KR800001506B1 - Preparing process for peptides containg imidazol - Google Patents

Abstract

Title compds.(I; A = H, alkyl, aralkyl, alkoxyalkyl, hydroxyalkyl, alkoxy; R = r-carboxy-r-butyrolactone group; X = -s-, -(CH2)N-; n = 1,2) having anesthetic antagonism were prepd. by condensation of peptide formable amino acid or peptide residues with peptide formable residues. Thus, 3.6 g S-carboxylmethyl-L-cysteine suspended in 40ml water and 20ml n-NaOH were reacted at 110≰C for 48 hrs., desalted, condensed and crystallized to give 1.55 g 3-oxo-5-carboxylperhydro-1,4-thiazine.

Description

[발명의 명칭][Name of invention]

이미다졸기 함유펩티드의 제조방법Method for preparing imidazole group-containing peptide

[발명의 상세한 설명]Detailed description of the invention

본 발명은 하기 식의 이미다졸기 함유 펩티드의 제조방법에 관한 것이다.The present invention relates to a method for producing an imidazole group-containing peptide of the following formula.

식중, A는 수소, 알킬, 아랄킬, 알콕시알킬, 하이드록시알킬 또는 알콕시이고, R는Wherein A is hydrogen, alkyl, aralkyl, alkoxyalkyl, hydroxyalkyl or alkoxy, R is

또는

or

를 나타내고, X는 -S-또는-(CH₂)n-(여기서 n은 1 또는 2임)를 나타내는데, R 및 기타의 구성 아미노산 잔기는 각각 L체 또는 D체 또는 라세미체 중의 어느 것이라도 좋다.And X represents -S-or- (CH ₂ ) n-, where n is 1 or 2, wherein R and other constituent amino acid residues are L or D or racemates, respectively. good.

본 발명의 제1의 목적은 상기 식(I)의 신규펩티드를 제공하는데 있으며 제2의 목적은 공지 TRH(L-피로구루타밀-L-히스티딜-L-프로린아미드)보다 TSH(thyroid stimilatinghormore)방출 활성이 약하지만, 마취길항작용(麻醉拮抗作用), 자발운동증가 또는 도파민 작용 증강의 적어도 하나가 TRH보다 강한 펩티드(I)을 제공하는 것이다.A first object of the present invention is to provide a novel peptide of formula (I), and a second object is thyroid stimilating hormore (TSH) than known TRH (L-pyrogutamyl-L-histidyl-L-prolinamide) Although the release activity is weak, at least one of anesthetic antagonism, spontaneous motility increase or dopamine action enhancement provides peptide (I) stronger than TRH.

상기식(I)에 있어서, A로 표시되는 알킬로서는 직쇄 또는 분지상의 탄소수 10까지의 알킬(예, 메틸, 에틸, 프로필, iso-프로필, 부틸, 제2급부틸, 제3급부틸, iso-부틸, 아밀, 헥실, 옥틸, 노닐, 데실 등)이 바람직하다. A로 표시되는 아랄킬로서는, 예컨대 페닐기에 탄소수 1~4개의 직쇄 또는 분지상의 알킬렌기[예 메틸렌, 에틸렌, 1,3-트리메틸렌(-CH₂CH₂CH₂-), 프로필렌 (

), -CH₂CH₂CH₂CH₂-,

등]이 결합한 것이 바람직하가. A로 표시되는 알콕시알킬로서는, 직쇄 또는 분지상의 탄소수 9까지의 것(예, 메톡시메틸, 메톡시에틸, 프로폭시프로필, 부톡시부틸, 메톡시옥틸, 등)이 바람직하다. A로 표시되는 알콕시로서는 탄소수 9까지의 것이 바람직하며, 그 구체예로서는 상기 A로 표시되는 알킬의 구체예에 각각 대응하는 알콕시를 들 수 있다.In the formula (I), alkyl represented by A is linear or branched alkyl having up to 10 carbon atoms (e.g., methyl, ethyl, propyl, iso-propyl, butyl, secondary butyl, tertiary butyl, iso) -Butyl, amyl, hexyl, octyl, nonyl, decyl and the like). As the aralkyl represented by A, for example, a phenyl group has a linear or branched alkylene group having 1 to 4 carbon atoms [eg methylene, ethylene, 1,3-trimethylene (-CH ₂ CH ₂ CH _2- ), propylene (

), -CH ₂ CH ₂ CH ₂ CH _2- ,

Etc.] is preferably combined. As the alkoxyalkyl represented by A, one having a linear or branched up to 9 carbon atoms (for example, methoxymethyl, methoxyethyl, propoxypropyl, butoxybutyl, methoxyoctyl, etc.) is preferable. As alkoxy represented by A, those having up to 9 carbon atoms are preferable, and specific examples thereof include alkoxy corresponding to specific examples of the alkyl represented by the above-mentioned A, respectively.

하이드록시 알킬로서는 탄소수 1~9의 것이 바람직하며, 그 구체예로서는 상기 A로 표시되는 알킬의 탄소수 1~9의 임의의 위치에 하이드록시가 치환된 것을 들 수 있다.As hydroxy alkyl, a C1-C9 thing is preferable, and the thing by which the hydroxy was substituted by the C1-C9 arbitrary position of the alkyl represented by said A as the specific example is mentioned.

본 명세서에 있어, 예를 들면 아미노산, 팹티드, 화합물의 잔기, 보호기, 용매 등을 IUPAC-IUB Commission on Biological Nomenclature에 의한 약호 기호 또는 당해분야에 있어서의 관용약호로 표시할 경우가 있다. 그 에를 다음에 든다.In the present specification, for example, amino acids, peptides, residues of compounds, protecting groups, solvents and the like may be indicated by a symbol or a common abbreviation in the art by the IUPAC-IUB Commission on Biological Nomenclature. I put that on next.

His : 히스티딘His: histidine

Pro : 프롤린Pro: Proline

Pip : 피페콜린산Pip: pipecolinic acid

Clu : 글루타민산Clu: Glutamic Acid

Tac : 메티-티아졸리딘-5-카르본산Tac: meti-thiazolidine-5-carboxylic acid

Oct : 3-옥소-5-카로복시퍼히드로-1,4-티아진Oct: 3-oxo-5-carboxoxyhydrohydro-1,4-thiazine

Obl : r-카르복시-r-부티로락톤Obl: r-carboxy-r-butyrolactone

Z : 벤질옥시카르보닐Z: benzyloxycarbonyl

BOC : t-부톡시카르보닐BOC: t-butoxycarbonyl

DCC : 디시클로헥실카르보닐디이미드DCC: Dicyclohexylcarbonyldiimide

N₃: 아지드N ₃ : azide

OtBu : t-부틸에스테르OtBu: t-butyl ester

Tos : 토실Tos: Tossil

HONB : N-하이드록시-5-노르보르넨-2,3-디카르복시이미드HONB: N-hydroxy-5-norbornene-2,3-dicarboxyimide

Hobt : N-하이드록시-1,2,3-벤조트리아졸Hobt: N-hydroxy-1,2,3-benzotriazole

Hosu : N-하이드록시숙신이미드Hosu: N-hydroxysuccinimide

DCHA : 디시클로헥실아민DCHA: Dicyclohexylamine

DMF : 디메틸포름아미드DMF: Dimethylformamide

그런데, 상기 약호는 그에 상당하는 화합물의 펩티드 결합을 형성할 수 있는 잔기를 나타낼 경우도 있다.By the way, the said symbol may show the residue which can form the peptide bond of the corresponding compound.

본 발명의 목적물(I)은 공지의 펩티드 합성수단으로 제조할 수 있다. 보호기의 도입 펩티드 결합 형성수단, 보호기의 탈리수단 등은 모두 그 자체는 공지의 것이다. 액상법으로도 또는 고상법에 의해서도 제조할 수 있다. 목적물(I)의 제조에 적용할 수 있는 펩티드 합성수단 자체는 예를들어, Schr

der and Lubke 공저 The Peptides, Vol. 1 (1966년도판)미합중국 뉴욕, Academic Press 발행 ; G.T.Young 편저 Peptides and Proteins Vol. 1~5. The Chemical Society (런던) 발행 : 이즈미야 노부오의 저서 “펩티드 합성”(마루젠 발행); 후지노와 공동발명자의 미국 특허 제3370694등에 기재되어 있으며, 예컨대, DCC/HONB법, 아지드법, 클로라이드법, 산무수물법, 혼산무수물법, DCC법, 활성에스테르법, 웃드워드시약 K를 사용하는 방법, 칼보디이미다졸법, 산화환원법, EEDQ (1-에톡시칼보닐-2-에톡시-1,2-디하이드로키니린)법 등의 수단을 들 수 있다.Object (I) of the present invention can be produced by known peptide synthesis means. Introduction of protecting groups Peptide bond forming means, deprotecting means of protecting group and the like are all known per se. It can also manufacture by a liquid phase method or a solid phase method. Peptide synthesis means itself applicable to the preparation of the target (I) is, for example, Schr

by der and Lubke The Peptides, Vol. 1 (1966 edition) Academic Press, New York, USA; GTYoung Editor Peptides and Proteins Vol. 1-5. Published by The Chemical Society (London) by Izumiya Nobuo, “Peptide Synthesis” by Maruzen; Fujino and co-inventor of U.S. Patent No. 3370694 and the like, for example, using DCC / HONB method, azide method, chloride method, acid anhydride method, mixed acid anhydride method, DCC method, active ester method, Woodward reagent K A method, a carbodiimidazole method, a redox method, and an EEDQ (1-ethoxycarbonyl-2-ethoxy-1,2-dihydrokininine) method.

본 발명의 목적물(I)을 제조할 경우에는 다음에 나타내는 세개의 점선 중의 하나의 점선으로 분할되는 2개의 부분에 해당하는 원료를 상기 공지 수단으로 반응시킬 수 있다.When producing the objective (I) of this invention, the raw material corresponding to two parts divided into one dotted line among three dotted lines shown below can be made to react with the said well-known means.

본 제법의 기본적 구체예를 식으로 제시한다.The basic embodiment of this manufacturing method is shown by the formula.

(1)(One)

(2)(2)

(3)(3)

(4)(4)

[식중, P는 보호기를, 또 (P)는 보호기가 반드시 필요한 것은 아니라는 것을 나타낸다. 한편

는 고상법용 수지를 나타내고, “축합”이라 함은 DCC와 같은 탈수축합제에 의한 축합 뿐만 아니라, 아지드, 클로라이드, 활성 에스테르등의 중간체를 경유하는 축합까지도 포함한다.][Wherein, P represents a protecting group and (P) indicates that a protecting group is not necessarily required. Meanwhile

Represents a solid phase resin, and "condensation" includes not only condensation by a dehydrating condensing agent such as DCC, but also condensation via intermediates such as azide, chloride, and active ester.]

목적물(I)을 제조하는 펩티드 결합 형성 반응에 앞서, 그 반응에 관여치 않는 아미노기, 이미노기, 카르복실기 등의 관능기를 공지 수단 및 보호기로 보호하여도 된다. 또한 그 펩티드 결합 형성반응에 관여하는 아미노기, 이미노기, 카르복실기는 공지의 활성화 수단으로 활성화하여도 좋다.Prior to the peptide bond formation reaction for producing the target (I), functional groups such as amino groups, imino groups, and carboxyl groups not involved in the reaction may be protected by known means and protecting groups. Moreover, the amino group, imino group, and carboxyl group which participate in the peptide bond formation reaction may be activated by a well-known activation means.

출발물질의 반응에 관여치 않는 α-아미노 기(예, 히스티딘 부분의 α-아미노기)의 보호기로서는 공지의 것이라도 좋고, 예를 들어 Z, BOC, t-아밀옥시카르보닐, 이소보르닐옥시카르보닐, 프탈로일, 트리플로오로아세틸, 포르밀기 등을 들 수 있다. 히스티딘 부분의 이미다졸 핵의 보호기로서는 공지 것이라도 좋으며, 예를 들어, 토실, 벤질, 2,4-디니트로페닐기 등을 들수 있는데, 그 보호는 반드시 필요한 것은 아니다.As a protecting group of the α-amino group (for example, the α-amino group of the histidine moiety) which is not involved in the reaction of the starting material, a known group may be used. For example, Z, BOC, t-amyloxycarbonyl, isobornyloxycarb And carbonyl, phthaloyl, trifluoroacetyl, formyl group and the like. As the protecting group of the imidazole nucleus of the histidine moiety, a known group may be used. Examples thereof include a tosyl, benzyl, 2,4-dinitrophenyl group and the like, but the protection is not necessary.

소기의 반응에 관여치 않는 출발물질 중의 카르복실기는 공지의 보호기로 보호되어 있어도 좋으며 예를 들어 에스테르(예, 메틸, 에틸, 벤질, p-니트로벤질, t-부틸 또는 t-아밀에스테르 등의 에스테르) 또는 금속염(예, 나트륨, 칼륨 등의 염)의 형으로 보호되어 있어도 좋다.The carboxyl groups in the starting materials not involved in the desired reaction may be protected by known protecting groups, for example esters (e.g., esters such as methyl, ethyl, benzyl, p-nitrobenzyl, t-butyl or t-amyl esters) Or it may be protected by the form of a metal salt (for example, salts, such as sodium and potassium).

소기의 반응에 관여하는 카르복실기는 사전에 공지의 형태로 활성화 하여도 좋고, 예를 들어 활성 에스테르(예, 펜타클로로페놀, 2,4,5-트리클로로페놀, 2,4-디니트로페놀, 시아노메틸알코올, P-니트로페놀, N-하이드톡시-5-노르보르넨-2,3-디카르복시이미드, N-하이드록시 숙신이미드, N-하이드록시프탈이미드 및 N-하이드록시 1,2,3-벤조트리아졸에스테르) 혹은 원료의 카르본산에 대응하는 카르본산 무수물, 아지드 등의 형으로 활성화 되어 있어도 좋다. 상기 활성화 에스테르 중에서도 N-하이드록시-5-노르보르넨-2,3-디카르복시이미드, N-하이드록시-1,2,3-벤조트리아졸, N-하이드록시 숙신이미드 등이 히스티딘 부분의 축합을 시행할 경우 라세미화가 적음으로 유리한 경우가 있다.The carboxyl group involved in the desired reaction may be activated in a known form in advance, for example, an active ester (e.g., pentachlorophenol, 2,4,5-trichlorophenol, 2,4-dinitrophenol, cyan) Nomethyl alcohol, P-nitrophenol, N-hydroxy-5-norbornene-2,3-dicarboxyimide, N-hydroxy succinimide, N-hydroxyphthalimide and N-hydroxy 1, 2,3-benzotriazole ester) or carboxylic anhydride, azide or the like corresponding to carboxylic acid as a raw material. Among the above activated esters, N-hydroxy-5-norbornene-2,3-dicarboxyimide, N-hydroxy-1,2,3-benzotriazole, N-hydroxy succinimide and the like Condensation may be advantageous due to less racemization.

본 축합 반응은 비반응성 용매(예, DMF, 클로로포름, 디옥산, 테트라히드로푸란 등) 중에서 실시할 수 있고, 반응 온도와 시간은 공지의 펩티드 합성법에 사용하는 범위에서 선택할 수 있으나, 약 30~60℃로 약 2~24시간으로 시행하는 것이 바람직하다.The condensation reaction can be carried out in a non-reactive solvent (e.g., DMF, chloroform, dioxane, tetrahydrofuran, etc.), and the reaction temperature and time can be selected from a range used for a known peptide synthesis method, but about 30 to 60 It is preferable to carry out at about 2 to 24 hours at ℃.

본 축합 반응에서 제조된 펩티트가 보호기를 갖는 경우, 그 보호기는 공지수단으로 탈수할 수 있다. 보호기 탈리수단으로서는 예컨대 촉매(예, 팔라듐 (흑), 팔라듐탄소, 백금 등)를 사용하는 접촉환원, 산(예, 불화수소, 취화수소, 염화수소, 트리플루오로초산 등)에 의한 가수분해, 액체암모니아 중의 나트륨에 의한 환원등을 열거할 수 있다.When the peptide produced in this condensation reaction has a protecting group, the protecting group can be dehydrated by known means. Examples of protecting group desorbing means include catalytic reduction using a catalyst (e.g., palladium (black), palladium carbon, platinum, etc.), hydrolysis by an acid (e.g., hydrogen fluoride, hydrogen embrittlement, hydrogen chloride, trifluoroacetic acid, etc.), liquid And reduction with sodium in ammonia.

목적물(I)은, 그 유지의 형태로 혹은 산염의 형태로 반응종료물에서 통상의 방법(예, 전용(轉用), 추출, 크로마토그래피, 결정화, 재침전)에 의해 분리 채취할 수 있다.The target substance (I) can be separated and collected by conventional methods (e.g., dedicated, extraction, chromatography, crystallization, reprecipitation) from the reaction termination product in the form of a fat or oil or an acid salt.

화합물(I)을 제조하기 위한 원료도 공지 방법 또는 그에 준한 방법으로 제조할 수 있다.The raw material for preparing compound (I) can also be manufactured by a well-known method or the method according to it.

목적물(I)은, 약리적으로 수용할 수 있는 무기산(예, 염산) 혹은 유기산(예, 초산, 주석산)과 염을 형성할 수 있다.The target object (I) can form a salt with a pharmacologically acceptable inorganic acid (eg hydrochloric acid) or organic acid (eg acetic acid, tartaric acid).

본 발명의 목적물(I)은 동물(예, 마우스, 랫트, 고양이, 개, 원숭이)에 투여하면, 마취길항작용, 수민길항작용, 자발운동증가 작용 및 도파민 작용 증강 작용의 적어도 하나를 얻을 수 있으므로 유용하고 더우기 TSH방출활성이 약하든지 아니면 전혀 없기 때문에 이점에서도 더욱 유용하다. 화합물(I)은 약리 작용의 면에서 L체가 가장 바람직하고, 이어서 라세미체가 좋다. 화합물(I)은 예를 들어 마취각성촉진, 소생, 자발운동증가 혹은 도파민 작용 증강을 목적으로 하는 약제로서 동물(예, 마우스, 랫트, 고양이, 개, 원숭이) 혹은 사람에게 투여할 수 있다.When the object (I) of the present invention is administered to an animal (eg, a mouse, a rat, a cat, a dog, a monkey), at least one of an anesthetic antagonism, a sumin antagonism, a spontaneous motility action, and a dopamine action enhancer action can be obtained. It is also useful, furthermore, because it has weak or no TSH release activity. Compound (I) is most preferably L in terms of pharmacological action, followed by racemate. Compound (I) can be administered to animals (eg, mice, rats, cats, dogs, monkeys) or humans, for example, as drugs for the purpose of promoting anesthesia, resuscitation, spontaneous exercise or enhancing dopamine action.

화합물(I)은 예를 들어 사람의 수민제중독, 의식장해, 다동아(多動兒), 정신분열증, 우울증, 파킨슨씨병의 치료에도 사용할 수 있다.Compound (I) can be used, for example, in the treatment of human susceptibility poisoning, consciousness disorder, many children, schizophrenia, depression, and Parkinson's disease.

그 투여는 예를 들어 주사(예, 정맥, 근육, 피하), 경구, 직양, 코 등에 가능하다.The administration is possible, for example, by injection (eg, intravenous, intramuscular, subcutaneous), oral, oval, nasal and the like.

상기 작용을 걷우기에 필요한 화합물(I)의 투여량은, 예를 들어 화합물(I)의 종류, 투여동물의 종류 및 건강상태, 투여 경로 등에 따라 다르지만, 예를 들어 주사의 경우, 약 0.1mg/kg~mg/kg(1회 투여량)경구의 경유 약 5mg/kg~500mg/kg(1회 투여량)의 범위에서 적절히 선택할 수 있다.The dosage of the compound (I) necessary for the action is varied depending on, for example, the type of compound (I), the type and health of the administered animal, the route of administration, and the like, for example, about 0.1 mg in the case of injection. / kg-mg / kg (single dose) Oral gas oil can be suitably selected from the range of about 5 mg / kg-500 mg / kg (single dose).

화합물(I)은 그대로도 투여할 수 있으나, 공지의 TRH와 동일한 약제형태(예, 주사제, 산제, 정제)로 투여할 수 있다.Compound (I) may be administered as it is, but may be administered in the same pharmaceutical form (eg, injection, powder, tablet) as known TRH.

이하에 기재한 모든 실시예 및 약리장용의 실험예에 있어서, 아미노산, 펩티드 및 기타 화합물에 관해 광학 이성체가 존재할 수 있는 경우, 특기하지 않는 한에 있어서는, L체를 나타내는 것으로 한다.In all the examples and pharmacological examples described below, when an optical isomer may exist with respect to amino acids, peptides, and other compounds, the L form is to be indicated unless otherwise specified.

[실시예 1]Example 1

Oct·His·Pro·NH₂의 합성Synthesis of Oct, His, Pro, NH ₂

(a) 3-옥소-5-카르복실퍼하이드로-1,4-티아진의 합성(a) Synthesis of 3-oxo-5-carboxyperhydro-1,4-thiazine

S-카르복실메틸-L-시스테인 3.6g(0.02M)을 40ml의 물에 현탁하고, 20ml의 N·NaOH를 가한다. 110℃, 48 시간 봉관중에서 반응 시킨다. 반응액은 암베를라이트 IR·120 B(H⁺형)의 컬럼 (4.5x12.0cm)을 통과시켜서 탈염한다. 여액은 건고될 때까지 농축한다. 잔사는 빙초산에 녹이고 에테르를 가하여 결정화하여 여취한다.3.6 g (0.02 M) of S-carboxymethyl-L-cysteine is suspended in 40 ml of water, and 20 ml of N.NaOH is added. The reaction is carried out at 110 DEG C for 48 hours. The reaction solution is desalted by passing through an amberlite IR · 120 B (H ⁺ type) column (4.5 × 12.0 cm). The filtrate is concentrated to dryness. The residue is dissolved in glacial acetic acid and crystallized by adding ether and filtered.

수량 : 1.55g(48.1%)Quantity: 1.55g (48.1%)

융점 : 152.0~153.0℃Melting Point: 152.0 ~ 153.0 ℃

선광도 :

72+1.1⁰(c=0.64, 수중)Radiance:

72 + 1.1 ⁰ (c = 0.64, underwater)

원소분석치 : C₅H₇O₃NS 로서Elemental Analysis Value: As C ₅ H ₇ O ₃ NS

계산치 : C. 37.26; H, 38; N, 8.69; S, 10.89Calculated: C. 37.26; H, 38; N, 8.69; S, 10.89

실험치 : C, 36.97; H, H4.28; N, 8.54; S, 19.73Experimental Value: C, 36.97; H, H 4.28; N, 8.54; S, 19.73

(b) Z-Hls-Pro-NH₂의 합성(b) Synthesis of Z-Hls-Pro-NH ₂

Z-Pro-NH₂32.7gZ-Pro-NH ₂ 32.7g

(0.12M)을 메타놀중에서 팔라듐혹을 촉매로 하여 통상의 방법에 따라 접촉환원을 시행한다. 촉매를 여과하고, 여액은 감압으로 농축한다. 이리하여 생기는 결정성 잔기를 진공에서 충분히 건조한다. 한편, Z-His-NH·NH₂36.4g(0.12M)를 N-HCl3.60ml에 용해하고, 이어서 초산에틸 480ml를 가하여 0℃로 냉각한다. 격렬히 교반하면서 아초산나트륨 8.3g(0.12M)의 수용액(30ml)을 적하하고, 3분 후에 냉 50% 탄산칼륨 용액 144ml를 가한다. 초산에틸층을 빼내고, 수층은 다시 한번 초산에틸로 추출한다. 양자를 합쳐서 무수 Na₂SO₄로 건조한다. 이 건조 초산에틸용액과 먼저 얻은 건조분말을 합쳐서 격렬하게 교반한다. N, N-디메틸포름아미드 150ml를 반응액에 가해서 4℃로 12시간 교반한 후 용매를 유거한다. 남은 유상물에 냉수를 가해서 결정화시킨다. 물에서 재결정한다.Catalytic reduction of (0.12M) in methanol with palladium ore is carried out in a conventional manner. The catalyst is filtered off and the filtrate is concentrated under reduced pressure. The resulting crystalline moiety is sufficiently dried in vacuo. On the other hand, 36.4 g (0.12 M) of Z-His-NHNH ₂ is dissolved in 3.60 ml of N-HCl, and then 480 ml of ethyl acetate is added and cooled to 0 ° C. While stirring vigorously, an aqueous solution of 8.3 g (0.12 M) of sodium acetate (30 ml) was added dropwise, and after 3 minutes, 144 ml of cold 50% potassium carbonate solution was added. The ethyl acetate layer was taken out, and the aqueous layer was once again extracted with ethyl acetate. Both are combined and dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ . The dried ethyl acetate solution and the dry powder obtained earlier are combined and stirred vigorously. 150 ml of N and N-dimethylformamide are added to the reaction solution, the mixture is stirred at 4 ° C for 12 hours, and the solvent is distilled off. Cold water is added to the remaining oil to crystallize it. Recrystallize from water.

수량 : 24.5g(53.%)Quantity: 24.5g (53.%)

융점 : 112.0~118.0℃Melting Point: 112.0 ~ 118.0 ℃

선광도 :

-39.8°(c=0.53, 수중)Radiance:

-39.8 ° (c = 0.53, underwater)

원소분석치 : C₁₉H₂₃N₅C₄·

H₂O로서Elemental Analysis: C ₁₉ H ₂₃ N ₅ C ₄ ·

As H ₂ O

계산치 : C, 57.86; H,6.13; N, 17.76Calculated: C, 57.86; H, 6.13; N, 17.76

실험치 : C, 58.16; H, 6.03; N, 17.65Experimental Value: C, 58.16; H, 6.03; N, 17.65

(c) Oct·His·Pro·NH₂의 합성(c) Synthesis of Oct, His, Pro, NH ₂

Z·His·Pro·NH₂1.20g(0.00312M)을 25%HBr/초산 15ml에 녹이고 실온하에 40분간 방치한다. 에테르 150ml를 가하고, 생기는 침전을 여취하에 NaOH를 넣은데시케이터 중에서 12시간 건조한다. 이 건조분말은 20ml의 N, N-디메틸포름아미드에 녹이고, 냉각하에 트리에틸아민 0.88ml (0.00624M)를 가한다. 생기는 염의 결정을 여별하고, 여액에 3-옥소-5-카르복시퍼하이드로-1,4-티아진 502mg (0.00312 M)과 HONB 670mg (0.00374M)을 가하여 녹이고, 0℃로 DDC772mg (0.00374M)을 가하여 빙실에서 48시간 교반한다. 이리하여 디시클로헥실요소를 여별하고, 여액은 진공에서 농축한다. 잔사에 초산에틸을 가해서 분말로 만든다. 이 분말을 70ml의 메타놀:크로로포름(1:9)의 혼액에 녹이고 실리카겔의 컬럼(4.5x6.0cm)에 주입하여 같은 용매 300ml로 컬럼을 씻고, 이어서 메타놀:클로로포름(4:6)의 혼액으로 목적물을 용출한다. 주용출 획분을 수집하여 용매를 유거하고, 남은 유상물은 물에 용해하여 불용물을 여별한다. 여액은 동결 건조한다.Dissolve 1.20 g (0.00312 M) of Z.His.Pro.NH ₂ in 15 ml of 25% HBr / acetic acid and leave for 40 minutes at room temperature. 150 ml of ether is added and the resulting precipitate is dried in a desiccator with NaOH under filter for 12 hours. This dry powder is dissolved in 20 ml of N, N-dimethylformamide and 0.88 ml (0.00624 M) of triethylamine is added under cooling. The resulting salt crystals were filtered off, and the filtrate was dissolved by adding 502 mg (0.00312 M) of 3-oxo-5-carboxyperhydro-1,4-thiazine and 670 mg (0.00374 M) of HONB, and DDC772 mg (0.00374 M) at 0 ° C. The mixture was stirred for 48 hours in an ice room. The dicyclohexyl urea is thus filtered off and the filtrate is concentrated in vacuo. Ethyl acetate is added to the residue to make a powder. This powder was dissolved in a mixture of 70 ml of methanol (chromoform (1: 9)) and poured into a column of silica gel (4.5x6.0 cm) to wash the column with 300 ml of the same solvent, followed by a mixture of methanol: chloroform (4: 6). Elutes the target product. Collect the main elution fractions to dilute the solvent, and dissolve the remaining oil in water to filter out the insolubles. The filtrate is lyophilized.

수량 : 771mgQuantity: 771mg

선광도 :

-57.5°(c=0.53, 수중)Radiance:

-57.5 ° (c = 0.53, underwater)

박층크로마토그라피 : Rf₁(n-부타놀 : 초산에틸Thin layer chromatography: Rf ₁ (n-butanol: ethyl acetate

초산 : 물=1 : 1 : 1 : 1, 담체; 실리카겔; 정색 : 파울리반응)으로 0.34Acetic acid: water = 1: 1: 1: 1, carrier; Silica gel; Color: 0.34 by Pauli Reaction)

원소분석치 : C₁₆H₂₂O₄N₆S·5H₂O로서Elemental analysis value: C ₁₆ H ₂₂ O ₄ N ₆ S · 5H ₂ O

계산치 : C, 39.67 ; H, 6.65; N, 17.36; S, 6.62Calc .: C, 39.67; H, 6.65; N, 17.36; S, 6.62

실험치 : C, 39.39; H, 5.12; N, 17.43; S, 6.79Found: C, 39.39; H, 5. 12; N, 17.43; S, 6.79

[실시예 2]Example 2

Oct·His·Pip·NH₂의 합성Synthesis of Oct-His-Pip-NH ₂

(a) Z-Pip-NH₂의 합성(a) Synthesis of Z-Pip-NH ₂

Z-Pip·OH 3.9(0.015M)과 HONB 2.70g (0.015 M)을 디옥산 : 초산에틸(4:1)의 혼액 50ml에 용해하고, 0℃로 DCC 3.09g(0.015 M)을 가하여 5시간 실온하에 교반한다. 이리하여 생성되는 디시클로헥실요소를 여별하고, 여액을 격렬히 교반하면서 이에 농암모니아수 5ml를 적하한다. 5시간 후, 감압으로 용매를 유거하고 잔사를 초산에틸에 용해한다. 초산에틸층은 5% NaHCO₃와 N·Hcl로 세정하여 건조한다. 초산에틸을 유거하고, 잔사는 석유벤젠을 가하여 결정화시킨다.초산에틸-석유 벤젠에서 재결정시킨다.Z-PipOH 3.9 (0.015 M) and HONB 2.70 g (0.015 M) were dissolved in 50 ml of a mixture of dioxane: ethyl acetate (4: 1), and DCC 3.09 g (0.015 M) was added at 0 ° C. for 5 hours. Stir at room temperature. The dicyclohexyl urea thus produced is filtered off, and 5 ml of concentrated ammonia water is added dropwise thereto while stirring the filtrate vigorously. After 5 hours, the solvent is distilled off under reduced pressure and the residue is dissolved in ethyl acetate. The ethyl acetate layer is washed with 5% NaHCO ₃ and N.Hcl and dried. Ethyl acetate is distilled off and the residue is crystallized by addition of petroleum benzene. Recrystallized from ethyl acetate-petroleum benzene.

수량 : 2.62g(66.7%)Quantity: 2.62g (66.7%)

융점 : 110.0~111.0℃Melting Point: 110.0 ~ 111.0 ℃

석광도 :

-36.1°(o=0.42, 메타놀중)Stone degree:

-36.1 ° (o = 0.42 in methanol)

원소분석치 : C₁₄H₁₈O₃N₂로서,Elemental Analysis Value: C ₁₄ H ₁₈ O ₃ N ₂ ,

계산치 : C, 64.10; H, 6.92; N, 10.68Calculated: C, 64.10; H, 6.92; N, 10.68

실험치 : C, 64.11; H, 6.90; N, 10.67Found: C, 64.11; H, 6. 90; N, 10.67

(b) Z-His·Pip·NH₂의 합성(b) Synthesis of Z-HisPipNH ₂

Z-His·Pip·NH₂5.3g (0.02M)을 통상의 방법에 따라 접촉환원을 시행하여 H·Pip·NH₂로 한다. 한편, Z·His·NH·NH₂6.1g (0.02M)을 실시예 1(b)와 같이하여 아지드로 변환하고, DMF 100ml에 용해한 H·Pip·NH₂와 4℃로 4일간, 실온하에 24시간 반응시킨 후, 용매를 유거하고, 잔사는 Rf₂(초산에틸 : 피리딘 : 초산 : 물 : 60 : 20 : 6 : 11)의 용매에 용해하고, 같은 용매계에서 실리카겔의 크로마토그라피(컬럼 : 3.0 X 20.0cm)를 실시하여 정제한다. 주용물 획분을 수집하여 농축하면 유상물을 얻는다.5.3 g (0.02M) of Z-HisPipNH _{2 is} subjected to contact reduction according to a conventional method to obtain H.PipNH ₂ . On the other hand, 6.1 g (0.02 M) of Z.His.NH.NH ₂ was converted to azide in the same manner as in Example 1 (b), and H.Pip.NH ₂ and 4 ° C dissolved in 100 ml of DMF at room temperature for 4 days at room temperature. After reacting for 24 hours, the solvent was distilled off, and the residue was dissolved in a solvent of Rf ₂ (ethyl acetate: pyridine: acetic acid: water: 60: 20: 6: 11), and chromatography of silica gel (column: 3.0 x 20.0 cm) to purify. Collect the main fraction fraction and concentrate to obtain an oil.

수량 : 40.g(50.0%)Quantity: 40.g (50.0%)

선광도:

-48.6°(c=0.54, DMF 중)Radiance:

-48.6 ° (c = 0.54 in DMF)

원소분석치 : C₂₀H₂₅O₄N₅·H₂O로서Elemental analysis value: C ₂₀ H ₂₅ O ₄ N ₅ · H ₂ O

계산치 : C, 57.54; H, 6.52; N, 16.78Calculated: C, 57.54; H, 6.52; N, 16.78

실험치 : C, 57.47; H, 6.48; N, 15.46Found: C, 57.47; H, 6. 48; N, 15.46

(c) Oct·His·Pip·NH₂의 합성(c) Synthesis of Oct-His-Pip-NH ₂

유상의 Z·His·Pip·NH₂1.20g (0.03M)을 25% HBr/초산 12ml로 1시간 50분 처리한다. 에테르 100ml를 가하여 생기는 침전을 여취하고, NaOH를 넣은 데시케이터 중에서 12시간 건조한다. 이 건조분말을 15ml의 N, N-디메틸포름아미드에 녹이고, 냉각하에 트리에틸아민 0.84ml(0.006M)를 가하여 중화시킨다. 석출되는 염을 여별하고, 여액은 그대로 아민 성분으로서 다음의 반응에 사용한다. 한편, 3-옥소-5-카르복시퍼하이드로-1,4-티아진 484ml(0.003M), HONB 540 mg(0.003M)을 5ml의 N, N-5-카르복시퍼하이드로-1,4-티아진 484ml(0.003M), HONB 540 mg(0.003M)을 5ml의 N, N-디메틸포름아미드에 용해하고 얻음으로 냉각하여 DCC 618mg(0.003M)을 가하고 3시간 동안 교반한다. 이 활성 에스테르의 용액과 먼저 얻은 아민 성분의 용액을 합쳐서 4℃로 12시간 교반한다. 생성되는 디시클로헥실 요소를 여별하고 여액은 진공에서 농축한다. 남은 유상물에 에테르를 가하여 분말로 하여 여취한다. 분말은 메타놀 클로로포름(1:9)의 혼액 100ml에 용해하고 실리카겔의 컬럼(2.5x16.0cm)에 주입한다. 컬럼은 같은 용매 700ml로 씻은 다음, 메타놀 : 클로로포름(4:6)의 혼액으로 목적물을 용출한다. 주용출 획분을 수집하여 용매를 감압에서 유거한다. 잔사는 소량의 0.1N-초산에 용해하여 세파덱스 LH-20의 컬럼(5.5x40.0cm)을 통과시킴으로써 더한층 정제를 한다. 주용출 획분을 수집하여 동결 건조한다.1.20 g (0.03 M) of oily Z.His.Pip.NH _{2 is} treated with 12 ml of 25% HBr / acetic acid for 1 hour and 50 minutes. 100 ml of ether is added to precipitate the precipitate, which is dried in a desiccator with NaOH for 12 hours. This dry powder is dissolved in 15 ml of N, N-dimethylformamide and neutralized by adding 0.84 ml (0.006 M) of triethylamine under cooling. The precipitated salt is filtered off and the filtrate is used as it is in the next reaction as an amine component. Meanwhile, 484 ml (0.003 M) of 3-oxo-5-carboxyperhydro-1,4-thiazine and 540 mg (0.003 M) of HONB were added to 5 ml of N, N-5-carboxyperhydro-1,4-thiazine. 484 ml (0.003 M), HONB 540 mg (0.003 M) are dissolved in 5 ml of N, N-dimethylformamide, cooled to obtain DCC 618 mg (0.003 M), and stirred for 3 hours. The solution of this active ester and the solution of the amine component obtained first are combined, and it stirred at 4 degreeC for 12 hours. The resulting dicyclohexyl urea is filtered off and the filtrate is concentrated in vacuo. Ether is added to the remaining oil and powdered. The powder is dissolved in 100 ml of a mixture of methanol chloroform (1: 9) and injected into a column of silica gel (2.5 × 16.0 cm). The column is washed with 700 ml of the same solvent, and then the desired product is eluted with a mixture of methanol: chloroform (4: 6). The main elution fractions are collected and the solvent is distilled off under reduced pressure. The residue is further purified by dissolving in a small amount of 0.1N-acetic acid and passing through a column of Sephadex LH-20 (5.5x40.0 cm). The main eluate fractions are collected and lyophilized.

수량 : 740mgQuantity: 740mg

선광도 :

-52.3°(c=0.70 수중)Radiance:

-52.3 ° (c = 0.70 underwater)

박층크로마토그라피 : Rf₁=0.50Thin layer chromatography: Rf ₁ = 0.50

원소분석치 : C₁₇H₂₄O₄N₆S·CH₃COOH·4H₂O로서Elemental Analysis Value: C ₁₇ H ₂₄ O ₄ N ₆ S.CH ₃ COOH.4H ₂ O.

계산치 : C, 42.21; H, 6.71; N, 15.55 S, 5,93Calculated: C, 42.21; H, 6.71; N, 15.55 S, 5,93

실험치 : C, 41.94; H, 5.38; N, 16.00; S, 6.48Experimental Value: C, 41.94; H, 5. 38; N, 16.00; S, 6.48

아미노산분석 ; (6N·HCl중, 110℃, 24시간 가수분해)Amino acid analysis; (Hydrolysis in 110N, 24 hours in 6NHCl)

His, 0.93(1); s-카르복시메틸시스테인, 1.03(1); Pip, 1.00(1); 평균회수율 94.2%His, 0.93 (1); s-carboxymethylcysteine, 1.03 (1); Pip, 1.00 (1); Average recovery rate 94.2%

[실시예 3]Example 3

Oct·His·Pro·NH·CH₃의 합성Synthesis of Oct, His, Pro, NH, CH ₃

(a) Z·Pro·NH·CH₃의 합성(a) Synthesis of Z, Pro, NH, CH ₃

Z·Pro·OH 12.5g(0.05M)와 HONB 9.8g(0.055M)을 디옥산 100ml에 용해하고, 냉각하에 DCC 11.3g(0.055M)을 가하여 실온으로 3시간 동안 교반한다. 생성되는 디시클로헥실 요소를 여별하고, 여액에 메틸아민염산염 5.06g(0.075M), 트리에탈아민 10.5ml(0.075M)와 물 10ml를 가하여 격렬하게 교반한다. 12시간 후, 감압으로 용매를 유거하고, 남은 유상물에 석유벤젠을 가하여 결정화한다. 초산 에틸-석유 벤젠에서 재결정한다.12.5 g (0.05 M) of Z.Pro.OH and 9.8 g (0.055 M) of HONB are dissolved in 100 ml of dioxane, and 11.3 g (0.055 M) of DCC is added under cooling, followed by stirring at room temperature for 3 hours. The resulting dicyclohexyl urea was filtered off, and 5.06 g (0.075 M) of methylamine hydrochloride, 10.5 ml (0.075 M) of triethanamine and 10 ml of water were added to the filtrate and stirred vigorously. After 12 hours, the solvent is distilled off under reduced pressure, and petroleum benzene is added to the remaining oil to crystallize. Recrystallize from ethyl acetate-petroleum benzene.

수량 : 8.2g(63.3%)Quantity: 8.2g (63.3%)

융점 : 48.0~49.0℃Melting Point: 48.0 ~ 49.0 ℃

선광도 :

-28.1°(c=0.68. DMF중)Radiance:

-28.1 ° (c = 0.68 in DMF)

원소분석치 : C₁₄H₁₈O₃N₂로서Elemental analysis value: C ₁₄ H ₁₈ O ₃ N ₂

계산치 : C, 64.10; H, 6.92; N, 10.68Calculated: C, 64.10; H, 6.92; N, 10.68

실험치 : C, 64.03; H, 6.92; N, 10.65Experimental Value: C, 64.03; H, 6.92; N, 10.65

(b) BOC·His·Pro·NH·CH₃의 합성(b) Synthesis of BOC, His, Pro, NH, CH ₃

Z·Pro·NH·CH₃5.2g(0.02M)을 통상의 방법에 따라 접촉환원을 시행하여 H·Pro·NH·CH₃로 만든다. 한편, BOC·His(Tos)·OH·DCHA 11.8g(0.02M)을 초산에틸에 현탁하고, 빙냉한 0.02N-H₂SO₄110ml를 가하여 격렬히 진탕한다. 초산에틸층을 물로 2회 씻어 건조 후 감압으로 초산에틸로 유거한다. 유상잔사와 먼저의 H·Pro·NH·CH₃를 아세토니트릴 및 메틸렌클로라이드(1:1)의 혼액 200ml에 녹여 빙냉한다. 이에 DCC 4.12g(0.02M)을 가하여 12시간 교반한다. 생성되는 디시클로헥실요소를 여별하고 여액은 감압으로 농축한다. 남은 유상물은 N,N-디메틸포름아미드 20ml에 녹이고 HObt 2.70g(0.04M)을 가하여 실온으로 5시간 방치한다. 용매를 진공으로 유거하고 잔사를 초산에틸에 용해한다. 초산에틸층을 물로 3회 추출한다. 수층을 NaHCO₃로 pH8로 하고, 식염으로 포화시켜 초산에틸로 추출한다. 초산에틸층은 포화식염수로 2회 세척한 후, 무수 Na₂SO₄로 건조한다. 초산에틸은 감압에서 유거하고 남은 유상물은 석유벤젠으로 처리하여 분말로서 여취한다.5.2 g (0.02 M) of Z.Pro.NH.CH _{3 is} subjected to contact reduction according to a conventional method to obtain H.Pro.NH.CH ₃ . On the other hand, 11.8 g (0.02 M) of BOC, Hi (Tos), OH, and DCHA are suspended in ethyl acetate, and 110 ml of ice-cold 0.02 NH ₂ SO ₄ is added and shaken vigorously. The ethyl acetate layer was washed twice with water, dried and then distilled off with ethyl acetate under reduced pressure. The oily residue and the first H.Pro.NH.CH ₃ are dissolved in 200 ml of a mixture of acetonitrile and methylene chloride (1: 1) and ice-cooled. 4.12 g (0.02 M) of DCC was added thereto, followed by stirring for 12 hours. The resulting dicyclohexyl urea is filtered off and the filtrate is concentrated under reduced pressure. The remaining oil is dissolved in 20 ml of N, N-dimethylformamide, and 2.70 g (0.04 M) of HObt is added, and the mixture is allowed to stand at room temperature for 5 hours. The solvent is distilled off in vacuo and the residue is dissolved in ethyl acetate. The ethyl acetate layer is extracted three times with water. The aqueous layer was adjusted to pH 8 with NaHCO ₃ , saturated with salt, and extracted with ethyl acetate. The ethyl acetate layer was washed twice with saturated brine and then dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ . Ethyl acetate is distilled off under reduced pressure, and the remaining oil is treated with petroleum benzene and filtered off as a powder.

수량 : 2.60g(35.6%)Quantity: 2.60g (35.6%)

융점 : 75.0(~) 80.0℃Melting Point: 75.0 (~) 80.0 ℃

선광도 :

-22.7°(c=0.74, N,N-디메틸포름아미드중)Radiance:

-22.7 ° (c = 0.74 in N, N-dimethylformamide)

원소분석치 : C₁₇H₂₇O₄N₅로서Elemental analysis value: C ₁₇ H ₂₇ O ₄ N ₅ as

계산치 : C, 55.87; H, 7.45; N, 19.17Calculated: C, 55.87; H, 7. 45; N, 19.17

실험치 : C, 56.12; H, 7.55; N, 18.39Found: C, 56.12; H, 7.55; N, 18.39

(c) Oct·His·Pro·NH·CH₃의 합성(c) Synthesis of Oct-His-Pro-NH-CH ₃

BOC-His·Pro·NH·CH₃1.46g(0.004M)을 25% HBr/초산 15ml에 녹여 실온으로 20분간 방치한다. 에테르 150ml를 가하여 생기는 침전을 여취하고, NaOH를 넣은 데시케이터 중에서 12시간 건조한다. 이 건조 분말을 15ml의 N,N-디메틸포름아미드에 녹이고 냉각하에 트리에틸아민 1.12ml(0.008M)를 가한다. 생기는 염을 여별하고, 여액은 그대로 다음 반응에 사용한다. 한편, 3-옥소-5-카르복시퍼하이드로-1,4-티아진 645mg(0.004M)과 HONB 720mg(0.004M)을 N,N-디메틸포름아미드에 용해하고, 냉각하에 DCC 825mg(0.00M)를 가해서 3시간 교반한다. 이 액에 먼저의 아민 용액을 가하여 4℃로 12시간 교반한다. 생긴 디시클로헥시요소를 여별하고, 이액은 진공에서 농축하고, 잔사에 에테르를 가해서 분말로 한다. 분말은 메타놀:클로로포름(1:9)의 혼액 100ml에 녹여 실리카겔이 컬럼(5.0×12.0cm)에 주입하여 컬럼을 같은 용매 500ml로 씻은 후 메타놀:클로로포름(4:6)의 혼액으로 목적물을 용출한다. 주용출획분을 수집하고, 용매를 유거하며, 잔사는 소량의 0.1N-초산에 용해하여 세파덱스 LH-20의 컬럼(5.5×40.0cm)를 통과시켜 가일층 정제한다. 주용출획분을 수집하여 동결 건조한다.1.46 g (0.004 M) of BOC-His.Pro.NH.CH ₃ is dissolved in 15 ml of 25% HBr / acetic acid and allowed to stand at room temperature for 20 minutes. 150 ml of ether is added to precipitate the precipitate, which is dried for 12 hours in a desiccator with NaOH. This dry powder is dissolved in 15 ml of N, N-dimethylformamide and 1.12 ml (0.008 M) of triethylamine are added under cooling. The resulting salt is filtered off and the filtrate is used as is in the next reaction. Meanwhile, 645 mg (0.004 M) of 3-oxo-5-carboxyperhydro-1,4-thiazine and 720 mg (0.004 M) of HONB were dissolved in N, N-dimethylformamide, and DCC 825 mg (0.00 M) under cooling. Was added and stirred for 3 hours. The first amine solution is added to this solution and stirred at 4 ° C for 12 hours. The resulting dicyclohexyurea is filtered off, the solution is concentrated in vacuo and ether is added to the residue to give a powder. The powder is dissolved in 100 ml of a mixture of methanol and chloroform (1: 9), silica gel is injected into a column (5.0 × 12.0 cm), the column is washed with 500 ml of the same solvent, and the target is eluted with a mixture of methanol and chloroform (4: 6). . The main eluate is collected, the solvent is distilled off, and the residue is dissolved in a small amount of 0.1 N-acetic acid and further purified by passing through a column of Sephadex LH-20 (5.5 × 40.0 cm). The main extract is collected and lyophilized.

수량: 1.04g, 선광도 :

-37.3°(c=0.63 수중), 박층크로마토그라피 : Rf₁=0.36Quantity: 1.04g, Luminous intensity:

-37.3 ° (c = 0.63 underwater), thin layer chromatography: Rf ₁ = 0.36

원소분석치 : C₁₇H₂₄O₄N₆S·CH₃COOH·4H₂O로서Elemental Analysis Value: C ₁₇ H ₂₄ O ₄ N ₆ S.CH ₃ COOH.4H ₂ O.

계산치 : C, 42.21; H, 6.71; N, 15.55; S, 5.93Calculated: C, 42.21; H, 6.71; N, 15.55; S, 5.93

실험치 : C, 41.88; H, 5.20; N, 15.63; S, 6.42Experimental Value: C, 41.88; H, 5.20; N, 15.63; S, 6.42

[실시예 4]Example 4

Oct·His·Pro·NHCH₂CH₂CH₃의 합성Synthesis of Oct-His-Pro-NHCH ₂ CH ₂ CH ₃

(a) Z·Pro·NHCH₂CH₂CH₂CH₃의 합성(a) Synthesis of Z.Pro.NHCH ₂ CH ₂ CH ₂ CH ₃

Z·Pro·OH 12.5g(0.05M)을 실시예 3(a)와 같이 하여, 활성 에스테르로 변환하고, 이에 n-부틸아민 5.7ml(0.06M)를 가해서 12시간 교반한다. 감압에서 디옥산을 유거하고 잔사를 초산에틸에 용해한다. 초산에틸층은 5% NaHCO₃, N-HCl로 세적하고 건조한다. 초산에틸을 감압 유거하고 잔사에 석유벤젠을 가하여 여취한다. 초산에틸에서 재결정한다. 수량 14.0g(92.7%)12.5 g (0.05 M) of Z.Pro.OH is converted to the active ester in the same manner as in Example 3 (a), and 5.7 ml (0.06 M) of n-butylamine is added thereto and stirred for 12 hours. Dioxane is distilled off under reduced pressure, and the residue is dissolved in ethyl acetate. The ethyl acetate layer was washed with 5% NaHCO ₃ , N-HCl and dried. Ethyl acetate is distilled off under reduced pressure, and petroleum benzene is added to the residue. Recrystallize from ethyl acetate. Quantity 14.0 g (92.7%)

융점 : 94.0~95.0℃Melting Point: 94.0 ~ 95.0 ℃

선광도 :

-39.6°(c=0.54, N,N-디메틸포름아미드중)Radiance:

-39.6 ° (c = 0.54 in N, N-dimethylformamide)

원소분석치 : C₁₇H₂₄O₃N₂로서,Elemental Analysis Value: C ₁₇ H ₂₄ O ₃ N ₂ ,

계산치 : C, 67.08; H, 7.95; N, 9.20Calculated: C, 67.08; H, 7.95; N, 9.20

실험치 : C, 66.83; H, 7.90; N, 9.05Found: C, 66.83; H, 7.90; N, 9.05

(b) BOC·His·Pro·NHCH₂CH₂CH₂CH₃의 합성(b) Synthesis of BOC-His-Pro-NHCH ₂ CH ₂ CH ₂ CH ₃

상기 화합물은 Z-Pro·NHCH₂CH₂CH₂CH₃6.1g(0.02M)을 사용하여, 실시예 3(b)의 메틸화합물과 같은 방법으로 합성한다. 수량 4.4g(53.5%)The compound is synthesized in the same manner as the methyl compound of Example 3 (b), using 6.1 g (0.02 M) of Z-Pro.NHCH ₂ CH ₂ CH ₂ CH ₃ . Quantity 4.4g (53.5%)

융점 : 60.0~70.0℃Melting Point: 60.0 ~ 70.0 ℃

선광도 :

-27.3℃(c=0.70, N,N-디메틸포름아미드 중)Radiance:

-27.3 ° C. (c = 0.70 in N, N-dimethylformamide)

원소분석치 : C₂₀H₃₃O₄N₅로서,Elemental analysis value: C ₂₀ H ₃₃ O ₄ N ₅ ,

계산치 : C, 58.94; H, 8.16; N, 17.19Calculated: C, 58.94; H, 8. 16; N, 17.19

실험치 : C, 59.05; H, 8.51; N, 16.47Experimental Value: C, 59.05; H, 8.51; N, 16.47

(c) Oct·His·Pro·NHCH₂CH₂CH₂CH₃의 합성(c) Synthesis of Oct, His, Pro, NHCH ₂ CH ₂ CH ₂ CH ₃

상기 화합물은 BOC·His·Pro·NHCH₂CH₂CH₂CH₃1.63g(0.004M)을 사용하여 실시예 3(c)의 메틸화합물과 같은 방법으로 합성한다. 수량 1.16gThe compound was synthesized in the same manner as the methyl compound of Example 3 (c), using 1.63 g (0.004 M) of BOCHisProNHCH ₂ CH ₂ CH ₂ CH ₃ . Quantity 1.16 g

선광도 :

-65.0(c=0.60, 수중).Radiance:

-65.0 (c = 0.60, underwater).

박층크로마토그라피 : Rf₁=0.62Thin layer chromatography: Rf ₁ = 0.62

원소분석치 : C₂₀H₃₀O₄N₆S·CH₃COOH·4H₂O로서,Elemental Analysis Value: C ₂₀ H ₃₀ O ₄ N ₆ S.CH ₃ COOH.4H ₂ O,

계산치 : C, 45.35; H, 7.25; N, 14.42; S, 5.50Calculated: C, 45.35; H, 7. 25; N, 14.42; S, 5.50

실험치 : C, 44.85; H, 5.75; N, 14.94; S, 6.36Found: C, 44.85; H, 5.75; N, 14.94; S, 6.36

[실시예 5]Example 5

Oct·His·pro·NHCH₂CH₂C₆H₅의 합성Synthesis of Oct-His-pro-NHCH ₂ CH ₂ C ₆ H ₅

(a) Z·Pro-NHCH₂CH₂C₆H_{5의 합성} (a) _{Synthesis of} Z.Pro-NHCH ₂ CH ₂ C ₆ H ₅

Z·Pro·OH 12.5g(0.05M)를 사용하여 실시예 4(a)의 n-부틸 화합물과 같은 방법으로 합성한다.It synthesize | combined by the method similar to the n-butyl compound of Example 4 (a) using Z.Pro.OH 12.5g (0.05M).

수량 : 16.0g(90.9%)Quantity: 16.0g (90.9%)

융점 : 86.0~88.0℃Melting Point: 86.0 ~ 88.0 ℃

선광도 :

-39.6°(c=0.54, N,N-디메틸포름아미드 중)Radiance:

-39.6 ° (c = 0.54 in N, N-dimethylformamide)

원소분석치 : C₂₁H₂₄O₃N₂로서,Elemental analysis value: C ₂₁ H ₂₄ O ₃ N ₂ ,

계산치 : C, 71.57; H, 6.86; N, 7.59Calculated: C, 71.57; H, 6. 86; N, 7.59

실험치 : C, 71.38; H, 6.72; N, 7.87Found: C, 71.38; H, 6. 72; N, 7.87

(b) BOC·His-Pro·NHCH₂CH₂C₆H₅의 합성(b) Synthesis of BOCHis-ProNHCH ₂ CH ₂ C ₆ H ₅

Z·Pro·NHCH₂CH₂C₆H₅7.0g(0.02M)을 사용하여 실시예 3(a)의 메틸화합물과 같은 방법으로 합성한다.Z.Pro.NHCH ₂ CH ₂ C ₆ H ₅ was synthesized in the same manner as in the methyl compound of Example 3 (a) using 7.0 g (0.02 M).

수량 : 6.5g(71.4%)Quantity: 6.5g (71.4%)

융점 : 70.0~75.0℃(분해)Melting Point: 70.0 ~ 75.0 ℃ (Decomposition)

선광도 :

-21.7°(c=0.75, N,N-디메틸포름아미드 중)Radiance:

-21.7 ° (c = 0.75 in N, N-dimethylformamide)

원소분석치 : C₂₄H₃₃O₄N₅로서,Elemental Analysis Value: As C ₂₄ H ₃₃ O ₄ N ₅ ,

계산키 : C, 63.27; H, 7.30; N, 15.38Calculation key: C, 63.27; H, 7. 30; N, 15.38

실험치 : C, 63,41; H, 7.49; N, 14.59Experimental Value: C, 63,41; H, 7. 49; N, 14.59

(c) Oct·His·pro·NHCH₂CH₂C₆H₅의 합성(c) Synthesis of Oct.His.pro.NHCH ₂ CH ₂ C ₆ H ₅

BOC·His·Pro·NHCH₂CH₂C₆H₅1.82g(0.004M)을 사용하여 실시예 3(c)의 메틸화합물과 같은 방법으로 합성한다.Synthesis was carried out in the same manner as the methyl compound of Example 3 (c), using 1.82 g (0.004 M) of BOC-His-Pro-NHCH ₂ CH ₂ C ₆ H ₅ .

수량 : 1.37gQuantity: 1.37g

선광도 :

-80.5°(c=0.56, 수중)Radiance:

-80.5 ° (c = 0.56, underwater)

박층크로마토그라피 : Rf₁=0.64Thin layer chromatography: Rf ₁ = 0.64

원소분석치 : C₂₄H₃₀O₄N₆S·CH₂COOH·3H₂O로서Elemental Analysis Value: C ₂₄ H ₃₀ O ₄ N ₆ S.CH ₂ COOH.3H ₂ O.

계산치 : C, 52.52; H, 6.43; N, 14.13; S, 5.39Calculated: C, 52.52; H, 6. 43; N, 14.13; S, 5.39

실험치 : c, 52.15; H, 5.73; N, 14.32; s, 5.61Found: c, 52.15; H, 5.73; N, 14. 32; s, 5.61

[실시예 6]Example 6

Cbl·His·Pro·NH₂의 합성Synthesis of Cbl, Hi, Pro, NH ₂

(a) Γ-카르복시-Γ부티로락톤의 합성(a) Synthesis of Γ-carboxy-Γbutyrolactone

H·Clu·OH 29.4g(0.2M)을 200ml의 물에 현탁하고, 실온으로 아초산나트륨 16.8g(0.24M)을 물 120ml에 녹인 용액과 2N-H₂SO₄120ml를 동시에 약 90분 동안에 걸쳐 적하한다. 반응액은 그대로 12시간 방치한다. 물을 감압에서 유거하고, 잔사에 열 아세톤을 가하여 추출한다. 아세톤을 유거하고, 남은 유상물은 감압 증류에 의하여 정제한다. 목적물은 170.0~175.0℃/0.5mmHg에서 용출되어 나온다.29.4 g (0.2 M) of H.Clu.OH was suspended in 200 ml of water, and a solution of 16.8 g (0.24 M) of sodium acetate in 120 ml of water at room temperature and 120 ml of 2N-H ₂ SO ₄ were simultaneously added for about 90 minutes. Dropping over The reaction solution is left as it is for 12 hours. The water is distilled off under reduced pressure, and extracted with heat acetone. Acetone is distilled off and the remaining oil is purified by distillation under reduced pressure. The target product elutes at 170.0 ~ 175.0 ° C / 0.5mmHg.

수량 : 14.3g(55.0%)Quantity: 14.3g (55.0%)

융점 : 50℃Melting Point: 50 ℃

선광도 :

-11.4°(c=0.77, 2N-NaOH 중)Radiance:

-11.4 ° (c = 0.77 in 2N-NaOH)

원소분석치 : C₅H₆O₄·1/2 H₂O로서,Elemental Analysis Value: C ₅ H ₆ O ₄ · 1/2 H ₂ O,

계산치 : C, 44.61; H, 4.87; N, 0.00Calculated: C, 44.61; H, 4.87; N, 0.00

실험치 : C, 44.69; H, 4.77; N, 0.00Found: C, 44.69; H, 4.77; N, 0.00

(b) Cbl·His·Pro·NH₂의 합성(b) Synthesis of Cbl-His-Pro-NH ₂

Γ-카르복시-Γ-부티로락톤 1.43g(0.011M)과 펜타클로로페놀 3.46g(0.013M)을 10ml의 N,N-디메틸포름아미드에 용해하여 얼음으로 냉각한다. 이에 DCC 2.37g(0.0115M)을 가하여 4시간 교반한다. 한편, Z·His·Pro·NH₂3.85g(0.01M)을 실시예 1(c)와 같이 처리하여 H·His·Pro·NH₂의 N,N-디메틸포름아미드 용액으로 한다. 양자를 합쳐서 4℃에서 48시간동안 교반한다. 이로 생긴 디시클로헥실요소를 여별하고 용매를 진공에서 유거하고, 잔사에 초산에틸을 가해서 분말로서 여취한다. 이 분말을 열아세토니트릴로 2회, 다음에 초산에틸로 세척한다. 그 결과 얻어지는 분말을 물에 용해하여 불용물을 여별하고 여액은 동결 건조한다.1.43 g (0.011 M) of Γ-carboxy-Γ-butyrolactone and 3.46 g (0.013 M) of pentachlorophenol are dissolved in 10 ml of N, N-dimethylformamide and cooled with ice. DCC 2.37g (0.0115M) was added and it stirred for 4 hours. On the other hand, 3.85 g (0.01 M) of Z.His.Pro.NH ₂ was treated in the same manner as in Example 1 (c) to obtain an N, N-dimethylformamide solution of H.His.Pro.NH ₂ . Combine both and stir at 4 ° C. for 48 hours. The resulting dicyclohexyl urea is filtered off and the solvent is distilled off in vacuo, ethyl acetate is added to the residue and filtered as a powder. The powder is washed twice with hot acetonitrile and then with ethyl acetate. The resulting powder is dissolved in water, the insolubles are filtered off and the filtrate is freeze-dried.

수량 : 3.80gQuantity: 3.80g

선광도 :

-53.4°(c=0.56, 수중)Radiance:

-53.4 ° (c = 0.56, underwater)

박층크로마토그라피 : Rf₁=0.43Thin layer chromatography: Rf ₁ = 0.43

원소분석치 : C₁₆H₂₁O₅N₅·5.5H₂O로서,Elemental Analysis Value: C ₁₆ H ₂₁ O ₅ N ₅ .5.5H ₂ O,

계산치 : C, 41.56; H, 7.17; N, 15.15Calculated: C, 41.56; H, 7. 17; N, 15.15

실험치 : c, 41.55; H, 5.41; N, 15.02Experimental Value: c, 41.55; H, 5.41; N, 15.02

[실시예 7]Example 7

Cbl·His·Pip·NH₂의 합성Synthesis of Cbl-His-Pip-NH ₂

Γ-카르복시--부티로락톤 390mg(0.003M)을 실시예 6(b)와 같이 처리하여 펜타클로로 페닐에스테르로 변환시킨다. 한편, Z·His·Pip·NH₂1.20g(0.003M)을 실시예 2(c)에 기재한 방법으로 처리하여, H·His·Pip·NH₂의 N,N-디메틸포름아미드 용액으로 한다. 이제 양자를 합쳐서 4℃로 12시간 교반한다. 이 결과 생기는 디시클로헥실 요소를 여별하고, 여액은 진공에서 유거한다. 잔사는 초산에틸을 가하여 분말로 한다. 이 분말은 열 아세토니트릴로 2회 세척한 후, 0.1N-초산에 용해하고, 불용물을 여별하고, 여액은 세파덱스 LH-20의 컬럼(5.5×40.0cm)을 통과시킴으로써 정제한다. 주용출획분을 수집하여 동결 건조한다.390 mg (0.003 M) of Γ-carboxy-butyrolactone are treated as in Example 6 (b) and converted to pentachloro phenylester. On the other hand, by treatment in the Z · His · Pip · NH ₂ method described by 1.20g (0.003M) in Example 2 (c), and a N, N- dimethylformamide, a solution of H · His · Pip · NH ₂ . Now combine both and stir at 4 ° C for 12 hours. The resulting dicyclohexyl urea is filtered off and the filtrate is distilled off in vacuo. The residue is added to ethyl acetate to obtain a powder. The powder is washed twice with hot acetonitrile and then dissolved in 0.1 N-acetic acid, the insolubles are filtered off, and the filtrate is purified by passing through a column of Sephadex LH-20 (5.5 x 40.0 cm). The main extract is collected and lyophilized.

수량 : 400mgQuantity: 400mg

선광도 :

-49.1°(c=0.86, 수중)Radiance:

-49.1 ° (c = 0.86, underwater)

박층크로마토그라피 : Rf₁=0.45Thin layer chromatography: Rf ₁ = 0.45

원소분석치 : C₁₇H₂₃O₅N₅·½CH₃COOH·3H₂O로서,Elemental Analysis Value: C ₁₇ H ₂₃ O ₅ N ₅ .½CH ₃ COOH · 3H ₂ O,

계산치 : C, 46.85; H, 6.77; N, 15.18Calculated: C, 46.85; H, 6. 77; N, 15.18

실험치 : C, 46.62; H, 5.68; N, 15.35Found: C, 46.62; H, 5.68; N, 15.35

[실시예 8]Example 8

Cbl·His·Pro·NH·CH₃의 합성Synthesis of Cbl-His-Pro-NH-CH ₃

Γ-카르복시-Γ-부티로락톤 520mg(0.04M)을 실시예 6(b)에 기재한 방법으로 펜타클로로페닐로 변환한다. 한편, BOC·His·Pro·NH·CH₃1.46g(0.004M)을 실시예 3(c)에 기재한 방법으로 초리하여, H·His·Pro·NH·CH₃의 N,N-디메틸포름아미드 용액으로 한다. 이제 양자를 합쳐서 4℃로 12시간 교반한다. 이리하여 생기는 디시클로핵실요소를 여별하고, 여액은 진공에서 유거한다. 잔사에 초산에틸을 가해서 분말로 한다. 이것을 아세토니트릴-초산에에서 2회 재침전시킨 후, 0.1N-초사늬 소량에 녹여 불용물을 여별한다. 여액은 세파덱스 LH-20의 컬럼(5.5×40.0cm)을 통과시켜서 정제한다. 주용출획분을 수집하여 동결 건조한다.520 mg (0.04 M) of Γ-carboxy-Γ-butyrolactone are converted to pentachlorophenyl by the method described in Example 6 (b). On the other hand, BOC · His · Pro · NH · CH 3 1.46g (0.004M) of Example 3 (c) to chori by the method described in, H · His · Pro · NH · CH 3 of N, N- dimethylformamide It is set as an amide solution. Now combine both and stir at 4 ° C for 12 hours. The resulting dicyclonuclear urea is filtered off and the filtrate is distilled off in vacuo. Ethyl acetate is added to the residue to obtain a powder. This is reprecipitated twice in acetonitrile-acetic acid, and then dissolved in a small amount of 0.1 N-secondary acid to filter insoluble materials. The filtrate is purified by passing through a column of Sephadex LH-20 (5.5 × 40.0 cm). The main extract is collected and lyophilized.

수량 : 860mgQuantity: 860mg

선광도 :

-68.0℃(c=0.63, 수중)Radiance:

-68.0 ° C (c = 0.63, underwater)

박층크로마토그라피 : Rf₁=0.35Thin layer chromatography: Rf ₁ = 0.35

원소분석치 : C₁₇H₂₃O₅N₅·½CH₃COOH·3H₂O로서,Elemental Analysis Value: C ₁₇ H ₂₃ O ₅ N ₅ .½CH ₃ COOH · 3H ₂ O,

계산치 : C, 46.85; H, 6.77; N, 15.18Calculated: C, 46.85; H, 6. 77; N, 15.18

실험치 : C, 46.88; H, 5.79; N, 15.17Found: C, 46.88; H, 5.79; N, 15.17

[실시예 9]Example 9

Cbl·His-Pro-NHCH₂CH₂CH₂CH₂CH₃의 합성Synthesis of CblHis-Pro-NHCH ₂ CH ₂ CH ₂ CH ₂ CH ₃

상기 화합물은 Γ-카르복시-Γ부티로락톤 520mg(0.004M)와 BOC·His·Pro·NHCH₂CH₂CH₂CH₂1.63g(0.004M)을 사용하여 실시예 8에 기재한 메틸 화합물과 같은 방법으로 합성한다.The compound was prepared in the same manner as the methyl compound described in Example 8 using 520 mg (0.004 M) of Γ-carboxy-Γ butyrolactone and 1.63 g (0.004 M) of BOC Heis Pro NHCH ₂ CH ₂ CH ₂ CH _2. Synthesized by the method.

수량 : 852mgQuantity: 852mg

선광도 :

-66.4°(c=0.67, 수중)Radiance:

-66.4 ° (c = 0.67, underwater)

박층크로마토그라피 : Rf₁=0.60Thin layer chromatography: Rf ₁ = 0.60

원소분석치 : C₂₀H₂₉O₅H₅·1/2CH₃COOH·3.5H₂O로서,Elemental Analysis Value: C ₂₀ H ₂₉ O ₅ H _5. 1 / 2CH ₃ COOH.3.5H ₂ O,

계산치 : C, 49.21; H, 7.47; N, 13.67Calculated: C, 49.21; H, 7.47; N, 13.67

실험치 : C, 48.85; H, 6.40; N, 13.80Experimental Value: C, 48.85; H, 6. 40; N, 13.80

[실시예 10]Example 10

Cbl-His-Pro-NHCH₂CH₂C₆H₅의 합성Synthesis of Cbl-His-Pro-NHCH ₂ CH ₂ C ₆ H ₅

상기 화합물은 Γ-부티로락톤 520mg(0.004M)과 BOC-His-Pro-NHCH₂CH₂C₆H₅1.82(0.004M)를 사용하여 실시예 8에 기재된 메틸 화합물과 같은 방법으로 합성한다.The compound is synthesized in the same manner as the methyl compound described in Example 8 using 520 mg (0.004 M) of Γ-butyrolactone and BOC-His-Pro-NHCH ₂ CH ₂ C ₆ H ₅ 1.82 (0.004 M).

수량 : 517mg.Quantity: 517mg.

선광도 :

-78.8°(c=0.52 수중)Radiance:

-78.8 ° (c = 0.52 underwater)

박층크로마토그라피 : Rf₁=0.63Thin layer chromatography: Rf ₁ = 0.63

원소분석치 : C₂₄H₂₉O₅H₅·1/2CH₃COOH·6H₂O로서,Elemental Analysis Value: C ₂₄ H ₂₉ O ₅ H _5. 1 / 2CH ₃ COOH.6H ₂ O.

계산치 : C, 59.58; H, 7.16; N, 11.57Calculated: C, 59.58; H, 7. 16; N, 11.57

실험치 : c, 49.63; H, 5.43; N, 11.96Found: c, 49.63; H, 5. 43; N, 11.96

[실시예 11]Example 11

Oct-His-Pro-NHCH₂CH₂CH₂CH₂CH₃의 합성Synthesis of Oct-His-Pro-NHCH ₂ CH ₂ CH ₂ CH ₂ CH ₃

(a) Z-His-Pro-OtBu의 합성(a) Synthesis of Z-His-Pro-OtBu

Z-Pro-OtBu 10.0g(0.033M)을 메타놀에 용해하고 이를 Pd촉매상에서 수첨초리한다. 촉매를 여과에 의해 제거하고, 여액을 감압하에 농축한다. 잔사에 Z-His-NHNH₂9.1g(0.03M)으로 조제한 Z-Hsi-N₃와 초산에틸의 냉혼액을 가한다. 이 혼합물을 4℃로 72시간 교반한 다음. 5% 중탄산나트륨 수용액으로 세척하고 이어 물로 세척한다. 용매를 감압하에 증발시킨다. 잔사를 석유에테르로 분쇄시키고 초산에틸에서 재경정한다.10.0 g (0.033 M) of Z-Pro-OtBu is dissolved in methanol and hydrogenated on a Pd catalyst. The catalyst is removed by filtration and the filtrate is concentrated under reduced pressure. A cold mixture of Z-Hsi-N ₃ and ethyl acetate prepared with 9.1 g (0.03 M) of Z-His-NHNH ₂ was added to the residue. The mixture was stirred at 4 ° C. for 72 hours. Wash with 5% aqueous sodium bicarbonate solution and then with water. The solvent is evaporated under reduced pressure. The residue is triturated with petroleum ether and recrystallized in ethyl acetate.

수량 : 9.5g(71.4%)Quantity: 9.5g (71.4%)

융점 : 143~145℃Melting Point: 143 ~ 145 ℃

선광도 :

-41.7°(c=0.47, DMF 중)Radiance:

-41.7 ° (c = 0.47 in DMF)

원소분석치 : C₂₃H₃₀O₅N₄로서,Elemental analysis value: C ₂₃ H ₃₀ O ₅ N ₄ ,

계산치 : C, 62.42; H, 6.83; N, 12.66Calculated: C, 62.42; H, 6.83; N, 12.66

실험치 : C, 62.15; H, 6.75; N, 1.71Found: C, 62.15; H, 6.75; N, 1.71

(b) Oct-His-Pro-OH의 합성(b) Synthesis of Oct-His-Pro-OH

DCC 2.06g(0.01M)을 Z-His-Pro-OtBu 4.42g(0.01M)로부터 접촉 수첨법에 의하여 조제된 H-His-Pro-OtBu와 3-옥소-5-카르복시퍼하이드로-1,4-티아진 1.61g(0.01M)과 HONB 1.79g(0.01M)가 DMF에 혼입된 혼합용액에 가하고, 이 혼합물을 실온으로 12시간 교반한다. 이리하여 생기는 요소를 여취하고 여액은 진공에서 증발시킨다. 잔사를 에테르로 분쇄한 후 여과에 의해 수집하고 이를 진공에서 P₂O₅상에서 건조한다. 건조 분말을 실온에서 트리플로오로 초산으로 3시간동안 초리하여 t-부틸에스테르를 제거한다. 과잉산은 감압하에 증발시키고 잔사를 에테르로 분쇄한 다음 여별에 의해 수집하여 진공에서 NaOH 과립체상에서 건조한다.3.06 g (0.01 M) of DCC was prepared by contact hydrogenation from 4.42 g (0.01 M) of Z-His-Pro-OtBu and 3-oxo-5-carboxyperhydro-1,4. 1.61 g (0.01 M) of thiazine and 1.79 g (0.01 M) of HONB are added to the mixed solution mixed in DMF, and the mixture is stirred at room temperature for 12 hours. The resulting urea is filtered off and the filtrate is evaporated in vacuo. The residue is triturated with ether and then collected by filtration and dried over P ₂ O ₅ in vacuo. The dry powder is triturated with acetic acid for 3 hours at room temperature with trifluoro to remove t-butyl ester. The excess acid is evaporated under reduced pressure, the residue is triturated with ether and collected by filtration and dried over NaOH granules in vacuo.

건조 분말을 클로포름-메타놀(9:1)의 혼액에 용해하고 실리카겔컬럼(5.0×8.0cm)에 충전한다. 이 컬럼을 같은 용매로 세척하고, 클로로포름 : 메타놀(6:4)의 혼액으로 희석한다. 주용출획분을 수집하여 감압하에 농축한다. 잔사는 빙냉각하에 0.2N-HCl50ml에 용해하고 동결 건조한다.The dry powder is dissolved in a mixture of chloroform-methanol (9: 1) and filled into a silica gel column (5.0 x 8.0 cm). The column is washed with the same solvent and diluted with a mixture of chloroform: methanol (6: 4). Collect the main eluate and concentrate under reduced pressure. The residue is dissolved in 50 ml of 0.2N-HCl under ice cooling and freeze-dried.

수량 : 2.60g(60.5%)Quantity: 2.60g (60.5%)

선광도 :

-61.9°(c=0.49, 수중)Radiance:

-61.9 ° (c = 0.49, underwater)

박층크로마토그라피 : Rf₁=0.35Thin layer chromatography: Rf ₁ = 0.35

원소분석치 : C₁₆H₂₁O₅N₅S·HCl·2.5H₂로서,Elemental Analysis Value: As C ₁₆ H ₂₁ O ₅ N ₅ S.HCl.2.5H ₂ ,

계산치 : C, 40.29; H, 5.72; N, 14.68; S, 6.23Calculated: C, 40.29; H, 5.72; N, 14.68; S, 6.23

실험치 : C, 40.28; H, 5.09; N, 14.65; S, 6.19Experimental Value: C, 40.28; H, 5.09; N, 14.65; S, 6.19

(c) Oct-His-Pro-NHCH₂CH₂CH₂CH₂CH₃의 합성(c) Synthesis of Oct-His-Pro-NHCH ₂ CH ₂ CH ₂ CH ₂ CH ₃

DCC 620mg(0.003M)을 Oct-His-Pro-OH 432mg(0.001M), HONB 269mg(0.0015M), n-아밀아민 0.29ml(0.0025M)를 DMF에 혼입한 혼액에 첨가하고, 이 혼합물을 실온하에 48시간 교반한다. 이리하여 생기는 요소를 여취하고, 여액을 진공하에 증발시킨다. 전사를 에테르로 분쇄하고 이 결과 얻어지는 분말을 실시예 3(c)에 기재한 바와 같은 방법으로 정제한다.620 mg (0.003 M) of DCC, 432 mg (0.001 M) of Oct-His-Pro-OH, 269 mg (0.0015 M) of HONB, 0.29 ml (0.0025 M) of n-amylamine were added to the mixture incorporating DMF and the mixture was added. Stir at room temperature for 48 hours. The resulting urea is filtered off and the filtrate is evaporated in vacuo. The transcription is triturated with ether and the resulting powder is purified by the method as described in Example 3 (c).

수량 : 110mgQuantity: 110mg

선광도 :

-65.4°(c=0.35, 수중)Radiance:

-65.4 ° (c = 0.35, underwater)

박층크로마토그라피 : Rf₁=0.73Thin layer chromatography: Rf ₁ = 0.73

원소분석치 : C₂₁H₃₂O₄N₆S·CH₃COOH·2H₂OElemental Analysis Value: C ₂₁ H ₃₂ O ₄ N ₆ S.CH ₃ COOH · 2H ₂ O

계산치 : C, 49.27; H, 7.19; , 14.99; S, 5.72Calculated: C, 49.27; H, 7. 19; , 14.99; S, 5.72

실험치 : C, 48.83; H, 6.56; N, 15.36; S, 5.57Found: C, 48.83; H, 6.56; N, 15.36; S, 5.57

[실시예 12]Example 12

대응하는 아민류를 사용하여 실시예 11(c)에 기재한 바와 같은 방법으로 제조되는 화합물을 다음에 열거하였다.The compounds prepared by the method as described in Example 11 (c) using the corresponding amines are listed below.

Oct-His-Pro-NHCH₂CH₃의 합성Synthesis of Oct-His-Pro-NHCH ₂ CH ₃

수량 : 137mgQuantity: 137mg

선광도 :

-67.7°(c=0.31, 수중)Radiance:

-67.7 ° (c = 0.31, underwater)

박층크로마토그라피 : Rf₁=0.55Thin layer chromatography: Rf ₁ = 0.55

원소분석치 : C₁₈H₂₆O₄N₆S·CH₃COOH·H₂O로서,Elemental Analysis Value: C ₁₈ H ₂₆ O ₄ N ₆ S.CH ₃ COOHH ₂ O,

계산치 : C, 47.99; H, 6.44; N, 16.79; S, 6.41Calculated: C, 47.99; H, 6. 44; N, 16.79; S, 6.41

실험치 ; C, 47.74; H, 6.43; N, 16.74; S, 6.15Experimental value; C, 47.74; H, 6. 43; N, 16.74; S, 6.15

Oct-His-Pro-NH-CH₂CH₂CH₃의 합성Synthesis of Oct-His-Pro-NH-CH ₂ CH ₂ CH ₃

수량 : 90mgQuantity: 90mg

선광도 :

-51.6°(c=0.31, 수중)Radiance:

-51.6 ° (c = 0.31, underwater)

박층크로마토그라피 : Rf₁=0.65Thin layer chromatography: Rf ₁ = 0.65

원소분석치 : C₁₉H₂₈O₄N₆S·CH₃COOH·2H₂O로서,Elemental Analysis Value: C ₁₉ H ₂₈ O ₄ N ₆ S.CH ₃ COOH.2H ₂ O,

계산치 : C, 47.36; H, 6.81; N, 15.78; S, 6.02Calculated: C, 47.36; H, 6.81; N, 15.78; S, 6.02

실험치 : C, 47.26; H, 6.13; N, 15,49; S, 6.02Found: C, 47.26; H, 6. 13; N, 15, 49; S, 6.02

Oct-His-Pro-NHCH₂CH₂CH₂CH₂CH₂CH₃의 합성Synthesis of Oct-His-Pro-NHCH ₂ CH ₂ CH ₂ CH ₂ CH ₂ CH ₃

수량 : 105mgQuantity: 105mg

선광도 :

-66.4°(c=0.54, 수중)Radiance:

-66.4 ° (c = 0.54, underwater)

박층크로마토그라피 : Rf₁=0.70Thin layer chromatography: Rf ₁ = 0.70

원소분석치 : C₂₂H₃₄O₄N₆S·CH₃COOH·2H₂O로서,Elemental Analysis Value: C ₂₂ H ₃₄ O ₄ N ₆ S.CH ₃ COOH.2H ₂ O,

계산치 : C, 50.16; H, 7.36; N, 14.62; S, 5.58Calculated: C, 50.16; H, 7. 36; N, 14.62; S, 5.58

실험치 : C, 49.76; H, 7.18; N, 15.78; S, 5.66Experimental Value: C, 49.76; H, 7. 18; N, 15.78; S, 5.66

전기한 실시예의 방법과 같이 하여 다음과 같은 펩티드를 제조할 수 있다.In the same manner as in the above-described example, the following peptide can be prepared.

Oct-His-Pro-NHCH₂CH₂OCH₃, Oct-His-Tac-NHCH₂CH₂CH₃ Oct-His-Pro-NHCH ₂ CH ₂ OCH ₃ , Oct-His-Tac-NHCH ₂ CH ₂ CH ₃

Cbl-His-Pro-NHCH₂CH₂OCH₃, Oct-His-Tac-NHCH₂CH₂OHCbl-His-Pro-NHCH ₂ CH ₂ OCH ₃ , Oct-His-Tac-NHCH ₂ CH ₂ OH

Oct-His-Pro-NHCH₂CH₂OH, Cbl-His-Tac-NH₂ Oct-His-Pro-NHCH ₂ CH ₂ OH, Cbl-His-Tac-NH ₂

Cbl-His-Pro-NHCH₂CH₂OH, Cbl-His-Tac-NHCH₂CH₂CH₂CH₃ Cbl-His-Pro-NHCH ₂ CH ₂ OH, Cbl-His-Tac-NHCH ₂ CH ₂ CH ₂ CH ₃

Oct-His-Tac-NH_2,Cbl-His-Tac-NHCH₂CH₂CH₃ Oct-His-Tac-NH _2, Cbl-His-Tac-NHCH ₂ CH ₂ CH ₃

Oct-His-Tac-NHCH₂CH₂CH₂CH₂CH₃, Cbl-His-Tac-NHCH₂CH₂OHOct-His-Tac-NHCH ₂ CH ₂ CH ₂ CH ₂ CH ₂ CH ₃ , Cbl-His-Tac-NHCH ₂ CH ₂ OH

[약리작용의 실험 결과][Experimental Results of Pharmacological Actions]

[시험방법][Test Methods]

(1) TSH 방출작용(1) TSH release

Schally의 방법(J. Biol. Chem. 244, p.4077, 1969)에 따라 랫트를 사용하여 시험하였다.Rats were tested according to Schally's method (J. Biol. Chem. 244, p. 4077, 1969).

(2) 마취 길항작용(항억제제작용)(2) anesthesia antagonism

마우스(ICR/JCL, 숫컷 4주령)를 사용하여 펜토바르비탈소오다 55mg/kg을 복강내에 투여하고, 정향 반사소실시, 즉 10분 후에 화합물(I) 및 TRH, 대조군에는 생리 식염수를 정맥내에 투여하여 정향반사 회복까지의 시간을 측정하였다[Prange etal. Life Sei. 14, p.447-55, (1974)].Mice (ICR / JCL, male 4 weeks old) were administered pentobarbitalsoda 55 mg / kg intraperitoneally and 10 minutes after clove reflexes, ie, compound (I) and TRH in control group, physiological saline intravenously The time to recovery of the clove reflection was measured by administration [Prange et al. Life Sei. 14, p. 447-55, (1974).

(3) 운동량 증대작용(3) momentum increase action

마우스(ICR/JCL 숫컷, 4주령) 10수를 1개군으로 사용하여 각 마우스를 회전 바구니(Activity wheel)에 넣어서, 자발운동 증대작용을 관찰하였다. 마우스에 화합물(I)을 정맥내에 투여한 이후 3시간의 자발운동에 의한 회전수를 대조군의 그것과 비교하였다.10 mice (ICR / JCL male, 4 weeks old) were used as one group, and each mouse was put in an activity wheel to observe spontaneous movement enhancement. After intravenous administration of compound (I) to mice, the rotational speed by spontaneous movement of 3 hours was compared with that of the control group.

(4) 도파민 작용 증강작용(4) dopamine potentiation

사전에 흡인에 의해 한쪽의 미상핵(尾狀核)을 파괴한 1군 10수의 숫마우스(ICR/JCL)를 레제르핀(i.p) 0.25mg/kg 전처치하(18~22시간) 도파민 수용체 자극제인 아포모르핀 0.25mg/kg,(I.P)에 의한 회전 운동수 및 두부의 전회(轉回) 발생율에 대한 화합물(I)의 영향을 조사했다. 화합물(I)은 아포모르핀 투여 30분 전에 투여하여 비 투여군(대조군)의 그것과 비교하였다. 본 시험은 Evertt 등[Fed. Proc., 23. P. 138, (1964)]이 실시한 D1-DOPA 투여에 의한 DOPA 상승작용을 알아보는 실험과 원리적으로는 동일하며, 도파민의 중추작용의 증강작용을 알아보기 위한 것이다.Dopamine receptor stimulant with 0.25 mg / kg pre-treatment (18-22 hours) of 10 male males (ICR / JCL) that had previously destroyed one caudate nucleus by suction. The effect of compound (I) on the number of rotational moments and the incidence of turnover by head apomorphine 0.25 mg / kg, (IP) was investigated. Compound (I) was administered 30 minutes before apomorphine administration and compared with that of the non-administered group (control). This test was conducted by Evertt et al. [Fed. Proc., 23. P. 138, (1964)] is basically the same as the experiment to determine the DOPA synergism by the administration of D1-DOPA, and to examine the potentiating effect of the dopamine central action.

이상 네가지 방법에 의하여 나타나는 화합물(I)의 효력비는 TRH를 1로 하여 TRH와 동일용량으로 표시하는 작용의 정도비로서 표시하였다. 성적은 다음 표에 나타내었다.The potency ratio of compound (I) represented by the above four methods was expressed as the ratio of the degree of action expressed at the same dose as TRH with TRH of 1. The results are shown in the following table.

[제1표][Table 1]

본 발명의 화합물(I)은 전기한 실시예와 동일한 방법으로 제조할 수 있으며, 전기한 약리시험 방법과 동일한 방법으로 약리작용을 시험할 수 있다.Compound (I) of the present invention may be prepared in the same manner as in the above-described examples, and the pharmacological action may be tested in the same manner as in the aforementioned pharmacological test method.

Claims (1)

팹티드를 형성할 수 있는 아미노산 또는 펩티드 잔기와 펩티드를 형성할 수 있는 잔기를 축합시킴을 특징으로 하는 하기 구조식의 신규 펩티드 또는 그의 약리학적으로 허용 가능한 염의 제조방법.A method for preparing a novel peptide or a pharmacologically acceptable salt thereof, wherein the amino acid or peptide moiety capable of forming a peptide is condensed with a moiety capable of forming a peptide.

상기 식에서, A는 수소, 알킬, 아랄킬, 알콕시알킬, 하이드록시알킬 또는 알콕시기를 나타내고, R은

이고, X는 -S- 또는 -(CH)₂n이다(단, 여기서 n은 1 또는 2임).Wherein A represents hydrogen, alkyl, aralkyl, alkoxyalkyl, hydroxyalkyl or an alkoxy group, R is

And X is -S- or-(CH) ₂ n where n is 1 or 2.