KR20230109193A - Whitening cosmetic composition containing mixed extract peony, locust tree, blue lotus, saffron, cornflower using Lactobaciilus brevis - Google Patents

Abstract

본 발명은 락토바실러스 브레비스 균주를 이용한 작약꽃, 회화나무꽃, 푸른연꽃, 샤프란꽃, 수레국화꽃 혼합추출물을 유효성분으로 함유하는 미백에 효능을 갖는 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 화장료 조성물은, 작약꽃, 회화나무꽃, 푸른연꽃, 샤프란꽃, 수레국화꽃의 혼합추출물에 락토바실러스 브레비스 균주를 접종하여 발효시킨 것을 특징으로 한다.
본 발명에 의해 종래에 비해 미백 효능을 가일층 높일 수 있는 화장료 조성물이 제공된다.The present invention relates to a cosmetic composition having a whitening effect containing a mixed extract of a peony flower, a painting tree flower, a blue lotus flower, a saffron flower, and a cornflower flower using a strain of Lactobacillus brevis as an active ingredient.
The cosmetic composition of the present invention is characterized by fermenting a mixture of extracts of peony flower, painting tree flower, blue lotus flower, saffron flower, and cornflower flower by inoculating a strain of Lactobacillus brevis.
According to the present invention, a cosmetic composition capable of further enhancing the whitening efficacy compared to the prior art is provided.

Description

락토바실러스 브레비스 균주를 이용하여 발효시킨 작약꽃, 회화나무꽃, 푸른연꽃, 샤프란꽃, 수레국화꽃 혼합추출물을 유효성분으로 함유하는 미백에 효능을 갖는 화장료 조성물{Whitening cosmetic composition containing mixed extract peony, locust tree, blue lotus, saffron, cornflower using Lactobaciilus brevis}Cosmetic composition containing mixed extract peony, locust containing mixed extracts of peony flower, pine tree flower, blue lotus flower, saffron flower, and cornflower flower fermented using Lactobacillus brevis strain as an active ingredient tree, blue lotus, saffron, cornflower using Lactobaciilus brevis}

본 발명은 미백에 효능을 갖는 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로 락토바실러스 브레비스 균주를 이용하여 발효시킨 작약꽃, 회화나무꽃, 푸른연꽃, 샤프란꽃, 수레국화꽃 혼합추출물을 유효성분으로 함유하는 미백에 효능을 갖는 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition having a whitening effect, and more specifically, to a cosmetic composition containing as an active ingredient a mixed extract of peony flower, pine tree flower, blue lotus flower, saffron flower, and cornflower flower fermented using a Lactobacillus brevis strain. It relates to a cosmetic composition having a whitening effect.

피부는 외부 환경과 직접 접하면서 인체를 보호하며 생화학적이고 물리적인 기능을 가지고 있는 중요한 조직으로, 크게 3가지 즉, 표피 (epidermis), 진피 (dermis), 그리고, 피하 (hypodermis)로 나누어진다.Skin is an important tissue that protects the human body while directly contacting the external environment and has biochemical and physical functions, and is largely divided into three parts: epidermis, dermis, and hypodermis.

미백제란 자외선에 의한 기미, 주근깨 등을 완화시키고, 멜라닌 색소의 생성을 억제하기 위하여 개발된 제품으로 작용메카니즘에 따라 자외선 차단, 사이토킨(cytokine) 조절, 멜라닌 (melanin) 합성 저해, 티로시나제(tyrosinase) 활성 저해, 박리촉진등으로 나누어진다.A whitening agent is a product developed to alleviate spots and freckles caused by ultraviolet rays and to inhibit the production of melanin pigment. It is divided into inhibition and exfoliation promotion.

피부색에 영향을 주는 색소로는 멜라닌, 카로틴, 헤모글로빈 등이 있는데 이중 가장 중요한 것은 멜라닌으로 멜라닌의 생성은 인종과 지역, 성별, 나이에 따라 달라지며 과잉 생성된 멜라닌은 기미, 주근깨와 자외선 노출로 인한 태닝과 같은 부분, 또는 전체적인 색소침착, 그 외에 여드름 및 흉터 등의 원인이 된다.Pigments that affect skin color include melanin, carotene, and hemoglobin. Among them, the most important is melanin. The production of melanin varies depending on race, region, gender, and age. It causes areas such as tanning, or overall pigmentation, as well as acne and scars.

멜라닌의 생합성은 아미노산의 일종인 티로신 (tyrosine)이 멜라노사이트 (melanocyte) 멜라노좀 (melanosome)에서 티로시나제 (tyrosinase)에 의해 산화되어 디하이드록시 페닐알라닌 (dihydroxy phenylalanine)으로 전환되는 것을 시작으로 이루어진다. 이 후 일련의 효소적 산화과정 및 비효소적 산화과정을 거쳐 갈색(pheomelanin), 흑색 (eumelanin)의 중합체로 형성된다. 이러한 생합성 과정은 멜라노좀 이라는 특수한 형태의 갈색 세포 내 소기관에서 진행되며 멜라닌 과립을 포함하는 멜라노좀은 핵 주변 부위에서 수지상 돌기 끝부분으로 이동, 케라티노사이트의 식세포작용에 의해 세포질 내로 이동하고 이들은 케라티노사이트의 핵 주변에 축적된다.Biosynthesis of melanin begins with conversion of tyrosine, a kind of amino acid, to dihydroxy phenylalanine by oxidation by tyrosinase in melanosomes of melanocytes. After that, it is formed into brown (pheomelanin) and black (eumelanin) polymers through a series of enzymatic and non-enzymatic oxidation processes. This biosynthetic process proceeds in a special type of brown cell organelle called melanosome. Melanosomes containing melanin granules move from the perinuclear region to the tip of dendrites and move into the cytoplasm by phagocytosis of keratinocytes. It accumulates around the nucleus of Latinocytes.

멜라닌의 합성과 멜라노좀의 수, 주위의 케라티노사이트로의 이동은 유전적인 요소뿐 아니라 호르몬과 자외선등의 영향을 받는다. 그 밖에 티로시나제의 발현 및 멜라닌의 합성, 전송에 관여하는 세포 내 조절인자인 사이토킨, 구리, 아연, 철 등의 금속 이온 및 인터페론, 프로스타글란딘, 히스타민 등이 관여하는 것으로 알려져 있다. 이러한 멜라닌 생성에 가장 중요한 역할을 하는 것은 티로시나제로 이 효소의 활성을 억제하여 피부의 미백 효과를 기대할 수 있다.The synthesis of melanin, the number of melanosomes, and movement to surrounding keratinocytes are affected by hormones and ultraviolet rays as well as genetic factors. In addition, it is known that cytokines, which are intracellular regulators involved in expression of tyrosinase and synthesis and transmission of melanin, metal ions such as copper, zinc, and iron, and interferon, prostaglandin, and histamine are involved. The most important role in melanin production is tyrosinase, which suppresses the activity of this enzyme, so that skin whitening effect can be expected.

현재까지 알려진 티로시나제 저해제로 알부틴, 하이드로퀴논 (hydroquinone), 하이드록시애니졸(hydroxyanisole), 아스코르브산 (ascorbic acid) 유도체, 코직산 (kojic acid), 레티노이드 (retinoids) 등이 있으나, 일부 저해제는 돌연변이를 유발하여 발암가능성이 있다는 실험결과가 있으며 그 외에도 안전성과 경제성, 경피를 통한 흡수성 등의 문제점이 있다. 이러한 문제점 때문에, 강한 저해활성을 지니며 안전성 및 경제성이 모두 보장되는 저해제의 개발이 요구되고 있다. 또한, 미백화장품 소재개발 연구는 멜라노좀까지의 침투능력, 케라티노사이트와의 상호관계, 표피세포의 분화재생 능력 등 다각적인 검토가 필요하며, 기존 미백물질들의 한계점과 문제점을 극복하고 보다 우수한 원료물질을 찾기 위하여 안전성이 입증되어 있는 천연물 중에서 유효소재를 탐색할 필요성이 있다.Tyrosinase inhibitors known to date include arbutin, hydroquinone, hydroxyanisole, ascorbic acid derivatives, kojic acid, and retinoids, but some inhibitors cause mutations. In addition, there are problems such as safety, economy, and absorption through the skin. Because of these problems, there is a demand for the development of inhibitors that have strong inhibitory activity and ensure both safety and economy. In addition, research on the development of materials for whitening cosmetics requires multilateral review, such as the ability to penetrate melanosomes, the relationship with keratinocytes, and the ability to differentiate and regenerate epidermal cells. In order to find a substance, there is a need to search for an effective material among natural products whose safety has been proven.

작약(芍藥, Jakyak, Paeoniae radix)은 참작약 및 동속 식물의 뿌리로서 매우 중요한 생약 중의 하나이다. 잎은 어긋나고, 잎자루는 길며, 2회 삼출 겹잎으로 작은 잎은 타원형이며, 톱니는 없다. 꽃은 줄기 끝에 한 개씩 나며, 5~6월에 흰 꽃이 핀다. 생약으로는 뿌리를 말린 것이며, 생지는 산의 나무 그늘에서 자란다. 우리나라 전국에 분포되어 있으며, 한방에서는 3월과 8월에 땅속줄기를 채취하여 햇볕에 말려 치조(治操), 양혈제(凉血劑), 보혈(補血), 익비(益脾), 지통(止痛)에 사용한다. 한방에서는 수렴완화(收斂緩和), 진경(鎭痙), 진통제(鎭痛劑)로서 사용되어 왔으며, 계지가화균약탕 등으로 사용되어 왔다. 과실은 골돌과로서 1~3개이고, 뿔 모양으로 홍색의 성숙하지 않은 종자와 흑색의 성숙한 종자가 노출된다. 번식은 분근을 하거나 종자를 이용한다. 약용으로 쓰이는 작약은 미나리아재비과(Ranuculaceae) 작약속(Paeonia)에 속하는 약용작물로서 초본인 작약과 목본인 모란으로 구분된다. 국내에서 재배되는 작약은 식물 분류 면에서 적작약(Paeonia lactiflora Pall), 백작약(Paeonia obovata Max.) 및 산작약(Paeonia japonica Miyabe et Takeda)으로 구분되며, 국내에서는 적작약의 변종이 주로 재배되고 있다고 알려져 있다(윤평섭, 한국원예식물도감, 1995).Peony (芍藥, Jakyak, Paeoniae radix) is one of the most important herbal medicines as a root of a peony and a plant of the same genus. Leaves are alternate, petioles are long, double exuded compound leaves, small leaves are elliptical, and have no sawtooth. Flowers come out one by one at the end of the stem, and white flowers bloom in May-June. As a crude drug, the roots are dried, and the raw material grows in the shade of trees in the mountains. It is distributed throughout Korea, and in oriental medicine, the underground stems are collected in March and August and dried in the sun to treat alveolar, yang blood, blood, blood, Ikbi, and pain ( It is used for 止痛. In oriental medicine, it has been used as a convergence relief, antispasmodic, and analgesic, and has been used as a gyejihwagyun yaktang. The fruit is a gobletaceae, with 1 to 3, horn-shaped, red immature seeds and black mature seeds are exposed. Propagation is by rooting or seed. Peonies used for medicinal purposes are medicinal crops belonging to the Paeonia genus of the Ranuculaceae family, and are classified into herbaceous peonies and woody peonies. Peonies grown in Korea are classified into Paeonia lactiflora Pall, Paeonia obovata Max., and Paeonia japonica Miyabe et Takeda in terms of plant classification, and it is known that varieties of Red Peony are mainly cultivated in Korea ( Yoon Pyeong-seop, Korean Horticultural Plant Encyclopedia, 1995).

"미백 기능을 갖는 작약 꽃 추출물 및 그 제조방법"(한국 등록특허공보 제10-0993603호, 특허문헌 1)에서는 작약 꽃 추출물을 티로시나아제 저해활성 실험을 실시하여 알부틴에 비해 미백 효과가 탁월하다는 점을 검증한 바 있다.In "Peony flower extract having whitening function and its preparation method" (Korean Patent Publication No. 10-0993603, Patent Document 1), a tyrosinase inhibitory activity test was conducted on the peony flower extract, and it was found that the whitening effect was excellent compared to arbutin. point has been verified.

회화나무(Sophora japonica L., Leguminosae)의 꽃봉오리를 말린 것을 괴화 (Sophorae Flos)라고 하여 한방에서 항고혈압, 출혈치료, 해열, 수렴, 지혈, 진정등의 목적으로 처방하고 있다. 성분으로 플라보노이드 화합물이 많으며 그 외 트리털피노이드 (triterpenoid)류도 함유하고 있다. 꿀을 많이 함유하고 있는 회화나무 꽃은 황색염료로 사용하며 괴화차로 만들어 고혈압의 예방에 쓰기도 한다. The dried flower buds of Sophora japonica L., Leguminosae are called Sophorae Flos and are prescribed for the purposes of antihypertensive, hemorrhagic treatment, antipyretic, astringent, hemostasis, and sedation in oriental medicine. It contains many flavonoid compounds as ingredients and also contains other triterpenoids. The flowers of the locust tree, which contains a lot of honey, are used as a yellow dye, and are also used to prevent high blood pressure by making infertility tea.

"회화나무꽃 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 주름 개선용 조성물"(한국 등록특허공보 제10-1289813호, 특허문헌 2)에서는 회화나무꽃의 염화메틸렌 분획물이 티로시나아제 억제 효과가 있는 지 검증한 바 있다.In the "Composition for improving skin wrinkles containing extracts of Porphyra japonica as an active ingredient" (Korean Patent Publication No. 10-1289813, Patent Document 2), it was verified whether the methylene chloride fraction of Pagoda japonica flowers has a tyrosinase inhibitory effect. have done

하지만 세포독성 실험에서 회화나무꽃 추출물이 100㎍/ml에서 세포 독성이 있는 것으로 실험 보고되었다.However, in the cytotoxicity test, it was reported that the extract of Porphyra sinensis was cytotoxic at 100 μg/ml.

"푸른연꽃(Nymphaea Caerulea)"은 물 속에서 가련한 꽃을 피우는 수련과 연꽃은 물의 요정이라 일컬어진다. 이집트 신화에서 태초의 물에서 솟아오른 연꽃으로 기록되어 있다. 고대 이집트에서는 옛날부터 특히 하늘색 련을 귀중하게 여겼는데, 꽃잎이 태양의 햇살처럼 퍼지고 아침에 피었다가 저녁에 오므라들며, 토지와 생물에 생명을 주는 나일강에서 자라 더욱 귀중한 것으로 생각하였다. 푸른 연꽃의 꽃잎, 씨앗등은 마음을 안정시키는 효능이 있는 것으로 알려져 있다.The "blue lotus (Nymphaea Caerulea)" is said to be a water lily and a lotus flower that blooms in the water as a water fairy. In Egyptian mythology, it is recorded as a lotus that rose from the primordial water. In ancient Egypt, the sky-blue lotus was especially valued since ancient times. The petals spread like the sun's rays, bloom in the morning and close in the evening, and were considered more valuable as they grew in the Nile River, which gives life to land and living things. The petals and seeds of the blue lotus are known to have the effect of stabilizing the mind.

"혼합 추출물을 포함하는 화장료 조성물"(한국 공개특허공보 제10-2017-0136958호, 특허문헌 3)에서는 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물을 유효 성분으로 포함하는 화장료 조성물이 멜라닌 생성 억제 효과를 발휘하는 실험 결과가 나타나 있기도 하다.In "Cosmetic Composition Containing Mixed Extract" (Korean Patent Publication No. 10-2017-0136958, Patent Document 3), a cosmetic composition containing a mixed extract of blue lotus and water lily as an active ingredient exhibits melanin production inhibitory effect Experimental results are also presented.

"락토바실러스를 이용한 병풀, 접시꽃, 푸른연꽃, 쓴풀 화장료용 발효물 및 그 제조방법과 화장료용 발효물을 함유한 상처치유, 피부 재생, 진정, 및 항염 효능을 갖는 화장료 조성물"(한국 등록특허공보 제10-2167786호, 특허문헌 4)에는 푸른연꽃에 병풀, 접시꽃, 쓴풀을 혼합하여 추출한 다음 이 추출물에 락토바실러스 쿠르바투스를 접종시켜 발효시킨 조성물에 대해 소개되어 있기도 하다."Cosmetic composition containing fermented product for cosmetic use of centella, hollyhock, blue lotus, and bitter plant using Lactobacillus, manufacturing method thereof, and cosmetic composition having wound healing, skin regeneration, soothing, and anti-inflammatory effects" (Korean Registered Patent Publication) No. 10-2167786, Patent Document 4) also introduces a composition obtained by inoculating and fermenting the extract with Lactobacillus curvatus after extracting a mixture of centella, hollyhock, and bitter grass in blue lotus.

그러나, 특허문헌 4에서는 푸른연꽃 외에 작약꽃이나 회화나무꽃에 대해 소개되어 있지 아니하며, 발효 균주도 본 발명의 락토바실러스 브레비스와 상이하다.However, in Patent Literature 4, peony flowers or pine flowers other than blue lotus are not introduced, and the fermentation strain is also different from the Lactobacillus brevis of the present invention.

샤프란(Crocus sativus)은 붓꽃과에 속하는 식물로 지구상에서 가장 비싼 향신료로 알려져 있다. 샤프란은 비타민과 미네랄이 풍부하고 항산화 성분을 가지고 있어 천식, 불면, 동맥 경화, 높은 혈압, 기억력 저하 현상을 완화하는 데도 도움을 주며 뇌세포 보호, 염증 개선, 해독 작용 및 세포 기능 활성화에도 효능이 있다고 알려져 있다.Saffron (Crocus sativus) is a plant belonging to the iris family and is known as the most expensive spice on earth. Saffron is rich in vitamins and minerals and has antioxidants, so it helps to relieve asthma, insomnia, hardening of the arteries, high blood pressure, and memory loss, and is also effective in protecting brain cells, improving inflammation, detoxifying, and activating cell functions. It is known.

"식용 꽃 혼합추출물을 함유하는 피부개선용 화장료 조성물"(한국 공개특허공보 제10-2021-0090770호, 특허문헌 5)에는 샤프란 꽃, 한련 꽃, 히비스커스 꽃 혼합추출물을 이용한 화장료 조성물에 대해 소개되어 있으나, 주름 개선, 보습, 피부 세포 재생, 자극 완화 등에 대한 효과만 소개되어 있을 뿐, 미백 효과에 대해서는 소개되어 있지 아니하다.In "Cosmetic Composition for Skin Improvement Containing Mixed Edible Flower Extract" (Korean Patent Publication No. 10-2021-0090770, Patent Document 5), a cosmetic composition using mixed extracts of saffron flowers, nasturtium flowers, and hibiscus flowers is introduced. However, only the effects on wrinkle improvement, moisturizing, skin cell regeneration, irritation relief, etc. are introduced, and the whitening effect is not introduced.

수레국화(Centaurea cyanus)는 피부를 생기있게 하고, 특히 건성피부에 효과적이며, 꽃의 침출액이 수렴성이 있어 산성 화장수로 쓰이며 눈이 피로하거나 염증이 있을 때에는 잎의 침축액을 안약으로 쓰고 있다.Cornflower (Centaurea cyanus) revitalizes the skin, is particularly effective for dry skin, and the extract of the flower has astringent properties, so it is used as an acidic lotion, and when the eyes are tired or inflamed, the saliva of the leaves is used as eye drops.

"피부 보습 및 피부 진정용 허브 화장료 조성물 및 그 제조방법"(한국 등록특허공보 제10-1119337호, 특허문헌 6)에는 수레국화 추출물 외에 보리지, 라벤더, 캐모마일, 클라리세이지, 히야신스 추출물을 포함하는 화장료 조성물이 소개되어 있으나, 미백에 대한 실험은 개시되어 있지 아니하다."Herbal cosmetic composition for skin moisturizing and skin soothing and manufacturing method thereof" (Korean Patent Publication No. 10-1119337, Patent Document 6) includes extracts of borage, lavender, chamomile, clary sage, and hyacinth in addition to cornflower extract. A cosmetic composition has been introduced, but experiments on whitening have not been disclosed.

이상 살펴본 바와 같이 작약꽃, 회화나무꽃, 푸른연꽃, 샤프란꽃, 수레국화꽃은 각각 화장료 조성물의 원료로 소개된 바 있고, 일부 원료는 미백에 관한 효과가 있음이 설명되어 있다.As described above, peony flower, pine tree flower, blue lotus flower, saffron flower, and cornflower flower have been introduced as raw materials of cosmetic compositions, respectively, and it is explained that some raw materials have a whitening effect.

하지만 일부는 미백 개선에 대한 효과가 입증된 바가 없으며, 또 락토바실러스 균주의 종류에 따른 미백 효과의 차이에 대한 내용도 개시된 바가 없는 실정이다.However, some of them have not been proven to have a whitening improvement effect, and there is no disclosure of differences in whitening effects depending on the type of Lactobacillus strain.

KR 10-0993603 (2010.11.04)KR 10-0993603 (2010.11.04) KR 10-1289813 (2013.07.19)KR 10-1289813 (2013.07.19) KR 10-2017-0136958 (2017.12.12)KR 10-2017-0136958 (2017.12.12) KR 10-2167786 (2020.10.13)KR 10-2167786 (2020.10.13) KR 10-2021-0090770 (2021.07.21)KR 10-2021-0090770 (2021.07.21) KR 10-1119337 (2012.02.15)KR 10-1119337 (2012.02.15)

본 발명의 락토바실러스 브레비스 균주를 이용한 작약꽃, 회화나무꽃, 푸른연꽃, 샤프란꽃, 수레국화꽃 혼합추출물을 유효성분으로 함유하는 미백에 효능을 갖는 화장료 조성물은 상기와 같은 종래 기술에서 발생하는 문제점을 해소하기 위한 것으로 미백 효능을 가일층 높일 수 있는 화장료 조성물을 제공하려는 것이다.A cosmetic composition having efficacy in whitening containing a mixed extract of peony flower, pine tree flower, blue lotus flower, saffron flower, and cornflower flower using the Lactobacillus brevis strain of the present invention as an active ingredient is a problem that occurs in the prior art as described above. It is intended to provide a cosmetic composition that can further increase the whitening efficacy.

본 발명의 락토바실러스 브레비스 균주를 이용한 작약꽃, 회화나무꽃, 푸른연꽃, 샤프란꽃, 수레국화꽃 혼합추출물을 유효성분으로 함유하는 미백에 효능을 갖는 화장료 조성물은 상기한 과제를 해결하기 위하여, 작약꽃, 회화나무꽃, 푸른연꽃, 샤프란꽃, 수레국화꽃의 혼합추출물에 락토바실러스 브레비스 균주를 접종하여 발효시킨 발효혼합추출물을 유효성분으로 포함한다.In order to solve the above problems, a cosmetic composition having efficacy in whitening containing a mixed extract of peony flower, painting tree flower, blue lotus flower, saffron flower, and cornflower flower using the Lactobacillus brevis strain of the present invention as an active ingredient, It contains as an active ingredient a fermented mixed extract obtained by inoculating and fermenting a mixed extract of flowers, painting tree flower, blue lotus flower, saffron flower, and cornflower flower with Lactobacillus brevis strain.

상기한 구성에 있어서, 상기 혼합추출물은, 작약꽃, 회화나무꽃, 푸른연꽃, 샤프란꽃, 수레국화꽃을 2.5 ~ 4.5 : 2.5 ~ 4.5 : 0.5 ~ 1.5 : 0.5 ~ 1.5 : 0.5 ~ 1.5의 중량비로 혼합한 혼합물을 추출한 것을 특징으로 한다.In the above configuration, the mixed extract is composed of peony flower, pine tree flower, blue lotus flower, saffron flower, and cornflower flower in a weight ratio of 2.5 to 4.5: 2.5 to 4.5: 0.5 to 1.5: 0.5 to 1.5: 0.5 to 1.5. It is characterized by extracting the mixed mixture.

상기한 구성에 있어서, 상기 혼합추출물은, 작약꽃, 회화나무꽃, 푸른연꽃, 샤프란꽃, 수레국화꽃을 3.5 : 3.5 : 1 : 1 : 1의 중량비로 혼합한 혼합물을 추출한 것을 특징으로 한다.In the above configuration, the mixed extract is characterized by extracting a mixture obtained by mixing peony flower, pine tree flower, blue lotus flower, saffron flower, and cornflower flower in a weight ratio of 3.5: 3.5: 1: 1: 1.

상기한 구성에 있어서, 혼합추출물은 상기 혼합물 100 중량부 대비 50,000 ~ 15,000 중량부의 물을 가하여 2 ~ 4시간 동안 열수 추출하여 수득한 것을 특징으로 한다.In the above configuration, the mixed extract is characterized in that it is obtained by hot water extraction for 2 to 4 hours by adding 50,000 to 15,000 parts by weight of water based on 100 parts by weight of the mixture.

상기한 구성에 있어서, 브룬펠시아 잎 추출물이 상기 락토바실러스 브레비스 균주에 의해 발효된 혼합추출물에 첨가되어 있되, 상기 혼합추출물과 브룬펠시아 잎 추출물은 9 : 1의 중량비로 혼합된 것을 특징으로 한다.In the above configuration, the brunfelcia leaf extract is added to the mixed extract fermented by the Lactobacillus brevis strain, and the mixed extract and brunfelcia leaf extract are mixed at a weight ratio of 9: 1. .

본 발명에 의해 종래에 비해 미백 효능을 가일층 높일 수 있는 화장료 조성물이 제공된다.According to the present invention, a cosmetic composition capable of further enhancing the whitening efficacy compared to the prior art is provided.

도 1은 본 발명에서 세포 독성 실험 결과를 나타낸 그래프.
도 2는 본 발명에서 멜라닌 함량 측정 결과를 나타낸 그래프.
도 3은 본 발명에서 티로시나아제 측정 결과를 나타낸 그래프.
도 4는 본 발명에서 MITF 측정 결과를 나타낸 그래프.1 is a graph showing the results of cytotoxicity experiments in the present invention.
Figure 2 is a graph showing the melanin content measurement results in the present invention.
Figure 3 is a graph showing the tyrosinase measurement results in the present invention.
4 is a graph showing MITF measurement results in the present invention.

본 발명은 락토바실러스 브레비스 균주를 이용한 작약꽃, 회화나무꽃, 푸른연꽃, 샤프란꽃, 수레국화꽃 혼합추출물을 유효성분으로 함유하는 미백에 효능을 갖는 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition having a whitening effect containing a mixed extract of a peony flower, a painting tree flower, a blue lotus flower, a saffron flower, and a cornflower flower using a strain of Lactobacillus brevis as an active ingredient.

본 발명의 화장료 조성물은 작약꽃, 회화나무꽃, 푸른연꽃, 샤프란꽃, 수레국화꽃의 혼합추출물에 락토바실러스 브레비스 균주를 접종하여 발효시킨 발효혼합추출물을 유효성분으로 포함한다.The cosmetic composition of the present invention contains, as an active ingredient, a fermented mixed extract obtained by inoculating and fermenting a mixture of extracts of peony flower, painting tree flower, blue lotus flower, saffron flower, and cornflower flower with Lactobacillus brevis strain.

이때, 상기 혼합추출물은, 작약꽃, 회화나무꽃, 푸른연꽃, 샤프란꽃, 수레국화꽃을 2.5 ~ 4.5 : 2.5 ~ 4.5 : 0.5 ~ 1.5 : 0.5 ~ 1.5 : 0.5 ~ 1.5의 중량비로 혼합한 혼합물을 추출한 것을 특징으로 한다.At this time, the mixed extract is a mixture obtained by mixing peony flower, painting tree flower, blue lotus flower, saffron flower, and cornflower flower in a weight ratio of 2.5 to 4.5: 2.5 to 4.5: 0.5 to 1.5: 0.5 to 1.5: 0.5 to 1.5. characterized by extraction.

상기 혼합추출물은 보다 바람직하기로는, 작약꽃, 회화나무꽃, 푸른연꽃, 샤프란꽃, 수레국화꽃을 3.5 : 3.5 : 1 : 1 : 1의 중량비로 혼합한 혼합물을 추출한 것을 특징으로 한다.More preferably, the mixed extract is characterized by extracting a mixture obtained by mixing peony flower, painting tree flower, blue lotus flower, saffron flower, and cornflower flower in a weight ratio of 3.5: 3.5: 1: 1: 1.

아울러, 상기 혼합추출물은 상기 혼합물 100 중량부 대비 50,000 ~ 15,000 중량부의 물을 가하여 2 ~ 4시간 동안 열수 추출하여 수득한 것을 특징으로 한다.In addition, the mixed extract is characterized in that obtained by hot water extraction for 2 to 4 hours by adding 50,000 to 15,000 parts by weight of water based on 100 parts by weight of the mixture.

또한, 브룬펠시아 잎 추출물이 상기 락토바실러스 브레비스 균주에 의해 발효된 혼합추출물에 첨가되어 있되, 상기 혼합추출물과 브룬펠시아 잎 추출물은 9 : 1의 중량비로 혼합된 것을 특징으로 한다.In addition, the brunfelsia leaf extract is added to the mixed extract fermented by the Lactobacillus brevis strain, and the mixed extract and brunfelsia leaf extract are mixed at a weight ratio of 9:1.

이하, 본 발명의 실시예에 대해 설명하기로 한다.Hereinafter, embodiments of the present invention will be described.

<실시예 1><Example 1>

작약꽃 3.5g, 회화나무꽃 3.5g, 푸른연꽃 1g, 샤프란꽃 1g, 수레국화꽃 1g을 혼합한 원물 10g에 90℃의 열수 1 kg을 넣고 3시간 동안 열수 추출하고, 추출물을 냉각한 다음 0.45㎛ 크기의 여과지로 여과 처리하였다.Add 1 kg of hot water at 90℃ to 10 g of raw material mixed with 3.5 g of peony flower, 3.5 g of Chinese apricot flower, 1 g of blue lotus flower, 1 g of saffron flower, and 1 g of cornflower flower, extract with hot water for 3 hours, cool the extract, and then add 0.45 It was filtered through a ㎛-sized filter paper.

여과 처리한 추출물을 멸균을 위해서 121℃, 15 psi의 조건으로 오토클래이브를 한 후에 방냉하였다.For sterilization, the filtered extract was autoclaved under conditions of 121° C. and 15 psi, and then allowed to cool.

이어 멸균 처리된 추출물에 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis) J2k-55 균주를 50ml 접종한 다음 35℃, 48시간, 150rpm의 조건으로 발효 처리하였다.Subsequently, 50 ml of Lactobacillus brevis J2k-55 strain was inoculated into the sterilized extract, and then fermented under conditions of 35° C., 48 hours, and 150 rpm.

발효 처리가 완료된 추출물을 실활을 한 후 0.45㎛ 크기의 여과지로 여과 처리한 다음 여과액을 감압 농축 및 진공 건조하여 분말상의 발효혼합추출물을 수득하였다.The fermented extract was inactivated, filtered through a 0.45 μm filter paper, and then the filtrate was concentrated under reduced pressure and vacuum dried to obtain a powdery fermented mixture extract.

이하, 상기 실시예와 비교하기 위한 비교예에 대해 설명하기로 한다.Hereinafter, a comparative example for comparison with the above embodiment will be described.

<비교예 1 내지 10><Comparative Examples 1 to 10>

하기 표 1의 배합에 따른 원물 10g에 90℃의 열수 1 kg을 넣고 3시간 동안 열수 추출하고, 추출물을 냉각한 다음 0.45㎛ 크기의 여과지로 여과 처리한 다음, 여과액을 감압 농축 및 진공 건조하여 분말을 수득하였다.1 kg of hot water at 90 ° C. was added to 10 g of the raw material according to the formulation of Table 1, followed by hot water extraction for 3 hours, cooling the extract, filtering with a 0.45 μm filter paper, and then concentrating the filtrate under reduced pressure and drying in vacuum. A powder was obtained.

원물 혼합
(g)original mix
(g) 작약꽃peony flower 회화나무꽃painting tree flower 푸른연꽃blue lotus 샤프란saffron 수레국화꽃cornflower 비교예 1Comparative Example 1 1010 00 00 00 00 비교예 2Comparative Example 2 00 1010 00 00 00 비교예 3Comparative Example 3 00 00 1010 00 00 비교예 4Comparative Example 4 00 00 00 1010 00 비교예 5Comparative Example 5 00 00 00 00 1010 비교예 6Comparative Example 6 22 22 22 22 22 비교예 7Comparative Example 7 3.53.5 1One 3.53.5 1One 1One 비교예 8Comparative Example 8 3.53.5 3.53.5 1One 1One 1One 비교예 9Comparative Example 9 1One 1One 1One 3.53.5 3.53.5 비교예 10Comparative Example 10 1One 3.53.5 1One 3.53.5 1One

<비교예 11 내지 13><Comparative Examples 11 to 13>

실시예 1과 동일하게 진행하되, 락토바실러스 플란타넘 J2K-27 균주를 접종한 것을 비교예 11로, 락토바실러스 펜토서스 J2K-185 균주를 접종한 것을 비교예 12로, 락토바실러스 쿠르바투스 J2K-01 균주를 접종한 것을 비교예 13으로 제조하였다.Proceed in the same manner as in Example 1, except that the Lactobacillus plantanum J2K-27 strain was inoculated as Comparative Example 11, and the Lactobacillus pentosus J2K-185 strain was inoculated as Comparative Example 12, and Lactobacillus curvatus J2K Inoculated with -01 strain was prepared in Comparative Example 13.

이하에서는 실시예와 비교예를 이용한 실험예에 대해 설명하기로 한다.Hereinafter, experimental examples using Examples and Comparative Examples will be described.

<실험예 1> 실시예 및 비교예의 세포 독성 확인 실험<Experimental Example 1> Cytotoxicity confirmation test of Examples and Comparative Examples

실시예 및 비교예의 세포 독성을 확인하기 위하여 MTT assay를 진행하였다.In order to confirm the cytotoxicity of Examples and Comparative Examples, MTT assay was performed.

96-well plate에 세포배양 배지(DMEM에 10% FBS가 첨가된 것)에 희석된 멜라닌형성세포(B16-F0)를 2.4 x 10³ cells/well 개씩 넣고 24시간 동안 부착시켰다. In a 96-well plate, 2.4 x 10 ³ cells/well of melanocytes (B16-F0) diluted in cell culture medium (DMEM to which 10% FBS was added) were placed and adhered for 24 hours.

실시예 및 비교예들을 계열 희석하여 각 웰에 처리한 후 72시간 동안 배양하였다. Examples and Comparative Examples were serially diluted and cultured for 72 hours after treatment in each well.

72시간이 지나면 배지를 제거하고, 500 ug/ml의 농도로 녹여진 MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide) 용액을 각 웰에 100 μL를 넣은 후 1시간 동안 37℃ CO₂ 배양기에서 반응하였다. After 72 hours, the medium was removed, and 100 μL of MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide) solution dissolved at a concentration of 500 μg/ml was added to each well. Reacted in a 37°C CO ₂ incubator for 1 hour.

배지를 제거하고 DMSO(Dimethyl sulfoxide)를 100 uL씩 넣어주었다. The medium was removed and 100 uL of DMSO (Dimethyl sulfoxide) was added.

1 시간 동안 차광반응시켜 생성된 formazan을 완전히 용해 시킨 후 마이크로플레이트 판독기에서 590 nm 흡광도를 측정하였다.After completely dissolving the formazan generated by light-shielding reaction for 1 hour, absorbance at 590 nm was measured in a microplate reader.

수학식 1과 같이 세포 생존율(%)을 정하였으며, 세포의 생존에 영향을 미치지 않는 시료의 농도를 결정하여 그 결과를 표 2 및 도 1에 나타내었다.The cell viability (%) was determined as in Equation 1, and the concentration of the sample that did not affect cell viability was determined, and the results are shown in Table 2 and FIG. 1.

<수학식 1><Equation 1>

세포생존율(%) = (sample absorbance / control absorbance)*100Cell viability (%) = (sample absorbance / control absorbance)*100

구분　division Cell viability (%)Cell viability (%) Standard deviationstandard deviation UntreatedUntreated 100100 0.250.25 ControlControl 100.35100.35 1.231.23 비교예1
(ppm)Comparative Example 1
(ppm) 5050 101.59101.59 4.224.22 100100 98.2698.26 1.621.62 250250 96.4896.48 3.423.42 비교예2Comparative Example 2 5050 99.6199.61 3.123.12 100100 98.5998.59 0.640.64 　(ppm)(ppm) 250250 101.26101.26 0.980.98 비교예3
(ppm)Comparative Example 3
(ppm) 5050 100.25100.25 1.341.34 100100 101.32101.32 2.752.75 250250 99.1599.15 2.612.61 비교예4
(ppm)Comparative Example 4
(ppm) 5050 100.25100.25 1.41.4 100100 101.32101.32 0.160.16 250250 98.8198.81 1.321.32 비교예5
(ppm)Comparative Example 5
(ppm) 5050 99.6299.62 2.162.16 100100 101.42101.42 1.321.32 250250 100.32100.32 0.110.11 비교예6
(ppm)Comparative Example 6
(ppm) 5050 101.25101.25 1.221.22 100100 99.499.4 2.942.94 250250 103.1103.1 1.571.57 비교예7
(ppm)Comparative Example 7
(ppm) 5050 97.2697.26 3.143.14 100100 9898 1.021.02 250250 99.5199.51 0.30.3 비교예8
(ppm)　Comparative Example 8
(ppm) 5050 102.3102.3 1.551.55 100100 101.21101.21 1.11.1 250250 100.43100.43 3.593.59 비교예9
(ppm)Comparative Example 9
(ppm) 5050 99.6199.61 2.042.04 100100 98.5198.51 0.310.31 250250 100.25100.25 0.250.25 비교예10
(ppm)Comparative Example 10
(ppm) 5050 101.32101.32 2.12.1 100100 98.2198.21 2.952.95 250250 99.1299.12 1.341.34 비교예11
(ppm)Comparative Example 11
(ppm) 5050 101.25101.25 1.351.35 100100 100.35100.35 1.61.6 250250 102.21102.21 3.423.42 비교예12
(ppm)Comparative Example 12
(ppm) 5050 101.05101.05 3.213.21 100100 99.8599.85 0.620.62 250250 100.02100.02 0.690.69 비교예13
(ppm)Comparative Example 13
(ppm) 5050 99.5899.58 1.341.34 100100 101.2101.2 2.322.32 250250 102.13102.13 2.332.33 실시예1
(ppm)Example 1
(ppm) 5050 99.899.8 0.750.75 100100 101.2101.2 0.380.38 250250 98.998.9 1.311.31 Arbutin(㎛)Arbutin (μm) 100100 100.64100.64 0.09 0.09

(실시예 및 비교예들의 단위는 ppm)(The unit of Examples and Comparative Examples is ppm)

상기 실험 결과 세포 생존율에 있어서는 실시예와 비교예 간의 큰 차이가 없는 것으로 나타났다.As a result of the above experiment, it was found that there was no significant difference between Examples and Comparative Examples in cell viability.

<실험예 2> 실시예 및 비교예의 멜라닌 함량 측정 실험<Experimental Example 2> Experiments for measuring melanin content in Examples and Comparative Examples

실시예 및 비교예의 미백효과를 측정하기 위해 B16-F0 세포를 96 well plate에 2.4 × 10³ cells/well로 분주하여, 5% CO₂가 공급되는 37℃ 습윤 배양기에서 24 시간 배양하였다.In order to measure the whitening effect of Examples and Comparative Examples, B16-F0 cells were dispensed at 2.4 × 10 ³ cells/well in a 96 well plate and cultured for 24 hours in a 37° C. wet incubator supplied with 5% CO ₂ .

96 well plate에 계열 희석한 sample 및 자극제를 각각 처리하였다. Serially diluted samples and stimulants were treated in a 96 well plate, respectively.

이때, 자극제인 α-MSH(alpha-Melanocyte stimulating hormone)의 최종 농도는 100 ng/mL 되도록 하였다. At this time, the final concentration of the stimulating agent α-MSH (alpha-Melanocyte stimulating hormone) was set to 100 ng/mL.

72 시간 배양 완료된 세포의 상층액을 405 nm에서 흡광도를 측정하였다. The absorbance of the supernatant of the cells after 72 hours of culture was measured at 405 nm.

Control은 α-MSH 100 ng/mL을 처리한 세포의 O.D 값을 이용하였다. Melanin contents (%)는 수학식 2를 이용하여 계산하여 그 결과를 표 3과 도 2에 나타내었다.As a control, the O.D value of cells treated with 100 ng/mL of α-MSH was used. Melanin contents (%) was calculated using Equation 2, and the results are shown in Table 3 and FIG. 2.

<수학식 2><Equation 2>

Melanin contents(%) = (sample absorbance / control absorbance)*100Melanin contents (%) = (sample absorbance / control absorbance)*100

　구분division Melanin contents(%)Melanin contents (%) Standard eviationStandard eviction UntreatedUntreated 12.7412.74 1.21.2 ControlControl 100100 0.130.13 비교예1
(ppm)Comparative Example 1
(ppm) 5050 102.55102.55 0.050.05 100100 95.6795.67 1.081.08 250250 94.8894.88 1.221.22 비교예2
(ppm)Comparative Example 2
(ppm) 5050 98.2298.22 2.162.16 100100 93.5193.51 1.871.87 250250 92.6792.67 1.061.06 비교예3
(ppm)Comparative Example 3
(ppm) 5050 101.51101.51 2.152.15 100100 97.5897.58 0.420.42 250250 100.21100.21 1.151.15 비교예4
(ppm)Comparative Example 4
(ppm) 5050 100.15100.15 2.42.4 100100 94.2894.28 3.273.27 250250 93.5193.51 1.091.09 비교예5
(ppm)Comparative Example 5
(ppm) 5050 98.2298.22 0.870.87 100100 91.2891.28 2.092.09 250250 92.1592.15 1One 비교예6Comparative Example 6 5050 98.2298.22 2.42.4 100100 95.4295.42 3.423.42 　(ppm)(ppm) 250250 99.8499.84 1.771.77 비교예7
(ppm)　Comparative Example 7
(ppm) 5050 96.2596.25 4.194.19 100100 96.7896.78 1.471.47 250250 94.2594.25 2.642.64 비교예8
(ppm)Comparative Example 8
(ppm) 5050 88.4988.49 1.791.79 100100 79.2579.25 3.973.97 250250 75.5675.56 1.281.28 비교예9
(ppm)Comparative Example 9
(ppm) 5050 96.2496.24 3.143.14 100100 95.1695.16 1.651.65 250250 92.5492.54 4.254.25 비교예10
(ppm)Comparative Example 10
(ppm) 5050 98.2298.22 2.42.4 100100 99.4899.48 1.581.58 250250 97.1597.15 1.281.28 비교예11
(ppm)Comparative Example 11
(ppm) 5050 89.2489.24 2.312.31 100100 81.2781.27 3.233.23 250250 78.8678.86 4.214.21 비교예12
(ppm)Comparative Example 12
(ppm) 5050 90.2190.21 0.360.36 100100 85.5285.52 4.254.25 250250 78.8678.86 3.513.51 비교예13
(ppm)Comparative Example 13
(ppm) 5050 91.4291.42 1.871.87 100100 86.6886.68 3.213.21 250250 82.4382.43 4.214.21 실시예 1
(ppm)Example 1
(ppm) 5050 78.5678.56 3.143.14 100100 74.3174.31 1.251.25 250250 61.2561.25 0.84 0.84 Arbutin (μM)Arbutin (μM) 100100 49.1849.18 1.37 1.37

(실시예 및 비교예들의 단위는 ppm)(The unit of Examples and Comparative Examples is ppm)

상기 실험 결과 비교예 중에서는 비교예 8의 멜라닌 함량이 적은 것으로 나타났으며, 실시예 1의 경우 상기의 비교예 8보다도 멜라닌 함량이 보다 더 적은 것으로 나타났다.As a result of the experiment, it was found that the melanin content of Comparative Example 8 was small among the Comparative Examples, and in the case of Example 1, the melanin content was found to be smaller than that of Comparative Example 8.

<실험예 3> 실시예 및 비교예의 유전자 발현 평가<Experimental Example 3> Gene expression evaluation of Examples and Comparative Examples

실시예 및 비교예8, 11, 12, 13의 Tyrosinase와 MITF의 발현에 미치는 영향을 알아보기 위해 Real time PCR 분석을 시행하였다. Real time PCR analysis was performed to determine the effect of Examples and Comparative Examples 8, 11, 12, and 13 on the expression of Tyrosinase and MITF.

B16-F0 세포를 6 well plate에 4.0×10⁵ cells/well로 분주하여, 5% CO₂가 공급되는 37℃ 배양기에서 24시간 배양하였다. The B16-F0 cells were dispensed in a 6 well plate at 4.0×10 ⁵ cells/well, and cultured for 24 hours in a 37° C. incubator supplied with 5% CO ₂ .

세포독성이 없는 농도로 계열 희석한 sample 및 자극제를 각각 처리하였다. Serially diluted samples and stimulants were treated at concentrations without cytotoxicity, respectively.

이때, 자극제인 α-MSH의 최종 농도가 100 ng/mL이 되도록하여 Tyrosinas 및 MITF를 확인하기 위해 각각 18시간, 2시간 반응시켰다.At this time, the final concentration of α-MSH, a stimulant, was 100 ng/mL and reacted for 18 hours and 2 hours, respectively, to confirm Tyrosinas and MITF.

배지 상등액을 제거하고 PBS로 세척하여 NucleoZOL(Macherey-nagel, Germany) 500 μL로 용해하였다. The medium supernatant was removed, washed with PBS, and dissolved with 500 μL of NucleoZOL (Macherey-nagel, Germany).

디에틸피로카보네이트-증류수(DEPC-DW) 200 μL를 첨가하여 15 분간 원심분리한 후 상층액 500 μL을 새로운 튜브에 옮겨주었다. After adding 200 μL of diethyl pyrocarbonate-distilled water (DEPC-DW) and centrifuging for 15 minutes, 500 μL of the supernatant was transferred to a new tube.

이소프로판올 500 μL를 넣어주어 10 분간 원심분리하고, 상층액을 제거한 후 75% 에탄올을 첨가하여 5 분간 원심분리하였다. 500 μL of isopropanol was added and centrifuged for 10 minutes, and after removing the supernatant, 75% ethanol was added and centrifuged for 5 minutes.

상층액을 제거하여 상온에서 건조시킨 뒤 디에틸피로카보네이트-증류수(DEPC-DW)를 40 μL씩 분주하여 용해시켜 분광광도계를 이용하여 RNA 정량했다. After removing the supernatant and drying at room temperature, 40 μL of diethyl pyrocarbonate-distilled water (DEPC-DW) was dispensed and dissolved, and RNA was quantified using a spectrophotometer.

HiSenScriptTM RH(-) RT PreMix Kit를 이용하여 정량된 RNA 1 μg과 DEPC-DW를 넣어 혼합하여 총 볼륨이 20 μL가 되도록 하였다. Using the HiSenScriptTM RH(-) RT PreMix Kit, 1 μg of quantified RNA and DEPC-DW were added and mixed so that the total volume was 20 μL.

42℃, 30분, 85℃, 10분, 4℃ ∞조건으로 cDNA 합성하였다. 합성된 상보적DNA(cDNA)는 2xReal-Time PCR Master Mix, BioFACT) 10 μL, cDNA 1 μL, Forward primer(10 pmole/μL) 1 μL, Reverse primer(10 pmole/μL) 1 μL와 DEPC-DW를 넣어 혼합하여 총 볼륨이 20 μL가 되도록 하였다. cDNA was synthesized under conditions of 42°C, 30 minutes, 85°C, 10 minutes, and 4°C ∞. The synthesized complementary DNA (cDNA) is 2xReal-Time PCR Master Mix, BioFACT) 10 μL, cDNA 1 μL, forward primer (10 pmole/μL) 1 μL, reverse primer (10 pmole/μL) 1 μL and DEPC-DW was added and mixed so that the total volume was 20 μL.

관련 유전자 primer 정보는 표 4와 같다. The related gene primer information is shown in Table 4.

NameName Forwar primerForwar primer Reverse primerReverse primer TyrosinaseTyrosinase 5’-CAGGCTCCCATCTTCAGCAGAT-3’5’-CAGGCTCCCATCTTCAGCAGAT-3’ 5’-ATCCCTGTGAGTGGACTGGCAA-3’5'-ATCCCTGTGAGTGGACTGGCAA-3' MITFMITF 5’-GATCGACCTCTACAGCAACCAG-3’5'-GATCGACCTCTACAGCAACCAG-3' 5’-GCTCTTGCTTCAGACTCTGTGG-3’5'-GCTCTTGCTTCAGACTCTGTGG-3' GAPDHGAPDH 5’-CATCACTGCCACCCAGAAGACTG-3’5’-CATCACTGCCACCCAGAAGACTG-3’ 5’-ATGCCAGTGAGCTTCCCGTTCAG-3’5'-ATGCCAGTGAGCTTCCCGTTCAG-3'

이어 Tyrosinase의 결과를 표 5와 도 3에 나타내었다.Subsequently, the results of Tyrosinase are shown in Table 5 and FIG. 3.

구분division Relative mRNA expression
(%ofcontrol)Relative mRNA expression
(%ofcontrol) Standard deviationstandard deviation UntreatedUntreated 12.0512.05 2.452.45 ControlControl 100100 1.671.67 비교예8
(ppm)　
　Comparative Example 8
(ppm)
5050 100.15100.15 2.42.4 100100 94.194.1 0.140.14 250250 88.2588.25 3.253.25 비교예11
(ppm)　
　Comparative Example 11
(ppm)
5050 95.695.6 1.681.68 100100 94.394.3 3.213.21 250250 91.291.2 3.343.34 비교예12
(ppm)　
　Comparative Example 12
(ppm)
5050 99.499.4 3.213.21 100100 9494 1.571.57 250250 89.289.2 2.242.24 비교예13
(ppm)　
　Comparative Example 13
(ppm)
5050 99.399.3 3.223.22 100100 98.798.7 2.142.14 250250 93.293.2 2.412.41 실시예 1
(ppm)　
　Example 1
(ppm)
5050 76.1476.14 1.621.62 100100 64.2964.29 4.274.27 250250 59.1559.15 2.972.97 Arbutin
μM)
　Arbutin
μM)
100100 39.1839.18 1.64 1.64

상기 표 및 도면의 그래프 결과를 보면 실시예가 비교예 8, 11 내지 13에 비해 티로시나아제 함량이 훨씬 적게 나타나는 것을 알 수 있다.Looking at the graph results of the tables and figures, it can be seen that the examples show much less tyrosinase content than Comparative Examples 8 and 11 to 13.

아울러, MITF의 결과를 표 6과 도 4에 나타내었다.In addition, the results of MITF are shown in Table 6 and FIG.

구분division Relative mRNA expression
(%ofcontrol)Relative mRNA expression
(%ofcontrol) Standard deviationstandard deviation UntreatedUntreated 18.4518.45 2.182.18 ControlControl 100100 3.43.4 비교예8
(ppm)Comparative Example 8
(ppm) 5050 99.0599.05 2.422.42 100100 97.8997.89 1.041.04 250250 84.2584.25 0.180.18 비교예11
(ppm)　Comparative Example 11
(ppm) 5050 99.8899.88 3.213.21 100100 98.2598.25 2.512.51 250250 89.5289.52 0.580.58 비교예12
(ppm)Comparative Example 12
(ppm) 5050 98.2198.21 0.790.79 100100 96.3396.33 3.213.21 250250 89.2189.21 2.472.47 비교예13
(ppm)　Comparative Example 13
(ppm) 5050 98.4598.45 3.153.15 100100 97.5297.52 2.472.47 250250 93.2193.21 3.563.56 실시예 1
(ppm)Example 1
(ppm) 5050 94.1794.17 0.650.65 100100 81.0581.05 1.541.54 250250 67.867.8 3.43.4 Arbutin (μM)Arbutin (μM) 100100 43.6843.68 1.87 1.87

상기 표 및 도면의 그래프 결과를 보면 실시예가 비교예 8, 11 내지 13에 비해 MITF 함량이 훨씬 적게 나타나는 것을 알 수 있다.Looking at the graph results of the tables and figures, it can be seen that the MITF content of Example is much smaller than that of Comparative Examples 8 and 11 to 13.

즉, 실시예 1의 경우 Tyrosinase와 MITF의 발현을 농도 의존적으로 감소시켜 피부 미백에 효과가 있음을 알 수 있다.That is, in the case of Example 1, it can be seen that the expression of Tyrosinase and MITF is reduced in a concentration-dependent manner, thereby having an effect on skin whitening.

<실시예 2 내지 4의 제조 및 관능 실험<Preparation and sensory experiments of Examples 2 to 4

브룬펠시아(Brunfelcia uniflora)는 가지과의 상록 소관목으로 브라질이 원산지이고, 꽃과 향기가 아름다워 마나카 또는 파라과이 쟈스민 등으로 불린다.Brunfelcia uniflora is an evergreen sub-shrub of the Solanaceae family and is native to Brazil. It is called Manaca or Paraguay jasmine because of its beautiful flowers and fragrance.

브룬펠시아 속에는 벤젠, 테르펜, 알칼로이드, 락톤 등의 성분이 들어 있으며, 특히 뿌리에는 쿠마린과 알칼로이드, 리그난 등이 함유되어 있다.Brunfelsia contains components such as benzene, terpenes, alkaloids, and lactones, and in particular, the root contains coumarin, alkaloids, and lignans.

브룬펠시아는 통증을 완하시켜주고 소변 배설을 촉진하는 효능이 알려져 있다.Brunfelsia is known to relieve pain and promote urinary excretion.

이러한 브룬펠시아를 활용하여 화장료 원료로 사용한 사례는 아직 보고되어 있지 않은 상태이다.Cases of using brunfelsia as a raw material for cosmetics have not yet been reported.

브룬펠시아 잎을 수득한 다음 세절하여 음건한 다음 건조된 브룬펠시아 잎 100g을 준비하고, 70%(V/V) 에탄올 1L 수용액으로 5시간씩 3회 환류추출하고 냉침한 후, 와트만 (Whatman) #5 여과지로 여과하고, 여과된 추출액을 50℃이하에서 감압농축한 후 동결건조기를 이용 건조하여 브룬펠시아 추출물을 수득하였다.After obtaining brunfelcia leaves, cut them and dry them in the shade, prepare 100 g of dried brunfelsia leaves, extract with reflux 3 times for 5 hours each with 70% (V / V) 1L ethanol aqueous solution, cool, and cool, Whatman ( Whatman) #5 filter paper, the filtered extract was concentrated under reduced pressure at 50 ℃ or less, and then dried using a lyophilizer to obtain a Brunfelsia extract.

이어 실시예 1의 화장료조성물과 8 : 1, 9 : 1, 10 : 1의 중량비로 혼합하여 실시예 2 내지 4의 화장료 조성물을 제조하였다.Subsequently, the cosmetic composition of Example 1 was mixed with the cosmetic composition of Example 1 at a weight ratio of 8: 1, 9: 1, and 10: 1 to prepare cosmetic compositions of Examples 2 to 4.

아울러, 실시예들 및 비교예들의 화장료 조성물 5 중량%, 세탄올 1 중량%, 스테아릴알콜 1 중량%, 글리세린모노스테아레이트 3 중량%, 솔비탄모노스테아레이트 1 중량%, POE 솔비탄모노스테아레이트 2 중량%, 바세린 2 중량%, 유동파라핀 6 중량%, 스쿠알란 5 중량%, 옥틸도데실미리스테이트 5 중량%, 글리세린 5 중량%, 부틸렌글리콜 5 중량%, 카복시비닐폴리머 0.2 중량%, 트리에탄올아민 0.2중량%, 잔량의 정제수를 혼합하여 영양 화장수를 제조하였다.In addition, 5% by weight of the cosmetic compositions of Examples and Comparative Examples, 1% by weight of cetanol, 1% by weight of stearyl alcohol, 3% by weight of glycerin monostearate, 1% by weight of sorbitan monostearate, POE sorbitan monostea 2% by weight of latex, 2% by weight of vaseline, 6% by weight of liquid paraffin, 5% by weight of squalane, 5% by weight of octyldodecyl myristate, 5% by weight of glycerin, 5% by weight of butylene glycol, 0.2% by weight of carboxyvinyl polymer, triethanol Nutritional lotion was prepared by mixing 0.2% by weight of amine and the remaining amount of purified water.

실시예들 및 비교예들의 화장료 조성물을 이용하여 제조된 화장품 제조예들에 대해 각 실시예 및 비교예별로 10명씩 무작위 추첨하여 3개월간 아침, 저녁에 1회씩 일정량 얼굴에 바르도록 한 후 하기의 항목으로 평가하였으며, 그 결과를 하기의 표 1에 타나냈다.For the cosmetic manufacturing examples prepared using the cosmetic compositions of Examples and Comparative Examples, 10 people were randomly drawn for each Example and Comparative Example, and applied to the face in a certain amount once in the morning and evening for 3 months, and then the following items It was evaluated, and the results are shown in Table 1 below.

(1) 평가 항목 : 주름 개선, 피부 유연화, 피부 미백, 보습(1) Evaluation items: Wrinkle improvement, skin softening, skin whitening, moisturizing

(2) 평가 기준평가 항목 : 5점 : 양호, 4점 : 다소 양호, 3점 : 차이 없음, 2점 : 다소 불량, 1점 : 불량(2) Evaluation Criteria Evaluation items: 5 points: Good, 4 points: Somewhat good, 3 points: No difference, 2 points: Somewhat bad, 1 point: Poor

구분division 주름 개선wrinkle improvement 피부 유연화skin softening 피부 미백skin whitening 보습Moisturizing 비교예1Comparative Example 1 3.33.3 3.23.2 3.33.3 3.43.4 비교예2Comparative Example 2 3.23.2 3.43.4 3.43.4 3.13.1 비교예3Comparative Example 3 3.33.3 3.53.5 3.33.3 3.43.4 비교예4Comparative Example 4 3.23.2 3.63.6 3.13.1 33 비교예5Comparative Example 5 3.43.4 3.53.5 3.53.5 2.92.9 비교예6Comparative Example 6 3.33.3 3.13.1 3.23.2 3.23.2 비교예7Comparative Example 7 3.43.4 3.23.2 3.43.4 3.43.4 비교예8Comparative Example 8 3.13.1 3.53.5 3.33.3 3.13.1 비교예9Comparative Example 9 3.23.2 3.43.4 3.23.2 2.82.8 비교예10Comparative Example 10 3.23.2 3.33.3 33 2.92.9 비교예11Comparative Example 11 3.23.2 3.43.4 3.43.4 3.13.1 비교예12Comparative Example 12 3.43.4 3.43.4 3.43.4 3.23.2 비교예13Comparative Example 13 3.23.2 3.53.5 3.23.2 3.23.2 실시예1Example 1 3.83.8 44 4.54.5 4.34.3 실시예2Example 2 3.73.7 3.43.4 3.53.5 3.43.4 실시예3Example 3 4.54.5 4.34.3 4.74.7 4.54.5 실시예4Example 4 3.63.6 3.63.6 3.43.4 3.33.3

상기 실험에서 알 수 있듯이 피부 미백은 물론 주름 개선, 피부 유연화, 보습 면에서도 실시예가 비교예들에 비해 우수한 것으로 나타났다.As can be seen from the above experiments, the examples were found to be superior to the comparative examples in terms of skin whitening, wrinkle improvement, skin softening, and moisturizing.

Claims (5)

미백에 효능을 갖는 화장료 조성물에 있어서,
작약꽃, 회화나무꽃, 푸른연꽃, 샤프란꽃, 수레국화꽃의 혼합추출물에 락토바실러스 브레비스 균주를 접종하여 발효시킨 발효혼합추출물을 유효성분으로 포함하는,
락토바실러스 브레비스 균주를 이용하여 발효시킨 작약꽃, 회화나무꽃, 푸른연꽃, 샤프란꽃, 수레국화꽃 혼합추출물을 유효성분으로 함유하는 미백에 효능을 갖는 화장료 조성물.
In the cosmetic composition having a whitening effect,
Containing as an active ingredient a fermented mixed extract obtained by inoculating and fermenting a mixed extract of peony flower, painting tree flower, blue lotus flower, saffron flower, and cornflower flower with Lactobacillus brevis strain,
A cosmetic composition having efficacy in whitening, containing as an active ingredient a mixed extract of peony flower, painting tree flower, blue lotus flower, saffron flower, and cornflower flower fermented using a strain of Lactobacillus brevis.
제 1항에 있어서,
상기 혼합추출물은,
작약꽃, 회화나무꽃, 푸른연꽃, 샤프란꽃, 수레국화꽃을 2.5 ~ 4.5 : 2.5 ~ 4.5 : 0.5 ~ 1.5 : 0.5 ~ 1.5 : 0.5 ~ 1.5의 중량비로 혼합한 혼합물을 추출한 것을 특징으로 하는,
락토바실러스 브레비스 균주를 이용하여 발효시킨 작약꽃, 회화나무꽃, 푸른연꽃, 샤프란꽃, 수레국화꽃 혼합추출물을 유효성분으로 함유하는 미백에 효능을 갖는 화장료 조성물.
According to claim 1,
The mixed extract,
Characterized by extracting a mixture of peony flowers, pine tree flowers, blue lotus flowers, saffron flowers, and cornflower flowers in a weight ratio of 2.5 to 4.5: 2.5 to 4.5: 0.5 to 1.5: 0.5 to 1.5: 0.5 to 1.5,
A cosmetic composition having efficacy in whitening, containing as an active ingredient a mixed extract of peony flower, painting tree flower, blue lotus flower, saffron flower, and cornflower flower fermented using a strain of Lactobacillus brevis.
제 2항에 있어서,
상기 혼합추출물은,
작약꽃, 회화나무꽃, 푸른연꽃, 샤프란꽃, 수레국화꽃을 3.5 : 3.5 : 1 : 1 : 1의 중량비로 혼합한 혼합물을 추출한 것을 특징으로 하는,
락토바실러스 브레비스 균주를 이용하여 발효시킨 작약꽃, 회화나무꽃, 푸른연꽃, 샤프란꽃, 수레국화꽃 혼합추출물을 유효성분으로 함유하는 미백에 효능을 갖는 화장료 조성물.
According to claim 2,
The mixed extract,
Characterized by extracting a mixture of peony flower, painting tree flower, blue lotus flower, saffron flower, and cornflower flower in a weight ratio of 3.5: 3.5: 1: 1: 1,
A cosmetic composition having efficacy in whitening, containing as an active ingredient a mixed extract of peony flower, painting tree flower, blue lotus flower, saffron flower, and cornflower flower fermented using a strain of Lactobacillus brevis.
제 2항에 있어서,
상기 혼합추출물은 상기 혼합물 100 중량부 대비 50,000 ~ 15,000 중량부의 물을 가하여 2 ~ 4시간 동안 열수 추출하여 수득한 것을 특징으로 하는,
락토바실러스 브레비스 균주를 이용하여 발효시킨 작약꽃, 회화나무꽃, 푸른연꽃, 샤프란꽃, 수레국화꽃 혼합추출물을 유효성분으로 함유하는 미백에 효능을 갖는 화장료 조성물.
According to claim 2,
Characterized in that the mixed extract was obtained by hot water extraction for 2 to 4 hours by adding 50,000 to 15,000 parts by weight of water relative to 100 parts by weight of the mixture,
A cosmetic composition having efficacy in whitening, containing as an active ingredient a mixed extract of peony flower, painting tree flower, blue lotus flower, saffron flower, and cornflower flower fermented using a strain of Lactobacillus brevis.
제 1항에 있어서,
브룬펠시아 잎 추출물이 상기 락토바실러스 브레비스 균주에 의해 발효된 혼합추출물에 첨가되어 있되,
상기 혼합추출물과 브룬펠시아 잎 추출물은 9 : 1의 중량비로 혼합된 것을 특징으로 하는,
락토바실러스 브레비스 균주를 이용하여 발효시킨 작약꽃, 회화나무꽃, 푸른연꽃, 샤프란꽃, 수레국화꽃 혼합추출물을 유효성분으로 함유하는 미백에 효능을 갖는 화장료 조성물.According to claim 1,
Brunfelsia leaf extract is added to the mixed extract fermented by the Lactobacillus brevis strain,
Characterized in that the mixed extract and Brunfelcia leaf extract are mixed in a weight ratio of 9: 1,
A cosmetic composition having efficacy in whitening, containing as an active ingredient a mixed extract of peony flower, painting tree flower, blue lotus flower, saffron flower, and cornflower flower fermented using a strain of Lactobacillus brevis.