KR20210073490A - 면역요법과 mdm2 억제제의 병용 - Google Patents

면역요법과 mdm2 억제제의 병용 Download PDF

Info

Publication number
KR20210073490A
KR20210073490A KR1020207037013A KR20207037013A KR20210073490A KR 20210073490 A KR20210073490 A KR 20210073490A KR 1020207037013 A KR1020207037013 A KR 1020207037013A KR 20207037013 A KR20207037013 A KR 20207037013A KR 20210073490 A KR20210073490 A KR 20210073490A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
cancer
immune checkpoint
mdm2 inhibitor
tumor
apg
Prior art date
Application number
KR1020207037013A
Other languages
English (en)
Inventor
다쥔 양
이판 짜이
더글라스 동 팡
치우치웅 탕
Original Assignee
어센테지 파마 (쑤저우) 컴퍼니 리미티드
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 어센테지 파마 (쑤저우) 컴퍼니 리미티드 filed Critical 어센테지 파마 (쑤저우) 컴퍼니 리미티드
Publication of KR20210073490A publication Critical patent/KR20210073490A/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/407—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with other heterocyclic ring systems, e.g. ketorolac, physostigmine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/438—The ring being spiro-condensed with carbocyclic or heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D471/20—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/10—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2818—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against CD28 or CD152
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/32—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against translation products of oncogenes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A61K2039/507—Comprising a combination of two or more separate antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

면역 체크포인트 분자 조절제의 유효량; 및 MDM2 억제제의 유효량을 포함하는 병용요법이 본원에 개시된다.
[화학식 I]

Description

면역요법과 MDM2 억제제의 병용
본 발명은 MDM2 및 MDM2-관련 단백질의 억제가 이점을 제공하는 병태 및 질환을 치료하기 위한 면역요법과 MDM2 억제제의 병용에 관한 것이다.
MDM2 억제제는 MDM2 종양단백질(oncoprotein)과 종양 억제인자 p53 단백질의 결합을 방해하여, 약리적 p53 활성화제로서 작용한다. p53 기능장애는 또한 염증을 유발하고 종양 면역 회피를 지원하므로 p53 기능장애가 종양발생의 면역학적 원인으로 작용함을 시사하는 새로운 증거가 발견되고 있다(Guo G, Cancer Research, 2017; 77(9):2292).
MDM2 및 p53은 자동조절 피드백 루프의 일부이다(Wu et al., Genes Dev . 7:1126 (1993)). MDM2는 p53에 의해 전사적으로 활성화되어, 적어도 3개의 메커니즘에 의해 p53 활성을 억제한다(Wu et al., Genes Dev . 7:1126 (1993)). 첫째, MDM2 단백질은 p53 트랜스활성화 도메인에 직접 결합함으로써 p53-매개 트랜스활성화를 억제한다. 둘째, MDM2 단백질은 핵외이송 신호 서열을 포함하고, p53에 결합시, p53의 핵외이송을 유도하여 p53이 표적 DNA에 결합하지 못하도록 한다. 셋째, MDM2 단백질은 E3 유비퀴틴 리가제이고, p53에 결합시, p53 분해를 촉진할 수 있다.
APG-115는 신규의, 생체 이용 가능한 매우 강력한 MDM2 억제제이다.
Figure pct00001
APG-115는 진행성(advanced) 고형 종양 또는 림프종 환자의 임상시험에 현재 사용되고 있다(NCT02935907). APG-115의 효능을 감안할 때, 암 치료에서의 이 약물 후보물질의 효능을 더 향상시키는 것이 유리하다.
MDM2 억제제 또는 이의 제약상 허용되는 염과 면역 체크포인트 분자 조절제(예컨대, 공동자극 분자의 활성화제 또는 면역 체크포인트 분자의 억제제)의 투여가 암을 시너지적으로 치료한다는 것이 본 출원의 발명자들에 의해 현재 밝혀졌다. 특히, 본원에 개시된 실시예 1 내지 3에서 입증되는 바와 같이, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 첨가가 면역요법(예컨대, 항PD-1 요법)의 효능을 향상시켜 반응률의 증가, 더 완전한 퇴행(CR) 반응군, 종양 성장의 지연, 및 내성 종양의 반응성 종양으로의 전환으로 이어진다는 것은 놀라운 발견이다.
따라서, 암 치료를 필요로 하는 대상체에게 a) 면역 체크포인트 분자 조절제의 유효량; 및 b) 하기 화학식(화학식 I)으로 표시되는 MDM2 억제제, 또는 이의 제약상 허용되는 염의 유효량을 투여하여 대상체의 암을 치료하는 방법이 본원에 제공되며,
[화학식 I]
Figure pct00002
각각의 변수의 정의는 본원에 제공되어 있다.
다른 양태에서, 암 치료를 필요로 하는 대상체에게 하기 화학식(화학식 I)으로 표시되는 MDM2 억제제, 또는 이의 제약상 허용되는 염의 유효량을 투여하여 대상체의 암을 치료하는 방법이 본원에 제공되며,
[화학식 I]
Figure pct00003
각각의 변수의 정의는 본원에 제공되어 있다.
본 발명에서 치료될 수 있는 암은 부신피질암, 진행암, 항문암, 재생불량빈혈, 담관암, 방광암, 골암, 골전이, 성인 뇌/CNS 종양, 소아 뇌/CNS 종양, 유방암, 남성 유방암, 소아암, 원발부위 불명암, 캐슬맨병, 자궁경부암, 융모막암종, 대장/직장 암, 자궁내막암, 식도암, 유잉 종양, 안암, 담낭암, 위장관 카르시노이드 종양, 위장관 기질 종양(GIST), 임신 영양막 질환, 두경부암, 간세포암, 호지킨병, 카포시 육종, 신장암, 후두 및 하인두 암, 성인 급성 림프구성 백혈병(ALL), 급성 골수성 백혈병(AML), 만성 림프구성 백혈병(CLL), 만성 골수성 백혈병(CML), 만성 골수단핵구성 백혈병(CMML), 소아 백혈병, 간암, 비소세포 폐암, 소세포 폐암, 폐 카르시노이드 종양, 피부 림프종, 악성 중피종, 메르켈세포 암종, 다발성 골수종, 골수이형성증후군, 비강 및 부비동 암, 비인두암, 신경모세포종, 비호지킨 림프종, 소아 비호지킨 림프종, 구강 및 구강인두 암, 골육종, 난소암, 췌장암, 음경암, 뇌하수체 종양, 전립선암, 망막모세포종, 횡문근육종, 침샘암, 육종(성인 연조직암), 기저 및 편평세포 피부암, 피부암(흑색종), 소장암, 위암, 고환암, 흉선암, 갑상선암, 자궁 육종, 요로상피 암종, 질암, 외음부암, 발덴스트롬 마크로글로불린혈증, 및 빌름스 종양으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
특정 구현예에서, 암은 췌장암, 선낭 암종, 폐암, 위장관 기질 종양, 및 유방암으로부터 선택된다. 특정 구현예에서, 암은 국소 진행성 또는 전이성 고형 종양 또는 림프종이다. 특정 구현예에서, 대상체는 치료 경험이 있고 질환 진행을 나타낸다.
또한, a) 면역 체크포인트 분자 조절제의 유효량; 및 b) 하기 화학식으로 표시되는 MDM2 억제제, 또는 이의 제약상 허용되는 염의 유효량을 포함하는 제약 조성물이 본원에 제공되며,
Figure pct00004
각각의 변수의 정의는 본원에 제공되어 있다.
또한, 암의 치료를 위한 약제의 제조에 있어서, a) 면역 체크포인트 분자 조절제의 유효량; 및 b) 본원에 개시된 화학식 I의 MDM2 억제제, 또는 이의 제약상 허용되는 염의 유효량의 용도가 본원에 제공된다.
다른 구현예에서, 암 치료에 사용하기 위한, a) 면역 체크포인트 분자 조절제의 유효량과, b) 본원에 개시된 화학식 I의 MDM2 억제제, 또는 이의 제약상 허용되는 염의 유효량의 조합이 본원에 제공된다.
도 1은 APG-115가 마우스 CD4+ T세포 활성화를 향상시켰음을 보여준다.
도 2는 APG-115가 자극된 마우스 T세포에서 사이토카인 생성을 증가시켰음을 보여준다.
도 3의 A는 MH-22A 세포를 지시된 용량의 APG-115로 72시간 동안 처치한 후 MDM2, p53, 총 STAT3(t-STAT3), 인산화 STAT3(p-STAT3), PD-L1, 및 β-액틴(로딩 대조군) 발현의 발현 수준을 나타낸다. 도 3의 B는 상이한 용량의 APG-115에 의한 PD-L1 발현 수준을 나타낸다.
도 4는 MH-22A 마우스 간암 세포로부터 유래된 동계 종양 모델에서 APG-115와의 병용에 의한 항PD-1 요법의 향상된 항종양 활성을 보여준다.
도 5는 확인 실험에서 지시된 제제로 처치된 개별 동물의 종양 성장 곡선을 나타낸다.
도 6은 항PD-1과 병용한 APG-115에 의한 처치에 있어서 MH-22A 쥣과 간암 동계 모델을 갖는 실험 동물의 체중 변화(%)를 나타낸다.
도 7은 전처치 CR 마우스와 나이브 마우스에서의 재자극유발(re-challenge) 후 종양 성장 곡선을 나타낸다.
도 8은 재자극유발 연구에서 마우스의 체중 변화(%)를 나타낸다.
도 9는 혈장 및 종양 조직에서의 APG-115 및 에파카도스타트의 노출을 나타낸다.
도 10은 TIL 분석을 위해 지정된 생체내 연구에서의 종양 성장 곡선을 나타낸다.
도 11은 TIL 연구에서 실험 동물의 체중 변화(%)를 나타낸다.
도 12는 APG-115와 항PD-1 항체에 의한 병용처치 후 동계 종양에서, 종양 침윤성 CD45+, CD3+, 및 세포독성 CD8+ 세포 집단의 실질적인 증가, 뿐만 아니라 M2 대식세포의 유의한 감소를 보여준다.
도 13은 MDSC 및 Treg 세포 백분율의 유의한 변화가 없음을 보여준다.
도 14는 MH-22A 동계 간종양의 처치에 있어서 APG-115와 항PD-1 간의 시너지 작용에 CD8+ T세포가 필요함을 보여준다.
도 15는 T세포 고갈 연구에서 실험 동물의 체중 변화(%)를 나타낸다.
도 16은 Trp53 돌연변이 MC38 동계 마우스 종양의 처치에 있어서 APG-115가 항PD-1 요법과 시너지 작용을 하는 것을 보여준다. 종양 성장 곡선은 다양한 시점(n=10)의 종양 부피의 평균 ± SEM으로 나타내어져 있다. 10 mg/kg의 항PD-1 항체를 17일 동안 1주일에 2회(biw) 복강내(i.p.) 투여하였다. APG-115는 17일 동안 2일마다 1회(q2d) 기준으로 경구(p.o.) 투여되었다.
도 17은 항PD-1 항체와 병용한 APG-115에 의한 처치에 있어서 MC38 쥣과 대장암 동계 모델을 갖는 실험 동물의 체중 변화(%)를 나타낸다.
도 18은 APG-115와의 병용에 의한 항PD-1 요법의 향상된 항종양 활성을 나타낸다.
도 19는 처치 관련 이상사례(AE) 중 하나로서 PLT 수치 변화의 경향을 나타낸다.
도 20은 처치 관련 이상사례 중 하나로서 ANC 수치 변화의 경향을 나타낸다.
도 21은 다양한 암 환자에서의 처치 기간 및 반응을 나타낸다.
도 22는 1일차(a) 또는 21일차(b) 임상시험에서의 APG-115의 혈장 농도-시간 프로파일을 나타낸다.
도 23의 (a) 및 (b)는 혈청 MIC-1 수준이 상승하였고, 증가가 고형 종양 환자에서 시험된 용량 범위 내에서 노출 의존적이었음을 나타낸다.
도 24는 PR 대상체의 표적 병변을 나타낸다.
도 25는 1일차(a) 및 21일차(b) I상 임상시험에서의 APG-115의 평균 농도-시간 프로파일을 나타낸다.
도 26의 (a) 및 (b)는 혈청 MIC-1 수준이 상승하였고, 증가가 고형 종양 환자에서 시험된 용량 범위 내에서 노출 의존적이었음을 나타낸다.
암의 치료를 위해 MDM2 억제제와 면역 체크포인트 분자 조절제(본원에서 "면역 체크포인트 조절제"라고도 함)를 사용하는 병용요법이 본원에 개시된다. 면역 체크포인트 조절제는 항종양 면역 반응을 조절하는 체크포인트 분자를 표적화 할 수 있다.
현재까지 승인된 면역 체크포인트 조절제(예컨대, 활성화제 또는 억제제)는 다수의 종양 유형에서 임상 반응을 나타냈으며, 더 폭 넓은 활용을 위해 지속적으로 평가되고 있다. 그러나, 면역세포에서의 단일 체크포인트 표적화에 대해 다수의 암에서 관찰된 현저한 반응에도 불구하고, 반응의 지속성은 일부 환자에서만 관찰되었다. 임상 환경에서 지속성 있는 항종양 반응을 개선하기 위한 노력은 현재, 다양한 면역요법에 의해 표적화된 T세포 경로의 분기에 기초한 병용요법을 이용해 다수의 체크포인트를 표적화하는 데 집중되어 있다. 병용요법의 임상시험은 장기간의 환자 결과를 토대로 진행 중이며 아직 결론은 나지 않았다. 상기 인용된 문헌[Sharma et al.] 참조.
T세포-매개 면역 반응은 항원 특이적 세포의 클론 선택, 이들의 활성화 및 증식, 항원 부위로의 전달, 및 면역 반응의 유발을 필요로 하는 일련의 사건을 수반한다. 각각 본원에 참조로 포함되는 문헌[Mockler et al., 2014, Frontiers in Oncol 4:1; 및 Pearce et al., 2013, Science 342(6155):1242454] 참조. T세포 수용체 및 공동자극 신호를 수신하면 T세포는 세포독성, 조절, 또는 헬퍼 T세포로 성장, 증식, 및 분화된다. T세포는 활성화 단계에 따라 별개의 대사 프로파일을 나타낸다. 전문이 본원에 참조로 포함되는 문헌[Mockler et al., 2014, Front. Oncol. 4: 107] 참조. 나이브 T세포는 기초 수준의 영양소 흡수를 채택하는 대사 정지 상태이며, ATP 생성의 주요 공급원으로서 산화적 인산화에 의존한다. 반면, 활성화된 T세포(이펙터 T세포)는 세포 성장, 증식, 분화, 및 이펙터 기능에 필요한 에너지 공급의 증가를 위해 신진대사 프로파일을 채택한다. 이펙터 T세포는 ATP 생성을 위해 산화적 인산화보다 당분해를 우선적으로 사용하므로 다량의 포도당을 소비한다. 나이브 T세포 및 이펙터 T세포와 달리, 기억 T세포의 긴 수명은 다른 대사 요구를 제기한다. 기억 단계로의 전이는 산화적 인산화를 유발하기 위해 지방산 산화에 대한 의존도가 증가된 정지 대사를 특징으로 한다. 요약하면, 각각의 T세포 발달 단계는 에너지 생산 및 생합성 전구체 생성을 통한 대사 지원을 필요로 한다. 따라서, 항상성을 유지하기 위해 T세포가 적절히 활성화되고 분화되는 것이 중요하다.
종양의 T세포, 소위 종양 침윤성 림프구(TIL)는 고형암 환자의 전반적인 생존에 대한 주요 공통 특징인 것으로 나타났다. 예를 들어 아미노산 트립토판 및 아르기닌을 고갈시키는 효소의 발현, 및 억제 활성을 갖는 선천적 세포 또는 조절 T세포의 존재로 인해, 종양 미세환경은 T세포 기능에 적대적이다. 또한, 암세포는 포도당이 미토콘드리아에서 더 대사되기보다는 미세환경으로 분비되는 젖산으로 대사되는 변경된 대사인 당분해를 특징으로 한다. 이러한 변경된 대사는 활성화된 종양유전자 및/또는 저산소증에 의해 좌우된다. 젖산은 면역세포의 기능에 부정적인 영향을 미치며, T세포 기능, 사이토카인 생성, 및 사이토카인 능력에 불리하다. 문헌[Droge et al., 1987, Cell Immunol 108(2):405-16; and Fischer et al., 2007, Blood 109(9):3812-9] 참조.
종양 미세환경 내의 특유의 바이오에너지요법 자극유발은 극저산소 영역에서 호기성 당분해 영역에 이르기까지 다양하여 미세환경 영양소 결핍을 초래할 수 있다. 상기 인용된 문헌[Mockler et al.] 참조. 이들 각각의 조건은 T세포 기능에 중대한 영향을 미쳐 항종양 면역 반응을 손상시킬 수 있다. 종양 미세환경에서의 저산소증 관련 변화는 T세포 증식의 감소를 초래하고, 미토콘드리아 산소 소비를 하향조절하고, 분화에 영향을 미쳐 지속적으로 낮은 수준의 염증을 유발할 수 있다. 또한, 영양소 결핍은 이펙터 T세포 생존 및 증식에 필수적인 포도당과 같은 기질의 이용 가능성을 제한할 수 있다.
T세포 활성화의 중심부는 포도당 대사의 현저한 증가를 비롯하여 세포 대사의 상당한 변경을 수반한다. 당분해는 오탄당 분로를 통해 NADPH와 함께 ATP 생성의 빠른 공급원을 나타내지만, 증식에 필수적인 분자의 완전한 보체를 생성하기에는 충분하지 않다. 그러나, ROS의 생성과 함께 증가된 미토콘드리아 산소 소비는 T세포 활성화 및 분화에 필수적이다. 또한, 세포외 공간에서 방출된 미토콘드리아 ATP는 면역-APC 시냅스에서 T세포 활성화를 조절하는 푸린성 신호전달 메커니즘을 가능하게 한다. 정상적인 미토콘드리아 기능은 1차 미토콘드리아 기능장애가 면역 기능장애 및 감염 발생률 증가와 관련이 있으므로 면역 반응을 이용하는 데 중심적인 역할을 한다. 문헌[Ledderose et al., 2014, J Biol Chem 289:25936; 및 Sena et al., 2013, Immunity 38:2 25] 참조.
암의 특징 중 하나는 면역계의 회피이므로, 암 면역요법은, 이펙터 T세포의 유익한 항종양 반응을 초기에 강화시킴으로써 기억 T세포 생성을 유도하고, 조절 T세포의 반응을 약화시킴으로써, 다른 접근법을 취해야 한다. 활성화된 종양 특이적 이펙터 T세포 수를 증가시키는 것이 항종양 면역성을 높이기 위한 가장 유리한 접근법일 것이다.
MDM2 억제제는 항암 치료제로서 이전에 설명된 바 있으며(예를 들어, 전체 내용이 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 번호 9,745,314), 인간에서, MDM2 및 MDM2-관련 단백질 활성의 억제가 이점을 제공하는 질환 및 병태를 치료하기 위한 단일 요법으로서 또는 표준 치료 화학요법제와 병용하는 형태로 평가 중에 있다.
본원에 제시된 결과는 MDM2 억제제가 마우스 CD4+ T세포 활성화를 향상시켰지만(실시예 1.1 참조), 처치가 APG-115 처치 T세포의 자가사멸을 유도하지 않았음을 보여준다. 또한, 자극된 마우스 T세포에서 MDM2 억제제 처치 후 염증성 사이토카인(IFN-γ, IL-2, TNF-α, IL-10, 및 IL-4 포함)의 상향조절이 관찰되었다(실시예 1.2 참조). 이러한 사이토카인은 성공적인 면역-매개 암 퇴치와 밀접한 관련이 있다. 또한, MDM2 억제제에 의한 처치는 종양세포에서 PD-L1 발현을 상향조절하였다(실시예 1.3 참조). 데이터는 MDM2 억제제가 실제로 시험관내 면역 반응을 촉진시킴을 시사한다.
본원에 제공된 생체내 효능 연구(실시예 2.1 참조) 결과, MH-22A 쥣과 간암 세포로부터 유래된 p53 야생형 동계 모델에서, 항PD-1 요법이 종양을 가진 동물의 상당 부분에서 종양 성장을 실질적으로 억제하여 완전 퇴행(CR) 또는 부분 퇴행(PR)을 유도하는 한편, MDM2 억제제의 첨가는 CR 분율을 확장시키고, 치료 효과를 촉진시키고, 중요하게는 나머지 비반응군을 PD-1 차단제에 반응하는 종양으로 전환시킬 수 있는 것으로 나타났다. 중요하게도, 병용처치의 이러한 시너지 효과는 p53 돌연변이 MC38 쥣과 대장 동계 마우스 모델에도 적용되었으며(실시예 3.1 참조), 이는 MDM2-p53의 면역 조절 기능이 무손상 p53을 필요로 하지 않을 수 있음을 나타낸다. MDM2 억제제에 의해 발휘되는 시너지 효과는 임상 평가 중인 IDO1 억제제인 에파카도스타트와 동등하거나 그보다 훨씬 더 크다. 순차적으로, 재자극유발 연구(실시예 2.2 참조) 결과, PD-1 차단제에 의해 치유된 CR 마우스처럼, 이전에 항PD-1 항체와 MDM2 억제제의 병용요법으로 처치된 CR 마우스가 MH-22A 종양세포의 재이식을 효율적으로 거부한 것으로 확인되었고, 이는 면역 기억의 성공적인 발달을 암시한다. 중요하게도, 종양 침윤성 림프구(TIL) 분석(실시예 2.3 참조)은 항PD-1 단일요법에 비해 병용요법 후에 CD45+ 세포, CD3+ T세포, 및 세포독성 CD8+ T세포의 유의한 증가, 뿐만 아니라 수지상 세포의 감소를 나타냈다. 데이터는 종양 미세환경에서 T세포, 특히 세포독성 CD8+ T세포 수의 증가, 및 수지상 세포의 감소에 의해 병용의 우수한 효과가 촉진됨을 시사한다.
또한, 약동학(PK) 분석 결과, MDM2 억제제의 전신 노출 및 종양 분포가 적절하게 달성된 것으로 나타났다. MDM2 억제제의 전신 노출 및 종양 분포의 증가는 용량에 비례하였다. 마지막으로, 동물 모델에서, 병용요법은 종양을 가진 마우스에 내약성이 양호하였다.
본원에 제시된 결과에 기초하면, MDM2 억제제와 면역 체크포인트 조절제 요법은 암 치료에 특히 효과적으로 협력 작용할 것으로 예상된다. 예를 들어, MDM2 억제제와 면역 체크포인트 분자 조절제의 병용은 T세포-매개 항종양 반응의 강화에 있어 이들 제제의 활성을 협력 작용시켜, 환자 결과의 전반적인 지속성을 개선할 가능성이 있다. 따라서, 본 발명은 암 치료를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 MDM2 억제제와 유효량의 면역 체크포인트 분자 조절제를 투여하여 대상체의 암을 치료하는 방법을 제공한다.
I. 정의
본 발명에 따라 그리고 본원에 사용된 바와 같이, 하기 용어들은 달리 명시되지 않는 한 다음과 같은 의미로 정의된다.
본원에 사용된 "면역 체크포인트" 또는 "면역 체크포인트 분자"는 신호를 조절하는 면역계의 분자이다. 면역 체크포인트 분자는 공동자극 체크포인트 분자(즉, 신호를 강화시킴), 또는 억제 체크포인트 분자(즉, 신호를 약화시킴)일 수 있다. 본원에 사용된 "공동자극 체크포인트 분자"는 신호를 강화시키거나 공동자극성인 면역계의 분자이다. 본원에 사용된 "억제 체크포인트 분자"는 신호를 약화시키거나 공동억제성인 면역계의 분자이다.
본원에 사용된 "면역 체크포인트 분자 조절제"는 대상체에서 면역 체크포인트의 활성을 변경할 수 있는 제제이다. 특정 구현예에서, 면역 체크포인트 분자 조절제는 PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, TIM-3, LAG3, CD160, 2B4, TGF β, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, OX40, CD2, CD27, ICAM-1, NKG2C, SLAMF7, NKp80, CD160, B7-H3, LFA-1, 1COS, 4-1BB, GITR, CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, 및 CD83을 포함하는 하나 이상의 면역 체크포인트 분자의 기능을 변경한다. 면역 체크포인트 조절제는 면역 체크포인트의 활성화제(예컨대, 작용제) 또는 억제제(예컨대, 길항제)일 수 있다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 분자 조절제는 면역 체크포인트 결합 단백질(예컨대, 항체, 항체 Fab 단편, 2가(divalent) 항체, 항체 약물 접합체, scFv, 융합 단백질, 2가(bivalent) 항체, 또는 4가 항체)이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 분자 조절제는 단클론 항체 또는 이의 항원결합 단편이다. 다른 구현예에서, 면역 체크포인트 분자 조절제는 소분자이다. 특정 구현예에서, 면역 체크포인트 분자 조절제는 항PD1 항체이다. 특정 구현예에서, 면역 체크포인트 분자 조절제는 항PD-L1 항체이다. 특정 구현예에서, 면역 체크포인트 분자 조절제는 항CTLA-4 항체이다.
본원에 사용된 용어 "MDM2-관련 단백질"은, MDM2와 적어도 25%의 서열 상동성을 가지며, p53 또는 p53-관련 단백질과 상호작용하거나 이들을 억제하는 단백질을 의미한다. MDM2-관련 단백질의 예는 MDMX를 포함하나, 이에 한정되지는 않는다.
본원에 사용된 용어 "기능적 p53"은 정상적 수준, 높은 수준, 또는 낮은 수준으로 발현된 야생형 p53, 및 야생형 p53 활성의 적어도 약 5%, 예를 들어 야생형 활성의 적어도 약 10%, 약 20%, 약 30%, 약 40%, 약 50% 이상을 보유하는 p53의 돌연변이체 또는 대립형질 변이체를 의미한다.
본원에 사용된 용어 "p53-관련 단백질"은, p53과 적어도 25%의 서열 상동성을 갖고, 종양 억제 활성을 가지며, MDM2 또는 MDM2-관련 단백질과의 상호작용에 의해 억제되는 단백질을 의미한다. p53-관련 단백질의 예는 p63 및 p73을 포함하나, 이에 한정되지는 않는다.
용어 "완전 퇴행"은 처치 후 종양이 검출되지 않음을 의미한다.
용어 "부분 퇴행"은 처치 전에 비해 종양 부피가 더 작아짐(예를 들어, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 미만)을 의미한다.
본원에 사용된 "제약상 허용되는" 성분은 타당한 이익/위험 비율에 상응하는 과도한 부작용(예컨대, 독성, 염증, 및 알레르기 반응) 없이 인간 및/또는 동물에 사용하기에 적합한 성분이다.
본원에 사용된 용어 "치료"는 바람직하게, 질환 또는 병태의 하나 이상의 징후 또는 증상의 완화 또는 개선(예를 들어, 부분 또는 완전 퇴행), 질환 정도의 감소, 질환 상태의 안정성(즉, 안정적인 질환을 달성하며 악화되지 않음), 질환 상태의 개선 또는 완화, 진행률의 감소 또는 진행 시간의 증가, 및 관해(부분적 또는 전체적)를 비롯하여, 유익하거나 바람직한 임상 결과를 얻기 위한 조치를 의미한다. 암의 "치료"는 또한, 치료가 없는 경우에 예상되는 생존과 비교하여 생존 연장을 의미할 수 있다. 치료는 치유적일 필요는 없다. 특정 구현예에서, 치료는, 예를 들어 통증 및 삶의 질(QOL)을 평가하는 허용 도구를 사용하여, 개인자격자(예컨대, 치료 의사)가 판단한 통증의 감소 또는 삶의 질의 증가 중 하나 이상을 포함한다. 특정 구현예에서, 치료는, 예를 들어 통증 및 삶의 질(QOL)을 평가하는 허용 도구를 사용하여, 개인자격자(예컨대, 치료 의사)가 판단한 통증의 감소 또는 삶의 질의 증가 중 하나 이상을 포함하지 않는다.
특정 구현예에서, 치료는 정규화된 값(예를 들어, 건강한 환자 또는 개인에서 얻은 값)에 근접하는, 예를 들어 정규화된 값과의 차이가 50% 미만인, 특정 구현예에서는 정규화된 값과의 차이가 약 25% 미만인, 다른 구현예에서는 정규화된 값과의 차이가 10% 미만인, 또 다른 구현예에서는 증상의 존재가 통상적 통계검정을 이용해 결정된 정규화된 값과 유의한 차이가 없는, 증상 또는 징후를 포함한다. 본원에 사용된 "치료"는 치료 전에 진행성 질환이 있던 대상체에서의 안정적인 질환의 유도, 진행 시간의 증가, 또는 생존 시간의 증가를 비롯하여, 종양 크기의 감소, 종양 성장의 억제를 포함할 수 있다. 증가는 적절한 대조군 또는 예상 결과와 비교하여 결정될 수 있다. 본원에 사용된 "치료"는 적절한 대조군과 비교하여, 종양 크기의 감소와 함께 또는 감소 없이, 대상체의 생존 증가를 포함할 수 있다. 치료는 치유적일 필요는 없다.
본원에 사용된 "병용투여" 또는 "병용요법"은 개별 제형 또는 단일 제약 제형을 사용하여 둘 이상의 활성제를 투여하거나, 두 활성제(또는 모든 활성제)가 동시에 생리 활성을 나타내는 기간이 존재하도록 임의의 순서로 연속 투여하는 것으로 이해된다. 본원에서, 하나의 활성제(예컨대, MDM2 억제제)는 제2 제제의 활성을 개선할 수 있는(예를 들어, 표적세포(예컨대, 암세포)를 제2 제제의 활성에 감작시킬 수 있는) 것으로 여겨진다. 병용투여에서 제제가 동시에, 동일한 빈도로, 또는 동일한 투여 경로로 투여될 필요는 없다. 본원에 사용된 "병용투여" 또는 "병용요법"은 MDM2 억제제를 하나 이상의 면역 체크포인트 분자 조절제와 함께 투여하는 것을 포함한다. 면역 체크포인트 조절제의 예는 본원에 제공되어 있다.
용어 "투여"는 제약 조성물을 대상체의 시스템 내에 또는 대상체 내부 또는 표피의 특정 부위에 전달하는 임의의 방법을 포함한다. 특정 구현예에서, 제제는 경구로 전달된다. 특정 구현예에서, 제제는 비경구로 투여된다. 특정 구현예에서, 제제는 주사 또는 주입에 의해 전달된다. 특정 구현예에서, 제제는 경점막을 비롯하여 국소적으로 전달된다. 특정 구현예에서, 제제는 흡입에 의해 전달된다. 본 발명의 특정 구현예에서, 제제는 정맥내, 근육내, 피하, 골수내 주사, 뿐만 아니라 척수강내, 직접 심실내, 복강내, 비강내, 또는 안구내 주사를 비롯한 비경구 전달에 의해 투여된다. 일 구현예에서, 본원에 제공된 조성물은 종양에 직접 주사함으로써 투여될 수 있다. 일부 구현예에서, 본 발명의 제형은 정맥내 주사 또는 정맥내 주입에 의해 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 본 발명의 제형은 연속 주입에 의해 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 투여는 경구 투여가 아니다. 특정 구현예에서, 투여는 전신 투여이다. 특정 구현예에서, 투여는 국소 투여이다. 일부 구현예에서, 예를 들어 정맥내 투여와 종양내 투여, 또는 정맥내 투여와 경구(peroral) 투여, 또는 정맥내 투여와 경구(oral) 투여, 정맥내 투여와 국소 투여, 또는 정맥내 투여와 경피 또는 경점막 투여와 같은 하나 이상의 투여 경로가 조합될 수 있다. 제제의 투여는 협력 근무하는 다수의 사람에 의해 수행될 수 있다. 제제의 투여는, 예를 들어 자가 전달(예컨대, 경구 전달, 피하 전달, 중심정맥관을 통한 정맥내 전달 등)에 의해; 또는 숙련된 전문가에 의한 전달(예컨대, 정맥내 전달, 근육내 전달, 종양내 전달, 연속 주입 등)을 위해, 특정 제제가 투여되도록 직접 또는 다른 사람을 통해, 대상체에 투여될 제제를 처방하고/하거나 지침을 제공하는 것을 포함한다.
본원에 사용된 용어 "생존"은 질환 또는 병태(예컨대, 암) 치료를 받은 대상체의 삶의 지속을 의미한다. 생존 시간은 임의의 시점, 예를 들어 임상시험 개시 시점, 이전 치료 요법의 완료 또는 실패 시점, 진단 시점 등으로부터 정의될 수 있다.
본원에 사용된 "분산액"은, 임의의 성질(예를 들어, 고체, 액체, 또는 기체)의 콜로이드 크기의 입자가 다른 조성 또는 상태의 연속상에 분산되어 있는 시스템을 의미한다. 정맥내 약물 전달에서, 연속상은 실질적으로 물이고, 분산된 입자는 고체(현탁액) 또는 불혼화성 액체(에멀젼)일 수 있다.
본 발명의 방법에 의해 치료될 "대상체"는 인간 또는 비인간 동물, 바람직하게는 포유동물, 더 바람직하게는 인간을 의미할 수 있다. 특정 구현예에서, 대상체는 본 발명의 방법을 이용해 치료를 시작하기 전에, 검출 가능한 종양을 가지고 있다. 특정 구현예에서, 대상체는 본 발명의 방법을 이용해 치료를 시작할 때, 검출 가능한 종양을 가지고 있다.
본원에 사용된 용어 "안전하고 치료적으로 유효한 양" 또는 "안전하고 유효한 양"은, 본 발명의 방식으로 사용될 때 타당한 이익/위험 비율에 상응하는 과도한 부작용(예컨대, 독성, 염증, 또는 알레르기 반응) 없이 원하는 치료 반응을 얻기에 충분한 성분의 양을 의미한다.
용어 "치료 유효량" 또는 "유효량"은 질환을 치료하기 위해 환자에게 투여될 때 질환에 대해 이러한 치료 효과를 나타내기에 충분한 화합물의 양을 의미한다. 질환 예방을 위해 투여될 때, 상기 양은 질환의 발병을 막거나 지연시키기에 충분하다. "치료 유효량" 또는 "유효량"은 화합물, 질환과 그 중중도, 및 치료될 환자의 연령, 체중 등에 따라 달라질 것이다. 치료 유효량 또는 유효량은 치유적일 필요는 없다. 치료 유효량 또는 유효량은 질환 또는 병태가 계속 발생하지 않도록 할 필요는 없다. 그 대신에, 치료 유효량 또는 유효량은 질환 또는 병태의 발병, 중증도, 또는 진행을 적어도 지연시키거나 감소시킬 양이다. 질환 진행은, 예를 들어 종양 크기, 진행 시간, 생존 시간, 또는 당업계에서 사용되는 기타 임상 척도에 의해 모니터링될 수 있다.
용어 "치료 효과"는 동물, 특히 포유동물, 더 구체적으로는 인간에서 약리적 활성 물질로 인한 국소적 또는 전신적 효과를 의미한다. 따라서, 이 용어는 질환의 진단, 치유, 완화, 치료, 또는 예방에 사용하거나, 동물 또는 인간의 바람직한 신체적 또는 정신적 발달 및 상태의 향상에 사용하기 위한 임의의 물질을 의미한다. "치료 유효량"이란 구는 임의의 치료에 적용할 수 있는 타당한 이익/위험 비율로 몇몇 원하는 국소적 또는 전신적 효과를 나타내는 물질의 양을 의미한다. 특정 구현예에서, 화합물의 치료 유효량은 치료 지수, 용해도 등에 따라 달라질 것이다.
"예방"은 질환 또는 장애에 걸릴 위험의 감소를 의미한다. 예방은 질환 또는 병태가 대상체에서 발생하거나 재발하지 않을 것을 필요로 하지 않는다.
용어 "장애" 및 "질환"은 포괄적으로 사용되며, 신체의 임의의 부분, 기관, 또는 시스템(또는 이들의 임의의 조합)의 정상적인 구조 또는 기능으로부터의 임의의 벗어남을 의미한다. 특정 질환은 생물학적, 화학적, 및 물리적 변화를 포함한 특징적인 증상 및 징후로 나타나며, 대개 다양한 기타 요인(인구통계학적 요인, 환경적 요인, 직업적 요인, 유전적 요인, 및 의학상 역사적 요인을 포함하나, 이에 한정되지는 않음)과 관련이 있다. 중요한 진단 정보를 얻기 위해 다양한 방법을 통해 특정의 특징적 징후, 증상, 및 관련 인자가 정량화될 수 있다.
본원에서 일련의 수치가 언급된 모든 경우, 언급된 임의의 수치는 수치 범위의 상한 또는 하한일 수 있는 것으로 이해되어야 한다. 또한, 본 발명은 이러한 모든 수치 범위, 즉 수치 상한과 수치 하한의 조합을 갖는 범위를 포함하는 것으로 이해되어야 하고, 상한 및 하한 각각에 대한 수치는 본원에 언급된 임의의 수치일 수 있다. 본원에 제공된 범위는 그 범위 내의 모든 값을 포함하는 것으로 이해된다. 예를 들어, 1~10은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10의 모든 값, 및 적절한 분수 값을 포함하는 것으로 이해된다. 특정 값 "이하", 예를 들어 5 이하로 표현된 범위는 그 범위의 상한을 포함한 모든 값, 예를 들어, 0, 1, 2, 3, 4, 5, 및 적절한 분수 값으로 이해된다. 최대 1주일 또는 1주일 이내는 0.5일, 1일, 2일, 3일, 4일, 5일, 6일, 또는 7일을 포함하는 것으로 이해된다. 유사하게, "적어도"로 한정된 범위는 제공된 하한 값 및 더 높은 모든 수를 포함하는 것으로 이해된다.
달리 나타내지 않는 한, 모든 퍼센트 표시는 w/w이다.
본원에 사용된 "약"은 평균의 3표준편차 내 또는 특정 기술에서의 표준 공차 범위 내를 포함하는 것으로 이해된다. 특정 구현예에서, "약"은 0.5 이하의 편차로 이해된다.
본원에서 문법상 단수형은 하나 또는 하나 초과의 대상(즉, 적어도 하나의 대상)을 지칭하기 위해 사용된다. 예를 들어, "요소"는 하나의 요소 또는 하나 초과의 요소를 의미한다.
본원에서 "포함하는"이라는 용어는, "포함하나 이에 한정되지 않는"이라는 구를 의미하기 위해 사용되고, 이들은 상호교환적으로 사용된다.
본원에서 "또는"이라는 용어는 문맥상 달리 명시하지 않는 한, "및/또는"이라는 용어를 의미하기 위해 포괄적으로 사용되고, 이들은 상호교환적으로 사용된다.
본원에서 "~와 같은"이라는 용어는, "~와 같은, 그러나 이에 한정되지 않는"이라는 구를 의미하기 위해 사용되고, 이들은 상호교환적으로 사용된다.
II. MDM2 억제제
본 발명에 개시된 MDM2 억제제는 p53 또는 p53-관련 단백질과 MDM2 또는 MDM2-관련 단백질 간의 상호작용을 억제한다. p53 또는 p53-관련 단백질에 대한 MDM2 또는 MDM2-관련 단백질의 부정적 효과를 억제함으로써, 본 발명의 MDM2 억제제는 세포를 자가사멸 및/또는 세포주기 정지의 유도인자에 감작시킨다. 일 구현예에서, 본 발명의 MDM2 억제제는 자가사멸 및/또는 세포주기 정지를 유도한다.
본원에 개시된 화합물은 MDM2 억제제로서 효과적일 수 있다. 일부 구현예에서, 본 발명의 화합물은 화학식 I로 표시되며(또는 이의 제약상 허용되는 염),
[화학식 I]
Figure pct00005
식 중,
Figure pct00006
는
Figure pct00007
로 이루어진 군으로부터 선택되고;
B는 C4-7 탄소환 고리이고;
R1은 H, 치환 또는 비치환 C1-4 알킬, 치환 또는 비치환 시클로알킬, 치환 또는 비치환 헤테로시클로알킬, ORa, 또는 NRaRb이고;
n은 0, 1, 또는 2이고;
R2, R3, R4, R5, R7, R8, R9, 및 R10은 독립적으로, H, F, Cl, CH3, 및 CF3로 이루어진 군으로부터 선택되고;
R6은
Figure pct00008
또는
Figure pct00009
이고;
Ra는 수소, 또는 치환 또는 비치환 C1-4 알킬이고;
Rb는 수소, 또는 치환 또는 비치환 C1-4 알킬이고;
Rc 및 Rd는 고리 B의 하나의 탄소 원자 상의 치환기이고, 이때
Rc는 H, C1-3 알킬, C1-3 알킬렌-ORa, ORa, 또는 할로이고;
Rd는 H, C1-3 알킬, C1-3 알킬렌-ORa, ORa, 또는 할로이거나;
Rc와 Rd는 이들이 부착되는 탄소 원자와 함께, 임의로 산소 원자를 함유하는 4 내지 6원의 스피로 치환기를 형성하고;
Re는 ―C(=O)ORa, ―C(=O)NRaRb, 또는 ―C(=O)NHSO2CH3이다.
구조식 I의 화합물은 MDM2-p53 상호작용을 억제하며, 다양한 질환 및 병태의 치료에 유용하다. 특히, 구조식 I의 화합물은 MDM2 및 MDM2-관련 단백질의 억제가 이점을 제공하는 질환 또는 병태, 예컨대 암 및 증식성 질환을 치료하는 방법에 사용된다. 상기 방법은 구조식 I의 화합물의 치료 유효량을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.
본원에 사용된 용어 "알킬"은, 메틸, 에틸, n-프로필, i-프로필, n-부틸, sec-부틸, t-부틸, n-펜틸, 2-메틸부틸, 3-메틸부틸, 2,2-디메틸프로필, n-헥실, 2-메틸펜틸, 3-메틸펜틸, 4-메틸펜틸, 2,2-디메틸부틸, 2,3-디메틸부틸, 3,3-디메틸부틸, 및 2-에틸부틸을 포함하나 이에 한정되지 않는 직쇄 및 분지형 포화 C1-10 탄화수소기를 의미한다. Cm-n이라는 용어는 알킬기가 "m"개 내지 "n"개의 탄소 원자를 가짐을 의미한다. 용어 "알킬렌"은 치환기를 갖는 알킬기를 의미한다. 알킬(예컨대, 메틸), 또는 알킬렌(예컨대, -CH2-) 기는, 예를 들어 독립적으로 선택된 할로, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 하이드록시, 알콕시, 니트로, 시아노, 알킬아미노, 또는 아미노 기 중 하나 이상, 일반적으로는 1개 내지 3개로 치환될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "할로"는 플루오로, 클로로, 브로모, 또는 요오도로 정의된다.
용어 "하이드록시"는 -OH로 정의된다.
용어 "알콕시"는 R이 알킬인 -OR로 정의된다.
용어 "아미노"는 -NH2로 정의되고, 용어 "알킬아미노"는 적어도 하나의 R이 알킬이고 제2의 R이 알킬 또는 수소인 -NR2로 정의된다.
용어 "카바모일"은 -C(=O)NR2로 정의된다.
용어 "카복시"는 -C(=O)OH 또는 이의 염으로 정의된다.
용어 "니트로"는 -NO2로 정의된다.
용어 "시아노"는 -CN으로 정의된다.
용어 "트리플루오로메틸"은 -CF3로 정의된다.
용어 "트리플루오로메톡시"는 -OCF3로 정의된다.
본원에 사용된 용어 "아릴"은 단환 또는 다환 방향족기, 바람직하게는 단환 또는 이환 방향족기를 의미한다. 아릴기의 예는 페닐, 나프틸, 플루오레닐, 아줄레닐, 안트릴, 페난트릴, 피레닐, 바이페닐, 및 터페닐을 포함하나, 이에 한정되지는 않는다. 아릴은 또한, 하나의 고리가 방향족이고 나머지가 포화, 부분 불포화, 또는 방향족인 이환 및 삼환 탄소 고리, 예컨대 디하이드로나프틸, 인데닐, 인다닐, 또는 테트라하이드로나프틸(테트랄리닐)을 의미한다. 달리 나타내지 않는 한, 아릴기는 비치환이거나, 예를 들어 할로, 알킬, 알케닐, -OCF3, -NO2, -CN, -NC, -OH, 알콕시, 아미노, 알킬아미노, -CO2H, -CO2알킬, -OCO알킬, 아릴, 및 헤테로아릴로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상, 특히 1개 내지 4개의 기로 치환될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "복소환"은 헤테로아릴 및 헤테로시클로알킬 고리 시스템을 의미한다.
본원에 사용된 용어 "헤테로아릴"은 1개 또는 2개의 방향족 고리를 함유하고 방향족 고리에 적어도 하나의 질소, 산소, 또는 황 원자를 함유하는 단환 또는 이환 고리 시스템을 의미한다. 헤테로아릴기의 각각의 고리는, 각각의 고리에서 헤테로원자의 총 수가 4개 이하이고 각각의 고리가 적어도 하나의 탄소 원자를 함유한다면, 1개 또는 2개의 O 원자, 1개 또는 2개의 S 원자, 및/또는 1개 내지 4개의 N 원자를 함유할 수 있다. 특정 구현예에서, 헤테로아릴기는 5개 내지 20개, 5개 내지 15개, 또는 5개 내지 10개의 고리 원자를 갖는다. 단환 헤테로아릴기의 예는 퓨라닐, 이미다졸릴, 이소티아졸릴, 이속사졸릴, 옥사디아졸릴, 옥사졸릴, 피라지닐, 피라졸릴, 피리다지닐, 피리딜, 피리미디닐, 피롤릴, 티아디아졸릴, 티아졸릴, 티에닐, 테트라졸릴, 트리아지닐, 및 트리아졸릴을 포함하나, 이에 한정되지는 않는다. 이환 헤테로아릴기의 예는 벤조퓨라닐, 벤즈이미다졸릴, 벤조이속사졸릴, 벤조피라닐, 벤조티아디아졸릴, 벤조티아졸릴, 벤조티에닐, 벤조티오페닐, 벤조트리아졸릴, 벤족사졸릴, 퓨로피리딜, 이미다조피리디닐, 이미다조티아졸릴, 인돌리지닐, 인돌릴, 인다졸릴, 이소벤조퓨라닐, 이소벤조티에닐, 이소인돌릴, 이소퀴놀리닐, 이소티아졸릴, 나프티리디닐, 옥사졸로피리디닐, 프탈라지닐, 프테리디닐, 푸리닐, 피리도피리딜, 피롤로피리딜, 퀴놀리닐, 퀴녹살리닐, 퀴아졸리닐, 티아디아졸로피리미딜, 및 티에노피리딜을 포함하나, 이에 한정되지는 않는다. 달리 나타내지 않는 한, 헤테로아릴기는 비치환이거나, 예를 들어 할로, 알킬, 알케닐, -OCF3, -NO2, -CN, -NC, -OH, 알콕시, 아미노, 알킬아미노, -CO2H, -CO2알킬, -OCO알킬, 아릴, 및 헤테로아릴로부터 선택되는 하나 이상, 특히 1개 내지 4개의 치환기로 치환될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "시클로알킬"은, 예를 들어 독립적으로 선택된 할로, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 하이드록시, 알콕시, 니트로, 시아노, 알킬아미노, 또는 아미노 기 중 하나 이상, 일반적으로는 1개 내지 3개로 임의로 치환된 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헵틸, 및 시클로옥틸을 비롯하여, 3개 내지 8개의 탄소 원자를 함유하는 단환 또는 이환의, 포화 또는 부분 불포화 고리 시스템을 의미한다.
본원에 사용된 용어 "헤테로시클로알킬"은 총 4개 내지 12개의 원자(이 중, 1개 내지 5개의 원자는 질소, 산소, 및 황으로부터 독립적으로 선택되고 나머지 원자는 탄소임)를 함유하는 단환 또는 이환의, 포화 또는 부분 불포화 고리 시스템을 의미한다. 헤테로시클로알킬기의 비제한적인 예는 아제티디닐, 피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 디하이드로피롤릴, 모르폴리닐, 티오모르폴리닐, 디하이드로피리디닐, 옥사시클로헵틸, 디옥사시클로헵틸, 티아시클로헵틸, 디아자시클로헵틸이고, 각각은 독립적으로 선택된 할로, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, 시아노, 아미노, 카바모일, 니트로, 카복시, C2-7 알케닐, C2-7 알키닐 등 중 하나 이상, 일반적으로는 1개 내지 3개로 고리의 원자 상에서 임의로 치환된다.
일부 구현예에서,
Figure pct00010
는
Figure pct00011
또는
Figure pct00012
이고;
일부 구현예에서, B는
Figure pct00013
또는
Figure pct00014
이고;
일부 구현예에서, n은 0 또는 1이고, R1은 H 또는 CH3이다.
일부 구현예에서,
Figure pct00015
는 H, CH3, 또는 CH2CH3이다.
일부 구현예에서, R2는 H이다. 다른 구현예에서, R3은 할로이고, 바람직하게는 클로로이다. 또 다른 구현예에서, R4는 H이고, R5는 H이거나, R4와 R5는 모두 H이다.
일부 구현예에서, R7은 할로이고, 더 바람직하게는 플루오로이다.
일부 구현예에서, R8, R9, 및 R10 각각은 H이다.
일부 구현예에서, Ra 및 Rb는 개별적으로 H, CH3, 또는 CH2CH3이다.
일부 구현예에서, Rc 및 Rd는 개별적으로 H, 할로, OH, CH3, CH2CH3, 또는 CH2OH이다. 일부 구현예에서, Rc와 Rd는 F와 F, H와 H, OH와 CH3, OH와 H, CH3와 CH3, CH3와 OH, H와 OH, CH2CH3와 CH2CH3, 및 CH2OH와 CH2OH이다.
일부 구현예에서, Re는 ―C(=O)OH, ―C(O)NH2, 또는 ―C(=O)NHSO2CH3이다.
일 구현예에서, MDM2 억제제는
Figure pct00016
,
Figure pct00017
,
Figure pct00018
,
Figure pct00019
,
Figure pct00020
,
Figure pct00021
,
Figure pct00022
,
Figure pct00023
,
Figure pct00024
,
Figure pct00025
,
Figure pct00026
,
Figure pct00027
,
Figure pct00028
,
Figure pct00029
, 및
Figure pct00030
로부터 선택된다.
일 구현예에서, MDM2 억제제는
Figure pct00031
,
또는 이의 제약상 허용되는 염이다.
일 구현예에서, MDM2 억제제는
Figure pct00032
,
또는 이의 제약상 허용되는 염이다. 이 화합물은 본원에서 APG-115라고도 한다.
본 출원에서 사용될 수 있는 더 많은 MDM2 억제제 및 MDM2 억제제의 합성은, 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 번호 9,745,314에 추가로 개시되어 있다.
본 발명의 화합물은 염으로서 존재할 수 있다. 본 발명의 화합물의 제약상 허용되는 염은 대개 본 발명의 방법에 바람직하다. 본원에 사용된 용어 "제약상 허용되는 염"은 구조식 I의 화합물의 염 또는 쌍성이온 형태를 의미한다. 화학식 I의 화합물의 염은 상기 화합물의 최종 단리 및 정제 중에 제조되거나, 상기 화합물을 알칼리 및 알칼리 토금속 이온(예컨대, Na+, K+, Ca2 +, 및 Mg2 +)과 같은, 그러나 이에 한정되지 않는 적합한 양이온, 뿐만 아니라 암모늄 및 치환된 암모늄 이온(예컨대, NH4 +, NHMe3 +, NH2Me2 +, NHMe3 +, 및 NMe4 +)과 같은, 그러나 이에 한정되지 않는 유기 양이온을 갖는 산과 반응시켜 별도로 제조될 수 있다. 제약상 허용되는 1가 및 2가 양이온의 예는, 예를 들어 문헌[Berge et al. J. Pharm . Sci ., 66:1-19 (1997)]에 논의되어 있다.
구조식 I의 화합물의 제약상 허용되는 염은 제약상 허용되는 산으로 형성된 산 부가염일 수 있다. 제약상 허용되는 염을 형성하는 데 사용될 수 있는 산의 예는 질산, 붕산, 염산, 브롬화수소산, 황산, 인산과 같은 무기산, 및 옥살산, 말레산, 석신산, 시트르산과 같은 유기산을 포함한다. 본 발명의 화합물의 염의 비제한적인 예는 하이드로클로라이드, 하이드로브로마이드, 하이드로요오다이드, 설페이트, 바이설페이트, 2-하이드록시에탄설포네이트, 포스페이트, 하이드로젠포스페이트, 아세테이트, 아디페이트, 알기네이트, 아스파르테이트, 벤조에이트, 바이설페이트, 부티레이트, 캄포레이트, 캄포설포네이트, 디글루코네이트, 글리세롤포스페이트, 헤미설페이트, 헵타노에이트, 헥사노에이트, 포르메이트, 석시네이트, 퓨마레이트, 말레에이트, 아스코르베이트, 이세티오네이트, 살리실레이트, 메탄설포네이트, 메시틸렌설포네이트, 나프틸렌설포네이트, 니코티네이트, 2-나프탈렌설포네이트, 옥살레이트, 파모에이트, 펙티네이트, 퍼설페이트, 3-페닐프로피오네이트, 피크레이트, 피발레이트, 프로피오네이트, 트리클로로아세테이트, 트리플루오로아세테이트, 포스페이트, 글루타메이트, 바이카보네이트, 파라톨루엔설포네이트, 운데카노에이트, 락테이트, 시트레이트, 타르트레이트, 글루코네이트, 메탄설포네이트, 에탄디설포네이트, 벤젠 설포네이트, 및 p-톨루엔설포네이트 염을 포함하나, 이에 한정되지는 않는다. 또한, 본 발명의 화합물에 존재하는 유효 아미노기는 메틸, 에틸, 프로필, 및 부틸 클로라이드, 브로마이드, 및 요오다이드; 디메틸, 디에틸, 디부틸, 및 디아밀 설페이트; 데실, 라우릴, 미리스틸, 및 스테릴 클로라이드, 브로마이드, 및 요오다이드; 및 벤질 및 페네틸 브로마이드로 4차화될 수 있다. 전술한 바에 비추어, 본원에 나타나는 본 발명의 화합물에 대한 모든 언급은 구조식 I의 화합물뿐만 아니라 이의 제약상 허용되는 염을 포함하고자 하는 것이다.
하나 이상의 키랄 중심을 갖는 화합물은 다양한 입체이성체 형태로 존재할 수 있다. 입체이성체는 공간적 배열만 다른 화합물이다. 입체이성체는 모든 부분입체이성체, 거울상이성체, 및 에피머 형태뿐만 아니라 이들의 라세미체 및 혼합물을 포함한다.
용어 "기하이성체"는, 2개의 치환기가 모두 고리의 동일측에 있거나(cis), 각각 고리의 반대측에 있는(trans) 적어도 2개의 치환기를 갖는 환형 화합물을 의미한다. 개시된 화합물이 입체화학을 나타내지 않고 명명되거나 구조로 도시된 경우, 명칭 또는 구조는 가능한 입체이성체, 또는 기하이성체, 또는 포함되는 입체이성체 또는 기하이성체의 혼합물 중 하나 이상을 포함하는 것으로 이해된다.
기하이성체가 명칭 또는 구조로 도시된 경우, 명명되거나 도시된 이성체는 다른 이성체보다 더 많은 정도로 존재하는(즉, 명명되거나 도시된 기하이성체의 기하이성질 순도는 중량 기준으로 50% 초과만큼, 예컨대 적어도 60%, 70%, 80%, 90%, 99%, 또는 99.9% 순수한) 것으로 이해되어야 한다 기하이성질 순도는 명명되거나 도시된 기하이성체의 혼합물 중의 중량을 모든 기하이성체의 혼합물 중의 총 중량으로 나누어 구해진다.
라세미 혼합물은 50%의 하나의 거울상이성체와 50%의 이에 상응하는 거울상이성체를 의미한다. 하나의 키랄 중심을 갖는 화합물이 키랄 중심의 입체화학을 나타내지 않고 명명되거나 도시된 경우, 명칭 또는 구조는 화합물의 두 가지 가능한 거울상이성체(예를 들어, 두 가지 거울상이성질적으로 순수하고, 거울상이성질적으로 풍부하거나 라세미체인) 형태를 모두 포함하는 것으로 이해된다. 2개 이상의 키랄 중심을 갖는 화합물이 키랄 중심의 입체화학을 나타내지 않고 명명되거나 도시된 경우, 명칭 또는 구조는 화합물의 모든 가능한 부분입체이성체 형태(예를 들어, 하나 이상의 부분입체이성체의 부분입체이성질적으로 순수하고 부분입체이성질적으로 풍부한 등몰의 혼합물(예컨대, 라세미 혼합물))를 포함하는 것으로 이해된다.
거울상이성체 및 부분입체이성체 혼합물은 잘 알려진 방법에 의해, 예컨대 키랄상 가스 크로마토그래피에 의해, 키랄상 고성능 액체 크로마토그래피에 의해, 키랄염 착물로서 화합물을 결정화함으로써, 또는 키랄 용매에서 화합물을 결정화함으로써 혼합물의 성분 거울상이성체 또는 입체이성체로 분해될 수 있다. 거울상이성체 및 부분입체이성체는 또한, 잘 알려진 비대칭 합성법에 의해 부분입체이성질적으로 또는 거울상이성질적으로 순수한 중간체, 시약, 및 촉매로부터 얻을 수 있다.
화합물이 단일 거울상이성체를 나타내는 명칭 또는 구조로 표시된 경우, 달리 나타내지 않는 한, 화합물은 적어도 60%, 70%, 80%, 90%, 99%, 또는 99.9% 광학적으로 순수하다("거울상이성질적으로 순수하다"라고도 함). 광학 순도는 명명되거나 도시된 거울상이성체의 혼합물 중의 중량을 두 거울상이성체의 혼합물 중의 총 중량으로 나눈 값이다.
개시된 화합물의 입체화학이 명명되거나 구조로 도시되고, 명명되거나 도시된 구조가 (예를 들어, 부분입체이성체의 쌍에서와 같이) 입체이성체를 1개보다 많이 포함하는 경우, 포함되는 입체이성체 중 하나 또는 포함되는 입체이성체의 임의의 혼합물이 포함되는 것으로 이해되어야 한다. 명명되거나 도시된 입체이성체의 입체이성질 순도는 중량 기준으로 적어도 60%, 70%, 80%, 90%, 99%, 또는 99.9%인 것으로 또한 이해되어야 한다. 이 경우 입체이성질 순도는 명칭 또는 구조에 의해 포함되는 입체이성체의 혼합물 중의 총 중량을 모든 입체이성체의 혼합물 중의 총 중량으로 나누어 구해진다.
III. 면역요법
면역계가 자기(self)를 비자기(non-self)와 구별하지 못하도록 복잡하고 중복되는 다양한 메커니즘을 이용할 수 있는 종양세포의 능력은 면역감시를 회피하는 종양의 기본 메커니즘을 나타낸다. 이러한 메커니즘은 항원 제시의 방해, T세포 활성화 또는 억제를 제어하는 조절 경로(면역 체크포인트 조절)의 파괴, 면역 억제에 기여하는 세포(Treg, MDSC)의 공급, 또는 면역 활성에 영향을 미치는 인자(IDO, PGE2)의 방출을 포함한다. 각각의 전문이 본원에 참조로 포함되는 문헌[Harris et al., 2013, J Immunotherapy Cancer 1:12; Chen et al., 2013, Immunity 39:1; Pardoll, et al., 2012, Nature Reviews: Cancer 12:252; 및 Sharma et al., 2015, Cell 161:205] 참조. 최근, 임상 용도로 승인되었거나 적극적으로 임상연구 중인 T세포 체크포인트 억제제, T세포 활성화제, 및 잠재적 백신에 이르는 접근법에 의한 면역항암 치료 양식이 폭발적으로 증가했다. 이들 중 항CTLA-4, 항PD-1, 및 항PD-L1 면역 체크포인트 요법을 비롯한 일부는 다양한 성공을 보여주었고, 임상 용도로 승인되었다. 다양한 암의 치료를 위한 임상 개발에서 체크포인트 억제제가 가장 발전된 것이지만, 이들은 항종양 반응을 개선하는 데 이용될 수 있는 잠재적 표적 및 경로의 일부를 나타낸다. 이는 전임상 및 임상 개발의 다양한 단계에 있는 면역 반응을 개선하는 공동자극 분자와 함께 체크포인트 또는 억제 경로에 영향을 미치는 가능성 있는 분자의 새로운 목록의 지속적인 출현에 의해 입증된다. 암 치료에 대해 평가되고 있는 새로운 면역 체크포인트의 예는 LAG-3(Triebel et al., 1990, J. Exp . Med. 171: 1393-1405), TIM-3(Sakuishi et al., 2010, J. Exp . Med . 207: 2187-2194), 및 VISTA(Wang et al., 2011, J. Exp . Med . 208: 577-592)를 포함한다. 면역 반응을 개선하는 공동자극 분자의 예는 ICOS(Fan et al., 2014, J. Exp. Med. 211: 715-725), OX40(Curti et al., 2013, Cancer Res. 73: 7189-7198), 및 4-1BB(Melero et al., 1997, Nat. Med. 3: 682-685)를 포함한다.
일부 구현예에서, 본 발명의 면역 체크포인트 분자는 공동자극 면역 체크포인트(즉, 면역 반응을 자극하는 분자)이고, 면역 체크포인트 조절제는 자극 면역 체크포인트의 활성화제(작용제)이다. 일부 구현예에서, 본 발명의 면역 체크포인트 분자는 억제 면역 체크포인트 분자(즉, 면역 반응을 억제하는 분자)이고, 면역 체크포인트 조절제는 억제 면역 체크포인트의 억제제(길항제)이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 면역 체크포인트 결합 단백질(예컨대, 항체, 항체 Fab 단편, 2가 항체, 항체 약물 접합체, scFv, 융합 단백질, 2가 항체, 또는 4가 항체)이다. 특정 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 하나 초과의 면역 체크포인트에 결합하거나, 이의 활성을 조절할 수 있다. 본 발명의 방법에 사용될 수 있는 자극 및 억제 면역 체크포인트, 및 이들 면역 체크포인트를 조절하는 분자의 예를 이하 제공한다.
i. 공동자극 면역 체크포인트 분자
CD27은 나이브 T세포의 항원 특이적 증식을 지원하며, T세포 기억의 생성에 필수적이다(예를 들어, 문헌[Hendriks et al. (2000) Nat. Immunol. 171 (5): 433-40] 참조). CD27은 또한 B세포의 기억 마커이다(예를 들어, 문헌[Agematsu et al. (2000) Histol . Histopathol. 15 (2): 573-6] 참조). CD27 활성은 림프구 및 수지상 세포에서의 리간드 CD70의 일시적 이용 가능성에 좌우된다(예를 들어, 문헌[Borst et al. (2005) Curr. Opin. Immunol. 17 (3): 275-81] 참조). CD27에 특이적인 다수의 면역 체크포인트 조절제가 개발되었으며, 본원에 개시된 바와 같이 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 CD27의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 CD27에 결합하는 제제(예컨대, 항CD27 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 CD27 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 CD27 길항제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 CD27결합 단백질(예컨대, 항체)이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 발리루맙(Celldex Therapeutics)이다. 추가의 CD27결합 단백질(예컨대, 항체)은 당업계에 알려져 있고, 예를 들어 미국 특허 번호 9,248,183, 9,102,737, 9,169,325, 9,023,999, 8,481,029; 미국 특허 출원 공개 번호 2016/0185870, 2015/0337047, 2015/0299330, 2014/0112942, 2013/0336976, 2013/0243795, 2013/0183316, 2012/0213771, 2012/0093805, 2011/0274685, 2010/0173324; 및 PCT 공개 번호 WO 2015/016718, WO 2014/140374, WO 2013/138586, WO 2012/004367, WO 2011/130434, WO 2010/001908, 및 WO 2008/051424에 개시되어 있으며, 이들 각각은 본원에 참조로 포함된다.
CD28. 분화 클러스터 28(CD28)은 T세포 활성화 및 생존에 필요한 공동자극 신호를 제공하는 T세포에서 발현되는 단백질 중 하나이다. T세포 수용체(TCR) 이외에 CD28을 통한 T세포 자극은 다양한 인터류킨(특히 IL-6)의 생성을 위한 강력한 신호를 제공할 수 있다. 수지상 세포에서 발현되는 2개의 리간드, 즉 CD80 및 CD86과의 결합은 T세포 증식을 촉진시킨다(예를 들어, 문헌[Prasad et al. (1994) Proc. Nat'l. Acad. Sci. USA 91(7): 2834-8] 참조). CD28에 특이적인 다수의 면역 체크포인트 조절제가 개발되었으며, 본원에 개시된 바와 같이 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 CD28의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 CD28에 결합하는 제제(예컨대, 항CD28 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 CD28 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 CD28 길항제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 CD28결합 단백질(예컨대, 항체)이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 TAB08(TheraMab LLC), 룰리주맙(BMS-931699로도 알려짐, Bristol-Myers Squibb), 및 FR104(OSE Immunotherapeutics)로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추가의 CD28결합 단백질(예컨대, 항체)은 당업계에 알려져 있고, 예를 들어 미국 특허 번호 9,119,840, 8,709,414, 9,085,629, 8,034,585, 7,939,638, 8,389,016, 7,585,960, 8,454,959, 8,168,759, 8,785,604, 7,723,482; 미국 특허 출원 공개 번호 2016/0017039, 2015/0299321, 2015/0150968, 2015/0071916, 2015/0376278, 2013/0078257, 2013/0230540, 2013/0078236, 2013/0109846, 2013/0266577, 2012/0201814, 2012/0082683, 2012/0219553, 2011/0189735, 2011/0097339, 2010/0266605, 2010/0168400, 2009/0246204, 2008/0038273; 및 PCT 공개 번호 WO 2015198147, WO 2016/05421, WO 2014/1209168, WO 2011/101791, WO 2010/007376, WO 2010/009391, WO 2004/004768, WO 2002/030459, WO 2002/051871, 및 WO 2002/047721에 개시되어 있으며, 이들 각각은 본원에 참조로 포함된다.
CD40. 분화 클러스터 40(CD40; TNFRSF5로도 알려짐)은 항원제시 세포를 비롯한 다양한 면역계 세포에서 발견된다. CD154로도 알려진 CD40L은 CD40의 리간드이며, 활성화된 CD4+ T세포의 표면에서 일시적으로 발현된다. CD40 신호전달은 수지상 세포를 성숙하도록 '허가'하여 T세포 활성화 및 분화를 유발하는 것으로 알려져 있다(예를 들어, 문헌 [O'Sullivan et al. (2003) Crit . Rev. Immunol. 23 (1): 83-107] 참조). CD40에 특이적인 다수의 면역 체크포인트 조절제가 개발되었으며, 본원에 개시된 바와 같이 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 CD40의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 CD40에 결합하는 제제(예컨대, 항CD40 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 CD40 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 CD40 길항제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 다세투주맙(Genentech/Seattle Genetics), CP-870,893(Pfizer), 블레셀루맙(Astellas Pharma), 루카투무맙(Novartis), CFZ533(Novartis; 예를 들어 문헌[Cordoba et al. (2015) Am. J. Transplant. 15(11): 2825-36] 참조), RG7876(Genentech Inc.), FFP104(PanGenetics, B.V.), APX005(Apexigen), BI 655064(Boehringer Ingelheim), Chi Lob 7/4(Cancer Research UK; 예를 들어 문헌[Johnson et al. (2015) Clin . Cancer Res. 21(6): 1321-8] 참조), ADC-1013(BioInvent International), SEA-CD40(Seattle Genetics), XmAb 5485(Xencor), PG120(PanGenetics B.V.), 테넬릭시맙(Bristol-Myers Squibb; 예를 들어 문헌[Thompson et al. (2011) Am. J. Transplant. 11(5): 947-57] 참조), 및 AKH3(Biogen; 예를 들어 국제 공개 번호 WO 2016/028810 참조)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 CD40결합 단백질이다. 추가의 CD40결합 단백질(예컨대, 항체)은 당업계에 알려져 있고, 예를 들어 미국 특허 번호 9,234,044, 9,266,956, 9,109,011, 9,090,696, 9,023,360, 9,023,361, 9,221,913, 8,945,564, 8,926,979, 8,828,396, 8,637,032, 8,277,810, 8,088,383, 7,820,170, 7,790,166, 7,445,780, 7,361,345, 8,961,991, 8,669,352, 8,957,193, 8,778,345, 8,591,900, 8,551,485, 8,492,531, 8,362,210, 8,388,971; 미국 특허 출원 공개 번호 2016/0045597, 2016/0152713, 2016/0075792, 2015/0299329, 2015/0057437 2015/0315282, 2015/0307616, 2014/0099317, 2014/0179907, 2014/0349395, 2014/0234344, 2014/0348836, 2014/0193405, 2014/0120103, 2014/0105907, 2014/0248266, 2014/0093497, 2014/0010812, 2013/0024956, 2013/0023047, 2013/0315900, 2012/0087927, 2012/0263732, 2012/0301488, 2011/0027276, 2011/0104182, 2010/0234578, 2009/0304687, 2009/0181015, 2009/0130715, 2009/0311254, 2008/0199471, 2008/0085531, 2016/0152721, 2015/0110783, 2015/0086991, 2015/0086559, 2014/0341898, 2014/0205602, 2014/0004131, 2013/0011405, 2012/0121585, 2011/0033456, 2011/0002934, 2010/0172912, 2009/0081242, 2009/0130095, 2008/0254026, 2008/0075727, 2009/0304706, 2009/0202531, 2009/0117111, 2009/0041773, 2008/0274118, 2008/0057070, 2007/0098717, 2007/0218060, 2007/0098718, 2007/0110754; 및 PCT 공개 번호 WO 2016/069919, WO 2016/023960, WO 2016/023875, WO 2016/028810, WO 2015/134988, WO 2015/091853, WO 2015/091655, WO 2014/065403, WO 2014/070934, WO 2014/065402, WO 2014/207064, WO 2013/034904, WO 2012/125569, WO 2012/149356, WO 2012/111762, WO 2012/145673, WO 2011/123489, WO 2010/123012, WO 2010/104761, WO 2009/094391, WO 2008/091954, WO 2007/129895, WO 2006/128103, WO 2005/063289, WO 2005/063981, WO 2003/040170, WO 2002/011763, WO 2000/075348, WO 2013/164789, WO 2012/075111, WO 2012/065950, WO 2009/062054, WO 2007/124299, WO 2007/053661, WO 2007/053767, WO 2005/044294, WO 2005/044304, WO 2005/044306, WO 2005/044855, WO 2005/044854, WO 2005/044305, WO 2003/045978, WO 2003/029296, WO 2002/028481, WO 2002/028480, WO 2002/028904, WO 2002/028905, WO 2002/088186, 및 WO 2001/024823에 개시되어 있으며, 이들 각각은 본원에 참조로 포함된다.
CD122. CD122는 인터류킨-2 수용체 베타 서브 유닛이며, CD8+ 이펙터 T세포의 증식을 증가시키는 것으로 알려져 있다. 예를 들어, 문헌[Boyman et al. (2012) Nat. Rev. Immunol . 12 (3): 180-190] 참조. CD122에 특이적인 다수의 면역 체크포인트 조절제가 개발되었으며, 본원에 개시된 바와 같이 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 CD122의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 CD122에 결합하는 제제(예컨대, 항CD122 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 CD122 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 CD122 길항제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 인간화 MiK-베타-1(Roche; 예를 들어, 참조로 포함되는 문헌[Morris et al. (2006) Proc Nat'l. Acad. Sci. USA 103(2): 401-6] 참조)이다. 추가의 CD122결합 단백질(예컨대, 항체)은 당업계에 알려져 있고, 예를 들어 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 번호 9,028,830에 개시되어 있다.
OX40. OX40 수용체(CD134로도 알려짐)는 이펙터 및 기억 T세포의 증식을 촉진시킨다. OX40은 또한 T-조절 세포의 분화 및 활성을 억제하고 사이토카인 생성을 조절한다(예를 들어, 문헌[Croft et al. (2009) Immunol. Rev. 229(1): 173-91] 참조). OX40에 특이적인 다수의 면역 체크포인트 조절제가 개발되었으며, 본원에 개시된 바와 같이 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 OX40의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 OX40에 결합하는 제제(예컨대, 항OX40 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 OX40 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 OX40 길항제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 MEDI6469(AgonOx/Medimmune), 포갈리주맙(MOXR0916 및 RG7888로도 알려짐; Genentech, Inc.), 타볼릭시주맙(MEDI0562로도 알려짐; Medimmune), 및 GSK3174998(GlaxoSmithKline)로 이루어진 군으로부터 선택되는 OX40결합 단백질(예컨대, 항체)이다. 추가의 OX-40결합 단백질(예컨대, 항체)은 당업계에 알려져 있고, 예를 들어 미국 특허 번호 9,163,085, 9,040,048, 9,006,396, 8,748,585, 8,614,295, 8,551,477, 8,283,450, 7,550,140; 미국 특허 출원 공개 번호 2016/0068604, 2016/0031974, 2015/0315281, 2015/0132288, 2014/0308276, 2014/0377284, 2014/0044703, 2014/0294824, 2013/0330344, 2013/0280275, 2013/0243772, 2013/0183315, 2012/0269825, 2012/0244076, 2011/0008368, 2011/0123552, 2010/0254978, 2010/0196359, 2006/0281072; 및 PCT 공개 번호 WO 2014/148895, WO 2013/068563, WO 2013/038191, WO 2013/028231, WO 2010/096418, WO 2007/062245, 및 WO 2003/106498에 개시되어 있으며, 이들 각각은 본원에 참조로 포함된다.
GITR. 글루코코르티코이드-유도 TNFR 패밀리 관련 유전자(GITR)는 Treg, CD4, 및 CD8 T세포에서 항시적으로 또는 조건적으로 발현되는 종양괴사인자 수용체(TNFR) 수퍼패밀리의 구성원이다. GITR은 TCR 결찰 및 활성화 후 이펙터 T세포에서 빠르게 상향조절된다. 인간 GITR 리간드(GITRL)는 2차 림프 기관 및 일부 비림프 조직의 APC에서 항시적으로 발현된다. GITR:GITRL 상호작용의 하류 효과는 Treg 활성의 약화를 유도하고 CD4+ T세포 활성을 향상시켜, Treg-매개 면역억제를 역전시키고 면역 자극을 증가시킨다. GITR에 특이적인 다수의 면역 체크포인트 조절제가 개발되었으며, 본원에 개시된 바와 같이 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 GITR의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 GITR에 결합하는 제제(예컨대, 항GITR 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 GITR 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 GITR 길항제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 TRX518(Leap Therapeutics), MK-4166(Merck & Co.), MEDI-1873(MedImmune), INCAGN1876(Agenus/Incyte), 및 FPA154(Five Prime Therapeutics)로 이루어진 군으로부터 선택되는 GITR결합 단백질(예컨대, 항체)이다. 추가의 GITR결합 단백질(예컨대, 항체)은 당업계에 알려져 있고, 예를 들어 미국 특허 번호 9,309,321, 9,255,152, 9,255,151, 9,228,016, 9,028,823, 8,709,424, 8,388,967; 미국 특허 출원 공개 번호 2016/0145342, 2015/0353637, 2015/0064204, 2014/0348841, 2014/0065152, 2014/0072566, 2014/0072565, 2013/0183321, 2013/0108641, 2012/0189639; 및 PCT 공개 번호 WO 2016/054638, WO 2016/057841, WO 2016/057846, WO 2015/187835, WO 2015/184099, WO 2015/031667, WO 2011/028683, 및 WO 2004/107618에 개시되어 있으며, 이들 각각은 본원에 참조로 포함된다.
ICOS. 유도성 T세포 공동자극인자(ICOS; CD278로도 알려짐)는 활성화된 T세포에서 발현된다. 이의 리간드는 주로 B세포와 수지상 세포에서 발현되는 ICOSL이다. ICOS는 T세포 이펙터 기능에 중요하다. ICOS 발현은 T세포 활성화시 상향조절된다(예를 들어, 문헌[Fan et al. (2014) J. Exp . Med . 211(4): 715-25] 참조). ICOS에 특이적인 다수의 면역 체크포인트 조절제가 개발되었으며, 본원에 개시된 바와 같이 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 ICOS의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 ICOS에 결합하는 제제(예컨대, 항ICOS 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 ICOS 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 ICOS 길항제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 MEDI-570(JMab-136으로도 알려짐, Medimmune), GSK3359609(GlaxoSmithKline/INSERM), 및 JTX-2011(Jounce Therapeutics)로 이루어진 군으로부터 선택되는 ICOS결합 단백질(예컨대, 항체)이다. 추가의 ICOS결합 단백질(예컨대, 항체)은 당업계에 알려져 있고, 예를 들어 미국 특허 번호 9,376,493, 7,998,478, 7,465,445, 7,465,444; 미국 특허 출원 공개 번호 2015/0239978, 2012/0039874, 2008/0199466, 2008/0279851; 및 PCT 공개 번호 WO 2001/087981에 개시되어 있으며, 이들 각각은 본원에 참조로 포함된다.
4- 1BB. 4-1BB(CD137로도 알려짐)는 종양괴사인자(TNF) 수용체 수퍼패밀리의 구성원이다. 4-1BB(CD137)는 프라이밍된 CD4+ 및 CD8+ T세포, 활성화된 NK세포, DC, 및 호중구에서 유도적으로 발현되는 II형 막관통 당단백질이며, 활성화된 대식세포, B세포, 및 DC에서 발견되는 4-1BB 리간드(4-1BBL)에 결합될 때 T세포 공동자극 분자로서 작용한다. 4-1BB 수용체의 결찰은 NF-κ B, c-Jun, 및 p38 신호전달 경로의 활성화를 유도하며, 구체적으로, 항자가사멸 유전자 BcL-x(L) 및 Bfl-1의 발현을 상향조절함으로써 CD8+ T세포의 생존을 촉진시키는 것으로 나타났다. 이러한 방식으로, 4-1BB는 차선의 면역 반응을 촉진시키거나 심지어 회복시키는 역할을 한다. 4-1BB에 특이적인 다수의 면역 체크포인트 조절제가 개발되었으며, 본원에 개시된 바와 같이 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 4-1BB의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 4-1BB에 결합하는 제제(예컨대, 항4-1BB 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 4-1BB 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 4-1BB 길항제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 우렐루맙(BMS-663513으로도 알려짐; Bristol-Myers Squibb) 또는 유토밀루맙(Pfizer)인 4-1BB결합 단백질이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 4-1BB결합 단백질(예컨대, 항체)이다. 4-1BB결합 단백질(예컨대, 항체)은 당업계에 알려져 있고, 예를 들어 미국 특허 번호 9,382,328, 8,716,452, 8,475,790, 8,137,667, 7,829,088, 7,659,384; 미국 특허 출원 공개 번호 2016/0083474, 2016/0152722, 2014/0193422, 2014/0178368, 2013/0149301, 2012/0237498, 2012/0141494, 2012/0076722, 2011/0177104, 2011/0189189, 2010/0183621, 2009/0068192, 2009/0041763, 2008/0305113, 2008/0008716; 및 PCT 공개 번호 WO 2016/029073, WO 2015/188047, WO 2015/179236, WO 2015/119923, WO 2012/032433, WO 2012/145183, WO 2011/031063, WO 2010/132389, WO 2010/042433, WO 2006/126835, WO 2005/035584, WO 2004/010947; 및 문헌[Martinez-Forero et al. (2013) J. Immunol. 190(12): 6694-706, 및 Dubrot et al. (2010) Cancer Immunol . Immunother. 59(8): 1223-33]에 개시되어 있으며, 이들 각각은 본원에 참조로 포함된다.
CD2. CD2(분화 클러스터 2)는 T세포 및 자연살해(NK) 세포의 표면에서 발견되는 세포 부착 분자이다. 이는 또한 T세포 표면 항원 T11/Leu-5, LFA-2, LFA-3 수용체, 적혈구 수용체, 및 로제트(rosette) 수용체로 불리었다. 이는 다른 세포의 표면에서 발현되는 다른 부착 분자, 예컨대 인간의 림프구 기능 관련 항원-3(LFA-3/CD58), 또는 설치류의 CD48과 상호작용한다. 부착 특성 외에도, CD2는 T세포 및 NK세포에서 공동자극 분자로서 작용한다. CD2는 T세포 및 NK세포에 특이적인 마커이므로, 면역조직화학에서 조직 절편에 이러한 세포가 존재하는지 확인하는 데 사용될 수 있다. T세포 림프종 및 백혈병의 대부분은 또한 CD2를 발현하여, 항원의 존재를 이용하여 이러한 병태를 B세포 신생물과 구별할 수 있도록 한다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 CD2의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 CD2에 결합하는 제제(예컨대, 항CD2 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 CD2 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 CD2 길항제이다.
ICAM -1. CD54(분화 클러스터 54)로도 알려진 ICAM-1(세포간 부착 분자 1)은 인간에서 ICAM1 유전자에 의해 인코딩되는 단백질이다. 이 유전자는, 일반적으로 내피세포 및 면역계의 세포에서 발현되는 세포 표면 당단백질을 인코딩한다. 이는 CD11a / CD18, 또는 CD11b / CD18 유형의 인테그린에 결합하며, 또한 리노바이러스에 의해 수용체로서 이용된다. ICAM-1은, 세포-세포 상호작용을 안정화시키고 백혈구 내피 이동을 촉진함에 있어 중요성이 오랫동안 알려진 내피- 및 백혈구-관련 막관통 단백질이다. 보다 최근에, ICAM-1은 인간 리노바이러스의 세포 침입을 위한 부위로서 특성화되었다. ICAM-1 결찰은 키나제 p56lyn을 비롯한 다수의 키나제가 관여하는 캐스케이드를 통한 신호전달에 의해 염증성 백혈구 공급과 같은 염증촉진 효과를 생성한다. ICAM-1은 지주막하 출혈(SAH)의 원인인 것으로 알려졌다. 많은 연구에서 대조군 대상체에 비해 SAH 환자에서 ICAM-1의 수준이 유의하게 상승한 것으로 나타났다. ICAM-1은 SAH 환자의 70%에 영향을 미치는 2차 증상인 뇌혈관연축과 직접적 관련이 없는 것으로 나타났지만, 항ICAM-1에 의한 치료는 혈관연축의 중증도를 감소시켰다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 ICAM-1의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 ICAM-1에 결합하는 제제(예컨대, 항ICAM-1 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 ICAM-1 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 ICAM-1 길항제이다.
NKG2C . NKG2-C II형 내재성 막단백질은 인간에서 KLRC2 유전자에 의해 인코딩되는 단백질이다. 자연살해(NK) 세포는 이전의 활성화없이 특정 종양세포 및 바이러스 감염 세포의 용해를 매개할 수 있는 림프구이다. 이들은 또한 특정 체액성 및 세포-매개 면역을 조절할 수 있다. NK세포는 NK세포 기능의 조절에 관여하는 것으로 알려진 몇몇 칼슘-의존적(C형) 렉틴을 우선적으로 발현한다. KLRC(NKG2)로 명명되는 그룹은 주로 자연살해(NK) 세포에서 발현되며, II형 막 배향(세포외 C 말단) 및 C형 렉틴 도메인의 존재를 특징으로 하는 막관통 단백질의 패밀리를 인코딩한다. KLRC(NKG2) 유전자 패밀리는 NK세포에서 우선적으로 발현되는 몇몇 C형 렉틴 유전자를 함유하는 영역인 NK 복합체 내에 위치한다. KLRC2 선택적 스플라이스 변이체가 설명된 바 있지만, 그 전장 특성은 결정되지 않았다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 NKG2C의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 NKG2C에 결합하는 제제(예컨대, 항NKG2C 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 NKG2C 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 NKG2C 길항제이다.
SLAMF7 . SLAM 패밀리 구성원 7은 인간에서 SLAMF7 유전자에 의해 인코딩되는 단백질이다. 표면 항원 CD319(SLAMF7)는 다발성 골수종에서 정상 형질세포 및 악성 형질세포의 강력한 마커이다. CD138(기존의 형질세포 마커)과 달리, CD319/SLAMF7은 훨씬 더 안정적이며, 지연 샘플 또는 심지어 동결보존된 샘플로부터 악성 형질세포를 강력히 단리시킬 수 있다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 SLAMF7의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 SLAMF7에 결합하는 제제(예컨대, 항SLAMF7 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 SLAMF7 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 SLAMF7 길항제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 엘로투주맙(Bristol-Myers Squibb and AbbVie)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 SLAMF7결합 단백질(예컨대, 항체)이다.
NKp80. NKp80은 살해세포 렉틴-유사 수용체 서브패밀리 F, 구성원 1로도 알려져 있다. NKp80 표면 발현은 또한, 과립상 림프구의 림프증식성 질환 환자로부터 유래된 모든 CD3- 및 6 / 10 CD3+ 거대 과립상 림프구 증식에서 검출되었다. 다클론 NK세포에서, NKp80의 mAb-매개 가교는 결과적으로 세포용해 활성 및 Ca2 + 이동(mobilization)을 유도하였다. 항NKp80 mAb에 대한 상이한 NK세포 클론의 세포용해 반응의 크기에 있어서 현저한 이질성이 존재하였다. 이러한 이질성은 상이한 NK 클론에 의해 발현된 NKp46 분자의 표면 밀도와 상관 관계가 있었다. NKp80의 mAb-매개 마스킹은 적절한 동종이형 피토헤마글루티닌-유도 T 모세포의 NK-매개 용해를 부분적으로 억제하는 한편, T세포 백혈병 세포를 비롯한 상이한 종양표적세포의 용해에는 영향을 미치지 않았다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 NKp80의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 NKp80에 결합하는 제제(예컨대, 항NKp80 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 NKp80 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 NKp80 길항제이다.
CD30. TNFRSF8로도 알려진 CD30은 종양괴사인자 수용체 패밀리 및 종양 마커의 세포막 단백질이다. 이 수용체는 활성화된 T세포 및 B세포에 의해 발현되지만, 휴면 T세포 및 B세포에 의해서는 발현되지 않는다. TRAF2 및 TRAF5는 이 수용체와 상호작용할 수 있으며, NF-카파B의 활성화를 유도하는 신호 전달을 매개할 수 있다. 이는 자가사멸의 양성 조절인자이며, 또한 자가반응성 CD8 이펙터 T세포의 증식력을 제한하여 자가면역으로부터 신체를 보호하는 것으로 나타났다. 별개의 이소형을 인코딩하는 이 유전자의 선택적으로 스플라이싱된 두 가지 전사 변이체가 보고된 바 있다. CD30은 역형성 대세포 림프종과 관련이 있다. 이는 배아 암종에서 발현되지만 정상피종에서는 발현되지 않으므로 이러한 생식 세포 종양을 구별하는 데 유용한 마커이다. CD30 및 CD15는 전형적인 호지킨 림프종 리드-스턴버그 세포에서도 발현된다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 CD30의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 CD30에 결합하는 제제(예컨대, 항CD30 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 CD30 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 CD30 길항제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 브렌툭시맙 베도틴(Adcetris, Seattle Genetics)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 CD30결합 단백질(예컨대, 항체)이다.
BAFFR . 종양괴사인자 수용체 수퍼패밀리 구성원 13C(TNFRSF13C) 및 BLyS 수용체 3(BR3)으로도 알려진 BAFF 수용체(B세포 활성화인자 수용체, BAFF-R)는 BAFF를 인식하는 TNF 수용체 수퍼패밀리의 막단백질이다. B세포 활성화인자(BAFF)는 시험관 내에서 B세포 생존을 향상시키고 말초 B세포 집단의 조절인자이다. 이 유전자에 의해 인코딩되는 단백질은 BAFF의 수용체이며, 단일 세포외 페닐알라닌-풍부 도메인을 함유하는 III형 막관통 단백질이다. 이 수용체는 BAFF-매개 성숙 B세포 생존에 필요한 주요 수용체인 것으로 생각된다. 마우스에서 BAFF의 과발현은 성숙 B세포 과형성 및 전신홍반루프스(SLE)의 증상을 초래한다. 또한, 일부 SLE 환자는 혈청에서의 BAFF 수준이 증가했다. 따라서, 비정상적으로 높은 수준의 BAFF는 자가반응성 B세포의 생존을 향상시킴으로써 자가면역 질환의 발병 원인일 수 있다는 것이 제안되었다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 BAFFR의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 BAFFR에 결합하는 제제(예컨대, 항BAFFR 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 BAFFR 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 BAFFR 길항제이다.
HVEM . 종양괴사인자 수용체 수퍼패밀리 구성원 14(TNFRSF14)로도 알려진 헤르페스바이러스 침입 매개체(HVEM)는 TNF 수용체 수퍼패밀리의 인간 세포 표면 수용체이다. 이 유전자에 의해 인코딩되는 단백질은 TNF 수용체 수퍼패밀리의 구성원이다. 이 수용체는 단순 포진 바이러스(HSV) 침입의 세포 매개체로서 확인되었다. 이 수용체 단백질에 대한 HSV 바이러스 외피 당단백질 D(gD)의 결합은 바이러스 침입 메커니즘의 일부인 것으로 나타났다. 이 수용체의 세포질 영역은 여러 TRAF 패밀리 구성원에 결합하여, 면역 반응을 활성화하는 신호 전달 경로를 매개할 수 있는 것으로 밝혀졌다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 HVEM의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 HVEM에 결합하는 제제(예컨대, 항HVEM 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 HVEM 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 HVEM 길항제이다.
CD7. CD7(분화 클러스터 7)은 인간에서 CD7 유전자에 의해 인코딩되는 단백질이다. 이 유전자는 면역글로불린 수퍼패밀리의 구성원인 막관통 단백질을 인코딩한다. 이 단백질은 흉선세포 및 성숙 T세포에서 발견된다. 이는 초기 림프구 발달 동안 T세포 상호작용뿐만 아니라 T세포/B세포 상호작용에도 필수적인 역할을 한다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 CD7의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 CD7에 결합하는 제제(예컨대, 항CD7 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 CD7 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 CD7 길항제이다.
LIGHT. 종양괴사인자 수퍼패밀리 구성원 14(TNFSF14)로도 알려진 LIGHT는 TNF 수퍼패밀리의 분비단백질이다. 이는 헤르페스바이러스 침입 매개체(HVEM), 뿐만 아니라 유인 수용체 3에 의해 인식된다. LIGHT는 "림프독소(lymphotoxin)에 상동성임, 유도성(inducible) 발현을 나타냄, T 림프구에서 발현되는 수용체인 헤르페스바이러스(herpesvirus) 침입 매개체에 결합하기 위해 HSV 당단백질(glycoprotein) D와 경쟁함"을 의미한다. 이는 분화 클러스터 용어에서 CD258로 분류된다. 이 유전자에 의해 인코딩되는 단백질은 종양괴사인자(TNF) 리간드 패밀리의 구성원이다. 이 단백질은 종양괴사인자 수용체 수퍼패밀리의 구성원인 TNFRSF14의 리간드이며, 헤르페스바이러스 침입 매개체 리간드(HVEML)로도 알려져 있다. 이 단백질은 림프구 세포의 활성화를 위한 공동자극인자, 및 헤르페스바이러스 감염 억제제로서 작용할 수 있다. 이 단백질은 T세포의 증식을 자극하고 다양한 종양세포의 자가사멸을 유발하는 것으로 나타났다. 이 단백질은 1차 간세포에서 종양괴사인자 알파-매개 자가사멸이 일어나지 않도록 하는 것으로 보고되어 있다. 별개의 이소형을 인코딩하는 선택적으로 스플라이싱된 두 가지 전사 변이체가 보고된 바 있다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 LIGHT의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 LIGHT에 결합하는 제제(예컨대, 항LIGHT 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 LIGHT 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 LIGHT 길항제이다.
CD83. CD83(분화 클러스터 83)은 CD83 유전자에 의해 인코딩되는 인간 단백질이다. CD83은 면역글로불린 수퍼패밀리에 속하는 내재성 막단백질이다. 면역학에서, 이 항원은 이들 매우 효율적인 항원제시 세포에 대한 발현 선택성이 처음 설명된 이후, 활성화/성숙 수지상 세포(DC)를 검출하는 데 광범위하게 사용되어 왔다. DC는 CD83을 발현하는 유일한 세포가 아니며, 광범위한 백혈구에서도 일시적으로 발견된다. 이 유전자에 의해 인코딩되는 단백질은 단일-패스 I형 막단백질이며, 수용체의 면역글로불린 수퍼패밀리의 구성원이다. 인코딩된 단백질은 항원 제시의 조절에 관여할 수 있다. 이 단백질의 가용성 형태는 수지상 세포에 결합하여 성숙을 억제할 수 있다. 이 유전자의 경우, 상이한 이소형을 인코딩하는 세 가지 전사 변이체가 발견되었다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 CD83의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 CD83에 결합하는 제제(예컨대, 항CD83 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 CD83 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 CD83 길항제이다.
ii. 억제 면역 체크포인트 분자
ADORA2A. 아데노신 A2A 수용체(A2A4)는 7개의 막관통 알파 나선을 갖는 G 단백질-결합 수용체(GPCR) 패밀리의 구성원이며, 암 치료에 있어서 중요한 체크포인트로 간주된다. A2A 수용체는 과반응성 면역세포를 음성적으로 조절할 수 있다(예를 들어, 문헌[Ohta et al. (2001) Nature 414(6866): 916-20] 참조). ADORA2A에 특이적인 다수의 면역 체크포인트 조절제가 개발되었으며, 본원에 개시된 바와 같이 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 ADORA2A의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 ADORA2A에 결합하는 제제(예컨대, 항ADORA2A 항체)이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 ADORA2A결합 단백질(예컨대, 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 ADORA2A 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 ADORA2A 길항제이다. ADORA2A결합 단백질(예컨대, 항체)은 당업계에 알려져 있고, 예를 들어 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 출원 공개 번호 2014/0322236에 개시되어 있다.
B7-H3. B7-H3(CD276으로도 알려짐)은 T세포 반응을 공동자극하거나 하향조절하는 분자의 그룹인 B7 수퍼패밀리에 속한다. B7-H3은 인간 T세포 반응을 강력하고 일관되게 하향조절한다(예를 들어, 문헌[Leitner et al. (2009) Eur . J. Immunol . 39(7): 1754-64] 참조). B7-H3에 특이적인 다수의 면역 체크포인트 조절제가 개발되었으며, 본원에 개시된 바와 같이 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 B7-H3의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 B7-H3에 결합하는 제제(예컨대, 항B7-H3 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 B7-H3 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 B7-H3 길항제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 DS-5573(Daiichi Sankyo, Inc.), 에노블리투주맙(MacroGenics, Inc.), 및 8H9(Sloan Kettering Institute for Cancer Research; 예를 들어 문헌[Ahmed et al. (2015) J. Biol. Chem. 290(50): 30018-29] 참조)로 이루어진 군으로부터 선택되는 항B7-H3결합 단백질이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 B7-H3결합 단백질(예컨대, 항체)이다. B7-H3결합 단백질(예컨대, 항체)은 당업계에 알려져 있고, 예를 들어 미국 특허 번호 9,371,395, 9,150,656, 9,062,110, 8,802,091, 8,501,471, 8,414,892; 미국 특허 출원 공개 번호 2015/0352224, 2015/0297748, 2015/0259434, 2015/0274838, 2014/032875, 2014/0161814, 2013/0287798, 2013/0078234, 2013/0149236, 2012/02947960, 2010/0143245, 2002/0102264; PCT 공개 번호 WO 2016/106004, WO 2016/033225, WO 2015/181267, WO 2014/057687, WO 2012/147713, WO 2011/109400, WO 2008/116219, WO 2003/075846, WO 2002/032375; 및 문헌[Shi et al. (2016) Mol . Med . Rep. 14(1): 943-8]에 개시되어 있으며, 이들 각각은 본원에 참조로 포함된다.
B7-H4. B7-H4(O8E, OV064, 및 V-set 도메인 함유 T세포 활성화 억제제(VTCN1)로도 알려짐)는 B7 수퍼패밀리에 속한다. 세포주기를 정지시킴으로써, T세포의 BT-B4 결찰은 성장, 사이토카인 분비, 및 세포독성의 발달에 강한 억제 효과를 갖는다. B7-H4Ig를 마우스에 투여하면 항원 특이적 T세포 반응을 손상시키는 반면, 특정 단클론 항체에 의한 내인성 B7-H4의 차단은 T세포 반응을 촉진시킨다(예를 들어, 문헌[Sica et al. (2003) Immunity 18(6): 849-61] 참조). B7-H4에 특이적인 다수의 면역 체크포인트 조절제가 개발되었으며, 본원에 개시된 바와 같이 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 B7-H4의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 B7-H4에 결합하는 제제(예컨대, 항B7-H4 항체)이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 B7-H4결합 단백질(예컨대, 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 B7-H4 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 B7-H4 길항제이다. B7-H4결합 단백질(예컨대, 항체)은 당업계에 알려져 있고, 예를 들어 미국 특허 번호 9,296,822, 8,609,816, 8,759,490, 8,323,645; 미국 특허 출원 공개 번호 2016/0159910, 2016/0017040, 2016/0168249, 2015/0315275, 2014/0134180, 2014/0322129, 2014/0356364, 2014/0328751, 2014/0294861, 2014/0308259, 2013/0058864, 2011/0085970, 2009/0074660, 2009/0208489; 및 PCT 공개 번호 WO 2016/040724, WO 2016/070001, WO 2014/159835, WO 2014/100483, WO 2014/100439, WO 2013/067492, WO 2013/025779, WO 2009/073533, WO 2007/067991, 및 WO 2006/104677에 개시되어 있으며, 이들 각각은 본원에 참조로 포함된다.
BTLA. CD272로도 알려진 B 및 T 림프구 약화인자(BTLA)는, 리간드로서 HVEM(헤르페스바이러스 침입 매개체)을 갖는다. BTLA의 표면 발현은 인간 CD8+ T세포가 나이브 상태로부터 이펙터 세포 표현형으로 분화하는 동안 점진적으로 하향조절되지만, 종양 특이적 인간 CD8+ T세포는 높은 수준의 BTLA를 발현한다(예를 들어, 문헌[Derre et al. (2010) J. Clin. Invest. 120 (1): 157-67] 참조). BTLA에 특이적인 다수의 면역 체크포인트 조절제가 개발되었으며, 본원에 개시된 바와 같이 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 BTLA의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 BTLA에 결합하는 제제(예컨대, 항BTLA 항체)이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 BTLA결합 단백질(예컨대, 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 BTLA 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 BTLA 길항제이다. BTLA결합 단백질(예컨대, 항체)은 당업계에 알려져 있고, 예를 들어 미국 특허 번호 9,346,882, 8,580,259, 8,563,694, 8,247,537; 미국 특허 출원 공개 번호 2014/0017255, 2012/0288500, 2012/0183565, 2010/0172900; 및 PCT 공개 번호 WO 2011/014438, 및 WO 2008/076560에 개시되어 있으며, 이들 각각은 본원에 참조로 포함된다.
CTLA -4. 세포독성 T 림프구 항원-4(CTLA-4)는 면역 조절 CD28-B7 면역글로불린 수퍼패밀리의 구성원이며, 나이브 및 휴면 T 림프구에 작용하여 B7-의존적 경로 및 B7-비의존적 경로를 통한 면역억제를 촉진시킨다(예를 들어, 문헌[Kim et al. (2016) J. Immunol. Res., Article ID 4683607, 14 pp.] 참조). CTLA-4는 소위 CD152로도 알려져 있다. CTLA-4는 T세포 활성화에 대한 역치를 조절한다. 예를 들어, 문헌[Gajewski et al. (2001) J. Immunol. 166(6): 3900-7] 참조. CTLA-4에 특이적인 다수의 면역 체크포인트 조절제가 개발되었으며, 본원에 개시된 바와 같이 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 CTLA-4의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 CTLA-4에 결합하는 제제(예컨대, 항CTLA-4 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 CTLA-4 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 CTLA-4 길항제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 이필리무맙(Yervoy; Medarex/Bristol-Myers Squibb), 트레멜리무맙(이전 명칭은 티실리무맙; Pfizer/AstraZeneca), JMW-3B3(애버딘 대학교), 및 AGEN1884(Agenus)로 이루어진 군으로부터 선택되는 CTLA-4결합 단백질(예컨대, 항체)이다. 추가의 CTLA-4결합 단백질(예컨대, 항체)은 당업계에 알려져 있고, 예를 들어 미국 특허 번호 8,697,845; 미국 특허 출원 공개 번호 2014/0105914, 2013/0267688, 2012/0107320, 2009/0123477; 및 PCT 공개 번호 WO 2014/207064, WO 2012/120125, WO 2016/015675, WO 2010/097597, WO 2006/066568, 및 WO 2001/054732에 개시되어 있으며, 이들 각각은 본원에 참조로 포함된다.
IDO. 인돌아민 2,3-디옥시게나제(IDO)는 면역 억제성을 갖는 트립토판 이화 효소이다. 다른 중요한 분자는 트립토판 2,3-디옥시게나제(TDO)이다. IDO는 T세포 및 NK세포를 억제하고, Treg 및 골수 유래 억제 세포를 생성하고 활성화하며, 종양 혈관형성을 촉진시키는 것으로 알려져 있다. 본원에 참조로 포함되는 문헌[Prendergast et al., 2014, Cancer Immunol Immunother. 63 (7): 721-35] 참조. IDO에 특이적인 다수의 면역 체크포인트 조절제가 개발되었으며, 본원에 개시된 바와 같이 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 IDO의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 IDO에 결합하는 제제(예컨대, 항IDO 항체와 같은 IDO결합 단백질)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 IDO 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 IDO 길항제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 노르하르만, 로즈마린산, COX-2 억제제, 알파-메틸-트립토판, 및 에파카도스타트로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일 구현예에서, 상기 조절제는 에파카도스타트이다.
KIR. 킬러 면역글로불린-유사 수용체(KIR)는, NK-매개 세포 용해로부터 세포를 보호하기 위해 자연살해(NK) 세포 기능을 음성적으로 조절하는 다양한 MHCI결합 분자를 포함한다. KIR은 일반적으로 NK세포에서 발현되지만, 종양 특이적 CTL에서도 검출되었다. KIR에 특이적인 다수의 면역 체크포인트 조절제가 개발되었으며, 본원에 개시된 바와 같이 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 KIR의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 KIR에 결합하는 제제(예컨대, 항KIR 항체)이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 KIR결합 단백질(예컨대, 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 KIR 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 KIR 길항제이다. 일부 구현예에서 면역 체크포인트 조절제는 리릴루맙(BMS-986015로도 알려짐; Bristol-Myers Squibb)이다. 추가의 KIR결합 단백질(예컨대, 항체)은 당업계에 알려져 있고, 예를 들어 미국 특허 번호 8,981,065, 9,018,366, 9,067,997, 8,709,411, 8,637,258, 8,614,307, 8,551,483, 8,388,970, 8,119,775; 미국 특허 출원 공개 번호 2015/0344576, 2015/0376275, 2016/0046712, 2015/0191547, 2015/0290316, 2015/0283234, 2015/0197569, 2014/0193430, 2013/0143269, 2013/0287770, 2012/0208237, 2011/0293627, 2009/0081240, 2010/0189723; 및 PCT 공개 번호 WO 2016/069589, WO 2015/069785, WO 2014/066532, WO 2014/055648, WO 2012/160448, WO 2012/071411, WO 2010/065939, WO 2008/084106, WO 2006/072625, WO 2006/072626, 및 WO 2006/003179에 개시되어 있으며, 이들 각각은 본원에 참조로 포함된다.
LAG-3. 림프구-활성화 유전자 3(LAG-3; CD223으로도 알려짐)은, MHC II에 경쟁적으로 결합하고 T세포 활성화를 위한 공동억제 체크포인트로서 작용하는 CD4-관련 막관통 단백질이다(예를 들어, 문헌[Goldberg and Drake (2011) Curr . Top. Microbiol. Immunol . 344: 269-78] 참조). LAG-3에 특이적인 다수의 면역 체크포인트 조절제가 개발되었으며, 본원에 개시된 바와 같이 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 LAG-3의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 LAG-3에 결합하는 제제(예컨대, 항PD-1 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 LAG-3 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 LAG-3 길항제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 렐라틀리맙(Bristol-Myers Squibb / Ono Pharmaceutical), 에프킬라기모드(IMP321로도 알려짐, Immutep), LAG525(IMP701로도 알려짐, Immutep / Novartis), BI-754111(Boehringer Ingelheim), TSR033(AnaptysBio / Tesaro, Inc.), IMP-761(Immutep / Prima Biomed), IBI110(Cinda Biopharma), GSK-2831781(IMP731로도 알려짐, Immutep / GlaxoSmithKline), MK-4280(Merck&Co., Inc.), 및 REGN3767(Regeneron / Sanofi)로 이루어진 군으로부터 선택되는 LAG-3결합 단백질(예컨대, 항체)이다. 추가의 LAG-3결합 단백질(예컨대, 항체)은 당업계에 알려져 있고, 예를 들어 미국 특허 번호 10,266,591, 9, 908, 936, 10, 358, 495, 10, 188, 730; 미국 특허 출원 공개 번호 2019/233,513, 2019/169294; PCT 공개 번호 WO2019/141092, WO2017/220555, WO2019/129137, WO2018/069500, WO2014/008218, WO2017/037203에 개시되어 있으며, 이들 각각은 본원에 참조로 포함된다.
PD-1. 세포예정사 단백질 1(PD-1; CD279 및 PDCD1로도 알려짐)은 면역계를 음성적으로 조절하는 억제 수용체이다. 나이브 T세포에 주로 영향을 미치는 CTLA-4와 달리, PD-1은 면역세포에서 보다 광범위하게 발현되고, 말초 조직 및 종양 미세환경에서 성숙 T세포 활성을 조절한다. PD-1은 T세포 수용체 신호전달을 방해함으로써 T세포 반응을 억제한다. PD-1은 2개의 리간드, 즉 PD-L1 및 PD-L2를 갖는다. PD-1에 특이적인 다수의 면역 체크포인트 조절제가 개발되었으며, 본원에 개시된 바와 같이 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 PD-1의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 PD-1에 결합하는 제제(예컨대, 항PD-1 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 PD-1 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 PD-1 길항제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 펨브롤리주맙(Keytruda; 이전 명칭은 람브롤리주맙; Merck & Co., Inc.), 니볼루맙(Opdivo; Bristol-Myers Squibb), 피딜리주맙(CT-011, CureTech), JS-001(Shanghai Junshi Bioscience Co.,Ltd.), SHR-1210(Incyte/Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd.), MEDI0680(AMP-514로도 알려짐; Amplimmune Inc./Medimmune), PDR001(Novartis), BGB-A317(BeiGene Ltd.), TSR-042(ANB011로도 알려짐; AnaptysBio/Tesaro, Inc.), REGN2810(세미플리맙으로도 알려짐, Regeneron Pharmaceuticals, Inc./Sanofi-Aventis), 및 PF-06801591(Pfizer)로 이루어진 군으로부터 선택되는 PD-1결합 단백질(예컨대, 항체)이다. 추가의 PD-1결합 단백질(예컨대, 항체)은 당업계에 알려져 있고, 예를 들어 미국 특허 번호 9,181,342, 8,927,697, 7,488,802, 7,029,674; 미국 특허 출원 공개 번호 2015/0152180, 2011/0171215, 2011/0171220; 및 PCT 공개 번호 WO 2004/056875, WO 2015/036394, WO 2010/029435, WO 2010/029434, WO 2014/194302에 개시되어 있으며, 이들 각각은 본원에 참조로 포함된다.
PD-L1/PD-L2. PD 리간드 1(PD-L1; B7-H1로도 알려짐) 및 PD 리간드 2(PD-L2; PDCD1LG2, CD273, 및 B7-DC로도 알려짐)는 PD-1 수용체에 결합한다. 두 리간드 모두 CD28 및 CTLA-4와 상호작용하는 B7-1 및 B7-2 단백질과 동일한 B7 패밀리에 속한다. PD-L1은, 예를 들어 상피세포, 내피세포, 및 면역세포를 비롯한 많은 세포 유형에서 발현될 수 있다. PDL-1의 결찰은 IFN, TNF, 및 IL-2 생성을 감소시키며, 감소된 T세포 반응성 및 증식뿐만 아니라 항원 특이적 T세포 아네르기와 관련된 항염증성 사이토카인, IL10의 생성을 자극한다. PDL-2는 주로 항원제시 세포(APC)에서 발현된다. PDL2 결찰은 또한 T세포 억제를 초래하지만, PDL-1-PD-1 상호작용이 G1/G2 단계에서 세포주기 정지를 통해 증식을 억제하는 경우, PDL2-PD-1 결합은 낮은 항원 농도에서 B7:CD28 신호를 차단하고 높은 항원 농도에서 사이토카인 생성을 감소시킴으로써 TCR-매개 신호전달을 억제하는 것으로 나타났다. PD-L1 및 PD-L2에 특이적인 다수의 면역 체크포인트 조절제가 개발되었으며, 본원에 개시된 바와 같이 사용될 수 있다.
일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 PD-L1의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 PD-L1에 결합하는 제제(예컨대, 항PD-L1 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 PD-L1 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 PD-L1 길항제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 더발루맙(MEDI-4736으로도 알려짐; AstraZeneca/Celgene Corp./Medimmune), 아테졸리주맙(Tecentriq; MPDL3280A 및 RG7446으로도 알려짐; Genetech Inc.), 아벨루맙(MSB0010718C로도 알려짐; Merck Serono/AstraZeneca); MDX-1105(BMS-936559, Medarex/Bristol-Meyers Squibb), AMP-224(Amplimmune, GlaxoSmithKline), LY3300054(Eli Lilly and Co.), JS003(Shanghai Junshi Bioscience Co.,Ltd.), SHR-1316(Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd.), KN035(Alphamab and 3D Medicines ), 또는 CK-301(Checkpoint Therapeutics)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 PD-L1결합 단백질(예컨대, 항체 또는 Fc-융합 단백질)이다. 추가의 PD-L1결합 단백질은 당업계에 알려져 있고, 예를 들어 미국 특허 출원 공개 번호 2016/0084839, 2015/0355184, 2016/0175397, 및 PCT 공개 번호 WO 2014/100079, WO 2016/030350, WO2013181634에 개시되어 있으며, 이들 각각은 본원에 참조로 포함된다.
일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 PD-L2의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 PD-L2에 결합하는 제제(예컨대, 항PD-L2 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 PD-L2 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 PD-L2 길항제이다. PD-L2결합 단백질(예컨대, 항체)은 당업계에 알려져 있고, 예를 들어 미국 특허 번호 9,255,147, 8,188,238; 미국 특허 출원 공개 번호 2016/0122431, 2013/0243752, 2010/0278816, 2016/0137731, 2015/0197571, 2013/0291136, 2011/0271358; 및 PCT 공개 번호 WO 2014/022758, 및 WO 2010/036959에 개시되어 있으며, 이들 각각은 본원에 참조로 포함된다.
TIM-3. T세포 면역글로불린 뮤신 3(TIM-3; A형 간염 바이러스 세포 수용체(HAVCR2)로도 알려짐)은 S형 렉틴 갈렉틴-9(Gal-9)에 결합하는 A I형 당단백질 수용체이다. TIM-3은 림프구, 간, 소장, 흉선, 신장, 비장, 폐, 근육, 망상적혈구, 및 뇌조직에서 광범위하게 발현되는 리간드이다. Tim-3은 IFN-γ분비 Th1 및 Tc1 세포에서 선택적으로 발현되는 것으로 처음에 확인되었다(Monney et al. (2002) Nature 415: 536-41). TIM-3 수용체에 의한 Gal-9의 결합은 하류 신호전달을 유발하여 T세포 생존 및 기능을 음성적으로 조절한다. TIM-3에 특이적인 다수의 면역 체크포인트 조절제가 개발되었으며, 본원에 개시된 바와 같이 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 TIM-3의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 TIM-3에 결합하는 제제(예컨대, 항TIM-3 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 TIM-3 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 TIM-3 길항제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 TSR-022(AnaptysBio/Tesaro, Inc.) 및 MGB453(Novartis)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 항TIM-3 항체이다. 추가의 TIM-3결합 단백질(예컨대, 항체)은 당업계에 알려져 있고, 예를 들어 미국 특허 번호 9,103,832, 8,552,156, 8,647,623, 8,841,418; 미국 특허 출원 공개 번호 2016/0200815, 2015/0284468, 2014/0134639, 2014/0044728, 2012/0189617, 2015/0086574, 2013/0022623; 및 PCT 공개 번호 WO 2016/068802, WO 2016/068803, WO　2016/071448, WO 2011/155607, 및 WO 2013/006490에 개시되어 있으며, 이들 각각은 본원에 참조로 포함된다.
VISTA. T세포 활성화의 V-도메인 Ig 억제인자(VISTA, 혈소판 수용체 Gi24로도 알려짐)는 T세포 반응을 음성적으로 조절하는 Ig 수퍼패밀리 리간드이다. 예를 들어, 문헌[Wang et al., 2011, J. Exp. Med. 208: 577-92] 참조. APC에서 발현되는 VISTA는 CD4+ 및 CD8+ T세포 증식 및 사이토카인 생성을 직접 억제한다(Wang et al. (2010) J Exp Med. 208(3): 577-92). VISTA에 특이적인 다수의 면역 체크포인트 조절제가 개발되었으며, 본원에 개시된 바와 같이 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 VISTA의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 VISTA에 결합하는 제제(예컨대, 항VISTA 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 VISTA 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 VISTA 길항제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 TSR-022(AnaptysBio/Tesaro, Inc.) 및 MGB453(Novartis)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 VISTA결합 단백질(예컨대, 항체)이다. VISTA결합 단백질(예컨대, 항체)은 당업계에 알려져 있고, 예를 들어 미국 특허 출원 공개 번호 2016/0096891; 및 PCT 공개 번호 WO 2014/190356, WO 2014/197849, WO 2014/190356, 및 WO 2016/094837에 개시되어 있으며, 이들 각각은 본원에 참조로 포함된다.
CD160. CD160은 처음에 단클론 항체 BY55로 확인된 27 kDa의 당단백질이다. 이의 발현은 세포용해 이펙터 활성을 갖는 말초혈 NK세포 및 CD8 T 림프구와 밀접하게 관련되어 있다. CD160의 cDNA 서열은 KIR2DL4 분자에 약한 상동성을 갖는 단일 Ig-유사 도메인을 갖는 181개 아미노산의 시스테인-풍부, 글리코실포스파티딜이노시톨-부착 단백질을 예측한다. CD160은 세포 표면에서, 단단히 이황화 결합된 다량체로서 발현된다. RNA 블롯 분석은 발현이 순환 NK 및 T 세포, 비장, 및 소장으로 매우 제한된 1.5 및 1.6 kb의 CD160 mRNA를 나타냈다. NK세포 내에서 CD160은 CD56dimCD16+ 세포에 의해 발현되는 반면, 순환 T세포 중에서, 이의 발현은 주로 TCRgd 함유 세포 및 TCRab+CD8brightCD95+CD56+CD28-CD27-세포로 제한된다. 조직에서, CD160은 모든 장상피내 림프구(intestinal intraepithelial lymphocyte)에서 발현된다. CD160은 전형적 및 비전형적 MHC 클래스 I 분자 모두에 대한 결합에 광범위한 특이성을 나타낸다. CD160은 HVEM의 리간드이며, 항PD-1 항체와 함께 항암 활성을 갖는 제안된 면역 체크포인트 억제제로 간주된다. CD160은 또한, 기존의 항혈관형성 약물에 반응하지 않거나 내성이 있는 인간 병리 안구 및 종양 신생혈관형성의 경우 가능성 있는 새로운 표적으로 제안되었다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 CD160의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 CD160에 결합하는 제제(예컨대, 항CD160 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 CD160 억제제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 CD160 활성화제이다.
2B4 . 자연살해세포 수용체 2B4는 CD244 유전자에 의해 인코딩되는 인간 단백질인 CD244(분화 클러스터 244)로도 알려져 있다. 이 유전자는 비-주조직적합복합체(MHC) 제한적 살해를 매개하는 자연살해세포(NK세포) (및 일부 T세포)에서 발현되는 세포 표면 수용체를 인코딩한다. 이 수용체를 통한 NK세포와 표적세포의 상호작용이 NK세포 세포용해 활성을 조절하는 것으로 생각된다. 이 유전자의 경우, 상이한 이소형을 인코딩하는 선택적으로 스플라이싱된 전사 변이체가 발견되었다. CD244는 호산구, 비만세포, 및 수지상 세포와 같은 비림프구에서도 발현될 수 있다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 2B4의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 2B4에 결합하는 제제(예컨대, 항2B4 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 2B4 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 2B4 길항제이다.
TGF β. 형질전환 성장인자 베타(TGF-β)는 4가지 상이한 이소형(TGF-β 1 내지 4, HGNC 기호 TGFB1, TGFB2, TGFB3, TGFB4) 및 모든 백혈구 계통에 의해 생성되는 많은 기타 신호전달 단백질을 포함하는 형질전환 성장인자 수퍼패밀리에 속하는 다기능적 사이토카인이다.
정상 세포에서, 신호전달 경로를 통해 작용하는 TGF-β는 G1 단계에서 세포주기를 정지시켜 증식을 중지시키거나, 분화를 유도하거나, 자가사멸을 촉진시킨다. 많은 암세포에서, TGF-β 신호전달 경로의 일부가 돌연변이되어 TGF-β는 더 이상 세포를 제어하지 못한다. 이러한 암세포는 증식한다. 주변 기질세포(섬유모세포)도 증식한다. 두 세포 모두 TGF-β의 생성을 증가시킨다. 이 TGF-β는 주변 기질세포, 면역세포, 내피 및 평활근 세포에 작용한다. 이는 면역억제와 혈관형성을 일으켜, 암을 더욱 침습성으로 만든다. TGF-β는 또한, 일반적으로 염증(면역) 반응으로 암을 공격하는 이펙터 T세포를 조절(억제) T세포로 전환시켜 염증 반응을 차단한다. 부착 분자를 발현하고 사이토카인을 분비하는 상이한 세포 유형 간의 피드백 상호작용에 의해 정상적인 조직 온전성이 유지된다. 암에서 이러한 피드백 메커니즘의 파괴는 조직을 손상시킨다. TGF-β 신호전달이 암세포에서 NF-κB 활성을 제어하지 못할 경우, 이는 적어도 두 가지 잠재적 효과를 갖는다: 첫째, 활성화된 면역세포의 존재하에 악성 종양이 지속될 수 있게 하고, 둘째, 암세포가 자가사멸 및 항염증성 매개체의 존재하에 생존하기 때문에 면역세포보다 오래 지속된다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 TGF-β의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 TGF-β에 결합하는 제제(예컨대, 항TGF-β 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 TGF-β 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 TGF-β 길항제이다.
TIGIT . Ig 및 ITIM 도메인을 갖는 T세포 면역수용체(TIGIT)는 일부 T세포 및 자연살해세포(NK)에 존재하는 면역수용체이다. 이는 또한 WUCAM 및 Vstm3으로서 확인된다. TIGIT는 수지상 세포(DC), 대식세포 등에서 높은 친화력으로 CD155(PVR)에 결합할 수 있고, 더 낮은 친화력으로 CD112(PVRL2)에 결합할 수도 있다.
TIGIT 및 PD-1은 흑색종이 있는 개체의 종양 항원 특이적(TA 특이적) CD8+ T세포 및 CD8+ 종양 침윤성 림프구(TIL)에서 과발현되는 것으로 나타났다. Chauvin et al., J Clin Invest. 125 (5): 2046-2058. TIGIT 및 PD-1의 차단은 TA 특이적 CD8+ T세포 및 TIL CD8+ T세포의 세포 증식, 사이토카인 생성, 및 탈과립화를 증가시켰다. TIGIT 및 PD-1 경로의 공동차단은 전임상 쥣과 모델에서 종양 거부를 유도한다. Johnston et al., Cancer Cell. 26 (6): 923-937. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 TIGIT의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 TIGIT에 결합하는 제제(예컨대, 항TIGIT 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 TIGIT 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 TIGIT 길항제이다.
LAIR1 . 백혈구-관련 면역글로불린-유사 수용체 1(LAIR1)은 인간에서 LAIR1 유전자에 의해 인코딩되는 단백질이다. LAIR1은 CD305(분화 클러스터 305)로 명명되기도 하였다. 이 유전자에 의해 인코딩되는 단백질은 NK세포, T세포, 및 B세포를 비롯한 말초 단핵세포에서 발견되는 억제 수용체이다. 억제 수용체는 면역 반응을 조절하여 자기로 인식된 세포의 용해를 방지한다. 이 유전자는 면역글로불린 수퍼패밀리 및 백혈구-관련 억제 수용체 패밀리 모두의 구성원이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 LAIR1의 활성 및/또는 발현을 조절하는 제제이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 LAIR1에 결합하는 제제(예컨대, 항LAIR1 항체)이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 LAIR1 작용제이다. 일부 구현예에서, 체크포인트 조절제는 LAIR1 길항제이다.
일부 구현예에서, 면역 체크포인트 분자는 PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, TIM-3, LAG3, CD160, 2B4, TGF β, VISTA, BTLA, TIGIT, 또는 LAIR1이다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 분자는 OX40, CD2, CD27, ICAM-1, NKG2C, SLAMF7, NKp80, B7-H3, LFA-1, 1COS, 4-1BB, GITR, CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, 또는 CD83이다. 특정 구현예에서, 면역 체크포인트 분자는 PD-1이다. 특정 구현예에서, 면역 체크포인트 분자는 PD-L1이다. 특정 구현예에서, 면역 체크포인트 분자는 CTLA-4이다.
IV. 조성물
본 발명은 암의 치료를 위한, 본원에 개시된 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)를 함유하는 제약 조성물을 제공한다. 본 발명의 제약 조성물은 본원에 개시된 하나 이상의 MDM2 억제제, 또는 이의 제약상 허용되는 염, 및 제약상 허용되는 담체 또는 희석제를 포함한다. 본 발명의 제약 조성물은 본원에 개시된 하나 이상의 면역 체크포인트 분자 조절제를 임의로 포함한다.
"제약상 허용되는 담체" 및 "제약상 허용되는 희석제"는, 제형화 및/또는 활성제의 투여 및/또는 대상체에 의한 흡수를 돕고 대상체에게 유의한 독소 부작용을 일으키지 않으면서 본 발명의 조성물에 포함될 수 있는 물질을 의미한다. 제약상 허용되는 담체 및/또는 희석제의 비제한적인 예는 물, NaCl, 생리 식염수, 젖산 링거, 정상 자당, 정상 포도당, 바인더, 충전제, 붕해제, 윤활제, 코팅, 감미료, 향미제, 염용액(예컨대, 링거액), 알코올, 오일, 젤라틴, 탄수화물, 예컨대 락토스, 아밀로스 또는 전분, 하이드록시메틸셀룰로스, 지방산 에스테르, 폴리비닐 피롤리딘, 및 착색제 등을 포함한다. 이러한 제제는 멸균될 수 있고, 필요한 경우, 본원에 제공된 화합물의 활성에 유해하게 반응하거나 방해되지 않는 윤활제, 보존제, 안정화제, 습윤제, 유화제, 삼투압에 영향을 미치는 염, 완충제, 착색제, 및/또는 방향족 물질 등과 같은 보조제와 혼합될 수 있다. 당업자는 기타 제약 부형제가 개시된 화합물과 함께 사용하기에 적합하다는 것을 인식할 것이다.
본 발명의 제약 조성물은 이를 위한 제약상 허용되는 하나 이상의 담체 및/또는 희석제, 예컨대 락토스, 전분, 셀룰로스, 및 덱스트로스를 임의로 포함한다. 기타 부형제, 예컨대 향미제, 감미제, 및 보존제, 예컨대 메틸, 에틸, 프로필, 및 부틸 파라벤도 포함될 수 있다. 적합한 부형제의 더 완전한 목록은 문헌[Handbook of Pharmaceutical Excipients, 5판, Pharmaceutical Press (2005)]에서 확인할 수 있다. 당업자는 다양한 유형의 투여 경로에 적합한 제형을 제조하는 방법을 알고 있을 것이다. 적합한 제형의 선택 및 제조를 위한 통상적인 절차 및 성분은, 예를 들어 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences (2003, 20판) 및 미국약전: 1999년 발행된 국립처방집(USP 24 NF19)]에 기재되어 있다. 담체, 희석제, 및/또는 부형제는 제약 조성물의 다른 성분과 상용성이고 이들의 수용자(recipient)에 유해하지 않다는 의미에서 "허용"된다.
일부 구현예에서, 병용요법을 위한 제약 조성물은 APG-115로 알려진 하기 구조식의 MDM2 억제제,
Figure pct00033
,
또는 이의 제약상 허용되는 염을 포함한다. 일부 구현예에서, 제약 조성물은 고체 투여 형태이다. 일부 구현예에서, 고체 투여 형태는 캡슐이다. 일부 구현예에서, 고체 투여 형태는 건식-충전 캡슐이다. 일부 구현예에서, 고체 투여 형태는 건식-충전된 크기 1의 젤라틴 캡슐이다. 일부 구현예에서, 캡슐은 약 10~500 mg의 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)를 포함한다. 일부 구현예에서, 제약 조성물 또는 캡슐은 규화 미정질 셀룰로스를 포함한다.
일부 구현예에서, 제약 조성물 또는 캡슐은 MDM2, 예컨대 APG-115를 약 10 mg, 15 mg, 20 mg, 25 mg, 30 mg, 35 mg, 40 mg, 45 mg, 50 mg, 55 mg, 60 mg, 65 mg, 70 mg, 75 mg, 80 mg, 85 mg, 90 mg, 95 mg, 100 mg, 105 mg, 110 mg, 120 mg, 130 mg, 140 mg, 150 mg, 160 mg, 170 mg, 180 mg, 190 mg, 210 mg, 220 mg, 230 mg, 240 mg, 250 mg, 260 mg, 270 mg, 280 mg, 290 mg, 또는 300 mg의 양으로 포함한다.
V. 치료 방법
암 치료를 필요로 하는 대상체의 암을 치료하는 방법으로서, 대상체에게 암이 치료되도록 하는 본 발명의 MDM2 억제제의 유효량, 및 적어도 하나의 면역 체크포인트 분자 조절제의 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 방법이 본원에 제공된다.
또한, 암 치료를 필요로 하는 대상체의 암을 치료하는 방법으로서, 대상체에게 암이 치료되도록 하는 본 발명의 MDM2 억제제의 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 방법이 본원에 제공된다. 특정 구현예에서, 암은 췌장암, 선낭 암종, 폐암, 위장관 기질 종양, 및 유방암으로부터 선택된다. 특정 구현예에서, 암은 국소 진행성 또는 전이성 고형 종양 또는 림프종이다. 특정 구현예에서, 대상체는 치료 경험이 있고 질환 진행을 나타낸다.
또한, 암을 치료하는 방법으로서, 암 치료를 필요로 하는 대상체에게 치료 유효량의 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)를 투여하는 단계를 포함하되, 상기 방법은 적어도 1회의 28일 치료 주기를 포함하고, MDM2 억제제가 치료 주기의 첫 연속 3주 동안 격일로 경구 투여되고 치료 주기의 넷째 주 동안은 투여되지 않으며, 치료 유효량은 약 100 mg 내지 약 200 mg의 MDM2 억제제인, 방법이 본원에 제공된다.
특정 구현예에서, 치료 유효량은 약 100 mg의 APG-115이다.
다른 구현예에서, 치료 유효량은 약 150 mg의 APG-115이다.
다른 구현예에서, 치료 유효량은 약 200 mg의 APG-115이다.
특정 구현예에서, 암은 전이성 고형 종양, 림프종, 진행성 연조직 육종, 또는 선낭 암종이다.
MDM2 억제제 조성물 및 투여
본원에 기재된 개시내용은, 단일치료제 또는 병용요법의 공동제제로서의 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)에 적용된다. 본 발명의 방법에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 본원에 기재된 조성물 및 제형과 같은 제약 조성물의 형태로 투여될 수 있다. 일부 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절제와 병용투여되고 정맥내 투여, 흡입 투여, 국소 투여, 또는 경구 투여용으로 제형화된다.
특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 하루에 적어도 1회 용량으로 투여된다. 특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 하루에 적어도 2회 용량으로 투여된다. 특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 하루에 적어도 3회 용량으로 투여된다. 특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 하루에 1회 용량으로 투여된다. 특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 하루에 2회 용량으로 투여된다. 특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 하루에 3회 용량으로 투여된다. MDM2 억제제(예컨대, APG-115)에 대한 추가의 적합한 치료 요법은, 예를 들어 전체 내용이 본원에 참조로 명백히 포함되는 미국 특허 번호 9,745,314에 제공되어 있다.
당업자는 암의 치료를 위한 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 효과적이고 비독성적인 양을 통상적 실험에 의해 결정할 수 있을 것이다. 예를 들어, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 치료 유효량은 대상체의 질환 상태(예를 들어, 단계 I 대 단계 IV), 연령, 성별, 합병증(예를 들어, 면역억제된 병태 또는 질환), 체중과 같은 인자, 및 대상체에서 원하는 반응을 유도하는 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 능력에 따라 달라질 수 있다. 투여 요법은 최적의 치료 반응을 제공하도록 조정될 수 있다. 예를 들어, 여러 분할 용량이 매일 투여되거나 연속 주입에 의해 투여될 수 있거나, 치료 상황의 긴급성에 따라 비례적으로 용량이 감소될 수 있다. 특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는, 단독으로 전달될 경우, 즉 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)가 다른 화학요법 또는 다른 암치료의 부작용을 개선하기 위한 주요 제제가 아닌, 치료용 항암제로서 투여되고/되거나 작용하는 경우에 치료적으로 유효할 양으로 투여된다.
특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는, 예를 들어 하나 이상의 면역 체크포인트 조절제의 치료 효과를 강화시킴으로써, 종양에 대한 면역 반응을 개선 또는 강화하는 데 효과적일 양으로 투여된다. 하기 제공된 투여량은, 국소 투여, 흡입 투여, 및 정맥내 투여(예를 들어, 연속 주입)를 비롯하여, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 임의의 투여 방식에 사용될 수 있다.
특정 구현예에서, 대상체에게 약 0.5 mg/kg 내지 약 10,000 mg/kg, 약 5 mg/kg 내지 약 5,000 mg/kg, 약 10 mg/kg 내지 약 3,000 mg/kg 범위의 용량의 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)가 투여된다. 일 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 약 10 mg/kg 내지 약 1,400 mg/kg의 범위로 투여된다. 일 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 약 10 mg/kg 내지 약 650 mg/kg의 범위로 투여된다. 일 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 약 10 mg/kg 내지 약 200 mg/kg의 범위로 투여된다. 다양한 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 약 1 mg/kg, 2 mg/kg, 5 mg/kg, 10 mg/kg, 15 mg/kg, 20 mg/kg, 25 mg/kg, 30 mg/kg, 35 mg/kg, 40 mg/kg, 45 mg/kg, 50 mg/kg, 55 mg/kg, 60 mg/kg, 65 mg/kg, 70 mg/kg, 75 mg/kg, 80 mg/kg, 85 mg/kg, 90 mg/kg, 95 mg/kg, 100 mg/kg, 105 mg/kg, 110 mg/kg, 120 mg/kg, 130 mg/kg, 140 mg/kg, 150 mg/kg, 160 mg/kg, 170 mg/kg, 180 mg/kg, 190 mg/kg, 210 mg/kg, 220 mg/kg, 230 mg/kg, 240 mg/kg, 250 mg/kg, 260 mg/kg, 270 mg/kg, 280 mg/kg, 290 mg/kg, 또는 300 mg/kg의 용량으로 투여된다.
이들 값 중 임의의 값을 상한 또는 하한으로 갖는 범위(예를 들어, 약 50 mg/kg 내지 약 200 mg/kg, 또는 약 650 mg/kg 내지 약 1400 mg/kg)도 본 발명의 일부인 것으로 이해되어야 한다. 일 구현예에서, 투여 용량은 적어도 약 1 mg/kg, 2 mg/kg, 적어도 약 5 mg/kg, 적어도 약 10 mg/kg, 적어도 약 12.5 mg/kg, 적어도 약 20 mg/kg, 적어도 약 25 mg/kg, 적어도 약 30 mg/kg, 적어도 약 35 mg/kg, 적어도 약 40 mg/kg, 적어도 약 45 mg/kg, 적어도 약 50 mg/kg, 적어도 약 55 mg/kg, 적어도 약 60 mg/kg, 적어도 약 65 mg/kg, 적어도 약 70 mg/kg, 적어도 약 75 mg/kg, 적어도 약 80 mg/kg, 적어도 약 85 mg/kg, 적어도 약 90 mg/kg, 적어도 약 95 mg/kg, 적어도 약 100 mg/kg, 적어도 약 104 mg/kg, 적어도 약 125 mg/kg, 적어도 약 150 mg/kg, 적어도 약 175 mg/kg, 적어도 약 200 mg/kg, 적어도 약 250 mg/kg, 적어도 약 300 mg/kg, 또는 적어도 약 400 mg/kg이다.
특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 약 10 mg/kg/일(24시간) 내지 약 150 mg/kg/일(24시간)의 용량으로 투여된다. 특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 약 1 mg/kg/일(24시간), 약 2 mg/kg/일(24시간), 약 5 mg/kg/일(24시간), 약 10 mg/kg(24시간), 약 15 mg/kg/일(24시간), 약 20 mg/kg/일(24시간), 약 25 mg/kg/일(24시간), 약 30 mg/kg/일(24시간), 약 35 mg/kg/ 일(24시간), 약 40 mg/kg/일(24시간), 약 45 mg/kg/일(24시간), 약 50 mg/kg/일(24시간), 약 55 mg/kg/일(24시간), 약 60 mg/kg/일(24시간), 약 65 mg/kg/일(24시간), 70 mg/kg/일(24시간), 약 75 mg/kg/일(24시간), 약 80 mg/kg/일(24시간), 약 85 mg/kg/일(24시간), 약 90 mg/kg/일(24시간), 약 95 mg/kg/일(24시간), 약 100 mg/kg/일(24시간), 약 105 mg/kg/일(24시간), 약 110 mg/kg/일(24시간), 약 120 mg/kg/일(24시간), 약 130 mg/kg/일(24시간), 약 140 mg/kg/일(24시간), 약 150 mg/kg/일(24시간), 약 160 mg/kg/일(24시간), 약 170 mg/kg/일(24시간), 약 180 mg/kg/일(24시간), 약 190 mg/kg/일(24시간), 약 200 mg/kg/일(24시간), 약 210 mg/kg/일(24시간), 약 220 mg/kg/일(24시간), 약 230 mg/kg/일(24시간), 약 240 mg/kg/일(24시간), 약 250 mg/kg/일(24시간), 약 260 mg/kg/일(24시간), 약 270 mg/kg/일(24시간), 약 280 mg/kg/일(24시간), 약 290 mg/kg/일(24시간), 및 약 300 mg/kg/일(24시간)로 이루어진 군으로부터 선택되는 용량으로 투여된다.
특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 약 10 mg/일(24시간) 내지 약 150 mg/일(24시간)의 용량으로 투여된다. 특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 약 1 mg/일(24시간), 약 2 mg/일(24시간), 약 5 mg/일(24시간), 약 10 mg/kg(24시간), 약 15 mg/일(24시간), 약 20 mg/일(24시간), 약 25 mg/일(24시간), 약 30 mg/일(24시간), 약 35 mg/kg/ 일(24시간), 약 40 mg/일(24시간), 약 45 mg/일(24시간), 약 50 mg/일(24시간), 약 55 mg/일(24시간), 약 60 mg/일(24시간), 약 65 mg/일(24시간), 70 mg/일(24시간), 약 75 mg/일(24시간), 약 80 mg/일(24시간), 약 85 mg/일(24시간), 약 90 mg/일(24시간), 약 95 mg/일(24시간), 약 100 mg/일(24시간), 약 105 mg/일(24시간), 약 110 mg/일(24시간), 약 120 mg/일(24시간), 약 130 mg/일(24시간), 약 140 mg/일(24시간), 약 150 mg/일(24시간), 약 160 mg/일(24시간), 약 170 mg/일(24시간), 약 180 mg/일(24시간), 약 190 mg/일(24시간), 약 200 mg/일(24시간), 약 210 mg/일(24시간), 약 220 mg/일(24시간), 약 230 mg/일(24시간), 약 240 mg/일(24시간), 약 250 mg/일(24시간), 약 260 mg/일(24시간), 약 270 mg/일(24시간), 약 280 mg/일(24시간), 약 290 mg/일(24시간), 및 약 300 mg/일(24시간)로 이루어진 군으로부터 선택되는 용량으로 투여된다.
특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 약 10 mg/kg/주의 용량으로 투여된다. 특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 약 25 mg/kg/주의 용량으로 투여된다. 특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 약 50 mg/kg/주의 용량으로 투여된다. 특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 약 75 mg/kg/주의 용량으로 투여된다. 특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 약 100 mg/kg/주의 용량으로 투여된다. 특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 약 125 mg/kg/주의 용량으로 투여된다. 특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 약 150 mg/kg/주의 용량으로 투여된다. 특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 약 5 mg/kg/주, 약 10 mg/kg/주, 약 25 mg/kg/주, 약 50 mg/kg/주, 약 75 mg/kg/주, 약 100 mg/kg/주, 약 125 mg/kg/주, 약 150 mg/kg/주, 약 175 mg/kg/주, 약 200 mg/kg/주, 약 225 mg/kg/주, 약 250 mg/kg/주, 약 300 mg/kg/주, 약 350 mg/kg/주, 약 400 mg/kg 주, 약 450 mg/kg/주, 약 500 mg/kg/주, 약 550 mg/kg/주, 약 600 mg/kg/주, 약 650 mg/kg/주, 및 약 700 mg/kg/주로 이루어진 군으로부터 선택되는 용량으로 투여된다.
일부 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 특정 종양장애의 치료를 위한 표준 치료에 따라 종양장애를 치료하는 데 사용되는 MDM2 억제제의 표준 투여량과 다른(예를 들어, 더 낮은) 투여량으로 투여된다. 특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 투여량은 특정 종양장애에 대한 MDM2 억제제(예컨대, APG-115) 분자의 표준 투여량보다 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 또는 90% 더 낮다. 특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115) 분자의 투여량은 특정 암에 대한 MDM2 억제제(예컨대, APG-115) 분자의 표준 투여량의 95%, 90%, 85%, 80%, 75%, 70%, 65%, 60%, 55%, 50%, 45%, 40%, 35%, 30%, 25%, 20%, 15%, 10%, 또는 5%다.
일부 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115), 또는 이의 제약상 허용되는 염은 격일로(QOD) 경구 투여된다. 일부 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115), 또는 이의 제약상 허용되는 염은 격일로 약 30 mg 내지 약 250 mg의 양으로 경구 투여된다. 일부 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115), 또는 이의 제약상 허용되는 염은 격일로 약 50 mg 내지 약 200 mg의 양으로 경구 투여된다. 일부 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115), 또는 이의 제약상 허용되는 염은 격일로 약 50 mg, 100 mg, 150 mg, 또는 200 mg의 양으로 경구 투여된다.
특히, 본원에 제공된 실시예에 개시된 바와 같이 마우스에서 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)에 대해 10 mg/kg 내지 50 mg/kg의 용량 범위가 사용된 경우, 이에 상응하는 임상적 관련 용량은 60 kg의 인간에 대해 각각 48.8 mg/일 및 244 mg/일이다. 본원에서는 마우스 용량을 인간 등가 용량(HED)로 변환하기 위해 12.3의 계수를 사용하였다. mg/kg 단위의 동물 용량을 HED mg/m2으로 변환하기 위해서는 km+를 곱한다. "Guidance for Industry Estimating the Maximum Safe Starting Dose in Initial Clinical Trials for Therapeutics in Adult Healthy Volunteers" 참조(U.S. Department of Health and Human Services, Food and Drug Administration, Center for Drug Evaluation and Research (CDER), 2005년 7월, Pharmacology and Toxicology).
면역 체크포인트 분자 조절제
대상체에게 MDM2 억제제 조성물을 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절제와 병용투여하여 암을 치료하는 방법이 제공된다. 특정 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 대상체의 면역 반응을 자극한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 자극 면역 체크포인트(예컨대, CD28, CD122, ICOS, OX40, CD2, CD27, ICAM-1, NKG2C, SLAMF7, NKp80, B7-H3, LFA-1, 1COS, 4-1BB, GITR, CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, 또는 CD83)의 발현 또는 활성을 자극하거나 증가시킨다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 억제 면역 체크포인트(예컨대, A2A4, B7-H3, B7-H4, IDO, KIR, PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, TIM-3, LAG3, CD160, 2B4, TGF β, VISTA, BTLA, TIGIT, 또는 LAIR1)의 발현 또는 활성을 억제하거나 감소시킨다.
특정 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 OX40, CD2, CD27, ICAM-1, NKG2C, SLAMF7, NKp80, B7-H3, LFA-1, 1COS, 4-1BB, GITR, CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, 및 CD83으로 이루어진 군으로부터 선택되는 면역 체크포인트 분자를 표적화 한다. 특정 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, TIM-3, LAG3, CD160, 2B4, TGF β, VISTA, BTLA, TIGIT, 및 LAIR1로 이루어진 군으로부터 선택되는 면역 체크포인트 분자를 표적화 한다. 특정 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 PD-1의 면역 체크포인트 분자를 표적화 한다. 특정 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 PD-L1의 면역 체크포인트 분자를 표적화 한다. 특정 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 CTLA-4의 면역 체크포인트 분자를 표적화 한다.
특정 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 펨브롤리주맙, 이필리무맙, 니볼루맙, 아테졸리주맙, 아벨루맙, 또는 더발루맙이다. 특정 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 AGEN-1884, BMS-986016, CS-1002, LAG525, MBG453, MEDI-570, OREG-103/BY40, 리릴루맙, 또는 트레멜리무맙이다. 특정 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 펨브롤리주맙, 니볼루맙, AMP-224, AMP-514, BGB-A317, 세미플리맙, JS001, CS1001, PDR-001, PF-06801591, IBI-308, 피딜리주맙, SHR-1210, 또는 TSR-042이다. 특정 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 아테졸리주맙, 아벨루맙, 더발루맙, AMP-224, JS003, LY3300054, MDX-1105, SHR-1316, KN035, 또는 CK-301이다.
특정 구현예에서, 면역 체크포인트 분자 조절제는 항종양 T세포 활성을 회복시킨다. 특정 구현예에서, 면역 체크포인트 분자 조절제는 T세포-억제 세포 활성을 차단한다. 특정 구현예에서, 면역 체크포인트 분자 조절제는 공동자극 체크포인트 분자의 활성화제이고, 공동자극 체크포인트 분자의 활성화제는 완전한 T세포 활성화에 필요한 공동자극 신호를 변경한다.
일부 구현예에서, 하나 초과(예를 들어, 2, 3, 4, 5개 이상)의 면역 체크포인트 조절제가 대상체에게 투여된다. 하나 초과의 면역 체크포인트 조절제가 투여되는 경우, 조절제는 각각 자극 면역 체크포인트 분자를 표적화하거나, 각각 억제 면역 체크포인트 분자를 표적화할 수 있다. 다른 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 자극 면역 체크포인트를 표적화하는 적어도 하나의 조절제, 및 억제 면역 체크포인트 분자를 표적화하는 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절제를 포함한다.
특정 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 결합 단백질, 예컨대 항체이다. 본원에 사용된 용어 "결합 단백질"은 표적 분자, 예컨대 면역 체크포인트 분자에 특이적으로 결합할 수 있는 단백질 또는 폴리펩티드를 의미한다. 일부 구현예에서, 결합 단백질은 항체 또는 이의 항원결합 부분이고, 표적 분자는 면역 체크포인트 분자이다. 일부 구현예에서, 결합 단백질은 표적 분자(예컨대, 면역 체크포인트 분자)에 특이적으로 결합하는 단백질 또는 폴리펩티드이다. 일부 구현예에서, 결합 단백질은 리간드이다. 일부 구현예에서, 결합 단백질은 융합 단백질이다. 일부 구현예에서, 결합 단백질은 수용체이다. 본 발명의 방법에 사용될 수 있는 결합 단백질의 예는 인간화 항체, 항체 Fab 단편, 2가 항체, 항체 약물 접합체, scFv, 융합 단백질, 2가 항체, 및 4가 항체를 포함하나, 이에 한정되지는 않는다.
본원에 사용된 용어 "항체"는 4개의 폴리펩티드 사슬, 즉 2개의 중(H)쇄와 2개의 경(L)쇄로 구성된 임의의 면역글로불린(Ig) 분자, 또는 이들의 임의의 기능적 단편, 돌연변이체, 변이체, 또는 유도체를 의미한다. 이러한 돌연변이체, 변이체, 또는 유도체 항체 형태는 당업계에 알려져 있다. 전장 항체에서, 각각의 중쇄는 중쇄 가변 영역(본원에서는 HCVR 또는 VH로 약칭) 및 중쇄 불변 영역으로 구성된다. 중쇄 불변 영역은 3개의 도메인, 즉 CH1, CH2, 및 CH3으로 구성된다. 각각의 경쇄는 경쇄 가변 영역(본원에서는 LCVR 또는 VL로 약칭) 및 경쇄 불변 영역으로 구성된다. 경쇄 불변 영역은 하나의 도메인 CL로 구성된다. VH 및 VL 영역은 상보성 결정 영역(CDR)으로 불리는 과변이 영역으로 더 세분화될 수 있고, 이들 사이에는 프레임워크 영역(FR)으로 불리는 더 보존된 영역이 산재한다. 각각의 VH 및 VL은 아미노-말단에서 카복시-말단 방향으로 FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4의 순서로 배열된 3개의 CDR과 4개의 FR로 구성된다. 면역글로불린 분자는 임의의 유형(예컨대, IgG, IgE, IgM, IgD, IgA, 및 IgY), 클래스(예컨대, IgG 1, IgG2, IgG 3, IgG4, IgA1, 및 IgA2), 또는 서브클래스의 분자일 수 있다. 일부 구현예에서, 항체는 전장 항체이다. 일부 구현예에서, 항체는 쥣과 항체이다. 일부 구현예에서, 항체는 인간 항체이다. 일부 구현예에서, 항체는 인간화 항체이다. 일부 구현예에서, 항체는 단클론 항체이다. 일부 구현예에서, 항체는 키메라 항체이다. 키메라 항체 및 인간화 항체는 CDR 이식 접근법(예를 들어, 미국 특허 번호 5,843,708; 6,180,370; 5,693,762; 5,585,089; 및 5,530,101 참조), 사슬 셔플링 전략(예를 들어, 미국 특허 번호 5,565,332; 문헌[Rader et al. (1998) PROC. NAT'L. ACAD. SCI. USA 95: 8910-8915] 참조); 분자 모델링 전략(미국 특허 번호 5,639,641) 등을 비롯하여 당업자에게 잘 알려진 방법에 의해 제조될 수 있다.
본원에 사용된 용어, 항체의 "항원결합 부분" 또는 "항원결합 단편"(또는 단순히 "항체 부분")은 항원에 특이적으로 결합하는 능력을 보유한 하나 이상의 항체 단편을 의미한다. 항체의 항원결합 기능은 전장 항체의 단편에 의해 수행될 수 있는 것으로 나타났다. 이러한 항체 구현예는 둘 이상의 다른 항원에 특이적으로 결합하는 이중특이적(bispecific, dual specific) 또는 다중특이적 형태일 수도 있다. 항체의 "항원결합 부분" 또는 "항원결합 단편"이라는 용어에 포함되는 결합 단편의 예는 (i) VL, VH, CL, 및 CH1 도메인으로 이루어진 1가 단편인 Fab 단편; (ii) 힌지 영역에서 이황화 결합(disulfide bridge)에 의해 연결된 2개의 Fab 단편을 포함하는 2가 단편인 F(ab')2 단편; (iii) VH 및 CH1 도메인으로 이루어진 Fd 단편; (iv) 항체의 단일 아암(arm)의 VL 및 VH 도메인으로 이루어진 Fv 단편; (v) 단일 가변 도메인을 포함하는 dAb 단편(Ward et al. (1989) NATURE 341: 544-546; 및 WO 90/05144 A1, 이들 내용은 본원에 참조로 포함됨); 및 (vi) 단리된 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 또한, Fv 단편의 두 단편 VL과 VH가 별개의 유전자에 의해 코딩되지만, 이들은 재조합 방법을 이용해, VL 영역과 VH 영역이 쌍을 이루어 1가 분자를 형성하는 단일 단백질 사슬(단일쇄 Fv(scFv)로 알려짐; 예를 들어 문헌[Bird et al. (1988) SCIENCE 242:423-426; 및 Huston et al. (1988) PROC. NAT'L. ACAD. SCI. USA 85:5879-5883] 참조)이 되도록 할 수 있는 "합성 링커"에 의해 결합될 수 있다. 이러한 단일쇄 항체도 항체의 "항원결합 부분" 또는 "항원결합 단편"이라는 용어에 포함되는 것이다. 디아바디(diabody)와 같은 다른 형태의 단일쇄 항체도 포함된다. 항원결합 부분도 단일 도메인 항체, 맥시바디, 미니바디, 나노바디, 인트라바디, 디아바디, 트리아바디, 테트라바디, v-NAR, 및 bis-scFv에 포함될 수 있다(예를 들어, 문헌[Hollinger and Hudson, Nature Biotechnology 23:1126-1136, 2005] 참조).
일부 구현예에서, 면역 체크포인트 분자 조절제는 단클론 항체 또는 이의 항원결합 단편이다. 본원에 사용된 "단클론 항체"는 단일 항원 결정기 또는 에피토프의 매우 특이적인 인식 및 결합에 관여하는 동종 항체 집단을 의미한다. 이는, 상이한 항원 결정기에 대해 특이적인 상이한 항체를 전형적으로 포함하는 다클론 항체와 대조적이다. 용어 "단클론 항체"는 무손상 및 전장 단클론 항체뿐만 아니라 항체 단편(예컨대, Fab, Fab', F(ab')2, Fv), 단일쇄(scFv) 돌연변이체, 항체 부분을 포함하는 융합 단백질, 및 항원 인식 부위를 포함하는 기타 임의의 변형 면역글로불린 분자를 포함한다. 또한, "단클론 항체"는, 하이브리도마, 파지 선택, 재조합 발현, 및 유전자이식 동물을 포함하나 이에 한정되지 않는 다양한 방식으로 제조된 항체를 의미한다.
본원에 사용된 용어 "CDR"은 항체 가변 서열 내의 상보성 결정 영역을 의미한다. 중쇄 및 경쇄의 각각의 가변 영역에는, 각각의 가변 영역에 대해 CDR1, CDR2, 및 CDR3으로 지정된 3개의 CDR이 존재한다. 본원에 사용된 용어 "CDR 세트"는 항원이 결합할 수 있는 단일 가변 영역에서 발생하는 3개의 CDR의 그룹을 의미한다. 이들 CDR의 정확한 경계는 시스템에 따라 다르게 정의되었다. Kabat이 기술한 시스템(Kabat et al., SEQUENCES OF PROTEINS OF IMMUNOLOGICAL INTEREST (National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1987) and (1991))은 항체의 임의의 가변 영역에 적용할 수 있는 확실한 잔기 넘버링 시스템을 제공할 뿐만 아니라, 3개의 CDR을 정의하는 정확한 잔기 경계를 제공한다. 이들 CDR은 Kabat CDR로 지칭될 수 있다. Chothia와 공동연구자들은 Kabat CDR 내의 특정 하위부분이 아미노산 서열 수준에서 많은 다양성을 가짐에도 불구하고 거의 동일한 펩티드 골격 구조를 채택한다는 것을 발견하였다(Chothia et al. (1987) J. MOL. BIOL. 196: 901-917, 및 Chothia et al. (1989) NATURE 342: 877-883). 이 하위부분들은 L1, L2, 및 L3, 또는 H1, H2, 및 H3으로 지정되었고, 여기서 "L" 및 "H"는 각각 경쇄 영역 및 중쇄 영역을 나타낸다. 이들 영역은 Chothia CDR로 지칭될 수 있으며, Kabat CDR과 중복되는 경계를 갖는다. Kabat CDR과 중복되는 CDR을 정의하는 다른 경계는 문헌[Padlan et al. (1995) FASEB J. 9: 133-139, 및 MacCallum et al. (1996) J. MOL. BIOL. 262(5): 732-45]에 기술된 바 있다. 또 다른 CDR 경계 정의는 상기 시스템 중 하나를 엄격하게 따르지 않을 수 있으나, 그럼에도 불구하고, 특정 잔기 또는 잔기 그룹 또는 심지어 전체 CDR이 항원 결합에 크게 영향을 미치지 않는다는 예측 또는 실험 결과에 비추어 짧아지거나 길어질 수 있지만, Kabat CDR과 중복될 것이다. 바람직한 구현예는 Kabat 또는 Chothia 정의 CDR을 사용하는 것이지만, 본원에 사용된 방법은 이들 시스템 중 하나에 따라 정의된 CDR을 이용할 수 있다.
본원에 사용된 용어 "인간화 항체"는 비인간 면역글로불린으로부터 유래된 최소한의 서열을 함유하는 키메라 면역글로불린, 면역글로불린 사슬, 또는 이들의 단편(예컨대, Fv, Fab, Fab', F(ab')2, 또는 기타 항체의 항원결합 서열)인 비인간(예컨대, 쥣과) 항체를 의미한다. 대부분의 경우, 인간화 항체 및 이의 항체 단편은 수용자의 상보성 결정 영역(CDR)의 잔기가 원하는 특이성, 친화력, 및 능력을 갖는 마우스, 래트, 또는 토끼와 같은 비인간 종(공여자 항체)의 CDR의 잔기로 대체된 인간 면역글로불린(수용자 항체 또는 항체 단편)이다. 일부 경우에, 인간 면역글로불린의 Fv 프레임워크 영역(FR) 잔기는 상응하는 비인간 잔기로 대체된다. 또한, 인간화 항체/항체 단편은 수용자 항체에서도, 도입된 CDR 또는 프레임워크 서열에서도 발견되지 않는 잔기를 포함할 수 있다. 이러한 변형은 항체 또는 항체 단편 성능을 추가로 개선하고 최적화할 수 있다. 일반적으로, 인간화 항체 또는 이의 항체 단편은, CDR 영역의 전부 또는 거의 전부가 비인간 면역글로불린의 CDR 영역에 해당하고 FR 영역의 전부 또는 상당 부분이 인간 면역글로불린 서열의 FR 영역인, 적어도 하나, 일반적으로는 2개의 가변 도메인의 거의 전부를 포함할 것이다. 인간화 항체 또는 항체 단편은 또한, 면역글로불린 불변 영역(Fc)의 적어도 일부, 일반적으로는 인간 면역글로불린의 면역글로불린 불변 영역의 적어도 일부를 포함할 수 있다. 더 자세한 내용은, 각각의 전문이 본원에 참조로 포함되는 문헌[Jones et al. (1986) NATURE 321: 522-525; Reichmann et al. (1988) NATURE 332: 323-329; 및 Presta (1992) CURR. OP. STRUCT. BIOL. 2: 593-596] 참조.
본원에 사용된 용어 "면역접합체" 또는 "항체 약물 접합체"는 항체 또는 이의 항원결합 단편과 화학요법제, 독소, 면역요법제, 이미징 프로브 등과 같은 다른 제제의 연결을 의미한다. 연결은 공유 결합, 또는 정전기력을 통한 것과 같은 비공유 상호작용일 수 있다. 면역접합체를 형성하기 위해, 당업계에 알려진 다양한 링커가 사용될 수 있다. 또한, 면역접합체는 면역접합체를 인코딩하는 폴리뉴클레오티드로부터 발현될 수 있는 융합 단백질의 형태로 제공될 수 있다.
본원에 사용된 "융합 단백질"은 원래 별개의 단백질(펩티드 및 폴리펩티드 포함)을 코딩하는 2개 이상의 유전자 또는 유전자 단편의 결합을 통해 생성된 단백질을 의미한다. 융합 유전자의 번역은 각각의 원래 단백질로부터 유래된 기능적 특성을 갖는 단일 단백질을 생성한다.
"2가 항체"는 2개의 항원결합 부위를 포함하는 항체 또는 이의 항원결합 단편을 의미한다. 2개의 항원결합 부위는 동일한 항원에 결합하거나, 각각 상이한 항원에 결합할 수 있고, 이 경우 항체 또는 항원결합 단편은 "이중특이적" 특징을 갖는다. "4가 항체"는 4개의 항원결합 부위를 포함하는 항체 또는 이의 항원결합 단편을 의미한다. 특정 구현예에서, 4가 항체는 이중특이적이다. 특정 구현예에서, 4가 항체는 다중특이적이다(즉, 2개 초과의 상이한 항원에 결합).
Fab(항원결합 단편) 항체 단편은, 중쇄 가변 영역(VH)과 중쇄 불변 영역 1(CH1) 부분으로 이루어진 폴리펩티드, 및 경쇄 가변(VL)과 경쇄 불변(CL) 부분으로 이루어진 폴리펩티드로 구성된 항체(CL과 CH1 부분은, 바람직하게는 Cys 잔기 간의 이황화 결합에 의해, 서로 결합됨)의 1가 항원결합 도메인을 포함하는 면역반응성 폴리펩티드이다.
특정 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 융합 단백질, 예를 들어 면역 체크포인트 조절제의 활성을 조절하는 융합 단백질이다. 일 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 치료 핵산 분자, 예를 들어 면역 체크포인트 단백질 또는 mRNA의 발현을 조절하는 핵산이다. 핵산 치료제는 당업계에 잘 알려져 있다. 핵산 치료제는 세포의 표적 서열에 상보적인 단일가닥 및 이중가닥(즉, 적어도 15개 뉴클레오티드 길이의 상보적 영역을 갖는 핵산 치료제) 핵산을 모두 포함한다. 특정 구현예에서, 핵산 치료제는 면역 체크포인트 단백질을 인코딩하는 핵산 서열에 대해 표적화된다.
안티센스 핵산 치료제는, 일반적으로 약 16개 내지 30개 뉴클레오티드 길이의 단일가닥 핵산 치료제이며, 배양물 또는 유기체에서 표적세포의 표적 핵산 서열에 상보적이다.
다른 양태에서, 제제는 단일가닥 안티센스 RNA 분자이다. 안티센스 RNA 분자는 표적 mRNA 내의 서열에 상보적이다. 안티센스 RNA는 mRNA와 염기쌍을 이루고 번역 기구를 물리적으로 방해함으로서 화학량론적 방식으로 번역을 억제할 수 있다(문헌[Dias, N. et al., (2002) Mol Cancer Ther 1:347-355] 참조). 안티센스 RNA 분자는 표적 mRNA에 상보적인 약 15~30개의 뉴클레오티드를 가질 수 있다. 안티센스 핵산, 화학적 변형, 및 치료 용도에 관한 특허는, 예를 들어 다음을 포함한다: 화학적으로 변형된 RNA 함유 치료 화합물에 관한 미국 특허 번호 5,898,031; 이들 화합물을 치료제로서 사용하는 방법에 관한 미국 특허 번호 6,107,094; 단일가닥의 화학적으로 변형된 RNA-유사 화합물을 투여하여 환자를 치료하는 방법에 관한 미국 특허 번호 7,432,250; 및 단일가닥의 화학적으로 변형된 RNA-유사 화합물을 함유하는 제약 조성물에 관한 미국 특허 번호 7,432,249. 미국 특허 번호 7,629,321은 복수의 RNA 뉴클레오시드 및 적어도 하나의 화학적 변형을 갖는 단일가닥 올리고뉴클레오티드를 사용하여 표적 mRNA를 절단하는 방법에 관한 것이다. 이 단락에 열거된 각각의 특허의 전체 내용은 본원에 참조로 포함된다.
본 발명의 방법에 사용하기 위한 핵산 치료제는 또한 이중가닥 핵산 치료제를 포함한다. 본원에서 상호교환적으로 사용되는 "RNAi 제제", "이중가닥 RNAi 제제", "이중가닥 RNA(dsRNA) 분자"("dsRNA 제제"라고도 함), "dsRNA", "siRNA", "iRNA 제제"는, 하기 정의된 바와 같이 실질적으로 상보적인 2개의 역평행 핵산 가닥을 포함하는 듀플렉스 구조를 갖는 리보핵산 분자의 복합체를 의미한다. 본원에 사용된 RNAi 제제는 또한 dsiRNA를 포함할 수 있다(예를 들어, 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 공개 20070104688 참조). 일반적으로, 각각의 가닥의 뉴클레오티드 대부분은 리보뉴클레오티드이지만, 본원에 기재된 바와 같이, 각각의 가닥 또는 양쪽 가닥은 하나 이상의 비-리보뉴클레오티드, 예컨대 데옥시리보뉴클레오티드 및/또는 변형된 뉴클레오티드를 포함할 수도 있다. 또한, 본 명세서에 사용된 "RNAi 제제"는 화학적으로 변형된 리보뉴클레오티드를 포함할 수 있고, RNAi 제제는 다수의 뉴클레오티드에 실질적 변형을 포함할 수 있다. 이러한 변형은, 본원에 개시되거나 당업계에 알려진 모든 유형의 변형을 포함할 수 있다. siRNA 분자에 사용되는 이러한 모든 변형은 본 명세서 및 청구범위의 목적을 위해 "RNAi 제제"에 포함된다. 본 발명의 방법에 사용되는 RNAi 제제는, 예를 들어 각각의 전체 내용이 본원에 참조로 포함되는 WO/2012/037254 및 WO 2009/073809에 개시된 바와 같이 화학적으로 변형된 제제를 포함한다.
면역 체크포인트 조절제는, 예를 들어 표준 투여량을 사용하여, 종양장애를 치료하기에 적절한 투여량으로 투여될 수 있다. 당업자는 암의 치료를 위한 면역 체크포인트 조절제의 효과적이고 비독성적인 양을 통상적 실험에 의해 결정할 수 있을 것이다. 면역 체크포인트 조절제의 표준 투여량은 당업자에게 알려져 있으며, 예를 들어 면역 체크포인트 조절제의 제조사가 제공하는 제품 설명서로부터 알 수 있다. 면역 체크포인트 조절제의 표준 투여량의 예는 하기 표 A에 제공되어 있다. 다른 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 특정 종양장애의 치료를 위한 표준 치료에 따라 종양장애를 치료하는 데 사용되는 면역 체크포인트 조절제의 표준 투여량과 다른(예를 들어, 더 낮은) 투여량으로 투여된다.
Figure pct00034
특정 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제의 투여량은 특정 암에 대한 면역 체크포인트 조절제의 표준 투여량보다 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 또는 90% 더 낮다. 특정 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제의 투여량은 특정 종양장애에 대한 면역 체크포인트 조절제의 표준 투여량의 95%, 90%, 85%, 80%, 75%, 70%, 65%, 60%, 55%, 50%, 45%, 40%, 35%, 30%, 25%, 20%, 15%, 10%, 또는 5%다. 면역 체크포인트 조절제가 병용투여되는 하나의 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제 중 적어도 하나는 특정 종양장애에 대한 면역 체크포인트 조절제의 표준 투여량보다 낮은 용량으로 투여된다. 면역 체크포인트 조절제가 병용투여되는 하나의 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제 중 적어도 2개는 특정 종양장애에 대한 면역 체크포인트 조절제의 표준 투여량보다 낮은 용량으로 투여된다. 면역 체크포인트 조절제가 병용투여되는 하나의 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제 중 적어도 3개는 특정 종양장애에 대한 면역 체크포인트 조절제의 표준 투여량보다 낮은 용량으로 투여된다. 면역 체크포인트 조절제가 병용투여되는 하나의 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 모두 특정 종양장애에 대한 면역 체크포인트 조절제의 표준 투여량보다 낮은 용량으로 투여된다. 일부 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제는 면역 체크포인트 조절제의 표준 투여량보다 낮은 용량으로 투여되고, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 MDM2 억제제의 표준 투여량보다 낮은 용량으로 투여된다.
MDM2 억제제와 면역 체크포인트 분자 조절제의 병용투여
본원에 사용된 용어 "병용투여"는 면역 체크포인트 조절제의 투여 전에, 투여와 동시에 또는 실질적으로 동시에, 투여 후에, 또는 투여와 간헐적으로 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)를 투여하는 것을 의미한다. 특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 면역 체크포인트 조절제의 투여 전에 투여된다. 특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 면역 체크포인트 조절제 투여 전 및 면역 체크포인트 조절제와 동시에 투여된다. 특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 면역 체크포인트 조절제 투여 전에 투여되지만 면역 체크포인트 조절제와 동시에 투여되지는 않는다(즉, 면역 체크포인트 조절제로 치료를 시작하기 전 또는 면역 체크포인트 조절제를 투여하기 전에 MDM2 억제제(예컨대, APG-115) 투여가 중단됨). 특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 면역 체크포인트 조절제와 동시에 투여된다. 특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 면역 체크포인트 조절제의 투여 후에 투여된다. 특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 면역 체크포인트 조절제의 투여와 동시에 그리고 투여 후에 투여된다. 특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 면역 체크포인트 조절제의 투여 후에 투여되지만 면역 체크포인트 조절제와 동시에 투여되지는 않는다(즉, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 투여를 시작하기 전에 면역 체크포인트 조절제의 투여가 중단됨).
MDM2 억제제(예컨대, APG-115) 및/또는 이의 제약 조성물과 면역 체크포인트 조절제는 상가적으로, 또는 더 바람직하게는 시너지적으로 작용할 수 있다. 일 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)와 면역 체크포인트 조절제는 시너지적으로 작용한다. 일부 구현예에서, 시너지 효과는 암의 치료에서 나타난다. 예를 들어, 일 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)와 면역 체크포인트 조절제의 병용은 면역 체크포인트 조절제에 의해 표적화된 암에 대한 면역 반응의 지속성을 개선(즉, 지속시간을 연장)시킨다. 다른 구현예에서, 시너지 효과는 면역 체크포인트 조절제와 관련된 독성의 조절에서 나타난다. 일 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)와 면역 체크포인트 조절제는 상가적으로 작용한다.
본 발명의 병용요법은 암의 치료에 이용될 수 있다. 일부 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)와 면역 체크포인트 조절제의 병용요법은 종양세포 성장을 억제한다. 따라서, 본 발명은 또한, 대상체의 종양세포 성장을 억제하는 방법으로서, 종양세포 성장이 억제되도록 대상체에게 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)와 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절제를 투여하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다. 특정 구현예에서, 암 치료는 대조군, 예컨대 집단 대조군과 비교하여 생존 연장 또는 종양 진행 시간 연장을 포함한다. 특정 구현예에서, 대상체는 인간 대상체이다. 바람직한 구현예에서, 대상체는 제1 용량의 MDM2 억제제(예컨대, APG-115) 또는 제1 용량의 면역 체크포인트 조절제의 투여 전에 종양이 있는 것으로 확인된다. 특정 구현예에서, 대상체는 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 첫 투여시 또는 면역 체크포인트 조절제의 첫 투여시 종양을 가지고 있다.
면역 체크포인트 조절제는 원하는 치료 효과(예컨대, 치료 또는 시너지 효과)가 달성되도록 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 투여와 관련하여 일정 시점에 투여된다. 예를 들어, 특정 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제 단독의 효능에 비해 면역 체크포인트 조절제의 효능을 효과적으로 강화시키기 위해, 또는 효과의 지속성을 개선하기 위해, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 투여 후 충분한 시간이 바람직할 수 있다. 특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 투여는 제1 용량의 면역 체크포인트 조절제의 투여 적어도 2시간, 적어도 4시간, 적어도 6시간, 적어도 8시간, 적어도 12시간, 적어도 18시간, 적어도 24시간, 적어도 36시간, 적어도 48시간, 적어도 3일, 적어도 4일, 적어도 5일, 적어도 6일, 적어도 1주, 적어도 2주, 적어도 3주, 적어도 4주, 적어도 5주, 적어도 6주, 적어도 7주, 또는 적어도 8주 전에 시작된다. 본 발명의 특정 구현예에서, 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절제의 투여는 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 투여가 시작되고 나서 적어도 24시간 후에, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 투여가 시작되고 나서 1주 이상 후에, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 투여가 시작되고 나서 2주 이상 후에, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 투여가 시작되고 나서 3주 이상 후에, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 투여가 시작되고 나서 4주 이상 후에, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 투여가 시작되고 나서 5주 이상 후에, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 투여가 시작되고 나서 6주 이상 후에, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 투여가 시작되고 나서 7주 이상 후에, 또는 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 투여가 시작되고 나서 8주 이상 후에 투여될 수 있다. 일부 구현예에서, 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절제의 투여는 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 투여가 시작되고 나서 적어도 24시간 후에 시작된다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절제의 투여는 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 투여가 시작되고 나서 24시간 내지 4주 후에 시작된다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절제의 투여는 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 투여가 시작되고 나서 24시간 내지 1주, 1주 내지 2주, 1주 내지 3주, 또는 2주 내지 4주 후에 시작된다.
일 구현예에서, 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절제의 투여는 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 투여가 시작되고 나서 약 1주 후에 시작된다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절제의 투여는 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 투여가 시작되고 나서 약 2주 후에 시작된다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절제의 투여는 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 투여가 시작되고 나서 약 3주 후에 시작된다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절제의 투여는 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 투여가 시작되고 나서 약 4주 후에 시작된다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절제의 투여는 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 투여가 시작되고 나서 약 5주 후에 시작된다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절제의 투여는 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 투여가 시작되고 나서 약 6주 후에 시작된다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절제의 투여는 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 투여가 시작되고 나서 약 7주 후에 시작된다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 면역 체크포인트 조절제의 투여는 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 투여가 시작되고 나서 약 8주 후에 시작된다.
특정 구현예에서, 로딩 용량의 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)가 면역 체크포인트 조절제의 투여 전에 투여된다. 특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 면역 체크포인트 조절제의 투여 전에 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 정상 상태 수준을 달성하기 위해 투여된다. 병용요법이 정맥내 투여 MDM2 억제제(예컨대, APG-115) 제형을 포함하는 경우, 대상체에게 암을 치료 또는 예방하는 용량으로 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)가 정맥내 투여된다. 일 구현예에서, 면역 체크포인트 조절제에 대한 반응이, 예를 들어 면역 체크포인트 조절제 단독에 의한 치료에 비해, 개선되도록 대상체에게 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)가 정맥내 투여된다.
일 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 투여는 면역 체크포인트 조절제로 치료를 시작하기 전에 중단된다(즉, 면역 체크포인트 조절제에 의한 치료는 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)에 의한 치료를 배제함). 일 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 투여는 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)와 면역 체크포인트 조절제가, 예를 들어 적어도 1회의 주기 동안, 동시에 투여되도록 면역 체크포인트 조절제로 치료를 시작한 후 계속되거나 재개된다.
일부 구현예에서, 암을 치료하기 위한 병용요법은 적어도 1회의 21일 치료 주기를 포함하며, MDM2 억제제 또는 이의 제약상 허용되는 염은 21일 치료 주기의 첫 연속 2주 동안 이를 필요로 하는 환자에게 격일로 경구 투여되고 치료 주기의 셋째 주 동안은 투여되지 않는다.
일부 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115), 또는 이의 제약상 허용되는 염은 21일 치료 주기의 1, 3, 5, 7, 9, 11, 및 13일차에 환자에게 경구 투여된다.
일부 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115), 또는 이의 제약상 허용되는 염은 21일 치료 주기의 14~21일차에 투여되지 않는다.
일부 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115), 또는 이의 제약상 허용되는 염은 21일 치료 주기의 1, 3, 5, 7, 9, 11, 및 13일차에 약 50 mg 내지 약 200 mg의 양으로 환자에게 경구 투여된다.
일부 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115), 또는 이의 제약상 허용되는 염은 21일 치료 주기의 1, 3, 5, 7, 9, 11, 및 13일차에 약 50 mg의 양으로 환자에게 경구 투여된다.
일부 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115), 또는 이의 제약상 허용되는 염은 21일 치료 주기의 1, 3, 5, 7, 9, 11, 및 13일차에 약 100 mg의 양으로 환자에게 경구 투여된다.
일부 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115), 또는 이의 제약상 허용되는 염은 21일 치료 주기의 1, 3, 5, 7, 9, 11, 및 13일차에 약 150 mg의 양으로 환자에게 경구 투여된다.
일부 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115), 또는 이의 제약상 허용되는 염은 21일 치료 주기의 1, 3, 5, 7, 9, 11, 및 13일차에 약 200 mg의 양으로 환자에게 경구 투여된다.
일부 구현예에서, PD-1 조절제는 21일 치료 주기의 1일차에 200 mg의 양으로 정맥내 주입을 통해 투여된다.
일부 구현예에서, 병용요법은 적어도 1회, 2회, 3회, 4회, 5회, 6회, 7회, 8회, 9회, 10회, 11회, 또는 12회의 21일 치료 주기를 포함한다. 일부 구현예에서, 병용요법은 질환 진행 또는 허용할 수 없는 독성이 나타날 때까지 계속된다.
특정 구현예에서, 적어도 1회, 2회, 3회, 4회, 또는 5회 주기의 병용요법이 대상체에게 투여된다. 대상체는 각 주기의 마지막에 반응 기준에 대해 평가된다. 대상체는 또한, 치료 요법이 충분히 내약성이 있음을 보장하기 위해 이상사례(예를 들어, 응고, 빈혈, 간 및 신장 기능 등)에 대해 각 주기에 걸쳐 모니터링된다.
하나 초과의 면역 체크포인트 조절제, 예를 들어 2개, 3개, 4개, 5개 이상의 면역 체크포인트 조절제가 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)와 병용투여될 수 있음에 유의해야 한다. 예를 들어, 일 구현예에서, 2개의 면역 체크포인트 조절제가 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)와 병용투여될 수 있다. 일 구현예에서,3개의 면역 체크포인트 조절제가 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)와 병용투여될 수 있다. 일 구현예에서,4개의 면역 체크포인트 조절제가 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)와 병용투여될 수 있다. 일 구현예에서,5개의 면역 체크포인트 조절제가 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)와 병용투여될 수 있다. 일부 구현예에서, 2개 이상의 면역 체크포인트 조절제는 동일한 면역 체크포인트 분자를 표적화한다. 일부 구현예에서, 2개 이상의 면역 체크포인트 조절제는 각각 다른 면역 체크포인트 분자를 표적화한다. 일반적으로, 암을 치료법적으로 치료하기 위해, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)와 본원에 기재된 면역 체크포인트 조절제를 포함하는 병용요법, 또는 단일요법으로서의 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)가 사용될 수 있다. 다양한 구현예에서, 종양장애는 백혈병, 림프종, 흑색종, 암종, 및 육종으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 특정 구현예에서, 병용요법은 고형 종양을 치료하는 데 사용된다. 본 발명의 다양한 구현예에서, 병용요법은 부신피질암, 진행암, 항문암, 재생불량빈혈, 담관암, 방광암, 골암, 골전이, 성인 뇌/CNS 종양, 소아 뇌/CNS 종양, 유방암, 남성 유방암, 소아암, 원발부위 불명암, 캐슬맨병, 자궁경부암, 대장/직장 암, 자궁내막암, 식도암, 유잉 종양, 안암, 담낭암, 위장관 카르시노이드 종양, 위장관 기질 종양(GIST), 임신 영양막 질환, 두경부암, 호지킨병, 카포시 육종, 신장암, 후두 및 하인두 암, 성인 급성 림프구성 백혈병(ALL), 급성 골수성 백혈병(AML), 만성 림프구성 백혈병(CLL), 만성 골수성 백혈병(CML), 만성 골수단핵구성 백혈병(CMML), 소아 백혈병, 간암, 비소세포 폐암, 소세포 폐암, 폐 카르시노이드 종양, 피부 림프종, 악성 중피종, 다발성 골수종, 골수이형성증후군, 비강 및 부비동 암, 비인두암, 신경모세포종, 비호지킨 림프종, 소아 비호지킨 림프종, 구강 및 구강인두 암, 골육종, 난소암, 췌장암, 음경암, 뇌하수체 종양, 전립선암, 망막모세포종, 횡문근육종, 침샘암, 육종(성인 연조직암), 기저 및 편평세포 피부암, 피부암(흑색종), 소장암, 위암, 고환암, 흉선암, 갑상선암, 자궁 육종, 질암, 외음부암, 발덴스트롬 마크로글로불린혈증, 및 빌름스 종양으로 이루어진 군으로부터 선택되는 암의 치료 또는 예방에 사용된다. 일 구현예에서, 병용요법은 흑색종, 호지킨 림프종, 폐암, 신장암, 방광암, 두경부암, 메르켈세포 암종, 요로상피 암종, 미소부수체 불안정성이 높거나 불일치 복구 결함이 있는 고형 종양, 육종, 대장암, 전립선암, 융모막암종, 유방암, 망막모세포종, 위 암종, 급성 골수성 백혈병, 림프종, 다발성 골수종, 또는 백혈병으로 이루어진 군으로부터 선택되는 암을 치료하는 데 사용된다. 일 구현예에서, 병용요법 또는 단일요법은 간세포암을 치료하는 데 사용될 수 있다. 일 구현예에서, 병용요법 또는 단일요법은 대장암을 치료하는 데 사용될 수 있다. 일 구현예에서, 병용요법 또는 단일요법은 PD-L1 발현이 높은 종양(항PD-1/L1 요법에 적합) 및 종양 돌연변이 가중치(TMB)가 높은 종양을 치료하는 데 사용될 수 있다. 일 구현예에서, 병용요법 또는 단일요법은 항PD-1/L1 요법에 대해 현재 승인된 암의 그룹으로부터 선택되는 암을 치료하는 데 사용될 수 있다. 특정 구현예에서, 병용요법 또는 단일요법은 췌장암, 선낭 암종, 폐암, 위장관 기질 종양, 및 유방암으로부터 선택되는 암을 치료하는 데 사용될 수 있다. 특정 구현예에서, 암은 국소 진행성 또는 전이성 고형 종양 또는 림프종이다. 특정 구현예에서, 대상체는 치료 경험이 있고 질환 진행을 나타낸다. 본원에 사용된 "치료 경험이 있는"은 대상체가 항암 요법으로 치료받은 적이 있음을 의미한다. 질환 진행은 이전 치료에 대한 반응성 감소의 징후, 예를 들어 종양 크기의 증가, 종양세포 수의 증가, 또는 종양 성장을 특징으로 한다.
그러나, 본 발명의 병용요법 또는 단일요법을 이용한 치료는 상기 유형의 암으로 한정되지는 않는다. 병용요법으로 치료될 수 있는 암의 예는, 예를 들어 신경교종, 교모세포종, 호지킨병, 비호지킨 림프종, 다발성 골수종, 신경모세포종, 유방암, 난소암, 폐암, 횡문근육종, 원발성 혈소판증가증, 원발성 마크로글로불린혈증, 소세포 폐종양, 원발성 뇌종양, 위암, 대장암, 악성 췌장 인슐린종, 악성 카르시노이드, 방광암, 전암성 피부 병변, 피부암, 고환암, 림프종, 갑상선암, 신경모세포종, 식도암, 비뇨생식관암, 악성 고칼슘혈증, 자궁경부암, 자궁내막암, 부신피질암, 및 전립선암을 포함하나, 이에 한정되지는 않는다. 일 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 다양한 유형의 피부암(예컨대, 편평세포 암종 또는 기저세포 암종), 췌장암, 유방암, 전립선암, 간암, 또는 골암을 치료 또는 예방하기 위해 면역 체크포인트 조절제와 병용하여 사용될 수 있다. 일 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)를 포함하는 병용요법은, 편평세포 암종(SCCIS(인시튜) 및 보다 공격적인 편평세포 암종 포함), 기저세포 암종(표재성, 결절성, 및 침윤성 기저세포 암종), 흑색종, 또는 광선각화증을 포함하나 이에 한정되지 않는 피부 종양장애의 치료에 사용된다.
일부 구현예에서, 병용요법은 절제불가능 또는 전이성 흑색종을 앓고 있는 환자를 치료하기 위한 것이다. 일부 구현예에서, 병용요법은 PD-1 요법에 난치성 또는 재발성인 환자를 치료하기 위한 것이다. 일부 구현예에서, 병용요법은 절제불가능 또는 전이성 흑색종을 앓고 있고 PD-1 요법에 난치성 또는 재발성인 환자를 치료하기 위한 것이다. 일부 구현예에서, 병용요법은 항PD-1 요법에 내성이 있는 환자를 치료하기 위한 것이다.
일부 구현예에서, 본 발명은 암 치료를 위해 항PD-1/PD-L1 요법을 받는 환자에서 과다 진행을 치료하는 방법으로서, 이러한 치료를 필요로 하는 환자에게 치료 유효량의 MDM2 억제제(MDM2 억제제(예컨대, APG-115), 또는 이의 제약상 허용되는 염)를 투여하는 단계를 포함하는 방법을 제공하며, 여기서 암은 흑색종, 절제불가능 또는 전이성 흑색종, 진행성 고형 종양(폐암, 신세포암, 대장암, 두경부암, 유방암, 뇌암, 자궁경부암, 자궁내막암, 및 기타 암 포함)이다.
특정 구현예에서, 암세포에 미칠 수 있는 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)를 포함하는 병용요법의 효과는 암세포에 의해 나타나는 대사 및 산화 플럭스의 다양한 상태에 따라 부분적으로 달라질 수 있다. MDM2 억제제(예컨대, APG-115)는 당분해 및 증가된 젖산 효용성에 대한 종양형성세포 의존성의 전환을 중단 및/또는 방해하는 데 이용될 수 있다. 암 상태와 관련하여, 종양 미세환경의 당분해 및 산화 플럭스의 방해는 암세포의 발달을 감소시키는 방식으로 자가사멸 및 혈관형성에 영향을 미칠 수 있다. 일부 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)와 당분해 및 산화 플럭스 인자의 상호작용은, 암에서 회복성 자가사멸 효과를 발휘하는 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)의 능력을 향상시킬 수 있다.
일 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)와 본원에 기재된 면역 체크포인트 조절제의 투여는 종양 크기, 무게, 또는 부피의 감소, 진행 시간의 증가, 종양 성장의 억제, 및/또는 종양장애 대상체의 생존 시간 연장 중 하나 이상을 가져올 수 있다. 특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)와 면역 체크포인트 조절제의 투여는 MDM2 억제제(예컨대, APG-115) 또는 면역 체크포인트 조절제를 단독투여한 상응하는 대조 대상체에 비해 적어도 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 100%, 200%, 300%, 400%, 또는 500%만큼 종양 크기, 무게, 또는 부피를 감소시키고, 진행 시간을 증가시키고, 종양 성장을 억제하고/하거나, 대상체의 생존 시간을 연장시킨다. 특정 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)와 면역 체크포인트 조절제의 투여는 MDM2 억제제(예컨대, APG-115) 또는 면역 체크포인트 조절제를 단독투여한 종양장애를 앓고 있는 상응하는 대조 대상체 집단에 비해 적어도 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 100%, 200%, 300%, 400%, 또는 500%만큼 종양 크기, 무게, 또는 부피를 감소시키고, 진행 시간을 증가시키고, 종양 성장을 억제하고/하거나, 종양장애를 앓고 있는 대상체 집단의 생존 시간을 연장시킨다. 다른 구현예에서, MDM2 억제제(예컨대, APG-115)와 면역 체크포인트 조절제의 투여는 치료 전에 진행성 종양장애가 있던 대상체에서 종양장애를 안정화시킨다.
본 발명의 바람직한 구현예를 이하 자세히 언급한다. 본 발명이 바람직한 구현예와 관련하여 설명되지만, 본 발명을 그러한 바람직한 구현예로 한정하고자 하는 것이 아님은 이해될 것이다. 반대로, 이는 첨부된 청구범위에 의해 정의되는 발명의 사상 및 범위 내에 포함될 수 있는 대안예, 변형예, 및 균등물을 포함하고자 하는 것이다.
실시예
본 발명의 많은 구현예를 설명하였지만, 본 발명의 화합물 및 방법을 이용하는 다른 구현예를 제공하기 위해 기본 실시예가 변경될 수 있음은 명백하다. 따라서, 본 발명의 범위는 예로서 표현된 특정 구현예에 의해 정의되기 보다는 첨부된 청구범위에 의해 정의되어야 함이 이해될 것이다.
본 출원 전반에 걸쳐 인용된 모든 참고 문헌(비특허 문헌, 등록 특허, 공개 특허 출원, 및 동시계류 중인 특허 출원 포함)의 내용은 전체가 본원에 참조로 명백히 포함된다. 달리 정의되지 않는 한, 본원에 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어는 당업자에게 일반적으로 알려진 의미에 따른다.
Figure pct00035
화학 시약 및 재료
HPMC는 Sigma-Aldrich(미주리주 세인트루이스)에서 구입하였다. 인산염 완충 용액(PBS)은 Genom Biotech(중국 항저우)에서 구입하였다. HP-β-CD는 Seebio Biotech(중국 상하이)에서 구입하였다. MMA는 Sigma-Aldrich(미주리주 세인트루이스)에서 구입하였다. TIL 분석 연구에 사용된 시약을 제조사, 카탈로그 번호, 및/또는 유통업체를 포함하여 표 1에 요약하였다.
Figure pct00036
세포 배양
MH-22A 쥣과 간암 세포 및 MC38 대장암 세포를 10%의 소 태아 혈청, 100 U/mL의 페니실린, 100 μg/mL의 스트렙토마이신, 및 L-글루타민(2 mM)으로 보충된 DMEM 배지 또는 RPMI1640 배지 내 부유 배양물로서 37℃의 공기 중 5% CO2의 분위기에서 시험관 내에 유지하였다. 종양세포를 주 2회 규칙적으로 계대 배양하였다. 지수 성장기에서 성장하는 세포를 회수하여 종양 접종을 위해 계수하였다.
제형
시험 검체의 제형을 표 2에 상세히 기재된 바와 같이 제조하였다. 제형은 적절한 보관 조건하에 보관되어 3일 이내에 사용되었다.
Figure pct00037
튜브를 부드럽게 위아래로 돌려 사용 직전에 제형이 균질하도록 하였다.
관찰 및 데이터 수집
종양세포 접종 후, 동물의 이환율과 사망률을 매일 확인하였다. 일상적인 모니터링시, 동물의 정상적인 행동에 대한 종양 성장 및 처치의 영향, 예컨대 운동성, 음식과 물 소비의 시각적 추정, 체중 증가/감소(체중은 매주 2회 측정), 눈/털의 소광, 및 기타 비정상적인 영향에 대해 확인하였다. 각각의 서브세트 내 동물의 수에 기초하여 사망 및 관찰된 임상 징후를 기록하였다. 투여의 전체 절차뿐만 아니라 종양 및 체중 측정은 층류 캐비닛에서 수행되었다.
종양 부피는 캘리퍼를 이용해 2차원으로 주 2회 측정되었고, 하기 식을 이용해 mm3 단위로 표시되었다.
종양 부피(mm3) = 0.5 a × b 2
식에서 a 및 b는 각각 종양의 긴 지름 및 짧은 지름이다.
상대적 종양 부피(RTV)는 하기 식을 이용해 계산되었다.
RTV=Vt /V1
식에서 V1 및 Vt는 치료 첫째 날(1일차)의 평균 종양 부피 및 특정 시점(t일차)의 평균 종양 부피이다.
시너지 점수는 하기 식을 이용해 계산되었다(Clarke R, Breast Cancer Research & Treatment, 1997, 46(2-3):255-278).
시너지 점수 = ((A/C) × (B/C)) / (AB/C);
A: 처치 A에 대한 반응; B: 처치 B에 대한 반응; C: 비히클 대조군에 대한 반응; AB: 처치 A와 B의 병용.
표준 NCI 절차를 사용하여 종양 파라미터를 계산하였다. 종양 성장 억제율(T/C %)은 처치된 종양의 평균 RTV(T)를 대조군 종양의 평균 RTV(C)로 나눈 값 × 100%로 계산되었다. 백분율 T/C 값은 항종양 유효성의 지표로서, NCI에서는 42% 미만의 T/C 값을 유의한 항종양 활성으로 간주한다. 10% 미만의 T/C 값은 매우 유의한 항종양 활성을 나타내는 것으로 간주되며, 독성 및 기타 특정 요건이 충족된다는 전제 하에 NCI에서 임상시험의 타당성 입증을 위해 사용하는 수준이다(DN-2 수준 활성이라고 함). 20% 초과의 체중 감소 최저점(그룹의 평균), 또는 20% 초과의 약물 사망은 과도한 독성 용량을 나타내는 것을 간주된다.
유세포 분석
죽은 세포를 배제하기 위해 live/dead 고정 염료(Invitrogen)를 사용하였다. FOXP3 염색을 위해 eBioscience의 FOXP3 키트를 사용하였다. 세포를 세척하고, MACS 완충액 또는 브릴리언트 염색 완충액에서 지시된 항체로 얼음 위에서 30분 동안 염색하였다. 이어서, 샘플을 Life Technology Attune NxT 유세포 분석기로 분석하였다.
PK 분석
정량적 LC/MS/MS 분석은 API 전기분무 이온화(ESI) 소스가 장착된 API 5500 질량 분석기(AB Sciex, 캐나다 온타리오)에 연결된 Exion HPLC 시스템(AB Sciex, 캐나다 온타리오)을 사용하여 수행되었다. HPLC 분리를 위해 Phenomenex Titank 페닐-헥실 컬럼(50 mm × 2.1 mm, 5 μm 입자 크기)을 사용하였다. 주입량은 2 μl였고, 유량은 0.5 ml/분으로 일정하게 유지하였다. 크로마토그래피는 이동상 A, 아세토니트릴:물:포름산 (5:95:0.1, 부피비) 및 B, 아세토니트릴:물:포름산 (95:5:0.1, 부피비)으로 수행되었다. 질량 분석기는 APG-115의 경우 ESI 양이온 모드로 작동된 한편, 에파카도스타트의 경우 ESI 음이온 모드로 작동되었다. 이온 검출은 양성 모드에서 APG-115와 IS(톨부타미드)에 대해 642.0→246.1 및 271.1→172.0, 음성 모드에서 에파카도스타트와 IS(톨부타미드)에 대해 435.9→338.8 및 269.2→169.2의 m/z 전이를 각각 모니터링하는 다중 반응 모니터링(MRM) 모드에서 수행되었다. 화합물 파라미터, 디클러스터링 전위(DP), 충돌 에너지(CE)는 각각 양성 모드에서 APG-115와 IS에 대해 51, 61 V, 80, 18 V, 음성 모드에서 에파카도스타트와 IS에 대해 -61, -15 V 및 -90, -23.5 V였다.
데이터 분석
종양 성장 곡선은 관찰 시간을 X축, 상응하는 종양 부피(기하 평균)를 Y축으로 하여 플롯팅하였다. 그룹 간 종양 부피를 비교하기 위해 일원분산분석(one-way ANOVA)을 수행하였고, 유의한 F-통계량(오차분산에 대한 처리분산의 비)가 얻어졌을 때, Games-Howell 검정으로 그룹 간 비교를 수행하였다. 모든 데이터는 SPSS(Statistical Product and Service Solutions) 버전 18.0(IBM, 미국 뉴욕주 아몽크)으로 분석하였다. 그래픽 표현을 위해 Prism 버전 6(GraphPad Software Inc., 미국 샌디에고)을 사용하였다. TIL 분석을 위해 Life technology Attune Nxt 유세포 분석기를 사용하였다. PK의 데이터 수집 및 정량화는 Analyst Software 버전 1.6.3(AB Sciex, 캐나다 온타리오)을 사용하여 수행되었다.
준수
이 연구에서 동물의 관리 및 사용과 관련된 프로토콜 및 모든 수정조항 또는 절차는 수행 전에 GenePharma의 기관 동물 관리 및 사용 위원회(IACUC)에 의해 검토되고 승인되었다. 연구 기간 동안, 동물의 관리 및 사용은 실험 동물 관리 평가 및 인증 협회(AAALAC)의 규정에 따라 수행되었다.
실시예 1: 시험관내 APG -115의 면역조절 효과
1.1 APG -115에 의한 CD4 + T세포의 활성화
미국 특허 번호 9745314 및 문헌[Aguilar et al. J. Med . Chem . 2017(60) 2819-2839]에 기재된 하나 이상의 절차를 이용해 MDM2 억제제 APG-115를 제조하였다.
이펙터 T세포는 항종양 면역에 중요한 역할을 한다. APG-115가 T세포 기능에 영향을 미치는지 조사하기 위해, 마우스 비장으로부터 단리된 CD4+ T세포를 APG-115 또는 용매 대조군 DMSO에 노출시켰다. 250 nM의 APG-115에 의한 처치에 있어서, 카스파제 3 절단은 T세포에서 검출되지 않았으며, 이는 APG-115가 T세포 자가사멸을 유도하지 않았음을 나타낸다. 특히, 250 nM의 APG-115에 의한 처치는 CD25highCD62Llow 세포 집단을 급격히 증가시켰고, 자극된 CD4+ T세포의 세포 크기를 증가시켰으며, 이는 T세포 활성화를 암시한다(도 1).
구체적으로, 마그네틱 비드를 사용하여 마우스 비장으로부터 CD4+ T세포를 양성적으로 선택하고, APG-115(250 nM) 또는 DMSO의 존재하에 5 μg/ml의 플레이트-결합 항CD3 및 2 μg/ml의 항CD28로 24시간(1일차) 또는 48시간(2일차) 동안 자극하였다. 유세포 분석으로 CD25-발현 및 CD62L-발현 집단(상단 패널), 및 FSC(하단 패널)의 백분율을 구하였다.
1.2 자극된 마우스 T세포에서 APG -115에 의한 사이토카인 생성의 유도
자극된 마우스 비장세포에서의 사이토카인 생성에 미치는 APG-115의 영향을 조사하였다. 마우스로부터 새로 단리된 마우스 비장세포를 APG-115(250 nM) 또는 DMSO의 존재하에 5 μg/ml의 플레이트-결합 항CD3 및 2 μg/ml의 항CD28로 24시간 동안 자극하였다. 처치 후, 세포 배양물로부터 상청액을 수집한 다음, 10종의 사이토카인을 시험할 수 있는 MSD V-PLEX 키트로 사이토카인을 측정하였다. 추가의 사이토카인, 즉 IL-1β, IL-5, KC/GRO, IL-12p70의 발현 수준은 검출 한계 미만이었다.
250 nM의 APG-115에 의한 처치는 IFN-γ, IL-2, TNF-α, IL-10, 및 IL-4를 비롯한 자극된 마우스 T세포에서 염증성 사이토카인의 상향조절을 일으켰다(도 2). 결과는 T세포에 대한 APG-115의 일반적인 활성화 향상 효과를 나타낸다. 이러한 사이토카인은 성공적인 면역-매개 암 퇴치에 기여할 수 있다.
1.3 APG -115에 의한 종양세포에서의 PD-L1 발현의 상향조절
전사인자 p53은 PD-L1 발현의 조절에 관여하여(Cortez MA, 2015), 항PD-1/PD-L1 처치 효능의 지표 역할을 할 수 있다. T세포에 대한 영향 외에, APG-115가 MH-22A 종양세포에서의 PD-L1 발현에 어떻게 영향을 미치는지도 시험관 내에서 조사하였다.
MH-22A 세포를 지시된 용량의 APG-115로 72시간 동안 처치하였다. MDM2, p53, 총 STAT3(t-STAT3), 인산화 STAT3(p-STAT3), PD-L1, 및 β-액틴(로딩 대조군) 발현의 발현 수준을 웨스턴 블로팅으로 측정하였다. 형광 강도에 의해 반영된 PD-L1 발현 수준을 유세포 분석으로 측정하였다.
결과는 APG-115에 의한 처치 후, TP53 및 pSTAT3 단백질의 발현이 용량 의존적 방식으로 상향조절된 것으로 나타났다(도 3의 A 및 B). 또한, 유세포 분석 결과, APG-115에 의한 종양세포의 처치가 PD-L1의 표면 발현을 용량 의존적으로 증가시킨 것으로 나타났다. 데이터는 APG-115에 의한 PD-L1 발현 종양세포의 유도가 종양세포를 항PD-1 요법에 의한 처치에 더 취약하게 할 수 있음을 시사한다.
실시예 2: Trp53 야생형 MH -22A 동계 모델에서 APG -115에 의한 PD-1 차단제의 향상된 항종양 활성
2.1 MH -22A 모델에서의 생체내 효능 연구
종양 성장을 위해 각각의 마우스의 우측 옆구리 부위에 0.2 mL의 PBS 중의 MH-22A 종양세포(5 × 106)를 피하 접종하였다. 평균 종양 크기가 약 65 mm3에 도달했을 때 처치를 시작하였다. 표 3의 실험 설계에 나타낸 요법에 따라 시험 검체를 종양을 가진 마우스에 투여하였다. 투여 시작일을 1일차로 정의하였다.
Figure pct00038
16일차에 최종 투여하고 나서 4시간 후, 그룹-1, 그룹-2, 그룹-3, 및 그룹-5에서 그룹당 5마리의 마우스로부터 혈액 및 종양 샘플을 수집하였다. 29일차에 최종 투여하고 나서 4시간 후, 그룹-4, 그룹-6, 그룹-7, 및 그룹-8에서 그룹당 5마리의 마우스로부터 혈액 샘플을 수집하였다. 약 100 μl의 혈액을 EDTA-2K 튜브에 수집하고, PK 분석을 위해 50 μl의 혈장을 수집하였다. 모든 샘플은 분석 전까지 -80℃에서 보관되었다.
이 연구에서, 에파카도스타트(IDO1 억제제)는 전임상 연구에서 강력한 면역 조절제로 입증되었기 때문에 비교를 위해 포함되었지만, 그 작용 메커니즘은 APG-115와 완전히 다르다.
도 4 및 표 4에 나타낸 바와 같이, 단일제제로서의 에파카도스타트 또는 APG-115에 의한 처치는 항종양 활성을 나타내지 않았다. 10 mg/kg의 항PD-1 단독에 의한 처치는 15일차에 T/C 값이 13%(p<0.05, 비히클 대비)로, 유의한 항종양 활성을 나타냈다. 항PD-1과 10 mg/kg 또는 50 mg/kg의 APG-115에 의한 병용처치는 더 큰 항종양 활성을 나타내어, 15일차에 각각 5%(P<0.01, 비히클 대비; P<0.001, APG-115 대비) 및 12%(P<0.05, 비히클 대비; P<0.01, APG-115 대비)의 T/C 값을 나타냈다. 항PD-1과 100 mg/kg의 에파카도스타트에 의한 병용처치도 T/C 값이 8%(p<0.01, 비히클 대비)로, 유의한 항종양 활성을 나타냈다.
과도한 크기의 종양으로 인해 15일차에 비히클, APG-115 10 mg/kg과 50 mg/kg 및 에파카도스타트 단일제제 그룹의 마우스를 안락사시켰다. 29일차에, 항PD-1 그룹에서 과도한 크기의 종양을 가진 한 마리 동물도 종료 처리되어, 이 그룹의 평균 종양 부피를 급격히 감소시켰다.
도 4에서, 종양 성장 곡선은 다양한 시점(n=10)의 종양 부피의 평균 ± SEM으로 나타내어져 있다. 10 mg/kg의 항PD-1 항체를 3주(wk) 동안 1주일에 2회(biw) 복강내(i.p.) 투여하였다. APG-115를 14일 또는 21일 동안 매일(qd) 기준으로 경구(p.o.) 투여하였다. 평균 종양 부피가 인도적 종점에 도달했기 때문에 15일차에 비히클, 에파카도스타트, 및 2개의 APG-115 처치군의 마우스를 안락사시켰다. 항PD-1 단일제제에 의한 처치에 반응하지 않고 과도한 크기의 종양을 가진 한 마리 동물이 29일차에 종료 처리되어, 평균 종양 부피를 급격히 감소시켰다.
항PD-1 단독투여군 및 병용군에서의 개별 동물의 종양 성장 곡선을 도 5에 도시하였다. 앞서 설명한 실험과 일치하여, 항PD-1 단일제제 처치군에서 10개 종양 중 1개는 처치에 반응하지 않았고 진행성 질환으로 나타났다(화살표로 표시). 그러나, 병용처치군에서, APG-115 또는 에파카도스타트는 처치된 모든 동물에서 종양 성장 억제에 의해 입증되는 바와 같이 내성 종양을 감작시킬 수 있었다.
표 4에 나타낸 바와 같이, 15일차에, 항PD-1 단일군에서 10마리 동물 중 1마리(반응률, 10%)가 PR을 나타낸 반면, 10 mg/kg의 APG-115와의 병용에서 1 CR 및 5 PR(60%), 50 mg/kg의 APG-115와의 병용에서 1 CR 및 1 PR(20%), 에파카도스타트와의 병용에서 3 PR(30%)이 달성되었다. 22일차에, 항PD-1 단일군에서 5 CR 및 3 PR(80%), 10 mg/kg의 APG-115와의 병용에서 7 CR 및 2 PR(90%), 50 mg/kg의 APG-115와의 병용에서 2 CR 및 5 PR(70%), 에파카도스타트와의 병용에서 5 CR 및 1 PR(60%)이 관찰되었다. 종점(39일차)에서, 항PD-1 단일군에서 및 8 CR(80%), 10 mg/kg의 APG-115와의 병용에서 및 9 CR(90%), 50 mg/kg의 APG-115와의 병용에서 8 CR(80%), 에파카도스타트와의 병용에서 7 CR 및 2 PR(90%)이 관찰되었다. 모든 처치에 있어서 체중 감소는 관찰되지 않았다(도 6).
종합하면, 항PD-1 단일제제 및 에파카도스타트와의 병용과 비교하여, APG-115와의 병용은 CR의 조기 시작 및 더 많은 CR 반응군을 달성하였다. 또한, 에파카도스타트와 마찬가지로, APG-115는 내성 종양을 감작시킬 수 있었다.
Figure pct00039
2.2 MH -22A 모델에서의 재자극유발 연구
처치된 동물의 면역 기억 발달을 추가로 확인하기 위해, 최종 투여 3주 후, 대조군으로서 5마리의 나이브 마우스와 함께, 항PD-1, 항PD-1 + 10 mg/kg 또는 50 mg/kg의 APG-115, 항PD-1 + 에파카도스타트 처치의 각 그룹으로부터(표 5) 무작위로 선택된 5마리의 치유된 마우스(즉, CR)에게 MH-22A 세포를 피하 접종하여 재자극을 유발시켰다. 종양 성장을 위해 재자극유발 연구의 마우스의 좌측 상부 옆구리에 0.2 mL의 PBS 중의 MH-22A 종양세포(5 × 106/마우스)를 피하로 재접종하였다. 세포 재접종 후 어떤 처치도 하지 않았다.
Figure pct00040
도 7에 도시된 바와 같이, 나이브 마우스에서 동계 종양의 재성장은 빠른 성장 속도를 나타낸 반면, 치유된 마우스는 세포 접종 후 만져지는 종양이 발생했고 이 작은 종양은 빠르게 완전 퇴행했다. 11일차에, 종양은 측정되지 않는 수준이 되었다. 이러한 데이터는 항PD-1, 또는 APG-115 또는 에파카도스타트와의 병용에 의해 처치된 CR 반응군이 재이식 종양세포를 퇴치할 수 있는 항종양 면역성을 발달시켰음을 확인시켜 준다. 모든 처치에 있어서 체중 감소는 관찰되지 않았다(도 8).
2.3 MH -22A 모델에서의 TIL 분석
종양 성장을 위해 각각의 마우스의 우측 옆구리 부위에 0.2 mL의 PBS 중의 MH-22A 종양세포(5 × 106)를 피하 접종하였다. 평균 종양 크기가 60 mm3에 도달했을 때 처치를 시작하였다. 표 6의 실험 설계에 나타낸 요법에 따라 시험 검체를 종양을 가진 마우스에 투여하였다. 투여 시작일을 1일차로 정의하였다.
Figure pct00041
마우스를 7일차에 안락사시키고, 종양을 기계적으로 분리하여 콜라게나제 IV(Sigma), 히알루론산(Sigma), 및 DNase(Sigma)로 분해하였다. 단일세포 현탁액을 제조하고, 유세포 분석을 위해 지시된 마커에 대해 염색하였다. 마지막 투여 24시간 후에 종양 샘플을 수집하였다.
MH-22A 쥣과 간암 종양을 가진 마우스를 지시된 상이한 요법에 따라 다양한 제제로 처치하였다. 이소형 대조군 항체를 대조군에 포함시켰다.
도 10 및 표 7에 나타낸 바와 같이, 10 mg/kg의 APG-115와 5 mg/kg의 항PD-1에 의한 병용처치는 일관되게 시너지적 항종양 활성을 나타내어, 29%(p<0.01, 대조군 대비; 시너지 점수, 1.8)의 T/C 값을 나타냈다. 반면, 에파카도스타트에 의한 병용처치는 단기간의 처치 후 이러한 시너지 효과를 나타내지 못했다. 모든 처치에 있어서 체중 감소는 관찰되지 않았다(도 11).
Figure pct00042
유세포 분석에 의한 TIL 분석
종양 부피가 약 300~500 mm3에 도달한 7일차에, 동계 종양을 수집하고 TIL 분석을 위해 처리하였다. p53wt MH-22A 동계 종양에서, 대조군과 비교하여, 항PD-1 단독에 의한 처치는 CD45+ 세포, CD3+ T세포, 및 세포독성 CD8+ T세포의 빈도를 단지 약간 증가시킨 반면(P>0.05, 도 12의 A), 병용요법은 이들 세포의 침윤을 증가시키는 더 유의한 효과를 나타냈다(p<0.01). 대조군에 비해 약 1.5 내지 2배 증가했다. M1 대식세포의 빈도는 대조군과 비교하여 항PD-1 항체 또는 병용요법에 의해 유의하게 증가했지만(P<0.01), 두 처치 간에 유의한 차이는 없었다(P>0.05). 가장 놀랍게도, M2 대식세포의 빈도는 대조군(P<0.01) 및 항PD-1 단일제제 그룹(P<0.05) 모두와 비교하여 병용요법에 의해 감소했다.
p53mut MC38 종양에서, 대조군과 비교하여, 항PD-1 단독에 의한 처치는 CD3+ T세포, 세포독성 CD8+ T세포, 및 M1 대식세포의 빈도를 대조군에 비해 약간 증가시킨 반면(P>0.05), CD8+ T세포를 제외하고(P>0.05), CD45+ 세포(P<0.001), CD3+ T세포(P<0.01), 및 M1 대식세포(P<0.01)의 빈도는 병용요법에 의해 유의하게 증가했다(도 12의 B). 중요하게도, CD45+ 세포 및 M1 대식세포의 빈도는 항PD-1 단일제제와 비교하여 병용요법에 의해 실질적으로 증가했다(P<0.05). 반면, M2 대식세포의 빈도는 대조군(P<0.001) 및 항PD-1 단일제제 그룹(P<0.05) 모두와 비교하여 병용요법에 의해 현저하게 감소했다. p53wt MH-22A 및 p53mut MC38 동계 종양 모두에서, CD4+ T세포, NK세포, MDSC, 및 조절 T(Treg) 세포의 표현형 분석은 APG-115, 항PD-1 항체, 또는 병용에 의한 처치 후 유의한 변화를 나타내지 않았다(도 13).
2.4 MH -22A 모델에서의 T세포 고갈 연구
TIL 분석 결과, APG-115와 항PD-1에 의한 병용처치 후 종양 침윤성 독성 CD8+ T세포의 통계적으로 유의한 증가가 있는 것으로 나타났다. 이러한 결과는 APG-115와 항PD-1의 병용처치로 강력한 이펙터 T세포 반응이 유도된다는 것을 나타낸다. 세포 작용 메커니즘을 추가로 설명하기 위해, 특정 CD4 또는 CD8 표적화 항체를 사용하여 면역세포의 고갈을 수행하였다.
종양 성장을 위해 각각의 마우스의 우측 옆구리 부위에 0.2 mL의 PBS 중의 MH-22A 종양세포(5 × 106)를 피하 접종하였다. 평균 종양 크기가 60 mm3에 도달했을 때 항CD4 및 항CD8의 처치를 시작하였다. 1일 후 APG-115와 항PD-1의 병용처치를 하였다. 표 8의 실험 설계에 나타낸 요법에 따라 시험 검체를 종양을 가진 마우스에 투여하였다. 투여 시작일을 1일차로 정의하였다.
Figure pct00043
이 연구에서, APG-115와 항PD-1에 의한 병용처치는 강력한 항종양 활성을 나타냈고, T/C 값은 11일차에 38%(p<0.05, 비히클 대조군 대비)였고, 평균 종양 부피는 15일차에 1347 mm3였다(도 14 및 표 9). 그러나, 병용요법에 의해 유도된 치료 효능은 CD8+ T세포의 고갈로 거의 완전히 사라졌다. 흥미롭게도, CD4+ T세포의 고갈은 APG-115와 항PD-1 항체의 병용처치에서 11일차에 39%의 T/C 값과 15일차에 709 mm3의 평균 TV를 나타냈다. 이러한 결과는 CD4+ T세포가 병용처치의 효능에 필요하지 않음을 시사한다. 모든 처치에 있어서 체중 변화는 관찰되지 않았다(도 15).
요약하면, 이러한 결과는 독성 CD8+ T세포가 APG-115와 항PD-1 항체에 의한 병용처치의 항종양 활성 향상에 필요하지만 CD4+ T세포는 필요하지 않음을 시사한다.
Figure pct00044
2.5 약동학(PK) 분석
실시예 2.1의 효능 연구에서, 전술한 바와 같이 15일차에 비히클, APG-115 10 mg/kg과 50 mg/kg, 및 에파카도스타트 단일제제 그룹의 마우스를 안락사시켰다. 이 연구에서 APG-115 및 에파카도스타트의 PK 특성을 평가하기 위해, 15일차의 마지막 투여 4시간 후 혈장 및 조직 샘플을 수집하였다.
도 9에 도시된 바와 같이, 15일 동안 10 mg/kg, 50 mg/kg의 APG-115를 매일 경구 투여한 후, APG-115의 혈장 농도는 각각 157.4 및 1228.0 ng/mL였다. 항PD-1과 병용한 10 mg/kg 또는 50 mg/kg의 APG-115의 혈장 농도는 각각 120.1 및 2152.4 ng/mL였다. 따라서, 단일제제로서 10 mg/kg 또는 50 mg/kg이 투여된 경우, 종양 조직의 APG-115 농도는 각각 152.2 및 1469.0 ng/g이었다. 또한, 단독으로 또는 항PD-1과 병용하여 100 mg/kg의 에파카도스타트를 매일 경구 투여한 후, 에파카도스타트의 혈장은 각각 5894.0 및 8619.0 ng/mL였다. 따라서, 단독으로 100 mg/kg이 투여된 경우, 종양의 에파카도스타트 농도는 9256.0 ng/g이었다. 전반적으로, 투여 후 APG-115 및 에파카도스타트의 적절한 전신 노출 및 조직 분포 결과가 확인되었다. 전신 노출 및 조직 분포의 증가는 대략 용량에 비례하였다. 또한, 항PD-1 항체와 APG-115 또는 에파카도스타트 간의 분명한 약동학적 상호작용은 없는 것으로 나타나, 약물-약물 상호작용의 우려를 불식시킨다.
실시예 3: Trp53 돌연변이 MC38 동계 모델에서 APG -115에 의한 PD-1 차단제의 향상된 항종양 활성
3.1 MC38 모델에서의 생체내 효능 연구
종양 성장을 위해 각각의 마우스의 우측 옆구리 부위에 0.1 mL의 PBS 중의 MC38 종양세포(5 × 105)를 피하 접종하였다. 평균 종양 크기가 약 63 mm3에 도달했을 때 처치를 시작하였다. 표 10의 실험 설계에 나타낸 요법에 따라 시험 검체를 종양을 가진 마우스에 투여하였다. 투여 시작일을 1일차로 정의하였다.
Figure pct00045
C57BL/6 백그라운드의 Trp53 돌연변이 MC38 동계 마우스 종양 모델에서 APG-115와 항PD-1 항체에 의한 병용처치의 효능을 추가로 평가하였다.
도 16 및 표 11에 나타낸 바와 같이, 단일제제로서의 APG-115에 의한 처치는 최소한의 항종양 활성을 나타냈다. 5 mg/kg의 항PD-1 단독에 의한 처치는 17일차에 T/C 값이 48%(p<0.01, 비히클 대비)로, 항종양 활성을 나타냈다. 항PD-1과 10 mg/kg 또는 50 mg/kg의 APG-115에 의한 병용처치는 더 큰 항종양 활성을 나타내어, 17일차에 각각 29%(P<0.001, 비히클 대비) 및 31%(P<0.001, 비히클 대비; P<0.01, APG-115 대비)의 T/C 값을 나타냈다. 모든 처치에 있어서 체중 감소는 관찰되지 않았다(도 17).
Figure pct00046
본원에 제공된 데이터는 PD-1 차단제와 병용한 MDM2 억제제(예컨대, APG-115)가 야생형 및 돌연변이 Trp53 종양 모두에서 항종양 활성을 향상시킴을 보여준다. MDM2 억제제는 종양 표적화 활성에서의 역할 외에도, 암에 대한 면역요법과 시너지 작용을 하는 면역 조절제로서 기능할 수 있다. 따라서, 이러한 결과는 p53 돌연변이 상태에 관계없이 인간 암의 시너지 효과에 대한 추가 임상연구를 뒷받침한다.
실시예 4: 병용 효과
APG-115와 항PD-1 요법에 의한 병용처치의 병용 효과를 시험관내 및 생체내 모두에서 광범위하게 조사하였다. 시험관내 연구 결과, APG-115 처치는 쥣과 CD4+ T세포 활성화를 향상시키고 동계 쥣과 종양 모델에서 염증성 사이토카인(IFN-γ, IL-2, TNF-α, IL-10, 및 IL-4 포함)의 상향조절을 유도하는 것으로 나타났다. 종양세포에서의 PD-L1의 증가된 표면 발현은 APG-115의 처치 후에도 검출되었다. 생체내 효능 연구 결과, MH22A 쥣과 간암 세포로부터 유래된 동계 모델에서, 항PD-1 요법이 종양을 가진 동물의 상당 부분에서 종양 성장을 실질적으로 억제하여 완전 퇴행(CR) 또는 부분 퇴행(PR)을 유도하는 한편, APG-115의 첨가는 CR 분율을 확장시키고, 치료 효과를 촉진시키고, 중요하게는 나머지 비반응군을 반응군으로 전환시킬 수 있는 것으로 나타났다(도 18).
순차적 재자극유발 연구 결과, 병용요법에 의해 처치된 CR 마우스가 MH22A 종양세포의 재이식을 효율적으로 거부한 것으로 확인되었고, 이는 면역 기억의 성공적인 발달을 암시한다.
또한, 종양 침윤성 림프구(TIL) 분석 결과, CD45+ 세포, CD3+ T세포, 및 CD8+ T세포가 항PD-1 단일요법에 비해 병용요법 후 유의하게 증가한 것으로 나타났다.
약동학(PK) 분석 결과, APG-115의 전신 노출 및 종양 노출은 용량에 비례하는 것으로 나타났다.
메커니즘적으로, 직접 T세포 활성화, T세포에서 사이토카인 방출, 및 종양세포에서 PD-L1 발현의 상향조절에서의 APG-115의 역할 이외에, 종양 침윤성 독성 CD8+ T세포의 실질적 증가 및 종양 미세환경에서 면역 억제 수지상 세포의 감소는 병용처치에서 항종양 활성의 향상에 중요한 역할을 할 수 있다.
종합하면, 전임상 데이터는 APG-115가 P53 야생형 및 돌연변이 P53 종양 모두에서 면역 조절제로 작용할 것이라는 것을 보여주었고, 이는 항PD-1/PD-L1 단일요법으로 급성진행되거나 그러한 요법에 재발성성 또는 난치성인 암 환자의 치료를 위한 새로운 접근법을 제공한다.
실시예 5 진행성 고형 종양 환자에서의 APG -115
중국(CTR20170975)에서 진행성 연조직 육종(STS), 선낭 암종(ACC), 또는 기타 고형 종양이 있는 환자가 APG-115로 치료받았다. 용량 증량에서, 환자들은 질환이 진행될 때까지 28일 주기의 처음 21일 동안 APG-115(100~200 mg)를 격일로 경구 투여받았다. 연구 목표는 8주마다 평가되는 안전성(1차 평가변수), 약동학(PK), 약력학(PD), 및 항종양 활성을 포함한다.
결과: 13명의 환자(STS 8명, ACC 2명, 골육종 2명)가 APG-115(100 mg, 150 mg, 200 mg)의 3개의 코호트에서 치료받았다. 이전 전신 항암 요법의 중위수는 2(범위 0~4)였다. 환자는 중위 2주기의 APG-115(범위 0~3)를 투여받았다. 200 mg의 제1주기 동안 1명의 환자에서 DLT가 관찰되었다(혈소판감소증 및 열성 호중구감소증 포함). 가장 흔한 AE(환자의 10% 이상에서 보고됨)는 빈혈, 혈소판감소증, 구토, 고콜레스테롤혈증, 및 백혈구감소증을 포함하였다. SAE는 7명의 환자(54%)에서 발생했다. 가장 흔한 3등급 또는 4등급 TRAE는 빈혈(38.5%), 혈소판감소증(38.5%), 백혈구감소증(30.8%), 및 호중구감소증이었다. 150 mg 용량에서 MDM2 증폭 및 TP53 wt를 가진 1명의 지방육종 환자에서 하나의 부분 반응이 관찰되었고, 5명의 환자는 최상의 전체 반응으로 SD를 가졌다. PK 분석은 100 내지 200 mg의 용량 수준에 걸쳐 단일 또는 다중 경구 투여 후 대략 용량에 비례하는 Cmax 및 AUC0-t의 증가를 나타냈고, 중위 Tmax는 4 내지 6시간의 범위였다. 예비 약력학 결과는 혈청 MIC-1 수준이 100 mg 이상의 APG-115 용량에서 시작하여 개별 기준선으로부터 상승했음을 보여주었고, 이는 가능성 있는 메커니즘적 PD 관계(p53 활성화)를 시사한다. 작용 메커니즘으로부터 예상되는 바와 같이, MIC-1 증가는 고형 종양 환자에서 시험된 용량 범위 내에서 노출 의존적이었다.
결론: APG-115는 MDM2 증폭 지방육종에 활성을 가졌다. AE 프로파일은 MDM2 표적화 약물 클래스의 다른 약물과 일치하였다.
실시예 6: 임상 연구
공개 라벨, 다기관 2-파트 Ib/II상 연구는 2개의 파트를 포함한다. 파트 1은 펨브롤리주맙의 라벨 용량과 병용한 APG-115의 용량 증량이다. 파트 2는 PD1/PD-L1 난치성/재발성 흑색종 환자에서의 펨브롤리주맙과 병용한 II상 권고 용량(RP2D)의 APG-115에 대한 II상 설계이다. 파트 1에서, 펨브롤리주맙과 병용한 APG-115의 용량 제한 독성(DLT)을 평가하여 APG-115의 최대 내약 용량(MTD)을 결정하기 위해 표준 "3 + 3" 설계가 사용된다. 4가지 용량 수준(50, 100, 150, 및 200 mg)의 APG-115가 시험된다. APG-115는 연속 2주 동안 격일로(QOD) 경구 투여(즉, 1, 3, 5, 7, 9, 11, 및 13일차에 투여)되고, 3주 단위 주기로 1주일은 투여를 중단한다. 펨브롤리주맙(PD-1 차단제)은 FDA 승인 라벨 용량에 따라, 즉 매 3주 단위 주기의 첫째 날에 200 mg의 정맥내 주입에 의해 투여된다. APG-115의 용량 및 스케줄은 독성에 따라 변경될 수 있다. 파트 2에서, 펨브롤리주맙과 병용한 APG-115의 RP2D로, 약 43명의 환자가 질환 진행, 허용할 수 없는 독성, 또는 다른 중단 기준이 충족될 때까지 병용치료를 받는다. 안전성, 내약성, 및 MTD 및 RP2D의 결정이 파트 1의 1차 목표이고, 전체 반응률이 파트 2의 1차 목표이다. PK, PD, 기타 항종양 평가 등은 2차 목표이다. 파트 2에서, Simon의 2-단계 설계(Simon R (1989). Controlled Clinical Trials 10: 1-10.)가 사용된다. 실제 반응률이 10% 이하라는 귀무가설이 단측 대립가설에 대해 검정된다.
포함 기준:
사전 동의서에 서명한 날에 18세 이상의 남성 또는 비임신, 비수유 여성 환자
파트 1:
1. 조직학적으로 확정된, 절제불가능 또는 전이성 흑색종 또는 진행성 고형 종양 환자로서 표준 치료 요법에 실패한 환자;
2. ECOG PS 0-2
3. CNS 전이 없음
파트 2:
1. 조직학적으로 확정된, 절제불가능 또는 전이성 흑색종, 및 PD1 항체 치료 후 난치성 또는 재발성, 다른 표준 치료 요법에 부적격;
2. ECOG PS 0-2;
3. irRECIST 및 RECIST 1.1에 따라 측정 가능한 질환, 이전에 조사된 부위, 또는 다른 국소 요법(예컨대, 병변내 주사)을 받은 부위에 위치한 병변은 측정 불가능한 것으로 간주
기대 수명 ≥ 3개월
이전 방사선요법 또는 화학요법제 또는 생물학적요법(PD1/PDL1 항체 포함)으로 인한 치료 관련 독성(탈모 제외)의 지속은 투약시 1등급 이하이어야 함.
자격에 대해 검사실에서 평가한 바에 따라 지속적인 보조 치료(수혈, 응고인자 및/또는 혈소판 주입, 적혈구/백혈구 성장인자 투여, 또는 알부민 주입 등) 없이 다음의 검사 값으로 표시된 적절한 골수 및 기관 기능
QTc 간격(평균 3) ≤ 450 ms(남성), 및 ≤470 ms(여성)
좌심실 구혈률(LVEF) ≥ 심초음파(ECHO) 또는 MUGA(multigated acquisition) 스캔에 의해 평가된 규정 정상의 하한(LLN)
배제 기준:
이전의 전신 MDM2-p53 억제제 치료. 첫 번째 투여 전 21일(니트로소우레아 또는 미토마이신 C의 경우 42일) 내에 화학요법을 받음.
연구 치료의 시작 전 마지막 6개월 내의 절제불가능 또는 전이성 흑색종에 대한 병변내 요법(예컨대, 탈리모진 라헤르파렙벡)에 의한 이전의 국소 치료.
첫 번째 투여 전 21일 내에 호르몬 및 생물학적(<1 반감기), 소분자 표적 요법 또는 기타 항암 요법을 받음. 연구 시작 후 14일 내의 방사선 또는 수술, 첫 번째 투여 전 28일 내의 흉부 방사선.
알려진 활성 중추신경계(CNS) 전이 및/또는 암종수막염이 있음. 또는 CNS의 종양 관련으로 인해 임상평가에 대해 신경학적 불안정성이 있음.
메게스트롤을 제외한 코르티코스테로이드 치료 요건, 스테로이드, 즉 국소 코르티코스테로이드, 반응성 기도질환에 대한 흡입형 코르티코스테로이드, 안과용 스테로이드, 관절내 스테로이드, 및 비강내 스테로이드의 국소 사용.
치료제의 첫 투여 전 28일 내의 임상시험용 제제 또는 장치에 의한 동시 치료.
실시예 7: 진행성 고형 종양 환자에서의 APG -115의 I상 연구
APG-115는 강력한 경구 활성 소분자 MDM2 단백질 억제제이다. MDM2 단백질에 결합하는 APG-115는 야생형 p53을 보유하는 종양세포에서 자가사멸의 유도를 통해 p53 종양 억제 기능을 회복시킨다. 또한, APG-115가 PD-1 차단제와 병용된 후 동계 종양 모델에서 향상된 항종양 활성이 입증되었다.
이러한 I상 연구(APG-115-US-001)는 미국(NCT02935907)에서 진행성 고형 종양 환자에 경구 투여된 APG-115의 안전성, 독성, 약동학(PK), 약력학(PD), 및 항종양 활성을 평가하기 위해 설계되었다.
APG-115의 PK 연구에 있어서, K2EDTA 인간 혈장 중의 APG-115는 D5-APG-115를 내부 표준(IS)으로 사용하는 LC/MS/MS 방법을 이용해 측정되었다. APG-115 및 IS는 인간 혈장으로부터 단백질 침전 추출을 이용해 추출되었다. 역상 HPLC 분리는 XBridge, C18(50 x 2.1 mm, 3.5 미크론)로 달성되었다. MS/MS 검출은 TIS 양성 모드에서 APG-115의 경우 m/z 642.3→246.3, 및 D5-APG-115(IS)의 경우 m/z 647.4→246.1의 질량 전이로 설정되었다.
APG-115의 안전성 연구에 있어서, 안전성 평가는 활력징후, 심전도(ECG) 파라미터, ECOG(Eastern Cooperative Oncology Group) 파라미터 성능 상태 데이터, 임상검사, 및 이상사례 데이터를 포함하였다. 안전성 평가는 각각의 치료 주기에서 수행되었다.
APG-115의 효능 연구에 있어서, 고형 종양 환자는 고형 종양에서의 반응 평가 기준의 현재 버전[개정 RECIST 가이드라인, 버전 1.1(Eisenhauer, 2009)]에 따라 2주기(즉, 8주)마다 반응에 대해 평가된다.
APG-115는 MDM2-p53의 상호작용을 차단할 수 있는 2세대 MDM2 억제제로, p53 단백질을 안정화시켜 세포주기 및 자가사멸에 대한 전사 조절 기능을 재개하도록 할 수 있다.
이 연구의 1차 목표는 APG-115의 안전성 및 내약성을 결정하고, 용량 제한 독성(DLT), 최대 내약 용량(MTD)/II상 권고 용량(RP2D)을 확인하는 것이었다. 이 연구의 2차 목표는 APG-115의 PK, PD, 항종양 효과를 결정하는 것이었다.
단일 용량 증량 연구를 수행하였다. APG-115의 용량 제한 독성(DLT)을 평가하여 APG-115의 최대 내약 용량(MTD)을 결정하기 위해 표준 "3 + 3" 설계를 사용하였다. 5가지 용량 수준(10, 20, 50, 100, 200, 및 300 mg)의 APG-115를 시험하였다. APG-115를 연속 3주 동안 격일로(QOD) 경구 투여(즉, 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 및 21일차에 투여)하였고, 4주 단위 주기로 1주일은 투여를 중단하였다. 용량 수준당 3명의 환자를 등록하였고, 환자가 DLT를 보이지 않으면, 3명의 환자를 다음 용량 수준에 등록하였다. 시험 설계 계획은 다음과 같다.
I상 용량 증량 연구-가속 용량 증량 후 표준 "3+3" 설계:
Figure pct00047
환자 등록을 위한 포함 기준은 다음과 같다.
1. 연령 ≥ 18세;
2. (ECOG) 성능 상태 ≤ 1;
3. 적절한 혈액 또는 골수, 신장 및 간 기능
4. 임상적 이점을 제공하는 것으로 알려진 이용 가능한 요법으로 치료한 후 질환이 진행된 환자에서 확정된 국소 진행성 또는 전이성 고형 종양 또는 림프종
환자 등록을 위한 배제 기준은 다음과 같다.
1. 연구 약물의 첫 투여 전 14일 내에 동시 항암 요법, 또는 임의의 임상 요법을 받음;
2. 항혈소판 제제와 함께, 치료 용량의 항응고제의 사용은 배제됨;
3. 중추신경계(CNS)의 종양 관련으로 인한 임상평가에 대한 신경학적 불안정성;
4. 조절되지 않은 동시발생 질병.
환자의 기준선 특성을 표 12(a) 및 12(b)에 나타낸다.
Figure pct00048
안전성 연구 결과를 표 12(c) 및 12(d)에 나타낸다. 2019년 4월 19일까지, 29명의 환자가 다양한 용량(10~300 mg)의 APG-115로 치료받았다. APG-115는 내약성이 양호했고, 관리 가능한 이상사례를 나타냈다. 가장 흔한 TRAE(>10%): 피로, 구역질, 구토, 식욕 감소, 설사, 호중구 수치 감소, 혈소판 수치 감소, 백혈구 수치 감소. 혈소판 수치 감소, 피로, 및 구역질이 DLT로서 결정되었다.
Figure pct00049
처치 관련 이상사례(모든 등급)
Figure pct00050
300 mg에서 감소된 1건의 G3 PLT, 300 mg에서 1건의 G3 구역질, 및 100 mg과 300 mg에서 각각 2건의 G3 피로를 포함하여 4건의 DLT가 제1주기 동안 관찰되었다(표 12(e) 참조).
도 19는 C2D1 후에 300 mg에서 2명의 환자, 200 mg에서 2명의 환자, 100 mg에서 1명의 환자가 PLT 수치 감소(100 x 10^3/u 미만)를 보였음을 나타냈다. 도 20은 C2D21 후에 3명의 환자가 절대 호중구 수치 감소(1.00 x 10^3/uL 미만)를 보였음을 나타냈다. APG-115 단일요법의 MTD/RP2D는 100 mg으로 결정되었다.
처치 관련 이상사례(3등급 이상)
Figure pct00051
예비 항종양 활성은 도 21에 도시되어 있다.
PK 분석 결과, AUC 및 Cmax는 일반적으로 20~300 mg의 용량 범위에 걸쳐 용량에 비례하여 증가하는 것으로 나타났다(도 22의 (a) 및 (b) 참조). 혈청 MIC-1(TP53 활성화의 PD 마커) 증가는 고형 종양 환자에서 시험된 용량 범위 내에서 노출 의존적이었다(도 23의 (a) 및 (b)). 진행성 고형 종양 환자에서의 펨브롤리주맙과 병용한 APG-115의 추가 평가가 진행 중이다.
실시예 8: 진행성 연조직 암종 환자에서의 APG -115의 I상 연구
APG-115는 신규의 경구 활성 소분자 MDM2 억제제이다. MDM2 단백질에 결합하는 APG-115는 야생형 p53을 보유하는 종양세포에서 자가사멸의 유도를 통해 p53 종양 억제 기능을 회복시킨다.
이는 진행성 연조직 육종 및 기타 고형 종양이 있는 중국인 환자에게 경구 투여된 APG-115의 안전성, 용량 제한 독성(DLT), 최대 내약 용량(MTD)/2상 권고 용량(RP2D), 약동학(PK), 약력학(PD) 프로파일, 및 항종양 활성을 평가하기 위해 설계된 I상 연구(CTR20170975)이다.
이 연구의 1차 목표는 APG-115의 안전성 및 내약성을 결정하고, DLT, MTD/RP2D를 확인하는 것이었다. 이 연구의 2차 목표는 APG-115의 PK, PD, 항종양 효과를 결정하는 것이었다.
단일 용량 증량 연구를 수행하였다. APG-115의 용량 제한 독성(DLT)을 평가하여 APG-115의 최대 내약 용량(MTD)을 결정하기 위해 표준 "3 + 3" 설계를 사용하였다. 3가지 용량 수준(100, 150, 200 mg)의 APG-115를 시험하였다. APG-115를 연속 3주 동안 격일로(QOD) 경구 투여(즉, 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 및 21일차에 투여)하였고, 4주 단위 주기로 1주일은 투여를 중단하였다. 용량 수준당 3명의 환자를 등록하였고, 환자가 DLT를 보이지 않으면, 3명의 환자를 다음 용량 수준에 등록하였다. 시험 설계 계획은 다음과 같다.
I상 용량 증량 연구: 표준 "3+3" 설계:
Figure pct00052
이 연구는 미국에서의 APG-115의 I상 연구의 예비 안전성 결과에 따라 200 mg의 초기 용량으로 수행되었다. 200 mg에서 2건의 DLT가 관찰되었기 때문에, 100 mg으로부터의 용량 증량의 재스케줄을 시작하였고, 100 mg(n=3) 및 150 mg(n=8) 용량 수준에서는 DLT가 없었다. 제2주기 중에/후에 150 mg에서 후기 발병 혈액 독성이 나타남으로 인해, 100 mg 용량 수준에서 안전성 확장을 수행하였다.
이 연구에 대한 포함 기준은 다음과 같다.
1. 연령 ≥ 18세;
2. 임상연구자가 적절하다고 판단한 표준 요법을 받지 않은 확정된 진행성 고형 종양
3. ECOG: 0-1;
4. 적절한 신장, 간, 및 혈액 기능
이 연구에 대한 배제 기준은 다음과 같다.
1. 이전의 전신 MDM2-p53 억제제 치료;
2. APG-115의 첫 투여 전 28일 또는 5 반감기 내에 표준 또는 임상 항암 요법을 받음;
3. 알려진 활성 중추신경계(CNS) 전이가 있음;
4. 연구 요건의 준수를 제한하는 조절되지 않은 동시발생 또는 정신적 질병/사회적 상황
환자의 기준선 특성을 표 13(a) 및 13(b)에 나타낸다.
Figure pct00053
Figure pct00054
Figure pct00055
안전성 연구 결과를 표 13(d) 및 13(e)에 나타낸다. 2019년 4월 23일까지, 14명의 진행성 고형 종양 환자(8 LPS)가 28일마다 21일 동안(7일 제외) 격일로 100~200 mg 범위의 APG-115를 투여받았다.
Figure pct00056
Figure pct00057
1명의 환자(200 mg)에서 2건의 DLT가 관찰되었다(혈소판감소증 및 열성 호중구감소증 포함). 1주기의 치료 후 100 mg 및 150 mg에서 DLT가 관찰되지 않았지만, 150 mg의 제2주기 중에 또는 후에 후기 발병 골수 억제가 관찰되었고, 안전성 확장이 100 mg에서 진행 중이다. APG-115는 시험된 모든 용량 수준에 걸쳐 내약성이 양호했고, 후기 발병 혈소판감소증으로 인해 MTD는 150 mg이었고, RP2D는 100 mg이었다. 가장 흔한 3등급 또는 4등급 AE는 혈액 독성, 특히 골수에서 p53의 활성화로 예측 가능한 혈소판감소증이었다.
예비 항종양 활성
14명의 환자 중에서, 1명의 피험자가 제2주기의 치료를 막 시작했기 때문에 기준선 후 종양 측정은 13명의 환자에서 얻어졌다.
5가지 SD(안정적인 질환):
1. 고분화 지방육종 환자(용량 수준: 200 mg; TP53-WT 및 MDM2 Amp): 제1주기 후 SD, G4 혈소판감소증으로 인한 철회;
2. 활막육종 환자(용량 수준: 100 mg; TP53-WT): 제2주기 후 SD;
3. 부신피질 암종 환자(용량 수준: 150 mg; TP53-WT):제2주기 후 SD, 혈소판감소증으로 인한 철회, 2개월 철회 후 SD 유지;
4. 고분화 지방육종 환자(용량 수준: 150 mg; TP53-WT): 제2주기 후 SD;
5. 부신피질 암종 환자(용량 수준: 150 mg; TP53-WT): 제2주기 후 SD, 제4주기 후 확정된 SD.
1건의 확정된 PR(부분 반응): (용량 수준: 150 mg ). 150 mg 용량을 투여한 지방종 지방육종 환자에서 1건의 확정된 부분 반응이 관찰되었고, 반응 기간은 4개월의 치료 중단 후 지속되었다.
1. 이전 요법(외과적 절제 및 화학요법(AD: 아드리아마이신 + 다카바진, 5회 주기)) 후 재발성 진행성 질환이 있는 지방족 지방육종 환자(TP53-WT 및 MDM2 Amp);
2. 이미징: APG-115의 2회 주기 후, 간문, 문맥대정맥 공간 사이에 위치한 표적 병변이 감소함, 1개월 철회 후 C4D15(G4 혈소판감소증에 기인) 및 PD 철회, RECIST 기준에 의해 확정된 PR(최상의 반응)이 4개월 철회 후 불가사의하게도 관찰됨, 표적 병변은 약 64% 감소됨;
3. 이 환자는 지속적인 혈소판감소증으로 인해 연구 기간 동안 다른 항종양제 복용을 거부함, 환자는 현재 관찰 중이며, 반응이 레거시 효과 때문인지 APG-115의 면역 효과 때문인지 아직 조사 중임;
4. AE: G4 혈소판감소증 및 G3 구토. 4월 23일까지, G4 혈소판감소증이 G1로 떨어짐.
예비 항종양 활성은 도 26에 도시되어 있다. PK 분석 결과, AUC 및 Cmax는 일반적으로 100~200 mg의 용량 범위에 걸쳐 용량에 비례하여 증가하는 것으로 나타났다(도 25의 (a) 및 (b) 참조). APG-115는 100~200 mg 범위에 걸쳐 대략 선형적인 약동학을 나타냈다.
혈청 MIC-1(TP53 활성화의 PD 마커) 증가는 고형 종양 환자에서 시험된 용량 범위 내에서 노출 의존적이었다(도 26의 (a) 및 (b)).
실시예 9. 절제불가능 또는 전이성 흑색종, 또는 진행성 고형 종양 환자에서의 펨브롤리주맙과 병용한 APG -115의 Ib / II상 연구
연구 설계
Ib/II 연구는 2개의 파트, 즉 용량 증량 연구 및 Simon의 2-단계 II상 연구로 구성된다.
용량 증량 연구에서, 전이성 고형 종양 환자의 치료를 위해 APG-115가 펨브롤리주맙과 병용된다. 4가지 용량 수준(50, 100, 150, 및 200 mg)의 APG-115가 시험된다. APG-115는 21일 주기의 연속 2주 동안 격일로(QOD) 경구 투여된다. 펨브롤리주맙은 21일 주기의 1일차에 200 mg IV로 투여된다. 용량 증량 연구의 1차 목표는 안전성, 내약성을 결정하고, MTD 및 RP2D를 결정하는 것이고, 기타 항종양 평가(6주마다 RECIST v1.1에 따라 평가)는 2차 목표이다.
Simon의 2-단계 II상 연구에서, PD1/PD-L1 난치성/재발성 흑색종 환자에게 RP2D의 APG-115가 펨브롤리주맙과 병용된다. 이 연구의 1차 목표는 전체 반응률을 결정하는 것이고, 2차 목표는 용량 증량 연구의 2차 목표와 동일하다.
결과
용량 증량 연구에서 총 14명의 환자가 펨브롤리주맙과 병용한 APG-115(50 mg, 100 mg, 150 mg, 200 mg)의 4개의 코호트에서 치료받았다. DLT는 관찰되지 않았고, MTD에 도달되지 않는다. 11명의 환자가 적어도 1건의 TEAE를 경험했고, 10명의 환자가 적어도 1건의 TRAE를 경험하였다. 가장 흔한 TRAE(≥10%)는 구역질(42.9%), 호중구 수치 감소(21.4%), 구토(14.3%), 식욕 감소(14.3%), 설사(14.3%), 혈소판 수치 감소(14.3%), 백혈구 수치 감소(14.3%), 및 피로(14.3%)였다. 4명의 환자가 적어도 1건의 3등급 이상의 TRAE를 경험했고, 호중구 수치 감소(21.4%)가 가장 흔한 것(≥10%)이었다. 3명의 환자에서 5건의 SAE가 발생했지만, 단지 1건의 3등급 열성 호중구감소증이 치료와 관련이 있었다. 100 mg 코호트의 진행성 NSCLC 환자 1명이 3개월의 니볼루맙 치료를 포함한 이전의 6선 요법에 실패한 후 "확정된 PR"을 받았고(아직 진행 중); 5명의 환자가 2주기 치료 후 "SD"를 받았고, 그중 2명은 "확정된 SD"를 받았다(진행 중). PK 분석은 50 내지 100 mg의 용량 수준에 걸쳐 대략 용량에 비례하는 노출 증가를 나타냈다. 예비 PR 결과는 혈청 MIC-1 수준이 APG-115 치료 후 상승했음을 보여주었고, 이는 환자에서의 가능성 있는 p53 활성화를 시사한다.
결론
펨브롤리주맙과 병용시, 특히 높은 용량 수준에서, APG-115는 관리 가능한 위장 독성 및 혈액 독성을 나타냈다. MTD에 도달되지 않는다. 펨브롤리주맙과 병용시, APG-115는 여러 종양 유형에서 기대할 만한 항종양 효과를 나타냈다.
본 출원인들이 본 발명의 많은 구현예를 설명하였지만, 본 발명의 화합물 및 방법을 이용하는 다른 구현예를 제공하기 위해 이러한 기본 실시예가 변경될 수 있음은 명백하다. 따라서, 본 발명의 범위는 예로서 표현된 특정 구현예에 의해 정의되기 보다는 첨부된 청구범위에 의해 정의되어야 함이 이해될 것이다.

Claims (104)

  1. 암을 치료하는 방법으로서, 암 치료를 필요로 하는 대상체에게,
    a) 면역 체크포인트 분자 조절제의 유효량; 및
    b) 하기 화학식으로 표시되는 MDM2 억제제, 또는 이의 제약상 허용되는 염의 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 방법.
    Figure pct00058

    (식 중,
    Figure pct00059
    는
    Figure pct00060

    로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    B는 C4-7 탄소환 고리이고;
    R1은 H, 치환 또는 비치환 C1-4 알킬, 치환 또는 비치환 시클로알킬, 치환 또는 비치환 헤테로시클로알킬, ORa, 또는 NRaRb이고;
    n은 0, 1, 또는 2이고;
    R2, R3, R4, R5, R7, R8, R9, 및 R10은 독립적으로, H, F, Cl, CH3, 및 CF3로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    R6은
    Figure pct00061
    또는
    Figure pct00062
    이고;
    Ra는 수소, 또는 치환 또는 비치환 C1-4 알킬이고;
    Rb는 수소, 또는 치환 또는 비치환 C1-4 알킬이고;
    Rc 및 Rd는 고리 B의 하나의 탄소 원자 상의 치환기이고, 이때
    Rc는 H, C1-3 알킬, C1-3 알킬렌-ORa, ORa, 또는 할로이고;
    Rd는 H, C1-3 알킬, C1-3 알킬렌-ORa, ORa, 또는 할로이거나;
    Rc와 Rd는 이들이 부착되는 탄소 원자와 함께, 임의로 산소 원자를 함유하는 4 내지 6원의 스피로 치환기를 형성하고;
    Re는 ―C(=O)ORa, ―C(=O)NRaRb, 또는 ―C(=O)NHSO2CH3임)
  2. 제1항에 있어서,
    Figure pct00063
    는
    Figure pct00064
    또는
    Figure pct00065
    이고;
    B는
    Figure pct00066
    또는
    Figure pct00067
    이고;
    Rc와 Rd는 F와 F, H와 H, OH와 CH3, OH와 H, CH3와 CH3, CH3와 OH, H와 OH, CH2CH3와 CH2CH3, 또는 CH2OH와 CH2OH인, 방법.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    Figure pct00068
    는 H, CH3, 또는 CH2CH3인, 방법.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, R2는 H이고; R3은 할로이고; R4 및 R5는 H인, 방법.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, R7은 플루오로이고; R8, R9, 및 R10 각각은 H이고; Re는 ―C(=O)OH, ―C(=O)NH2, 또는 ―C(=O)NHSO2CH3인, 방법.
  6. 제1항에 있어서, 상기 MDM2 억제제는
    Figure pct00069
    ,
    Figure pct00070
    ,
    Figure pct00071
    ,
    Figure pct00072
    ,
    Figure pct00073
    ,
    Figure pct00074
    ,
    Figure pct00075
    ,
    Figure pct00076
    ,
    Figure pct00077
    ,
    Figure pct00078
    ,
    Figure pct00079
    ,
    Figure pct00080
    ,
    Figure pct00081
    ,
    Figure pct00082
    , 및
    Figure pct00083
    로부터 선택되는, 방법.
  7. 제1항에 있어서, 상기 MDM2 억제제는
    Figure pct00084
    , 또는
    Figure pct00085
    ,
    또는 이의 제약상 허용되는 염인, 방법.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자 조절제는 항체, 항체 Fab 단편, 2가 항체, 항체 약물 접합체, scFv, 융합 단백질, 2가 항체, 또는 4가 항체인, 방법.
  9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자 조절제는 단클론 항체 또는 이의 항원결합 단편인, 방법.
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자는 억제 면역 체크포인트 분자이고, 상기 면역 체크포인트 분자 조절제는 상기 억제 면역 체크포인트 분자의 억제제인, 방법.
  11. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자는 공동자극 체크포인트 분자이고, 상기 면역 체크포인트 분자 조절제는 상기 공동자극 체크포인트 분자의 활성화제인, 방법.
  12. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자는 PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, TIM-3, LAG3, CD160, 2B4, TGF β, VISTA, BTLA, TIGIT, 또는 LAIR1인, 방법.
  13. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자는 OX40, CD2, CD27, ICAM-1, NKG2C, SLAMF7, NKp80, B7-H3, LFA-1, 1COS, 4-1BB, GITR, CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, 또는 CD83인, 방법.
  14. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자는 PD-1인, 방법.
  15. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자는 PD-L1인, 방법.
  16. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자는 CTLA-4인, 방법.
  17. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자 조절제는 항종양 T세포 활성을 회복시키는, 방법.
  18. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자 조절제는 T세포-억제 세포 활성을 차단하는, 방법.
  19. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자 조절제는 공동자극 체크포인트 분자의 활성화제이고, 상기 공동자극 체크포인트 분자의 활성화제는 완전한 T세포 활성화에 필요한 공동자극 신호를 변경하는, 방법.
  20. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자 조절제는 펨브롤리주맙, 이필리무맙, 니볼루맙, 아테졸리주맙, 아벨루맙, 또는 더발루맙인, 방법.
  21. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자 조절제는 AGEN-1884, BMS-986016, CS-1002, LAG525, MBG453, MEDI-570, OREG-103/BY40, 리릴루맙, 또는 트레멜리무맙인, 방법.
  22. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자 조절제는 펨브롤리주맙, 니볼루맙, AMP-224, AMP-514, BGB-A317, 세미플리맙, JS001, CS1001, PDR-001, PF-06801591, IBI-308, 피딜리주맙, SHR-1210, 또는 TSR-042인, 방법.
  23. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자 조절제는 아테졸리주맙, 아벨루맙, 더발루맙, AMP-224, JS003, LY3300054, MDX-1105, SHR-1316, KN035, 또는 CK-301인, 방법.
  24. 제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, MDM2 억제제의 유효량은 약 1 mg 내지 약 300 mg인, 방법.
  25. 제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, MDM2 억제제의 유효량은 약 5 mg 내지 약 200 mg인, 방법.
  26. 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자 조절제와 상기 MDM2 억제제가 동시에 투여되는, 방법.
  27. 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자 조절제와 상기 MDM2 억제제가 순차적으로 투여되는, 방법.
  28. 제1항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 암은 부신피질암, 진행암, 항문암, 재생불량빈혈, 담관암, 방광암, 골암, 골전이, 성인 뇌/CNS 종양, 소아 뇌/CNS 종양, 유방암, 남성 유방암, 소아암, 원발부위 불명암, 캐슬맨병, 자궁경부암, 대장/직장 암, 자궁내막암, 식도암, 유잉 종양, 안암, 담낭암, 위장관 카르시노이드 종양, 위장관 기질 종양(GIST), 임신 영양막 질환, 두경부암, 호지킨병, 카포시 육종, 신장암, 후두 및 하인두 암, 성인 급성 림프구성 백혈병(ALL), 급성 골수성 백혈병(AML), 만성 림프구성 백혈병(CLL), 만성 골수성 백혈병(CML), 만성 골수단핵구성 백혈병(CMML), 소아 백혈병, 간암, 비소세포 폐암, 소세포 폐암, 폐 카르시노이드 종양, 피부 림프종, 악성 중피종, 다발성 골수종, 골수이형성증후군, 비강 및 부비동 암, 비인두암, 신경모세포종, 비호지킨 림프종, 소아 비호지킨 림프종, 구강 및 구강인두 암, 골육종, 난소암, 췌장암, 음경암, 뇌하수체 종양, 전립선암, 망막모세포종, 횡문근육종, 침샘암, 육종(성인 연조직암), 기저 및 편평세포 피부암, 피부암(흑색종), 소장암, 위암, 고환암, 흉선암, 갑상선암, 자궁 육종, 질암, 외음부암, 발덴스트롬 마크로글로불린혈증, 메르켈세포 암종, 요로상피 암종, 미소부수체 불안정성이 높거나 불일치 복구 결함이 있는 고형 종양, 육종, 대장암, 융모막암종, 급성 골수성 백혈병, 림프종, 백혈병, 및 빌름스 종양으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
  29. 제1항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 암은 흑색종, 호지킨 림프종, 폐암, 신장암, 방광암, 두경부암, 메르켈세포 암종, 요로상피 암종, 미소부수체 불안정성이 높거나 불일치 복구 결함이 있는 고형 종양, 육종, 대장암, 전립선암, 융모막암종, 유방암, 망막모세포종, 위 암종, 급성 골수성 백혈병, 림프종, 다발성 골수종, 또는 백혈병으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
  30. 제1항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 암은 간세포암 또는 대장암인, 방법.
  31. 제1항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 암은 야생형 또는 돌연변이 p53 활성이 있는, 방법.
  32. a) 면역 체크포인트 분자 조절제의 유효량; 및
    b) 하기 화학식으로 표시되는 MDM2 억제제, 또는 이의 제약상 허용되는 염의 유효량을 포함하는 제약 조성물.
    Figure pct00086

    (식 중,
    Figure pct00087
    는
    Figure pct00088

    로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    B는 C4-7 탄소환 고리이고;
    R1은 H, 치환 또는 비치환 C1-4 알킬, 치환 또는 비치환 시클로알킬, 치환 또는 비치환 헤테로시클로알킬, ORa, 또는 NRaRb이고;
    n은 0, 1, 또는 2이고;
    R2, R3, R4, R5, R7, R8, R9, 및 R10은 독립적으로, H, F, Cl, CH3, 및 CF3로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    R6은
    Figure pct00089
    또는
    Figure pct00090
    이고;
    Ra는 수소, 또는 치환 또는 비치환 C1-4 알킬이고;
    Rb는 수소, 또는 치환 또는 비치환 C1-4 알킬이고;
    Rc 및 Rd는 고리 B의 하나의 탄소 원자 상의 치환기이고, 이때
    Rc는 H, C1-3 알킬, C1-3 알킬렌-ORa, ORa, 또는 할로이고;
    Rd는 H, C1-3 알킬, C1-3 알킬렌-ORa, ORa, 또는 할로이거나;
    Rc와 Rd는 이들이 부착되는 탄소 원자와 함께, 임의로 산소 원자를 함유하는 4 내지 6원의 스피로 치환기를 형성하고;
    Re는 ―C(=O)ORa, ―C(=O)NRaRb, 또는 ―C(=O)NHSO2CH3임)
  33. 제32항에 있어서,
    Figure pct00091
    는
    Figure pct00092
    또는
    Figure pct00093
    이고;
    B는
    Figure pct00094
    또는
    Figure pct00095
    이고;
    Rc와 Rd는 F와 F, H와 H, OH와 CH3, OH와 H, CH3와 CH3, CH3와 OH, H와 OH, CH2CH3와 CH2CH3, 또는 CH2OH와 CH2OH인, 제약 조성물.
  34. 제32항 또는 제33항에 있어서,
    Figure pct00096
    는 H, CH3, 또는 CH2CH3인, 제약 조성물.
  35. 제32항 내지 제34항 중 어느 한 항에 있어서, R2는 H이고; R3은 할로이고; R4 및 R5는 H인, 제약 조성물.
  36. 제32항 내지 제35항 중 어느 한 항에 있어서, R7은 플루오로이고; R8, R9, 및 R10 각각은 H이고; Re는 ―C(=O)OH, ―C(=O)NH2, 또는 ―C(=O)NHSO2CH3인, 제약 조성물.
  37. 제32항에 있어서, 상기 MDM2 억제제는
    Figure pct00097
    ,
    Figure pct00098
    ,
    Figure pct00099
    ,
    Figure pct00100
    ,
    Figure pct00101
    ,
    Figure pct00102
    ,
    Figure pct00103
    ,
    Figure pct00104
    ,
    Figure pct00105
    ,
    Figure pct00106
    ,
    Figure pct00107
    ,
    Figure pct00108
    ,
    Figure pct00109
    ,
    Figure pct00110
    , 및
    Figure pct00111
    로부터 선택되는, 제약 조성물.
  38. 제32항에 있어서, 상기 MDM2 억제제는
    Figure pct00112
    , 또는
    Figure pct00113
    ,
    또는 이의 제약상 허용되는 염인, 제약 조성물.
  39. 제32항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자 조절제는 항체, 항체 Fab 단편, 2가 항체, 항체 약물 접합체, scFv, 융합 단백질, 2가 항체, 또는 4가 항체인, 제약 조성물.
  40. 제32항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자 조절제는 단클론 항체 또는 이의 항원결합 단편인, 제약 조성물.
  41. 제32항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자는 PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, TIM-3, LAG3, CD160, 2B4, TGF β, VISTA, BTLA, TIGIT, 또는 LAIR1인, 제약 조성물.
  42. 제32항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자는 OX40, CD2, CD27, ICAM-1, NKG2C, SLAMF7, NKp80, B7-H3, LFA-1, 1COS, 4-1BB, GITR, CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, 또는 CD83인, 제약 조성물.
  43. 제32항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자는 PD-1인, 제약 조성물.
  44. 제32항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자는 PD-L1인, 제약 조성물.
  45. 제32항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자는 CTLA-4인, 제약 조성물.
  46. 제32항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자 조절제는 항종양 T세포 활성을 회복시키는, 제약 조성물.
  47. 제32항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자 조절제는 T세포-억제 세포 활성을 차단하는, 제약 조성물.
  48. 제32항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자 조절제는 공동자극 체크포인트 분자의 활성화제이고, 상기 공동자극 체크포인트 분자의 활성화제는 완전한 T세포 활성화에 필요한 공동자극 신호를 변경하는, 제약 조성물.
  49. 제32항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자 조절제는 펨브롤리주맙, 이필리무맙, 니볼루맙, 아테졸리주맙, 아벨루맙, 또는 더발루맙인, 제약 조성물.
  50. 제32항 내지 제40중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자 조절제는 LAG525, BMS-986016, MBG453, MEDI-570, OREG-103/BY40, 리릴루맙, 또는 트레멜리무맙인, 제약 조성물.
  51. 제32항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자 조절제는 JS001, SHR-1210, BGB-A317, IBI-308, 또는 REGN2810인, 제약 조성물.
  52. 제32항 내지 제40중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자 조절제는 JS003, SHR-1316, KN035, 또는 BMS-936559인, 제약 조성물.
  53. 제1항에 있어서, 상기 MDM2 억제제, 또는 이의 제약상 허용되는 염이 격일로 경구 투여되는, 방법.
  54. 제53항에 있어서, 상기 MDM2 억제제가 격일로 약 30 mg 내지 약 250 mg의 양으로 경구 투여되는, 방법.
  55. 제53항에 있어서, 상기 MDM2 억제제가 격일로 약 50 mg 내지 약 200 mg의 양으로 경구 투여되는, 방법.
  56. 제53항에 있어서, 상기 MDM2 억제제가 격일로 약 50 mg, 100 mg, 150 mg, 또는 200 mg의 양으로 경구 투여되는, 방법.
  57. 제53항 내지 제56항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 MDM2 억제제는
    Figure pct00114
    ,
    또는 이의 제약상 허용되는 염인, 방법.
  58. 제57항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자는 PD-1인, 방법.
  59. 제57항에 있어서, PD-1은 21일 또는 28일 치료 주기의 1일차에 200 mg의 양으로 정맥내 주입을 통해 투여되는, 방법.
  60. 제1항에 있어서, 상기 방법은 적어도 1회의 21일 또는 28일 치료 주기를 포함하고, 상기 MDM2 억제제, 또는 이의 제약상 허용되는 염이 21일 또는 28일 치료 주기의 첫 연속 2주 동안 이를 필요로 하는 환자에게 격일로 경구 투여되고 치료 주기의 셋째 주 동안은 투여되지 않거나; 상기 방법은 적어도 1회의 28일 치료 주기를 포함하고, 상기 MDM2 억제제, 또는 이의 제약상 허용되는 염이 28일 치료 주기의 첫 연속 3주 동안 이를 필요로 하는 환자에게 격일로 경구 투여되고 치료 주기의 넷째 주 동안은 투여되지 않는, 방법.
  61. 제60항에 있어서, 상기 MDM2 억제제, 또는 이의 제약상 허용되는 염이 21일 치료 주기의 1, 3, 5, 7, 9, 11, 및 13일차에 상기 환자에게 경구 투여되거나, 상기 MDM2 억제제, 또는 이의 제약상 허용되는 염이 28일 치료 주기의 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 및 21일차에 상기 환자에게 경구 투여되는, 방법.
  62. 제60항에 있어서, 상기 MDM2 억제제, 또는 이의 제약상 허용되는 염이 21일 치료 주기의 14~21일차에 투여되지 않거나, 상기 MDM2 억제제, 또는 이의 제약상 허용되는 염이 28일 치료 주기의 22~28일차에 투여되지 않는, 방법.
  63. 제60항 내지 제62항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 MDM2 억제제가 21일 치료 주기의 1, 3, 5, 7, 9, 11, 및 13일차에 약 50 mg 내지 약 200 mg의 양으로 상기 환자에게 경구 투여되거나; 상기 MDM2 억제제가 28일 치료 주기의 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 및 21일차에 약 50 mg 내지 약 200 mg의 양으로 상기 환자에게 경구 투여되는, 방법.
  64. 제63항에 있어서, 상기 MDM2 억제제가 21일 치료 주기의 1, 3, 5, 7, 9, 11, 및 13일차에 약 50 mg의 양으로 상기 환자에게 경구 투여되거나, 상기 MDM2 억제제가 28일 치료 주기의 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 및 21일차에 약 50 mg의 양으로 상기 환자에게 경구 투여되는, 방법.
  65. 제63항에 있어서, 상기 MDM2 억제제가 21일 치료 주기의 1, 3, 5, 7, 9, 11, 및 13일차에 약 100 mg의 양으로 상기 환자에게 경구 투여되거나; 상기 MDM2 억제제가 28일 치료 주기의 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 및 21일차에 약 100 mg의 양으로 상기 환자에게 경구 투여되는, 방법.
  66. 제63항에 있어서, 상기 MDM2 억제제가 21일 치료 주기의 1, 3, 5, 7, 9, 11, 및 13일차에 약 150 mg의 양으로 상기 환자에게 경구 투여되거나, 상기 MDM2 억제제가 28일 치료 주기의 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 및 21일차에 약 100 mg의 양으로 상기 환자에게 경구 투여되는, 방법.
  67. 제63항에 있어서, 상기 MDM2 억제제가 21일 치료 주기의 1, 3, 5, 7, 9, 11, 및 13일차에 약 200 mg의 양으로 상기 환자에게 경구 투여되거나, 상기 MDM2 억제제가 28일 치료 주기의 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 및 21일차에 약 100 mg의 양으로 상기 환자에게 경구 투여되는, 방법.
  68. 제60항 내지 제67항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 MDM2 억제제는
    Figure pct00115
    ,
    또는 이의 제약상 허용되는 염인, 방법.
  69. 제60항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 면역 체크포인트 분자는 PD-1인, 방법.
  70. 제69항에 있어서, PD-1의 조절제가 21일 치료 주기 또는 28일 치료 주기의 1일차에 200 mg의 양으로 정맥내 주입을 통해 투여되는, 방법.
  71. 제60항 내지 제70항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법은 적어도 1회, 2회, 3회, 4회, 5회, 6회, 7회, 8회, 9회, 또는 10회의 21일 치료 주기 또는 28일 치료 주기를 포함하는, 방법.
  72. 제60항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 환자는 절제불가능 또는 전이성 흑색종을 앓고 있는, 방법.
  73. 제60항 내지 제72항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 환자는 PD-1 요법에 난치성 또는 재발성인, 방법.
  74. 제60항 내지 제72항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 환자는 절제불가능 또는 전이성 흑색종을 앓고 있고 PD-1 요법에 난치성 또는 재발성인, 방법.
  75. 제60항 내지 제72항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 환자는 항PD-1 요법에 내성이 있는, 방법.
  76. 제60항 내지 제72항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 환자는 진행성 고형 종양을 앓고 있는, 방법.
  77. 하기 구조의 MDM2 억제제, 또는 이의 제약상 허용되는 염을 포함하는 제약 조성물로서, 고체 투여 형태인 제약 조성물.
    Figure pct00116
  78. 제77항에 있어서, 상기 고체 투여 형태는 캡슐인, 제약 조성물.
  79. 제78항에 있어서, 상기 고체 투여 형태는 건식-충전 캡슐인, 제약 조성물.
  80. 제79항에 있어서, 상기 고체 투여 형태는 건식-충전된 크기 1의 젤라틴 캡슐인, 제약 조성물.
  81. 제78항 내지 제80항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 캡슐은 약 30 mg 내지 약 250 mg, 또는 약 100 mg 내지 약 200 mg의 APG-115를 포함하는, 제약 조성물.
  82. 제81항에 있어서, 상기 캡슐은 약 50 mg, 100 mg, 150 mg, 또는 200 mg의 APG-115를 포함하는, 제약 조성물.
  83. 제78항 내지 제83항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 캡슐은 규화 미정질 셀룰로스를 추가로 포함하는, 제약 조성물.
  84. 암 치료를 위해 항PD-1/PD-L1 요법을 받는 환자에서 과다 진행을 치료하는 방법으로서, 이러한 치료를 필요로 하는 환자에게 치료 유효량의 MDM2 억제제를 투여하는 단계를 포함하되, 상기 MDM2 억제제는
    Figure pct00117
    ,
    또는 이의 제약상 허용되는 염인, 방법.
  85. 제84항에 있어서, 암은 흑색종인, 방법.
  86. 제84항에 있어서, 암은 절제불가능 또는 전이성 흑색종인, 방법.
  87. 제84항에 있어서, 암은 진행성 고형 종양 또는 진행성 연조직 암종인, 방법.
  88. 제87항에 있어서, 고형 종양은 폐암, 신세포암, 대장암, 두경부암, 유방암, 뇌암, 자궁경부암, 또는 자궁내막암인, 방법.
  89. 암을 치료하는 방법으로서, 암 치료를 필요로 하는 대상체에게 치료 유효량의 MDM2 억제제를 투여하는 단계를 포함하되, 상기 방법은 적어도 1회의 28일 치료 주기를 포함하고, MDM2 억제제가 치료 주기의 첫 연속 3주 동안 격일로 경구 투여되고 치료 주기의 넷째 주 동안은 투여되지 않으며, 치료 유효량은 약 100 mg 내지 약 200 mg의 MDM2 억제제인, 방법.
  90. 제89항에 있어서, 상기 MDM2 억제제는 하기 구조의 APG-115,
    Figure pct00118
    ,
    또는 이의 제약상 허용되는 염인, 방법.
  91. 제90항에 있어서, 치료 유효량은 약 100 mg의 APG-115인, 방법.
  92. 제90항에 있어서, 치료 유효량은 약 150 mg의 APG-115인, 방법.
  93. 제90항에 있어서, 치료 유효량은 약 200 mg의 APG-115인, 방법.
  94. 제90항에 있어서, 암은 전이성 고형 종양인, 방법.
  95. 제90항에 있어서, 암은 림프종인, 방법.
  96. 제90항에 있어서, 암은 진행성 연조직 육종인, 방법.
  97. 제90항에 있어서, 암은 선낭 암종인, 방법.
  98. 제89항 내지 제97항 중 어느 한 항에 있어서, 암은 국소 진행성 또는 전이성 고형 종양 또는 림프종인, 방법.
  99. 제98항에 있어서, 상기 대상체는 치료 경험이 있고 질환 진행을 나타내는, 방법.
  100. 제89항 내지 제99항 중 어느 한 항에 있어서, 암은 췌장암, 선낭 암종, 폐암, 위장관 기질 종양, 및 유방암으로부터 선택되는, 방법.
  101. 제89항 내지 제100항 중 어느 한 항에 있어서, 암은 진행성 고형 종양 또는 진행성 연조직 암종인, 방법.
  102. 제101항에 있어서, 진행성 고형 종양은 폐암, 신세포암, 대장암, 두경부암, 유방암, 뇌암, 자궁경부암, 난소암, 전립선암, 식도 편평세포암, 췌장암, 자궁내막암, 선낭 암종인, 방법.
  103. 제101항에 있어서, 진행성 연조직 암종은 육종(예컨대, 지방육종, 횡문근육종, 연골육종, 골육종, 활막육종, 및 부신피질 암종)인, 방법.
  104. 제89항에 있어서, 암은 부신피질암, 진행암, 항문암, 재생불량빈혈, 담관암, 방광암, 골암, 골전이, 성인 뇌/CNS 종양, 소아 뇌/CNS 종양, 유방암, 남성 유방암, 소아암, 원발부위 불명암, 캐슬맨병, 자궁경부암, 대장/직장 암, 자궁내막암, 식도암, 유잉 종양, 안암, 담낭암, 위장관 카르시노이드 종양, 위장관 기질 종양(GIST), 임신 영양막 질환, 두경부암, 호지킨병, 카포시 육종, 신장암, 후두 및 하인두 암, 성인 급성 림프구성 백혈병(ALL), 급성 골수성 백혈병(AML), 만성 림프구성 백혈병(CLL), 만성 골수성 백혈병(CML), 만성 골수단핵구성 백혈병(CMML), 소아 백혈병, 간암, 비소세포 폐암, 소세포 폐암, 폐 카르시노이드 종양, 피부 림프종, 악성 중피종, 다발성 골수종, 골수이형성증후군, 비강 및 부비동 암, 비인두암, 신경모세포종, 비호지킨 림프종, 소아 비호지킨 림프종, 구강 및 구강인두 암, 골육종, 난소암, 췌장암, 음경암, 뇌하수체 종양, 전립선암, 망막모세포종, 횡문근육종, 침샘암, 육종(성인 연조직암), 기저 및 편평세포 피부암, 피부암(흑색종), 소장암, 위암, 고환암, 흉선암, 갑상선암, 자궁 육종, 질암, 외음부암, 발덴스트롬 마크로글로불린혈증, 및 빌름스 종양으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
KR1020207037013A 2018-08-08 2019-08-07 면역요법과 mdm2 억제제의 병용 KR20210073490A (ko)

Applications Claiming Priority (9)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2018099280 2018-08-08
CNPCT/CN2018/099280 2018-08-08
CNPCT/CN2018/124866 2018-12-28
CN2018124866 2018-12-28
CNPCT/CN2019/073720 2019-01-29
CN2019073720 2019-01-29
US201962853069P 2019-05-27 2019-05-27
US62/853,069 2019-05-27
PCT/CN2019/099664 WO2020030016A1 (en) 2018-08-08 2019-08-07 Combination of immunotherapies with mdm2 inhibitors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20210073490A true KR20210073490A (ko) 2021-06-18

Family

ID=69414548

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020207037013A KR20210073490A (ko) 2018-08-08 2019-08-07 면역요법과 mdm2 억제제의 병용

Country Status (11)

Country Link
US (1) US20220175725A1 (ko)
EP (1) EP3833445A4 (ko)
JP (1) JP2021534088A (ko)
KR (1) KR20210073490A (ko)
CN (1) CN110812478B (ko)
AU (1) AU2019316865A1 (ko)
BR (1) BR112021002303A2 (ko)
CL (1) CL2021000300A1 (ko)
MX (1) MX2020013728A (ko)
TW (1) TWI786322B (ko)
WO (1) WO2020030016A1 (ko)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20240060622A (ko) 2021-09-01 2024-05-08 크로스테크놀로지 라보 컴퍼니 리미티드 전기 이중층 커패시터를 통한 전자 전도 기능을 갖는 전지

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2020169073A1 (en) * 2019-02-24 2020-08-27 Ascentage Pharma (Suzhou) Co., Ltd. Treatment methods and biomarkers for mdm2 inhibitors
JP2022501394A (ja) * 2019-07-26 2022-01-06 アセンテージ ファーマ（スーチョウ）カンパニー，リミティド Ｍｄｍ２阻害剤の医薬組成物、並びに疾患を予防及び／又は治療するためのその使用
CN113337602A (zh) * 2020-03-02 2021-09-03 苏州亚盛药业有限公司 Mdm2抑制剂的治疗方法和生物标志物
WO2021207598A1 (en) * 2020-04-10 2021-10-14 Aprea Therapeutics, Inc. Combination treatment with an agonist of p53 and a second therapeutic agent
WO2021208911A1 (en) * 2020-04-14 2021-10-21 Ascentage Pharma (Suzhou) Co., Ltd. Novel medical use of mdm2 inhibitors
WO2021254277A1 (en) * 2020-06-15 2021-12-23 Ascentage Pharma (Suzhou) Co., Ltd. Microsuspension of an mdm2 inhibitor and therapeutic applications thereof
US20230381176A1 (en) * 2020-09-25 2023-11-30 Ascentage Pharma (Suzhou) Co., Ltd. A pharmaceutical composition and use thereof for treatment of cancer
CN112022812B (zh) * 2020-11-03 2021-01-29 上海亚盛医药科技有限公司 一种包含杂环类化合物的组合物、其制备方法和应用
WO2022177995A1 (en) * 2021-02-17 2022-08-25 University Of Florida Research Foundation, Incorporated Anti-lair1 antibodies for the treatment of cancer

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2712973T3 (es) * 2014-04-17 2019-05-17 Univ Michigan Regents Inhibidores de MDM2 y métodos terapéuticos que usan los mismos
WO2016040892A1 (en) * 2014-09-13 2016-03-17 Novartis Ag Combination therapies
CN113788818A (zh) * 2016-04-06 2021-12-14 密执安大学评议会 Mdm2蛋白质降解剂
JP2020516604A (ja) * 2017-04-05 2020-06-11 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 抗がん併用療法

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20240060622A (ko) 2021-09-01 2024-05-08 크로스테크놀로지 라보 컴퍼니 리미티드 전기 이중층 커패시터를 통한 전자 전도 기능을 갖는 전지

Also Published As

Publication number Publication date
AU2019316865A1 (en) 2020-12-17
MX2020013728A (es) 2021-05-27
CN110812478A (zh) 2020-02-21
EP3833445A1 (en) 2021-06-16
JP2021534088A (ja) 2021-12-09
EP3833445A4 (en) 2022-04-27
CL2021000300A1 (es) 2021-10-29
BR112021002303A2 (pt) 2021-05-04
US20220175725A1 (en) 2022-06-09
WO2020030016A1 (en) 2020-02-13
CN110812478B (zh) 2021-05-25
TW202021582A (zh) 2020-06-16
TWI786322B (zh) 2022-12-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TWI786322B (zh) 免疫療法與ｍｄｍ２抑制劑的組合及其用途
US20210145977A1 (en) Methods and pharmaceutical composition for the treatment of cancer
AU2015303164B2 (en) Combination therapies with anti CD40 antibodies
CN110691795A (zh) 包含抗-lag3抗体、pd-1途径抑制剂和免疫治疗剂组合的组合物
Assal et al. Emerging targets in cancer immunotherapy: beyond CTLA-4 and PD-1
JP2023085370A (ja) 免疫調節剤を併用するがんの治療
JP7252627B2 (ja) 制御性ｂ１０細胞を枯渇させる抗体および方法並びに免疫チェックポイント阻害剤との併用における使用
US20200157225A1 (en) Inhibitor of suv39h1 histone methyltransferase for use in cancer combination therapy
JP2018521983A (ja) がんを治療するための組成物および方法
Borrie et al. T Lymphocyte–Based Cancer Immunotherapeutics
JP2023509359A (ja) 鉄依存性細胞分解の誘導物質との併用抗癌療法
KR20190098995A (ko) 면역 반응의 조절을 위한 옥사바이사이클로헵탄
KR20210117277A (ko) 인간 넥틴-2에 특이적인 항체
KR20230069181A (ko) 암 치료를 위한 방법, 요법 및 용도
BR112017002729B1 (pt) Terapia de combinação kit para tratar um tumor sólido em um indivíduo, anticorpo ou porção de ligação a antígeno do mesmo, uso e composição farmacêutica