KR20200059213A - 표적화된 방사선 치료요법에 의해 유도된 혈관 무결성을 보호하는 방법 - Google Patents

표적화된 방사선 치료요법에 의해 유도된 혈관 무결성을 보호하는 방법 Download PDF

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잔센파마슈티카엔.브이.
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Abstract

표적화된 방사선 치료요법에 노출된 대상체에서 혈관 무결성을 보호하는 방법이 기재된다. 특히, TPOm과 같은 유효량의 트롬보포이에틴 (TPO) 모사체를 사용하여 방사선 치료요법 후 혈관 무결성을 보호한다.

Description

표적화된 방사선 치료요법에 의해 유도된 혈관 무결성을 보호하는 방법
전자 제출된 서열 목록에 대한 참조
본 출원은 ASCII 포맷의 서열 목록으로 2018년 7월 24일자로 작성되고 크기가 약 3.7 kb인 "서열 목록"이란 파일명으로 EFS-Web을 통해 전자 제출된 서열 목록을 포함한다. EFS-Web을 통해 제출된 서열 목록은 본 명세서의 일부이고 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
발명의 분야
본 발명은 혈관 무결성을 보호하는 방법, 보다 구체적으로 표적화된 방사선 치료요법에 노출된 대상체에서 혈관 무결성을 보호하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 유효량의 트롬보포이에틴 (TPO) 모사체를 대상체에게 투여함을 포함한다.
방사선 독성 또는 방사선 질병으로도 알려져 있는 급성 방사선 증후군 (ARS)은 매우 짧은 기간에 고용량의 투과 방사선에 의한 전신 (또는 대부분의 신체) 조사에 의해 야기되는 급성 질병이다. 이것은 이환률과 사망률을 초래할 수 있는 다단계 과정이다(참조: Waselenko et al., Ann. Intern Med. 140(12):1037-51 (2004)). 조사의 즉각적인 효과는 혈관계 내에서 나타나고 이어서 현저한 조혈 효과가 나타난다(참조: Krigsfeld et al., Radiat. Res. 180(3): 231-4 (2013)). 조사 후 24시간 이내에, 혈관 내피 세포는 백혈구 부착 및 혈관외 유출을 촉진하는 부착 분자 (예를 들어, L-셀렉틴)를 발현하고 염증 반응을 초래할 수 있다(참조: Hallahan et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 217(3):784-95 (1995); Hallahan et al., Radiat. Res. 152(1):6-13 (1999)). 이들 조기 혈관 효과는 기저막의 노출 및 출혈을 동반할 수 있고 이는 이어서 미세응고 형성을 초래한다. 미세응고 형성의 정도에 따라, 이는 이어서 혈소판 및 섬유소용해 인자 고갈을 초래할 수 있다. 혈소판 집단은 조혈 줄기 세포의 조사 고갈로 인해 효율적으로 보충될 수 없기 때문에, 혈소판감소증이 잇따라 일어나서 혈관을 더 얇아지게 하고 파종성 혈관내 응고병증으로 진행시킨다. 따라서, 혈관 내피의 보호는 방사선-유도된 손상 및 사망률을 완화시킬 수 있다(참조: Rotolo et al., J. Clin. Invest. 122(5):1786-90 (2012)).
방사선 노출 후 주변의 정상 조직에 손상을 초래하는 발병기전은 복잡하다. 이온화 방사선은 직접적인 세포 독성 (과도한 반응성 산소 종 생성), 염증 및 선천성 면역 반응을 통해 조직실질과 혈관 둘 모두에서 세포 사멸을 야기한다(참조: Kim et al., Radiat. Oncol. J. 32(3):103-15 (2014)). 일부 변화는 급성으로 (즉, 염증, 혈관 내피 손상, 미세-출혈) 일어나는 반면, 다른 변화는 방사선 노출 후 수주 내지 수개월에 나타난다 (즉, 만성 염증, 신경 기능부전, 흉터 및 섬유증). 섬유아세포 증식은 후기 단계 방사선 치료요법 (RT) 손상의 주요 구성요소이다(참조: Brush et al., Semin. Radiat. Oncol. 17(2):121-30 (2007)).
방사선-유도된 이환율과 사망률의 다양한 측면들이 혈소판 고갈로부터 비롯됨을 고려하여, 여러 연구자들은 트롬보포이에틴 (TPO)-기반 치료요법이 급성 방사선 증후군을 예방하는데 효과적인지를 평가하였다(참조: Mouthon et al., Can. J. Physiol. Pharmacol. 80(7):717-21 (2002); Neelis et al., Blood 90(7):2565-73 (1997)). 증진된 생존을 위한 잠재적인 기전은 혈관 내피에 대한 직접적인 보호 및/또는 회복 효과뿐만 아니라 골수 보호 및 혈소판 자극 효과를 포함한다. 트롬보포이에틴 (TPO)은 간에 의해 합성되고 분비되는 성장 인자이다. TPO는 (혈소판 성숙화를 자극하기 위해) 거핵세포 상의 c-mpl 및 기존 혈소판 (음성 피드백을 제공함)에 결합함으로써 혈소판 수준을 조절한다(참조: Mitchell and Bussell, Semin. Hematol. 52(1):46-52 (2015)). TPO는 또한 혈관 내피 세포 상에 위치한 c-mpl 수용체에 결합함으로써 혈관계에 직접 작용할 수 있다(참조: Langer et al., J. Mol. Cell Cardiol. 47(2):315-25 (2009)). 독소루비신 매개된 심혈관 손상(참조: Chan et al., Eur. J. Heart Fail. 13(4):366-76 (2011)), 심혈관 허혈 재관류 손상(참조: Baker et al., Cardiovasc. Res. 77(1):44-53 (2008)) 및 뇌졸중(참조: Zhou et al., J. Cereb Blood Flow Metab. 31(3):924-33 (2011))의 동물 모델에서 트롬보포이에틴의 직접적인 혈관 보호 효과를 입증하는 여러 연구가 있어 왔다. 그러나, 재조합 인간 TPO는 인간에서 실행 가능한 치료요법이 아닌데, 그 이유는 만성 혈소판 감소증을 초래할 수 있는 내인성 TPO에 대한 교차-반응성 항체가 유도되기 때문이다(참조: Li et al., Blood 98(12):3241-8 (2001)).
상당한 혈관 손상은 표적화된 방사선, 예컨대 고용량 정위적 체부 방사선 치료요법 (SBRT) 또는 정위적 방사선 수술 (SRS)에 의해 유도될 수 있다(참조: Park et al., Radiation Research: March 2012, Vol. 177, No. 3, pp. 311-327). 방사선-유도된 혈관 손상은 고용량 표적화된 방사선에 대한 인간 종양의 반응에서 중요한 역할을 수행할 수 있는 것으로 시사되고, 예를 들어, 종양 내 미세환경에 대한 손상은 종양 세포의 간접적인 사멸을 초래할 수 있다. 그러나, 표적화된 방사선으로 치료를 받은 많은 환자들은 치료 결과로 부작용이 발생한다. 예를 들어, 치유 의도로 표적화된 방사선 치료요법으로 치료를 받은 두경부 편평 세포 암종 (HNSCC)을 앓는 환자의 90%는 부작용을 발생시키고, 이는 피부염, 구강 건조증 (침샘 생성 손실), 및 구강 점막염 (구강 인두 및/또는 식도 점막의 염증 및 궤양)을 포함한다(참조: Birer et al., Radiation Research, 188(1):94-104 (2017)). 혈관 손상이 표적화된 방사선 후 역할을 수행할 것으로 추정되는 또 다른 예는 전립선 암의 치료를 위한 전립선의 표적화된 조사 후 발기 기능부전과 관련된다(참조: Gaither et al., The Journal of Sexual Medicine, 2017, 14(9):1071-8 and Nolan et al., Int J Radiat Oncol Biol Phys. 2015, 91(4):796-806). 표적화된 방사선 치료요법에 의해 유도된 혈관 변화에 대한 TPO 또는 TPO 모사체의 효과는 보고된 적이 없다.
방사선 치료요법 후 정상 조직을 보호하는 방법 및 조성물에 대한 중요하고 충족되지 않은 요구가 존재한다.
발명의 개요
놀랍게도 본 발명에서 트롬보포이에틴 (TPO) 모사체가 표적화된 방사선 치료요법 후 정상 조직에서 혈관계를 보호하고 혈관 무결성을 보존한다는 것을 발견하였다. 따라서, 본원에는 표적화된 방사선 치료요법에 노출된 대상체에서 혈관 무결성을 보호하는 방법이 제공된다. 상기 방법은 표적화된 방사선 치료요법에 노출된 대상체에게 유효량의 트롬보포이에틴 (TPO) 모사체를 투여함을 포함하고, 바람직하게 상기 TPO 모사체는 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하고, 보다 바람직하게 TPO 모사체는 RWJ-800088 또는 로미플로스팀이다. 본원의 구현예에 따라, TPO 모사체는 대상체가 표적화된 방사선 치료요법에 노출된 후 적어도 약 10분 내지 적어도 약 420분에 투여되고, 보다 바람직하게, TPO 모사체는 하기 화학식 I의 구조를 갖는 TPOm 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 에스테르이며, 유효량의 TPO 모사체의 대상체로의 투여는 대상체의 혈관 무결성을 보호한다:
[화학식 I]
Figure pct00001
상기 화학식 I에서,
MPEG는 메톡시폴리에틸렌 글리콜 또는 메톡시폴리(에틸렌 글리콜)을 나타낸다.
특정 구현예에서, 표적화된 방사선 치료요법에 노출된 대상체는 암 치료를 받고 있다. 암은, 예를 들어, 전립선암, 두경부암, 간세포 암종, 결장암, 폐암, 흑색종 및 유방암으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.
특정 구현예에서, TPO 모사체는 대상체가 표적화된 방사선 치료요법에 노출된 후 적어도 약 20분 내지 적어도 약 360분, 적어도 약 40분 내지 적어도 약 240분, 적어도 약 60분 내지 적어도 약 180분, 또는 이들 사이의 임의의 시간에 대상체에게 투여된다.
특정 구현예에서, 상기 대상체는 유효량의 TPO 모사체의 1회 용량으로 투여된다.
특정 구현예에서, 유효량의 TPO 모사체는 정맥내, 근육내, 피내 또는 피하로 대상체에게 투여된다. 바람직한 구현예에서, TPO 모사체는 피하 주사에 의해 투여된다.
또 다른 일반적인 양상에서, 본원은 이를 필요로 하는 대상체에서 혈관 무결성을 보존하기 위한 키트에 관한 것이다. 상기 키트는 유효량의 TPO 모사체 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물 및 혈관 무결성을 보존하기 위한 적어도 하나의 추가 치료제 또는 장치를 포함한다. 임의로, 상기 키트는 TPO 모사체를 대상체에게 투여하기 위한 도구를 추가로 포함한다. 바람직하게, 상기 키트는 서열번호 1의 아미노산 서열을 갖는 TPO 모사체, 보다 바람직하게 RWJ-800088 또는 로미플로스팀의 TPO 모사체를 포함한다.
본원의 바람직한 구현예에 대한 하기의 상세한 설명뿐만 아니라 전술한 요약은 첨부된 도면과 함께 판독하는 경우 더 잘 이해될 것이다. 그러나, 본원은 도면에 나타낸 정확한 구현예로 제한되지 않음이 이해되어야 한다. 도 1 내지 10에서 사용된 "TPOm"은 RWJ-800088을 지칭한다.
도 1은 전립선에 대해 20 Gy 표적화된 방사선 치료 (RT) 후 치료에 의한 평균 래트 체중을 보여준다. 도 1a는 모든 래트가 치료에 상관없이 방사선 후 체중이 계속 증가함을 입증하는 그래프를 보여준다. 도 1b는 체중 증가율 (평균 g/주/래트)이 그룹 간에 유의하게 상이했음을 입증하는 그래프를 보여주고, TPOm/샴과 식염수/RT 래트 간에서만 유의한 쌍별 차이를 나타내고 *는 p<0.01을 나타낸다. N=8-9 래트/그룹.
도 2는 TPOm이 전립선 RT 후의 손상된 음부 동맥 혈관확장으로부터 래트를 보호한다는 것을 입증하는 그래프를 보여준다. RT 후 9주 째에, 음부 동맥은 심초음파 검사를 사용하여 시각화하였고 직경은 0.4 mg/kg의 정맥내 하이드랄라진 주입 전 (이전(Pre)) 및 후 (이후(Post))에 측정하였다. *는 이전-동맥 및 이후-동맥 직경 간의 유의한 (p<0.05) 차이를 나타낸다 (쌍을 이룬 t-시험 (paired t-test)). N= 5-8마리 래트/그룹.
도 3은 방사선장 (radiation field) 외부의 혈관계를 보호한다는 것을 보여준다. 도 3a는 RT-이후 9주 째에 CD31에 대해 염색된 혈관 내피 세포의 면역형광 이미지를 보여준다. 면역형광 이미지를 생성하기 위해, 음경 조직을 절개하고, 냉동절제하고, 혈관 내피 세포를 CD31 면역형광을 사용하여 시각화하였다. 도 3b는 음경 동맥의 단면적을 입증하는 그래프를 보여준다. 도 3c은 둘레의 픽셀/마이크론으로서 CD31 밀도 (CD31 발현/동맥 둘레)의 정량화를 입증하는 그래프를 보여준다. N=4-6/그룹.
도 4는 래트에서 전립선 RT (20 Gy) 유도된 발기 기능부전 (ED)가 RT 이후 10분 째에 투여된 단일 용량의 TPOm에 의해 방지되지 않았음을 입증하는 그래프를 보여준다. 해면 신경 자극 후 해면체내 압력 (ICP)을 RT (20 Gy) 후 9주 째에 시험하였고 평균 동맥압 (MAP)으로 정규화하였다. 신경은 4V, 6V 또는 8V로 자극하였고, 각각의 래트로부터 최상의 반응이 분석을 위해 사용하였다. 별표 *는 방사선의 유의한 효과를 나타낸다 (p=0.004, 양방향 ANOVA). N=6-7마리 래트/그룹.
도 5는 RT + TPOm 아암에서 마우스를 사용하여 입증한, 시간 활성 곡선 (TAC: time activity curve)의 추출 스킴을 보여준다. 도 5a는 연구 초기 시점에서 덱스트란의 발현을 보여주는 혈관계 주위에서 선택된 직사각형 관심 영역 (ROI: region of interest)의 이미지를 보여준다. 도 5b는 도 5a의 ROI 내에서 강도의 80th 백분위수에 대한 임계값에 의해 식별된 혈관계의 하위 영역의 이미지를 보여준다. 도 5c는 연구의 마지막 시점에서 보여지는 도 5a에서와 동일한 영역의 이미지를 보여준다. 도 5a에 비해 증진된 혈관외 발현을 주목한다. 도 5d는 10초 간격으로 150초 시점에서 측정된, 도 5b에서 전체 시야 또는 전체 TAC와 혈관 TAC 둘 다에 대한 TAC 또는 ROI를 입증하는 그래프를 보여준다. 각 관찰은 해당 시점에서 관련 영역 내 모든 픽셀에 대한 평균 발현이다. 각 유형의 ROI에 대해 3개의 선이 있는데, 이들은 3개의 연속적인 조직 슬라이스를 나타낸다. 혈관 TAC (적색)는 모든 시점에서 전체 TAC (검정색)보다 픽셀 강도가 높음에 주목한다.
도 6은 도 5에 나타낸 연구에 대해 추출된 시간 활성 곡선 (TAC)에 기초한 파틀락 (Patlak) 분석을 사용한 투과율의 슬라이스별 추정을 입증하는 그래프를 보여준다. 점은 식(1.5)에 주어진 바와 같이, 양 x(t) 대 y(t)의 관찰된 파틀락 플롯을 보여준다. 선은 데이터에 적합한 최소 제곱을 보여준다. 적합선의 식이 주어진다. 투과율은 적합선의 계수로부터 추정된다. 슬라이스에 걸쳐 추정된 계수의 변산도가 낮음에 주목한다.
도 7은 치료 이전, 조사 이후 3일 및 7일 째에 덱스트란 투과율을 입증하는 그래프를 보여주고; 식염수 및 TPOm (300 ug/kg)은 조사 이후 6시간 째에 투여하였다.
도 8은 식염수/RT 그룹에서 개별 동물에 대한 RT 이후 3일 및 7일 째에 대한 투과율 간에 상관관계가 없음을 입증하는 그래프를 보여준다. 도면에서 각각의 포인트는 주어진 동물에서 모든 슬라이스의 평균 추정 투과성 값이다.
도 9는 아크리딘 오렌지 생체 현미경 (acridine orange intravital microscopy)을 사용하여 평가된 백혈구/내피 세포 상호작용을 보여준다. 도 9a는 1초에 걸쳐 3개의 주변 백혈구가 이동하는 것을 보여주는 대표적인 일련의 이미지를 보여준다. 혈관 내피를 따라 구르는 백혈구는 주변 혈류와 비교하여 이들의 느린 속도로 인해 용이하게 구분되었다. 도 9b는 각 마우스에 대해 플롯팅된 전단 속도 대 L/E 상호작용을 입증하는 그래프를 보여주고, 기울기를 계산하였다. 도 9c는 RT가 전단 속도와 L/E 상호작용 간의 관계를 상당히 변화시켰지만, TPOm은 보다 높은 전단 속도에서 L/E 상호작용을 방지했음을 입증하는 그래프를 보여준다.
도 10은 아크리딘 오렌지 분석으로부터의 혈관 특징을 보여준다. 최대 4개의 혈관을 마우스당 선택하였고 각각에 대해 혈류 속도 및 혈관 직경을 결정하였다. 전단 속도는 식 ((속도)x(8))/직경을 사용하여 계산하였다. 각 마커는 마우스당 평균 값을 나타내고 오차 막대는 평균 ± SEM을 나타낸다. 치료 그룹 간에 유의한 차이는 없었다.
본원의 개시내용은 표적화된 방사선 치료요법에 노출된 대상체에서 혈관 무결성을 보호하기 위한 치료제로서 트롬보포이에틴 (TPO) 모사체의 식별에 적어도 부분적으로 기초한다. TPO 모사체는 대상체의 혈관계, 특히 건강한 조직의 혈관계에 대한 방사선의 부정적인 영향으로부터 보호하기 위해 제형화될 수 있고 표적화된 방사선 치료요법에 노출된 대상체에게 투여될 수 있다.
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달리 정의되지 않는 한, 본원에 사용된 모든 기술 및 과학 용어들은 본 발명이 속하는 당업자에 의해 통상적으로 이해되는 바와 동일한 의미를 갖는다. 그렇지 않으면, 본원에 사용된 특정 용어들은 본원 명세서에 명시된 의미를 갖는다.
본원에 그리고 첨부된 청구항에 사용된 바와 같이, 단수 형태 "a", "an" 및 "the"는 문맥상 명백히 달리 나타내지 않는 한 복수의 언급을 포함한다는 것에 주목해야 한다.
달리 언급되지 않는 한, 본원에 기재된 농도 또는 농도 범위와 같은 임의의 수치 값은 모든 경우에 "약"이라는 용어에 의해 변형되는 것으로 이해되어만 한다. 따라서, 수치 값은 전형적으로, 인용된 값의 ± 10%를 포함한다. 예를 들어, 1 mg/mL의 농도는 0.9 mg/mL 내지 1.1 mg/mL를 포함한다. 마찬가지로, 1% 내지 10% (w/v)의 농도 범위는 0.9% (w/v) 내지 11% (w/v)를 포함한다. 본원에 사용된 바와 같이, 수치 범위의 사용은 문맥상 명백히 달리 나타내지 않은 한, 모든 가능한 하위 범위, 상기 범위 내의 정수를 포함한 그 범위 내의 모든 개별 수치 값 및 그 값의 분수를 명백히 포함한다.
달리 나타내지 않는 한, 일련의 요소들 앞에 있는 "적어도"라는 용어는 일련의 모든 요소들을 지칭하는 것으로 이해되어야 한다. 당업자는 통상의 실험만을 사용하여 본원에 기재된 본 발명의 특정 구현예에 대한 많은 등가물을 인식하거나 확인할 수 있을 것이다. 그러한 등가물은 본 발명에 포함되는 것으로 의도된다.
본원에 사용되는 바와 같이, 용어 "포함하다 (comprises)", "포함하는 (comprising)", "포함하다 (includes)", "포함하는 (including)", "갖는다 (has)", "갖는 (having)", "함유하다 (contains)" 또는 "함유하는 (containing)" 또는 이의 임의의 다른 변형은 언급된 정수 또는 정수 그룹을 포함하지만 임의의 다른 정수 또는 정수 그룹의 배제를 의미하지 않는 것으로 이해될 것이며, 비-배타적이거나 개방적 (open-ended)인 것으로 의도된다. 예를 들어, 요소들 목록을 포함하는 조성물, 혼합물, 공정, 방법, 물품 또는 장비는 필수적으로 이들 요소들로만 제한되지 않으며 명백히 나열되지 않거나 그러한 조성물, 혼합물, 공정, 방법, 물품 또는 장비에 고유한 다른 요소들을 포함할 수 있다. 추가로, 달리 명백히 언급되지 않는 한, "또는"은 포괄적이거나 배타적이지 않음을 지칭한다. 예를 들어, 조건 A 또는 B는 하기 중 어느 하나에 의해 충족된다: A는 참 (또는 존재함)이고 B는 거짓 (또는 존재하지 않음)이고, A는 거짓 (또는 존재하지 않음)이고 B는 참(또는 존재함)이고, A 및 B 둘 다는 참 (또는 존재함)이다.
본원에 사용된 바와 같이, 다수 언급된 요소들 간의 접속사 용어 "및/또는"은 개별 및 조합된 옵션 둘 모두를 포함하는 것으로 이해된다. 예를 들어, 2개의 요소들이 "및/또는"에 의해 결합되는 경우, 제1의 옵션은 제2 요소 없이 제1 요소의 적용 가능성을 나타낸다. 제2 옵션은 제1 요소 없이 제2의 요소의 적용 가능성을 나타낸다. 제3 옵션은 제1 및 제2 요소들 모두의 적용 가능성을 나타낸다. 이들 옵션 중 어느 하나는 본원에 사용된 용어 "및/또는"의 의미에 속하고 따라서 상기 용어의 요건을 충족하는 것으로 이해된다. 하나 초과의 옵션의 동시 적용 가능성은 또한 용어 "및/또는"의 의미에 속하고 따라서 상기 용어의 요건을 충족하는 것으로 이해된다.
본원에 사용된 바와 같이, 본원 명세서 및 청구항 전반에 걸쳐 사용된 용어 "로 이루어로 진다 (consists of)" 또는 이의 변형, 예컨대 "로 이루어진다 (consist of)" 또는 "로 이루어진 (consisting of)"은 임의의 언급된 정수 및 정수 그룹의 포함을 나타내지만, 어떠한 추가의 정수 또는 정수 그룹들도 명시된 방법, 구조 또는 조성물에 부가될 수 없다.
본원에 사용된 바와 같이, 본원 명세서 및 청구항 전반에 걸쳐 사용된 용어 "로 필수적으로 이루어진다 (consists essentially of)" 또는 이의 변형, 예컨대 "로 필수적으로 이루어진다 (consist essentially of)" 또는 "로 필수적으로 이루어진 (consisting essentially of)"은 임의의 언급된 정수 및 정수 그룹의 포함 및 명시된 방법, 구조 또는 조성물의 기본 또는 신규 성질을 실제로 변화시키지 않는 임의의 언급된 정수 또는 정수 그룹의 선택적 포함을 나타낸다. M.P.E.P. § 2111.03을 참조한다.
본원에 사용된 바와 같이, "대상체"는 본 발명의 구현예에 따른 방법에 의해 백신 접종될 것이거나 백신 접종된 임의의 동물, 바람직하게, 포유동물, 가장 바람직하게는 인간을 의미한다. 본원에 사용된 용어 "포유동물"은 임의의 포유동물을 포함한다. 포유동물의 예는 소, 말, 양, 돼지, 고양이, 개, 마우스, 래트, 토끼, 기니피그, 몽키, 인간 등, 보다 바람직하게는 인간을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
단어 "우측", "좌측", "하부" 및 "상부"는 참조할 도면에서의 방향을 지정한다.
본원에 사용된 바와 같이, 대상체에게 2개 이상의 치료요법의 투여와 관련하여 용어 "조합하여"는 하나 초과의 치료요법의 사용을 지칭한다. 용어 "조합하여"의 사용은 치료요법이 대상체에게 투여되는 순서를 제한하지 않는다. 예를 들어, 제1 치료요법 (예를 들어, 본원에 기재된 조성물)은 제2 치료요법의 투여 전 (예를 들어, 5분, 15분, 30분, 45분, 1시간, 2시간, 4시간, 6시간, 12시간, 16시간, 24시간, 48시간, 72시간, 96시간, 1주, 2주, 3주, 4주, 5주, 6주, 8주, 또는 12주 전), 이와 동시에 또는 후속적으로 (예를 들어, 5분, 15분, 30분, 45분, 1시간, 2시간, 4시간, 6시간, 12시간, 16시간, 24시간, 48시간, 72시간, 96시간, 1주, 2주, 3주, 4주, 5주, 6주, 8주, 또는 12주 후) 대상체에게 투여될 수 있다.
또한 바람직한 발명의 구성요소의 치수 또는 특징을 언급하는 경우 본원에 사용된 용어 "약", "대략적으로", "일반적으로", "실질적으로" 등은 당업자에 의해 이해되는 바와 같이, 기재된 치수/특징이 엄격한 경계 또는 파라미터가 아니고 기능적으로 동일하거나 유사한 이로부터의 작은 변화를 배제하지 않는 것으로 이해되어야 한다. 최소한, 수치 파라미터를 포함하는 그러한 언급은 당업계에서 허용되는 수학적 및 산업적 원리 (예를 들어, 반올림, 측정 또는 다른 시스템 오류, 제조 공차 등)를 사용하여 최소 유효 숫자를 변화시키지 않는 변화를 포함할 것이다.
본원에 사용된 용어 "혈관 무결성을 보호하는"은 RT 후 대상체에서 혈관계의 기능 및 구조 중 적어도 하나를 보존하고 유지하는 것을 지칭한다. 혈관계의 1차 기능은 대상체의 신체 전반에 걸쳐 혈액과 림프를 운반하여 산소와 영양물을 전달하고 조직 폐물질을 제거하는 것이다. 용어 "혈관 무결성을 보호하는"은 혈관계의 기능을 보존하거나 유지하여 신체 전반에 걸쳐 혈액과 림프의 순환이 표적화된 방사선 치료요법에 노출시 상당한 영향을 받지 않거나 변화되지 않도록 하는 것을 지칭할 수 있다. 용어 "혈관 무결성을 보호하는"은 또한 혈관계의 하나 이상의 다른 기능을 보존하거나 유지하는 것, 예컨대 RT 후 손상된 음부 혈관 확장으로부터 대상체를 보호하거나 RT 후 혈관 수축을 감소시키는 것을 지칭할 수 있다. 혈관계는 혈액과 림프를 각각 신체 전반에 걸쳐 순환시키는 혈관과 림프관으로 구성된다. 구조적으로, 혈관은 외부 내피 층 및 3개의 조직 층; 외막 (tunica externa), 중막 (tunica media), 및 속막 (tunica intima)으로 구성된다. 용어 "혈관 무결성을 보호하는"은 추가로 혈관계의 구조가 방사선 치료요법 후 크게 변경되거나 유의적으로 영향을 받지 않도록, 예를 들어, RT 후 실질적 혈관 누출 또는 혈관 내피 백혈구 상호작용에서의 실질적인 증가가 없도록 혈관계의 구조를 보존하거나 유지하는 것을 지칭할 수 있다.
표적화된 방사선 치료요법
본원에 사용된 용어 "RT", "TRT" 또는 "표적화된 방사선 치료요법"은 신체의 특정 기관 또는 부분에 우선적으로 표적화되거나 국소화된 이온화 방사선을 사용하는 치료요법을 지칭한다. 이것은 일반적으로 암 치료의 일부로 사용된다. 표적화된 방사선 치료요법 (TRT)은 때때로 방사선 치료, 방사선요법, 조사 또는 x-선 치료요법으로 지칭된다. 표적화된 방사선 치료요법은 주로 3가지로 분류된다: 외부 빔 방사선 치료요법 (EBRT 또는 XRT), 내부 방사선 치료요법, 및 전신 방사성동위원소 치료요법. 때때로, 방사선은 동일하거나 약간 더 높은 용량을 전달하기 위해 여러 치료에서 제공될 수 있는데, 이는 분할 방사선 치료요법 (fractioned radiation therapy)으로 불리운다.
외부 빔 방사선 치료요법 (EBRT)은 신체 외부에서 고에너지 광선을 종양으로 지시하는 기계를 사용한다. EBRT의 예는 정위적 방사선 치료요법, 이미지 유도 방사선 치료요법 (IGRT), 강도 변조 방사선 치료요법 (IMRT), 나선형-단층 치료요법 (helical-tomotherapy), 양성자 빔 방사선 치료요법 및 수술 중 방사선 치료요법 (IORT)을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.
내부 방사선은 근접 방사선 치료 (brachytherapy)로도 불리우며, 방사성 이식체는 종양 내 또는 근처의 체내에 위치한다. 이는 외부 방사선 치료로 가능할 수 있는 것보다 더 작은 영역에서 더 높은 선량의 방사선을 허용한다. 이것은 일반적으로 이식체로 불리우는 소형 홀더 내에 밀봉된 방사선 공급원을 사용한다. 상이한 유형의 이식체는 펠렛, 씨드, 리본, 와이어, 니들, 캡슐, 벌룬 또는 튜브로 불리울 수 있다. 내부 방사선의 그러한 한 예는 경동맥 화학 색전술 (TACE)이다.
전신 방사성동위원소 치료요법 (SRT)은 또한 밀봉되지 않은 공급원 방사선 치료요법이다. 표적화된 방사성 약물을 SRT에서 사용하여 특정 유형의 암, 예컨대 갑상선, 골 및 전립선을 전신적으로 치료한다. 표적화 실체, 예컨대 모노클로날 항체 또는 세포-특이적 리간드에 전형적으로 연결된 이들 약물은 입으로 투여되거나 정맥으로 투여될 수 있고; 그런 다음, 이들은 원하는 표적에 도달할 때까지 신체를 통해 이동하며 거기에서 약물은 비교적 높은 농도로 축적될 것이다.
하나의 구현예에서, 본 발명은 두경부 암을 치료하기 위한 표적화된 방사선 치료요법에 관한 것이다. 두경부 암에 대한 전형적인 방사선 과정은 매일 치료와 함께 3-5주 지속된다. 그러나, 빠르게 성장하는 암은, 장기간에 걸쳐 매일 방사선량이 제공되는 경우 불량하게 제어된다. 따라서, 특정의 빠르게 성장하는 두경부 암, 예컨대 비인두 암에 대해 방사선 전달을 가속화하고 하루 2회 이상의 치료 (과분화)로 제공될 수 있다. 일부 구현예에서, 두경부 암을 갖는 대상체는 하루 1회 투여되는 보다 낮은 용량으로 이루어진 표준 치료요법과 비교하여 하루 2회 투여되는 고용량의 방사선 치료요법으로 치료된다.
EBRT 및/또는 근접 방사선 치료는 통상적으로 두경부 방사선 치료를 위해 사용된다. 예를 들어, 제거 가능한 이식체는 입, 혀, 목 및 비인두의 암의 치료에 사용될 수 있으며, 여기서, 이들은 외부 빔 방사선 치료요법 후 강내 부스트로서 주어진다. 이식체는 암 영역에 위치하고 적절한 용량이 투여된 경우 제거된다. 제거 가능한 이식체에서 가장 통상적으로 사용되는 방사성 물질은 이리듐 192이다. 일부 구현예에서, 예를 들어, 재발성 비인두 악성 종양의 치료, 입과 목에서의 1차 부위의 접근 가능한 재발의 완화 또는 자궁 경부 림프절 전이의 경우에 방사성 공급원의 영구 배치가 필요할 수 있다. 요오드 125 및 팔라듐 103은 영구 이식체에 사용되는 방사성 물질일 수 있다.
두경부 암에 대해 표적화된 방사선의 부작용은, 예를 들어, 점막염, 입 또는 목의 점막의 염증 또는 구갈 (dry mouse) (구강건조증)을 포함한다. 또 다른 흔하게 접하게 되는, 두경부 암에 대한 방사선 치료요법의 합병증은 비정상적으로 낮은 수준의 갑상선 호르몬으로, 갑상선 기능저하증으로도 지칭된다.
또 다른 구현예에서, 본 발명은 전립선 암을 치료하기 위한 표적화된 방사선 치료요법에 관한 것이다. EBRT 및 고선량률 (HDR)의 근접 방사선 치료는 전립선 암의 치료를 위한 2가지 주요 유형의 방사선 치료요법이다. 전립선 암에 대한 표적화된 방사선의 부작용은, 예를 들어, 빈번한 배뇨, 곤란하거나 고통스러운 배뇨, 소변 내 혈액, 소변 누출, 고통스러운 배변, 직장 출혈 및 성기능 장애, 예컨대 발기 부전을 포함한다.
TPO 모사체
본원에 사용된 바와 같이, "TPOm", "TPO 모사체" 또는 "트롬보포이에틴 모사체"는 트롬보포이에틴 수용체에 결합하고 이를 활성화시킬 수 있는 펩타이드를 포함하는 화합물을 지칭한다. 바람직하게, 본 발명에 유용한 TPO 모사체에서, 트롬보포이에틴 수용체에 결합하고 이를 활성화시킬 수 있는 펩타이드는 트롬보포이에틴 (TPO)과 유의한 상동성을 갖지 않는다. TPO와의 상동성 부재는 TPO 항체의 생성에 대한 잠재력을 감소시킨다. TPO 모사체에 유용한 상기 펩타이드의 예는 미국 공개 공보 제2003/0158116호; 제2005/0137133호; 제2006/0040866호; 제2006/0210542호; 제2007/0148091호; 제2008/0119384호; 미국 특허 제5,869,451호; 제7,091,311호; 제7,615,533호; 제8,227,422호; 국제 특허 공개 공보 제WO2007/021572호; 제WO2007/094781호; 및 제WO2009/148954호에 기재된 것들을 포함하지만 이에 제한되지 않고, 이들의 전체 내용은 본원에 참조로 포함된다. 보다 바람직하게, 본 발명에 유용한 TPO 모사체에서, 트롬보포이에틴 수용체에 결합하고 이를 활성화시킬 수 있는 펩타이드는 펩타이드의 하나 이상의 성질을 개선시키는 모이어티에 공유적으로 연결된다. 비제한적인 예로서, 모이어티는 폴리에틸렌 글리콜 (PEG), 폴리프로필렌 글리콜, 폴리락트산 및 폴리글리콜산을 포함하지만 이에 제한되지 않는 친수성 중합체일 수 있다. 모이어티는 또한 폴리펩타이드, 예컨대 Fc 영역 또는 알부민일 수 있다.
바람직한 구현예에서, 본 발명에 유용한 TPO 모사체는 IEGPTLRQXaaLAARYaa (서열번호 1)의 아미노산 서열을 갖는 펩타이드를 포함하고, 여기서, Xaa는 트립토판 (W) 또는 β-(2-나프틸)알라닌 ("2-Nal"로 본원에서 지칭됨)이고, Yaa는 알라닌 (A) 또는 사르코신 ("Sar"로 본원에서 지칭됨)이다. 바람직하게, 서열번호 1의 펩타이드는 PEG에 공유적으로 연결되거나 Fc 도메인에 융합된다.
일부 구현예에서, 본 발명에 유용한 TPO 모사체는 PEG, 바람직하게 약 5,000 내지 약 30,000 돌턴의 평균 분자량을 갖는 PEG에 공유적으로 연결된 서열번호 1의 펩타이드를 포함한다. 바람직하게, PEG는 모노메톡시폴리에틸렌 글리콜 (MePEG-OH), 모노메톡시폴리에틸렌 글리콜-석시네이트 (MePEG-S), 모노메톡시폴리에틸렌 글리콜-석신이미딜 석시네이트 (MePEG-S-NHS), 모노메톡시폴리에틸렌 글리콜-아민 (MePEG-NH2), 모노메톡시폴리에틸렌 글리콜-트레실레이트 (MePEG-TRES), 및 모노메톡시폴리에틸렌 글리콜-이미다졸-카보닐 (MePEG-IM)로 이루어진 군으로부터 선택된다. 펩타이드의 페길화는 효능 상실없이 화합물의 감소된 소거율을 초래한다. 예를 들어, 이의 전체 내용이 본원에 참조로 포함된 미국 특허 제7,576,056호를 참조한다.
하나의 바람직한 구현예에서, 본 발명에 유용한 TPO 모사체는 RWJ-800088 또는 이의 유도체이다. 본원에 사용된 바와 같이, "RWJ-800088"은 다음과 같은 라이신아미드 잔기에 의해 연결된 2개의 동일한 14량체 및
Figure pct00002
각각의 N-말단 이소류신에 공유적으로 연결된 메톡시폴리(에틸렌 글리콜) (MPEG)을 갖는 29량체 펩타이드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 에스테르를 지칭한다. 14량체는 서열번호 1과 동일하고, 여기서, Xaa는 2-Nal이고, Yaa는 Sar이고, RWJ-800088은 따라서 라이신아미드 잔기에 의해 연결된 서열번호 2 (IEGPTLRQ(2-Nal)LAAR(Sar))의 2개의 14개 아미노산 펩타이드 쇄로 구성되고, 각 N-말단 이소류신은 메톡시 폴리에틸렌 글리콜 (MPEG) 쇄에 연결된다. 따라서, RWJ-800088은 (MPEG-Ile-Glu-Gly-Pro-Thr-Leu-Arg-Gln-(2-Nal)-Leu-Ala-Ala-Arg-(Sar))2-Lys-NH2의 약칭 분자 구조를 갖거나 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 에스테르이고; 여기서, (2-Nal)은 β-(2-나프틸)알라닌이고, (Sar)은 사르코신이고, MPEG는 메톡시폴리(에틸렌 글리콜)이다. 바람직하게, MPEG는 대략적으로 20,000 돌턴의 분자량을 갖거나 메톡시폴리에틸렌 글리콜 20,000을 나타낸다.
하나의 구현예에서, RWJ-800088은 화학식 I의 분자 구조를 갖거나 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 에스테르이다:
화학식 I
Figure pct00003
바람직한 구현예에서, RWJ-800088에서 MPEG는 메톡시폴리에틸렌글리콜 20000이고, RWJ-800088은 하기의 전체 화학명을 갖는다: 메톡시폴리에틸렌글리콜 20000-프로피오닐-L-이소류실-L-글루타밀-글리실-L-프롤릴-L-트레오닐-L-류실-L-아르기닐-L-글루타미닐-L-2-나프틸알라닐-L-류실-L-알라닐-L-알라닐-L-아르기닐-사르코실-Ne-(메톡시폴리에틸렌글리콜 20000-프로피오닐-L-이소류실-L-글루타밀-글리실-L-프롤릴-L-트레오닐-L-류실-L-아르기닐-L-글루타미닐-L-2-나프틸알라닐-L-류실-L-알라닐-L-알라닐-L-아르기닐-사르코실-)-라이신아미드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 에스테르. PEG가 없는 펩타이드의 분자량은 3,295 돌턴이고 2개의 20,000 돌턴의 MPEG 쇄를 갖는 것은 대략 43,295 돌턴이다.
일부 구현예에서, 본 발명에 유용한 TPO 모사체는 Fc 도메인에 융합된 서열번호 1의 펩타이드를 포함한다. 펩타이드를 Fc 도메인에 융합하는 것은 생체내 펩타이드를 안정화시킬 수 있다. 예를 들어, 이의 전체 내용이 본원에 참조로 포함된 미국 특허 제6,660,843호를 참조한다.
또 다른 바람직한 구현예에서, 본 발명에 유용한 TPO 모사체는 로미플로스팀이다. 본원에 사용된 바와 같이, "로미플로스팀"은 서열번호 1의 펩타이드의 N-말단 이소류신에 연결된 Fc 도메인을 갖는 융합 단백질을 지칭하며, 여기서, Xaa는 W이고 Yaa는 A이다. 특히, 로미플로스팀은 하기의 아미노산 서열을 갖는다:
Figure pct00004
이것은 IEGPTLRQWLAARA (서열번호 3)의 트롬보포이에틴 수용체 결합 도메인 아미노산 서열을 갖는다.
용량 및 투여
TPO 모사체는, 예를 들어, 약제학적 담체 또는 희석제와 연합된 약제학적 조성물의 활성 성분으로서 투여될 수 있다. TPO 모사체는 경구, 폐, 비경구 (근육내, 복막내, 정맥내 (IV) 또는 피하 주사), 흡입 (미세 분말 제형을 통해), 경피, 비강, 질내, 직장, 또는 설하 투여 경로에 의해 투여될 수 있으며 각 투여 경로에 적절한 투여 형태로 제형화될 수 있다. 예를 들어, 국제 공개 공보 제WO1993/25221호 (Bernstein et al.) 및 제WO1994/17784호 (Pitt et al.)를 참조하고, 이의 관련 내용은 본원에 참조로 포함된다.
경구 투여를 위한 고체 제형은 캡슐제, 정제, 환제, 산제 및 과립제를 포함한다. 그러한 고체 투여 형태에서, 활성 펩타이드 화합물은 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 담체, 예컨대 슈크로스, 락토스 또는 전분과 혼합된다. 그러한 투여 형태는 또한 통상적인 관행에서와 같이 불활성 희석제 이외의 추가의 물질, 예를 들어, 윤활제, 예컨대 마그네슘 스테아레이트를 포함할 수 있다. 캡슐제, 정제 및 환제의 경우, 투여 형태는 또한 완충제를 포함할 수 있다. 정제 및 환제는 추가로 장용 코팅제와 함께 제조될 수 있다.
경구 투여용 액체 투여 형태는 약제학적으로 허용되는 에멀젼, 용액, 현탁액, 시럽을 포함하며 엘릭시르는 당업계에서 통상적으로 사용되는 불활성 희석제, 예컨대 물을 함유한다. 그러한 불활성 희석제 이외에, 조성물은 또한 보조제, 예컨대 습윤제, 유화제 및 현탁제, 및 감미제, 향미제 및 방향제를 포함할 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제는 멸균 수성 또는 비수성 용액, 현탁액 또는 에멀젼을 포함한다. 비-수성 용매 또는 비히클의 예는 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 식물성 오일, 예컨대 올리브유 및 옥수수유, 겔라틴, 및 주사 가능한 유기 에스테르, 예컨대 에틸 올레에이트이다. 그러한 투여 형태는 또한 보조제, 예컨대 보존제, 습윤제, 유화제 및 분산제를 함유할 수 있다. 이들은, 예를 들어, 박테리아 보유 필터를 통한 여과에 의해, 멸균제를 조성물에 혼입함에 의해, 조성물을 조사함에 의해 또는 조성물을 가열함에 의해 멸균될 수 있다. 이들은 또한 사용 직전에 멸균수, 또는 일부 다른 멸균 주사 가능한 매체를 사용하여 제조될 수 있다.
TPO 모사체의 투여는 전형적으로 근육내, 피하 또는 정맥내이다. 그러나, 피부, 피내 또는 비강과 같은 투여 방식이 또한 고려될 수 있다. TPO 모사체의 근육내 투여는 니들을 사용하여 TPO 모사체 조성물의 현탁액을 주사함으로써 달성될 수 있다. 대안은 조성물을 투여하기 위한 니들이 없는 주사 장치 (예를 들어, BiojectorTM을 사용하는) 또는 TPO 모사체 조성물의 동결-건조된 분말을 사용하는 것이다.
정맥내, 피부 또는 피하 주사 또는 환부에 주사를 위해, TPO 모사체 조성물은 발열원이 없고 적합한 pH, 등장성 및 안정성을 갖는 비경구적으로 허용되는 수용액 형태로 존재할 수 있다. 당업자는, 예를 들어, 등장성 비히클, 예컨대 염화나트륨, 링거 주사, 락테이트화된 링거 주사를 사용하여 적합한 용액을 잘 제조할 수 있다. 보존제, 안정화제, 완충제, 항산화제 및/또는 다른 첨가제는 필요에 따라 포함될 수 있다. 서방형 제형이 또한 사용될 수 있다.
직장 또는 질 투여를 위한 조성물은 바람직하게 좌제이며, 이는 활성 TPO 모사체 이외에 부형제, 예컨대 코코아 버터 또는 좌제 왁스를 함유할 수 있다. 비강 또는 설하 투여를 위한 조성물은 또한 당업계에 널리 공지된 표준 부형제로 제조한다.
전형적으로, 투여는 대상체에게 투여되는 표적화된 방사선 치료요법에 대해 혈관 무결성을 유지하고 보호하는 것을 목표로 할 것이다. TPO 모사체 조성물은 표적화된 방사선 치료 동안에 또는 치료 후 대상체에게 투여되고 TPO 모사체 조성물은 바람직하게 RT의 효능을 감소시키지 않으면서 대상체의 건강한 조직에서 혈관 무결성을 보호하기에 충분한 양으로 투여된다.
TPO 모사체를 함유하는 약제학적으로 허용되는 조성물은 대상체에게 투여되어 대상체의 혈관계에 대한 보호 효과를 일으킨다. 대상체의 혈관계에 대한 보호 효과를 생성하기에 충분한 조성물의 양은 조성물의 "유효 용량" 또는 "유효량"으로 정의된다. TPO 모사체 조성물의 유효량은, 예를 들어, 대상체의 상태 (예를 들어, 혈관계 무결성의 중증도, 표적화된 방사선 치료요법에 대한 노출 길이), 대상체의 물리적 특징 (예를 들어, 신장, 체중 등), 및 RT의 특성 (예를 들어, 방사선의 유형 및 선량, 주파수 등)에 의존한다. 실제 투여되는 양 및 투여 속도 및 시간-경과는 본원 개시내용의 관점에서 당업자에 의해 결정될 수 있다.
치료 처방, 예를 들어, 용량 등에 대한 결정은 일반 개업의 및 다른 의사의 책임 또는 수의과 관련하여 수의사에게 달려 있고, 전형적으로 치료될 장애, 개별 환자의 병태, 전달 부위, 투여 방법 및 개업의에게 알려진 다른 요인들을 고려한다. 상기 언급된 기술 및 프로토콜의 예는 문헌(참조: Remington's Pharmaceutical Sciences, 16th edition, Osol, A. ed., 1980)에서 찾을 수 있다.
특정 구현예에서, TPO 모사체는 대상체가 표적화된 방사선 치료요법에 노출된 후 대상체에게 적어도 약 10분 내지 적어도 약 420분, 적어도 약 10분 내지 적어도 약 300분, 적어도 약 10분 내지 적어도 약 180분, 적어도 약 10 분 내지 적어도 약 60분, 적어도 약 20분 내지 적어도 약 420분, 적어도 약 20분 내지 적어도 약 300분, 적어도 약 20 분 내지 적어도 약 180분, 적어도 약 20분 내지 적어도 약 60분, 적어도 약 40분 내지적어도 약 420분, 적어도 약 40분 내지 적어도 약 300분, 적어도 약 40분 내지 적어도 약 180분, 적어도 약 40분 내지 적어도 약 60분, 적어도 약 60 분 내지 적어도 약 420분, 적어도 약 60분 내지 적어도 약 300분, 적어도 약 60분 내지 적어도 약 180분, 적어도 약 60 분 내지 적어도 약 120분, 적어도 약 60분 내지 적어도 약 90분, 적어도 약 80분 내지 적어도 약 420분, 적어도 약 80분 내지 적어도 약 300분, 적어도 약 80분 내지 적어도 약 180분, 적어도 약 80분 내지 적어도 약 120분, 적어도 약 100분 내지 적어도 약 420분, 적어도 약 100분 내지 적어도 약 300분, 적어도 약 100분 내지 적어도 약 180분, 적어도 약 100분 내지 적어도 약 150분, 적어도 약 120분 내지 적어도 약 420분, 적어도 약 120분 내지 적어도 약 300분, 적어도 약 120분 내지 적어도 약 180분, 적어도 약 140분 내지 적어도 약 420분, 적어도 약 140분 내지 적어도 약 300분, 적어도 약 140분 내지 적어도 약 180분, 적어도 약 160분 내지 적어도 약 420분, 적어도 약 160분 내지 적어도 약 300분, 적어도 약 160분 내지 적어도 약 180분, 적어도 약 180분 내지 적어도 약 420분, 적어도 약 180분 내지 적어도 약 300분, 또는 이들 사이의 임의의 시간에 투여된다. 특정 구현예에서, TPO 모사체는 대상체가 표적화된 방사선 치료요법에 노출된 후 적어도 약 10분, 적어도 약 20분, 적어도 약 40분, 적어도 약 60분, 적어도 약 80분, 적어도 약 100분, 적어도 약 120분, 적어도 약 140분, 적어도 약 160분, 적어도 약 180분, 적어도 약 200분, 적어도 약 220분, 적어도 약 240분, 적어도 약 260분, 적어도 약 280분, 적어도 약 300분, 적어도 약 320분, 또는 적어도 약 340분에 투여된다. 특정 구현예에서, TPO 모사체는 대상체가 표적화된 방사선 치료요법에 노출된 후 적어도 약 8시간, 적어도 약 10시간, 적어도 약 12시간, 적어도 약 14시간, 적어도 약 16시간, 적어도 약 18시간, 적어도 약 20시간, 적어도 약 22시간, 적어도 약 24시간에 투여된다. 특정 구현예에서, TPO 모사체는 대상체가 표적화된 방사선 치료요법에 노출된 후 약 10분, 약 20분, 약 40분, 약 60분, 약 80분, 약 100분, 약 120분, 약 140분, 약 160분, 약 180분, 약 200분, 약 220ㅍ, 약 240분, 약 260분, 약 280분, 약 300분, 약 320분, 약 340분, 약 360분, 약 420분 이하에 투여된다. 특정 구현예에서, TPO 모사체는 대상체가 표적화된 방사선 치료요법에 노출된 후 약 8시간, 약 10시간, 약 12시간, 약 14시간, 약 16시간, 약 18시간, 약 20시간, 약 22시간, 약 24시간 이하에 투여된다.
TPO 모사체의 제조 및 TPO 모사체의 조성물로의 임의의 제형화 후, 조성물은 개체, 특히, 인간 또는 다른 영장류에 투여될 수 있다. 인간 또는 또 다른 포유동물, 예를 들어, 마우스, 래트, 햄스터, 기니피그, 토끼, 양, 염소, 돼지, 말, 소, 당나귀, 몽키, 개 또는 고양이에 투여될 수 있다. 비-인간 포유동물로의 전달은 치료 목적일 필요는 없지만, 실험적 맥락에서, 예를 들어, TPO 모사체의 투여로 인한 혈관 무결성을 보호하는 기전의 연구에 사용하기 위한 것일 수 있다.
본 발명의 TPO 모사체 조성물은 치료될 병태에 따라 동시에 또는 순차적으로, 단독으로 또는 다른 치료와 조합하여 투여될 수 있다.
TPO 모사체 조성물은, 경우에 따라, 활성 성분을 함유하는 하나 이상의 단위 투여 형태를 함유할 수 있는 키트, 팩 또는 분배기에 제공될 수 있다. 키트는, 예를 들어, 금속 또는 플라스틱 포일, 예컨대 블리스터 팩을 포함할 수 있다. 키트, 팩 또는 분배기는 투여를 위한 지침서를 수반할 수 있다. 키트에 포함되는 장치는, 예를 들어, 컨테이너, 전달 비히클 또는 투여 장치일 수 있다.
키트는 혈관 무결성을 보호하기 위한 적어도 하나의 추가의 치료제 또는 장치를 추가로 포함할 수 있다. 키트에 포함되는 추가의 치료제는 공지되어 있거나 TPO 또는 TPO 모사체와 투여되는 경우 유리한 성질을 입증하는 임의의 화합물 또는 치료제를 지칭한다. 그러한 제제의 예는 다음과 같을 수 있지만 이에 제한되지 않는다: 다른 TPO 모사체, 혈관 무결성을 보호하기 위해 사용될 수 있는 다른 제제 (예컨대, 방사선 보호제, 예를 들어, Ethyol® 또는 아미포스틴), 방사선 감작제 (예컨대, IUdR, BUdR, 미소니다졸, 니모라졸, 에타니다졸, 플루오솔, RSR-13, 및 모텍사핀 가돌리늄 (MGd)), 호르몬 (예컨대, 두경부 암에 대한 갑상선 호르몬), 또는 황체 형성 호르몬-방출 호르몬 (LHRH) 효능제 (LHRH 유사체 또는 GnRH 길항제로도 불림). LHRH의 예는 류프롤리드 (루프론, 엘리가드 (Eligard)), 고세렐린 (졸라덱스 (Zoladex)), 트립토렐린 (트렐스타 (Trelstar)) 또는 히스트렐린 (반타스 (Vantas))을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
구현예
본 발명은 또한 하기의 비제한적인 구현예를 제공한다.
구현예 1은 표적화된 방사선 치료요법에 노출된 대상체에서 혈관 무결성을 보호하는 방법이고, 상기 방법은 대상체에게 유효량의 트롬보포이에틴 (TPO) 모사체를 투여함을 포함한다.
구현예 1(a)는 상기 TPO 모사체가 서열번호 1의 아미노산 서열을 갖는 펩타이드를 포함하는, 구현예 1의 방법이다.
구현예 1(b)는 상기 펩타이드가 서열번호 2의 아미노산 서열을 갖는, 구현예 1(a)의 방법이다.
구현예 1(c)는 상기 TPO 모사체가 상기 펩타이드에 공유적으로 연결된 친수성 중합체를 추가로 포함하는, 구현예 1(a) 또는 1(b)의 방법이다.
구현예 1(d)는 상기 친수성 중합체가 i) 폴리에틸렌 글리콜 (PEG), ii) 폴리프로필렌 글리콜, iii) 폴리락트산, 또는 iv) 폴리글리콜산 중 어느 하나인, 구현예 1(c)의 방법이다.
구현예 1(e)는 상기 친수성 중합체가 PEG인, 구현예 1(d)의 방법이다.
구현예 1(f)는 상기 PEG가 모노메톡시폴리에틸렌 글리콜 (MePEG-OH), 모노메톡시폴리에틸렌 글리콜-석시네이트 (MePEG-S), 모노메톡시폴리에틸렌 글리콜-석신이미딜 석시네이트 (MePEG-S-NHS), 모노메톡시폴리에틸렌 글리콜-아민 (MePEG-NH2), 모노메톡시폴리에틸렌 글리콜-트레실레이트 (MePEG-TRES), 또는 모노메톡시폴리에틸렌 글리콜-이미다졸릴-카보닐 (MePEG-IM) 중 어느 하나인, 구현예 1(e)의 방법이다.
구현예 1(g)는 상기 PEG가 메톡시폴리(에틸렌 글리콜) (MPEG)인, 구현예 1(e)의 방법이다.
구현예 1(h)는 상기 TPO 모사체가 화학식 I의 분자 구조를 갖는 RWJ-800088또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 에스테르인, 구현예 1(g)의 방법이다:
Figure pct00005
구현예 1(i)는 상기 RWJ-800088에서 MPEG가 메톡시폴리에틸렌 글리콜20000인, 구현예 1(h)의 방법이다.
구현예 1(j)는 상기 펩타이드가 서열번호 3의 아미노산 서열을 갖는, 구현예 1(a)의 방법이다.
구현예 1(k)는 상기 펩타이드가 폴리펩타이드에 융합된, 구현예 1(j)의 방법이다.
구현예 1(l)은 상기 폴리펩타이드가 Fc 도메인인, 구현예 1(k)의 방법이다.
구현예 1(m)은 상기 TPO 모사체가 로미플로스팀인, 구현예 1(l)의 방법이다.
구현예 1(n)은 로미플로스팀이 서열번호 4의 아미노산 서열을 포함하는, 구현예 1(m)의 방법이다.
구현예 2는 상기 표적 방사선 치료요법에 노출된 대상체가 암 치료를 받고 있는, 구현예 1 내지 1(n) 중 어느 하나의 방법이다.
구현예 2(a)는 상기 암이 전립선암, 두경부암, 간세포 암종, 결장암, 폐암, 흑색종, 췌장암, 및 유방암으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 구현예 2의 방법이다.
구현예 2(b)는 상기 암이 전립선암인, 구현예 2의 방법이다.
구현예 2(c)는 상기 암이 두경부암인, 구현예 2의 방법이다.
구현예 3은 대상체에 표적화된 방사선 치료요법이 적용된 후 적어도 약 10분 내지 적어도 약 420분에 상기 약제학적 조성물이 대상체에게 투여되는, 구현예 1 내지 2(c) 중 어느 하나의 방법이다.
구현예 3a는 대상체가 표적화된 방사선 치료요법에 노출된 후 적어도 약 20분 내지 적어도 약 360분에 상기 TPO 모사체가 대상체에게 투여되는, 구현예 3의 방법이다.
구현예 4는 대상체가 표적화된 방사선 치료요법에 노출된 후 적어도 약 40분 내지 적어도 약 240분에 상기 TPO 모사체가 대상체에게 투여되는, 구현예 3의 방법이다.
구현예 5는 대상체가 표적화된 방사선 치료요법에 노출된 후 적어도 약 60분 내지 적어도 약 180분에 상기 TPO 모사체가 대상체에게 투여되는, 구현예 3의 방법이다.
구현예 6은 대상체가 표적화된 방사선 치료요법에 노출된 후 적어도 약 10분에 상기 TPO 모사체가 대상체에게 투여되는, 구현예 3의 방법이다.
구현예 7은 상기 대상체가 1회 초과 용량의 유효량의 TPO 모사체를 투여받는, 구현예 1 내지 6 중 어느 하나의 방법이다.
구현예 8은 표적화된 방사선 치료요법 후 대상체를 손상된 음부 동맥 혈관확장으로부터 보호하는 방법이고, 상기 방법은 이를 필요로 하는 대상체에 유효량의 트롬보포이에틴 (TPO) 모사체를 투여함을 포함한다.
구현예 9는 표적화된 방사선 치료요법 후 대상체에서 혈관수축을 감소시키는 방법이고, 상기 방법은 이를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 트롬보포이에틴 (TPO) 모사체를 투여함을 포함한다.
구현예 10은 표적화된 방사선 치료요법 후 대상체에서 혈관 누출을 감소시키는 방법이고, 상기 방법은 이를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 트롬보포이에틴 (TPO) 모사체를 투여함을 포함한다.
구현예 11은 표적화된 방사선 치료요법 후 대상체에서 혈관 내피 백혈구 상호작용을 감소시키는 방법이고, 상기 방법은 이를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 트롬보포이에틴 (TPO) 모사체를 투여함을 포함한다.
구현예 11(a)는 상기 TPO 모사체가 서열번호 1의 아미노산 서열을 갖는 펩타이드를 포함하는, 구현예 8 내지 11 중 어느 하나의 방법이다.
구현예 11(b)는 상기 펩타이드가 서열번호 2의 아미노산 서열을 갖는, 구현예 11(a)의 방법이다.
구현예 11(c)는 상기 TPO 모사체가 상기 펩타이드에 공유적으로 연결된 친수성 중합체를 추가로 포함하는, 구현예 11(a) 또는 11(b)의 방법이다.
구현예 11(d)는 상기 친수성 중합체가 i) 폴리에틸렌 글리콜 (PEG), ii) 폴리프로필렌 글리콜, iii) 폴리락트산, 또는 iv) 폴리글리콜산 중 어느 하나인, 구현예 11(c)의 방법이다.
구현예 11(e)는 상기 친수성 중합체가 PEG인, 구현예 11(d)의 방법이다.
구현예 11(f)는 상기 PEG가 모노메톡시폴리에틸렌 글리콜 (MePEG-OH), 모노메톡시폴리에틸렌 글리콜-석시네이트 (MePEG-S), 모노메톡시폴리에틸렌 글리콜-석신이미딜 석시네이트 (MePEG-S-NHS), 모노메톡시폴리에틸렌 글리콜-아민 (MePEG-NH2), 모노메톡시폴리에틸렌 글리콜-트레실레이트 (MePEG-TRES), 또는 모노메톡시폴리에틸렌 글리콜-이미다졸릴-카보닐 (MePEG-IM) 중 어느 하나인, 구현예 11(e)의 방법이다.
구현예 11(g)는 상기 PEG가 메톡시폴리(에틸렌 글리콜) (MPEG)인, 구현예 11(e)의 방법이다.
구현예 11(h)는 상기 TPO 모사체가 화학식 I의 분자 구조를 갖는 RWJ-800088 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 에스테르인, 구현예 11(g)의 방법이다:
Figure pct00006
구현예 11(i)는 상기 RWJ-800088에서 MPEG가 메톡시폴리에틸렌 글리콜20000인, 구현예 11(h)의 방법이다.
구현예 11(j)는 상기 펩타이드가 서열번호 3의 아미노산 서열을 갖는, 구현예 11(a)의 방법이다.
구현예 11(k)는 상기 펩타이드가 폴리펩타이드에 융합된, 구현예 11(j)의 방법이다.
구현예 11(l)은 상기 폴리펩타이드가 Fc 도메인인, 구현예 11(k)의 방법이다.
구현예 11(m)은 상기 TPO 모사체가 로미플로스팀인, 구현예 11(l)의 방법이다.
구현예 11(n)은 로미플로스팀이 서열번호 4의 아미노산 서열을 포함하는, 구현예 11(m)의 방법이다.
구현예 12는 상기 표적화된 방사선 치료요법이 암 또는 종양을 치료하기 위해 대상체에 적용되는, 구현예 8 내지 11(n) 중 어느 하나의 방법이다.
구현예 13은 상기 암이 전립선암, 두경부암, 간세포 암종, 결장암, 폐암, 흑색종, 췌장암, 및 유방암으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 구현예 12의 방법이다.
구현예 13(a)는 상기 암이 전립선암인, 구현예 13의 방법이다.
구현예 13(b)는 상기 암이 두경부암인, 구현예 13의 방법이다.
구현예 14는 표적화된 방사선 치료요법 및 유효량의 트롬보포이에틴 (TPO) 모사체를 대상체에게 투여함을 포함하는, 이를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법이다.
구현예 14(a)는 상기 TPO 모사체가 서열번호 1의 아미노산 서열을 갖는 펩타이드를 포함하는, 구현예 14의 방법이다.
구현예 14(b)는 상기 펩타이드가 서열번호 2의 아미노산 서열을 갖는, 구현예 14(a)의 방법이다.
구현예 14(c)는 상기 TPO 모사체가 상기 펩타이드에 공유적으로 연결된 친수성 중합체를 추가로 포함하는, 구현예 14(a) 또는 14(b)의 방법이다.
구현예 14(d)는 상기 친수성 중합체가 i) 폴리에틸렌 글리콜 (PEG), ii) 폴리프로필렌 글리콜, iii) 폴리락트산, 또는 iv) 폴리글리콜산 중 어느 하나인, 구현예 14(c)의 방법이다.
구현예 14(e)는 상기 친수성 중합체가 PEG인, 구현예 14(d)의 방법이다.
구현예 14(f)는 상기 PEG가 모노메톡시폴리에틸렌 글리콜 (MePEG-OH), 모노메톡시폴리에틸렌 글리콜-석시네이트 (MePEG-S), 모노메톡시폴리에틸렌 글리콜-석신이미딜 석시네이트 (MePEG-S-NHS), 모노메톡시폴리에틸렌 글리콜-아민 (MePEG-NH2), 모노메톡시폴리에틸렌 글리콜-트레실레이트 (MePEG-TRES), 또는 모노메톡시폴리에틸렌 글리콜-이미다졸릴-카보닐 (MePEG-IM) 중 어느 하나인, 구현예 14(e)의 방법이다.
구현예 14(g)는 상기 PEG가 메톡시폴리(에틸렌 글리콜) (MPEG)인, 구현예 14(e)의 방법이다.
구현예 14(h)는 상기 TPO 모사체가 화학식 I의 분자 구조를 갖는 RWJ-800088 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 에스테르인, 구현예 14(g)의 방법이다:
Figure pct00007
구현예 14(i)는 상기 RWJ-800088에서 MPEG가 메톡시폴리에틸렌 글리콜20000인, 구현예 14(h)의 방법이다.
구현예 14(j)는 상기 펩타이드가 서열번호 3의 아미노산 서열을 갖는, 구현예 14(a)의 방법이다.
구현예 14(k)는 상기 펩타이드가 폴리펩타이드에 융합된, 구현예 14(j)의 방법이다.
구현예 14(l)는 상기 폴리펩타이드가 Fc 도메인인, 구현예 14(k)의 방법이다.
구현예 14(m)은 상기 TPO 모사체가 로미플로스팀인, 구현예 14(l)의 방법이다.
구현예 14(n)은 로미플로스팀이 서열번호 4의 아미노산 서열을 포함하는, 구현예 14(m)의 방법이다.
구현예 15는 상기 암이 전립선암, 두경부암, 간세포 암종, 결장암, 폐암, 흑색종, 췌장암, 및 유방암으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 구현예 14 내지 14(n) 중 어느 하나의 방법이다.
구현예 15(a)는 상기 암이 전립선암인, 구현예 15의 방법이다.
구현예 15(b)는 상기 암이 두경부암인, 구현예 15의 방법이다.
구현예 16은 대상체에 표적화된 방사선 치료요법이 적용된 후 적어도 약 10분 내지 적어도 약 420분에 상기 TPO 모사체가 투여되는, 구현예 14 내지 15(b) 중 어느 하나의 방법이다.
구현예 17은 상기 대상체가 표적화된 방사선 치료요법 및 유효량의 TPO 모사체의 투여 후 손상된 음부 동맥 혈관확장으로부터 보호되는, 구현예 14 내지 16 중 어느 하나의 방법이다.
구현예 18은 상기 대상체가 표적화된 방사선 치료요법 및 유효량의 TPO 모사체의 투여 후 감소된 혈관수축을 갖는, 구현예 14 내지 16 중 어느 하나의 방법이다.
구현예 19는 상기 대상체가 표적화된 방사선 치료요법 및 유효량의 TPO 모사체의 투여 후 감소된 혈관 누출을 갖는, 구현예 14 내지 16 중 어느 하나의 방법이다.
구현예 20은 상기 대상체가 표적화된 방사선 치료요법 및 유효량의 TPO 모사체의 투여 후 감소된 혈관 내피 백혈구 상호작용을 갖는, 구현예 14 내지 16 중 어느 하나의 방법이다.
구현예 21은 유효량의 트롬보포이에틴 (TPO) 모사체 및 표적화된 방사선 치료요법에 노출된 대상체에서 혈관 무결성을 보호하기 위한 장치 및/또는 또 다른 제제를 포함하는 약제학적 조성물이고, 여기서, 상기 TPO 모사체는 서열번호 1의 아미노산 서열을 갖는 펩타이드를 포함한다.
구현예 22는 상기 다른 제제가 다른 TPO 모사체, 방사선 보호제, 방사선 감작, 호르몬, 또는 황체형성 호르몬-방출 호르몬 (LHRH) 효능제 (LHRH 유사체 또는 GnRH 효능제로도 불림)로 이루어진 군으로부터 선택되는, 구현예 21의 약제학적 조성물이다.
구현예 22a는 상기 방사선 보호제가 Ethyol®(아미포스틴)을 포함하는, 구현예 22의 약제학적 조성물이다.
구현예 22b는 상기 방사선 감작제가 IUdR, BUdR, 미소니다졸, 니모라졸, 에타니다졸, 플루오솔, RSR-13, 또는 모텍사핀 가돌리늄 (MGd)을 포함하는, 구현예 22 또는 22a의 약제학적 조성물이다.
구현예 22c는 상기 호르몬이 두경부암 치료를 위한 갑상선인, 구현예 22 내지 22b의 어느 하나의 약제학적 조성물이다.
구현예 22d는 상기 (LHRH) 효능제가 류프롤리드 (루프론, 엘리가드), 고세렐린 (졸라덱스), 트립토렐린 (트렐스타) 또는 히스트렐린 (반타스)을 포함하는, 구현예 22 내지 22c 중 어느 하나의 약제학적 조성물이다.
구현예 23은 상기 표적화된 방사선이 10-70 그레이 (Gray, Gy)의 선량으로 투여되는, 구현예 1 내지 20 중 어느 하나의 방법이다.
구현예 23(a)는 상기 방사선의 선량이 10 그레이 (Gy)인, 구현예 23의 방법이다.
구현예 23(b)는 상기 방사선의 선량이 20 그레이 (Gy)인, 구현예 23의 방법이다.
구현예 23(c)는 상기 방사선의 선량이 30 그레이 (Gy)인, 구현예 23의 방법이다.
구현예 23(d)는 상기 방사선의 선량이 40 그레이 (Gy)인, 구현예 23의 방법이다.
구현예 23(e)는 상기 방사선의 선량이 50 그레이 (Gy)인, 구현예 23의 방법이다.
구현예 23(f)는 상기 방사선의 선량이 60 그레이 (Gy)인, 구현예 23의 방법이다.
구현예 23(g)는 상기 방사선의 선량이 70 그레이 (Gy)인, 구현예 23의 방법이다.
구현예 23(h)는 상기 방사선의 선량이 1 내지 10개 분획으로 대상체에게 투여되는, 구현예 23 내지 23(g) 중 어느 하나의 방법이다.
구현예 23(i)는 상기 대상체가 하루 1회 표적화된 방사선 치료요법으로 치료받는, 구현예 23 내지 23(h) 중 어느 하나의 방법이다.
구현예 23(j)는 상기 대상체가 하루 2회 표적화된 방사선 치료요법으로 치료받는, 구현예 23 내지 23(i) 중 어느 하나의 방법이다.
구현예 24는 상기 표적화된 방사선이 외부 빔 방사선 치료요법, 내부 방사선 치료요법 및 전신 방사성동위원소 치료요법으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 구현예 1 내지 20 및 23 내지 23(j) 중 어느 하나의 방법이다.
구현예 25는 상기 표적화된 방사선이 분할 방사선 치료요법인, 구현예 24의 방법이다.
실시예
실시예 1: 트롬보포이에틴 모사체의 투여는 발기부전에 대한 래트 전립선 조사 모델에서 혈관 기능을 보존한다.
재료 및 방법
동물: 35마리의 8주령 수컷 스프라그 돌리 래트는 연구소 (Charles River Laboratories) (Malvern, Pa)로부터 입수하여 표준 하우징 조건하에 쌍별 거주시켰다. 동물은 4개 그룹으로 나누었다: 식염수/샴, 식염수 RT, TPOm/샴, TPOm/RT. 모든 동물 연구는 연구 위원회 (Duke University School of Medicine Institutional Animal Care and Use Committee)의 승인을 받았다.
TPOm 합성 및 치료: TPOm은 전술한 바와 Janssen Pharmaceuticals에 의해 합성되었고(참조: Knight et al., Int. J. Toxicol. 30(4):385-404 (2011)), 동결건조된 분말로서 드라이 아이스에 담아 기관 (Duke University)으로 운송하였다. TPOm은 멸균 식염수 중에서 재구성하고, 멸균 여과하고, 분취하고, 사용할 때까지 -20℃에서 저장하였다. TPOm은 RT 후 10분에 피하 주사 (3,000 ㎍/kg)를 통해 단일 용량으로서 투여하였다. 이 용량은 다중 시점에서 투여될 때 위약과 비교하여 실질적인 생존 이점을 생성하는 래트 전신 방사선 연구에서의 그 효과에 기초하여 선택되었다.
전립선 조사: 정위적 이미지-유도된 전립선 단일 분획 RT는 이전에 공개된 바와 같이 수행하였다(참조: Kimura et al., J. Sex Med. 9(6):1535-49 (2012)). 간략하게, 래트는 마취시키고 폴리스티렌 블록 상에 고정화시켰다. CT 스캔을 수행하여 GE 디스커버리 RT590 (GE Healthcare, Little Chalfont, Uk)을 사용하여 전체 골반을 이미지화하였다. 개별화된 치료 계획은 에클립스 치료 계획 시스템 (Eclipse treatment planning system) (Varian Medical Systems, Palo Alto, Ca)을 사용하여 각각의 래트에 대해 준비하였다. 전립선과 직장의 윤곽을 잡았고 1차 치료 용적은 전립선 1 mm까지의 확장에 이어서 1 mm까지 확장된 직장을 공제하여 생성하였다. 6 MV의 빔 에너지를 사용하는 단일의 역학적 컨포멀 아크 계획 (single, dynamic conformal arc plan)을 정규화하여 20 Gy를 직장의 부분 간격과 함께 단일 분획으로 1차 치료 용적의 95%에 전달하였다. 방광, 음경 및 고환의 대부분은 영역으로부터 배제하였다. 이어서, 래트를 계획한 바와 같이 동일한 마취 윈도우 내 골 이미지 가이드와 함께 치료하기 전 콘 빔 컴퓨터 계산된 단층촬영을 사용하여 NovalisTx 방사선수술 리낙 (radiosurgery linac) (Brainlab AG, Munich, DE and Varian Medical Systems)에서 치료하였다. 샴 조사된 래트를 마취시키고 조사 없이 폴리스티렌 블록에 고정시켰다.
음경해면체내 압력(ICP) 측정: 음경해면체내 압력 (ICP) 측정을 위해, 이전에 공개된 프로토콜을 따랐다(참조: Kimura et al., J. Sex Med. 8(8):2215-26 (2011)). 간략하게, 래트는 케타민/크실라진으로 마취시켰다. 경동맥을 시각화하기 위해 복부 경추 피부를 절개하고, 연속 평균 동맥압 (MAP) 모니터링을 위해 헤파린화된 식염수를 함유하는 폴리에틸렌 (PE)-50 튜브를 삽입하였다. 이어서, 복막을 개방하고 고환을 축출하였다. 후측면 전립선을 따라 해면 신경을 시각화하고 식염수로 채워진 PE-60 튜브에 연결된 23G 니들을 음경 기부 근처의 동측 판에 삽입하였다. 튜브 둘 모두는 압력 변환기 (World Precision Instruments, Sarasota, FL)에 연결하였다. 해면 신경을 단리하고 자극 사이에 1분의 휴식과 함께 1분 동안 4, 6 또는 8 V로 S48 자극기 (RI, West Warwick, RI)에 연결된 양극성 전극을 사용하여 분리하고 자극 하였다. MAP 및 ICP는 LabChart 7 소프트웨어 (ADInstruments, Colorado Spring, Co)를 사용하여 기록하였고, 기준선 압력 및 마취 효과의 래트 간 차이를 최소화하기 위한 비율로 표현하였다.
하이드랄라진-유도된 혈관 확장의 초음파 측정: ICP 측정 후, 청각 겔을 전립선 영역에 적용하였고 마우스 고주파 에코 변환기 (MS5505)를 내음부 동맥에 적용하였다. 이미지를 B-모드로 Vevo 2100 기계 (Visual Sonics; Toronto, On)를 사용하여 획득하여 2-D 심장 초음파 검사에 의해 동맥 직경을 평가하였다. 모든 동물에서 치골과 동일한 US-측정 거리를 사용하여 재현 가능한 US 배치를 확인하였다. 이어서, 하이드랄라진 (Sigma, St. Louis, MO) (0.4 mg/kg)을 1분에 걸쳐 경동맥 카테터를 통해 주입하였고, 심장초음파를 반복하였다. 동맥 직경은 Vevo 2100 소프트웨어용 혈관 패키지를 사용하여 측정하였다.
CD31 염색 및 정량: 음경은 액체 질소에서 급속 냉동시키고 사용때 까지 -80℃에서 저장하였다. 냉동절개부 (10 ㎛)는 Crytome FSE 크리오스태트 (cryostat) (ThermoFisher Scientific, Kalamazoo, Mi)를 사용하여 제조하였다. 절개부는 아세톤 중에서 20분 동안 고정화시키고, 공기 건조시키고, 10% 당나귀 혈청 (Sigma)을 사용하여 차단하였다. 1차 항체 (마우스 항-래트 CD31, 클론 TLD-3A12, BD Pharmingen, Franklin Lakes, NJ) 및 2차 항체 (Alexa Fluor 488-접합된 당나귀 항-마우스 IgG; Jackson ImmunoResearch, West Grove, Pa)를 각각 1시간 동안 적용하였고, 절개부는 포르말린 중에 고정화시키기 전에 5분 동안 2.5 ㎍/ml에서 Hechst 33342 (Sigma)를 사용하여 대비염색시키고 Cytoseal60 (ThermoScientific)을 사용하여 밀봉하였다. 슬라이드는 ZEN 2 소프트웨어가 장착된 Zeiss Axio 이미지화기 현미경을 사용하여 이미지화하였다. 샘플에 걸쳐 동일한 노출 시간을 사용하여 염색 24시간 이내에 샘플을 이미지화하였다. 혈관 둘레에 정규화된 CD31 발현을 ImageJ 소프트웨어를 사용하여 수행하였다. 먼저, 측정은 알려진 길이 (100 마이크론)의 스케일 바로 전체적으로 보정하였다. 이어서, ImageJ 윤곽 도구를 사용하여 둘레 (마이크론) 및 면적 (마이크론2)에 대한 측정 값을 수득하였다. 이어서, CD31 발현은 각각의 혈관 주변에 CD31만이 염색된 부분을 강조하고 모든 이미지에 걸쳐 균일한 역치를 사용하여, 염색된 영역의 픽셀 카운트를 수득함에 의해 정량하였다. 혈관 크기 변화를 설명하기 위해, 각각의 혈관에 대해, CD31 발현에 대한 미가공 계수는 이어서 상기 혈관에 대한 둘레로 정규화하였다. 모든 분석은 맹검 방식으로 완료하였다.
통계: 통계학적 분석은 프리즘 (Prism) 6 (GraphPad, LaJolla, Ca)을 사용하여 완료하였다. 양방향 ANOVA는 체중 증가율에 대해 사용되었고 ICP 및 쌍을 이루지 않은 t-시험을 사용하여 조직학적 변화를 비교하였다. 윌콕손 쌍을 이룬-t-시험을 사용하여 하이드랄라진 투여 전 및 후에 각각의 래트에서 동맥 직경을 비교하였다. 래트 중량은 양방향 반복 측정 ANOVA를 사용하여 평가하였다.
결과
TPOm은 방사선 치료요법 (RT) 후 체중 증가율의 감소를 방지한다.
모든 래트는 RT 후 체중이 계속 증가하여 방사선 치료의 정확성과 위장 조직에 대한 노출을 최소화하는 능력을 나타낸다. 그러나, 식염수 조사된 래트의 체중 대 시간 플롯은 다른 모든 치료 그룹에 비해 체중의 감소된 비율 및 정도를 보여주었다(도 1a). 양방향 반복된 측정 ANOVA를 수행하였고 이는 체중 증가, RT-이후 시간 및 치료 양상의 유의한 (p=0.0054) 상호작용을 입증하였다. 평균 체중 증가율에서의 차이는 식염수/샴 (27.5 ± 2.8 g/주), TPOm/샴 (37.7 ± 3.3 g/주), 식염수/RT (21.6 ± 1.6 g/주) 및 TPOm/RT (28.6 ± 3.9 g/주) 그룹 간에서 관찰되었지만(도 1b); 양방향 ANOVA에 이어서 터키 (Tukey) 사후검정 시험은 단지 TPOm/샴과 식염수/RT 그룹 간에서만 유의한 쌍을 이룬 차이 (p<0.05)를 확인했다.
TPOm은 RT 후 동맥 기능을 보존한다.
TPOm이 혈관 기능을 보존할 수 있었는지를 평가하기 위해, 초음파 심장초음파를 사용하여 하이드랄라진 투여에 대한 응답으로 음부 동맥 확장을 측정하였다(도 2). 방사선 (p=0.86), TPOm, (p=0.47) 또는 상호작용 (p=0.46)과 관련하여 그룹에 걸쳐 기준선 동맥 직경에는 어떠한 유의한 차이도 없었다. 하이드랄라진 주입 후, 식염수/샴 래트로부터의 동맥은 직경이 평균 28.8%±14.6%로 유의적으로 증가하였다. TPOm 단독으로 치료된 비-조사된 래트는 직경이 10.4%±10% 증가한 것으로 나타났다. 식염수/RT 래트로부터의 동맥은 하이드랄라진 후 확장할 수 없었고, 기준선으로부터 직경에서 비-유의적 -7.4%±9.9% 변화를 보여주고, 이는 RT가 래트에서 동맥 기능, 예를 들어, 음부 동맥 혈관확장을 손상시켰음을 나타낸다. 그러나, RT 후 치료는 동맥 기능을 보존하였고, 예를 들어, 래트를 손상된 음부 동맥 혈관확장으로부터 보호하고, 동맥은 하이드랄라진에 응답하여 직경에서 24.1%±7.2% 변화를 보여주고, 비-조사된 대조군과 유의적으로 상이하지 않았다.
TPOm은 혈관 수축으로부터 보호한다.
음경 동맥에 대한 RT 및 TPOm 상호작용의 효과를 평가하기 위해, 냉동보존된 음경을 CD31 발현에 대해 조직학적으로 평가하여 혈관계를 확인하였다(도 3a). 식염수 또는 TPOm으로 치료받은 비조사된 래트에서 음경 동맥 둘레에 어떠한 차이도 없었지만 방사선은 샴/식염수 대조군과 비교하여 동맥의 단면적을 유의적으로 감소시켰다(p<0.01). 음경 동맥 단면적에서의 이러한 감소는 TPOm/RT 래트에서 나타나지 않았고(도 3b), 이는 RT에 의해 유도된 혈관수축으로부터의 보호 효과를 시사한다. CD31 염색 (CD31+ 픽셀의 수)은 혈관 내피 두께의 마커로서 평가하였고, 이 값은 동맥 둘레로 정규화하여 동맥 크기에서의 차이를 설명하였다. CD31+ 픽셀/㎛로서 표현되는 경우, 양방향 ANOVA는 RT의 유의한 효과를 보여주었지만 임의의 치료 그룹 간에 CD31 밀도에서 어떠한 쌍별 차이도 없었다(도 3c).
TPOm에 의한 혈관 보호는 시험된 조건하에서 9주에 발기를 보존하기 위해 충분하지 않았다.
이전에, 방사선-유도된 ED에 대한 래트 모델은 방사선량과 ED의 발생 간에 S자 모양의 관계를 나타내는 것으로 관찰되었다(참조: Koontz et al., "Dose dependence of radiation-induced erectile dysfunction in an animal model," J. Sex. Med. 9 (Proceedings from the 17th AnnualFallScientificMeetingofSexualMedicineSocietyofNorthAmerica,LasVegas,NV,Nov.10-13(2011)(2012)). 14, 20 및 25 Gy의 용량은 각각 래트의 50%, 80% 및 100%에서 ED를 초래할 것이다(데이터는 나타내지 않음). TPOm의 완화 효과를 시험하기 위해, 20 Gy의 용량은 용량 반응 곡선의 S자 모양의 부분을 따라 변화를 검출하기 위해 적용하였다. TPOm 단독으로 치료받은 래트는 ICP:MAP의 증가된 변산도를 보여주었지만, 평균은 식염수로 치료받은 비조사된 래트와 유의적으로 상이하지 않았다(도 4). RT 단독으로 치료받은 6마리의 래트 중에서, 5마리의 래트는 0.6 초과의 ICP:MAP 비율을 생성할 수 없었고, 이 연구에서 83%의 ED 침투율을 보여준다. 방사선 후 TPOm 치료는 ED를 예방하지 않았고 67%의 침투율을 갖는다. 양방향 ANOVA는 비조사된 샴 대조군과 식염수/RT 및 TPOm/RT 래트 둘 모두 간의 유의한 차이를 동정하는 사후검정 터키 분석과 함께 RT의 유의한 효과 (p=0.0043)를 보여주었다.
실시예 2: 방사선-유도된 혈관 투과성과 백혈구 부착에 대한 트롬보포이에틴 모사체의 효과를 평가하기 위한 신규 뮤린 귀 정맥 모델의 적용.
재료 및 방법
동물. Flk1-mCherry 마우스 (참조: Larina et al., Anat. Rec. 292(3):333-41 (2009))는 시설 (Duke University Breeding Core facility)에서 사육하였다. 적어도 8주령의 수컷 및 암컷 마우스는 실험 전반에 걸쳐 비-장벽 시설 및 수용된 그룹으로 옮겼다. Flk1-mCherry 마우스에서 혈관 내피 세포는 항상성으로 mCherry를 발현하였고 이는 생체내 현미경 이미지화 및 분석을 용이하게 한다. 모든 동물 연구는 연구 위원회 (Duke University School of Medicine Institutional Animal Care and Use Committee)의 승인을 받았다.
귀 조사 . 마우스는 80/8 mg/kg 케타민/크실라진을 i.p. 주사하여 마취시켰다. 마우스를 좌측 귀 이개 (pinna)를 제외하고는 전신을 차폐하는 원통형 리드 지그 (cylindrical lead jig)에 위치시키고 203 cGy/분의 선량률 (2 mm Al 필터를 사용한 320 kVp/10 mA)로 직교전압 X-선 320 조사기 (Precision X-ray Inc.; North Branford, Ct)를 사용하여 조사하였다. 모든 선량측정은 실험을 개시하기 전에 듀크 방사선 물리학 (Duke Radiation Physics)으로 확인되었다.
TPOm 합성 및 투여 . TPOm은 전술한 바와 같이 Janssen Pharmaceuticals에 의해 합성되었고(참조: Knight et al., Int. J. Toxicol. 30(4):385-404 (2011), 건조된 형태로 기관 (Duke University)으로 운송하였다. TPOm은 멸균 식염수 중에서 재구성하고, 멸균 여과하고, 분취하고, 사용할 때까지 -20℃에서 저장하였다. 주사 직전, 적정 분취액을 해동시키고 희석하였다. 마우스는 방사선 6시간 후에 피하로 300 ㎍/kg의 TPOm을 투여받았다.
생체내 현미경. 마우스를 이소플루란 (2%, 산소와 혼합)을 통해 마취시키고 귀를 화학적으로 탈모시키고(Nair™) 70% 에탄올로 세척하였다. 마우스를 제이스 옵저버 (Zeiss Observer) Z1 (Carl Zeiss AG, Oberkochen, Germany) 도립 현미경 아래의 가열된 스테이지 위에 위치시켰다. 조사된 귀는 양면 테이프를 사용하여 플렉시 유리 슬라이드에 부착시켰다. 이미지는 Zen 이미지화 소프트웨어 (Carl Zeiss AG, Oberkochen, Germany)를 사용하여 획득하였다. Flk1-mCherry 마우스에서 혈관 내피 세포는 mCherry를 발현하고, 이는 제이스 텍사스 레드 필터 (Zeiss Texas Red filter) (Ex. 560/40; Em. 630/75)를 사용하여 시각화하였다. 아크리딘 오렌지 및 FITC-덱스트란은 제이스 (Zeiss) eGFP/FITC/Alexa488 필터 (Ex. 470/40; Em. 525/50)를 사용하여 시각화하였다.
백혈구-내피 세포(L/E) 상호작용. 마우스를 현미경으로 배향시킨 후, 0.5 mg의 아크리딘 오렌지 (Sigma, St. Louis, MO; 멸균 식염수에 용해된)를 정맥 내 주사하였다. 아크리딘 오렌지는 혈액 내 모든 핵화된 세포 (즉, 백혈구)를 표지한다. 혈관계는 60초 동안 이미지화하였고, 이미지는 200 ms 마다 촬영되었다. 구르는 백혈구는 혈관벽을 따라 변연되어 혈류로부터 명확하게 해리된 세포로 정의되었다. 이들의 직경에 기초하여 마우스당 4개의 세정맥이 확인되었고, 각 세정맥에서 3개의 미리 선택된 지점을 지나서 구르는 백혈구의 수를 계수하였다. 혈관 직경 (D) 및 자유-유동 백혈구 속도 (V)를 또한 측정하고 이를 사용하여 (8×V)/D로서 정의된 전단 속도를 계산하였다. 모든 비디오는 치료 그룹에 맹검인 연구자에 의해 분석하였다.
혈관 투과성 측정 및 평가. 마우스를 현미경으로 배향시킨 후, 타이곤 마이크로보어 튜브 카테터 (Tygon Microbore tubing catheter) (Harvard Apparatus)로 시린지에 부착된 30G 니들은 꼬리 정맥에 삽입하였다. FITC 및 mCherry 채널 둘 모두의 Z-스택 이미지는 10초 마다 획득하였고, 0.5 mg의 FITC-접합된 70 kDa 덱스트란을 제3 세트의 이미지들을 수거한 후 카테터를 통해 주사하였다. 이미지 획득은 25분 동안 10초 마다 수행하였다.
투과성의 하나의 구획 모델은 C T (t)에 대한 식을 사용하여 추정되었다. 시간 t에서 혈관외 조직 내 덱스트란의 조직 농도 (시간 활성 곡선 [TAC]으로서 공지됨)는 하기에 의해 주어진다:
Figure pct00008
모델(0.1)은 시간 t에서 조직 농도에서의 변화가 지연 Δ에서 혈관계 내 덱스트란의 농도인 C B (t-Δ)에 비례한다고 가정한다. 단순하게 하기 위해, 혈관외 조직으로부터 혈관 구획으로 다시 복귀하는 덱스트란의 가능성을 배제하였다. 이 설정에서, 관심 대상의 양은 k 1, 투과율이다. C B (0) = 0 (시간 0에서 조직 내 덱스트란이 없다)인 초기 조건을 가정하면, 미분 식(1.1)은 다음과 같이 풀이될 수 있다:
Figure pct00009
식(0.2)으로부터 k 1 추정은 t, C B (t) 및 C T (t) 시점에서 덱스트란의 혈관내 및 혈관외 농도 둘 모두를 알아야 한다. 신뢰할 수 있는 혈관 마커의 부재로 인해, 이미지에서 혈관 및 혈관외 성분들을 정확하게 구분하는 것은 어려웠다. 그러나, 가장 초기의 덱스트란 신호가 단지 혈관계에서 나타나기 때문에 혈관계 일부는 확인할 수 있었다. 이 영역 상에 ROI를 그려서 TPOm은 방사선장 외부의 혈관계를 보호한다. 도 3a는 RT 이후 9주 째에 CD31에 대해 염색된 혈관 내피 세포의 면역형광 이미지를 보여준다. 면역형광 이미지를 생성하기 위해, 음경 조직을 절개하고, 냉동절제하고, 혈관 내피 세포를 CD31 면역형광을 사용하여 시각화하였다. 도 3b는 음경 동맥의 단면적을 입증하는 그래프를 보여준다. 도 3c는 둘레의 픽셀/마이크론으로서 CD31 밀도 (CD31 발현/동맥 둘레)의 정량화를 입증하는 그래프를 보여준다. N=4-6/그룹.
도 4는 래트에서 전립선 RT (20 Gy) 유도된 발기 기능부전 (ED)가 RT 이후 10분 째에 투여된 단일 용량의 TPOm에 의해 방지되지 않았음을 입증하는 그래프를 보여준다. 해면 신경 자극 후 해면체내 압력 (ICP)을 RT (20 Gy) 후 9주 째에 시험하였고 평균 동맥압 (MAP)으로 정규화하였다. 신경은 4V, 6V 또는 8V로 자극하였고, 각각의 래트로부터 최상의 반응이 분석을 위해 사용하였다. 별표 *는 방사선의 유의한 효과를 나타낸다 (p=0.004, 양방향 ANOVA). N=6-7마리 래트/그룹.
도에서, 혈관 TAC C B (t)를 추정할 수 있다. TAC가 혈관계의 다른 부분에 걸쳐 균일하다는 가정이 이루어졌다. 혈관외 영역을 식별하기 위한 시도 대신, 혈관 및 조직 성분 둘 모두로 구성된 전체 시야 C F (t)에서 평균 활성을 계산하였다. 일반성을 잃지 않고, 이 전체 활성은 다음과 같이 표현할 수 있다:
Figure pct00010
여기서, v b 는 혈관계로 구성된 시야에서 (미지의) 면적 분획이다. 이어서, 식(0.3)에서 미지의 조직 TAC C T (t)는 다음과 같이 식(0.2)을 사용하여 대체될 수 있다:
Figure pct00011
혈관 TAC, C B (t)가 엄격하게 양수 (> 0)인 것으로 가정하면, (0.4)의 양변은 변환된 식을 수득하기 위해 나눌 수 있다:
Figure pct00012
즉,
Figure pct00013
여기서,
Figure pct00014
,
Figure pct00015
및
Figure pct00016
식(0.5)은 직선 형태인 것으로 나타날 수 있고 이는 선형 회귀를 사용하여 피팅될 수 있다. 미지의 상수 v b 및 m은 적합 회귀 선의 기울기와 절편으로서 추정된다. 일반적으로 파틀락 그래프 분석으로서 공지된 상기 추정 기술은 역학적 PET 연구에서 방사선 추적기의 조직 수송 속도를 추정하는데 사용된다(참조: Patlak et al., J. Cereb Blood Flow Metab. 3(1):1-7 (1983)). 실제로, (0.5)에 기재된 선형 관계가 도 6에 나타낸 기울기를 유도하기 전에 평형에 도달하는데 시간이 걸린다. 이러한 이유 때문에, 선형 관계는 연구의 처음 10분을 제외함으로써 피팅하였다. 이러한 목적을 위해, 투과성 상수는 다음과 같이 추정될 수 있다:
Figure pct00017
순환 혈액 세포 분석. 마우스는 복막내로 주사된 50 μL의 유타졸 (Euthasol) (Virbac, Fort Worth, Tx)로 안락사시켰다. 마우스가 발가락 핀치에 비-반응성이 된 후, 그러나 심장박동이 멈추기 전에, 500 μL의 혈액을 헤파린화된 시린지를 통해 심장 천공에 의해 수거하였고, 즉시 20 μL의 헤파린을 사용하여 와동시켰다. CBC 분석은 연구소 (Duke University Veterinary Diagnostic Laboratory)의 IDEXX ProCyte Dx 혈액학 분석기를 사용하여 수행하였다.
결과
혈관 투과성에 대한 TPOm의 효과
방사선-매개된 혈관 내피 세포 아폽토시스의 결과 중 하나는 감소된 혈관 무결성이고, 이는 혈관 누출을 초래한다(참조: Weintraub et al., Am. Coll. Cardiol. 55(12):1237-9 (2010)). 혈관 무결성은 70 kDa FITC-덱스트란의 정맥내 주사 후 혈관계로부터 덱스트란 혈관외유출을 정량함으로써 평가하였다. 이 크기의 덱스트란은 이것이 알부민 크기에 근접하기 때문에 선택되었고; 따라서, 이의 혈관외유출은 생리학적으로 관련이 있다(참조: Dreher et al., J. Natl. Cancer Inst. 98(5):335-44 (2006)). 덱스트란은 이미지화를 개시한 후 30초에 주사하여 배경 신호를 확립하였다. 주사 후, 강한 형광성 신호는 혈관 네트워크 전반에 걸쳐 산재하는 혈관계 내에서 나타났다. 누출은 혈관계내에서 기원하는 FITC 신호의 "확산"으로서 관찰되었다.
조직으로부터 혈관계로의 역 수송을 포함하는 모델이 고려되었지만, 양방향으로 수송하는 표준 모델은 혈액 TAC가 음성 대수적 형태를 가짐을 추정하고, 상기 혈액 TAC는 단색적으로 시간 경과에 따라 감소함을 암시한다. 본원에 제시된 관찰된 혈액 TAC에 기초하여, 이것은 다수의 경우에 위반되고, 일부 개체들은 이미지화 동안에 이후 시점에 증가함에 이어서 감소한다. 이것은 표준 모델이 일부 데이터에 대해 불량하게 피팅함을 시사한다. 피팅된 모델은 이것이 혈액 TAC에 대한 임의의 특정 형태를 사전 추정하지 않고 경험적으로 관찰된 데이터를 사용하기 때문에 보다 강력하였다.
TPOm 치료요법은 누출을 감소시킴에 의해 혈관 무결성을 보존하였다.
비-조사된 대조군 마우스는 강한 혈관 무결성을 보여주었고 신호는 혈관 내에 남아있었고 25분 이미지화 세션 동안 눈에 띄게 변화하지 않았다. 혈관 무결성이 RT에 의해 손상된 마우스에서, FITC 신호는 명백하게 혈관 마스크를 넘어 연장되었다. 투과율은 각 마우스에 대해 계산되었고 도 7에 나타낸다.
방사선은 조사 후 3일 및 7일 째에 투과율을 유의하게 증가시켰다 (p < 0.05, 대조군과 비교하여(표 1)). 그러나, 조사 후 TPOm으로 치료받은 마우스로부터 투과율은 이의 어느 하나의 시점에서 비-조사된 대조군과 유의하게 상이하지 않았다. 그러나, 대조군 그룹에서 상승된 투과성을 보여주는 일부 동물이 있는 반면 TPOm 그룹에서 어떠한 동물도 7일 째에 나타나지 않았다. 3일 및 7일 째에 투과율 간에는 어떠한 상관관계도 없었고, 이는 동물들 사이에서 손상이 동시에 최고치가 되지 않을 수 있음을 시사한다(도 8).
보정된 덱스트란 투과율 비교의 ANOVA 결과
용어 효과 표준 오차 t-값 p-값
기준선 0.0012 0.0003 3.7025 0.0003
RT D3 0.0013 0.0006 2.0089 0.0483*
RT D7 0.0015 0.0006 2.2727 0.0260*
RT + TPO D3 0.0009 0.0007 1.2689 0.2086
RT + TPO D7 -0.0002 0.0007 -0.2346 0.8152
백혈구-내피 세포 상호작용에 대한 TPOm의 효과.
이전의 연구는 생체내 현미경을 사용하여 조사-매개된 염증 반응을 정량화하여, 조사된 소장(참조: Johnson et al., BMC Surgery 4:10 (2004)), 피부(참조: Kimura et al., Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 33(3):627-33 (1995)), 및 설하 점막(참조: Birer et al., "Inhibition of the continuum of radiation-induced normal tissue injury by a redox-active mu porphyrin," Radiation Research, 188(1):94-104 (2017))의 말단 세정맥에서 구르는 백혈구를 증가시켰다. 백혈구-내피 상호작용을 평가하기 위해, 조사 후 (6 Gy) 24시간에 귀 혈관계의 실시간 이미지를 수득하였다. 백혈구 핵은 혈관내 아크리딘 오렌지 주사 후 표지화시켰고, 이것은 형광성 현미경에 의한 시각화를 허용하였다. 구르는 백혈구는 샴 및 RT 마우스 둘 모두에서 자유 유동(도 9a)으로부터 명백하게 분리된 비율로 혈관 벽을 따라 변연되어 있는 것으로 명백하게 나타날 수 있다.
모세관 후 세정맥은 분석을 위해 사용하였고, 이는 직경 (대략적으로 직경 15-60 ㎛)과 수렴성 혈류의 증거를 기준으로 다른 혈관으로부터 구분되었다. 치료는 선택된 혈관 중에서 평균 혈류 속도, 직경 또는 전단 속도에 대한 어떠한 유의한 효과도 갖지 않았다(도 10).
혈관 벽과 평행한 혈류의 힘인 전단 속도는 L/E 상호작용에 대해 직접적인 영향을 미친다. 보다 높은 전단 속도는 부착 분자와의 백혈구 상호작용을 감소시킨다. 이것은 전단 속도 대 L/E 상호작용을 플롯팅할 때 높은 전단 속도와 음성 기울기에서 보다 적은 L/E 상호작용으로 해석된다. 이 관계에 대한 RT의 역할을 조사하기 위해, 전단 속도 및 L/E 상호작용은 마우스당 적어도 4개의 혈관에 대해 결정하였고, 각 혈관에 대한 값은 스캐터 플롯으로서 그래프화되었고(도 9b), 기울기는 GraphPad 프리즘을 사용하여 각 개별 마우스에 대해 계산되었다. 예상된 바와 같이, L/E 상호작용은 전단 속도가 증가함에 따라께 감소하였고, -14.4±5.1의 기울기를 산출하였다(도 9c).
그러나, 조사 후 24시간에, 충분한 내피 활성화는 보다 높은 전단 속도에서도 L/E 상호작용이 지속되도록 일어나고, 5.6±3.6의 평균 기울기를 초래하였다.
백혈구 계수의 전신적 변화로부터 관찰 결과가 발생할 가능성을 배제하기 위해, 완전한 혈액 계수를 수행하였다(표 2). 조사 이후 24시간 까지, RT 마우스에서 혈소판이 약간 감소하였지만, 이것은 유의하지 않았다. 그룹에 걸쳐 또는 RT, TPOm 또는 상호작용의 효과로서 총 백혈구, 호중구 또는 림프구에서 어떠한 유의한 차이도 없었다. 따라서, L/E 상호작용에서 관찰된 증가는 단지 상승된 혈액 성분들의 부산물이 아니었다.
완전한 혈액 계수는 RT 이후 24시간 째에 수득되었다. N=5/그룹; 데이터는 평균±SEM으로서 제시된다.
식염수,
0 Gy		 TPOm,
0 Gy		 식염수,
6 Gy		 TPOm,
6 Gy		 TPOm의 효과
(p-값)		 RT의
효과
(p-값)		 상호작용의 효과
(p-값)
혈소판
(K/μL)		 582±80 531±68 370±70 548±105 0.4523 0.2543 0.1815
백혈구
(K/μL)		 2.5±0.5 2.55±0.48 3.64±0.7 2.11±0.33 0.2603 0.9926 0.1073
호중구
(K/μL)		 0.368±0.05 0.68±0.31 0.456±0.09 0.232±0.05 0.7929 0.291 0.1235
림프구
(K/μL)		 1.79±0.44 1.77±0.23 1.52±0.12 1.33±0.24 0.7046 0.2292 0.7779
귀에 대해 6 Gy로 치료받고 이후 6시간에 식염수 또는 300 ㎍/kg의 TPOm을 피하로 투여받은 마우스에서, L/E 상호작용 및 전단 속도 간의 관계에 대한 통계학적으로 유의한 효과가 있었고 식염수 그룹에서 평균 기울기는 -14.4±10.9인 반면, TPOm 치료받은 그룹과 비-조사된 대조군 간에는 어떠한 차이 (-8.7±6.4의 평균 기울기)도 없었다. 이들 발견은 TPOm이 조사 후 혈관 내피 백혈구 상호작용을 감소시키고 따라서 조사 후 혈관 무결성의 유지를 촉진시킬 수 있다는 가설을 지지한다.
당업자는 이의 광범위한 본 발명의 개념으로부터 벗어나는 것 없이 상기 구현예가 변화될 수 있음을 인지할 것이다. 따라서, 본 발명이 기재된 특정 구현에 제한되지 않는 것으로 이해되지만 본원의 개시내용에 의해 정의된 바와 같은 본 발명의 취지 및 범위 내에서의 변형을 포함하는 것으로 의도된다.
SEQUENCE LISTING <110> Janssen Pharmaceutica N.V. <120> METHODS OF PROTECTING VASCULAR INTEGRITY INDUCED BY TARGETED RADIATION THERAPY <130> 688097.0510/334WO <150> us 62/537,049 <151> 2017-07-26 <160> 4 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic peptide <220> <221> X <222> (9)..(9) <223> tryptophan or beta-(2-naphthyl)alanine <220> <221> X <222> (14)..(14) <223> alanine or sarcosine <400> 1 Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Xaa Leu Ala Ala Arg Xaa 1 5 10 <210> 2 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic peptide <220> <221> X <222> (9)..(9) <223> beta -(2-naphthyl)alanine <220> <221> X <222> (14)..(14) <223> sarcosine <400> 2 Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Xaa Leu Ala Ala Arg Xaa 1 5 10 <210> 3 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 3 Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala 1 5 10 <210> 4 <211> 269 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Recombinant peptide <400> 4 Met Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu 1 5 10 15 Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu 20 25 30 Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 35 40 45 His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 50 55 60 Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr 65 70 75 80 Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn 85 90 95 Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro 100 105 110 Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln 115 120 125 Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val 130 135 140 Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val 145 150 155 160 Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro 165 170 175 Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr 180 185 190 Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val 195 200 205 Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu 210 215 220 Ser Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg 225 230 235 240 Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Ile 245 250 255 Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala 260 265

Claims (15)

  1. 표적화된 방사선 치료요법에 노출된 대상체에서 혈관 무결성을 보호하는 방법으로서, 상기 방법이 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는, 유효량의 트롬보포이에틴 (TPO) 모사체를 대상체에게 투여함을 포함하는, 방법.
  2. 제1항에 있어서, 상기 TPO 모사체가 하기 화학식 I의 구조를 갖는 RWJ-800088 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 에스테르인, 방법:
    화학식 I
    Figure pct00018

    상기 화학식 I에서,
    MPEG는 메톡시폴리에틸렌글리콜20000이다.
  3. 제1항에 있어서, 상기 TPO 모사체가 서열번호 4를 포함하는 로미플로스팀인, 방법.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 표적화된 방사선 치료요법에 노출된 상기 대상체가 암 치료를 받고 있는, 방법.
  5. 제4항에 있어서, 상기 암이 전립선암, 두경부암, 간세포 암종, 결장암, 폐암, 흑색종, 췌장암, 및 유방암으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체가 방사선에 노출된 후 적어도 약 10분 내지 적어도 약 420분에 상기 TPO 모사체가 대상체에게 투여되는, 방법.
  7. 제6항에 있어서, 대상체가 방사선에 노출된 후 적어도 약 20분 내지 적어도 약 360분에 상기 TPO 모사체가 대상체에게 투여되는, 방법.
  8. 제7항에 있어서, 대상체가 방사선에 노출된 후 적어도 약 40분 내지 적어도 약 240분에 상기 TPO 모사체가 대상체에게 투여되는, 방법.
  9. 제8항에 있어서, 대상체가 방사선에 노출된 후 적어도 약 60분 내지 적어도 약 180분에 상기 TPO 모사체가 대상체에게 투여되는, 방법.
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체가 표적화된 방사선 치료요법 및 유효량의 TPO 모사체의 투여 후 손상된 음부 동맥 혈관확장으로부터 보호되는, 방법.
  11. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체가 표적화된 방사선 치료요법 및 유효량의 TPO 모사체의 투여 후 감소된 혈관수축을 갖는, 방법.
  12. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체가 표적화된 방사선 치료요법 및 유효량의 TPO 모사체의 투여 후 감소된 혈관 누출을 갖는, 방법.
  13. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체가 표적화된 방사선 치료요법 및 유효량의 TPO 모사체의 투여 후 감소된 혈관 내피 백혈구 상호작용을 갖는, 방법.
  14. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 표적화된 방사선 치료요법이 외부 빔 방사선 치료요법, 내부 방사선 치료요법 및 전신 방사성동위원소 치료요법으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
  15. 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 표적화된 방사선이 10-70 그레이 (Gray, Gy)의 선량으로 투여되는, 방법.
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Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2022523663A (ja) * 2019-01-25 2022-04-26 ヤンセン ファーマシューティカ エヌ．ベー． 放射線処置および／または放射線模倣剤処置を伴う、肝損傷を緩和し、肝臓の肥厚、再生、および細胞の生着を促進するための方法
CN113402614A (zh) * 2021-04-22 2021-09-17 山东泉港药业有限公司 血小板生成素拟肽融合蛋白(fc-tmp)编码基因与应用
WO2023225628A2 (en) * 2022-05-20 2023-11-23 Janssen Pharmceutica Nv Methods for mitigating lung injury in conjunction with exposure to radiation and/or radiation or radiomimetic treatments
WO2024095178A1 (en) 2022-11-01 2024-05-10 Janssen Pharmaceutica Nv Thrombopoietin mimetic for use in the treatment of acute liver failure

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK0644771T4 (da) 1992-06-11 2006-12-27 Alkermes Inc Lægemiddelsystem til levering af erythropoietin
US5354934A (en) 1993-02-04 1994-10-11 Amgen Inc. Pulmonary administration of erythropoietin
US5869451A (en) * 1995-06-07 1999-02-09 Glaxo Group Limited Peptides and compounds that bind to a receptor
BR9608587A (pt) * 1995-06-07 1999-01-05 Glaxo Group Ltd Composto que se liga ao receptor de trombopoietina composição farmacêutica e processo para o tratamento de um paciente sofrendo de um distúrbio
US7091311B2 (en) 1996-06-07 2006-08-15 Smithkline Beecham Corporation Peptides and compounds that bind to a receptor
US6660843B1 (en) 1998-10-23 2003-12-09 Amgen Inc. Modified peptides as therapeutic agents
US7723295B2 (en) 2003-08-28 2010-05-25 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. Peptides and compounds that bind to a receptor
US7576056B2 (en) 2003-08-28 2009-08-18 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. Peptides and compounds that bind to a receptor
US7615533B2 (en) * 2004-08-16 2009-11-10 Janssen Pharmaceutica N.V. TPO peptide compounds for treatment of anemia
US20060210542A1 (en) 2004-08-16 2006-09-21 Yurkow Edward J Use of TPO mimetic compounds and pharmaceutical compositions in the treatment of anemia
AU2007208226A1 (en) * 2006-01-25 2007-08-02 Amgen Inc. Thrombopoietic compounds
ES2516649T3 (es) 2006-02-14 2014-10-31 Janssen Pharmaceutica Nv Uso de compuestos péptidos de TPO y composiciones farmacéuticas en el tratamiento de la anemia
CN100391474C (zh) * 2006-06-13 2008-06-04 卢建军 用于治疗血小板减少的注射用药物
EP2307041B1 (en) 2008-06-03 2019-03-13 Janssen Pharmaceutica, N.V. Tpo mimetic peptide for preventing hematological disorder associated with cancer treatment
MX2011008936A (es) * 2009-02-24 2011-09-21 Alexion Pharma Inc Anticuerpos que contienen peptidos terapeuticos mimeticos de tpo/epo.
JP6150374B2 (ja) * 2012-11-15 2017-06-21 国立大学法人弘前大学 放射線被ばく治療剤及び放射線被ばく治療方法

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