KR20220008303A - 하부 요로 증상의 개선 방법 - Google Patents

Abstract

실시양태는 펙사포티드 트리플루테이트 및 제약상 허용되는 담체를 함유하는 조성물을 사용하여, LUTS를 갖는 포유동물의 증상을 개선시키는 방법을 포함한다. 이 방법은 펙사포티드 트리플루테이트를 이를 필요로 하는 포유동물에게 단독으로 또는 담체와 함께 근육내로, 경구로, 정맥내로, 척수강내로, 종양내로, 비강내로, 국소로, 경피로 등으로 투여하는 것을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

Description

하부 요로 증상의 개선 방법

서열 목록

본 출원은 ASCII 포맷으로 전자 제출되고 그 전문이 본원에 참조로 포함되는 서열 목록을 포함한다.

관련 출원에 관한 교차 참조

본 출원은 2019년 5월 13일에 출원된 미국 특허 출원 번호 16/410,685로 우선권 주장하며, 이는 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.

1. 실시양태의 분야

실시양태는 소형 펩티드에 기초한 화합물 및 제약상 허용되는 담체를 함유하는 조성물을 사용하여 하부 요로 증상 (LUTS)을 갖는 환자에서 LUTS를 개선하고, 보다 구체적으로 폐쇄성 배뇨 증상을 개선하는 방법을 포함한다.

2. 관련 기술의 설명

유럽 비뇨기학 협회 (EAU) 및 미국 비뇨기학 협회 (AUA) 지침은 LUTS를 하부 요로 (LUT)에 영향을 미치는 저장 (자극성) 증상 (주간 빈뇨, 절박뇨 및 야간뇨), 배뇨 (폐쇄성) 증상 (복압배뇨, 약뇨, 간헐뇨, 및 불완전 배뇨), 또는 배뇨 후 증상 (배뇨 후 요점적)으로서 정의한다 (Oelke M, et al., European Association of Urology, Eur. Urol. 2013 Jul; 64(1):118-40).

양성 전립선 비대증 (BPH)은 전립선의 평활근 및 상피 세포의 비악성 증식을 지칭하는 조직학적 진단이다 (Lee C, et al., "Intrinsic and extrinsic factors controlling benign prostatic growth," Prostate, 1997;31:131-138; Auffenberg GB, et al., "Established medical therapy for benign prostatic hyperplasia," Urol Clin North Am,. 2009;36:443-459). 정확한 병인은 알려져 있지 않다. BPH의 진행은 전립선 (병리학적)의 크기에 의해 결정되는 양성 전립선 확대 (BPE)로 이어질 수 있다. 조직학적 BPH를 갖는 남성의 대략 50%에서 BPE가 발생한다. BPE는 결국 방광 출구 폐쇄 (BOO)를 유발할 수 있으며, 이는 또한 BPE와 연관된 경우에 양성 전립선 폐쇄 (BPO)로 지칭된다. BOO 및 BPO는 요로역학적 측정으로 결정된다. 일부 환자는 BPE를 나타내지만 유의한 LUTS를 갖지 않을 수 있는 반면, 다른 환자는 LUTS를 나타낼 수 있고 QoL의 유의한 저하를 갖지만 BPE를 갖지 않을 수 있다 (Park, H.J., et al., "Urinary Tract Symptoms (LUTS) Secondary to Benign Prostatic Hyperplasia (BPH)., World J. Mens Health, No. 31(3), 193-207 (2013)).

하부 요로 증상 (LUTS)은 일반적으로 2가지 주요 유형의 증상으로 분류된다: 1) "저장" 증상으로도 지칭되는 "자극성," 및 2) "배뇨" 증상으로도 지칭되는 "폐쇄성". 자극성/저장 증상은 배뇨 필요 절박성, 보다 높은 빈도, 및 야간뇨 (밤에 잠든 후 보다 빈번하게 배뇨할 필요가 있음)를 포함한다. 폐쇄성 배뇨 증상은 약한 소변 흐름, 소변을 비우기 위해 밀거나 압박할 필요성, 배뇨 후 불완전 배뇨의 감각, 및 배뇨 과정 동안 수회 중단 및 시작을 포함한다.

미국 및 유럽은 LUTS, BPH 및 LUTS/BPH의 치료에서 의사를 보조하기 위한 지침을 확립하였다 (Oelke M, et al., European Association of Urology, Eur. Urol. 2013 Jul; 64(1):118-40). 상기 지침은, 증상을 나타내지만 약물 치료나 외과적 개입이 필요할 만큼 충분히 방해받지 않는 남성을 위한, 관찰 대기 (watchful waiting, WW)부터 약물 치료, 외과적 개입에 이르기까지 다양한 치료 옵션에 대해 설명한다. 약물 치료 지침은 알파-차단제 (알파-아드레날린성 길항제), 5-알파-리덕타제 억제제 (5ARI), 항무스카린제 (항콜린제), PDE5 억제제 (타달라필), 조합 요법 및 바소프레신 유사체의 사용을 포함하였다. 5ARI 또는 항무스카린제와 알파-차단제와 같은 조합 요법의 사용이 또한 권장되었다.

전립선 수술, 예컨대 전립선의 경요도 절제는 절대적 적응증 또는 약물 치료-내성 LUTS를 갖는 남성에서 지시된다. 수술에 대한 적응증은 중증 상태, 예컨대 요폐, 육안적 혈뇨, 요로 감염 및 방광 결석을 포함한다. 제안된 최소 침습적 치료는 경요도 마이크로파 요법 및 경요도 바늘 요법을 포함한다. 수술에 부적합한 남성을 위한 카테터삽입에 대한 대안은 전립선 스텐트를 포함한다. 다양한 이용가능한 치료 옵션에도 불구하고, 이들 성가신 증상을 치료하기 위한 효과적이고 안전한 작용제에 대한 미충족된 의료 필요가 남아있으며, 이들 증상 중 일부는 전립선 확대에 의해 유발될 수 있고, 이는 만성 요로 감염, 요실금, 급성 및 만성 요폐, 및 신부전과 같은 보다 심각한 문제를 초래할 수 있다.

유해하거나 원치 않는 세포 및 조직을 파괴하여 그의 제거를 용이하게 하거나 그의 추가의 성장을 억제하는 능력을 갖는 것으로 공지된 일부 작용제는 미국 특허 번호 6,924,266; 7,241,738; 7,317,077; 7,408,021; 7,745,572; 8,067,378; 8,293,703; 8,569,446; 및 8,716,247; 및 미국 특허 출원 공개 번호 2017/0360885; 2017/0020957; 2016/0361380; 및 2016/0215031에 개시되어 있으며, 이들 각각의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다. 하나의 이러한 작용제는 펙사포티드 트리플루테이트로서 공지되어 있다.

통상적인 약물 요법의 위험 및 부작용 또는 외과적 개입 없이 LUTS를 갖는 환자의 증상을 개선시킬 수 있는 치료에 대한 필요가 존재한다. 또한, 통상적인 약물 요법의 위험 및 부작용 또는 외과적 개입 없이 LUTS를 갖는 환자의 폐쇄성 배뇨 증상을 개선시킬 수 있는 치료에 대한 필요가 존재한다.

상기 관련 기술의 설명을 비롯하여 본 명세서 전반에 걸쳐, 임의의 및 모든 미국 특허 공개 특허 출원을 비롯하여 본원에 기재된 임의의 및 모든 공개적으로 이용가능한 문헌은 그 전문이 구체적으로 본원에 참조로 포함된다. 상기 관련 기술의 설명은 계류 중인 미국 특허 출원을 비롯한 본원에 기재된 임의의 문헌이 본 개시내용에 대한 선행 기술임을 인정하는 어떠한 방식으로도 의도되지 않는다. 또한, 기재된 생성물, 방법 및/또는 장치와 연관된 임의의 단점에 대한 본원의 기재는 실시양태를 제한하도록 의도되지 않는다. 실제로, 실시양태의 측면은 기재된 생성물, 방법 및/또는 장치의 특정 특징을 그의 기재된 단점을 겪지 않으면서 포함할 수 있다.

실시양태의 개요

LUTS를 갖는 환자에 대한 삶의 질을 개선시키기 위한 새로운, 덜 독성이며, 덜 빈번한 (예를 들어, 매일 또는 매주 의약을 복용할 필요를 피하는) 치료에 대한 관련 기술분야의 필요가 남아있다. 또한, LUTS를 갖는 환자에서 폐쇄성 배뇨 증상을 개선시키는 이러한 치료에 대한 필요성이 관련 기술분야에 남아있다. 실시양태는 이러한 요구를 충족시킨다.

본 개시내용은 아미노산 서열 Ile-Asp-Gln-Gln-Val-Leu-Ser-Arg-Ile-Lys-Leu-Glu-Ile-Lys-Arg-Cys-Leu (펙사포티드 트리플루테이트 또는 "FT")에 의해 기재된 특정 펩티드를 포함한 특정 펩티드가 하부 요로 증상 (LUTS)을 갖는 환자에서 LUTS를 유의하게 개선시킬 수 있고, 보다 특히 폐쇄성 배뇨 증상을 개선시킬 수 있다는 발견을 부분적으로 전제로 한다.

본 개시내용은 또한 부분적으로 FT를 단독으로 또는 포유동물에서 원치 않는 세포 증식을 치료 및/또는 사멸시킬 수 있는 추가의 활성제와 조합하여 사용하는 것이 LUTS와 연관된 폐쇄성 배뇨 증상을 갖는 환자에서 예상치 못한 개선을 제공한다는 발견을 전제로 한다.

조성물은 에어로졸, 주입, 볼루스 주사, 이식 장치, 지속 방출 시스템 등을 통해 근육내로, 경구로, 정맥내로, 복강내로, 뇌내로 (실질내로), 뇌실내로, 종양내로, 병변내로, 피내로, 척수강내로, 비강내로, 안내로, 동맥내로, 국소로, 경피로 투여될 수 있다. 대안적으로, FT 펩티드는 펩티드를 발현하는 유전자를 투여함으로써, 이러한 생산을 유도하는 백신을 투여함으로써, 또는 펩티드를 생체내 발현하는 세포, 박테리아 또는 바이러스를 도입함으로써, 유전자 변형으로 인해 또는 다른 방식으로 생체내 발현될 수 있다.

또 다른 실시양태에서, FT를 포함하는 조성물을 단독으로 또는 포유동물에서 원치 않는 세포 증식을 치료 및/또는 사멸시킬 수 있는 하나 이상의 추가의 활성제와 조합하여 투여하는 것은, FT를 함유하지 않는 대조군 조성물을 투여하는 경우와 비교하여, 국제 전립선 증상 점수 (IPSS)에 의해 측정된 평균 폐쇄성 배뇨 증상 (MOVS)을 30% 초과만큼 개선시킨다.

또 다른 실시양태에서, FT를 포함하는 조성물을 단독으로 또는 포유동물에서 원치 않는 세포 증식을 치료 및/또는 사멸시킬 수 있는 하나 이상의 추가의 활성제와 조합하여 투여하는 것은, FT를 함유하지 않는 대조군 조성물을 투여하는 경우와 비교하여, 국제 전립선 증상 점수 (IPSS)에 의해 측정된 평균 자극성 저장 증상 (MISS)을 20% 초과만큼 개선시킨다.

상기 일반적 설명 및 하기 상세한 설명은 둘 다 예시적이고 설명적이며, 청구된 바와 같은 실시양태의 추가의 설명을 제공하도록 의도된다. 다른 목적, 이점 및 특징은 하기 실시양태의 상세한 설명으로부터 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 용이하게 명백할 것이다.

바람직한 실시양태의 상세한 설명

실시양태가 기재되기 전에, 본 발명은 기재된 특정한 방법론, 프로토콜, 세포주, 벡터 및 시약으로 제한되지 않는 것으로 이해되며, 이는 이들이 달라질 수 있기 때문이다. 또한, 본원에 사용된 용어는 단지 특정한 실시양태를 기재하기 위한 것이며, 단지 첨부된 청구범위에 의해서만 제한될 본 발명의 실시양태의 범주를 제한하는 것으로 의도되지 않는다는 것이 이해되어야 한다.

본원에 사용된 용어 및 어구는 달리 명시되지 않는 한 하기 제시된 바와 같이 정의된다. 본 명세서 전반에 걸쳐, 단수 형태는 문맥이 달리 명백하게 지시하지 않는 한 복수 지시대상을 포함한다. 따라서, 예를 들어, "숙주 세포"에 대한 언급은 복수의 이러한 숙주 세포를 포함하고, "항체"에 대한 언급은 하나 이상의 항체 및 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 그의 등가물 등에 대한 언급이다.

본원에 기재된 아미노산 및 아미노산 잔기는 하기 표에 제공된 허용된 1문자 또는 3문자 코드에 따라 지칭될 수 있다.

3-문자 아미노산	1-문자 기호	기호
알라닌	A	Ala
아르기닌	R	Arg
아스파라긴	N	Asn
아스파르트산	D	Asp
시스테인	C	Cys
글루타민	Q	Gln
글루탐산	E	Glu
글리신	G	Gly
히스티딘	H	His
이소류신	I	Ile
류신	L	Leu
리신	K	Lys
메티오닌	M	Met
페닐알라닌	F	Phe
프롤린	P	Pro
세린	S	Ser
트레오닌	T	Thr
트립토판	W	Trp
티로신	Y	Tyr
발린	V	Val

본원에 사용된 펙사포티드 트리플루테이트 ("FT")는 아미노산 서열: Ile-Asp-Gln-Gln-Val-Leu-Ser-Arg-Ile-Lys-Leu-Glu-Ile-Lys-Arg-Cys-Leu (서열식별번호: 1)를 갖는 17량체 펩티드를 나타낸다. FT는 미국 특허 번호 6,924,266; 7,241,738; 7,317,077; 7,408,021; 7,745,572; 8,067,378; 8,293,703; 8,569,446; 및 8,716,247, 및 미국 특허 출원 공개 번호 2017/0360885; 2017/0020957; 2016/0361380; 및 2016/0215031에 개시되어 있다. 이들 특허 및 공개된 출원의 개시 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.

FT는 하기로 표시된다:

서열식별번호: 1: IDQQVLSRIKLEIKRCL 또는 Ile-Asp-Gln-Gln-Val-Leu-Ser-Arg-Ile-Lys-Leu-Glu-Ile-Lys-Arg-Cys-Leu.

용어 "단편"은 단백질 또는 펩티드의 아미노산 서열의 연속적 하위서열로 이루어진 단백질 또는 폴리펩티드를 지칭하고, 자연 발생 단편, 예컨대 스플라이스 변이체 및 자연 발생하는 생체내 프로테아제 활성으로부터 생성된 단편을 포함한다. 이러한 단편은 아미노 말단, 카르복시 말단, 및/또는 내부에서 (예컨대 자연적 스플라이싱에 의해) 말단 절단될 수 있다. 이러한 단편은 아미노 말단 메티오닌의 존재 또는 부재 하에 제조될 수 있다. 용어 "단편"은 직접적으로 또는 링커를 통해 함께 연결된, 공통적인 또는 그렇지 않은 인접 아미노산 서열을 갖는 동일한 단백질 또는 펩티드로부터의 동일하거나 상이한 단편을 포함한다. 관련 기술분야의 통상의 기술자는 본원에 약술된 지침 및 절차를 사용하여 과도한 실험 없이 실시양태에 사용하기 위한 적합한 단편을 선택할 수 있을 것이다.

용어 "변이체"는 단백질 또는 펩티드의 아미노산 서열과 비교하여 1개 이상의 아미노산 치환, 결실 및/또는 삽입이 존재하는 단백질 또는 폴리펩티드를 지칭하고, 단백질 또는 펩티드의 자연 발생 대립유전자 변이체 또는 선택적 스플라이스 변이체를 포함한다. 용어 "변이체"는 펩티드 서열 내의 하나 이상의 아미노산을 유사하거나 상동성인 아미노산(들) 또는 유사하지 않은 아미노산(들)으로 대체하는 것을 포함한다. 아미노산을 유사하거나 상동성인 것으로 순위화할 수 있는 많은 척도가 있다. (Gunnar von Heijne, Sequence Analysis in Molecular Biology, p. 123-39 (Academic Press, New York, N.Y. 1987.) 바람직한 변이체는 하나 이상의 아미노산 위치에서의 알라닌 치환을 포함한다. 다른 바람직한 치환은 단백질의 전체 알짜 전하, 극성 또는 소수성에 거의 또는 전혀 영향을 미치지 않는 보존적 치환을 포함한다. 보존적 치환은 하기 표 2에 제시된다.

보존적 아미노산 치환

염기성:	아르기닌 리신 히스티딘
산성:	글루탐산 아스파르트산
비전하 극성:	글루타민 아스파라긴 세린 트레오닌 티로신
비극성:	페닐알라닌 트립토판 시스테인 글리신 알라닌 발린 프랄린 메티오닌 류신 이소류신

표 3은 아미노산 치환의 또 다른 방식을 제시한다:

원래 잔기	치환
Ala	gly;ser
Arg	lys
Asn	gln;his
Asp	Glu
Cys	Ser
Gln	asn
Glu	asp
Gly	ala;pro
His	asn;gln
Ile	eu;val
Leu	ile;val
Lys	arg;gln;glu
Met	leu;tyr;ile
Phe	met;leu;tyr
Ser	thr
Thr	Ser
Trp	tyr
Tyr	trp;phe
Val	ile;leu

다른 변이체는 덜 보존적인 아미노산 치환, 예컨대 (a) 예를 들어 시트 또는 나선 형태와 같은 치환 영역 내의 폴리펩티드 백본의 구조, (b) 표적 부위에서의 분자의 전하 또는 소수성, 또는 (c) 측쇄의 벌크를 유지하는 것에 대한 그의 효과가 보다 유의하게 상이한 잔기를 선택하는 것으로 이루어질 수 있다. 일반적으로 기능에 대해 보다 유의한 효과를 가질 것으로 예상되는 치환은 (a) 글리신 및/또는 프롤린이 또 다른 아미노산에 의해 치환되거나 결실 또는 삽입되거나; (b) 친수성 잔기, 예를 들어 세릴 또는 트레오닐이 소수성 잔기, 예를 들어 류실, 이소류실, 페닐알라닐, 발릴 또는 알라닐에 대해 (또는 이에 의해) 치환되거나; (c) 시스테인 잔기가 임의의 다른 잔기에 대해 (또는 이에 의해) 치환되거나; (d) 양전기 측쇄를 갖는 잔기, 예를 들어 리실, 아르기닐 또는 히스티딜이 음전하를 갖는 잔기, 예를 들어 글루타밀 또는 아스파르틸에 대해 (또는 이에 의해) 치환되거나; 또는 (e) 벌크 측쇄를 갖는 잔기, 예를 들어 페닐알라닌이 이러한 측쇄를 갖지 않는 잔기, 예를 들어 글리신에 대해 (또는 이에 의해) 치환된다. 다른 변이체는 신규 글리코실화 및/또는 인산화 부위(들)를 생성하도록 설계된 것, 또는 기존 글리코실화 및/또는 인산화 부위(들)를 결실시키도록 설계된 것을 포함한다. 변이체는 글리코실화 부위, 단백질분해적 절단 부위 및/또는 시스테인 잔기에서의 적어도 하나의 아미노산 치환을 포함한다. 변이체는 또한 링커 펩티드 상의 단백질 또는 펩티드 아미노산 서열 전 또는 후에 추가의 아미노산 잔기를 갖는 단백질 및 펩티드를 포함한다. 예를 들어, 시스테인 잔기는 디술피드 결합의 형성에 의한 펩티드의 고리화를 허용하기 위해 FT의 아미노 및 카르복시 말단 둘 다에 부가될 수 있다. 용어 "변이체"는 또한 펩티드의 3' 또는 5' 말단에 플랭킹된 적어도 1개 및 최대 25개 또는 그 초과의 추가의 아미노산을 갖는 FT의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩티드를 포괄한다.

용어 "유도체"는 자연적 과정, 예컨대 프로세싱 및 다른 번역후 변형, 뿐만 아니라 화학적 변형 기술, 예를 들어 하나 이상의 폴리에틸렌 글리콜 분자, 당, 포스페이트, 및/또는 다른 분자 (분자 또는 분자들이 야생형 단백질 또는 FT에 천연적으로는 부착되지 않은 것임)의 첨가에 의해 화학적으로 변형된, 화학적으로 변형된 단백질 또는 폴리펩티드를 지칭한다. 유도체는 염을 포함한다. 이러한 화학적 변형은 기본 교재 및 보다 상세한 논문, 뿐만 아니라 방대한 연구 문헌에 널리 기재되어 있고, 이들은 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 널리 공지되어 있다. 동일한 유형의 변형이 소정의 단백질 또는 폴리펩티드 내의 여러 부위에서 동일하거나 다양한 정도로 존재할 수 있다는 것이 이해될 것이다. 또한, 주어진 단백질 또는 폴리펩티드는 많은 유형의 변형을 함유할 수 있다. 변형은 펩티드 백본, 아미노산 측쇄, 및 아미노 또는 카르복실 말단을 비롯하여 단백질 또는 폴리펩티드 내의 임의의 위치에서 발생할 수 있다. 변형은, 예를 들어 아세틸화, 아실화, ADP-리보실화, 아미드화, 플라빈의 공유 부착, 헴 모이어티의 공유 부착, 뉴클레오티드 또는 뉴클레오티드 유도체의 공유 부착, 지질 또는 지질 유도체의 공유 부착, 포스포티딜이노시톨의 공유 부착, 가교, 고리화, 디술피드 결합 형성, 탈메틸화, 공유 가교의 형성, 시스테인의 형성, 피로글루타메이트의 형성, 포르밀화, 감마-카르복실화, 글리코실화, GPI 앵커 형성, 히드록실화, 아이오딘화, 메틸화, 미리스토일화, 산화, 단백질분해 프로세싱, 인산화, 프레닐화, 라세미화, 글리코실화, 지질 부착, 황산화, 글루탐산 잔기의 감마-카르복실화, 히드록실화 및 ADP-리보실화, 셀레노일화, 황산화, 단백질에 대한 아미노산의 전달-RNA 매개 부가, 예컨대 아르기닐화, 및 유비퀴틴화를 포함한다. 예를 들어, Proteins--Structure And Molecular Properties, 2nd Ed., T. E. Creighton, W. H. Freeman and Company, New York (1993) 및 Wold, F., "Posttranslational Protein Modifications: Perspectives and Prospects," pgs. 1-12 in Posttranslational Covalent Modification Of Proteins, B. C. Johnson, Ed., Academic Press, New York (1983); Seifter et al., Meth. Enzymol. 182:626-646 (1990) 및 Rattan et al., "Protein Synthesis: Posttranslational Modifications and Aging," Ann. N.Y. Acad. Sci. 663: 48-62 (1992) 를 참조한다. 용어 "유도체"는 단백질 또는 폴리펩티드가 분지화되거나, 또는 분지화와 함께 또는 분지화 없이 시클릭이 되도록 하는 화학적 변형을 포함한다. 시클릭, 분지형 및 분지형 시클릭 단백질 또는 폴리펩티드는 번역후 자연적 과정으로부터 생성될 수 있고, 또한 완전 합성 방법에 의해 제조될 수 있다.

용어 "상동체"는 2개의 폴리펩티드의 아미노산의 위치에서의 유사성을 비교하기 위해 통상적으로 사용되는 표준 방법에 의해 결정할 때 FT의 그의 아미노산 서열에서 적어도 60% 동일한 단백질을 의미한다. 두 단백질 간의 유사성 또는 동일성 정도는 문헌 [Computational Molecular Biology, Lesk, A. M., ed., Oxford University Press, New York, 1988; Biocomputing: Informatics and Genome Projects, Smith, D. W., ed., Academic Press, New York, 1993; Computer Analysis of Sequence Data, Part I, Griffin, A. M., and Griffin, H. G., eds., Humana Press, New Jersey, 1994; Sequence Analysis in Molecular Biology, von Heinje, G., Academic Press, 1987; Sequence Analysis Primer, Gribskov, M. and Devereux, J., eds., M Stockton Press, New York, 1991; 및 Carillo H. and Lipman, D., SIAM, J. Applied Math., 48:1073, 1988]에 기재되어 있는 것을 포함하지만 이에 제한되지 않는 공지된 방법에 의해 쉽게 계산될 수 있다. 동일성을 결정하는 바람직한 방법은 시험된 서열 사이의 가장 큰 매치를 제공하도록 설계된다. 동일성 및 유사성을 결정하는 방법은 공개적으로 이용가능한 컴퓨터 프로그램에서 코드화된다.

2개의 서열 사이의 동일성 및 유사성을 결정하는데 유용한 바람직한 컴퓨터 프로그램 방법은 GCG 프로그램 패키지 (Devereux, J., et al., Nucleic Acids Research, 12(1): 387 (1984)), BLASTP, BLASTN, 및 FASTA ,Atschul, S. F. et al., J. Molec. Biol., 215: 403-410 (1990)를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. BLAST X 프로그램은 NCBI 및 다른 공급원으로부터 공개적으로 이용가능하다 (BLAST Manual, Altschul, S., et al., NCBI NLM NIH Bethesda, Md. 20894; Altschul, S., et al., J. Mol. Biol., 215: 403-410 (1990)). 예로서, 컴퓨터 알고리즘 예컨대 GAP (제네틱 컴퓨터 그룹(Genetic Computer Group), 위스콘신 대학교, 위스콘신주 매디슨)를 사용하여, 퍼센트 서열 동일성이 결정될 2개의 단백질 또는 폴리펩티드를 그의 각각의 아미노산의 최적 매칭 (알고리즘에 의해 결정된 바와 같은 "매칭된 스팬")을 위해 정렬한다.

갭 개방 페널티 (평균 대각선의 3배로서 계산됨; "평균 대각선"은 사용되는 비교 행렬의 대각선의 평균임; "대각선"은 특정 비교 행렬에 의한 각각의 완전한 아미노산 매치에 할당된 점수 또는 수임) 및 갭 연장 페널티 (통상적으로 갭 개방 페널티의 {분율 (1/10)}배임), 뿐만 아니라 비교 행렬, 예컨대 PAM 250 또는 BLOSUM 62가 알고리즘과 함께 사용된다. 표준 비교 행렬 (PAM250 비교 행렬에 대해 Dayhoff et al. in: Atlas of Protein Sequence and Structure, vol. 5, supp.3 참조; BLOSUM 62 비교 행렬에 대해 Henikoff et al., Proc. Natl. Acad. Sci USA, 89:10915-10919 참조)이 또한 알고리즘에 의해 사용될 수 있다. 이어서, 퍼센트 동일성을 알고리즘에 의해 계산하였다. 상동체는 전형적으로 경우에 따라 비교 단백질 또는 펩티드와 비교하여 하나 이상의 아미노산 치환, 결실, 및/또는 삽입을 가질 것이다.

용어 "융합 단백질"은 하나 이상의 펩티드가 항체 또는 Fab 단편 또는 단쇄 Fv와 같은 항체 단편 (이로 제한되지 않음)과 같은 단백질에 재조합 방식으로 융합되거나 화학적으로 접합된 (공유 및 비-공유 포함) 단백질을 의미한다. 용어 "융합 단백질"은 또한 펩티드의 다량체 (즉, 이량체, 삼량체, 사량체 및 고급 다량체)를 의미한다. 이러한 다량체는 1종의 펩티드를 포함하는 동종 다량체, 1종 초과의 펩티드를 포함하는 이종 다량체, 및 적어도 1종의 펩티드 및 적어도 1종의 다른 단백질을 포함하는 이종 다량체를 포함한다. 이러한 다량체는 소수성, 친수성, 이온성 및/또는 공유 회합, 결합 또는 연결의 결과일 수 있거나, 링커 분자를 사용한 가교에 의해 형성될 수 있거나, 또는 예를 들어 리포솜 형성에 의해 간접적으로 연결될 수 있다.

용어 "펩티드 모방체" 또는 "모방체"는 펩티드 또는 단백질의 생물학적 활성을 모방하지만 화학적 성질에서 더 이상 펩티드성이 아닌, 즉, 더 이상 임의의 펩티드 결합 (즉, 아미노산 사이의 아미드 결합)을 함유하지 않는 생물학적 활성 화합물을 지칭한다. 여기서, 용어 펩티드 모방체는 성질이 더 이상 완전히 펩티드성이 아닌 분자, 예컨대 슈도-펩티드, 세미-펩티드 및 펩토이드를 포함하도록 보다 넓은 의미로 사용된다. 이러한 보다 넓은 의미의 펩티드 모방체 (펩티드의 일부가 펩티드 결합이 결여된 구조에 의해 대체된 경우)의 예는 하기에 기재된다. 완전히 비-펩티드이든 또는 부분적으로 비-펩티드이든, 실시양태에 따른 펩티드 모방체는 펩티드 모방체가 기초로 하는 펩티드 내의 활성 기의 3차원 배열과 밀접하게 유사한 반응성 화학적 모이어티의 공간적 배열을 제공한다. 이러한 유사한 활성-부위 기하구조의 결과로서, 펩티드 모방체는 펩티드의 생물학적 활성과 유사한 생물학적 시스템에 대한 효과를 갖는다.

실시양태의 펩티드 모방체는 바람직하게는 3차원 형상 및 생물학적 활성 둘 다에서 본원에 기재된 펩티드와 실질적으로 유사하다. 펩티드 모방체를 생성하기 위해 관련 기술분야에 공지된 펩티드를 구조적으로 변형시키는 방법의 예는, 특히 N-말단에서 활성에 불리하게 영향을 미치지 않으면서 단백질분해적 분해에 대한 증진된 안정성을 유도할 수 있는 D-아미노산 잔기 구조를 유도하는 백본 키랄 중심의 역위를 포함한다. 예는 논문 "Tritriated D-ala.sup.1-Peptide T Binding", Smith C. S. et al., Drug Development Res., 15, pp. 371-379 (1988)에서 주어진다. 제2 방법은 안정성을 위해 시클릭 구조, 예컨대 N 내지 C 쇄간 이미드 및 락탐을 변경시키는 것이다 (Ede et al. in Smith and Rivier (Eds.) "Peptides: Chemistry and Biology", Escom, Leiden (1991), pp. 268-270). 이의 예는 입체형태적으로 제한된 티모펜틴-유사 화합물, 예컨대 미국 특허 출원번호 4,457,489 (1985) (Goldstein, G. et al.)에 개시된 것들에 제공된다 (이의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨). 제3 방법은 단백질분해에 대한 내성을 부여하는, 펩티드 내의 펩티드 결합을 슈도펩티드 결합으로 치환하는 것이다.

일반적으로 펩티드 구조 및 생물학적 활성에 영향을 미치지 않는 다수의 슈도펩티드 결합이 기재되어 있다. 이러한 접근법의 한 예는 레트로-인버소 슈도펩티드 결합을 치환하는 것이다 ("Biologically active retroinverso analogues of thymopentin", Sisto A. et al in Rivier, J. E. and Marshall, G. R. (eds), "Peptides, Chemistry, Structure and Biology", Escom, Leiden (1990), pp. 722-773 및 Dalpozzo, et al. (1993), Int. J. Peptide Protein Res., 41:561-566, 본원에 참조로 포함됨). 이 변형에 따르면, 펩티드의 아미노산 서열은 펩티드 결합 중 1개 이상이 레트로-인버소 슈도펩티드 결합에 의해 대체된 것을 제외하고는 상기 기재된 펩티드의 서열과 동일할 수 있다. 바람직하게는, 가장 N-말단의 펩티드 결합이 치환되는데, 이는 이러한 치환이 N-말단에 작용하는 엑소펩티다제에 의한 단백질분해에 대한 내성을 부여할 것이기 때문이다. 추가의 변형은 또한 아미노산의 화학적 기를 유사한 구조의 다른 화학적 기로 대체함으로써 이루어질 수 있다. 생물학적 활성의 상실이 없거나 거의 없이 효소적 절단에 대한 안정성을 증진시키는 것으로 공지된 또 다른 적합한 슈도펩티드 결합은 환원된 동배체 슈도펩티드 결합이다 (Couder, et al. (1993), Int. J. Peptide Protein Res., 41:181-184] (본원에 전문이 참고로 포함됨)).

따라서, 이들 펩티드의 아미노산 서열은 펩티드 결합 중 하나 이상이 동배체 슈도펩티드 결합에 의해 대체된 것을 제외하고는 FT의 서열과 달리 동일할 수 있다. 바람직하게는, 가장 N-말단의 펩티드 결합이 치환되는데, 이는 이러한 치환이 N-말단에 작용하는 엑소펩티다제에 의한 단백질분해에 대한 내성을 부여할 것이기 때문이다. 하나 이상의 환원된 동배체 슈도펩티드 결합을 갖는 펩티드의 합성은 관련 기술분야에 공지되어 있다 (Couder, et al. (1993), 상기 인용됨). 다른 예는 펩티드 결합을 대체하기 위한 케토메틸렌 또는 메틸술피드 결합의 도입을 포함한다.

펩티드의 펩토이드 유도체는 생물학적 활성에 대한 중요한 구조적 결정인자를 보유하지만, 펩티드 결합을 제거함으로써 단백질분해에 대한 내성을 부여하는 또 다른 부류의 펩티드 모방체를 나타낸다 (Simon, et al., 1992, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89:9367-9371, 그 전문이 본원에 참조로 포함됨). 펩토이드는 N-치환된 글리신의 올리고머이다. 각각 천연 아미노산의 측쇄에 상응하는 다수의 N-알킬 기가 기재되어 있다 (Simon, et al. (1992), 상기 인용됨). 펩티드의 아미노산의 일부 또는 전부는 대체된 아미노산에 상응하는 N-치환된 글리신으로 대체될 수 있다.

용어 "펩티드 모방체" 또는 "모방체"는 또한 하기 정의된 바와 같은 역-D 펩티드 및 거울상이성질체를 포함한다.

용어 "역-D 펩티드"는 펩티드의 L-아미노산 서열과 비교하여 역순으로 배열된 D-아미노산으로 이루어진 생물학적으로 활성인 단백질 또는 펩티드를 지칭한다. 따라서, L-아미노산 펩티드의 카르복시 말단 잔기는 D-아미노산 펩티드의 아미노 말단이 되는 등이다. 예를 들어, 펩티드 ETESH는 H_dS_dE_dT_dE_d가 되고, 여기서 E_d, H_d, S_d, 및 T_d는 각각 L-아미노산, E, H, S, 및 T에 상응하는 D-아미노산이다.

용어 "거울상이성질체"는 펩티드의 아미노산 서열 내의 하나 이상의 L-아미노산 잔기가 상응하는 D-아미노산 잔기(들)로 대체된, 생물학적으로 활성인 단백질 또는 펩티드를 지칭한다.

본원에 사용된 "조성물"은 FT 및 임의로 추가의 활성제를 함유하는 임의의 조성물을 폭넓게 지칭한다. 조성물은 건조 제제, 수용액 또는 멸균 조성물을 포함할 수 있다. FT를 포함하는 조성물은 혼성화 프로브로서 사용될 수 있다. 프로브는 동결-건조된 형태로 저장될 수 있고, 안정화제, 예컨대 탄수화물과 회합될 수 있다. 혼성화에서, 프로브는 염, 예를 들어 NaCl; 세제, 예를 들어 소듐 도데실 술페이트 (SDS), 및 다른 성분, 예를 들어 덴하르트 용액, 분유, 연어 정자 DNA 등을 함유하는 수용액 중에 배치될 수 있다.

추가의 활성제가 FT와 함께 사용되는 실시양태에서, 표현 "활성제"는 원치 않는 세포 증식 및/또는 조직 성장을 제거할 수 있는 임의의 작용제를 나타내기 위해 사용된다. 적합한 활성제는 (i) 항암 활성제 (예컨대 알킬화제, 토포이소머라제 I 억제제, 토포이소머라제 II 억제제, RNA/DNA 항대사물, 및 항유사분열제); (ii) 양성 성장을 치료하기 위한 활성제, 예컨대 항여드름 및 항사마귀 활성제; (iii) 항안드로겐 화합물, (시프로테론 아세테이트 (1α,2β-메틸렌-6-클로로-17α-아세톡시-6-디히드로프로게스테론) 타목시펜, 아로마타제 억제제); (iv) 알파1-아드레날린성 수용체 차단제 (탐술로신, 테라조신, 독사조신, 프라조신, 부나조신, 인도라민, 알풀조신, 실로도신); (v) 5 α-리덕타제 억제제 (피나스테리드, 두타스테리드); (vi) 포스포디에스테라제 유형 5 (PDE5) 억제제 (타달라필) 및 그의 조합을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.

본 개시내용은 또한 부분적으로 FT를 단독으로 또는 포유동물에서 원치 않는 세포 증식을 치료 및/또는 사멸시킬 수 있는 추가의 활성제와 조합하여 사용하는 것이 LUTS와 연관된 폐쇄성 배뇨 증상을 앓고 있는 환자에서 예상치 못한 개선을 제공한다는 발견을 전제로 한다. 어떠한 특정한 이론 또는 작업에 얽매이는 것을 의도하지는 않지만, 본 발명자는 포유동물에게 FT를 투여하는 것이 LUTS를 갖는 환자에서 예상하지 못한 우수한 개선을 제공한다는 것을 예상외로 발견하였다. 본 발명자들은 BPH를 치료하기 위한 임상 시험을 수행할 때, FT를 단독으로 또는 또 다른 활성제와 조합하여 투여하는 것이 LUTS를 갖는 환자에서 자극성 및 폐쇄성 배뇨 증상 둘 다를 비롯한 증상을 극적으로 개선시킨다는 것을 예상외로 발견하였다.

본원에 기재된 조성물로 치료된 환자는 FT를 함유하지 않는 대조군 조성물을 투여한 경우와 비교하여, 국제 전립선 증상 점수 (IPSS)에 의해 측정된 평균 폐쇄성 배뇨 증상 (MOVS)에서 30% 초과만큼의 극적인 개선을 나타내었다. 실시양태는 IPSS에 의해 측정된 평균 폐쇄성 배뇨 증상 (MOVS)을 약 30% 내지 약 150%, 또는 약 35% 내지 약 125%, 또는 약 45% 내지 약 105%의 범위 내로 개선시킬 수 있다. 본원에 기재된 조성물로 치료된 환자는 FT를 함유하지 않는 대조군 조성물을 투여한 경우와 비교하여, IPSS에 의해 측정된 평균 자극성 저장 증상 (MISS)에서 20% 초과만큼의 극적인 개선을 나타내었다. 실시양태는 IPSS에 의해 측정된 평균 자극성 저장 증상 (MISS)을 약 20% 내지 약 50%, 또는 약 25% 내지 약 40%, 또는 약 30% 내지 약 35%의 범위 내로 개선시킬 수 있다.

본 발명자는 LUTS를 갖는 환자에게 통상적인 BPH 경구 의약의 투여가 위약만을 받은 환자와 비교하여, IPSS에 의해 측정된 평균 폐쇄성 배뇨 증상 (MOVS) 및 IPSS에 의해 측정된 평균 자극성 저장 증상 (MISS)에서 극적인 감소를 나타냈음을 발견하였다. 본 발명자들은 MOVS의 감소가 약 50%이고 MISS의 감소가 약 40%임을 발견하였다. 따라서, BPH를 치료하기 위한 통상적인 요법은 LUTS를 갖는 환자의 증상을 개선시킬 것으로 예상되지 않았을 것이며, 이에 따라 FT의 투여를 포함하는 본 발명에 의해 실현된 극적인 개선은 훨씬 더 예상외의 것이다.

실시양태는 포유동물에게 FT를 단독으로 또는 추가의 활성제의 투여와 조합하여 1회 또는 1회 초과로 투여하는 것을 포함하는, LUTS를 갖는 포유동물을 치료하는 방법을 포함한다. 방법은 FT를 포함하는 조성물을 단독으로 또는 담체에 접합되어 근육내로, 경구로, 정맥내로, 복강내로, 뇌내로 (실질내로), 뇌실내로, 병변내로, 안내로, 동맥내로, 척수강내로, 종양내로, 비강내로, 국소로, 경피로, 피하로 또는 피내로 투여하는 것을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

인간; 마우스; 토끼; 개; 양; 및 다른 가축; 수의사, 동물원-키퍼 또는 야생 보존 고용인에 의해 치료되거나 치료가능한 임의의 포유동물을 비롯한 임의의 포유동물이 본 발명의 사용으로부터 이익을 얻을 수 있다. 바람직한 포유동물은 인간, 양 및 개이다. 본 명세서 전반에 걸쳐 포유동물 및 환자는 상호교환가능하게 사용된다.

FT의 다른 보다 작은 단편은 이들 펩티드가 동일하거나 유사한 생물학적 활성을 보유하도록 선택될 수 있다는 것이 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 명백할 것이다. 다른 단편은 이들 펩티드가 동일하거나 유사한 생물학적 활성을 보유하도록 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 선택될 수 있다. 실시양태의 펩티드는 이들 다른 단편을 포함한다. 일반적으로, 실시양태의 펩티드는 적어도 4개의 아미노산, 바람직하게는 적어도 5개의 아미노산, 보다 바람직하게는 적어도 6개의 아미노산을 갖는다.

실시양태는 또한 함께 연결된 2개 이상의 FT 서열을 포함하는 FT를 추가의 활성제와 함께 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하는, LUTS를 갖는 포유동물 (또는 환자)을 치료하는 방법을 포괄한다. FT가 목적하는 생물학적 활성을 갖는 한, 2개 이상의 FT 서열도 목적하는 생물학적 활성을 보유할 것이다.

상기 실시양태에 포함되는 FT 및 그의 단편, 변이체, 유도체, 상동체, 융합 단백질 및 모방체는 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 방법, 예컨대 재조합 DNA 기술, 단백질 합성, 및 자연 발생 펩티드, 단백질, 변이체, 유도체 및 그의 상동체의 단리를 이용하여 제조할 수 있다. FT 및 그의 단편, 변이체, 유도체, 상동체, 융합 단백질 및 모방체는 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 방법을 이용하여 다른 펩티드, 단백질, 및 그의 단편, 변이체, 유도체 및 상동체로부터 제조될 수 있다. 이러한 방법은 펩티드 또는 단백질을 FT로 절단하기 위한 프로테아제의 사용을 포함한다 (이에 제한되지는 않음). 예를 들어, 미국 특허 번호 6,924,266; 7,241,738; 7,317,077; 7,408,021; 7,745,572; 8,067,378; 8,293,703; 8,569,446; 및 8,716,247, 및 미국 특허 출원 공개 번호 2017/0360885; 2017/0020957; 2016/0361380; 및 2016/0215031에 개시된 임의의 방법을 사용하여 본원에 기재된 FT 펩티드를 제조할 수 있다.

본 발명의 실시양태는 IPSS에 의해 측정시에 LUTS와 연관된 폐쇄성 및/또는 자극성 증상을 개선하는, LUTS를 갖는 포유동물의 치료 방법에 관한 것이다. 이러한 방법은 그를 필요로 하는 포유동물에게 치료 유효량의 FT를 단독으로 또는 추가의 활성제와 조합하여 투여하는 것을 포함한다. 필요한 포유동물은 양성 전립선 비대증 (BPH)을 또한 갖는 포유동물과 무관하게, LUTS를 갖는 포유동물일 수 있거나, 또는 필요한 포유동물은 BPH 및 LUTS 둘 다를 갖는 포유동물이다. 필요한 포유동물은 또한 LUTS와 연관된 증상의 개선으로부터 이익을 얻을 임의의 포유동물일 수 있다.

추가의 활성제는, 사용된다면, (i) 항암 활성제 (예컨대 알킬화제, 토포이소머라제 I 억제제, 토포이소머라제 II 억제제, RNA/DNA 항대사물, 및 항유사분열제); (ii) 양성 성장을 치료하기 위한 활성제, 예컨대 항여드름 및 항사마귀 활성제 (살리실산); (iii) 항안드로겐 화합물, (시프로테론 아세테이트 (1α,2β-메틸렌-6-클로로-17α-아세톡시-6-데히드로프로게스테론)) 타목시펜, 아로마타제 억제제); (iv) 알파1-아드레날린성 수용체 차단제 (탐술로신, 테라조신, 독사조신, 프라조신, 부나조신, 인도라민, 알풀조신, 실로도신); (v) 5 α-리덕타제 억제제 (피나스테리드, 두타스테리드); (vi) 포스포디에스테라제 유형 5 (PDE5) 억제제 (타달라필) 및 그의 조합에서 선택되는 하나 이상의 활성제일 수 있다. 바람직하게는, 추가의 활성제는 탐술로신; 피나스테리드; 테라조신; 독사조신; 프라조신; 타달라필; 알푸조신; 실로도신; 두타스테리드; 두타스테리드 및 탐술로신의 조합물; 및 이의 혼합물 및 조합물로 이루어진 군으로부터 선택된다.

본원에 기재된 치료 조성물은 치료 유효량의 FT를 제약상 허용되는 담체와 혼합하여 포함할 수 있다. 일부 대안적 실시양태에서, 추가의 활성제는 FT와 함께 동일한 조성물로 투여될 수 있고, 다른 실시양태에서, FT를 포함하는 조성물은 주사로서 투여되는 반면, 추가의 활성제는 경구 의약 (겔, 캡슐, 정제, 액체 등)으로 제제화된다. 담체 물질은 주사용수일 수 있고, 바람직하게는 포유동물에게 투여하기 위한 용액에서 통상적인 다른 물질로 보충될 수 있다. 전형적으로, FT는 정제된 FT 펩티드를 1종 이상의 생리학상 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제와 함께 포함하는 조성물의 형태로 투여될 것이다. 중성 완충 염수 또는 혈청 알부민과 혼합된 염수가 예시적인 적절한 담체이다. 바람직하게는, 생성물은 적절한 부형제 (예를 들어, 수크로스)를 사용하여 동결건조물로서 제제화된다. 다른 표준 담체, 희석제 및 부형제가 필요에 따라 포함될 수 있다. 실시양태의 조성물은 또한 적절한 범위의 pH 값을 갖는 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 완충제, 예컨대 약 pH 7.0-8.5의 트리스 완충제, 또는 약 pH 4.0-5.5의 아세테이트 완충제를 포함할 수 있으며, 이는 소르비톨 또는 그에 대한 적합한 대체물을 추가로 포함할 수 있다.

경구 투여를 위한 고체 투여 형태는 캡슐, 정제, 환제, 분말 및 과립을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 이러한 고체 투여 형태에서, 추가의 활성제 및/또는 FT는 하기 중 적어도 하나와 혼합될 수 있다: (a) 1종 이상의 불활성 부형제 (또는 담체), 예컨대 시트르산나트륨 또는 인산이칼슘; (b) 충전제 또는 증량제, 예컨대 전분, 락토스, 수크로스, 글루코스, 만니톨 및 규산; (c) 결합제, 예컨대 카르복시메틸셀룰로스, 알기네이트, 젤라틴, 폴리비닐피롤리돈, 수크로스 및 아카시아; (d) 보습제, 예컨대 글리세롤; (e) 붕해제, 예컨대 한천-한천, 탄산칼슘, 감자 또는 타피오카 전분, 알긴산, 특정 복합 실리케이트 및 탄산나트륨; (f) 용액 지연제, 예컨대 파라핀; (g) 흡수 촉진제, 예컨대 4급 암모늄 화합물; (h) 습윤제, 예컨대 아세틸 알콜 및 글리세롤 모노스테아레이트; (i) 흡착제, 예컨대 카올린 및 벤토나이트; 및 (j) 윤활제, 예컨대 활석, 스테아르산칼슘, 스테아르산마그네슘, 고체 폴리에틸렌 글리콜, 소듐 라우릴 술페이트, 또는 그의 혼합물. 캡슐, 정제 및 환제의 경우, 투여 형태는 또한 완충제를 포함할 수 있다.

경구 투여를 위한 액체 투여 형태는 제약상 허용되는 에멀젼, 용액, 현탁액, 시럽 및 엘릭시르를 포함한다. 활성 화합물 이외에도, 액체 투여 형태는 관련 기술분야에서 통상적으로 사용되는 불활성 희석제, 예컨대 물 또는 다른 용매, 가용화제 및 유화제를 포함할 수 있다. 예시적인 유화제는 에틸 알콜, 이소프로필 알콜, 에틸 카르보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알콜, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 디메틸포름아미드, 오일, 예컨대 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수 배아 오일, 올리브 오일, 피마자 오일 및 참깨 오일, 글리세롤, 테트라히드로푸르푸릴 알콜, 폴리에틸렌글리콜, 소르비탄의 지방산 에스테르, 또는 이들 물질의 혼합물 등이다.

이러한 불활성 희석제 이외에, 조성물은 또한 보조제, 예컨대 습윤제, 유화제 및 현탁화제, 감미제, 향미제 및 방향제를 포함할 수 있다.

실시양태의 조성물 내의 활성 성분의 실제 투여량 수준은 특정 조성물 및 투여 방법에 대한 목적하는 치료 반응을 얻기 위해 효과적인 FT 및 추가의 활성제의 양을 얻기 위해 변할 수 있다. 따라서, 선택된 투여량 수준은 목적하는 치료 효과, 투여 경로, 목적하는 치료 지속기간 및 다른 인자에 따라 달라진다.

인간을 비롯한 포유동물의 경우, 유효량은 체표면적에 기초하여 투여될 수 있다. 다양한 크기, 종의 동물 및 인간에 대한 투여량의 상관관계 (mg/M² 체표면에 기초함)는 E. J. Freireich et al., Cancer Chemother. Rep., 50 (4):219 (1966)에 기재되어 있다. 체표면적은 개체의 신장 및 체중으로부터 대략적으로 결정될 수 있다 (예를 들어, Scientific Tables, Geigy Pharmaceuticals, Ardsley, N.Y. pp. 537-538 (1970) 참조).

숙주에게 투여되는 FT 펩티드 및 추가의 활성제의 총 1일 용량은 단일 또는 분할 용량일 수 있다. 투여 단위 조성물은 1일 용량을 구성하는데 사용될 수 있는 그러한 양의 그의 하위다중물을 함유할 수 있다. 그러나, 임의의 특정한 환자에 대한 구체적 용량 수준은 체중, 전반적 건강, 성별, 식이, 투여 시간 및 경로, 투여된 약물의 효력, 흡수 및 배출 속도, 다른 약물과의 조합 및 치료될 특정한 질환의 중증도를 포함한 다양한 인자에 따라 달라질 것임이 이해될 것이다. 조성물은 주사 또는 주입으로서 단지 1회 투여되는 것이 바람직하거나, 또는 또 다른 바람직한 실시양태에서, 조성물은 2회 투여된다. 이러한 실시양태에서, 조성물의 투여 사이의 기간은 2개월 내지 10년, 또는 8개월 내지 4년, 또는 약 1년 초과 (예를 들어, 1년 내지 2년)로 달라질 수 있다.

실시양태에 따른 FT를 포함하는 조성물의 투여 방법은 조성물을 에어로졸, 주입, 볼루스 주사, 이식 장치, 지속 방출 시스템 등을 통해 근육내로, 경구로, 정맥내로, 복강내로, 뇌내로 (실질내로), 뇌실내로, 종양내로, 병변내로, 피내로, 척수강내로, 비강내로, 안내로, 동맥내로, 국소로, 경피로 투여하는 것을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 예를 들어, 미국 특허 번호 6,924,266; 7,241,738; 7,317,077; 7,408,021; 7,745,572; 8,067,378; 8,293,703; 8,569,446; 및 8,716,247, 및 미국 특허 출원 공개 번호 2017/0360885; 2017/0020957; 2016/0361380; 및 2016/0215031에 개시된 임의의 투여 방법이 사용될 수 있다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 BPH를 갖고, 또한 LUTS를 임의로 갖는 포유동물을 확인하고, 상기 포유동물에게 치료 유효량의 FT (서열식별번호: 1 (Ile-Asp-Gln-Gln-Val-Leu-Ser-Arg-Ile-Lys-Leu-Glu-Ile-Lys-Arg-Cys-Leu))를 1회 이상 투여하는 것을 포함하는, BPH를 또한 갖는 포유동물을 임의로 포함하여 LUTS를 갖는 포유동물에서 증상을 개선시키는 방법을 제공한다. 특정 실시양태에서, 단리된 FT 펩티드는 다음으로 이루어지는 군에서 선택된 하나 이상의 활성제와 조합하여 투여될 수 있다: (1) 5α-리덕타제의 억제제 및/또는 항에스트로겐, (2) 5α-리덕타제의 억제제 및/또는 아로마타제 억제제, (3) 5α-리덕타제 억제제 및/또는 17β-HSD 억제제, (4) 5α-리덕타제 억제제, 항에스트로겐 및 아로마타제 억제제, (5) 5α-리덕타제 억제제, 항에스트로겐 및 17β-HSD 억제제, (6) 5α-리덕타제 억제제, 아로마타제 억제제, 항에스트로겐 및 17β-HSD 억제제, (7) 5α-리덕타제 억제제, 항안드로겐 및 항에스트로겐, (8) 5α-리덕타제 억제제, 항안드로겐 및 아로마타제 억제제, (9) 5α-리덕타제 억제제, 항안드로겐 및 17β-HSD 억제제, (10) 5α-리덕타제 억제제, 항안드로겐, 항에스트로겐 및 아로마타제 억제제, (11) 5α-리덕타제 억제제, 항안드로겐, 아로마타제 억제제 및 17β-HSD 억제제, (12) 5α-리덕타제 억제제, 항안드로겐, 아로마타제 억제제, 항에스트로겐 및 17β-HSD 억제제, (13) 17β-HSD 억제제 및 항에스트로겐, (14) 17β-HSD 억제제 및 아로마타제 억제제, (15) 17β-HSD 억제제, 아로마타제 억제제 및 항에스트로겐, (16) 17β-HSD 억제제, 항안드로겐 및 항에스트로겐, (17) 17β-HSD 억제제, 항안드로겐 및 아로마타제 억제제, (18) 17β-HSD 억제제, 항안드로겐, 항에스트로겐 및 아로마타제 억제제, (19) 항에스트로겐 및 아로마타제 억제제 및 (20) 항에스트로겐, 아로마타제 억제제 및 항안드로겐, (21) LHRH 효능제 또는 길항제, 5α-리덕타제의 억제제 및 항에스트로겐, (22) LHRH 효능제 또는 길항제, 5α-리덕타제의 억제제 및 아로마타제 억제제, (23) LHRH 효능제 또는 길항제, 5α 리덕타제 억제제 및 17β-HSD 억제제, (24) LHRH 효능제 또는 길항제, 5α-리덕타제 억제제, 항에스트로겐 및 아로마타제 억제제, (25) LHRH 효능제 또는 길항제, 5α-리덕타제 억제제, 항에스트로겐 및 17β-HSD 억제제, (26) LHRH 효능제 또는 길항제, 5α-리덕타제 억제제, 아로마타제 억제제, 항에스트로겐 및 17β-HSD 억제제, (27) LHRH 효능제 또는 길항제, 5α-리덕타제 억제제, 항안드로겐 및 항에스트로겐, (28) LHRH 효능제 또는 길항제, 5α-리덕타제 억제제, 항안드로겐 및 아로마타제 억제제, (29) LHRH 효능제 또는 길항제, 5α-리덕타제 억제제, 항안드로겐 및 17β-HSD 억제제, (30) LHRH 효능제 또는 길항제, 5α-리덕타제 억제제, 항안드로겐, 항에스트로겐 및 아로마타제 억제제, (31) LHRH 효능제 또는 길항제, 5α-리덕타제 억제제, 항안드로겐, 아로마타제 억제제 및 17β-HSD 억제제, (32) LHRH 효능제 또는 길항제, 5α-리덕타제 억제제, 항안드로겐, 아로마타제 억제제, 항에스트로겐 및 17β-HSD 억제제, (33) LHRH 효능제 또는 길항제, 17β-HSD 억제제 및 항에스트로겐, (34) LHRH 효능제 또는 길항제, 17β-HSD 억제제 및 아로마타제 억제제, (35) LHRH 효능제 또는 길항제, 17β-HSD 억제제, 아로마타제 억제제 및 항에스트로겐, (36) LHRH 효능제 또는 길항제, 17β-HSD 억제제, 항안드로겐 및 항에스트로겐, (37) LHRH 효능제 또는 길항제, 17β-HSD 억제제, 항안드로겐 및 아로마타제 억제제, (38) LHRH 효능제 또는 길항제, 17β-HSD 억제제, 항안드로겐, 항에스트로겐 및 아로마타제 억제제, (39) LHRH 효능제 또는 길항제, 항에스트로겐 및 아로마타제 억제제, 및 (40) LHRH 효능제 또는 길항제, 항에스트로겐, 아로마타제 억제제 및 항안드로겐.

하기 실시예는 본 실시양태를 예시하기 위해 제공된다. 그러나, 실시양태는 이들 실시예에 기재된 구체적 조건 또는 세부사항에 제한되지 않는 것으로 이해되어야 한다. 명세서 전반에 걸쳐, 미국 특허를 비롯한 공개적으로 입수가능한 문헌에 대한 임의의 및 모든 참고문헌은 구체적으로 참조로 포함된다. 특히, 실시양태는 미국 특허 번호 6,924,266; 7,241,738; 7,317,077; 7,408,021; 7,745,572; 8,067,378; 8,293,703; 8,569,446; 및 8,716,247, 및 미국 특허 출원 공개 번호 2017/0360885; 2017/0020957; 2016/0361380; 및 2016/0215031 (이들 각각은 그에 명시된 특정 펩티드가 정상 설치류 근육 조직, 피하 결합 조직, 진피 및 다른 조직에서 생체내 세포 사멸을 유발하는데 효과적인 작용제임을 밝혀냄)에 함유된 예를 명백하게 참조로 포함한다.

실시예 1

BPH를 갖고 임의로 LUTS를 또한 갖는 환자에게 초음파 유도 하에 오피스 세팅에서 비뇨기과 전문의에 의해 이중-맹검 조건 하에 a) 포스페이트 완충 염수 pH 7.2 ("PBS") 중 FT (서열식별번호: 1 (Ile-Asp-Gln-Gln-Val-Leu-Ser-Arg-Ile-Lys-Leu-Glu-Ile-Lys-Arg-Cys-Leu), 2.5 mg) 또는 b) PBS 단독의 전립선내 주사를 제공하였다. 환자를 규칙적인 신체 검사, 실험실 시험, 및 증상의 평가로 1 내지 6년 동안 추적하였다. 증상적 평가는 전립선 증상적 개선 또는 악화를 측정하기 위해 사용되는 정량적 척도인 국제 전립선 증상 점수 (IPSS)에 의해 측정하였다. IPSS는 하기를 정량화한다: 1) 배뇨 후 불완전 방광 비움; 2) 빈번한 배뇨; 3) 배뇨 동안 중단 및 시작; 4) 긴급한 소변 필요; 5) 소변 흐름의 약화; 6) 배뇨 동안 누르거나 압박할 필요; 7) 밤에 잠든 후에 배뇨할 필요가 있음 (야간뇨).

IPSS 항목 1, 3, 5 및 6은 폐쇄성 배뇨 스케일을 포함하고, IPSS 항목 2, 4 및 7은 자극성 저장 스케일을 포함한다. 기준선 자극성 저장 점수로부터 추적 점수까지의 차이; 및 기준선 폐쇄성 배뇨 점수로부터 추적 점수까지의 차이를 FT 치료된 대상체 및 위약 치료된 대조군에서 계산하였다. 놀랍게도, FT의 단일 사전 주사를 받은 대상체에서의 폐쇄성 배뇨 결과의 개선량은 자극성 저장 증상에서 발견된 변화보다 유의하게 더 우수하였다. 결과를 표 1에 요약하였다.

<표 1>

*p=.012 t 검정 vs 위약 대조군. 　

표 1에 제시된 바와 같이, 본원에 기재된 조성물로 치료된 환자는 FT를 함유하지 않는 대조군 조성물을 투여한 경우와 비교하여, 국제 전립선 증상 점수 (IPSS)에 의해 측정된 평균 폐쇄성 배뇨 증상 (MOVS)에서 46% 초과만큼의 개선을 나타내었다. 표 1은 또한 본원에 기재된 조성물로 치료된 환자가 FT를 함유하지 않는 대조군 조성물을 투여한 경우와 비교하여, IPSS에 의해 측정된 평균 자극성 저장 증상 (MISS)에서 34% 초과만큼의 개선을 나타냈음을 보여준다. 따라서, FT의 투여는 BPH를 앓고 있는 환자에서 MOVS 및 MISS의 보다 큰 개선을 제공한다. BPH를 갖는 환자는 또한 LUTS를 갖거나 갖지 않을 수 있기 때문에, 개선은 BPH 및 LUTS 둘 다를 앓고 있는 환자에서만 훨씬 더 클 가능성이 있다.

실시예 2

제2 분석군에서, BPH를 갖고 임의로 LUTS를 또한 갖는 환자에게 초음파 유도 하에 오피스 세팅에서 비뇨기과 전문의에 의해 이중-맹검 조건 하에 PBS pH 7.2 비히클 단독의 전립선내 주사를 제공하였다. 환자는 규칙적인 신체 검사, 실험실 시험, 및 증상의 평가로 1 내지 3년 동안 추적되었다. PBS 비히클 단독 주사를 받은 환자 및 이후에 알파 차단제, 예컨대 탐술로신, 테라조신, 독사조신; 또는 5-알파 리덕타제 억제제, 예컨대 피나스테리드, 두타스테리드 또는 포스포디에스테라제 유형 5 억제제 (PDE5 억제제), 예컨대 타달라필을 비롯한 BPH를 치료하는데 사용되는 통상적인 경구 의약을 추가로 받은 환자는, 위약을 받기 전 및 후에, 및 추가의 통상적인 경구 BPH 의약을 받은 후에 평가하였다. IPSS는 하기를 정량화한다: 1) 배뇨 후 불완전 방광 비움; 2) 빈번한 배뇨; 3) 배뇨 동안 중단 및 시작; 4) 긴급한 소변 필요; 5) 소변 흐름의 약화; 6) 배뇨 동안 누르거나 압박할 필요; 7) 밤에 잠든 후에 배뇨할 필요가 있음 (야간뇨). IPSS 항목 1, 3, 5 및 6은 폐쇄성 배뇨 스케일을 포함하고, IPSS 항목 2, 4 및 7은 자극성 저장 스케일을 포함한다. 기준선 자극성 저장 점수로부터 추적 점수까지의 차이; 및 기준선 폐쇄성 배뇨 점수로부터 추적 점수까지의 차이를 맹검 위약 치료된 환자 및 후속적으로 통상적인 경구 BPH 의약으로 치료된 맹검 위약 치료된 환자에서 계산하였다. 위약의 사전 주사 후에 후속 BPH 경구 의약을 투여받은 대상체에서의 폐쇄성 배뇨 및 자극성 저장 결과의 개선량은 초기 위약 주사 후에 대상체에서 발견된 변화보다 유의하게 더 양호하지 않았고, 실제로 더 불량하였다. 결과를 표 2에 요약하였다.

<표 2>

표 2의 결과는 BPH를 치료하기 위한 통상적인 경구 의약을 투여받은 BPH를 가진 환자가 위약 대조군만을 투여받은 환자와 비교하여 MOVS 또는 MISS에서 개선을 보이지 않음을 보여준다. 실제로, LUTS의 증상은 BPH를 치료하기 위한 통상적인 경구 의약을 받은 환자에서 다소 악화되는 것으로 보인다. 따라서, BPH를 치료하는데 효과적인 것으로 공지된 작용제는 LUTS를 또한 갖는 환자에서 증상의 개선을 제공할 것으로 예상되지 않았을 것이며, FT로 치료된 환자에 대해 본원에서 제시된 극적인 개선은 훨씬 더 예상할 수 없었을 것이다.

실시예 3

제3 분석군에서, BPH를 갖고 임의로 LUTS를 또한 갖는 환자에게 초음파 유도 하에 오피스 세팅에서 비뇨기과 전문의에 의해 이중-맹검 조건 하에 PBS pH 7.2 비히클 단독의 전립선내 주사를 제공하였다. 환자는 규칙적인 신체 검사, 실험실 시험, 및 증상의 평가로 1 내지 3년 동안 추적되었다. 1-3년 후에 PBS 비히클 단독 주사를 받은 131명의 환자는 포스페이트 완충 염수 pH 7.2 ("PBS") 중 FT (서열식별번호: 1 (Ile-Asp-Gln-Gln-Val-Leu-Ser-Arg-Ile-Lys-Leu-Glu-Ile-Lys-Arg-Cys-Leu), 2.5 mg)의 교차 주사를 받았다. 기준선 폐쇄성 배뇨 점수로부터 추적 점수까지의 차이를 맹검 위약 치료된 환자 (군 1); 후속적인 통상적인 경구 BPH 의약을 받은 맹검 위약 치료된 환자 (군 2), 및 후속적으로 FT 치료를 받은 맹검 위약 치료된 환자 (군 3)에서 계산하였다. 위약의 사전 주사 후에 후속 FT 주사를 받은 대상체에서의 폐쇄성 배뇨 결과의 개선량은 초기 위약 주사 후에 대상체에서 발견된 변화보다 유의하게 더 우수하였고, 맹검 위약에 이어서 통상적인 경구 BPH 의약을 받은 환자에서의 개선보다 유의하게 더 우수하였다. 결과를 하기 표 3에 요약하였다.

<표 3>

*p<.0001, 위약 단독과 비교한 t 검정;

**p<.0001, 위약에 이어 후속 통상적인 경구 BPH 의약과 비교한 t 검정

표 3에 제시된 바와 같이, 본원에 기재된 조성물로 치료된 환자는 국제 전립선 증상 점수 (IPSS)에 의해 측정된 평균 폐쇄성 배뇨 증상 (MOVS)에서, FT를 함유하지 않는 대조군 조성물을 투여한 경우와 비교하여 104% 초과만큼의 개선, 및 위약 대조군에 이어서 통상적인 경구 BPH 의약을 투여한 경우와 비교했을 때 320% 초과만큼의 개선을 나타내었다. FT는 이전에 BPH를 치료하는데 효과적인 것으로 보고되었고, 공지된 BPH 요법 (예를 들어, 통상적인 경구 의약 - 상기 실시예 2 참조)이 자극성 또는 폐쇄성 증상을 치료하는데 효과적이지 않은 것으로 밝혀졌기 때문에, FT의 투여가 다른 공지된 BPH 요법과 비교시 LUTS를 갖는 환자에서 폐쇄성 배뇨 증상을 개선시킬 것이라고 예상할 이유는 없으며, 하물며 300% 초과의 개선을 예상할 이유는 없을 것이다.

실시예 4

제4 분석군에서, BPH를 갖고 임의로 LUTS를 또한 갖는 환자에게 초음파 유도 하에 오피스 세팅에서 비뇨기과 전문의에 의해 이중-맹검 조건 하에 PBS pH 7.2 비히클 단독 또는 FT의 전립선내 주사를 제공하였다. 환자는 규칙적인 신체 검사, 실험실 시험, 및 증상의 평가로 1 내지 3년 동안 추적되었다. 217명의 환자는 이중 맹검 위약 단독을 받았다 (군 1). 287명의 환자는 이중 맹검 FT 단독을 받았다 (군 2). 1-3년 후, PBS 비히클 단독 주사를 받은 131명의 환자는 FT의 교차 주사를 받았다 (군 3). 189명의 환자의 마지막 군은 맹검 FT를 받은 후, 1-3년 후에 FT의 제2 주사를 받았다 (군 4). 기준선 폐쇄성 배뇨 점수로부터 추적 점수까지의 차이를 맹검 위약 치료된 환자에서 계산하고 (n=217), FT 치료를 받은 군 2-4와 비교하였다 (n=607). FT 주사를 받은 모든 대상체에서의 폐쇄성 배뇨 결과의 개선량은 위약 주사 단독 후 대상체에서 발견된 변화보다 유의하게 더 양호하였다. 결과를 표 4에 요약하였다.

<표 4>

*p<0.0001, t 검정 vs 위약 대조군.

표 4에 제시된 바와 같이, 본원에 기재된 조성물로 치료된 환자는 FT를 함유하지 않는 대조군 조성물을 투여한 것과 비교하여, 국제 전립선 증상 점수 (IPSS)에 의해 측정된 평균 폐쇄성 배뇨 증상 (MOVS)에서 105% 초과만큼의 개선을 나타내었다.

상기 실시예로부터의 결과는 LUTS를 갖는 환자에서 증상을 개선하는데 있어서 FT 펩티드의 예상외로 우수한 효과를 예시한다. 실시양태의 취지 또는 범주로부터 벗어나지 않으면서 본 실시양태의 방법 및 조성물에서 다양한 변형 및 변경이 이루어질 수 있음이 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 명백할 것이다.

SEQUENCE LISTING <110> NYMOX CORPORATION AVERBACK, Paul <120> METHOD OF TREATING LOWER URINARY TRACT SYMPTOMS WITH FEXAPOTIDE TRIFLUTATE <130> 063307-0504596 <140> 16/410,650 <141> 2019-05-13 <160> 1 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 1 Ile Asp Gln Gln Val Leu Ser Arg Ile Lys Leu Glu Ile Lys Arg Cys 1 5 10 15 Leu

Claims (12)

1. 하부 요로 증상 (LUTS)을 갖는 포유동물의 증상을 개선시키는 방법으로서,
   (i) LUTS를 갖고 양성 전립선 비대증 (BPH)을 갖지 않는 포유동물을 확인하는 단계; 및 (ii) LUTS를 갖지만 BPH를 갖지 않는 포유동물에게 치료 유효량의 서열식별번호: 1 (Ile-Asp-Gln-Gln-Val-Leu-Ser-Arg-Ile-Lys-Leu-Glu-Ile-Lys-Arg-Cys-Leu)을 투여하는 단계를 포함하고,
   서열식별번호: 1을 함유하지 않는 대조군 조성물을 투여하는 경우와 비교하여 국제 전립선 증상 점수 (IPSS)에 의해 측정된 평균 폐쇄성 배뇨 증상 (MOVS)을 30% 초과만큼 개선시키는, 방법.
2. 제1항에 있어서, 치료 유효량의 제1항에 따른 서열식별번호: 1 및 담체를 투여하는 것을 포함하는 방법.
3. 제1항에 있어서, 서열식별번호: 1이 1회 초과로 투여되는 것인 방법.
4. 제1항에 있어서, 서열식별번호: 1이 경구로, 피하로, 피내로, 비강내로, 정맥내로, 근육내로, 척수강내로, 비강내로, 종양내로, 국소로 및 경피로 이루어진 군으로부터 선택된 방법에 의해 투여되는 것인 방법.
5. 제1항에 있어서, IPSS에 의해 측정된 평균 폐쇄성 배뇨 증상 (MOVS)을 약 30% 내지 약 150%의 범위 내로 개선시키는 방법.
6. 제5항에 있어서, IPSS에 의해 측정된 평균 폐쇄성 배뇨 증상 (MOVS)을 약 35% 내지 약 125%의 범위 내로 개선시키는 방법.
7. 제6항에 있어서, IPSS에 의해 측정된 평균 폐쇄성 배뇨 증상 (MOVS)을 약 45% 내지 약 105%의 범위 내로 개선시키는 방법.
8. 제1항에 있어서, 양성 전립선 비대증 (BPH)을 치료하는데 유용한 것으로 공지된 경구 의약을 받은 환자의 IPSS에 의해 측정된 평균 폐쇄성 배뇨 증상 (MOVS)과 비교하여, MOVS를 300% 초과만큼 개선시키는 방법.
9. 제1항에 있어서, 서열식별번호: 1을 함유하지 않는 대조군 조성물을 투여하는 경우와 비교하여, IPSS에 의해 측정된 평균 자극성 저장 증상 (MISS)을 20% 초과만큼 개선시키는 방법.
10. 제9항에 있어서, IPSS에 의해 측정된 평균 자극성 저장 증상 (MISS)을 약 20% 내지 약 50% 범위 내의 양만큼 개선시키는 방법.
11. 제10항에 있어서, IPSS에 의해 측정된 평균 자극성 저장 증상 (MISS)을 약 25% 내지 약 40% 범위 내의 양만큼 개선시키는 방법.
12. 제11항에 있어서, IPSS에 의해 측정된 평균 자극성 저장 증상 (MISS)을 약 30% 내지 약 35% 범위 내의 양만큼 개선시키는 방법.