KR20220099958A - Cdk5의 치환된 1,6-나프티리딘 억제제 - Google Patents

Cdk5의 치환된 1,6-나프티리딘 억제제 Download PDF

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KR20220099958A
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고란 말로이치크
메튜 에이치. 다니엘스
브렛 디. 윌리엄스
마올린 유
마크 더블유. 레드보어
진-크리스토프 피. 하만지
제나 리지에 왕
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골드핀치 바이오 인코포레이티드
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Abstract

본원에서는 화학식 I의 화합물, 및 관련 염 및 약제학적 조성물이 기재된다. 또한 본원에서는 화학식 I의 화합물 및 관련된 염 및 약제학적 조성물을 사용하여, 예를 들어, 콩팥 질환, 콩팥 기능부전 또는 다낭성 콩팥 질환과 같은 질환 및 병태를 치료하는 방법이 기재된다.
화학식 I

Description

CDK5의 치환된 1,6-나프티리딘 억제제
관련 출원
본 출원은 2019년 10월 1일자로 출원된 미국 가특허 출원 제62/908,952호; 및 2020년 7월 10일자로 출원된 미국 가특허 출원 제63/050,384호의 우선권의 이득을 주장한다.
사이클린-의존성 키나제 (CDK)는 세포 사이클 진행 및 전사 제어를 조절하는데 중요한 역할을 하는 프롤린-지시된 세린/트레오닌 키나제 계열에 속한다. 프롤린-지시된 세린/트레오닌 키나제인 사이클린-의존성 키나제 5 (CDK5)는 뉴런 발달 및 기능에서 필수 역할로 인해 독특하다. CDK5는 이것이 전형적으로 사이클린과 결합시 활성화되지 않고, 심지어 이것이 다른 CDK와 높은 아미노산 서열 상동성을 갖지만 활성화를 위해 T-루프 인산화를 요구하지 않기 때문에 특이하다. CDK5는 이전에 이것이 단지 p35 또는 p39 및 이들의 절단된 대응물과 상호작용할 것으로 사료되었다. 최근 증거는 CDK5가 CDK5 활성 수준을 조절하는 다른 단백질 중에서도 특정 사이클린과 상호작용할 수 있음을 시사한다. 최근 발견은 다양한 질환에 연루된 CDK5 활성 및 CDK5 연관된 경로를 조절하는 분자 상호작용을 보고한다. 또한 본원에서는 CDK5가 종양형성의 개시 및 진행에 기여한다는 증거의 증가하는 실체가 포함된다.
CDK5는 시냅스 형성 및 시냅스 가소성 뿐만 아니라 조기 신경 발달 동안에 뉴런 이동 (Xie 등, 2003) 및 축삭 인도 (Connell-Crowley 등, 2000)를 포함하는, 신경 세포에서 다양한 생리학적 역할을 수행한다 (Cheung 등, 2006; Lai 및 Ip, 2009). 그러나, 보다 최근에, CDK5는 또한 감각 경로를 포함하는 통증 신호전달 (Pareek 등, 2006)과 같이 중추 신경계 외부에서 및 췌장 베타 세포에서 글루코스 자극된 인슐린 수준을 조절하는데 중요한 역할을 수행하는 것으로 밝혀졌다 (Wei 등, 2005). 이의 주요 생리학적 역할로 인해, CDK5의 제어되지 않는 활성은 다양한 질환/장애와 연관되어 있어 CDK5가 치료학적 약물을 위한 잠재적 분자 표적으로서 부상하였다. 뉴런에서, CDK5 탈조절은 뉴런 아폽토시스를 촉발하고 (Cheung and Ip, 2004), 이는 CDK5 활성의 비정상적인 조절이 신경변성 질환, 예를 들어, 알츠하이머 질환 (AD) 및 파킨슨 질환 (PD)의 진행에 관여함을 시사한다. 비정상적인 CDK5 활성은 예를 들어, 전립선 및 갑상선 암종과 같은 암 발달, 진행 및 전이와 연관이 있다 (Strock 등, 2006; Lin 등, 2007).
AD의 2개의 주요 병리학적 특징은 환부 뇌에서 노인성 플라크 및 신경섬유 덩어리의 축적이다. CDK5의 탈조절은 병리학적 병태하에 생성된 p35의 절단 생성물인 p25의 존재에 의해 유발된다 (Patrick 등, 1999). p25 단백질의 축적은 AD 환자의 뇌에서 발견된다 (Patrick 등, 1999). 최근 발견은 CDK5가 노인성 플라크 (Monaco, 2004) 및 신경섬유 덩어리 (Cruz 등, 2003)의 형성을 조절하는 주요 키나제 중 하나임을 지적한다.
CDK5와 연관된 또 다른 주요 신경변성 질환은 파킨슨 질환 (PD)이다. 병리학적으로 PD는 선택된 뉴런 집단, 특히 흑색질 (substantia nigra pars compacta)의 도파민성 뉴런의 점진적인 사멸로 인한 운동 장애를 특징으로 한다 (Muntane 등, 2008). 1-메틸-4-페닐-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘 (MPTP)에 의해 유도된 PD 마우스 모델에서, CDK5의 상승된 발현 및 활성은 도파민성 뉴런 세포사와 상호관련이 있는 것으로 보고되었다 (Smith 등, 2003; Qu 등, 2007). 더욱이, 관심 대상은 CDK5의 억제가 도파민 방출을 증가시켜 PD 진행 완화를 도와줄수 있음을 주지하는 것이다 (Chergui 등, 2004). CDK5는 또한 다수의 다른 신경변성 질환 및 신경학적 장애, 예를 들어, 헌팅톤 질환 (Anne 등, 2007), 근위축성 측색 경화증 (ALS; Bajaj 등, 1998) 및 허혈 손상 (Wang 등, 2003)과 관련이 있다.
비정상적 CDK5 활성은 또한 진성 당뇨병 (2형 당뇨병)의 병리와 연관이 있다. CDK5의 활성화인자인 p35는 췌장 베타 세포에 존재하고 이의 활성은 글루코스에 반응하는 인슐린 방출을 음성적으로 조절한다 (Wei 및 Tomizawa, 2007). p35 단백질 및 CDK5 활성에서 지속적 증가는 높은 글루코스 노출시 뮤린 (murine) 베타 세포에서 보고된다 (Ubeda 등, 2006). 더욱이, 화학적 억제제에 의한 CDK5 활성의 억제는 배양된 베타 세포에서 및 글루코스 의존성 방식의 당뇨병의 마우스 모델에서 인슐린 분비를 증가시킨다 (Ubeda 등, 2006). p35-/- 마우스가 글루코스 투여 시 증진된 인슐린 분비를 나타낸다는 관찰과 일치한다 (Wei 등, 2005). CDK5는 당독성 (glucotoxicity) 동안에 Ca2+　채널 활성의 조절 또는 인슐린 유전자 발현의 조절을 통해 작용하는 것으로 사료된다 (Wei 등, 2005; Ubeda 등, 2006). 따라서, CDK5 억제제는 2형 당뇨병의 치료를 위해 잠재적인 치료제일 수 있다 (Kitani 등, 2007).
CDK5는 또한 진통제 약물에 대한 주요 잠재적인 표적으로 부상하고 있다. CDK5/p35는 통각수용 경로와 간접적으로 연계되어 있다. 예를 들어, CDK5는 증가된 MAPK 활성을 유도하는 통각과민증을 잠재적으로 변형시키는 통각수용 뉴런에서 미토겐 활성화된 단백질 키나제 (MAPK)의 활성화를 조절한다. CDK5는 또한 칼슘 칼모듈린 키나제 II, 델타 FosB, NMDA 수용체 및 P/Q 유형 전압-의존성 칼슘 채널과 같은 다른 통증 경로에 연루되어 있다. 추가로, 연구는 CDK5 억제제가 급성 통증의 관리에 이득이 될 수 있음을 시사한다. CDK5/p35는 통증의 프로세싱에 관여하고 이의 억제가 정상 통증 경로의 반응성을 감소시키는 것으로 나타났다 (Pareek 등, 2006; Pareek and Kulkarni, 2006). CDK5는 또한 말초 염증 반응 동안 음성 피드백 루프를 통해 미토겐 활성화된 단백질 키나제1/2(MEK1/2)/1M 활성을 조절한다 (Pareek and Kulkarni, 2006). 또한 열, 양성자 및 캡사이신에 의해 활성화되는 리간드 개폐 양이온 채널인 일과성 수용체 전위 바닐로이드 1(TRPV1)은 최근에 CDK5의 기질로서 동정되었다 (Pareek 등, 2007). CDK5에 의한 TRPV1의 인산화는 통증 신호전달 동안 TRPV1의 기능을 조절하기 때문에, CDK5는 진통제 약물을 개발하기 위한 새로운 분자 표적으로 작용할 수 있는 것으로 사료된다.
보다 최근에, CDK5는 섬모 길이 및 관형 상피 분화를 제어하는데 중요한 역할을 하는 것으로서 동정되었다. CDK5의 약리학적 또는 유전학적 감소는 PKD의 효과적이고 지속적인 중단을 유도한다. 　CDK5는 적어도 부분적으로 미세소관 동력학을 조절함에 의해 1차 섬모에 작용할 수 있다. 세포 분화의 회복을 목표로 하는 새로운 치료 접근법이 낭포성 콩팥 질환에 대한 효과적인 치료법을 산출할 가능성이 있다고 시사되었다 (Husson 등 2016). 또한, CDK5는 유해한 것으로 나타났고 DN에서 세포외 신호 조절 키나제 1/2(ERK1/2)/퍼옥시좀 증식자 활성화 수용체 감마(PPRAγ) 경로를 통해 세뇨관간질 섬유증(TIF)을 촉진한다.　이들 발견은 CDK5가 DN에서 ERK1/2/PPARγ 경로와 EMT를 활성화함으로써 세뇨관간질 섬유증을 증가시키는 새로운 기전을 입증한다. 따라서, CDK5는 당뇨병성 신증에서 치료학적 잠재력을 가질 수 있다 (Bai 등 2016).
따라서, CDK5의 추가의 억제제가 필요하다.
발명의 개요
하나의 양상에서, 본 발명은 CDK5의 억제제인 화합물을 특징으로 한다. 일부 구현예에서, 본 발명의 화합물은 화학식 I을 갖는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다:
[화학식 I]
Figure pct00001
상기 식에서,
환 A는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 사이클로알킬 또는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 포화된 헤테로사이클릴이고;
환 B는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 아릴, 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 헤테로아릴 또는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 헤테로사이클릴이고;
R1은 -N(R5)-, -C(O)-, -S-, -S(O)-, -S(O)2-, -[C(R4)2]1-2-, -[C(R4)2]0-1-CH=,
-N(R5)-S(O)2-, -S(O)2-N(R5), -C(R4)2-N(R5)-, -N(R5)-C(R4)2-, -C(R4)2-S(O)2-, -C(=N-OH)-, -C(=N-O-C1-C4 알킬)-, 또는 -S(O)2-C(R4)2-이고;
각각의 R2는 독립적으로 할로, -OH, -C1-C6 알킬, -C1-C6 할로알킬, -C1-C6 하이드록시알킬, -(C0-C4 알킬렌)-C(O)-OH, -(C0-C4 알킬렌)-C(O)-O-C1-C4 알킬, -(C0-C4 알킬렌)-O-C1-C4 알킬, -(C0-C4 알킬렌)-O-C1-C4 하이드록시알킬, -(C0-C4 알킬렌)-C(O)-N(R6)2, -(C0-C4 알킬렌)-N(R6)2, 또는 -(C0-C4 알킬렌)-포화된 헤테로사이클릴이고, 여기서, 상기 포화된 헤테로사이클릴은 임의로 할로, -OH, 또는 -CH3으로 치환되고;
각각의 R3은 독립적으로 할로; -CN; -OH; -N(R6)2; -C1-C4 알킬; -O-C1-C4 알킬; -O-C1-C4 알킬렌-C(O)-N(R6)2; -C(O)-O-C1-C4 알킬; -C(O)-N(R6)2; -S(O)2-N(R6)2; -S(O)2-C1-C4 알킬; 하나 이상의 -OH로 임의로 치환된 C2-C4 알키닐; 1,2,4-트리아졸-1-일메틸; 모르폴리닐메틸; 사이클로프로필; =O; -CH2CH2-C(O)-O-CH3; -N(R6)-S(O)2-CH3; 임의로 치환된 아릴; 임의로 치환된 헤테로아릴; 또는 임의로 치환된 헤테로사이클릴이고, 여기서, R3의 임의의 알킬 부분은 할로, -CN, 또는 -N(R6)2, 또는 -OH 중 하나 이상으로 임의로 치환되고;
각각의 R4는 독립적으로 수소, 할로, -OH, -CN, -N(R6)2, -OH, 할로, -CN, 또는 -N(R6)2중 하나 이상으로 임의로 치환된 -C1-C4 알킬; 또는 -OH, 할로, -CN, 또는 -N(R6)2 중 하나 이상으로 임의로 치환된 O-C1-C4 알킬이거나;
하나의 R4는 환 A 중 환 탄소원자와 함께 환 A에 스피로융합되거나, 융합되거나 브릿지된 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릴 환을 형성하거나;
동일한 탄소 원자에 결합된 2개의 R4는 함께 =CH2-(C0-C3 알킬), C3-C6 사이클로알킬, 또는 C4-C7 헤테로사이클릴을 형성하고;
R5는 수소; -CN, -OH, -COOH, C(O)-O-C1-C4 알킬, 또는 피라졸릴 중 하나 이상으로 임의로 치환된 C1-C4 알킬; -S(O)2-C1-C4 알킬; -C(O)C(O)OH; -COOH; 또는 -C(O)-O-C1-C4 알킬이거나;
R5는 환 A 중 환 탄소원자와 함께 환 A에 스피로융합되거나, 융합되거나 브릿지된 헤테로사이클릴 환을 형성하고;
각각의 R6은 독립적으로 수소 또는 -C1-C4 알킬이고;
m은 0,1, 2, 3, 4, 5, 또는 6이고;
n은 0, 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6이고;
"----"는 단일 결합 또는 이중 결합을 나타낸다.
하나의 양상에서, 본 발명은 본원에 기재된 화합물 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.
하나의 양상에서, 본 발명은 본원에 기재된 치료학적 유효량의 화합물 또는 조성물을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 비정상적 CDK5 과활성을 특징으로 하는 질환 또는 병태를 치료하는 방법에 관한 것이다. 일부 구현예에서, 상기 질환 또는 병태는 콩팥의 질환 또는 병태이다. 일부 구현예에서, 상기 질환은 다낭성 콩팥 질환이다. 일부 구현예에서, 상기 질환 또는 병태는 섬모병증이다. 방법은 포유류, 예를 들어, 사람 및 연구 동물, 예를 들어, 마우스, 래트, 토끼 또는 원숭이, 또는 가축 및 농장 동물, 예를 들어, 고양이, 개, 염소, 양, 돼지, 소 또는 말과 같은 기타 동물을 포함하는 다양한 대상체에 대해 효과적이다. 일부 구현예에서, 대상체는 사람이다.
본 발명은 여러 이점을 제공한다. 본원에 기재된 예방학적 및 치료학적 방법은 콩팥 질환 및 섬모병증을 치료하는데 효과적이고, 경우에 따라 최소의 부작용을 갖는다. 추가로, 본원에 기재된 방법은 콩팥 질환, 예를 들어, 다낭성 콩팥 질환 또는 섬모병증을 치료하거나 이의 위험을 감소시키는 화합물을 동정하기 위해 효과적이다.
달리 정의되지 않는 한, 본원에서 사용된 모든 기술 용어 및 과학 용어들은 본 발명이 속하는 기술분야의 통상적인 숙련가에 의해 통상적으로 이해되는 바와 동일한 의미를 갖는다. 본원에 기재된 것들과 유사하거나 등가인 방법 및 재료가 본 발명의 실시 또는 시험에 사용될 수 있지만, 적합한 방법 및 재료가 하기에 기재되어 있다. 본원에서 언급된 모든 간행물, 특허 출원, 특허 및 기타 참조 문헌은 그 내용 전체가 참조로 인용된다. 상기 문헌들과 내용상 상충하는 경우가 발생하는 경우에는, 정의를 포함하는 본 명세서가 우선할 것이다. 추가로, 상기 재료, 방법 및 예는 단지 예시적인 것이고 제한하는 것으로 의도되지 않는다.
본 발명의 다른 특성, 목적 및 이점은 발명의 상세한 설명으로부터 및 청구범위로부터 명확해질 것이다.
도 1은 본 발명의 예시적인 화합물에 대한 NMR 및 MS 데이터를 보여준다.
정의
용어 "아실"은 당업계에 인지되고 화학식 히드로카르빌C(O)-, 바람직하게는 알킬C(O)-로 표시되는 그룹을 지칭한다.
용어 "아실아미노"는 당업계에 인지되고, 아실 그룹으로 치환된 아미노 그룹을 지칭하고, 예를 들어, 화학식 하이드로카빌C(O)NH-로 나타낼 수 있다.
용어 "아실옥시"는 당업계에 인지되고 화학식 히드로카르빌C(O)O-, 바람직하게는 알킬C(O)O-로 나타낸 그룹을 지칭한다.
용어 "알콕시"는 여기에 산소가 부착된, 알킬 그룹, 바람직하게, 저급 알킬 그룹을 지칭한다. 대표적인 알콕시 그룹은 메톡시, 트리플루오로메톡시, 에톡시, 프로폭시, 3급-부톡시 등을 포함한다.
용어 "알콕시알킬"은 알콕시 그룹으로 치환된 알킬 그룹을 지칭하고, 화학식 알킬-O-알킬로 나타낼 수 있다.
본원에 사용된 용어 "알케닐"은 적어도 하나의 이중 결합을 함유하는 지방족 그룹을 지칭하고 "비치환된 알케닐" 및 "치환된 알케닐" 둘다를 포함하는 것으로 의도되며, 이의 후자는 알케닐 그룹의 하나 이상의 탄소 상에 수소를 대체하는 치환체를 갖는 알케닐 모이어티를 지칭한다. 이러한 치환체는 하나 이상의 이중 결합에 포함되거나 포함되지 않은 하나 이상의 탄소 상에 존재할 수 있다. 더욱이, 이러한 치환체는 안정성이 금지되는 경우를 제외하고, 하기에 논의되는 바와 같이 알킬 그룹에 대해 고려되는 모든 것을 포함한다. 예를 들어, 하나 이상의 알킬, 카보사이클릴, 아릴, 헤테로사이클릴, 또는 헤테로아릴 그룹에 의한 알케닐 그룹의 치환이 고려된다.
"알킬" 그룹 또는 "알칸"은 완전히 포화된 직쇄 또는 측쇄 비-방향족 탄화수소이다. 전형적으로, 직쇄 또는 측쇄 알킬 그룹은 달리 정의되지 않는 경우 1 내지 약 20개 탄소원자, 바람직하게 1 내지 10개를 갖는다. 직쇄 및 분지쇄 알킬 그룹의 예는 메틸, 에틸, n-프로필, 이소-프로필, n-부틸, 2급-부틸, 3급-부틸, 펜틸, 헥실, 펜틸 및 옥틸을 포함한다. C1-C6 직쇄 또는 측쇄 알킬 그룹은 또한 "저급 알킬" 그룹을 지칭한다.
더욱이, 명세서, 실시예 및 청구범위 전반에 걸쳐 사용된 용어 "알킬"(또는 "저급 알킬")은 "비치환된 알킬" 및 "치환된 알킬" 둘다를 포함하도록 의도되며, 이의 후자는 탄화수소 골격의 하나 이상의 탄소상에 수소를 대체하는 치환체를 갖는 알킬 모이어티를 지칭한다. 달리 명시되지 않는 경우, 이러한 치환체는 예를 들어, 할로겐(예를 들어, 플루오로), 하이드록실, 카보닐(예를 들어, 카복실, 알콕시카보닐, 포르밀 또는 아실), 티오카보닐(예를 들어, 티오에스테르, 티오아세테이트 또는 티오포르메이트), 알콕시, 포스포릴, 포스페이트, 포스포네이트, 포스피네이트, 아미노, 아미도, 아미딘, 이민, 시아노, 니트로, 아지도, 설프하이드릴, 알킬티오, 설페이트, 설포네이트, 설파모일, 설폰아미도, 설포닐, 헤테로사이클릴, 아르알킬, 또는 방향족 또는 헤테로방향족 모이어티를 포함할 수 있다. 바람직한 구현예에서, 치환된 알킬 상의 치환체는 C1-6 알킬, C3-6 사이클로알킬, 할로겐, 카보닐, 시아노, 또는 하이드록실로부터 선택된다. 보다 바람직한 구현예에서, 치환된 알킬 상의 치환체는 플루오로, 카보닐, 시아노 또는 하이드록실로부터 선택된다. 탄화수소 쇄 상에서 치환된 모이어티는 적절한 경우 그 자체로 치환될 수 있다는 것이 당업자에 의해 이해될 것이다. 예를 들어, 치환된 알킬의 치환체는 아미노, 아지도, 이미노, 아미도, 포스포릴(포스포네이트 및 포스피네이트 포함), 설포닐(설페이트, 설폰아미도, 설파모일 및 설포네이트 포함), 및 실릴 그룹의 치환 및 비치환된 형태 및 에테르, 알킬티오, 카보닐(케톤, 알데하이드, 카복실레이트 및 에스테르 포함), -CF3, -CN 등을 포함할 수 있다. 예시적인 치환된 알킬은 하기되어 있다. 사이클로알킬은 알킬, 알케닐, 알콕시, 알킬티오, 아미노알킬, 카보닐-치환된 알킬, -CF3, -CN 등으로 추가로 치환될 수 있다.
달리 명시되지 않는 경우, 그 자체로 또는 다른 치환체의 일부로서 "알킬렌"은 명시된 수의 탄소 원자를 갖고 상응하는 알칸으로부터 2개의 수소 원자를 제거하여 유래된 포화 직쇄 또는 측쇄 2가 그룹을 지칭한다. 직쇄 및 측쇄 알킬렌 그룹의 예는 -CH2- (메틸렌), -CH2-CH2- (에틸렌), -CH2-CH2-CH2- (프로필렌), -C(CH3)2-, -CH2-CH (CH3)-, -CH2-CH2-CH2-CH2-, -CH2-CH2-CH2-CH2-CH2- (펜틸렌), -CH2-CH(CH3)-CH2-, 및 -CH2-C(CH3)2-CH2-를 포함한다.
아실, 아실옥시, 알킬, 알케닐, 알키닐 또는 알콕시와 같은 화학적 모이어티와 함께 사용될 때 용어 "Cx-y"는 쇄에 x 내지 y개의 탄소를 함유하는 그룹를 포함하는 것을 의미한다. 예를 들어, 용어 "Cx-y 알킬"은 할로알킬 그룹을 포함하는, 쇄에서 x 내지 y개의 탄소를 함유하는 직쇄 알킬 및 측쇄 알킬 그룹을 포함하는 치환 또는 비치환된 포화 탄화수소 그룹을 지칭한다. 바람직한 할로알킬 그룹은 트리플루오로메틸, 디플루오로메틸, 2,2,2-트리플루오로에틸 및 펜타플루오로에틸을 포함한다. C0 알킬은 그룹이 말단 위치에 있는 수소를 나타내며 내부의 경우 결합을 지적한다. 용어 "C2-y 알케닐" 및 "C2-y 알키닐"은 길이가 유사하고 상기된 알킬과 가능한 치환이 유사하지만 각각 적어도 하나의 이중 또는 삼중 결합을 함유하는 치환 또는 비치환된 불포화 지방족 그룹을 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "알킬아미노"는 적어도 하나의 알킬 그룹으로 치환된 아미노 그룹을 지칭한다.
용어 "알킬티오"는 알킬 그룹으로 치환된 티올 그룹을 지칭하고, 화학식 알킬S-로 나타낼 수 있다.
본원에 사용된 용어 "알키닐"은 적어도 하나의 삼중 결합을 함유하는 지방족 그룹을 지칭하고 "비치환된 알키닐" 및 "치환된 알키닐" 둘다를 포함하는 것으로 의도되며, 이의 후자는 알키닐 그룹의 하나 이상의 탄소 상에 수소를 대체하는 치환체를 갖는 알키닐 모이어티를 지칭한다. 상기 치환체는 하나 이상의 삼중 결합에 포함되거나 포함되지 않은 하나 이상의 탄소 상에 존재할 수 있다. 더욱이, 이러한 치환체는 안정성이 금지되는 경우를 제외하고, 하기에 논의되는 바와 같이 알킬 그룹에 대해 고려되는 모든 것을 포함한다. 예를 들어, 하나 이상의 알킬, 카보사이클릴, 아릴, 헤테로사이클릴, 또는 헤테로아릴 그룹에 의한 알키닐 그룹의 치환이 고려된다.
본원에 사용된 용어 "아미드"는 그룹
Figure pct00002
을 지칭하고,
여기서, 각각의 RA는 독립적으로 수소 또는 하이드로카르빌 그룹을 나타내거나 2개의 RA는 이들이 부착된 N 원자와 함께 환 구조 내 4 내지 8개 원자를 갖는 헤테로사이클을 형성한다.
용어 "아민" 및 "아미노"는 당업계 인지되고 비치환되고 치환된 아민 및 이의 염 둘다를 지칭하고, 예를 들어,
Figure pct00003
또는
Figure pct00004
에 의해 나타낼 수 있는 모이어티를 지칭하고,
여기서, 각각의 RA는 독립적으로 수소 또는 하이드로카르빌 그룹을 나타내거나 2개의 RA가 이들이 부착된 N 원자와 함께 환 구조 내 4 내지 8개 원자를 갖는 헤테로사이클을 형성한다.
본원에 사용된 용어 "아미노알킬"은 아미노 그룹으로 치환된 알킬 그룹을 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "아르알킬"은 아릴 그룹으로 치환된 알킬 그룹을 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "아릴"은 치환되거나 비치환된 단일-환 방향족 그룹을 포함하고, 상기 환의 각각의 원자는 탄소이다. 바람직하게, 상기 환은 6- 또는 10원 환, 보다 바람직하게 6원 환이다. 용어 "아릴"은 또한 2개 이상의 탄소가 2개의 인접한 환에 공통된 2개 이상의 사이클릭 환을 갖는 폴리사이클릭 환 시스템을 포함하고, 여기서 상기 환 중 적어도 하나는 방향족이고, 예를 들어 다른 사이클릭 환은 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 아릴, 헤테로아릴 및/또는 헤테로사이클릴일 수 있다. 아릴 그룹은 벤젠, 나프탈렌, 페난트렌, 페놀, 아닐린 등을 포함한다.
용어 "카바메이트"는 당업계 인지되고
Figure pct00005
또는
Figure pct00006
그룹을 지칭하고
여기서, 각각 RA는 독립적으로 수소 또는 하이드로카빌 그룹, 예를 들어, 알킬 그룹을 나타내거나, RA 둘다는 개입 원자(들)과 함께 환 구조에서 4 내지 8개 원자를 갖는 헤테로사이클을 형성한다.
본원에 사용된 용어 "카보사이클" 및 "카보사이클릭"은 환의 각각의 원자가 탄소인 포화 또는 불포화 환을 지칭한다. 용어 카보사이클은 방향족 카보사이클 및 비-방향족 카보사이클 둘다를 포함한다. 비-방향족 카보사이클은 모든 탄소 원자가 포화된 사이클로알칸 환 및 적어도 하나의 이중 결합을 함유하는 사이클로알켄 환 둘다를 포함한다. "카보사이클"은 5-7원 모노사이클릭 및 8-12원 바이사이클릭 환을 포함한다. 바이사이클릭 카보사이클의 각각의 환은 포화된, 불포화된 및 방향족 환으로부터 선택될 수 있다. 카보사이클은 1개, 2개 또는 3개 이상의 원자가 2개의 환간에 공유된 바이사이클릭 분자를 포함한다. 용어 "융합된 카보사이클"은 상기 환 각각이 다른 환과 2개의 인접한 원자를 공유하는 바이사이클릭 카보사이클을 지칭한다. 융합된 카보사이클의 각각의 환은 포화된, 불포화된 및 방향족 환으로부터 선택될 수 있다. 예시적인 구현예에서, 방향족 환, 예를 들어 페닐은 포화 또는 불포화 환, 예를 들어 사이클로헥산, 사이클로펜탄 또는 사이클로헥센에 융합될 수 있다. 원자가가 허용하는 한 포화, 불포화 및 방향족 바이사이클릭 환의 임의의 조합은 카보사이클릭 정의에 포함된다. 예시적인 "카보사이클"은 사이클로펜탄, 사이클로헥산, 바이사이클로[2.2.1]헵탄, 1,5-사이클로옥타디엔, 1,2,3,4-테트라히드로나프탈렌, 바이사이클로[4.2.0]옥트-3-엔, 나프탈렌 및 아다만탄을 포함한다. 예시적인 융합된 카보사이클은 데칼린, 나프탈렌, 1,2,3,4-테트라히드로나프탈렌, 바이사이클로[4.2.0]옥탄, 4,5,6,7-테트라히드로-1H-인덴 및 바이사이클로[4.1.0]헵트-3-엔을 포함한다. "카보사이클"은 수소 원자를 보유할 수 있는 임의의 하나 이상의 위치에서 치환될 수 있다.
"사이클로알킬" 그룹은 완전히 포화된 사이클릭 탄화수소이다. "사이클로알킬"은 모노사이클릭 및 바이사이클릭 환을 포함한다. 전형적으로, 모노사이클릭 사이클로알킬 그룹은 달리 정의되지 않는다면 3 내지 약 10개 탄소 원자, 보다 전형적으로 3 내지 8개 탄소원자를 갖는다. 바이사이클릭 사이클로알킬의 제2 환은 포화된, 불포화된 및 방향족 환으로부터 선택될 수 있다. 사이클로알킬은 1개, 2개 또는 3개 이상의 원자가 2개의 환간에 공유된 바이사이클릭 분자를 포함한다. 용어 "융합된 사이클로알킬"은 상기 환 각각이 다른 환과 2개의 인접한 원자를 공유하는 바이사이클릭 사이클로알킬을 지칭한다. 융합된 바이사이클릭 사이클로알킬의 제2 환은 포화된, 불포화된 및 방향족 환으로부터 선택될 수 있다. "사이클로알케닐" 그룹은 하나 이상의 이중 결합을 함유하는 사이클릭 탄화수소이다.
본원에 사용된 용어 "카보사이클릴알킬"은 카보사이클 그룹으로 치환된 알킬 그룹을 지칭한다.
용어 "카보네이트"는 당업계 인지되고 그룹 -OCO2-RA를 지칭하고, 여기서, RA는 하이드로카빌 그룹을 나타낸다.
본원에 사용된 용어 "카복시"는 화학식 -CO2H에 의해 나타낸 그룹을 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "에스테르"는 그룹 -C(O)ORA를 지칭하고, 여기서, RA는 하이드로카빌 그룹을 나타낸다.
본원에 사용된 용어 "에테르"는 산소를 통해 또 다른 하이드로카빌 그룹에 연결된 하이드로카빌 그룹을 지칭한다. 따라서, 하이드로카빌 그룹의 에테르 치환체는 하이드로카빌-O-일 수 있다. 에테르는 대칭 또는 비대칭일 수 있다. 에테르의 예는 헤테로사이클-O-헤테로사이클 및 아릴-O-헤테로사이클을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 에테르는 화학식 알킬-O-알킬에 의해 나타낼 수 있는 "알콕시알킬" 그룹을 포함한다.
본원에 사용된 용어 "할로" 및 "할로겐"은 할로겐을 의미하고 클로로, 플루오로, 브로모 및 요오도를 포함한다.
본원에 사용된 용어 "헤트아르알킬" 및 "헤테로아르알킬"은 헤트아릴 그룹으로 치환된 알킬 그룹을 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "헤테로알킬"은 탄소 원자 및 적어도 하나의 헤테로원자의 포화된 또는 불포화된 쇄를 지칭하고, 여기서, 2개의 헤테로원자는 인접해 있지 않다.
용어 "헤테로아릴" 및 "헤트아릴"은 치환 또는 비치환된 방향족 단일 환 구조, 바람직하게는 5 내지 7원 환, 보다 바람직하게는 5 내지 6원 환을 포함하고, 이의 환 구조는 적어도 하나의 헤테로원자, 바람직하게는 1 내지 4개의 헤테로원자, 보다 바람직하게는 1개 또는 2개의 헤테로원자를 포함한다. 용어 "헤테로아릴" 및 "헤트아릴"은 또한 2개 이상의 탄소가 2개의 인접한 환에 공통된 2개 이상의 사이클릭 환을 갖는 폴리사이클릭 환 시스템을 포함하고, 여기서 상기 환 중 적어도 하나는 헤테로방향족이고, 예를 들어 다른 사이클릭 환은 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 아릴, 헤테로아릴 및/또는 헤테로사이클릴일 수 있다. 헤테로아릴 그룹은 예를 들어 피롤, 푸란, 티오펜, 이미다졸, 옥사졸, 티아졸, 피라졸, 피리딘, 피라진, 피리다진 및 피리미딘 등을 포함한다.
본원에 사용된 용어 "헤테로원자"는 탄소 또는 수소 이외의 다른 임의의 요소의 원자를 의미한다. 바람직한 헤테로원자는 질소, 산소 및 황이다.
용어 "헤테로사이클릴", "헤테로사이클" 및 "헤테로사이클릭"은 치환 또는 비치환된 비-방향족 단일 환 구조, 바람직하게는 3 내지 10원 환, 보다 바람직하게는 3 내지 7원 환을 포함하고, 이의 환 구조는 적어도 하나의 헤테로원자, 바람직하게는 1 내지 4개의 헤테로원자, 보다 바람직하게는 1개 또는 2개의 헤테로원자를 포함한다. 용어 "헤테로사이클릴" 및 "헤테로사이클릭"은 또한 2개 이상의 탄소가 2개의 인접한 환에 공통된 2개 이상의 사이클릭 환을 갖는 폴리사이클릭 환 시스템을 포함하고, 여기서 상기 환 중 적어도 하나는 헤테로사이클릭이고, 예를 들어, 다른 사이클릭 환은 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 아릴, 헤테로아릴 및/또는 헤테로사이클릴일 수 있다. 헤테로사이클릴 그룹은 예를 들어, 피페리딘, 피페라진, 피롤리딘, 테트라히드로피란, 테트라히드로푸란, 모르폴린, 락톤, 락탐 등을 포함한다.
본원에 사용된 용어 "헤테로사이클릴알킬" 또는 "헤테로사이클로알킬"은 헤테로사이클 그룹으로 치환된 알킬 그룹을 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "하이드로카빌"은 =O 또는 =S 치환체를 갖지 않는 탄소 원자를 통해 결합된 그룹을 지칭하고, 전형적으로 적어도 하나의 탄소-수소 결합 및 주로 탄소 골격을 갖지만, 임의로 헤테로원자를 포함할 수 있다. 따라서, 메틸, 에톡시에틸, 2-피리딜 및 트리플루오로메틸과 같은 그룹은 본 출원의 목적을 위해 히드로카빌인 것으로 간주되지만, 아세틸 (연결 탄소 상에 =O 치환체를 가짐) 및 에톡시 (이는 탄소가 아닌 산소를 통해 연결된)가 아니다. 하이드로카빌 그룹은 아릴, 헤테로아릴, 카보사이클, 헤테로사이클릴, 알킬, 알케닐, 알키닐, 및 이들의 조합을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.
본원에 사용된 용어 "하이드록시알킬"은 하이드록시 그룹으로 치환된 알킬 그룹을 지칭한다.
아실, 아실옥시, 알킬, 알케닐, 알키닐, 또는 알콕시와 같은 화학적 모이어티와 함께 사용되는 경우 용어 "저급"은 치환체에 10개 이하, 바람직하게는 6개 이하의 비-수소 원자가 있는 기를 포함하는 것을 의미한다. 예를 들어, "저급 알킬"은 10개 이하, 바람직하게는 6개 이하의 탄소 원자를 함유하는 알킬 그룹을 지칭한다. 특정 구현예에서, 본원에 정의된 아실, 아실옥시, 알킬, 알케닐, 알키닐, 또는 알콕시 치환체는 단독으로 나타나든 다른 치환기와 조합되어 나타나든, 예를 들어 하이드록시알킬 및 아르알킬에서와 같이 (이 경우에, 예를 들어, 아릴 그룹 내 원자는 알킬 치환체에서 탄소 원자를 계수하는 경우 계수되지 않는다) 각각 저급 아실, 저급 아실옥시, 저급 알킬, 저급 알케닐, 저급 알키닐 또는 저급 알콕시이다.
용어 "폴리사이클릴", "폴리사이클", 및 "폴리사이클릭"은 2개 이상의 원자가 2개의 인접한 환에 공통된, 예를 들어 환이 "융합된 환"인 2개 이상의 환 (예를 들어, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 아릴, 헤테로아릴 및/또는 헤테로사이클릴)을 지칭한다. 폴리사이클의 환 각각은 치환되거나 비치환될 수 있다. 특정 구현예에서, 폴리사이클의 각각의 환은 환 내 3 내지 10개의 원자, 바람직하게는 5 내지 7개의 원자를 함유한다.
용어 "실릴"은 3개의 하이드로카빌 모이어티가 부착된 규소 모이어티를 지칭한다.
용어 "치환된"은 골격의 하나 이상의 탄소 상에 수소를 대체하는 치환체를 갖는 모이어티를 언급한다. "치환" 또는 "로 치환된"은 이러한 치환이 치환된 원자 및 치환체의 허용된 원자가에 따르고, 치환이 예를 들어 재배열, 폐환, 제거 등에 의해서와 같이 자발적으로 변형되지 않는 안정한 화합물을 생성한다는 암시적 단서를 포함하는 것으로 이해될 것이다. 본원에 사용된 용어 "치환된"은 유기 화합물의 모든 허용 가능한 치환체를 포함하는 것으로 고려된다. 광범위한 양상에서, 허용되는 치환체는 유기 화합물의 비사이클릭 (acyclic) 사이클릭, 측쇄 및 비측쇄, 카보사이클릭 및 헤테로사이클릭, 방향족 및 비-방향족 치환체를 포함한다. 허용되는 치환체는 적절한 유기 화합물에 대해 하나 이상이고 동일하거나 상이할 수 있다. 본 발명의 목적을 위해, 질소와 같은 헤테로원자는 수소 치환체 및/또는 헤테로원자의 원자가를 충족시키는 본원에 기재된 유기 화합물의 임의의 허용 가능한 치환체를 가질 수 있다. 치환체는 본원에 기재된 임의의 치환체, 예를 들어, 할로겐, 하이드록실, 카보닐(예를 들어, 카복실, 알콕시카보닐, 포르밀 또는 아실), 티오카보닐(예를 들어, 티오에스테르, 티오아세테이트 또는 티오포르메이트), 알콕시, 포스포릴, 포스페이트, 포스포네이트, 포스피네이트, 아미노, 아미도, 아미딘, 이민, 시아노, 니트로, 아지도, 설프하이드릴, 알킬티오, 설페이트, 설포네이트, 설파모일, 설폰아미도, 설포닐, 헤테로사이클릴, 아르알킬, 또는 방향족 또는 헤테로방향족 모이어티를 포함할 수 있다. 바람직한 구현예에서, 치환된 알킬 상의 치환체는 C1-6 알킬, C3-6 사이클로알킬, 할로겐, 카보닐, 시아노, 또는 하이드록실로부터 선택된다. 보다 바람직한 구현예에서, 치환된 알킬 상의 치환체는 플루오로, 카보닐, 시아노 또는 하이드록실로부터 선택된다. 치환체는 적절한 경우 그 자체로 치환될 수 있다는 것이 당업자에 의해 이해될 것이다. 구체적으로 "비치환된"으로서 명시되지 않는 경우, 화학적 모이어티에 대한 언급은 치환된 변이체를 포함하는 것으로 이해된다. 예를 들어, "아릴" 그룹 또는 모이어티에 대한 언급은 암시적으로 치환된 및 비치환된 변이체 둘다를 포함한다.
용어 "설페이트"는 당업계 인지되고 그룹 -OSO3H, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 지칭한다.
"설폰아미드"라는 용어는 당업계 인지되고 화학식
Figure pct00007
또는
Figure pct00008
으로 나타낸 그룹을 언급하고
여기서, 각각의 RA는 독립적으로 수소 또는 하이드로카빌, 예를 들어, 알킬을 나타내거나, RA 둘다는 개입 원자(들)과 함께 환 구조에서 4 내지 8개 원자를 갖는 헤테로사이클을 형성한다.
용어 "설폭사이드"는 당업계 인지되고 그룹 -S(O)-RA를 지칭하고, 여기서, RA는 하이드로카빌 그룹을 나타낸다.
용어 "설포네이트"는 당업계 인지되고 그룹 SO3H, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 지칭한다.
용어 "설폰"은 당업계 인지되고 그룹 -S(O)2-RA를 지칭하고, 여기서, RA는 하이드로카빌 그룹을 나타낸다.
본원에 사용된 용어 "티오알킬"은 티올 그룹으로 치환된 알킬 그룹을 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "티오에스테르"는 그룹 -C(O)SRA 또는 -SC(O)RA를 지칭하고, 여기서, RA는 하이드로카빌을 나타낸다.
본원에 사용된 용어 "티오에테르"는 에테르와 동등하고, 여기서, 상기 산소는 황으로 대체된다.
용어 "우레아"는 당업계 인지되고 화학식
Figure pct00009
으로 나타낼 수 있고
여기서, 각각의 RA는 독립적으로 수소 또는 하이드로카빌, 예를 들어, 알킬을 나타내거나, 임의의 위치의 RA는 또 다른 및 개입 원자(들)과 함께 환 구조에서 4 내지 8개 원자를 갖는 헤테로사이클을 형성한다.
"보호 그룹"은 분자 내의 반응성 작용 그룹에 부착될 때, 작용 그룹의 반응성을 차폐, 감소 또는 방지하는 원자 그룹을 지칭한다. 전형적으로, 보호 그룹은 합성 과정 동안에 목적하는 바와 같이 선택적으로 제거될 수 있다. 보호 그룹의 예는 문헌 (Greene 및 Wuts, Protective Groups in Organic Chemistry, 3rd Ed., 1999, John Wiley & Sons, NY and Harrison 등, Compendium of Synthetic Organic Methods, Vols. 1-8, 1971-1996, John Wiley & Sons, NY)에서 찾을 수 있다. 대표적인 질소 보호 그룹은 포밀, 아세틸, 트리플루오로아세틸, 벤질, 벤질옥시카보닐 ("CBZ"), 3급-부톡시카보닐 ("Boc"), 트리메틸실릴 ("TMS"), 2-트리메틸실릴-에탄설포닐 ("TES"), 트리틸 및 치환된 트리틸 그룹, 알릴옥시카보닐, 9-플루오레닐메틸옥시카보닐 ("FMOC"), 니트로-베라트릴옥시카보닐 ("NVOC") 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 대표적인 하이드록실 보호 그룹은 하이드록실 그룹이 아실화(에스테르화)되거나 알킬화된 것들, 예를 들어, 벤질 및 트리틸 에테르 및 알킬 에테르, 테트라히드로피라닐 에테르, 트리알킬실릴 에테르 (예를 들어, TMS 또는 TIPS 그룹), 글리콜 에테르, 예를 들어, 에틸렌 글리콜 및 프로필렌 글리콜 유도체 및 알릴 에테르를 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
본원에 사용된 바와 같이, 질환, 장애 또는 병태를 "예방하거나" "발병 위험을 감소시키는" 치료제는 통계적 샘플에서 치료 대상에서 질환, 장애 또는 병태의 발병을 감소시키거나, 미처리 대조군 샘플에 비해 장애 또는 병태의 하나 이상의 증상의 발병을 지연시키거나 중증도를 감소시키는 화합물을 지칭한다.
용어 "치료하는"은 예방학적 및/또는 치료학적 치료를 포함한다. 용어 "예방학적 또는 치료학적" 치료는 당업계 인지되고 숙주에게 하나 이상의 본원의 조성물의 투여를 포함한다. 원치 않는 병태 (예를 들어, 숙주 동물의 질환 또는 다른 원치않는 상태)의 임상적 증상 전에 투여되는 경우, 치료는 예방학적(즉, 이것은 원치않는 병태의 발병으로부터 숙주를 보호한다)이고, 반면, 원치않는 병태의 증상 후 투여되는 경우, 치료는 치료학적 (즉, 이것은 기존의 원치 않는 병태 또는 이의 부작용을 감소시키거나, 완화시키거나 안정화시키기 위해 의도된다)이다.
용어 "동시 투여" 및 "동시에 투여되는"이라는 문구는 이전에 투여된 치료 화합물이 체내에서 여전히 효과적인 동안 제2 화합물이 투여되도록 2개 이상의 상이한 치료학적 화합물의 임의의 형태의 투여를 지칭한다 (예를 들어, 2개의 화합물은 환자에서 동시에 효과적이고, 이는 두 화합물의 상승 효과를 포함할 수 있다). 예를 들어, 상이한 치료학적 화합물은 동시에 또는 순차적으로 동일한 제형 중에 또는 별도의 제형으로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상이한 치료학적 화합물은 서로에 대해 1시간, 12시간, 24시간, 36시간, 48시간, 72시간 또는 1주 이내에 투여될 수 있다. 따라서, 상기 치료를 받은 개체는 상이한 치료학적 화합물의 조합 효과가 이득이될 수 있다.
용어 "전구약물"은 생리학적 조건하에서 본 발명의 치료학적 활성제로 전환되는 화합물을 포괄하는 것으로 의도된다. 전구약물을 제조하기 위한 통상의 방법은 목적하는 분자가 되도록 생리학적 조건하에서 가수분해되는 하나 이상의 선택된 모이어티를 포함하는 것이다. 다른 구현예에서, 전구약물은 숙주 동물의 효소 활성에 의해 전환된다. 예를 들어, 에스테르 또는 카보네이트 (예를 들어, 알콜 또는 카복실산의 에스테르 또는 카보네이트)는 본 발명의 바람직한 전구약물이다. 특정 구현예에서, 상기 나타낸 제형 중에 본 발명의 화합물의 일부 또는 전부는 상응하는 적합한 전구약물으로 대체될 수 있고, 예를 들어, 여기서, 모계 화합물 내 하이드록실은 에스테르로서 제공되거나 모계 화합물에 존재하는 카보네이트 또는 카복실산은 에스테르로서 제공된다.
본원에 사용된 바와 같은 "소분자"는 분자량이 약 3,000 돌턴 미만인 작은 유기 또는무기 분자를 지칭한다. 일반적으로, 본 발명에 유용한 소분자는 3,000 돌턴(Da) 미만의 분자량을 갖는다. 소분자는 예를 들어, 적어도 약 100 Da 내지 약 3,000 Da (예를 들어, 약 100 내지 약 3,000 Da, 약 100 내지 약 2500 Da, 약 100 내지 약 2,000 Da, 약 100 내지 약 1,750 Da, 약 100 내지 약 1,500 Da, 약 100 내지 약 1,250 Da, 약 100 내지 약 1,000 Da, 약 100 내지 약 750 Da, 약 100 내지 약 500 Da, 약 200 내지 약 1500, 약 500 내지 약 1000, 약 300 내지 약 1000 Da, 또는 약 100 내지 약 250 Da)일 수 있다
일부 구현예에서, "소분자"는 전형적으로 약 1000미만의 분자량을 갖는 유기, 무기 또는 유기금속 화합물을 지칭한다. 일부 구현예에서, 소분자는 1nm 정도의 크기를 갖는 유기 화합물이다.　일부 구현예에서, 본 발명의 소분자 약물은 약 1000 미만의 분자량을 갖는 올리고펩타이드 및 다른 생분자를 포함한다.
"유효량"은 이롭거나 목적하는 결과를 수행하기에 충분한 양이다. 예를 들어, 치료학적 양은 목적하는 치료학적 효과를 달성하는 양이다. 상기 양은 예방학적 유효량과 동일하거나 상이할 수 있고, 이는 질환 또는 질환 증상의 발병을 예방하기 위해 필요한 양이다. 유효량은 하나 이상의 투여, 적용 또는 용량으로 투여될 수 있다. 조성물의 치료학적 유효량은 선택된 조성물에 의존한다. 조성물은 하루 1회 이상 내지 격일 1회를 포함하는 주당 1회 이상으로 투여될 수 있다. 당업자는 질환 또는 장애의 중증도, 이전의 치료, 대상체의 일반 건강 및/또는 연령 및 존재하는 다른 질환을 포함하지만 이에 제한되지 않는 특정 인자들이 대상체를 효과적으로 치료하기 위해 요구되는 용량 및 타이밍에 영향을 줄 수 있임을 인지한다. 또한, 치료학적 유효량의 본원에 기재된 조성물을 사용한 대상체의 치료는 단일 치료 또는 일련의 치료를 포함할 수 있다.
본 발명의 화합물
본 발명의 하나의 양상은 본원에 기재된 치료학적 유효량의 화합물을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 비정상적 CDK5 과활성을 특징으로 하는 질환 또는 병태를 치료하는 방법을 제공한다. 일부 구현예에서, 상기 화합물은 CDK5의 소분자 억제제이다.
특정 구현예에서, 상기 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 화학식 I을 갖는다:
[화학식 I]
Figure pct00010
상기 식에서,
환 A는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 사이클로알킬 또는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 포화된 헤테로사이클릴이고;
환 B는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 아릴, 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 헤테로아릴 또는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 헤테로사이클릴이고;
R1은 -N(R5)-, -C(O)-, -S-, -S(O)-, -S(O)2-, -[C(R4)2]1-2-, -[C(R4)2]0-1-CH=,
-N(R5)-S(O)2-, -S(O)2-N(R5), -C(R4)2-N(R5)-, -N(R5)-C(R4)2-, -C(R4)2-S(O)2-, -C(=N-OH)-, -C(=N-O-C1-C4 알킬)-, 또는 -S(O)2-C(R4)2-이고;
각각의 R2는 독립적으로 할로, -OH, -C1-C6 알킬, -C1-C6 할로알킬, -C1-C6 하이드록시알킬, -(C0-C4 알킬렌)-C(O)-OH, -(C0-C4 알킬렌)-C(O)-O-C1-C4 알킬, -(C0-C4 알킬렌)-O-C1-C4 알킬, -(C0-C4 알킬렌)-O-C1-C4 하이드록시알킬, -(C0-C4 알킬렌)-C(O)-N(R6)2, -(C0-C4 알킬렌)-N(R6)2, 또는 -(C0-C4 알킬렌)-포화된 헤테로사이클릴이고, 여기서, 상기 포화된 헤테로사이클릴은 임의로 할로, -OH, 또는 -CH3으로 치환되고;
각각의 R3은 독립적으로 할로; -CN; -OH; -N(R6)2; -C1-C4 알킬; -O-C1-C4 알킬; -O-C1-C4 알킬렌-C(O)-N(R6)2; -C(O)-O-C1-C4 알킬; -C(O)-N(R6)2; -S(O)2-N(R6)2; -S(O)2-C1-C4 알킬; 하나 이상의 -OH로 임의로 치환된 C2-C4 알키닐; 1,2,4-트리아졸-1-일메틸; 모르폴리닐메틸; 사이클로프로필; =O; -CH2CH2-C(O)-O-CH3; -N(R6)-S(O)2-CH3; 임의로 치환된 아릴; 임의로 치환된 헤테로아릴; 또는 임의로 치환된 헤테로사이클릴이고, 여기서, R3의 임의의 알킬 부분은 할로, -CN, 또는 -N(R6)2, 또는 -OH 중 하나 이상으로 임의로 치환되고;
각각의 R4는 독립적으로 수소, 할로, -OH, -CN, -N(R6)2, -OH, 할로, -CN, 또는 -N(R6)2중 하나 이상으로 임의로 치환된 -C1-C4 알킬; 또는 -OH, 할로, -CN, 또는 -N(R6)2 중 하나 이상으로 임의로 치환된 O-C1-C4 알킬이거나;
하나의 R4는 환 A 중 환 탄소원자와 함께 환 A에 스피로융합되거나, 융합되거나 브릿지된 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릴 환을 형성하거나;
동일한 탄소 원자에 결합된 2개의 R4는 함께 =CH2-(C0-C3 알킬), C3-C6 사이클로알킬, 또는 C4-C7 헤테로사이클릴을 형성하고;
R5는 수소; -CN, -OH, -COOH, C(O)-O-C1-C4 알킬, 또는 피라졸릴 중 하나 이상으로 임의로 치환된 C1-C4 알킬; -S(O)2-C1-C4 알킬; -C(O)C(O)OH; -COOH; 또는 -C(O)-O-C1-C4 알킬이거나;
R5는 환 A 중 환 탄소원자와 함께 환 A에 스피로융합되거나, 융합되거나 브릿지된 헤테로사이클릴 환을 형성하고;
각각의 R6은 독립적으로 수소 또는 -C1-C4 알킬이고;
m은 0,1, 2, 3, 4, 5, 또는 6이고;
n은 0, 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6이고;
"----"는 단일 결합 또는 이중 결합을 나타낸다.
화학식 I의 일부 구현예에서, 각각의 R3은 독립적으로 할로; -CN; -OH; -N(R6)2; -C1-C4 알킬; -O-C1-C4 알킬; -O-C1-C4 알킬렌-C(O)-N(R6)2; -C(O)-O-C1-C4 알킬; -C(O)-N(R6)2; -S(O)2-N(R6)2; -S(O)2-C1-C4 알킬; 임의로 치환된 아릴; 임의로 치환된 헤테로아릴; 또는 임의로 치환된 헤테로사이클릴이고, 여기서, R3의 임의의 알킬 부분은 할로, -CN, 또는 -N(R6)2, 또는 -OH 중 하나 이상으로 임의로 치환된다.
특정 구현예에서, 환 B는 페닐, -C(O)-페닐, 1,3,4-티아디아졸-2-일, 이미다조[1,2-b]피리다진-3-일, 이속사졸-3-일, 1,3-디하이드로이소벤조푸란-5-일, 2H-크로멘-6-일, 1,2,3,4-테트라하이드로이소퀴놀린-6-일, 1,2,3,4-테트라하이드로이소퀴놀린-7-일, 이소인돌린-5-일, 1,2-디하이드로피리딘-3-일, 1,2-디하이드로피리딘-5-일, 피리디닐 또는 피리미디닐이다.
특정 구현예에서, 적어도 하나의 R3은 플루오로, 클로로, -OH, =O, -CH3, -CH2CH3, -C(CH3)3, -CH (CH3)2, -CN, -CH2CH2-C(O)-O-CH3, -C(O)-O-CH2CH3, -OCH3, -O-CH2CH2-C(O)-N(R6)2, -N(R6)2, -CH2-N(R6)2, -S(O)2-N(R6)2, -N(R6)-S(O)2-CH3, -S(O)2CH3, -C(O)-N(R6)2, -C((CH3)2)-OH, -C≡C-C((CH3)2)-OH, 또는 -CH2CN이다.
특정 구현예에서, 적어도 하나의 R3은 1,2,4-트리아졸-1-일, 1,2,4-트리아졸-1-일메틸, 1,2,3,4-테트라졸-1-일, 1,2,3,4-테트라졸-5-일, 1,2,4-옥사디아졸-3-일, 1,2-디하이드로피리딘-6-일, 1,2-디하이드로피리딘-3-일, 1,2-디하이드로피리딘-5-일, 1,2-디하이드로피리딘-1-일, 4,5-디하이드로-1,2,4-옥사디아졸-3-일, 이소티아졸리딘-2-일, 피라졸릴, 피라진-2-일, 피리딘-2-일, 피리딘-3-일, 피리딘-4-일, 피리미딘-4-일, 피롤리딘-1-일, 모르폴린-4-일, 모르폴린-4-일메틸, 티오모르폴린-4-일, 피페리딘-1-일, 피페라진-1-일, 테트라하이드로피란-4-일, 옥사졸리딘-3-일, 이미다졸리딘-1-일, 사이클로프로필, 또는 페닐이고, 여기서, 상기 적어도 하나의 R3은 임의로 및 독립적으로 할로, =O, -OH, CN, C1-C4 알킬, C1-C4 하이드록시알킬, C1-C4 할로알킬, -COOH, -C(O)-N(R6)2, -(C0-C4 알킬렌)-C(O)-O-C1-C4 알킬, 또는 -O-C1-C4 알킬로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환체로 치환된다.
특정 구현예에서,
Figure pct00011
에 의해 나타낸 화합물의 일부는 다음과 같다: 1,3-디하이드로이소벤조푸란-5-일, 1-플루오로-2-메틸이소인돌린-6-일, 1-옥소-1,2,3,4-테트라하이드로이소퀴놀린-6-일, 1-옥소-1,2,3,4-테트하하이드로이소퀴놀린-7-일, 2-(1-하이드록시-1-메틸에탄-1-일)피리딘-5-일, 2-(모르폴린-4-일)페닐, 2-플루오로-4-(1,2,4-옥사디아졸-3-일)페닐, 2-플루오로-4-(1,2,4-트리아졸-1-일메틸)페닐, 2-플루오로-4-(1-에틸-2-옥소-1,2 디하이드로피리딘-3-일)페닐, 2-플루오로-4-(1-메틸-2-옥소-1,2-디하이드로피리딘-3-일)페닐, 2-플루오로-4-(1-메틸-2-옥소-1,2-디하이드로피리딘-5-일)페닐, 2-플루오로-4-(1-메틸-2-옥소-1,2-디하이드로피리딘-6-일)페닐, 2-플루오로-4-(2-카바밀페닐)페닐, 2-플루오로-4-(2-시아노페닐)페닐, 2-플루오로-4-(2-에톡시카보닐페닐)페닐, 2-플루오로-4-(2-메톡시피리딘-3-일)페닐, 2-플루오로-4-(2-메톡시피리딘-4-일)페닐, 2-플루오로-4-(2-메톡시피리딘-5-일)페닐, 2-플루오로-4-(2-메톡시피리딘-6-일)페닐, 2-플루오로-4-(2-옥소-1,2-디하이드로피리딘-1-일)페닐, 2-플루오로-4-(2-옥소-1,2-디하이드로피리딘-3-일)페닐, 2-플루오로-4-(2-옥소-1,2-디하이드로피리딘-5-일)페닐, 2-플루오로-4-(2-옥소-1,2-디하이드로피리딘-6-일)페닐, 2-플루오로-4-(2-옥소-3-메틸이미다졸리딘-1일)페닐, 2-플루오로-4-(3-(1-하이드록시-1-메틸에탄-1-일)피라졸-1-일)페닐, 2-플루오로-4-(3-카바밀페닐)페닐, 2-플루오로-4-(3-카바밀피라졸-1-일)페닐, 2-플루오로-4-(3-카복시페닐)페닐, 2-플루오로-4-(3-카복시피라졸-1-일)페닐, 2-플루오로-4-(3-시아노페닐)페닐, 2-플루오로-4-(3-시아노피라졸-1-일)페닐, 2-플루오로-4-(3-에톡시카보닐페닐)페닐, 2-플루오로-4-(3-플루오로페닐)페닐, 2-플루오로-4-(3-하이드록시메틸피라졸-1-일)페닐, 2-플루오로-4-(3-메톡시피라졸-1-일)페닐, 2-플루오로-4-(3-메톡시페닐)페닐, 2-플루오로-4-(3-메톡시피라진-2-일)페닐, 2-플루오로-4-(3-메틸카바밀피라졸-1-일)페닐, 2-플루오로-4-(3-메틸페닐)페닐, 2-플루오로-4-(3-N,N-디메틸카바밀피라졸-1-일)페닐, 2-플루오로-4-(4-카바밀페닐)페닐, 2-플루오로-4-(4-카복시피라졸-1-일)페닐, 2-플루오로-4-(4-시아노페닐)페닐, 2-플루오로-4-(4-시아노피라졸-1-일)페닐, 2-플루오로-4-(4-에톡시카보닐페닐)페닐, 2-플루오로-4-(4-플루오로페닐)페닐, 2-플루오로-4-(4-메톡시카보닐피라졸-1-일)페닐, 2-플루오로-4-(4-메톡시페닐)페닐, 2-플루오로-4-(4-메틸페닐)페닐, 2-플루오로-4-(5-시아노피리딘-2-일)페닐, 2-플루오로-4-(5-하이드록시메틸피라졸-1-일)페닐, 2-플루오로-4-(5-옥소-4,5-디하이드로-1,2,4-옥사디아졸-3-일)페닐, 2-플루오로-4-(모르폴린-4-일메틸)페닐, 2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐, 2-플루오로-4-(피라졸-3-일)페닐, 2-플루오로-4-(피리딘-3-일)페닐, 2-플루오로-4-(피리딘-4-일)페닐, 2-플루오로-4-(피리미딘-5-일)페닐, 2-플루오로-4-메틸페닐, 2-플루오로-5-(1-메틸-2-옥소-1,2-디하이드로피리딘-3-일)페닐, 2-플루오로-5-(2-옥소피롤리딘-1-일)페닐, 2-플루오로-5-(모르폴린-4-일)페닐, 2-플루오로-5-에틸페닐, 2-플루오로페닐, 2-하이드록시피리딘-3-일, 2-메틸-4-(2-카바밀에톡시)페닐, 2-메틸-4-(2-옥소피롤리딘-1-일)페닐, 2-메틸-4-이소프로필카바밀페닐, 2-메틸페닐, 2-옥소-1,2-디하이드로피리딘-4-일, 2-옥소-1,2-디하이드로피리딘-5-일, 2-옥소-2H-크로멘-6-일, 3-(1,2,3,4-테트라졸-1-일)페닐, 3-(2-옥소이미다졸리딘-1-일)페닐, 3-(2-옥소-옥사졸리딘-3-일)페닐, 3-(2-옥소피롤리딘-1-일)페닐, 3-(3-하이드록시-3-메틸부탄-1-인-1-일)페닐, 3-(4-메틸피페라진-1-일)페닐, 3-(아미노설포닐)페닐, 3-(시아노메틸)페닐, 3-(에톡시카보닐)페닐, 3-(메틸설포닐)페닐, 3-(모르폴린-4-일)페닐, 3-(모르폴린-4-일메틸)페닐, 3,5-디메틸페닐, 3-아미노페닐카보닐, 3-카바밀페닐, 3-시아노페닐, 3-사이클로프로필페닐, 3-에틸페닐, 3-메톡시-4-메틸설포닐아미노페닐, 3-메틸페닐, 4-(1,1-디옥소이소티아졸리딘-2-일)페닐, 4-(1,1-디옥소티오모르폴린-4-일)페닐, 4-(1,2,3,4-테트라졸-5-일)페닐, 4-(1,2,4-트리아졸-1-일)페닐, 4-(2-메톡시피리미딘-4-일)페닐, 4-(2-옥소-옥사졸리딘-3-일)페닐, 4-(3-옥소모르폴린-4-일)페닐, 4-(3-옥소피페라진-1-일)페닐, 4-(4-하이드록시피페리딘-1-일)페닐, 4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐, 4-(4-메틸피페리딘-1-일)페닐, 4-(5-옥소-4,5-디하이드로-1,2,4-옥사디아졸-3-일)페닐, 4-(모르폴린-4-일)페닐, 4-(모르폴린-4-일메틸)페닐, 4-(N,N-디메틸아미노메틸)페닐, 4-(N,N-디메틸아미노설포닐)페닐, 4-(피롤리딘-1-일)페닐, 4-(테트라하이드로피란-4-일)페닐, 4-시아노메틸페닐, 4-디메틸아미노페닐, 4-이소프로필페닐, 4-메틸카바밀페닐, 4-메틸페닐, 4-메틸설포닐페닐, 4-t-부틸페닐, 5-(2-메톡시카보닐에탄-1-일)-1,3,4-티아디아졸-2-일, 5-메톡시피리딘-3-일, 7-클로로이미다조[1,2-b]피리다진-3-일, 이속사졸-3-일, 페닐, 또는 피리미딘-5-일.
특정 구현예에서, 환 A는 피페리디닐, 피페리디닐리덴, 피페라지닐, 피롤리디닐, 아제티디닐, 사이클로헥실, 사이클로펜틸, 사이클로부틸, 아자바이사이클로[3.3.1]노나닐, 또는 아자바이사이클로[2.2.1]헵타닐이다.
특정 구현예에서, 각각의 R2는 독립적으로 -F, -OH, -CH3, -CH2CH3, -CH2CF3,
-CH2CH2OH, -CH2CH(OH)CH2OH, -CH(CH3)2, -CH(CH3)-COOH, -COOH, -NH2, -NH(CH3), -N(CH3)2-CH2C(O)NH2, 또는 옥세탄-3-일메틸이다.
특정 구현예에서,
Figure pct00012
에 의해 나타낸 화합물의 일부는 다음과 같다: 1-(2,2,2-트리플루오로에틸)피페리딘-4-일, 1-(2-하이드록시에틸)피페리딘-4-일, 1-(2,3-디하이드록시프로필)피페리딘-4-일, 1-(카바밀메틸)피페리딘-4-일, 1-(옥세탄-3-일메틸)피페리딘-4-일, 1,3-디메틸피페리딘-4-일, 1,4-디메틸피페리딘-4-일, 1-에틸피페리딘-4-일, 1-이소프로필피페리딘-4-일, 1-메틸-1-옥소피페리딘-4-일, 1-메틸-3,3-디플루오로피페리딘-4-일, 1-메틸-4-하이드록시피페리딘-4-일, 1-메틸피페리딘-4-일, 1-메틸피페리딘-4-일리덴, 1-메틸피롤리딘-3-일, 2-아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-5-일, 2-메틸피페리딘-4-일, 3,3-디플루오로피페리딘-4-일, 3-아미노사이클로부틸, 3-아미노피롤리딘-1-일, 3-아미노피페리딘-1-일, 3-카복시피페리딘-4-일, 3-메틸피페리딘-4-일, 4-(디메틸아미노)사이클로헥실, 4-(메틸아미노)사이클로헥실, 4-아미노-4-메틸사이클로헥실, 4-아미노사이클로헥실, 4-하이드록시사이클로헥실, 4-하이드록시피페리딘-4-일, 4-메틸피페라진-1-일, 9-아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-일, 아제티딘-3-일, 피페라진-1-일, 피페리딘-4-일, 또는 피페리딘-4-일리덴.
특정 구현예에서, R1은 -N(CH3)-, -NH-, -N(CH2CH2OH)-, -N(CH2COOH)-, -N(CH2CH2COOH)-, -N(S(O)2CH3)-, -N(C(O)C(O)OH)-, -C(O)-, -S-, -S(O)-, -S(O)2-, -C(CH3)(OH)-, -C(CH3)(F)-, -C(CH2CH3)(OH)-, -C(CF3)(OH)-, -CH(CH3)-, -CH(CH2CH3)-, -CH(OH)-, -CH(CH2OH)-, -CH(=CH2)-, -C(=N-OH), -C(=N-OCH3), -CF2-, -CHF-, -CH(OCH3)-, -CH=, -CH2-, -CH(NH2)-, -CH(NHCH3)-, -NH-S(O)2-, -N(CH2CN)-, -S(O)2-NH-, -N(CH2COOCH3)-, -CH2-S(O)2-, -N(CH(CH3)COOH)-, 피라졸-4-일메틸아미닐렌, 사이클로프로판-1,1-디일, 및 옥세탄-2,2-디일이다.
특정 구현예에서, 상기 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 화학식 Ia를 갖는다:
[화학식 Ia]
Figure pct00013
상기 식에서,
환 B'는 페닐, 피리딘-3-일, 또는 1,3-디하이드로이소벤조푸란-5-일이고;
R11은 -S-, -S(O)2-, -CF2-, -C(F)(CH3)-, -C(OH)(CH3)-, -CH(CH3)-, 또는 -C(O)-이고;
R12a는 수소, -CH3, -CH2CH2OH, 또는 옥세탄-3-일메틸이고;
R12b는 수소 또는 -CH3이고;
각각의 R13은 존재하는 경우 독립적으로 플루오로; -CN 및 -OH 중 하나 이상으로 임의로 치환된 C1-C4 알킬; 하나 이상의 -OH로 임의로 치환된 C2-C4 알키닐; -C(O)N(R6)2; -C(O)O-C1-C4 알킬; -N(R6)2; -S(O)2N(R6)2; -SO2-C1-C4 알킬; 플루오로, -CN, -C(O)N(R6), -COOH, -O-C1-C4 알킬, 및 C1-C4 하이드록시알킬 중 하나 이상으로 임의로 치환된 페닐; 하나 이상의 O-C1-C4 알킬로 임의로 치환된 피리디닐; -COOH, C1-C4 하이드록시알킬, -C(O)O-C1-C4 알킬 중 하나 이상으로 임의로 치환된 피라졸릴; O-C1-C4 알킬로 임의로 치환된 피리미딜; 옥소-치환된 1,2-디하이드로피리디닐; C1-C4 알킬로 추가로 임의로 치환된, 옥소-치환된 피라졸리디닐; 옥소-치환된 옥사졸리디닐; 옥소-치환된 피롤리디닐; 옥소-치환된 티아졸리디닐; 옥소-치환된 티오모르폴리닐; 모르폴리닐; 또는 사이클로프로필이고;
각각의 R6는 독립적으로 수소 또는 C1-C4 알킬이고;
p는 0, 1 또는 2이다.
특정 구현예에서, p는 2이고, 하나의 R13은 플루오로이다.
특정 구현예에서, 환 B는 페닐이다.
특정 구현예에서, 각각의 R13은 독립적으로 플루오로, -CH3, -CH2CH3, -CH2CN, -CH(CH3)2, -C≡C-C(CH3)2OH, -C(OH)(CH3)CH3, -C(CH3)3, -C(O)NH2, -C(O)OCH2CH3, -N(CH3)2, -S(O)2NH2, -SO2CH3, 1,1-디옥소티아졸리딘-2-일, 1,1-디옥소티오모르폴린-4-일, 2-시아노페닐, 2-메톡시피리딘-4-일, 2-메톡시피리딘-5-일, 2-메톡시피리미딘-4-일, 2-옥소-1,2-디하이드로피리딘-6-일, 2-옥소-1,2-디하이드로피리딘-3-일, 2-옥소-3-메틸피라졸리딘-1-일, 2-옥소옥사졸-3-일, 2-옥소피롤리딘-1-일, 3-카바밀페닐, 3-카복시페닐, 3-카복시피라졸-1-일, 3-시아노페닐, 3-플루오로페닐, 3-하이드록시메틸피라졸-1-일, 3-메톡시페닐, 4-카복시피라졸-1-일, 4-시아노페닐, 4-메톡시카보닐피라졸-1-일, 4-메톡시페닐, 모르폴린-4-일, 피라졸-1-일, 피라졸-3-일, 피리딘-3-일, 피리미딘-5-일 또는 사이클로프로필이다.
특정 구현예에서, 상기 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 화학식 Ib를 갖는다:
[화학식 Ib]
Figure pct00014
상기 식에서,
R21은 -CH(CH3)-, -CH(OH)-, -C(CH3)(OH)-, C(=CH2)-, N(CH2C(O)OH)-, -S-, 또는 -S(O)2-이고;
R22는 수소, -CH3, -CH2CH3, -CH2CH2OH, 또는 아제티딘-3-일메틸이고;
각각의 R23은 독립적으로 플루오로; C1-C4 알킬; 하이드록시로 임의로 치환된 C2-C4 알키닐; -N(R6)2; -O-C1-C4 알킬렌-C(O)-N(R6)2; 할로, -CN, C1-C4 알킬, -O-C1-C4 알킬, -C(O)N(R6)2, 및 -C(O)-C1-C4 알킬 중 하나 이상으로 임의로 치환된 페닐; -O-C1-C4 알킬로 임의로 치환된 피리디닐; -CN, -C1-C4 알킬, -C1-C4 하이드록시알킬, -C(O)N(R6)2, -COOH, 및 -C(O)-O-C1-C4 알킬 중 하나 이상으로 임의로 치환된 피라졸릴; 옥소-치환된 옥사디아졸릴; 모르폴리닐; 모르폴리닐메틸; 테트라하이드로피라닐; 피롤리디닐; 피리미디닐; 테트라졸릴; C1-C4 알킬로 임의로 치환된 피페리디닐; 또는 사이클로프로필이고;
q는 1 또는 2이다.
특정 구현예에서, q는 2이고; 하나의 R23은 -CH3 또는 플루오로이다.
특정 구현예에서, 각각의 R23은 독립적으로 플루오로, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, C≡C-C((CH3)2)OH, -N(CH3)2, -OCH2CH2C(O)NH2, 1,2,3,4-테트라졸-5-일, 2-메톡시피리딘-3-일, 2-메톡시피리딘-4-일, 2-메톡시피리딘-5-일, 2-메톡시피리딘-6-일, 3-(N,N-디메틸카바밀)피라졸-1-일, 3-카바밀페닐, 3-카바밀피라졸-1-일, 3-카복시피라졸-1-일, 3-시아노페닐, 3-시아노피라졸-1-일, 3-에톡시카보닐페닐, 3-플루오로페닐, 3-하이드록시메틸피라졸-1-일, 3-메톡시카보닐피라졸-1-일, 3-메톡시페닐, 3-메틸페닐, 4-카바밀페닐, 4-시아노페닐, 4-에톡시카보닐페닐, 4-플루오로페닐, 4-메톡시카보닐피라졸-1-일, 4-메톡시페닐, 4-메틸페닐, 4-메틸피페리딘-1-일, 5-옥소-1,2,4-옥사디아졸-3-일, 사이클로프로필, 플루오로, 모르폴린-4-일, 모르폴린-4-일메틸, 피라졸-1-일, 피리딘-3-일, 피리딘-4-일, 피리미딘-5-일, 피롤리딘-1-일 또는 테트라하이드로피란-4-일이다.
특정 구현예에서, 화합물은 표 1에서 화합물 100-315 중 어느 하나 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염으로부터 선택된다.
특정 구현예에서, 본 발명의 화합물은 라세믹일 수 있다.　 특정 구현예에서, 본 발명의 화합물은 하나의 에탄티오머가 풍부할 수 있다.　 예를 들어, 본 발명의 화합물은 30% 초과 ee, 40% ee, 50% ee, 60% ee, 70% ee, 80% ee, 90% ee, 또는 심지어 95% 이상의 ee를 가질 수 있다.
본 발명의 화합물은 하나 초과의 입체중심을 갖는다.　 따라서, 본 발명의 화합물은 하나 이상의 부분입체이성질체가 풍부할 수 있다.　 예를 들어, 본 발명의 화합물은 30% 초과의 de, 40% de, 50% de, 60% de, 70% de, 80% de, 90% de, 또는 심지어 95% 이상의 de를 가질 수 있다.　 특정 구현예에서, 본 발명의 화합물은 하나 이상의 입체발생 중심에서 실질적으로 하나의 이성질체 형태를 갖고 나머지 입체발생 중심에서 다중 이성질체 형태를 갖는다.
특정 구현예에서, 에난티오머 과량의 입체중심은 적어도 40% ee, 50% ee, 60% ee, 70% ee, 80% ee, 90% ee, 92% ee, 94% ee, 95% ee, 96% ee, 98% ee 이상의 ee이다.
본원에 사용된 바와 같이, 입체화학 없이 그려진 단일 결합은 화합물의 입체화학을 나타내지 않는다.
본원에 사용된 바와 같이, 빗금친 또는 굵은 쐐기형이 아닌 결합은 상대적이지만 절대적이지는 않은 입체화학적 구성을 나타낸다 (예를 들어, 주어진 부분입체이성질체의 에난티오머를 구별하지 않음).
본원에 사용된 바와 같이, 빗금친 또는 굵은 쐐기 결합은 절대 입체화학적 형태를 지적한다.　
일부 구현예에서, 본 발명은 본 발명의 화합물 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다. 특정 구현예에서, 본 발명의 화합물의 치료학적 제제 또는 약제학적 조성물은 주로 화합물의 하나의 에난티오머를 제공하도록 농축될 수 있다.　 에난티오머적으로 농축된 혼합물은 예를 들어, 적어도 60몰 %의 하나의 에난티오머, 또는 보다 바람직하게 적어도 75, 90, 95, 또는 심지어 99 몰 퍼센트를 포함할 수 있다.　 특정 구현예에서, 하나의 에난티오머가 농축된 화합물은 다른 에난티오머가 실질적으로 없고, 여기서 실질적으로 없다는 것은 미지의 물질이 예를 들어, 조성물 또는 화합물 혼합물에서 다른 거울상이성질체의 양과 비교하여 10% 미만, 또는 5% 미만, 또는 4% 미만, 또는 3% 미만, 2% 미만, 또는 1% 미만을 구성함을 의미한다.　 예를 들어, 조성물 또는 화합물 혼합물이 98g의 제1 에난티오머와 2g의 제2 에난티오머를 함유하는 경우, 이는 98몰%의 제1 에난티오머 및 단지 2%의 제2 에난티오머를 함유한다고 일컬어진다.　
특정 구현예에서, 치료학적 제제 또는 약제학적 조성물은 본 발명의 화합물의 하나의 부분입체이성질체를 우세하게 제공하도록 농축될 수 있다.　 에난티오머적으로 농축된 혼합물은 예를 들어, 적어도 60몰%의 하나의 부분입체이성질체, 또는 보다 바람직하게 적어도 75, 90, 95, 또는 심지어 99몰%를 포함할 수 있다.
약제학적 조성물
본 발명의 조성물 및 방법은 이를 필요로 하는 대상체를 치료하기 위해 사용될 수 있다. 특정 구현예에서, 대상체는 사람 또는 비-사람 포유류와 같은 포유류이다. 사람과 같은 대상체에게 투여되는 경우, 조성물 또는 화합물은 바람직하게는 예를 들어 본 발명의 화합물 및 악제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물로서 투여된다. 약제학적으로 허용되는 담체는 당업계에 널리 공지되어 있고, 예를 들어, 물 또는 생리학적으로 완충된 식염수와 같은 수용액 또는 글리콜, 글리세롤, 올리브 오일과 같은 오일 또는 주사 가능한 유기 에스테르와 같은 기타 용매 또는 비히클을 포함한다. 바람직한 구현예에서, 이러한 약제학적 조성물이 사람 투여, 특히 침습적 투여 경로(즉, 상피 장벽을 통한 수송 또는 확산을 우회하는 주사 또는 이식과 같은 경로)를 위한 것인 경우, 수용액은 발열원이 없거나, 실질적으로 발열원이 없다. 부형제는 예를 들어 제제의 지연 방출을 수행하거나 하나 이상의 세포, 조직 또는 기관을 선택적으로 표적화하도록 선택될 수 있다. 약제학적 조성물은 정제, 캡슐 (스프링클 캡슐 및 젤라틴 캡슐 포함), 과립, 재구성용 동결건조물, 분말, 용액, 시럽, 좌제, 주사제 등과 같은 투여 단위 형태일 수 있다. 조성물은 또한 경피 전달 시스템, 예를 들어 피부 패치에 존재할 수 있다. 조성물은 또한 점안제와 같은 국소 투여에 적합한 용액에 존재할 수 있다.
약제학적으로 허용되는 담체는 예를 들어 본 발명의 화합물과 같은 화합물의 안정화, 용해도 증가 또는 흡수 증가 작용을 하는 생리학적으로 허용되는 제제를 함유할 수 있다. 이러한 생리학적으로 허용되는 제제는 예를 들어 글루코스, 슈크로스 또는 덱스트란과 같은 탄수화물, 아스코르브산 또는 글루타티온과 같은 항산화제, 킬레이트화제, 저분자량 단백질 또는 기타 안정화제 또는 부형제를 포함한다. 생리학적으로 허용되는 제제를 포함하는 약제학적으로 허용되는 담체의 선택은 예를 들어 조성물의 투여 경로에 의존한다. 제제 또는 약제학적 조성물은 자가-유화 약물 전달 시스템 또는 자가-미세유화 약물 전달 시스템일 수 있다. 약제학적 조성물 (제제)은 또한 예를 들어 본 발명의 화합물이 내부에 혼입될 수 있는 리포좀 또는 기타 중합체 매트릭스일 수 있다. 예를 들어, 인지질 또는 기타 지질을 포함하는 리포좀은 무독성이고 생리학적으로 허용되며 대사가 가능한 담체로서 제조 및 투여가 비교적 간단하다.
"약제학적으로 허용되는"이라는 문구는 건전한 의학적 판단의 범위 내에서 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응 또는 기타 문제 또는 합병증 없이 대상체의 조직과 접촉하여 사용하기에 적합하고 합리적인 이점/위험 비율에 상응하는 화합물, 물질, 조성물 및/또는 투여 형태를 지칭하기 위해 본원에 사용된다.
"약제학적으로 허용되는 염"은 환자의 치료에 적합하거나 환자의 치료와 상용성인 산 부가염 또는 염기성 부가염을 지칭하기 위해 본원에서 사용된다.
본원에 사용된 용어 "약제학적으로 허용되는 산 부가염"은 개시된 화합물의 임의의 무독성 유기 또는 무기 염을 의미한다. 적합한 염을 형성하는 예시적인 무기산은 염산, 브롬화수소산, 황산 및 인산 및 오르토인산일수소나트륨 및 황산수소칼륨과 같은 금속염을 포함한다. 적합한 염을 형성하는 예시적인 유기산은 모노-, 디- 및 트리카복실산, 예를 들어 글리콜산, 락트산, 피루브산, 말론산, 숙신산, 글루타르산, 푸마르산, 말산, 타르타르산, 바이타르타르산, 시트르산, 아스코르브산, 말레산, 벤조산, 페닐아세트산, 신남산, 살리실산, 및 설포살리실산 및 p-톨루엔 설폰산 및 메탄설폰산과 같은 설폰산을 포함한다. 일산 또는 이산 염이 형성될 수 있고, 이러한 염은 수화, 용매화 또는 실질적으로 무수 형태로 존재할 수 있다. 일반적으로, 본원에 기재된 화합물의 산부가염은 물 및 다양한 친수성 유기 용매에 보다 용해성이고, 일반적으로 이들의 유리 염기 형태와 비교하여 더 높은 융점을 입증한다. 적당한 염의 선택은 당업자에게 공지되어 있다. 다른 비-약제학적으로 허용되는 염, 예를 들어, 옥살레이트는, 예를 들어, 실험실 사용을 위해 또는 약제학적으로 허용되는 산 부가 염으로의 후속 전환을 위해 본원에 기재된 화합물의 단리에서 사용될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "약제학적으로 허용되는 염기 부가염"은 본원에 기재된 임의의 산 화합물의 임의의 무독성 유기 또는 무기 염기 부가염을 의미한다. 적합한 염을 형성하는 예시적인 무기 염기는 리튬, 나트륨, 칼륨, 칼슘, 마그네슘 또는 수산화바륨을 포함한다. 적합한 염을 형성하는 예시적인 유기 염기는 메틸아민, 트리메틸아민 및 피콜린 또는 암모니아와 같은 지방족, 지환족 또는 방향족 유기 아민을 포함한다. 적절한 염의 선택은 당업자에게 알려져 있다.
본원에 사용된 "약제학적으로 허용되는 담체"라는 문구는 액체 또는 고체 충전제, 희석제, 부형제, 용매 또는 캡슐화 물질과 같은 약제학적으로 허용되는 물질, 조성물 또는 비히클을 의미한다. 각각의 담체는 제형의 다른 성분과 상용성일수 있고 대상에게 해를 끼치지 않는다는 의미에서 "허용되는"이어야 한다. 약제학적으로 허용되는 담체로서 작용할 수 있는 물질의 일부 예는 다음과 같다: (1) 락토스, 글루코스 및 슈크로스와 같은 당류; (2) 옥수수 전분 및 감자 전분과 같은 전분; (3) 셀룰로스 및 이의 유도체, 예를 들어, 나트륨 카복시메틸 셀룰로스, 에틸 셀룰로스 및 셀룰로스 아세테이트; (4) 트라가칸트 분말; (5) 맥아; (6) 젤라틴; (7) 활석; (8) 코코아 버터 및 좌약 왁스와 같은 부형제; (9) 땅콩유, 면화씨유, 홍화유, 참기름, 올리브유, 옥수수유 및 대두유와 같은 오일; (10) 프로필렌 글리콜과 같은 글리콜; (11) 글리세린, 소르비톨, 만니톨 및 폴리에틸렌 글리콜과 같은 폴리올; (12) 에틸 올레에이트 및 에틸 라우레이트와 같은 에스테르; (13) 한천; (14) 수산화마그네슘 및 수산화알루미늄과 같은 완충제; (15) 알긴산; (16) 발열원 없는 물; (17) 등장 식염수; (18) 링거 용액; (19) 에틸 알코올; (20) 포스페이트 완충액; 및 (21) 악제학적 제형에 사용되는 기타 무독성 상용성 물질.
약제학적 조성물 (제제)은 예를 들어, 경구 (예를 들어, 수성 또는 비수성 용액 또는 현탁액에서와 같은 드렌치, 정제, 캡슐 (스프링클 캡슐 및 젤라틴 캡슐 포함), 볼루스, 분말, 과립, 혀에 적용하기 위한 페이스트); 구강 점막을 통한 흡수(예를 들어, 설하); 항문, 직장 또는 질(예를 들어, 페서리, 크림 또는 거품); 비경구 (예를 들어, 멸균 용액 또는 현탁액으로서 근육내, 정맥내, 피하 또는 척수강내 포함); 비강으로; 복막 내; 피하로; 경피적으로(예를 들어, 피부에 적용되는 패치로서); 및 국소적으로 (예를 들어, 피부에 적용되는 크림, 연고 또는 스프레이로서, 또는 점안제로서)를 포함하는 다수의 투여 경로 중 임의의 것에 의해 대상체에게 투여될 수 있다. 화합물은 또한 흡입을 위해 제형화될 수 있다. 특정 구현예에서, 화합물은 멸균수에 단순히 용해되거나 현탁될 수 있다. 적당한 경로의 투여 및 이를 위해 적합한 조성물의 세부사항은 예를 들어, 미국 특허 제6,110,973호, 제5,763,493호, 제5,731,000호, 제5,541,231호, 제5,427,798호, 제5,358,970호 및 제4,172,896호, 및 본원에 인용된 특허 문헌에서 찾을 수 있다.
제형은 단위 투여 형태로 편리하게 제공될 수 있고 약학 분야에 잘 공지된 임의의 방법에 의해 제조될 수 있다. 단일 투여 형태를 생성하기 위해 담체 물질과 조합될 수 있는 활성 성분의 양은 치료되는 대상체, 특정 투여 방식에 따라 다양하다. 단일 투여 형태를 생성하기 위해 담체 물질과 조합될 수 있는 활성 성분의 양은 일반적으로 치료 효과를 생성하는 화합물의 양일 것이다. 일반적으로, 100% 중에서, 상기 양은 활성 성분의 약 1% 내지 약 99%, 바람직하게는 약 5% 내지 약 70%, 가장 바람직하게는 약 10% 내지 약 30%의 범위일 것이다.
이들 제제 또는 조성물의 제조 방법은 활성 화합물, 예를 들어, 본 발명의 화합물을 담체 및 임의로 하나 이상의 보조 성분과 회합시키는 단계를 포함한다. 일반적으로, 제형은 본 발명의 화합물을 액체 담체, 또는 미분된 고체 담체, 또는 둘 모두와 균일하고 친밀하게 회합시킨 다음, 필요한 경우 생성물을 성형함으로써 제조된다.
경구 투여에 적합한 본 발명의 제형은 캡슐 (스프링클 캡슐 및 젤라틴 캡슐 포함), 카쉐제, 환제, 정제, 로젠지 (향이 나는 베이스 사용, 일반적으로 슈크로스 및 아카시아 또는 트라가칸트 사용), 동결건조물, 분말, 과립의 형태, 또는 수성 또는 비수성 액체의 용액 또는 현탁액, 또는 수중유 또는 유중수 액체 에멀젼, 엘릭시르 또는 시럽, 또는 알약 (젤라틴 및 글리세린, 또는 슈크로스 및 아카시아와 같은 비활성 염기 사용) 및/또는 구강 세정제 등의 형태일 수 있고, 각각은 활성 성분으로서 소정량의 본 발명의 화합물을 함유한다. 조성물 또는 화합물은 또한 볼루스, 약 또는 페이스트로 투여될 수 있다.
경구 투여용 고체 투여 형태 (캡슐 (스프링클 캡슐 및 젤라틴 캡슐 포함), 정제, 환제, 당의정, 분말, 과립 등)를 제조하기 위해, 활성 성분은 나트륨 시트레이트 또는 인산이칼슘 및/또는 다음 중 어느 하나와 같은 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 담체와 혼합된다: (1) 전분, 락토스, 슈크로스, 글루코스, 만니톨 및/또는 규산과 같은 충전제 또는 증량제; (2) 결합제, 예를 들어 카복시메틸셀룰로스, 알기네이트, 젤라틴, 폴리비닐 피롤리돈, 슈크로스 및/또는 아카시아; (3) 글리세롤과 같은 보습제; (4) 한천-한천, 탄산칼슘, 감자 또는 타피오카 전분, 알긴산, 특정 실리케이트 및 탄산나트륨과 같은 붕해제; (5) 파라핀과 같은 용액 지연제; (6) 4차 암모늄 화합물과 같은 흡수 촉진제; (7) 습윤제, 예를 들어 세틸 알코올 및 글리세롤 모노스테아레이트; (8) 카올린 및 벤토나이트 점토와 같은 흡수제; (9) 활석, 칼슘 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 고체 폴리에틸렌 글리콜, 나트륨 라우릴 설페이트 및 이들의 혼합물과 같은 윤활제; (10) 변형된 및 비변형된 사이클로덱스트린과 같은 착화제; 및 (11) 착색제. 캡슐 (스프링클 캡슐 및 젤라틴 캡슐 포함), 정제 및 환제의 경우, 약제학적 조성물은 또한 완충제를 포함할 수 있다. 유사한 유형의 고체 조성물은 또한 락토스 또는 밀크 당류, 및 고분자량의 폴리에틸렌 글리콜 등과 같은 부형제를 사용하여 연질 및 경질 충전 젤라틴 캡슐의 충전제로서 사용될 수 있다.
정제는 임의로 하나 이상의 보조 성분과 함께 압축 또는 성형에 의해 제조될 수 있다. 압축 정제는 결합제 (예를 들어, 젤라틴 또는 하이드록시프로필메틸 셀룰로스), 윤활제, 불활성 희석제, 보존제, 붕해제 (예를 들어, 나트륨 전분 글리콜레이트 또는 가교결합된 나트륨 카복시메틸 셀룰로스), 계면활성제 또는 분산제를 사용하여 제조할 수 있다. 성형된 정제는 불활성 액체 희석제로 습윤화된 분말 화합물의 혼합물을 적합한 기계에서 성형함으로써 제조할 수 있다.
정제, 및 약제학적 조성물의 다른 고체 투여 형태, 예를 들어 당의정, 캡슐 (스프링클 캡슐 및 젤라틴 캡슐 포함), 환제 및 과립은 임의로 약제학적 제형화 기술분야에 널리 공지된 장용피 및 기타 코팅과 같은 코팅 및 쉘로 스코어링되거나 제조될 수 있다. 이들은 또한 목적하는 방출 프로필, 다른 중합체 매트릭스, 리포좀 및/또는 미소구체를 제공하기 위해 다양한 비율로 하이드록시프로필메틸 셀룰로스를 사용하여 본원의 활성 성분의 느린 방출 또는 제어 방출을 제공하도록 제형화될 수 있다. 이들은 예를 들어 보균 필터를 통한 여과에 의해, 또는 사용 직전에 멸균수 또는 일부 다른 멸균 주사 가능한 매질에 용해될 수 있는 멸균 고체 조성물 형태의 멸균제를 혼입함으로써 멸균될 수 있다. 이들 조성물은 또한 임의로 불투명화제를 함유할 수 있고 이들이 활성 성분(들)만을 또는 우선적으로 위장관의 특정 부분에서 임의로 지연된 방식으로 방출하는 조성물일 수 있다. 사용될 수 있는 매립 조성물의 예로는 중합체 물질 및 왁스를 포함한다. 활성 성분은 또한 적절한 경우 하나 이상의 상기된 부형제와 함께 마이크로캡슐화된 형태일 수 있다.
경구 투여에 유용한 액체 투여 형태는 약제학적으로 허용되는 에멀젼, 재구성을 위한 동결건조물, 마이크로에멀젼, 용액, 현탁제, 시럽 및 엘릭시르를 포함한다. 활성 성분에 추가하여, 액체 투여 형태는 예를 들어 물 또는 기타 용매, 사이클로덱스트린 및 이의 유도체, 가용화제 및 유화제, 예를 들어 에틸 알콜, 이소프로필 알콜, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알콜, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸렌 글리콜, 오일(특히, 면실, 땅콩, 옥수수, 배아, 올리브, 피마자유 및 참기름), 글리세롤, 테트라히드로푸릴 알콜, 폴리에틸렌 글리콜 및 소르비탄의 지방산 에스테르, 및 이들의 혼합물을 함유할 수 있다.
불활성 희석제 외에, 경구 조성물은 또한 습윤제, 유화제 및 현탁제, 감미제, 향미제, 착색제, 방향제 및 방부제와 같은 보조제를 포함할 수 있다.
현탁액은 활성 화합물에 더하여, 예를 들어 에톡실화 이소스테아릴 알콜, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 및 소르비탄 에스테르, 미세결정질 셀룰로스, 알루미늄 메타하이드록사이드, 벤토나이트, 한천-한천 및 트라가칸트, 및 이들의 혼합물과 같은 현탁제를 함유할 수 있다.
직장, 질 또는 요도 투여를 위한 약제학적 조성물의 제형은 하나 이상의 활성 화합물을 예를 들어 코코아 버터, 폴리에틸렌 글리콜, 좌약 왁스 또는 살리실레이트를 포함하는 하나 이상의 적합한 비자극성 부형제 또는 담체와 혼합함으로써 제조될 수 있고, 실온에서는 고체이지만 체온에서는 액체이므로 직장이나 질강에서 녹아 활성 화합물을 방출하는 좌약으로서 제공될 수 있다.
구강 투여용 약제학적 조성물의 제형은 구강 세정제, 경구 스프레이, 또는 경구 연고제로서 제공될 수 있다.
대안적으로 또는 추가로, 조성물은 카테터, 스텐트, 와이어, 또는 다른 관내 장치를 통한 전달을 위해 제형화될 수 있다. 이러한 장치를 통한 전달은 방광, 요도, 요관, 직장 또는 장으로의 전달에 특히 유용할 수 있다.
질 투여에 적합한 제형은 또한 적절한 것으로 당업계에 공지된 바와 같은 담체를 함유하는 페서리, 탐폰, 크림, 겔, 페이스트, 발포제 또는 분무 제형을 포함한다.
국소 또는 경피 투여를 위한 투여 형태는 분말, 분무제, 연고, 페이스트, 크림, 로션, 젤, 용액, 패치 및 흡입제를 포함한다. 활성 화합물은 멸균 조건 하에 약제학적으로 허용되는 담체 및 필요할 수 있는 임의의 방부제, 완충제 또는 추진제와 혼합될 수 있다.
연고, 페이스트, 크림 및 겔은 활성 화합물 외에 동물 및 식물성 지방, 오일, 왁스, 파라핀, 전분, 트라가칸트, 셀룰로스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 규산, 활석 및 산화아연, 또는 이들의 혼합물과 같은 부형제를 함유할 수 있다.
분말 및 분무제는 활성 화합물 외에 락토스, 활석, 규산, 수산화알루미늄, 칼슘 실리케이트 및 폴리아미드 분말, 또는 이들 물질의 혼합물과 같은 부형제를 함유할 수 있다. 분무제는 클로로플루오로탄화수소와 같은 통상적인 추진제와 부탄 및 프로판과 같은 휘발성 비치환 탄화수소를 추가로 함유할 수 있다.
경피 패치는 신체로의 본 발명의 화합물의 제어된 전달을 제공하는 추가 이점을 갖는다. 이러한 투여 형태는 활성 화합물을 적절한 매질에 용해 또는 분산시킴으로써 제조될 수 있다. 흡수 향상제는 피부를 통한 화합물의 유량(flux)을 증가시키는데 사용될 수도 있다. 이러한 플럭스의 속도는 속도 조절 막을 제공하거나 중합체 매트릭스 또는 겔에 화합물을 분산시켜 조절할 수 있다.
안과용 제형, 안연고, 분말, 용액 등도 또한 본 발명의 범위 내에 있는 것으로 고려된다. 예를 들어, 안과용 제형은 미국 공개 공보 제2005/0080056호, 제2005/0059744호, 제2005/0031697호 및 제2005/004074호 및 미국 특허 제6,583,124호에 기재되어 있고, 이의 내용은 본원에 참조로 포함된다. 경우에 따라, 액체 안과용 제형은 누액, 방수 또는 유리체액과 유사한 성질을 갖거나 이러한 유체와 상용성이다. 바람직한 투여 경로는 국소 투여(예를 들어, 점안제와 같은 국소 투여, 또는 이식을 통한 투여)이다.
본원에 사용된 "비경구 투여" 및 "비경구 투여되는"이라는 문구는 일반적으로 주사에 의한 장관 및 국소 투여 이외의 투여 방식을 의미하며, 정맥내, 근육내, 동맥내, 척추강내, 캡슐내, 안와내, 심장내, 피내, 복막내, 기관간, 피하, 표피하, 관절내, 안내, 피막하, 지주막하, 척수내 및 흉골내 주사 및 주입을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
비경구 투여에 적합한 약제학적 조성물은 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 멸균 등장성 수성 또는 비수성 용액, 분산액, 현탁액 또는 에멀젼, 또는 사용 직전에 멸균 주사용 용액 또는 분산액으로 재구성될 수 있는 멸균 분말과 조합된 하나 이상의 활성 화합물을 포함하고, 이는 항산화제, 완충제, 정균제, 제형을 의도된 수용자의 혈액과 등장성으로 만드는 용질 또는 현탁제 또는 증점제를 함유할 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물에 사용될 수 있는 적합한 수성 및 비수성 담체의 예는 물, 에탄올, 폴리올 (예를 들어, 글리세롤, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜 등), 및 이들의 적합한 혼합물, 올리브 오일과 같은 식물성 오일 및 에틸 올레에이트와 같은 주사 가능한 유기 에스테르를 포함한다. 적절한 유동성은 예를 들어 렉시틴과 같은 코팅 물질의 사용, 분산액의 경우 필요한 입자 크기의 유지 및 계면활성제의 사용에 의해 유지될 수 있다.
이들 조성물은 또한 방부제, 습윤제, 유화제 및 분산제와 같은 보조제를 함유할 수 있다. 미생물 작용의 방지는 다양한 항균제 및 항진균제, 예를 들어 파라벤, 클로로부탄올, 페놀 소르브산 등을 포함함으로써 보장될 수 있다. 또한, 당류, 염화나트륨 등과 같은 등장화제를 조성물에 포함시키는 것이 바람직할 수 있다. 또한, 주사 가능한 약제학적 형태의 장기간 흡수는 알루미늄 모노스테아레이트 및 젤라틴과 같은 흡수를 지연시키는 제제의 포함에 의해 야기될 수 있다.
일부 경우에 약물의 효과를 연장하기 위해 피하 또는 근육내 주사로 약물의 흡수를 늦추는 것이 바람직할 수 있다. 이것은 수용해도가 불량한 결정질 또는 무정형 물질의 액체 현탁액을 사용함으로써 달성될 수 있다. 약물의 흡수율은 그의 해리 속도에 좌우되는데, 이는 결과적으로 결정의 크기 및 결정 형태에 따라 상이할 수 있다. 다르게는, 비경구적으로 투여된 약물 형태의 지연된 흡수는 약물을 오일 비히클 중에 용해 또는 현탁시킴으로써 달성된다.
주사 가능한 데포 형태는 폴리락티드-폴리글리콜리드와 같은 생분해성 중합체에서 대상 화합물의 마이크로캡슐화된 매트릭스를 형성함으로써 제조된다. 약물 대 중합체의 비율 및 사용된 특정 중합체의 성질에 따라 약물 방출 속도를 제어할 수 있다. 기타 생분해성 중합체의 예로는 폴리(오르토에스테르) 및 다가(무수물)을 포함한다. 데포 주사 가능한 제형은 또한 신체 조직과 상용성인 리포좀 또는 마이크로에멀젼에 약물을 포집함에 의해 제조된다.
본 발명의 방법에 사용하기 위해, 활성 화합물은 그 자체로, 또는 예를 들어, 약제학적으로 허용되는 담체와 함께 약 0.1 내지 약 99.5% (보다 바람직하게는 약 0.5 내지 약 90%)의 활성 성분을 함유하는 약제학적 조성물로서 제공될 수 있다.
도입 방법은 또한 충전식 또는 생분해성 장치에 의해 제공될 수 있다. 다양한 서방성 중합체 장치가 개발되었고, 최근 몇 년 동안 단백질 바이오의약품을 포함한 약물의 제어된 전달을 위해 생체 내에서 시험되었다. 생분해성 및 비분해성 중합체 둘다를 포함하는 다양한 생체적합성 중합체 (하이드로겔 포함)를 사용하여 특정 표적 부위에서 화합물의 지속 방출을 위한 이식체를 형성할 수 있다.
약제학적 조성물에서 활성 성분의 실제 투여량 수준은 특정 환자, 조성물 및 투여 방식에 대해 환자에게 독성 없이 목적하는 치료 반응을 달성하는데 효과적인 활성 성분의 양을 수득하기 위해 다양할 수 있다.
선택된 용량 수준은 특정 화합물 또는 사용된 화합물의 조합, 또는 이의 에스테르, 염 또는 아미드의 활성, 투여 경로, 투여 시간, 사용되는 특정 물질(들)의 분비 속도, 치료 기간, 사용된 특정 화합물(들)과 함께 사용되는 기타 약물, 화합물 및/또는 물질, 연령, 성별, 체중, 병태, 일반적인 건강 및 치료받는 대상체의 이전 병력 및 의학 분야에서 잘 알려진 인자를 포함하는 다양한 인자에 의존한다.
당업계 기술을 갖는 의사 또는 수의사는 필요한 약제학적 조성물의 치료학적 유효량을 용이하게 결정하고 처방할 수 있다. 예를 들어, 의사 또는 수의사는 목적하는 치료학적 효과를 달성하고 목적하는 효과가 달성될 때까지 투여량을 점진적으로 증가시키기 위해 필요한 것보다 낮은 수준에서 약제학적 조성물 또는 화합물의 투여를 개시할 수 있다. "치료학적 유효량"은 목적하는 치료 효과를 유발하기 위해 충분한 화합물의 농도를 의미한다. 화합물의 유효량이 대상체의 체중, 성별, 연령 및 병력에 의존한다는 것은 일반적으로 이해된다. 유효량에 영향을 미치는 다른 인자는 대상체 병태의 중증도, 치료 중인 장애, 화합물의 안정성 및 경우에 따라 본 발명의 화합물과 함께 투여되는 또 다른 유형의 치료학적 제제를 포함할 수 있지만 이에 제한되지 않는다. 더 많은 총 용량은 제제의 다중 투여에 의해 전달될 수 있다. 효능 및 용량을 결정하는 방법은 당업자에게 공지되어 있다 (Isselbacher 등 (1996) Harrison's Principles of Internal Medicine 13 ed., 1814-1882, 이는 본원에 참조로 포함됨).
일반적으로, 본 발명의 조성물 및 방법에 사용되는 활성 화합물의 적합한 1일 용량은 치료학적 효과를 생성하기에 효과적인 가장 낮은 용량인 화합물의 양일 것이다. 이러한 유효 용량은 일반적으로 위에서 설명한 인자에 의존한다.
경우에 따라, 활성 화합물의 효과적인 1일 용량은 1, 2, 3, 4, 5, 6 또는 그 이상의 서브-용량으로 하루 전체에 걸쳐 적절한 간격으로 별도로 투여될 수 있으며, 임의로 단위 투여 형태로 투여될 수 있다. 본 발명의 특정 구현예에서, 활성 화합물은 1일 2회 또는 3회 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 활성 화합물은 하루 1회 투여된다.
특정 구현예에서, 본 발명의 화합물은 단독으로 사용되거나 또 다른 유형의 치료제와 함께 투여될 수 있다. 본원에 사용된 문구 "동시 투여"는 이전에 투여된 치료 화합물이 체내에서 여전히 효과적인 동안 제2 화합물이 투여되도록 2개 이상의 상이한 치료학적 화합물의 임의의 형태의 투여를 지칭한다 (예를 들어, 2개의 화합물은 대상체에서 동시에 효과적이고, 이는 두 화합물의 상승 효과를 포함할 수 있다). 예를 들어, 상이한 치료학적 화합물은 동시에 또는 순차적으로 동일한 제형 중에 또는 별도의 제형으로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 상이한 치료학적 화합물은 서로에 대해 1시간, 12시간, 24시간, 36시간, 48시간, 72시간 또는 1주 이내에 투여될 수 있다. 따라서, 상기 치료를 받은 대상체는 상이한 치료학적 화합물의 조합 효과가 이득이될 수 있다.
특정 구현예에서, 본 발명의 화합물과 하나 이상의 추가 치료학적 제제(들)의 동시 투여는 본 발명의 화합물 또는 하나 이상의 추가의 치료학적 제제(들)의 각각의 개별 투여에 비해 개선된 효능을 제공한다. 이러한 특정 구현예에서, 동시 투여는 상가 효과를 제공하며, 여기서 상가 효과는 본 발명의 화합물 및 하나 이상의 추가 치료학적 제제(들)의 개별 투여 효과 각각의 합을 지칭한다.
본 발명은 본 발명의 조성물 및 방법에서 본 발명의 화합물의 약제학적으로 허용되는 염의 용도를 포함한다. 특정 구현예에서, 본 발명의 고려되는 염은 알킬, 디알킬, 트리알킬 또는 테트라-알킬 암모늄 염을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 특정 구현예에서, 본 발명의 고려되는 염은 L-아르기닌, 베넨타민, 벤자틴, 베타인, 수산화칼슘, 콜린, 데아놀, 디에탄올아민, 디에틸아민, 2-(디에틸아미노)에탄올, 에탄올아민, 에틸렌디아민, N-메틸글루카민, 하이드라바민, 1H-이미다졸, 리튬, L-라이신, 마그네슘, 4-(2-하이드록시에틸)모르폴린, 피페라진, 칼륨, 1-(2-하이드록시에틸)피롤리딘, 나트륨, 트리에탄올아민, 트로메타민 및 아연염을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 특정 구현예에서, 본 발명의 고려되는 염은 Na, Ca, K, Mg, Zn 또는 기타 금속 염을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
약제학적으로 허용되는 산부가염은 또한 물, 메탄올, 에탄올, 디메틸포름아미드 등과 같은 다양한 용매화물로서 존재할 수 있다. 이러한 용매화물의 혼합물도 제조할 수 있다. 이러한 용매화물의 공급원은 결정화 용매, 제조 또는 결정화 용매에 고유하거나 이러한 용매에 우연적일 수 있다.
습윤제, 유화제 및 윤활제, 예를 들어, 나트륨 라우릴 설페이트 및 마그네슘 스테아레이트, 및 착색제, 이형제, 코팅제, 감미료, 향미제 및 방향제, 방부제 및 항산화제가 또한 조성물에 존재할 수 있다.
약제학적으로 허용되는 항산화제의 예는 다음을 포함한다: (1) 아스코르브산, 시스테인 하이드로클로라이드, 중황산나트륨, 메타중아황산나트륨, 아황산나트륨 등과 같은 수용성 항산화제; (2) 지용성 항산화제, 예를 들어, 아스코르빌 팔미테이트, 부틸화 하이드록시아니솔(BHA), 부틸화 하이드록시톨루엔(BHT), 렉시틴, 프로필 갈레이트, 알파-토코페롤 등; 및 (3) 시트르산, 에틸렌디아민 테트라아세트산 (EDTA), 소르비톨, 타르타르산, 인산 등과 같은 금속 킬레이팅제.
치료 방법
본원에 기재된 화합물 및 조성물은 콩팥 또는 섬모병증의 질환 또는 병태와 같은 비정상적인 CDK5 과활성을 특징으로 하는 질환 또는 상태를 치료하기 위해 사용될 수 있다. CDK5 억제제의 투여는 CDK5의 상향조절 (즉, 건강한 조직과 비교하여 환부 조직에서 증가된 수준의 CDK5 단백질)과 관련된 치료 적응증에서 이점을 보여줄 것이다.
일부 구현예에서, 상기 질환 또는 병태는 콩팥의 질환 또는 병태이다. 일부 구현예에서, 콩팥 질환 또는 병태는 낭성 콩팥 질환, 신장 섬유증, 당뇨병성 신증, 실질 신장 질환, 또는 감소된 신장 기능이다. 일부 구현예에서, 콩팥 질환 또는 병태는 만성 콩팥 질환, 다낭성 콩팥 질환, 상염색체 우성 다낭성 콩팥 질환, 상염색체 열성 다낭성 콩팥 질환, 또는 신인후염-수질 낭성 콩팥 질환이다. 일부 구현예에서, 상기 질환은 다낭성 콩팥 질환이다.
일부 구현예에서, 상기 질환 또는 병태는 섬모병증이다. 일부 구현예에서, 섬모병증은 신경변성 질환, 간 질환, 염증, 암 또는 종양이다. 일부 구현예에서, 신경변성 질환은 알츠하이머 질환 또는 파킨슨 질환이다. 일부 구현예에서, 간 질환은 다낭성 간 질환이다.
콩팥 질환
콩팥 질환 및 상태는 신부전(말기 콩팥 질환 또는 ESRD로서 공지된), 콩팥 결석, 다낭성 콩팥 질환, 낭성 콩팥 질환, 신장 섬유증, 당뇨병성 신증, 실질 신장 질환, 신장 기능 저하, 만성 콩팥 질환, 다낭성 콩팥 질환, 상염색체 우성 다낭성 콩팥 질환, 상염색체 열성 다낭성 콩팥 질환 및 신인후염-수질 낭성 콩팥 질환을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 미국에서 콩팥 질환의 주요 원인은 당뇨병, 고혈압 및 콩팥의 여과 단위인 사구체를 손상시키는 질환인 사구체신염을 포함한다. (https://www.kidney.org/atoz/content/kidneydiscauses).
낭성 콩팥 질환
낭성 콩팥 질환은 광범위한 유전성, 발달성 및 후천성 병태를 지칭한다. 낭성 변화가 있는 신생물이 포함되면서 40개 이상의 분류 및 서브타입이 동정되었다. 질환 분류에 따라 질환의 발현은 태어날 때부터 또는 훨씬 나중에 성인이 될 때까지 나타날 수 있다. 낭성 질환은 하나 또는 둘다의 콩팥을 포함할 수 있고, 다른 기형이 있는 경우 발생할 수도 있고 발생하지 않을 수도 있다. 낭성 콩팥 질환의 발병률은 남성 집단에서 더 많이 발견되며 유병률은 나이가 들수록 증가한다. 신낭종은 50세 이상 환자의 50% 이상에서 보고되었다. 전형적으로 낭종은 연간 2.88 mm까지 자라고 관련된 통증 및/또는 출혈을 유발한다.
낭성 콩팥 질환 중 가장 흔한 것은 다낭성 콩팥 질환이고, 두 가지 만연된 서브타입이 있다: 상염색체 열성 및 상염색체 우성 다낭성 콩팥 질환. 상염색체 열성 다낭성 콩팥 질환 (ARPKD)은 주로 영유아에서 진단된다. 상염색체 우성 다낭성 콩팥 질환 (ADPKD)은 성인기에 가장 흔히 진단된다.
신장 섬유증
섬유성 장애는 흔하고 다양한 형태를 가지며 생명을 위협할 수 있다. 이것에 대한 더 좋은 예는 모든 만성 신장 질환에 동반되는 진행성 섬유증외엔 없다. 신장 섬유증은 손상 후 재생하는 콩팥의 제한된 능력의 직접적인 결과이다. 신장 흉터는 신장 기능의 점진적인 상실을 초래하여 궁극적으로 말기 신부전으로 이어지며 투석 또는 콩팥 이식이 필요하다[Hewitson: Fibrosis in the kidney: is a problem shared a problem halved? Fibrogenesis & Tissue Repair 2012 5(Suppl 1):S14].
실질 신장 질환
신장 실질은 신피질 (신장의 최외곽 부분)을 포함하는 콩팥의 기능성 부분이다. 신피질은 약 100만 개의 네프론(이들은 콩팥을 통과하는 혈액의 주요 여과기인 사구체와 소변의 적절한 양/함량을 생성하기 위해 체액을 변형시키는 세뇨관을 갖는다)을 포함한다. 신장 수질은 주로 소변이 배출되도록 하는 수거 시스템의 시작 부분인 세뇨관/관으로 이루어진다. 신장 실질 질환은 콩팥의 이러한 부분을 손상시키는 의학적 병태를 의미한다. 이들 질환은 선천성, 유전성 또는 후천성일 수 있다. 원인은 다양하며 다낭성 콩팥과 같은 유전학적 질환, 부모로부터 물려받은 유전 질환, 세균 및 바이러스 감염, 콩팥 결석, 고혈압, 당뇨병, 루푸스 신염 또는 자반병과 관련된 신염과 같은 자가면역 질환, 약물 등을 포함한다. 일반적인 징후는 손/발/눈의 종창(부종), 고혈압, 빈혈, 골 변화, 혈뇨, 복부 부종을 포함한다. 일반적인 증상은 식욕 부진, 가려움증, 메스꺼움 및 구토, 피로, 관절 통증, 잦은 야간 배뇨 및 현기증을 포함한다. [https://www.nicklauschildrens.org/conditions/renal-parenchyma-diseases]
만성 콩팥 질환
만성 신부전이라고도 하는 만성 콩팥 질환은 콩팥 기능의 점진적인 상실을 나타낸다. 만성 콩팥 질환이 진행 단계에 도달하면 위험한 수준의 체액, 전해질 및 노폐물이 체내에 축적될 수 있다. 만성 콩팥 질환은 콩팥 기능이 현저하게 손상될 때까지 명백하지 않을 수 있다. 만성 콩팥 질환에 대한 치료는 일반적으로 근본 원인을 제어하여 콩팥 손상의 진행을 늦추는 데 중점을 둔다. 만성 콩팥 질환은 인공 여과(투석) 또는 콩팥 이식 없이는 치명적인 말기 신부전으로 진행될 수 있다. 만성 콩팥 질환은 질환이나 병태가 콩팥 기능을 손상시켜 몇 달 또는 몇 년에 걸쳐 콩팥 손상을 유발할때 발생한다. 만성 콩팥 질환을 유발하는 질환 및 병태는 당뇨병, 고혈압, 사구체신염, 간질성 신염, 다낭성 콩팥 질환, 요로의 장기간 폐쇄(예를 들어, 전립선 비대, 콩팥 결석, 및 일부 암과 같은 병태로부터), 방광요관 역류 및 신우신염이라고도 하는 재발성 콩팥 감염을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.[https://www.mayoclinic.org/diseases-conditions/chronic-kidney-disease/symptoms-causes/syc-20354521]
신장염 - 수질 낭성 콩팥 질환
수질 낭성 콩팥 질환 (MCKD) 및 신장염(NPH)은 정상 또는 감소된 크기의 콩팥에 있는 양측 작은 피질수질 낭종 및 말기 신장 질환 (ESRD)으로 이어지는 세뇨관간질 경화증을 특징으로 하는 유사한 신장 형태를 갖는 2개의 유전 질환을 지칭한다. 이들 장애는 많은 임상 및 조직병리학적 특성을 공유하기 때문에 전통적으로 복합체 (NPH 복합체)의 일부로 간주되었다. 주요 차이점은 유전 방식, ESRD 발병 연령 및 신장 외 증상에 있다.[https://emedicine.medscape.com/article/982359-overview].
신장염은 어린이에게 영향을 미치는 콩팥의 유전 장애이다. 수질 낭성 콩팥 질환으로서 분류된다. 상기 장애는 상염색체 열성 방식으로 유전되며 드물기는 하지만 소아 신부전의 가장 흔한 유전적 원인이다. 이것은 섬모병증 형태이다. 발병률은 미국에서 100만 명당 0.9명, 캐나다에서 50,000명 중 1명으로 추정되었다. 영아, 청소년 및 청소년 형태의 신장염이 동정되었다. 특징화의 범위는 광범위하지만, 신장염에 의해 영향을 받는 사람들은 전형적으로 다뇨증(대형 용적의 소변 생성), 다갈증 (과도한 액체 섭취), 그리고 몇 개월에서 몇 년 후에 말기 콩팥 질환, 생존을 위해 투석이나 콩팥 이식을 필요로 하는 병태를 나타낸다. 신장염을 앓는 일부 개체는 또한 병판망막 변성, 간 문제, 안구운동 실행증 및 원뿔형 골단(살디노-마인저 증후군)을 포함할 수 있는 소위 "콩팥외 증상"을 갖고 있다. 신장염의 기전은 낭성 콩팥 질환에서 돌연변이된 모든 단백질이 원발성 섬모에서 발현된다는 것을 지적한다. NPHP 유전자 돌연변이는 신호 전달에서 결함을 유발하여 평면 세포 극성의 결함을 유발한다. 섬모 이론은 여러 기관이 NPHP(망막 변성, 소뇌 형성 부전, 간 섬유증 및 지적 장애)에 관여한다는 것을 지적한다.
수질 낭성 콩팥 질환 (MCKD)은 말기 신장 질환을 유도하는 세뇨관간질 경화증을 특징으로 하는 상염색체 우성 콩팥 장애이다. 낭종의 존재는 질환의 초기 또는 전형적인 진단 특징이 아니고 적어도 4가지 다른 유전자 돌연변이가 상기 병태를 유발할 수 있기 때문에 상염색체 우성 세뇨관간질 콩팥 질환 (ADTKD)이라는 명칭이 특정 개체에 대한 기본 유전자 변이체에 첨부되도록 제안되었다. 중요하게, 수질 집합관에서 낭종이 발견되면 이들은 다낭성 콩팥 질환과 달리 수축된 콩팥을 유도할 수 있다. 수질 낭성 콩팥 질환에는 뮤신-1 콩팥 질환 1(MKD1) 및 뮤신-2 콩팥 질환/유로모듈린 콩팥 질환 (MKD2)의 두 가지 알려진 형태가 있다. 질환의 세 번째 형태는 레닌을 암호화하는 유전자 (ADTKD-REN)의 돌연변이로 인해 발생하며 이전에는 가족성 청소년 고요산혈증 신증 2형으로 공지되어 있다. 수질 낭성 콩팥 질환의 징후/증상 측면에서, 상기 질환은 진단이 쉽지 않고 드물다. 상기 병태에서 콩팥 기능의 손실은 시간이 지남에 따라 천천히 발생하지만 영향을 받은 개체에서 다음 징후/증상이 관찰될 수 있다. 다갈증, 야뇨증, 쇠약, 식욕 부진, 가려움증, 골 통증, 창백, 메스꺼움. 상기 질환을 갖는 일부 개체는 통풍이 발병하는데, 치료하지 않으면 간헐적인것 대신 아니라 만성이 되어 관절에 대부분 영향을 미친다.
다낭성 콩팥 질환
다낭성 콩팥 질환 (PKD)은 신장 세뇨관이 구조적으로 비정상적이게 되어 콩팥 내에 다발성 낭종의 발생 및 성장을 유도하는 유전 장애이다. 이들 낭종은 자궁, 유아기, 아동기 또는 성인기에 발병하기 시작할 수 있다. 낭종은 그 안으로 펌핑된 유체로 채워진 작동하지 않는 세뇨관이며, 크기는 미세한 것에서 거대한 것까지 다양하여 인접한 정상 세뇨관을 부수고 결국에는 기능을 하지 못하게 만든다. PKD는 600,000명 이상의 사람들에게 영향을 미치는 미국에서 가장 흔한 유전 질환 중 하나이다. 이는 모든 말기 신장 질환의 거의 10%의 원인이다.
다낭성 콩팥 질환의 원인
PKD는 특정 비정상 단백질을 생성하는 비정상 유전자에 의해 유발되고; 상기 단백질은 세뇨관 발달에 부정적인 영향을 갖는다. PKD는 상염색체 우성 다낭성 콩팥 질환 (ADPKD)과 상염색체 열성 다낭성 콩팥 질환 (ARPKD)의 두 가지 유형에 대한 일반적인 용어이고, 상기 유형 각각은 그들 자신의 병리 및 유전 원인을 갖는다. 비정상적인 유전자는 신체의 모든 세포에 존재하고; 결과로서, 간, 정낭 및 췌장에 낭종이 존재할 수 있다. 상기 유전적 결함은 또한 대동맥 뿌리 동맥류 및 Willis 대뇌 동맥 서클의 동맥류를 유발할 수 있으며, 상기 동맥류가 파열되면 지주막하 출혈을 유발할 수 있다.
진단은 다음 중 하나, 일부 또는 모두에서 의심될 수 있다: 새로운 발병 옆구리 통증 또는 붉은 소변; 양성 가족력; 신체 검사에서 확대된 콩팥의 촉진; 복부 초음파 검사에서 우연히 발견된 소견; 또는 일상적인 실험실 작업(BUN, 혈청 크레아티닌 또는 eGFR)에서 비정상적인 콩팥 기능의 우연한 발견. 다낭성 콩팥 질환은 복부 CT 스캔 및 동일한 영역의 MRI 및 초음파를 통해 확인될 수 있다. 신체 검사/시험은 간 비대, 심장 잡음 및 혈압 상승을 나타낼 수 있다.
합병증은 레닌-안지오텐신-알도스테론계(RAAS)의 활성화로 인한 고혈압, 빈번한 낭종 감염, 요출혈, 신기능 저하를 포함한다. 고혈압은 안지오텐신 전환 효소 억제제 (ACEI) 또는 안지오텐신 수용체 차단제 (ARB)로 치료한다. 감염은 항생제로 치료한다. 신기능 저하는 신장 대체 치료요법 (RRT): 투석 및/또는 이식으로 치료된다. 의심되거나 확정된 진단 시점부터 관리는 공인된 신장 전문의에 의해 이루어진다. 어떠한 FDA 승인된 치료법이 없다. 그러나 경증에서 중등도의 식이 제한은 상염색체 우성 다낭성 콩팥 질환 (ADPKD)의 진행을 늦추는 것으로 나타났다. 소정의 경우에 질환이 충분히 진행되면 신장 전문의 또는 기타 의사와 환자는 말기 콩팥 질환 (신부전, 전형적으로 4 또는 5단계의 만성 콩팥 질환)을 치료하기 위해 어떤 형태의 신장 대체 치료요법을 사용할 것인지 결정해야 한다.
섬모병증
섬모병증은 세포 섬모 또는 섬모 고정 구조, 기본 신체 또는 섬모 기능의 유전적 장애이다. 1차 섬모는 발달 과정을 안내하는 데 중요하므로 배아가 발달하는 동안 비정상적인 섬모 기능은 특정 유전적 문제와 상관없이 발생할 수 있는 일련의 기형을 유도할 수 있다. 이러한 발달 장애의 임상적 특징의 유사성은 이들이 느슨하게 비정상적인 섬모 기능에 기인하여 섬모병증이라고 불리는 인식 가능한 증후군 클러스터를 형성함을 의미한다. 실제 원인에 상관 없이, 그것은 증후군이 섬모병증인지의 여부를 정의하는 일련의 특징적인 특성들의 클러스터링이다.
다낭성 간 질환
다낭성 간 질환 (PLD)은 일반적으로 정상 간 조직 전체에 흩어져 있는 다발성 낭종의 존재를 나타낸다. PLD는 일반적으로 상염색체 우성 다낭성 콩팥 질환과 관련하여 나타나며, 유병률은 400~1000명 중 1명이며 모든 말기 신장 질환 사례의 8~10%를 차지한다. 훨씬 더 드문 상염색체 우성 다낭성 간 질환은 임의의 신장 침범 없이 진행된다. PRKCSH 및 SEC63과의 연관성이 기재되었다. 다낭성 간 질환은 상염색체 우성 다낭성 콩팥 질환 (콩팥 낭종 포함)과 상염색체 우성 다낭성 간 질환 (간 낭종만 해당)의 두 가지 형태로 나타난다. PLD를 갖는 대부분의 환자들은 통상의 연구 후 발견되는 단순한 낭종과 함께 무증상이다. 간에서 낭종의 존재를 확인한 후, 빌리루빈, 알칼리성 포스파타제, 알라닌 아미노트랜스퍼라제 및 프로트롬빈 시간을 포함한 간 기능을 확인하기 위해 실험실 시험이 지시될 수 있다. PLD 환자는 종종 인접한 장기를 압박하여 메스꺼움, 호흡 문제 및 제한된 신체 능력을 유도하는 확대된 간을 갖는다. 질환의 진행은 낭종의 양과 크기에 비해 남아 있는 간실질의 양을 고려하여 분류한다. 많은 환자들은 무증상이어서 수술을 위한 후보가 아니다. 낭종으로 인한 통증이나 합병증이 있는 환자에 대한 치료 목표는 기능하는 간 실질을 보호하면서 낭종의 크기를 감소시키는 것이다. 낭종은 수술로 제거하거나 흡인 경화 치료요법을 사용하여 제거할 수 있다.
알츠하이머 질환
알츠하이머 질환 (AD)은 일반적으로 천천히 시작하여 시간경과에 따라 점차적으로 악화되는 만성 신경변성 질환이다. 이것은 치매 원인의 60 내지 70%의 원인이다. 가장 통상적인 조기 증상은 최근 사건을 기억하기가 어렵다. 질병이 진행됨에 따라 증상은 언어 문제, 방향 감각 상실 (쉽게 길을 잃는 것을 포함), 기분 변화, 동기 상실, 자기를 관리하지 않음 및 행동 문제를 포함할 수 있다. 사람의 병태가 저하됨에 따라, 이들은 가족과 사회에서 이탈하게된다. 점진적으로, 신체 기능은 상실되어 결국에 사망하게 된다. 진행 속도는 다양할 수 있지만, 진단 후 전형적인 수명은 3 내지 9년이다. 알츠하이머 질환의 원인은 불량하게 이해된다. 위험의 약 70%는 많은 유전자들이 일반적으로 관여하는 사람의 부모로부터 유전되는 것으로 사료된다. 다른 위험 인자는 두부 손상, 우울증 및 고혈압의 병력을 포함한다. 질환 진행은 뇌에서 플라크 및 신경섬유 덩어리와 연관된다. 가능한 진단은 질병의 병력과 다른 가능한 원인을 배제하기 위한 의료 이미지화 및 혈액 검사를 통한 인지 시험을 기반으로 한다. 초기 증상은 흔히 정상적인 노화 때문에 오인된다. 뇌 조직의 검사는 명확한 진단을 필요로 한다. 정신적, 육체적 운동과 비만을 피하면 AD의 위험을 감소시킬 수 있고; 그러나 이러한 권장 사항을 뒷받침하는 증거는 약하다. 위험을 감소시키는 것으로 나타난 약물 또는 보충물은 없다. 일부는 일시적으로 증상을 개선시킬 수 있지만 어떠한 치료도 이의 진행을 중단시키거나 역전시키지 않는다. 2015년에는 전 세계적으로 약 2,980만 명이 AD를 앓았다. 이것은 대부분 흔히 65세 이상의 사람들에서 개시하지만 4 내지 5%의 사례는 조기 개시 알츠하이머이다. 이것은 65세 이상의 사람들의 약 6%에 영향을 미친다.
파킨슨 질환
파킨슨 질환 (PD)은 주로 운동 시스템에 영향을 미치는 중추 신경계의 장기 퇴행성 장애이다. 질환이 악화되면 비운동성 증상이 더 흔하게 되었다. 상기 증상은 일반적으로 서서히 나타난다. 질환 초기에 가장 명백한 증상은 떨림, 경직, 느린 움직임, 걷기 어려움이다. 사고 및 거동 문제가 또한 일어날 수 있다. 치매는 질환의 진행 단계에서 흔하게 된다. 우울증과 불안도 흔하며 PD를 갖는 환자의 1/3 이상에서 발생한다. 다른 증상은 감각, 수면 및 정서적 문제를 포함한다. 주요 운동 증상을 총칭하여 "파킨슨병" 또는 "파킨슨병 증후군"이라고 한다. 파킨슨 질환의 원인은 유전적 요인과 환경적 요인 둘다가 관여하는 것으로 사료된다. 영향을 받은 가족 구성원이 있는 사람들은 스스로 질환에 걸릴 가능성이 더 크다. 또한 특정 살충제에 노출된 사람들과 이전에 머리 부상을 당한 적이 있는 사람들에게서 위험이 증가하는 반면, 담배 흡연자와 커피나 차를 마시는 사람들에서는 위험이 감소한다. 질환의 운동 증상은 중뇌 영역인 흑질의 세포가 사멸하여 비롯된다. 이것은 상기 뇌 영역에서 충분한 도파민을 유도하지 않는다. 상기 세포 사멸의 원인은 잘 알려져 있지 않지만 뉴런의 루이체에 단백질이 축적되는 것과 관련이 있다. 전형적인 경우의 진단은 주로 증상을 기반으로 하며, 다른 질환을 배제하기 위해 신경 영상과 같은 시험을 사용한다. 2015년에 PD는 620만 명에게 영향을 미치고 전 세계적으로 약 117,400명의 사망을 초래하였다. 파킨슨 질환은 전형적으로 60세 이상의 사람들에게 발생하며 그 중 약 1%가 영향을 받는다. 진단 후 평균 기대 수명은 7 내지 15년이다.
단백뇨
단백뇨는 단백질이 소변에 존재하는 병리학적 병태이다. 알무민뇨는 일종의 단백뇨이다. 미세알부민뇨는 콩팥이 소량의 알부민을 소변으로 누출시킬 때 발생한다. 적당히 기능하는 신체에서 알부민은 콩팥에 의해 혈류에 유지되기 때문에 일반적으로 소변에 존재하지 않는다. 미세알부민뇨는 24시간 소변 수집 (20~200 μg/min) 또는 보다 일반적으로 적어도 2번의 높은 농도 (30~300 mg/L)에서 진단된다. 미세알부민뇨는 당뇨병성 신증의 전조가 될 수 있다. 이들 값 초과의 알부민 수준은 거대알부민뇨로 불리운다. 특정 병태, 예를 들어, 당뇨병성 신증을 가진 대상체는 미세알부민뇨에서 거대알부민뇨로 진행될 수 있으며 콩팥 질환이 진행 단계에 도달함에 따라 신증 범위 (>3.5 g/24시간)에 도달할 수 있다.
단백뇨의 원인
단백뇨는 국소 분절 사구체경화증, IgA 신증, 당뇨병성 신증, 루푸스 신염, 막증식성 사구체신염, 진행성(초승달) 사구체신염 및 막성 사구체신염을 포함하는 다수의 병태와 관련될 수 있다.
A. 국소 분절 사구체경화증(FSGS)
국소 분절 사구체경화증(FSGS)은 콩팥의 여과 시스템(사구체)을 공격하여 심각한 흉터를 유발하는 질환이다. FSGS는 혈액 내 단백질이 소변으로 누출될 때 발생하는 신증후군( 단백뇨)으로 알려진 질병의 많은 원인 중 하나이다. 어떠한 근본 원인이 발견되지 않는 경우 1차 FSGS는 일반적으로 신증후군으로서 나타난다. 2차 FSGS는 근본 원인이 동정된 경우 일반적으로 콩팥 기능부전 및 단백뇨로 나타난다. FSGS는 유전적일 수 있고; 현재 유전적 형태의 FSGS에 대한 몇 가지 알려진 유전적 원인이 있다.
매우 소수의 치료는 FSGS를 갖는 환자에 대해 가용하다. 많은 환자들은 스테로이드 용법으로 치료를 받으며, 이의 대부분은 매우 심한 부작용을 갖는다. 일부 환자는 면역억제 약물, 및 소변에서 단백질의 수준을 저하시키는 것으로 나타난 혈압 약물에 양성으로 반응하는 것으로 나타났다. 현재까지 통성적으로 허용되는 효과적인 치료법이나 치유법이 없으며 FSGS를 치료하기 위해 FDA 승인을 받은 약물은 없다. 따라서, 단백뇨를 감소시키거나 억제하는 보다 효과적인 방법이 바람직할 수 있다.
B. IgA 신증
IgA 신증(IgA 신염, IgAN, 버거(Berger) 질환 및 후두염동반성 (synpharyngitic) 사구체신염으로서도 알려진)은 사구체신염(콩팥 사구체의 염증)의 한 형태이다. IgA 신증은 전 세계적으로 가장 흔한 사구체신염이다. 1차 IgA 신증은 사구체에 IgA 항체의 침착을 특징으로 한다. 사구체 IgA 침착과 연관된 다른 질환이 있고, 가장 흔한 것은 헤노흐-쇤라인 자반증 (Henoch-Schφnlein purpura)(HSP)이며, 이는 많은 사람들에 의해 IgA 신증의 전신 형태인 것으로 간주된다. 헤노흐-쇤라인 자반증은 특징적인 자반증 피부 발진, 관절염 및 복통을 나타내며 젊은 성인 (16-35세)에서 더 흔하게 발생한다. HSP는 IgA 신증보다 양성 예후와 관련이 있다. IgA 신증의 경우 20년 동안 25-30%의 사례에서 만성 신부전증으로 서서히 진행된다.
C. 당뇨병성 신증
키멜스티엘-윌슨 (Kimmelstiel-Wilson) 증후군 및 모세혈관 상호 사구체신염으로도 알려진 당뇨병성 신증은 콩팥 사구체에 있는 모세혈관의 혈관병증에 의해 유발되는 진행성 콩팥 질환이다. 이것은 신증후군과 미만성 사구체경화증을 특징으로 한다. 이는 오랜 진성 당뇨병으로 인한 것이며 투석을 위한 주요 원인이다. 당뇨병성 신증 과정에서 가장 먼저 검출할 수 있는 변화는 사구체가 두꺼워지는 것이다. 상기 단계에서 콩팥은 소변에서 정상보다 더 많은 혈청 알부민을 허용하기 시작할 수 있다. 당뇨병성 신증이 진행됨에 따라 결절성 사구체 경화증에 의해 다수의 사구체가 파괴되고 소변으로 배출되는 알부민 양이 증가한다.
D. 루푸스 신염
루푸스 신염은 전신성 홍반성 루푸스의 합병증인 콩팥 장애이다. 루푸스 신염은 항체와 보체가 콩팥에 축적되어 염증을 일으킬 때 발생한다. 이것은 흔히 단백뇨를 유발하고 신부전증으로 신속하게 진행할 수 있다. 질소 폐기물은 혈류에 축적된다. 전신성 홍반성 루푸스는 간질성 신염을 포함하여 콩팥의 내부 구조의 다양한 장애를 유발한다. 루푸스 신염은 10,000명 중 약 3명에게 영향을 미친다.
E. 막증식성 사구체신염 I/II/III
막증식성 사구체신염은 콩팥 사구체간질과 기저막이 두꺼워져 보체를 활성화시키고 사구체를 손상시키는 침착물에 의해 유발되는 사구체신염의 한 유형이다. 3개 유형의 막증식성 사구체신염이 있다. I형은 콩팥에 면역 복합체 침착에 의해 유발되며 고전적 보체 경로와 연관되어 있는 것으로 사료된다. II형은 I형과 유사하지만, 대체 보체 경로와 연관되어 있는 것으로 사료된다. III형은 매우 희귀하고 상피하 침착과 I형 질환의 전형적인 병리학적 소견이 혼합된 것을 특징으로 한다.
면역형광 현미경을 기반으로 하는 MPGN에는 면역 복합체 매개 및 보체 매개의 두 가지 주요 유형이 있다. 저보체혈증은 모든 유형의 MPGN에서 일반적이다. 면역 복합체 매개 MPGN에서 보체 활성화는 고전적인 경로를 통해 발생하며 전형적으로 정상 또는 약간 감소된 혈청 C3 농도 및 낮은 혈청 C4 농도로 나타난다. 보체 매개 MPGN에서 대체 경로의 활성화로 인해 일반적으로 낮은 혈청 C3 및 정상 C4 수준이 있다. 그러나 보체 매개 MPGN은 정상 혈청 C3 농도에 의해 배제되지 않으며, 고밀도 침착 질환 (DDD) 또는 C3 사구체신염 (C3GN)이 있는 성인에서 정상 C3 농도를 찾는 것은 드문 일이 아니다.
C3 사구체신염 (C3GN)은 광학현미경 (LM)상에서 사구체신염, 밝은 C3 염색 및 면역형광현미경(IF)에서 C1q, C4 및 면역글로불린 (Ig)의 부재, 및 전자 현미경(EM)상에 사구체간질 및/또는 내피하 전자 밀도 침착을 보여준다. 때때로 막내 및 상피하 침착물도 흔히 존재한다. 'C3 사구체병증'이라는 용어는 흔히 C3GN 및 DDD (고밀도 침착 질환)를 포함하기 위해 사용되고, 이 둘 다는 보체의 대체 경로 (AP)의 조절 장애로부터 비롯된다. C3GN과 DDD는 LM 및 IF 연구에서 서로 구별하기 어려울 수 있다. 그러나 EM은 C3GN에서 사구체간질 및/또는 내피하, 막내 및 상피하 침착물을 보여주는 반면 고밀도 오스뮴 친화성 침착물은 사구체 기저막 (GBM)을 따라 및 DDD의 사구체간질에 존재한다. C3GN 및 DDD 둘다는 IF에서 면역글로불린 염색이 없다는 점에서 면역복합체 매개 사구체신염과 구별된다 (Sethi 등, Kidney Int. (2012) 82(4):465-473).
F. 진행성(초승달) 사구체신염
진행성 (초승달 모양) 사구체신염 (PG)은 치료하지 않고 방치할 경우 급성 신부전증으로 신속하게 진행되어 수개월 내에 사망하는 콩팥 증후군이다. 사례의 50%에서 PG는 굿파스쳐 (Goodpasture) 증후군, 전신성 홍반성 루푸스 또는 베게너 육아종증과 같은 기저 질환과 관련이 있고; 나머지 경우는 특발성이다. 근본 원인과 상관 없이 PG는 콩팥의 사구체에 심각한 손상을 포함하고, 많은 사구체는 특징적인 초승달 모양의 흉터를 함유한다. PG 환자는 혈뇨, 단백뇨, 때때로 고혈압 및 부종이 있다. 단백뇨의 정도가 때때로 신증후군과 연관된 범위인 3 g/24시간을 초과할 수 있다 하더라도 임상 양상은 신염 증후군과 일치한다. 치료되지 않은 질환은 빈약한 콩팥 기능과 연관된 감소된 소변량(핍뇨)으로 진행할 수 있다.
G. 막성 사구체신염
막성 사구체신염 (MGN)은 천천히 진행되는 콩팥 질환으로 대부분 30세에서 50세 사이의 환자, 일반적으로 백인에 영향을 미친다. 신증후군으로 발달할 수 있다. MGN은 면역 복합체를 순환시킴에 의해 유발된다. 현재 연구에 따르면 면역 복합체의 대부분이 동일계 항원에 대한 항체의 사구체 기저막으로의 결합을 통해 형성된다. 상기 항원은 기저막에 내인성일 수 있거나 전신 순환계로부터 침착될 수 있다.
H. 알포트 증후군
알포트 증후군은 사구체신염, 말기 콩팥 질환 및 청력 상실을 특징으로 하는 5,000-10,000명의 아동 중 약 1명에게 영향을 미치는 유전 질환이다. 알포트 증후군은 또한 눈에 영향을 줄 수 있지만, 이후의 삶에서 수정체에 변화가 발생하는 경우를 제외하고는 변화가 일반적으로 시력에 영향을 미치지 않는다. 혈뇨가 보편적이다. 단백뇨는 콩팥 질환이 진행됨에 따라 나타나는 특성이다.
I. 고혈압 콩팥 질환
고혈압 콩팥 질환 (고혈압 신장경화증(HN 또는 HNS) 또는 고혈압 신증 (HN))은 만성 고혈압으로 인한 콩팥에 대한 손상을 언급하는 의학적 병태이다. HN은 양성과 악성의 두 가지 유형으로 나눌 수 있다. 양성 신장경화증은 60세 이상의 개체에서 흔하지만 악성 신장경화증은 흔하지 않으며 이완기 혈압이 130 mmHg를 넘는 고혈압 환자의 1-5%에 영향을 미친다. 식욕 부진, 메스꺼움, 구토, 가려움증, 졸음 또는 혼란, 체중 감소, 입안의 불쾌한 맛을 포함한 만성 콩팥 질환의 징후 및 증상이 나타날 수 있다. 만성 고혈압은 신장 조직에 손상을 유발하고; 이는 작은 혈관, 사구체, 콩팥 세뇨관 및 간질 조직을 포함한다. 조직이 경화되고 두꺼워지는 것은 신장경화증으로서 공지되어 있다. 혈관의 협소화는 조직으로 가는 혈액이 적어져 조직에 도달하는 산소가 줄어들어 조직 사멸(허혈)을 유도함을 의미한다.
J. 신증후군
신증후군은 콩팥 손상으로 인한 증상의 집합체이다. 이는 소변에 단백질, 낮은 혈중 알부민 수준, 높은 혈중 지질 및 유의적인 종창을 포함한다. 다른 증상은 체중 증가, 피로감 및 거품이 많은 소변을 포함할 수 있다. 합병증은 혈전, 감염 및 고혈압을 포함할 수 있다. 원인은 국소 분절 사구체경화증, 막성 신증 및 최소 변화 질환과 같은 여러 콩팥 질환을 포함한다. 이것은 또한 당뇨병 또는 루푸스로서 발생할 수 있다. 기본 기전은 전형적으로 콩팥의 사구체에 대한 손상을 포함한다. 진단은 전형적으로 소변 시험과 때로는 콩팥 생검을 기반으로 한다. 이것은 소변에 적혈구가 없다는 점에서 신염 증후군과 상이하다. 신증후군은 다량의 단백뇨 (1일 체표면적 1.73 m2당 > 3.5 g 또는 아동의 경우 시간당 체표면적 1제곱미터당 > 40 mg), 저알부민혈증 (<2.5 g/dl), 고지혈증, 및 얼굴에서 시작되는 부종을 특징으로 한다. 지질뇨(소변의 지질)도 발생할 수 있지만 신증후군 진단에 필수적인 것은 아니다. 저나트륨혈증은 나트륨 배출량이 적을 때도 발생한다. 유전적 형태의 신증후군은 전형적으로 스테로이드 및 기타 면역억제제 치료에 내성이다. 치료요법의 목표는 요단백 손실과 종창을 조절하고, 아동이 성장할 수 있도록 좋은 영양물을 공급하고, 합병증을 예방하는 것이다. 장애를 조절하기 위해 조기에 공격적인 치료가 사용된다.
K. 최소 변화 질환
최소 변화 질환 (MCD, 무엇 보다 최소 변화 사구체병증 및 무병이라고도 함)은 콩팥에 영향을 미치는 질환으로 신증후군을 유발한다. 최소 변화 질환의 임상 징후는 단백뇨 (단백질, 주로 알부민이 소변으로 비정상적으로 배출됨), 부종(수분 유지의 결과로서 연조직의 종창), 체중 증가 및 저알부민혈증 (낮은 혈청 알부민)이다. 이러한 징후는 총체적으로 신증후군로서 지칭된다. 최소 변화 질환의 첫 번째 임상 징후는 일반적으로 체중 증가와 연관된 부종이다. 종창은 경미할 수 있지만 환자는 하반신의 부종, 안와주위 부종, 음낭/음순 부위의 종창, 더 심한 경우 아나사르카 (anasarca)가 나타날 수 있다. 보다 늙은 성인에서, 환자는 또한 급성 콩팥 손상 (영향을 받은 성인의 20-25%) 및 고혈압이 존재할 수 있다. 질환 과정으로 인해 최소 변화 질환을 가진 환자도 혈전 및 감염의 위험이 있다.
L. 막성 신증
막성 신증은 사구체 기저막 (GBM)이 두꺼워지는 GBM상에 면역 복합체가 침착되는 것을 지칭한다. 원인은 일반적으로 알려져 있지 않지만(특발성), 2차 원인은 약물, 감염, 자가면역 장애 및 암을 포함한다. 증상은 서서히 시작되는 부종과 양성 요도 침강물을 동반한 심한 단백뇨, 정상적인 신기능, 정상 또는 상승된 혈압을 포함한다. 막성 신증은 신장 생검으로 진단된다. 자연적인 관해가 일반적이다. 진행 위험이 높은 환자의 치료는 일반적으로 코르티코스테로이드와 사이클로포스파미드 또는 클로람부실을 사용한다.
M. 감염후 사구체신염
급성 증식성 사구체신염은 사구체의 장애 (사구체신염) 또는 콩팥 내 작은 혈관 장애이다. 이는 세균 감염의 흔한 합병증으로, 전형적으로 스트렙토코커스 세균 유형 12, 4 및 1 (농가진)에 의한 피부 감염이고 또한 감염 후 또는 스트렙토코커스 감염 후 사구체신염으로도 알려진 스트렙토코커스 인두염 후에 발생한다. 이것은 향후 알부민뇨증에 대한 위험 인자일 수 있다. 성인의 경우 콩팥 문제가 발생할 때 감염의 징후와 증상이 여전히 존재할 수 있으며 감염 관련 사구체신염 또는 세균 감염 관련 사구체신염이라는 용어도 사용된다. 급성 사구체신염으로 인해 1990년에 전 세계적으로 24,000명이 사망했지만 2013년에는 19,000명이 사망하였다. 급성 증식성 사구체신염 (스트렙토코커스 감염 후 사구체신염)은 일반적으로 감염 3주 후 항체와 보체 단백질을 생성하는 데 필요한 시간을 고려할 때 일반적으로 인두나 피부에 스트렙토코커스 세균 감염으로 인해 유발된다. 감염은 콩팥의 혈관에 염증이 발병하도록 유발하여 신장 기관이 소변을 걸러내는 능력을 방해한다. [요구되는 인용]]급성 증식성 사구체신염은 아동에서 가장 흔하게 일어난다.
N. 얇은 기저막 질환
얇은 기저막 질환 (TBMD, 양성 가족성 혈뇨 및 얇은 기저막 신증 또는 TBMN이라고도 공지된)은 IgA 신증과 함께 다른 증상이 없는 혈뇨의 가장 흔한 원인이다. 상기 질환에서 유일한 이상 소견은 콩팥의 사구체 기저막이 얇아지는 것이다. 그 중요성은 환자가 평생 동안 정상적인 콩팥 기능을 유지하면서 양성 예후를 보인다는 사실에 있다. 얇은 기저막 질환이 있는 대부분의 환자는 우연히 요검사에서 현미경적 혈뇨가 발견된다. 혈압, 콩팥 기능 및 요단백 배출은 일반적으로 정상이다. 경미한 단백뇨 (1일 1.5 g 미만)와 고혈압이 소수의 환자에서 나타난다. 명백한 혈뇨와 허리 통증은 신장 결석이나 허리 통증-혈뇨 증후군과 같은 다른 원인에 대한 조사를 촉진시켜야 한다. 또한 전신증상이 없기 때문에 청각장애나 시각장애가 있는 경우에는 알포트 증후군과 같은 유전성 신염에 대한 조사를 촉진시켜야 한다. TBMD가 있는 일부 개체는 알포트 증후군을 유발하는 유전자에 대한 보균자로 사료된다.
O. 사구체간질 증식성 사구체신염
사구체간질 증식성 사구체신염은 주로 사구체간질과 주로 연관된 사구체신염의 한 형태이다. 인터류킨-10이 동물 모델에서 이를 억제할 수 있다는 일부 증거가 있다.[2] 이것은 세계보건기구(WHO)에 의해 II형 루푸스 신염으로 분류된다. 신장 사구체의 사구체간질 세포는 순환하는 면역글로불린을 흡수하고 분해하기 위해 세포내이입을 사용한다. 상기 정상 공정은 사구체간질 세포 증식 및 매트릭스 침착을 자극한다. 따라서 순환 면역글로불린이 증가하는 기간(즉, 루푸스 및 IgA 신증) 동안 사구체에 있는 사구체간질 세포와 매트릭스의 수가 증가할 것으로 예상된다. 이것은 신염 증후군을 특징으로 한다.
P. 아밀로이드증(1차)
아밀로이드증은 아밀로이드 원섬유로 알려진 비정상적인 단백질이 조직에 축적되는 질환 그룹이다.[4] 증상은 유형에 따라 다르며 종종 가변적이다.[2] 이들은 설사, 체중 감소, 피로감, 혀의 비대, 출혈, 무감각, 서 있을 때 어지러움, 다리의 종창 또는 비장의 비대를 포함할 수 있다.[2] 아밀로이드증에는 약 30가지 상이한 유형이 있고 각각 특정 단백질의 잘못된 폴딩으로 인한 것이다.[5] 일부는 유전적인 반면 다른 일부는 후천적이다.[3] 이들은 국소적 형태와 전신적 형태로 분류된다.[2] 가장 흔한 4가지 유형의 전신 질환은 경쇄(AL), 염증(AA), 투석(Aβ2M), 유전 및 노년(ATTR)이다. 1차 아밀로이드증은 연관된 임상 병태가 동정되지 않은 아밀로이드증을 지칭한다.
Q. c1q 신증
C1q 신증은 면역형광현미경에서 특징적인 사구체간질 C1q 침착이 관찰되는 희귀 사구체 질환이다. 조직학적으로 정의되어 있고 제대로 이해되지 않고 있다. 광학 현미경의 특성은 이질적이며 최소 변화 질환 (MCD), 국소 분절 사구체 경화증(FSGS) 및 증식성 사구체신염을 포함한다. 임상 양상도 다양하며 아동과 성인 둘다에서 무증상 혈뇨 또는 단백뇨에서 명백한 신염 또는 신 증후군에 이르기까지 다양하다. 진단 당시의 고혈압과 신부전증은 흔한 소견이다. 최적의 치료는 명확하지 않으며 일반적으로 기저 광현미경 병변에 의해 안내된다. 코르티코스테로이드는 스테로이드 내성 사례를 위해 준비된 면역억제제와 함께 치료의 주류이다. 신 증후군과 FSGS의 존재는 MCD 환자에서 유리한 결과와 대조적으로 불리한 결과를 예측하는 것으로 보인다 (Devasahayam, 등, "C1q Nephropathy: The Unique Underrecognized Pathological Entity," Analytical Cellular Pathology, vol. 2015, Article ID 490413, 5 pages, 2015. https://doi.org/10.1155/2015/490413.)
R. 항-GBM 질환
굿파스쳐의 질환으로도 알려진 항-사구체 기저막(GBM) 질환은 콩팥과 폐에서 작은 혈관에 염증을 유발하는 희귀 병태이다. 항사구체 기저막(GBM) 항체는 주로 콩팥 및 폐를 공격하지만, 권태감, 체중 감소, 피로, 발열, 오한과 같은 전신 증상도 흔하며 관절통 및 통증에서와 같다. 상기 병태를 갖는 사람의 60~80%는 폐와 콩팥 둘다의 관여를 경험하고, 20~40%는 콩팥만 관여하고 10% 미만은 폐만 관여한다. 폐 증상은 일반적으로 신장 증상보다 먼저 나타나며 일반적으로 객혈, 흉통(전체 사례의 50% 미만), 기침 및 숨가쁨을 포함한다. 콩팥 증상은 일반적으로 소변 내 혈액, 소변 내 단백질, 사지 또는 얼굴의 설명할 수 없는 종창, 혈액 내 다량의 요소 및 고혈압을 포함한다. GPS는 혈액의 형질 세포에서 항-GBM 항체를 비정상적으로 생성한다. 항-GBM 항체는 폐포와 사구체 기저막을 공격한다. 이들 항체는 반응성 에피토프를 기저막에 결합시키고 보체 캐스케이드를 활성화하여 태그된 세포의 사멸을 유도한다. T 세포가 또한 연루되어 있다. 이것은 일반적으로 II형 과민성 반응으로 고려된다.
소변 단백질 수준의 측정
소변 내 단백질 수준은 당업계에 공지된 방법을 사용하여 측정될 수 있다. 최근까지, 정확한 단백질 측정은 24시간 소변 수거를 필요로 하였다. 24시간 수거에서, 환자는 컨테이너에 소변을 보며 화장실에 갈때 그 사이에 냉장보관한다. 환자는 아침에 처음으로 화장실을 다녀온 후 소변을 모으기 시작하도록 지시된다. 나머지 하루 동안의 모든 소변은 용기에 수집되어야 한다. 다음날 아침, 환자는 기상 후 첫 배뇨를 추가하고 수거가 완료된다.
보다 최근에, 연구자는 단일 소변 샘플이 요구되는 정보를 제공할 수 있음을 밝혔다. 보다 새로운 기술에서 소변 샘플에서 알부민 양은 정상적인 근육 분해의 부산물인 크레아티닌 양과 비교한다. 측정은 소변 알부민 대 크레아티닌 비율 (UACR)로 불리운다. 각각의 크레아티닌 (30 mg/g)에 대해 30 mg 이상의 알부민을 함유하는 소변 샘플은 문제가 있을 수 있다는 경고이다. 연구 시험이 30 mg/g을 초과하면 1~2주 후에 다른 UACR 시험이 수행되어야 한다. 두 번째 시험이 또한 높은 수준의 단백질을 보여주면, 환자는 콩팥 기능 저하의 징후인 지속적인 단백뇨를 갖는 것이고, 콩팥 기능을 평가하기 위한 추가 시험을 가져야 한다.
혈액 내 크레아티닌 양을 측정하는 시험은 또한 대상체의 콩팥이 노폐물을 효율적으로 제거하는지의 여부를 보여준다. 혈액 내 너무 많은 크레아티닌은 사람이 콩팥 손상을 가졌다는 징후이다. 의사는 크레아티닌 측정을 사용하여 콩팥이 혈액을 얼마나 효율적으로 여과하는지를 추정할 수 있다. 상기 계산은 추정 사구체 여과율 또는 eGFR로 불리운다. 만성 콩팥 질환은 eGFR이 분 당 60 밀리리터 (mL/min) 미만인 경우 존재한다.
CDK5
사이클린 의존성 키나제 (CDK)는 세포 주기를 조절하는 역할로 처음 발견된 단백질 키나제 계열이다. 이들은 또한 전사, mRNA 프로세싱 및 신경 세포의 분화를 조절하는데 관여한다. 이들은 모든 공지된 진핵세포에 존재하고 세포 주기에서 이들의 조절 기능은 진화적으로 보존되었다.
최근에 CDK5는 감각 경로에서 필수 키나제로서 부상하였다. CDK5는 뇌의 적절한 발달에 필요하며 활성화되기 위해서는 CDK5는 CDK5R1 또는 CDK5R2와 연합해야 한다. Cdk5는 뉴런 성숙화 및 이동 과정에 관여하여 릴린 신호 전달 쇄의 주요 세포 내 어댑터를 인산화한다. 상기 효소의 탈조절은 알츠하이머병을 비롯한 여러 신경변성 질환과 관련이 있다. 이것은 또한 명백하게 액틴 조절 단백질 칼데스몬의 활성을 감소시킴으로써 침습성 암에도 관여한다. 최근 데이터는 또한 단백뇨 예방을 포함하여 신장 생리학에서 중요한 역할을 하는 고도로 특수화되고 말단 분화된 사구체 세포인 족세포에서 분화, 증식 및 형태의 조절자로서의 CDK5의 역할을 시사한다 (Griffin 등, Am J Pathol. (2004) 165(4):1175-1185). CDK5는 또한 다른 비-뉴런 조직에서 역할을 하는 것으로 입증되었다 (Dhavan R and Tsai LH, Nat Rev Mol Cell Biol. (2001) 2:749-759).
따라서, 특정 구현예에서, 본 발명은 비정상적 CDK5 과활성을 특징으로 하는 질환 또는 병태를 치료하거나 이를 발병할 위험을 감소시키기 위한 방법을 제공하고, 상기 방법은 치료학적 유효량의 본 발명의 화합물 (예를 들어, 화학식 I을 갖는 화합물) 또는 상기 화합물을 포함하는 약제학적 조성물을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.
일부 구현예에서, 질환 또는 병태는 콩팥의 질환 또는 병태이다. 일부 구현예에서, 상기 질환은 다낭성 콩팥 질환이다.
치료될 대상체
본 발명의 하나의 양상에서, 대상체는 이들이 다낭성 콩팥 질환과 같은 콩팥의 질환 또는 병태와 같은 비정상적 CDK5 과활성을 갖거나 이들을 발병할 위험에 처한 것을 기반으로 하여 선택된다.
콩팥의 질환 또는 병태를 갖거나 이를 발병할 위험에 처한 대상체는 당뇨병, 고혈압 또는 특정 가족 배경을 갖는 자들을 포함한다. 미국에서 당뇨병은 말기 신질환 (ESRD)의 주요 원인이다. 1형 및 2형 당뇨병 둘다에서, 소변 중 알부민은 콩팥 기능을 악화시키는 제1 징후들 중 하나이다. 콩팥 기능이 저하되면 소변 중 알부민의 양은 증가한다. 콩팥 질환을 발병할 또 다른 위험 인자는 고혈압이다. 고혈압을 갖는 사람에서 단백뇨는 콩팥 기능 저하의 지표이다. 고혈압이 제어되지 않는 경우, 사람은 완전한 콩팥 기능부전으로 진행할 수 있다. 아프리카계 미국인은 백인보다 혈압이 약간 상승할 때에도 고혈압을 갖고 이로 인해 콩팥 문제가 발생할 가능성이 더 크다. 단백뇨의 위험이 있는 다른 그룹은 아메리칸 인디언, 히스패닉/라틴계, 태평양 제도계 미국인, 노인 및 과체중 대상체이다.
본 발명의 하나의 양상에서, 대상체는 콩팥의 질환 또는 상태를 갖거나 발병할 위험이 있다는 것을 기초로 선택된다. 콩팥의 질환 또는 병태를 갖거나 이들을 발병할 위험이 있는 대상체는 하나 이상의 병태의 증상을 갖는 대상체이다. 단백뇨의 증상은 당업자에게 공지되어 있고, 이에 제한되는 것 없이 소변에 다량의 단백질을 포함하여 변기에서 거품이 생기는 것처럼 보일 수 있다. 다량의 단백질 손실은 부종을 유발할 수 있으며, 손, 발, 복부 또는 얼굴에 부종이 발생할 수 있다. 이들은 대형 단백질 손실의 징후이며 콩팥 질환이 진행되었음을 나타낸다. 연구 시험은 광범위한 콩팥 손상이 발생하기 전에 대상체의 소변에 단백질이 있는지의 여부를 발견하기 위한 유일한 방법이다.
방법은 포유류, 예를 들어, 사람 및 연구 동물, 예를 들어, 마우스, 래트, 토끼 또는 원숭이, 또는 가축 및 농장 동물, 예를 들어, 고양이, 개, 염소, 양, 돼지, 소 또는 말과 같은 기타 동물을 포함하는 다양한 대상체에 대해 효과적이다. 일부 구현예에서, 대상체는 포유류이다. 일부 구현예에서, 대상체는 사람이다.
실시예
본 발명은 하기의 실시예에서 추가로 기재되고 이는 청구범위에 기재된 발명의 범위를 제한하지 않는다.
역상 HPLC 정제 ("Prep-HPLC")는 변형제로서 포름산 또는 중탄산암모늄을 사용한 물 및 아세토니트릴의 혼합물과 함께 농도 구배 용출을 사용한 Waters C18 컬럼 상에서 수행하였다.
실시예 1. 중간체의 제조
하기의 화학적 중간체를 합성하고 본 발명의 다양한 화합물의 제조에 유용하다. 본 실시예 뿐만 아니라 뒤따르는 화합물 합성 실시예에 기재된 특정 중간체도 본 발명의 범위 내에 있는 화합물이라는 것이 당업자에게 용이하게 자명할 것이다.
A. 7-클로로-1,6-나프티리딘-2-올
Figure pct00015
에틸 (2E)-3-(4-아미노-6-클로로피리딘-3-일)프로프-2-에노에이트. DMF (1.5 L) 중의 2-클로로-5-요오도피리딘-4-아민 (350 g, 1375 mmol, 1 당량) 및 트리스 (2-메톡시페닐)포스핀 (8.37 g, 27.5 mmol, 0.02 당량)의 교반 혼합물에 TEA (167 g, 1651 mmol, 1.2 당량), Pd(OAc)2 (9.26 g, 41.3 mmol, 0.03 당량) 및 에틸 프로프-2-에노에이트 (330.5 g, 3301 mmol, 2.4 당량)를 질소 대기하에 실온에서 적가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 반응은 실온에서 물 (9000 mL)을 첨가하여 켄칭하였다. 침전된 고체는 여과에 의해 수거하였고, EtOAc (2 x 1000 mL)로 세척하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켜 에틸 (2E)-3-(4-아미노-6-클로로피리딘-3-일)프로프-2-에노에이트 (286 g, 92%)를 갈색 고체로서 수득하였다.
7-클로로-1,6-나프티리딘-2-올. DIEA (2400 mL) 중의 에틸 (2E)-3-(4-아미노-6-클로로피리딘-3-일)프로프-2-에노에이트 (120 g, 1 당량)의 용액에 주위 온도에서 DBU (161.2 g, 2 당량)를 첨가하였다. 수득한 혼합물은 120℃에서 32시간 동안 교반하였다. 목적하는 생성물은 LCMS에 의해 검출될 수 있다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 하였다. 반응 혼합물은 진공하에 농축시키고 잔사를 빙/수에 붓고 이어서 여과하고, 이어서 필터 케이크를 수거하여 7-클로로-1,6-나프티리딘-2-올 (80 g, 84%)을 담갈색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.11 (s, 1H), 8.70 (s, 1H), 8.01 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 6.61 (d, J = 9.6 Hz, 1H)
B. 2,7-디클로로-1,6-나프티리딘
Figure pct00016
옥시염화인 (50 mL) 중의 7-클로로-1,6-나프티리딘-2-올 (16 g, 89 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 DMF (0.1 mL)를 질소 대기하에 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 110℃에서 8시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 수득한 혼합물은 물 (250 mL)로 희석하고 DCM (2 x 250 mL)으로 추출하였다. 배합 유기 층을 염수 (1 x 200 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 PE/EtOAc (10:1 내지 3:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 2,7-디클로로-1,6-나프티리딘 (10.06 g, 57%)을 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 9.10 (s, 1H), 8.26 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.53 (d, J = 8.6 Hz, 1H)
C. 2-브로모-7-클로로-1,6-나프티리딘.
Figure pct00017
DCE (100 mL) 중의 7-클로로-1,6-나프티리딘-2-올 (10 g, 1 당량)의 교반 용액에 실온에서 POBr3 (100 g) 및 DMF (405 mL, 5.54 mmol, 0.1 당량)를 첨가하였다. 수득한 혼합물은 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 하였다. 수득한 혼합물은 DCM (400 mL)으로 희석하고 빙수에 붓고, DCM (2 x 400 mL)으로 추출하였다. 배합 유기 층을 염수 (2 x 200 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 PE/EtOAc (10:1 내지 1:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 2-브로모-7-클로로-1,6-나프티리딘 (6 g, 45%)을 회색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.34 (s, 1H), 8.63 - 8.51 (m, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.91 (d, J = 8.6 Hz, 1H)
D. 7-클로로-1,6-나프티리딘-2-티올
Figure pct00018
DMF (20 mL) 중의 2,7-디클로로-1,6-나프티리딘 (1000 mg, 5.024 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 NaSH (1408.41 mg, 25.122 mmol, 5 당량)를 질소 대기하에 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 110℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 하였다. 수득한 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 ACN (3 x10 mL)으로 세척하였다. 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 330 g; 이동상 A: 물 (+ 5 mM NH4NO3); 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 25 min에서 25% B - 60% B 농도구배; 검출기: 245 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하고 목적하는 생성물은 33% B에서 수거하였다. 감압하에 농축시켜 7-클로로-1,6-나프티리딘-2-티올 (650 mg, 66%)을 오렌지 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.85-13.82 (brs, 1H), 8.85 (s, 1H), 7.90 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.31 (d, J = 9.2 Hz, 1H).
E. 3급-부틸 4-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-카보닐)피페리딘-1-카복실레이트
Figure pct00019
3급-부틸 4-에티닐피페리딘-1-카복실레이트. MeOH (1000 mL) 중의 3급-부틸 4-포르밀피페리딘-1-카복실레이트 (100 g, 469 mmol, 1 당량) 및 디메틸-1-디아조-2-옥소프로필포스포네이트 (99.08 g, 515.8 mmol, 1.1 당량)의 교반 용액에 K2CO3 (97.20 g, 703 mmol, 1.5 당량)을 질소 대기하에 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응은 TLC에 의해 모니터링하였다. 수득한 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 에탄올 (2 x 150 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 PE/EtOAc (100:1 내지 20:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 3급-부틸 4-에티닐피페리딘-1-카복실레이트 (97 g, 98%)를 백색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 4-(3-이소프로폭시-3-옥소프로프-1-인-1-일)피페리딘-1-카복실레이트. THF (1200 mL) 중의 3급-부틸-4-에티닐피페리딘-1-카복실레이트 (100 g, 477.808 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 엑산 중의 n-BuLi (49.51, 772.9 mmol, 1.1 당량)을 질소 대기하에 -78℃에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 -78℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물에 THF (100 mL) 중의 이소프로필 크로로포르메이트 (64.41 g, 525.589 mmol, 1.1 당량)을 적가 충전하고 이어서 질소 대기 하에 -78℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응은 TLC에 의해 모니터링하였다. 반응은 포화 NH4Cl (aq.)로 -78℃에서 켄칭하였다. 수득한 혼합물은 EtOAc (3 x 400 mL)로 추출하였다. 배합 유기 층을 염수 (1 x 500 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 PE/EtOAc (50:1 내지 30:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 3급-부틸 4-(3-이소프로폭시-3-옥소프로프-1-인-1-일)피페리딘-1-카복실레이트 (120 g, 85%)를 백색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 4-[3-이소프로폭시-3-옥소-1-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)프로프-1-엔-1-일]피페리딘-1-카복실레이트. THF (1200 mL) 중의 3급-부틸 4-(3-이소프로폭시-3-옥소프로프-1-인-1-일)피페리딘-1-카복실레이트 (120 g, 406 mmol, 1 당량), CuCl (1206.57 mg, 12.188 mmol, 0.03당량) 및 크산트포스 (7052.04 mg, 12.188 mmol, 0.03 당량)의 교반 용액에 t-BuONa (2340.04 mg, 24.375 mmol, 0.06 당량)를 질소 대기하에 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물에 비스 (피나콜라토)디보론 (134.11 g, 528.135 mmol, 1.3 당량) 및 MeOH (26034.54 mg, 812.515 mmol, 2 당량)를 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응은 TLC에 의해 모니터링하였다. 반응은 포화 NH4Cl (aq.)로 실온에서 켄칭하였다. 수득한 혼합물은 EtOAc (2 x 1500 mL)로 추출하였다. 배합 유기 층을 염수 (1 x 1500 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 PE/EtOAc (30:1 내지 20:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 3급-부틸 4-(3-이소프로폭시-3-옥소-1-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)프로프-1-엔-1-일]피페리딘-1-카복실레이트 (170 g, 99%)를 백색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 4-[1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2일)-3-이소프로폭시-3-옥소프로프-1-엔-1-일]피페리딘-1-카복실레이트. 1,4-디옥산 (1000 mL) 및 H2O (200 mL) 중의 3급-부틸 4-[3-이소프로폭시-3-옥소-1-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)프로프-1-엔-1-일]피페리딘-1-카복실레이트 (75 g, 1.50 당량), 2-브로모-7-클로로-1,6-나프티리딘 (45 g, 1 당량) 및 KF (11.91 g, 10 당량)에 Pd(PPh3)4 (7.1 g, 0.30 당량)를 아르곤 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 24시간 동안 아르곤 대기하에 75℃에서 교반하였다. 반응은 염수 (600 mL)을 첨가하여 켄칭하였다. 수성층은 EtOAc (3 x 600 mL)로 추출하였다. 수거된 유기층은 염수 (3 x 500 mL)로 세척하였다. 이는 무수 Na2SO4로 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔사는 PE:EtOAc (20:1 내지 5:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 3급-부틸 4-[1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)-3-이소프로폭시-3-옥소프로프-1-엔-1-일)피페리딘-1-카복실레이트 (80 g, 71%)를 황색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 4-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-카보닐)피페리딘-1-카복실레이트 (중간체 E). 아세톤 (1.20 L) 및 물 (0.40 L) 중의 3급-부틸 4-[1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)-3-이소프로폭시-3-옥시프로프-1-엔-1-일]피페리딘-1-카복실레이트 (60.0 g, 130 mmol)의 교반 용액에 칼륨 오스메이트 (VI) 탈수화물 (14.4 g, 39.1 mmol) 및 N-메틸모르폴린-N-옥사이드 (91.7 g, 782 mmol)를 주위 온도에서 첨가하였다. 혼합물은 36시간 동안 주위 온도에서 교반하였다. 반응 혼합물은 수성 나트륨 티오설페이트 (300 mL, 포화)에 의해 0℃에서 켄칭하였고, 에틸 아세테이트 (3 x 500 mL)로 추출하였다. 배합된 유기 분획물을 염수 (3 x 300 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고 여과하였다. 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 석유 에테르 중 1 내지 20%의 에틸 아세테이트로 용출시키면서 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물 (36.0 g, 73%)을 황색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.82 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.51 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 4.13 (s, 2H), 2.44 (s, 3H), 1.37-1.29 (m, 2H), 1.13-1.05 (m, 2H).
F. 7-클로로-2-(1-메틸피페리딘-4-카보닐)-1,6-나프티리딘.
Figure pct00020
7-클로로-2-(피페리딘-4-카보닐)-1,6-나프티리딘. DCM (100 mL) 중의 3급-부틸 4-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-카보닐)피페리딘-1-카복실레이트 (3750 mg, 10 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 TFA (100 mL)를 0℃에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 DCM (3 x 10 mL)으로 추출하였다. 배합된 유기층을 DCM (3 x 10 mL)으로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압하에 농축시켜 갈색 고체로서 7-클로로-2-(피페리딘-4-카보닐)-1,6-나프티리딘 (2600 mg, 95%)을 수득하였다.
7-클로로-2-(1-메틸피페리딘-4-카보닐)-1,6-나프티리딘 (중간체 F). THF (3 mL) 중의 7-클로로-2-(피페리딘-4-카보닐)-1,6-나프티리딘 (140 mg, 0.508 mmol, 1 당량) 및 NaBH(OAc)3 (161.41 mg, 0.762 mmol, 1.50 당량)의 교반 용액에 HCHO (30.49 mg, 1.015 mmol, 2 당량)를 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 DCM/MeOH (10:1)로 용출시키면서 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 7-클로로-2-(1-메틸피페리딘-4-카보닐)-1,6-나프티리딘 (130 mg, 88)을 황갈색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.48 (s, 1H), 8.87 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.19 (s, 1H), 4.13-4.07 (m, 1H), 3.45-3.42 (m, 2H), 3.20-3.16 (m, 2H), 2.77 (s, 3H), 2.20-2.16 (m, 2H), 1.86-1.82 (m, 2H).
G. 2-플루오로-4-(피라졸-1-일)아닐린.
Figure pct00021
DMSO (100 mL) 중의 2-클로로-4-요오도아닐린 (10 g, 42.191 mmol, 1 당량) 및 피라졸 (4.31 g, 63.3 mmol, 1.50 당량)의 교반 혼합물에 8-하이드록시퀴놀린 (0.92 g, 6.3 mmol, 0.15 당량), K2CO3 (8.75 g, 63.3 mmol, 1.50 당량) 및 CuI (1.21 g, 6.35 mmol, 0.15 당량)를 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 120℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 하였다. 수득한 혼합물은 조제탄산암모늄(hartshorn) (3 x 200 mL)으로 세척하였다. 수득한 혼합물은 EtOAc (4 x 300 mL)로 추출하였다. 배합 유기 층을 염수 (2 x 300 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 PE/EtOAc (20:1 내지 4:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 2-플루오로-4-(피라졸-1-일)아닐린 (7.0 g, 94%)를 적색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.30 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.50 (dd, J = 12.6, 2.5 Hz, 1H), 7.37-7.35 (m, 1H), 6.86-6.82 (m, 1H), 6.47-6.45 (m, 1H), 5.27-5.25 (brs, 2H).
하기 표에 나타낸 중간체 제조는 적당한 재료로 개시하는 중간체 G의 합성을 위해 기재된 방법 및 프로토콜에 의해 성취하였다.
Figure pct00022
N. [1-(4-아미노-3-플루오로페닐)피라졸-3-일]메탄올.
Figure pct00023
THF (50 mL) 중의 메틸 1-(4-아미노-3-플루오로페닐)피라졸-3-카복실레이트 (9 g, 38.3 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 LiAlH4 (1.74 g, 45.9 mmol, 1.2 당량)을 질소 대기하에 0℃에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 실온에서 1시간 동안 교반하였다 반응은 물 (1.7 mL)로 실온에서 켄칭하고 15% NaOH (aq.) (1.7 mL) 및 물 (5.1 mL)을 첨가하였다. 수득한 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 EtOAc (3 x 50 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 DCM/MeOH (50:1 내지 10:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 [1-(4-아미노-3-플루오로페닐)피라졸-3-일]메탄올 (7 g, 88 %)을 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.20 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.46 (dd, J = 12.7, 2.4 Hz, 1H), 7.38-7.27 (m, 1H), 6.86-6.81 (m, 1H), 6.40 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 5.20-5.19 (brs, 2H), 5.09 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 4.47 (d, J = 5.8 Hz, 2H).
하기 표에 나타낸 중간체의 제조는 중간체 I의 합성에서 형성된 부산물로 개시하면서, 중간체 N의 합성을 위해 기재된 바와 같은 방법 및 프로토콜에 따른다:
Figure pct00024
P. 2-(1-(4-아미노-3-플루오로페닐)-1H-피라졸-3-일)프로판-2-올.
Figure pct00025
THF (5 mL) 중의 메틸 1-(4-아미노-3-플루오로페닐)피라졸-3-카복실레이트 (300 mg, 1.275 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 브로모 (메틸) 마그네슘 (3.40 mL, 10.200 mmol, 8 당량, 에테르 중에 3M)을 질소 대기하에 -78℃에서 적가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응은 포화 NH4Cl (aq.) (5 mL)로 0℃에서 켄칭하였다. 수득한 혼합물은 물 (20 mL)로 희석하고 EtOAc (3 x 30 mL)로 추출하였다. 배합 유기 층을 염수 (3 x 30 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 Prep-TLC (PE/EtOAc 2:1)로 정제하여 회색 고체로서 2-[1-(4-아미노-3-플루오로페닐)피라졸-3-일]프로판-2-올 (100 mg, 33%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.14 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.57 (dd, J = 11.5, 3.0 Hz, 1H), 7.35-7.29 (m, 1H), 6.93-6.78 (m, 1H), 6.40 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 5.21-5.17 (brs, 2H), 4.96-4.93 (brs, 1H), 1.46 (s, 6H).
Q. 2-플루오로-4-(모르폴린-4-일메틸)아닐린
Figure pct00026
4-(브로모메틸)-2-플루오로-1-니트로벤젠. DCE (41.50 g, 13.13 당량) 중의 2-플루오로-4-메틸-1-니트로벤젠 (5 g, 32.231 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 NBS (100 mg, 2당량) 및 AIBN (0.64 g, 3.868 mmol, 0.12 당량)을 질소 대기하에 80℃에서 분획으로 첨가하였다. 조 생성물 자체가 사용되었다.
4-[(3-플루오로-4-니트로페닐)메틸]모르폴린. DCE (41.5g) 중의 4-(브로모메틸)-2-플루오로-1-니트로벤젠 (7 g, 29.911 mmol, 1 당량) 및 모르폴린 (7.82 g, 89.734 mmol, 3 당량)의 교반 용액에 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 목적하는 생성물은 LCMS에 의해 검출될 수 있다. 잔사는 HCl (aq.)를 사용하여 pH 6으로 산성화시키고/염기화시키고/중화시켰다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 330 g; 이동상 A: 물 (+ 5 mM FA); 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 20 min에서 33% B - 45% B 농도구배; 검출기: 220 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획은 40% B에서 수거하였고, 감압하에 농축시켜 4-[(3-플루오로-4-니트로페닐)메틸]모르폴린 (1.2 g, 17%)을 황색 고체로서 수득하였다.
2-플루오로-4-(모르폴린-4-일메틸)아닐린 (중간체 Q). 메탄올 (12.0 mL) 및 물 (1.20 mL) 중의 4-[(3-플루오로-4-니트로페닐)메틸]모르폴린 (0.40 g, 1.67 mmol) 및 철 분말(0.65 g, 11.7 mmol)의 교반 혼합물에 염화암모늄 (0.89 g, 16.7 mmol)을 주위 온도에서 첨가하였다. 반응 혼합물은 0.5시간 동안 65℃에서 교반시켰다. 주위 온도로 냉각시킨 후, 혼합물은 감압하에 농축시키고 잔사는 디클로로메탄 중 1 내지 8%의 메탄올로 용출시키면서 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물 (0.28 g, 80%)을 황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 6.97-6.93 (m, 1H), 6.86-6.83 (m, 1H), 6.75-6.70 (m, 1H), 5.13-5.09 (brs, 2H), 3.63-3.59 (m, 4H), 2.46-2.40 (m, 4H).
R. 6-(4-아미노-3-플루오로페닐)-1-메틸피리딘-2-온
Figure pct00027
3-브로모-1-메틸피리딘-2-온. DMF (100 mL) 중의 3-브로모-1H-피리딘-2-온 (10 g, 57.472 mmol, 1 당량) 및 K2CO3 (11.91 g, 86.176 mmol, 1.50 당량)의 교반 혼합물에 CH3I (12.24 g, 86.208 mmol, 1.5 당량)를 실온에서 적가하였다. 수득한 혼합물은 60℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 EtOAc (8 x 500 mL)로 추출하였다. 배합된 유기층을 염수 (2 x 100 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 PE/EtOAc (4:1 내지 1:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 3-브로모-1-메틸피리딘-2-온 (8 g, 74)을 황색 오일로서 수득하였다.
6-(4-아미노-3-플루오로페닐)-1-메틸피리딘-2-온 (중간체 R). 1,4-디옥산 (90 mL) 및 H2O (30 mL) 중의 2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)아닐린 (1.27 g, 05 mmol, 1 당량) 및 6-브로모-1-메틸피리딘-2-온 (1.51 g, 08 mmol, 1.50 당량)의 교반 용액에 Pd(PPh3)4 (0.37 g, 00 mmol, 0.06 당량) 및 K2CO3 (1.48 g, 0.011 mmol, 2 당량)을 질소 대기하에 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 하였다. 수득한 혼합물은 물 (500 mL)로 희석하였다.수득한 혼합물은 EtOAc (3 x 150 mL)로 추출하였다. 배합 유기 층을 염수 (2 x 100 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 DCM/MeOH (50:1 내지 20:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 6-(4-아미노-3-플루오로페닐)-1-메틸피리딘-2-온 (856.8 mg, 73%)을 담황색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.70-7.55 (m, 1H), 7.57-7.53 (m, 1H), 7.55-7.47 (m, 1H), 7.30-7.27 (m, 1H), 6.79-6.76 (m, 1H), 6.29-6.25 (m, 1H), 5.27-5.23 (brs, 2H), 3.49 (s, 3H).
하기 표에 나타낸 중간체 제조는 적당한 재료로 개시하는 중간체 R의 합성을 위해 기재된 방법 및 프로토콜에 따른다.
Figure pct00028
W. 5-(4-아미노-3-플루오로페닐)-1-메틸피리딘-2-온
Figure pct00029
디옥산 (10 mL) 및 H2O (2 mL) 중의 2-플루오로-4-요오도아닐린 (500 mg, 2.110 mmol, 1 당량) 및 1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-2-온 (743.91 mg, 3.164 mmol, 1.50 당량)의 용액에 K2CO3 (728.88 mg, 5.274 mmol, 2.50 당량) 및 Pd(PPh3)4 (243.77 mg, 0.211 mmol, 0.10 당량)을 첨가하였다. 2시간 동안 80℃에서 질소 대기하에 교반시킨 후, 수득한 혼합물을 냉각시키고 감압하에 농축시켰다. 잔사는 PE/EtOAc (10:1 내지 1:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 5-(4-아미노-3-플루오로페닐)-1-메틸피리딘-2-온 (400 mg, 87%)을 담황색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.87 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.81 (dd, J = 9.3, 2.7 Hz, 1H), 7.19 (dd, J = 12.6, 2.1 Hz, 1H), 7.13-7.09 (m, 1H), 6.91-6.87 (m,1H), 6.62 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 3.64 (s, 3H).
하기 표에 나타낸 중간체 제조는 적당한 재료로 개시하는 중간체 W의 합성을 위해 기재된 방법 및 프로토콜에 따른다.
Figure pct00030
AB. 1-(3-아미노-4-플루오로페닐)피롤리딘-2-온 (중간체 AB).
Figure pct00031
1,4-디옥산 (30 mL) 중의 5-브로모-2-플루오로아닐린 (800 mg, 4.210 mmol, 1 당량) 및 피롤리돈 (394.14 mg, 4.631 mmol, 1.10 당량)의 교반 혼합물에 Pd(OAc)2 (141.78 mg, 0.632 mmol, 0.15 당량), 크산트포스 (730.83 mg, 1.263 mmol, 0.30 당량) 및 Cs2CO3 (2.74 mg, 8.41 mmol, 2 당량)을 질소 대기하에 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 방치하였다. 수득한 혼합물은 DCM/MeOH = 10/1 (150 mL)로 희석시켰다. 침전된 고체는 여과에 의해 수거하였다. 수득한 혼합물은 진공 농축시켰다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 120 g; 이동상 A: 물 (+ 5 mM NH4HCO3); 이동상 B: ACN; 유속: 40 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 30 min에서 20% B - 50% B 농도구배; 검출기: 220 nm의 조건과 함께 역상 섬광 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획은 34% B에서 수거하고, 감압하에 농축시켜 백색 고체로서 1-(3-아미노-4-플루오로페닐)피롤리딘-2-온 (315 mg, 38%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.20-7.17 (m, 1H), 6.97-6.92 (m, 1H), 6.71-6.68 (m, 1H), 5.19-5.15 (brs, 2H), 3.73 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 2.45 (t, J = 8.1 Hz, 2H), 2.10-1.96 (m, 2H).
하기 표에 나타낸 중간체 Ac의 제조는 적당한 재료로 개시하는 중간체 AB의 합성을 위해 기재된 방법 및 프로토콜에 따른다.
Figure pct00032
AD. 2-플루오로-5-(모르폴린-4-일)아닐린
Figure pct00033
DMSO (10 mL) 중의 5-브로모-2-플루오로아닐린 (1 g, 5.263 mmol, 1 당량) 및 모르폴린 (550.20 mg, 6.315 mmol, 1.20 당량)의 교반 혼합물에 K3PO4 (3.35 g, 15.782 mmol, 3 당량), L-프롤린 (363.54 mg, 3.158 mmol, 0.60 당량) 및 CuI (300.69 mg, 1.579 mmol, 0.30 당량)을 실온에서 적가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 120℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 수득한 혼합물은 EtOAc (3 x 100 mL)로 추출하였다. 배합된 유기층을 염수 (2 x 100 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축시켰다. 잔사 생성물은 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하여 (컬럼, C18,330 g; 이동상: A:물/0.05% NH4HCO3, 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 25 min 내 25% B 내지 60% B; 검출기, 220 nm, 모니터, 254 nm, 목적하는 생성물은 33% B에서 수거하였다)) 2-플루오로-5-(모르폴린-4-일)아닐린 (190 mg, 18 %)을 담갈색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 6.85-6.88 (m, 1H), 6.37-6.35 (m, 1H), 6.10-6.07 (m, 1H), 4.99-4.96 (brs, 2H), 3.73-3.70 (m, 4H), 2.97-2.93 (m, 4H).
AE. 3-(4-아미노-3-플루오로페닐)-4H-1,2,4-옥사디아졸-5-온
Figure pct00034
4-아미노-3-플루오로-N-하이드록시벤젠카복스이미다미드. 에틸 알콜 (20 mL) 및 H2O (5 mL) 중의 4-아미노-3-플루오로벤조니트릴 (1 g, 7.346 mmol, 1 당량) 및 Na2CO3 (4.28 g, 40.403 mmol, 5.50 당량)의 교반 혼합물에 하이드록실아민 하이드로클로라이드 (2.55 g, 36.730 mmol, 5 당량)를 질소 대기하에 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 70℃에서 16시간 동안 교반하였다. 목적하는 생성물은 LCMS에 의해 검출될 수 있다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 하였다. 다음 단계에서 조 생성물을 사용하였다.
3-(4-아미노-3-플루오로페닐)-4H-1,2,4-옥사디아졸-5-온 (중간체 AE). 1,4-디옥산 (50 mL) 중의 4-아미노-3-플루오로-N-하이드록시벤젠카복스이미다미드 (2.60 g, 15.370 mmol, 1 당량) 및 DBU(2.60 g, 17.079 mmol, 1.11 당량)의 교반 혼합물에 CDI (3.74 g, 23.055 mmol, 1.50 당량)을 질소 대기하에 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 110℃에서 16시간 동안 교반하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사 생성물은 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하였다 (컬럼: 구형 C18, 20~ 40 um, 80 g; 이동상 A: 물 (+ 0.05% FA); 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; B의 농도구배: 5%, 6 min; 5%~25%, 15 min; 25%~45%,15 min;45%~95%,15 min, 검출기: 220 nm). 목적하는 생성물을 함유하는 분획은 30% B에서 수거하고, 감압하에 농축시켜 담갈색 고체로서 3-(4-아미노-3-플루오로페닐)-4H-1,2,4-옥사디아졸-5-온 (730 mg, 24)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.57-7.26 (m, 2H), 6.87-6.83 (m, 1H), 5.99-5.96 (brs, 2H).
AF. 2-플루오로-4-(1,2,4-옥사디아졸-3-일)아닐린
Figure pct00035
트리메틸 오르토포르메이트 (20 mL) 중의 4-아미노-3-플루오로-N-하이드록시벤젠카복스이미다미드 (중간체 AE의 합성 단계 1로부터의 조 생성물, 500 mg, 2.956 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 TFA (1, 13.463 mmol, 4.55 당량)를 질소 대기하에 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 30분 동안 실온에서 교반하고 이어서 질소 대기하에 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 목적하는 생성물은 LCMS에 의해 검출될 수 있다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 PE/EtOAc (4:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 2-플루오로-4-(1,2,4-옥사디아졸-3-일)아닐린 (220 mg, 42%)을 담황색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.56 (s, 1H), 7.62-7.53 (m, 2H), 6.90-6.86 (m, 1H), 5.89-5.85 (brs, 2H).
실시예 2. 화합물 100의 제조
Figure pct00036
7-[(2-플루오로페닐)아미노]-1,6-나프티리딘-2-올. 100 mL의 환저 플라스크에 디옥산 (40 mL) 중의 7-클로로-1,6-나프티리딘-2-올 (3 g, 16.612 mmol, 1 당량), 2-플루오로아닐린 (2.03 g, 18.273 mmol, 1.10 당량), Pd(OAc)2 (0.37 g, 1.661 mmol, 0.10 당량), 크산트포스 (1.92 g, 3.322 mmol, 0.20 당량), 및 Cs2CO3 (16.24 g, 49.837 mmol, 3 당량)을 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 110℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 하였다. 수득한 혼합물은 EtOAc (3 x 400 mL)로 추출하였다. 배합 유기 층을 물 (3 x 100 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 DCM/MeOH (12:1)로 용출시키면서 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 7-[(2-플루오로페닐)아미노]-1,6-나프티리딘 (3.2g, 75%)을 갈색 고체로서 수득하였다.
2-클로로-N-(2-플루오로페닐)-1,6-나프티리딘-7-아민. 100 mL의 환저 플라스크에 DCE (40 mL) 중의 7-[(2-플루오로페닐)아미노]-1,6-나프티리딘-2-올 (3.20 g, 12.537 mmol, 1 당량), PPh3 (9.86 g, 37.610 mmol, 3 당량) 및 CCl4 (5.79 g, 37.610 mmol, 3 당량)을 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 하였다. 반응은 실온에서 포화 NaHCO3으로 켄칭하였다. 수득한 혼합물은 DCM (3 x 100 mL)으로 추출하였다. 배합 유기 층을 물 (3 x 50 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 헥산/EtOAc (5:1)으로 용출시키면서 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 2-클로로-N-(2-플루오로페닐)-1,6-나프티리딘-7-아민 (1.2g, 35%)을 황색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 4-([7-[(2-플루오로페닐)아미노]-1,6-나프티리딘-2-일](메틸)아미노)피페리딘-1-카복실레이트. 25 mL의 밀봉된 튜브에 2-클로로-N-(2-플루오로페닐)-1,6-나프티리딘-7-아민 (100 mg, 0.365 mmol, 1 당량) 및 3급-부틸 4-(메틸아미노)피페리딘-1-카복실레이트 (86.13 mg, 0.402 mmol, 1.10 당량)를 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 하였다. 이로써 3급-부틸 4-([7-[(2-플루오로페닐)아미노]-1,6-나프티리딘-2-일](메틸)아미노)피페리딘-1-카복실레이트 (80mg, 51%)를 수득하였다. 조 생성물은 추가의 정제 없이 직접 다음 단계에서 사용하였다.
N7-(2-플루오로페닐)-N2-메틸-N2-(피페리딘-4-일)-1,6-나프티리딘-2,7-디아민 (화합물 100). DCM (5 mL) 중의 3급-부틸 4-([7-[(2-플루오로페닐)아미노]-1,6-나프티리딘 -2-일](메틸)아미노)피페리딘-1-카복실레이트 (80 mg, 0.177 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 HCl (가스) 및 1,4-디옥산 (3 mL, 98.736 mmol, 557.30 당량)을 실온에서 적가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 TLC에 의해 모니터링하였다. 반응은 실온에서 포화 NaHCO3으로 켄칭하였다. 수득한 혼합물은 DCM (3 x 30 mL)으로 추출하였다. 배합 유기 층을 물 (3 x 15 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 120 g; 이동상 A: 물 (+ 3.2g NH4HCO3); 이동상 B: ACN; 유속: 90 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 20 min에서 30% B - 50% B 농도구배; 검출기: 254 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물은 45% B에서 수거하였고, 감압하에 농축시켜 N7-(2-플루오로페닐)-N2-메틸-N2-(피페리딘-4-일)-1,6-나프티리딘-2,7-디아민 (39.1 mg)을 회색 고체로서 수득하였다.
실시예 3. 화합물 101 및 112의 제조
Figure pct00037
3급-부틸 4-[(2-메톡시-2-옥소에틸)아미노]피페리딘-1-카복실레이트. 3급-부틸 4-아미노피페리딘-1-카복실레이트 (10 g, 49.930 mmol, 1 당량) 및 메틸 2-브로모아세테이트 (6.11 g, 39.941 mmol, 0.80 당량)의 교반 혼합물에 DIEA (19.36 g, 149.795 mmol, 3 당량)를 질소 대기하에 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응은 TLC에 의해 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 방치하였다. 잔사는 PE/EtOAc (5/1 내지 1/1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 3급-부틸 4-[(2-메톡시-2-옥소에틸)아미노]피페리딘-1-카복실레이트 (4 g, 29%)를 담황색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일) (2-메톡시-2-옥소에틸)아미노]피페리딘-1-카복실레이트. 2,7-디클로로-1,6-나프티리딘 (1.12 g, 5.627 mmol, 0.90 당량) 및 3급-부틸 4-[(2-메톡시-2-옥소에틸)아미노]피페리딘-1-카복실레이트 (1.70 g, 6.242 mmol, 1 당량)의 교반 혼합물에 DIEA (2.42 g, 18.724 mmol, 3 당량)를 질소 대기항 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 110℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 330 g; 이동상 A: 물 (+ 5 mM NH4HCO3); 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 20 min에서 50% B - 75% B 농도구배; 검출기: 220 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물은 70% B에서 수거하였고, 감압하에 농축시켜 3급-부틸-4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)(2-메톡시-2-옥소에틸)아미노]피페리딘-1-카복실레이트 (800 mg, 29%)를 황색 고체로서 수득하였다.
메틸 2-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일) (피페리딘-4-일)아미노]아세테이트. MeOH (20 mL) 중의 3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일) (2-메톡시-2-옥소에틸)아미노]피페리딘-1-카복실레이트 (800 mg)의 교반 용액에 1,4-디옥산 (20 mL) 중의 HCl (가스)을 질소 대기하에 실온에 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 수득한 혼합물은 진공 농축시켰다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 이로써 메틸 2-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일) (피페리딘-4-일)아미노]아세테이트 (600 mg)를 황색 고체를 수득하였다.
메틸 2-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일](피페리딘-4-일)아미노]아세테이트 (화합물 112). 1,4-디옥산 (20 mL) 중의 2-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)(피페리딘-4-일)아미노]아세테이트 (500 mg, 1.493 mmol, 1 당량) 및 [1-(4-아미노-3-플루오로페닐)피라졸-3-일]메탄올 (340.40 mg, 1.643 mmol, 1.10 당량)의 교반 혼합물에 Pd(OAc)2 (50.29 mg, 0.224 mmol, 0.15 당량), 크산트포스 (259.24 mg, 0.448 mmol, 0.30 당량) 및 Cs2CO3 (973.18 mg, 2.987 mmol, 2 당량)을 질소 대기하에 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 방치하였다. 수득한 혼합물은 EtOAc (3 x 500 mL)로 추출하였다. 배합 유기 층을 염수 (2x 300 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 330 g; 이동상 A: 물 (+ 5 mM NH4HCO3); 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 20 min에서 50% B - 70% B 농도구배; 검출기: 220 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물을 65% B에서 수거하고, 감압하에 농축시켜 메틸 2-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일](피페리딘-4-일)아미노]아세테이트 (200 mg, 26%)를 황색 고체로서 수득하였다.
[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일](피페리딘-4-일)아미노]아세트산 (화합물 101). THF 및 H2O 중의 메틸 2-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일](피페리딘-4-일)아미노]아세테이트 (10 mg, 0.020 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 LiOH (1.42 mg, 0.059 mmol, 3 당량)를 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 TLC에 의해 모니터링하였다. 혼합물/잔사를 시트르산으로 pH 4로 산성화시켰다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 조 생성물 (10 mg)을 Prep-HPLC로 정제하여 [[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일](피페리딘-4-일)아미노]아세트산 (2 mg, 21%)을 담황색 고체로서 수득하였다.
화합물 111, 120, 125, 126, 176 및 178은 적당한 물질로 개시하면서, 화합물 101의 합성을 위해 기재된 바와 같은 방법 및 프로토콜에 의해 합성하였다.
실시예 4. 화합물 119의 제조
Figure pct00038
메틸 2-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일) (1-메틸피페리딘-4-일)아미노]아세테이트. THF (15 mL) 중의 메틸 2-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일) (피페리딘-4-일)아미노]아세테이트 (화합물 101, 120 mg, 0.358 mmol, 1 당량의 합성으로부터 단계 3) 및 HCHO (16.14 mg, 0.538 mmol, 1.50 당량)의 교반 혼합물에 TEA (72.54 mg, 0.717 mmol, 2 당량) 및 NaBH(OAc)3 (113.95 mg, 0.538 mmol, 1.50 당량)을 질소 대기하에 0℃에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 120 g; 이동상 A: 물 (+ 5 mM NH4HCO3); 이동상 B: ACN; 유속: 40 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 15 min에서 40% B - 55% B 농도구배; 검출기: 220 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물은 45% B에서 수거하였고, 감압하에 농축시켜 메틸 2-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)(1-메틸피페리딘-4-일)아미노]아세테이트 (90 mg, 72%)를 황색 고체로서 수득하였다.
메틸 2-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일](1-메틸피페리딘-4-일)아미노]아세테이트. 1,4-디옥산 (10 mL) 중의 메틸 2-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)(1-메틸피페리딘-4-일)아미노]아세테이트 (100 mg, 0.287 mmol, 1 당량) 및 [1-(4-아미노-3-플루오로페닐)피라졸-3-일]메탄올 (65.34 mg, 0.315 mmol, 1.10 당량)의 교반 혼합물에 Pd(OAc)2 (9.65 mg, 0.043 mmol, 0.15 당량), 크산트포스 (49.76 mg, 0.086 mmol, 0.30 당량) 및 Cs2CO3 (186.81 mg, 0.573 mmol, 2 당량)을 질소 대기하에 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 방치하였다. 수득한 혼합물은 EtOAc (3 x 200 mL)로 추출하였다. 배합 유기 층을 염수 (2 x 100 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 120 g; 이동상 A: 물 (+ 5 mM NH4HCO3); 이동상 B: ACN; 유속: 40 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 20 min에서 60% B - 95% B 농도구배; 검출기: 220 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물을 90% B에서 수거하고, 감압하에 농축시켜 메틸 2-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일](1-메틸피페리딘-4-일)아미노]아세테이트 (50 mg, 34%)를 황색 고체로서 수득하였다.
[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일](1-메틸피페리딘-4-일)아미노]아세트산 (화합물 119). THF (25 mL) 및 물 (5 mL) 중 메틸 2-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일](1-메틸피페리딘-4-일)아미노]아세테이트 (200 mg, 0.385 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 LiOH (46.09 mg, 1.925 mmol, 5 당량)를 실온에서 적가하였다. 반응 혼합물은 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사를 Prep-HPLC로 정제하여 포름산; [[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일](1-메틸피페리딘-4-일)아미노]아세트산 (150.4 mg, 71%)을 담녹색 고체로서 수득하였다.
화합물 132 및 170은 적당한 물질로 개시하면서, 화합물 119의 합성을 위해 기재된 바와 같은 방법 및 프로토콜에 따라 합성하였다.
실시예 5. 화합물 144의 제조
Figure pct00039
메틸 2-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일) (1-에틸피페리딘-4-일)아미노]아세테이트. DMF (10 mL) 중의 메틸 2-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일) (피페리딘-4-일)아미노]아세테이트 (화합물 101, 300 mg, 0.896 mmol, 1 당량의 합성으로부터 단계 3) 및 TEA (272.02 mg, 2.688 mmol, 3 당량)의 교반 혼합물에 에틸 요오다이드 (139.75 mg, 0.896 mmol, 1 당량)를 질소 대기하에 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 330 g; 이동상 A: 물 (+ 5 mM NH4HCO3); 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 20 min에서 30% B - 55% B 농도구배; 검출기: 220 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물은 48% B에서 수거하였고, 감압하에 농축시켜 메틸 2-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)(1-에틸피페리딘-4-일)아미노]아세테이트 (180 mg, 55%)를 황색 고체로서 수득하였다.
메틸 2-[(1-에틸피페리딘-4-일)[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]아미노]아세테이트. 1,4-디옥산 (10 mL) 중의 메틸 2-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)(1-에틸피페리딘-4-일)아미노]아세테이트 (180 mg, 0.496 mmol, 1 당량) 및 [1-(4-아미노-3-플루오로페닐)피라졸-3-일]메탄올 (113.07 mg, 0.546 mmol, 1.10 당량)의 교반 혼합물에 Pd(OAc)2 (16.71 mg, 0.074 mmol, 0.15 당량), 크산트포스 (86.11 mg, 0.149 mmol, 0.30 당량) 및 Cs2CO3 (323.25 mg, 0.992 mmol, 2 당량)을 질소 대기하에 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 110℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 방치하였다. 수득한 혼합물은 EtOAc (3 x 300 mL)로 추출하였다. 배합된 유기층을 염수 (2 x 100 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 330 g; 이동상 A: 물 (+ 5 mM NH4HCO3); 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 25 min에서 30% B - 60% B 농도구배; 검출기: 220 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물을 55% B에서 수거하고, 감압하에 농축시켜 메틸 2-[(1-에틸피페리딘-4-일)[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]아미노]아세테이트 (200 mg, 76%)를 황색 고체로서 수득하였다.
[(1-에틸피페리딘-4-일)[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]아미노]아세트산 (화합물 144). THF (25 mL) 및 물 (5 mL) 중 메틸 2-[[1-에틸피페리딘-4-일)[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]아미노]아세테이트 (200 mg, 0.375 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 LiOH (44.88 mg, 1.874 mmol, 5 당량)를 실온에서 적가하였다. 반응 혼합물은 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사를 Prep-HPLC로 정제하여 [(1-에틸피페리딘-4-일)[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]아미노]아세트산 (111.0 mg, 52%)를 녹색 고체로서 수득하였다.
화합물 143, 145 및 147은 적당한 물질로 개시하면서, 화합물 144의 합성을 위해 기재된 바와 같은 방법 및 프로토콜에 따라 합성하였다.
실시예 6. 화합물 155의 제조
Figure pct00040
메틸 2-[(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일]페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일][(1s,4s)-4-(메틸아미노)사이클로헥실]아미노]아세테이트. CH3I (217.45 mg, 1.532 mmol, 1.50 당량) 중의 메틸 2-[(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-2-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)[(1s,4s)-4-아미노사이클로헥실]아미노]아세테이트 (화합물 126, 300 mg, 0.613 mmol, 1 당량의 합성으로 끝에서 두번째 중간체)의 교반 용액에 DIEA (396 mg, 3.064 mmol, 3 당량)를 0℃에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하였다 (컬럼, C18,120 g; 이동상 A:물/0.05% NH4HCO3, 이동상 B: ACN; 유속: 40 mL/min; 농도구배: 20분 동안 15% B 내지 45% B; 검출기, 254 nm 및 220 nm, 목적하는 생성물은 28% B에서 수거하였다). 감압하에 농축시켜 메틸 2-[(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일]페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)[(1s,4s)-4-(메틸아미노)사이클로헥실]아미노]아세테이트 (100 mg, 32%)를 오렌지 고체로서 수득하였다.
[(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일]페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일][(1s,4s)-4-(메틸아미노)사이클로헥실]아미노]아세트산 (화합물 155). THF (5 mL) 및 H2O(1 mL)중의 메틸 2-[(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)[(1s,4s)-4-(메틸아미노)사이클로헥실]아미노]아세테이트 (100 mg, 0.199 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 LiOH (14.27 mg, 0.596 mmol, 3 당량)를 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 60분 동안 교반하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다: (컬럼: XBridge Shield RP18 OBD 컬럼, 5 μm,19*150 mm).감압하에 농축시켜 [(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일]페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)[(1s,4s)-4-(메틸아미노)사이클로헥실]아미노]아세테이트 (1.3 mg, 1%)를 백색 고체로서 수득하였다.
실시예 7. 화합물 182의 제조
Figure pct00041
메틸 2-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일][(1s,4s)-4-(디메틸아미노)사이클로헥실]아미노]아세테이트. CH3OH (5 mL) 중의 메틸 2-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일][(1s,4s)-4-아미노사이클로헥실]아미노]아세테이트 (화합물 126, 320 mg, 0.616 mmol, 1 당량의 합성으로 부터 끝에서 두번째 중간체)의 교반 용액에 NaBH(OAc)3 (261.06 mg, 1.232 mmol, 2 당량) 및 HCHO (0.20 mL, 6.571 mmol, 2당량)를 0℃에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하였다 (컬럼, C18,120 g; 이동상 A:물/0.05% NH4HCO3, 이동상 B: ACN; 유속: 40 mL/min; 농도구배: 20분 동안 15% B 내지 45% B; 검출기, 254 nm 및 220 nm, 목적하는 생성물은 28% B에서 수거하였다). 감압하에 농축시켜 메틸 2-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일)[(1s,4s)-4-(디메틸아미노)사이클로헥실]아미노]아세테이트 (100 mg, 30%)를 담녹색 고체로서 수득하였다.
[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일][(1s,4s)-4-(디메틸아미노)사이클로헥실]아미노]아세트산 (화합물 182). THF (5 mL) 중의 메틸 2-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일](1s,4s)-4-(디메틸아미노)사이클로헥실]아미노]아세테이트 (100 mg, 0.183 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 LiOH (13.12 mg, 0.548 mmol, 3 당량) 및 H2O (1 mL)를 0℃에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 조 생성물 (mg)을 Prep-HPLC로 정제하여 [[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일](1s,4s)-4-(디메틸아미노)사이클로헥실]아미노]아세트산 (4.7 mg, 5%)를 담황색 고체로서 수득하였다.
화합물 160은 적당한 물질로 개시하면서, 화합물 182의 합성을 위해 기재된 바와 같은 방법 및 프로토콜에 따라 합성하였다.
실시예 8. 화합물 102의 제조
Figure pct00042
3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)아미노)피페리딘-1-카복실레이트. 2,7-디클로로-1,6-나프티리딘 (2 g, 10.049 mmol, 1 당량)에 3급-부틸 4-아미노피페리딘-1-카복실레이트 (2.01 g, 10.036 mmol, 1 당량) 및 DIEA (2.60 g, 20.117 mmol, 2 당량)를 실온에서 첨가하였다. 점성 혼합물을 16시간 동안 100℃에서 가열하였다. 목적하는 생성물은 LCMS에 의해 검출될 수 있다. 반응 혼합물은 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하여 (컬럼, C18,330 g; 이동상: A:물/0.05% NH4HCO3, 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 20 min 내 40% B 내지 70% B; 검출기, 254 nm, 모니터, 220 nm, 목적하는 생성물은 62% B에서 수거하였다) 3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)아미노]피페리딘-1-카복실레이트 (3 g, 82%)를 황색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]아미노]피페리딘-1-카복실레이트. 1,4-디옥산 (6 mL) 중의 3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)아미노]피페리딘-1-카복실레이트 (150 mg, 0.413 mmol, 1 당량)의 용액에 [1-(4-아미노-3-플루오로페닐)피라졸-3-일]메탄올 (102.79 mg, 0.496 mmol, 1.20 당량), 크산트포스 (47.84 mg, 0.083 mmol, 0.20 당량), Cs2CO3 (404.06 mg, 1.240 mmol, 3 당량) 및 Pd(OAc)2 (9.28 mg, 0.041 mmol, 0.10 당량)를 질소 대기하에 첨가하였다. 수득한 혼합물은 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 목적하는 생성물은 LCMS에 의해 검출될 수 있다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 하였다. 혼합물에 EA (100 mL)을 첨가하고 여과하였다. 여과물을 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물은 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하여 (컬럼, C18, 330 g; 이동상: A:물/0.05% NH4HCO3, 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 20 min 내 40% B 내지 70% B; 검출기, 254 nm, 모니터, 220 nm, 목적하는 생성물은 65% B에서 수거하였다) 3급-부틸 4-[[ 7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]아미노]피페리딘-1-카복실레이트 (215 mg, 97%)를 백색 고체로서 수득하였다.
[1-(3-플루오로-4-[[2-(피페리딘-4-일아미노)-1,6-나프티리딘-7-일]아미노]페닐)피라졸-3-일]메탄올 (화합물 102). DCM (12 mL) 중의 TFA (3 mL)의 용액에 3급-부틸 4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]아미노]피페리딘-1-카복실레이트 (210 mg, 0.394 mmol, 1 당량)를 주위 온도에서 첨가하였다. 이어서 혼합물은 주위 온도에서 2시간 동안 교반하였다. 목적하는 생성물은 LCMS에 의해 검출될 수 있다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 혼합물을 NaHCO3 (aq.)을 사용하여 pH 8로 염기성화시키고 감압하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 Prep-HPLC에 의해 정제하여 [1-(3-플루오로-4-[[2-(피페리딘-4-일아미노)-1,6-나프티리딘-7-일]아미노]페닐)피라졸-3-일]메탄올 (33.2 mg, 19%)을 담녹색 고체로서 수득하였다.
화합물 104, 166, 172, 173 및 179는 적당한 물질로 개시하면서, 화합물 102의 합성을 위해 기재된 바와 같은 방법 및 프로토콜에 따라 합성하였다.
실시예 9. 화합물 103 및 105의 제조
Figure pct00043
3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일) [2-옥산-2-일옥시)에틸)아미노]피페리딘-1-카복실레이트. DMF (5 mL, 64.609 mmol, 234.44 당량) 중 DMF (15 mL, 193.826 mmol, 175.83 당량) 중의 3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)아미노]피페리딘-1-카복실레이트 (화합물 102, 100 mg, 0.276 mmol, 1 당량의 합성의 단계 1로부터)의 교반 용액에 NaH (34.39 mg, 1.433 mmol, 1.3 당량)를 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 30분 동안 교반하였다. 상기 혼합물에 2-(2-브로모에톡시)옥산 (345.73 mg, 1.654 mmol, 1.5 당량)을 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 반응물은 포화 NH4Cl (aq.)로 켄칭하였다. 수득한 혼합물은 EtOAc (2 x 50 mL)로 추출하였다. 배합 유기 층을 염수 (1 x 50 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 PE/EtOAc (20:1 내지 3:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)[2-옥산-2-일옥시)에틸]아미노]피페리딘-1-카복실레이트 (350 mg, 65%)를 회색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일][2-(옥산-2-일옥시)에틸]아미노]피페리딘-1-카복실레이트. 1,4-디옥산 (6 mL) 중의 3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)[2-(옥산-2-일옥시)에틸]아미노]피페리딘-1-카복실레이트 (220 mg, 0.448 mmol, 1 당량), [1-(4-아미노-3-플루오로페닐)피라졸-3-일]메탄올 (111.40mg, 0.538 mmol, 1.2 당량), 크산트포스 (51.85 mg, 0.090 mmol, 0.2 당량) 및 Cs2CO3 (291.96mg, 0.896 mmol, 2 당량)의 교반 용액에 Pd(OAc)2 (20.12 mg, 0.090 mmol, 0.2 당량)를 질소 대기하에 실온에서 적가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 진공 농축시켰다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 330 g; 이동상 A: 물 (+ 5 mM NH4CO3); 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 20 min에서 5% B - 45% B 농도구배; 검출기: 220 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물을 40% B에서 수거하고, 감압하에 농축시켜 3급-부틸 4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일][2-(옥산-2-일옥시)에틸]아미노]피페리딘-1-카복실레이트 (150 mg, 51%)를 백색 고체로서 수득하였다
2-[[7-([2-플루오로-4-[5-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일](피페리딘-4-일)아미노]에탄올 (화합물 103) 및 2-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일](피페리딘-4-일)아미노]에탄올 (화합물 105). DCM (15 mL, 235.951 mmol, 2081.96 당량) 중의 3급-부틸 4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일][2-(옥산-2-일옥시)에틸]아미노]피페리딘-1-카복실레이트 (75 mg, 0.113 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 TFA (45 mL, 605.837 mmol, 5345.73 당량)를 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 수득한 혼합물은 ACN (10 mL)로 희석하였다. 혼합물은 포화 NaHCO3 (aq.)으로 pH 8로 염기성화시켰다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다.
잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 330 g; 이동상 A: 물 (+ 5 mM NH4CO3); 이동상 B: ACN; 유속: 85 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 20 min에서 30% B - 75% B 농도구배; 검출기: 254 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물은 38% B에서 수거하였고, 감압하에 농축시켜 목적하는 생성물 (35 mg 혼합물)을 수득하였다.혼합물은 하기의 조건과 함께 키랄-HPLC에 의해 분리하였다: 컬럼: CHIRALPAK IG, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A: Hex:DCM=3:1(0.2%IPA)--HPLC, 이동상 B:EtOH--HPLC; 유속: 20 mL/min; 농도구배: 25 min 내 30 B 내지 30 B; 220/254 nm; 17.7 min에서 분획물을 수거하고 감압하에 농축시켜 2-[[7-([2-플루오로-4-[5-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일](피페리딘-4-일)아미노]에탄올 (9.8 mg, 18%)을 회색 고체로서 수득하였다. 22.2 min에 분획물을 수거하고 감압하에 농축시켜 2-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일](피페리딘-4-일)아미노]에탄올 (3.9 mg, 7%)을 회색 고체로서 수득하였다.
실시예 10. 화합물 106의 제조
Figure pct00044
3급-부틸 4-[N-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)메탄설폰아미도]피페리딘-1-카복실레이트. DMF (5 mL) 중의 3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)아미노]피페리딘-1-카복실레이트 (화합물 102, 250 mg, 0.689 mmol, 1 당량의 합성의 단계 1로부터)의 교반 용액에 NaH (55.11 mg, 1.378 mmol, 2 당량, 60%)를 실온에서 첨가하였다, 수득한 혼합물은 실온에서 30분 동안 교반하였다. MsCl (236.77 mg, 2.067 mmol, 3 당량)을 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 조 생성물은 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하여 (컬럼, C18,330 g; 이동상: A:물/0.05% TFA, 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 20 min 내 40% B 내지 70% B; 검출기, 220 nm, 모니터, 254 nm, 목적하는 생성물은 70% B에서 수거하였다) 3급-부틸 4-[N-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)메탄설폰아미도]피페리딘-1-카복실레이트 (200 mg, 66%)를 황색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 4-[N-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일)메탄설폰아미도]피페리딘-1-카복실레이트. 1,4-디옥산 (10 mL) 중의 3급-부틸 4-[N-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)메탄설폰아미도]피페리딘-1-카복실레이트 (200 mg, 0.454 mmol, 1 당량) 및 2-플루오로-4-(피라졸-1-일)아닐린 (88.40 mg, 0.499 mmol, 1.10 당량)의 교반 혼합물에 크산트포스 (52.49 mg, 0.091 mmol, 0.2 당량), Cs2CO3 (295.57 mg, 0.907 mmol, 2 당량) 및 Pd(OAc)2 (10.18 mg, 0.045 mmol, 0.10 당량)을 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 DCM (3 x 10 mL)으로 세척하였다. 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하여 (컬럼, C18, 330 g; 이동상 A:물/0.05% TFA, 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 20 min 내 40% B 내지 70% B; 검출기, 254 nm, 모니터, 220 nm, 목적하는 생성물은 69% B에서 수거하였다) 3급-부틸 4-[N-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일]메탄설폰아미도]피페리딘-1-카복실레이트 (200 mg, 76%)를 황색 고체로서 수득하였다.
N-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일]페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)-N-(피페리딘-4-일)메탄설폰아미드 (화합물 106). DCM (4 mL) 중의 3급-부틸 4-[[7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)메탄설폰아미도]피페리딘-1-카복실레이트 (50 mg, 0.086 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 TFA (1 mL, 13.463 mmol, 156.62 당량)를 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 포화 NaHCO3 (aq.)으로 pH 8로 염기성화시켰다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 조 생성물 (30 mg)을 Prep-HPLC로 정제하여 N-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)-N-(피페리딘-4-일)메탄설폰아미드 (12.8 mg, 31%)를 황색 고체로서 수득하였다.
실시예 11. 화합물 109의 제조
Figure pct00045
3급-부틸 4-[N-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)-2-메톡시-2-옥소아세트아미도]피페리딘-1-카복실레이트. DCM (10 mL) 중의 3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)아미노]피페리딘-1-카복실레이트 (화합물 102, 50 mg, 0.138 mmol, 1 당량의 합성의 단계 1로부터) 및 TEA(27.89 mg, 0.276 mmol, 2 당량)의 교반 혼합물에 메틸 옥살로클로리데이트 (25.32 mg, 0.207 mmol, 1.50 당량)를 0℃에서 적가하였다, 수득한 혼합물은 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 DCM (3 x 100 mL)으로 추출하였다. 배합된 유기층을 염수 (1 x 100 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하여 (컬럼, C18, 330 g; 이동상 A:물/0.05% TFA, 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 20 min 내 40% B 내지 80% B; 검출기, 254 nm, 모니터, 220 nm, 목적하는 생성물은 74% B에서 수거하였다) 3급-부틸 4-[N-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일]-2-메톡시-2-옥소아세트아미도]피페리딘-1-카복실레이트 (450 mg, 91%)를 분홍색 고체로서 수득하였다.
[[1-(3급-부톡시카보닐)피페리딘-4-일](7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)카바모일]포름산. 1,4-디옥산 (10 mL) 중의 3급-부틸 4-[N-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)-2-메톡시-2-옥소아세트아미도]피페리딘-1-카복실레이트 (400 mg, 0.891 mmol, 1 당량) 및 2-플루오로-4-(피라졸-1-일)아닐린 (189.46 mg, 1.069 mmol, 1.20 당량)의 교반 혼합물에 크산트포스 (103.12 mg, 0.178 mmol, 0.20 당량), Cs2CO3 (580.65 mg, 1.782 mmol, 2 당량) 및 Pd(OAc)2 (20.01 mg, 0.089 mmol, 0.10 당량)을 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 100℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 하였다. 수득한 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 EtOAc (3 x 10 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하여 (컬럼, C18, 330 g; 이동상 A:물/0.05% NH4HCO3, 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 30 min 내 30% B 내지 70% B; 검출기, 254 nm, 모니터, 220 nm, 목적하는 생성물은 57% B에서 수거하였다) [[1-(3급-부톡시카보닐)피페리-4-일](7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일]카바모일]포름산 (100 mg, 19%)를 황색 고체로서 수득하였다.
[(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일) (피페리딘-4-일)카바모일]포름산 (화합물 109). DCM (4 mL) 중의 [[1-(3급-부톡시카보닐)피페리딘-4-일](7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)카바모일]포름산 (100 mg, 1 당량)의 교반 용액에 TFA (1 mL)를 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 포화 NaHCO3 (aq.)으로 pH 8로 염기성화시켰다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 조 생성물 (50 mg)을 Prep-HPLC로 정제하여 [(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)(피페리딘-4-일)카바모일]포름산 (24.1 mg, 29%)을 황색 고체로서 수득하였다.
실시예 12. 화합물 110의 제조
Figure pct00046
메틸 2-[[(1r,4r)-4-하이드록시사이클로헥실]아미노]아세테이트. DMF (10 mL) 중의 (1r,4r)-4-아미노사이클로헥산-1-올 (5 g, 43.412 mmol, 1 당량) 및 메틸 2-브로모아세테이트 (6.64 g, 0.043 mmol, 1 당량)의 교반 혼합물에 DIEA (11.22 g, 0.087 mmol, 2 당량)을 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 110℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 DCM/MeOH (20:1 내지 15:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 2-[[(1r,4r)-4-하이드록시사이클로헥실]아미노]아세테이트 (3 g, 37%)을 백색 고체로서 수득하였다.
메틸 2-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일) [(1r,4r)-4-하이드록시사이클로헥실)아미노]아세테이트. THF (2 mL) 중의 메틸 2-[[(1r,4r)-하이드록시사이클로헥실]아미노]아세테이트 (2 g, 10.682 mmol, 1 당량) 및 2,7-디클로로-1,6-나프티리딘 (1.06 g, 5.341 mmol, 0.50 당량)의 교반 혼합물에 DIEA (1.38 g, 10.678 mmol, 1 당량)를 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 110℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 하였다. 잔사는 PE/EtOAc (20:1 내지 5:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 메틸 2-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일[(1r,4r)-4-하이드록시사이클로헥실]아미노]아세테이트 (200 mg, 36%)을 황색 고체로서 수득하였다.
메틸 2-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일][(1r,4r)-4-하이드록시사이클로헥실]아미노]아세테이트 1,4-디옥산 (10 mL) 중의 메틸 2-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)[(1r,4r)-하이드록시사이클로헥실]아미노]아세테이트 (300 mg, 0.858 mmol, 1 당량) 및 [1-(4-아미노-3-플루오로페닐)피라졸-3-일)메탄올 (195.47 mg, 0.943 mmol, 1.10 당량)의 교반 혼합물에 크산트포스 (148.86 mg, 0.257 mmol, 0.30 당량), Cs2CO3 (558.84 mg, 1.715 mmol, 2 당량) 및 Pd(OAc)2 (28.88 mg, 0.129 mmol, 0.15 당량)을 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 하였다. 수득한 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 EtOAc (3 x 10 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하여 (컬럼, C18, 330 g; 이동상 A:물/0.05% NH4HCO3, 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 20 min 내 20% B 내지 50% B; 검출기, 254 nm 및 220 nm, 목적하는 생성물은 46% B에서 수거하였다) 메틸 2-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일][(1r,4r)-4-하이드록시사이클로헥실]아미노]아세테이트 (200 mg, 45%)를 황색 고체로서 수득하였다.
[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일][(1r,4r)-4-하이드록시사이클로헥실]아미노]아세트산 (화합물 110). THF (10 mL) 및 H2O (2 mL) 중의 메틸 2-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일][(1r,4r)-4-하이드록시사이클로헥실]아미노]아세테이트 (120 mg, 0.231 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 LiOH (27.60 mg, 1.153 mmol, 5 당량)를 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물은 HCl (aq.)을 사용하여 pH 6으로 산성화시켰다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 조 생성물 (100 mg)을 Prep-HPLC로 정제하여 [[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일][(1r,4r)-4-하이드록시사이클로헥실]아미노]아세트산 (71.5 mg, 73%)를 녹색 고체로서 수득하였다.
실시예 13. 화합물 114 및 116의 제조
Figure pct00047
1-3급-부틸 3-메틸 4-아미노-5,6-디하이드로-2H-피리딘-1,3-디카복실레이트. MeOH (100 mL) 중의 1-3급-부틸 3-메틸 4-옥소피페리딘-1,3-디카복실레이트 (4 g, 15.547 mmol, 1 당량에 NH4OAc (3.60 g, 46.641 mmol, 3 당량)을 0℃에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응은 TLC에 의해 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 DCM (3 x 200 mL)으로 추출하였다. 배합된 유기층을 염수 (1 x 300 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축시켰다. 이로써 1-3급-부틸 3-메틸 4-아미노-5,6-디하이드로-2H-피리딘-1,3-디카복실레이트 (3.8 g, 95%)를 백색 고체로서 수득하였다.
1-3급-부틸 3-메틸 4-아미노피페리딘-1,3-디카복실레이트. THF (35 mL) 중의 1-3급-부틸 3-메틸 4-아미노-5,6-디하이드로-2H-피리딘-1,3-디카복실레이트 (3.80 g, 14.826 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 NaBH(OAc)3 (7.86 g, 37.086 mmol, 2.50 당량) 및 HOAc (10 mL, 174.515 mmol, 11.77 당량)을 0℃에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 포화 NaHCO3 (aq.)으로 pH 8로 염기성화시켰다. 수득한 혼합물은 DCM/MeOH (10:1) (3 x 100 mL)로 추출하였다. 배합된 유기층을 염수 (1 x 100 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축시켰다. 이로써 1-3급-부틸 3-메틸 4- 아미노피페리딘-1,3-디카복실레이트 (1.2 g, 31%)를 백색 고체로서 수득하였다.
1-3급-부틸 3-메틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)아미노]피페리딘-1,3-디카복실레이트. THF (5 mL) 중의 1-3급-부틸 3-메틸 4-아미노피페리딘-1,3-디카복실레이트 (500 mg, 1.936 mmol, 1 당량) 및 2,7-디클로로-1,6-나프티리딘 (192.62 mg, 0.968 mmol, 0.5 당량)의 교반 혼합물에 DIEA (250.16 mg, 1.936 mmol, 1 당량)를 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 110℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 하였다. 조 생성물은 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하여 (컬럼, C18,330 g; 이동상: A:물/0.05% TFA, 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 20 min 내 20% B 내지 50% B; 검출기, 254 nm 및 220 nm, 목적하는 생성물은 50% B에서 수거하여) 1-3급-부틸 3-메틸4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)아미노]피페리딘-1,3-디카복실레이트 (500 mg, 61%)를 흰색 고체로서 수득하였다.
1-3급-부틸 3-메틸 4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]아미노]피페리딘-1,3-디카복실레이트. 1,4-디옥산 (10.0 mL) 중의 1-3급-부틸 3-메틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)아미노]피페리딘-1,3-디카복실레이트 (0.50 g, 1.19 mmol) 및 [1-(4-아미노-3-플루오로페닐)피라졸-3-일]메탄올 (0.27 g, 1.31 mmol)의 교반 용액에 크산트포스 (0.21 g, 0.36 mmol), 탄산세슘 (0.77 g, 2.38 mmol) 및 팔라듐 아세테이트 (40.0 mg, 0.18 mmol)를 주위 온도에서 첨가하였다. 반응 혼합물은 3회 동안 질소로 퍼징하고 2시간 동안 100℃에서 질소 대기하에 교반하였다. 수득한 혼합물은 주위 온도로 냉각시키고 여과하였다. 필터 케이크는 에틸 아세테이트 (3 x 10.0 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물은 수거하였고, 감압하에 농축시켜 표제 화합물 (0.27 g, 38%)을 황색 고체로서 수득하였다.
메틸 4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]아미노]피페리딘-3-카복실레이트. MeOH (8 mL) 중의 1-3급-부틸 3-메틸 4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]아미노]피페리딘-1,3-디카복실레이트 (270 mg, 0.456 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 1,4-디옥산 (2 mL) 중의 HCl (가스)을 0℃에서 적가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 포화 NaHCO3 (aq.)으로 pH 8로 염기성화시켰다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사 생성물은 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하여 (컬럼, C18, 330 g; 이동상 A:물/0.05% NH4HCO3, 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 20 min 내 20% B 내지 50% B; 검출기, 254 nm 및 220 nm, 목적하는 생성물은 45% B에서 수거하였다) 메틸 4-[[ 7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]아미노]피페리딘-3-카복실레이트 (150 mg, 66%)를 백색 고체로서 수득하였다. 조 생성물 (150 mg)은 하기의 조건과 함께 Prep-키랄-HPLC로 정제하여 (컬럼: CHIRALPAK IE, 2*25cm, 5 μm; 이동상 A:MTBE (10 mm NH3-MEOH)--HPLC, 이동상 B:EtOH--HPLC; 유속: 20 mL/min; 농도구배: 20 min 내 15 B 내지 15 B; 220/254 nm; RT1:12.224; RT2:14.576) 메틸 (3S,4S)-4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]아미노]피페리딘-3-카복실레이트 및 메틸 (3R,4R)-4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]아미노]피페리딘-3-카복실레이트 (각각 60 mg)를 수득하였다.
(3S,4S)-4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]아미노]피페리딘-3-카복실산 (화합물 116). THF (2 mL) 및 H2O (10 mL) 중의 메틸 (3S, 4S)-4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]아미노]피페리딘-3-카복실레이트 (60 mg, 0.122 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 LiOH (14.62 mg, 0.610 mmol, 5 당량)를 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 조 생성물 (60 mg)을 Prep-HPLC로 정제하여 (3S, 4S)-4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]아미노]피페리딘-3-카복실산 (33.8 mg, 57%)를 황색 고체로서 수득하였다.
(3R,4R)-4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]아미노]피페리딘-3-카복실산 (화합물 114). THF (10 mL) 및 H2O (2 mL) 중의 메틸 (3R, 4R)-4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]아미노]피페리딘-3-카복실레이트 (60 mg, 0.122 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 LiOH (14.62 mg, 0.610 mmol, 5 당량)를 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 조 생성물 (60 mg)을 Prep-HPLC로 정제하여 (3R, 4R)-4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]아미노]피페리딘-3-카복실산 (29.3 mg, 50%)을 황색 고체로서 수득하였다.
실시예 14. 화합물 131의 제조
Figure pct00048
1-벤질-3-메틸 4-아미노-5,6-디하이드로-2H-피리딘-1,3-디카복실레이트. MeOH (100 mL) 중의 1-벤질 3-메틸 4-옥소피페리딘-1,3-디카복실레이트 (3 g, 10.299 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 NH4OAc (2.38 g, 30.896 mmol, 3 당량)을 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 DCM (3 x 300 mL)으로 추출하였다. 배합된 유기층을 염수 (1 x 300 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축시켰다. 이로써 1-벤질-3-메틸 4-아미노-5,6-디하이드로-2H-피리딘-1,3-디카복실레이트 (2.8 g, 93%)를 백색 고체로서 수득하였다.
1-벤질-3-메틸 4-아미노피페리딘-1,3-디카복실레이트. ACN (45 mL) 중의 1-벤질 3-메틸 4-아미노-5,6-디하이드로-2H-피리딘-1,3-디카복실레이트 (2.80 g, 9.645 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 NaBH(OAc)3 (8.18 g, 38.578 mmol, 4 당량) 및 HOAc (30 mL 당량)을 0℃에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사를 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하여 (컬럼, C18,330 g; 이동상: A:물/0.05% NH4HCO3, 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 20 min 내 15% B 내지 35% B; 검출기, 220 nm, 모니터, 254 nm, 목적하는 생성물은 32% B에서 수거하였다) 1-벤질 3-메틸 4-아미노피페리딘-1,3-디카복실레이트 (1.6 g, 56%)을 백색 고체로서 수득하였다.
1-벤질 3-메틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)아미노]피페리딘-1,3-디카복실레이트. THF (2 mL) 중의 1-벤질-3-메틸 4-아미노피페리딘-1,3-디카복실레이트 (800 mg, 2.737 mmol, 1 당량) 및 DIEA (707.37 mg, 5.473 mmol, 2 당량)의 교반 혼합물에 2,7-디클로로-1,6-나프티리딘 (653.60 mg, 3.284 mmol, 1.20 당량)를 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 110℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하여 (컬럼, C18,330 g; 이동상 A:물/0.05% TFA, 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 20 min 내 20% B 내지 50% B; 검출기, 254 nm, 모니터, 220 nm, 목적하는 생성물은 42% B에서 수거하였다) 1-벤질 3-메틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)아미노]피페리딘-1,3-디카복실레이트 (140 mg, 11%)를 수득하였다.
1-벤질 3-메틸 4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]아미노]피페리딘-1,3-디카복실레이트. 1,4-디옥산 (4 mL) 중의 1-벤질 3-메틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)아미노]피페리딘-1,3-디아세테이트 (140 mg, 0.308 mmol, 1 당량) 및 [1-(4-아미노-3-플루오로페닐)피라졸-3-일]메탄올 (76.52 mg, 0.369 mmol, 1.20 당량)의 교반 혼합물에 Pd(OAc)2 (10.36 mg, 0.046 mmol, 0.15 당량), 크산트포스 (53.42 mg, 0.092 mmol, 0.30 당량) 및 Cs2CO3 (200.54 mg, 0.616 mmol, 2 당량)을 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 110℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 하였다. 수득한 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 EtOAc (3 x 10 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하여 (컬럼, C18, 330 g; 이동상 A:물/0.05% TFA, 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 20 min 내 30% B 내지 60% B; 검출기, 254 nm, 모니터, 220 nm, 목적하는 생성물은 48% B에서 수거하였다) 1-벤질 3-메틸 4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일)페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]피페리딘-1,3-디카복실레이트 (110 mg, 57%)를 녹색 고체로서 수득하였다.
메틸 4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]아미노]피페리딘-3-카복실레이트. MeOH (10 mL) 중의 1-벤질 3-메틸 4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]아미노]피페리딘-1,3-디카복실레이트 (110 mg, 0.176 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 Pd/C (9.36 mg, 0.088 mmol, 0.50 당량)를 수소 대기하에 실온에서 적가하였다. 수득한 혼합물은 수소 대기하에 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 MeOH (3 x 20 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압하에 농축시켰다. 조 생성물은 추가의 정제 없이 직접 다음 단계에서 사용하였다.
시스-4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]아미노]피페리딘-3-카복실산 (화합물 131). THF (5 mL) 및 H2O (1 mL) 중의 메틸 4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]아미노]피페리딘-3-카복실레이트 (60 mg, 0.122 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 LiOH (14.62 mg, 0.610 mmol, 5 당량)를 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 조 생성물 (30 mg)을 Prep-HPLC로 정제하여 시스-4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]아미노]피페리딘-3-카복실산 (7 mg, 12%)를 황색 고체로서 수득하였다.
실시예 15. 화합물 140의 제조
Figure pct00049
3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)아미노]-4-메틸피페리딘-1-카복실레이트. THF (2 mL) 중의 3급-부틸 4-아미노-4-메틸피페리딘-1-카복실레이트 (646.06 mg, 3.015 mmol, 1.20 당량) 및 2,7-디클로로-1,6-나프티리딘 (500 mg, 2.512 mmol, 1 당량)의 교반 혼합물에 DIEA (974.05 mg, 7.537 mmol, 3 당량)을 질소 대기하에 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 110℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온에서 냉각되도록 방치하고 감압 농축시켰다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 330 g; 이동상 A: 물 (+ 5 mM NH4NO3); 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 30 min에서 55% B - 95% B 농도구배; 검출기: 245 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물은 83% B에서 수거하였고, 감압하에 농축시켜 3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)아미노]-4-메틸피페리딘-1-카복실레이트 (170 mg, 17%)를 백색 고체로서 수득하였다.
7-클로로-N-(4-메틸피페리딘-4-일)-1,6-나프티리딘-2-아민 ClCH2CH2Cl (10 mL) 중의 3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)아미노]-4-메틸피페리딘-1-카복실레이트 (170 mg, 0.451 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 TFA (1 mL, 13.463 mmol, 29.85 당량)를 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 330 g; 이동상 A: 물 (+ 5 mM NH4NO3); 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 30 min에서 35% B - 65% B 농도구배; 검출기: 254 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물은 59% B에서 수거하였고, 감압하에 농축시켜 7-클로로-N-(4-메틸피페리딘-4-일)-1,6-나프티리딘-2-아민 (50 mg, 40%)를 담갈색 고체로서 수득하였다.
7-클로로-N-(1,4-디메틸피페리딘-4-일)-1,6-나프티리딘-2-아민 THF (5 mL) 중의 7-클로로-N-(4-메틸피페리딘-4-일)-1,6-나프티리딘-2-아민 (50 mg, 0.181 mmol, 1 당량) 및 NaBH(OAc)3 (76.58 mg, 0.361 mmol, 2 당량)의 교반 혼합물에 CH3COOH (21.70 mg, 0.361 mmol, 2 당량) 및 HCHO (10.85 mg, 0.361 mmol, 2 당량)를 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 80℃에서 4시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 하였다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 330 g; 이동상 A: 물 (+ 5 mM NH4NO3); 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 30 min에서 35% B - 75% B 농도구배; 검출기: 254 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물은 59% B에서 수거하고, 감압하에 농축시켜 담갈색 고체로서 7-클로로-N-(1,4-디메틸피페리딘-4-일)-6-나프티리딘-2-아민 (20 mg, 38%)을 수득하였다.
[1-[4-([2-[(1,4-디메틸피페리딘-4-일)아미노]-1,6-나프티리딘-7-일]아미노) -3-플루오로페닐]피라졸-3-일]메탄올 (화합물 140). 1,4-디옥산 (2 mL) 중의 7-클로로-N-(1,4-디메틸피페리딘-4-일)-1,6-나프티리딘-2-아민 (20 mg, 0.069 mmol, 1 당량) 및 [1-(4-아미노-3-플루오로페닐)피라졸-3-일]메탄올 (18.53 mg, 0.089 mmol, 1.30 당량)의 교반 혼합물에 크산트포스 (11.94 mg, 0.021 mmol, 0.30 당량), Cs2CO3 (44.82 mg, 0.138 mmol, 2 당량) 및 팔라듐 아세테이트 (3.09 mg, 0.014 mmol)을 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 하였다. 잔사는 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 (컬럼: Sunfire Prep C18 OBD 컬럼, 10 um,19*250 mm) [1-[4-([2-[(1,4-디메틸피페리딘-4-일)아미노]-1,6-나프티리딘-7-일]아미노)-3-플루오로페닐]피라졸-3-일]메탄올 (5.1 mg, 14%)을 백색 고체로서 수득하였다.
화합물 313 및 318은 적당한 물질로 개시하면서, 화합물 140의 합성을 위해 기재된 바와 같은 방법 및 프로토콜에 따라 합성하였다.
실시예 16. 화합물 162의 제조
Figure pct00050
벤질 4-[(카바모일메틸)아미노]피페리딘-1-카복실레이트: N-에틸-N-이소프로필프로판-2-아민 (10.0 mL) 중의 벤질 4-아미노피페리딘-1-카복실레이트 (3.00 g, 12.8 mmol)의 교반 용액에 주위 온도에서 2-브로모아세트아미드 (1.41 g, 10.2 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물은 16시간 동안 60℃에서 교반시켰다. 수득한 혼합물은 주위 온도로 냉각되도록 하고 감압하에 농축시켰다. 잔사는 컬럼: C18 컬럼 330 g; 이동상 A: 물 (+ 5 mM NH4HCO3); 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 20 min 내 33% B 내지 45% B; 검출기: UV 254/220 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물은 40% B에서 수거하였고, 감압하에 농축시켜 표제 화합물 (2.00 g, 53%)을 백색 고체로서 수득하였다.
벤질 4-[(카바모일메틸)(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)아미노]피페리딘-1-카복실레이트: N-에틸-N-이소프로필프로판-2-아민 (3.00 mL) 중의 2,7-디클로로-1,6-나프티리딘 (0.70 g, 3.52 mmol)의 교반 용액에 주위 온도에서 벤질 4-[(카바모일메틸)아미노]피페리딘-1-카복실레이트 (1.23 g, 4.22 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물은 48시간 동안 100℃에서 교반시켰다 수득한 혼합물은 주위 온도로 냉각되도록 하고 감압하에 농축시켰다. 잔사는 컬럼: C18 컬럼 330 g; 이동상 A: 물 (+ 5 mM NH4HCO3); 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 20 min 내 40% B 내지 70% B; 검출기: UV 254/220 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물은 64% B에서 수거하였고, 감압하에 농축시켜 표제 화합물 (0.70 g, 43%)을 황색 고체로서 수득하였다.
벤질 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)(시아노메틸)아미노]피페리딘-1-카복실레이트: 디클로로메탄 (20.0 mL) 중의 벤질 4-[(카바모일메틸)(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)아미노]피페리딘-1-카복실레이트 (0.70 g, 1.54 mmol) 및 트리플루오로아세트산 무수물 (0.65 g, 3.08 mmol)의 교반 용액에 트리에틸아민 (0.47 g, 4.63 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 반응 용액은 서서히 실온으로 가온시키고 2시간 동안 교반하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 석유 에테르 중 1 내지 50%의 에틸 아세테이트로 용출시키면서 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물 (0.50 g, 74%)을 황색 고체로서 수득하였다.
벤질 4-[(시아노메틸)[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]아미노]피페리딘-1-카복실레이트. 1,4-디옥산 (10.00 mL) 중의 벤질 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)(시아노메틸)아미노]피페리딘-1-카복실레이트 (120 mg, 0.275 mmol, 1 당량) 및 [1-(4-아미노-3-플루오로페닐)피라졸-3-일]메탄올 (62.75 mg, 0.303 mmol, 1.10 당량)의 교반 혼합물에 Pd(OAc)2 (9.27 mg, 0.041 mmol, 0.15 당량), 크산트포스 (47.79 mg, 0.083 mmol, 0.30 당량) 및 Cs2CO3 (179.39 mg, 0.551 mmol, 2.00 당량)을 질소 대기하에 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 하였다. 수득한 혼합물은 EtOAc (3 x 300 mL)로 추출하였다. 배합 유기 층을 염수 (2 x 100 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 120 g; 이동상 A: 물 (+ 5 mM NH4HCO3); 이동상 B: ACN; 유속: 45 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 20 min에서 60% B - 90% B 농도구배; 검출기: 220 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물을 85% B에서 수거하고, 감압하에 농축시켜 벤질 4-[(시아노메틸)[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]아미노]피페리딘-1-카복실레이트 (120 mg, 72%)를 황색 고체로서 수득하였다.
2-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일](피페리딘-4-일)아미노]아세토니트릴 (화합물 162). EtOH (40 mL) 중의 벤질 4-[(시아노메틸)[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]아미노]피페리딘-1-카복실레이트 (100 mg)의 용액에 100 mL의 환저 플라스크에서 질소 대기하에 Pd/C (30 mg)를 첨가하였다. 혼합물을 수소 벌룬을 사용하여 수소 대기 하에 실온에서 48시간 동안 수소화시키고, 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 잔사를 Prep-HPLC로 정제하여 2-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일](피페리딘-4-일)아미노]아세토니트릴 (7.8 mg)을 황색 고체로서 수득하였다.
실시예 17. 화합물 287 및 309의 제조
Figure pct00051
3급-부틸 4-메틸피라졸-1-카복실레이트. DCM (40 mL) 중의 포메피졸(2.50 g, 30.448 mmol, 1 당량) 및 디-3급-부틸 디카보네이트 (7.31 g, 33.5 mmol))의 교반 용액에 DMAP (371.98 mg, 3.045 mmol, 0.10 당량)를 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 수득한 혼합물을 DCM (100 mL)으로 희석시키고, 수득한 혼합물은 희석된 염산 (100 mL, 0.5 N), 물 (100 mL), 포화 염수 (100 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압하에 농축시켜 갈색 오일로서 3급-부틸 4-메틸피라졸-1-카복실레이트 (5.20 g, 93%)를 수득하였다.
3급-부틸 4-[(1H-피라졸-4-일메틸)아미노]피페리딘-1-카복실레이트. 사염화탄소 (80 mL) 중의 3급-부틸 4-메틸피라졸-1-카복실레이트 (4.00 g, 21.9 mmol)의 교반 용액에 주위 온도에서 AIBN (0.36 g, 2.19 mmol) 및 NBS (4.30 g, 24.1 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물은 16시간 동안 70℃에서 교반시켰다. 수득한 혼합물은 주위 온도로 냉각시켰다. 상기 혼합물에 3급-부틸 4-아미노피페리딘-1-카복실레이트 (6.59 g, 32.9 mmol) 및 N-에틸-N-이소프로필프로판-2-아민 (8.50 g, 65.9 mmol)을 첨가하였다. 수득한 혼합물은 추가로 16시간 동안 주위 온도에서 교반하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 컬럼: C18 컬럼 330 g; 이동상 A: 물 (+ 0.05% FA); 이동상 B: ACN; 유속: 45 mL/min; 농도구배: 20 min 내 10% B 내지 35% B; 검출기: UV 254/220 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물은 30% B에서 수거하였고, 감압하에 농축시켜 3급-부틸 4-[(1H-피라졸-4-일메틸)아미노]피페리딘-1-카복실레이트 (2.99 g, 36%)를 황색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일) (1H-피라졸-4-일메틸)아미노]피페리딘-1-카복실레이트. DMF (20 mL) 중의 3급-부틸 4-[(1H-피라졸-4-일메틸)아미노]피페리딘-1-카복실레이트 (1 g, 3.567 mmol, 1 당량), 2,7-디클로로-1,6-나프티리딘 (0.71 g, 3.567 mmol, 1 당량) 및 DIEA (1.38 g, 10.700 mmol, 3 당량은 질소 대기하에 ℃에서 16시간 동안 교반하였다. 수득한 혼합물은 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하였다 (컬럼: 구형 C18, 20~ 40 um, 330 g; 이동상 A: 물 (10 mM NH4HCO3); 이동상 B: ACN; 유속: 85 mL/min; 농도구배(B%): 5%, 5min; 5%~35%, 15 min; 35%~75%,18 min;75%~95%,15 min; 95%, 5 min; 검출기: 220 nm). 목적하는 생성물을 함유하는 분획물은 수거하였고, 감압하에 농축시켜 3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)(1H-피라졸-4-일메틸)아미노]피페리딘-1-카복실레이트 (245 mg, 15%)를 담황색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일) ([[1-옥산-2-일)피라졸-4-일]메틸])아미노]피페리딘-1-카복실레이트. THF (10 mL) 중의 3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)(1 H-피라졸-4-일메틸)아미노]피페리딘-1-카복실레이트 (225 mg, 0.508 mmol, 1 당량) 및 3,4-디하이드로-2H-피란(0.85g, 10.2 mmol)의 교반 용액에 p-톨루엔설폰산 (17.49 mg, 0.102 mmol, 0.20 당량)을 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 DCM/MeOH (100:1 내지 3:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)([[1-옥산-2-일)피라졸-4-일]메틸])아미노]피페리딘-1-카복실레이트 (165 mg, 61%)를 담황색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]([[1-(옥산-2-일)피라졸-4-일]메틸])아미노]피페리딘-1-카복실레이트. 1,4-디옥산 (3 mL) 중의 3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)([[1-(옥산-2-일)피라졸-4-일]메틸])아미노]피페리딘-1-카복실레이트 (50.0 mg, 0.095 mmol) 및 [1-(4-아미노-3-플루오로페닐)피라졸-3-일]메탄올 (21.6 mg, 0.11 mmol)의 교반 용액에 팔라듐 아세테이트 (3.19 mg, 0.014 mmol), 크산트포스 (16.5 mg, 0.028 mmol) 및 탄산세슘 (61.8 mg, 0.19 mmol)를 주위 온도에서 첨가하였다. 반응 혼합물은 3회 동안 질소로 퍼징하고 2시간 동안 100℃에서 질소 대기하에 교반하였다 수득한 혼합물은 주위 온도로 냉각시키고, 물 (20.0 mL)로 희석하고 디클로로메탄 (3 x 20.0 mL)으로 추출하였다. 배합된 유기 층을 염수 (3 x 10.0 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 여과하였다. 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 prep-TLC (디클로로메탄: 메탄올 = 15:1)에 의해 정제하여 표제 화합물 (50.0 mg, LCMS 상의 62% 순도, 75% 수율)을 황색 고체로서 수득하고, 이는 추가의 정제 없이 직접적으로 다음 단계에 사용되었다
[1-(3-플루오로-4-[[2-[피페리딘-4-일(1H-피라졸-4-일메틸)아미노] -1,6-나프티리딘-7-일]아미노)페닐]피라졸-3-일]메탄올 (화합물 287). DCM (4 mL) 중의 3급-부틸 4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]([[1-(옥산-2-일)피라졸-4-일]메틸])아미노]피페리딘-1-카복실레이트 (12 mg)의 교반 용액에 TFA (0.5 mL)를 실온에서 적가하였다. 반응 혼합물은 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 포화된 NaHCO3 (aq.)을 사용하여 pH =8로 염기성화하였다. 수득한 혼합물은 EtOAc (2 x 50 mL)로 추출하였다. 배합 유기 층을 염수 (1 x 50 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 Prep-HPLC에 의해 정제하여 [1-[3-플루오로-4-([2-(피페리딘-4-일(1H-피라졸-4-일메틸)아미노]-1,6-나프티리딘-7-일]아미노)페닐]피라졸-3-일]메탄올 (3.4 mg)을 백색 고체로서 수득하였다.
[1-[3-플루오로-4-([2-[(1-메틸피페리딘-4-일) (1H-피라졸-4-일메틸)아미노] -1,6-나프티리딘-7-일]아미노)페닐]피라졸-3-일]메탄올 (화합물 309). MeOH (5 mL) 중의 [1-[3-플루오로-4-([2-[피페리딘-4-일(1H-피라졸-4-일메틸)아미노]-1,6-나프티리딘-7-일]아미노)페닐]피라졸-3-일]메탄올 (4 mg, 08 mmol, 1 당량) 및 HCHO (0.01 mL, 0.333 mmol, 35.06 당량)의 교반 혼합물에 NaBH3CN (0.73 mg, 0.012 mmol, 1.49 당량)을 0℃에서 적가하였다. 반응 혼합물은 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 잔사는 포화된 NaHCO3 (aq.)을 사용하여 pH=8로 염기성화하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 Prep-HPLC에 의해 정제하여 [1-[3-플루오로-4-([2-[(1-메틸피페리딘-4-일)(1H-피라졸-4-일메틸)아미노]-1,6-나프티리딘-7-일]아미노)페닐]피라졸-3-일]메탄올 (1.4 mg, 34 %)을 백색 고체로서 정제하였다.
실시예 18. 화합물 124의 제조
Figure pct00052
3급-부틸 4-(브로모메틸리덴)피페리딘-1-카복실레이트. THF (50 mL) 중의 (브로모메틸)트리페닐포스파늄 브로마이드 (15321.66 mg, 35.132 mmol, 1.4 당량)의 교반 용액/혼합물에 LiHMDS (7558.01 mg, 45.169 mmol, 1.8 당량)을 질소 대기하에 -20℃에서 분획으로 적가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 -20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물에 3급-부틸 4-옥소피페리딘-1-카복실레이트 (5 g, 25.094 mmol, 1 당량)을 -20℃에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 추가로 16시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 반응은 포화 NH4Cl (aq.)로 실온에서 켄칭하였다. 수득한 혼합물은 EtOAc (3 x 50 mL)로 추출하였다. 배합 유기 층을 염수 (2x 50 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 PE/EtOAc (20:1 내지 5:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 3급-부틸 4-(브로모메틸리덴)피페리딘-1-카복실레이트 (2.5 g, 36%)를 회색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 4-[(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)메틸리덴]피페리딘-1-카복실레이트. 1,4-디옥산 중의 3급-부틸 4-(브로모메틸리덴)피페리딘-1-카복실레이트 (2.50 g, 9.052 mmol, 1 당량) 및 비스 (피나콜라토)디보론 (3.45 g, 13.578 mmol, 1.5 당량)의 교반 용액/혼합물에 Pd(dppf)Cl2 (0.66 g, 0.905 mmol, 0.10 당량) 및 KOAc (2.67 g, 27.157 mmol, 3 당량)을 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응은 실온에서 물로 켄칭하였다. 수득한 혼합물은 EtOAc (3 x 30 mL)로 추출하였다. 배합된 유기층을 염수 (2 x 20 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 PE/EtOAc (5:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 3급-부틸 4-[(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일) 메틸리덴]피페리딘-1-카복실레이트 (1.2 g, 41%)를 회색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)메틸리덴]피페리딘-1-카복실레이트. 디옥산 (100 mL) 중의 2,7-디클로로-1,6-나프티리딘 (1.98 g, 9.948 mmol, 1 당량), 3급-부틸 4-[(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)메틸리덴]피페리딘-1-카복실레이트 (6.43 g, 19.896 mmol, 2 당량), Pd(PPh3)4 (2.30 g, 1.990 mmol, 0.20 당량) 및 H2O (10 mL, 555.084 mmol, 55.80 당량) 중의 Na2CO3 (2.11 g, 19.896 mmol, 2 당량)의 혼합물 및 상기 수득한 혼합물을 N2 대기 하에 40시간 동안 100℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 실온으로 냉각시키고 H2O (100 mL)를 첨가하였다. 수득한 혼합물은 EtOAc (3 x 100 mL)로 추출하였다. 배합 유기 층을 염수 (2 x 100 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압하에 농축시켜 잔사를 수득하고, 이는 PE/EtOAc (4:1 내지 2:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 3급-부틸 4-[(7-클로로 -1,6-나프티리딘-2-일)메틸리덴]피페리딘-1-카복실레이트 (2.0 g, 65% 순도, 36%)를 담황색 오일로서 수득하였다.
3급-부틸 4-[(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일]페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일]메틸리덴]피페리딘-1-카복실레이트. 1,4-디옥산 중의 3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)메틸리덴]피페리딘-1-카복실레이트 (100 mg, 0.278 mmol, 1 당량) 및 2-플루오로-4-(피라졸-1-일)아닐린 (54.16 mg, 0.306 mmol, 1.10 당량)의 교반 용액/혼합물에 Pd(OAc)2 (9.36 mg, 0.042 mmol, 0.15 당량), 크산트포스 (48.24 mg, 0.083 mmol, 0.3 당량) 및 Cs2CO3 (181.09 mg, 0.556 mmol, 2 당량)을 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 110℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 실온에서 물로 켄칭하였다. 수득한 혼합물은 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 배합 유기 층을 염수 (2 x 10 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 DCM/MeOH (10:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 3급-부틸 4-[(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일) 메틸리덴]피페리딘-1-카복실레이트 (80 mg, 57%)를 담갈색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 4-[(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일]페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일]메틸]피페리딘-1-카복실레이트. 에탄올 중의 3급-부틸 4-[(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일]페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)메틸리덴]피페리딘-1-카복실레이트 (80 mg, 0.160 mmol, 1 당량)의 교반 용액/혼합물에 Pd/C (1.70 mg, 0.016 mmol, 0.1 당량)를 수소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 수소 대기하에 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 이어서 수득한 혼합물은 수소 대기하에 50℃에서 4시간 동안 교반하였다. 수득한 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 에탄올 (3 x 10 mL)로 세척하였다. 여과물은 감압하에 농출시켜 3급-부틸 4-[(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)메틸]피페리딘-1-카복실레이트 (80 mg, 조물질)를 갈색 오일로서 수득하였다.
N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-2-(피페리딘-4-일메틸)-1,6-나프티리딘-7-아민 (화합물 124). DCM 중의 (4-[(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)메틸]피페리딘-1-카복실레이트 (80 mg)의 교반 용액/혼합물에 TFA (0.50 mL)를 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 조 생성물 (40 mg)은 Prep-HPLC로 정제하여 적색 고체로서 N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-2-(피페리딘-4-일메틸)-1,6-나프티리딘-7-아민; 트리플루오로아세트산 (9 mg)을 적색 고체로서 수득하였다.
실시예 19. 화합물 130의 제조
Figure pct00053
ClCH2CH2 (6 mL) 중의 3급-부틸 4-[[7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)메틸리덴]피페리딘-1-카복실레이트 (100 mg, 0.200 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 TFA (0.60 mL, 8.078 mmol, 40.44 당량)를 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 Prep-HPLC로 정제하여 N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-2-(피페리딘-4-일리덴메틸)-1,6-나프티리딘-7-아민 (3.1 mg, 3%)을 황색 고체로서 수득하였다.
실시예 20. 화합물 150의 제조
Figure pct00054
7-클로로-2-(피페리딘-4-일리덴메틸)-1,6-나프티리딘. THF (5 mL) 중의 3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)메틸리덴]피페리딘-1-카복실레이트 (화합물 124 단계 3, 200 mg)의 교반 용액에 1,4-디옥산 (5 mL) 중의 HCl (가스)을 질소 대기하에 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 330 g; 이동상 A: 물 (0.5%TFA); 이동상 B: ACN; 유속: 85 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 20 min에서 33% B - 45% B 농도구배; 검출기: 254 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물은 40% B에서 수거하였고, 감압하에 농축시켜 7-클로로-2-(피페리딘-4-일리덴메틸)-1,6-나프티리딘 (90 mg, 62%)을 황색 고체로서 수득하였다.
7-클로로-2-[(1-메틸피페리딘-4-일리덴)메틸]-1,6-나프티리딘 THF (3 mL, 370.290 mmol, 320.60 당량) 중의 7-클로로-2-(피페리딘-4-일리덴메틸)-1,6-나프티리딘 (300 mg, 1.155 mmol, 1 당량) 및 HCHO (52.02 mg, 1.733 mmol, 1.5 당량)의 교반 용액에 NaBH(OAc)3 (367.19 mg, 1.733 mmol, 1.5 당량)을 질소 대기하에 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 330 g; 이동상 A: 물 (0.5%TFA); 이동상 B: ACN; 유속: 85 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 20 min에서 33% B - 45% B 농도구배; 검출기: 254 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물은 40% B에서 수거하였고, 감압하에 농축시켜 7-클로로-2-[(1-메틸피페리딘-4-일리덴)메틸]-1,6-나프티리딘 (130 mg, 41%)을 황색 고체로서 수득하였다.
[1-[3-플루오로-4-([2-[(1-메틸피페리딘-4-일리덴)메틸] -1,6-나프티리딘-7-일]아미노)페닐]피라졸-3-일]메탄올. 1,4-디옥산 (20 mL) 중의 7-클로로-2-[(1-메틸피페리딘-4-일리덴)메틸]-1,6-나프티리딘 (54 mg, 0.197 mmol, 1 당량), [1-(4-아미노-3-플루오로페닐)피라졸-3-일]메탄올 (44.96 mg, 0.217 mmol, 1.10 당량), 크산트포스 (34.24 mg, 0.059 mmol, 0.3 당량) 및 Cs2CO3 (128.54 mg, 0.395 mmol, 2.0 당량)의 교반 용액에 Pd(OAc)2 (6.64 mg, 0.030 mmol, 0.15 당량)을 질소 대기하에 실온에서 적가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 하였다. 수득한 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 에틸 아세테이트 (3 x 20 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 330 g; 이동상 A: 물 (10 mM NH4CO3); 이동상 B: ACN; 유속: 85 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 20 min에서 33% B - 45% B 농도구배; 검출기: 254 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물은 40% B에서 수거하였고, 감압하에 농축시켜 [1-[3-플루오로-4-([2-[(1-메틸피페리딘-4-일리덴)메틸]-1,6-나프티리딘-7-일]아미노)페닐]피라졸-3-일]메탄올 (5.8 mg, 6%)을 황색 고체로서 수득하였다
실시예 21. 화합물 209 및 240의 제조
Figure pct00055
3급-부틸 4-[(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일]페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)(하이드록시)메틸]-4-하이드록시피페리딘-1-카복실레이트. 아세톤 (1.50 mL) 중의 3급-부틸 4-[(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)메틸리덴]피페리딘-1-카복실레이트 (화합물 124 단계 4, 25 mg, 1 당량) 및 NMO (15 mg, 2.50 당량)의 교반된 혼합물에 K2OsO4.2H2O (2 mg, 0.10 당량) 및 H2O (0.15 mL)를 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 하였다. 수득한 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 EtOAc (3 x 10 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 Prep-TLC (DCM/MeOH 100:1)로 정제하여 3급-부틸 4-[(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일) (하이드록시)메틸]-4-하이드록시피페리딘-1-카복실레이트 (26 mg)를 황색 고체로서 수득하였다.
4-[(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일]페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)(하이드록시)메틸] 피페리딘-4-올)(화합물 209). DCM (10 mL) 중의 3급-부틸 4-[(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)(하이드록시)메틸]-4-하이드록시피페리딘-1-카복실레이트 (110 mg, 1 당량)의 교반 용액에 TFA (1 mL)를 0℃에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 포화 NaHCO3 (aq.)으로 pH 8로 염기성화시켰다.수득한 고체는 감압하에 오븐에서 건조시켜 4-[(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일) (하이드록시)메틸]피페리딘-4-올 (6.7 mg)를 황색 고체로서 수득하였다.
4-[(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일]페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)(하이드록시)메틸]-1-메틸피페리딘-4-올 (화합물 240). DCM (5 mL) 중의 4-[(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)(하이드록시)메틸]피페리딘-4-올 (82 mg, 3.286 mmol, 1 당량) 및 HCHO (27.30 mg, 4.272 mmol, 2 당량)의 교반 혼합물에 NaBH(OAc)3 (53.40 mg, 0.329 mmol, 1.50 당량)을 실온에서 적가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 Prep-HPLC로 정제하여 4-[(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일) (하이드록시)메틸]-1-메틸피페리딘-4-올 (27.3mg)를 담황색 고체로서 수득하였다.
실시예 22. 화합물 164의 제조
Figure pct00056
3급-부틸 1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)-6-아자스피로[2.5]옥탄-6-카복실레이트. DMSO (40 mL) 중의 3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티디린-2-일)메틸리덴]피페리딘-1-카복실레이트 (화합물 124 단계 3, 430 mg, 1.195 mmol, 1 당량)의 용액에 DMSO(20 mL) 중의 t-BuONa (172.26 mg, 1.792 mmol, 1.50 당량) 및 트리메틸(옥소)-l^[6]-설파닐륨 요오다이드 (394.46 mg, 1.792 mmol, 1.50 당량)을 0℃에서 N2 대기하에 적가하였다. 수득한 혼합물을 70℃로 가온하고 16시간 동안 70℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 실온으로 냉각시키고, DCM (100 mL) 및 H2O (100 mL)를 첨가하였다. 수득한 혼합물은 DCM (5 x 100 mL)으로 추출하였다. 배합 유기 층을 염수 (3 x 100 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압하에 농축시켜 잔사를 수득하고, 이는 PE/EtOAc (4:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 3급-부틸 1-(7-클로로 -1,6-나프티리딘-2-일)-6-아자스피로[2.5]옥탄-6-카복실레이트 (288 mg , 64%)를 담황색 반고체로서 수득하였다.
3급-부틸 1-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일]페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)-6-아자스피로[2.5]옥탄-6-카복실레이트 5 mL의 마이크로파 바이알에 3급-부틸 1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)-6-아자스피로[2.5]옥탄-6-카복실레이트 (37.40 mg, 0.100 mmol, 1 당량), 2-플루오로-4-(피라졸-1-일)아닐린 (17.72 mg, 0.100 mmol, 1 당량), Pd(OAc)2 (3.37 mg, 0.015 mmol, 0.15 당량), 크산트포스 (17.36 mg, 0.030 mmol, 0.30 당량), Cs2CO3 (65.18 mg, 0.200 mmol, 2 당량) 및 디옥산 (2 mL, 23.608 mmol, 236.01 당량)을 충전시키고 상기 수득한 혼합물은 밀봉된 튜브를 통해 N2 대기하에 2시간 동안 100℃에서 교반하였다. 목적하는 생성물은 LCMS에 의해 검출될 있고, 어떠한 후처리를 수행하지 않았다.
2-[6-아자스피로[2.5]옥탄-1-일]-N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-1,6-나프티리딘-7-아민. DCM (20 mL, 314.601 mmol, 1079.30 당량) 및 TFA (2 mL, 26.926 mmol, 92.38 당량) 중의 3급-부틸 1-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)-6-아자스피로[2.5]옥탄-6-카복실레이트 (150 mg, 0.291 mmol, 1 당량)를 1.5시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 NaHCO3 (aq)를 사용하여 pH 9로 염기성화시킴에 이어서 수득한 혼합물은 DCM (5 x 100 mL)으로 추출하였다. 배합 유기 층을 염수 (2 x 100 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압 농축시켜 추가의 정제 없이 2-[6-아자스피로[2.5]옥탄-1-일]-N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-1,6-나프티리딘-7-아민 (150 mg, 96%)을 담황색 고체로서 수득하였다.
N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-2-[6-메틸-6-아자스피로[2.5]옥탄-1-일]-1,6-나프티리딘-7-아민. THF (10 mL) 및 NaBH(OAc)3 (89.74 mg, 0.423 mmol, 1.50 당량) 중의 2-[6-아자스피로[2.5]옥탄-1-일]-N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-1,6-나프티리딘-7-아민 (150 mg, 0.282 mmol, 1 당량, 78%), HCHO (34.36 mg, 0.423 mmol, 1.50 당량, 37%)의 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응은 실온에서 H2O (20 mL)의 첨가로 켄칭시키고 수득한 혼합물은 DCM (3 x 100 mL)으로 추출하였다. 배합 유기층을 염수 (100 mL)로 세척하고 감압하에 농축시켜 잔사를 수득하고, 이는 컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 μm; 이동상 A: 물 (10 mM NH4HCO3), 이동상 B: ACN; 유속:60 mL/min; 농도구배:7 min 40 B 내지 60 B; 254/220 nm; RT1: 6.5 min의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-2-[6-메틸-6-아자스피로[2.5]옥탄-1-일]-1,6-나프티리딘-7-아민 (54.9 mg, 45%)을 담황색 고체로서 수득하였다.
실시예 23. 화합물 141 및 149의 제조
Figure pct00057
3급-부틸 4-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일]페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-카보닐)피페리딘-1-카복실레이트. 무수 1,4-디옥산 (15 mL) 중의 3급-부틸 4-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-카보닐)피페리딘-1-카복실레이트 (150 mg, 0.399 mmol, 1 당량) 및 2-플루오로-4-(피라졸-1-일)아닐린 (84.86 mg, 0.479 mmol, 1.2 당량)의 교반 혼합물에 Cs2CO3 (260.07 mg, 0.798 mmol, 2 당량), Pd(OAc)2 (13.44 mg, 0.060 mmol, 1.5 당량) 및 크산트포스 (69.28 mg, 0.120 mmol, 0.3 당량)을 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 수득한 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 DCM 및 MeOH (10:1)의 용액으로 세척하였다. 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 Prep-TLC (DCM/MeOH, 40:1)로 정제하여 3급-부틸 4-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-카보닐) 피페리딘-1-카복실레이트 (140 mg, 67%)를 황색 고체로서 수득하였다.
N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-2-(피페리딘-4-카보닐)-1,6-나프티리딘-7-아민 (화합물 141). DCM (18 mg) 중의 3급-부틸 4-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-카보닐)피페리딘-1-카복실레이트 (140 mg)의 교반 용액에 TFA (2 mL)를 0℃에서 적가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 수득한 혼합물은 진공 농축시켰다. 잔사는 DCM (50 mL) 중에 용해시키고, 포화된 NaHCO3 (aq.)을 사용하여 pH 8로 염기성화하였다. 수득한 혼합물은 DCM (2 x 50 mL)으로 추출하였다. 배합 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 Prep-TLC (DCM/MeOH 20:1)로 정제하여 N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-2-(피페리딘-4-카보닐)-1,6-나프티리딘-7-아민 (100 mg)을 황색 고체로서 수득하였다.
(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일]페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)(피페리딘-4-일)메탄올 (화합물 149). MeOH (10 mL) 중의 N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-2-(피페리딘-4-카보닐)-1,6-나프티리딘-7-아민 (100 mg, 0.240 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 NaBH4 (18.17 mg, 0.480 mmol, 2 당량)를 0℃에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 수득한 혼합물은 진공 농축시켰다. 조 생성물을 Prep-HPLC로 정제하여 (7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)(피페리딘-4-일)메탄올 (80 mg, 79%)를 담황색 고체로서 수득하였다.
실시예 24. 화합물 247 및 254의 제조
Figure pct00058
3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)(하이드록시)메틸]피페리딘-1-카복실레이트. MeOH (5 mL) 중의 3급-부틸 4-(7-클로로-1,6-나프티리딘 -2-카보닐)피페리딘-1-카복실레이트 (200 mg, 0.532 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 NaBH4 (30.20 mg, 0.798 mmol, 1.50 당량)를 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 0℃에서 10분 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하였다 (컬럼, C18,120 g; 이동상 A:물/0.05% NH4HCO3, 이동상 B: ACN; 유속: 40 mL/min; 구배: 20분 동안 40% B 내지 85% B; 검출기, 254 nm 및 220 nm, 목적하는 생성물은 68% B에서 수거하였다). 감압하에 농축시켜 3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일) (하이드록시)메틸]피페리딘-1-카복실레이트 (130 mg, 64%)을 백색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일](하이드록시)메틸]피페리딘-1-카복실레이트. 1,4-디옥산 (15 mL) 중의 3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)(하이드록시)메틸]피페리딘-1-카복실레이트 (450 mg, 1.191 mmol, 1 당량) 및 [1-(4-아미노-3-플루오로페닐)피라졸-3-일]메탄올 (271.44 mg, 1.310 mmol, 1.10 당량)의 교반 혼합물에 Pd(OAc)2 (40.10 mg, 0.179 mmol, 0.15 당량), 크산트포스 (206.72 mg, 0.357 mmol, 0.30 당량) 및 Cs2CO3 (776.03 mg, 2.382 mmol, 2 당량)을 질소 대기하에 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 80℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 방치하였다. 수득한 혼합물은 EtOAc (3 x 300 mL)로 추출하였다. 배합 유기 층을 염수 (2 x 100 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 330 g; 이동상 A: 물 (+ 5 mM FA); 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 25 min에서 30% B - 60% B 농도구배; 검출기: 220 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물을 55% B에서 수거하고, 감압하에 농축시켜 3급-부틸 4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일](하이드록시)메틸]피페리딘-1-카복실레이트 (280 mg, 42%)를 황색 고체로서 수득하였다.
[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일](피페리딘-4-일)메탄올. DCM (10 mL) 중의 3급-부틸 4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일](하이드록시)메틸]피페리딘-1-카복실레이트 (280 mg, 1 당량)의 교반 용액에 TFA (1 mL)를 0℃에서 적가하였다. 반응 혼합물은 0℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 포화된 NaHCO3 (aq.)을 사용하여 pH =8로 염기성화하였다. 수득한 혼합물은 EtOAc (3 x 200 mL)로 추출하였다. 배합 유기 층을 염수 (1 x 100 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 120 g 이동상 A: 물 (+ 5 mM NH4HCO3); 이동상 B: ACN; 유속: 40 mL/min; 구배: 5% - 5% B, 8min, 20 min에서 45% B - 70% B 농도구배; 검출기: 220 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물을 65% B에서 수거하고, 감압하에 농축시켜 [7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일](피페리딘-4-일)메탄올 (180 mg)을 황색 고체로서 수득하였다.
(R)- 및 (S)-[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일](1-메틸피페리딘-4-일)메탄올 (화합물 247 및 254). THF (10 mL) 중의 [7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)(피페리딘-4-일)메탄올 (90 mg, 0.201 mmol, 1 당량) 및 HCHO (0.50 mL, 13.655 mmol, 68.05 당량)의 교반 혼합물에 NaBH(OAc)3 (63.79 mg, 0.301 mmol, 1.50 당량)을 질소 대기하에 0℃에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 DCM (3 x 300 mL)으로 추출하였다. 배합 유기 층을 염수 (2 x 200 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 120 g; 이동상 A: 물 (+ 5 mM FA); 이동상 B: ACN; 유속: 45 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 25 min에서 35% B - 65% B 농도구배; 검출기: 220 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물은 65% B에서 수거하였고, 감압하에 농축시켜 라세미체 40 mg을 수득하였다. 라세미체는 하기의 조건과 함께 키랄-Prep-HPLC에 의해 정제하였다 (컬럼: CHIRALPAK IG, 2*25 cm, 5 um; 이동상 A: Hex:DCM = 3:1 (10 mM NH3-MeOH), 이동상 B: EtOH:DCM = 1:1; 유속:19 mL/min; 농도구배 (%): 12 min 내 60 B 내지 60 B; 검출기: 220/254 nm.). [7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일](1-메틸피페리딘-4-일)메탄올의 분리된 에난티오머를 수득하였다.
화합물 247은 6.254 min에 황색 고체로서 용출되었다. 화합물 254는 9.587 min에 황색 고체로서 용출되었다.
화합물 241 및 243은 적당한 물질로 개시하면서, 화합물 247 및 254의 합성을 위해 기재된 바와 같은 방법 및 프로토콜에 따라 합성하였다.
실시예 25. 화합물 252 및 255의 제조
Figure pct00059
DMF (6 mL) 중의 [7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일)페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일)(피페리딘-4-일)메탄올 (화합물 247, 단계 3, 90 mg, 0.201 mmol, 1 당량) 및 에탄올, 2-요오도- (69.02 mg, 0.401 mmol, 2 당량)의 교반된 혼합물에 TEA (60.92 mg, 0.602 mmol, 3 당량)를 질소 대기하에 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 120 g; 이동상 A: 물 (+ 5 mM FA); 이동상 B: ACN; 유속: 45 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 25 min에서 36% B - 70% B 농도구배; 검출기: 220 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물은 66% B에서 수거하였고, 감압하에 농축시켜 라세미체 70 mg을 수득하였다. 라세미체는 하기의 조건과 함께 키랄-Prep-HPLC에 의해 정제하였다 (컬럼: CHIRALPAK IG, 2*25 cm, 5 um; 이동상 A: Hex:DCM = 3:1 (10 mM NH3-MeOH), 이동상 B: EtOH:DCM = 1:1; 유속: 20 mL/min; 농도구배 (%): 13 min 내 60 B 내지 60 B; 검출기: 220/254 nm.). 2-(4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일] (하이드록시)메틸]피페리딘-1-일)에탄올의 분리된 에난티오머를 수득하였다.
화합물 252는 10.754 min에 황색 고체로서 용출되었다. 화합물 255는 8.52 min에 황색 고체로서 용출되었다.
실시예 26. 화합물 250 및 251의 제조
Figure pct00060
3'-플루오로-4'-[[2-(피페리딘-4-카보닐)-1,6-나프티리딘-7-일]아미노]-[1,1'-바이페닐]-3-카보니트릴. DCM (3 mL) 중의 3급-부틸 4-[7-([3-시아노-3-플루오로-[1,1-바이페닐]-4-일]아미노)-1,6-나프티리딘-2-카보닐]피페리딘-1-카복실레이트 (화합물 141, 단계 1, 100 mg, 1 당량과 유사한 방법을 통해 제조된)의 교반된 용액에 TFA (0.30 mL)을 질소 대기하에 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 PE/EtOAc (10/1 내지 1/1)로 용출시키면서 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 3'-플루오로-4'-[[2-(피페리딘-4-카보닐)-1,6-나프티리딘-7-일]아미노]-[1,1’-바이페닐]-3-카보니트릴 (20 mg, 24%)을 황색 고체로서 수득하였다.
3'-플루오로-4'-([2-[1-(2-하이드록시에틸)피페리딘-4-카보닐] -1,6-나프티리딘-7-일]아미노)-[1,1'-바이페닐]-3-카보니트릴 DMF (2.50 mL) 중의 3'-플루오로-4'-[[2-(피페리딘-4-카보닐)-1,6-나프티리딘-7-일]아미노]-[1,1’-바이페닐]-3-카보니트릴 (86 mg, 0.190 mmol, 1 당량) 및 에탄올, 2-요오도-(39.31 mg, 0.229 mmol, 1.2 당량)의 교반된 혼합물에 TEA (38.55 mg, 0.381 mmol, 2 당량)를 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하여 (컬럼, C18,330 g; 이동상 A:물/0.05% NH4HCO3, 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 20 min 내 20% B 내지 50% B; 검출기, 254 nm, 모니터, 220 nm, 목적하는 생성물은 45% B에서 수거하였다) 3'-플루오로-4'-([2-[1-(2-하이드록시에틸)피페리딘-4-카보닐]-1,6-나프티리딘-7-일]아미노)-[1,1'-바이페닐]-3-카보니트릴 (70 mg, 74%)을 황색 고체로서 수득하였다.
(R)- 및 (S)-3'-플루오로-4'-[(2-[하이드록시[1-(2-하이드록시에틸)피페리딘-4-일]메틸]-1,6-나프티리딘-7-일)아미노]-[1,1'-바이페닐]-3-카보니트릴 (화합물 250 및 251). MeOH (2 mL) 중의 3'-플루오로-4'-([2-[1-(2-하이드록시에틸)피페리딘-4-카보닐]-1,6-나프티리딘-7-일]아미노)-[1,1’-바이페닐]-3-카보니트릴 (70 mg, 0.141 mmol, 1 당량)에 실온에서 NaBH4 (8.02 mg, 0.212 mmol, 1.5 당량)를 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 컬럼, C18 실리카 겔; 이동상, 물 중 MeOH, 10 min 내 30% 내지 50%; 검출기, UV 254 nm의 조건과 함께 역상 크로마토그래피에 의해 정제하여 55 mg의 라세미체를 수득하였다. 상기 라세미체는 하기의 조건과 함께 SFC에 의해 분리하였다: 컬럼: CHIRALPAK IG, 2 x 25 cm, 5 um; 이동상 A: Hex (+ 10 mM NH3), 이동상 B: EtOH: DCM = 1: 1; 유속: 17 mL/분; 농도구배: 12 min 내 등용매 90B; 검출기: UV 220/254 nm; RT1: 6.247 min; RT 2: 9.324 min.
화합물 250 - 수율: 20.4 mg. 화합물 251 - 수율: 21.9 mg
실시예 27. 화합물 217의 제조
Figure pct00061
THF (2 mL) 중의 N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-2-(피페리딘-4-카보닐)-1,6-나프티리딘-7-아민 (80 mg, 0.192 mmol, 1 당량), 포름알데하이드 용액 (20.27 mg, 0.250 mmol, 1.30 당량, 37%) 및 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (122.14 mg, 0.576 mmol, 3 당량)의 혼합물을 질소 대기하에 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 Prep-HPLC로 정제하여 N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-2-(1-메틸피페리딘-4-카보닐)-1,6-나프티리딘-7-아민 (46.6 mg, 56%)을 오렌지 고체로서 수득하였다.
실시예 28. 화합물 175 및 176의 제조
Figure pct00062
MeOH (10 mL) 중의 N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-2-(1-메틸피페리딘-4-카보닐)-1,6-나프티리딘-7-아민 (150 mg, 0.348 mmol, 1 당량)의 교반 혼합물에 NaBH4 (26.37 mg, 0.697 mmol, 2 당량)를 0℃에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 수득한 혼합물은 진공 농축시켰다. 잔사는 하기의 조건과 함께 역상 크로마토그래피로 정제하였다: 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 330 g; 이동상 A: 물 (+ 5 mM NH4HCO3; 이동상 B: ACN; 유속: 45 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 20 min에서 20% B - 40% B 농도구배; 검출기: 254 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물은 33% B에서 수거하였고, 감압하에 농축시켜 라세미체 120 mg을 수득하였다. 라세미체는 하기의 조건과 함께 키랄-HPCL로 정제하였다 (컬럼: CHIRALPAK IG, 2*25cm, 5 μm; 이동상 A: Hex (10 mm NH3), 이동상 B:EtOH:DCM=1:1--HPLC; 유속: 20 mL/min; 농도구배: 18 min 내 60 B 내지 60 B; 220/254 nm; RT1:5.664; RT2:9.823). (R)- 및 (S)-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일) (1-메틸피페리딘-4-일)메탄올을 수득하였다.
화합물 175 - 수율: 50.9 mg. 화합물 176 - 수율: 46.3 mg.
화합물 344 및 347은 적당한 물질로 개시하면서, 화합물 175 및 176의 합성을 위해 기재된 바와 같은 방법 및 프로토콜에 따라 합성하였다.
실시예 29. 화합물 292의 제조
Figure pct00063
1-(3-플루오로-4-[[2-(1-메틸피페리딘-4-카보닐)-1,6-나프티리딘-7-일]아미노]페닐)피라졸-3-카복실산. THF (5 mL) 중의 메틸 1-(3-플루오로-4-[[2-(1-메틸피페리딘-4-카보닐)-1,6-나프티리딘-7-일]아미노]페닐)피라졸-3-카복실레이트 (화합물 217, 80 mg, 0.164 mmol, 1 당량과 유사한 과정을 통해 제조된)의 교반 용액에 LiOH (19.61 mg, 0.819 mmol, 5 당량) 및 H2O (2 mL)를 0℃에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하였다 (컬럼, C18, 120 g; 이동상 A:물/0.05% NH4HCO3, 이동상 B: ACN; 유속: 40 mL/min; 농도구배: 20분에서 25% B 내지 55% B; 검출기, 254 nm 및 220 nm, 목적하는 생성물은 38% B에서 수거하였다).감압 농축시켜 1-(3-플루오로-4-[[2-(1-메틸피페리딘-4-카보닐)-1,6-나프티리딘-7-일]아미노]페닐)피라졸-3-카복실산 (55 mg, 70%)을 오렌지 고체로서 수득하였다.
1-[3-플루오로-4-([2-[하이드록시(1-메틸피페리딘-4-일)메틸] -1,6-나프티리딘-7-일]아미노]페닐]피라졸-3-카복실산. MeOH (3 mL) 중의 1-(3-플루오로-4-[[2-(1-메틸피페리딘-4-카보닐)-1,6-나프티리딘-7-일]아미노]페닐)피라졸-3-카복실산 (55 mg, 0.116 mmol, 1 당량)에 NaBH4 (5.26 mg, 0.139 mmol, 1.20 당량)을 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 0℃에서 10분 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하였다: (컬럼: XBridge Shield RP18 OBD 컬럼, 5μm,19*150 mm). 감압 농축시켜 1-[3-플루오로-4-([2-[하이드록시(1-메틸피페리딘-4-일)메틸]-1,6-나프티리딘-7-일]아미노]페닐)피라졸-3-카복실산 (14.6 mg, 26%)을 황색 고체로서 수득하였다.
실시예 30. 화합물 387 및 391의 제조
Figure pct00064
3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)(메톡시)메틸]피페리딘-1-카복실레이트. DMF (10 mL) 중의 3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)(하이드록시)메틸]피페리딘-1-카복실레이트 (화합물 247, 단계 1, 120 mg, 0.318 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 NaH (11.43 mg, 0.476 mmol, 1.5 당량)를 질소 대기하에 0℃에서 적가하였다, 수득한 혼합물은 질소 대기하에 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 혼합물에 질소 대기하에 0℃에서 CH3I (90.15 mg, 0.635 mmol, 2.0 당량)를 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 실온에서 1시간 동안 교반하였. 반응은 포화 NH4Cl (aq.)로 실온에서 켄칭하였다. 수득한 혼합물은 EtOAc (2 x 50 mL)로 추출하였다. 배합 유기 층을 염수 (1 x 30 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 PE:EA (10:1)로 용출시키면서 TLC에 의해 정제하여 3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일) (메톡시)메틸]피페리딘-1-카복실레이트 (73 mg, 58%)를 백색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 4-[(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일]페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)(메톡시)메틸]피페리딘-1-카복실레이트. 디옥산 (2 mL) 중에 3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일) (메톡시)메틸]피페리딘-1-카복실레이트 (70 mg, 0.179 mmol, 1 당량), 2-플루오로-4-(피라졸-1-일)아닐린 (47.47 mg, 0.268 mmol, 1.5 당량), 브레트포스 Pd G3 (32.37 mg, 0.036 mmol, 0.20 당량) 및 Alphos (58.23 mg, 0.071 mmol, 0.40 당량)의 교반 용액에 DBU (81.58 mg, 0.536 mmol, 3 당량)를 질소 대기하에 25℃에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 66℃에서 2시간 동안 교반하였다. 수득한 혼합물은 진공 농축시켰다. 잔사는 DCM/MeOH (10:1)로 용출시키면서, TLC로 정제하여 3급-부틸 4-[(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일) (메톡시)메틸]피페리딘-1-카복실레이트 (55 mg, 57%)를 백색 고체로서 수득하였다.
(R)- 및 (S)-N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-2-[메톡시(1-메틸피페리딘-4-일)메틸]-1,6-나프티리딘-7-아민 (화합물 387 및 391). DCM (50 mL) 중의 3급-부틸 4-[(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일) (메톡시)메틸]피페리딘-1-카복실레이트 (55 mg, 0.103 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 TFA (5 mL)를 질소 대기하에 실온에서 적가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 실온에서 1시간 동안 교반하였다 반응은 TLC에 의해 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 수득한 혼합물은 DCM (15 mL)으로 희석하였다. 혼합물에 Et3N (10 mL)을 첨가하였다. 수득한 혼합물은 1시간 동안 교반시키고 감압하에 농축시켰다. 상기 혼합물은 THF (15 mL, 246.860 mmol)로 희석시키고, 여기에 HCHO (3.72 mg, 0.124 mmol, 1.2 당량), NaBH(OAc)3 (30.64 mg, 0.145 mmol, 1.4 당량)을 첨가하였다. 수득한 혼합물은 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 반응은 실온에서 포화 NaHCO3 (aq.)으로 켄칭하였다. 수득한 혼합물은 진공 농축시켰다. 잔사는 Prep-TLC (DCM/MeOH 5:1)로 정제하여 20 mg의 라세미체를 수득하였다. 라세미체는 하기의 조건과 함께 SFC에 의해 분리하였다: 컬럼: CHIRALPAK IG, 2*25cm, 5 μm; 이동상 A: Hex (10 mm NH3), 이동상 B:EtOH:DCM=1:1--HPLC; 유속: 20 mL/min; 농도구배: 20min 내 25 B 내지 25 B; 220/254 nm; RT1:16.404 min; RT2:18.501min. (R)- 및 (S)-(N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-2-[메톡시(1-메틸피페리딘-4-일)메틸]-1,6-나프티리딘-7-아민을 수득하였다.
화합물 387 - 16.4 min에서 용출됨; 수율: 3.2 mg. 화합물 391 - 18.5 min에서 용출됨; 수율: 5.4 mg.
실시예 31. 화합물 165의 제조
Figure pct00065
3급-부틸 4-[아미노(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일]페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일]메틸]피페리딘-1-카복실레이트. THF (20 mL) 중의 3급-부틸 4-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-카보닐)피페리딘-1-카복실레이트 (200 mg, 0.387 mmol, 1 당량) 및 테트라에톡시티타늄 (88.32 mg, 0.387 mmol, 1 당량)에 MeOH 중의 NH3(g)의 용액 (0.17 mL, 1.190 mmol, 3.07 당량)을 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. MeOH (20 mL) 중의 3급-부틸 4-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-카복스이미돌)피페리딘-1-카복실레이트의 조 생성물 (280 mg, 조 생성물)에 NaBH4 (30.82 mg, 0.815 mmol, 1.50 당량)를 0℃에서 분획으로 충전하였다. 수득한 혼합물은 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 Prep-TLC (DCM/MeOH 5:1)로 정제하여 3급-부틸 4-[아미노(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)메틸] 피페리딘-1-카복실레이트 (70 mg, 24%)를 황색 발포로서 수득하였다.
2-[아미노(피페리딘-4-일)메틸]-N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-1,6-나프티리딘-7-아민 (화합물 165). DCM (10 mL) 중의 3급-부틸 4-[아미노(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)메틸]피페리딘-1-카복실레이트 (50 mg, 0.097 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 ZnBr2 (217.56 mg, 0.966 mmol, 10 당량)를 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 50℃에서 16시간 동안 교반하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 330 g; 이동상 A: 물 + 0.5% FA); 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 25 min에서 10% B - 30% B 농도구배; 검출기: 254 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물을 18% B에서 수거하고, 감압하에 농축시켜 2-[아미노(피페리딘-4-일)메틸]-N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-1,6-나프티리딘-7-아미늄 디포르메이트 (28.8 mg)를 황색 고체로서 수득하였다.
화합물 395 및 400은 적당한 물질로 개시하면서, 화합물 165의 합성을 위해 기재된 바와 같은 방법 및 프로토콜에 따라 합성하였다.
실시예 32. 화합물 196, 205 및 216의 제조
Figure pct00066
3급-부틸 4-[1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)-1-하이드록시에틸]피페리딘-1-카복실레이트. THF (140 mL) 중의 3급-부틸 4-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-카보닐)피페리딘-1-카복실레이트 (4070 mg, 10.829 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 CH3MgBr (3873.80 mg, 32.486 mmol, 3 당량)을 질소 대기하에 0℃에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 반응은 포화 NH4Cl (aq.)로 0℃에서 켄칭하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 DCM/MeOH (60:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 3급-부틸 4-[1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)-1-하이드록시에틸)피페리딘-1-카복실레이트 (4200 mg, 98%)를 갈색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 4-[1-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일]페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)-1-하이드록시에틸]피페리딘-1-카복실레이트. 1,4-디옥산 (50 mL) 중의 3급-부틸 4-[1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)-1-하이드록시에틸]피페리딘-1-카복실레이트 (260 mg, 0.663 mmol, 1 당량) 및 2-플루오로-4-(피라졸-1-일)아닐린 (152.81 mg, 0.862 mmol, 1.30 당량)의 교반 혼합물에 크산트포스 (115.16 mg, 0.199 mmol, 0.30 당량), Cs2CO3 (432.32 mg, 1.327 mmol, 2 당량) 및 Pd(OAc)2 (29.79 mg, 0.133 mmol, 0.20 당량)를 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 80℃에서 6시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 수득한 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 EtOAc (3 x 20 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하였다 (컬럼, C18,120 g; 이동상 A:물/0.05% TFA, 이동상 B: ACN; 유속: 40 mL/min; 농도구배: 20min 내 40% B 내지 95% B; 검출기, 254 nm 및 220 nm, 목적하는 생성물은 95% B에서 수거하였다).감압하에 농축시켜 3급-부틸 4-[1-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)-1-하이드록시에틸]피페리딘-1-카복실레이트 (300 mg, 84%)를 갈색 고체로서 수득하였다.
1-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)-1-(피페리딘-4-일)에탄올 (화합물 196). CH2Cl2 (20 mL) 중의 3급-부틸 N-[4-[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일설포닐]-1-메틸사이클로헥실]카바메이트 (200.00 mg, 0.327 mmol, 1.00 당량)의 교반된 용액에 TFA (20 mL, 20%)를 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하였다 (컬럼, C18,120 g; 이동상 A:물/0.05% NH4NCO3, 이동상 B: ACN; 유속: 40 mL/min; 농도구배: 20min 내 30% B 내지 65% B; 검출기, 254 nm 및 220 nm, 목적하는 생성물은 46% B에서 수거하였다). 감압하에 농축시켜 1-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일]페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)-1-(피페리딘-4-일)에탄올;포름산 (230 mg, 91.43%)를 황색 고체로서 수득하였다.
(R)- 및 (S)-1-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노-1,6-나프티리딘-2-일)-1-(1-메틸피페리딘-4-일)에탄올 (화합물 205 및 216):
THF (20 mL) 중의 1-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)-1-(피페리딘-4-일)에탄올 (20 mg, 0.046 mmol, 1 당량) 및 HCHO (2.78 mg, 0.093 mmol, 2 당량)의 교반 혼합물에 NaBH(OAc)3 (19.60 mg, 0.092 mmol, 2 당량)을 0℃에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하였다 (컬럼: XBridge Shield RP18 OBD 컬럼, 5 μm,19*150 mm). 감압 농축시켜 100 mg의 라세미체를 수득하였다. 상기 라세미체는 하기의 조건과 함께 SFC에 의해 분리하였다: 컬럼: CHIRALPAK IG, 2*25 cm, 5 μm; 이동상 A: Hex:DCM=3:1 (10 mm NH3-MEOH)--HPLC, 이동상 B:EtOH--HPLC; 유속: 20 mL/min; 농도구배: 22min 내 30 B 내지 30 B; 220/254 nm; RT1:11.279; RT2:17.825; 주사 용적:1.35 mL; 전개 수:3; (R)- 및 (S)-1-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)-1-(1-메틸피페리딘-4-일)에탄올을 수득하였다.
화합물 205 -11.279 min에서 용출됨; 수율: 14.0 mg. 화합물 216 - 17.825 min에서 용출됨; 수율: 14.8 mg
화합물 389 및 392는 적당한 물질로 개시하면서, 화합물 196의 합성을 위해 기재된 바와 같은 방법 및 프로토콜에 따라 합성하였다.
실시예 33. 화합물 345의 제조
Figure pct00067
3급-부틸 4-[1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)-1-하이드록시에틸]피페리딘-1-카복실레이트. THF (140 mL) 중의 3급-부틸 4-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-카보닐)피페리딘-1-카복실레이트 (4070 mg, 10.829 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 CH3MgBr (3873.80 mg, 32.486 mmol, 3 당량)을 질소 대기하에 0℃에서 첨가하였다, 수득한 혼합물은 질소 대기하에 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 반응은 포화 NH4Cl (aq.)로 0℃에서 켄칭하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 DCM/MeOH (60:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 3급-부틸 4-[1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)-1-하이드록시에틸)피페리딘-1-카복실레이트 (4200 mg, 98%)를 갈색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 4-[(1R)-1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)-1-하이드록시에틸]피페리딘-1-카복실레이트. 3급-부틸 4-[1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)-1-하이드록시에틸]피페리딘-1-카복실레이트 (4.60 g, 11.7 mmol)는 하기의 조건과 함께 SFC에 의해 분리하였다: 컬럼: CHIRALPAK IG, 5*25cm,10 um; 이동상 A:CO2, 이동상 B:MeOH:ACN=1:1 (2 mM NH3-MeOH); 유속: 200 mL/min; 농도구배: 50% B; 220 nm; RT1:6.1; RT2:12.02; 주사 용적:15 mL; 전개 수:5; 12.02 min에서 분획을 수거하고 감압 농축시켜 3급-부틸 4-[(1R)-1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)-1-하이드록시에틸]피페리딘-1-카복실레이트 (1670 mg, 36%)를 담황색 고체로서 수득하였다 (보다 느린 용출 이성질체).
(1R)-1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)-1-(1-메틸피페리딘-4-일)에탄올. DCM (40 mL) 중의 3급-부틸 4-[(1R)-1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)-1-하이드록시에틸]피페리딘-1-카복실레이트 (1670 mg, 4.261 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 TFA (8 mL, 98.744 mmol, 23.17 당량)를 공기 대기하에 0℃에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. DCM (20 mL) 중의 교반 혼합물에 TEA (13.72 mL, 98.707 mmol, 23.16 당량)를 실온에서 분획으로 첨가하였다. 5분 후 포르말린 (255.90 mg, 8.523 mmol, 2 당량, 33%) 및 NaBH(OAc)3 (1083.77 mg, 5.114 mmol, 1.20 당량)을 첨가하였다. 수득한 혼합물은 공기 대기하에 실온에서 1시간 동안 교반하였다 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 DCM/MeOH (6:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (1R)-1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일) -1-(1-메틸피리딘-4-일)에탄올 (1300 mg, 99%)을 담황색 고체로서 수득하였다.
(1R)-1-(1-메틸피페리딘-4-일)-1-[7-(페닐아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]에탄올 (화합물 345). 1,4-디옥산 (1.50 mL) 중의 (1R)-1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)-1-(1-메틸피페리딘-4-일)에탄올 (40 mg, 0.131 mmol, 1 당량) 및 아닐린 (14.62 mg, 0.157 mmol, 1.2 당량)의 교반 혼합물에 Pd(OAc)2 (4.40 mg, 0.020 mmol, 0.15 당량), 크산트포스 (22.71 mg, 0.039 mmol, 0.3 당량) 및 Cs2CO3 (85.23 mg, 0.262 mmol, 2 당량)을 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 100℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 하였다. 수득한 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 EtOAc (3 x 10 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 Prep-TLC (DCM/MeOH 5:1)에 의해 정제하여 (1R)-1-(1-메틸피페리딘-4-일)-1-[7-(페닐아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]에탄올 (16.5 mg, 34%)을 황색 고체로서 수득하였다.
화합물 320, 325, 335, 341, 342, 346, 348, 350, 351, 351, 352, 354, 355, 356, 358, 366, 367, 369, 370, 371, 372, 373, 377, 383, 388, 393, 397, 399, 402, 404, 405, 406, 407, 408, 409, 411, 412, 및 413, 및 중간체 AG:
Figure pct00068
(화합물 360 (대안적 개시 물질)의 제조; 실시예 35 , 및 AH:
Figure pct00069
(화합물 414의 제조; 실시예 37)은 적당한 물질로 개시하면서, 화합물 345의 합성을 위해 기재된 바와 같은 방법 및 프로토콜에 따라 합성하였다.
실시예 34. 화합물 359 및 363의 제조
Figure pct00070
3급-부틸 4-[1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)-1-플루오로에틸]피페리딘-1-카복실레이트. DCM (1 mL) 중의 3급-부틸 4-[1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)-1-하이드록시에틸]피페리딘-1-카복실레이트 (200 mg, 0.510 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 DAST (2 mL)를 질소 대기하에 -78℃에서 적가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 반응은 포화 NaHCO3 (aq.)으로 0℃에서 켄칭하였다. 수득한 혼합물은 EtOAc (3 x 100 mL)로 추출하였다. 배합된 유기층을 염수 (1 x 100 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 Prep-TLC (PE:EtOAc 5:1)로 정제하여 3급-부틸 4-[1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)-1- 플루오로에틸]피페리딘-1-카복실레이트 (90 mg, 45%)을 황색 고체로서 수득하였다.
7-클로로-2-[1-플루오로-1-(피페리딘-4-일)에틸]-1,6-나프티리딘 DCM (5 mL) 중의 3급-부틸 4-[1-(7-클로로-1,6-나프티리딘 -2-일)-1-플루오로에틸]피페리딘-1-카복실레이트 (100 mg, 0.254 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 TFA (1 mL)를 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 이로써, 7-클로로-2-[1-플루오로-1-(피페리딘-4-일)에틸]-1,6-나프티리딘 (70 mg, 94%)을 담황색 고체로서 수득하였다.
7-클로로-2-[1-플루오로-1-(1-메틸피페리딘-4-일)에틸]-1,6-나프티리딘. THF (4 mL) 중의 7-클로로-2-[1-플루오로-1-(피페리딘-4-일)에틸]-1,6-나프티리딘 (70 mg, 0.238 mmol, 1 당량) 및 NaBH(OAc)3 (75.75 mg, 0.357 mmol, 1.50 당량)의 교반 용액에 HCHO (14.31 mg, 0.477 mmol, 2 당량)를 실온에서 적가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 DCM/MeOH (15:1)로 용출시키면서 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 7-클로로-2-[1-플루오로-1-(1-메틸피페리딘-4-일)에틸]-1,6-나프티리딘 (50 mg, 68%)을 담황색 고체로서 수득하였다.
(R)- 및 (S)-2-[1-플루오로-1-(1-메틸피페리딘-4-일)에틸]-N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-1,6-나프티리딘-7-아민. 1,4-디옥산 (4 mL) 중의 7-클로로-2-[1-플루오로-1-(1-메틸피페리딘-4-일)에틸]-1,6-나프티리딘 (60 mg, 0.195 mmol, 1 당량) 및 2-플루오로-4-(피라졸-1-일)아닐린 (37.99 mg, 0.214 mmol, 1.10 당량)의 교반 혼합물에 크산트포스 (33.84 mg, 0.058 mmol, 0.30 당량), Cs2CO3 (127.03 mg, 0.390 mmol, 2 당량) 및 Pd(OAc)2 (6.56 mg, 0.029 mmol, 0.15 당량)를 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 DCM/MeOH (15:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 라세미체를 수득하였다. 라세미체를 키랄 SFC에 의해 정제하여 2-[(1S)-1-플루오로-1-(1-메틸피페리딘-4-일)에틸]-N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-1,6-나프티리딘-7-아민 및 2-[(1R)-1-플루오로-1-(1-메틸피페리딘-4-일)에틸]-N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-1,6-나프티리딘-7-아민을 수득하였다.
화합물 363 - 수율: 14.1 mg. 화합물 359: 수율: 8.9 mg.
실시예 35. 화합물 362의 제조
Figure pct00071
H2O (2 mL) 중의 메틸 1-[3-플루오로-4-([2-[(1R)-1-하이드록시-1-(1-메틸피페리딘-4-일)에틸]-1,6-나프티리딘-7-일]아미노)페닐]피라졸-4-카복실레이트 (화합물 367, 50 mg, 0.099 mmol, 1 당량)의 교반된 혼합물에 LiOH (7.12 mg, 0.297 mmol, 3 당량)를 0℃에서 분획으로 첨가하였다.수득한 혼합물은 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물/잔사는 HCl (aq.)을 사용하여 pH 7으로 중성화하였다. 수득한 혼합물은 진공 농축시켰다. 잔사는 Prep-HPLC로 정제하여 1-[3-플루오로-4-([2-[(1R)-1-하이드록시-1-(1-메틸피페리딘-4-일)에틸]-1,6-나프티리딘-7-일]아미노)페닐]피라졸-4-카복실산 (33.6 mg, 69%)을 황색 고체로서 수득하였다.
화합물 324 및 360은 적당한 물질로 개시하면서, 화합물 362의 합성을 위해 기재된 바와 같은 방법 및 프로토콜에 따라 합성하였다.
실시예 36. 화합물 364의 제조
Figure pct00072
DMF (3 mL) 중의 3-플루오로-4-([2-[(1R)-1-하이드록시-1-(1-메틸피페리딘-4-일)에틸]-1,6-나프티리딘-7-일]아미노)-[1,1-바이페닐]-3-카복실산 (화합물 360, 50 mg, 0.100 mmol, 1 당량), TEA (20.21 mg, 0.200 mmol, 2 당량), NH4HCO3 (39.48 mg, 0.499 mmol, 5 당량) 및 HATU (56.97 mg, 0.150 mmol, 1.50 당량)의 혼합물을 질소 대기하에 40℃에서 3시간 동안 교반하였다. 수득한 혼합물은 Prep-HPLC로 정제하여 (R)-3'-플루오로-4'-((2-(1-하이드록시-1-(1-메틸피페리딘-4-일)에틸]-1,6-나프티리딘-7-일]아미노)-[1,1'-바이페닐]-3-카복스아미드 (10.4 mg, 21%)를 황색 고체로서 수득하였다.
실시예 37. 화합물 414의 제조
Figure pct00073
DCM (3 mL, 78.650 mmol, 1008.11 당량) 중의 (1R)-1-(7-[[2-플루오로-4-(1-[[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸]피라졸-3-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)-1-(1-메틸피페리딘-4-일)에탄올 (45 mg, 0.078 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 TFA (3 mL, 40.389 mmol, 517.69 당량)을 2시간 동안 공기 대기하에 실온에서 적가하였다. 혼합물은 포화 NaHCO3 (aq.)으로 pH 7로 염기성화시켰다. 수득한 혼합물은 EtOAc (3 x 5 mL)로 추출하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압하에 농축시켰다. 조 생성물 (20.9 mg)은 Prep-HPLC로 정제하여 (1R)-1-(7-[[2-플루오로-4-(1H-피라졸-3-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)-1-(1-메틸피페리딘-4-일)에탄올 (14.4 mg, 41%)을 담황색 고체로서 수득하였다.
실시예 38. 화합물 186 및 188의 제조
Figure pct00074
1-3급-부틸 3-에틸 2-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)프로판디오에이트. DMF (100 mL) 중의 2,7-디클로로-1,6-나프티리딘 (7 g, 35.171 mmol, 1 당량)의 용액에 1-3급-부틸 3-에틸 프로판디오에이트 (13.24 g, 70.341 mmol, 2 당량) 및 Cs2CO3 (22.92 g, 70.341 mmol, 2 당량)을 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 80℃에서 밤새 교반하였다. 수득한 혼합물은 물 (500 mL)?로 희석하고 에틸 아세테이트 (2 x 300 mL)로 추출하였다. 배합된 유기 층을 물 (5 x 300), 염수 (300 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 여과하였다. 여과물은 감압하에 농축시키고, 잔사는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하고, 석유 에테르 중의 3~10% 에틸 아세테이트로 용출시켜 1-3급-부틸 3-에틸 2-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)프로판디오에이트 (7.5 g, 60%)를 갈색 오일로서 수득하였다.
에틸 2-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)아세테이트. DCM (40 mL) 중의 1-3급-부틸 3-에틸 2-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)프로판디오에이트 (1.60 g, 4.561 mmol, 1 당량)의 용액에 TFA (10 mL, 134.630 mmol, 29.52 당량)를 0℃에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 수득한 혼합물은 EtOAc(100 mL)로 희석하였다. 수득한 혼합물은 염수 (2 x 100 mL)로 세척하였다. 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고 감압하에 농축시켰다. 잔사는 PE/EtOAc (5:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 에틸 2-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)아세테이트 (1.2 g)을 황색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 4-[1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일) -2-에톡시 -2-옥소에틸]피페리딘-1-카복실레이트. DMF (100 mL) 중의 에틸 2-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)아세테이트 (5.30 g, 21.142 mmol, 1 당량)의 용액에 수산화나트륨 (오일 중 60%, 0.76g, 31.714 mmol, 1.50 당량)을 0℃에서 첨가하였다. 혼합물은 30분 동안 교반하였다. 3급-부틸 4-요오도피페리딘-1-카복실레이트 (9.87 g, 31.720 mmol, 1.50 당량)를 첨가하고 혼합물은 Rt로 가온되도록 방치하고 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물은 물 (500 mL)로 켄칭하고 에틸 아세테이트 (2 x 200 mL)로 추출하였다.배합된 유기 층을 물 (5 x 200), 염수 (200 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 여과하였다. 여과물은 감압하에 농축시키고, 잔사는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하고, 석유 에테르 중의 1~3% 에틸 아세테이트로 용출시켜 3급-부틸 4-[1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)-2-에톡시-2-옥소에틸]피페리딘-1-카복실레이트 (5.6 g)를 갈색 오일로서 수득하였다.
3급-부틸 4-[2-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)-1-에톡시-1-옥소프로판-2-일]피페리딘-1-카복실레이트. DMF (35 mL) 중의 3급-부틸 4-[1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)-2-에톡시-2-옥소에틸]피페리딘-1-카복실레이트 (1g, 2.305 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 NaH (119.82 mg, 2.996 mmol, 1.3 당량, 60%)를 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다, 수득한 혼합물은 실온에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물에 CH3I (490.65 mg, 3.457 mmol, 1.5 당량)를 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 포화 NH4Cl (aq.)로 실온에서 켄칭하였다. 수득한 혼합물은 EtOAc (2 x 100 mL)로 추출하였다. 배합된 유기층을 염수 (2 x 50 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 PE/EtOAc (10:1 내지 3:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 3급-부틸 4-[2-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)-1-에톡시-1-옥소프로판-2-일]피페리딘-1-카복실레이트 (800 mg, 77%)를 회색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 4-[1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)에틸]피페리딘-1-카복실레이트. MeOH (20 mL) 중의 3급-부틸 4-[2-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)-1-에톡시-1-옥소프로판 -2-일]피페리딘-1-카복실레이트 (800 mg, 1.786 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 2N NaOH (20 mL)을 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다, 수득한 혼합물은 질소 대기하에 50℃에서 36시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 수득한 혼합물은 염수 (100 mL)로 희석하였다. 수득한 혼합물은 EtOAc (2 x 100 mL)로 추출하였다. 배합된 유기층을 염수 (1 x 50 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 PE/EtOAc (10:1 내지 3:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 3급-부틸 4-[1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)에틸]피페리딘-1-카복실레이트 (500 mg, 74%)를 회색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 4-[1-[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]에틸]피페리딘-1-카복실레이트 1,4-디옥산 (50 mL) 중의 3급-부틸 4-[1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)에틸]피페리딘-1-카복실레이트 (510 mg, 1.357 mmol, 1 당량), [1-(4-아미노-3-플루오로페닐)피라졸-3-일]메탄올 (309.24 mg, 1.492 mmol, 1.1 당량), 크산트포스 (235.51 mg, 0.407 mmol, 0.3 당량) 및 Cs2CO3 (884.11 mg, 2.713 mmol, 2.0 당량)의 교반 용액에 Pd(OAc)2 (45.69 mg, 0.204 mmol, 0.15 당량)를 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 하였다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 330 g; 이동상 A: 물 (+ 5 mM HOAc); 이동상 B: ACN; 유속: 45 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 20 min에서 33% B - 45% B 농도구배; 검출기: 254 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물을 40% B에서 수거하고, 감압하에 농축시켜 3급-부틸 4-[1-[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]에틸]피페리딘-1-카복실레이트 (445 mg, 60%)를 백색 고체로서 수득하였다
[1-[3-플루오로-4-([2-[1-피페리딘-4-일)에틸]-1,6-나프티리딘-7-일]아미노)페닐]피라졸-3-일]메탄올 DCM (10 mL) 중의 3급-부틸 4-[1-[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]에틸]피페리딘-1-카복실레이트 (450 mg, 0.823 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 TFA (1 mL)를 질소 대기하에 실온에서 적가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 실온에서 1시간 동안 교반하였다 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 수득한 혼합물은 염수 (50 mL)로 희석하였다. 혼합물/잔사는 포화 NaHCO3 (aq.)으로 pH 8로 염기성화시켰다. 수득한 혼합물은 DCM (2 x 50 mL)으로 추출하였다. 배합 유기 층을 염수 (1 x 100 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 PE/EtOAc (10:1 내지 3:1)로 용출시키면서 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 [1-[3-플루오로-4-([2-[1-(피페리딘-4-일)에틸]-1,6-나프티리딘-7-일]아미노)페닐]피라졸-3-일]메탄올 (300 mg, 81%)을 황색 고체로서 수득하였다.
(R)- 및 (S)-[1-[3-플루오로-4-([2-[1-(1-메틸피페리딘-4-일)에틸] -1,6-나프티리딘-7-일]아미노)페닐]피라졸-3-일]메탄올 (화합물 186 및 188). THF (50 mL) 중의 [1-[3-플루오로-4-([2-[1-(피페리딘-4-일)에틸]-1,6-나프티리딘-7-일]아미노)페닐]피라졸-3-일]메탄올 (300 mg, 0.672 mmol, 1 당량) 및 HCHO (26.22 mg, 0.873 mmol, 1.3 당량)의 교반 용액에 NaBH(OAc)3 (213.59 mg, 18 mmol, 1.5 당량)을 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 실온에서 1시간 동안 교반하였다 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 330 g; 이동상 A: 물 (+ 0.05% TFA); 이동상 B: ACN; 유속: 85 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 20 min에서 33% B - 45% B 농도구배; 검출기: 254 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물은 40% B에서 수거하였고, 감압하에 농축시켜 라세미체 생성물을 수득하였다. 라세미체는 하기의 조건과 함께 Prep-키랄에 의해 분리하였다: 컬럼: CHIRALPAK IG, 20*250 mm,5 um; 이동상 A: Hex (8 mmol/L NH3MeOH), 이동상 B: EtOH:DCM=1:1; 유속: 20 mL/min; 농도구배:20 min 내 38 B 내지 38 B; 220/254 nm; RT1:13.916 min; RT2:16.349 min; 주사 용적:0.5 mL; 전개 수:10;; (R)- 및 (S)- [1-[3-플루오로-4-([2-[1-(1-메틸피페리딘-4-일)에틸]-1,6-나프티리딘-7-일]아미노)페닐]피라졸-3-일]메탄올을 수득하였다.
화합물 186 - 16.349 min에서 용출됨; 수율: 43.7 mg. 화합물 188 - 13.916 min에서 용출됨;
수율: 48.4 mg.
화합물 204, 244, 246, 310, 311, 314, 315, 319, 322, 333, 및 339는 적당한 물질로 개시하면서 화합물 186 및 188의 합성을 위해 기재된 바와 같은 방법 및 프로토콜에 따라 합성하였다.
실시예 39. 화합물 410의 제조
Figure pct00075
7-클로로-2-[1-(피페리딘-4-일)에틸]-1,6-나프티리딘. DCM (15 mL) 중의 3급-부틸 4-[1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)에틸]피페리딘-1-카복실레이트 (화합물 188; 단계 5, 700 mg, 1.862 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 TFA (30 mL, 403.891 mmol, 216.89 당량)를 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 DCM (3 x 10 mL)으로 추출하였다. 배합 유기 층을 DCM (3 x 10 mL)으로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압하에 농축시켜 갈색 오일로서 7-클로로-2-[1-(피페리딘-4-일)에틸]-1,6-나프티리딘 (500 mg, 97%)을 수득하였다.
7-클로로-2-[1-(1-메틸피페리딘-4-일)에틸]-1,6-나프티리딘. MeOH (10 mL) 중의 7-클로로-2-[1-(피페리딘-4-일)에틸]-1,6-나프티리딘 (500 mg, 1.813 mmol, 1 당량) 및 HCHO (362.92 mg, 3.626 mmol, 2 당량, 30%)의 교반 용액에 NaBH3CN (227.87 mg, 3.626 mmol, 2 당량)을 0℃에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사를 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하여 (컬럼, C18,120 g; 이동상: A:물/0.05% NH4HCO3, 이동상 B: ACN; 유속: 40 mL/min; 농도구배: 20 min 내 45% B 내지 95% B; 검출기, 254 nm 및 220 nm, 목적하는 생성물은 75% B에서 수거하였다) 7-클로로-2-[1-(1-메틸피페리딘-4-일)에틸]-1,6-나프티리딘 (250 mg, 47%)을 갈색 고체로서 수득하였다.
3'-플루오로-4'-([2-[1-(1-메틸피페리딘-4-일)에틸]-1,6-나프티리딘-7-일]아미노)-[1,1'-바이페닐]-3-카복스아미드 (화합물 410). 1,4-디옥산 (8.00 mL) 중의 7-클로로-2-[1-(1-메틸피페리딘-4-일)에틸]-1,6-나프티리딘 (198.10 mg, 0.684 mmol, 1 당량) 및 4-아미노-3-플루오로-[1,1-바이페닐]-3-카복스아미드 (157.38 mg, 0.684 mmol, 1 당량)의 교반 혼합물에 Pd(OAc)2 (46.04 mg, 0.205 mmol, 0.30 당량), 크산트포스 (237.31 mg, 0.410 mmol, 0.60 당량) 및 Cs2CO3 (445.43 mg, 1.367 mmol, 2 당량)을 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 프렙-TLC (DCM/MeOH 5:1)로 정제하여 조 생성물을 수득하고 이는 Prep-HPLC에 의해 추가로 정제하여 3'-플루오로-4'-([2-[1-(1-메틸피페리딘-4-일)에틸]-1,6-나프티리딘-7-일]아미노)-[1,1'-바이페닐]-3-카복스아미드 (14.6 mg, 4%)를 담황색 고체로서 수득하였다.
화합물 368 및 386은 적당한 물질로 개시하면서, 화합물 410의 합성을 위해 기재된 바와 같은 방법 및 프로토콜에 따라 합성하였다.
실시예 40. 화합물 139의 제조
Figure pct00076
3급-부틸 4-[2-에톡시-1-[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]-2-옥소에틸]피페리딘-1-카복실레이트. 1,4-디옥산 (10 mL) 중의 3급-부틸 4-[1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)-2-에톡시-2-옥소에틸]피페리딘-1-카복실레이트 (화합물 188, 단계 3, 300 mg, 0.691 mmol, 1 당량) 및 [1-(4-아미노-3-플루오로페닐)피라졸-3-일]메탄올 (157.58 mg, 0.760 mmol, 1.10 당량)의 교반 혼합물에 Pd(OAc)2 (23.28 mg, 0.104 mmol, 0.15 당량), 크산트포스 (120.01 mg, 0.207 mmol, 0.30 당량) 및 Cs2CO3 (450.51 mg, 1.383 mmol, 2 당량)을 질소 대기하에 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 방치하였다. 수득한 혼합물은 EtOAc (3 x 200 mL)로 추출하였다. 배합 유기 층을 염수 (2 x 100 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 330 g; 이동상 A: 물 (+ 5 mM NH4HCO3); 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 30 min에서 45% B - 80% B 농도구배; 검출기: 220 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물을 75% B에서 수거하고, 감압하에 농축시켜 3급-부틸 4-[2-에톡시-1-[7-([2-프룰오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]-2-옥소에틸]피페리딘-1-카복실레이트 (200 mg, 47%)를 황색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 4-[1-[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]-2-하이드록시에틸]피페리딘-1-카복실레이트. THF (6 mL) 중의 3급-부틸 4-[2-에톡시-1-[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]-2-옥소에틸]피페리딘-1-카복실레이트 (50 mg, 0.083 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 LiAlH4 (3.77 mg, 0.099 mmol, 1.20 당량)를 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 실온에서 0.5시간 동안 교반하였다. 반응은 TLC에 의해 모니터링하였다. 반응은 실온에서 물 (0.3 mL)로 켄칭하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 DCM/MeOH (10:1)로 용출시키면서, TLC로 정제하여 3급-부틸 4-[1-[7-[[2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일]-2-하이드록시에틸]피페리딘-1-카복실레이트 (30 mg, 64%)를 회색 고체로서 수득하였다.
[1-[3-플루오로-4-([2-[1-(피페리딘-4-일)에테닐] -1,6-나프티리딘-7-일]아미노)페닐]피라졸-3-일]메탄올. THF (2 mL) 중의 3급-부틸 3-메틸 4-[1-[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]-2-하이드록시에틸]피페리딘-1-카복실레이트 (15 mg)의 교반 용액에 1,4-디옥산 (2 mL) 중의 HCl (가스)을 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응은 TLC에 의해 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 진공 농축시켰다. 잔사를 Prep-HPLC에 의해 정제하여 [1-(3-플루오로-4-[[2-[1-(피페리딘-4-일)에테닐] -1,6-나프티리딘-7-일]아미노]페닐]피라졸-3-일]메탄올 (3.3 mg)을 담황색 고체로서 수득하였다.
실시예 41. 화합물 168의 제조
Figure pct00077
에틸 2-[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]-2-(피페리딘-4-일)아세테이트. DCM (10 mL, 157.300 mmol, 317.06 당량) 중의 3급-부틸 4-[2-에톡시-1-[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]-2-옥소에틸]피페리딘-1-카복실레이트 (화합물 139, 단계 1, 300 mg, 0.496 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 TFA (1 mL, 13.463 mmol, 27.14 당량)를 질소 대기하에 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 330 g; 이동상 A: 물 (0.5%TFA); 이동상 B: ACN; 유속: 85 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 20 min에서 33% B - 45% B 농도구배; 검출기: 254 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물을 40% B에서 수거하고, 감압하에 농축시켜 에틸 2-[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]-2-(피페리딘-4-일)아세테이트 (160 mg, 63%)를 황색 고체로서 수득하였다
에틸 2-[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]-2-(1-메틸피페리딘-4-일)아세테이트. THF (15 mL) 중의 에틸 2-[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일)페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]-2-(피페리딘-4-일)메탄올 (160 mg, 0.317 mmol, 1 당량) 및 HCHO (14.28 mL, 0.476 mmol, 1.50 당량)의 교반 용액에 NaBH(OAc)3 (107.53 mg, 0.507 mmol, 1.60 당량)을 질소 대기하에 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 330 g; 이동상 A: 물 (0.5% TFA); 이동상 B: ACN; 유속: 85 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 20 min에서 33% B - 45% B 농도구배; 검출기: 254 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물을 40% B에서 수거하고, 감압하에 농축시켜 에틸 2-[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]-2-(1-메틸피페리딘-4-일)아세테이트 (111 mg, 67%)를 황색 고체로서 수득하였다
2-[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]-2-(1-메틸피페리딘-4-일)메탄올. THF (10 mL) 중의 에틸 2-[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]-2-(1-메틸피페리딘-4-일)아세테이트 (100 mg, 0.193 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 LiAlH4 (18.30 mg, 0.482 mmol, 2.5 당량)를 질소 대기하에 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 실온에서 1시간 동안 교반하였다 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 330 g; 이동상 A: 물 (0.5%TFA); 이동상 B: ACN; 유속: 85 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 20 min에서 33% B - 45% B 농도구배; 검출기: 254 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물을 40% B에서 수거하고, 감압하에 농축시켜 2-[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]-2-(1-메틸피페리딘-4-일)에탄올 (55 mg, 59%)를 황색 고체로서 수득하였다.
[1-[3-플루오로-4-([2-[1-(1-메틸피페리딘-4-일)에테닐] -1,6-나프티리딘-7-일]아미노)페닐]피라졸-3-일]메탄올. DCM (10 mL) 중의 2-[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]-2-(1-메틸피페리딘-4-일)에탄올 (55 mg)의 교반 용액에 TFA (1 mL)를 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 330 g; 이동상 A: 물 (0.5%TFA); 이동상 B: ACN; 유속: 85 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 20 min에서 33% B - 45% B 농도구배; 검출기: 254 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물은 40% B에서 수거하였고, 감압하에 농축시켜 [1-[3-플루오로-4-([2-[1-(1-메틸피페리딘-4-일)에테닐]-1,6-나프티리딘-7-일]아미노)페닐]피라졸-3-일]메탄올 (7.1 mg)을 황색 고체로서 수득하였다
실시예 42. 화합물 142의 제조
Figure pct00078
THF (2 mL) 중의 3급-부틸 4-[1-[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]-2-하이드록시에틸]피페리딘-1-카복실레이트 (화합물 139, 단계 2, 15 mg)의 교반 용액에 1,4-디옥산 (2 mL) 중의 HCl (가스)을 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응은 TLC에 의해 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 진공 농축시켰다. 잔사를 Prep-HPLC로 정제하여 2-[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]-2-(피페리딘-4-일)에탄올; 포름산 (2.1 mg)을 담황색 고체로서 수득하였다.
실시예 43. 화합물 312 및 316의 제조
Figure pct00079
3급-부틸 4-[1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)사이클로프로필]피페리딘-1-카복실레이트. THF (30 mL, 370.290 mmol, 692.22 당량) 중의 3급-부틸 4-[1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)에테닐]피페리딘-1-카복실레이트 (200 mg, 0.535 mmol, 1 당량) 및 t-BuOK (90.04 mg, 0.802 mmol, 1.5 당량)의 교반 용액에 트리메틸설폭소늄 요오다이드 (176.58 mg, 0.802 mmol, 1.5 당량)를 질소 대기하에 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 반응은 포화 NH4Cl (aq.)으로 실온에서 켄칭하였다. 수득한 혼합물은 EtOAc (3 x 150 mL)로 추출하였다. 배합 유기 층을 염수 (1 x 150 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 PE/EtOAc (1:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 3급-부틸 4-[1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)사이클로프로필]피페리딘-1-카복실레이트 (150 mg, 72%)를 백색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 4-[1-[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]사이클로프로필]피페리딘-1-카복실레이트. 1,4-디옥산 (10 mL) 중의 3급-부틸 4-[1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)사이클로프로필]피페리딘-1-카복실레이트 (130 mg, 0.335 mmol, 1 당량), [1-(4-아미노-3-플루오로페닐)피라졸-3-일]메탄올 (83.33 mg, 0.402 mmol, 1.20 당량), 크산트포스 (58.17 mg, 0.101 mmol, 0.3 당량) 및 Cs2CO3 (218.38 mg, 0.670 mmol, 2.0 당량)의 교반 용액에 Pd(OAc)2 (11.29 mg, 0.050 mmol, 0.15 당량)를 질소 대기하에 실온에서 적가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 Prep-TLC (DCM/MeOH 10:1)에 의해 정제하여 3급-부틸 4-[1-[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일)페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]사이클로프로필]피페리딘-1-카복실레이트 (90 mg, 48%)를 회색 고체로서 수득하였다.
[1-(3-플루오로-4-[[2-[1-(피페리딘-4-일)사이클로프로필] -1,6-나프티리딘-7-일]아미노)페닐]피라졸-3-일]메탄올 (화합물 316). DCM (10 mL) 중의 3급-부틸 4-[1-[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]사이클로프로필]피페리딘-1-카복실레이트 (100 mg, 0.179 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 TFA (1 mL)를 질소 대기하에 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 수득한 혼합물은 진공 농축시켰다. 수득한 혼합물은 DCM (10 mL)로 희석하였다. 혼합물은 포화 NaHCO3 (aq.)으로 pH 9로 염기성화시켰다. 수득한 혼합물은 DCM (3 x 50 mL)으로 추출하였다. 배합 유기 층을 염수 (1 x 30 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 DCM/MeOH (10:1)로 용출시키면서 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 [1-[3-플루오로-4-([2-[1-(피페리딘-4-일)사이클로프로필]-1,6-나프티리딘-7-일]아미노)페닐]피라졸-3-일]메탄올 (50 mg, 60%)을 담황색 고체로서 수득하였다.
[1-(3-플루오로-4-([2-[1-(1-메틸피페리딘-4-일)사이클로프로필] -1,6-나프티리딘-7-일]아미노)페닐]피라졸-3-일]메탄올 (화합물 312). THF (15 mL) 중의 [1-[3-플루오로-4-([2-[1-(피페리딘-4-일)사이클로프로필]-1,6-나프티리딘-7-일]아미노)페닐]피라졸-3-일]메탄올 (60 mg, 0.131 mmol, 1 당량), HCHO (4.71 mg, 0.157 mmol, 1.20 당량)의 교반 용액에 NaBH(OAc)3 (41.60 mg, 0.196 mmol, 1.50 당량)을 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 실온에서 1시간 동안 교반하였다 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 조 생성물 (30 mg)을 Prep-HPLC에 의해 정제하여 [1-[3-플루오로-4-([2-[1-(1-메틸피페리딘-4-일)사이클로프로필] -1,6-나프티리딘-7-일]아미노)페닐]피라졸-3-일]메탄올 (16 mg, 25%)을 백색 고체로서 수득하였다.
실시예 44. 화합물 169 및 291의 제조
Figure pct00080
3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)디플루오로메]피페리딘-1-카복실레이트. DAST (5 mL) 중의 3급-부틸 4-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-카보닐)피페리딘-1-카복실레이트 (200 mg, 0.532 mmol, 1 당량)의 혼합물을 질소 대기하에 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 50 mL의 냉 포화된 NaHCO3 (aq.)에 첨가하였다. 수성층은 EtOAc (2 x 100 mL)로 추출하였다. 배합 유기 층을 염수 (100 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 Prep-TLC (DCM/MeOH 50:1)로 정제하여 3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)디플루오로메틸]피페리딘-1-카복실레이트 (130 mg, 61%)를 황색 발포로서 수득하였다.
3급-부틸 4-[디플루오로(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일]페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일]메틸]피페리딘-1-카복실레이트. 무수 1,4-디옥산 (15 mL) 중의 3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)디플루오로메틸]피페리딘-1-카복실레이트 (130 mg, 0.327 mmol, 1 당량) 및 2-플루오로-4-(피라졸-1-일)아닐린 (63.68 mg, 0.359 mmol, 1.10 당량)의 교반 혼합물에 Pd(OAc)2 (11 mg, 0.049 mmol, 0.15 당량), 크산트포스 (56.72 mg, 0.098 mmol, 0.30 당량) 및 Cs2CO3 (212.93 mg, 0.654 mmol, 2 당량)을 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 수득한 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 DCM 및 MeOH (10:1)로 세척하였다. 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 Prep-TLC (PE/ EA, 2:1)로 정제하여 3급-부틸 4-[디플루오로(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)메틸] 피페리딘-1-카복실레이트 (130 mg, 73%)를 황색 발포로서 수득하였다.
2-[디플루오로(피페리딘-4-일)메틸]-N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-1,6-나프티리딘-7-아민 (화합물 169). DCM (15 mL) 중의 3급-부틸 4-[디플루오로(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)메틸]피페리딘-1-카복실레이트 (130 mg, 0.241 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 브롬화아연 (543.56 mg, 2.414 mmol, 10 당량)을 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 50℃에서 16시간 동안 교반하였다. 수득한 혼합물은 물 (100 mL)로 희석하고 DCM (3 x 50 mL)으로 추출하였다. 배합 유기청을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 여과하였다. 여과물을 감합하에 농축시키고, 잔사는 Prep-HPLC로 정제하여 2-[디플루오로(피페리딘-4-일)메틸]-N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-1,6-나프티리딘-7-아민 (33.9 mg, 32%)을 황색 고체로서 수득하였다.
2-[디플루오로(1-메틸피페리딘-4-일)메틸]-N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-1,6-나프티리딘-7-아민 (화합물 291). THF (10 mL) 중의 2-[디플루오로(피페리딘-4-일)메틸]-N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-1,6-나프티리딘-7-아민 (30 mg, 0.068 mmol, 1 당량) 및 포름알데하이드 용액 (6.16 mg, 0.205 mmol, 3 당량)에 NaBH(OAc)3 (43.50 mg, 0.205 mmol, 3 당량)을 0℃에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 수득한 혼합물은 수성 포화 NaHCO3 (20 mL)으로 희석시키고, 에틸 아세테이트 (2 x 50 mL)로 추출하였다. 배합 유기 층은 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압하에 농축시켰다. 조 생성물은 Prep-HPLC로 정제하여 2-[디플루오로(1-메틸피페리딘-4-일)메틸]-N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-1,6-나프티리딘-7-아민 (13.3 mg)을 황색 고체로서 수득하였다.
실시예 45. 화합물 375 및 381의 제조
Figure pct00081
N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-2-(1-메틸피페리딘-4-카보닐)-1,6-나프티리딘-7-아민 (33 mg, 0.077 mmol, 1 당량), 하이드록실아민 하이드로클로라이드 (13.32 mg, 0.192 mmol, 2.50 당량) 및 피리딘 (2 mL)의 혼합물을 1시간 동안 50℃에서 교반하였다. 조 생성물 (33 mg)을 Prep-HPLC로 정제하여 N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-2-[(1E)-(하이드록시이미노) (1-메틸피페리딘-4-일)메틸]-1,6-나프티리딘-7-아민 (7.1 mg, 21%) 및 N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-2-[(1Z)-(하이드록시이미노) (1-메틸피페리딘-4-일)메틸]-1,6-나프티리딘-7-아민 (4.8 mg, 14%)을 황색 고체로서 수득하였다.
화합물 357 및 361은 적당한 물질로 개시하면서, 화합물 375 및 381의 합성을 위해 기재된 바와 같은 방법 및 프로토콜에 따라 합성하였다.
실시예 46. 화합물 365의 제조
Figure pct00082
7-클로로-2-(2-(1-메틸피페리딘-4-일)옥세탄-2-일)-1,6-나프티리딘. t-BuOH (5 mL) 중의 7-클로로-2-(1-메틸피페리딘-4-카보닐)-1,6-나프티리딘 (120 mg, 0.414 mmol, 1 당량) 및 t-BuOK (185.88 mg, 1.657 mmol, 4 당량)의 교반 혼합물에 트리메틸(옥소)-람다6-설파닐륨 요오다이드 (364.56 mg, 1.657 mmol, 4 당량)를 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 50℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 Prep-TLC (DCM/MeOH 15:1)에 의해 정제하여 7-클로로-2-[2-(1-메틸피페리딘-4-일)옥세탄-2-일]-1,6-나프티리딘 (60 mg, 조 생성물)을 황색 고체로서 수득하였다.
N-(2-플루오로-4-(1H-피라졸-1-일)페닐)-2-(2-(1-메틸피페리딘-4-일)옥세탄-2-일)-1,6-나프티리딘-7-아민 (화합물 365). 1,4-디옥산 (4 mL) 중의 7-클로로-2-[2-(1-메틸피페리딘-4-일)옥세탄-2-일]-1,6-나프티리딘 (60 mg, 0.189 mmol, 1 당량) 및 2-플루오로-4-(피라졸-1-일)아닐린 (40.14 mg, 0.227 mmol, 1.20 당량)의 교반 혼합물에 Cs2CO3 (123.02 mg, 0.378 mmol, 2 당량), 크산트포스 (32.77 mg, 0.057 mmol, 0.30 당량) 및 Pd(OAc)2 (6.36 mg, 0.028 mmol, 0.15 당량)를 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 하였다. 수득한 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 EtOAc (3 x 10 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 Prep-TLC (DCM/MeOH = 10:1)에 의해 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물 (60 mg)은 Prep-HPLC로 정제하여 N-[2-플루오로-4-(1H-피라졸-1-일)페닐]-2-[2-(1-메틸피페리딘-4-일)옥세탄-2-일] -1,6-나프티리딘-7-아민 (7.6 mg, 8%)을 황색 고체로서 수득하였다.
실시예 47. 화합물 343 및 349의 제조
Figure pct00083
1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)-2,2,2-트리플루오로-1-(1-메틸피페리딘-4-일)에탄올. 에틸렌 글리콜 디메틸 에테르 (4.00 mL) 중의 7-클로로-2-(1-메틸피페리딘-4-카보닐)-1,6-나프티리딘 (0.10 g, 0.35 mmol) 및 불화세슘 (65.5 mg, 0.43 mmol)의 교반 혼합물에 (트리플루오로메틸)트리메실실란 (0.12 g, 0.86 mmol)을 질소 대기하에 0℃에서 적가하였다. 수득한 혼합물은 추가로 질소 대기하에 48시간 동안 주위 온도에서 교반하였다. 반응물은 물 (20.0 mL)로 켄칭하고 에틸 아세테이트 (3 x 20.0 mL)로 추출하였다. 배합된 유기 층을 염수 (3 x 10.0 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 여과하였다. 여과물은 감압하에 농축시켜 표제 화합물 (0.13 g, 조 생성물)을 황색 고체로서 수득하고, 이는 추가의 정제 없이 직접적으로 다음 단계에 사용되었다.
2,2,2-트리플루오로-1-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)-1-(1-메틸피페리딘-4-일)에탄올. 마이크로파 바이알 (10 mL)에 디옥산 (5 mL) 중의 1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)-2,2,2-트리플루오로-1-(1-메틸피페리딘-4-일)에탄올 (124 mg, 0.345 mmol, 1 당량), 2-플루오로-4-(피라졸-1-일)아닐린 (67.17 mg, 0.379 mmol, 1.1 당량), 크산트포스 (59.83 mg, 0.103 mmol, 0.3 당량), Pd(OAc)2 (11.61 mg, 0.052 mmol, 0.15 당량) 및 Cs2CO3 (224.59 mg, 0.689 mmol, 2 당량)을 첨가하고, 수득한 혼합물은 밀봉된 튜브를 통해 2시간 동안 100℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 방치하였다. 반응은 실온에서 물로 켄칭하였다. 수득한 혼합물은 DCM (100 x mL)으로 추출하였다. 배합 유기 층을 염수 (3 x 50 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 컬럼, C18 실리카 겔; 이동상, 물 중의 MeOH, 10 min 내 10% 내지 50% 농도구배; 검출기, UV 254 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 황색 고체로서 2,2,2-트리플루오로-1-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)-1-(1-메틸피페리딘-4-일)에탄올 (100 mg, 57%)을 황색 고체로서 수득하였다.
(R)-2,2,2-트리플루오로-1-(7-((2-플루오로-4-(1H-피라졸-1-일)페닐)아미노)-1,6-나프티리딘-2-일)-1-(1-메틸피페리딘-4-일)에탄-1-올 및 (S)-2,2,2-트리플루오로-1-(7-((2-플루오로-4-(1H-피라졸-1-일)페닐)아미노)-1,6-나프티리딘-2-일)-1-(1-메틸피페리딘-4-일)에탄-1-올 (화합물 343 및 349). 2,2,2-트리플루오로-1-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)-1-(1-메틸피페리딘-4-일)에탄올 (0.10 g)은 하기의 조건과 함께 키랄-Prep-HPLC에 의해 분리하였다: 컬럼: CHIRALPAK IG, 2 x 25 cm, 5 um; 이동상 A: Hex: 디클로로메탄 = 3 : 1 (+ MeOH 중의 10 mM NH3), 이동상 B: EtOH; 유속: 20 mL/min; 농도구배: 13 min 내 등용매 25% B; 검출기: UV 254/220 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다.
화합물 343 - 10.83 min에서 용출됨; 수율: 30.4 mg. 화합물 349 - 7.84 min에서 용출됨; 수율: 32.5 mg
화합물 390, 394, 396, 398, 401 및 403은 적당한 물질로 개시하면서, 화합물 343 및 349의 합성을 위해 기재된 바와 같은 방법 및 프로토콜에 따라 합성하였다.
실시예 48. 화합물 215의 제조
Figure pct00084
메틸 7-클로로-1,6-나프티리딘-2-카복실레이트. THF (40 mL) 및 MeOH (10 mL) 중의 2,7-디클로로-1,6-나프티리딘 (1700 mg, 8.54 mmol, 1 당량) 및 TEA(2.59 g, 25.6 mmol, 3 당량)의 교반 혼합물에 Pd(OAc)2 (383.5 mg, 1.708 mmol, 0.20 당량) 및 DPPP (2113.7 mg, 5.125 mmol, 0.60 당량)를 질소 대기하에 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 CO 대기하에 60℃에서 밤새 교반하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 PE/EtOAc (1:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 메틸 7-클로로-1,6-나프티리딘-2-카복실레이트 (700 mg, 37%)을 회색 고체로서 수득하였다.
메틸 7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-카복실레이트. 디옥산 (40 mL) 중의 메틸 7-클로로-1,6-나프티리딘-2-카복실레이트 (700 mg, 3.144 mmol, 1 당량), 2-플루오로-4-(피라졸-1-일)아닐린 (668.52 mg, 3.773 mmol, 1.20 당량) 및 Cs2CO3 (2048.90 mg, 6.288 mmol, 2 당량)의 교반 혼합물에 Pd(OAc)2 (141.18 mg, 0.629 mmol, 0.2 당량) 및 크산트포스 (1091.59 mg, 1.887 mmol, 0.6 당량)를 질소 대기하에 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. 수득한 혼합물은 진공 농축시켰다. 잔사는 PE/EtOAc (1:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 메틸 7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-카복실레이트 (450 mg, 39%)를 황색 고체로서 수득하였다.
7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-카복실산. THF (20 mL, 246.860 mmol, 199.33 당량) 및 H2O (5 mL, 277.542 mmol, 224.10 당량) 중의 메틸 7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일]페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-카복실레이트 (450 mg, 1.238 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 LiOH (148.29 mg, 6.192 mmol, 5 당량)를 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. 수득한 혼합물은 진공 농축시켰다. 잔사는 Prep-TLC (DCM/MeOH 10:1)로 정제하여 7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-카복실산 (270 mg, 62%)을 적색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸-N-[1-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일]페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-카보닐)피롤리딘-3-일]카바메이트. 7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-카복실산 (270 mg, 0.773 mmol, 1 당량) 및 3급-부틸 N-(피롤리딘-3-일)카바메이트 (431.88 mg, 2.319 mmol, 3 당량)의 교반 용액에 DMF (4 mL)에 HATU (382.05 mg, 15 mmol, 1.3 당량) 및 TEA (234.64 mg, 2.319 mmol, 3 당량)를 실온에서 적가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 2.5시간 동안 교반하였다.수득한 혼합물은 진공 농축시켰다. 잔사는 Prep-TLC (EtOAc)로 정제하여 3급-부틸 N-[1-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-카보닐)피롤리딘-3-일]카바메이트 (150 mg, 37%)를 황색 고체로서 수득하였다.
2-(3-아미노피롤리딘-1-카보닐)-N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-1,6-나프티리딘-7-아민 (화합물 215). DCM (10 mL) 중의 3급-부틸 N-[1-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-카보닐)피롤리딘-3-일]카바메이트 (80.0 mg, 0.155 mmol, 1 당량)의 교반된 용액에 TFA (1 mL)를 실온에서 적가하였다. 수득한 혼합물은 진공 농축시켰다. 잔사는 하기의 조건과 함께 역상 크로마토그래피로 정제하였다: 컬럼: 구형 C18, 20~40 um, 120 g; 이동상 A:물 (0.05%TFA), 이동상 B: ACN; 유속: 45 mL/min; 농도구배 (B%): 5%~25%, 10 min; 25%~37%, 17 min; 37%~95%; 2 min; 95%, 5 min; 검출기: 254 nm; Rt: 42 min. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물을 37% B에서 수거하고, 감압하에 농축시켜 2-(3- 아미노피롤리딘-1-카보닐)-N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-1,6-나프티리딘-7-아민; 포름산 (51.9 mg, 73%)을 황색 고체로서 수득하였다.
실시예 49. 화합물 242의 제조
Figure pct00085
7-클로로-1,6-나프티리딘-2-카복실산. THF (40 mL) 및 H2O(10 mL)중의 메틸 7-클로로-1,6-나프티리딘-2-카복실레이트 (화합물 215, 단계 1, 400 mg 1.797 mmol, 1 당량)의 교반 혼합물에 LiOH (172.11 mg, 7.187 mmol, 4 당량)를 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 50℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물은 HCl (aq.)을 사용하여 pH 7으로 중성화하였다. 수득한 혼합물은 진공 농축시켰다. 잔사는 헥산/EtOAc (1:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 7-클로로-1,6-나프티리딘-2-카복실산 (200 mg, 43%)을 회색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 N-[1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-카보닐)피페리딘-3-일]카바메이트. DMF (12 mL) 중의 7-클로로-1,6-나프티리딘-2-카복실산 (250 mg, 1.198 mmol, 1 당량) 및 3급-부틸 N-(피페리딘-3-일)카바메이트 (480.06 mg, 2.397 mmol, 2 당량)의 교반 혼합물에 TEA (363.82 mg, 3.595 mmol, 3 당량) 및 HATU (683.54 mg, 1.798 mmol, 1.5 당량)를 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 수득한 혼합물은 진공 농축시켰다. 잔사는 EtOAc (1:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 3급-부틸 N-[1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-카보닐)피페리딘-3-일]카바메이트 (120 mg, 25%)를 황색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 N-[1-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일]페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-카보닐)피레리딘-3-일]카바메이트. 디옥산 (10 mL) 중의 3급-부틸 N-[1-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-카보닐)피페리딘-3-일]카바메이트 (200 mg, 0.512 mmol, 1 당량), 2-플루오로-4-(피라졸-1-일)아닐린 (108.79 mg, 0.614 mmol, 1.20 당량) 및 Pd(OAc)2(22.98 mg, 0.102 mmol, 0.2 당량)의 교반 혼합물에 크산트포스 (177.64 mg, 0.307 mmol, 0.6 당량) 및 Cs2CO3 (266.74 mg, 0.819 mmol, 1.6 당량)을 질소 대기하에 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 80℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. 수득한 혼합물은 진공 농축시켰다. 잔사는 Prep-TLC (PE/ EtOAc 1:1)로 정제하여 3급-부틸 N-[1-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-카보닐)피페리딘-3-일]카바메이트 (120 mg, 35%)를 황색 고체로서 수득하였다.
2-(3-아미노피페리딘-1-카보닐)-N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-1,6-나프티리딘-7-아민 (화합물 242). DCM (10 mL) 중의 3급-부틸 N-[1-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-카보닐)피페리딘-3-일]카바메이트 (60 mg, 0.113 mmol, 1 당량)의 교반된 용액에 TFA (1 mL)를 실온에서 적가하였다. 수득한 혼합물은 진공 농축시켰다. 잔사는 포화 NaHCO3 (aq.)으로 pH 8로 염기성화시켰다. 수득한 혼합물은 진공 농축시켰다. 잔사는 하기의 조건과 함께 역상 크로마토그래피로 정제하였다: 컬럼: 구형 C18, 20~40 um, 120 g 이동상 A: 물 (10 mM NH4HCO3 및 0.05% NH3H2O), 이동상 B: ACN; 유속: 45 mL/min; 농도구배 (B%): 5%~25%, 13 min; 25%~37%, 17 min; 37%~95%; 2 min; 95%, 5 min; 검출기: 254 nm; Rt: 30 min. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물을 37% B에서 수거하고, 감압하에 농축시켜 2-(3-아미노피페리딘-1-카보닐)-N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-1,6-나프티리딘-7-아민 (72.1 mg, 92%)을 황색 고체로서 수득하였다.
실시예 50. 화합물 207의 제조
Figure pct00086
1,3-디에틸 2-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)프로판디오에이트. DMF 중의 2,7-디클로로-1,6-나프티리딘 (1200 mg, 1 당량) 및 디에틸 말로네이트 (1940 mg, 2 당량)의 교반 혼합물에 Cs2CO3 (4000 mg, 2 당량)을 질소 대기하에 실온에서 적가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 80℃에서 4시간 동안 교반하였다. 수득한 오일은 감압하에 오븐에서 건조시켰다. 잔사는 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하였다 (컬럼, C18,330 g; 이동상 A:물/0.05% TFA, 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 40 min 내 20% B 내지 60% B; 검출기, 254 nm, 모니터, 220 nm, 목적하는 생성물은 58% B에서 수거하였다). 이로써 메틸 1,3-디에틸 2-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)프로판디오에이트 (1400 mg)를 백색 고체로서 수득하였다.
7-클로로-2-메틸-1,6-나프티리딘. THF (45.0 mL) 및 물 (10.0 mL) 중의 1,3-디에틸 2-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)프로판디오에이트 (1.60 g, 4.97 mmol)에 질소 대기하에 수산화나트륨(1.00 g, 25.0 mmol)을 질소 대기하에 0℃에서 첨가하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 잔사는 Prep-TLC (PE/EtOAc 1:1)에 의해 정제하여 7-클로로-2-메틸-1,6-나프티리딘 (650 mg)을 황색 고체로서 수득하였다.
2-(브로모메틸)-7-클로로-1,6-나프티리딘. CCl4(17 mL) 중의 7-플루오로-2-메틸-1,6-나프티리딘 (550 mg, 1 당량)의 교반 용액에 NBS (1140 mg, 2당량) 및 BPO (155 mg, 0.20 당량)를 질소 대기하에 80℃에서 분획으로 첨가하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 잔사는 Prep-TLC (PE/EtOAc 1:1)에 의해 정제하여 2-(브로모메틸)-7-클로로-1,6-나프티리딘 (150 mg)을 백색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 4-[[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)메틸]설파닐]피페리딘-1-카복실레이트. DMF 중의 2-(브로모메틸)-7-클로로-1,6-나프티리딘 (150 mg, 1 당량) 및 3급-부틸 4-설파닐피페리딘-1-카복실레이트 (153 mg, 1.20 당량)의 교반 혼합물에 NaH (21 mg, 1.50 당량)을 질소 대기하에 실온에서 적가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 실온에서 1시간 동안 교반하였다 수득한 오일은 감압하에 오븐에서 건조시켰다. 잔사는 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하였다 (컬럼, C18,330 g; 이동상 A:물/0.05% TFA, 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 40 min 내 20% B 내지 60% B; 검출기, 254 nm, 모니터, 220 nm, 목적하는 생성물은 58% B에서 수거하였다). 이로써 3급-부틸 4-([[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-)메틸]설파닐] 피페리딘-1-카복실레이트 (128 mg)를 백색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)메탄설포닐]피페리딘-1-카복실레이트. DCM (5 mL) 중의 3급-부틸 4-[[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)메틸]설파닐]피페리딘-1-카복실레이트 (128 mg, 1 당량)의 교반 용액에 m-CPBA (168 mg, 3 당량)를 질소 대기하에 0℃에서 분획으로 첨가하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하여 (컬럼, C18,330 g; 이동상: A:물/0.05% NH4HCO3, 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 20 min 내 20% B 내지 50% B; 검출기, 254 nm, 모니터, 220 nm, 목적하는 생성물은 45% B에서 수거하였다) 3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)메탄설포닐]피페리딘-1-카복실레이트 (133mg)를 백색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]메탄설포닐]피페리딘-1-카복실레이트. 1,4-디옥산 (3 mL) 중의 3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)메탄설포닐]피페리딘-1-카복실레이트 (100 mg, 1 당량) 및 [1-(4-아미노-3-플루오로페닐)피라졸-3-일]메탄올 (64 mg, 1.30 당량)의 교반 혼합물에 Pd(OAc)2 (8 mg, 0.15 당량), 크산트포스 (41 mg, 0.30 당량) 및 K2CO3 (65 mg, 2 당량)을 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 방치하였다. 수득한 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 EtOAc (3 x 10 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하여 (컬럼, C18, 330 g; 이동상: A:물/0.05% NH4HCO3, 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 30 min 내 20% B 내지 60% B; 검출기, 254 nm, 모니터, 220 nm, 목적하는 생성물은 58% B에서 수거하였다) 3급-부틸 4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]메탄설포닐]피페리딘-1-카복실레이트 (62 mg)를 갈황색 고체로서 수득하였다.
[1-(3-플루오로-4-([2-[(피페리딘-4-설포닐)메틸] -1,6-나프티리딘-7-일]아미노)페닐]피라졸-3-일]메탄올 (화합물 207). DCM (10 mL) 중의 3급-부틸 4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]메탄설포닐]피페리딘-1-카복실레이트 (70 mg, 1 당량)의 교반 용액에 TFA (1 mL)를 0℃에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 포화 NaHCO3 (aq.)으로 pH 8로 염기성화시켰다. 수득한 고체는 감압하에 오븐에서 건조시켜 [1-[3-플루오로-4-([2-[(피페리딘-4-설포닐)메틸]-1,6-나프티리딘-7-일] 아미노)페닐]피라졸-3-일]메탄올 (18 mg)를 황색 고체로서 수득하였다.
실시예 51. 화합물 208의 제조
Figure pct00087
3급-부틸 4-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일설포닐)피페라진-1-카복실레이트. -5℃로 냉각된 2M HCl (7.5 mL) 및 DCM (20 mL)의 혼합물에 -5℃에서 NaOCl (~10% 용액, 6.50 mL, 10.075 mmol, 3.35 당량)을 첨가함에 이어서 반응 혼합물은 30분 동안 -5℃에서 교반하였다. 상기 반응 혼합물에 7-클로로-1,6-나프티리딘-2-티올 (591 mg, 35 mmol, 1 당량)을 첨가하고, 상기 수득한 혼합물은 60분 동안 -5℃에서 교반하였다. 과량의 염소는 혼합물의 황녹색이 사라질때까지 1 M Na2SO3을 첨가함에 의해 켄칭하였다. 반응 혼합물은 이어서 분리 깔때기로 옮기고 유기층은 신속하게 분리되고 빙수 중 플라스크에 수거하였다. 수성상은 신속하게 DCM (2 x 50 mL)으로 추출하였다. 유기 추출물을 배합하고 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 혼합물은 DCM (20 mL) 중의 3급-부틸 피페라진-1-카복실레이트 (671.71 mg, 3.606 mmol, 1.20 당량) 및 DIPEA (1.17 g, 9.016 mmol, 3 당량)의 냉 (-30℃) 교반 용액으로 여과하였다. 반응 혼합물은 추가로 1시간 동안 교반하고 염-빙 욕조에서 냉각시켰다. 반응은 H2O (100 mL)의 첨가로 켄칭시키고 수득한 혼합물은 DCM (3 x 50 mL)으로 추출하였다. 배합 유기 층을 염수 (2 x 50 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 PE:EtOAc (2:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 3급-부틸 4-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일설포닐)피페라진-1-카복실레이트 (420 mg, 33%)를 백색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 4-[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일설포닐]피페라진-1-카복실레이트. 20 mL의 마이크로파 바이알에 [1-(4-아미노-3-플루오로페닐)피라졸-3-일]메탄올 (175.65 mg, 0.848 mmol, 1 당량), 3급-부틸 4-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일설포닐)피페라진-1-카복실레이트 (350 mg, 0.848 mmol, 1 당량), 디옥산 (15 mL, 177.061 mmol, 208.88 당량), Pd(OAc)2 (28.55 mg, 0.127 mmol, 0.15 당량), 크산트포스 (147.15 mg, 0.254 mmol, 0.30 당량) 및 K3PO4 (539.80 mg, 2.543 mmol, 3 당량)를 충전시키고, 이어서 수득한 혼합물은 N2 대기하에 2시간 동안 60℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 실온으로 냉각시키고, DCM (200 mL) 및 H2O (100 mL)를 첨가하였다. 유기층은 염수 (2 x 50 mL)로 세척하고 감압하에 농축시켰다. 잔사는 컬럼, C18 실리카 겔; 이동상, 물 중의 MeCN (10 mmol/L NH4HCO3), 15 min 내 40% 내지 55% 농도구배; 검출기, UV 220 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 3급-부틸 4-[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일설포닐]피페라진-1-카복실레이트 (75 mg, 15%)를 담황색 고체로서 수득하였다.
[1-(3-플루오로-4-[[2-(피페리딘-1-설포닐)-1,6-나프티리딘-7-일]아미노]페닐]피라졸-3-일]메탄올 (화합물 208). 3급-부틸 4-[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일설포닐]-피페라진-1-카복실레이트 (75 mg, 0.129 mmol, 1 당량), DCM (25 mL, 393.251 mmol, 3060.23 당량) 및 TFA (2.50 mL, 33.658 mmol, 261.92 당량)의 혼합물을 2시간 동안 0℃에서 교반하였다. 반응은 포화 NaHCO3 (당량 20 mL)의 첨가로 0℃에서 켄칭하였다. 수득한 혼합물은 DCM (3 x 100 mL)으로 추출하였다. 배합 유기층은 염수 (2 x 50 mL)로 세척하고 감압하에 농축시켰다. 조 생성물을 Prep-HPLC에 의해 정제하여 [1-(3-플루오로-4-[[2-(피페라진-1-설포닐)-1,6-나프티리딘-7-일]아미노]페닐)피라졸-3-일]메탄올 (28.4 mg, 45%)을 황색 고체로서 수득하였다.
화합물 248은 적당한 물질로 개시하면서, 화합물 208의 합성을 위해 기재된 바와 같은 방법 및 프로토콜에 따라 합성하였다.
실시예 52. 화합물 245의 제조
Figure pct00088
THF (10 mL) 중의 [1-(3-플루오로-4-[[2-(피페라진-1-설포닐)-1,6-나프티리딘-7-일]아미노]페닐)피라졸-3-일]메탄올 (85 mg, 0.176 mmol, 1 당량), HCHO (10.56 mg, 0.352 mmol, 2 당량)의 교반 용액에 NaBH(OAc)3 (74.52 mg, 1.186 mmol, 6.75 당량)을 0℃에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하였다 (컬럼: XBridge Shield RP18 OBD 컬럼, 5 μm,19*150 mm). 감압 농축시켜 [1-(3-플루오로-4-[[2-(4-메틸피페라진-1-일설포닐)-1,6-나프티리딘-7-일]아미노]페닐)피라졸-3-일]메탄올 (28.7 mg, 32%)을 오렌지 고체로서 수득하였다.
실시예 53. 화합물 203의 제조
Figure pct00089
Figure pct00090
2,3,4,5,6-펜타플루오로페닐 7-클로로-1,6-나프티리딘-2-설포네이트. -5℃로 냉각된 2M HCl (7.5 mL) 및 DCM (20 mL)의 혼합물에 -5℃에서 NaOCl (~10% 용액, 6.50 mL, 10.075 mmol, 3.35 당량)을 첨가함에 이어서 반응 혼합물은 30분 동안 -5℃에서 교반하였다. 상기 반응 혼합물에 7-클로로-1,6-나프티리딘-2-티올 (591 mg, 35 mmol, 1 당량)을 첨가하고, 상기 수득한 혼합물은 60분 동안 -5℃에서 교반하였다. 과량의 염소는 혼합물의 황녹색이 사라질 때까지 1 M Na2SO3을 첨가함에 의해 켄칭하였다. 반응 혼합물은 이어서 분리 깔때기로 옮기고 유기층은 신속하게 분리되고 빙수 중 플라스크에 수거하였다. 수성상은 신속하게 DCM (2 x 50 mL)으로 추출하였다. 유기 추출물을 배합하고 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과물을 -30℃에서 디클로로메탄 (20.0 mL) 중의 펜타플루오로페놀 (0.184 g, 1.01 mmol) 및 트리에틸아민 (0.15 g, 1.50 mmol)의 냉각전 교반 용액에 첨가하였다. 수득한 반응 혼합물은 추가로 1시간 동안 -30℃에서 교반시켰다. 반응 혼합물은 물 (60.0 mL), aq. 10% KH2PO4 (2 x 30.0 mL), 포화 NaHCO3 (2 x 30.0 mL), 물 (30.0 mL) 및 염수 (30.0 mL) 각각으로 세척하였다. 유기 분획물을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고 여과하였다. 여과물은 감압하에 농축시켜 표제 화합물 (0.41 g, 조 생성물)을 담황색 고체로서 수득하고, 이는 추가의 정제 없이 직접적으로 다음 단계에 사용되었다.
7-클로로-N-(1-메틸피페리딘-4-일)-1,6-나프티리딘-2-설폰아미드 조 2,3,4,5,6-펜타플루오로페닐 7-클로로-1,6-나프티리딘-2-설포네이트 (610 mg, 1.485 mmol, 1 당량), 1-메틸피페리딘-4-아민 (186.57 mg, 1.634 mmol, 1.10 당량), DIPEA (575.88 mg, 4.456 mmol, 3 당량) 및 MeCN (20.09 mL, 489.397 mmol, 257.34 당량)의 혼합물은 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물은 농축시켜 잔사를 수득하고 이는 컬럼, C18 실리카 겔; 이동상, 물 중의 MeCN (10 mmol/L NH4HCO3), 10 min 내 20% 내지 30% 농도구배; 검출기, UV 220 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 7-클로로-N-(1-메틸피페리딘-4-일)-1,6-나프티리딘-2-설폰아미드 (250 mg, 49%)를 담황색 고체로서 수득하였다.
7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-N-(1-메틸피페리딘-4-일)-1,6-나프티리딘-2-설폰아미드 (화합물 203). 20 mL의 마이크로파 바이알에 7-클로로-N-(1-메틸피페리딘-4-일)-1,6-나프티리딘-2-설폰아미드 (250 mg, 0.734 mmol, 1 당량), [1-(4-아미노-3-플루오로페닐)피라졸-3-일]메탄올 (151.99 mg, 0.734 mmol, 1 당량), 디옥산 (15 mL, 177.061 mmol, 241.39 당량), Pd(OAc)2 (24.70 mg, 0.110 mmol, 0.15 당량), 크산트포스 (127.33 mg, 0.220 mmol, 0.30 당량) 및 K3PO4 (467.09 mg, 2.201 mmol, 3 당량)를 충전시키고, 이어서 수득한 혼합물은 N2 대기하에 2시간 동안 100℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 실온으로 냉각시키고, EtOAc (150 mL) 및 H2O (100 mL)를 첨가하였다. 수득한 혼합물은 EtOAc (3 x 50 mL)로 추출하였다. 배합 유기층을 염수 (2 x 50 mL)로 세척하고 감압하에 농축시켜 잔사를 수득하고, 이는 Prep-HPLC에 의해 정제하여 7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-N-(1-메틸피페리딘-4-일)-1,6-나프티리딘-2-설폰아미드 (13.7 mg, 3%)를 황색 고체로서 수득하였다.
실시예 54. 화합물 107의 제조
Figure pct00091
3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)설파닐]피페리딘-1-카복실레이트. 1,4-디옥산 (20 mL) 중의 2,7-디클로로-1,6-나프티리딘 (1 g, 5.024 mmol, 1 당량) 및 3급-부틸 4-설파닐피페리딘-1-카복실레이트 (1.31 g, 6.029 mmol, 1.20 당량)의 교반 혼합물에 DIEA (1.30 g, 10.049 mmol, 2 당량), 크산트포스 (581.44 mg, 15 mmol, 0.20 당량) 및 Pd2(dba)3CHCl3 (520.07 mg, 0.502 mmol, 0.10 당량)을 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 50℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 방치하였다. 잔사는 PE/EtOAc (20:1 내지 10:1)로 용출시키면서, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)설파닐]피페리딘-1-카복실레이트 (1.8 g, 94%)를 회색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 4-[(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일]페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일]설파닐]피페리딘-1-카복실레이트 1,4-디옥산 (8 mL) 중의 3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)설파닐]피페리딘-1-카복실레이트 (100 mg, 0.263 mmol, 1 당량) 및 2-플루오로-4-(피라졸-1-일)아닐린 (51.30 mg, 0.290 mmol, 1.1 당량)의 교반 혼합물에 크산트포스 (30.46 mg, 0.053 mmol, 0.2 당량), Cs2CO3 (171.53 mg, 0.526 mmol, 2 당량) 및 Pd(OAc)2 (5.91 mg, 0.026 mmol, 0.1 당량)를 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 110℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 방치하였다. 수득한 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 DCM (3 x 10 mL)으로 세척하였다. 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하여 (컬럼, C18, 330 g; 이동상: A:물/0.05% NH4HCO3, 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 20 min 내 40% B 내지 70% B; 검출기, 254 nm, 모니터, 220 nm, 목적하는 생성물은 65% B에서 수거하였다) 3급-부틸 4-[(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일]페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)설파닐]피페리딘-1-카복실레이트 (110 mg, 80%)를 황색 고체로서 수득하였다.
N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-2-(피페리딘-4-일설파닐)-1,6-나프티리딘-7-아민 (화합물 107). DCM (4 mL) 중의 3급-부틸 4-[(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)설파닐]피페리딘-1-카복실레이트 (50 mg, 0.096 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 TFA (1 mL)를 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 포화 NaHCO3 (aq.)으로 pH 8로 염기성화시켰다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 조 생성물 (40 mg)은 Prep-HPLC로 정제하여 N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-2-(피페리딘-4-일설파닐)-1,6-나프티리딘-7-아민 (17.2 mg, 42%)을 황색 고체로서 수득하였다.
화합물 108, 118, 129 및 133은 적당한 물질로 개시하면서, 화합물 107의 합성을 위해 기재된 바와 같은 방법 및 프로토콜에 따라 합성하였다.
실시예 55. 화합물 134 및 136의 제조
Figure pct00092
7-클로로-2-(피페리딘-4-일설파닐)-1,6-나프티리딘. DCM (20 mL) 중의 3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)설파닐]피페리딘-1-카복실레이트 (1 g, 2.632 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 TFA (2 mL, 26.926 mmol, 10.23 당량)를 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 포화 NaHCO3 (aq.)으로 pH 8로 염기성화시켰다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사를 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하여 (컬럼, C18,330 g; 이동상: A:물/0.05% NH4HCO3, 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 20 min 내 20% B 내지 50% B; 검출기, 254 nm, 모니터, 220 nm, 목적하는 생성물은 42% B에서 수거하였다) 7-벤질-2-(피페리딘-4-일설파닐)-1,6-나프티리딘 (650 mg, 88%)을 백색 고체로서 수득하였다.
3-[[2-(피페리딘-4-일설파닐)-1,6-나프티리딘-7-일]아미노]벤즈아미드 (화합물 134) 및 3-아미노-N-[2-(피페리딘-4-일설포닐)-1,6-나프티리딘-7-일]벤즈아미드 (화합물 136). 1,4-디옥산 (4 mL) 중의 7-클로로-2-(피페리딘-4일설파닐)-1,6-나프티리딘 (150 mg, 3.286 mmol, 1 당량) 및 3-아미노벤즈아미드 (88 mg, 4.272 mmol)의 교반 혼합물에 Pd(OAc)2 (18 mg, 0.329 mmol, 0.15 당량), 크산트포스 (93 mg, 0.657 mmol, 0.30 당량) 및 Cs2CO3 (351 mg, 6.572 mmol, 2 당량)을 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 110℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 방치하였다. 수득한 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 EtOAc (3 x 10 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 Prep-HPLC에 의해 정제하여 황색 고체로서 3-[[2-(피페리딘-4-일설파닐)-1,6-나프티리딘-7-일]아미노]벤즈아미드; 포름산 (7.9 mg) 및 백색 고체로서 3-아미노-N-[2-(피페리딘-4-일설파닐)-1,6-나프티리딘-7-일]벤즈아미드; 포름산 (14 mg)을 수득하였다.
실시예 56. 화합물 138의 제조
Figure pct00093
2-[4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)설파닐]피페리딘-1-일]에탄올. THF (5 mL, 0.657mmol) 중의 7-플루오로 -2-(피페리딘-4일설파닐)-1,6-나프티리딘 (화합물 134, 단계 1, 120 mg, 3.286 mmol, 1 당량) 및 에탄올, 2-요오도-(89 mg, 4.272 mmol, 1.20 당량)의 교반된 혼합물에 TEA (87 mg, 0.329 mmol, 2 당량)를 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하여 (컬럼, C18,330 g; 이동상: A:물/0.05% NH4HCO3, 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 20 min 내 20% B 내지 50% B; 검출기, 254 nm, 모니터, 220 nm, 목적하는 생성물은 45% B에서 수거하였다) 2-[4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)설파닐]피페리딘-1-일]에탄올 (100 mg)을 황색 고체로서 수득하였다.
2-(4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]설파닐](피페리딘-1-일)에탄올 (화합물 138). 1,4-디옥산 (5 mL, 0.038 mmol) 중의 2-[4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)설파닐]피페리딘-1-일]에탄올 (60 mg, 3.286 mmol, 1 당량) 및 [1-(4-아미노-3-플루오로페닐)피라졸-3-일]메탄올 (77 mg, 4.272 mmol, 2 당량)의 교반 혼합물에 Pd(OAc)2 (13 mg, 0.329 mmol, 0.15 당량), 크산트포스 (65 mg, 0.657 mmol, 0.30 당량) 및 Cs2CO3 (242 mg, 6.572 mmol, 4 당량)을 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 110℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 방치하였다. 수득한 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 EtOAc (3 x 10 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사를 Prep-HPLC로 정제하여 2-(4-[[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]설파닐]피페리딘-1-일)에탄올 (6.5 mg)을 담황색 고체로서 수득하였다.
실시예 57. 화합물 121의 제조
Figure pct00094
3급-부틸 N-[(1s,4s)-4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)설파닐]사이클로헥실]카바메이트. THF (10 mL) 중의 7-클로로-1,6-나프티리딘-2-티올 (100 mg, 1 당량) 및 3급-부틸 N-[(1r,4r)-4-하이드록시사이클로헥실]카바메이트 (548.47 mg, 5 당량)의 교반된 혼합물에 DEAD (177.55 mg, 2 당량) 및 PPh3 (267.35 mg, 2 당량)을 질소 대기하에 0℃에서 적가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 EtOAc (3 x 200 mL)로 추출하였다. 배합 유기 층을 염수 (2 x 100 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 330 g; 이동상 A: 물 (+ 5 mM NH4NO3); 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 30 min에서 55% B - 95% B 농도구배; 검출기: 254 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물은 95% B에서 수거하였고, 감압하에 농축시켜 3급-부틸 N-[(1s,4s)-4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)설파닐]사이클로헥실]카바메이트 (260 mg)를 담황색 고체로서 수득하였다.
3급-부틸 N-[(1s,4s)-4-[(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)설파닐]사이클로헥실]카바메이트. 1,4-디옥산 (5 mL) 중의 3급-부틸-[(1s,4s)-4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)설파닐]사이클로헥실]카바메이트 (120 mg, 0.305 mmol, 1 당량) 및 2-플루오로-4-(피라졸-1-일)아닐린 (70.17 mg, 0.396 mmol, 1.30 당량)의 교반 혼합물에 크산트포스 (52.88 mg, 0.091 mmol, 0.30 당량), Cs2CO3 (198.50 mg, 0.609 mmol, 2 당량) 및 Pd(OAc)2 (10.26 mg, 0.046 mmol, 0.15 당량)를 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 방치하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 수득한 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 EtOAc (3 x 20 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하였다 (컬럼, C18,330 g; 이동상 A:물/0.05% TFA, 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 20min 내 50% B 내지 95% B; 검출기, 254 nm 및 220 nm, 목적하는 생성물은 95% B에서 수거하였다).감압하에 농축시켜 3급-부틸 N-[(1s,4s)-4-[(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)설파닐]사이클로헥실] 카바메이트 (110 mg, 67%)를 담갈색 고체로서 수득하였다.
N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-2-[[(1s,4s)-4-아미노사이클로헥실]설파닐]-1,6-나프티리딘-7-아민 (화합물 121). MeOH (10 mL) 중의 3급-부틸 N-[(1s,4s)-4-[(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)설파닐]사이클로헥실]카바메이트 (110 mg, 0.206 mmol, 1 당량)의 교반된 용액에 1,4-디옥산 (12 mL, 394.943 mmol, 1919.60 당량) 중의 HCl (가스)을 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 Prep-HPLC로 정제하여 N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-2-[[(1s,4s)-아미노사이클로헥실]설파닐]-1,6-나프티리딘-7-아민 (24.7 mg, 27%)을 담황색 고체로서 수득하였다.
화합물 122, 135, 153, 157, 159 및 161은 적당한 물질로 개시하면서, 화합물 121의 합성을 위해 기재된 바와 같은 방법 및 프로토콜에 따라 합성하였다.
실시예 58. 화합물 138의 제조
Figure pct00095
7-클로로-2-[(1-메틸피페리딘-4-일)설파닐]-1,6-나프티리딘. THF (100 mL) 중의 7-클로로-1,6-나프티리딘-2-티올 (6 g, 30.511 mmol, 1 당량) 및 4-피페리딘올, 1-메틸-(17.57 g, 152.555 mmol, 5 당량)의 교반된 혼합물에 DEAD (10.63 g, 61.022 g, 2 당량) 및 PPh3 (14.40 g, 54.920 mmol, 1.80 당량)을 질소 대기하에 0℃에서 적가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 330 g; 이동상 A: 물 (+ 5 mM TFA); 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 30 min에서 30% B - 65% B 농도구배; 검출기: 254 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물은 40% B에서 수거하였고, 감압하에 농축시켜 7-클로로-2-[(1-메틸피페리딘-4-일)설파닐]-1,6-나프티리딘 (3g, 33%)을 황색 고체로서 수득하였다.
3'-플루오로-4'-([2-[(1-메틸피페리딘-4-일)설파닐]-1,6-나프티리딘-7-일]아미노)-[1,1'-바이페닐]-3-카보니트릴 (화합물 138). 1,4-디옥산 (10 mL) 중의 7-클로로-2-[(1-(1-메틸피페리딘-4-일)설파닐]-1,6-나프티리딘 (200 mg, 3.286 mmol, 1 당량) 및 4-아미노-3-플루오로-[1,1-바이페닐]-3-카보니트릴 (159 mg, 4.272 mmol, 1.10 당량)의 교반 혼합물에 Pd(OAc)2 (23 mg, 0.329 mmol, 0.15 당량), 크산트포스 (118.40 mg, 0.657 mmol, 0.30 당량) 및 Cs2CO3 (445 mg, 6.572 mmol, 2 당량)을 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 110℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 방치하였다. 수득한 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 EtOAc (3 x 10 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 Prep-HPLC로 정제하여 3'-플루오로-4'-([2-[(1-메틸피페리딘-4-일)설파닐]-1,6-나프티리딘-7-일]아미노)-[1,1’-바이페닐]-3-카보니트릴 (77mg)을 백색 고체로서 수득하였다.
실시예 59. 화합물 115 및 117의 제조
Figure pct00096
3급-부틸 4-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일]페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일설피닐)피페리딘-1-카복실레이트. DCM (30 mL) 중의 3급-부틸 4-[(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일)설파닐]피페리딘-1-카복실레이트 (화합물 107, 단계 2, 1 g, 1.921 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 m-CPBA (265.16 mg, 1.537 mmol, 0.80 당량)를 0℃에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 반응은 포화 NaHSO3(당량)으로 0℃에서 켄칭하였다. 수득한 혼합물은 DCM (3 x 100 mL)으로 추출하였다. 배합된 유기층을 염수 (1 x 100 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하여 (컬럼: C18, 330 g; 이동상 A:물/0.05% NH4HCO3, 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 20 min 내 30% B 내지 60% B; 검출기, 220 nm, 모니터, 254 nm, 최종 생성물은 60% B에서 수거하였다) 3급-부틸 4-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일설피닐)피페리딘-1-카복실레이트 (450 mg, 43%)를 황색 고체로서 및 3급-부틸 4-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일설포닐)피페리딘-1-카복실레이트 (100 mg, 9%)를 황색 고체로서 수득하였다.
(R)- 및 (S)-N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-2-[피페리딘-4-설피닐]-1,6-나프티리딘-7-아민 (화합물 115 및 117). DCM (8 mL) 중의 3급-부틸 4-(7-[[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]아미노]-1,6-나프티리딘-2-일설피닐]피페리딘-1-카복실레이트 (150 mg)의 교반 용액에 TFA (1 mL)를 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 포화 NaHCO3 (aq.)으로 pH 8로 염기성화시켰다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 조 생성물 (120 mg)은 하기의 조건과 함께 Prep-HPLC로 정제하여 (컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 μm) P1 및 P2의 혼합물을 수득하였다. 조 생성물 (70 mg)을 Prep-HPLC로 정제하여 N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-2-[(R)-피페리딘-4-설피닐]-1,6-나프티리딘-7-아민 (21 mg)을 황색 고체로서 및 N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-2-[(S)-피페리딘-4-설피닐]-1,6-나프티리딘-7-아민 (18 mg)을 황색 고체로서 수득하였다.
화합물 115 - 14.727 min에서 용출됨; 수율: 21 mg. 화합물 117 - 18.838 min에서 용출됨; 수율: 18 mg.
실시예 60. 화합물 123의 제조
Figure pct00097
3급-부틸 4-[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일설포닐]피페리딘-1-카복실레이트. DCM (20 mL) 중의 3급-부틸 4-[[7-([2-플루오로-4-[-3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일]설파닐]피페리딘-1-카복실레이트 (화합물 108, 단계 2, 400 mg, 0.726 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 m-CPBA (250.71 mg, 1.453 mmol, 2 당량)를 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하여 (컬럼, C18, 330 g; 이동상 A:물/0.05% TFA, 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 20 min 내 30% B 내지 60% B; 검출기, 254 nm, 모니터, 220 nm, 목적하는 생성물은 56% B에서 수거하였다) 3급-부틸 4-[7-([2-플루오로-4[3-(하이드록시에틸)피라졸-1-일]페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일설포닐]피페리딘-1-카복실레이트 (200 mg, 47%)를 황색 고체로서 수득하였다.
[1-(3-플루오로-4-[[2-(피페리딘-4-설포닐)-1,6-나프티리딘-7-일]아미노]페닐)피라졸-3-일]메탄올 (화합물 123). DCM (10 mL) 중의 3급-부틸 4-[7-([2-플루오로-4-[3-(하이드록시메틸)피라졸-1-일)페닐]아미노)-1,6-나프티리딘-2-일설포닐)피페리딘-1-카복실레이트 (200 mg, 0.343 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 TFA (1 mL, 13.463 mmol, 39.22 당량)를 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 포화 NaHCO3 (aq.)으로 pH 8로 염기성화시켰다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 하기의 조건과 함께 역상 플래쉬에 의해 정제하여 (컬럼, C18,120 g; 이동상 A:물/0.05% NH4HCO3, 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 20 min 내 15% B 내지 40% B; 검출기, 254 nm, 모니터, 220 nm, 목적하는 생성물은 32% B에서 수거하였다) [1-(3-플루오로-4-[[2-(피페리딘-4-설포닐)-1,6-나프티리딘-7-일]아미노]페닐)피라졸-3-일]메탄올 (70 mg, 42%)을 오렌지 고체로서 수득하였다.
화합물 113, 151, 171, 174, 180, 181, 197, 199, 200, 206, 210, 212, 및 234는 적당한 물질로 개시하면서 화합물 및 123의 합성을 위해 기재된 바와 같은 방법 및 프로토콜에 따라 합성하였다.
실시예 61. 화합물 127의 제조
Figure pct00098
THF (10 mL, 123.430 mmol, 617.89 당량) 중의 [1-(3-플루오로-4-[[2-(피페리딘-4-일설파닐)-1,6-나프티리딘-7-일]아미노]페닐)피라졸-3-일]메탄올 (화합물 108, 90 mg, 0.200 mmol, 1 당량) 및 TEA (40.43 mg, 0.400 mmol, 2 당량)의 교반 혼합물에 NaBH(OAc)3 (63.51 mg, 0.300 mmol, 1.50 당량) 및 HCHO (7.80 mg, 0.260 mmol, 1.30 당량)를 실온에서 적가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 포화 NaHCO3 (aq.)으로 pH 8로 염기성화시켰다. 수득한 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 EtOAc (3 x 10 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압하에 농축시켰다. 조 생성물 (60 mg)을 Prep-HPLC에 의해 정제하여 [1-[3-플루오로-4-([2-[(1-메틸피페리딘-4-일)설파닐] -1,6-나프티리딘-7-일]아미노)페닐]피라졸-3-일]메탄올 (29.3 mg, 31%)을 백색 고체로서 수득하였다.
화합물 128 및 148은 적당한 물질로 개시하면서, 화합물 127의 합성을 위해 기재된 바와 같은 방법 및 프로토콜에 따라 합성하였다.
실시예 62. 화합물 158의 제조
Figure pct00099
3급-부틸 4-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일설포닐)피페리딘-1-카복실레이트. DCM (40 mL) 중의 3급-부틸 4-[(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일)설파닐]피페리딘-1-카복실레이트 (500 mg, 1.316 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 m-CPBA (681.36 mg, 3.948 mmol, 3 당량)를 질소 대기하에 0℃에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응은 TLC에 의해 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 DCM (3 x 300 mL)으로 추출하였다. 배합 유기 층을 염수 (2 x 200 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 컬럼: 구형 C18, 20 - 40 um, 330 g; 이동상 A: 물 (+ 5 mM FA); 이동상 B: ACN; 유속: 80 mL/min; 농도구배: 5% - 5% B, 10 min, 30 min에서 35% B - 80% B 농도구배; 검출기: 220 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 목적하는 생성물을 함유하는 분획물은 72% B에서 수거하였고, 감압하에 농축시켜 3급-부틸 4-(7-클로로-1,6-나프티리딘-2-일설포닐)피페리딘-1-카복실레이트 (350 mg, 64%)를 황색 고체로서 수득하였다.
7-클로로-2-(피페리딘-4-설포닐)-1,6-나프티리딘. DCM (80 mL) 중의 3급-부틸 4-(7-클로로-1,6-나프티리딘 -2-일설포닐)피페리딘-1-카복실레이트 (7 g)의 교반 용액에 TFA (10 mL)를 실온에서 적가하였다. 반응 혼합물은 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 TLC에 의해 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 포화된 NaHCO3 (aq.)을 사용하여 pH =8로 염기성화하였다. 수득한 혼합물은 DCM (3 x 1000 mL)으로 추출하였다. 배합 유기 층을 염수 (2 x 500 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압하에 농축시켰다. 이로써, 7-클로로-2-(피페리딘-4-설포닐)-1,6-나프티리딘 (5.5 g)을 담황색 고체로서 수득하였다.
7-클로로-2-(1-메틸피페리딘-4-일설포닐)-1,6-나프티리딘. THF (30 mL) 중의 7-클로로-2-(피페리딘-4-설포닐)-1,6-나프티리딘 (1 g, 3.207 mmol, 1 당량) 및 HCHO (0.13 g, 04 mmol, 1.3 당량)의 교반 혼합물에 NaBH(OAc)3 (1.02 g, 4.811 mmol, 1.5 당량)을 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 컬럼, C18 실리카 겔; 이동상, 물 중의 MeOH, 10 min 내 30% 내지 50% 농도구배; 검출기, UV 254 nm의 조건과 함께 역상 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 7-클로로-2-(1-메틸피페리딘-4-일설포닐)-1,6-나프티리딘 (980 mg, 93%)을 황색 고체로서 수득하였다.
N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-2-(1-메틸피페리딘-4-일설포닐)-1,6-나프티리딘-7-아민 (화합물 158). 1,4-디옥산 (15 mL) 중의 7-클로로-2-(1-메틸피페리딘-4-일설포닐]-1,6-나프티리딘 (60 mg, 0.184 mmol, 1 당량) 및 2-플루오로-4-(피라졸-1-일)아닐린 (35.89 mg, 0.203 mmol, 1 당량)의 교반 혼합물에 Pd(OAc)2 (6.20 mg, 0.028 mmol, 0.15 당량), 크산트포스 (31.97 mg, 0.055 mmol, 0.30 당량) 및 Cs2CO3 (120 mg, 0.368 mmol, 2 당량)을 질소 대기하에 실온에서 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 110℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 방치하였다. 수득한 혼합물은 EtOAc (3 x 300 mL)로 추출하였다. 배합된 유기층을 염수 (2 x 100 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 Prep-HPLC로 정제하여 N-[2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐]-2-(1-메틸피페리딘-4-일설포닐)-1,6-나프티리딘-7-아민 (29.2 mg, 33%)을 황색 고체로서 수득하였다.
화합물 156, 288, 289, 290, 376, 378, 379, 380, 382, 384, 및 385는 적당한 물질로 개시하면서 화합물 및 158의 합성을 위해 기재된 바와 같은 방법 및 프로토콜에 따라 합성하였다.
실시예 63. 화합물 183의 제조
Figure pct00100
3,4'-디플루오로-[1,1'-바이페닐]-4-아민. 디옥산 (10 mL, 0.211 M, 20 Vols) 중의 2-플루오로-4-요오도아닐린 (0.5g, 2.11 mmol, 1 당량), 4-플루오로페닐보론산 (0.47 g, 3.359 mmol, 1.592 당량) 및 XPhos Pd G3(129 mg, 0.152 mmol, 0.072 당량)의 혼합물에 N2를 살포한 다음 K3PO4 (1.5 g, 7.066 mmol, 3.35 당량) 및 물 (2 mL, 1.055 M, 4 Vols)로 충전하였다. 4시간 동안 100℃로 가열하였다. RT로 냉각시키고, 층을 분리하고 이어서 셀라이트를 통해 유기물을 여과하고 EtOAc로 용출시킨다. SiO2 상으로 여과물을 진공 농축시키고, 플래쉬 크로마토그래피 (ISCO 40 g, 0-100% EtOAc/헵탄)를 통해 정제하였다. 3,4'-디플루오로-[1,1'-바이페닐]-4-아민 (382.4 mg, 1.86 mmol, 수율 88 %)을 황색 고체로서 수득하였다.
N-{3,4'-디플루오로-[1,1'-바이페닐]-4-일}-2-(1-메틸피페리딘-4-일설포닐)-1,6-나프티리딘-7-아민 (화합물 183). 디옥산 (0.5 mL, 0.188 M, 16.34 Vols) 중의 7-클로로-2-(1-메틸피페리딘-4-일설포닐)-1,6-나프티리딘 (화합물 158, 단계 3,30.6 mg, 0.094 mmol, 1 당량), 3,4'-디플루오로-[1,1'-바이페닐]-4-아민 (27.3 mg, 0.133 mmol, 1.416 당량) 및 브레트포스 Pd G3 (5 mg, 06 mmol, 0.059 당량)에 N2를 살포하고 이어서 MTBD (0.102 g, 0.1 mL, 0.664 mmol, 7.074 당량)를 충전하였다. 4시간 동안 60℃에서 교반하였다. LCMS는 생성물 매쓰 형성을 보여준다. RT로 냉각시키고, 셀라이트를 통해 여과하고, EtOAc로 용출시키고 진공 농축시켰다. 플래쉬 크로마토그래피(ISCO 4g, 0-20% MeOH/DCM)를 통해 정제하였다. 불순한 생성물을 수득하였다. 다시 정제 (ISCO 4 g, 0-100% MeOH/EtOAc)하였다. N-{3,4'-디플루오로-[1,1'-바이페닐]-4-일}-2-(1-메틸피페리딘-4-일설포닐)-1,6-나프티리딘-7-아민 (6.4 mg, 0.013 mmol, 수율 13.779%)을 황색 고체로서 수득하였다.
화합물 201, 202, 224, 225, 226, 227, 228, 229, 230, 231, 232, 233, 234, 235, 236, 237, 238, 239 및 293은 적당한 물질로 개시하면서, 화합물 183의 합성을 위해 기재된 바와 같은 방법 및 프로토콜을 따라 합성하였다.
화합물 184, 185, 191, 192, 193, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 256, 257, 258, 259, 260, 262, 263, 264, 265, 266, 267, 268, 269, 270, 271, 272, 273, 274, 275, 276, 277, 278, 279, 280, 281, 282, 283, 284, 285, 286, 294, 295, 296, 297, 298, 299, 300, 301, 302, 303, 304, 305, 306, 307, 308, 및 374는 상업적 아닐린으로 개시하면서 화합물 183의 합성의 제2 단계에 대해 기재된 바와 같은 방법 및 프로토콜에 따라 합성하였다.
실시예 64. 화합물 198의 제조
Figure pct00101
THF (20 mL) 및 물 (4 mL) 중의 메틸 1-(3-플루오로-4-[[2-(1-메틸피페리딘-4-일설포닐)-1,6-나프티리딘-7-일]아미노]페닐)피라졸-3-카복실레이트 (100 mg, 0.191 mmol, 1 당량) 및 LiOH (45.65 mg, 1.906 mmol, 10 당량)를 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 수득한 혼합물은 감압하에 농축시켰다. 잔사는 Prep-HPLC로 정제하여 1-(3-플루오로-4-((2-((1-메틸피페리딘-4-일)설포닐]-1,6-나프티리딘-7-일]아미노)페닐)-1H-피라졸-3-카복실산 (16.3 mg, 17%)을 황색 고체로서 수득하였다.
화합물 194은 적당한 물질로 개시하면서, 화합물 198의 합성을 위해 기재된 바와 같은 방법 및 프로토콜에 따라 합성하였다.
실시예 65. 화합물 317의 제조
Figure pct00102
DMF (3 mL) 중의 1-(3-플루오로-4-[[2-(1-메틸피페리딘-4-일설포닐)-1,6-나프티리딘-7-일]아미노]페닐)피라졸-3-카복실산 (60 mg, 0.118 mmol, 1 당량) 및 HATU (89.37 mg, 0.235 mmol, 2 당량)에 NH4HCO3 (46.45 mg, 0.588 mmol, 5 당량) 및 TEA (35.68 mg, 0.353 mmol, 3 당량)를 질소 대기하에 실온에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 질소 대기하에 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응은 LCMS로 모니터링하였다. 혼합물은 실온으로 냉각되도록 방치하였다. 수득한 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 EtOAc (3 x 10 mL)로 세척하였다. 조 생성물 (mg)을 Prep-HPLC에 의해 정제하여 1-(3-플루오로-4-[[2-(1-메틸피페리딘-4-일설포닐)-1,6-나프티리딘-7-일]아미노]페닐)피라졸-3-카복스아미드 (16.4 mg, 27%)를 황색 고체로서 수득하였다.
본 발명의 예시적인 화합물에 대한 NMR 및 MS 데이터는 도 1에 포함된다.
실시예 66. CDK5 및 CDK2 이동 전환 검정
화합물 효능은 CDK5/p25 및 임의로 CDK2/CycA2의 효소 활성의 변화를 통해 측정되었다. 효소, CDK5/p25 및 CDK2/CycA2는 Carna Biosciences (각각 Cat #04-106 및 04-103)에서 공급되었다. 시험 화합물 스톡을 100% DMSO에 희석하고 TECAN EVO200 (TECAN)를 사용하여 384웰 플레이트에서 3배 희석하였다. 스타우로스포린은 모든 검정에서 참조 대조군 화합물로서 사용하였다.
20 nL의 화합물은 Echo550 (Labcyte Inc)를 사용하여 384-웰 플레이트 (Greiner 781201)로 옮겼다. 효소, ATP, 및 10 mM MgCl2는 실온에서 30분 동안 검정 완충액 (50 mM HEPES pH 7.5, 1 mM EGTA, 0.01% Brij-35, 0.05% BSA, 2 mM DTT) 중에서 화합물과 사전 항온처리하였다. 펩타이드 기질 (CDK5/p25에 대한 FL 펩타이드 29 (Perkin Elmer); CDK2/CycA2에 대해 FL 펩타이드 18 (Perkin Elmer))을 첨가하여 반응을 개시하였다. 최종 검정은 0.154 nM CDK5/p25 또는 1.25 nM CDK2/CycA2, 10 μM (CDK5/p25에 대해) 또는 37 μM (CDK2/CycA2에 대해) ATP, 및 1.5 μM 의 적당한 펩타이드 기질을 함유하였다. 최종 DMSO 농도는 ≤1%였다.
CDK5/p25 반응은 60분 동안 실온에서 항온처리하였다. CDK2/CycA2 반응은 120분 동안 실온에서 항온처리하였다. 반응은 0.5M EDTA를 함유하는 70 μL의 중단 완충액을 첨가하여 켄칭하였다. 샘플은 EZ 판독기 (Perkin Elmer)를 사용하여 분석하였다.
결과는 % 비히클로 나타내고, 여기서 % 비히클 = 100 × (U - C2)/(C1 - C2), 여기서 U는 샘플의 신호이고, C1은 상위 대조군의 평균(화합물이 첨가되지 않은 신호)이고, C2는 하위 대조군의 평균(효소 대신 완충액이 있는 신호)이다. IC50은 다음과 같이 정의된 4-파라미터 피트를 사용하여 화합물 농도의 함수로서 억제 백분율을 피팅함으로써 결정된다.
Y =하단 + (상단-하단)/(1+10((LogIC50-X)*힐 기울기(Hill Slope))), 여기서, X는 화합물 농도의 log이고, Y는 %비히클 또는 X에서 X 반응이고, 상단 및 하단은 Y와 동일한 단위의 정체기이고, 힐 기울기(Hill's Slope)는 단위가 없으며 IC50은 절반-최대 억제 농도이다.
[표 1] 예시적인 화합물의 억제 활성 및 특이성
CDK2 및 CDK5 활성에 대해: "A" = 10 nM 미만; "B" = 10 내지 100 nM; "C" = 100 nM 초과 내지 1 μM 이하; "D" = 1 μM 초과. 특이성에 대해: "+++" = CDK2보다 CDK5에 대해 100배 초과로 보다 활성; "++" = CDK2보다 CDK5에 대해 10배 초과 및 100배 이하로 보다 활성; 및 "+" = CDK2보다 CDK5에 대해 10배 이하로 보다 활성.
Figure pct00103
Figure pct00104
Figure pct00105
Figure pct00106
Figure pct00107
참조 인용
본원에 인용된 모든 미국 특허 및 미국 및 PCT 공개 특허 출원은 본원에 참조로 포함된다.
등가물
전술한 명세서는 당업자가 본 발명을 실시할 수 있도록 하기에 충분하다. 본 발명은 제공된 실시예에 의해 범위가 제한되지 않아야 하는데, 그 이유는 실시예가 본 발명의 한 측면의 단일 예시로서 의도되고 다른 기능적으로 동등한 실시예가 본 발명의 범위 내에 있기 때문이다. 여기에 도시되고 설명된 것 외에 본 발명의 다양한 변형은 전술한 설명으로부터 당업자에게 명백할 것이고 첨부된 청구범위의 범위 내에 속한다. 본 발명의 이점 및 목적은 필수적으로 본 발명의 각각의 구현예에 의해 포함되지 않는다.
서열 번호 1
하기는 실시예 66에 사용된 CDK5 단백질의 아미노산 서열이다.
MQKYEKLEKIGEGTYGTVFKAKNRETHEIVALKRVRLDDDDEGVPSSALREICLLKELKHKNIVRLHDVLHSDKKLTLVFEFCDQDLKKYFDSCNGDLDPEIVKSFLFQLLKGLGFCHSRNVLHRDLKPQNLLINRNGELKLADFGLARAFGIPVRCYSAEVVTLWYRPPDVLFGAKLYSTSIDMWSAGCIFAELANAGRPLFPGNDVDDQLKRIFRLLGTPTEEQWPSMTKLPDYKPYPMYPATTSLVNVVPKLNATGRDLLQNLLKCNPVQRISAEEALQHPYFSDFCPP

Claims (28)

  1. 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
    화학식 I
    Figure pct00108

    상기 식에서,
    환 A는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 사이클로알킬 또는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 포화된 헤테로사이클릴이고;
    환 B는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 아릴, 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 헤테로아릴 또는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 헤테로사이클릴이고;
    R1은 -N(R5)-, -C(O)-, -S-, -S(O)-, -S(O)2-, -[C(R4)2]1-2-, -[C(R4)2]0-1-CH=,
    -N(R5)-S(O)2-, -S(O)2-N(R5), -C(R4)2-N(R5)-, -N(R5)-C(R4)2-, -C(R4)2-S(O)2-, -C(=N-OH)-, -C(=N-O-C1-C4 알킬)-, 또는 -S(O)2-C(R4)2-이고;
    각각의 R2는 독립적으로 할로, -OH, -C1-C6 알킬, -C1-C6 할로알킬, -C1-C6 하이드록시알킬, -(C0-C4 알킬렌)-C(O)-OH, -(C0-C4 알킬렌)-C(O)-O-C1-C4 알킬, -(C0-C4 알킬렌)-O-C1-C4 알킬, -(C0-C4 알킬렌)-O-C1-C4 하이드록시알킬, -(C0-C4 알킬렌)-C(O)-N(R6)2, -(C0-C4 알킬렌)-N(R6)2, 또는 -(C0-C4 알킬렌)-포화된 헤테로사이클릴이고, 여기서, 상기 포화된 헤테로사이클릴은 임의로 할로, -OH, 또는 -CH3으로 치환되고;
    각각의 R3은 독립적으로 할로; -CN; -OH; -N(R6)2; -C1-C4 알킬; -O-C1-C4 알킬; -O-C1-C4 알킬렌-C(O)-N(R6)2; -C(O)-O-C1-C4 알킬; -C(O)-N(R6)2; -S(O)2-N(R6)2; -S(O)2-C1-C4 알킬; 하나 이상의 -OH로 임의로 치환된 C2-C4 알키닐; 1,2,4-트리아졸-1-일메틸; 모르폴리닐메틸; 사이클로프로필; =O; -CH2CH2-C(O)-O-CH3; -N(R6)-S(O)2-CH3; 임의로 치환된 아릴; 임의로 치환된 헤테로아릴; 또는 임의로 치환된 헤테로사이클릴이고, 여기서, R3의 임의의 알킬 부분은 할로, -CN, 또는 -N(R6)2, 또는 -OH 중 하나 이상으로 임의로 치환되고;
    각각의 R4는 독립적으로 수소, 할로, -OH, -CN, -N(R6)2, -OH, 할로, -CN, 또는 -N(R6)2 중 하나 이상으로 임의로 치환된 -C1-C4 알킬; 또는 -OH, 할로, -CN, 또는 -N(R6)2 중 하나 이상으로 임의로 치환된 O-C1-C4 알킬이거나;
    하나의 R4는 환 A 중 환 탄소원자와 함께 환 A에 스피로융합되거나, 융합되거나 브릿지된 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릴 환을 형성하거나;
    동일한 탄소 원자에 결합된 2개의 R4는 함께 =CH2-(C0-C3 알킬), C3-C6 사이클로알킬, 또는 C4-C7 헤테로사이클릴을 형성하고;
    R5는 수소; -CN, -OH, -COOH, C(O)-O-C1-C4 알킬, 또는 피라졸릴 중 하나 이상으로 임의로 치환된 C1-C4 알킬; -S(O)2-C1-C4 알킬; -C(O)C(O)OH; -COOH; 또는 -C(O)-O-C1-C4 알킬이거나;
    R5는 환 A 중 환 탄소원자와 함께 환 A에 스피로융합되거나, 융합되거나 브릿지된 헤테로사이클릴 환을 형성하고;
    각각의 R6은 독립적으로 수소 또는 -C1-C4 알킬이고;
    m은 0,1, 2, 3, 4, 5, 또는 6이고;
    n은 0, 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6이고;
    "----"는 단일 결합 또는 이중 결합을 나타낸다.
  2. 청구항 1에 있어서, 각각의 R3이 독립적으로 할로; -CN; -OH; -N(R6)2; -C1-C4 알킬; -O-C1-C4 알킬; -O-C1-C4 알킬렌-C(O)-N(R6)2; -C(O)-O-C1-C4 알킬; -C(O)-N(R6)2; -S(O)2-N(R6)2; -S(O)2-C1-C4 알킬; 임의로 치환된 아릴; 임의로 치환된 헤테로아릴; 또는 임의로 치환된 헤테로사이클릴이고, 여기서, R3의 임의의 알킬 부분이 할로, -CN, 또는 -N(R6)2, 또는 -OH 중 하나 이상으로 임의로 치환되는, 화합물 또는 이의 염.
  3. 청구항 1 또는 2에 있어서, 환 B가 페닐, -C(O)-페닐, 1,3,4-티아디아졸-2-일, 이미다조[1,2-b]피리다진-3-일, 이속사졸-3-일, 1,3-디하이드로이소벤조푸란-5-일, 2H-크로멘-6-일, 1,2,3,4-테트라하이드로이소퀴놀린-6-일, 1,2,3,4-테트라하이드로이소퀴놀린-7-일, 이소인돌린-5-일, 1,2-디하이드로피리딘-3-일, 1,2-디하이드로피리딘-5-일, 피리디닐, 또는 피리미디닐인, 화합물 또는 이의 염.
  4. 청구항 1 또는 3에 있어서, 적어도 하나의 R3이 플루오로, 클로로, -OH, =O, -CH3, -CH2CH3, -C(CH3)3, -CH(CH3)2, -CN, -CH2CH2-C(O)-O-CH3, -C(O)-O-CH2CH3, -OCH3, -O-CH2CH2-C(O)-N(R6)2, -N(R6)2, -CH2-N(R6)2, -S(O)2-N(R6)2, -N(R6)-S(O)2-CH3, -S(O)2CH3, -C(O)-N(R6)2, -C((CH3)2)-OH, -C≡C-C((CH3)2)-OH, 또는 -CH2CN인, 화합물 또는 이의 염.
  5. 청구항 1 또는 3에 있어서, 적어도 하나의 R3이 1,2,4-트리아졸-1-일, 1,2,4-트리아졸-1-일메틸, 1,2,3,4-테트라졸-1-일, 1,2,3,4-테트라졸-5-일, 1,2,4-옥사디아졸-3-일, 1,2-디하이드로피리딘-6-일, 1,2-디하이드로피리딘-3-일, 1,2-디하이드로피리딘-5-일, 1,2-디하이드로피리딘-1-일, 4,5-디하이드로-1,2,4-옥사디아졸-3-일, 이소티아졸리딘-2-일, 피라졸릴, 피라진-2-일, 피리딘-2-일, 피리딘-3-일, 피리딘-4-일, 피리미딘-4-일, 피롤리딘-1-일, 모르폴린-4-일, 모르폴린-4-일메틸, 티오모르폴린-4-일, 피페리딘-1-일, 피페라진-1-일, 테트라하이드로피란-4-일, 옥사졸리딘-3-일, 이미다졸리딘-1-일, 사이클로프로필, 또는 페닐이고, 여기서, 상기 적어도 하나의 R3은 임의로 및 독립적으로 할로, =O, -OH, CN, C1-C4 알킬, C1-C4 하이드록시알킬, C1-C4 할로알킬, -COOH, -C(O)-N(R6)2, -(C0-C4 알킬렌)-C(O)-O-C1-C4 알킬, 또는 -O-C1-C4 알킬로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환체로 치환된, 화합물 또는 이의 염.
  6. 청구항 1 또는 3에 있어서,
    Figure pct00109
    에 의해 나타낸 화합물 일부가 1,3-디하이드로이소벤조푸란-5-일, 1-플루오로-2-메틸이소인돌린-6-일, 1-옥소-1,2,3,4-테트라하이드로이소퀴놀린-6-일, 1-옥소-1,2,3,4-테트하하이드로이소퀴놀린-7-일, 2-(1-하이드록시-1-메틸에탄-1-일)피리딘-5-일, 2-(모르폴린-4-일)페닐, 2-플루오로-4-(1,2,4-옥사디아졸-3-일)페닐, 2-플루오로-4-(1,2,4-트리아졸-1-일메틸)페닐, 2-플루오로-4-(1-에틸-2-옥소-1,2 디하이드로피리딘-3-일)페닐, 2-플루오로-4-(1-메틸-2-옥소-1,2-디하이드로피리딘-3-일)페닐, 2-플루오로-4-(1-메틸-2-옥소-1,2-디하이드로피리딘-5-일)페닐, 2-플루오로-4-(1-메틸-2-옥소-1,2-디하이드로피리딘-6-일)페닐, 2-플루오로-4-(2-카바밀페닐)페닐, 2-플루오로-4-(2-시아노페닐)페닐, 2-플루오로-4-(2-에톡시카보닐페닐)페닐, 2-플루오로-4-(2-메톡시피리딘-3-일)페닐, 2-플루오로-4-(2-메톡시피리딘-4-일)페닐, 2-플루오로-4-(2-메톡시피리딘-5-일)페닐, 2-플루오로-4-(2-메톡시피리딘-6-일)페닐, 2-플루오로-4-(2-옥소-1,2-디하이드로피리딘-1-일)페닐, 2-플루오로-4-(2-옥소-1,2-디하이드로피리딘-3-일)페닐, 2-플루오로-4-(2-옥소-1,2-디하이드로피리딘-5-일)페닐, 2-플루오로-4-(2-옥소-1,2-디하이드로피리딘-6-일)페닐, 2-플루오로-4-(2-옥소-3-메틸이미다졸리딘-1일)페닐, 2-플루오로-4-(3-(1-하이드록시-1-메틸에탄-1-일)피라졸-1-일)페닐, 2-플루오로-4-(3-카바밀페닐)페닐, 2-플루오로-4-(3-카바밀피라졸-1-일)페닐, 2-플루오로-4-(3-카복시페닐)페닐, 2-플루오로-4-(3-카복시피라졸-1-일)페닐, 2-플루오로-4-(3-시아노페닐)페닐, 2-플루오로-4-(3-시아노피라졸-1-일)페닐, 2-플루오로-4-(3-에톡시카보닐페닐)페닐, 2-플루오로-4-(3-플루오로페닐)페닐, 2-플루오로-4-(3-하이드록시메틸피라졸-1-일)페닐, 2-플루오로-4-(3-메톡시피라졸-1-일)페닐, 2-플루오로-4-(3-메톡시페닐)페닐, 2-플루오로-4-(3-메톡시피라진-2-일)페닐, 2-플루오로-4-(3-메틸카바밀피라졸-1-일)페닐, 2-플루오로-4-(3-메틸페닐)페닐, 2-플루오로-4-(3-N,N-디메틸카바밀피라졸-1-일)페닐, 2-플루오로-4-(4-카바밀페닐)페닐, 2-플루오로-4-(4-카복시피라졸-1-일)페닐, 2-플루오로-4-(4-시아노페닐)페닐, 2-플루오로-4-(4-시아노피라졸-1-일)페닐, 2-플루오로-4-(4-에톡시카보닐페닐)페닐, 2-플루오로-4-(4-플루오로페닐)페닐, 2-플루오로-4-(4-메톡시카보닐피라졸-1-일)페닐, 2-플루오로-4-(4-메톡시페닐)페닐, 2-플루오로-4-(4-메틸페닐)페닐, 2-플루오로-4-(5-시아노피리딘-2-일)페닐, 2-플루오로-4-(5-하이드록시메틸피라졸-1-일)페닐, 2-플루오로-4-(5-옥소-4,5-디하이드로-1,2,4-옥사디아졸-3-일)페닐, 2-플루오로-4-(모르폴린-4-일메틸)페닐, 2-플루오로-4-(피라졸-1-일)페닐, 2-플루오로-4-(피라졸-3-일)페닐, 2-플루오로-4-(피리딘-3-일)페닐, 2-플루오로-4-(피리딘-4-일)페닐, 2-플루오로-4-(피리미딘-5-일)페닐, 2-플루오로-4-메틸페닐, 2-플루오로-5-(1-메틸-2-옥소-1,2-디하이드로피리딘-3-일)페닐, 2-플루오로-5-(2-옥소피롤리딘-1-일)페닐, 2-플루오로-5-(모르폴린-4-일)페닐, 2-플루오로-5-에틸페닐, 2-플루오로페닐, 2-하이드록시피리딘-3-일, 2-메틸-4-(2-카바밀에톡시)페닐, 2-메틸-4-(2-옥소피롤리딘-1-일)페닐, 2-메틸-4-이소프로필카바밀페닐, 2-메틸페닐, 2-옥소-1,2-디하이드로피리딘-4-일, 2-옥소-1,2-디하이드로피리딘-5-일, 2-옥소-2H-크로멘-6-일, 3-(1,2,3,4-테트라졸-1-일)페닐, 3-(2-옥소이미다졸리딘-1-일)페닐, 3-(2-옥소-옥사졸리딘-3-일)페닐, 3-(2-옥소피롤리딘-1-일)페닐, 3-(3-하이드록시-3-메틸부탄-1-인-1-일)페닐, 3-(4-메틸피페라진-1-일)페닐, 3-(아미노설포닐)페닐, 3-(시아노메틸)페닐, 3-(에톡시카보닐)페닐, 3-(메틸설포닐)페닐, 3-(모르폴린-4-일)페닐, 3-(모르폴린-4-일메틸)페닐, 3,5-디메틸페닐, 3-아미노페닐카보닐, 3-카바밀페닐, 3-시아노페닐, 3-사이클로프로필페닐, 3-에틸페닐, 3-메톡시-4-메틸설포닐아미노페닐, 3-메틸페닐, 4-(1,1-디옥소이소티아졸리딘-2-일)페닐, 4-(1,1-디옥소티오모르폴린-4-일)페닐, 4-(1,2,3,4-테트라졸-5-일)페닐, 4-(1,2,4-트리아졸-1-일)페닐, 4-(2-메톡시피리미딘-4-일)페닐, 4-(2-옥소-옥사졸리딘-3-일)페닐, 4-(3-옥소모르폴린-4-일)페닐, 4-(3-옥소피페라진-1-일)페닐, 4-(4-하이드록시피페리딘-1-일)페닐, 4-(4-메틸피페라진-1-일)페닐, 4-(4-메틸피페리딘-1-일)페닐, 4-(5-옥소-4,5-디하이드로-1,2,4-옥사디아졸-3-일)페닐, 4-(모르폴린-4-일)페닐, 4-(모르폴린-4-일메틸)페닐, 4-(N,N-디메틸아미노메틸)페닐, 4-(N,N-디메틸아미노설포닐)페닐, 4-(피롤리딘-1-일)페닐, 4-(테트라하이드로피란-4-일)페닐, 4-시아노메틸페닐, 4-디메틸아미노페닐, 4-이소프로필페닐, 4-메틸카바밀페닐, 4-메틸페닐, 4-메틸설포닐페닐, 4-t-부틸페닐, 5-(2-메톡시카보닐에탄-1-일)-1,3,4-티아디아졸-2-일, 5-메톡시피리딘-3-일, 7-클로로이미다조[1,2-b]피리다진-3-일, 이속사졸-3-일, 페닐, 또는 피리미딘-5-일인, 화합물 또는 이의 염.
  7. 청구항 1 내지 6 중 어느 한 항에 있어서, 환 A가 피페리디닐, 피페리디닐리덴, 피페라지닐, 피롤리디닐, 아제티디닐, 사이클로헥실, 사이클로펜틸, 사이클로부틸, 아자바이사이클로[3.3.1]노나닐, 또는 아자바이사이클로[2.2.1]헵타닐인, 화합물 또는 이의 염.
  8. 청구항 1 내지 7 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 R2가 독립적으로 -F, -OH, -CH3, -CH2CH3, -CH2CF3, -CH2CH2OH, -CH2CH(OH)CH2OH, -CH(CH3)2, -CH(CH3)-COOH, -COOH, -NH2, -NH (CH3), -N(CH3)2-CH2C(O)NH2, 또는 옥세탄-3-일메틸인, 화합물 또는 이의 염.
  9. 청구항 1 내지 8 중 어느 한 항에 있어서,
    Figure pct00110
    에 나타낸 화합물의 일부가 1-(2,2,2-트리플루오로에틸)피페리딘-4-일, 1-(2-하이드록시에틸)피페리딘-4-일, 1-(2,3-디하이드록시프로필)피페리딘-4-일, 1-(카바밀메틸)피페리딘-4-일, 1-(옥세탄-3-일메틸)피페리딘-4-일, 1,3-디메틸피페리딘-4-일, 1,4-디메틸피페리딘-4-일, 1-에틸피페리딘-4-일, 1-이소프로필피페리딘-4-일, 1-메틸-1-옥소피페리딘-4-일, 1-메틸-3,3-디플루오로피페리딘-4-일, 1-메틸-4-하이드록시피페리딘-4-일, 1-메틸피페리딘-4-일, 1-메틸피페리딘-4-일리덴, 1-메틸피롤리딘-3-일, 2-아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-5-일, 2-메틸피페리딘-4-일, 3,3-디플루오로피페리딘-4-일, 3-아미노사이클로부틸, 3-아미노피롤리딘-1-일, 3-아미노피페리딘-1-일, 3-카복시피페리딘-4-일, 3-메틸피페리딘-4-일, 4-(디메틸아미노)사이클로헥실, 4-(메틸아미노)사이클로헥실, 4-아미노-4-메틸사이클로헥실, 4-아미노사이클로헥실, 4-하이드록시사이클로헥실, 4-하이드록시피페리딘-4-일, 4-메틸피페라진-1-일, 9-아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-일, 아제티딘-3-일, 피페라진-1-일, 피페리딘-4-일, 또는 피페리딘-4-일리덴인, 화합물 또는 이의 염.
  10. 청구항 1 내지 9 중 어느 한 항에 있어서, R1이 -N(CH3)-, -NH-, -N(CH2CH2OH)-, -N(CH2COOH)-, -N(CH2CH2COOH)-, -N(S(O)2CH3)-, -N(C(O)C(O)OH)-, -C(O)-, -S-, -S(O)-, -S(O)2-, -C(CH3)(OH)-, -C(CH3)(F)-, -C(CH2CH3)(OH)-, -C(CF3)(OH)-, -CH(CH3)-, -CH(CH2CH3)-, -CH(OH)-, -CH(CH2OH)-, -CH(=CH2)-, -C(=N-OH), -C(=N-OCH3), -CF2-, -CHF-, -CH(OCH3)-, -CH=, -CH2-, -CH(NH2)-, -CH(NHCH3)-, -NH-S(O)2-, -N(CH2CN)-, -S(O)2-NH-, -N(CH2COOCH3)-, -CH2-S(O)2-, -N(CH(CH3)COOH)-, 피라졸-4-일메틸아미닐렌, 사이클로프로판-1,1-디일, 또는 옥세탄-2,2-디일인, 화합물 또는 이의 염.
  11. 청구항 1에 있어서, 구조 화학식 Ia를 갖는 화합물 또는 이의 염:
    화학식 Ia
    Figure pct00111

    상기 식에서,
    환 B'는 페닐, 피리딘-3-일, 또는 1,3-디하이드로이소벤조푸란-5-일이고;
    R11은 -S-, -S(O)2-, -CF2-, -C(F)(CH3)-, -C(OH)(CH3)-, -CH(CH3)-, 또는 -C(O)-이고;
    R12a는 수소, -CH3, -CH2CH2OH, 또는 옥세탄-3-일메틸이고;
    R12b는 수소 또는 -CH3이고;
    각각의 R13은 존재하는 경우 독립적으로 플루오로; -CN 및 -OH 중 하나 이상으로 임의로 치환된 C1-C4 알킬; 하나 이상의 -OH로 임의로 치환된 C2-C4 알키닐; -C(O)N(R6)2; -C(O)O-C1-C4 알킬; -N(R6)2; -S(O)2N(R6)2; -SO2-C1-C4 알킬; 플루오로, -CN, -C(O)N(R6), -COOH, -O-C1-C4 알킬, 및 C1-C4 하이드록시알킬 중 하나 이상으로 임의로 치환된 페닐; 하나 이상의 O-C1-C4 알킬로 임의로 치환된 피리디닐; -COOH, C1-C4 하이드록시알킬, -C(O)O-C1-C4 알킬 중 하나 이상으로 임의로 치환된 피라졸릴; O-C1-C4 알킬로 임의로 치환된 피리미딜; 옥소-치환된 1,2-디하이드로피리디닐; C1-C4 알킬로 임의로 추가 치환된, 옥소-치환된 피라졸리디닐; 옥소-치환된 옥사졸리디닐; 옥소-치환된 피롤리디닐; 옥소-치환된 티아졸리디닐; 옥소-치환된 티오모르폴리닐; 모르폴리닐; 또는 사이클로프로필이고;
    각각의 R6는 독립적으로 수소 또는 C1-C4 알킬이고;
    p는 0, 1 또는 2이다.
  12. 청구항 11에 있어서, p가 2이고, 하나의 R13이 플루오로인, 화합물 또는 이의 염.
  13. 청구항 11 또는 12에 있어서, 환 B가 페닐인, 화합물 또는 이의 염.
  14. 청구항 11 내지 13 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 R13이 독립적으로 플루오로, -CH3, -CH2CH3, -CH2CN, -CH(CH3)2, -C≡C-C(CH3)2OH, -C(OH)(CH3)CH3, -C(CH3)3, -C(O)NH2, -C(O)OCH2CH3, -N(CH3)2, -S(O)2NH2, -SO2CH3, 1,1-디옥소티아졸리딘-2-일, 1,1-디옥소티오모르폴린-4-일, 2-시아노페닐, 2-메톡시피리딘-4-일, 2-메톡시피리딘-5-일, 2-메톡시피리미딘-4-일, 2-옥소-1,2-디하이드로피리딘-6-일, 2-옥소-1,2-디하이드로피리딘-3-일, 2-옥소-3-메틸피라졸리딘-1-일, 2-옥소옥사졸-3-일, 2-옥소피롤리딘-1-일, 3-카바밀페닐, 3-카복시페닐, 3-카복시피라졸-1-일, 3-시아노페닐, 3-플루오로페닐, 3-하이드록시메틸피라졸-1-일, 3-메톡시페닐, 4-카복시피라졸-1-일, 4-시아노페닐, 4-메톡시카보닐피라졸-1-일, 4-메톡시페닐, 모르폴린-4-일, 피라졸-1-일, 피라졸-3-일, 피리딘-3-일, 피리미딘-5-일 또는 사이클로프로필인, 화합물 또는 이의 염.
  15. 청구항 1에 있어서, 구조 화학식 Ib를 갖는 화합물 또는 이의 염:
    화학식 Ib
    Figure pct00112

    상기 식에서,
    R21은 -CH(CH3)-, -CH(OH)-, -C(CH3)(OH)-, C(=CH2)-, N(CH2C(O)OH)-, -S-, 또는 -S(O)2-이고;
    R22는 수소, -CH3, -CH2CH3, -CH2CH2OH, 또는 아제티딘-3-일메틸이고;
    각각의 R23은 독립적으로 플루오로; C1-C4 알킬; 하이드록시로 임의로 치환된 C2-C4 알키닐; -N(R6)2; -O-C1-C4 알킬렌-C(O)-N(R6)2; 할로, -CN, C1-C4 알킬, -O-C1-C4 알킬, -C(O)N(R6)2, 및 -C(O)-C1-C4 알킬 중 하나 이상으로 임의로 치환된 페닐; -O-C1-C4 알킬로 임의로 치환된 피리디닐; -CN, -C1-C4 알킬, -C1-C4 하이드록시알킬, -C(O)N(R6)2, -COOH, 및 -C(O)-O-C1-C4 알킬 중 하나 이상으로 임의로 치환된 피라졸릴; 옥소-치환된 옥사디아졸릴; 모르폴리닐; 모르폴리닐메틸; 테트라하이드로피라닐; 피롤리디닐; 피리미디닐; 테트라졸릴; C1-C4 알킬로 임의로 치환된 피페리디닐; 또는 사이클로프로필이고;
    q는 1 또는 2이다.
  16. 청구항 15에 있어서, q가 2이고, 하나의 R23이 -CH3 또는 플루오로인, 화합물 또는 이의 염.
  17. 청구항 15 또는 16에 있어서, 각각의 R23이 독립적으로 플루오로, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, C≡C-C((CH3)2)OH, -N(CH3)2, -OCH2CH2C(O)NH2, 1,2,3,4-테트라졸-5-일, 2-메톡시피리딘-3-일, 2-메톡시피리딘-4-일, 2-메톡시피리딘-5-일, 2-메톡시피리딘-6-일, 3-(N,N-디메틸카바밀)피라졸-1-일, 3-카바밀페닐, 3-카바밀피라졸-1-일, 3-카복시피라졸-1-일, 3-시아노페닐, 3-시아노피라졸-1-일, 3-에톡시카보닐페닐, 3-플루오로페닐, 3-하이드록시메틸피라졸-1-일, 3-메톡시카보닐피라졸-1-일, 3-메톡시페닐, 3-메틸페닐, 4-카바밀페닐, 4-시아노페닐, 4-에톡시카보닐페닐, 4-플루오로페닐, 4-메톡시카보닐피라졸-1-일, 4-메톡시페닐, 4-메틸페닐, 4-메틸피페리딘-1-일, 5-옥소-1,2,4-옥사디아졸-3-일, 사이클로프로필, 플루오로, 모르폴린-4-일, 모르폴린-4-일메틸, 피라졸-1-일, 피리딘-3-일, 피리딘-4-일, 피리미딘-5-일, 피롤리딘-1-일 또는 테트라하이드로피란-4-일인, 화합물 또는 이의 염.
  18. 청구항 1에 있어서, 도 1에서 화합물 100 내지 414로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
  19. 청구항 1 내지 18 중 어느 한 항의 화합물; 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물.
  20. 청구항 1 내지 17 중 어느 한 항의 치료학적 유효량의 화합물 또는 제18항의 조성물을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 비정상적 CDK5 과활성을 특징으로 하는 질환 또는 병태를 치료하는 방법.
  21. 청구항 20에 있어서, 상기 질환 또는 병태가 콩팥의 질환 또는 병태인, 방법.
  22. 청구항 21에 있어서, 상기 콩팥 질환 또는 병태가 낭성 콩팥 질환, 신장 섬유증, 당뇨병성 신증, 실질 신장 질환, 또는 감소된 신장 기능인, 방법.
  23. 청구항 22에 있어서, 상기 콩팥 질환 또는 병태가 만성 콩팥 질환, 다낭성 콩팥 질환, 상염색체 우성 다낭성 콩팥 질환, 상염색체 열성 다낭성 콩팥 질환, 또는 신인후염-수질 낭성 콩팥 질환인, 방법.
  24. 청구항 23에 있어서, 상기 질환이 다낭성 콩팥 질환인, 방법.
  25. 청구항 20에 있어서, 상기 질환 또는 병태가 섬모병증인, 방법.
  26. 청구항 25에 있어서, 상기 섬모병증이 신경변성 질환, 간 질환, 염증, 암 또는 종양인, 방법.
  27. 청구항 26에 있어서, 상기 섬모병증이 신경변성 질환이고; 상기 신경변성 질환이 알츠하이머 질환 또는 파킨슨 질환인, 방법.
  28. 청구항 26에 있어서, 상기 섬모병증이 간 질환이고; 상기 간 질환이 다낭성 간 질환인, 방법.
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