 분자내에 존재하는 다른 아미노기를 차단하지 않고 환상 카르바메이트로 동시에 차단시킬 수 있음을 알았다("Journal of Antibiotics", 25, No.12, 741-742(1972) ; 미국특허 제3,925,354호 및 3,965,089호 참조).For the selective protection of amino groups and hydroxyl groups in aminoglycoside antibiotics, several successful methods have been developed and the selective protection of related hydroxyl groups is used. However, the methods currently used for the selective protection of certain particular amino groups among the many amino acids present in aminoglycoside antibiotics are difficult to implement or require some complex manipulations. This is because all amino groups in the aminoglycoside antibiotics do not differ significantly in their reactivity, but the 6'-amino group of kanamycin A, for example, is bound to any carbon atom linked to only one carbon atom in the aminoglycoside molecule. Amino or methylamino groups exhibit higher reactivity than amino or methylamino groups bonded to any carbon atom linked to two or more carbon atoms in such aminoglycoside molecules. For this reason, the electron amino or methylamino group can react better with the acylating agent having an acyl group introduced as an amino-protecting group as compared to the latter amino or methylamino group and thus have an electron-type amino or methylamino group well protected with an acyl group. N-protected derivatives can be produced in higher yield than other N-protected derivatives. Many years ago, the inventors found that when an amino group and a hydroxyl group are adjacent to each other in pairs in a stereoconfiguration of an aminoglycoside antibiotic molecule, the amino and hydroxyl groups compete with each other in the form of cyclic carbamate by treating with sodium hydride. It has been found that pairs of amino and hydroxyl groups can be blocked simultaneously with cyclic carbamates without blocking other amino groups present in the same molecule ("Journal of Antibiotics", 25, No. 12, 741-742 (1972). ; US Pat. Nos. 3,925,354 and 3,965,089).

최근에 나가부산과 그의 공동연구자들은 동(Ⅱ), 닉켈(Ⅱ), 코발트(Ⅱ) 및 카드늄(Ⅱ)으로 부터 선택한 2가 전이금속(M⁺⁺)의 염을 불활성 유기용매에서 가나마이신, 젠타미신 및 시소미신으로 표시되는 4-0-(아미노글리코실)-6-0-(아미노글리코실)-2-데옥시스트렙트아민류에 속하는 아미노글리코사이드 항생제와 반응할때, 이 2가 전이금속 양이온은 아미노글리코사이드 분자에서 "인접"관계의 특별한 위치에 존재하는 아미노와 히드록실기의 쌍과 착화되므로서 아미노글리코사이드 항생제-전이금속양이온 착화합물을 형성한다(일본공개명세서 소화 52-153944 및 1979년 1월 23일자로 미국특허 제4,136,254호로 허여된 미국특허 명세서 SN697,297을 참조). 이러한 아미노글리코사이드 항생제-전이금속 양이온 착화합물에서 착화된 아미노기는 2가 전이금속 양이온으로 차단된다. 이러한 착화합물이 계속하여 아실기를 갖는 아실화제와 반응할 때, 2가 금속 양이온으로 차단되지 않은 금속착화 합몰내의 비착화된 아미노기만이 주로 아실화되므로 아실기로 선택적보호가 이룩될 수 있다. 이것은 예를들어 가나마이신 A를 참조로하여 아래에 설명되었다. 동(Ⅱ ), 닉켈(Ⅱ ), 코발트(Ⅱ ) 및 카드늄(Ⅱ )으로 부터 선택한 2가 전이금속 양이온이 가나마이신 A와 반응할때, 2가 금속양이온(M⁺⁺)의 착화반응은 하기일반식(Ⅰ)으로 표시된 바와 같이 1-아미노기와 2"-하이드록시기사이 및 3"-아미노기와 4"-히드록실기 사이에서 일어난다.Recently, Nagabusan and his co-workers studied salts of divalent transition metals (M ⁺⁺ ) selected from copper (II), nickel (II), cobalt (II) and cadmium (II) in an inert organic solvent, kanamycin, When reacted with aminoglycoside antibiotics belonging to 4-0- (aminoglycosyl) -6-0- (aminoglycosyl) -2-deoxystrepamines represented by gentamicin and sisomicin, these divalent transitions Metal cations are complexed with pairs of amino and hydroxyl groups present at particular positions in the "adjacent" relationship in the aminoglycoside molecule to form an aminoglycoside antibiotic-transition metal cation complex (see Japanese Patent Publication No. 52-153944 and See US patent specification SN697,297, issued Jan. 23, 1979, to US Pat. No. 4,136,254. The amino groups complexed in these aminoglycoside antibiotic-transition metal cation complexes are blocked with divalent transition metal cations. When such a complex compound subsequently reacts with an acylating agent having an acyl group, selective protection may be achieved with an acyl group since only uncomplexed amino groups in the metal complex moiety which are not blocked with a divalent metal cation are mainly acylated. This is described below with reference to, for example, kanamycin A. When a divalent transition metal cation selected from copper (II), nickel (II), cobalt (II) and cadmium (II) reacts with kanamycin A, the complexing reaction of divalent metal cation (M ⁺⁺ ) is as follows. As represented by formula (I), it occurs between 1-amino group and 2 "-hydroxy group and between 3" -amino group and 4 "-hydroxyl group.

상기 착화반응에서 적어도 2몰의 전이금속염이 1몰의 가나마이신 A에 대하여 필요하다. 생성된 금속착화합물에서 1-아미노와 3"-아미노기는 동시에 차단된다. 일반식(Ⅰ)의 이러한 착화합물을 폴리펩티드의 일반적 합성에서 공지된 아미노-보호기로서 사용할 수 있는 아실기를 갖는 아실화제로 처리하였을 때, 비착화 된 3-아미노와 6'-아미노기만이 아실화하여 3,6'-디-N-아실화유도체를 얻는다(미국화학회지 100, 5253-5254(1978)참조).At least 2 moles of transition metal salt are required for 1 mole of kanamycin A in the complexing reaction. 1-amino and 3 "-amino groups are simultaneously blocked in the resulting metal complex. When such a complex of formula (I) is treated with an acylating agent having an acyl group that can be used as a known amino-protecting group in the general synthesis of polypeptides Only uncomplexed 3-amino and 6'-amino groups are acylated to give 3,6'-di-N-acylated derivatives (see, US Chem. 100, 5253-5254 (1978)).

본 발명인은 보고된 상기 사실을 알았으나 다른 여러가지 금속양이온들과 가나마이신 A 및 가나마이신 B 같은 아미노글리코사이드 항생제 뿐만 아니라 아미노글리코사이드의 반-합성 유도체와의 상호 작용에 대하여 더 연구하였다. 그결과 2가 아연 양이온이 상술한 2가 닉켈, 코발트, 동과 카드늄 양이온들과는 상이하게 작용할지라도 아연 양이온은 데옥시스트렙트 아민 부분의 6-히드록실기에 연결된 3"-아미노글리코실이나 3"-알킬아미노글리코실기를 갖는 데옥시스트렙트 아민부분으로 이루어진 아미노 글리코사이드 화합물(가나마이신 A,B나 C같은 것)의 1-아미노(또는 1-알킬아미노)기와 3"-아미노(또는 3"-알킬아미노)기와 강하게 착화되어 1-아미노기와 3"-아미노기를 둘다 차단시킨다는 것을 알았다.The inventors have known the above reported, but have further studied the interaction of various other metal cations with aminoglycoside antibiotics such as kanamycin A and kanamycin B as well as semi-synthetic derivatives of aminoglycosides. As a result, although the divalent zinc cation acts differently from the divalent nickel, cobalt, copper and cadmium cations described above, the zinc cation is a 3 "-aminoglycosyl or 3" linked to the 6-hydroxyl group of the deoxystrepamine amine moiety. 1-amino (or 1-alkylamino) groups of aminoglycoside compounds (such as kanamycin A, B or C) consisting of deoxystrept amine moieties with alkylaminoglycosyl groups, 3 "-amino (or 3" It was found that the complexed strongly with the -alkylamino) group blocked both the 1-amino group and the 3 "-amino group.

나가부산과 그의 공동연구자에 의하면, 2가 닉켈, 코발트, 동이나 카드늄 양이온을 예를 들어 가나마이신 B와 반응시킨다면, 하기 일반식(Ⅱ)의 가나마이신 B-금속열 착화합물이 형성됨을 예상할 수 있다 :According to Nagabusan and his co-workers, if bivalent nickel, cobalt, copper or cadmium cations are reacted with, for example, kanamycin B, the kanamycin B-metal thermal complex of the following general formula (II) can be expected to form. have :

이러한 예상은 상기 "미국화학회지"의 나가부산과 그의 공동연구자의 보고에 의하여 알 수 있는 데이에 따르면 가나마이신 B는 가나마이신 B분자의 1- 및 2"-위치 사이, 2'- 및 3'-위치사이 및 2"- 및 3"-위치사이에 3쌍의 이웃한 아미노-히드록실기를 함유하기 때문에 이웃한 아미노-히드록실기쌍은 2가전이금속원소와 가역 착화합물을 형성할 수 있음을 예상할 수 있다. 그러나 가나마이신 B가 2가 금속 양이온, 즉 아연 양이온과 반응하였을 때, 실제로 형성된 가나마이신 B-아연염 착화합물을 나가부산의 제안과는 반대로 아연 양이온에 의하여 차단되지 않는 유리 2'-아미노와 3'-히드록실기를 함유한다. 만일 아연 양이온과 2'-아미노 및 3'-히드록실기와의 착화반응이 일어난다 할지라도, 착화력은 대단히 낮아서 실제로 2'-아미노와 3'-히드록실기는 차단될 수 없다. 그러므로 가나마이신 B-아연 양이온 착화합물이 아미노-보호 아실기로서 벤질옥시 카르보닐기를 도입하기 위하여 예를 들어 N-벤질옥시카르보닐옥시 석신이미드와 반응하여 아실화되었을 때, 3개의 3-, 2'- 및 6'-아미노기를 아실화한 트리-3,2',6'-N-아실화 유도체가 다른 N-아실화 유도체보다 고수율로 사실상 생성되며, 그러나 이때 3,6'-디-N-아실화 유도체는 실제로 얻을 수 없었다(이후에 기술된 실시예 19를 참조). 이러한 실험적 사실은 아연양이온이 상술한 4개의 전이원소 양이온과 상이하게 작용함을 나타내어, 실제로 아연 양이온은 이웃한 2'-아미노와 3'-히드록실기의 쌍과 착화합물을 형성하지 않음을 나타낸다.This expectation is reported by the report of Nagabusan and his collaborators in the Journal of the American Chemical Society, according to Day. Adjacent amino-hydroxyl group pairs can form reversible complexes with divalent metal elements because they contain three pairs of adjacent amino-hydroxyl groups between the positions and between 2 "-and 3" -positions. As expected, however, when kanamycin B reacts with a divalent metal cation, i.e., a zinc cation, the freely formed kanamycin B-zinc salt complex is not blocked by zinc cations, contrary to the suggestion of Nagabusan. -Amino and 3'-hydroxyl groups, although complexing reactions of zinc cations with 2'-amino and 3'-hydroxyl groups occur, the complexing power is very low and actually 2'-amino and 3 ' -Hydroxyl groups can be blocked Therefore, when the kanamycin B-zinc cation complex is acylated by reaction with, for example, N-benzyloxycarbonyloxy succinimide to introduce benzyloxy carbonyl groups as amino-protecting acyl groups, three 3-, Tri-3,2 ', 6'-N-acylated derivatives acylated with 2'- and 6'-amino groups are substantially produced in higher yield than other N-acylated derivatives, but at this time 3,6'-di -N-acylated derivatives could not be obtained in practice (see Example 19, described later) This experimental fact indicates that zinc cations behave differently than the four transition element cations described above, in fact zinc cations It does not form a complex with a pair of 2'-amino and 3'-hydroxyl groups.

다른 예로서, 가나마이신 A를 아연 양이온과 반응시킨 다음 벤질옥시카르보닐기로 아실화시켰을 때(상기 일반식(Ⅰ)을 참조) 주아실화 생성물로서 3,6'-디-N-벤질옥시 카르보닐 가나마이신 A가 형성되는데, 이때 가나마이신의 1몰당 몰이상의 양으로 아연양이온이 사용된다. 이경우, 이러한 아실화 반응은 나가부산의 반응매카니즘의 설명에 의하면 트리-N-벤질옥시카르보닐 유도체는 다른 N-아실화 유도체보다 높은 수율로 형성된다는 예상에도 불구하고, 주르 가나마이신 A의 1,3,6',3"-테트라-N-벤질옥시카르보닐유도체가 형성되는 동시에 아실화되지 않은 초기의 가나마이신 A가 어느정도까지 형성되나 실제적으로 가나마이신 A의 트리-N-벤질옥시카르보닐 유도체는 낮은 수율로 형성된다는 것은 특기할만 하다(하기의 실시예 7을 참조). 나가부산의 미국특허 제4,136,254호의 명세서와 특허 청구범위에서 동(Ⅱ ), 닉켈(Ⅱ ), 코발트(Ⅱ )등과 같은 2가 전이금속의 염은 상기의 일반식(Ⅰ) 에 표시된 바와같이 가나마이신 A-전이금속염 착화합물을 형성시키기 위하여 가나마이신 A의 몰당 적어도 2몰의 총량을 사용하였을때 효과적임을 기술하고 있으나 본 발명의 실험에 의하면 4개의 전이금속 양이온과는 대조적으로 아연 양이온을 가나마이신 A의 몰당 적어도 1몰의 총량으로 사용하였을 때 가나마이신 A의 1-아미노와 3"-아미노기를 효과적으로 차단할 수 있음을 알 수 있다.As another example, 3,6'-di-N-benzyloxy carbonyl ghana as a main acylated product when kanamycin A is reacted with a zinc cation and then acylated with a benzyloxycarbonyl group (see general formula (I) above) Mycin A is formed, wherein zinc cations are used in an amount of more than one mole per mole of kanamycin. In this case, according to the explanation of the reaction mechanism of the nagabuic acid, the acylation reaction was carried out in spite of the expectation that tri-N-benzyloxycarbonyl derivative was formed in higher yield than other N-acylated derivatives. Although the 3,6 ', 3 "-tetra-N-benzyloxycarbonyl derivative is formed and the initial unacylated kanamycin A is formed to some extent, it is actually a tri-N-benzyloxycarbonyl derivative of kanamycin A. It is worth noting that is formed in a low yield (see Example 7 below) and in the description and patent claims of U.S. Patent No. 4,136,254 to Nagabusan, and (II), Nickel (II), Cobalt (II) and the like. Salts of the same divalent transition metal are effective when at least 2 moles per mole of kanamycin A are used to form the kanamycin A-transition metal salt complex as indicated in Formula (I) above. However, experiments of the present invention show that, in contrast to four transition metal cations, when the zinc cation is used in a total amount of at least 1 mole per mole of kanamycin A, the 1-amino and 3 "-amino groups of kanamycin A are effectively blocked. It can be seen that.

본 발명의 실험에 의하면, 닉켈염을 1몰의 가나마이신 A에 대하여 1몰보다 약간 많은 양으로 반응시킨 다음 생성된 가나마이신 A-닉켈염 착화합물을 벤질옥시카르보닐기로 아실화하였을때 3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐 가나마이신 A를 대단히 낮은 수율로 얻는데, 이는 가나마이신 A-아연염 착화합물을 아실화하였을 때(다음의 실시예 7을 참조) 상당한 수율로 얻을 수 있음을 알 수 있다.According to the experiment of the present invention, when the nickel salt was reacted with a molar amount of slightly more than 1 mole with respect to 1 mole of kanamycin A, and then the acylated kanamycin A-nickel salt complex was benzyloxycarbonyl group, 3,6 ' Di-N-benzyloxycarbonyl kanamycin A is obtained in a very low yield, which can be seen in significant yield when acylated kanamycin A-zinc salt complex (see Example 7 below). have.

상술한 사실로 부터 아연(Ⅱ ) 양이온은 닉켈(Ⅱ ), 코발트(Ⅱ ), 동(Ⅱ ) 및 카드늄(Ⅱ )의 착화메카니즘과 상이한 아미노글리코사이드와의 착화메카니즘을 나타내며, 아미노글리코사이드 아연 양이온 착화합물은 아미노글리코사이드가 닉켈(Ⅱ ), 동(Ⅱ ), 코발트(Ⅱ ) 및 카드늄(Ⅱ )과의 착화합물과 다른 착화안정성을 갖는다. 아연 양이온과 아미노글리코사이드 항생제와의 착화에 있어서, 아연 양이온은 저렴하고 주위를 오염시키지 않는 아연염의 형태로 제공된다.From the above facts, zinc (II) cations represent complexation mechanisms of nickels (II), cobalt (II), copper (II) and cadmium (II) with different aminoglycoside complexes, and aminoglycoside zinc cations Complex compounds have complexation stability in which aminoglycosides are different from those of nickel (II), copper (II), cobalt (II) and cadmium (II). In the complexation of zinc cations with aminoglycoside antibiotics, zinc cations are provided in the form of zinc salts which are inexpensive and do not contaminate the environment.

더 구체적으로 설명하면, 본 발명은 아연 양이온을 불활성 유기용매에서 데옥시스트랩트 아민 부분의 6-히드록실기에 연결된 3-아미노글리코실이나 3-알킬아미노글리코실기를 갖고 가능하면 데옥시스트렙트아민 부분의 4-히드록실기에 연결된 아미노글리코실기를 갖는 데옥시스트렙트 아민을 함유하는 아미노글리코사이드 항생제와 반응시켰을때, 아연 양이온은 아미노글리코사이드 항생제의 성질에 따라 변하는 특별한 위치에 있는 아미노-히드록실쌍과 착화하여 차단되고 ; 이렇게 형성된 아미노-글리코사이드 항생제-아연 약이온 착화합물이 폴리펩티드의 합성에서 아미노-보호기를 도입하기 위하여 통상 사용되는 아실기를 갖는 아실화제와 반응할때, 이 아실화제는 아연 양이온에 의하여 착화되지 않으므로서 차단되지 않는 아미노글리코사이드 항생제의 적어도 한개의 아미노기를 아실화 시키므로서 아실화 아미노기는 보호되며 ; 또한 생성된 아실화 생성물(다시 말하면, 아실화 아미노기를 갖는 아미노글리코사이드 항생제-아연 양이온 착화합물)을 상기 아실화생성물로 부터 아연 양이온을 제거하는 적당한 시약으로 처리하였을때, 아연 착화합물은 파괴되어 초기에 아연과 비착화된 아미노기를 갖거나 또는 아실기로 선택적으로 보호된 아미노글리코사이드 항생제의 선택적으로 보호된 유도체를 얻는다.More specifically, the present invention relates to a zinc cation having a 3-aminoglycosyl or 3-alkylaminoglycosyl group linked to the 6-hydroxyl group of the deoxystrap amine moiety in an inert organic solvent and possibly deoxystrept. When reacted with an aminoglycoside antibiotic containing a deoxystrept amine having an aminoglycosyl group linked to the 4-hydroxyl group of the amine moiety, the zinc cation is in the amino- at a particular position that varies depending on the nature of the aminoglycoside antibiotic. Blocked by complexing with a hydroxyl pair; When the amino-glycoside antibiotic-zinc weak ion complex thus formed is reacted with an acylating agent having an acyl group commonly used to introduce an amino-protecting group in the synthesis of the polypeptide, the acylating agent is blocked because it is not complexed by a zinc cation. Acylated amino groups are protected by acylating at least one amino group of an aminoglycoside antibiotic that is not present; In addition, when the resulting acylation product (ie, aminoglycoside antibiotic-zinc cation complex having an acylated amino group) is treated with a suitable reagent to remove zinc cations from the acylation product, the zinc complex is destroyed and initially A selectively protected derivative of an aminoglycoside antibiotic having an amino group uncomplexed with zinc or optionally protected with an acyl group is obtained.

본 발명의 방법에서 출발물질로 사용된 4-0-(아미노글리코실)기를 갖거나 갖지않는 6-0-(3"-아미노 또는 3"-알킬아미노-3"-데옥시글리코실)-2-데옥시스트렙트 아민으로 구성된 아미노글리코사이드 항생제의 부분적으로 보호된 N-아실화 유도체에서 데옥시스트렙트 아민 부분의 1-아미노와 3"-아미노 또는 3"-알킬아미노기는 보호되지 않으나 아미노글리코사이드 분자의 모든 다른 아미노기는 아실기로 보호된다. 이러한 부분적으로 보호된 N-아실화유도체는 다음과 같은 단계의 방법으로 제조할 수 있다;6-0- (3 "-amino or 3" -alkylamino-3 "-deoxyglycosyl) -2 with or without the 4-0- (aminoglycosyl) group used as starting material in the process of the invention In partially protected N-acylated derivatives of aminoglycoside antibiotics consisting of deoxystrept amines, the 1-amino and 3 "-amino or 3" -alkylamino groups of the deoxystrept amine moiety are not protected but aminoglyco All other amino groups of the side molecules are protected with acyl groups Such partially protected N-acylated derivatives can be prepared by the following steps;

(i) 아연 염과 아미노글리코사이드 항생제를 디메틸설폭사이드, 수성 디메틸설폭사이드, 디메틸포름아미드, 수성 디메틸포름아미드, 디메틸설폭사이드와 디메틸포름아미드의 혼합물, 테트라하이드로푸란, 수성 테트라하이드로푸란, 메타놀, 수성 메타놀, 에타놀과 수성 에타놀로부터 선택한 불활성 유기용매에서 초산 나트륨을 첨가하거나 첨가하지 않고, 또는 가열하에나 냉각하에 주위온도에서 반응시켜서 아미노글리코사이드 항생제-아연 양이온 착화합물을 형성시키고,(i) Zinc salts and aminoglycoside antibiotics include dimethyl sulfoxide, aqueous dimethyl sulfoxide, dimethylformamide, aqueous dimethylformamide, mixtures of dimethyl sulfoxide and dimethylformamide, tetrahydrofuran, aqueous tetrahydrofuran, methanol, In an inert organic solvent selected from aqueous methanol, ethanol and aqueous ethanol, with or without the addition of sodium acetate or by reaction at ambient temperature under heating or cooling to form an aminoglycoside antibiotic-zinc cation complex,

( ii)다음 일반식(Ⅳa) 카르복실산 :(ii) the following general formula (IVa) carboxylic acid:

R^5COOH (Ⅳa)R ^5C OOH (IVa)

(여기서 R⁵는 수소, 알킬기 특히 1-6개의 탄소원자를 갖는 알킬기, 아릴기 특히 페닐 또는 알알킬기, 특히 벤질을 나타내고 이들 기는 디 치환할 수 있다) 또는 상기 카르복실산 (Ⅳa)의 산 할로겐화물, 산무수물 또는 활성 에스테르 ;Wherein R ⁵ represents hydrogen, an alkyl group, in particular an alkyl group having 1-6 carbon atoms, an aryl group, in particular a phenyl or alalkyl group, in particular benzyl, these groups may be di-substituted) or an acid halide of said carboxylic acid (IVa) , Acid anhydrides or active esters;

다음 일반식(Ⅳb)의 클로로포름메이트 :Chloroformmate of the following general formula (IVb):

R⁵O-CO-Cl (Ⅳb)R ⁵ O-CO-Cl (IVb)

또는 다음 일반식( Ⅳc)의 P-니트로페닐 카르보네이트 :Or P-nitrophenyl carbonate of formula (IVc)

R⁵O-CO-O-C₆H₅-P-NO₂(Ⅳc)R ⁵ O-CO-OC ₆ H ₅ -P-NO ₂ (IVc)

또는 다음 일반식(Ⅳd)의 활성 N-히드록시석신이미드 에스테르 :Or an active N-hydroxysuccinimide ester of the general formula (IVd)

또는 다음 일반식(Ⅳe)의 아지드포름메이트 :Or an azide formate of the general formula (IVe):

R⁵O-CO-N₃(Ⅳ e)R ⁵ O-CO-N ₃ (Ⅳ e)

(여기서 R⁵는 상술한 바와 같다)(Wherein R ⁵ is as described above)

또는 다음 일반식(Ⅳf)의 알킬-, 아릴-, 또는 알알킬-설폰산 :Or alkyl-, aryl-, or alalkyl-sulfonic acid of formula (IVf):

R⁶SO₃H (Ⅳf )R ⁶ SO ₃ H (IVf)

(여기서 R⁶는 수소, 알킬기 특히 1-6개의 탄소원자를 갖는 알킬기, 아릴기, 특히 페닐, 알알킬기, 특히 벤질과 같은 페닐알킬기를 나타내고, 이들기는 더 치환될 수 있다)Where R ⁶ represents hydrogen, an alkyl group, in particular an alkyl group having 1-6 carbon atoms, an aryl group, in particular a phenylalkyl group such as phenyl, an alalkyl group, in particular benzyl, which groups may be further substituted)

또는 상기 알킬-, 아릴-, 또는 알알킬-설폰산의 산할로겐화물, 산무수물 또는 활성에스테르로부터 선택한 아실화제와 상기 아미노글리코사이드 항생제-아연 양이온 착화합물을 -20~100℃ 의 온도에서 반응시켜서, 상기 아미노글리코사이드 항생제-아연 양이온 착화합물에 존재하는 비-착화아미노기를 아실화 하므로서 N-아실화 아미노글리코사이드 항생제-아연 양이온 착화합물을 제조하고,Or an acylating agent selected from an acid halide, an acid anhydride or an active ester of the alkyl-, aryl- or alalkyl-sulfonic acid with the aminoglycoside antibiotic-zinc cation complex at a temperature of -20 to 100 ° C, Preparing an N-acylated aminoglycoside antibiotic-zinc cation complex by acylating a non-complexed amino group present in the aminoglycoside antibiotic-zinc cation complex,

(iii ) 상기 N-아실화 아미노글리코사이드 항생제-아연 양이온 착화합물을 물과 또는 메타놀, 에타놀, 액체 암모니아 에틸아민과 트리에틸아민과 같은 수성 또는 무수극성 유기용매와 또는 황화수소, 알카리금속황화물이나 알카리토류금속황화물 또는 물에서의 수산화 암모늄과 또는 카르복실산이나 설폰산 기능기를 함유하는 양이온-교환수지와 또는 암모늄 기능기를 함유하는 음이온-교환수지와 또는 금속-킬레이트 기능기를 함유하는 킬레이트-교환수지와 또는 금속-결합기능기를 함유하는 불수용성 고-중합체로 키틴이나 키토산과 가열 또는 냉각하에 주위 온도에서 반응시켜 상기 착화합물로부터 아연 양이온을 제거하므로서 부분적으로 보호된 N-아실화 아미노글리코사이드 항생제 유도체를 제조하는 것이다.(iii) the N-acylated aminoglycoside antibiotic-zinc cationic complexes with water or with an aqueous or anhydrous organic solvent such as methanol, ethanol, liquid ammonia ethylamine and triethylamine, or hydrogen sulfide, alkali metal sulfides or alkaline earths. Ammonium hydroxide in metal sulfide or water or cation-exchange resins containing carboxylic or sulfonic acid functional groups or anion-exchange resins containing ammonium functional groups or chelate-exchange resins containing metal-chelate functional groups or A water-insoluble high-polymer containing a metal-linked functional group is reacted with chitin or chitosan at ambient temperature under heating or cooling to form a partially protected N-acylated aminoglycoside antibiotic derivative by removing zinc cations from the complex. will be.

또한 본 발명은 유도체에서 아미노글리코사이드 분자의 1-아미노기이외의 모든 아미노기(3"-아미노기를 포함)가 동일하거나 상이한 아실기에 의하여 차단 또는 보호된 4-0-(아미노글리코실)기를 갖는 6-0(3"-아미노-또는 3"-알킬아미노-3"-데옥시글리코실)-2-데옥시시스렙트아민 부분으로 이루어진 아미노글리코사이드 항생제의 선택적으로 보호된 N-아실화 유도체의 제조방법을 포함한다.The present invention also provides a 6- (aminoglycosyl) group having a 4-0- (aminoglycosyl) group in which all of the amino groups (including 3 ''-amino groups) other than the 1-amino group of the aminoglycoside molecule are blocked or protected by the same or different acyl groups. Process for the preparation of selectively protected N-acylated derivatives of aminoglycoside antibiotics consisting of 0 (3 "-amino- or 3" -alkylamino-3 "-deoxyglycosyl) -2-deoxycistreptamine moieties It includes.

본 발명의 방법에 따루면 (이후부터 "아연-착체"공정이라 칭함), 유도체에서 아미노글리코사이드 분자의 1-아미노 및 3"-아미노기(또는 3"-알킬아미노기) 두개 이외의 모든 아미노기가 아실기로 보호되고 또한 여기선 1-아미노와 3"-아미노(또는 3"-알킬아미노)기가 보호되지 않고 남아 있는 아미노글리코사이드 항생제의 선택적이나 부분적으로 보호된 N-아실화 유도체를 제조하는 것이 가능하다. 이렇게 부분적으로 보호된 N-아실화 아미노글리코사이드 항생제 유도체를 상술한 바와 같이 1-N-아실화시키기 위해 α-히드록시-ω -아미노알카노산이나 이들의 반응물과 반응시킬때, (i ) 아미노글리코사이드 분자의 1-아미노기만을 α -히드록시-ω -아미노알카노산으로 알킬화한 1-N-아실화 생성물, (ii ) 3"-아미노(또는 3"-알킬아미노)기만을 아실화한 3"-N-아실화 생성물, (iii ) 1-아미노 및 3"-아미노(또는 3"-알킬아미노) 두기를 아실화한 생성물과 (ⅳ ) 1- 및 3"-아미노(또는 3"-알킬아미노기)의 어느 것도 아실화되지 않은 미반응물질로 구성된 혼합형태의 아실화 생성물을 실제 얻는다. 상기의 혼합된 아실화 생성물로부터 원하는 1-N-아실화 생성물을 얻기 위하여서는, 1-N-아실화 생성물을 크로마토그라피 또는 어떤 다른 단리방법에 의하여 단리시키는 부가적 단계를 실시할 필요가 있다. 더우기 1-아미노기가 3"-아미노(또는 3"-알킬아미노)기보다 더 반응성이 크므로 원하는 1-N-아실화 생성물의 실제수율은 약 40-60%로서 1- 및 3"-아미노(또는 3"-알킬아미노)기의 반응성이 서로 동일하다고 가정하여 계산하였을때 이론적으로 최대수율인을 25% 초과한다. 1-N-아실화의 반응조건을 최적으로 조절하였을 지라도, N-아실화 생성물이 바람직하지 못하게 부산물로 형성되기 때문에, 항상 혼합된 아실화 생성물을 주의하여 컬럼 크로마토그라피하여 원하지 않는 N-아실화부산물을 제거하는 부가적 단계가 필요하다.According to the method of the present invention (hereinafter referred to as the "zinc-complex" process), all amino groups other than two 1-amino and 3 "-amino groups (or 3" -alkylamino groups) of the aminoglycoside molecules in the derivative are acyl. It is possible to prepare selective or partially protected N-acylated derivatives of aminoglycoside antibiotics which are protected with groups and in which the 1-amino and 3 "-amino (or 3" -alkylamino) groups remain unprotected. When the partially protected N-acylated aminoglycoside antibiotic derivatives are reacted with α-hydroxy-ω-aminoalkanoic acid or their reactants to 1-N-acylate as described above, (i) amino 1-N-acylated products in which only the 1-amino group of the glycoside molecule is alkylated with α-hydroxy-ω-aminoalkanoic acid, (ii) 3 that acylated only a 3 "-amino (or 3" -alkylamino) group "-N-acylated products, (iii) 1-amino and 3" -amino (or 3 "-alkylamino) acylated products and (iii) 1- and 3" -amino (or 3 "-alkyl The actual acylated product of the unreacted substance in which none of the amino groups) is acylated is actually obtained.To obtain the desired 1-N-acylated product from the mixed acylation product, Additional isolation of the misfired product by chromatography or any other isolation method Furthermore, since the 1-amino group is more reactive than the 3 "-amino (or 3" -alkylamino) group, the actual yield of the desired 1-N-acylated product is about 40-60%. Calculated assuming that the reactivity of the 1- and 3 "-amino (or 3" -alkylamino) groups are identical to each other, the theoretical maximum yield exceeds 25%. The reaction conditions of 1-N-acylation are optimally Although controlled, since N-acylated products are undesirably formed as by-products, an additional step is always required to carefully column mixed acylation products to remove unwanted N-acylated byproducts.

이러한 결점을 제거하기 위하여, 1-아미노기이외의 모든 아미노기를 보호하여 아미노글리코사이드 항생제의 선택적으로 보호된 N-아실화 유도체를 제조하는 것이 필요했다. 이러한 요구를 충족시키기 위하여, 본 발명에서는 상술한 "아연-착화"공정으로 부터 얻은 바와 같은 유리 1- 및 3"-아미노기를 함유하는 선택적이나 부분적으로 보호된 N-아실화 아미노글리코사이드 항생제 유도체의 3"-아미노(또는 3"-알킬아미노)기를 선택적으로 보호할 수 있는 반면에 1-아미노기를 차단하지 않은채 남게 하는 방법을 연구했다.To eliminate this drawback, it was necessary to protect all amino groups other than 1-amino groups to produce selectively protected N-acylated derivatives of aminoglycoside antibiotics. To meet this need, the present invention provides for the use of selective or partially protected N-acylated aminoglycoside antibiotic derivatives containing free 1- and 3 "-amino groups as obtained from the" zinc-complexing "process described above. We studied ways to leave 3-amino (or 3 " -alkylamino) groups selectively protected while leaving 1-amino groups unblocked.

결과적으로, 본 발명인은 "아연-착화"공정으로 얻은 부분적으로 보호된 아실화 아미노글리코사이드 항생제유도체를 개미산 에스테르, 디할로-또는 트리할로-알카노산 에스테르 또는 N-포르밀이미다졸로부터 선택한 아실화제와 반응시켰을때, 3"-아미노 또는 3"-알킬아미노기는 1-아미노기를 아실화하지 않고 차단목적을 위해 아아화할 수 있음을 알 수 있다. 이러한 선택적 3"-N-보호공정을 상술한 "아연-착화"공정(다시 말하면 본 발명의 공정)과 연결시키면 유도체에서 아미노글리코사이드 분자의 1-아미노기 이외의 모든 아미노기를 동일하거나 상이한 아실기로 선택적으로 보호한 6-0-(3"-아미노 또는 3"-알킬아미노-3"-데옥시글리코실)-2-데옥시스트렙르 아민부분으로 이루어진 아미노글리코사이드 항생제의 선택적으로 보호된 N-아실화 유도체를 효과적인 방법으로 제조할 수 있다. "아연-착화"공정과 선택적 3"-N-보호공정의 결합으로, 아미노글리코사이드 항생제의 원하는 1-N-는 보호되지 않으나 다른 N-는 모두 보호된 유도체를 모체 아미노글리코사이드 항생제로부터 70%이상의 수율로 얻을 수 있는 장점이 있다. 이러한 1-N-는 보호되지 않았으나 다른 N-는 모두 보호된 유도체를 아미노글리코사이드 항생제의 1-N-아실화에 사용했을때, 원하지 않는 N-아실화 생성물이 부산물로 형성되지 않고, 원하는 1-N-아실화 생성물을 회수하고 정제할 수 있는 부가적 장점을 제공한다.As a result, the inventors have selected partially protected acylated aminoglycoside antibiotic derivatives obtained by the "zinc-complexing" process from formic acid esters, dihalo- or trihalo-alkanoic acid esters or N-formylimidazoles. When reacted with an acylating agent, it can be seen that the 3 "-amino or 3" -alkylamino group can be acylation for blocking purposes without acylating the 1-amino group. Linking this optional 3 "-N-protection process with the above-described" zinc-complexing "process (ie, the process of the present invention) selects all amino groups in the derivative other than the 1-amino group of the aminoglycoside molecule with the same or different acyl groups. Optionally protected N-A of aminoglycoside antibiotics consisting of 6-0- (3 "-amino or 3" -alkylamino-3 "-deoxyglycosyl) -2-deoxystrep amine moieties protected with The misfired derivatives can be prepared in an effective manner. Combination of a "zinc-complexing" process with an optional 3 "-N-protection process, the desired 1-N- of the aminoglycoside antibiotic is not protected but all other N- protected derivatives are 70% from the parent aminoglycoside antibiotic. The above yields have the advantage that undesired N-acylation when 1-N- is unprotected but all other N- protected derivatives are used for 1-N-acylation of aminoglycoside antibiotics. The product does not form as a by-product and provides the additional advantage of recovering and purifying the desired 1-N-acylated product.

본 발명에 따르면, 유도체에서 데옥시스트 렙트아민부분의 1-아미노기는 보호되지 않으나 아미노글리코사이드 분자에서 같거나 다른 아실기로 보호되는 4-0-(아미노글리코실)을 갖는 6-0-(3"-아미노-또는 3"-알킬아미노-3"-데옥시글리코실)-2-데옥시스트렙트아민 부분으로 이루어진 아미노글리코사이드 항생제의 선택적으로 보호된 N-아실화유도체를 제조하는 방법을 제공하는데, 이 방법은 다음과 같이 이루어진다 :According to the invention, the 1-amino group of the deoxystreptamine moiety in the derivative is not protected but 6-0- (3 having 4-0- (aminoglycosyl) protected with the same or different acyl groups in the aminoglycoside molecule. Provided is a method for preparing a selectively protected N-acylated derivative of an aminoglycoside antibiotic consisting of the "-amino- or 3" -alkylamino-3 "-deoxyglycosyl) -2-deoxystrepamine moiety. This method works as follows:

불활성 유기용매에서 아실화제로서 하기 일반식(Ⅷ )의 알카노산 에스테르 또는 N-포르밀 이미다졸을 1-아미노와 3"-아미노 또는 3"-알킬아미노기 또는 보호되지 않고 다른 모든 아미노는 아미노-보호기인 아실기로 보호된 아미노글리코사이드 항생제의 부분적으로 보호된 N-아실화 유도체와 반응시켜, 부분적으로 보호된 N-아실화 유도체의 3"-아미노 또는 3"-알킬아미노기를 상기 아실화제의 아실기 R^aCO-로 선택적으로 아실화시키므로서 아미노글리코사이드 항생제의 원하는 1-N-는 보호되지 않고 다른 N-는 모두 보호된 유도체를 얻는다.Alkanoic acid esters or N-formyl imidazoles of the following general formulas as acylating agents in inert organic solvents are either 1-amino and 3 "-amino or 3" -alkylamino groups or unprotected and all other amino By reacting with a partially protected N-acylated derivative of an aminoglycoside antibiotic protected with a phosphorus acyl group, the 3 "-amino or 3" -alkylamino group of the partially protected N-acylated derivative is acyl group of said acylating agent By selectively acylating with R ^a CO-, the desired 1-N- of the aminoglycoside antibiotic is not protected and all other N- are protected derivatives.

(상기식에서 R^a은 수소원자 또는 1-6개의 탄소원자를 갖는 디할로알킬이나 트리할로알킬이고 ; Rb는 1-6개의 탄소원자를 갖는 알킬옥시, 알알킬옥시 특히 페닐옥시기를 나타낸다)(Wherein R ^a is hydrogen atom or dihaloalkyl or trihaloalkyl having 1-6 carbon atoms; Rb represents alkyloxy, alalkyloxy, especially phenyloxy group having 1-6 carbon atoms)

본 발명의 방법의 실예를 보다 상세히 기술하면 다음과 같다.An example of the method of the present invention is described in more detail as follows.

아미노글리코사이드 분자에 있는 1-아미노와 3"-아미노(또는 3"-알킬아미노)기이외의 모든 아미노기가 보호된 본 발명의 방법에 따람 일반식(Ⅷ )의 아실화제와 반응시키고자 하는 부분적으로 보호된 N-아실화 아미노 글리코사이드 항생제 유도체는 상기 "아연-착화"공정에서 제조된 것과 동일한 것이다. 따람서 본 발명의 방법에서 사용한 부분적으로 보호된 N-아실화 아미노글리코사이드 항생제유도체에 통상 존재하는 아실기는 첫공정에서 사용한 아실기(일반식 Ⅳ_a-e에서 R⁵CO-, R⁵OCO-, 또는 R⁵SO₂-기)와 동일하며, 일반적으로 종래의 아미노-보호기로서 공지된 알카노일기, 아로일기, 알콕시카르보닐기, 알알킬옥시카르보닐기, 아릴옥시카르보닐기, 알킬설포닐기, 알알킬설포닐기 또는 아릴설포닐기가 있다. 또한 출발물질로서 된 부분적으로 보호된 N-아실화 아미노글리코사이드 항생제 유도체는 미국특허 제4,136,254호에 따른 상술한 나가부산의 방법에 의하여 제조된 것이다.Partially intended to react with an acylating agent of the general formula according to the method of the invention in which all amino groups other than 1-amino and 3 "-amino (or 3" -alkylamino) groups in the aminoglycoside molecule are protected The N-acylated amino glycoside antibiotic derivative protected with is the same as that prepared in the above "zinc-complexing" process. Thus, the acyl groups normally present in the partially protected N-acylated aminoglycoside antibiotic derivatives used in the process of the present invention are the acyl groups (R ⁵ CO-, R ⁵ OCO- in Formula IV _ae , or R ⁵ SO ₂ -group), which is generally known as a conventional amino-protecting group, an alkanoyl group, aroyl group, alkoxycarbonyl group, alalkyloxycarbonyl group, aryloxycarbonyl group, alkylsulfonyl group, alalkylsulfonyl group or aryl There is a sulfonyl group. Partially protected N-acylated aminoglycoside antibiotic derivatives as starting materials are also prepared by the method of Nagabuic acid described above according to US Pat. No. 4,136,254.

본 발명의 방법의 실시에서, 보호되지 않은 1- 및 3"-아미노(또는 3"-알킬아미노)기를 갖는 부분적으로 보호된 N-아실화 아미노글리코사이드 항생제 유도체를 출발물질로 사용하며 적당한 불활성 유기용매내에 용해 시키거나 분산시킨다. 생성된 용액이나 현탁액에 아실화제로서 일반식(Ⅷ )의 알카노산 에스테르 또는 N-포르밀이미다졸을 최소한 사용된 출발물질과 같은 몰량으로 첨가한다. 불활성 유기용매는 출발물질에 대하여 높은 용해력을 나타내는 것으로, 예를 들면 디메틸설폭사이드, 디메틸포름아미드와 헥사메틸포스포르 트리아미드를 들수 있으며, 테트람하이드로푸란, 디옥산, 아세토니트릴, 니트로메탄, 설포란, 디메틸아세트아미드, 클로로포름, 디클로로메탄, 메타놀, 에타놀, N-부타놀과 N-부타놀 뿐만 아니람 이러한 용매들의 수용액도 사용가능하다. 벤젠, 톨루엔과 에틸에테르도 비록 원하는 생성물의 더 불량한 수율을 가져오게는 하나, 반응 매체용매로서 사용가능하다. 일반식(Ⅷ )의 아실화제에서 R^a는 디할로알킬이나 트리할로알킬기 특히 디클로로메틸, 트리플루오로메틸 또는 트리클로로메틸이 바람직하며, R^b는 메톡시 또는 에톡시같은 알콕시기가 적당하다. R^b가 아릴옥시기일때, 이것은 펜옥시이다. 아실화제(Ⅷ )의 예를 들면 개미산 메틸, 개미산에틸, 개미산 부틸, 개미산 벤질, 개미산 페닐, 메틸 디클로로아세테이트, 메틸 트리클로로아세테이트, 페닐 트리클로로아세테이트, 메틸 트리플루오로아세테이트, 에틸 트리플루오로아세테이트, 페닐 트리클로로아세테이트가 있다. 이러한 종류의 아실화제를 사용하면 출발물질의 3"-아미노기를 포르밀화, 디클로아세틸화, 트리클로로아세틸화 또는 트리플루오로 아세틸화한다. 트리플루오로초산 에스테르 특히 에틸 플루오로아세테이트가 가장 적당하다. 이러한 종류의 아실기는 종래의 탈보호방법에 의하여 다음의 N-보호기 제거단계에서 용이하게 제거할 수 있는 장점이 있다. 만일 일반식(Ⅷ )의 알카노산 알킬 에스테르를 알킬화제로 사용하지 않고 대신에 N-히드록시석신이미드 에스테르 같은 대응하는 알카노산 무수물이나 이의 활성 에스테르를 아실화 공정에 사용한다면(본 발명의 둘째 방법에 따르지 않음), 3"-아미노기의 선택적 아실화가 일어날 수 없고 1-N-아실화 생성물의 부산물형성 또는 주로 1-N-아실화 생성물로 이루어진 혼합된 아실화 생성물을 형성한다. 아실화제로서 동일한 알카노산의 무수물이나 활성 에스테르를 사용할 때는 3"-아미노기의 목적하는 선택적 아실화가 성취되지 않음을 알 수 있다.In the practice of the process of the invention, partially protected N-acylated aminoglycoside antibiotic derivatives having unprotected 1- and 3 "-amino (or 3" -alkylamino) groups are used as starting materials and suitable inert organic Dissolve or disperse in solvent. To the resulting solution or suspension is added an alkanoic acid ester of the general formula or N-formylimidazole as an acylating agent in at least the same molar amount as the starting materials used. Inert organic solvents exhibit high solubility in starting materials, for example dimethylsulfoxide, dimethylformamide and hexamethylphosphor triamide, and include tetraramhydrofuran, dioxane, acetonitrile, nitromethane and sulfide. Aqueous solutions of such solvents are also available, including porane, dimethylacetamide, chloroform, dichloromethane, methanol, ethanol, N-butanol and N-butanol. Benzene, toluene and ethyl ether can also be used as solvents for the reaction medium, although this leads to poorer yields of the desired product. In the acylating agent of the general formula (R), R ^a is preferably dihaloalkyl or trihaloalkyl group, in particular dichloromethyl, trifluoromethyl or trichloromethyl, and R ^b is preferably an alkoxy group such as methoxy or ethoxy. When R ^b is an aryloxy group, it is phenoxy. Examples of acylating agents include methyl formate, ethyl formate, butyl formate, formic acid benzyl, formic phenyl, methyl dichloroacetate, methyl trichloroacetate, phenyl trichloroacetate, methyl trifluoroacetate, ethyl trifluoroacetate, Phenyl trichloroacetate. Use of this kind of acylating agent results in formylation, dicloacetylation, trichloroacetylation or trifluoro acetylation of the 3 "-amino group of the starting material. Trifluoroacetic acid esters, especially ethyl fluoroacetate, are most suitable. This kind of acyl group has the advantage that it can be easily removed in the following N-protection group removal step by a conventional deprotection method, if an alkanoic acid alkyl ester of the general formula If a corresponding alkanoic anhydride such as N-hydroxysuccinimide ester or its active ester is used in the acylation process (not according to the second method of the present invention), selective acylation of the 3 "-amino group cannot occur and 1-N By-product formation of acylation products or mixed acylation products consisting predominantly of 1-N-acylation products. It can be seen that the desired selective acylation of the 3 ″ -amino group is not achieved when using the same anhydride or active ester of the same alkanoic acid as the acylating agent.

본 발명에서 사용할 수 있는 일반식(Ⅷ )의 아실화제는 반응성이 상이하며 이들의 반응성은 "강"에서 부터 "약"까지 광범위하다. 강한 반응성의 아실화제를 사용하였을 때, 아실화반응은 냉각하에 짧은 반응시간으로 행하고, 반면 약한 반응성의 아실화제를 사용하였을 때, 아실화반응은 가열하에서 또는 오랜 시간동안 반응을 행한다. 그러나 일반적으로 반응온도는 -30° ~+120℃ 의 범위이고, 반응시간은 30분-48시간 범위가 적당하다.The acylating agents of the general formula (Ⅷ) usable in the present invention differ in reactivity and their reactivity ranges from "strong" to "about". When using a highly reactive acylation agent, the acylation reaction is carried out with a short reaction time under cooling, while when using a weakly reactive acylating agent, the acylation reaction is carried out under heating or for a long time. In general, however, the reaction temperature is in the range of -30 ° to + 120 ° C, and the reaction time is in the range of 30 minutes to 48 hours.

이렇게 얻은 원하는 선택적 3"-아실화 생성물은 공지방법 예를 들어 용매를 증발시키거나 또는 물을 첨가하여 침전시키거나 하여 반응혼합물로부터 회수하고, 필요하면 더 정제한다.The desired optional 3 "-acylated product thus obtained is recovered from the reaction mixture by known methods, for example by evaporating the solvent or by precipitation with water and further purified if necessary.

본 발명의 방법에 의하여 선택적 3"-N-아실화를 이룩할 수 있는 반응 메카니즘은 아직 확실히 밝혀지지 않았으나 다음과 같이 설명할 수 있다. 즉 일반식(Ⅷ )의 아실화제는 먼저 출발물질의 히드록실기를 아실화하면 중간체로서에 스테르생성물이 생성되고 다음 아미노기가 중간체로 에스테르화된 히드록실기의 이웃에 있을때, 이 0-에스테르화 아실기는 아미노기(본 발명 공정의 경우 대응하는 3"-아미노나 3"-알킬아미노기)로 이동하므로서 상기 아미노기의 아실화가 이루어진다고 볼 수 있다.The reaction mechanism that can achieve selective 3 "-N-acylation by the method of the present invention is not yet clear, but can be explained as follows. That is, the acylating agent of the general formula is firstly a hydroxyl of the starting material. Acylating the real group yields a ester product as an intermediate and when the next amino group is in the neighborhood of the hydroxyl group esterified with the intermediate, this 0-esterified acyl group is an amino group (the corresponding 3 "-amino in the case of the process of the present invention). Na 3 "-alkylamino group), it can be seen that the acylation of the amino group is achieved.

이러한 가정에 따르면, 히드록실기의 이웃에 있지 않는 1-아미노기는 본 발명에서 아실화되지 않는 이유를 알 수 있다. 그밖에도 본 발명에 따람 트리플루오로 아세틸화 또는 포르밀화를 행할때 에스테르 중간생성물을 얻을 수 없다. 트리플루오로아세틸화 나포르밀화에 따람 에스테르생성물이 회수될 수 없는 이유는 0-트리플루오로아세틸기 또는 0-포르밀기가 불안정하고 아미노기로 이동하지 않는 일정량의 불안정한 0-아실기(즉 공지된 0→ N-아실이전)를 3"-N-아실화생성물의 회수와 정제과정에서 아실화된 히드록실기로 부터 제거하여 유리히드록실기가 복귀되도록 한다. 그러나 본 발명은 본 공정에 포함된 반응메카니즘의 상기 설명에 한정되는 것은 아니다. 본 발명에 따른 일반식(Ⅷ )의 아실화제로서 사용할 수 있는 화합물 가운데 아실기가 히드록실기와의 반응에 의하여 0-아실기로 전환되어 에스테르생성물을 형성할 때보다 불안정한 에스테르 생성물을 형성하는 아실기를 이들이 갖는 것이면 어느것이나 본 발명의 방법에 적당하다.According to this assumption, it can be seen that the 1-amino group not adjacent to the hydroxyl group is not acylated in the present invention. In addition, no ester intermediates can be obtained when trifluoro acetylation or formylation according to the invention. The reason why the ester product cannot be recovered due to trifluoroacetylated naformylation is that a certain amount of unstable 0-acyl group (i.e., known as 0-trifluoroacetyl group or 0-formyl group is unstable and does not move to amino group) 0 → N-acyl transfer) is removed from the acylated hydroxyl group during the recovery and purification of the 3 ″ -N-acylated product so that the free hydroxyl group is returned. It is not limited to the above description of the reaction mechanism, among the compounds which can be used as acylating agents of the general formula according to the present invention, acyl groups are converted to 0-acyl groups by reaction with hydroxyl groups to form ester products. Any of these having acyl groups which form more unstable ester products are suitable for the process of the invention.

본 발명의 공정을 N-포르밀이미다졸 대신에 N-아세틸-이미다졸, N-프로피오닐-이미다졸 및 N-부티로일-이미다졸 같은 N-알카노일-이미다졸을 사용하여 행할때, 부분적으로 보호된 N-아실화이미노글리코사이드 항생제 유도체의 3"-아미노 또는 3"-알킬아미노기는 아실화되지 않으나 이 3"-아미노나 3"-알킬아미노기에 이웃한 히드록실기는 사용된 N-알카노일-이미다졸의 알카노일기에 의하여 에스테르화되어 에스테르화 중간생성물을 얻게됨을 알 수 있다. 이러한 0-에스테르화 생성물이나 이 0-에스테르화 생성물을 함유하는 전체 혼합물을 주위온도에서 수산화 암모늄과 같은 알카리성 시약으로 처리하였을 때, 0-에스테르화 알카노일기는 이웃의 3"-아미노나 3"-알킬아미노기로 이전되어, 선택적 아실화가 일어나서 3"-아미노나 3"-알킬아미노기의 보호가 이루어진다. 따람서 부분적으로 보호된 N-아실화 아미노글리코사이드 항생제 유도체와 N-알카노일-이미다졸의 반응으로부터의 반응혼합물을 먼저 원하는 3"-N-아실화 생성물을 함유하지 않으나 반응혼합물을 수성 암모니아같은 알카리성 시약과 처리하여 알카리성으로 한후 반응혼합물로부터 원하는 3"-N-아실화 생성물을 회수할 수 있다(상기 실시예 39 참조).When the process of the invention is carried out using N-alkanoyl-imidazoles such as N-acetyl-imidazole, N-propionyl-imidazole and N-butyroyl-imidazole instead of N-formylimidazole The 3 "-amino or 3" -alkylamino group of the partially protected N-acyl iminoglycoside antibiotic derivative is not acylated but hydroxyl groups adjacent to this 3 "-amino or 3" -alkylamino group are used. It can be seen that it is esterified by an alkanoyl group of N-alkanoyl-imidazole to obtain an esterified intermediate. When such a 0-esterified product or the entire mixture containing this 0-esterified product is treated with an alkaline reagent such as ammonium hydroxide at ambient temperature, the 0-esterified alkanoyl group is adjacent to 3 "-amino or 3". Transferring to the -alkylamino group, selective acylation takes place to protect the 3 "-amino or 3" -alkylamino group. The reaction mixture from the reaction of a partially protected N-acylated aminoglycoside antibiotic derivative with N-alkanoyl-imidazole is thus free of the desired 3 "-N-acylation product, but the reaction mixture may be After treating with alkaline reagents to be alkaline, the desired 3 ″ -N-acylated product can be recovered from the reaction mixture (see Example 39 above).

본 발명 방법을 사용할 때, 반-합성 항균제로 공지된 1-N-아실화 아미노글리코사이드 항생제를 고수율로 제조할 수 있다. 따라서 본 발명은 모체 아미노글리코 사이드 항생제로 부터 출발하여 1-N-(α -히드록시-ω - 아미노알카노일) 아미노글리코사이드 항생제의 제조공정을 제공하는 것으로, 본 방법은 상술한 "아연-착화"공정에 의하여 1-아미노와 3"-아미노 또는 3"-알킬아미노기는 보호되지 않고 다른 아미노기는 보호되는 부분적으로 보호된 N-아실화 아미노글리코사이드항생제 유도체를 제조하는 단계 ; 1-N-는 보호되지 않고 다른 N-는 모두 보호된 유도체를 본 발명의 둘째 공정인 선택적 3"-N-아실화 방법으로 제조하는 단계 ; 상기 3"-N-아실화단계로부터 얻은 1-N-는 보호되지 않고 다른 N-는 모두 보호된 유도체의 1-아미노기를 α-히드록시-ω -아미노알카노산, 특히 3-아미노-2-히드록시프로피온산(이소세린)이나 4-아미노-2-히드록시부티르산으로 아실화시키는 단계 ; 이렇게 얻은 1-N-아실화생성물로 부터 보호기를 제거하는 단계의 결합으로 구성된다.When using the method of the invention, 1-N-acylated aminoglycoside antibiotics known as semi-synthetic antimicrobials can be prepared in high yield. The present invention therefore provides a process for the preparation of 1-N- (α-hydroxy-ω-aminoalkanoyl) aminoglycoside antibiotics starting from the parent aminoglycoside antibiotics, the method of "Processing to prepare a partially protected N-acylated aminoglycoside antibiotic derivative wherein the 1-amino and 3" -amino or 3 "-alkylamino groups are not protected and other amino groups are protected; Preparing a derivative in which 1-N- is unprotected and all other N- are protected by the selective 3 "-N-acylation method which is the second process of the present invention; N- is unprotected and all other N- are protected by the 1-amino group of the α-hydroxy-ω-aminoalkanoic acid, in particular 3-amino-2-hydroxypropionic acid (isoserine) or 4-amino-2 Acylating with hydroxybutyric acid; It consists of a combination of steps of removing the protecting group from the 1-N-acylated product thus obtained.

특히 본 발명의 특징은 4-0-(아미노글리코실)기를 갖는 6-0-(3"-아미노 또는 3"-알킬아미노-3"-데옥시글리코실)-2-데옥시스트랩트아민 부분으로 이루어진 아미노글리코 사이드 항생제의 1-N-(α -히드록시-ω -아미노알카놀일) 유도체를 제조하는 개량된 방법을 제공하는데 이 방법은 다음과 같은 연속단계로 이루어 진다.In particular, a feature of the invention is a 6-0- (3 "-amino or 3" -alkylamino-3 "-deoxyglycosyl) -2-deoxystrapamine moiety having a 4-0- (aminoglycosyl) group. Provided is an improved process for preparing 1-N- (α-hydroxy-ω-aminoalkanolyl) derivatives of aminoglycoside antibiotics consisting of the following continuous steps.

(a) 아연 양이온을 불활성 유기용매에서 아미노글리코사이드 항생제와 반응시켜 아연 양이온과 아미노글리코사이드 항생제와의 착화합물을 제조하고 ;(a) reacting a zinc cation with an aminoglycoside antibiotic in an inert organic solvent to produce a complex of zinc cation with an aminoglycoside antibiotic;

(b) 반응불활성 유기용매에서 아미노-보호기로서 도입하고자 하는 아실기를 갖는 아실화제를 상기 단계(a)에서 제조된 아미노글리코사이드 항생제-아연 양이온 착화합물과 반응시켜 최초에 착화되지 않은 아실화아미노기를 갖는 아미노글리코사이드 항생제의 선택 N-아실화 유도체의 착화합물을 제조하고 ;(b) reacting an acylating agent having an acyl group to be introduced as an amino-protecting group in a reactive organic solvent with the aminoglycoside antibiotic-zinc cation complex compound prepared in step (a) to have an acylated amino group not initially complexed. Selection of aminoglycoside antibiotics Complexes of N-acylated derivatives are prepared;

(c) 상기 단계(b)에서 제조된 선택적 N-아실화 아미노글리코사이드 항생제 유도체-아연 양이온 착화합물을 N-아실화 아연 착화합물로 부터 아연 양이온을 제거한 시약과 반응시켜, 아연 양이온을 유리시키므로서 아미노글리코사이드 분자에서 1-아미노와 3"-아미노 또는 3"-알킬아미노는 보호되지 않으나 다른 모든 아미노기는 아실기에 의하여 보호되는 부분적으로 그리고 선택적으로 보호된 N-아실화 아미노글리코사이드 항생제 유도체를 제조하고 ;(c) reacting the selective N-acylated aminoglycoside antibiotic derivative-zinc cation complex prepared in step (b) with a reagent which removes the zinc cation from the N-acylated zinc complex, thereby releasing the zinc cation N-acylated aminoglycoside antibiotic derivatives in which the 1-amino and 3 "-amino or 3" -alkylamino in the glycoside molecule are not protected but all other amino groups are protected partially and optionally protected by acyl groups ;

(d) 상기 단계(c)에서 얻은 부분적 및 선택적으로 보호된 N-아실화 유도체를 불활성 유기용매내에서 아실화제인 다음 일반식(Ⅷ )의 알카노산 에스테르 또는 N-포르밀이미다졸과 반응시켜 3"-아미노나 3"-알킬아미노기를 상기 아실화제의 아실기 R^aCO-로 선택적으로 아실화시키므로서 1-아미노기이외의 모든 아미노기들을 아실기로 보호하는 아미노글리코사이드 항생제의 1-N-는 보호되지 않고 다른 N-는 모두 아실화되어 보호된 유도체를 제조하고 ;(d) reacting the partially and optionally protected N-acylated derivatives obtained in step (c) with an alkanoic acid ester of formula (VII) or N-formylimidazole, which is an acylating agent in an inert organic solvent 1-N- of an aminoglycoside antibiotic which protects all amino groups other than the 1-amino group by acyl by selectively acylating a 3 "-amino or 3" -alkylamino group with the acyl group R ^a CO- of the acylating agent. Is not protected and all other N- are acylated to prepare protected derivatives;

(상기식에서 R^a는 수소원자 또는 1-6개의 탄소원자를 갖는 디할로알킬이나 트리할로알킬기이고, R^b는 1-6개의 탄소원자를 갖는 알알킬옥시 특히 벤질옥시 또는 아릴옥시 특히 펜옥시를 나타낸다)(Wherein R ^a is a hydrogen atom or a dihaloalkyl or trihaloalkyl group having 1-6 carbon atoms, and R ^b represents an alalkyloxy especially benzyloxy or aryloxy especially phenoxy having 1-6 carbon atoms) )

(e) 상기 단계(d)에서 얻은 1-N-는 보호되지 않고 다른 N-는 모두 보호된 유도체를 아미노기가 보호되지 않았거나 보호된 하기 일반식(Ⅸ )의 α-히드록시-ω -아미노알카노산 또는 이의 반응성 유도체와 반응시켜 상기의 1-비보호 유도체의 1-아미노기를 아실화시키고 ;(e) 1-N- obtained in step (d) is not protected and all other N- are all protected derivatives having the amino group unprotected or protected by α-hydroxy-ω-amino Reacting with an alkanoic acid or a reactive derivative thereof to acylate the 1-amino group of the 1-unprotected derivative;

(상기식에서 m는 1이나 2이다)(Where m is 1 or 2)

(f) 종래의 보호기 제거방법에 의하여 상기 단계(e)에서 얻은 1-N-아실화 생성물로 부터 잔유 아미노보호기를 제거하여서 제조하는 단계로 이루어진다.(f) preparing by removing the residual amino protecting group from the 1-N-acylated product obtained in step (e) by a conventional protecting group removal method.

본 발명의 방법을 상세히 기술하면 다음과 같다.The method of the present invention is described in detail as follows.

본 방법의 첫번째 단계(a)에서 시발물질로 사용할 수 있는 아미노글리코사이드 항생제는 상기 아연착화공정에서 상술한 것과 동일하고, 아연 양이온과 아미노글리코사이드 항생제의 착화반응은 상술한 것과 동일한 방법으로 이루어진다. 첫번째 단계(a)에서 얻은 아미노글리코사이드 항생제-아연 양이온의 착화합물의 아실화는 상술된 바와 동일한 방법으로 본 방법의 둘째 단계(b)에서 실시된다. 이렇게 얻은 선택적 N-아실화 아미노글리코사이드 항생제-아연 양이온 착화합물로 부터 아연 양이온의 제거는 상술한 여러가지 방법으로 본 방법의 셋째 단게(c)에서 실시되어 아연 양이온이 유리되고 아미노글리코사이드 분자에서 1-아미노 및 3"-아미노 또는 3"-알킬아미노기가 보호되지 않았으나 다른 모든 아미노기는 단계(b)에서 사용한 아실화제의 아실기로 차단된 부분적 및 선택적으로 보호된 N-아실화 아미노글리코사이드 항생제 유도체를 얻는다. 그리고 아미노글리코사이드 항생제의 부분적 및 선택적으로 보호된 N-아실화 유도체는 본 방법의 단계(b)에서 상기 본 발명의 방법에서 기술된 바와 동일한 방법으로 일반식의 알카노산 에스테르 또는 N-포르밀이미다졸과 반응시켜서, 1-아미노기가 아실화되지 않고 부분적으로 N-보호된 아미노글리코사이드 항생제 유도체를 선택적으로 3"-N-아실화하여 얻는다.The aminoglycoside antibiotic which can be used as a starting material in the first step (a) of the method is the same as described above in the zinc complexing process, and the complexing reaction of the zinc cation and the aminoglycoside antibiotic is carried out in the same manner as described above. Acylation of the aminoglycoside antibiotic-zinc cation complex obtained in the first step (a) is carried out in the second step (b) of the process in the same manner as described above. The removal of zinc cations from the selective N-acylated aminoglycoside antibiotic-zinc cation complexes thus obtained was carried out in the third step (c) of this method by various methods described above to liberate the zinc cations and to form 1-in the aminoglycoside molecules. The amino and 3 "-amino or 3" -alkylamino groups are not protected but all other amino groups result in partial and optionally protected N-acylated aminoglycoside antibiotic derivatives blocked by the acyl groups of the acylating agents used in step (b). . And the partially and optionally protected N-acylated derivatives of the aminoglycoside antibiotics are formulated with the alkanoic acid esters or N-formyls of the general formula in the same manner as described in the process of the invention above in step (b) of the process. Reaction with midazoles results in selective 3 ″ -N-acylation of aminoglycoside antibiotic derivatives in which the 1-amino group is not acylated and is partially N-protected.

본 공정의 다섯번째 단계(e)에서, 상기 단계(d)에서 얻은 아미노그리코사이드 항생제의 1-N-는 보호되지 않고 다른 N-는 전부 보호된 유도체를 일반식(X)의α -히드록시-ω -아미노알카노산 특히 3-아미노-2-히드록시프로피온산(DL-이소세린, D-이소세린이나 L-이소세린) 또는 L-4-아미노-2-히드록시부티르산과 반응시켜 아미노글리코사이드 항생제의 1-아미노기를 3-아미노-2-히드록시프로피오닐이나 4-아미노-2-히드록시부티릴기로 아실화시킨다. 이러한 1-N-아실화는 일반적으로 아미드 합성의 공지방법에 따라 영국특허 제1,426,908호 또는 미국특허 제4,001,208호의 명세서에 서술된 바와 같이 디옥산, 디메톡시에탄, 디메틸포름아미드, 테트라하이드로 푸란이나 이들의 수성용매 같은 불활성유기용매에서 보호된 아미노글리코사이드 항생제를 유리산 형태 또는 이들의 활성 에스테르 형태 예를 들어 디시클로헥실카르 보디이미드에스테르, 혼합된 산무수물, 산아지드와 같은 이소세린이나 L-4-아미노-2-히드록시부티르산과 반응시켜서 행한다. 이소세린과 L-4-아미노-2-히드록시부티르산은 아미노기가 아미노-보호기로 차단된 것이다. 이러한 목적에 적당한 아미노-보호기는 1-N-아실화시키고자하는 1-N-는 보호되지 않으나 다른 N-는 모두 보호된 아미노글리코사이드 항생제 유도체에 사용한 것과 동일하거나 상이하다. t-부톡시카르보닐기는 수성, 트리플루오로초산, 수성 초산 및 묽은 염산 같은 묽은 산으로 처리하므로서 용이하게 제거할 수 있는 아미노-보호기가 바람직하다. 팔라듐이나 산화백금 촉매상에서 종래의 촉매적 수소첨가 분해에 의하여 제거되는 벤질옥시 카르보닐기 뿐만 아니라 히드라진으로 가수분해에 의하여 용이하게 제거되는 프탈로일기는 본 목적에서 아미노 보호기로서 대단히 유용하다.In the fifth step (e) of this process, 1-N- of the aminoglycoside antibiotic obtained in step (d) is not protected and all of the other N- are protected derivatives of the general formula (X). Aminoglycosides by reacting with hydroxy-ω-aminoalkanoic acids, especially 3-amino-2-hydroxypropionic acid (DL-isoserine, D-isoserine or L-isoserine) or L-4-amino-2-hydroxybutyric acid The 1-amino group of the side antibiotic is acylated with 3-amino-2-hydroxypropionyl or 4-amino-2-hydroxybutyryl group. Such 1-N-acylation is generally dioxane, dimethoxyethane, dimethylformamide, tetrahydrofuran or theirs as described in the specification of British Patent No. 1,426,908 or US Patent No. 4,001,208, according to known methods of amide synthesis. The aminoglycoside antibiotics protected in an inert organic solvent, such as an aqueous solvent, may be prepared in free acid form or in their active ester form, for example dicyclohexylcarbodiimide esters, mixed acid anhydrides, isoserine or L-4 such as acid azide. It is carried out by reacting with amino-2-hydroxybutyric acid. Isoserine and L-4-amino-2-hydroxybutyric acid are those in which the amino group is blocked with an amino-protecting group. Suitable amino-protecting groups for this purpose are the same as or different from those used for the 1-N- to be acylated 1-N- but not all other N- are protected aminoglycoside antibiotic derivatives. t-butoxycarbonyl groups are preferred amino-protecting groups which can be easily removed by treatment with dilute acids such as aqueous, trifluoroacetic acid, aqueous acetic acid and dilute hydrochloric acid. Not only benzyloxy carbonyl groups that are removed by conventional catalytic hydrocracking on palladium or platinum oxide catalysts, but also phthaloyl groups that are easily removed by hydrolysis with hydrazine are very useful as amino protecting groups for this purpose.

본 발명의 1-N-아실화 단계(e)에서 아실화 반응은 α-히드록시- ω-아미노알카노산(X )의 활성 에스테르를 사용하여 수성 유기용매에서 실시하는 것이 바람직하다. 적당한 활성 에스테르는 이소세린이나 L-4-벤질옥시카르보닐아미노-2-히드록시부티르산의 N-히드록시석신이미드 에스테르이고 이러한 활성 에스테르는 1-N-아실화된 아미노글리코사이드의 몰당 1-2몰, 바람직하기로는 1-1.5몰의 양으로 사용한다. 반응매체로 사용하기 적당한 물과 혼합할 수 있는 유기용매로는 디옥산, 디메톡시에탄, 디메틸포름아미드, 테트라하이드로푸란이 바람직하다.The acylation reaction in the 1-N-acylation step (e) of the present invention is preferably carried out in an aqueous organic solvent using an active ester of α-hydroxy-ω-aminoalkanoic acid (X). Suitable active esters are N-hydroxysuccinimide esters of isoserine or L-4-benzyloxycarbonylamino-2-hydroxybutyric acid and these active esters are 1- per mole of 1-N-acylated aminoglycosides. 2 moles, preferably 1-1.5 moles, is used. Dioxane, dimethoxyethane, dimethylformamide, tetrahydrofuran are preferred as organic solvents that can be mixed with water suitable for use as the reaction medium.

상기 단계(e) 다음에, 본 방법의 N-탈보호 단계(f)를 행하여 모든 잔유 아미노-보호기를 상기 단계(e)에서 얻은 1-N-아실화 생성물로 부터 제거한다. 잔유 아미노-보호기의 제거는 종래의 N-탈보호 방법에 의하여 이룩된다. 알콕시카르보닐형태의 잔유 아미노-보호기는 트리플루오로 초산이나 초산의 수용액 또는 묽은 염산과 같은 묽은 산용액으로 가수분해하여 제거한다. 알알킬옥시카르보닐 형태, 예를 들어 벤질옥시카르보닐인 잔유 아미노보호기는 종래의 촉매적 수소첨가 분해에 의하여 용이하게 제거된다.Following step (e), N-deprotection step (f) of the process is carried out to remove all residual amino-protecting groups from the 1-N-acylated product obtained in step (e). Removal of the residual amino-protecting groups is accomplished by conventional N-deprotection methods. Residual amino-protecting groups in the alkoxycarbonyl form are hydrolyzed and removed with a dilute acid solution such as trifluoroacetic acid or an aqueous solution of acetic acid or dilute hydrochloric acid. Residue aminoprotecting groups in the alalkyloxycarbonyl form, for example benzyloxycarbonyl, are readily removed by conventional catalytic hydrocracking.

본 방법의 단계(e)의 1-N-아실화 생성물로 부터 모든 잔유 아미노-보호기를 제거할때, 원하는 1-N-(2-히드록시-3-아미노프로피오닐)이나 1-N-(2-히드록시-4-아미노부티릴)-아미노글리코사이드 항생제를 높은 수율로 얻는다.When removing all residual amino-protecting groups from the 1-N-acylated product of step (e) of the process, the desired 1-N- (2-hydroxy-3-aminopropionyl) or 1-N- ( 2-hydroxy-4-aminobutyryl) -aminoglycoside antibiotics are obtained in high yield.

본 발명의 방법에 의하여 제조된 1-N-(α -히드록시-ω -아미노알카노일)아미노글리코사이드 항생제의 예를 들면 다음과 같다.Examples of 1-N- (α-hydroxy-ω-aminoalkanoyl) aminoglycoside antibiotics prepared by the method of the present invention are as follows.

(1) 1-N-(L-4-아미노-2-히드록시부티릴)-가나마이신 A(1) 1-N- (L-4-amino-2-hydroxybutyryl)-kanamycin A

(2) 1-N-(L-4-아미노-2-히드록시부티릴)-3'-데옥시가나마이신 A(2) 1-N- (L-4-amino-2-hydroxybutyryl) -3'-deoxyganamycin A

(3)1-N-(L-4-아미노-2-히드록시부티릴)-3',4'-디-데옥시가나마이신 A(3) 1-N- (L-4-amino-2-hydroxybutyryl) -3 ', 4'-di-deoxyganamycin A

(4) 1-N-(L-4-아미노-2-히드록시부티릴)-토부라마이신 A(4) 1-N- (L-4-amino-2-hydroxybutyryl) -toburamycin A

(5) 1-N-(L-4-아미노-2-히드록시부티릴)-디베카신(5) 1-N- (L-4-amino-2-hydroxybutyryl) -dibecasin

(6) 1-N-(3-아미노-2-히드록시프로피오닐)-디베카신(6) 1-N- (3-amino-2-hydroxypropionyl) -divecacin

본 발명의 방법의 다른 용도는 보호되지 않은 1-아미노기를 함유하는 모든 N-아실화 아미노글리코사이드 유도체로 부터 1-N-알킬 아미노글리코사이드 항생제를 제조하는 것으로, 이러한 용도의 예를들면 저급 지방족 알데히드와 시아노보로히드라이드로 알킬화하므로서 시소마이신으로 부터 네틸마이신이나 이의 1-N-알킬유도체를 제조하는 것이다.Another use of the process of the invention is to prepare 1-N-alkyl aminoglycoside antibiotics from all N-acylated aminoglycoside derivatives containing unprotected 1-amino groups, for example lower aliphatic By alkylating with aldehydes and cyanoborohydrides, netylmycin or its 1-N-alkyl derivative is prepared from sisomycin.

본 발명을 실시예를 들어 상세히 설명하면 다음과 같다.Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to Examples.

[실시예 1]Example 1

3,6-디-N-벤질옥시카르보닐-3'-트리플루오로아세틸 가나마이신 A의 제조Preparation of 3,6-di-N-benzyloxycarbonyl-3'-trifluoroacetyl kanamycin A

4ml의 디메틸설폭사이드에 용해시킨 504mg의 3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐 가나마이신 A의 용액을 220mg의 에틸 트리플루오로아세테이트와 혼합하고, 얻은 혼합물을 주위온도에서 1야 방치한다. 소량의 트리플루오로초산을 반응혼합물에 첨가한 다음, 반응용액을 다량의 에틸 에테르에 붓고, 생성된 오일상의 물질을 에틸 에테르로 잘 세척하면 고화 물질을 얻는다. 이 물질을 잘 건조하면 640mg의 본 화합물을 고체물질로 얻는다.A solution of 504 mg of 3,6'-di-N-benzyloxycarbonyl kanamycin A dissolved in 4 ml of dimethyl sulfoxide is mixed with 220 mg of ethyl trifluoroacetate, and the resulting mixture is left at ambient temperature for 1 night. . A small amount of trifluoroacetic acid is added to the reaction mixture, then the reaction solution is poured into a large amount of ethyl ether, and the resulting oily substance is washed well with ethyl ether to give a solidified material. Drying this material well yields 640 mg of the compound as a solid.

수율 99%,

=98°(Cl, 피리딘)Yield 99%,

= 98 ° (Cl, pyridine)

원소 분석 C₃₆H₄₇N₄O₁₆F₂.CF₃.COOH에 대한Elemental Analysis C ₃₆ H ₄₇ N ₄ O ₁₆ F ₂ .CF ₃ .COOH

계산치 : C, 47.40; H, 5.02; N, 5.82%Calculated: C, 47.40; H, 5.02; N, 5.82%

실측치 : C, 47.13; H, 5.15; N, 5.79%Found: C, 47.13; H, 5. 15; N, 5.79%

[실시예 2]Example 2

3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐-3"-N-트리플루오로아세틸 가나마이신 A의 제조Preparation of 3,6'-di-N-benzyloxycarbonyl-3 "-N-trifluoroacetyl kanamycin A

0.4ml의 디메틸설폭사이드에 용해시킨 20mg의 3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐 가나마이신 A의 용액을 6mg의 페닐 트리플루오로아세테이트와 혼합시키고, 얻은 혼합물을 주위온도에서 1야 방치시킨 다음 반응혼합물을 실시예 1에서와 같은 방법으로 처리하면 실시예 1의 것과 동일한 24.8mg의 본 화합물을 얻는다. 수율 97%A 20 mg solution of 3,6'-di-N-benzyloxycarbonyl kanamycin A dissolved in 0.4 ml of dimethyl sulfoxide was mixed with 6 mg of phenyl trifluoroacetate, and the resulting mixture was allowed to stand overnight at ambient temperature. The reaction mixture was then treated in the same manner as in Example 1 to give 24.8 mg of the present compound as in Example 1. Yield 97%

[실시예 3]Example 3

3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐-3"-N-트리플루오로아세틸 가나마이신 A의 제조Preparation of 3,6'-di-N-benzyloxycarbonyl-3 "-N-trifluoroacetyl kanamycin A

0.3ml의 헥사메틸포스포트리아미드에 용해시킨 10mg의 3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐 가나마이신 A의 용액을 7mg의 에틸 트리플루오로아세테이트와 혼합시키고, 얻은 혼합물을 주위온도에서 1야 방치시킨다. 반응용액을 소량의 트리플루오로 초산과 혼합시킨 다음, 다량의 에틸 에테르에 붓는다. 침적된 오일상의 물질을 에틸 에테르로 잘 세척하고 생성된 고체물질을 건조하면 11.7mg(수율 91%의 본 화합물을 고체 형태인 이의 모노-트리플루오로아세테이트.A solution of 10 mg of 3,6'-di-N-benzyloxycarbonyl kanamycin A dissolved in 0.3 ml of hexamethylphosphotriamide was mixed with 7 mg of ethyl trifluoroacetate and the resulting mixture was kept at 1 ambient temperature. Let it be. The reaction solution is mixed with a small amount of trifluoro acetic acid and then poured into a large amount of ethyl ether. The precipitated oily material was washed well with ethyl ether and the resulting solid was dried to give 11.7 mg (yield 91% of the compound in its solid form as mono-trifluoroacetate.

[실시예 4]Example 4

3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐-3"-N-트리플루오로아세틸 가나마이신 A의 제조Preparation of 3,6'-di-N-benzyloxycarbonyl-3 "-N-trifluoroacetyl kanamycin A

0.3ml의 디메틸포름아미드에 현탁시킨 10mg의 3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐 가나마이신 A의 현탁액을 7mg의 에틸 트리플루오로아세테이트와 혼합하고, 얻은 혼합물을 주위온도에서 1야 방치시킨다. 이렇게 얻은 균일한 반응용액을 소량의 트리플루오로초산과 혼합한 다음 대량의 에틸에테르에 붓고, 침지된 오일상의 물질을 에틸 에테르로 세척하여 고화시킨 다음, 얻은 고체를 건조하면 11.5mg(수율 90%)의 본 화합물을 이의 모노트리플루오로아세테이트 고체형태로 얻는다.A suspension of 10 mg of 3,6'-di-N-benzyloxycarbonyl kanamycin A suspended in 0.3 ml of dimethylformamide was mixed with 7 mg of ethyl trifluoroacetate, and the resulting mixture was left overnight at ambient temperature. Let it be. The homogeneous reaction solution thus obtained was mixed with a small amount of trifluoroacetic acid and poured into a large amount of ethyl ether, and the immersed oily substance was washed with ethyl ether to solidify. The solid obtained was dried to yield 11.5 mg (yield 90%). This compound of) is obtained in its monotrifluoroacetate solid form.

[실시예 5]Example 5

3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐-3"-N-트리플루오로아세틸 가나마이신 A의 제조Preparation of 3,6'-di-N-benzyloxycarbonyl-3 "-N-trifluoroacetyl kanamycin A

0.35ml의 설포란에 현탁시킨 10mg의 3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐 가나마이신 A의 현탁액을 7mg의 에틸트리플루오로아세테이트와 혼합하고, 혼합물을 주위온도에서 1야 교반시킨 다음, 반응혼합물을 실시예 1에서와 같은 방법으로 처리하면 12.0mg(수율 94%)의 본 생성물을 모노-트리플루오로아세테이트 고체물질 형태로 얻는다.A suspension of 10 mg of 3,6'-di-N-benzyloxycarbonyl kanamycin A suspended in 0.35 ml of sulfolane is mixed with 7 mg of ethyltrifluoroacetate, and the mixture is stirred at ambient temperature overnight. The reaction mixture was treated in the same manner as in Example 1 to obtain 12.0 mg (94% yield) of the product in the form of a mono-trifluoroacetate solid.

[실시예 6]Example 6

3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐-3"-N-트리플루오로아세틸 가나마이신 A의 제조Preparation of 3,6'-di-N-benzyloxycarbonyl-3 "-N-trifluoroacetyl kanamycin A

0.8ml의 테트라하이드로푸란에 현탁시킨 22mg의 3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐 가나마이신 A의 현탁액을 10mg의 에틸 트리플루오로아세테이트와 혼합하고, 혼합물을 2일간 교반한다. 생성된 균일 반응용액을 15mg의 에틸 플루오로아세테이트 및 8mg의 무수탄산나트륨과 혼합하고, 1야 교반시킨후 2일간 방치한다. 생성된 반응용액을 작게 농축하여, 농축물을 물로 세척한 다음 건조하면 고체물질을 얻는다. 고체물질을 소량의 트리플루오로초산과 함께 소량의 테트라하이드로푸란에 현탁시키고, 여기서 얻은 혼합물을 교반한후 에틸에테르를 첨가한다. 침전된 고체를 여별하고, 에테르로 세척하고 건조하면 21mg(수율 74%)의 본 화합물을 고체인 모노-트리플루오로아세테이트로 얻는다.A suspension of 22 mg of 3,6'-di-N-benzyloxycarbonyl kanamycin A suspended in 0.8 ml of tetrahydrofuran is mixed with 10 mg of ethyl trifluoroacetate and the mixture is stirred for 2 days. The resulting homogeneous reaction solution is mixed with 15 mg of ethyl fluoroacetate and 8 mg of anhydrous sodium carbonate, stirred for 1 night and left for 2 days. The resulting reaction solution is concentrated to small concentration, the concentrate is washed with water and dried to obtain a solid material. The solid material is suspended in a small amount of tetrahydrofuran with a small amount of trifluoroacetic acid and the mixture obtained is stirred and then ethyl ether is added. The precipitated solid is filtered off, washed with ether and dried to afford 21 mg (74% yield) of the present compound as a solid mono-trifluoroacetate.

+98°(Cl, 피리딘)

+ 98 ° (Cl, pyridine)

[실시예 7]Example 7

3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐-3"-N-트리플루오로아세틸 가나마이신 A의 제조Preparation of 3,6'-di-N-benzyloxycarbonyl-3 "-N-trifluoroacetyl kanamycin A

몰-테트라하이드로푸란(1:1, 0.3ml)에 용해시킨 10mg의 3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐 가나마이신 A의 용액을 0.1ml의 테트라하이드로푸란에 용해시킨 5mg의 에틸 플루오로아세테이트용액과 혼합시키고 생성된 혼합물을 주위온도에서 1일간 방치한다. 생성된 혼합물에 에틸 트리플루오로아세테이트(10mg), 무수탄산나트륨(4.4mg) 및 테트라하이드로푸란(0.1ml)의 혼합물을 5시간 간격(모두 4회)으로 첨가하여 3"-N-트리플루오로아세틸화를 시킨다. 반응용액을 농축한 다음, 실시예 6에서와 동일한 방법으로 처리하면 5.5mg(수율 43%)의 본 생성물 모노트리플루오로아세테이트를 고체로 얻는다.5 mg of ethyl fluorine in a solution of 10 mg of 3,6'-di-N-benzyloxycarbonyl kanamycin A dissolved in molar-tetrahydrofuran (1: 1, 0.3 ml) in 0.1 ml of tetrahydrofuran Mix with the low acetate solution and leave the resulting mixture at ambient temperature for 1 day. To the resulting mixture, a mixture of ethyl trifluoroacetate (10 mg), anhydrous sodium carbonate (4.4 mg) and tetrahydrofuran (0.1 ml) was added at 5 hour intervals (all 4 times) to add 3 "-N-trifluoroacetyl The reaction solution is concentrated and treated in the same manner as in Example 6 to give 5.5 mg (yield 43%) of the product monotrifluoroacetate as a solid.

[실시예 8]Example 8

3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐-3"-N-트리플루오로아세틸 가나마이신 A의 제조Preparation of 3,6'-di-N-benzyloxycarbonyl-3 "-N-trifluoroacetyl kanamycin A

물-에타놀(2:3, 0.6ml)에 용에시킨 10mg의 3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐 가나마이신 A의 용액을 0.1ml의 테트라한이드로 푸란에 용해시킨 5mg의 에틸 트리플루오로아세테이트용액에 첨가한 다음, 혼합물을 주위온도에서 1일간 방치한다. 반응용액을 실시에 6에서와 같은 방법으로 처리하면 2.3mg(수율 18%)의 본 생성물 모노-트리플루오로아세테이트를 고체물질로 얻는다.10 mg of 3,6'-di-N-benzyloxycarbonyl kanamycin A dissolved in water-ethanol (2: 3, 0.6 ml) was dissolved in 0.1 ml of tetrahedide in furan 5 mg of ethyl tri After addition to the fluoroacetate solution, the mixture is left at ambient temperature for 1 day. The reaction solution was treated in the same manner as in Example 6 to obtain 2.3 mg (yield 18%) of the product mono-trifluoroacetate as a solid.

[실시예 9]Example 9

3,6'-디-N-t-부톡시카르보닐-3"-N-트리플루오로아세틸 가나마이신 A의 제조Preparation of 3,6'-di-N-t-butoxycarbonyl-3 "-N-trifluoroacetyl kanamycin A

(a) 3,6'-디-N-부톡시카르보닐가나마이신 A의 제조(a) Preparation of 3,6'-di-N-butoxycarbonylganamycin A

500mg(1.03m몰)의 가나마이신 A(유리염기)를 12ml의 디메틸설폭사이드에 현탁시키고, 이 현탁액에 1g(4.55몰)의 초산아연 이수화물을 첨가한다. 혼합물을 균일용액이 될때까지 실온에서 교반한 다음, 이에 370mg(2.59m몰)의 t-부톡시카르보닐아지드를 첨가한후, 생성된 혼합물을 실온에서 일야 방치한 다음, 실시예 1에서 술된방 법으로 처리하면 590mg(80%)의 본 화합물을 무색고체로서 얻는다.500 mg (1.03 mmol) of kanamycin A (freebase) are suspended in 12 ml of dimethylsulfoxide, and 1 g (4.55 mol) of zinc acetate dihydrate is added to this suspension. The mixture was stirred at room temperature until a homogeneous solution was added thereto, followed by addition of 370 mg (2.59 mmol) of t-butoxycarbonylazide, and the resulting mixture was left at room temperature overnight, followed by the procedure described in Example 1. Treatment yielded 590 mg (80%) of this compound as a colorless solid.

+89°(cl, 물-디메틸포름아마이드 1:2)

+ 89 ° (cl, water-dimethylformamide 1: 2)

(b) 3,6'-디-N-t-부톡시카르보닐-3"-N-트리플루오로아세틸 가나마이신 A의 제조(b) Preparation of 3,6'-di-N-t-butoxycarbonyl-3 "-N-trifluoroacetyl kanamycin A

3,6'-디-N-부톡시카르보닐 가나마이신 A(60mg)를 0.5ml의 디메틸설폭사이드에 용해시키고, 생성된 용액을 25mg의 에틸 트리플루오로아세테이트와 혼합한 후, 얻은 혼합물을 주위온도에서 1야 방치한다. 반응용액을 실시예 1에 기술된 방법으로 처리하면 고체인 76.8mg(수율 98%)의 본 화합물 트리플루오로아세테이트를 얻는다.3,6'-di-N-butoxycarbonyl kanamycin A (60 mg) was dissolved in 0.5 ml of dimethylsulfoxide, the resulting solution was mixed with 25 mg of ethyl trifluoroacetate, and the resulting mixture was Leave at room temperature for 1 night. Treatment of the reaction solution by the method described in Example 1 yielded 76.8 mg (yield 98%) of the compound trifluoroacetate as a solid.

+72°(cl, 물-디메틸포름아미드, 1:2)

+ 72 ° (cl, water-dimethylformamide, 1: 2)

원소 분석 C₃₀H₅₁N₄O₁₆F₂.CF₃COOH에 대한Elemental Analysis C ₃₀ H ₅₁ N ₄ O ₁₆ F ₂ .CF _{3 for} COOH

계산치 : C, 42.95; H, 5.86; N, 6.26%Calculated: C, 42.95; H, 5.86; N, 6.26%

실측치 : C, 42.77; H, 5.92; N, 6.38%Found: C, 42.77; H, 5.92; N, 6.38%

[실시예 10]Example 10

3,6'-디-N-(p-메톡시벤질옥시카르보닐)-3"-N-트리플루오로아세틸 가나마이신 A의 제조Preparation of 3,6'-di-N- (p-methoxybenzyloxycarbonyl) -3 "-N-trifluoroacetyl kanamycin A

0.4ml의 디메틸설폭사이드에 용해시킨 40mg의 3,6'-디-N-(p-메톡시벤질옥시카르보닐) 가나마이신 A(실시예 8참조)의 용액을 18mg의 에틸 트리플루오로아세테이트와 혼합하고, 혼합물을 주위온도에서 1야 방치한 다음, 반응용액을 실시예 1에서와 같은 방법으로 처리하면 49.3mg(수율 98%)의 본 화합물을 고체물질로서 얻는다.A solution of 40 mg of 3,6'-di-N- (p-methoxybenzyloxycarbonyl) kanamycin A (see Example 8) dissolved in 0.4 ml of dimethyl sulfoxide was mixed with 18 mg of ethyl trifluoroacetate. After mixing and leaving the mixture at ambient temperature for one night, the reaction solution was treated in the same manner as in Example 1 to obtain 49.3 mg (yield 98%) of the present compound as a solid material.

+78°(cl, 물-디메틸포름아미드 1:2)

+ 78 ° (cl, water-dimethylformamide 1: 2)

원소 분석 C₃₈H₅₁N₄O₁₈F₃.CF₃COOH에 대한Elemental Analysis C ₃₈ H ₅₁ N ₄ O ₁₈ F ₃ .CF _{3 for} COOH

계산치 : C, 46.97; H, 5.12; N, 5.48%Calculated: C, 46.97; H, 5. 12; N, 5.48%

실측치 : C, 46.97; H, 5.12; N, 5.48%Found: C, 46.97; H, 5. 12; N, 5.48%

[실시예 11]Example 11

3,6',3"-트리-N-트리플루오로아세틸 가나마이신 A의 제조Preparation of 3,6 ', 3 "-tri-N-trifluoroacetyl kanamycin A

75mg의 3,6'-디-N-트리플루오로아세틸 가나마이신 A와 트리에틸아민(12mg)을 35mg의 디메틸설폭사이드와 다음에 35mg의 에틸 트리플루오로아세테이트와 혼합하고, 혼합물을 1야 교반하여 원하는 3"-N-트리플루오로아세틸화를 시킨 다음, 반응용액을 실시예 1에서와 동일한 방법으로 처리하면 94.2mg(수율 96%)의 본 화합물을 고체물질로서 얻는다.75 mg of 3,6'-di-N-trifluoroacetyl kanamycin A and triethylamine (12 mg) were mixed with 35 mg of dimethylsulfoxide followed by 35 mg of ethyl trifluoroacetate, and the mixture was stirred overnight. The desired 3 "-N-trifluoroacetylation was carried out, and then the reaction solution was treated in the same manner as in Example 1 to obtain 94.2 mg (yield 96%) of the compound as a solid.

+75°(cl, 물-디메틸포름아미드, 1:2)

+ 75 ° (cl, water-dimethylformamide, 1: 2)

원소 분석 C₂₄H₃₃N₄O₁₄F₉.CF₃COOH에 대한Elemental Analysis C ₂₄ H ₃₃ N ₄ O ₁₄ F ₉ .CF _{3 for} COOH

계산치 : C, 35.22; H, 3.87; N, 6.32%Calculated: C, 35.22; H, 3.87; N, 6.32%

실측치 : C, 35.09; H, 3.99; N; 6.07%Found: C, 35.09; H, 3.99; N; 6.07%

[실시예 12]Example 12

3,6'-디-N-펜옥시카르보닐-3"-N-트리플루오로아세틸 가나마이신 A의 제조Preparation of 3,6'-di-N-phenoxycarbonyl-3 "-N-trifluoroacetyl kanamycin A

0.5ml의 디메틸설폭사이드에 용해시킨 53mg의 3,6'-디-N-펜옥시카르보닐 가나마이신 A와 트리에틸아민(9mg)의 용액을 23mg의 메틸 트리플루오로아세테이트와 혼합시키고, 혼합물을 실시예 1에서와 동일한 방법으로 처리하면 65mg(수율 95%)의 본 화합물을 고체물질로 얻는다.A solution of 53 mg of 3,6'-di-N-phenoxycarbonyl kanamycin A and triethylamine (9 mg) dissolved in 0.5 ml of dimethyl sulfoxide was mixed with 23 mg of methyl trifluoroacetate and the mixture was Treatment in the same manner as in Example 1 yields 65 mg (95% yield) of the compound as a solid.

+70°(cl, 물-디메틸포름아미드, 1:2)

+ 70 ° (cl, water-dimethylformamide, 1: 2)

원소 분석 C₃₄H₄₈N₄O₁₆F₈.CF₃COOH에 대한Elemental Analysis C ₃₄ H ₄₈ N ₄ O ₁₆ F ₈ .CF _{3 for} COOH

계산치 : C, 46.26; H, 4.74; N, 5.99%Calculated: C, 46.26; H, 4. 74; N, 5.99%

실측치 : C, 45.88; H, 4.96; N, 5.77%Found: C, 45.88; H, 4.96; N, 5.77%

[실시예 13]Example 13

3,6',3"-트리-N-포르밀 가나마이신 A의 제조Preparation of 3,6 ', 3 "-Tri-N-formyl kanamycin A

62mg의 3,6'-N-포르밀 가나마이신 A와 90mg의 에틸포르메이트와 1ml의 디 메틸설폭사이드의 혼합물을 밀폐관에서 100℃ 로 12시간 가열하여 원하는 3"-N-포르밀화를 시킨다. 반응용액을 소량의 개미산과 혼합한 다음 다량의 에틸 에테르내에 붓고, 실시예 1과 동일한 방법으로 처리하면, 닌히드린에 양성인 고체물질인 69mg(수율 98%)의 본 화합물을 얻는다.A mixture of 62 mg of 3,6'-N-formyl kanamycin A, 90 mg of ethyl formate, and 1 ml of dimethylsulfoxide was heated to 100 ° C in a closed tube for 12 hours to give the desired 3 "-N-formylation. The reaction solution is mixed with a small amount of formic acid, poured into a large amount of ethyl ether, and treated in the same manner as in Example 1 to obtain 69 mg (yield 98%) of the compound as a solid material positive for ninhydrin.

+109°(cl, 몰-디메틸포름 아미드, 1:2)

+ 109 ° (cl, mol-dimethylformamide, 1: 2)

원소 분석 C₂₁H₃₆N₄O₁₄.HCOOH에 대한Elemental Analysis C ₂₁ H ₃₆ N ₄ O ₁₄ .for HCOOH

계산치 : C, 43.00; H, 6.23; N, 0.21%Calculated: C, 43.00; H, 6. 23; N, 0.21%

실측치 : c, 42.83; H, 6.19; N, 9.10%Found: c, 42.83; H, 6. 19; N, 9.10%

[실시예 14]Example 14

3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐메틸-6'-N-트리-3"-N-플루오로아세틸 가나마이신 A의 제조Preparation of 3,6'-di-N-benzyloxycarbonylmethyl-6'-N-tri-3 "-N-fluoroacetyl kanamycin A

68mg의 3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐-6'-N-메틸가나마이신 A, 트리에틸아민(11mg), 30mg의 에틸 트리플루오로아세테이트와 0.7ml의 디메틸설폭사이드의 혼합물을 실시예 1에서와 동일한 방법으로 처리하면 고체물질인 86mg(수율 99%)의 본 화합물 모노-트리플루오로아세테이트를 얻는다.A mixture of 68 mg 3,6'-di-N-benzyloxycarbonyl-6'-N-methylganamycin A, triethylamine (11 mg), 30 mg ethyl trifluoroacetate and 0.7 ml dimethylsulfoxide Treatment in the same manner as in Example 1 gave 86 mg (99% yield) of the compound mono-trifluoroacetate as a solid material.

+65°(cl, 물-디메틸포름아미드, 1:2)

+ 65 ° (cl, water-dimethylformamide, 1: 2)

[실시예 15]Example 15

3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐-3'-데옥시-3"-N-트리플루오로아세틸 가나마이신 A의 제조Preparation of 3,6'-di-N-benzyloxycarbonyl-3'-deoxy-3 "-N-trifluoroacetyl kanamycin A

0.4ml의 디메틸설폭사이드에 용해시킨 52mg의 3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐-3'-데옥시가나마이신 A의 용액을 21mg의 에틸 트리플루오로아세테이트와 혼합하고, 혼합물을 주위온도에서 1야 방치한 다음, 반응용액을 실시예 1에서와 같은 방법으로 처리하면 고체물질인 64.8mg(수율 97%)의 본 화합물을 얻는다.A solution of 52 mg of 3,6'-di-N-benzyloxycarbonyl-3'-deoxyganamycin A dissolved in 0.4 ml of dimethyl sulfoxide was mixed with 21 mg of ethyl trifluoroacetate and the mixture was After standing at room temperature for one night, the reaction solution was treated in the same manner as in Example 1 to obtain 64.8 mg (yield 97%) of the present compound as a solid.

+70°(c1, 물-디메틸포름 아미드, 1:2)

+ 70 ° (c1, water-dimethylformamide, 1: 2)

원소 분석 C₃₆H₄₇N₄O₁₅F₃CF₃.COOH에 대한Elemental Analysis C ₃₆ H ₄₇ N ₄ O ₁₅ F ₃ CF ₃ .for COOH

계산치 : C, 48.21; H, 5.11; N, 5.92%Calculated: C, 48.21; H, 5.11; N, 5.92%

실측치 : C, 47.94; H, 5.35; N, 5.77%Found: C, 47.94; H, 5. 35; N, 5.77%

[실시예 16]Example 16

3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐-3'-데옥시-3"-N-포르밀가나마이신 A의 제조Preparation of 3,6'-di-N-benzyloxycarbonyl-3'-deoxy-3 "-N-formylganamycin A

0.7ml의 디메틸설폭사이드에 용해시킨 3,6'-디-N-벤질옥시가나마이신 A의 용액을 65mg의 페닐 포르메이트와 혼합하고, 혼합물을 3"-N-포르밀화를 위하여 50℃ 에서 1야 가열한다. 반응용액을 소량의 개미산과 혼합하고, 실시예 1에서와 같은 방법으로 처리하면 고체물질인 83mg(수율 97%)의 본 화합물 모노-포르메이트를 얻는다.A solution of 3,6'-di-N-benzyloxyganamycin A dissolved in 0.7 ml of dimethylsulfoxide was mixed with 65 mg of phenyl formate and the mixture was mixed at 1 ° C at 50 ° C for 3 "-N-formylation. The reaction solution is mixed with a small amount of formic acid and treated in the same manner as in Example 1 to obtain 83 mg (yield 97%) of the compound mono-formate as a solid.

[실시예 17]Example 17

3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐-3"-N-디클로로아세틸-3'-데옥시가나마이신 A의 제조Preparation of 3,6'-di-N-benzyloxycarbonyl-3 "-N-dichloroacetyl-3'-deoxyganamycin A

0.5ml의 디메틸설폭사이드에 용해시킨 35mg의 3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐-3'-데옥시가나마이신 A의 용액을 12mg의 메틸 디클로로아세태이트와 혼합하고, 혼합물을 주위온도에서 1야 방치한다. 반응용액을 소량의 디클로로 초산과 혼합한 다음, 실시예 1에서와 같은 방법으로 처리하면, 고체물질인 44.5mg(수율 96%)의 본 화합물을 얻는다.A solution of 35 mg of 3,6'-di-N-benzyloxycarbonyl-3'-deoxyganamycin A dissolved in 0.5 ml of dimethyl sulfoxide was mixed with 12 mg of methyl dichloroacetate and the mixture was Leave at room temperature for 1 night. The reaction solution was mixed with a small amount of dichloroacetic acid and treated in the same manner as in Example 1 to obtain 44.5 mg (yield 96%) of the present compound as a solid.

+65°(cl, 물-디메틸포름아미드, 1:2)

+ 65 ° (cl, water-dimethylformamide, 1: 2)

원소분석Elemental analysis

C₃₆H₄₈N₄O₁₅Cl₂. CHCl₂COOH에 대한C ₃₆ H ₄₈ N ₄ O ₁₅ Cl ₂ . For CHCl ₂ COOH

계산치 : C, 46.73; H, 5.16; N, 5.74; Cl, 14.52%Calculated: C, 46.73; H, 5. 16; N, 5.74; Cl, 14.52%

실측치 : C, 46.58; H, 5.33; N, 5.62; Cl, 14.28%Found: C, 46.58; H, 5. 33; N, 5.62; Cl, 14.28%

[실시예 18]Example 18

3, 6'-N-디벤질옥시카르보닐-3"-N-트리클로로아세틸-3'-데옥시가나마이신 A의 제조Preparation of 3, 6'-N-dibenzyloxycarbonyl-3 "-N-trichloroacetyl-3'-deoxyganamycin A

0.7ml의 디메틸설폭사이드에 용해시킨 58mg의 3, 6'-디-N-벤질옥시카르보닐-3'-에옥시가나마이신 A의 용액을 25mg의 메틸 트리클로로아세테이트와 혼합하고, 혼합물을 50℃에서 1야 방치한다. 반응용액을 소량의 트리클로로초산과 혼합한 다음, 실시예 1에서와 같이 처리하며 고체물질인 80.5mg(수율 98%)의 본 화합물을 얻는다.A solution of 58 mg of 3, 6'-di-N-benzyloxycarbonyl-3'-ethoxyganamycin A dissolved in 0.7 ml of dimethyl sulfoxide was mixed with 25 mg of methyl trichloroacetate and the mixture was heated to 50 ° C. 1 night left. The reaction solution is mixed with a small amount of trichloroacetic acid and then treated as in Example 1 to obtain 80.5 mg (yield 98%) of the present compound as a solid.

+65° (cl, 물-디메틸포름아미드, 1 : 2)

+ 65 ° (cl, water-dimethylformamide, 1: 2)

원소분석 C₃₆H₄₇N₄O₁₅Cl₃.Cl₃CO₂H에 대한Elemental Analysis for C ₃₆ H ₄₇ N ₄ O ₁₅ Cl ₃ .Cl ₃ CO ₂ H

계산치 : C, 43.65; H, 4.63; N, 5.36; Cl, 20.34%Calculated: C, 43.65; H, 4.63; N, 5.36; Cl, 20.34%

실측치 : C, 43.44; H, 4.77; N, 5.30; Cl, 20.19%Found: C, 43.44; H, 4.77; N, 5.30; Cl, 20.19%

[실시예 19]Example 19

3, 6'-디-N-벤질옥시카르보닐-3'-N-데옥시-3"-트리플루오로아세틸-6'-N'-카틸가나마이신 A의 제조Preparation of 3, 6'-di-N-benzyloxycarbonyl-3'-N-deoxy-3 "-trifluoroacetyl-6'-N'-catylganamycin A

1ml의 디메틸포름아미드에 용해시킨 72mg의 3, 6'-디-N-벤질옥시카르보닐-3'-데옥시-6'-N-메틸가나마이신 A의 용액을 30mg의 에틸 트리플루오로아세테이트와 혼합하고, 혼합물을 주위온도에서 1야 교반시킨 다음, 반응용액을 실시예 1에서와 같은 방법으로 처리하면, 89.5mg(수율 97%)의 본 화합물을 모노-트리플루오로아세테이트를 얻는다.A solution of 72 mg of 3, 6'-di-N-benzyloxycarbonyl-3'-deoxy-6'-N-methylganamycin A dissolved in 1 ml of dimethylformamide was mixed with 30 mg of ethyl trifluoroacetate. After mixing and stirring the mixture at ambient temperature for one night, the reaction solution was treated in the same manner as in Example 1 to obtain 89.5 mg (yield 97%) of the compound as mono-trifluoroacetate.

+70°(cl, 물-디메틸포름아미드, 1 : 2)

+ 70 ° (cl, water-dimethylformamide, 1: 2)

[실시예 20]Example 20

3, 6'-디-N-벤질옥시카르보닐-4'-데옥시-3'-N-트리플루오로아세틸 가나마이신 A의 제조Preparation of 3, 6'-di-N-benzyloxycarbonyl-4'-deoxy-3'-N-trifluoroacetyl kanamycin A

1ml의 디메틸설폭사이드에 용해시킨 71mg의 3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐-4'-데옥시가나마이신 A, 트리에틸아민(12mg)과 30mg의 에틸 트리플루오로아세테이트의 용액을 실시예 1에서와 같은 방법으로 처리하면 고체물질인 90mg(수율99%)의 본 화합물 모노-트리플루오로아세테이트를 얻는다.A solution of 71 mg of 3,6'-di-N-benzyloxycarbonyl-4'-deoxyganamycin A, triethylamine (12 mg) and 30 mg of ethyl trifluoroacetate dissolved in 1 ml of dimethyl sulfoxide Treatment in the same manner as in Example 1 yields 90 mg (99% yield) of the compound mono-trifluoroacetate as a solid material.

+72°(cl, 물-디메틸포름아미드, 1 : 2)

+ 72 ° (cl, water-dimethylformamide, 1: 2)

[실시예 21]Example 21

3, 6'-N-디벤질옥시카르보닐-3', 4'-디데옥시-3"-N-트리플루오로아세틸 가나마이신 A의 제조Preparation of 3, 6'-N-dibenzyloxycarbonyl-3 ', 4'-dideoxy-3 "-N-trifluoroacetyl kanamycin A

1ml의 디메틸설폭사이드에 용해시킨 75mg의 3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐-3', 4'-디데옥시가나마이신 A와 30mg의 에틸 트리플루오로아세테이트의 용액을 실시예 1에서와 같은 방법으로 처리하면 고체물질인 96mg(수율 99%)의 본 화합물을 얻는다.A solution of 75 mg of 3,6'-di-N-benzyloxycarbonyl-3 ', 4'-dideoxyganamycin A dissolved in 1 ml of dimethylsulfoxide and 30 mg of ethyl trifluoroacetate in Example 1 was prepared. Treatment in the same manner to obtain 96 mg (99% yield) of the compound as a solid material.

+72°(cl, 물-디메틸설폭사이드, 1 : 2)

+ 72 ° (cl, water-dimethylsulfoxide, 1: 2)

원소분석 C₃₆H₄₇N₄O₁₄F₃. CF₃COOH에 대한Elemental Analysis C ₃₆ H ₄₇ N ₄ O ₁₄ F ₃ . For CF ₃ COOH

계산치 : C, 49.03; H, 5.20; N, 6.02%Calculated: C, 49.03; H, 5.20; N, 6.02%

실측치 : C, 48.83; H, 5.46; N, 5.87%Found: C, 48.83; H, 5. 46; N, 5.87%

[실시예 22]Example 22

3, 6'-디-N-벤질옥시카르보닐-3', 4'-디데옥시-3"-N-포르밀가나마이신 A의 제조Preparation of 3, 6'-di-N-benzyloxycarbonyl-3 ', 4'-dideoxy-3 "-N-formylganamycin A

75mg의 3, 6'-디-N-벤질옥시카르보닐-3', 4'-디데옥시가나마이신 A와 65mg의 페닐포르메이트를 1ml의 디메틸설폭사이드에 용해시키고, 생성된 용액을 실시예 16에서와 같은 방법으로 처리하면, 고체물질인 80mg(수율 97%)의 본 화합물 모노포르메이트를 얻는다.75 mg of 3, 6'-di-N-benzyloxycarbonyl-3 ', 4'-dideoxyganamycin A and 65 mg of phenylformate are dissolved in 1 ml of dimethylsulfoxide and the resulting solution is Example 16 Treatment in the same manner as in gives 80 mg (97% yield) of the compound monoformate as a solid.

+80° (cl, 물-디메틸포름아미드, 1:2)

+ 80 ° (cl, water-dimethylformamide, 1: 2)

[실시예 23]Example 23

3, 6'-디-N-벤질옥시카르보닐-3', 4'-디데옥시-3"-N-디클로로아세틸 가나마이신 A의 제조Preparation of 3, 6'-di-N-benzyloxycarbonyl-3 ', 4'-dideoxy-3 "-N-dichloroacetyl kanamycin A

0.9ml의 디메틸설폭사이드에 용해시킨 68mg의 3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐-3', 4'-디데옥시가나마이신 A의 용액을 25mg의 메틸 디클로로아세테이트와 혼합하고, 혼합물을 주위온도에서 1야 방치한다. 반응용액을 소량의 디클로로 초산과 혼합한 다음, 실시예 1에서와 같은 방법으로 처리하면 고체물질인 88mg(수율 97%)의 본 화합물을 얻는다.A 68 mg solution of 3,6'-di-N-benzyloxycarbonyl-3 ', 4'-dideoxyganamycin A dissolved in 0.9 ml of dimethylsulfoxide was mixed with 25 mg of methyl dichloroacetate and the mixture was Leave at 1 ambient temperature. The reaction solution was mixed with a small amount of dichloroacetic acid and treated in the same manner as in Example 1 to obtain 88 mg (yield 97%) of the present compound as a solid.

+67° (cl, 물-디메틸포름아미드, 1:2)

+ 67 ° (cl, water-dimethylformamide, 1: 2)

[실시예 24]Example 24

3, 2', 6'-트리-N-벤질옥시카르보닐-3"-N-트리플루오로 아세틸 가나마이신 A의 제조Preparation of 3, 2 ', 6'-tri-N-benzyloxycarbonyl-3 "-N-trifluoro acetyl kanamycin A

1ml의 디메틸설폭사이드에 용해시킨 78mg의 3, 2', 6'-트리-N-벤질옥시카르보닐 가나마이신 A와 트리에틸아민(11mg)의 용액을 35mg의 에틸 트리플루오로아세테이트와 혼합하고, 혼합물을 실시예 1에서와 같은 방법으로 처리하면, 고체물질인 92mg(수율 95%)의 본 화합물을 모노트리플루오로아세테이트를 얻는다.A solution of 78 mg of 3, 2 ', 6'-tri-N-benzyloxycarbonyl ganamycin A and triethylamine (11 mg) dissolved in 1 ml of dimethyl sulfoxide was mixed with 35 mg of ethyl trifluoroacetate, When the mixture was treated in the same manner as in Example 1, 92 mg (yield 95%) of the present compound as a solid was obtained with monotrifluoroacetate.

+60° (cl, 물-디메틸포름아미드, 1:2)

+ 60 ° (cl, water-dimethylformamide, 1: 2)

[실시예 25]Example 25

3,2',6'-트리-N-벤질옥시카르보닐-3"-N-포르밀토브라마이신의 제조Preparation of 3,2 ', 6'-tri-N-benzyloxycarbonyl-3 "-N-formyltobramycin

1.2ml의 디메틸설폭사이드에 용해시킨 82mg의 3,2',6'-트리-N-벤질옥시카르보닐-토브라마이신과 트리에틸아민(12mg)의 용액을 60mg의 페닐 포르메이트와 혼합하고, 혼합물을 실시예 16에서와 같은방법으로 처리하면 고체물질인 86mg(수율 97%)의 본 화합물을 얻는다.A solution of 82 mg of 3,2 ', 6'-tri-N-benzyloxycarbonyl-tobramycin and triethylamine (12 mg) dissolved in 1.2 ml of dimethyl sulfoxide was mixed with 60 mg of phenyl formate, The mixture was treated in the same manner as in Example 16 to obtain 86 mg (yield 97%) of the present compound as a solid.

+71(cl, 물-디메틸포름아미드, 1:2)

+71 (cl, water-dimethylformamide, 1: 2)

원소 분석 C₄₅H₅₅N₅O₁₆. HCOOH에 대한Elemental Analysis C ₄₅ H ₅₅ N ₅ O ₁₆ . For HCOOH

계산치 : C, 55.98; H, 6.09; N, 7.42%Calculated: C, 55.98; H, 6.09; N, 7.42%

실측치 : C, 55.50; H, 6.22; N, 7.28%Found: C, 55.50; H, 6. 22; N, 7.28%

[실시예 26]Example 26

3,2',6'-트리-N-벤질옥시카르보닐-6'-N-메틸-3"-N-트리플루오로아세틸 토브라마이신의 제조.Preparation of 3,2 ', 6'-tri-N-benzyloxycarbonyl-6'-N-methyl-3 "-N-trifluoroacetyl tobramycin.

1.2ml의 디메틸설폭사이드에 용해시킨 80mg의 3,2',6'-트리-N-벤질옥시카르보닐-6'-N-메틸토브라마이신과 트리에틸아민(12mg)의 용액을 30mg의 에틸트리플루오로아세테이트와 혼합하고, 혼합물을 실시예 1에서와 같은 방법으로 처리하면 고체물질인 97mg(수율 98%)의 본 화합물 모노-트리플루오로아세테이트를 얻는다.A solution of 80 mg of 3,2 ', 6'-tri-N-benzyloxycarbonyl-6'-N-methyltobramycin and triethylamine (12 mg) dissolved in 1.2 ml of dimethyl sulfoxide was dissolved in 30 mg of ethyl. Mixing with trifluoroacetate and treating the mixture in the same manner as in Example 1 yields 97 mg (98% yield) of the compound mono-trifluoroacetate as a solid.

+60°(cl, 물-디메틸포름아미드, 1:2)

+ 60 ° (cl, water-dimethylformamide, 1: 2)

[실시예 27]Example 27

3,2',6'-트리-N-벤질옥시카르보닐-3"-N-트리플루오로 아세틸 디베카신의 제조Preparation of 3,2 ', 6'-tri-N-benzyloxycarbonyl-3 "-N-trifluoro acetyl dibecasin

1ml의 디메틸설폭사이드 에용해시킨 82mg의 3,2',6'-트리-N-벤질옥시카르보닐-디베카신의 용액을 30mg의 에틸 트리플루오로 아세테이트와 혼합하고, 혼합물을 실시예 1에서와 같은 방법으로 처리하면, 고체물질인 100mg(수율 98%)의 본 화합물을 얻는다.A solution of 82 mg of 3,2 ', 6'-tri-N-benzyloxycarbonyl-dibecasin dissolved in 1 ml of dimethylsulfoxide was mixed with 30 mg of ethyl trifluoro acetate and the mixture was prepared in Example 1 and In the same manner, 100 mg (yield 98%) of the compound is obtained as a solid.

+61°(cl, 물-디메틸포름아미드, 1:2)

+ 61 ° (cl, water-dimethylformamide, 1: 2)

원소 분석 C₄₄H₅₄N₅O₁₅F₃.CF COOH에 대한Elemental Analysis C ₄₄ H ₅₄ N ₅ O ₁₅ F ₃ .CF For COOH

계산치 : C, 51.93; H, 5.21; N, 6.58%Calculated: C, 51.93; H, 5. 21; N, 6.58%

실측치 : C, 51.84; H, 5.38; N, 6.47%Found: C, 51.84; H, 5. 38; N, 6.47%

[실시예 28]Example 28

3,2',6',3"-테트라-N-트리플루오로아세틸 디베카신의 제조Preparation of 3,2 ', 6', 3 "-tetra-N-trifluoroacetyl dibecasin

1ml의 디메틸설폭사이드에서의 71mg의 3,2',6'-트리-N-트리플루오로아세틸디베카신과 30mg의 에틸 트리플루오로 아세테이트의 혼합물을 40에서 1야 방치한 다음, 실시예 1에서와 같은 방법으로 처리하면 고체물질인 90mg(수율 99%)의 본 화합물을 얻는다.A mixture of 71 mg of 3,2 ', 6'-tri-N-trifluoroacetyldibecasin and 30 mg of ethyl trifluoro acetate in 1 ml of dimethylsulfoxide was left at 40 to 1 night, and then in Example 1 Treatment in the same manner to obtain 90 mg (99% yield) of the compound as a solid material.

+70°(cl, 물-디메틸포름아미드, 1:2)

+ 70 ° (cl, water-dimethylformamide, 1: 2)

원소 분석 C₂₆H₃₃N₅O₁₂F₁₂. CF₃.COOH에 대한Elemental Analysis C ₂₆ H ₃₃ N ₅ O ₁₂ F ₁₂ . For CF ₃ .COOH

계산치 : C, 35.42; H, 3.61; N, 7.38%Calculated: C, 35.42; H, 3.61; N, 7.38%

실측치 : C, 35.40; H, 3.89; N, 7.17%Found: C, 35.40; H, 3.89; N, 7.17%

[실시예 29]Example 29

3,2',6'-트리-N-벤질옥시카르보닐-3"-N-포르밀디베카신의 제조Preparation of 3,2 ', 6'-tri-N-benzyloxycarbonyl-3 "-N-formyldibecasin

1.1ml의 디메틸설폭사이드에서의 79mg의 3,2',6'-트리-N-벤질옥시카르보닐-디베카신과-60mg의 페닐 포르메이트의 혼합물을 실시예 16에서와 같은 방법으로 처리하면 체물질인 84mg(수율 98%)의 본 화합물 모노포르메이트를 얻는다.A mixture of 79 mg of 3,2 ', 6'-tri-N-benzyloxycarbonyl-divecasin and -60 mg of phenyl formate in 1.1 ml of dimethylsulfoxide was treated in the same manner as in Example 16. 84 mg (yield 98%) of this compound as a substance is obtained.

[실시예 30]Example 30

3,2',6'-트리-N-벤질옥시카르보닐-3"-N-디클로로아세틸디베카신의 제조Preparation of 3,2 ', 6'-tri-N-benzyloxycarbonyl-3 "-N-dichloroacetyldibecasin

1.2ml의 디메틸설폭사이드에 용해시킨 84mg의 3,2',6'-트리-N-벤질옥시카르보닐디베카신의 용액을 실시예 17에서와 같은 방법으로 25mg의 메틸디클로로아세테이트와 반응시키면 고체물질인 104mg(수율 97%)의 본 화합물 모노-디클로로아세테이트를 얻는다.A 84 mg solution of 3,2 ', 6'-tri-N-benzyloxycarbonyldibecacin dissolved in 1.2 ml of dimethyl sulfoxide was reacted with 25 mg of methyldichloroacetate in the same manner as in Example 17. 104 mg (97% yield) of the present compound mono-dichloroacetate is obtained.

+59° (cl, 물-디메틸포름아미드, 1:2)

+ 59 ° (cl, water-dimethylformamide, 1: 2)

[실시예 31]Example 31

3,2',6'-트리-N-벤질옥시카르보닐-6'-N-메틸-3"-N-트리플루오로아세틸디베카신의 제조Preparation of 3,2 ', 6'-tri-N-benzyloxycarbonyl-6'-N-methyl-3 "-N-trifluoroacetyldibecasin

1.ml의 디메틸설폭사이드에 용해시킨 85mg의 3,2',6'-트리-N-벤질옥시카르보닐-6'-N-메틸디베카신의 용액을 30mg의 에틸 트리플루오로아세테이트와 혼합하고, 혼합물을 실시예 1에서와 같은 방법으로처리하면 고체물질인 103.5mg(수율 98%)의 본 화합물, 모노-디클로로아세테이트를 얻는다.A solution of 85 mg of 3,2 ', 6'-tri-N-benzyloxycarbonyl-6'-N-methyldibecasin dissolved in 1. ml of dimethyl sulfoxide was mixed with 30 mg of ethyl trifluoroacetate. , The mixture was treated in the same manner as in Example 1 to obtain 103.5 mg (yield 98%) of the present compound, mono-dichloroacetate, as a solid material.

+60°(cl, 물-디메틸포름아미드, 1 : 2)

+ 60 ° (cl, water-dimethylformamide, 1: 2)

[실시예 32]Example 32

3,2'-디-N-벤질옥시카르보닐-3"-N-포르밀가나마이신 C의 제조Preparation of 3,2'-di-N-benzyloxycarbonyl-3 "-N-formylganamycin C

1.5ml의 디메틸설폭사이드에 용해시킨 81mg의 3,2'-디-N-벤질옥시카르보닐 가나마이신 C와 트리에틸아민(14mg)의 용액을 90mg의 에틸포르메이트와 혼합하고, 혼합물을 실시예 16에서와 같은 방법으로 처리하면 고체물질인 85.5mg(수율 96%)의 본 화합물 모노포르메이트를 얻는다.A solution of 81 mg of 3,2'-di-N-benzyloxycarbonyl kanamycin C and triethylamine (14 mg) dissolved in 1.5 ml of dimethylsulfoxide was mixed with 90 mg of ethyl formate, and the mixture was prepared in Example. Treatment in the same manner as in 16 yields 85.5 mg (96% yield) of the compound monoformate as a solid.

+81° (cl, 물-디메틸포름아미드, 1:2)

+ 81 ° (cl, water-dimethylformamide, 1: 2)

[실시예 33]Example 33

3,2',6'-트리-N-벤질옥시카르보닐-3"-N-트리플루오로아세틸 시소마이신의 제조Preparation of 3,2 ', 6'-tri-N-benzyloxycarbonyl-3 "-N-trifluoroacetyl sisomycin

1.5ml의 디메틸설폭사이드에 용해시킨 82mg의 3, 2', 6'-트리-N-벤질옥시카르보닐-시소마이신의용액을 30mg의 에틸 트리플루오로아세테이트와 혼합하고, 혼합물을 실시예 1에서와 같은 방법으로 처리하면 고체물질인 99mg(수율 97%)의 본 화합물 모노-트리플루오로아세테이트를 얻는다.82 mg of 3, 2 ', 6'-tri-N-benzyloxycarbonyl-sisomicin solution dissolved in 1.5 ml of dimethyl sulfoxide was mixed with 30 mg of ethyl trifluoroacetate and the mixture was prepared in Example 1. Treatment in the same manner to obtain 99 mg (97% yield) of the compound mono-trifluoroacetate as a solid material.

+151°(cl, 물-디메틸포름아미드, 1:2)

+ 151 ° (cl, water-dimethylformamide, 1: 2)

[실시예 34]Example 34

3,2',6'-트리-N-벤질옥시카르보닐-3"-N-트리플루오로아세틸 에틸마이신의 제조Preparation of 3,2 ', 6'-tri-N-benzyloxycarbonyl-3 "-N-trifluoroacetyl ethylmycin

1.3ml의 디메틸설폭사이드에 용해시킨 85mg의 3, 2', 6'-트리-N-벤질옥시카르보닐-네틸마이신의 용액을 30mg의 에틸 트리플루오로아세테이트와 혼합하고, 혼합물을 실시예 1에서와 같은 방법으로 처리하면 고체물질인 103mg(수율 98%)의 본 화합물을 얻는다.A solution of 85 mg of 3, 2 ', 6'-tri-N-benzyloxycarbonyl-netylmycin dissolved in 1.3 ml of dimethyl sulfoxide was mixed with 30 mg of ethyl trifluoroacetate and the mixture was prepared in Example 1 Treatment in the same manner to obtain 103 mg (98% yield) of the compound as a solid material.

+145°(cl, 물-디메틸포름아미드, 1:2)

+ 145 ° (cl, water-dimethylformamide, 1: 2)

[실시예 35]Example 35

3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐-3"-N-트리플루오로아세틸겐타마이신 B의 제조Preparation of 3,6'-di-N-benzyloxycarbonyl-3 "-N-trifluoroacetylgentamycin B

1.2ml의 디메틸설폭사이드에 용해시킨 72mg의 3, 6'-디-N-벤질옥시카르보닐겐타마이신 B의 용액을 30mg의 에틸 트리플루오로아세테이트와 혼합하고, 혼합물을 실시예 1에서와 같은 방법으로 처리하면 고체물질인 91mg(수율 99%)의 본 화합물 모노트리플루오로아세테이트를 얻는다.A solution of 72 mg of 3, 6'-di-N-benzyloxycarbonylgentamicin B dissolved in 1.2 ml of dimethylsulfoxide was mixed with 30 mg of ethyl trifluoroacetate and the mixture was prepared as in Example 1. The resultant treatment gave 91 mg (99% yield) of the compound monotrifluoroacetate as a solid.

+92°(cl, 물-디메틸포름아미드, 1:2)

+ 92 ° (cl, water-dimethylformamide, 1: 2)

[실시예 36]Example 36

3,2,6'-트리-N-벤질옥시카르보닐-3"-N-트리플루오로아세틸겐타마이신 C₁및 C₁a 혼합물의 제조Preparation of 3,2,6'-tri-N-benzyloxycarbonyl-3 "-N-trifluoroacetylgentamycin C ₁ and C ₁ a mixture

1.5ml의 디메틸설폭사이드에 용해시킨 84mg의 3, 2', 6'-트리-N-벤질옥시카르보닐-겐타마이신 C₁및 C₁a 혼합물의 용액을 30mg의 에틸 트리플루오로아세테이트와 혼합하고, 생성된 혼합물을 실시예 1에서와 같은 방법으로 처리하면 고체물질인 101mg의 본 화합물 모노-트리플루오로아세테이트를 얻는다.A solution of 84 mg of 3, 2 ', 6'-tri-N-benzyloxycarbonyl-gentamycin C ₁ and C ₁ a mixture dissolved in 1.5 ml of dimethyl sulfoxide was mixed with 30 mg of ethyl trifluoroacetate. The resultant mixture was treated in the same manner as in Example 1 to obtain 101 mg of the compound mono-trifluoroacetate as a solid.

+87°(cl, 물-디메틸포름아미드, 1:2)

+ 87 ° (cl, water-dimethylformamide, 1: 2)

[실시예 37]Example 37

3,2',6'-트리-N-벤질옥시카르보닐-3', 4'-디데옥시-3'-에노-3"-N-트리플루오로아세틸 가나마이신 B의 제조Preparation of 3,2 ', 6'-tri-N-benzyloxycarbonyl-3', 4'-dideoxy-3'-eno-3 "-N-trifluoroacetyl kanamycin B

1.2ml의 디메틸설폭사이드에 용해시킨 83mg의 3, 2', 6'-트리-N-벤질옥시카르보닐-3', 4'-디데옥시-3'-에노-가나마이신 B와 35mg의 에틸 트리플루오로아세테이트의 혼합물을 주위온도에서 1야 방치한 다음, 반응용액을 실시예 1에서와 같은 방법으로 처리하면, 고체물질인 99.5mg(수율 96%)의 본 화합물 모노트리플루오로아세테이트를 얻는다.83 mg of 3, 2 ', 6'-tri-N-benzyloxycarbonyl-3', 4'-dideoxy-3'-eno-ganamycin B dissolved in 1.2 ml of dimethylsulfoxide and 35 mg of ethyl tree After the mixture of fluoroacetate was left at ambient temperature for one night, the reaction solution was treated in the same manner as in Example 1 to obtain 99.5 mg (yield 96%) of the compound monotrifluoroacetate as a solid.

+26°(cl, 물-디메틸포름아미드, 1:2)

+ 26 ° (cl, water-dimethylformamide, 1: 2)

[실시예 38]Example 38

3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐-3'-데옥시-3"-N-포르밀가나마이신 A의 제조Preparation of 3,6'-di-N-benzyloxycarbonyl-3'-deoxy-3 "-N-formylganamycin A

0.8ml의 디메틸설폭사이드에 용해시킨 90mg의 3, 6'-디-N-벤질옥시카르보닐-3'-데옥시가나마이신 A의 용액을 13mg의 N-포르밀이미다졸과 혹합하고, 혼합물을 주위 온도에서 1야 방치한다. 반응용액을 소량의 개미산과 반응시킨 다음, 실시예 1에서와 같이 에틸 에테르로 처리하면 고체물질인 94mg(수율 95%)의 본 화합물 모노포르메이트를 얻는다.A solution of 90 mg of 3, 6'-di-N-benzyloxycarbonyl-3'-deoxyganamycin A dissolved in 0.8 ml of dimethylsulfoxide was combined with 13 mg of N-formylimidazole and the mixture Allow 1 to stand at ambient temperature. The reaction solution was reacted with a small amount of formic acid, and then treated with ethyl ether as in Example 1 to obtain 94 mg (yield 95%) of the compound monoformate as a solid.

[실시예 39]Example 39

3, 6', 3"-트리-N-아세틸가나마이신 A의 제조Preparation of 3, 6 ', 3 "-tri-N-acetylganamycin A

1ml의 디메틸설폭사이드에서의 100mg의 3, 6'-디-N-아세틸가나마이신의 A와 20mg(1몰의 출발물질에 대하여 1.03몰비)의 N-아세틸이미다졸의 혼합물을 얼음-냉각하에 3시간 교반시킨 다음, 주위온도에서 1야 방치한다. 반응용액에 0.3ml의 28%의 수성암모니아를 혼합하여 알카리화시킨 다음, 주위온도에서 3일간 방치한다. 생성된 반응혼합물을 에틸 에테르로 처리하면 에테르-불용성 시럽을 얻는다. 시럽을 물에 용해시킨 다음 CM-세파덱스 C-25(NH4⁺형태)(스웨덴소재의 파르마시아 파인화학회사의 제품)의 컬럼에 통과시키고, 수지컬럼을 0.05N 수성 암모니아로 전개시킨 후, 용출된 원하는 생성물을 함유하는 유분을 함께 혼합하고 농축 건조시킨다. 농축물을 물에 용해시키고, 수용액을 초산으로 중화시킨 다음, 농축건조하면 고체생성물인 109mg(수율 90%)의 본 화합물을 얻는다.A mixture of 100 mg of 3, 6'-di-N-acetylganamycin A and 20 mg (1.03 molar ratio per mole of starting material) in 1 ml of dimethylsulfoxide under ice-cooling After stirring for 3 hours, it is allowed to stand for 1 night at ambient temperature. 0.3 ml of 28% aqueous ammonia was mixed with the reaction solution, and then left for 3 days at ambient temperature. Treatment of the resulting reaction mixture with ethyl ether gives an ether-insoluble syrup. The syrup was dissolved in water and passed through a column of CM-Sepadex C-25 (NH4 ⁺ form) (manufactured by Parmacia Fine Chemicals, Sweden), and the resin column was developed with 0.05N aqueous ammonia, followed by elution. The fractions containing the desired product are mixed together and concentrated to dryness. The concentrate is dissolved in water, the aqueous solution is neutralized with acetic acid and then concentrated to dryness to give 109 mg (90% yield) of the present compound as a solid product.

+98°(cl, 물-디메틸포름아미드, 1:2)

+ 98 ° (cl, water-dimethylformamide, 1: 2)

원소분석 C₂₄H₄₂N₄O₁₄. CH₃COOH에 대한Elemental Analysis C ₂₄ H ₄₂ N ₄ O ₁₄ . For CH ₃ COOH

계레치 : C, 45.34; H, 7.02; N, 8.14%Ureatch: C, 45.34; H, 7.02; N, 8.14%

실측치 : C, 45.22; H, 7.20; N, 1.11%Found: C, 45.22; H, 7. 20; N, 1.11%

[실시예 40]Example 40

1-N-(L-4-아미노-2-히드록시부티릴)가나마이신 A(아미카신)의 합성Synthesis of 1-N- (L-4-amino-2-hydroxybutyryl) ganamycin A (amicasin)

(a) 3, 6'-디-N-벤질옥시카르보닐-가나마이신 A의 제조(a) Preparation of 3, 6'-di-N-benzyloxycarbonyl-ganamycin A

(i) 디메틸설폭사이드(50ml)와 테트라하이드로푸란(20ml)의 혼합용매에 현탁시킨 2.0g(4.13m몰)의 가나마이신 A(유리염기)의 현탁액을 4g(18.1m몰)의 초산아연 이수화물과 혼합하고, 생성된 혼합물을 균일용액이 될 때 까지 주위온도로 교반시킨다. 이 때 약 4-5시간내에 현탁된 가나마이신 A는 용해되어 가나마이신 A-아연양이온 착화합물을 형성한다. 생성된 용액을 0℃로 냉각한 다음, 이 용액에 40ml의 테트라하이드로푸란-디메틸설폭사이드(용량으로 1 : 1)의 혼합용매에 용해시킨 2.31g(9.5m몰)의 N-벤질옥시카르보닐옥시석신이미드의 냉각용액(0℃)을 약 1시간에 걸쳐 적가한다음 4시간 동안주위온도에서 방치시킨다. 이때, 가나마이신 A의 아연착화합물은 벤질옥시카르보닐화가 일어난다. 생성된 반응용액을 전개용매로서 클로로포름-에타놀-28% 수성암모니아(용량으로 1: 1: 1)의 저부층을 사용하여 시리카겔, 틴 레이어 케로마토그라피하면 시리카겔 판상에는 Rf0.23에서 주된 스포트가 나타나고 주된 스포트위에 다른 부산물로 간주된 2 또는 3개의 부수스포트가 나타나는 것이 관찰되었다.(i) 4 g (18.1 mmol) zinc acetate dihydrate in a suspension of 2.0 g (4.13 mmol) kanamycin A (free base) suspended in a mixed solvent of dimethyl sulfoxide (50 ml) and tetrahydrofuran (20 ml). Mix with water and stir the resulting mixture to ambient temperature until homogeneous solution. At this time, kanamycin A suspended in about 4-5 hours is dissolved to form kanamycin A-zinc cation complex. The resulting solution was cooled to 0 ° C., and then dissolved in 40 ml of tetrahydrofuran-dimethylsulfoxide (1: 1 by volume) in a mixed solvent of 2.31 g (9.5 mmol) N-benzyloxycarbonyl Cooling solution of oxysuccinimide (0 ° C.) is added dropwise over about 1 hour and left at ambient temperature for 4 hours. At this time, the zinc complex of kanamycin A undergoes benzyloxycarbonylation. When the resulting reaction solution was used as a developing solvent, using a bottom layer of chloroform-ethanol-28% aqueous ammonia (1: 1: 1), silica gel and tin layer keratography were performed on the silica gel plate. It was observed that on the main spots two or three secondary spots were considered as other by-products.

(ii)상기 단체 (i)에서 얻은 N-벤질옥시카르보닐화가된 가나마이신 A-아연 양이온 착화합물을 함유하는 반응용액을 500ml의 에틸 에테르내에 붓고 침전된 오일상의 생성물을 에틸 에테르로 수회 세척하면 N-벤질옥시카르보닐화된 착화합물로 구성된 8.8g의 농시럽상 생성물을 얻는다.(ii) Pour the reaction solution containing N-benzyloxycarbonylated kanamycin A-zinc cation complex compound obtained in the above (i) into 500 ml of ethyl ether and wash the precipitated oily product several times with ethyl ether. 8.8 g of a concentrated syrup phase product consisting of a benzyloxycarbonylated complex is obtained.

(iii)시럽상 착화생성물로부터 아연 양이온의 제거는 카르복실기능기(-COOH)를 갖는 약한 산성 양이온-교환수지[암베라이트CG-50 수지(H⁺형태), 미국 Rohm & Haas회사의 제품]을 사용하여 상술한 방법으로 실시한다. 60ml의 암베라이트 CG50(H⁺형태) 수지를 물-디옥산(용량으로 2 : 1)으로 사전에 잘 포화시킨 다음, 컬럼을 이수지로 채우고 물-디옥산(용량으로 1 : 1)에 용해시킨 1g의 시럽상 착화 생성물의 용액을 컬럼에 통과시킨 다음, 이를 1% 초산을 함유하는 물-디옥산(용량으로 2 : 1)으로 전개시킨다. 닌히드린에 양성인 원하는 생성물, 즉 3, 6'-디-N-벤질옥시카르보닐-가나마이신 A를 함유하는 용출액 유분이 먼저 나오고 다음 디페닐카르보아지드와의 발색에 양성인 초산아연을 함유하는 유분이 수집된다. 원하는 생성물을 함유하는 전자 유분을 함께 혼합하고 농축시키고, 농출물을 에틸 에테르로 세척하면 무색고체의 형태로 340mg(수율 81%)의 3, 6'-디-N-벤질옥시카르보닐-가나마이신 A를 얻는다.(iii) Removal of zinc cations from syrup-like complexes using weakly acidic cation-exchange resins with carboxyl functional groups (-COOH) [Amberite CG-50 resin (H ⁺ form), manufactured by Rohm & Haas, USA) By the method described above. 60 ml of Amberlite CG50 (H ⁺ form) resin was well saturated beforehand with water-dioxane (2: 1 by volume), then the column was filled with dihydrate and dissolved in water-dioxane (1: 1 by volume). A solution of 1 g of syruped complex product is passed through a column and then developed with water-dioxane (2: 1 in volume) containing 1% acetic acid. The desired product positive for ninhydrin, i.e. an eluate fraction containing 3, 6'-di-N-benzyloxycarbonyl- kanamycin A, comes out first and then contains zinc acetate positive for color development with diphenylcarbonazide. Is collected. The electronic fractions containing the desired product are mixed together and concentrated, and the concentrate is washed with ethyl ether to give 340 mg (yield 81%) of 3, 6'-di-N-benzyloxycarbonyl-ganamycin in the form of a colorless solid. Get A

+76°(cl, 물-디메틸포름아미드, 1:2)

+ 76 ° (cl, water-dimethylformamide, 1: 2)

원소 분석 Ct-1H₄₈N₄O₁₆. 2CH₃CO₃H. H₂O에 대한Elemental Analysis Ct-1 H ₄₈ N ₄ O ₁₆ . For 2CH ₃ CO ₃ H. H ₂ O

계레치 : C, 51.23; H, 6.56; N, 6.29%Guerici: C, 51.23; H, 6.56; N, 6.29%

실측치 : C, 51.02; H, 6.71; N, 6.22%Found: C, 51.02; H, 6.71; N, 6.22%

(b) 3,6'-N-N-벤질옥시카르보닐-3"-N-트리플루오로아세틸가나마이신 A 트리풀루오로아세테이트의 제조(b) Preparation of 3,6'-N-N-benzyloxycarbonyl-3 "-N-trifluoroacetylganamycin A trifuluroacetate

상기 공정(a)에서 얻은 생성물을 1.5몰의 트리에틸아민을 첨가하여 실시예) 1에서와 같은 방법으로 처리하면 본 화합물을 얻는다.The product obtained in step (a) was treated in the same manner as in Example 1 1 with the addition of 1.5 mol of triethylamine to obtain the present compound.

(c) 1-N-(L-4-아미노-2-히드록시부티릴)가나마이신 A의 제조(c) Preparation of 1-N- (L-4-amino-2-hydroxybutyryl) ganamycin A

1.5ml의 물-테트라하이드로푸란(용량으로 1 : 1)에 용해시킨 상기 공정(b)에서 얻은 60mg의 3, 6'-디-N-벤질옥시카르보닐-3"-N-트리플루오로아세틸 가나마이신A의 용약을 7의 무수탄산나트륨과 혼합한 다음, 23mg의 L-4-벤질옥시카르보닐아미노-2-히드록시부틸산의 N-히드록시석신이미드를 첨가하고, 혼합물을 주위온도에 10시간 방치한다.60 mg of 3, 6'-di-N-benzyloxycarbonyl-3 "-N-trifluoroacetyl obtained in the step (b) dissolved in 1.5 ml of water-tetrahydrofuran (1: 1 at a dose) Mix the solution of kanamycin A with 7 anhydrous sodium carbonate, then add 23 mg of N-hydroxysuccinimide of L-4-benzyloxycarbonylamino-2-hydroxybutyl acid and mix the mixture to ambient temperature. Leave for 10 hours.

이렇게 얻은 반응용액에 작게농축하고 물과 혼합시키면 고체가 침전한다. 고체를 3ml의 2N수성 암모니아-테트라 하이드로푸란(용량으로 5 : 3)에 용해시키고 용액을 주위온도에서 1야 방치시켜 3"-N-트리플루오로아세틸기를 효과적으로 제거한다. 반응 혼합물을 농축 건조하면 고체잔유물을 얻는데 이 고체잔유물을 4ml의 물-디옥산(1 : 1)에 용해시키고, 얻은 용액을 소량의 초산을 첨가하여 약산성으로 만든 다음, 팔라듐 브댁촉매의 존재하에 대기압하에 수소로 1시간 수소첨가분해시켜 벤질옥시카르보닐 기를 제거한다. 생성된 반응용액을 여과하여 농축시키고 농축물을 CM-세파뎃스 C-25(NH₄ ⁺형태)(스웨덴소재 파마시아 파인회사의 제품)의 컬럼을 통과시키고, 이를 0→.0.5N 수성 암모니아로 경사전개시킨다. 원하는 생성물을 함유하는 유분을 함께 혼합하고 농축 건조하면 36mg(수율 89%)의 본 화합물 모노카보 네이트를 얻는다. 이 생성물의 약리적 성질 및 항균적활성도는 확인된 시료와 동일함에 밝혀졌다.The reaction solution obtained is concentrated in small amounts and mixed with water to precipitate a solid. The solid is dissolved in 3 ml of 2N aqueous ammonia-tetra hydrofuran (5: 3 by volume) and the solution is left overnight at ambient temperature to effectively remove the 3 "-N-trifluoroacetyl group. The reaction mixture is concentrated to dryness. A solid residue is obtained, which is dissolved in 4 ml of water-dioxane (1: 1), the resulting solution is made slightly weak by addition of a small amount of acetic acid, and then hydrogenated at atmospheric pressure in the presence of a palladium decoxide catalyst for 1 hour hydrogen. The addition reaction is followed to remove the benzyloxycarbonyl group The resulting reaction solution is concentrated by filtration and the concentrate is passed through a column of CM-Sephaxes C-25 (form NH ₄ ⁺ ) (product of Pharmacia Pine Company, Sweden). The mixture was decanted from 0 to 0.5 N aqueous ammonia, and the oil containing the desired product was mixed together and concentrated to dryness to give 36 mg (89% yield) of the compound monocarbonate. Pharmacological properties and antimicrobial activity of the enemy Dangerous was found as identical to the check sample.

[실시예 41]Example 41

1-N-[(L)-4-아미노-2-히드록시부티릴]-3'-데옥시가나마이신 A의 합성Synthesis of 1-N-[(L) -4-amino-2-hydroxybutyryl] -3'-deoxyganamycin A

(a) 3,6'-N-디벤질옥시카르보닐-3'-데옥시가나마이신 A의 제조(a) Preparation of 3,6'-N-dibenzyloxycarbonyl-3'-deoxyganamycin A

12ml의 디메틸설폭사이드에 용해시킨 500mg(1.07m몰)의 3'-데옥시가나마이신 A(유리염기)의 현탁액을 1g(4.55m몰) 초산아연 이수화물과 혼합하고 생성된 혼합물을 교반하여 균일한 용액으로 만든다. 이 용액에 5ml의 디메틸설폭사이드-테트라하이드로푸란(용량으로 1 : 1)에 용해시킨 610mg(2.45m몰)의 N-벤질옥시카르보닐석신이미드의 용액을 첨가하고 반응용액을 주위온도에서 1야 방치한 다음, 반응용액을 실시예 40(a)(iii)에서와 같은 방법으로 처리하면 무색고체형태로 765mg(수율 82%)의 상기 본 화합물을 얻는다.A suspension of 500 mg (1.07 mmol) of 3'-deoxyganamycin A (free base) dissolved in 12 ml of dimethyl sulfoxide was mixed with 1 g (4.55 mmol) zinc acetate dihydrate and the resulting mixture was stirred to uniformity. Make one solution. To this solution was added a solution of 610 mg (2.45 mmol) N-benzyloxycarbonylsuccinimide dissolved in 5 ml of dimethylsulfoxide-tetrahydrofuran (1: 1 in volume) and the reaction solution was added at ambient temperature. After being left to stand, the reaction solution was treated in the same manner as in Example 40 (a) (iii) to give 765 mg (yield 82%) of the present compound as a colorless solid.

+76°(cl, 물-디메틸포름아미드, 1:2)

+ 76 ° (cl, water-dimethylformamide, 1: 2)

원소 분석 C₃₄H₄₈N₄O₁₄. 2CH₃CO2H. H₂O에 대한Elemental Analysis C ₃₄ H ₄₈ N ₄ O ₁₄ . 2CH ₃ CO2H. For H ₂ O

계레치 : C, 52.16; H, 6.68; N, 6.40%Guerici: C, 52.16; H, 6.68; N, 6.40%

실측치 : C, 51.99; H, 6.95; N, 6.20%Found: C, 51.99; H, 6.95; N, 6.20%

(b) 3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐-3'-데옥시-3"-트리플루오로아세틸가나마이신 A 트리풀루오로아세테이트의 제조(b) Preparation of 3,6'-di-N-benzyloxycarbonyl-3'-deoxy-3 "-trifluoroacetylganamycin A tripulouroacetate

상기 공정(a)에서 얻은 생성물을 15에서와 같은 방법으로 처리하면 본 화합물을 얻는다.The product obtained in step (a) was treated in the same manner as in 15 to obtain the present compound.

(c) 1-N-(L-4-아미노-2-히드록시부티릴)-3'-데옥시가나마이신 A의 제조(c) Preparation of 1-N- (L-4-amino-2-hydroxybutyryl) -3'-deoxyganamycin A

1.5ml의 물-테트라하이드로푸란(용량으로 1 : 2)에 용해시킨 상기 공정(b)에서 얻은 50mg의 3, 6'-디-N-벤질옥시카르보닐-3'-데옥시-3"-N-트리플루오로아세틸가나마이신A 트리플루오로아세테이트의 용액을 6mg의 무수탄산나트륨과 혼합한 다음, 20mg의 L-4-벤질옥시카르보닐-2-아미노히드록시부틸산의 N-히드록시석신이미드에스테르를 첨가한다. 혼합물을 주위온도에 8간방 방치한 후, 반응용액을 작게 농축시킨 다음, 물과 혼합하면 고체가 침전한다. 고체물 3ml의 2N수성 암모니아-테트라하이드로푸란(용량으로 1 : 1) 과 혼합하고 혼합물을 주위온도에서 1야 방치하여 3"-N-트리플루오로아세틸기를 제거한다. 반응용액을 농축건조하여 잔유물을 얻고 이 잔유물을 4ml의 물-디옥산(용량을 1 : 1)과 혼합하고, 얻은 용액을 소량의 초산을 첨가하여 약산성으로 만든 다음, 팔라듐-브랙 촉매상에서 대기압력하에 1시간동안 수소로 수소첨가분해하여 벤질옥시카르보닐기를 제거한 다음, 수소첨가분해 반응용액을 실시예 40(c)에서와 같은 방법으로 처리하면 30mg(수율 87%)의 본 화합물 모노카보네이트 모노히드레이트를 얻는다.50 mg of 3, 6'-di-N-benzyloxycarbonyl-3'-deoxy-3 "-obtained in the above step (b) dissolved in 1.5 ml of water-tetrahydrofuran (1: 2 in volume). A solution of N-trifluoroacetylganamycin A trifluoroacetate was mixed with 6 mg of anhydrous sodium carbonate, and then 20 mg of N-hydroxysuccinic acid of L-4-benzyloxycarbonyl-2-aminohydroxybutyl acid was added. The midester is left to stand at ambient temperature, the reaction solution is concentrated to a small concentration and mixed with water to precipitate a solid 3 ml of 2N aqueous ammonia-tetrahydrofuran (volume 1: 1). 1) and leave the mixture at ambient temperature for 1 night to remove 3 "-N-trifluoroacetyl group. The reaction solution was concentrated to dryness to obtain a residue, which was then mixed with 4 ml of water-dioxane (volume 1: 1), and the resulting solution was made slightly acidic by addition of a small amount of acetic acid, followed by atmospheric pressure on a palladium-rack catalyst. Hydrogenated with hydrogen under hydrogen for 1 hour to remove the benzyloxycarbonyl group, and then the hydrocracking reaction solution was treated in the same manner as in Example 40 (c) to 30 mg (yield 87%) of the compound monocarbonate monohydrate. Get

+89°(cl, 물)

+ 89 ° (cl, water)

[실시예 42]Example 42

L-4-아미노-2-이드록시부티릴) 3',4'L-4-amino-2-hydroxybutyryl) 3 ', 4'

2ml의 물-테트라하이드로푸란(1 : 2)에 용해시킨실시예 20에서 얻은 70mg의 3, 6'-디-N-벤질옥시카르보닐-3',4'-디데옥시-3"-N-트리플루오로아세틸 가나마이신A 트리플루오로아세테이트의 용액을 9mg 무수탄산나트륨과 혼합한 다음, 28mg의 L-4-벤질옥시카르보닐아미노-2-히드록시부틸산의 N-히드록시석신이미드에스테르를 첨가한다. 혼합물을 실온에서 10시간 방치한 다음, 용액을 작게 농축시키고, 물과 혼합하면 고체가 침전한다.70 mg of 3, 6'-di-N-benzyloxycarbonyl-3 ', 4'-dideoxy-3 "-N- obtained in Example 20 dissolved in 2 ml of water-tetrahydrofuran (1: 2) A solution of trifluoroacetyl kanamycin A trifluoroacetate was mixed with 9 mg anhydrous sodium carbonate and then 28 mg of N-hydroxysuccinimide ester of L-4-benzyloxycarbonylamino-2-hydroxybutyl acid The mixture is left at room temperature for 10 hours, then the solution is concentrated small and mixed with water to precipitate a solid.

상기 고체물 4ml의 3N수성 암모니아테-트라하이드로푸란(1 : 2)의 혼합용매와 혼합하고, 혼합물을 주위온도에서 1야 방치한다. 반응용액을 농축건조하여 얻은 고체잔유물을 6ml의 물-디옥산( 1 : 3)과 혼합하고, 이 용액을 소량의 초산을 첨가하여 약산성으로 만든 다음, 팔라듈-브랙촉매상에서 대기압력하에 1.5시간 수소와 함께 수소첨가 분해시킨 다음, 반응용액을 실시예 40(c)에서와 같은 방법으로 처리하면 42mg(수율 91%)의 본 화합물 모노카보네이트를 얻는다.4 ml of the solid is mixed with a mixed solvent of 3N aqueous ammonia tetra-furanfuran (1: 2), and the mixture is allowed to stand at ambient temperature overnight. The reaction solution was concentrated to dryness and the solid residue was mixed with 6 ml of water-dioxane (1: 3), and the solution was made slightly weak by addition of a small amount of acetic acid, and then 1.5 hours of atmospheric pressure on a palladium-rack catalyst. After hydrocracking with hydrogen, the reaction solution was treated in the same manner as in Example 40 (c) to give 42 mg (yield 91%) of the compound monocarbonate.

+91°(cl, 물)

+ 91 ° (cl, water)

[실시예 43]Example 43

1-N-(L-4-아미노-2-히드록시부티릴)토브라마이신의 합성Synthesis of 1-N- (L-4-amino-2-hydroxybutyryl) tobramycin

(a)3, 2', 6'-트리-N-벤질옥시카르보닐 토브라마이신의 제조(a) Preparation of 3, 2 ', 6'-tri-N-benzyloxycarbonyl tobramycin

12ml의디메틸설폭사이드에 현탁시킨480mg(1.03m몰)의 토브라마이신(유리염기)의 현탁액을 1g(4.55m몰)의 토산아연 이수화물과 혼합하고 혼합물을 1시간 교반한다. 토브라마이신-아연 양이온 착화합물을 함유하는 반응용액을 10ml의 테트라하이드로푸-란디메틸설폭사이드(용량으로 1 : 1)에 용해시킨 850mg(3.4m몰)의 N-벤질옥시카르보닐옥시석신이미드의 용액을 약 1시간에 걸쳐 적가하고, 형성된 반응혼합물을 주위온도에서 1야 교반시킨다. 생성된 반응용액을 실시예 40(a)(ii)에서와 같은 방법으로 다량의 에틸 에테르로 처리하면, N-벤질옥시카르보닐화된 토브라마이신 아연 착화합물로된 시럽상 생성물을 얻는다. 시럽상 착화생성물을 물-디옥산(2 : 1)의 비를 용량으로 1 : 2로 바꾼 것이외에는 실시예 40(a)(iii)에서와 같은 방법으로 처리하면 무색고체인 810mg(수율 78%)의 본 화합물을 얻는다.A suspension of 480 mg (1.03 mmol) of tobramycin (free base) suspended in 12 ml of dimethylsulfoxide is mixed with 1 g (4.55 mmol) zinc tosan zinc dihydrate and the mixture is stirred for 1 hour. 850 mg (3.4 mmol) N-benzyloxycarbonyloxysuccinimide in which a reaction solution containing a tobramycin-zinc cation complex was dissolved in 10 ml of tetrahydrofu-randimethylsulfoxide (1: 1 in volume). The solution of was added dropwise over about 1 hour, and the reaction mixture formed was stirred for one night at ambient temperature. The resulting reaction solution was treated with a large amount of ethyl ether in the same manner as in Example 40 (a) (ii) to give a syrup phase product of N-benzyloxycarbonylated tobramycin zinc complex. 810 mg of a colorless solid (yield 78%) when the syrup phase complexed product was treated in the same manner as in Example 40 (a) (iii) except that the ratio of water-dioxane (2: 1) was changed to 1: 2. To the present compound.

+65°(cl, 물-디메틸포름아미드, 1:2)

+ 65 ° (cl, water-dimethylformamide, 1: 2)

원소 분석 C₄₂H₅₅N₅O₁₈. 2CH₃CO₂H. H₂O에 대한Elemental analysis C ₄₂ H ₅₅ N ₅ O ₁₈ . For 2CH ₃ CO ₂ H.H ₂ O

계산치 : C, 54.81; H, 6.50; N, 6.95%Calculated: C, 54.81; H, 6. 50; N, 6.95%

실측치 : C, 54.77; H, 6.71; N, 6.88%Found: C, 54.77; H, 6.71; N, 6.88%

(b) 3, 2' 6'-트리-N-벤질옥시카르보닐-3"-N-포르밀로브라마이신 모노포르메이트의 제조(b) Preparation of 3, 2 '6'-tri-N-benzyloxycarbonyl-3 "-N-formillobramycin monoformate

상기 공정(a)에서 얻은 생성물을 25에서와 같은 방법으로 처리하면 본 화합물을 얻는다.The product obtained in step (a) is treated in the same manner as in 25 to obtain the present compound.

(c) 1-N-(L-4-아미노-2-히드록시부티릴)토브라마이신의 제조.(c) Preparation of 1-N- (L-4-amino-2-hydroxybutyryl) tobramycin.

3ml의 물-테트라하이드로푸란(1 : 3)에 용해시킨 상기공정(b)에서 얻은 100mg의 3, 2', 6'-트리-N-벤질옥시카르보닐-3"-N-포르밀토브라마이신 모노포르메이트의 용액을 12mg의 무수탄산나트륨과 혼합한 다음, 40mg의 (L)-4-벤질옥시카르보닐아미노-2-아미노히드록시부티르산의 N-히드록시석신이미드 에스테르를 첨가한다. 혼합물을 주위온도에서 10시간 방치한 후, 형성된 반응용액을 작게농축하여 물과 혼합하면 고체가 침전한다.100 mg of 3, 2 ', 6'-tri-N-benzyloxycarbonyl-3 "-N-formyltobramycin obtained in the step (b) dissolved in 3 ml of water-tetrahydrofuran (1: 3) The solution of monoformate is mixed with 12 mg of anhydrous sodium carbonate, and then 40 mg of (L) -4-benzyloxycarbonylamino-2-aminohydroxybutyric acid N-hydroxysuccinimide ester is added. After standing at ambient temperature for 10 hours, the reaction solution formed was concentrated in small amounts and mixed with water to precipitate a solid.

고체물 2ml의 10%의 수성 과산화수소에 현탁시키고, 현탁액을 60℃에서 3시간 교반시킨 다음, 여과하여 디-N-포르밀 유도체로 된 고체잔유물을 얻는다. 고체잔유물을 8ml의 물-디옥산( 1 : 3)에 용해시키고, 용액을소량의 초산을 첨가하여 약산으로 만든 다음, 팔라듈브랙촉매상에서 대기압하에 1.5시간 수소첨가분해시킨다. 반응용액을 실시예 40(c)에서와 같이 처리하고 CM-새파덱스 C-25컬럼을 통과시킨 다음, 이를 0→1N 수성 암모니아로 경사전개시킨다. 원하는 생성물을 함유하는 유분을 혼합하고 농축건조시키면 67mg(수율 87%)의 상기 본 화합물 디카보네이트 디히드레이트를 얻는다.Suspension is suspended in 2 ml of 10% aqueous hydrogen peroxide, the suspension is stirred at 60 ° C. for 3 hours, and then filtered to give a solid residue of di-N-formyl derivative. The solid residue is dissolved in 8 ml of water-dioxane (1: 3), the solution is made weakly by the addition of a small amount of acetic acid and then hydrocracked under atmospheric pressure on a palladulac catalyst over 1.5 hours. The reaction solution is treated as in Example 40 (c) and passed through a CM-safadex C-25 column, which is then decanted with 0 → 1N aqueous ammonia. The oil containing the desired product is mixed and concentrated to dryness to yield 67 mg (87% yield) of the present compound dicarbonate dihydrate.

+78°(cl, 물)

+ 78 ° (cl, water)

본 생성물은 기준 생성물과 일치한다.This product is consistent with the reference product.

[실시예 44]Example 44

1-N-(L-4-아미노-2-히드록시카르보닐)디베카신의 합성Synthesis of 1-N- (L-4-amino-2-hydroxycarbonyl) divecasin

(a)3, 2', 6'-트리-N-벤질옥시카르보닐디베카신의 제조(a) Preparation of 3, 2 ', 6'-tri-N-benzyloxycarbonyldibecasin

600ml(1.33m몰)의 디베카신(유리염기)을 교반하여 15ml의 디메틸설폭사이드와 혼합하고, 용액을 교반하여 1.4g(6.4m몰)의 초산아연 이수화물과 혼합하고, 이 용액에 12ml의 디메틸설폭사이드에 용해시킨 1.1g(4.4m몰)의 N-벤질옥시카르보닐옥시석신이미드의 용액을 1시간에 걸쳐 적가하고, 혼합물을 실온에서 1야 방치한 다음, 생성된 반응용액을 다량의 에틸 에테르와 혼합하면 주로 원하는 생성물과 소량의 디메틸설폭사이드로된 오일상의 침전물을 얻는다. 생성된 오일상의 침전물을 상부액체상과 분리하고 에틸에테르로 디 새척하면 시럽상 생성물을 얻는다.600 ml (1.33 mmol) dibecasin (free base) is stirred and mixed with 15 ml of dimethyl sulfoxide, the solution is stirred and mixed with 1.4 g (6.4 mmol) zinc acetate dihydrate, and 12 ml is added to this solution. A solution of 1.1 g (4.4 mmol) of N-benzyloxycarbonyloxysuccinimide dissolved in dimethyl sulfoxide was added dropwise over 1 hour, and the mixture was allowed to stand at room temperature for 1 night. Mixing with a large amount of ethyl ether gives an oily precipitate of mainly the desired product and a small amount of dimethylsulfoxide. The resulting oily precipitate is separated from the upper liquid phase and diwashed with ethyl ether to give a syrupy product.

시럽상 생성물은 물로 반복새척하고, 이물과의 처리로 초기에 존재하는 과잉의 초산아연을 제거하고 또한 N-벤질옥시카르보닐화된 아연착화합물을 분해시켜 1.1g의 물에 불용인 고체잔유물을 얻는다. 이 고체는 전개용매인 클로로포름-메타놀-18% 수성 암모니아(용량으로 1 : 1 : 1)의 저부상으로 전개시킨 시리카겐 틴 레이어크로마토그라피에서 R_F0.13에서의 단일 스포트를 나타내며, 이는 미량의 아연과 함께 거의 순수한 3, 2', 6'-트리-N-벤질옥시카르보닐-디베카신으로 구성된다.The syrup phase product is repeatedly washed with water and treated with a foreign body to remove excess zinc acetate initially present and also to decompose the N-benzyloxycarbonylated zinc complex to obtain a solid residue insoluble in 1.1 g of water. . This solid shows a single spot at R _F 0.13 in the silica gel tin layer chromatography developed at the bottom of the developing solvent chloroform-methanol-18% aqueous ammonia (1: 1: 1 by volume), which is a trace of zinc. Together with nearly pure 3, 2 ', 6'-tri-N-benzyloxycarbonyl-divecasin.

+71°(cl, 물-디메틸포름아미드, 1 : 2).

+ 71 ° (cl, water-dimethylformamide, 1: 2).

그러나 고체물 3N수성 암모니아 용액으로 세척하면, 아연 양이온의 오염의 없는 순수한 생성물을 얻는다.However, washing with solid 3N aqueous ammonia solution gives a pure product free of contamination of zinc cations.

(b)3, 2', 6'-트리-N-벤질옥시카르보닐-3"-N-트리플루오로아세틸디베카신 트리플루오로아세테이트의 제조.(b) Preparation of 3, 2 ', 6'-tri-N-benzyloxycarbonyl-3 "-N-trifluoroacetyldibecasin trifluoroacetate.

상기 공정(a)의 생성물을 실시예 27에서와 같이 처리하여 제목 화합물을 얻는다.The product of step (a) was treated as in Example 27 to yield the title compound.

(c) 1-N-(L-4-아미노-2-히드록시부티릴)디베카신의 제조(c) Preparation of 1-N- (L-4-amino-2-hydroxybutyryl) dibecasin

5ml의 물-테트라하이드로푸란(1 : 3)에 용해시킨 상기 공정(b)에서 얻은 170mg의 3, 2', 6'-트리-N-벤질옥시카르보닐-3"-N-트리플루오로아세틸디베카신 트리플루오로 아세테이트의 용액을 18mg의 무수탄산나트륨과 혼합한 다음, 60mg의 (S)-4-벤질옥시카르보닐아미노-2-히드록시부티르산의 N-히드록시석신이미드 에스테르를 첨가한하고, 혼합물을 주위온도에서 9시간 방치한한다. 반응용액을 작게농축하여 물과 혼합하면 고체가 침전된다.170 mg of 3, 2 ', 6'-tri-N-benzyloxycarbonyl-3 "-N-trifluoroacetyl obtained in the step (b) dissolved in 5 ml of water-tetrahydrofuran (1: 3) A solution of dibecasin trifluoro acetate was mixed with 18 mg of sodium carbonate anhydrous, followed by the addition of 60 mg of N-hydroxysuccinimide ester of (S) -4-benzyloxycarbonylamino-2-hydroxybutyric acid The mixture is left for 9 hours at ambient temperature, and the reaction solution is concentrated in small amounts to mix with water to precipitate a solid.

상기 고체물 12ml의 4N수성 암모니아테-트라하이드로푸란(1 : 3)과 혼합하고, 혼합물을 주위온도에서 1야 방치한다. 반응용액을 농축건조하여 얻은 잔유고체를 12ml의 물-디옥산(1 : 3)에 용해시키고 용액을 소량의 초산을 첨가하여 약산성으로 한 다음, 팔라듐 브랙상에서 대기압하에 1.5시간 수소첨가분해시킨다. 반응용액을 실시예 43(c)에서와 같은 방법으로 처리하면 96mg(수율 89%)본 화합물 디카보네이트를 얻는다.12 ml of the solid was mixed with 4N aqueous ammonia tetra-furanfuran (1: 3), and the mixture was left at ambient temperature for 1 night. The reaction solution was concentrated to dryness, and the remaining solid was dissolved in 12 ml of water-dioxane (1: 3), the solution was made slightly weak by addition of a small amount of acetic acid, and then hydrocracked under atmospheric pressure on palladium black for 1.5 hours. The reaction solution was treated in the same manner as in Example 43 (c) to give 96 mg (yield 89%) of this compound dicarbonate.

+86°(co,23 물)

+ 86 ° (co, 23 water)

이 생성물의 약리적 성질 및 항균적 활성도는 기준시료[Joural of Ahtibiotics Vol.26, p412(1973)]과 일치한다.The pharmacological properties and antimicrobial activity of this product are consistent with the reference sample (Joural of Ahtibiotics Vol. 26, p412 (1973)).

[실시예 45]Example 45

1-N-(DL-3-아미노-2-히드록시카르보닐)디베카신, 즉 1-N-DL-이소세린디베카신의 제조Preparation of 1-N- (DL-3-amino-2-hydroxycarbonyl) dibecasin, i.e. 1-N-DL-isoseredibecasin

5ml의 물-테트라하이드로푸란(1 : 3)에 용해시킨 실시예 27의 150mg의 3, 2', 6'-트리-N-벤질옥시카르보닐-3"-N-트리플루오로아세틸 디베카신 용액을 16mg의 무수탄산나트륨과 혼합한 다음, 51mg의 DL-3-벤질옥시카르보닐아미노-2-히드록시부티르산의 N-히드록시석신이미드에스테르(즉 DL-3-벤질옥시카르보닐이소세린)를 첨가한다. 혼합물을 주위온도에서 10시간 방치한 다음, 반응용액을 실시예 44(c)에서와 같은 방법으로 처리하면 82mg(수율 88%)의 본화합물의 디카보네이트를 얻는다.150 mg of 3, 2 ', 6'-tri-N-benzyloxycarbonyl-3 "-N-trifluoroacetyl dibecacin of Example 27 dissolved in 5 ml of water-tetrahydrofuran (1: 3) The solution was mixed with 16 mg of anhydrous sodium carbonate and then 51 mg of N-hydroxysuccinimide ester of DL-3-benzyloxycarbonylamino-2-hydroxybutyric acid (ie DL-3-benzyloxycarbonylisoserine) The mixture was left at ambient temperature for 10 hours and then treated with the same method as in Example 44 (c) to give 82 mg (yield 88%) of dicarbonate of the present compound.

+82°(cl, 물)

+ 82 ° (cl, water)

이 생성물의 약리적성질 및 항균적 활성도는 기준시료와 동일함이 발견되었다.The pharmacological and antimicrobial activity of this product was found to be the same as the reference sample.

[실시예 46]Example 46

1-N-(DL-4-아미노-2-히드록시부티릴)디베카신의 합성Synthesis of 1-N- (DL-4-amino-2-hydroxybutyryl) dibecasin

(a)3, 2', 6'-트리-N-P-메톡시벤질옥시카르보닐디베카신의 제조(a) Preparation of 3, 2 ', 6'-tri-N-P-methoxybenzyloxycarbonyldibecasin

500ml(1.11m몰)의 디베카신(유리염기)를 15ml의 디메틸설폭사이드내에 현탁시키고, 현탁액을 교반하여 용액으로 만든 다음, 용액에 교반하여 1.2g(5.5m몰)의 초산아연 이수화물을 첨가하고, 생성된 용액에 10ml의 디메틸설폭사이드에 용해시킨 1.17g(3.86m몰)의 p-메톡시카르보벤조옥시 p-니트로페닐에스테르용액을 30분간에 걸쳐 적가한 후, 혼합물을 실온에서 1야 방치한다. 생성된용액을 실시예 44(a)에서 기술된 방법으로 처리하면 893mg(수율 85%)본 화합물을 얻는다.500 ml (1.11 mmol) of dibecasin (free base) are suspended in 15 ml of dimethylsulfoxide, the suspension is stirred into a solution, and then stirred in the solution to give 1.2 g (5.5 mmol) of zinc acetate dihydrate. To the resulting solution, 1.17 g (3.86 mmol) of p-methoxycarbobenzooxy p-nitrophenyl ester solution dissolved in 10 ml of dimethyl sulfoxide was added dropwise over 30 minutes, and the mixture was then stirred at room temperature. One night left. The resulting solution was treated by the method described in Example 44 (a) to give 893 mg (85% yield) of this compound.

+69°(cl, 물-디메틸포름아미트드, 1 : 2).

+ 69 ° (cl, water-dimethylformamide, 1: 2).

(b)3, 2', 6'-리메-N-p-톡시벤질옥시카르보닐-3"-N-트리플루오로아세틸디베카신 트리플루오로아세테이트의 제조.(b) Preparation of 3, 2 ', 6'-lime-N-p-oxybenzyloxycarbonyl-3 "-N-trifluoroacetyldibecasin trifluoroacetate.

2ml의 디메틸설폭사이드에 용해시킨 160mg의 3, 2', 6'-트리-N-p-메톡시벤질옥시카르보닐디베카신의 용액 N 48mg의 에틸트리플루오로 아세테이트와 혼합하고, 혼합물을 실시예 1에서와 같은 방법으로 처리하면 188mg(수율 96%)의 본 화합물을 얻는다.A solution of 160 mg of 3, 2 ', 6'-tri-Np-methoxybenzyloxycarbonyldibecasin N dissolved in 2 ml of dimethyl sulfoxide was mixed with 48 mg of ethyltrifluoro acetate and the mixture was prepared in Example 1 Treated in the same manner as 188 mg (96% yield) of the present compound.

+58°(cl, 물-디메틸포름아미드, 1 : 2).

+ 58 ° (cl, water-dimethylformamide, 1: 2).

(c) 1-N-(L-4-아미노-2-히드록시부틸)디베카신의 제조(c) Preparation of 1-N- (L-4-amino-2-hydroxybutyl) dibecasin

5ml의 물-테트라하이드로푸란(1 : 3)에 용해시킨 상기 단계(b)에서 얻은 150mg의 3, 2', 6'-트리-N-p-메톡시벤질옥시카르보닐-3"-N-트리플루오로아세틸디베카신 트리플루오로 아세테이트의 용액을 14mg의 무수탄산 나트륨과 혼합한후, 54mg의 (S)-4-(p-메톡시벤질옥시카르보닐)아미노-2-히드록시부티르산의 N-히드록시석신이미드 에스테르를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 8시간 방치한다. 반응용액을 작게 농축하고 물과 혼합하면 고체가 침전한다.150 mg of 3, 2 ', 6'-tri-Np-methoxybenzyloxycarbonyl-3 "-N-trifluoro obtained in step (b) dissolved in 5 ml of water-tetrahydrofuran (1: 3) A solution of roacetyldibecasin trifluoro acetate was mixed with 14 mg of anhydrous sodium carbonate and then 54 mg of (S) -4- (p-methoxybenzyloxycarbonyl) amino-2-hydroxybutyric acid N- Hydroxysuccinimide ester is added and the mixture is left for 8 hours at room temperature The reaction solution is concentrated small and mixed with water to precipitate a solid.

상기 고체에 수성 메타놀에 용해한 1N 염산(1 : 3)(6 ml)용액을 첨가하고, 혼합물을 60℃에서 4시간 가열하여 p-메톡시벤질옥시카르보닐기를 제거한다. 용액을 작게농축하고, 농축액에 용액이 pH0이 될때까지 5N 수성암모니아를 첨가한다. 용액을 실온에서 1야 방치하고 용액을 농축하면 잔유물이 남는다. 얻은 잔유물을 물에 용해시키고 용액을 물로 충분히 세척한 CM-세파텍스 C-25(NH₄ ⁺형태)의 컬럼상에 채운 다음, 0→1N 수성암모니아로 경사전개시킨다. 원하는 생성물을 함유하는 유분을 혼합하고 농축건조하면 77mg(수율 87%) 본 본화합물의 디카보네이트를 얻는다.To the solid was added 1N hydrochloric acid (1: 3) (6 ml) solution dissolved in aqueous methanol, and the mixture was heated at 60 ° C for 4 hours to remove the p-methoxybenzyloxycarbonyl group. Concentrate the solution small and add 5N aqueous ammonia to the concentrate until the solution is at pH0. The solution is left at room temperature for one night and the solution is concentrated, leaving a residue. The resulting residue is dissolved in water and the solution is filled on a column of CM-Sephatex C-25 (NH ₄ ⁺ form) washed with water and then decanted into 0 → 1N aqueous ammonia. The oil containing the desired product is mixed and concentrated to dryness to give 77 mg (yield 87%) of the dicarbonate of the present compound.

+85°(cl, 물)

+ 85 ° (cl, water)

Claims (1)

데옥시스트넵토아민 부분의 1-아미노기는 보호되지 않으나 아미노-글리코사이드 분자에서 다른 모든 아미노기는 같거나 다른 아실기로 보호된 4-0-(아미노글리코신)을 갖는 6-0-(3"-아미노-또는 3"-알킬아미노-3"-데옥시글리코신)-2-데옥시스트렙토아민 부분으로 이루어진 아미노글리코사이드 항생제의 선택적으로 보호된 N-아실화 유도체의 제조방법에 있어서, 아실화제인 다음 일반식(Ⅷ)의 알카노산에스테르:The 1-amino group of the deoxystnetoamine moiety is not protected, but all other amino groups in the amino-glycoside molecule have 6-0- (3 "-with 4-0- (aminoglycosine) protected with the same or different acyl groups. A process for preparing an optionally protected N-acylated derivative of an aminoglycoside antibiotic consisting of an amino- or 3 "-alkylamino-3" -deoxyglycosine) -2-deoxystreptoamine moiety, which is an acylating agent. Alkanoic acid esters of the general formula:

(상기식에서 R^a는 수소원자 또는 1-6개의 탄소원자를 갖는 디할로알킬 또는 트리할로알킬기이고, R^b는 1-6개의 탄소원자를 갖는 알킬옥시기, 알알킬옥시기, 특히 벤질옥시기, 또는 아릴옥시기 특히 페닐옥시기이다) 또는 N-포르밀이미다졸, N-아세틸이미다졸을 30분내지 24시간 동안 30°∼120℃의 온도, 주위온도에서 불활성 유기용매하에 1-아미노와 3"-아미노 또는 3"-알킬아미노기는 보호되지 않으나 다른 모든 아미노기는 아미노 보호기인 아실기로 보호된 아미노글리코사이드 항생제의 부분적으로 보호된 N-아실화 유도체와 반응시켜서, 부분적으로 보호된 N-아실화 유도체의 3"-아미노 또는 3"-알킬아미노기를 상기 아실화제인 아실기 R⁶CO-와 선택적으로 아실화하므로서, 아미노 글리코사이드 항생제의 1-N는 보호되지 않으나 다른 N-는 모두 보호되는 원하는 유도체를 제조함을 특징으로 하는 상기 제조방법.(Wherein R ^a is a hydrogen atom or a dihaloalkyl or trihaloalkyl group having 1-6 carbon atoms, R ^b is an alkyloxy group, an alalkyloxy group, especially a benzyloxy group, having 1-6 carbon atoms, Or an aryloxy group, in particular a phenyloxy group) or N-formylimidazole, N-acetylimidazole for 1 minute to 30 minutes to 24 hours under an inert organic solvent at a temperature of 30 ° to 120 ° C at ambient temperature. And the 3 "-amino or 3" -alkylamino group is unprotected but all other amino groups are reacted with partially protected N-acylated derivatives of aminoglycoside antibiotics protected with acyl groups which are amino protecting groups, partially protected N- By selectively acylating the 3 "-amino or 3" -alkylamino group of the acylated derivative with the acylating agent acyl group R ⁶ CO-, 1-N of the amino glycoside antibiotic is not protected but all other N- are protected. Being circle The preparation method, characterized in that to prepare a derivative.