KR20230023664A - Anti-Claudin18.2 Antibodies and Uses Thereof - Google Patents

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Abstract

본 발명은 클라우딘18.2에 특이적으로 결합하는 신규 항체 및 항체 단편, 및 상기 항체 또는 항체 단편을 포함하는 조성물에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 상기 항체 또는 이의 항체 단편을 인코딩하는 핵산, 상기 핵산을 포함하는 숙주 세포, 및 관련 용도에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 상기 항체 및 상기 항체 단편의 치료적 및 진단적 용도에 관한 것이다.The present invention relates to novel antibodies and antibody fragments that specifically bind to claudin 18.2, and to compositions comprising the antibodies or antibody fragments. The invention also relates to nucleic acids encoding said antibodies or antibody fragments thereof, host cells comprising said nucleic acids, and related uses. The invention also relates to therapeutic and diagnostic uses of said antibodies and said antibody fragments.

Description

항-클라우딘18.2 항체 및 이의 용도Anti-Claudin18.2 Antibodies and Uses Thereof

본 출원은 2020년 6월 19일에 출원된 중국 특허 출원 번호 CN202010570517.X를 기초로 하고 이의 우선권을 주장하며, 이의 개시 내용은 전체가 참고로 본 명세서에 포함된다.This application is based on and claims priority to Chinese Patent Application No. CN202010570517.X filed on Jun. 19, 2020, the disclosure content of which is incorporated herein by reference in its entirety.

본 발명은 클라우딘18.2에 특이적으로 결합하는 신규 항체 및 항체 단편, 및 상기 항체 또는 항체 단편을 포함하는 조성물에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 상기 항체 또는 이의 항체 단편을 인코딩하는 핵산, 상기 핵산을 포함하는 숙주 세포, 및 관련 용도에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 상기 항체 및 상기 항체 단편의 치료적 및 진단적 용도에 관한 것이다.The present invention relates to novel antibodies and antibody fragments that specifically bind to claudin 18.2, and to compositions comprising the antibodies or antibody fragments. The invention also relates to nucleic acids encoding said antibodies or antibody fragments thereof, host cells comprising said nucleic acids, and related uses. The invention also relates to therapeutic and diagnostic uses of said antibodies and said antibody fragments.

클라우딘은 단백질 패밀리이며 세포 사이의 긴밀한 접합을 구성하는 중요한 구성 요소이다. 그들은 분자의 세포간 흐름을 제어하는 세포간 장벽을 확립하여, 이에 따라 세포 사이의 분자 흐름을 제어할 수 있다. 클라우딘 패밀리 단백질은 N-말단과 C-말단 모두 세포질에 포함되는 테트라스파닌 도메인을 가지고 있다. 다른 클라우딘은 다른 조직에서 발현되고 이들의 기능적 변화는 다양한 조직에서 암의 발전과 연관된다. 예를 들어, 클라우딘-1은 결장암에서 발현되어 예후값(prognostic value)이 있고, 클라우딘-18은 위암에서 발현되며, 클라우딘-10은 간세포암종에서 발현된다. 세포막 표면 단백질인 클라우딘은 다양한 치료 전략의 유용한 표적이다.Claudins are a family of proteins and are important components of the tight junctions between cells. They can establish intercellular barriers that control the flow of molecules between cells, thereby controlling the flow of molecules between cells. Claudin family proteins have tetraspanin domains included in the cytoplasm at both the N-terminus and the C-terminus. Different claudins are expressed in different tissues and their functional changes are associated with the development of cancer in various tissues. For example, claudin-1 is expressed in colon cancer and has prognostic value, claudin-18 is expressed in gastric cancer, and claudin-10 is expressed in hepatocellular carcinoma. Claudin, a cell membrane surface protein, is a useful target for a variety of therapeutic strategies.

클라우딘-18의 아이소폼 2(클라우딘18.2 또는 CLDN18.2)는 고도로 선택적인 세포 계통 마커이다. 정상 조직에서의 발현은 위점막의 분화된 상피세포에만 국한되어 있으며 위줄기세포 영역에서는 발현되지 않는다. CLDN18.2는 원발성 위암의 상당 부분에서 발현되며, 그 발현 수준은 위 전이성 암 조직에서 유지된다. CLDN18.2의 발현은 위암 외에 췌장암에서도 발견되었으며, 이러한 암 치료에 이상적인 표적 분자이다(Singh, P., Toom, S. & Huang, Y. Anti-CLDN18.2 antibody as new targeted therapy for advanced gastric cancer. J Hematol Oncol 10, 105 (2017). https://doi.org/10.1186/s13045-017-0473-4).Isoform 2 of claudin-18 (claudin18.2 or CLDN18.2) is a highly selective cell lineage marker. Expression in normal tissues is limited to differentiated epithelial cells of the gastric mucosa and is not expressed in the gastric stem cell region. CLDN18.2 is expressed in a significant proportion of primary gastric cancer, and its expression level is maintained in gastric metastatic cancer tissues. Expression of CLDN18.2 was found in pancreatic cancer as well as gastric cancer, and is an ideal target molecule for the treatment of these cancers (Singh, P., Toom, S. & Huang, Y. Anti-CLDN18.2 antibody as new targeted therapy for advanced gastric cancer). J Hematol Oncol 10, 105 (2017). https://doi.org/10.1186/s13045-017-0473-4 ).

종양 치료에 대한 미충족 임상 수요가 크기 때문에 클라우딘18.2를 표적으로 하는 약물의 개발이 필요하다. 클라우딘18.2에 대한 일부 모노클로날 항체가 선행 기술에서 개발되었지만, 이들 항체의 대부분은 면역원성, 낮은 친화성, 낮은 특이성 및 일반적인 ADCC 활성의 잠재적으로 높은 위험을 갖는 키메라 항체이다.Because of the great unmet clinical demand for tumor treatment, the development of drugs targeting claudin 18.2 is necessary. Although some monoclonal antibodies to claudin18.2 have been developed in the prior art, most of these antibodies are chimeric antibodies with a potentially high risk of immunogenicity, low affinity, low specificity and general ADCC activity.

따라서, 면역원성이 낮고, 클라우딘18.2에 대한 결합 친화성이 더 강하고, 특이성이 우수하고, ADCC 및 CDC 활성이 강하고, 항종양 활성이 더 우수한 클라우딘18.2에 대한 신규 항체의 개발이 여전히 필요하다.Therefore, there is still a need to develop novel antibodies against claudin 18.2 with low immunogenicity, stronger binding affinity to claudin 18.2, excellent specificity, strong ADCC and CDC activities, and better antitumor activity.

일부 측면에서, 본 발명은 본 명세서에 기재된 바와 같은 3개의 중쇄 가변 영역 CDR 및 3개의 경쇄 가변 영역 CDR을 포함하고, CLDN18.2에 결합하는 항체 또는 이의 항원-결합 단편에 관한 것이다.In some aspects, the invention relates to an antibody or antigen-binding fragment thereof comprising three heavy chain variable region CDRs and three light chain variable region CDRs as described herein and that binds CLDN18.2.

일부 측면에서, 본 발명의 CLDN18.2에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 본 명세서에 기재된 바와 같은 중쇄 가변 영역 및/또는 경쇄 가변 영역을 포함한다.In some aspects, an antibody or antigen-binding fragment thereof that binds CLDN18.2 of the invention comprises a heavy chain variable region and/or a light chain variable region as described herein.

일부 측면에서, 본 발명의 CLDN18.2에 결합하는 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 본 명세서에 기재된 바와 같은 중쇄 불변 영역 및/또는 경쇄 불변 영역을 추가로 포함한다.In some aspects, an antibody or antigen-binding fragment thereof that binds CLDN18.2 of the invention further comprises a heavy chain constant region and/or a light chain constant region as described herein.

일부 측면에서, 본 발명은 또한 하기 실시양태에 관한 것이다.In some aspects, the invention also relates to the following embodiments.

1. 본 발명의 CLDN18.2에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편이 제공되며, 여기서 항체는 항체 또는 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 형태의 항원 결합 단편, 바람직하게는 항체 또는 IgG1 형태의 항원 결합 단편이다.1. An antibody or antigen-binding fragment thereof that binds to CLDN18.2 of the present invention is provided, wherein the antibody is an antibody or an antigen-binding fragment in the form of an IgG1, IgG2, IgG3 or IgG4, preferably an antibody or antigen-binding fragment in the form of IgG1 am.

2. 본 발명의 CLDN18.2에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편이 제공되며, 여기서 항체는 모노클로날 항체이다.2. An antibody or antigen-binding fragment thereof that binds to CLDN18.2 of the present invention is provided, wherein the antibody is a monoclonal antibody.

3. 본 발명의 CLDN18.2에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편이 제공되며, 여기서 항체는 인간화 항체, 인간 항체 또는 키메라 항체이다.3. An antibody or antigen-binding fragment thereof that binds to CLDN18.2 of the present invention is provided, wherein the antibody is a humanized antibody, a human antibody or a chimeric antibody.

4. 본 발명의 CLDN18.2에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편이 제공되며, 여기서 항원 결합 단편은 Fab, Fab', Fab'-SH, Fv, 단쇄 항체(예를 들어, scFv), (Fab')2, 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH), 도메인 항체(dAb) 및 선형 항체로부터 선택된 항체 단편이다.4. An antibody or antigen-binding fragment thereof that binds CLDN18.2 of the present invention is provided, wherein the antigen-binding fragment is Fab, Fab', Fab'-SH, Fv, single chain antibody (eg scFv), (Fab ') 2 , single domain antibodies (eg VHH), domain antibodies (dAbs) and linear antibodies.

5. 본 발명의 CLDN18.2에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편이 제공되며, 여기서 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 하기 특성 중 하나 이상을 갖는다.5. An antibody or antigen-binding fragment thereof that binds to CLDN18.2 of the present invention is provided, wherein the antibody or antigen-binding fragment thereof has one or more of the following characteristics.

(i) 높은 친화성으로 CLDN18.2(예를 들어, 인간 CLDN18.2)에 결합하지만 CLDN18.1(예를 들어, 인간 CLDN18.1)에는 결합하지 않음;(i) binds CLDN18.2 (eg, human CLDN18.2) but not CLDN18.1 (eg, human CLDN18.1) with high affinity;

(ii) 약 15nM 미만, 바람직하게는 약 10nM, 9.5nM, 9nM, 8.5nM, 8nM, 7.5nM, 7nM, 6.5nM, 6nM, 5.5nM, 5nM, 4.5nM, 4nM, 3.5nM 또는 3nM 이하의 평형 해리 상수(KD)로 인간 CLDN18.2에 결합;(ii) less than about 15 nM, preferably less than about 10 nM, 9.5 nM, 9 nM, 8.5 nM, 8 nM, 7.5 nM, 7 nM, 6.5 nM, 6 nM, 5.5 nM, 5 nM, 4.5 nM, 4 nM, 3.5 nM or 3 nM equilibrium binding to human CLDN18.2 with dissociation constant (K D );

(iii) 세포 표면의 CLDN18.2에는 결합하지만 세포 표면의 CLDN18.1에는 결합하지 않음;(iii) binds cell surface CLDN18.2 but not cell surface CLDN18.1;

(iv) ADCC 활성 또는 CDC 활성, 예를 들어 ADCC 활성 또는 공지된 항체(예를 들어, Zmab)와 동등하거나 이보다 더 높은 CDC 활성을 가짐;(iv) has ADCC activity or CDC activity, eg ADCC activity or CDC activity equal to or greater than that of a known antibody (eg Zmab);

(v) 종양 세포, 예를 들어 CLDN18.2를 발현하는 종양 세포의 억제; 및(v) inhibition of tumor cells, eg, tumor cells expressing CLDN18.2; and

(vi) 약 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65% 또는 70% 이상의 종양 성장 억제로 종양 성장을 효과적으로 억제할 수 있음.(vi) can effectively inhibit tumor growth by at least about 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65% or 70% tumor growth inhibition.

6. 본 발명의 CLDN18.2에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 경쇄 가변 영역 또는 중쇄 가변 영역, 또는 경쇄 또는 중쇄를 인코딩하는 단리된 핵산이 제공된다.6. An isolated nucleic acid encoding the light chain variable region or heavy chain variable region, or light chain or heavy chain, of an antibody or antigen-binding fragment thereof that binds CLDN18.2 of the present invention is provided.

7. 본 발명의 핵산을 포함하는 벡터가 제공되며, 여기서 바람직하게는 벡터는 발현 벡터이다.7. A vector comprising a nucleic acid of the invention is provided, wherein preferably the vector is an expression vector.

8. 본 발명의 핵산 또는 벡터를 포함하는 숙주 세포가 제공되며, 여기서 바람직하게는, 숙주 세포는 원핵 또는 진핵이며, 보다 바람직하게는, 숙주 세포는 효모 세포, 포유류 세포(예를 들어, 293 세포 또는 CHO 세포, 예컨대 CHO-S 세포 또는 HEK293 세포), 혹은 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 제조에 적합한 추가 세포로부터 선택된다.8. A host cell comprising a nucleic acid or vector of the invention is provided, wherein preferably the host cell is prokaryotic or eukaryotic, more preferably the host cell is a yeast cell, a mammalian cell (e.g. a 293 cell) or CHO cells, such as CHO-S cells or HEK293 cells), or further cells suitable for the production of antibodies or antigen-binding fragments thereof.

9. CLDN18.2에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제조하기 위한 방법이 제공되며, 본 발명의 CLDN18.2에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 인코딩하는 핵산의 발현에 적합한 조건 하 본 발명의 숙주 세포를 배양하는 단계, 및 선택적으로 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 단리시키는 단계를 포함하며; 선택적으로, 상기 방법은 숙주 세포로부터 CLDN18.2에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 복원시키는 단계를 추가로 포함한다.9. Methods are provided for preparing antibodies or antigen-binding fragments thereof that bind CLDN18.2, under conditions suitable for expression of nucleic acids encoding antibodies or antigen-binding fragments thereof that bind CLDN18.2 of the present invention. culturing the host cells of, and optionally isolating the antibody or antigen-binding fragment thereof; Optionally, the method further comprises restoring the antibody or antigen-binding fragment thereof that binds CLDN18.2 from the host cell.

10. 본 발명의 CLDN18.2에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편 및 추가 물질, 예를 들어, 세포독성제를 포함하는 면역접합체가 제공된다.10. Immunoconjugates are provided comprising an antibody or antigen-binding fragment thereof that binds to CLDN18.2 of the present invention and an additional agent, such as a cytotoxic agent.

11. 본 발명의 CLDN18.2 또는 본 발명의 면역접합체에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편, 및 선택적으로 하나 이상의 추가 치료제, 예를 들어, 화학요법제, 사이토카인, 세포독성제, 추가 항체, 소분자 약물 또는 면역조절제, 및 선택적으로 약제학적 보충 물질을 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다.11. An antibody or antigen-binding fragment thereof that binds CLDN18.2 of the invention or an immunoconjugate of the invention, and optionally one or more additional therapeutic agents, e.g., chemotherapeutic agents, cytokines, cytotoxic agents, additional antibodies, A pharmaceutical composition comprising a small molecule drug or immunomodulatory agent and, optionally, a pharmaceutical supplement material is provided.

12. 본 발명의 CLDN18.2 또는 본 발명의 면역접합체에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편, 및 하나 이상의 추가 치료제, 예를 들어 화학요법제, 사이토카인, 세포독성제, 추가 항체, 소분자 약물 또는 면역조절제를 포함하는 약제학적 조합을 제공한다.12. An antibody or antigen-binding fragment thereof that binds CLDN18.2 of the invention or an immunoconjugate of the invention, and one or more additional therapeutic agents, such as chemotherapeutic agents, cytokines, cytotoxic agents, additional antibodies, small molecule drugs or A pharmaceutical combination comprising an immunomodulatory agent is provided.

13. 대상체에서 종양을 예방 또는 치료하기 위한 방법을 제공하며, 이는 유효량의 본 발명의 CLDN18.2, 또는 본 발명의 면역접합체, 약제학적 조성물 또는 약제학적 조합에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.13. Provided is a method for preventing or treating a tumor in a subject, comprising an antibody or antigen binding fragment thereof that binds to CLDN18.2 of the present invention in an effective amount, or an immunoconjugate, pharmaceutical composition or pharmaceutical combination of the present invention. Administering to a subject.

14. 대상체에서 ADCC 및/또는 CDC를 유도하기 위한 방법을 제공하며, 이는 유효량의 본 발명의 CLDN18.2, 또는 본 발명의 면역접합체, 약제학적 조성물 또는 약제학적 조합에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.14. Provided is a method for inducing ADCC and/or CDC in a subject, comprising an antibody that binds to an effective amount of CLDN18.2 of the present invention, or an immunoconjugate, pharmaceutical composition or pharmaceutical combination of the present invention, or antigen binding thereof administering the fragment to a subject.

15. 종양을 치료 또는 예방하고 및/또는 ADCC 및/또는 CDC를 유도하기 위한 약물 또는 약제학적 조합의 제조에 있어서 본 발명의 항체 또는 면역접합체의 용도가 제공된다.15. The use of an antibody or immunoconjugate of the present invention in the manufacture of a drug or pharmaceutical combination for treating or preventing tumors and/or inducing ADCC and/or CDC is provided.

16. 본 발명의 방법 또는 용도가 제공되며, 여기서 종양은 암이고; 바람직하게는, 상기 암은 상승된 수준의 CLDN18.2를 갖는다(예를 들어, 핵산 또는 단백질 수준에서).16. A method or use of the invention is provided, wherein the tumor is cancer; Preferably, the cancer has elevated levels of CLDN18.2 (eg at the nucleic acid or protein level).

17. 본 발명의 방법이 제공되며, 여기서 방법은 환자에게 하나 이상의 요법, 예를 들어, 치료 양식 및/또는 추가 치료제를 투여하는 단계를 추가로 포함하고; 바람직하게는, 상기 치료 양식은 외과적 치료 및/또는 방사선 요법을 포함하고, 상기 추가 치료제는 화학요법제, 사이토카인, 세포독성제, 추가 항체, 소분자 약물 및 면역조절제로부터 선택된다.17. A method of the present invention is provided, wherein the method further comprises administering to the patient one or more therapies, eg, a treatment modality and/or an additional therapeutic agent; Preferably, said treatment modality comprises surgical treatment and/or radiation therapy, and said additional therapeutic agent is selected from chemotherapeutic agents, cytokines, cytotoxic agents, additional antibodies, small molecule drugs and immunomodulatory agents.

18. 본 발명의 용도가 제공되며, 여기서 약물 또는 약제학적 조합이 하나 이상의 요법, 예를 들어, 치료 양식 및/또는 추가 치료제와 조합하여 대상체에게 투여될 수 있고; 바람직하게는, 상기 치료 양식은 외과적 치료 및/또는 방사선 요법을 포함하고, 상기 추가 치료제는 화학요법제, 사이토카인, 세포독성제, 추가 항체, 소분자 약물 및 면역조절제로부터 선택된다.18. A use of the present invention is provided wherein a drug or pharmaceutical combination may be administered to a subject in combination with one or more therapies, eg, treatment modalities and/or additional therapeutic agents; Preferably, said treatment modality comprises surgical treatment and/or radiation therapy, and said additional therapeutic agent is selected from chemotherapeutic agents, cytokines, cytotoxic agents, additional antibodies, small molecule drugs and immunomodulatory agents.

19. 샘플에서 CLDN18.2를 검출하기 위한 방법이 제공되며, 상기 방법은 다음을 포함한다.19. A method for detecting CLDN18.2 in a sample is provided, the method comprising:

(a) 샘플을 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 접촉시키는 단계; 및(a) contacting the sample with an antibody or antigen-binding fragment thereof of the invention; and

(b) 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 CLDN18.2에 의해 형성된 복합체를 검출하는 단계를 포함하고, 여기서, 선택적으로 항체는 검출가능하게 표지된다.(b) detecting a complex formed by the antibody or antigen-binding fragment thereof and CLDN18.2, wherein optionally the antibody is detectably labeled.

도 1은 항-CLDN18.2 항체가 세포 표면 상의 CLDN18.2에 특이적으로 결합함을 보여준다.
도 2는 항-CLDN18.2 항체는 세포 표면의 CLDN18.1에 결합하지 않음을 보여준다.
도 3은 CHO-hCLDN18.2에 대한 항-CLDN18.2 항체의 리포터 유전자 기반 ADCC 활성을 보여준다.
도 4는 CHO-hCLDN18.2에 대한 인간화 항-CLDN18.2 항체의 리포터 유전자 기반 ADCC 활성을 보여준다.
도 5는 위암 세포주 NUGC-4, 위암 세포주 KATO III-hCLDN18.2 및 췌장암 세포주 DAN-G-hCLDN18.2에 대한 항-CLDN18.2 항체의 결합을 보여준다.
도 6은 항-CLDN18.2 항체에 대한 CDC 활성 분석을 보여준다.
도 7은 항-CLDN18.2 항체에 대한 ADCC 활성 분석을 보여준다.
도 8은 췌장암의 마우스 모델에서 항-CLDN18.2 항체의 항종양 효과를 보여준다.
도 9는 위암의 마우스 모델에서 항-CLDN18.2 항체의 항종양 효과를 보여준다.1 shows that anti-CLDN18.2 antibodies specifically bind to CLDN18.2 on the cell surface.
2 shows that anti-CLDN18.2 antibodies do not bind to CLDN18.1 on the cell surface.
Figure 3 shows the reporter gene-based ADCC activity of anti-CLDN18.2 antibodies against CHO-hCLDN18.2.
Figure 4 shows the reporter gene-based ADCC activity of humanized anti-CLDN18.2 antibodies against CHO-hCLDN18.2.
Figure 5 shows the binding of anti-CLDN18.2 antibodies to gastric cancer cell line NUGC-4, gastric cancer cell line KATO III-hCLDN18.2 and pancreatic cancer cell line DAN-G-hCLDN18.2.
Figure 6 shows the CDC activity assay for anti-CLDN18.2 antibodies.
Figure 7 shows the ADCC activity assay for anti-CLDN18.2 antibodies.
8 shows the anti-tumor effect of anti-CLDN18.2 antibody in a mouse model of pancreatic cancer.
9 shows the anti-tumor effect of anti-CLDN18.2 antibody in a mouse model of gastric cancer.

I. 정의I. Definition

본 발명을 상세히 기술하기에 앞서, 본 발명은 본 출원에 기술된 특정 방법, 프로토콜 및 시약에 한정되지 않으며, 이는 달라질 수 있음을 이해해야 한다. 또한, 본 명세서에서 사용되는 용어는 단지 특정 실시양태를 기술하기 위한 것이며 본 발명의 범위를 한정하지 않는다. 첨부된 청구항만이 본 발명의 범위를 제한할 것이다. 달리 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 모든 기술적 및 과학적 용어는 당업자가 통상적으로 이해하는 것과 동일한 의미를 가진다.Prior to describing the present invention in detail, it should be understood that the present invention is not limited to the specific methods, protocols and reagents described herein, as these may vary. Also, the terminology used herein is only for describing specific embodiments and does not limit the scope of the present invention. Only the appended claims will limit the scope of the present invention. Unless defined otherwise, all technical and scientific terms used herein have the same meaning as commonly understood by one of ordinary skill in the art.

본 명세서를 설명하기 위해 용어를 다음과 같이 정의한다. 단수형은 복수형을 포함할 수 있으며, 이의 반대도 마찬가지이다. 본 명세서에서 사용되는 용어는 특정 실시양태를 설명하기 위한 것이며, 본 발명의 범위를 제한하기 위한 것이 아니다.To describe this specification, terms are defined as follows. The singular can include the plural and vice versa. The terminology used herein is for describing specific embodiments and is not intended to limit the scope of the present invention.

수치와 조합하여 사용되는 용어 "약"은 명시된 수치 미만의 하한 5% 내지 명시된 수치 초과의 상한 5% 범위의 수치를 포함하는 것으로 의도된다.The term "about" when used in combination with a numerical value is intended to include a numerical value ranging from a lower limit of 5% below the specified value to an upper limit of 5% above the specified value.

본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "및/또는"은 옵션 중 임의의 하나 또는 옵션 중 임의의 두 개 이상을 지칭한다.As used herein, the term “and/or” refers to any one of the options or any two or more of the options.

본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "포함한다(comprise/include)"는 기재된 요소, 정수 또는 단계를 포함하되, 그 외의 다른 모든 요소, 정수 또는 단계를 배제하지 않음을 의미하는 것으로 의도된다. 본 명세서에서 사용되는 용어 "포함하다(comprise/include)"는, 달리 정의하지 않는 한 기재된 요소, 정수 또는 단계가 전체를 구성되는 상황 또한 망라한다. 예를 들어, 특정 서열을 "포함하는(comprising)" 항체 가변 영역이라고 언급할 경우, 특정 서열로 구성된 항체 가변 영역도 망라하는 것으로 의도된다.As used herein, the term "comprise/include" is intended to mean including the recited elements, integers or steps, but not excluding all other elements, integers or steps. As used herein, the term "comprise/include" also encompasses situations in which a recited element, integer or step constitutes the whole, unless otherwise defined. For example, when referring to an antibody variable region "comprising" a specific sequence, it is intended to also encompass the antibody variable region consisting of the specific sequence.

본 명세서에서 사용되는 용어 "클라우딘(CLAUDIN)" 또는 "CLDN"은 세포 간의 밀착접합 구조를 결정하는 가장 중요한 골격 단백질로서, 유착접합부에 관여하며, 종양세포의 전이 및 침윤에 중요한 역할을 한다. 클라우딘 단백질은 포유동물 상피 및 내피 세포, 주로 상피 세포의 측면 표면 및 기저 세포의 원형질막에 널리 존재한다. 서로 다른 클라우딘 단백질은 서로 다른 조직에서 각각의 특정 발현을 가지며, 여기서 클라우딘18(CLDN18) 유전자는 3q22.3에 위치하고, 분자량이 24kDa이고, 261개의 아미노산 잔기를 포함하고, 클라우딘 수퍼패밀리의 구성원이며, 이의 단백질 구조는 2개의 세포외 루프 및 4개의 막횡단 도메인을 포함한다. 인간 CLDN18 또는 클라우딘18 단백질의 두 하위 유형은 각각 클라우딘18.1 또는 CLDN18.1(UniProt ID: P56856-1)과 클라우딘18.2 또는 CLDN18.2(UniProt ID: P56856-2)이다. 두 단백질의 1차 구조 서열에서, N-말단 신호 펩티드에서 세포외 루프 1(Loop1) 구조까지의 일부 위치의 아미노산 잔기만 다르며, 특히 세포외 루프 1에서 CLDN18.1과 CLDN18.2는 8개 아미노산만 다르다. CLDN18 단백질의 두 하위 유형의 속간 서열 상동성도 매우 높다. CLDN18.2의 세포외 루프 1의 서열은 인간, 마우스 및 붉은털 원숭이와 같은 다른 종에서 완전히 동일하며, 반면 인간과 마우스 CLDN18.2 단백질의 상동성은 84%에 이르며, 이는 CLDN18.2 단백질의 서열이 극도로 보존되어 있음을 나타낸다(O. Tureci. 등, Gene, 481:83-92, 2011). CLDN18.2 또는 이의 임의의 변이체 및 아이소폼은 이들이 자연적으로 발현되는 세포 또는 조직으로부터 단리되거나 당업계에 널리 공지된 기술 및/또는 본 명세서에 기재된 기술을 사용하여 재조합적으로 생성될 수 있다. 한 실시양태에서, 본 명세서에 기재된 CLDN18.2는 인간 CLDN18.2이다.As used herein, the term "CLAUDIN" or "CLDN" is the most important scaffold protein that determines the tight junction structure between cells, is involved in adhesion junctions, and plays an important role in metastasis and invasion of tumor cells. Claudin proteins are widely present in mammalian epithelial and endothelial cells, mainly on the lateral surface of epithelial cells and in the plasma membrane of basal cells. Different claudin proteins have their respective specific expression in different tissues, wherein the claudin 18 (CLDN18) gene is located at 3q22.3, has a molecular weight of 24 kDa, contains 261 amino acid residues, and is a member of the claudin superfamily; Its protein structure includes two extracellular loops and four transmembrane domains. The two subtypes of the human CLDN18 or claudin18 protein are claudin18.1 or CLDN18.1 (UniProt ID: P56856-1) and claudin18.2 or CLDN18.2 (UniProt ID: P56856-2), respectively. In the primary structural sequences of the two proteins, only amino acid residues at some positions from the N-terminal signal peptide to the extracellular loop 1 (Loop1) structure differ, in particular, CLDN18.1 and CLDN18.2 in the extracellular loop 1 are 8 amino acids. only different The sequence homology between the two subtypes of the CLDN18 protein is also very high. The sequence of extracellular loop 1 of CLDN18.2 is completely identical in different species such as human, mouse and rhesus monkey, whereas the homology between human and mouse CLDN18.2 protein reaches 84%, which corresponds to the sequence of CLDN18.2 protein. is extremely conserved (O. Tureci. et al., Gene , 481:83-92, 2011). CLDN18.2 or any variants and isoforms thereof can be isolated from cells or tissues in which they are naturally expressed or can be produced recombinantly using techniques well known in the art and/or described herein. In one embodiment, CLDN18.2 described herein is human CLDN18.2.

본 명세서에 사용된 용어 "항-CLDN18.2 항체", "항-CLDN18.2", "CLDN18.2 항체" 또는 "CLDN18.2에 결합하는 항체"는 항체가 (인간) CLDN18.2를 표적으로 하는 치료제로서 사용될 수 있도록 충분한 친화성으로 (인간) CLDN18.2에 결합할 수 있는 항체를 지칭한다. 한 실시양태에서, (인간) CLDN18.2 항체는 체외 또는 체내에서 높은 친화성으로 (인간) CLDN18.2에 결합한다. 한 실시양태에서, (인간) CLDN18.2 항체는 CLDN18.1에 결합하지 않는다. 한 실시양태에서, (인간) CLDN18.2 항체는 CLDN18.2를 발현하는 세포에 결합하지만 CLDN18.1을 발현하는 세포에는 결합하지 않는다. 일부 실시양태에서, 결합은 예를 들어 방사선면역분석(RIA), 생물층 간섭계(BLI), MSD 분석, 표면 플라즈몬 공명(SPR) 또는 유세포분석에 의해 결정된다.As used herein, the term "anti-CLDN18.2 antibody", "anti-CLDN18.2", "CLDN18.2 antibody" or "an antibody that binds CLDN18.2" refers to an antibody that targets (human) CLDN18.2. refers to an antibody capable of binding (human) CLDN18.2 with sufficient affinity so that it can be used as a therapeutic agent. In one embodiment, the (human) CLDN18.2 antibody binds to (human) CLDN18.2 with high affinity either in vitro or in vivo. In one embodiment, the (human) CLDN18.2 antibody does not bind CLDN18.1. In one embodiment, the (human) CLDN18.2 antibody binds cells expressing CLDN18.2 but not cells expressing CLDN18.1. In some embodiments, binding is determined by, for example, radioimmunoassay (RIA), biolayer interferometry (BLI), MSD analysis, surface plasmon resonance (SPR), or flow cytometry.

용어 "항체 단편"은 온전한 항체의 일부를 포함한다. 바람직한 실시양태에서, 항체 단편은 항원 결합 단편이다.The term “antibody fragment” includes parts of intact antibodies. In a preferred embodiment, the antibody fragment is an antigen-binding fragment.

"항원 결합 단편"은 온전한 항체와 상이한 분자를 지칭하고, 이는 온전한 항체의 일부를 포함하고 온전한 항체가 결합하는 항원에 결합한다. 항체 단편의 예로는 Fv, Fab, Fab', Fab'-SH, F(ab')2, 도메인 항체(dAb), 선형 항체, 단쇄 항체(예를 들어, scFv), 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH), 2가 항체 또는 이의 단편, 또는 낙타류 항체를 포함하나 이에 한정되지는 않는다."Antigen-binding fragment" refers to a molecule different from an intact antibody, which comprises a portion of an intact antibody and binds the antigen to which the intact antibody binds. Examples of antibody fragments include Fv, Fab, Fab', Fab'-SH, F(ab') 2 , domain antibodies (dAb), linear antibodies, single chain antibodies (eg scFv), single domain antibodies (eg scFv) , VHH), bivalent antibodies or fragments thereof, or camelid antibodies.

용어 "항원"은 면역 반응을 유도하는 분자를 지칭한다. 이러한 면역 반응은 특정 면역 세포의 항체 생성 또는 활성화, 또는 이 둘을 모두 포함한다. 당업자는 본질적으로 모든 단백질 및 펩티드를 포함하는 임의의 매크로 분자를 항원으로서 사용할 수 있음을 이해할 것이다. 또한, 항원은 재조합 또는 게놈 DNA에서 유도할 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 용어 "에피토프"는 항체 분자와 특이적으로 상호작용하는 항원(예를 들어, CLDN18.2)의 모이어티를 지칭한다.The term "antigen" refers to a molecule that induces an immune response. These immune responses include antibody production or activation of specific immune cells, or both. One skilled in the art will understand that any macromolecule, including essentially all proteins and peptides, can be used as an antigen. Antigens can also be derived from recombinant or genomic DNA. As used herein, the term “epitope” refers to a moiety of an antigen (eg, CLDN18.2) that specifically interacts with an antibody molecule.

기준 항체로서 "동일하거나 중복되는 에피토프에 결합하는 항체"는 경쟁 분석에서 기준 항체의 항원에 대한 결합의 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 또는 95% 이상을 차단하는 항체를 지칭한다. 역으로, 기준 항체는 경쟁 분석에서 항체와 이의 항원의 결합의 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 또는 95% 이상을 차단한다.An "antibody that binds to the same or overlapping epitope" as a reference antibody refers to an antibody that blocks at least 50%, 60%, 70%, 80%, 90% or 95% of the binding of the reference antibody to its antigen in a competition assay. do. Conversely, the reference antibody blocks at least 50%, 60%, 70%, 80%, 90% or 95% of the binding of the antibody to its antigen in a competition assay.

항원 결합에서 기준 항체와 경합하는 항체란, 경합 분석에서 기준 항체와 항원 결합의 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 또는 95% 이상을 차단하는 항체를 지칭한다. 역으로, 기준 항체는 경쟁 분석에서 항체와 이의 항원의 결합의 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 또는 95% 이상을 차단한다. 항체가 다른 항체와 경쟁하는지 여부를 결정하기 위해 다양한 유형의 경쟁적 결합 분석, 예컨대 직접 또는 간접 고상 방사면역분석(RIA), 직접 또는 간접 고상 효소 면역분석(EIA) 및 샌드위치 경쟁 분석이 사용될 수 있다.An antibody that competes with a reference antibody for antigen binding refers to an antibody that blocks at least 50%, 60%, 70%, 80%, 90% or 95% of the antigen binding of the reference antibody in a competition assay. Conversely, the reference antibody blocks at least 50%, 60%, 70%, 80%, 90% or 95% of the binding of the antibody to its antigen in a competition assay. Various types of competitive binding assays can be used to determine whether an antibody competes with another antibody, such as direct or indirect solid phase radioimmunoassay (RIA), direct or indirect solid phase enzyme immunoassay (EIA), and sandwich competition assay.

기준 항체와 이의 항원의 결합을 억제(예를 들어, 경합적 억제)하는 항체는 기준 항체와 이의 항원의 결합의 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 또는 95% 이상을 억제하는 항체를 지칭한다. 역으로, 기준 항체는 항체와 이의 항원의 결합의 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 또는 95% 이상을 억제한다. 항체와 이의 항원의 결합은 친화성(예를 들어, 평형 해리상수)에 의해 측정할 수 있다. 친화성 측정법은 당업계에 공지되어 있다.An antibody that inhibits (e.g., competitively inhibits) the binding of a reference antibody to its antigen is one that inhibits at least 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, or 95% of the binding of the reference antibody to its antigen. refers to antibodies. Conversely, the reference antibody inhibits at least 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, or 95% of the binding of the antibody to its antigen. Binding of an antibody to its antigen can be measured by affinity (eg equilibrium dissociation constant). Affinity assays are known in the art.

기준 항체와 동일하거나 유사한 결합 친화성 및/또는 특이성을 나타내는 항체는 기준 항체의 결합 친화성 또는 특이성의 적어도 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 또는 95% 이상을 가질 수 있는 항체를 지칭한다. 이는 당업계에서 공지된 결합 친화성 및/또는 특이성 측정법 중 임의의 방법으로 측정할 수 있다.An antibody that exhibits the same or similar binding affinity and/or specificity as the reference antibody may have at least 50%, 60%, 70%, 80%, 90% or 95% or more of the binding affinity or specificity of the reference antibody. refers to This can be measured by any of the methods for measuring binding affinity and/or specificity known in the art.

"상보성 결정 영역(complementarity determining region)" 또는 "CDR 영역" 또는 "CDR"은 항체 가변 영역 내의 서열에서 가변성이 매우 높은 부분으로서, 구조적으로 정의된 루프("초가변 루프"; hypervariable loop)를 형성하고/향성하거나 항원 접촉 잔기("항원 접촉부위"; antigen contact site)를 포함한다. CDR은 주로 항원 에피토프에 대한 결합을 담당한다. 중쇄 및 경쇄의 CDR은 일반적으로 CDR1, CDR2, CDR3으로 지칭하고, N-말단으로부터 순차적으로 넘버링된다. 항체의 중쇄 가변 도메인에 위치한 CDR은 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3으로 지칭하고, 반면에 항체의 경쇄 가변 도메인에 위치한 CDR은 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3으로 지칭한다. 주어진 경쇄 가변 영역 및 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열에서 각 CDR의 정확한 아미노산 서열의 경계는, 예를 들어, 항체의 3차원 구조와 CDR 고리의 배치에 기초한 Chothia(Chothia 등 (1989) Nature 342: 877-883; Al-Lazikani et al., "Standard conformations for the canonical structures of immunoglobulins", Journal of Molecular Biology, 273, 927-948 (1997)), 항체 서열 가변성에 기초한 Kabat(Kabat 등, Sequences of Proteins of Immunological Interest, 제4판, U.S. Department of Health and Human Services, National Institutes of Health (1987)), AbM(University of Bath), Contact(University College London), International ImMunoGeneTics database(IMGT) (World Wide Web에 있는 imgt.cines.fr/), 다수의 결정 구조를 사용하는 친화성 전파 클러스터링에 기초한 North CDR definition을 포함하는 공지된 항체 CDR 할당 시스템(CDR assignment system) 중 하나 또는 이들의 조합을 사용하여 결정할 수 있다.A "complementarity determining region" or "CDR region" or "CDR" is a highly variable portion of a sequence within an antibody variable region, forming a structurally defined loop ("hypervariable loop"). and/or contain antigen contact residues (“antigen contact sites”). CDRs are primarily responsible for binding to antigenic epitopes. The CDRs of the heavy and light chains are generally referred to as CDR1, CDR2, CDR3 and are numbered sequentially from the N-terminus. The CDRs located in the heavy chain variable domain of an antibody are referred to as HCDR1, HCDR2 and HCDR3, while the CDRs located in the light chain variable domain of an antibody are referred to as LCDR1, LCDR2 and LCDR3. The boundaries of the precise amino acid sequence of each CDR in a given amino acid sequence of the light chain variable region and heavy chain variable region can be determined, for example, by Chothia (Chothia et al. (1989) Nature 342: 877- 883; Al-Lazikani et al., "Standard conformations for the canonical structures of immunoglobulins", Journal of Molecular Biology , 273, 927-948 (1997)), Kabat based on antibody sequence variability (Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest , 4th edition, US Department of Health and Human Services, National Institutes of Health (1987)), University of Bath (AbM), Contact (University College London), International ImMunoGeneTics database (IMGT) (imgt on the World Wide Web) .cines.fr/), a North CDR definition based on affinity propagation clustering using multiple crystal structures, or a combination of known antibody CDR assignment systems.

예를 들어, 서로 다른 CDR 측정 방식에 따르면, 각 CDR의 잔기는 다음과 같다.For example, according to different CDR measurement methods, the residues of each CDR are as follows.

Figure pct00001
Figure pct00001

CDR은 또한 기준 CDR 서열(예를 들어, 본 발명의 예시적인 CDR 중 임의의 것)과 Kabat 넘버링 위치가 동일한지의 여부에 기초하여 결정할 수 있다.CDRs can also be determined based on whether the Kabat numbering positions are identical to a reference CDR sequence (eg, any of the exemplary CDRs of the present invention).

달리 명시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 용어 "CDR" 또는 "CDR 서열"은 위에 기재된 임의의 방식에 의해 결정된 CDR 서열을 망라한다.Unless otherwise specified, the term "CDR" or "CDR sequence" as used herein encompasses a CDR sequence determined by any of the methods described above.

달리 명시되지 않는 한, 항체 가변 영역(중쇄 가변 영역 잔기 및 경쇄 가변 영역 잔기를 포함)의 잔기 위치는 Kabat 넘버링 시스템에 따라 넘버링된다(Kabat 등, Sequences of Proteins of Immunological Interest, 제5판, Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1991)).Unless otherwise specified, residue positions in antibody variable regions (including heavy chain variable region residues and light chain variable region residues) are numbered according to the Kabat numbering system (Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest , Fifth Edition, Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1991)).

한 실시양태에서, 본 발명의 항체의 중쇄 가변 영역 CDR은 하기 규칙에 따라 결정된다.In one embodiment, the heavy chain variable region CDRs of an antibody of the invention are determined according to the following rules.

VH CDR1은 AbM 규칙에 따라 결정되고 VH CDR 2 및 3은 모두 Kabat 규칙에 따라 결정된다.VH CDR1 is determined according to the AbM rule and VH CDRs 2 and 3 are both determined according to the Kabat rule.

한 실시양태에서, 본 발명의 항체의 경쇄 가변 영역 CDR은 Kabat 규칙에 따라 결정된다.In one embodiment, the light chain variable region CDRs of an antibody of the invention are determined according to the Kabat rule.

한 실시양태에서, 본 발명의 항체의 중쇄 가변 영역 CDR은 하기 규칙에 따라 결정된다: VH CDR1은 AbM 규칙에 따라 결정되고, VH CDR 2 및 3은 모두 Kabat 규칙에 따라 결정되고; 경쇄 가변 영역 CDR은 Kabat 규칙에 따라 결정된다.In one embodiment, the heavy chain variable region CDRs of an antibody of the invention are determined according to the following rules: VH CDR1 is determined according to AbM rules, VH CDRs 2 and 3 are both determined according to Kabat rules; Light chain variable region CDRs are determined according to the Kabat rule.

상이한 할당 시스템에 의해 결정된 항체의 가변 영역의 CDR 경계도 상이할 수 있다는 것을 주의해야 한다. 다시 말해, 상이한 할당 시스템에 의해 정의한 동일한 항체의 가변 영역의 CDR 서열은 상이하다. 따라서, 본 발명에서 정의된 특정 CDR 서열을 갖는 항체를 정의할 때, 항체의 범위는 또한 가변 영역 서열이 특이적 CDR 서열을 포함하지만 적용된 상이한 방식(예: 상이한 할당 시스템 규칙 또는 이들의 조합)으로 인해 본 발명에 의해 정의된 특이적 CDR 경계와 상이한 청구된 CDR 경계를 갖는 항체를 망라한다.It should be noted that the CDR boundaries of the variable regions of antibodies determined by different assignment systems may also be different. In other words, the CDR sequences of the variable regions of the same antibody defined by different assignment systems are different. Thus, when defining antibodies having specific CDR sequences as defined herein, a range of antibodies is also intended to include those whose variable region sequences include specific CDR sequences, but in different ways applied (e.g., different allocation system rules or combinations thereof). to encompass antibodies with claimed CDR boundaries that differ from the specific CDR boundaries defined by the present invention.

상이한 특이성(즉, 상이한 항원에 대한 상이한 결합 부위)을 갖는 항체는 (동일한 할당 시스템 하에서) 상이한 CDR을 갖는다. 그러나, CDR이 항체에 따라 다르지만, CDR 내 제한된 수의 아미노산의 위치만이 항원 결합과 직접 관련된다. 최소 중첩 영역은 Kabat, Chothia, AbM, Contact, 및 North 방법 중 적어도 2개를 사용하여 결정할 수 있으며, 이에 따라 항원 결합을 위한 "최소 결합 유닛"이 제공된다. 최소 결합 유닛은 CDR의 하위 부분일 수 있다. 당업자가 명백하게 이해할 바와 같이, 나머지 CDR 서열의 잔기는 항체의 구조 및 단백질 접힘에 의해 결정할 수 있다. 따라서, 본 명세서에 제시된 임의의 CDR 변이체 역시 고려 대상이다. 예를 들어, 한 CDR 변이체에서 최소 결합 유닛의 아미노산 잔기는 변하지 않지만, Kabat 또는 Chothia에 의해 정의한 나머지 CDR 잔기는 보존적으로 치환될 수 있다.Antibodies with different specificities (ie, different binding sites for different antigens) have different CDRs (under the same allocation system). However, while CDRs vary from antibody to antibody, only a limited number of amino acid positions within the CDRs are directly involved in antigen binding. The minimal overlapping region can be determined using at least two of the Kabat, Chothia, AbM, Contact, and North methods, thereby providing a “minimal binding unit” for antigen binding. A minimal binding unit may be a sub-portion of a CDR. As will be apparent to those skilled in the art, the residues of the remaining CDR sequences can be determined by the structure and protein folding of the antibody. Accordingly, any CDR variants presented herein are also contemplated. For example, in one CDR variant, the amino acid residue of the minimal binding unit is unchanged, but the remaining CDR residues defined by Kabat or Chothia may be conservatively substituted.

본 명세서에서 사용되는 용어 "Fc 영역"은 면역글로불린 중쇄의 CH2 및 CH3의 불변 영역을 정의하며, 천연 서열의 Fc 영역 및 변이체 Fc 영역을 포함한다. Fc 영역은 면역 세포 표면의 상이한 Fc 수용체에 결합하여 CDC\ADCC\ADCP 효과기 기능을 유발할 수 있다. 이러한 이펙터 기능은 일반적으로 Fc 영역이 결합 도메인(예를 들어, 항체 가변 도메인)과 연관되어야 하며, 본 명세서에 개시된 분석과 같은 다양한 분석을 사용하여 평가할 수 있다.As used herein, the term "Fc region" defines the CH2 and CH3 constant regions of an immunoglobulin heavy chain, and includes native sequence Fc regions and variant Fc regions. The Fc region can trigger CDC\ADCC\ADCP effector functions by binding to different Fc receptors on the surface of immune cells. Such effector functions generally require an Fc region to be associated with a binding domain (eg, an antibody variable domain) and can be assessed using a variety of assays, such as those described herein.

"IgG 형태의 항체"는 IgG 형태에 속하는 항체의 중쇄 불변 영역을 지칭한다. 동일한 유형의 항체의 중쇄 불변 영역은 동일하고, 상이한 유형의 항체의 중쇄 불변 영역은 상이하다. 예를 들어, IgG4 형태의 항체는 IgG4로부터 유래된 항체의 중쇄 불변 영역을 지칭하거나, 또는 IgG1 형태의 항체는 IgG1으로부터 유래된 항체의 중쇄 불변 영역을 지칭한다."IgG type antibody" refers to the heavy chain constant region of an antibody belonging to the IgG type. The heavy chain constant regions of antibodies of the same type are identical, and the heavy chain constant regions of antibodies of different types are different. For example, an antibody of the IgG4 type refers to the heavy chain constant region of an antibody derived from IgG4, or an antibody of the IgG1 type refers to the heavy chain constant region of an antibody derived from IgG1.

"인간화" 항체는 비인간 CDR로부터의 아미노산 잔기 및 인간 FR로부터의 아미노산 잔기를 포함하는 항체를 가리킨다. 일부 실시양태에서, 인간화 항체는 적어도 1개, 일반적으로 2개의 가변 도메인을 실질적으로 전부 포함하며, CDR 전부, 또는 실질적으로 전부가 비인간 항체의 CDR에 상응하고, FR 전부 또는 실질적으로 전부가 인간 항체의 FR에 지칭한다. 인간화 항체는 인간 항체로부터 유래된 항체 불변 영역의 적어도 일부를 선택적으로 포함할 수 있다. 항체(예컨대, 비인간 항체)의 "인간화 형태"는 이미 인간화된 항체를 지칭한다.A “humanized” antibody refers to an antibody comprising amino acid residues from non-human CDRs and amino acid residues from human FRs. In some embodiments, a humanized antibody comprises substantially all of at least one, and usually two, variable domains, all or substantially all of the CDRs correspond to those of a non-human antibody, and all or substantially all of the FRs are those of a human antibody. refers to the FR of A humanized antibody may optionally comprise at least a portion of an antibody constant region derived from a human antibody. A “humanized form” of an antibody (eg, a non-human antibody) refers to an antibody that has already been humanized.

"인간 항체", "완전 인간 항체" 및 "완전 인간화 항체"는 서로 교환하여 사용될 수 있고, 인간 또는 인간 세포에 의해 생성되거나 인간 항체 라이브러리 또는 다른 인간 항체 인코딩 서열을 이용하는 비인간 공급원으로부터 유래된 항체의 아미노산 서열에 상응하는 아미노산 서열을 갖는 항체를 지칭한다. 인간 항체의 해당 정의에 따라 비인간 항원 결합 잔기를 포함하는 인간화 항체는 명시적으로 배제된다.“Human antibody,” “fully human antibody,” and “fully humanized antibody” may be used interchangeably, and may be used interchangeably and refer to antibodies produced by humans or human cells, or derived from non-human sources that utilize human antibody libraries or other human antibody encoding sequences. Refers to an antibody having an amino acid sequence that corresponds to an amino acid sequence. Humanized antibodies comprising non-human antigen-binding moieties are expressly excluded according to that definition of a human antibody.

본 명세서에 사용된 바와 같이, "결합" 또는 "특이적 결합"은 결합 효과가 항체에 대해서 선택적이고 원하지 않거나 특이적이지 않은 상호작용과 구별할 수 있음을 의미한다. 특정한 항원에 결합하는 항원 결합 부위의 능력은 효소결합면역흡착검사(ELISA) 또는 당업계에서 공지된 일반적 결합 분석, 예컨대, 방사선면역분석(RIA), 생물층 간섭계, MSD 분석 또는 표면 플라즈몬 공명(SPR)에 의해 결정될 수 있다.As used herein, "binding" or "specific binding" means that the effect of binding is selective for the antibody and distinguishable from unwanted or non-specific interactions. The ability of an antigen-binding site to bind to a particular antigen can be assessed by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) or general binding assays known in the art, such as radioimmunoassay (RIA), biolayer interferometry, MSD assay, or surface plasmon resonance (SPR). ) can be determined by

"면역접합체"는 세포독성제 또는 표지를 포함하되 이에 한정되지 않는 그 외 물질 하나 이상에 접합한 항체이다.An “immunoconjugate” is an antibody conjugated to one or more other substances including, but not limited to, a cytotoxic agent or label.

본 명세서에 사용된 용어 "치료제"는 화학요법제, 사이토카인, 세포독성제, 추가 항체, 소분자 약물 또는 면역억제제(예를 들어, 면역억제적 제제)를 포함하는 종양, 예를 들어 암을 예방 또는 치료하는 데 효과적인 임의의 물질을 포함한다.As used herein, the term "therapeutic agent" includes chemotherapeutic agents, cytokines, cytotoxic agents, additional antibodies, small molecule drugs, or immunosuppressive agents (eg, immunosuppressive agents) to prevent tumors, e.g., cancer. or any substance effective to treat.

본 명세서에서 사용되는 용어 "세포독성제"는 세포의 기능을 억제 또는 예방하고/거나 세포 사멸 또는 파괴를 야기하는 물질을 지칭한다.As used herein, the term “cytotoxic agent” refers to a substance that inhibits or prevents the function of cells and/or causes cell death or destruction.

"화학요법제"는 면역계 질환의 치료에 유용한 화합물을 포함한다.A "chemotherapeutic agent" includes compounds useful for the treatment of diseases of the immune system.

용어 "소분자 약물"은 생물학적 과정을 조절할 수 있는 저분자량 유기화합물을 지칭한다. "소분자"는 분자량이 10kD 미만, 일반적으로 2kD 미만, 바람직하게는 1kD 미만인 분자로 정의한다. 소분자는 무기분자, 유기분자, 무기성분을 포함하는 유기분자, 방사성 원자를 포함하는 분자, 합성 분자, 펩티드 모방체 및 항체 모방체를 포함하되 이에 한정되지는 않는다. 치료제로서, 대분자에 비해 소분자는 세포에 보다 잘 침투하고 분해에 덜 민감하며 면역 반응을 유도할 가능성이 더 낮다.The term "small molecule drug" refers to a low molecular weight organic compound capable of modulating a biological process. A "small molecule" is defined as a molecule having a molecular weight of less than 10 kD, usually less than 2 kD, preferably less than 1 kD. Small molecules include, but are not limited to, inorganic molecules, organic molecules, organic molecules containing inorganic components, molecules containing radioactive atoms, synthetic molecules, peptidomimetics and antibody mimics. As therapeutics, compared to large molecules, small molecules penetrate cells better, are less susceptible to degradation, and are less likely to elicit an immune response.

본 명세서에서 사용되는 용어 "면역조절제"는 면역 반응을 억제 또는 조절하는 천연 또는 합성 활성제 또는 약물을 지칭한다. 면역 반응은 체액 반응 또는 세포 반응일 수 있다. 면역조절제는 면역억제제를 포함한다.As used herein, the term "immunomodulator" refers to a natural or synthetic active agent or drug that suppresses or modulates the immune response. An immune response may be a humoral response or a cellular response. Immunomodulators include immunosuppressive agents.

본 명세서에서 사용되는 용어 "면역억제제", "면역억제약물" 또는 "면역억제물질"은 면역계의 활동을 억제 또는 예방하기 위해 면역억제요법에서 사용하는 치료제를 지칭한다.As used herein, the term "immunosuppressive agent", "immunosuppressant drug" or "immunosuppressive substance" refers to a therapeutic agent used in immunosuppressive therapy to suppress or prevent the activity of the immune system.

용어 "유효량"은 단일 또는 다중 용량으로 환자에게 투여된 후 치료 또는 예방을 필요로 하는 환자에서 예상되는 효과를 생성하는 본 발명의 항체, 단편, 접합체, 조성물 또는 조합의 양 또는 용량을 지칭한다.The term "effective amount" refers to that amount or dose of an antibody, fragment, conjugate, composition or combination of the invention that, after being administered to a patient in single or multiple doses, produces the expected effect in a patient in need of treatment or prophylaxis.

"치료학적으로 유효량"은 원하는 기간 동안 필요한 투여량으로 원하는 치료 결과를 달성하기에 효과적인 용량을 지칭한다. 치료학적으로 유효량은 또한 항체 또는 항체 단편, 또는 이의 접합체 또는 조성물 또는 조합물의 독성 또는 원하지 않은 효과가 유익한 치료 효과보다 못하는 양을 말한다. "치료학적으로 유효량"은 측정가능한 파라미터(예를 들어, 종양 부피)를 치료되지 않은 대상체에 비해 바람직하게는 적어도 약 20%, 보다 바람직하게는 적어도 약 40%, 보다 더 바람직하게는 적어도 약 50%, 60% 또는 70%를 억제한다."Therapeutically effective amount" refers to a dose effective to achieve the desired therapeutic result at the required dosage for a desired period of time. A therapeutically effective amount also refers to an amount in which toxic or undesirable effects of the antibody or antibody fragment, or conjugate or composition or combination thereof, outweigh the beneficial therapeutic effects. A "therapeutically effective amount" is preferably at least about 20%, more preferably at least about 40%, even more preferably at least about 50% of a measurable parameter (eg, tumor volume) relative to an untreated subject. %, 60% or 70% inhibition.

"예방학적으로 유효량"은 원하는 기간 동안 필요한 투여량으로 원하는 예방 효과를 달성하기에 효과적인 용량을 지칭한다. 일반적으로 예방학적인 양은 질환의 이전 또는 초기 단계에 대상체에게 투여되기 때문에, 예방학적으로 유효량은 치료학적으로 유효량보다 적을 것이다."Prophylactically effective amount" refers to a dose effective to achieve the desired prophylactic effect at the required dosage for a desired period of time. Because prophylactic amounts are generally administered to a subject prior to or at an early stage of disease, a prophylactically effective amount will be less than a therapeutically effective amount.

본 명세서에서 사용되는 용어 "숙주 세포", "숙주 세포주" 및 "숙주 세포 배양물"은 서로 교환하여 사용될 수 있으며, 외인성 핵산이 도입된 세포를 지칭하며 이러한 세포의 후대를 포함한다. 숙주 세포는 "형질전환체" 및 "형질전환 세포"를 포함하며, 이는 계대 횟수와 상관없이 1차 형질전환 세포 및 이로부터 유래한 후대를 포함한다. 자손은 핵산 함량이 모세포와 완전히 동일하지 않을 수 있으며, 돌연변이를 포함할 수 있다. 본 명세서는 최초로 형질전환한 세포로부터 선별 또는 선택한 것과 동일한 기능 또는 생물학적 활성을 가지는 돌연변이 후대를 포함한다.As used herein, the terms "host cell", "host cell line" and "host cell culture" may be used interchangeably and refer to a cell into which an exogenous nucleic acid has been introduced and includes progeny of such a cell. Host cells include “transformants” and “transformed cells,” which include primary transformed cells and progeny derived therefrom, regardless of the number of passages. The progeny may not be completely identical in nucleic acid content to the parent cell and may contain mutations. The present specification includes mutant progeny that have the same function or biological activity as those screened or selected from the originally transformed cell.

본 명세서에서 사용되는 용어 "표지"는 폴리뉴클레오티드 프로브 또는 항체와 같은 작용제에 직접 또는 간접적으로 접합 또는 축합되어 접합 또는 축합된 작용제의 검출을 용이하게 하는 화합물 또는 조성물을 지칭한다. 표지 자체가 검출할 수 있거나(예를 들어, 방사성 동위원소 표지 또는 형광 표지), 효소 표지의 경우 검출 가능한 기질 화합물 또는 조성물의 화학적 변화를 촉진할 수 있다. 상기 용어는 검출 가능한 물질을 프로브 또는 항체에 결합(즉 물리적 연결)시킴으로써 프로브 또는 항체를 직접 표지하는 것과, 직접 표지된 다른 시약과 반응시킴으로써 프로브 또는 항체를 간접적으로 표지하는 것을 망라한다.As used herein, the term "label" refers to a compound or composition that is directly or indirectly conjugated or condensed to an agent, such as a polynucleotide probe or antibody, to facilitate detection of the conjugated or condensed agent. The label itself may be detectable (eg, radioisotope labels or fluorescent labels) or, in the case of an enzymatic label, may catalyze a chemical change in a substrate compound or composition that is detectable. The term encompasses direct labeling of a probe or antibody by binding (i.e. physical linkage) of a detectable substance to the probe or antibody, and indirect labeling of a probe or antibody by reacting with another directly labeled reagent.

"개체" 또는 "대상체"는 포유류를 포함한다. 포유류는 가축(예를 들어, 소, 염소, 고양이, 개, 말), 영장류(예를 들어, 인간과 원숭이와 같은 인간 이외의 영장류), 토끼류 및 설치류(예를 들어, 마우스, 래트)를 포함하되 이에 제한되지는 않는다. 일부 실시양태에서, 개체 또는 대상체는 인간이다.“Individual” or “subject” includes mammals. Mammals include livestock (eg cows, goats, cats, dogs, horses), primates (eg humans and non-human primates such as monkeys), rabbits and rodents (eg mice, rats). Including, but not limited to. In some embodiments, the individual or subject is a human.

"단리"된 항체는 해당 항체의 천연 환경의 성분으로부터 분리된 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 예를 들어 전기영동(예를 들어, SDS-PAGE, 등전 집속(IEF) 및 모세관 전기영동) 또는 크로마토그래피(예를 들어, 이온 교환 또는 역상 HPLC)에 의해 결정된 바와 같이, 95% 또는 99% 초과의 순도로 정제된다.An “isolated” antibody is an antibody that has been separated from a component of its natural environment. In some embodiments, an antibody is determined by, for example, electrophoresis (eg, SDS-PAGE, isoelectric focusing (IEF), and capillary electrophoresis) or chromatography (eg, ion exchange or reverse phase HPLC). , purified to greater than 95% or 99% purity.

"항-CLDN18.2 항체 또는 이의 단편을 인코딩하는 단리된 핵산"은 단일 벡터 또는 개별 벡터 내의 핵산 분자, 및 숙주 세포 내의 하나 이상의 위치에 존재하는 핵산 분자를 포함하는 항체 중쇄 또는 경쇄(또는 이의 단편, 예를 들어, 중쇄 가변 영역 또는 경쇄 가변 영역)를 인코딩하는 하나 이상의 상기 핵산 분자를 지칭한다."Isolated nucleic acid encoding an anti-CLDN18.2 antibody or fragment thereof" refers to an antibody heavy or light chain (or fragment thereof) comprising a nucleic acid molecule in a single vector or in separate vectors, and the nucleic acid molecule present at one or more locations in a host cell. , eg, a heavy chain variable region or a light chain variable region).

서열 간 서열 동일성에 대한 계산은 하기와 같이 수행된다.Calculations for sequence identity between sequences are performed as follows.

2개의 아미노산 서열 또는 2개의 핵산 서열의 동일성 백분율을 결정하기 위해, 최적의 비교를 목적으로 해당 서열을 정렬한다(예를 들어, 최적의 정렬을 위해 갭을 제1 및 제2 아미노산 서열 또는 핵산 서열 중 하나 또는 양자 모두에 도입하거나, 비상동성 서열을 비교 시 폐기할 수 있음). 한 바람직한 실시양태에서, 비교를 목적으로, 정렬한 기준 서열의 길이는 기준 서열 길이의 적어도 30%, 바람직하게는 적어도 40%, 보다 바람직하게는 적어도 50% 또는 60%, 보다 더 바람직하게는 적어도 70%, 80%, 90% 또는 100%이다. 이어서 상응하는 아미노산 위치 또는 뉴클레오티드 위치에서의 아미노산 잔기 또는 뉴클레오티드를 비교한다. 제1 서열 내의 위치가 제2 서열 내의 상응하는 위치에 있는 동일한 아미노산 잔기 또는 뉴클레오티드에 점유될 경우, 해당 위치에 있는 분자는 동일하다.To determine the percent identity of two amino acid sequences or two nucleic acid sequences, the sequences are aligned for the purpose of optimal comparison (e.g., gaps are placed between first and second amino acid sequences or nucleic acid sequences for optimal alignment). can be introduced into one or both of them, or discarded when comparing non-homologous sequences). In a preferred embodiment, for comparison purposes, the length of the aligned reference sequence is at least 30%, preferably at least 40%, more preferably at least 50% or 60%, even more preferably at least, of the length of the reference sequence. 70%, 80%, 90% or 100%. The amino acid residues or nucleotides at corresponding amino acid positions or nucleotide positions are then compared. When a position in the first sequence is occupied by the same amino acid residue or nucleotide as the corresponding position in the second sequence, the molecules at that position are identical.

수학 알고리즘을 사용하여 두 서열을 비교하고 서열 간의 동일성 백분율을 계산할 수 있다. 한 바람직한 실시양태에서, 2개의 아미노산 서열 간의 동일성 백분율은 Blossom 62 매트릭스 또는 PAM250 매트릭스 및 16, 14, 12, 10, 8, 6 또는 4의 갭 가중치 및 1, 2, 3, 4, 5 또는 6의 길이 가중치를 사용하여 GCG 소프트웨어 패키지의 GAP 프로그램에 통합된 Needlema and Wunsch 알고리즘((1970) J. Mol. Biol., 48:444-453; http://www.gcg.com에서 사용 가능)으로 결정된다. 또 다른 바람직한 실시양태에서, 2개의 뉴클레오티드산 서열 간의 동일성 백분율은 NWSgapdna.CMP 매트릭스 및 40, 50, 60, 70 또는 80의 갭 가중치 및 1, 2, 3, 4, 5 또는 6의 길이 가중치를 사용하여 GCG 소프트웨어 패키지의 GAP 프로그램(http://www.gcg.com에서 사용 가능)으로 결정한다. 특히 바람직한 매개변수 세트(및 달리 명시되지 않는 한, 사용해야 하는 매개변수 세트)는 갭 페널티 12, 갭 연장 페널티 4, 프레임시프트 갭 페널티 5를 가지는 Blossom 62 스코어링 매트릭스이다. 또한, 2개의 아미노산 서열 또는 뉴클레오티드 서열 간의 동일성 백분율은 ALIGN 프로그램(버전 2.0)에 통합된 E. Meyers 및 W. Miller 알고리즘((1989) CABIOS, 4:11-17)을 사용하여 PAM120 가중잉여표, 갭 길이 페널티 12, 갭 페널티 4로 결정한다. 추가적으로 또는 대안적으로, 본 명세서에 기재된 핵산 서열 및 단백질 서열은 예를 들어 다른 패밀리 구성원 서열 또는 관련 서열을 확인하기 위해 공개 데이터베이스에서 검색할 수 있도록 "질의 서열"로서 추가로 사용할 수 있다.A mathematical algorithm can be used to compare two sequences and calculate the percent identity between sequences. In a preferred embodiment, the percent identity between two amino acid sequences is the Blossom 62 matrix or the PAM250 matrix and a gap weight of 16, 14, 12, 10, 8, 6 or 4 and a gap weight of 1, 2, 3, 4, 5 or 6 Determined by the Needlema and Wunsch algorithm ((1970) J. Mol. Biol ., 48:444-453; available at http://www.gcg.com) incorporated in the GAP program in the GCG software package using length weights. do. In another preferred embodiment, the percent identity between two nucleotide sequences is determined using the NWSgapdna.CMP matrix and gap weights of 40, 50, 60, 70 or 80 and length weights of 1, 2, 3, 4, 5 or 6 and determined by the GAP program in the GCG software package (available at http://www.gcg.com). A particularly preferred set of parameters (and one that should be used unless otherwise specified) is the Blossom 62 scoring matrix with a gap penalty of 12, a gap extension penalty of 4, and a frameshift gap penalty of 5. In addition, the percent identity between two amino acid sequences or nucleotide sequences can be calculated using the E. Meyers and W. Miller algorithm ((1989) CABIOS, 4:11-17) incorporated in the ALIGN program (version 2.0) to calculate the PAM120 weighted redundancy table, It is decided with a gap length penalty of 12 and a gap penalty of 4. Additionally or alternatively, the nucleic acid sequences and protein sequences described herein may further be used as "query sequences" to be searched in public databases, for example to identify other family member sequences or related sequences.

본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "엄격도 조건(예컨대 낮은 엄격도, 중간 엄격도, 높은 엄격도 또는 극도의 엄격도) 하에서의 혼성화"는 혼성화 및 세척 조건을 설명한다. 혼성화 반응을 수행하기 위한 지시 사항은 본 명세서에 참조로 포함된 Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, N.Y. (1989), 6.3.1-6.3.6에서 발견할 수 있다. 인용문헌은 수성 및 비수성 방법을 기재하고 있으며, 기타 방법을 사용할 수도 있다. 본 명세서에 언급된 바람직한 혼성화 조건은 하기와 같다: 1) 낮은 엄격성 혼성화 조건은 약 45°C의 6X 염화나트륨/시트르산나트륨(SSC)에 있고, 이어서 적어도 50°C의 0.2X SSC, 0.1% SDS에서 2회 세척하고(낮은 엄격성 조건의 경우, 세척 온도는 55°C로 증가될 수 있음); 2) 중간 엄격성 혼성화 조건은 약 45°C의 6X SSC에 있고, 이어서 약 60°C의 0.2X SSC, 0.1% SDS에서 1회 이상 세척하고; 3) 높은 엄격성 혼성화 조건은 약 45°C의 6X SSC에 있고, 이어서 65°C의 0.2X SSC, 0.1% SDS에서 1회 이상 세척되며; 바람직하게는 4) 극히 엄격성 혼성화 조건은 65°C의 0.5M 인산나트륨, 7% SDS에 있고, 이어서 65°C의 0.2X SSC, 0.1% SDS에서 1회 이상의 세척한다. 극히 엄격한 조건 (4)는 바람직한 조건이며, 달리 명시되지 않는 한 사용되어야 하는 조건이다.As used herein, the term “hybridization under stringency conditions (eg, low stringency, moderate stringency, high stringency, or extreme stringency)” describes hybridization and wash conditions. Instructions for performing hybridization reactions can be found in Current Protocols in Molecular Biology , John Wiley & Sons, NY (1989), 6.3.1-6.3.6, incorporated herein by reference. The references describe aqueous and non-aqueous methods, but other methods may be used. Preferred hybridization conditions mentioned herein are as follows: 1) Low stringency hybridization conditions are in 6X sodium chloride/sodium citrate (SSC) at about 45°C, followed by 0.2X SSC, 0.1% SDS at at least 50°C. twice at (for low stringency conditions, the wash temperature can be increased to 55 °C); 2) medium stringency hybridization conditions are in 6X SSC at about 45 °C, followed by one or more washes in 0.2X SSC, 0.1% SDS at about 60 °C; 3) high stringency hybridization conditions are in 6X SSC at about 45 °C, followed by one or more washes in 0.2X SSC, 0.1% SDS at 65 °C; Preferably 4) extremely stringent hybridization conditions are in 0.5M sodium phosphate, 7% SDS at 65°C, followed by one or more washes in 0.2X SSC, 0.1% SDS at 65°C. Extremely stringent condition (4) is the preferred condition and is the condition that should be used unless otherwise specified.

"항종양 효과"는 다양한 수단으로 입증할 수 있는 생물학적 효과를 지칭하며, 예를 들어 종양 부피 감소, 종양 세포 수 감소, 종양 세포 증식 감소 또는 종양 세포 생존력 감소를 포함하되 이에 한정되지는 않는다."Anti-tumor effect" refers to a biological effect that can be demonstrated by various means, including, but not limited to, reduction in tumor volume, reduction in tumor cell number, reduction in tumor cell proliferation, or reduction in tumor cell viability.

용어 "종양" 및 "암"은 서로 교환해서 사용할 수 있으며 고체 및 액체의 종양을 망라한다.The terms “tumor” and “cancer” are used interchangeably and encompass both solid and liquid tumors.

용어 "암" 및 "암성"은 전형적으로 비조절 세포 성장을 특징으로 하는 포유동물에서의 생리학적 질환을 지칭 또는 기재한다. 어떤 실시양태에서는, 본 발명의 항체를 사용한 치료에 적합한 암은 이러한 암의 전이성 형태를 포함하는 위암 또는 췌장암을 포함한다.The terms "cancer" and "cancerous" refer to or describe a physiological disease in mammals that is typically characterized by unregulated cell growth. In certain embodiments, cancers suitable for treatment with an antibody of the invention include gastric or pancreatic cancer, including metastatic forms of such cancers.

용어 "종양"은 악성 또는 양성 여부에 상관없이 모든 신생물 세포 성장 및 증식, 모든 전암성 및 암성 세포 및 조직을 지칭한다. 본 명세서에서 언급될 때 용어 "암", "암성" 및 "종양"을 상호배타적으로 사용하지 않는다.The term "tumor" refers to all neoplastic cell growth and proliferation, whether malignant or benign, and all precancerous and cancerous cells and tissues. When referred to herein, the terms "cancer", "cancerous" and "tumor" are not used mutually exclusive.

용어 "약제학적 보충물질"은 활성 물질과 함께 투여하는 희석제, 보조제(예를 들어, 프로인트 보조제(완전 및 불완전)), 부형제, 담체, 안정제 등을 지칭한다.The term "pharmaceutical supplement" refers to diluents, adjuvants (eg, Freund's adjuvants (complete and incomplete)), excipients, carriers, stabilizers, and the like, administered with the active substance.

본 명세서에서 사용되는 용어 "약제학적 조성물"은 안에 함유한 활성 성분의 생물 활성이 효과적으로 발휘되게 하는 형태로 존재하고, 조성물이 투여되는 대상체에 허용되지 않는 독성을 가지는 추가 성분을 함유하지 않는 조성물을 지칭한다.As used herein, the term "pharmaceutical composition" refers to a composition that is present in a form in which the biological activity of the active ingredient contained therein is effectively exhibited, and which does not contain additional ingredients having unacceptable toxicity to the subject to which the composition is administered. refers to

용어 "약제학적 조합"은 키트 및 약제학적 조성물을 포함하나 이에 제한되지 않는 비고정 조합 생성물 또는 고정 조합 생성물을 지칭한다. 용어 "비고정 조합"은 활성 성분이(예를 들어, (i) 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 단편, 및 (ii) 추가 치료제) 환자에게 동시에 또는 순차적으로(특정 시간 제한 없이 또는 동일하거나 상이한 시간 간격으로) 별도의 실체로서 투여되는 것을 의미하고, 여기서 이러한 투여는 환자에게 2종 이상의 예방적 또는 치료적 유효 활성제를 제공한다. 일부 실시양태에서, 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 단편 및 약제학적 조합에 사용되는 추가 치료제는 단독으로 사용될 때 이들의 수준을 초과하지 않는 수준으로 투여된다. 용어 "고정 조합"은 2종 이상의 활성제가 단일 실체의 형태로 환자에게 동시에 투여되는 것을 의미한다. 2종 이상의 활성제의 용량 및/또는 시간 간격은 바람직하게는 성분의 조합 사용이 어느 한 성분의 단독 사용에 의해 달성되는 것보다 더 큰 질환 또는 장애에 대한 치료 효과를 초래할 수 있도록 선택된다. 성분은 각각 별도의 제제 형태를 취할 수 있고 이러한 별도의 제제 형태는 동일하거나 상이할 수 있다.The term "pharmaceutical combination" refers to non-fixed combination products or fixed combination products, including but not limited to kits and pharmaceutical compositions. The term “non-fixed combination” means that the active ingredients (e.g., (i) an anti-CLDN18.2 antibody or fragment thereof, and (ii) an additional therapeutic agent) are administered to the patient simultaneously or sequentially (without a specific time limit or the same or different therapeutic agents). time interval) as separate entities, wherein such administration provides the two or more prophylactically or therapeutically effective active agents to the patient. In some embodiments, the anti-CLDN18.2 antibody or fragment thereof and the additional therapeutic agent used in the pharmaceutical combination are administered at levels that do not exceed their level when used alone. The term "fixed combination" means that two or more active agents are administered simultaneously to a patient in the form of a single entity. Doses and/or time intervals of the two or more active agents are preferably selected such that combined use of the components results in a greater therapeutic effect on the disease or disorder than would be achieved by either component alone. Each component may take the form of a separate formulation and these separate formulation forms may be the same or different.

본 명세서에서 사용되는 용어 "조합 요법"은 본 명세서에 기재된 바와 같은 질환을 치료하기 위해 2종 이상의 치료제 또는 치료 양식(예를 들어, 방사선 요법 또는 수술)의 투여/적용을 지칭한다. 이러한 투여는 이들 치료제를, 기본상 동시에 투여하는 방식, 예를 들어 고정 비율의 활성 성분을 함유하는 단회 캡슐의 형태로 같이 투여하는 것을 포함한다. 선택적으로, 이러한 투여는 여러 개 혹은 별개의 용기(예컨대, 정제, 캡슐, 분말 및 액체)에서의 활성 성분을 같이 투여하는 것을 포함한다. 분말 및/또는 액체는 투여 전에 재구성하거나 원하는 용량으로 희석될 수 있다. 또한 이러한 투여는 또한 대략 동일한 시간에 또는 상이한 시간에 순차적 방식으로 각 유형의 치료제를 사용하는 것을 포함한다. 모든 경우에 치료 요법은 본 명세서에 기재된 장애 또는 증상의 치료에 있어서 약제학적 조합의 유용한 효과를 제공할 것이다.The term "combination therapy" as used herein refers to the administration/application of two or more therapeutic agents or treatment modalities (eg, radiation therapy or surgery) to treat a disease as described herein. Such administration includes administering these therapeutic agents together in an essentially simultaneous manner, for example in the form of a single capsule containing a fixed proportion of the active ingredient. Optionally, such administration includes co-administration of the active ingredients in several or separate containers (eg, tablets, capsules, powders, and liquids). Powders and/or liquids may be reconstituted prior to administration or diluted to the desired dose. Such administration also includes using each type of therapeutic agent in a sequential fashion, either at approximately the same time or at different times. In all cases, the treatment regimen will provide beneficial effects of the pharmaceutical combination in the treatment of the disorders or conditions described herein.

본 명세서에서 사용된 바와 같이, "치료"(또는 "치료하다" 또는 "치료하는")는 기존의 증상, 장애, 병태 또는 질환의 진행 또는 중증도를 지연, 저해, 저지, 완화, 중단, 감소, 역전시키는 것을 지칭한다.As used herein, “treatment” (or “treat” or “treating”) refers to delaying, inhibiting, arresting, alleviating, stopping, reducing the progression or severity of an existing symptom, disorder, condition or disease; refers to reversal.

본 명세서에서 사용된 바와 같이, "예방"(또는 "예방하다" 또는 "예방하는")은 질환 또는 장애, 혹은 특정 질환 또는 장애의 증상의 발전 또는 진행을 억제하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 가족력에 암이 있는 대상체는 예방 요법의 후보자이다. 일반적으로 암의 경우, 용어 "예방"은 암의 징후 또는 증상 개시 전에, 특히 암의 위험이 있는 대상체에게 약물을 투여하는 것을 지칭한다.As used herein, “prevention” (or “prevent” or “preventing”) includes inhibiting the development or progression of a disease or disorder, or symptoms of a particular disease or disorder. In some embodiments, subjects with a family history of cancer are candidates for prophylactic therapy. In the case of cancer in general, the term "prevention" refers to administering a drug prior to the onset of signs or symptoms of cancer, particularly to a subject at risk of cancer.

본 명세서에서 사용되는 용어 "벡터"는 연결되어 있는 기타 핵산을 증식시킬 수 있는 핵산 분자를 지칭한다. 상기 용어는 자가 복제 핵산 구조로서 작용하는 벡터 및 숙주 세포에 도입되었을 때 상기 숙주 세포의 게놈에 결합하는 벡터를 포함한다. 일부 벡터는 조작 가능하게 연결된 핵산의 발현을 지시할 수 있다. 이러한 벡터는 본 명세서에서 "발현 벡터"로 칭한다.As used herein, the term “vector” refers to a nucleic acid molecule capable of propagating other nucleic acids to which it has been linked. The term includes vectors that act as self-replicating nucleic acid structures and vectors that, when introduced into a host cell, bind to the host cell's genome. Some vectors are capable of directing the expression of operably linked nucleic acids. Such vectors are referred to herein as "expression vectors".

"대상체/환자/개체 샘플"은 환자 또는 대상체로부터 얻은 세포 또는 유체를 지칭한다. 조직 또는 세포 샘플의 공급원은, 예를 들어 신선, 동결 및/또는 보존 장기 또는 조직 샘플 또는 생검 샘플 또는 천자 샘플로부터의 고체 조직; 혈액 또는 임의의 혈액 성분; 뇌척수액, 양수, 복막액, 또는 간질액과 같은 유체; 임신 또는 발달 기간 중 임의의 시점에서 대상체로부터 채취한 세포일 수 있다. 조직 샘플은 조직과 자연적으로 혼합되지 않는 화합물, 예컨대 보존제, 항응고제, 완충제, 고정제, 영양소 및 항생제를 포함할 수 있다.“Subject/patient/subject sample” refers to cells or fluid obtained from a patient or subject. The source of the tissue or cell sample may be solid tissue, for example from a fresh, frozen and/or preserved organ or tissue sample or biopsy sample or puncture sample; blood or any blood component; fluids such as cerebrospinal fluid, amniotic fluid, peritoneal fluid, or interstitial fluid; Cells may be harvested from a subject at any time during pregnancy or development. Tissue samples may contain compounds that do not naturally mix with tissue, such as preservatives, anticoagulants, buffers, fixatives, nutrients and antibiotics.

II. 항체II. antibody

일부 실시양태에서, 본 발명의 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 CLDN18.2(예를 들어, 인간 CLDN18.2)에 높은 친화성으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 항-CLDN18.2 항체는 CLDN18.2(예를 들어, 인간 CLDN18.2)에 특이적으로 결합하지만, CLDN18.1(예를 들어, 인간 CLDN18.1)에는 결합하지 않는다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 공지된 CLDN18.2 항체, 예를 들어 졸베툭시맙(Zmab으로 약칭됨) 항체보다 인간 CLDN18.2에 대해 더 높은 결합 친화성을 갖는다. 일부 실시양태에서, 항체의 친화성은 생물층 간섭계 또는 표면 플라즈몬 공명에 의해 결정된다.In some embodiments, an anti-CLDN18.2 antibody or antigen-binding fragment thereof of the invention binds CLDN18.2 (eg, human CLDN18.2) with high affinity. In some embodiments, an anti-CLDN18.2 antibody of the invention specifically binds to CLDN18.2 (eg, human CLDN18.2) but binds to CLDN18.1 (eg, human CLDN18.1). I never do that. In some embodiments, an antibody or antigen-binding fragment thereof of the invention has a higher binding affinity to human CLDN18.2 than a known CLDN18.2 antibody, such as the zolbetuximab (abbreviated Zmab) antibody. . In some embodiments, the affinity of an antibody is determined by biolayer interferometry or surface plasmon resonance.

일부 실시양태에서, 본 발명의 항-CLDN18.2 항체는 약 15nM 미만, 바람직하게는 약 10nM, 9.5nM, 9nM, 8.5nM, 8nM, 7.5nM, 7nM, 6.5nM, 6nM, 5.5nM, 5nM, 4.5nM, 4nM, 3.5nM 또는 3nM 이하의 평형 해리 상수(KD)로 인간 CLDN18.2에 결합하고, 일부 실시양태에서는, KD는 앞서 언급한 값(종점 포함) 사이에 있다.In some embodiments, an anti-CLDN18.2 antibody of the invention is less than about 15 nM, preferably about 10 nM, 9.5 nM, 9 nM, 8.5 nM, 8 nM, 7.5 nM, 7 nM, 6.5 nM, 6 nM, 5.5 nM, 5 nM, binds human CLDN18.2 with an equilibrium dissociation constant (K D ) of 4.5 nM, 4 nM, 3.5 nM or 3 nM or less, and in some embodiments, the K D is between the aforementioned values, inclusive of the endpoints.

일부 실시양태에서, 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 세포 표면 상의 CLDN18.2에 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 세포 표면 상의 CLDN18.1에 결합하지 않는다. 일부 실시양태에서, CLDN18.2는 세포 표면에서 발현되거나 과발현된다. 일부 실시양태에서, 세포는 CLDN18.2를 발현하는 CHO 세포 또는 293 세포, 예를 들어 CHO-S 세포 또는 HEK293 세포이다. 일부 실시양태에서, 세포는 CLDN18.2를 발현하는 암세포, 예를 들어 CLDN18.2를 자연적으로 발현하거나 CLDN18.2를 발현하도록 인공적으로 형질감염되거나 CLDN18.2의 증가된 발현 수준을 갖도록 인공적으로 형질감염된 세포, 예를 들어, CLDN18.2를 발현하는 위암 세포주 또는 췌장암 세포주, 예컨대 NUGC-4, KATO III 및 DAN-G 세포주, 예를 들어 CLDN18.2를 과발현하는 KATO III 및 DAN-G 세포주이다.In some embodiments, an antibody or antigen-binding fragment thereof of the invention binds CLDN18.2 on the cell surface. In some embodiments, an antibody or antigen-binding fragment thereof of the invention does not bind CLDN18.1 on the cell surface. In some embodiments, CLDN18.2 is expressed or overexpressed on the cell surface. In some embodiments, the cell is a CHO cell or 293 cell expressing CLDN18.2, eg a CHO-S cell or HEK293 cell. In some embodiments, the cell is a cancer cell that expresses CLDN18.2, e.g., naturally expresses CLDN18.2 or is artificially transfected to express CLDN18.2 or is artificially transfected to have an increased expression level of CLDN18.2. Infected cells, eg, gastric cancer cell lines expressing CLDN18.2 or pancreatic cancer cell lines, such as NUGC-4, KATO III and DAN-G cell lines, eg KATO III and DAN-G cell lines overexpressing CLDN18.2.

일부 실시양태에서, 결합은 유세포 분석법에 의해 결정된다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 항체는 약 15nM, 10nM, 9nM, 8nM, 7nM, 6nM 또는 5.5nM 이하의 EC50으로 CHO 세포 상에서 과발현된 CLDN18.2에 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 항체는 약 4nM, 3.7nM, 3.5nM, 3nM, 2.5nM, 2nM, 1.5nM, 1nM, 0.9nM, 0.8nM, 0.7nM 또는 0.6 이하의 EC50으로 CLDN18.2를 발현하는 암세포, 예를 들어, CLDN18.2를 발현하는 위암 세포주 또는 췌장암 세포주, 예컨대 NUGC-4, KATO III 및 DAN-G 세포주, 예를 들어 CLDN18.2를 과발현하는 KATO III 및 DAN-G 세포주에 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 항체는 공지된 항체, 예를 들어 Zmab의 CLDN18.2를 발현하는 세포와 결합하는 EC50와 비교할 만하거나 그보다 작은 EC50, 또는 공지된 항체 Zmab의 Ec50의 75%, 70%, 65%, 60%, 55%, 50%, 45%, 40%, 35%, 30%, 25%, 20% 또는 15% 미만을 갖는다.In some embodiments, binding is determined by flow cytometry. In some embodiments, an antibody of the invention binds CLDN18.2 overexpressed on CHO cells with an EC 50 of about 15 nM, 10 nM, 9 nM, 8 nM, 7 nM, 6 nM or 5.5 nM or less. In some embodiments, an antibody of the invention is about 4nM, 3.7nM, 3.5nM, 3nM, 2.5nM, 2nM, 1.5nM, 1nM, 0.9nM, 0.8nM, 0.7nM or CLDN18.2 with an EC 50 of 0.6 or less. Cancer cells expressing CLDN18.2, such as gastric cancer cell lines or pancreatic cancer cell lines, such as NUGC-4, KATO III and DAN-G cell lines, such as CLDN18.2 overexpressing KATO III and DAN-G cell lines combine In some embodiments, an antibody of the invention has an EC 50 comparable to or less than an EC 50 that binds to a cell expressing CLDN18.2 of a known antibody, eg, Zmab, or an EC 50 of 75 of the EC 50 of the known antibody Zmab. %, 70%, 65%, 60%, 55%, 50%, 45%, 40%, 35%, 30%, 25%, 20% or less than 15%.

일부 실시양태에서, 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 ADCC 활성 또는 CDC 활성, 예를 들어 공지된 항체(예를 들어, Zmab)의 것과 비교할 만하거나 이보다 더 높은 ADCC 활성 또는 CDC 활성을 갖는다.In some embodiments, an antibody or antigen-binding fragment thereof of the invention has ADCC activity or CDC activity, eg, ADCC activity or CDC activity that is comparable to or higher than that of known antibodies (eg, Zmab).

일부 실시양태에서, 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 종양 세포, 예를 들어 CLDN18.2를 발현하는 종양 세포를 억제할 수 있다.In some embodiments, an antibody or antigen-binding fragment thereof of the invention is capable of inhibiting a tumor cell, eg, a tumor cell expressing CLDN18.2.

일부 실시양태에서, 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 암을 치료하는 데 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 약 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65% 또는 70% 이상의 종양 성장 억제로 종양 성장을 효과적으로 억제할 수 있다.In some embodiments, antibodies or antigen-binding fragments thereof of the invention may be used to treat cancer. In some embodiments, an antibody or antigen-binding fragment thereof of the invention achieves at least about 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, or 70% tumor growth inhibition. It can effectively inhibit tumor growth.

일부 실시양태에서, 본 발명의 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 중쇄 가변 영역(HCDR): HCDR1, HCDR2 및 HCDR3으로부터의 3개의 상보성 결정 영역을 포함한다.In some embodiments, an anti-CLDN18.2 antibody or antigen-binding fragment thereof of the invention comprises three complementarity determining regions from a heavy chain variable region (HCDR): HCDR1, HCDR2 and HCDR3.

일부 실시양태에서, 본 발명의 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 경쇄 가변 영역(LCDR): LCDR1, LCDR2 및 LCDR3으로부터 3개의 상보성 결정 영역을 포함한다.In some embodiments, an anti-CLDN18.2 antibody or antigen-binding fragment thereof of the invention comprises three complementarity determining regions from a light chain variable region (LCDR): LCDR1, LCDR2 and LCDR3.

일부 실시양태에서, 본 발명의 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 중쇄 가변 영역(HCDR)으로부터의 3개의 상보성 결정 영역 및 경쇄 가변 영역(LCDR)으로부터의 3개의 상보성 결정 영역을 포함한다.In some embodiments, an anti-CLDN18.2 antibody or antigen-binding fragment thereof of the invention comprises three complementarity determining regions from a heavy chain variable region (HCDR) and three complementarity determining regions from a light chain variable region (LCDR). .

일부 측면에서, 본 발명의 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 중쇄 가변 영역(VH)을 포함한다. 일부 측면에서, 본 발명의 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 경쇄 가변 영역(VL)을 포함한다. 일부 측면에서, 본 발명의 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 중쇄 가변 영역(VH) 및/또는 경쇄 가변 영역(VL)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 중쇄 가변 영역은 중쇄 가변 영역으로부터의 3개의 상보성 결정 영역(CDR): HCDR1, HCDR2 및 HCDR3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 경쇄 가변 영역은 경쇄 가변 영역으로부터의 3개의 상보성 결정 영역(CDR): LCDR1, LCDR2 및 LCDR3을 포함한다.In some aspects, an anti-CLDN18.2 antibody or antigen-binding fragment thereof of the invention comprises a heavy chain variable region (VH). In some aspects, an anti-CLDN18.2 antibody or antigen-binding fragment thereof of the invention comprises a light chain variable region (VL). In some aspects, an anti-CLDN18.2 antibody or antigen-binding fragment thereof of the invention comprises a heavy chain variable region (VH) and/or a light chain variable region (VL). In some embodiments, a heavy chain variable region comprises three complementarity determining regions (CDRs) from a heavy chain variable region: HCDR1, HCDR2 and HCDR3. In some embodiments, a light chain variable region comprises three complementarity determining regions (CDRs) from a light chain variable region: LCDR1, LCDR2 and LCDR3.

일부 실시양태에서, 본 발명의 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 항체 중쇄 불변 영역 HC를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 항체 경쇄 불변 영역 LC를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 중쇄 불변 영역 HC 및 경쇄 불변 영역 LC를 추가로 포함한다.In some embodiments, an anti-CLDN18.2 antibody or antigen-binding fragment thereof of the invention further comprises an antibody heavy chain constant region HC. In some embodiments, an anti-CLDN18.2 antibody or antigen-binding fragment thereof of the invention further comprises an antibody light chain constant region LC. In some embodiments, an anti-CLDN18.2 antibody or antigen-binding fragment thereof of the invention further comprises a heavy chain constant region HC and a light chain constant region LC.

일부 실시양태에서, 본 발명의 중쇄 가변 영역은In some embodiments, a heavy chain variable region of the invention

(i) 서열 번호 4, 15, 21, 26, 27, 36, 37, 45, 48, 53, 56, 61, 66, 72, 73, 80 및 85로부터 선택된 아미노산 서열과 적어도 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성되고; 또는(i) at least 90%, 91% of an amino acid sequence selected from SEQ ID NOs: 4, 15, 21, 26, 27, 36, 37, 45, 48, 53, 56, 61, 66, 72, 73, 80 and 85; comprises or consists of an amino acid sequence having 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% or 99% identity; or

(ii) 서열 번호 4, 15, 21, 26, 27, 36, 37, 45, 48, 53, 56, 61, 66, 72, 73, 80 및 85로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성되고; 또는(ii) comprises or consists of an amino acid sequence selected from SEQ ID NOs: 4, 15, 21, 26, 27, 36, 37, 45, 48, 53, 56, 61, 66, 72, 73, 80 and 85; or

(iii) 서열 번호 4, 15, 21, 26, 27, 36, 37, 45, 48, 53, 56, 61, 66, 72, 73, 80 및 85로부터 선택된 아미노산 서열과 비교하여 하나 이상(바람직하게는 10개 이하, 보다 바람직하게는 5개, 4개, 3개, 2개 또는 1개 이하)의 아미노산 변화(바람직하게는 아미노산 치환, 보다 바람직하게는 아미노산 보존적 치환)를 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성되고, 여기서 바람직하게는, 상기 아미노산 변화는 CDR에서 발생하지 않는다.(iii) one or more compared to an amino acid sequence selected from SEQ ID NOs: 4, 15, 21, 26, 27, 36, 37, 45, 48, 53, 56, 61, 66, 72, 73, 80 and 85 (preferably comprises an amino acid sequence with no more than 10, more preferably no more than 5, 4, 3, 2 or 1 amino acid changes (preferably amino acid substitutions, more preferably amino acid conservative substitutions) or consists of, wherein preferably, said amino acid change does not occur in a CDR.

일부 실시양태에서, 본 발명의 경쇄 가변 영역은In some embodiments, a light chain variable region of the invention

(i) 서열 번호 9, 19, 22, 31, 32, 40, 41, 47, 49, 55, 57, 65, 68, 75, 76, 83 및 86으로부터 선택된 아미노산 서열과 적어도 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성되고; 또는(i) at least 90%, 91% of an amino acid sequence selected from SEQ ID NOs: 9, 19, 22, 31, 32, 40, 41, 47, 49, 55, 57, 65, 68, 75, 76, 83 and 86; comprises or consists of an amino acid sequence having 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% or 99% identity; or

(ii) 서열 번호 9, 19, 22, 31, 32, 40, 41, 47, 49, 55, 57, 65, 68, 75, 76, 83 및 86으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성되고; 또는(ii) comprises or consists of an amino acid sequence selected from SEQ ID NOs: 9, 19, 22, 31, 32, 40, 41, 47, 49, 55, 57, 65, 68, 75, 76, 83 and 86; or

(iii) 서열 번호 9, 19, 22, 31, 32, 40, 41, 47, 49, 55, 57, 65, 68, 75, 76, 83 및 86으로부터 선택된 아미노산 서열과 비교하여 하나 이상(바람직하게는 10 이하, 보다 바람직하게는 5, 4, 3, 2 또는 1 이하)의 아미노산 변화(바람직하게는 아미노산 치환, 보다 바람직하게는 아미노산 보존적 치환)를 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성되고, 여기서 바람직하게는, 상기 아미노산 변화는 CDR에서 발생하지 않는다.(iii) one or more compared to an amino acid sequence selected from SEQ ID NOs: 9, 19, 22, 31, 32, 40, 41, 47, 49, 55, 57, 65, 68, 75, 76, 83 and 86 (preferably comprises or consists of an amino acid sequence having no more than 10, more preferably no more than 5, 4, 3, 2 or 1 amino acid changes (preferably amino acid substitutions, more preferably amino acid conservative substitutions), wherein Preferably, said amino acid changes do not occur in CDRs.

일부 실시양태에서, 본 발명의 중쇄 가변 영역(HCDR)으로부터의 3개의 상보성 결정 영역 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3은In some embodiments, the three complementarity determining regions HCDR1, HCDR2 and HCDR3 from a heavy chain variable region (HCDR) of the invention are

(i) 서열 번호 4에 제시된 VH에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3,(i) the three complementarity determining regions HCDR1, HCDR2 and HCDR3 contained in the VH set forth in SEQ ID NO: 4,

(ii) 서열 번호 15 또는 21에 제시된 VH에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3,(ii) the three complementarity determining regions HCDR1, HCDR2 and HCDR3 contained in the VH set forth in SEQ ID NO: 15 or 21;

(iii) 서열 번호 26 또는 27에 제시된 VH에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3,(iii) the three complementarity determining regions HCDR1, HCDR2 and HCDR3 contained in the VH set forth in SEQ ID NO: 26 or 27;

(iv) 서열 번호 36 또는 37에 제시된 VH에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3,(iv) the three complementarity determining regions HCDR1, HCDR2 and HCDR3 contained in the VH set forth in SEQ ID NO: 36 or 37;

(v) 서열 번호 45 또는 48에 제시된 VH에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3,(v) the three complementarity determining regions HCDR1, HCDR2 and HCDR3 contained in the VH set forth in SEQ ID NO: 45 or 48;

(vi) 서열 번호 53 또는 56에 제시된 VH에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3,(vi) the three complementarity determining regions HCDR1, HCDR2 and HCDR3 contained in the VH set forth in SEQ ID NO: 53 or 56;

(vii) 서열 번호 61 또는 66에 제시된 VH에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3,(vii) the three complementarity determining regions HCDR1, HCDR2 and HCDR3 contained in the VH set forth in SEQ ID NO: 61 or 66;

(viii) 서열 번호 72 또는 73에 제시된 VH에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3,(viii) the three complementarity determining regions HCDR1, HCDR2 and HCDR3 contained in the VH set forth in SEQ ID NO: 72 or 73;

(ix) 서열 번호 80 또는 85에 제시된 VH에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및(ix) three complementarity determining regions HCDR1, HCDR2 and HCDR3 contained in the VH set forth in SEQ ID NO: 80 or 85, and

(x) (i)~(ix) 중 어느 하나의 서열에 비해, 3개의 HCDR에서 총계 적어도 1개, 아울러 5개, 4개, 3개, 2개 또는 1개 이하의 아미노산 변화(바람직하게는 아미노산 치환, 보다 바람직하게는 보존적 치환)를 포함하는 서열로부터 선택된다.(x) a total of at least 1, as well as no more than 5, 4, 3, 2 or 1 amino acid changes (preferably amino acid substitutions, more preferably conservative substitutions).

일부 실시양태에서, 본 발명의 경쇄 가변 영역(LCDR)으로부터의 3개의 상보성 결정 영역 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3은In some embodiments, the three complementarity determining regions LCDR1, LCDR2 and LCDR3 from a light chain variable region (LCDR) of the invention are

(i) 서열번호 9에 제시된 VL에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3,(i) the three complementarity determining regions LCDR1, LCDR2 and LCDR3 contained in the VL set forth in SEQ ID NO: 9;

(ii) 서열번호 19 또는 22에 제시된 VL에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3,(ii) the three complementarity determining regions LCDR1, LCDR2 and LCDR3 contained in the VL set forth in SEQ ID NO: 19 or 22;

(iii) 서열번호 31 또는 32에 제시된 VL에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3,(iii) the three complementarity determining regions LCDR1, LCDR2 and LCDR3 contained in the VL set forth in SEQ ID NO: 31 or 32;

(iv) 서열번호 40 또는 41에 제시된 VL에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3,(iv) the three complementarity determining regions LCDR1, LCDR2 and LCDR3 contained in the VL set forth in SEQ ID NO: 40 or 41;

(v) 서열번호 47 또는 49에 제시된 VL에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3,(v) the three complementarity determining regions LCDR1, LCDR2 and LCDR3 contained in the VL set forth in SEQ ID NO: 47 or 49;

(vi) 서열번호 55 또는 57에 제시된 VL에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3,(vi) the three complementarity determining regions LCDR1, LCDR2 and LCDR3 contained in the VL set forth in SEQ ID NO: 55 or 57;

(vii) 서열번호 65 또는 68에 제시된 VL에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3,(vii) the three complementarity determining regions LCDR1, LCDR2 and LCDR3 contained in the VL set forth in SEQ ID NO: 65 or 68;

(viii) 서열번호 75 또는 76에 제시된 VL에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3,(viii) the three complementarity determining regions LCDR1, LCDR2 and LCDR3 contained in the VL set forth in SEQ ID NO: 75 or 76;

(ix) 서열번호 83 또는 86에 제시된 VL에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3, 및(ix) the three complementarity determining regions LCDR1, LCDR2 and LCDR3 contained in the VL set forth in SEQ ID NO: 83 or 86, and

(x) (i)~(ix) 중 어느 하나의 서열에 비해, 3개의 LCDR에서 총계 적어도 1개, 아울러 5개, 4개, 3개, 2개 또는 1개 이하의 아미노산 변화(바람직하게는 아미노산 치환, 보다 바람직하게는 보존적 치환)를 포함하는 서열로부터 선택된다.(x) a total of at least 1, as well as no more than 5, 4, 3, 2 or 1 amino acid changes (preferably amino acid substitutions, more preferably conservative substitutions).

일부 실시양태에서, 서열번호 1, 12, 23, 33, 42, 50, 58, 69 또는 77에 제시된 아미노산 서열과 비교하여, HCDR1은 서열번호 1, 12, 23, 33, 42, 50, 58, 69 또는 77에 제시된 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성되고, 또는 HCDR1은 1개, 2개 또는 3개의 변화(바람직하게는 아미노산 치환, 보다 바람직하게는 보존적 치환)를 갖는 아미노산 서열을 포함한다.In some embodiments, compared to the amino acid sequence set forth in SEQ ID NOs: 1, 12, 23, 33, 42, 50, 58, 69 or 77, the HCDR1 is SEQ ID NOs: 1, 12, 23, 33, 42, 50, 58, 69 or 77, or HCDR1 comprises an amino acid sequence with 1, 2 or 3 changes (preferably amino acid substitutions, more preferably conservative substitutions).

일부 실시양태에서, 서열번호 2, 13, 20, 24, 34, 43, 51, 59, 70, 78, 84, 93 또는 94에 제시된 아미노산 서열과 비교하여, HCDR2는 서열번호 2, 13, 20, 24, 34, 43, 51, 59, 70, 78, 84, 93 또는 94에 제시된 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성되고, 또는 HCDR2는 1개, 2개 또는 3개의 변화(바람직하게는 아미노산 치환, 보다 바람직하게는 보존적 치환)를 갖는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서In some embodiments, compared to the amino acid sequence set forth in SEQ ID NOs: 2, 13, 20, 24, 34, 43, 51, 59, 70, 78, 84, 93 or 94, the HCDR2 is SEQ ID NOs: 2, 13, 20, 24, 34, 43, 51, 59, 70, 78, 84, 93 or 94 comprises or consists of the amino acid sequence set forth in 94, or the HCDR2 contains 1, 2 or 3 changes (preferably amino acid substitutions, preferably conservative substitutions), wherein

서열번호 93은 YIAPFXGDSRYNQKFKG이고, 여기서 X는 임의의 아미노산, 바람직하게는 N 또는 Q 또는 이의 보존적 아미노산 치환이고; 또는 서열번호 94는 VIWGDXSTNYHSVLIS이고, 여기서 X는 임의의 아미노산, 바람직하게는 G 또는 V 또는 이의 보존적 아미노산 치환이다.SEQ ID NO: 93 is YIAPFXGDSRYNQKFKG, where X is any amino acid, preferably N or Q or a conservative amino acid substitution thereof; or SEQ ID NO: 94 is VIWGDXSTNYHSVLIS, where X is any amino acid, preferably G or V or a conservative amino acid substitution thereof.

일부 실시양태에서, 서열번호 3. 14, 25, 35, 44, 52, 60, 71 또는 79에 제시된 아미노산 서열과 비교하여, HCDR3은 서열번호 3, 14, 25, 35, 44, 52, 60, 71 또는 79에 제시된 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성되고, 또는 HCDR3은 1개, 2개 또는 3개의 변화(바람직하게는 아미노산 치환, 보다 바람직하게는 보존적 치환)를 갖는 아미노산 서열을 포함한다.In some embodiments, compared to the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 3. 14, 25, 35, 44, 52, 60, 71 or 79, the HCDR3 is SEQ ID NO: 3, 14, 25, 35, 44, 52, 60, 71 or 79, or HCDR3 comprises an amino acid sequence with 1, 2 or 3 changes (preferably amino acid substitutions, more preferably conservative substitutions).

일부 실시양태에서, 서열번호 6, 16, 28, 38, 62, 67 또는 11에 제시된 아미노산 서열과 비교하여, LCDR1은 서열번호 6, 16, 28, 38, 62, 67 또는 11에 제시된 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성되고, 또는 LCDR1은 1개, 2개 또는 3개의 변화(바람직하게는 아미노산 치환, 보다 바람직하게는 보존적 치환)를 갖는 아미노산 서열을 포함하며;In some embodiments, compared to the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 6, 16, 28, 38, 62, 67, or 11, LCDR1 has an amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 6, 16, 28, 38, 62, 67, or 11. comprises, consists of, or LCDR1 comprises an amino acid sequence with 1, 2 or 3 changes (preferably amino acid substitutions, more preferably conservative substitutions);

여기서 서열번호 11은 KSSQSLLXGGNQKNYLT이고, 여기서 X는 임의의 아미노산, 바람직하게는 N 또는 Q 또는 이의 보존적 아미노산 치환이다.wherein SEQ ID NO: 11 is KSSQSLLXGGNQKNYLT, wherein X is any amino acid, preferably N or Q or a conservative amino acid substitution thereof.

일부 실시양태에서, 서열번호 7, 17, 29, 63 또는 81에 제시된 아미노산 서열과 비교하여, LCDR2는 서열번호 7, 17, 29, 63 또는 81에 제시된 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성되고, 또는 LCDR2는 1개, 2개 또는 3개의 변화(바람직하게는 아미노산 치환, 보다 바람직하게는 보존적 치환)를 갖는 아미노산 서열을 포함한다.In some embodiments, compared to the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 7, 17, 29, 63, or 81, the LCDR2 comprises or consists of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 7, 17, 29, 63, or 81, or LCDR2 comprises an amino acid sequence with 1, 2 or 3 changes (preferably amino acid substitutions, more preferably conservative substitutions).

일부 실시양태에서, 서열번호 8, 18, 30, 39, 46, 54, 64, 74 또는 82에 제시된 아미노산 서열과 비교하여, LCDR3은 서열번호 8, 18, 30, 39, 46, 54, 64, 74 또는 82에 제시된 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성되고, 또는 LCDR3은 1개, 2개 또는 3개의 변화(바람직하게는 아미노산 치환, 보다 바람직하게는 보존적 치환)를 갖는 아미노산 서열을 포함한다.In some embodiments, compared to the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 8, 18, 30, 39, 46, 54, 64, 74, or 82, the LCDR3 is SEQ ID NO: 8, 18, 30, 39, 46, 54, 64, 74 or 82, or LCDR3 comprises an amino acid sequence with one, two or three changes (preferably amino acid substitutions, more preferably conservative substitutions).

일부 실시양태에서, 본 발명의 항체 중쇄 불변 영역 HC는 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4의 중쇄 불변 영역, 바람직하게는 IgG1의 중쇄 불변 영역이다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 항체 경쇄 불변 영역 LC는 람다 또는 카파 경쇄 불변 영역, 바람직하게는 카파 경쇄 불변 영역이다.In some embodiments, an antibody heavy chain constant region HC of the invention is an IgG1, IgG2, IgG3 or IgG4 heavy chain constant region, preferably an IgG1 heavy chain constant region. In some embodiments, an antibody light chain constant region LC of the invention is a lambda or kappa light chain constant region, preferably a kappa light chain constant region.

일부 바람직한 실시양태에서, 본 발명의 항체 중쇄 불변 영역 HC는In some preferred embodiments, an antibody heavy chain constant region HC of the invention is

(i) 서열번호 5로부터 선택된 아미노산 서열과 적어도 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성되고;(i) an amino acid sequence having at least 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% or 99% identity to an amino acid sequence selected from SEQ ID NO: 5; comprises or consists of;

(ii) 서열번호 5로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성되고; 또는(ii) comprises or consists of an amino acid sequence selected from SEQ ID NO:5; or

(iii) 서열번호 5로 부터 선택된 아미노산 서열과 비교하여 1개 이상(바람직하게는 20개 또는 10개 이하, 보다 바람직하게는 5개, 4개, 3개, 2개 또는 1개 이하)의 아미노산 변화(바람직하게는 아미노산 치환, 보다 바람직하게는 보존적 치환)를 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된다.(iii) one or more (preferably no more than 20 or 10, more preferably no more than 5, 4, 3, 2 or 1) amino acids compared to the amino acid sequence selected from SEQ ID NO: 5 It comprises or consists of an amino acid sequence with changes (preferably amino acid substitutions, more preferably conservative substitutions).

일부 실시양태에서, 아미노산 변화는 Fc 영역에서 발생한다. 한 실시양태에서, Fc 영역의 아미노산 변화는 항체의 CDC 또는 ADCC 활성을 증가시킨다.In some embodiments, amino acid changes occur in an Fc region. In one embodiment, amino acid changes in the Fc region increase the CDC or ADCC activity of the antibody.

일부 실시양태에서, 본 발명의 항체 경쇄 불변 영역 LC는In some embodiments, an antibody light chain constant region LC of the invention is

(i) 서열번호 10으로부터 선택된 아미노산 서열과 적어도 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성되고;(i) an amino acid sequence having at least 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% or 99% identity to an amino acid sequence selected from SEQ ID NO: 10; comprises or consists of;

(ii) 서열번호 10으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성되고; 또는(ii) comprises or consists of an amino acid sequence selected from SEQ ID NO: 10; or

(iii) 서열번호 10으로 부터 선택된 아미노산 서열과 비교하여 1개 이상(바람직하게는 20개 또는 10개 이하, 보다 바람직하게는 5개, 4개, 3개, 2개 또는 1개 이하)의 아미노산 변화(바람직하게는 아미노산 치환, 보다 바람직하게는 보존적 치환)를 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된다.(iii) one or more (preferably no more than 20 or 10, more preferably no more than 5, 4, 3, 2 or 1) amino acids compared to the amino acid sequence selected from SEQ ID NO: 10 It comprises or consists of an amino acid sequence with changes (preferably amino acid substitutions, more preferably conservative substitutions).

본 발명의 일부 특정 실시양태에서, 본 발명의 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 하기를 포함한다.In some specific embodiments of the invention, an anti-CLDN18.2 antibody or antigen-binding fragment thereof of the invention comprises.

(i) 서열번호 4에 제시된 VH에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 9에 제시된 VL에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3; (i) the three complementarity determining regions HCDR1, HCDR2 and HCDR3 contained in the VH shown in SEQ ID NO: 4, and the three complementarity determining regions LCDR1, LCDR2 and LCDR3 contained in the VL shown in SEQ ID NO: 9;

(ii) 서열번호 15 또는 21에 제시된 VH에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 19 또는 22에 제시된 VL에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;(ii) the three complementarity determining regions HCDR1, HCDR2 and HCDR3 contained in the VH shown in SEQ ID NO: 15 or 21 and the three complementarity determining regions LCDR1, LCDR2 and LCDR3 contained in the VL shown in SEQ ID NO: 19 or 22;

(iii) 서열번호 26 또는 27에 제시된 VH에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 31 또는 32에 제시된 VL에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;(iii) three complementarity determining regions HCDR1, HCDR2 and HCDR3 contained in the VH shown in SEQ ID NO: 26 or 27, and the three complementarity determining regions LCDR1, LCDR2 and LCDR3 contained in the VL shown in SEQ ID NO: 31 or 32;

(iv) 서열번호 36 또는 37에 제시된 VH에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 40 또는 41에 제시된 VL에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;(iv) three complementarity determining regions HCDR1, HCDR2 and HCDR3 contained in the VH shown in SEQ ID NO: 36 or 37, and the three complementarity determining regions LCDR1, LCDR2 and LCDR3 contained in the VL shown in SEQ ID NO: 40 or 41;

(v) 서열번호 45 또는 48에 제시된 VH에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 47 또는 49에 제시된 VL에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;(v) the three complementarity determining regions HCDR1, HCDR2 and HCDR3 contained in the VH set forth in SEQ ID NO: 45 or 48 and the three complementarity determining regions LCDR1, LCDR2 and LCDR3 contained in the VL set forth in SEQ ID NO: 47 or 49;

(vi) 서열번호 53 또는 56에 제시된 VH에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 55 또는 57에 제시된 VL에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;(vi) the three complementarity determining regions HCDR1, HCDR2 and HCDR3 contained in the VH set forth in SEQ ID NO: 53 or 56 and the three complementarity determining regions LCDR1, LCDR2 and LCDR3 contained in the VL set forth in SEQ ID NO: 55 or 57;

(vii) 서열번호 61 또는 66에 제시된 VH에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 65 또는 68에 제시된 VL에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;(vii) three complementarity determining regions HCDR1, HCDR2 and HCDR3 contained in the VH set forth in SEQ ID NO: 61 or 66 and the three complementarity determining regions LCDR1, LCDR2 and LCDR3 contained in the VL set forth in SEQ ID NO: 65 or 68;

(viii) 서열번호 72 또는 73에 제시된 VH에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 75 또는 76에 제시된 VL에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;(viii) three complementarity determining regions HCDR1, HCDR2 and HCDR3 contained in the VH set forth in SEQ ID NO: 72 or 73 and the three complementarity determining regions LCDR1, LCDR2 and LCDR3 contained in the VL set forth in SEQ ID NO: 75 or 76;

(ix) 서열번호 80 또는 85에 제시된 VH에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 83 또는 86에 제시된 VL에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3.(ix) three complementarity determining regions HCDR1, HCDR2 and HCDR3 contained in the VH set forth in SEQ ID NO: 80 or 85, and the three complementarity determining regions LCDR1, LCDR2 and LCDR3 contained in the VL set forth in SEQ ID NO: 83 or 86.

본 발명의 일부 특정 실시양태에서, 본 발명의 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 하기를 포함한다.In some specific embodiments of the invention, an anti-CLDN18.2 antibody or antigen-binding fragment thereof of the invention comprises.

(i) 서열번호 1, 2 및 3 각각의 아미노산 서열에 제시된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 6, 7 및 8 각각의 아미노산 서열에 제시된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;(i) HCDR1, HCDR2 and HCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 1, 2 and 3, respectively, and LCDR1, LCDR2 and LCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 6, 7 and 8, respectively;

(ii) 서열번호 12, 13 및 14 각각의 아미노산 서열에 제시된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 16, 17 및 18 각각의 아미노산 서열에 제시된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;(ii) HCDR1, HCDR2 and HCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 12, 13 and 14, respectively, and LCDR1, LCDR2 and LCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 16, 17 and 18 respectively;

(iii) 서열번호 12, 20 및 14 각각의 아미노산 서열에 제시된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 16, 17 및 18 각각의 아미노산 서열에 제시된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;(iii) HCDR1, HCDR2 and HCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 12, 20 and 14, respectively, and LCDR1, LCDR2 and LCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 16, 17 and 18 respectively;

(iv) 서열번호 12, 93 및 14 각각의 아미노산 서열에 제시된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 16, 17 및 18 각각의 아미노산 서열에 제시된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;(iv) HCDR1, HCDR2 and HCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 12, 93 and 14, respectively, and LCDR1, LCDR2 and LCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 16, 17 and 18 respectively;

(v) 서열번호 23, 24 및 25 각각의 아미노산 서열에 제시된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 28, 29 및 30 각각의 아미노산 서열에 제시된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;(v) HCDR1, HCDR2 and HCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 23, 24 and 25, respectively, and LCDR1, LCDR2 and LCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 28, 29 and 30 respectively;

(vi) 서열번호 33, 34 및 35 각각의 아미노산 서열에 제시된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 38, 17 및 39 각각의 아미노산 서열에 제시된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;(vi) HCDR1, HCDR2 and HCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 33, 34 and 35, respectively, and LCDR1, LCDR2 and LCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 38, 17 and 39 respectively;

(vii) 서열번호 42, 43 및 44 각각의 아미노산 서열에 제시된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 38, 17 및 46 각각의 아미노산 서열에 제시된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;(vii) the HCDR1, HCDR2 and HCDR3 set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 42, 43 and 44, respectively, and the LCDR1, LCDR2 and LCDR3 set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 38, 17 and 46, respectively;

(viii) 서열번호 50, 51 및 52 각각의 아미노산 서열에 제시된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 28, 17 및 54 각각의 아미노산 서열에 제시된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;(viii) HCDR1, HCDR2 and HCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 50, 51 and 52, respectively, and LCDR1, LCDR2 and LCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 28, 17 and 54 respectively;

(ix) 서열번호 58, 59 및 60 각각의 아미노산 서열에 제시된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 62, 63 및 64 각각의 아미노산 서열에 제시된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;(ix) HCDR1, HCDR2 and HCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 58, 59 and 60, respectively, and LCDR1, LCDR2 and LCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 62, 63 and 64 respectively;

(x) 서열번호 58, 59 및 60 각각의 아미노산 서열에 제시된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 67, 63 및 64 각각의 아미노산 서열에 제시된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;(x) HCDR1, HCDR2 and HCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 58, 59 and 60, respectively, and LCDR1, LCDR2 and LCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 67, 63 and 64 respectively;

(xi) 서열번호 58, 59 및 60 각각의 아미노산 서열에 제시된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 11, 63 및 64 각각의 아미노산 서열에 제시된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;(xi) HCDR1, HCDR2 and HCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 58, 59 and 60, respectively, and LCDR1, LCDR2 and LCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 11, 63 and 64, respectively;

(xii) 서열번호 69, 70 및 71 각각의 아미노산 서열에 제시된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 38, 17 및 74 각각의 아미노산 서열에 제시된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;(xii) the HCDR1, HCDR2 and HCDR3 set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 69, 70 and 71, respectively, and the LCDR1, LCDR2 and LCDR3 set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 38, 17 and 74, respectively;

(xiii) 서열번호 77, 78 및 79 각각의 아미노산 서열에 제시된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 28, 81 및 82 각각의 아미노산 서열에 제시된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;(xiii) the HCDR1, HCDR2 and HCDR3 set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 77, 78 and 79, respectively, and the LCDR1, LCDR2 and LCDR3 set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 28, 81 and 82, respectively;

(xiv) 서열번호 77, 84 및 79 각각의 아미노산 서열에 제시된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 28, 81 및 82 각각의 아미노산 서열에 제시된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;(xiv) the HCDR1, HCDR2 and HCDR3 set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 77, 84 and 79, respectively, and the LCDR1, LCDR2 and LCDR3 set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 28, 81 and 82, respectively;

(xv) 서열번호 77, 94 및 79 각각의 아미노산 서열에 제시된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 28, 81 및 82 각각의 아미노산 서열에 제시된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3.(xv) HCDR1, HCDR2 and HCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 77, 94 and 79, respectively, and LCDR1, LCDR2 and LCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 28, 81 and 82, respectively.

본 발명의 일부 특정 실시양태에서, 본 발명의 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 하기를 포함한다.In some specific embodiments of the invention, an anti-CLDN18.2 antibody or antigen-binding fragment thereof of the invention comprises.

(i) 서열번호 4에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 9에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;(i) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 4, or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 9, or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL;

(ii) 서열번호 15 또는 21에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 19 또는 22에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL; (ii) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 15 or 21 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and an amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 19 or 22 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL comprising or consisting of;

(iii) 서열번호 15에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 19에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;(iii) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 15 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 19 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL;

(iv) 서열번호 21에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 22에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;(iv) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 21 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL;

(v) 서열번호 26 또는 27에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 31 또는 32에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;(v) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 26 or 27 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and an amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 31 or 32 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL comprising or consisting of;

(vi) 서열번호 26에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 31에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;(vi) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 26 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and a VL comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 31 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto;

(vii) 서열번호 27에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 32에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;(vii) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 27 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL;

(viii) 서열번호 36 또는 37에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 40 또는 41에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;(viii) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 36 or 37 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and an amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 40 or 41 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL comprising or consisting of;

(ix) 서열번호 36에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 40에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;(ix) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 36 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 40 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL;

(x) 서열번호 37에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 41에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;(x) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 37 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 41 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL;

(xi) 서열번호 45 또는 48에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 47 또는 49에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;(xi) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 45 or 48 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and an amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 47 or 49 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL comprising or consisting of;

(xii) 서열번호 45에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 47에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;(xii) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 45 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 47 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL;

(xiii) 서열번호 48에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 49에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;(xiii) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 48 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 49 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL;

(xiv) 서열번호 53 또는 56에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 55 또는 57에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;(xiv) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 53 or 56 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and an amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 55 or 57 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL comprising or consisting of;

(xv) 서열번호 53에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 55에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;(xv) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 53 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 55 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL;

(xvi) 서열번호 56에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 57에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;(xvi) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 56 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 57 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL;

(xvii) 서열번호 61 또는 66에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 65 또는 68에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;(xvii) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 61 or 66 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and an amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 65 or 68 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL comprising or consisting of;

(xviii) 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;(xviii) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 61 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 65 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL;

(xix) 서열번호 66에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 68에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;(xix) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 66 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 68 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL;

(xx) 서열번호 72 또는 73에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 75 또는 76에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;(xx) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 72 or 73 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and an amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 75 or 76 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto VL comprising or consisting of;

(xxi) 서열번호 72에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 75에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;(xxi) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 72 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and a VL comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 75 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto;

(xxii) 서열번호 73에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 76에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;(xxii) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 73 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 76 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL;

(xxiii) 서열번호 80 또는 85에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 83 또는 86에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;(xxiii) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 80 or 85 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and an amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 83 or 86 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto VL comprising or consisting of;

(xxiv) 서열번호 80에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 83에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;(xxiv) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 80 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 83 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL;

(xxv) 서열번호 85에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 86에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL.(xxv) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 85 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 86 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL.

본 발명의 한 실시양태에서, 본 명세서에 기재된 아미노산 변화는 아미노산 치환, 삽입 또는 결실을 포함한다. 바람직하게는, 본 명세서에 기재된 아미노산 변화는 아미노산 치환, 바람직하게는 보존적 치환이다.In one embodiment of the invention, amino acid changes described herein include amino acid substitutions, insertions or deletions. Preferably, the amino acid changes described herein are amino acid substitutions, preferably conservative substitutions.

바람직한 실시양태에서, 본 명세서에 기재된 아미노산 변화는 CDR 이외의 영역(예를 들어, FR)에서 발생한다. 보다 바람직하게는, 본 명세서에 기재된 아미노산 변화는 중쇄 가변 영역 이외의 영역 및/또는 경쇄 가변 영역 이외의 영역에서 발생한다. 일부 실시양태에서, 본 명세서에 기재된 아미노산 변화는 항체 중쇄 불변 영역의 Fc 영역에서 발생한다. 바람직한 실시양태에서, Fc 영역의 아미노산 변화는 항체의 ADCC 및/또는 CDC 효과를 증가시킨다.In a preferred embodiment, the amino acid changes described herein occur in regions other than CDRs (eg, FRs). More preferably, the amino acid changes described herein occur outside the heavy chain variable region and/or outside the light chain variable region. In some embodiments, the amino acid changes described herein occur in the Fc region of an antibody heavy chain constant region. In a preferred embodiment, amino acid changes in the Fc region increase the ADCC and/or CDC effects of the antibody.

일부 실시양태에서, 치환은 보존적 치환이다. 보존적 치환은 동일한 부류의 또 다른 아미노산으로 아미노산을 치환하는 것, 예를 들어, 또 다른 산성 아미노산으로 산성 아미노산을 치환하거나, 또 다른 염기성 아미노산으로 염기성 아미노산을 치환하거나, 혹은 또 다른 중성 아미노산으로 중성 아미노산을 치환하는 것을 지칭한다. 예시적인 치환은 하기의 표에 나타나 있다.In some embodiments, substitutions are conservative substitutions. A conservative substitution is the substitution of an amino acid with another amino acid of the same class, for example, an acidic amino acid with another acidic amino acid, a basic amino acid with another basic amino acid, or a neutral amino acid with another neutral amino acid. Refers to substitution of amino acids. Exemplary substitutions are shown in the table below.

Figure pct00002
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특정 실시양태에서, 치환은 항체의 CDR에서 발생한다. 일반적으로, 얻은 변이체는 모항체에 비하여 특정한 생물학적 특성(예를 들어, 친화성 증가)이 변형(예를 들어, 개선)되거나, 및/또는 모항체의 특정 생물학적 특성을 실질적으로 유지할 것이다. 예시적인 치환변이체는 친화성 성숙 항체이다.In certain embodiments, substitutions occur in the CDRs of an antibody. Generally, the resulting variant will alter (eg, improve) certain biological properties (eg, increase affinity) relative to the parent antibody, and/or will substantially retain certain biological properties of the parent antibody. An exemplary substitutional variant is an affinity matured antibody.

특정 실시양태에서, 본 명세서에 제공된 항체는 항체가 글리코실화되는 정도를 증가 또는 감소시키도록 변경된다. 아미노산 서열을 변경하여 하나 이상의 글리코실화 부위를 생성 또는 제거함으로써 항체의 글리코실화 부위에 대한 첨가 또는 결실를 편리하게 달성할 수 있다. 항체가 Fc 영역을 포함하는 경우, 이에 부착된 탄수화물도 변경될 수 있다. 일부 응용에서, 원하지 않는 글리코실화 부위를 제거하는 변형은 예를 들어 항체 의존성 세포 매개 세포독성(ADCC) 기능을 향상시키기 위해 푸코스 모티프를 제거하는 것과 같이 유용할 수 있다(Shield 등. (2002) JBC277:26733 참고). 다른 응용에서, 갈락토실화 변형으로 보체 의존성 세포독성(CDC)을 변형할 수 있다.In certain embodiments, an antibody provided herein is altered to increase or decrease the extent to which the antibody is glycosylated. Additions or deletions to glycosylation sites of an antibody may be conveniently accomplished by altering the amino acid sequence to create or remove one or more glycosylation sites. Where the antibody comprises an Fc region, the carbohydrate attached to it may also be altered. In some applications, modifications that remove unwanted glycosylation sites may be useful, for example to remove fucose motifs to enhance antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity (ADCC) function (Shield et al. (2002)). See JBC277:26733). In another application, galactosylation modification can modify complement dependent cytotoxicity (CDC).

특정 실시양태에서, 하나 이상의 아미노산 변형이 본 명세서에 제공된 항체의 Fc 영역 내로 도입될 수 있고, 이에 의해 항체의 하나 이상의 기능적 특성, 예컨대 혈청 반감기, 보체 고정, 보체 의존적 세포독성, Fc 수용체 결합 및/또는 항체 의존적 세포 매개 세포독성을 변경하기 위한 Fc 영역 변이체를 생성한다. Fc 영역 변이체는 하나 이상의 아미노산 위치에서 아미노산 변화(예를 들어, 치환)을 포함하는 인간 Fc 영역 서열(예컨대, 인간 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 Fc 영역)을 포함할 수 있다.In certain embodiments, one or more amino acid modifications may be introduced into the Fc region of an antibody provided herein, whereby one or more functional properties of the antibody, such as serum half-life, complement fixation, complement dependent cytotoxicity, Fc receptor binding and/or or creating Fc region variants to alter antibody dependent cell mediated cytotoxicity. An Fc region variant may comprise a human Fc region sequence (eg, a human IgG1, IgG2, IgG3 or IgG4 Fc region) comprising an amino acid change (eg substitution) at one or more amino acid positions.

본 발명의 한 실시양태에서, 항체의 ADCC 활성 또는 CDC 활성을 증가시키기 위해 변화는 본 명세서에 기재된 항체의 Fc 영역에 도입된다.In one embodiment of the invention, changes are introduced to the Fc region of an antibody described herein to increase the ADCC activity or CDC activity of the antibody.

특정 실시양태에서, 시스테인 조작으로 수식한 항체, 예컨대 "술포MAb"를 생성할 필요가 생길 수 있으며, 여기서 항체의 하나 이상의 잔기는 시스테인 잔기에 치환된다.In certain embodiments, it may be necessary to generate antibodies modified by cysteine engineering, such as “sulfoMAbs,” wherein one or more residues of the antibody are substituted for cysteine residues.

특정 실시양태에서, 본 명세서에 개시된 항체를 추가로 변형하여 당업계에서 이미 알려져 있고 용이하게 사용할 수 있는 그 외 비단백질 부분을 포함할 수 있다. 항체 유도체화에 적합한 부분은 수용성 중합체를 포함하되, 이에 한정되지는 않는다. 수용성 중합체의 비제한적 예로는 폴리에틸렌 글리콜(PEG), 에틸렌 글리콜/프로필렌 글리콜 공중합체, 카르복시메틸 셀룰로오스, 글루칸, 폴리비닐 알콜, 폴리비닐피롤리돈, 폴리-1,3-디옥산, 폴리-1,3,6-트리옥산, 에틸렌/말레산 무수물 공중합체, 폴리아미노산(호모중합체 또는 랜덤 공중합체), 및 글루칸 또는 폴리(n-비닐피롤리돈) 폴리에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜 단독중합체, 폴리프로필렌 옥사이드/에틸렌 옥사이드 공중합체, 폴리옥시에틸렌화된 폴리올(예를 들어, 글리세롤), 폴리비닐 알코올 및 이들의 혼합물을 포함하되, 이에 한정되지는 않는다.In certain embodiments, an antibody disclosed herein may be further modified to include other non-proteinaceous portions already known in the art and readily available. Moieties suitable for antibody derivatization include, but are not limited to, water soluble polymers. Non-limiting examples of water soluble polymers include polyethylene glycol (PEG), ethylene glycol/propylene glycol copolymers, carboxymethyl cellulose, glucan, polyvinyl alcohol, polyvinylpyrrolidone, poly-1,3-dioxane, poly-1, 3,6-trioxane, ethylene/maleic anhydride copolymer, polyamino acid (homopolymer or random copolymer), and glucan or poly(n-vinylpyrrolidone) polyethylene glycol, propylene glycol homopolymer, polypropylene oxide/ ethylene oxide copolymers, polyoxyethylenated polyols (eg, glycerol), polyvinyl alcohol, and mixtures thereof.

일부 실시양태에서, 본 발명의 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 하기 특성 중 하나 이상을 갖는다.In some embodiments, an anti-CLDN18.2 antibody or antigen-binding fragment thereof of the invention has one or more of the following characteristics.

(i) 본 발명의 항체와 동일하거나 유사한 CLDN18.2에 대한 결합 친화성 및/또는 특이성을 나타내는 것;(i) exhibiting the same or similar binding affinity and/or specificity to CLDN18.2 as the antibody of the present invention;

(ii) 본 발명의 항체의 CLDN18.2에 대한 결합을 억제(예를 들어, 경쟁적으로 억제)하는 것; (ii) inhibit (eg, competitively inhibit) binding of an antibody of the invention to CLDN18.2;

(iii) 본 발명의 항체와 동일하거나 중복되는 에피토프에 대한 결합;(iii) binding to the same or overlapping epitopes as the antibodies of the present invention;

(iv) CLDN18.2에 대한 결합에 대해 본 발명의 항체와 경쟁하는 것;(iv) compete with an antibody of the invention for binding to CLDN18.2;

(v) 본 발명의 항체의 하나 이상의 생물학적 특성을 갖는 것.(v) having one or more biological properties of an antibody of the invention.

일부 실시양태에서, 본 발명의 항-CLDN18.2 항체는 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 형태의 항체, 바람직하게는 IgG1 형태의 항체이다.In some embodiments, an anti-CLDN18.2 antibody of the invention is an antibody of the form IgG1, IgG2, IgG3 or IgG4, preferably of the form IgG1.

일부 실시양태에서, 항-CLDN18.2 항체는 모노클로날 항체이다.In some embodiments, an anti-CLDN18.2 antibody is a monoclonal antibody.

일부 실시양태에서, 항-CLDN18.2 항체는 인간화 항체이다.In some embodiments, an anti-CLDN18.2 antibody is a humanized antibody.

일부 실시양태에서, 항-CLDN18.2 항체는 인간 항체이다. In some embodiments, an anti-CLDN18.2 antibody is a human antibody.

일부 실시양태에서, 항-CLDN18.2 항체는 키메라 항체이다.In some embodiments, an anti-CLDN18.2 antibody is a chimeric antibody.

일부 실시양태에서, 항-CLDN18.2 항체의 프레임워크 서열의 적어도 일부는 인간 컨센서스 프레임워크 서열이다.In some embodiments, at least a portion of the framework sequences of an anti-CLDN18.2 antibody are human consensus framework sequences.

한 실시양태에서, 본 발명의 항-CLDN18.2 항체는 또한 이의 항체 단편(예를 들어, 항원 결합 단편), 바람직하게는 Fab, Fab', Fab'-SH, Fv, 단쇄 항체(예를 들어, scFv), (Fab')2, 단일 도메인 항체(예를 들어VHH), 도메인 항체(dAb) 및 선형 항체로부터 선택된 항체 단편을 망라한다.In one embodiment, an anti-CLDN18.2 antibody of the present invention is also an antibody fragment (e.g., an antigen-binding fragment) thereof, preferably a Fab, Fab', Fab'-SH, Fv, single chain antibody (e.g. , scFv), (Fab') 2 , single domain antibodies (eg VHH), domain antibodies (dAbs) and antibody fragments selected from linear antibodies.

III. 본 발명의 핵산 및 이를 포함하는 숙주 세포III. Nucleic acids of the invention and host cells comprising them

한 측면에서, 본 발명은 앞서 언급한 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 단편을 중 임의의 하나를 인코딩하는 핵산을 제공한다. 한 실시양태에서, 본 발명은 핵산을 포함하는 벡터를 제공한다. 한 실시양태에서, 벡터는 발현 벡터, 예를 들어 pcDNA3.1이다. 한 실시양태에서, 본 발명은 핵산 또는 벡터를 포함하는 숙주 세포를 제공한다. 한 실시양태에서, 숙주 세포는 진핵 세포이다. 또 다른 실시양태에서, 숙주 세포는 효모 세포, 포유동물 세포(예를 들어, CHO 세포(예를 들어, CHO-S) 또는 293 세포(예를 들어, 293F 또는 HEK293 세포)), 또는 항체 또는 이의 단편을 생성하기에 적합한 추가 세포로부터 선택된다. 또 다른 실시양태에서, 숙주 세포는 원핵생물이다.In one aspect, the invention provides a nucleic acid encoding any one of the foregoing anti-CLDN18.2 antibodies or fragments thereof. In one embodiment, the invention provides vectors comprising nucleic acids. In one embodiment the vector is an expression vector, eg pcDNA3.1. In one embodiment, the invention provides a host cell comprising the nucleic acid or vector. In one embodiment, the host cell is a eukaryotic cell. In another embodiment, the host cell is a yeast cell, a mammalian cell (eg, a CHO cell (eg, CHO-S) or a 293 cell (eg, 293F or HEK293 cell)), or an antibody or and selected from additional cells suitable for producing the fragment. In another embodiment, the host cell is prokaryotic.

한 측면에서, 본 발명은 본 명세서에 기재된 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 단편 중 어느 하나를 인코딩하는 핵산을 제공한다. 핵산은 항체의 경쇄 가변 영역 및/또는 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열을 인코딩하는 핵산, 또는 항체의 경쇄 및/또는 중쇄의 아미노산 서열을 인코딩하는 핵산을 포함할 수 있다.In one aspect, the invention provides nucleic acids encoding any one of the anti-CLDN18.2 antibodies or fragments thereof described herein. A nucleic acid may include a nucleic acid encoding the amino acid sequence of a light chain variable region and/or a heavy chain variable region of an antibody, or a nucleic acid encoding the amino acid sequence of a light chain and/or heavy chain of an antibody.

예를 들어, 본 발명의 핵산은 서열번호 4, 15, 21, 26, 27, 36, 37, 45, 48, 53, 56, 61, 66, 72, 73, 80 및 85 또는 서열번호 9, 19, 22, 31, 32, 40, 41, 47, 49, 55, 57, 65, 68, 75, 76, 83 및 86 중 어느 하나로부터 선택된 아미노산 서열을 인코딩하는 핵산; 또는 서열번호 4, 15, 21, 26, 27, 36, 37, 45, 48, 53, 56, 61, 66, 72, 73, 80 및 85 또는 서열번호 9, 19, 22, 31, 32, 40, 41, 47, 49, 55, 57, 65, 68, 75, 76, 83 및 86 중 어느 하나로부터 선택된 아미노산 서열과 적어도 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 인코딩하는 핵산을 포함한다.For example, nucleic acids of the present invention may be SEQ ID NOs: 4, 15, 21, 26, 27, 36, 37, 45, 48, 53, 56, 61, 66, 72, 73, 80 and 85 or SEQ ID NOs: 9, 19 , 22, 31, 32, 40, 41, 47, 49, 55, 57, 65, 68, 75, 76, 83 and 86; or SEQ ID NOs: 4, 15, 21, 26, 27, 36, 37, 45, 48, 53, 56, 61, 66, 72, 73, 80 and 85 or SEQ ID NOs: 9, 19, 22, 31, 32, 40 , 41, 47, 49, 55, 57, 65, 68, 75, 76, 83 and 86 and at least 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95 nucleic acids encoding amino acid sequences having %, 96%, 97%, 98% or 99% identity.

본 발명은 또한 서열번호 4, 15, 21, 26, 27, 36, 37, 45, 48, 53, 56, 61, 66, 72, 73, 80 및 85 또는 서열번호 9, 19, 22, 31, 32, 40, 41, 47, 49, 55, 57, 65, 68, 75, 76, 83 및 86 중 어느 하나로부터 선택된 아미노산 서열을 인코딩하는 핵산 서열을 포함하는 핵산, 또는 서열번호 4, 15, 21, 26, 27, 36, 37, 45, 48, 53, 56, 61, 66, 72, 73, 80 및 85 또는 서열번호 9, 19, 22, 31, 32, 40, 41, 47, 49, 55, 57, 65, 68, 75, 76, 83 및 86 중 어느 하나로부터 선택된 아미노산 서열과 적어도 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 인코딩하는 핵산 선열을 포함하는 핵산과 비교하여, 엄격한 조건하에서 하나 이상의 대체(예를 들어, 보존적 대체), 결실 또는 삽입이 되거나 갖기 위해 혼성화되는 핵산을 망라한다.The present invention also relates to SEQ ID NOs: 4, 15, 21, 26, 27, 36, 37, 45, 48, 53, 56, 61, 66, 72, 73, 80 and 85 or SEQ ID NOs: 9, 19, 22, 31, A nucleic acid comprising a nucleic acid sequence encoding an amino acid sequence selected from any one of 32, 40, 41, 47, 49, 55, 57, 65, 68, 75, 76, 83 and 86, or SEQ ID NOs: 4, 15, 21 , 26, 27, 36, 37, 45, 48, 53, 56, 61, 66, 72, 73, 80 and 85 or SEQ ID NOs: 9, 19, 22, 31, 32, 40, 41, 47, 49, 55 , 57, 65, 68, 75, 76, 83 and 86 and at least 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, A nucleic acid that hybridizes to or has one or more replacements (e.g., conservative replacements), deletions, or insertions under stringent conditions compared to a nucleic acid comprising a sequence of nucleic acids that encodes an amino acid sequence with 98% or 99% identity. cover

한 실시양태에서, 본 발명은 핵산을 포함하는 하나 이상의 벡터를 제공한다. 한 실시양태에서, 벡터는 발현 벡터, 예컨대 진핵 발현 벡터이다. 벡터는 바이러스, 플라스미드, 코스미드, λ 파지 또는 효모 인공 염색체(YAC)를 포함하되 이에 한정되지는 않는다. 한 실시양태에서, 벡터는 pcDNA3.1이다.In one embodiment, the invention provides one or more vectors comprising nucleic acids. In one embodiment, the vector is an expression vector, such as a eukaryotic expression vector. Vectors include, but are not limited to, viruses, plasmids, cosmids, lambda phages, or yeast artificial chromosomes (YACs). In one embodiment, the vector is pcDNA3.1.

한 실시양태에서, 벡터를 포함하는 숙주 세포가 제공된다. 항체를 인코딩하는 벡터의 클로닝 또는 발현에 적합한 숙주 세포는 본 명세서에 기재된 원핵세포 또는 진핵세포를 포함한다. 예를 들어, 항체는, 특히 글리코실화 및 Fc 이펙터 기능이 필요하지 않을 때, 박테리아에서 생성할 수 있다. 발현 후, 항체를 가용성 분획의 박테리아 세포 페이스트로부터 단리하고 추가로 정제할 수 있다.In one embodiment, a host cell comprising the vector is provided. Host cells suitable for cloning or expressing vectors encoding the antibodies include prokaryotic or eukaryotic cells described herein. For example, antibodies can be produced in bacteria, particularly when glycosylation and Fc effector function are not required. After expression, the antibody can be isolated from the bacterial cell paste in the soluble fraction and further purified.

한 실시양태에서, 숙주 세포는 진핵 세포이다. 또 다른 실시양태에서, 숙주 세포는 효모 세포, 포유동물 세포, 및 항체 또는 이의 단편을 생성하기에 적합한 추가 세포로부터 선택된다. 예를 들어, 진핵 미생물, 예컨대 사상 진균 또는 효모는 항체를 인코딩하는 벡터에 적합한 클로닝 또는 발현 숙주이다. 예를 들어, 글리코실화 경로는 "인간화"된 진균 및 효모 균주는 부분적 또는 전체적으로 인간 글리코실화 패턴을 가지는 항체를 생성할 수 있다. 글리코실화 항체 발현에 적합한 숙주 세포는 다세포 유기체(무척추동물 및 척추동물)로부터 또한 유래한다. 척추동물 세포도 숙주로서 사용할 수 있다. 예를 들어, 현탁액 성장에 적합하도록 조작한 포유류 세포주를 사용할 수 있다. 유용한 포유동물 숙주 세포주의 다른 예로는 SV40으로 형질전환된 원숭이 신장 CV1 세포주(COS-7), 인간 배아 신장 세포주(HEK293, 293F 또는 293T 세포) 등이다. 다른 유용한 포유동물 숙주 세포주는 DHFR-CHO 세포, CHO-S 세포, ExpiCHO 등을 포함하는 차이니즈 햄스터 난소(CHO) 세포; 및 Y0, NS0 및 Sp2/0과 같은 골수종 세포주를 포함한다. 항체 생성에 적합한 포유동물 숙주 세포주는 당업계에 공지되어 있다.In one embodiment, the host cell is a eukaryotic cell. In another embodiment, the host cell is selected from yeast cells, mammalian cells, and additional cells suitable for producing antibodies or fragments thereof. For example, eukaryotic microbes such as filamentous fungi or yeast are suitable cloning or expression hosts for vectors encoding antibodies. For example, fungal and yeast strains that have "humanized" glycosylation pathways can produce antibodies with partially or fully human glycosylation patterns. Suitable host cells for expressing glycosylated antibodies also come from multicellular organisms (invertebrates and vertebrates). Vertebrate cells can also be used as hosts. For example, mammalian cell lines engineered to be suitable for suspension growth may be used. Other examples of useful mammalian host cell lines are the monkey kidney CV1 cell line (COS-7) transformed with SV40, the human embryonic kidney cell line (HEK293, 293F or 293T cells), and the like. Other useful mammalian host cell lines include Chinese Hamster Ovary (CHO) cells, including DHFR-CHO cells, CHO-S cells, ExpiCHO, and the like; and myeloma cell lines such as Y0, NSO and Sp2/0. Mammalian host cell lines suitable for antibody production are known in the art.

IV. 본 발명의 항체 분자의 생산 및 정제IV. Production and purification of antibody molecules of the invention

한 실시양태에서, 본 발명은 본 발명의 항체 분자 또는 이의 단편(바람직하게는 항원 결합 단편)을 제조하기 위한 방법을 제공하며, 여기서 방법은 본 발명의 항체 단편 또는 이의 단편(바람직하게는 항원 결합 단편)을 인코딩하는 핵산을 발현하기에 적합한 조건 하에 숙주 세포를 배양하는 단계를 포함하고, 및 선택적으로 항체 또는 이의 단편(예를 들어, 항원 결합 단편)을 단리하는 단계를 포함한다. 특정 실시양태에서, 상기 방법은 숙주 세포로부터 본 발명의 항체 분자 또는 이의 단편(예를 들어, 항원 결합 단편)을 복원하는 단계를 추가로 포함한다.In one embodiment, the invention provides a method for preparing an antibody molecule or fragment thereof (preferably an antigen-binding fragment) of the invention, wherein the method comprises an antibody fragment or fragment thereof (preferably antigen-binding fragment) of the invention. fragment), and optionally isolating the antibody or fragment thereof (eg, an antigen-binding fragment). In certain embodiments, the method further comprises retrieving an antibody molecule of the invention or fragment thereof (eg, an antigen-binding fragment) from a host cell.

한 실시양태에서, 본 발명은 본 발명의 항체 분자를 제조하기 위한 방법을 제공하며, 상기 방법은 항체(예를 들어, 임의의 하나 및/또는 하나 이상의 폴리펩티드 사슬)를 인코딩하는 핵산, 또는 위에 제공된 바와 같이 핵산을 포함하는 발현 벡터를 포함하는 숙주 세포를 항체가 발현하기 적합한 조건 하에 배양하는 단계를 포함하고, 및 선택적으로 숙주 세포(또는 숙주 세포 배지)로부터 항체를 복원하는 단계를 포함한다.In one embodiment, the invention provides a method for making an antibody molecule of the invention, the method comprising a nucleic acid encoding an antibody (e.g., any one and/or one or more polypeptide chains), or a method provided above culturing a host cell comprising an expression vector comprising a nucleic acid as described above under conditions suitable for expression of the antibody, and optionally reconstituting the antibody from the host cell (or host cell medium).

본 발명의 항체 분자의 재조합 생성을 위해, 항체(예를 들어, 위에 기재된 항체, 예를 들어 임의의 하나 및/또는 하나 이상의 폴리펩티드 사슬)를 인코딩하는 핵산을 단리하고, 숙주 세포에서의 추가적 클로닝 및/또는 발현을 위해 하나 이상의 벡터에 삽입한다. 상기 핵산을 통상적인 절차를 사용하여(예를 들어, 항체의 중쇄 및 경쇄를 인코딩하는 유전자에 특이적으로 결합할 수 있는 올리고뉴클레오티드 프로브를 사용하여) 용이하게 단리하고 시퀀싱할 수 있다.For recombinant production of an antibody molecule of the invention, nucleic acid encoding an antibody (eg, an antibody described above, eg, any one and/or more than one polypeptide chain) is isolated, further cloning in a host cell, and /or inserted into one or more vectors for expression. Such nucleic acids can be readily isolated and sequenced using conventional procedures (eg, using oligonucleotide probes capable of binding specifically to genes encoding the heavy and light chains of antibodies).

본 명세서에 기재된 바와 같이 제조한 항체 분자는 당업계에 공지된 종래 기술, 예컨대 고성능 액체 크로마토그래피, 이온 교환 크로마토그래피, 겔 전기영동, 친화성 크로마토그래피, 크기 배제 크로마토그래피 등으로 정제할 수 있다. 특정 단백질 정제하는 데 사용하는 실제 조건이 순전하, 소수성, 친수성과 같은 요소에 따라 달라질 수 있음은 당업자에게는 자명한 사실일 것이다. 본 발명의 항체 분자의 순도는 크기 배제 크로마토그래피, 겔 전기이동, 고성능 액체 크로마토그래피 등을 포함하는 잘 알려진 여러 분석기법 중 임의의 하나에 의해 결정될 수 있다.Antibody molecules prepared as described herein can be purified by conventional techniques known in the art, such as high performance liquid chromatography, ion exchange chromatography, gel electrophoresis, affinity chromatography, size exclusion chromatography, and the like. It will be apparent to those skilled in the art that the actual conditions used to purify a particular protein may vary depending on factors such as net charge, hydrophobicity, and hydrophilicity. The purity of an antibody molecule of the present invention can be determined by any one of several well-known analytical techniques including size exclusion chromatography, gel electrophoresis, high performance liquid chromatography, and the like.

V. 분석V. Analysis

본 명세서에 제공된 항-CLDN18.2 항체는 당업계에 공지된 다양한 검정을 통해 그의 물리적/화학적 특성 및/또는 생물활성에 대해 확인, 스크리닝 또는 특성화될 수 있다. 한 측면에서, 본 발명의 항체는, 예를 들어 ELISA 및 웨스턴 블로팅과 같은 공지된 방법으로 항원 결합 활성을 테스트한다. CLDN18.2에 대한 결합은 당업계에 공지된 방법에 의해 결정될 수 있고, 예시적인 방법이 본 명세서에 개시되어 있다. 일부 실시양태에서, 결합은 방사면역분석(RIA), 생물층 간섭계, MSD 분석, 표면 플라즈몬 공명(SPR) 또는 유세포 분석에 의해 결정된다.Anti-CLDN18.2 antibodies provided herein may be identified, screened for, or characterized for their physical/chemical properties and/or bioactivity through a variety of assays known in the art. In one aspect, antibodies of the invention are tested for antigen binding activity by known methods such as, for example, ELISA and Western blotting. Binding to CLDN18.2 can be determined by methods known in the art, and exemplary methods are disclosed herein. In some embodiments, binding is determined by radioimmunoassay (RIA), biolayer interferometry, MSD analysis, surface plasmon resonance (SPR), or flow cytometry.

또 다른 측면에서, 경쟁 검정은 CLDN18.2에 대한 결합에 대해 본 명세서에 개시된 항-CLDN18.2 항체 중 임의의 하나와 경쟁하는 항체를 확인하는 데 사용될 수 있다. 특정 실시양태에서, 이러한 경쟁적 항체는 본 명세서에 개시된 항-CLDN18.2 항체 중 임의의 하나와 동일하거나 중복되는 에피토프(예를 들어, 선형 또는 입체형태적 에피토프)에 결합한다.In another aspect, a competition assay can be used to identify an antibody that competes for binding to CLDN18.2 with any one of the anti-CLDN18.2 antibodies disclosed herein. In certain embodiments, such competing antibodies bind to the same or overlapping epitopes (eg, linear or conformational epitopes) as any one of the anti-CLDN18.2 antibodies disclosed herein.

본 발명은 또한 생물활성을 갖는 항-CLDN18.2 항체를 확인하기 위한 검정을 제공한다. 생물활성은 예를 들어 CLDN18.2에 대한 결합(예를 들어, 인간 CLDN18.2에 대한 결합), CLDN18.2를 발현하는 세포에 대한 결합, 세포의 CDC 또는 ADCC에 대한 활성, 종양 세포의 억제 등을 포함할 수 있다. 본 발명은 체내 및/또는 체외에서 이러한 생물활성을 가지는 항체를 추가로 제공한다.The present invention also provides assays for identifying anti-CLDN18.2 antibodies that have bioactivity. Biological activities include, for example, binding to CLDN18.2 (eg binding to human CLDN18.2), binding to cells expressing CLDN18.2, activity to CDC or ADCC of cells, inhibition of tumor cells etc. may be included. The present invention further provides antibodies having such bioactivity in vivo and/or ex vivo.

특정 실시양태에서, 본 발명의 항체는 이러한 생물활성을 특징으로 한다.In certain embodiments, antibodies of the invention are characterized by such bioactivity.

위의 체외 검정 중 임의의 하나에 사용하기 위한 세포는 CLDN18.2를 자연적으로 발현하거나 CLDN18.2를 발현 또는 과발현하도록 조작된 세포주를 포함한다. 이러한 세포는 또한 CLDN18.2를 발현하는 세포주 및 CLDN18.2를 정상적으로는 발현하지 않지만 CLDN18.2를 인코딩하는 DNA로 형질감염된 세포주를 포함한다. 일부 실시양태에서, 이러한 세포는 위암 세포 또는 췌장암 세포이다. 일부 실시양태에서, 세포는 CLDN18.2를 발현하는 CHO 세포이다. 일부 실시양태에서, 세포는 CLDN18.2를 과발현하는 KATO III 및 DAN-G 세포주와 같은 NUGC-4, KATO III 및 DAN-G 세포주이다.Cells for use in any one of the above in vitro assays include cell lines that naturally express CLDN18.2 or that have been engineered to express or overexpress CLDN18.2. Such cells also include cell lines that express CLDN18.2 and cell lines that do not normally express CLDN18.2 but have been transfected with DNA encoding CLDN18.2. In some embodiments, such cells are gastric cancer cells or pancreatic cancer cells. In some embodiments, the cell is a CHO cell expressing CLDN18.2. In some embodiments, the cell is a NUGC-4, KATO III and DAN-G cell line, such as the KATO III and DAN-G cell lines overexpressing CLDN18.2.

위의 검정 중 임의의 하나는 항-CLDN18.2 항체 대신에 또는 이에 더하여 본 발명의 면역접합체를 사용함으로써 수행될 수 있는 것으로 이해될 것이다.It will be appreciated that any one of the above assays can be performed by using an immunoconjugate of the invention in place of or in addition to an anti-CLDN18.2 antibody.

위의 검정 중 임의의 하나는 항-CLDN18.2 항체 및 다른 활성제의 조합을 사용하여 수행될 수 있는 것으로 이해될 것이다.It will be appreciated that any one of the above assays can be performed using a combination of an anti-CLDN18.2 antibody and another active agent.

VI. 면역접합체VI. immunoconjugate

일부 실시양태에서, 본 발명은 본 명세서에 제공하는 항-CLDN18.2 항체 중 임의의 하나와, 화학요법제, 사이토카인, 세포독성제, 추가 항체, 소분자 약물 또는 면역조절제(예를 들어, 항염증제 또는 면역억제제)를 포함하는 치료제와 같은 추가 물질을 포함하는 면역접합체를 제공한다. 한 실시양태에서, 세포독성제와 같은 추가물질은 세포에 유해한 임의의 약제를 포함한다.In some embodiments, the invention provides a combination of any one of the anti-CLDN18.2 antibodies provided herein with a chemotherapeutic agent, cytokine, cytotoxic agent, additional antibody, small molecule drug, or immunomodulatory agent (e.g., an anti-inflammatory agent). or an immunosuppressive agent). In one embodiment, the additional agent, such as a cytotoxic agent, includes any agent that is detrimental to cells.

일부 실시양태에서, 면역접합체는 암을 예방하거나 치료하는 데 사용된다.In some embodiments, the immunoconjugate is used to prevent or treat cancer.

VII. 약제학적 조성물 및 약제학적 제제VII. Pharmaceutical Compositions and Pharmaceutical Formulations

일부 실시양태에서, 본 발명은 항-CLDN18.2 항체 중 임의의 하나 또는 이의 단편(바람직하게는 이의 항원 결합 단편) 또는 본 명세서에 기재된 이의 면역접합체를 포함하는 조성물을 제공하며, 여기서 바람직하게는 조성물은 약제학적 조성물이다. 한 실시양태에서, 상기 조성물은 약제학적 보충물질을 추가로 포함한다. 한 실시양태에서, 조성물, 예를 들어 약제학적 조성물은, 본 발명의 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 단편, 또는 이의 면역접합체 및 1종 이상의 추가 치료제의 조합을 포함한다.In some embodiments, the invention provides a composition comprising any one of the anti-CLDN18.2 antibodies or fragments thereof (preferably antigen-binding fragments thereof) or immunoconjugates thereof described herein, wherein preferably The composition is a pharmaceutical composition. In one embodiment, the composition further comprises a pharmaceutical supplement. In one embodiment, a composition, eg, a pharmaceutical composition, comprises a combination of an anti-CLDN18.2 antibody or fragment thereof, or immunoconjugate thereof, of the invention and one or more additional therapeutic agents.

본 발명은 또한 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 면역접합체를 포함하는 조성물(약제학적 조성물 또는 약제학적 제제 포함) 또는 항-CLDN18.2 항체를 인코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 조성물(약제학적 조성물 또는 약제학적 제제 포함)을 포함한다. 특정 실시양태에서, 조성물은 CLDN18.2에 결합하는 하나 이상의 항체 또는 이의 단편 또는 하나 이상의 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 단편을 인코딩하는 하나 이상의 폴리뉴클레오티드를 포함한다. 이러한 조성물은 완충제를 포함하여 당업계에서 공지된 약제학적 담체 및 약제학적 부형제와 같은 적합한 약제학적 보충물질을 추가로 포함할 수 있다.The present invention also relates to a composition (including a pharmaceutical composition or pharmaceutical formulation) comprising an anti-CLDN18.2 antibody or immunoconjugate thereof or a composition (including a pharmaceutical composition or pharmaceutical formulation) comprising a polynucleotide encoding an anti-CLDN18.2 antibody. including medical preparations). In certain embodiments, a composition comprises one or more antibodies or fragments thereof that bind CLDN18.2 or one or more polynucleotides encoding one or more anti-CLDN18.2 antibodies or fragments thereof. Such compositions may further include suitable pharmaceutical supplements such as pharmaceutical carriers and pharmaceutical excipients known in the art, including buffers.

본 명세서에 사용된 바와 같이, "약제학적 담체"는 생리학적으로 양립할 수 있는 모든 용매, 분산 매개제, 등장제, 흡수지연제를 포함한다.As used herein, “pharmaceutical carrier” includes any solvent, dispersion medium, isotonic agent, or absorption delaying agent that is physiologically compatible.

약제학적 보충물질의 사용 및 응용에 관해서는, Handbook of Pharmaceutical Excipients, 제8판, R. C. Rowe, P. J. Seskey 및 S. C. Owen, Pharmaceutical Press, London, Chicago를 참조한다.For the use and applications of pharmaceutical supplements, see Handbook of Pharmaceutical Excipients , 8th Edition, RC Rowe, PJ Seskey and SC Owen, Pharmaceutical Press, London, Chicago.

본 발명의 조성물은 여러 가지 형태일 수 있다. 이들 형태는, 예를 들어 액체, 반고체, 고체 투여제형, 예컨대 용액(예를 들어, 주사용액 및 주입용액), 분말 또는 현탁액, 리포좀 및 좌약 을 포함한다. 바람직한 형태는 투여의 목적 모드 및 치료적 사용에 따라 달라진다.Compositions of the present invention may take many forms. These forms include, for example, liquid, semi-solid, solid dosage forms such as solutions (eg, injectable and infusible solutions), powders or suspensions, liposomes and suppositories. The preferred form depends on the intended mode of administration and therapeutic use.

본 명세서에 기재된 항체를 포함하는, 바람직하게는 동결건조 제제 또는 수용액의 형태인 약제학적 제제는 본 발명의 원하는 순도의 항체를 하나 이상의 선택적 약제학적 보조 재료와 혼합함으로써 제조될 수 있다.Pharmaceutical formulations comprising the antibodies described herein, preferably in the form of lyophilized formulations or aqueous solutions, can be prepared by mixing the antibodies of the invention in the desired purity with one or more optional pharmaceutical auxiliary materials.

본 발명의 약제학적 조성물 또는 제제는 또한 치료 대상인 특정 적응증에 필요한 하나 넘은 활성 성분, 바람직하게는 서로에게 악영향을 미치지 않으면서 상보성 활성을 가지는 활성 성분을 포함할 수 있다. 예를 들어 또한 화학요법제, 사이토카인, 세포독성제, 백신, 추가 항체, 소분자 약물 또는 면역조절제와 같은 추가 치료제를 제공하는 것이 필요할 수 있다. 활성 성분은 의도하는 목적을 위해 효과적인 양으로 적절하게 조합된다.The pharmaceutical composition or formulation of the present invention may also contain more than one active ingredient required for the particular indication being treated, preferably active ingredients having complementary activities without adversely affecting each other. It may also be necessary to provide additional therapeutic agents such as, for example, chemotherapeutic agents, cytokines, cytotoxic agents, vaccines, additional antibodies, small molecule drugs or immunomodulatory agents. The active ingredients are suitably combined in effective amounts for the intended purpose.

서방형 제제를 제조할 수 있다. 서방형 제제의 적합한 예로는 항체를 함유하는 고형 소수성 중합체의 반투과성 매트릭스를 포함한다. 매트릭스는 필름 또는 마이크로캡슐과 같은 성형품의 형태이다.Sustained release formulations can be prepared. Suitable examples of sustained release formulations include semipermeable matrices of solid hydrophobic polymers containing the antibody. The matrix is in the form of a shaped article such as a film or microcapsule.

VIII. 약제학적 조합 및 키트VIII. Pharmaceutical combinations and kits

일부 실시양태에서, 본 발명은 또한 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 단편(바람직하게는 항원 결합 단편), 또는 이의 면역접합체, 및 하나 이상의 추가 치료제(예를 들어, 화학요법제, 사이토카인, 세포독성제, 추가 항체, 소분자 약물 또는 면역조절제)를 포함하는 약제학적 조합 또는 약제학적 조합 생성물을 제공한다.In some embodiments, the present invention also provides an anti-CLDN18.2 antibody or fragment thereof (preferably an antigen-binding fragment), or immunoconjugate thereof, and one or more additional therapeutic agents (e.g., chemotherapeutic agents, cytokines, cell toxic agents, additional antibodies, small molecule drugs or immunomodulatory agents).

본 발명의 또 다른 목적은 본 발명의 약제학적 조합물을 포함하는 부품 키트를 제공하는 것이며; 바람직하게는, 키트는 약제학적 용량 단위의 형태이다. 따라서 투여량 단위는 투여 요법 또는 약물 투여 사이의 간격에 따라 제공될 수 있다.Another object of the present invention is to provide a kit of parts comprising the pharmaceutical combination of the present invention; Preferably, the kit is in the form of a pharmaceutical dosage unit. Thus, dosage units may be provided according to dosing regimens or intervals between drug administrations.

한 실시양태에서, 본 발명의 부품 키트는 다음과 같이 동일한 패키지에 포함한다.In one embodiment, the kit of parts of the present invention is included in the same package as follows.

- 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 단편을 포함하는 약제학적 조성물을 함유하는 제1 용기;- a first container containing a pharmaceutical composition comprising an anti-CLDN18.2 antibody or fragment thereof;

- 다른 치료제를 포함하는 약제학적 조성물을 함유하는 제2 용기.- A second container containing a pharmaceutical composition comprising another therapeutic agent.

IX. 용도 및 방법IX. Uses and methods

본 발명의 한 측면은 대상체의 종양(예를 들어, 암)을 예방 또는 치료하기 위한 방법을 제공하며, 이는 유효량의 본 발명의 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 단편(바람직하게는 항원 결합 단편), 면역접합체, 약제학적 조성물, 약제학적 조합물 또는 키트를 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.One aspect of the invention provides a method for preventing or treating a tumor (eg, cancer) in a subject, comprising an effective amount of an anti-CLDN18.2 antibody or fragment thereof (preferably an antigen-binding fragment) of the invention. , administering the immunoconjugate, pharmaceutical composition, pharmaceutical combination or kit to a subject.

일부 실시양태에서, 종양(예를 들어, 암) 환자는 CLDN18.2를 갖는다(예를 들어, 상승된 수준에서, 예를 들어 핵산 또는 단백질 수준에서).In some embodiments, the tumor (eg, cancer) patient has CLDN18.2 (eg, at an elevated level, eg, at the nucleic acid or protein level).

일부 실시양태에서, 종양, 예를 들어 암은 고형 종양 및 혈액 종양뿐만 아니라 전이성 병변을 포함한다. 한 실시양태에서, 고형 종양의 예로는 약성 종양을 포함한다. 암은 초기, 중기 또는 말기 단계 암일 수 있으며, 또는 전이성 암일 수 있다.In some embodiments, the tumor, eg cancer, includes solid tumors and hematological tumors as well as metastatic lesions. In one embodiment, examples of solid tumors include drug tumors. The cancer can be an early, intermediate or late stage cancer, or it can be a metastatic cancer.

일부 실시양태에서, 종양 치료는 핵산 또는 단백질 수준에서 CLDN18.2의 억제로부터 이익을 얻을 것이다. 일부 실시양태에서, 종양 치료는 본 발명의 항체에 의해 유도된 ADCC 또는 CDC 효과로부터 이익을 얻는다.In some embodiments, tumor treatment will benefit from inhibition of CLDN18.2 at the nucleic acid or protein level. In some embodiments, the tumor treatment benefits from an ADCC or CDC effect induced by an antibody of the invention.

특정 실시양태에서, 본 발명의 항-CLDN18.2 항체는 종양 세포, 예를 들어 위암 세포 또는 췌장암 세포와 같은 CLDN18.2를 발현하는 종양 세포의 증식을 억제할 수 있다.In certain embodiments, an anti-CLDN18.2 antibody of the invention is capable of inhibiting proliferation of tumor cells, eg, tumor cells expressing CLDN18.2, such as gastric cancer cells or pancreatic cancer cells.

특정 실시양태에서, 본 발명의 항-CLDN18.2 항체는 강력한 ADCC 또는 CDC 활성을 갖는다.In certain embodiments, an anti-CLDN18.2 antibody of the invention has potent ADCC or CDC activity.

일부 실시양태에서, 종양은 종양 면역 회피이다.In some embodiments, the tumor is tumor immune evasion.

일부 실시양태에서, 종양은 암, 예를 들어 위암 또는 췌장암이다.In some embodiments, the tumor is cancer, eg gastric cancer or pancreatic cancer.

대상체는 포유동물, 예를 들어 영장류, 바람직하게는 고등 영장류, 예를 들어 인간(예를 들어, 본 명세서에 기재된 질환이 있거나 발병할 위험이 있는 개체)일 수 있다. 한 실시양태에서, 대상체는 본 명세서에 기재된 질환(예를 들어, 암)이 있거나 발병할 위험이 있다. 특정 실시양태에서, 대상체는 추가 요법, 예를 들어 화학 요법 및/또는 방사선 요법을 받고 있거나 받은 경험이 있다. 일부 실시양태에서, 대상체는 이전에 면역요법을 받은 적 있거나 받고 있다.The subject can be a mammal, eg a primate, preferably a higher primate, eg a human (eg, an individual suffering from or at risk of developing a disease described herein). In one embodiment, the subject has or is at risk of developing a disease (eg, cancer) described herein. In certain embodiments, the subject is receiving or has received additional therapy, eg, chemotherapy and/or radiation therapy. In some embodiments, the subject has previously received or is receiving immunotherapy.

다른 측면에서, 본 발명은 본 명세서에 기재된 용도를 위한, 예를 들어, 본 명세서에 언급된 관련 질환 또는 장애를 예방하거나 치료하는 데 사용하기 위해 약물을 생산 또는 제조하는데 있어서, 항체 분자 또는 이의 단편, 이의 면역접합체, 약제학적 조성물, 약제학적 조합물 또는 키트의 용도를 제공한다.In another aspect, the invention provides an antibody molecule or fragment thereof for use as described herein, e.g., in producing or manufacturing a drug for use in preventing or treating a related disease or disorder referred to herein. , immunoconjugates, pharmaceutical compositions, pharmaceutical combinations or kits thereof.

일부 실시양태에서, 본 발명의 항체 분자 또는 이의 단편, 이의 면역접합체, 약제학적 조성물, 약제학적 조합물 또는 키트는 장애 및/또는 장애와 관련된 증상의 발병을 지연시킨다.In some embodiments, an antibody molecule or fragment thereof, immunoconjugates thereof, pharmaceutical composition, pharmaceutical combination or kit of the invention delays the onset of a disorder and/or symptoms associated with the disorder.

일부 실시양태에서, 항체 분자 또는 이의 단편, 이의 면역접합체, 또는 본 발명의 약제학적 조성물은 또한 하나 이상의 다른 요법, 예를 들어, 본 명세서에 기재된 용도, 예를 들어 본 명세서에 언급된 관련 질환 또는 장애를 예방하거나 치료하는 데 사용하기 위한 치료 방식 및/또는 기타 치료제와 조합하여 투여될 수 있다.In some embodiments, the antibody molecule or fragment thereof, immunoconjugate thereof, or pharmaceutical composition of the present invention may also be used in one or more other therapies, e.g., for a use described herein, e.g., for a related disease or It can be administered in combination with other therapeutic agents and/or modalities for use in preventing or treating disorders.

일부 실시양태에서, 치료 양식은 수술, 방사선 요법, 부분 조사, 집중 조사 등을 포함한다.In some embodiments, treatment modalities include surgery, radiation therapy, partial irradiation, focused irradiation, and the like.

일부 실시양태에서, 치료제는 화학요법제, 사이토카인, 세포독성제, 백신, 추가 항체, 소분자 약물 또는 면역조절제로부터 선택된다.In some embodiments, the therapeutic agent is selected from chemotherapeutic agents, cytokines, cytotoxic agents, vaccines, additional antibodies, small molecule drugs, or immunomodulatory agents.

면역조절제의 예로는 면역억제제 또는 소염제를 포함한다.Examples of immunomodulatory agents include immunosuppressive agents or anti-inflammatory agents.

일부 실시양태에서, 본 명세서에 기재된 항체 조합은 예를 들어, 별도의 항체로서 개별적으로 투여될 수 있다.In some embodiments, antibody combinations described herein can be administered separately, eg as separate antibodies.

상기 조합 요법은 동시투여(예를 들어, 2종 이상의 치료제가 동일한 제제 또는 별도의 제제에 함유됨) 및 별도의 투여를 포함한다. 여기서 본 발명의 항체는 그 외 치료제 및/또는 약제를 투여하기 전에, 동시에 및/또는 투여한 후에 투여할 수 있다.Such combination therapy includes simultaneous administration (eg, two or more therapeutic agents contained in the same formulation or in separate formulations) and separate administration. Here, the antibody of the present invention may be administered before, simultaneously with, and/or after administration of other therapeutic agents and/or drugs.

약제학적 조성물의 투여경로는 공지된 방법을 기초하여, 예를 들어, 경구, 정맥내, 복강내, 뇌내(실질내), 심 실내, 근육내, 안구내, 동맥내, 문맥내 또는 병변내 경로로 투여하거나, 지속 방출 시스템 또는 이식 장치를 통해 투여할 수 있다. 특정 실시양태에서, 조성물을 볼루스 주입, 연속 주입 또는 이식 장치에 의해 투여할 수 있다.The route of administration of the pharmaceutical composition may be, for example, oral, intravenous, intraperitoneal, intracerebral (intraparenchymal), intraventricular, intramuscular, intraocular, intraarterial, intraportal or intralesional routes based on known methods. It can be administered as an oral route, or through a sustained-release system or an implantable device. In certain embodiments, the composition may be administered by bolus infusion, continuous infusion, or implantation device.

조성물을 도한 이식한 막, 스펀지, 혹은 원하는 분자를 흡수하거나 캡슐화하는 그 밖의 적절한 물질을 통해 국소적으로 투여할 수도 있다. 특정 실시양태에서, 이식 장치를 사용하는 경우, 해당 장치를 임의의 적합한 조직 또는 기관에 이식할 수 있으며, 원하는 분자를 확산, 서방성 볼루스 또는 연속 투여를 통해 송달할 수 있다.The composition may also be administered topically via an implanted membrane, sponge, or other suitable material that absorbs or encapsulates the desired molecule. In certain embodiments, when an implantable device is used, the device can be implanted into any suitable tissue or organ, and the desired molecule can be delivered via diffusion, sustained release bolus, or continuous administration.

X. 진단 및 검출을 위한 방법 및 조성물X. Methods and Compositions for Diagnosis and Detection

특정 실시양태에서, 본 명세서에 제공된 항-CLDN18.2 항체 중 임의의 하나 또는 이의 단편(바람직하게는 항원 결합 단편)은 생물학적 샘플에서 CLDN18.2의 존재를 검출하는 데 사용될 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 용어 "검출" 또는 "검출하다"는 정량적 및 정성적 검출을 포함하고, 예시적 검출은 면역조직화학 기술, 면역세포화학 기술, 유세포 분석법(예를 들어, FACS), 항체 분자와 복합체화한 자기 비드, ELISA, PCR(예를 들어, RT-PCR)를 관여한다. 특정 실시양태에서, 생물학적 샘플은 혈액, 혈청, 또는 생물학적 기원의 그 외 체액 샘플이다. 특정 실시양태에서, 생물학적 샘플은 세포 또는 조직을 포함한다. 일부 실시양태에서, 생물학적 샘플은 증식성 또는 암성 병변으로부터 유래한다.In certain embodiments, any one of the anti-CLDN18.2 antibodies or fragments thereof (preferably antigen-binding fragments) provided herein may be used to detect the presence of CLDN18.2 in a biological sample. As used herein, the term "detection" or "detect" includes quantitative and qualitative detection, exemplary detection being immunohistochemical techniques, immunocytochemical techniques, flow cytometry (eg FACS), antibody molecules It involves magnetic beads complexed with, ELISA, PCR (eg, RT-PCR). In certain embodiments, a biological sample is blood, serum, or other bodily fluid sample of biological origin. In certain embodiments, a biological sample comprises cells or tissue. In some embodiments, the biological sample is from a proliferative or cancerous lesion.

한 실시양태에서, 진단 또는 검출 방법에 사용하기 위한 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 단편이 제공된다. 다른 측면에서, 생물학적 샘플에서 CLDN18.2의 존재를 검출하기 위한 방법이 제공된다. 특정 실시양태에서, 상기 방법은 생물학적 샘플 중의 CLDN18.2 단백질의 존재를 검출하는 단계를 포함한다. 특정 실시양태에서, CLDN18.2는 인간 CLDN18.2이다. 특정 실시양태에서, 상기 방법은 CLDN18.2에 대한 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 단편의 결합을 허용하는 조건 하에 생물학적 샘플을 본 명세서에 기재된 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 단편과 접촉시키는 단계, 및 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 단편 및 CLDN18.2에 의해 복합체가 형성되는지 여부를 검출하는 단계를 포함한다. 복합체의 형성은 CLDN18.2의 존재를 지시한다. 상기 방법은 체외 또는 체내 방법일 수 있다. 한 실시양태에서, 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 단편은 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 단편으로 치료하기에 적합한 대상체를 선택하는 데 사용되며, 예를 들어, 여기서 CLDN18.2는 대상체를 선택하기 위한 바이오마커이다.In one embodiment, an anti-CLDN18.2 antibody or fragment thereof for use in a diagnostic or detection method is provided. In another aspect, a method for detecting the presence of CLDN18.2 in a biological sample is provided. In certain embodiments, the method comprises detecting the presence of CLDN18.2 protein in a biological sample. In certain embodiments, CLDN18.2 is human CLDN18.2. In certain embodiments, the method comprises contacting a biological sample with an anti-CLDN18.2 antibody or fragment thereof described herein under conditions permissive for binding of the anti-CLDN18.2 antibody or fragment thereof to CLDN18.2; and detecting whether a complex is formed by the anti-CLDN18.2 antibody or fragment thereof and CLDN18.2. Formation of the complex indicates the presence of CLDN18.2. The methods may be in vitro or in vivo methods. In one embodiment, an anti-CLDN18.2 antibody or fragment thereof is used to select a subject suitable for treatment with the anti-CLDN18.2 antibody or fragment thereof, e.g., wherein CLDN18.2 is used to select a subject. It is a biomarker for

한 실시양태에서, 본 발명의 항체는 종양, 예를 들어 암을 진단하는데 사용하여, 예를 들어 개체에서 본 명세서에 기재된 질환의 치료 또는 진행, 진단 및/또는 병기를 평가(예를 들어, 모니터링)할 수 있다. 특정 실시양태에서, 표지된 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 단편이 제공된다. 표지는 직접적으로 검출되는 표지 또는 모이어티(예를 들어, 형광 표지, 발색단 표지, 전자밀도 표지, 화학발광 표지 및 방사성 표지)은 물론, 효소 또는 리간드와 같이, 예를 들어 효소 반응 또는 분자 상호작용에 의해 간접적으로 검출되는 모이어티를 포함하되 이에 한정되지는 않는다.In one embodiment, an antibody of the invention is used to diagnose a tumor, e.g., cancer, e.g., to assess (e.g., monitor) the treatment or progression, diagnosis and/or staging (e.g., monitoring) of a disease described herein in an individual. )can do. In certain embodiments, labeled anti-CLDN18.2 antibodies or fragments thereof are provided. Labels include labels or moieties that are directly detected (eg, fluorescent labels, chromophore labels, electron density labels, chemiluminescent labels, and radioactive labels), as well as enzymes or ligands, such as, for example, enzymatic reactions or molecular interactions. Including, but not limited to, moieties that are indirectly detected by

본 명세서에 제공된 일부 실시양태에서, 샘플은 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 단편으로 치료하기 전에 얻는다. 일부 실시양태에서, 다른 치료법을 적용하기 전에 샘플을 얻는다. 일부 실시양태에서, 샘플은 다른 요법으로 치료하는 동안 또는 다른 요법으로 치료한 후에 얻는다.In some embodiments provided herein, a sample is obtained prior to treatment with an anti-CLDN18.2 antibody or fragment thereof. In some embodiments, a sample is obtained prior to application of other treatments. In some embodiments, the sample is obtained during or after treatment with another therapy.

일부 실시양태에서, 샘플은 포르말린 고정 파라핀 포매(FFPE) 샘플이다. 일부 실시양태에서, 샘플은 생검(예를 들어, 코어 생검) 시편, 외과용 시편(예를 들어, 외과용 절제술에서 얻은 시편) 또는 미세침 흡인물이다.In some embodiments, the sample is a formalin fixed paraffin embedded (FFPE) sample. In some embodiments, the sample is a biopsy (eg, core biopsy) specimen, a surgical specimen (eg, a specimen obtained from a surgical resection), or a fine needle aspirate.

일부 실시양태에서, CLDN18.2는 치료 전에, 예를 들어 초기 치료 전에 또는 특정 치료로부터의 간격 후의 치료 전에 검출된다.In some embodiments, CLDN18.2 is detected prior to treatment, eg, before an initial treatment or after an interval from a particular treatment.

일부 실시양태에서, 본 발명의 질환을 치료하기 위한 방법이 제공되며, 상기 방법은: 대상체(예를 들어, 샘플)(예를 들어, 대상체의 샘플)에서 CLDN18.2의 존재를 검출하여 CLDN18.2 값을 결정하는 단계; CLDN18.2 값을 대조값과 비교하는 단계; 및 CLDN18.2 값이 대조군 값보다 큰 경우, 치료 유효량의 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 단편(예를 들어, 본 명세서에 기재된 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 단편)을 선택적으로 하나 이상의 다른 요법과 조합하여 대상체에게 투여하여 질환을 치료하는 단계를 포함한다.In some embodiments, a method for treating a disease of the invention is provided, the method comprising: detecting the presence of CLDN18.2 in a subject (eg, a sample) (eg, a sample of a subject) to obtain a CLDN18. 2 determining the value; comparing the CLDN18.2 value to a control value; and, if the CLDN18.2 value is greater than the control value, a therapeutically effective amount of an anti-CLDN18.2 antibody or fragment thereof (eg, an anti-CLDN18.2 antibody or fragment thereof described herein) optionally with one or more other therapies. and administering to a subject in combination with to treat the disease.

본 발명의 이러한 및 다른 측면과 실시양태를 도면(하기 도면의 간단한 설명) 및 본 발명의 하기 상세한 설명에 기술하고, 하기의 실시예를 통해 설명한다. 본 발명의 여러 실시예에서 본 발명 전문에 걸쳐 위에 기재한 일부 또는 전체 특징을 다양하게 조합할 수 있다. 하기 실시예는 본 발명을 추가로 설명한다. 단 실시예는 한정이 아니라 예시에 지나지 않으며, 당업자는 다양한 변형을 가할 수 있음을 이해해야 한다.These and other aspects and embodiments of the present invention are described in the drawings (brief description of the drawings below) and the following detailed description of the invention, and are illustrated by means of the examples below. Various combinations of some or all of the features described above may be used in various embodiments of the present invention throughout the present invention. The following examples further illustrate the present invention. However, it should be understood that the embodiments are merely illustrative rather than limiting, and various modifications may be made by those skilled in the art.

실시예Example

표 A: 본 발명의 예시적인 항체 및 양성 대조군 항체의 서열에 대한 서열번호 넘버링(AbM 규칙에 의해 정의된 HCDR1 및 Kabat 규칙에 의해 정의된 HCDR2, HCDR3, LCDR1, LCDR2 및 LCDR3)Table A: SEQ ID numbering for sequences of exemplary antibodies of the invention and positive control antibodies (HCDR1 defined by AbM rules and HCDR2, HCDR3, LCDR1, LCDR2 and LCDR3 defined by Kabat rules)

Figure pct00003
Figure pct00003

실시예 1. 안정적으로 발현되는 세포주의 구축Example 1. Construction of stably expressed cell lines

인간 CLDN18.2를 과발현하는 세포주의 제조Preparation of cell lines overexpressing human CLDN18.2

제조업체의 지침에 따라 인간 클라우딘18.2(약칭 CLDN18.2, 이하 동일)를 안정적으로 발현하는 세포주를 구축하기 위해 Freedom® CHO-S® 키트(Invitrogen, A1369601)를 사용하였다. 먼저, 인간 CLDN18.2(UniProt ID: P56856-2) 전장 유전자를 벡터 pCHO1.0에 구축하고 구축된 플라스미드를 화학적 형질감염 및 전기 형질감염에 의해 CHO-S 세포(Invitrogen, A1369601) 및 HEK293 세포(Invitrogen, A14527)에 형질감염시키고, 형질감염된 세포를 2회 가압 스크리닝하여 CLDN18.2를 발현하는 세포 풀을 얻었다. 그 후, 유세포분석기(MoFlo XDP, Beckman Coulter)를 사용하여 CLDN18.2를 많이 발현하는 세포를 선별하고, CLDN18.2를 안정적으로 발현하는 모노클로날 세포주 CHO-hCLDN18.2및 HEK293-hCLDN18.2를 희석하여 얻었다.Freedom® CHO-S® kit (Invitrogen, A1369601) was used to construct a cell line stably expressing human claudin 18.2 (abbreviated as CLDN18.2, hereinafter the same) according to the manufacturer's instructions. First, human CLDN18.2 (UniProt ID: P56856-2) full-length gene was constructed in vector pCHO1.0, and the constructed plasmid was chemically transfected and electrotransfected into CHO-S cells (Invitrogen, A1369601) and HEK293 cells ( Invitrogen, A14527), and the transfected cells were subjected to double pressure screening to obtain a cell pool expressing CLDN18.2. Thereafter, using a flow cytometer (MoFlo XDP, Beckman Coulter), cells expressing high levels of CLDN18.2 were selected, and monoclonal cell lines CHO-hCLDN18.2 and HEK293-hCLDN18.2 stably expressing CLDN18.2 were selected. was obtained by dilution.

인간 CLDN18.1를 과발현하는 세포주의 제조Preparation of cell lines overexpressing human CLDN18.1

제조업체의 지침에 따라 인간 클라우딘18.1(약칭 CLDN18.1, 이하 동일)을 안정적으로 발현하는 세포주를 제작하기 위해 Freedom® CHO-S® 키트(Invitrogen, A1369601)를 사용하였다. 먼저, 인간 CLDN18.1(UniProt ID: P56856-1) 전장 유전자를 벡터 pCHO1.0(Invitrogen, A1369601)에 구축하고, 구축된 플라스미드를 화학적 형질감염에 의해 CHO-S 세포(Invitrogen, A1369601)에 형질감염시키고, 형질감염된 세포를 2회 가압 스크리닝하여 CLDN18.1을 발현하는 세포 풀을 얻었다. 이어서, 유세포분석기(MoFlo XDP, Beckman Coulter)를 사용하여 CLDN18.1을 고도로 발현하는 세포를 선별하고, CLDN18.1을 안정적으로 발현하는 모노클로날 클론 세포주 CHO-hCLDN18.1을 희석하여 얻었다.Freedom® CHO-S® kit (Invitrogen, A1369601) was used to construct a cell line stably expressing human claudin 18.1 (abbreviated as CLDN18.1, hereinafter the same) according to the manufacturer's instructions. First, human CLDN18.1 (UniProt ID: P56856-1) full-length gene was constructed in vector pCHO1.0 (Invitrogen, A1369601), and the constructed plasmid was transfected into CHO-S cells (Invitrogen, A1369601) by chemical transfection. After infection, the transfected cells were subjected to two rounds of pressure screening to obtain a pool of cells expressing CLDN18.1. Subsequently, cells highly expressing CLDN18.1 were selected using a flow cytometer (MoFlo XDP, Beckman Coulter), and a monoclonal clonal cell line CHO-hCLDN18.1 stably expressing CLDN18.1 was obtained by dilution.

CLDN18.2를 과발현하는 종양 세포주의 구축Construction of tumor cell lines overexpressing CLDN18.2

인간 CLDN18.2(UniProt ID: P56856-2) 전장 유전자를 내부의 GFP 서열을 치환하는 벡터 pWPT-GFP(Addgene, 12255)에 구축하였고, 구축물을 렌티바이러스의 패키징 벡터 psPAX2(Addgene, 12260) 및 pMD2.G(Addgene, 12259)와 함께 바이러스 패키징을 위해 HEK293T(ATCC, CRL-3216) 세포에 형질감염시켰다. 48시간 및 72시간 동안 배양된 배양 상청액을 각각 수집하고, 렌티바이러스를 PEG8000을 사용하여 농축하였다. 췌장암 DAN-G 세포 및 위암 KATO III 세포에 농축 바이러스를 형질감염시키고, 그런 다음 CLDN18.2를 발현하는 세포를 유세포 분석기(MoFlo XDP, Beckman Coulter)를 사용하여 선별하여 CLDN18.2로 안정적으로 형질감염된 종양 세포주 DAN-G-CLDN18.2 및 KATO III-CLDN18.2를 얻었다.The human CLDN18.2 (UniProt ID: P56856-2) full-length gene was constructed into the vector pWPT-GFP (Addgene, 12255) substituting the internal GFP sequence, and the construct was transformed into the lentiviral packaging vector psPAX2 (Addgene, 12260) and pMD2 HEK293T (ATCC, CRL-3216) cells were transfected for viral packaging with .G (Addgene, 12259). Culture supernatants cultured for 48 hours and 72 hours were collected, respectively, and the lentivirus was concentrated using PEG8000. Pancreatic cancer DAN-G cells and gastric cancer KATO III cells were transfected with the enriched virus, and cells expressing CLDN18.2 were then selected using flow cytometry (MoFlo XDP, Beckman Coulter) to obtain stable transfection with CLDN18.2. Tumor cell lines DAN-G-CLDN18.2 and KATO III-CLDN18.2 were obtained.

실시예 2. 항-hCLDN18.2 모노클로날 항체에 대한 하이브리도마의 스크리닝Example 2. Screening of hybridomas for anti-hCLDN18.2 monoclonal antibodies

본 발명에서는 하이브리도마 기술을 채용하였다. 실시예 1에서 얻은 세포(CHO-huClaudin18.2)를 사용하여 마우스를 면역화하였고(방법 및 과정은 표 1에 나타나 있음), 얻어진 마우스의 비장 세포를 골수종 세포와 축합하여 CLDN18.2 항체를 분비할 수 있는 하이브리도마 세포를 얻었다.Hybridoma technology was employed in the present invention. Mice were immunized using the cells (CHO-huClaudin18.2) obtained in Example 1 (methods and procedures are shown in Table 1), and the spleen cells of the obtained mice condensed with myeloma cells to secrete CLDN18.2 antibody. Hybridoma cells were obtained.

마우스의 예방접종Vaccination of mice

표 1. 실험동물 및 예방접종 안내Table 1. Laboratory animals and vaccination information

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하이브리도마의 축합Condensation of hybridomas

마우스를 희생시키고, 복강을 무균적으로 열어 비장을 꺼내고, 비장 주위에 부착된 결합 조직을 제거하였다. 비장 세포 현탁액을 제조하기 위해 바늘을 사용하여 압착함으로써 비장 세포를 완전히 방출시켰다. 세포 현탁액을 70μM 세포 스크린을 통해 여과하고, RPMI-1640 배지로 1회 세척하고, 1200rpm에서 6분 동안 원심분리하였다. 상청액을 제거하고, 세포를 RBC 용해 완충액(GIBCO)으로 재현탁시킨 후, RBC를 용해시켰다. 현탁액을 원심분리하여 상청액을 제거하고, 세포를 RPMI-1640 배지에 재현탁하고 계수하였다. SP2/0 세포와 적혈구가 용해된 비장 세포를 1:2 내지 1:1의 비율로 혼합하고, 1000rpm에서 6분간 원심분리하였다. 상청액을 제거한 후, 혼합된 세포를 축합 완충액에 재현탁시켰다. 그런 다음 15mL의 축합 완충액을 첨가하고 혼합물을 1000rpm에서 5분 동안 원심분리하여 상청액을 제거하였다. 위의 단계를 한 번 반복하였다. 세포를 적절한 부피의 축합 완충액에 재현탁하고 혼합 세포 밀도를 1×107cells/mL로 조정하였다. 전기축합 장치에 의한 축합 후, 세포를 전기축합 접시에 실온에서 5분 동안 방치하였다. 세포를 원심분리 튜브로 옮기고 1×104 내지 2×104cells/mL로 희석하였다. 100μL의 세포 현탁액을 96-웰 플레이트의 각 웰에 첨가하였다. 배지는 축합 후 5일째에 교체되었다. 배양 10일(또는 그 이상, 세포 성장 상태에 따라 다름) 후, 상청액을 수집하고 유세포 분석기(FACS)로 측정하여 양성 클론을 스크리닝하였다.The mice were sacrificed, the spleen was taken out by aseptically opening the abdominal cavity, and the connective tissue attached around the spleen was removed. The splenocytes were completely released by squeezing using a needle to prepare a splenocyte suspension. The cell suspension was filtered through a 70 μM cell screen, washed once with RPMI-1640 medium, and centrifuged at 1200 rpm for 6 minutes. The supernatant was removed, and the cells were resuspended in RBC Lysis Buffer (GIBCO) before RBC lysis. The suspension was centrifuged to remove the supernatant, and the cells were resuspended in RPMI-1640 medium and counted. SP2/0 cells and spleen cells in which red blood cells were lysed were mixed at a ratio of 1:2 to 1:1, and centrifuged at 1000 rpm for 6 minutes. After removing the supernatant, the mixed cells were resuspended in condensation buffer. Then, 15 mL of condensation buffer was added and the mixture was centrifuged at 1000 rpm for 5 minutes to remove the supernatant. The above steps were repeated once. The cells were resuspended in an appropriate volume of condensation buffer and the mixed cell density was adjusted to 1×10 7 cells/mL. After condensation with an electrocondensation device, the cells were left in an electrocondensation dish at room temperature for 5 minutes. The cells were transferred to a centrifuge tube and diluted to 1×10 4 to 2×10 4 cells/mL. 100 μL of cell suspension was added to each well of a 96-well plate. Medium was changed on day 5 after condensation. After 10 days of culture (or longer, depending on cell growth conditions), supernatants were collected and measured by flow cytometry (FACS) to screen for positive clones.

하이브리도마 세포의 고처리량 스크리닝High-throughput screening of hybridoma cells

항-CLDN18.2 항체를 특이적으로 발현하는 하이브리도마 세포를 유세포분석기(FACS)로 스크리닝하였고, 분비된 항체는 CLDN18.1에 결합하지 않았다.Hybridoma cells specifically expressing the anti-CLDN18.2 antibody were screened by flow cytometry (FACS) and the secreted antibody did not bind to CLDN18.1.

실시예 1에서 얻은 검사 대상 세포(HEK293-hCLDN18.2)를 계수하여 1×106cells/mL로 희석한 후 U자형 바닥 96-웰 플레이트에 100μL/well로 첨가하였다. 세포를 500g에서 5분 동안 원심분리하여 세포 배지를 제거하였다. 96-웰 플레이트의 하이브리도마 배양 상청액을 100μL/웰로 U자형 플레이트에 첨가하고, 세포를 재현탁하고, 현탁액을 30분 동안 얼음 위에 두었다. 현탁액을 500g에서 5분간 원심분리하여 상청액을 제거하고, 세포를 PBS로 1회 세척하였다. FITC 표지된 항-마우스 Fab 2차 항체 100μL(PBS에서 1:500 희석)을 각 웰에 첨가하고, FITC 표지된 항-인간 Fab 2차 항체 100μL를 양성 대조군 항체에 첨가하였다. 혼합물을 어둠 속에서 얼음 위에서 30분 동안 인큐베이션하였다. 혼합물을 500g에서 5분간 원심분리하여 상청액을 제거하고, 세포를 PBS로 1회 세척하였다. 세포를 50μL의 1x PBS로 재현탁시키고 FACS에 의해 결정하였다.The cells to be tested (HEK293-hCLDN18.2) obtained in Example 1 were counted, diluted to 1×10 6 cells/mL, and then added to a U-shaped bottom 96-well plate at 100 μL/well. The cell media was removed by centrifuging the cells at 500g for 5 minutes. The hybridoma culture supernatant from the 96-well plate was added to the U-shaped plate at 100 μL/well, the cells were resuspended, and the suspension was placed on ice for 30 minutes. The suspension was centrifuged at 500 g for 5 minutes to remove the supernatant, and the cells were washed once with PBS. 100 μL of FITC-labeled anti-mouse Fab secondary antibody (diluted 1:500 in PBS) was added to each well, and 100 μL of FITC-labeled anti-human Fab secondary antibody was added to the positive control antibody. The mixture was incubated for 30 minutes on ice in the dark. The mixture was centrifuged at 500 g for 5 minutes to remove the supernatant, and the cells were washed once with PBS. Cells were resuspended in 50 μL of 1x PBS and determined by FACS.

인간 CLDN18.2에는 결합하지만 인간 CLDN18.1에는 결합하지 않는 하이브리도마 세포의 9개 균주를 얻기 위해 양성 클론을 위에 기재된 것과 동일한 방식으로 CHO-hCLDN18.1에 대해 다시 스크리닝하였다. 하이브리도마 세포의 8개 균주는 Bal b/c 마우스로부터 유래되었고, 하이브리도마 세포의 1개 균주는 H2L2 완전 인간 형질전환 마우스로부터 유래되었다. 자세한 내용은 표 2를 참조한다.Positive clones were screened again for CHO-hCLDN18.1 in the same manner as described above to obtain 9 strains of hybridoma cells that bind human CLDN18.2 but not human CLDN18.1. Eight strains of hybridoma cells were derived from Bal b/c mice and one strain of hybridoma cells was derived from H2L2 fully human transgenic mice. See Table 2 for details.

표 2. 하이브리도마의 고처리량 스크리닝을 통해 얻은 후보 항체 클론Table 2. Candidate antibody clones obtained from high-throughput screening of hybridomas.

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실시예 3. 항체 유전자 획득Example 3. Obtaining antibody genes

실시예 2에서 얻은 하이브리도마 세포의 9개 균주(3G3, 14A5, 25C7, 38F8, 69H9, 46F6, 59C1, 51H10 및 HB37A6)의 항체 경쇄 및 중쇄 유전자 서열을 분자생물학 기술을 사용하여 추출하였다. 9개의 하이브리도마 세포 각각의 총 RNA를 RNA 추출 키트(Biomiga, R6311-02)로 추출한 후 PrimeScript II 제1 표준 cDNA 합성 키트(Takara, 6110A)로 역전사하여 cDNA를 얻었다. 항체의 중쇄 및 경쇄 가변 영역 서열을 각각 축퇴 프라이머로 증폭하여 pMD20-T 벡터(Takara, 6028)에 삽입하고, 라이게이션 및 형질전환 후 클론을 선별하여 시퀀싱하였다.The antibody light chain and heavy chain gene sequences of 9 strains (3G3, 14A5, 25C7, 38F8, 69H9, 46F6, 59C1, 51H10 and HB37A6) of hybridoma cells obtained in Example 2 were extracted using molecular biology techniques. Total RNA from each of the nine hybridoma cells was extracted with an RNA extraction kit (Biomiga, R6311-02), and then reverse transcribed with a PrimeScript II First Standard cDNA Synthesis Kit (Takara, 6110A) to obtain cDNA. The heavy chain and light chain variable region sequences of the antibody were amplified with degenerate primers, respectively, inserted into the pMD20-T vector (Takara, 6028), and after ligation and transformation, clones were selected and sequenced.

항체 서열은 표 A를 참조한다.See Table A for antibody sequences.

실시예 4. 재조합 CLDN18.2 항체의 제조Example 4. Preparation of recombinant CLDN18.2 antibody

실시예 2에서 스크리닝된 9개의 항체(3G3, 14A5, 25C7, 38F8, 69H9, 46F6, 59C1, 51H10 및 HB37A6)와 대조군 항체인 졸베툭시맙(Zmab으로 약칭, INN117에서 유래된 서열)은 전장 모노클로날 항체로서 HEK293 세포(Invitrogen, A14527)에서 발현되었다. 발현 벡터를 먼저 구축하였다. 9쌍의 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 각각 인간 IgG1의 중쇄 불변 영역(서열번호 5) 및 경쇄 카파 불변 영역(서열번호 10)의 N-말단에 각각 위치하였고, N 말단 신호 펩티드를 갖는 pcDNA3.1 발현 벡터로 구축하여 경쇄 및 중쇄 발현 벡터를 얻었다. 얻어진 경쇄 및 중쇄 발현 벡터를 각각 PEI(Polysciences Inc, 23966)로 동시 형질감염시켜 HEK293 세포를 일시적으로 형질감염시키고, 배양 7일 후 배지 상청액을 수집하였다. 상청액을 Protein A 컬럼(Hitrap Mabselect Sure, GE 11-0034-95)으로 정제한 후 한외여과 및 PBS(Gibco, 70011-044)로 완충액 교환하였다. 농도는 A280 방법으로 결정하고, 순도는 SEC-HPLC 방법으로 결정하여 95%보다 큰 순도의 항체 용액을 얻었다.The nine antibodies (3G3, 14A5, 25C7, 38F8, 69H9, 46F6, 59C1, 51H10 and HB37A6) screened in Example 2 and the control antibody zolvetuximab (abbreviated as Zmab, sequence derived from INN117) were full-length monoclonal It was expressed in HEK293 cells (Invitrogen, A14527) as a lonal antibody. Expression vectors were first constructed. Nine pairs of heavy chain variable regions and light chain variable regions were respectively located at the N-terminus of the heavy chain constant region (SEQ ID NO: 5) and light chain kappa constant region (SEQ ID NO: 10) of human IgG1, pcDNA3 having an N-terminal signal peptide. 1 expression vector to obtain light chain and heavy chain expression vectors. The resulting light chain and heavy chain expression vectors were co-transfected with PEI (Polysciences Inc, 23966) to transiently transfect HEK293 cells, and after 7 days of culture, the medium supernatant was collected. The supernatant was purified with a Protein A column (Hitrap Mabselect Sure, GE 11-0034-95), followed by ultrafiltration and buffer exchange with PBS (Gibco, 70011-044). The concentration was determined by the A280 method and the purity was determined by the SEC-HPLC method to obtain an antibody solution with a purity greater than 95%.

실시예 5. BLI에 의한 항원에 대한 재조합 CLDN18.2 항체의 친화성 결정Example 5. Affinity Determination of Recombinant CLDN18.2 Antibodies for Antigens by BLI

인간 CLDN18.2에 대한 본 발명의 항체의 결합에 대한 평형 해리 상수(KD)를 생물층 간섭계(BLI)에 의해 결정하였다. 기존의 방법에 따라 BLI 친화성 검정을 진행하였다(Estep, P등, High throughput solution based measurement of antibody-antigen affinity and epitope binding. MAbs, 2013.5(2): p. 270-8). AHC(18-5060, 포테바이오) 센서를 SD 완충액(1x PBS, BSA 0.1%, Tween-20 0.05%)에 담갔다. 100μL의 SD 완충액, 각 항체 및 인간 클라우딘18.2 단백질(P50251802, GenScript)을 각각 96웰 검정 폴리스티렌 반면적 마이크로플레이트(Greiner, 675076)에 첨가하였다. 검출은 Fortebio Octet Red96을 사용하여 수행하였고, KD 값은 Fortebio Octet 분석 소프트웨어를 사용하여 분석하였다. 항체의 친화성 데이터는 표 3에 나타나 있다: 9개의 항체 모두 높은 친화성을 가지며, 여기서 3G3이 대조군 항체 Zmab에 대한 친화성과 비교할 만한 것을 제외하고, 다른 모든 항체는 대조군 항체 Zmab보다 우수하다.The equilibrium dissociation constants (K D ) for binding of antibodies of the invention to human CLDN18.2 were determined by biolayer interferometry (BLI). BLI affinity assay was performed according to the existing method (Estep, P et al., High throughput solution based measurement of antibody-antigen affinity and epitope binding. MAbs , 2013.5(2): p. 270-8). The AHC (18-5060, Fortebio) sensor was immersed in SD buffer (1x PBS, BSA 0.1%, Tween-20 0.05%). 100 μL of SD buffer, each antibody and human claudin 18.2 protein (P50251802, GenScript) were each added to a 96-well assay polystyrene half-plate microplate (Greiner, 675076). Detection was performed using Fortebio Octet Red96, and KD values were analyzed using Fortebio Octet analysis software. The affinity data of the antibodies are shown in Table 3: All nine antibodies have high affinity, except that 3G3 has comparable affinity to the control antibody Zmab, all other antibodies are superior to the control antibody Zmab.

표 3. CLDN18.2 항체의 친화성 상수Table 3. Affinity constants of CLDN18.2 antibody

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실시예 6. CLDN18 세포에 대한 CLDN18.2 항체의 결합 특이성Example 6. Binding specificity of CLDN18.2 antibody to CLDN18 cells

실시예 1에서 얻어진 인간 CLDN18.2 및 인간 CLDN18.1(즉, 실시예에 기재된 바와 같이 제조된 CHO-hCLDN18.2 및 CHO-hCLDN18.1)로 안정적으로 형질감염된 CHO-S 세포주에 대한 위의 9개의 항체 각각의 결합을 유세포 분석(FACS)에 의해 결정하였다. 실험 방법에 대해 실시예 2를 참조하였다. 실험 데이터는 GraphPad Prism 소프트웨어를 사용하여 분석되었으며, 도 1 및 도 2를 얻었다. 도 1 및 도 2에 나타난 바와 같이, 9개의 항체 모두는 인간 CLDN18.2에 특이적으로 결합하지만 인간 CLDN18.1에는 결합하지 않는다.The above for CHO-S cell lines stably transfected with human CLDN18.2 and human CLDN18.1 obtained in Example 1 (i.e., CHO-hCLDN18.2 and CHO-hCLDN18.1 prepared as described in Example). Binding of each of the nine antibodies was determined by flow cytometry (FACS). See Example 2 for the experimental method. Experimental data were analyzed using GraphPad Prism software, and Figures 1 and 2 were obtained. As shown in Figures 1 and 2, all nine antibodies specifically bind to human CLDN18.2 but not to human CLDN18.1.

실시예 7. CLDN18.2 항체에 대한 리포터 유전자 기반 ADCC 활성 분석Example 7. Reporter gene-based ADCC activity assay for CLDN18.2 antibody

위의 9개 항체의 ADCC 활성은 루시페라제 리포터 유전자를 함유하는 ADCC 효과기 세포(Promega, G7102)를 사용하여 결정하였다. 대수 성장기의 표적 세포 CHO-hCLDN18.2 및 ADCC 효과기 세포를 별도로 계수하고 1:6의 비율로 50μL의 총 부피, 웰당 총 1.75×105개의 세포로 96-웰 흰색 바닥 플레이트에 첨가하였다. 그런 다음 위의 각 항체를 각 웰에 첨가하고 세포를 37°C, 5% CO2에서 8 내지 10시간 동안 인큐베이션하였다. 항체 각각의 농도는 하기와 같았다: 출발점은 3nM이었고, 그 다음 3배 희석을 수행하여 총 9개의 농도점을 얻었다; 즉, 각 항체에 사용된 농도는 3nM, 1nM, 0.333nM, 0.111nM, 0.037nM, 0.123nM, 0.0041nM, 0.0014nM 및 0.00046nM이다. 제조사의 지시에 따라 Bio-GloTM 루시페라아제 시약(Promega, G7940)을 사용하여 형광검출을 수행하였다. 도 3의 결과에 나타난 바와 같이, 9개의 항체 모두는 대조군 항체 Zmab의 ADCC 활성과 유사한 ADCC 활성을 갖는다.ADCC activity of the above 9 antibodies was determined using ADCC effector cells (Promega, G7102) containing a luciferase reporter gene. Target cells CHO-hCLDN18.2 and ADCC effector cells in logarithmic growth phase were counted separately and added to 96-well white bottom plates at a ratio of 1:6 in a total volume of 50 μL, total 1.75×10 5 cells per well. Then, each of the above antibodies was added to each well and the cells were incubated at 37°C, 5% CO 2 for 8 to 10 hours. The concentration of each antibody was as follows: starting point was 3 nM, then 3-fold dilution was performed to obtain a total of 9 concentration points; That is, the concentrations used for each antibody are 3nM, 1nM, 0.333nM, 0.111nM, 0.037nM, 0.123nM, 0.0041nM, 0.0014nM and 0.00046nM. Fluorescence detection was performed using Bio-Glo ™ luciferase reagent (Promega, G7940) according to the manufacturer's instructions. As shown in the results of Figure 3, all nine antibodies have ADCC activity similar to that of the control antibody Zmab.

실시예 8. 마우스 항체의 인간화Example 8. Humanization of Mouse Antibodies

실시예 3에서 8개의 마우스 항체(3G3, 14A5, 25C7, 38F8, 69H9, 46F6, 59C1 및 51H10)가 인간화를 위해 선택되었다. 항체의 CDR 영역은 중쇄 CDR1에 대한 Abm 명명 규칙 및 나머지 CDR에 대한 Kabat 명명 규칙으로 결정되었다. 유사성을 위한 서열 정렬을 통해, 뮤린 항체 가변 영역 서열과 비교하여 가장 유사도가 높은 인간 생식계열 유전자 서열을 인간화 항체의 프레임워크 영역 주형으로 선택하고, 그런 다음 CDR 영역을 주형에 이식하였다. Discovery Studio 소프트웨어를 이용하여 각 항체의 3차원 구조를 구축하였으며, CDR 영역에 영향을 미치는 프레임워크 영역의 아미노산을 역돌연변이시켜 인간화 항체 서열을 얻었다. 인간화 항체 Hz3G3, Hz14A5, Hz25C7, Hz38F8, Hz69H9, Hz46F6, Hz59C1 및 Hz51H10의 서열은 표 A에 나타나 있다.In Example 3, 8 mouse antibodies (3G3, 14A5, 25C7, 38F8, 69H9, 46F6, 59C1 and 51H10) were selected for humanization. The CDR regions of the antibody were determined with the Abm naming convention for the heavy chain CDR1 and the Kabat naming convention for the remaining CDRs. Through sequence alignment for similarity, the human germline gene sequence with the highest similarity compared to the murine antibody variable region sequence was selected as the framework region template of the humanized antibody, and then the CDR region was grafted onto the template. A three-dimensional structure of each antibody was constructed using Discovery Studio software, and amino acids in the framework region affecting the CDR region were reverse mutated to obtain a humanized antibody sequence. The sequences of the humanized antibodies Hz3G3, Hz14A5, Hz25C7, Hz38F8, Hz69H9, Hz46F6, Hz59C1 and Hz51H10 are shown in Table A.

이들 인간화 재조합 항체를 실시예 4에 기재된 방법에 따라 제조 및 정제하여 95%보다 큰 순도를 갖는 PBS 중 항체 용액을 수득하였다.These humanized recombinant antibodies were prepared and purified according to the method described in Example 4 to obtain antibody solutions in PBS with greater than 95% purity.

실시예 9. SPR에 의한 CLDN18.2 항체의 친화성 결정Example 9. Affinity determination of CLDN18.2 antibody by SPR

인간 CLDN18.2에 대한 8개의 인간화 항체(Hz3G3, Hz14A5, Hz25C7, Hz38F8, Hz69H9, Hz46F6, Hz59C1 및 Hz51H10) 및 1개의 완전한 인간 항체(HB37A6)의 결합에 대한 평형 해리 상수(KD)를 표면 플라즈몬 공명(SPR)에 의해 결정하였다. 제조업체의 지침에 따라, 인간 클라우딘18.2(GenScrip, P50251802)를 아미노 커플링 키트(GE Healthcare, BR-1006-33)를 사용하여 CM5 칩(GE Healthcare, 29-1496-03)의 표면에 결합시켰고, 나머지 활성화 부위는 결합 후 1M 에탄올아민을 주입하여 차단되었다. 제조업체의 지침에 따라 칩 표면의 항원과 이동상의 항체 간의 결합 및 해리를 Biacore(GE Healthcare, T200)로 결정하여 친화성 및 동역학 상수를 얻었다. 구배 희석 후 항체(0 내지 100nM)는 결합 시간 180초, 해리 시간 600초로 낮은 농도에서 높은 농도의 순서로 칩 표면 위로 흘렀다. 마지막으로, 칩은 10mM 글리신 pH 1.5(GE Healthcare, BR-1003-54)를 사용하여 재생되었다. 데이터 결과의 동역학 분석 결과는 1:1 결합 모델과 함께 Biacore T200 분석 소프트웨어를 사용하여 수행되었다. 표 4에 나타난 바와 같이, Hz25C7 및 Hz3G3을 제외한 나머지 항체들은 모두 대조군 항체 Zmab보다 친화성이 더 우수하였다.Equilibrium dissociation constants (K D ) for the binding of 8 humanized antibodies to human CLDN18.2 (Hz3G3, Hz14A5, Hz25C7, Hz38F8, Hz69H9, Hz46F6, Hz59C1 and Hz51H10) and one fully human antibody (HB37A6) to surface plasmon It was determined by resonance (SPR). According to the manufacturer's instructions, human claudin18.2 (GenScrip, P50251802) was coupled to the surface of a CM5 chip (GE Healthcare, 29-1496-03) using an amino coupling kit (GE Healthcare, BR-1006-33), The remaining active sites were blocked by injecting 1M ethanolamine after binding. Association and dissociation between antigens on the chip surface and antibodies on the mobile phase were determined with Biacore (GE Healthcare, T200) according to the manufacturer's instructions to obtain affinity and kinetic constants. After gradient dilution, antibodies (0 to 100 nM) were flowed over the chip surface in the order of low concentration to high concentration with an association time of 180 seconds and a dissociation time of 600 seconds. Finally, the chip was regenerated using 10 mM glycine pH 1.5 (GE Healthcare, BR-1003-54). Kinetic analysis of the data results were performed using Biacore T200 analysis software with a 1:1 binding model. As shown in Table 4, all the other antibodies except for Hz25C7 and Hz3G3 had better affinity than the control antibody Zmab.

표 4. SPR에 의한 CLDN18.2 항체의 친화성 상수(평형 해리 상수)의 결정Table 4. Determination of affinity constant (equilibrium dissociation constant) of CLDN18.2 antibody by SPR

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Figure pct00007

실시예 10. 인간화 항체에 대한 리포터 유전자 기반 ADCC 활성 검정Example 10. Reporter gene-based ADCC activity assay for humanized antibodies

SPR 친화성 데이터를 기반으로 리포터 유전자 기반 ADCC 활성 분석을 위해 Hz14A5, Hz38F8, Hz69H9, Hz46F6, Hz59C1 및 Hz51H10이 선택되었다. 실험 과정에 대해 실시예 7을 참조하였다. 도 4에 나타난 바와 같이, 인간화 항체 Hz14A5, Hz38F8, Hz69H9, Hz46F6, Hz59C1 및 Hz51H10은 모두 대조군 항체와 비교할 만한 ADCC 활성을 나타낸다.Based on the SPR affinity data, Hz14A5, Hz38F8, Hz69H9, Hz46F6, Hz59C1 and Hz51H10 were selected for the reporter gene-based ADCC activity assay. See Example 7 for the experimental procedure. As shown in Figure 4, the humanized antibodies Hz14A5, Hz38F8, Hz69H9, Hz46F6, Hz59C1 and Hz51H10 all show comparable ADCC activity to the control antibody.

실시예 11. 종양 세포주에 대한CLDN18.2 항체의 결합Example 11. Binding of CLDN18.2 antibody to tumor cell lines

위의 결과를 기초하여, 1개의 인간화 항체 Hz69H9 및 1개의 완전한 인간 항체 HB37A6이 추가 결정을 위해 선택되었다. 실시예 4를 참조하면, 위암 세포주 NUGC-4, 위암 세포주 KATO III-hCLDN18.2 및 췌장암 세포주 DAN-G-hCLDN18.2 각각에 대한 두 항체의 결합은 FACS에 의해 결정되었다. 도 5는 인간화 항체 Hz69H9 및 완전한 인간 항체 HB37A6은 둘 다 비교적 양호한 종양 세포 특이성 결합을 갖으며, 이는 대조군 항체 Zmab보다 더 나음을 나타낸다.Based on the above results, one humanized antibody Hz69H9 and one fully human antibody HB37A6 were selected for further determination. Referring to Example 4, the binding of the two antibodies to each of the gastric cancer cell line NUGC-4, the gastric cancer cell line KATO III-hCLDN18.2 and the pancreatic cancer cell line DAN-G-hCLDN18.2 was determined by FACS. Figure 5 shows that both the humanized antibody Hz69H9 and the fully human antibody HB37A6 have relatively good tumor cell specific binding, better than the control antibody Zmab.

실시예 12. CLDN18.2 항체에 대한 CDC 활성 검정Example 12. CDC activity assay for CLDN18.2 antibody

항체 분자의 CDC 활성은 KATO III-CLDN18.2 세포주를 사용하여 결정하였다. 1×105개의 표적 세포 KATO III-hCLDN18.2를 96-웰 플레이트에 첨가한 후, 적절한 농도의 항체 분자를 첨가하였다. 반응 시스템을 37°C에서 30분 동안 인큐베이션한 다음, 새로 제조된 인간 혈청 보체(Sigma, S1764)를 첨가하였다. 항체의 농도는 다음과 같았다: 초기 농도가 150μg/mL인 연속 희석 농도, 3배 희석 후 총 9개의 농도점. 반응 시스템을 37°C의 인큐베이터에서 3시간 동안 다시 인큐베이션하고, 그런 다음 CCK-8 키트(Dojindo, CK04)를 사용하여 마이크로플레이트 판독기(ThermoFisher, MULTISKAN FC)로 데이터를 판독하였다. 결과는 도 6에 나타나 있고, 여기서 Hz69H9 및 HB37A6은 대조군 항체 Zmab와 비교할 만한 CDC 활성을 갖는다.The CDC activity of the antibody molecules was determined using the KATO III-CLDN18.2 cell line. After adding 1×10 5 target cells KATO III-hCLDN18.2 to a 96-well plate, an appropriate concentration of antibody molecules was added. The reaction system was incubated at 37 °C for 30 minutes, then freshly prepared human serum complement (Sigma, S1764) was added. The concentrations of the antibodies were as follows: serially diluted concentrations with an initial concentration of 150 μg/mL, a total of 9 concentration points after 3-fold dilution. The reaction system was incubated again for 3 h in an incubator at 37 °C, and then data was read with a microplate reader (ThermoFisher, MULTISKAN FC) using the CCK-8 kit (Dojindo, CK04). The results are shown in Figure 6, where Hz69H9 and HB37A6 have comparable CDC activity to the control antibody Zmab.

실시예 13. CLDN18.2 항체에 대한 ADCC 활성 검정Example 13. ADCC activity assay for CLDN18.2 antibody

인간 말초 혈액 단핵 세포(PBMC, Allcell 또는 Saily)를 완전 배지 RPMI-1640(Hyclone, SH30809.01) +10% 소 태아 혈청(FBS, Hyclone, SH30084.03)에 재현탁시켰고, PBMC를 1×107cells/mL로 조정하였다. 클라우딘18.2를 과발현하는 NUGC-4 세포 또는 DAN-G 종양 표적 세포 DAN-G-CLDN18.2를 Far-Red(Invitrogen)로 10분 동안 표지하고, 2회 세척하고, 완전 배지 RPMI-1640(Hyclone, SH30809.01) +10% 소 태아 혈청(FBS, Hyclone, SH30084.03)에 재현탁하였다. 세포 농도를 2×105cells/mL로 조정하였다. PBMC를 각각의 항-클라우딘18.2 모노클로날 클론 항체 Hz69H9 및 HB37A6 및 대조군 항체 Zmab과 혼합하였다(각 항체에 대해 초기 농도가 30nM, 3배 연속 희석, 총 12개의 농도점). 혼합물을 37℃에서 30분 동안 인큐베이션한 다음, 50μL의 종양 표적 세포(1×104)를 50:1의 효과기 대 표적 비율로 50μL의 PBMC 효과기 세포에 첨가하였다. 혼합물을 37℃에서 8시간 동안 인큐베이션하고 원심분리하고, 세포를 10μg/mL의 최종 농도로 요오드화프로피디움(PI, Invitrogen)에 재현탁시켰고, Far-Red 및 PI 이중 양성 세포는 유세포 분석기(BD, FACSCELESTA)에 의해 검출되었다. 종양 표적 세포에 대한 사멸 비율은 FACSDiva 소프트웨어(BD, Celestsa)에 의해 계산되었다.Human peripheral blood mononuclear cells (PBMC, Allcell or Saily) were resuspended in complete medium RPMI-1640 (Hyclone, SH30809.01) + 10% fetal bovine serum (FBS, Hyclone, SH30084.03), and PBMCs were 1 × 10 It was adjusted to 7 cells/mL. NUGC-4 cells overexpressing claudin18.2 or DAN-G tumor target cells DAN-G-CLDN18.2 were labeled with Far-Red (Invitrogen) for 10 minutes, washed twice, and cultured in complete medium RPMI-1640 (Hyclone, SH30809.01) + 10% fetal bovine serum (FBS, Hyclone, SH30084.03). The cell concentration was adjusted to 2×10 5 cells/mL. PBMCs were mixed with the respective anti-Claudin18.2 monoclonal antibodies Hz69H9 and HB37A6 and the control antibody Zmab (initial concentration 30 nM for each antibody, 3-fold serial dilution, total of 12 concentration points). The mixture was incubated at 37° C. for 30 minutes, then 50 μL of tumor target cells (1×10 4 ) was added to 50 μL of PBMC effector cells at an effector to target ratio of 50:1. The mixture was incubated at 37°C for 8 hours, centrifuged, cells were resuspended in propidium iodide (PI, Invitrogen) to a final concentration of 10 μg/mL, Far-Red and PI double positive cells were analyzed by flow cytometry (BD, FACSCELESTA). Percentage killing of tumor target cells was calculated by FACSDiva software (BD, Celestsa).

항-클라우딘18.2 모노클로날 항체 의존성 세포매개 NUGC-4 종양 세포독성의 결과는 도 7A 및 도 7B 에 나타나 있고, 여기서 대조군 항체 Zmab뿐만 아니라 Hz69H9 및 HB37A6은 NUGC-4 세포에 대한 NK 세포의 세포독성 사멸을 용량-의존적으로 매개할 수 있으며, 종양 세포에 대한 Hz69H9 및 HB37A6의 최대 사멸량은 대조군 항체 Zmab보다 더 크다. Hz69H9 및 HB37A6이 더 강한 세포 매개 종양 세포독성을 갖는 것으로 나타난다. 항-클라우딘18.2 모노클로날 항체 의존성 세포매개 DAN-G 종양 세포독성 결과는 도 7C 및 도 7D에 나타나 있고, 여기서 대조군 항체 Zmab뿐만 아니라 Hz69H9 및 HB37A6은 종양 세포에 대한 NK 세포의 세포독성 사멸을 용량-의존적으로 매개할 수 있으며, 2개의 상이한 기증자의 PBMC에서 HB37A6 및 Hz69H9에 의해 매개되는 최대 사멸량은 대조군 항체 Zmab보다 더 크다. 위의 결과는 Hz69H9 및 HB37A6이 대조군 항체 Zmab에 비해 더 강한 세포-매개 종양 세포독성을 갖는다는 것을 나타낸다.The results of anti-Claudin18.2 monoclonal antibody dependent cell-mediated NUGC-4 tumor cytotoxicity are shown in Figures 7A and 7B, where the control antibodies Zmab as well as Hz69H9 and HB37A6 were cytotoxic to NK cells against NUGC-4 cells. Killing can be mediated in a dose-dependent manner, and the maximal amount of killing of Hz69H9 and HB37A6 on tumor cells is greater than that of the control antibody Zmab. Hz69H9 and HB37A6 appear to have stronger cell-mediated tumor cytotoxicity. Anti-Claudin 18.2 monoclonal antibody dependent cell-mediated DAN-G tumor cytotoxicity results are shown in Figures 7C and 7D, where the control antibodies Zmab as well as Hz69H9 and HB37A6 were capable of cytotoxic killing of NK cells against tumor cells. -dependently, the maximal amount of killing mediated by HB37A6 and Hz69H9 in PBMCs from two different donors is greater than that of the control antibody Zmab. The above results indicate that Hz69H9 and HB37A6 have stronger cell-mediated tumor cytotoxicity compared to the control antibody Zmab.

실시예 14. CLDN18.2 항체의 체내 항종양 효과Example 14. In vivo antitumor effect of CLDN18.2 antibody

1. DAN-G-CLDN18.2 종양 보유 마우스 모델에 대한 항체의 활성1. Antibody activity against DAN-G-CLDN18.2 tumor-bearing mouse model

인간 췌장암이 있는 NOD-SCID 마우스(베이징 바이탈 리버 실험동물기술유한회사에서 구입한 암컷 NOD-SCID 마우스(15 내 18g) 60마리)에서 항종양 효과를 테스트하기 위해 HZ69H9 및 HB37A6 항체를 선택하였다. 실시예 1에서 구축한 인간 췌장암 세포 DAN-G-CLDN18.2를 후속 체내 실험을 위해 통상적으로 계대배양하였다. 세포를 원심분리하여 수집하고, DAN-G-CLDN18.2 세포를 PBS(1x)로 분산시켜 세포 밀도가 12×105개/mL인 현탁액을 얻었다. 세포 현탁액을 마트리겔과 1:1로 혼합하여 세포 농도가 6×105개/mL인 세포 현탁액을 제조하였다. 0일째에, 0.2mL의 세포 현탁액을 NOD-SCID 마우스 각각의 우측 복부 영역에 피하 접종하여 DAN-G-CLDN18.2 종양-보유 마우스 모델을 확립하였다.HZ69H9 and HB37A6 antibodies were selected to test antitumor effects in NOD-SCID mice with human pancreatic cancer (60 female NOD-SCID mice (15 to 18 g) purchased from Beijing Vital River Experimental Animal Technology Co., Ltd.). Human pancreatic cancer cells DAN-G-CLDN18.2 constructed in Example 1 were routinely subcultured for subsequent in vivo experiments. Cells were collected by centrifugation, and DAN-G-CLDN18.2 cells were dispersed in PBS (1x) to obtain a suspension with a cell density of 12x10 5 cells/mL. The cell suspension was mixed with Matrigel at a ratio of 1:1 to prepare a cell suspension having a cell concentration of 6×10 5 cells/mL. On day 0, a DAN-G-CLDN18.2 tumor-bearing mouse model was established by inoculating 0.2 mL of the cell suspension subcutaneously into the right abdominal region of each NOD-SCID mouse.

각 마우스의 종양 부피는 종양 세포 접종 5일 후 측정하였으며, 종양 부피가 43.36mm3 내지 89.47mm3 범위인 마우스를 선택하여 종양 부피의 크기에 따라 복잡한 방식으로 그룹으로 나누었다(각 그룹에 8마리의 마우스).The tumor volume of each mouse was measured 5 days after tumor cell inoculation, and mice with a tumor volume ranging from 43.36 mm 3 to 89.47 mm 3 were selected and divided into groups in a complex manner according to the size of the tumor volume (8 mice in each group). mouse).

대조군 항체 Zmab 뿐만 아니라 hIgG(Equitech-Bio, 배치 번호 160308-02), Hz69H9 및 HB37A6을 접종 후 5일, 9일, 12일 및 16일째에 매먼 10mg/kg의 용량으로 마우스에 투여하였고, 마우스의 종양 부피를 주 2 내지 3회 모니터링하였다. 종양 부피 측정: 종양의 장축(L)의 최대 길이와 단축(W)의 최대 길이는 버니어 칼리퍼(vernier caliper)로 측정했고, 종양의 부피는 다음 공식으로 계산했다: V = L×W2/2. 마우스의 체중을 전자저울을 사용하여 측정하였다.The control antibody Zmab as well as hIgG (Equitech-Bio, batch number 160308-02), Hz69H9 and HB37A6 were administered to mice at a dose of 10 mg/kg Mamon on days 5, 9, 12 and 16 after inoculation, and the Tumor volume was monitored 2-3 times a week. Tumor volume measurement: The maximum length of the major axis (L) and the maximum length of the minor axis (W) of the tumor were measured with a vernier caliper, and the tumor volume was calculated by the following formula: V = L×W 2 / 2. The body weight of the mice was measured using an electronic balance.

2. NUCG-4 종양 보유 마우스 모델에 대한 항체의 활성2. Antibody activity against NUCG-4 tumor-bearing mouse model

인간 위암이 있는 NOG 마우스(베이징 바이탈 리버 실험동물기술유한회사에서 구입한 암컷 NOG 마우스(15 내 18g) 100마리)에서 항종양 효과를 테스트하기 위해 HZ69H9 및 HB37A6 항체를 선택하였다. PBMC 세포(Allcell)를 소생시키고 원심분리하여 세포를 수집하였다. PBMC 세포를 PBS(1x)로 분산시켜 세포 밀도가 2.5x106개/mL인 세포 현탁액을 얻었다. 0일째에, NOG 인간화 마우스 모델을 확립하기 위해 0.2mL의 세포 현탁액을 안과 정맥을 통해 각 NOG 마우스에 주사하였다.HZ69H9 and HB37A6 antibodies were selected to test antitumor effects in NOG mice with human gastric cancer (100 female NOG mice (15 to 18 g) purchased from Beijing Vital River Experimental Animal Technology Co., Ltd.). PBMC cells (Allcell) were resuscitated and cells were collected by centrifugation. The PBMC cells were dispersed in PBS (1x) to obtain a cell suspension with a cell density of 2.5x10 6 cells/mL. On day 0, 0.2 mL of the cell suspension was injected into each NOG mouse via the ophthalmic vein to establish the NOG humanized mouse model.

NUGC-4 세포를 소생시키고 후속 체내 실험을 위해 통상적으로 계대배양하였다. 세포를 원심분리하여 수집하고, NUGC-4 세포를 PBS(1x)로 분산시켜 세포 밀도가 12×106개/mL인 현탁액을 얻었다. 현탁액을 마트리겔과 1:1로 혼합하여 세포 농도가 6×106개/mL인 세포 현탁액을 제조하였다. 5일째에, 0.2mL의 세포 현탁액을 NOG 인간화 마우스 각각의 우측 복부 영역에 피하 접종하여 NUCG-4 종양 보유 마우스 모델을 확립하였다.NUGC-4 cells were resuscitated and subcultured routinely for subsequent in vivo experiments. Cells were collected by centrifugation, and NUGC-4 cells were dispersed in PBS (1x) to obtain a suspension with a cell density of 12×10 6 cells/mL. The suspension was mixed with Matrigel at a ratio of 1:1 to prepare a cell suspension having a cell concentration of 6×10 6 cells/mL. On day 5, 0.2 mL of the cell suspension was subcutaneously inoculated into the right abdominal region of each NOG humanized mouse to establish a NUCG-4 tumor-bearing mouse model.

마우스를 종양 세포 접종 후 1일째에 무작위로 그룹으로 나누었다(그룹당 7마리의 마우스). 대조군 항체 Zmab 뿐만 아니라 hIgG(Equitech-Bio, 배치 번호 160308-02), Hz69H9 및 HB37A6을 접종 후 1일, 5일, 8일 및 12일째에 매번 10mg/kg의 용량으로 마우스에 투여하였고, 마우스의 종양 부피와 체중을 주 2 내지 3회 모니터링하였다. 종양 부피 측정: 종양의 장축(L)의 최대 길이와 단축(W)의 최대 길이는 버니어 칼리퍼(vernier caliper)로 측정했고, 종양의 부피는 다음 공식으로 계산했다: V = L×W2/2. 마우스의 체중을 전자저울을 사용하여 측정하였다.Mice were randomly divided into groups on day 1 after tumor cell inoculation (7 mice per group). The control antibody Zmab as well as hIgG (Equitech-Bio, batch number 160308-02), Hz69H9 and HB37A6 were administered to mice at a dose of 10 mg/kg each time on days 1, 5, 8 and 12 after inoculation, Tumor volume and body weight were monitored 2-3 times a week. Tumor volume measurement: The maximum length of the major axis (L) and the maximum length of the minor axis (W) of the tumor were measured with a vernier caliper, and the tumor volume was calculated by the following formula: V = L×W 2 / 2. The body weight of the mice was measured using an electronic balance.

3. 결과3. Results

결과는 도 8에 나타나 있고, 여기서 대조군 항체 Zmab 뿐만 아니라 Hz69H9 및 HB37A6은 모두 인간 췌장암 DAN-G-hCLDN18.2 마우스 모델에서 종양 성장을 억제할 수 있다. 도 9에 나타난 바와 같이, 인간 위암 NUGC-4 마우스 모델에서 Hz69H9 및 HB37A6은 대조군 항체 Zmab보다 더 우수한 항종양 효과를 나타낸다.The results are shown in Figure 8, where both Hz69H9 and HB37A6 as well as the control antibody Zmab are able to inhibit tumor growth in the human pancreatic cancer DAN-G-hCLDN18.2 mouse model. As shown in Figure 9, in the human gastric cancer NUGC-4 mouse model, Hz69H9 and HB37A6 exhibit better antitumor effects than the control antibody Zmab.

접종 26일째에 상대적 종양 성장 억제율(TGI%)을 계산하였으며, 계산식은 하기와 같다.On the 26th day of inoculation, the relative tumor growth inhibition rate (TGI%) was calculated, and the formula is as follows.

TGI% = 100%×(대조군의 종양 부피-치료군의 종양 부피)/(대조군의 종양 부피-투여 전 대조군의 종양 부피).TGI% = 100% × (tumor volume of control group-tumor volume of treatment group)/(tumor volume of control group-tumor volume of control group before administration).

DAN-G-CLDN18.2 종양 보유 마우스 모델에서 Hz69H9 및 HB37A6의 TGI는 각각 70% 및 28%였고 Zmab의 TGI는 24%였고;In the DAN-G-CLDN18.2 tumor-bearing mouse model, the TGI of Hz69H9 and HB37A6 was 70% and 28%, respectively, and that of Zmab was 24%;

NUGC-4 종양 보유 마우스 모델에서 Hz69H9 및 HB37A6의 TGI는 각각 46% 및 31%였고 Zmab의 TGI는 0%였다.In the NUGC-4 tumor-bearing mouse model, the TGI of Hz69H9 and HB37A6 was 46% and 31%, respectively, and that of Zmab was 0%.

서열 정보:Sequence information:

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SEQUENCE LISTING <110> 신달바이오제약(쑤저우) 유한회사(Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd.) <120> 항-클라우딘18.2 항체 및 이의 용도 <130> PF 210417PCT <160> 94 <170> PatentIn 버전 3.3 <210> 1 <211> 10 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 1 Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Val Met Ser 1 5 10 <210> 2 <211> 17 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 2 Thr Ile Ser His Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 3 <211> 13 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 3 Asp Ala Pro Tyr Tyr Asp Ile Leu Thr Gly Tyr Arg Tyr 1 5 10 <210> 4 <211> 122 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 4 Glu Val Gln Leu Leu Asp Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Val Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Asn Trp Val 35 40 45 Ser Thr Ile Ser His Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Ile Asp Ala Pro Tyr Tyr Asp Ile Leu Thr Gly Tyr Arg Tyr Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 5 <211> 330 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 5 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys 1 5 10 15 Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr 65 70 75 80 Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Lys Ala Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys 100 105 110 Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 115 120 125 Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 130 135 140 Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp 145 150 155 160 Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 165 170 175 Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 180 185 190 His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 195 200 205 Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 210 215 220 Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu 225 230 235 240 Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 245 250 255 Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 260 265 270 Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 275 280 285 Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn 290 295 300 Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 305 310 315 320 Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 325 330 <210> 6 <211> 11 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 6 Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Trp Leu Ala 1 5 10 <210> 7 <211> 7 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 7 Lys Ala Ser Ser Leu Glu Ser 1 5 <210> 8 <211> 9 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 8 Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Ser Tyr Thr 1 5 <210> 9 <211> 107 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 9 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Trp 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Lys Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Ser Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 10 <211> 107 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 10 Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu 1 5 10 15 Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 20 25 30 Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln 35 40 45 Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser 50 55 60 Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 65 70 75 80 Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser 85 90 95 Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 100 105 <210> 11 <211> 17 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa는 임의의 자연 발생 아미노산일 수 있음 <400> 11 Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Xaa Gly Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu 1 5 10 15 Thr <210> 12 <211> 10 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 12 Gly Tyr Ser Phe Ser Ser Tyr Asn Ile His 1 5 10 <210> 13 <211> 17 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 13 Tyr Ile Ala Pro Phe Asn Gly Asp Ser Arg Tyr Asn Gln Lys Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 14 <211> 9 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 14 Leu Asn Arg Gly Asn Ser Leu Asp Tyr 1 5 <210> 15 <211> 118 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 15 Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Met Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Thr Gly Tyr Ser Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Asn Ile His Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Tyr Ile Ala Pro Phe Asn Gly Asp Ser Arg Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Val Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met His Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Gly Arg Leu Asn Arg Gly Asn Ser Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Ser Leu Thr Val Ser Ser 115 <210> 16 <211> 17 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 16 Lys Ser Ser Gln Ser Leu Phe Asn Ser Gly Asn Gln Arg Asn Tyr Leu 1 5 10 15 Thr <210> 17 <211> 7 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 17 Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser 1 5 <210> 18 <211> 9 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 18 Gln Asn Asn Tyr Ile Tyr Pro Leu Thr 1 5 <210> 19 <211> 113 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 19 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Thr Val Thr Ala Gly 1 5 10 15 Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Phe Asn Ser 20 25 30 Gly Asn Gln Arg Asn Tyr Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln 35 40 45 Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val 50 55 60 Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 65 70 75 80 Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Phe Tyr Tyr Cys Gln Asn 85 90 95 Asn Tyr Ile Tyr Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu 100 105 110 Lys <210> 20 <211> 17 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 20 Tyr Ile Ala Pro Phe Gln Gly Asp Ser Arg Tyr Asn Gln Lys Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 21 <211> 118 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 21 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Asn Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Tyr Ile Ala Pro Phe Gln Gly Asp Ser Arg Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Leu Asn Arg Gly Asn Ser Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 22 <211> 113 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 22 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Phe Asn Ser 20 25 30 Gly Asn Gln Arg Asn Tyr Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln 35 40 45 Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val 50 55 60 Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 65 70 75 80 Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Asn 85 90 95 Asn Tyr Ile Tyr Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile 100 105 110 Lys <210> 23 <211> 10 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 23 Gly Phe Ser Phe Ser Asp Tyr Gly Met His 1 5 10 <210> 24 <211> 17 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 24 Tyr Ile Asn Ser Gly Ser Arg Thr Leu Tyr Tyr Ala Asp Thr Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 25 <211> 10 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 25 Asn Ala Tyr Tyr Gly Asn Ala Met Asp Tyr 1 5 10 <210> 26 <211> 119 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 26 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Glu Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Ala Tyr Ile Asn Ser Gly Ser Arg Thr Leu Tyr Tyr Ala Asp Thr Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Phe 65 70 75 80 Leu Gln Met Thr Ser Leu Arg Ser Glu Glu Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 Thr Arg Asn Ala Tyr Tyr Gly Asn Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Ser Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 27 <211> 119 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 27 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Tyr Ile Asn Ser Gly Ser Arg Thr Leu Tyr Tyr Ala Asp Thr Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Asp Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asn Ala Tyr Tyr Gly Asn Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 28 <211> 17 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 28 Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser Gly Asn Gln Arg Asn Tyr Leu 1 5 10 15 Thr <210> 29 <211> 7 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 29 Trp Ser Ser Thr Arg Gly Ser 1 5 <210> 30 <211> 9 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 30 Gln Asn Val Tyr Tyr Tyr Pro Phe Thr 1 5 <210> 31 <211> 113 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 31 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Thr Val Thr Ala Gly 1 5 10 15 Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser 20 25 30 Gly Asn Gln Arg Asn Tyr Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Ile Pro Gly Gln 35 40 45 Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ser Ser Thr Arg Gly Ser Gly Val 50 55 60 Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 65 70 75 80 Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Phe Cys Gln Asn 85 90 95 Val Tyr Tyr Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Arg Leu Glu Val 100 105 110 Lys <210> 32 <211> 113 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 32 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser 20 25 30 Gly Asn Gln Arg Asn Tyr Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln 35 40 45 Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ser Ser Thr Arg Gly Ser Gly Val 50 55 60 Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 65 70 75 80 Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Asn 85 90 95 Val Tyr Tyr Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile 100 105 110 Lys <210> 33 <211> 11 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 33 Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly Tyr Gly Trp Asn 1 5 10 <210> 34 <211> 16 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 34 Tyr Ile His Phe Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser 1 5 10 15 <210> 35 <211> 9 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 35 Ser Gly Lys Gly Asn Ala Met Asp Tyr 1 5 <210> 36 <211> 118 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 36 Gln Val Gln Leu Lys Glu Ser Gly Pro Asp Leu Val Lys Pro Ser Gln 1 5 10 15 Ser Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Thr Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly 20 25 30 Tyr Gly Trp Asn Trp Ile Arg Gln Phe Pro Gly Asn Lys Leu Glu Trp 35 40 45 Met Gly Tyr Ile His Phe Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu 50 55 60 Lys Ser Arg Ile Ser Ile Thr Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Phe 65 70 75 80 Leu Gln Leu Asn Ser Val Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ser Gly Lys Gly Asn Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Ser Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 37 <211> 118 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 37 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly 20 25 30 Tyr Gly Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp 35 40 45 Ile Gly Tyr Ile His Phe Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu 50 55 60 Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser 65 70 75 80 Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ser Gly Lys Gly Asn Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 38 <211> 17 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 38 Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu 1 5 10 15 Thr <210> 39 <211> 9 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 39 Gln Asn Asp Tyr Tyr Phe Pro Phe Thr 1 5 <210> 40 <211> 113 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 40 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Thr Val Thr Ala Gly 1 5 10 15 Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser 20 25 30 Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln 35 40 45 Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val 50 55 60 Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 65 70 75 80 Val Ile Asn Met Gln Ala Glu Asp Leu Ala Leu Tyr Tyr Cys Gln Asn 85 90 95 Asp Tyr Tyr Phe Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile 100 105 110 Lys <210> 41 <211> 113 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 41 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser 20 25 30 Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln 35 40 45 Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val 50 55 60 Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 65 70 75 80 Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Asn 85 90 95 Asp Tyr Tyr Phe Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile 100 105 110 Lys <210> 42 <211> 10 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 42 Gly Tyr Thr Phe Thr Lys Tyr Ile Ile Gln 1 5 10 <210> 43 <211> 17 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 43 Tyr Ile Asn 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Val Thr Ala Gly 1 5 10 15 Glu Arg Val Thr Met Thr Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser 20 25 30 Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln 35 40 45 Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val 50 55 60 Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 65 70 75 80 Ile Ser Ser Leu Gln Ser Glu Asp Leu Ala Val Tyr Phe Cys Gln Asn 85 90 95 Asp Tyr Ser Phe Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile 100 105 110 Lys <210> 48 <211> 118 <212> PRT <213> 인공 <220> <223> 합성 펩티드 <400> 48 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Lys Tyr 20 25 30 Ile Ile Gln Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Arg Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Tyr Ile Asn Pro Tyr Asn Asp Asp Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Arg Asp Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Thr Tyr 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Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser 20 25 30 Gly Asn Gln Arg Asn Tyr Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln 35 40 45 Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val 50 55 60 Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 65 70 75 80 Ile Ser Ser Leu Gln Ala Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Asn 85 90 95 Ser Tyr Phe Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile 100 105 110 Lys <210> 58 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 58 Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Gly Met Ala 1 5 10 <210> 59 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 59 Phe Ile Asn Asn Leu Ala Tyr Ser Ile Tyr Val Asp Thr Val Thr 1 5 10 15 Gly <210> 60 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 60 Phe Thr Thr Gly Asn Val Met Asp Tyr 1 5 <210> 61 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 61 Glu Val Met Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Arg Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Gly Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val 35 40 45 Ala Phe Ile Asn Asn Leu Ala Tyr Ser Ile Tyr Val Asp Thr Val 50 55 60 Thr Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Glu Asn Ala Lys Asp Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Glu Met Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Phe Thr Thr Gly Asn Val Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gl y Thr 100 105 110 Ser Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 62 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 62 Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Gly Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu 1 5 10 15 Thr <210> 63 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 63 Trp Ser Ser Thr Arg Glu Ser 1 5 <210 > 64 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 64 Gln Asn Ser Tyr Ser Tyr Pro Leu Thr 1 5 <210> 65 <211> 113 <212> PRT < 213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 65 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Thr Val Thr Ala Gly 1 5 10 15 Glu Lys Val Thr Met Thr Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Gly 20 25 30 Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln 35 40 45 Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ser Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val 50 55 60 Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 65 70 75 80 Ile Thr Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Asn 85 90 95 Ser Tyr Ser Tyr Pro Leu Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Leu 100 105 110 Lys <210> 66 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 66 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Gly Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Phe Ile Asn Asn Leu Ala Tyr Ser Ile Tyr Val Asp Thr Val 50 55 60 Thr Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Phe Thr Thr Gly Asn Val Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 67 <211> 17 <212> PRT <213 > Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 67 Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Gln Gly Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu 1 5 10 15 Thr <210> 68 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 68 Asp Ile Val Met Thr Gl n Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Gln Gly 20 25 30 Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln 35 40 45 Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ser Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val 50 55 60 Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 65 70 75 80 Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Asn 85 90 95 Ser Tyr Ser Tyr Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile 100 105 110 Lys <210> 69 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 69 Gly Tyr Ser Phe Thr Thr Thr Tyr Trp Met His 1 5 10 <210> 70 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 70 Leu Ile Asp Pro Ser Asp Ser Glu Thr Arg Leu Asn Gln Lys Phe Lys 1 5 10 15 Asp <210> 71 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 71 Asn Arg Trp Leu Leu Gly 1 5 <210> 72 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 72 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gln Leu Val Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Thr Tyr 20 25 30 Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Leu Ile Asp Pro Ser Asp Ser Glu Thr Arg Leu Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Arg Leu Ser Ser Pro Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Ser Asn Arg Trp Leu Leu Gly Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 73 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 73 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Thr Tyr 20 25 30 Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Leu Ile Asp Pro Ser Asp Ser Glu Thr Arg Leu Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Val Asp Thr Ser Th r Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Ser Asn Arg Trp Leu Leu Gly Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 74 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 74 Gln Asn Asp Tyr Ser Tyr Pro Leu Thr 1 5 <210> 75 <211> 113 <212 > PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 75 Asp Ile Gln Met Ile Gln Ser Pro Ser Ser Leu Thr Val Thr Ala Gly 1 5 10 15 Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser 20 25 30 Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln 35 40 45 Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val 50 55 60 Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 65 70 75 80 Ile Ser Ser Val Gln Thr Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Asn 85 90 95 Asp Tyr Ser Tyr Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Ile 100 105 110 Lys <210> 76 <211> 113 <2 12> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 76 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser 20 25 30 Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln 35 40 45 Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val 50 55 60 Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 65 70 75 80 Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Asn 85 90 95 Asp Tyr Ser Tyr Pro Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile 100 105 110 Lys <210> 77 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 77 Gly Phe Ser Leu Asn Ser Tyr Gly Val Gly 1 5 10 <210> 78 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 78 Val Ile Trp Gly Asp Gly Ser Thr Asn Tyr His Ser Val Leu Ile Ser 1 5 10 15 <210> 79 <211 > 9 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 79 Ile Thr Arg Gly Asn Ala Met Asp Tyr 1 5 <210> 80 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 80 Gln Val Gln Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln 1 5 10 15 Ser Leu Ser Ile Thr Cys Ser Val Ser Gly Phe Ser Leu Asn Ser Tyr 20 25 30 Gly Val Gly Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Gly Val Ile Trp Gly Asp Gly Ser Thr Asn Tyr His Ser Val Leu Ile 50 55 60 Ser Arg Leu Ser Ile Arg Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu 65 70 75 80 Lys Leu Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Met Ile Thr Arg Gly Asn Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 81 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 81 Trp Ala Ser Thr Arg Lys Ser 1 5 <210> 82 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 82 Gln Asn Asn Tyr Leu Phe Pro Leu Thr 1 5 <210> 83 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 83 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Le u Thr Val Thr Ala Gly 1 5 10 15 Glu Lys Ile Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser 20 25 30 Gly Asn Gln Arg Asn Tyr Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln 35 40 45 Thr Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Lys Ser Gly Val 50 55 60 Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 65 70 75 80 Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Ser Cys Gln Asn 85 90 95 Asn Tyr Leu Phe Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu 100 105 110 Lys <210> 84 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptides <400> 84 Val Ile Trp Gly Asp Val Ser Thr Asn Tyr His Ser Val Leu Ile Ser 1 5 10 15 <210> 85 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400 > 85 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Asn Ser Tyr 20 25 30 Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Val Ile Trp Gly A sp Val Ser Thr Asn Tyr His Ser Val Leu Ile 50 55 60 Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu 65 70 75 80 Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Ile Thr Arg Gly Asn Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 86 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 86 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser 20 25 30 Gly Asn Gln Arg Asn Tyr Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln 35 40 45 Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Lys Ser Gly Val 50 55 60 Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 65 70 75 80 Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Asn 85 90 95 Asn Tyr Leu Phe Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile 100 105 110 Lys <210> 87 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 87 Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Trp Ile Asn 1 5 10 <210> 88 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 88 Asn Ile Tyr Pro Ser Asp Ser Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe Lys 1 5 10 15 <210> 89 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 89 Ser Trp Arg Gly Asn Ser Phe Asp Tyr 1 5 <210> 90 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 90 Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Trp Ile Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gl n Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Asn Ile Tyr Pro Ser Asp Ser Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Pro Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Thr Arg Ser Trp Arg Gly Asn Ser Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Thr Leu Thr Val Ser Ser 115 <210> 91 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <400> 91 Gln Asn Asp Tyr Ser Tyr Pro Phe Thr 1 5 <210> 92 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial <220 > <223> Synthetic Peptide <400> 92 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Thr Val Thr Ala Gly 1 5 10 15 Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser 20 25 30 Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln 35 40 45 Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val 50 55 60 Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 65 70 75 80 Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Asn 85 90 95 Asp Tyr Ser Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile 100 105 110 Lys <210> 93 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic Peptide <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <400> 93 Tyr Ile Ala Pro Phe Xaa Gly Asp Ser Arg Tyr Asn Gln Lys Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 94 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic peptide <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <400> 94Val Ile Trp Gly Asp Xaa Ser Thr Asn Tyr His Ser Val Leu Ile Ser 1 5 10 15

Claims (24)

항-CLDN18.2 항체 또는 이의 항원 결합 단편으로서,
(i) 서열번호 4에 제시된 VH에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 9에 제시된 VL에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;
(ii) 서열번호 15 또는 21에 제시된 VH에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 19 또는 22에 제시된 VL에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;
(iii) 서열번호 26 또는 27에 제시된 VH에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 31 또는 32에 제시된 VL에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;
(iv) 서열번호 36 또는 37에 제시된 VH에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 40 또는 41에 제시된 VL에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;
(v) 서열번호 45 또는 48에 제시된 VH에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 47 또는 49에 제시된 VL에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;
(vi) 서열번호 53 또는 56에 제시된 VH에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 55 또는 57에 제시된 VL에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;
(vii) 서열번호 61 또는 66에 제시된 VH에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 65 또는 68에 제시된 VL에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;
(viii) 서열번호 72 또는 73에 제시된 VH에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 75 또는 76에 제시된 VL에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;
(ix) 서열번호 80 또는 85에 제시된 VH에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 83 또는 86에 제시된 VL에 함유된 3개의 상보성 결정 영역 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3을 포함하는, 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 항원 결합 단편.As an anti-CLDN18.2 antibody or antigen-binding fragment thereof,
(i) the three complementarity determining regions HCDR1, HCDR2 and HCDR3 contained in the VH shown in SEQ ID NO: 4, and the three complementarity determining regions LCDR1, LCDR2 and LCDR3 contained in the VL shown in SEQ ID NO: 9;
(ii) the three complementarity determining regions HCDR1, HCDR2 and HCDR3 contained in the VH shown in SEQ ID NO: 15 or 21 and the three complementarity determining regions LCDR1, LCDR2 and LCDR3 contained in the VL shown in SEQ ID NO: 19 or 22;
(iii) the three complementarity determining regions HCDR1, HCDR2 and HCDR3 contained in the VH set forth in SEQ ID NO: 26 or 27 and the three complementarity determining regions LCDR1, LCDR2 and LCDR3 contained in the VL set forth in SEQ ID NO: 31 or 32;
(iv) the three complementarity determining regions HCDR1, HCDR2 and HCDR3 contained in the VH shown in SEQ ID NO: 36 or 37 and the three complementarity determining regions LCDR1, LCDR2 and LCDR3 contained in the VL shown in SEQ ID NO: 40 or 41;
(v) the three complementarity determining regions HCDR1, HCDR2 and HCDR3 contained in the VH set forth in SEQ ID NO: 45 or 48 and the three complementarity determining regions LCDR1, LCDR2 and LCDR3 contained in the VL set forth in SEQ ID NO: 47 or 49;
(vi) the three complementarity determining regions HCDR1, HCDR2 and HCDR3 contained in the VH set forth in SEQ ID NO: 53 or 56 and the three complementarity determining regions LCDR1, LCDR2 and LCDR3 contained in the VL set forth in SEQ ID NO: 55 or 57;
(vii) three complementarity determining regions HCDR1, HCDR2 and HCDR3 contained in the VH set forth in SEQ ID NO: 61 or 66 and the three complementarity determining regions LCDR1, LCDR2 and LCDR3 contained in the VL set forth in SEQ ID NO: 65 or 68;
(viii) three complementarity determining regions HCDR1, HCDR2 and HCDR3 contained in the VH set forth in SEQ ID NO: 72 or 73 and the three complementarity determining regions LCDR1, LCDR2 and LCDR3 contained in the VL set forth in SEQ ID NO: 75 or 76;
(ix) three complementarity determining regions HCDR1, HCDR2 and HCDR3 contained in the VH set forth in SEQ ID NO: 80 or 85, and the three complementarity determining regions LCDR1, LCDR2 and LCDR3 contained in the VL set forth in SEQ ID NO: 83 or 86; , an anti-CLDN18.2 antibody or antigen-binding fragment thereof. 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 항원 결합 단편으로서,
(i) 서열번호 1, 2 및 3 각각의 아미노산 서열에 제시된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 6, 7 및 8 각각의 아미노산 서열에 제시된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;
(ii) 서열번호 12, 13 및 14 각각의 아미노산 서열에 제시된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 16, 17 및 18 각각의 아미노산 서열에 제시된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;
(iii) 서열번호 12, 20 및 14 각각의 아미노산 서열에 제시된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 16, 17 및 18 각각의 아미노산 서열에 제시된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;
(iv) 서열번호 12, 93 및 14 각각의 아미노산 서열에 제시된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 16, 17 및 18 각각의 아미노산 서열에 제시된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;
(v) 서열번호 23, 24 및 25 각각의 아미노산 서열에 제시된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 28, 29 및 30 각각의 아미노산 서열에 제시된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;
(vi) 서열번호 33, 34 및 35 각각의 아미노산 서열에 제시된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 38, 17 및 39 각각의 아미노산 서열에 제시된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;
(vii) 서열번호 42, 43 및 44 각각의 아미노산 서열에 제시된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 38, 17 및 46 각각의 아미노산 서열에 제시된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;
(viii) 서열번호 50, 51 및 52 각각의 아미노산 서열에 제시된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 28, 17 및 54 각각의 아미노산 서열에 제시된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;
(ix) 서열번호 58, 59 및 60 각각의 아미노산 서열에 제시된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 62, 63 및 64 각각의 아미노산 서열에 제시된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;
(x) 서열번호 58, 59 및 60 각각의 아미노산 서열에 제시된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 67, 63 및 64 각각의 아미노산 서열에 제시된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;
(xi) 서열번호 58, 59 및 60 각각의 아미노산 서열에 제시된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 11, 63 및 64 각각의 아미노산 서열에 제시된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;
(xii) 서열번호 69, 70 및 71 각각의 아미노산 서열에 제시된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 38, 17 및 74 각각의 아미노산 서열에 제시된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;
(xiii) 서열번호 77, 78 및 79 각각의 아미노산 서열에 제시된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 28, 81 및 82 각각의 아미노산 서열에 제시된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;
(xiv) 서열번호 77, 84 및 79 각각의 아미노산 서열에 제시된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 28, 81 및 82 각각의 아미노산 서열에 제시된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3;
(xv) 서열번호 77, 94 및 79 각각의 아미노산 서열에 제시된 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3, 및 서열번호 28, 81 및 82 각각의 아미노산 서열에 제시된 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3을 포함하는, 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 항원 결합 단편.As an anti-CLDN18.2 antibody or antigen-binding fragment thereof,
(i) HCDR1, HCDR2 and HCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 1, 2 and 3, respectively, and LCDR1, LCDR2 and LCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 6, 7 and 8, respectively;
(ii) HCDR1, HCDR2 and HCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 12, 13 and 14, respectively, and LCDR1, LCDR2 and LCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 16, 17 and 18 respectively;
(iii) HCDR1, HCDR2 and HCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 12, 20 and 14, respectively, and LCDR1, LCDR2 and LCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 16, 17 and 18 respectively;
(iv) HCDR1, HCDR2 and HCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 12, 93 and 14, respectively, and LCDR1, LCDR2 and LCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 16, 17 and 18 respectively;
(v) HCDR1, HCDR2 and HCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 23, 24 and 25, respectively, and LCDR1, LCDR2 and LCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 28, 29 and 30 respectively;
(vi) HCDR1, HCDR2 and HCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 33, 34 and 35, respectively, and LCDR1, LCDR2 and LCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 38, 17 and 39 respectively;
(vii) the HCDR1, HCDR2 and HCDR3 set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 42, 43 and 44, respectively, and the LCDR1, LCDR2 and LCDR3 set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 38, 17 and 46, respectively;
(viii) HCDR1, HCDR2 and HCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 50, 51 and 52, respectively, and LCDR1, LCDR2 and LCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 28, 17 and 54 respectively;
(ix) HCDR1, HCDR2 and HCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 58, 59 and 60, respectively, and LCDR1, LCDR2 and LCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 62, 63 and 64 respectively;
(x) HCDR1, HCDR2 and HCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 58, 59 and 60, respectively, and LCDR1, LCDR2 and LCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 67, 63 and 64 respectively;
(xi) HCDR1, HCDR2 and HCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 58, 59 and 60, respectively, and LCDR1, LCDR2 and LCDR3 as set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 11, 63 and 64, respectively;
(xii) the HCDR1, HCDR2 and HCDR3 set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 69, 70 and 71, respectively, and the LCDR1, LCDR2 and LCDR3 set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 38, 17 and 74, respectively;
(xiii) the HCDR1, HCDR2 and HCDR3 set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 77, 78 and 79, respectively, and the LCDR1, LCDR2 and LCDR3 set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 28, 81 and 82, respectively;
(xiv) the HCDR1, HCDR2 and HCDR3 set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 77, 84 and 79, respectively, and the LCDR1, LCDR2 and LCDR3 set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 28, 81 and 82, respectively;
(xv) an anti-CLDN18.2 comprising the HCDR1, HCDR2 and HCDR3 set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 77, 94 and 79, respectively, and the LCDR1, LCDR2 and LCDR3 set forth in the amino acid sequences of SEQ ID NOs: 28, 81 and 82, respectively. Antibodies or antigen-binding fragments thereof. 제1항 또는 제2항에 있어서,
중쇄 가변 영역 및/또는 경쇄 가변 영역을 포함하고, 상기 중쇄 가변 영역은
(i) 서열 번호 4, 15, 21, 26, 27, 36, 37, 45, 48, 53, 56, 61, 66, 72, 73, 80 및 85로부터 선택된 아미노산 서열과 적어도 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성되고; 또는
(ii) 서열 번호 4, 15, 21, 26, 27, 36, 37, 45, 48, 53, 56, 61, 66, 72, 73, 80 및 85로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성되고; 또는
(iii) 서열 번호 4, 15, 21, 26, 27, 36, 37, 45, 48, 53, 56, 61, 66, 72, 73, 80 및 85로부터 선택된 아미노산 서열과 비교하여 하나 이상(바람직하게는 10개 이하, 보다 바람직하게는 5개, 4개, 3개, 2개 또는 1개 이하)의 아미노산 변화(바람직하게는 아미노산 치환, 보다 바람직하게는 아미노산 보존적 치환)를 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성되고, 여기서 바람직하게는, 상기 아미노산 변화는 CDR에서 발생하지 않고, 및/또는
상기 경쇄 가변 영역은
(i) 서열 번호 9, 19, 22, 31, 32, 40, 41, 47, 49, 55, 57, 65, 68, 75, 76, 83 및 86으로부터 선택된 아미노산 서열과 적어도 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성되고; 또는
(ii) 서열 번호 9, 19, 22, 31, 32, 40, 41, 47, 49, 55, 57, 65, 68, 75, 76, 83 및 86으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성되고; 또는
(iii) 서열 번호 9, 19, 22, 31, 32, 40, 41, 47, 49, 55, 57, 65, 68, 75, 76, 83 및 86으로부터 선택된 아미노산 서열과 비교하여 하나 이상(바람직하게는 10개 이하, 보다 바람직하게는 5개, 4개, 3개, 2개 또는 1개 이하)의 아미노산 변화(바람직하게는 아미노산 치환, 보다 바람직하게는 아미노산 보존적 치환)를 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성되고, 여기서 바람직하게는, 상기 아미노산 변화는 CDR에서 발생하지 않는, 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 항원 결합 단편.According to claim 1 or 2,
a heavy chain variable region and/or a light chain variable region, wherein the heavy chain variable region
(i) at least 90%, 91% of an amino acid sequence selected from SEQ ID NOs: 4, 15, 21, 26, 27, 36, 37, 45, 48, 53, 56, 61, 66, 72, 73, 80 and 85; comprises or consists of an amino acid sequence having 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% or 99% identity; or
(ii) comprises or consists of an amino acid sequence selected from SEQ ID NOs: 4, 15, 21, 26, 27, 36, 37, 45, 48, 53, 56, 61, 66, 72, 73, 80 and 85; or
(iii) one or more compared to an amino acid sequence selected from SEQ ID NOs: 4, 15, 21, 26, 27, 36, 37, 45, 48, 53, 56, 61, 66, 72, 73, 80 and 85 (preferably comprises an amino acid sequence with no more than 10, more preferably no more than 5, 4, 3, 2 or 1 amino acid changes (preferably amino acid substitutions, more preferably amino acid conservative substitutions) or consists of, wherein preferably, said amino acid change does not occur in a CDR, and/or
The light chain variable region is
(i) at least 90%, 91% of an amino acid sequence selected from SEQ ID NOs: 9, 19, 22, 31, 32, 40, 41, 47, 49, 55, 57, 65, 68, 75, 76, 83 and 86; comprises or consists of an amino acid sequence having 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% or 99% identity; or
(ii) comprises or consists of an amino acid sequence selected from SEQ ID NOs: 9, 19, 22, 31, 32, 40, 41, 47, 49, 55, 57, 65, 68, 75, 76, 83 and 86; or
(iii) one or more compared to an amino acid sequence selected from SEQ ID NOs: 9, 19, 22, 31, 32, 40, 41, 47, 49, 55, 57, 65, 68, 75, 76, 83 and 86 (preferably comprises an amino acid sequence with no more than 10, more preferably no more than 5, 4, 3, 2 or 1 amino acid changes (preferably amino acid substitutions, more preferably amino acid conservative substitutions) An anti-CLDN18.2 antibody or antigen-binding fragment thereof, comprising or consisting of, wherein preferably, said amino acid change does not occur in a CDR. 제1항 또는 제2항에 있어서,
(i) 서열번호 4에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 9에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;
(ii) 서열번호 15 또는 21에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 19 또는 22에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;
(iii) 서열번호 15에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 19에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;
(iv) 서열번호 21에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 22에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;
(v) 서열번호 26 또는 27에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 31 또는 32에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;
(vi) 서열번호 26에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 31에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;
(vii) 서열번호 27에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 32에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;
(viii) 서열번호 36 또는 37에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 40 또는 41에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;
(ix) 서열번호 36에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 40에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;
(x) 서열번호 37에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 41에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;
(xi) 서열번호 45 또는 48에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 47 또는 49에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;
(xii) 서열번호 45에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 47에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;
(xiii) 서열번호 48에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 49에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;
(xiv) 서열번호 53 또는 56에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 55 또는 57에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;
(xv) 서열번호 53에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 55에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;
(xvi) 서열번호 56에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 57에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;
(xvii) 서열번호 61 또는 66에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 65 또는 68에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;
(xviii) 서열번호 61에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 65에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;
(xix) 서열번호 66에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 68에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;
(xx) 서열번호 72 또는 73에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 75 또는 76에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;
(xxi) 서열번호 72에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 75에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;
(xxii) 서열번호 73에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 76에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;
(xxiii) 서열번호 80 또는 85에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 83 또는 86에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;
(xxiv) 서열번호 80에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 83에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VL;
(xxv) 서열번호 85에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 VH, 및 서열번호 86에 제시된 아미노산 서열 또는 이와 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성된 Vl을 포함하는, 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 항원 결합 단편.According to claim 1 or 2,
(i) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 4, or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 9, or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL;
(ii) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 15 or 21 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and an amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 19 or 22 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL comprising or consisting of;
(iii) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 15 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 19 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL;
(iv) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 21 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 22 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL;
(v) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 26 or 27 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and an amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 31 or 32 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL comprising or consisting of;
(vi) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 26 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 31 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL;
(vii) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 27 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL;
(viii) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 36 or 37 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and an amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 40 or 41 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL comprising or consisting of;
(ix) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 36 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 40 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL;
(x) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 37 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 41 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL;
(xi) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 45 or 48 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and an amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 47 or 49 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL comprising or consisting of;
(xii) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 45 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 47 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL;
(xiii) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 48 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 49 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL;
(xiv) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 53 or 56 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and an amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 55 or 57 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL comprising or consisting of;
(xv) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 53 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 55 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL;
(xvi) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 56 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 57 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL;
(xvii) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 61 or 66 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and an amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 65 or 68 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL comprising or consisting of;
(xviii) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 61 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 65 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL;
(xix) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 66 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 68 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL;
(xx) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 72 or 73 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and an amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 75 or 76 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto VL comprising or consisting of;
(xxi) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 72 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 75 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL;
(xxii) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 73 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 76 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL;
(xxiii) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 80 or 85 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and an amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 83 or 86 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto VL comprising or consisting of;
(xxiv) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 80 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 83 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. VL;
(xxv) a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 85 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto, and a VH comprising or consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 86 or an amino acid sequence having at least 90% identity thereto. An anti-CLDN18.2 antibody or antigen-binding fragment thereof, comprising Vl. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 중쇄 불변 영역 및/또는 경쇄 불변 영역을 추가로 포함하는, 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 항원 결합 단편.5. The anti-CLDN18.2 antibody or antigen-binding fragment thereof according to any one of claims 1 to 4, further comprising a heavy chain constant region and/or a light chain constant region. 제5항에 있어서,
상기 중쇄 불변 영역 HC는
(i) 서열번호 5로부터 선택된 아미노산 서열과 적어도 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성되고,
(ii) 서열번호 5로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성되고, 또는
(iii) 서열번호 5로 부터 선택된 아미노산 서열과 비교하여 1개 이상(바람직하게는 20개 또는 10개 이하, 보다 바람직하게는 5개, 4개, 3개, 2개 또는 1개 이하)의 아미노산 변형(바람직하게는 아미노산 치환, 보다 바람직하게는 아미노산 보존적 치환)을 가지는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성되고; 및/또는
상기 경쇄 불변 영역 LC는
(i) 서열번호 10으로부터 선택된 아미노산 서열과 적어도 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성되고;
(ii) 서열번호 10으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성되고; 또는
(iii) 서열번호 10으로부터 선택된 아미노산 서열과 비교하여 1개 이상(바람직하게는 20개 또는 10개 이하, 보다 바람직하게는 5개, 4개, 3개, 2개 또는 1개 이하)의 아미노산 변형(바람직하게는 아미노산 치환, 보다 바람직하게는 아미노산 보존적 치환)을 가지는 아미노산 서열을 포함하거나 이로 구성되는, 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 항원 결합 단편.According to claim 5,
The heavy chain constant region HC is
(i) an amino acid sequence having at least 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% or 99% identity to an amino acid sequence selected from SEQ ID NO: 5; contains or consists of;
(ii) comprises or consists of an amino acid sequence selected from SEQ ID NO: 5, or
(iii) one or more (preferably no more than 20 or 10, more preferably no more than 5, 4, 3, 2 or 1) amino acids compared to the amino acid sequence selected from SEQ ID NO: 5 comprising or consisting of an amino acid sequence with modifications (preferably amino acid substitutions, more preferably amino acid conservative substitutions); and/or
The light chain constant region LC is
(i) an amino acid sequence having at least 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% or 99% identity to an amino acid sequence selected from SEQ ID NO: 10; comprises or consists of;
(ii) comprises or consists of an amino acid sequence selected from SEQ ID NO: 10; or
(iii) one or more (preferably no more than 20 or 10, more preferably no more than 5, 4, 3, 2 or 1) amino acid modifications compared to the amino acid sequence selected from SEQ ID NO: 10 An anti-CLDN18.2 antibody or antigen-binding fragment thereof comprising or consisting of an amino acid sequence having (preferably amino acid substitutions, more preferably amino acid conservative substitutions). 제5항 또는 제6항에 있어서,
상기 아미노산 변화는 상기 중쇄 불변 영역의 Fc 영역에서 발생하는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.According to claim 5 or 6,
The amino acid change occurs in the Fc region of the heavy chain constant region, the antibody or antigen-binding fragment thereof. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 항체는 항체 또는 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 형태의 항원 결합 단편이고; 바람직하게는, 상기 항체는 항체 또는 IgG1 형태의 항원 결합 단편인, CLDN18.2에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편.According to any one of claims 1 to 7,
The antibody is an antibody or an antigen-binding fragment in the form of an IgG1, IgG2, IgG3 or IgG4; Preferably, the antibody is an antibody or an antigen-binding fragment in the form of an IgG1 antibody or antigen-binding fragment thereof that binds to CLDN18.2. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 항체는 모노클로날 항체인, CLDN18.2에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편.According to any one of claims 1 to 8,
The antibody is a monoclonal antibody, an antibody or antigen-binding fragment thereof that binds to CLDN18.2. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 항체는 인간화 항체, 인간 항체 또는 키메라 항체인, CLDN18.2에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편.According to any one of claims 1 to 9,
The antibody is a humanized antibody, a human antibody or a chimeric antibody, an antibody that binds to CLDN18.2 or an antigen-binding fragment thereof. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 항원 결합 단편은 Fab, Fab', Fab'-SH, Fv, 단쇄 항체(예를 들어, scFv), (Fab')2, 단일 도메인 항체(예를 들어, VHH), 도메인 항체(dAb) 및 선형 항체로부터 선택된 항체 단편인, 항체 또는 이의 항원 결합 단편.According to any one of claims 1 to 10,
The antigen-binding fragments include Fab, Fab', Fab'-SH, Fv, single chain antibody (eg scFv), (Fab') 2 , single domain antibody (eg VHH), domain antibody (dAb) and An antibody or antigen-binding fragment thereof, which is an antibody fragment selected from linear antibodies. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 하기 특성 중 하나 이상을 갖는, 항-CLDN18.2 항체 또는 이의 항원 결합 단편:
(i) 높은 친화성으로 CLDN18.2(예를 들어, 인간 CLDN18.2)에 결합하지만 CLDN18.1(예를 들어, 인간 CLDN18.1)에는 결합하지 않음;
(ii) 약 15nM 미만, 바람직하게는 약 10nM, 9.5nM, 9nM, 8.5nM, 8nM, 7.5nM, 7nM, 6.5nM, 6nM, 5.5nM, 5nM, 4.5nM, 4nM, 3.5nM 또는 3nM 이하의 평형 해리 상수(KD)로 인간 CLDN18.2에 결합;
(iii) 세포 표면의 CLDN18.2에는 결합하지만 세포 표면의 CLDN18.1에는 결합하지 않음;
(iv) ADCC 활성 또는 CDC 활성, 예를 들어 공지된 항체(예를 들어, Zmab)와 동등하거나 이보다 더 높은 ADCC 활성 또는 CDC 활성을 가짐;
(v) 종양 세포, 예를 들어 CLDN18.2를 발현하는 종양 세포의 억제; 및
(vi) 약 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65% 또는 70% 이상의 종양 성장 억제로 종양 성장을 효과적으로 억제할 수 있음.According to any one of claims 1 to 11,
The anti-CLDN18.2 antibody or antigen-binding fragment thereof, wherein the antibody or antigen-binding fragment thereof has one or more of the following characteristics:
(i) binds CLDN18.2 (eg, human CLDN18.2) but not CLDN18.1 (eg, human CLDN18.1) with high affinity;
(ii) less than about 15 nM, preferably less than about 10 nM, 9.5 nM, 9 nM, 8.5 nM, 8 nM, 7.5 nM, 7 nM, 6.5 nM, 6 nM, 5.5 nM, 5 nM, 4.5 nM, 4 nM, 3.5 nM or 3 nM equilibrium binding to human CLDN18.2 with dissociation constant (K D );
(iii) binds cell surface CLDN18.2 but not cell surface CLDN18.1;
(iv) has ADCC activity or CDC activity, eg, ADCC activity or CDC activity equal to or higher than that of a known antibody (eg, Zmab);
(v) inhibition of tumor cells, eg, tumor cells expressing CLDN18.2; and
(vi) can effectively inhibit tumor growth by at least about 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65% or 70% tumor growth inhibition. 단리된 핵산으로서, 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 CLDN18.2에 결합하는 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 경쇄 가변 영역 또는 중쇄 가변 영역, 또는 경쇄 또는 중쇄를 인코딩하는, 단리된 핵산.An isolated nucleic acid encoding a light chain variable region or a heavy chain variable region, or a light or heavy chain, of the antibody or antigen-binding fragment thereof that binds to CLDN18.2 according to any one of claims 1 to 12. nucleic acids. 벡터로서, 제13항에 따른 핵산을 포함하고, 여기서 바람직하게는, 상기 벡터는 발현 벡터인, 벡터.A vector comprising the nucleic acid according to claim 13 , wherein preferably the vector is an expression vector. 숙주 세포로서, 제13항에 따른 핵산 또는 제14항에 따른 벡터를 포함하고, 여기서 바람직하게는, 상기 숙주 세포는 원핵 또는 진핵이며, 보다 바람직하게는, 상기 숙주 세포는 효모 세포, 포유류 세포(예를 들어, 293 세포 또는 CHO 세포, 예컨대 CHO-S 세포 또는 HEK293 세포), 혹은 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 제조에 적합한 추가 세포로부터 선택되는, 숙주 세포.As a host cell, it comprises the nucleic acid according to claim 13 or the vector according to claim 14, wherein preferably, the host cell is prokaryotic or eukaryotic, more preferably, the host cell is a yeast cell, a mammalian cell ( eg 293 cells or CHO cells, such as CHO-S cells or HEK293 cells), or additional cells suitable for the production of antibodies or antigen-binding fragments thereof. CLDN18.2에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제조하기 위한 방법으로서,
제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 CLDN18.2에 결합하는 상기 항체 또는 이의 상기 항원 결합 단편을 인코딩하는 핵산의 발현에 적합한 조건 하에서 제15항에 따른 숙주 세포를 배양하는 단계, 및 선택적으로 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 단리하는 단계를 포함하고; 여기서 선택적으로, 상기 방법은 상기 숙주 세포로부터 CLDN18.2에 결합하는 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 복원하는 단계를 추가로 포함하는, 방법.A method for producing an antibody or antigen-binding fragment thereof that binds to CLDN18.2,
Cultivating the host cell according to claim 15 under conditions suitable for expression of a nucleic acid encoding said antibody or said antigen-binding fragment thereof that binds to CLDN18.2 according to any one of claims 1 to 12, and optionally isolating said antibody or antigen-binding fragment thereof; Optionally, the method further comprises restoring the antibody or antigen-binding fragment thereof that binds CLDN18.2 from the host cell. 면역접합체로서, 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 CLDN18.2에 결합하는 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편 및 추가 물질, 예를 들어 세포독성제를 포함하는, 면역접합체.An immunoconjugate comprising the antibody or antigen binding fragment thereof that binds to CLDN18.2 according to any one of claims 1 to 12 and an additional substance, for example a cytotoxic agent. 약제학적 조성물로서, 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 CLDN18.2에 결합하는 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편, 또는 제17항에 따른 면역접합체, 및 선택적으로 하나 이상의 추가 치료제, 예를 들어, 화학요법제, 사이토카인, 세포독성제, 추가 항체, 소분자 약물 또는 면역조절제, 및 선택적으로 약제학적 보충 물질을 포함하는, 약제학적 조성물.A pharmaceutical composition, wherein said antibody or antigen-binding fragment thereof binds to CLDN18.2 according to any one of claims 1 to 12, or an immunoconjugate according to claim 17, and optionally one or more additional therapeutic agents, e.g. A pharmaceutical composition comprising, for example, a chemotherapeutic agent, cytokine, cytotoxic agent, additional antibody, small molecule drug or immunomodulatory agent, and optionally a pharmaceutical supplement material. 약제학적 조합으로서, 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 CLDN18.2에 결합하는 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편, 또는 제17항에 따른 면역접합체, 및 하나 이상의 추가 치료제, 예를 들어 화학요법제, 사이토카인, 세포독성제, 추가 항체, 소분자 약물 또는 면역조절제를 포함하는, 약제학적 조합.As a pharmaceutical combination, the antibody or antigen-binding fragment thereof that binds to CLDN18.2 according to any one of claims 1 to 12, or the immunoconjugate according to claim 17, and one or more additional therapeutic agents, for example A pharmaceutical combination comprising a chemotherapeutic agent, cytokine, cytotoxic agent, additional antibody, small molecule drug or immunomodulatory agent. 대상체의 종양을 예방 또는 치료하기 위한 방법으로서, 유효량의 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 CLDN18.2에 결합하는 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편, 또는 제17항에 따른 면역접합체, 제18항에 따른 약제학적 조성물, 또는 제19항에 따른 약제학적 조합을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 방법.As a method for preventing or treating a tumor in a subject, an effective amount of the antibody or antigen-binding fragment thereof that binds to CLDN18.2 according to any one of claims 1 to 12, or an immunoconjugate according to claim 17, A method comprising administering the pharmaceutical composition according to claim 18 or the pharmaceutical combination according to claim 19 to a subject. 대상체에서 ADCC 및/또는 CDC를 유도하기 위한 방법으로서, 유효량의 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 CLDN18.2에 결합하는 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편, 또는 제17항에 따른 면역접합체, 또는 제18항에 따른 약제학적 조성물, 또는 제19항에 따른 약제학적 조합을 대상체에게 투여하는 것을 포함하며, 여기서 바람직하게는, 상기 대상체는 종양을 갖는, 방법.A method for inducing ADCC and/or CDC in a subject, wherein said antibody or antigen-binding fragment thereof binds to CLDN18.2 according to any one of claims 1 to 12 in an effective amount, or immunization according to claim 17 A method comprising administering the conjugate, or the pharmaceutical composition according to claim 18, or the pharmaceutical combination according to claim 19 to a subject, wherein preferably the subject has a tumor. 제20항 또는 제21항에 있어서, 상기 종양은 암이고; 바람직하게는, 상기 암은 상승된 수준의 CLDN18.2를 갖고(예를 들어, 핵산 또는 단백질 수준에서); 예를 들어, 상기 암은 췌장암 또는 위암인, 방법.22. The method of claim 20 or 21, wherein the tumor is cancer; Preferably, the cancer has elevated levels of CLDN18.2 (eg at the nucleic acid or protein level); For example, the cancer is pancreatic cancer or gastric cancer. 제20항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법은 환자에게 하나 이상의 요법, 예를 들어, 치료 양식 및/또는 추가 치료제를 투여하는 것을 추가로 포함하고; 바람직하게는, 상기 치료 양식은 외과적 치료 및/또는 방사선 요법을 포함하고, 상기 추가 치료제는 화학요법제, 사이토카인, 세포독성제, 추가 항체, 소분자 약물 및 면역조절제로부터 선택되는, 방법.23. The method of any one of claims 20-22, wherein the method further comprises administering to the patient one or more therapies, eg, treatment modalities and/or additional therapeutic agents; Preferably, the treatment modality comprises surgical treatment and/or radiation therapy, and wherein the additional therapeutic agent is selected from chemotherapeutic agents, cytokines, cytotoxic agents, additional antibodies, small molecule drugs and immunomodulatory agents. 샘플에서 CLDN18.2를 검출하기 위한 방법으로서,
(a) 상기 샘플을 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 항체 또는 이의 항원 결합 단편 또는 제17항에 따른 면역접합체와 접촉시키는 단계; 및
(b) 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 CLDN18.2에 의해 형성된 복합체를 검출하는 단계를 포함하고, 여기서, 선택적으로 상기 항체는 검출가능하게 표지되는, 방법.


As a method for detecting CLDN18.2 in a sample,
(a) contacting the sample with the antibody or antigen-binding fragment thereof according to any one of claims 1 to 12 or the immunoconjugate according to claim 17; and
(b) detecting a complex formed by the antibody or antigen-binding fragment thereof and CLDN18.2, wherein optionally the antibody is detectably labeled.
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