KR20210031466A - 상승 작용량의 붕산을 이용한 뎁시펩타이드 항생제의 항균 작용 증진 - Google Patents

Abstract

개선된 효능 및 안전성을 가진 로티립신 등의 뎁시펩타이드 항생제를 사용하여 신체 표면에 관련된 감염의 치료 또는 예방을 위한 외용 또는 국소용 제제를 제공한다. 감염 모델에서 테스트한 로티립신의 살균 효과는, 자체로서 아무런 약학적 활성을 생성하지 않는 첨가제 수준의 저 농도의 붕산을 첨가함으로써 실질적으로 향상되어, 용량 감소, 투여 기간 및 투여 주기에 기인하여 개선된 안정성을 가진 외용 제제를 위한 조성물을 제공한다.

Description

상승 작용량의 붕산을 이용한 뎁시펩타이드 항생제의 항균 작용 증진

본 발명은 세균 감염의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 뎁시펩타이드(depsipeptide) 항생제 약물-함유 (바람직하게는, 로티립신 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 입체 이성질체) 외부 제제에 관한 것이다. 환자 또는 대상체에서 외부 감염의 치료에 이들 제제를 사용하는 방법은 본 발명의 추가적인 측면을 나타낸다.

<관련 출원>

이 출원은 2018년 6월 13일에 제출된 동일한 발명의 명칭의 미국 가출원 제62/684,316호의 우선권을 주장하며, 그 전체 내용은 본원에 참고로 포함된다.

세균 감염 치료에 효과적인 항균제의 역사는 페니실린이 처음으로 임상 효능을 보인 1941년부터 약 80 년을 아우르며 1940년대부터 1960년대까지 천연 원료에서 최소 15종의 항균제 (항생제)가 발견되었다. 1960년대초 이후 신약 개발은 주로 기존 화합물을 기반으로 한 합성 방법에 의해 수행되어 천연 원료에서 개발된 새로운 항생제의 수가 극도로 감소했다. 따라서, 1980년대부터 2000년대까지 이러한 약물의 두 가지 사례만이 성공적으로 개발되었다.

한편, 임상적 측면에서는 항균제의 빈도와 수가 증가함에 따라 항생제에 내성이 있는 내약성 세균이 전 세계에 출현하여 확산되고 있다. 항생제 치료와 의료 기술이 발달한 선진국에서 특히 그렇다. 그 결과 1980 년대 이후 약물 내성 세균의 비율이 급격히 증가했다.

더욱이, 생물학적 발달의 결과로 약물 내성 세균은 많은 국가에서 다중 약물 내성을 획득하도록 진화했으며, 이는 그 자체로 중대한 임상 문제이며 새로운 항균 약물 개발을 복잡하게 한다.

과거에 문제가 되었던 세균 감염은 거의 항상 환자의 병원 감염이었지만 2000년 이후 병원과 의료 시설에서 지역 사회 감염으로 인한 발병 사례가 많이 보고되어 전적으로 새로운 위협이 되고 있다. 이러한 감염 발생률이 증가하는 주요 원인 중 하나는 세균의 특성과 새로운 (천연) 숙주의 피부와 접촉하여 숙주가 감염되지 않은 환자에게 쉽게 전염될 수 있다는 사실이다. 따라서, 이러한 문제를 제거하거나 적어도 감소시키는 효과적인 해결책의 하나로서, 과거에 항균 치료에 자주 사용되던 경구약이나 주사제에 더해, 아직도 오래된 항균제에 대한 의존도가 높고, 선택지가 매우 제한된 외용 항균약의 영역에, 우수한 효능을 나타내는 약제를 제공하는 것도 유용하다.

12개의 아미노산 잔기를 가진 뎁시펩타이드 항생제인 로틸리브신은 그람 양성 구균, 특히 메티실린 내성 황색 포도상 구균 (MRSA) 감염에 효과적인 항균 약물로 밝혀졌다. 로틸리브신은 Lysobacter sp.에서 생성된 일련의 항균 활성 성분에서 분리되었다. 미국 특허 번호 제5,648,455호에 개시된 WAP-8294 균주 및 문헌[Harad 등, J. Chromatogr. A, 2001, Vol. 932, No. 1-2, pp. 75-81]로부터 분리되었다.

천연 공급원에서 발견 및/또는 제조된 대부분의 기존 항생제와 달리 로티립신(lotilibcin)은 매우 제한된 수의 세균에서만 강력한 항균 활성을 나타내고 일반적으로 그램 양성 세균에 대해서만 작용하는 고유한 자연 생물학적 프로필을 가지고 있다. 특히, 로티립신은 MRSA, MRSE(메티실린 내성 포도상 구균) 등 약물 내성 포도상 구균에 대해 2시간 이내에 살균 항균 활성을 나타낸다. 따라서, 로티립신은 좁은 범위의 항균 스펙트럼과 강력한 항생제 특성을 가진 항-MRSA 항생제이다.

약물 제제에서 로티립신의 실제 사용을 위해, 미국 특허 번호 제5,648,455호는 통상적인 기술을 사용하는 주사, 경구 제제(정제) 및 외용 제제(연고 및 점안제)를 위한 전형적인 제제를 실시예 13에 개시한다.

주사 또는 점적 주입에 의한 로티립신의 사용을 위해, 미국 특허 번호 제7,968,588호는 안전성을 극적으로 향상시킬 수 있고 특히 MRSA를 사용한 약물 내성 세균에 의한 전신 감염 치료에 효과적인 히드록시프로필-β- 시클로덱스트린을 함유하는 포뮬러를 보여준다. 그러나, 향상되고 예상치 못한 활성을 나타내는 국소 세균 감염 또는 국소 제형에 적용하는 방법에 대한 개시는 없다.

본 발명자들은 국소 세균 감염에 대한 치료약으로서 로티립신을 사용할 가능성을 조사했다. 실제적으로, 단지 일반식을 개시하는 미국 특허 번호 제5,648,455호 또는 점적을 위한 비경구 제형과 관련된 교시인 미국 특허 번호 제7,968,588호로부터의 교시 또는 다른 선행 기술을 사용하여 국소 세균 감염 치료를 위한 국소 제제에 로티립신을 넣는 것이 어려웠다. 그 이유는 다음과 같다.

미국 특허 제5,648,455호에서 언급한 바와 같이 로티립신은 혈청 성분이 존재하는 생리적 환경에서 현저하게 향상된 항균 활성을 갖는 것으로 알려져 있다. 이것은 참신하고, 예상치 못한 일이다. 거의 모든 항생제는 혈청 알부민의 존재하에 상호 작용이 발생할 때 세균에 대해 덜 활동적이다. 따라서, 로티립신은 동물 감염 모델에서 종래 항균제를 능가하는 효능을 발휘한다. 그러나, 미국 특허 제5,648,455호에 개시된 바와 같이 종래 기술에 공지된 제형을 사용하여 기존 항균제와 동일한 용량 이상으로 로티립신을 투여하였을 때, 로티립신에 대한 약리학적 효능은 이에 상응하는 것으로 밝혀졌다. 필요한 약물 농도를 유지하면 특히 조직 학적 변화를 수반하는 자극적 반응 또는 독성 반응의 형태로 독성이 나타난다. 그 결과 안전성과 효능 둘 다를 동시에 확보할 수 없다는 결론을 내릴 수 있다.

또한 과거 오랜 기간에 걸쳐 의료, 축산업, 농업, 임업, 수산업 등의 광범위한 분야에서 세계적으로 항균제가 사용/남용된 결과, 최근에서는, 이들 항균제에 노출된 세균의 미생물학적 진화가 가속되어, 고도의 다중 약물 내성을 획득하는 약물 내성 세균으로의 세균의 변이가 발생한다. 따라서, 20년 이상 전에 발견된 화합물인 로티립신에 대해서, 외용을 목적으로 한 국소 세균 감염 치료제로서, 현재의 고도 약물 내성 세균에 대해 기존의 항균제를 크게 능가하는 약효성을 과학적으로 증명하는 것은 의외였다.

따라서, 본 발명자는 효과적이고 안전한 방식으로 국소 사용을 위해 로티립신을 외용 목적으로 새로운 의약 제제를 찾기 위해 로티립신의 사용을 계속해서 조사하였다.

미국 특허 제5,648,455호 미국 특허 제7,968,588호 미국 특허 제7,968,588호

J. Am. Chem. Soc., Vol. 119:No. 28, 6680-6681 (1997) J. Antibiotics, Vol. 51:No. 10, 929-935 (1998)

본 발명이 해결하고자 하는 과제는, 표적 항균 스펙트럼 범위와 강력한 항생 활성을 갖는 천연 발생 뎁시펩타이드 항생제(바람직하게는, 로티립신)를 포함하는 고효능 및 안전성 프로파일을 갖는 국소용 제제 또는 외용 조성물을 제공하는 것이다. 상기 제제는 로티립신의 항균 작용을 상승적으로 향상시키는 첨가제 물질을 함유한다.

본 발명자들은 상기 문제를 해결하기 위한 진지한 조사를 통해 그 자체로서 방부 또는 항생 효과가 없는 첨가제 수준에 해당하는 저농도의 붕산을 첨가함으로써, 고도의 효능과 안전성을 갖는 외용의 뎁시펩타이드 항생제 함유 제제를 제조할 수 있음을 발견하여 본 발명을 완성하였다.

본 발명에 의하면, 각종 외용 국소 처방 조성물에 있어서 뎁시펩타이드계 항생 물질, 특히 로티립신에 저농도의 붕산을 함유시키는 것에 의하여, 기존의 국소 세균 감염용의 항균약에 비하여 뛰어난 항균 활성을 나타내는 상승 효과를 얻는 것이 가능하게 된다. 이 신규 조성물은, 뎁시펩타이드계 항생 물질의 유효 농도를 현저하게 저하시킬 수 있기 때문에, 고도의 유효성과 안전성이 양립한 외용 처방 조성물이 된다.

도 1은 마우스의 실험적 메티실린 내성 황색 포도상 구균(MRSA) 피부 감염 모델을 이용한 단회 투여에 의한 약효 평가 시험(예비 시험)의 결과를 도시하는 도면이다. 세로축은 1×10⁶ CFU(colony forming unit)의 세균이 접종된 피부에 피험 물질을 도포에 의하여 단회 투여하고, 24시간이 경과한 후에 감염된 피부 조직을 채취하여, 그 피부 조직의 CFU 수를 계수하고, 그 CFU 수의 증감에 의해 유효성을 평가한 결과이다. 가로축은 개별의 검체를 도시하고 있다.
도 2는 마우스의 실험적 메티실린 내성 황색 포도상 구균(MRSA) 피부 감염 모델을 이용한 단회 투여에 의한 약효 평가 시험(주 시험)의 결과를 도시하는 도면이다. 도 1과 마찬가지로, 세로축은 1×10⁶ CFU의 균이 접종된 피부에 피험물질을 도포에 의하여 단회 투여하고, 24시간이 경과한 후에 그 감염된 피부 조직을 채취하여, 그 피부 조직의 CFU 수를 계수하고, 그 CFU 수의 증감에 의해 유효성을 평가한 결과이다. 가로축은 개별의 검체를 도시하고 있다.
도 3은 마우스의 실험적 메티실린 내성 황색 포도상 구균(MRSA) 피부 감염 모델을 이용한 단회 투여에 의한 약효 평가 시험(추가 시험)의 결과를 도시하는 도면이다. 도 1과 마찬가지로, 세로축은 1×10⁶ CFU의 균이 접종된 피부에 피험물질을 도포에 의하여 단회 투여하고, 24시간이 경과한 후에 그 감염된 피부 조직을 채취하여, 그 피부 조직의 CFU 수를 계수하고, 그 CFU 수의 증감에 의해 유효성을 평가한 결과이다. 가로축은 개별의 검체를 도시하고 있다.

용어의 정의 및 사용

이하에, 본 발명을 상세하게 설명한다. 이하의 설명에 있어서 %는 특별히 지정하지 않는 한 중량%이다. 농도(예, mg/mL, mM/ml 등)도 본 발명의 설명에 사용한다.

이하의 용어를 본 명세서를 통하여 본 발명의 설명에 사용한다. 용어가 본 명세서에 구체적으로 정의되지 않은 경우는, 통상의 기술자에 의해 사용되는 것과 마찬가지의 의미로 해석해야 한다.

값의 범위가 제공되는 경우, 문맥이 달리 명시하지 않는 한, 각 중간 값은 하한 단위의 10 분의 1까지로 이해된다. 보다 적은 범위에 독립적으로 포함될 수 있는 그 범위의 상한 및 하한도, 언급된 범위에서 특히 제외되지 않는 한, 본 발명내에 포함된다. 기재된 범위가 한계(상한, 하한) 중 하나 또는 둘 다를 포함하는 경우, 포함된 한계 둘 중 하나를 제외한 범위도 본 발명에 포함된다.

달리 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 모든 기술적 및 과학적 용어는 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 본 명세서에 기재된 것과 유사하거나 동등한 임의의 방법 및 재료가 본 발명의 실시 또는 시험에 사용될 수 있지만, 바람직한 방법과 재료에 대해 설명할 것이다.

본 명세서 및 첨부된 청구 범위에서 사용된 바와 같이, 단수 형태(‘a’, ‘an’, ‘the’)는, 문맥이 달리 명시하지 않는 한, 복수 형태를 포함한다는 것을 유의해야 한다.

또한, 다음 용어는 이하와 같이 정의된다.

용어 ‘환자’ 또는 ‘대상(subject)’은 예방적 치료(예방)를 포함하여 본 발명에 따른 조성물로 치료를 받는 동물, 일반적으로 포유 동물, 특히 가축 및 바람직하게는 인간을 설명하기 위해 명세서 전체에서 사용된다. 인간 환자와 같은 특정 동물에 특정한 감염, 상태 또는 질병 상태의 치료에 있어서, 환자라는 용어는 특정 동물을 말한다. 대부분의 경우, 본 발명의 환자 또는 대상은 성별 중 하나 또는 둘인 인간 환자이다.

‘유효’라는 용어는, 특별히 지정이 없는 한, 어떤 화합물을 그 사용 목적의 범위 내에서 사용하였을 경우에 의도된 결과를 가져오는 양인 것을 의미한다. 이 결과는 감염 및/또는 질환 상태의 예방 및/또는 치료에 관하여, 특히 MRSA 및 다른 본 명세서에 기재된 감염증에 관한 것이고, 경우에 따라서는 상승 효과를 가져오는 것이다. 감염증 질환의 치료에 있어서의 통상의 사용 조건 하에서는, 그 항생 물질로 처치된 세균이 감염 부위로부터 사멸 또는 소실하였을 경우에, 그 항생 물질은 유효하다고 생각된다. 충분한 시간에 걸쳐 사용한 유효한 항생 물질은, 조직 또는 전신의 건전성의 개선도 생긴다. 유효라는 용어는, 본 발명에서 특히 설명 또는 사용되어 있지 않은 다른 모든 유효량 또는 유효 농도의 용어(‘치료에 유효’라는 용어도 포함한다)를 포함한다. ‘치료에 유효한 농도’라는 용어는, 처치 부위 또는 증상의 처치에 있어서의 예방, 치유, 치료, 안정화, 개선을 일으키는 항생 물질의 농도 또는 양이라고 정의되며, MRSA의 감소 또는 제거를 포함할 수도 있다.

따라서, 여기에 제공되는 것은, 본 발명에서 제공되는 항균 조성물과 접촉시키는 것에 의한 세균의 사멸 방법이다. 일례에 있어서, 사멸시키는 세균은 포도상 구균(Staphylococcus)이다. 일부의 예에서는, 세균의 사멸은, 그것을 본 항균 조성물과 접촉시키고 나서 10분 이내, 15분 이내, 20분 이내, 또는 30분 이내(예를 들어, 10-30분, 10-20분 또는 10-15분 이내)에 일어난다. 일부의 예에서는, 본 조성물과 접촉한 세균 모두가 사멸하는 것이 아니더라도 본 조성물은 항균 조성물이다. 예를 들어, 일부의 예에서는, 본 항균 조성물과 접촉시키고 나서 10분 이내, 15분 이내, 20분 이내, 또는 30분 이내(예를 들어, 10-30분, 10-20분 또는 10-15분 이내)에 사멸한 미생물이 90% 이상, 95% 이상, 99% 이상, 99.9% 이상, 99.99% 이상, 또는 99.999% 이상(예를 들어, 균이 1/10 이하, 1/20 이하, 1/30 이하, 1/40 이하, 1/50 이하, 또는 1/100 이하로 감소)이다.

‘화합물’이라는 용어는, 본 명세서에 개시한 특정의 화합물 또는 생활성의 약제를 기술하기 위하여 사용하고, 그 모든 입체 이성체(부분 입체 이성질체, 개개의 광학 이성체/거울상 이성질체 또는 라세미 혼합물 및 기하 이성체를 포함한다)를 포함한다. 본 명세서에 있어서의 화합물이라는 용어는 안정한 화합물을 의미한다. 화합물은, 설명에 따라, 단일 화합물이어도, 2종 이상의 화합물의 혼합물이어도 무방하다.

본 명세서에서 이용한 ‘약학적으로 허용되는’라는 용어는, 그 화합물 또는 조성물이, 질환의 위중성 및 처치의 필요성을 고려하여 과도한 부작용을 생기게 하지 않고 본 명세서 기재의 처치 목적을 달성하기 위하여 대상에게 투여하는 데에 적합한 것을 의미한다.

용어 ‘독립적으로’는 독립적으로 적용되는 변수가 적용마다 독립적으로 변함을 나타내기 위해 본 명세서에 사용된다.

용어 ‘약’ 및 ‘대략’은 등가물로 사용된다. 이 출원에서 사용된 임의의 숫자는 관련 통상의 기술자에 의해 인지되는 임의의 정상적인 변동을 포함하는 것을 의미한다. 예를 들어, 본 명세서에 사용된 용어 ‘대략’ 또는 ‘약’은 하나 이상의 관심 값에 적용되며, 언급된 참조 값과 유사한 값을 의미한다. 특정 실시 형태에서, 문맥에 따라, 용어 ‘대략’ 또는 ‘약’은 어떤 방향으로든(그 보다 크거나 보다 적거나) 15%, 14%, 13%, 12%, 11%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1% 또는 이하, 종종은 문맥으로부터 달리 명시되지 않는 한(그러한 수치가 양수의 100%를 넘는 경우를 제외함) 언급된 기준 값의 5% 또는 그 이하에 포함되는 수치 범위를 말한다.

국소 조성물, 국소 적용

‘국소 조성물’이라는 용어는, 국소 제형으로 외용 투여되는 조성물을 의미한다. 국소 투여용의 일반적인 처방 조성물은 Remington's Pharmaceutical Sciences, 18판, Mack Publishing, p.1288 - 1300(1990)에 기재되어 있다. 따라서 일부의 태양(態樣)에서는, 조성물의 제형은, 수성 겔 혹은 페이스트, 연고, 크림(무수 혹은 함수), 로션(무수 혹은 함수), 에멀젼, 스프레이, 용액, 에어졸, 스틱(고체 크림), 액체 반창고, 분말, 흡입 스프레이, 점비 스프레이, 기초적 적제(滴劑)(드롭), 뺨 드롭(cheek drop), 설하(舌下) 드롭, 점안액 또는 스프레이, 점이액 또는 스프레이, 및 경피 패치가 된다.

‘국소 적용’이란, 본 명세서에 기재되지 않은 한, 질병 상태 및/또는 상태의 치료에서 환자 또는 대상체의 외부 표면에 조성물을 투여하는 것을 기술하기 위해 사용된다. 전술한 국소 적용을 위한 조성물은 화장용 및 치료용 둘 다를 위한 사용을 발견하기 위해 검토된다. 치료적 용도는, 감염증, 대부분은 세균 감염, 특히 약제 내성 세균 감염의 치료용이다. 일부의 태양에서는, 상기 조성물은 피부 또는 신체의 다른 표피 표면에 직접 도포되는 것이다. 본 조성물은 증상에 따라 하루에 1, 2, 3 또는 그 이상의 적당한 횟수로 도포할 수 있다. 도포량은 일반적으로 중요하지 않지만, 대부분은 하루당 약 0.001mg ~ 5.0g 또는 그 이상(대부분은 약 1mg 이상 ~ 약 2g까지)을 포함하는 조성물을 신체의 소정의 표면에 복수 회로 나누어 도포할 수 있다. 후술하는 바와 같이, 국소 조성물은, 방부제, 계면 활성제, 아쥬번트, 담체, 다른 유효 성분 등의 다른 성분을 함유할 수 있고, 특히 겔, 크림, 연고, 로션, 액체 등의 형태를 취할 수 있다.

‘항균’이라는 용어는, 화합물이 세균을 사멸시키거나, 또는 세균의 증식을 저해하는 것을 설명하는 의미로 본 명세서에서는 사용한다. 이와 같은 화합물은 항생 물질 또는 정균 물질이라고 불리기도 한다.

‘방부제’라는 용어는, 환자의 표면에 국소 적용될 수 있는 항미생물성 물질이라고 정의된다. 본 태양에 있어서, 붕산은 대체로 방부성 물질로 분류된다. 본 발명의 새로운 지견(知見)에 의하면, 방부성의 붕산을, 약제로서의 작용이 인정되지 않는 저농도로, 뎁시펩타이드류, 특히 로티립신과 같은 항생 물질과 병용하는 것에 의하여, 포도상 구균과 같은 어떤 종류의 세균에 대한 항균 활성의 상승 효과적인 개선과 효력 증대가 달성될 수 있다.

여드름의 정의

본 명세서에서 이용한 ‘여드름’이라는 용어는, 심상성 여드름, 독물성 여드름, 낭포성 여드름, 섬광상(閃光狀) 아크네, 구진성(丘疹性) 여드름, 농포성(膿疱性) 여드름, MRSA 기인 여드름, 및 결절 낭포성 여드름으로 이루어지는 군으로부터 선택된 증상을 의미한다. 여드름의 치료에 사용하는 경우, 본 발명의 국소 처방 조성물은, 항(抗)여드름 치료에 이미 사용되고 있는 추가의 처방 성분을 한층 더 함유할 수 있다. 본 조성물에 사용하는 경우, 뎁시펩타이드계 항생 물질 및 방부성의 붕산과의 병용에 유용한 항여드름제는, 과산화 벤조일, 살리실산 및 레티노이드로 이루어지는 군으로부터 선택할 수 있다.

상처와 상처 감염의 정의

본 명세서에서 이용한 ‘상처(wound)’란 조직의 손상이라고 정의되고, ‘감염 상처’ 또는 ‘상처 감염’이란, 통상은 조직 손상의 결과로서 일어나는 감염이라고 정의된다. 이 조직 손상으로서는, 화상, 열상(裂傷), 찰과상, 교상(咬傷), 수술창, 자창(刺創), 궤양을 들 수 있고, 그것들에 한정되지 않지만, 복잡 피부·연부 조직 감염(cSSTI) 유래의 급성 및 만성 상처, 피부·피부 구조 감염(SSSI) 유래의 급성 및 만성 상처, 정맥 울혈성 궤양, 당뇨병성 궤양, 압박 궤양, 수술 후 궤양, 외상 후 궤양 및 자연 궤양을 포함한다.

상승 및 그에 따른 이익의 정의

본 명세서에서 이용한 ‘상승’ 및 ‘상승 작용’이란, 의학에 있어서 특정 목적으로 병용된 2종류의 물질의 어떤 종류의 상호 작용을 의미한다. 물질이 조합될 때, 다른 물질이 있는 상태에서 한 물질의 작용은 마치 하나가 두 배가 된 것과 같을 수 있으며 따라서 작용은 두 배가 되는데, 이는 첨가제로 정의된다. 부가적 상호 작용에서 두 번째 물질은 다른 물질보다 두 배 더 많은 것을 재현하는 것 외에는 이익이 없다. 상승 작용은 두 물질의 조합으로 인한 결과가 앞서 언급한 두 배를 넘을 때 발생한다. 상승 효과의 일반적인 정의는 조합의 2배를 넘는 작용을 포함하며, 실제 사용시 일반적으로 조합시 구성 요소의 4배를 넘는 것으로부터 10배를 넘는 향상을 의미한다.

감염 부위에서 세균을 죽이는 것과 같은 유익한 작용 외에도 항생제와 소독제 및 상처 감염의 내인성 분자 간의 유익한 상승적 효과에는, 섬유 아세포 이동 자극, 엘라스틴 생성 촉진, 염증 인자 발현 감소 및 특정 유전자의 상향 조절, 피부의 잔주름 감소, 피부색 정상화, 피부 색소 균형 조절, 피부 발적 감소, 피부 밝기 증가, 피부 수분 함량 및 수분 증가, 피부 피지 양 감소 또는 정상화, 멜라닌 생성 감소, 콜라겐 단백질 생산 증가, 콜라겐 유전자 발현 증가, 성체 줄기 세포 증식 증가, 탄수화물의 세포 대사 증가, 지질의 세포 대사 증가, 아포토시스 예방, 혈관 신생 증가, 세포의 세포주기 상향 조절, 혈관 신생 증가, 여포 발달 증가가 포함된다.

외용을 위한 뎁시펩타이드 로티립신 및 붕산의 상승적인 조합

본 발명은, 세균 감염, 보다 고빈도에는 세균 상처 감염증의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 유효량의 뎁시펩타이드계 항생 물질을 함유하는 국소 도포용 조성물로서, 붕산을 적어도 0.01 중량% 더 함유하는 조성물에 관한 것이다. 특정의 바람직한 실시 형태에 있어서, 붕산의 농도는 약 5.0 mM/ml (약 313μg/mL) 이상 약 40 mM/ml (약 2500μg/ml) 이하의 범위이고, 뎁시펩타이드의 농도는 약 18 nM/ml (약 0.03μg/ml) 이상 또는 약 152 nM/ml (약 0.25μg/ml) 이상 약 4881 nM/ml (약 8.0μg/ml) 이하의 범위이다.

본 발명의 대상이 되는 뎁시펩타이드계 항생 물질이란, 일반적으로 펩타이드 구조 중의 아미노산 잔기끼리가 아미드 결합(－CONHR－, R은 아미노산의 측쇄)에 의하여 그 분자가 구성되는데, 적어도 1개 이상의 아미드 결합이 에스테르 결합(－COOR－)으로 치환된 구조를 가지는 화합물을 가리킨다. 본 발명에서 사용하는 뎁시펩타이드계 항생 물질로서는, 12개의 아미노산 잔기에 의하여 구성되는 분자 구조를 가지는 것이 바람직하고, 특히 하기 화학 구조식 (1)로 나타내지는 로티립신 또는 그 약학적으로 허용되는 염 또는 입체 이성체가 바람직하다.

로티립신을 포함하는 뎁시펩타이드 항균제는, 그 약학적으로 허용되는 염의 형태로 사용할 수도 있다. 약학적으로 허용되는 염의 예로서는, 무기산염, 예를 들어, 염산염, 취화 수소산염, 요오드화 수소산염 등, 및 유기산염, 예를 들어, 주석산염, 구연산염, 톨루엔술폰산염 등을 들 수 있다. 로티립신의 특히 바람직한 염은 이염산염이다.

뎁시펩타이드계 항생제의 본 외용 조성물 중의 함유량은, 표적 대상으로 하는 세균의 종류나 감염증의 종류와 위중도, 질환의 부위, 치료·예방의 사용 용도별이나 약제의 제형 등에 의하여 각각 다른 것이지만, 붕산과의 병용에 의하여 그 항균 활성을 유의하게 발휘할 수 있도록 설정된다. 조성물 중 뎁시펩타이드 항생제의 최소량은 바람직하게는 적어도 0.01 중량%, 보다 바람직하게는 적어도 0.05 중량%, 가장 바람직하게는 적어도 0.1 중량%이고, 최대량은 바람직하게는 5.0 중량%, 보다 바람직하게는 2.5 중량%, 더욱 더 바람직하게는 2.0 중량%, 가장 바람직하게는 1.0 중량%이다. 보다 구체적으로는, 로티립신 또는 다른 뎁시펩타이드계 항생제의 최종 외용 조성물 중의 함유량은, 최종 조성물의 중량에 대해, 바람직하게는 0.01 ~ 5.0 중량%, 보다 바람직하게는 0.05 ~ 2.5%, 한층 더 바람직하게는 0.05 ~ 2.0%, 가장 바람직하게는 0.1 ~ 1.0%이다. 바람직한 일 태양에 있어서, 본 약제 조성물은 50 또는 100그램의 튜브에 충전되고, 환자 또는 대상의 환부에 조성물의 유효량(대부분은 약 1 ~ 2그램)을 하루에 4 ~ 5회 문질러 바르는 것에 의하여 투여된다. 전형적으로는, 이와 같은 조성물은, 환자 또는 대상의 환부에 하루당 약 100 ~ 500mg 또는 그 이상, 바람직하게는 약 250mg까지의 붕산과, 약 2.5 ~ 15mg, 바람직하게는 약 10mg까지의 뎁시펩타이드계 항생 물질(바람직하게는 로티립신)을 투여하게 된다.

본 발명에 의하여 항균력 증강의 목적으로 배합하는 붕산은, 제제 중에 배합하는 것이 허용되어 있는 붕산 나트륨(붕사), 붕산 암모늄 등의 붕산염 또는 붕산 에스테르(이하에서는 붕산 유도체라고 칭한다)의 형태로 사용할 수도 있다. 그 경우에는, 최종 조성물 중 붕산 나트륨, 붕산 암모늄 또는 그에 상응하는 에스테르(‘붕산 화학제(boric acid chemical agent)’)의 양(중량)은 본 발명에 전형적으로 사용되는 붕산의 양에 적합하도록 조정된다. 그러므로, 붕산 화학제의 중량은 최종 조성물 중에 사용된 붕산(전술한 바와 같음)의 몰 당량과 같은 양으로 포함된다. 예로서, 본 출원의 조성물에 사용된 붕산의 양은, 본 발명의 조성물에 포함되어야 하는 붕산 화학제의 양(중량)을 결정하기 위해 사용된 붕산 화학제의 몰 당량으로 전환된다. 붕산의 양으로부터 전환된 붕산 화학제의 양은 상술한 범위내에 들어간다.

첨가되는 붕산의 양은, 로티립신의 항생 활성이 그러한 양의 붕산의 존재 하에서 향상될 수 있음을 확인하였으므로, 최종 조성물의 0.01 중량% 이상이다. 붕산의 첨가량의 하한은 바람직하게는 0.05 중량%, 한층 더 바람직하게는 0.1 중량%이고, 상한은 바람직하게는 5.0 중량%, 보다 바람직하게는 2.5 중량%, 한층 더 보다 바람직하게는 2.0%, 가장 바람직하게는 1.0 중량%이다. 보다 구체적으로는, 붕산의 첨가량은, 바람직하게는 0.01 ~ 5.0 중량%, 보다 바람직하게는 0.05 ~ 2.5 중량%, 한층 더 바람직하게는 0.05 ~ 2.0 중량%, 한층 더 보다 바람직하게는 0.1 ~ 1.0 중량%이다. 붕산을 대체할 수 있는 붕산 화학제가 일반적으로 붕산보다 더 큰 몰 중량을 갖는다는 점을 감안할 때, 사용되는 붕산 화학제의 양은 일반적으로 붕산에 대해 상기 범위 이상이다.

붕산은, 의료의 현장에서 이용되는 화합물로서의 역사가 매우 깊다. 1702년에 네델란드의 화학자 Wilhelm Homberg에 의하여 그 결정 화합물이 처음으로 황산철과 붕사의 증류로부터 취출되었다. 그 후, 1875년대 후반에는 영국의 외과의 Joseph Lister에 의하여 붕산을 비등시키고 천에 스며들게 한 후에 건조한 것(boracic lint)을 외과 의료에 있어서의 소독용으로 이용하는 것이 제창되었다.

일본 내에서는, 붕산은 과거에 10%(w/v)의 고농도로 배합된 붕산 연고 및 붕산 아연화 연고가 일본 약국방 의약품으로서 수재되고, 의료용으로 이용되어 왔다. 그러나, 국내외에 있어서의 붕산에 의한 중독 사례나, 경피 흡수에 의한 안전성 면의 문제가 평판에 이르러, 1985년의 의약품 재평가 - 의료용 그 24(쇼와 60년 7월 30일, 약발 제755호)에 있어서, 10% 붕산 연고, 10% 붕산 아연화 연고는 각각 ‘유용성이 없다’, ‘배합 의의가 인정되지 않는다’라고 판정되었다. 그 결과, 이것들의 붕산 연고, 붕산 아연화 연고, 나아가 붕사 글리세린에 관하여도 일본 약국방 및 약가 기준으로부터 삭제되었다.

따라서, 오늘날에는 붕산은, 2% 이하의 저농도의 붕산에 한하여, 안과 영역의 적용으로서 ‘결막낭의 세정·소독’에만 유용성이 인정되고, 사용이 인정되고 있다. 그 외, 이 2% 이하의 약효를 발휘하지 않는 저농도 붕산은, 안정화제, 완충제, 등장화제, pH 조절제, 방부제, 보존제, 용해 보조제의 목적으로 사용하는 의약품 첨가제로서 일본 내에서는 외용 용도(경피)로 18mg/g(1.8%(w/w)), 안과 용도로 20mg/mL(2.0%(w/v)), 이비과 용도로 20mg/mL(2.0%(w/v))까지의 사용이 인정되고 있다.

즉, 붕산은 10% 정도의 고농도에 있어서는 의료 용도에 있어서 어느 정도의 유용성이 인정된 과거가 있지만, 이와 같은 고농도에 있어서는 유효성 이상으로 안전성의 문제를 일으키는 것이 밝혀진 이후, 의료의 현장에서의 유용성은 의약품 당국에 의하여 인정되지 않고, 단체(單體)에서의 산업 실용화에는 적합하지 않게 되었다. 한편, 2% 이하의 저농도에서는, 붕산은 의약품 성분 상당의 유효성이 나타내지는 일은 없고, 안과 용도의 세정용 외에, 외용 용도에서의 의약품 안정화 작용, 완충 작용, 등장화 작용, 용해 보조 작용, pH 조절, 방부·보존의 목적으로 대체 선택지가 존재하는 첨가제로서만 사용되는 것에 지나지 않는다.

세균의 정의

본 발명의 외용 조성물은, 약제 내성형의 균을 포함하는 황색 포도상 구균(Staphylococcus aureus), 표피 포도상 구균(Staphylococcus epidermidis), 프로피오니박테륨속(Propionibacterium), 바실루스속(Bacillus) 등의 그램 양성균(약제 내성 세균(예, MRSA로 약칭되는 메티실린 내성 황색 포도상 구균(Methicillin Resistant Staphylococcus aureus aka)을 포함한다)이고, 로티립신으로 대표되는 뎁시펩타이드계 항생 물질이 항균 활성을 나타내는 균을 그 대상 세균으로 한다.

황색 포도상 구균은, 사람이나 동물의 피부, 비공 등에 상주하는 균이지만, 피부의 절창(切創)이나 자창 등에 기인하는 국소 감염증 외, 눈이나 귀, 코에도 각종 감염증을 일으킨다. 증상이 진행하였을 경우, 폐렴, 복막염, 패혈증, 수막염 등의 생사에 관련되는 위중한 감염증에 이르는 경우도 있다. 당해 균, 특히 메티실린 내성 등의 약제 내성균은 의료 시설에서의 원내 감염에 더하여, 시중 감염의 확대도 문제가 되고 있기 때문에, 이 균에 의한 피부 등의 국소 감염증이나, 수술창 감염증의 예방 및 치료, 또한 공중 위생의 측면으로부터 중요해지는 의료 시설 내 등에 있어서의 감염 확대 방지책으로서의 사용 용도에도 본 외용 조성물은 유용하다.

프로피오니박테륨속에 속하는 아크네균(Propionibacterium acnes)에 관하여는, 여드름(심상성 여드름)의 발생에 관여하고 있고, 본 발명의 외용 약제 조성물은 당해 균에 대하여도 유효하다. 따라서, 본 발명의 외용 조성물은 여드름 일반의 치료에도 사용할 수 있고, 여기서 여드름이란, 심상성 여드름, 독물성 여드름, 낭포성 여드름, 섬광상 아크네, 구진성 여드름, 농포성 여드름, MRSA 기인 여드름, 및 결절 낭포성 여드름으로 이루어지는 군으로부터 선택된 증상이다. 이 경우, 본 외용 조성물은, 유효량의 붕산 또는 그 유도체와 로티립신에 더하여, 유효량의 과산화 벤조일, 살리실산 및/또는 레티노이드를 한층 더 함유하는 것이 바람직하다.

바실루스속의 균에 관하여는, 특히 탄저균이 인축(짐승) 공통 감염증의 원인균으로서 중요하고, 통상의 접촉 감염 경로 이외에 비말 감염을 일으키는 종류의 균인 것으로부터, 당해 균에 의한 불측의 감염을 미연에 방지하는 용도로서도 본 발명에 의한 외용 조성물의 이용이 유용하다.

본 발명의 외용 조성물에 의한 치료·예방의 대상이 되는 세균 감염에 관하여는, 사람뿐만 아니라 개, 고양이, 가축 등의 포유동물의 감염증도 그 대상에 포함된다.

본 발명의 조성물 및 성분

본 발명의 국소용/외용 조성물은, 상기의 세균류에 인한 감염증 치료·예방을 위한 피부, 눈, 귀, 코로의 국소 투여(예, 도포제, 점안제, 점이제, 점비제로서), 함수(含嗽)용 제제로서 입 안으로의 적용, 나아가서는 흡입 제제로서 호흡기로의 투여에 유효하다. 본 국소 조성물은, 대상 또는 환자의 항문/직장 또는 질(膣)에 투여되는 제형으로 제제화하여도 무방하다.

제형으로서는, 액체상(용액, 현탁액, 에멀젼 혹은 분산액), 연고, 겔, 에어졸, 고체, 크림 등, 여러 태양으로서 사용할 수 있다.

제제상의 필요에 따라, 계면 활성제, 부형제, 유성제(油性劑), 증점제, 방부제, 비타민제, Ph 조정제, 항산화제, 착색제, 향료 등의 약학적으로 허용되는 1종 또는 2종 이상의 보조 첨가 성분을 적의하게 함유시킬 수 있다. 이것들은, 예를 들어, 음이온 계면 활성제, 비이온 계면 활성제, 양성 계면 활성제, 탄화 수소, 천연 유지, 지방산, 고급 알코올, 알킬 글리세릴 에테르류, 에스테르류, 실리콘유류, 다가 알코올, 저급 알코올, 당류, 고분자 화합물, 혈청 성분, 분체(粉體)류, 염류, 유기산류, 물 등을 포함한다.

계면 활성제로서는, 폴리옥시에틸렌 고급 지방산 에테르, 소르비탄 지방산 에스테르, 폴리옥시에틸렌 글리콜 모노올레이트, 폴리옥시에틸렌 경화 피마자유 등의 비이온 계면 활성제, 지방산 모노카르본산, 폴리옥시에틸렌 알킬 에테르 초산염, 폴리옥시에틸렌 알킬 황산염 등의 음이온 계면 활성제, 알킬아미노베타인, 이미다졸린형, 글리신형 등의 양성 계면 활성제 등을 들 수 있다.

부형제로서는, 물, 알코올, 글리세린, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 하이드록시에틸 셀룰로오스, 소르비톨, 카르복시메틸 셀룰로오스, 결정 셀룰로오스, 전분, 덱스트린, α-시클로덱스트린, 하이드록시프로필-β-시클로덱스트린, 침강 실리카 등을 들 수 있다. 유성제로서는, 야자유, 팜유, 올리브유, 유동 파라핀, 스콸렌, 바셀린, 올레인산, 세틸 알코올, 스테아릴 알코올, 이소스테아릴 알코올, 디메틸폴리실록산, 폴리옥시에틸렌 스테아릴 에테르 등을 들 수 있다. 증점제로서는, 카르복시비닐 폴리머, 카르복시메틸 셀룰로오스, 카라기난, 알긴산 나트륨 등을 들 수 있다. 방부제로서는, 안식향산, 디하이드로 초산, 소르빈산, 염화 벤잘코늄, 옥시 안식향산 알킬 에스테르 등을 들 수 있다. 비타민제로서는, 비타민 A, 비타민 B, 비타민 C, 비타민 E 등을 들 수 있다.

본 발명의 국소/외용 조성물은, 종래부터 알려진 일반적인 제제의 제조 방법에 의하여 제조할 수 있다. 투여 빈도 또는 횟수는 한정적이지는 않지만, 많은 경우, 처치하여야 할 적응증 또는 증상에 따라 적의 하루에 1, 2, 3 또는 그 이상의 횟수로 투여 또는 도포가 행하여진다. 유효량이 공급되는 한, 소기의 치료 결과를 달성하기 위한 본 외용 조성물의 도포량은 일반적으로 한정되지 않는다. 많은 경우, 질병 상태 및/또는 증상의 처치에 있어서 소기의 결과를 달성하는 데에 신체의 소정 표면에 0.001mg ~ 1.0그램의 조성물을 도포할 수 있다. 상술한 바와 같이, 본 외용 조성물은 방부제, 계면 활성제, 부형제, 담체, 다른 유효 성분 등을 함유할 수 있다. 본제는 매일 1회 또는 복수회 투여할 수 있지만, 보다 긴 투여 간격도 가능하다.

이하의 시험예에 있어서, 붕산 병용에 의한 뎁시펩타이드계 항생 물질의 항균 활성을 증강하는 효과를 실증한다. 시험예에서는, 뎁시펩타이드계 항생 물질로서, 그 대표예인 로티립신을 이용하였을 경우에 관하여 설명한다. 덧붙여, 시험에 실제로 이용한 화합물은 로티립신 이염산염이다.

실시예 1

로티립신의 항균력에 미치는 붕산의 영향 평가

로티립신의 항균력에 미치는 붕산의 영향을 평가하기 위하여, 마우스의 MRSA 피부 감염 모델을 이용하여, 이것에 단회 투여 실험을 행하고, 약효 평가를 검토하였다. 당해 시험에 있어서의 비교 대조(양성 대조)용 검체에는, 실제로 의약품 용도로서 임상에서 범용되고 있는 외용 항균제 무피로신을 이용하였다.

(1-1) in vitro 시험

마우스에서의 검토에 앞서, 당해 약효 평가 시험에서 이용하는 피험균(被檢菌)을 이용하여 각 화합물의 항균 활성을 측정하였다. 측정 방법은 일본 화학 요법 학회가 정하는 표준법(미량 액체 희석법)에 준하였다. 배지(培地)로는, 혈청 성분으로서 5% FBS(태아 소 혈청)를 첨가하거나 첨가하지 않은 Cation-adjusted Mueller-Hinton 배지(CAMHB)를 사용하였다.

그 결과, 표 1에 나타내는 바와 같이, 로티립신의 항균력은 혈청 성분(FBS)이 존재하지 않는 조건에서는 무피로신보다 약한 것이 밝혀지고, 혈청 성분 존재하의 조건에서는 무피로신과 거의 동일한 정도의 항균력을 나타내었다. 붕산 단독으로는 0.25%(2500μg/mL)에 상당하는 농도에서 항균력을 나타내고, 혈청 성분 첨가의 유무는 그 항균력에 영향을 주지 않았다.

(1-2) 마우스에 있어서의 약효 평가 시험

상기 항균 활성의 측정 결과를 바탕으로, 마우스의 MRSA 피부 감염 모델을 이용한 단회 투여에 의한 약효 평가 시험을 행하였다.

이 시험에서는, 일반적으로 알려진 수용성 연고 기제(글리세린, 이하 용제라고도 한다)에 피험 물질을 혼합, 용해시키고, Ph 조절제를 적의 더하여 pH 5 전후 부근에 조절한 저자극성의 처방을 조제하고, 시험에 제공하였다.

당해 시험은, 예비 시험과 메인 시험으로 나누어 실시하였다.

예비 시험

예비 시험에서는, 표 2에 나타내는 바와 같이, 각종 농도의 로티립신 혹은 붕산 단독에 더하여, 무피로신 2%(양성 대조 검체)를 단회 투여하고, 유효성에 관하여 용량-반응성을 확인하였다.

예비 시험의 실시 방법은, 다음과 같다. 즉 마우스의 배부(背部)에 실험적 열상처 부위를 작성한 후, 한 마리당 1×10⁶ CFU의 MRSA를 환부 피하에 접종하여 피부 감염을 일으키게 하고, 이것에 다음날, 피험물질 각종을 세 마리/군씩 단회, 경피 투여하고, 나아가 하루 경과한 감염 부위로부터 피부 조직을 채취하여 균수의 증감을 세균학적 수법에 의하여 측정하고, 유효성을 평가하였다.

당해 시험에 있어서는 붕산의 피험 농도로서 0.1% 및 1.0%의 농도를 평가 대상으로 하였다. 붕산의 용량 설정에 있어서는, 전에 상세하게 설명한 바와 같이, 붕산의 역사적 배경을 고려하였다. 즉, 붕산은 10% 이상의 고농도에 있어서는, 유효성 이상으로 안전성의 문제를 일으키는 것이 밝혀졌다. 한편, 2% 이하의 저농도에서는, 의약품 성분 상당의 유효성이 나타나는 일은 없고, 안과 용도의 세정용 외에, 외용 용도에서의 의약품 안정화 작용, 완충 작용, 등장화 작용, 용해 보조 작용, pH 조절, 방부·보존의 목적으로 대체 선택지가 존재하는 첨가제로서 사용되는 것에 지나지 않는다.

예비 시험의 결과, 도 1에 도시하는 바와 같이, 로티립신 단독 투여는, 0.02%, 0.2%, 0.5%의 3종류의 농도에 관하여, 농도에 의존하여 유효성이 확인되고, 0.5%의 농도에 관하여는 비교 대조 검체인 무피로신 2%에 상당하는 약효를 나타내는 것이 밝혀졌다.

한편, 붕산은, in vitro에 있어서 피험균에 대한 발육 저지 농도가 0.25%(2500μg/mL) 상당이었지만, 동물 감염 모델에 있어서의 약효 평가에서는 이 농도의 4배에 상당하는 1%(10000μg/mL)의 농도를 투여하여도, 음성 대조 검체와 동일한 정도 이하의 균수 변화를 나타낼 뿐이었다. 즉, 붕산 자체의 균의 발육을 저지하는 항균력에 관하여는, 0.1 ~ 1%의 범위에서는 동물 감염 모델의 경우에는 전혀 효과가 없는 것을 알았다.

주 시험

주 시험에서는, 로티립신 0.5%에, 예비 시험에서 항균력을 인정하지 않는 1% 붕산을 배합한 처방을 준비하고, 이것을 양성 대조 검체인 무피로신 2%와 비교하는 형태로 마우스 MRSA 피부 감염 모델에 단회 도포 투여하고, 약효 평가를 행하였다.

결과를 도 2에 도시한다. 놀랄 만한 일로, 로티립신 0.5%에, 항균력을 가지지 않는 저농도의 붕산 1%를 배합한 처방을 단회 경피 투여한 군에서는, 무피로신 2%와 비교하여, 100배에 이르는 균수의 감소를 인정하고, 당해 처방이 매우 강한 약효를 나타내는 것을 확인하였다.

추가 시험

본 발명자는, 주 시험에서 얻어진 완전히 새로운 지견을 바탕으로, 추가 시험을 실시하였다. 즉, 로티립신, 붕산의 농도를 한층 더 1/2로 낮추고, 로티립신 0.25%에 붕산 0.5%를 더한 처방을 준비하고, 무피로신 2%와의 약효 비교를 행하였다.

그 결과, 도 3에 도시하는 바와 같이, 역시 로티립신 0.25%에 붕산 0.5%를 배합한 처방에 있어서도, 무피로신 2%와 비교하여 유의(有意)하게 균을 감소시키는 항균력을 나타내었다.

이상의 일련의 평가 검토로부터 분명한 바와 같이, 본 발명자는, 뎁시펩타이드계 항생 물질인 로티립신에 저농도의 붕산을 배합하는 것에 의하여, 화합물의 유효성 프로파일을 비약적으로 높이는 것에 성공하였다.

본 발명에 의한 처방을 이용하면, 항생 물질 로티립신을 사람이나 동물류의 각종 세균 감염 치료를 위하여 외용 항균약으로서 이용할 때에, 치료 효과 혹은 예방 목적으로서의 감염 방어 효과를 비약적으로 높이는 것이 가능하다. 또한, 이 효과에 의하여 치료 자체에 요하는 기간 전체를 큰 폭으로 단축하는 것도 가능하고, 결과적으로 투여량·빈도의 저감을 가져오는 안전성이 높은 항균약으로서, 나아가서는 항균약 폭로의 전체의 현저한 양적 저감에 의한 내성균 억제에도 공헌할 수 있는 외용제로서 의료의 현장에 제공하는 것이 가능하다.

실시예 2

in vitro의 항균 활성 측정 시험과 동물을 이용한 약효 평가 시험과의 관련

본 발명자는, 상기 시험예 1에 나타내는 바와 같이, 동물을 이용한 약효 평가 시험의 결과, 붕산을 병용하는 것은 외용 용도를 목적으로 하는 뎁시펩타이드계 항생 물질 로티립신의 의약품으로서의 실용성에 관하여 놀라울 정도의 플러스의 영향을 가져온다고 하는 신규의 지견을 얻었다. 그러나 한편으로, 당해 결과가 얻어진 것에 의하여 본 발명자는, 새롭게 부차적으로 생긴 과제와도 마주보지 않으면 안 되게 되었다. 그것은 즉, 동물의 약효 평가 시험으로부터 얻어지는 유효성 데이터를, 약제 감수성 시험과 같은 간편한 in vitro의 항균 활성 측정 시험에 있어서, 재현하여야 하는 것이다.

의료용 항균약은, 일반적으로 병원 등의 의료 시설의 임상 검사부에 있어서는 간편한 in vitro의 시험이 실시되고, 이 얻어진 수치의 결과로부터, 인체에 투여하는 경우의 유효성을 예측하고, 항균 치료를 위한 실제의 처방 투여가 이루어지는 프로세스를 거치는 것이다.

본 발명자가 미리 실시한, 동물을 사용하지 않는 일련의 in vitro에서의 검토에 있어서는, 로티립신에 붕산이 더하여져도, 병용에 의한 항균력의 현저한 상승을 확인하기까지는 이르지 않았다.

(2-1) in vitro MIC 시험

그래서, 당해 과제를 해결하기 위하여, 추가 검토로서, in vitro의 조건에서 로티립신에 대한 붕산의 항균력 증강 작용의 용량-반응성을 밝히기 위한 검토도 행하였다. 즉, 각종 농도의 붕산을 배합한 조건에 있어서 로티립신의 MRSA 임상 분리주에 대한 항균력을 측정하였다. 측정 방법은 일본 화학 요법 학회가 정하는 표준법(미량 액체 희석법)에 준하여, 배지에는 Cation-adjusted Mueller-Hinton 배지(CAMHB)를 사용하였다. 로티립신의 농도는 로티립신 단독의 MIC에 대응해서 1 μg/mL로 고정되었다.

이 시험에서는 로티립신의 항균 활성을 증강시키는 것이 이미 알려진 혈청 성분 FBS를 양성 대조 검체로 하였다. 미리, 당해 시험에서 이용하는 피험균에 대한 붕산 단독의 항균 활성을 미리 평가하였는데, 항MRSA 활성(MIC)은 2500μg/mL(0.25%에 상당)였다.

이 시험의 결과를 표 5에 나타낸다. 이 결과로부터, 붕산 첨가 조건에 관하여는, 당해 화합물이 균발육을 저지하는 0.25% 이상의 농도에서는, 붕산 자체의 항균 작용에 의한, 외관상의 MIC값의 저하가 인정되었다. 단, 상기의 마우스 약효 평가 시험의 결과로부터는 도 1에 도시하는 바와 같이, 붕산 단독 조건에서는 1%의 비교적 높은 농도 조건이어도 항균 작용(약효)이 조금도 확인되지 않았기 때문에, 당해 in vitro 검토에 있어서의 결과는 동물에서 확인된 약효(붕산 병용에 의한 상승 효과)에 그대로 적용시킬 수 없는 것이 밝혀졌다.

붕산 농도가 0.1% 이하의 조건에서는 로티립신 항균력의 증강 작용은 전혀 인정되지 않았다. 붕산 농도 0.2%의 조건은, 로티립신의 항균력(MIC값)의 증강을 약하게 인정하였지만, 당연히, 동물에서의 검토 결과(붕산 병용에 의한 로티립신 약효의 현저한 증강)를 설명하는 것은 아니었다.

(2-2) 교차 MIC 시험

상기 검토로부터, 동물 시험에 있어서의 붕산 병용에 의한 로티립신 항균 작용의 현저한 증강을 충분히 설명할 수 있는 결과는 얻어지지 않았기 때문에, 본 발명자는, 로티립신에 대한 붕산의 병용 효과의 상세에 관하여 한층 더 평가 검토를 행하였다. 즉, MRSA에 대한 항균 활성을, 2종의 피험 물질의 각종 농도를 교차시키는 형태로 항균력을 측정 평가하였다(교차 MIC 시험). 측정 방법에 관하여는 일본 화학 요법 학회가 정하는 표준법(미량 액체 희석법)에 준하여, 배지에는 Cation-adjusted Mueller-Hinton 배지(CAMHB)를 사용하였다. MRSA의 접종 균량은 2×10⁵ CFU/well로 하고, 배양 온도 37℃의 조건에서 20시간 배양 후, 각종 농도를 조합한 조건하에서의 균발육 유무를 확인하였다. 시험 결과를 다음의 표 6에 나타낸다.

표 6에 나타낸 결과로부터, 각 피검물질의 교차 MIC값(타방(他方)의 화합물의 존재하에서의 최소 발육 저지 농도)을 읽어내고, 그 결과를 기초로 하기의 FIC (Fractional Inhibitory Concentration) index의 계산식을 이용하여 2개의 물질의 상호 작용의 평가를 행하였다.

당해 검토의 결과, 상기 계산식에 의하여 산출되는 로티립신과 붕산의 병용 효과에 관하여는, 양 화합물의 FIC index가 1인 것이 밝혀지고, 병용 효과는 거의 불관이거나 매우 약한 상가 효과가 확인될 뿐이었다.

(2-3) 5% FBS를 이용한 교차 MIC 시험

본 발명자는, in vitro에 있어서의 붕산 병용 시의 로티립신 항균력이 동물 약효 평가 시험에서 얻어진 데이터와 상관하지 않는 점에 관하여, 그 요인을 밝히기 위하여, 보다 생체에 투여하였을 경우에 가까운 조건에서 평가하는 목적으로, 혈청 성분 FBS(Fetal Bovine Serum, 소태아혈청)를 미리 기초 배지에 첨가한 조건 설정을 주고, 붕산 병용의 로티립신 항균력에 미치는 영향에 관하여 재차 평가 검토를 행하였다. 구체적으로는, in vitro 시험용 배지인 Cation-adjusted Mueller-Hinton 배지(CAMHB)에 미리 5% FBS를 함유시킨 후, 로티립신, 붕산의 병용 효과를 조사하는 교차 MIC 시험을 실시하였다. 측정 방법은 일본 화학 요법 학회가 정하는 표준법(미량 액체 희석법)에 준하였다.

그 결과, 놀랄 만한 일로 병용 효과의 평가 지표가 되는 FIC index는 0.25가 되고, 본 발명자는, 로티립신 항균력의 붕산 병용에 의한 매우 강한 상승 효과를 확인하는 것에 성공하였다. 당해 결과는, 동물 약효 평가 시험에서 얻어진 지견과도 상관하는 것이었다. 평가 결과를 표 7에 나타낸다. 표 7에 있어서, 붕산의 상승 효과가 얻어지는 최소 농도는 313μg/mL이고, 로티립신의 그것은 0.03μg/mL이다.

상기 in vitro에서의 검토 결과로부터, 미리 일정량의 FBS 등의 혈청 성분을 함유시킨 기초 배지를 이용하여, 붕산 배합 로티립신의 항균력 측정 시험을 행하는 것에 의하여, 동물 등의 약효 예측에 투영 가능하고, 또한 농도 의존적으로 로티립신 유효 농도의 극적인 저감을 확인하는 방법을 밝힐 수 있었다.

실시예 3

본 발명자는, 당해 혈청 성분 존재하에 있어서의 로티립신 항균력에 영향을 주는 붕산의 병용 효과에 관하여, 보다 정량적으로 평가하기 위한 검토도 행하였다. 즉, 5% FBS를 함유시킨 시험 배지(CAMHB)에 피험균 및 각종 농도의 검체 화합물을 첨가한 후, 24시간 경과 후에 배지 중의 균수를 측정하고, 붕산 병용 조건에 있어서의 로티립신 항균 작용의 강도의 평가를 행하였다. 측정 결과를 표 8에 나타낸다.

균수의 24시간 후의 변화(감소)를 지표로 평가하였는데, 5% FBS 존재하에서 로티립신에 붕산을 병용하였을 경우에는, 붕산 농도가, 본래는 균 증식을 억제하지 않는 붕산의 MIC에 이르지 않는 저농도(1250μg/mL)여도, 로티립신 단독 조건의 경우의 24시간 후의 균수 변화와 비교하여 1000배 정도나 로티립신의 항균력이 증강되는 것을 확인하였다.

한편, 붕산을 단독으로 평가하였을 경우에는, 균의 MIC에 상당하는 2500μg/mL의 농도에서도 24시간 후에 균수가 감소하는 것이 없었다. 당해 결과로부터, 붕산 자체의 항균 성능은 높지 않은 것을 알았다.

실시예 4

본 발명자는 나아가, 로티립신의 항균력을 증강할 수 있는 붕산의 최소 필요량(농도)을 밝히는 목적으로 in vitro의 검토를 행하였다. 즉, 시험 배지인 Cation-adjusted Mueller-Hinton 배지(CAMHB)에는 5% FBS를 함유시키고, 0.015 ~ 8μg/mL의 범위에서 배가 희석된 로티립신에 10μg/mL(0.001%), 100μg/mL(0.01%), 300μg/mL(0.03%)의 3종류의 저농도의 붕산을 더한 것을 각 피험 물질로 하고, MRSA에 대한 항균력을 측정하였다. 측정 방법은 일본 화학 요법 학회가 정하는 표준법(미량 액체 희석법)에 준하였다.

그 결과, 로티립신의 항MRSA 활성을 상승시키기 위하여 필요한 붕산의 최소 농도는, 100μg/mL(0.01%)인 것이 밝혀지고, 붕산 단독 조건에서의 MIC에 상당하는 2500μg/mL의 농도와 비교하여 1/25 정도인 것을 알았다. 측정 결과를 표 9에 나타낸다.

실시예 5

시험예 2 ~ 4의 in vitro의 검토 결과를 기초로, 로티립신의 붕산 병용에 의한 유용성을 찾는 일환으로서, 균의 내성화에 주는 영향에 관하여, 증량 계대(繼代) 배양법에 의한 MRSA의 내성 획득성의 평가 검토를 행하였다. 즉, 시험 배지 Cation-adjusted Mueller-Hinton 배지(CAMHB)에 5% FBS를 함유시키고, 피험균(제1세대)에 대한 상법(常法)에 따라 MIC를 측정한 후, 1/4 MIC에 상당하는 농도의 피험액으로부터 일부를 채취하고, 이것을 한천 배지 등에 배양하여 제2세대의 균으로서 분리하고, 다시 피험균액을 조제하여 MIC의 측정을 행하였다. 마찬가지의 균 채취 프로세스 및 항균력 측정을 한층 더 반복하고, 제3세대까지 MIC의 측정을 행하였다. 항균력(MIC)의 측정 방법에 관하여는 일본 화학 요법 학회가 정하는 표준법(미량 액체 희석법)에 준하였다. 결과의 평가 지표에 관하여는 만일 MIC값의 상승이 보였을 경우, 이것을 균의 내성화로 판단하고, 그 정도(수치)를 평가하였다. 또한, MIC가 상승하였을 경우에는, 1/4 MIC에 상당하는 농도의 피험액으로부터 미량을 검체로서 채취하고 한천 배지에 배양 후, 그 콜로니의 형태학 특징을 아울러 평가하였다.

그 결과, 제3세대의 균에서는, 로티립신 단독의 경우 MIC값이 32μg/mL까지 상승하였지만, 붕산을 병용한 조건에서는 MIC값의 상승은 8μg/mL까지의 상승에 머물었다. 즉, 로티립신은 붕산의 병용에 의하여 내성균 유도를 지연시키는 효과가 밝혀졌다. 제3세대의 균의 콜로니의 형상에 관하여는, 로티립신 단독, 붕산 배합 로티립신의 구별을 불문하고, 제1세대의 균의 콜로니와 비교하여 생육이 늦고, 직경이 보다 작은 콜로니가 확인되고, Small Colony Variant (SCV)인 것을 알았다. 측정 결과를 표 10에 나타낸다.

실시예 6

본 발명자는, 로티립신의 항MRSA 활성에 있어서의 붕산 병용의 유용성을 확인하였기 때문에, MRSA 이외의 다른 균에 관하여도 마찬가지의 유용성이 확인되는지 여부, in vitro에 있어서의 스크리닝의 검토를 행하였다. 즉, 그램 양성 구균 각종에 관하여 각각 적절히 선택된 시험 배지를 이용하여 5% FBS 첨가 혹은 비첨가의 2종류의 조건에 의한 항균력 측정 시험을 행하고, 혈청의 첨가에 의하여 로티립신 항균 활성이 증강되는 것과 같은 균종을 탐색, 평가하였다. 덧붙여, 당해 스크리닝 검토에 관하여는 붕산은 병용하지 않았다. 검토 측정 방법은 일본 화학 요법 학회가 정하는 표준법(미량 액체 희석법)에 준하였다.

그 결과, 그램 양성 간균으로 분류되는 바실루스속으로부터 Bacillus subtilis, Bacillus anthracis, 및 여드름의 원인균이 되는 Propionibacterium acnes를 포함하는 프로피오니박테륨속의 균은 5% FBS의 첨가에 의하여 로티립신 항균 활성이 증강되는 것을 알고, 붕산 병용에 의하여 한층 더 항균력을 증강하게 하는 조건을 만족하는 균종인 것이 밝혀졌다. 평가 결과를 표 11에 나타낸다.

실시예 7

상기의 검토 결과로부터 찾아내진 균종에 관하여는, 로티립신이 항균 활성을 나타내고, 또한 혈청 성분 첨가에 의하여 항균력이 증강되는 조건을 만족하기 때문에, 붕산을 병용하는 것에 의하여 한층 더 항균력이 한층 증강되는 것을 생각할 수 있다.

그래서, 본 발명자는, 이것을 확인하기 위하여, 여드름이나 농피증의 원인균이고 내성균으로서도 임상상 중요한 Propionibacterium acnes에 관하여, MRSA로 이미 실시가 끝난, 혈청 성분 존재하에 있어서의 로티립신 항균력에 영향을 주는 붕산의 병용 효과의 정량적 평가 검토를 행하였다. 즉, 5% FBS를 함유시킨 시험 배지(CAMHB)에 피험균 Propionibacterium acnes 및 각종 농도의 검체 화합물을 첨가한 후, 일정 시간 경과 후에 배지 중의 균수를 측정하고, 붕산 병용 조건에 있어서의 로티립신 항균 작용의 강도에 관한 평가를 행하였다. 덧붙여, Propionibacterium acnes는, MRSA와는 달라 혐기성 균이기 때문에, 배지는 GAM 배지를 사용하고, 배양은 혐기 배양하고(산소 흡수·탄산 가스 발생제를 사용), 배양 시간은 48시간으로 하였다. 또한, 로티립신에 병용하는 붕산 농도에 관하여는, 미리 당해 시험에서 이용하는 피험균에 대한 붕산 단독의 항균 활성을 평가하였는데, 항균 활성이 1250μg/mL(0.125%에 상당)였던 것으로부터 병용 붕산의 농도를 625μg/mL(0.0625%에 상당)로 하였다.

그 결과, 균수의 48시간 후의 변화(감소)를 지표로 평가하였는데, 5% FBS 존재하에서는, 로티립신은, 본래 균 증식을 억제하지 않는 붕산의 MIC에 이르지 않는 저농도(625μg/mL)를 병용하였을 경우에서도, 로티립신 단독 조건의 경우의 48시간 후의 균수 변화와 비교하여 10000배 정도나 그 항균력이 증강되는 것을 확인하였다. 측정 결과를 표 12에 나타낸다.

이상, 본 발명자가 예의(銳意) 검토를 행한 결과, 뎁시펩타이드계 항생 물질 로티립신에, 약리 활성(본 발명에 있어서는 항균 활성)을 가지지 않는 저농도 붕산을 배합시키는 것에 의하여, 외용 용도를 위한 유효성 프로파일을 비약적으로 높이는 것에 성공하였다.

또한, 사람 의약품으로서 실용화를 도모하는데 있어서 중요하게 되는, 동물 감염 모델의 약효 데이터와 상관하는 in vitro 항균력 측정 시험상의 설정 조건에 관하여도 밝힐 수 있었다.

로티립신은, MRSA에 대하여 통상의 in vitro 항균력 측정 시험에서는 1.0μg/mL보다 높은 농도로 항균력을 나타내지만, 시험 배지에 미리 FBS를 함유시키는 상기 방법을 채용하면, 붕산 병용에 의하여, 0.015 ~ 1.0μg/mL 혹은 한층 더 낮은 농도로 항균력을 나타내는 것을 확인하는 것이 가능한, 당해 in vitro 측정에서 얻어진 결과는 그대로 동물이나 사람에서의 유효성 예측에 적용시키는 것이 가능하다.

붕산의 첨가량에 관하여는, 붕산 단독으로 피험균에 대하여 나타내는 발육 저지 농도의 반분 이하의 농도로 억제하는 것이 바람직하고, 100 ~ 1250μg/mL(0.01 ~ 0.125%), 바람직하게는 100 ~ 625μg/mL(0.01% ~ 0.0625%) 정도가 바람직하다. 전술한 바와 같이, 붕산 대신에, 그 같은 화학 당량(몰 당량)에 상당하는 양을 함유하는 붕산 나트륨 등의 붕산염 화합물을 사용하여도 무방하다.

조성물

이하, 실시예에 의하여 본 발명을 더 설명하지만, 본 발명은 이것들에 한정되는 것은 아니다.

［외용제의 처방예 1］

하기 표 13에 나타내는 조성(단위：질량%)이 되도록 각 성분을 균일하게 용해하고 교반 혼합시키는 것에 의하여 겔 연고 처방 1A 및 처방 1B를 얻었다. pH 조절액으로서는, 100mM 인산수소이나트륨 39용량(볼륨)과 100mM 인산이수소일나트륨 61용량으로 이루어지는 인산 완충액에 0.1N 수산화 나트륨 용액을 최종으로 0.02N가 되도록 더한 것을 사용하였다.

당해 처방 1A 및 처방 1B에 관하여 25℃로 1개월간, 외관의 안정성을 평가한 결과, 모두 제제상의 문제가 되는 색조, 성상(性狀)의 변화를 인정하지 않았다. 모르모트를 이용한 피부 자극성 시험에서는, 자극성이 충분히 낮은 것이었다.

［외용제의 처방예 2］

하기 표 14에 나타내는 조성(단위：질량%)이 되도록 각 성분을 균일하게 용해하고 교반 혼합시키는 것에 의하여 크림 처방 2A 및 처방 2B를 얻었다.

당해 처방 2A 및 처방 2B에 관하여 25℃로 1개월간, 외관의 안정성을 평가한 결과, 모두 제제상의 문제가 되는 색조, 성상의 변화를 인정하지 않았다. 모르모트를 이용한 피부 자극성 시험에서는, 자극성이 충분히 낮은 것이었다.

［외용제의 처방예 3］

하기 표 15에 나타내는 조성(단위：질량%)이 되도록 각 성분을 균일하게 용해시키고 교반하는 것에 의하여 점이액, 점비액의 용도를 겸하는 점안제 처방 3A 및 처방 3B를 얻었다.

당해 처방 3A 및 처방 3B에 관하여 25℃로 1개월간, 외관의 안정성을 평가한 결과, 모두 제제상의 문제가 되는 색조, 성상의 변화를 인정하지 않았다. 토끼를 이용한 안점막 자극성 시험에서는, 이상을 인정하지 않고 양호한 인용성(tolerability)을 나타내는 것이었다.

［외용제의 처방예 4］

하기 표 16에 나타내는 조성(단위：질량%)이 되도록 각 성분을 균일하게 용해시키고 교반하는 것에 의하여 수성의 흡입제 처방 4A 및 처방 4B를 얻었다.

당해 처방 4A 및 처방 4B에 관하여 25℃로 1개월간, 외관의 안정성을 평가한 결과, 모두 제제상의 문제가 되는 색조, 성상의 변화를 인정하지 않았다. 모르모트를 이용한 구강 점막 자극성 시험에서는, 이상을 인정하지 않고 양호한 인용성을 나타내는 것이었다.

［외용제의 처방예 5］

하기 표 17에 나타내는 조성(단위：질량%)이 되도록 각 성분을 균일하게 용해시키고 교반하는 것에 의하여 로션제 처방 5A 및 처방 5B를 얻었다.

당해 처방 5A 및 처방 5B에 관하여 25℃로 1개월간, 외관의 안정성을 평가한 결과, 모두 제제상의 문제가 되는 색조, 성상의 변화를 인정하지 않았다. 모르모트를 이용한 피부 자극성 시험에서는, 자극성이 충분히 낮은 것이었다.

［외용제의 처방예 6］

표 18에 나타내는 조성의 외용 로션제 처방 6A 및 6B를, 각 성분을 균일하게 혼합하고, 균질인 조성물로 하는 것에 의하여 조제하였다. 이하 성분을 사용하여 100g의 국소 조성물을 쉽게 만들 수 있다.

이 처방 조성물은 환자 또는 대상의 피부 또는 상처의 감염증에 대하여 적용할 수 있다. 실제로는, 이 로션제 약 0.5 ~ 1.5그램을 환부에 매일 4 ~ 5회 투여한다. 본 처방 조성물은, MRSA를 포함하는 세균 감염에 대하여 상승적인 항균 활성을 준다.

산업상의 이용 가능성

본 발명에 의하여 개시되는 뎁시펩타이드계 항생 물질을 위한 외용 제제의 처방을 이용하면, 뎁시펩타이드계 항생 물질, 특히 로티립신을 사람이나 동물류의 각종 세균 감염 치료를 위하여 외용 항균약으로서 이용할 때에, 표적으로 하는 세균에 인한 국소 감염증에 있어서 치료 유효성·감염 예방의 효과가 강력하고 또한 균의 내성화도 억제할 수 있는 것과 같은, 새롭고 유용한 항균 치료를 담당하는 신규 의약품을 의료의 현장에 제공할 수 있다.

또한, 이 효과에 의하여 치료 자체에 요하는 기간 전체를 큰 폭으로 단축하는 것도 가능하고, 결과적으로 투여량·빈도의 저감을 가져오는 안전성이 높은 외용 항균약으로서, 나아가서는 항균약 폭로의 전체의 현저한 양적 저감에 의한 내성균 억제에도 공헌할 수 있는 외용 항균약을 의료의 현장에 제공하는 것이 가능하다. 나아가서는, 금세기에 들어 여전히 세계적으로 확대화가 염려되고 있는 내성균의 문제에 대하여, 유효한 해결 수단을 주는 것이 가능하다.

Claims (31)

1. 최소 0.03μg/mL 농도의 뎁시펩타이드 항생제 및 최소 0.01 질량%의 붕산을 포함하는 세균 감염의 예방 또는 치료에 사용하기 위해 제형화된 외용 항균 조성물로서, 이들의 조합은 상승적인 항균 활성을 나타내어, 상기 세균을 박멸하고, 상기 세균에 의한 상기 감염을 개선하거나 해결하는, 조성물.
2. 제1항에 있어서,
   상기 조성물에 의해 치료된 상기 세균이 메티실린 내성 황색 포도상 구균(Methicillin Resistant Staphylococcus aureus) 또는 프로피오니박테리움 아크네(Propionibacterium acne)를 포함하는 황색 포도상 구균인 조성물.
3. 제1항에 있어서,
   상기 치료되는 세균 감염은 화상, 열상, 찰과상, 물린 상처, 외과적 상처, 천공 상처, 궤양(복잡한 피부 및 연조직 감염(cSSTI)의 급성 및 만성 상처를 포함 하나 이에 제한되지 않음), 피부 및 피부 구조 감염(SSSI) 정맥류성 궤양으로 인한 급성 및 만성 상처, 당뇨병성 궤양, 욕창, 수술 후 궤양, 외상 후 궤양 및 자연 궤양으로 인한 조직 손상 후 감염을 포함하는 조성물.
4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
   상기 뎁시펩타이드 항생제가 12개의 아미노산 잔기에 의해 구성되는 분자 구조를 가지는 조성물.
5. 제4항에 있어서,
   상기 뎁시펩타이드 항생제가 하기 [화학식 1]를 가지는 로티립신 또는 그 약학적으로 허용가능한 염 또는 입체 이성질체인 조성물.
   [화학식 1]
   

   
6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서,
   상기 뎁시펩타이드 항생제를 0.01 질량%-5.0 질량%의 양으로 함유하는 조성물.
7. 제6항에 있어서,
   상기 뎁시펩타이드 항생제를 0.05 질량%-2.5 질량%의 양으로 함유하는 조성물.
8. 제6항에 있어서,
   상기 뎁시펩타이드 항생제를 0.05 질량%-2.0 질량%의 양으로 함유하는 조성물.
9. 제6항에 있어서,
   상기 뎁시펩타이드 항생제를 0.1 질량%-1.0 질량%의 양으로 함유하는 조성물.
10. 제6항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 붕산을 0.01 질량%-5.0 질량%의 양으로 함유하는 조성물.
11. 제10항에 있어서,
    상기 붕산을 0.05 질량%-2.5 질량%의 양으로 함유하는 조성물.
12. 제10항에 있어서,
    상기 붕산을 0.05 질량%-2.0 질량%의 양으로 함유하는 조성물.
13. 제10항에 있어서,
    상기 붕산을 0.1 질량%-1.0 질량%의 양으로 함유하는 조성물.
14. 유효량의 붕산과 조합하여 지속적인 효능을 나타내는 유효량의 뎁시펩타이드 항생제를 포함하는 상처 또는 신체 표면 감염에서의 미생물 성장 억제에 외용 사용을 위해 제형화된 살균 조성물로서, 상기 뎁시펩타이드 항생제 및 상기 붕산의 조합은 상승적인 항균 활성을 나타내는, 조성물.
15. 제14항에 있어서,
    약제 내성 또는 다중 약제 내성 세균에 의해 야기되는 상처 또는 신체 표면 감염의 치료에 사용되는 조성물.
16. 제15항에 있어서,
    상기 약제 내성 세균이 메티실린 내성 황색 포도상 구균인 조성물.
17. 제14항 또는 제15항에 있어서,
    상기 뎁시펩타이드는 본질적으로 12개의 아미노산 잔기로 구성되는 조성물.
18. 제14항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 뎁시펩타이드가 하기 [화학식 1]을 가진 로티립신 또는 그 약학적으로 허용가능한 염 또는 입체 이성질체인 조성물.
    [화학식 1]
    

    
19. 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 살균 조성물은, 본질적으로 최종 조성물 중 5.0mM/ml(313μg/ml) 내지 40mM/ml(2500μg/ml)의 붕산 및 적어도 18nM/ml(0.03μg/ml) 또는 적어도 152nM/ml(0.25μg/ml) 내지 4881nM/ml(약 8.0μg/ml)의 농도 범위의 뎁시펩타이드로 이루어진 조성물.
20. 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서,
    연고, 크림, 로션, 고약 또는 액체 조성물로 제형화된 조성물.
21. 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 뎁시펩타이드 항생제 및 붕산의 혼합물(X)은 또한 1:16의 중량비(X:Y)로 HP-베타 사이클로덱스트린(Y)을 포함하는 조성물.
22. 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서,
    유효량의 소 혈청 알부민(BSA)을 더 포함하는 조성물.
23. 제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서,
    국소 투여 제형의 조성물.
24. 제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서,
    흡입 투여 제형의 조성물.
25. 제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서,
    눈 투여 제형의 조성물.
26. 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항의 조성물을 이를 필요로 하는 환자 또는 대상에 투여하는 것을 포함하는, 상기 환자 또는 대상의 상처 또는 표면의 세균 감염을 치료하기 위한 방법.
27. 제26항에 있어서,
    상기 세균 감염은 메티실린 내성 황색 포도상 구균(MRSA)에 의한 감염인 방법.
28. 제26항 또는 제27항에 있어서,
    상기 상처가 급성 상처인 방법.
29. 제26 또는 제27항에 있어서,
    상기 상처가 만성 상처인 방법.
30. 제26항 내지 제29항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 상처는, 의학적으로 복합 피부 및 연조직 감염(cSSTI) 또는 복합 피부 및 피부 구조 감염(cSSSI)으로 정의되는 방법.
31. 제26항 또는 제27항에 있어서,
    상기 감염이 메티실린 내성 황색 포도상 구균(MRSA)에 의한 유발된 여드름을 포함하는 여드름인 방법.
    

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