KR20210081298A - 항비만 조성물 및 이의 제조 방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 감귤 미숙과(풋귤)를 이용한 항비만 조성물의 제조 방법 및 상기 방법으로 제조된 항비만 조성물에 관한 것이다.
Description
본 발명은 감귤 미숙과(풋귤)를 이용한 항비만 조성물의 제조 방법 및 상기 방법으로 제조된 항비만 조성물에 관한 것이다.
비만은 에너지의 섭취와 소비의 불균형에 의해서 야기되는 현상으로 체내에 지방이 과잉 축적되어 있는 상태를 의미한다. 다양한 원인에 의해 야기되기 때문에 명확한 원인은 아직 밝혀지지 않았지만 일반적으로 지나친 열량 섭취, 내분비 장애, 운동부족, 유전적 요인 등에 기인하는 것으로 인식되고 있다. 그리고 생활 습관과 밀접한 관계가 있기 때문에 일반적으로 생활습관병이라고도 한다. 전 세계적으로 비만 인구는 지속적으로 증가되고 있는 추세이며 한국도 소득수준의 향상과 식생활 습관이 서구화되면서 비만 인구가 급증하고 있다. 구체적으로, 대한민국 만 19세 이상의 비만 유병률은 1998년 26.0%에서 지속적으로 증가되어 2008년에는 31.0%로, 이는 미국(만 20세 이상, 체질량지수 30 kg/m2 이상)의 비만유병률 32.2%와 비슷한 수준이다. 비만이 심각한 사회적 문제로 대두되면서 국내에서도 성인병의 주요원인으로 자리 잡고 있는 비만을 예방하기 위해 다양한 대책과 활발한 연구가 진행되고 있다.
비만 치유를 위한 방법으로는 식사 등 생활 습관의 개선과 약물투여, 수술 등이 있으며, 최근에는 건강기능식품시장이 커지면서 식이조절과 병행한 기능성 식품으로 개선하려는 시도가 많이 이루어지고 있다. 우리나라에서도 건강기능성 식품에 관한 법률이 제정되어 다양한 건강기능성 소재 및 식품이 식품의약품안전청의 허가를 받아 유통되고 있고, 그 중 체중 조절과 연관된 개별인정형 원료 성분으로는 conjugated linoleic acid (CLA), hydroxy-citric acid (HCA), CJ-hibiscus 복합추출물 등이 허가를 받아 시판되고 있다. 천연물을 이용한 항비만 소재에 관한 연구를 살펴보면 식욕 억제에 관여하는 물질로 hydroxy-citric acid, palm oil, olibra, 식이섬유 등이 있으며, 지방의 소화 및 흡수를 저해하는 물질로는 chitin, 플라보노이드 등, 그리고 열 발생을 유도하여 지방의 축적을 억제하는 물질로는 고추의 capsaicin, CLA, 우유 칼슘과 관련된 단백질 등이 보고되고 있다. 뿐만 아니라 한의학에서도 지실, 녹차, 천궁, 진피, 솔잎 등이 체중조절에 효과가 있는 것으로 보고되고 있다. 비만의 개선을 위해 가장 좋은 방법은 스스로 식이 조절을 통해 섭취 열량을 조절하여 자신의 생활 패턴과 활동량에 적합한 열량을 섭취하도록 하는 것이며, 이와 병행하여 다양한 천연물 유래의 항비만 성분을 꾸준히 섭취하면 개선 효과를 배가 시킬 수 있을 것이다. 현재 건강기능소재 시장에서 가장 큰 비중을 차지하는 것이 체지방 감소와 체중 감량 소재이며 현재는 CLA, HCA 등이 시장을 주도 하고 있으나, 많은 연구자들에 의해 국내 농산물과 한약재 유래의 항비만 소재 개발에 대한 연구가 활발히 진행 되어 순수 국내 소재로 개발된 우수한 항비만 건강기능성 식품의 개발이 많이 이루어질 것으로 기대된다.
또한, 2014년 기준 대한민국 성인의 32.4%가 비만인 것으로 조사되었으며 비만 치료 및 예방 시장은 약 7조원에 이르는 것으로 확인되었다. 또한 비만 및 다이어트 기능성식품 시장은 약 3조원에 이르는 것으로 확인되었다. 다이어트 소재 중 차별화된 개별인정형 다이어트 소재의 성장률이 높았으며 이는 개별인정형 천연물 기능성 소재 개발에 대한 필요성을 고취시킨다.
천연물을 이용한 건강기능성 식품과 관련하여, 대한민국 등록특허 제10-1632580호에서는 비만 억제 효과를 갖는 건강기능식품 및 이의 제조방법에 관하여 개시하고 있다. 이 발명에서는 생강, 마카, 옥수수, 마테잎 및 녹차잎을 각각 법제한 다음, 가열하여 추출하는 건강기능 식품에 관하여 기재하고 있지만, 지질대사의 개선을 통한 항비만 효과만 가지고 있어 비만의 원인인 지질의 흡수를 차단하지 못하고 있으며, 각각 따로 법제하고 추출하는 방법이 복잡하여 제품화가 어려운 단점이 있다.
한편, 감귤에는 플라보노이드 성분을 포함한 다양한 생리활성 물질이 포함되어 있다고 알려져 있으며 이러한 성분들은 항산화활성, 항암활성, 항비만, 콜레스테롤 저하 기능이 있다고 알려져 있다. 감귤류에는 과실이 성숙되는 정도에 따라 플라보노이드 함량과 조성이 변하는 것으로 알려져 있는데, 감귤 미숙과(풋귤)에서는 플라보노이드의 함량과 종류가 다양하게 존재한다. 구체적으로, 제주산 감귤류의 숙기에 따른 헤스페리딘 함량 변화를 보면 감귤의 숙기가 지남에 따라 그 함량이 점차 낮아지는 것을 확인할 수 있다.
감귤이 되는 과정의 중간 단계인 풋귤은 특정 시기에만 얻을 수 있으며, 전체 감귤 생산량에서 30% 가량을 차지한다. 또한, 풋귤은 고기능성, 고부가가치 상품화가 가능한 탁월한 성분을 가지고 있는 열매로서, 식품, 건강기능식품, 화장품 등 다양한 분야에서 상품화가 가능한 특장점을 지니고 있으나, 대부분 비상품과로 버려지고 있는 실정이다.
그러나, 최근 감귤 미숙과에 대한 유통이 조건부로 허용되면서, 현재 풋귤 소비 증대를 위한 기능성 제품 개발 관련 연구가 필요하나, 감귤 미숙과(풋귤)의 기능성분을 상품화할 수 있는 연구는 활성화되어 있지 않은 단계이다.
본 발명은 상술한 종래 기술의 문제점을 개선하기 위한 것으로, 플라보노이드 성분이 풍부하다고 알려진 감귤보다 더 기능 성분이 많은 감귤 미숙과(풋귤)로부터 추출된 추출물을 효소 처리하여 천연물 유래 항비만 조성물을 제조하는 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
그러나, 본원이 해결하고자 하는 과제는 이상에서 언급한 과제로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 통상의 기술자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
상기 목적을 달성하기 위해, 본 발명은 (1) 감귤 미숙과를 슬라이스화 하여 건조시키는 단계; (2) 상기 건조된 감귤 미숙과 슬라이스를 용매 추출하는 단계; (3) 상기 추출물을 제1 농축하는 단계; (4) 상기 제1 농축물을 효소 처리하는 단계; 및 (5) 상기 효소 처리된 제1 농축물을 제2 농축하는 단계를 포함하는, 항비만 조성물의 제조 방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 항비만 조성물의 제조 방법으로 제조된 항비만 조성물울 제공한다.
본 발명의 항비만 조성물의 제조 방법은 다양한 기능성을 가진 감귤 미숙과(풋귤)를 이용하여 기능성분의 효과를 극대화하고, 우수한 항산화 및 항비만 효과를 가지는 조성물을 제조할 수 있는 방법을 제공한다.
도 1은 본 실시예에 따른 건조 풋귤 제조 과정의 모식도이다.
도 2a 내지 도 2d는 추출용매 농도별 기능성분 추출 테스트 결과를 나타낸 것이다.
도 3a 내지 3d는 건조 풋귤 슬라이스 무게(투입량)에 따른 기능성분 추출 테스트 결과를 나타낸 것이다.
도 4a 내지 4c는 용매 추출 온도별 기능성분 함량 테스트 결과를 나타낸 것이다.
도 5는 추출 시간별 기능성분 추출 테스트 결과를 나타낸 것이다.
도 6은 효소 처리를 통한 기능성분의 전환 및 생성을 나타낸 것이다.
도 7은 생물전환 전후 풋귤 추출물의 DPPH radical 억제 활성 결과를 나타낸 것이다.
도 8은 생물전환 전후 감귤 미숙과(풋귤) 추출물의 α-Amylase 저해활성 확인 결과를 나타낸 것이다.
도 9는 생물전환 전후 감귤 미숙과(풋귤) 추출물의 췌장지방 분해 효소 저해 활성 확인 결과를 나타낸 것이다.
도 2a 내지 도 2d는 추출용매 농도별 기능성분 추출 테스트 결과를 나타낸 것이다.
도 3a 내지 3d는 건조 풋귤 슬라이스 무게(투입량)에 따른 기능성분 추출 테스트 결과를 나타낸 것이다.
도 4a 내지 4c는 용매 추출 온도별 기능성분 함량 테스트 결과를 나타낸 것이다.
도 5는 추출 시간별 기능성분 추출 테스트 결과를 나타낸 것이다.
도 6은 효소 처리를 통한 기능성분의 전환 및 생성을 나타낸 것이다.
도 7은 생물전환 전후 풋귤 추출물의 DPPH radical 억제 활성 결과를 나타낸 것이다.
도 8은 생물전환 전후 감귤 미숙과(풋귤) 추출물의 α-Amylase 저해활성 확인 결과를 나타낸 것이다.
도 9는 생물전환 전후 감귤 미숙과(풋귤) 추출물의 췌장지방 분해 효소 저해 활성 확인 결과를 나타낸 것이다.
본 발명은, 감귤 미숙과(풋귤) 추출물을 유효성분으로 포함하는 항비만 조성물의 제조 방법, 상기 방법에 의해 제조된 항비만 조성물을 포함하는 항비만용 건강기능식품 및 가공 식품에 관한 것이다.
본 명세서에서, “감귤 미숙과”는 충분히 익지 않은 감귤의 미숙과(未熟果)를 의미하는 것으로, “풋귤”이라고 칭할 수도 있다.
본 명세서에서, 브릭스(Brix)는 당도를 의미하는 것으로, 예를 들어, 당이 있는 임의의 용액 100 g에 당이 1 g 존재하는 경우 1 brix(%)라 할 수 있다.
항비만 조성물의 제조 방법
본 발명에 따른 항비만 조성물의 제조 방법은, (1) 감귤 미숙과를 슬라이스한 후 건조시키는 단계; (2) 상기 건조된 감귤 미숙과를 용매 추출하는 단계; (3) 상기 추출물을 제1 농축하는 단계; (4) 상기 제1 농축물을 효소 처리하는 단계; 및 (5) 상기 효소 처리된 제1 농축물을 제2 농축하는 단계를 포함하며, 상기 제2 농축 단계 후 실활 및 살균하는 단계를 더 포함할 수 있다.
제주도의 감귤은 고기능성 천연 성분이 풍부한 국내 최고의 과일이다. 특히 감귤이 되는 과정인 풋귤의 경우 고기능성, 고부가가치 상품화가 가능한 탁월한 성분을 품고 있는 천연물로서 식품, 의료, 향장품, 사료 산업 분야에서 탁월한 상품화가 가능한 특장점을 가지고 있다. 그러나 풋귤은 아무 때나 얻을 수 있는 과일이 아니므로, 보존을 위한 가공 처리가 필요하다.
구체적으로, 풋귤은 적과 후 시간이 경과할수록 녹색이 황색으로 변해가는 변질이 발생하므로, 기능성분 및 원과 그대로 보존하기 위하여 적과일 5일 이내에 가공하여야 한다.
먼저, 본 발명에 따른 항비만 조성물의 제조 방법은, 감귤 미숙과를 슬라이스한 후 건조시켜 건조된 감귤 미숙과를 제조한다.
본 발명에 따른 항비만 조성물의 제조 방법은, 상기 감귤 미숙과를 1 내지 5 mm의 크기, 바람직하게는, 3 내지 5 mm의 크기로 슬라이스하는 것을 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에 따른 항비만 조성물의 제조 방법은, 상기 슬라이스된 감귤 미숙과를 25 내지 70℃ 온도의 건조기에서 12 내지 60 시간 동안 열풍 건조하여 건조된 감귤 미숙과를 수득할 수 있고, 바람직하게는 55 내지 65℃온도의 건조기에서 30 내지 50 시간 동안 열풍 건조를 수행하여 건조된 감귤 미숙과를 수득할 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 건조된 감귤 미숙과는 15 vol% 이하의 수분 함량을 가지는 것이 바람직하고, 수분 함량이 11 vol% 이하인 것이 더욱 바람직하다.
또한, 상기 건조된 감귤 미숙과 슬라이스는 불투명 용기에 밀봉 및 흡습 처리하여 공기와 차단하여 보관하는 것이 바람직하다.
이어서, 상기 건조된 감귤 미숙과 슬라이스를 용매 추출하여 추출물을 수득한다.
본 발명에 따른 항비만 조성물의 제조 방법은, 상기 용매 추출의 용매로서 에탄올 등의 알코올과 물이 사용될 수 있으며, 상기 알코올 중량에 대하여 10 내지 300 배, 가장 바람직하게는 12 배의 물을 가수하는 것을 포함할 수 있다. 상기 알코올의 농도는 10 내지 90 vol%일 수 있고, 바람직하게는 30 내지 90 vol% 농도일 수 있고, 더욱 바람직하게는 50 내지 80 vol% 농도일 수 있다.
또한, 상기 용매 추출 단계는 40 내지 90℃의 온도 범위에서 1 내지 90 시간 동안 수행하는 것일 수 있고, 바람직하게는, 60 내지 90℃의 온도 범위에서 12 내지 72 시간 동안 수행하는 것일 수 있고, 더욱 바람직하게는, 80℃의 온도에서 24 내지 36 시간 동안 수행하는 것일 수 있다. 또한, 상기 용매 추출 단계를 1회 이상 수행할 수 있으며, 3회 이상 반복 수행하는 것이 바람직하다.
일 구체예에서, 대량 생산 공정에 적용 가능하면서도 기능성분 함량을 높이기 위해, 60% 에탄올 중량에 12배 가수하여 80℃에서 24 시간 동안 추출을 수행하는 것이 바람직할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
일 구체예에서, 추출시 건조된 감귤 미숙과(풋귤)은 추출포에 계량하여 추출을 진행하며 추출액은 별도의 추출액 보관 통에 이송 후 반복 추출하여 수율을 높힐 수 있고, 예를 들어, 3회 이상 반복 추출할 수 있다.
이어서, 상기 추출물을 제1 농축하여 제1 농축물을 수득한다.
본 발명에 따른 항비만 조성물의 제조 방법은, 상기 제1 농축에 의해 상기 추출물이 50 내지 70 Brix%로 농축되는 것을 포함한다.
이어서, 상기 제1 농축물을 효소 처리하여 효소 처리된 제1 농축물을 수득한다.
일 구현예에서, 상기 효소 처리에서 사용되는 효소로는, 예를 들어, 멀티팩트(multipact), 비스코자임(viscozyme), 비스코자임 엘(viscozyme L), 펙티넥스(pectinex), 펙티넥스 울트라 에스피-엘(Pectinex Ultra SP-L), 셀루클라스트(celluclast), 온데아(ondea), 울트라플로(ultraflo), 아밀로글루코시다아제 300(amg 300) 등이 있을 수 있다.
또한, 상기 효소 처리는 30 내지 50℃의 온도 범위에서 0.5 내지 48 시간 동안 발효시키는 것일 수 있다.
또한, 상기 효소 처리는 상기 제1 농축물을 3 내지 30 Brix%로 희석한 후 수행될 수 있다.
이어서, 상기 효소 처리된 제1 농축물을 제2 농축하여 제2 농축물을 수득한다. 또한, 상기 제2 농축물을 실활 및 살균하는 단계를 추가 수행하여 감귤 미숙과 추출물을 포함하는 항비만 조성물을 수득할 수 있다.
본 발명에 따른 항비만 조성물의 제조 방법은, 상기 제2 농축에 의해 상기 감귤 미숙과 추출물이 50 내지 70 Brix%로 재농축 되는 것을 포함한다.
또한, 상기 실활 및 살균은 80 내지 90℃의 온도 범위에서 0.5 내지 2 시간 동안 수행하는 것일 수 있다.
항비만 조성물 및 이를 포함하는 및 건강기능식품 및 가공식품
본 발명은, 상술한 방법에 의해 제조된 항비만 조성물을 포함하며, 본 발명의 항비만 조성물은, 상기 항목에서 설명한 일체의 내용이 동일하게 적용된다.
일 예로, 본 발명에 따른 방법으로 제조된 상기 항비만 조성물은, 감귤 미숙과로부터 추출된 플라보노이드를 포함하며, 예를 들어, 나리루틴(narirutin), 나린긴(naringin), 헤스페리딘(hesperidin), 나린게닌(naringenin), 네오페스페리딘(neohesperidin), 프루닌(prunin), 나린게닌-7-O-글루코사이드(naringenin-7-o-glucoside) 등의 플라보노이드 성분을 포함할 수 있다.
또한, 본 발명의 건강기능식품 및 가공식품은 상술한 항비만 조성물을 포함하는 점 이외에, 건강기능식품 및/또는 가공식품 제조나 가공에 적용되는 일련의 공지의 기술이 적용된 것을 포함한다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 더욱 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 하기의 실시예에 의하여 한정되는 것은 아니다.
실시예: 항비만 조성물의 제조
1. 슬라이스된 건조 풋귤의 제조
제주도 서귀포시 남원읍 하례리 농장에서 풋귤 8.5톤을 수매하였고, 잔류농약검사를 공인 기관에 의뢰하여 원료의 안전성을 확보하였다.
수매한 풋귤 원과는 적과 후 시간이 경과 할수록 초록색이 노란색으로 변해가는 변질이 생기므로, 기능성분 및 원과 그대로 보존하기 위하여 적과일 기준 5일 이내에 가공하였다. 가공순서는 다음과 같이 농가에서 인력을 이용하여 적과 후 세척하고, citrus slice machine을 이용하여 3 mm 내지 5 mm 두께로 슬라이스한 후 열풍건조기 트레이에 넓게 펼쳐서 적재 후 55℃내지 65℃에서 30 내지 50 시간 동안 수분 함량 약 11% 이하로 건조하였다. 이와 같은 과정을 도 1에 나타내었다.
하기 표 1에 나타낸 바와 같이, 풋귤 원과 8.5 ton을 건조한 결과 약 998 kg의 건조물을 얻을 수 있었으며, 이는 약 11.74%의 평균 수율을 나타내었다.
| 가공처 | 원과작업량 (Kg) | 건조풋귤 (Kg) | 건조수율 (%) |
| 제주향 | 4,500 | 492 | 10.93 |
| 제주사랑농수산 | 4,000 | 506 | 12.65 |
| total | 8,500 | 998 | 11.74 (평균수율) |
2. 기능성분 추출
풋귤에 함유되어 있으며, 기능성분으로 알려진 Hesperidin, Naringin, Narirutin, Neohesperidin 등을 추출 타깃으로 선정하였다. 최적 기능성분 추출조건을 set up하기 위하여 추출용매, 시간, 온도, 무게, 용매 농도별 추출 test를 진행하였다. 용매는 식용에 가능한 H2O와 EtOH를 사용하였으며, 시간은 1h, 2h, 3h, 4h, 5h, 6h, 7h, 8h, 9h, 10h, 12h, 16h, 20h, 24h, 36h, 48h 동안 연속 추출 테스트를 진행하였다. 온도는 40℃50℃60℃70℃80℃에서 추출 테스트를 하였으며, 시료의 무게는 추출 용매 1L 당 3g, 5g, 10g, 15g, 20g, 25g, 30g, 35g, 40g, 추출 용매 농도는 10% EtOH부터 90% EtOH을 사용하여 각 조건별로 추출 테스트를 설정(set up) 하였다. 기능성분이 함유된 추출액은 Vacuum evaporator를 이용하여 60 brix%로 농축하여 보관하였다.
(1) 건조 풋귤 슬라이스의 최적 추출 조건 테스트
풋귤 슬라이스 건조물의 최적 추출 조건을 확립하기 위하여 60% 주정에 12시간, 24시간 동안 풋귤을 침지시킨 후 추출 테스트를 진행하였다. 하기 표 2 및 3에 나타낸 바와 같이, 침지한 결과 자연 침지된 추출액에서는 시간이 지날수록 더 높은 기능성 함량을 보였으나, 최종 6시간 추출까지 병행하여 진행하였을 때는 최종 추출액에서 큰 유의미한 차이를 보이지는 않았다.
[표 2]
[표 3]
(2) 추출용매 농도별 기능성분 추출 테스트
추출 용매 최적 농도를 측정하기 위하여 10% 내지 90% 에탄올을 제조하여 동일 시료량을 투입 후 추출 테스트를 진행하였고, 그 결과를 도 2a 내지 도 2d에 나타내었다.
도 2a 내지 도 2d를 참조하면, 60% 에탄올에서 기능성분이 가장 많이 추출되는 것을 확인하였다. 이 실험은 반복 실험을 통하여 재현성을 확인하였다.
(3) 건조 풋귤 슬라이스 무게(투입량)에 따른 기능성분 추출 테스트
건조 풋귤 슬라이스 무게별 최적 투입량을 측정하기 위하여 60% 에탄올에 3g, 5g, 10g, 15g, 20g, 25g, 30g, 40g을 투입하여 각각의 기능성분 추출 함량을 분석하였고, 그 결과를 도 3a 내지 도 3d에 나타내었다.
도 3a 내지 도 3d를 참조하면, 40g 투입한 추출액에서 가장 많은 기능성분이 검출 되었으며 그 다음 30g, 25g 순으로 시료량에 비례하여 기능성분이 검출되었다. 그러나 산업화를 위해서는 제품 원가 등을 고려해야 하므로 in vitro, in vivo등의 결과를 바탕으로 최적 투입량을 결정하였다.
(4) 추출 온도별 기능성분 함량 테스트
용매추출시 기능성분의 최적 추출 온도 조건을 측정하기 위하여 40℃에서 80℃까지 각 기능성분 함량을 분석하였고, 그 결과를 도 4a 내지 도 4c에 나타내었다.
도 4a 내지 도 4c를 참조하면, 추출 온도가 80℃일 때 기능성분이 가장 높게 검출되는 것을 확인할 수 있었다.
(5) 추출 시간별 기능성분 추출 테스트
용매 추출시 최적 온도 조건인 80℃에서 1h, 2h, 4h, 6h, 8h, 10h, 12h, 24h, 36h, 48h, 60h 각 시간별 추출 후 기능성분 함량 테스트를 진행하였고, 그 결과를 도 5에 나타내었다.
도 5를 참조하면, 24 시간에서 60 시간까지 기능성분이 높은 것으로 나타났으나, 현장 대량생산 공정 개발에 적용하는 경우 36 시간 이하로 추출 조건을 고려해 볼 수 있다.
3. 기능성분 전환
풋귤에 기능성분으로 알려져 있고 실제로 많이 함유된 hesperidin, narirutin 등을 이용하여 더 효능 효과가 좋은 2차 대사산물 prunin, 나린게닌-7-O-글루코사이드(naringenin-7-o-glucoside) hesperitin, naringenin 등을 생산하고자 상업 효소를 이용하였다. 이용된 효소는 multipact, viscozyme, viscozyme L, pectinex, Pectinex Ultra SP-L, celluclast, ondea, ultraflo, amg 300 등을 이용하였다.
(1) 기능성분 분석
기능성분 분석을 위하여 지표물질 분석에 필요한 standard를 구입하였다. 지표물질 standard는 sigma-aldrich에서 HPLC grade 제품을 구입하여 사용하였으며, 구입한 std는 다음과 같다.
- Hesperetin : Sigma / Cas No. 69097-99-0 / ≥95%
- Hesperidin : Sigma / Cas No. 520-26-3 / ≥80%
- Naringenin : Sigma / Cas No. 67604-48-2 / ≥95%
- Naringin : Sigma / Cas No. 10236-47-2 / ≥95%
- Narirutin : Sigma / Cas No. 14259-46-2 / ≥98%
- Neohesperidin : Sigma / Cas No. 13241-33-3 / ≥90%
- Prunin : Avention / Cas No. 529-55-5 / 98%
또한, 기능성분 정량 분석을 위하여 HPLC(Agilent 1260 series)와 XDB -C18 column을 이용하였다.
(2) 기능성분 분석 결과
도 6에 나타낸 바와 같이, 펙티나아제 계통의 효소를 이용하였을 때 run time 11분대에서 새로운 2차 대사산물이 많이 생성되는 것을 확인하였다. 현재 본 연구에서 사용하는 8종의 STD에 매칭되는 피크가 없었으므로 현재는 무엇인지 알 수는 없었으나 추가 지표물질을 확보하여 물질을 확인하여야 한다.
4. 원료 기능성 in vitro 테스트
풋귤 추출물의 항산화 효능, α-Amylase 저해활성 확인, 췌장 지방분해 효소 저해활성 확인, 지방세포 분화 정도 확인 등을 통해 항비만 효과가 있는지 1차 스크리닝하였다.
본 테스트에서는, 효소 처리에 따른 효과를 비교하기 위해, 효소처리를 하지 않은 풋귤(풋귤 추출물), Pectinex Ultra SP-L로 효소처리한 풋귤(이하, E.풋귤A 또는 풋귤 추출물 A), Pectinex Ultra SP-L 및 Viscozyme L로 효소처리한 풋귤(이하, E.풋귤B 또는 풋귤 추출물 B)을 샘플로 이용하였으며, 각 샘플들을 정제수에 녹여 농도별로 효과를 비교하였다.
(1) 풋귤 추출물의 항산화 효능 확인 결과
풋귤 추출물의 항산화 효능을 확인하기 위해 생물전환 전후 풋귤 추출물의 DPPH radical 억제 활성 결과를 도 7에 나타내었다.
생물전환 전후의 풋귤 추출물의 항산화 활성을 확인한 결과, 항산화 물질로 알려져 있는 알부틴(Arbutin)의 경우 100 μg/mL의 농도에서 DHHP radical을 87% 이상 소거하는 것으로 확인되었으며, 풋귤 추출물은 동일 농도에서 64%, 생물전환한 후의 풋귤 추출물 A와 B의 경우에는 각각 74%, 83% 이상 소거하는 것을 확인하였다.
(2) 풋귤 추출물의 α-Amylase 저해활성 확인 결과
생물전환 전후 풋귤 추출물을 이용하여 α-amylase 효소 저해 활성을 알아본 결과, 도 8에 나타낸 바와 같이, 생물전환 전후의 풋귤 추출물 모두 100 μg/mL 이상 처리하였을 때 60% 이상의 저해도를 보였으며, 생물전환 전후 추출물 모두 비슷한 정도의 저해 활성을 보이는 것을 확인할 수 있었다.
(3) 풋귤 추출물의 췌장 지방분해 효소 저해활성 확인 결과
생물전환 전후 풋귤 추출물을 이용하여 췌장 리파아제(pancreatic lipase) 저해 활성을 도 9에 나타내었고, 그 결과 양성대조군인 올리스탯(Orlistat)에 비해 효능은 적지만, 생물전환 전후의 풋귤 추출물 은 농도에 비례하여 췌장 지방분해 효소를 저해하는 것을 확인할 수 있었다.
Claims (15)
- (1) 감귤 미숙과를 슬라이스한 후 건조시키는 단계;
(2) 상기 건조된 감귤 미숙과를 용매 추출하는 단계;
(3) 상기 추출물을 제1 농축하는 단계;
(4) 상기 제1 농출물을 효소 처리하는 단계; 및
(5) 상기 효소 처리된 제1 농축물을 제2 농축하는 단계
를 포함하는, 항비만 조성물의 제조 방법. - 청구항 1에 있어서,
상기 (1) 단계는, 감귤 미숙과를 1 내지 5 mm로 슬라이스한 후 12 내지 60 시간 동안 열풍 건조하는 것을 포함하는, 항비만 조성물의 제조 방법. - 청구항 2에 있어서,
상기 열풍 건조는 25 내지 70℃의 온도 범위에서 수행되는 것인, 항비만 조성물의 제조 방법. - 청구항 1에 있어서,
상기 건조된 감귤 미숙과의 수분함량은 15 vol% 이하인, 항비만 조성물의 제조 방법. - 청구항 1에 있어서,
상기 (2) 단계에서, 상기 용매 추출은 40 내지 90℃의 온도 범위에서 1 내지 90 시간 동안 수행되는 것인, 항비만 조성물의 제조 방법. - 청구항 5에 있어서,
상기 용매 추출의 용매로서 10 내지 90 vol% 농도의 알코올 및 물이 사용되는 것인, 항비만 조성물의 제조 방법. - 청구항 5에 있어서,
상기 (2) 단계에서, 상기 용매 추출이 3회 이상 반복 수행되는 것을 포함하는, 항비만 조성물의 제조 방법. - 청구항 1에 있어서,
상기 (3) 단계에서, 상기 제1 농축에 의해 상기 추출물이 50 내지 70 Brix%로 농축되는 것인, 항비만 조성물의 제조 방법. - 청구항 1에 있어서,
상기 (4) 단계에서, 상기 효소 처리는 멀티팩트(multipact), 비스코자임(viscozyme), 비스코자임 엘(viscozyme L), 펙티넥스(pectinex), 펙티넥스 울트라 에스피-엘(Pectinex Ultra SP-L), 셀루클라스트(celluclast), 온데아(ondea), 울트라플로(ultraflo) 및 아밀로글루코시다아제 300(amg 300)로부터 선택되는 1종 이상의 효소를 사용하는 것을 포함하는, 항비만 조성물의 제조 방법. - 청구항 9에 있어서,
상기 효소 처리는 상기 제1 농축물을 3 내지 30 Brix%로 희석한 후 수행되는 것을 포함하는, 항비만 조성물의 제조 방법. - 청구항 1에 있어서,
상기 (4) 단계에서, 상기 효소 처리는 30 내지 50℃의 온도 범위에서 0.5 내지 48 시간 동안 발효시키는 것을 포함하는, 항비만 조성물의 제조 방법. - 청구항 1에 있어서,
상기 (5) 단계에서, 상기 제2 농축에 의해 상기 효소 처리된 제1 농축물이 50 내지 70 Brix%로 재농축 되는 것인, 항비만 조성물의 제조 방법. - 청구항 1에 있어서,
상기 (5) 단계 후, 상기 제2 농출물을 실활 및 살균하는 단계를 더 포함하는, 항비만 조성물의 제조 방법. - 청구항 1에 있어서,
상기 실활 및 살균 단계는 80 내지 90℃의 온도 범위에서 0.5 내지 2 시간 동안 수행되는 것인, 항비만 조성물의 제조 방법. - 청구항 1 내지 14 중 어느 한 항에 따른 방법으로 제조된, 항비만 조성물.
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|---|---|---|---|---|
| WO2024096185A1 (ko) * | 2022-11-04 | 2024-05-10 | 농업회사법인주식회사 코삿 | 감귤껍질 및 버섯의 복합 발효물을 유효성분으로 함유하는 항-비만용 조성물 |
| KR20240077110A (ko) | 2022-11-24 | 2024-05-31 | 주식회사 비케이바이오 | 청귤 과피 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만 또는 이상지질혈증의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 |
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| KR101632580B1 (ko) | 2015-05-28 | 2016-06-23 | 김용규 | 비만 억제 효과를 갖는 건강기능식품 및 이의 제조방법 |
| KR102052610B1 (ko) * | 2016-10-10 | 2019-12-05 | 대구한의대학교산학협력단 | 떫은감과 귤껍질을 이용한 항 비만 조성물의 제조방법 |
-
2020
- 2020-12-23 KR KR1020200182563A patent/KR102623370B1/ko active IP Right Grant
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