KR20200096593A - 갑각류 어획물로부터 단백질 인지질 복합체를 제조하는 방법 - Google Patents

Abstract

단백질을 포함하는 갑각류 어획물(crustacean catch)로부터 단백질 인지질 복합체(protein phospholipid complex)를 제조하는 방법이 청구되며, 여기서 가수분해는 갑각류 어획물의 단백질을 실질적으로 변성시키지 않으면서 일어나는 것이다. 갑각류 어획물로부터 안정한 단백질 인지질 에멀젼(emulsion)을 제조하는 방법이 또한 청구된다. 갑각류 오일(crustacean oil)을 제조하는 방법이 청구되며 여기서 오일은 가수분해된 갑각류 어획물로부터 분리되는 것이다. 단백질 인지질 복합체를 제조하는 다른 방법이 청구되는데, 이것은 껍데기를 제거하지 않는 것, 껍데기를 제거하는 것, 및 껍데기를 제거한 후 다시 첨가하여 단백질 인지질 복합체를 형성하는 것과 관련이 있다.

Description

갑각류 어획물로부터 단백질 인지질 복합체를 제조하는 방법

관련출원의 상호참조

본 출원은 2017년 12월 4일자로 출원된 미국 가출원 일련번호 제62/594,105호의 이익을 주장하며, 이는 본원에 참고문헌으로 통합되어 있다.

본 발명의 배경

최근 몇 년간, 과학적 연구는 에이코사펜타엔산(eicosapentaenoic acid, EPA) 및 도코사헥사엔산(docosahexaenoic acid, DHA)과 같은 오메가-3 지방산(omega-3 fatty acids)이 풍부한 식이(diet)의 건강상의 이점을 지지해왔다. 이들 지방산은 뇌건강을 유지하는데 필수적이라는 것이 밝혀졌으며 연구들은 이들이 또한 심혈관계 건강을 증진시키고, 염증을 감소시키며 관절염을 예방하고, 위건강(gastric health)을 개선하며, 항-우울 효과를 가진다는 것을 보여주었다.

오메가-3 지방산은 특정 어류, 갑각류(crustaceans), 견과류, 및 씨앗류를 포함한 다양한 식품원(food source)에서 자연적으로 존재한다. 게다가, 오메가-3 지방산의 농축된(concentrated) 형태는 비타민 및 보충제 산업에서 큰 부분을 구성한다. 동물-유래의 오메가-3 지방산 공급원 중에서, 어유(fish oil)는 인기있는 비타민 공급원으로 유명해졌다. 그러나, 어유 캡슐은 "생선 냄새(fishy)"의 뒷맛을 남긴다는 문제점이 있다.

과학자들은 오메가-3 지방산의 대체 공급원을 연구하여 이들이 더욱 생물학적으로 이용 가능한지(bioavailable) 연구하고 있다. 예를 들어, 일부 연구는 남극 크릴(Antarctic krill)로부터 유래한 크릴 오일(krill oil)이 어유보다 더욱 생물학적으로 이용 가능하기 때문에 오메가-3 지방산의 우수한 공급원이 될 수 있다는 것을 예비적으로 보여주었다. Ramprasat 등의 "Enhanced increase of omega-3 index in healthy individuals with response to 4-week n-3 fatty acid supplementation from krill oil versus fish oil", Lipids in Health and Disease 2013, 12: 178; 및 Schuchardt 등의 "Incorporation of EPA and DHA into plasma phospholipids in response to different omega-3 fatty acid formulations - a comparative bioavailability study of fish oil vs. krill oil" Lipids in Health and Disease 2011, 10:145;를 참고할 것. 일부는 이들 오메가-3 지방산이 인지질(phospholipids)에 결합하기 때문에, 트리글리세리드(triglycerides)에 결합하는 어류 공급원에서 유래한 오메가-3 지방산에 비해 더욱 생물학적으로 이용 가능한 것이라고 추측한다. Schuchardt 등을 참고할 것. 게다가, 이것은 크릴은 세계에서 가장 큰 생물량(biomass)을 가지면서 해마다 대양에서 단지 1% 미만의 크릴만이 수확되기 때문에 지속성이 있고(sustainable); 크릴은 뒷맛이 없고 수은이 관측되지 않는 수준이어서 판매되고 있으며; 크릴은 항산화제인 아스타잔틴(astaxanthin)을 포함하고 있다.

크릴 오일이 오메가-3 지방산의 우수한 공급원으로 보이지만, 오메가-3 지방산을 수확하고; 생물학적으로 이용 가능하고, 수분 및 기타 오염물질(contaminants)가 적고, 크릴 단백질을 이용해 높은 품질의 크릴 오일 및 기타 제품을 제조하기 위해 후속적으로 더 가공할 수 있는 제품을 제조하기 위한; 크릴을 가공하기 위한 더 좋은 방법의 필요성이 남아있다. 더욱 구체적으로, 소화효소(digestive enzymes)가 가수분해(hydrolysis)에 의해 불활성화되고, 가수분해 단계 동안 크릴 내의 단백질이 실질적으로 변성되지 않는, 단백질 인지질 복합체를 제조하는 새로운 방법, 및 에멀젼(emulsion)이 분리되지 않고 수분함량이 미생물 성장을 예방하기에 충분히 낮은, 안정적인 단백질 인지질 에멀젼을 제조하는 새로운 방법에 관한 필요성이 존재한다.

본 발명의 요약

본 발명의 한 측면은 다음의 단계를 포함하는, 단백질 인지질 복합체(protein phospholipid complex, PPC)를 제조하는 방법과 관련이 있다: a) 갑각류 어획물(crustacean catch)을 분해(disintegration)하여, 단백질을 포함하는 분해된 갑각류 어획물을 제공하는 단계; b) 상기 분해된 갑각류 어획물을 단백질분해효소(proteolytic enzyme)와 접촉시켜 상기 단백질을 실질적으로 변성시키지 않으면서 가수분해된 갑각류 어획물을 제공하는 단계; 및 c) 상기 가수분해된 갑각류 어획물을 분리하여 단백질 인지질 복합체를 제공하는 단계.

일 실시양태에서, 상기 접촉시키는 단계는 제2 효소를 더 포함한다. 바람직하게는, 상기 제2 효소는 키티나아제(chitinase), 콜라게나아제(collagenase), 또는 다른 단백질분해효소를 포함한다. 상기 단백질분해효소는 바람직하게는 산성, 중성, 및 알칼리성 프로테아제(proteases)의 혼합물이다.

일 실시양태에서, 접촉시키는 단계의 단백질분해효소는 적어도 하나의 메탈로엔도펩티다아제(metalloendopeptidase)를 포함한다. 또다른 실시양태에서, 단백질분해효소는 엑소펩티다아제(exopeptidase)를 포함하지 않는다.

일 실시양태에서, 접촉시키는 단계는 제1 프로테아제 혼합물 및 제2 프로테아제 혼합물과 접촉시키는 단계를 포함한다. 제1 프로테아제 혼합물은 적어도 하나의 알칼리성 프로테아제를 갖는 것이고, 제2 프로테아제 혼합물은 산성 프로테아제, 중성 프로테아제, 및 알칼리성 프로테아제를 갖는 것이다.

바람직하게는, 상기 제1 프로테아제 혼합물은 상기 분해된 갑각류 어획물의 총 중량의 0.3-0.5%를 구성하는 것이고; 상기 제2 프로테아제 혼합물은 상기 분해된 갑각류 어획물의 총 중량의 0.03-0.05%를 구성하는 것이다.

바람직한 실시양태에서, 프로테아제는 바실러스 리체니포르미스(Bacillus Licheniformis)로부터 유래한 것이다.

일 실시양태에서, 접촉시키는 단계는 세포벽분해효소(cell wall degrading enzyme)와 접촉시키는 것을 포함한다.

바람직하게는, 상기 분해된 갑각류 어획물은 단백질분해효소와 100분 이상 접촉되어 가수분해된 갑각류 어획물을 제공한다. 접촉시키는 단계는 유기용제(organic solvent)를 포함할 수 있다. 접촉시키는 단계는 상기 분해된 갑각류 어획물을 45-75 ℃의 온도 범위에서 배양하는 단계를 포함할 수 있다.

상기 분해된 갑각류 어획물은 바람직하게는 크릴이다. 분해시키는 단계 동안, 갑각류 어획물은 펄핑(pulping), 밀링(milling), 그라인딩(grinding), 및/또는 슈레딩(shredding)에 의해 가공될 수 있다.

상기 방법에 의해 제조되는 PPC는 15% w/w 미만의 수분함량을 포함한다.

크릴 내의 단백질은 소화효소 및 기타 단백질(소화효소를 제외한 것)을 포함할 수 있다.

본 발명의 다른 측면은 다음의 단계를 포함하는, 안정한 단백질 인지질 에멀젼을 제조하는 방법과 관련이 있다: a) 갑각류 어획물을 분해(disintegration)하여, 분해된 갑각류 어획물을 제공하는 단계; b) 상기 분해된 갑각류 어획물을 단백질분해효소와 접촉시켜 가수분해된 갑각류 어획물을 제공하는 단계; 및 c) 상기 가수분해된 갑각류 어획물을 분리하여 안정한 단백질 인지질 에멀젼을 제공하는 단계.

일 실시양태에서, 접촉시키는 단계는 제2 효소를 포함한다. 바람직하게는, 제2 효소는 키티나아제, 콜라게나아제, 또는 다른 단백질분해효소를 포함한다. 단백질분해효소는 바람직하게는 산성, 중성, 및 알칼리성 프로테아제의 혼합물이다.

분해된 갑각류 어획물은 바람직하게는 크릴이다. 분해시키는 단계 동안 갑각류 어획물은 펄핑, 밀링, 그라인딩, 및/또는 슈레딩에 의해 가공될 수 있다.

일 실시양태에서, 접촉시키는 단계의 단백질분해효소는 적어도 하나의 메탈로엔도펩티다아제를 포함한다. 또다른 실시양태에서, 상기 단백질분해효소는 엑소펩티다아제를 포함하지 않는다. 접촉시키는 단계는 유기용제를 포함할 수 있다.

접촉시키는 단계는 상기 분해된 갑각류 어획물을 45-75 ℃의 온도 범위에서 배양하는 단계를 포함할 수 있다.

본 방법에 따라 제조된 단백질 인지질 에멀젼은 45-55% 수분함량 v/v를 포함할 수 있다.

본 발명의 다른 측면은 물, 단백질, 및 지질을 포함하는 안정한 단백질 인지질 에멀젼과 관련이 있다.

본 발명의 다른 측면은 다음의 단계를 포함하는 갑각류 오일을 제조하는 방법과 관련이 있다: a) 갑각류 어획물을 분해하여, 단백질을 포함하는 분해된 갑각류 어획물을 제공하는 단계; b) 상기 분해된 갑각류 어획물을 단백질분해효소와 접촉시켜 가수분해된 갑각류 어획물을 제공하는 단계; 및 c) 상기 가수분해된 갑각류 어획물을 분리하여 갑각류 오일을 제공하는 단계.

바람직하게는, 상기 갑각류 오일은 크릴 오일이고, 상기 분해된 갑각류 어획물은 분해된 크릴이다. 바람직하게는, 상기 단백질분해효소는 산성, 중성, 및 알칼리성 프로테아제의 혼합물을 포함한다. 일 실시양태에서, 상기 방법은 추출 단계 없이 수행된다.

본 발명의 다른 측면은 갑각류 오일; 및 아마씨 오일(flaxseed oil), 호박씨 오일(pumpkinseed oil), 카놀라 오일(canola oil), 대두유(soybean oil), 월넛 오일(walnut oil), 어유(fish oil), 해표유(seal oil), 미세조류 오일(microalgae oil), 홍합 오일(mussels oil), 및 새우 오일(shrimp oil)로 이루어진 군에서 선택된 다른 오일로 이루어진 군에서 선택된 다른 오일;을 포함하는 영양 보충제(nutritional supplement)와 관련이 있다. 바람직하게는, 상기 오일은 초록입홍합 오일(green-lipped mussel oil)이다. 또한, 상기 바람직한 갑각류 오일은 크릴 오일이다.

본 발명의 다른 측면은 다음의 단계를 포함하는 단백질 인지질 복합체를 제조하는 방법과 관련이 있다: a) 갑각류 어획물을 분해하여, 단백질을 포함하는 분해된 갑각류 어획물을 제공하는 단계; b) 상기 분해된 갑각류 어획물을 단백질분해효소와 접촉시켜 상기 단백질을 실질적으로 변성시키지 않으면서 가수분해된 갑각류 어획물을 제공하는 단계; 및 c) 상기 가수분해된 갑각류 어호기물을 분리하여 단백질 인지질 복합체를 제공하는 단계로서, 여기서 껍데기는 분리하는 단계 동안 상기 가수분해된 갑각류 어획물로부터 제거되지 않고 단백질 인지질 복합체의 일부인 것인, 단계. 바람직하게는, 상기 갑각류 어획물은 크릴이다.

본 발명의 다른 측면은 다음의 단계를 포함하는 단백질 인지질 복합체를 제조하는 방법과 관려이 있다: a) 갑각류 어획물을 분해하여, 단백질을 포함하는 분해된 갑각류 어획물을 제공하는 단계; b) 상기 분해된 갑각류 어획물을 단백질분해효소와 접촉시켜 상기 단백질을 변성시키지 않으면서 가수분해된 갑각류 어획물을 제공하는 단계; 및 c) 상기 가수분해된 갑각류 어획물을 분리하여 단백질 인지질 복합체를 제공하는 단계로서, 다음의 단계: (1) 상기 가수분해된 갑각류 어획물로부터 껍데기를 분리하는 단계; (2) 상기 가수분해된 갑각류 어획물을 저온살균(pasteurizing)하여 상기 효소를 불활성화시키는 단계; (3) 분리를 통해 과잉의 수분을 제거하는 단계; 및 (4) 상기 가수분해된 갑각류 어획물에 껍데기를 다시 첨가하여 단백질 인지질 복합체를 제공하는 단계;를 포함하는 것인, 단계.

바람직하게는, 상기 껍데기는 단계 (1)에서 필터 또는 체(sieve)로 상기 가수분해된 갑각류 어획물로부터 분리되는 것이다. 다른 바람직한 실시양태에서, 과잉의 수분은 단계 (3)에서 수평 원심분리기(horizontal centrifuge)에 의해 제거된다. 단계 (4)에서, 상기 껍데기는 바람직하게는 유용성(utility)의 목적으로 단독으로 또는 불용성 입자와 함께 다시 첨가된다.

본 발명의 이점은 효소를 포함하는 가수분해 파라미터가 선택되어 소화효소는 불활성화, 즉, 가수분해되는 반면, 모든 단백질이 최소한으로 손상을 입는다는 것이다, 즉, 실질적으로 변성되지 않고 각 어획물의 가치를 극대화하는 장래 용도에 이용 가능하다는 것이다. 게다가, 부분적으로 가수분해된 단백질은 변성된 단백질에 비해 생물학적 성장에 이용할 수 없는 형태의 수분을 더 많이 보유할 수 있는데, 이것은 PPC가 생물학적 활성을 증가시키지 않으면서 전반적인 가공성(processability) 및 저장성(storability)에 좋은 수분을 높은 수준으로 포함할 수 있다는 것을 의미한다. 가수분해된 단백질은 또한 수중생물(aquatic species)에게 소화가 잘 되고 영양분이 높기 때문에, 크릴 오일의 제조의 제품에 의해 수생사료(aquatic feed) 내에 도입될 수 있다.

또다른 이점은 고온에서 분리되지 않고 낮은 수분함량을 보유하여 미생물학적 활성을 예방하고 수송(transport)에 유리할 수 있는, 안정적인 단백질 인지질 에멀젼의 제조이다. PPC 및 안정적인 단백질 인지질 에멀젼 모두 더 가공되어 높은 품질의 갑각류 오일이 추출될 수 있고, 남은 가수분해된 단백질도 또한 이용될 수 있다.

도 1은 단백질 인지질 복합체를 제조하는 방법의 일 실시양태의 흐름도를 나타낸다. 흐름도에서, 점선은 선택적 단계(optional steps)를 나타낸다. 예를 들어, 외골격(exoskeleton)은 가수분해 단계 후에 선택적으로 제거될 수 있으며, 가수분해된 크릴이 저온살균되고 과잉의 수분이 제거된 후에 선택적으로 다시 첨가될 수 있다.
도 2는 에멀젼 또는 오일을 제조하는 방법의 일 실시양태의 흐름도를 나타낸다.

상세한 설명

본 발명의 한 측면은 단백질 인지질 복합체(protein phospholipid complex, PPC)를 제조하는 방법과 관련이 있다. 특히, 본 방법의 가공 파라미터는 크릴 내에 자연적으로 존재하는 소화효소는 가수분해 동안 불활성화되는 반면, 가수분해와 관련된 가공 조건에 의해 실질적으로 변성되지 않는 높은 품질의 단백질이 유지되도록 한다.

갑각류 어획물(Crustacean Catch)

첫 번째 단계는 갑각류 어획물을 제공하는 단계를 포함한다. 갑각류(crustacean)는 외골격(exoskeleton)을 가진 해양생물을 지칭하며, 갑각아문(Crustacea subphylum)의 일부로 분류된다. 갑각류 어획물은 크릴(krill), 새우(shrimp), 바닷가재(lobsters), 게(crab), 물벼룩(water fleas), 및/또는 따개비류(barnacles)를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 바람직한 갑각류 어획물은 크릴, 예를 들면 남극 크릴(Antarctic krill) (유포시아 슈퍼바(Euphausia Superba))이다. 갑각류 어획물은 신선한 것이거나 미리 냉동된 것일 수 있다. 그러나, 60분 이내에 잡힌 신선한 크릴, 더욱 바람직하게는 30분 이내의 것이 가공하기에 바람직한 갑각류 어획물이다.

갑각류 어획물을 분해하는 단계

갑각류 어획물은 (갓 잡힌 크릴의 경우 즉시) 분해되어 분해된 갑각류 어획물을 형성한다. 분해는 후속 가공 단계에 더욱 도움이 되도록, 갑각류 어획물을 작은 조각 또는 더욱 작은 입자 크기로 물리적으로 분해시키는 것을 포함한다. 하기의 값은 임의의 방식으로 조합되어 분해된 갑각류 어획물의 입자 크기의 최소값, 최대값, 또는 범위를 생성할 수 있다: 1 mm, 2 mm, 3 mm, 4 mm, 5 mm, 6 mm, 7 mm, 8 mm, 9 mm, 10 mm, 11 mm, 12 mm, 13 mm, 14 mm, 15 mm, 16 mm, 17 mm, 18 mm, 19 mm, 20 mm, 21 mm, 22 mm, 23 mm, 24 mm, 및 25 mm. 예를 들어, 분해된 갑각류 어획물은 약 1-25 mm, 더욱 바람직하게는 약 3-15 mm, 및 가장 바람직하게는 약 3-6 mm 사이의 입자 크기를 가질 수 있다.

갑각류 어획물은 특정 범위의 입자 크기를 만들기 위해(effectuate) 임의의 통상적인 수단을 사용하여 분해될 수 있다. 예를 들어, 분해 수단(apparatus)은 갑각류 어획물을 그라인딩(grind), 펄핑(pulp), 밀링(mill), 및/또는 슈레딩(shred)하는 것일 수 있다. 분해 수단의 예시는 나이프 슈레더(knife shredder), 블렌더(blender), 및 균질기(homogenizer)를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

분해 공정이 일어나는 온도는 갑각류 어획물이 신선할 때 (예를 들어, 60분 이내에 잡힌 크릴)인 갑각류 어획물이 잡혔을 때의 물의 주변 온도를 중심으로 한다. 따라서 온도는 약 -2℃ 및 약 +1℃ 사이, 바람직하게는 약 0℃ 내지 약 +6℃ 사이의 온도이다.

가수분해

두 번째 단계는 분해된 갑각류 어획물을 하나 이상의 단백질분해효소와 접촉시켜 가수분해된 갑각류 어획물을 제공하는 단계를 포함한다. 가수분해된 갑각류 어획물은 분해된 갑각류 어획물이 가수분해(hydrolysis)를 진행할 때 형성된다. 가수분해는 단백질분해효소와 같은 생물학적 물질에 의해 유발되거나 매개되는 화학 반응 또는 과정으로, 자연적인 단백질 서열이 짧아져서 (즉, 예를 들면, 아미노산 서열인 일차 구조의 펩타이드 결합을 분해함으로써) 더 작은 펩타이드 및 유리 아미노산(free amino acids)을 형성하는 것이다.

분해된 갑각류 어획물은 가수분해하여 갑각류 어획물이 죽을 때 이로부터 방출되는 리파아제(lipase) 및 포스포리파아제(phospholipase)와 같은 소화효소가 불활성화될 수 있도록 해야 한다. 만약 이들 소화효소가 방출될 때 불활성화되지 않으면, 이들은 갑각류 어획물 내의 인지질(phospholipid) 및 지방산(fatty acids)를 파괴할 것이다. 소화효소를 불활성화시키기 위해, 분해된 갑각류 어획물을 가수분해된 갑각류 어획물을 형성하기 위한 특정 조건하에 단백질분해효소와 접촉시킨다. 단백질분해효소는 크릴 내의 다른 단백질은 최소한으로 손상시키면서 소화효소를 표적으로 하도록 특이적으로 선택되며, 이것은 분해된 갑각류 어획물의 외골격에서 유래한 일부 인지질 및 펩타이드를 분리하면서 후속적으로 사용될 수 있다.

효소, 온도, pH, 및 지속시간(duration)의 선택과 같은, 가수분해의 조건을 선택하여 특정 정도의 가수분해로 부분적으로 가수분해된 갑각류 어획물을 얻는다. 부분적으로 가수분해된 어획물은 바람직한데, 소화효소는 불활성화되는 반면 다른 단백질들은 더 작은 펩타이드 및 유리 아미노산으로 분해될 수 있기 때문이다. 대조적으로, 완전히 가수분해된 갑각류 어획물은 바람직하지 않은데, 어획물 내의 모든 단백질이 유리 아미노산으로 분해된다는 것을 의미한다.

가수분해의 정도는 pH-stat, 트리니트로벤젠설폰산(trinitrobenzenesulfonic acid, TNBS), o-프탈디알데하이드(o-phthaldialdehyde, OPA), 트라이클로로아세트산 가용성 질소(trichloroacetic acid soluble nitrogen, SN-TCA), 및 포르몰 적정법(formol titration methods)과 같이 본 기술분야에 공지된 방법으로 확인할 수 있다. 하기의 비율은 조합되어 범위를 생성하거나 또는 가수분해의 정도를 특정하는 최소값 또는 최대값으로서 개별적으로 사용될 수 있다: 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 및 99%. 예를 들어, 갑각류 어획물 내의 단백질의 약 30% 이상이 가수분해된다. 더욱 바람직하게는, 갑각류 어획물 내의 단백질의 약 40% 이상이 가수분해된다. 또다른 실시양태에서, 가수분해의 정도는 90%까지 될 수 있어 가수분해가 거의 완성되었음을 명시할 수 있다.

나아가, 부분적으로 가수분해된 단백질은 이들의 성질에 의해 단백질의 소화율(digestibility)을 증가시킨다. 예를 들어, 부분적으로 가수분해된 단백질의 소화성 소화율(pepsic digestibility)은 대략 약 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 또는 95% 이다. 가장 바람직하게는, 부분적으로 가수분해된 단백질의 소화성 소화율은 약 91%이다. 증가된 소화율은 부분적으로 가수분해된 단백질이 필수 아미노산을 합성할 수 없는 동물들에게 영양가가 높다는 것을 의미한다. 부분적으로 가수분해된 단백질을 수중생물 및/또는 애완동물을 위한 사료 보충제(feed supplement) 제품으로 사용하는 것에 관심이 있다.

소화성 소화율은 생체 내(in vivo) 표준방법(standard practices) 또는 시험관 내(in vitro)에서 수행되는 신규한 방법으로 측정될 수 있다. 이전에는, 연구자들은 래트(rat), 수탉(rooster) 및/또는 닭(chicken) 피험체를 사용하여 상기 동물들이 단백질-함유 화합물을 먹이로 먹을 때 소화된 단백질의 양을 측정함으로써 생체 내 소화성 소화율을 측정했다. 질소-함량에 관해 동물 배설물을 분석하여 제품 중 소화 가능한 단백질의 양의 지표를 제공했다. 단백질 소화율을 확인하는 더 신규한 방법은, 가수분해된 단백질 용액에 아민 작용기 또는 카르복실산 작용기와 반응하는 분광 시약(spectroscopic agent)을 첨가하여, 효소적 소화(enzymatic digestion) 동안 방출되는 아미노산의 양을 시각적으로 평가할 수 있게 함으로써 수행될 수 있다.

추가적으로, 단백질분해효소(들), 조건, 및 가수분해 시간은 소화 효소 및 기타 단백질(소화 효소 이외의 효소)을 포함하여 크릴 내의 임의의 단백질을 실질적으로 변성시키지 않으면서 소화효소를 불활성화할 수 있도록 특이적으로 선택된다. 변성은 단백질이 본래 상태로 존재할 때의 4차, 3차, 및/또는 2차 구조를 잃었을 때 발생한다.

다른 실시양태에서, 소화효소가 변성되지 않거나 또는 기타 단백질들이 변성되지 않는다. 변성되지 않은, 부분적으로 가수분해된 단백질이 바람직한데, 이것은 이들이 생물학적 성장에 이용 불가능한 형태로 더 적은 양의 물을 보유하는 변성된 단백질에 비해, 상당한 양의 물을 생물학적 성장에 이용 불가능한 형태로 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10배 더 길게 보유한다는 것이 밝혀졌기 때문이다. 수분을 유지하는 능력은 생성물의 유동성(flowability) 및 저장성(storability)을 증가시킴으로써 PPC의 유용성(utility)를 증가시킨다. 따라서, 오랜 시간 동안 생물학적 성장을 촉진하지 않으면서 상당한 양의 물을 유지할 수 있는, 부분적으로 가수분해된 단백질을 포함하는 것이 PPC 또는 기타 다른 하류 생성물에 유리하다.

기타 단백질을 실질적으로 변성시키지 않는다는 것은, 크릴 내의 기타 단백질을 0%, 1% 미만, 2% 미만, 3% 미만, 4% 미만, 5% 미만, 6% 미만, 7% 미만, 8% 미만, 9% 미만, 10% 미만, 20% 미만, 25% 미만, 또는 30% 미만으로 변성시키는 것으로 정의된다.

바람직하게는 가수분해는 분해된 갑각류 어획물이 단백질분해효소와 접촉되어 배양될 때 일어난다. 배양의 최적 온도는 갑각류 어획물 내의 기타 단백질들을 변성시키지 않으면서 소화효소의 가수분해에 도움이 되는 특정 효소(들)를 활성화시키는 온도이다. 온도는 본 기술분야에 공지된 임의의 수단을 통해, 가공하는 동안 달성될 수 있다. 바람직하게는, 단백질분해효소는 뜨거운 물에 첨가되고 이어서 교반(agitation)하에 분해된 갑각류 어획물과 혼합된다. 이에 대신하여, 단백질분해효소는 물에 첨가되고 이어서 혼합물이 가열될 수 있고, 또는 효소, 물, 및 분해된 갑각류 어획물이 함께 혼합된 후에 가열된다.

다음의 백분율 값을 조합하여, 분해된 갑각류의 중량을 기준으로 접촉 단계(contacting step) 동안 첨가되는 물의 양의 최소값, 최대값, 또는 범위를 생성할 수 있다: 35%, 36%, 37%, 38%, 39%, 40%, 41%, 42%, 43%, 44%, 45%, 46%, 47%, 48%, 49%, 50%, 51%, 52%, 53%, 54%, 및 55%. 예를 들어, 물은 분해된 갑각류의 중량의 약 50%까지의 양으로 첨가된다. 또다른 예시에서, 분해된 갑각류의 중량을 기준으로 약 45% 내지 약 50%의 물이 첨가된다.

다음의 값을 조합하여 분해된 갑각류 어획물이 최적으로 가수분해되는, 즉, 배양되는 온도의 최소값, 최대값, 또는 범위를 생성할 수 있다: 45℃, 46℃, 47℃, 48℃, 49℃, 50℃, 51℃, 52℃, 53℃, 54℃, 55℃, 56℃, 57℃, 58℃, 59℃, 60℃, 61℃, 62℃, 63℃, 64℃, 65℃, 66℃, 67℃, 68℃, 69℃, 70℃, 71℃, 72℃, 73℃, 74℃, 및 75℃. 예를 들어, 접촉 단계는 분해된 갑각류 어획물을 약 45℃내지 약 75℃의 범위의 온도에서 배양하는 단계를 포함한다. 이들 온도는 물의 온도 또는 물, 효소(들), 및/또는 분해된 갑각류 어획물의 혼합물의 온도에 적용될 수 있다. 예를 들어, 물은 단백질분해효소(들)과 혼합되기 전에 약 60℃의 온도까지 가열될 수 있다. 다른 실시예에서, 효소(들)은 약 45℃내지 약 65℃에서 최적으로 기능할 수 있다.

사용되는 효소의 양은 본 기술분야의 통상의 기술자에 의해 결정되어 크릴 내의 기타 단백질을 실질적으로 변성시키지 않으면서 소화효소를 충분히 불활성화시키고, 분해된 갑각류 어획물의 외골격으로부터 일부 인지질 및 펩타이드를 분리할 수 있다.

예를 들어, 사용되는 단백질분해효소는 분해된 갑각류 어획물의 총 중량의 약 0.1% 미만의 양으로 사용될 수 있다. 다음의 값은 임의의 방식으로 조합되어 분해된 갑각류 어획물의 총 중량의 비율로서의 단백질분해효소의 양의 최소값 및 최대값을 가진 범위를 생성할 수 있다: 0.3%, 0.29%, 0.28%, 0.27%, 0.26%, 0.25%, 0.24%, 0.23%, 0.22%, 0.21%, 0.2%, 0.19%, 0.18%, 0.17%, 0.16%, 0.15%, 0.14%, 0.13%, 0.12%, 0.11%, 0.1%, 0.09%, 0.08%, 0.07%, 0.06%, 0.05%, 0.04%, 0.03%, 0.02%, 및 0.01%. 일 실시양태에서, 단백질분해효소는 분해된 갑각류 어획물의 총중량을 기준으로 약 0.01% 내지 0.1%의 양으로 단계 b)에서 사용될 수 있다.

용액의 pH는 사용되는 특정 단백질분해효소(들)를 기준으로 가수분해가 최적으로 진행되도록 조정될 수 있다.

가수분해 단계는 가수분해된 갑각류 어획물을 생성하기 위한 임의의 적정한 시간이 소요될 수 있다. 가수분해에 필요한 시간에 영향을 미치는 요인은 혼합체의 온도 및 pH 뿐만 아니라 반응이 교반과 함께 또는 교반 없이 이루어지는지 여부 및 교반의 강도를 포함한다.

예를 들어, 가수분해는 100분 미만이 소요될 수 있다. 다음의 분(minutes) 값은 임의의 방식으로 조합되어 가수분해에 필요한 시간의 최소값 및 최대값을 가진 범위를 생성할 수 있다: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 및 40. 예시로서, 가수분해는 약 15-18분이 소요되거나, 약 45분 미만이 소요될 수 있다.

다른 실시양태에서, 가수분해는 100분 넘게 소요될 수 있다. 다음의 분 값은 임의의 방식으로 조합되어 가수분해에 필요한 시간의 최소값 및 최대값을 가진 범위를 생성할 수 있다: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 105, 110, 115, 120, 125, 130, 135, 140, 145, 150, 155, 160, 165, 170, 175, 180, 185, 190, 195, 200, 205, 210, 215, 220, 225, 230, 235, 및 240. 예시로서, 가수분해는 약 100-180분이 소요되거나, 약 180분 미만이 소요될 수 있다.

단백질분해효소(Proteolytic Enzymes)

본 발명에서 유용한 단백질분해효소는 단백질 뼈대(backbone)을 따라 있는 펩타이드 결합(peptide bonds)을 가수분해하여 큰 단백질 부자를 작은 분자로 자르는 식용등급(food grade) 효소이다. 본원에서 사용되는 바와 같이, "단백질분해효소(proteolytic enzyme)", "프로테아제(protease)", 및 "펩티다아제(peptidase)"라는 용어는 상호교환적으로 사용된다. 본원에서 사용되는 바와 같이, "엑소펩티다아제(exopeptidase)"라는 용어는 펩타이드 결합을 절단하여 펩타이드 또는 단백질의 말단 아미노산을 제거하는 가수분해효소를 지칭한다. 말단 아미노산은 단백질 또는 펩타이드의 N-말단 또는 C-말단의 약 10개 아미노산 내에 있는 아미노산이다. 본원에서 사용되는 바와 같이, "엔도펩티다아제(endopeptidase)"라는 용어는 폴리펩타이드 또는 단백질 내의 펩타이드 결합의 절단을 촉매하는 효소를 지칭한다. 펩티다아제는 펩타이드 결합상에 작용한다는 것을 나타내는 것이고, 엔도펩티다아제는 이들이 내부 결합(internal bonds)라는 것을 나타내는 것이다.

단백질분해효소는 카르복실-에스테르 하이드롤라제(carboxylic-ester hydrolases), 티오에스터 하이드롤라제(thioester hydrolases), 포스포릭-모노에스테르 하이드롤라제(phosphoric-monoester hydrolases), 포스파타아제(phosphatases), 포스포릭-디에스테르 하이드롤라제(phosphoric-diester hydrolases), 트리포스포릭-모노에스테르 하이드롤라제(triphosphoric-monoester hydrolases), 설퍼릭-에스테르 하이드롤라제(sulfuric-ester hydrolases), 설파타아제(sulfatases), 디포스포릭 모노에스터라아제(diphosphoric monoesterases), 및 포스포릭-트리에스테르 하이드롤라제(phosphoric-triester hydrolases)와 같은 에스터라아제 효소(esterase enzymes); 글리코시다아제(glycosidases), 즉, O- 및 S-글리코실 화합물(O- and S-glycosyl compounds)을 가수분해 하는 효소들 및 N-글리코실 화합물을 가수분해하는 효소들 같은 글리코실라제(Glycosylases); 예를 들어 티오에테르(thioether) 및 트리알킬설포늄(trialkylsulfonium)을 가수분해하는, 에테르 결합(ether bonds)에 작용하는 효소들;을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 펩티다아제는 아미노펩티다아제(aminopeptidases), 디펩티딜-펩티다아제(dipeptidyl-peptidases) 및 트리펩티딜-펩티다아제(tripeptidyl-peptidases)와 같은 엑소펩티다아제, 카복시펩티다아제(carboxypeptidases) (세린(serine)-타입 카복시펩티다아제, 메탈로카복시펩티다아제(metallocarboxypeptidases), 시스테인(cysteine)-타입 카복시펩티다아제), 디펩티다아제(dipeptidases), 오메가 펩티다아제(omega peptidases), 및 펩티딜-디펩티다아제(peptidyl-dipeptidases); 및 세린 엔도펩티다아제, 시스테인 엔도펩티다아제, 아스파르트산 엔도펩티다아제(aspartic endopeptidases)와 같은 엔도펩티다아제(endopeptidases), Ab Enzymes사의 Corolase^® 7089와 같은 아메탈로엔도펩티다아제(Ametalloendopeptidases), CAS 9001-92-7, 및 트레오닌 엔도펩티다아제(threonine endopeptidases)와 같은 엔도펩티다아제; 탄소-할라이드 화합물(carbon-halide compounds)를 단일 서브-서브클래스(sub-subclass)로 가수분해하는 효소; 인-질소 결합(phosphorus-nitrogen bonds)에 작용하는 효소; 황-질소 결합(sulfur-nitrogen bonds)에 작용하는 효소; C-포스포노기(C-phosphono-groups)를 가수분해하는 효소; 황-황 결합에 작용하는 효소; 및 탄소-황 결합에 작용하는 효소;를 포함한다.

상기 하이드롤라제의 카테고리 각각의 예시가 아래에 있다. 카르복실-에스테르 하이드롤라제는 카르복실에스터라아제(carboxylesterase), 아릴에스터라아제(arylesterase), 트리아실글리세롤 리파아제(triacylglycerol lipase), 포스포리파아제 A2(phospholipase A2), 리소포스포리파아제(lysophospholipase), 아세틸에스터라아제(acetylesterase), 아세틸콜린에스터라아제(acetylcholinesterase), 콜린에스터라아제(cholinesterase), 트로핀에스터라아제(tropinesterase), 펙틴에스터라아제(pectinesterase), 스테롤 에스터라아제(sterol esterase), 클로로필라아제(chlorophyllase), L- 아라비노노락토나아제(L-arabinonolactonase), 글루코노락토나아제(gluconolactonase), 유로노락토나아제(uronolactonase), 탄네이스(tannase), 하이록시뷰티레이트-다이머 하이드롤라제(hydroxybutyrate-dimer hydrolase), 아실글리세롤 리파아제(acylglycerol lipase), 3-옥소아디페이트 에놀-락토나아제(3-oxoadipate enol-lactonase), 1,4-락토나아제(1,4-lactonase), 갈락토리파아제(galactolipase), 4-피리독소락토나아제(4-pyridoxolactonase), 아실카르티닌 하이드롤라제(acylcarnitine hydrolase), 아미노아실-tRNA 하이드롤라제(aminoacyl-tRNA hydrolase), D-아라비노노락토나아제(D-arabinonolactonase), 6-포스포글루코노락토나아제(6-phosphogluconolactonase), 포스포리파아제 A1(phospholipase A1), 6-아세틸글루코스 디아세틸라아제(6-acetylglucose deacetylase), 지질단백질 리파아제(lipoprotein lipase), 디하이드로쿠마린 하이드롤라제(dihydrocoumarin hydrolase), 리모닌-D-링-락토나아제(limonin-D-ring-lactonase), 스테로이드-락토나아제(steroid-lactonase), 트리아세테이트-락토나아제(triacetate-lactonase), 악티노마이신 락토나아제(actinomycin lactonase), 오르셀리네이트-뎁시드 하이드롤라제(orsellinate-depside hydrolase), 세팔로스포린-C 디아세틸라아제(cephalosporin-C deacetylase), 클로로제네이트 하이드롤라제(chlorogenate hydrolase), α-아미노산 에스터라아제(α-amino-acid esterase), 4-메틸옥살로아세테이트 에스터라아제(4-methyloxaloacetate esterase), 카르복시메틸렌부테놀리다아제(carboxymethylenebutenolidase), 디옥시리모네이트 A-링-락토나아제(deoxylimonate A-ring-lactonase), 1-알킬-2-아세틸글리세로포스포콜린 에스터라아제(1-alkyl-2-acetylglycerophosphocholine esterase), 푸사리닌-C 오르니틴에스터라아제(fusarinine-C ornithinesterase), 시나핀 에스터라아제(sinapine esterase), 왁스-에스테르 하이드롤라제(wax-ester hydrolase), 포볼-디에스테르 하이드롤라제(phorbol-diester hydrolase), 포스파티딜이노시톨 데아실라제(phosphatidylinositol deacylase), 시알레이트 O-아세틸에스터라아제(sialate O-acetylesterase), 아세톡시뷰티닐비티오펜 디아세틸라아제(acetoxybutynylbithiophene deacetylase), 아세틸살리실레이트 디아세틸라아제(acetylsalicylate deacetylase), 메틸움벨리페릴-아세테이트 디아세틸라아제(methylumbelliferyl-acetate deacetylase), 2-피론-4,6-디카르복실레이트 락토나아제(2-pyrone-4,6-dicarboxylate lactonase), N- 아세틸갈락토즈아미노글리칸 디아세틸라아제(N-acetylgalactosaminoglycan deacetylase), 유충-호르몬 에스터라아제(juvenile-hormone esterase), 비스(2-에틸헥실)프탈레이트 에스터라아제(bis(2-ethylhexyl)phthalate esterase), 단백질-글루타메이트 메틸에스터라아제(protein-glutamate methylesterase), 11-시스-레티닐-팔미테이트 하이드롤라제(11-cis-retinyl-palmitate hydrolase), 레티노이드 아이소머로하이드롤라제(retinoid isomerohydrolase), L-람노노-1,4-락토나아제(L-rhamnono-1,4-lactonase), 5-(3,4-디아세톡시부트-1-이닐)-2,2´-비디오펜 디아세틸라아제(5-(3,4-diacetoxybut-1-ynyl)-2,2´-bithiophene deacetylase), 지방산-아실-에틸-에스테르 신타아제(fatty-acyl-ethyl-ester synthase), 실로노-1,4-락토나아제(xylono-1,4-lactonase), 세트락세이트 벤질에스터라아제(cetraxate benzylesterase), 아세틸알킬글리세롤 아세틸하이드롤라제(acetylalkylglycerol acetylhydrolase), 아세틸자일란 에스터라아제(acetylxylan esterase), 페룰로일 에스터라아제(feruloyl esterase), 큐티나아제(cutinase), 폴리(3-하이드록시뷰티레이트) 디폴리머라아제(poly(3-hydroxybutyrate) depolymerase), 폴리(3-하이드록시옥타노에이트) 디폴리머라아제(poly(3-hydroxyoctanoate) depolymerase), 아실로자이아실 하이드롤라제(acyloxyacyl hydrolase), 폴리뉴리딘-알데하이드 에스터라아제(polyneuridine-aldehyde esterase), 호르몬-감수성 리파아제(hormone-sensitive lipase), 아세틸아즈말린 에스터라아제(acetylajmaline esterase), 정족수-감지 N-아실-호모세린 락토나아제(quorum-quenching N-acyl-homoserine lactonase), 페오포르비다아제(pheophorbidase), 모노테르펜 ε-락톤 하이드롤라제(monoterpene ε-lactone hydrolase), 코카인 에스터라아제(***e esterase), 피멜릴-[아실-캐리어 단백질] 메틸 에스테르 에스터라아제(pimelyl-[acyl-carrier protein] methyl ester esterase), 람노갈락투로난 아세틸에스터라아제(rhamnogalacturonan acetylesterase), 푸모니신 B1 에스터라아제(fumonisin B1 esterase), 피레드로이드 하이드롤라제(pyrethroid hydrolase), 단백질 포스파타아제 메틸에스터라아제-1(protein phosphatase methylesterase-1), 전-트랜스-레티닐 에스테르 13-시스 아이소머하이드롤라제(all-trans-retinyl ester 13-cis isomerohydrolase), 2-옥소-3-(5-옥소퓨란-2-일리덴)프로파노에이트 락토나아제(2-oxo-3-(5-oxofuran-2-ylidene)propanoate lactonase), 4-설포뮤코노락톤 하이드롤라제(4-sulfomuconolactone hydrolase), 미코페놀산 아실-글루쿠로니드 에스터라아제(mycophenolic acid acyl-glucuronide esterase), 다면 헤미아세탈 아세테이트 에스터라아제(versiconal hemiacetal acetate esterase), 아클라시노마이신 메틸에스터라아제(aclacinomycin methylesterase), D-아미노아실-tRNA 디아실라아제(D-aminoacyl-tRNA deacylase), 메틸레이티드 디프틴 메틸하이드롤라제(methylated diphthine methylhydrolase), [Wnt 단백질(Wnt protein)] O-팔미톨레오일-L-세린 하이드롤라제(O-palmitoleoyl-L-serine hydrolase), 6-데옥시-6-설포글루코노락토나아제(6-deoxy-6-sulfogluconolactonase), 클로로필리드 에이 하이드롤라제(chlorophyllide a hydrolase), 폴리(에틸렌 테레프탈레이트) 하이드롤라제(poly(ethylene terephthalate) hydrolase), 및 모노(에틸렌 테레프탈레이트) 하이드롤라제(mono(ethylene terephthalate) hydrolase)를 포함한다.

티오에스터 하이드롤라제는 아세틸-CoA 하이드롤라제(acetyl-CoA hydrolase), 팔미토일-CoA 하이드롤라제(palmitoyl-CoA hydrolase), 숙시닐-CoA 하이드롤라제(succinyl-CoA hydrolase), 3-하이드록시아이소뷰티릴-CoA 하이드롤라제(3-hydroxyisobutyryl-CoA hydrolase), 하이드록시메틸글루타릴-CoA 하이드롤라제(hydroxymethylglutaryl-CoA hydrolase), 하이드록시아실글루타티온 하이드롤라제(hydroxyacylglutathione hydrolase), 글루타티온 티올에스터라아제(glutathione thiolesterase), 포르밀-CoA 하이드롤라제(formyl-CoA hydrolase), 아세토아세틸-CoA 하이드롤라제(acetoacetyl-CoA hydrolase), S-포르밀글루타티온 하이드롤라제(S-formylglutathione hydrolase), S-숙시닐글루타티온 하이드롤라제(S-succinylglutathione hydrolase), 올레오일-[아실-캐리어-단백질] 하이드롤라제(oleoyl-[acyl-carrier-protein] hydrolase), 시트레이트-리아제 디아세틸라아제(citrate-lyase deacetylase), (S)-메틸말로닐-CoA 하이드롤라제((S)-methylmalonyl-CoA hydrolase), ADP-의존성 단쇄-아실-CoA 하이드롤라제(ADP-dependent short-chain-acyl-CoA hydrolase), APD-의존성 중쇄-아실-CoA 하이드롤라제(ADP-dependent medium-chain-acyl-CoA hydrolase), 아실-CoA 하이드롤라제(acyl-CoA hydrolase), 도데카노일-[아실-캐리어-단백질] 하이드롤라제(dodecanoyl-[acyl-carrier-protein] hydrolase), 팔미토일[단백질] 하이드롤라제(palmitoyl[protein] hydrolase), 4-하이드록시벤조일-CoA 4-티오에스터라아제(hydroxybenzoyl-CoA thioesterase), 페닐아세틸-CoA 하이드롤라제(phenylacetyl-CoA hydrolase), 콜로일-CoA 하이드롤라제(choloyl-CoA hydrolase), 1,4-디하이드록시-2-나프토일-CoA 하이드롤라제(1,4-dihydroxy-2-naphthoyl-CoA hydrolase), 플루오로아세틸-CoA 티오에스터라아제(fluoroacetyl-CoA thioesterase), (3S)-말릴-CoA 티오에스터라아제((3S)-malyl-CoA thioesterase), 디하이드로모나콜린 L-[로바스타틴 노나케타이드 신타아제] 티오에스터라아제(dihydromonacolin L-[lovastatin nonaketide synthase] thioesterase), 및 2-아미노벤조일아세틸-CoA 티오에스터라아제(2-aminobenzoylacetyl-CoA thioesterase)를 포함한다.

포스포릭-모노에스터 하이드롤라제는 알칼린 포스파타아제(alkaline phosphatase), 산성 포스파타아제(acid phosphatase), 포스포세린 포스파타아제(phosphoserine phosphatase), 포스파티데이트 포스파타아제(phosphatidate phosphatase), 5´-뉴클리오티다아제(5´-nucleotidase), 3´-뉴클리오티다아제(3´-nucleotidase), 3´(2′),5′-비스포스페이트 뉴클리오티다아제(3´(2′),5′-bisphosphate nucleotidase), 3-피타아제(3-phytase), 글루코스-6-포스파타아제(glucose-6-phosphatase), 글루코스-1-포스파타아제(glucose-1-phosphatase), 프럭토스-비스포스파타아제(fructose-bisphosphatase), 트레할로스-포스파타아제(trehalose-phosphatase), 메틸포스포티오글리세레이트 포스파타아제(methylphosphothioglycerate phosphatase), 히스티디놀-포스파타아제(histidinol-phosphatase), 단백질-세린/트레오닌 포스파타아제(protein-serine/threonine phosphatase), [포스포릴라아제(phosphorylase)] 포스파타아제, 포스포글라이콜레이트 포스파타아제(phosphoglycolate phosphatase), 글리세롤-2-포스파타아제(glycerol-2-phosphatase), 포스포글리세레이트 포스파타아제(phosphoglycerate phosphatase), 글리세롤-1-포스파타아제(glycerol-1-phosphatase), 만니톨-1-포스파타아제(mannitol-1-phosphatase), 당-포스파타아제(sugar-phosphatase), 수크로스-포스페이트 포스파타아제(sucrose-phosphate phosphatase), 이노시톨-포스페이트 포스파타아제(inositol-phosphate phosphatase), 4-피타아제(4-phytase), 포스퍼타이딜글리세로포스파타아제(phosphatidylglycerophosphatase), ADP-포스포글리세레이트 포스파타아제(ADP-phosphoglycerate phosphatase), N-아실뉴라미네이트-9-포스파타아제(N-acylneuraminate-9-phosphatase), 뉴클레오티다아제(nucleotidase), 폴리뉴클레오티드 3´-포스파타아제(polynucleotide 3´-phosphatase), 폴리뉴클레오티드 5´-포스파타아제(polynucleotide 5´-phosphatase), 데옥시뉴클레오타이드 3´ 포스파타아제(deoxynucleotide 3´-phosphatase), 티미딜레이트 5´-포스파타아제(thymidylate 5´-phosphatase), 포스포이노시티드 5-포스파타아제(phosphoinositide 5-phosphatase), 세도헵툴로오스-비스포스파타아제(sedoheptulose-bisphosphatase), 3-포스포글리세레이트 포스파타아제(3-phosphoglycerate phosphatase), 스트렙토마이신-6-포스포타아제(streptomycin-6-phosphatase), 구아니디노데옥시-사일로-이노시톨-4-포스파타아제(guanidinodeoxy-scyllo-inositol-4-phosphatase), 4-니트로페닐포스파타아제(4-nitrophenylphosphatase), [글리코젠-신타아제-D(glycogen-synthase-D)] 포스파타아제, [피루베이트 디하이드로제나아제(아세틸기-전달)(pyruvate dehydrogenase (acetyl-transferring))]-포스파타아제, [아세틸-CoA 카복실라아제(acetyl-CoA carboxylase)]-포스파타아제, 3-데옥시-만노-옥툴로소네이트-8-포스파타아제(3-deoxy-manno-octulosonate-8-phosphatase), 프럭토스-2,6-비스포스페이트 2-포스파타아제(fructose-2,6-bisphosphate 2-phosphatase), [하이드록시메틸글루타릴-CoA 환원효소(hydroxymethylglutaryl-CoA reductase) (NADPH)]-포스파타아제, 단백질-티로신-포스파타아제(protein-tyrosine-phosphatase), [피루베이트 키나아제(pyruvate kinase)]-포스파타아제, 소르비톨-6-포스파타아제(sorbitol-6-phosphatase), 돌리칠-포스파타아제(dolichyl-phosphatase), [3-메틸-2-옥소부타노에이트 탈수소효소(3-methyl-2-oxobutanoate dehydrogenase) (2-메틸프로파노일-전달(2-methylpropanoyl-transferring))]-포스파타아제, [미오신-경쇄(myosin-light-chain)] 포스파타아제, 프럭토스-2,6-비스포스페이트 6-포스파타아제(fructose-2,6-bisphosphate 6-phosphatase), 칼데스몬-포스포타아제(caldesmon-phosphatase), 이노시톨-폴리포스페이트 5-포스파타아제(inositol-polyphosphate 5-phosphatase), 이노시톨-1,4-비스포스페이트 1-포스포타아제(inositol-1,4-bisphosphate 1-phosphatase), 당-말단-포스파타아제(sugar-terminal-phosphatase), 알킬아세틸글리세로포스파타아제(alkylacetylglycerophosphatase), 포스포에놀피루베이트 포스파타아제(phosphoenolpyruvate phosphatase), 다중 이노시톨-폴리포스페이트 포스포타아제(multiple inositol-polyphosphate phosphatase), 2-카복시-D-아라비니톨-1-포스포타아제(2-carboxy-D-arabinitol-1-phosphatase), 포스파티딜이노시톨-3-포스파타아제(phosphatidylinositol-3-phosphatase), 포스파티딜이노시톨-3,4-비스포스페이트 4-포스파타아제(phosphatidylinositol-3,4-bisphosphate 4-phosphatase), 포스파티딜이노시톨-3,4,5-트리포스페이트 3-포스파타아제(phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate 3-phosphatase), 2-데옥시글루코스-6-포스파타아제(2-deoxyglucose-6-phosphatase), 글루코실글리세롤 3-포스파타아제(glucosylglycerol 3-phosphatase), 만노실-3-포스포글리세레이트 포스파타아제(mannosyl-3-phosphoglycerate phosphatase), 2-포스포설포락테이트 포스파타아제(2-phosphosulfolactate phosphatase), 5-피타아제(5-phytase), 아데노실코발라민/α-리바졸 포스파타아제(adenosylcobalamin/α-ribazole phosphatase), 피리독살 포스파타아제(pyridoxal phosphatase), 포스포에타놀아민/포스포콜린 포스파타아제(phosphoethanolamine/phosphocholine phosphatase), 지질-포스페이트 포스파타아제(lipid-phosphate phosphatase), 아시리덕톤 신타아제(acireductone synthase), 포스파티딜이노시톨-4,5-비스포스페이트 4-포스포타아제(phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate 4-phosphatase), 만노실프럭토스-포스페이트 포스파타아제(mannosylfructose-phosphate phosphatase), 2,3-비스포스포글리세레이트 3-포스포타아제(2,3-bisphosphoglycerate 3-phosphatase), 디아실글리세롤 디포스페이트 포스파타아제(diacylglycerol diphosphate phosphatase), D-글리세로-β-D-만노-헵토스 1,7-비스포스페이트 7-포스포타아제(D-glycero-β-D-manno-heptose 1,7-bisphosphate 7-phosphatase), D-글리세로-α-D-만노-헵토스 1,7-비스포스페이트 7-포스파타아제(D-glycero-α-D-manno-heptose 1,7-bisphosphate 7-phosphatase), ADP-리보스 1´´-포스페이트 포스파타아제(ADP-ribose 1´´-phosphate phosphatase), 글루코실-3-포스포글리세레이트 포스파타아제(glucosyl-3-phosphoglycerate phosphatase), 포스파티딜이노시톨-3,4,5-트리포스페이트 5-포스파타아제(phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate 5-phosphatase), 2-하이드록시-3-케토-5-메틸티오펜테닐-1-포스페이트 포스파타아제(2-hydroxy-3-keto-5-methylthiopentenyl-1-phosphate phosphatase), 5´´-포스포리보스타마이신 포스파타아제(5´´-phosphoribostamycin phosphatase), 5´-데옥시뉴클레오티다아제(5´-deoxynucleotidase), 말토오스 6´-포스페이트 포스파타아제(maltose 6´-phosphate phosphatase), 7-메틸구아노신 뉴클레오티다아제(7-methylguanosine nucleotidase), 카노사민-6-포스페이트 포스파타아제(kanosamine-6-phosphate phosphatase), L-갈락토스 1-포스페이트 포스파타아제(L-galactose 1-phosphate phosphatase), D-갈락토스 1-포스페이트 포스파타아제(D-galactose 1-phosphate phosphatase), 포스파티딜이노시톨-3,5-비스포스페이트 3-포스파타아제(phosphatidylinositol-3,5-bisphosphate 3-phosphatase), 슈도유리딘 5´-포스파타아제(pseudouridine 5´-phosphatase), 3´,5´-뉴클레오시드 비스포스페이트 포스파타아제(3´,5´-nucleoside bisphosphate phosphatase), IMP-특이적 5´-뉴클레오티다아제(IMP-specific 5´-nucleotidase), 티아민 포스페이트 포스파타아제(thiamine phosphate phosphatase), 발리독실아민 A 7´-포스페이트 포스파타아제(validoxylamine A 7´-phosphate phosphatase), FMN 하이드롤라제(FMN hydrolase), 3-데옥시-D-글리세로-D-갈락토-노눌로피라노소네이트 9-포스파타아제(3-deoxy-D-glycero-D-galacto-nonulopyranosonate 9-phosphatase), 5-아미노-6-(5-포스포-D-리비틸아미노)유라실 포스파타아제(5-amino-6-(5-phospho-D-ribitylamino)uracil phosphatase), 및 N-아세틸-D-뮤라메이트 6-포스페이트 포스파타아제(N-acetyl-D-muramate 6-phosphate phosphatase)를 포함한다.

포스포릭-디에스테르 하이드롤라제는 포스포디에스터라아제 I(phosphodiesterase I), 글리세로포스포콜린 포스포디에스터라아제(glycerophosphocholine phosphodiesterase), 포스포리파아제 C(phospholipase C), 포스포리파아제 D(phospholipase D), 포스포이노시티드 포스포리파아제 C(phosphoinositide phospholipase C), 스핑고미엘린 포스포디에스터라아제(sphingomyelin phosphodiesterase), 세린-에탄올아민포스페이트 포스포디에스터라아제(serine-ethanolaminephosphate phosphodiesterase), [아실-캐리어-단백질] 포스포디에스터라아제([acyl-carrier-protein] phosphodiesterase), 2´,3´-고리형-뉴클레오티드 2´-포스포디에스터라아제(2´,3´-cyclic-nucleotide 2´-phosphodiesterase), 3´,5´-고리형-뉴클레오티드 포스포디에스터라아제(3´,5´-cyclic-nucleotide phosphodiesterase), 3´,5´-고리형-GMP 포스포디에스터라아제(3´,5´-cyclic-GMP phosphodiesterase), 2´,3´-고리형-뉴클레오티드 3´-포스포디에스터라아제(2´,3′-cyclic-nucleotide 3′´-phosphodiesterase), 글리세로포스포콜린 콜린포스포디에스터라아제(glycerophosphocholine cholinephosphodiesterase), 알킬글리세로포스포에탄올아민 포스포디에스터라아제(alkylglycerophosphoethanolamine phosphodiesterase), CMP-N-아실뉴라미네이트 포스포디에스터라아제(CMP-N-acylneuraminate phosphodiesterase), 스핑고미엘린 포스포디에스터라아제 D(sphingomyelin phosphodiesterase D), 글리세롤-1,2-고리형-포스페이트 2-포스포디에스터라아제(glycerol-1,2-cyclic-phosphate 2-phosphodiesterase), 글리세로포스포이노시톨 이노시톨포스포다이에스터라아제(glycerophosphoinositol inositolphosphodiesterase), 글리세로포스포이노시톨 글리세로포스포디에스터라아제(glycerophosphoinositol glycerophosphodiesterase), N-아세틸글루코사민-1-포스포디에스테르 α-N-아세틸글루코사미니다아제(N-acetylglucosamine-1-phosphodiester α-N-acetylglucosaminidase), 글리세로포스포디에스테르 포스포디에스터라아제(glycerophosphodiester phosphodiesterase), 돌리칠포스페이트-글루코스 포스포디에스터라아제(dolichylphosphate-glucose phosphodiesterase), 돌리칠포스페이트-만노오스 포스포디에스터라아제(dolichylphosphate-mannose phosphodiesterase), 글리코실포스파티딜이노시톨 포스포리파아제 D(glycosylphosphatidylinositol phospholipase D), 글루코스-1-포스포-D-만노실글리코프로틴 포스포디에스터라아제(glucose-1-phospho-D-mannosylglycoprotein phosphodiesterase), 고리형-구아닐레이트-특이적-포스포디에스터라아제(cyclic-guanylate-specific phosphodiesterase), 3´,5´-고리형-AMP 포스포디에스터라아제(3,5´´-cyclic-AMP phosphodiesterase), N-아세틸포스파티딜에탄올아민-가수분해 포스포리파아제 D(N-acetylphosphatidylethanolamine-hydrolysing phospholipase D), 포스포리보실 1,2-고리형 포스페이트 포스포디에스터라아제(phosphoribosyl 1,2-cyclic phosphate phosphodiesterase), 7,8-디하이드로네오프테린-2´,3´-고리형 포스페이트 포스포디에스터라아제(7,8-dihydroneopterin 2´,3´-cyclic phosphate phosphodiesterase), 포스포리보실 1,2-고리형 포스페이트 1,2- 디포스포디에스터라아제(phosphoribosyl 1,2-cyclic phosphate 1,2-diphosphodiesterase), 및 RNA 2´,3´-고리형 3´-포스포디에스터라아제(RNA 2´,3´-cyclic 3´-phosphodiesterase)를 포함한다.

트리포스포릭-모노에스테르 하이드롤라제는 dGTPase를 포함한다.

설퍼릭-에스테르 하이드롤라제는 아릴설파타아제(arylsulfatase), 스테릴-설파타아제(steryl-sulfatase), 글리코설파타아제(glycosulfatase), N-아세틸갈락토사민-6-설파타아제(N-acetylgalactosamine-6-sulfatase), 콜린-설파타아제(choline-sulfatase), 셀룰로오스-폴리설파타아제(cellulose-polysulfatase), 세레브로시드-설파타아제(cerebroside-sulfatase), 콘드로-4-설파타아제(chondro-4-sulfatase), 콘드로-6-설파타아제(chondro-6-sulfatase), 디설포글루코사민-6-설파타아제(disulfoglucosamine-6-sulfatase), N-아세틸갈락토사민-4-설파타아제(N-acetylgalactosamine-4-sulfatase), 이듀로네이트-2-설파타아제(iduronate-2-sulfatase), N-아세틸글루코사민-6-설파타아제(N-acetylglucosamine-6-sulfatase), N-설포글루코사민-3-설파타아제(N-sulfoglucosamine-3-sulfatase), 모노메틸-설파타아제(monomethyl-sulfatase), D-락테이트-2-설파타아제(D-lactate-2-sulfatase), 글루쿠로네이트-2-설파타아제(glucuronate-2-sulfatase), 및 (R)-특이적 2차-알킬설파타아제((R)-specific secondary-alkylsulfatase)를 포함한다.

디포스포릭-모노에스테르 하이드롤라제는 프레닐-디포스파타아제(prenyl-diphosphatase), 구아노신-3′,5′-비스(디포스페이트) 3′-디포스파타아제(guanosine-3′,5′-bis(diphosphate) 3′-diphosphatase), 모노테르페닐-디포스포타아제(monoterpenyl-diphosphatase), 제라닐제라닐 디포스페이트 디포스포타아제(geranylgeranyl diphosphate diphosphatase), 파르네실 디포스포타아제(farnesyl diphosphatase), 투베르쿨로시놀 신타아제(tuberculosinol synthase), 이소투베르쿨로시놀 신타아제(isotuberculosinol synthase), (13E)-라브다-7,13-디엔-15올 신타아제((13E)-labda-7,13-dien-15-ol synthase), 제라닐 디포스페이트 디포스포타아제(geranyl diphosphate diphosphatase), 및 (+)-콜라벨룰 신타아제((+)-kolavelool synthase)를 포함한다.

포스포릭-트리에스테르 하이드롤라제는 아릴디알킬포스파타아제(aryldialkylphosphatase) 및 디이소프로필-플루오로포스파타아제(diisopropyl-fluorophosphatase)를 포함한다.

5′-포스포모노에스테르 생성 엑소데오시리보뉴클레아제(Exodeoxyribonucleases producing 5′-phosphomonoesters)는 엑소데옥시리보뉴클레아제 I(exodeoxyribonuclease I), 엑소데옥시리보뉴클레아제 III(exodeoxyribonuclease III), 엑소데옥시리보뉴클레아제(exodeoxyribonuclease) (람다-유도성(lambda-induced)), 엑소데옥시리보뉴클레아제(exodeoxyribonuclease) (SP3 파지-유도성(phage SP3-induced)), 엑소데옥시리보뉴클레아제 V(exodeoxyribonuclease V), 엑소데옥시리보뉴클레아제 VII(exodeoxyribonuclease VII), 아데노신-5′-디포스포-5′-[DNA] 디포스파타아제(adenosine-5′-diphospho-5′-[DNA] diphosphatase), 및 구아노신-5´-디포스포-5´-[DNA] 디포스포타아제(guanosine-5´-diphospho-5´-[DNA] diphosphatase)를 포함한다.

3´-포스포모노에스테르 생성 엑소데옥시리보뉴클레아제(Exodeoxyribonucleases producing 3´-phosphomonoesters)는 5´내지 3´ 엑소데옥시리보뉴클레아제(5´to 3´ exodeoxyribonucleases)(뉴클레오시드 3´-포스페이트-형성(nucleoside 3´-phosphate-forming)) 및 DNA-3´-디포스포-5´-구아노신 디포스포타아제를 포함한다.

5´-포스포모노에스테르 생성 엑소리보뉴클레아제는 엑소리보뉴클레아제 II(exoribonuclease II), 엑소리보뉴클레아제 H(exoribonuclease H), 올리고뉴클레오티다아제(oligonucleotidase), 폴리(A)-특이적 리보뉴클레아제(poly(A)-specific ribonuclease), 및 리보뉴클레아제 D(ribonuclease D)를 포함한다.

3'-포스포모노에스테르 생성 엑소리보뉴클레아제는 효모 리보뉴클레아제(yeast ribonuclease)를 포함한다.

리보핵산 또는 데옥시리보핵산으로 활성화되고 5'-포스포모노에스터라아제를 생성하는 엑소뉴클레아제는 베놈 엑소뉴클레아제(venom exonuclease)를 포함한다.

리보 또는 데옥시리보핵산으로 활성화되고 3'-포스포모노에스테르를 생성하는 엑소뉴클레아제로서, 비장 엑소뉴클레아제(spleen exonuclease) 같은 것;

5'-포스포모노에스테르 생성 엔도데옥시리보뉴클레아제는 데옥시리보뉴클레아제 I(deoxyribonuclease I), 데옥시리보뉴클레아제 IV(deoxyribonuclease IV), 타입 I 부위-특이적 데옥시리보뉴클레아제(type I site-specific deoxyribonuclease), 타입 II 부위-특이적 데옥시리보뉴클레아제(type II site-specific deoxyribonuclease), 타입 III 부위-특이적 데옥시리보뉴클레아제(type III site-specific deoxyribonuclease), CC-선호 엔도데옥시리보뉴클레아제(CC-preferring endodeoxyribonuclease), 데옥시리보뉴클레아제 V(deoxyribonuclease V), T₄ 데옥시리보뉴클레아제 II(T₄ deoxyribonuclease II), 및 T₄ 데옥시리보뉴클레아제 IV(T₄ deoxyribonuclease IV)를 포함한다.

3'-포스포모노에스테르 생성 엔도데옥시리보뉴클레아제는 데옥시리보뉴클레아제 II(deoxyribonuclease II)를 포함한다.

아스페르길루스 데옥시리보뉴클레아제 K1(Aspergillus deoxyribonuclease K1)은 크로스오버 접합 엔도데옥시리보뉴클레아제(crossover junction endodeoxyribonuclease) 및 데옥시리보뉴클레아제 X(deoxyribonuclease X)를 포함한다.

변형 염기에 특이적인 부위-특이적 엔도데옥시리보뉴클레아제는 데옥시리보뉴클레아제(deoxyribonuclease)(피리미딘 다이머(pyrimidine dimer))를 포함한다.

5'-포스포모노에스테르 생성 엔도리보뉴클레아제가 또한 포함된다.

황색망사점균 리보뉴클레아제(Physarum polycephalum ribonuclease)는 리보뉴클레아제 α(ribonuclease α), 리보뉴클레아제 III(ribonuclease III), 리보뉴클레아제 H(ribonuclease H), 리보뉴클레아제 P(ribonuclease P), 리보뉴클레아제 IV(ribonuclease IV), 리보뉴클레아제 P4(ribonuclease P4), 리보뉴클레아제 M5(ribonuclease M5), 리보뉴클레아제(ribonuclease) [폴리-(U)-특이적] [poly-(U)-specific], 리보뉴클레아제 IX(ribonuclease IX), tRNase Z, 리보뉴클레아제 E(ribonuclease E), 및 레트로바이러스 리보뉴클레아제 H(retroviral ribonuclease H); 리보뉴클레아제 T₂(ribonuclease T₂)와 같은 3'-포스포모노에스테르 생성 엔도리보뉴클레아제(Endoribonucleases producing 3'-phosphomonoesters)를 포함한다.

고초균 리보뉴클레아제(Bacillus subtilis ribonuclease)는 리보뉴클레아제 T₁(ribonuclease T₁), 리보뉴클레아제 U₂(ribonuclease U₂), 및 췌장 리보뉴클레아제(pancreatic ribonuclease)를 포함한다.

엔테로박터 리보뉴클레아제는 리보뉴클레아제 F(ribonuclease F), 리보뉴클레아제 V(ribonuclease V), 및 rRNA 엔도뉴클레아제(rRNA endonuclease)를 포함한다.

리보핵산 또는 데옥시리보핵산으로 활성화되고 5'-포스포모노에스테르(5'-phosphomonoesters)를 생산하는 엔도리보뉴클레아제; 아스페르길루스 뉴클레아제 S1(Aspergillus nuclease S1); 및 세라티아 마르세센스 뉴클레아제(Serratia marcescens nuclease)가 또한 포함된다.

리보핵산 또는 데옥시리보핵산으로 활성화되고 3'-포스포모노에스테르(3'-phosphomonoesters)를 생산하는 엔도리보뉴클레아제는 미구균 뉴클레아제(micrococcal nuclease)를 포함한다.

글리코실라제(Glycosylases)가 또한 포함된다.

글리코시다아제(Glycosidases), 즉, O- 및 S-글리코실 화합물(O- and S-glycosyl compounds)를 가수분해하는 효소는 α-아밀라아제(α-amylase), β-아밀라아제(β-amylase), 글루칸 1,4-α-글루코시다아제(glucan 1,4-α-glucosidase), 셀룰로스(cellulose), 엔도-1,3(4)-β-글루카나아제(endo-1,3(4)-β-glucanase), 이눌리나아제(inulinase), 엔도-1,4-β-자일라나아제(endo-1,4-β-xylanase), 올리고-1,6-글루코시다아제(oligo-1,6-glucosidase), 덱스트라나아제(dextranase), 키티나아제(chitinase), 폴리갈락투로나아제(polygalacturonase), 라이소자임(lysozyme), 엑소-α-시알리다아제(exo-α-sialidase), α-글루코시다아제(α-glucosidase), β-글루코시다아제(β-glucosidase), α-갈락토시다아제(α-galactosidase), β-갈락토시다아제(β-galactosidase), α-만노시다아제(α-mannosidase), β-만노시다아제(β-mannosidase), β-프럭토푸라노시다아제(β-fructofuranosidase), α,α-트레할라아제(α,α-trehalase), β-글루쿠로니다아제(β-glucuronidase), 엔도-1,3-β-자일라나아제(endo-1,3-β-xylanase), 아밀로-α-1,6-글루코시다아제(amylo-α-1,6-glucosidase), 히알루로노글루코사미니다아제(hyaluronoglucosaminidase), 히알루로노글루쿠로니다아제(hyaluronoglucuronidase), 자일란 1,4-β-자일로시다아제(xylan 1,4-β-xylosidase), β-D-푸코시다아제(β-D-fucosidase), 글루칸 엔도-1,3-β-D-글루코시다아제(glucan endo-1,3-β-D-glucosidase), α-L-람노시다아제(α-L-rhamnosidase), 폴룰라나아제(pullulanase), GDP-글루코시다아제(GDP-glucosidase), β-L-람노시다아제(β-L-rhamnosidase), 푸코이다나아제(fucoidanase), 글루코실세라미다아제(glucosylceramidase), 갈락토실세라미다아제(galactosylceramidase), 갈락토실갈락토실글루코실세라미다아제(galactosylgalactosylglucosylceramidase), 수크로스 α-글루코시다아제(sucrose α-glucosidase), α-N-아세틸갈락토사미니다아제(α-N-acetylgalactosaminidase), α-N-아세틸글루코사미니다아제(α-N-acetylglucosaminidase), α-L-푸코시다아제(α-L-fucosidase), β-N-아세틸헥소사미니다아제(β-N-acetylhexosaminidase), β-N-아세틸갈락토사미니다아제(β-N-acetylgalactosaminidase), 사이클로말토덱스트리나아제(cyclomaltodextrinase), 비-환원 말단 α-L-아라비노푸라노시다아제(non-reducing end α-L-arabinofuranosidase), 글루쿠로노실-디설포글루코사민 글루쿠로니다아제(glucuronosyl-disulfoglucosamine glucuronidase), 이소풀룰라나아제(isopullulanase), 글루칸 1,3-β-글루코시다아제(glucan 1,3-β-glucosidase), 글루칸 엔도-1,3-α-글루코시다아제(glucan endo-1,3-α-glucosidase), 글루칸 1,4-α-말토테트라오하이드롤라제(glucan 1,4-α-maltotetraohydrolase), 마이코덱스트라나아제(mycodextranase), 글리코실세라미다아제(glycosylceramidase), 1,2-α-L-푸코시다아제(1,2-α-L-fucosidase), 2,6-β-프룩탄 6-레반바이오하이드롤라제(2,6-β-fructan 6-levanbiohydrolase), 레바나아제(levanase), 퀘르시트리나아제(quercitrinase), 갈락투란 1,4-α-갈락투로니다아제(galacturan 1,4-α-galacturonidase), 이소아밀라아제(isoamylase), 글루칸 1,6-α-글루코시다아제(glucan 1,6-α-glucosidase), 글루칸 엔도-1,2-β-글루코시다아제(glucan endo-1,2-β-glucosidase), 자일란 1,3-β-자일로시다아제(xylan 1,3-β-xylosidase), 리케니나아제(licheninase), 글루칸 1,4-β-글루코시다아제(glucan 1,4-β-glucosidase), 글루칸 엔도-1,6-β-글루코시다아제(glucan endo-1,6-β-glucosidase), L-아이두로니다아제(L-iduronidase), 만난 1,2-(1,3)-α-만노시다아제(mannan 1,2-(1,3)-α-mannosidase), 만난 엔도-1,4-β-만노시다아제(mannan endo-1,4-β-mannosidase), 프럭탄 β-프룩토시다아제(fructan β-fructosidase), β-아가라아제(β-agarase), 엑소-폴리-α-갈락투로노시다아제(exo-poly-α-galacturonosidase), κ-카라기나아제(κ-carrageenase), 글루칸 1,3-α-글루코시다아제(glucan 1,3-α-glucosidase), 6-포스포-β-갈락토시다아제(6-phospho-β-galactosidase), 6-포스포-β-글루코시다아제(6-phospho-β-glucosidase), 협막-다당류 엔도-1,3-α-갈락토시다아제(capsular-polysaccharide endo-1,3-α-galactosidase), 비-환원 말단 β-L-아라비노피라노시다아제(non-reducing end β-L-arabinopyranosidase), 아라비노갈락탄 엔도-β-1,4-갈락타나아제(arabinogalactan endo-β-1,4-galactanase), 셀룰로스 1,4-β-셀로바이오시다아제(cellulose 1,4-β-cellobiosidase) (비-환원 말단), 펩티도글리칸 β-N-아세틸뮤라미다아제(peptidoglycan β-N-acetylmuramidase), α,α-포스포트레할라아제(α,α-phosphotrehalase), 글루칸 1,6-α-이소말토시다아제(glucan 1,6-α-isomaltosidase), 덱스트란 1,6-α-이소말토트리오시다아제(dextran 1,6-α-isomaltotriosidase), 만노실-글리코프로틴 엔도-β-N-아세틸글루코사미니다아제(mannosyl-glycoprotein endo-β-N-acetylglucosaminidase), 엔도-α-N-아세틸갈락토사미니다아제(endo-α-N-acetylgalactosaminidase), 글루칸 1,4-α-말토헥사오시다아제(glucan 1,4-α-maltohexaosidase), 아라비난 엔도-1,5-α-L-아라비나나아제(arabinan endo-1,5-α-L-arabinanase), 만난 1,4-만노바이오시다아제(mannan 1,4-mannobiosidase), 만난 엔도-1,6-α-만노시다아제(mannan endo-1,6-α-mannosidase), 혈액형 물질 엔도-1,4-β-갈락토시다아제(blood-group-substance endo-1,4-β-galactosidase), 케라탄황산염 엔도-1,4-β-갈락토시다아제(keratan-sulfate endo-1,4-β-galactosidase), 스테릴-β-글루코시다아제(steryl-β-glucosidase), 3α(S)-스트릭토시딘 β-글루코시다아제(3α(S)-strictosidine β-glucosidase), 만노실-올리고당 글루코시다아제(mannosyl-oligosaccharide glucosidase), 단백질-글루코실갈락토실하이드록시리신 글루코시다아제(protein-glucosylgalactosylhydroxylysine glucosidase), 락타아제(lactase), 엔도갈락토사미니다아제(endogalactosaminidase), 1,3-α-L-푸코시다아제(1,3-α-L-fucosidase), 2-데옥시글루코시다아제(2-deoxyglucosidase), 만노실-올리고당 1,2-α-만노시다아제(mannosyl-oligosaccharide 1,2-α-mannosidase), 만노실-올리고당 1,3-1,6-α-만노시다아제(mannosyl-oligosaccharide 1,3-1,6-α-mannosidase), 분지-덱스트란 엑소-1,2-α-글루코시다아제(branched-dextran exo-1,2-α-glucosidase), 글루칸 1,4-α-말토트리오하이드롤라제(glucan 1,4-α-maltotriohydrolase), 아미그달린 β-글루코시다아제(amygdalin β-glucosidase), 프루나신 β-글루코시다아제(prunasin β-glucosidase), 비시아닌 β-글루코시다아제(vicianin β-glucosidase), 올리고자일로글루칸 β-글리코시다아제(oligoxyloglucan β-glycosidase), 폴리만뉴로네이트 하이드롤라제(polymannuronate hydrolase), 말토오스-6´-포스페이트 글루코시다아제(maltose-6´-phosphate glucosidase), 엔도글리코실세라미다아제(endoglycosylceramidase), 3-데옥시-2-옥툴로소니다아제(3-deoxy-2-octulosonidase), 라우카프리신 β-글루코시다아제(raucaffricine β-glucosidase), 코니페린 β-글루코시다아제(coniferin β-glucosidase), 1,6-α-L-푸코시다아제(1,6-α-L-fucosidase), 글리시리진 하이드롤라제(glycyrrhizin hydrolase), 엔도-α-시알리다아제(endo-α-sialidase), 글리코프로틴 엔도-α-1,2-만노시다아제(glycoprotein endo-α-1,2-mannosidase), 자일란 α-1,2-글루쿠로노시다아제(xylan α-1,2-glucuronosidase), 키토사나아제(chitosanase), 글루칸 1,4-α-말토하이드롤라제(glucan 1,4-α-maltohydrolase), 디프럭토스-무수물 신타아제(difructose-anhydride synthase), 네오플루라나아제(neopullulanase), 글루쿠로노아라비노자일란 엔도-1,4-β-자일라나아제(glucuronoarabinoxylan endo-1,4-β-xylanase), 만난 엑소-1,2-1,6-α-만노시다아제(mannan exo-1,2-1,6-α-mannosidase), α-글루쿠로니다아제(α-glucuronidase), 락토-N-바이오시다아제(lacto-N-biosidase), 4-α-D-{(1→4)-α-D-글루카노(glucano)}트레할로스 트레할로하이드롤라제(trehalose trehalohydrolase), 한계 덱스트리나아제(limit dextrinase), 폴리(ADP-리보오스)글리코하이드롤라제(poly(ADP-ribose) glycohydrolase), 3-데옥시옥툴로소나아제(3-deoxyoctulosonase), 갈락탄 1,3-β-갈락토시다아제(galactan 1,3-β-galactosidase), β-갈락토푸라노시다아제(β-galactofuranosidase), 티오글루코시다아제(thioglucosidase), β-프리메베로시다아제(β-primeverosidase), 올리고자일로글루칸 환원-말단-특이적 셀룰로바이오하이드롤라제(oligoxyloglucan reducing-end-specific cellobiohydrolase), 자일로글루칸-특이적 엔도-β-1,4-글루카나아제(xyloglucan-specific endo-β-1,4-glucanase), 만노실글리코프로틴 엔도-β-만노시다아제(mannosylglycoprotein endo-β-mannosidase), 프룩탄 -(2,1)-프룩토시다아제(fructan β-(2,1)-fructosidase), 프룩탄 β-(2,6)-프룩토시다아제(fructan β-(2,6)-fructosidase), 자일로글루칸-특이적 엑소-β-1,4-글루카나아제(xyloglucan-specific exo-β-1,4-glucanase), 올리고당 환원-말단 자일라나아제(oligosaccharide reducing-end xylanase), ι-카라기나아제(ι-carrageenase), α-아가라아제(α-agarase), α-네오아가로-올리고당 하이드롤라제(α-neoagaro-oligosaccharide hydrolase), β-아피오실-β-글루코시다아제(β-apiosyl-β-glucosidase), λ-카라기나아제(λ-carrageenase), 1,6-α-D-만노시다아제(1,6-α-D-mannosidase), 갈락탄 엔도-1,6-β-갈락토시다아제(galactan endo-1,6-β-galactosidase), 엑소-1,4-β-D-글루코사미니다아제(exo-1,4-β-D-glucosaminidase), 헤파라나아제(heparinase), 바이칼린-β-D-글루쿠로니다아제(baicalin-β-D-glucuronidase), 헤스페리딘 6-O-α-L-람노실-β-D-글루코시다아제(hesperidin 6-O-α-L-rhamnosyl-β-D-glucosidase), 단백질 O-GlcNAcase(protein O-GlcNAcase), 만노실글리세레이트 하이드롤라제(mannosylglycerate hydrolase), 람노갈락투로난 하이드롤라제(rhamnogalacturonan hydrolase), 불포화 람노갈락투로닐 하이드롤라제(unsaturated rhamnogalacturonyl hydrolase), 람노갈락투로난 갈락투로노하이드롤라제(rhamnogalacturonan galacturonohydrolase), 람노갈락투로난 람노하이드롤라제(rhamnogalacturonan rhamnohydrolase), β-D-글루코피라노실 앱시세이트 β-글루코시다아제(β-D-glucopyranosyl abscisate β-glucosidase), 셀룰로스 1,4-β-셀룰로바이오시다아제(cellulose 1,4-β-cellobiosidase) (환원 말단), α-D-자일로시드 자일로하이드롤라제(α-D-xyloside xylohydrolase), β-포르피라나아제(β-porphyranase), 젤란 4당류 불포화 글루쿠로노실 하이드롤라제(gellan tetrasaccharide unsaturated glucuronosyl hydrolase), 불포화 콘드로이틴 이당류 하이드롤라제(unsaturated chondroitin disaccharide hydrolase), 갈락탄 엔도-β-1,3-갈락타나아제(galactan endo-β-1,3-galactanase), 4-하이드록시-7-메톡시-3-옥소-3,4-디하이드로-2H-1,4-벤조옥사진-2-일 글루코시드 β-D-글루코시다아제(4-hydroxy-7-methoxy-3-oxo-3,4-dihydro-2H-1,4-benzoxazin-2-yl glucoside β-D-glucosidase), UDP-N-아세틸글루코사민 2-에피머라아제(UDP-N-acetylglucosamine 2-epimerase) (가수분해하는 것(hydrolylsing)), UDP-N,N´-디아세틸바실로사민 2-에피머라아제(UDP-N,N´-diacetylbacillosamine 2-epimerase) (가수분해하는 것), 비-환원 말단 β-L-아라비노푸라노시다아제(non-reducing end β-L-arabinofuranosidase), 프로토디오신 26-O-β-D-글루코시다아제(protodioscin 26-O-β-D-glucosidase), (Ara-f)3-Hyp β-L-아라비노바이오시다아제((Ara-f)3-Hyp β-L-arabinobiosidase), 아베나코시다아제(avenacosidase), 디오스신 글리코시다아제(dioscin glycosidase) (디오스게닌(diosgenin)을 형성하는 것), 디오스신 글리코시다아제(dioscin glycosidase) (3-O-β-D-Glc-디오스게닌(diosgenin)을 형성하는 것), 진세노시다아제 타입 III(ginsenosidase type III), 진세노시드 Rb1 β-글루코시다아제(ginsenoside Rb1 β-glucosidase), 진세노시다아제 타입 I(ginsenosidase type I), 진세노시다아제 타입 IV(ginsenosidase type IV), 20-O-다중-글리코시드 진세노시다아제(20-O-multi-glycoside ginsenosidase), 한계 덱스트린 α-1,6-말토테트라오스-하이드롤라제(limit dextrin α-1,6-maltotetraose-hydrolase), β-1,2-만노시다아제(β-1,2-mannosidase), α-만난 엔도-1,2-α-만나나아제(α-mannan endo-1,2-α-mannanase), 설포퀴노보시다아제(sulfoquinovosidase), 엑소-키티나아제(exo-chitinase) (비-환원 말단(non-reducing end)), 엑소-키티나아제(exo-chitinase) (환원 말단(reducing end)), 엔도-키토덱스티나아제(endo-chitodextinase), 카복시메틸셀룰라아제(carboxymethylcellulase), 1,3-α-이소말토시다아제(1,3-α-isomaltosidase), 및 이소말토오스 글루코하이드롤라제(isomaltose glucohydrolase)를 포함한다.

가수분해 N-글리코실 화합물(Hydrolysing N-glycosyl compounds)은 퓨린 뉴클레오시다아제(purine nucleosidase), 이노신 뉴클레오시다아제(inosine nucleosidase), 유리딘 뉴클레오시다아제(uridine nucleosidase), AMP 뉴클레오시다아제(AMP nucleosidase), NAD+ 글리코하이드롤라제(NAD+ glycohydrolase), ADP-리보실 사이클라아제(ADP-ribosyl cyclase)/ 고리형 ADP-리보오스 하이드롤라제(cyclic ADP-ribose hydrolase), 아데노신 뉴클레오시다아제(adenosine nucleosidase), 리보실피리미딘 뉴클레오시다아제(ribosylpyrimidine nucleosidase), 아데노실호모시스테인 뉴클레오시다아제(adenosylhomocysteine nucleosidase), 피리미딘-5´-뉴클레오티드 뉴클레오시다아제(pyrimidine-5´-nucleotide nucleosidase), β-아스파르틸-N-아세틸글루코사미니다아제(β-aspartyl-N-acetylglucosaminidase), 이노시네이트 뉴클레오시다아제(inosinate nucleosidase), 1-메틸아데노신 뉴클레오시다아제(1-methyladenosine nucleosidase), NMN 뉴클레오시다아제(NMN nucleosidase), DNA-데옥시이노신 글리코실라아제(DNA-deoxyinosine glycosylase), 메틸디오아데노신 뉴클레오시다아제(methylthioadenosine nucleosidase), 데옥시리보디피리미딘 엔도뉴클레오시다아제(deoxyribodipyrimidine endonucleosidase), [단백질 ADP-리보실알지닌(ADP-ribosylarginine)] 하이드롤라제, DNA-3-메틸아데닌 글리코실라아제 I(DNA-3-methyladenine glycosylase I), DNA-3-메틸아데닌 글리코실라아제 II(DNA-3-methyladenine glycosylase II), rRNA N-글리코실라아제(rRNA N-glycosylase), DNA-포름아미도피리미딘 글리코실라아제(DNA-formamidopyrimidine glycosylase), ADP-리보실(ADP-ribosyl)-[디니트로젠 환원효소(dinitrogen reductase)] 하이드롤라제, N-메틸 뉴클레오시다아제(N-methyl nucleosidase), 퓨탈로신 하이드롤라제(futalosine hydrolase), 유라실-DNA-글리코실라아제(uracil-DNA glycosylase), 이중-가닥 유라실-DNA 글리코실라아제(double-stranded uracil-DNA glycosylase), 티민-DNA 글리코실라아제(thymine-DNA glycosylase), 및 아미노데옥시퓨탈로신 뉴클레오시다아제(aminodeoxyfutalosine nucleosidase)를 포함한다.

티오에테르(Thioether) 및 트리알킬설포늄(trialkylsulfonium) 하이드롤라제는 아데노실호모시스테이나아제(adenosylhomocysteinase) 및 아데노실메티오닌 하이드롤라제(adenosylmethionine hydrolase)를 포함한다.

에테르 하이드롤라제(Ether hydrolases)는 이소코리스마타아제(isochorismatase), 라이소플라즈말로제나아제(lysoplasmalogenase), 트랜스-에폭시숙시네이트 하이드롤라제(trans-epoxysuccinate hydrolase), 류코트리엔-A4 하이드롤라제(leukotriene-A4 hydrolase), 헤폭실린-에폭시드 하이드롤라제(hepoxilin-epoxide hydrolase), 리모넨-1,2-에폭시드 하이드롤라제(limonene-1,2-epoxide hydrolase), 마이크로소멀 에폭시드 하이드롤라제(microsomal epoxide hydrolase), 용해성 에폭시드 하이드롤라제(soluble epoxide hydrolase), 콜레스테롤-5,6-옥시드 하이드롤라제(cholesterol-5,6-oxide hydrolase), 옥세핀-CoA 하이드롤라제(oxepin-CoA hydrolase), 코리스마타아제(chorismatase), 2,4-디니트로아니솔 O-디메틸라아제(2,4-dinitroanisole O-demethylase), 및 트랜스-2,3-디하이드로-3-하이드록시안트라닐산 신타아제(trans-2,3-dihydro-3-hydroxyanthranilic acid synthase)를 포함한다.

아미노펩티다아제(Aminopeptidases)는 류실 아미노펩티다아제(leucyl aminopeptidase), 막 알라닐 아미노펩티다아제(membrane alanyl aminopeptidase), 시스티닐 아미노펩티다아제(cystinyl aminopeptidase), 트리펩타이드 아미노펩티다아제(tripeptide aminopeptidase), 프롤릴 아미노펩티다아제(prolyl aminopeptidase), 아미노펩티다아제 B(aminopeptidase B), 글루타밀 아미노펩티다아제(glutamyl aminopeptidase), Xaa-Pro 아미노펩티다아제(Xaa-Pro aminopeptidase), 박테리아 류실 아미노펩티다아제(bacterial leucyl aminopeptidase), 클로스트리디움계 아미노펩티다아제(clostridial aminopeptidase), 세포기질 알라닐 아미노펩티다아제(cytosol alanyl aminopeptidase), 아미노펩티다아제 Y(aminopeptidase Y), Xaa-Trp 아미노펩티다아제(Xaa-Trp aminopeptidase), 트립토파닐 아미노펩티다아제 (tryptophanyl aminopeptidase), 메티오닐 아미노펩티다아제(methionyl aminopeptidase), D-입체특이적 아미노펩티다아제(D-stereospecific aminopeptidase), 아미노펩티다아제 Ey(aminopeptidase Ey), 아스파르틸 아미노펩티다아제(aspartyl aminopeptidase), 아미노펩티다아제 I(aminopeptidase I), PepB 아미노펩티다아제(PepB aminopeptidase), 아미노펩티다아제 S(aminopeptidase S), Xaa-His 디펩티다아제(Xaa-His dipeptidase), Xaa-Arg 디펩티다아제(Xaa-Arg dipeptidase), Xaa-메틸-His 디펩티다아제(Xaa-methyl-His dipeptidase), Glu-Glu 디펩티다아제(Glu-Glu dipeptidase), Xaa-Pro 디펩티다아제(Xaa-Pro dipeptidase), Met-Xaa 디펩티다아제(Met-Xaa dipeptidase), 비-입체특이적 디펩티다아제(non-stereospecific dipeptidase), 세포기질 비특이적 디펩티다아제(cytosol nonspecific dipeptidase), 막 디펩티다아제(membrane dipeptidase), b-Ala-His 디펩티다아제(b-Ala-His dipeptidase), 디펩티다아제 E(dipeptidase E), 및 D-Ala-D-Ala 디펩티다아제(D-Ala-D-Ala dipeptidase)를 포함한다.

디펩티딜-펩티다아제(Dipeptidyl-peptidases) 및 트리펩티딜-펩티다아제(tripeptidyl-peptidases)는 디펩티딜-펩티다아제 I(dipeptidyl-peptidase I), 디펩티딜-펩티다아제 II(dipeptidyl-peptidase II), 디펩티딜-펩티다아제 III(dipeptidyl-peptidase III), 디펩티딜-펩티다아제 IV(dipeptidyl-peptidase IV), 디펩티딜-펩티다아제(dipeptidyl-dipeptidase), 트리펩티딜-펩티다아제 I(tripeptidyl-peptidase I), 트리펩티딜-펩티다아제 II(tripeptidyl-peptidase II), Xaa-Pro 디펩티딜-펩티다아제(Xaa-Pro dipeptidyl-peptidase), 및 Xaa-Xaa-Pro 트리펩티딜-펩티다아제(Xaa-Xaa-Pro tripeptidyl-peptidase); 펩티딜-디펩티다아제 A(peptidyl-dipeptidase A), 펩티딜-디펩티다아제 B(peptidyl-dipeptidase B), 펩티딜-디펩티다아제 Dcp(peptidyl-dipeptidase Dcp), 및 시아노피시나아제(cyanophycinase)와 같은 펩티딜-디펩티다아제(Peptidyl-dipeptidases); 리소좀 Pro-Xaa 카복시펩티다아제(lysosomal Pro-Xaa carboxypeptidase), 세린-타입 D-Ala-D-Ala 카복시펩티다아제(serine-type D-Ala-D-Ala carboxypeptidase), 카복시펩티다아제 C(carboxypeptidase C), 및 카복시펩티다아제 D(carboxypeptidase D)와 같은 세린-타입 카복시펩티다아제(Serine-type carboxypeptidases); 카복시펩티다아제 A(carboxypeptidase A), 카복시펩티다아제 B(carboxypeptidase B), 리신 카복시펩티다아제(lysine carboxypeptidase), Gly-Xaa 카복시펩티다아제(Gly-Xaa carboxypeptidase), 알라닌 카복시펩티다아제(alanine carboxypeptidase), 뮤라모일펜타펩타이드 카복시펩티다아제(muramoylpentapeptide carboxypeptidase), 카복시펩티다아제 E(carboxypeptidase E), 글루타메이트 카복시펩티다아제(glutamate carboxypeptidase), 카복시펩티다아제 M(carboxypeptidase M), 뮤라모일테트라펨타이드 카복시펩티다아제(muramoyltetrapeptide carboxypeptidase), 아연 D-Ala-D-Ala 카복시펩티다아제(zinc D-Ala-D-Ala carboxypeptidase), 카복시펩티다아제 A2(carboxypeptidase A2), 막 Pro-Xaa 카복시펩티다아제(membrane Pro-Xaa carboxypeptidase), 튜불리닐-Tyr 카복시펩티다아제(tubulinyl-Tyr carboxypeptidase), 카복시펩티다아제 T(carboxypeptidase T), 카복시펩티다아제 Taq(carboxypeptidase Taq), 카복시펩티다아제 U(carboxypeptidase U), 글루타메이트 카복시펩티다아제 II(glutamate carboxypeptidase II), 메탈로카복시펩티다아제 D(metallocarboxypeptidase D), 및 안지오텐신-전환효소 2(angiotensin-converting enzyme 2)와 같은 메탈로카복시펩티다아제(Metallocarboxypeptidases);를 포함한다.

시스테인-타입 카복시펩티다아제(Cysteine-type carboxypeptidases)는 카텝신 X(cathepsin X)를 포함한다.

오메가 펩티다아제는 아실아미노아실-펩티다아제(acylaminoacyl-peptidase), 펩티딜-글리신아미다아제(peptidyl-glycinamidase), 파이로글루타밀-펩티다아제 I(pyroglutamyl-peptidase I), b-아스파르틸-펩티다아제(b-aspartyl-peptidase), 파이로글루타밀-펩티다아제 II(pyroglutamyl-peptidase II), N-포르밀메티오닐-펩티다아제(N-formylmethionyl-peptidase), g-글루타밀 하이드롤라제(g-glutamyl hydrolase), g-D-글루타밀-메소-디아미노피멜레이트 펩티다아제(g-D-glutamyl-meso-diaminopimelate peptidase), 및 유비퀴티닐 하이드롤라제 1(ubiquitinyl hydrolase 1)을 포함한다.

세린 엔도펩티다아제(Serine endopeptidases)는 키모트립신(Chymotrypsin), 키모트립신 C(chymotrypsin C), 메트리딘(metridin), 트립신(trypsin), 트롬빈(thrombin), 응고인자 Xa(coagulation factor Xa), 플라스민(plasmin), 엔테로펩티다아제(enteropeptidase), 아크로신(acrosin), a-리틱 엔도펩티다아제(a-lytic endopeptidase), 글루타밀 엔도펩티다아제(glutamyl endopeptidase), 카텝신 G(cathepsin G), 응고인자 VIIa(coagulation factor VIIa), 응고인자 IXa(coagulation factor IXa), 쿠쿠미신(cucumisin), 프롤릴 올리고펩티다아제(prolyl oligopeptidase), 응고인자 Xia(coagulation factor Xia), 브라키우란(brachyuran), 혈장 칼리크레인(plasma kallikrein), 조직 칼리크레인(tissue kallikrein), 췌장 엘라스타아제(pancreatic elastase), 백혈구 엘라스타아제(leukocyte elastase), 응고인자 XIIa(coagulation factor XIIa), 키마아제(chymase), 보체 하위요소 C1r(complement subcomponent C1r), 보체 하위요소 C1s(complement subcomponent C1s), 전형적-보체-경로 C3/C5 전환효소(classical-complement-pathway C3/C5 convertase), 보체인자 I(complement factor I), 보체인자 D(complement factor D), 대체-보체-경로 C3/C5 전환효소(alternative-complement-pathway C3/C5 convertase), 세레비신(cerevisin), 하이포더민 C(hypodermin C), 리실 엔도펩티다아제(lysyl endopeptidase), 엔도펩티다아제 La(endopeptidase La), g-레닌(g-renin), 베놈빈 AB(venombin AB), 류실 엔도펩티다아제(leucyl endopeptidase), 트립타아제(tryptase), 스쿨텔라린(scutelarin), 켁신(kexin), 서브틸리신(subtilisin), 오리진(oryzin), 펩티다아제 K(peptidase K), 테르모마이콜린(thermomycolin), 터미타아제(thermitase), 엔도펩티다아제 So(endopeptidase So), t-플라스미노젠 활성화제(t-plasminogen activator), 단백질 C(protein C) (활성화된 것(activated)), 췌장 엔도펩티다아제 E(pancreatic endopeptidase E), 췌장 엘라스타아제 II(pancreatic elastase II), IgA-특이적 세린 엔도펩티다아제(IgA-specific serine endopeptidase), u-플라스미노젠 활성화제(u-plasminogen activator), 베놈빈 A(venombin A), 퓨린(furin), 미엘로블라스틴(myeloblastin), 세메노겔라아제(semenogelase), 그랜자임 A(granzyme A, 그랜자임 B(granzyme B), 스트렙토그리신 A(streptogrisin A), 스트렙토그리신 B(streptogrisin B), 글루타밀 엔도펩티다아제 II(glutamyl endopeptidase II), 올리고펩티다아제 B(oligopeptidase B), 리물루스 응고인자 C(limulus clotting factor C), 리물루스 응고 인자 B(limulus clotting factor B), 리물루스 응고효소(limulus clotting enzyme), 억제자 LexA(repressor LexA), 신호 펩티다아제 I(signal peptidase I), 토가비린(togavirin), 플라비비린(flavivirin), 엔도펩티다아제 Clp(endopeptidase Clp), 전구단백질 전환효소 1(proprotein convertase 1), 전구단백질 전환효소 2(proprotein convertase 2), 스네이크 베놈 인자 V 활성제(snake venom factor V activator), 락토세핀(lactocepin), 어셈블린(assembling), 헤파시비린(hepacivirin), 스퍼모신(spermosin), 세돌리신(sedolisin), 잔토모날리신(xanthomonalisin), C-말단 가공 펩티다아제(C-terminal processing peptidase), 피사로리신(physarolisin), 만난-결합 렉틴-연관 세린 프로테아제-2(mannan-binding lectin-associated serine protease-2), 장사방형 프로테아제(rhomboid protease), 헵신(hepsin), 펩티다아제 Do(peptidase Do), HtrA2 펩티다아제(HtrA2 peptidase), 매트립타아제(Matriptase), C5a 펩티다아제(C5a peptidase), 아쿠알리신 1(aqualysin 1), 부위-1 프로테아제(site-1 protease), 페스티바이러스 NS3 폴리프로틴 펩티다아제(pestivirus NS3 polyprotein peptidase), 말 아르테리바이러스 세린 펩티다아제(equine arterivirus serine peptidase), 감염성 췌장 네크로시스 비르나바이러스 Vp4 펩티다아제(infectious pancreatic necrosis birnavirus Vp4 peptidase), SpoIVB 펩티다아제(SpoIVB peptidase), 각질층 키모트립틱 효소(stratum corneum chymotryptic enzyme), 칼리크레인 8(kallikrein 8), 칼리크레인 13(kallikrein 13), 및 오비덕틴(oviductin)을 포함한다.

시스테인 엔도펩티다아제(Cysteine endopeptidases)는 카텝신 B(cathepsin B), 파파인(papain), 피카인(ficain), 키모파파인(chymopapain), 아스클레파인(asclepain), 클로스트리파인(clostripain), 스트렙토파인(streptopain), 액티니다인(actinidain), 카텝신 L(cathepsin L), 카텝신 H(cathepsin H), 카텝신 T(cathepsin T), 글리실 엔도펩티다아제(glycyl endopeptidase), 암 응혈원인자(cancer procoagulant), 카텝신 S(cathepsin S), 피코르나인 3C(picornain 3C), 피코르나인 2A(picornain 2A), 카리카인(caricain), 아나나인(ananain), 줄기 브로멜라인(stem bromelain), 과일 브로멜라인(fruit bromelain), 레구마인(legumain), 히스토라이사인(histolysain), 카스파제-1(caspase-1), 진지파인 R(gingipain R), 카텝신 K(cathepsin K), 아데나인(adenain), 블레오마이신 하이드롤라제(bleomycin hydrolase), 카텝신 F(cathepsin F), 카텝신 O(cathepsin O), 카텝신 V(cathepsin V), 핵-봉입-a 엔도펩티다아제(nuclear-inclusion-a endopeptidase), 도움-보체 프로테이나제(helper-component proteinase), L-펩티다아제(L-peptidase), 진지파인 K(gingipain K), 스타포파인(staphopain), 세파라제(separase), V-캐스 엔도펩티다아제(V-cath endopeptidase), 크루지파인(cruzipain), 칼파인-1(calpain-1), 칼파인-2(calpain-2), 칼파인-3(calpain-3), 카스파제-2(caspase-2), 카스파제(caspase-3), 카스파제(caspase-4), 카스파제-5(caspase-5), 카스파제(caspase-6), 카스파제(caspase-7), 카스파제(caspase-8), 카스파제(caspase-9), 카스파제(caspase-10), 카스파제(caspase-11), 펩티다아제 1(peptidase 1) (진드기(mite)), 칼시비린(calicivirin), 진지파인(zingipain), Ulp1 펩티다아제(Ulp1 peptidase), SARS 코로나바이러스 메인 프로테이나제(SARS coronavirus main proteinase), 솔타제 A(sortase A), 및 솔타제 B(sortase B)를 포함한다.

아스파르트산 엔도펩티다아제(Aspartic endopeptidases)는 펩신 A(pepsin A), 펩신 B(pepsin B), 가스트릭신(gastricsin), 키모신(chymosin), 카텝신 D(cathepsin D), 네펜테신(nepenthesin), 레닌(renin), HIV-1 레트로펩신(HIV-1 retropepsin), 프로-오피오멜라노코르틴 전환효소(pro-opiomelanocortin converting enzyme), 아스퍼질로펩신 I(aspergillopepsin I), 아스퍼질로펩신 II(aspergillopepsin II), 페니실로펩신(penicillopepsin), 리조푸스펩신(rhizopuspepsin), 엔도티아펩신(endothiapepsin), 뮤코르펩신(mucorpepsin), 캔디다펩신(candidapepsin), 사카로펩신(saccharopepsin), 로도토룰라펩신(rhodotorulapepsin), 아크로실린드로펩신(acrocylindropepsin), 폴리포로펩신(polyporopepsin), 파이크노포로펩신(pycnoporopepsin), 사이탈리도펩신 A(scytalidopepsin A), 사이탈리도펩신 B(scytalidopepsin B), 카텝신 E(cathepsin E), 베리어펩신(barrierpepsin), 신호 펩티다아제 II(signal peptidase II), 플라스멥신 I(plasmepsin I), 플라스멥신 II(plasmepsin II), 피텝신(phytepsin), 옙신 1(yapsin 1), 테르몹신(thermopsin), 프레필린 펩티다아제(prepilin peptidase), 노다바이러스 엔도펩티다아제(nodavirus endopeptidase), 메맙신 1(memapsin 1), 메맙신 2(memapsin 2), HIV-2 레트로펩신(HIV-2 retropepsin), 플라스미노젠 활성제 Pla(plasminogen activator Pla), 옴프틴(omptin), 인간 내인성 레트로바이러스 K 엔도펩티다아제(human endogenous retrovirus K endopeptidase), HycI 펩티다아제(HycI peptidase)를 포함한다.

메탈로엔도펩티다아제(Metalloendopeptidases)는 아트롤리신 A(atrolysin A), 미생물 콜라게나아제(microbial collagenase), 류코리신(leucolysin), 간질성 콜라게나아제(interstitial collagenase), 네프릴리신(neprilysin), 엔벨리신(envelysin), IgA-특이적 메탈로엔도펩티다아제(IgA-specific metalloendopeptidase), 프로콜라젠 N-엔도펩티다아제(procollagen N-endopeptidase), 티멧 올리고펩티다아제(thimet oligopeptidase), 뉴로리신(neurolysin), 스트로멜리신 1(stromelysin 1), 메프린 A(meprin A), 프로콜라젠 C-엔도펩티다아제(procollagen C-endopeptidase), 펩티딜-Lys 메탈로엔도펩티다아제(peptidyl-Lys metalloendopeptidase), 아스타신(astacin), 스트로멜리신 2(stromelysin 2), 매트릴리신(matrilysin), 젤라티나아제 A(gelatinase A), 비브리오리신(vibriolysin), 슈도리신(pseudolysin), 테르모리신(thermolysin), 바실로리신(bacillolysin), 아우레오리신(aureolysin), 코코리신(coccolysin), 마이코리신(mycolysin), b-용해성 메탈로엔도펩티다아제(b-lytic metalloendopeptidase), 펩티딜-Asp 메탈로엔도펩티다아제(peptidyl-Asp metalloendopeptidase), 호중구 콜라게나아제(neutrophil collagenase), 젤라티나아제 B(gelatinase B), 레이쉬마놀리신(leishmanolysin), 사카로리신(saccharolysin), 가메톨리신(gametolysin), 듀테롤리신(deuterolysin), 세랄리신(serralysin), 아트롤리신 B(atrolysin B), 아트롤리신 C(atrolysin C), 아트록사제(atroxase), 아트롤리신 F(atrolysin F), 아다말리신(adamalysin), 호릴리신(horrilysin), 루베르리신(ruberlysin), 보트로파신(bothropasin), 보트로리신(bothrolysin), 오피올리신(ophiolysin), 트리메렐리신 I(trimerelysin I), 트리메렐리신 II(trimerelysin II), 뮤크롤리신(mucrolysin), 피트릴리신(pitrilysin), 인슐리신(insulysin), O-시알로글리코프로틴 엔도펩티다아제(O-sialoglycoprotein endopeptidase), 루셀리신(russellysin), 미토콘드리아 중간 펩티다아제(mitochondrial intermediate peptidase), 닥틸리신(dactylysin), 날디리신(nardilysin), 마그놀리신(magnolysin), 메프린 B(meprin B), 미토콘드리아 가공 펩티다아제(mitochondrial processing peptidase), 대식세포 엘라스타아제(macrophage elastase), 코리올리신 L(choriolysin L), 코리올리신 H(choriolysin H), 텐톡시리신(tentoxilysin), 폰토자일리신(bontoxilysin), 올리고펩티다아제 A(oligopeptidase A), 엔도텔린-전환효소 1(endothelin-converting enzyme 1), 피브로라제(fibrolase), 자라하긴(jararhagin), 푸라질리신(fragilysin), 리소스타핀(lysostaphin), 플라베스타신(flavastacin), 스네파리신(snapalysin), gpr 엔도펩티다아제(gpr endopeptidase), 파파리신-1(pappalysin-1), 막-타입 기질 메탈로프로테이나제-1(membrane-type matrix metalloproteinase-1), ADAM10 엔도펩티다아제(ADAM10 endopeptidase), ADAMTS-4 엔도펩티다아제(ADAMTS-4 endopeptidase), 탄저병 치사인자 엔도펩티다아제(anthrax lethal factor endopeptidase), Ste24 엔도펩티다아제(Ste24 endopeptidase), S2P 엔도펩티다아제(S2P endopeptidase), ADAM 17 엔도펩티다아제(ADAM 17 endopeptidase), 및 ADAMTS13 엔도펩티다아제(ADAMTS13 endopeptidase)를 포함한다.

트레오닌 엔도펩티다아제(Threonine endopeptidases)는 프로테아좀 엔도펩티다아제 복합체(proteasome endopeptidase complex) 및 HslU―HslV 펩티다아제를 포함한다.

알려지지 않은 촉매 메커니즘의 엔도펩티다아제가 또한 포함된다.

선형 아미드에서, 펩타이드 결합 이외의 탄소-질소 결합에 작용하는 것은 아스파라기나아제(asparaginase), 글루타미나아제(glutaminase), ω-아미다아제(ω-amidase), 아미다아제(amidase), 우레아제(urease), β-우레이도프로피오나아제(β-ureidopropionase), 우레이도숙시나아제(ureidosuccinase), 포밀아스파르테이트 디포르밀라아제(formylaspartate deformylase), 아릴포름아미다아제(arylformamidase), 포르밀테트라하이드로폴레이트 디포르밀라아제(formyltetrahydrofolate deformylase), 페니실린 아미다아제(penicillin amidase), 바이오티니다제(biotinidase), 아릴-아크릴아미다아제(aryl-acylamidase), N-아실-알리파틱-L-아미노산 아미도하이드롤라제(N-acyl-aliphatic-L-amino acid amidohydrolase), 아스파르토아실라아제(aspartoacylase), 아세틸오르니틴 디아세틸라아제(acetylornithine deacetylase), 아실-리신 디아실라아제(acyl-lysine deacylase), 숙시닐-디아미노피멜레이트 디숙시닐라아제(succinyl-diaminopimelate desuccinylase), 니코틴아미다아제(nicotinamidase), 시트룰리나아제(citrullinase), N-아세틸-β-알라닌 디아세틸라아제(N-acetyl-β-alanine deacetylase), 판토테나아제(pantothenase), 세라미다아제(ceramidase), 콜로일글리신 하이드롤라제(choloylglycine hydrolase), N-아세틸글루코사민-6-포스페이트 디아세틸라아제(N-acetylglucosamine-6-phosphate deacetylase), N4-(β-N-아세틸글루코사미닐)-L-아스파라기나아제(N4-(β-N-acetylglucosaminyl)-L-asparaginase), N-아세틸뮤라모일-L-알라닌 아미다아제(N-acetylmuramoyl-L-alanine amidase), 2-(아세트아미도메틸렌)숙시네이트 하이드롤라제(2-(acetamidomethylene)succinate hydrolase), 5-아미노펜타나미다아제(5-aminopentanamidase), 포르밀메티오닌 디포르밀라아제(formylmethionine deformylase), 히퓨레이트 하이드롤라제(hippurate hydrolase), N-아세틸글루코사민 디아세틸라아제(N-acetylglucosamine deacetylase), D-글루타미나아제(D-glutaminase), N-메틸-2-옥소글루타라메이트 하이드롤라제(N-methyl-2-oxoglutaramate hydrolase), 글루타민-(아스파라긴-)아제(glutamin-(asparagin-)ase), 알킬아미다아제(alkylamidase), 아실아그마틴 아미다아제(acylagmatine amidase), 키틴 디아세틸라아제(chitin deacetylase), 니코틴아마이드-뉴클레오티드 아미다아제(nicotinamide-nucleotide amidase), 펩티딜-글루타미나아제(peptidyl-glutaminase), 단백질-글루타민 글루타미나아제(protein-glutamine glutaminase), 6-아미노헥사노에이트-올리고머 엑소하이드롤라제(6-aminohexanoate-oligomer exohydrolase), N-아세틸디아미노피멜레이트 디아세틸라아제(N-acetyldiaminopimelate deacetylase), 아세틸스퍼미딘 디아세틸라아제(acetylspermidine deacetylase), 포름아미다아제(formamidase), 펜타나미다아제(pentanamidase), 4-아세트아미도뷰티릴-CoA 디아세틸라아제(4-acetamidobutyryl-CoA deacetylase), 펩타이드-N4-(N-아세틸-β-글루코사미닐)아스파라긴 아미다아제(peptide-N4-(N-acetyl-β-glucosaminyl)asparagine amidase), N-카르바모일푸트레신 아미다아제(N-carbamoylputrescine amidase), 알로파네이트 하이드롤라제(allophanate hydrolase), 장쇄-지방산-아실-글루타메이트 디아실라아제(long-chain-fatty-acyl-glutamate deacylase), N,N-디메틸포름아미다아제(N,N-dimethylformamidase), 트립토파나미다아제(tryptophanamidase), N-벤질옥시카보닐글리신 하이드롤라제(N-benzyloxycarbonylglycine hydrolase), N-카르바모일사르코신 아미다아제(N-carbamoylsarcosine amidase), N-(장쇄-아실)에타놀아민 디아실라아제(N-(long-chain-acyl)ethanolamine deacylase), 미모시나아제(mimosinase), 아세틸푸트레신 디아세틸라아제(acetylputrescine deacetylase), 4-아세트아미도뷰티레이트 디아세틸라아제(4-acetamidobutyrate deacetylase), Nα-벤질옥시카보닐류신 하이드롤라제(Nα-benzyloxycarbonylleucine hydrolase), 테아닌 하이드롤라제(theanine hydrolase), 2-(하이드록시메틸)-3-(아세트아미도메틸렌)숙시네이트 하이드롤라제(2-(hydroxymethyl)-3-(acetamidomethylene)succinate hydrolase), 4-메틸렌글루타미나아제(4-methyleneglutaminase), N-포르밀글루타메이트 디포르밀라아제(N-formylglutamate deformylase), 글리코스핀고리피드 디아실라아제(glycosphingolipid deacylase), 아쿨레아신-A 디아실라아제(aculeacin-A deacylase), N-페룰로이글리신 디아실라아제(N-feruloylglycine deacylase), D-벤조일아르기닌-4-니트로아닐라이드 아미다아제(D-benzoylarginine-4-nitroanilide amidase), 카르니틴아미다아제(carnitinamidase), 케노데옥시콜로일타우린 하이드롤라제(chenodeoxycholoyltaurine hydrolase), 유레타나아제(urethanase), 아릴알킬 아실아미다아제(arylalkyl acylamidase), N-카르바모일-D-아미노산 하이드롤라제(N-carbamoyl-D-amino-acid hydrolase), 글루타티오닐스퍼미딘 아미다아제(glutathionylspermidine amidase), 프탈릴 아미다아제(phthalyl amidase), N-아실-D-아미노산 디아실라아제(N-acyl-D-amino-acid deacylase), N-아실-D-글루타메이트 디아실라아제(N-acyl-D-glutamate deacylase), N-아실-D-아스파르테이트 디아실라아제(N-acyl-D-aspartate deacylase), 뷰렛 아미도하이드롤라제(biuret amidohydrolase), (S)-N-아세틸-1-페닐에틸아민 하이드롤라제((S)-N-acetyl-1-phenylethylamine hydrolase), 만델아미드 아미다아제(mandelamide amidase), N-카르바모일-L-아미노산 하이드롤라제(N-carbamoyl-L-amino-acid hydrolase), 펩티드 디포르밀라아제(peptide deformylase), N-아세틸글루코사미닐포스파티딜이노시톨 디아세틸라아제(N-acetylglucosaminylphosphatidylinositol deacetylase), 아데노실코빈아미드 하이드롤라제(adenosylcobinamide hydrolase), N-치환 포름아미드 디포르밀라아제(N-substituted formamide deformylase), 판테테인 하이드롤라제(pantetheine hydrolase), 글루타릴-7-아미노세팔로스포라닌산 아실라아제(glutaryl-7-aminocephalosporanic-acid acylase), γ-글루타밀-γ-아미노뷰티레이트 하이드롤라제(γ-glutamyl-γ-aminobutyrate hydrolase), N-말로닐유레아 하이드롤라제(N-malonylurea hydrolase), 숙시닐글루타메이트 디숙시닐라아제(succinylglutamate desuccinylase), 아실-호모세린-락톤 아실라아제(acyl-homoserine-lactone acylase), 히스톤 디아세틸라아제(histone deacetylase), 지방산 아미드 하이드롤라제(fatty acid amide hydrolase), (R)-아미다아제((R)-amidase), L-프롤린 아미드 하이드롤라제(L-proline amide hydrolase), 2-아미노-5-포르밀아미노-6-리보실아미노피리미딘-4(3H)-원 5´-모노포스페이트 디포르밀라아제(2-amino-5-formylamino-6-ribosylaminopyrimidin-4(3H)-one 5´-monophosphate deformylase), N-아세틸-1-D-미오-이노시톨-2-아미노-2-데옥시-α-D-글루코피라노시드 디아세틸라아제(N-acetyl-1-D-myo-inositol-2-amino-2-deoxy-α-D-glucopyranoside deacetylase), 펩티도글리칸-N-아세틸글루코사민 디아세틸라아제(peptidoglycan-N-acetylglucosamine deacetylase), 키틴 이당류 디아세틸라아제(chitin disaccharide deacetylase), N-포르밀말레메이트 디포르밀라아제(N-formylmaleamate deformylase), 말레메이트 아미도하이드롤라제(maleamate amidohydrolase), UDP-3-O-아실-N-아세틸글루코사민 디아세틸라아제(UDP-3-O-acyl-N-acetylglucosamine deacetylase), 스핑고미엘린 디아세틸라아제(sphingomyelin deacylase), 페르옥시우레이도아크릴레이트(peroxyureidoacrylate)/우레이도아크릴레이트 아미도하이드롤라제(ureidoacrylate amidohydrolase), 2-옥소글루타라메이트 아미다아제(2-oxoglutaramate amidase), 2´-N-아세틸파로마민 디아세틸라아제(2´-N-acetylparomamine deacetylase), 2´´´-아세틸-6´´´-하이드로옥시네오마이신 C 디아세틸라아제(2´´´-acetyl-6´´´-hydroxyneomycin C deacetylase), N-아실-아로마틱-L-아미노산 아미도하이드롤라제(N-acyl-aromatic-L-amino acid amidohydrolase), 마이코티올 S-결합 아미다아제(mycothiol S-conjugate amidase), 우레이도글리콜레이드 아미도하이드롤라제(ureidoglycolate amidohydrolase), 6-아미노헥사노에이트-올리고머 엔도하이드롤라제(6-aminohexanoate-oligomer endohydrolase), γ-글루타밀 헤르시닐시스테인 S-옥시드 하이드롤라제(γ-glutamyl hercynylcysteine S-oxide hydrolase), Pup 아미도하이드롤라제(Pup amidohydrolase), 단백질 N-말단 아스파라긴 아미드하이드롤라제(protein N-terminal asparagine amidohydrolase), 단백질 N-말단 글루타민 아미도하이드롤라제(protein N-terminal glutamine amidohydrolase), γ-글루타밀아닐라이드 하이드롤라제(γ-glutamylanilide hydrolase), 단백질 디글리카제(protein deglycase), N2-아세틸-L-2,4-디아미노뷰타노에이트 디아세틸라아제(N2-acetyl-L-2,4-diaminobutanoate deacetylase), 옥사메이트 아미도하이드롤라제(oxamate amidohydrolase), 및 자스모노일-L-아미노산 하이드롤라제(jasmonoyl-L-amino acid hydrolase)를 포함한다.

고리형 아미드(cyclic amides)는 바르비투라아제(barbiturase), 디하이드로피리미디나아제(dihydropyrimidinase), 디하이드로오로타아제(dihydroorotase), 카복시메틸하이단토이나아제(carboxymethylhydantoinase), 알란토이나아제(allantoinase), β-락타마아제(β-lactamase), 이미다졸로네프로프리오나아제(imidazolonepropionase), 5-옥소프롤리나아제(5-oxoprolinase) (ATP-가수분해), 크레아티니나아제(creatininase), L-리신-락타마아제(L-lysine-lactamase), 6-아미노헥사노에이트-고리형-다이머 하이드롤라제(6-aminohexanoate-cyclic-dimer hydrolase), 2,5-디옥소피페라진 하이드롤라제(2,5-dioxopiperazine hydrolase), N-메틸히단토이나아제(N-methylhydantoinase) (ATP-가수분해), 시아누르산 아미도하이드롤라제(cyanuric acid amidohydrolase), 말레이미드 하이드롤라제(maleimide hydrolase), 하이드록시이소우레이트 하이드롤라제(hydroxyisourate hydrolase), 에나미다아제(enamidase), 스트렙토트리신 하이드롤라제(streptothricin hydrolase), 및 이사틴 하이드롤라제(isatin hydrolase)를 포함한다.

선형 아미딘(linear amidines)은 아르기나아제(arginase), 구아니디노아세타아제(guanidinoacetase), 크레아티나아제(creatinase), 알란토이카아제(allantoicase), 포름이미도일아스파르테이트 디이미나아제(formimidoylaspartate deiminase), 아르기닌 디이미나아제(arginine deiminase), 구아니디노뷰티라아제(guanidinobutyrase), 포름이미도일글루타마아제(formimidoylglutamase), 알란토에이트 디이미나아제(allantoate deiminase), D-아르기나아제(D-arginase), 아그마티나아제(agmatinase), 아그마틴 디이미나아제(agmatine deiminase), 포름이미도일글루타메이트 디이미나아제(formimidoylglutamate deiminase), 아미디노아스파르타아제(amidinoaspartase), 단백질-아르기닌-디이미나아제(protein-arginine deiminase), 메틸구아니디나아제(methylguanidinase), 구아니디노프로피오나아제(guanidinopropionase), 디메틸아르기나아제(dimethylargininase), 디구아니디노뷰타나아제(diguanidinobutanase), 메틸렌디유레아 디아미나아제(methylenediurea deaminase), 프로클라바미네이트 아미디노하이드롤라제(proclavaminate amidinohydrolase), N-숙시닐아르기닌 디하이드롤라제(N-succinylarginine dihydrolase), N1-아미노프로필아그마틴 유레오하이드롤라제(N1-aminopropylagmatine ureohydrolase), Nω-하이드록시-L-아르기닌 아미디노하이드롤라제(Nω-hydroxy-L-arginine amidinohydrolase), 및 (S)-유레이도글리신 아미노하이드롤라제((S)-ureidoglycine aminohydrolase)를 포함한다.

고리형 아미딘(cyclic amidines)은 사이토신 디아미나아제(cytosine deaminase), 아데닌 디아미나아제(adenine deaminase), 구아닌 디아미나아제(guanine deaminase), 아데노신 디아미나아제(adenosine deaminase), 시티딘 디아미나아제(cytidine deaminase), AMP 디아미나아제(AMP deaminase), ADP 디아미나아제(ADP deaminase), 아미노이미다콜라아제(aminoimidazolase), 메테닐테트라하이드로폴레이트 사이클로하이드롤라제(methenyltetrahydrofolate cyclohydrolase), IMP 사이클로하이드롤라제(IMP cyclohydrolase), 프테린 디아미나아제(pterin deaminase), dCMP 디아미나아제(dCMP deaminase), dCTP 디아미나아제(dCTP deaminase), 구아노신 디아미나아제(guanosine deaminase), GTP 사이클로하이드롤라제 I(GTP cyclohydrolase I), 아데노신-포스페이트 디아미나아제(adenosine-phosphate deaminase), ATP 디아미나아제(ATP deaminase), 포스포리보실-AMP 사이클로하이드롤라제(phosphoribosyl-AMP cyclohydrolase), 피리티아민 디아미나아제(pyrithiamine deaminase), 크리아티닌 디아미나아제(creatinine deaminase), 1-피롤린-4-하이드록시-2-카복실레이트 디아미나아제(1-pyrroline-4-hydroxy-2-carboxylate deaminase), 플라스티시딘-S 디아미나아제(blasticidin-S deaminase), 세피아프테린 디아미나아제(sepiapterin deaminase), GTP 사이클로하이드롤라제 II(GTP cyclohydrolase II), 디아미노하이드록시포스포리보실아미노피리미딘 디아미나아제(diaminohydroxyphosphoribosylaminopyrimidine deaminase), 메테닐테트라하이드로메타노프테린 사이클로하이드롤라제(methenyltetrahydromethanopterin cyclohydrolase), S-아데노실호모시스테인 디아미나아제(S-adenosylhomocysteine deaminase), GTP 사이클로하이드롤라제 IIa(GTP cyclohydrolase IIa), dCTP 디아미나아제(dCTP deaminase) (dUMP-형성), S-메틸-5´-티오아데노신 디아미나아제(S-methyl-5´-thioadenosine deaminase), 8-옥소구아닌 디아미나아제(8-oxoguanine deaminase), tRNA(아데닌(adenine)34) 디아미나아제(deaminase), tRNAAla(아데닌37) 디아미나아제, tRNA(사이토신(ytosine)) 디아미나아제, mRNA(사이토신 6666) 디아미나아제, 이중-가닥 RNA 아데닌 디아미나아제(double-stranded RNA adenine deaminase), 단일-가닥 DNA 사이토신 디아미나아제(single-stranded DNA cytosine deaminase), GTP 사이클로하이드롤라제 IV(GTP cyclohydrolase IV), 아미노데옥시퓨탈로신 디아미나아제(aminodeoxyfutalosine deaminase), 5´-데옥시아데노신 디아미나아제(5´-deoxyadenosine deaminase), N-이소프로필아멜라이드 이소프로필아미노하이드롤라제(N-isopropylammelide isopropylaminohydrolase), 하이드록시데클로로아트라진 에틸아미노하이드롤라제(hydroxydechloroatrazine ethylaminohydrolase), 엑토인 하이드롤라제(ectoine hydrolase), 멜라민 디아미나아제(melamine deaminase), 및 cAMP 디아미나아제(cAMP deaminase)를 포함한다.

In 니트릴(In nitriles)은 니트릴라아제(nitrilase), 리시닌 니트릴라아제(ricinine nitrilase), 사이아노알라닌 니트릴라아제(cyanoalanine nitrilase), 아크릴아세토니트릴라아제(arylacetonitrilase), 브로목시닐 니트릴라아제(bromoxynil nitrilase), 지방족 니트릴라아제(aliphatic nitrilase), 및 티오시아네이트 하이드롤라제(thiocyanate hydrolase)를 포함한다.

기타 화합물은 리보플라비나아제(riboflavinase), 아미노피리미딘 아미노하이드롤라제(aminopyrimidine aminohydrolase), 2-아미노뮤코네이트 디아미나아제(2-aminomuconate deaminase), 글루코사민-6-포스페이트 디아미나아제(glucosamine-6-phosphate deaminase), 1-아미노사이클로프로판-1-카복실레이트 디아미나아제(1-aminocyclopropane-1-carboxylate deaminase), 5-니트로안트라닐산 아미노하이드롤라제(5-nitroanthranilic acid aminohydrolase), 2-니트로이미다졸 니트로하이드롤라제(2-nitroimidazole nitrohydrolase), 2-이미노뷰타노에이트/2-이미노프로파노에이트 디아미나아제(2-iminobutanoate/2-iminopropanoate deaminase), 및 2-아미노뮤코네이트 디아미나아제(2-aminomuconate deaminase) (2-하이드록시뮤코네이트(2-hydroxymuconate)-형성)를 포함한다.

인-함유 무수물(phosphorus-containing anhydrides) 중 산성 무수물에 작용하는 것은 무기 디포스포타아제(inorganic diphosphatase), 트리메타포스포타아제(trimetaphosphatase), 아데노시네트리포스포타아제(adenosinetriphosphatase), 아피라아제(apyrase), 뉴클레오시드 디포스페이트 포스파타아제(nucleoside diphosphate phosphatase), 아실포스파타아제(acylphosphatase), ATP 디포스파타아제(ATP diphosphatase), 뉴클레오티드 디포스파타아제(nucleotide diphosphatase), 엔도폴리포스파타아제(endopolyphosphatase), 엑소폴리포스파타아제(exopolyphosphatase), dCTP 디포스파타아제(dCTP diphosphatase), ADP-리보오스 디포스파타아제(ADP-ribose diphosphatase), 아데노신-테트라포스파타아제(adenosine-tetraphosphatase), 뉴클레오시드-트리포스페이트 포스파타아제(nucleoside-triphosphate phosphatase), CDP-글리세롤 디포스파타아제(CDP-glycerol diphosphatase), 비스(5´-뉴클레오실)-테트라포스파타아제(bis(5´-nucleosyl)-tetraphosphatase)(비대칭성(asymmetrical)), FAD 디포스파타아제(FAD diphosphatase), 5´-아실포스포아데노신 하이드롤라제(5´-acylphosphoadenosine hydrolase), ADP-당 디포스포타아제(ADP-sugar diphosphatase), NAD⁺ 디포스파타아제(NAD⁺ diphosphatase), Dutp 디포스파타아제(dUTP diphosphatase), 뉴클레오시드 포스포아실하이드롤라제(nucleoside phosphoacylhydrolase), 트리포스파타아제(triphosphatase), CDP-디아실글리세롤 디포스파타아제(CDP-diacylglycerol diphosphatase), 언데카프레닐-디포스페이트 포스파타아제(undecaprenyl-diphosphate phosphatase), 티아민 트리포스파타아제(thiamine-triphosphatase), 비스(5´-아데노실)-트리포스파타아제(bis(5´-adenosyl)-triphosphatase), 포스포리보실-ATP 디포스파타아제(phosphoribosyl-ATP diphosphatase), 티미딘-트리포스파타아제(thymidine-triphosphatase), 구아노신-5´-트리포스페이트(guanosine-5´-triphosphate), 3´-디포스페이트 포스파타아제(3´-diphosphate phosphatase), 비스(5´-뉴클레오실)-테트라포스파타아제(bis(5´-nucleosyl)-tetraphosphatase)(대칭성(symmetrical)), 구아노신-디포스파타아제(guanosine-diphosphatase), 돌리칠디포스파타아제(dolichyldiphosphatase), 올리고당-디포스포돌리콜 디포스파타아제(oligosaccharide-diphosphodolichol diphosphatase), UDP-당 디포스파타아제(UDP-sugar diphosphatase), 디포스포이노시톨-폴리포스페이트 디포스파타아제(diphosphoinositol-polyphosphate diphosphatase), Mn²⁺-의존성 ADP-리보오스/CDP-알코올(Mn²⁺-dependent ADP-ribose/CDP-alcohol) 디포스파타아제(diphosphatase), UDP-2,3-디아실글루코사민 디포스파타아제(UDP-2,3-diacylglucosamine diphosphatase), 8-옥소-dGTP 디포스파타아제(8-oxo-dGTP diphosphatase), 2-하이드록시-dATP 디포스파타아제(2-hydroxy-dATP diphosphatase), UDP-2,4-디아세트아미도-2,4,6-트리데옥시-β-L-알트로파이라노오스 하이드롤라제(UDP-2,4-diacetamido-2,4,6-trideoxy-β-L-altropyranose hydrolase), 8-옥소-dGDP 포스파타아제(8-oxo-dGDP phosphatase), 5´-(N7-메틸(methyl) 5´-트리포스포구아노신(triphosphoguanosine))-[mRNA] 디포스파타아제(diphosphatase), 디아데노신 헥사포스페이트 하이드롤라제(diadenosine hexaphosphate hydrolase) (AMP-형성(AMP-forming)), 디아데노신 헥사포스페이트 하이드롤라제(diadenosine hexaphosphate hydrolase) (ATP-형성), 5´-(N7-메틸구아노신(methylguanosine) 5´-트리포스포(triphospho))-[mRNA] 하이드롤라제(hydrolase), α-D-리보오스 1-메틸포스포네이트 5-트리포스페이트 디포스파타아제(α-D-ribose 1-methylphosphonate 5-triphosphate diphosphatase), 이노신 디포스페이트 포스파타아제(inosine diphosphate phosphatase), (d)CTP 디포스파타아제((d)CTP diphosphatase), XTP/dITP 디포스파타아제(XTP/dITP diphosphatase), 디하이드로네오프테린 트리포스페이트 디포스파타아제(dihydroneopterin triphosphate diphosphatase), 및 게라닐 디포스페이트 포스포하이드롤라제(geranyl diphosphate phosphohydrolase)를 포함한다.

In 술포닐-함유 무수물(sulfonyl-containing anhydrides)은 아데닐릴설파타아제(adenylylsulfatase) 및 포스포아데닐릴설파타아제(phosphoadenylylsulfatase)를 포함한다.

산성 무수물에 작용하여 물질의 막관통 이동(transmembrane movement)을 촉매하는 것은 인지질-전위 ATPase(phospholipid-translocating ATPase), Mg2⁺-도입 ATPase(Mg2⁺-importing ATPase), Cd2⁺-배출 ATPase(Cd2⁺-exporting ATPase), Cu2⁺-배출 ATPase(Cu2⁺-exporting ATPase), Zn²⁺-배출 ATPase(Zn²⁺-exporting ATPase), H⁺-배출 ATPase(H⁺-exporting ATPase), Na⁺-배출 ATPase(Na⁺-exporting ATPase), Ca²⁺-수송 ATPase(Ca²⁺-transporting ATPase), Na⁺/K⁺-교환 ATPase(Na⁺/K⁺-exchanging ATPase), H⁺/K⁺-교환 ATPase(H⁺/K⁺-exchanging ATPase), Cl^--수송 ATPase(Cl^--transporting ATPase), K⁺-수송 ATPase(K⁺-transporting ATPase), H⁺-수송 2-섹터 ATPase(H⁺-transporting two-sector ATPase), Na⁺-수송 2-섹터 ATPase(Na⁺-transporting two-sector ATPase), 아비산염-수송 ATPase(arsenite-transporting ATPase), 단당류-수송 ATPase(monosaccharide-transporting ATPase), 올리고당-수송 ATPase(oligosaccharide-transporting ATPase), 말토오스-수송 ATPase(maltose-transporting ATPase), 글리세롤-3-포스페이트-수송 ATPase(glycerol-3-phosphate-transporting ATPase), 극성-아미노산-수송 ATPase(polar-amino-acid-transporting ATPase), 비극성-아미노산-수송 ATPase(nonpolar-amino-acid-transporting ATPase), 올리고펩타이드-수송 ATPase(oligopeptide-transporting ATPase), 니켈-수송 ATPase(nickel-transporting ATPase), 황산염-수송 ATPase(sulfate-transporting ATPase), 질산염-수송 ATPase(nitrate-transporting ATPase), 인산염-수송 ATPase(phosphate-transporting ATPase), 포스포네이트-수송 ATPase(phosphonate-transporting ATPase), 몰리브데산염-수송 ATPase (molybdate-transporting ATPase), Fe³⁺-수송 ATPase(Fe³⁺-transporting ATPase), 폴리아민-수송 ATPase(polyamine-transporting ATPase), 4기-아민-수송 ATPase (quaternary-amine-transporting ATPase), 비타민 B12-수송 ATPase(vitamin B12-transporting ATPase), 철-킬레이트 수송 ATPase(iron-chelate-transporting ATPase), 망가니즈-수송 ATPase(manganese-transporting ATPase), 타우린-수송 ATPase(taurine-transporting ATPase), 구아닌-수송 ATPase(guanine-transporting ATPase), 협막-다당류 수송 ATPase(capsular-polysaccharide-transporting ATPase), 지질다당류-수송 ATPase(lipopolysaccharide-transporting ATPase), 테이코산-수송 ATPase(teichoic-acid-transporting ATPase), 헴-수송 ATPase(heme-transporting ATPase), β-글루칸 수송 ATPase (β-glucan-transporting ATPase), 펩타이드-수송 ATPase(peptide-transporting ATPase), 생체이물-수송 ATPase(xenobiotic-transporting ATPase), 카드뮴-수송 ATPase(cadmium-transporting ATPase), 지방산-아실-CoA 수송 ATPase(fatty-acyl-CoA-transporting ATPase), α-인자-수송 ATPase(α-factor-transporting ATPase), 채널-기울기-조절 ATPase(channel-conductance-controlling ATPase), 단백질-분비 ATPase(protein-secreting ATPase), 미토콘드리아 단백질-수송 ATPase(mitochondrial protein-transporting ATPase), 엽록체 단백질-수송 ATPase(chloroplast protein-transporting ATPase), Ag⁺-배출 ATPase(Ag⁺-exporting ATPase), Cu⁺-배출 ATPase(Cu⁺-exporting ATPase), 및 텀스텐산염-도입 ATPase(tungstate-importing ATPase)를 포함한다.

세포(cellular) 및 세포내(subcellular) 운동을 촉진하기 위해 산성 무수물에 작용하는 것은 미오신 ATPase(myosin ATPase), 디네인 ATPase(dynein ATPase), 미세소관-절단 ATPase(microtubule-severing ATPase), 플러스-종단-지향성 키네신 ATPase(plus-end-directed kinesin ATPase), 마이너스-종단-지향성 키네신 ATPase(minus-end-directed kinesin ATPase), 소포-융합 ATPase(vesicle-fusing ATPase), 퍼옥시좀-조립 ATPase(peroxisome-assembly ATPase), 프로테아좀 ATPase(proteasome ATPase), 샤페로닌 ATPase(chaperonin ATPase), 비-샤페로닌 분자 샤페론 ATPase(non-chaperonin molecular chaperone ATPase), 뉴클레오플라스민 ATPase(nucleoplasmin ATPase), DNA 헬리카제(DNA helicase), 및 RNA 헬리카제(RNA helicase)를 포함한다.

세포성 및 세포내 운동을 촉진하기 위해 GTP에 작용하는 것은 이종삼량체 G-단백질 GTPase(heterotrimeric G-protein GTPase), 소형 단량체 GTPase(small monomeric GTPase), 단백질-합성 GTPase(protein-synthesizing GTPase), 신호-인식-입자 GTPase(signal-recognition-particle GTPase), 디나민 GTPase(dynamin GTPase), 및 튜뷸린 GTPase(tubulin GTPase)를 포함한다.

케톤 물질(ketonic substances) 내의 탄소-탄소 결합에 작용하는 것은 옥살로아세타아제(oxaloacetase), 푸마로일아세토아세타아제(fumarylacetoacetase), 키뉴레니나아제(kynureninase), 플로레틴 하이드롤라제(phloretin hydrolase), 아실파이루베이트 하이드롤라제(acylpyruvate hydrolase), 아세틸파이루베이트 하이드롤라제(acetylpyruvate hydrolase), β-디케톤 하이드롤라제(β-diketone hydrolase), 2,6-디옥소-6-페닐헥사-3-에노에이트 하이드롤라제(2,6-dioxo-6-phenylhexa-3-enoate hydrolase), 2-하이드록시 뮤코네이트-6-세미알데하이드 하이드롤라제(2-hydroxymuconate-6-semialdehyde hydrolase), 사이클로헥세인-1,3-디오네 하이드롤라제(cyclohexane-1,3-dione hydrolase), 사이클로헥세인-1,2-디오네 하이드롤라제(cyclohexane-1,2-dione hydrolase), 코발트-프레코린 5A 하이드롤라제(cobalt-precorrin 5A hydrolase), 2-하이드록시-6-옥소-6-(2-아미노페닐)헥사-2,4-디에노에이트 하이드롤라제(2-hydroxy-6-oxo-6-(2-aminophenyl)hexa-2,4-dienoate hydrolase), 2-하이드록시-6-옥소노나-2,4-디엔디오에이트 하이드롤라제(2-hydroxy-6-oxonona-2,4-dienedioate hydrolase), 4,5:9,10-디세코-3-하이드록시-5,9,17-트리옥소안드로스타-1(10),2-디엔-4-오에이트 하이드롤라제(4,5:9,10-diseco-3-hydroxy-5,9,17-trioxoandrosta-1(10),2-diene-4-oate hydrolase), 6-옥소캠포르 하이드롤라제(6-oxocamphor hydrolase), 2,6-디하이드록시슈도옥시니코틴 하이드롤라제(2,6-dihydroxypseudooxynicotine hydrolase), 3-푸마릴파이루베이트 하이드롤라제(3-fumarylpyruvate hydrolase), 6-옥소사이클로헥스-1-엔-1-카르보닐-CoA 히드라타아제(6-oxocyclohex-1-ene-1-carbonyl-CoA hydratase), 3D-(3,5/4)-트리하이드록시사이클로헥산-1,2-디오네 아크릴하이드롤라제(3D-(3,5/4)-trihydroxycyclohexane-1,2-dione acylhydrolase) (개환(ring-opening)), 및 말레일파이루베이트 하이드롤라제(maleylpyruvate hydrolase)를 포함한다.

탄소-할라이드 화합물(carbon-halide compounds) 내의 할라이드 결합에 작용하는 것은 알킬할리다아제(alkylhalidase), (S)-2-할로산 디할로게나아제((S)-2-haloacid dehalogenase), 할로아세테이트 디할로게나아제(haloacetate dehalogenase), 할로알케인 디할로게나아제(haloalkane dehalogenase), 4-클로로벤조에이트 디할로게나아제(4-chlorobenzoate dehalogenase), 4-클로로벤조일-CoA 디할로게나아제(4-chlorobenzoyl-CoA dehalogenase), 아트라진 클로로하이드롤라제(atrazine chlorohydrolase), (R)-2-할로산 디할로게나아제((R)-2-haloacid dehalogenase), 2-할로산 디할로게나아제(2-haloacid dehalogenase) (입체형(configuration)-역전(inverting)), 및 2-할로산 디할로게나아제(2-haloacid dehalogenase) (입체형-유지)를 포함한다.

인-질소 결합(phosphorus-nitrogen bond)에 작용하는 것은 포스포아미다아제(phosphoamidase), 단백질 아르기닌 포스파타아제(protein arginine phosphatase), 및 포스포히스티딘 포스파타아제(phosphohistidine phosphatase)를 포함한다.

황-질소 결합(sulfur-nitrogen bonds)에 작용하는 것은 N-술포글루코사민 술포하이드롤라제(N-sulfoglucosamine sulfohydrolase) 및 시클라메이트 술포하이드롤라제(cyclamate sulfohydrolase)를 포함한다.

탄소-인 결합(carbon-phosphorus bonds)에 작용하는 것은 포스포노아세트알데하이드 하이드롤라제(phosphonoacetaldehyde hydrolase), 포스포노아세테이트 하이드롤라제(phosphonoacetate hydrolase), 및 포스포노파이루베이트 하이드롤라제(phosphonopyruvate hydrolase)를 포함한다.

황-황 결합(sulfur-sulfur bonds)에 작용하는 것은 트리티오네이트 하이드롤라제(trithionate hydrolase)를 포함한다.

탄소-황 결합에 작용하는 것은 UDP-술포퀴노보스 신타아제(UDP-sulfoquinovose synthase), 2´-하이드록시비페닐-2-술피네이트 디술피나아제(2´-hydroxybiphenyl-2-sulfinate desulfinase), 3-술피노프로파노일-CoA 디술피나아제(3-sulfinopropanoyl-CoA desulfinase), 이황화탄소 하이드롤라제(carbon disulfide hydrolase), 및 [CysO 황-캐리어 단백질]-S-L-시스테인 하이드롤라제([CysO sulfur-carrier protein]-S-L-cysteine hydrolase)를 포함한다.

상업적으로 이용 가능한 바람직한 효소는 티올 프로테아제(thiol protease) (Enzybel International S.A.사의 파파인(Papain), CAS 9001-73-4), 세린 엔도프로테아제(serine endoprotease) (Novozymes사의 Protamex), 및 고초균(Bacillus subtilis) 배양체 유래의 엔도-펩티다아제(endo-peptidase) 활성을 함유하는 중성 프로테아제(neutral protease), 즉, 메탈로엔도펩티다아제(Metalloendopeptidase), 서브틸리스 중성 프로테이나제(subtilis neutral proteinase) (Ab Enzymes사의 Corolase^® 7089, CAS 9001-92-7)를 포함한다.

일 실시양태에서, 프로테아제 혼합물이 사용될 수 있다. 적절한 프로테아제 혼합물은 하나 이상의 산성, 중성, 및 알칼리성 프로테아제를 포함한다.

산성 프로테아제는 산성 환경(예를 들어, pH 2.0-5.0, 2.0-3.0, 2.0-4.0, 또는 3.0-5.0)에서 최대 활성 및 안정성을 나타내고 pH 값이 6.0 이상이면 불활성화되는 단백질-소화 효소(protein-digesting enzymes)이다. 산성 프로테아제는 일반적으로 등전점(isoelectric point)이 낮고 염기성 아미노산 함량이 낮다.

중성 프로테아제는 좁은 pH 범위(pH 5 내지 8)에서 활성화되고, 열내성(thermotolerance)이 상대적으로 낮을 수 있다. 중성 프로테아제는 시스테인 프로테아제(cysteine proteases), 메탈로프로테아제(metalloproteases), 및 일부 세린 프로테아제(serine proteases)를 포함한다.

알칼리성 프로테아제는 알칼리성 pH, 즉, 적어도 pH 9, 적어도 pH 10, 적어도 pH 11에서 높은 활성을 갖는 특징이 있다. 알칼리성 프로테아제의 예시는 세린 프로테아제(serine proteases)를 포함한다. 이들은 에스테르분해(esterolytic) 활성 및 아미다아제(amidase) 활성을 포함하는 광범위한 기질 특이성(substrate specificities)을 갖는다. 세린 프로테아제의 등전점은 일반적으로 pH 4 및 6 사이이다. 매우 알칼리성인 pH에서 활성인 세린 알칼린 프로테아제(Serine alkaline proteases)가 세린 프로테아제의 가장 큰 하위그룹을 대표한다.

일 실시양태에서, 프로테아제 혼합물은 바실러스 리체니포르미스(Bacillus Licheniformis)에서 유래한 프로테아제를 포함한다. 본 기술분야에 바실러스 리체니포르미스로부터 유래한 산성, 중성, 및 알칼리성 프로테아제가 공지되어 있다. 예시는 다음을 참고할 것: Yilmaz et al., J Enzyme Inhib Med Chem, 2016, 31(6):1241-1247; Rao et al., Microbiology and Molecular Biology Reviews, 1998, 62(3): 597-635; 및 Jellouli et al., Process Biochemistry, 2011, 46(6): 1248-1256.

일 실시양태에서, 프로테아제 혼합물은 아스페르길루스(Aspergillus) 속 유래의 유기체(organisms)로부터 수득한 식용등급(food grade) 세포벽 분해효소를 포함한다. 아스페르길루스로부터 유래한 세포벽 분해효소의 예시는 밀라아제(mylase), 펙티나아제(pectinase), 자일라나아제(xylanase), 및 셀룰로스 효소(cellulose enzymes)를 포함한다. 구체적인 예시는 β-글루코시다아제(β-glucosidase), 엔도글루카나아제(endoglucanase), 필터페퍼라아제(filterpaperase), 폴리갈락투로나아제(polygalacturonase), 및 펙테이트 리에이즈(pectate lyase)를 포함한다.

일 실시양태에서. 본 발명의 방법은 적어도 하나의 알칼리성 프로테아제를 포함하는 제1 프로테아제 혼합물; 및 적어도 하나의 산성 프로테아제, 중성 프로테아제, 및 알칼리성 프로테아제를 포함하는 제2 프로테아제 혼합물;의 첨가를 포함한다.

제1 프로테아제 혼합물은 적어도 한 가지, 적어도 두 가지, 적어도 세 가지, 또는 적어도 네 가지 알칼리성 프로테아제를 포함한다. 일 실시양태에서, 알칼리성 프로테아제(들)는 바실러스 리체리포르미스로부터 유래한 것이다. 일 실시양태에서, 제1 프로테아제 혼합물은 오직 엔도프로테아제(endoproteases)만 포함한다.

일 실시양태에서, 제1 프로테아제 혼합물은 하나의 알칼리성 프로테아제만 포함한다.

일 실시양태에서, 제1 프로테아제 혼합물은 두 가지 알칼리성 프로테아제를 포함한다. 일 실시양태에서, 제1 알칼리성 프로테아제 및 제2 알칼리성 프로테아제는 제1 프로테아제 혼합물의 프로테아제의 총 100%를 차지한다. 일 실시양태에서, 제1 알칼리성 프로테아제는 프로테아제 혼합물의 1-80%이고, 제2 알칼리성 프로테아제는 프로테아제 혼합물의 1-80%이다. 일 실시양태에서, 제1 알칼리성 프로테아제는 프로테아제 혼합물의 1-30%이고, 제2 알칼리성 프로테아제는 프로테아제 혼합물의 70-99%이다. 일 실시양태에서, 제1 알칼리성 프로테아제는 프로테아제 혼합물의 1-10%이고, 제2 알칼리성 프로테아제는 프로테아제 혼합물의 9-99%이다. 일 실시양태에서, 제1 알칼리성 프로테아제 및 제2 알칼리성 프로테아제는 제1 프로테아제 혼합물에서 동등한 비율로 존재한다.

일 실시양태에서, 제1 프로테아제 혼합물은 세 가지 알칼리성 프로테아제를 포함한다. 일 실시양태에서, 제1 알칼리성 프로테아제, 제2 알칼리성 프로테아제, 및 세 번째 알칼리성 프로테아제는 제1 프로테아제 혼합물의 프로테아제의 총 100%를 차지한다. 일 실시양태에서, 제1 알칼리성 프로테아제는 프로테아제 혼합물의 1-80%이고, 제2 알칼리성 프로테아제는 프로테아제 혼합물의 1-80%이고, 세 번째 알칼리성 프로테아제는 프로테아제 혼합물의 1-80%이다. 일 실시양태에서, 제1 알칼리성 프로테아제는 프로테아제 혼합물의 1-30%이고, 제2 알칼리성 프로테아제는 프로테아제 혼합물의 1-30%이고, 세 번째 알칼리성 프로테아제는 프로테아제 혼합물의 50-98%이다. 일 실시양태에서, 제1 알칼리성 프로테아제는 프로테아제 혼합물의 1-10%이고, 제2 알칼리성 프로테아제는 프로테아제 혼합물의 1-30%이고, 세 번째 알칼리성 프로테아제는 프로테아제 혼합물의 10-98%이다. 일 실시양태에서, 제1 알칼리성 프로테아제, 제2 알칼리성 프로테아제, 및 세 번째 알칼리성 프로테아제는 제1 프로테아제 혼합물에서 동등한 비율로 존재한다.

제2 프로테아제 혼합물은 다음 중 적어도 하나를 포함한다: 산성 프로테아제, 중성 프로테아제, 및 알칼리성 프로테아제. 일 실시양태에서, 산성 프로테아제, 중성 프로테아제, 또는 알칼리성 프로테아제는 바실러스 리체니포르미스로부터 유래한 것이다. 제2 프로테아제 혼합물의 프로테아제는 엑소프로테아제(exoproteases) 및 엔도프로테아제(endoproteases)를 포함할 수 있다.

일 실시양태에서, 제2 프로테아제 혼합물은 산성 프로테아제 및 중성 프로테아제를 포함한다. 일 실시양태에서, 산성 프로테아제 및 중성 프로테아제는 제2 프로테아제 혼합물의 프로테아제의 총 100%를 차지한다. 일 실시양태에서, 제2 프로테아제 혼합물은 1-80%의 산성 프로테아제 및 1-80%의 중성 프로테아제를 포함한다. 일 실시양태에서, 산성 프로테아제는 프로테아제 혼합물의 1-30%이고 중성 프로테아제는 프로테아제 혼합물의 70-99%이다. 일 실시양태에서, 산성 프로테아제는 프로테아제 혼합물의 1-10%이고, 중성 프로테아제는 프로테아제 혼합물의 9-99%이다. 일 실시양태에서, 산성 프로테아제 및 중성 프로테아제는 제2 프로테아제 혼합물에서 동등한 비율로 존재한다.

일 실시양태에서, 제2 프로테아제 혼합물은 산성 프로테아제 및 알칼리성 프로테아제를 포함한다. 일 실시양태에서, 산성 프로테아제 및 알칼리성 프로테아제는 제2 프로테아제 혼합물의 프로테아제의 총 100%를 차지한다. 일 실시양태에서, 제2 프로테아제 혼합물은 1-80%의 산성 프로테아제 및 1-80%의 알칼리성 프로테아제를 포함한다. 일 실시양태에서, 산성 프로테아제는 프로테아제 혼합물의 1-30%이고, 알칼리성 프로테아제는 프로테아제 혼합물의 70-99%이다. 일 실시양태에서, 산성 프로테아제는 프로테아제 혼합물의 1-10%이고, 알칼리성 프로테아제는 프로테아제 혼합물의 9-99%이다. 일 실시양태에서, 산성 프로테아제 및 알칼리성 프로테아제는 제2 프로테아제 혼합물에서 동등한 비율로 존재한다.

일 실시양태에서, 제2 프로테아제 혼합물은 중성 프로테아제 및 알칼리성 프로테아제를 포함한다. 일 실시양태에서, 제1 중성 프로테아제 및 알칼리성 프로테아제는 제2 프로테아제 혼합물의 프로테아제의 총 100%를 차지한다. 일 실시양태에서, 제2 프로테아제 혼합물은 1-80% 중성 프로테아제 및 1-80% 알칼리성 프로테아제를 포함한다. 일 실시양태에서, 중성 프로테아제는 프로테아제 혼합물의 1-30%이고, 알칼리성 프로테아제는 프로테아제 혼합물의 70-99%이다. 일 실시양태에서, 중성 프로테아제는 프로테아제 혼합물의 1-10%이고, 알칼리성 프로테아제는 프로테아제 혼합물의 9-99%이다. 일 실시양태에서, 중성 프로테아제 및 알칼리성 프로테아제는 제2 프로테아제 혼합물에서 동등한 비율로 존재한다.

일 실시양태에서, 제2 프로테아제 혼합물은 산성 프로테아제, 중성 프로테아제, 및 알칼리성 프로테아제를 포함한다. 일 실시양태에서, 산성 프로테아제, 중성 프로테아제, 및 알칼리성 프로테아제는 제2 프로테아제 혼합물의 프로테아제의 총 100%를 차지한다. 일 실시양태에서, 제2 프로테아제 혼합물은 1-80%의 산성 프로테아제, 1-80%의 중성 프로테아제, 및 1-80%의 알칼리성 프로테아제를 포함한다. 일 실시양태에서, 제2 프로테아제 혼합물은 1-10%의 산성 프로테아제, 1-30%의 중성 프로테아제, 및 60-98%의 알칼리성 프로테아제를 포함한다. 일 실시양태에서, 산성 프로테아제, 중성 프로테아제, 및 알칼리성 프로테아제는 제2 프로테아제 혼합물에서 동등한 비율로 존재한다.

일 실시양태에서, 제1 프로테아제 혼합물의 알칼리성 프로테아제는 제2 프로테아제 혼합물에는 없는 것이다.

일 실시양태에서, 제1 프로테아제 혼합물 / 제2 프로테아제 혼합물의 양은 제1 프로테아제 혼합물의 0.2-0.6%이고, 제2 프로테아제 혼합물의 0.02-0.06%이다. 일 실시양태에서, 제1 프로테아제 혼합물 / 제2 프로테아제 혼합물의 양은 제1 프로테아제 혼합물의 0.3-0.5%이고, 제2 프로테아제 혼합물의 0.03-0.05%이다. 일 실시양태에서, 제1 프로테아제 혼합물의 양은 약 0.4%이고, 제2 프로테아제 혼합물의 양은 약 0.04%이다.

제1 프로테아제 혼합물을 위한, 상업적으로 이용 가능한 바람직한 프로테아제 혼합물은 Endocut-02L (TailorFood / Tailorzyme)를 포함한다. 제2 프로테아제 혼합물을 위한, 상업적으로 이용 가능한 바람직한 프로테아제 혼합물은 Exocut-BL (TailorFood / Tailorzyme)를 포함한다. Exocut-BL은 하나 이상의 프로테아제를 대신하여, 또는 하나 이상의 프로테아제에 더하여 아스페르길루스로부터 유래한 세포벽 분해효소를 포함할 수 있다.

다음의 값은 임의의 방식으로 조합되어, 분해된 갑각류 어획물의 총 중량에 대한 비율로서 Endocut 프로테아제 혼합물의 양의 최소값 및 최대값을 가진 범위를 생성할 수 있다: 0.01%, 0.1%, 0.2%, 0.3%, 0.4%, 0.5%, 0.6%, 0.7%, 0.8%, 0.9%, 1.0%, 또는 1.5%.

다음의 값은 임의의 방식으로 조합되어, 분해된 갑각류 어획물의 총 중량에 대한 비율로서 Exocut 프로테아제 혼합물의 양의 최소값 및 최대값을 가진 범위를 생성할 수 있다: 0.005%, 0.01%, 0.02%, 0.03%, 0.04%, 0.05%, 0.06%, 0.07%, 0.08%, 0.09%, 0.1%, 0.25%, 또는 0.5%.

일 실시양태에서, Endocut/Exocut의 양은 0.2-0.6%의 Endocut 프로테아제 혼합물 및 0.02-0.06%의 Exocut 프로테아제 혼합물이다. 일 실시양태에서, Endocut/Exocut의 양은 0.3-0.5%의 Endocut 프로테아제 혼합물 및 0.03-0.05%의 Exocut 프로테아제 혼합물이다. 일 실시양태에서, Endocut의 양은 약 0.4%이고, Exocut의 양은 약 0.04%이다.

일 실시양태에서, 제1 프로테아제 혼합물 및 제2 프로테아제 혼합물은 분해된 갑각류 어획물에 동시에 첨가된다.

일 실시양태에서, 가수분해 단계는 갑각류 어획물을 제2 프로테아제 혼합물에 접촉시키는 단계 전에 갑각류 어획물을 제1 프로테아제 혼합물에 접촉시키는 단계를 포함한다. 본 실시양태에서, 다음의 분(minutes) 값은 임의의 방식으로 조합되어 제2 프로테아제 혼합물의 첨가 전에 제1 프로테아제 혼합물로 가수분해하는데 필요한 시간의 최소값 및 최대값을 가진 범위를 생성할 수 있다: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 105, 110, 115, 120, 125, 130, 135, 140, 145, 150, 155, 160, 165, 170, 175, 180, 185, 190, 195, 200, 205, 210, 215, 220, 225, 230, 235, 및 240. 예를 들어, 분해된 갑각류 어획물은 제2 프로테아제 혼합물의 첨가 전에 제1 프로테아제 혼합물로 1-10분 동안 가수분해된다.

일 실시양태에서, 가수분해 단계는 갑각류 어획물을 제1 프로테아제 혼합물과 접촉시키는 단계 전에 제2 프로테아제 혼합물을 분해된 갑각류 어획물과 접촉시키는 단계를 포함한다. 본 실시양태에서, 다음의 분(minutes) 값은 임의의 방식으로 조합되어 제1 프로테아제 혼합물의 첨가 전에 제2 프로테아제 혼합물로 가수분해하는데 필요한 시간의 최소값 및 최대값을 가진 범위를 생성할 수 있다: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 105, 110, 115, 120, 125, 130, 135, 140, 145, 150, 155, 160, 165, 170, 175, 180, 185, 190, 195, 200, 205, 210, 215, 220, 225, 230, 235, 및 240. 예를 들어, 분해된 갑각류 어획물은 제1 프로테아제 혼합물의 첨가 전에 두 버너째 프로테아제 혼합물로 1-10분 동안 가수분해된다. 또다른 실시양태에서, 키티나아제(chitinase) 또는 콜라게나아제(collagenase)를 포함하는 제2 효소가 사용된다. 이 효소는 제1 효소 또는 효소 조합(enzyme combination)과 합하여 사용될 수 있다.

또다른 실시양태에서, 가수분해 단계에서 사용되는 효소(들)는 엑소펩티다아제(exopeptidase)를 포함하지 않는다.

접촉시키는 단계는 또한 유기용제(organic solvent)의 사용을 포함할 수있다. 유용한 유기용제는 에탄올, 아세톤, 및 아세트산에틸(ethylacetate)을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

가수분해의 중단(Stopping Hydrolysis)

가수분해는 효소(들)을 불활성화함으로써 중단시킬 수 있다. 효소(들)은 저해제의 첨가, 보조인자(co-facotrs)의 제거(예를 들어, 투석을 통한 중요 이온의 제거), 열 불활성화(thermal inactivation) 및/또는 임의의 기타 불활성화 수단을 포함한 다양한 방법으로 불활성화될 수 있다.

각 효소가 불활성화되는 조건은 다를 수 있으나, 일반적으로 용액의 pH 및 온도를 높이는 것을 포함한다. 예를 들어, Corolase^® 7089의 불활성화는 pH 값 > 7.5 및 55℃보다 높은 온도에서 시작한다. 이 조건은 효소가 분해된 갑각류 어획물의 단백질을 변성시키지 않는 온도에서 불활성화되도록 선택된 것이다. 다음의 온도는 임의의 방식으로 조합되어 갑각류 어획물의 단백질을 변성시키지 않으면서 효소(들)가 불활성화되는 온도의 최소값, 최대값, 또는 범위를 생성할 수 있다: 85℃, 86℃, 87℃, 88℃, 89℃, 90℃, 91℃, 92℃, 93℃, 94℃, 95℃, 96℃, 97℃, 98℃, 99℃, 및 100℃. 예를 들어, 효소 A는 약 90℃이상의 온도 또는 바람직하게는 약 92℃ 및 약 98℃ 사이의 온도에서 불활성화될 수 있다.

상술한 바와 같이, 가수분해는 정확한 순간에 중단되어 갑각류 어획물이 바람직하게는 부분적으로만 가수분해되어, 단백질이 특정한 정도로 가수분해된 가수분해된 갑각류 어획물을 생성할 수 있다. 나아가, 본 기술분야의 통상의 기술자는 특정 효소(들)로 가수분해하는 조건 및 시간, 및 특정 비율로 갑각류 어획물이 가수분해되도록 가수분해된 갑각류 어획물을 생성하는 조건을 확인할 수 있을 것이다.

단백질 인지질 복합체(Protein Phospholipid Complex)를 제공하기 위해 분리하는 단계

세 번째 단계는 가수분해된 갑각류 어획물을 분리하여 PPC를 제공하는 단계를 포함한다. 본 단계에서, PPC가 특정 기준을 충족하도록 하기 위해 다양한 공정이 이용될 수 있다. 예를 들어, PPC의 지질 함량은 거의 30-55%이다. 또다른 실시예에서, 플루오르화물(fluoride) 수준을 감소시켜 플루오르화물 함량이 PPC의 kg당 약 5 mg 미만인 PPC를 생성할 수 있다.

플루오르화물 함량을 감소시키는 것은 다양한 방식으로 실행될 수 있다. 예를 들어, 갑각류 어획물의 외골격, 즉, 껍질(crust), 갑피(carapace), 및/또는 껍데기(shell)는 대개 플루오르화물이 높다. 가수분해된 갑각류 어획물로부터 외골격, 예를 들어, 껍데기를 제거하는 것은 플루오르화물 함량을 낮추기 위한 한 가지 방법이다. 껍데기는 필터(filter), 체(sieve), 디캔터(decanter) 또는 원심분리기(centrifuge)와 같은 다양한 수단으로 제거될 수 있다. 예를 들어, 필터 또는 체의 개구부 크기는 상당한 또는 임의의 양의 비-껍데기 가수분해 생성물을 제거하지 않으면서 모든 또는 대부분의 껍데기가 제거될 수 있도록 선택될 수 있다. 약 125 mm, 25 mm, 4 mm, 1 mm, 250 μm, 45 μm, 및 20 μm로부터 선택된 메시 사이즈(mesh sizes)를 가진 표준 직조 와이어 체(woven wire sieve)가 사용될 수 있다. 갑각류 물질로부터 플루오르화물 함량을 감소시키는 방법을 개시한 Bruheim 등의 미국 특허 제8,557,297호 및 제9,068,142호는 이들의 전문이 참고문헌으로 본원에 통합된다.

껍데기는 또한 공정 동안 다양한 시점에서 제거될 수 있다. 예를 들어, 껍데기는 가수분해 직후이지만 저온살균(pasteurization) 및 효소(들)의 불활성화 전에 디캔터 또는 체로 제거될 수 있다.

플루오르화물 함량을 감소시키는 것은 또한 초임계(supercritical) 추출 및/또는 준임계(subcritical) 유체(fluid) 추출물에 의해 크릴 오일이 생성될 때 후속적으로(downstream) 달성될 수 있다. 따라서, 껍데기는 주요 공정 라인에서 가수분해 후에 제거될 수 있고 효소 불활성화 공정 후에 주요 공정 라인에 재도입될 수 있다. 다시 말해서, 껍데기 및/또는 임의의 기타 불용성 입자가 건조단계 전에 주요 공정 라인에 재도입될 수 있다. 껍데기 및/또는 임의의 기타 불용성 입자를 주요 공정 라인에 재도입시키는 것은 PPC의 유용성에 유리할 수 있는데, 이것은 껍데기가 생성물을 견고한 블록(blocks)으로 포장되도록 하기 때문으로, 이 블록은 분리하기가 더 용이하고 후속 공정에서 유동성(flowability)이 더 커지도록 한다. 불용성 입자는 바람직하게는 식용등급이고, 후속 PPC(PPC downstream)으로부터 용이하게 제거될 수 있다. 불용성 입자의 예시는 섬유(fibers)를 포함한다.

이에 대신하여, 껍데기는 공정 중에 언제든지 제거할 필요가 없고, PPC의 일부가 될 수 있다. 상술한 바와 같이, 껍데기와 결합한 임의의 과잉 플루오린이 초임계 공정에 의해 후속적으로 제거될 수 있다.

또다른 실시예에서, 분리단계 동안 미생물학적 활성을 방지하기 위해 수분함량이 감소될 수 있다. PPC의 수분함량은 미생물 성장의 가능성이 낮은 수분 비율이다. 다음의 비율은 PPC의 수분함량의 최소값, 최대값, 또는 값의 범위를 생성할 수 있다: 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 또는 15% w/w. 예를 들어, PPC는 PPC의 총 중량을 기준으로 약 15% 미만의 수분을 함유한다. 이상적으로, 수분활성(water activity)은 약 0.85 미만이고 바람직하게는 약 0.65이다.

수분은 가수분해 후에 하나 이상의 탈수단계로 제거될 수 있는데, 탈수단계는 분리 공정 이전의, 분리 공정 동안의, 또는 분리 공정 후의 건조 및 역학적 제거를 포함할 수 있다. 바람직한 탈수방법은 진공하에 저온 건조(low temperature drying)시키는 단계 및 부드러운 침전물을 위한 디캔터 원심분리기(decanter centrifuge) 또는 수평 원심분리기(horizontal centrifuge)로 처리하는 단계를 포함한다. 디캔터 및 분리기(separator)와 같은 임의의 분리방법이 사용될 수 있다. 바람직한 분리기는 회전력(rotational forces)를 사용하여 샘플을 회전시켜 샘플이 층으로 분리되게 하는 것이다.

수평 원심분리기(horizontal centrifuge)는 통상의 원심분리기와 마찬가지로 X-평면 및/또는 Y-평면에 반대로 Z-평면에서 혼합물을 회전시킬 수 있는 임의의 장치이다. 회전은 튜브 모양의 엔클로져(enclosure) 내에 수평으로 정렬된 스크류-타입(screw-type) 컨베이어 요소(conveyor element)에 의해 발생한다. 이어서 유도된 원심력(centrifugal force)은 더 무거운 입자를 엔클로져의 바깥쪽 가장자리에 층을 쌓고, 더 가벼운 입자는 엔클로져의 중앙에 더 가까운 층을 형성한다. 일부 수평 원심분리기는 확장된 분리 경로를 포함하고 높은 중력을 유도하도록 변형된다. 바람직한 수평 원심분리기는 침전물로부터 물을 기계적으로 분리하는 Flottweg Sedicanter^®이다. Sedicanter^®는 긴 수평 정화(clarification)/분리 구역을 포함하는 변형된 수평 원심분리기로서 높은 원심력 (5,000 내지 10,000 g)을 발생시킨다. Sedicanter^® S3E-3 모델은 12"의 보울(bowl) 직경, 7750 rpm의 보울 회전 속도,

의 크기, 및 2315 lbs의 중량을 갖는다.

단백질 인지질 에멀젼(Protein Phospholipid Emulsion)

본 발명의 또다른 측면은 안정적인 단백질 인지질 에멀젼을 생성하는 방법에 관한 것이다. 본 방법에서, 특정 효소 및 가공 파라미터(parameters)를 선택하여 최종 생성물이 안정한 에멀젼임을 보장한다. 안정한 에멀젼은 인지질, 지방산 및 가수분해된 단백질과 같은 기능성 성분(functional ingredients)을 보호하고, 이들 기능성 성분들의 처리(handling), 안정성, 및 효능(efficacy)을 개선하기 위한 것이다.

안정한 에멀젼은 육안검사 및/또는 점성측정(viscosity measurements)하여 확인했을 때 실온 또는 약간 높은 온도에서 분리되지 않는 에멀젼으로 정의된다. 다음의 온도는 고온(elevated temperatures)을 정의하는데 사용되는 온도의 최소값 또는 최대값을 나타낼 수 있고 또는 조합되어 고온을 정의하는데 사용되는 온도의 범위를 생성할 수 있다: 20℃, 21℃, 22℃, 23℃, 24℃, 25℃, 26℃, 27℃, 28℃, 29℃, 30℃, 31℃, 32℃, 33℃, 34℃, 35℃, 36℃, 37℃, 38℃, 39℃, 40℃, 41℃, 42℃, 43℃, 44℃, 및 45℃. 월(months)로 나타낸 다음의 시간(time periods)은, 상술한 바와 같은 고온에서 에멀젼이 얼마나 오래 안정성을 유지해야 하는지의 요건을 정의하는데 사용되는 최소값 또는 최대값을 나타낼 수 있고 또는 조합되어 상기 요건을 정의하는데 사용되는 범위를 생성할 수 있다: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 또는 24 개월. 예를 들어, 안정한 에멀젼은 최대 약 40℃의 온도에서 4개월 동안 분리되지 않는 에멀젼으로, 또는, 또다른 실시예에서, 주위 온도(ambient temperature)(예를 들어, 20℃ 및 25℃사이)에서 6개월 동안 분리되지 않는 에멀젼으로 정의될 수 있다. 추가적으로, 안정한 에멀젼은 미생물학적 성장을 방지하는데 이상적인 수분 함량을 함유하고, 사람의 소비에 관한 안전지침 이내에 부합한다.

갑각류 어획물은 상술한 바와 같이 첫 번째 단계에서 분해된다. 두 번째 단계에서, 분해된 갑각류 어획물은 단백질분해효소와 접촉되어 가수분해된 갑각류 어획물을 제공한다. 이 단계에서, 효소(들)의 선택은 그 효소(들)가 인지질이 안정한 에멀젼을 형성하는 것을 저해하지 않는다는 것을 보장하는데 중요하다. 접촉 단계를 위한 파라미터는 상술한 바와 같다.

세 번째 단계에서, 가수분해된 갑각류 어획물은 분리되어 안정한 인지질 에멀젼을 제공한다. 세 번째 단계는 초임계 공정(supercritical processing)과 같은 유체 추출 공정(fluid extraction process)을 포함할 수 있다.

안정한 단백질 인지질 에멀젼의 수분함량은 각각 최소값 및 최대값을 나타내거나 조합되어 범위를 생성할 수 있는 다음의 값 중 임의의 것일 수 있다: 40% v/v, 41% v/v, 42% v/v, 43% v/v, 44% v/v, 45% v/v, 46% v/v, 47% v/v, 48% v/v, 49% v/v, 50% v/v, 51% v/v, 52% v/v, 53% v/v, 54% v/v, 55% v/v, 56% v/v, 57% v/v, 58% v/v, 59% v/v, 및 60% v/v. 예를 들어, 바람직한 수분함량은 약 45-55 % v/v이다.

본 발명의 또다른 측면은 물, 단백질, 및 지질을 포함하는 안정한 단백질 인지질과 관련이 있다.

갑각류 오일(Crustacean Oil)

본 발명의 또다른 측면은 갑각류 오일을 제조하는 방법에 관한 것이다. 본 방법은 갑각류 어획물을 분해하여 단백질을 포함하는 분해된 갑각류 어획물을 제공하는 단계; 분해된 갑각류 어획물을 하나 이상의 단백질분해효소와 접촉시켜 상기 단백질을 실질적으로 변성시키지 않으면서 가수분해된 갑각류 어획물을 제공하는 단계; 및 상기 가수분해된 갑각류 어획물을 분리하여 PPC를 제공하는 단계;를 포함한다. 이들 단계는 상술되어 있다. 본 방법은 또한 PPC로부터 갑각류 오일을 추출하는 단계를 포함하는 네 번째 단계를 포함한다.

추출 단계는 바람직하게는 유체 추출을 사용하여 PPC로부터 오일을 분리하는 단계를 포함한다. 바람직한 유체는 초임계 CO₂(supercritical CO₂), 에탄올, 아세톤, 및/또는 C₁-C₃ 1가 알코올(C₁-C₃ monohydric alcohol)을 포함한다. 초임계 CO₂는 기체처럼 용기를 채우기 위해 특성이 확장되지만, 액체의 것과 같은 밀도를 유지를 갖는 임계 온도 및 임계 압력 이상에 놓인 액체 상태의 CO₂를 포함하는 임의의 혼합물을 지칭한다. 이산화탄소는 31.1℃ 및 72.9 atm/7.39 MPa 이상에서 초임계가 된다.

PPC로부터 갑각류 오일을 추출하는 일부 방법이 Bruheim 등의 미국 특허 제9,034,388호에 기술되어 있으며, 이 내용이 전체로서 참고문헌으로 통합되어 있다. 초임계 공정(Supercritical processing)이 또한 Bruheim 등의 미국 특허 제9,068,142호에 기술되어 있으며, 이 내용이 전체로서 참고문헌으로 통합되어 있다.

예를 들어, 갑각류 오일은 두 단계의 공정을 이용하여 PPC로부터 추출될 수 있다. 단계 1에서, 중성 지방질(neutral lipid)은 순수한(neat) 초임계 CO₂ 또는 CO₂에 약 1-10%의 공용매(co-solvent)(예를 들어, 에탄올)를 더한 것으로 추출함으로써 제거될 수 있다. 단계 2에서, 갑각류 오일은 약 10-30%의 에탄올과 조합한 초임계 CO₂를 사용하여 추출될 수 있다.

바람직한 갑각류 오일은 크릴 오일이고, 분해된 갑각류 어획물은 바람직하게는 분해된 크릴이다.

갑각류 오일은 바람직하게는 약 400-500 g/Kg의 인지질 및 약 200-260 g/Kg의 오메가-3 지방산(fatty acids)을 포함한다.

하나 이상의 기타 영양 오일(nutritional oils)은 본 발명의 갑각류 오일과 합해져 건강상의 이익을 갖는 단일 복용 형태(single dosage form)를 생성할 수 있다. 영양 오일은 기타 해양 공급원, 식물 공급원, 또는 기타 동물 공급원으로부터 유래할 수 있다. 영양 오일의 일부 예시는 식물성 오일(아마씨 오일(flaxseed oil), 호박씨 오일(pumpkinseed oil), 카놀라 오일(canola oil), 대두유(soybean oil), 또는 월넛 오일(walnut oil) 같은 것), 어유(fish oil), 해표유(seal oil), 미세조류 오일(microalgae oil), 홍합 오일(mussels oil), 및 새우 오일(shrimp oil)을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 바람직한 추가적인 해양 공급원은 초록입홍합 오일(green-lipped mussel oil)이다.

상술한 갑각류 오일은 다양한 건강상의 이익을 위해, 인간 및 개와 같은 동물에게 투여하기에 적합하다. 예를 들어, 개와 같은 애완동물은 크릴 오일 캡슐이 직접 투여되거나, 크릴 오일이 직접 이들의 음식에 넣어질 수 있다.

본 발명의 또다른 측면은 추출 단계 없이, 즉, 추출 단계가 없는 경우에 갑각류 오일을 생성하는 방법에 관한 것이다. 본 방법은 갑각류 어획물을 분해하여 단백질을 포함하는 분해된 갑각류 어획물을 제공하는 단계; 분해된 갑각류 어획물을 단백질분해효소와 접촉시켜 상기 단백질을 실질적으로 변성시키지 않으면서 가수분해된 갑각류 어획물을 제공하는 단계; 및 가수분해된 갑각류 어획물을 분리하여 유리 갑각류 오일(free crustacean oil)을 제공하는 단계;를 포함한다. 바람직한 단백질분해효소는 거의 완전한 가수분해를 제공할 수 있는 효소로서 갑각류 오일을 유리 오일(free oil)로 방출하는 것들이다. 예를 들어, 바람직한 단백질분해 효소는 바실러스 리체니포르미스로부터 유래한 산성, 중성, 및 알칼리성 프로테아제의 혼합물이다.

본 명세서 전반에서 "일 실시양태(one embodiment)", "실시양태(an embodiment)", "일 실시예(one example)", 또는 "실시예(an example)"라고 언급하는 것은 그 실시양태 또는 실시예와 관련되어 기술된 구체적인 특징, 구조 또는 특성이 본 실시양태들의 적어도 하나의 실시양태에 포함된다는 것을 의미한다. 따라서, 본 명세서 전반에 걸쳐 다양한 위치에서의 "일 실시양태에 있어서(in one embodiment)", "실시양태에 있어서(in an embodiment)", "일 실시예(one example)", 또는 "실시예(an example)"라는 구절(phase)의 등장은 반드시 동일한 실시양태 또는 실시예를 지칭하는 것은 아니다. 나아가, 구체적인 특징, 구조, 또는 특성은 임의의 적절한 조합 및/또는 하나 이상의 실시양태 또는 실시예의 하위-조합과 합해질 수 있다. 게다가, 본원에서 제공된 도면은 본 기술분야의 통상의 기술자에게 설명하기 위한 목적임이 이해될 것이다.

나아가, 달리 명시적으로 언급되지 않은 한, "또는(or)"는 배타적인(exclusive) "또는"이 아닌, 포괄적인(inclusive) "또는"을 나타내는 것이다. 예를 들어, 조건 A 또는 B(condition A or B)는 다음 중 어느 하나로 만족된다: A가 참이고(또는 존재함) B가 거짓(또는 존재하지 않음); A가 거짓이고(또는 존재하지 않음) B가 참(또는 존재함); 및, A 및 B가 모두 참(또는 존재함).

실시예

잡은 후 30분 이내에, 신선한 크릴을 절단기를 사용해 대략 3-6mm 크기의 입자로 채썬다(shredded). 이 때 크릴의 온도는 대략 1-2℃이다. 신선한 물(크릴 중량의 최대 50% w/w까지) 및 효소(크릴 중량의 약 0.2% w/w)의 혼합물을 첨가하고 약 50℃의 온도로 가열한다. 가수분해는 대략 30분이 소요된다. 효소의 양, 온도, 및 가수분해의 시간은 가수분해 동안 크릴 단백질이 변성되지 않도록 중요하게(critically) 선택한다.

가수분해 후에, 껍데기는 체 또는 디캔터로 주요 공정 라인으로부터 분리한다. 이어서 주요 공정 라인의 가수분해된 크릴은 저온살균하여 위생학적 품질(hygienic)을 보장하고 효소를 불활성화시킨다. 저온살균은 90℃에서 최소 10분 동안 이루어진다. 가수분해된 크릴은 이어서 역학적으로 과잉의 수분을 제거하기 위한 세디캔터(sedicanter) 및 저온 진공 건조(low temperature vacuum drying)를 사용해 건조시킨다. 결과물은 PPC이다.

크릴을 가수분해단계 후의 디캔터 단계가 제거된다는 점을 제외하고, 실시예 1에 나타낸 바와 같이 가공한다. 가수분해 후에, 크릴은 디캔터를 건너뛴다. 따라서, 크릴 껍데기는 가수분해된 크릴 내에 남아있고, 하위 주요 공정 라인을 따라 저온살균을 진행하고 이어서 세디캔터 및 저온 진공 건조을 진행한다.

따라서, 크릴 껍데기는 PPC와 혼합된 상태를 유지한다. 크릴 껍데기를 생성물과 혼합시키는 것이 유리한데, 이것은 껍데기가 단단한 생성물이 용이하게 분해될 수 있게 하고 공정 중 유동성(flowability)을 증가시키기 때문이다. 또다른 이점은 가수분해 후에도 여전히 껍데기에 연결되어 있는 임의의 작은 단백질 부분(small protein fraction)이 껍데기 밖으로 분리되는 대신 생성물과 함께 여전히 유지된다는 것이다.

껍데기의 존재로 인한 생성물 내의 과잉의 플루오르화물은 초임계 추출하는 동안 후속적으로 제거할 수 있다.

크릴을 가수분해한 후에, 크릴 껍데기를 주요 공정 라인으로부터 분리한다. 그러나, 껍데기는 불활성화 공정 및 세디캔터를 건너뛴 후에, 즉, 건조기(dryer) 이전에 주요 공정 라인에 재도입한다.

따라서, 본 발명의 바람직한 실시양태를 기술하였으나, 본 기술분야의 통상의 기술자들은 본 발명의 사상을 벗어나지 않고, 본 명세서의 청구범위의 진정한 범위 내에 포함되는 추가적인 변형 및 변화를 모두 포함하는 기타의 실시양태가 이루어질 수 있음을 깨달을 것이다.

500 kg의 크릴(5 mm로 다져진 것)을 500 kg의 물에 첨가한다. Tailorzymes사의 Endocut/Exocut를 각각 0.4% 및 0.04%의 용량으로 첨가한다. 반응을 55℃에서 2시간 동안 진행한다. 디캔터는 800 ltr/시간의 유동 속도로 5400 rpm에서 작동시킨다. 분리기는 약 8200 rpm, 1000 ltr/시간의 유동 속도에서, 그리고 300초마다 슈팅(shooting)하도록 작동시킨다. 슈팅시간은 가수분해물이 방출되는 시간을 지칭한다.

실시예 1의 물질균형(Mass balance)

생성물	질량(mass) (kg)	질량 (%)	건물량(Dry matter) (%)	수확량 (%)
껍데기	55	5.7	30	3.44
가수분해물	700	73	9.5	13.85
PPC	160	16.7	25	8.33
손실	45	4.6

500 kg의 크릴을 500 kg의 물에 첨가한다. Endocut/Exocut를 각각 0.4% 및 0.04%의 용량으로 첨가한다. 반응 온도는 55℃이고 반응 시간은 2시간이다.

디캔터는 5400 rpm, 유동 800 ltr/시간에서 작동시킨다. 온도는 90도까지 증가시키고, 가수분해물은 8200 rpm, 유동 1000 ltr/시간에서 작동하는 분리기 상에서 가공하였다. 가수분해물의 슈팅은 매 900초마다 슈팅되도록 단계적으로 증가시켰다.

실시예 2의 물질균형

생성물	질량 (kg)	질량 (%)	건물량 (%)	수확량 (%)
껍데기	43	7.17	28	4.3
가수분해물	409	68.17	9.5	12.95
PPC	105	17.50	25	8.75
손실	43	7.17

300kg의 크릴을 300 kg의 물 및 Corrolase 7089 (0.15%의 용량)에 첨가한다. 반응은 디캔터(껍데기 제거)에 들어가기 전에 1 시간의 총 반응 시간 동안 55℃의 온도에서 수행하고, 불활성화시키기 전에 추가로 2시간 수행한다.

디캔터는 2800 rpm, 유동 650 ltr/시간에서 작동시킨다. 분리기는 약 8200 rpm에서, 유동 1000 ltr/시간에서, 그리고 매 300초마다 슈팅하도록 작동시켰다. 유리 오일(free oil)은 형성되지 않는다.

실시예 3의 물질균형

생성물	질량 (kg)	질량 (%)	건물량 (%)	수확량 (%)
껍데기	40	4.2	30	2.5
가수분해물	750	78	9.5	14.84
PPC	120	12.5	25	6.25
손실	50	5.3

220 kg의 크릴을 55 kg의 물 및 Corrolase 7089 (0.15%의 용량)과 혼합한다. 반응은 디캔터 단계(decanting) 전에 55℃의 온도에서 1시간의 반응 시간으로 수행하고, 불활성화 전에 추가로 2시간을 수행한다.

디캔터는 2800 rpm, 유동 650 ltr/시간에서 작동시켰다. 분리기는 약 8200 rpm, 유동 1000 ltr/시간에서 매 300초마다 슈팅하도록 작동시켰다. 유리 오일은 형성되지 않는다.

실시예 4의 물질균형

생성물	질량 (kg)	질량 (%)	건물량 (%)	수확량 (%)
껍데기	26	9.45	32	3.78
가수분해물	178	64.73	14	11.33
PPC	55	20	25	6.25
손실	16	5.82

500 kg의 크릴을 125 kg의 물 및 Endocut/Exocut (각각 0.4% 및 0.04%의 용량)과 혼합한다. 반응 온도는 55℃이다. 반응은 디캔터 단계 전에 1시간 동안 수행하고, 불활성화 전에 30분 수행한다. 디캔터: 2800 rpm, 유동 650 ltr/시간.

실시예 5의 물질균형

생성물	질량 (kg)	질량 (%)	건물량 (%)	수확량 (%)
껍데기	50	8	32	3.2
가수분해물	517	87.2	14	14.48
PPC	33	5.28	25	1.65
손실	25	4

분리기는 약 8200 rpm, 유동 1000 ltr/시간에서, 그리고 매 600초마다 슈팅되도록 작동시킨다.

설정(즉, 역압(counterpressure))을 일부 변경한 후 유리 오일을 분리기로부터 분리하는 것이 가능해졌다. 상기 오일은 다음의 조성을 가졌다 (표 6).

실시예 5 중에 형성된 유리 오일의 조성

파라미터	양
조단백질(Crude Protein) (N = 6.25)	74 g/kg
조지방(Crude fat)	443 g/kg
조회분(Crude Ash) (550℃)	40 g/kg
플루오르화물	411 mg/kg
포스파티딜콜린(Phosphatidylcholine)	93.7 g/kg
리소-포스파티딜콜린(Lyso-Phosphatidylcholine)	13.5 g/kg
포스파티딜에탄올아민(Phosphatidylethanolamine)	4.2 g/kg
N-아실-포스파티딜에탄올아민(N-acyl-Phosphatidylethanolamine)	0.5 g/kg
리소-포스파티딜에탄올아민(Lyso-Phosphatidylethanolamine)	1 g/kg
수분함량(Karl Fischer)	400 g/kg
아스타잔틴(Astaxanthine)	7.1 mg/kg

실시예 1의 가부분해물은 이어서 마이크로(micro) 및 나노-여과(nano-filtration)로 추가적으로 가공하여 300-400 달톤(Dalton)보다 작은 분자를 제거하였다.

50% DM의 가수분해물은 8의 브릭스값(brix value)까지 물로 희석하였다.

투석유물(retentate)는 분무건조(spray drying)를 이용하여 건조시켰다.

건조된 생성물을 사용하여 음료와 혼합하였고 그 결과 맛과 향이 없는 음료가 나왔다.

효소적 가수분해(enzymatic hydrolysis)는 55℃ 및 150 RPM에서 Distek Premiere 5100 Dissolution System으로 수행하였다. Endocut-02L의 효소 용량은 1 kg/톤(ton) 내지 5 kg/톤까지, Exocut-BL의 효소 용량은 0.05 kg/톤 내지 0.4 kg/톤까지 달라졌으며, 두 가지 첨가물 모두 원료를 기준으로 하였다. 원료를 4.5 mm의 그라인더 플레이트(grinder plate)를 사용하여 육류-그라인더에서 가공하였고, 아래 표에 따라 물을 첨가하였으며, 이는 모두 효소 첨가 전에 이루어졌다. 60 또는 120분의 총 반응 시간 후에, 불활성화는 가열(95℃) 수단으로 수행하였고, 체로 껍데기를 초기 분리하고, 그 뒤 남아있는 현탁액은 여과하였다. 일부 시험의 경우, 최종 불활성화는 껍데기의 분리 후에 수행하였다. 모든 분획(fractions)은 물질균형 측정 및 사후 분석을 위해 유지하고 가중(weighted)시켰다.

실험 설정

		반응 조건
ID	설명	Endocut-02L [g/kg]	Exocut-BL [g/kg]	온도 [℃]	교반(Stirring) 속도 [rpm]	반응 시간 [분]	수분 첨가[%]	불활성화
0	블라인드(Blind)	0	0	55	150	120	100%	95℃ 껍데기 포함 (incl. Shells)
1	Endocut-02L + BL	1	0	55	150	120	25%	95℃ 껍데기 포함
2	Endocut-02L + BL	4	0.4	55	150	120	100%	95℃ 껍데기 포함
3	Endocut-02L + BL	2	0.2	55	150	120	100%	95℃ 껍데기 포함
4	Endocut-02L + BL	1	0.1	55	150	120	100%	95℃ 껍데기 포함
5	Endocut-02L + BL	1	0.05	55	150	120	100%	95℃ 껍데기 포함
6	Endocut-02L	4	0	55	150	60	100%	95℃ 껍데기 제외(excl. Shells)
7	Endocut-02L + BL	4	0.4	55	150	60	100%	95℃ 껍데기 포함
8	Endocut-02L + BL	4	0.4	55	150	60	100%	95℃ 껍데기 제외
9	Endocut-02L	5	0	55	150	60	100%	95℃ 껍데기 제외
10	Endocut-02L + BL	3	0.3	55	150	60	100%	95℃ 껍데기 제외

가수분해물의 관능 평가(Sensorial evaluation)

		반응 조건					맛
ID	설명	Endocut-02L [g/kg]	Exocut-BL [g/kg]	반응 시간 [분]	수분 첨가[%]	불활성화	단맛	쓴맛	전체적인 느낌(impression)
6	Endocut-02L	4	0	60	100%	95℃ 껍데기 제외			++
7	Endocut-02L + BL	4	0.4	60	100%	95℃ 껍데기 포함			+++
8	Endocut-02L + BL	4	0.4	60	100%	95℃ 껍데기 제외			+++
9	Endocut-02L	5	0	60	100%	95℃ 껍데기 제외			+
10	Endocut-02L + BL	3	0.3	60	100%	95℃ 껍데기 제외			++

Claims (39)

1. 하기 단계를 포함하는, 단백질 인지질 복합체(protein phospholipid complex)를 제조하는 방법:
   a) 갑각류 어획물(crustacean catch)을 분해(disintegration)하여, 단백질을 포함하는 분해된 갑각류 어획물을 제공하는 단계;
   b) 상기 분해된 갑각류 어획물을 단백질분해효소(proteolytic enzyme)와 접촉시켜 상기 단백질을 실질적으로 변성시키지 않으면서 가수분해된 갑각류 어획물을 제공하는 단계; 및
   c) 상기 가수분해된 갑각류 어획물을 분리하여 단백질 인지질 복합체를 제공하는 단계.
   
2. 제1항에 있어서,
   상기 접촉시키는 단계는 제2 효소를 더 포함하는 것인, 방법.
   
3. 제1항 또는 제2항에 있어서,
   상기 제2 효소는 키티나아제(chitinase), 콜라게나아제(collagenase), 또는 다른 단백질분해효소(proteolytic enzyme)를 포함하는 것인, 방법.
   
4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
   상기 단백질분해효소는 산성, 중성, 및 알칼리성 프로테아제(proteases)의 혼합물인 것인, 방법.
   
5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서,
   상기 단백질분해효소는 제1 프로테아제 혼합물 및 제2 프로테아제 혼합물을 포함하는 것인, 방법.
   
6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서,
   상기 제1 프로테아제 혼합물은 적어도 하나의 알칼리성 프로테아제를 포함하는 것이고; 상기 제2 프로테아제 혼합물은 산성 프로테아제, 중성 프로테아제, 및 알칼리성 프로테아제를 포함하는 것인, 방법.
   
7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
   상기 제1 프로테아제 혼합물은 상기 분해된 갑각류 어획물의 총 중량의 0.3-0.5%를 구성하는 것이고; 상기 제2 프로테아제 혼합물은 상기 분해된 갑각류 어획물의 총 중량의 0.03-0.05%를 구성하는 것인, 방법.
   
8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
   상기 프로테아제는 바실러스 리체니포르미스(Bacillus Licheniformis)로부터 유래한 것인, 방법.
   
9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서,
   단계 (b)의 접촉은 세포벽분해효소(cell wall degrading enzyme)와 접촉시키는 것을 포함하는 것인, 방법.
   
10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 분해된 갑각류 어획물은 단백질분해효소와 100분 이상 접촉되어 가수분해된 갑각류 어획물을 제공하는 것인, 방법.
    
11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 갑각류 어획물은 크릴(krill)을 포함하는 것인, 방법.
    
12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 분해는 펄핑(pulping), 밀링(milling), 그라인딩(grinding), 또는 슈레딩(shredding) 중 하나 이상을 포함하는 것인, 방법.
    
13. 제1항 내지 제12 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 접촉은 유기용제(organic solvent)를 포함하는 것인, 방법.
    
14. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 접촉은 상기 분해된 갑각류 어획물을 45-75 ℃의 온도 범위에서 배양하는 단계를 포함하는 것인, 방법.
    
15. 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 단백질 인지질 복합체는 15% w/w 미만의 수분함량을 갖는 것인, 방법.
    
16. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 갑각류 어획물 단백질은 소화효소(digestive enzymes) 및 기타 단백질을 포함하는 것인, 방법.
    
17. 하기 단계를 포함하는, 안정한 단백질 인지질 에멀젼(emulsion)을 제조하는 방법:
    a) 갑각류 어획물을 분해(disintegration)하여 분해된 갑각류 어획물을 제공하는 단계;
    b) 상기 분해된 갑각류 어획물을 단백질분해효소와 접촉시켜 가수분해된 갑각류 어획물을 제공하는 단계; 및
    c) 상기 가수분해된 갑각류 어획물을 분리하여 안정한 단백질 인지질 에멀젼을 제공하는 단계.
    
18. 제17항에 있어서,
    상기 접촉은 제2 효소를 더 포함하는 것인, 방법.
    
19. 제17항 또는 제18항에 있어서,
    상기 제2 효소는 키티나아제, 콜라게나아제, 또는 다른 단백질분해효소를 포함하는 것인, 방법.
    
20. 제17항 내지 제19항에 있어서,
    상기 단백질분해효소는 산성, 중성, 및 알칼리성 프로테아제의 혼합물인 것인, 방법.
    
21. 제17항 내지 제20항에 있어서,
    상기 갑각류 어획물은 크릴을 포함하는 것인 방법.
    
22. 제17항 내지 제21항에 있어서,
    상기 분해(disintegration)는 펄핑, 밀링, 그라인딩, 또는 슈레딩 중 하나 이상을 포함하는 것인, 방법.
    
23. 제17항 내지 제22항에 있어서,
    상기 접촉은 유기용제를 포함하는 것인, 방법.
    
24. 제17항 내지 제23항에 있어서,
    상기 접촉은 상기 분해된 갑각류 어획물을 45-75 ℃의 온도 범위에서 배양하는 단계를 포함하는 것인, 방법.
    
25. 제17항 내지 제24항에 있어서,
    상기 안정한 단백질 인지질 에멀젼은 45-55%의 수분함량 v/v를 포함하는 것인, 방법.
    
26. 물, 단백질 및 지질을 포함하는 안정한 단백질 인지질 에멀젼.
    
27. 하기 단계를 포함하는, 갑각류 오일을 제조하는 방법:
    a) 갑각류 어획물을 분해(disintegration)하여, 단백질을 포함하는 분해된 갑각류 어획물을 제공하는 단계;
    b) 상기 분해된 갑각류 어획물을 하나 이상의 단백질분해효소와 접촉시켜 상기 단백질을 실질적으로 변성시키지 않으면서 가수분해된 갑각류 어획물을 제공하는 단계; 및
    c) 상기 가수분해된 갑각류 어획물을 분리하여 갑각류 오일을 제공하는 단계.
    
28. 제27항에 있어서,
    상기 갑각류 오일은 크릴 오일이고, 상기 분해된 갑각류 어획물은 분해된 크릴인 것인, 방법.
    
29. 제27항 및 제28항에 있어서,
    상기 단백질분해효소는 산성, 중성, 및 알칼리성 프로테아제의 혼합물을 포함하는 것인, 방법.
    
30. 제27항 내지 제29항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 방법은 추출(extraction) 없이 수행되는 것인, 방법.
    
31. 갑각류 오일; 및 아마씨 오일(flaxseed oil), 호박씨 오일(pumpkinseed oil), 카놀라 오일(canola oil), 대두유(soybean oil), 월넛 오일(walnut oil), 어유(fish oil), 해표유(seal oil), 미세조류 오일(microalgae oil), 홍합 오일(mussels oil), 및 새우 오일(shrimp oil)로 이루어진 군에서 선택된 또다른 오일;을 포함하는, 영양 보충제(nutritional supplement).
    
32. 제31항에 있어서,
    상기 또다른 오일은 초록입홍합 오일(green-lipped mussel oil)인 것인, 영양 보충제.
    
33. 제31항 또는 제32항에 있어서,
    상기 갑각류 오일은 크릴 오일인 것인, 영양 보충제.
    
34. 하기 단계를 포함하는, 단백질 인지질 복합체를 제조하는 방법:
    a) 갑각류 어획물을 분해(disintegration)하여, 단백질을 포함하는 분해된 갑각류 어획물을 제공하는 단계;
    b) 상기 분해된 갑각류 어획물을 단백질분해효소와 접촉시켜 상기 단백질을 변성시키지 않으면서 가수분해된 갑각류 어획물을 제공하는 단계; 및
    c) 상기 가수분해된 갑각류 어획물을 분리하여 단백질 인지질 복합체를 제공하는 단계로서, 여기서 껍데기는 분리 단계 동안 상기 가수분해된 갑각류 어획물로부터 제거되지 않고 단백질 인지질 복합체의 일부인 것인, 단계.
    
35. 제34항에 있어서,
    상기 갑각류 어획물은 크릴인 것인, 방법.
    
36. 하기 단계를 포함하는, 단백질 인지질 복합체를 제조하는 방법:
    a) 갑각류 어획물을 분해(disintegration)하여, 단백질을 포함하는 분해된 갑각류 어획물을 제공하는 단계;
    b) 상기 분해된 갑각류 어획물을 단백질분해효소와 접촉시켜 상기 단백질은 변성시키지 않으면서 가수분해된 갑각류 어획물을 제공하는 단계; 및
    c) 상기 가수분해된 갑각류 어획물을 분리하여 단백질 인지질 복합체를 제공하는 단계로서, 다음의 단계를 포함하는 것인, 단계: (1) 상기 가수분해된 갑각류 어획물로부터 껍데기를 분리하는 단계; (2) 상기 가수분해된 갑각류 어획물을 저온살균(pasteurizing)하여 상기 효소를 불활성화시키는 단계; (3) 분리를 통해 과잉의 수분을 제거하는 단계; 및 (4) 상기 가수분해된 갑각류 어획물에 껍데기를 다시 첨가하여 단백질 인지질 복합체를 제공하는 단계.
    
37. 제36항에 있어서,
    상기 껍데기는 단계 (1)에서 필터 또는 체(sieve)로 상기 가수분해된 갑각류 어획물로부터 분리되는 것인, 방법.
    
38. 제36항 또는 제37항에 있어서,
    상기 과잉의 수분은 단계 (3)에서 수평 원심분리기(horizontal centrifuge)에 의해 제거되는 것인, 방법.
    
39. 제36항 내지 제38항에 있어서,
    상기 껍데기는 유용성(utility)의 목적으로 불용성 입자와 함께 단계 (4)에서 다시 첨가되는 것인, 방법.
    

Images