KR20240105013A - 고수 추출물을 포함하는 지방간 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 - Google Patents
고수 추출물을 포함하는 지방간 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 고수 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 고수 추출물을 포함하는 조성물은 고지방식이로 인한 혈액 내 지방 및 간 내 지방의 축적을 억제하고, 간을 보호하는 효과를 나타내어, 지방간 질환의 예방, 개선 또는 치료를 위한 식품 및 의약품 제조에 유용하게 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 고수 추출물을 포함하는 조성물은 고지방식이로 인한 혈액 내 지방 및 간 내 지방의 축적을 억제하고, 간을 보호하는 효과를 나타내어, 지방간 질환의 예방, 개선 또는 치료를 위한 식품 및 의약품 제조에 유용하게 사용될 수 있다.
Description
본 발명은 고수 추출물을 포함하는 지방간 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
간은 우리 몸에서 각종 대사 작용, 해독, 분해, 합성 및 분비를 담당하는 중요한 장기로, (i) 에너지 대사 관리 기능, (ii) 효소, 알부민, 인지질 등의 합성, 저장 및 분배 기능, (iii) 각종 대사산물을 담관을 통해 십이지장으로 배설하는 기능 및 (iv) 해독 및 분해 기능 등을 갖는다. 이러한 역할을 하는 간의 기능에 이상이 발생하면 생체의 영양소 대사에 문제를 유발하게 되며, 간 기능 이상을 일으키는 간 질환에는 지방간, 간염, 간경변증, 간암 등이 있다.
그 중, 지방간은 정상 간에서 지방이 차지하는 비율(5%)보다 많은 양의 지방이 간에 축적된 증상을 의미한다. 지방간은 크게 과음으로 인한 알콜성 지방간과 비만, 당뇨병, 고지혈증, 약물 등으로 인한 비알콜성 지방간으로 나눌 수 있는데, 알콜성 지방간은 알콜을 많이 섭취하게 되면 간에서 지방 합성이 촉진되고 정상적인 에너지 대사가 이루어지지 않아 발생하고, 비알콜성 지방간은 알콜 이외의 원인으로 인하여 발생한다. 상기 비알콜성 지방간은 지방 대사의 이상을 초래하는 성인병에 동반되는 경우가 빈번한 것으로 알려져 있으며, 특히 비알콜성 지방간 질환(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)은 가장 흔한 간질환의 하나로서 간에 지방이 축적되어 발생하며, 이 질환은 염증에 더 민감하게 반응하게 하여 간의 기능을 저하시키게 된다.
구체적으로, 비알콜성 지방간 질환은 과량의 알콜을 섭취하지 않은 환자에서 염증 반응을 동반하지 않는 비알콜성 단순 지방간, 비알콜성 지방간염(non-alcoholic steatohepatitis, NASH) 및 이에 의해 진전되어 간세포의 염증반응, 간섬유화 및 간경화를 포함하는 넓은 범위의 질환을 의미한다. 비알콜성 지방간 질환은 원인에 따라 원발성과 속발성으로 나뉜다. 원발성은 대사증후군의 특징인 고지혈증, 당뇨, 또는 비만 등에 의해 발생되며, 속발성은 급격한 체중 감소, 기아 등과 같은 영양적 원인, 다양한 약물, 대사성 원인 및 기타 요인에 의해 발생하는 것으로 알려져 있다.
알콜성 지방간의 경우에는, 알콜의 섭취를 억제함으로써, 증상의 완화 또는 호전을 기대할 수 있는 반면, 비알콜성 지방간의 경우에는 뚜렷한 발병원인이 밝혀져 있지 않아, 상대적으로 치료에 어려움을 겪고 있다. 비알콜성 지방간 질환의 치료와 관련하여, 몇 가지 당뇨 또는 비만 치료 약제 투여의 지방간 질환에 대한 효과가 보고된 바 있다. 경구용 비만치료제로 사용되고 있는 올리스탓(Orlistat)의 경우 지방간염 환자에서 간의 조직학적 향상을 유도했다는 보고(Hussein et al., 2007)가 있으며, PPAR(peroxisome proliferator-activated receptor)의 작용물질(agonist)인 티아졸리딘디온(Thiazolidinedione, TZD) 계열의 약물은 간과 근육에서의 지방 축척을 억제하고, 비알콜성 지방간 질환의 동물 모델에서 간에 대해 직접적인 항 섬유화 작용을 나타내는 것으로 보고된 바 있다(Galli A et al., 2002). 현재 운동이나 금주, 식이요법 등과 약물 치료를 병행해서 간 질환을 치료하고는 있지만, 근본적으로 완전히 치유가 되기는 어렵기 때문에 효과적이고 개선된 간 질환 치료제 또는 간 보호제의 개발이 계속적으로 필요하다.
한편, 천연물을 사용하여 간 기능 개선 효과를 살펴본 연구로는, 간 기능 유지 및 개선에 유용한 발효유 및 그 제조방법(한국특허등록 제10-0461580호), 헛개나무 열매 추출물을 유효성분으로 함유하는 간 기능 개선 효과와 숙취개선 효능을 가진 기능성 식품조성물(한국특허공개 제10-2003-0027615호), 진주초 식물의 추출물을 포함하는 B형 간염 치료제 및 그 제조방법(한국특허공개 제10-2003-0063308호) 등이 개발된 바 있다. 그러나 여전히 상업적으로 성공할 만큼 지방간 질환 예방 또는 치료 효과가 우수하고 부작용이 적은 천연물 유래 기술에 대한 필요성이 있다.
이러한 배경 하에서, 본 발명자들은 지방간 질환을 예방 또는 치료할 수 있는 조성물을 개발하기 위해 예의 연구 노력한 결과, 고수 추출물을 지방간 질환의 예방, 개선 또는 치료를 위한 식품 조성물 및 약학적 조성물 소재로 사용할 수 있음을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
Chithra V, Leelamma S. Hypolipidemic effect of coriander seeds (Coriandrum sativum): mechanism of action. Plant Foods Hum Nutr. 1997;51(2):167-72.
본 발명은 전술한 문제 및 이와 연관된 다른 문제를 해결하는 것을 목적으로 한다.
본 발명의 목적은 고수 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 식품 조성물을 포함하는 건강기능식품을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 고수 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 고수 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간 질환의 예방 또는 치료용 의약외품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 고수 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간 질환의 예방 또는 개선용 사료 조성물을 제공하는 것이다.
이를 구체적으로 설명하면 다음과 같다. 한편, 본 출원에서 개시된 각각의 설명 및 실시형태는 각각의 다른 설명 및 실시 형태에도 적용될 수 있다. 즉, 본 출원에서 개시된 다양한 요소들의 모든 조합이 본 출원의 범주에 속한다. 또한, 하기 기술된 구체적인 서술에 의하여 본 출원의 범주가 제한된다고 볼 수 없다.
상기 목적을 달성하기 위한 일 양태로서, 본 발명은 고수 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 용어 '고수(Coriandrum sativum)'는 미나리목 미나리과 고수속 한해살이 식물로서 6~7월쯤 하얀 꽃이 피고 9~10월쯤에 열매를 맺는 식물이며, 타이, 인도, 베트남 등에서 널리 향신료로 사용되고 있다.
본 발명의 용어 '추출물'은 상기 고수의 추출처리에 의하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다.
또한, 본 발명에 따른 고수의 부위에 제한 없이, 예를 들어, 잎, 뿌리, 줄기 등으로부터 얻어지는 추출물일 수 있다.
본 발명의 상기 추출물을 추출하는 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다. 상기 추출 방법의 비제한적인 예로는, 열수 추출법, 냉침 추출법, 용매 추출법, 수증기 증류법, 용출법, 압착법, 초음파 추출법, 여과법, 환류 추출법 등이 있으며, 이들은 단독으로 수행되거나 2종 이상의 방법을 병용하여 수행될 수 있다.
본 발명의 상기 추출물은 적절한 용매를 이용하여 고수로부터 추출한 것이며, 예를 들어 조추출물, 극성용매 가용 추출물 또는 비극성 용매 가용 추출물을 모두 포함할 수 있다. 상기 추출물을 제조하기 위해 사용되는 추출 용매의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 상기 추출 용매의 비제한적인 예로는 물; 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올, 프로필알콜, 부틸알콜 등의 탄소수 1 내지 4 저급 알콜; 글리세린, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 등의 다가 알코올; 메틸아세테이트, 에틸아세테이트, 아세톤, 벤젠, 헥산, 디에틸에테르, 디클로로메탄 등의 탄화수소계 용매; 또는 이들의 혼합물을 사용할 수 있다. 구체적으로, 상기 추출 용매는 에탄올일 수 있다. 또한, 상기 용매를 사용하여 1회 이상 추출하여 용매 추출물을 제조할 수 있다.
구체적으로, 본 발명에서 고수 추출물은 고수에 고수 중량 대비 5 내지 15배의 증류수를 첨가하여, 20 내지 80℃의 온도에서 1 내지 5시간씩 수회 반복하여 환류냉각추출한 것일 수 있다. 더욱 구체적으로, 고수에 고수 중량 대비 8 내지 12배의 증류수를 첨가하여, 40 내지 60℃의 온도에서 2 내지 4시간씩 수회 반복하여 환류냉각추출한 것일 수 있다.
본 발명의 상기 추출물은 부유하는 고체 입자를 제거하기 위해 여과, 예를 들어 나일론 등을 이용해 입자를 걸러내거나 여과지, 냉동여과법 등을 이용해 여과시킨 후 그대로 사용되거나, 이를 농축 또는 건조(예컨대 동결건조, 열풍건조, 분무건조 등)시켜 사용될 수 있다. 또한, 상기 추출물은 추가로 통상의 분획 공정을 거칠 수도 있으며, 통상의 정제 방법을 이용하여 정제될 수도 있다.
구체적으로, 본 발명에서 고수를 증류수를 첨가하여 추출한 후, 감압농축기로 농축하고 이를 동결건조시켜 사용할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 용어 '유효성분'이란 단독으로 목적하는 활성을 나타내거나, 또는 그 자체는 활성이 없는 담체와 함께 활성을 나타낼 수 있는 성분을 의미한다.
본 발명의 조성물에서 유효성분은 지방간 질환의 예방 또는 치료 활성, 간 보호 활성 또는 간 기능 개선 활성을 나타낼 수 있는 한 그 구체적 용도, 제형, 배합 목적 등에 따라 임의의 양(유효량)으로 포함될 수 있는데, 통상적인 유효량은 조성물 전체 중량을 기준으로 할 때 0.01 중량 % 내지 99.9 중량 % 범위 내에서 결정될 수 있다. 상기 '유효량'이란 본 발명 조성물의 적용 대상인 개체에게 당업계의 통상의 기술자의 제언에 의한 투여 기간 동안 본 발명의 조성물이 투여될 때, 지방간 질환의 예방 또는 치료 등 의도한 기능적, 약리학적 효과를 나타낼 수 있는, 본 발명의 조성물에 포함되는 유효성분의 양을 말한다. 이러한 유효량은 당업계의 통상의 기술자가 통상의 능력 범위 내에서 실험적으로 결정될 수 있다.
본 발명의 용어 '지방간 질환'은 정상 간에서 지방이 차지하는 비율(5%)보다 많은 양의 지방이 간에 축적된 증상을 의미한다. 상기 지방간은 과음으로 인한 알콜성 지방간; 또는 비만, 당뇨병, 고지혈증 또는 약물 등으로 인한 비알콜성 지방간을 포함할 수 있다. 알콜성 지방간은 알콜을 많이 섭취하게 되면 간에서 지방 합성이 촉진되고 정상적인 에너지 대사가 이루어지지 않아 발생하고, 비알콜성 지방간은 알콜 이외의 원인으로 인하여 발생하며, 상기 비알콜성 지방간은 지방 대사의 이상을 초래하는 성인병에 동반되는 경우가 빈번한 것으로 알려져 있다.
본 발명의 상기 지방간 질환은 비알콜성 지방간일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 용어 '비알콜성 지방간 질환(Non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)'은 알콜이 아닌 다른 발생 원인에 기인하여 간에 지방이 축적되는 질환을 의미한다. 비알콜성 지방간 질환은 원발성과 속발성에 따른 비알콜성 지방간 질환을 모두 포함하나, 바람직하게는 원발성 고지혈증, 당뇨 또는 비만으로부터 발생되는 비알콜성 지방간 질환을 의미한다. 예를 들어, 비알콜성 지방간 질환은 단순 지방간(Simple steatosis) 질환, 영양성 지방간 질환, 기아성 지방간 질환, 비만성 지방간 질환, 당뇨병성 지방간 질환, 지방간염 및 이러한 질환의 전진에 의해 발생되는 간섬유화 (Liver fibrosis)와 간경화 (Liver cirrhosis)를 포함할 수 있다.
본 발명의 조성물은 혈중 알라닌 아미노트랜스퍼라아제(Alanine aminotransferase; ALT) 또는 아스파라트산 아미노트랜스퍼라아제(Aspartate Aminotransferase; AST)의 수치를 감소시키는 것일 수 있다.
본 발명의 용어 '알라닌 아미노트랜스퍼라아제(Alanine aminotransferase; ALT)'는 주로 간이나 신장 등의 조직에서 많이 발견되고, 신체 내에서 세포의 질소 대사와 아미노산 대사, 간에서의 당신생성(gluconeogenesis)에 관계된 효소로서, 생리학적, 병리학적 상태에 따라 골격근으로부터 전구체 형태로 이동되어 그 기능을 수행한다. 알라닌 아미노트랜스퍼라아제는 알라닌과 α-케토글루타레이트(α-ketoglutarate)를 L-글루타메이트(L-glutamate)와 피루베이트(pyruvate)로 바꾸는 반응 과정에서 알라닌의 아미노기(amino-group)를 L-글루타메이트로 이동시키는 아미노전이 효소 활성을 가지고 있으며, 이는 피루베이트를 L-젖산(L-lactic acid)으로 바꾸는 과정을 잇달아 수행하며, 상기 가역적 반응 외에도 그 반대로 역행하는 반응에서도 알라닌 아미노전이효소는 아미노기를 이동시키는 매개체 역할을 수행한다. 또한, 간에서 일어나는 당신생성(gluconeogenesis) 과정에서 이러한 알라닌 아미노트랜스퍼라아제의 아미노 전이 반응이 수반되므로 간에는 ALT의 효소가 매우 많은 양 존재하게 된다. 실제 간에서의 ALT 효소 활성은 혈액 내의 효소활성보다 3000배 정도 더 높게 측정되는 것으로 알려져 있다(Lott and Wolf, 1986). 따라서, 특히 간 조직에 매우 높은 농도로 존재하는 알라닌 아미노트랜스퍼라아제는 간 조직이 독성물질이나 바이러스의 감염, 알코올, 비만 등의 여러 가지 요인 등에 의하여 손상을 받게 되면 혈액 내로 방출되어 순환하기 때문에 혈액의 알라닌 아미노전이효소 활성이 증가하게 된다. 그렇기 때문에 혈액 내의 알라닌 아미노전이효소 활성을 측정하여 간질환의 진단 여부를 유추할 수 있다.
본 발명의 용어 '아스파라트산 아미노트랜스퍼라아제(Asparate aminotransferase; AST)'는 간 조직의 세포와 관련된 또 다른 효소라는 점에서 상기 ALT와 유사하며, AST는 급성 간 손상이 있을 때 증가한다.
또한, 본 발명의 조성물은 혈중 젖산 탈수소효소(Lactate Dehydorgenase; LDH), 트리글리세리드(Triglyceride; TG), 총 콜레스테롤(Total Cholesterol) 또는 저밀도 지질단백질(Low-density Lipoprotein; LDL)의 수준을 감소시키는 것일 수 있다.
본 발명의 조성물은 간 조직에서 지방 생성을 억제하거나, 간 내 지방 축적을 억제함으로써 상기 지방간 질환을 예방 또는 개선하는 것일 수 있다.
본 발명의 식품 조성물은 지방간 질환의 예방 또는 개선 효과를 가지는 한, 상기 고수 추출물을 다양한 함량으로 포함할 수 있다.
본 발명의 식품 조성물은 고수 추출물 이외에, 복용이나 섭취의 편리성을 증진시키기 위하여, 당업계에서 이미 안전성이 검증되고 해당 활성을 갖는 것으로 공지된 임의의 화합물이나 천연 추출물을 추가로 포함할 수 있다.
이러한 화합물 또는 추출물에는 각국 약전(한국에서는 '대한민국약전'), 각국 건강기능식품공전(한국에서는 식약처 고시인 '건강기능식품 기준 및 규격') 등의 공정서에 실려 있는 화합물 또는 추출물, 의약품의 제조·판매를 규율하는 각국의 법률(한국에서는 '약사법')에 따라 품목 허가를 받은 화합물 또는 추출물, 건강기능식품의 제조·판매를 규율하는 각국 법률(한국에서는 '건강기능식품에 관한 법률')에 따라 기능성이 인정된 화합물 또는 추출물이 포함될 수 있다.
본 발명의 용어 '식품'은 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료, 비타민 복합제, 영양 보조제(nutritional supplement), 기능성 식품, 식품 첨가제(food additive), 건강 기능 식품 및 건강 식품 등이 있으며, 통상적인 의미의 식품을 모두 포함한다.
상기 건강 식품(health food)은 일반식품에 비해 적극적인 건강유지나 증진 효과를 가지는 식품을 의미하고, 건강보조식품(health supplement food)은 건강보조 목적의 식품을 의미한다. 경우에 따라, 건강 기능 식품, 건강식품, 건강보조식품의 용어는 호용된다.
본 발명의 용어 '건강 기능 식품'이란, 특정보건용 식품(food for special health use, FoSHU)와 동일한 용어로, 영양 공급 외에도 생체조절기능이 효율적으로 나타나도록 가공된 의학, 의료효과가 높은 식품을 의미한다. 여기서 '기능(성)'이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다. 본 발명의 식품은 당 업계에서 통상적으로 사용되는 방법에 의하여 제조가능하며, 상기 제조시에는 당 업계에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한 상기 식품의 제형 또한 식품으로 인정되는 제형이면 제한 없이 제조될 수 있다. 본 발명의 식품 조성물은 다양한 형태의 제형으로 제조될 수 있으며, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어나, 본 발명의 식품은 지방간 개선을 위한 보조제로 섭취가 가능하다.
구체적으로, 상기 건강 기능 식품은 고수 추출물을 음료, 차류, 향신료, 껌, 과자류 등의 식품소재에 첨가하거나, 환, 정제, 캡슐, 분말, 현탁액 등으로 제조한 식품으로, 이를 섭취할 경우 건강상 특정한 효과를 가져오는 것을 의미하나, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용이 없는 장점이 있다.
본 발명의 식품 조성물은, 일상적으로 섭취하는 것이 가능하기 때문에 지방간 질환 개선 효과를 기대할 수 있어 매우 유용하다.
본 발명의 식품 조성물은 어떠한 형태로도 제조될 수 있으며, 예컨대 차, 쥬스, 탄산음료, 이온음료 등의 음료류, 우유, 요구루트 등의 가공 유류(乳類), 껌류, 떡, 한과, 빵, 과자, 면 등의 식품류, 정제, 캡슐, 환, 과립, 액상, 분말, 편상, 페이스트상, 시럽, 겔, 젤리, 바 등의 제제류 등으로 제조될 수 있다. 또한, 본 발명의 식품 조성물은 법률상·기능상의 구분에 있어서 제조·유통 시점의 시행 법규에 부합하는 한 임의의 제품 구분을 띨 수 있다. 예컨대 한국 '건강기능식품에관한법률'에 따른 건강기능식품이거나, 한국 '식품위생법'의 식품공전(식약처 고시 '식품의 기준 및 규격')상 각 식품유형에 따른 과자류, 다류, 음료류, 특수용도식품 등일 수 있다.
또한, 본 발명의 식품 조성물에는 그 유효성분 이외에 식품첨가물이 포함될 수 있다. 식품첨가물은 일반적으로 식품을 제조, 가공 또는 보존함에 있어 식품에 첨가되어 혼합되거나 침윤되는 물질로서 이해될 수 있는데, 식품과 함께 매일 그리고 장기간 섭취되므로 그 안전성이 보장되어야 한다. 이러한 식품첨가물은 용도면에 있어서는 감미료, 향미증진제, 보존료, 유화제, 향료 등으로 구분된다.
상기 감미료는 식품에 적당한 단맛을 부여하기 위하여 사용되는 것으로, 천연의 것이거나 합성된 것을 사용할 수 있다. 예를 들어, 네오탐, 락티톨, D-리보오스, 만니톨, D-말티톨, 사카린나트륨 등의 감미료가 사용될 수 있다.
상기 향미증진제는 식품의 맛이나 향을 증진시키는 식품 첨가물로, 천연의 것과 합성된 것 모두 사용될 수 있다. 예를들어, 향미증진제는 5'-구아닐산이나트륨, L-글루탐산, 글리신, 베타인 등이 사용될 수 있다.
상기 보존료로서는 메타중아황산나트륨, 무수아황산, 소브산, 안식향산, 자몽종자추출물 등이 사용될 수 있다.
상기 유화제는 물과 기름 등 섞이지 않는 두 가지 또는 그 이상의 상(phases)을 균질하게 섞어주거나 유지시키는 식품첨가물로, 글루콘산나트륨, 글리세린지방산에스테르, 레시틴, 스테아린산마그네슘, 알긴산 등이 사용될 수 있다.
상기 향료는 식품에 특유한 향을 부여하거나 제조공정 중 손실된 식품 본래의 향을 보강시키는 식품첨가물로, 에틸바닐린, 옥탄산에틸, 초산리나릴, 카프론산알릴, 파라메틸아세토페논 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 식품 조성물은 전술한 바의 식품첨가물 이외에, 기능성과 영양성을 보충, 보강할 목적으로 당업계에 공지되고 식품첨가물로서 안정성이 보장된 생리활성 물질이나 미네랄류를 포함할 수 있다. 상기 생리활성 물질로는 녹차 등에 포함된 카테킨류, 비타민 B1, 비타민 C, 비타민 E, 비타민 B12 등의 비타민류, 토코페롤, 디벤조일티아민 등을 들 수 있으며, 미네랄류로서는 구연산칼슘 등의 칼슘 제제, 스테아린산마그네슘 등의 마그네슘 제제, 구연산철 등의 철 제제, 염화크롬, 요오드칼륨, 셀레늄, 게르마늄, 바나듐, 아연 등을 들 수 있다.
본 발명의 식품 조성물에는 전술한 바의 식품첨가물이 제품 유형에 따라 그 목적을 달성할 수 있는 적정량으로 포함될 수 있으며, 본 발명의 식품 조성물에 포함될 수 있는 기타의 식품첨가물과 관련하여서는 각국 식품공전이나 식품첨가물 공전을 참조할 수 있다.
상기 고수 추출물을 식품첨가물로 사용하는 경우, 고수 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 혼합양은 그의 사용 목적에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
본 발명의 용어 '예방'은 본 발명의 조성물을 통해 지방간 질환의 발명을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미하며, 본 발명의 용어 '개선'은 본 발명의 조성물을 통해 지방간 질환이 호전되도록 하거나 이롭게 되도록 하는 모든 행위를 의미한다.
상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 고수 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 용어 '고수', '추출물', '유효성분', '지방간 질환', '예방' 및 '조성물'은 전술한 바와 같다.
본 발명의 용어 '치료'는 본 발명의 약학적 조성물의 투여를 통해 지방간 질환이 호전 또는 완화되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미한다.
본 발명의 약학적 조성물은 통상의 방법에 따른 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 더 포함할 수 있다. 약학적으로 허용되는 담체는 투여 경로나 제형에 따라 당업계에 주지되어 있으며, 구체적으로는 '대한민국약전'을 포함한 각국의 약전을 참조할 수 있다. 본 발명의 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 또한, 본 발명의 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제는 비자연적 담체일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 약학적 조성물은 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 또는 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 상세하게는, 제형화할 경우 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트, 수크로오스, 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 액체 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 및 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 오일, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔, 마크로골, 트윈 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다. 약학적 조성물의 구체적인 제제화와 관련하여서는 당업계에 공지되어 있으며, 예컨대 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences(19th ed., 1995)] 등을 참조할 수 있다. 상기 문헌은 본 명세서의 일부로서 간주된다.
본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여한다. 상기 약학적으로 유효한 양은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분하며 부작용을 일으키지 않을 정도의 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 환자의 건강상태, 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 방법, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 배합 또는 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 투여량 및 횟수는 어떠한 면에서든 본 발명의 범위를 제한하는 것은 아니다.
본 발명의 약학적 조성물은 쥐, 개, 고양이, 소, 말, 돼지, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로를 통해 투여될 수 있으며, 인간인 경우가 바람직할 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있으며, 예를 들어 경구, 정맥, 근육 또는 피하 주사에 의해 투여될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 고수 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간 질환의 예방 또는 치료용 의약외품 조성물을 제공한다.
본 발명의 용어 '고수', '추출물', '유효성분', '지방간 질환', '예방', '치료' 및 '조성물'은 전술한 바와 같다.
본 발명에서 '의약외품'은 사람이나 동물의 질병을 진단, 치료, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용하는 물품 중 기구, 기계 또는 장치가 아닌 것 및 사람이나 동물의 구조와 기능에 약리학적 영향을 줄 목적으로 사용하는 물품 중 기구, 기계 또는 장치가 아닌 것을 제외한 물품을 의미하며, 일 구체예로 내복용 제제를 포함할 수 있으나 이에 제한되는 것이 아니며, 의약외품의 제제화 방법, 용량, 이용방법, 구성성분 등은 기술분야에 공지된 통상의 기술로부터 적절히 선택될 수 있다.
본 발명의 의약외품 조성물에는 상기 성분 외에 필요에 따라 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 더욱 포함할 수 있다. 상기 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제는 본 발명의 효과를 해하지 않는 한 제한되지 않으며, 예를 들어 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제, 윤활제, 감미제, 방향제, 보존제 등을 포함할 수 있다.
상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 고수 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간 질환의 예방 또는 개선용 사료 조성물을 제공한다.
본 발명의 용어 '고수', '추출물', '유효성분', '지방간 질환', '예방', '개선' 및 '조성물'은 전술한 바와 같다.
본 발명에서 용어, '사료'는 동물이 먹고, 섭취하며, 소화시키기 위한 임의의 천연 또는 인공 규정식, 한끼식 등 또는 상기 한끼식의 성분으로, 당업계의 공지된 다양한 형태의 사료로 제조가능하며, 구체적으로는 농후 사료, 조사료, 사료 첨가제 또는 특수사료가 포함될 수 있으나 이에 제한되지 않는다.
농후사료에는 밀, 귀리, 옥수수 등의 곡류를 포함하는 종자열매류, 곡물을 정제하고 얻는 부산물로서 쌀겨, 밀 기울, 보릿겨 등을 포함하는 겨류, 콩, 유체, 깨, 아마인, 코코야자 등을 채유하고 얻는 부산물인 깻묵류와 고구마, 감자 등에서 녹말을 뺀 나머지인 녹말찌꺼기의 주성분인 잔존녹말질류 등의 찌꺼기류, 어분, 물고기찌꺼기, 어류에서 얻은 신선한 액상물(液狀物)을 농축시킨 것인 피시솔루블(fish soluble), 육분(肉粉), 혈분, 우모분, 탈지분유, 우유에서 치즈, 탈지유에서 카제인을 제조할 때의 잔액인 훼이(whey)를 건조한 건조훼이 등의 동물질 사료, 효모, 클로렐라, 해조류가 있으나 이에 제한되지 않는다. 조사료에는 야초, 목초, 풋베기 등의 생초(生草)사료, 사료용 순무, 사료용 비트, 순무의 일종인 루터베어거 등의 뿌리채소류, 생초, 풋베기작물, 곡실(穀實) 등을 사일로에 채워 놓고 젖산발효시킨 저장사료인 사일리지(silage), 야초, 목초를 베어 건조시킨 건초, 종축용(種畜用) 작물의 짚, 콩과 식물의 나뭇잎이 있으며, 이에 제한되지 않는다. 특수사료에는 굴껍테기, 암염 등의 미네랄 사료, 요소나 그 유도체인 디우레이드이소부탄 등의 요소사료, 천연사료원료만을 배합했을 때 부족하기 쉬운 성분을 보충하거나, 사료의 저장성을 높이기 위해서 배합사료에 미량으로 첨가하는 물질인 사료첨가물, 식이보조제가 있으나 이에 제한되지 않는다.
본 발명에 따른 상기 지방간 질환의 예방 또는 개선, 간 보호 또는 간 기능 개선용 사료 조성물은 당업계에 공지된 다양한 사료 제조방법에 따라 적절한 유효 농도 범위에서 고수 추출물을 첨가하여 제조 가능하다.
본 발명에 따른 사료 조성물은 지방간 질환의 예방 또는 개선, 간 보호 또는 간 기능 개선을 목적으로 하는 개체이면 특별히 한정되지 않고, 어떠한 것이든 적용가능하다. 예를 들면, 원숭이, 개, 고양이, 토끼, 모르모트, 랫트, 마우스, 소, 양, 돼지, 염소 등과 같은 비인간동물, 조류 및 어류 등 어느 개체에도 적용이 가능하다.
본 발명에 따른 고수 추출물을 포함하는 조성물은 고지방식이로 인한 혈액 내 지방 및 간 내 지방의 축적을 억제하고, 간을 보호하는 효과를 나타내어, 지방간 질환의 예방, 개선 또는 치료를 위한 식품 및 의약품 제조에 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물 투여에 따른 체중 변화를 분석한 결과를 나타낸 그래프이다. (###p < 0.001, ***p < 0.001)
도 2는 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물 투여에 따른 간 무게 변화를 분석한 결과를 나타낸 그래프이다. (###p < 0.001, **p < 0.01, ***p < 0.001)
도 3은 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물 투여에 따른 혈청 ALT 변화를 분석한 결과를 나타낸 그래프이다. (###p < 0.001, *p < 0.05, **p < 0.01)
도 4는 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물 투여에 따른 혈청 AST 변화를 분석한 결과를 나타낸 그래프이다. (###p < 0.001, **p < 0.01)
도 5는 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물 투여에 따른 혈청 LDH 변화를 분석한 결과를 나타낸 그래프이다. (##p < 0.01, *p < 0.05)
도 6은 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물 투여에 따른 혈청 중성지방(TG) 변화를 분석한 결과를 나타낸 그래프이다. (##p < 0.01, *p < 0.05, **p < 0.01)
도 7은 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물 투여에 따른 혈청 총콜레스테롤(TC) 변화를 분석한 결과를 나타낸 그래프이다. (###p < 0.001, **p < 0.01)
도 8은 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물 투여에 따른 혈청 LDL 변화를 분석한 결과를 나타낸 그래프이다. (###p < 0.001, **p < 0.01)
도 9는 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물 투여에 따른 간의 조직학적 변화를 H&E 염색을 통해 확인한 결과이다.
도 10은 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물 투여에 따른 간 조직 내 지방증 정도를 분석한 결과를 나타낸 그래프이다. (###p < 0.001, **p < 0.01)
도 11은 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물 투여에 따른 간세포의 팽창 정도를 분석한 결과를 나타낸 그래프이다. (###p < 0.001, *p < 0.05)
도 12는 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물 투여에 따른 염증 정도를 분석한 결과를 나타낸 그래프이다. (###p < 0.001, *p < 0.05, **p < 0.01)
도 13은 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물 투여에 따른 NAFLD 활성을 분석한 결과를 나타낸 그래프이다. (###p < 0.001, ***p < 0.001)
도 14는 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물 투여에 따른 간 조직 내 지방 분포 정도를 Oil red O 염색을 통해 확인한 결과이다.
도 15는 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물 투여에 따른 간 조직 내 지방 분포 정도를 Oil red O 염색을 통해 분석한 결과를 나타낸 그래프이다. (###p < 0.001, ***p < 0.001)
도 2는 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물 투여에 따른 간 무게 변화를 분석한 결과를 나타낸 그래프이다. (###p < 0.001, **p < 0.01, ***p < 0.001)
도 3은 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물 투여에 따른 혈청 ALT 변화를 분석한 결과를 나타낸 그래프이다. (###p < 0.001, *p < 0.05, **p < 0.01)
도 4는 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물 투여에 따른 혈청 AST 변화를 분석한 결과를 나타낸 그래프이다. (###p < 0.001, **p < 0.01)
도 5는 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물 투여에 따른 혈청 LDH 변화를 분석한 결과를 나타낸 그래프이다. (##p < 0.01, *p < 0.05)
도 6은 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물 투여에 따른 혈청 중성지방(TG) 변화를 분석한 결과를 나타낸 그래프이다. (##p < 0.01, *p < 0.05, **p < 0.01)
도 7은 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물 투여에 따른 혈청 총콜레스테롤(TC) 변화를 분석한 결과를 나타낸 그래프이다. (###p < 0.001, **p < 0.01)
도 8은 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물 투여에 따른 혈청 LDL 변화를 분석한 결과를 나타낸 그래프이다. (###p < 0.001, **p < 0.01)
도 9는 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물 투여에 따른 간의 조직학적 변화를 H&E 염색을 통해 확인한 결과이다.
도 10은 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물 투여에 따른 간 조직 내 지방증 정도를 분석한 결과를 나타낸 그래프이다. (###p < 0.001, **p < 0.01)
도 11은 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물 투여에 따른 간세포의 팽창 정도를 분석한 결과를 나타낸 그래프이다. (###p < 0.001, *p < 0.05)
도 12는 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물 투여에 따른 염증 정도를 분석한 결과를 나타낸 그래프이다. (###p < 0.001, *p < 0.05, **p < 0.01)
도 13은 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물 투여에 따른 NAFLD 활성을 분석한 결과를 나타낸 그래프이다. (###p < 0.001, ***p < 0.001)
도 14는 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물 투여에 따른 간 조직 내 지방 분포 정도를 Oil red O 염색을 통해 확인한 결과이다.
도 15는 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물 투여에 따른 간 조직 내 지방 분포 정도를 Oil red O 염색을 통해 분석한 결과를 나타낸 그래프이다. (###p < 0.001, ***p < 0.001)
이하, 실시예를 통하여 본 발명의 구성 및 효과를 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위가 이에 의해 한정되는 것은 아니다.
실시예 1: 고수 추출물의 제조
본 발명의 고수 추출물을 제조하기 위해 건조된 것을 시장에서 구입하여 사용하였고, 건 고수를 분쇄하여 중량 대비 10배의 물을 첨가해 90℃에서 3시간씩 2회 추출하였다. 이후, 감압농축기(R-114 Rotavapor system, Buchi Labortechnik AG, Flawil, Switzerland)를 이용해 농축액을 얻었으며, 동결건조기(LP 20, Ilshinbiobase, Yangju, Korea)로 건조하였다. 얻어진 건조물은 -20℃에 보관하여 하기 실험에 사용하였다.
실험예 1: 고수 추출물의 고지방식이에 의해 비알콜성지방간이 유도된 마우스 모델에서 간기능 개선 효과 확인
1.1. 동물 준비 및 시료 준비
실시예 1의 고수 추출물의 간 기능 개선에 대한 효능 평가를 위해 고지방식이(60%kcal fat diet; HFD)에 의한 비알콜성지방간 유도 마우스 모델을 이용하였다. 본 실시 예에 사용한 5주령의 C57BL/6 수컷 마우스(20~22g)는 ㈜ 오리엔트 바이오 (Seongnam, Korea)에서 분양하여 1주일간의 순화기간을 거쳐 표 1에 나타낸 바와 같이 그룹(n=8)을 무작위 배정하였다. 식이와 식수는 자유롭게 섭취하도록 하였으며 시험물질은 증류수(distilled water)를 vehicle로 사용하여 12주간 경구 투여하였다. 양성대조군은 간 기능 개선에 효능이 있는 것으로 알려진 밀크시슬 추출물을 사용하였다.
| 구분 | 식이 | 투여물질 | 투여농도(mg/kg) |
| ND | normal diet | distilled water | - |
| HFD | 60% kcal fat diet | distilled water | - |
| CS100 | 고수 추출물 | 100 | |
| CS200 | 고수 추출물 | 200 | |
| MT | 밀크시슬 | 100 |
1.2. 통계처리
하기 실험 결과들의 분석을 위해 GraphPad Prism 7(GraphPad Software, Inc., SanDiego, CA)를 이용하였다. 통계 분석은 One-way analysis of variance(ANOVA)를 실시하였으며 유의성 검정은 Dunnet’s multiple range test를 실시하여 p<0.05의 수준에서 통계 유의적임을 검정하였다.
1.3. 체중 변화량 및 간 무게 측정
본 실시예의 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물 투여에 따른 체중 변화량(kg)을 분석하기 위해 12주간 주 1회 측정하였으며, 간 무게(mg)는 시험 종료일에 마우스를 흡입 마취한 후, 조직을 적출하여 무게를 측정하였다.
그 결과, 도 1(체중, g)에 나타난 바와 같이 ND 그룹 대비 HFD 그룹의 12주간 체중 증가량이 1.63배 증가한 것으로 나타났다(p<0.001). 소재 투여 그룹의 경우 HFD 그룹이 46.97±1.63 g, CS100 그룹은 45.29±1.57 g으로 유의적 차이가 나타나지 않았으나, CS200 그룹의 경우 41.68±1.45 g으로 유의적으로 낮게 나타났다. 또한 도 2(간무게, g)의 변화를 분석한 결과, ND 그룹 대비 HFD 그룹에서 1.76 배 정도로 높게 나타났으며(p<0.001), 소재 투여에 따라 HFD 그룹 대비 CS100 및 CS200 그룹에서 각각 22%(p<0.01), 31.2%(p<0.001) 정도의 유의적인 감소가 나타났다. 따라서, 고수 추출물 투여로 인해 비알콜성 지방간으로 유도된 체중 및 간 무게의 증가율을 완화시키는데 도움을 줄 것으로 사료된다.
1.4. 혈청생화학적 평가
본 실시예의 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물의 혈청생화학적 효능 평가를 위해 12주간의 투여를 마친 마우스를 흡입 마취 후, 혈액을 채취하여 원심분리기(Centrifuge 5424 R, eppendorf, Hamburg, Germany)로 3000 rpm에서 10분간 혈청을 원심 분리하였다. 혈청으로부터 alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), lactate dehydrogenase (LDH), triglyceride (TG), total cholesterol(TC), low-density lipoprotein (LDL) cholesterol을 automatic blood biochemical test analyzer (Chemistry analyzer AU680, Beckman Coulter, Tokyo, Japan)를 이용하여 측정하였다.
그 결과, 간 기능을 나타내는 대표적 바이오마커인 AST, ALT 및 LDH의 경우, 도 3의 serum ALT (U/L) 결과에서 ND그룹 대비 HFD그룹에서 4.59배(p<0.001) 증가율을 나타내었으며, HFD 대비 고수추출물 투여 그룹에서 CS100 그룹 및 CS200 그룹 각각 38.5%(p<0.05) 및 49.6%(p<0.01) 정도의 유의적인 감소가 나타났다. 또한 도 4에 나타낸 serum AST (U/L)의 결과에서도 ND 그룹 대비 HFD 그룹에서 2.63 배 정도 증가(p<0.001)를 나타내었으며, HFD 그룹 대비 CS100 그룹은 28.2%, CS200 그룹은 32.3%로 각각 유의적인 감소를 나타내었다(p<0.01). 한편, 도 5에 나타낸 serum LDH (U/L)의 결과에서 ND 그룹 대비 HFD 그룹에서 1.76배 증가(p<0.01)를 나타내었고, HFD 그룹 대비 고수 추출물 투여 그룹에서 CS100 그룹에선 감소하는 경향을 보였으나 유의적이지 않았으며, CS200 그룹에서 35.4% 정도의 유의적인 감소를 나타내었다(p<0.05). 따라서, 고수 추출물 투여가 비알콜성 지방간으로 유도된 간 기능 손상을 완화시키는데 도움을 줄 것으로 사료된다.
또한, 간의 지방대사 바이오마커인 혈중지질수준을 나타내는 중성지방 (TG, mg/DL)의 경우 도 6에서 나타낸 바와 같이, ND 그룹 대비 HFD 그룹에서 1.71배 정도의 유의적인 증가를 보였으며(p<0.01), HFD 그룹 대비 CS100 그룹 및 CS200 그룹에서 각각 30.1%(p<0.05) 및 36.6%(p<0.01) 정도의 유의적 감소를 나타냈다. 도 7의 총콜레스테롤(TC, mg/dL) 결과에서는 ND 그룹 대비 HFD 그룹에서 1.87배(p<0.001)의 유의적 증가가 나타났으며, HFD 그룹 대비 CS100 그룹은 16.5%, CS200 그룹은 17.6%로 각각 유의적인 감소를 나타내었다(p<0.01). 또한, 도 8의 LDL (mg/dL)의 결과에서 ND 그룹 대비 HFD 그룹에서 2.74배 정도의 증가(p<0.001)와 HFD 그룹 대비 CS100 및 CS200 그룹에서 27.6% 및 31.1%로 각각 유의적인 감소를 나타내었다(p<0.01). 따라서, 고수 추출물 투여가 비알콜성 지방간으로 유도된 과도한 혈중지질수준의 증가를 완화시키는데 도움을 줄 것으로 사료된다.
1.5. 간 조직학적 평가
본 실시예의 고지방 식이에 의한 지방간 유도 마우스에서 고수 추출물의 간 조직학적 효능 평가를 위해, 마우스 부검 시 적출한 간 조직을 10% 중성 포르말린(neutral formalin)으로 고정하여 파라핀 block을 제작하였다. 4 μm 두께로 박절한 조직절편을 이용하여 hematoxylin and eosin(H&E) 염색을 수행하여 조직학적 변화를 분석하였다. 또한, 간 조직 내 지방 축적 정도를 분석하기 위해 조직을 동결하여 free floating method를 통해 냉동 절편을 얻어 oil red O (ORO) 염색을 수행하였다. 각각의 염색조직 슬라이드로부터 digital slide scanner (Motic Easyscan one, Motic, Hong Kong)를 이용해 이미지를 얻었으며, image analysis software (Motic DS Assistant, Hong Kong)를 이용하여 간 조직학적 변화를 평가하였다.
도 9는 간의 조직학적 변화를 H&E염색을 통해 비알콜성 지방간의 증상을 확인한 결과이며, 각각의 변화를 도 10 내지 도 12의 그래프로 나타내었다. 도 10의 결과, ND 그룹 대비 HFD 그룹에서 지방증(steatosis)의 소견이 증가함을 알 수 있으며, HFD 그룹 대비 CS100 그룹에서 차이가 미비하나 CS200 그룹에서는 확연히 감소한 것을 나타냈다. 또한, 도 11의 간세포의 팽창(ballooning) 소견의 결과에서 ND 그룹 대비 HFD 그룹에서 유의적인 증가를 나타내었다. CS100 그룹은 간세포의 팽창이 감소하는 경향을 보였으나 유의적인 변화를 보이지 않았으며, CS200 그룹은 유의적인 감소를 나타내었다(p<0.05). 도 12의 염증(inflammation) 소견인 세포의 침윤(infiltration)의 소견에서는 ND 그룹 대비 HFD 그룹에서 유의적 증가를 보인 반면, HFD 대비 CS100 및 CS200 그룹에서 확연히 감소하여 각각 (p<0.05) 및 (p<0.01)로 유의적인 감소를 나타냈다. 도 13은 도 10 내지 도 12의 결과를 종합하여 나타낸 NAFLD activity (NAS)의 결과로 ND 그룹 대비 HFD 그룹에서 7.8배가량 유의적 증가를 나타내었고(p<0.001), HFD 그룹 대비 고수 추출물 투여 그룹에서 CS100 그룹은 감소하는 경향을 나타내었으나 유의적 차이를 보이지 않았다. 반면, CS200 그룹에서는 HFD 그룹 대비 57.8%의 유의적으로 감소한 결과를 나타내었다(p<0.001). 따라서, 고수 추출물 투여가 고지방식이로 유도된 비알콜성지방간의 증상을 완화시키는데 도움을 줄 수 있을 것으로 사료된다.
또한, 도 14는 간의 조직학적 변화를 Oil red O 염색을 통해 간 조직 내 지방 분포 정도를 나타낸 결과로, 도 15의 그래프로 그 결과를 나타내었다. 그 결과, ND 그룹 대비 HFD 그룹에서 확연히 유의적으로 증가한 것으로 나타났으며(p<0.001), HFD 그룹 대비 고수 추출물 투여 그룹에서 각각 CS100 그룹은 44.2% 및 CS200 그룹은 58.4%로 유의적인 감소를 나타내었다. 따라서, 고수 추출물 투여가 고지방식이로 유도된 지방간의 증상을 완화시키는데 도움을 줄 수 있을 것으로 사료된다.
Claims (17)
- 고수 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 고수 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알콜 용매 또는 이들의 혼합 용매로 추출된 것인, 식품 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 지방간 질환은 비알콜성 지방간 질환인, 식품 조성물. - 제3항에 있어서,
상기 비알콜성 지방간 질환은 단순 지방간 질환, 영양성 지방간 질환, 기아성 지방간 질환, 비만성 지방간 질환, 당뇨병성 지방간 질환, 지방간염, 간섬유화 및 간경화로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인, 식품 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 조성물은 간 내 지방 축적을 억제하는 것인, 식품 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 조성물은 혈중 알라닌 아미노트랜스퍼라아제(Alanine Aminotransferase; ALT) 또는 아스파라트산 아미노트랜스퍼라아제(Aspartate Aminotransferase; AST)의 수치를 감소시키는 것인, 식품 조성물. - 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 식품 조성물을 포함하는, 건강기능식품.
- 고수 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제8항에 있어서,
상기 고수 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알콜 용매 또는 이들의 혼합 용매로 추출된 것인, 약학적 조성물. - 제8항에 있어서,
상기 지방간 질환은 비알콜성 지방간 질환인, 약학적 조성물. - 제10항에 있어서,
상기 비알콜성 지방간 질환은 단순 지방간 질환, 영양성 지방간 질환, 기아성 지방간 질환, 비만성 지방간 질환, 당뇨병성 지방간 질환, 지방간염, 간섬유화 및 간경화로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인, 약학적 조성물. - 제8항에 있어서,
상기 조성물은 간 내 지방 축적을 억제하는 것인, 약학적 조성물. - 제8항에 있어서,
상기 조성물은 혈중 알라닌 아미노트랜스퍼라아제(Alanine Aminotransferase; ALT) 또는 아스파라트산 아미노트랜스퍼라아제(Aspartate Aminotransferase; AST)의 수치를 감소시키는 것인, 약학적 조성물. - 고수 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간 질환의 예방 또는 치료용 의약외품 조성물.
- 제14항에 있어서,
상기 지방간 질환은 비알콜성 지방간 질환인, 의약외품 조성물. - 고수 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간 질환의 예방 또는 개선용 사료 조성물.
- 제16항에 있어서,
상기 지방간 질환은 비알콜성 지방간 질환인, 사료 조성물.
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