KR20230080335A - Uses of etravirine for treating metabolic and fibrotic diseases - Google Patents

Abstract

본 발명은 에트라비린(Etravirine)의 대사성 질환 및 섬유화 질환 치료 용도에 관한 것으로, 보다 상세하게는 지질 축적 억제 및 섬유화 관련 지표의 개선 효과를 나타내는 에트라비린의 신규한 용도로서 대사성 질환 및 섬유화 질환 예방 또는 치료 용도에 관한 것이다.
에트라비린을 포함하는 본 발명의 조성물은 간 세포에서의 지질 축적과 섬유화를 억제하는 효과가 매우 탁월하며, 이러한 효과는 Bcl-2 (B-cell lymphoma 2) 억제제, DPP-4 (Dipeptidyl peptidase-4) 억제제 및 니클로사미드(Niclosamide)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 약물과 병용함으로써 시너지 효과가 나타날 수 있어 대사성 질환 및 섬유화 질환 예방 또는 치료제 개발에 매우 유용하게 활용될 수 있다. The present invention relates to the use of etravirine for the treatment of metabolic diseases and fibrotic diseases, and more particularly, as a novel use of etravirine showing the effect of inhibiting lipid accumulation and improving fibrosis-related indicators, metabolic diseases and fibrotic diseases It relates to prophylactic or therapeutic use.
The composition of the present invention containing etravirine has a very excellent effect of inhibiting lipid accumulation and fibrosis in liver cells, and these effects are achieved by a Bcl-2 (B-cell lymphoma 2) inhibitor, DPP-4 (Dipeptidyl peptidase- 4) A synergistic effect can be obtained by using it in combination with one or more drugs selected from the group consisting of inhibitors and niclosamide, so it can be very useful for the development of preventive or therapeutic agents for metabolic diseases and fibrotic diseases.

Description

에트라비린의 대사성 질환 및 섬유화 질환 치료 용도{Uses of etravirine for treating metabolic and fibrotic diseases}Uses of etravirine for treating metabolic and fibrotic diseases}

본 발명은 에트라비린(Etravirine)의 대사성 질환 및 섬유화 질환 치료 용도에 관한 것으로, 보다 상세하게는 지질 축적 억제 및 섬유화 관련 지표의 개선 효과를 나타내는 에트라비린의 신규한 용도로서 대사성 질환 및 섬유화 질환 예방 또는 치료 용도에 관한 것이다. The present invention relates to the use of etravirine for the treatment of metabolic diseases and fibrotic diseases, and more particularly, as a novel use of etravirine showing the effect of inhibiting lipid accumulation and improving fibrosis-related indicators, metabolic diseases and fibrotic diseases It relates to prophylactic or therapeutic use.

대사증후군(Metabolic syndrome)은 생체 내에서의 물질대사 장애에 의해 발생하는 질환을 총칭한다. 일반적으로 당질, 지질, 단백질, 비타민, 전해질 및 수분 등의 불균형에 의해 발생하게 되는데, 그 예로는 비만, 당뇨병, 고지혈증, 지방간, 동맥경화증, 고혈압 등이 있다. 이 중에서도 제2형 당뇨병의 경우에는 성인기에 주로 나타나는 당뇨병으로서 인슐린에 대한 저항성의 증가를 특징으로 한다. 인슐린 수용체 자체의 감소, 혹은 그 민감도가 떨어지거나 세포 내 글리코겐 합성을 일으키는 2차 전달자에 문제가 생기면 인슐린에 대한 민감도가 떨어지게 된다. 따라서, 제2형 당뇨병을 인슐린 비의존성 당뇨병이라 하며 당뇨의 85∼90%를 차지한다.Metabolic syndrome is a general term for diseases caused by metabolic disorders in vivo. In general, it is caused by an imbalance of carbohydrates, lipids, proteins, vitamins, electrolytes, and water, and examples thereof include obesity, diabetes, hyperlipidemia, fatty liver, arteriosclerosis, and high blood pressure. Among them, in the case of type 2 diabetes, it is characterized by an increase in resistance to insulin as a diabetes mainly appearing in adulthood. When the insulin receptor itself decreases, or when the sensitivity decreases, or when there is a problem with the second messenger that causes intracellular glycogen synthesis, the sensitivity to insulin decreases. Therefore, type 2 diabetes is called non-insulin dependent diabetes and accounts for 85-90% of diabetes.

특히, 비만은 외관상의 심미적 측면에서도 사회적 이슈가 되고 있지만, 사실 이로 인해 당뇨, 고혈압 등의 대사질환 합병증과 같은 건강상의 심각한 위험이 초래될 수 있다는 점이 비만의 가장 심각한 문제점이다. 이와 같은 비만의 병적인 상태와 관계있는 증상이 비만 개체에게서 나타나는 전신성 만성염증(systemic chronic inflammation)이다. 염증반응은 체내에서 일어나는 면역 기작의 하나로서, 국소적으로 발생할 시 외부로부터의 병균이나 바이러스의 침입으로부터 몸을 방어하는 중요한 반응이다. 그러나 이와 같은 염증반응이 체내 면역반응의 균형 붕괴로 인하여 전신적, 만성적으로 과다하게 활성화되면 체내에서 일어나는 대사작용에 장애를 유발하게 된다. 비만으로 인해 유발되는 만성염증 반응은 당뇨, 심혈관계 질환, 동맥경화 등 각종 대사증후군의 원인으로 밝혀지고 있으며 비만을 질병으로 규정하는 가장 중요한 요소이기도 하다. 만성염증 반응으로 인한 이차적 대사증후군의 발병 없이는 비만은 단순히 미용상의 문제이며, 최근 세계보건기구에서도 당뇨와 같이 삶의 질을 현저히 떨어뜨리는 이차적 대사증후군을 유발할 수 있는 만성 염증반응을 이유로 들어 비만을 질병으로 규정한 바 있다.In particular, although obesity has become a social issue in terms of appearance and aesthetics, in fact, the most serious problem of obesity is that it can cause serious health risks such as metabolic disease complications such as diabetes and hypertension. A symptom related to such a pathological state of obesity is systemic chronic inflammation that appears in obese individuals. An inflammatory reaction is one of the immune mechanisms occurring in the body, and when it occurs locally, it is an important reaction to defend the body from the invasion of pathogens or viruses from the outside. However, when such an inflammatory response is systemically and chronically excessively activated due to a breakdown in the balance of the body's immune response, it causes disorders in metabolism occurring in the body. The chronic inflammatory response induced by obesity has been identified as the cause of various metabolic syndromes such as diabetes, cardiovascular disease, and arteriosclerosis, and is also the most important factor in defining obesity as a disease. Obesity is simply a cosmetic problem without the occurrence of secondary metabolic syndrome due to chronic inflammatory response, and the World Health Organization recently cited obesity as a disease, citing chronic inflammatory response that can cause secondary metabolic syndrome that significantly reduces quality of life, such as diabetes. has been defined as

한편, 지방간은 간세포 내에 비정상적으로 지방이 축적된 상태를 말하며, 의학적으로 중성지질 함량이 전체 간 무게의 5% 이상을 초과하는 병적 상태를 의미한다. 일반적으로 지방간은 지속적이고 과다한 음주에 의해 유발되는 알콜성 지방간 (Alcoholic fatty liver disease, ALD)과 알콜 섭취력은 거의 없지만 알콜성 지방간과 유사한 간 조직소견을 나타내는 비알콜성 지방간의 두 가지로 구분할 수 있다.On the other hand, fatty liver refers to a state in which fat is abnormally accumulated in hepatocytes, and medically refers to a pathological condition in which the triglyceride content exceeds 5% or more of the total weight of the liver. In general, fatty liver can be divided into alcoholic fatty liver disease (ALD), which is caused by continuous and excessive drinking, and non-alcoholic fatty liver, which has liver tissue findings similar to alcoholic fatty liver, although there is little history of alcohol consumption. there is.

알콜성 지방간은 우리나라에 흔하며, 알콜 섭취로 인해 간에서 지방합성이 촉진되고 정상적인 에너지 대사가 이루어지지 않음으로써 발병하며, 알콜 섭취 정도에 따라 간염이나 간경변으로 발전될 수 있다.Alcoholic fatty liver disease is common in Korea, and occurs when fat synthesis is promoted in the liver due to alcohol intake and normal energy metabolism is not performed.

비알콜성 지방간은 음주와 관계없이 비만, 당뇨병, 고지혈증, 약물 등의 원인에 의해 발병될 수 있으며, 진행 경과에 따라 염증 반응을 동반하지 않는 단순 지방간 (steatosis)와 간세포의 염증반응(hepatocellular inflammation)을 나타내는 비알콜성 지방간염 (non-alcoholic steatohepatitis, NASH), 진행 섬유화증 (advanced fibrosis) 및 간경변(cirrhosis)까지 포함하는 넓은 범위의 질환을 의미한다.Non-alcoholic fatty liver can be caused by causes such as obesity, diabetes, hyperlipidemia, drugs, etc., regardless of drinking. It refers to a wide range of diseases including non-alcoholic steatohepatitis (NASH), advanced fibrosis, and cirrhosis.

비알코올성 지방간질환(nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)은 현대 사회의 고지방 및 고열량 식이 섭취에 따른 성인병의 증가로 선진국 기준 성인 인구의 20-30%가 비알코올성 지방간 질환(NAFLD)을 나타내며 그 중 2-3%가 비알코올성 지방간염(NASH) 환자로 이행된다고 보고되고 있을 뿐 아니라, 특히, 조직학적으로 섬유화와 염증을 동반한 지방간염 소견을 보여 간경변, 간부전 및 간암으로 발전할 위험이 매우 높아지게 된다.Nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) is an increase in adult diseases due to high-fat and high-calorie diet intake in modern society, and 20-30% of the adult population in developed countries has nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD), among which 2- It is reported that 3% of patients with non-alcoholic steatohepatitis (NASH) are transferred, and in particular, histologically, histological findings of steatohepatitis accompanied by fibrosis and inflammation increase the risk of developing cirrhosis, liver failure, and liver cancer.

현재 지방간염이 비만, 인슐린저항성, 2형 당뇨병 등과 밀접한 관계가 있다는 것은 밝혀졌으나, 명확한 발병기전은 현재 활발한 연구가 진행 중에 있으며, 최근 'two-hit' hypothesis가 제안되면서 지방간염은 간세포 안에 지방이 쌓이면서 시작되며 비만, 당뇨병 등과 연관되어 나타나는 인슐린저항성이 주된 발병기전으로 여겨지고 있다. 또한 증가된 간세포 내 유리지방산(free fatty acid,FFA)이나 콜레스테롤에 의한 lipotoxicity와 증가된 염증성 사이토카인(cytokine) 및 이들 수용체가 지방간에서 지방간염으로 진행하는 과정에서 중요한 역할을 한다고 보고되고 있다.Currently, it has been found that steatohepatitis is closely related to obesity, insulin resistance, and type 2 diabetes, but a clear pathogenesis is currently under active research. Insulin resistance, which begins as it accumulates and is associated with obesity and diabetes, is considered to be the main pathogenesis. In addition, it has been reported that lipotoxicity caused by increased free fatty acid (FFA) or cholesterol in hepatocytes, increased inflammatory cytokines, and these receptors play an important role in the process of progressing from fatty liver to steatohepatitis.

한편, 섬유증(fibrosis)은 섬유아세포에 의한 세포 외 기질의 비정상적 생성, 축적 및 침착이 일어나는 질환으로, 기관 또는 조직의 섬유화에 의해 발병한다. 섬유증은 장기 손상을 유발하는 매우 치명적인 질환이다. 일례로 IPF (idiopathic pulmonary fibrosis)는 섬유아세포 축적 및 근섬유아세포 분화와 관련된 재발성 폐포 상피세포 손상의 결과로 나타나며, 폐 실질 (lung parenchyma) 조직의 비가역적 파괴와 함께 세포 외 기질 (extracellular matrix; ECM)의 과량 축적을 야기하는 만성, 진행성, 그리고 치사성 질환이다. 그러나 현재까지 섬유증에 대한 효과적인 치료법이 없는 실정이므로 (Fibrogenesis Tissue Repair, 2012, 5(1): 11; N Engl J Med, 2001, 345(7): 517), 섬유증을 효과적으로 예방 또는 치료할 수 있는 치료제 개발이 지속적으로 요구되고 있다.On the other hand, fibrosis is a disease in which abnormal production, accumulation, and deposition of extracellular matrix by fibroblasts occurs, and is caused by fibrosis of organs or tissues. Fibrosis is a very fatal disease that causes organ damage. For example, idiopathic pulmonary fibrosis (IPF) occurs as a result of recurrent alveolar epithelial cell damage associated with fibroblast accumulation and myofibroblast differentiation, resulting in irreversible destruction of lung parenchyma tissue and extracellular matrix (ECM). ) is a chronic, progressive, and lethal disease that causes excessive accumulation of However, since there is no effective treatment for fibrosis to date (Fibrogenesis Tissue Repair, 2012, 5(1): 11; N Engl J Med, 2001, 345(7): 517), therapeutic agents that can effectively prevent or treat fibrosis Development is constantly required.

섬유증은 다양한 기초 질환의 결과로서 발생된다. 만성 염증 또는 조직 손상/재형성은 전형적인 섬유증 유발 사례이다. 구체적인 질환 예로는 특발성 폐 섬유증(IPF), 알콜성 및 비알콜성 간 경화증과 연관된 간 섬유증, 신장 섬유증, 심장 섬유증 및 비정상적 상처 치유로부터 발생한 켈로이드 형성을 들 수 있다 [Wynn, T. A. (2004) Nature Reviews Immunology. 4: 583-594; Friedman, S.L. (2013) Science Translation Medicine. 5(167):1-17]. 추가로, 섬유증은 류마티스 관절염, 크론병, 전신 홍반 루푸스 및 경피증을 비롯한 만성 자가면역 질환과 관련된 핵심 병리학적 특징이다. 심각한 미충족 의료 요구를 나타내는 질환으로는 특발성 폐 섬유증(IPF), 경피증 및 비알콜성 지방간염(NASH) 관련 간 섬유증을 들 수 있다. NASH 관련 간 섬유증의 증가된 발병률은 2형 당뇨병 및 비만의 것과 직접적으로 유사한 것으로 예상된다.Fibrosis develops as a result of various underlying diseases. Chronic inflammation or tissue damage/remodeling is a typical fibrosis-induced event. Specific disease examples include idiopathic pulmonary fibrosis (IPF), liver fibrosis associated with alcoholic and non-alcoholic liver cirrhosis, renal fibrosis, cardiac fibrosis, and keloid formation resulting from abnormal wound healing [Wynn, T. A. (2004) Nature Reviews. Immunology. 4: 583-594; Friedman, S.L. (2013) Science Translation Medicine. 5(167):1-17]. Additionally, fibrosis is a key pathological feature associated with chronic autoimmune diseases including rheumatoid arthritis, Crohn's disease, systemic lupus erythematosus and scleroderma. Diseases that present a significant unmet medical need include idiopathic pulmonary fibrosis (IPF), scleroderma and nonalcoholic steatohepatitis (NASH) associated liver fibrosis. The increased incidence of NASH-related liver fibrosis is expected to directly parallel that of type 2 diabetes and obesity.

한편, 간섬유증(liver cirrhosis 또는 hepatic fibrosis)이나 간경화증(또는 간경병증, liver cirrhosis)은 간조직이 손상과 재생을 반복하여 간염이 발생하고, 간염에서 간섬유증으로 다시 간섬유증에서 간경화증으로 진행되면서 발생되는 질환에 속한다. 간섬유증은 간세포의 지속적인 파괴와 반복적인 간손상에 따라 나타나는 섬유화 현상 (liver fibrogenesis)으로, ECM(extracellular matrix, 세포 외 기질)의 생성은 증가되지만 이에 대한 분해는 상대적으로 줄어드는 현상이 발생하고 심해지면 간경화증, 간부전이나 간암으로 진행된다. 간섬유증은 일단 섬유화가 진행되면 정상간으로 복원되기가 어려우며, 간경화증이나 간암으로 진행되어 이에 대한 사망률이 계속적으로 증가되는 추세이다. 간경화증은 만성적인 염증으로 인해 정상적인 간 조직이 재생결절(regenerative nodules; 작은 덩어리가 만들어지는 현상) 등의 섬유화 조직으로 바뀌어 간의 기능이 저하되는 것을 의미한다. 지금까지 이들 질환에 대한 구체적인 치료는 존재하지 않고 있다.On the other hand, hepatic fibrosis (liver cirrhosis or hepatic fibrosis) or liver cirrhosis (or liver cirrhosis, liver cirrhosis) occurs when liver tissue repeats damage and regeneration, resulting in hepatitis, and progresses from hepatitis to liver fibrosis and from liver fibrosis to cirrhosis. belonging to a disease Liver fibrosis is a fibrosis phenomenon (liver fibrogenesis) that occurs due to the continuous destruction of liver cells and repetitive liver damage. The production of ECM (extracellular matrix) is increased, but the degradation of it is relatively reduced. It progresses to cirrhosis, liver failure or liver cancer. Liver fibrosis is difficult to restore to a normal liver once fibrosis progresses, and it progresses to liver cirrhosis or liver cancer, resulting in a continuously increasing mortality rate. Liver cirrhosis refers to deterioration of liver function by changing normal liver tissue into fibrotic tissue such as regenerative nodules (a phenomenon in which small lumps are formed) due to chronic inflammation. So far, there is no specific treatment for these diseases.

이에, 본 발명자는 대사성 질환과 섬유화 질환을 효과적이고 안전하게 치료할 수 있는 치료제를 개발하기 위하여 예의 연구를 거듭한 결과, 에트라비린이 지질 축적을 억제하고 섬유화 관련 지표들의 개선 효과를 나타낸다는 것과, 이와 같은 효과는 다른 약물들과의 병용을 통해 더욱 향상된다는 것을 발견하고 본 발명을 완성하게 되었다. Accordingly, the present inventors have repeatedly conducted intensive research to develop a therapeutic agent that can effectively and safely treat metabolic diseases and fibrotic diseases, and as a result, etravirine inhibits lipid accumulation and exhibits an improvement effect of fibrosis-related indicators, and such It was found that the effect is further improved through combination with other drugs, and the present invention was completed.

따라서, 본 발명의 목적은 에트라비린(Etravirine)을 유효성분으로 포함하는 대사성 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다. Accordingly, an object of the present invention is to provide a pharmaceutical composition for preventing or treating metabolic diseases comprising Etravirine as an active ingredient.

본 발명의 다른 목적은 에트라비린(Etravirine)을 유효성분으로 포함하는 섬유화 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다. Another object of the present invention is to provide a pharmaceutical composition for preventing or treating fibrotic disease comprising Etravirine as an active ingredient.

전술한 본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 에트라비린(Etravirine)을 유효성분으로 포함하는 대사성 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다. In order to achieve the above object of the present invention, the present invention provides a pharmaceutical composition for preventing or treating metabolic diseases comprising Etravirine as an active ingredient.

본 발명의 다른 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 에트라비린(Etravirine)을 유효성분으로 포함하는 섬유화 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다. In order to achieve another object of the present invention, the present invention provides a pharmaceutical composition for preventing or treating fibrotic disease comprising Etravirine as an active ingredient.

본 발명에서 사용되는 용어, "치료" 또는 "치료하는 것" 이란, 환자에게 치료제 즉, 본 발명의 화합물(단독으로 또는 다른 약학적 제제와 결합하여)의 적용 또는 투여 또는 HBV 감염, HBV 감염의 증상 또는 HBV 감염으로 발전할 가능성이 있는 환자(예를 들면, 진단 또는 탈체 적용)로부터 치료, 치유, 완화, 경감, 변경, 해결, 개선, 향상 또는 HBV 감염, HBV 감염의 증상 또는 HBV 감염으로 발절될 가능성에 영향을 미치기 위한 목적을 가지고 분리된 조직 또는 세포주에 치료제의 적용 또는 투여로서 정의된다. 이러한 치료는 특히 게놈 약학의 분야로부터 얻어진 지식에 기초하여 맞춰지고 변경될 수 있다.As used herein, the term "treatment" or "treating" refers to the application or administration of a therapeutic agent, that is, a compound of the present invention (alone or in combination with other pharmaceutical agents) to a patient or HBV infection, HBV infection Treatment, cure, alleviation, alleviation, alteration, resolution, amelioration, improvement or outbreak of HBV infection, symptoms of HBV infection, or HBV infection from patients at risk of developing symptoms or HBV infection (e.g., diagnosis or ex vivo application) It is defined as the application or administration of a therapeutic agent to an isolated tissue or cell line for the purpose of influencing the likelihood of becoming infected. Such treatment can be tailored and modified based on knowledge obtained, inter alia, from the field of genomic pharmacology.

본 발명에서 사용되는 용어, "예방하다" 또는 "예방" 이란, 만약 아무것도 일어나지 않았다면, 장애 또는 질병 진전이 없는 것 또는 이미 장애 또는 질병 진전이 있었다면 더 이상의 장애 또는 질병의 진전이 없는 것을 의미한다. 또한, 고려되는 것은 장애 또는 질병에 관련된 증상의 일부 또는 전부를 예방하는 하나의 능력이다.As used herein, the term "prevent" or "prevention" means that, if nothing has happened, there is no development of the disorder or disease, or if there has already been the development of the disorder or disease, there is no further development of the disorder or disease. Also contemplated is one's ability to prevent some or all of the symptoms associated with a disorder or disease.

본 발명에서 사용되는 용어, "환자", "개체" 또는 "대상" 이란, 인간 또는 인간을 제외한 포유동물을 나타낸다. 예를 들면, 인간을 제외한 포유동물은 양 과, 소 과, 돼지 과, 개 과, 고양이 과 및 쥐 과의 포유동물와 같은 가축 및 애완동물을 포함한다. 바람직하게는 환자, 대상 또는 개체는 인간이다.As used herein, the term "patient", "individual" or "subject" refers to a human or a non-human mammal. For example, non-human mammals include livestock and pets such as ovine, bovine, porcine, canine, feline and murine mammals. Preferably the patient, subject or individual is a human.

본 발명에서 사용되는 용어, "유효량", "약학적 유효량" 및 "치료학적 유효량"이란, 원하는 생물학적 결과를 제공하는 제제의 무독성의 충분한 양을 나타낸다. 상기 결과는 신호, 증상 또는 질병의 원인의 감소 및/또는 약화이거나, 생물학적 시스템의 임의의 다른 원하는 변화일 수 있다. 임의의 개체의 경우에 적절한 치료 양은 통상의 실험을 사용하여 해당 기술분야에서 통상의 기술자에 의하여 결정될 수 있다.As used herein, the terms "effective amount", "pharmaceutically effective amount" and "therapeutically effective amount" refer to a non-toxic sufficient amount of an agent to provide a desired biological result. The result may be a reduction and/or attenuation of a signal, symptom or cause of a disease, or any other desired change in a biological system. An appropriate therapeutic amount for any individual can be determined by one skilled in the art using routine experimentation.

본 발명에서 사용되는 용어, "약학적으로 허용가능한" 이란, 화합물의 생물학적 활성 또는 특성을 저해하지 않고, 상대적으로 무독성인, 즉, 물질이 원하지 않는 생물학적 효과 또는 그것이 함유하고 있는 조성물의 임의의 구성성분과 해로운 방법으로 상호작용 없이 개체에게 투여될 수 있는 담체 또는 희석액과 같은 물질을 나타낸다.As used herein, the term "pharmaceutically acceptable" means that it does not interfere with the biological activity or properties of a compound and is relatively non-toxic, that is, a substance has an undesirable biological effect or any component of a composition it contains. Refers to a substance, such as a carrier or diluent, that can be administered to an individual without interacting in a detrimental way with the component.

본 발명에서 사용되는 용어, "약학적으로 허용가능한 염"이란, 약학적으로 허용가능한 무기산, 유기산, 용매 화합물, 수화물 또는 그것의 포접 화합물을 포함하는 무독성의 산으로부터 제조된 투여되는 화합물의 염을 나타낸다. 이러한 무기산의 예로는 염산, 브롬산, 요오드산, 질산, 황산, 인산, 아세트산, 헥사플루오로인산, 시트르산, 글루콘산, 벤조산, 프로피온산, 부티르산, 설포살리실산, 말레산, 라우르산, 말산, 푸마르산, 석신산, 타르타르산, 암소닉(amsonic) 산, 팜산, p-톨루엔설폰산 및 메실릭 산이 있다. 적절한 유기산은 예를 들어, 지방족, 방향족, 카복실 및 설폰 부류의 유기산으로부터 선택될 수 있으며, 그 예로, 포름산, 아세트산, 프로피온산, 석신산, 캄포설폰산, 시트르산, 푸마르산, 글루콘산, 이세티온산, 락트산, 말산, 점액산, 타르타르산, 파라-톨루엔설폰산, 글리콜산, 글루쿠론산, 말레산, 푸로산, 글루탐산, 벤조산, 아트라닐산, 살리실산, 페닐아세트산, 만델산, 엠포닉산(팜산), 메탄설폰산, 에탄설폰산, 판토텐산, 벤젠설폰산(베실레이트), 스테아르산, 설파닐산, 알긴산, 갈락투론산 등이 있다. 게다가, 약학적으로 허용가능한 염은 비제한적인 예로서, 알칼리토금속 염(예를 들면, 칼슘 또는 마그네슘), 알칼리금속 염(예를 들면, 나트륨-의존성(sodium-dependent) 또는 칼륨) 및 암모늄 염을 포함한다.As used herein, the term "pharmaceutically acceptable salt" refers to a salt of a compound to be administered prepared from non-toxic acids including pharmaceutically acceptable inorganic acids, organic acids, solvates, hydrates or clathrates thereof. indicate Examples of such inorganic acids are hydrochloric acid, hydrobromic acid, iodic acid, nitric acid, sulfuric acid, phosphoric acid, acetic acid, hexafluorophosphoric acid, citric acid, gluconic acid, benzoic acid, propionic acid, butyric acid, sulfosalicylic acid, maleic acid, lauric acid, malic acid, fumaric acid. , succinic acid, tartaric acid, amsonic acid, palmic acid, p-toluenesulfonic acid and mesylic acid. Suitable organic acids may be selected, for example, from the aliphatic, aromatic, carboxylic and sulfonic classes of organic acids, such as formic acid, acetic acid, propionic acid, succinic acid, camphorsulfonic acid, citric acid, fumaric acid, gluconic acid, isethionic acid, Lactic acid, malic acid, mucous acid, tartaric acid, para-toluenesulfonic acid, glycolic acid, glucuronic acid, maleic acid, furoic acid, glutamic acid, benzoic acid, atranilic acid, salicylic acid, phenylacetic acid, mandelic acid, emphonic acid (pam acid), Examples include methanesulfonic acid, ethanesulfonic acid, pantothenic acid, benzenesulfonic acid (besylate), stearic acid, sulfanilic acid, alginic acid, and galacturonic acid. Moreover, pharmaceutically acceptable salts include, but are not limited to, alkaline earth metal salts (eg calcium or magnesium), alkali metal salts (eg sodium-dependent or potassium) and ammonium salts. includes

본 발명에서 사용되는 용어, "약학적으로 허용가능한 담체"는 본 발명내에서 유용한 화합물을 환자 내에서 또는 환자에게 그의 의도된 기능을 수행할 수 있도록 운반 또는 수송과 관련된 액체 또는 고체 필러, 안정제, 분산제, 현탁제, 희석액, 첨가제, 농조화제, 용매 또는 캡슐화 물질과 같은 약학적으로 허용가능한 물질, 조성물 또는 담체를 의미한다. 전형적으로, 이러한 구성물은 하나의 기관 또는 신체의 일부로부터 신체의 다른 기관 또는 부분으로 운반되거나 수송된다. 각각의 담체는 본 발명 내에서 유용한 화합물을 포함하는 화학식의 다른 성분과 병용가능한 것 및 환자에게 손상을 주지 않는 관점에서 "허용가능" 해야 한다. 약학적으로 허용가능한 담체로서 작용할 수 있는 물질의 일부 예는 다음을 포함한다: 약학적 제형에 이용되는 락토오스, 글루코스 및 수크로오스와 같은 당류; 옥수수 전분 및 감자 전분과 같은 전분류; 셀룰로오스 및 소듐 카복시메틸 셀룰로오스, 에틸셀룰로오스 및 셀룰로오스 아세테이트와 같은 그의 유도체; 트래거캔스(tragacanth) 분말; 맥아; 젤라틴; 탈크; 코코아 버터 및 좌약 왁스와 같은 첨가제; 땅콩오일, 면실유, 홍화유, 참기름, 올리브 오일, 옥수수 오일 및 콩기름과 같은 오일; 플로필렌글리콜과 같은 글리콜; 글리세린, 솔비톨, 만니톨 및 폴리에틸렌글리콜과 같은 폴리올; 에틸올리에이트 및 에틸라우레이트와 같은 에스테르류; 한천; 마그네슘 하이드록사이드 및 알루미늄 하이드록사이드와 같은 완충제; 계면 활성제; 알긴산; 발열성 물질 제거수; 등장액; 링거 용액(Ringer's solution); 에틸알코올; 인산염 버퍼 용액; 및 다른 무독성의 병용가능한 물질. 또한, 본 발명에서 사용되는, "약학적으로 허용가능한 담체"는 본 발명내에서 유용한 화합물의 활성과 병용가능하고, 환자에게 생리학상으로 허용가능한 일부 또는 전부 코팅제, 항바이러스제 및 항균제 및 흡수 지연제 등을 포함한다. 또한, 보충의 활성 화합물은 상기 조성물내에 혼입될 수 있다. 추가로 "약학적으로 허용가능한 담체"는 본 발명 내에서 유용한 화합물의 약학적으로 허용가능한 염을 더 포함할 수 있다. 본 발명의 실시에서 사용된 약학적 조성물에 포함될 수 있는 다른 추가적인 성분은 해당 기술분야에 알려져 있고, 예를 들면, 참고문헌으로서 여기에 포함되어 있는 Remington's Pharmaceutical Sciences (Genaro, Ed., Mack Publishing Co., 1985, Easton, PA)에 기술되어 있다.As used herein, the term "pharmaceutically acceptable carrier" refers to a liquid or solid filler, stabilizer, A pharmaceutically acceptable substance, composition or carrier such as a dispersing agent, suspending agent, diluent, additive, thickening agent, solvent or encapsulating material. Typically, these components are carried or transported from one organ or part of the body to another organ or part of the body. Each carrier must be "acceptable" in the sense of being compatible with the other ingredients of the formula, including compounds useful within the present invention, and not injurious to the patient. Some examples of materials that can serve as pharmaceutically acceptable carriers include: sugars such as lactose, glucose and sucrose used in pharmaceutical formulations; starches such as corn starch and potato starch; cellulose and its derivatives such as sodium carboxymethyl cellulose, ethylcellulose and cellulose acetate; tragacanth powder; malt; gelatin; talc; additives such as cocoa butter and suppository wax; oils such as peanut oil, cottonseed oil, safflower oil, sesame oil, olive oil, corn oil and soybean oil; glycols such as propylene glycol; polyols such as glycerin, sorbitol, mannitol and polyethylene glycol; esters such as ethyl oleate and ethyl laurate; agar; buffers such as magnesium hydroxide and aluminum hydroxide; Surfactants; alginic acid; pyrogen-free water; isotonic solution; Ringer's solution; ethyl alcohol; phosphate buffer solution; and other non-toxic compatible substances. In addition, as used in the present invention, "pharmaceutically acceptable carrier" is compatible with the activity of compounds useful within the present invention, and is physiologically acceptable to patients in part or in whole coating agent, antiviral and antibacterial agent, and absorption delaying agent. Include etc. Supplementary active compounds may also be incorporated into the compositions. Further "pharmaceutically acceptable carriers" may further include pharmaceutically acceptable salts of compounds useful within the present invention. Other additional ingredients that may be included in the pharmaceutical compositions used in the practice of the present invention are known in the art and are described, for example, in Remington's Pharmaceutical Sciences (Genaro, Ed., Mack Publishing Co. , 1985, Easton, PA).

본 발명에서 사용되는 용어, "조성물" 또는 "약학적 조성물"은 본 발명 내에서 유용한 적어도 하나의 화합물과 약학적으로 허용가능한 담체의 혼합물을 나타낸다. 약학적 조성물은 환자 또는 대상에게 상기 화합물의 투여를 용이하게 한다. 이에 제한되지 않지만 정맥주사, 경구, 에어로졸, 비경구, 안구, 폐 및 국소의 투여를 포함하는 화합물을 투여하는 다양한 기술들이 해당 기술분야에 존재한다.As used herein, the term "composition" or "pharmaceutical composition" refers to a mixture of at least one compound useful within the present invention with a pharmaceutically acceptable carrier. A pharmaceutical composition facilitates administration of the compound to a patient or subject. A variety of techniques exist in the art for administering compounds including, but not limited to, intravenous, oral, aerosol, parenteral, ocular, pulmonary and topical administration.

본 발명에서 사용되는 용어, "병용 요법" 또는 "조합하여"라는 용어는 본 명세서에 기재된 병태 또는 장애(즉, 대사성 질환 및 섬유화 질환)를 치료하기 위해 2가지 이상의 치료제를 투여하는 것을 지칭한다. 이러한 투여는 이들 치료제를 실질적으로 동시적인 방식으로, 예컨대 고정된 비율의 활성 성분을 갖는 단일 캡슐로 공동 투여하는 것을 포함한다. 대안적으로, 이러한 투여는 각각의 활성 성분에 대해 다중 또는 개별 용기(예를 들어, 캡슐, 분말, 및 액체)로 공동 투여하는 것을 포함한다. 분말 및/또는 액체는 투여 전에 원하는 용량으로 재구성되거나 희석될 수 있다. 또한, 이러한 투여는 거의 동시에 또는 서로 다른 시간에 각 유형의 치료제를 순차적으로 사용하는 것도 포함한다. 어느 경우든, 치료 요법은 본원에 기재된 병태 또는 장애의 치료에 있어서 약물 병용의 이로운 효과를 제공할 것이다.As used herein, the terms "combination therapy" or "in combination" refer to the administration of two or more therapeutic agents to treat the conditions or disorders described herein (ie, metabolic diseases and fibrotic diseases). Such administration includes co-administration of these therapeutic agents in a substantially simultaneous manner, such as in a single capsule having a fixed proportion of the active ingredients. Alternatively, such administration includes co-administration in multiple or separate containers (eg, capsules, powders, and liquids) for each active ingredient. Powders and/or liquids may be reconstituted or diluted to the desired dosage prior to administration. In addition, such administration includes sequential use of each type of therapeutic agent at about the same time or at different times. In either case, the treatment regimen will provide beneficial effects of the drug combination in the treatment of the conditions or disorders described herein.

병용 요법은 "시너지 효과"를 제공할 수 있고 "시너지적"임을 입증할 수 있다. 즉, 활성 성분들이 함께 사용될 때 달성되는 효과가 화합물을 개별적으로 사용함으로써 발생하는 효과의 합보다 크다. 시너지 효과는 활성 성분이 (1) 공동 제형화 되어 조합된 단위 투여 제형으로 동시에 투여되거나 전달될 때; (2) 개별 제형으로서 교대로 또는 병행하여 전달될 때; 또는 (3) 일부 다른 계획에 의해 전달될 때, 얻어질 수 있다. 교대 요법으로 전달되는 경우, 시너지 효과는 화합물이 순차적으로, 예를 들어 개별 주사기로 서로 달리 주사하여 투여되거나 전달될 때 얻을 수 있다. 일반적으로, 교대 요법 동안에는, 각각의 활성 성분의 유효 투여량이 순차적으로, 즉 연속하여 투여되는 반면, 병용 요법에서는 2가지 이상의 활성 성분의 유효 투여량이 함께 투여된다. 본원에서 사용되는 시너지 효과는 2가지 치료제가 단독으로 투여되는 각 약물의 효과의 단순 합보다 더 큰 효과를 생성하는 작용을 의미한다. 시너지 효과는 예를 들어 Sigmoid-Emax 방정식(Holford, N. H. G. and Scheiner, L. B., Clin. Pharmacokinet. 6: 429-453 (1981)), Loewe 가산성 방정식(Loewe, S. and Muischnek, H., Arch. Exp. Pathol Pharmacol. 114: 313-326 (1926)), 및 중위수 효과 방정식(Chou, T. C. and Talalay, P., Adv. Enzyme Regul. 22: 27-55 (1984))과 같은 적합한 방법을 사용하여 계산될 수 있다. 상기 언급된 각각의 방정식은 약물 병용의 효과를 평가하는 데 도움이 되는 해당 그래프를 생성하기 위해 실험 데이터에 적용될 수 있다. 상기 언급된 방정식과 관련된 해당 그래프는 각각 농도-효과 곡선, 이소볼로그램 곡선, 및 병용지수 곡선이다.Combination therapy can provide a "synergistic effect" and can prove to be "synergistic." That is, the effect achieved when the active ingredients are used together is greater than the sum of the effects produced by using the compounds individually. A synergistic effect occurs when the active ingredients are (1) co-formulated and administered or delivered simultaneously in a combined unit dosage form; (2) when delivered alternately or in parallel as separate dosage forms; or (3) when delivered by some other initiative. When delivered in alternating therapy, a synergistic effect can be obtained when the compounds are administered or delivered sequentially, eg by different injections in separate syringes. Generally, during alternation therapy, effective doses of each active ingredient are administered sequentially, i.e. consecutively, whereas in combination therapy, effective dosages of two or more active ingredients are administered together. Synergistic effect as used herein refers to the action of two therapeutic agents to produce an effect greater than the simple sum of the effects of each drug administered alone. Synergistic effects are described, for example, by the Sigmoid-Emax equation (Holford, N. H. G. and Scheiner, L. B., Clin. Pharmacokinet. 6: 429-453 (1981)), the Loewe additive equation (Loewe, S. and Muischnek, H., Arch. Exp. Pathol Pharmacol. 114: 313-326 (1926)), and the median effect equation (Chou, T. C. and Talalay, P., Adv. Enzyme Regul. 22: 27-55 (1984)). can be calculated. Each of the equations mentioned above can be applied to experimental data to generate corresponding graphs that help evaluate the effects of drug combinations. Corresponding graphs related to the above-mentioned equations are concentration-effect curves, isobologram curves, and combination index curves, respectively.

이하, 본 발명에 대해 상세히 설명한다. Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 에트라비린(Etravirine)을 유효성분으로 포함하는 대사성 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.The present invention provides a pharmaceutical composition for preventing or treating metabolic diseases comprising etravirine as an active ingredient.

본 발명의 일실시예에 따르면, 상기 에트라비린은 간 세포주에서 지질 축적을 억제하는 활성 및 간 섬유화 마커의 발현을 억제하는 활성이 매우 뛰어나 간 세포에서 지질 축적에 의해 발생하는 대사성 질환의 예방 또는 치료제로 매우 유용하게 활용될 수 있음이 확인되었다. According to one embodiment of the present invention, the etravirine is very excellent in inhibiting activity of lipid accumulation in liver cell lines and expression of liver fibrosis markers, preventing or preventing metabolic diseases caused by lipid accumulation in liver cells. It has been confirmed that it can be used very usefully as a treatment.

본 발명에서 상기 대사성 질환은 대사증후군(metabolic syndrome), 대사질환 등으로도 표현될 수 있으며, 당뇨, 비만, 인슐린 저항성, 지방간, 비알코올성 지방간 질환(Non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD), 고지혈증 및 고혈압으로 이루어진 군에서 선택될 수 있다. 바람직하게는, 상기 대사성 질환은 지방간 또는 비알코올성 지방간 질환일 수 있다. In the present invention, the metabolic disease may also be expressed as metabolic syndrome, metabolic disease, etc., and diabetes, obesity, insulin resistance, fatty liver, non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD), hyperlipidemia and It can be selected from the group consisting of hypertension. Preferably, the metabolic disease may be fatty liver or non-alcoholic fatty liver disease.

본 발명에서 상기 비알코올성 지방간질환은 비알코올성 지방간증(non-alcoholic steatosis), 비알코올성 지방간염(non-alcoholic steatohepatitis, NASH), 간섬유화(fibrosis) 및 간경변(cirrhosis)으로 이루어진 군에서 선택될 수 있으며, 가장 바람직하게는 비알코올성 지방간염일 수 있다. In the present invention, the non-alcoholic fatty liver disease may be selected from the group consisting of non-alcoholic steatosis, non-alcoholic steatohepatitis (NASH), fibrosis, and cirrhosis And, most preferably, it may be non-alcoholic steatohepatitis.

NAFLD가 존재하는 일부 사람들은 비알콜성 지방간염 (NASH)이라고 불리는 보다 심각한 형태의 NAFLD가 발병될 수 있고, NASH에서, 간 내 지방 축적은 염증 및 상이한 정도의 흉터와 관련된다. 본 발명에서 상기 NASH는 지방증에 대한 간 생검의 조직병리학 점수 (0 내지 3), 소엽 염증 점수 (0 내지 2), 및 간세포 풍선화 점수 (0 내지 2)의 총합인, NAFLD 활성 점수 (NAS)에 의해 NAFLD 범위 내에서 정의될 수 있다. Some people with NAFLD can develop a more severe form of NAFLD called non-alcoholic steatohepatitis (NASH), in which accumulation of fat in the liver is associated with inflammation and scarring to varying degrees. In the present invention, the NASH is the NAFLD activity score (NAS), which is the sum of histopathology scores (0 to 3), lobular inflammation scores (0 to 2), and hepatocyte ballooning scores (0 to 2) of liver biopsies for steatosis. Can be defined within the NAFLD scope by

본 발명의 일 양태에서, 상기 약학적 조성물은 Bcl-2 (B-cell lymphoma 2) 억제제, DPP-4 (Dipeptidyl peptidase-4) 억제제 및 니클로사미드(Niclosamide)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 약물을 추가로 포함할 수 있다. In one aspect of the present invention, the pharmaceutical composition comprises at least one drug selected from the group consisting of a Bcl-2 (B-cell lymphoma 2) inhibitor, a DPP-4 (Dipeptidyl peptidase-4) inhibitor, and Niclosamide may additionally be included.

본 발명에서 상기 "Bcl-2 억제제"는 항-세포자멸사 단백질의 BCL-2 패밀리에 속하는 하나 이상의 단백질, 예를 들어, Bcl-2, Bcl-xL 및 Bcl-w로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상을 억제할 수 있는 물질로서, 세포의 프로그래밍된 세포 살해를 유도함으로써 작용을 하는 약물 군이다. 본 발명의 다른 일 양태에서는, 상기 Bcl-2 억제제는 Bcl-2, Bcl-xL 및 Bcl-w 뿐만 아니라 Bcl-2 패밀리 구성원인 MCL-1 및 BFL-1을 추가로 억제하는 것을 특징으로 할 수 있다. 즉, 본 발명에서 상기 Bcl-2 억제제는 Bcl-2 패밀리 단백질 중 어느 하나 이상을 암호화하는 유전자의 발현 또는 단백질의 활성을 억제하는 것을 모두 포함할 수 있다. 예를 들면, 전술한 Bcl-2 패밀리 단백질의 mRNA에 대한 안티센스 뉴클레오티드, 앱타머, 작은 간섭 RNA (siRNA), 짧은 헤어핀 RNA (shRNA), 마이크로 RNA (miRNA) 또는 RNA 간섭 (RNAi), 천연물, 유기화합물, 저분화화합물, 항체, 단백질 등이 포함될 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다. In the present invention, the "Bcl-2 inhibitor" is one or more proteins belonging to the BCL-2 family of anti-apoptotic proteins, for example, any one or more selected from the group consisting of Bcl-2, Bcl-xL and Bcl-w. is a group of drugs that act by inducing programmed cell death of cells. In another aspect of the present invention, the Bcl-2 inhibitor may further inhibit Bcl-2, Bcl-xL and Bcl-w as well as Bcl-2 family members MCL-1 and BFL-1. there is. That is, the Bcl-2 inhibitors in the present invention may include those that inhibit the expression of a gene encoding one or more of the Bcl-2 family proteins or the activity of a protein. For example, antisense nucleotides, aptamers, small interfering RNA (siRNA), short hairpin RNA (shRNA), micro RNA (miRNA) or RNA interference (RNAi) against mRNA of the aforementioned Bcl-2 family proteins, natural products, organic Compounds, low-differentiation compounds, antibodies, proteins, etc. may be included, but are not limited thereto.

본 발명의 일 양태에서, 상기 Bcl-2 억제제의 비제한적인 예시로 오바토클락스(obatoclax), 나비토클락스(navitoclax), 베네토클락스(venetoclax), 사부토클락스(sabutoclax), A-1155463, A-1331852, ABT-737, TW-37, A-1210477, AT101, HA14-1, BAM7, S44563 및 UMI-77가 포함될 수 있으며, 본 발명의 바람직한 일 양태에서 상기 Bcl-2 억제제는 오바토클락스 일 수 있다. In one aspect of the present invention, non-limiting examples of the Bcl-2 inhibitor include obatoclax, navitoclax, venetoclax, sabutoclax, A -1155463, A-1331852, ABT-737, TW-37, A-1210477, AT101, HA14-1, BAM7, S44563 and UMI-77, and in a preferred embodiment of the present invention, the Bcl-2 inhibitor is It could be Obatoclax.

본 발명에서 상기 DPP-4 (Dipeptidyl peptidase-4)는 CD26 (cluster of differentiation 26)으로 명명되기도 하며, 면역 조절, 아폽토시스, 신호전달 등에 관여하는 단백질로 알려져 있다. 상기 DPP-4 억제제는 DPP-4 뉴클레오티드의 발현 또는 DPP-4 단백질의 활성을 억제하는 것을 모두 포함할 수 있다. 예를 들면, DPP-4의 mRNA에 대한 안티센스 뉴클레오티드, 앱타머, 작은 간섭 RNA (siRNA), 짧은 헤어핀 RNA (shRNA), 마이크로 RNA (miRNA) 또는 RNA 간섭 (RNAi), 천연물, 유기화합물, 저분화화합물, 항체, 단백질 등이 포함될 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.In the present invention, the DPP-4 (Dipeptidyl peptidase-4) is also called CD26 (cluster of differentiation 26), and is known as a protein involved in immune regulation, apoptosis, and signal transduction. The DPP-4 inhibitors may include those that inhibit the expression of DPP-4 nucleotides or the activity of DPP-4 proteins. For example, antisense nucleotides, aptamers, small interfering RNA (siRNA), short hairpin RNA (shRNA), micro RNA (miRNA) or RNA interference (RNAi) against mRNA of DPP-4, natural products, organic compounds, low differentiation Compounds, antibodies, proteins, etc. may be included, but are not limited thereto.

본 발명의 일 양태에서, 상기 DPP-4 억제제의 비제한적인 예시로 DPP-4 억제제는 시타글립틴 (sitagliptin), 빌다글립틴 (vildagliptin), 삭사글립틴 (saxagliptin), 리나글립틴 (linagliptin), 두토글립틴(dutogliptin), 제미글립틴 (gemigliptin), 알로글립틴 (alogliptin), 아나글립틴 (Anagliptin), 베르베린(Berberine), 디프로틴 (Diprotin) 및 루피올 (Lupeol)이 포함될 수 있으며, 본 발명의 바람직한 일 양태에서 상기 DPP-4 억제제는 시타글립틴일 수 있다. In one aspect of the present invention, non-limiting examples of the DPP-4 inhibitor include sitagliptin, vildagliptin, saxagliptin, and linagliptin. , dutogliptin, gemigliptin, alogliptin, anagliptin, berberine, diprotin and lupeol, In a preferred aspect of the present invention, the DPP-4 inhibitor may be sitagliptin.

본 발명에서 상기 니클로사미드(niclosamide)는 1960년 FDA 승인을 받아 50년 가까이 다양한 기생충 감염 치료에 사용되는 경구형 살리실 아닐리드 유도체로, 니클로사마이드는 최근 분자 타겟은 명확하게 밝혀지지 않았지만, 최근 Wnt, S100A4, Notch 및 안드로겐 수용체와 같은 많은 신호 경로를 조절하는 항암 약물로서 기능을 할 수 있다고 제시된 바 있으나, 대사성 질환 예방 또는 치료 효과를 나타낸다는 것은 보고된 바 없다. In the present invention, niclosamide is an oral salicyl anilide derivative that has been approved by the FDA in 1960 and used for the treatment of various parasitic infections for nearly 50 years. Although it has been suggested that it can function as an anti-cancer drug regulating many signal pathways such as Wnt, S100A4, Notch and androgen receptor, it has not been reported to exhibit metabolic disease preventive or therapeutic effects.

본 발명의 일 양태에서, 상기 에트라비린; 및 Bcl-2 (B-cell lymphoma 2) 억제제, DPP-4 (Dipeptidyl peptidase-4) 억제제 및 니클로사미드(Niclosamide)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 약물은 병용 요법으로서, 또는 병용 제제로서 대사성 질환 치료에 활용될 수 있다. In one aspect of the invention, the etravirine; And at least one drug selected from the group consisting of a Bcl-2 (B-cell lymphoma 2) inhibitor, a DPP-4 (Dipeptidyl peptidase-4) inhibitor, and Niclosamide as a combination therapy or as a combination drug for metabolic diseases can be used for treatment.

구체적으로, 에트라비린 및 Bcl-2 억제제; 에트라비린 및 DPP-4 억제제; 에트라비린 및 니클로사미드; 에트라비린, Bcl-2 억제제 및 DPP-4 억제제; 에트라비린, Bcl-2 억제제 및 니클로사미드; 에트라비린, DPP-4 억제제 및 니클로사미드; 및 에트라비린, Bcl-2 억제제, DPP-4 억제제 및 니클로사미드로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상의 병용 요법 또는 병용 제제는 대사성 질환 예방 또는 치료 효과에 있어서 시너지 효과가 나타날 수 있다. Specifically, etravirine and Bcl-2 inhibitors; etravirine and DPP-4 inhibitors; etravirine and niclosamide; etravirine, a Bcl-2 inhibitor and a DPP-4 inhibitor; Etravirine, Bcl-2 inhibitors and niclosamide; Etravirine, DPP-4 inhibitors and niclosamide; And any one or more combination therapies or combination agents selected from the group consisting of etravirine, a Bcl-2 inhibitor, a DPP-4 inhibitor, and niclosamide may exhibit a synergistic effect in preventing or treating metabolic diseases.

이 경우, 상기 병용 제제에 포함된 각 구성성분은 별개로, 동시에 또는 순차적으로 사용되기 위해 제제화될 수 있다. 즉, 순차적으로 투여하는 경우, 병용 제제는 2회 이상 투여로 투여할 수 있다. 병용 투여에는 별개의 제형 또는 단일 제약 제형을 사용하여 동시-투여하는 것과, 어느 한 순서로 순차적으로 투여하는 것이 포함될 수 있다. In this case, each component included in the combination preparation may be formulated for use separately, simultaneously or sequentially. That is, in the case of sequential administration, the combination preparation may be administered in two or more administrations. Concomitant administration can include co-administration using separate formulations or a single pharmaceutical formulation, as well as sequential administration in either order.

본 발명에서 상기 에트라비린 및 추가적인 약물이 병용 요법 또는 병용 제제로서 사용되는 경우, 이들 병용 약물은 1:0.01 내지 500의 몰비로 병용 투여될 수 있다. 상기 에트라비린이 둘 이상의 약물과 병용 요법 또는 병용 제제로서 사용되는 경우, 이들 병용 약물은 1:0.01 내지 500:0.01 내지 500의 몰비로 병용 투여될 수 있다. In the present invention, when the etravirine and the additional drug are used as a combination therapy or combination drug, these combination drugs may be administered in combination at a molar ratio of 1:0.01 to 500. When the above etravirine is used as a combination therapy or combination preparation with two or more drugs, these combination drugs may be administered in combination at a molar ratio of 1:0.01 to 500:0.01 to 500.

본 발명은 또한 에트라비린 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염; 및 오바토클락스, 시타글립틴, 니클로사미드 및 이들의 약학적으로 허용가능한 염으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 유효성분으로 포함하는 대사성 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다. The present invention also relates to etravirine or a pharmaceutically acceptable salt thereof; and obatoclax, sitagliptin, niclosamide, and a pharmaceutical composition for preventing or treating metabolic diseases comprising at least one selected from the group consisting of pharmaceutically acceptable salts thereof as an active ingredient.

구체적으로, 에트라비린 및 오바토클락스; 에트라비린 및 시타글립틴; 에트라비린 및 니클로사미드; 에트라비린, 오바토클락스 및 시타글립틴; 에트라비린, 오바토클락스 및 니클로사미드; 및 에트라비린, 오바토클락스, 시타글립틴 및 니클로사미드로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상의 병용 요법 또는 병용 제제는 대사성 질환 예방 또는 치료 효과에 있어서 시너지 효과가 나타날 수 있다. Specifically, etravirine and obatoclax; etravirine and sitagliptin; etravirine and niclosamide; etravirine, obatoclax and sitagliptin; etravirine, obatoclax and niclosamide; And any one or more combination therapies or combination agents selected from the group consisting of etravirine, obatoclax, sitagliptin, and niclosamide may exhibit a synergistic effect in preventing or treating metabolic diseases.

본 발명에 따른 약학적 조성물은 에트라비린을 단독으로 함유하거나 약학적으로 허용되는 담체와 함께 적합한 형태로 제형화 될 수 있으며, 부형제 또는 희석제를 추가로 함유할 수 있다. 상기에서 '약학적으로 허용되는'이란 생리학적으로 허용되고 인간에게 투여될 때, 통상적으로 위장 장애, 현기증 등과 같은 알레르기 반응 또는 이와 유사한 반응을 일으키지 않는 비독성의 조성물을 말한다.The pharmaceutical composition according to the present invention may contain etravirine alone or may be formulated in a suitable form together with a pharmaceutically acceptable carrier, and may further contain an excipient or diluent. In the above, 'pharmaceutically acceptable' refers to a non-toxic composition that is physiologically acceptable and does not cause allergic reactions such as gastrointestinal disorders, dizziness, etc., or similar reactions when administered to humans.

약학적으로 허용되는 담체로는 예컨대, 경구 투여용 담체 또는 비경구 투여용 담체를 추가로 포함할 수 있다.A pharmaceutically acceptable carrier may further include, for example, a carrier for oral administration or a carrier for parenteral administration.

경구 투여용 담체는 락토스, 전분, 셀룰로스 유도체, 마그네슘 스테아레이트, 스테아르산 등을 포함할 수 있다.Carriers for oral administration may include lactose, starch, cellulose derivatives, magnesium stearate, stearic acid and the like.

아울러, 경구투여용으로 사용되는 다양한 약물전달물질을 포함할 수 있다. 또한, 비경구 투여용 담체는 물, 적합한 오일, 식염수, 수성 글루코오스 및 글리콜 등을 포함할 수 있으며, 안정화제 및 보존제를 추가로 포함할 수 있다. 적합한 안정화제로는 아황산수소나트륨, 아황산나트륨 또는 아스코르브산과 같은 항산화제가 있다. 적합한 보존제로는 벤즈알코늄 클로라이드, 메틸-또는 프로필-파라벤 및 클로로부탄올이 있다.In addition, various drug delivery materials used for oral administration may be included. In addition, the carrier for parenteral administration may include water, suitable oil, saline, aqueous glucose and glycol, and the like, and may further include a stabilizer and a preservative. Suitable stabilizers include antioxidants such as sodium bisulfite, sodium sulfite or ascorbic acid. Suitable preservatives include benzalkonium chloride, methyl- or propyl-paraben and chlorobutanol.

본 발명의 약학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현택제 등을 추가로 포함할 수 있다. 그 밖의 약학적으로 허용되는 담체 및 제제는 다음의 문헌에 기재되어 있는 것을 참고로 할 수 있다(Remington's Pharmaceutical Sciences, 19th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, 1995).The pharmaceutical composition of the present invention may further include a lubricant, a wetting agent, a sweetening agent, a flavoring agent, an emulsifier, a suspending agent, and the like in addition to the above components. Other pharmaceutically acceptable carriers and formulations may be referenced as described in the following literature (Remington's Pharmaceutical Sciences, 19th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, 1995).

본 발명의 조성물은 인간을 비롯한 포유동물에 어떠한 방법으로도 투여할 수 있다. 예를 들면, 경구 또는 비경구적으로 투여할 수 있다. 비경구적인 투여방법으로는 이에 한정되지는 않으나, 정맥내, 근육내, 동맥내, 골수내, 경막내, 심장내, 경피, 피하, 복강내, 비강내, 장관, 국소, 설하 또는 직장내 투여일 수 있다.The composition of the present invention can be administered to mammals including humans by any method. For example, it can be administered orally or parenterally. Parenteral administration methods include, but are not limited to, intravenous, intramuscular, intraarterial, intramedullary, intrathecal, intracardiac, transdermal, subcutaneous, intraperitoneal, intranasal, intestinal, topical, sublingual or rectal administration can be

본 발명의 약학적 조성물은 상술한 바와 같은 투여 경로에 따라 경구 투여용 또는 비경구 투여용 제제로 제형화할 수 있다.The pharmaceutical composition of the present invention may be formulated into a formulation for oral administration or parenteral administration according to the administration route as described above.

경구 투여용 제제의 경우에 본 발명의 조성물은 분말, 과립, 정제, 환제, 당의정제, 캡슐제, 액제, 겔제, 시럽제, 슬러리제, 현탁액 등으로 당업계에 공지된 방법을 이용하여 제형화될 수 있다. 예를 들어, 경구용 제제는 활성성분을 고체 부형제와 배합한 다음 이를 분쇄하고 적합한 보조제를 첨가한 후 과립 혼합물로 가공함으로써 정제 또는 당의정제를 수득할 수 있다. 적합한 부형제의 예로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨 및 말티톨 등을 포함하는 당류와 옥수수 전분, 밀 전분, 쌀 전분 및 감자 전분 등을 포함하는 전분류, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 나트륨 카르복시메틸셀룰로오즈 및 하이드록시프로필메틸-셀룰로즈 등을 포함하는 셀룰로즈류, 젤라틴, 폴리비닐피롤리돈 등과 같은 충전제가 포함될 수 있다. 또한, 경우에 따라 가교결합 폴리비닐피롤리돈, 한천, 알긴산 또는 나트륨 알기네이트 등을 붕해제로 첨가할 수 있다.In the case of preparations for oral administration, the composition of the present invention may be formulated into powders, granules, tablets, pills, dragees, capsules, solutions, gels, syrups, slurries, suspensions, etc. using a method known in the art. can For example, preparations for oral use may be obtained by combining the active ingredient with a solid excipient, which is then milled and, after adding suitable auxiliaries, processed into a mixture of granules to obtain tablets or dragees. Examples of suitable excipients include sugars including lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol and maltitol, starches including corn starch, wheat starch, rice starch and potato starch, cellulose, Celluloses including methyl cellulose, sodium carboxymethylcellulose and hydroxypropylmethyl-cellulose, and the like, fillers such as gelatin, polyvinylpyrrolidone, and the like may be included. In addition, cross-linked polyvinylpyrrolidone, agar, alginic acid or sodium alginate may be added as a disintegrant, if desired.

나아가, 본 발명의 약학적 조성물은 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제 및 방부제 등을 추가로 포함할 수 있다.Furthermore, the pharmaceutical composition of the present invention may further include an anticoagulant, a lubricant, a wetting agent, a flavoring agent, an emulsifier, and a preservative.

비경구 투여용 제제의 경우에는 주사제, 크림제, 로션제, 외용연고제, 오일제, 보습제, 겔제, 에어로졸 및 비강 흡입제의 형태로 당업계에 공지된 방법으로 제형화할 수 있다. 이들 제형은 모든 제약 화학에 일반적으로 공지된 처방서인 문헌(Remington's Pharmaceutical Science, 19th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA,1995)에 기재되어 있다.In the case of preparations for parenteral administration, they may be formulated in the form of injections, creams, lotions, external ointments, oils, moisturizers, gels, aerosols, and nasal inhalants by methods known in the art. These formulations are described in Remington's Pharmaceutical Science, 19th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, 1995, which is a generally known formula for all pharmaceutical chemistry.

본 발명의 조성물의 총 유효량은 단일 투여량(single dose)으로 환자에게 투여될 수 있으며, 다중 투여량(multiple dose)으로 장기간 투여되는 분할 치료 방법(fractionated treatment protocol)에 의해 투여될 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 질환의 정도에 따라 유효성분의 함량을 달리할 수 있다. 바람직하게 본 발명의 약학적 조성물의 바람직한 전체 용량은 1일당 환자 체중 1 당 약 0.01 내지 10,000mg, 가장 바람직하게는 0.1 내지 500mg일 수 있다. 그러나 상기 약학적 조성물의 용량은 제제화 방법, 투여 경로 및 치료 횟수뿐만 아니라 환자의 연령, 체중, 건강 상태, 성별, 질환의 중증도, 식이 및 배설율 등 다양한 요인들을 고려하여 환자에 대한 유효 투여량이 결정되는 것이므로, 이러한 점을 고려할 때 당 분야의 통상적인 지식을 가진 자라면 본 발명의 조성물의 적절한 유효 투여량을 결정할 수 있을 것이다. 본 발명에 따른 약학적 조성물은 본 발명의 효과를 보이는 한 그 제형, 투여 경로 및 투여 방법에 특별히 제한되지 아니한다.The total effective amount of the composition of the present invention can be administered to the patient in a single dose or by a fractionated treatment protocol in which multiple doses are administered over a long period of time. The pharmaceutical composition of the present invention may vary the content of the active ingredient according to the severity of the disease. Preferably, the preferred total dose of the pharmaceutical composition of the present invention may be about 0.01 to 10,000 mg, most preferably 0.1 to 500 mg per patient body weight per day. However, the dosage of the pharmaceutical composition is determined by considering various factors such as the formulation method, administration route, and number of treatments as well as the patient's age, weight, health condition, sex, severity of disease, diet and excretion rate, etc. Therefore, considering this point, those skilled in the art will be able to determine an appropriate effective dosage of the composition of the present invention. The pharmaceutical composition according to the present invention is not particularly limited in its formulation, administration route and administration method as long as it exhibits the effects of the present invention.

본 발명은 또한 에트라비린(Etravirine)을 유효성분으로 포함하는 섬유화 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다. The present invention also provides a pharmaceutical composition for preventing or treating fibrotic disease comprising Etravirine as an active ingredient.

본 발명에서 상기 섬유화 질환은 섬유증(fibrosis)으로도 불리며, 세포외 기질(ECM)의 과잉 축적으로 관련 조직의 딱딱해짐 및/또는 반흔으로 이어짐을 특징으로 하는 만성적 및 진행성 질환이다. 이것은 복잡한 세포, 세포외 기질, 사이토카인 및 성장 인자의 상호 작용을 통해 발달한다. 다른 세포 유형은 거주 간엽세포(섬유아 세포 및 근육섬유 아세포) 및 상피와 내피 세포 유래의 ECM 생산 세포(상피- 및 내피-간엽 전환으로 불리는 과정을 통해), 국부 또는 골수 유래 줄기세포(섬유세포) 등을 포함한다. 섬유아세포는 정상적인 상처 치유에 관여하는 주요 세포 유형으로서, 및 섬유 형성에서 중요한 이펙터 세포로서 오랫동안 간주되어 왔다. 그들은 콜라겐 및 다른 ECM 성분에 매우 합성적이며, 또한 α-평활근 액틴(α-SMA)의 드 노보 발현을 특징으로 한다(Scotton C.J. and Chambers R.C., 2007에서 검토). 섬유증의 동물모델에서 섬유성 병변의 근육섬유 아세포의 존재는 활성 섬유증의 발병과 상관하며, 인간의 질병의 섬유성 병소에 대한 지속성 및 국부화는 질환의 진행과 관련되어 있다(Kuhn C. and McDonald J.A., 1991, 및 Zhang et al., 1994). 근육섬유 아세포는 또한 강화된 이주 표현형을 나타내며(Suganuma etal. 1995) 다수의 전섬유화 매개체를 방출할 수 있다.In the present invention, the fibrotic disease is also called fibrosis, and is a chronic and progressive disease characterized by excessive accumulation of extracellular matrix (ECM) leading to hardening and/or scarring of related tissues. It develops through complex interactions of cells, extracellular matrix, cytokines, and growth factors. Other cell types include resident mesenchymal cells (fibroblasts and myofibroblasts) and ECM-producing cells derived from epithelial and endothelial cells (through a process called epithelial- and endothelial-mesenchymal transition), and local or bone marrow-derived stem cells (fibroblasts). ), etc. Fibroblasts have long been considered as the major cell type involved in normal wound healing and as important effector cells in fibrogenesis. They are highly synthetic to collagen and other ECM components, and are also characterized by de novo expression of α-smooth muscle actin (α-SMA) (reviewed in Scotton C.J. and Chambers R.C., 2007). The presence of myofibroblasts in fibrotic lesions in animal models of fibrosis correlates with the onset of active fibrosis, and the persistence and localization of fibrotic lesions in humans is associated with disease progression (Kuhn C. and McDonald J.A., 1991, and Zhang et al., 1994). Myofibroblasts also display an enhanced migration phenotype (Suganuma et al. 1995) and are capable of releasing multiple mediators of profibrosis.

본 발명에서 상기 섬유화 질환은 그 종류가 특별히 제한되지 않으며, 만성 염증 또는 조직 손상/재형성 등에 의해 발생하고, 세포외 기질(ECM)의 과잉 축적으로 관련 조직의 딱딱해짐 및/또는 반흔으로 이어지는 진행성 질환이라면 모두 포함될 수 있다. 상기 섬유화 질환의 비제한적인 예시로 폐 섬유증, 간 섬유증, 피부 섬유증, 신장 섬유증, 췌장 섬유증, 전신성 경화증 및 심장 섬유증이 포함될 수 있다. In the present invention, the type of fibrotic disease is not particularly limited, and is caused by chronic inflammation or tissue damage/remodeling, etc., and is a progressive disease that leads to hardening and/or scarring of related tissues due to excessive accumulation of extracellular matrix (ECM). Any disease can be included. Non-limiting examples of the fibrotic disease may include pulmonary fibrosis, liver fibrosis, skin fibrosis, renal fibrosis, pancreatic fibrosis, systemic sclerosis and cardiac fibrosis.

상기 폐 섬유증(lung fibrosis)은 폐 조직의 반흔을 포함하는 심각한 의학적 증상이다. 이러한 증상은 폐의 폐포와 간질 조직에 염증이 생겨 스스로를 복구하기 위한 시도로 조직에 반흔으로 발전할 때 발생한다. 폐 섬유증은 섬유성 조직(섬유 상흔)과 정상 폐 실질의 점진적 교환을 포함한다. The lung fibrosis is a serious medical condition involving scarring of lung tissue. These symptoms occur when the alveoli and interstitial tissue of the lungs become inflamed and develop scars in the tissue in an attempt to repair itself. Pulmonary fibrosis involves progressive exchange of fibrotic tissue (fibrous scar) with normal lung parenchyma.

폐 섬유증은 만성 염증성 과정(유육종증, 베게너 육아종 질환), 감염, 환경 작용제(석면, 실리카, 특정 가스에 노출), 이온화 방사선에 노출(예를 들면 가슴의 종양을 치료하기 위한 방사선 요법), 만성 증상(루푸스), 및 특정 약물(예를 들면 아미오다론, 블레오마이신, 핑기앙마이신(pingyangmycin), 부설판, 메토트렉세이트, 및 니트로푸란토인)을 포함하는 많은 조건이 원인이 될 수 있다.Pulmonary fibrosis is characterized by chronic inflammatory processes (sarcomatosis, Wegener's granulomatous disease), infections, environmental agents (exposure to asbestos, silica, certain gases), exposure to ionizing radiation (e.g. radiation therapy to treat tumors in the chest), and chronic conditions. (lupus), and certain medications (eg amiodarone, bleomycin, pingyangmycin, busulfan, methotrexate, and nitrofurantoin).

과민성 폐렴으로 알려진 상태에서, 폐의 섬유화는 흡입된 유기 먼지 또는 산업 화학 물질에 대한 높은 면역 반응 후에 발전할 수 있다. 이러한 증상은 대부분 세균, 곰팡이, 동물 산물로 오염된 먼지의 흡입으로부터 초래된다.In a condition known as hypersensitivity pneumonitis, fibrosis of the lungs may develop after a high immune response to inhaled organic dust or industrial chemicals. These symptoms mostly result from inhalation of dust contaminated with bacteria, fungi, or animal products.

상기 간 섬유증 또는 간성 섬유증은 대부분의 만성 간 질환에서 일어나는 세포외 기질 단백질(콜라겐을 포함)의 과도한 축적 및 이후의 반흔 형성과정이다. 경시적으로 진행된 간 섬유증은 간경변을 초래한다. 간경변은 만성 간 질환의 마지막 단계이며, 일반적으로 불량한 장기 예후와 비가역적이다. 진행된 단계에서 유일한 선택사항은 간 이식이다. 간암의 위험은 간경변이 현저히 증가하며 간경변은 전암상태(간세포 암)로 볼 수 있다. 실제로, 간경변 및 간암은 전세계 사망의 10 가지 원인 중 하나이다. 따라서, 간 섬유증 및 이후의 간경변증의 효과적인 치료에 대한 필요성이 존재한다. 불행하게도, 이용가능한 치료 선택사항이 거의 없으며, 대부분의 치료는 간경변의 원인 및/또는 증상을 해결하는 것으로 구성된다. The liver fibrosis or hepatic fibrosis is a process of excessive accumulation of extracellular matrix proteins (including collagen) and subsequent scar formation that occurs in most chronic liver diseases. Liver fibrosis that progresses over time results in cirrhosis. Cirrhosis is the final stage of chronic liver disease and is generally irreversible with poor long-term prognosis. At an advanced stage, the only option is a liver transplant. The risk of liver cancer is significantly increased with cirrhosis, and cirrhosis can be seen as a precancerous condition (hepatocellular carcinoma). In fact, cirrhosis and liver cancer are among the top 10 causes of death worldwide. Thus, there is a need for effective treatment of liver fibrosis and subsequent cirrhosis. Unfortunately, there are few treatment options available, and most treatment consists of addressing the causes and/or symptoms of cirrhosis.

제한된 수의 임상 시험은 간에서 섬유증의 억제 또는 지연을 특이적으로 대응하는 후보 약물로 진행중이다. 그러나 이들 시험은 NASH(비알코올성 지방간염)등의 특정 간질환을 표적으로 한다. A limited number of clinical trials are ongoing with candidate drugs that specifically address the inhibition or retardation of fibrosis in the liver. However, these trials target specific liver diseases, such as non-alcoholic steatohepatitis (NASH).

상기 피부 섬유증 또는 표피 섬유증은 피부의 과도한 상흔이며, 병리학적 상처 치유 반응의 결과이다. 광범위한 섬유성 피부 질환이 있다: 강피증, 신성섬유화성 피부증, 혼합성 결합조직 질환, 경화성 점액수종, 경화성 수종, 및 호산구성 근막염. 화학 물질이나 물리적 작용제(기계적 외상, 화상상처)에 대한 노출은 또한 섬유성 피부 질환의 잠재적인 원인이다. 피부 섬유증은 면역, 자가 면역 및 염증 기전에 의해 주도될 수 있다. 섬유 아세포의 콜라겐 생성 및 분해의 균형은 피부 섬유증의 병태 생리 과정에서 중요한 역할을 한다. 형질전환 성장 인자-β(TGB-β) 및 인터루킨-4(IL-4)와 같은 특정의 시토카인은 상처 치유 및 섬유화를 촉진하는 반면, 인터페론-γ(IFN-γ) 및 종양 괴사 인자-α(TNF-α)등의 다른 것은 항섬유증이다. 정상 피부의 섬유아세포는 정지되어 있다. 이들은 결합조직 단백질의 양을 제어하고 낮은 증식활성을 갖는다. 피부 손상 후, 이러한 세포들은 활성화되고, 즉 이들은 α-평활근 액틴(α-SMA)을 발현하고 다량의 결합조직 단백질을 합성한다. 활성화된 세포들은 흔히 근육섬유 아세포라고 불리운다.The skin fibrosis or epidermal fibrosis is excessive scarring of the skin and results from a pathological wound healing response. There are a wide range of fibrotic skin diseases: scleroderma, nephrogenic dermatosis, mixed connective tissue disease, sclerosing myxedema, sclerotic hydrocele, and eosinophilic fasciitis. Exposure to chemical or physical agents (mechanical trauma, burns) is also a potential cause of fibrotic skin disease. Skin fibrosis can be driven by immune, autoimmune and inflammatory mechanisms. The balance of collagen production and degradation in fibroblasts plays an important role in the pathophysiological process of skin fibrosis. Certain cytokines such as transforming growth factor-β (TGB-β) and interleukin-4 (IL-4) promote wound healing and fibrosis, while interferon-γ (IFN-γ) and tumor necrosis factor-α ( Others, such as TNF-α), are anti-fibrotic. Fibroblasts in normal skin are quiescent. They control the amount of connective tissue proteins and have low proliferative activity. After skin injury, these cells are activated, ie they express α-smooth muscle actin (α-SMA) and synthesize large amounts of connective tissue proteins. Activated cells are often called myofibroblasts.

피부 경화증은 피부 섬유증을 말한다; 공막 = 하드 및 진피 피부. 그러나, 피부 섬유증은 특히 전신 피부 경화증의 일부인 경우 건강 결과에 중요한 영향을 미칠 수 있다. 후자는 자가 면역 병인의 결합조직 질환을 의미한다. 제한된 피부 경피증은 얼굴과 발의 피부로 제한되는 반면, 확산 피부 경피증은 더 많은 피부를 커버하며 내장기관으로 진행할 수 있다.scleroderma refers to skin fibrosis; Sclera = hard and dermal skin. However, dermal fibrosis can have a significant impact on health outcomes, particularly when it is part of systemic scleroderma. The latter refers to connective tissue diseases of autoimmune etiology. Restricted cutaneous scleroderma is limited to the skin of the face and feet, whereas diffuse cutaneous scleroderma covers more skin and may progress to the visceral organs.

상기 신장섬유증은 세포의 과도한 증식, 조직과 반흔의 경화를 의미한다. 신장 섬유증은 신부전 및 도관 설치, 예를 들면 복막 및 혈관 접근 섬유증에 따른 투석으로부터 야기될 수 있다. 신장 섬유증은 또한 사구체 질환(예를 들면 사구체 경화증, 사구체 신염), 만성 신부전, 급성 신부전, 말기 신장질환 및 신장 장애와 같은 신장병증으로부터 발생할 수 있다. 병인론과 상관없이, 모든 만성 신장질환 환자들은 경시적으로 신장 기능의 점진적 쇠퇴를 나타낸다. 섬유증, 소위 반흔은 병태생리학의 주요 원인이다. 섬유증은 세포외 기질(주로 콜라겐으로 구성됨)의 과도한 축적을 수반하며, 통상적으로 정상 조직이 반흔조직으로 대체되는 경우 기능 상실을 초래한다. 이 과정은 주로 비가역적이며, 필수적으로 말기 신부전, 즉 평생 투석 또는 신장 이식을 필요로 하는 증상을 유도한다. The renal fibrosis means excessive proliferation of cells, hardening of tissues and scars. Renal fibrosis can result from renal failure and catheterization, eg dialysis following peritoneal and vascular access fibrosis. Renal fibrosis can also result from nephropathy such as glomerular disease (eg glomerulosclerosis, glomerulonephritis), chronic renal failure, acute renal failure, end-stage renal disease and renal failure. Regardless of etiology, all patients with chronic kidney disease exhibit a gradual decline in renal function over time. Fibrosis, so-called scarring, is a major cause of the pathophysiology. Fibrosis involves excessive accumulation of extracellular matrix (composed primarily of collagen), usually resulting in loss of function when normal tissue is replaced by scar tissue. This process is often irreversible and essentially leads to end-stage renal failure, a condition requiring lifelong dialysis or kidney transplantation.

상기 심장 섬유증은, 심장 질환의 특징으로, 심장 돌연사, 심실 부정맥, 좌심실(LV) 기능장애, 및 심장 장애에 기여하는 것으로 생각된다. 심장 섬유증은 심근세포 사멸 후에 발생하는 섬유화 콜라겐의 불균형적인 축적, 염증, 증가된 작업 부하, 비대 및 다수의 호르몬, 시토카인 및 성장 인자에 의한 자극을 특징으로 한다.The cardiac fibrosis, a hallmark of heart disease, is thought to contribute to sudden cardiac death, ventricular arrhythmias, left ventricular (LV) dysfunction, and cardiac disorders. Cardiac fibrosis is characterized by disproportionate accumulation of fibrotic collagen, inflammation, increased workload, hypertrophy, and stimulation by a number of hormones, cytokines, and growth factors that occur after cardiomyocyte death.

심장 섬유증은 또한 심장 섬유아세포의 불균형적 증식으로 인하여 심장 판막의 이상 농축을 의미할 수 있지만, 더욱 일반적으로는 심장 근육의 섬유아세포의 증식을 의미한다. 섬유 세포는 일반적으로 콜라겐을 분비하고, 심장에 대한 구조적 지지를 제공하는 작용을 한다. 지나치게 활성화되면, 이 과정은 판막의 농축과 섬유증의 원인이 되며, 이때 백색 조직은 주로 삼첨판을 구축할 뿐만 아니라, 폐 동맥판에서도 발생한다. 농축 및 유연성 상실은 결국 판막 부전과 우측 심장 마비가 발생할 수 있다.Cardiac fibrosis can also refer to abnormal thickening of heart valves due to disproportionate proliferation of cardiac fibroblasts, but more generally refers to proliferation of fibroblasts in the heart muscle. Fibrous cells normally secrete collagen and function to provide structural support for the heart. When overly activated, this process causes thickening and fibrosis of the valves, at which time white tissue not only builds the tricuspid valve, but also occurs in the pulmonary valve. Concentration and loss of flexibility can eventually lead to valve failure and right-sided heart failure.

상기 췌장섬유증을 유발하는 만성 췌장염(CP)은 비가역적인 형태학적 변화 및 샘의 점진적 섬유화 대체를 특징으로 하는 췌장의 진행성 염증성 질환이다. 실질성 섬유증에서 외분비 및 내분비 기능의 손실이 생긴다. CP의 주요 증상은 복통과 소화불량이다. 극도로, 췌장은 낭종 또는 석회화 또는 종양과 함께 또는 이들 없이 확대 또는 위축될 수 있다. 관은 확장되거나 불규칙적이거나 수축될 수 있다. 주요한 병적 특징은 소엽 조직의 불규칙적이고 불균일한 손실, 만성 염증, 동맥 관 변화 및 섬유증을 포함한다. 유전자 돌연변이(이들로 제한되지 않지만, 낭포성 섬유증, 양이온 트립시노겐 유전자, 특발성 급성 및 만성 췌장염의 CFTR 유전자 돌연변이, 췌장 분비성 트립신 억제제 유전자, 키모트립시노겐 C 유전자, 칼슘 감지 수용체 유전자, α-1 안티트립신 결핍을 포함함), 대사(알코올, 담배 흡연, 고칼슘 혈증, 고지혈증, 만성 신부전), 환경 요인(미량 영양소 결핍(아연, 구리 및 셀레늄 등의 영양인자; 또한 조사후 노출), 폐쇄성(종양), 허혈성(혈관 질환)) 및 자가 면역 질환과 관련되어 있거나 1차 경화성 담관 불꽃, 쇼그렌 증후군, 1차 담즙성 장애 및 1형 당뇨병과 관련된 복합적인 병원성 기전의 최종 증상이다. Chronic pancreatitis (CP), which causes pancreatic fibrosis, is a progressive inflammatory disease of the pancreas characterized by irreversible morphological changes and progressive fibrotic replacement of the gland. In parenchymal fibrosis, loss of exocrine and endocrine function occurs. The main symptoms of CP are abdominal pain and indigestion. Extremely, the pancreas may be enlarged or atrophied with or without cysts or calcifications or tumors. The tube may be dilated, irregular or constricted. The major pathological features include irregular and non-uniform loss of lobular tissue, chronic inflammation, ductal changes and fibrosis. Gene mutations (including but not limited to cystic fibrosis, cationic trypsinogen gene, CFTR gene mutation in idiopathic acute and chronic pancreatitis, pancreatic secretory trypsin inhibitor gene, chymotrypsinogen C gene, calcium sensing receptor gene, α- 1 including antitrypsin deficiency), metabolic (alcohol, tobacco smoking, hypercalcemia, hyperlipidemia, chronic renal failure), environmental factors (micronutrient deficiencies (nutritional factors such as zinc, copper and selenium; also post-irradiation exposure), obstructive ( tumor), ischemic (vascular disease)) and autoimmune diseases, or is the final manifestation of a complex pathogenic mechanism associated with primary sclerosing bile duct flames, Sjogren's syndrome, primary biliary disorders and type 1 diabetes mellitus.

이와 같은 다양한 섬유증에 있어서, 본 발명에 따른 에트라비린을 포함하는 조성물은 각 조직 또는 세포에서 procollagen alpha 1의 양을 감소시켜 섬유화 반응을 억제하며, 이와 같은 효과는 Bcl-2 (B-cell lymphoma 2) 억제제, DPP-4 (Dipeptidyl peptidase-4) 억제제 및 니클로사미드(Niclosamide)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 약물과 병용되었을 때 시너지 효과가 나타날 수 있다. In such various fibrosis, the composition containing etravirine according to the present invention suppresses the fibrosis reaction by reducing the amount of procollagen alpha 1 in each tissue or cell, and this effect is Bcl-2 (B-cell lymphoma 2) A synergistic effect may occur when used in combination with one or more drugs selected from the group consisting of inhibitors, dipeptidyl peptidase-4 (DPP-4) inhibitors, and niclosamide.

본 발명은 또한 에트라비린 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염; 및 오바토클락스, 시타글립틴, 니클로사미드 및 이들의 약학적으로 허용가능한 염으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 유효성분으로 포함하는 섬유화 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다. The present invention also relates to etravirine or a pharmaceutically acceptable salt thereof; and obatoclax, sitagliptin, niclosamide, and a pharmaceutical composition for preventing or treating fibrotic disease comprising at least one selected from the group consisting of pharmaceutically acceptable salts thereof as an active ingredient.

에트라비린을 포함하는 본 발명의 조성물은 간 세포에서의 지질 축적과 섬유화를 억제하는 효과가 매우 탁월하며, 이러한 효과는 Bcl-2 (B-cell lymphoma 2) 억제제, DPP-4 (Dipeptidyl peptidase-4) 억제제 및 니클로사미드(Niclosamide)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 약물과 병용함으로써 시너지 효과가 나타날 수 있어 대사성 질환 및 섬유화 질환 예방 또는 치료제 개발에 매우 유용하게 활용될 수 있다. The composition of the present invention containing etravirine has a very excellent effect of inhibiting lipid accumulation and fibrosis in liver cells, and these effects are achieved by a Bcl-2 (B-cell lymphoma 2) inhibitor, DPP-4 (Dipeptidyl peptidase- 4) A synergistic effect can be obtained by using it in combination with one or more drugs selected from the group consisting of inhibitors and niclosamide, so it can be very useful for the development of preventive or therapeutic agents for metabolic diseases and fibrotic diseases.

도 1은 사람 간 세포주 HepG2에 팔미트산(PA)을 처리하여 지질 축적을 유도한 후 에트라비린 또는 오바토클락스를 처리하여 이들 약물의 지질 축적 억제 활성을 평가한 결과이다.
도 2는 사람 간 세포주 HepG2에 팔미트산(PA)을 처리한 배양액을 사람 간 성상세포인 LX-2에 에트라비린 또는 오바토클락스와 함께 처리하고, 이들 약물의 섬유화 마커 aSMA의 발현 억제능을 평가한 결과이다.
도 3은 사람 간 성상세포인 LX-2에서의 에트라비린, 오바토클락스 또는 이의 조합의 세포독성을 MTT assay로 평가한 결과이다.
도 4는 비알코올성 지방간염 섬유화 반응이 유발된 사람 간 성상세포 LX-2에 에트라비린, 오바토클락스 또는 이들의 조합을 Cmax 농도로 처리한 후, 배양액으로 분비된 procollagen alpha 1의 양을 ELISA assay로 확인한 결과이다.
도 5는 비알코올성 지방간염 섬유화 반응이 유발된 사람 간 성상세포 LX-2에 에트라비린, 오바토클락스 또는 이들의 조합을 Cmax 농도로 처리한 후, 세포 내 섬유화 마커 유전자(Col1A1, fibronectin 및 Col4A1)의 발현 변화를 qPCR로 확인한 결과이다.
도 6은 비알콜성지방간염 동물모델(CDA-HFD)에 에트라비린 단독 또는 에트라비린과 오바토클락스를 병용 투여에 따른 AST, ALT측정 결과이다.
도 7은 비알콜성지방간염 동물모델(CDA-HFD)에 에트라비린 단독 또는 에트라비린과 오바토클락스를 병용 투여에 따른 간조직 무게 측정 결과이다.
도 8운 비알콜성지방간염 동물모델(CDA-HFD)에 에트라비린 단독 또는 에트라비린과 오바토클락스를 병용 투여에 따른 NAFLD activity score 이다.
도 9는 비알콜성지방간염 동물모델(CDA-HFD)에 에트라비린 단독 또는 에트라비린과 오바토클락스를 병용 투여에 따른 Steatosis score 이다.
도 10은 비알콜성지방간염 동물모델(CDA-HFD)에 에트라비린 단독 또는 에트라비린과 오바토클락스를 병용 투여에 따른 Lobular inflammation score 이다.
도 11은 비알콜성지방간염 동물모델(CDA-HFD)에 에트라비린 단독 또는 에트라비린과 오바토클락스를 병용 투여에 따른 Fibrosis score 이다.
도 12는 비알콜성지방간염 동물모델(CDA-HFD)에 에트라비린 단독 또는 에트라비린과 오바토클락스를 병용 투여에 따른 간조직 절편의 hematoxylin&eosin (H&E), Psrius red (PSR) 염색 사진이다.1 shows the results of evaluating the lipid accumulation inhibitory activity of these drugs by treating human liver cell line HepG2 with palmitic acid (PA) to induce lipid accumulation, and then treating them with etravirine or obatoclax.
Figure 2 shows the human liver cell line HepG2 treated with palmitic acid (PA) culture medium treated with human hepatic stellate cells LX-2 together with etravirine or obatoclax, and the ability of these drugs to inhibit the expression of the fibrosis marker aSMA is the result of evaluation.
Figure 3 is a result of evaluating the cytotoxicity of etravirine, obatoclax, or a combination thereof in human hepatic stellate cells, LX-2, by MTT assay.
Figure 4 shows the amount of procollagen alpha 1 secreted into the culture medium after treating non-alcoholic steatohepatitis fibrosis-induced human hepatic stellate cells LX-2 with etravirine, obatoclax, or a combination thereof at a Cmax concentration. This is the result confirmed by ELISA assay.
Figure 5 shows the treatment of non-alcoholic steatohepatitis fibrosis-induced human hepatic stellate cells LX-2 with etravirine, obatoclax, or a combination thereof at a Cmax concentration, and then intracellular fibrosis marker genes (Col1A1, fibronectin and This is the result of confirming the expression change of Col4A1) by qPCR.
Figure 6 is a non-alcoholic steatohepatitis animal model (CDA-HFD) AST, ALT measurement results according to etravirine alone or combined administration of etravirine and obatoclax.
Figure 7 is a result of liver tissue weight measurement according to the combined administration of etravirine alone or etravirine and obatoclax to a non-alcoholic steatohepatitis animal model (CDA-HFD).
Figure 8 is the NAFLD activity score according to the combined administration of etravirine or etravirine and obatoclax in the non-alcoholic steatohepatitis animal model (CDA-HFD).
Figure 9 is a Steatosis score according to the combined administration of etravirine alone or etravirine and obatoclax in a non-alcoholic steatohepatitis animal model (CDA-HFD).
Figure 10 is a lobular inflammation score according to the combined administration of etravirine or etravirine and obatoclax in a non-alcoholic steatohepatitis animal model (CDA-HFD).
Figure 11 is a Fibrosis score according to the combined administration of etravirine alone or etravirine and Obatoclax to a non-alcoholic steatohepatitis animal model (CDA-HFD).
12 is a photograph of hematoxylin&eosin (H&E) and Psrius red (PSR) staining of liver tissue sections according to etravirine alone or combined administration of etravirine and obatoclax in a non-alcoholic steatohepatitis animal model (CDA-HFD) am.

이하, 본 발명을 하기 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명이 이들에 의해 제한되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in detail by the following examples. However, the following examples are only for illustrating the present invention, and the present invention is not limited thereto.

실시예 1. 간 세포에서의 지질 축적 억제 활성Example 1. Lipid accumulation inhibitory activity in liver cells

사람 간세포인 HepG2 세포주에 팔미트산(PA) 400 uM을 처리한 후 에트라비린(etravirine) 또는 오바토클락스(obatoclax)를 2.5 uM 농도로 처리하였다. 24시간 뒤 세포에 축적된 중성지방을 Oil-red O 염색을 통하여 측정하였다.HepG2 cell line, which is a human hepatocyte, was treated with 400 uM of palmitic acid (PA) and then treated with etravirine or obatoclax at a concentration of 2.5 uM. After 24 hours, the amount of neutral fat accumulated in the cells was measured by Oil-red O staining.

그 결과, 도 1에 나타낸 바와 같이 에트라비린 또는 오바토클락스 처리군에서 미처리 대조군 대비 간 세포에서의 지질 축적이 현저하게 억제되는 것으로 확인되었다. As a result, as shown in Figure 1, it was confirmed that lipid accumulation in liver cells was significantly inhibited in the etravirine or obatoclax-treated group compared to the untreated control group.

실시예 2. 간 섬유화 억제 효능 Example 2. Efficacy of inhibiting liver fibrosis

사람 간세포인 HepG2 세포주에 팔미트산 400 uM 을 24시간 처리한 배양액(HepG2-PACM)을 사람 간성상세포인 LX-2 세포에 에트라비린(etravirine) 또는 오바토클락스를 2.5 uM 농도로 처리하였다. 24시간 뒤 LX-2 세포에서 섬유화 마커 aSMA를 염색하여 정량하였다.HepG2 cell line, a human hepatocyte, was treated with 400 uM of palmitic acid for 24 hours (HepG2-PACM), and LX-2 cells, a human hepatic stellate cell, were treated with etravirine or obatoclax at a concentration of 2.5 uM. . After 24 hours, fibrosis marker aSMA was stained and quantified in LX-2 cells.

그 결과, 도 2에 나타낸 바와 같이 에트라비린 또는 오바토클락스 처리군에서 미처리 대조군 대비 간 세포에서의 섬유화 마커 aSMA의 발현이 억제되는 것으로 확인되었다.As a result, as shown in Figure 2, it was confirmed that the expression of the fibrosis marker aSMA in liver cells was suppressed in the etravirine or obatoclax-treated group compared to the untreated control group.

실시예 3. 세포독성 평가Example 3. Cytotoxicity evaluation

상기 실시예 1 및 2에서 우수한 지질 축적 억제 및 섬유화 억제 약물인 에트라비린 및 오바토클락스를 사람 간성상세포인 LX-2 세포주에 허가용량 또는 임상승인 용량에서의 혈중 Cmax 농도만큼 단독 처리하거나 동시 처리하였다. 48시간, 72시간이 지난 후 MTT assay를 통해 세포의 성장률을 측정하였다.In Example 1 and 2, etravirine and obatoclax, which are excellent lipid accumulation inhibitory and fibrosis inhibitory drugs, were treated alone or simultaneously at the Cmax concentration in blood at a licensed dose or clinically approved dose in the LX-2 cell line, which is a human hepatic stellate cell. processed. After 48 hours and 72 hours, the cell growth rate was measured by MTT assay.

구체적으로, 에트라비린의 허가 용량, 용법은 성인 200 mg twice daily 경구 투약이고 이 때의 혈장 Cmax는 평균 401 ng/mL (최소 255 mL ~ 최대 1190 ng/mL) 이다. 이를 몰농도로 환산하면 약 0.92 uM (최소 0.56 uM ~ 최대 2.74 uM) 이다 (NCT01121809; J Antimicrob Chemother. 2012 Mar;67(3):681-4). 본 실험에서는 에트라비린 1 uM 을 세포에 처리하였다.Specifically, the approved dosage and usage of etravirine is oral administration of 200 mg twice daily for adults, and the average plasma Cmax at this time is 401 ng/mL (minimum 255 mL ~ maximum 1190 ng/mL). When this is converted into a molar concentration, it is about 0.92 uM (minimum 0.56 uM ~ maximum 2.74 uM) (NCT01121809; J Antimicrob Chemother . 2012 Mar; 67 (3): 681-4). In this experiment, cells were treated with 1 uM of etravirine.

오바토클락스는 FDA 미승인 약물로 임상1/2상에서 허용된 용량, 용법은 3시간에 걸친 20, 28, 40 mg/m² 정맥 투약이다 (NCT00600964; Blood. 2009 Jan 8; 113(2): 299-305). 이 때의 혈장 평균 Cmax는 각각 77.9 ng/mL, 72.9 ng/mL, 92.6 ng/mL로 이를 몰농도로 환산하면 약 188 nM, 176 nM, 224 nM 이다. 본 실험에서는 오바토클락스 200 nM을 처리하였다.Obatoclax is an FDA-approved drug, and the dosage and regimen allowed in phase 1/2 clinical trials are 20, 28, and 40 mg/m ² intravenous administration over 3 hours (NCT00600964; Blood . 2009 Jan 8; 113 (2): 299 -305). The average plasma Cmax at this time was 77.9 ng/mL, 72.9 ng/mL, and 92.6 ng/mL, respectively, which are about 188 nM, 176 nM, and 224 nM when converted into molar concentrations. In this experiment, 200 nM of obatoclax was treated.

그 결과, 도 3에 나타낸 바와 같이 에트라비린 단독, 오바토클락스 단독 및 이들의 병용 처리군에서 모두 세포독성이 나타나지 않았다. As a result, as shown in FIG. 3, no cytotoxicity was observed in the groups treated with etravirine alone, obatoclax alone, and the combination thereof.

실시예 4. Cmax 농도에서의 섬유화 억제능Example 4. Fibrosis inhibition ability at Cmax concentration

사람 간성상세포인 LX-2 세포주에 올레산과 팔미트산을 2:1 비율로 섞은 배양액 (500 uM) 과 TGF beta (5 ng/mL)를 함께 처리하여 비알콜성 지방간염에서의 섬유화 반응을 유발하였다.LX-2 cell line, a human hepatic stellate cell, was treated with a culture solution (500 uM) mixed with oleic acid and palmitic acid in a ratio of 2:1 and TGF beta (5 ng/mL) to induce fibrosis in non-alcoholic steatohepatitis. did

유발과 동시에 에트라비린(1 uM) 및 오바토클락스(200 nM)를 단독 처리하거나 동시 처리하였다. 24시간이 지난 후 세포 내 섬유화 유전자(Col1A1, Col4A1 및 Fibronectin)의 발현 정도를 qPCR로 분석하고, 48시간이 지난 후 배양액으로 분비된 procollagen alpha 1의 양을 ELISA기법을 통해 측정하였다. At the same time as induction, etravirine (1 uM) and obatoclax (200 nM) were treated alone or simultaneously. After 24 hours, the expression level of intracellular fibrosis genes (Col1A1, Col4A1 and Fibronectin) was analyzed by qPCR, and the amount of procollagen alpha 1 secreted into the culture medium after 48 hours was measured by ELISA technique.

그 결과, 도 4에 나타낸 바와 같이 에트라비린 단독처리에 의해 섬유화 반응이 약 76% 감소하였고 오바토클락스 단독처리에 의해 섬유화 반응이 약 34% 감소하였다. 두 약물을 동시에 처리하였을 경우 섬유화 반응이 약 98% 억제됨을 확인하였다.As a result, as shown in Figure 4, the fibrosis reaction was reduced by about 76% by etravirine treatment alone, and the fibrosis reaction was reduced by about 34% by Obatoclax alone treatment. When the two drugs were simultaneously treated, it was confirmed that the fibrosis reaction was inhibited by about 98%.

또한, 도 5에 나타낸 바와 같이 에트라비린 단독처리에 의해 섬유화 유전자 Col1A1의 발현이 각각 26%, 28% 감소하였다. 오바토클락스 단독처리에 의해 섬유화 유전자 Col4A1 및 Fibronectin의 발현이 각각 50%, 21% 감소하였다. 에트라비린과 오바토클락스를 동시처리한 경우 Col1A1, Col4A1 및 Fibronectin의 유전자 발현이 각각 49%, 72%, 45% 감소하였다.In addition, as shown in Figure 5, the expression of the fibrosis gene Col1A1 was reduced by 26% and 28%, respectively, by etravirine treatment alone. Expression of the fibrosis gene Col4A1 and fibronectin were reduced by 50% and 21%, respectively, by Obatoclax alone. Co-treatment with etravirine and Obatoclax reduced the gene expression of Col1A1, Col4A1 and Fibronectin by 49%, 72% and 45%, respectively.

실시예 5. 비알콜성지방간염 동물 모델을 이용한 약물 경구 투여 실험Example 5. Oral drug administration experiment using non-alcoholic steatohepatitis animal model

실시예 5-1: 전임상 시험 준비 및 실시Example 5-1: Preclinical test preparation and implementation

C57/BL/6 Mice에 특수사료 CDA-HFD (L-Amino Acid Rodent Diet With 60 kcal％ Fat, No Added Choline and 0.1％ Methionine (Cat No: A06071302))를 6주간 급여기에 넣고 자유롭게 섭취하는 방식으로 비알콜성지방간염 및 간 섬유화 모델을 만들고 정상군은 Matched control diet (L-Amino Acid Diet with 10 kcal% Fat with Methionine and Choline (Cat No: A06071314))을 자유롭게 섭취시켰다. 비알콜성지방간염이 발생한 마우스에 CDA-HFD 식이를 유지한 상태로 각각 오베티콜릭산(obeticholic acid, OCA) 30 mg/kg/day, 에트라비린(etravirine, ETR) 저농도(Low) 20 mg/kg/day, 에트라비린 고농도(High) 100 mg/kg/day를 3주간 매일 경구투여(oral administration) 하였고, 에트라비린 저농도 20 mg/kg/day 와 오바토클락스 저농도 0.2 mg/kg/day 를 병용으로 각각 경구투여, 정맥내주사 하여 병증을 21일째에 측정하여 기록하였다. 각 시험군의 구성을 하기 표 1에 종합하여 나타내었다. (N=10/군, G1: Matched control diet, G2: CDA-HFD, G3: CDA-HFD + OCA, G4: CDA-HFD + 에트라비린 (20 mpk, PO), G5: CDA-HFD + 에트라비린 (100 mpk, PO), G6: CDA-HFD + 에트라비린 + 오바토클락스 (20 mpk, PO + 0.2 mpk, IV)C57/BL/6 Mice with special feed CDA-HFD (L-Amino Acid Rodent Diet With 60 kcal% Fat, No Added Choline and 0.1% Methionine (Cat No: A06071302)) in feeding period for 6 weeks and freely consumed Non-alcoholic steatohepatitis and liver fibrosis models were made, and the normal group was freely fed a Matched control diet (L-Amino Acid Diet with 10 kcal% Fat with Methionine and Choline (Cat No: A06071314)). Mice with non-alcoholic steatohepatitis were maintained on the CDA-HFD diet, respectively, obeticholic acid (OCA) 30 mg/kg/day, etravirine (ETR) low concentration (ETR) 20 mg /kg/day, etravirine high concentration 100 mg/kg/day was administered orally daily for 3 weeks, etravirine low concentration 20 mg/kg/day and obatoclax low concentration 0.2 mg/kg /day was administered orally and intravenously administered in combination, respectively, and symptoms were measured and recorded on the 21st day. The composition of each test group is shown in Table 1 below. (N=10/group, G1: Matched control diet, G2: CDA-HFD, G3: CDA-HFD + OCA, G4: CDA-HFD + Etravirine (20 mpk, PO), G5: CDA-HFD + ET Labyrin (100 mpk, PO), G6: CDA-HFD + Etravirine + Obatoclax (20 mpk, PO + 0.2 mpk, IV)

모든 동물에 대하여 매일 2 회 이상 증상관찰을 실시하였다. 임상증상을 보이는 개체에 대하여 기록을 유지하였다. 시험기간 중 사망동물이 발생한 경우 부검을 실시하였다. 군분리는 모델 유도 후 5 주차에 혈당, ALT (FUJI, #3250), AST (FUJI, #3150) 항목의 결과를 바탕으로 6 주차에 시행하였다. 혈당은 혈당측정기(다이아텍코리아, Auto-chek plus)를 이용해 측정하며, ALT, AST는 전자동 건식 생화학 분석기(FUJI, Dri-Chem NX700ie)를 이용해 분석하였다.Symptomatic observation was performed at least twice a day for all animals. Records were maintained for subjects exhibiting clinical symptoms. An autopsy was performed in case of death of an animal during the test period. Grouping was performed at week 6 based on the results of blood glucose, ALT (FUJI, #3250), and AST (FUJI, #3150) items at week 5 after model induction. Blood glucose was measured using a blood glucose meter (Diatech Korea, Auto-chek plus), and ALT and AST were analyzed using a fully automatic dry biochemical analyzer (FUJI, Dri-Chem NX700ie).

간의 경우 전체 간 조직의 무게를 측정하고 사진촬영 하였다. 그 중 Left lobe를 10% Neutral buffered formalin에 고정하여, H&E staining, Slide scan, PSR staining 하였고 NAS (NAFLD activity score), FS (NASH fibrosis stage) 분석을 진행하였다. NAS와 FS의 분석 기준은 하기 표 2와 같다.In the case of the liver, the total liver tissue was weighed and photographed. Among them, the left lobe was fixed in 10% neutral buffered formalin, and H&E staining, slide scan, and PSR staining were performed, and NAS (NAFLD activity score) and FS (NASH fibrosis stage) analysis were performed. The analysis criteria of NAS and FS are shown in Table 2 below.

본실험의 결과에 대하여 자료의 정규성을 가정하고, 모수적인 다중비교(parametric multiple comparison procedures)를 이용하여 분석하였다. 모수적 일원분산분석(One-way ANOVA) 결과가 유의하였을 경우, Dunnett's multiple comparison test를 이용하여 사후검정을 실시하였다. 통계학적 분석은 Prism 8.4.3 (GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA)을 이용하여 실시하며, p값이 0.05 미만일 경우, 통계학적으로 유의한 것으로 판정하였다.The results of this experiment were analyzed using parametric multiple comparison procedures, assuming normality of the data. If the results of one-way ANOVA were significant, a post hoc test was performed using Dunnett's multiple comparison test. Statistical analysis was performed using Prism 8.4.3 (GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA), and a p value of less than 0.05 was determined to be statistically significant.

실시예 5-2: 혈액 생화학 분석 (ALT, AST)Example 5-2: Blood biochemical analysis (ALT, AST)

도 6에 나타난 바와 같이 혈액 생화학(AST/ALT) 분석결과, AST는 G1 Matched control diet 군 88.93 ± 19.47 IU/L에 비해 모든 시험군(G2~G6)에서 유의하게 높았다(p<0.01). ALT도 G1 Matched control diet 군 47.15 ± 18.73 IU/L에 비해 모든 시험군(G2~G6)에서 유의하게 높았다(p<0.01). G2 CDA-HFD 군에 비하여 AST/ALT는 G1 군을 제외한 다른 시험군과 유의한 차이는 없었다. 각 시험군의 혈액 생화학 분석 결과를 하기 표 3에 종합하여 나타내었다.As shown in FIG. 6, as a result of blood biochemistry (AST/ALT) analysis, AST was significantly higher in all test groups (G2-G6) compared to 88.93 ± 19.47 IU/L in the G1 Matched control diet group (p<0.01). ALT was also significantly higher in all test groups (G2~G6) compared to 47.15 ± 18.73 IU/L in the G1 Matched control diet group (p<0.01). Compared to the G2 CDA-HFD group, there was no significant difference in AST/ALT from other test groups except for the G1 group. The blood biochemical analysis results of each test group are summarized in Table 3 below.

실시예 5-3: 간 조직 무게Example 5-3: Liver Tissue Weight

도 7와 같이, G1 Matched control diet 군 1.60 ± 0.25 g의 간 조직 절대 중량은 다른 시험군(G2~G8)과 유의한 차이는 없었다. G2 CDA-HFD 군 1.82 ± 0.27 g에 비하여 G1군을 제외한 다른 시험군 간 조직 절대 중량은 유의한 차이가 없었다. As shown in FIG. 7, the absolute weight of liver tissue of 1.60 ± 0.25 g of the G1 Matched control diet group was not significantly different from that of the other test groups (G2 to G8). Compared to the G2 CDA-HFD group of 1.82 ± 0.27 g, there was no significant difference in tissue absolute weight between the other test groups except for the G1 group.

간 조직의 상대 중량을 측정한 결과, G1 Matched control diet 군 4.79 ± 0.36%에 비하여 G2 CDA-HFD 군 7.58 ± 0.92%, G3 CDA-HFD + OCA 군 7.71 ± 1.26%, G4 CDA-HFD + 에트라비린 (20 mpk, PO) 군 7.71 ± 1.14%, G5 CDA-HFD + 에트라비린 (100 mpk, PO) 군 8.05 ± 1.18% 그리고 G6 CDA-HFD + 에트라비린 + 오바토클락스 (20 mpk, PO + 0.2 mpk, IV) 군 7.80 ± 1.48%로 유의하게 높은 간 조직의 상대 중량을 확인하였다(p<0.01). 그리고 G2 CDA-HFD 군 7.58 ± 0.92%에 비하여 G1군을 제외한 다른 시험군 간 조직 상대 중량에 유의한 차이는 없었다. 각 시험군의 간 조직 무게를 하기 표 4에 종합하여 나타내었다.As a result of measuring the relative weight of liver tissue, compared to the G1 Matched control diet group 4.79 ± 0.36%, the G2 CDA-HFD group 7.58 ± 0.92%, the G3 CDA-HFD + OCA group 7.71 ± 1.26%, the G4 CDA-HFD + Etra virine (20 mpk, PO) group 7.71 ± 1.14%, G5 CDA-HFD + etravirine (100 mpk, PO) group 8.05 ± 1.18% and G6 CDA-HFD + etravirine + obatoclax (20 mpk, PO + 0.2 mpk, IV) group 7.80 ± 1.48% significantly higher relative weight of liver tissue was confirmed (p <0.01). And compared to the G2 CDA-HFD group (7.58 ± 0.92%), there was no significant difference in tissue relative weight between the other test groups except for the G1 group. The liver tissue weights of each test group are summarized and shown in Table 4 below.

실시예 5-4: 이상현상(Clinical signs) 및 이상병변 (Necropsy findings)Example 5-4: Clinical Signs and Necropsy Findings

일일 일반증상을 관찰 한 결과, 시험기간 중 이상현상은 관찰되지 않았다. 또한 시험 종료일에 부검을 진행한 결과, 간을 제외한 주요장기에서 이상병변은 확인되지 않았다. As a result of observing general symptoms daily, no abnormalities were observed during the test period. In addition, as a result of the autopsy at the end of the test, no abnormal lesions were identified in major organs except the liver.

실시예 5-5: NAFLD activity score (NAS)Example 5-5: NAFLD activity score (NAS)

간 조직 L1A의 NAS 분석을 진행한 결과, G1 Matched control diet 군 0.00 ± 0.00 score에 비하여 모든 시험군(G2~G6)에서 유의하게 높게 측정되었다(p<0.01). G2 CDA-HFD 군 3.70 ± 1.16 score에 비하여 G3 CDA-HFD + OCA 군 1.60 ± 0.84 score, G4 CDA-HFD + 에트라비린 (20 mpk, PO) 군 2.30 ± 0.82 score, G5 CDA-HFD + 에트라비린 (100 mpk, PO) 군 2.00 ± 0.94 score, G6 CDA-HFD + 에트라비린 + 오바토클락스 (20 mpk, PO + 0.2 mpk, IV) 군 1.70 ± 0.95 score로 유의하게 낮게 측정되었다(p<0.01, 도 8 내지 10 및 표 5). As a result of NAS analysis of liver tissue L1A, it was significantly higher in all test groups (G2 ~ G6) than the G1 Matched control diet group, 0.00 ± 0.00 score (p <0.01). G2 CDA-HFD group 3.70 ± 1.16 score, G3 CDA-HFD + OCA group 1.60 ± 0.84 score, G4 CDA-HFD + etravirine (20 mpk, PO) group 2.30 ± 0.82 score, G5 CDA-HFD + Etra The virine (100 mpk, PO) group scored 2.00 ± 0.94, and the G6 CDA-HFD + Etravirine + Obatoclax (20 mpk, PO + 0.2 mpk, IV) group scored 1.70 ± 0.95, which was significantly lower (p <0.01, Figures 8 to 10 and Table 5).

간 조직 L1B의 NAS 분석을 진행한 결과, G1 Matched control diet 군 0.00 ± 0.00 score에 비하여 모든 시험군(G2~G6)에서 유의하게 높게 측정되었다(p<0.01). G2 CDA-HFD 군 3.30 ± 0.95 score에 비하여 G3 CDA-HFD + OCA 군 1.40 ± 0.70 score, G4 CDA-HFD + 에트라비린 (20 mpk, PO)군 2.20 ± 0.79 score, G5 CDA-HFD + 에트라비린 (100 mpk, PO) 군 1.60 ± 0.84 score, G6 CDA-HFD + 에트라비린 + 오바토클락스 (20 mpk, PO + 0.2 mpk, IV)군 1.40 ± 0.70 score로 유의하게 낮게 측정되었다(p<0.01 또는 p<0.05, 도 8 내지 10 및 표 6). As a result of NAS analysis of liver tissue L1B, it was significantly higher in all test groups (G2-G6) than the G1 Matched control diet group, 0.00 ± 0.00 score (p<0.01). G2 CDA-HFD group 3.30 ± 0.95 score, G3 CDA-HFD + OCA group 1.40 ± 0.70 score, G4 CDA-HFD + etravirine (20 mpk, PO) group 2.20 ± 0.79 score, G5 CDA-HFD + Etra The virine (100 mpk, PO) group scored 1.60 ± 0.84, and the G6 CDA-HFD + Etravirine + Obatoclax (20 mpk, PO + 0.2 mpk, IV) group scored 1.40 ± 0.70, which was significantly lower (p <0.01 or p<0.05, Figures 8-10 and Table 6).

실시예 5-6: Fibrosis stage (FS)Example 5-6: Fibrosis stage (FS)

도 11 및 도 12와 같이 간 조직 L1A의 FS 분석을 진행한 결과, G2 CDA-HFD 군은 stage 3으로 가장 높은 stage로 분석되었으며, G3 CDA-HFD + OCA 군, G4 CDA-HFD + 에트라비린 (20 mpk, PO) 군, G5 CDA-HFD + 에트라비린 (100 mpk, PO) 군은 stage 2로 분석이 되었고 G6 CDA-HFD + 에트라비린 + 오바토클락스 (20 mpk, PO + 0.2 mpk, IV) 군은 stage 1c로 가장 낮은 stage로 분석되었다. 각 시험군의 FS 를 하기 표 7에 종합하여 나타내었다.As a result of the FS analysis of liver tissue L1A as shown in FIGS. 11 and 12, the G2 CDA-HFD group was analyzed as the highest stage as stage 3, the G3 CDA-HFD + OCA group, and the G4 CDA-HFD + etravirine (20 mpk, PO) group, G5 CDA-HFD + Etravirine (100 mpk, PO) group were analyzed as stage 2, and G6 CDA-HFD + Etravirine + Obatoclax (20 mpk, PO + 0.2 mpk, IV) group was analyzed as the lowest stage as stage 1c. The FS of each test group is shown in Table 7 below.

결론적으로 CDA-HFD 사료로 유도된 비알코올성지방간염 모델에서 에트라비린의 용량 의존적인 지방간 개선 및 간섬유화 억제 효과를 확인할 수 있었다. 특히 에트라비린 저농도 단독 투여에 비하여 에트라비린 저농도와 오바토클락스를 병용 투여하였을 경우 에트라비린 고농도 투여군 보다 NAS 와 FS 수치가 더욱 개선됨을 확인할 수 있었다. 이를 통해 에트라비린 및 에트라비린과 오바토클락스의 병용 투여가 비알콜성지방간염의 치료법으로 가능함을 유추해볼 수 있다.In conclusion, the dose-dependent effect of etravirine on improving fatty liver and inhibiting liver fibrosis was confirmed in the non-alcoholic steatohepatitis model induced by CDA-HFD feed. In particular, it was confirmed that the NAS and FS values were further improved than in the high-concentration etravirine administration group when the low-concentration etravirine and obatoclax were administered in combination compared to the administration of the low-concentration etravirine alone. Through this, it can be inferred that the combined administration of etravirine and etravirine and obatoclax is possible as a treatment for non-alcoholic steatohepatitis.

에트라비린을 포함하는 본 발명의 조성물은 간 세포에서의 지질 축적과 섬유화를 억제하는 효과가 매우 탁월하며, 이러한 효과는 Bcl-2 (B-cell lymphoma 2) 억제제, DPP-4 (Dipeptidyl peptidase-4) 억제제 및 니클로사미드(Niclosamide)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 약물과 병용함으로써 시너지 효과가 나타날 수 있어 대사성 질환 및 섬유화 질환 예방 또는 치료제 개발에 매우 유용하게 활용될 수 있어 산업상 이용가능성이 매우 높다. The composition of the present invention containing etravirine has a very excellent effect of inhibiting lipid accumulation and fibrosis in liver cells, and these effects are achieved by a Bcl-2 (B-cell lymphoma 2) inhibitor, DPP-4 (Dipeptidyl peptidase- 4) A synergistic effect can be obtained by using it in combination with one or more drugs selected from the group consisting of inhibitors and niclosamide, so it can be very useful for preventing or developing a treatment for metabolic diseases and fibrotic diseases, so it has industrial applicability. Very high.

Claims (13)

에트라비린(Etravirine) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 대사성 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
A pharmaceutical composition for preventing or treating metabolic diseases comprising Etravirine or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
제1항에 있어서, 상기 대사성 질환은 당뇨, 비만, 인슐린 저항성, 지방간, 비알코올성 지방간 질환(Non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD), 고지혈증 및 고혈압으로 이루어진 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
The pharmaceutical composition according to claim 1, wherein the metabolic disease is selected from the group consisting of diabetes, obesity, insulin resistance, fatty liver, non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD), hyperlipidemia and hypertension. .
제2항에 있어서, 상기 비알코올성 지방간 질환은 비알코올성 지방간증(non-alcoholic steatosis), 비알코올성 지방간염(non-alcoholic steatohepatitis), 간섬유화(fibrosis) 및 간경변(cirrhosis)으로 이루어진 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
The method of claim 2, wherein the non-alcoholic fatty liver disease is selected from the group consisting of non-alcoholic steatosis, non-alcoholic steatohepatitis, fibrosis, and cirrhosis. A pharmaceutical composition, characterized in that.
제1항에 있어서, Bcl-2 (B-cell lymphoma 2) 억제제, DPP-4 (Dipeptidyl peptidase-4) 억제제 및 니클로사미드(Niclosamide)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 약물을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
The method of claim 1, further comprising at least one drug selected from the group consisting of a Bcl-2 (B-cell lymphoma 2) inhibitor, a DPP-4 (Dipeptidyl peptidase-4) inhibitor, and Niclosamide. Characterized by the pharmaceutical composition.
제4항에 있어서, 상기 Bcl-2 억제제는 오바토클락스(obatoclax), 나비토클락스(navitoclax), 베네토클락스(venetoclax), 사부토클락스(sabutoclax), A-1155463, A-1331852, ABT-737, TW-37, A-1210477, AT101, HA14-1, BAM7, S44563, UMI-77 및 이들의 약학적으로 허용가능한 염으로 이루어진 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
The method of claim 4, wherein the Bcl-2 inhibitor is obatoclax, navitoclax, venetoclax, sabutoclax, A-1155463, A-1331852 , ABT-737, TW-37, A-1210477, AT101, HA14-1, BAM7, S44563, UMI-77 and a pharmaceutical composition characterized in that selected from the group consisting of pharmaceutically acceptable salts thereof.
제4항에 있어서, 상기 DPP-4 억제제는 시타글립틴 (sitagliptin), 빌다글립틴 (vildagliptin), 삭사글립틴 (saxagliptin), 리나글립틴 (linagliptin), 두토글립틴(dutogliptin), 제미글립틴 (gemigliptin), 알로글립틴 (alogliptin), 아나글립틴 (Anagliptin), 베르베린(Berberine), 디프로틴 (Diprotin), 루피올 (Lupeol) 및 이들의 약학적으로 허용가능한 염으로 이루어진 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
The method of claim 4, wherein the DPP-4 inhibitor is sitagliptin, vildagliptin, saxagliptin, linagliptin, dutogliptin, gemigliptin (gemigliptin), alogliptin (alogliptin), anagliptin (Anagliptin), berberine (Berberine), diprotin (Diprotin), lupeol (Lupeol) and pharmaceutically acceptable salts thereof Characterized by the pharmaceutical composition.
제4항에 있어서, 상기 에트라비린 및 추가의 약물은 동시에, 개별적으로 또는 순차적으로 병용 투여되는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
The pharmaceutical composition according to claim 4, wherein the etravirine and the additional drug are administered simultaneously, separately or sequentially.
제4항에 있어서, 상기 에트라비린 및 추가의 약물은 1:0.01 내지 500의 몰비로 병용 투여되는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
The pharmaceutical composition according to claim 4, wherein the etravirine and the additional drug are co-administered in a molar ratio of 1:0.01 to 500.
에트라비린 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염; 및 오바토클락스, 시타글립틴, 니클로사미드 및 이들의 약학적으로 허용가능한 염으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 유효성분으로 포함하는 대사성 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
Etravirine or a pharmaceutically acceptable salt thereof; and obatoclax, sitagliptin, niclosamide, and pharmaceutically acceptable salts thereof, comprising as an active ingredient at least one pharmaceutical composition for preventing or treating metabolic diseases.
에트라비린(Etravirine)을 유효성분으로 포함하는 섬유화 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
A pharmaceutical composition for preventing or treating fibrotic disease comprising Etravirine as an active ingredient.
제10항에 있어서, 상기 섬유화 질환은 폐 섬유증, 간 섬유증, 피부 섬유증, 신장 섬유증, 췌장 섬유증, 전신성 경화증 및 심장 섬유증으로 이루어진 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
The pharmaceutical composition according to claim 10, wherein the fibrotic disease is selected from the group consisting of pulmonary fibrosis, liver fibrosis, skin fibrosis, kidney fibrosis, pancreatic fibrosis, systemic sclerosis and cardiac fibrosis.
제11항에 있어서, Bcl-2 (B-cell lymphoma 2) 억제제, DPP-4 (Dipeptidyl peptidase-4) 억제제 및 니클로사미드(Niclosamide)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 약물을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
The method of claim 11, further comprising at least one drug selected from the group consisting of a Bcl-2 (B-cell lymphoma 2) inhibitor, a DPP-4 (Dipeptidyl peptidase-4) inhibitor, and Niclosamide. Characterized by the pharmaceutical composition.
에트라비린 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염; 및 오바토클락스, 시타글립틴, 니클로사미드 및 이들의 약학적으로 허용가능한 염으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 유효성분으로 포함하는 섬유화 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물. Etravirine or a pharmaceutically acceptable salt thereof; and obatoclax, sitagliptin, niclosamide, and a pharmaceutical composition for preventing or treating fibrotic disease comprising at least one selected from the group consisting of pharmaceutically acceptable salts thereof as an active ingredient.

Images