KR810000584B1 - Process for preparing nucleosides - Google Patents

Abstract

5'-Deoxy-5-fluorocytidine(I) and -uridine and their acid addn. salts, useful as antitumor agents, were prepd. from 5-fluorocytidine and 5-fluorouridine, resp. Thus, 5-fluorocytidine was treated with Me2C(OMe)2, the 2',3'-protected nucleoside was iodinated with tri-Ph phosphite methiodide, and the resultant 5'-deoxy-5'-iodo deriv. was catalytically hydrogenated and then deprotected to give I. I at a dose of 400 mg/kg, i.p., inhibited the growth of Sarcoma 180 in mice by 95%.

Description

뉴클레오시드의 제조방법Method for preparing nucleoside

본 발명은 효력있는 항종양제로 유효한 신규의 피리미딘 뉴클레오시드 특히 5'-데옥시-5-플루오로시티딘, 5'-데옥시-5-플루오로우리딘 및 그 산부가염의 제약학적 제조방법에 관한 것이다.The present invention provides pharmaceutical preparations of novel pyrimidine nucleosides, particularly 5'-deoxy-5-fluorocytidine, 5'-deoxy-5-fluorouridine and acid addition salts thereof, which are effective as potent antitumor agents. It is about a method.

본 발명의 화합물은 시티딘 또는 우리딘을 대응하는 5'-데옥시 화합물로 전환시키는 통상의 방법과 유사한 과정에 의해 각각 5-플루오로시티딘 또는 5-플루오로우리딘으로부터 출발하여 쉽게 제조된다. 예를들어 출발 뉴클레오시드는 5'-위치에서 직접 할로겐화하거나 또는 더 바람직하게 고정적 보호그룹을 사용하여 2', 3'-디하이드록시 그룹을 케탈화한 후 5'-위치에서 할로겐화한다. 생성된 5'-할로 화합물을 촉매적 수소화 반응 또는 복합 금속 수화물과 같은 환원제에 의해 케탈화반응을 하지 않을 경우의 최종 생성물인 5'-데옥시 화합물로 환원한다. 케탈화반응, 즉 보호 그룹을 사용하였을 경우, 상기의 그룹은 5'-데옥시 최종 생성물을 수득하기 위해 통상의 방법으로 가수 분해하여 제거한다. 마지막으로 5'-데옥시-5-플루오로시티딘 및 5'-데옥시-5-플루오로우리딘은 통상의 방법에 따라 제약학적으로 허용되는 산과 반응하여 제약학적으로 허용되는 염을 생성한다.Compounds of the present invention are readily prepared starting from 5-fluorocytidine or 5-fluorouridine, respectively, by procedures analogous to conventional methods for converting cytidine or uridine to the corresponding 5'-deoxy compound. . For example, starting nucleosides are halogenated directly at the 5'-position or more preferably using a fixed protecting group to ketalize the 2 ', 3'-dihydroxy group and then halogenated at the 5'-position. The resulting 5'-halo compound is reduced to the 5'-deoxy compound, which is the final product in the absence of ketalization by a catalytic hydrogenation or a reducing agent such as a complex metal hydrate. If a ketalization reaction, ie a protecting group is used, the group is hydrolyzed and removed by conventional means to obtain a 5'-deoxy final product. Finally, 5'-deoxy-5-fluorocytidine and 5'-deoxy-5-fluorouridine react with pharmaceutically acceptable acids according to conventional methods to produce pharmaceutically acceptable salts. .

＂제약학적으로 허용되는 염＂은 무기물산 및 염화수소, 취화수소, 인산염, 황산염, 질산염, 아세테이트, 포르메이트, 말리에이트, 푸마레이트 또는 벤조에이트와 같은 유기산으로 구성되는 그룹으로부터 얻은 산으로 형성된 무독성염을 의미한다.`` Pharmaceutically acceptable salts '' are non-toxic salts formed from inorganic acids and acids obtained from the group consisting of organic acids such as hydrogen chloride, hydrogen sulfide, phosphates, sulfates, nitrates, acetates, formate, maleate, fumarate or benzoate Means.

바람직한 2', 3'-하이드록시-보호그룹은 아니실리덴, 사이클로헥실리덴, 메톡시메틸리덴 또는 가장 바람직하게 이소프로필리덴 또는 벤질리덴그룹들로 더 치환된 알킬리덴, 사이클로알킬리덴 및 아르알킬리덴그룹이다.Preferred 2 ', 3'-hydroxy-protecting groups are alkylidene, cycloalkylidene and arylidene, cyclohexylidene, methoxymethylidene or most preferably further substituted with isopropylidene or benzylidene groups Alkylidene group.

5-플루오로시티딘 또는 5-플루오로우리딘이 2', 3'-디하이드록시보호 케탈 형태로 전환되는 반응은 통상의 과정을 사용하여 진행된다. 그중 바람직한 것은 플루오로뉴클레오시드를 P-톨루엔설폰산과 같은 유기설폰산 및 아세톤과 같은 케톤 용매의 적절한 유기 용매에 용해한 2,2-디메톡시프로판과 같은 케탈화제로 처리하는 것이다. 반응은 0 내지 60℃사이의 온도에서, 가장 바람직하게는 실온에서 진행된다.The reaction in which 5-fluorocytidine or 5-fluorouridine is converted to the 2 ', 3'-dihydroxyprotected ketal form is carried out using conventional procedures. Preferred among them is the treatment of fluoronucleosides with a ketalizing agent such as 2,2-dimethoxypropane dissolved in an appropriate organic solvent of an organic sulfonic acid such as P-toluenesulfonic acid and a ketone solvent such as acetone. The reaction proceeds at a temperature between 0 and 60 ° C., most preferably at room temperature.

5'-할로 치환체의 도입은 5-플루오로뉴클레오시드, 바람직하게 상기로 제조된 2',3'-디하이드록시-보호화합물을 출발물질로 하여 실시된다. 본 발명의 목적에 바람직한 할로겐은 요오드 및 브로모이다. 예를들어 요오드 그룹은 원하는 물질 화합물이 0내지 100℃사이의 온도, 가장 바람직하게 실온에서 디메틸포름아미드(DMF)와 같은 극성 비-프로틱 유기용매로 처리한 트리페닐포스파이트 메티오디드와 같은 적절한 요오드화제와 반응하여 도입된다.The introduction of the 5'-halo substituents is carried out using a 5-fluoronucleoside, preferably the 2 ', 3'-dihydroxy-protecting compound prepared above as starting material. Preferred halogens for the purposes of the present invention are iodine and bromo. For example, the iodine group is suitable for the desired material compound, such as triphenylphosphite methoxide, treated with a polar non-protic organic solvent such as dimethylformamide (DMF) at a temperature between 0 and 100 ° C., most preferably at room temperature. It is introduced by reaction with an iodinating agent.

5'-브로모 그룹의 도입은 트리페닐포핀과 4 취화 탄소의 혼합물과 같이 적절한 브롬화제를 사용하여 성취된다. 브롬화반응은 10 내지 100℃의 온도에서 DMF와 같은 이극성 아프로틱 용매에서 진행된다.Introduction of the 5'-bromo group is accomplished using a suitable brominating agent such as a mixture of triphenylphosphine and tetraglycol carbon. The bromination reaction proceeds in a bipolar aprotic solvent such as DMF at a temperature of 10-100 ° C.

상기에 지적된 대로 제조된 5'-할로 중간체의 매질을 대응하는 5'-데옥시 화합물로 전환시키는 반응은 탄소상의 팔라듐, 황산 바륨상의 팔라듐, 팔라듐, 니켈들의 귀금속 촉매를 사용하여 알코올, 바람직하게 메탄올과 같은 프로톤성 극성 용매내에서 촉매적 수소화 반응에 의해 쉽게 성취될 수 있다. 반응은 0 내지 60℃의 온도에서 바람직하게 실온에서 및 1내지 5atm의 압력으로, 가장 바람직하게는 대기압하에서 진행되고 유기염기 바람직하게 트리에틸아민과 같은 트리-저급 알킬아민의 존재하에서 진행된다.The reaction for converting the medium of the 5'-halo intermediate prepared as indicated above to the corresponding 5'-deoxy compound is carried out using alcohol, preferably using a noble metal catalyst of palladium on carbon, palladium on barium sulfate, palladium, nickel It can be easily accomplished by catalytic hydrogenation in protic polar solvents such as methanol. The reaction proceeds at a temperature of 0 to 60 ° C., preferably at room temperature and at a pressure of 1 to 5 atm, most preferably under atmospheric pressure and in the presence of an organic base, preferably tri-lower alkylamine, such as triethylamine.

5'-할로 화합물은 대응 5'-데옥시 화합물로 전환하는데 사용되는 다른 적절한 환원제는 트리부틸 주석수화물, 나트륨 시아노보로하이드라이드 또는 리튬 트리에틸보로하이드라이드와 같은 복합금속 수화물들이다. 0 내지 100℃사이의 온도에서 각 언급된 제제에 대한 적절한 용매로 통상의 기술로써 진행된다.Other suitable reducing agents used to convert the 5'-halo compound to the corresponding 5'-deoxy compound are complex metal hydrates such as tributyl tin hydrate, sodium cyanoborohydride or lithium triethylborohydride. Proceed by conventional techniques with the appropriate solvent for each of the mentioned formulations at temperatures between 0 and 100 ° C.

케탈보호 그룹이 존재하는 경우 그 그룹은 통상적 기술의 방법으로 가수분해하여 쉽게 제거된다.If a ketalprotecting group is present, the group is easily removed by hydrolysis by conventional techniques.

예를들어 이소프로필리덴 그룹은 실온에서 트리플루오로 아세트산으로 처리하여 분리된다.For example, isopropylidene groups are separated by treatment with trifluoro acetic acid at room temperature.

본 발명은 상기의 과정에 따라 생성된 신규의 중간 매질인 5'-데옥시-2',3'-0-이소프로필리덴-5-플루오로시티딘 및 5'-데옥시-2',3'-0-이소프로필리덴-5-플루오로우리딘을 포함한다.The present invention provides novel intermediate media 5'-deoxy-2 ', 3'-0-isopropylidene-5-fluorocytidine and 5'-deoxy-2', 3 produced according to the above process. '-0-isopropylidene-5-fluorouridine.

5'-데옥시-5-플루오로시티딘, 5'-데옥시-5-플루오로우리딘 및 그것들의 제약학적으로 허용되는 산부가염은 새앙쥐에게 경구 및 비경구로 많은 양 투여하여 에르리히암 및 육종 180에 대항하는 활성을 나타내며 항종양제로써 유용하다. 그것들은 또한 활성 성분을 직접 또는 뒤늦게 방출하고 혼화성인 조제학적 담체물질과 함께 함유되어 있는 조제학적 제제형태의 약물로써 사용된다.5'-deoxy-5-fluorocytidine, 5'-deoxy-5-fluorouridine and their pharmaceutically acceptable acid addition salts can be administered orally and parenterally to chicks in Erlich and It has activity against sarcoma 180 and is useful as an antitumor agent. They are also used as medicaments in the form of pharmaceutical preparations which release the active ingredient directly or later and which are contained together with a compatible carrier.

이 담체물질은 장내로, 경피내로 또는 비경구 투여에 적절한 유기 또는 무기 비활성 담체물질 즉, 물, 젤라틴, 아라비아고무 젖산, 전분, 마그네슘 스테아르산염, 활석, 식물유, 폴리알킬렌글리콜, 석유 젤리등이다.The carrier material is an organic or inorganic inert carrier material suitable for enteral, transdermal or parenteral administration, namely water, gelatin, gum arabic lactic acid, starch, magnesium stearate, talc, vegetable oil, polyalkylene glycol, petroleum jelly, etc. .

조제학적 제제는 고체상(예 : 정제, 당제, 좌약 또는 캅셀), 반 고체상(연고) 또는 액상(용액, 현탁액 또는 유탁액)으로 제조되며 또한 살균되고 및/또는 방부제, 안정제, 경화제 또는 유화제와 같은 보조약, 향미증가제, 여러 삼투압에 대한 염 또는 완충액으로 각용하는 물질들을 포함한다. 조제학적 제제는 통상의 방법에 따라 제조된다.Pharmaceutical formulations are prepared in solid phase (e.g. tablets, sugars, suppositories or capsules), semi-solid phase (ointments) or liquid (solutions, suspensions or emulsions) and are also sterilized and / or preservatives, stabilizers, curing agents or emulsifiers Adjuvant, flavor enhancer, salts or buffers for various osmotic pressures. Pharmaceutical formulations are prepared according to conventional methods.

[항종양실험]Antitumor Experiment

화합물을 동물에 투여하기 위해 물에 용해시킨다.The compound is dissolved in water for administration to the animal.

[육종 180 실험][180 breeding experiments]

종양의 작은 부분(20 내지 30mg)을 18 내지 20g의 흰쥐의 오른쪽 사타구니에 투관침에 의해 피하로 주사한다. 7 내지 10일전의 피하주사로 형성된 종양의 공여체로부터 작은 획분을 수득한다. 주사한 날로부터 처리하기 시작하여 하루에 8 차례의 처리를 계속한다. 동물을 주사한 후 8일간 방치하고 종양을 떼내어 무게를 잰다. 처리되지 않은 조절그룹(C)으로부터 얻은 종양의 평균무게를 처리된 그룹(T)으로부터 얻은 종양의 평균 무게로 나눈 비율을 계산해낸다. 종양 증가율의 방해 백분율을 다음의 공식으로부터 계산해낸다.A small portion of the tumor (20-30 mg) is injected subcutaneously by trocar into the right groin of 18-20 g of rats. Small fractions are obtained from the donor of the tumor formed by subcutaneous injection 7-10 days ago. Processing starts from the day of injection and continues eight times a day. The animals are left for 8 days after injection and the tumor is removed and weighed. The ratio of the average weight of tumors from untreated control group (C) divided by the average weight of tumors from treated group (T) is calculated. The percentage disturbance of tumor growth rate is calculated from the following formula.

방해 백분율이 50%이상인 경우, 화합물은 특별한 투여량에 대해 활성적으로 나타난다.If the percentage of interference is greater than 50%, the compound appears active for the particular dose.

[에르리히 암 실험][Errich Cancer Experiment]

7 내지 10일전에 주사한 공여체인 18 내지 20g의 흰쥐로부터 유도되고 1 내지 10 식염으로 희석한 복수중 종량세포 현탁액 0.5ml를 피하주사하여 고상의 종양을 얻는다. 처리 및 측정 과정을 육종 180 실험에서 사용된 방식과 동일하게 행한다.Solid tumors are obtained by subcutaneous injection of 0.5 ml of a multi-modal cell suspension derived from 18-20 g of rats injected 7-10 days prior and diluted with 1-10 saline. The treatment and measurement procedures are performed in the same manner as used in the breeding 180 experiment.

실험에서 얻어진 결과, 본 발명 유용한 화합물 및 전기술의 대표적 화합물이 다음표 1에 요약되어 있다.As a result of the experiments, compounds useful in the present invention and representative compounds of the prior art are summarized in Table 1 below.

[표 1]TABLE 1

새앙쥐에서 육종 180종양에 대항하는 피리미딘 뉴클레오시드의 효과Effect of pyrimidine nucleosides against 180 sarcomas in piglets

[표 2]TABLE 2

새앙쥐에서 에르리히 암에 대항하는 피리미딘 뉴클레오시드의 효과Effect of pyrimidine nucleosides against Erlich cancer in piglets

[실시예 1]Example 1

아세톤(1500ml) 및 2,2-디메톡시프로판(200ml)에 현탁한 5-플루오로시티딘(92g) 및 P-톨루엔 설폰산 모노하이드레이트(80g)의 현탁액을 실온에서 2시간 동안 교반한다. 과량의 고체인 이탄산 나트륨을 가하고 그 혼합물을 산성이 완전히 중화될 때까지 교반한다. 고체를 여과한 후 아세톤으로 세척하고 그 여액 및 세척액을 증발하여 건조한다. 잔사를 가열한 에틸 아세테이트(700ml)로 잘게 처리한 후 천천히 재결정한다. 밤새 저장한 후 고체를 수집하고 에틸 아세테이트로 세척한 다음 진공에서 건조시킨다.A suspension of 5-fluorocytidine (92 g) and P-toluene sulfonic acid monohydrate (80 g) suspended in acetone (1500 ml) and 2,2-dimethoxypropane (200 ml) is stirred at room temperature for 2 hours. Excess solid sodium bicarbonate is added and the mixture is stirred until the acid is completely neutralized. The solid is filtered off, washed with acetone and the filtrate and washings are evaporated to dryness. The residue is triturated with heated ethyl acetate (700 ml) and slowly recrystallized. After overnight storage, the solids are collected, washed with ethyl acetate and dried in vacuo.

99.5g(94%)의 2',3'-0-이소프로필리덴-5-플루오로시티딘을 수득한다. 화합물을 메탄올/에틸 아세테이트로 부터 재결정한다. 융점 182 내지 184℃99.5 g (94%) of 2 ', 3'-0-isopropylidene-5-fluorocytidine are obtained. The compound is recrystallized from methanol / ethyl acetate. Melting Point 182-184 ° C

디메틸 포름아미드(DMF, 300ml, 건조)에 용해한 2',3'-0-이소프로필리덴-5-플루오로시티딘(32g) 및 트리페닐 포스파이트 메티오디드(60g)의 용액을 실온에서 1.5시간 동안 저장한다. 메탄올(100ml)을 가하고 30분후 용액을 증발시켜 유상으로 하고 에틸 아세테이트(700ml)와 수성나트늄 티오설페이트(5%, 700ml)사이에서 분배한다. 에틸 아세테이트층을 수성 티오설페이트(700ml)로 한번, 물(700ml)로 두번 세척하고 증발하여 유상으로 한다.A solution of 2 ', 3'-0-isopropylidene-5-fluorocytidine (32 g) and triphenyl phosphite methoxide (60 g) dissolved in dimethyl formamide (DMF, 300 ml, dried) was 1.5 hours at room temperature. To save. Methanol (100 ml) is added and after 30 minutes the solution is evaporated to oily and partitioned between ethyl acetate (700 ml) and aqueous sodium thiosulfate (5%, 700 ml). The ethyl acetate layer is washed once with aqueous thiosulfate (700 ml) and twice with water (700 ml) and evaporated to an oil phase.

이 물질을 가열한 에틸 아세테이트(400ml)에 용해시킨 후 헥산을 결정이 생성될 때까지 가열한 용액에 가한다. 0℃에서 저장한 후 결정을 수집하고 헥산으로 세척한 후 진공하에서 건조한다. 2번째 결정을 액으로부터 수득한다. 융점이 192 내지 194℃인 5'-데옥시-5'-요오드-2',3'-0-이소프로필리덴-5-플루오르시티딘을 총 30.1g(69%) 수득한다.This material is dissolved in heated ethyl acetate (400 ml) and hexane is then added to the heated solution until crystals form. After storage at 0 ° C. the crystals are collected, washed with hexane and dried under vacuum. A second crystal is obtained from the liquid. A total of 30.1 g (69%) of 5'-deoxy-5'-iodine-2 ', 3'-0-isopropylidene-5-fluorocytidine having a melting point of 192-194 ° C is obtained.

메탄올(500ml) 및 트리에틸아민(20ml)에 용해한 5'-데옥시-5'-요오도-2',3'-0-이소프로필리덴-5-플루오로시티딘(48g)을 탄소상의 팔라듐(5%,25g)의 존재하에서 30분간 대기압의 실온에서 수소로 처리한다. 그동안 현탁액을 진동기를 사용하여 진탕한다. 촉매를 샐라이트

을 통한 여과로 제거한 후 여액을 증발 건조하고 에틸 아세테이트(200ml)로 잘게 처리한다. 밤새 방치한 후 여과에 의해 결정을 제거하고 그 여액을 대략 100ml로 증발시키고 다시 밤새 저장한다. 2번째의 결정을 여과로 다시 제거하고 그 여액을 증발 건조한 후 진공하에서 펌프하여 거품상의 5'-데옥시-2',3'0-이소프로필리덴-5-플루오로시티딘 31g(93%)을 수득한다. 이 물질은 융점이 168 내지 170℃인 결정상의 피크레이트염을 생성하는 특징을 갖는다.5'-deoxy-5'-iodo-2 ', 3'-0-isopropylidene-5-fluorocytidine (48 g) dissolved in methanol (500 ml) and triethylamine (20 ml) was palladium on carbon. Treatment with hydrogen at room temperature at atmospheric pressure for 30 minutes in the presence of (5%, 25 g). Meanwhile, the suspension is shaken using a vibrator. Salite Catalyst

After removal by filtration through, the filtrate is evaporated to dryness and finely treated with ethyl acetate (200 ml). After standing overnight the crystals are removed by filtration and the filtrate is evaporated to approximately 100 ml and stored again overnight. The second crystal was removed again by filtration and the filtrate was evaporated to dryness and pumped under vacuum to give 31 g (93%) of foamy 5'-deoxy-2 ', 3'0-isopropylidene-5-fluorocytidine. To obtain. This material is characterized by producing a crystalline peakate salt having a melting point of 168 to 170 캜.

5'-데옥시-2',3'-0-데옥시이소프로필리덴-5-플루오로시티딘(31g)을 90%의 트리플루오로아세트산(200ml)로 40분간 처리한다. 용액을 증발 건조하고 계속에탄올의 부분을 증발하여 잔여의 물및 트리플루오로아세트산을 제거하고 400ml의 에틸아세테이트에 용해한다. 트리에틸아민을 알칼리성 혼합물에 가하고 수분후에 결정화를 시작한다. 밤새 저장 한후 결정을 수집하고 에틸 아세테이트로 세척하고 진공하에서 건조한다. 모액을 에틸 아세테이트(4ℓ)와 그후에 에틸아세테이트/메탄올(5 : 1, V/V 4ℓ)에서 용출하는 실리카겔컬럼(600g)으로 크로마토그래피하여 부수적 물질을 수득한다. 적절한 획분을 증발 건조하고 도웩스 50

(H⁺)컬럼(2.3×60cm)을 통과시킨다. 예비적의 물로 세척한 후 필요로 하는 물질을 수성암모니아(NI)로 용출하여 수득한다. 암모니아 획분을 증발건조하고 잔사를 에탄올로부터 재결정한다. 상기의 방법으로 부수적인 6.7g의 5'-데옥시-5-플루오로 시티딘을 수득한다. 총 수득량=20.7g(78%); 융점 209 내지 211℃(분해)5'-deoxy-2 ', 3'-0-deoxyisopropylidene-5-fluorocytidine (31 g) is treated with 90% trifluoroacetic acid (200 ml) for 40 minutes. The solution is evaporated to dryness, and the portion of ethanol is evaporated to remove residual water and trifluoroacetic acid and dissolved in 400 ml of ethyl acetate. Triethylamine is added to the alkaline mixture and crystallization begins after a few minutes. After overnight storage the crystals are collected, washed with ethyl acetate and dried in vacuo. The mother liquor is chromatographed with silica gel column (600 g) eluting with ethyl acetate (4 L) and then with ethyl acetate / methanol (5: 1, V / V 4 L) to afford ancillary material. Evaporate and dry appropriate fractions

Pass the (H ⁺ ) column (2.3 x 60 cm). After washing with preparative water the required material is obtained by eluting with aqueous ammonia (NI). The ammonia fractions are evaporated to dryness and the residue is recrystallized from ethanol. This method yields an additional 6.7 g of 5'-deoxy-5-fluoro cytidine. Total yield = 20.7 g (78%); Melting Point 209-211 ° C (Decomposition)

[실시예 2]Example 2

메탄올(30ml) 및 트리에틸아민(1ml)에 용해한 5'-데옥시-5'-요오도-5-플루오로시티딘(1.5g)을 탄소상의 팔라듐(0.75g, 10%)의 존재 및 대기압하의 실온에서 90분간 수소로 처리한다. 그동안 현탁액을 진동기를 사용하여 진탕시킨다. 촉매를 여과로 제거하고 메탄올로 세척한후 화합한 여액과 세척액을 증발 건조한 다음 물(100ml)에 용해한다. 수성 용액을 도웩스 50

(H⁺)컬럼 (2.3×30cm)에 통과시킨 후 예비의 물(1ℓ)로 세척하고 필요로 하는 물질을 수성 수산화 암모늄(2N, 2ℓ)으로 용출하여 수득한다. 암모니아 용출제를 증발 건조하고 잔사를 에탄올(2×200ml)로 함께 증발한 후 동일한 용매로 부터 결정화하여 융점이 207내지 208℃인 0.685g(67%)의 5'-데옥시-5-플루오로시티딘을 수득한다.5'-deoxy-5'-iodo-5-fluorocytidine (1.5 g) dissolved in methanol (30 ml) and triethylamine (1 ml) was present in palladium on carbon (0.75 g, 10%) and atmospheric pressure Treatment with hydrogen at room temperature for 90 minutes. Meanwhile, the suspension is shaken using a vibrator. The catalyst is removed by filtration, washed with methanol, the combined filtrate and wash are evaporated to dryness and dissolved in water (100 ml). Dowks 50 Aqueous Solution

Pass through a (H ⁺ ) column (2.3 x 30 cm), wash with preliminary water (1 L), and eluate the required material with aqueous ammonium hydroxide (2N, 2 L). The ammonia eluent was evaporated to dryness and the residue was evaporated together with ethanol (2 × 200 ml) and crystallized from the same solvent to give 0.685 g (67%) of 5'-deoxy-5-fluoro having a melting point of 207 to 208 ° C. Obtain cytidine.

다음의 두가지 다른 방법에 의해 출발 물질을 생성한다.The starting material is produced by the following two different methods.

(a) 5-플루오로시티딘으로부터 (50ml)에 용해한 5-플루오로시티딘(2.61)의 용액을 실온에서 5시간 동안 트리페닐 포스파이트 메티오디드(5.42g)으로 처리한다. 반응 혼합물을 박층크로마토그래피하면 출발물질의 존재가 나타나므로 트리페닐포스파이트 메티오디드(5.42g)의 부분을 더 가하고 반응을 70분간 더 진행시킨다. 메탄올(10ml)을 가하고 15분후 용액을 증발하여 유상으로한 다음 에틸아세테이트/메탄올(1 : 1, V/V, 3ml)에 용해한 후 실리카겔 컬럼(600g)을 통과시킨다. 컬럼을 에틸 아세테이트/메탄올(10 : 1, V/V)로 용출한 후 20ml의 획분을 수집한다. 190 내지 280ml의 획분을 결합한 후 증발하여 노란색의 고체를 얻고 물(30ml)에 다시 용해한다. 용액을 도웩스 50

(H⁺)컬럼 (2.3×40cm)에 통과시키고 예비의 물로 세척한 후 2N의 수산화암모늄으로 용출한다. 용출제를 증발시켜 200mg의 결정물질을 수득한다(5.4%) 에탄올로부터 재결정하여 융점이 (187 내지 189℃)인 정제된 물질을 수득한다.(a) A solution of 5-fluorocytidine (2.61) dissolved in (50 ml) from 5-fluorocytidine is treated with triphenyl phosphite methoxide (5.42 g) at room temperature for 5 hours. Chromatography of the reaction mixture reveals the presence of starting material, so a further portion of triphenylphosphite methoxide (5.42 g) is added and the reaction proceeds for 70 minutes. Methanol (10ml) was added and after 15 minutes, the solution was evaporated to an oil phase, dissolved in ethyl acetate / methanol (1: 1, V / V, 3ml) and passed through a silica gel column (600g). The column is eluted with ethyl acetate / methanol (10: 1, V / V) and 20 ml of fractions are collected. Combine 190-280 ml of fractions and evaporate to give a yellow solid which is dissolved again in water (30 ml). Dopes solution 50

Pass through a (H ⁺ ) column (2.3 x 40 cm), wash with preliminary water and elute with 2N ammonium hydroxide. Eluent is evaporated to yield 200 mg of crystalline material (5.4%) which is recrystallized from ethanol to give a purified material having a melting point (187-189 ° C.).

(b) 5'-데옥시-5'-요오드-2',3'-0-이소프로필리덴-5-플루오로시티리딘으로부터 트리플루오로아세트산/물 (9:1, V/V, 100ml)에 용해한 5'-데옥시-5'-요오도-2',3'-0-이소프로필리덴-5-플루오로시티딘 (20g)의 용액을 실온에서 70분간 저장한다. 용액을 증발 건조하고 에탄올(2×200ml)로 다시 증발한 후 에틸 아세테이트(200ml)에 용해시킨다. 트리에틸아민을 중성 혼액에 가하고 밤새 방치한 후 결정을 수집하고 건조시킨다. 수득량=16.8g(93%)(b) Trifluoroacetic acid / water from 5'-deoxy-5'-iodine-2 ', 3'-0-isopropylidene-5-fluorocytidine (9: 1, V / V, 100 ml) A solution of 5'-deoxy-5'-iodo-2 ', 3'-0-isopropylidene-5-fluorocytidine (20 g) dissolved in was stored at room temperature for 70 minutes. The solution is evaporated to dryness and evaporated again with ethanol (2 x 200 ml) and then dissolved in ethyl acetate (200 ml). Triethylamine is added to the neutral mixture and left overnight before crystals are collected and dried. Yield = 16.8 g (93%)

[실시예 3]Example 3

아세톤(750ml) 및 2,2-디메톡시프로판(94ml)에 녹인 5-플루오로우리딘(50g) 및 P-톨루엔 설폰산 모노하이드레이트(39.3g)의 현탁액을 실온에서 50분간 교반한다. 과량의 이탄산나트륨 고체를 투명한 용액에 가하고 혼합물을 중성이 될때까지 교반한다. 고체를 여과로 제거하고 아세톤으로 세척한 후 그 여액 및 세척액을 결합시켜 증발 건조한다. 고체 잔사를 에틸 아세테이트(2ℓ)로 부터 재결정화하여 융점이 196 내지 197℃인 2',3'-0-이소 프로필리딘-5-플루오로우리딘 48g(83%)을 수득한다.A suspension of 5-fluorouridine (50 g) and P-toluene sulfonic acid monohydrate (39.3 g) dissolved in acetone (750 ml) and 2,2-dimethoxypropane (94 ml) is stirred at room temperature for 50 minutes. Excess sodium bicarbonate solid is added to the clear solution and the mixture is stirred until neutral. The solid is removed by filtration, washed with acetone and the filtrate and wash are combined and evaporated to dryness. The solid residue is recrystallized from ethyl acetate (2 L) to give 48 g (83%) of 2 ', 3'-0-isopropylidine-5-fluorouridine having a melting point of 196-197 ° C.

DHF(250ml, 건조)에 용해한 2',3'-0-이소 프로필리딘-5-플루오로우리딘(46.4g)용액을 트리페닐 포스파이트메티오디드(86.7g)으로 처리하고 실온에서 50분간 저장한다. 메탄올(250ml)을 가하고 30분후 용액을 증발하여 유상으로 한다음 에틸 아세테이트(1ℓ)와 수성 아황산 나트륨(5%, 1ℓ)사이에서 분배한다. 에틸 아세테이트층을 물(2×1ℓ)로 세척하고 밤새 황산 나트륨으로 건조한 후 증발 건조한다. 오일을 에틸 아세테이트(350ml)로부터 결정화하여 융점이 202 내지 203℃인 5'-데옥시-5'-요오드-2',3'-0-이소프로필렌-5-플루오로우리딘 52.9g(85%)을 수득한다.A 2 ', 3'-0-isopropylidine-5-fluorouridine (46.4 g) solution dissolved in DHF (250 ml, dried) was treated with triphenyl phosphitemethoxide (86.7 g) and stored at room temperature for 50 minutes. do. Methanol (250 ml) is added and after 30 minutes the solution is evaporated to oil phase and partitioned between ethyl acetate (1 L) and aqueous sodium sulfite (5%, 1 L). The ethyl acetate layer is washed with water (2 × 1 L), dried over sodium sulfate overnight and evaporated to dryness. The oil was crystallized from ethyl acetate (350 ml) to give 52.9 g (85%) of 5'-deoxy-5'-iodine-2 ', 3'-0-isopropylene-5-fluorouridine having a melting point of 202-203 캜. ).

메탄올(800ml) 및 트리에틸아민(15ml)에 용해한 5'-데옥시-5'-요오도-2',3'-0-이소프로필리딘-5-플루오로우리딘(24g)을 탄소상의 팔라듐(12g, 5%)의 존재 및 실온의 대기압하에서 90분간 수소로 처리한다. 반응을 진동기를 사용하여 진탕시킨다. 촉매를 셀라이트

을 통한 여과로 제거한 후 메탄올로 세척하고 결합한 여액 및 세척액을 증발 건조한 다음 에틸 아세테이트(200ml)로 1시간 동안 처리한 후 여과에 의해 결정을 제거한다. 여액의 용량을 대략 1/2까지 증발시킨 후 밤새 저장하고 다시 여과하여 제2의 결정을 제거한다. 여액을 증발 건조하고 진공하에서 펌프한 후 생성된 5'-데옥시-2',3'-0-이소프로필리덴-5-플루오로우리딘 〔UV (CH₃OH) : λmax 204nm (ε 10900) 및 267nm (ε 8670) IR (KBr) : 3380, 3200, 1710, 1670cm^-1〕을 1시간 동안 수성 트리플루오로아세트산(90%, 200ml)로 처리한다. 생성물을 증발 건조한 후 계속적으로 에탄올과 함께 증발시켜 물 및 트리플루오로아세트산을 제거한 다음 에틸 아세테이트로부터 재결정하여 1.35g(79%)의 5'-데옥시-5-플루오로우리딘 : 융점 189 내지 190℃을 수득한다.5'-deoxy-5'-iodo-2 ', 3'-0-isopropylidine-5-fluorouridine (24 g) dissolved in methanol (800 ml) and triethylamine (15 ml) was palladium on carbon. Treatment with hydrogen for 90 minutes in the presence of (12 g, 5%) and atmospheric pressure at room temperature. The reaction is shaken using a vibrator. Celite catalyst

After removal by filtration through, washed with methanol, the combined filtrate and washings were evaporated to dryness, treated with ethyl acetate (200 ml) for 1 hour and then the crystals were removed by filtration. The volume of the filtrate is evaporated to approximately 1/2, then stored overnight and filtered again to remove the second crystal. 5'-deoxy-2 ', 3'-0-isopropylidene-5-fluorouridine produced after evaporation to dryness of the filtrate and pumped under vacuum [UV (CH ₃ OH): lambda max 204 nm (ε 10900) And 267 nm (ε 8670) IR (KBr): 3380, 3200, 1710, 1670 cm ⁻¹ ] are treated with aqueous trifluoroacetic acid (90%, 200 ml) for 1 hour. The product was evaporated to dryness and subsequently evaporated with ethanol to remove water and trifluoroacetic acid and then recrystallized from ethyl acetate to give 1.35 g (79%) of 5'-deoxy-5-fluorouridine: melting point 189 to 190 To give C.

[실시예 4]Example 4

메탄올(10ml) 및 트리에틸아민(0.5ml)에 용해한 5'-데옥시-5'-요오드-5-플루오로우리딘(291mg)용액을 대기압하의 탄소상의 팔라듐(5%, 145mg)의 존재하에서 수소화 반응시킨다. 1.5시간 후에 여과에 의해 촉매를 제거하고 그 여액을 증발건조한 후 극소량의 가열한 에틸아세테이트에 용해한다. 냉각하면서 트리에틸 암모늄 요오디드의 결정을 분리한다. 이것들을 여과로 제거하고 그 여액을 증발 건조한 후 에틸올로부터 재결정한다. 5'-데옥시-5-플루오로우리딘의 수득량=130mg(68%).A 5'-deoxy-5'-iodine-5-fluorouridine (291 mg) solution dissolved in methanol (10 ml) and triethylamine (0.5 ml) was dissolved in the presence of palladium on carbon (5%, 145 mg) under atmospheric pressure. Hydrogenation reaction. After 1.5 hours, the catalyst was removed by filtration, and the filtrate was evaporated to dryness and dissolved in a very small amount of heated ethyl acetate. The crystals of triethyl ammonium iodide are separated while cooling. These are removed by filtration and the filtrate is evaporated to dryness and recrystallized from ethylol. Yield of 5′-deoxy-5-fluorouridine = 130 mg (68%).

출발물질은 다음의 두가지 다른 과정에 따라 수득된다.Starting materials are obtained according to the following two different procedures.

(a) 5-플루오로우리딘으로부터(a) from 5-fluorouridine

DMF(50ml)에 녹인 5-플루오로우리딘(2.62g)의 용액을 실온에서 1.75시간 동안 트리페닐 포스파이트 메티오디드(5.42g)로 처리한다. 메탄올(10ml)을 가하고 30분후 용액을 유상으로 증발한 후 에틸아세테이트(30ml)에 용해시킨 다음 실리카 컬럼(500g)을 통과시킨다. 컬럼을 에틸 아세테이트로 용출하고 20ml의 획분을 수집한다. 획분 61 내지 130을 결합하고 증발 건조한 후 가열한 에틸 아세테이트(50ml)에 용해한다.A solution of 5-fluorouridine (2.62 g) dissolved in DMF (50 ml) is treated with triphenyl phosphite methoxide (5.42 g) at room temperature for 1.75 hours. Methanol (10 ml) was added, and after 30 minutes, the solution was evaporated into an oil phase, dissolved in ethyl acetate (30 ml), and passed through a silica column (500 g). The column is eluted with ethyl acetate and 20 ml of fractions are collected. Fractions 61 to 130 are combined, evaporated to dryness and dissolved in heated ethyl acetate (50 ml).

헥산(10ml)을 첨가하여 결정성 물질을 수득한다. 실온에서 밤새 저장한 후 결정을 수득하고 헥산으로 세척한 다음 진공하에서 건조한다. 2번째 생성물을 모액으로부터 얻는다. 총 수득량=1.13g(30%); 융점 174.5 내지 175.5℃Hexane (10 ml) is added to give crystalline material. After overnight storage at room temperature the crystals are obtained, washed with hexane and dried under vacuum. The second product is obtained from the mother liquor. Total yield = 1.13 g (30%); Melting Point 174.5-175.5 ° C

(b) 5'-데옥시-5'-요오도-2',3'-0-이소프로필리덴-5-플루오로우리딘으로부터 5'-데옥시-5'-요오도-2',3'-0-이소프로필리덴-5-플루오로우리딘(4g)을 실온에서 15분간 트리플루오로아세트산/물(9 : 1, V/V, 30ml)로 처리한다. 용액을 증발건조한 후 에탄올(2×100ml)과 함께 증발한 다음 에틸 아세테이트로부터 잔사를 재결정한다. 수득량=1.865g(88%)(b) 5'-deoxy-5'-iodo-2 ', 3 from 5'-deoxy-5'-iodo-2', 3'-0-isopropylidene-5-fluorouridine '-0-isopropylidene-5-fluorouridine (4 g) is treated with trifluoroacetic acid / water (9: 1, V / V, 30 ml) at room temperature for 15 minutes. The solution is evaporated to dryness and then evaporated with ethanol (2 x 100 ml) and the residue is recrystallized from ethyl acetate. Yield = 1.865 g (88%)

[실시예 5]Example 5

수분 함유한 과립 정제 제형Water-containing granule tablet formulation

[과정][process]

1. 1,2,3 및 4를 혼합한다.1. Mix 1,2,3 and 4

물로 과립화하고 밤새 건조한 후 연마시킨다.Granulate with water, dry overnight and grind.

2. 미리 혼합한 5 및 6을 가하고 5분간 혼합한 후 적절한 압력을 가한다.2. Add 5 and 6 mixed in advance, mix for 5 minutes and then apply the appropriate pressure.

[실시예 6]Example 6

수분 함유한 과립 정제 제형Water-containing granule tablet formulation

[과정][process]

1. 1,3 및 4를 적절한 믹서로 혼합하고 알코올에 용해한 2로 과립화한 후 밤새 건조하고 연마시킨다.1. Mix 1, 3 and 4 with a suitable mixer, granulate with 2 dissolved in alcohol, dry and grind overnight.

2. 단계 1의 과립에 5를 가한 후 적절한 압력을 가한다.2. Add 5 to the granules of step 1 and then apply the appropriate pressure.

[실시예 7]Example 7

캅셀 제형Capsule Formulation

[과정][process]

1. 1 및 2를 적절한 믹서로 10분간 혼합한다.1. Mix 1 and 2 for 10 minutes with a suitable mixer.

2. 3 및 4를 단계 1의 혼합물에 가한 후 5분간 혼합한다.2. Add 3 and 4 to the mixture from Step 1 and mix for 5 minutes.

3. 적절한 기계에 채운다.3. Fill the appropriate machine.

[실시예 8]Example 8

건조한 비경구 투여 형태Dry parenteral dosage forms

(1) 총 5g의 5'-데옥시-5-플루오로 시티딘 또는 5'-데옥시-5-플루오로우리딘을 75ml의 증류수에 녹이고 그 용액을 세균 여과장치를 통과시킨 후 10개의 살균한 병에 무균적으로 나눈다. 용액을 냉동건조하여 병당 500ml의 살균된 건조 고체를 수득한다.(1) 5 g of 5'-deoxy-5-fluorocytidine or 5'-deoxy-5-fluorouridine are dissolved in 75 ml of distilled water and the solution is passed through a bacterial filter and then sterilized 10 times. Aseptically divide into a bottle. The solution is lyophilized to yield 500 ml of sterile dry solid per bottle.

(2) 병 또는 앰플당 500mg의 양의 5'-데옥시-5-플루오로시티딘 또는 5'-데옥시-5-플루오로우리딘의 투명하고 린트 제거한 결정을 저장소에 저장하고 무균 상태로 가열한다.(2) Store clear and lint-free crystals of 5'-deoxy-5-fluorocytidine or 5'-deoxy-5-fluorouridine in an amount of 500 mg per bottle or ampoule in a reservoir and aseptically Heat.

상기의 건조한 투여형태는 사용하기 전에 주사에는 물과 같은 적절한 살균성의 수성 용매를 첨가하거나 비경구투여에는 염화나트륨 또는 5%의 덱스트로즈의 등장액을 첨가하여 재구성한다.The dry dosage form is reconstituted prior to use by the addition of a suitable bactericidal aqueous solvent such as water for injection or by the addition of an isotonic solution of sodium chloride or 5% dextrose for parenteral administration.

Claims (1)

2',3'-케탈화된 5'-데옥시-5-플루오로시티딘 또는 5'-데옥시-5-플루오로우리딘의 2',3'-0-보호그룹을 가수분해하여 제거하거나 5'-데옥시-5'-할로-5-플루오로시티딘 또는 -데옥시-5'-할로-5-플루오로우리딘을 5'-위치에서 환원하고, 생성된 5'-데옥시-5-플루오로시티딘 또는 -우리딘을 산으로 반응시킴을 특징으로하는 5'-데옥시-5 플루오로시티딘, 5'-데옥시-5-플루오로우리딘으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 피리미딘 뉴클레오시드 또는 그 산부가염의 제조방법.Hydrolysis of 2 ', 3'-ketylated 5'-deoxy-5-fluorocytidine or 2', 3'-0-protecting group of 5'-deoxy-5-fluorouridine to remove Or reduce 5'-deoxy-5'-halo-5-fluorocytidine or -deoxy-5'-halo-5-fluorouridine at the 5'-position, and the resulting 5'-deoxy A pyri selected from the group consisting of 5'-deoxy-5 fluorocytidine, 5'-deoxy-5-fluorouridine, characterized by reacting -5-fluorocytidine or -uridine with an acid Method for preparing midine nucleosides or acid addition salts thereof.