KR20230158641A - Therapy for drug-resistant cancer by administration of anti-her2 antibody/drug conjugate - Google Patents

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KR20230158641A
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her2
antibody
cancer
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drugs
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Korean (ko)
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다카히로 지코
유스케 오기타니
가즈타카 요시하라
세이코 엔도
요시히코 후지사키
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다이이찌 산쿄 가부시키가이샤
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Abstract

기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암에 대해 유효한 치료로서 식 : -(숙신이미드-3-일-N)-CH2CH2CH2CH2CH2-C(=O)-GGFG-NH-CH2-O-CH2-C(=O)-(NH-DX) 로 나타내는 링커 및 약물과, 항 HER2 항체가 결합한 항체-약물 콘주게이트를 사용한, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제 및 치료 방법을 제공한다.It is an effective treatment for HER2-expressing cancer that is resistant or intractable to existing anti-HER2 drugs. Formula: -(succinimide-3-yl-N)-CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 -C(=O) -GGFG-NH-CH 2 -O-CH 2 -C(=O)-(NH-DX) and an existing anti-HER2 drug using an antibody-drug conjugate in which a drug and an anti-HER2 antibody are combined. Provides a treatment and treatment method for resistant or refractory HER2-expressing cancer.

Description

항 HER2 항체-약물 콘주게이트 투여에 의한 내성암의 치료 {THERAPY FOR DRUG-RESISTANT CANCER BY ADMINISTRATION OF ANTI-HER2 ANTIBODY/DRUG CONJUGATE}Treatment of resistant cancer by administration of anti-HER2 antibody-drug conjugate {THERAPY FOR DRUG-RESISTANT CANCER BY ADMINISTRATION OF ANTI-HER2 ANTIBODY/DRUG CONJUGATE}

본 발명은 항 HER2 항체와 엑사테칸을 링커 구조를 통해서 결합시킨 항체-약물 콘주게이트에 의한 약제 내성암 (이하, 간단히 「내성암」 이라고도 기재한다), 특히 내성을 획득한 암의 치료에 관한 것이다.The present invention relates to the treatment of drug-resistant cancer (hereinafter also simply referred to as “resistant cancer”), especially cancer that has acquired resistance, using an antibody-drug conjugate in which an anti-HER2 antibody and exatecan are linked through a linker structure. will be.

암 세포 표면에 발현하고, 또한 세포에 내재화할 수 있는 항원에 결합하는 항체에, 세포 독성을 갖는 약물을 결합시킨 항체-약물 콘주게이트 (Antibody-Drug Conjugate ; ADC) 는, 암 세포에 선택적으로 약물을 송달할 수 있음으로써, 암 세포 내에 약물을 축적시켜, 암 세포를 사멸시키는 것을 기대할 수 있다 (비특허문헌 1 ∼ 3). ADC 로서 예를 들어, 항 CD33 항체에 칼리키아미신을 결합시킨 Mylotarg (등록상표 ; INN : 젬투주맙 오조가미신) 가 급성 골수성 백혈병의 치료약으로서 인가되고 있었다. 또, 항 CD30 항체에 오리스타틴 E 를 결합시킨 Adcetris (등록상표 ; INN : 브렌툭시맙 베도틴) 가 호지킨 림프종과 미분화 대세포 림프종의 치료약으로서 인가되었다 (비특허문헌 4). 또한, 항 HER2 항체인 트라스투주맙에 링커 구조를 통해서 항종양성 약물인 메이탄시노이드 (DM1) 를 결합한 Kadcyla (등록상표 ; T-DM1 ; INN : 트라스투주맙 엠탄신 ; 비특허문헌 34) 도 인가되었다. 지금까지 인가된 ADC 에 함유되는 약물은, DNA 또는 튜불린을 표적으로 하고 있다.Antibody-Drug Conjugate (ADC) is a drug that combines a cytotoxic drug with an antibody that binds to an antigen that is expressed on the surface of cancer cells and can be internalized into the cells. By being able to deliver, it can be expected that the drug will accumulate in cancer cells and kill the cancer cells (Non-Patent Documents 1 to 3). As an ADC, for example, Mylotarg (registered trademark; INN: gemtuzumab ozogamicin), which combines calicheamicin with an anti-CD33 antibody, has been approved as a treatment for acute myeloid leukemia. Additionally, Adcetris (registered trademark; INN: brentuximab vedotin), which combines auristatin E with an anti-CD30 antibody, has been approved as a treatment for Hodgkin's lymphoma and undifferentiated large cell lymphoma (Non-patent Document 4). In addition, Kadcyla (registered trademark; T-DM1; INN: trastuzumab emtansine; Non-patent Document 34), which binds the anti-tumor drug maytansinoid (DM1) to trastuzumab, an anti-HER2 antibody, through a linker structure approved. Drugs contained in ADCs approved so far target DNA or tubulin.

항종양성의 저분자 화합물로서 토포이소메라아제 I 를 저해하여 항종양 작용을 발현하는 화합물인 캠토테신 유도체가 알려져 있다. 그 중에 하기 식 :Camptothecin derivatives, which are low-molecular-weight antitumor compounds that exhibit antitumor activity by inhibiting topoisomerase I, are known. Among them, the following formula:

[화학식 1] [Formula 1]

Figure pat00001
Figure pat00001

으로 나타내는 항종양성 화합물 (엑사테칸, IUPAC 명 : (1S,9S)-1-아미노-9-에틸-5-플루오로-1,2,3,9,12,15-헥사하이드로-9-하이드록시-4-메틸-10H,13H-벤조[de]피라노[3',4':6,7] 인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-10,13-디온, (화학명 : (1S,9S)-1-아미노-9-에틸-5-플루오로-2,3-디하이드로-9-하이드록시-4-메틸-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-10,13(9H,15H)-디온으로서 나타낼 수도 있다)) 은, 수용성의 캠토테신 유도체이다 (특허문헌 1, 2). 이 화합물은, 현재 임상에서 사용되고 있는 이리노테칸과는 달리, 항종양 효과의 발현을 위해, 효소에 의한 활성화를 필요로 하지 않는다. 또, 이리노테칸의 약효 본체인 SN-38 이나, 동일하게 임상에서 사용되고 있는 토포테칸보다 강한 토포이소메라아제 I 저해 활성이 관찰되고, in vitro 에서 여러 가지 암 세포에 대해 보다 강한 살세포 활성이 관찰되었다. 특히 p-당단백질 (P-glycoprotein) 의 발현에 의해 SN-38 등에 내성을 나타내는 암 세포에 대해서도 효과가 관찰되었다. 또, 마우스의 인간 종양 피하 이식 모델에서도 강한 항종양 효과가 관찰되었지만, 임상 시험이 실시되었지만 출시에는 이르지 않았다 (비특허문헌 5 ∼ 10). 엑사테칸이 ADC 의 약물로서 유효하게 작용하는지에 대해서는 분명하지 않았다.Antitumor compound represented by (exatecan, IUPAC name: (1S,9S)-1-amino-9-ethyl-5-fluoro-1,2,3,9,12,15-hexahydro-9-hydro Roxy-4-methyl-10H,13H-benzo[de]pyrano[3',4':6,7] indolizino[1,2-b]quinoline-10,13-dione, (chemical name: (1S) ,9S)-1-Amino-9-ethyl-5-fluoro-2,3-dihydro-9-hydroxy-4-methyl-1H,12H-benzo[de]pyrano[3',4': 6,7]Indolizino[1,2-b]quinoline-10,13(9H,15H)-dione)) is a water-soluble camptothecin derivative (Patent Documents 1 and 2). This compound, unlike irinotecan currently used clinically, does not require activation by enzymes to exhibit antitumor effects. In addition, stronger topoisomerase I inhibitory activity was observed than SN-38, which is the main medicinal product of irinotecan, and Topotecan, which is also used clinically, and stronger cell killing activity was observed against various cancer cells in vitro. . In particular, the effect was observed on cancer cells showing resistance to SN-38, etc. due to the expression of P-glycoprotein. In addition, a strong anti-tumor effect was also observed in a human tumor subcutaneous transplant model in mice, but although clinical trials were conducted, it did not reach the market (Non-patent Documents 5 to 10). It was not clear whether exatecan acts effectively as an ADC drug.

DE-310 은, 생분해성의 카르복시메틸덱스트란폴리알코올 폴리머에 엑사테칸을, GGFG 펩티드 스페이서를 통해서 결합시킨 복합체이다 (특허문헌 3). 엑사테칸을 고분자 프로드러그화함으로써, 높은 혈중 체류성을 유지시키고, 또한 종양 신생 혈관의 투과성의 항진과 종양 조직 체류성을 이용하여, 수동적으로 종양 부위에 대한 지향성을 높인 것이다. DE-310 은, 효소에 의한 펩티드 스페이서의 절단에 의해, 활성 본체인 엑사테칸, 및 글리신이 아미노기에 결합하고 있는 엑사테칸이 지속적으로 유리되고, 그 결과 약물 동태가 개선된다. 비임상 시험에 있어서의 여러 가지 종양의 평가 모델에 있어서, DE-310 은, 여기에 포함되는 엑사테칸의 총량이 엑사테칸 단제의 투여시보다 감소하고 있음에도 불구하고, 단제의 투여시보다 보다 높은 유효성을 나타냈다. DE-310 에 관해서는 임상 시험이 실시되어 유효예도 확인되고, 활성 본체가 정상 조직보다 종양에 집적되는 것이 확인되었다는 보고가 있다. 한편, 종양에 대한 DE-310 및 활성 본체의 집적은 정상 조직에 대한 집적과 큰 차가 없어, 인간에서는 수동적인 타게팅은 볼 수 없었다는 보고도 있다 (비특허문헌 11 ∼ 14). 결과적으로 DE-310 도 출시에는 이르지 않아, 엑사테칸이 이와 같은 타게팅을 지향한 약물로서 유효하게 기능하는가에 대해서는 분명하지 않았다.DE-310 is a complex in which exatecan is bound to a biodegradable carboxymethyldextran polyalcohol polymer through a GGFG peptide spacer (Patent Document 3). By converting exatecan into a polymer prodrug, high blood retention is maintained, and directivity to the tumor site is passively increased by utilizing the enhanced permeability of tumor new blood vessels and tumor tissue retention. In DE-310, by cleavage of the peptide spacer with an enzyme, exatecan, which is the active substance, and exatecan, in which glycine is bound to an amino group, are continuously released, resulting in improved pharmacokinetics. In various tumor evaluation models in non-clinical trials, DE-310 is more effective than when administered as a single drug, even though the total amount of exatecan contained therein is reduced compared to when administered as a single drug. It showed high effectiveness. Regarding DE-310, clinical trials were conducted and effective cases were confirmed, and it was reported that the active substance was confirmed to accumulate in tumors rather than normal tissues. On the other hand, there are also reports that the accumulation of DE-310 and the active body in tumors is not significantly different from the accumulation in normal tissues, and that passive targeting has not been observed in humans (Non-patent Documents 11 to 14). As a result, DE-310 was not released, and it was unclear whether exatecan would function effectively as a targeting drug.

DE-310 의 관련 화합물로서, -NH-(CH2)4-C(=O)- 로 나타내는 구조 부분을 -GGFG- 스페이서와 엑사테칸 사이에 삽입하고, -GGFG-NH-(CH2)4-C(=O)- 를 스페이서 구조로 하는 복합체도 알려져 있지만 (특허문헌 4), 동 복합체의 항종양 효과에 대해서는 전혀 알려지지 않았다.As a related compound of DE-310, the structural portion represented by -NH-(CH 2 ) 4 -C(=O)- is inserted between the -GGFG- spacer and exatecan, and -GGFG-NH-(CH 2 ) A complex with 4 -C(=O)- as a spacer structure is also known (Patent Document 4), but nothing is known about the antitumor effect of this complex.

HER2 는, 인간 상피 세포 증식 인자 수용체 2 형 관련 암 유전자로서 동정된 대표적인 증식 인자 수용체형의 암 유전자 산물의 하나이고, 분자량 185 kDa 의 티로신키나아제 도메인을 갖는 막 관통형 수용체 단백이다 (비특허문헌 15). HER2 의 DNA 서열 및 아미노산 서열은 공적 데이터베이스 상에 공개되어 있고, 예를 들어, M11730 (Genbank), NP_004439.2 (NCBI) 등의 액세션 번호에 의해 참조할 수 있다.HER2 is one of the representative growth factor receptor-type oncogene products identified as a human epithelial growth factor receptor type 2-related oncogene, and is a transmembrane receptor protein with a tyrosine kinase domain with a molecular weight of 185 kDa (Non-patent Document 15 ). The DNA sequence and amino acid sequence of HER2 are published in public databases and can be referenced by accession numbers such as M11730 (Genbank), NP_004439.2 (NCBI), etc.

HER2 (neu, ErbB-2) 는 EGFR (epidermal growth factor receptor : 상피 증식 인자 수용체) 패밀리의 하나이고, 호모다이머 혹은 다른 EGFR 수용체인 HER1 (EGFR, ErbB-1), HER3 (ErbB-3), HER4 (ErbB-4) 와의 헤테로다이머 형성 (비특허문헌 16 ∼ 18) 에 의해 세포내 티로신 잔기가 자기 인산화되어 활성화됨으로써, 정상 세포 및 암 세포에 있어서 세포의 증식·분화·생존에 중요한 역할을 하고 있는 것이 알려져 있다 (비특허문헌 19, 20). HER2 는 유방암, 위암, 난소암 등 여러 가지 암종에 있어서 과잉 발현하고 있고 (비특허문헌 21 ∼ 26), 유방암에 있어서는 부 (負) 의 예후 인자인 것이 보고되고 있다 (비특허문헌 27, 28).HER2 (neu, ErbB-2) is a member of the EGFR (epidermal growth factor receptor) family, and homodimeric or other EGFR receptors such as HER1 (EGFR, ErbB-1), HER3 (ErbB-3), and HER4 By forming heterodimers with (ErbB-4) (Non-Patent Documents 16 to 18), intracellular tyrosine residues are autophosphorylated and activated, thereby playing an important role in cell proliferation, differentiation, and survival in normal and cancer cells. This is known (Non-patent Documents 19, 20). HER2 is overexpressed in various cancer types such as breast cancer, stomach cancer, and ovarian cancer (Non-Patent Documents 21 to 26), and it has been reported to be a negative prognostic factor in breast cancer (Non-Patent Documents 27, 28). .

트라스투주맙은, 재조합 인간화 항 HER2 모노클로날 항체 (huMAb4D5-8, rhuMAb HER2, 허셉틴 (등록상표)) 라고 칭해지는 마우스 항 HER2 항체 4D5 (비특허문헌 29, 특허문헌 5) 의 인간화 항체 (특허문헌 6) 이다. 트라스투주맙은, HER2 의 세포외 도메인 IV 에 특이적으로 결합하고, 항체 의존성 세포 장해 (ADCC) 유도나 HER2 로부터의 시그널 전달 저해를 통해서 항암 효과를 발휘한다 (비특허문헌 30, 31). 트라스투주맙은 HER2 를 과잉 발현한 종양에 대해 높은 효과를 나타내므로 (비특허문헌 32), HER2 를 과잉 발현하고 있는 전이성 유방암 환자에서의 치료약으로서, 미국에서 1999년, 일본에 있어서 2001년에 출시되었다.Trastuzumab is a humanized antibody (patent) of mouse anti-HER2 antibody 4D5 (Non-patent Document 29, Patent Document 5), also called recombinant humanized anti-HER2 monoclonal antibody (huMAb4D5-8, rhuMAb HER2, Herceptin (registered trademark)). Document 6). Trastuzumab specifically binds to the extracellular domain IV of HER2 and exerts anticancer effects through induction of antibody-dependent cell damage (ADCC) and inhibition of signal transduction from HER2 (Non-patent Documents 30, 31). Trastuzumab is highly effective against tumors overexpressing HER2 (Non-Patent Document 32), and was launched in the United States in 1999 and in Japan in 2001 as a treatment for patients with metastatic breast cancer overexpressing HER2. It has been done.

유방암에 있어서의 트라스투주맙의 치료 효과는 충분히 증명되어 있는 한편 (비특허문헌 33), 트라스투주맙에 응답하는 것은, 광범위한 종래의 항암 치료를 받은 HER2 를 과잉 발현한 유방암 환자의 약 15 ％ 라고 일컬어지며, 이 집단의 약 85 ％ 의 환자는 트라스투주맙 처치에 대해 응답하지 않거나, 응답이 빈약할 뿐이었다.While the therapeutic effect of trastuzumab in breast cancer has been sufficiently proven (Non-patent Document 33), approximately 15% of breast cancer patients overexpressing HER2 who have received a wide range of conventional anticancer treatments respond to trastuzumab. It is said that approximately 85% of patients in this population did not respond to trastuzumab treatment or responded only poorly.

따라서, 트라스투주맙에 대해 응답하지 않거나, 응답이 빈약한 HER2 를 과잉 발현하는 종양 또는 HER2 발현에 관련하는 장애를 앓고 있는 환자를 위해, HER2 발현에 관련하는 질병을 표적으로 하는 치료약의 필요성이 인식되어 있고, 트라스투주맙에 링커 구조를 통해서 항종양성 약물을 결합한 T-DM1 이나 HER2 의 세포외 도메인 II 를 표적으로 하여, 헤테로다이머 형성을 저해하도록 설계된 퍼투주맙 (퍼제타 (등록상표) ; 비특허문헌 35, 특허문헌 7) 이 개발되었다. 그러나, 응답성이나 활성의 강도, 그리고 적응 범위는 여전히 충분하지 않고, HER2 를 표적으로 하는 미충족 요구가 존재하고 있다Therefore, for patients suffering from HER2-overexpressing tumors or disorders related to HER2 expression that do not respond or respond poorly to trastuzumab, there is a recognized need for therapeutic drugs targeting diseases related to HER2 expression. Pertuzumab (Perjeta (registered trademark); non-patented) is designed to inhibit heterodimer formation by targeting the extracellular domain II of T-DM1 or HER2, which binds an anti-tumor drug to trastuzumab through a linker structure. Document 35, Patent Document 7) was developed. However, the responsiveness, intensity of activity, and adaptive range are still not sufficient, and there is an unmet need for targeting HER2.

항체-약물 콘주게이트로서, 항 HER2 항체와 엑사테칸을 구성 요소로 하는 항체-약물 콘주게이트가 알려져 있고, 특히 다음 구조의 것이 우수한 특성을 갖는 것이 분명해지고 있다 (특허문헌 8). 즉, 다음 식으로 나타내는 링커 및 약물과, 항 HER2 항체가 결합한 항체-약물 콘주게이트이다.As an antibody-drug conjugate, an antibody-drug conjugate containing an anti-HER2 antibody and exatecan as components is known, and it has become clear that the one with the following structure in particular has excellent properties (Patent Document 8). That is, it is an antibody-drug conjugate in which an anti-HER2 antibody is bound to a linker and a drug shown in the following formula.

-(숙신이미드-3-일-N)-CH2CH2CH2CH2CH2-C(=O)-GGFG-NH-CH2-O-CH2-C(=O)-(NH-DX) -(succinimide-3-yl-N)-CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 -C(=O)-GGFG-NH-CH 2 -O-CH 2 -C(=O)-(NH -DX)

(식 중,(During the ceremony,

-(숙신이미드-3-일-N)- 은 다음 식 : -(succinimide-3-yl-N)- has the following formula:

[화학식 2] [Formula 2]

Figure pat00002
Figure pat00002

으로 나타내는 구조이고, 이것의 3 위치에서 항 HER2 항체와 티오에테르 결합에 의해 결합하고, 1 위치의 질소 원자 상에서 이것을 포함하는 링커 구조 내의 메틸렌기와 결합하고,It is a structure represented by, and binds to the anti-HER2 antibody at the 3rd position through a thioether bond, and binds to the methylene group in the linker structure containing this on the nitrogen atom at the 1st position,

-(NH-DX) 는 다음 식 : -(NH-DX) is the following formula:

[화학식 3] [Formula 3]

Figure pat00003
Figure pat00003

으로 나타내는 1 위치의 아미노기의 질소 원자가 결합 부위로 되어 있는 기를 나타낸다.represents a group in which the nitrogen atom of the amino group at the 1st position is the binding site.

상기의 항 HER2 항체-약물 콘주게이트는, 항 HER2 항체 1 분자에 대해 다음 식으로 나타내는 약물-링커 구조 : The above anti-HER2 antibody-drug conjugate has a drug-linker structure expressed by the following formula for one anti-HER2 antibody molecule:

-(숙신이미드-3-일-N)-CH2CH2CH2CH2CH2-C(=O)-GGFG-NH-CH2-O-CH2-C(=O)-(NH-DX)-(succinimide-3-yl-N)-CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 -C(=O)-GGFG-NH-CH 2 -O-CH 2 -C(=O)-(NH -DX)

를 결합시키고 있다. 이 약물-링커 구조는 항체의 사슬 사이의 디술파이드 결합 부위 (2 지점의 중사슬-중사슬 사이, 및 2 지점의 중사슬-경사슬 사이) 에, 티오에테르 결합을 통해서 최대 8 개 결합시킬 수 있다. 이 최대수에 가까운, 거의 8 개의 약물-링커 구조를 결합시킨 항 HER2 항체-약물 콘주게이트가 취득되고 있다. 이와 같은 항체 1 분자당의 약물 결합수가 많은 항체-약물 콘주게이트는, 매우 우수한 항암 작용을 발휘하는 것이 분명해지고 있다. 예를 들어, 담암 마우스를 사용한 전임상 연구에 있어서, 암 세포에서의 HER2 의 발현이 저발현이어도 살세포 활성을 갖는 것이 확인되고 있다 (특허문헌 8, 비특허문헌 36). 이와 같이 상기의 항 HER2 항체-약물 콘주게이트는, 우수한 항암약으로서 기대되고, 임상 시험이 진행 중이다.is combining. This drug-linker structure can bind up to eight disulfide bonding sites between antibody chains (two heavy chains to heavy chains and two heavy chains to light chains) through thioether bonds. there is. An anti-HER2 antibody-drug conjugate combining almost eight drug-linker structures, which is close to this maximum number, has been obtained. It has become clear that such antibody-drug conjugates with a large number of drug bonds per antibody molecule exhibit very excellent anticancer activity. For example, in preclinical studies using cancer-bearing mice, it has been confirmed that HER2 has cell killing activity even when the expression of HER2 in cancer cells is low (Patent Document 8, Non-Patent Document 36). As described above, the anti-HER2 antibody-drug conjugate is expected to be an excellent anticancer drug, and clinical trials are in progress.

일본 공개특허공보 평5-59061 호Japanese Patent Publication No. 5-59061 일본 공개특허공보 평8-337584 호Japanese Patent Publication No. 8-337584 국제 공개 제1997/46260 호International Publication No. 1997/46260 국제 공개 제2000/25825 호International Publication No. 2000/25825 미국 특허 제5677171 호US Patent No. 5677171 미국 특허 제5821337 호US Patent No. 5821337 국제 공개 제01/00244 호International Publication No. 01/00244 국제 공개 제2015/115091호International Publication No. 2015/115091

Ducry, L., et al., Bioconjugate Chem. (2010) 21, 5-13. Ducry, L., et al., Bioconjugate Chem. (2010) 21, 5-13. Alley, S. C., et al., Current Opinion in Chemical Biology (2010) 14, 529-537. Alley, S. C., et al., Current Opinion in Chemical Biology (2010) 14, 529-537. Damle N. K. Expert Opin. Biol. Ther. (2004) 4, 1445-1452. Damle N.K. Expert Opin. Biol. Ther. (2004) 4, 1445-1452. Senter P. D., et al., Nature Biotechnology (2012) 30, 631-637. Senter P. D., et al., Nature Biotechnology (2012) 30, 631-637. Kumazawa, E., Tohgo, A., Exp. Opin. Invest. Drugs (1998) 7, 625-632. Kumazawa, E., Tohgo, A., Exp. Opin. Invest. Drugs (1998) 7, 625-632. Mitsui, I., et al., Jpn J. Cancer Res. (1995) 86, 776-782. Mitsui, I., et al., Jpn J. Cancer Res. (1995) 86, 776-782. Takiguchi, S., et al., Jpn J. Cancer Res. (1997) 88, 760-769. Takiguchi, S., et al., Jpn J. Cancer Res. (1997) 88, 760-769. Joto, N. et al. Int J Cancer (1997) 72, 680-686. Joto, N. et al. Int J Cancer (1997) 72, 680-686. Kumazawa, E. et al., Cancer Chemother. Pharmacol. (1998) 42, 210-220. Kumazawa, E. et al., Cancer Chemother. Pharmacol. (1998) 42, 210-220. De Jager, R., et al., Ann N Y Acad Sci (2000) 922, 260-273. De Jager, R., et al., Ann N Y Acad Sci (2000) 922, 260-273. Inoue, K. et al., Polymer Drugs in the Clinical Stage, Edited by Maeda et al. (2003) 145-153. Inoue, K. et al., Polymer Drugs in the Clinical Stage, Edited by Maeda et al. (2003) 145-153. Kumazawa, E. et al., Cancer Sci (2004) 95, 168-175. Kumazawa, E. et al., Cancer Sci (2004) 95, 168-175. Soepenberg, O. et al., Clinical Cancer Research, (2005) 11, 703-711. Soepenberg, O. et al., Clinical Cancer Research, (2005) 11, 703-711. Wente M. N. et al., Investigational New Drugs (2005) 23, 339-347. Wente M. N. et al., Investigational New Drugs (2005) 23, 339-347. Coussens L, et al., Science. 1985 ; 230 (4730) : 1132-1139. Coussens L, et al., Science. 1985 ; 230 (4730): 1132-1139. Graus-Porta G, et al., EMBO J. 1997 ; 16 : 1647-1655. Graus-Porta G, et al., EMBO J. 1997 ; 16:1647-1655. Karnagaran D, et al., EMBO J. 1996 ; 15 : 254-264. Karnagaran D, et al., EMBO J. 1996 ; 15:254-264. Sliwkowski MX, et al., J. Biom Chem. 1994 ; 269 : 14661-14665. Sliwkowski MX, et al., J. Biom Chem. 1994 ; 269:14661-14665. Di Fore PP, et al., Science. 1987 ; 237 : 178-182. Di Fore PP, et al., Science. 1987 ; 237:178-182. Hudziak RM, et al., Proc Natl Acad Sci U S A. 1987 ; 84 : 7159-7163. Hudziak R M, et al., Proc Natl Acad Sci U S A. 1987 ; 84:7159-7163. Hardwick R, et al., Eur. J Surg Oncol. 1997 (23) : 30-35. Hardwick R, et al., Eur. J Surg Oncol. 1997(23):30-35. Korkaya H, et al., Oncogene. 2008 ; 27 (47) : 6120-6130. Korkaya H, et al., Oncogene. 2008 ; 27(47):6120-6130. Yano T, et al., Oncol Rep. 2006 ; 15 (1) : 65-71. Yano T, et al., Oncol Rep. 2006 ; 15(1):65-71. Slamon DJ, et al., Science. 1987 ; 235 : 177-182. Slamon DJ, et al., Science. 1987 ; 235:177-182. Gravalos C, et al., Ann Oncol 19 : 1523-1529, 2008. Gravalos C, et al., Ann Oncol 19:1523-1529, 2008. Fukushige S et al., Mol Cell Biol 6 : 955-958, 1986. Fukushige S et al., Mol Cell Biol 6:955-958, 1986. Slamon DJ, et al. Science. 1989 ; 244 : 707-712. Slamon DJ, et al. Science. 1989 ; 244:707-712. Kaptain S et al., Diagn Mol Pathol 10 : 139-152, 2001. Kaptain S et al., Diagn Mol Pathol 10:139-152, 2001. Fendly. et al., Cancer Research 1990 (50) : 1550-1558. Fendly. et al., Cancer Research 1990 (50): 1550-1558. Sliwkowski MX, et al., Semin Oncol. 1999 ; 26 (4,Suppl 12) : 60-70. Sliwkowski MX, et al., Semin Oncol. 1999 ; 26 (4,Suppl 12):60-70. Hudis CA, et al., N Engl J Med. 357 : 39-51, 2007. Hudis CA, et al., N Engl J Med. 357:39-51, 2007. Vogel CL, et al., J Clin Oncol. 2002 ; 20 (3) : 719-726. Vogel CL, et al., J Clin Oncol. 2002 ; 20(3):719-726. Baselga et al., J. Clin. Oncol. 14 : 737-744 (1996). Baselga et al., J. Clin. Oncol. 14:737-744 (1996). Howard A. et al., J Clin Oncol 29 : 398-405. Howard A. et al., J Clin Oncol 29:398-405. Adams CW, et al., Cancer Immunol Immunother. 2006 ; 6 : 717-727. Adams CW, et al., Cancer Immunol Immunother. 2006 ; 6:717-727. Ogitani Y. et al., Clinical Cancer Research, 2016, Oct 15 ; 22 (20) : 5097-5108, Epub 2016 Mar 29. Ogitani Y. et al., Clinical Cancer Research, 2016, Oct 15; 22(20):5097-5108, Epub 2016 Mar 29.

항암약은, 치료를 위한 투여가 계속되었을 경우, 일단은 효과가 관찰되고 있어도, 암 세포의 획득 내성 (이하, 본 발명에 있어서 「이차 내성」 이라고도 한다) 에 의해 치료 효과가 관찰되지 않게 되는 것이 알려져 있다. 예를 들어, HER2 발현암에 있어서는, 트라스투주맙 엠탄신에 의한 치료가 실시된 결과, 트라스투주맙 엠탄신에 대한 내성 또는 난치성을 획득한 암이 새롭게 생기는 것이 알려져 있다. 따라서, 이와 같은 내성을 획득한 암 (이하, 본 발명에 있어서 「이차 내성암」 이라고도 한다) 에 주효하는 새로운 치료 방법을 제공할 수 있는 약제가 요망된다. 본 발명은, 기존의 항 HER2 약에 의한 치료에 의해 내성 또는 난치성을 획득한 HER2 발현암이어도 충분한 치료 효과가 관찰되는 치료제 및 치료 방법을 제공하는 것을 주된 과제로 한다.For anticancer drugs, when administration for treatment continues, even if an effect is observed, the therapeutic effect is no longer observed due to acquired resistance of cancer cells (hereinafter also referred to as “secondary resistance” in the present invention). It is known. For example, in HER2-expressing cancers, it is known that as a result of treatment with trastuzumab emtansine, new cancers that acquire resistance or incurability to trastuzumab emtansine arise. Therefore, there is a need for a drug that can provide a new treatment method that is effective for cancers that have acquired such resistance (hereinafter also referred to as “secondary resistant cancer” in the present invention). The main object of the present invention is to provide a treatment and treatment method in which a sufficient therapeutic effect is observed even in HER2-expressing cancers that have acquired resistance or incurability by treatment with existing anti-HER2 drugs.

또, HER2 를 발현하고 있음에도 불구하고, 기존의 항 HER2 약에서는 당초부터 치료 효과가 관찰되지 않는 암 (바꿔 말하면, 기존의 항 HER2 약에 의한 치료에 상관없이, 기존의 항 HER2 약에 대해 본래 지닌 내성 또는 난치성을 갖는 HER2 발현암) 이 알려져 있다. 그러한 HER2 발현암으로는, HER2 저발현의 암이나 유방암 및 위암 이외의 고형암 (예를 들어, 대장암, 비소세포 폐암 등) 을 들 수 있다. 본 발명은, 그러한 HER2 발현암이어도 충분한 치료 효과가 관찰되는 치료제 및 치료 방법을 제공하는 것도 주된 과제로 한다.In addition, cancers for which no therapeutic effect was initially observed with existing anti-HER2 drugs despite expressing HER2 (in other words, regardless of treatment with existing anti-HER2 drugs, cancers that have inherent properties against existing anti-HER2 drugs) HER2-expressing cancers that are resistant or incurable) are known. Such HER2-expressing cancers include cancers with low HER2 expression and solid cancers other than breast cancer and stomach cancer (for example, colon cancer, non-small cell lung cancer, etc.). The main object of the present invention is to provide a therapeutic agent and a treatment method in which a sufficient therapeutic effect is observed even in such HER2-expressing cancers.

본 발명자들은, 다음 식으로 나타내는 링커 및 약물과, 항 HER2 항체가 결합한 항체-약물 콘주게이트 : The present inventors have developed an antibody-drug conjugate in which an anti-HER2 antibody is bound to a linker and a drug represented by the following formula:

-(숙신이미드-3-일-N)-CH2CH2CH2CH2CH2-C(=O)-GGFG-NH-CH2-O-CH2-C(=O)-(NH-DX)-(succinimide-3-yl-N)-CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 -C(=O)-GGFG-NH-CH 2 -O-CH 2 -C(=O)-(NH -DX)

가, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암에 대해 우수한 항종양 효과를 나타내고, 또한 안전성도 우수한 것을 전임상 시험 및 임상 시험에 있어서 알아내었다. 이 항체-약물 콘주게이트에 의하면, 이차 내성암이어도 유효한 치료를 기대할 수 있다.It has been found in preclinical and clinical trials that it exhibits excellent antitumor effects against HER2-expressing cancers that are resistant or intractable to existing anti-HER2 drugs, and that it is also excellent in safety. According to this antibody-drug conjugate, effective treatment can be expected even for secondary resistant cancer.

즉, 본 발명은 이하의 [1] ∼ [144] 를 제공한다.That is, the present invention provides the following [1] to [144].

[1] 하기 식으로 나타내는 링커 및 약물과, 항 HER2 항체가 결합한 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 것을 특징으로 하는, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제 : [1] A therapeutic agent for HER2-expressing cancer that is resistant or intractable to existing anti-HER2 drugs, comprising an antibody-drug conjugate in which an anti-HER2 antibody is bound to a linker and a drug represented by the following formula:

-(숙신이미드-3-일-N)-CH2CH2CH2CH2CH2-C(=O)-GGFG-NH-CH2-O-CH2-C(=O)-(NH-DX).-(succinimide-3-yl-N)-CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 -C(=O)-GGFG-NH-CH 2 -O-CH 2 -C(=O)-(NH -DX).

(식 중,(During the ceremony,

-(숙신이미드-3-일-N)- 은 다음 식 : -(succinimide-3-yl-N)- has the following formula:

[화학식 4][Formula 4]

Figure pat00004
Figure pat00004

으로 나타내는 구조이고, 이것의 3 위치에서 항 HER2 항체와 티오에테르 결합에 의해 결합하고, 1 위치의 질소 원자 상에서 이것을 포함하는 링커 구조 내의 메틸렌기와 결합하고,It is a structure represented by, and binds to the anti-HER2 antibody at the 3rd position through a thioether bond, and binds to the methylene group in the linker structure containing this on the nitrogen atom at the 1st position,

-(NH-DX) 는 다음 식 : -(NH-DX) is the following formula:

[화학식 5][Formula 5]

Figure pat00005
Figure pat00005

으로 나타내는 1 위치의 아미노기의 질소 원자가 결합 부위로 되어 있는 기를 나타내고,represents a group in which the nitrogen atom of the amino group at the 1st position is the binding site,

-GGFG- 는, -Gly-Gly-Phe-Gly- 의 테트라펩티드 잔기를 나타낸다)-GGFG- represents the tetrapeptide residue of -Gly-Gly-Phe-Gly-)

[2] 내성 또는 난치성이, 기존의 항 HER2 약에 의한 치료에 의해 획득된 내성 또는 난치성인, [1] 에 기재된 치료제.[2] The therapeutic agent according to [1], which is resistant or refractory, and is resistant or refractory acquired through treatment with an existing anti-HER2 drug.

[3] 내성 또는 난치성이, 기존의 항 HER2 약에 의한 치료에 상관없이 본래 지닌 내성 또는 난치성인, [1] 에 기재된 치료제.[3] The therapeutic agent according to [1], which is inherently resistant or refractory regardless of treatment with existing anti-HER2 drugs.

[4] 기존의 항 HER2 약이, 트라스투주맙 엠탄신, 트라스투주맙, 퍼투주맙, 및 라파티닙으로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나인, [1] 내지 [3] 중 어느 하나에 기재된 치료제.[4] The therapeutic agent according to any one of [1] to [3], wherein the existing anti-HER2 drug is at least one selected from the group consisting of trastuzumab emtansine, trastuzumab, pertuzumab, and lapatinib.

[5] 기존의 항 HER2 약이 트라스투주맙 엠탄신인, [1] 내지 [3] 중 어느 하나에 기재된 치료제.[5] The therapeutic agent according to any one of [1] to [3], wherein the existing anti-HER2 drug is trastuzumab emtansine.

[6] 기존의 항 HER2 약이 트라스투주맙인, [1] 내지 [3] 중 어느 하나에 기재된 치료제.[6] The therapeutic agent according to any one of [1] to [3], wherein the existing anti-HER2 drug is trastuzumab.

[7] 기존의 항암약에 의한 치료력을 갖는 환자에게 투여하기 위한, [1] 내지 [6] 중 어느 하나에 기재된 치료제.[7] The therapeutic agent according to any one of [1] to [6], for administration to a patient who has a history of treatment with existing anticancer drugs.

[8] 기존의 항암약이, 트라스투주맙 엠탄신, 트라스투주맙, 퍼투주맙, 라파티닙, 이리노테칸, 시스플라틴, 카르보플라틴, 옥살리플라틴, 플루오로우라실, 겜시타빈, 카페시타빈, 파클리탁셀, 도세탁셀, 독소루비신, 에피루비신, 시클로포스파미드, 마이토마이신 C, 테가푸르·기메라실·오테라실 배합제, 세툭시맙, 파니투무맙, 베바시주맙, 라무시루맙, 레고라페닙, 트리플루리딘·티피라실 배합제, 제피티닙, 엘로티닙, 아파티닙, 메토트랙사이트, 및 페메트렉세드로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나를 포함하는, [7] 에 기재된 치료제.[8] Existing anticancer drugs include trastuzumab emtansine, trastuzumab, pertuzumab, lapatinib, irinotecan, cisplatin, carboplatin, oxaliplatin, fluorouracil, gemcitabine, capecitabine, paclitaxel, docetaxel, and doxorubicin. , epirubicin, cyclophosphamide, mitomycin C, tegafur, gimeracil, oteracil combination, cetuximab, panitumumab, bevacizumab, ramucirumab, regorafenib, triple The therapeutic agent described in [7], comprising at least one selected from the group consisting of luridin-tipiracil combination agent, gefitinib, erlotinib, afatinib, methotrexed, and pemetrexed.

[9] 기존의 항암약이 트라스투주맙 엠탄신을 포함하는, [7] 에 기재된 치료제.[9] The therapeutic agent according to [7], wherein the existing anticancer drug includes trastuzumab emtansine.

[10] 기존의 항암약이 트라스투주맙을 포함하는, [7] 에 기재된 치료제.[10] The treatment according to [7], wherein the existing anticancer drug includes trastuzumab.

[11] 기존의 항암약이 이리노테칸을 포함하는, [7] 에 기재된 치료제.[11] The treatment according to [7], wherein the existing anticancer drug contains irinotecan.

[12] 항체-약물 콘주게이트의 1 항체당 약물-링커 구조의 평균 결합수가 7 내지 8 개의 범위인, [1] 내지 [11] 중 어느 하나에 기재된 치료제.[12] The therapeutic agent according to any one of [1] to [11], wherein the average number of drug-linker structures per antibody in the antibody-drug conjugate is in the range of 7 to 8.

[13] 항체-약물 콘주게이트의 1 항체당 약물-링커 구조의 평균 결합수가 7.5 내지 8 개의 범위인, [1] 내지 [11] 중 어느 하나에 기재된 치료제.[13] The therapeutic agent according to any one of [1] to [11], wherein the average number of drug-linker structures per antibody in the antibody-drug conjugate is in the range of 7.5 to 8.

[14] 항체-약물 콘주게이트에 있어서의 항 HER2 항체가, 서열 번호 1 에 있어서 아미노산 번호 1 내지 449 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 중사슬 및 서열 번호 2 에 있어서 아미노산 번호 1 내지 214 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 경사슬을 포함하여 이루어지는 항체인, [1] 내지 [13] 중 어느 하나에 기재된 치료제.[14] The anti-HER2 antibody in the antibody-drug conjugate has a heavy chain consisting of the amino acid sequence shown in amino acid numbers 1 to 449 in SEQ ID NO: 1 and the amino acid sequence shown in amino acid numbers 1 to 214 in SEQ ID NO: 2. The therapeutic agent according to any one of [1] to [13], which is an antibody comprising a light chain.

[15] 항체-약물 콘주게이트에 있어서의 항 HER2 항체가, 서열 번호 1 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 중사슬 및 서열 번호 2 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 경사슬을 포함하여 이루어지는 항체인, [1] 내지 [13] 중 어느 하나에 기재된 치료제.[15] The anti-HER2 antibody in the antibody-drug conjugate is an antibody comprising a heavy chain consisting of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1 and a light chain consisting of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 2, [1] to The therapeutic agent according to any one of [13].

[16] 항체-약물 콘주게이트의 1 회당 투여량이 5.4 ㎎/㎏ 내지 8 ㎎/㎏ 의 범위인, [1] 내지 [15] 중 어느 하나에 기재된 치료제.[16] The therapeutic agent according to any one of [1] to [15], wherein the single dose of the antibody-drug conjugate is in the range of 5.4 mg/kg to 8 mg/kg.

[17] 항체-약물 콘주게이트의 1 회당 투여량이 5.4 ㎎/㎏ 인, [1] 내지 [15] 중 어느 하나에 기재된 치료제.[17] The therapeutic agent according to any one of [1] to [15], wherein the antibody-drug conjugate is administered at a dose of 5.4 mg/kg per time.

[18] 항체-약물 콘주게이트의 1 회당 투여량이 6.4 ㎎/㎏ 인, [1] 내지 [15] 중 어느 하나에 기재된 치료제.[18] The therapeutic agent according to any one of [1] to [15], wherein the antibody-drug conjugate dose is 6.4 mg/kg per time.

[19] 항체-약물 콘주게이트의 1 회당 투여량이 7.4 ㎎/㎏ 인, [1] 내지 [15] 중 어느 하나에 기재된 치료제.[19] The therapeutic agent according to any one of [1] to [15], wherein the antibody-drug conjugate is administered at a dose of 7.4 mg/kg per time.

[20] 항체-약물 콘주게이트의 1 회당 투여량이 8 ㎎/㎏ 인, [1] 내지 [15] 중 어느 하나에 기재된 치료제.[20] The therapeutic agent according to any one of [1] to [15], wherein the antibody-drug conjugate is administered at a dose of 8 mg/kg per time.

[21] 항체-약물 콘주게이트가 3 주에 1 회의 간격으로 투여되는, [1] 내지 [20] 중 어느 하나에 기재된 치료제.[21] The therapeutic agent according to any one of [1] to [20], wherein the antibody-drug conjugate is administered at intervals of once every three weeks.

[22] 유방암, 위암, 대장암, 비소세포 폐암, 식도암, 침샘암, 위식도 접합부 선암, 담관암, 파제트병, 췌장암, 난소암, 및 자궁암 육종으로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나의 암의 치료를 위한, [1] 내지 [21] 중 어느 하나에 기재된 치료제.[22] Treatment of at least one cancer selected from the group consisting of breast cancer, stomach cancer, colon cancer, non-small cell lung cancer, esophageal cancer, salivary gland cancer, gastroesophageal junction adenocarcinoma, cholangiocarcinoma, Paget's disease, pancreatic cancer, ovarian cancer, and uterine cancer sarcoma. The therapeutic agent according to any one of [1] to [21] for.

[23] 유방암의 치료를 위한, [1] 내지 [21] 중 어느 하나에 기재된 치료제.[23] The therapeutic agent according to any one of [1] to [21] for the treatment of breast cancer.

[24] 위암의 치료를 위한, [1] 내지 [21] 중 어느 하나에 기재된 치료제.[24] The therapeutic agent according to any one of [1] to [21] for the treatment of stomach cancer.

[25] 위암 및 위식도 접합부 선암의 치료를 위한, [1] 내지 [21] 중 어느 하나에 기재된 치료제.[25] The therapeutic agent according to any one of [1] to [21] for the treatment of gastric cancer and gastroesophageal junction adenocarcinoma.

[26] 대장암의 치료를 위한, [1] 내지 [21] 중 어느 하나에 기재된 치료제.[26] The therapeutic agent according to any one of [1] to [21] for the treatment of colon cancer.

[27] 비소세포 폐암의 치료를 위한, [1] 내지 [21] 중 어느 하나에 기재된 치료제.[27] The therapeutic agent according to any one of [1] to [21] for the treatment of non-small cell lung cancer.

[28] 침샘암의 치료를 위한, [1] 내지 [21] 중 어느 하나에 기재된 치료제.[28] The therapeutic agent according to any one of [1] to [21] for the treatment of salivary gland cancer.

[29] HER2 발현암이 HER2 과잉 발현의 암인, [1] 내지 [28] 중 어느 하나에 기재된 치료제.[29] The therapeutic agent according to any one of [1] to [28], wherein the HER2-expressing cancer is a cancer of over-expression of HER2.

[30] HER2 과잉 발현의 암이, 면역 조직 화학법에 의해 HER2 의 발현이 3+ 로 판정된 암인, [29] 에 기재된 치료제.[30] The therapeutic agent according to [29], wherein the cancer with over-expression of HER2 is a cancer in which the expression of HER2 is determined to be 3+ by immunohistochemistry.

[31] HER2 과잉 발현의 암이, 면역 조직 화학법에 의해 HER2 의 발현이 2+ 로 판정되고, 또한 in situ 하이브리다이제이션법에 의해 HER2 의 발현이 양성으로 판정된 암인, [29] 에 기재된 치료제.[31] The cancer with overexpression of HER2 is a cancer in which the expression of HER2 is determined to be 2+ by immunohistochemistry and the expression of HER2 is determined to be positive by the in situ hybridization method, as described in [29]. remedy.

[32] HER2 발현암이 HER2 저발현의 암인, [1] 내지 [28] 중 어느 하나에 기재된 치료제.[32] The therapeutic agent according to any one of [1] to [28], wherein the HER2-expressing cancer is a cancer with low HER2 expression.

[33] HER2 저발현의 암이, 면역 조직 화학법에 의해 HER2 의 발현이 2+ 로 판정되고, 또한 in situ 하이브리다이제이션법에 의해 HER2 의 발현이 음성으로 판정된 암인, [32] 에 기재된 치료제.[33] The cancer with low HER2 expression is a cancer in which the expression of HER2 is determined to be 2+ by immunohistochemistry and the expression of HER2 is determined to be negative by the in situ hybridization method, as described in [32]. remedy.

[34] HER2 저발현의 암이, 면역 조직 화학법에 의해 HER2 의 발현이 1+ 로 판정된 암인, [32] 에 기재된 치료제.[34] The treatment agent according to [32], wherein the cancer with low HER2 expression is a cancer in which the expression of HER2 is determined to be 1+ by immunohistochemistry.

[35] 수술 불능 또는 재발암의 치료를 위한, [1] 내지 [34] 중 어느 하나에 기재된 치료제.[35] The therapeutic agent according to any one of [1] to [34] for the treatment of inoperable or recurrent cancer.

[36] 약학적으로 허용되는 제제 성분을 함유하는, [1] 내지 [35] 중 어느 하나에 기재된 치료제.[36] The therapeutic agent according to any one of [1] to [35], containing a pharmaceutically acceptable preparation component.

[37] 하기 식으로 나타내는 링커 및 약물과, 항 HER2 항체가 결합한 항체-약물 콘주게이트를, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료를 필요로 하는 환자에게 투여함으로써, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암을 치료하는 방법 : [37] An antibody-drug conjugate in which an anti-HER2 antibody is combined with a linker and a drug shown in the formula below is administered to a patient in need of treatment for HER2-expressing cancer that is resistant or intractable to existing anti-HER2 drugs. Methods of treating HER2-expressing cancer that is resistant or incurable to anti-HER2 drugs:

-(숙신이미드-3-일-N)-CH2CH2CH2CH2CH2-C(=O)-GGFG-NH-CH2-O-CH2-C(=O)-(NH-DX).-(succinimide-3-yl-N)-CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 -C(=O)-GGFG-NH-CH 2 -O-CH 2 -C(=O)-(NH -DX).

(식 중,(During the ceremony,

-(숙신이미드-3-일-N)- 은 다음 식 : -(succinimide-3-yl-N)- has the following formula:

[화학식 6][Formula 6]

Figure pat00006
Figure pat00006

으로 나타내는 구조이고, 이것의 3 위치에서 항 HER2 항체와 티오에테르 결합에 의해 결합하고, 1 위치의 질소 원자 상에서 이것을 포함하는 링커 구조 내의 메틸렌기와 결합하고,It is a structure represented by, and binds to the anti-HER2 antibody at the 3rd position through a thioether bond, and binds to the methylene group in the linker structure containing this on the nitrogen atom at the 1st position,

-(NH-DX) 는 다음 식 : -(NH-DX) is the formula:

[화학식 7][Formula 7]

Figure pat00007
Figure pat00007

으로 나타내는 1 위치의 아미노기의 질소 원자가 결합 부위로 되어 있는 기를 나타내고,represents a group in which the nitrogen atom of the amino group at the 1st position is the binding site,

-GGFG- 는, -Gly-Gly-Phe-Gly- 의 테트라펩티드 잔기를 나타낸다)-GGFG- represents the tetrapeptide residue of -Gly-Gly-Phe-Gly-)

[38] 내성 또는 난치성이, 기존의 항 HER2 약에 의한 치료에 의해 획득된 내성 또는 난치성인, [37] 에 기재된 방법.[38] The method described in [37], wherein the resistance or refractory property is resistance or refractory property acquired through treatment with an existing anti-HER2 drug.

[39] 내성 또는 난치성이, 기존의 항 HER2 약에 의한 치료에 상관없이 본래 지닌 내성 또는 난치성인, [37] 에 기재된 방법.[39] The method described in [37], where resistance or refractoriness is inherently resistant or refractory regardless of treatment with existing anti-HER2 drugs.

[40] 기존의 항 HER2 약이, 트라스투주맙 엠탄신, 트라스투주맙, 퍼투주맙, 및 라파티닙으로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나인, [37] 내지 [39] 중 어느 하나에 기재된 방법.[40] The method according to any one of [37] to [39], wherein the existing anti-HER2 drug is at least one selected from the group consisting of trastuzumab emtansine, trastuzumab, pertuzumab, and lapatinib.

[41] 기존의 항 HER2 약이 트라스투주맙 엠탄신인, [37] 내지 [39] 중 어느 하나에 기재된 방법.[41] The method according to any one of [37] to [39], wherein the existing anti-HER2 drug is trastuzumab emtansine.

[42] 기존의 항 HER2 약이 트라스투주맙인, [37] 내지 [39] 중 어느 하나에 기재된 방법.[42] The method according to any one of [37] to [39], wherein the existing anti-HER2 drug is trastuzumab.

[43] 기존의 항암약에 의한 치료력을 갖는 환자에게 실시하기 위한, [37] 내지 [42] 중 어느 하나에 기재된 방법.[43] The method according to any one of [37] to [42], for use on a patient who has a history of treatment with existing anticancer drugs.

[44] 기존의 항암약이, 트라스투주맙 엠탄신, 트라스투주맙, 퍼투주맙, 라파티닙, 이리노테칸, 시스플라틴, 카르보플라틴, 옥살리플라틴, 플루오로우라실, 겜시타빈, 카페시타빈, 파클리탁셀, 도세탁셀, 독소루비신, 에피루비신, 시클로포스파미드, 마이토마이신 C, 테가푸르·기메라실·오테라실 배합제, 세툭시맙, 파니투무맙, 베바시주맙, 라무시루맙, 레고라페닙, 트리플루리딘·티피라실 배합제, 제피티닙, 엘로티닙, 아파티닙, 메토트랙사이트, 및 페메트렉세드로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나를 포함하는, [43] 에 기재된 방법.[44] Existing anticancer drugs include trastuzumab emtansine, trastuzumab, pertuzumab, lapatinib, irinotecan, cisplatin, carboplatin, oxaliplatin, fluorouracil, gemcitabine, capecitabine, paclitaxel, docetaxel, and doxorubicin. , epirubicin, cyclophosphamide, mitomycin C, tegafur, gimeracil, oteracil combination, cetuximab, panitumumab, bevacizumab, ramucirumab, regorafenib, triple The method described in [43], comprising at least one selected from the group consisting of luridine-tipiracil combination agent, gefitinib, erlotinib, afatinib, methotrexed, and pemetrexed.

[45] 기존의 항암약이 트라스투주맙 엠탄신을 포함하는, [43] 에 기재된 방법.[45] The method described in [43], wherein the existing anticancer drug includes trastuzumab emtansine.

[46] 기존의 항암약이 트라스투주맙을 포함하는, [43] 에 기재된 방법.[46] The method described in [43], wherein the existing anticancer drug includes trastuzumab.

[47] 기존의 항암약이 이리노테칸을 포함하는, [43] 에 기재된 방법.[47] The method described in [43], wherein the existing anticancer drug contains irinotecan.

[48] 항체-약물 콘주게이트의 1 항체당 약물-링커 구조의 평균 결합수가 7 내지 8 개의 범위인, [37] 내지 [47] 중 어느 하나에 기재된 방법.[48] The method according to any one of [37] to [47], wherein the average number of drug-linker structures per antibody in the antibody-drug conjugate is in the range of 7 to 8.

[49] 항체-약물 콘주게이트의 1 항체당 약물-링커 구조의 평균 결합수가 7.5 내지 8 개의 범위인, [37] 내지 [47] 중 어느 하나에 기재된 방법.[49] The method according to any one of [37] to [47], wherein the average number of drug-linker structures per antibody in the antibody-drug conjugate is in the range of 7.5 to 8.

[50] 항체-약물 콘주게이트에 있어서의 항 HER2 항체가, 서열 번호 1 에 있어서 아미노산 번호 1 내지 449 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 중사슬 및 서열 번호 2 에 있어서 아미노산 번호 1 내지 214 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 경사슬을 포함하여 이루어지는 항체인, [37] 내지 [49] 중 어느 하나에 기재된 방법.[50] The anti-HER2 antibody in the antibody-drug conjugate has a heavy chain consisting of the amino acid sequence shown in amino acid numbers 1 to 449 in SEQ ID NO: 1 and the amino acid sequence shown in amino acid numbers 1 to 214 in SEQ ID NO: 2. The method according to any one of [37] to [49], which is an antibody comprising a light chain.

[51] 항체-약물 콘주게이트에 있어서의 항 HER2 항체가, 서열 번호 1 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 중사슬 및 서열 번호 2 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 경사슬을 포함하여 이루어지는 항체인, [37] 내지 [49] 중 어느 하나에 기재된 방법.[51] The anti-HER2 antibody in the antibody-drug conjugate is an antibody comprising a heavy chain consisting of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1 and a light chain consisting of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 2, [37] to The method described in any one of [49].

[52] 항체-약물 콘주게이트의 1 회당 투여량이 5.4 ㎎/㎏ 내지 8 ㎎/㎏ 의 범위인, [37] 내지 [51] 중 어느 하나에 기재된 방법.[52] The method according to any one of [37] to [51], wherein the single dose of the antibody-drug conjugate is in the range of 5.4 mg/kg to 8 mg/kg.

[53] 항체-약물 콘주게이트의 1 회당 투여량이 5.4 ㎎/㎏ 인, [37] 내지 [51] 중 어느 하나에 기재된 방법.[53] The method according to any one of [37] to [51], wherein the single dose of the antibody-drug conjugate is 5.4 mg/kg.

[54] 항체-약물 콘주게이트의 1 회당 투여량이 6.4 ㎎/㎏ 인, [37] 내지 [51] 중 어느 하나에 기재된 방법.[54] The method according to any one of [37] to [51], wherein the dosage of the antibody-drug conjugate per time is 6.4 mg/kg.

[55] 항체-약물 콘주게이트의 1 회당 투여량이 7.4 ㎎/㎏ 인, [37] 내지 [51] 중 어느 하나에 기재된 방법.[55] The method according to any one of [37] to [51], wherein the single dose of the antibody-drug conjugate is 7.4 mg/kg.

[56] 항체-약물 콘주게이트의 1 회당 투여량이 8 ㎎/㎏ 인, [37] 내지 [51] 중 어느 하나에 기재된 방법.[56] The method according to any one of [37] to [51], wherein the antibody-drug conjugate is administered in an amount of 8 mg/kg per time.

[57] 항체-약물 콘주게이트를 3 주에 1 회의 간격으로 투여하는, [37] 내지 [56] 중 어느 하나에 기재된 방법.[57] The method according to any one of [37] to [56], wherein the antibody-drug conjugate is administered at intervals of once every three weeks.

[58] 유방암, 위암, 대장암, 비소세포 폐암, 식도암, 침샘암, 위식도 접합부 선암, 담관암, 파제트병, 췌장암, 난소암, 및 자궁암 육종으로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나의 암의 치료를 위한, [37] 내지 [57] 중 어느 하나에 기재된 방법.[58] Treatment of at least one cancer selected from the group consisting of breast cancer, stomach cancer, colon cancer, non-small cell lung cancer, esophageal cancer, salivary gland cancer, gastroesophageal junction adenocarcinoma, cholangiocarcinoma, Paget's disease, pancreatic cancer, ovarian cancer, and uterine cancer sarcoma. For the method described in any one of [37] to [57].

[59] 유방암의 치료를 위한, [37] 내지 [57] 중 어느 하나에 기재된 방법.[59] The method according to any one of [37] to [57] for the treatment of breast cancer.

[60] 위암의 치료를 위한, [37] 내지 [57] 중 어느 하나에 기재된 방법.[60] The method according to any one of [37] to [57] for the treatment of stomach cancer.

[61] 위암 및 위식도 접합부 선암의 치료를 위한, [37] 내지 [57] 중 어느 하나에 기재된 방법.[61] The method according to any one of [37] to [57] for the treatment of gastric cancer and gastroesophageal junction adenocarcinoma.

[62] 대장암의 치료를 위한, [37] 내지 [57] 중 어느 하나에 기재된 방법.[62] The method according to any one of [37] to [57] for the treatment of colon cancer.

[63] 비소세포 폐암의 치료를 위한, [37] 내지 [57] 중 어느 하나에 기재된 방법.[63] The method according to any one of [37] to [57] for the treatment of non-small cell lung cancer.

[64] 침샘암의 치료를 위한, [37] 내지 [57] 중 어느 하나에 기재된 방법.[64] The method according to any one of [37] to [57] for the treatment of salivary gland cancer.

[65] HER2 발현암이 HER2 과잉 발현의 암인, [37] 내지 [64] 중 어느 하나에 기재된 방법.[65] The method according to any one of [37] to [64], wherein the HER2-expressing cancer is a cancer with over-expression of HER2.

[66] HER2 과잉 발현의 암이, 면역 조직 화학법에 의해 HER2 의 발현이 3+ 로 판정된 암인, [65] 에 기재된 방법.[66] The method described in [65], wherein the cancer with over-expression of HER2 is a cancer in which the expression of HER2 is determined to be 3+ by immunohistochemistry.

[67] HER2 과잉 발현의 암이, 면역 조직 화학법에 의해 HER2 의 발현이 2+ 로 판정되고, 또한 in situ 하이브리다이제이션법에 의해 HER2 의 발현이 양성으로 판정된 암인, [65] 에 기재된 방법.[67] The cancer with overexpression of HER2 is a cancer in which the expression of HER2 is determined to be 2+ by immunohistochemistry and the expression of HER2 is determined to be positive by the in situ hybridization method, as described in [65]. method.

[68] HER2 발현암이 HER2 저발현의 암인, [37] 내지 [64] 중 어느 하나에 기재된 방법.[68] The method according to any one of [37] to [64], wherein the HER2-expressing cancer is a cancer with low HER2 expression.

[69] HER2 저발현의 암이, 면역 조직 화학법에 의해 HER2 의 발현이 2+ 로 판정되고, 또한 in situ 하이브리다이제이션법에 의해 HER2 의 발현이 음성으로 판정된 암인, [68] 에 기재된 방법.[69] The cancer with low HER2 expression is a cancer in which the expression of HER2 is determined to be 2+ by immunohistochemistry and the expression of HER2 is judged to be negative by the in situ hybridization method, as described in [68]. method.

[70] HER2 저발현의 암이, 면역 조직 화학법에 의해 HER2 의 발현이 1+ 로 판정된 암인, [68] 에 기재된 방법.[70] The method described in [68], wherein the cancer with low HER2 expression is a cancer in which the expression of HER2 is determined to be 1+ by immunohistochemistry.

[71] 수술 불능 또는 재발암의 치료를 위한, [37] 내지 [70] 중 어느 하나에 기재된 방법.[71] The method according to any one of [37] to [70] for the treatment of inoperable or recurrent cancer.

[72] 약학적으로 허용되는 제제 성분과 함께 항체-약물 콘주게이트를 투여하는, [37] 내지 [71] 중 어느 하나에 기재된 방법.[72] The method according to any one of [37] to [71], wherein the antibody-drug conjugate is administered together with a pharmaceutically acceptable formulation component.

[73] 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료약으로서의 사용을 위한, 하기 식으로 나타내는 링커 및 약물과, 항 HER2 항체가 결합한 항체-약물 콘주게이트 : [73] An antibody-drug conjugate in which an anti-HER2 antibody is combined with a linker and drug represented by the following formula for use as a treatment for HER2-expressing cancer that is resistant or incurable to existing anti-HER2 drugs:

-(숙신이미드-3-일-N)-CH2CH2CH2CH2CH2-C(=O)-GGFG-NH-CH2-O-CH2-C(=O)-(NH-DX).-(succinimide-3-yl-N)-CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 -C(=O)-GGFG-NH-CH 2 -O-CH 2 -C(=O)-(NH -DX).

(식 중,(During the ceremony,

-(숙신이미드-3-일-N)- 은 다음 식 : -(succinimide-3-yl-N)- has the following formula:

[화학식 8][Formula 8]

Figure pat00008
Figure pat00008

으로 나타내는 구조이고, 이것의 3 위치에서 항 HER2 항체와 티오에테르 결합에 의해 결합하고, 1 위치의 질소 원자 상에서 이것을 포함하는 링커 구조 내의 메틸렌기와 결합하고,It is a structure represented by, and binds to the anti-HER2 antibody at the 3rd position through a thioether bond, and binds to the methylene group in the linker structure containing this on the nitrogen atom at the 1st position,

-(NH-DX) 는 다음 식 : -(NH-DX) is the following formula:

[화학식 9][Formula 9]

Figure pat00009
Figure pat00009

으로 나타내는 1 위치의 아미노기의 질소 원자가 결합 부위로 되어 있는 기를 나타내고,represents a group in which the nitrogen atom of the amino group at the 1st position is the binding site,

-GGFG- 는, -Gly-Gly-Phe-Gly- 의 테트라펩티드 잔기를 나타낸다)-GGFG- represents the tetrapeptide residue of -Gly-Gly-Phe-Gly-)

[74] 내성 또는 난치성이, 기존의 항 HER2 약에 의한 치료에 의해 획득된 내성 또는 난치성인, [73] 에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[74] The antibody-drug conjugate according to [73], which is resistant or refractory, and is resistant or refractory acquired by treatment with an existing anti-HER2 drug.

[75] 내성 또는 난치성이, 기존의 항 HER2 약에 의한 치료에 상관없이 본래 지닌 내성 또는 난치성인, [73] 에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[75] The antibody-drug conjugate according to [73], which is inherently resistant or refractory regardless of treatment with existing anti-HER2 drugs.

[76] 기존의 항 HER2 약이, 트라스투주맙 엠탄신, 트라스투주맙, 퍼투주맙, 및 라파티닙으로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나인, [73] 내지 [75] 중 어느 하나에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[76] The antibody-drug according to any one of [73] to [75], wherein the existing anti-HER2 drug is at least one selected from the group consisting of trastuzumab emtansine, trastuzumab, pertuzumab, and lapatinib. Conjugate.

[77] 기존의 항 HER2 약이 트라스투주맙 엠탄신인, [73] 내지 [75] 중 어느 하나에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[77] The antibody-drug conjugate according to any one of [73] to [75], wherein the existing anti-HER2 drug is trastuzumab emtansine.

[78] 기존의 항 HER2 약이 트라스투주맙인, [73] 내지 [75] 중 어느 하나에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[78] The antibody-drug conjugate according to any one of [73] to [75], wherein the existing anti-HER2 drug is trastuzumab.

[79] 기존의 항암약에 의한 치료력을 갖는 환자에게 투여하기 위한, [73] 내지 [78] 중 어느 하나에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[79] The antibody-drug conjugate according to any one of [73] to [78], for administration to a patient who has a history of treatment with existing anticancer drugs.

[80] 기존의 항암약이, 트라스투주맙 엠탄신, 트라스투주맙, 퍼투주맙, 라파티닙, 이리노테칸, 시스플라틴, 카르보플라틴, 옥살리플라틴, 플루오로우라실, 겜시타빈, 카페시타빈, 파클리탁셀, 도세탁셀, 독소루비신, 에피루비신, 시클로포스파미드, 마이토마이신 C, 테가푸르·기메라실·오테라실 배합제, 세툭시맙, 파니투무맙, 베바시주맙, 라무시루맙, 레고라페닙, 트리플루리딘·티피라실 배합제, 제피티닙, 엘로티닙, 아파티닙, 메토트랙사이트, 및 페메트렉세드로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나를 포함하는, [79] 에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[80] Existing anticancer drugs include trastuzumab emtansine, trastuzumab, pertuzumab, lapatinib, irinotecan, cisplatin, carboplatin, oxaliplatin, fluorouracil, gemcitabine, capecitabine, paclitaxel, docetaxel, and doxorubicin. , epirubicin, cyclophosphamide, mitomycin C, tegafur, gimeracil, oteracil combination, cetuximab, panitumumab, bevacizumab, ramucirumab, regorafenib, triple The antibody-drug conjugate described in [79], comprising at least one selected from the group consisting of luridine-tipiracil combination agent, gefitinib, erlotinib, afatinib, methotrexed, and pemetrexed.

[81] 기존의 항암약이 트라스투주맙 엠탄신을 포함하는, [79] 에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[81] The antibody-drug conjugate according to [79], wherein the existing anticancer drug includes trastuzumab emtansine.

[82] 기존의 항암약이 트라스투주맙을 포함하는, [79] 에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[82] The antibody-drug conjugate described in [79], where the existing anticancer drug includes trastuzumab.

[83] 기존의 항암약이 이리노테칸을 포함하는, [79] 에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[83] The antibody-drug conjugate described in [79], in which an existing anticancer drug contains irinotecan.

[84] 항체-약물 콘주게이트의 1 항체당 약물-링커 구조의 평균 결합수가 7 내지 8 개의 범위인, [73] 내지 [83] 중 어느 하나에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[84] The antibody-drug conjugate according to any one of [73] to [83], wherein the average number of drug-linker structures per antibody in the antibody-drug conjugate is in the range of 7 to 8.

[85] 항체-약물 콘주게이트의 1 항체당 약물-링커 구조의 평균 결합수가 7.5 내지 8 개의 범위인, [73] 내지 [83] 중 어느 하나에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[85] The antibody-drug conjugate according to any one of [73] to [83], wherein the average number of drug-linker structures per antibody in the antibody-drug conjugate is in the range of 7.5 to 8.

[86] 항체-약물 콘주게이트에 있어서의 항 HER2 항체가, 서열 번호 1 에 있어서 아미노산 번호 1 내지 449 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 중사슬 및 서열 번호 2 에 있어서 아미노산 번호 1 내지 214 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 경사슬을 포함하여 이루어지는 항체인, [73] 내지 [85] 중 어느 하나에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[86] The anti-HER2 antibody in the antibody-drug conjugate has a heavy chain consisting of the amino acid sequence shown in amino acid numbers 1 to 449 in SEQ ID NO: 1 and the amino acid sequence shown in amino acid numbers 1 to 214 in SEQ ID NO: 2. The antibody-drug conjugate according to any one of [73] to [85], which is an antibody comprising a light chain.

[87] 항체-약물 콘주게이트에 있어서의 항 HER2 항체가, 서열 번호 1 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 중사슬 및 서열 번호 2 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 경사슬을 포함하여 이루어지는 항체인, [73] 내지 [85] 중 어느 하나에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[87] The anti-HER2 antibody in the antibody-drug conjugate is an antibody comprising a heavy chain consisting of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1 and a light chain consisting of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 2, [73] to The antibody-drug conjugate according to any one of [85].

[88] 항체-약물 콘주게이트의 1 회당 투여량이 5.4 ㎎/㎏ 내지 8 ㎎/㎏ 의 범위인, [73] 내지 [87] 중 어느 하나에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[88] The antibody-drug conjugate according to any one of [73] to [87], wherein the single dose of the antibody-drug conjugate is in the range of 5.4 mg/kg to 8 mg/kg.

[89] 항체-약물 콘주게이트의 1 회당 투여량이 5.4 ㎎/㎏ 인, [73] 내지 [87] 중 어느 하나에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[89] The antibody-drug conjugate according to any one of [73] to [87], wherein the dosage per dose of the antibody-drug conjugate is 5.4 mg/kg.

[90] 항체-약물 콘주게이트의 1 회당 투여량이 6.4 ㎎/㎏ 인, [73] 내지 [87] 중 어느 하나에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[90] The antibody-drug conjugate according to any one of [73] to [87], wherein the dosage per dose of the antibody-drug conjugate is 6.4 mg/kg.

[91] 항체-약물 콘주게이트의 1 회당 투여량이 7.4 ㎎/㎏ 인, [73] 내지 [87] 중 어느 하나에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[91] The antibody-drug conjugate according to any one of [73] to [87], wherein the dosage per dose of the antibody-drug conjugate is 7.4 mg/kg.

[92] 항체-약물 콘주게이트의 1 회당 투여량이 8 ㎎/㎏ 인, [73] 내지 [87] 중 어느 하나에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[92] The antibody-drug conjugate according to any one of [73] to [87], wherein the dosage per dose of the antibody-drug conjugate is 8 mg/kg.

[93] 항체-약물 콘주게이트가 3 주에 1 회의 간격으로 투여되는, [73] 내지 [92] 중 어느 하나에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[93] The antibody-drug conjugate according to any one of [73] to [92], wherein the antibody-drug conjugate is administered at intervals of once every three weeks.

[94] 유방암, 위암, 대장암, 비소세포 폐암, 식도암, 침샘암, 위식도 접합부 선암, 담관암, 파제트병, 췌장암, 난소암, 및 자궁암 육종으로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나의 암의 치료를 위한, [73] 내지 [93] 중 어느 하나에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[94] Treatment of at least one cancer selected from the group consisting of breast cancer, stomach cancer, colon cancer, non-small cell lung cancer, esophageal cancer, salivary gland cancer, gastroesophageal junction adenocarcinoma, cholangiocarcinoma, Paget's disease, pancreatic cancer, ovarian cancer, and uterine cancer sarcoma For the antibody-drug conjugate according to any one of [73] to [93].

[95] 유방암의 치료를 위한, [73] 내지 [93] 중 어느 하나에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[95] The antibody-drug conjugate according to any one of [73] to [93] for the treatment of breast cancer.

[96] 위암의 치료를 위한, [73] 내지 [93] 중 어느 하나에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[96] The antibody-drug conjugate according to any one of [73] to [93] for the treatment of gastric cancer.

[97] 위암 및 위식도 접합부 선암의 치료를 위한, [73] 내지 [93] 중 어느 하나에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[97] The antibody-drug conjugate according to any one of [73] to [93], for the treatment of gastric cancer and gastroesophageal junction adenocarcinoma.

[98] 대장암의 치료를 위한, [73] 내지 [93] 중 어느 하나에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[98] The antibody-drug conjugate according to any one of [73] to [93] for the treatment of colon cancer.

[99] 비소세포 폐암의 치료를 위한, [73] 내지 [93] 중 어느 하나에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[99] The antibody-drug conjugate according to any one of [73] to [93] for the treatment of non-small cell lung cancer.

[100] 침샘암의 치료를 위한, [73] 내지 [93] 중 어느 하나에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[100] The antibody-drug conjugate according to any one of [73] to [93] for the treatment of salivary gland cancer.

[101] HER2 발현암이 HER2 과잉 발현의 암인, [73] 내지 [100] 중 어느 하나에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[101] The antibody-drug conjugate according to any one of [73] to [100], wherein the HER2-expressing cancer is a cancer with over-expression of HER2.

[102] HER2 과잉 발현의 암이, 면역 조직 화학법에 의해 HER2 의 발현이 3+ 로 판정된 암인, [101] 에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[102] The antibody-drug conjugate according to [101], wherein the cancer overexpressing HER2 is a cancer in which the expression of HER2 is determined to be 3+ by immunohistochemistry.

[103] HER2 과잉 발현의 암이, 면역 조직 화학법에 의해 HER2 의 발현이 2+ 로 판정되고, 또한 in situ 하이브리다이제이션법에 의해 HER2 의 발현이 양성으로 판정된 암인, [101] 에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[103] The cancer with overexpression of HER2 is a cancer in which the expression of HER2 is determined to be 2+ by immunohistochemistry and the expression of HER2 is determined to be positive by the in situ hybridization method, as described in [101]. Antibody-drug conjugates.

[104] HER2 발현암이 HER2 저발현의 암인, [73] 내지 [100] 중 어느 하나에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[104] The antibody-drug conjugate according to any one of [73] to [100], wherein the HER2-expressing cancer is a cancer with low HER2 expression.

[105] HER2 저발현의 암이 면역 조직 화학법에 의해 HER2 의 발현이 2+ 로 판정되고, 또한 in situ 하이브리다이제이션법에 의해 HER2 의 발현이 음성으로 판정된 암인, [104] 에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[105] The antibody described in [104], where the cancer with low HER2 expression is a cancer in which the expression of HER2 is determined to be 2+ by immunohistochemistry and the expression of HER2 is determined to be negative by the in situ hybridization method. -Drug conjugates.

[106] HER2 저발현의 암이, 면역 조직 화학법에 의해 HER2 의 발현이 1+ 로 판정된 암인, [104] 에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[106] The antibody-drug conjugate according to [104], wherein the cancer with low HER2 expression is a cancer in which the expression of HER2 is determined to be 1+ by immunohistochemistry.

[107] 수술 불능 또는 재발암의 치료를 위한, [73] 내지 [106] 중 어느 하나에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[107] The antibody-drug conjugate according to any one of [73] to [106] for the treatment of inoperable or recurrent cancer.

[108] 약학적으로 허용되는 제제 성분과 함께 투여되는, [73] 내지 [107] 중 어느 하나에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[108] The antibody-drug conjugate according to any one of [73] to [107], which is administered together with a pharmaceutically acceptable formulation component.

[109] 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암을 치료하기 위한 의약의 제조를 위한, 하기 식으로 나타내는 링커 및 약물과, 항 HER2 항체가 결합한 항체-약물 콘주게이트의 사용 :[109] Use of an antibody-drug conjugate in which an anti-HER2 antibody is combined with a linker and drug represented by the following formula for the production of a drug for treating HER2-expressing cancer that is resistant or intractable to existing anti-HER2 drugs:

-(숙신이미드-3-일-N)-CH2CH2CH2CH2CH2-C(=O)-GGFG-NH-CH2-O-CH2-C(=O)-(NH-DX).-(succinimide-3-yl-N)-CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 -C(=O)-GGFG-NH-CH 2 -O-CH 2 -C(=O)-(NH -DX).

(식 중,(During the ceremony,

-(숙신이미드-3-일-N)- 은 다음 식 :-(succinimide-3-yl-N)- has the following formula:

[화학식 10][Formula 10]

Figure pat00010
Figure pat00010

으로 나타내는 구조이고, 이것의 3 위치에서 항 HER2 항체와 티오에테르 결합에 의해 결합하고, 1 위치의 질소 원자 상에서 이것을 포함하는 링커 구조 내의 메틸렌기와 결합하고,It is a structure represented by, and binds to the anti-HER2 antibody at the 3rd position through a thioether bond, and binds to the methylene group in the linker structure containing this on the nitrogen atom at the 1st position,

-(NH-DX) 는 다음 식 : -(NH-DX) is the following formula:

[화학식 11][Formula 11]

Figure pat00011
Figure pat00011

으로 나타내는 1 위치의 아미노기의 질소 원자가 결합 부위로 되어 있는 기를 나타내고,represents a group in which the nitrogen atom of the amino group at the 1st position is the binding site,

-GGFG- 는, -Gly-Gly-Phe-Gly- 의 테트라펩티드 잔기를 나타낸다)-GGFG- represents the tetrapeptide residue of -Gly-Gly-Phe-Gly-)

[110] 내성 또는 난치성이, 기존의 항 HER2 약에 의한 치료에 의해 획득된 내성 또는 난치성인, [109] 에 기재된 사용.[110] Use according to [109], where resistance or refractory properties are acquired by treatment with existing anti-HER2 drugs.

[111] 내성 또는 난치성이, 기존의 항 HER2 약에 의한 치료에 상관없이 본래 지닌 내성 또는 난치성인, [109] 에 기재된 사용.[111] Use as described in [109], which is inherently resistant or refractory, regardless of treatment with existing anti-HER2 drugs.

[112] 기존의 항 HER2 약이, 트라스투주맙 엠탄신, 트라스투주맙, 퍼투주맙, 및 라파티닙으로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나인, [109] 내지 [111] 중 어느 하나에 기재된 사용.[112] Use according to any one of [109] to [111], wherein the existing anti-HER2 drug is at least one selected from the group consisting of trastuzumab emtansine, trastuzumab, pertuzumab, and lapatinib.

[113] 기존의 항 HER2 약이 트라스투주맙 엠탄신인, [109] 내지 [111] 중 어느 하나에 기재된 사용.[113] Use according to any one of [109] to [111], wherein the existing anti-HER2 drug is trastuzumab emtansine.

[114] 기존의 항 HER2 약이 트라스투주맙인, [109] 내지 [111] 중 어느 하나에 기재된 사용.[114] Use according to any one of [109] to [111], wherein the existing anti-HER2 drug is trastuzumab.

[115] 기존의 항암약에 의한 치료력을 갖는 환자에게 투여하기 위한 의약의 제조를 위한, [109] 내지 [114] 중 어느 하나에 기재된 사용.[115] The use according to any one of [109] to [114] for the manufacture of a medicine for administration to a patient who has a history of treatment with existing anticancer drugs.

[116] 기존의 항암약이, 트라스투주맙 엠탄신, 트라스투주맙, 퍼투주맙, 라파티닙, 이리노테칸, 시스플라틴, 카르보플라틴, 옥살리플라틴, 플루오로우라실, 겜시타빈, 카페시타빈, 파클리탁셀, 도세탁셀, 독소루비신, 에피루비신, 시클로포스파미드, 마이토마이신 C, 테가푸르·기메라실·오테라실 배합제, 세툭시맙, 파니투무맙, 베바시주맙, 라무시루맙, 레고라페닙, 트리플루리딘·티피라실 배합제, 제피티닙, 엘로티닙, 아파티닙, 메토트랙사이트, 및 페메트렉세드로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나를 포함하는, [115] 에 기재된 사용.[116] Existing anticancer drugs include trastuzumab emtansine, trastuzumab, pertuzumab, lapatinib, irinotecan, cisplatin, carboplatin, oxaliplatin, fluorouracil, gemcitabine, capecitabine, paclitaxel, docetaxel, and doxorubicin. , epirubicin, cyclophosphamide, mitomycin C, tegafur, gimeracil, oteracil combination, cetuximab, panitumumab, bevacizumab, ramucirumab, regorafenib, triple The use described in [115], comprising at least one selected from the group consisting of luridine-tipiracil combination agent, gefitinib, erlotinib, afatinib, methotrexed, and pemetrexed.

[117] 기존의 항암약이 트라스투주맙 엠탄신을 포함하는, [115] 에 기재된 사용.[117] The use described in [115], where the existing anticancer drug includes trastuzumab emtansine.

[118] 기존의 항암약이 트라스투주맙을 포함하는, [115] 에 기재된 사용.[118] The use described in [115], where the existing anticancer drug includes trastuzumab.

[119] 기존의 항암약이 이리노테칸을 포함하는, [115] 에 기재된 사용.[119] The use described in [115], where the existing anticancer drug contains irinotecan.

[120] 항체-약물 콘주게이트의 1 항체당 약물-링커 구조의 평균 결합수가 7 내지 8 개의 범위인, [109] 내지 [119] 중 어느 하나에 기재된 사용.[120] Use according to any one of [109] to [119], wherein the average number of drug-linker structures per antibody of the antibody-drug conjugate is in the range of 7 to 8.

[121] 항체-약물 콘주게이트의 1 항체당 약물-링커 구조의 평균 결합수가 7.5 내지 8 개의 범위인, [109] 내지 [119] 중 어느 하나에 기재된 사용.[121] Use according to any one of [109] to [119], wherein the average number of drug-linker structures per antibody of the antibody-drug conjugate is in the range of 7.5 to 8.

[122] 항체-약물 콘주게이트에 있어서의 항 HER2 항체가, 서열 번호 1 에 있어서 아미노산 번호 1 내지 449 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 중사슬 및 서열 번호 2 에 있어서 아미노산 번호 1 내지 214 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 경사슬을 포함하여 이루어지는 항체인, [109] 내지 [121] 중 어느 하나에 기재된 사용.[122] The anti-HER2 antibody in the antibody-drug conjugate has a heavy chain consisting of the amino acid sequence shown in amino acid numbers 1 to 449 in SEQ ID NO: 1 and the amino acid sequence shown in amino acid numbers 1 to 214 in SEQ ID NO: 2. Use according to any one of [109] to [121], which is an antibody comprising a light chain.

[123] 항체-약물 콘주게이트에 있어서의 항 HER2 항체가, 서열 번호 1 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 중사슬 및 서열 번호 2 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 경사슬을 포함하여 이루어지는 항체인, [109] 내지 [121] 중 어느 하나에 기재된 사용.[123] The anti-HER2 antibody in the antibody-drug conjugate is an antibody comprising a heavy chain consisting of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1 and a light chain consisting of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 2, [109] to Use described in any one of [121].

[124] 항체-약물 콘주게이트의 1 회당 투여량이 5.4 ㎎/㎏ 내지 8 ㎎/㎏ 의 범위인, [109] 내지 [123] 중 어느 하나에 기재된 사용.[124] The use according to any one of [109] to [123], wherein the single dose of the antibody-drug conjugate is in the range of 5.4 mg/kg to 8 mg/kg.

[125] 항체-약물 콘주게이트의 1 회당 투여량이 5.4 ㎎/㎏ 인, [109] 내지 [123] 중 어느 하나에 기재된 사용.[125] The use according to any one of [109] to [123], wherein the antibody-drug conjugate is administered in a dose of 5.4 mg/kg per time.

[126] 항체-약물 콘주게이트의 1 회당 투여량이 6.4 ㎎/㎏ 인, [109] 내지 [123] 중 어느 하나에 기재된 사용.[126] The use according to any one of [109] to [123], wherein the antibody-drug conjugate is administered at a dose of 6.4 mg/kg per time.

[127] 항체-약물 콘주게이트의 1 회당 투여량이 7.4 ㎎/㎏ 인, [109] 내지 [123] 중 어느 하나에 기재된 사용.[127] The use according to any one of [109] to [123], wherein the antibody-drug conjugate is administered at a dose of 7.4 mg/kg per time.

[128] 항체-약물 콘주게이트의 1 회당 투여량이 8 ㎎/㎏ 인, [109] 내지 [123] 중 어느 하나에 기재된 사용.[128] The use according to any one of [109] to [123], wherein the antibody-drug conjugate is administered at a dose of 8 mg/kg per time.

[129] 항체-약물 콘주게이트가 3 주에 1 회의 간격으로 투여되는, [109] 내지 [128] 중 어느 하나에 기재된 사용.[129] The use according to any one of [109] to [128], wherein the antibody-drug conjugate is administered at intervals of once every three weeks.

[130] 유방암, 위암, 대장암, 비소세포 폐암, 식도암, 침샘암, 위식도 접합부 선암, 담관암, 파제트병, 췌장암, 난소암, 및 자궁암 육종으로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나의 암의 치료를 위한 의약의 제조를 위한, [109] 내지 [129] 중 어느 하나에 기재된 사용.[130] Treatment of at least one cancer selected from the group consisting of breast cancer, stomach cancer, colon cancer, non-small cell lung cancer, esophageal cancer, salivary gland cancer, gastroesophageal junction adenocarcinoma, cholangiocarcinoma, Paget's disease, pancreatic cancer, ovarian cancer, and uterine cancer sarcoma Use according to any one of [109] to [129] for the manufacture of a medicine for.

[131] 유방암의 치료를 위한 의약의 제조를 위한, [109] 내지 [129] 중 어느 하나에 기재된 사용.[131] Use according to any one of [109] to [129] for the manufacture of a medicine for the treatment of breast cancer.

[132] 위암의 치료를 위한 의약의 제조를 위한, [109] 내지 [129] 중 어느 하나에 기재된 사용.[132] Use according to any one of [109] to [129] for the production of a medicine for the treatment of stomach cancer.

[133] 위암 및 위식도 접합부 선암의 치료를 위한 의약의 제조를 위한, [109] 내지 [129] 중 어느 하나에 기재된 사용.[133] Use according to any one of [109] to [129] for the production of a medicine for the treatment of gastric cancer and gastroesophageal junction adenocarcinoma.

[134] 대장암의 치료를 위한 의약의 제조를 위한, [109] 내지 [129] 중 어느 하나에 기재된 사용.[134] Use according to any one of [109] to [129] for the production of a medicine for the treatment of colon cancer.

[135] 비소세포 폐암의 치료를 위한 의약의 제조를 위한, [109] 내지 [129] 중 어느 하나에 기재된 사용.[135] Use according to any one of [109] to [129] for the production of a medicine for the treatment of non-small cell lung cancer.

[136] 침샘암의 치료를 위한 의약의 제조를 위한, [109] 내지 [129] 중 어느 하나에 기재된 사용.[136] Use according to any one of [109] to [129] for the manufacture of a medicine for the treatment of salivary gland cancer.

[137] HER2 발현암이 HER2 과잉 발현의 암인, [109] 내지 [136] 중 어느 하나에 기재된 사용.[137] Use according to any one of [109] to [136], wherein the HER2-expressing cancer is a cancer with over-expression of HER2.

[138] HER2 과잉 발현의 암이, 면역 조직 화학법에 의해 HER2 의 발현이 3+ 로 판정된 암인, [137] 에 기재된 사용.[138] Use according to [137], where the cancer with over-expression of HER2 is a cancer in which the expression of HER2 is determined to be 3+ by immunohistochemistry.

[139] HER2 과잉 발현의 암이, 면역 조직 화학법에 의해 HER2 의 발현이 2+ 로 판정되고, 또한 in situ 하이브리다이제이션법에 의해 HER2 의 발현이 양성으로 판정된 암인, [137] 에 기재된 사용.[139] The cancer with overexpression of HER2 is a cancer in which the expression of HER2 is determined to be 2+ by immunohistochemistry and the expression of HER2 is determined to be positive by the in situ hybridization method, as described in [137]. use.

[140] HER2 발현암이 HER2 저발현의 암인, [109] 내지 [136] 중 어느 하나에 기재된 사용.[140] Use according to any one of [109] to [136], wherein the HER2-expressing cancer is a cancer with low HER2 expression.

[141] HER2 저발현의 암이, 면역 조직 화학법에 의해 HER2 의 발현이 2+ 로 판정되고, 또한 in situ 하이브리다이제이션법에 의해 HER2 의 발현이 음성으로 판정된 암인, [140] 에 기재된 사용.[141] The cancer with low HER2 expression is a cancer in which the expression of HER2 is determined to be 2+ by immunohistochemistry and the expression of HER2 is determined to be negative by the in situ hybridization method, as described in [140]. use.

[142] HER2 저발현의 암이, 면역 조직 화학법에 의해 HER2 의 발현이 1+ 로 판정된 암인, [140] 에 기재된 사용.[142] Use according to [140], where the cancer with low HER2 expression is a cancer in which the expression of HER2 is determined to be 1+ by immunohistochemistry.

[143] 수술 불능 또는 재발암의 치료를 위한 의약의 제조를 위한, [109] 내지 [142] 중 어느 하나에 기재된 사용.[143] Use according to any one of [109] to [142] for the manufacture of a medicine for the treatment of inoperable or recurrent cancer.

[144] 의약이 약학적으로 허용되는 제제 성분을 포함하는, [109] 내지 [143] 중 어느 하나에 기재된 사용.[144] The use according to any one of [109] to [143], where the medicine contains a pharmaceutically acceptable preparation ingredient.

에 관한 것이다.It's about.

또, 본 발명은 이하와 같이 나타낼 수도 있다.Additionally, the present invention can also be expressed as follows.

[1] 내성암의 치료를 위한, 하기 식으로 나타내는 링커 및 약물과, 항 HER2 항체가 결합한 항체-약물 콘주게이트, 그 염, 또는 그들의 수화물의 사용.[1] Use of an antibody-drug conjugate, a salt thereof, or a hydrate thereof, in which an anti-HER2 antibody is bound to a linker and a drug represented by the formula below, for the treatment of resistant cancer.

-(숙신이미드-3-일-N)-CH2CH2CH2CH2CH2-C(=O)-GGFG-NH-CH2-O-CH2-C(=O)-(NH-DX)-(succinimide-3-yl-N)-CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 -C(=O)-GGFG-NH-CH 2 -O-CH 2 -C(=O)-(NH -DX)

(식 중,(During the ceremony,

-(숙신이미드-3-일-N)- 은 다음 식 : -(succinimide-3-yl-N)- has the following formula:

[화학식 12][Formula 12]

Figure pat00012
Figure pat00012

으로 나타내는 구조이고, 이것의 3 위치에서 항 HER2 항체와 티오에테르 결합에 의해 결합하고, 1 위치의 질소 원자 상에서 이것을 포함하는 링커 구조 내의 메틸렌기와 결합하고,It is a structure represented by, and binds to the anti-HER2 antibody at the 3rd position through a thioether bond, and binds to the methylene group in the linker structure containing this on the nitrogen atom at the 1st position,

-(NH-DX) 는 다음 식 : -(NH-DX) is the following formula:

[화학식 13][Formula 13]

Figure pat00013
Figure pat00013

으로 나타내는 1 위치의 아미노기의 질소 원자가 결합 부위로 되어 있는 기를 나타낸다)(represents a group in which the nitrogen atom of the amino group at the 1 position is the binding site)

[2] 내성암이 이차 내성암인 [1] 에 기재된 사용.[2] Use as described in [1] where the resistant cancer is secondary resistant cancer.

[3] 이차 내성이 항 HER2 항체를 포함하는 항체-약물 콘주게이트의 투여에 의한 이차 내성인 [2] 에 기재된 사용.[3] Use according to [2], wherein the secondary resistance is secondary resistance caused by administration of an antibody-drug conjugate containing an anti-HER2 antibody.

[4] 이차 내성이, 항 HER2 항체-약물 콘주게이트인 T-DM1 의 투여에 의해 획득된 이차 내성인 [2] 또는 [3] 에 기재된 사용.[4] Use according to [2] or [3], wherein the secondary resistance is secondary resistance acquired by administration of T-DM1, an anti-HER2 antibody-drug conjugate.

[5] 이차 내성이 항 HER2 항체의 투여에 의한 이차 내성인 [2] 에 기재된 사용.[5] Use as described in [2], where the secondary resistance is secondary resistance caused by administration of an anti-HER2 antibody.

[6] 항체-약물 콘주게이트의 1 항체당 약물-링커 구조의 평균 결합수가 2 내지 8 개의 범위인 [1] 내지 [5] 중 어느 하나에 기재된 사용.[6] Use according to any one of [1] to [5], wherein the average number of drug-linker structures per antibody of the antibody-drug conjugate is in the range of 2 to 8.

[7] 항체-약물 콘주게이트의 1 항체당 약물-링커 구조의 평균 결합수가 3 내지 8 개의 범위인 [1] 내지 [5] 중 어느 하나에 기재된 사용.[7] Use according to any one of [1] to [5], wherein the average number of drug-linker structures per antibody of the antibody-drug conjugate is in the range of 3 to 8.

[8] 항체-약물 콘주게이트의 1 항체당 약물-링커 구조의 평균 결합수가 7 내지 8 개의 범위인 [1] 내지 [5] 중 어느 하나에 기재된 사용.[8] Use according to any one of [1] to [5], wherein the average number of drug-linker structures per antibody of the antibody-drug conjugate is in the range of 7 to 8.

[9] 항체-약물 콘주게이트의 1 항체당 약물-링커 구조의 평균 결합수가 7.5 내지 8 개의 범위인 [1] 내지 [5] 중 어느 하나에 기재된 사용.[9] Use according to any one of [1] to [5], wherein the average number of drug-linker structures per antibody of the antibody-drug conjugate is in the range of 7.5 to 8.

[10] 항체-약물 콘주게이트의 투여량이 0.8 ㎎/㎏ 내지 8 ㎎/㎏ 의 범위인 [1] 내지 [9] 중 어느 하나에 기재된 사용.[10] Use according to any one of [1] to [9], wherein the dosage of the antibody-drug conjugate is in the range of 0.8 mg/kg to 8 mg/kg.

[11] 항체-약물 콘주게이트의 투여가 3 주에 1 회 실시되는 [1] 내지 [10] 중 어느 하나에 기재된 사용.[11] The use according to any one of [1] to [10], wherein the antibody-drug conjugate is administered once every three weeks.

[12] 내성암이 폐암, 요로 상피암, 대장암, 전립선암, 난소암, 췌암, 유방암, 방광암, 위암, 위장간질 종양, 자궁경부암, 식도암, 편평상피암, 복막암, 간암, 간세포암, 결장암, 직장암, 결장 직장암, 자궁 내막암, 자궁암, 침샘암, 신장암, 외음부암, 갑상선암, 음경암, 백혈병, 악성 림프종, 형질 세포종, 골수종, 또는 육종인 [1] 내지 [11] 중 어느 하나에 기재된 사용.[12] Resistant cancers include lung cancer, urothelial cancer, colon cancer, prostate cancer, ovarian cancer, pancreatic cancer, breast cancer, bladder cancer, stomach cancer, gastrointestinal stromal tumor, cervical cancer, esophageal cancer, squamous cell carcinoma, peritoneal cancer, liver cancer, hepatocellular cancer, colon cancer, Any one of [1] to [11], which is rectal cancer, colorectal cancer, endometrial cancer, uterine cancer, salivary gland cancer, kidney cancer, vulvar cancer, thyroid cancer, penile cancer, leukemia, malignant lymphoma, plasmacytoma, myeloma, or sarcoma. use.

[13] 하기 식으로 나타내는 링커 및 약물과, 항 HER2 항체가 결합한 항체-약물 콘주게이트, 그 염, 또는 그들의 수화물을 활성 성분으로 하고, 약학적으로 허용되는 제제 성분을 함유하는 내성암의 치료용 의약 조성물.[13] For the treatment of resistant cancer, containing a linker and a drug shown in the following formula, an antibody-drug conjugate in which an anti-HER2 antibody is bound, a salt thereof, or a hydrate thereof as an active ingredient, and containing pharmaceutically acceptable formulation components. Medicinal composition.

-(숙신이미드-3-일-N)-CH2CH2CH2CH2CH2-C(=O)-GGFG-NH-CH2-O-CH2-C(=O)-(NH-DX)-(succinimide-3-yl-N)-CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 -C(=O)-GGFG-NH-CH 2 -O-CH 2 -C(=O)-(NH -DX)

(식 중,(During the ceremony,

-(숙신이미드-3-일-N)- 은 다음 식 : -(succinimide-3-yl-N)- has the following formula:

[화학식 14][Formula 14]

Figure pat00014
Figure pat00014

으로 나타내는 구조이고, 이것의 3 위치에서 항 HER2 항체와 티오에테르 결합에 의해 결합하고, 1 위치의 질소 원자 상에서 이것을 포함하는 링커 구조 내의 메틸렌기와 결합하고,It is a structure represented by, and binds to the anti-HER2 antibody at the 3rd position through a thioether bond, and binds to the methylene group in the linker structure containing this on the nitrogen atom at the 1st position,

-(NH-DX) 는 다음 식 : -(NH-DX) is the following formula:

[화학식 15][Formula 15]

Figure pat00015
Figure pat00015

으로 나타내는 1 위치의 아미노기의 질소 원자가 결합 부위로 되어 있는 기를 나타낸다)(represents a group in which the nitrogen atom of the amino group at the 1 position is the binding site)

[14] 내성암이 이차 내성암인 [13] 에 기재된 치료용 의약 조성물.[14] The pharmaceutical composition for treatment according to [13], wherein the resistant cancer is secondary resistant cancer.

[15] 이차 내성이 항 HER2 항체를 포함하는 항체-약물 콘주게이트의 투여에 의한 이차 내성인 [13] 에 기재된 치료용 의약 조성물.[15] The pharmaceutical composition for treatment according to [13], wherein the secondary resistance is secondary resistance caused by administration of an antibody-drug conjugate containing an anti-HER2 antibody.

[16] 이차 내성이 항 HER2 항체-약물 콘주게이트인 T-DM1 투여에 의해 획득된 이차 내성인 [14] 또는 [15] 에 기재된 치료용 의약 조성물.[16] The pharmaceutical composition for treatment according to [14] or [15], wherein the secondary resistance is secondary resistance acquired by administration of T-DM1, which is an anti-HER2 antibody-drug conjugate.

[17] 이차 내성이 항 HER2 항체의 투여에 의한 이차 내성인 [14] 에 기재된 치료용 의약 조성물.[17] The pharmaceutical composition for treatment according to [14], wherein the secondary resistance is secondary resistance caused by administration of an anti-HER2 antibody.

[18] 항체-약물 콘주게이트의 1 항체당 약물-링커 구조의 평균 결합수가 2 내지 8 개의 범위인 [13] 내지 [17] 중 어느 하나에 기재된 치료용 의약 조성물.[18] The pharmaceutical composition for treatment according to any one of [13] to [17], wherein the average number of drug-linker structures per antibody in the antibody-drug conjugate is in the range of 2 to 8.

[19] 항체-약물 콘주게이트의 1 항체당 약물-링커 구조의 평균 결합수가 3 내지 8 개의 범위인 [13] 내지 [17] 중 어느 하나에 기재된 치료용 의약 조성물.[19] The pharmaceutical composition for treatment according to any one of [13] to [17], wherein the average number of drug-linker structures per antibody in the antibody-drug conjugate is in the range of 3 to 8.

[20] 항체-약물 콘주게이트의 1 항체당 약물-링커 구조의 평균 결합수가 7 내지 8 개의 범위인 [13] 내지 [17] 중 어느 하나에 기재된 치료용 의약 조성물.[20] The pharmaceutical composition for treatment according to any one of [13] to [17], wherein the average number of drug-linker structures per antibody in the antibody-drug conjugate is in the range of 7 to 8.

[21] 항체-약물 콘주게이트의 1 항체당 약물-링커 구조의 평균 결합수가 7.5 내지 8 개의 범위인 [13] 내지 [17] 중 어느 하나에 기재된 치료용 의약 조성물.[21] The pharmaceutical composition for treatment according to any one of [13] to [17], wherein the average number of drug-linker structures per antibody in the antibody-drug conjugate is in the range of 7.5 to 8.

[22] 항체-약물 콘주게이트의 투여량이 0.8 ㎎/㎏ 내지 8 ㎎/㎏ 의 범위인 [13] 내지 [21] 중 어느 하나에 기재된 치료용 의약 조성물.[22] The pharmaceutical composition for treatment according to any one of [13] to [21], wherein the dosage of the antibody-drug conjugate is in the range of 0.8 mg/kg to 8 mg/kg.

[23] 3 주에 1 회 투여되는 [13] 내지 [21] 중 어느 하나에 기재된 치료용 의약 조성물.[23] The therapeutic pharmaceutical composition according to any one of [13] to [21], which is administered once every three weeks.

[24] 내성암이 폐암, 요로 상피암, 대장암, 전립선암, 난소암, 췌암, 유방암, 방광암, 위암, 위장간질 종양, 자궁경부암, 식도암, 편평상피암, 복막암, 간암, 간세포암, 결장암, 직장암, 결장 직장암, 자궁 내막암, 자궁암, 침샘암, 신장암, 외음부암, 갑상선암, 음경암, 백혈병, 악성 림프종, 형질 세포종, 골수종, 또는 육종인 [13] 내지 [23] 중 어느 하나에 기재된 치료용 의약 조성물.[24] Resistant cancers include lung cancer, urothelial cancer, colon cancer, prostate cancer, ovarian cancer, pancreatic cancer, breast cancer, bladder cancer, stomach cancer, gastrointestinal stromal tumor, cervical cancer, esophageal cancer, squamous cell carcinoma, peritoneal cancer, liver cancer, hepatocellular cancer, colon cancer, Any one of [13] to [23], which is rectal cancer, colorectal cancer, endometrial cancer, uterine cancer, salivary gland cancer, kidney cancer, vulvar cancer, thyroid cancer, penile cancer, leukemia, malignant lymphoma, plasmacytoma, myeloma, or sarcoma. Pharmaceutical composition for therapeutic use.

[25] 하기 식으로 나타내는 링커 및 약물과, 항 HER2 항체가 결합한 항체-약물 콘주게이트, 그 염, 또는 그들의 수화물을 투여하는 것을 특징으로 하는 내성암의 치료 방법.[25] A method of treating resistant cancer, comprising administering an antibody-drug conjugate in which an anti-HER2 antibody is bound to a linker and a drug represented by the formula below, a salt thereof, or a hydrate thereof.

-(숙신이미드-3-일-N)-CH2CH2CH2CH2CH2-C(=O)-GGFG-NH-CH2-O-CH2-C(=O)-(NH-DX)-(succinimide-3-yl-N)-CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 -C(=O)-GGFG-NH-CH 2 -O-CH 2 -C(=O)-(NH -DX)

(식 중, (During the ceremony,

-(숙신이미드-3-일-N)- 은 다음 식 : -(succinimide-3-yl-N)- has the following formula:

[화학식 16][Formula 16]

Figure pat00016
Figure pat00016

으로 나타내는 구조이고, 이것의 3 위치에서 항 HER2 항체와 티오에테르 결합에 의해 결합하고, 1 위치의 질소 원자 상에서 이것을 포함하는 링커 구조 내의 메틸렌기와 결합하고,It is a structure represented by, and binds to the anti-HER2 antibody at the 3rd position through a thioether bond, and binds to the methylene group in the linker structure containing this on the nitrogen atom at the 1st position,

-(NH-DX) 는 다음 식 : -(NH-DX) is the following formula:

[화학식 17][Formula 17]

Figure pat00017
Figure pat00017

으로 나타내는 1 위치의 아미노기의 질소 원자가 결합 부위로 되어 있는 기를 나타낸다)(represents a group in which the nitrogen atom of the amino group at the 1 position is the binding site)

[26] 내성암이 이차 내성암인 [25] 에 기재된 치료 방법.[26] The treatment method described in [25], where the resistant cancer is secondary resistant cancer.

[27] 이차 내성이 항 HER2 항체를 포함하는 항체-약물 콘주게이트의 투여에 의한 이차 내성인 [26] 에 기재된 치료 방법.[27] The treatment method described in [26], wherein the secondary resistance is secondary resistance caused by administration of an antibody-drug conjugate containing an anti-HER2 antibody.

[28] 이차 내성이 항 HER2 항체-약물 콘주게이트인 T-DM1 투여에 의해 획득된 이차 내성인 [26] 또는 [27] 에 기재된 치료 방법.[28] The treatment method according to [26] or [27], wherein the secondary resistance is secondary resistance acquired by administration of T-DM1, an anti-HER2 antibody-drug conjugate.

[29] 이차 내성이 항 HER2 항체의 투여에 의한 이차 내성인 [26] 에 기재된 치료 방법.[29] The treatment method described in [26], wherein the secondary resistance is secondary resistance caused by administration of an anti-HER2 antibody.

[30] 항체-약물 콘주게이트의 1 항체당 약물-링커 구조의 평균 결합수가 2 내지 8 개의 범위인 [25] 내지 [29] 중 어느 하나에 기재된 치료 방법.[30] The treatment method according to any one of [25] to [29], wherein the average number of drug-linker structures per antibody in the antibody-drug conjugate is in the range of 2 to 8.

[31] 항체-약물 콘주게이트의 1 항체당 약물-링커 구조의 평균 결합수가 3 내지 8 개의 범위인 [25] 내지 [29] 중 어느 하나에 기재된 치료 방법.[31] The treatment method according to any one of [25] to [29], wherein the average number of drug-linker structures per antibody in the antibody-drug conjugate is in the range of 3 to 8.

[32] 항체-약물 콘주게이트의 1 항체당 약물-링커 구조의 평균 결합수가 7 내지 8 개의 범위인 [25] 내지 [29] 중 어느 하나에 기재된 치료 방법.[32] The treatment method according to any one of [25] to [29], wherein the average number of drug-linker structures per antibody in the antibody-drug conjugate is in the range of 7 to 8.

[33] 항체-약물 콘주게이트의 1 항체당 약물-링커 구조의 평균 결합수가 7.5 내지 8 개의 범위인 [25] 내지 [29] 중 어느 하나에 기재된 치료 방법.[33] The treatment method according to any one of [25] to [29], wherein the average number of drug-linker structures per antibody in the antibody-drug conjugate is in the range of 7.5 to 8.

[34] 항체-약물 콘주게이트의 투여량이 0.8 ㎎/㎏ 내지 8 ㎎/㎏ 의 범위인 [25] 내지 [33] 중 어느 하나에 기재된 치료 방법.[34] The treatment method according to any one of [25] to [33], wherein the dosage of the antibody-drug conjugate is in the range of 0.8 mg/kg to 8 mg/kg.

[35] 항체-약물 콘주게이트의 투여가 3 주에 1 회 실시되는 [25] 내지 [34] 중 어느 하나에 기재된 치료 방법.[35] The treatment method according to any one of [25] to [34], wherein the antibody-drug conjugate is administered once every three weeks.

[36] 내성암이 폐암, 요로 상피암, 대장암, 전립선암, 난소암, 췌암, 유방암, 방광암, 위암, 위장간질 종양, 자궁경부암, 식도암, 편평상피암, 복막암, 간암, 간세포암, 결장암, 직장암, 결장 직장암, 자궁 내막암, 자궁암, 침샘암, 신장암, 외음부암, 갑상선암, 음경암, 백혈병, 악성 림프종, 형질 세포종, 골수종, 또는 육종인 [25] 내지 [35] 중 어느 하나에 기재된 치료 방법.[36] Resistant cancers include lung cancer, urothelial cancer, colon cancer, prostate cancer, ovarian cancer, pancreatic cancer, breast cancer, bladder cancer, stomach cancer, gastrointestinal stromal tumor, cervical cancer, esophageal cancer, squamous cell carcinoma, peritoneal cancer, liver cancer, hepatocellular cancer, colon cancer, Any one of [25] to [35], which is rectal cancer, colorectal cancer, endometrial cancer, uterine cancer, salivary gland cancer, kidney cancer, vulvar cancer, thyroid cancer, penile cancer, leukemia, malignant lymphoma, plasmacytoma, myeloma, or sarcoma. Treatment method.

[37] 하기 식으로 나타내는 링커 및 약물과, 항 HER2 항체가 결합한 항체-약물 콘주게이트, 그 염, 또는 그들의 수화물을 활성 성분으로 하고, 약학적으로 허용되는 제제 성분을 함유하여, 항암약에 내성을 나타내는 암 환자에게 적용되는, 치료용 의약 조성물.[37] An antibody-drug conjugate in which an anti-HER2 antibody is bound to a linker and a drug represented by the following formula, a salt thereof, or a hydrate thereof as the active ingredient, and contains pharmaceutically acceptable formulation components, and is resistant to anticancer drugs. A therapeutic pharmaceutical composition applied to cancer patients representing .

-(숙신이미드-3-일-N)-CH2CH2CH2CH2CH2-C(=O)-GGFG-NH-CH2-O-CH2-C(=O)-(NH-DX)-(succinimide-3-yl-N)-CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 -C(=O)-GGFG-NH-CH 2 -O-CH 2 -C(=O)-(NH -DX)

(식 중,(During the ceremony,

-(숙신이미드-3-일-N)- 은 다음 식 : -(succinimide-3-yl-N)- has the following formula:

[화학식 18][Formula 18]

Figure pat00018
Figure pat00018

으로 나타내는 구조이고, 이것의 3 위치에서 항 HER2 항체와 티오에테르 결합에 의해 결합하고, 1 위치의 질소 원자 상에서 이것을 포함하는 링커 구조 내의 메틸렌기와 결합하고,It is a structure represented by, and binds to the anti-HER2 antibody at the 3rd position through a thioether bond, and binds to the methylene group in the linker structure containing this on the nitrogen atom at the 1st position,

-(NH-DX) 는 다음 식 : -(NH-DX) is the following formula:

[화학식 19][Formula 19]

Figure pat00019
Figure pat00019

으로 나타내는 1 위치의 아미노기의 질소 원자가 결합 부위로 되어 있는 기를 나타낸다)(represents a group in which the nitrogen atom of the amino group at the 1 position is the binding site)

[38] 항암약에 의한 치료력을 갖는 암 환자에게 적용되는 [37] 에 기재된 치료용 의약 조성물.[38] The therapeutic pharmaceutical composition according to [37], which is applied to cancer patients who have curative properties with anticancer drugs.

[39] 다른 항암약으로 바꾸고, 혹은 다른 항암약에 조합하여 사용되는 [37] 또는 [38] 에 기재된 치료용 의약 조성물.[39] The therapeutic pharmaceutical composition according to [37] or [38], which is used by changing to another anticancer drug or in combination with another anticancer drug.

[40] 항암약에 대한 내성이 이차 내성인 [37] 내지 [39] 중 어느 하나에 기재된 치료용 의약 조성물.[40] The pharmaceutical composition for treatment according to any one of [37] to [39], wherein resistance to an anticancer drug is secondary resistance.

[41] 항암약이 항 HER2 항체를 포함하는 항체-약물 콘주게이트인 [37] 내지 [40] 중 어느 하나에 기재된 치료용 의약 조성물.[41] The pharmaceutical composition for treatment according to any one of [37] to [40], wherein the anticancer drug is an antibody-drug conjugate containing an anti-HER2 antibody.

[42] 항암약이 트라스투주맙 엠탄신 (T-DM1) 인 [41] 에 기재된 치료용 의약 조성물.[42] The therapeutic pharmaceutical composition according to [41], wherein the anticancer drug is trastuzumab emtansine (T-DM1).

[43] 항암약이 항 HER2 항체인 [37] 내지 [40] 중 어느 하나에 기재된 치료용 의약 조성물.[43] The pharmaceutical composition for treatment according to any one of [37] to [40], wherein the anticancer drug is an anti-HER2 antibody.

[44] 항체-약물 콘주게이트의 1 항체당 약물-링커 구조의 평균 결합수가 2 내지 8 개의 범위인 [37] 내지 [43] 중 어느 하나에 기재된 치료용 의약 조성물.[44] The pharmaceutical composition for treatment according to any one of [37] to [43], wherein the average number of drug-linker structures per antibody of the antibody-drug conjugate is in the range of 2 to 8.

[45] 항체-약물 콘주게이트의 1 항체당 약물-링커 구조의 평균 결합수가 3 내지 8 개의 범위인 [37] 내지 [43] 중 어느 하나에 기재된 치료용 의약 조성물.[45] The pharmaceutical composition for treatment according to any one of [37] to [43], wherein the average number of drug-linker structures per antibody in the antibody-drug conjugate is in the range of 3 to 8.

[46] 항체-약물 콘주게이트의 1 항체당 약물-링커 구조의 평균 결합수가 7 내지 8 개의 범위인 [37] 내지 [43] 중 어느 하나에 기재된 치료용 의약 조성물.[46] The pharmaceutical composition for treatment according to any one of [37] to [43], wherein the average number of drug-linker structures per antibody in the antibody-drug conjugate is in the range of 7 to 8.

[47] 항체-약물 콘주게이트의 1 항체당 약물-링커 구조의 평균 결합수가 7.5 내지 8 개의 범위인 [37] 내지 [43] 중 어느 하나에 기재된 치료용 의약 조성물.[47] The pharmaceutical composition for treatment according to any one of [37] to [43], wherein the average number of drug-linker structures per antibody in the antibody-drug conjugate is in the range of 7.5 to 8.

[48] 항체-약물 콘주게이트의 투여량이 0.8 ㎎/㎏ 내지 8 ㎎/㎏ 의 범위인 [37] 내지 [47] 중 어느 하나에 기재된 치료용 의약 조성물.[48] The pharmaceutical composition for treatment according to any one of [37] to [47], wherein the dosage of the antibody-drug conjugate is in the range of 0.8 mg/kg to 8 mg/kg.

[49] 3 주에 1 회 투여되는 [37] 내지 [48] 중 어느 하나에 기재된 치료용 의약 조성물.[49] The pharmaceutical composition for treatment according to any one of [37] to [48], which is administered once every three weeks.

[50] 내성암이 폐암, 요로 상피암, 대장암, 전립선암, 난소암, 췌암, 유방암, 방광암, 위암, 위장간질 종양, 자궁경부암, 식도암, 편평상피암, 복막암, 간암, 간세포암, 결장암, 직장암, 결장 직장암, 자궁 내막암, 자궁암, 침샘암, 신장암, 외음부암, 갑상선암, 음경암, 백혈병, 악성 림프종, 형질 세포종, 골수종, 또는 육종인 [37] 내지 [49] 중 어느 하나에 기재된 치료용 의약 조성물.[50] Resistant cancers include lung cancer, urothelial cancer, colon cancer, prostate cancer, ovarian cancer, pancreatic cancer, breast cancer, bladder cancer, stomach cancer, gastrointestinal stromal tumor, cervical cancer, esophageal cancer, squamous cell carcinoma, peritoneal cancer, liver cancer, hepatocellular cancer, colon cancer, Rectal cancer, colorectal cancer, endometrial cancer, uterine cancer, salivary gland cancer, kidney cancer, vulvar cancer, thyroid cancer, penile cancer, leukemia, malignant lymphoma, plasmacytoma, myeloma, or sarcoma according to any one of [37] to [49]. Pharmaceutical composition for therapeutic use.

본 발명에서 사용되는 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 치료제는, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암에 대해 우수한 항종양 효과를 나타내고, 이차 내성암이어도 높은 항종양 효과를 나타낸다. 또, 안전성도 우수하므로, 유효한 치료 방법을 제공할 수 있다.The therapeutic agent containing the antibody-drug conjugate used in the present invention exhibits an excellent antitumor effect against HER2-expressing cancers that are resistant or refractory to existing anti-HER2 drugs, and exhibits a high antitumor effect even in secondary resistant cancers. Additionally, since it has excellent safety, an effective treatment method can be provided.

도 1 은, 인간화 항 HER2 모노클로날 항체 중사슬의 아미노산 서열 (서열 번호 1) 을 나타낸다.
도 2 는, 인간화 항 HER2 모노클로날 항체 경사슬의 아미노산 서열 (서열 번호 2) 을 나타낸다.
도 3 은, 항체-약물 콘주게이트 (1) 또는 T-DM1 에 의한, T-DM1 에 이차 내성화된 HER2 양성 인간 유방암 ST1616B/TDR 종양 피하 이식 누드 마우스에 대한 항종양 효과를 나타내는 도면이다. 도면 중, 가로축은 첫회 투여로부터의 일수, 세로축은 종양 체적을 나타낸다.
도 4 는, 항체-약물 콘주게이트 (1) 또는 T-DM1 에 의한, T-DM1 에 이차 내성화된 HER2 양성 인간 유방암 ST1360B/TDR 종양 피하 이식 누드 마우스에 대한 항종양 효과를 나타내는 도면이다. 도면 중, 가로축은 첫회 투여로부터의 일수, 세로축은 종양 체적을 나타낸다.
도 5 는, 항체-약물 콘주게이트 (1) 의 임상 시험에 있어서의 약물 동태를 나타내는 도면이다.
도 6 은, 항체-약물 콘주게이트 (1) 에 관한 임상 시험에 있어서의 안전성과 인용성을 나타내는 도면이다.
도 7 은, 항체-약물 콘주게이트 (1) 의 임상 시험에 있어서의 유효성에 대해, ORR (객관적 주효율) 및 DCR (병세 컨트롤률) 을 나타내는 도면이다.
도 8 은, 항체-약물 콘주게이트 (1) 의 임상 시험에 있어서의 유효성에 대해, 최대 종양 축소율 (％) 을 나타내는 도면이다.
도 9 는, 항체-약물 콘주게이트 (1) 의 임상 시험에 있어서의 유효성에 대해, 치료 기간·효과를 나타내는 도면이다.
도 10 은, 항체-약물 콘주게이트 (1) 의 임상 시험에 있어서의 유효성에 대해, 최대 종양 축소율 (％) 을 나타내는 도면이다.
도 11 은, 항체-약물 콘주게이트 (1) 의 임상 시험에 있어서의 유방암에 대한 유효성에 대해, 종양 축소율 (％) 의 시간 추이를 나타내는 도면이다.
도 12 는, 항체-약물 콘주게이트 (1) 의 임상 시험에 있어서의 위암에 대한 유효성에 대해, 종양 축소율 (％) 의 시간 추이를 나타내는 도면이다.
도 13 은, 항체-약물 콘주게이트 (1) 의 임상 시험에 있어서의 HER2 발현 고형암 (유방암 및 위암을 제외한다) 에 대한 유효성에 대해, 최대 종양 축소율 (％) 을 나타내는 도면이다. 도면 중, 「C」 는 대장암의 코호트를 나타내고, 「L」 은 비소세포 폐암의 코호트를 나타내고, 「S」 는 침샘암의 코호트를 나타내고, 「P」 는 파제트병의 코호트를 나타내고, 「Ch」 는 담관암의 코호트를 나타내고, 「E」 는 식도암의 코호트를 나타낸다. 또, 도면 중 「※」 는 치료가 진행 중인 것을 나타낸다.
도 14 는, 항체-약물 콘주게이트 (1) 의 임상 시험에 있어서의 HER2 발현 고형암 (유방암 및 위암을 제외한다) 에 대한 유효성에 대해, 종양 축소율 (％) 의 시간 추이를 나타내는 도면이다. 도면 중, 「Colorectal」 은 대장암의 코호트를 나타내고, 「NSCLC」 는 비소세포 폐암의 코호트를 나타내고, 「Salivary」 는 침샘암의 코호트를 나타내고, 「Other」 은 그 밖의 암의 코호트를 나타낸다.Figure 1 shows the amino acid sequence (SEQ ID NO: 1) of the heavy chain of a humanized anti-HER2 monoclonal antibody.
Figure 2 shows the amino acid sequence (SEQ ID NO: 2) of the light chain of the humanized anti-HER2 monoclonal antibody.
Figure 3 is a diagram showing the antitumor effect of antibody-drug conjugate (1) or T-DM1 on nude mice subcutaneously implanted with HER2-positive human breast cancer ST1616B/TDR tumor secondary to T-DM1. In the figure, the horizontal axis represents the number of days from the first administration, and the vertical axis represents the tumor volume.
Figure 4 is a diagram showing the antitumor effect of antibody-drug conjugate (1) or T-DM1 on nude mice subcutaneously implanted with HER2-positive human breast cancer ST1360B/TDR tumor secondary to T-DM1. In the figure, the horizontal axis represents the number of days from the first administration, and the vertical axis represents the tumor volume.
Figure 5 is a diagram showing the pharmacokinetics in clinical trials of antibody-drug conjugate (1).
Figure 6 is a diagram showing safety and tolerability in clinical trials regarding antibody-drug conjugate (1).
Figure 7 is a diagram showing the ORR (objective main efficiency) and DCR (disease control rate) regarding the effectiveness in clinical trials of the antibody-drug conjugate (1).
Figure 8 is a diagram showing the maximum tumor reduction rate (%) regarding the effectiveness in clinical trials of antibody-drug conjugate (1).
Figure 9 is a diagram showing the treatment period and effect regarding the effectiveness in clinical trials of antibody-drug conjugate (1).
Figure 10 is a diagram showing the maximum tumor reduction rate (%) regarding the effectiveness in clinical trials of antibody-drug conjugate (1).
Figure 11 is a diagram showing the time course of tumor reduction rate (%) regarding the effectiveness against breast cancer in clinical trials of antibody-drug conjugate (1).
Figure 12 is a diagram showing the time course of tumor reduction rate (%) regarding the effectiveness against gastric cancer in clinical trials of antibody-drug conjugate (1).
Figure 13 is a diagram showing the maximum tumor reduction rate (%) regarding the effectiveness against HER2-expressing solid tumors (excluding breast cancer and stomach cancer) in clinical trials of antibody-drug conjugate (1). In the figure, “C” represents the colon cancer cohort, “L” represents the non-small cell lung cancer cohort, “S” represents the salivary gland cancer cohort, “P” represents the Paget disease cohort, and “ “Ch” represents the cholangiocarcinoma cohort, and “E” represents the esophageal cancer cohort. In addition, “※” in the drawing indicates that treatment is in progress.
Figure 14 is a diagram showing the time course of the tumor reduction rate (%) regarding the effectiveness against HER2-expressing solid cancers (excluding breast cancer and stomach cancer) in clinical trials of antibody-drug conjugate (1). In the figure, “Colorectal” represents the colon cancer cohort, “NSCLC” represents the non-small cell lung cancer cohort, “Salivary” represents the salivary gland cancer cohort, and “Other” represents the other cancer cohorts.

이하, 본 발명을 실시하기 위한 바람직한 형태에 대해 도면을 참조하면서 설명한다. 또한, 이하에 설명하는 실시형태는, 본 발명의 대표적인 실시형태의 일례를 나타낸 것이고, 이에 의해 본 발명의 범위가 좁게 해석되는 일은 없다.Hereinafter, a preferred form for carrying out the present invention will be described with reference to the drawings. In addition, the embodiment described below shows an example of a representative embodiment of the present invention, and the scope of the present invention is not construed narrowly by this.

본 발명에 있어서 사용되는 항체-약물 콘주게이트는, 다음 식으로 나타내는 링커 및 약물과, 항 HER2 항체가 결합한 항 HER2 항체-약물 콘주게이트이다.The antibody-drug conjugate used in the present invention is an anti-HER2 antibody-drug conjugate in which an anti-HER2 antibody is bound to a linker and a drug represented by the following formula.

-(숙신이미드-3-일-N)-CH2CH2CH2CH2CH2-C(=O)-GGFG-NH-CH2-O-CH2-C(=O)-(NH-DX)-(succinimide-3-yl-N)-CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 -C(=O)-GGFG-NH-CH 2 -O-CH 2 -C(=O)-(NH -DX)

식 중, -(숙신이미드-3-일-N)- 은 다음 식 : where -(succinimide-3-yl-N)- has the following formula:

[화학식 20][Formula 20]

Figure pat00020
Figure pat00020

으로 나타내는 구조이고, 이것의 3 위치에서 항 HER2 항체와 티오에테르 결합에 의해 결합하고, 1 위치의 질소 원자 상에서 이것을 포함하는 링커 구조 내의 메틸렌기와 결합한다.It is a structure represented by, and binds to the anti-HER2 antibody at the 3rd position through a thioether bond, and binds to the methylene group in the linker structure containing this on the nitrogen atom at the 1st position.

-(NH-DX) 는 다음 식 : -(NH-DX) is the following formula:

[화학식 21][Formula 21]

Figure pat00021
Figure pat00021

으로 나타내는 1 위치의 아미노기의 질소 원자가 결합 부위로 되어 있는 기이다.It is a group in which the nitrogen atom of the amino group at the 1 position, represented by , serves as the binding site.

또, -GGFG- 는, -Gly-Gly-Phe-Gly- 의 테트라펩티드 잔기를 나타낸다.Additionally, -GGFG- represents the tetrapeptide residue of -Gly-Gly-Phe-Gly-.

본 명세서에 있어서는, 항체-약물 콘주게이트 중 링커 및 약물로 이루어지는 부분 구조를 「약물-링커 구조」 라고 칭한다. 이 약물-링커 구조는, 항체의 사슬 사이의 디술파이드 결합 부위 (2 지점의 중사슬-중사슬 사이, 및 2 지점의 중사슬-경사슬 사이) 에 있어서 생성된 티올기 (바꿔 말하면, 시스테인 잔기의 황 원자) 에 결합하고 있다.In this specification, the partial structure consisting of a linker and a drug in the antibody-drug conjugate is referred to as a “drug-linker structure.” This drug-linker structure is a thiol group (in other words, a cysteine residue) generated at the disulfide bond site between the chains of the antibody (between the heavy chain at two points and between the heavy chain and light chain at two points). It is bonded to the sulfur atom of .

본 발명에 있어서 사용되는 항 HER2 항체-약물 콘주게이트는, 다음 식 : The anti-HER2 antibody-drug conjugate used in the present invention has the following formula:

[화학식 22][Formula 22]

Figure pat00022
Figure pat00022

으로 나타내는 구조로 나타낼 수도 있다.It can also be expressed as a structure represented by .

여기서, 약물-링커 구조는, 항 HER2 항체와 티오에테르 결합에 의해 결합하고 있다. 또, n 은 이른바 DAR (Drug-to-Antibody Ratio) 와 동일한 의미이고, 항체 1 분자에 대한 약물의 결합수를 나타낸다. DAR 은 평균값, 즉, 평균 약물 결합수로서 특정되고, 표기되는 수치이다. 본 발명의 항체-약물 콘주게이트의 경우, n 은 2 내지 8 이면 되고, 바람직하게는 3 내지 8 이고, 보다 바람직하게는 7 내지 8 이고, 더욱 바람직하게는 7.5 내지 8 이고, n 은 약 8 인 것을 바람직하게 사용할 수 있다.Here, the drug-linker structure is bound to the anti-HER2 antibody by a thioether bond. In addition, n has the same meaning as so-called DAR (Drug-to-Antibody Ratio) and represents the number of drugs bound to one antibody molecule. DAR is a numerical value specified and expressed as an average value, that is, the average number of drug bonds. In the case of the antibody-drug conjugate of the present invention, n may be 2 to 8, preferably 3 to 8, more preferably 7 to 8, further preferably 7.5 to 8, and n is about 8. can be used preferably.

이하에 본 발명에서 사용되는 항체-약물 콘주게이트에 대해 상세하게 설명한다.Below, the antibody-drug conjugate used in the present invention will be described in detail.

[항체][Antibody]

본 발명에 있어서 사용되는 항 HER2 항체-약물 콘주게이트에 사용되는 항 HER2 항체는, 어느 종에서 유래해도 되지만, 바람직하게는, 인간, 래트, 마우스, 및 토끼를 예시할 수 있다. 항체가 인간 이외의 종에서 유래하는 경우에는, 주지된 기술을 사용하여, 키메라화 또는 인간화하는 것이 바람직하다. 본 발명의 항체는, 폴리클로날 항체이어도 되고, 모노클로날 항체이어도 되지만, 모노클로날 항체가 바람직하다.The anti-HER2 antibody used in the anti-HER2 antibody-drug conjugate used in the present invention may be derived from any species, but preferred examples include human, rat, mouse, and rabbit. When the antibody is derived from a species other than human, it is preferable to chimerize or humanize the antibody using well-known techniques. The antibody of the present invention may be a polyclonal antibody or a monoclonal antibody, but a monoclonal antibody is preferred.

항 HER2 항체는 종양 세포를 표적으로 할 수 있는 항체이고, 즉 종양 세포를 인식할 수 있는 특성, 종양 세포에 결합할 수 있는 특성, 종양 세포 내에 도입되어 내재화되는 특성, 그리고 종양 세포에 대한 살세포 활성 등을 구비하고 있고, 항종양 활성을 갖는 화합물을, 링커를 통해서 결합시켜 항체-약물 콘주게이트로 할 수 있다.Anti-HER2 antibodies are antibodies that can target tumor cells, that is, they have the characteristics of recognizing tumor cells, the characteristics of binding to tumor cells, the characteristics of being introduced and internalized into tumor cells, and the ability to kill tumor cells. Compounds that have anti-tumor activity, etc., can be combined through a linker to form an antibody-drug conjugate.

항체의 종양 세포에 대한 결합성은, 플로우 사이토메트리를 사용하여 확인할 수 있다. 종양 세포 내로의 항체의 도입은, (1) 치료 항체에 결합하는 이차 항체 (형광 표지) 를 사용하여 세포 내에 도입된 항체를 형광 현미경으로 가시화하는 어세이 (Cell Death and Differentiation (2008) 15, 751-761), (2) 치료 항체에 결합하는 이차 항체 (형광 표지) 를 사용하여 세포 내에 도입된 형광량을 측정하는 어세이 (Molecular Biology of the Cell Vol. 15, 5268-5282, December 2004), 또는 (3) 치료 항체에 결합하는 이뮤노톡신을 사용하여, 세포 내에 도입되면 독소가 방출되어 세포 증식이 억제된다는 Mab-ZAP 어세이 (Bio Techniques 28 : 162-165, January 2000) 를 사용하여 확인할 수 있다. 이뮤노톡신으로는, 디프테리아 독소의 촉매 영역과 프로테인 G 의 리컴비넌트 복합 단백질도 사용할 수 있다.The binding of an antibody to tumor cells can be confirmed using flow cytometry. Introduction of antibodies into tumor cells is (1) an assay that uses a secondary antibody (fluorescent label) that binds to a therapeutic antibody to visualize the antibodies introduced into the cells with a fluorescence microscope (Cell Death and Differentiation (2008) 15, 751 -761), (2) an assay that measures the amount of fluorescence introduced into cells using a secondary antibody (fluorescent label) that binds to a therapeutic antibody (Molecular Biology of the Cell Vol. 15, 5268-5282, December 2004), or (3) using an immunotoxin that binds to a therapeutic antibody, confirming using the Mab-ZAP assay (Bio Techniques 28:162-165, January 2000) that when introduced into cells, the toxin is released and cell proliferation is inhibited. You can. As an immunotoxin, the catalytic domain of diphtheria toxin and the recombinant complex protein of protein G can also be used.

항체의 항종양 활성은, in vitro 에서는, 세포의 증식의 억제 활성을 측정함으로써 확인할 수 있다. 예를 들어, 항체의 표적 단백질을 과잉 발현하고 있는 암 세포주를 배양하고, 배양계에 여러 가지 농도로 항체를 첨가하여, 포커스 형성, 콜로니 형성 및 스페로이드 증식에 대한 억제 활성을 측정할 수 있다. in vivo 에서는, 예를 들어, 표적 단백질을 고발현하고 있는 종양 세포주를 이식한 누드 마우스에 항체를 투여하고, 암 세포의 변화를 측정함으로써, 항종양 활성을 확인할 수 있다.The antitumor activity of an antibody can be confirmed in vitro by measuring its activity to inhibit cell proliferation. For example, a cancer cell line overexpressing the target protein of the antibody can be cultured, the antibody can be added to the culture system at various concentrations, and the inhibitory activity on focus formation, colony formation, and spheroid proliferation can be measured. In vivo, for example, antitumor activity can be confirmed by administering an antibody to nude mice transplanted with a tumor cell line highly expressing the target protein and measuring changes in cancer cells.

항체-약물 콘주게이트는 항종양 효과를 발휘하는 화합물을 결합시키고 있으므로, 항체 자체가 항종양 효과를 갖는 것은 바람직하지만, 필수는 아니다. 항종양성 화합물의 세포 장해성을 종양 세포에 있어서 특이적·선택적으로 발휘시키는 목적에서는, 항체가 내재화되어 종양 세포 내로 이행하는 성질이 있는 것이 중요하고, 바람직하다.Since the antibody-drug conjugate combines a compound that exerts an anti-tumor effect, it is desirable, but not essential, for the antibody itself to have an anti-tumor effect. For the purpose of exerting the cytotoxicity of an anti-tumor compound specifically and selectively on tumor cells, it is important and desirable that the antibody has the property of being internalized and transferred into tumor cells.

항 HER2 항체는 공지된 수단에 의해 취득할 수 있다. 예를 들어, 이 분야에서 통상 실시되는 방법을 사용하여, 항원이 되는 폴리펩티드를 동물에 면역하고, 생체 내에 산생되는 항체를 채취, 정제함으로써 얻을 수 있다. 항원의 유래는 인간에 한정되지 않고, 마우스, 래트 등의 인간 이외의 동물에서 유래하는 항원을 동물에 면역할 수도 있다. 이 경우에는, 취득된 이종 항원에 결합하는 항체와 인간 항원의 교차성을 시험함으로써, 인간의 질환에 적용 가능한 항체를 선별할 수 있다.Anti-HER2 antibodies can be obtained by known means. For example, it can be obtained by immunizing an animal with a polypeptide serving as an antigen, collecting and purifying the antibody produced in the body, using a method commonly practiced in this field. The origin of the antigen is not limited to humans, and animals can also be immunized with antigens derived from animals other than humans, such as mice and rats. In this case, antibodies applicable to human diseases can be selected by testing the crossover between the antibody binding to the acquired heterogeneous antigen and the human antigen.

또, 공지된 방법 (예를 들어, Kohler and Milstein, Nature (1975) 256, p.495-497 ; Kennet, R. ed., Monoclonal Antibodies, p.365-367, Plenum Press, N. Y. (1980)) 에 따라, 항원에 대한 항체를 산생하는 항체 산생 세포와 미엘로마 세포를 융합시킴으로써 하이브리도마를 수립하여, 모노클로날 항체를 얻을 수도 있다.Also, known methods (e.g., Kohler and Milstein, Nature (1975) 256, p.495-497; Kennet, R. ed., Monoclonal Antibodies, p.365-367, Plenum Press, N.Y. (1980)) Accordingly, a monoclonal antibody can be obtained by establishing a hybridoma by fusing an antibody-producing cell that produces an antibody against an antigen with a myeloma cell.

또한, 항원은 항원 단백질을 코드하는 유전자를 유전자 조작에 의해 숙주 세포에 산생시킴으로써 얻을 수 있다. 구체적으로는, 항원 유전자를 발현 가능한 벡터를 제조하고, 이것을 숙주 세포에 도입하여 그 유전자를 발현시키고, 발현한 항원을 정제하면 된다. 상기의 유전자 조작에 의한 항원 발현 세포, 혹은 항원을 발현하고 있는 세포주를 동물에 면역하는 방법을 사용함으로써도 항체를 취득할 수 있다.Additionally, antigens can be obtained by producing genes encoding antigen proteins in host cells through genetic manipulation. Specifically, a vector capable of expressing an antigen gene is prepared, introduced into a host cell to express the gene, and the expressed antigen is purified. Antibodies can also be obtained by using the method of immunizing animals with the above-mentioned genetically modified antigen-expressing cells or cell lines expressing the antigen.

본 발명에서 사용할 수 있는 항 HER2 항체는, 특별히 제한은 없지만, 예를 들어, 이하의 특성을 갖는 것이 바람직하다.There are no particular restrictions on the anti-HER2 antibody that can be used in the present invention, but for example, it is preferable to have the following characteristics.

(1) 이하의 특성을 갖는 것을 특징으로 하는 항 HER2 항체 ;(1) Anti-HER2 antibody characterized by having the following characteristics;

(a) HER2 에 특이적으로 결합한다.(a) Binds specifically to HER2.

(b) HER2 와 결합함으로써 HER2 발현 세포에 내재화되는 활성을 갖는다.(b) By binding to HER2, it has the activity of being internalized into HER2-expressing cells.

(2) HER2 의 세포외 도메인에 결합하는 상기 (1) 에 기재된 항체.(2) The antibody described in (1) above, which binds to the extracellular domain of HER2.

(3) 모노클로날 항체인 상기 (1) 또는 (2) 에 기재된 항체.(3) The antibody according to (1) or (2) above, which is a monoclonal antibody.

(4) 항체 의존성 세포 상해 (ADCC) 활성 및/또는 보체 의존성 세포 상해 (CDC) 활성을 갖는 상기 (1) 내지 (3) 중 어느 하나에 기재된 항체.(4) The antibody according to any one of (1) to (3) above, which has antibody-dependent cell damage (ADCC) activity and/or complement-dependent cell damage (CDC) activity.

(5) 마우스 모노클로날 항체, 키메라 모노클로날 항체, 또는 인간화 모노클로날 항체인, 상기 (1) 내지 (4) 중 어느 하나에 기재된 항체.(5) The antibody according to any one of (1) to (4) above, which is a mouse monoclonal antibody, a chimeric monoclonal antibody, or a humanized monoclonal antibody.

(6) 서열 번호 1 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 중사슬 및 서열 번호 2 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 경사슬을 포함하여 이루어지는 인간화 모노클로날 항체인 상기 (1) 내지 (5) 중 어느 하나에 기재된 항체.(6) The antibody according to any one of (1) to (5) above, which is a humanized monoclonal antibody comprising a heavy chain consisting of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1 and a light chain consisting of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 2. .

(7) 중사슬 카르복실 말단의 리신 잔기가 결실되어 있는 상기 (1) 내지 (6) 중 어느 하나에 기재된 항체.(7) The antibody according to any one of (1) to (6) above, wherein the lysine residue at the heavy chain carboxyl terminal is deleted.

(8) 서열 번호 1 에 있어서 아미노산 번호 1 내지 449 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 중사슬 및 서열 번호 2 에 있어서 아미노산 번호 1 내지 214 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 경사슬을 포함하여 이루어지는 상기 (7) 에 기재된 항체.(8) the heavy chain consisting of the amino acid sequence shown in amino acid numbers 1 to 449 in SEQ ID NO: 1 and the light chain consisting of the amino acid sequence shown in amino acid numbers 1 to 214 in SEQ ID NO: 2. Antibodies.

(9) 상기 (1) 내지 (8) 중 어느 하나에 기재된 항체를 코드하는 폴리뉴클레오티드를 함유하는 발현 벡터에 의해 형질 전환된 숙주 세포를 배양하는 공정 및 당해 공정에서 얻어진 배양물로부터 목적으로 하는 항체를 채취하는 공정을 포함하는 당해 항체의 제조 방법에 의해 얻어지는 항체.(9) A step of culturing a host cell transformed with an expression vector containing a polynucleotide encoding the antibody according to any one of (1) to (8) above, and the antibody of interest from the culture obtained in the step. An antibody obtained by a method for producing the antibody, including the step of collecting.

이하에, 본 발명에 있어서 사용되는 항 HER2 항체에 대해 설명한다.Below, the anti-HER2 antibody used in the present invention is explained.

본 명세서에 있어서, 「암」 과「종양」 은 동일한 의미로 사용하고 있다.In this specification, “cancer” and “tumor” are used with the same meaning.

본 명세서에 있어서, 「유전자」 라는 단어에는, DNA 뿐만 아니라 그 mRNA, cDNA 및 그 cRNA 도 포함된다.In this specification, the word “gene” includes not only DNA but also its mRNA, cDNA, and its cRNA.

본 명세서에 있어서, 「폴리뉴클레오티드」 라는 단어는 핵산과 동일한 의미로 사용하고 있고, DNA, RNA, 프로브, 올리고 뉴클레오티드, 및 프라이머도 포함된다.In this specification, the word “polynucleotide” is used in the same sense as nucleic acid, and also includes DNA, RNA, probes, oligonucleotides, and primers.

본 명세서에 있어서, 「폴리펩티드」 「단백질」 「단백」 은 구별하지 않고 사용하고 있다.In this specification, “polypeptide,” “protein,” and “protein” are used without distinction.

본 명세서에 있어서, 「세포」 에는, 동물 개체 내의 세포, 배양 세포도 포함하고 있다.In this specification, “cell” also includes cells within animal organisms and cultured cells.

본 명세서에 있어서, 「HER2」 라는 단어는, HER2 단백과 동일한 의미로 사용하고 있다.In this specification, the word “HER2” is used with the same meaning as HER2 protein.

본 명세서에 있어서, 항 HER2 항체란, 특별히 제한은 없지만, 퍼투주맙 (국제 공개 01/00245호), 트라스투주맙 (미국 특허 제5821337호) 등을 들 수 있지만, 트라스투주맙이 바람직하다. 단, HER2 에 특이적으로 결합하는, 보다 바람직하게는, HER2 와 결합함으로써 HER2 발현 세포에 내재화되는 활성을 갖는 항 HER2 항체이면 이것에 한정되지 않는다.In this specification, the anti-HER2 antibody is not particularly limited and includes pertuzumab (International Publication No. 01/00245), Trastuzumab (US Patent No. 5821337), and Trastuzumab is preferred. However, the antibody is not limited to this as long as it is an anti-HER2 antibody that specifically binds to HER2, more preferably has the activity of being internalized into HER2-expressing cells by binding to HER2.

본 명세서에 있어서, 「트라스투주맙」 은 HERCEPTIN (등록상표), huMAb4D5-8, rhuMAb4D5-8 이라고 불리는 경우도 있고, 서열 번호 1 (도 1) 에 있어서 아미노산 번호 1 내지 449 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 중사슬 및 서열 번호 2 (도 2) 에 있어서 아미노산 번호 1 내지 214 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 경사슬을 포함하여 이루어지는 인간화 항체이다.In this specification, “trastuzumab” may also be called HERCEPTIN (registered trademark), huMAb4D5-8, or rhuMAb4D5-8, and is composed of the amino acid sequence shown in amino acid numbers 1 to 449 in SEQ ID NO: 1 (Figure 1). It is a humanized antibody comprising a heavy chain and a light chain consisting of the amino acid sequence shown in amino acid numbers 1 to 214 in SEQ ID NO: 2 (FIG. 2).

본 명세서에 있어서, 「특이적으로 결합」 이라는 단어는, 비특이적인 흡착이 아닌 결합을 의미한다. 결합이 특이적인지 여부의 판정 기준으로는, 예를 들어, 해리 정수 (定數) (이하, 「Kd」) 를 들 수 있다. 바람직한 항체의 HER2 단백에 대한 Kd 값은 1 × 10-5 M 이하, 5 × 10-6 M 이하, 2 × 10-6 M 이하, 또는 1 × 10-6 M 이하 ; 보다 바람직하게는 5 × 10-7 M 이하, 2 × 10-7 M 이하, 또는 1 × 10-7 M 이하 ; 보다 더 바람직하게는 5 × 10-8 M 이하, 2 × 10-8 M 이하, 또는 1 × 10-8 M 이하 ; 최적으로는 5 × 10-9 M 이하, 2 × 10-9 M 이하, 또는 1 × 10-9 M 이하이다. HER2 단백과 항체의 결합은, Surface Plasmon Resonance 법, ELISA 법, RIA 법 등 공지된 방법을 사용하여 측정할 수 있다.In this specification, the word “specifically binds” means binding rather than non-specific adsorption. Examples of criteria for determining whether binding is specific include the dissociation constant (hereinafter “Kd”). The Kd value for the HER2 protein of a preferred antibody is 1 x 10 -5 M or less, 5 x 10 -6 M or less, 2 x 10 -6 M or less, or 1 x 10 -6 M or less; More preferably, it is 5 × 10 -7 M or less, 2 × 10 -7 M or less, or 1 × 10 -7 M or less; Even more preferably, it is 5 × 10 -8 M or less, 2 × 10 -8 M or less, or 1 × 10 -8 M or less; Optimally, it is 5 × 10 -9 M or less, 2 × 10 -9 M or less, or 1 × 10 -9 M or less. The binding between the HER2 protein and the antibody can be measured using known methods such as the Surface Plasmon Resonance method, ELISA method, and RIA method.

본 명세서에 있어서의 「CDR」 이란, 상보성 결정 영역 (CDR : Complemetarity determining region) 을 의미한다. 항체 분자의 중사슬 및 경사슬에는 각각 3 지점의 CDR 이 있는 것이 알려져 있다. CDR 은, 초가변 영역 (hypervariable domain) 이라고도 불리고, 항체의 중사슬 및 경사슬의 가변 영역 내에 있고, 일차 구조의 변이성이 특히 높은 부위이고, 중사슬 및 경사슬의 폴리펩티드 사슬의 일차 구조 상에 있어서, 각각 3 지점으로 분리되어 있다. 본 명세서에 있어서는, 항체의 CDR 에 대해, 중사슬의 CDR 을 중사슬 아미노산 서열의 아미노 말단측으로부터 CDRH1, CDRH2, CDRH3 이라고 표기하고, 경사슬의 CDR 을 경사슬 아미노산 서열의 아미노 말단측으로부터 CDRL1, CDRL2, CDRL3 이라고 표기한다. 이들 부위는 입체 구조 상에서 서로 근접하여, 결합하는 항원에 대한 특이성을 결정하고 있다.“CDR” in this specification means complementarity determining region (CDR). It is known that the heavy and light chains of antibody molecules each have three CDR points. CDR is also called a hypervariable domain, and is located within the variable regions of the heavy and light chains of an antibody, and is a region where the variability of the primary structure is particularly high, and is located on the primary structure of the polypeptide chains of the heavy and light chains. , each is separated into 3 points. In this specification, regarding the CDRs of antibodies, the heavy chain CDRs are denoted as CDRH1, CDRH2, and CDRH3 from the amino terminal side of the heavy chain amino acid sequence, and the light chain CDRs are denoted as CDRL1, CDRH3 from the amino terminal side of the light chain amino acid sequence. They are denoted as CDRL2 and CDRL3. These sites are close to each other in three-dimensional structure, and determine the specificity for the antigen to which they bind.

본 발명에 있어서, 「스트린젠트한 조건하에서 하이브리다이즈한다」 란, 시판되는 하이브리다이제이션 용액 ExpressHyb Hybridization Solution (클론텍사 제조) 중, 68 ℃ 에서 하이브리다이즈하는 것, 또는 DNA 를 고정시킨 필터를 사용하여 0.7 - 1.0 M 의 NaCl 존재하, 68 ℃ 에서 하이브리다이제이션을 실시한 후, 0.1 - 2 배 농도의 SSC 용액 (1 배 농도 SSC 란 150 mM NaCl, 15 mM 시트르산나트륨으로 이루어진다) 을 사용하여, 68 ℃ 에서 세정함으로써 동정할 수 있는 조건 또는 그것과 동등한 조건으로 하이브리다이즈하는 것을 말한다.In the present invention, “hybridizing under stringent conditions” means hybridizing at 68°C in a commercially available hybridization solution, ExpressHyb Hybridization Solution (manufactured by Clontech), or using a filter fixing DNA. After hybridization was performed at 68°C in the presence of 0.7 - 1.0 M NaCl, a 0.1 - 2-fold concentration SSC solution (1-fold concentration SSC consists of 150 mM NaCl and 15 mM sodium citrate) was used to perform hybridization. , refers to hybridization under conditions that can be identified by washing at 68°C or under conditions equivalent to those.

1. HER21.HER2

HER2 는 인간 상피 세포 증식 인자 수용체 2 형 관련 암 유전자로서 동정된 대표적인 증식 인자 수용체형의 암 유전자 산물의 하나이고, 분자량 185 kDa 의 티로신키나아제 도메인을 갖는 막 관통형 수용체 단백이다. HER1 (EGFR, ErbB-1), HER2 (neu, ErbB-2), HER3 (ErbB-3), HER4 (ErbB-4) 로 이루어지는 EGFR 패밀리의 하나이고, 호모 혹은 다른 EGFR 인 HER1, HER3, 또는 HER4 와의 헤테로다이머 형성에 의해 세포 내 티로신 잔기가 자기 인산화되어 활성화됨으로써, 정상 세포 및 종양 세포에 있어서 세포의 증식·분화·생존에 중요한 역할을 하는 것이 알려져 있다.HER2 is one of the representative growth factor receptor-type oncogene products identified as a human epithelial cell growth factor receptor type 2-related oncogene, and is a transmembrane receptor protein with a tyrosine kinase domain with a molecular weight of 185 kDa. It is a member of the EGFR family consisting of HER1 (EGFR, ErbB-1), HER2 (neu, ErbB-2), HER3 (ErbB-3), and HER4 (ErbB-4), and is a homo or other EGFR, such as HER1, HER3, or HER4. It is known that intracellular tyrosine residues are autophosphorylated and activated by heterodimer formation, thereby playing an important role in cell proliferation, differentiation, and survival in normal and tumor cells.

본 발명에서 사용하는 HER2 단백은, 인간, 비인간 포유 동물 (래트, 마우스 등) 의 HER2 발현 세포로부터 직접 정제하여 사용하거나, 혹은 당해 세포의 세포막 획분을 조제하여 사용할 수 있고, 또, HER2 를 in vitro 에서 합성하거나, 혹은 유전자 조작에 의해 숙주 세포에 산생시킴으로써 얻을 수 있다. 유전자 조작에서는, 구체적으로는, HER2 cDNA 를 발현 가능한 벡터에 삽입한 후, 전사와 번역에 필요한 효소, 기질 및 에너지 물질을 포함하는 용액 중에서 합성하거나, 혹은 다른 원핵 생물, 또는 진핵 생물의 숙주 세포를 형질 전환하여 HER2 를 발현시킴으로써, 그 단백질을 얻을 수 있다. 또, 상기의 유전자 조작에 의한 HER2 발현 세포, 혹은 HER2 를 발현하고 있는 세포주를 HER2 단백으로서 사용할 수도 있다.The HER2 protein used in the present invention can be purified directly from HER2-expressing cells of humans and non-human mammals (rats, mice, etc.), or can be used by preparing cell membrane fractions of the cells, and HER2 can be used in vitro. It can be obtained by synthesizing it or producing it in host cells through genetic manipulation. In genetic manipulation, specifically, HER2 cDNA is inserted into an expression vector and then synthesized in a solution containing enzymes, substrates, and energy substances necessary for transcription and translation, or in host cells of other prokaryotes or eukaryotes. By transforming and expressing HER2, the protein can be obtained. Additionally, HER2-expressing cells or cell lines expressing HER2 through the above-mentioned genetic manipulation can also be used as the HER2 protein.

HER2 의 DNA 서열 및 아미노산 서열은 공적 데이터베이스 상에 공개되어 있고, 예를 들어, M11730 (Genbank), NP_004439.2 (NCBI) 등의 액세션 번호에 의해 참조할 수 있다.The DNA sequence and amino acid sequence of HER2 are published in public databases and can be referenced by accession numbers such as M11730 (Genbank), NP_004439.2 (NCBI), etc.

또, 상기 HER2 의 아미노산 서열에 있어서, 1 또는 수 개의 아미노산이 치환, 결실 및/또는 부가된 아미노산 서열로 이루어지고, 당해 단백질과 동등한 생물 활성을 갖는 단백질도 HER2 에 포함된다.In addition, in the amino acid sequence of HER2, proteins consisting of amino acid sequences in which one or several amino acids are substituted, deleted, and/or added, and having biological activity equivalent to the protein in question, are also included in HER2.

인간 HER2 단백은, N 말단 22 아미노산 잔기로 이루어지는 시그널 서열, 630 아미노산 잔기로 이루어지는 세포외 도메인, 23 아미노산 잔기로 이루어지는 세포막 관통 도메인, 580 아미노산 잔기로 이루어지는 세포내 도메인으로 구성되어 있다.The human HER2 protein is composed of a signal sequence composed of 22 amino acid residues at the N terminus, an extracellular domain composed of 630 amino acid residues, a transmembrane domain composed of 23 amino acid residues, and an intracellular domain composed of 580 amino acid residues.

2. 항 HER2 항체의 제조2. Preparation of anti-HER2 antibody

본 발명의 HER2 에 대한 항체는, 예를 들어, 이 분야에서 통상 실시되는 방법에 따라, HER2 또는 HER2 의 아미노산 서열에서 선택되는 임의의 폴리펩티드를 동물에 면역하고, 생체 내에 산생되는 항체를 채취, 정제함으로써 얻을 수 있다. 항원이 되는 HER2 의 생물종은 인간에 한정되지 않고, 마우스, 래트 등의 인간 이외의 동물에서 유래하는 HER2, 래트 p185neu 등을 동물에 면역할 수도 있다. 이 경우에는, 취득된 이종 HER2 에 결합하는 항체와 인간 HER2 와의 교차성을 시험함으로써, 인간의 질환에 적용 가능한 항체를 선별할 수 있다.The antibody against HER2 of the present invention can be prepared by, for example, immunizing an animal with HER2 or an arbitrary polypeptide selected from the amino acid sequence of HER2, collecting and purifying the antibody produced in vivo, according to a method commonly practiced in this field. You can get it by doing. The species of HER2 that serves as the antigen is not limited to humans. Animals can also be immunized with HER2 derived from non-human animals such as mice and rats, rat p185neu, etc. In this case, antibodies applicable to human diseases can be selected by testing the cross-activity between the acquired heterologous HER2-binding antibody and human HER2.

또, 공지된 방법 (예를 들어, Kohler and Milstein, Nature (1975) 256, p.495-497 ; Kennet, R. ed., Monoclonal Antibodies, p.365-367, Plenum Press, N. Y. (1980)) 에 따라, HER2 에 대한 항체를 산생하는 항체 산생 세포와 미엘로마 세포를 융합시킴으로써 하이브리도마를 수립하여, 모노클로날 항체를 얻을 수도 있다.Also, known methods (e.g., Kohler and Milstein, Nature (1975) 256, p.495-497; Kennet, R. ed., Monoclonal Antibodies, p.365-367, Plenum Press, N.Y. (1980)) Accordingly, a monoclonal antibody can be obtained by establishing a hybridoma by fusing an antibody-producing cell that produces an antibody against HER2 with a myeloma cell.

또한, 항원이 되는 HER2 는 HER2 유전자를 유전자 조작에 의해 숙주 세포에 발현시킴으로써 얻을 수 있다.Additionally, HER2, which serves as an antigen, can be obtained by expressing the HER2 gene in host cells through genetic manipulation.

구체적으로는, HER2 유전자를 발현 가능한 벡터를 제조하고, 이것을 숙주 세포에 도입하여 그 유전자를 발현시키고, 발현한 HER2 를 정제하면 된다.Specifically, a vector capable of expressing the HER2 gene is prepared, introduced into a host cell to express the gene, and the expressed HER2 is purified.

또, 상기의 유전자 조작에 의한 HER2 발현 세포, 혹은 HER2 를 발현하고 있는 세포주를 HER2 단백으로서 사용할 수도 있다. 항 HER2 항체는, 공지된 수단에 의해 취득할 수 있다. 이하, 구체적으로 HER2 에 대한 항체의 취득 방법을 설명한다.Additionally, HER2-expressing cells or cell lines expressing HER2 through the above-mentioned genetic manipulation can also be used as the HER2 protein. Anti-HER2 antibodies can be obtained by known means. Hereinafter, a method for obtaining an antibody against HER2 will be described in detail.

(1) 항원의 조제(1) Preparation of antigen

항 HER2 항체를 제조하기 위한 항원으로는, HER2 또는 그 적어도 6 개가 연속된 부분 아미노산 서열로 이루어지는 폴리펩티드, 혹은 이들에 임의의 아미노산 서열이나 담체가 부가된 유도체를 들 수 있다.Antigens for producing anti-HER2 antibodies include polypeptides consisting of HER2 or at least six consecutive partial amino acid sequences, or derivatives to which any amino acid sequence or carrier is added.

HER2 는, 인간의 종양 조직 혹은 종양 세포로부터 직접 정제하여 사용할 수 있고, 또, HER2 를 in vitro 에서 합성하거나, 혹은 유전자 조작에 의해 숙주 세포에 산생시킴으로써 얻을 수 있다.HER2 can be used by purifying it directly from human tumor tissue or tumor cells, or it can be obtained by synthesizing HER2 in vitro or producing it in host cells through genetic manipulation.

유전자 조작에서는, 구체적으로는, HER2 의 cDNA 를 발현 가능한 벡터에 삽입한 후, 전사와 번역에 필요한 효소, 기질 및 에너지 물질을 포함하는 용액 중에서 합성하거나, 혹은 다른 원핵 생물 또는 진핵 생물의 숙주 세포를 형질 전환하여 HER2 를 발현시킴으로써 항원을 얻을 수 있다.In genetic manipulation, specifically, the HER2 cDNA is inserted into an expression vector and then synthesized in a solution containing enzymes, substrates, and energy substances required for transcription and translation, or using host cells of other prokaryotes or eukaryotes. Antigens can be obtained by transformation to express HER2.

또, 막단백질인 HER2 의 세포외 영역과 항체의 정상 영역을 연결한 융합 단백질을 적절한 숙주·벡터계에 있어서 발현시킴으로써, 분비 단백질로서 항원을 얻을 수도 있다.Additionally, an antigen can be obtained as a secreted protein by expressing a fusion protein connecting the extracellular region of the membrane protein HER2 and the normal region of an antibody in an appropriate host/vector system.

HER2 의 cDNA 는, 예를 들어 HER2 의 cDNA 를 발현하고 있는 cDNA 라이브러리를 주형으로 하여, HER2 cDNA 를 특이적으로 증폭시키는 프라이머를 사용하여 폴리메라아제 연쇄 반응 (PCR ; Saiki, R. K., et al., Science (1988) 239, p.487-489 참조) 을 실시하는, 이른바 PCR 법에 의해 취득할 수 있다.HER2 cDNA can be generated, for example, by polymerase chain reaction (PCR; Saiki, R. K., et al., using a cDNA library expressing HER2 cDNA as a template and primers that specifically amplify HER2 cDNA It can be obtained by the so-called PCR method (see Science (1988) 239, p. 487-489).

폴리펩티드의 인·비트로 (in vitro) 합성으로는, 예를 들어 로슈·다이아그노스틱스사 제조의 래피드 트랜슬레이션 시스템 (RTS) 을 들 수 있지만, 이것에 한정되지 않는다.Examples of in vitro synthesis of polypeptides include, but are not limited to, the Rapid Translation System (RTS) manufactured by Roche Diagnostics.

원핵 세포의 숙주로는, 예를 들어, 대장균 (Escherichia coli) 이나 고초균 (Bacillus subtilis) 등을 들 수 있다. 목적으로 하는 유전자를 이들 숙주 세포 내에서 형질 전환시키기 위해서는, 숙주과 적합할 수 있는 종 유래의 레플리콘 즉 복제 기점과, 조절 서열을 포함하고 있는 플라스미드 벡터로 숙주 세포를 형질 전환시킨다. 또, 벡터로는, 형질 전환 세포에 표현 형질 (표현형) 의 선택성을 부여할 수 있는 서열을 갖는 것이 바람직하다.Hosts of prokaryotic cells include, for example, Escherichia coli and Bacillus subtilis. In order to transform a target gene in these host cells, the host cells are transformed with a plasmid vector containing a replicon, that is, an origin of replication, and a regulatory sequence derived from a species compatible with the host. In addition, the vector is preferably one that has a sequence that can provide selectivity for the expression trait (phenotype) to the transformed cell.

진핵 세포의 숙주 세포에는, 척추 동물, 곤충, 효모 등의 세포가 포함되고, 척추 동물 세포로는, 예를 들어, 원숭이의 세포인 COS 세포 (Gluzman, Y. Cell (1981) 23, p.175-182, ATCC CRL-1650 ; ATCC : American Type Culture Collection), 마우스 섬유아세포 NIH3T3 (ATCC No.CRL-1658) 이나 차이니즈·햄스터 난소 세포 (CHO 세포, ATCC CCL-61) 의 디하이드로 엽산 환원 효소 결손주 (Urlaub, G. and Chasin, L. A. Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1980) 77, p.4126-4220) 등이 자주 사용되고 있지만, 이들에 한정되지 않는다.Host cells of eukaryotic cells include cells of vertebrates, insects, yeast, etc., and examples of vertebrate cells include COS cells, which are monkey cells (Gluzman, Y. Cell (1981) 23, p.175 -182, ATCC CRL-1650; ATCC: American Type Culture Collection), mouse fibroblast NIH3T3 (ATCC No.CRL-1658) or Chinese/hamster ovary cells (CHO cells, ATCC CCL-61) with dehydrofolate reductase deficiency. Note (Urlaub, G. and Chasin, L.A. Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1980) 77, p.4126-4220) are frequently used, but are not limited to these.

상기와 같이 하여 얻어지는 형질 전환체는, 이 분야에서 통상 실시되는 방법에 따라 배양할 수 있고, 그 배양에 의해 세포내 또는 세포외에 목적으로 하는 폴리펩티드가 산생된다.The transformant obtained as described above can be cultured according to a method commonly practiced in this field, and the polypeptide of interest is produced intracellularly or extracellularly by the culturing.

그 배양에 사용되는 배지로는, 채용한 숙주 세포에 따라 관용되는 각종 것을 적절히 선택할 수 있고, 대장균이면, 예를 들어, LB 배지에 필요에 따라, 암피실린 등의 항생 물질이나 IPMG 를 첨가하여 사용할 수 있다.The medium used for the culture can be appropriately selected from various types tolerated depending on the host cell employed. If it is E. coli, for example, antibiotics such as ampicillin or IPMG can be added to LB medium as needed. there is.

상기 배양에 의해, 형질 전환체의 세포내 또는 세포외에 산생되는 재조합 단백질은, 그 단백질의 물리적 성질이나 화학적 성질 등을 이용한 각종 공지된 분리 조작법에 의해 분리·정제할 수 있다.The recombinant protein produced inside or outside the cells of the transformant by the above-mentioned culture can be separated and purified by various known separation methods using the physical and chemical properties of the protein.

그 방법으로는, 구체적으로는 예를 들어, 통상적인 단백질 침전제에 의한 처리, 한외 여과, 분자 체 크로마토그래피 (겔 여과), 흡착 크로마토그래피, 이온 교환 크로마토그래피, 어피니티 크로마토그래피 등의 각종 액체 크로마토그래피, 투석법, 이들의 조합 등을 예시할 수 있다.The method specifically includes, for example, treatment with a conventional protein precipitant, ultrafiltration, molecular sieve chromatography (gel filtration), adsorption chromatography, ion exchange chromatography, and various liquid chromatography such as affinity chromatography. Examples include graphy, dialysis, and combinations thereof.

또, 발현시키는 재조합 단백질에 6 잔기로 이루어지는 히스티딘 태그를 연결함으로써, 니켈 어피니티 칼럼으로 효율적으로 정제할 수 있다. 혹은, 발현시키는 재조합 단백질에 IgG 의 Fc 영역을 연결함으로써, 프로테인 A 칼럼으로 효율적으로 정제할 수 있다.Additionally, by linking a histidine tag consisting of 6 residues to the recombinant protein to be expressed, it can be efficiently purified using a nickel affinity column. Alternatively, by linking the Fc region of IgG to the recombinant protein to be expressed, it can be efficiently purified using a Protein A column.

상기 방법을 조합함으로써 용이하게 고수율, 고순도로 목적으로 하는 폴리펩티드를 대량으로 제조할 수 있다.By combining the above methods, the target polypeptide can be easily produced in large quantities with high yield and high purity.

상기에 서술한 형질 전환체 자체를 항원으로서 사용할 수도 있다. 또, HER2 를 발현하는 세포주를 항원으로서 사용할 수도 있다. 이와 같은 세포주로는, 인간 유방암주 SK-BR-3, BT-474, KPL-4, 또는 JIMT-1, 인간 위암주 NCI-N87, 및 인간 난소암주 SK-OV-3 을 들 수 있지만, HER2 를 발현하는 한, 이들 세포주에 한정되지 않는다.The transformant itself described above can also be used as an antigen. Additionally, a cell line expressing HER2 can also be used as an antigen. Such cell lines include human breast cancer lines SK-BR-3, BT-474, KPL-4, or JIMT-1, human stomach cancer lines NCI-N87, and human ovarian cancer lines SK-OV-3, but HER2 As long as it expresses, it is not limited to these cell lines.

(2) 항 HER2 모노클로날 항체의 제조(2) Preparation of anti-HER2 monoclonal antibody

HER2 와 특이적으로 결합하는 항체의 예로서, HER2 와 특이적으로 결합하는 모노클로날 항체를 들 수 있지만, 그 취득 방법은 이하에 기재하는 바와 같다.Examples of antibodies that specifically bind to HER2 include monoclonal antibodies that specifically bind to HER2, and the method for obtaining them is as described below.

모노클로날 항체의 제조에 있어서는, 일반적으로 하기와 같은 작업 공정이 필요하다.In the production of monoclonal antibodies, the following work processes are generally required.

즉,in other words,

(a) 항원으로서 사용하는 생체 고분자의 정제, 또는 항원 발현 세포의 조제(a) Purification of biopolymers used as antigens or preparation of antigen-expressing cells

(b) 항원을 동물에 주사함으로써 면역시킨 후, 혈액을 채취하여 그 항체가를 검정하여 비장 적출의 시기를 결정하고 나서, 항체 산생 세포를 조제하는 공정(b) After immunizing an animal by injecting an antigen, blood is collected, the antibody titer is tested, the timing of spleen removal is determined, and antibody-producing cells are prepared.

(c) 골수종 세포 (이하 「미엘로마」 라고 한다) 의 조제(c) Preparation of myeloma cells (hereinafter referred to as “myeloma”)

(d) 항체 산생 세포와 미엘로마의 세포 융합(d) Cell fusion of antibody-producing cells and myeloma

(e) 목적으로 하는 항체를 산생하는 하이브리도마군의 선별(e) Selection of hybridoma group producing the target antibody

(f) 단일 세포 클론으로의 분할 (클로닝)(f) Division into single cell clones (cloning)

(g) 경우에 따라서는, 모노클로날 항체를 대량으로 제조하기 위한 하이브리도마의 배양, 또는 하이브리도마를 이식한 동물의 사육(g) In some cases, culturing hybridomas for mass production of monoclonal antibodies, or raising animals transplanted with hybridomas

(h) 이와 같이 하여 제조된 모노클로날 항체의 생리 활성, 및 그 결합 특이성의 검토, 혹은 표지 시약으로서의 특성의 검정(h) Examination of the physiological activity and binding specificity of the monoclonal antibody prepared in this way, or testing of its properties as a labeling reagent

등이다.etc.

이하, 모노클로날 항체의 제조법을 상기 공정에 따라 상세히 서술하지만, 그 항체의 제조법은 이것에 제한되지 않고, 예를 들어 비세포 (脾細胞) 이외의 항체 산생 세포 및 미엘로마를 사용할 수도 있다.Hereinafter, the method for producing a monoclonal antibody will be described in detail according to the above-mentioned steps, but the method for producing the antibody is not limited to this, and, for example, antibody-producing cells other than splenocytes and myeloma may be used.

(a) 항원의 정제(a) Purification of antigen

항원으로는, 상기한 바와 같은 방법으로 조제한 HER2 또는 그 일부를 사용할 수 있다.As the antigen, HER2 or a portion thereof prepared by the method described above can be used.

또, HER2 발현 재조합 체세포에 의해 조제한 막 획분, 또는 HER2 발현 재조합 체세포 자신, 또한 당업자에게 주지된 방법을 사용하여 화학 합성한 본 발명 관련의 단백질의 부분 펩티드를 항원으로서 사용할 수도 있다.Additionally, a membrane fraction prepared from HER2-expressing recombinant somatic cells, the HER2-expressing recombinant somatic cells themselves, or a partial peptide of a protein related to the present invention chemically synthesized using a method well known to those skilled in the art can also be used as an antigen.

또한 HER2 발현 세포주를 항원으로서 사용할 수도 있다.Additionally, HER2-expressing cell lines can also be used as antigens.

(b) 항체 산생 세포의 조제(b) Preparation of antibody-producing cells

공정 (a) 에서 얻어진 항원과, 프로인드의 완전 또는 불완전 아쥬반트, 혹은 칼리명반과 같은 보조제를 혼합하고, 면역원으로서 실험 동물에 면역시킨다. 이 밖에, 항원 발현 세포를 면역원으로서 실험 동물에 면역시키는 방법도 있다. 실험 동물은 공지된 하이브리도마 제조법에서 사용되는 동물을 지장없이 사용할 수 있다. 구체적으로는, 예를 들어 마우스, 래트, 염소, 양, 소, 말 등을 사용할 수 있다. 단, 적출한 항체 산생 세포와 융합시키는 미엘로마 세포의 입수 용이성 등의 관점에서, 마우스 또는 래트를 피면역 동물로 하는 것이 바람직하다.The antigen obtained in step (a) is mixed with an adjuvant such as Freund's complete or incomplete adjuvant or potassium alum, and the test animal is immunized as an immunogen. In addition, there is also a method of immunizing experimental animals with antigen-expressing cells as an immunogen. As experimental animals, animals used in known hybridoma production methods can be used without any problems. Specifically, for example, mice, rats, goats, sheep, cows, horses, etc. can be used. However, from the viewpoint of ease of obtaining myeloma cells to be fused with the extracted antibody-producing cells, it is preferable to use mice or rats as the immunized animal.

또, 실제로 사용하는 마우스 및 래트의 계통에는 특별히 제한은 없고, 마우스의 경우에는, 예를 들어 각 계통 A, AKR, BALB/c, BDP, BA, CE, C3H, 57BL, C57BL, C57L, DBA, FL, HTH, HT1, LP, NZB, NZW, RF, R III, SJL, SWR, WB, 129 등을, 또 래트의 경우에는, 예를 들어, Wistar, Low, Lewis, Sprague, Dawley, ACI, BN, Fischer 등을 사용할 수 있다.In addition, there are no particular restrictions on the mouse and rat strains actually used, and in the case of mice, for example, each strain A, AKR, BALB/c, BDP, BA, CE, C3H, 57BL, C57BL, C57L, DBA, FL, HTH, HT1, LP, NZB, NZW, RF, R III, SJL, SWR, WB, 129, etc., and in the case of rats, for example, Wistar, Low, Lewis, Sprague, Dawley, ACI, BN , Fischer, etc. can be used.

이들 마우스 및 래트는, 예를 들어, 닛폰 클레아 주식회사, 닛폰 찰스·리버 주식회사 등의 실험 동물 사육 판매 업자로부터 입수할 수 있다.These mice and rats can be obtained from laboratory animal breeding and sales companies such as Nippon Clea Co., Ltd. and Nippon Charles River Co., Ltd., for example.

피면역 동물로는, 후술하는 미엘로마 세포와의 융합 적합성을 감안하면, 마우스에서는 BALB/c 계통이, 래트에서는 Wistar 및 Low 계통이 특히 바람직하다.As immunized animals, the BALB/c lineage in mice and the Wistar and Low lines in rats are particularly preferable, considering their compatibility with myeloma cells, which will be described later.

또, 항원의 인간과 마우스에서의 상동성을 고려하여, 자기 항체를 제거하는 생체 기구를 저하시킨 마우스, 즉 자기 면역 질환 마우스를 사용하는 것도 바람직하다.Also, considering the homology of antigens between humans and mice, it is also desirable to use mice with a reduced biological mechanism for removing autoantibodies, that is, mice with autoimmune diseases.

또한, 이들 마우스 또는 래트의 면역시의 주령은, 바람직하게는 5 ∼ 12 주령, 더욱 바람직하게는 6 ∼ 8 주령이다.Additionally, the age of these mice or rats at the time of immunization is preferably 5 to 12 weeks, more preferably 6 to 8 weeks.

HER2 또는 이 재조합체에 의해 동물을 면역시키기 위해서는, 예를 들어, Weir, D. M., Handbook of Experimental Immunology Vol. I. II. III., Blackwell Scientific Publications, Oxford (1987) ; Kabat, E. A. and Mayer, M. M., Experimental Immunochemistry, Charles C Thomas Publisher Springfield, Illinois (1964) 등에 상세하게 기재되어 있는 공지된 방법을 사용할 수 있다.To immunize animals with HER2 or its recombinants, see, e.g., Weir, D. M., Handbook of Experimental Immunology Vol. I. II. III., Blackwell Scientific Publications, Oxford (1987) ; Known methods described in detail in Kabat, E. A. and Mayer, M. M., Experimental Immunochemistry, Charles C Thomas Publisher Springfield, Illinois (1964), etc. can be used.

이들 면역법 중, 본 발명에 있어서 바람직한 방법을 구체적으로 나타내면, 예를 들어 이하와 같다.Among these immunization methods, preferred methods in the present invention are specifically shown, for example, as follows.

즉, 먼저, 항원인 막단백질 획분, 또는 항원을 발현시킨 세포를 동물의 피내 또는 복강 내에 투여한다. 단, 면역 효율을 높이기 위해서는 양자의 병용이 바람직하고, 전반은 피내 투여를 실시하고, 후반 또는 최종회만 복강내 투여를 실시하면, 특히 면역 효율을 높일 수 있다.That is, first, the membrane protein fraction, which is the antigen, or the cells expressing the antigen are administered intradermally or intraperitoneally to the animal. However, in order to increase the immunization efficiency, a combination of both is preferable. If the first half is administered intradermally and only the second half or last dose is administered intraperitoneally, the immunization efficiency can be particularly increased.

항원의 투여 스케줄은, 피면역 동물의 종류, 개체차 등에 따라 상이하지만, 일반적으로는, 항원 투여 횟수 3 ∼ 6 회, 투여 간격 2 ∼ 6 주간이 바람직하고, 투여 횟수 3 ∼ 4 회, 투여 간격 2 ∼ 4 주간이 더욱 바람직하다.The antigen administration schedule varies depending on the type of animal to be immunized, individual differences, etc., but generally, the number of antigen administrations is 3 to 6 times, with an administration interval of 2 to 6 weeks, and the number of administrations is 3 to 4 times, with an administration interval of 2 to 6 weeks. 2 to 4 weeks is more preferable.

또, 항원의 투여량은, 동물의 종류, 개체차 등에 따라 상이하지만, 일반적으로는 0.05 ∼ 5 ㎎, 바람직하게는 0.1 ∼ 0.5 ㎎ 정도로 한다.In addition, the dosage of the antigen varies depending on the type of animal, individual differences, etc., but is generally about 0.05 to 5 mg, preferably about 0.1 to 0.5 mg.

추가 면역은, 이상과 같은 항원 투여의 1 ∼ 6 주 후, 바람직하게는 1 ∼ 4 주 후, 더욱 바람직하게는 1 ∼ 3 주 후에 실시한다. 면역원이 세포인 경우에는, 1 × 106 내지 1 × 107 개의 세포를 사용한다.The booster immunization is performed 1 to 6 weeks after the above-mentioned antigen administration, preferably 1 to 4 weeks later, and more preferably 1 to 3 weeks later. When the immunogen is a cell, 1 × 10 6 to 1 × 10 7 cells are used.

또한, 추가 면역을 실시할 때의 항원 투여량은, 동물의 종류, 크기 등에 따라 상이하지만, 일반적으로, 예를 들어 마우스의 경우에는 0.05 ∼ 5 ㎎, 바람직하게는 0.1 ∼ 0.5 ㎎, 더욱 바람직하게는 0.1 ∼ 0.2 ㎎ 정도로 한다. 면역원이 세포인 경우에는, 1 × 106 내지 1 × 107 개의 세포를 사용한다.In addition, the antigen dosage when performing additional immunization varies depending on the type and size of the animal, but generally, for example, in the case of mice, it is 0.05 to 5 mg, preferably 0.1 to 0.5 mg, more preferably. is set at about 0.1 to 0.2 mg. When the immunogen is a cell, 1 × 10 6 to 1 × 10 7 cells are used.

상기 추가 면역으로부터 1 ∼ 10 일 후, 바람직하게는 2 ∼ 5 일 후, 더욱 바람직하게는 2 ∼ 3 일 후에 피면역 동물로부터 항체 산생 세포를 포함하는 비장 세포 또는 림프구를 무균적으로 취출한다. 그 때에 항체가를 측정하고, 항체가가 충분히 높아진 동물을 항체 산생 세포의 공급원으로서 사용하면, 이후의 조작의 효율을 높일 수 있다.Spleen cells or lymphocytes containing antibody-producing cells are aseptically removed from the immunized animal 1 to 10 days, preferably 2 to 5 days, and more preferably 2 to 3 days after the booster immunization. If the antibody titer is measured at that time and an animal with a sufficiently high antibody titer is used as a source of antibody-producing cells, the efficiency of subsequent operations can be increased.

여기서 사용되는 항체가의 측정법으로는, 예를 들어, RIA 법 또는 ELISA 법을 들 수 있지만 이들 방법에 제한되지 않는다. 본 발명에 있어서의 항체가의 측정은, 예를 들어 ELISA 법에 의하면, 이하에 기재하는 바와 같은 순서에 의해 실시할 수 있다.Examples of the antibody titer measurement method used here include, but are not limited to, the RIA method or the ELISA method. Measurement of the antibody titer in the present invention can be performed, for example, by the ELISA method according to the procedures described below.

먼저, 정제 또는 부분 정제한 항원을 ELISA 용 96 구멍 플레이트 등의 고상 표면에 흡착시키고, 또한 항원이 흡착되어 있지 않은 고상 표면을 항원과 관계없는 단백질, 예를 들어 소 혈청 알부민 (BSA) 에 의해 덮고, 그 표면을 세정 후, 제 1 항체로서 단계 희석시킨 시료 (예를 들어 마우스 혈청) 에 접촉시켜, 상기 항원에 시료 중의 항체를 결합시킨다.First, the purified or partially purified antigen is adsorbed to a solid surface such as a 96 hole plate for ELISA, and the solid surface to which the antigen is not adsorbed is covered with a protein unrelated to the antigen, such as bovine serum albumin (BSA). After washing the surface, it is brought into contact with a sample (for example, mouse serum) that has been serially diluted as a first antibody, and the antibody in the sample is bound to the antigen.

또한 제 2 항체로서 효소 표지된 마우스 항체에 대한 항체를 첨가하여 마우스 항체에 결합시키고, 세정 후 그 효소의 기질을 첨가하여, 기질 분해에 기초하는 발색에 의한 흡광도의 변화 등을 측정함으로써, 항체가를 산출한다.In addition, as a second antibody, an antibody against an enzyme-labeled mouse antibody is added, bound to the mouse antibody, washed, and then the enzyme substrate is added, and the change in absorbance due to color development based on substrate decomposition is measured, so that the antibody Calculate .

피면역 동물의 비장 세포 또는 림프구로부터의 항체 산생 세포의 분리는, 공지된 방법 (예를 들어, Kohler et al., Nature (1975) 256, p.495 ; Kohler et al., Eur. J. Immunol. (1977) 6, p.511 ; Milstein et al., Nature (1977), 266, p.550 ; Walsh, Nature, (1977) 266, p.495) 에 따라 실시할 수 있다. 예를 들어, 비장 세포의 경우에는, 비장을 세절하여 세포를 스테인리스 메시로 여과한 후, 이글 최소 필수 배지 (MEM) 에 부유시켜 항체 산생 세포를 분리하는 일반적 방법을 채용할 수 있다.Isolation of antibody-producing cells from spleen cells or lymphocytes of immunized animals can be accomplished using known methods (e.g., Kohler et al., Nature (1975) 256, p.495; Kohler et al., Eur. J. Immunol (1977) 6, p.511; Milstein et al., Nature (1977), 266, p.550; Walsh, Nature, (1977) 266, p.495). For example, in the case of spleen cells, a general method can be employed in which the spleen is cut into pieces, the cells are filtered through a stainless steel mesh, and then suspended in Eagle's minimal essential medium (MEM) to isolate antibody-producing cells.

(c) 골수종 세포 (이하, 「미엘로마」 라고 한다) 의 조제(c) Preparation of myeloma cells (hereinafter referred to as “myeloma”)

세포 융합에 사용하는 미엘로마 세포에는 특별한 제한은 없고, 공지된 세포주로부터 적절히 선택하여 사용할 수 있다. 단, 융합 세포로부터 하이브리도마를 선택할 때의 편리성을 고려하여, 그 선택 수속이 확립되어 있는 HGPRT (Hypoxanthine-guanine phosphoribosyl transferase) 결손주를 사용하는 것이 바람직하다.There are no particular restrictions on the myeloma cells used for cell fusion, and they can be appropriately selected from known cell lines. However, considering the convenience of selecting hybridomas from fused cells, it is preferable to use HGPRT (Hypoxanthine-guanine phosphoribosyl transferase) deficient strain for which the selection procedure has been established.

즉, 마우스 유래의 X63-Ag8 (X63), NS1-ANS/1 (NS1), P3X63-Ag8.U1 (P3U1), X63-Ag8.653 (X63.653), SP2/0-Ag14 (SP2/0), MPC11-45.6TG1.7 (45.6TG), FO, S149/5XXO, BU.1 등, 래트 유래의 210.RSY3.Ag.1.2.3 (Y3) 등, 인간 유래의 U266AR (SKO-007), GM1500·GTG-A12 (GM1500), UC729-6, LICR-LOW-HMy2 (HMy2), 8226AR/NIP4-1 (NP41) 등이다. 이들 HGPRT 결손주는 예를 들어, ATCC 등으로부터 입수할 수 있다.That is, mouse-derived X63-Ag8 (X63), NS1-ANS/1 (NS1), P3X63-Ag8.U1 (P3U1), ), MPC11-45.6TG1.7 (45.6TG), FO, S149/5XXO, BU.1, etc., 210.RSY3.Ag.1.2.3 (Y3), etc., from rat, U266AR (SKO-007), from human , GM1500·GTG-A12 (GM1500), UC729-6, LICR-LOW-HMy2 (HMy2), 8226AR/NIP4-1 (NP41), etc. These HGPRT deletion strains can be obtained from, for example, ATCC.

이들 세포주는 적당한 배지, 예를 들어 8-아자구아닌 배지 (RPMI-1640 배지에 글루타민, 2-메르캅토에탄올, 겐타마이신, 및 소 태아 혈청 (이하 「FBS」 라고 한다) 을 첨가한 배지에 8-아자구아닌을 첨가한 배지), 이스코브 개변 둘베코 배지 (Iscove's Modified Dulbecco's Medium ; 이하 「IMDM」 이라고 한다), 또는 둘베코 개변 이글 배지 (Dulbecco's Modified Eagle Medium ; 이하 「DMEM」 이라고 한다) 로 계대 배양하지만, 세포 융합의 3 내지 4 일 전에 정상 배지 (예를 들어, 10 ％ FCS 를 포함하는 ASF104 배지 (아지노모토 주식회사 제조)) 로 계대 배양하여, 융합 당일에 2 × 107 이상의 세포수를 확보해 둔다.These cell lines are grown in a suitable medium, for example, 8-azaguanine medium (RPMI-1640 medium supplemented with glutamine, 2-mercaptoethanol, gentamicin, and fetal bovine serum (hereinafter referred to as “FBS”)). Subculture with azaguanine-added medium), Iscove's Modified Dulbecco's Medium (hereinafter referred to as “IMDM”), or Dulbecco's Modified Eagle Medium (hereinafter referred to as “DMEM”) However, 3 to 4 days before cell fusion, subculture is performed with normal medium (for example, ASF104 medium containing 10% FCS (manufactured by Ajinomoto Co., Ltd.)) to ensure a cell number of 2 × 10 7 or more on the day of fusion. .

(d) 세포 융합(d) Cell fusion

항체 산생 세포와 미엘로마 세포의 융합은, 공지된 방법 (Weir, D. M., Handbook of Experimental Immunology Vol. I. II. III., Blackwell Scientific Publications, Oxford (1987) ; Kabat, E. A. and Mayer, M. M., Experimental Immunochemistry, Charles C Thomas Publisher Springfield, Illinois (1964) 등) 에 따라, 세포의 생존률을 극도로 저하시키지 않을 정도의 조건하에서 적절히 실시할 수 있다.Fusion of antibody-producing cells and myeloma cells can be performed using a known method (Weir, D. M., Handbook of Experimental Immunology Vol. I. II. III., Blackwell Scientific Publications, Oxford (1987); Kabat, E. A. and Mayer, M. M., Experimental Immunochemistry, Charles C Thomas Publisher Springfield, Illinois (1964), etc.), it can be appropriately carried out under conditions that do not significantly reduce the survival rate of cells.

그와 같은 방법으로서 예를 들어, 폴리에틸렌글리콜 등의 고농도 폴리머 용액 중에서 항체 산생 세포와 미엘로마 세포를 혼합하는 화학적 방법, 전기적 자극을 이용하는 물리적 방법 등을 사용할 수 있다. 이 중, 상기 화학적 방법의 구체예를 나타내면 이하와 같다.As such a method, for example, a chemical method of mixing antibody-producing cells and myeloma cells in a high-concentration polymer solution such as polyethylene glycol, a physical method using electrical stimulation, etc. can be used. Among these, specific examples of the above chemical methods are as follows.

즉, 고농도 폴리머 용액으로서 폴리에틸렌글리콜을 사용하는 경우에는, 분자량 1500 ∼ 6000, 바람직하게는 2000 ∼ 4000 의 폴리에틸렌글리콜 용액 중에서, 30 ∼ 40 ℃, 바람직하게는 35 ∼ 38 ℃ 의 온도에서 항체 산생 세포와 미엘로마 세포를 1 ∼ 10 분간, 바람직하게는 5 ∼ 8 분간 혼합한다.That is, when polyethylene glycol is used as a high-concentration polymer solution, antibody-producing cells are mixed at a temperature of 30 to 40°C, preferably 35 to 38°C, in a polyethylene glycol solution with a molecular weight of 1,500 to 6,000, preferably 2,000 to 4,000. Myeloma cells are mixed for 1 to 10 minutes, preferably 5 to 8 minutes.

(e) 하이브리도마군의 선택(e) Selection of hybridoma group

상기 세포 융합에 의해 얻어지는 하이브리도마의 선택 방법은 특별히 제한은 없지만, 통상 HAT (히포크산틴·아미노프테린·티미딘) 선택법 (Kohler et al., Nature (1975) 256, p.495 ; Milstein et al., Nature (1977) 266, p.550) 이 사용된다.There are no particular restrictions on the method of selecting hybridomas obtained by the above cell fusion, but usually HAT (hypoxanthine·aminopterin·thymidine) selection method (Kohler et al., Nature (1975) 256, p.495; Milstein et al., Nature (1977) 266, p.550) is used.

이 방법은, 아미노프테린에서 생존할 수 없는 HGPRT 결손주의 미엘로마 세포를 사용하여 하이브리도마를 얻는 경우에 유효하다. 즉, 미융합 세포 및 하이브리도마를 HAT 배지에서 배양함으로써, 아미노프테린에 대한 내성을 갖는 하이브리도마만을 선택적으로 잔존시키고, 또한 증식시킬 수 있다.This method is effective when obtaining hybridomas using HGPRT-deficient myeloma cells that cannot survive on aminopterin. That is, by culturing unfused cells and hybridomas in HAT medium, only hybridomas resistant to aminopterin can selectively remain and proliferate.

(f) 단일 세포 클론으로의 분할 (클로닝)(f) Division into single cell clones (cloning)

하이브리도마의 클로닝법으로는, 예를 들어 메틸셀룰로오스법, 연 (軟) 아가로오스법, 한계 희석법 등의 공지된 방법을 사용할 수 있다 (예를 들어 Barbara, B. M. and Stanley, M. S. : Selected Methods in Cellular Immunology, W. H. Freeman and Company, San Francisco (1980) 참조). 이들 방법 중, 특히 메틸셀룰로오스법 등의 삼차원 배양법이 바람직하다. 예를 들어, 세포 융합에 의해 형성된 하이브리도마군을 ClonaCell-HY Selection Medium D (StemCell Technologies 사 제조 #03804) 등의 메틸셀룰로오스 배지에 현탁하여 배양하고, 형성된 하이브리도마 콜로니를 회수함으로써 모노클론 하이브리도마의 취득이 가능하다. 회수된 각 하이브리도마 콜로니를 배양하고, 얻어진 하이브리도마 배양 상청 중에 안정적으로 항체가가 관찰된 것을 HER2 모노클로날 항체 산생 하이브리도마주로서 선택한다.As a cloning method for hybridomas, known methods such as the methylcellulose method, soft agarose method, and limiting dilution method can be used (e.g., Barbara, B. M. and Stanley, M. S.: Selected Methods in Cellular Immunology, W. H. Freeman and Company, San Francisco (1980). Among these methods, three-dimensional culture methods such as the methylcellulose method are particularly preferable. For example, the hybridoma group formed by cell fusion is suspended and cultured in a methylcellulose medium such as ClonaCell-HY Selection Medium D (#03804 manufactured by StemCell Technologies), and the formed hybridoma colonies are recovered to produce monoclonal hybrids. It is possible to acquire a cutting board. Each recovered hybridoma colony is cultured, and the hybridoma line in which a stable antibody titer is observed in the resulting hybridoma culture supernatant is selected as the hybridoma line producing the HER2 monoclonal antibody.

(g) 하이브리도마의 배양에 의한 모노클로날 항체의 조제(g) Preparation of monoclonal antibodies by culturing hybridomas

이와 같이 하여 선택된 하이브리도마는, 이것을 배양함으로써, 모노클로날 항체를 효율적으로 얻을 수 있지만, 배양에 앞서, 목적으로 하는 모노클로날 항체를 산생하는 하이브리도마를 스크리닝하는 것이 바람직하다.Monoclonal antibodies can be efficiently obtained by culturing the hybridomas selected in this way, but it is preferable to screen hybridomas that produce the desired monoclonal antibody prior to culturing.

이 스크리닝에는 그 자체가 이미 알려진 방법을 채용할 수 있다.For this screening, methods already known per se can be employed.

본 발명에 있어서의 항체가의 측정은, 예를 들어 상기 (b) 의 항목에서 설명한 ELISA 법에 의해 실시할 수 있다.Measurement of antibody titer in the present invention can be performed, for example, by the ELISA method described in item (b) above.

이상의 방법에 의해 얻은 하이브리도마는, 액체 질소 중 또는 -80 ℃ 이하의 냉동고 중에 동결 상태로 보존할 수 있다.Hybridomas obtained by the above method can be stored in a frozen state in liquid nitrogen or in a freezer at -80°C or lower.

클로닝을 완료한 하이브리도마는, 배지를 HT 배지로부터 정상 배지로 바꾸어 배양된다.Hybridomas that have completed cloning are cultured by changing the medium from HT medium to normal medium.

대량 배양은, 대형 배양병을 사용한 회전 배양, 혹은 스피너 배양으로 실시된다. 이 대량 배양에 있어서의 상청으로부터, 겔 여과 등, 당업자에게 주지된 방법을 사용하여 정제함으로써, 본 발명의 단백질에 특이적으로 결합하는 모노클로날 항체를 얻을 수 있다.Mass culture is carried out by rotation culture using large culture bottles or spinner culture. By purifying the supernatant from this mass culture using methods well known to those skilled in the art, such as gel filtration, a monoclonal antibody that specifically binds to the protein of the present invention can be obtained.

또, 동 계통의 마우스 (예를 들어, 상기의 BALB/c), 혹은 Nu/Nu 마우스의 복강 내에 하이브리도마를 주사하고, 그 하이브리도마를 증식시킴으로써, 본 발명의 모노클로날 항체를 대량으로 포함하는 복수를 얻을 수 있다.In addition, by injecting hybridomas into the abdominal cavity of mice of the same strain (e.g., BALB/c above) or Nu/Nu mice and proliferating the hybridomas, a large amount of the monoclonal antibody of the present invention is produced. You can get a plurality that includes .

복강 내에 투여하는 경우에는, 사전 (3 ∼ 7 일 전) 에 2,6,10,14-테트라메틸펜타데칸 (2,6,10,14-tetramethylpentadecane ; 프리스탄) 등의 광물유를 투여하면, 보다 다량의 복수가 얻어진다.When administering intraperitoneally, administering mineral oil such as 2,6,10,14-tetramethylpentadecane (pristane) in advance (3 to 7 days in advance) may improve the effect. A large amount of ascites is obtained.

예를 들어, 하이브리도마와 동 계통의 마우스의 복강 내에 미리 면역 억제제를 주사하여, T 세포를 불활성화시킨 후, 20 일 후에 106 ∼ 107 개의 하이브리도마·클론 세포를, 혈청을 포함하지 않는 배지 중에 부유 (0.5 ㎖) 시켜 복강 내에 투여하고, 통상 복부가 팽만해져, 복수가 고인 시점에서 마우스로부터 복수를 채취한다. 이 방법에 의해, 배양액 중에 비해 약 100 배 이상의 농도의 모노클로날 항체가 얻어진다.For example, after inactivating T cells by preliminarily injecting an immunosuppressant into the abdominal cavity of a mouse of the same strain as the hybridoma, 20 days later, 10 6 to 10 7 hybridoma/clone cells were mixed with serum. It is suspended (0.5 ml) in an untreated medium and administered intraperitoneally, and ascites is usually collected from the mouse when the abdomen becomes distended and ascites accumulates. By this method, monoclonal antibodies can be obtained at a concentration approximately 100 times higher than that in the culture medium.

상기 방법에 의해 얻은 모노클로날 항체는, 예를 들어 Weir, D. M. : Handbook of Experimental Immunology, Vol. I, II, III, Blackwell Scientific Publications, Oxford (1978) 에 기재되어 있는 방법으로 정제할 수 있다.Monoclonal antibodies obtained by the above method are described, for example, in Weir, D. M.: Handbook of Experimental Immunology, Vol. It can be purified by the method described in I, II, III, Blackwell Scientific Publications, Oxford (1978).

이렇게 하여 얻어지는 모노클로날 항체는, HER2 에 대해 높은 항원 특이성을 갖는다. 본 발명의 모노클로날 항체로는, 특별히 제한은 없지만, 마우스 모노클로날 항체 4D5 (ATCC CRL 10463) 를 들 수 있다.The monoclonal antibody obtained in this way has high antigen specificity for HER2. There is no particular limitation on the monoclonal antibody of the present invention, and examples include mouse monoclonal antibody 4D5 (ATCC CRL 10463).

(h) 모노클로날 항체의 검정(h) Assay of monoclonal antibodies

이렇게 하여서 얻어진 모노클로날 항체의 아이소타입 및 서브클래스의 결정은 이하와 같이 실시할 수 있다.The isotype and subclass of the monoclonal antibody thus obtained can be determined as follows.

먼저, 동정법으로는 옥털로니 (Ouchterlony) 법, ELISA 법, 또는 RIA 법을 들 수 있다.First, identification methods include the Ouchterlony method, ELISA method, or RIA method.

옥털로니법은 간편하기는 하지만, 모노클로날 항체의 농도가 낮은 경우에는 농축 조작이 필요하다.Although the Octalony method is simple, a concentration operation is necessary when the concentration of monoclonal antibody is low.

한편, ELISA 법 또는 RIA 법을 사용한 경우에는, 배양 상청을 그대로 항원 흡착 고상과 반응시키고, 또한 제 2 차 항체로서 각종 이뮤노글로블린 아이소타입, 서브클래스에 대응하는 항체를 사용함으로써, 모노클로날 항체의 아이소타입, 서브클래스를 동정하는 것이 가능하다.On the other hand, when using the ELISA method or RIA method, the culture supernatant is reacted with the antigen-adsorbed solid phase as is, and antibodies corresponding to various immunoglobulin isotypes and subclasses are used as secondary antibodies to produce monoclonal antibodies. It is possible to identify isotypes and subclasses of .

또, 더 간편한 방법으로서, 시판되는 동정용의 키트 (예를 들어, 마우스 타이퍼 키트 ; 바이오래드사 제조) 등을 이용할 수도 있다.Additionally, as a simpler method, a commercially available identification kit (e.g., Mouse Typer kit; manufactured by Bio-Rad) can also be used.

또한 단백질의 정량은, 폴린 로리법, 및 280 ㎚ 에 있어서의 흡광도 (1.4 (OD280) = 이뮤노글로블린 1 ㎎/㎖) 로부터 산출하는 방법에 의해 실시할 수 있다.Protein quantification can also be performed by the Pauline Lowry method and a method of calculating the absorbance at 280 nm (1.4 (OD280) = immunoglobulin 1 mg/ml).

또한 (2) 의 (a) 내지 (h) 의 공정을 다시 실시하여 별도로 독립적으로 모노클로날 항체를 취득했을 경우에 있어서도, (g) 의 공정에서 얻어진 항 HER2 항체와 동등한 세포 상해 활성을 갖는 항체를 취득하는 것이 가능하다. 이와 같은 항체의 일례로서, (g) 의 공정에서 얻어진 항 HER2 항체와 동일한 에피토프에 결합하는 항체를 들 수 있다. 새롭게 제조된 모노클로날 항체가, 상기 항 HER2 항체가 결합하는 부분 펩티드 또는 부분 입체 구조에 결합하면, 그 모노클로날 항체가 동일한 에피토프에 결합하는 것으로 판정할 수 있다. 또, 상기 항 HER2 항체의 HER2 에 대한 결합에 대해 그 모노클로날 항체가 경합하는 (즉, 그 모노클로날 항체가, 상기 항 HER2 항체와 HER2 의 결합을 방해하는) 것을 확인함으로써, 구체적인 에피토프의 서열 또는 구조가 결정되어 있지 않아도, 그 모노클로날 항체가 항 HER2 항체와 동일한 에피토프에 결합하는 것으로 판정할 수 있다. 에피토프가 동일하다는 것이 확인되었을 경우, 그 모노클로날 항체가 상기 항 HER2 항체와 동등한 항원 결합능 또는 생물 활성을 가지고 있는 것이 강하게 기대된다.In addition, even when the steps (a) to (h) of (2) are performed again and monoclonal antibodies are obtained separately, the antibody has a cytotoxic activity equivalent to that of the anti-HER2 antibody obtained in the step (g). It is possible to acquire. An example of such an antibody is an antibody that binds to the same epitope as the anti-HER2 antibody obtained in step (g). If the newly prepared monoclonal antibody binds to the partial peptide or partial conformation to which the anti-HER2 antibody binds, it can be determined that the monoclonal antibody binds to the same epitope. In addition, by confirming that the monoclonal antibody competes with the binding of the anti-HER2 antibody to HER2 (i.e., the monoclonal antibody interferes with the binding of the anti-HER2 antibody to HER2), specific epitopes can be identified. Even if the sequence or structure is not determined, it can be determined that the monoclonal antibody binds to the same epitope as the anti-HER2 antibody. If it is confirmed that the epitope is the same, it is strongly expected that the monoclonal antibody will have an antigen-binding ability or biological activity equivalent to that of the anti-HER2 antibody.

(3) 그 밖의 항체(3) Other antibodies

본 발명의 항체에는, 상기 HER2 에 대한 모노클로날 항체에 더하여, 인간에 대한 이종 항원성을 저하시키는 것 등을 목적으로 하여 인위적으로 개변한 유전자 재조합형 항체, 예를 들어, 키메라 (Chimeric) 항체, 인간화 (Humanized) 항체, 인간 항체 등도 포함된다. 이들 항체는, 이미 알려진 방법을 사용하여 제조할 수 있다.The antibodies of the present invention include, in addition to the monoclonal antibodies against HER2, artificially modified genetically recombinant antibodies for the purpose of reducing heterogeneous antigenicity to humans, for example, chimeric antibodies. , Humanized antibodies, human antibodies, etc. are also included. These antibodies can be produced using already known methods.

키메라 항체로는, 항체의 가변 영역과 정상 영역이 서로 이종인 항체, 예를 들어 마우스 또는 래트 유래 항체의 가변 영역을 인간 유래의 정상 영역에 접합한 키메라 항체를 들 수 있다 (Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 81, 6851-6855, (1984) 참조). 본 발명의 키메라 항체로는, 특별히 제한은 없지만, 인간 IgG1 또는 IgG2 의 중사슬 정상 영역을 포함하는 키메라 항체 4D5 를 들 수 있다.Chimeric antibodies include antibodies in which the variable region and constant region of the antibody are heterogeneous, for example, a chimeric antibody in which the variable region of a mouse- or rat-derived antibody is conjugated to a human-derived constant region (Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 81, 6851-6855, (1984)). There is no particular limitation on the chimeric antibody of the present invention, but examples include chimeric antibody 4D5 containing the heavy chain constant region of human IgG1 or IgG2.

인간화 항체로는, 이종 항체의 상보성 결정 영역 (CDR ; complementarity determining region) 만을 인간 유래의 항체에 삽입한 항체 (Nature (1986) 321, p.522-525 참조), CDR 이식법에 의해, 이종 항체의 CDR 의 서열에 더하여, 이종 항체의 일부의 프레임 워크의 아미노산 잔기도 인간 항체에 이식한 항체 (국제 공개 제90/07861호), 유전자 변환 돌연변이 유발 (gene conversion mutagenesis) 스트래터지를 사용하여 인간화된 항체 (미국 특허 제5821337호) 를 들 수 있다.Humanized antibodies include antibodies in which only the complementarity determining region (CDR) of a heterologous antibody is inserted into a human-derived antibody (see Nature (1986) 321, p. 522-525), and the heterogeneous antibody is transformed by CDR transplantation. In addition to the CDR sequence, the amino acid residues of the framework of part of the heterologous antibody were also grafted onto a human antibody (International Publication No. 90/07861), and humanized using a gene conversion mutagenesis strategy. and antibodies (US Patent No. 5821337).

또한, 본 명세서에 있어서의 「수 개」 란, 1 내지 10 개, 1 내지 9 개, 1 내지 8 개, 1 내지 7 개, 1 내지 6 개, 1 내지 5 개, 1 내지 4 개, 1 내지 3 개, 또는 1 혹은 2 개를 의미한다.In addition, “number” in this specification means 1 to 10, 1 to 9, 1 to 8, 1 to 7, 1 to 6, 1 to 5, 1 to 4, and 1 to 8. It means 3, or 1 or 2.

또, 본 명세서에 있어서의 아미노산의 치환으로는 보존적 아미노산 치환이 바람직하다. 보존적 아미노산 치환이란, 아미노산 측사슬에 관련이 있는 아미노산 그룹 내에서 생기는 치환이다. 바람직한 아미노산 그룹은 이하와 같다 : 산성 그룹 = 아스파르트산, 글루탐산 ; 염기성 그룹 = 리신, 아르기닌, 히스티딘 ; 비극성 그룹 = 알라닌, 발린, 류신, 이소류신, 프롤린, 페닐알라닌, 메티오닌, 트립토판 ; 및 비대전극성 패밀리 = 글리신, 아스파라긴, 글루타민, 시스테인, 세린, 트레오닌, 티로신. 다른 바람직한 아미노산 그룹은 다음과 같다 : 지방족 하이드록시 그룹 = 세린 및 트레오닌 ; 아미드 함유 그룹 = 아스파라긴 및 글루타민 ; 지방족 그룹 = 알라닌, 발린, 류신 및 이소류신 ; 그리고 방향족 그룹 = 페닐알라닌, 트립토판 및 티로신. 이러한 아미노산 치환은 원래의 아미노산 서열을 갖는 물질의 특성을 저하시키지 않는 범위에서 실시하는 것이 바람직하다.In addition, conservative amino acid substitution is preferable as amino acid substitution in this specification. Conservative amino acid substitutions are substitutions that occur within a group of amino acids related to the amino acid side chain. Preferred amino acid groups are as follows: acid group = aspartic acid, glutamic acid; Basic group = lysine, arginine, histidine; Non-polar groups = alanine, valine, leucine, isoleucine, proline, phenylalanine, methionine, tryptophan; and nonpolar family = glycine, asparagine, glutamine, cysteine, serine, threonine, tyrosine. Other preferred amino acid groups are: aliphatic hydroxy groups = serine and threonine; Amide containing groups = asparagine and glutamine; Aliphatic groups = alanine, valine, leucine and isoleucine; and aromatic groups = phenylalanine, tryptophan and tyrosine. Such amino acid substitutions are preferably carried out in a range that does not deteriorate the properties of the material having the original amino acid sequence.

상기의 중사슬 아미노산 서열 및 경사슬 아미노산 서열과 높은 상동성을 나타내는 서열을 조합함으로써, 상기의 각 항체와 동등한 생물 활성을 갖는 항체를 선택하는 것이 가능하다. 이 같은 상동성은, 일반적으로는 80 ％ 이상의 상동성이고, 바람직하게는 90 ％ 이상의 상동성이고, 보다 바람직하게는 95 ％ 이상의 상동성이고, 가장 바람직하게는 99 ％ 이상의 상동성이다. 또, 중사슬 또는 경사슬의 아미노산 서열에 1 내지 수 개의 아미노산 잔기가 치환, 결실 또는 부가된 아미노산 서열을 조합하는 것에 의해서도, 상기의 각 항체와 동등한 생물 활성을 갖는 항체를 선택하는 것이 가능하다. 또한, 본 명세서에 있어서의 「상동성」 은 「동일성」 과 동일한 의미로 사용하고 있다.By combining sequences showing high homology with the above heavy chain amino acid sequence and light chain amino acid sequence, it is possible to select an antibody having biological activity equivalent to each of the above antibodies. This homology is generally 80% or more, preferably 90% or more, more preferably 95% or more, and most preferably 99% or more. In addition, it is possible to select an antibody having biological activity equivalent to each of the above antibodies by combining amino acid sequences in which one to several amino acid residues are substituted, deleted, or added to the amino acid sequence of the heavy chain or light chain. In addition, in this specification, “homology” is used with the same meaning as “identity.”

2 종류의 아미노산 서열간의 상동성은, Blast algorithm version 2.2.2 (Altschul, Stephen F., Thomas L. Madden, Alejandro A. Schaeffer, Jinghui Zhang, Zheng Zhang, Webb Miller, and David J. Lipman (1997), 「Gapped BLAST and PSI-BLAST : a new generation of protein database search programs」, Nucleic Acids Res.25 : 3389-3402) 의 디폴트 파라미터를 사용함으로써 결정할 수 있다. Blast algorithm 은, 인터넷으로 www.ncbi.nlm.nih.gov/blast 에 액세스함으로써도 사용할 수 있다.Homology between two types of amino acid sequences was determined using the Blast algorithm version 2.2.2 (Altschul, Stephen F., Thomas L. Madden, Alejandro A. Schaeffer, Jinghui Zhang, Zheng Zhang, Webb Miller, and David J. Lipman (1997), It can be determined by using the default parameters of 「Gapped BLAST and PSI-BLAST: a new generation of protein database search programs」, Nucleic Acids Res.25: 3389-3402). The Blast algorithm can also be used by accessing www.ncbi.nlm.nih.gov/blast on the Internet.

본 발명의 항체로는, 또한 HER2 에 결합하는 인간 항체를 들 수 있다. 항 HER2 인간 항체란, 인간 유래의 아미노산 서열만을 갖는 항 HER2 항체를 의미한다. 항 HER2 인간 항체는, 인간 항체의 중사슬과 경사슬의 유전자를 포함하는 인간 염색체 단편을 갖는 인간 항체 산생 마우스를 사용한 방법 (Tomizuka, K. et al., Nature Genetics (1997) 16, p.133-143 ; Kuroiwa, Y. et. al., Nucl. Acids Res. (1998) 26, p.3447-3448 ; Yoshida, H. et. al., Animal Cell Technology : Basic and Applied Aspects vol. 10, p.69-73 (Kitagawa, Y., Matsuda, T. and Iijima, S. eds.), Kluwer Academic Publishers, 1999 ; Tomizuka, K. et. al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA (2000) 97, p.722-727 등을 참조.) 에 의해 취득할 수 있다.Antibodies of the present invention also include human antibodies that bind to HER2. Anti-HER2 human antibody refers to an anti-HER2 antibody having only human-derived amino acid sequences. The anti-HER2 human antibody is a method using a human antibody-producing mouse having a human chromosome fragment containing the heavy chain and light chain genes of a human antibody (Tomizuka, K. et al., Nature Genetics (1997) 16, p.133 -143 ; Kuroiwa, Y. et. al., Nucl. Acids Res. (1998) 26, p.3447-3448 ; Yoshida, H. et. al., Animal Cell Technology: Basic and Applied Aspects vol. 10, p .69-73 (Kitagawa, Y., Matsuda, T. and Iijima, S. eds.), Kluwer Academic Publishers, 1999; Tomizuka, K. et. al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA (2000) 97, p.722-727, etc.) can be obtained by .

이와 같은 인간 항체 산생 마우스는, 구체적으로는, 내재성 면역 글로블린 중사슬 및 경사슬의 유전자좌 (座) 가 파괴되고, 대신 효모 인공 염색체 (Yeast artificial chromosome, YAC) 벡터 등을 통해서 인간 면역 글로블린 중사슬 및 경사슬의 유전자좌가 도입된 유전자 재조합 동물로서, 녹아웃 동물 및 트랜스제닉 동물의 제조 및 이들 동물끼리를 교배시킴으로써 만들어 낼 수 있다.Specifically, in such human antibody-producing mice, the loci of the endogenous immunoglobulin heavy and light chains are destroyed, and instead, human immunoglobulin heavy chains are produced through yeast artificial chromosome (YAC) vectors, etc. and genetically recombinant animals into which a light chain locus has been introduced, which can be produced by producing knockout animals and transgenic animals and crossing these animals with each other.

또, 유전자 재조합 기술에 의해, 그와 같은 인간 항체의 중사슬 및 경사슬의 각각을 코드하는 cDNA, 바람직하게는 그 cDNA 를 포함하는 벡터에 의해 진핵 세포를 형질 전환하고, 유전자 재조합 인간 모노클로날 항체를 산생하는 형질 전환 세포를 배양함으로써, 이 항체를 배양 상청 중에서 얻을 수도 있다.Furthermore, by genetic recombination technology, a eukaryotic cell is transformed with a vector containing cDNA, preferably the cDNA, encoding each of the heavy chain and light chain of such a human antibody, and a genetically recombinant human monoclonal is produced. This antibody can also be obtained from the culture supernatant by culturing transformed cells that produce antibodies.

여기서, 숙주로는 예를 들어 진핵 세포, 바람직하게는 CHO 세포, 림프구나 미엘로마 등의 포유 동물 세포를 사용할 수 있다.Here, for example, eukaryotic cells, preferably mammalian cells such as CHO cells, lymphocytes or myeloma, can be used as the host.

또, 인간 항체 라이브러리에서 선별한 파지 디스플레이 유래의 인간 항체를 취득하는 방법 (Wormstone, I. M. et. al, Investigative Ophthalmology ＆ Visual Science. (2002) 43(7), p.2301-2308 ; Carmen, S. et. al., Briefings in Functional Genomics and Proteomics (2002), 1(2), p.189-203 ; Siriwardena, D. et. al., Ophthalmology (2002) 109(3), p.427-431 등 참조.) 도 알려져 있다.In addition, a method of acquiring human antibodies derived from phage display selected from a human antibody library (Wormstone, I. M. et. al, Investigative Ophthalmology & Visual Science. (2002) 43(7), p.2301-2308; Carmen, S. et.al., Briefings in Functional Genomics and Proteomics (2002), 1(2), p.189-203 ; Siriwardena, D. et.al., Ophthalmology (2002) 109(3), p.427-431, etc. ref.) is also known.

예를 들어, 인간 항체의 가변 영역을 1 본쇄 항체 (scFv) 로서 파지 표면에 발현시키고, 항원에 결합하는 파지를 선택하는 파지 디스플레이법 (Nature Biotechnology (2005), 23, (9), p.1105-1116) 을 사용할 수 있다.For example, a phage display method in which the variable region of a human antibody is expressed as a single-chain antibody (scFv) on the surface of a phage and the phage that binds to the antigen is selected (Nature Biotechnology (2005), 23, (9), p.1105 -1116) can be used.

항원에 결합함으로써 선택된 파지의 유전자를 해석함으로써, 항원에 결합하는 인간 항체의 가변 영역을 코드하는 DNA 서열을 결정할 수 있다.By analyzing the genes of the phage selected by binding to the antigen, the DNA sequence encoding the variable region of the human antibody that binds to the antigen can be determined.

항원에 결합하는 scFv 의 DNA 서열이 분명해지면, 당해 서열을 갖는 발현 벡터를 제조하고, 적당한 숙주에 도입하여 발현시킴으로써 인간 항체를 취득할 수 있다 (국제 공개 제92/01047호, 동 92/20791호, 동 93/06213호, 동 93/11236호, 동 93/19172호, 동 95/01438호, 동 95/15388호 ; Annu. Rev. Immunol (1994) 12, p.433-455 ; Nature Biotechnology (2005) 23(9), p.1105-1116).Once the DNA sequence of the scFv that binds to the antigen is known, human antibodies can be obtained by preparing an expression vector having the sequence and introducing it into an appropriate host and expressing it (International Publication No. 92/01047, 92/20791). , No. 93/06213, No. 93/11236, No. 93/19172, No. 95/01438, No. 95/15388; Annu. Rev. Immunol (1994) 12, p.433-455; Nature Biotechnology ( 2005) 23(9), p.1105-1116).

항체의 성질을 비교할 때의 다른 지표의 일례로는, 항체의 안정성을 들 수 있다. 시차 주사 칼로리메트리 (DSC) 는, 단백의 상대적 구조 안정성의 좋은 지표가 되는 열 변성 중점 (Tm) 을 재빠르게, 또 정확하게 측정할 수 있는 장치이다. DSC 를 사용하여 Tm 값을 측정하고, 그 값을 비교함으로써, 열 안정성의 차이를 비교할 수 있다. 항체의 보존 안정성은, 항체의 열 안정성과 어느 정도의 상관을 나타내는 것이 알려져 있으며 (Lori Burton, et. al., Pharmaceutical Development and Technology (2007) 12, p.265-273), 열 안정성을 지표로, 바람직한 항체를 선발할 수 있다. 항체를 선발하기 위한 다른 지표로는, 적절한 숙주 세포에 있어서의 수량 (收量) 이 높은 것, 및 수용액 중에서의 응집성이 낮은 것을 들 수 있다. 예를 들어 수량이 가장 높은 항체가 가장 높은 열 안정성을 나타낸다고는 할 수 없기 때문에, 이상에 서술한 지표에 기초하여 종합적으로 판단하여, 인간에 대한 투여에 가장 적합한 항체를 선발할 필요가 있다.An example of another index when comparing the properties of antibodies is the stability of the antibodies. Differential scanning calorimetry (DSC) is a device that can quickly and accurately measure the thermal denaturation midpoint (Tm), which is a good indicator of the relative structural stability of proteins. By measuring Tm values using DSC and comparing the values, differences in thermal stability can be compared. It is known that the storage stability of an antibody is correlated to some extent with the thermal stability of the antibody (Lori Burton, et. al., Pharmaceutical Development and Technology (2007) 12, p.265-273), and thermal stability is used as an indicator. , a desirable antibody can be selected. Other indicators for selecting antibodies include high yield in appropriate host cells and low aggregation in aqueous solution. For example, since it cannot be said that the antibody with the highest yield shows the highest thermal stability, it is necessary to make a comprehensive judgment based on the indicators described above to select the antibody most suitable for administration to humans.

본 발명에서 사용되는 항체에는 항체의 수식체도 포함된다. 당해 수식체란, 본 발명의 항체에 화학적 또는 생물학적인 수식이 실시되어 이루어지는 것을 의미한다. 화학적인 수식체에는, 아미노산 골격에 대한 화학 부분의 결합, N-결합 또는 O-결합 탄수화물 사슬에 대한 화학 부분의 결합을 갖는 화학 수식체 등이 포함된다. 생물학적인 수식체에는, 번역 후 수식 (예를 들어, N-결합 또는 O-결합형 당 사슬의 부가, N 말단 또는 C 말단의 프로세싱, 탈아미드화, 아스파르트산의 이성화, 메티오닌의 산화 등) 된 것, 원핵 생물 숙주 세포를 사용하여 발현시킴으로써 N 말단에 메티오닌 잔기가 부가된 것 등이 포함된다. 또, 본 발명의 항체 또는 항원의 검출 또는 단리를 가능하게 하기 위해서 표지된 것, 예를 들어, 효소 표지체, 형광 표지체, 어피니티 표지체도 이러한 수식체의 의미에 포함된다. 이와 같은 본 발명의 항체의 수식체는, 항체의 안정성 및 혈중 체류성의 개선, 항원성의 저감, 항체 또는 항원의 검출 또는 단리 등에 유용하다.Antibodies used in the present invention also include modified antibodies. The modifier means that the antibody of the present invention is subjected to chemical or biological modification. Chemical modifications include those having a chemical moiety bonded to an amino acid skeleton, a chemical moiety bonded to an N-linked or O-linked carbohydrate chain, and the like. Biological modifications include post-translational modifications (e.g., addition of N-linked or O-linked sugar chains, N-terminal or C-terminal processing, deamidation, isomerization of aspartic acid, oxidation of methionine, etc.). These include those in which a methionine residue is added to the N terminus by expression using a prokaryotic host cell. Additionally, those labeled to enable detection or isolation of the antibody or antigen of the present invention, for example, enzyme labels, fluorescent labels, and affinity labels, are also included in the meaning of these modifiers. Such modified antibodies of the present invention are useful for improving the stability and blood retention of antibodies, reducing antigenicity, and detecting or isolating antibodies or antigens.

또, 본 발명에 있어서 사용되는 항체에 결합하고 있는 당 사슬 수식을 조절하는 것 (글리코실화, 탈푸코오스화 등) 에 의해, 항체 의존성 세포 상해 활성을 증강시키는 것이 가능하다. 항체의 당 사슬 수식의 조절 기술로는, 국제 공개 제99/54342호, 동 00/61739호, 동 02/31140호 등이 알려져 있지만, 이들에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 항체에는 당해 당 사슬 수식이 조절된 항체도 포함된다.Additionally, it is possible to enhance the antibody-dependent cytotoxic activity by adjusting the modification of the sugar chain bound to the antibody used in the present invention (glycosylation, defucosylation, etc.). Technologies for controlling the sugar chain modification of antibodies include International Publication Nos. 99/54342, 00/61739, and 02/31140, but are not limited to these. The antibodies of the present invention also include antibodies in which the sugar chain modification has been adjusted.

항체 유전자를 일단 단리한 후, 적당한 숙주에 도입하여 항체를 제조하는 경우에는, 적당한 숙주와 발현 벡터의 조합을 사용할 수 있다. 항체 유전자의 구체예로는, 본 명세서에 기재된 항체의 중사슬 서열을 코드하는 유전자, 및 경사슬 서열을 코드하는 유전자를 조합한 것을 들 수 있다. 숙주 세포를 형질 전환할 때에는, 중사슬 서열 유전자와 경사슬 서열 유전자는, 동일한 발현 벡터에 삽입되어 있는 것이 가능하고, 또 다른 발현 벡터에 삽입되어 있는 것도 가능하다.When producing an antibody by first isolating the antibody gene and introducing it into an appropriate host, a combination of an appropriate host and an expression vector can be used. Specific examples of antibody genes include a combination of a gene encoding the heavy chain sequence of the antibody described herein and a gene encoding the light chain sequence. When transforming a host cell, the heavy chain sequence gene and the light chain sequence gene may be inserted into the same expression vector or may be inserted into another expression vector.

진핵 세포를 숙주로서 사용하는 경우, 동물 세포, 식물 세포, 진핵 미생물을 사용할 수 있다. 특히 동물 세포로는, 포유류 세포, 예를 들어, 원숭이의 세포인 COS 세포 (Gluzman, Y. Cell (1981) 23, p.175-182, ATCC CRL-1650), 마우스 섬유아세포 NIH3T3 (ATCC No.CRL-1658) 이나 차이니즈·햄스터 난소 세포 (CHO 세포, ATCC CCL-61) 의 디하이드로 엽산 환원 효소 결손주 (Urlaub, G. and Chasin, L. A. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. (1980) 77, p.4126-4220) 를 들 수 있다.When eukaryotic cells are used as the host, animal cells, plant cells, or eukaryotic microorganisms can be used. In particular, animal cells include mammalian cells, such as monkey COS cells (Gluzman, Y. Cell (1981) 23, p.175-182, ATCC CRL-1650), mouse fibroblasts NIH3T3 (ATCC No. CRL-1658) or a dihydrofolate reductase-deficient strain of Chinese/hamster ovary cells (CHO cells, ATCC CCL-61) (Urlaub, G. and Chasin, L.A. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. (1980) 77, p.4126-4220).

원핵 세포를 사용하는 경우에는, 예를 들어, 대장균, 고초균을 들 수 있다.When using prokaryotic cells, examples include Escherichia coli and Bacillus subtilis.

이들 세포에 목적으로 하는 항체 유전자를 형질 전환에 의해 도입하고, 형질 전환된 세포를 in vitro 에서 배양함으로써 항체가 얻어진다. 당해 배양에 있어서는 항체의 서열에 의해 수량이 상이한 경우가 있고, 동등한 결합 활성을 갖는 항체 중에서 수량을 지표로 의약으로서의 생산이 용이한 것을 선별하는 것이 가능하다. 따라서, 본 발명의 항체에는, 상기 형질 전환된 숙주 세포를 배양하는 공정, 및 당해 공정에서 얻어진 배양물로부터 목적으로 하는 항체 또는 당해 항체의 기능성 단편을 채취하는 공정을 포함하는 것을 특징으로 하는 당해 항체의 제조 방법에 의해 얻어지는 항체도 포함된다.Antibodies are obtained by introducing the target antibody gene into these cells through transformation and culturing the transformed cells in vitro. In this culture, the quantity may differ depending on the sequence of the antibody, and among antibodies with equivalent binding activity, it is possible to select those that are easy to produce as a medicine using the quantity as an indicator. Therefore, the antibody of the present invention includes a step of culturing the transformed host cell, and a step of collecting the target antibody or a functional fragment of the antibody from the culture obtained in the step. Antibodies obtained by the production method are also included.

또한, 포유류 배양 세포에서 생산되는 항체에서는, 그 중사슬의 카르복실 말단의 리신 잔기가 결실되는 것이 알려져 있고 (Journal of Chromatography A, 705 : 129-134 (1995)), 또, 동일하게 중사슬 카르복실 말단의 글리신, 리신의 2 아미노산 잔기가 결실되고, 새롭게 카르복실 말단에 위치하는 프롤린 잔기가 아미드화되는 것이 알려져 있다 (Analytical Biochemistry, 360 : 75-83 (2007)). 그러나, 이들 중사슬 서열의 결실 및 수식은, 항체의 항원 결합능 및 이펙터 기능 (보체의 활성화나 항체 의존성 세포 장해 작용 등) 에는 영향을 미치지 않는다. 따라서, 본 발명에 관련된 항체에는, 당해 수식을 받은 항체 및 당해 항체의 기능성 단편도 포함되고, 중사슬 카르복실 말단에 있어서 1 또는 2 의 아미노산이 결실된 결실체, 및 아미드화된 당해 결실체 (예를 들어, 카르복실 말단 부위의 프롤린 잔기가 아미드화된 중사슬) 등도 포함된다. 단, 항원 결합능 및 이펙터 기능이 유지되고 있는 한, 본 발명에 관련된 항체의 중사슬의 카르복실 말단의 결실체는 상기의 종류에 한정되지 않는다. 본 발명에 관련된 항체를 구성하는 2 개의 중사슬은, 완전 길이 및 상기의 결실체로 이루어지는 군에서 선택되는 중사슬 중 어느 1 종이어도 되고, 어느 2 종을 조합한 것이어도 된다. 각 결실체의 양비는 본 발명에 관련된 항체를 산생하는 포유류 배양 세포의 종류 및 배양 조건에 영향을 받을 수 있지만, 본 발명에 관련된 항체는, 바람직하게는 2 개의 중사슬의 쌍방에서 카르복실 말단의 하나의 아미노산 잔기가 결실되어 있는 것을 들 수 있다.In addition, it is known that in antibodies produced in mammalian cultured cells, the lysine residue at the carboxyl terminus of the heavy chain is deleted (Journal of Chromatography A, 705: 129-134 (1995)), and similarly, the heavy chain carboxyl residue is deleted. It is known that the two amino acid residues of glycine and lysine at the boxyl terminal are deleted, and the proline residue newly located at the carboxyl terminal is amidated (Analytical Biochemistry, 360: 75-83 (2007)). However, deletion and modification of these heavy chain sequences do not affect the antigen-binding ability or effector function (activation of complement or antibody-dependent cytotoxicity, etc.) of the antibody. Therefore, the antibodies related to the present invention also include antibodies that have received the above-mentioned modification and functional fragments of the above-mentioned antibodies, and include deletion forms in which 1 or 2 amino acids are deleted from the heavy chain carboxyl terminus, and amidated deletion forms ( For example, heavy chains in which the proline residue at the carboxyl terminal is amidated) are also included. However, as long as the antigen-binding ability and effector function are maintained, the carboxyl terminal deletion product of the heavy chain of the antibody related to the present invention is not limited to the above types. The two heavy chains constituting the antibody related to the present invention may be any one type of heavy chain selected from the group consisting of full-length and the above-mentioned deletion product, or may be a combination of any two types. Although the amount ratio of each deletion product may be influenced by the type and culture conditions of the mammalian culture cell producing the antibody related to the present invention, the antibody related to the present invention preferably has carboxyl terminals at both of the two heavy chains. One example is one in which one amino acid residue is deleted.

본 발명에 있어서 사용되는 항체의 아이소타입으로는, 예를 들어 IgG (IgG1, IgG2, IgG3, IgG4) 등을 들 수 있지만, 바람직하게는 IgG1 또는 IgG2 를 들 수 있다.Examples of the isotype of the antibody used in the present invention include IgG (IgG1, IgG2, IgG3, IgG4), and preferably IgG1 or IgG2.

항체의 생물 활성으로는, 일반적으로는 항원 결합 활성, 항원과 결합함으로써 그 항원을 발현하는 세포에 내재화되는 활성, 항원의 활성을 중화시키는 활성, 항원의 활성을 증강시키는 활성, 항체 의존성 세포 상해 (ADCC) 활성, 보체 의존성 세포 상해 (CDC) 활성 및 항체 의존성 세포 매개 식작용 (ADCP) 을 들 수 있지만, 본 발명에 관련된 항체가 갖는 생물 활성은, HER2 에 대한 결합 활성이고, 바람직하게는 HER2 와 결합함으로써 HER2 발현 세포에 내재화되는 활성이다. 또한 본 발명의 항체는, 세포 내재화 활성에 더하여, ADCC 활성, CDC 활성 및/또는 ADCP 활성을 겸비하고 있어도 된다.The biological activities of antibodies generally include antigen-binding activity, the activity of being internalized by cells expressing the antigen by binding to the antigen, the activity of neutralizing the activity of the antigen, the activity of enhancing the activity of the antigen, and antibody-dependent cell injury ( ADCC) activity, complement-dependent cell damage (CDC) activity, and antibody-dependent cell-mediated phagocytosis (ADCP), but the biological activity possessed by the antibody related to the present invention is the binding activity to HER2, and preferably binds to HER2. This activity is internalized in HER2-expressing cells. Additionally, the antibody of the present invention may have ADCC activity, CDC activity, and/or ADCP activity in addition to cell internalization activity.

얻어진 항체는 균일해질까지 정제할 수 있다. 항체의 분리, 정제는 통상적인 단백질에서 사용되고 있는 분리, 정제 방법을 사용하면 된다. 예를 들어 칼럼 크로마토그래피, 필터 여과, 한외 여과, 염석, 투석, 조제용 폴리아크릴아미드 겔 전기 영동, 등전점 전기 영동 등을 적절히 선택, 조합하면, 항체를 분리, 정제할 수 있다 (Strategies for Protein Purification and Characterization : A Laboratory Course Manual, Daniel R. Marshak et al. eds., Cold Spring Harbor Laboratory Press (1996) ; Antibodies : A Laboratory Manual. Ed Harlow and David Lane, Cold Spring Harbor Laboratory (1988)) 가 이들에 한정되는 것은 아니다.The obtained antibody can be purified until it becomes homogeneous. Antibodies can be separated and purified using conventional separation and purification methods used for proteins. For example, antibodies can be separated and purified by appropriately selecting and combining column chromatography, filter filtration, ultrafiltration, salting out, dialysis, preparative polyacrylamide gel electrophoresis, and isoelectric point electrophoresis (Strategies for Protein Purification) and Characterization: A Laboratory Course Manual, Daniel R. Marshak et al. eds., Cold Spring Harbor Laboratory Press (1996); Antibodies: A Laboratory Manual. Ed Harlow and David Lane, Cold Spring Harbor Laboratory (1988)). It is not limited.

크로마토그래피로는, 어피니티 크로마토그래피, 이온 교환 크로마토그래피, 소수성 크로마토그래피, 겔 여과 크로마토그래피, 역상 크로마토그래피, 흡착 크로마토그래피 등을 들 수 있다.Chromatography includes affinity chromatography, ion exchange chromatography, hydrophobic chromatography, gel filtration chromatography, reverse phase chromatography, and adsorption chromatography.

이들 크로마토그래피는, HPLC 나 FPLC 등의 액체 크로마토그래피를 사용하여 실시할 수 있다.These chromatographies can be performed using liquid chromatography such as HPLC or FPLC.

어피니티 크로마토그래피에 사용하는 칼럼으로는, 프로테인 A 칼럼, 프로테인 G 칼럼을 들 수 있다. 예를 들어 프로테인 A 칼럼을 사용한 칼럼으로서, Hyper D, POROS, Sepharose F. F. (파마시아 주식회사) 등을 들 수 있다.Columns used in affinity chromatography include Protein A column and Protein G column. For example, columns using Protein A columns include Hyper D, POROS, Sepharose F.F. (Pharmacia Co., Ltd.), etc.

또 항원을 고정화시킨 담체를 사용하여, 항원에 대한 결합성을 이용하여 항체를 정제할 수도 있다.Additionally, antibodies can be purified by using a carrier on which an antigen is immobilized, taking advantage of their binding properties to the antigen.

[항종양성 화합물][Anti-tumor compounds]

본 발명에서 사용되는 항 HER2 항체-약물 콘주게이트에 결합되어 있는 항종양성 화합물에 대해 서술한다. 이러한 항종양성 화합물은, 캠토테신 유도체인 엑사테칸 (IUPAC 명 : (1S,9S)-1-아미노-9-에틸-5-플루오로-1,2,3,9,12,15-헥사하이드로-9-하이드록시-4-메틸-10H,13H-벤조[de]피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-10,13-디온, (화학명 : (1S,9S)-1-아미노-9-에틸-5-플루오로-2,3-디하이드로-9-하이드록시-4-메틸-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-10,13(9H,15H)-디온으로서 나타낼 수도 있다)) 이다. 엑사테칸은, 다음 식 :The anti-tumor compound bound to the anti-HER2 antibody-drug conjugate used in the present invention is described. This antitumor compound is exatecan (IUPAC name: (1S,9S)-1-amino-9-ethyl-5-fluoro-1,2,3,9,12,15-hexahydro), a camptothecin derivative. -9-hydroxy-4-methyl-10H,13H-benzo[de]pyrano[3',4':6,7]indolizino[1,2-b]quinoline-10,13-dione, ( Chemical Name: (1S,9S)-1-Amino-9-ethyl-5-fluoro-2,3-dihydro-9-hydroxy-4-methyl-1H,12H-benzo[de]pyrano[3' ,4':6,7]indolizino[1,2-b]quinoline-10,13(9H,15H)-dione)). Exatecan has the following formula:

[화학식 23][Formula 23]

Figure pat00023
Figure pat00023

으로 나타내는 화합물이다.It is a compound represented by .

엑사테칸은 캠토테신 구조를 가지므로, 산성 수성 매체 중 (예를 들어 pH3 정도) 에서는 락톤 고리가 형성된 구조 (폐환체) 로 평형이 치우치고, 한편, 염기성 수성 매체 중 (예를 들어 pH10 정도) 에서는 락톤 고리가 개환된 구조 (개환체) 로 평형이 치우치는 것이 알려져 있다. 이와 같은 폐환 구조 및 개환 구조에 대응하는 엑사테칸 잔기를 도입한 항체-약물 콘주게이트는, 모두 본 발명에서 사용되는 항체-약물 콘주게이트의 범위에 포함되는 것은 말할 필요도 없다.Since exatecan has a camptothecin structure, the equilibrium is biased towards the structure in which the lactone ring is formed (closed body) in an acidic aqueous medium (e.g., around pH 3), while in a basic aqueous medium (e.g., around pH 10). It is known that the equilibrium is biased toward a structure in which the lactone ring is ring-opened (ring-opened product). It goes without saying that all antibody-drug conjugates into which exatecan residues corresponding to such ring-closed and ring-opened structures are introduced are included in the scope of antibody-drug conjugates used in the present invention.

[링커 구조][Linker structure]

본 발명에서 사용되는 항 HER2 항체-약물 콘주게이트에 있어서 항종양성 화합물을 항 HER2 항체에 결합시키는 링커 구조에 대해 서술한다. 당해 링커는, 다음 식 :The linker structure that binds the anti-tumor compound to the anti-HER2 antibody in the anti-HER2 antibody-drug conjugate used in the present invention is described. The linker has the following formula:

-(숙신이미드-3-일-N)-CH2CH2CH2CH2CH2-C(=O)-GGFG-NH-CH2-O-CH2-C(=O)--(succinimide-3-yl-N)-CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 -C(=O)-GGFG-NH-CH 2 -O-CH 2 -C(=O)-

(식 중,(During the ceremony,

-(숙신이미드-3-일-N)- 은 다음 식 :-(succinimide-3-yl-N)- has the following formula:

[화학식 24][Formula 24]

Figure pat00024
Figure pat00024

으로 나타내는 구조이고, 이것의 3 위치에서 항 HER2 항체와 티오에테르 결합에 의해 결합하고, 1 위치의 질소 원자 상에서 이것을 포함하는 링커 구조 내의 메틸렌기와 결합하고,It is a structure represented by, and binds to the anti-HER2 antibody at the 3rd position through a thioether bond, and binds to the methylene group in the linker structure containing this on the nitrogen atom at the 1st position,

-GGFG- 는, -Gly-Gly-Phe-Gly- 의 테트라펩티드 잔기를 나타낸다)-GGFG- represents the tetrapeptide residue of -Gly-Gly-Phe-Gly-)

으로 나타낼 수 있다.It can be expressed as

[종양 세포 내에서 방출되는 화합물][Compounds released within tumor cells]

본 발명에 있어서 사용되는 항 HER2 항체-약물 콘주게이트는, 종양 세포 내로 이동한 후에는 링커 부분이 절단되고, 식 :The anti-HER2 antibody-drug conjugate used in the present invention is cleaved at the linker portion after moving into tumor cells, and has the formula:

NH2-CH2-O-CH2-C(=O)-(NH-DX)NH 2 -CH 2 -O-CH 2 -C(=O)-(NH-DX)

으로 나타내는 구조의 약물 유도체가 유리되어도 된다.A drug derivative having the structure shown may be released.

상기 약물 유도체의 동 분자 내에 있는 아미날 구조는 불안정하기 때문에, 또한 자기 분해되어, 식 :Since the aminal structure in the copper molecule of the drug derivative is unstable, it also undergoes self-decomposition, resulting in the formula:

HO-CH2-C(=O)-(NH-DX)HO-CH 2 -C(=O)-(NH-DX)

으로 나타내는 화합물이 유리되는 것이 확인되고 있다.It has been confirmed that the compound represented by is liberated.

상기 화합물은, 다음 식 :The compound has the following formula:

[화학식 25][Formula 25]

Figure pat00025
Figure pat00025

으로 나타낼 수 있다 (이하, 본 발명에 있어서, 「화합물 1」 이라고 부르는 경우도 있다).(Hereinafter, in the present invention, it may be referred to as “Compound 1”).

화합물 1 은, 본 발명에서 사용되는 항체-약물 콘주게이트가 갖는 항종양 활성의 본체인 것으로 생각되고, 토포이소메라아제 I 저해 작용을 갖는 것이 확인되고 있다 (Ogitani Y. et al., Clinical Cancer Research, 2016, Oct 15 ; 22(20) : 5097-5108, Epub 2016 Mar 29).Compound 1 is believed to be the basis of the antitumor activity of the antibody-drug conjugate used in the present invention, and has been confirmed to have a topoisomerase I inhibitory effect (Ogitani Y. et al., Clinical Cancer Research , 2016, Oct 15; 22(20): 5097-5108, Epub 2016 Mar 29).

또한, 본 발명에서 사용되는 항체-약물 콘주게이트는, 바이스탠더 효과를 갖는 것도 알려져 있다 (Ogitani Y. et al., Cancer Science (2016) 107, 1039-1046). 이 바이스탠더 효과는, 본 발명에서 사용되는 항체-약물 콘주게이트가 HER2 발현 암 세포에 내재화된 후, 방출된 화합물 1 이, HER2 를 발현하고 있지 않은 근방의 암 세포에 대해서도 항종양 효과를 미침으로써 발휘된다.In addition, the antibody-drug conjugate used in the present invention is also known to have a bystander effect (Ogitani Y. et al., Cancer Science (2016) 107, 1039-1046). This bystander effect is that after the antibody-drug conjugate used in the present invention is internalized into HER2-expressing cancer cells, the released Compound 1 has an anti-tumor effect even on nearby cancer cells that do not express HER2. It is exerted as

[제조 방법][Manufacturing method]

본 발명에서 사용되는 항체-약물 콘주게이트는, 티올기 (또는 술프히드릴기라고도 한다) 를 갖는 항 HER2 항체에, 다음의 화합물 (이하, 본 발명에 있어서 「화합물 2」 라고도 부른다) :The antibody-drug conjugate used in the present invention is an anti-HER2 antibody having a thiol group (also referred to as a sulfhydryl group) and the following compound (hereinafter also referred to as “Compound 2” in the present invention):

(말레이미드-N-일)-CH2CH2CH2CH2CH2-C(=O)-GGFG-NH-CH2-O-CH2-C(=O)-(NH-DX)(maleimide-N-yl)-CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 -C(=O)-GGFG-NH-CH 2 -O-CH 2 -C(=O)-(NH-DX)

(식 중, (말레이미드-N-일)- 은, 다음 식 :(of the formula, (maleimide-N-yl)-is, in the following formula:

[화학식 26][Formula 26]

Figure pat00026
Figure pat00026

으로 나타내는 질소 원자가 결합 부위인 기이고,The nitrogen atom represented by is a group that is a binding site,

-(NH-DX) 는, 다음 식 :-(NH-DX) is the following formula:

[화학식 27][Formula 27]

Figure pat00027
Figure pat00027

으로 나타내는 1 위치의 아미노기의 질소 원자가 결합 부위로 되어 있는 기이고,It is a group in which the nitrogen atom of the amino group at the 1st position is the binding site,

-GGFG- 는, -Gly-Gly-Phe-Gly- 의 테트라펩티드 잔기를 나타낸다)-GGFG- represents the tetrapeptide residue of -Gly-Gly-Phe-Gly-)

을 반응시킴으로써 제조할 수 있다.It can be manufactured by reacting.

화합물 2 는, 국제 공개 제2015/115091호의 실시예 26, 32, 및 33 에 기재된 제조 방법 등을 참고로 제조할 수 있다. 화합물 2 는, N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(2-{[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노}-2-옥소에톡시)메틸]글리신아미드라는 화학명으로 나타낼 수 있다.Compound 2 can be produced by referring to the production methods described in Examples 26, 32, and 33 of International Publication No. 2015/115091. Compound 2 is N-[6-(2,5-dioxo-2,5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl)hexanoyl]glycylglycyl-L-phenylalanyl-N-[( 2-{[(1S,9S)-9-ethyl-5-fluoro-9-hydroxy-4-methyl-10,13-dioxo-2,3,9,10,13,15-hexahydro- 1H,12H-benzo[de]pyrano[3',4':6,7]indolizino[1,2-b]quinolin-1-yl]amino}-2-oxoethoxy)methyl]glycinamide It can be expressed by the chemical name .

술프히드릴기를 갖는 항 HER2 항체는, 당업자가 주지된 방법으로 얻을 수 있다 (Hermanson, G. T, Bioconjugate Techniques, pp.56-136, pp.456-493, Academic Press (1996)). 예를 들어, 트리스(2-카르복시에틸)포스핀염산염 (TCEP) 등의 환원제를 항 HER2 항체에 작용시켜 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원하여 술프히드릴기를 생성시키는 ; 등의 방법을 들 수 있지만 이들에 한정되지 않는다.Anti-HER2 antibodies having a sulfhydryl group can be obtained by methods well known to those skilled in the art (Hermanson, G. T, Bioconjugate Techniques, pp.56-136, pp.456-493, Academic Press (1996)). For example, a reducing agent such as tris(2-carboxyethyl)phosphine hydrochloride (TCEP) is applied to the anti-HER2 antibody to reduce the disulfide bond in the hinge portion of the antibody to generate a sulfhydryl group; Methods such as these may be mentioned, but are not limited to these.

구체적으로는, 환원제로서 TCEP 를, 항체 내 힌지부 디술파이드 1 개당에 대해 0.3 내지 3 몰 당량 사용하여, 킬레이트제를 포함하는 완충액 중에서, 항 HER2 항체와 반응시킴으로써, 항체 내 힌지부 디술파이드가 부분적 혹은 완전히 환원된 항 HER2 항체를 얻을 수 있다. 킬레이트제로는, 예를 들어 에틸렌디아민 4 아세트산 (EDTA) 이나 디에틸렌트리아민 5 아세트산 (DTPA) 등을 들 수 있다. 이들을 1 mM 내지 20 mM 의 농도로 사용하면 된다. 완충액으로는, 인산나트륨이나 붕산나트륨, 아세트산나트륨 용액 등을 사용할 수 있다. 구체적으로는, 항 HER2 항체를 4 ℃ 내지 37 ℃ 에서 1 내지 4 시간 TCEP 와 반응시킴으로써 부분적 혹은 완전히 환원된 술프히드릴기를 갖는 항 HER2 항체를 얻을 수 있다.Specifically, by using 0.3 to 3 molar equivalents of TCEP as a reducing agent for each hinge disulfide in the antibody and reacting with the anti-HER2 antibody in a buffer containing a chelating agent, the hinge disulfide in the antibody is partially reduced. Alternatively, a completely reduced anti-HER2 antibody can be obtained. Examples of the chelating agent include ethylenediamine 4 acetic acid (EDTA) and diethylenetriamine 5 acetic acid (DTPA). These may be used at a concentration of 1mM to 20mM. As a buffer solution, sodium phosphate, sodium borate, sodium acetate solution, etc. can be used. Specifically, an anti-HER2 antibody having a partially or completely reduced sulfhydryl group can be obtained by reacting an anti-HER2 antibody with TCEP at 4°C to 37°C for 1 to 4 hours.

여기서 술프히드릴기를 약물-링커 부분에 부가시키는 반응을 실시함으로써 티오에테르 결합에 의해 약물-링커 부분을 결합시킬 수 있다.Here, by performing a reaction to add a sulfhydryl group to the drug-linker portion, the drug-linker portion can be bonded through a thioether bond.

술프히드릴기를 갖는 항 HER2 항체 1 개당, 2 내지 20 몰 당량의 화합물 2 를 사용하여, 항 HER2 항체 1 개당 2 개 내지 8 개의 약물이 결합한 항체-약물 콘주게이트 (1) 를 제조할 수 있다. 구체적으로는, 술프히드릴기를 갖는 항 HER2 항체를 포함하는 완충액에, 화합물 2 를 용해시킨 용액을 첨가하여 반응시키면 된다. 여기서, 완충액으로는, 아세트산나트륨 용액, 인산나트륨이나 붕산나트륨 등을 사용하면 된다. 반응시의 pH 는 5 내지 9 이고, 보다 바람직하게는 pH7 부근에서 반응시키면 된다. 화합물 2 를 용해시키는 용매로는, 디메틸술폭사이드 (DMSO), 디메틸포름아미드 (DMF), 디메틸아세트아미드 (DMA), N-메틸-2-피리돈 (NMP) 등의 유기 용매를 사용할 수 있다.An antibody-drug conjugate (1) in which 2 to 8 drugs are bound to each anti-HER2 antibody can be produced using 2 to 20 molar equivalents of Compound 2 per anti-HER2 antibody having a sulfhydryl group. Specifically, the solution in which Compound 2 is dissolved is added to a buffer solution containing an anti-HER2 antibody having a sulfhydryl group, and the reaction is allowed. Here, as a buffer solution, sodium acetate solution, sodium phosphate, sodium borate, etc. may be used. The pH during the reaction is 5 to 9, and more preferably, the reaction is performed around pH 7. As a solvent for dissolving Compound 2, organic solvents such as dimethyl sulfoxide (DMSO), dimethylformamide (DMF), dimethylacetamide (DMA), and N-methyl-2-pyridone (NMP) can be used.

화합물 2 를 용해시킨 유기 용매 용액을, 술프히드릴기를 갖는 항 HER2 항체를 포함하는 완충액에 1 내지 20 ％ v/v 를 첨가하여 반응시키면 된다. 반응 온도는, 0 내지 37 ℃, 보다 바람직하게는 10 내지 25 ℃ 이고, 반응 시간은, 0.5 내지 2 시간이다. 반응은, 미반응의 화합물 2 의 반응성을 티올 함유 시약에 의해 실활시킴으로써 종료할 수 있다. 티올 함유 시약은 예를 들어, 시스테인 또는 N-아세틸-L-시스테인 (NAC) 이다. 보다 구체적으로는, NAC 를, 사용한 C 화합물 2 에 대해, 1 내지 2 몰 당량 첨가하고, 실온에서 10 내지 30 분 인큐베이트함으로써 반응을 종료할 수 있다.The organic solvent solution in which Compound 2 is dissolved may be reacted by adding 1 to 20% v/v to a buffer solution containing an anti-HER2 antibody having a sulfhydryl group. The reaction temperature is 0 to 37°C, more preferably 10 to 25°C, and the reaction time is 0.5 to 2 hours. The reaction can be terminated by deactivating the reactivity of unreacted compound 2 with a thiol-containing reagent. Thiol-containing reagents are, for example, cysteine or N-acetyl-L-cysteine (NAC). More specifically, the reaction can be terminated by adding 1 to 2 molar equivalents of NAC relative to the C compound 2 used and incubating at room temperature for 10 to 30 minutes.

제조한 항체-약물 콘주게이트는, 이하의 공통 조작에 의해 농축, 버퍼 교환, 정제, 항체 농도, 및 항체 1 분자당의 약물 평균 결합수의 측정을 실시하여, 항체-약물 콘주게이트의 동정을 실시할 수 있다.The prepared antibody-drug conjugate is concentrated, buffer exchanged, purified, and the antibody concentration and the average number of drugs bound per antibody molecule are measured through the following common operations to identify the antibody-drug conjugate. You can.

공통 조작 A : 항체 또는 항체-약물 콘주게이트 수용액의 농축Common operation A: Concentration of aqueous solution of antibody or antibody-drug conjugate

Amicon Ultra (50,000 MWCO, Millipore Co.) 의 용기 내에 항체 또는 항체-약물 콘주게이트 용액을 넣고, 원심기 (Allegra X-15R, Beckman Coulter, Inc.) 를 사용한 원심 조작 (2000 G 내지 3800 G 로 5 내지 20 분간 원심) 으로, 항체 또는 항체-약물 콘주게이트 용액을 농축하였다.The antibody or antibody-drug conjugate solution was placed in a container of Amicon Ultra (50,000 MWCO, Millipore Co.), and centrifuged using a centrifuge (Allegra to 20 minutes of centrifugation) to concentrate the antibody or antibody-drug conjugate solution.

공통 조작 B : 항체의 농도 측정Common operation B: Measurement of antibody concentration

UV 측정기 (Nanodrop 1000, Thermo Fisher Scientific Inc.) 를 사용하여, 메이커 규정의 방법에 따라, 항체 농도의 측정을 실시하였다. 그 때, 항체마다 상이한 280 ㎚ 흡광 계수 (1.3 ㎖㎎-1㎝-1 내지 1.8 ㎖㎎-1㎝-1) 를 사용하였다.Antibody concentration was measured using a UV meter (Nanodrop 1000, Thermo Fisher Scientific Inc.) according to the method specified by the manufacturer. At that time, a different absorption coefficient of 280 nm (1.3 mL mg -1 cm -1 to 1.8 mL mg -1 cm -1 ) was used for each antibody.

공통 조작 C-1 : 항체의 버퍼 교환Common operation C-1: Buffer exchange of antibodies

Sephadex G-25 담체를 사용한 NAP-25 칼럼 (Cat.No.17-0852-02, GE Healthcare Japan Corporation) 을, 메이커 규정의 방법에 따라, 염화나트륨 (137 mM) 및 에틸렌디아민 4 아세트산 (EDTA, 5 mM) 을 포함하는 인산 완충액 (10 mM, pH6.0 ; 본 명세서에서 PBS6.0/EDTA 라고 칭한다) 으로 평형화시켰다. 이 NAP-25 칼럼 1 개에 대해, 항체 수용액 2.5 ㎖ 를 올린 후, PBS6.0/EDTA 3.5 ㎖ 로 용출시킨 획분 (3.5 ㎖) 을 분취하였다. 이 획분을 공통 조작 A 에 의해 농축하고, 공통 조작 B 를 사용하여 항체 농도의 측정을 실시한 후에, PBS6.0/EDTA 를 사용하여 10 ㎎/㎖ 로 항체 농도를 조정하였다.A NAP-25 column (Cat.No.17-0852-02, GE Healthcare Japan Corporation) using a Sephadex G-25 carrier was incubated with sodium chloride (137mM) and ethylenediamine 4 acetic acid (EDTA, 5%) according to the method specified by the manufacturer. It was equilibrated with a phosphate buffer solution (10 mM, pH 6.0; referred to herein as PBS6.0/EDTA) containing To one NAP-25 column, 2.5 ml of antibody aqueous solution was added, and then the fraction (3.5 ml) eluted with 3.5 ml of PBS6.0/EDTA was collected. This fraction was concentrated using common operation A, and the antibody concentration was measured using common operation B, and then the antibody concentration was adjusted to 10 mg/ml using PBS6.0/EDTA.

공통 조작 C-2 : 항체의 버퍼 교환Common operation C-2: Buffer exchange of antibodies

Sephadex G-25 담체를 사용한 NAP-25 칼럼 (Cat.No.17-0852-02, GE Healthcare Japan Corporation) 을, 메이커 규정의 방법에 따라, 염화나트륨 (50 mM) 및 EDTA (2 mM) 를 포함하는 인산 완충액 (50 mM, pH6.5 ; 본 명세서에서 PBS6.5/EDTA 라고 칭한다) 으로 평형화시켰다. 이 NAP-25 칼럼 1 개에 대해, 항체 수용액 2.5 ㎖ 를 올린 후, PBS6.5/EDTA 3.5 ㎖ 로 용출시킨 획분 (3.5 ㎖) 을 분취하였다. 이 획분을 공통 조작 A 에 의해 농축하고, 공통 조작 B 를 사용하여 항체 농도의 측정을 실시한 후에, PBS6.5/EDTA 를 사용하여 20 ㎎/㎖ 로 항체 농도를 조정하였다.A NAP-25 column (Cat.No.17-0852-02, GE Healthcare Japan Corporation) using a Sephadex G-25 carrier was column containing sodium chloride (50mM) and EDTA (2mM) according to the method specified by the manufacturer. It was equilibrated with phosphate buffer (50mM, pH6.5; referred to herein as PBS6.5/EDTA). To one NAP-25 column, 2.5 ml of an aqueous antibody solution was added, and then a fraction (3.5 ml) eluted with 3.5 ml of PBS6.5/EDTA was collected. This fraction was concentrated using common operation A, and the antibody concentration was measured using common operation B, and then the antibody concentration was adjusted to 20 mg/ml using PBS6.5/EDTA.

공통 조작 D : 항체-약물 콘주게이트의 정제Common Operation D: Purification of Antibody-Drug Conjugates

시판되는 인산 완충액 (PBS7.4, Cat.No.10010-023, Invitrogen), 염화나트륨 (137 mM) 을 포함하는 인산나트륨 완충액 (10 mM, pH6.0 ; 본 명세서에서 PBS6.0 이라고 칭한다) 또는 소르비톨 (5 ％) 을 포함하는 아세트산 완충액 (10 mM, pH5.5 ; 본 명세서에서 ABS 라고 칭한다) 중 어느 완충액으로 NAP-25 칼럼을 평형화시켰다. 이 NAP-25 칼럼에, 항체-약물 콘주게이트 반응 수용액 (약 1.5 ㎖) 을 올리고, 메이커 규정의 양의 완충액으로 용출시킴으로써, 항체 획분을 분취하였다. 이 분취 획분을 다시 NAP-25 칼럼에 올리고, 완충액으로 용출시키는 겔 여과 정제 조작을 합계 2 내지 3 회 반복함으로써, 미결합의 약물 링커나 저분자 화합물 (트리스(2-카르복시에틸)포스핀염산염 (TCEP), N-아세틸-L-시스테인 (NAC), 디메틸술폭사이드) 을 제외한 항체-약물 콘주게이트를 얻었다.Commercially available phosphate buffer solution (PBS7.4, Cat.No.10010-023, Invitrogen), sodium phosphate buffer solution containing sodium chloride (137mM) (10mM, pH6.0; herein referred to as PBS6.0), or sorbitol The NAP-25 column was equilibrated with any of the acetic acid buffer solutions (10 mM, pH 5.5; referred to as ABS in this specification) containing (5%). The antibody-drug conjugate reaction aqueous solution (about 1.5 ml) was placed on this NAP-25 column, and the antibody fraction was fractionated by eluting with an amount of buffer solution specified by the manufacturer. This fraction is placed again on the NAP-25 column, and the gel filtration purification operation of eluting with buffer is repeated a total of 2 to 3 times to remove unbound drug linker and low-molecular-weight compounds (tris(2-carboxyethyl)phosphine hydrochloride (TCEP). ), N-acetyl-L-cysteine (NAC), and dimethyl sulfoxide), an antibody-drug conjugate was obtained.

공통 조작 E : 항체-약물 콘주게이트에 있어서의 항체 농도 및 항체 1 분자당 약물 평균 결합수의 측정 (1)Common operation E: Measurement of antibody concentration and average number of drug bonds per antibody molecule in antibody-drug conjugate (1)

항체-약물 콘주게이트에 있어서의 결합 약물 농도는, 항체-약물 콘주게이트 수용액의 280 ㎚ 및 370 ㎚ 의 2 파장에 있어서의 UV 흡광도를 측정한 후에 하기의 계산을 실시함으로써, 산출할 수 있다.The bound drug concentration in the antibody-drug conjugate can be calculated by measuring the UV absorbance of the antibody-drug conjugate aqueous solution at two wavelengths of 280 nm and 370 nm and then performing the following calculation.

어느 파장에 있어서의 전체 흡광도는 계 내에 존재하는 모든 흡수 화학종의 흡광도의 합과 동일하므로 (흡광도의 가성성), 항체와 약물의 콘쥬게이션 전후에 있어서, 항체 및 약물의 몰 흡광 계수에 변화가 없다고 가정하면, 항체-약물 콘주게이트에 있어서의 항체 농도 및 약물 농도는, 하기의 관계식으로 나타낸다.Since the total absorbance at a certain wavelength is equal to the sum of the absorbances of all absorbing chemical species present in the system (absorbance causticity), there is a change in the molar extinction coefficient of the antibody and drug before and after conjugation of the antibody and drug. Assuming there are none, the antibody concentration and drug concentration in the antibody-drug conjugate are expressed by the following relational formula.

A280 = AD,280 + AA,280 = εD,280CD + εA,280CA 식 (I)A 280 = A D,280 + A A,280 = ε D,280 C D + ε A,280 C A Equation (I)

A370 = AD,370 + AA,370 = εD,370CD + εA,370CA 식 (II)A 370 = A D,370 + A A,370 = ε D,370 C D + ε A,370 C A Equation (II)

여기서, A280 은 280 ㎚ 에 있어서의 항체-약물 콘주게이트 수용액의 흡광도를 나타내고, A370 은 370 ㎚ 에 있어서의 항체-약물 콘주게이트 수용액의 흡광도를 나타내고, AA,280 은 280 ㎚ 에 있어서의 항체의 흡광도를 나타내고, AA,370 은 370 ㎚ 에 있어서의 항체의 흡광도를 나타내고, AD,280 은 280 ㎚ 에 있어서의 콘주게이트 전구체의 흡광도를 나타내고, AD,370 은 370 ㎚ 에 있어서의 콘주게이트 전구체의 흡광도를 나타내고, εA,280 은 280 ㎚ 에 있어서의 항체의 몰 흡광 계수를 나타내고, εA,370 은 370 ㎚ 에 있어서의 항체의 몰 흡광 계수를 나타내고, εD,280 은 280 ㎚ 에 있어서의 콘주게이트 전구체의 몰 흡광 계수를 나타내고, εD,370 은 370 ㎚ 에 있어서의 콘주게이트 전구체의 몰 흡광 계수를 나타내고, CA 는 항체-약물 콘주게이트에 있어서의 항체 농도를 나타내고, CD 는 항체-약물 콘주게이트에 있어서의 약물 농도를 나타낸다.Here, A 280 represents the absorbance of the antibody-drug conjugate aqueous solution at 280 nm, A 370 represents the absorbance of the antibody-drug conjugate aqueous solution at 370 nm, and A A,280 represents the absorbance of the antibody-drug conjugate aqueous solution at 280 nm. represents the absorbance of the antibody, A A,370 represents the absorbance of the antibody at 370 nm, A D,280 represents the absorbance of the conjugate precursor at 280 nm, and A D,370 represents the absorbance of the antibody at 370 nm. represents the absorbance of the conjugate precursor, ε A,280 represents the molar extinction coefficient of the antibody at 280 nm, ε A,370 represents the molar extinction coefficient of the antibody at 370 nm, and ε D,280 represents the molar extinction coefficient of the antibody at 280 nm. represents the molar extinction coefficient of the conjugate precursor at nm, ε D,370 represents the molar extinction coefficient of the conjugate precursor at 370 nm, C A represents the antibody concentration in the antibody-drug conjugate, C D represents the drug concentration in the antibody-drug conjugate.

여기서, εA,280, εA,370, εD,280, εD,370 은, 사전에 준비한 값 (계산 추정값 또는 화합물의 UV 측정으로부터 얻어진 실측값) 이 사용된다. 예를 들어, εA,280 은, 항체의 아미노산 서열로부터, 이미 알려진 계산 방법 (Protein Science, 1995, vol. 4, 2411-2423) 에 의해 추정할 수 있다. εA,370 은, 통상 제로이다. 제조예에 있어서, 트라스투주맙의 몰 흡광 계수는, εA,280 = 215400 (계산 추정값) 및 εA,370 = 0 을 사용하였다. εD,280 및 εD,370 은, 사용하는 콘주게이트 전구체를 어느 몰 농도에 용해시킨 용액의 흡광도를 측정함으로써, 람베르트·베르의 법칙 (흡광도 = 몰 농도 × 몰 흡광 계수 × 셀 광로 길이) 에 의해 얻을 수 있다. 제조예에 있어서의 약물 링커의 몰 흡광 계수는, 특별히 언급이 없는 한, εD,280 = 5000 (실측 평균값), εD,370 = 19000 (실측 평균값) 을 사용하였다. 항체-약물 콘주게이트 수용액의 A280 및 A370 을 측정하고, 이들 값을 식 (I) 및 (II) 에 대입하여 연립 방정식을 풀음으로써, CA 및 CD 를 구할 수 있다. 또한 CD 를 CA 로 나눔으로써 1 항체당 약물 평균 결합수를 구할 수 있다.Here, ε A,280 , ε A,370 , ε D,280 , and ε D,370 are values prepared in advance (calculated estimated values or actual measured values obtained from UV measurements of compounds). For example, ε A,280 can be estimated from the amino acid sequence of the antibody using a known calculation method (Protein Science, 1995, vol. 4, 2411-2423). ε A,370 is usually zero. In the production example, the molar extinction coefficient of trastuzumab was ε A,280 = 215400 (calculated estimate value) and ε A,370 = 0. ε D,280 and ε D,370 are obtained by measuring the absorbance of a solution in which the conjugate precursor used is dissolved at a certain molar concentration, according to Lambert-Beer's law (absorbance = molar concentration × molar extinction coefficient × cell optical path length) It can be obtained by Unless otherwise specified, the molar extinction coefficient of the drug linker in the production example was ε D,280 = 5000 (actual average value) and ε D,370 = 19000 (actual average value). C A and C D can be obtained by measuring A 280 and A 370 of the antibody-drug conjugate aqueous solution and substituting these values into equations (I) and (II) to solve simultaneous equations. Additionally, the average number of drugs bound per antibody can be obtained by dividing C D by C A.

공통 조작 F : 항체-약물 콘주게이트에 있어서의 항체 1 분자당 약물 평균 결합수의 측정 (2)Common operation F: Measurement of average number of drug bonds per antibody molecule in antibody-drug conjugate (2)

항체-약물 콘주게이트에 있어서의 항체 1 분자당의 약물 평균 결합수는, 전술한 공통 조작 E 에 더하여, 이하의 방법을 사용하는 고속 액체 크로마토그래피 (HPLC) 분석에 의해서도 구할 수 있다.In addition to the common operation E described above, the average number of drug bonds per antibody molecule in an antibody-drug conjugate can also be determined by high-performance liquid chromatography (HPLC) analysis using the following method.

[F-1. HPLC 분석용 샘플의 조제 (항체-약물 콘주게이트의 환원)][F-1. Preparation of samples for HPLC analysis (reduction of antibody-drug conjugate)]

항체-약물 콘주게이트 용액 (약 1 ㎎/㎖, 60 ㎕) 을 디티오트레이톨 (DTT) 수용액 (100 mM, 15 ㎕) 과 혼합한다. 혼합물을 37 ℃ 에서 30 분 인큐베이트함으로써, 항체-약물 콘주게이트의 L 사슬 및 H 사슬 사이의 디술파이드 결합을 절단한 샘플을 HPLC 분석에 사용한다.The antibody-drug conjugate solution (approximately 1 mg/ml, 60 μl) is mixed with dithiothreitol (DTT) aqueous solution (100 mM, 15 μl). By incubating the mixture at 37°C for 30 minutes, a sample in which the disulfide bond between the L and H chains of the antibody-drug conjugate is cleaved is used for HPLC analysis.

[F-2. HPLC 분석][F-2. HPLC analysis]

HPLC 분석을 하기의 측정 조건으로 실시한다.HPLC analysis is performed under the following measurement conditions.

HPLC 시스템 : Agilent 1290 HPLC 시스템 (Agilent Technologies)HPLC system: Agilent 1290 HPLC system (Agilent Technologies)

검출기 : 자외 흡광도계 (측정 파장 : 280 ㎚)Detector: Ultraviolet absorbance meter (measurement wavelength: 280 nm)

칼럼 : PLRP-S (2.1 × 50 ㎜, 8 ㎛, 1000 Å ; Agilent Technologies, P/N PL1912-1802)Column: PLRP-S (2.1 × 50 ㎜, 8 ㎛, 1000 Å; Agilent Technologies, P/N PL1912-1802)

칼럼 온도 : 80 ℃Column temperature: 80℃

이동상 A : 0.04 ％ 트리플루오로아세트산 (TFA) 수용액Mobile phase A: 0.04% trifluoroacetic acid (TFA) aqueous solution

이동상 B : 0.04 ％ TFA 를 포함하는 아세토니트릴 용액Mobile phase B: acetonitrile solution containing 0.04% TFA

그래디언트 프로그램 : 29 ％ - 36 ％ (0 분 - 12.5 분), 36 ％ - 42 ％ (12.5 - 15 분), 42 ％ - 29 ％ (15 분 - 15.1 분), 29 ％ - 29 ％ (15.1 분 - 25 분)Gradient program: 29% - 36% (0 min - 12.5 min), 36% - 42% (12.5 - 15 min), 42% - 29% (15 min - 15.1 min), 29% - 29% (15.1 min - 25 minutes)

샘플 주입량 : 15 ㎕Sample injection volume: 15 ㎕

[F-3. 데이터 해석][F-3. Data interpretation]

[F-3-1] 약물이 결합하고 있지 않은 항체의 L 사슬 (L0) 및 H 사슬 (H0) 에 대해, 약물의 결합한 L 사슬 (약물이 하나 결합한 L 사슬 : L1) 및 H 사슬 (약물이 하나 결합한 H 사슬 : H1, 약물이 2 개 결합한 H 사슬 : H2, 약물이 3 개 결합한 H 사슬 : H3) 은, 결합한 약물의 수에 비례하여 소수성이 증가하여 유지 시간이 커지므로, L0, L1, H0, H1, H2, H3 의 순서로 용출된다. L0 및 H0 와의 유지 시간 비교에 의해 검출 피크를 L0, L1, H0, H1, H2, H3 중 어느 것에 할당할 수 있다.[F-3-1] For the L chain (L 0 ) and H chain (H 0 ) of the antibody to which the drug is not bound, the L chain to which the drug is bound (L chain to which one drug is bound: L 1 ) and H chain (H chain with one drug bound: H 1 , H chain with two drugs bound: H 2 , H chain with three drugs bound: H 3 ) Hydrophobicity increases in proportion to the number of drugs bound, so retention time increases. Therefore, it is eluted in the following order: L 0 , L 1 , H 0 , H 1 , H 2 , and H 3 . By comparing retention times with L 0 and H 0 , the detection peak can be assigned to any of L 0 , L 1 , H 0 , H 1 , H 2 , and H 3 .

[F-3-2] 약물 링커에 UV 흡수가 있기 때문에, 약물 링커의 결합수에 따라, L 사슬, H 사슬 및 약물 링커의 몰 흡광 계수를 사용하여 하기 식에 따라 피크 면적값의 보정을 실시한다.[F-3-2] Since the drug linker has UV absorption, the peak area value is corrected according to the formula below using the molar extinction coefficients of the L chain, H chain, and drug linker according to the number of bonds of the drug linker. do.

Figure pat00028
Figure pat00028

Figure pat00029
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여기서, 각 항체에 있어서의 L 사슬 및 H 사슬의 몰 흡광 계수 (280 ㎚) 는, 이미 알려진 계산 방법 (ProteinScience, 1995, vol. 4, 2411-2423) 에 의해, 각 항체의 L 사슬 및 H 사슬의 아미노산 서열로부터 추정되는 값을 사용할 수 있다. 트라스투주맙의 경우, 그 아미노산 서열에 따라, L 사슬의 몰 흡광 계수로서 26150 을, H 사슬의 몰 흡광 계수로서 81290 을 추정값으로서 사용하였다. 또, 약물 링커의 몰 흡광 계수 (280 ㎚) 는, 각 약물 링커를 메르캅토에탄올 또는 N-아세틸시스테인으로 반응시키고, 말레이미드기를 숙신이미드티오에테르로 변환한 화합물의 실측의 몰 흡광 계수 (280 ㎚) 를 사용하였다.Here, the molar extinction coefficient (280 nm) of the L chain and H chain for each antibody is the L chain and H chain of each antibody according to a known calculation method (ProteinScience, 1995, vol. 4, 2411-2423). The value estimated from the amino acid sequence can be used. In the case of trastuzumab, 26150 as the molar extinction coefficient of the L chain and 81290 as the molar extinction coefficient of the H chain were used as estimated values according to its amino acid sequence. In addition, the molar extinction coefficient (280 nm) of the drug linker is the actual molar extinction coefficient (280 nm) of a compound obtained by reacting each drug linker with mercaptoethanol or N-acetylcysteine and converting the maleimide group into succinimide thioether. ㎚) was used.

[F-3-3] 피크 면적 보정값 합계에 대한 각 사슬 피크 면적비 (％) 를 하기 식에 따라 계산한다.[F-3-3] Calculate each chain peak area ratio (%) to the sum of the peak area correction values according to the formula below.

Figure pat00030
Figure pat00030

[F-3-4] 항체-약물 콘주게이트에 있어서의 항체 1 분자당 약물 평균 결합수를 하기 식에 따라 계산한다.[F-3-4] The average number of drug bonds per antibody molecule in the antibody-drug conjugate is calculated according to the formula below.

약물 평균 결합수 = (L0 피크 면적비 x 0 + L0 피크 면적비 x 1 + H0 피크 면적비 x 0 + H1 피크 면적비 x 1 + H2 피크 면적비 x 2 + H3 피크 면적비 x 3)/100 x 2Drug average binding number = (L 0 peak area ratio x 0 + L 0 peak area ratio x 1 + H 0 peak area ratio x 0 + H 1 peak area ratio x 1 + H 2 peak area ratio x 2 + H 3 peak area ratio x 3)/100 x 2

본 발명에서 사용되는 항 HER2 항체-약물 콘주게이트는, 대기 중에 방치하거나, 또는 재결정이나 정제 조작을 함으로써, 수분을 흡수하거나, 혹은 흡착수가 부착되는 등을 하여, 수화물이 되는 경우가 있고, 그와 같은 물을 포함하는 화합물 또는 염도 본 발명에서 사용되는 항 HER2 항체-약물 콘주게이트에 포함된다.The anti-HER2 antibody-drug conjugate used in the present invention may absorb moisture or adhere to adsorbed water and become a hydrate when left in the air or when subjected to recrystallization or purification. Compounds or salts containing the same water are also included in the anti-HER2 antibody-drug conjugate used in the present invention.

또, 본 발명에서 사용되는 항 HER2 항체-약물 콘주게이트에는, 여러 가지 방사성 또는 비방사성 동위체로 라벨된 화합물도 포함된다. 본 발명의 항체-약물 콘주게이트를 구성하는 원자의 1 이상에, 원자 동위체를 비천연 비율로 함유할 수 있다. 원자 동위체로는, 예를 들어, 중수소 (2H), 트리튬 (3H), 요오드-125 (125I), 또는 탄소-14 (14C) 등을 들 수 있다. 또, 본 발명 화합물은, 예를 들어, 트리튬 (3H), 요오드-125 (125I), 또는 탄소-14 (14C) 등의 방사성 동위체로 방사성 표지될 수 있다. 방사성 표지된 화합물은, 치료 또는 예방제, 연구 시약, 예를 들어, 어세이 시약, 및 진단제, 예를 들어, 인비보 화상 진단제로서 유용하다. 본 발명에서 사용되는 항체-약물 콘주게이트의 모든 동위체 변이종은, 방사성인지의 여부에 상관없이, 본 발명의 범위에 포함된다.Additionally, the anti-HER2 antibody-drug conjugate used in the present invention also includes compounds labeled with various radioactive or non-radioactive isotopes. One or more of the atoms constituting the antibody-drug conjugate of the present invention may contain atomic isotopes in a non-natural ratio. Atomic isotopes include, for example, deuterium ( 2H ), tritium ( 3H ), iodine-125 ( 125I ), or carbon-14 ( 14C ). Additionally, the compounds of the present invention may be radioactively labeled with a radioactive isotope such as, for example, tritium ( 3H ), iodine-125 ( 125I ), or carbon-14 ( 14C ). Radiolabeled compounds are useful as therapeutic or prophylactic agents, research reagents, such as assay reagents, and diagnostic agents, such as in vivo imaging agents. All isotopic variants of the antibody-drug conjugates used in the present invention, regardless of whether they are radioactive or not, are included within the scope of the present invention.

[의약] [medicine]

본 발명의 치료제는, 본 발명에서 사용되는 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 것을 특징으로 한다. 또, 본 발명의 치료 방법은, 본 발명에서 사용되는 항체-약물 콘주게이트를 환자에게 투여하는 것을 특징으로 한다. 이들은, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제 및 치료 방법으로서 사용할 수 있다.The therapeutic agent of the present invention is characterized by containing the antibody-drug conjugate used in the present invention. Additionally, the treatment method of the present invention is characterized by administering the antibody-drug conjugate used in the present invention to the patient. These can be used as a treatment or treatment method for HER2-expressing cancer that is resistant or incurable to existing anti-HER2 drugs.

본 발명에 있어서 「내성」 또는 「난치성」 이란, 항암제에 의한 치료에 대해 무응답인 성질을 나타내고, 「무응답성」, 「불응성」 이라고도 표현할 수 있고, 또, 무응답임으로써 종양의 증식을 방지할 수 없으므로, 「불내성」 이라고도 표현할 수 있다.In the present invention, “resistance” or “refractory” refers to the property of not responding to treatment with an anticancer agent, and can also be expressed as “non-responsiveness” or “refractoriness,” and non-response can prevent tumor growth. Since it cannot be tolerated, it can also be expressed as “intolerance”.

본 발명의 「내성 또는 난치성」 은, 「기존의 항 HER2 약에 의한 치료에 의해 획득된 내성 또는 난치성」 이어도 되고, 「기존의 항 HER2 약에 의한 치료에 상관없이 본래 지닌 내성 또는 난치성」 이어도 된다.“Resistance or refractoriness” in the present invention may be “resistance or refractoriness acquired through treatment with existing anti-HER2 drugs,” or “inherent resistance or refractoriness regardless of treatment with existing anti-HER2 drugs.” .

또한, 본 발명에 있어서 「HER2 발현암」 이란, 세포 표면에 HER2 단백을 발현하고 있는 암 세포를 포함하는 암 및/또는 종양인 것을 나타낸다.In addition, in the present invention, “HER2-expressing cancer” refers to cancer and/or a tumor containing cancer cells expressing the HER2 protein on the cell surface.

본 발명에 있어서 「기존의 항 HER2 약」 이란, 본 발명의 항체-약물 콘주게이트를 제외한, 임상에 있어서 사용되고 있는 HER2 를 표적으로 하는 약제인 것을 나타내고, 바람직하게는, 표준 치료에 있어서 사용되고 있는 항 HER2 약인 것을 나타낸다. 「기존의 항 HER2 약」 은, 상기의 요건을 만족시키는 것이면 특별히 한정은 없지만, 바람직하게는, 트라스투주맙 엠탄신 (Trastuzumab emtansine, T-DM1), 트라스투주맙 (Trastuzumab), 퍼투주맙 (Pertuzumab), 및 라파티닙 (Lapatinib) 으로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나이고, 보다 바람직하게는, 트라스투주맙 엠탄신 또는 트라스투주맙이고, 더욱 더 바람직하게는 트라스투주맙 엠탄신이다.In the present invention, “existing anti-HER2 drug” refers to a drug targeting HER2 that is used in clinical practice, excluding the antibody-drug conjugate of the present invention, and is preferably an anti-HER2 drug used in standard treatment. Indicates that it is a HER2 drug. The “existing anti-HER2 drug” is not particularly limited as long as it satisfies the above requirements, but is preferably Trastuzumab emtansine (T-DM1), Trastuzumab, or Pertuzumab. ), and Lapatinib, more preferably Trastuzumab Emtansine or Trastuzumab, and even more preferably Trastuzumab Emtansine.

본 발명의 치료제 및 치료 방법은, 기존의 항암약에 의한 치료력을 갖는 환자에게 투여하기 위해, 바람직하게 사용할 수 있다.The therapeutic agent and treatment method of the present invention can be preferably used for administration to patients who have a history of treatment with existing anticancer drugs.

본 발명에 있어서 「기존의 항암약」 이란, 본 발명에서 사용되는 항체-약물 콘주게이트를 제외한, 임상에 있어서 사용되고 있는 항암약인 것을 나타낸다. 「기존의 항암약」 은, 상기의 요건을 만족시키는 것이면 특별히 한정은 없지만, 바람직하게는, 트라스투주맙 엠탄신, 트라스투주맙, 퍼투주맙, 라파티닙, 이리노테칸 (Irinotecan, CPT-11), 시스플라틴 (Cisplatin), 카르보플라틴 (Carboplatin), 옥살리플라틴 (Oxaliplatin), 플루오로우라실 (Fluorouracil, 5-FU), 겜시타빈 (Gemcitabine), 카페시타빈 (Capecitabine), 파클리탁셀 (Paclitaxel), 도세탁셀 (Docetaxel), 독소루비신 (Doxorubicin), 에피루비신 (Epirubicin), 시클로포스파미드 (Cyclophosphamide), 마이토마이신 C (Mitomycin C), 테가푸르 (Tegafur)·기메라실 (Gimeracil)·오테라실 (Oteracil) 배합제, 세툭시맙 (Cetuximab), 파니투무맙 (Panitumumab), 베바시주맙 (Bevacizumab), 라무시루맙 (Ramucirumab), 레고라페닙 (Regorafenib), 트리플루리딘 (Trifluridine)·티피라실 (Tipiracil) 배합제, 제피티닙 (Gefitinib), 엘로티닙 (Erlotinib), 아파티닙 (Afatinib), 메토트랙사이트 (Methotrexate), 및 페메트렉세드 (Pemetrexed) 로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나를 포함한다.In the present invention, “existing anticancer drugs” refer to anticancer drugs currently used in clinical practice, excluding the antibody-drug conjugates used in the present invention. The “existing anticancer drug” is not particularly limited as long as it satisfies the above requirements, but is preferably trastuzumab emtansine, trastuzumab, pertuzumab, lapatinib, irinotecan (CPT-11), cisplatin ( Cisplatin, Carboplatin, Oxaliplatin, Fluorouracil (5-FU), Gemcitabine, Capecitabine, Paclitaxel, Docetaxel, Doxorubicin (Doxorubicin), Epirubicin, Cyclophosphamide, Mitomycin C, Tegafur·Gimeracil·Oteracil combination agent , Cetuximab, Panitumumab, Bevacizumab, Ramucirumab, Regorafenib, Trifluridine·Tipiracil combination drug , Gefitinib, Erlotinib, Afatinib, Methotrexate, and Pemetrexed.

유방암의 치료의 경우에는, 「기존의 항암약」 은, 바람직하게는, 트라스투주맙 엠탄신, 트라스투주맙, 퍼투주맙, 라파티닙, 플루오로우라실, 파클리탁셀, 도세탁셀, 독소루비신, 에피루비신, 시클로포스파미드, 및 메토트랙사이트로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나를 포함하고, 보다 바람직하게는, 트라스투주맙 엠탄신 또는 트라스투주맙을 포함하고, 더욱 더 바람직하게는, 트라스투주맙 엠탄신을 포함한다.In the case of treatment of breast cancer, the “existing anticancer drugs” are preferably trastuzumab emtansine, trastuzumab, pertuzumab, lapatinib, fluorouracil, paclitaxel, docetaxel, doxorubicin, epirubicin, and cyclophos. It contains at least one selected from the group consisting of pamide and methotrexite, more preferably contains trastuzumab emtansine or trastuzumab, and even more preferably contains trastuzumab emtansine. do.

위암의 치료의 경우에는, 「기존의 항암약」 은, 바람직하게는, 트라스투주맙, 이리노테칸, 시스플라틴, 플루오로우라실, 파클리탁셀, 도세탁셀, 독소루비신, 에피루비신, 및 마이토마이신 C 로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나를 포함하고, 보다 바람직하게는, 트라스투주맙 및/또는 이리노테칸을 포함하고, 더욱 더 바람직하게는, 트라스투주맙을 포함한다.In the case of treatment of stomach cancer, the “existing anticancer drug” is preferably from the group consisting of trastuzumab, irinotecan, cisplatin, fluorouracil, paclitaxel, docetaxel, doxorubicin, epirubicin, and mitomycin C. Contains at least one selected, more preferably includes trastuzumab and/or irinotecan, and even more preferably includes trastuzumab.

대장암의 치료의 경우에는, 「기존의 항암약」 은, 바람직하게는, 이리노테칸, 옥살리플라틴, 플루오로우라실, 세툭시맙, 파니투무맙, 베바시주맙, 라무시루맙, 레고라페닙, 및 트리플루리딘·티피라실 배합제로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나를 포함하고, 보다 바람직하게는, 이리노테칸을 포함한다.In the case of treatment of colon cancer, “existing anticancer drugs” are preferably irinotecan, oxaliplatin, fluorouracil, cetuximab, panitumumab, bevacizumab, ramucirumab, regorafenib, and triple It contains at least one selected from the group consisting of luridine-tipiracil combination agents, and more preferably contains irinotecan.

비소세포 폐암의 치료의 경우에는, 「기존의 항암약」 은, 바람직하게는, 이리노테칸, 시스플라틴, 카르보플라틴, 겜시타빈, 제피티닙, 엘로티닙, 아파티닙, 및 페메트렉세드로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나를 포함한다.In the case of treatment of non-small cell lung cancer, the “existing anticancer drug” is preferably a group consisting of irinotecan, cisplatin, carboplatin, gemcitabine, gefitinib, erlotinib, afatinib, and pemetrexed. Contains at least one selected from.

본 발명의 치료제 및 치료 방법은, 바람직하게는, 본 발명에서 사용되는 항체-약물 콘주게이트의 1 회당 투여량이 5.4 ㎎/㎏ (체중 1 ㎏ 당 투여량이 5.4 ㎎ 인 것을 나타낸다. 이하, 동일.) 내지 8 ㎎/㎏ 의 범위인 것을 특징으로 하고, 보다 바람직하게는, 5.4 ㎎/㎏, 6.4 ㎎/㎏, 7.4 ㎎/㎏, 또는 8 ㎎/㎏ 이고, 더욱 더 바람직하게는, 5.4 ㎎/㎏, 또는 6.4 ㎎/㎏ 이다.In the therapeutic agent and treatment method of the present invention, the antibody-drug conjugate used in the present invention preferably has a dosage of 5.4 mg/kg (refers to a dosage of 5.4 mg per 1 kg of body weight. Hereinafter, the same applies). to 8 mg/kg, more preferably 5.4 mg/kg, 6.4 mg/kg, 7.4 mg/kg, or 8 mg/kg, and even more preferably 5.4 mg/kg. , or 6.4 mg/kg.

본 발명의 치료제 및 치료 방법은, 바람직하게는, 본 발명에서 사용되는 항체-약물 콘주게이트가 3 주에 1 회의 간격으로 투여되는 것을 특징으로 한다.The therapeutic agent and treatment method of the present invention are preferably characterized in that the antibody-drug conjugate used in the present invention is administered at intervals of once every three weeks.

본 발명의 치료제 및 치료 방법은, 바람직하게는, 유방암, 위암 (위선암이라고 부르기도 한다), 대장암 (결장 직장암이라고 부르는 경우도 있고, 결장암 및 직장암을 포함한다), 비소세포 폐암, 식도암, 침샘암, 위식도 접합부 선암, 담관암, 파제트병, 췌장암, 난소암, 및 자궁암 육종으로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나의 암의 치료를 위해서 사용할 수 있고, 보다 바람직하게는, 유방암, 위암, 대장암, 비소세포 폐암, 식도암, 침샘암, 위식도 접합부 선암, 담관암, 및 파제트병으로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나의 암의 치료를 위해서 사용할 수 있고, 더욱 더 바람직하게는, 유방암, 위암, 대장암, 또는 비소세포 폐암의 치료를 위해서 사용할 수 있다.The treatment and treatment method of the present invention are preferably used for breast cancer, stomach cancer (sometimes called gastric adenocarcinoma), colon cancer (sometimes called colorectal cancer, including colon cancer and rectal cancer), non-small cell lung cancer, esophageal cancer, and salivary gland cancer. It can be used for the treatment of at least one cancer selected from the group consisting of cancer, gastroesophageal junction adenocarcinoma, cholangiocarcinoma, Paget's disease, pancreatic cancer, ovarian cancer, and uterine carcinosarcoma, more preferably breast cancer, stomach cancer, and colon cancer. It can be used for the treatment of at least one cancer selected from the group consisting of non-small cell lung cancer, esophageal cancer, salivary gland cancer, gastroesophageal junction adenocarcinoma, cholangiocarcinoma, and Paget's disease, and even more preferably, breast cancer, stomach cancer, and colon cancer. It can be used for the treatment of cancer or non-small cell lung cancer.

또한, 유방암에 대해서는, 기존의 항 HER2 약인 트라스투주맙 엠탄신 및 트라스투주맙에 의한 치료가 관찰되고 있다. 또, 위암 및 위식도 접합부 선암에 대해서도, 기존의 항 HER2 약인 트라스투주맙에 의한 치료가 관찰되고 있다. 따라서, 본 발명의 치료제를 유방암, 위암, 및 위식도 접합부 선암으로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나의 암의 치료를 위해서 사용하는 경우에는, 「내성 또는 난치성」 은, 바람직하게는, 「기존의 항 HER2 약에 의한 치료에 의해 획득된 내성 또는 난치성」 이다.Additionally, for breast cancer, treatment with the existing anti-HER2 drugs Trastuzumab Emtansine and Trastuzumab has been observed. Additionally, treatment with trastuzumab, an existing anti-HER2 drug, has been observed for gastric cancer and gastroesophageal junction adenocarcinoma. Therefore, when the therapeutic agent of the present invention is used for the treatment of at least one cancer selected from the group consisting of breast cancer, gastric cancer, and gastroesophageal junction adenocarcinoma, “resistance or refractory” preferably refers to “existing cancer.” Resistance or incurability acquired by treatment with HER2 drugs.”

한편, 대장암, 비소세포 폐암, 식도암, 침샘암, 담관암, 파제트병, 췌장암, 난소암, 및 자궁암 육종에 대해서는, 기존의 항 HER2 약에 의한 유효한 치료 방법은 확립되어 있지 않다. 따라서, 본 발명의 치료제 및 치료 방법을 대장암, 비소세포 폐암, 식도암, 침샘암, 담관암, 파제트병, 췌장암, 난소암, 및 자궁암 육종으로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나의 암의 치료를 위해서 사용하는 경우에는, 「내성 또는 난치성」 은, 바람직하게는, 「기존의 항 HER2 약에 의한 치료에 상관없이 본래 지닌 내성 또는 난치성」 이다.On the other hand, effective treatment methods using existing anti-HER2 drugs have not been established for colon cancer, non-small cell lung cancer, esophageal cancer, salivary gland cancer, bile duct cancer, Paget's disease, pancreatic cancer, ovarian cancer, and uterine cancer sarcoma. Therefore, the therapeutic agent and treatment method of the present invention can be used for the treatment of at least one cancer selected from the group consisting of colon cancer, non-small cell lung cancer, esophageal cancer, salivary gland cancer, cholangiocarcinoma, Paget's disease, pancreatic cancer, ovarian cancer, and uterine cancer. In the case of use, “resistance or refractoriness” preferably means “inherent resistance or refractoriness regardless of treatment with existing anti-HER2 drugs.”

본 발명의 치료제 및 치료 방법은, HER2 발현암이면, HER2 과잉 발현의 암이어도, HER2 저발현의 암이어도 사용할 수 있다. The treatment agent and treatment method of the present invention can be used for HER2-expressing cancer, whether it is a cancer with over-expression of HER2 or a cancer with low-expression of HER2.

본 발명에 있어서 「HER2 과잉 발현의 암」 이란, 당업자에게 있어서 HER2 과잉 발현의 암이라고 인식되는 것이면 특별히 제한은 없지만, 바람직하게는, 면역 조직 화학법 (IHC) 에 의해 HER2 의 발현이 3+ 로 판정된 암, 또는 면역 조직 화학법에 의해 HER2 의 발현이 2+ 로 판정되고, 또한 in situ 하이브리다이제이션법 (ISH) 에 의해 HER2 의 발현이 양성으로 판정된 암을 들 수 있다. 또한, 본 발명의 in situ 하이브리다이제이션법에는, 형광 in situ 하이브리다이제이션법 (FISH) 과, Dual Color in situ 하이브리다이제이션법 (DISH) 이 포함된다.In the present invention, "cancer with over-expression of HER2" is not particularly limited as long as it is recognized by those skilled in the art as a cancer with over-expression of HER2, but preferably, the expression of HER2 is 3+ by immunohistochemistry (IHC). Examples include cancers that have been determined, or cancers in which HER2 expression is determined to be 2+ by immunohistochemistry and HER2 expression is determined to be positive by in situ hybridization (ISH). Additionally, the in situ hybridization method of the present invention includes fluorescence in situ hybridization (FISH) and dual color in situ hybridization (DISH).

본 발명에 있어서 「HER2 저발현의 암」 이란, 당업자에게 있어서 HER2 저발현의 암이라고 인식되는 것이면 특별히 제한은 없지만, 바람직하게는, 면역 조직 화학법에 의해 HER2 의 발현이 2+ 로 판정되고, 또한 in situ 하이브리다이제이션법에 의해 HER2 의 발현이 음성으로 판정된 암, 또는 면역 조직 화학법에 의해 HER2 의 발현이 1+ 로 판정된 암을 들 수 있다.In the present invention, "cancer with low expression of HER2" is not particularly limited as long as it is a cancer that is recognized by those skilled in the art as a cancer with low expression of HER2, but preferably, the expression of HER2 is determined to be 2+ by immunohistochemistry, Additionally, cancers in which the expression of HER2 was determined to be negative by in situ hybridization, or cancers in which the expression of HER2 was determined to be 1+ by immunohistochemistry, may be included.

면역 조직 화학법에 의한 HER2 발현도의 판정 방법이나, in situ 하이브리다이제이션법에 의한 HER2 발현의 양성 또는 음성의 판정 방법은, 당업자에게 있어서 인식되고 있는 것이면 특별히 제한은 없지만, 예를 들어, HER2 검사 가이드 유방암편 제 4 판 (유방암 HER2 검사 병리부회 작성) 을 들 수 있다.There are no particular restrictions on the method of determining the level of HER2 expression by immunohistochemistry or the method of determining positive or negative HER2 expression by the in situ hybridization method as long as it is recognized by those skilled in the art, for example, HER2 test. An example is the 4th edition of the Breast Cancer Guide (created by the Breast Cancer HER2 Test Pathology Department).

본 발명의 치료제 및 치료 방법은, 바람직하게는, 수술 불능 또는 재발암의 치료를 위해서 사용할 수 있다.The therapeutic agent and treatment method of the present invention can preferably be used for the treatment of inoperable or recurrent cancer.

본 발명의 치료제 및 치료 방법은, 약학적으로 허용되는 제제 성분을 함유하여 사용할 수 있다.The therapeutic agent and treatment method of the present invention can be used containing pharmaceutically acceptable preparation ingredients.

본 발명의 치료제는, 바꿔 말하면, 본 발명에서 사용되는 항체-약물 콘주게이트, 그 염, 또는 그들의 수화물을 활성 성분으로 하고, 약학적으로 허용되는 제제 성분을 함유하는 내성암의 치료용 의약 조성물로서 사용할 수도 있다.The therapeutic agent of the present invention, in other words, is a pharmaceutical composition for the treatment of resistant cancer containing the antibody-drug conjugate, its salt, or hydrate thereof used in the present invention as an active ingredient and pharmaceutically acceptable preparation components. You can also use it.

본 발명의 치료용 의약 조성물은, 기존의 항암약에 내성을 나타내는 암 (즉 내성암), 특히 기존의 항암약에 대한 내성을 획득한 암 (즉 이차 내성암) 에 대해 우수한 항종양 활성을 나타낸다. 따라서, 본 발명의 치료용 의약 조성물은, 암 환자 중, 기존의 항암약에 내성을 나타내는 환자군 (기존의 항암약에 의한 치료력을 갖는 환자) 에게 적용되어 현저한 항종양 효과를 발휘한다.The therapeutic pharmaceutical composition of the present invention exhibits excellent antitumor activity against cancer that is resistant to existing anticancer drugs (i.e., resistant cancer), especially cancer that has acquired resistance to existing anticancer drugs (i.e., secondary resistant cancer). . Therefore, the therapeutic pharmaceutical composition of the present invention is applied to a group of cancer patients who exhibit resistance to existing anticancer drugs (patients with a history of treatment with existing anticancer drugs) and exhibits a remarkable antitumor effect.

「기존의 항암약」 의 정의는, 전술한 바와 같지만, 바람직하게는 트라스투주맙 엠탄신 (T-DM1) 등의 항 HER2 항체를 포함하는 항체-약물 콘주게이트, 혹은 트라스투주맙, 또는 퍼투주맙 등의 항 HER2 항체 그 자체이다.The definition of “existing anticancer drug” is the same as described above, but is preferably an antibody-drug conjugate containing an anti-HER2 antibody such as trastuzumab emtansine (T-DM1), or trastuzumab, or pertuzumab. It is the anti-HER2 antibody itself.

본 발명의 치료용 의약 조성물은, 이들 기존의 항암약 대신, 혹은 이들 기존의 항암약과 조합되어 암 환자에게 투여됨으로써, 이들 기존의 항암약에 내성을 획득한 암에 대해서도 높은 치료 효과를 나타낸다.The therapeutic pharmaceutical composition of the present invention, when administered to cancer patients instead of these existing anticancer drugs or in combination with these existing anticancer drugs, shows a high therapeutic effect even on cancers that have acquired resistance to these existing anticancer drugs.

본 발명의 치료용 의약 조성물은, 바람직하게는, 본 발명에서 사용되는 항체-약물 콘주게이트의 1 회당 투여량이 0.8 ㎎/㎏ 내지 8 ㎎/㎏ 의 범위인 것을 특징으로 하고, 보다 바람직하게는, 5.4 ㎎/㎏, 6.4 ㎎/㎏, 7.4 ㎎/㎏, 또는 8 ㎎/㎏ 인 것을 특징으로 하고, 더욱 더 바람직하게는, 5.4 ㎎/㎏, 또는 6.4 ㎎/㎏ 인 것을 특징으로 한다.The pharmaceutical composition for treatment of the present invention is preferably characterized in that the dosage per time of the antibody-drug conjugate used in the present invention is in the range of 0.8 mg/kg to 8 mg/kg, and more preferably, It is characterized as 5.4 mg/kg, 6.4 mg/kg, 7.4 mg/kg, or 8 mg/kg, and even more preferably, it is characterized as 5.4 mg/kg, or 6.4 mg/kg.

본 발명의 치료용 의약 조성물의 투여 간격은, 1 주에 1 회 (q1w), 2 주에 1 회 (q2w), 3 주에 1 회 (q3w), 또는 4 주에 1 회 (q4w) 이어도 되지만, 바람직하게는, 3 주에 1 회이다.The administration interval of the therapeutic pharmaceutical composition of the present invention may be once a week (q1w), once every two weeks (q2w), once every three weeks (q3w), or once every four weeks (q4w). , preferably once every three weeks.

본 발명의 치료용 의약 조성물은, 바람직하게는, 내성암이 폐암, 요로 상피암, 대장암, 전립선암, 난소암, 췌암, 유방암, 방광암, 위암, 위장간질 종양, 자궁경부암, 식도암, 편평상피암, 복막암, 간암, 간세포암, 결장암, 직장암, 결장 직장암, 자궁 내막암, 자궁암, 침샘암, 신장암, 외음부암, 갑상선암, 음경암, 백혈병, 악성 림프종, 형질 세포종, 골수종, 또는 육종인 경우에 사용할 수 있고, 보다 바람직하게는, 내성암이 유방암, 위암, 대장암, 또는 비소세포 폐암인 경우에 사용할 수 있고, 더욱 더 바람직하게는, 내성암이 유방암, 또는 위암인 경우에 사용할 수 있다.The therapeutic pharmaceutical composition of the present invention is preferably used to treat resistant cancers such as lung cancer, urothelial cancer, colon cancer, prostate cancer, ovarian cancer, pancreatic cancer, breast cancer, bladder cancer, stomach cancer, gastrointestinal stromal tumor, cervical cancer, esophageal cancer, squamous cell cancer, Peritoneal cancer, liver cancer, hepatocellular cancer, colon cancer, rectal cancer, colorectal cancer, endometrial cancer, uterine cancer, salivary gland cancer, kidney cancer, vulvar cancer, thyroid cancer, penile cancer, leukemia, malignant lymphoma, plasmacytoma, myeloma, or sarcoma. It can be used, more preferably, when the resistant cancer is breast cancer, stomach cancer, colon cancer, or non-small cell lung cancer, and even more preferably, when the resistant cancer is breast cancer or stomach cancer.

본 발명의 치료제 및 치료용 의약 조성물은, 암 세포의 성장을 느리게 하여, 증식을 억제하고, 나아가서는 암 세포를 파괴할 수 있다. 이들 작용에 의해, 암 환자에게 있어서, 암에 의한 증상으로부터의 해방이나, QOL 의 개선을 달성할 수 있고, 암 환자의 생명을 유지하여 치료 효과가 달성된다. 암 세포의 파괴에는 이르지 않는 경우에도, 암 세포의 증식의 억제나 컨트롤에 의해 암 환자에게 있어서 보다 높은 QOL 을 달성하면서 보다 장기의 생존을 달성시킬 수 있다.The therapeutic agent and therapeutic pharmaceutical composition of the present invention can slow the growth of cancer cells, inhibit their proliferation, and further destroy cancer cells. Through these actions, cancer patients can achieve liberation from cancer-related symptoms and improve QOL, and the life of the cancer patient is maintained and a therapeutic effect is achieved. Even when the destruction of cancer cells does not result, inhibition or control of the proliferation of cancer cells can achieve a higher QOL and longer survival in cancer patients.

이와 같은 약물 요법에 있어서의 약물 단독에서의 사용 외에, 아쥬반트 요법에 있어서 다른 요법과 조합하는 약제로서도 사용할 수 있고, 외과 수술이나, 방사선 요법, 호르몬 요법 등과 조합할 수 있다. 나아가서는 네오아쥬반트 요법에 있어서의 약물 요법의 약제로서 사용할 수도 있다.In addition to use as a drug alone in such drug therapy, it can also be used as a drug in combination with other treatments in adjuvant therapy, and can be combined with surgery, radiation therapy, hormone therapy, etc. Furthermore, it can also be used as a drug therapy agent in neoadjuvant therapy.

이상과 같은 치료적 사용 외에, 미세한 전이 암 세포의 증식을 억제하고, 나아가서는 파괴한다는 예방 효과도 기대할 수 있다. 특히 원발성의 암 세포에 있어서 HER2 의 발현이 확인되었을 때에 본 발명에서 사용되는 항 HER2 항체-약물 콘주게이트를 투여함으로써 암 전이의 억제나, 예방 효과를 기대할 수 있다. 예를 들어, 전이 과정에서 체액 중에 있는 암 세포를 억제하여 파괴하는 효과나, 어느 조직에 착상한 직후의 미세한 암 세포에 대한 억제, 파괴 등의 효과를 기대할 수 있다. 따라서, 특히 외과적인 암의 제거 후에 있어서의 암 전이의 억제, 예방 효과를 기대할 수 있다.In addition to the above therapeutic uses, a preventive effect can be expected by suppressing the proliferation of microscopic metastatic cancer cells and ultimately destroying them. In particular, when the expression of HER2 is confirmed in primary cancer cells, an inhibitory or preventive effect on cancer metastasis can be expected by administering the anti-HER2 antibody-drug conjugate used in the present invention. For example, effects such as suppressing and destroying cancer cells in body fluids during the metastasis process or suppressing and destroying microscopic cancer cells immediately after implantation in a certain tissue can be expected. Therefore, an effect of suppressing and preventing cancer metastasis can be expected, especially after surgical removal of cancer.

본 발명에서 사용되는 항 HER2 항체-약물 콘주게이트는, 환자에 대해서는 전신 요법으로서 적용하는 것 외에, 암조직에 국소적으로 적용하여 치료 효과를 기대할 수 있다.The anti-HER2 antibody-drug conjugate used in the present invention can be expected to have a therapeutic effect not only by applying it as systemic therapy to patients, but also by applying it locally to cancer tissue.

본 발명의 치료제 및 치료용 의약 조성물은, 포유 동물에 대해 바람직하게 투여할 수 있지만, 보다 바람직하게는 인간에게 투여할 수 있다.The therapeutic agent and therapeutic pharmaceutical composition of the present invention can be preferably administered to mammals, but more preferably to humans.

본 발명의 치료제 및 치료용 의약 조성물은, 1 종 이상의 약학적으로 허용되는 제제 성분을 포함하여 투여될 수 있다. 약학적으로 허용되는 제제 성분은, 본 발명에서 사용되는 항체-약물 콘주게이트의 투여량이나 투여 농도에 따라, 이 분야에 있어서 통상 사용되는 제제 첨가물 그 외로부터 적절히 선택하여 적용할 수 있다. 약학적으로 허용되는 제제 성분은, 대표적으로는, 1 종 이상의 약학적 캐리어 (예를 들어, 멸균한 액체) 를 포함한다. 여기서 액체에는, 예를 들어, 물 및 오일 (석유, 동물 기원, 식물 기원, 또는 합성 기원의 오일) 이 포함된다. 오일은, 예를 들어, 락카세이유, 대두유, 광유, 참기름 등이어도 된다. 물은, 본 발명의 치료제 및 치료용 의약 조성물이 정맥내 투여되는 경우에, 보다 대표적인 캐리어이다. 식염수 용액, 그리고 덱스트로오스 수용액 및 글리세롤 수용액도 또한, 액체 캐리어로서, 특히, 주사용 용액을 위해서 사용될 수 있다. 적절한 약학적 부형제는, 이 분야에서 공지된 것에서 적절히 선택할 수 있다. 약학적으로 허용되는 제제 성분은 또, 원한다면, 미량의 습윤제 혹은 유화제, 또는 pH 완충화제를 포함할 수 있다. 약학적으로 허용되는 제제 성분의 적절한 예는, E. W. Martin 에 의한 「Remington's Pharmaceutical Sciences」 에 기재된다. 그 처방은 투여의 양태에 대응한다.The therapeutic agent and pharmaceutical composition for treatment of the present invention may be administered containing one or more pharmaceutically acceptable preparation components. Pharmaceutically acceptable formulation components can be appropriately selected and applied from formulation additives or other formulations commonly used in this field, depending on the dosage or administration concentration of the antibody-drug conjugate used in the present invention. Pharmaceutically acceptable formulation components typically include one or more pharmaceutical carriers (eg, sterilized liquids). Liquids here include, for example, water and oils (petroleum, oils of animal origin, vegetable origin or synthetic origin). The oil may be, for example, lacquer oil, soybean oil, mineral oil, or sesame oil. Water is a more typical carrier when the therapeutic agents and therapeutic pharmaceutical compositions of the present invention are administered intravenously. Saline solutions, as well as aqueous dextrose and aqueous glycerol solutions can also be used as liquid carriers, especially for injectable solutions. Suitable pharmaceutical excipients can be appropriately selected from those known in the art. Pharmaceutically acceptable formulation components may also include trace amounts of wetting or emulsifying agents or pH buffering agents, if desired. Suitable examples of pharmaceutically acceptable formulation ingredients are described in “Remington's Pharmaceutical Sciences” by E. W. Martin. The prescription corresponds to the mode of administration.

여러 가지 송달 시스템이 공지되어 있고, 본 발명의 치료제 및 치료용 의약 조성물을 투여하기 위해서 사용될 수 있다. 도입 방법으로는, 피내, 근육내, 복강내, 정맥내, 및 피하의 경로를 들 수 있지만, 이들에 한정되지 않는다. 투여는, 예를 들어, 주입 또는 볼루스 주사에 의한 것일 수 있다. 특정한 바람직한 실시형태에 있어서, 본 발명의 치료제 및 치료용 의약 조성물의 투여는, 주입에 의한 것이다. 비경구적 투여는, 바람직한 투여 경로이다.Various delivery systems are known and can be used to administer the therapeutic agents and therapeutic pharmaceutical compositions of the present invention. Introduction methods include, but are not limited to, intradermal, intramuscular, intraperitoneal, intravenous, and subcutaneous routes. Administration may be by, for example, infusion or bolus injection. In a specific preferred embodiment, the therapeutic agent and therapeutic pharmaceutical composition of the present invention are administered by injection. Parenteral administration is a preferred administration route.

대표적 실시형태에 있어서, 본 발명의 치료제 및 치료용 의약 조성물은, 인간에 대한 정맥내 투여에 적합한 조성물로서, 상습적 순서에 따라 처방된다. 대표적으로는, 정맥내 투여를 위한 조성물은, 멸균의 등장성의 수성 완충액 중의 용액이다. 필요한 경우, 본 발명의 치료제 및 치료용 의약 조성물은 또, 가용화제 및 주사 부위에서의 동통을 완화시키기 위한 국소 마취제 (예를 들어, 리그노카인) 를 포함할 수 있다. 일반적으로, 상기 성분은, 예를 들어, 활성제의 양을 나타내는 앰플 또는 사셰 등에 밀봉하여 시일된 용기 중의 건조 동결 건조 분말 또는 무수의 농축물로서, 별개로, 또는 단위 제형 중에서 함께 혼합하여 중 어느 것으로 공급된다. 본 발명의 치료제 및 치료용 의약 조성물이 주입에 의해 투여되는 형태의 경우, 그것은, 예를 들어, 멸균의 제약 그레이드의 물 또는 식염수를 포함하는 주입 보틀로 투약될 수 있다. 본 발명의 치료제 및 치료용 의약 조성물이 주사에 의해 투여되는 경우, 주사용 멸균수 또는 식염수의 앰플은, 예를 들어, 상기 성분이 투여 전에 혼합될 수 있도록 제공될 수 있다.In a representative embodiment, the therapeutic agent and therapeutic pharmaceutical composition of the present invention are compositions suitable for intravenous administration to humans and are prescribed according to a routine procedure. Typically, the composition for intravenous administration is a solution in a sterile isotonic aqueous buffer. If necessary, the therapeutic agent and therapeutic pharmaceutical composition of the present invention may also contain a solubilizer and a local anesthetic (eg, lignocaine) to relieve pain at the injection site. Generally, the ingredients are either separately or mixed together in a unit dosage form as a dry lyophilized powder or anhydrous concentrate in a hermetically sealed container, e.g., an ampoule or sachet, indicating the amount of active agent. supplied. When the therapeutic agent and therapeutic pharmaceutical composition of the present invention are in a form to be administered by injection, they can be administered, for example, in an infusion bottle containing sterile pharmaceutical grade water or saline solution. When the therapeutic agent and therapeutic pharmaceutical composition of the present invention are administered by injection, an ampoule of sterile water or saline solution for injection may be provided, for example, so that the components can be mixed before administration.

본 발명의 치료제 및 치료용 의약 조성물은, 본 발명에서 사용되는 항 HER2 항체-약물 콘주게이트만을 포함하는 의약 조성물이어도 되고, 본 발명에서 사용되는 항 HER2 항체-약물 콘주게이트 및 적어도 하나의 이 이외의 암 치료제를 포함하는 조성물이어도 된다. 본 발명에서 사용되는 항 HER2 항체-약물 콘주게이트는, 기존의 항암약과 함께 투여할 수도 있고, 이로써 항암 효과를 증강시킬 수 있다. 이와 같은 목적으로 사용되는 기존의 항암약은, 본 발명의 항체-약물 콘주게이트와 동시에, 따로따로, 혹은 연속해서 개체에 투여되어도 되고, 각각의 투여 간격을 바꾸어 투여해도 된다. 「기존의 항암약」 의 정의는 전술한 바와 같다.The therapeutic agent and pharmaceutical composition for treatment of the present invention may be a pharmaceutical composition containing only the anti-HER2 antibody-drug conjugate used in the present invention, or may contain the anti-HER2 antibody-drug conjugate used in the present invention and at least one other conjugate other than the anti-HER2 antibody-drug conjugate. It may be a composition containing a cancer treatment agent. The anti-HER2 antibody-drug conjugate used in the present invention can be administered together with existing anticancer drugs, thereby enhancing the anticancer effect. Existing anticancer drugs used for this purpose may be administered to an individual simultaneously with the antibody-drug conjugate of the present invention, separately, or continuously, or may be administered at different administration intervals. The definition of “existing anticancer drug” is as described above.

본 발명의 치료제 및 치료용 의약 조성물은, 선택된 조성과 필요한 순도를 갖는 제제로서, 동결 건조 제제 혹은 액상 제제로서 제제화할 수 있다. 동결 건조 제제로서 제제화할 때에는, 이 분야에 있어서 사용되는 적당한 제제 첨가물이 포함되는 제제이어도 된다. 또 액제에 있어서도 동일하게 하여, 이 분야에 있어서 사용되는 각종 제제 첨가물을 포함하는 액상 제제로서 제제화할 수 있다.The therapeutic agent and pharmaceutical composition for treatment of the present invention have a selected composition and the required purity and can be formulated as a freeze-dried preparation or a liquid preparation. When formulated as a freeze-dried preparation, the preparation may contain appropriate preparation additives used in this field. In the same way, liquid preparations can be formulated as liquid preparations containing various preparation additives used in this field.

실시예Example

이하에 나타내는 예에 의해 본 발명을 구체적으로 설명하지만, 본 발명은 이들에 한정되는 것은 아니다. 또, 이들은 어떠한 의미에 있어서도 한정적으로 해석되는 것은 아니다.The present invention will be specifically explained by examples shown below, but the present invention is not limited to these. Also, these are not to be interpreted limitedly in any sense.

[제조예 : 항체-약물 콘주게이트의 조제][Preparation example: Preparation of antibody-drug conjugate]

특허문헌 8 (국제 공개 제2015/115091호) 에 기재된 제조 방법에 따라, 하기 식으로 나타내는 항체-약물 콘주게이트 (이하, 「항체-약물 콘주게이트 (1)」 또는 「ADC (1)」 이라고 칭한다) 를 제조하였다.According to the production method described in Patent Document 8 (International Publication No. 2015/115091), an antibody-drug conjugate represented by the following formula (hereinafter referred to as “antibody-drug conjugate (1)” or “ADC (1)” ) was prepared.

[화학식 28][Formula 28]

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여기서, 약물-링커 구조는, 항체와 티오에테르 결합에 의해 결합하고 있고, n 은 7 내지 8 의 범위이다.Here, the drug-linker structure is linked to the antibody by a thioether bond, and n is in the range of 7 to 8.

[평가예 1 : 항종양 시험][Evaluation Example 1: Anti-tumor test]

마우스 : 6 - 12 주령의 암컷 면역 결손 Crl : Nu(Ncr)-Foxn1Nu 마우스 (찰스·리버사) 를 실험에 제공하였다.Mice: 6-12 week old female immunodeficient Crl:Nu(Ncr)-Foxn1 Nu mice (Charles River Corporation) were provided for the experiment.

측정·계산식 : 종양의 장경 및 단경을 전자식 디지털 캘리퍼로 1 주에 2 회 측정하고, 종양 체적 (㎣) 을 계산하였다. 계산식을 이하에 나타낸다.Measurement/calculation formula: The long and short diameters of the tumor were measured twice a week with an electronic digital caliper, and the tumor volume (㎣) was calculated. The calculation formula is shown below.

종양 체적 (㎣) = 0.52 × 장경 (㎜) × [단경 (㎜)]2 Tumor volume (㎣) = 0.52 × major diameter (mm) × [minor diameter (mm)] 2

항체-약물 콘주게이트 (1) : DAR = 7.6 인 것을 사용하였다. 항체-약물 콘주게이트 (1) 를, 용매 (10 mM 히스티딘, 10 ％ 트레할로오스, 0.02 ％ 폴리솔베이트 20, pH 5.5) 로 희석시켰다. 트라스투주맙 엠탄신 (T-DM1) 은 생리 식염수로 희석시켰다. 항체-약물 콘주게이트 (1) 의 희석액 또는 T-DM1 의 희석액을, 10 ㎖/㎏ 으로 마우스의 미정맥 내에 투여하였다.Antibody-drug conjugate (1): DAR = 7.6 was used. Antibody-drug conjugate (1) was diluted with a solvent (10 mM histidine, 10% trehalose, 0.02% polysorbate 20, pH 5.5). Trastuzumab emtansine (T-DM1) was diluted with physiological saline. The diluted solution of antibody-drug conjugate (1) or the diluted solution of T-DM1 was administered into the caudal vein of the mouse at 10 mL/kg.

T-DM1 치료 후, 내성화된 HER2 양성 유방암 환자로로부터 적출한 종양을, 암컷 면역 결손 마우스에 이식함으로써, 복수회 계대 유지하였다. 그 후, 마우스에 T-DM1 을 지속 투여함으로써, T-DM1 에 높은 내성을 획득한 종양인 ST1616B/TDR 및 ST1360B/TDR 을 얻었다. ST1616B/TDR 은, T-DM1 을 13 개월간 계속 투여된 환자, ST1360B/TDR 은, T-DM1 을 3 개월간 계속 투여된 환자에게 유래하는 종양이다. 이들 종양은, 모두 HER2 과잉 발현 (면역 조직 화학 염색 (IHC) 에 의한 판정은 3+) 이다.After T-DM1 treatment, tumors extracted from patients with resistant HER2-positive breast cancer were transplanted into female immunodeficient mice and maintained for multiple passages. Thereafter, by continuously administering T-DM1 to mice, ST1616B/TDR and ST1360B/TDR, tumors that acquired high resistance to T-DM1, were obtained. ST1616B/TDR is a tumor originating from a patient who continued to administer T-DM1 for 13 months, and ST1360B/TDR is a tumor originating from a patient who continued to administer T-DM1 for 3 months. These tumors all overexpress HER2 (3+ as determined by immunohistochemistry (IHC)).

고형 종양의 종양편을 암컷 면역 결손 마우스의 체측부에 피하 이식하고, 종양 체적이 대략 200 ㎣ 에 도달한 시점에서 무작위로 군 나누기를 실시하였다. 군 나누기일을 제 0 일로 하고, 항체-약물 콘주게이트 (1) 를 3 ㎎/㎏ 또는 10 ㎎/㎏ 의 용량으로 제 0 일에 미정맥 내 투여하였다. T-DM1 은 10 ㎎/㎏ 의 용량으로 제 0, 7, 14, 21 일에 미정맥 내 투여하였다. 컨트롤군으로서, 항체-약물 콘주게이트 (1) 의 희석에 사용한 용매만을 투여하는 군을 설정하였다.Tumor fragments of solid tumors were subcutaneously transplanted into the corpus of female immunodeficient mice, and when the tumor volume reached approximately 200 mm 3 , the mice were randomly divided into groups. The group division day was set as day 0, and antibody-drug conjugate (1) was administered intracaudal vein at a dose of 3 mg/kg or 10 mg/kg on day 0. T-DM1 was administered intravenously at a dose of 10 mg/kg on days 0, 7, 14, and 21. As a control group, a group administered only the solvent used for dilution of the antibody-drug conjugate (1) was set.

결과를 도 3 또는 도 4 에 나타낸다. ST1616B/TDR 종양 및 ST1360B/TDR 종양에 대해, T-DM1 의 투여는 종양의 증식을 억제하지 않았다. 한편 항체-약물 콘주게이트 (1) 는 3 ㎎/㎏ 및 10 ㎎/㎏ 중 어느 투여에 있어서도 종양의 증식을 현저하게 억제하였다. 모든 약제 투여군에 있어서 마우스의 체중 감소는 관찰되지 않았다.The results are shown in Figure 3 or Figure 4. For ST1616B/TDR tumors and ST1360B/TDR tumors, administration of T-DM1 did not inhibit tumor proliferation. On the other hand, antibody-drug conjugate (1) significantly suppressed tumor growth at both doses of 3 mg/kg and 10 mg/kg. No weight loss was observed in mice in all drug administration groups.

이상으로부터, 항체-약물 콘주게이트 (1) 는 T-DM1 에 대해 내성을 획득한 종양 (즉 이차 내성암) 에 대해, 현저한 항종양 활성을 갖는 것이 분명해졌다. 또, 안전성도 우수한 것도 분명하다.From the above, it became clear that the antibody-drug conjugate (1) has remarkable antitumor activity against tumors that have acquired resistance to T-DM1 (i.e., secondary resistant cancers). Also, it is clear that it has excellent safety.

[평가예 2 : 임상 시험][Evaluation Example 2: Clinical Trial]

항체-약물 콘주게이트는, 암 유전자 발현 종양 세포에 대해 효율적으로 또한 특이적인 약물 송달의 효과를 갖는 유망한 의약이다. 항체-약물 콘주게이트 (1) 는, 신규한 토포이소메라아제 I 저해약을 갖는 HER2 를 타깃으로 한 항체-약물 콘주게이트이다 (표 1). 임상 시험에 사용된 항체-약물 콘주게이트 (1) 의 DAR 은 7 - 8 의 범위이고, 8 에 가까운 값이다. 전임상 데이터로부터 HER2 타깃팅이 매우 특이적인 것이 증명되었다. 전임상 모델에 있어서, 항체-약물 콘주게이트 (1) 는, 트라스투주맙 엠탄신 (T-DM1) 보다 훨씬 광범위한 항종양 스펙트럼과 T-DM1 내성 및 HER2 저발현 종양에 대한 효과를 나타냈다.Antibody-drug conjugates are promising medicines that have the effect of efficiently and specifically delivering drugs to tumor cells expressing cancer genes. Antibody-drug conjugate (1) is an antibody-drug conjugate targeting HER2 with a novel topoisomerase I inhibitor (Table 1). The DAR of the antibody-drug conjugate (1) used in clinical trials ranges from 7 to 8, with a value close to 8. Preclinical data demonstrated that HER2 targeting was highly specific. In preclinical models, the antibody-drug conjugate (1) exhibited a much broader antitumor spectrum than trastuzumab emtansine (T-DM1) and was effective against T-DM1-resistant and HER2-low-expressing tumors.

용량 점증 파트 (Part 1) 시험 및 전개 용량 파트 (Part 2) 시험이, HER2 양성의 유방암, 위암, 나아가서는 이것 등과 상이한 HER2 발현 고형암에 대해, 하기와 같은 내용으로 단계 1 (Phase 1) 로 진행 중이다.The dose escalation part (Part 1) test and development dose part (Part 2) test is being conducted in Phase 1 (Phase 1) for HER2-positive breast cancer, stomach cancer, and HER2-expressing solid cancers that are different from these, with the following contents. It's in progress.

시험 계획 :Test Plan:

오픈 라벨, 단계 1 (Phase 1) 용량 점증 시험.Open-label, Phase 1 dose-escalation study.

EWOC 원칙에 따른 mCRM 법에 의해 최대 내용량 (MTD) 을 구한다.The maximum content capacity (MTD) is obtained by the mCRM method based on the EWOC principle.

항체-약물 콘주게이트 (1) 는, 인용할 수 없는 독성 또는 병태의 증악 (憎惡) 이 관찰될 때까지 3 주에 1 번 정맥내 투여.Antibody-drug conjugate (1) is administered intravenously once every three weeks until unacceptable toxicity or worsening of the condition is observed.

용량 제한 독성 (DLT) 은, 사이클 1 (제 1 - 21 일) 에 있어서 구한다.Dose limiting toxicity (DLT) is determined in Cycle 1 (Days 1 - 21).

파트 1 시험 : 용량 점증 시험 (일본에 있어서 실시)Part 1 test: Capacity escalation test (conducted in Japan)

유방암 또는 위선암/위식도 접합부 선암Breast cancer or gastric adenocarcinoma/gastroesophageal junction adenocarcinoma

피험자수는 적어도 18 로 하고, 16 ％ 의 피험자 (즉 피험자의 1/6) 가 HER2 발현 (IHC 2+, 3+) 으로 상정한다.The number of subjects is at least 18, and 16% of subjects (i.e. 1/6 of the subjects) are assumed to have HER2 expression (IHC 2+, 3+).

파트 2 시험 : 용량 전개 시험 (일미에 있어서 실시)Part 2 Test: Capacity Deployment Test (Conducted in Japan and the United States)

파트 2a ; 피험자수 40, HER2 과잉 발현, T-DM1 치료력이 있는 유방암.Part 2a ; Number of subjects: 40, HER2 overexpression, T-DM1 treatment history breast cancer.

파트 2b ; 피험자수 40, HER2 과잉 발현, 트라스투주맙 치료력이 있는 위선암/위식도 접합부 선암.Part 2b ; Number of subjects: 40, HER2 overexpression, gastric adenocarcinoma/gastroesophageal junction adenocarcinoma with a history of trastuzumab treatment.

파트 2c ; 피험자수 20, HER2 저발현, 유방암.Part 2c ; Number of subjects: 20, HER2 low expression, breast cancer.

파트 2d ; 피험자수 20, 유방암 또는 위선암을 제외한 HER2 발현 고형암.Part 2d ; Number of subjects: 20, HER2-expressing solid tumors excluding breast cancer or gastric adenocarcinoma.

주목표 :Main goal:

항체-약물 콘주게이트 (1) 의 안전성과 인용성의 평가.Evaluation of safety and tolerability of antibody-drug conjugate (1).

항체-약물 콘주게이트 (1) 의 최대 내용량, 및 제 2 상 시험 추천 용량을 구한다.The maximum effective dose of the antibody-drug conjugate (1) and the recommended dose for phase 2 testing are determined.

이차 목표 및 탐사적 목표 :Secondary and Exploratory Objectives:

항체-약물 콘주게이트 (1) 의 약물 동태의 평가.Evaluation of the pharmacokinetics of antibody-drug conjugate (1).

항체-약물 콘주게이트 (1) 의 유효성의 평가.Evaluation of the effectiveness of antibody-drug conjugate (1).

객관적 주효율 (ORR ; 완전 주효 (CR) + 부분 주효 (PR)).Objective main effect (ORR; complete effect (CR) + partial effect (PR)).

병세 컨트롤률 (DCR ; CR + PR + 안정 (SD)).Disease control rate (DCR; CR + PR + stable (SD)).

주효 기간, SD 기간, 응답 시간, 무증악 생존 기간.Effective period, SD period, response time, symptom-free survival period.

항체-약물 콘주게이트 (1) 에 대한 인간 항인간화 항체의 평가.Evaluation of human anti-humanized antibodies for antibody-drug conjugates (1).

시험 결과Test result

파트 1 시험 : 용량 점증 시험 (일본에 있어서 실시)Part 1 test: Capacity escalation test (conducted in Japan)

(1) 피험자의 해석(1) Subject's interpretation

피험자의 상황은 표 2 에 나타낸 바와 같다.The subjects' situations are shown in Table 2.

(2) 약물 동태(2) Pharmacokinetics

항체-약물 콘주게이트 (1) 는, 0.8 ㎎/㎏, 1.6 ㎎/㎏, 3.2 ㎎/㎏, 5.4 ㎎/㎏, 6.4 ㎎/㎏, 8 ㎎/㎏ 중 어느 투여량으로, 3 주에 1 번 (q3w) 투여되었다. 이것 등의 투여로부터 측정된 항체-약물 콘주게이트 (1) 의 약물 동태를 도 5 에 나타냈다.Antibody-drug conjugate (1) is administered at any of the following dosages: 0.8 mg/kg, 1.6 mg/kg, 3.2 mg/kg, 5.4 mg/kg, 6.4 mg/kg, and 8 mg/kg, once every three weeks. (q3w) was administered. The pharmacokinetics of antibody-drug conjugate (1) measured from this administration are shown in Figure 5.

항체-약물 콘주게이트 (1) 의 노출은 3.2 ㎎/㎏ 이상의 용량으로 투여량비 이상으로 높고, T1/2 는 3.2 ㎎/㎏ 이상의 용량으로 연장되어 있다.The exposure of the antibody-drug conjugate (1) is higher than the dose ratio at a dose of 3.2 mg/kg or more, and T 1/2 is extended at a dose of 3.2 mg/kg or more.

도면에 「화합물 1」 로서 기재되어 있는 화합물의 T1/2 는 flip-flop 현상 때문에 항체-약물 콘주게이트 (1) 와 유사하다 (데이터 생략). 또한, 화합물 1 은 다음의 구조를 갖는다.T 1/2 of the compound described as “Compound 1” in the drawing is similar to antibody-drug conjugate (1) due to the flip-flop phenomenon (data omitted). Additionally, Compound 1 has the following structure.

[화학식 29][Formula 29]

Figure pat00034
Figure pat00034

사이클 1 에서의 항체-약물 콘주게이트 (1), 6.4 ㎎/㎏ 투여에 있어서의 Cmin (10700 ng/㎖) 의 중앙값은, 전임상에서의 활성 성분 농도 전체를 기초로 한 목표 노출 (4260 ng/㎖) 을 초과하여, T-DM1 출시 용량의 3.6 ㎎/㎏ 과 거의 동일하였다. 또한, 항체-약물 콘주게이트 (1) 의 목표 투여량은 5.0 ㎎/㎏ 이었다.The median Cmin (10700 ng/ml) for antibody-drug conjugate (1), administered at 6.4 mg/kg in cycle 1, was the target exposure (4260 ng/ml) based on all active ingredient concentrations in preclinical studies. ), which was almost identical to the T-DM1 launch dose of 3.6 mg/kg. Additionally, the target dosage of antibody-drug conjugate (1) was 5.0 mg/kg.

(3) 안전성과 인용성(3) Safety and tolerability

안전성과 인용성의 결과를 도 6 에 나타냈다.The safety and tolerability results are shown in Figure 6.

0.8 ㎎ ∼ 8 ㎎/㎏ 의 코호트에서는 MTD 에는 도달하지 않았다.The MTD was not reached in the 0.8 mg to 8 mg/kg cohort.

어느 용량 레벨에 있어서도, 용량 제한 독성, 그레이드 4, 심독성에 이르지 않았다.No dose-limiting toxicity, grade 4, cardiotoxicity was achieved at any dose level.

가장 자주 관찰되는 유해 사상 (AEs) 은, 저부터 중 정도의 소화기, 및 혈액학적 사상이었다.The most frequently observed adverse events (AEs) were low to moderate gastrointestinal and hematological events.

7 건의 그레이드 3 의 유해 사상 (저칼륨혈증 (1), 빈혈 (1), 호중구수 감소 (1), 림프구수 감소 (2), 알칼리포스파타아제 증가 (1), 담관염 (1)) 가 22 명의 피험자 중 4 명에서 발생하였다 (18 ％).There were 7 grade 3 adverse events (hypokalemia (1), anemia (1), decreased neutrophil count (1), decreased lymphocyte count (2), increased alkaline phosphatase (1), and cholangitis (1)) in 22 people. It occurred in 4 of the subjects (18%).

사이클 2 이후에, 6.4 ㎎/㎏ (n = 4/6) 과 8.0 ㎎/㎏ (n = 2/3) 의 코호트에 있어서 6 명의 피험자가 유해 사상에 의해 투여량이 감량되었지만, 투여 중지에는 이르지 않았다.After cycle 2, 6 subjects in the 6.4 mg/kg (n = 4/6) and 8.0 mg/kg (n = 2/3) cohorts had dose reductions due to adverse events, but did not lead to dosing discontinuation. .

(4) 유효성(4) Validity

유효성을 도 7, 8, 9 에 나타냈다.The effectiveness is shown in Figures 7, 8, and 9.

12 명의 T-DM1 기 (旣) 치료예와 5 명의 HER2 저발현 피험자를 포함하는 20 명의 평가 가능 피험자에 있어서, ORR 35 ％ (7 PRs), DCR 90 ％ 가 달성되었다 (도 8, 9).In 20 evaluable subjects, including 12 stage T-DM1 treated cases and 5 HER2 low-expression subjects, an ORR of 35% (7 PRs) and a DCR of 90% were achieved ( FIGS. 8 and 9 ).

항체-약물 콘주게이트 (1) 는, T-DM1 을 포함하는 표준 치료에 불응 또는 불내 (不耐) 가 된 유방암 환자에 있어서, ORR 42 ％, DCR 92 ％ 를 달성하였다 (도 7). 또한, 전치료에 있어서의 T-DM1 의 치료 효과는 ORR 18 ％, DCR 64 ％ 이고, 항체-약물 콘주게이트 (1) 는, T-DM1 에 의한 치료보다 고율로 주효하였다.Antibody-drug conjugate (1) achieved an ORR of 42% and a DCR of 92% in breast cancer patients who were refractory or intolerant to standard treatment including T-DM1 ( Fig. 7 ). In addition, the therapeutic effect of T-DM1 in pretreatment was ORR 18% and DCR 64%, and the antibody-drug conjugate (1) was effective at a higher rate than treatment with T-DM1.

PR (Partial Response) 을 달성한 증례 중 1 명은 등록시 IHC1+ 이었다 (도 8).Among the cases that achieved PR (Partial Response), one was IHC1+ at registration (Figure 8).

PR 을 달성한 증례의 대부분은 5.4 ㎎/㎏ 이상의 용량이었다 (도 8, 9).Most of the cases that achieved PR were doses above 5.4 mg/kg (Figures 8 and 9).

파트 2 시험 : 용량 전개 시험 (일미에 있어서 실시)Part 2 Test: Capacity Deployment Test (Conducted in Japan and the United States)

(1) 피험자의 해석(1) Subject's interpretation

파트 2 시험의 각 코호트에 있어서의 피험자수, 및 항체-약물 콘주게이트 (1) 의 투여량은, 표 3 에 나타낸 바와 같다. 어느 코호트도, 항체-약물 콘주게이트 (1) 는 3 주에 1 회의 간격으로 투여되었다.The number of subjects in each cohort of the Part 2 test and the dosage of antibody-drug conjugate (1) are shown in Table 3. For both cohorts, antibody-drug conjugate (1) was administered at intervals of once every 3 weeks.

Figure pat00035
Figure pat00035

(2) 유효성(2) Validity

(2-1)(2-1)

파트 2 시험 전체에 있어서의 유효성에 대해, 도 10 에 최대 종양 축소율 (％) 을 나타냈다. 도면 중, 「유방암 HER2 양성」 는, HER2 과잉 발현의 유방암의 코호트를 나타내고, 「유방암 HER2 저」 는, HER2 저발현의 유방암의 코호트를 나타내고, 「위암 HER2 양성」 는, HER2 과잉 발현의 위암의 코호트를 나타내고, 「위암 HER2 저」 는, HER2 저발현의 위암의 코호트를 나타내고, 「기타」 는, 유방암 및 위암을 제외한 HER2 발현 고형암을 나타낸다. 항체-약물 콘주게이트 (1) 는, 어느 암종에 있어서도, 또, HER2 가 과잉 발현이어도 저발현이어도, 우수한 종양 축소 효과를 나타내는 것이 판명되었다.Regarding the effectiveness in the entire Part 2 test, the maximum tumor reduction rate (%) is shown in Figure 10. In the figure, “breast cancer HER2 positive” represents a cohort of breast cancer with overexpression of HER2, “breast cancer HER2 low” represents a cohort of breast cancer with low expression of HER2, and “stomach cancer HER2 positive” represents a cohort of breast cancer with overexpression of HER2. Indicates a cohort, "gastric cancer HER2 low" represents a cohort of gastric cancer with low HER2 expression, and "other" represents HER2-expressing solid cancers excluding breast cancer and stomach cancer. It has been revealed that the antibody-drug conjugate (1) exhibits an excellent tumor reduction effect in any type of cancer, regardless of whether HER2 is over-expressed or under-expressed.

(2-2)(2-2)

항체-약물 콘주게이트 (1) 의 유방암에 대한 유효성에 대해, 도 11 에 종양 축소율 (％) 의 시간 추이를 나타냈다. 도면 중, 「유방암 HER2 양성」 는, HER2 과잉 발현의 유방암의 코호트를 나타내고, 「유방암 HER2 저」 는, HER2 저발현의 유방암의 코호트를 나타낸다. 또, 항체-약물 콘주게이트 (1) 의 위암에 대한 유효성에 대해, 도 12 에 종양 축소율 (％) 의 시간 추이를 나타냈다. 도면 중, 「위암 HER2 양성」 는, HER2 과잉 발현의 위암의 코호트를 나타내고, 「위암 HER2 저」 는, HER2 저발현의 위암의 코호트를 나타낸다. 항체-약물 콘주게이트 (1) 는, 어느 암종에 있어서도, 또, HER2 가 과잉 발현이어도 저발현이어도, 우수한 종양 축소 유지 효과를 나타내는 것이 판명되었다.Regarding the effectiveness of the antibody-drug conjugate (1) against breast cancer, the time course of the tumor reduction rate (%) is shown in Figure 11. In the figure, “breast cancer HER2 positive” represents a cohort of breast cancer with overexpression of HER2, and “breast cancer HER2 low” represents a cohort of breast cancer with low expression of HER2. Additionally, regarding the effectiveness of the antibody-drug conjugate (1) against gastric cancer, the time course of the tumor reduction rate (%) is shown in Figure 12. In the figure, “gastric cancer HER2 positive” represents a cohort of gastric cancers with HER2 overexpression, and “gastric cancer HER2 low” represents a cohort of gastric cancers with HER2 low expression. It has been revealed that the antibody-drug conjugate (1) exhibits an excellent tumor reduction and maintenance effect in any type of cancer, regardless of whether HER2 is over-expressed or under-expressed.

(2-3)(2-3)

파트 2 시험에 있어서의 유효성에 대해, ORR (객관적 주효율) 및 DCR (병세 컨트롤률) 을 표 4 에 나타냈다. 항체-약물 콘주게이트 (1) 는, 모든 코호트에 있어서, 높은 ORR 및 DCR 을 나타냈다. 특히, 트라스투주맙 엠탄신 (T-DM1) 에 의한 치료력이 있는 유방암 환자, 트라스투주맙 엠탄신과 퍼투주맙의 병용에 의한 치료력이 있는 유방암 환자, 및 이리노테칸 (CPT-11) 에 의한 치료력이 있는 위암 환자에 있어서, 높은 ORR 및 DCR 을 나타냈다.Regarding the effectiveness in the Part 2 test, ORR (objective main efficiency) and DCR (disease control rate) are shown in Table 4. Antibody-drug conjugate (1) showed high ORR and DCR in all cohorts. In particular, breast cancer patients with a history of treatment with trastuzumab emtansine (T-DM1), breast cancer patients with a history of treatment with the combination of trastuzumab emtansine and pertuzumab, and patients with a history of treatment with irinotecan (CPT-11) In gastric cancer patients, high ORR and DCR were observed.

(2-4)(2-4)

파트 2d 시험 (유방암 및 위암을 제외한 HER2 발현 고형암) 의 피험자에게는,For subjects in the Part 2d trial (HER2-expressing solid tumors excluding breast and gastric cancer):

대장암 (11 명), 비소세포 폐암 (5 명), 침샘암 (4 명), 파제트병 (2 명), 식도암 (1 명), 및 담관암 (1 명) 의 환자가 포함되어 있다.Patients with colon cancer (11 patients), non-small cell lung cancer (5 patients), salivary gland cancer (4 patients), Paget's disease (2 patients), esophageal cancer (1 patient), and bile duct cancer (1 patient) were included.

평가 가능한 환자 12 명에 있어서, ORR 33 ％, DCR 91 ％ 를 달성하였다. 대장암에서는, 5 명 중 2 명이 PR 을 달성하였다. 침샘암에서는 4 명 중 2 명이 PR 을 달성하였다.In 12 evaluable patients, ORR of 33% and DCR of 91% were achieved. In colorectal cancer, 2 out of 5 patients achieved a PR. In salivary gland cancer, 2 out of 4 patients achieved PR.

(2-5)(2-5)

파트 2d 시험의 결과를 표 5 에 나타낸다. 항체-약물 콘주게이트 (1) 는, 평가 가능한 환자 22 명에 있어서, 파트 2d 시험 전체에서, ORR 31.8 ％, DCR 81.8 ％ 를 달성하였다. 이 중, 대장암의 코호트에서는, ORR 20.0 ％, DCR 80.0 ％ 를 달성하고, 비소세포 폐암의 코호트에서는, ORR 20.0 ％, DCR 60.0 ％ 를 달성하고, 침샘암의 코호트에서는, ORR 75.0 ％, DCR 100.0 ％ 를 달성하고, 그 밖의 암 (파제트병, 식도암, 및 담관암) 의 코호트에서는, ORR 33.3 ％, DCR 100.0 ％ 를 달성하였다.The results of the Part 2d test are shown in Table 5. Antibody-drug conjugate (1) achieved an ORR of 31.8% and a DCR of 81.8% in the entire Part 2d trial in 22 evaluable patients. Among these, the colon cancer cohort achieved an ORR of 20.0% and a DCR of 80.0%, the non-small cell lung cancer cohort achieved an ORR of 20.0% and a DCR of 60.0%, and the salivary gland cancer cohort achieved an ORR of 75.0% and a DCR of 100.0%. % was achieved, and in the cohort of other cancers (Paget's disease, esophageal cancer, and cholangiocarcinoma), ORR of 33.3% and DCR of 100.0% were achieved.

Figure pat00037
Figure pat00037

또, 파트 2d 시험에 있어서의 항체-약물 콘주게이트 (1) 의 유효성에 대해, 도 13 에 최대 종양 축소율 (％) 을 나타냈다 (도면 중, 「C」 는 대장암의 코호트를 나타내고, 「L」 은 비소세포 폐암의 코호트를 나타내고, 「S」 는 침샘암의 코호트를 나타내고, 「P」 는 파제트병의 코호트를 나타내고, 「Ch」 는 담관암의 코호트를 나타내고, 「E」 는 식도암의 코호트를 나타낸다. 도면 중 「※」 는 치료가 진행 중인 것을 나타낸다.).Additionally, regarding the effectiveness of the antibody-drug conjugate (1) in the Part 2d test, the maximum tumor reduction rate (%) is shown in Figure 13 (in the figure, "C" represents the colon cancer cohort, and "L" represents the colon cancer cohort). represents the non-small cell lung cancer cohort, “S” represents the salivary gland cancer cohort, “P” represents the Paget disease cohort, “Ch” represents the cholangiocarcinoma cohort, and “E” represents the esophageal cancer cohort. In the drawing, “※” indicates that treatment is in progress.)

또한 도 14 에 종양 축소율 (％) 의 시간 추이를 나타냈다 (도면 중, 「Colorectal」 은 대장암의 코호트를 나타내고, 「NSCLC」 는 비소세포 폐암의 코호트를 나타내고, 「Salivary」 는 침샘암의 코호트를 나타내고, 「Other」 는 그 밖의 암의 코호트를 나타낸다).Additionally, the time trend of tumor reduction rate (%) is shown in Figure 14 (in the figure, “Colorectal” represents the colon cancer cohort, “NSCLC” represents the non-small cell lung cancer cohort, and “Salivary” represents the salivary gland cancer cohort. and “Other” indicates other cancer cohorts).

항체-약물 콘주게이트 (1) 는, 어느 암종에 있어서도, 또, HER2 가 과잉 발현이어도 저발현이어도, 우수한 종양 축소 효과를 나타내는 것이 판명되었다.It has been revealed that the antibody-drug conjugate (1) exhibits an excellent tumor reduction effect in any type of cancer, regardless of whether HER2 is over-expressed or under-expressed.

(3) 안전성과 인용성(3) Safety and tolerability

안전성과 인용성의 결과를 표 6 에 나타냈다. 가장 자주 관찰되는 유해 사상 (AEs) 은, 구역질, 식욕 감소, 구토와 같은 소화기계 독성이었다. 그러나, 그레이드 3 이상의 유해 사상은 적은 것이 판명되었다. 또, 혈소판수 감소, 호중구수 감소와 같은 골수 억제도 관찰되었지만, 이들에 대해서도 그레이드 3 이상의 유해 사상은 적은 것이 판명되었다.The safety and tolerability results are shown in Table 6. The most frequently observed adverse events (AEs) were gastrointestinal toxicity such as nausea, decreased appetite, and vomiting. However, it was found that there were few harmful casualties of grade 3 or higher. In addition, bone marrow suppression, such as decreased platelet count and decreased neutrophil count, was also observed, but it was found that these adverse events of grade 3 or higher were rare.

총괄General

항체-약물 콘주게이트 (1) 는, 파트 1 시험 (용량 점증 시험) 에서는 MTD 에는 도달하지 않고, 높은 인용성을 나타냈다.Antibody-drug conjugate (1) did not reach the MTD in the Part 1 test (dose escalation test) and showed high tolerability.

20 명의 평가 가능한 피험자 중, 항체-약물 콘주게이트 (1) 는, 35 ％ 의 ORR 과 90 ％ 의 DCR 을 달성하였다.Among 20 evaluable subjects, antibody-drug conjugate (1) achieved an ORR of 35% and a DCR of 90%.

항체-약물 콘주게이트 (1) 는, T-DM1 기치료의 유방암 환자에 있어서, 전치료의 T-DM1 보다 높은 주효율을 나타냈다.Antibody-drug conjugate (1) showed higher efficacy than pre-treatment T-DM1 in breast cancer patients undergoing T-DM1 treatment.

파트 2 시험 (용량 전개 시험) 에서는, 항체-약물 콘주게이트 (1) 는, 5.4 ㎎/㎏ 및 6.4 ㎎/㎏ 의 투여량으로 3 주에 1 회의 간격으로 투여되었다. 항체-약물 콘주게이트 (1) 는, 어느 암종에 있어서도, 또, HER2 가 과잉 발현이어도 저발현이어도, 우수한 항종양 효과를 나타내는 것이 판명되었다. 또, 그레이드 3 이상의 유해 사상은 적은 것이 확인되고, 우수한 안전성을 나타내는 것이 판명되었다.In Part 2 test (dose development test), antibody-drug conjugate (1) was administered at doses of 5.4 mg/kg and 6.4 mg/kg at intervals of once every 3 weeks. It has been revealed that the antibody-drug conjugate (1) exhibits excellent anti-tumor effects in any type of cancer, regardless of whether HER2 is over-expressed or under-expressed. In addition, it was confirmed that there were few harmful events of grade 3 or higher, and it was found to exhibit excellent safety.

이상으로부터, 항체-약물 콘주게이트 (1) 는, 항암약에 의한 전치료에 의해 내성을 획득한 암에 대해서도 우수한 항암 작용을 갖는 것이 나타났다. 이와 같은 전치료로는, 항 HER2 요법 (기존의 항 HER2 약에 의한 치료, 혹은 기존의 항 HER2 약과 이 이외의 항암약의 조합 등에 의한 치료) 을 들 수 있다. 항 HER2 요법으로서 트라스투주맙, 및 퍼투주맙 등의 항체의 투여, 혹은 항 HER2 항체-약물 콘주게이트인 T-DM1 의 투여 등을 들 수 있다. 이것 등의 전치료에 있어서 사용된 항 HER2 약은, 치료 대상이 되는 암이 HER2 양성 (즉 HER2 과잉 발현) 인 것이 투여 전의 검사에 의해 확인되고 있는 것이 필수이다. 따라서, HER2 가 인식되어 주효한다는 작용기작의 점에서는 당해 암종에 대한 효과가 기대되어 투여가 실시되는 것이다. 그러나, 이것 등의 항 HER2 약의 투여가 계속된 후에 있어서는, 일단은 기대한 바와 같이 항암 작용이 확인되고 있어도, 어떠한 메커니즘에 의해 항암 작용이 확인되지 않게 되는 병태에 이르는 것이 관찰된다. 이와 같은 상황에 있어서, 본 발명에서 사용되는 항체-약물 콘주게이트 (1) 는, 전치료의 항 HER2 약 투여의 효과가 관찰되지 않게 된 암이어도 우수한 항암 작용이 확인되었던 것이다. 즉, 항체-약물 콘주게이트 (1) 는, 기존의 항 HER2 약이 전치료로서 투여되어 내성을 획득한 암 (이차 내성암) 이어도 우수한 항암 작용을 나타내는 것이 확인되었다.From the above, it was shown that the antibody-drug conjugate (1) has excellent anticancer activity even against cancers that have acquired resistance through pretreatment with anticancer drugs. Such pretreatment may include anti-HER2 therapy (treatment with an existing anti-HER2 drug, or a combination of an existing anti-HER2 drug with another anticancer drug, etc.). Examples of anti-HER2 therapy include administration of antibodies such as trastuzumab and pertuzumab, or administration of T-DM1, an anti-HER2 antibody-drug conjugate. For anti-HER2 drugs used in pretreatment such as this, it is essential that the cancer being treated is HER2 positive (i.e., overexpresses HER2) by a test prior to administration. Therefore, in terms of the mechanism of action in which HER2 is recognized and effective, the drug is administered because it is expected to be effective against the cancer in question. However, after continued administration of anti-HER2 drugs such as this, it is observed that although anti-cancer activity is confirmed as expected, a condition in which anti-cancer activity is not confirmed due to some mechanism is reached. In such a situation, the antibody-drug conjugate (1) used in the present invention was confirmed to have excellent anticancer activity even in cancers in which the effect of pretreatment anti-HER2 drug administration was not observed. In other words, it was confirmed that the antibody-drug conjugate (1) exhibits excellent anticancer activity even in cancers that have acquired resistance to existing anti-HER2 drugs by administering them as pretreatment (secondary resistant cancers).

또, 항체-약물 콘주게이트 (1) 는, HER2 저발현의 암이나, 유방암 및 위암 이외의 고형암 (예를 들어, 대장암, 비소세포 폐암, 침샘암, 파제트병, 식도암, 및 담관암 등) 에 대해서도 우수한 치료 효과를 나타내는 것이 임상 시험에 있어서 실증되었다. 이것 등의 암은, HER2 를 발현하고 있음에도 불구하고, 기존의 항 HER2 약에서는 당초부터 치료 효과가 관찰되지 않은 암 (바꿔 말하면, 기존의 항 HER2 약에 의한 치료에 상관없이, 기존의 항 HER2 약에 대해 본래 지닌 내성 또는 난치성을 갖는 HER2 발현암) 이다.In addition, the antibody-drug conjugate (1) is used for cancer with low expression of HER2 and solid cancers other than breast cancer and stomach cancer (e.g., colon cancer, non-small cell lung cancer, salivary gland cancer, Paget's disease, esophageal cancer, and bile duct cancer, etc.) It has been demonstrated in clinical trials that it also exhibits excellent therapeutic effects. These cancers, despite expressing HER2, are cancers for which no therapeutic effect was initially observed with existing anti-HER2 drugs (in other words, regardless of treatment with existing anti-HER2 drugs, existing anti-HER2 drugs It is a HER2-expressing cancer that has inherent resistance or incurability to cancer.

이상에 의해, 본 발명에서 사용되는 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 치료제 및 치료용 의약 조성물, 그리고 본 발명의 항체-약물 콘주게이트를 투여하는 것을 특징으로 하는 치료 방법은, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료가 우수하다는 것이 나타났다.As described above, the therapeutic agent and therapeutic pharmaceutical composition containing the antibody-drug conjugate used in the present invention, and the treatment method characterized by administering the antibody-drug conjugate of the present invention, are effective in treating existing anti-HER2 drugs. It has been shown that the treatment of resistant or refractory HER2-expressing cancer is excellent.

서열표 프리텍스트Sequence table free text

서열 번호 1 : 인간화 항 HER2 모노클로날 항체 중사슬의 아미노산 서열SEQ ID NO: 1: Amino acid sequence of heavy chain of humanized anti-HER2 monoclonal antibody

서열 번호 2 : 인간화 항 HER2 모노클로날 항체 경사슬의 아미노산 서열SEQ ID NO: 2: Amino acid sequence of humanized anti-HER2 monoclonal antibody light chain

SEQUENCE LISTING <110> Daiichi Sankyo Company, Limited <120> TREATMENT FOR DRUG-RESISTANT CANCER USING ANTI-HER2 ANTIBODY-DRUG CONJUGATE <130> PD20-9018WO <150> JP2016-199341 <151> 2016-10-07 <150> JP2017-097589 <151> 2017-05-16 <150> JP2017-172814 <151> 2017-09-08 <160> 12 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 450 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> amino acid sequence of the heavy chain of Trastuzumab <400> 1 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr 20 25 30 Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ser Arg Trp Gly Gly Asp Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 115 120 125 Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 165 170 175 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 180 185 190 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys 195 200 205 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp 210 215 220 Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly 225 230 235 240 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 245 250 255 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 260 265 270 Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 275 280 285 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 290 295 300 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 305 310 315 320 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 325 330 335 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 340 345 350 Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 355 360 365 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 370 375 380 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 385 390 395 400 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp 405 410 415 Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 420 425 430 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 435 440 445 Gly Lys 450 <210> 2 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> amino acid sequence of the light chain of Trastuzumab <400> 2 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala 20 25 30 Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 3 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of Lp <400> 3 Asp Gly Gly Phe 1 <210> 4 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of Lp <400> 4 Glu Gly Gly Phe 1 <210> 5 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of Lp <400> 5 Gly Gly Phe Gly 1 <210> 6 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of Lp <400> 6 Ser Gly Gly Phe 1 <210> 7 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of Lp <400> 7 Lys Gly Gly Phe 1 <210> 8 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of Lp <400> 8 Asp Gly Gly Phe Gly 1 5 <210> 9 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of Lp <400> 9 Gly Gly Phe Gly Gly 1 5 <210> 10 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of Lp <400> 10 Asp Asp Gly Gly Phe Gly 1 5 <210> 11 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of Lp <400> 11 Lys Asp Gly Gly Phe Gly 1 5 <210> 12 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of Lp <400> 12 Gly Gly Phe Gly Gly Gly Phe 1 5 SEQUENCE LISTING <110> Daiichi Sankyo Company, Limited <120> TREATMENT FOR DRUG-RESISTANT CANCER USING ANTI-HER2 ANTIBODY-DRUG CONJUGATE <130>PD20-9018WO <150> JP2016-199341 <151> 2016-10-07 <150> JP2017-097589 <151> 2017-05-16 <150> JP2017-172814 <151> 2017-09-08 <160> 12 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 450 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> amino acid sequence of the heavy chain of Trastuzumab <400> 1 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr 20 25 30 Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ser Arg Trp Gly Gly Asp Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 115 120 125 Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 165 170 175 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 180 185 190 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys 195 200 205 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp 210 215 220 Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly 225 230 235 240 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 245 250 255 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 260 265 270 Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 275 280 285 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 290 295 300 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 305 310 315 320 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 325 330 335 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 340 345 350 Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 355 360 365 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 370 375 380 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 385 390 395 400 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp 405 410 415 Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 420 425 430 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 435 440 445 Gly Lys 450 <210> 2 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> amino acid sequence of the light chain of Trastuzumab <400> 2 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala 20 25 30 Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 3 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of Lp <400> 3 Asp Gly Gly Phe One <210> 4 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of Lp <400> 4 Glu Gly Gly Phe One <210> 5 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of Lp <400> 5 Gly Gly Phe Gly One <210> 6 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of Lp <400> 6 Ser Gly Gly Phe One <210> 7 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of Lp <400> 7 Lys Gly Gly Phe One <210> 8 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of Lp <400> 8 Asp Gly Gly Phe Gly 1 5 <210> 9 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of Lp <400> 9 Gly Gly Phe Gly Gly 1 5 <210> 10 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of Lp <400> 10 Asp Asp Gly Gly Phe Gly 1 5 <210> 11 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of Lp <400> 11 Lys Asp Gly Gly Phe Gly 1 5 <210> 12 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of Lp <400> 12 Gly Gly Phe Gly Gly Gly Phe 1 5

Claims (31)

하기 식으로 나타내는 링커 및 약물과, 항 HER2 항체가 결합한 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 것을 특징으로 하는, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제로서, 내성 또는 난치성이 기존의 항 HER2 약에 의한 치료에 의해 획득된 내성 또는 난치성이고, 항체-약물 콘주게이트의 1 회당 투여량이 5.4 ㎎/㎏ 또는 6.4 ㎎/㎏ 인, 치료제 :
-(숙신이미드-3-일-N)-CH2CH2CH2CH2CH2-C(=O)-GGFG-NH-CH2-O-CH2-C(=O)-(NH-DX)
(식 중,
-(숙신이미드-3-일-N)- 은 다음 식 :
Figure pat00039

으로 나타내는 구조이고, 이것의 3 위치에서 항 HER2 항체와 티오에테르 결합에 의해 결합하고, 1 위치의 질소 원자 상에서 이것을 포함하는 링커 구조 내의 메틸렌기와 결합하고,
-(NH-DX) 는 다음 식 :
Figure pat00040

으로 나타내는 1 위치의 아미노기의 질소 원자가 결합 부위로 되어 있는 기를 나타내고,
-GGFG- 는, -Gly-Gly-Phe-Gly- 의 테트라펩티드 잔기를 나타낸다)A treatment for HER2-expressing cancer that is resistant or refractory to existing anti-HER2 drugs, comprising an antibody-drug conjugate in which an anti-HER2 antibody is bound to a linker and a drug shown in the formula below. A therapeutic agent for which resistance or refractoriness is acquired by treatment with an anti-HER2 drug, and the dosage per dose of the antibody-drug conjugate is 5.4 mg/kg or 6.4 mg/kg:
-(succinimide-3-yl-N)-CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 -C(=O)-GGFG-NH-CH 2 -O-CH 2 -C(=O)-(NH -DX)
(During the ceremony,
-(succinimide-3-yl-N)- has the following formula:
Figure pat00039

It is a structure represented by, and binds to the anti-HER2 antibody at the 3rd position through a thioether bond, and binds to the methylene group in the linker structure containing this on the nitrogen atom at the 1st position,
-(NH-DX) is the following formula:
Figure pat00040

represents a group in which the nitrogen atom of the amino group at the 1st position is the binding site,
-GGFG- represents the tetrapeptide residue of -Gly-Gly-Phe-Gly-) 제 1 항에 있어서,
기존의 항 HER2 약이 트라스투주맙 엠탄신, 트라스투주맙, 퍼투주맙, 및 라파티닙으로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나인, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제.According to claim 1,
A treatment for HER2-expressing cancer that is resistant or refractory to existing anti-HER2 drugs, wherein the existing anti-HER2 drugs are at least one selected from the group consisting of trastuzumab emtansine, trastuzumab, pertuzumab, and lapatinib. 제 1 항에 있어서,
기존의 항 HER2 약이 트라스투주맙 엠탄신인, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제.According to claim 1,
A treatment for HER2-expressing cancer that is resistant or incurable to existing anti-HER2 drugs, for which the existing anti-HER2 drug is trastuzumab emtansine. 제 1 항에 있어서,
기존의 항 HER2 약이 트라스투주맙인, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제.According to claim 1,
A treatment for HER2-expressing cancer that is resistant or incurable to existing anti-HER2 drugs, the existing anti-HER2 drug being trastuzumab. 제 1 항에 있어서,
기존의 항암약에 의한 치료력을 갖는 환자에게 투여하기 위한, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제.According to claim 1,
A treatment for HER2-expressing cancer that is resistant or incurable to existing anti-HER2 drugs, for administration to patients who have a history of treatment with existing anti-cancer drugs. 제 5 항에 있어서,
기존의 항암약이, 트라스투주맙 엠탄신, 트라스투주맙, 퍼투주맙, 라파티닙, 이리노테칸, 시스플라틴, 카르보플라틴, 옥살리플라틴, 플루오로우라실, 겜시타빈, 카페시타빈, 파클리탁셀, 도세탁셀, 독소루비신, 에피루비신, 시클로포스파미드, 마이토마이신 C, 테가푸르·기메라실·오테라실 배합제, 세툭시맙, 파니투무맙, 베바시주맙, 라무시루맙, 레고라페닙, 트리플루리딘·티피라실 배합제, 제피티닙, 엘로티닙, 아파티닙, 메토트랙사이트, 및 페메트렉세드로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나를 포함하는, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제.According to claim 5,
Existing anticancer drugs include trastuzumab emtansine, trastuzumab, pertuzumab, lapatinib, irinotecan, cisplatin, carboplatin, oxaliplatin, fluorouracil, gemcitabine, capecitabine, paclitaxel, docetaxel, doxorubicin, and epirubi. Shin, cyclophosphamide, mitomycin C, tegafur, gimeracil, oteracil combination, cetuximab, panitumumab, bevacizumab, ramucirumab, regorafenib, trifluridine, HER2-expressing cancer that is resistant or refractory to existing anti-HER2 drugs, including at least one selected from the group consisting of tipiracil combination agent, gefitinib, erlotinib, afatinib, methotrexed, and pemetrexed. cure. 제 5 항에 있어서,
기존의 항암약이 트라스투주맙 엠탄신을 포함하는, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제.According to claim 5,
A treatment for HER2-expressing cancer that is resistant or refractory to existing anti-HER2 drugs, including trastuzumab emtansine. 제 5 항에 있어서,
기존의 항암약이 트라스투주맙을 포함하는, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제.According to claim 5,
A treatment for HER2-expressing cancer that is resistant or incurable to existing anti-HER2 drugs, including trastuzumab. 제 5 항에 있어서,
기존의 항암약이 이리노테칸을 포함하는, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제.According to claim 5,
A treatment for HER2-expressing cancer that is resistant or incurable to existing anti-HER2 drugs, including irinotecan. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서,
항체-약물 콘주게이트의 1 항체당 약물-링커 구조의 평균 결합수가 7 내지 8 개의 범위인, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제.The method according to any one of claims 1 to 9,
A treatment for HER2-expressing cancer that is resistant or incurable to existing anti-HER2 drugs, wherein the average number of drug-linker structures per antibody in the antibody-drug conjugate is in the range of 7 to 8. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서,
항체-약물 콘주게이트의 1 항체당 약물-링커 구조의 평균 결합수가 7.5 내지 8 개의 범위인, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제.The method according to any one of claims 1 to 9,
A treatment for HER2-expressing cancer that is resistant or incurable to existing anti-HER2 drugs, wherein the average number of drug-linker structures per antibody in the antibody-drug conjugate is in the range of 7.5 to 8. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서,
항 HER2 항체가, 서열 번호 1 에 있어서 아미노산 번호 1 내지 449 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 중사슬 및 서열 번호 2 에 있어서 아미노산 번호 1 내지 214 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 경사슬을 포함하는, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제.The method according to any one of claims 1 to 9,
The anti-HER2 antibody is an existing anti-HER2 antibody comprising a heavy chain consisting of the amino acid sequence shown in amino acid numbers 1 to 449 in SEQ ID NO: 1 and a light chain consisting of the amino acid sequence shown in amino acid numbers 1 to 214 in SEQ ID NO: 2. A treatment for HER2-expressing cancer that is resistant or incurable to drugs. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서,
항 HER2 항체가, 서열 번호 1 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 중사슬 및 서열 번호 2 에 기재된 아미노산 서열로 이루어지는 경사슬을 포함하는, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제.The method according to any one of claims 1 to 9,
A treatment for HER2-expressing cancer that is resistant or refractory to existing anti-HER2 drugs, wherein the anti-HER2 antibody contains a heavy chain consisting of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1 and a light chain consisting of the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 2. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서,
항체-약물 콘주게이트의 1 회당 투여량이 5.4 ㎎/㎏ 인, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제.The method according to any one of claims 1 to 9,
A treatment for HER2-expressing cancer that is resistant or incurable to existing anti-HER2 drugs, and which contains a single dose of 5.4 mg/kg of the antibody-drug conjugate. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서,
항체-약물 콘주게이트의 1 회당 투여량이 6.4 ㎎/㎏ 인, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제.The method according to any one of claims 1 to 9,
A treatment for HER2-expressing cancer that is resistant or incurable to existing anti-HER2 drugs, and which contains a single dose of 6.4 mg/kg of the antibody-drug conjugate. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서,
항체-약물 콘주게이트가 3 주에 1 회의 간격으로 투여되는, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제.The method according to any one of claims 1 to 9,
A treatment for HER2-expressing cancer that is resistant or refractory to existing anti-HER2 drugs, in which an antibody-drug conjugate is administered at intervals of once every three weeks. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서,
유방암, 위암, 대장암, 비소세포 폐암, 식도암, 침샘암, 위식도 접합부 선암, 담관암, 파제트병, 췌장암, 난소암, 자궁암 및 육종으로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나의 암의 치료를 위한, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제.The method according to any one of claims 1 to 9,
For the treatment of at least one cancer selected from the group consisting of breast cancer, stomach cancer, colon cancer, non-small cell lung cancer, esophageal cancer, salivary gland cancer, gastroesophageal junction adenocarcinoma, cholangiocarcinoma, Paget's disease, pancreatic cancer, ovarian cancer, uterine cancer, and sarcoma, A treatment for HER2-expressing cancer that is resistant or incurable to existing anti-HER2 drugs. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서,
유방암의 치료를 위한, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제.The method according to any one of claims 1 to 9,
For the treatment of breast cancer, a treatment for HER2-expressing cancer that is resistant or incurable to existing anti-HER2 drugs. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서,
위암의 치료를 위한, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제.The method according to any one of claims 1 to 9,
For the treatment of gastric cancer, a treatment for HER2-expressing cancer that is resistant or intractable to existing anti-HER2 drugs. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서,
위암 및 위식도 접합부 선암의 치료를 위한, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제.The method according to any one of claims 1 to 9,
For the treatment of gastric cancer and gastroesophageal junction adenocarcinoma, a treatment for HER2-expressing cancer that is resistant or incurable to existing anti-HER2 drugs. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서,
대장암의 치료를 위한, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제.The method according to any one of claims 1 to 9,
For the treatment of colon cancer, a treatment for HER2-expressing cancer that is resistant or intractable to existing anti-HER2 drugs. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서,
비소세포 폐암의 치료를 위한, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제.The method according to any one of claims 1 to 9,
For the treatment of non-small cell lung cancer, a treatment for HER2-expressing cancer that is resistant or incurable to existing anti-HER2 drugs. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서,
침샘암의 치료를 위한, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제.The method according to any one of claims 1 to 9,
For the treatment of salivary gland cancer, a treatment for HER2-expressing cancer that is resistant or incurable to existing anti-HER2 drugs. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서,
HER2 발현암이 HER2 과잉 발현의 암인, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제.The method according to any one of claims 1 to 9,
A treatment for HER2-expressing cancers that are resistant or incurable to existing anti-HER2 drugs, where HER2-expressing cancers are cancers that over-express HER2. 제 24 항에 있어서,
HER2 과잉 발현의 암이, 면역 조직 화학법에 의해 HER2 의 발현이 3+ 로 판정된 암인, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제.According to claim 24,
A treatment for HER2-expressing cancers that are resistant or refractory to existing anti-HER2 drugs, where HER2 over-expression is cancer in which HER2 expression is determined to be 3+ by immunohistochemistry. 제 24 항에 있어서,
HER2 과잉 발현의 암이, 면역 조직 화학법에 의해 HER2 의 발현이 2+ 로 판정되고, 또한 in situ 하이브리다이제이션법에 의해 HER2 의 발현이 양성으로 판정된 암인, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제.According to claim 24,
Cancers with over-expression of HER2 are cancers in which HER2 expression is determined to be 2+ by immunohistochemistry and HER2 expression is determined to be positive by in situ hybridization, and are resistant to existing anti-HER2 drugs. Or a treatment for incurable HER2-expressing cancer. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서,
HER2 발현암이 HER2 저발현의 암인, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제.The method according to any one of claims 1 to 9,
A treatment for HER2-expressing cancers that are resistant or incurable to existing anti-HER2 drugs, where HER2-expressing cancers are cancers with low HER2 expression. 제 27 항에 있어서,
HER2 저발현의 암이, 면역 조직 화학법에 의해 HER2 의 발현이 2+ 로 판정되고, 또한 in situ 하이브리다이제이션법에 의해 HER2 의 발현이 음성으로 판정된 암인, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제.According to clause 27,
Cancers with low HER2 expression are cancers in which HER2 expression is determined to be 2+ by immunohistochemistry and HER2 expression is determined to be negative by in situ hybridization, and are resistant to existing anti-HER2 drugs. Or a treatment for incurable HER2-expressing cancer. 제 27 항에 있어서,
HER2 저발현의 암이, 면역 조직 화학법에 의해 HER2 의 발현이 1+ 로 판정된 암인, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제.According to clause 27,
A treatment for HER2-expressing cancers that are resistant or refractory to existing anti-HER2 drugs, where HER2 expression is determined to be 1+ by immunohistochemistry. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서,
수술 불능 또는 재발암의 치료를 위한, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제.The method according to any one of claims 1 to 9,
A treatment for HER2-expressing cancer that is resistant or incurable to existing anti-HER2 drugs for the treatment of inoperable or recurrent cancer. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서,
약학적으로 허용되는 제제 성분을 함유하는, 기존의 항 HER2 약에 대해 내성 또는 난치성의 HER2 발현암의 치료제.The method according to any one of claims 1 to 9,
A treatment for HER2-expressing cancer that is resistant or incurable to existing anti-HER2 drugs and contains pharmaceutically acceptable ingredients.
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Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BR112020003474A2 (en) * 2017-08-23 2020-10-20 Daiichi Sankyo Company, Limited pharmaceutical composition, and method for producing a pharmaceutical composition
BR112020024061A2 (en) * 2018-05-28 2021-02-17 Daiichi Sankyo Company, Limited therapeutic agent for cancer with mutated her2
KR20210038904A (en) * 2018-07-25 2021-04-08 다이이찌 산쿄 가부시키가이샤 Effective method for preparing antibody-drug conjugates
CA3108044A1 (en) 2018-07-31 2020-02-06 Daiichi Sankyo Company, Limited Treatment of metastatic brain tumor by administration of antibody-drug conjugate
CN112714649A (en) * 2018-09-06 2021-04-27 第一三共株式会社 Novel cyclic dinucleotide derivatives and antibody drug conjugates thereof
RS63715B1 (en) 2019-03-29 2022-11-30 Medimmune Ltd Compounds and conjugates thereof
WO2021097220A1 (en) 2019-11-15 2021-05-20 Seagen Inc. Methods of treating her2 positive breast cancer with tucatinib in combination with an anti-her2 antibody-drug conjugate
US20230293714A1 (en) 2020-07-20 2023-09-21 Daiichi Sankyo Company, Limited Combination of anti-her2 antibody-drug conjugate with her dimerization inhibitor
CN116239601B (en) 2020-09-30 2023-10-13 映恩生物制药（苏州）有限公司 Antitumor compound and preparation method and application thereof
KR102247908B1 (en) * 2020-10-08 2021-05-06 주식회사 엠디엡투스 HER2 aptamer-anticancer drug complex and use thereof
WO2022099762A1 (en) * 2020-11-12 2022-05-19 博瑞生物医药（苏州）股份有限公司 Antibody conjugate intermediate and preparation method therefor
US20220378929A1 (en) * 2021-02-25 2022-12-01 MediBoston Limted Anti-her2 antibody-drug conjugates and uses thereof
JP2024519982A (en) * 2021-05-24 2024-05-21 レメゲン シーオー．，エルティーディー． Use of HER2-targeted antibody-drug conjugates in the treatment of HER2-low expressing breast cancer
US11806405B1 (en) 2021-07-19 2023-11-07 Zeno Management, Inc. Immunoconjugates and methods
WO2024008102A1 (en) * 2022-07-05 2024-01-11 Wuxi Xdc (Shanghai) Co., Ltd. Linker for conjugation

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0559061A (en) 1991-01-16 1993-03-09 Dai Ichi Seiyaku Co Ltd Hexacyclic compound
JPH08337584A (en) 1995-04-10 1996-12-24 Dai Ichi Seiyaku Co Ltd Condensed six-membered cyclic amino compound, medicine containing the same and production of the same
US5677171A (en) 1988-01-12 1997-10-14 Genentech, Inc. Monoclonal antibodies directed to the HER2 receptor
WO1997046260A1 (en) 1996-06-06 1997-12-11 Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. Drug complexes
US5821337A (en) 1991-06-14 1998-10-13 Genentech, Inc. Immunoglobulin variants
WO2000025825A1 (en) 1998-10-30 2000-05-11 Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. Dds compounds and method for assaying the same
WO2001000244A2 (en) 1999-06-25 2001-01-04 Genentech, Inc. METHODS OF TREATMENT USING ANTI-ErbB ANTIBODY-MAYTANSINOID CONJUGATES
WO2015115091A1 (en) 2014-01-31 2015-08-06 第一三共株式会社 Anti-her2 antibody-drug conjugate

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IL162181A (en) 1988-12-28 2006-04-10 Pdl Biopharma Inc A method of producing humanized immunoglubulin, and polynucleotides encoding the same
DK0585287T3 (en) 1990-07-10 2000-04-17 Cambridge Antibody Tech Process for producing specific binding pair elements
GB9015198D0 (en) 1990-07-10 1990-08-29 Brien Caroline J O Binding substance
EP0605522B1 (en) 1991-09-23 1999-06-23 Medical Research Council Methods for the production of humanized antibodies
WO1993011236A1 (en) 1991-12-02 1993-06-10 Medical Research Council Production of anti-self antibodies from antibody segment repertoires and displayed on phage
EP0656941B1 (en) 1992-03-24 2005-06-01 Cambridge Antibody Technology Limited Methods for producing members of specific binding pairs
GB9313509D0 (en) 1993-06-30 1993-08-11 Medical Res Council Chemisynthetic libraries
EP0731842A1 (en) 1993-12-03 1996-09-18 Medical Research Council Recombinant binding proteins and peptides
WO1999054342A1 (en) 1998-04-20 1999-10-28 Pablo Umana Glycosylation engineering of antibodies for improving antibody-dependent cellular cytotoxicity
ES2420835T3 (en) 1999-04-09 2013-08-27 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Procedure to control the activity of immunofunctional molecules
ES2329437T3 (en) 1999-06-25 2009-11-26 Genentech, Inc. ANTI-ERBB2 ANTIBODIES HUMANIZED AND TREATMENT WITH ANTI-ERBB2 ANTIBODIES.
CN103333860B (en) 2000-10-06 2015-07-08 协和发酵麒麟株式会社 Cells producing antibody compositions

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5677171A (en) 1988-01-12 1997-10-14 Genentech, Inc. Monoclonal antibodies directed to the HER2 receptor
JPH0559061A (en) 1991-01-16 1993-03-09 Dai Ichi Seiyaku Co Ltd Hexacyclic compound
US5821337A (en) 1991-06-14 1998-10-13 Genentech, Inc. Immunoglobulin variants
JPH08337584A (en) 1995-04-10 1996-12-24 Dai Ichi Seiyaku Co Ltd Condensed six-membered cyclic amino compound, medicine containing the same and production of the same
WO1997046260A1 (en) 1996-06-06 1997-12-11 Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. Drug complexes
WO2000025825A1 (en) 1998-10-30 2000-05-11 Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. Dds compounds and method for assaying the same
WO2001000244A2 (en) 1999-06-25 2001-01-04 Genentech, Inc. METHODS OF TREATMENT USING ANTI-ErbB ANTIBODY-MAYTANSINOID CONJUGATES
WO2015115091A1 (en) 2014-01-31 2015-08-06 第一三共株式会社 Anti-her2 antibody-drug conjugate

Non-Patent Citations (36)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Adams CW, et al., Cancer Immunol Immunother. 2006 ; 6 : 717-727.
Alley, S. C., et al., Current Opinion in Chemical Biology (2010) 14, 529-537.
Baselga et al., J. Clin. Oncol. 14 : 737-744 (1996).
Coussens L, et al., Science. 1985 ; 230 (4730) : 1132-1139.
Damle N. K. Expert Opin. Biol. Ther. (2004) 4, 1445-1452.
De Jager, R., et al., Ann N Y Acad Sci (2000) 922, 260-273.
Di Fore PP, et al., Science. 1987 ; 237 : 178-182.
Ducry, L., et al., Bioconjugate Chem. (2010) 21, 5-13.
Fendly. et al., Cancer Research 1990 (50) : 1550-1558.
Fukushige S et al., Mol Cell Biol 6 : 955-958, 1986.
Graus-Porta G, et al., EMBO J. 1997 ; 16 : 1647-1655.
Gravalos C, et al., Ann Oncol 19 : 1523-1529, 2008.
Hardwick R, et al., Eur. J Surg Oncol. 1997 (23) : 30-35.
Howard A. et al., J Clin Oncol 29 : 398-405.
Hudis CA, et al., N Engl J Med. 357 : 39-51, 2007.
Hudziak RM, et al., Proc Natl Acad Sci U S A. 1987 ; 84 : 7159-7163.
Inoue, K. et al., Polymer Drugs in the Clinical Stage, Edited by Maeda et al. (2003) 145-153.
Joto, N. et al. Int J Cancer (1997) 72, 680-686.
Kaptain S et al., Diagn Mol Pathol 10 : 139-152, 2001.
Karnagaran D, et al., EMBO J. 1996 ; 15 : 254-264.
Korkaya H, et al., Oncogene. 2008 ; 27 (47) : 6120-6130.
Kumazawa, E. et al., Cancer Chemother. Pharmacol. (1998) 42, 210-220.
Kumazawa, E. et al., Cancer Sci (2004) 95, 168-175.
Kumazawa, E., Tohgo, A., Exp. Opin. Invest. Drugs (1998) 7, 625-632.
Mitsui, I., et al., Jpn J. Cancer Res. (1995) 86, 776-782.
Ogitani Y. et al., Clinical Cancer Research, 2016, Oct 15 ; 22 (20) : 5097-5108, Epub 2016 Mar 29.
Senter P. D., et al., Nature Biotechnology (2012) 30, 631-637.
Slamon DJ, et al. Science. 1989 ; 244 : 707-712.
Slamon DJ, et al., Science. 1987 ; 235 : 177-182.
Sliwkowski MX, et al., J. Biom Chem. 1994 ; 269 : 14661-14665.
Sliwkowski MX, et al., Semin Oncol. 1999 ; 26 (4,Suppl 12) : 60-70.
Soepenberg, O. et al., Clinical Cancer Research, (2005) 11, 703-711.
Takiguchi, S., et al., Jpn J. Cancer Res. (1997) 88, 760-769.
Vogel CL, et al., J Clin Oncol. 2002 ; 20 (3) : 719-726.
Wente M. N. et al., Investigational New Drugs (2005) 23, 339-347.
Yano T, et al., Oncol Rep. 2006 ; 15 (1) : 65-71.

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