KR20230094217A - 루테올린-7-글루코시드를 포함하는 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 루테올린-7-글루코시드를 포함하는 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 루테올린-7-글루코시드(Luteolin-7-glucoside)을 포함하는 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물; 및 탈모 예방 및 치료용 약학 조성물에 관한 것이다.

Description

루테올린-7-글루코시드를 포함하는 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물{Composition for preventing hair loss and promoting hair growth comprising Luteolin-7-glucoside}

본 발명은 루테올린-7-글루코시드를 포함하는 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 피부에 대한 부작용 없이 안전하게 사용될 수 있으며 모발 성장 관련 유전자들의 발현을 증가시킴으로써 탈모 예방 및 발모 촉진 효과가 우수한 조성물에 관한 것이다.

일반적으로 모발의 주기는 생장기(anagen phase), 퇴행기(catagen phase), 휴지기(telogen phase)로 이루어지며, 그 주기를 반복하면서 탈모와 발모가 계속된다. 남성의 경우 모발의 생장기는 3~5년, 여성의 경우는 조금 더 긴 4~6년이며, 모발의 퇴화기는 30~45일, 그리고 휴지기는 3~4개월 정도가 된다. 휴지기의 단계에 이르면 새로운 모발이 생성되는 발생기가 시작된다. 이러한 과정에서 이루어지는 탈모는 자연스러운 현상이나, 상대적으로 긴 휴지기가 오래 지속되어 모발의 양이 적어지는 상태가 되면 탈모질환이 된다.

지금까지 탈모의 정확한 원인은 밝혀져 있지 않으나, 모발 주기 조절과 관련된 모유두세포(dermal papilla cells)의 증식 억제나 기능 저하, 남성호르몬의 작용에 의한 모발주기의 비정상화, 두피로의 혈류량 저하로 인한 모발주기의 비정상적 변화, 항암제 등의 약물, 정신적 스트레스, 물리적 자극, 환경오염 등이 요인으로 여겨지고 있다. 한편, 모유두세포는 모근 가장 아래부분에 위치한 모발 성장 핵심 세포로 모발의 수와 굵기를 결정한다. 최근 발모 및 탈모에 관여하는 많은 조절인자들에 관한 연구가 활발히 진행되고 있는데, 모발의 성장에 영향을 주는 단백질로는 EGF, VEGF, IGF 등이 있으며 모유두세포의 활성을 조절하여 모발주기에 영향을 미치는 것으로 알려져 있다. 그리고 탈모와 연관된 5-α 환원효소(reductase)와 탈모유도 유전자 DKK 등을 억제시키는 물질에 관한 연구도 진행되고 있다.

이러한 두피 질환이나 탈모 등을 개선하기 위한 탈모 치료법의 일 예는 모발 이식법으로 모발이 나 있는 피부의 플러그를 모발이 성장하는 두피의 부위로부터 탈모 부위로 이식하는 방법이다. 이러한 방법은 시간이 허비되고 상대적으로 큰 고통이 따를 뿐 아니라 비용도 많이 든다. 또 다른 치료법으로는 약물 요법이 있는데, 예를 들어 미녹시딜(minoxidil)과 같이 두피에 바름으로써 모세혈관 확장을 통해 탈모를 방지하거나, 피나스테라이드(finasteride)와 같이 탈모를 유발하는 남성 호르몬인 DHT(5-a dihydrotestosterone) 생성을 억제하는 방법 등을 통해 탈모를 방지 할 수 있다. 그러나 상기와 같은 약물은 탈모 방지를 개선하는 효과는 있으나, 그에 따른 부작용을 유발하는 문제점이 있다.

상기와 같은 이유로, 천연 추출물을 이용한 탈모 방지, 발모, 발모 촉진용 조성물에 관한 연구가 이루어지고 있으며, 예를 들어 이에 관한 특허 출원으로써, 전엽음양곽, 하늘타리, 강진향, 뱀무 및 조구등을 포함하는 탈모방지 및 발모촉진용 조성물(대한민국특허공개 제10-2009-0076671호) 등과 같은 기술과 관련하여 다수의 특허 출원이 존재하고 있다.

그러나, 이와 같은 추출물 외에 탈모 예방 및 발모 촉진 효과가 우수한 단일 성분의 천연 성분을 포함하는 조성물이 제공되는 경우 관련 분야에서 널리 적용될 수 있을 것으로 기대된다.

이에 본 발명의 한 측면에 의하면 부작용이 없는 천연 성분을 포함하는 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물이 제공된다.

이에 본 발명의 다른 측면에 의하면 부작용이 없는 천연 성분 포함하는 탈모 예방 및 발모 촉진용 치료용 약학 조성물이 제공된다.

본 발명의 일 견지에 의하면, 루테올린-7-글루코시드(Luteolin-7-glucoside)를 포함하는, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물이 제공된다.

본 발명의 다른 견지에 의하면, 루테올린-7-글루코시드(Luteolin-7-glucoside)를 포함하는, 탈모 예방 및 치료용 약학 조성물이 제공된다.

본 발명의 조성물은 모두유 세포의 증식을 촉진하고, 모발 성장을 증진시키는 유전자의 발현 효과가 뛰어나므로, 본 발명의 조성물은 인체에 부작용이 없으면서도 우수한 탈모 예방 및 발모 촉진 효과를 갖는 탈모 치료용 약학 조성물, 탈모 예방 및 발모 촉진용 화장료 조성물 등으로 유용하게 이용될 수 있다.

도 1은 루테올린-7-글루코시드 처리 농도에 따른 모유두 세포 성장 및 증식 결과를 나타낸 것이다.
도 2는 루테올린-7-글루코시드(Luteolin-7-glucoside)에 의하여 발모 연관 유전자인 (a) FGF7 및 (b) VEGF 유전자의 mRNA 발현량을 확인한 결과를 나타낸 것이다.
도 3은 루테올린-7-글루코시드(Luteolin-7-glucoside)에 의하여 탈모 연관 유전자인 (a) 5α-환원효소 및 (b) DKK 유전자의 mRNA 발현량을 확인한 결과를 나타낸 것이다.
도 4는 루테올린-7-글루코시드 및 루테올린에 대한 모유두세포 증식 시험 결과를 나타낸 것이다.

이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 바람직한 실시 형태를 설명한다. 그러나, 본 발명의 실시 형태는 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 이하 설명하는 실시 형태로 한정되는 것은 아니다.

본 발명에 의하면 인체 유래 모유두세포의 증식을 촉진시키고, 발모 연관유전자 발현 촉진 혹은 탈모 연관유전자의 발현 억제를 활성화 시키는 천연 유래 성분을 포함하는 조성물이 제공된다.

보다 상세하게 본 발명의 조성물은 하기 화학식 I의 루테올린-7-글루코시드(Luteolin-7-glucoside)를 포함하는, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물인 것일 수 있다:

[화학식 1]

이때, 유효 성분인 상기 루테올린-7-글루코시드(Luteolin-7-glucoside)은 상기 조성물에 0.1 내지 50 ppm의 농도로 포함되는 것일 수 있으며, 예를 들어 0.2 내지 20 ppm, 또는 0.2 내지 10ppm의 함량으로 포함될 수 있다. 상기 조성물에 루테올린-7-글루코시드가 0.1 ppm 미만의 함량으로 포함되는 경우에는 충분한 모발 성장 촉진 효과를 얻을 수 없고, 50 ppm 을 초과하는 경우에는 제형 안정성이 낮아질 수 있다.

본 발명의 상기 조성물은 유효성분인 루테올린-7-글루코시드에 의하여 모유두 세포의 증식을 활성화시키고, 이에 의하여 모발 성장 촉진 및 탈모 예방 효과를 나타내며, 뿐만 아니라 모낭 주기를 조절하여 모낭 세포가 퇴행기로 가는 것을 막거나 지연시켜 오랜 시간 성장기에 머물러 있게 함으로써 모발의 성장을 촉진시키는 효과를 제공할 수 있다.

본 발명에 따른 조성물은 예를 들어, 화장료 조성물, 약학 조성물 또는 건강식품 조성물일 수 있으며, 피부 외용제 조성물 또는 경구용 조성물로 제형화 될 수 있다.

상기 경구용 조성물의 경우 제형은 예를 들면, 정제, 환제, 경질 및 연질 캅셀제, 액제, 현탁제, 유화제, 시럽제, 분제, 산제, 세립제, 과립제, 펠렛제 등이 있으며, 이들 제형은 유효 성분 이외에 계면 활성제, 희석제(예: 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 만니톨, 솔비톨, 셀룰로스 및 글리신), 활택제(예: 실리카, 탈크, 스테아르산 및 그의 마그네슘 또는 칼슘염 및 폴리에틸렌 글리콜)를 함유할 수 있다. 정제는 또한 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 전분 페이스트, 젤라틴, 트라가칸스, 메틸셀룰로오스, 나트륨 카복시메틸셀룰로오스 및 폴리비닐피롤리딘과 같은 결합제를 함유할 수 있으며, 경우에 따라 전분, 한천, 알긴산 또는 그의 나트륨 염과 같은 붕해제, 흡수제, 착색제, 향미제, 및 감미제 등의 약제학적 첨가제를 함유할 수 있다. 상기 정제는 통상적인 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 의해 제조될 수 있다. 또한, 상기 비경구 투여 형태로 경피 투여형 제형일 수 있으며, 예를 들어 주사제, 점적제, 연고, 로션, 겔, 크림, 스프레이, 현탁제, 유제, 좌제(坐劑), 패취 등의 제형일 수 있으나, 이에 제한 되는 것은 아니다.

예를 들어 상기 조성물은 루테올린-7-글루코시드(Luteolin-7-glucoside)및 잔부의 화장품 베이스를 포함하는 화장품 조성물인 것일 수 있으며, 유효 성분인 루테올린-7-글루코시드와 함께 통상적으로 화장품 조성물에 배합될 수 있는 어떠한 다른 성분도 포함할 수 있다.

본 발명의 화장품 조성물에 첨가할 수 있는 성분으로서는 예를 들어 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 방부제, 살균제, 산화 방지제, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제 등을 들 수 있다.

유지 성분으로서는 에스테르계 유지, 탄화수소계 유지, 실리콘계 유지, 불소계 유지, 동물 유지, 식물 유지 등을 들 수 있고, 보습제로서는 수용성 저분자 보습제, 지용성 분자 보습제, 수용성 고분자, 지용성 고분자 등을 들 수 있다.

한편, 에몰리엔트제로서는 장쇄아실글루타민산콜레스테릴에스테르, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 12-히드록시스테아르산, 스테아르산, 로진산, 라놀린지방산콜레스테릴에스테르 등을 들 수 있고, 계면 활성제로서는 비이온성 계면 활성제, 음이온성 계면 활성제, 양이온성 계면 활성제, 양성 계면 활성제 등을 들 수 있다.

유기 및 무기 안료로서는 규산, 무수규산, 규산마그네슘, 탈크, 세리사이트, 마이카, 카올린, 벵갈라, 클레이, 벤토나이트, 티탄피막운모, 옥시염화비스무트, 산화지르코늄, 산화마그네슘, 산화아연, 산화티탄, 산화알루미늄, 황산칼슘, 황산바륨, 황산마그네슘, 탄산칼슘, 탄산마그네슘, 산화철, 군청, 산화크롬, 수산화크롬, 칼라민 및 이들의 복합체등의 무기 안료; 폴리아미드, 폴리에스테르, 폴리프로필렌, 폴리스티렌, 폴리우레탄, 비닐수지, 요소수지, 페놀수지, 불소수지, 규소수지, 아크릴수지, 멜라민수지, 에폭시수지, 폴리카보네이트수지, 디비닐벤젠ㆍ스티렌 공중합체, 실크파우더, 셀룰로오스, CI 피그먼트옐로우, CI 피그먼트오렌지 등의 유기 안료 및 이들의 무기 안료와 유기 안료의 복합 안료 등을 들 수 있다.

살균제로서는 히노키티올, 트리클로산, 트리클로로히드록시디페닐에테르, 크로르헥시딘글루콘산염, 페녹시에탄올, 레조르신, 이소프로필메틸페놀, 아줄렌, 살리칠산, 진크필리티온, 염화벤잘코늄, 감광소 301호, 모노니트로과이어콜나트륨, 운데시렌산 등을 들 수 있고, 산화 방지제로서는 부틸히드록시아니솔, 갈릭산프로필, 엘리소르빈산 등을 들 수 있으며, pH 조정제로서는 시트르산, 시트르산나트륨, 말산, 말산나트륨, 프말산, 프말산나트륨, 숙신산, 숙신산나트륨, 수산화나트륨, 인산일수소나트륨 등을 들 수 있다. 알코올로서는 세틸알코올 등의 고급 알코올을 들 수 있다.

방부제는 벤조산, 파라옥시안식향산에스테르, 메칠클로로이소치아졸리논의 혼합물, 페녹시에탄올, 디엠디엠히단토인 등이 될 수 있다. 향료는 일반적으로 두피 및 모발용 화장료 조성물에 이용되는 성분이 사용될 수 있다.

또한, 이외에 첨가해도 되는 배합 성분은 이에 한정되는 것은 아니며, 상기 어느 성분도 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 배합 가능하지만, 조성물의 총 중량에 대하여 바람직하게는 1 내지 20% 중량, 보다 바람직하게는 5 내지 10% 중량으로 배합된다.

본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어 용액, 유탁액, 현탁액, 페이스트, 크림, 겔, 파우더, 스프레이, 등을 들 수 있다.

이러한 제형으로 형성되기 위해 본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효성분으로서 상기 물봉선 추출물 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 보조제 및 담체 성분을 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물에는 어 필요에 따라 일반적인 화장료 조성물에 포함되는 어떠한 성분을 배합해도 된다. 이외에 포함되는 배합 성분으로서는 예를 들어 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제, 정제수 등을 들 수 있다.

본 발명의 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물은 예를 들어 상기 샴푸, 린스, 트리트먼트, 에센스, 토닉, 크림, 팩 및 로션 중 어느 하나의 제형일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

보다 상세하게는, 헤어토닉, 헤어컨디셔너, 헤어에센스, 헤어로션, 헤어샴푸, 헤어린스, 헤어트리트먼트, 헤어크림, 헤어왁스, 헤어팩, 헤어비누, 헤어클렌징폼, 머릿기름, 모발건조제, 모발보존처리제, 모발염색제, 모발용 웨이브제, 모발탈색제, 헤어겔, 헤어모이스처라이저, 헤어무스, 눈썹영양제, 속눈썹 영양제 및 헤어스프레이의 제형을 포함하며, 다만 이에 제한되는 것은 아니다.

한편, 본 발명의 다른 견지로, 루테올린-7-글루코시드(Luteolin-7-glucoside)을 포함하는, 탈모 예방 및 치료용 약학 조성물이 제공된다.

이때, 유효 성분인 상기 루테올린-7-글루코시드(Luteolin-7-glucoside)은 상기 조성물에 0.1 내지 50 ppm의 농도로 포함되는 것일 수 있으며, 예를 들어 0.2 내지 20 ppm, 또는 0.2 내지 100ppm의 함량으로 포함될 수 있다. 상기 조성물에 루테올린-7-글루코시드가 0.1 ppm 미만의 함량으로 포함되는 경우에는 충분한 모발 성장 촉진 효과를 얻을 수 없고, 50 ppm 을 초과하는 경우에는 제형 안정성이 낮아질 수 있다.

한편, 본 발명의 탈모 예방 및 치료용 약학 조성물은 루테올린-7-글루코시드(Luteolin-7-glucoside) 및 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 탈모 예방 및 치료용 약학 조성물일 수 있다. 본 발명에 따른 상기 약학 조성물은 비경구, 직장, 국소, 경피, 피하 등으로 투여될 수 있으며, 예를 들어 두피에 국소 투여될 수 있다.

나아가, 본 발명의 상기 약학 조성물은 사용 목적에 맞게 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁제, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구 제형, 멸균 주사 용액, 비 경구 제형의 형태 등 다양한 형태로 제형화 하여 사용할 수 있다.

이러한 약학 조성물에 포함될 수 있는 적합한 담체, 부형제 및 희석제의 예로는 락토오스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 비정질 셀룰로즈, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸하이드록시벤조에이트, 프로필하이드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유 등을 들 수 있다.

또한, 상기 본 발명의 약학 조성물은 충전제, 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제, 방부제 등을 추가로 포함할 수 있다.

경구 투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 상기 탈모 예방 및 치료용 약학 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면 전분, 탄산칼슘, 수크로스, 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 제형화 할 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크와 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구용 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 액체 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.

비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성 용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성 용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 주사제의 기제로는 용해제, 등장화제, 현탁화제, 유화제, 안정화제 및 방부제와 같은 종래의 첨가제를 포함할 수 있다.

바람직하게, 상기 약학 조성물은 외용제 제형인 것이며, 이와 같은 피부 외용 약학조성물은 탈모 방지 및 발모 촉진 효과를 갖는 피부 외용제로서 크림, 젤, 패취, 분무제, 연고제, 경고제, 로션제, 리니멘트제, 파스타제 또는 카타플라스마제의 피부 외용제 형태의 약학 조성물로 제조하여 사용할 수 있으나, 이에 한정하는 것은 아니다.

본 발명의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물 형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르며, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다.

특히 본 발명의 상기 약학 조성물은 남성형 탈모의 치료용인, 탈모 예방 및 치료용 약학 조성물일 수 있다.

또한, 본 발명의 조성물은 탈모 예방, 개선, 완화 및 발모 촉진용 건강식품 조성물의 형태일 수 있다. 본 발명의 건강식품 조성물에 있어서, 상기 조성물은 액상 또는 고체 상태의 제형일 수 있고, 정제, 캡슐제, 연질캡슐제, 환제, 과립제, 음료(드링크제), 다이어트바, 쵸콜렛, 카라멜 제형 또는 과자류 제형일 수 있으며, 그 제형이 특별히 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 건강식품 조성물은 건강식품 조성물은 상기 유효 성분 외에도 필요에 따라 부형제, 당류, 향료, 색소, 유지류, 단백질 등을 적의 함유할 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물은 발모 및 육모 촉진 효과를 증가시키기 위하여 피부 흡수 촉진 물질을 함유할 수 있다.

이하, 구체적인 실시예를 통해 본 발명을 보다 구체적으로 설명한다. 하기 실시예는 본 발명의 이해를 돕기 위한 예시에 불과하며, 본 발명의 범위가 이에 한정되는 것은 아니다.

실시예

1. 모유두세포 배양 및 증식 시험

CCK-8(Cell counting kit-8)은 WST-8이라는 수용성의 테트라졸륨염(tetrazolium salt) 시약으로, 살아있는 세포의 미토콘드리아에 있는 탈수소효소(dehydrogenase)에 의해 오렌지색의 수용성 포르마잔(Formazan)을 형성하게 된다. CCK-8에 의해 나타나는 오렌지색 파장 450nm의 흡광도는 세포의 수를 반영하므로 세포 성장 및 증식을 측정하는데 이용하였다. CCK-8 분석법을 통해 각각 0.2ppm, 1ppm, 5ppm 농도의 루테올린-7-글루코시드(Luteolin-7-glucoside)을 이용하여 인체 모유두세포의 성장 촉진 효능을 측정하였다. 구체적으로 96-웰 플레이트에 3x10³ 개의 모유두세포를 24시간 배양한 후 무혈청 배지로 바꾸어 배지에 포함된 성장인자를 제거한 뒤 루테올린-7-글루코시드를 처리하였다. 음성대조군으로는 동량의 용매인 DMSO를 사용하였고, 양성대조군으로는 1ppm 농도의 미녹시딜(Minoxidil)을 사용하였다. 24시간 동안 배양한 뒤, CCK8을 처리하고 450 nm의 흡광도를 측정하여 세포 성장을 분석하였다.

그 결과, 도 1에 나타난 바와 같이, 음성대조군에 비하여 0.2ppm, 특히 1ppm, 및5ppm 농도의 루테올린-7-글루코시드가 처리된 경우 세포 성장 및 증식이 유의하게 증가하는 것을 확인하였다 (T-test, *p <0.05).

한편, 도 4에 나타난 바와 같이, 루테올린-7-글루코시드 및 루테올린을 각각 1ppm으로 처리한 모유두세포 증식 시험에서는 루테올린에 비해 루테올린-7-글루코시드에서 약 25% 증식이 높아지는 것을 확인 하였으며, 이는 배당체에 의한 효과로 판단되었다.

2. 발모 연관 유전자의 발현

(1) 발모연관 유전자 mRNA 발현 검증

발모는 섬유아세포성장인자 7(Fibroblast growth factor 7, 이하 'FGF7)'과 VEGF(Vascular endothelial growth factor)와 같은 성장인자에 의해 촉진된다.

FGF7은 FGF의 여러 종류 중에 하나로, 모발의 성장기에 고발현된다고 알려져 있다. 따라서, FGF7의 고발현은 모발의 성장과 밀접한 관련성을 지닌다고 할 수 있다. 또한, 대표적인 탈모 치료제 중 하나인 미녹시딜(Minoxidil)은 모발 성장을 유도하며 VEGF를 고발현시킨다는 보고가 있다. 따라서, 루테올린-7-글루코시드(Luteolin-7-glucoside)에 의한 FGF7 및 VEGF 유전자 발현량을 확인함으로 모발 성장 효과를 확인할 수 있다.

상기 1.에서 모유두세포 증식을 충분히 유도한 1 ppm에서 루테올린-7-글루코시드를 무혈청 배지로 배양한 모유두세포에 처리하고 24시간 후 각 유전자 발현 변화를 분석하였다. 구체적으로 mRNA 추출은 ReliaPrep?? RNA Miniprep Systems(Promega)를 이용하였으며, poly-A 프라이머와 역전사 중합효소(Reverese transcriptase)를 이용한 역전사 중합효소 연쇄반응(RT-PCR, Reverse transcription polymerase chain reaction)으로 cDNA를 만들고 실시간중합효소연쇄반응(Real-time quantitative PCR)을 이용하여 각 mRNA의 양을 측정하였다. 각 mRNA 양은 항존 유전자인 Gapdh의 양으로 보정하였다.

그 결과, 도 2에 나타난 바와 같이, 루테올린-7-글루코시드에 의해 FGF7 및 VEGF mRNA가 증가하는 양상을 나타내었다.

(2) 탈모연관 유전자 mRNA 발현 검증

남성형 탈모와 연관된 대표적인 유전자는 5α-환원효소(5α-reductase)가 있다. 남성 호르몬인 테스토스테론은 유전자는 5α-환원효소에 의해 DHT로 변환이 되고 DHT에 의해 모발이 가늘어지며 탈모가 촉진된다고 보고되어 있다. 또한, DHT는 DKK와 같은 연관 유전자 발현을 촉진시켜 발모를 억제시킨다고 보고되어 있다. 프로펙시아(물질명 Finasteride)는 5α-환원효소를 억제하여 남성형 탈모의 진행을 더디게 한다고 알려져 있다. 따라서, 5α-환원효소와 DKK 유전자 발현을 통해 루테올린-7-글루코시드에 의한 탈모 유발 효과를 확인할 수 있다. 구체적인 mRNA 추출 및 유전자 분석은 도 2에서 서술한 것과 같은 방식으로 진행하였다.

그 결과, 도 3에 나타난 바와 같이, 루테올린-7-글루코시드에 의해 5α-환원효소와 DKK mRNA가 감소하는 양상을 나타내었다.

이상에서 본 발명의 실시예에 대하여 상세하게 설명하였지만 본 발명의 권리범위는 이에 한정되는 것은 아니고, 청구범위에 기재된 본 발명의 기술적 사상을 벗어나지 않는 범위 내에서 다양한 수정 및 변형이 가능하다는 것은 당 기술분야의 통상의 지식을 가진 자에게는 자명할 것이다.

Claims (9)

1. 루테올린-7-글루코시드(Luteolin-7-glucoside)을 포함하는, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물.
   
2. 제1항에 있어서, 상기 루테올린-7-글루코시드(Luteolin-7-glucoside)은 상기 조성물에 0.1 내지 50 ppm의 농도로 포함되는, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물.
   
3. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 건강식품 조성물 또는 화장품 조성물인, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물.
   
4. 제3항에 있어서, 상기 화장품 조성물은 샴푸, 린스, 트리트먼트, 에센스, 토닉, 크림, 팩 및 로션 중 어느 하나의 제형인, 탈모 예방 및 발모 촉진 조성물.
   
5. 루테올린-7-글루코시드(Luteolin-7-glucoside)을 포함하는, 탈모 예방 및 치료용 약학 조성물.
   
6. 제5항에 있어서, 상기 루테올린-7-글루코시드(Luteolin-7-glucoside)은 상기 조성물에 0.1 내지 50 ppm의 농도로 포함되는, 탈모 예방 및 치료용 약학 조성물.
   
7. 제5항에 있어서, 상기 조성물은 루테올린-7-글루코시드(Luteolin-7-glucoside) 및 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는, 탈모 예방 및 치료용 약학 조성물.
   
8. 제5항에 있어서, 상기 약학 조성물은 외용제 제형인, 탈모 예방 및 치료용 약학 조성물.
   
9. 제5항에 있어서, 상기 약학 조성물은 남성형 탈모의 치료용인, 탈모 예방 및 치료용 약학 조성물.

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