KR790001821B1 - Preparation of fermented milk containing viable bifidobacteria - Google Patents

Abstract

Fermented milk contg, viable Bifidobacterium bifidum, was manufactured by culturing Bifidobacterium bifidum YIT-4002 on pure milk without reducing agents or growth stimulators at 36-38OC and pH 6-7 aerobically.

Description

비휘이도 생균을 함유하는 발효유제품의 제조법Manufacturing method of fermented milk product containing vivid bacteria

제 1 도 및 제 2 도는 비휘이도균의 배양중의 생균수, 산도 및 pH의 변화를 표시하는 그래프.1 and 2 are graphs showing changes in the number of viable cells, acidity and pH during culturing of non-viral bacteria.

본 발명은 비휘이도 균의 생균을 함유하는 발효유제품의 제조법에 관한 것이다.The present invention relates to a method for producing a fermented milk product containing live bacteria of non-bright bacteria.

비휘이도 균은 모유영양아의 장내(腸內) 세균총(叢)의 거의 전부를 차지하는 세균으로서 잘 알려져 있다. 비휘이도균의 생리적 의의에 관하여서는 이미 다수의 연구가 있으며,Non-viral bacteria are well known as bacteria which occupy almost all of the intestinal bacterial flora of breast-feeding infants. There is already a lot of research on the physiological significance of non-Wifi bacteria.

(1) 부패균에 의한 부패의 억제작용(1) Inhibition of Corruption by Decay Bacteria

(2) 독성 아민의 생성 지지작용(2) supporting the production of toxic amines

(3) 포스포 푸로테인 포스파타아제의 작용에 의한 인유(人乳) 카제인의 소화촉직 작용.(3) Digestive action of phosphorus casein by action of phosphoprotein phosphatase.

(4) 유산(乳酸), 초산(酢酸), 의산(擬酸) 등의 생성에 수반되는 장관(腸管)내의 pH 저하에 의한 병원균의 생육억제 작용 등이 명백히 되어 있다.(4) Inhibition of growth of pathogens by pH lowering in the intestinal tract accompanying production of lactic acid, acetic acid, and acid, etc. is evident.

이와 같이 유아에 있어서 유용한 비휘이도균이 인공 영양아의 경우는 대단히 적으며 이것이 모유영양아에 비교하여서 장내질환에 걸리기 쉬운 원인의 하나라고 생각되고 있다.As such, there are very few non-viral bacteria that are useful in infants, and are considered to be one of the causes of intestinal diseases as compared to breast-fed infants.

그래서 인공영양아의 장관내 세균총을 모유영양아와 동일하게 바꾸는 것을 목적으로 하여 육아용 조정분유의 모유화나, 비휘이도균을 함유하는 육아용 조정분유 등의 유제품을 제조하여 투여하는 것이 시도되어 왔었다.Therefore, it has been attempted to manufacture and administer dairy products such as breast milking of infant formulas or parenting formulas containing non-viral bacteria for the purpose of changing the intestinal bacterial flora of artificial nutrients to breast milk nutrients.

그러나 우유 등을 배지로 하여 배양한 비휘이도균을 투여하려고 하는 후자의 시도는 다음과 같은 문제점에 조우(遭遇)하여 아직도 실용화된 예는 없다. 즉 비휘이도균은 우유의 가공에 널리 사용되고 있는 유산균과 비교하여 보면 다음과 같은 문제가 있다.However, the latter attempt to administer non-viral bacteria cultured with milk or the like as a medium encounters the following problems and there is no practical example. In other words, compared to lactic acid bacteria that are widely used in the processing of non-microbial bacteria has the following problems.

(1) 생육환경으로서 보통 엄격한 혐기(嫌氣)조건을 필요로 한다.(1) The growing environment usually requires strict anaerobic conditions.

(2) 영양조건이 복잡하고 또한 엄격하기 때문에 효모엑쓰 등의 생육촉진물질을 함유하지 않은 순수한 우유 배지에서는 증식하지 않는다.(2) Due to the complex and strict nutritional conditions, it does not grow in pure milk medium that does not contain growth promoting substances such as yeast extract.

(3) 내산성이 낮기 때문에 발효유와 같은 낮은 pH 영역에서 장기간 생존시키는 것은 곤란하다.(3) Long-term survival in low pH regions such as fermented milk is difficult because of low acid resistance.

우유배지에 비휘이도균의 생육 촉진물질을 첨가하면 호기적 조건에서도 배양할 수 있으나 제품의 맛이나 냄새가 악화하는 일이 많으며, 또 생육촉진물질은 일반적으로 값이 비싸므로 실용적이 못된다.If the growth medium of non-microbial bacteria is added to the milk medium, it can be cultured even in aerobic conditions, but the taste or smell of the product is often worsened, and the growth promoting material is generally expensive and therefore not practical.

본 발명자 등은 이상과 같은 비휘이도균 배양상의 문제점을 해결하기 위하여 여러가지 연구를 거듭한 결과 호기적조건하에서 환원제도 생육촉진물질도 전혀 함유하지 않은 순수한 우유배지에서 왕성하게 증식한다고 하는 특이한 성질을 가진 비휘이도균이 존재하는 것을 알게된 것이다.The present inventors have conducted various studies to solve the above problems of non-Wifi bacteria, as a result of vigorous growth in pure milk medium containing no reducing agent or growth promoting substance under aerobic conditions. I knew that there was an island.

본 발명은 위와 같은 견해에 따른 것으로서 상기한 새로이 발견된 비휘이도균을 전유(全乳), 탈지유 또는 이들의 분유에서의 환원유 등으로부터 이루어진 우유배지에 접종하여 배양하는 것을 특징으로 하는 비휘이도생균을 함유하는 발효유제품의 제조법이다.The present invention is in accordance with the above-described view, the non-visible bacteria characterized in that the inoculated and cultured in the milk medium consisting of the newly discovered non-visible bacteria, such as whole milk, skim milk or reduced milk in these powdered milk. It is a manufacturing method of the fermented milk product containing.

상기 본 발명에서 사용하는 비휘이도균은Non-microbial bacteria used in the present invention is

(1) 호기 조건하에서 증식할 수 있으며 생육촉진 물질의 첨가도 불필요하므로 특별한 배양법을 채용할 필요가 없으며 배양이 극히 용이하다.(1) It can grow under aerobic conditions, and it is unnecessary to add growth promoting material, so there is no need to adopt special culture method and culture is extremely easy.

(2) 첨가물에 의한 기호성의 저하를 막는 것을 가능하게 하고 배양물의 그 후의 조미공정을 용이하게 한다.(2) It is possible to prevent the decrease in palatability by the additives and to facilitate the subsequent seasoning step of the culture.

(3) 배양에 과잉된 첨가물을 필요로 하지 않는 것은 특히 유아용식품(또는 그것을 위한 첨가물)으로서 호직하다.(3) Those that do not require excess additives in culture are particularly suitable as baby food (or additives for them).

(4) 균이 본질적으로 내산소성을 갖추고, 또한 영양요구성도 단순하므로 배양물(또는 그 가공물)의 보존중의 생균수의 저하가 적으며, 또한 생균 유지를 위한 조건에 따라서 음식물 등에의 가공이 제한되는 일이 적다.(4) The bacteria are essentially oxygen resistant and have a simple nutritional composition, so that the number of viable cells in the culture (or the processed product) is less reduced, and the processing of foods and the like in accordance with the conditions for maintaining the viable bacteria is difficult. There are few restrictions.

이 때문에 본 발명에 의하여 종래 공지의 비휘이도균으로서는 불가능하였던 배양법에 의해 배양이 가능하게 되며, 또한 새로운 비휘이도생균 함유음식물의 제조가 가능하게 된 것이다.For this reason, the present invention enables culturing by a culture method that has not been possible with conventionally known non-microbial bacteria, and also enables the production of new non-microbial bacteria-containing foods.

이와 같이 비휘이도균을 이용한 음식물 등의 제조에 새로운 가능성을 제공한 신규의 비휘이도균주는 이미 몇개로 단리(單離)되어 각각 그 유용성이 확인되어가고 있는 바, 그 대표적인 일예에 대하여 이하 상세히 서술한다. 이 비휘이도균[비휘이도박테리움 비휘이덤(Bifido bacterium bifidum) YIT-4002]는 건강한 모유영양아의 분변(糞便)에서 채취한 비휘이도균을 계대배양(繼代培養)한 것 중에서 발견된 것이며, 이하 서술하는 바와 같은 특성을 가지고 있다.As described above, a number of new non-viral strains that have provided new possibilities for the production of foods and the like using non-viral bacteria have already been isolated, and their usefulness has been confirmed. This non-Wifi bacteria (Bifido bacterium bifidum YIT-4002) was found in subcultured non-Wifi bacteria from the feces of healthy breast-feeding infants. It has the characteristics as described below.

(1) 주요균학적 성질과 상태(1) Main bacteriological properties and condition

그람 양성(gram 陽性) 무아포간균(無娥胞桿菌) (0.5×2-3μ)으로 세포 내부에 메틸렌부루에 친화성을 가지고 있는 과립(顆粒)이 존재한다.Gram-positive Gram-free Bacillus spp. (0.5 × 2-3μ) and granules that have affinity for methylene bran in the cell.

현미경으로 관찰하면 세포의 선단이 분기하여 Y자형성, V자형상, 만곡형상 등 여러가지 형상을 나타낸다.When viewed under a microscope, the tip of the cell branches to show various shapes such as Y-shape, V-shape, and curved shape.

중층법으로서 형성시킨 코로니(COLONY)는 원통형상, 볼록형상(Convex), 렌즈형상을 표시하며 프레트 저부에 생긴 코로니는 여러가지 현상을 나타낸다.COLONY formed as a middle layer method shows a cylindrical shape, a convex shape, and a lens shape, and the colony generated at the bottom of the frit shows various phenomena.

혐기 VL-G, 액체배지로서 72시간 배양 후의 초산(酢酸)/유산(乳酸)의 생성몰비는 1.6±0.5이었다.The production molar ratio of acetic acid / lactic acid after incubation for 72 hours as anaerobic VL-G and liquid medium was 1.6 ± 0.5.

또한 상기 배양액에 대하여 유산의 선광도를 검토하였던 바, 선광도-0.038 선광성 L(+) 24%+DL 76%를 표시하였다.In addition, when the optical density of lactic acid was examined with respect to the culture solution, the optical density -0.038 optical density L (+) 24% + DL 76% was displayed.

카타라아제(-), 탄산가스 생성(-), 시스테인 밀크 응고성(+), 제라틴 액화성 (-), 초산(硝酸鹽)의 환원성(-), 인돌의 생성(-), 유화수소 생성(硫化水素生性)(-)이다.Catalase (-), carbon dioxide (-), cysteine milk coagulation (+), gelatin liquefaction (-), acetic acid (-) reduction (-), indole (-), hydrogen sulfide Produced (-).

이들의 분류학적 성질과 상태는 비휘이도박테리움 속의 정의를 만족하는 것이다.Their taxonomic nature and state satisfy the definition of the genus Non-Fidobacterium.

(2) 지적(至適) 증식 온도 및 pH(2) Intellectual growth temperature and pH

지적 온도는 36-38℃이며, 25℃ 이하 및 45℃ 이상에서는 증식하지 않는다.Intellectual temperature is 36-38 degreeC, and does not proliferate below 25 degreeC and 45 degreeC or more.

지적 pH는 6-7로서 pH5.0 이하에서는 증식하지 않는다.Intellectual pH is 6-7 and does not grow below pH5.0.

(3) 당(糖) 발효성(3) sugar fermentation

글루코오스, 후락토오스, 락토오스, 갈락토오스의 각당은 양성, 아라비노오스, 키시로오스, 살리신, 만노오스, 만니톨, 메레치토오스, 세로비오오스, 솔비톨, 이누린, 트레하로오스, 람노오스, 말토오스, 리보오스, 솔보오스의 각당은 음성이다.Each sugar of glucose, fructose, lactose and galactose is positive, arabinose, cysiloose, salicylic acid, mannose, mannitol, meretose, serobiose, sorbitol, inulin, treharose, rhamnose, maltose, Riboose and Solboose are negative.

이와 같은 발효 패턴은 비휘이도균의 표준주(비휘이도 박테리움 비휘이덤 E319, 이하 표준주라함)의 그것과 완전히 일치하였다.This fermentation pattern was in full agreement with that of the standard strains of the non-microbial bacteria (non-visible bacterium vividum E319, hereinafter referred to as standard strain).

(4) 산소감수성 및 영양요구성(4) oxygen sensitivity and nutritional composition

유고형분농도 12%의 환원탈지유배지(생육촉진제 등의 첨가물을 포함하지 않는다)에 산소를 포화시켜서(약 6.5ppm) 초기균수 10⁷-10⁸/㎖, 배양온도 37℃로서 호기배양을 행한 경우, 24시간 이내에 균수 10⁹/㎖ 이상에 달한다(동일한 배양조건으로서 보통의 비휘이도균은 거의 증식하지 않거나, 도리어 균수가 감소한다. 후술 (後述) 실시예 (2) 참조).When aerobic cultivation is carried out by reducing oxygen at 12% milk solid concentration (does not contain additives such as growth accelerator) and saturating oxygen (approximately 6.5 ppm) with an initial bacterial count of 10 ⁷ -10 ⁸ / ml and a culture temperature of 37 ° C. The number of bacteria reaches 10 ⁹ / ml or more within 24 hours. (In the same culture conditions, normal non-microbial bacteria hardly proliferate, or rather, the number of bacteria decreases. See Example (2) below).

이상과 같이 YIT-4002는 보통의 비휘이도균이 증식하지 않는 호기적 조건하의 순수 우유배지에서 잘 증식하는 일 이외는 비휘이도 박테리움 비휘이덤과 전연 부합한 분류학적 성질과 상태를 표시한다. 이것으로부터 본 균주(菌株)는 비휘이도박테리움 비휘이덤의 변이주(變異株)인 것이 확인되었다.As described above, YIT-4002 displays taxonomic properties and state consistent with non-viral bacterium vividum except that it grows well in pure milk medium under aerobic conditions where normal non-viral bacteria do not grow. From this, it was confirmed that this strain is a mutant strain of non-fidobacterium non-widomes.

[동상 기준은 버지스 메뉴얼(Bergey's Manual-1974년)에 의함, 또한 본 균주는 공업기술원 미생물공업기술 연구소에 균 기탁수리 번호 제3371호로서 기탁하고 있다.][The statue is based on the Burgy's Manual (1974), and the strain has been deposited with the microbial laboratory No. 3371 to the Institute of Microbiological Technology, Institute of Technology.

본 발명을 실시함에 있어서 사용하는 비휘이도균이 상술한 바와 같이 호적한 특성을 갖고 있으므로 하등 특수한 배양방법을 채용할 필요가 없으며, 보통의 유산균배양과 동일한 방법에 의하여도 지장이 없다. 따라서 유산균과의 혼합배양도 가능하다.Since the non-microbial bacteria used in carrying out the present invention have suitable characteristics as described above, there is no need to adopt any special culture method, and the same method as the normal lactic acid bacteria culture does not interfere. Therefore, mixed culture with lactic acid bacteria is possible.

종래의 비휘이도균의 배양에 즈음하여 반드시 사용되어온 환원제나 생육촉진제는 본 발명의 경우 꼭 필요한 것은 아니다. 그러나 배양물의 이용상 장해가 되지 아니하는 경우에 소량의 생육촉진제 등을 사용하여 균의 증식을 촉진하는 것은 지장이 없다.In the present invention, a reducing agent or a growth promoter, which have been necessarily used in the culture of conventional non-microbial bacteria, is not necessary. However, when the use of culture is not impeded, there is no problem in promoting the growth of bacteria by using a small amount of growth promoter.

보통의 배양조건에서는 배양 18-24시간에서 생균수가 최고에 달하고, 이것과 병행하여 산이 생성하여 pH가 저하한다. 또다시 배양을 계속하면 균수는 감소하기 시작하나 산의 생성은 아직도 잠시 계속한 후 포화치(飽和値)에 달한다.Under normal culture conditions, the viable cell number reaches the highest at 18-24 hours of culture, and in parallel, acid is generated and the pH decreases. If the culture continues again, the number of bacteria starts to decrease, but acid production is still continued for a while before reaching saturation level.

따라서 배양물의 용도와의 관련에 있어서 적당한 단계에서 배양을 중단한다. 배양물은 그대로 혹은 적당하게 감미료나 과즙, 물 등과 혼합하여 또는 다른 유제품이나 기타의 식품과 혼합하여 비휘이도 생균을 함유하는 새로운 음식물로서 이용할 수 있다. 또 배양물을 일단 동결건조 또는 분무건조하고 비휘이도 생균을 함유하는 건조분말로 한 후 이용할 수도 있다.Therefore, the culture is stopped at an appropriate stage in relation to the use of the culture. The culture may be used as a new food containing non-viral viable bacteria as it is or as appropriately mixed with sweeteners, juices, water, or the like, or with other dairy products or other foods. The culture may also be lyophilized or spray-dried and used as a dry powder containing non-viral viable bacteria.

이하 실시예에 의하여 본 발명을 설명한다.The present invention will be described by the following examples.

각 실시예에 있어서 생균수는 로고사(Rogosa)의 개량변경된 배지를 사용하여 중층법으로서 측정한 값이며, 산도는 배양액 5㎖를 중화하는데 소요한 0.1N 가성소오다 ㎖수(數)이다. 또 변이주라고 함은 전기한 비휘이도박테리움 비휘이덤(YIT-4002)를 지칭하는 것이다.In each example, the number of viable cells is measured by the stratification method using a modified modified medium of Rogosa, and the acidity is the number of ml of 0.1 N caustic soda consumed to neutralize 5 ml of the culture solution. In addition, the mutant strain refers to the non-Vifidobacterium vividum (YIT-4002) described above.

[실시예 1]Example 1

변이주 및 표준주를 포함한 대표적인 비휘이도균 3종에 의한 혐기배양을 행하였다.Anaerobic culture was carried out by three representative non-viral bacteria, including mutant strains and standard strains.

종균은 로고사의 개량변경된 배지(한천을 제외한 액체배지 1ℓ당 피루빈산 1㎖, 환원형 글루타치온 0.2g 첨가)로서 배양 후, 무균적으로 집균(集菌), 세정(洗淨)한 균체를 1/100M인산염 완충액(pH 6.8)에 현탁시킨것(OD 660mμ=1.5)이다.The seed was cultured as a logo modified medium (1 ml of pyruvic acid per 1 liter of liquid medium except agar and 0.2 g of reduced glutathione), and then aseptically collected and washed. Suspended in / 100M phosphate buffer (pH 6.8) (OD 660mμ = 1.5).

본 배양의 배지에는 12% 환원탈지유를 사용하여 멸균후, 혐기 자(Jar)의 기상(氣相)을 질소가스 95% 탄산가스 5%의 혼합가스로 치환하여 혐기상태로 하였다. 배양 개시한 때에 있어서의 배지중의 용존(溶存) 산소량은 0.1ppm 이하였다.After sterilization using 12% reduced skim milk in the culture medium of the culture, the gas phase of the anaerobic jar was replaced with a mixed gas of nitrogen gas 95% carbon dioxide gas 5% to be anaerobic. The amount of dissolved oxygen in the medium at the start of the culture was 0.1 ppm or less.

배양의 진행에 수반하는 생균수, 산도 및 pH의 변화를 제 1 도에 표시한다. 변이주는 24시간에서 생균수 6.5×10⁹/㎖에 달하고, 생균수의 증가와 아울러 현저한 양의 산이 생성하며, pH가 저하한다. 그런데 비교예의 경우는 극히 근소한 증식과 산생성(酸生性) 밖에는 인정되지 않으며 순수한 탈지유배지로서는 혐기조건하에서도 거의 증식할 수 없는 것을 알 수 있다.The number of viable cells, acidity and pH accompanying the progress of the culture is shown in FIG. The mutant strain reached 6.5 × 10 ⁹ / ml of viable cell counts at 24 hours, increased the number of viable cells, produced a significant amount of acid, and decreased pH. However, in the case of the comparative example, only very small growth and acid production are recognized, and it can be seen that the pure skim milk medium hardly grows under anaerobic conditions.

[실시예 2]Example 2

실시예 (1)의 경우와 동일한 종균(種菌)과 배지를 사용하여 호기배양을 행하였다. 배지는 멸균후 30분간 산소가스를 통하여 산소를 포화시켰다(용존산소량 6.5ppm).Aerobic culture was performed using the same seed and medium as in Example (1). After sterilization of the medium, oxygen was saturated through oxygen gas for 30 minutes (dissolved oxygen content of 6.5 ppm).

배양경과를 제 2 도에 표시한다. 배양 24시간 후에 5.0×10⁹/㎖에 달하였다. 이것에 대하여 비교예의 경우는 거의 증식하지 않으며 배양개시 후 즉시 생균수가 감소하기 시작하는 예도 있었다.The culture progress is shown in FIG. After 24 hours of incubation, it reached 5.0 × 10 ⁹ / ml. On the other hand, the comparative example hardly proliferated, and in some cases, the viable cell count began to decrease immediately after the start of culture.

[실시예 3]Example 3

본 예에서는 변이주에 의한 발효유제조를 위한 배양조건의 검토를 행하였다.In this example, the culture conditions for fermented milk production by mutants were examined.

(가) 스타아터(starter)의 첨가량과 증식과의 관계 스타아터는 8%, 환원탈지유로서 20시간 배양후, 저온으로 3일간 보존한 것을 사용하였다. 환원탈지유배지에 스타아터를 1-10%의 범위로서 여러가지로 변화시켜서 첨가하고 호기배양을 행하였다.(A) Relationship between the amount of starter added and growth The starter was 8% and reduced skim milk, which had been incubated for 20 hours and stored at low temperature for 3 days. The star determinator was variously added to the reduced skim milk medium in the range of 1-10%, and aerobic culture was performed.

스타아터의 첨가량이 3%까지는 첨가량에 비례하여 산(酸) 생성량(生成量)의 증가가 인정되었으나 그 이상의 첨가량으로는 거의 차이를 확인할 수 없었다. 이 첨가량에 대하여서는 파이로트(pilot) 시험에 있어서도 검토하고 1-2%의 첨가량으로서 충분한 것이 확인되었다(종래의 보고에 의하면 스타아터는 보통 5-10% 첨가되어 있으며, 이와 같은 대량의 스타아터를 조제하기 위하여서는 스타아터 조제를 위한 스타아터가 필요하게 된다.).Up to 3% of the amount added was found to increase the amount of acid produced in proportion to the amount added, but little difference could be confirmed with the added amount. This addition amount was also examined in a pilot test, and it was confirmed that an addition amount of 1-2% was sufficient. (A conventional report shows that a star theater is usually added 5-10%, and such a large amount of star theater In order to prepare a star theater, a star theater for the preparation of star theater is needed.).

(나) 배양온도와 증식과의 관계(B) Relationship between incubation temperature and growth

16% 환원탈지유를 조제하여 멸균후 균을 제거한 공기를 흡입시키면서 37℃로 냉각하여 전기한 스타아터를 2.0% 접종하고 30, 34, 40 및 40℃로서 배양을 행하였다.16% reduced skim milk was prepared, sterilized with sterilized air, sterilized with air, and then inoculated with 2.0% of the star theater, which was cooled to 37 ° C and incubated at 30, 34, 40, and 40 ° C.

증식은 37℃가 가장 우수하며 다음에 34℃와 40℃가 양호하며, 30℃와 43도℃에서는 현저하게 억제되었다.Proliferation was best at 37 ° C, followed by 34 ° C and 40 ° C, and significantly inhibited at 30 ° C and 43 ° C.

(다) 생균수의 유지와 pH와의 관계(C) Relationship between maintenance of viable cells and pH

12%의 환원탈지유에 변이주를 접종하고, 배양액의 pH가 5.0, 4.6, 4.6, 4.1에 각각 도달할때까지 배양한 4개의 시료(試料)를 급히 냉각하여 5℃로서 보존하고 생균수의 변화를 측정하였다. 그 결과를 제1표에 표시한다(수치는 1㎖당의 생균수).Inoculate the mutant strain with 12% of reduced skim milk, and rapidly cool the four samples incubated until the pH of the culture reached 5.0, 4.6, 4.6, and 4.1, and preserve them at 5 ° C and change the viable cell count. Measured. The result is shown in a 1st table | surface (number is the number of live bacteria per ml).

[제 1 표][Table 1]

보존에 의한 생균수의 저하는 배양액의 pH에 의하여 달라지며 pH 4.3 이하에서는 보존이 진행됨에 따라서 급격한 저하를 표시한다. 그러나 pH 4.6 이상이라면 별반 현저한 저하는 없다.The decrease in the number of viable cells by preservation depends on the pH of the culture medium, and below pH 4.3, the preservation progresses rapidly and shows a sharp decrease. However, if the pH is above 4.6, there is no noticeable decrease.

이상의 실험은 모두 환원탈지유를 사용하여 행하였으나 전유나, 탈지유 혹은 그들의 혼합유를 사용하여도 동일한 결과가 얻어졌다.All the above experiments were carried out using reduced skimmed milk, but the same results were obtained using whole milk, skim milk, or mixed oil thereof.

[실시예 4(발효유 음료 제조예)]Example 4 Fermented Milk Beverage Production Example

(1) 탈지분유 160g을 수도물로서 용해하여 1ℓ로 하고, 100℃로 30분간 가열 살균한다. 냉각후 사전에 순수 배양하여 놓은 변이주 스타아터를 2% 첨가하고, 37℃로서 16시간 배양한다. 배양액 525㎖와 사탕 35g, 솔비톨 35g을 함유하는 시럽 475㎖를 혼합하고, 향료를 첨가한 후 균질화하여 제품으로 한다. 제품의 산도 3.5, pH 4.7, 생균수 2.9×10⁹/㎖이었다.(1) 160 g of skim milk powder is dissolved as tap water to make 1 L and sterilized by heating at 100 ° C. for 30 minutes. After cooling, 2% of the mutant strainer, which was purely incubated in advance, is added and incubated for 16 hours at 37 ° C. 525 ml of the culture solution, 475 ml of syrup containing 35 g of candy and 35 g of sorbitol are mixed, homogenized after the addition of perfume, to obtain a product. The acidity of the product was 3.5, pH 4.7, and the number of viable cells was 2.9 × 10 ⁹ / ml.

(2) 전유에 탈지분유를 가하여 탈지유고형분 농도가 16%가 되도록 조정한 것을 가열멸균하고 락토바실루스, 애시도휘루스의 스타아터를 5%, 변이주의 스타아터를 1%, 각각 첨가한 후 37℃로 20분간 배양한다. 얻어진 배양액 525㎖를 글루코오스 20g, 과당 35g을 포함하는 시럽 472㎖와 혼합하고 향료를 첨가후 균질화하여 제품으로 한다.(2) Heat sterilize the milk powder by adding skim milk powder to 16% of skimmed milk solids, and add 5% of Lactobacillus and Ashdophyrus starters and 1% of mutant strains, respectively. Incubate for 20 minutes at ℃. 525 ml of the obtained culture solution is mixed with 472 ml of syrup containing 20 g of glucose and 35 g of fructose.

제품의 산도 3.3, pH 4.8, 생균수 : 변이주 1.9×10⁹/㎖ 애시도휘르스균 5.0×10⁸/㎖이었다.The acidity of the product was 3.3, pH 4.8, and the number of viable cells: mutant strain 1.9 × 10 ⁹ / ml Ashdovir bacteria 5.0 × 10 ⁸ / ml.

(3) 탈지분유 100g와 전지분유 60g을 수도물에 용해하여 1ℓ로 하고, 멸균후 변이주 스타아터를 3% 접종하고 37℃로서 12시간 배양한다.(3) 100 g of skim milk powder and 60 g of whole milk powder are dissolved in tap water to make 1 L. After sterilization, 3% of mutant star theater is inoculated and incubated for 12 hours at 37 ° C.

배양액 525㎖를 과즙[온주(溫州) 밀감, 사과] 100g, 설탕 40g, 솔비톨 35g을 함유하는 시럽과 혼합하고 향료를 가하여 균질화하여 제품으로 한다.525 ml of the culture solution is mixed with a syrup containing 100 g of fruit juice (Wenzhou mandarin, apple), 40 g of sugar, and 35 g of sorbitol, and homogenized by adding flavoring to make a product.

제품의 산도 4.0, pH 4.6, 생균수 1.5×10⁹/㎖이었다.The acidity of the product was 4.0, pH 4.6, and the number of living cells was 1.5 × 10 ⁹ / ml.

Claims (1)

생육촉진 물질을 함유하지 않은 순수 우유배지중 호기적 조건하에서 증식가능한 비휘이도균 변이주[비휘이도 박테리움 비휘이덤(Bifido-Bacterium Bifidum) YIT-4002(균기탁수리 제3371호)]를 우유배지에 접종하여 배양하는 것을 특징으로 하는 비휘이도 생균을 함유하는 발효유제품의 제조법.A non-microbial strain (Bifido-Bacterium Bifidum) YIT-4002 (Bacterial Accessory No. 3371) capable of growing under aerobic conditions in pure milk medium containing no growth promoting substance A method for producing a fermented milk product containing non-viral viable bacteria, which is inoculated and cultured.

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