KR20230024679A - 메나퀴논-7을 유효 성분으로서 함유하는 콜라겐 산생 촉진제 - Google Patents
메나퀴논-7을 유효 성분으로서 함유하는 콜라겐 산생 촉진제 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은, 피부의 질병, 알레르기, 노화에 대한 개선 및/또는 예방에 유효한 피부 콜라겐 산생(産生) 촉진제에 관한 것이고, 보다 상세하게는 메나퀴논-7을 유효 성분으로서 함유하는 콜라겐 산생 촉진제에 관한 것이다. 본 발명의 메나퀴논-7을 유효 성분으로서 함유하는 콜라겐 산생 촉진제는 세균이나 바이러스에 의한 감염 방지, 피부병 방지, 알레르기 물질 등의 이물의 진입 방지, 피부의 노화, 주름 예방·개선, 수분 보지(保持) 등에 매 우 유효하다. 사람이 1일 당 필요하게 되는 비타민 K의 기준량은 55~80 ㎍ (일본인의 식사 섭취 기준 2010년판)이지만, 허용 상한 섭취량은 설정되지 않고, 비타민 K는 안전성이 높은 물질이라고 할 수 있다. 특히, 메나퀴논-7은 낫토로 부터의 장기 섭취의 경험이 있는 것으로부터 안전성이 더욱 높다. 따라서, 본 발명의 콜라겐 산생 촉진제는 피부의 주름 개선·예방제 혹은 피부의 노화 개선·예방제로서 종래 알려져 있는 제품보다 안전성의 관점에서 뛰 어나다. 지용성인 메나퀴논-7은 종래의 콜라겐 산생 촉진제보다 체내에 축적되기 쉽기 때문에, 작용이 지속된다고 하는 효과도 있다. 또, 메나퀴논-7은 경구로 섭취해도 분해·대사되지 않고, 메나퀴논-7로서 작용할 수 있어, 매우 유리한 콜라겐 산생 촉진제이다.
Description
본 발명은, 피부의 질병, 알레르기, 노화에 대한 개선 및/또는 예방에 유효한 피부 콜라겐 산생(産生) 촉진제에 관한 것이고, 보다 상세하게는 메나퀴논-7을 유효 성분으로서 함유하는 콜라겐 산생 촉진제에 관한 것이다.
피부는 주로 표피, 진피 및 피하 조직으로 나눌 수 있다. 진피는 표피 하에서 피부 구조를 지지하기 위해서, 콜라겐, 히알루론산 등으로 구성되는 세포외 매트릭스로 불리는 생체 구조물로 채워져 있다. 이 세포외 매트릭 스 성분은 섬유아(芽)세포 등에 의해서 산생된다. 건강하고 젊은 피부에서는, 콜라겐 등의 세포외 매트릭스 성 분의 산생이 양호하고, 세균이나 바이러스에 의한 감염 방지, 피부병 방지, 알레르기 물질 등의 이물의 진입 방 지, 피부의 탄력성 유지 및 수분 보지(保持)가 이루어지고 있다. 한편, 기미, 주름, 늘어짐, 피부가 거칠어지 는 것과 같은 증상으로 대표되는 피부의 노화는 콜라겐 등의 세포외 매트릭스 성분의 감소와 함께 진행한다고 한다.
피부의 콜라겐을 증가시키는 소재가 다수 보고되고 있다(특허문헌 1~14). 그러나, 대부분의 것은, 그 효과는 충분하지 않고, 제조 비용이 매우 높고, 그리고 식(食) 경험이 충분하지 않기 때문에 안전성 등에 과제가 많다. 비타민 K는 일반적으로 비타민 K 의존성 단백질이 특이적으로 가지는 글루타민산 잔기를 γ카르복시 글루타민산 (Gla)으로 전환하는데 필요한 비타민이라고 파악되고 있다. 비타민 K 의존성 단백질로서는, 간장에서 만들어지 는 몇개의 혈액 응고에 관계하는 인자, 골조직으로부터 만들어지는 오스테오칼신(osteocalcin), 혈관 등의 연부 조직에서 만들어지는 매트릭스 Gla 단백질 등이 알려져 있다.
비타민 K류의 피부에의 효과로서는, 항EGFR 요법에 기인하는 염증에 관련 하는 피부 상태나 Rash의 예방이나 치 료(특허문헌 14 및 15)가 알려져 있다. 또, 멜라닌 등 색소 침착에 관한 피부 질환을 치료하는 것(특허문헌 16)이나, 눈의 멍(bruising)이나 다크 서클에 대한 효과(비특허문헌 1 및 2), 얼굴의 기미, 눈 아래의 기미, 붉 어짐, 달아오름 등의 증상을 개선하는 비타민 K와 비타민 E의 복합 제재(특허문헌 17), 및 리폰산 등과의 조합 에 의한 피부용 외용제(특허문헌 18)가 알려져 있다.비타민 K2의 일종인 메나퀴논-4는, SXR 리셉터를 통한 골아세포의 콜라겐 증가 효과가 알려져 있다(비특허문헌 3). 또, 메나퀴논-4가 프로테인 키나아제 A(protein kinase A) 의존적인 경로에서 일하는 인자군에 대해서 작 용하는 일도 알려져 있다(비특허문헌 4).
종래 알려져 있는 피부 콜라겐의 산생을 촉진하는 물질은, 유효성과 안전성의 면에서 반드시 만족되지 않는다.그래서, 본 발명의 목적은 식 경험 풍부하고 안전한 식품 성분 또는 영양소이며, 미량으로 콜라겐 산생 촉진 작 용을 가지는 소재를 제공하는 것에 있다.
본 발명자 등은 낫토(納豆)에 포함되어 장기간 섭취 경험이 있는 비타민 K 중 메나퀴논-7의 생리기능에 대해서 예의 연구해 왔다. 그 중에서, 피부 세포에의 효과를 조사했는데, 의외로 메나퀴논-4에는 보이지 않고, 메나퀴 논-7에만 피부 세포의 콜라겐 산생 촉진 작용이 있음을 발견하여, 본 발명에 이르렀다. 즉, 본 발명은, 메나퀴 논-7을 유효 성분으로서 함유하는 피부 콜라겐 산생 촉진제를 제공한다.
특허문헌 14~18에 비타민 K류의 피부에의 작용이 알려져 있어도, 후술의 실시예 및 비교예가 나타낸 바와 같이, 메나퀴논-4에는 피부 콜라겐 산생 촉진 작용이 없고, 메나퀴논-7에는 콜라겐 산생 촉진 작용이 있는 것은 종래 알려지지 않았다. 본 발명에 의해, 메나퀴논-7을 유효 성분으로 하는 피부 콜라겐 산생 촉진제를 제공할 수 있 는 것은 완전히 뜻밖의 일이다.
게다가 본 발명자 등은, 경구로 섭취한 메나퀴논-7이 피부에의 유효량이 되는 밀도에 이르는 것을 찾아냈다. 이 식견을 기초로, 본 발명은 피부 콜라겐 산생 촉진제를 포함하는 경피투여제 및 경구투여제도 제공한다. 종 래 알려져 온 피부 콜라겐 촉진하는 화합물은 경구로 섭취했을 때에, 피부에 분배되는 것이 분명하지 않았다. 메나퀴논-4에 피부 콜라겐 산생 촉진 작용이 없는 것이 밝혀진 것을 종합 하면, 메나퀴논-7을 유효 성분으로 하 는 피부 콜라겐 산생 촉진제를 포함하는 경피투여제 및 경구투여제가 피부 콜라겐 증가 작용을 가지는 것은 완 전히 뜻밖의 일이다.
본 발명의 메나퀴논-7을 유효 성분으로서 함유하는 콜라겐 산생 촉진제는 세균이나 바이러스에 의한 감염 방지, 피부병 방지, 알레르기 물질 등의 이물의 진입 방지, 피부의 노화, 주름 예방·개선, 수분 보지(保持) 등에 매 우 유효하다.
사람이 1일 당 필요하게 되는 비타민 K의 기준량은 55~80 ㎍ (일본인의 식사 섭취 기준 2010년판)이지만, 허용 상한 섭취량은 설정되지 않고, 비타민 K는 안전성이 높은 물질이라고 할 수 있다. 특히, 메나퀴논-7은 낫토로 부터의 장기 섭취의 경험이 있는 것으로부터 안전성이 더욱 높다. 따라서, 본 발명의 콜라겐 산생 촉진제는 피 부의 주름 개선·예방제 혹은 피부의 노화 개선·예방제로서 종래 알려져 있는 제품보다 안전성의 관점에서 뛰 어나다.
지용성인 메나퀴논-7은 종래의 콜라겐 산생 촉진제보다 체내에 축적되기 쉽기 때문에, 작용이 지속된다고 하는 효과도 있다. 또, 메나퀴논-7은 경구로 섭취해도 분해·대사되지 않고, 메나퀴논-7로서 작용할 수 있어, 매우 유리한 콜라겐 산생 촉진제이다.
본 발명의 콜라겐 산생 촉진제는 의약으로서 이용할 수 있지만, 서플리먼트나 화장품 용도로 해도 일상적으로 섭취 또는 사용하는 것이 매우 용이하다. 따라서, 피부의 노화 및 질병의 예방도 기도된다.
이하에, 본 발명의 콜라겐 산생 촉진제의 일 실시형태를 상세하게 설명한다. 우선, 본 발명의 피부 콜라겐 산 생 촉진제에 사용 가능한 메나퀴논-7은 비타민 K2의 일종이다. 비타민 K2는 이소프로노이드 측쇄의 길이가 달 라짐에 따라, 메나퀴논-4에서 MK-15까지 분류된다. 본 발명의 피부 콜라겐 산생 촉진제는 이소프로노이드 측쇄 의 길이가 7인 비타민 K2를 필수 성분으로 한다.
메나퀴논-7은 영양소로서 식품 중에 많이 포함되고, 특히 낫토 및 낫토균 유래의 것, 고초균(枯草菌), 유산균 등 미생물 유래의 것으로부터 취득할 수 있다. 또, 메나퀴논-7은 상기 이외에도 화학적으로 합성한 것도 사용 가능하다.
본 발명의 피부 콜라겐 산생 촉진제에의 메나퀴논-7의 함유량은 조성물의 형태 및 섭취량에 따라서 달라지지만, 통상 0.00002~100 중량%로 좋고, 바람직하게는 0.0003~70 중량%, 보다 바람직하게는 0.003~50 중량%의 범위이다. 메나퀴논-7이 0.00002 중량% 이하이면, 피부 콜라겐 증가 효과를 얻는데 필요한 양을 섭취할 수 없 는 경우가 있다.
본 발명의 피부 콜라겐 산생 촉진제에는, 필수 성분의 메나퀴논-7에 더해서, 피부 콜라겐 산생 촉진 효과를 가 지는 종래 알려져 있는 식품 성분의 1종 또는 2종 이상을 첨가해도 좋다. 또, 콜라겐이나 콜라겐 분해물, 아미 노산 등의 콜라겐의 원료로 이루어진 성분을 첨가해도 좋다.
본 발명의 피부 콜라겐 산생 촉진제를 의약으로서 이용하는 경우는, 필수 성분의 메나퀴논-7 및 적당한 콜라겐 산 산생 물질 및 콜라겐, 콜라겐 분해물, 아미노산 종류에 더해서, 의약의 조제로서 범용되는 것을 첨가해도 좋 다. 예를 들면, 제형 및 투여 방법에 따라서, 범용의 부형제, 붕괴제, 결합제, 활택제, 비타민, 크산틴 유도체, pH 조정제, 청량화제, 현탁화제, 점조제, 용해 보조제, 항산화제, 코팅제, 가소제, 계면활성제, 물, 알 코올류, 수용성 고분자, 감미료, 교미제(矯味劑), 산미료, 향료, 착색제 등을 발명의 효과를 해치지 않는 질적 및 양적 범위에서 첨가하는 것이 가능하다.
본 발명의 피부 콜라겐 산생 촉진제는 의약으로서 사용하기 위해서, 산제(散劑), 과립제, 캡슐제, 환제, 정제, 츄어블정, 드롭과 같은 고형 제재나, 드링크제, 수(水)제, 현탁제, 유제, 시럽, 드라이 시럽과 같은 액제 등의 경구투여제, 혹은 액제, 수제, 유제, 크림과 같은 경피투여제의 형태로 가공된다.
본 발명의 피부 콜라겐 산생 촉진제를 의약으로서 사용하는 경우의 섭취 방법은 특별히 한정되지 않는다. 예를 들면, 경구 섭취, 경피 섭취, 수액, 주사(근육내, 복강내, 피하 또는 정맥) 등이다. 바람직하게는, 환자의 부 담이 적은 관점에서, 정제, 캡슐제 등의 경구 섭취이다.
본 발명의 피부 콜라겐 산생 촉진제를 의약에 이용하는 경우에는, 증상에 따라서, 적당히 섭취량을 설정하면 좋 지만, 일반적으로 예방약으로서 이용하는 경우는 1일 당 메나퀴논-7의 섭취량으로서 10 ㎍~100 mg로 좋고, 20 ㎍~100 mg가 바람직하지만 바람직하고, 5~50 mg가 더욱 바람직하다. 치료약으로서 이용하는 경우는 1~150 mg로 사용 가능하다.
본 발명의 피부 콜라겐 산생 촉진제를 화장품으로서 이용하는 경우는, 필수 성분의 메나퀴논-7 및 적당한 피부 콜라겐 산생 물질이나 콜라겐의 원료로 이루어진 아미노산류, 콜라겐 분해물, 콜라겐, 젤라틴에 더해서, 화장품 의 조제로서 범용되는 것을 첨가해도 좋다. 예를 들면, 에틸렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜,1,3-부틸렌글리콜, 1,4-부틸렌글리콜, 디프로필렌글리콜, 글리세린, 디글리세린, 폴리글리세린, 펜틸렌글리콜, 이소프렌글리콜, 글루코오스, 말토오스, 프룩토오스, 자일리톨, 소르비톨, 말토트리오스, 에리스리톨 등의 다가 알코올;메탄올, 에탄올, 프로필 알코올, 이소프로필 알코올, 부틸 알코올, 이소부틸 알코올 등의 저급 알코올 ;올레인산, 이소 스테아린산, 라우린산, 미리스틴산, 팔미틴산, 스테아린산, 베헨산, 운데실렌산 등의 고급 지 방산류;올리브유, 옥수수유, 동백유, 마카데미아 넛트유, 아보카드유, 유채씨유, 참기름, 피마자유, 사플라워 유, 면실유, 호호바유, 야자유, 팜유 등의 유지;카르나우바 왁스, 칸델리라 왁스, 밀랍(beeswax), 라놀린 등의 왁스류;소르비톨, 만니톨, 글루코스, 자당, 락토오스, 트레할로스 등의 당류;카라기난, 잔탄껌, 젤라틴, 펙틴, 아가로스, 알긴산염, 덱스트린, 메틸셀룰로오스, 에틸셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 히드록시에 틸셀룰로오스, 카르복시메틸셀룰로오스, 카르복시 비닐 폴리머, 폴리 비닐 알코올, 폴리 비닐피롤리돈, 아라비 아 껌, 카라야 껌, 트라간트 껌, 타마린드 껌 등의 증점제;페녹시에탄올, 메틸파라벤, 에틸파라벤, 프로필파라 벤, 부틸파라벤, 파라 옥시안식향산 에스테르, 안식향산, 살리실산과 그 염류, 솔빈산과 그 염류, 디히드로 아 세트산과 그 염류, 클로로 크레졸, 헥사클로로펜 등의 방부제;라우로일 황산나트륨, 모노올레인산 폴리옥시에 틸렌소르비탄 등의 비이온 계면활성제, 알킬설페이트염, 노르말 도데실벤젠술폰산 나트륨 등의 음이온 계면활성 제, 폴리옥시에틸렌 도데실 모노메틸암모늄클로라이드 등의 양이온 계면활성제;스테로이드계 및 비스테로이드 계 항염증제;비타민 A, 비타민 D, 비타민 E, 비타민 F, (메나퀴논-7 이외의) 비타민 K군의 비타민군이나 디카 프릴산 피리독신, 디팔미틴산 피리독신, 디팔미틴산 아스코르빌, 모노팔미틴산 아스코르빌, 모노스테아린산 아 스코르빌 등의 비타민 유도체;플라보노이드, 카로테노이드 등의 항산화제;스쿠알란, 스쿠알렌, 유동 파라핀 등의 고급 지방족 탄화수소류;세라미드, 세레브로시드, 스핀고미엘린 등의 스핀고 지방질;콜레스테롤, 파이토 스테롤 등의 스테롤류;메틸 폴리실록산, 메틸페닐 폴리실록산, 메틸 시클로폴리실록산, 옥타메틸 시클로테트라 실록산, 옥타메틸 시클로펜타실록산, 데카메틸 시클로펜타실록산, 메틸하이드로젠폴리실록산 등의 실리콘류;파 라아미노안식향산, 파라아미노안식향산 모노 글리세린 에스테르, 안트라닐산메틸, 호모멘틸 N-아세틸안트라닐레 이트, 파라메톡시계피산옥틸, 에틸-4-이소프로필 신나메이트 등의 자외선 흡수제;벤토나이트, 스멕타이트, 바 이데라이트, 논트로나이트, 사포나이트, 헥토라이트, 소코나이트, 스티븐사이트 등의 광물;적산화철, 황산화철, 흑산화철, 산화 코발트, 군청, 감청, 산화 티탄, 산화 아연 등의 무기 안료;적색 202호, 황색 4호, 청색 404호 등의 착색료;향료;향유 등을 들 수 있다.
본 발명의 피부 콜라겐 산생 촉진제를 화장품으로서 사용하기 위해서, 액제, 수제, 유제, 유액, 크림, 분체와 같은 경피투여제, 혹은 산제, 과립제, 캡슐제, 환제, 정제, 츄어블정, 드롭과 같은 고형 제재나 드링크제, 수제, 현탁제, 유제, 시럽, 드라이 시럽과 같은 액제 등의 경구투여제의 형태로 가공된다.
본 발명의 피부 콜라겐 산생 촉진제를 화장품으로서 사용하는 경우의 섭취 방법은 경구 섭취 또는 경피섭취이다. 화장품으로서의 즉효성의 관점에서, 수제, 유제, 유액, 크림으로의 경피투여가 바람직하다.
본 발명의 콜라겐 산생 촉진제를 화장품에 이용하는 경우에는, 1일당 메나퀴논-7의 섭취량(도포량)으로서 0.001~100 mg가 바람직하고, 0.05~50 mg가 더욱 바람직하다.
본 발명의 피부 콜라겐 산생 촉진제를 서플리먼트로서 이용하는 경우는, 필수 성분의 메나퀴논-7 및 적당한 다 른 콜라겐 증가 물질에 더해서, 서플리먼트의 첨가제로서 범용되는 것을 첨가해도 좋다. 예를 들면, 경구투여 제의 형태에 따라서, 범용의 부형제, 붕괴제, 결합제, 활택제, 비타민, 크산틴 유도체, 아미노산, pH 조정제, 청량화제, 현탁화제, 점조제, 용해 보조제, 항산화제, 코팅제, 가소제, 계면활성제, 물, 알코올류, 수용성 고분 자, 감미료, 교미제, 산미료, 향료, 착색제 등을 발명의 효과를 해치지 않는 질적 및 양적 범위에서 첨가하는 것이 가능하다.
본 발명의 피부 콜라겐 산생 촉진제를 서플리먼트로서 사용하기 위해서, 예를 들면, 산제, 과립제, 캡슐제, 환 제, 정제, 츄어블정, 드롭과 같은 통상의 식품과는 다른 경구투여제로 가공된다.
본 발명의 피부 콜라겐 산생 촉진제를 서플리먼트 등의 건강식품에 이용하는 경우에는, 안전성을 고려하여 1일 당 메나퀴논-7의 섭취량으로서 0.01~50 mg가 바람직하고, 0.01~1 mg가 더욱 바람직하다.
본 발명의 피부 콜라겐 산생 촉진제의 배합예를 나타낸다. 그러나, 본 발명은, 이하의 배합예로 한정되는 것은 아니다.
이하에, 실시예를 이용해 본 발명을 보다 상세하게 설명하지만, 본 발명은 이하의 실시예에 한정되는 것은 아니 다.
[실시예 1]
정상 사람 섬유 아세포를 이용하여, 메나퀴논-7의 피부 콜라겐 산생 촉진 작용을 비타민 K1 및 메나퀴논-4와 비 교했다. 메나퀴논-7시약(Wako Pure Chemical Industries, Ltd. 제품)은 HPLC로 순도 검정한 것을 사용했다.
-5
설정 농도는 세포 계에서의 비타민 K류의 최대 용해도 1.5x10
M로 비교했다. 비타민 K1(Wako Pure Chemical
Industries, Ltd. 제품) 및 메나퀴논-4(Sigma 제품)의 순도는 HPLC법에 의해 검정한 것을 사용했다. 1.시험 방법
정상 사람 진피 섬유 아세포(Kurabo Industries Ltd. 제품)를 0.5 중량% 송아지 혈청(FBS) 함유 둘베코 개변
4
이글 배지(Dulbecco's modified Eagle's medium, DMEM)(Sigma 제품)를 이용해 1 웰 당 2.0 x10
개의 세포 밀도
가 되도록 96 홀 마이크로플레이트에 파종했다. 파종 48시간 후, 표 5에 기재된 농도의 메나퀴논-7을 함유하는 0.5 중량% FBS 함유 DMEM와 교환했다. 메나퀴논-7은 에탄올에 용해한 후, 0.5% FBS 함유 DMEM에서 100배 희석 한 용액을 시험 최고 농도액으로서 조제했다. 또, 양성 컨트롤로서 아스코빈산 인산 마그네슘염(VC-PMg)을 이 용해 시험 방법에 문제가 없는 것을 확인했다. 48시간 시료 함유 배지로 배양한 후, 배지 상청을 회수해 I형 콜라겐량 측정의 ELISA에 제공했다. 세포는 0.5% Triton X-100 용액에서 용해 후, 단백량을 정량했다.
2.콜라겐양의 측정
배지 및 검양선용 I형 콜라겐 용액을 고흡착형 ELISA 플레이트의 각 웰에 넣고, 37℃에서 2시간 코팅한 후, 1% 소 혈청 알부민(BSA) 용액을 이용해 37℃에서 1시간 블로킹했다. 1차 항체 반응은 Anti-Human Collagen Type I antibody(Rabbit)를 0.3% BSA 용액으로 희석해, 37℃에서 1시간 반응시켰다. 2차 항체 반응은 히스토파인 MAX-PO(R)(Rabbit)를 인산 완충액으로 희석해, 37℃에서 1시간 반응시켰다. 다음으로, 0.3mg/ml의 2,2'- Azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonicacid) diammouniumsalt(ABTS) 및 0.03%의 과산화수소를 포함하는 인산-구연산 완충액(0.1 M, pH 4.0) 용액을 더해 20분간 반응시켜, 마이크로 플레이트 리더에서 405 nm의 흡광 도를 측정했다.
배지 중 I형 콜라겐양은 같은 ELISA 플레이트로 측정한 검양선으로부터 환산해, 전(全) 세포의 단백량으로 배지 중의 I형 콜라겐양을 제거하는 것에 의해서 단위 단백량 당 I형 콜라겐양으로서 산출했다.
-5
도 1은 정상 사람 진피 섬유 아세포에 대한 메나퀴논-7, 비타민 K1 및 메나퀴논-4(각각, 1.5x10
M라고 하는 고
용량에 있어서)의 콜라겐 산생 촉진 작용을, 시료 미첨가시의 단위 단백량 당 I형 콜라겐 산생량을 100으로 했 을 때의 상대치로서 평가한 결과이다. 시료 첨가는 각 군 n=6으로 시험을 실시하고, 결과는 각각의 평균치+표 준편차로 나타내고 있다. 또한, 통계 처리에 대해서는, 시료 미첨가의 대조군에 대한 Student t 검정을 실시하 고, 1% 미만의 위험률의 경우 *를 붙였다.
도 1에 나타낸 바와 같이, 메나퀴논-7(도 1 내의 MK-7)만이 의미 있게 콜라겐 산생량이 증가했다. 메나퀴논-4(도 1 내의 MK-4)에 대해서는, 또한 그 4 배량의 6.0x10 가하지 않았다.
[실시예 2]
표 5에 나타내는 농도 범위의 메나퀴논-7의 사람 진피 섬유 아세포에 대한 콜라겐 산생 촉진 작용을 조사했다. 결과를 표 5에 나타낸다. 시료 첨가는 각 군 n=6으로 시험을 실시하고, 결과는 각각의 평균치로 나타내고 있다. 또한, 통계 처리에 대해서는, 시료 미첨가의 대조군에 대한 Student t 검정을 실시하고, 1% 미만의 위험 률의 경우 *를 붙였다.
표 5에 나타낸 바와 같이, 메나퀴논-7은 0.5x10
포의 I형 콜라겐 산생을 촉진하는 것이 분명해졌다. [실시예 3]
Wistar계 래트(수컷, 5주령(週齡)을 정제 사료 AIN93G(Oriental Yeast 제품)를 1주간 자유롭게 섭취시켜 순화한 후, 군간의 체중이 균일해지도록 1군 3마리로 군을 나누었다. 래트 표준식(AIN93G)과 메나퀴논-7을 첨가한 메 나퀴논-7 첨가 사료(메나퀴논-7:150 ㎍/g)를 각 군 3마리씩의 래트에 90일간 자유 섭취시킨 후, 피부 중의 비 타민 K 농도를 측정했다. 비타민 K의 분석은 고속 액체 크로마토그래피를 이용해 백금흑(黑)을 이용한 포스트 칼럼 환원 형광 검출법에 의해 분석했다(Sato et al. Biochim. Biophys. Acta 1622, 145-150). 결과를 표 6에 나타낸다.
※평균±SD
150 ㎍/g의 메나퀴논-7식(食)을 섭취함으로써, 콜라겐 산생 촉진에 필요한 메나퀴논-7 농도(0.5x10 M: 325ng/g)를 넘는 메나퀴논-7이 피부 조직에 검출되었다. 이것으로부터, 메나퀴논-7은 경구 섭취가 유망한 투여 경로라고 생각할 수 있다.
[실시예 4]
4주령의 Crl:CD(SD)(SPF) 수컷 래트를 입하(入荷) 후 1주간의 검역 기간을 포함한 투여 개시까지 순화했다. 검역·순화 기간 중, 일반 상태 관찰을 매일 실시해, 체중을 입하 후 1일(입하 익일), 3일 및 7일에 측정했다. 군간의 체중이 균일해지도록 1군 5마리로 4군으로 분리했다.
래트 표준식 AIN93G에, 메나퀴논-7을 첨가한 3 종류의 사료:고(高)MK7식(메나퀴논-7:45.4 ㎍/g식), 중(中)MK7 식(메나퀴논-7:15 ㎍/g식), 및 저(低)MK7식(메나퀴논-7:4.54 ㎍/g식), 및 MK7 무첨가식을 90일간 자유 섭취시 켰다.
마지막 날에 절식 후, 해부를 실시해, 복부를 바리캉으로 정중하게 털을 없앤 후, 진피를 포함하는 피부를 채취 했다. 피부를 100 mg 정도로 잘라내, 정확하게 칭량했다. 피부 콜라겐양을 피부 콜라겐 정량 키트(biocolor 제품의 상품명 Sircol Collagen Assay Kit)에 의해 측정했다. MK7 무첨가식을 컨트롤로서 첨가식 3군의 콜라겐 증가량을 비교했다. Student t 검정에 의해 통계 처리를 실시해, 위험률 P<0.05를 유의차 있음으로 판단했다. 결과를 표 7에 나타낸다. 표 중, * 표시는 유의차를 나타낸다.
※ 콜라겐 증가율=(I형 콜라겐 양/무첨가식에서의 I형 콜라겐 양-1)*100
표 7에 나타낸 바와 같이, MK7를 경구 섭취하면, 용량 의존적으로 콜라겐이 증가하는 경향을 나타냈다. 그리고, 45.4 ㎍/g식의 섭취로, 피부 콜라겐이 통계적으로 의미 있게 증가하는 것을 확인했다.
Claims (3)
- 메나퀴논-7을 유효 성분으로서 함유하는 피부 콜라겐 산생(産生) 촉진제.
- 제1항에 기재된 피부 콜라겐 산생 촉진제를 포함하는 경피투여제.
- 제1항에 기재된 피부 콜라겐 산생 촉진제를 포함하는 경구투여제.
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