KR20210121126A - 골관절염의 징후 또는 증상의 치료 방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 항-신경 성장 인자(NGF) 항체에 의한 골관절염의 징후 또는 증상의 치료에 관한 것이다.

Description

골관절염의 징후 또는 증상의 치료 방법

본 발명은 항-신경 성장 인자(NGF) 항체에 의한 골관절염의 징후 또는 증상의 치료에 관한 것이다.

골관절염(OA)은 통증 및 이동 장애의 주요 원인이다(문헌[McAlindon et al. Osteoarthritis Cartilage. 2014;22(3):363-388]). OA와 관련된 통증 관리에 대한 많은 치료 옵션 및 가이드라인에도 불구하고, 많은 환자는 적절한 통증 제어가 달성되지 않기 때문에 약제에 대한 불만 및 약제를 바꿀 필요성을 알린다(문헌[McAlindon et al 2014, Hochberg et al. Arthritis Care Res (Hoboken). 2012;64(4):465-474]; [Zhang et al. Osteoarthritis Cartilage. 2008;16(2):137-162]). 비-스테로이드성 항염증 약물(NSAID) 및 오피오이드(opioid)는 OA 통증에 대한 표준 약리학 치료이나, 이는 흔히 이상 사례(AE), 예컨대 위장관 및 심혈관 AE, 다발성 장기 부전 및 의존성 또는 중독에 대한 잠재력의 증가된 위험과 관련된다(McAlindon et al; Hochberg et al; Zhang et al). 노인 및/또는 당뇨병 환자가 특히 나머지 인구보다 이들 AE에 취약하다(문헌[Kim et al. BMJ open diabetes research & care. 2015;3(1):e000133]; [Sowers et al. Arch Intern Med. 2005;165(2):161-168]; [Wehling et al. European journal of clinical pharmacology. 2014;70(10):1159-1172]).

주요 통증 조절자의 기능을 표적화하는 새로운 약리학 요법의 개발은 효능 및/또는 안전성이 개선된 새로운 치료 옵션을 제공할 수 있다. 신경 성장 인자(NGF)는 통증 신호 전달 및 병태생리학에서 입증된 역할을 갖는, 뉴트로핀 및 통증의 주요 매개자이다. 타네주맙(tanezumab)은 NGF에 대한 고 특이성 및 친화도를 가져 수용체 TrkA 및 p75에 대한 NGF의 결합을 차단하는 인간화된 항-NGF 단클론 항체이다(문헌[Abdiche et al. Protein Sci. 2008;17(8):1326-1335]; [Hefti et al. Trends Pharmacol Sci. 2006;27(2):85-91]; [Mantyh et al. Anesthesiology. 2011;115(1):189-204]). 만성 통증 질환(OA 및 만성 하요부 통증)을 갖는 환자에서 무작위화된 임상 실험에서, 타네주맙은 유의미하게 통증을 감소시키고 신체 기능 및 OA의 환자의 전반적 평가(PGA; Patient's Global Assessment)를 개선함으로써 임상적으로 의미있는 개선을 제공하였다(문헌[Balnescu et al. Ann Rheum Dis. 2014;73(9):1665-1672]; [Brown et al. J Neurol Sci. 2014;345(1-2):139-147]; [Brown et al. J Pain. 2012;13(8):790-798]; [Brown et al. Arthritis Rheum. 2013;65(7):1795-1803]; [Ekman et al. J Rheumatol. 2014;41(11):2249-2259]; [Evans et al. J Urol. 2011;185(5):1716-1721]; [Gimbel et al. Pain. 2014;155(9):1793-1801]; [Katz et al. Pain. 2011;152(10):2248-2258]; [Kivitz et al. Pain. 2013;154(7):1009-1021]; [Lane et al. N Engl J Med. 2010;363(16):1521-1531]; [Nagashima et al. Osteoarthritis Cartilage. 2011;19(12):1405-1412]; [Schnitzer et al. Ann Rheum Dis. 2015;74(6):1202-1211]; [Schnitzer et al. Osteoarthritis Cartilage. 2011;19(6):639-646]; [Spierings et al. Pain. 2013;154(9):1603-1612]; [Spierings et al. Pain. 2014;155(11):2432-2433]). 후기 개발 연구의 수행 동안, 전체 관절 대체를 필요로 하는 예상치 못한 AE는 US 식품의약청이 (암 통증을 제외한 모든 적응증에 대해) 개발 중인 모든 NGF-억제제 요법에 대한 부분적 임상 중단을 강제하도록 했다. 블라인딩된 판정 위원회는 관절 관련된 AE를 리뷰하고 판정하며, 고 투여량이고 NSAID와 병용되는 결정된 타네주맙 치료가 급속 진행성 OA의 증가와 연관되었는지를 결정하였다(문헌[Hochberg et al. Arthritis Rheumatol. 2016;68(2):382-391]). 이어서, 부분적 임상 중단은 해제되었고, 위험-완화 전략이 항-NGF 항체 시험 설계에 포함되었다.

안전성은 오피오이드 또는 NSAID에 의한 장기 요법에 대한 우려 사항이다. 오피오이드는 졸림, 진정, 메스꺼움, 구토, 현기증, 구갈, 소양증, 평활근 경련, 요정체 및 변비를 포함하는 다양한 통상적 역효과와 관련된다. 이는 CNS의 내부 및 외부 둘 모두에서 다양한 구조물, 예컨대 GI 관(예를 들어 변비), 진정 시스템(예를 들어 메스꺼움 및 현기증) 및 수질(예를 들어 구토)에서 오피오이드 수용체의 존재 및 오피오이드 수용체 신호 전달의 역할 때문이다. 호흡 저하는 만성 오피오이드 사용에 대한 덜 통상적인 AE이나, 이러한 잠재적으로 중대한 사례는 뇌간의 호흡 중추 및/또는 CO₂ 정체를 뇌관으로 신호 전달하는 구조에 위치한 μ-오피오이드 수용체의 활성화를 통해 매개된다. 최종적으로, 종래의 μ-오피오이드 수용체 작용제는 억제성 개재 뉴런으로부터 GABA 방출을 억제함으로써 중간변연계에서 도파민 신호 전달을 활성화하고, 이는 일부 환자에서 행복감을 생성하고 강한 보람있는 상태를 야기할 수 있다. 모니터링하지 않은 오피오이드 사용은 중독의 발달을 초래할 수 있고, 1150만명의 사람들이 US에서 오피오이드를 남용하고 오피오이드 과투여량으로 인한 사망이 지난 십년에 걸쳐 증가하였다고(매년 약 42,000건의 사망) 추정된다.

본원에 개시된 발명은 부적절한 통증 경감 또는 진통제 요법(오피오이드를 포함함)에 대한 과민성의 이력을 갖는 환자에서 골관절염의 징후 또는 증상의 치료와 관련된다.

따라서, 한 양태에서, 본 발명은 환자에서 골관절염(OA)의 징후 또는 증상을 치료하는 방법을 제공하되, 상기 방법은 상기 방법은 상기 환자에게 항-신경 성장 인자(NGF) 항체를 8주마다 2.5 mg의 투여량으로 피하 주사를 통해 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 상기 환자는 부적절한 통증 경감 또는 진통제 요법에 대한 과민성의 이력을 가지며, 상기 항-NGF 항체에 의한 치료는 효과적으로 OA의 징후 또는 증상을 상기 항-NGF 항체에 의한 치료 시작 후 적어도 16주까지 개선한다.

추가적 양태에서, 본 발명은 환자에서 골관절염(OA)의 징후 또는 증상을 치료하는 방법을 제공하되, 상기 방법은 상기 환자에게 항-신경 성장 인자(NGF) 항체를 8주마다 5 mg의 투여량으로 피하 주사를 통해 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 상기 환자는 부적절한 통증 경감 또는 진통제 요법에 대한 과민성의 이력을 가지며, 상기 항-NGF 항체에 의한 치료는 효과적으로 OA의 징후 또는 증상을 상기 항-NGF 항체에 의한 치료 시작 후 적어도 16주까지 개선한다.

일부 실시양태에서, 항-NGF 항체는 타네주맙이다.

일부 실시양태에서, 치료는 효과적으로 OA와 관련된 통증을 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 통증은 만성 OA와 관련된 중등도 내지 중증의 통증이다.

일부 실시양태에서, WOMAC 통증 보조척도, WOMAC 신체 기능 보조척도 및/또는 OA의 환자 전반적 평가(PGA-OA)에 의해 측정시, 치료는 OA 징후 또는 증상을 개선한다.

일부 실시양태에서, 치료는 효과적으로 OA의 징후 또는 증상을 치료 시작 후 적어도 24주까지 또는 적어도 56주까지 개선한다.

일부 실시양태에서, 치료 시작 전 기선 값과 비교하여, 치료는 WOMAC 통증, WOMAC 신체 기능 및/또는 PGA-OA를 개선한다.

일부 실시양태에서, 진통제 요법과 비교하여, 치료는 OA 징후 또는 증상을 개선한다. 일부 실시양태에서, 진통제 요법은 NSAID 및/또는 오피오이드를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 진통제 요법은 오피오이드의 투여를 포함하지 않는다. 일부 실시양태에서, 진통제 요법은 NSAID의 투여를 포함하지 않는다. 일부 실시양태에서, NGF 항체에 의한 치료 시작 전 OA 징후 또는 증상과 비교하여, 치료는 OA 징후 또는 증상을 개선한다.

일부 실시양태에서, 치료는 하기로부터 선택되는 하나 이상의 임상 척도를 추가로 개선한다: a) 치료 제16주 및/또는 제24주에 WOMAC 통증 보조척도의 50% 이상의 감소; b) 기선에서 치료 제2주까지 WOMAC 통증 보조척도의 감소; 또는 c) 기선에서 치료 제1주까지 인덱스 관절의 평균 통증 점수의 감소.

일부 실시양태에서, 환자는 부적절한 통증 경감 또는 진통제 요법(NSAID, 트라마돌(tramadol) 또는 오피오이드를 포함할 수 있음)에 대한 과민성의 이력을 갖는다. 일부 실시양태에서, 환자는 부적절한 통증 경감, 또는 적어도 2개, 적어도 3개 또는 적어도 4개의 상이한 부류의 진통제에 대한 과민성의 이력을 갖는다. 일부 실시양태에서, 환자는 부적절한 통증 경감, 또는 적어도 2개, 적어도 3개 또는 적어도 4개의 진통제에 대한 과민성의 이력을 갖는다. 일부 실시양태에서, 환자는 치료 전에 하나 이상의 진통제, 한 실시양태에서 오피오이드 진통제 복용에 대한 꺼림의 이력이 있다. 일부 실시양태에서, 환자는 사용 금지 사유로 인해 진통제를 복용할 수 없었다. 일부 실시양태에서, 환자는 사용 금지 사유로 인해 트라마돌 또는 오피오이드를 복용할 수 없었다. 일부 실시양태에서, 환자는 오피오이드 중독을 진단받았다. 이러한 집단의 선택 이유는 보다 중증이거나 치료 내성의 통증을 갖는 환자 및 남아있는 치료 옵션이 제한된 환자를 선택함으로써 치료될 환자에 대한 이익-위험 상관관계를 최적화하기 위한 것이다.

일부 실시양태에서, 항-NGF 항체 투여 전에, 환자는 이전에 진통제 요법에 의해 치료받았다.

일부 실시양태에서, 환자는 적어도 1개, 적어도 2개, 적어도 3개, 적어도 4개 또는 적어도 5개의 진통제 요법에 의한 치료의 이력을 갖는다. 진통제는 동일하거나 상이한 진통제일 수 있다.

일부 실시양태에서, 진통제 요법은 환자에 대한 오피오이드 투여를 포함한다. 일부 실시양태에서, 진통제 요법은 환자에 대한 트라마돌 투여를 포함한다. 일부 실시양태에서, 진통제 요법은 환자에 대한 NSAID 투여를 포함한다. 일부 실시양태에서, NSAID는 나프록센, 셀레콕십(celecoxib) 또는 디클로페낙(diclofenac)으로부터 선택된다.

일부 실시양태에서, 치료는 환자에서 오피오이드 중독을 방지한다. 일부 실시양태에서, 항-NGF 항체에 의한 치료는 오피오이드 투여를 피하고 오피오이드 중독을 방지한다.

일부 실시양태에서, 환자는 진통제에 대한 중독의 이력을 갖는다. 일부 실시양태에서, 환자는 오피오이드에 대한 중독의 이력을 갖는다. 일부 실시양태에서, 환자는 트라마돌에 대한 중독의 이력을 갖는다.

일부 실시양태에서, 진통제는 오피오이드, NSAID 및 아세트아미노펜(acetaminophen)으로부터 선택될 수 있다. 일부 실시양태에서, NSAID는 이부프로펜(ibuprofen), 나프록센(naproxen), 나프로신(naprosyn), 디클로페낙, 케토프로펜(ketoprofen), 톨메틴(tolmetin), 슬린닥(slindac), 메페남산(mefenamic acid), 메클로페남산(meclofenamic acid), 디플루니잘(diflunisal), 플루페니잘(flufenisal), 피록심(piroxim), 수독시캄(sudoxicam), 이속시캄(isoxicam); 셀레콕십, 로페콕십(rofecoxib), DUP-697, 플로설리드(flosulide), 멜록시캄(meloxicam), 6-메톡시-2 나프틸아세트산, MK-966, 나부메톤(nabumetone), 니메설리드(nimesulide), NS-398, SC-5766, SC-58215, T-614로부터 선택된 COX-2 억제제; 또는 이들의 조합으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 오피오이드는 모르핀 유사 생물학적 활성을 나타내는 임의의 화합물일 수 있다. 일부 실시양태에서, 오피오이드는 진통제는 트라마돌, 모르핀, 코데인(codeine), 다이하이드로코데인, 다이아세틸모르핀, 하이드로코돈(hydrocodone), 하이드로모르폰(hydromorphone), 레보르파놀(levorphanol), 옥시모르폰(oxymorphone), 알펜타닐(alfentanil), 부프레노르핀(buprenorphine), 부토르파놀(butorphanol), 펜타닐(fentanyl), 수펜타닐(sufentanyl), 메페리딘(meperidine), 메타돈(methadone), 날부핀(nalbuphine), 프로폭시펜(propoxyphene) 및 펜타조신(pentazocine); 또는 이들의 조합으로부터 선택된다.

일부 실시양태에서, 환자는 항-NGF 항체에 의한 치료 동안 NSAID를 투여받지 않는다. 일부 실시양태에서, 환자는 항체의 마지막 투여 후 16주 동안 NSAID를 투여받지 않는다.

일부 실시양태에서, 환자는 중등도 내지 중증 골관절염 통증을 갖는다.

일부 실시양태에서, 환자는 항-NGF 항체에 의한 치료 전에 적어도 2년, 적어도 3년, 적어도 4년, 적어도 5년 또는 적어도 6년 동안 골관절염을 진단받지 않았다.

일부 실시양태에서, OA는 고관절, 무릎, 견관절 또는 손의 OA이다. 일부 실시양태에서, OA는 고관절 또는 무릎의 OA이다.

일부 실시양태에서, 항-NGF 항체는 적어도, 2, 3, 4, 5 또는 6회 이상의 투여량에 대해 8-주 간격으로 투여된다.

일부 실시양태에서, 2.5 mg의 투여량은 1회 이상의 8-주 투여량 후에 5 mg으로 증가된다.

일부 실시양태에서, 환자는 기선으로부터 WOMAC 통증이 30% 미만 감소되는 경우 무 반응(non-response); WOMAC 통증이 30% 이상 내지 50% 미만 감소되는 경우 중간 반응(moderate response); WOMAC 통증이 50% 이상 감소되는 경우 고 반응(substantial response)이다. 일부 실시양태에서, 감소 수준은 치료 동안 2개의 시점 사이에 평가된다.

일부 실시양태에서, 2.5 mg의 투여량에 대해 무 반응인 환는 증가된 후속 투여량을 제공받았다. 일부 실시양태에서, 투여량은 5 mg으로 증가된다.

일부 실시양태에서, 2회 투여량을 제공받은 후에 만족스러운 임상 반응을 갖지 않는 환자는 추가적 투여량을 제공받지 않는다.

일부 실시양태에서, 항-NGF 항체 투여 전에, 환자는 a) 골관절염 관절에서 5 이상의 WOMAC 통증 보조척도 값; b) 골관절염 관절에서 5 이상의 WOMAC 신체 기능 보조척도 값; 및/또는 c) 보통, 나쁨 또는 매우 나쁨의 PGA-OA 값을 갖는다.

일부 실시양태에서, 항-NGF 항체 투여 전에, 환자는 2 이상의 켈그렌-로렌스(Kellgren-Lawrence) x-선 등급을 갖는다. 일부 실시양태에서, 환자는 2, 3 또는 4의 켈그렌-로렌스 등급을 갖는다. 일부 실시양태에서, 환자는 인덱스 관절에서 4의 켈그렌-로렌스 등급을 갖는 중증 방사선 촬영 골관절염을 갖는다.

일부 실시양태에서, 항-NGF 항체 투여 전에, 환자는 NSAID의 안정한 투여량 섭생법을 제공받았다. 일부 실시양태에서, 항-NGF 항체 투여 전에, 환자는 NSAID를 제공받지 않았다. 일부 실시양태에서, 환자는 NSAID의 투여 후에 사전 이상 사례를 가졌다.

일부 실시양태에서, 환자는 항-NGF 항체에 의한 치료 시작 전에 골관절염 관절의 방사선 평가를 받았다. 일부 실시양태에서, 방사선 평가가 관절의 급속 진행성 골관절염을 확인한 경우, 환자는 항-NGF 항체에 의한 치료로부터 제외되었다.

일부 실시양태에서, 방법은 항-NGF 항체에 의한 치료 동안 규칙적인 간격으로 골관절염 관절의 방사선 평가를 수행하는 단계를 추가로 포함한다.

일부 실시양태에서, 중앙 방사선학 리뷰어에 의해 결정시 및 이미징 아틀라스(imaging atlas)에 의해 정의된 바와 같이, 임의의 스크리닝 방사선 사진에서 하기 질환 중 임의의 하나의 방사선 촬영 증거가 존재하는 경우, 항-NGF 항체에 의한 치료 전에 또는 동안에, 환자는 치료로부터 제외될 수 있다: 무릎의 과도한 부정렬, 중증 연골 석회증; 기타 관절병증(예를 들어 류마티스 관절염), 전신 대사성 골 질환(예를 들어 가통풍, 파제트병; 전이성 석회화), 대형 낭종성 병변, 원발성 또는 전이성 종양 병변, 스트레스 또는 외상성 골절.

일부 실시양태에서, 중앙 방사선학 리뷰어에 의해 결정시 및 스크리닝시 이미징 아틀라스에 의해 정의된 바와 같이, 하기 질환 중 임의의 하나의 방사선 촬영 증거가 존재하는 경우, 항-NGF 항체에 의한 치료 전에 또는 동안에, 환자는 치료로부터 제외될 수 있다: 1) 급속 진행성 골관절염, 2) 퇴화성 또는 위축성 골관절염, 3) 연골하 부족 골절, 4) 무릎의 자발적 골괴사(SPONK), 5) 골괴사, 또는 6) 병적 골절.

일부 실시양태에서, 환자는 각각의 투여량 전에 급속 진행성 골관절염의 징후 또는 증상의 발생에 대해 모니터링된다. 일부 실시양태에서, 모니터링은 방사선 평가(예컨대 X-선)를 포함한다.

일부 실시양태에서, 방사선 촬영 평가는 치료 동안 매년 수행된다. 방사선 평가는 고관절 및/또는 무릎의 양쪽 평가일 수 있다. 일부 실시양태에서, 급속 진행성 골관절염의 증상은 새로운 발병, 중증의 지속적 통증 또는 관절 팽창을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 치료는 환자에서 급속 진행성 골관절염이 발생한 경우 중단된다.

일부 실시양태에서, 항-NGF 항체는 서열번호 1에 나타낸 서열을 갖는 가변 중쇄 영역으로부터의 3개의 CDR 및 서열번호 2에 나타낸 서열을 갖는 가변 경쇄 영역으로부터의 3개의 CDR을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-NGF 항체는 서열번호 3에 나타낸 서열을 갖는 HCDR1, 서열번호 4에 나타낸 서열을 갖는 HCDR2, 서열번호 5에 나타낸 서열을 갖는 HCDR3, 서열번호 6에 나타낸 서열을 갖는 LCDR1, 서열번호 7에 나타낸 서열을 갖는 LCDR2 및 서열번호 8에 나타낸 서열을 갖는 LCDR3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-NGF 항체는 서열번호 1에 나타낸 서열을 갖는 가변 중쇄 영역 및 서열번호 2에 나타낸 서열을 갖는 가변 경쇄 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-NGF 항체는 서열번호 9에 나타낸 서열을 갖는 중쇄 및 서열번호 10에 나타낸 서열을 갖는 경쇄를 포함한다. 일부 실시양태에서, 서열번호 9의 중쇄 아미노산 서열의 C-말단 리신(K)은 임의적이다. 따라서, 일부 실시양태에서, 중쇄 아미노산 서열은 C-말단 리신(K)이 없고, 서열번호 11에 나타낸 서열을 갖는다.

일부 실시양태에서, 방법은 효과량의 제2 치료제를 투여하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.

또한, 환자에서 골관절염(OA)의 징후 또는 증상을 치료하는 방법에서 사용하기 위한 항-NGF 항체가 제공되되, 상기 방법은 상기 환자에게 항-신경 성장 인자(NGF) 항체를 8주마다 2.5 mg 또는 5 mg의 투여량으로 피하 주사를 통해 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 상기 환자는 부적절한 통증 경감 또는 진통제 요법에 대한 과민성의 이력을 가지며, 항-NGF 항체에 의한 치료는 효과적으로 OA의 징후 또는 증상을 상기 항-NGF 항체에 의한 치료 시작 후 적어도 16주까지 개선한다.

또한, 환자에서 골관절염(OA)의 징후 또는 증상의 치료를 위한 약제의 제조에서 항-NGF 항체의 용도가 제공되되, 상기 치료는 상기 환자에게 항-신경 성장 인자(NGF) 항체를 8주마다 2.5 mg의 투여량으로 피하 주사를 통해 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 상기 환자는 부적절한 통증 경감 또는 진통제 요법에 대한 과민성의 이력을 가지며, 상기 항-NGF 항체에 의한 치료는 효과적으로 OA의 징후 또는 증상을 상기 항-NGF 항체에 의한 치료 시작 후 적어도 16주까지 개선한다.

또한, 환자에서 골관절염(OA)의 징후 또는 증상을 치료하는 방법에서 사용하기 위한 항-NGF 항체가 제공되되, 상기 방법은 상기 환자에게 항-신경 성장 인자(NGF) 항체를 8주마다 2.5 mg 또는 5 mg의 투여량으로 피하 주사를 통해 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 상기 환자는 부적절한 통증 경감 또는 진통제 요법에 대한 과민성의 이력을 가지며, 상기 치료에서 상기 항-NGF 항체의 사용은 효과적으로 OA의 징후 또는 증상을 상기 항-NGF 항체에 의한 치료 시작 후 적어도 16주까지 개선한다.

또한, 환자에서 골관절염(OA)의 징후 또는 증상의 치료를 위한 약제의 제조에서 항-NGF 항체의 용도가 제공되되, 상기 치료는 상기 환자에게 항-신경 성장 인자(NGF) 항체를 8주마다 2.5 mg의 투여량으로 피하 주사를 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 환자는 부적절한 통증 경감 또는 진통제 요법에 대한 과민성의 이력을 가니며, 상기 치료에서 상기 항-NGF 항체의 용도는 효과적으로 OA의 징후 또는 증상을 상기 항-NGF 항체에 의한 치료 시작 후 적어도 16주까지 개선하는 것이다.

도 1은 실시예 1에 기재된 연구의 연구 개요이다.
도 2는 실시예 1에 기재된 연구에서 기선에서 제16주까지 WOMAC 통증, WOMAC 신체 기능 및 PGA-OA의 변화를 나타낸다.
도 3은 실시예 1에 기재된 연구에서 치료 기간 동안 WOMAC 통증, WOMAC 신체 기능 및 인덱스 관절 점수의 평균 일일 통증의 변화를 나타낸다.
도 4는 실시예 1에 기재된 연구에서 제16주에서 WOMAC 통증 반응자 비율을 나타낸다.
도 5는 실시예 1에 기재된 연구에 대한 제8주의 무 반응자 중 제16주의 WOMAC 통증 반응자 비율을 나타낸다.
도 6 실시예 2에 기재된 연구에서 제24주에서 WOMAC 통증, WOMAC 신체 기능 및 PGA-OA 점수의 기선으로부터의 변화를 나타낸다.
도 7은 제24주까지 WOMAC 통증 보조척도의 기선으로부터의 변화를 나타낸다.
도 8은 제24주까지 WOMAC 신체 기능 보조척도의 기선으로부터의 변화를 나타낸다.
도 9는 제24주까지 OA의 환자 전반적 평가의 기선으로부터의 변화를 나타낸다.
도 10은 실시예 3에 기재된 연구에서 제56주까지 WOMAC 통증 보조척도의 기선으로부터의 변화를 나타낸다.
도 11은 실시예 3에 기재된 연구에서 제56주까지 WOMAC 신체 기능 보조척도의 기선으로부터의 변화를 나타낸다.
도 12는 실시예 3에 기재된 연구에서 제56주까지 OA의 환자 전반적 평가의 기선으로부터의 변화를 나타낸다.

본원에 개시된 발명은 부적절한 통증 경감 또는 진통제 요법에 대한 과민성의 이력을 갖는 환자에서 골관절염의 징후 또는 증상의 치료에 관한 것이다.

따라서, 한 양태에서, 본 발명은 환자에서 골관절염(OA)의 징후 또는 증상을 치료하는 방법을 제공하되, 상기 방법은 상기 환자에게 항-신경 성장 인자(NGF) 항체를 8주마다 2.5 mg의 투여량으로 피하 주사를 통해 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 상기 환자는 부적절한 통증 경감 또는 진통제 요법에 대한 과민성의 이력을 가지며, 상기 항-NGF 항체에 의한 치료는 효과적으로 OA의 징후 또는 증상을 상기 항-NGF 항체에 의한 치료 시작 후 적어도 16주까지 개선한다.

추가적 양태에서, 본 발명은 환자에서 골관절염(OA)의 징후 또는 증상을 치료하는 방법을 제공하되, 상기 방법은 상기 환자에게 항-신경 성장 인자(NGF) 항체를 8주마다 5 mg의 투여량으로 피하 주사를 통해 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 상기 환자는 부적절한 통증 경감 또는 진통제 요법에 대한 과민성의 이력을 가지며, 항-NGF 항체에 의한 치료는 효과적으로 OA의 징후 또는 증상을 상기 항-NGF 항체에 의한 치료 시작 후 적어도 16주까지 개선한다.

일반적 기술

본 발명의 실행은, 달리 지시되지 않는 한, 당분야의 기술 내에 속하는 분자 생물학(재조합 기술을 포함함), 미생물학, 세포 생물학, 생화학 및 면역학의 통상적 기술을 사용한다. 이러한 기술은 문헌, 예컨대 문헌[Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition (Sambrook et al., 1989) Cold Spring Harbor Press; Oligonucleotide Synthesis (M.J. Gait, ed., 1984); Methods in Molecular Biology, Humana Press; Cell Biology: A Laboratory Notebook (J.E. Cellis, ed., 1998) Academic Press; Animal Cell Culture (R.I. Freshney, ed., 1987); Introduction to Cell and Tissue Culture (J.P. Mather and P.E. Roberts, 1998) Plenum Press; Cell and Tissue Culture: Laboratory Procedures (A. Doyle, J.B. Griffiths, and D.G. Newell, eds., 1993-1998) J. Wiley and Sons; Methods in Enzymology (Academic Press, Inc.); Handbook of Experimental Immunology (D.M. Weir and C.C. Blackwell, eds.); Gene Transfer Vectors for Mammalian Cells (J.M. Miller and M.P. Calos, eds., 1987); Current Protocols in Molecular Biology (F.M. Ausubel et al., eds., 1987); PCR: The Polymerase Chain Reaction, (Mullis et al., eds., 1994); Current Protocols in Immunology (J.E. Coligan et al., eds., 1991); Short Protocols in Molecular Biology (Wiley and Sons, 1999); Immunobiology (C.A. Janeway and P. Travers, 1997); Antibodies (P. Finch, 1997); Antibodies: a practical approach (D. Catty., ed., IRL Press, 1988-1989); Monoclonal antibodies: a practical approach (P. Shepherd and C. Dean, eds., Oxford University Press, 2000); Using antibodies: a laboratory manual (E. Harlow and D. Lane (Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1999); The Antibodies (M. Zanetti and J.D. Capra, eds., Harwood Academic Publishers, 1995)]에 충분히 설명되어 있다.

정의

하기 용어는, 달리 지시되지 않는 한, 하기 의미를 갖는 것으로 이해되어야 한다:

"항체"는 면역 글로불린 분자의 가변 영역에 위치한 적어도 하나의 항원 인식 부위를 통해 표적, 예컨대 탄수화물, 폴리뉴클레오티드, 지질, 폴리펩티드 등에 특이적으로 결합할 수 있는 면역 글로불린 분자이다. 본원에 사용된 바와 같이, 상기 용어는 다클론 또는 단클론 항체뿐만 아니라, 달리 명시되지 않는 한, 이의 임의의 항원 결합부(특이적 결합에 대해 온전한 항체와 경쟁함), 항원 결합부를 포함하는 융합 단백질, 및 항원 인식 부위를 포함하는 임의의 다른 변형된 배열의 면역 글로불린 분자를 또한 포함한다. 항원 결합부는 예를 들어 Fab, Fab', F(ab')₂, Fd, Fv, 도메인 항체(dAb, 예를 들어 상어 및 낙타 항체), 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 단편, 단쇄 가변 단편 항체(scFv), 맥시바디, 미니바디, 인트라바디, 다이아바디, 트라이아바디, 테트라바디, v-NAR 및 bis-scFv, 및 폴리펩티드에 특이적 항원 결합을 부여하는 데 충분한 면역 글로불린의 적어도 일부를 함유하는 폴리펩티드를 포함한다. 항체는 임의의 부류의 항체, 예컨대 IgG, IgA 또는 IgM(또는 이의 하위부류)을 포함하고, 항체는 특정 부류일 필요가 없다. 중쇄의 불변 영역의 항체 아미노산 서열에 따라, 면역 글로불린은 다양한 부류로 배정될 수 있다. 면역 글로불린의 5개의 주요 클래스가 존재한다: IgA, IgD, IgE, IgG 및 IgM. 이들은 하위클래스(이소타입), 예를 들어 IgG₁, IgG₂, IgG₃, IgG₄, IgA₁ 및 IgA₂로 추가로 분류될 수 있다. 다양한 부류의 면역 글로불린에 해당하는 중쇄 불변 영역은 각각 알파, 델타, 엡실론, 감마 및 뮤로 지칭된다. 다양한 부류의 면역 글로불린의 서브유닛 구조 및 3차원 배열은 주지되어 있다.

항체의 "가변 영역"은 단독으로 또는 조합된 항체 경쇄의 가변 영역 또는 항체 중쇄의 가변 영역을 지칭한다. 당분야에 주지된 바와 같이, 중쇄 및 경쇄의 가변 영역 각각은 초가변 영역으로도 공지된 3개의 상보성 결정 영역(CDR)에 연결된 4개의 프레임워크 영역(FR)으로 이루어지고, 항체의 항원 결합 부위의 형성에 기여한다. 해당 가변 영역의 변이체가 특히 CDR 영역의 외부에서(즉 프레임워크 영역에서) 아미노산 잔기의 치환에 의해 목적되는 경우, 해당 가변 영역과 동일한 표준이되는 부류의 CDR1 및 CDR2 서열을 함유하는 다른 항체의 가변 영역과 비교함으로써 적절한 아미노산 치환, 바람직하게는 보존적 아미노산 치환을 확인할 수 있다 (문헌[Chothia and Lesk, J Mol Biol 196(4): 901-917, 1987]).

특정 실시양태에서, CDR의 최종적 묘사 및 항체의 결합 부위를 포함하는 잔기의 식별은 항체의 구조를 해석하고/하거나 항체-리간드 복합체의 구조를 해석함으로써 달성된다. 특정 실시양태에서, 이는 당업자에게 공지된 임의의 다양한 기술, 예컨대 X-선 결정학에 의해 달성될 수 있다. 특정 실시양태에서, 다양한 분석 방법이 사용되어 CDR 영역을 확인하거나 어림잡을 수 있다. 특정 실시양태에서, 다양한 분석 방법이 사용되어 CDR 영역을 확인하거나 어림잡을 수 있다. 이러한 방법의 예는 비제한적으로 카바트(Kabat) 정의, 코티아(Chothia) 정의, AbM 정의, 접촉부 정의 및 배좌 정의를 포함한다.

카바트 정의는 항체의 잔기를 넘버링하기 위한 표준이고, 전형적으로 CDR 영역을 확인하는 데 사용된다. 예를 들어, 문헌[Johnson & Wu, 2000, Nucleic Acids Res., 28: 214-8]을 참조한다. 코티아 정의는 카바트 정의와 유사하나, 코티아 정의는 특정 구조적 루프 영역의 위치를 고려한다. 예를 들어, 문헌[Chothia et al., 1986, J. Mol. Biol., 196: 901-17]; [Chothia et al., 1989, Nature, 342: 877-83]을 참조한다. AbM 정의는 항체 구조를 모델링하는 Oxford Molecular Group에서 생산한 컴퓨터 프로그램의 통합 도구를 사용한다. 예를 들어, 문헌[Martin et al., 1989, Proc Natl Acad Sci (USA), 86:9268-9272; "AbM^TM, A Computer Program for Modeling Variable Regions of Antibodies," Oxford, UK; Oxford Molecular, Ltd]을 참조한다. AbM 정의는 지식 데이터베이스 및 압이니시오(ab initio) 방법, 예컨대 문헌[Samudrala et al., 1999, "Ab Initio Protein Structure Prediction Using a Combined Hierarchical Approach," in PROTEINS, Structure, Function and Genetics Suppl., 3:194-198]에 기재된 것의 조합을 사용하여 일차 서열로부터 항체의 삼차 구조를 모델링한다. 접촉부 정의는 이용가능한 복합 결정 구조의 분석을 기반으로 한다. 예를 들어, 문헌[MacCallum et al., 1996, J. Mol. Biol., 5:732-45]을 참조한다. CDR의 "배좌 정의"로 본원에 지칭되는 또 다른 접근법에서, CDR의 위치는 항원 결합에 대한 엔탈피 기여를 하는 잔기로서 확인될 수 있다. 예를 들어, 문헌[Makabe et al., 2008, Journal of Biological Chemistry, 283:1156-1166]을 참조한다. 또 다른 CDR 경계 정의는 상기 접근법 중 하나를 엄격히 따르지는 않으나, 특정 잔기 또는 잔기의 군이 항원 결합에 유의미하게 영향을 미치지 않는다는 예측 또는 실험적 발견을 고려하여 짧아지거나 길어질 수 있으나, 카바트 CDR의 적어도 일부와 중첩된다. 본원에 사용된 CDR은 당분야에 공지된 임의의 접근법(이들 접근법의 조합을 포함함)에 의해 정의된 CDR을 지칭한다. 본원에 사용된 방법은 이들 접근법 중 임의의 하나에 따라 정의된 CDR을 사용할 수 있다. 하나 초과의 CDR을 함유하는 임의의 제시된 실시양태의 경우, CDR은 카바트, 코티아, 연장, AbM, 접촉부 및/또는 배좌 정의 중 임의의 것에 따라 정의될 수 있다.

당분야에 공지된 바와 같이, 항체의 "불변 영역"은 단독으로 또는 조합으로 항체 경쇄의 불변 영역 또는 항체 중쇄의 불변 영역을 지칭한다.

본원에 사용된 "단클론 항체"는 실질적으로 균질한 항체의 집단으로부터 수득한 항체를 지칭하고, 즉 집단을 포함하는 개별적 항체가 부수적인 양으로 존재할 수 있는 가능한 자연 발생 돌연변이를 제외하고 동일하다. 단클론 항체는 단일 항원성 부위에 대해 지향하도록 고도로 특이적이다. 또한, 다양한 결정기(에피토프)에 대해 지향적인 다양한 항체를 포함하는 다클론 항체 제제와 비교하여, 단클론 항체 각각은 항원 상의 단일 결정기에 대해 지향적이다. 수식어 "단클론"은 실질적으로 균질한 항체 집단으로부터 수득한 항체의 특성을 나타내고, 임의의 특정 방법에 의해 항체 생산을 요구하는 것으로 해석되어서는 안 된다. 예를 들어, 본 발명에 따라 사용되는 단클론 항체는 처음 문헌[Kohler and Milstein, 1975, Nature 256:495]에 기재된 바와 같이 하이브리도마에 의해 생산될 수 있거나, 재조합 DNA 방법, 예컨대 US 4,816,567에 기재된 것에 의해 생산될 수 있다. 또한, 단클론 항체는 예를 들어 문헌[McCafferty et al., 1990, Nature 348:552-554]에 기재된 기술을 사용하여 생산된 파지 라이브러리로부터 단리될 수 있다.

본원에 사용된 "인간화된" 항체는 비-인간 면역 글로불린으로부터 유래된 최소 서열을 함유하는 키메라 면역 글로불린, 면역 글로불린 쇄 또는 이의 단편(예컨대 Fv, Fab, Fab', F(ab')₂ 또는 항체의 기타 항원-결합 하위서열)인 비-인간(예를 들어 뮤린) 항체의 형태를 지칭한다. 바람직하게는, 인간화된 항체는 수용자의 CDR의 잔기가 목적하는 특이성, 친화도 및 용량을 갖는 비-인간 종(공여자 항체), 예컨대 마우스, 래트 또는 래빗의 CDR의 잔기에 의해 대체된 인간 면역 글로불린(수용자 항체)이다. 인간화된 항체는 수용자 항체 또는 외래 CDR 또는 프레임워크 서열 모두에서 발견되지 않는 잔기를 포함할 수 있으나, 항체 기능을 추가로 개선하고 최적화시키기 위해 포함된다.

일부 경우에, 인간 면역 글로불린의 Fv 프레임워크 영역(FR) 잔기는 상응하는 비-인간 잔기에 의해 대체된다. 또한, 인간화된 항체는 수용자 항체 또는 외래 CDR 또는 프레임워크 서열 모두에서 발견되지 않는 잔기를 포함할 수 있으나, 항체 성능을 추가로 개선하고 최적화시키기 위해 포함된다. 일반적으로, 인간화된 항체는 실질적으로 모든 적어도 하나, 전형적으로 2개의 가변 도메인을 포함할 것이며, 여기서 모든 또는 실질적으로 모든 CDR 영역은 비-인간 면역 글로불린의 것에 상응하고, 모든 또는 실질적으로 모든 FR 영역은 인간 면역 글로불린 컨센서스 서열의 것이다. 또한, 인간화된 항체는 전형적으로 인간 면역 글로불린의 것인 면역 글로불린 불변 영역 또는 도메인(Fc) 중 적어도 일부를 포함할 것이다. 본 발명의 일부 양태에서, 항체는 WO 99/58572에 기재된 바와 같이 변형된 Fc 영역을 갖는다. 인간화된 항체의 다른 형태는 원래 항체에 대해 변경될 수 있고, 원래 항체의 하나 이상의 CDR로부터 유래된 하나 이상의 CDR로 지칭될 수 있는, 하나 이상의 CDR(CDR L1, CDR L2, CDR L3, CDR H1, CDR H2 또는 CDR H3)을 갖는다.

인간화는 설치류 또는 돌연변이 설치류 CDR 또는 CDR 서열을 상응하는 인간 항체의 서열에 대해 치환함으로써 Winter 및 동료의 방법에 따라 본질적으로 수행될 수 있다(문헌[Jones et al. Nature 321:522-525 (1986)]; [Riechmann et al. Nature 332:323-327 (1988)]; [Verhoeyen et al. Science 239:1534-1536 (1988)]). 또한, US 5,225,539; 5,585,089; 5,693,761; 5,693,762; 5,859,205를 참조하고; 이들은 그 전문이 본원에 참고로 포함된다. 일부 경우에, 인간 면역 글로불린의 하나 이상의 가변 영역의 프레임워크 영역 내의 잔기는 상응하는 비-인간 잔기로 대체된다(예를 들어 US 5,585,089; 5,693,761; 5,693,762; 및 6,180,370 참조). 또한, 인간화된 항체는 수용자 항체 또는 공여자 항체에서 발견되지 않는 잔기를 포함할 수 있다. 이들 변형은 (예를 들어 목적하는 친화도를 수득하기 위해) 항체 성능을 추가로 개선하도록 한다. 일반적으로, 인간화된 항체는 실질적으로 모든 적어도 하나, 전형적으로 2개의 가변 도메인을 포함할 것이고, 여기서 모든 또는 실질적으로 모든 초가변 영역은 비-인간 면역 글로불린에 상응하고, 모든 또는 실질적으로 모든 프레임워크 영역은 인간 면역 글로불린 서열의 것이다. 또한, 인간화된 항체는 임의적으로 전형적으로 인간 면역 글로불린의 것인 면역 글로불린 불변 영역(Fc)의 적어도 일부를 포함할 것이다. 추가 세부사항을 위해, 문헌[Jones et al. Nature 321:522-525 (1986)]; [Riechmann et al. Nature 332:323-327(1988)]; 및 [Presta Curr. Op. Struct. Biol. 2:593-596 (1992)]을 참조하고, 이들은 그 전문이 본원에 참고로 포함된다. 따라서, 이러한 "인간화된" 항체는 온전한 인간 가변 도메인보다 실질적으로 적은 것이 비-인간 종의 상응하는 서열에 의해 치환된 항체를 포함할 수 있다. 실제는, 인간화된 항체는 전형적으로 일부 CDR 잔기 및 아마도 일부 프레임워크 잔기가 설치류 항체의 유사 부위로부터의 잔기에 의해 치환된 인간 항체이다. 예를 들어, US 5,225,539; 5,585,089; 5,693,761; 5,693,762; 5,859,205를 참조한다. 또한, US 6,180,370 및 WO 01/27160을 참조하고, 여기서 인간화된 항체, 및 미리 결정된 항원에 대해 개선된 친화도를 갖는 인간화된 항체의 생산 기술이 개시된다.

"인간 항체"는, 인간에 의해 생산된 항체의 것에 상응하고/하거나 본원에 개시된 바와 같이 인간 항체의 임의의 생산 기술을 사용하여 생산된 아미노산 서열을 갖는 것을 지칭한다. 인간 항체의 이러한 정의는 비-인간 항원 결합 잔기를 포함하는 인간화된 항체를 구체적으로 배제한다.

용어 "키메라 항체"는, 가변 영역 서열이 하나의 종으로부터 유래되고 불변 영역 서열이 또 다른 종으로부터 유래된 항체, 예컨대 가변 영역 서열이 마우스 항체로부터 유래되고 불변 영역 서열이 인간 항체로부터 유래된 항체를 지칭하는 것으로 의도된다.

항체 "타네주맙"은 인간 신경 성장 인자(NGF)에 대해 지향적인 인간화된 면역 글로불린 G 유형 2(IgG2) 단클론 항체이다. 타네주맙은 인간 NGF에 고 친화도 및 특이성을 가지고 인간 NGF에 결합하고 세포 배양 모델에서 NGF의 활성을 효과적으로 차단한다. 타네주맙 및/또는 이의 뮤린 전구체는 관절염, 암 통증 및 수술 후 통증을 포함하는 병리학적 통증의 동물 모델에서 효과적인 진통제인 것으로 나타났다. 타네주맙은 각각 서열번호 1 및 2의 가변 중쇄 영역 및 가변 경쇄 영역에 대한 서열을 갖는다. 중쇄 및 경쇄 서열은 서열번호 9 및 10, 또는 서열번호 11 및 10에 제공된다. 서열번호 9의 중쇄 아미노산 서열의 C-말단 리신(K)은 임의적이고, 처리되어 C-말단 리신(K)이 없고 서열번호 11에 나타낸 서열을 갖는 중쇄 아미노산 서열을 초래할 수 있다. 타네주맙의 서열은 하기 표 1에 제공된다. 타네주맙은 참고로 본원에 포함된 WO2004/058184에서 항체 E3으로서 기재되어 있다.

당분야에 공지된 바와 같이, 본원에서 상호교환적으로 사용되는 "폴리뉴클레오티드" 또는 "핵산"은 임의의 길이의 뉴클레오티드의 쇄를 지칭하고, DNA 및 RNA를 포함한다. 뉴클레오티드는 데옥시리보뉴클레오티드, 리보뉴클레오티드, 변형된 뉴클레오티드 또는 염기 및/또는 이의 유사체, 또는 DNA 또는 RNA 폴리머라제에 의해 쇄 내로 혼입될 수 있는 임의의 물질일 수 있다. 폴리뉴클레오티드는 변형된 뉴클레오티드, 예컨대 메틸화된 뉴클레오티드 및 이의 유사체를 포함할 수 있다. 존재하는 경우, 뉴클레오티드 구조에 대한 변형은 쇄의 조립 전 또는 후에 전달될 수 있다. 뉴클레오티드의 서열에 비-뉴클레오티드 성분이 개재될 수 있다. 폴리뉴클레오티드는 예컨대 라벨링 성분과의 접합에 의해 중합 후에 추가로 변형될 수 있다. 다른 유형의 변형은 예를 들어 "caps", 유사체에 의한 하나 이상의 자연 발생 뉴클레오티드의 치환, 뉴클레오티드간 변형, 예컨대 펜턴트 모이어티, 예컨대 단백질(예를 들어 뉴클레아제, 독소, 항체, 신호 펩티드, 폴리-L-리신 등)을 함유하는 하전되지 않은 연결기(예를 들어 메틸 포스포네이트, 포스포트라이에스터, 포스포아미데이트, 카바메이트 등)에 의한 및 하전된 연결기(예를 들어 포스포로티오에이트, 포스포로다이티오에이트 등)에 의한 것, 킬레이터(예를 들어 금속, 방사성 금속, 붕소, 산화성 금속 등)를 함유하거나 알킬레이터를 함유하는 삽입제(예를 들어 아크리딘, 소랄렌 등)에 의한 것, 변형된 연결기(예를 들어 알파 아노머 핵산 등)에 의한 것, 및 폴리뉴클레오티드의 변형되지 않은 형태를 포함할 수 있다. 또한, 당에 통상적으로 존재하는 임의의 하이드록시 기는 예를 들어 포스포네이트 기, 포스페이트 기에 의해 대체될 수 있고 표준 보호기에 의해 보호될 수 있고 활성화되어 추가적 뉴클레오티드에 대한 추가적 연결기를 제조할 수 있거나, 고체 지지체 상에 접합될 수 있다. 5' 및 3' 말단 OH는 포스포릴화될 수 있거나 1 내지 20개의 탄소 원자의 아민 또는 유기 캡핑기 모이어티에 의해 치환될 수 있다. 또한, 다른 하이드록시는 표준 보호기로 유도체화될 수 있다. 또한, 폴리뉴클레오티드는 예를 들어 2'-O-메틸-, 2'-O-알릴, 2'-플루오로- 또는 2'-아지도-리보스, 탄소환형 당 유사체, 알파- 또는 베타-아노머 당, 에피머 당, 예컨대 아라비노스, 자일로스 또는 릭소스, 피라노스 당, 푸라노스 당, 세도헵툴로스, 비환형 유사체 및 무염기 뉴클레오시드 유사체, 예컨대 메틸 리보시드를 포함하는 당분야에 일반적으로 공지된 리보스 또는 데옥시리보스 당의 유사 형태를 함유할 수 있다. 하나 이상의 포스포다이에스터 연결기는 대안적 연결기에 의해 대체될 수 있다. 이들 대안적 연결기는 비제한적으로 포스페이트가 P(O)S(티오에이트), P(S)S(다이티오에이트), (O)NR₂(아미데이트), P(O)R, P(O)OR', CO 또는 CH₂(폼아세탈)에 의해 대체된 실시양태를 포함하되, 여기서 각각의 R 또는 R'은 독립적으로 H, 에터(-O-) 연결기를 임의적으로 함유하는 치환되거나 치환되지 않은 알킬(1 내지 20개의 C), 아릴, 알켄일, 사이클로알킬, 사이클로알켄일 또는 아랄딜이다. 폴리뉴클레오티드의 모든 연결기가 동일할 필요는 없다. 전술된 설명은 RNA 및 DNA를 포함하는, 본원에 언급된 모든 폴리뉴클레오티드에 적용된다.

에피토프에 "우선적으로 결합"하거나 "특이적으로 결합"하는 항체(본원에서 상호교환적으로 사용됨)는 당분야에서 이해되는 용어이고, 이러한 특이적 또는 우선적 결합을 결정하는 방법이 또한 당분야에 주지되어 있다. 분자가 대안적 세포 또는 기질과 반응하거나 결합하는 것보다 빈번히 신속하게 긴 기간 동안 및/또는 큰 친화도를 가지고 분자가 특정 세포 또는 기질과 반응하거나 결합하는 경우 분자는 "특이적 결합" 또는 "우선적 결합"을 나타낸다고 한다. 항체가 다른 기질에 결합하는 것보다 큰 친화도, 결합력, 용이성 및/또는 긴 기간으로 결합하는 경우 항체는 표적에 "특이적으로 결합"하거나 "우선적으로 결합"한다. 예를 들어, 표적(예를 들어 PD-1) 에피토프에 특이적으로 또는 우선적으로 결합하는 항체는 다른 표적 에피토프 또는 비-표적 에피토프에 결합하는 것보다 큰 친화도, 결합력, 용이성 및/또는 긴 기간으로 이러한 에피토프에 결합하는 항체이다. 또한, 예를 들어 제1 표적에 특이적으로 또는 우선적으로 결합하는 항체(또는 모이어티 또는 에피토프)는 제2 표적에 특이적으로 또는 우선적으로 결합하지 않거나 결합할 수 있음이 이러한 정의를 읽음으로써 이해된다. 이와 같이, "특이적 결합" 또는 "우선적 결합"은 배타적 결합을 (포함할 수 있으나) 반드시 필요로 하는 것은 아니다. 반드시 그런 것은 아니나 일반적으로, 결합의 언급은 우선적 결합을 의미한다.

본원에 사용된 "실질적으로 순수한"은 적어도 50% 순수한(즉 오염물이 없는), 보다 바람직하게는 적어도 90% 순수한, 보다 바람직하게는 적어도 95% 순수한, 보다 더 바람직하게는 적어도 98% 순수한, 가장 바람직하게는 적어도 99% 순수한 물질을 지칭한다.

"숙주 세포"는 폴리뉴클레오티드 삽입물의 혼입을 위한 벡터에 대한 수용자일 수 있거나 수용자인 개별적 세포 또는 세포 배양물을 포함한다. 숙주 세포는 단일 숙주 세포의 자손을 포함하고, 자손은 자연적, 우연적 또는 의도적 돌연변이로 인해 원래 모 세포와 (형태학에 있어서 또는 게놈 DNA 상보성에 있어서) 완전히 동일할 필요는 없다. 숙주 세포는 본 발명의 폴리뉴클레오티드에 의해 생체내 형질감염된 세포를 포함한다.

당분야에 공지된 바와 같이, 용어 "Fc 영역"은 면역 글로불린 중쇄의 C-말단 영역을 한정하는 데 사용된다. "Fc 영역"은 천연 서열 Fc 영역 또는 변이체 Fc 영역일 수 있다. 면역 글로불린 중쇄의 Fc 영역의 경계는 변할 수 있지만, 인간 IgG 중쇄 Fc 영역은 일반적으로 위치 Cys226 또는 Pro230의 아미노산 잔기로부터 이의 카복시 말단으로 이어지는 것으로 정의된다. Fc 영역의 잔기의 넘버링은 카바트에서와 같이 EU 인덱스의 것이다. 문헌[Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md., 1991]. 면역 글로불린의 Fc 영역은 일반적으로 2개의 불변 도메인, CH2 및 CH3을 포함한다. 당분야에 공지된 바와 같이, Fc 영역은 이량체 또는 단량체 형태로 존재할 수 있다.

당분야에 사용된 바와 같이, "Fc 수용체" 및 "FcR"은 항체의 Fc 영역에 결합하는 수용체를 설명한다. 바람직한 FcR은 천연 서열 인간 FcR이다. 또한, 바람직한 FcR은 IgG 항체(감마 수용체)에 결합하는 것이고, FcγRI, FcγRII 및 FcγRIII 하위 클래스의 수용체(이들 수용체의 대립형질 변이체 및 선택적으로 스플라이싱된 형태를 포함함)를 포함한다. FcγRII 수용체는 FcγRIIA(활성화 수용체) 및 FcγRIIB(억제 수용체)를 포함하고, 이는 이의 세포질 도메인에서 주로 상이한 유사한 아미노산 서열을 갖는다. FcR은 문헌[Ravetch and Kinet, 1991, Ann. Rev. Immunol., 9:457-92]; [Capel et al., 1994, Immunomethods, 4:25-34]; 및 [de Haas et al., 1995, J. Lab. Clin. Med., 126:330-41]에 리뷰되어 있다. 또한, "FcR"은 신생아 수용체인 FcRn을 포함하고, 이는 모 IgG를 태아로 전달하는 것을 담당한다(문헌[Guyer et al., 1976, J. Immunol., 117:587]; 및 [Kim et al., 1994, J. Immunol., 24:249]).

항체와 관련하여 본원에 사용된 용어 "경쟁하다"는 제1 항체 또는 이의 항원-결합부가 제2 항체 또는 이의 항원-결합부의 결합과 충분히 유사한 방식으로 에피토프에 결합하되 제2 항체의 부재 하에 제1 항체의 결합과 비교하여 제1 항체와 이의 동족 에피토프의 결합의 결과가 제2 항체의 존재 하에 감지가능하게 감소됨을 의미한다. 제2 항체와 이의 에피토프의 결합이 또한 제1 항체의 존재 하에 감지가능하게 감소되는 대안이 가능할 수 있으나, 반드시 그런 것은 아니다. 즉, 제1 항체는 제2 항체의 부재 하에 제2 항체와 이의 에피토프의 결합을 억제하여 제1 항체와 이의 각각의 에피토프의 결합을 억제할 수 있다. 그러나, 동일하든 크든 작든, 항체 각각이 감지가능하게 나머지 항체와 이의 동족 에피토프 또는 리간드의 결합을 억제하는 경우, 항체는 이들의 각각의 에피토프의 결합에 대해 서로 "교차-경쟁"한다고 한다. 경쟁 및 교차-경쟁 항체 모두가 본 발명에 포괄된다. 이러한 경쟁 또는 교차-경쟁이 발생하는 메커니즘에 관계 없이(예를 들어 입체 장애, 형태 변화 또는 공동 에피토프 또는 이의 일부에 대한 결합), 숙련가는 본원에 제공된 교시를 기반으로 이러한 경쟁 및/또는 교차-경쟁 항체가 포함되고 본원에 개시된 방법에 유용할 수 있음을 알 수 있다.

"기능적 Fc 영역"은 천연 서열 Fc 영역의 하나 이상의 효과기 기능을 갖는다. 예시적 "효과기 기능"은 C1q 결합; 보체 의존성 세포독성; Fc 수용체 결합; 항체-의존적 세포 매개된 세포독성; 식균 작용; 세포 표면 수용체(예를 들어 B 세포 수용체)의 하향 조절 등을 포함한다. 이러한 효과기 기능은 일반적으로 Fc 영역이 결합 도메인(예를 들어 항체 가변 도메인)과 결합하는 것을 요구하고, 이러한 항체 효과기 기능을 평하기 위해 당분야에 공지된 다양한 분석을 사용하여 평가될 수 있다.

"천연 서열 Fc 영역"은 자연에서 발견되는 Fc 영역의 아미노산 서열과 동일한 아미노산 서열을 포함한다. "변이체 Fc 영역"은 적어도 하나의 아미노산 변형에 의해 천연 서열 Fc 영역과 상이한 아미노산 서열을 포함하나, 천연 서열 Fc 영역의 적어도 하나의 효과기 기능을 보유한다. 바람직하게는, 변이체 Fc 영역은 천연 서열 Fc 영역 또는 모 폴리펩티드의 Fc 영역과 비교하여 천연 서열 Fc 영역 또는 모 폴리펩티드의 Fc 영역에서 적어도 하나의 아미노산 치환, 예를 들어 약 1 내지 약 10개의 아미노산 치환, 바람직하게는 약 1 내지 약 5개의 아미노산 치환을 갖는다. 본원에서 변이체 Fc 영역은 바람직하게는 천연 서열 Fc 영역 및/또는 모 폴리펩티드의 Fc 영역에 대해 적어도 약 80% 서열 동일성, 가장 바람직하게는 적어도 약 90% 서열 동일성, 보다 바람직하게는 적어도 약 95%, 적어도 약 96%, 적어도 약 97%, 적어도 약 98%, 적어도 약 99% 서열 동일성을 가질 것이다.

본원에 사용된 "치료"는 유익하거나 바람직한 임상 결과를 수득하기 위한 접근법이다. 본 발명의 목적을 위해, 유익하거나 바람직한 임상 결과는 예를 들어 항-NGF 항체의 투여 전과 비교하여 골관절염의 징후 또는 증상의 감소 또는 호전을 포함한다.

"개선함"은 본원에 기재된 항-NGF 항체를 투여하지 않는 것과 비교하여 골관절염의 하나 이상의 징후 또는 증상의 경감 또는 호전을 의미한다. 또한, "개선함"은 증상의 지속 기간의 단축 또는 축소를 포함한다.

약물, 화합물 또는 약학 조성물의 본원에 사용된 "효과적 투여량" 또는 "효과량"은 유익하거나 바람직한 결과를 달성하는 데 충분한 양이다. 보다 구체적 양태에서, 효과량은 골관절염의 징후 또는 증상을 예방하거나 완화시키거나 개선하고/하거나 치료 중인 개체의 생존을 연장시킨다. 예방적 사용의 경우, 유익하거나 바람직한 결과는 질병의 발병 동안 나타나는 질병의 생화학, 조직학 및/또는 행동 증상, 이의 합병증 및 중간 병리학적 표현형을 포함하는 질병의 위험의 제거 또는 감소, 중증도의 경감 또는 발단의 지연을 포함한다. 치료적 사용의 경우, 유익하거나 바람직한 결과는 임상 결과, 예컨대 골관절염, 예컨대 고관절, 무릎, 견관절 또는 손의 골관절염의 하나 이상의 징후 또는 증상의 감소, 질병을 치료하는 데 필요한 다른 약제의 투여량의 감소, 또 다른 약제의 효과의 증진 및/또는 환자에서 질병의 진행 지연을 포함한다. 효과적 투여량은 1회 이상의 투여량으로 투여된다. 본 발명의 목적을 위해, 약물, 화합물 또는 약학 조성물의 효과적 투여량은 직접적으로 또는 간접적으로 예방적 또는 치료적 치료를 달성하는 데 충분한 양이다. 임상 맥락에서 이해되는 바와 같이, 약물, 화합물 또는 약학 조성물의 효과적 투여량은 또 다른 약물, 화합물 또는 약학 조성물과 함께 달성되지 않거나 달성될 수 있다. 따라서, "효과적 투여량"은 하나 이상의 치료제 투여의 맥락에서 고려될 수 있고, 단일 제제는, 하나 이상의 다른 제제와 함께 바람직한 결과가 달성되거나 달성될 수 있는 경우, 효과량으로 제공된 것으로 간주될 수 있다.

용어 "부적절한 통증 경감 또는 진통제 요법에 대한 과민성"은 진통제에 의한 치료 후에 이상 사례를 경험한 환자; 진통제에 의한 치료에 내성인 환자; 통증을 포함하는 골관절염의 징후 또는 증상의 하나 이상의 척도에서 임상적으로 의미있는 개선을 나타내지 않는 환자; 진통제 요법(오피오이드를 포함함)에 중독된 환자; 또는 진통제 요법에 대한 거부감을 나타내는 환자를 지칭한다. 따라서, 상기 용어는 다른 진통제의 사용이 효과적이지 않거나 적절하지 않은 환자에 대한 언급을 포함한다.

골관절염의 징후 또는 증상의 평가가 치료 기간 동안 및/또는 후에 기선과 비교하여 임상 척도를 통해 정량화될 때 치료는 "효과적으로 개선"되거나 "효과적으로 감소"된다. 기선에서의 임상 척도와 치료 동안/후에 임상 척도 사이의 차이는 징후 또는 증상이 개선되고 치료가 효과적인지를 결정하기 위해 비교되고 사용된다. 이러한 비교는 플라세보, 또는 이전 요법 중 하나 이상의 것에 대한 비교를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 비교는 플라세보, 또는 진통제 요법, 예컨대 오피오이드 또는 NSAID에 의한 치료에 대한 것일 수 있다. 일부 실시양태에서, 비교는 NGF 항체에 의한 치료 시작 전 징후 또는 증상에 대한 것일 수 있다. 예를 들어, WOMAC 통증 보조척도 값은, 기선에서 환자에 대해 결정된 후에, 치료 기간에 걸쳐, 예컨대 제2주, 제4주, 제8주, 제16주, 제24주, 제32주, 제40주, 제48주, 제56주 또는 그 이후에서 결정될 수 있다. 유사하게, WOMAC 신체 기능 보조척도 값이 또한 상기 방식으로 결정될 수 있다. 또한, PGA-OA가 또한 상기 방식으로 결정될 수 있다.

일부 실시양태에서, 치료는 치료 시작시 또는 전 기선 WOMAC 통증과 비교하여 효과적으로 WOMAC 통증을 적어도 약 2.5, 적어도 약 2.6, 적어도 약 2.7, 적어도 약 2.8, 적어도 약 2.9, 적어도 약 3.0, 적어도 약 3.1, 적어도 약 3.2, 적어도 약 3.3, 적어도 약 3.4, 적어도 약 3.5, 적어도 약 3.6, 적어도 약 3.7만큼 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 치료는 치료 시작시 또는 전 기선과 비교하여 WOMAC 통증을 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% 또는 95% 초과 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 치료는 타네주맙에 대한 플라세보와 비교하여 효과적으로 WOMAC 통증 점수를 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 치료는 타네주맙에 대한 플라세보와 비교하여 효과적으로 WOMAC 통증 점수를 적어도 약 0.2, 0.25, 0.3, 0.35, 0.4, 0.45, 0.5, 0.55, 0.6, 0.65, 0.7, 0.75, 0.8, 0.85, 0.9, 0.95 또는 1만큼 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 치료는 기선 및/또는 타네주맙에 대한 플라세보와 비교하여 오피오이드 진통제 또는 NSAID 진통제보다 크게 효과적으로 WOMAC 통증 점수를 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 치료는 NSAID와 비교하여 WOMAC 통증 점수를 적어도 약 0.1, 0.15, 0.2, 0.25, 0.3, 0.35만큼 더 감소시킨다. 일부 실시양태에서, WOMAC 통증 점수의 감소가 치료 제16주, 제24주, 제32주, 제40주, 제48주 또는 제56주에서 관찰된다. 일부 실시양태에서, 기선으로부터의 변화는 최소 제곱 평균을 기반으로 한다.

일부 실시양태에서, 치료는 치료 시작시 또는 전 기선과 비교하여 효과적으로 WOMAC 신체 기능 점수를 적어도 약 2.5, 적어도 약 2.6, 적어도 약 2.7, 적어도 약 2.8, 적어도 약 2.9, 적어도 약 3.0, 적어도 약 3.1, 적어도 약 3.2, 적어도 약 3.3, 적어도 약 3.4, 적어도 약 3.5, 적어도 약 3.6, 적어도 약 3.7만큼 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 치료는 치료 시작시 또는 전 기선과 비교하여 WOMAC 신체 기능을 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% 또는 95% 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 치료는 타네주맙에 대한 플라세보와 비교하여 효과적으로 WOMAC 신체 기능 점수를 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 치료는 타네주맙에 대한 플라세보와 비교하여 효과적으로 WOMAC 신체 기능 점수를 적어도 약 0.2, 0.25, 0.3, 0.35, 0.4, 0.45, 0.5, 0.55, 0.6, 0.65, 0.7, 0.75, 0.8, 0.85, 0.9, 0.95, 1 또는 1.1만큼 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 치료는 기선 및/또는 플라세보와 비교하여 오피오이드 진통제 또는 NSAID 진통제보다 크게 효과적으로 WOMAC 신체 기능 점수를 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 치료는 NSAID와 비교하여 WOMAC 신체 기능 점수를 적어도 약 0.1, 0.15, 0.2, 0.25, 0.3, 0.35, 0.4만큼 더 감소시킨다. 일부 실시양태에서, WOMAC 신체 기능 점수의 감소는 치료 제16주, 제24주, 제32주, 제40주, 제48주 또는 제56주에 관찰된다. 일부 실시양태에서, 기선으로부터의 변화는 최소 제곱 방법을 기반으로 한다.

일부 실시양태에서, 치료는 치료 시작시 또는 전 기선과 비교하여 효과적으로 PGA-OA 점수를 적어도 약 0.7, 0.75, 0.8, 0.85, 0.9, 0.95, 1 또는 1.1만큼 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 치료는 치료 시작시 또는 전 기선과 비교하여 PGA-OA를 15%, 20%, 25%, 30% 또는 40% 초과 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 치료는 타네주맙에 대한 플라세보와 비교하여 효과적으로 PGA-OA 점수를 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 치료는 타네주맙에 대한 플라세보와 비교하여 효과적으로 PGA-OA 점수를 적어도 약 0.1, 0.15, 0.2, 0.25, 0.3, 0.35, 0.4, 0.45 또는 0.5만큼 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 치료는 기선 및/또는 타네주맙에 대한 플라세보와 비교하여 오피오이드 진통제 또는 NSAID 진통제보다 크게 효과적으로 PGA-OA 점수를 감소시킨다. 일부 실시양태에서, PGA-OA 점수의 감소는 치료 제16주, 제24주, 제32주, 제40주, 제48주 또는 제56주에 관찰된다. 일부 실시양태에서, 기선으로부터의 변화는 최소 제곱 방법을 기반으로 한다.

용어 "기선"은 치료 방법의 부분으로서 항-NGF 항체의 투여 전에 환자에 대한 징후 또는 증상 관련 측정의 값을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 용어 "기선"은 골관절염을 갖지 않는 건강한 대조군 개체에 대한 징후 또는 증상 관련 측정의 값을 지칭한다.

일부 실시양태에서, 항-NGF 항체에 의한 치료는 상기 항체에 의한 치료 시작 후 적어도 8주까지 효과적으로 OA의 징후 또는 증상을 개선한다. 일부 실시양태에서, 항-NGF 항체에 의한 치료는 상기 항체에 의한 치료 시작 후 적어도 10주까지 효과적으로 OA의 징후 또는 증상을 개선한다. 일부 실시양태에서, 항-NGF 항체에 의한 치료는 상기 항체에 의한 치료 시작 후 적어도 12주까지 효과적으로 OA의 징후 또는 증상을 개선한다. 일부 실시양태에서, 항-NGF 항체에 의한 치료는 상기 항체에 의한 치료 시작 후 적어도 14주까지 효과적으로 OA의 징후 또는 증상을 개선한다. 일부 실시양태에서, 항-NGF 항체에 의한 치료는 상기 항체에 의한 치료 시작 후 적어도 16주까지 효과적으로 OA의 징후 또는 증상을 개선한다. 일부 실시양태에서, 항-NGF 항체에 의한 치료는 상기 항체에 의한 치료 시작 후 적어도 24주까지 효과적으로 OA의 징후 또는 증상을 개선한다. 일부 실시양태에서, 항-NGF 항체에 의한 치료는 상기 항체에 의한 치료 시작 후 적어도 32주까지 효과적으로 OA의 징후 또는 증상을 개선한다. 일부 실시양태에서, 항-NGF 항체에 의한 치료는 상기 항체에 의한 치료 시작 후 적어도 40주까지 효과적으로 OA의 징후 또는 증상을 개선한다.

일부 실시양태에서, 항-NGF 항체에 의한 치료는 상기 항체에 의한 치료 시작 후 1주일 이내에 효과적으로 OA의 징후 또는 증상을 개선한다. 일부 실시양태에서, 항-NGF 항체에 의한 치료는 상기 항체에 의한 치료 시작 후 2주일 이내에 효과적으로 OA의 징후 또는 증상을 개선한다.

일부 실시양태에서, 치료는 OA와 관련된 통증을 개선한다. 일부 실시양태에서, 통증은 중등도 내지 중증 OA와 관련된 통증이고; 임의적으로 만성 통증이다.

WOMAC 통증 보조척도는 지난 48시간 동안 인덱스 관절(선택된 연구 무릎 또는 고관절)에서 OA으로 인해 경험한 통증의 양과 관련된 5개의 질문으로 구성된다. WOMAC 통증 보조척도는 5개의 개별적 질문의 점수의 평균으로서 계산되고, 이는 정수가 아닐 수 있다. 각각의 질문에 대한 WOMAC 통증 보조척도 NRS 점수, 및 WOMAC 통증 보조척도 점수는 0 내지 10 범위이고, 점수가 높을수록 통증이 큼을 시사한다.

WOMAC 신체 기능 보조척도는 지난 48시간 동안 인덱스 관절(선택된 연구 무릎 또는 고관절)에서 관절염으로 인해 경험하는 어려움의 정도와 관련된 17개의 질문으로 구성된다. WOMAC 신체 기능 보조척도는 17개의 개별적 질문의 점수의 평균으로서 게산되고, 이는 정수가 아닐 수 있다. 각각의 질문에 대한 WOMAC 신체 기능 보조척도 NRS 점수, 및 WOMAC 신체 기능 보조척도 점수는 0 내지 10 범위이고, 점수가 높을수록 더 나쁜 기능을 시사한다. 이는 움직이고 일상 생활의 통상적 활동을 수행하는 개체의 능력을 지칭한다.

PGA-OA 값은 환자에 대한 질문을 기반으로 한다: "관절의 골관절염이 당신에게 영향을 미치는 모든 방식을 고려할 때, 오늘 하루는 어땠나요?". 환자는 하기 등급을 사용하여 상태를 평가한다:

· 등급 설명

1 - 매우 좋음 - 무증상 및 정상 활동의 제한 없음

2 - 좋음 - 약간의 증상 및 정상 활동의 제한 없음

3 - 보통 - 중간 증상 및 일부 정상 활동의 제한

4 - 나쁨 - 심한 증상 및 대부분의 정상 활동 수행에 대한 무능력

5 - 매우 나쁨 - 견딜 수 없는 매우 심한 증상 및 모든 정상 활동 수행에 대한 무능력

켈그렌-로렌스 x-선 등급은 골관절염의 중증도를 분류하는 방법이다(문헌[Kellgren and Lawrence., Ann Rheum Dis 2000: 16(4): 494-502]).

고관절의 급속 진행성 골관절염(RPOA)은 처음 Forestier에 의해 1957년에 설명되었고 후속적으로 위축성 골관절염, 급속 파괴형 골관절염, 급속 파괴형 관절증, 급속 진행성 고관절병 또는 급속 파괴형 고관절증으로서 많은 연구에서 설명되었다. 급속 진행성 고관절 골관절염은, 이전 방사선 사진으로부터 연골용해의 결과로서 급속 관절 공간 협소화를 나타내는 방사선 사진과 함께 흔히 중증의 고관절 통증, 및 후속적으로 대퇴골두 및 절구를 포함하는 중증 진행성 위축성 골 파괴를 동반하는 골 용해성 단계를 나타내는 개체를 특징으로 한다. 대퇴골두의 뚜렷한 평탄화 및 체중 지지 영역의 연골하 뼈의 손실이 있을 수 있고, 일부 경우에 대퇴골두는 잘려진 것처럼 보인다. 골극은 전형적으로 두드러지게 작거나 없다. 골 경화는 대퇴골두 및 절구의 밀착 부위에 흔히 존재하며, 연골하 잔해는 예외 없이 존재하고, 건막염을 초래할 수 있는 골 단편화 및 데브리스가 통상적으로 관찰된다. Lequesne는 2 mm/년 이상의 관절 공간 협소화 또는 1년 이내에 관절 공간의 50% 초과의 손실을 갖는 개체가 급속 진행성 골관절염을 앓는 것으로 간주되어야 한다는 것을 제안하였다. 종단적 연구의 부족으로 인해, 관절 공간(연골용해)의 급속 손실을 갖는 개체 중 얼만큼의 비율이 골 파괴로 진행하는지는 분명하지 않다. 또한, 골관절염의 급속 진행은 견관절 및 무릎에서 설명되었다.

전체 골관절염 집단에서 급속 진행성 골관절염의 발생률은 완전히 정의되지 않았다. 고관절 골관절염의 급속 진행의 경우, 유병률은 임상 사례 시리즈 분석을 기반으로 약 2 내지 18% 범위이다. 급속 진행성 골관절염의 병태생리학은 이해되지 않았다. 하기를 포함하는 다양한 메커니즘이 제안되었다; 허혈, 정맥 정체, 국소 영양 결핍, 건막염, 기계적 과부하, NSAID 또는 코르티코스테로이드 사용, 수산화인회석 또는 피로포스페이트 결정의 관절내 퇴적 및 연골하 부족 골절.

진행된 OA 집단에서 급속 진행성 OA의 비 및 상기 질병 진행의 원인에 대한 데이터가 문헌에 없다 문헌[Hochberg et al., Arthritis Rheumatol., vol. 68, no. 2. pp. 382-391]에 기재된 바와 같이, "급속 진행성 골관절염은 연골용해의 결과로서 급속 관절 공간 협소화를 나타내는 방사선 사진과 함께 통증을 특징으로 한다(유형-1)". 아마 이후에, 이들 환자는 중증 진행성 위축성 골 파괴를 동반하는 골용해성 단계로 진행한다(유형-2). 그러나, 이러한 연속성은 종단적 연구의 부족으로 인해 분명하지 않다(문헌[Hochberg et al., Arthritis Rheumatol., vol. 68, no. 2. pp. 382-391]).

용어 "인덱스 관절"은 치료 시작 전 스크리닝시 가장 통증있는 관절을 지칭하고, 치료 동안 평가되는 관절이다. 예를 들어, 인덱스 관절은 치료 시작 전 스크리닝시 좌우 고관절 및 무릎의 가장 통증있는 관절이다.

양 무릎, 양 고관절 및 양 견관절의 방사선 평가(x-선)는 치료 전에, 스크리닝시에 및 치료 동안에 수행되거나 수득될 수 있다. 또한, 골관절염을 시사하는 징후 또는 증상을 나타내는 다른 주요 관절이 이미지화될 수 있다. 주요 관절은 발가락 및 손의 관절을 제외한 사지, 예컨대 견관절, 팔꿈치, 손목, 고관절, 무릎, 발목의 움직임이 자유로운 활막성 관절로서 정의된다. 스크리닝시에 이미지화된 임의의 관절 연구 기간 동안 확인된 위험에 있는 다른 관절이 또한 이미지화될 수 있다.

중앙 방사선학 판독사(중앙 판독사)는 배제하기 위한 관절 상태의 결정 및 확인을 포함하는 적격성 평가를 위해 방사선학 이미지를 리뷰할 수 있다. 스크리닝시 필요한 방사선 사진은 이미지의 중앙 방사선학 리뷰를 가능하게 하기 위해 및 NGF 항체에 의한 초기 투여에 대한 개체 적격성을 평가하기 위해 초기 통증 평가 기간(IPAP) 시작 적어도 2주 전에 수득될 수 있다. 일부 실시양태에서, 개체는 스크리닝 방사선 사진이 리뷰되고 적격성이 평가될 때까지 NGF 항체에 의한 투여 시작에 대해 허용되지 않을 수 있다.

X-선 기술자는, 이의 직업 교육 및 자격증에 더하여, 무릎, 고관절 및 견관절에 대한 방사선 촬영 프로토콜 수행을 훈련한다. 무릎 및 고관절의 관절 공간 너비 측정의 재현성 및 정확도를 용이하게 하기 위해, 반자동 소프트웨어 및 포지셔닝 프레임 표준화된 서브젝트 및 관절 포지셔닝 프로토콜을 사용할 수 있다. Core Imaging Laboratory는 방사선 촬영 이미지/스트리닝시 및 후속처리 시점에서 수행된 평가의 품질, 표준화 및 재현성을 보장하기 위해 현장과 협력할 책임이 있다. 필요한 X-선에 대한 추가적 세부사항은 사이트 이미징 매뉴얼에 제공되어 있다.

중앙 방사선학 판독사(중앙 판독사)는 면허가 있는 방사선사일 수 있거나 근골격계 방사선사와 동등한 국제 지위를 가질 수 있다. 중앙 판독사는 이의 책임 범위에 대한 구체적인 설명이 포함된 이미징 아틀라스 및 이미징 샤터에 의해 관리될 수 있다. 중앙 판독사는 적격성의 평가(켈그렌-로렌스 등급의 결정을 포함함) 및 배제하기 위한 관절 상태, 예컨대 급속 진행성 골관절염, 위축성 또는 비대성 골관절염, 연골하 부족 골절(무릎의 자발적 골괴사[SPONK]), 일차 골괴사 및 병리학적 골절의 확인을 위한 스크리닝시에 방사선학 이미지를 리뷰할 수 있다. 치료 시작 후에, 중앙 판독사는 판정 위원회의 평가를 추가로 전당하게 만들 수 있는 관절 상태, 예컨대 가능하거나 예상되는 급속 진행성 골관절염, 연골하 부족 골절(무릎의 자발적 골괴사[SPONK]), 일차 골괴사 또는 병리학적 골절의 진단을 위해 방사선학 이미지를 리뷰할 수 있다.

가능하거나 예상되는 관절 사례(즉 급속 진행성 골관절염, 연골하 부족 골절, 무릎의 자발적 골괴사(SPONK), 일차 골괴사 또는 병리학적 골절)를 갖는 것으로 확인된 개체 및 어떤 이유로든 전체 관절 대체를 겪은 개체에서, 모든 이미지 및 기타 소스 서류는 상기 사례의 리뷰 및 판정을 위해 블라인딩된 판정 위원회에게 제공될 수 있다. 사례의 판정 위원회의 평가는 사례의 최종 분류에 해당할 수 있다.

중앙 방사선학 판독사에 의해 결정된 바와 같이 및 이미징 아틀라스에 의해 정의된 바와 같이 임의의 스크리닝 방사선 사진에서 임의의 하기 조건의 방사선 촬영 증거가 있는 경우, 환자는 항-NGF 항체에 의한 치료 동안에 또는 전에 항-NGF 항체에 의한 치료로부터 제외될 수 있다: 무릎의 과도한 부정렬, 중증 연골 석회증; 기타 관절병증(예를 들어 류마티스 관절염), 전신 대사성 골 질환(예를 들어 가통풍, 파제트병; 전이성 석회화), 대형 낭종성 병변, 원발성 또는 전이성 종양 병변, 스트레스 또는 외상성 골절. 일부 실시양태에서, 중앙 방사선학 판독사에 의해 결정된 바와 같이 및 이미징 아틀라스에 의해 정의된 바와 같이 임의의 스크리닝 방사선 사진에서 임의의 하기 조건의 방사선 촬영 증거가 있는 경우, 환자는 항-NGF 항체에 의한 치료 전에 또는 동안에 항-NGF 항체에 의한 치료로부터 제외될 수 있다: 1) 급속 진행성 골관절염, 2) 위축성 또는 비대성 골관절염, 3) 연골하 부족 골절, 4) 무릎의 자발적 골괴사(SPONK), 5) 골괴사 또는 6) 병적 골절.

일부 실시양태에서, 환자는 각각의 투여량 전에 급속 진행성 골관절염의 징후 또는 증상의 발달에 대해 모니터링된다. 일부 실시양태에서, 모니터링은 방사선 평가(예컨대 X-선)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 방사선 촬영 평가는 치료 동안 매년 수행된다. 방사선 평가는 고관절 및/또는 무릎 양쪽 평가일 수 있다. 일부 실시양태에서, 급속 진행성 골관절염의 증상은 새로운 발병, 중증의 지속적 통증 또는 관절내 부기를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 환자에서 급속 진행성 골관절염이 발생한 경우 치료는 중단된다.

본원에 상호교환적으로 사용되는 "환자", "개체" 또는 "대상체"는 포유동물, 보다 바람직하게는 인간이다. 또한, 포유동물은 비제한적으로 가축(예를 들어 소, 돼지, 말, 닭 등), 스포츠용 동물, 애완 동물, 영장류, 말, 개, 고양이, 마우스 및 래트를 포함한다.

본원에 사용된 "벡터"는 숙주 세포에서 하나 이상의 해당 유전자 또는 서열을 전달할 수 있고, 바람직하게는 발현할 수 있는 구축물을 의미한다. 벡터의 예는 비제한적으로 바이러스 벡터, 네이키드 DNA 또는 RNA 발현 벡터, 플라스미드, 코스미드 또는 파지 벡터, 양이온성 축합제와 결합된 DNA 또는 RNA 발현 벡터, 리소좀에 캡슐화된 DNA 또는 RNA 발현 벡터, 및 특정 진핵 세포, 예컨대 프로듀서 세포를 포함한다.

본원에 사용된 "발현 제어 서열"은 핵산의 전사를 유도하는 핵산 서열을 의미한다. 발현 제어 서열는 프로모터, 예컨대 구성 또는 유도 프로모터, 또는 인핸서일 수 있다. 발현 제어 서열은 전사될 핵산 서열에 작동가능하게 연결된다.

본원에 사용된 "약학적으로 허용되는 담체" 또는 "약학적으로 허용되는 부형제"는, 활성 성분과 조합될 때, 상기 성분이 생물학적 활성을 유지하도록 하고 개체의 면역계와 비반응성인 임의의 물질을 포함한다. 예는 비제한적으로 표준 약학 담체, 예컨대 포스페이트 완충된 염수 용액, 물, 유화제, 예컨대 유/수 유화액, 및 다양한 유형의 습윤제를 포함한다. 에어로졸 또는 비경구 투여에 바람직한 희석제는 포스페이트 완충된 염수(PBS) 또는 생리 식염수(0.9%)이다. 이러한 담체를 함유하는 조성물은 주지된 통상적 방법에 의해 제형화된다(예를 들어 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th edition, A. Gennaro, ed., Mack Publishing Co., Easton, PA, 1990]; 및 [Remington, The Science and Practice of Pharmacy 20th Ed. Mack Publishing, 2000] 참조).

용어 "효과기 기능"은 항체의 Fc 영역에 기인하는 생물학적 활성을 지칭한다. 항체 효과기 기능의 예는 비제한적으로 항체-의존적 세포 매개된 세포독성(ADCC), Fc 수용체 결합, 보체 의존성 세포독성(CDC), 식균 작용, C1q 결합 및 세포 표면 수용체(예를 들어 B 세포 수용체; BCR)의 하향 조절을 포함한다. 예를 들어, US 6,737,056을 참조한다. 이러한 효과기 기능은 일반적으로 Fc 영역이 결합 도메인(예를 들어 항체 가변 도메인)에 결합할 것을 필요로 하고, 이러한 항체 효과기 기능을 평가하기 위해 당분야에 공지된 다양한 분석을 사용하여 평가될 수 있다. 효과기 기능의 예시적 측정은 Fcγ3 및/또는 C1q 결합을 통한다.

본원에 사용된 "항체-의존적 세포 매개된 세포독성" 또는 "ADCC"는 Fc 수용체(FcR)를 발현하는 비특이적 세포독성 세포(예를 들어 자연 살해(NK) 세포, 호중구 및 대식 세포)가 표적 세포에 결합한 항체를 인식하고 후속적으로 상기 표적 세포의 용해를 야기하는, 세포 매개된 반응을 지칭한다. 해당 분자의 ADCC 활성은 예컨대 US 5,500,362 또는 5,821,337에 기재된 시험관내 ADCC 분석을 사용하여 평가될 수 있다. 이러한 분석에 유용한 효과기 세포는 말초혈 단핵 세포(PBMC) 및 NK 세포를 포함한다. 대안적으로 또는 부가적으로, 해당 분자의 ADCC 활성은 생체내, 예를 들어 동물 모델에서, 예컨대 문헌[Clynes et al., 1998, PNAS (USA), 95:652-656]에 개시된 것에서 평가될 수 있다.

"보체 의존성 세포독성" 또는 "CDC"는 보체의 존재 하에 표적의 용해를 지칭한다. 보체 활성화 경로는 보체계의 제1 성분(C1q)을 동족 항원과 복합된 분자(예를 들어 항체)에 결합시킴으로써 개시된다. 보체 활성화를 평가하기 위해, 예를 들어 문헌[Gazzano-Santoro et al., J. Immunol. Methods, 202: 163 (1996)]에 기재된 CDC 분석을 수행할 수 있다.

본원에 사용된 용어 "k_on" 또는 "k_a"는 항원에 대한 항체의 결합의 속도 상수를 지칭한다. 구체적으로, 속도 상수(k_on 또는 k_a, 및 k_off 또는 k_d) 및 평형 해리 상수는 전항체(즉 이가) 및 단량체 단백질을 사용하여 측정된다.

본원에 사용된 용어 "k_off " 또는 "k_d"는 항체/항원 복합체로부터 항체의 해리의 속도 상수를 지칭한다.

본원에 사용된 용어 "K_D"는 항체-항원 상호작용의 평형 해리 상수를 지칭한다.

본원에서 값 또는 파라미터과 관련하여 "약"의 언급은 그 값 또는 파라미터 그 자체에 관한 실시양태를 포함한다(기술한다). 예를 들어, "약 X"을 언급하는 기술은 "X"의 기술을 포함한다. 수치적 범위는 상기 범위를 한정하는 수를 포함한다. 일반적으로 말하면, 용어 "약"은 변수의 지시된 값, 및 지시된 값의 실험 오차 내에(예를 들어 평균에 대해 95% 신뢰 구간 내에) 또는 지시된 값의 10% 내에 변수의 모든 값을 지칭한다(둘 중 더 큰 것). 용어 "약"이 기간(연, 월, 주, 일 등)의 맥락 내에 사용되는 경우, 용어 "약"은 기간 ± 그 다음의 부차적 시간의 하나의 단위의 양(예를 들어 약 1년은 11 내지 13개월을 의미하고; 약 6개월은 6개월 ± 1주일을 의미하고; 약 1주일은 6 내지 8일을 의미한다) 또는 지시된 값의 10% 이내를 의미한다(둘 중 더 큰 것).

용어 "피하 투여"는 피하 층 내로 물질의 투여를 지칭한다.

용어 "예방함" 또는 "예방하다"는 (a) 장애가 발생하지 못하게 함 또는 (b) 장애의 개시 또는 장애의 증상의 개시를 지연함을 지칭한다.

실시양태가 표현 "포함하다"와 함께 본원에 기재된 경우, 그 외에 "이루어짐" 및/또는 "본질적으로 이루어짐"에 관해 기재된 유사 실시양태가 또한 제공되는 것으로 이해된다.

본 발명의 양태 또는 실시양태가 마르쿠쉬(Markush) 그룹 또는 대안의 다른 그룹화의 관점에서 기재되는 경우, 본 발명은 전체로서 나열된 전체 그룹뿐만 아니라 개별적으로 그룹의 각각의 구성원 및 주요 그룹의 모든 가능한 하위 그룹, 뿐만 아니라 그룹 구성원 중 하나 이상이 부재하는 주요 군을 포함합니다. 또한, 본 발명은 청구된 본 발명에서 임의의 그룹 구성원 중 하나 이상의 명시적 배제를 예상한다.

달리 정의되지 않는 한, 본원에 사용된 모든 기술 및 과학 용어는 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 상충되는 경우, 정의를 포함하여 본원이 우선한다. 본원 및 청구범위 전반에 걸쳐, 용어 "포함하다" 또는 이의 변형 "포함함"은 명시된 정수 또는 정수의 군의 포함을 의미하지만 임의의 다른 정수 또는 정수 그룹의 배제를 의미하지 않는 것으로 이해될 것이다. 문맥상 달리 요구되지 않는 한, 단수 용어는 복수를 포함하고 복수 용어는 단수를 포함한다. 용어 "예를 들어"에 따르는 임의의 예는 완전하거나 제한적인 것을 의미하지 않는다.

예시적인 방법 및 재료가 본원에 기재되어 있지만, 본원에 기재된 것과 유사하거나 동등한 방법 및 재료가 본 발명의 실시 또는 시험에서 또한 사용될 수 있다. 재료, 방법 및 예는 예시일 뿐이며 제한하려는 의도가 아니다.

항-NGF 항체

치료 방법에서 사용하기 위한 항-NGF 항체가 본원에 제공된다.

한 양태에서, 항-NGF 항체는 NGF에 결합하고 trkA 및/또는 p75에 대한 NGF의 결합을 억제한다.

한 실시양태에서, 항체는 서열번호 1의 중쇄 가변 영역으로부터의 3개의 CDR을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열번호 2의 경쇄 가변 영역으로부터의 3개의 CDR을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열번호 1의 중쇄 가변 영역으로부터의 3개의 CDR 및 서열번호 2의 경쇄 가변 영역으로부터의 3개의 CDR을 포함한다.

일부 실시양태에서, CDR은 카바트, 코티아, 연장, AbM, 접촉부 및/또는 배좌 정의 중 임의의 것에 따라 정의될 수 있다. 일부 실시양태에서, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 5, 서열번호 6, 서열번호 7 및 서열번호 8에 나타낸 CDR을 카바트 및 코티아 방법의 조합에 의해 결정한다.

본 발명에 사용된 예시적 항체 서열은 비제한적으로 하기에 나열된 서열을 포함한다.

한 실시양태에서, 항체는 타네주맙이다.

일부 실시양태에서, 항체는 서열번호 3에 나타낸 서열을 갖는 HCDR1, 서열번호 4에 나타낸 서열을 갖는 HCDR2, 서열번호 5에 나타낸 서열을 갖는 HCDR3, 서열번호 6에 나타낸 서열을 갖는 LCDR1, 서열번호 7에 나타낸 서열을 갖는 LCDR2 및 서열번호 8에 나타낸 서열을 갖는 LCDR3을 포함한다.

일부 실시양태에서, 항체는 서열번호 1에 나타낸 서열을 갖는 중쇄 가변 영역(VH)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열번호 2의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 영역(VL)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열번호 1에 나타낸 서열을 갖는 중쇄 가변 영역(VH) 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 영역(VL)을 포함한다.

일부 실시양태에서, 항체는 서열번호 9에 나타낸 아미노산 서열을 갖는 중쇄 및 서열번호 10에 나타낸 아미노산 서열을 갖는 경쇄를 포함한다. 일부 실시양태에서, 서열번호 9의 중쇄 아미노산 서열의 C-말단 리신(K)은 임의적이다. 따라서, 일부 실시양태에서, 중쇄 아미노산 서열은 C-말단 리신(K)이 없고 서열번호 11에 나타낸 서열을 갖는다. 따라서, 일부 실시양태에서, 항체는 서열번호 11에 나타낸 아미노산 서열을 갖는 중쇄 및 서열번호 10에 나타낸 아미노산 서열을 갖는 경쇄를 포함한다.

일부 실시양태에서, 항체는 파시누맙(fasinumab) 또는 REGN475이거나(예를 들어 본원에 참고로 포함된 US 2009/0041717 참조) 파시누맙 또는 REGN475와 동일하거나 실질적으로 동일한 아미노산 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, 항체는 풀라누맙(fulranumab)이다.

본원에 기재된 항체는 당분야에 공지된 임의의 방법에 의해 생산될 수 있다.

항체는 적합한 숙주 세포를 사용하여 재조합식으로 생산될 수 있다. 본원의 항-NGF 항체를 암호화하는 핵산은 발현 벡터 내로 클로닝될 수 있고, 이어서 이는 숙주 세포 내로 도입될 수 있고, 여기서 세포는 달리 면역 글로불린 단백질을 생산하지 않아 재조합 숙주 세포에서 항체의 합성물을 수득한다. 세포 배양, 및 단백질 또는 폴리펩티드의 발현에 감수성인 임의의 숙주 세포가 본 발명에 따라 사용될 수 있다. 특정 실시양태에서, 숙주 세포는 포유동물이 것이다. 숙주로서 사용가능한 포유동물 세포주는 당분야에 주지되어 있고 ATCC(American Type Culture Collection)로부터 입수가능한 많은 불멸화된 세포주를 포함한다. 비제한적인 예시적 포유동물 세포는 비제한적으로 하기를 포함한다: NS0 세포, HEK 293 및 차이니즈 햄스터 난소(CHO) 세포, 및 이들의 유도체, 예컨대 293-6E 및 CHO DG44 세포, CHO DXB11 및 Potelligent(등록상표) CHOK1SV 세포(BioWa/Lonza, Allendale, NJ). 또한, 포유동물 숙주 세포는 비제한적으로 하기를 포함한다: 인간 자궁경부 암종 세포(HeLa, ATCC CCL 2), 햄스터 새끼 신장(BHK, ATCC CCL 10) 세포, 원숭이 신장 세포(COS) 및 인간 간세포 암종 세포(예를 들어 Hep G2). 기타 비제한적인 예는 본 발명에 따라 사용될 수 있는 포유동물 세포의 기타 비제한적인 예는 하기를 포함한다: 인간 망막모세포(PER.C6(등록상표); Crucell, Leiden, The Netherlands); SV40에 의해 형질전환된 원숭이 신장 CV1 세포주(COS-7, ATCC CRL 1651); 인간 배아 신장 세포주 293(HEK 293) 또는 현탁 배양에서 성장을 위해 서브클로닝된 293 세포(문헌[Graham et al., J. Gen Virol. 1997; 36:59]); 마우스 세르톨리 세포(TM4, Mather, Biol. Reprod. 1980; 23:243-251); 원숭이 신장 세포(CV1 ATCC CCL 70); 아프리카 그린 원숭이 신장 세포(VERO-76, ATCC CRL-1 587); 개 신장 세포(MDCK, ATCC CCL 34); 버팔로 래트 간 세포(BRL 3A, ATCC CRL 1442); 인간 폐 세포(W138, ATCC CCL 75); 인간 간 세포(Hep G2, HB 8065); 마우스 유방 종양(MMT 060562, ATCC CCL51); TR1 세포(문헌[Mather et al., Annals N.Y. Acad. Sci. 1982; 383:44-68]); MRC 5 세포; FS4 세포; 인간 간암 세포주(Hep G2); 및 많은 골수종 세포주, 예컨대 비제한적으로 BALB/c 마우스 골수종 세포주(NS0/1, ECACC No: 85110503), NS0 세포 및 Sp2/0 세포.

또한, 폴리펩티드 또는 단백질을 발현하는 상업적으로 입수가능하거나 비-상업적으로 입수가능한 많은 세포주가 사용될 수 있다. 당업자는, 다양한 세포주가 다양한 영양 필요요건을 가질 수 있고/있거나 최적 성장 및 폴리펩티드 또는 단백질 발현에 대한 다양한 배양 조건을 필요로 할 수 있고 필요에 따라 조건을 변경할 수 있음을 이해한다.

하이브리도마 세포주의 생산을 위해, 숙주 동물의 면역화의 경로 및 일정은 일반적으로 본원에 추가로 기재되는 바와 같이 항체 자극 및 생산에 대해 확립된 통상적 기술에 일치한다. 인간 및 마우스 항체 생산의 일반적 기술은 당분야에 공지되어 있고/있거나 본원에 기재되어 있다.

인간을 포함하는 임의의 포유동물 개체 또는 이로부터 기원한 항체 생산 세포는 포유동물, 예컨대 인간 및 하이브리도마 세포주의 생산을 기반으로서 작용하도록 조작될 수 있음이 고려된다. 전형적으로, 숙주 동물은 본원에 기재된 것을 포함하는 소정량의 면역원으로 복강내로, 근육내로, 경구로, 피하로, 발바닥내로 및/또는 피내로 접종받는다.

하이브리도마는 문헌[Kohler, B. and Milstein, C., Nature 256:495-497, 1975]의 일반적 체성 세포 하이브리드화 기술 또는 문헌[uck, D. W., et al., In Vitro, 18:377-381, 1982]에서 변형된 것을 사용하여 림프구 및 불멸화된 골수종 세포로부터 생산될 수 있다. 입수가능한 골수종 세포주, 예컨대 비제한적으로 X63-Ag8.653 및 Salk Institute의 Cell Distribution Center(San Diego, Calif., USA)의 것이 하이브리드화에 사용될 수 있다. 일반적으로, 기술은 퓨소젠(fusogen), 예컨대 폴리에틸렌 글리콜을 사용하거나 당업자에게 주지된 전기적 방법에 의해 골수종 세포 및 림프 세포를 융합하는 것을 수반한다. 융합 후에, 세포는 융합 배지로부터 분리되고 선택적 성장 배지, 예컨대 하이포잔틴-아미노프테린-티미딘(HAT) 배지에서 성장하여 하이브리드화되지 않은 모 세포를 제거한다. 혈청으로 보충되거나 보충되지 않은 본원에 기재된 임의의 배지가 단클론 항체를 분비하는 하이브리도마를 배양하기 위해 사용될 수 있다. 세포 융합 기술에 또 다른 대안으로서, EBV 불멸화된 B 세포가 사용되어 본 발명의 단클론 항체를 생산할 수 있다. 하이브리도마는 필요에 따라 확장되고 서브클로닝되고, 상청액은 통상적 면역 분석 절차(예를 들어 방사선 면역 분석, 효소 면역 분석 또는 형광 면역 분석)에 의해 항-면역원 활성에 대해 분석된다.

항체의 공급원으로 사용될 수 있는 하이브리도마는 단클론 항체를 생산하는 모 하이브리도마의 모든 유도체, 자손 세포를 포함한다.

본 발명에서 사용되는 항체를 생산하는 하이브리도마를 시험관내 또는 생체내 공지된 절차를 사용하여 성장시킬 수 있다. 단클론 항체는 필요에 따라 배양 매질 또는 체액으로부터 통상적 면역 글로불린 정제 절차, 예컨대 암모늄 설페이트 침전, 겔 전기영동, 투석, 크로마토그래피 또는 한외 여과에 의해 단리될 수 있다. 바람직하지 않은 활성은 존재하는 경우 예를 들어 고체 상에 부착된 면역원으로 제조된 흡착체 위에 제제를 지나가게 하고 면역원에서 목적하는 항체를 용출시키거나 방출시킴으로써 제거될 수 있다. 이작용성 또는 유도체화 제제, 예컨대 말레이미도벤조일 설포석신이미드 에스터(시스테인 잔기를 통해 접합), N-하이드록시석신이미드(리신 잔기를 통함), 글루타르알데하이드, 석신산 무수물, SOCl₂ 또는 R¹N=C=NR(여기서 R 및 R¹은 다양한 알킬 기임)를 사용하여, 면역화될 종에서 면역원성인 단백질, 예를 들어 키홀 림펫 헤모시아닌, 혈청 알부민, 소 티로글로불린 또는 대두 트립신 억제제에 접합된, 항체 표적(예를 들어 PD-1), 인간 표적 단백질(예를 들어 PD-1) 또는 표적, 또는 표적 아미노산 서열을 함유하는 단편을 발현하는 세포에 의한 숙주 동물의 면역화로 항체 집단(예를 들어 단클론 항체)를 수득할 수 있다.

필요에 따라, 해당 항체(단클론 또는 다클론)가 서열 분석될 수 있고, 이어서 폴리뉴클레오티드 서열이 발현 또는 번식을 위해 벡터 내로 클로닝될 수 있다. 해당 항체를 암호화하는 서열은 숙주 세포에서 벡터에서 유지될 수 있고, 이어서 숙주 세포는 추가적 사용을 위해 확장되거나 동결될 수 있다. 세포 배양물에서 재조합 단클론 항체의 생산은 당분야에 공지된 방법에 의해 B 세포로부터 항체 유전자의 클로닝을 통해 수행될 수 있다. 예를 들어, 문헌[Tiller et al., J. Immunol. Methods 329, 112, 2008]; US 7,314,622를 참조한다.

일부 실시양태에서, 항체는 하이브리도마 기술을 사용하여 생산될 수 있다. 임의의 포유동물 개체, 예컨대 인간 또는 이로부터 유래된 항체 생산 세포가 포유동물, 예컨대 인간, 하이브리도마 세포주의 생산의 기반으로서 작용하도록 조작될 수 있음이 고려된다. 숙주 동물의 면역화의 경로 및 일정은 일반적으로 본원에 추가로 기재되는 바와 같이 항체 자극 및 생산에 대해 확립된 통상적 기술에 일치한다. 전형적으로, 숙주 동물은 본원에 기재된 것을 포함하는 소정량의 면역원을 복강내로, 근육내로, 경구로, 피하로, 발바닥내로 및/또는 피내로 접종받는다.

일부 실시양태에서, 본원에 기재된 항체는 이의 불변 영역의 보존된 위치에서 글리코실화된다(문헌[Jefferis and Lund, 1997, Chem. Immunol. 65:111-128]; [Wright and Morrison, 1997, TibTECH 15:26-32]). 면역 글로불린의 올리고사카라이드 측쇄는 단백질의 기능(문헌[Boyd et al., 1996, Mol. Immunol. 32:1311-1318]; [Wittwe and Howard, 1990, Biochem. 29:4175-4180]) 및 당단백질의 분획들 사이의 분자내 상호작용(이는 당단백질의 형태 및 제시된 3차원 표면에 영향을 미칠 수 있음)(문헌[Jefferis and Lund, supra]; [Wyss and Wagner, 1996, Current Opin. Biotech. 7:409-416])에 영향을 미친다. 또한, 올리고사카라이드는 특이적 인식 구조물을 기반으로 제시된 당단백질을 특정 분자에 표적화시키는 작용을 할 수 있다. 또한, 항체의 글리코실화는 항체 의존적 세포성 세포독성(ADCC)에 영향을 미치는 것으로 보고되었다. 특히, β(1,4)-N-아세틸글루코사민일트랜스퍼라제 III(GnTIII)의 테트라사이클린-조절된 발현, 이등분 GlcNAc의 글리코실트랜스퍼라제 촉매 작용 형성에 의해 CHO 세포에 의해 생산된 항체는 개선된 ADCC 활성을 갖는 것으로 보고되었다(문헌[Umana et al., 1999, Nature Biotech. 17:176-180]).

항체의 글리코실화는 전형적으로 N-연결되거나 O-연결된다. N-연결은 아스파라긴 잔기의 측쇄에 대한 탄수화물 모이어티의 부착을 지칭한다. 트라이펩티드 서열 아스파라긴-X-세린, 아스파라긴-X-트레오닌 및 아스파라긴-X-시스테인(여기서 X는 프롤린을 제외한 임의의 아미노산임)은 아스파라긴 측쇄에 대한 탄수화물 모이어티의 효소에 의한 부착에 대한 인식 서열이다. 따라서, 폴리펩티드에서 이들 트라이펩티드 서열 중 어느 하나의 존재는 잠재적 글리코실화 부위를 생성할 수 있다. 5-하이드록시프롤린 또는 5-하이드록시리신이 또한 사용될 수 있지만, O-연결된 글리코실화는 하이드록시아미노산, 가장 통상적으로 세린 또는 트레오닌에 대한 당 N-아세틸갈락토사민, 갈락토스 또는 자일로스 중 하나의 부착을 지칭한다.

항체에 대한 글리코실화 부위의 부가는 상기에 기재된 트라이펩티드 서열 중 하나 이상을 함유하도록(N-연결된 글리코실화 부위) 아미노산 서열을 변경함으로써 편리하게 달성된다. 또한, 원래 항체의 서열에 대한 하나 이상의 세린 또는 트레오닌 잔기의 첨가 또는 이에 의한 치환에 의해 변경이 수행될 수 있다(O-연결된 글리코실화 부위).

또한, 항체의 글리코실화 패턴은 근본적인 뉴클레오티드 서열을 변경하지 않고 변경될 수 있다. 글리코실화는 항체를 발현하는 데 사용된 숙주 세포에 크게 좌우된다. 잠재적 치료법으로서 재조합 당단백질, 예를 들어 항체의 발현에 사용된 세포 유형이 드물게 천연 세포이기 때문에, 항체의 글리코실화 패턴의 변형이 예상될 수 있다(예를 들어 문헌[Hse et al., 1997, J. Biol. Chem. 272:9062-9070] 참조).

숙주 세포의 선택에 더하여, 항체의 재조합 생산 동안 글리코실화에 영향을 미치는 인자는 성장 모드, 배지 제형, 배양 밀도, 산소 처리, pH, 정제 계획 등을 포함한다. 다양한 방법이, 올리고사카라이드 생산에 수반되는 특정 효소를 도입하거나 과발현하는 것을 포함하여, 특정 숙주 유기체에서 달성된 글리코실화 패턴을 변경하도록 제안되었다(US 5,047,335; 5,510,261 및 5,278,299). 글리코실화 또는 특정 유형의 글리코실화는 당단백질로부터, 예를 들어 엔도글리코시다제 H(Endo H), N-글리코시다제 F, 엔도글리코시다제 F1, 엔도글리코시다제 F2, 엔도글리코시다제 F3을 사용하여 효소에 의해 제거될 수 있다. 또한, 재조합 숙주 세포는 유전자 조작되어 특정 유형의 폴리사카라이드의 처리에 있어서 결함이 있을 수 있다. 상기 및 유사한 기술이 당분야에 주지되어 있다.

변형의 다른 방법은, 비제한적으로 효소적 방법, 산화성 치환 및 킬레이트화를 포함하는 당분야에 공지된 커플링 기술의 사용을 포함한다. 변형은 예를 들어 면역 분석에서 라벨 부착을 위해 사용될 수 있다. 변형된 폴리펩티드는 당분야에 확립된 절차를 사용하여 생산되고, 일부가 하기 및 실시예에 기재되는 당분야에 공지된 표준 분석을 사용하여 스크리닝된다.

폴리뉴클레오티드, 벡터 및 숙주 세포

또한, 본 발명은 본원에 기재된 임의의 항-NGF 항체를 암호화하는 폴리뉴클레오티드를 제공한다. 한 양태에서, 본 발명은 본원에 기재된 임의의 폴리뉴클레오티드의 생산 방법을 제공한다. 폴리뉴클레오티드는 당분야에 공지된 절차에 의해 생산되고 발현된다.

또 다른 양태에서, 본 발명은 본 발명의 임의의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 조성물(예컨대 약학 조성물)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 조성물은 본원에 기재된 임의의 항-NGF 항체를 암호화하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 벡터를 포함한다.

또 다른 양태에서, 본원에 기재된 항-NGF 항체를 생산하는 단리된 세포주가 제공된다.

임의의 이런한 서열에 상보적인 폴리뉴클레오티드가 또한 본 발명에 포함된다. 폴리뉴클레오티드는 단일가닥(암호화 또는 안티센스) 또는 이중가닥일 수 있고, DNA(게놈, cDNA 또는 합성) 또는 RNA 분자일 수 있다. RNA 분자는 HnRNA 분자(이는 인트론을 함유하고 일대일 방식으로 DNA 분자에 상응함), 및 mRNA 분자(이는 인트론을 함유하지 않음)를 포함한다. 추가적 암호화 또는 비-암호화 서열은 본 발명의 폴리뉴클레오티드에 존재할 필요는 없으나 존재할 수 있고, 폴리뉴클레오티드는 다른 분자 및/또는 지지체 불질에 연결될 필요는 없으나 연결될 수 있다.

폴리뉴클레오티드는 천연 서열(즉 항체 또는 이의 단편을 암호화하는 내인성 서열)을 포함할 수 있거나 상기 서열의 변이체를 포함할 수 있다. 폴리뉴클레오티드 변이체는 암호화된 폴리펩티드의 면역 반응성이 천연 면역 반응성 분자와 비교하여 약화되도록 하나 이상의 치환, 부가, 결실 및/또는 삽입을 함유한다. 암호화된 폴리펩티드의 면역 반응성에 대한 효과는 일반적으로 본원에 기재된 바와 같이 평가될 수 있다. 변이체는 바람직하게는 천연 항체 또는 이의 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오티드 서열에 대해 적어도 약 70% 동일성, 보다 바람직하게는 적어도 약 80% 동일성, 보다 더 바람직하게는 적어도 약 90% 동일성, 가장 바람직하게는 적어도 약 95% 동일성을 나타낸다.

2개의 폴리뉴클레오티드 또는 폴리펩티드 서열은, 상기 2개의 서열의 뉴클레오티드 또는 아미노산의 서열이 하기에 기재되는 바와 같이 최대 유사성에 대해 정렬시 동일한 경우 "동일"하다고 한다. 2개의 서열 사이의 비교는 전형적으로 비교 윈도우에 대해 서열을 비교하여 서열 유사성의 국소 영역을 확인하고 비교함으로써 수행된다. 본원에 기재된 "비교 윈도우"는 2개의 서열을 최적으로 정렬시킨 후에 서열이 동일한 수의 인접 위치의 기준 서열에 대해 비교되는 적어도 약 20개, 일반적으로 30 내지 약 75개 또는 40 내지 약 50개의 인접 위치의 분절을 지칭한다.

비교를 위한 서열의 최적 정렬을, 디폴트 파라미터를 사용하여 bioinformatics 소프트웨어(DNASTAR(등록상표), Inc., Madison, WI)의 Lasergene(등록상표) 스위트의 MegAlign(등록상표) 프로그램을 사용하여 수행할 수 있다. 이러한 프로그램은 하기 참고문헌에 기재된 여러 정렬 계획을 포함한다: 문헌[Dayhoff, M.O., 1978, A model of evolutionary change in proteins - Matrices for detecting distant relationships. In Dayhoff, M.O. (ed.) Atlas of Protein Sequence and Structure, National Biomedical Research Foundation, Washington DC Vol. 5, Suppl. 3, pp. 345-358]; [Hein J., 1990, Unified Approach to Alignment and Phylogenes pp. 626-645 Methods in Enzymology vol. 183, Academic Press, Inc., San Diego, CA]; [Higgins, D.G. and Sharp, P.M., 1989, CABIOS 5:151-153]; [Myers, E.W. and Muller W., 1988, CABIOS 4:11-17]; [Robinson, E.D., 1971, Comb. Theor. 11:105]; [Santou, N., Nes, M., 1987, Mol. Biol. Evol. 4:406-425]; [Sneath, P.H.A. and Sokal, R.R., 1973, Numerical Taxonomy the Principles and Practice of Numerical Taxonomy, Freeman Press, San Francisco, CA]; [Wilbur, W.J. and Lipman, D.J., 1983, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 80:726-730].

바람직하게는, "서열 동일성의 백분율"은 적어도 20개의 위치의 비교 윈도우에 대해 2개의 최적으로 정렬된 서열을 비교함으로써 결정되고, 여기서 비교 윈도우에서 폴리뉴클레오티드 또는 폴리펩티드 서열의 일부는 2개의 서열의 최적 정렬을 위한 기준 서열(이는 부가 또는 결실을 포함하지 않음)과 비교시 20% 이하, 일반적으로 5 내지 15%, 또는 10 내지 12%의 부가 또는 결실(즉 갭)을 포함할 수 있다. 백분율은, 동일한 핵산 염기 또는 아미노산 잔기가 둘 모두의 서열에서 발생하는 위치의 수를 결정하여 매칭된 위치의 수를 산출하고, 상기 매칭된 위치의 수를 기준 서열에서 위치의 총 수(즉 윈도우 크기)로 나누고 결과를 100으로 곱하여 서열 동일성의 백분율을 산출함으로써 계산될 수 있다.

변이체는 부가적으로 또는 대안적으로 천연 유전자, 또는 이의 일부 또는 보체에 대해 실질적으로 동족일 수 있다. 이러한 폴리뉴클레오티드 변이체는 천연 항체를 암호화하는 자연 발생 DNA 서열(또는 상보적 서열)에 대해 중간 엄격도 조건(moderately stringent condition) 하에 하이브리드화할 수 있다.

적합한 "중간 엄격도 조건"은 하기를 포함한다: 5 X SSC, 0.5% SDS, 1.0 mM EDTA(pH 8.0)의 용액에서 사전 세척; 50℃ 내지 65℃에서 5 X SSC 밤새 하이브리드화; 이어서 0.1 % SDS를 함유하는 2X, 0.5X 및 0.2X SSC 각각에 의해 세척.

본원에 사용된 "고 엄격도 조건"은 하기이다: (1) 세척을 위해 저 이온 강도 및 고온, 예를 들어 0.015 M 나트륨 클로라이드/0.0015 M 나트륨 시트레이트/0.1% 나트륨 도데실 설페이트를 50℃에서 사용하는 것; (2) 하이브리드화 동안 변성제, 예컨대 폼아미드, 예를 들어 50% (v/v) 폼아미드와 0.1% 소 혈청 알부민/0.1% Ficoll/0.1% 폴리비닐피롤리돈/50 mM 나트륨 포스페이트 완충제(pH 6.5)를 750 mM 나트륨 클로라이드, 75 mM 나트륨 시트레이트와 함께 42℃에서 사용하는 것; 또는 (3) 50% 폼아미드, 5 x SSC(0.75 M NaCl, 0.075 M 나트륨 시트레이트), 50 mM 나트륨 포스페이트(pH 6.8), 0.1% 나트륨 피로포스페이트, 5 x 덴하르트 용액, 초음파 처리된 연어 정자 DNA(50 μg/ml), 0.1% SDS 및 10% 덱스트란 설페이트를 42℃에서, 42℃에서 0.2 x SSC(나트륨 클로라이드/나트륨 시트레이트) 및 55℃에서 50% 폼아미드로 세척하고, 이어서 55℃에서 EDTA를 함유하는 0.1 x SSC로 이루어진 고 엄격성 세척을 수행하는 것. 숙련가는 온도, 이온 강도 등을 필요에 따라 조정하여 인자, 예컨대 프로브 길이 등을 조정하는 방법을 안다.

유전자 암호의 중축의 결과로서, 본원에 기재된 폴리펩티드를 암호화하는 많은 뉴클레오티드 서열이 존재함을 당업자는 알 수 있다. 이들 폴리뉴클레오티드 중 일부는 임의의 천연 유전의 뉴클레오티드 서열에 대해 최소 동족성을 갖는다. 그러나, 코돈 사용빈도의 차이로 인해 변하는 폴리뉴클레오티드는 본 발명에서 구체적으로 고려된다. 또한, 본원에 제공된 폴리뉴클레오티드 서열을 포함하는 유전자의 대립형질은 본 발명의 범위 내에 있다. 대립형질은 하나 이상의 돌연변이, 예컨대 뉴클레오티드의 결실, 부가 및/또는 치환의 결과로서 변경되는 내인성 유전자이다. 생산된 mRNA 및 단백질은 변경된 구조 또는 기능을 가질 필요는 없으나 가질 수 있다. 대립형질은 표준 기술(예컨대 하이브리드화, 증폭 및/또는 데이터베이스 서열 비교)을 사용하여 확인될 수 있다.

본 발명의 폴리뉴클레오티드는 화학 합성, 재조합 방법 또는 PCR을 사용하여 생산될 수 있다. 화학 폴리뉴클레오티드 합성 방법은 당분야에 주지되어 있고 본원에 상세히 기재될 필요는 없다. 당업자는 본원에 제공된 서열 및 상업적 DNA 합성 장치를 사용하여 목적하는 DNA 서열을 생산할 수 있다.

재조합 방법을 사용하여 폴리뉴클레오티드를 생산하기 위해, 본원에 추가로 논의되는 바와 같이, 목적하는 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드를 적합한 벡터 내로 삽입할 수 있고, 차례로 벡터를 복제 및 증폭에 적합한 숙주 세포 내로 도입할 수 있다. 폴리뉴클레오티드를 당분야에 공지된 임의의 방법에 의해 숙주 세포 내로 삽입할 수 있다. 외인성 폴리뉴클레오티드를 직접 도입, 세포내섭취, 형질주입, F-메이팅 또는 전기천공에 의해 도입함으로써 세포를 형질전환시킨다. 도입 후에, 외인성 폴리뉴클레오티드는 세포 내에 비-일체 벡터(예컨대 플라스미드)로서 유지될 수 있거나 숙주 세포 게놈 내로 일체화될 수 있다. 이렇게 증폭된 폴리뉴클레오티드는 당분야에 주지된 방법에 의해 숙주 세포로부터 단리될 수 있다. 예를 들어, 문헌[Sambrook et al., 1989]을 참조한다.

대안적으로, PCR은 DNA 서열의 복제를 가능하게 한다. PCR 기술은 당분야에 주지되어 있고 US 4,683,195, 4,800,159, 4,754,065 및 4,683,202, 및 문헌[PCR: The Polymerase Chain Reaction, Mullis et al. eds., Birkauswer Press, Boston, 1994]에 기재되어 있다.

RNA는 적절한 벡터에서 단리된 DNA를 사용하고 이를 적합한 숙주 세포 내로 삽입함으로써 생산될 수 있다. 세포가 복제하고 DNA가 RNA로 전사될 때, RNA는 예를 들어 상기 문헌[Sambrook et al., 1989]에 제시된 바와 같이 당업자에게 주지된 방법을 사용하여 단리될 수 있다.

적합한 클로닝 벡터는 표준 기술에 따라 구축될 수 있거나, 당분야에서 이용가능한 많은 클로닝 벡터로부터 선택될 수 있다. 선택된 클로닝 벡터가 사용되도록 의도된 숙주 세포에 따라 변할 수 있지만, 유용한 클로닝 벡터는 일반적으로 자기-복제할 수 있는 능력을 가질 수 있고/있거나 특정 제한 엔도뉴클라제에 대한 단일 표적을 가질 수 있고/있거나 벡터를 함유하는 클론을 선택함에 있어서 사용될 수 있는 마커에 대한 유전자를 가질 수 있다. 적합한 예는 플라스미드 및 박테리아 바이러스, 예를 들어 pUC18, pUC19, Bluescript(예를 들어 pBS SK+) 및 이의 유도체, mp18, mp19, pBR322, pMB9, ColE1, pCR1, RP4, 파지 DNA, 및 셔틀 벡터, 예컨대 pSA3 및 pAT28을 포함한다. 상기 및 많은 기타 클로닝 벡터가 상업 판매회사, 예컨대 BioRad, Strategene 및 Invitrogen으로부터 입수가능하다.

발현 벡터가 추가로 제공된다. 발현 벡터는 일반적으로 본 발명에 따른 폴리뉴클레오티드를 함유하는 복제가능한 폴리뉴클레오티드 구축물이다. 발현 벡터가 숙주 세포에서 에피좀으로서 또는 염색체 DNA의 일체 부분으로서 복제가능해야 함이 시사된다. 적합한 발현 벡터는 비제한적으로 플라스미드, 바이러스 벡터, 예컨대 아데노바이러스, 아데노 관련 바이러스, 레트로바이러스, 코스미드 및 WO 87/04462에 개시된 발현 벡터를 포함한다. 벡터 성분은 일반적으로 비제한적으로 하기 중 하나 이상을 포함한다: 신호 서열; 복제 기점; 하나 이상의 마커 유전자; 적합한 전사 제어 요소(예컨대 프로모터, 인핸서 및 종결 부위). 발현(즉 전사)에서, 하나 이상의 전사 제어 요소, 예컨대 리보좀 결합 부위, 전사 개시 부위 및 정지 코돈이 또한 일반적으로 필요하다.

해당 폴리뉴클레오티드를 함유하는 벡터는 많은 적절한 방법, 예컨대 전기천공, 칼슘 클로라이드, 루비듐 클로라이드, 칼슘 포스페이트, DEAE-덱스트란 또는 기타 물질을 사용하는 형질주입; 미세 투사물 충격; 리포펙션; 및 감염(예를 들어 여기서 벡터는 감염체, 예컨대 우두 바이러스임)에 의해 숙주 세포 내로 도입될 수 있다. 도입 벡터 또는 폴리뉴클레오티드의 선택은 흔히 숙주 세포의 특징에 좌우될 수 있다.

또한, 본 발명은 본원에 기재된 임의의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 숙주 세포를 제공한다. 이종 DNA를 과발현할 수 있는 임의의 숙주 세포가 해당 항체, 폴리펩티드 또는 단백질를 암호화하는 유전자를 단리하기 위한 목적으로 사용될 수 있다. 포유동물 숙주 세포의 비제한적인 예는 비제한적으로 COS, HeLa 및 CHO 세포를 포함한다. 또한, WO 87/04462를 참조한다. 적합한 비-포유동물 숙주 세포는 원핵생물(예컨대 에스케리키아 콜라이(Escherichia coli) 또는 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)) 및 효모(예컨대 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae), 쉬조사카로마이세스 폼베(Schizosaccharomyces pombe); 또는 클루이베로마이세스 락티스(Kluyveromyces lactis))를 포함한다. 바람직하게는, 숙주 세포는 숙주 세포에 존재하는 경우 상응하는 해당 내인성 항체 또는 단백질의 것보다 약 5배, 보다 바람직하게는 10배, 보다 더 바람직하게는 20배 높은 수준의 cDNA를 발현한다. NGF에 대한 특이적 결합에 대해 숙주 세포를 스크리닝하는 것은 면역 분석 또는 FACS에 의해 수행된다. 해당 항체 또는 단백질을 과발현하는 세포가 확인될 수 있다.

조성물

본 발명은 본원에 기재된 항-NGF 항체의 효과량을 포함하는 약학 조성물을 제공한다. 이러한 조성물의 예 및 제형화 방법이 또한 본원에 기재된다.

조성물은 하나 초과의 항-NGF 항체를 포함할 수 있는 것으로 이해된다.

본 발명에 사용된 조성물은 동결 건조된 제형 또는 수용액의 형태로 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 안정화제를 추가로 포함할 수 있다(문헌[Remington: The Science and practice of Pharmacy 20th Ed., 2000, Lippincott Williams and Wilkins, Ed. K. E. Hoover]). 허용되는 담체, 부형제 또는 안정화제는 투여량 및 농도에서 수용자에게 비독성이고, 완충제, 예컨대 포스페이트, 시트레이트 및 기타 유기 산; 산화 방지제, 예컨대 아스크로브산 및 메티오닌; 보존제(예컨대 옥타데실다이메틸벤질 암모늄 클로라이드; 헥사메토늄 클로라이드; 벤즈알코늄 클로라이드, 벤즈에토늄 클로라이드; 페놀, 부틸 또는 벤질 알코올; 알킬 파라벤, 예컨대 메틸 또는 프로필 파라벤; 카테콜; 레조르시놀; 사이클로헥산올; 3-펜탄올; 및 m-크레졸); 저분자량(약 10개 미만의 잔기) 폴리펩티드; 단백질, 예컨대 혈청 알부민, 젤라틴 또는 면역 글로불린; 친수성 중합체, 예컨대 폴리비닐피롤리돈; 아미노산, 예컨대 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 히스티딘, 아르기닌 또는 리신; 모노사카라이드, 다이사카라이드, 및 기타 탄수화물, 예컨대 글루코스, 만노스 또는 덱스트란; 킬레이트화제, 예컨대 EDTA; 당, 예컨대 수크로스, 만니톨, 트레할로스 또는 솔비톨; 염 형성 상대 이온, 예컨대 나트륨; 금속 착체(예를 들어 Zn-단백질 착체); 및/또는 비이온성 계면활성제, 예컨대 TWEEN(상표), PLURONICS(상표) 또는 폴리에틸렌 글리콜(PEG)을 포함할 수 있다. 약학적으로 허용되는 부형제는 본원에 추가로 기재된다.

또한, 항-NGF 항체 및 이의 조성물은 제제의 효과를 증진시키고/시키거나 보완하는 역할을 하는 다른 제제와 함께 사용될 수 있거나, 그와 별개로, 동시에 또는 순차적으로 투여될 수 있다.

골관절염의 징후 또는 증상의 개선 방법

한 양태에서, 본 발명은 환자에서 골관절염(OA)의 징후 또는 증상을 치료하는 방법을 제공한다.

일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 개체에게 추가적 형태의 요법에 의해 치료하는 단계를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 추가적 형태의 요법은 NGF 길항제, trkA 길항제, IL-1 길항제, IL-6 길항제, IL-6R 길항제, 오피오이드, 아세트아미노펜, 국부 마취제, NMDA 조절제, 칸나비노이드 수용체 작용제, P2X 패밀리 조절제, VR1 길항제, 기질 P 길항제, Nav1.7 길항제, 사이토킨 또는 사이토킨 수용체 길항제, 스테로이드, 기타 염증 억제제 및 코르티코스테로이드로부터 선택될 수 있는 추가적 치료제이다.

일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 환자에 대한 NSAID 투여를 포함하지 않는다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 환자에 대한 오피오이드 투여를 포함하지 않는다.

본원에 기재된 모든 방법에 대하여, 항-NGF 항체의 언급은 또한 하나 이상의 추가적 제제를 포함하는 조성물을 포함한다. 이들 조성물은 당분야에 주지된 적합한 부형제, 예컨대 약학적으로 허용되는 부형제, 예컨대 완충제를 추가로 포함할 수 있다. 본 발명은 단독으로 또는 다른 치료 방법과 병용으로 사용될 수 있다.

본원에 기재된 항-NGF 항체는 전신 투여(예를 들어 정맥내 또는 피하 투여)를 통해 개체에게 투여된다. 바람직하게는, 항체는 피하 주사를 통해 투여된다.

항-NGF 항체의 다양한 제형이 투여에 사용될 수 있다. 약학적으로 허용되는 부형제는 당분야에 공지되어 있고, 약리학적으로 효과적인 물질의 투여를 가능하게 하는 비교적 불활성 물질이다. 예를 들어, 부형제는 형태 또는 농도를 제공할 수 있거나 희석제로서 작용할 수 있다. 적합한 부형제는 비제한적으로 안정화제, 습윤제 및 유화제, 삼투압 조절용 염, 캡슐화제, 완충제 피부 침투 인핸서를 포함한다. 장관외 및 비장관외 약물 전달을 위한 부형제 및 제형은 문헌[Remington, The Science and Practice of Pharmacy 20th Ed. Mack Publishing, 2000]에 제시되어 있다.

일부 실시양태에서, 이들 제제는 (예를 들어 복강내로, 정맥내로, 피하로, 근육내로, 관절내로 등) 주사에 의한 투여를 위해 제형화된다. 따라서, 이들 제제는 약학적으로 허용되는 비히클, 예컨대 염수, 링거액, 덱스트로스 용액 등과 조합될 수 있다. 특정 투여량 섭생법, 즉 투여량, 타이밍 및 반복은 특정 개체 및 상기 개체의 병력에 좌우될 수 있다.

일부 실시양태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 타네주맙은 본원에 참고로 포함된 WO2010/032220에 기재된 제형으로 투여된다.

일부 실시양태에서, 제형은 액체 제형이고, 약 2.5 mg/ml, 5 mg/ml, 10 mg/ml 또는 20 mg/ml 농도의 항-NGF 항체, 및 히스티딘 완충제를 포함한다.

일부 실시양태에서, 제형은 폴리솔베이트 20일 수 있는 계면활성제를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 제형은 트레할로스 디하이드레이트 또는 수크로스를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 제형은 EDTA; 일부 실시양태에서 이나트륨 EDTA일 수 있는 킬레이트화제를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 제형은 pH 6.0 ± 0.3의 것이다.

일부 실시양태에서, 제형은 약 2.5 mg/ml, 5 mg/ml, 10 mg/ml 또는 20 mg/ml 타네주맙; 약 10 mM 히스티딘 완충제; 약 84 mg/ml 트레할로스 디하이드레이트; 약 0.1 mg/ml 폴리솔베이트 20; 약 0.05 mg/ml 이나트륨 EDTA를 포함하고; 제형은 pH 6.0 ± 0.3의 것이다.

일부 실시양태에서, 제형은 약 2.5 mg/ml 또는 5 mg/ml를 포함한다. 일부 실시양태에서, 제형은 약 1 ml의 총 부피를 갖는다.

일부 실시양태에서, 제형은 유리 또는 플라스틱 바이알 또는 시린지에 담긴다. 일부 실시양태에서, 제형은 사전 충전된 유리 또는 플라스틱 바이알 또는 시린지에 담긴다.

항-NGF 항체는 8주마다 투여될 수 있다. 여러 투여량에 걸친 반복 투여에서, 치료는 골관절염의 징후 또는 증상의 목적하는 억제가 발생할 때까지 지속된다. 이러한 요법의 진행은 통상적 기술 및 분석에 의해 모니터링될 수 있다.

투여 섭생법(사용된 특이적 항-NGF 항체를 포함함)은 시간이 흐름에 따라 변할 수 있다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 투여량은 8주마다 투여되는 2.5 mg이다. 일부 실시양태에서, 투여량은 8주마다 투여되는 5 mg이다. 일부 실시양태에서, 2.5 mg의 투여량은 후속 투여에서 5 mg으로 증가될 수 있다. 예를 들어, 2.5 mg의 투여량이 요법 시작시 투여될 수 있고, 이어서 5 mg의 투여량이 제8주에 투여될 수 있고, 5 mg의 투여량은 제16주에 투여되고, 이후에는 각각 8주에 1회의 투여량이 투여될 수 있다. 또한, 또 다른 예로서, 2.5 mg의 투여량은 요법 개시시 및 제8주에 투여될 수 있고, 5 mg의 투여량이 제16주에 투여될 수 있고, 이후에는 각각 8주에 1회의 투여량이 투여될 수 있다. 또한, 또 다른 예로서, 2.5 mg의 투여량이 요법의 개시시 투여될 수 있고 8주에 1회 투여량이 1 또는 2회 이상 투여된 후에, 5 mg의 후속 투여량이 8주마다 투여될 수 있다.

항체가 파시누맙인 일부 양태에서(예를 들어 본원에 참고로 포함된 US 2009/0041717 참조), 항체는 0.5 내지 50 mg의 투여량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 항체는 0.5 내지 12 mg의 투여량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 항체는 1 mg, 2 mg, 3 mg, 4 mg, 5 mg, 6 mg, 7 mg, 8 mg, 9 mg 또는 10 mg의 투여량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 항체는 피하로 또는 정맥내로 투여된다. 일부 실시양태에서, 항체는 4주마다 또는 8주마다 투여된다.

항체가 파시누맙과 동일하거나 실질적으로 동일한 아미노산 서열을 포함하는 일부 양태에서(예를 들어 본원에 참고로 포함된 US 2009/0041717 참조), 항체는 0.5 내지 50 mg의 투여량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 항체는 0.5 내지 12 mg의 투여량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 항체는 1 mg, 2 mg, 3 mg, 4 mg, 5 mg, 6 mg, 7 mg, 8 mg, 9 mg 또는 10 mg의 투여량으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 항체는 피하로 또는 정맥내로 투여된다. 일부 실시양태에서, 항체는 4주마다 또는 8주마다 투여된다.

일부 실시양태에서, 부하 투여량(또는 유도 투여량)이 투여된 후에, 유지 투여량의 투여가 보다 적은 양으로 보다 적은 빈도로 뒤따른다.

본 발명의 목적을 위해, 항-NGF 항체의 적절한 투여량은 사용된 항체, 치료할 증상의 유형 및 중증도, 제제가 예방 또는 치료 목적으로 투여되는지 여부, 이전 요법, 환자의 병력 및 제제에 대한 반응, 투여된 제제에 대한 환자의 클리어런스 비 및 담당의의 재량에 좌우될 것이다. 전형적으로 투여량이 목적하는 결과를 달성하는 데 이를 때까지 임상의는 항-NGF 항체를 투여할 것이다. 투여량 및/또는 빈도는 치료 과정에 걸쳐 변할 수 있다. 실증적 고려사항, 예컨대 반감기는 일반적으로 투여량의 결정에 기여할 것이다. 투여의 빈도는 치료 과정에 걸쳐 결정되고 조정될 수 있고, 반드시 그러한 것은 아니나 일반적으로 증상의 치료 및/또는 억제 및/또는 개선 및/또는 지연을 기반으로 한다.

한 실시양태에서, 항-NGF 항체의 투여량은 1회 이상의 투여량의 항-NGF 항체를 제공받은 개체에서 실증적으로 결정될 수 있다. 예를 들어, 개체는 증가하는 투여량의 항-NGF 항체를 제공받는다. 효능을 평가하기 위해, 골관절염의 징후 또는 증상의 지표가 따를 수 있다.

본 발명의 방법에 따른 본원에 기재된 항-NGF 항체의 투여는 예를 들어 수용자의 생리학적 상태, 투여의 목적이 치료를 위한 것인지 또는 예방을 위한 것인지 여부, 및 숙련된 의사에게 공지된 기타 인자에 따라 지속적일 수 있거나 간헐적일 수 있다. 항-NGF 항체의 투여는 사전 선택된 기간에 걸쳐 본질적으로 지속적일 수 있거나 일련의 간격을 둔 투여량으로 투여될 수 있다.

일부 실시양태에서, 하나 초과의 항-NGF 항체가 존재할 수 있다. 적어도 1개, 적어도 2개, 적어도 3개, 적어도 4개, 적어도 5개 또는 그 이상의 상이한 항-NGF 항체가 존재할 수 있다. 일반적으로, 이들 항-NGF 항체는 서로 악영향을 미치지 않는 상보적 활성을 가질 수 있다.

일부 실시양태에서, 항-NGF 항체는 하나 이상의 추가적 치료제의 투여와 병용으로 투여될 수 있다.

일부 실시양태에서, 항-NGF 항체 투여는 수술을 포함하는 통상적 요법 치료 섭생법과 병용된다.

제형

본 발명에 따라 사용되는 항-NGF 항체의 치료 제형은 목적하는 순도를 갖는 단백질을 임의적 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 안정화제와 혼합함으로써 동결건조된 제형 또는 수용액의 형태로 저장을 위해 생산된다(문헌[Remington, The Science and Practice of Pharmacy 20th Ed. Mack Publishing, 2000]). 허용되는 담체, 부형제 또는 안정화제는 사용된 투여량 및 농도에서 수용자에게 비독성이고, 완충제, 예컨대 포스페이트, 시트레이트 및 기타 유기 산; 염, 예컨대 나트륨 클로라이드; 산화 방지제, 예컨대 아스코르브산 및 메티오닌; 보존제(예컨대 옥타데실다이메틸벤질 암모늄 클로라이드; 헥사메토늄 클로라이드; 벤즈알코늄 클로라이드, 벤즈에토늄 클로라이드; 페놀, 부틸 또는 벤질 알코올; 알킬 파라벤, 예컨대 메틸 또는 프로필 파라벤; 카테콜; 레조르시놀; 사이클로헥산올; 3-펜탄올; 및 m-크레졸); 저분자량(약 10개 미만의 잔기) 폴리펩티드; 단백질, 예컨대 혈청 알부민, 젤라틴 또는 면역 글로불린; 친수성 중합체, 예컨대 폴리비닐피롤리돈; 아미노산, 예컨대 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 히스티딘, 아르기닌 또는 리신; 모노사카라이드, 다이사카라이드 및 기타 탄수화물, 예컨대 글루코스, 만노스 또는 덱스트린; 킬레이트화제, 예컨대 EDTA; 당, 예컨대 수크로스, 만니톨, 트레할로스 또는 솔비톨; 염 형성 상대 이온, 예컨대 나트륨; 금속 착체(예를 들어 Zn-단백질 착체); 및/또는 비이온성 계면활성제, 예컨대 TWEEN(상표), PLURONICS(상표) 또는 폴리에틸렌 글리콜(PEG)을 포함할 수 있다.

항-NGF 항체를 함유하는 리포좀은 예컨대 문헌[Epstein, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82:3688 (1985)]; [Hwang, et al., Proc. Natl Acad. Sci. USA 77:4030 (1980)]; 및 US 4,485,045 및 4,544,545에 기재된 당분야에 공지된 방법에 의해 생산된다. 증진된 순환 시간을 갖는 리포좀은 US 5,013,556에 개시되어 있다. 특히 유용한 리포좀은 포스파티딜콜린, 콜레스테롤 및 PEG-유도체화된 포스파티딜에탄올아민(PEG-PE)을 포함하는 지질 조성물을 사용한 역상 증발에 의해 생산될 수 있다. 리포좀은 목적하는 직경을 갖는 리포좀을 수득도록 한정된 공극 크기의 필터를 통해 압출된다.

또한, 활성 성분은 예를 들어 코아세르베이션(coacervation) 기술 또는 계면 중합에 의해 제조된 마이크로 캡슐, 예를 들어 각각 하이드록시메틸셀룰로스 또는 젤라틴-마이크로 캡슐 및 폴리-(메틸메타크릴레이트) 마이크로 캡슐, 콜로이드성 약물 전달 시스템(예를 들어 리포좀, 알부민 마이크로 스피어, 마이크로 유화액, 나노 입자 및 나노 캡슐) 또는 마이크로 유화액에 포착될 수 있다. 이러한 기술은 문헌[Remington, The Science and Practice of Pharmacy 20th Ed. Mack Publishing (2000)]에 개시되어 있다.

서방형 제제를 제조할 수 있다. 서방형 제제의 적합한 예는 항체를 함유하는 고체 소수성 중합체의 반투성 매트릭스를 포함하고, 상기 매트릭스는 성형체, 예를 들어 필름 또는 마이크로 캡슐의 형태이다. 서방형 매트릭스의 예는 폴리에스터, 하이드로겔(예를 들어 폴리(2-하이드록시에틸-메타크릴레이트) 또는 폴리(비닐알코올)), 폴리락티드(US 3,773,919), L-글루탐산 및 7 에틸-L-글루타메이트의 공중합체, 난분해성 에틸렌-비닐 아세테이트, 분해성 락트산-글리콜산 공중합체, 예컨대 LUPRON DEPOT(상표)(락트산-글리콜산 공중합체 및 류프롤리드 아세테이트로 구성된 주사용 마이크로 스피어), 수크로스 아세테이트 이소부티레이트, 및 폴리-D-(-)-3-하이드록시부티르산을 포함한다.

생체내 투여에 사용되는 제형은 멸균되어야 한다. 이는 예를 들어 멸균 여과 막을 통한 여과에 의해 용이하게 달성된다. 치료용 항-NGF 항체 조성물은 일반적으로 멸균 접근 포트를 갖는 용기, 예를 들어 피하 주사 바늘에 의해 뚫릴 수 있는 스타퍼를 갖는 정맥내 용액 백 또는 바이알 내에 위치한다.

본 발명에 따른 조성물은 경구, 비경구 또는 직장 투여, 또는 흡인 또는 흡입에 의한 투여를 위한 단위 투여량 형태, 예컨대 정제, 환약, 캡슐, 분말, 과립, 용액 또는 현탁액, 좌제일 수 있다.

고체 조성물, 예컨대 정제의 제조를 위해, 주요 활성 성분을 약학 담체, 예를 들어 통상적 정제화 성분, 예컨대 옥수수 전분, 락토스, 수크로스, 솔비톨, 활석, 스테아르산, 마그네슘 스테아레이트, 이칼슘 포스페이트 또는 검, 및 기타 약학 희석제, 예를 들어 물과 혼합하여 본 발명의 화합물 또는 이의 비독성의 약학적으로 허용되는 염의 균질 혼합물을 함유하는 고체 사전 제형화 조성물을 형성한다. 이들 사전 제형화 조성물이 균질한 것으로 언급되는 경우, 활성 성분이 조성물에 걸쳐 고르게 분포되어 조성물이 동일하게 효과적인 단위 투여량 형태, 예컨대 정제, 환약 및 캡슐로 용이하게 세분될 수 있음을 의미한다. 이어서, 이러한 고체 사전 제형화 조성물은 약 0.1 내지 약 500 mg의 본 발명의 활성 성분을 함유하는 상기에 기재된 유형의 단위 투여량 형태로 세분화된다. 새로운 조성물의 정제 또는 환약은 코팅될 수 있거나 컴파운딩되어 장기 작용의 유리점을 제공하는 투여량 형태를 제공할 수 있다. 예를 들어, 정제 또는 환약은 내부 투여량 및 외부 투여량 성분을 포함할 수 있고, 후자는 전자 위에 외피의 형태이다. 2개의 성분은, 위에서 분해에 저항하고 내부 성분이 온전하게 십이지장으로 통과하는 것을 가능하게 하거나 서서히 방출되게 하는 작용을 하는 장용성 층에 의해 분리될 수 있다. 다양한 물질이 이러한 장용성 층 또는 코팅에 사용될 수 있고, 이러한 물질은 많은 중합체성 산 및 중합체성 산과 쉘락, 세틸 알코올 및 셀룰로스 아세테이트와 같은 물질의 혼합물을 포함한다.

적합한 표면 활성제는 특히 비이온성 제제, 예컨대 폴리옥시에틸렌솔비탄(예를 들어 Tween(상표) 20, 40, 60, 80 또는 85) 및 기타 솔비탄(예를 들어 Span(상표) 20, 40, 60, 80 또는 85)을 포함한다. 표면 활성제를 갖는 조성물은 적절하게 0.05 내지 5% 표면 활성제를 포함할 수 있고, 0.1 내지 2.5%일 수 있다. 다른 성분, 예를 들어 만니톨, 또는 다른 약학적으로 허용되는 비히클이 필요에 따라 첨가될 수 있음이 이해된다.

적합한 유화액은 상업적으로 입수가능한 지방 유화액, 예컨대 Intralipid(상표), Liposyn(상표), Infonutrol(상표), Lipofundin(상표) 및 Lipiphysan(상표)을 사용하여 제조할 수 있다. 활성 성분은 사전 혼합된 유화액 조성물에 용해될 수 있거나 대안적으로 이는 오일(예를 들어 대두 오일, 홍화 오일, 면실 오일, 옥수수 오일 또는 아몬드 오일) 및 인지질(예를 들어 계란 인지질, 대두 인지질 또는 대두 레시틴) 및 물과 혼합시 형성된 유화액에 용해될 수 있다. 다른 성분, 예를 들어 글리세롤 또는 글루코스가 유화액의 장력을 조정하기 위해 첨가될 수 있음이 이해된다. 적합한 유화액은 전형적으로 20% 이하의 오일, 예를 들어 5 내지 20%의 오일을 함유할 수 있다. 지방 유화액은 0.1 내지 1.0 μm, 특히 0.1 내지 0.5 μm의 지방 액적을 포함할 수 있고, 5.5 내지 8.0 범위의 pH를 가질 수 있다.

유화액 조성물은 항-NGF 항체를 Intralipid(상표) 또는 이의 성분(대두 오일, 계란 인지질, 글리세롤 및 물)과 혼합함으로써 제조된 것일 수 있다.

흡인용 또는 흡입용 조성물은 약학적으로 허용되는 수성 또는 유기 용매 중의 용액 또는 현탁액, 또는 이들의 혼합물, 및 분말을 포함한다. 액체 또는 고체 조성물은 상기에 제시된 적합한 약학적으로 허용되는 부형제를 함유할 수 있다. 일부 실시양태에서, 조성물은 국부 또는 전신 효과를 위해 경구 또는 코 호흡 경로에 의해 투여된다. 바람직하게는 멸균의 약학적으로 허용되는 용매 중의 조성물은 기체의 사용에 의해 분무될 수 있다. 분무되는 용액은 분무 장치로부터 직접적으로 흡입될 수 있거나, 흡입 장치는 페이스 마스크, 텐트 또는 간헐적 정압 호흡 기계에 부착될 수 있다. 용액, 현탁액 또는 분말 조성물은 적절한 방법으로 제형을 전달하는 장치로부터 바람직하게는 경구로 또는 코로 투여될 수 있다.

키트

또한, 본 발명은 본원에 기재된 모든 항-NGF 항체를 포함하는 포함하는 키트를 제공한다. 본 발명의 키트는 본원에 기재된 항-NGF 항체를 포함하는 하나 이상의 용기 및 본원에 기재된 본 발명의 임의의 방법에 따르는 지시서를 포함한다. 일반적으로, 이들 지시서는 상기에 기재된 치료적 치료를 위한 항-NGF 항체의 투여의 설명을 포함한다. 일부 실시양태에서, 키트는 단일 투여량 투여를 제시하기 위해 제공된다. 특정 실시양태에서, 키트는 건조된 단백질을 갖는 제1 용기 및 수성 제형을 갖는 제2 용기 둘 모드를 함유할 수 있다. 특정 실시양태에서, 단실 및 다실의 사전 충전된 시린지(예를 들어 액체 시린지 및 라이오 시린지)를 함유하는 키트가 포함된다.

항-NGF 항체의 사용과 관련된 지시서는 일반적으로 의도된 치료를 위한 투여량, 투여 일정 및 투여의 경로에 관한 정보를 포함한다. 용기는 단위 투여량, 벌크 패키지(예를 들어 멀티-투여량 패키지) 또는 하위 단위 투여량일 수 있다. 본 발명의 키트에 제공되는 지시서는 전형적으로 라벨 또는 패키지 삽입물(예를 들어 키트에 포함된 종이 시트) 상에 기록된 지시서이나, 기계로 판독가능한 지시서(예를 들어 자성 또는 광학 저장 디스크 상에 포함된 지시서)가 또한 허용된다.

본 발명의 키트는 적합한 패키징으로 존재한다. 적합한 패키징은 비제한적으로 바이알, 병, 자(jar), 가요성 패키징(예를 들어 밀봉된 마일라 또는 플라스틱 백) 등을 포함한다. 특정 장치, 예컨대 흡입기, 비강 투여 장치(예를 들어 애토마이저) 또는 주입 장치, 예컨대 미니 펌프와 조합으로 사용되는 패키지가 또한 고려된다. 키트는 멸균 접근 포트를 가질 수 있다(예를 들어 용기는 피하 주사 바늘에 뚫릴 수 있는 스타퍼를 갖는 정맥내 용액 백 또는 바이알일 수 있다). 또한, 용기는 멸균 접근 포트를 가질 수 있다(예를 들어 용기는 피하 주사 바늘에 의해 뚫릴 수 있는 스타퍼를 갖는 정맥내 용액 백 또는 바이알일 수 있다). 조성물의 적어도 하나의 활성제는 항-NGF 항체이다. 용기는 제2 약학 활성제를 추가로 포함할 수 있다.

키트는 임의적으로 추가적 성분, 예컨대 완충제 및 설명 정보를 제공할 수 있다. 일반적으로, 키트는 용기, 및 상기 용기 상의 또는 그와 결합된 라벨 또는 패키지 삽입물을 포함한다.

실시예

실시예 1

연구 설계

이는 고관절 또는 무릎의 중등도 내지 중증 OA를 갖는 환자에서 피하(SC) 타네주맙의 효능 및 안전성을 평가하는 무작위화, 이중맹검, 플라세보-제어, 멀티센터, 병행 군, 투여량 적정 연구(16-주 치료 기간, 24-주 안전성 후속 기간)였다. 모든 환자는 참가 전에 사전 동의 서면을 제출하였다. 연구를 헬싱키 선언 및 모든 국제 조화 회의 임상시험 관리 가이드라인에 따라 수행하였다.

일차 목적은, 플라세보 처리와 비교하여, 고정 투여(기선 및 제8주에서 투여된 2.5 mg) 및 강제적 투여량 적정(기선에서 투여된 2.5 mg 및 제8주에서 투여된 5 mg)의 제16주에서 2개의 SC 타네주맙 치료 섭생법의 우수한 효능을 입증하는 것이다. 이차 목적은 하기를 평가하는 것이다: (1) 8주 간격의 타네주맙 2.5 mg의 2회의 투여와 비교한, 제8주에서 2.5 mg으로부터 5 mg으로 적정된 타네주맙의 효능; 및 (2) 타네주맙 투여 섭생법 둘 모두에 대한 안전성.

연구를 3개의 기간으로 나누었다: 스크리닝(≤37일), 치료(16주) 및 안전성 후속 기간(24주). 스크리닝 절차는 금지 약물 세척 기간 및 초기 통증 평가 기간(IPAP)(무작위화/기선 3 내지 7일 전)을 포함하였다.

연구 집단

환자는 18세 이상이고, 미국 류마티스학 협회 기준 및 스크리닝시 x-선 확인(켈그렌-로렌스 x-선 등급 ≥2)에 따라 고관절 또는 무릎 OA를 갖는 것으로 진단받았다. 참가 기준은 스크리닝 및 기선 둘 모두에서 5 이상의 인덱스 관절 WOMAC 통증 보조척도, 5 이상의 기선 WOMAC 신체 기능 보조척도, 및 "보통", "나쁨" 또는 "매우 나쁨"의 기선 환자의 골관절염의 전반적 평가(PGA-OA)를 포함하였다. 인덱스 관절을 스크리닝시 최대 통증의 고관절 또는 무릎으로서 정의하였다. 환자는 하기와 같은 기록된 이력을 가졌다: (1) 아세트아미노펜으로부터 불충분한 통증 경감; (2) 불충분한 통증 경감, NSAID에 대한 과민성 또는 NSAID에 대한 사용 금지 사유; 및 (3) 불충분한 통증 경감, 트라마돌 또는 오피오이드에 대한 과민성, 또는 트라마돌 또는 오피오이드에 대한 사용 금지 사유(또는 오피오이드 복용의 꺼림).

주요 배제 기준은 하기를 포함하였다: 중앙 판독사에 의해 결정시 스크리닝 x-선 상에서 임의의 주요 관절에서 사전 지정된 관절 안전성 질환(예를 들어 급속 진행성 OA[RPOA], 연골하 부족 골절, 골괴사, 병적 골절)의 흔적; 인덱스 관절 효능 평가를 혼란시킬 수 있는 병력(예를 들어 류마티스 관절염, 혈청 반응 음성 척추관절병, 통풍, 연골 석회증/가통풍); 전년도 고관절, 무릎 또는 견관절의 큰 외상 또는 수술; 연구 동안 임의의 예정된 수술; 인덱스 관절에서 임의의 최근 관절내 코르티코스테로이드 또는 히알우론산 주사; 신경 질환의 병력(예를 들어 말초 또는 자율 신경병증, 알츠하이머병, 다발성 경화증); 스크리닝시 7 초과의 자율 신경 증상 조사(문헌[Zilliox et al., 2011;76(12):1099-1105]) 점수; 및 임신 또는 수유.

치료

컴퓨터-생성 무작위화 코드를 사용하여, 환자를 3개의 SC 치료 섭생법 중 하나에 동일하게 배분하여 무작위화하였다: 기선 및 제8주에 플라세보(즉 플라세보); 기선 및 제8주에 타네주맙 2.5 mg(즉 타네주맙 2.5 mg); 및 기선에서 타네주맙 2.5 mg 및 제8주에서 타네주맙 5 mg(즉 타네주맙 2.5/5 mg; 도 1).

허용되는 부수적 치료는 심혈관 예방을 위한 325 mg/d 이하의 아스피린 및 기타 비-OA, 비-통증 질환에 대한 안정한 투여량의 약제를 포함하였다. 진통제는 하기를 제외하고 금지되었다. 비-OA 질환에 대한 NSAID는 기선과 제24주 사이에 최대 10일/8-주 기간으로 허용되나 연구 방문 48시간 이내에는 허용되지 않는다. 구조 약제(아세트아미노펜)는 치료 기간 동안 ≤3000 mg/d 및 ≤3일/주로 허용되나, 효능 평가를 수집하는 인클리닉(in-clinic) 방문 24시간 이내에는 허용되지 않는다. OA 통증의 치료 기준은 마지막 연구 약물 투여량 16주 후에 허용된다.

효능 평가

공동-일차 효능 평가변수는 WOMAC 통증 보조척도, WOMAC 신체 기능 보조척도 및 PGA-OA의 기선에서 제16주까지의 변화이다(문헌[Theiler et al., Osteoarthritis Cartilage. 2002;10(6):479-481]; [Stengaard-Pederson et al., Rheumatology (Oxford). 2004;43(5):592-595]). WOMAC 통증 및 WOMAC 신체 기능 보조척도는 마지막 48시간 이내에 증상을 측정하고; 둘 모두는 11-점 숫자 평가 척도를 사용하되, 점수가 높을수록 높은 수준의 통증 또는 보다 악화된 기능을 시사한다. PGA-OA의 경우, 환자는 "관절/무릎의 골관절염이 당신에게 영향을 미치는 모든 방식을 고려할 때, 오늘 하루는 어땠나요?"라는 질문에 1(매우 좋음) 내지 5(매우 나쁨)의 척도로 답하게 된다.

주요 이차 효능 평가변수는 제16주에서 WOMAC 통증의 50% 이상의 반응자 비율이었다. 다른 이차 효능 평가변수는 제16주에서 WOMAC 통증 반응자 비율(≥30%, ≥70% 및 ≥90%), 및 제2주, 제4주, 제8주, 제12주 및 제16주 동안 환자가 보고한 구조 약제 사용이었다.

연구에 걸쳐 인접 시점 사이에(제4주 내지 제8주, 제8주 내지 제12주, 및 제12주 내지 제16주), WOMAC 통증 반응 카테고리의 개별적 환자 변화(무 반응: WOMAC 통증의 30% 미만의 감소; 중간 반응: WOMAC 통증의 30% 이상 내지 50% 미만의 감소; 및 고 반응: WOMAC 통증의 기선으로부터 50% 이상의 감소)를 분할표를 사용하여 조사하였다. 이들 분석을 사후에 수행하였다. 일관된 무 반응자는 2개의 연속된 시점에서 WOMAC 통증의 기선으로부터의 30% 미만의 감소를 갖는 환자였다. 일관된 중간 반응자는 2개의 연속된 시점에서 WOMAC 통증의 기선으로부터의 30% 이상 내지 50% 미만의 감소를 갖는 환자였다. 일관된 고 반응자는 2개의 연속된 시점에서 WOMAC 통증의 기선으로부터의 50% 이상의 감소를 유지한 환자였다.

안전성 평가

안전성 평가는 하기를 포함하였다: 이상 사례(AE) 보고; 실험실 시험; 12-유도 심전도; 시팅(sitting) 활력 징후; 기립 혈압 평가; 신체 검사; 근골격계 검사; 신경병증 장애 점수를 사용하여 기록한 신경학적 검사(문헌[Dyck et al., Neurology. 1995;45(6):1115-1121]); 자율 신경 증상 조사 점수(문헌[Zilliox et al., Neurology. 2011;76(12):1099-1105]); 전체 관절 대체(TJR)를 포함하는 관절 안전성 사례의 판정; 및 항-약물 항체 평가. AE는 MedDRA v21.0을 사용하여 암호화되었다. 치료를 연구하는 AE 중증도 및 상관관계를 조사관이 평가하였다.

신경 평가

프로토콜-명시된 기준을 충족하는 환자를 말초 신경병증 및/또는 자율 교감 신경병증에 대해 추가로 평가하였다. 신경 검사를 프로토콜-필수 트레이닝을 받은 조사관 또는 지정된 의사가 모든 클리닉 방문시 수행하였고, 결과를 신경병증 장애 점수(Dyck et al)를 사용하여 기록하였다. 말초 신경병증 또는 비정상적 말초 감각의 AE가 하기와 같이 기록된 경우 환자를 진찰 신경과 전문의에게 보냈다: (1) 중대함; (2) 중증의 강도; (3) 연구 철회를 야기함; 또는 (4) 연구 참가가 끝날 때까지 진행 중이었음. 임의의 중대하거나 중증의 자율 교감 신경병증을 시사하는AE(즉 서맥, 기립성 저혈압, 실신, 무한증 또는 발한 저하증)가 기록된 환자를 심장 전문의 또는 신경과 전문의가 추가로 평가하였다.

관절 안전성 사례

조사관은 각각의 연구 방문시 근골격계 검사를 수행하였다. 조사관은 eDiary를 통해 2주 이상 지속되는 증가된 중증 또는 지속적 통증을 기록한 환자를 평가하여 추가적 후속 조치가 필요한지를 결정하였다. 기선 후(post-baseline) x-선(예정되거나 구체적 이유로)을 가능하거나 예상되는 RPOA, 연골하 부족 골절, 일차 골괴사 또는 병적 골절에 대해 중앙 판독사가 평가하였다. 보장되는 경우, 자기 공명 이미징 스캔을 수행하였고/하였거나 환자는 정형외과 의사에게 보내졌다. 가능하거나 예상되는 관절 안전성 사례의 모든 경우 또는 임의의 이유의 TJR의 경우를 정형외과, 류마티스학, 정형외과 병리학 및 근골격계 방사선학 전문가로 이루어진 블라인딩된 판정 위원회가 판정하였다.

통계학

2개의 이전 연구의 조합된 분석을 사용하여(문헌[Brown et al., J Pain. 2012;13(8):790-798]; [Brown et al., Arthritis Rheum. 2013;65(7):1795-1803]), 3개의 모든 공동-일차 평가변수에 대해 플라세보 대비 타네주맙 2.5 mg 및 타네주맙 2.5/5 mg의 비교를 위해 5% 양측 수준에서 통계적 유의도를 달성하도록 90% 검정력을 제공하기 위해 치료군 당 약 230명의 개체의 샘플 크기를 결정하였다. 공동-일차 평가변수를 ITT(intent-to-treat) 집단(1회 이상의 연구 약제 투여량을 제공받은 모든 환자)에서 기선 점수, 기선 환자 일지 평균 통증, 인덱스 관절, 켈그렌-로렌스 등급, 치료군 및 연구 사이트에 대한 조건을 무작위 효과로서 사용하여 공분산 모델을 사용하여 분석하였다. 누락 데이터는 중단 이유에 따라 다중 대체 전략으로 처리하였다.

공동-일차 평가변수는 먼저 타네주맙 2.5/5 mg 대 플라세보의 시험으로서 정의된 단계적 하향 전략을 사용하였고, 통계적으로 유의미한 경우, 타네주맙 2.5 mg 대 플라세보를 시험하였다. 타네주맙 치료군은 3개의 모든 공동-일차 평가변수가 유의미한 경우 플라세보보다 우수한 것으로 선언되었다. 성공적인 일차 비교에 따라 주요 이차 효능 평가변수를 Hochberg 절차를 사용하여 둘 모두의 타네주맙 섭생법 대 플라세보에 대해 시험하였다. 다른 이차 평가변수에 대한 비교는 조정되지 않았다. 타네주맙 투여량 섭생법 사이의 비교는 단지 설명을 위한 것이었다. 안전성 평가는 치료군에 의해 치료군 집단의 백분율로서 요약되었다.

결과

환자

무작위화는 698명의 환자를 포함하였고, 696명은 1회 이상의 연구 치료 투여량을 제공받았다(적격성 기준을 충족시키지 않는 2명의 무작위화된 환자는 투여 전에 중단됨). 1회 이상의 연구 치료 투여량을 제공받은 모든 환자를 효능 및 안전성에 대해 분석하였다. 환자 기선 특징은 치료군 간에 유사하였다(표 2).

효능

타네주맙 2.5 mg 및 2.5/5 mg 둘 모두는 제16주에 플라세보와 비교하여 WOMAC 통증, WOMAC 신체 기능 및 PGA-OA의 통계적으로 유의미한 개선을 나타냈다(P≤.05; 도 2); 따라서, 둘 모두의 타네주맙 투여 섭생법은 공동-일차 평가변수를 충족하였다.

타네주맙 2.5 mg(둘 모두의 활성 치료군은 기선에서 제공받음)은 제1주 이내에 효능을 나타냈다. 플라세보와 비교하여, 둘 모두의 타네주맙 군은 제1주에서 평균 일일 인덱스 관절 통증의 통계적으로 유의미한 개선을 나타냈고(플라세보 대비 최소 제곱[LS] 평균 차이 ± 표준 오차[SE]: 타네주맙 2.5 mg 군의 경우 -0.33 ± 0.15, 및 타네주맙 2.5/5 mg 군의 경우 -0.38 ± 0.15, 둘 모두 P < 0.05), 제3일(타네주맙 2.5 mg 군) 및 제5일(타네주맙 2.5/5 mg 군)에 시작이 분명하였다. 둘 모두의 타네주맙 투여 섭생법은 제1 평가(제2주)에서 플라세보 대비 WOMAC 통증 및 WOMAC 신체 기능의 통계적으로 유의미한 효능을 나타냈다(플라세보, 타네주맙 2.5 mg 및 타네주맙 2.5/5 mg 군 각각에서 기선으로부터 WOMAC 통증 평균 변화[SE] -2.20 [0.21], -2.87 [0.21] 및 -2.89 [0.21], 플라세보 대비 각각의 타네주맙 아암에 대해 P≤.01; 플라세보, 타네주맙 2.5 mg 및 타네주맙 2.5/5 mg 군 각각에서 WOMAC 신체 기능 평균 변화[SE] -2.14 [0.21], -2.89 [0.21] 및 -3.05 [0.21], 플라세보 대비 각각의 타네주맙 아암에 대해 P≤.001). 제16주에, 각각의 타네주맙 섭생법의 보다 많은 비율의 환자(타네주맙 2.5 mg 및 타네주맙 2.5/5 mg 군 각각에서 54.5% 및 57.1%)는 플라세보와 비교하여(37.9%, 모든 경우 P≤.001) 기선으로부터 WOMAC 통증 보조척도의 50% 이상의 감소를 보고하였다. 또한, 각각의 타네주맙 섭생법의 보다 많은 비율의 환자는 제16주에서 플라세보와 비교하여(모든 경우 P≤.05) 기선으로부터 WOMAC 통증의 30% 이상 및 70% 이상의 감소를 보고하였다; 제16주에서 90% 이상의 반응 수준에서 치료군에 대한 유의미한 차이는 없었다(데이터는 나타내지 않음). 일반적으로, 제8주에 기선으로부터 15% 이상, 30% 이상 또는 50% 이상의 감소를 달성하지 않은 환자의 대다수는 제16주에서도 반응하지 않았다. 그러나, 제8주에 기선으로부터 WOMAC 통증의 50% 이상의 감소를 달성하지 않은 환자 중에서, 많은 비율(33%)이, 또 다른 2.5 mg의 투여량을 제공받은 군(22%) 또는 플라세보로 치료받은 군(19%)과 비교하여, 제8주에서 타네주맙 5 mg을 제공받은 후에 제16주에 기선에 대한 50% 이상의 개선을 경험하였다.

제8주 효능 평가 후 타네주맙 2.5/5 mg 군이 타네주맙 5 mg을 제공받았을 때 투여량 적정의 약간의 이점이 있었다. 제8주 평가에서 치료 반응이 없는(WOMAC 통증의 30% 미만의 감소) 타네주맙-치료받은 환자 중에서, 5 mg 투여량으로의 상향-적정은, 타네주맙 2.5 mg 제2 투여량을 제공받은 타네주맙 2.5 mg 군의 경우 각각 11.4%(10/88) 및 15.9%(14/88)와 비교하여, 제12주에 중간 반응으로의 전이22.2%(20/90) 및 고 반응으로의 전이 18.9%(17/90)를 야기하였다. 그러나, 제8주 평가에서 이미 중간 또는 고 반응(WOMAC 통증의 30% 이상의 감소)을 달성한 타네주맙-치료받은 환자에서, 5 mg 투여량으로의 상향-적정은 제12주에서 중간 또는 고 반응 유지의 확률을 증가시키지 않았다: 2.5 mg 군의 환자의 59.7%(138/231) 및 2.5/5 mg 군의 환자의 59.2%(138/233)가 제8주에서 제12주까지 중간 또는 고 반응을 유지하였다. 따라서, 무 반응자는 투여량 적정으로부터 이익을 얻었지만, 반응자는 그러하지 않았다. 제12주 및 제16주 평가에서, 기선으로부터의 효능 개선은 타네주맙 2.5 mg 군보다 타네주맙 2.5/5mg 군에서 약간 더 컸다(도 3).

타네주맙 2.5/5 mg으로 치료받은 군과 비교하여 보다 많은 플라세보 처리된 환자가 구조 약제를 복용한 것으로 보고된 제2주(P≤.05), 및 타네주맙 처리 아암의 환자보다 많은 플라세보 처리된 환자가 구조 약제를 복용한 것으로 보고된 제4주(둘 모두의 경우 P≤.05; 데이터는 나타내지 않음)를 제외하고, 구조 약제를 복용한 환자의 비율은 2개의 타네주맙 치료군과 플라세보 사이에 유의미한 차이는 존재하지 않았다.

안전성

AE의 빈도는 치료군에 걸쳐 유사하였다. 대부분의 AE는 경증 내지 중등도의 중증도를 나타냈다(데이터는 나타내지 않음). 비인두염, 사지 통증 및 둔감증은 임의의 치료군의 환자 중 3% 이상에서 발생하였고, 치료 기간 동안 플라세보와 비교하여 타네주맙-치료받은 환자에서 보다 빈번히 발생하였다. 7명의 환자가 AE로 인해 중단하였다. 비-소세포 폐암 단계 IV로 인한 1건의 사망 및 자살로 인한 1건의 사망이 타네주맙 2.5/5 mg 군에서 안전성 후속 기간 동안 보고되었다; 둘 중 어떤 것도 치료와 관련된 것으로 간주되지 않았다.

신경 평가

비정상적 말초 감각의 AE의 발생률은 치료군에 걸쳐 낮았고, 모두 경증 또는 중등도의 중증도를 나타냈다. 최종 신경 검사에서 대부분의 새롭거나 악화된 이상은 임상적으로 유의미한 것으로 간주되지 않았다. 임의의 시점에서 타네주맙-치료받은 환자와 플라세보 사이에 기선으로부터의 신경병증 장애 점수의 유의미한 차이는 없었다(데이터는 나타내지 않음). 연구 책임자에 의해 보고된, 심장 또는 신경 전문의가 평가한 환자의 교감 신경병증 진단은 없었다.

관절 안전성 사례

37명의 환자가 관절 안전성 사례를 판정하였다. 대부분 환자(30/37, 81%)는 정상 OA 진행으로 판정된 관절 안전성 사례를 가졌다. 판정된 RPOA 경우는 사전 정의된 용어에 의해 분류되었고(유형 1(급속 관절 공간 협소화 [≥2 mm]; n=4) 또는 유형 2(관절의 손상 또는 악화; n=2)), 타네주맙-치료받은 환자에서만 나타났다(6/464; 1.3%). 판정된 관절 안전성 사례의 대다수는 TJR이었다(28/37 환자; 76%). 대부분의 환자는 인덱스 관절의 TJR(26/28 환자; 93%), 선택적(elective) TJR(즉 관련된 AE는 없었고, TJR을 정상적 OA 진행으로 판정함; 21/28 환자; 75%), 정상적 OA 진행으로 판정된 TJR(26/28 환자; 93%) 및 치료 기간 후에 발생한 TJR(19/28 환자; 68%)을 겪었다.

고찰

타네주맙은, 환자 중 약 85%가 무릎 인덱스 관절을 가지고, 약 15%가 고관절 인덱스 관절을 갖는 본 연구에서 3개의 모든 공동-일차 평가변수에 대해 제16주에서 플라세보와 비교하여 둘 모두의 투여량 아암에서 우수한 효능을 나타냈다. 통증 및 신체 기능의 개선은 제2주에서 측정된 제1 시점에서 유의미하였다. 2.5 mg에서 5 mg으로의 타네주맙 강제적 적정은 타네주맙 2.5 mg을 계속한 환자와 비교하여 약간의 효능 개선을 야기하였다.

전반적으로, 타네주맙은 일반적으로 안전하고 내성이 좋았다. 치료군에 걸쳐, 보다 많은 AE가 안전성 후속 기간 대비 치료 기간 동안 발생하였다. 비인두염, 사지 통증 및 둔감증은 임의의 치료군의 환자 중 3% 이상에서 각각 관찰되었고, 플라세보-처리된 환자에서보다 타네주맙-치료받은 환자에서 보다 통상적이었다. 둔감증 및 사지 통증에 대해 관찰된 패턴은 OA의 이전 제어된 3상 타네주맙 연구의 데이터와 일치한다. 본 연구에서, 전반적으로 가장 통상적인 몇가지 AE(예를 들어 관절통, 둔감증)는 또한 OA의 이전 타네주맙 연구에서 가장 통상적인 AE 중 하나였다. 그러나, 본 연구에서, 관절통은 플라세보-처리된 환자에서보다 타네주맙-치료받은 환자에서 덜 통상적이고, 이전 타네주맙 연구와 상이한 패턴을 나타낸다.

본 연구에서, 소수의 환자는 전반적으로(37/696; 5%) 판정을 보장하는 관절 안전성 사례를 경험하였고, 대부분의 사례(30/37; 81%)는 정상적 OA 진행으로 판정되었다. 전반적으로, RPOA(유형 1, 가속된 관절 공간 협소화; 유형 2, 관절의 손상 또는 악화)는 6명(1.3%)의 타네주맙-치료받은 환자에서 발생하였다(문헌[Pivec et al., Orthopedics. 2013;36(2):118-125]). 골괴사, 연골하 부족 골절(하나의 경우는 연구 전에 존재하였던 것으로 간주되었다) 또는 병적 골절로 판정된 관절 안전성 사례는 없었다. RPOA(유형 1 및 2)로서 판정된 사례는 타네주맙 2.5/5 mg(0.4%)과 비교하여 타네주맙 2.5 mg 군(2.2%)에서 보다 흔히 발생하였고, 이는 본 연구에서 RPOA에 대한 타네주맙 투여량-반응 효과가 없음을 시사한다. RPOA 경우와 연관된 통증 경감 또는 통증의 급격한 증가의 일관된 패턴은 없었다. RPOA 유형 2 사례 모두는 스크리닝시 켈그렌-로렌스 등급 4였던 인덱스 관절에서 발생하였고, 연구 동안 NSAID 사용을 보고한 환자는 없었다. 하나의 RPOA 유형 2 경우에서, 연구 완료 후에 판정된 스크리닝 x-선은 환자가 타네주맙 치료 전에 위축성 OA 및 가능한 골괴사를 가졌음을 시사하였다.

모든 TJR은 스크리닝시 켈그렌-로렌스 등급 3 내지 4였던 관절에서 발생하였다. 대부분 TJR은 치료 기간 후에 발생하였고(환자의 68%) 선택적이었고(환자의 75%), 즉 TJR은 AE와 관련되지 않았고 사례는 정상적 OA 진행으로서 판정되었다. 보다 많은 TJR이 플라세보-처리된 환자에서보다 타네주맙-치료받은 환자에서 발생하였다; 그러나 대부분의 TJR은 정상적 OA 진행으로서 판정된 관절에서 발생하였다. 타네주맙-치료받은 환자에서 보다 높은 TJR 발생률은 적어도 부분적으로 이들 환자가 경험한 보다 높은 정도의 통증 경감에 의해 설명될 수 있고; 예를 들어, 치료에 만족을 경험한 환자는 세척 후 심한 통증을 덜 견디고 통증을 유지하려는 의지가 낮을 수 있다. 총 2명의 타네주맙-치료받은 환자는 TJR을 수행했고 RPOA를 판정하였다. 본 연구에서 보다 긴 관찰 기간은 이전 타네주맙 연구와 비교하여 보다 높은 발생률의 TJR에 기여할 수 있다.

판정 과정은 긴 치료 후 관찰 기간과 함께 타네주맙으로 치료받은 환자에서 OA 발생의 보다 포괄적인 평가를 가능하게 하였다. 그러나, 짧은 기간 및 제한된 연구 집단은 한계를 나타낸다. 16-주 치료 기간은 긴 기간에 걸친 반복된 타네주맙 투여에 의해 증상을 보이는 OA 통증을 치료함에 있어서 효능을 유지시키는 능력을 평가하기에 너무 짧다. 연구 집단은 효능을 입증하는 데 적절하나, 보다 긴 기간에 걸쳐 연구된 보다 큰 환자 집단이 안전성 사례의 보다 정확한 추정을 위해 필요하다.

결론적으로, 본 연구 결과는 SC 타네주맙 2.5 mg 및 2.5/5 mg 투여 섭생법 둘 모두가 일반적으로 안전하고 내약성이 좋음을 시사한다. 신경 AE 및 RPOA 발생률은 타네주맙-치료받은 환자에서 낮았다. 보다 많은 타네주맙-치료받은 환자가 TJR을 겪었지만, 대부분의 TJR은 정상적 OA 진행으로서 판정된 관절에서 발생하였다. 또한, 연구 효능 결과는, 타네주맙 2.5 mg 및 2.5/5 mg 둘 모두가 표준 OA 통증 치료에 대한 과민성 또는 불완전 반응을 나타내는 중등도 내지 중증의 고관절 또는 무릎 OA 환자에서 유의미한 통증 경감 및 개선된 기능을 제공할 수 있음을 시사한다.

실시예 2

목적

표준 진통제 치료에 대해 반응하지 않거나 이를 견딜 수 없는 중등도 내지 중증 OA 통증이 있는 환자에서 타네주맙의 효능 및 안전성을 평가하기 위한 것이다.

방법

무작위화, 이중맹검, 플라세보-제어 연구(24-주 치료; 24-주 안전성 후속 조치)를 미국 류마티스학 협회 기준을 기반으로 무릎 또는 고관절 OA를 갖는 유럽 또는 일본 환자에서 수행하였다. 주요 포함 기준은 하기와 같았다: 5 이상의 인덱스 관절의 웨스턴 온타리오 대학교 및 맥마스터 대학교 골관절염 인덱스(WOMAC) 통증 및 신체 기능 점수; 보통, 나쁨 또는 매우 나쁨의 OA의 환자 전반적 평가(PGA-OA) 점수; 불충분한 통증 경감 또는 아세트아미노펜, 경구용 NSAID, 및 트라마돌 또는 오피오이드에 대한 과민성(또는 오피오이드 복용 꺼림)의 이력. 환자는 피하 타네주맙(2.5 또는 5 mg) 또는 플라세보를 기선, 제8주 및 제16주에서 제공받았다. 공동-일차 평가변수는 플라세보와 비교한 제24주에서 WOMAC 통증, WOMAC 신체 기능 및 PGA-OA 점수의 기선으로부터 변화이다. 3개의 주요 이차 평가변수는 하기와 같다: 제24주에서 WOMAC 통증 보조척도의 50% 이상의 감소, 기선에서 제2주까지 WOMAC 통증 보조척도 변화, 및 기선에서 제1주까지 인덱스 관절의 주간 평균 통증 점수 변화(일일 일지를 기반으로 함). 관절 안전성 사례의 판정을 포함하는 안전성을 평가하였다.

결과

인구학 및 기선 특징(표 4)은 연구 아암에 걸쳐 유사하였다.

3개의 공동-일차 평가변수는 기선에서 제24주까지 WOMAC 통증, 신체 기능 및 PGA-OA의 변화이다. 단계적으로 감소하는 시험 절차를 사용한 경우(게이트 킵핑(gate keeping) 접근법의 단일 그래픽 노드에 상응함), 타네주맙 5 mg 치료는 3개 모두의 공동-일차 평가변수에 대해 플라세보 처리보다 상당히 큰 개선을 제공하였다(표 5 및 도 6). 타네주맙 2.5 mg 치료의 경우, 2개의 공동-일차 평가변수는 WOMAC 통증(p=0.0088) 및 WOMAC 신체 기능(p=0.0008)에서 유의미한 개선을 달성하였으나, PGA-OA는 제24주에 유의미한 개선을 달성하지 않았다(p=0.1092). 따라서, 특히 주요 이차 평가변수에 대해 추가적 시험을 수행하지 않았다(결론 도출).

도 7, 도 8 및 도 9에 도시된 바와 같이, WOMAC 통증 및 신체 기능의 기선으로부터의 변화는 타네주맙 2.5 mg 및 5 mg 치료군 사이에 시간이 흐름에 따라 유사하였지만, PGA-OA의 경우 타네주맙 5 mg 투여량 치료군은 시간이 흐름에 따라 타네주맙 2.5 mg의 투여량 치료군보다 약간 개선되었다.

3개의 주요 이차 평가변수는 제24주에서 WOMAC 통증 보조척도의 50% 이상의 감소, 기선에서 제2주까지 WOMAC 통증 보조척도의 변화, 및 기선에서 제1주까지 주간 평균 통증 점수 변화였다. 시험 절차는 부록에 제공된 그래픽 접근법에 따랐다. PGA-OA에 대한 플라세보 처리 대비 타네주맙 2.5 mg의 유의미하지 않은 결과로 인해(p=0.1092), 주요이차 평가변수를 시험하지 않았다. 따라서, 모든 주요 이차 평가변수는 플라세보 처리보다 유의미하게 좋지 않은 것으로 결론지어졌다. 그러나, 모든 주요 이차 평가변수는 타네주맙 치료군 둘 모두에서 플라세보 처리보다 수치상 양호하였다(표 6).

또한, 제24주에서, 타네주맙(투여량 둘 모두)의 효능은 WOMAC 통증에 대해 켈그렌-로렌스(KL) 등급 4의 인덱스 관절을 갖는 환자에서 플라세보보다 양호하였다(플라세보 대비 LS 평균 차이±SE, 타네주맙 2.5 mg의 경우, -0.19±0.23[공칭 P=0.419](KL2/3의 경우) 및 -0.84±0.28[공칭 P=0.002](KL4의 경우); 및 타네주맙 5 mg의 경우, -0.32±0.23[공칭 P=0.173](KL2/3의 경우) 및 -0.98±0.28[공칭 P=0.001](KL4의 경우)).

치료-유발 AE는 플라세보, 타네주맙 2.5 mg 및 타네주맙 5 mg 군에서 각각 환자의 55%, 53% 및 57%에서 발생하였다(표 1). 중대 AE의 발생률은 플라세보에 비해(1.1%) 둘 모두의 타네주맙 군(2.5 mg = 2.8%; 5 mg = 3.2%)에서 높았다. AE로 인한 중단은 군에 걸쳐 유사하였다. 임의의 군의 환자 중 3% 이상에서 발생하고 플라세보에 비해 둘 모두의 타네주맙 군에서 보다 빈번히 발생하는 AE는 요통 및 OA였다. TJR은 플라세보, 타네주맙 2.5 mg 및 타네주맙 5 mg 군에서 각각 환자의 6.7%, 7.8% 및 7.0%에서 발생하였다. 대부분의 관절 안전성 사례는 정상 OA 진행으로 판정되었다(58/79; 73.4%). 사전에 명시된 복합 관절 안전성 평가변수 사례는 플라세보, 타네주맙 2.5 mg 및 타네주맙 5 mg 군에서 각각 환자의 0%, 1.8% 및 3.2%에서 발생하였다. 이는 급속 진행성 OA를 갖는 12명의 환자(유형 1 n=8; 유형 2 n=4), 연골하 부족 골절을 갖는 1명의 환자 및 일차 골괴사를 갖는 1명의 환자를 포함하였다.

결론

타네주맙 5 mg은 통증, 신체 기능 및 PGA-OA의 3개의 모든 공동-일차 평가변수를 유의미하게 개선하였다. 타네주맙 2.5 mg은 통증 및 신체 기능의 유의미한 개선을 제공하였지만, PGA-OA에 대한 유의도에 도달하는 데 실패하였다. 둘 모두의 치료군에 대한 주요 이차 효능 평가변수는 플라세보 처리군보다 수치상 양호하였다.

타네주맙은 중증 방사선 촬영 골관절염을 갖는 환자, 특히 켈그렌-로렌스 등급 4의 인덱스 관절을 갖는 환자에서 효과적이었다.

유사한 수의 전체 관절 대체(TJR)가 3개의 치료군에서 보고되었고, 발생률에 대한 치료군 사이의 차이는 없었다. 관절 안전성 사례는 플라세보보다 타네주맙을 사용한 경우 더 일반적이었다.

타네주맙은 약화성의 진행성 상태인 골관절염의 통증을 비롯한 징후 또는 증상의 치료를 개선하기 위한 비-오피오이드 옵션으로서 가능성이 있다.

실시예 3

연구 설계

본 연구는 x-선 확인에 의한 미국 류마티스학 협회 기준을 기반으로 무릎 또는 고관절의 골관절염(OA)을 갖는 환자에서 NSAID와 비교한 56주 동안 SC 주사를 투여한, 타네주맙의 안전성 및 효능에 대한 무작위화, 이중맹검, 활동-제어, 멀티센터, 병행 군, 3상 시험이었다. 환자는 5 이상의 기선 WOMAC 통증 및 신체 기능 점수, 및 '보통', '나쁨' 또는 '매우 나쁨'의 기선 PGA-OA를 가졌다. 환자는 안정한 투여량의 경구용 NSAID 치료제를 제공받았고, 아세트아미노펜, 및 트라마돌 또는 오피오이드에 의한 OA의 사전 치료가 (1) 적절한 통증 경감을 제공하지 않았거나, (2) 사용 금지 사유 또는 불내성(트라마돌, 오피오이드)으로 인해 환자가 취할 수 없었거나, (3) 환자가 복용 꺼렸음(오피오이드)을 지시하는 문서화된 이력을 가졌다.

약 3000명 환자(치료군 당 약 1000명)는 1:1:1 비로 3개의 치료군 중 하나에 무작위화하도록 예정되었고, 인덱스 관절(고관절, 무릎), 임의의 무릎 또는 고관절 관절의 최고 켈그렌-로렌스 등급(2, 3, 4) 및 스크리닝 동안 NSAID 치료(나프록센, 셀레콕십, 디클로페낙)의 요인에 의해 계층화하였다.

환자는 각각 8주씩 분리된 총 7회의 SC 주사, 및 제56주에 걸쳐 일일 경구(PO) 연구 약제 BID를 제공받았다. 3개의 치료군은 하기와 같았다:

· 타네주맙 2.5 mg SC 및 NSAID에 대한 플라세보 BID PO;

· 타네주맙 5 mg SC 및 NSAID에 대한 플라세보 BID PO;

· 타네주맙에 대한 플라세보 SC 및 NSAID BID PO.

NSAID는 나프록센 500 mg BID, 셀레콕십 100 mg BID 또는 디클로페낙 ER 75 mg BID였다.

본 연구는 80주의 전체(무작위화 후) 기간을 갖도록 설계되었고 3개의 기간, 즉 스크리닝(최대 37일까지), 이중맹검 처리(56주) 및 안전성 후속 조치(24주)로 구성되었다(도 1). 스크리닝 기간은 필요에 따라 세척 기간(2 내지 30일 동안 지속), 및 초기 통증 평가 기간(무작위화/기선 7일 전; 최소 3일)을 포함하였다.

제16주 방문에서, 환자는 연구 제품을 지속시키기 위해 인덱스 관절에서 기선에 비해 WOMAC 통증 보조척도의 30% 이상의 감소, 및 제2주, 제4주 또는 제8주에서 기선으로부터 WOMAC 통증 보조척도의 15% 이상의 감소를 가졌다. 이러한 반응 기준을 충족시키지 않은 환자는 치료 기간을 중단하고 안전성 후속 기간에 진입하였다.

환자 집단

ITT(Intent-to-Treat) 집단은, 무작위화되고 1회 이상의 투여량의 SC 연구 약물을 제공받은 모든 환자를 포함하였다. 이러한 분석 세트는 무작위화 배정에 따라 분석되는 모든 효능 평가변수에 대해 주요하였다.

안전성 집단는 1회 이상의 투여량의 SC 연구 치료를 제공받은 모든 환자를 포함하였다. 이러한 분석 세트는 제공받은 치료에 따라 분석되는 안전성 평가변수에 대해 주요하였다.

본 연구에서, ITT 및 안전성 집단은 동일하였다.

2015년 8월 20일과 2017년 8월 8일 사이에, 총 3021명의 환자를 미국, 유럽, 남아메리카 및 아시아/태평양의 307개의 센터에서 무작위화하였다. 모두 1008명의 환자를 타네주맙 2.5 mg으로 무작위화하고, 1005명의 환자를 타네주맙 5 mg으로 무작위화하고 1008명의 환자를 NSAID로 무작위화하였다. 치료군 각각에서 6명, 7명 및 12명의 환자를 각각 무작위화하였으나 치료하지 않았다. 추가적 환자 배치를 표 7 및 표 8에 나타냈다.

인구학 및 기선 특징(표 9)는 3개의 치료군에 걸쳐 유사하였다.

효능: 주요 결과 및 보조적 결과

3개의 공동-일차 평가변수는 기선에서 제16주까지 WOMAC 통증, WOMAC 신체 기능 및 PGA-OA의 변화였다. 타네주맙 5 mg 치료군의 경우, 제16주에서 2개의 공동-일차 평가변수 WOMAC 통증(p=0.0148) 및 WOMAC 신체 기능(p=0.0030)이 유의미한 개선을 달성하였으나, PGA-OA는 유의미한 개선을 달성하지 않았다(표 10). 따라서, 명시된 시험 절차 하에, 추가적 가설 검증(및 결론 도출)을 특히 주요 이차 평가변수에 대해 수행하지 않았다. 또한, 도 10, 도 11 및 도 12를 참조한다.

주요 이차 평가변수는 제16주에서 WOMAC 통증 보조척도의 50% 이상의 개선이었다. PGA-OA에 대한 NSAID 치료 대비 타네주맙 5 mg의 유의미하지 않은 결과로 인해, 주요 이차 평가변수를 시험하지 않았다. 따라서, 주요 이차 평가변수는 NSAID 치료보다 유의미하게 양호하지 않은 것으로 결론지어졌다. 그러나, 주요 이차 평가변수는 타네주맙 치료군 둘 모두에서 NSAID 치료보다 수치상 양호하였다(표 11).

제16주에서 WOMAC 통증 보조척도의 다른 수준의 개선의 다른 수준(30%, 70% 및 90%)을 표 12에 나타냈다. 타네주맙 5 mg 치료군은 비조정 p-값을 기반으로 NSAID 치료군과 비교하여 70% 및 90% 수준에서 유의미한 개선을 나타냈다.

하기 표 13은 제56주에서 WOMAC 통증, WOMAC 신체 기능 및 PGA-OA의 기선으로부터의 변화의 분석 결과를 요약한다. 또한, 시간 경과에 따른 치료 반응에 대해 도 10, 도 11 및 도 12를 참조한다. 제56주에서 기선으로부터의 변화에 대해 타네주맙 치료군과 NSAID 치료군 사이의 주목할 만한 치료 차이점은 없었다.

안전성

안전성 집단은 타네주맙 2.5 mg으로 치료받은 1002명의 환자, 타네주맙 5 mg으로 치료받은 998명 및 NSAID로 치료받은 996명으로 이루어졌다. 가장 큰 비율의 환자는 2회 투여량의 SC 연구 약제(타네주맙 2.5 mg, 타네주맙 5 mg 및 NSAID 치료군에서 각각 31.8%, 30.4% 및 33.5%의 환자) 또는 7회의 투여량을 제공받았다(각각 46.3%, 43.7% 및 44.9%).

표 14는 치료 기간 동안 치료-유발 이상 사례를 요약한다. 이상 사례는 타네주맙 2.5 mg 치료군(62.8%)에서보다 타네주맙 5 mg 치료군(67.1%)에서 보다 큰 비율의 환자에 의해 보고된 반면에, 이상 사례를 보고한 환자의 비율은 NSAID 치료군에서 최저였다(60.3%).

가장 빈번한 이상 사례(임의의 치료군에서 3% 이상)를 표 15에 나타냈다. 관절통, 비인두염, 골관절염, 관절 종창, 급속 진행성 골관절염 및 두통이 NSAID 치료군에서보다 타네주맙 치료군 각각에서 보다 빈번히 보고되었다(치료군 사이에 1% 초과의 차이). 둘 모두의 타네주맙 치료군에서보다 NSAID 치료군에서 보다 빈번히(1% 초과의 차이) 보고된 사례는 없었다.

총 10건의 사망이 본 연구에서 보고되었다. 5건의 사망이 치료 기간 동안(타네주맙 2.5 mg 치료군의 2명의 환자, 및 타네주맙 5 mg 치료군의 3명의 환자), 및 3건의 사망이 연구의 안전성 후속 기간 동안(타네주맙 2.5 mg 치료군의 2명의 환자 및 타네주맙 5 mg 치료군의 1명의 환자) 보고되었고, 2건은 환자의 연구 중단 후 발생하였다(타네주맙 5 mg 치료군의 1명 환자 및 NSAID 치료군의 1명 환자). 치료 기간 동안 발생한 5건의 사망 중 4건은 심혈관 원인(심근 경색 또는 심장 마비)으로 인한 것이었고, 다섯번째 사망은 폐색전으로 인해 초래되었다. 5명의 환자 모두는 고혈압 및/또는 관상동맥 질환의 관련 병력을 가졌다. 안전성 후속 기간 동안 발생한 3건의 사망 중 2건은 만성 폐 질환 및 담배 사용의 장기 이력을 갖는 환자의 호흡 부전과 관련되었다. 안전성 후속 기간 동안 발생한 세번째 사망은 혼합된 모르핀/코데인 독성으로 인한 것이었다. 연구 중단 후 사망한 환자의 경우, 타네주맙 군의 환자는 고혈압의 병력을 가졌고 돌연사하였고(부검 정보는 입수가능하지 않았다); NSAID 치료군의 환자는 고혈압 및 비만의 병력을 가졌고 심폐 정지로 사망하였다. 연구 조사관에 의해 치료-관련된 것으로 간주되는 사망은 없었다.

가장 빈번한 중대 이상 사례(임의의 치료군에서 2명 이상의 환자)는 표 16에 제공된다. 타네주맙 5 mg 치료군은 타네주맙 2.5 mg 및 NSAID 치료군과 비교하여 중대 이상 사례의 최고 전체 발생률을 가졌다. 골관절염, 급속 진행성 OA 및 관절통은 타네주맙 2.5 mg 및 NSAID 치료군에서보다 타네주맙 5 mg 치료군에서 보다 빈번히 보고되었다(0.5% 이상의 치료군 차이).

총 335명의 환자가 판정 기준을 충족하는 관절 안전성 사례를 가졌다(표 17 및 표 18). 판정이 필요한 사례를 갖는 환자는 타네주맙 5 mg 치료군에서 가장 많았고(171[17.1%]), 타네주맙 2.5 mg 치료군(115[11.5%]) 및 NSAID 치료군(49[4.9%])이 뒤따랐다. 일차 복합 관절 안전성 평가변수(급속 진행성 OA, 일차 골괴사, 연골하 부족 골절, 병적 골절)의 발생률 및 관찰 시간-보정 비는 타네주맙 2.5 mg 치료군(3.8% 및 37.4 사례/1000 환자-년) 및 NSAID 치료군(1.5% 및 14.8 사례/1000 환자-년)과 비교하여 타네주맙 5 mg 치료군(7.1% 및 71.5 사례/1000 환자-년)에서 가장 높았다. 각각의 타네주맙 치료군 및 NSAID 치료군 사이의 관찰 시간-보정 비의 차이는 통계적으로 유의미하였다(타네주맙 2.5 mg 대 NSAID, p=0.0017; 타네주맙 5 mg 대 NSAID, p<0.0001; 표 15).

3개의 치료군에 걸쳐 일차 복합 관절 안전성 평가변수를 갖는 124명의 환자 중에서, 최다 사례는 급속 진행성 OA 유형 1이었고(88건의 사례[71%]), 급속 진행성 OA 유형 2(18건의 사례[15%]) 및 연골하 부족 골절(17건의 사례[14%])이 뒤따랐다. 일차 골괴사의 1건의 사례 및 병적 골절의 0건의 사례가 치료군에 걸쳐 관찰되었다. 일차 복합 평가변수에서 영향받은 관절은 96명의 환자에서 무릎이었고, 25명의 환자에서 고관절이었고, 3명의 환자에서 견관절이었다. 124명의 환자 중 28명에서, 일차 복합 평가변수는 영향받은 관절에서 전체 관절 대체와 관련되었다(12명 급속 진행성 OA 유형 1, 11명 급속 진행성 OA 유형 2, 1명 일차 골괴사, 및 4명 연골하 부족 골절).

일차 복합 평가변수의 치료군 차이는 주로 급속 진행성 OA의 증가된 비에 의해 유발되었다. 급속 진행성 OA(유형 1 및 2 조합)의 경우, 상기 비는 NSAID 치료군과 비교하여(1.2% 및 11.9 사례/1000 환자-년) 둘 모두의 타네주맙 치료군(타네주맙 2.5 mg, 3.2% 및 31.4 사례/1000 환자-년 [p=0.0027]; 타네주맙 5 mg, 6.3% 및 63.3 사례/1000 환자-년 [p=<0.0001])에서 높았다. 또한, 급속 진행성 OA 유형 2의 비는 NSAID 치료군과 비교하여(0.1% 및 1.0 사례/1000 환자-년) 타네주맙 5 mg 치료군에서 높은 반면에(1.4% 및 13.9 사례/1000 환자-년; p=0.0008), 타네주맙 2.5 mg(0.3% 및 2.9 사례/1000 환자-년)과 NSAID 치료군 사이의 비 차이는 유의미하게 상이하지 않았다. 타네주맙 치료군 중 하나와 NSAID 치료군 사이에 연골하 부족 골절에 대한 비 차이는 수치상 높았으나 통계적으로 상이하지 않았다.

총 89명의 환자가 급속 진행성 OA 유형 1로 판정된 관절 안전성 사례를 가졌다(타네주맙 5 mg 치료군에서 49명, 타네주맙 2.5 mg 치료군에서 29명, 및 NSAID 치료군에서 11명). 이들 89명의 환자에서, 급속 진행성 OA 유형 1에 의해 영향받은 총 94개의 관절이 존재하였고, 여기서 84%(79)의 사례는 무릎에서 발생하였다(표 19). 고관절은 사례의 15%(14)에서 영향을 받은 관절이었고, 1건의 사례(1%)에서 영향받은 관절은 견관절이었다. 급속 진행성 OA 유형 1로 판정된 94개의 영향받은 관절 중 90개(96%)는 스크리닝 x-선에 대해 OA의 방사선 촬영 증거를 가졌다(켈그렌-로렌스[KL] 등급 1, n=18; KL 등급 2, n=39; KL 등급 3, n=33; KL 등급 4, n=0). 전체 관절 대체는 94건의 사례 중 14%(13)에서 급속 진행성 OA 유형 1과 관련되었다.

급속 진행성 OA 유형 2는 18명의 환자에서 발생하였고(타네주맙 5 mg 치료군에서 14명, 타네주맙 2.5 mg 치료군에서 3명의 환자, 및 NSAID 치료군에서 1명의 환자), 총 20개의 관절이 영향을 받았다. 치료군에 걸쳐, 10개의 영향받은 무릎, 8개의 영향받은 고관절, 및 2개의 영향받은 견관절이 존재하였다. 급속 진행성 OA 유형 2로 판정된 20개의 영향받은 관절 중에서, 16개(80%)는 스크리닝시 OA의 방사선 촬영 증거를 가졌다(KL 등급 1, n=1; KL 등급 2, n=1; KL 등급 3, n=6; KL 등급 4, n=8). 급속 진행성 OA 유형 2의 사례는 20개의 영향받은 관절 중 11개(55%)에서 전체 관절 대체와 관련되었다.

17명의 환자가 연골하 부족 골절으로 판정된 관절 안전성 사례를 가졌다(타네주맙 5 mg 치료군에서 7명, 타네주맙 2.5 mg 치료군에서 6명의 환자, 및 NSAID 치료군에서 4명의 환자). 연골하 부족 골절에 의해 영향받은 대부분의 관절은 무릎이었고(14건의 사례[82%]); 15개(88%)의 영향받은 관절은 스크리닝 방사선 사진 상에서 방사선 촬영 OA의 증거를 가졌다.

통틀어 172명의 환자만이 OA의 정상적 진행으로 판정된 관절 안전성 사례를 가졌다(타네주맙 5 mg 치료군에서 79명, 타네주맙 2.5 mg 치료군에서 66명, 및 NSAID 치료군에서 27명). OA의 정상적 진행으로 판정된 총 213개의 관절이 존재하였다(152개의 무릎, 57개의 고관절, 2개의 견관절 및 2개의 기타 관절). OA의 정상적 진행으로 판정된 213개의 관절 중에 206개가 스크리닝 방사선 사진 상에 방사선 촬영 증거를 가졌다(켈그렌-로렌스 [KL] 등급 1, n=5; KL 등급 2, n=29; KL 등급 3, n=113; KL 등급 4, n=59).

판정 기준을 충족하는 관절 안전성 사례를 갖는 335명의 전체 환자 중에서, 총 157명의 환자가 연구 관찰 기간 동안 전체 관절 대체(TJR)를 겪었다(표 20). 타네주맙 2.5 mg 치료군에서 53명(5.3%), 타네주맙 5 mg 치료군에서 79명(7.9%) 및 NSAID 치료군에서 25명(2.5%)이 존재하였다. TJR에 대한 NSAID 대비 비 차이는 타네주맙 치료군 둘 모두보다 통계적으로 컸다. TJR를 겪은 환자 중 85명(54%)은 이상 사례와 관련되고/되거나 복합 관절 안전성 사례로 판정된 1회 이상의 TJR을 겪었다(즉 수술은 선택적인 것으로 간주되지 않음). 상기에 기재된 바와 같이, 전체 관절 대체를 겪은 환자 중에서, 12명의 환자가 급속 진행성 OA 유형 1의 판정 결과를 가졌고, 11명의 환자가 급속 진행성 OA 유형 2의 판정 결과를 가졌고, 1명의 환자가 일차 골괴사의 판정 결과를 가졌고, 4명의 환자가 연골하 부족 골절의 판정 결과를 가졌다. TJR을 겪은 나머지 129명의 환자의 경우, 이들의 판정 결과는 OA의 정상적 진행 대비 급속인지를 결정하기에 충분하지 않은 정보(n=2), OA의 정상적 진행(n=122) 또는 기타(n=5)였다.

157명 환자의 환자 중 19명(12%)은 관찰 기간 동안 보고된 176건의 TJR에 대해 관찰 기간 동안 2회 이상의 TJR을 겪었다. TJR의 약 82%는 스크리닝시 KL 등급 3 또는 4였던 영향받은 관절에서 발생하였고, TJR의 약 70%는 인덱스 관절에서 발생하였다. 대체된 관절은 무릎(n=102), 고관절(n=69) 및 견관절(n=5)이었다.

주요 결과 해석

연구의 일차 안전성 목적은, 관절 안전성에 대한 복합 판정된 평가변수를 사용하여 56-주 치료 과정에 걸쳐 NSAID 치료와 비교하여 타네주맙 2.5 mg 또는 타네주맙 5 mg SC를 제공받은 무릎 또는 고관절의 OA를 갖는 환자에서 관절 안전성 사례의 장기 위험성을 특성규명하는 것이었다. 일차 복합 평가변수의 관찰 시간-보정 비는 타네주맙 2.5 mg 치료군에서 37.4 사례/1000 환자-년이었고, 타네주맙 5 mg 치료군에서 71.5 사례/1000 환자-년이었고, NSAID 치료군에서 14.8 사례/1000 환자-년이었다. 타네주맙 치료군에 대한 비는 NSAID 치료군보다 통계적으로 유의미하게 높았다.

급속 진행성 OA(조합된 유형 1 및 2, 및 유형 1)에 대한 비는 NSAID 치료군과 비교하여 각각의 타네주맙 치료군에서 유의미하게 높았다. 급속 진행성 OA 유형 2의 비는 NSAID 치료군과 비교하여 타네주맙 5 mg 치료군에서 유의미하게 높았다.

연구의 일차 효능 목적은 2.5 또는 5 mg을 사용한 경우 달성되지 않았다. NSAID 치료 대비 타네주맙 5 mg 치료의 경우, WOMAC 통증 및 WOMAC 신체 기능의 기선에서 제16주까지의 변화의 공동-일차 효능 평가변수의 통계적으로 유의미한 개선이 있었으나, PGA-OA에 대해서는 없었다. NSAID 치료 대비 타네주맙 2.5 mg 치료군의 경우, 제16주에서 공동-일차 효능 평가변수의 통계적으로 유의미한 개선은 없었다.

PGA-OA의 공동-일차 평가변수에 대한 유의미하지 않은 결과로 인해 통계적으로 유의미하다고 선언할 수 없으나, 타네주맙 5 mg에 의한 치료가 NSAID 치료와 비교하여 우수한 반응자 비율을 제공하였음(제16주에서 WOMAC 통증의 50% 이상의 개선)의 몇몇 증거가 존재하였다.

제56주에서 WOMAC 통증, WOMAC 신체 기능 및 PGA-OA의 기선으로부터의 변화에 대한 주목할 만한 치료 차이는 없었다.

이상 사례 데이터는 이전 타네주맙 OA 연구에 일치하며, 새로운 안전성 신호는 확인되지 않았다.

본원에 기재된 바와 같은 치료 방법을 언급하는 실시양태에서, 이러한 실시양태는 또한 상기 치료에 사용하기 위한, 또는 대안적으로 상기 치료에 사용하기 위한 약제 제조를 위한 추가 실시양태이다.

개시된 교시는 다양한 적용례, 방법, 키트 및 조성물을 참조하여 설명되었지만, 본원의 교시 및 하기 청구된 발명으로부터 벗어남이 없이 다양한 변경 및 수정이 이루어질 수 있음을 이해할 수 있다. 전술한 예는 개시된 교시를 더 잘 설명하기 위해 제공되며, 본원에 제시된 교시의 범위를 제한하도록 의도되지 않는다. 본 교시가 이러한 예시적인 실시양태와 관련하여 설명되었지만, 숙련가는 과도한 실험 없이 이러한 예시적인 실시양태의 수많은 변형 및 수정이 가능하다는 것을 쉽게 이해할 수 있다. 이러한 모든 변형 및 수정은 현재 교시의 범위 내에 있다.

특허, 특허 출원, 논문, 교과서 등을 포함하여 본원에 인용된 모든 참고 문헌 및 그에 인용된 참고 문헌은 그 전문이 참고로 본원에 포함된다. 비제한적으로 정의된 용어, 용어 사용, 기재된 기술 등을 포함하여 통합된 문헌 및 유사한 자료 중 하나 이상이 본원과 상이하거나 모순되는 경우 본원이 우선한다.

전술한 설명 및 실시예는 본 발명의 특정한 구체적 실시양태를 상세히 설명하고 본 발명자들이 고려한 최상의 모드를 설명한다. 그러나, 전술한 내용이 텍스트에서 아무리 상세하게 나타날 수 있더라도, 본 발명은 다양한 방식으로 실행될 수 있고, 본 발명은 첨부된 청구범위 및 이의 임의의 등가물에 따라 해석되어야 함이 이해될 수 있다.

SEQUENCE LISTING <110> Pfizer Inc. <120> Methods of Treating Signs and Symptoms of Osteoarthritis <130> PC72497A <140> PCT/IB2020/050611 <141> 2020-01-27 <150> US 62/797,537 <151> 2019-01-28 <150> US 62/835,297 <151> 2019-04-17 <150> US 62/851,988 <151> 2019-05-23 <150> US 62/923,663 <151> 2019-10-21 <150> US 62/947,113 <151> 2019-12-12 <150> US 62/949,777 <151> 2019-12-18 <160> 11 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 1 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Ile Gly Tyr 20 25 30 Asp Leu Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Ile Ile Trp Gly Asp Gly Thr Thr Asp Tyr Asn Ser Ala Val Lys 50 55 60 Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu 65 70 75 80 Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Gly Gly Tyr Trp Tyr Ala Thr Ser Tyr Tyr Phe Asp 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1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Asn Asn 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Thr Ser Arg Phe His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Glu His Thr Leu Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 11 <211> 446 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Construct <400> 11 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Ile Gly Tyr 20 25 30 Asp Leu Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Ile Ile Trp Gly Asp Gly Thr Thr Asp Tyr Asn Ser Ala Val Lys 50 55 60 Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu 65 70 75 80 Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Gly Gly Tyr Trp Tyr Ala Thr Ser Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 115 120 125 Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala 130 135 140 Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 145 150 155 160 Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 165 170 175 Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 180 185 190 Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His 195 200 205 Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys 210 215 220 Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val 225 230 235 240 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 245 250 255 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu 260 265 270 Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser 290 295 300 Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320 Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile 325 330 335 Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu 355 360 365 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser 385 390 395 400 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415 Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 435 440 445

Claims (29)

1. 환자에서 골관절염(OA)의 징후 또는 증상을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 상기 환자에게 항-신경 성장 인자(NGF) 항체를 8주마다 2.5 mg의 투여량으로 피하 주사를 통해 투여하는 단계를 포함하되, 상기 환자는 부적절한 통증 경감 또는 진통제 요법에 대한 과민성의 이력을 가지며, 상기 항-NGF 항체에 의한 치료는 효과적으로 OA의 징후 또는 증상을 상기 항-NGF 항체에 의한 치료 시작 후 적어도 16주까지 개선하는, 방법.
2. 환자에서 골관절염(OA)의 징후 또는 증상을 치료하는 방법으로서, 상기 방법은 상기 환자에게 항-신경 성장 인자(NGF) 항체를 8주마다 5 mg의 투여량으로 피하 주사를 통해 투여하는 단계를 포함하되, 상기 환자는 부적절한 통증 경감 또는 진통제 요법에 대한 과민성의 이력을 가지며, 상기 항-NGF 항체에 의한 치료는 효과적으로 OA의 징후 또는 증상을 상기 항-NGF 항체에 의한 치료 시작 후 적어도 16주까지 개선하는, 방법.
3. 제1항 또는 제2항에 있어서,
   항-NGF 항체가 타네주맙인, 방법.
4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
   WOMAC 통증 보조척도, WOMAC 신체 기능 보조척도 및/또는 OA의 환자 전반적 평가(PGA-OA)에 의해 측정시 치료가 효과적으로 OA의 징후 또는 증상을 개선하는, 방법.
5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서,
   치료가 효과적으로 OA의 징후 또는 증상을 치료 시작 후 적어도 24주까지 개선하는, 방법.
6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서,
   치료가 효과적으로 OA의 징후 또는 증상을 치료 시작 후 적어도 56주까지 개선하는, 방법.
7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
   치료 시작 전 기선 값과 비교하여 치료가 효과적으로 WOMAC 통증, WOMAC 신체 기능 및/또는 PGA-OA를 개선하는, 방법.
8. 제7항에 있어서,
   치료가 하기로부터 선택되는 하나 이상의 임상 척도를 추가로 개선하는, 방법: a) 치료 제16주 및/또는 제24주에 WOMAC 통증 보조척도의 50% 이상의 감소; b) 기선에서 치료 제2주까지 WOMAC 통증 보조척도의 감소; 또는 c) 기선에서 치료 제1주까지 인덱스 관절의 평균 통증 점수의 감소.
9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서,
   환자가 항-NGF 항체 투여 전에 진통제 요법에 의해 이전에 치료받은, 방법.
10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서,
    환자가 항-NGF 항체에 의한 치료 동안 NSAID를 투여받지 않는, 방법.
11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서,
    환자가 항-NGF 항체에 의한 치료 시작 전에 골관절염 관절의 방사선 평가를 받는, 방법.
12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서,
    환자가 항-NGF 항체에 의한 치료 동안 골관절염 관절의 방사선 평가를 받는, 방법.
13. 제11항 또는 제12항에 있어서,
    방사선 평가가 관절의 급속 진행성 골관절염을 확인한 경우, 환자가 항-NGF 항체에 의한 치료로부터 제외되는, 방법.
14. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서,
    환자가 중등도 내지 중증 골관절염 통증을 갖는, 방법.
15. 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서,
    항-NGF 항체 투여 전에, 환자가 a) 골관절염 관절에서 5 이상의 WOMAC 통증 보조척도 값; b) 골관절염 관절에서 5 이상의 WOMAC 신체 기능 보조척도 값; 및/또는 c) 보통, 나쁨 또는 매우 나쁨의 PGA-OA 값을 갖는, 방법.
16. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서,
    항-NGF 항체 투여 전에, 환자가 2 이상의 켈그렌-로렌스 x-선 등급을 갖는, 방법.
17. 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서,
    골관절염 관절의 방사선 평가를 규칙적 간격으로 수행하는 단계를 추가로 포함하는, 방법.
18. 제1항 및 제3항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서,
    2.5 mg의 투여량을 1회 이상의 8-주 투여량 후에 5 mg으로 증가시키는, 방법.
19. 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서,
    항-NGF 항체가 적어도 2회 이상의 투여량으로 8-주 간격으로 투여되는, 방법.
20. 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서,
    OA가 고관절, 무릎, 견관절 또는 손의 OA인, 방법.
21. 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서,
    항-NGF 항체에 의한 치료가 환자에서 오피오이드 중독을 방지하는, 방법.
22. 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서,
    진통제 요법이 환자에 대한 오피오이드의 투여를 포함하는, 방법.
23. 제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서,
    진통제 요법이 환자에 대한 트라마돌의 투여를 포함하는, 방법.
24. 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서,
    진통제 요법이 환자에 대한 NSAID의 투여를 포함하는, 방법.
25. 제1항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서,
    항-NGF 항체가 서열번호 1에 나타낸 서열을 갖는 가변 중쇄 영역으로부터의 3개의 CDR 및 서열번호 2에 나타낸 서열을 갖는 가변 경쇄 영역으로부터의 3개의 CDR을 포함하는, 방법.
26. 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서,
    항-NGF 항체가 서열번호 3에 나타낸 서열을 갖는 HCDR1, 서열번호 4에 나타낸 서열을 갖는 HCDR2, 서열번호 5에 나타낸 서열을 갖는 HCDR3, 서열번호 6에 나타낸 서열을 갖는 LCDR1, 서열번호 7에 나타낸 서열을 갖는 LCDR2 및 서열번호 8에 나타낸 서열을 갖는 LCDR3을 포함하는, 방법.
27. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서,
    항-NGF 항체가 서열번호 1에 나타낸 서열을 갖는 가변 중쇄 영역 및 서열번호 2에 나타낸 서열을 갖는 가변 경쇄 영역을 포함하는, 방법.
28. 제1항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서,
    항-NGF 항체가 서열번호 9에 나타낸 서열을 갖는 중쇄 및 서열번호 10에 나타낸 서열을 갖는 경쇄를 포함하되, 서열번호 9의 중쇄 아미노산 서열의 C-말단 리신(K)이 임의적인, 방법.
29. 제1항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서,
    항-NGF 항체가 서열번호 11에 나타낸 서열을 갖는 중쇄 및 서열번호 10에 나타낸 서열을 갖는 경쇄를 포함하는, 방법.

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