KR20230008368A - 긴병꽃풀 지상부 추출물을 포함하는 항균제 조성물 및 이를 포함하는 피부 외용제 - Google Patents
긴병꽃풀 지상부 추출물을 포함하는 항균제 조성물 및 이를 포함하는 피부 외용제 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 긴병꽃풀 지상부 추출물을 포함하는 항균제 조성물 및 이를 포함하는 피부 외용제에 관한 것으로, 본 발명의 일 측면은, 긴병꽃풀(Glechoma grandis (A. Gray) Kuprian) 지상부 추출물을 유효성분으로 포함하는, 항균제 조성물을 제공한다.
Description
본 발명은 긴병꽃풀 지상부 추출물을 포함하는 항균제 조성물 및 이를 포함하는 피부 외용제에 관한 것이다.
생활 속 항균 제품들은 대부분 화학물질(화학 항균제)들을 함유하고 있으며, 이로 인한 안전성 문제들이 지속적으로 발생하고 있다. 일례로, 우리나라에서도 얼마 전 '가습기 살균제'로 인해 심각한 사회적 문제가 발생한 바 있다.
그러나 현재 화학 항균제를 대체할 천연 물질 성분의 제품들은 생산되고 있지 않으며, 의약품 분야에서도 외용 항균제 대부분은 화학물질 기반의 항균 물질이 차지하고 있다. 따라서, 천연 물질 기반 항균제에 대한 개발이 신속하게 이루어질 필요가 있다.
한편, 긴병꽃풀(Glechoma grandis (A. Gray) Kuprian)은 경기도와 대한민국 중남부 전역의 들판이나 논가에 자라는 여러해살이 초본으로, 한국에서는 금전초의 대용으로도 사용하였다. 한의학 문헌에서 언급되는 ‘금전초’는 앵초과의 과로황(Lysimachia christinae Hance)의 전초이며, 청열해독, 통림, 소종 등의 효능을 가지고 있어 간담질환과 비뇨기계의 결석을 치료하는데 쓰인다.
그러나 아직까지 긴병꽃풀이 항균제 또는 항균용 피부 외용제로 사용된 사례는 보고된 바 없다.
전술한 배경기술은 발명자가 본원의 개시 내용을 도출하는 과정에서 보유하거나 습득한 것으로서, 반드시 본 출원 전에 일반 공중에 공개된 공지기술이라고 할 수는 없다.
본 발명은 상술한 문제점을 해결하기 위한 것으로, 본 발명의 목적은, 긴병꽃풀 지상부 추출물을 함유하는 천연 물질 기반의 항균제 조성물 및 이를 포함하는 항균용 피부 외용제를 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은, 항균제 조성물 제조를 위한 긴병꽃풀 지상부 추출물의 제조방법을 제공하는 것이다.
그러나, 본 발명이 해결하고자 하는 과제는 이상에서 언급한 것들로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 해당 분야 통상의 기술자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
본 발명의 일 측면은, 긴병꽃풀(Glechoma grandis (A. Gray) Kuprian) 지상부 추출물을 유효성분으로 포함하는, 항균제 조성물을 제공한다.
일 실시형태에 따르면, 상기 긴병꽃풀 지상부 추출물의 농도는, 0.01 g/ml 내지 0.05 g/ml인 것일 수 있다.
일 실시형태에 따르면, 상기 긴병꽃풀 지상부 추출물은, 폴리페놀 5 중량% 내지 10 중량%를 포함하는 것일 수 있다.
일 실시형태에 따르면, 상기 긴병꽃풀 지상부 추출물은, 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 클로로포름, 1,3-부틸렌글리콜, n-헥산, 디에틸에테르, 부틸아세테이트 및 디클로로메탄으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상을 추출 용매로 하여 추출된 것일 수 있다.
일 실시형태에 따르면, 상기 저급 알코올은, 에탄올인 것일 수 있다.
일 실시형태에 따르면, 상기 추출은, 20 ℃ 내지 30 ℃의 온도에서 24 시간 내지 48 시간 동안 수행되는 것일 수 있다.
일 실시형태에 따르면, 폐렴간균(Klebsiella pneumoniae), 녹농균(Pseudomonas aeruginosa), 포도상구균(Staphylococcus aureus) 및 대장균(Escherichia coli) 중 적어도 하나 이상의 균주에 대하여 항균 활성을 갖는 것일 수 있다.
일 실시형태에 따르면, 상기 항균제 조성물은, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제 함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 제형을 포함하는 것일 수 있다.
본 발명의 다른 측면은, 상기 항균제 조성물을 포함하는, 항균용 피부 외용제를 제공한다.
본 발명에 따른 항균제 조성물은, 긴병꽃풀 지상부 추출물을 포함함으로써, 대장균, 황색포도상구균, 폐렴간균 및 녹농균에 대한 우수한 항균력을 갖는 효과가 있으며, 인체 안전성 및 피부 안전성이 확보될 수 있는 효과가 있다.
또한, 긴병꽃풀 지상부 추출물을 활용함으로써, 산림자원의 고부가가치화 및 다양한 제품 적용에 따른 신소득 창출에 기여할 수 있는 효과가 있다.
도 1은, 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.01 g/mL)의 대장균 및 황색포도상구균에 대한 항균시험 결과를 나타낸 사진이다.
도 2는, 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.02 g/mL)의 대장균 및 황색포도상구균에 대한 항균시험 결과를 나타낸 사진이다.
도 3은, 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.03 g/mL)의 대장균 및 황색포도상구균에 대한 항균시험 결과를 나타낸 사진이다.
도 4는, 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.05 g/mL)의 대장균 및 황색포도상구균에 대한 항균시험 결과를 나타낸 사진이다.
도 5는, 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.05 g/mL)의 녹농균 및 폐렴간균에 대한 항균시험 결과를 나타낸 사진이다.
도 6은, 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.03 g/mL)의 녹농균 및 폐렴간균에 대한 항균시험 결과를 나타낸 사진이다.
도 7은, 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.02 g/mL)의 녹농균 및 폐렴간균에 대한 항균시험 결과를 나타낸 사진이다.
도 8은, 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.01 g/mL)의 녹농균 및 폐렴간균에 대한 항균시험 결과를 나타낸 사진이다.
도 2는, 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.02 g/mL)의 대장균 및 황색포도상구균에 대한 항균시험 결과를 나타낸 사진이다.
도 3은, 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.03 g/mL)의 대장균 및 황색포도상구균에 대한 항균시험 결과를 나타낸 사진이다.
도 4는, 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.05 g/mL)의 대장균 및 황색포도상구균에 대한 항균시험 결과를 나타낸 사진이다.
도 5는, 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.05 g/mL)의 녹농균 및 폐렴간균에 대한 항균시험 결과를 나타낸 사진이다.
도 6은, 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.03 g/mL)의 녹농균 및 폐렴간균에 대한 항균시험 결과를 나타낸 사진이다.
도 7은, 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.02 g/mL)의 녹농균 및 폐렴간균에 대한 항균시험 결과를 나타낸 사진이다.
도 8은, 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.01 g/mL)의 녹농균 및 폐렴간균에 대한 항균시험 결과를 나타낸 사진이다.
이하에서, 첨부된 도면을 참조하여 실시예들을 상세하게 설명한다. 그러나, 실시예들에는 다양한 변경이 가해질 수 있어서 특허출원의 권리 범위가 이러한 실시예들에 의해 제한되거나 한정되는 것은 아니다. 실시예들에 대한 모든 변경, 균등물 내지 대체물이 권리 범위에 포함되는 것으로 이해되어야 한다.
실시예에서 사용한 용어는 단지 설명을 목적으로 사용된 것으로, 한정하려는 의도로 해석되어서는 안된다. 단수의 표현은 문맥상 명백하게 다르게 뜻하지 않는 한, 복수의 표현을 포함한다. 본 명세서에서, "포함하다" 또는 "가지다" 등의 용어는 명세서 상에 기재된 특징, 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것이 존재함을 지정하려는 것이지, 하나 또는 그 이상의 다른 특징들이나 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것들의 존재 또는 부가 가능성을 미리 배제하지 않는 것으로 이해되어야 한다.
다르게 정의되지 않는 한, 기술적이거나 과학적인 용어를 포함해서 여기서 사용되는 모든 용어들은 실시예가 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가지고 있다. 일반적으로 사용되는 사전에 정의되어 있는 것과 같은 용어들은 관련 기술의 문맥 상 가지는 의미와 일치하는 의미를 가지는 것으로 해석되어야 하며, 본 출원에서 명백하게 정의하지 않는 한, 이상적이거나 과도하게 형식적인 의미로 해석되지 않는다.
또한, 첨부 도면을 참조하여 설명함에 있어, 도면 부호에 관계없이 동일한 구성 요소는 동일한 참조부호를 부여하고 이에 대한 중복되는 설명은 생략하기로 한다. 실시예를 설명함에 있어서 관련된 공지 기술에 대한 구체적인 설명이 실시예의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우 그 상세한 설명을 생략한다.
또한, 실시 예의 구성 요소를 설명하는 데 있어서, 제 1, 제 2, A, B, (a), (b) 등의 용어를 사용할 수 있다. 이러한 용어는 그 구성 요소를 다른 구성 요소와 구별하기 위한 것일 뿐, 그 용어에 의해 해당 구성 요소의 본질이나 차례 또는 순서 등이 한정되지 않는다. 어떤 구성 요소가 다른 구성요소에 "연결", "결합" 또는 "접속"된다고 기재된 경우, 그 구성 요소는 그 다른 구성요소에 직접적으로 연결되거나 접속될 수 있지만, 각 구성 요소 사이에 또 다른 구성 요소가 "연결", "결합" 또는 "접속"될 수도 있다고 이해되어야 할 것이다.
어느 하나의 실시 예에 포함된 구성요소와, 공통적인 기능을 포함하는 구성요소는, 다른 실시 예에서 동일한 명칭을 사용하여 설명하기로 한다. 반대되는 기재가 없는 이상, 어느 하나의 실시 예에 기재한 설명은 다른 실시 예에도 적용될 수 있으며, 중복되는 범위에서 구체적인 설명은 생략하기로 한다.
본 발명의 일 측면은, 긴병꽃풀(Glechoma grandis (A. Gray) Kuprian) 지상부 추출물을 유효성분으로 포함하는, 항균제 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 항균제 조성물은, 긴병꽃풀 지상부 추출물을 포함하는 천연 물질 기반의 항균제 조성물로서, 우수한 항균력을 가지며 인체 안전성이 확보되는 효과가 있다.
상기 긴병꽃풀(Glechoma grandis (A. Gray) Kuprian) 지상부 추출물은, 긴병꽃풀의 잎, 줄기를 비롯한 지상부 영역의 추출물을 의미할 수 있다.
상기 긴병꽃풀 지상부 추출물은, 피부자극성 및 안점막 자극성이 없어 피부 안전성을 확보할 수 있다.
또한, 단회경구투여(최고 용량 2,000 mg/kg Body weight) 및 단회경피투여(최고 용량 2,000 mg/kg Body weight) 시 독성이 없음이 입증되어, 최고 용량을 초과하지 않는 범위에서 경구투여 및 경피투여될 수 있다. 즉, 상기 긴병꽃풀 지상부 추출물은, 경구용 제제 또는 피부 외용제의 형태로 제조되어 인체에 경구투여 또는 경피투여될 수 있다.
일 실시형태에 따르면, 상기 항균제 조성물 중, 상기 긴병꽃풀 지상부 추출물의 농도는, 0.01 g/ml 내지 0.05 g/ml인 것일 수 있다.
상기 긴병꽃풀 지상부 추출물의 농도 범위는, 대장균, 황색포도상구균, 폐렴간균 및 녹농균에 대한 항균력을 모두 확보하면서, 항균제 제품에 적용시 제조 용이성 및 경제성을 확보할 수 있는 농도 범위일 수 있다.
일 실시형태에 따르면, 상기 긴병꽃풀 지상부 추출물은, 폴리페놀 5 중량% 내지 10 중량%를 포함하는 것일 수 있다. 바람직하게는, 폴리페놀 7 중량% 내지 9 중량%를 포함하는 것일 수 있다.
폴리페놀은 다수의 페놀 작용기를 가진 고분자로, 우리 몸에 있는 활성산소를 해가 없는 물질로 바꿔주는 항산화물질 중 하나로 알려져 있으며, 그 종류는 수천 가지가 넘는다. 잘 알려진 예로는 녹차에 든 카테킨, 포도주의 레스베라트롤, 사과와 양파의 쿼세틴 등이 있으며, 과일에 많이 함유된 플라보노이드와 콩에 많은 이소플라본도 폴리페놀의 일종이다. 또한, 폴리페놀은 항균 활성을 나타내는 것으로 알려져 있다.
상기 긴병꽃풀 지상부 추출물은, 유효성분으로서 폴리페놀을 추출물 전체 중 5 중량% 내지 10 중량%, 바람직하게는 7 중량% 내지 9중량% 포함함으로써, 항균 활성이 향상되는 효과가 있다.
일 실시형태에 따르면, 상기 긴병꽃풀 지상부 추출물은, 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 클로로포름, 1,3-부틸렌글리콜, n-헥산, 디에틸에테르, 부틸아세테이트 및 디클로로메탄으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상을 추출 용매로 하여 추출된 것일 수 있다.
일 실시형태에 따르면, 상기 저급 알코올은, 에탄올인 것일 수 있다.
바람직하게는, 상기 저급 알코올은, 50% (v/v) 내지 90% (v/v) 에탄올일 수 있고, 더욱 바람직하게는, 60% (v/v) 내지 80% (v/v) 에탄올인 것일 수 있다.
상기 에탄올의 농도 범위는, 상기 긴병꽃풀 지상부 추출물 내 유효성분(폴리페놀 포함)의 추출 효율을 최대화할 수 있는 범위일 수 있다.
일 실시형태에 따르면, 상기 추출은, 20 ℃ 내지 30 ℃의 온도에서 24 내지 48 시간 동안 수행되는 것일 수 있다.
일 실시형태에 따르면, 상기 추출은, 0.1 MPa 내지 0.2 MPa 압력 조건에서 수행되는 것일 수 있다.
상기 온도, 시간 및 압력 조건 범위를 벗어날 경우, 상기 긴병꽃풀 추출물 내 유효성분이 충분히 추출되지 않거나 유효성분이 파괴될 수 있다.
일 실시형태에 따르면, 폐렴간균(Klebsiella pneumoniae), 녹농균(Pseudomonas aeruginosa), 포도상구균(Staphylococcus aureus) 및 대장균(Escherichia coli) 중 적어도 하나 이상의 균주에 대하여 항균 활성을 갖는 것일 수 있다.
일 실시형태에 따르면, 상기 항균제 조성물은, 폐렴간균(Klebsiella pneumoniae), 녹농균(Pseudomonas aeruginosa), 포도상구균(Staphylococcus aureus) 및 대장균(Escherichia coli) 중 적어도 하나 이상의 균주에 대하여, 99.9% 이상의 균감소율을 나타내는 것일 수 있다.
본 발명에 따른 항균제 조성물은, 폐렴간균(Klebsiella pneumoniae), 녹농균(Pseudomonas aeruginosa), 포도상구균(Staphylococcus aureus) 및 대장균(Escherichia coli) 중 적어도 하나 이상의 균주에 대하여, 99.9% 이상의 균감소율을 나타냄으로써 우수한 항균 활성을 가지며, 다양한 항균제품에 적용 가능한 특징을 갖는다.
일 실시형태에 따르면, 상기 항균제 조성물은, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제 함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 제형을 포함하는 것일 수 있다.
본 발명의 다른 측면은, 상기 항균제 조성물을 포함하는, 항균용 피부 외용제를 제공한다.
본 발명에 따른 항균용 피부 외용제는, 피부 자극성 및 안점막 자극성이 없어 피부 안전성이 우수한 효과를 갖는다.
일 실시형태에 따르면, 상기 항균용 피부 외용제 중, 상기 항균제 조성물은 1 중량% 내지 5 중량%로 포함되는 것일 수 있다.
상기 항균제 조성물의 함량이 상기 범위 미만일 경우 도포 부위에 항균 효과가 충분히 나타나지 않을 수 있고, 상기 범위를 초과할 경우 도포력 또는 피부 흡수력이 저하될 수 있다.
상기 피부 외용제는, 일반적으로 외용에 사용하는 조성물 전반을 포괄하는 개념으로, 기초 화장료, 메이크업 화장료, 모발용 화장료, 면도용 화장료 등 각종 화장료를 포함하는 화장료 조성물이나 연고제 등의 다양한 의약품 내지 의약외품 등으로 폭넓게 적용 가능한 것을 의미할 수 있다. 예를 들어, 상기 의약외품은 소독청결제, 샤워폼, 가그린, 물티슈, 세제비누, 핸드워시, 가습기 충진제, 마스크, 연고제, 코팅제 또는 필터충진제일 수 있다.
상기 피부 외용제 조성물은 유효성분 외에 사용용도 및 외용제 조성물의 성질에 따라 통상 외용제에 배합되고 있는 성분, 구체적으로 보습제, 자외선 흡수제, 비타민류, 동식 물 추출성분, 소화제, 미백제, 혈관확장제, 수렴제, 청량제, 호르몬제 등을 추가로 배합한 것일 수 있다.
상기 피부 외용제 조성물의 제형은 사용용도 및 외용제 조성물의 성질에 따라 적절한 형태를 취할 수 있으며, 구체적으로 수용액계, 가용화계, 유화계, 유액계, 겔계, 페이스트계, 연고계, 에어졸계, 물-기름 2층계, 물-기름-분말 3층계일 수 있으며, 상기 제형에 의해 본 발명의 외용제의 제형 및 형태가 제한되는 것은 아니다.
또한, 상기 피부 외용제는 유효성분을 피부 조직으로 침투 또는 이행시키기 위해서 필요한 기제를 추가로 포함할 수 있다.
일 실시형태에 따르면, 상기 항균용 피부 외용제는, 용액제, 현탁제, 스프레이제, 패취제, 패드제, 크림제, 연고제 또는 겔제의 제형으로 제조될 수 있다.
용액제는 유효 화합물 이외에 통상의 부형제, 예를 들면 용매, 가용화제 및 유화제, 예를 들면 물, 에틸알코올, 이소프로필알코올, 에틸카보네이트, 에틸아세테이트, 벤질알코올, 벤질벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 디메틸포름아미드, 오일, 특히 면실유, 낙화생유, 동백유, 알로에베라, 글리세린, 천연옥수수 배종유, 올리브유, 피마자유, 아몬드유 및 참깨유, 글리세롤, 글리세롤 포름알코올, 테티라히드로푸르푸릴 알코올, 폴리에틸렌 글리콜 및 소르비탄의 지방산 에스테르, 또는 이들 물질의 혼합물을 포함할 수 있으며, 보존제로서 메틸 또는 프로필-p-히드록시벤조에이트 또는 솔브산 등을 포함할 수 있다.
현탁제는 유효 화합물 이외에 통상의 부형제, 예를 들면 액상 희석제 (예: 물, 에틸알코올 및 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜), 및 현탁제 (예: 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨, 소르비탄 에스테르, 셀룰로스 유도체 및 수소화 식용유지), 미세 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 한천 및 트라가칸트, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 또는 이들 물질의 혼합물을 함유할 수 있다.
연고제, 크림제 및 겔제는 유효 화합물 이외에 통상의 부형제, 예를 들면 동물성 및 식물성 지방, 왁스 파라핀, 전분, 타르가칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 규산, 활석 및 산화 아연 또는 이들 물질의 혼합물을 함유할 수 있다.
본 발명의 또 다른 측면은, 상기 항균제 조성물을 포함하는, 식품 첨가물, 의약품, 수의약품 또는 화장품 조성물을 제공한다.
상기 식품 첨가물, 의약품, 수의약품 또는 화장품 조성물은, 분말, 과립, 캡슐, 환제, 정제, 츄잉검과 같은 고체 형태 또는 시럽, 용액, 현탁액과 같은 액체 형태를 비롯한 경구 투여에 적합한 임의의 형태로 제형화될 수 있다. 또한, 크림, 연고, 겔, 밀크, 페이스트, 유제, 형청, 마스크, 향유, 체액, 스프레이, 좌제, 질 좌약, 경피 흡수제 패치, 치약, 치주젤, 구강 청결제 등과 같은 형태로 제형화될 수 있다.
일 실시형태에 따르면, 상기 항균제 조성물은, 경구 또는 국소 투여용으로 제형화될 수 있다.
상기 항균제 조성물을 포함하는 의약품 또는 수의약품의 경우, 상기 항균제 조성물이 치료학적 유효량으로 포함 또는 투여된다.
본 발명의 다른 측면은, 긴병꽃풀의 지상부를 건조 및 분쇄하여 긴병꽃풀 지상부 건조물을 제조하는 단계; 상기 긴병꽃풀 지상부 건조물을 용매 추출하여 긴병꽃풀 지상부 추출물을 얻는 단계; 상기 긴병꽃풀 지상부 추출물을 여과한 후 감압 농축하여 용매를 제거하는 단계; 및 상기 용매가 제거된 긴병꽃풀 지상부 추출물을 동결 건조하는 단계;를 포함하는, 긴병꽃풀 지상부 추출물의 제조방법을 제공한다.
상기 긴병꽃풀의 지상부는, 긴병꽃풀의 잎 및 줄기 중 적어도 하나를 포함할 수 있다.
일 실시형태에 따르면, 상기 긴병꽃풀 지상부 추출물을 얻는 단계는, 상기 긴병꽃풀 지상부 건조물을 20 ℃ 내지 30 ℃ 온도로 24 시간 내지 48 시간 동안 용매에 침지시킨 후, 상등액과 침전물을 분리하여 긴병꽃풀 지상부 추출물을 수득하는 것일 수 있다.
여기서, 상기 상등액과 침전물을 분리하는 과정은 반복 수행될 수 있다.
일 실시형태에 따르면, 상기 긴병꽃풀 지상부 추출물을 얻는 단계는, 1회 이상 수행될 수 있고, 바람직하게는, 3회 이상 반복 수행될 수 있다. 이는, 긴병꽃풀 지상부 내 포함된 유효성분을 충분히 추출하기 위함일 수 있다.
이하, 실시예 및 비교예에 의하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다.
단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1> 긴병꽃풀 지상부 추출물의 제조
긴병꽃풀의 줄기와 잎 5 kg을 채취하여 열풍건조 또는 자연 음지 건조 또는 동결 건조후 분쇄하였다. 분쇄한 시료에 시료 중량의 10배 양의 에탄올 70% (v/v)을 가하여 실온에서 약 24 시간 침지한 후 상등액과 침전물을 분리하여 동일한 방법으로 3회 반복 추출하였다. 각 시료 추출물은 여과지(Whatman No.2)를 이용하여 여과한 후 EYELA 증발기(evaporator)로 감압 농축하여 용매를 제거 후 동결 건조하였으며, 이 시료를 - 20 ℃ 온도에서 보관하였다. 이때, 긴병꽃풀은 오산 일원에서 채취하였다.
<실시예 2> 긴병꽃풀 지상부 추출물을 포함하는 피부 외용제 제조
실시예 1의 긴병꽃풀 지상부 추출물에 정제수, 에탄올 및 레몬 오일 등을 첨가하여 피부 외용제를 제조하였다.
<실험예 1> 긴병꽃풀 지상부 추출물의 대장균 및 황색포도상구균에 대한 항균력 평가
실시예 1의 방법으로 제조된 긴병꽃풀 지상부 추출물의 농도 및 균주별 항균력을 각각 평가하였다.
시험 방법 및 결과를 표 1내지 표 4 및 도 1 내지 도 4에 나타내었다.
1) 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.01 g/mL)에 대한 항균력 평가
| 시험 항목 | 시험 방법 | 시험 결과 | 시험환경 | |||
| 초기농도 (CFU/mL) |
24시간 후 농도 (CFU/mL) |
감소율 (%) |
||||
| 항균시험: 대장균 |
BLANK | KCL-FIR-1002: 2018 | 9.0 X 104 | 9.1 X 105 | - | (37.0±0.2) ℃ |
| 긴병꽃풀 에탄올 추출물 (0.01g/ml) |
9.0 X 104 | < 10 | 99.9 | |||
| 항균시험: 황색포도상구균 |
BLANK | 3.7 X 104 | 9.7 X 105 | - | ||
| 긴병꽃풀 에탄올 추출물 (0.01g/ml) |
3.7 X 104 | < 10 | 99.9 | |||
* CFU : Colony Forming Unit* 접종원 농도(CFU/mL) : 대장균 : 9.0 x 106, 황색포도상구균 : 3.7 x 106
* 사용균주 : Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 6538
* 반응시간 : 24시간
도 1은, 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.01 g/mL)의 대장균 및 황색포도상구균에 대한 항균시험 결과를 나타낸 사진이다.
표 1 및 도 1을 참조하면, 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.01 g/mL)은 대장균 및 황색포도상구균에 대해 99.9%의 항균활성을 나타내는 것을 확인할 수 있다.
2) 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.02 g/mL)에 대한 항균력 평가
| 시험 항목 | 시험 방법 | 시험 결과 | 시험환경 | |||
| 초기농도 (CFU/mL) |
24시간 후 농도 (CFU/mL) |
감소율 (%) |
||||
| 항균시험: 대장균 |
BLANK | KCL-FIR-1002: 2018 | 9.0 X 104 | 9.1 X 105 | - | (37.0±0.2) ℃ |
| 긴병꽃풀 에탄올 추출물 (0.02g/ml) |
9.0 X 104 | < 10 | 99.9 | |||
| 항균시험: 황색포도상구균 |
BLANK | 3.7 X 104 | 9.7 X 105 | - | ||
| 긴병꽃풀 에탄올 추출물 (0.02g/ml) |
3.7 X 104 | < 10 | 99.9 | |||
* CFU : Colony Forming Unit* 접종원 농도(CFU/mL) : 대장균 : 9.0 x 106, 황색포도상구균 : 3.7 x 106
* 사용균주 : Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 6538
* 반응시간 : 24시간
도 2는, 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.02 g/mL)의 대장균 및 황색포도상구균에 대한 항균시험 결과를 나타낸 사진이다.
표 2 및 도 2를 참조하면, 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.02 g/mL)은 대장균 및 황색포도상구균에 대해 99.9%의 항균활성을 나타내는 것을 확인할 수 있다.
3) 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.03 g/mL)에 대한 항균력 평가
| 시험 항목 | 시험 방법 | 시험 결과 | 시험환경 | |||
| 초기농도 (CFU/mL) |
24시간 후 농도 (CFU/mL) |
감소율 (%) |
||||
| 항균시험: 대장균 |
BLANK | KCL-FIR-1002: 2018 | 9.0 X 104 | 9.1 X 105 | - | (37.0±0.2) ℃ |
| 긴병꽃풀 에탄올 추출물 (0.03g/ml) |
9.0 X 104 | < 10 | 99.9 | |||
| 항균시험: 황색포도상구균 |
BLANK | 3.7 X 104 | 9.7 X 105 | - | ||
| 긴병꽃풀 에탄올 추출물 (0.03g/ml) |
3.7 X 104 | < 10 | 99.9 | |||
* CFU : Colony Forming Unit* 접종원 농도(CFU/mL) : 대장균 : 9.0 x 106, 황색포도상구균 : 3.7 x 106
* 사용균주 : Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 6538
* 반응시간 : 24시간
도 3은, 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.03 g/mL)의 대장균 및 황색포도상구균에 대한 항균시험 결과를 나타낸 사진이다.
표 3 및 도 3을 참조하면, 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.03 g/mL)은 대장균 및 황색포도상구균에 대해 99.9%의 항균활성을 나타내는 것을 확인할 수 있다.
4) 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.05 g/mL)에 대한 항균력 평가
| 시험 항목 | 시험 방법 | 시험 결과 | 시험환경 | |||
| 초기농도 (CFU/mL) |
24시간 후 농도 (CFU/mL) |
감소율 (%) |
||||
| 항균시험: 대장균 |
BLANK | KCL-FIR-1002: 2018 | 9.0 X 104 | 9.1 X 105 | - | (37.0±0.2) ℃ |
| 긴병꽃풀 에탄올 추출물 (0.05g/ml) |
9.0 X 104 | < 10 | 99.9 | |||
| 항균시험: 황색포도상구균 |
BLANK | 3.7 X 104 | 9.7 X 105 | - | ||
| 긴병꽃풀 에탄올 추출물 (0.05g/ml) |
3.7 X 104 | < 10 | 99.9 | |||
* CFU : Colony Forming Unit* 접종원 농도(CFU/mL) : 대장균 : 9.0 x 106, 황색포도상구균 : 3.7 x 106
* 사용균주 : Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 6538
* 반응시간 : 24시간
도 4는, 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.05 g/mL)의 대장균 및 황색포도상구균에 대한 항균시험 결과를 나타낸 사진이다.
표 4 및 도 4를 참조하면, 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.05 g/mL)은 대장균 및 황색포도상구균에 대해 99.9%의 항균활성을 나타내는 것을 확인할 수 있다.
<실험예 2> 긴병꽃풀 지상부 추출물의 녹농균 및 폐렴간균에 대한 항균력 평가
실시예 1의 방법으로 제조된 긴병꽃풀 지상부 추출물의 농도 및 균주별 항균력을 각각 평가하였다.
시험 방법 및 결과를 표 5내지 표 8 및 도 5 내지 도 8에 나타내었다.
1) 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.05 g/mL)에 대한 항균력 평가
| 시험 항목 | 시험 방법 | 시험 결과 | 시험환경 | |||
| 초기농도 (CFU/mL) |
24시간 후 농도 (CFU/mL) |
감소율 (%) |
||||
| 항균시험: 녹농균 |
BLANK | KCL-FIR-1002: 2018 | 4.3 X 104 | 9.0 X 105 | - | (37.0±0.2) ℃ |
| 긴병꽃풀 에탄올 추출물 (0.05g/ml) |
4.3 X 104 | < 10 | 99.9 | |||
| 항균시험: 폐렴간균 |
BLANK | 8.3 X 104 | 9.3 X 105 | - | ||
| 긴병꽃풀 에탄올 추출물 (0.05g/ml) |
8.3 X 104 | < 10 | 99.9 | |||
* CFU : Colony Forming Unit* 접종원 농도(CFU/mL) : 녹농균 : 4.3 x 106, 폐렴간균 : 8.3 x 106
* 사용균주 : Pseudomonas aeruginosa ATCC 15442, Klebsiella pneumoniae ATCC 4352
* 반응시간 : 24시간
도 5는, 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.05 g/mL)의 녹농균 및 폐렴간균에 대한 항균시험 결과를 나타낸 사진이다.
표 5 및 도 5를 참조하면, 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.05 g/mL)은 녹농균 및 폐렴간균에 대해 99.9%의 항균활성을 나타내는 것을 확인할 수 있다.
2) 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.03 g/mL)에 대한 항균력 평가
| 시험 항목 | 시험 방법 | 시험 결과 | 시험환경 | |||
| 초기농도 (CFU/mL) |
24시간 후 농도 (CFU/mL) |
감소율 (%) |
||||
| 항균시험: 녹농균 |
BLANK | KCL-FIR-1002: 2018 | 4.3 X 104 | 9.0 X 105 | - | (37.0±0.2) ℃ |
| 긴병꽃풀 에탄올 추출물 (0.03g/ml) |
4.3 X 104 | < 10 | 99.9 | |||
| 항균시험: 폐렴간균 |
BLANK | 8.3 X 104 | 9.3 X 105 | - | ||
| 긴병꽃풀 에탄올 추출물 (0.03g/ml) |
8.3 X 104 | < 10 | 99.9 | |||
* CFU : Colony Forming Unit* 접종원 농도(CFU/mL) : 녹농균 : 4.3 x 106, 폐렴간균 : 8.3 x 106
* 사용균주 : Pseudomonas aeruginosa ATCC 15442, Klebsiella pneumoniae ATCC 4352
* 반응시간 : 24시간
도 6은, 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.03 g/mL)의 녹농균 및 폐렴간균에 대한 항균시험 결과를 나타낸 사진이다.
표 6 및 도 6을 참조하면, 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.03 g/mL)은 녹농균 및 폐렴간균에 대해 99.9%의 항균활성을 나타내는 것을 확인할 수 있다.
3) 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.02 g/mL)에 대한 항균력 평가
| 시험 항목 | 시험 방법 | 시험 결과 | 시험환경 | |||
| 초기농도 (CFU/mL) |
24시간 후 농도 (CFU/mL) |
감소율 (%) |
||||
| 항균시험: 녹농균 |
BLANK | KCL-FIR-1002: 2018 | 4.3 X 104 | 9.0 X 105 | - | (37.0±0.2) ℃ |
| 긴병꽃풀 에탄올 추출물 (0.02g/ml) |
4.3 X 104 | < 10 | 99.9 | |||
| 항균시험: 폐렴간균 |
BLANK | 8.3 X 104 | 9.3 X 105 | - | ||
| 긴병꽃풀 에탄올 추출물 (0.02g/ml) |
8.3 X 104 | < 10 | 99.9 | |||
* CFU : Colony Forming Unit* 접종원 농도(CFU/mL) : 녹농균 : 4.3 x 106, 폐렴간균 : 8.3 x 106
* 사용균주 : Pseudomonas aeruginosa ATCC 15442, Klebsiella pneumoniae ATCC 4352
* 반응시간 : 24시간
도 7은, 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.02 g/mL)의 녹농균 및 폐렴간균에 대한 항균시험 결과를 나타낸 사진이다.
표 7 및 도 7을 참조하면, 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.02 g/mL)은 녹농균 및 폐렴간균에 대해 99.9%의 항균활성을 나타내는 것을 확인할 수 있다.
4) 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.01 g/mL)에 대한 항균력 평가
| 시험 항목 | 시험 방법 | 시험 결과 | 시험환경 | |||
| 초기농도 (CFU/mL) |
24시간 후 농도 (CFU/mL) |
감소율 (%) |
||||
| 항균시험: 녹농균 |
BLANK | KCL-FIR-1002: 2018 | 4.3 X 104 | 9.0 X 105 | - | (37.0±0.2) ℃ |
| 긴병꽃풀 에탄올 추출물 (0.01g/ml) |
4.3 X 104 | < 10 | 99.9 | |||
| 항균시험: 폐렴간균 |
BLANK | 8.3 X 104 | 9.3 X 105 | - | ||
| 긴병꽃풀 에탄올 추출물 (0.01g/ml) |
8.3 X 104 | < 10 | 99.9 | |||
* CFU : Colony Forming Unit* 접종원 농도(CFU/mL) : 녹농균 : 4.3 x 106, 폐렴간균 : 8.3 x 106
* 사용균주 : Pseudomonas aeruginosa ATCC 15442, Klebsiella pneumoniae ATCC 4352
* 반응시간 : 24시간
도 8은, 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.01 g/mL)의 녹농균 및 폐렴간균에 대한 항균시험 결과를 나타낸 사진이다.
표 8 및 도 8을 참조하면, 긴병꽃풀 에탄올 추출물(0.01 g/mL)은 녹농균 및 폐렴간균에 대해 99.9%의 항균활성을 나타내는 것을 확인할 수 있다.
<실험예 3> 긴병꽃풀 에탄올 추출물의 피부자극 시험
1) 실험 방법
Rabbit에 대한 긴병꽃풀 70% (v/v) 에탄올 추출물의 피부자극을 평가하기 위하여, 0.5 mL의 시험 물질을 등 부위에 24 시간 첩포한 후(1일 1회), 72 시간 동안의 사망률, 일반 증상, 체중 변화 및 피부자극을 관찰 및 평가하였다.
a) 군 구성
| 군 | 성 | 동물번호 | 마리수 | 투여용량 | 투여부위 (마리당) |
투여경로 |
| G1 | 수컷 | 1101 - 1106 | 6 | 대조물질 : 0.5 mL대조물질 : 0.5 mL | 대조부위 : 2 시험부위 : 2 |
피부 |
b) 투여전 과정투여 약 24 시간 전에 등 부위를 제모 [약 (15 × 15) cm2]한 후, 투여 직전에 각각 [(2.5 × 2.5) cm2] 넓이의 투여부위 2 개소와 대조부위 2 개소로 구분 및 표시하였다. 실험동물 당 투여부위와 대조부위를 각각 찰과부위와 비찰과부위로 구분하였으며, 찰과부위는 표피만 손상되고 진피는 손상되지 않으며 피가 나지 않는 정도의 찰과상을 입혔다.
c) 시험물질 투여
0.5 mL의 시험물질을 gauze [(2.5 × 2.5) cm2]에 균일하게 도포하였다. 시험물질을 투여한 gauze를 상부 의 찰 과부위 1 개 소와 비찰과 부위 1 개소에 부 착하였으며, 하부의 대조부위에는 0.5 mL의 대조물질을 시험부위와 동일하게 부착하였다. 투여부위를 비자극성 테이프 (Tegaderm, 3M)와 탄력붕대 (Coban, 3M)를 이용하여 잘 고정시켰다. 첩포는 24 시간 후 제거하고 피부에 남아있는 시험물질은 세척물질 (멸균증류수)을 이용해 부드럽게 세정해주었다.
2) 실험 결과
a) 사망률 및 일반 증상
모든 동물에서 시험물질 투여로 인한 사망동물은 관찰되지 않았으며, 일반증상 관찰결과, 시험물질 투여 후 24 시간에 전례에서 시험물질의 성상과 유사한 피부의 착색화 증상이 실험종료 시까지 관찰되었다.
b) 체중변화
체중측정 결과, 시험물질 투여에 의한 체중변화는 관찰되지 않았다.
c) 투여부위의 관찰 및 평가
시험물질 투여부위를 관찰한 결과, 피부자극이 관찰되지 않았다. Draize의 평가방법에 따라 1차 피부자극지수 (P.I.I.)는 "0.0" 으로 산출되었다.
상기 결과로부터 rabbit에 대한 피부자극시험에서 긴병꽃풀 70% 에탄올 추출물은 "비자극성(Non-irritant)" 물질로 판단되었다.
<실험예 4> 긴병꽃풀 에탄올 추출물의 안점막자극 시험
1) 실험 방법
Rabbit에 대한 긴병꽃풀 70% (v/v) 에탄올 추출물의 안점막자극을 평가하기 위하여 0.1 mL의 시험물질을 안구에 1 회 투여한 후 7 일 동안의 사망률, 일반증상, 체중변화 및 안점막자극을 관찰 및 평가하였다.
a) 군 구성
| 군 | 성 | 동물번호 | 마리수 | 투여용량 | 투여부위 |
| G1(Non-washing) | 수컷 | 1101 - 1106 | 6 | 0.1 ml | Right eye |
| G2(Washing) | 수컷 | 1201 - 1203 | 3 | 0.1 ml | Right eye |
b) 투여전 과정투여 약 24 시간 전에 양안의 각막, 홍채 및 결막 등의 이상유무를 휴대용 슬릿램프 (HEINE OPTOTECHNIK GmbH & Co. KG, 독일)를 이용하여 확인하였다.
c) 시험물질 투여
Rabbit을 보정한 후 9 마리의 우안에 시험물질 0.1 mL을 직접 투여하고, 좌안은 대조부위로 설정하였다. 투여 후 시험물질의 누출 방지를 위해 상하안검을 잡아 약 1 초간 폐안시켰다. 세척군 3 마리는 시험물질 투여 20 - 30 초 후, 양쪽 눈에 세척물질 (멸균생리식염수)를 사용하여 충분히 세척하였고, 나머지 6 마리는 세척하지 않았다.
2) 실험 결과
a) 사망률 및 일반증상
실험기간 중 시험물질 투여로 인한 사망동물은 관찰되지 않았고, 모든 동물에서 특이할 만한 이상증상은 관찰되지 않았다.
b) 체중변화
체중측정 결과, 모든 동물에서 정상적인 체중증가가 관찰되었다.
c) 투여부위의 관찰 및 평가
시험물질 투여부위를 관찰한 결과, 비세척군 및 세척군 모두에서 안점막자극이 관찰되지 않았다. Draize의 평가방법에 따른 급성안점막자극지수 (I.A.O.I.)는 비세척군 및 세척군에서 모두 "0.0" 으로 산출되었다.
상기 결과로부터 rabbit에 대한 안점막자극시험에서 긴병꽃풀 70% 에탄올 추출물은 "무자극물(Nonirritating)" 물질로 판단되었다.
<실험예 5> 긴병꽃풀 에탄올 추출물의 단회경구투여 독성시험
1) 실험 방법
긴병꽃풀 70% (v/v) 에탄올 추출물에 대한 단회경구투여독성시험을 실시하기 위해 SD계 rat를 사용하여 식품의약품안전처 고시“의약품등의 독성시험기준”에 따라 2000 mg/kg B.W. 용량을 최고용량으로 설정하고 공비를 2 로 두어 1000 및 500 mg/kg B.W. 으로 중용량 및 저용량을 설정하여 암·수 각각에 단회경구투여 하였다.
시험물질 투여 후 14 일간 사망률, 일반증상, 체중변화를 관찰하였으며, 생존동물은 부검하여 육안적으로 장기의 이상 유무를 검사하였다.
a) 군 구성
| 군 | 성 | 동물번호 | 마리수 | 투여량 (mg/kg B.W.) |
투여액량 (mL/kg B.W.) |
투여경로 |
| G1 | 수컷 | 1101 - 1105 | 5 | 0 | 10 | 경구 |
| G1 | 암컷 | 2101 - 2105 | 5 | 0 | 10 | 경구 |
| G2 | 수컷 | 1201 - 1205 | 5 | 500 | 10 | 경구 |
| G2 | 암컷 | 2201 - 2205 | 5 | 500 | 10 | 경구 |
| G3 | 수컷 | 1301 - 1305 | 5 | 1000 | 10 | 경구 |
| G3 | 암컷 | 2301 - 2305 | 5 | 1000 | 10 | 경구 |
| G4 | 수컷 | 1401 - 1405 | 5 | 2000 | 10 | 경구 |
| G4 | 암컷 | 2401 - 2405 | 5 | 2000 | 10 | 경구 |
※ G1 : 부형제 대조군, G2 - G4 : 시험물질 투여군, B.W. : Body weightb) 시험물질의 투여 경로 및 방법
약 18 시간 절식시킨 실험동물에 시험물질 조제물을 경구투여용 sonde를 장착한 주사기를 이용하여 위내에 1 회 강제 투여하였다.
c) 관찰항목
일반증상은 모든 동물에 대하여 1일 1회 관찰 하였으며, 시험물질 투여 후 14 일간 관찰하였다. 단, 투여 당일에는 투여 후 0.5, 1, 2, 3 및 4 시간에 관찰하였다.
체중은 도입 시, 군 분리 시, 시험물질투여 개시 직전, 투여 개시 후 7 일 및 14 일째에 측정하였다.
부검은 투여 후 14 일째 모든 생존동물의 외관 검사를 실시한 후, Isoflurane (아이프란액, 하나제약) 마취하에 방혈치사 하여 육안으로 장기를 검사하였다.
2) 실험 결과
실험기간 중 시험물질 투여에 의한 사망동물은 관찰되지 않았고, 일반증상 관찰결과, 시험물질 투여에 의한 이상소견은 관찰되지 않았다.
체중측정 결과, 모든 시험물질 투여군에서 부형제 대조군과 비교하여 통계학적으로 유의 적인 차이는 관찰되지 않았고, 부검소견 결과, 모든 투여군에서 시험물질 투여에 의한 이상소견은 관찰되지 않았다.
상기 결과로부터 rat에 긴병꽃풀 70% 에탄올 추출물을 단회경구투여 시 시험물질 투여와 관련된 독성학적 소견이 인정되지 않았으므로 개략의 치사량은 암·수 모두 2000 mg/kg B.W.으로 판단되었다.
<실험예 6> 긴병꽃풀 에탄올 추출물의 단회경피투여 독성시험
1) 실험 방법
긴병꽃풀 70% (v/v) 에탄올 추출물에 대한 단회경피투여독성시험을 실시하기 위해 SD계 rat를 사용하여 식품의약품안전처 고시“의약품등의 독성시험기준”에 따라 2000 mg/kg B.W. 용량을 최고용량으로 설정하고 공비를 2 로 두어 1000 및 500 mg/kg B.W. 으로 중용량 및 저용량을 설정하여 암·수 각각에 단회경피투여 하였다.
시험물질 투여 후 14 일간 사망률, 일반증상, 체중변화를 관찰하였으며, 생존동물은 부검하여 육안적으로 장기의 이상 유무를 검사하였다.
a) 군 구성
| 군 | 성 | 동물번호 | 마리수 | 투여량 (mg/kg B.W.) |
투여액량 (mL/kg B.W.) |
투여경로 |
| G1 | 수컷 | 1101 - 1105 | 5 | 0 | 5 | 경피 |
| G1 | 암컷 | 2101 - 2105 | 5 | 0 | 5 | 경피 |
| G2 | 수컷 | 1201 - 1205 | 5 | 500 | 5 | 경피 |
| G2 | 암컷 | 2201 - 2205 | 5 | 500 | 5 | 경피 |
| G3 | 수컷 | 1301 - 1305 | 5 | 1000 | 5 | 경피 |
| G3 | 암컷 | 2301 - 2305 | 5 | 1000 | 5 | 경피 |
| G4 | 수컷 | 1401 - 1405 | 5 | 2000 | 5 | 경피 |
| G4 | 암컷 | 2401 - 2405 | 5 | 2000 | 5 | 경피 |
※ G1 : 부형제 대조군, G2 - G4 : 시험물질 투여군, B.W. : Body weightb) 시험물질의 투여 경로 및 방법
투여 전날 실험동물의 등 부위를 가급적 피부가 손상 되지 않도록 넓게 제모하였다. 시험물질의 도포면적은 체표면적의 10 % 정도 [rat : (4 × 4) cm2]로 하였다. 시험물질 조제물을 gauze에 적용 후 제모한 부위에 부착하고, 시험물질의 유실을 막기 위해 비자극성 테이프 (Tegaderm, 3M)와 탄력붕대 (Coban, 3M)로 24 시간 고정하였다. 노출 종료 후 도포물을 제거하고 피부에 남아있는 시험물질 조제물을 멸균증류수 (주사용수)로 잘 닦아주었다.
c) 관찰항목
일반증상은, 모든 동물에 대하여 1일 1회 관찰하였으며, 시험물질 투여 후 14 일간 관찰하였다. 단, 투여 당일에는 투여 후 0.5, 1, 2, 3 및 4 시간에 관찰하였다.
체중은 도입 시, 군 분리 시, 시험물질투여 개시 직전, 투여 개시 후 7 일 및 14 일째에 측정하였다.
부검은 투여 후 14 일째 모든 생존동물의 외관 검사를 실시한 후, Isoflurane (아이프란액, 하나제약) 마취하에 방혈치사 하여 육안으로 장기를 검사하였다.
2) 실험 결과
실험기간 중 시험물질 투여에 의한 사망동물은 관찰되지 않았고, 일반증상 관찰결과, 암컷 1000 m g/kg B.W . 시험물 질 투여군 및 암 ·수컷 2000 m g/kg B.W . 시험물질 투여군에서 관찰된 피부의 착색화가 관찰되었다.
체중측정 결과, 모든 시험물질 투여군에서 부형제 대조군과 비교하여 통계학적으로 유의적인 차이는 관찰되지 않았고, 부검소견 결과, 모든 투여군에서 시험물질 투여에 의한 이상소견은 관찰되지 않았다.
상기 결과로부터 rat에 긴병꽃풀 70% 에탄올 추출물을 단회경피투여 시 시험물질 투여와 관련된 독성학적 소견이 인정되지 않았으므로 개략의 치사량은 암·수 모두 2000 mg/kg B.W. 으로 판단된다.
<실험예 7> 긴병꽃풀 지상부 추출물의 폴리페놀 함량 측정
상기 제조된 긴병꽃풀 지상부 추출물의 총 폴리페놀 함량은 Folin-Denis 방법을 변형하여 측정하였다. 농축하지 않은 추출물 10 μL를 취하여 10% sodium carbonate (Na2CO3) 200 μL와 1N Folin-ciocalteu reagent 10 μL와 혼합하여 상온에서 30분 반응 후 750 nm에서의 흡광도를 측정하였다.
폴리페놀 함량은 galic acid를 표준물질로 한 표준곡선을 통해 계산하였다.
본 발명의 일 실시형태에 따른 긴병꽃풀 지상부 추출물(긴병꽃풀 70% (v/v) 에탄올 추출물)의 총 폴리페놀 함량을 측정한 결과, 추출물의 총 폴리페놀 함량은 88.44 mg/g GAE로 나타났다.
이상과 같이 실시예들이 비록 한정된 도면에 의해 설명되었으나, 해당 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 상기를 기초로 다양한 기술적 수정 및 변형을 적용할 수 있다. 예를 들어, 설명된 기술들이 설명된 방법과 다른 순서로 수행되거나, 및/또는 설명된 시스템, 구조, 장치, 회로 등의 구성요소들이 설명된 방법과 다른 형태로 결합 또는 조합되거나, 다른 구성요소 또는 균등물에 의하여 대치되거나 치환되더라도 적절한 결과가 달성될 수 있다.
그러므로, 다른 구현들, 다른 실시예들 및 특허청구범위와 균등한 것들도 후술하는 청구범위의 범위에 속한다.
Claims (9)
- 긴병꽃풀(Glechoma grandis (A. Gray) Kuprian) 지상부 추출물을 유효성분으로 포함하는,
항균제 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 긴병꽃풀 지상부 추출물의 농도는,
0.01 g/ml 내지 0.05 g/ml인 것인,
항균제 조성물.
- [제1항에 있어서,
상기 긴병꽃풀 지상부 추출물은,
폴리페놀 5 중량% 내지 10 중량%를 포함하는 것인,
항균제 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 긴병꽃풀 지상부 추출물은,
물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 클로로포름, 1,3-부틸렌글리콜, n-헥산, 디에틸에테르, 부틸아세테이트 및 디클로로메탄으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상을 추출 용매로 하여 추출된 것인,
항균제 조성물.
- 제4항에 있어서,
상기 저급 알코올은, 에탄올인 것인,
항균제 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 추출은,
20 ℃ 내지 30 ℃의 온도에서 24 시간 내지 48 시간 동안 수행되는 것인,
항균제 조성물.
- 제1항에 있어서,
폐렴간균(Klebsiella pneumoniae), 녹농균(Pseudomonas aeruginosa), 포도상구균(Staphylococcus aureus) 및 대장균(Escherichia coli) 중 적어도 하나 이상의 균주에 대하여 항균 활성을 갖는 것인,
향균제 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 항균제 조성물은,
용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제 함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 제형을 포함하는 것인,
항균제 조성물.
- 제1항의 항균제 조성물을 포함하는,
항균용 피부 외용제.
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|---|---|---|---|
| KR1020210088931A KR102607410B1 (ko) | 2021-07-07 | 2021-07-07 | 긴병꽃풀 지상부 추출물을 포함하는 항균제 조성물 및 이를 포함하는 피부 외용제 |
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| KR1020210088931A KR102607410B1 (ko) | 2021-07-07 | 2021-07-07 | 긴병꽃풀 지상부 추출물을 포함하는 항균제 조성물 및 이를 포함하는 피부 외용제 |
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| KR102616939B1 (ko) * | 2023-03-07 | 2023-12-21 | 정상욱 | 화장품 잔여물 측정 방법 |
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| KR20140130649A (ko) * | 2014-09-29 | 2014-11-11 | 제이앤팜유한책임회사 | 마카추출물과 긴병꽃풀, 감초, 병풀, 인동추출물을 함유하는 피부노화방지용 화장료 조성물 |
| KR20160083299A (ko) * | 2014-12-30 | 2016-07-12 | 경희대학교 산학협력단 | 긴병꽃풀 추출물을 함유한 화상 치료용 외용제 조성물 |
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- 2021-07-07 KR KR1020210088931A patent/KR102607410B1/ko active IP Right Grant
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| https://14128625.tistory.com/272, 일상을프레임에가두다, 긴병꽃풀, 2017.01.27. * |
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| KR102616939B1 (ko) * | 2023-03-07 | 2023-12-21 | 정상욱 | 화장품 잔여물 측정 방법 |
Also Published As
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|---|---|
| KR102607410B1 (ko) | 2023-11-29 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| AMND | Amendment | ||
| E601 | Decision to refuse application | ||
| X091 | Application refused [patent] | ||
| AMND | Amendment | ||
| X701 | Decision to grant (after re-examination) |