KR20200046952A

KR20200046952A - heteroaromatic macrocyclic derivatives as protein kinase inhibitors

Info

Publication number: KR20200046952A
Application number: KR1020180128811A
Authority: KR
Inventors: 심태보; 신인재; 조한나; 최승혜; 최환근; 고은화
Original assignee: 한국과학기술연구원
Priority date: 2018-10-26
Filing date: 2018-10-26
Publication date: 2020-05-07
Also published as: WO2020085742A1; KR102163494B1

Abstract

The present invention relates to: a 2,7-substituted cyano[3,2-d]pyrimidine cyclized compound having protein kinase inhibitory activity; a pharmaceutically acceptable salt thereof; and a pharmaceutical composition for preventing, alleviating or treating diseases caused by abnormal cell growth which contains the compound as an active component. A novel 2,7-substituted cyano[3,2-d]pyrimidine cyclized compound of the present invention exhibits excellent inhibitory effects on various protein kinases involved in the growth factor signal transduction, thereby being useful as an agent for preventing, alleviating or treating abnormal cell growth diseases caused by these protein kinases.

Description

단백질 키나아제 저해제인 헤테로방향족 매크로시클릭 유도체 {heteroaromatic macrocyclic derivatives as protein kinase inhibitors}Heteroaromatic macrocyclic derivatives as protein kinase inhibitors

본 발명은 단백질 키나아제 저해활성을 갖는 2,7-치환된 사이아노[3,2-d]피리미딘 화합물, 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 그리고 이 화합물을 유효성분으로 함유하는 비정상 세포 성장으로 유발되는 질환의 예방, 경감 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.The present invention is caused by abnormal cell growth containing a 2,7-substituted cyano [3,2- d ] pyrimidine compound having a protein kinase inhibitory activity, a pharmaceutically acceptable salt thereof, and the compound as an active ingredient It relates to a pharmaceutical composition for the prevention, alleviation or treatment of a disease.

단백질 키나아제는 단백질의 타이로신, 세린 및 트레오닌 잔기에 위치하는 하이드록시 그룹의 인산화를 촉매하는 효소로서, 세포의 성장, 분화 및 증식을 유발하는 성장 인자 신호 전달에 중요한 역할을 담당하고 있다.Protein kinase is an enzyme that catalyzes the phosphorylation of hydroxy groups located at tyrosine, serine and threonine residues in proteins, and plays an important role in the transmission of growth factor signals that cause cell growth, differentiation and proliferation.

생체의 항상성 유지를 위해서 생체 내 신호 전달 체계는 켜짐과 꺼짐이 원활하게 균형을 이루어야 한다. 그러나 특정 단백질 키나아제의 돌연변이나 과발현은 정상적인 세포 내 신호 전달체계를 붕괴시켜 암, 염증, 대사성 질환, 뇌질환 등 다양한 질병을 유발한다. 비정상 세포 성장 질환을 유발하는 대표적인 단백질 키나아제로는 Raf, KDR, Fms, Tie2, SAPK2a, Ret, Abl, Abl(T315I), ALK, Aurora A, Bmx, CDK/cyclinE, Kit, Src, EGFR, EphA1, FGFR3, Flt3, Fms, IGF-1R, IKKb, IR, Itk, JAK2, KDR, Met, mTOR, PDGFRa, Plk1, Ret, Syk, Tie2, TrtB 등이 있다. In order to maintain the homeostasis of the living body, the signal transmission system in the living body needs to balance on and off smoothly. However, mutation or overexpression of a specific protein kinase disrupts the normal intracellular signal transduction system, causing various diseases such as cancer, inflammation, metabolic disease, and brain disease. Representative protein kinases that cause abnormal cell growth diseases include Raf, KDR, Fms, Tie2, SAPK2a, Ret, Abl, Abl (T315I), ALK, Aurora A, Bmx, CDK / cyclinE, Kit, Src, EGFR, EphA1, FGFR3, Flt3, Fms, IGF-1R, IKKb, IR, Itk, JAK2, KDR, Met, mTOR, PDGFRa, Plk1, Ret, Syk, Tie2, TrtB and the like.

인간 단백질 키나아제는 인간 전체 유전자의 약 1.7%에 해당하는 518 종이 존재하는 것으로 추정된다 (Manning et al, Science, 2002, 298, 1912). 인간 단백질 키나아제는 크게 타이로신 단백질 키나아제 (90 종 이상)와 세린/트레오닌 단백질 키나아제로 양분될 수 있다. 타이로신 단백질 키나아제는 20개의 아과로 구분되는 58종의 수용체 타이로신 키나아제와 10개의 아과로 구분되는 32종의 세포질/비수용체로 나눌 수 있다. 수용체 타이로신 키나아제는 세포 표면에는 성장 인자를 수용할 수 있는 도메인과 세포질에는 타이로신 잔기를 인산화 할 수 있는 활성부위를 갖고 있다. 성장인자가 수용체 타이로신 키나아제 세포 표면의 성장인자 수용체 자리에 결합되면, 수용체 타이로신 키나아제는 중합체를 형성하고 세포질의 타이로신 잔기는 자가인산화 된다. 그리고 하위 계열 단백질들의 순차적인 인산화를 통해 신호 전달이 핵 내로 진행되어서 종국에는 암을 유발하는 전사인자들이 과발현 된다. It is estimated that there are 518 species of human protein kinase, about 1.7% of all human genes (Manning et al, Science, 2002, 298, 1912). Human protein kinase can be largely divided into tyrosine protein kinase (more than 90 species) and serine / threonine protein kinase. Tyrosine protein kinase can be divided into 58 receptor tyrosine kinases divided into 20 subfamily and 32 cytoplasmic / non-receptors divided into 10 subfamily. The receptor tyrosine kinase has a domain capable of accommodating growth factors on the cell surface and an active site capable of phosphorylating tyrosine residues in the cytoplasm. When growth factors bind to receptor tyrosine kinase cell surface growth factor receptor sites, the receptor tyrosine kinase forms a polymer and cytosolic tyrosine residues are autophosphorylated. And through the sequential phosphorylation of sub-family proteins, signal transmission proceeds into the nucleus, and eventually, transcription factors that cause cancer are overexpressed.

국소 부착 키나아제(focal adhesion kinase ; FAK)는 세포질에 존재하는 125 kD의 타이로신 단백질 키나아제이다. FAK는 인테그린(integrin)과 성장인자 신호전달 체계를 조절해서 세포의 이동, 증식, 생존에 결정적인 역할을 담당한다. FAK 단백질과 FAK mRNA은 편편세포암종(squamous cell carcinoma), 침윤성 직장암/유방암, 전이성 전립선암, 흑색종, 신경교종(glioma)과 같은 여러 종류의 암세포에서 과발현/활성화 되어 있다는 것이 확인되었다. 그리고 노바티스(Novartis)의 FAK 저해제인 TAE226 (Cancer Invest. 2008, 26(2), 145)은 세 가지 (HeyA8, SKOV3ip1 그리고 HeyA8-MDR) 동물모델을 통해서 유방암에 효능이 있다 (Cancer Res. 2007, 67(22), 10976)는 것이 입증되었다. 또한 화이자(Pfizer)의 FAK 저해제인 PF-573,228 (Proc Am Assoc Cancer Res, 2006, 47, Abst 5072)는 현재 성공적으로 임상 시험 중인데, 전립선암 (PC-3M), 유방암 (BT474), 췌장암 (BxPc3), 폐암 (H460), 뇌암 (U87MG) 등의 동물모델에서 효능을 보였다. 나아가 FAK 저해제 (TAE226)와 도세탁셀(docetaxel)의 병용투여는 동물모델에서 탁월한 (85～97% tumor reduction, P values <0.01) 효능을 보였다 (Cancer Res. 2007, 67(22), 10976). Focal adhesion kinase (FAK) is a 125 kD tyrosine protein kinase present in the cytoplasm. FAK plays a crucial role in cell migration, proliferation and survival by regulating the integrin and growth factor signaling systems. It was confirmed that FAK protein and FAK mRNA are overexpressed / activated in several types of cancer cells such as squamous cell carcinoma, invasive rectal cancer / breast cancer, metastatic prostate cancer, melanoma, and glioma. And Novartis' FAK inhibitor, TAE226 (Cancer Invest. 2008, 26 (2), 145), is effective against breast cancer through three (HeyA8, SKOV3ip1 and HeyA8-MDR) animal models (Cancer Res. 2007, 67 (22), 10976). In addition, Pfizer's FAK inhibitor PF-573,228 (Proc Am Assoc Cancer Res, 2006, 47, Abst 5072) is currently in clinical trials, with prostate cancer (PC-3M), breast cancer (BT474), and pancreatic cancer (BxPc3) ), Lung cancer (H460), brain cancer (U87MG), and showed efficacy in animal models. Furthermore, the combined administration of FAK inhibitor (TAE226) and docetaxel showed excellent (85-97% tumor reduction, P values <0.01) efficacy in animal models (Cancer Res. 2007, 67 (22), 10976).

FAK은 인테그린(integrin) 세포막 단백질의 신호에 관여한다. 외부의 다양한 자극에 반응하여 인테그린 수용체가 서로 뭉치면(clustering), 이에 따라 인테그린의 세포내 도메인(cytoplasmic tail)은 세포골격(cytoskeleton) 및 신호전달 단백질과 결합한다. FAK의 FERM (F for 4.1 protein, E for ezrin, R for radixin and M for moesin) 도메인과 FAT (Focal Adhesion Targeting) 도메인은 독립적으로 인테그린의 세포내 도메인과 결합하여 FAK가 국소부착점에 위치하게 한다. 국소부착점에 서로 가깝게 모인 FAK은 Y397 잔기에 분자내(intra-molecular) 혹은 분자간(inter-molecular) 인산화가 유도되어 활성화된다. FAK의 인산화된 Y397 잔기에 Src kinase의 SH2 도메인이 결합하여 FAK/Src complex를 이루게 된다. FAK에 결합된 Src kinase는 FAK의 여러 타이로신 잔기들(Y407,Y576/577, Y861, Y925)에 추가적인 인산화를 수행하게 된다. 또한 FAK/Src complex는 다양한 신호전달 단백질(P130Cas, Grb2, PI3K, Grb7)과 결합하여 인산화를 수행한다. 정상적인 세포의 경우 FAK을 경유한 신호전달은 매우 엄격하게 통제된다. 그러나 종양으로 변한 세포에서 FAK은 과발현되고 활성화되어 악성종양의 여러 특징들을 야기한다. FAK은 암세포의 증식을 촉진하고 침윤을 증가시키며 암세포의 이동을 증가시킨다. 또한 FAK은 암세포 사멸을 억제하고 혈관신생을 증가시킨다고 보고되었다. FAK is involved in the signaling of integrin cell membrane proteins. When the integrin receptors cluster together in response to a variety of external stimuli, the integrin's intracellular domain (cytoplasmic tail) thus binds the cytoskeleton and signaling proteins. FAK's FERM (F for 4.1 protein, E for ezrin, R for radixin and M for moesin) domain and FAT (Focal Adhesion Targeting) domain independently combine with the intracellular domain of integrin, allowing FAK to be located at the local attachment point . FAKs that are collected close to each other at the local attachment point are activated by the induction of intra-molecular or inter-molecular phosphorylation at the Y397 residue. The SH2 domain of the Src kinase is bound to the phosphorylated Y397 residue of the FAK to form the FAK / Src complex. Src kinase bound to FAK undergoes additional phosphorylation to several tyrosine residues of FAK (Y407, Y576 / 577, Y861, Y925). In addition, the FAK / Src complex combines with various signaling proteins (P130Cas, Grb2, PI3K, Grb7) to perform phosphorylation. In normal cells, signaling via FAK is very tightly controlled. However, in cells that have turned into tumors, FAK is overexpressed and activated, leading to several features of malignant tumors. FAK promotes cancer cell proliferation, increases infiltration, and increases cancer cell migration. It has also been reported that FAK inhibits cancer cell death and increases angiogenesis.

FAK은 인테그린(integrin) 뿐만 아니라 EGFR(epidermal growth factor receptor) 및 PDGFR(platelet derived growth factor receptor)과 같은 여러 성장인자 수용체의 표적단백질이다. 이러한 수용체의 과발현 혹은 활성수용체의 발현은 정상세포를 종양세포로 전환시킨다. 따라서 FAK은 이러한 수용체의 종양관련 신호전달에 관여하는 중요한 인산화 효소이다. FAK의 N-terminal FERM 도메인은 EGFR과 결합하고, EGF (epidermal growth factor) 인자에 의한 세포이동에 FAK의 C-terminal 도메인이 관여한다고 보고되었다. 이러한 사실은 FAK이 N-terminal FERM 도메인을 통하여 외부의 EGFR 수용체의 신호를 인지하고, FAK의 C-terminal FAT 도메인을 통하여 외부의 인테그린의 신호를 인지하여 세포 외부의 신호를 통합하는 역할 수행한다고 할 수 있다.FAK is a target protein of several growth factor receptors, such as integrin and epidermal growth factor receptor (EGFR) and platelet derived growth factor receptor (PDGFR). Overexpression of these receptors or expression of an active receptor converts normal cells into tumor cells. Therefore, FAK is an important phosphorylating enzyme involved in the tumor-related signaling of these receptors. The N-terminal FERM domain of FAK binds to EGFR and it has been reported that the C-terminal domain of FAK is involved in cell migration by epidermal growth factor (EGF) factor. These facts indicate that FAK recognizes the signal of the external EGFR receptor through the N-terminal FERM domain and recognizes the signal of the external integrin through the C-terminal FAT domain of FAK, thereby integrating the signal outside the cell. You can.

FAK을 다양한 방법으로 저해하면 세포의 사멸이 유도된다. FAK에 의한 세포생존은 주로 PI-3 Kinase (Phosphoinositide-3 kinase) 에 의해 수행된다. FAK의 인산화된 Y397는 PI-3 kinase와 결합하여 제2의 신호물질인 PI(3,4,5)P3 및 PI(3,4)P2를 합성하고 이들은 PKB(protein kinase B; AKT)를 세포막으로 위치하게 하여 PDK (3'-phosphoinositide-dependent kinase)에 의해 인산화 된다. 활성화된 PKB는 여러 세포사멸 단백질(p21WAF, FKHR, Bad, GSK3)을 불활성화시켜 세포사멸을 억제한다. 또 다른 생존신호는 p130Cas의 SH3 도메인을 FAK의 Proline-rich 모티브에 결합시켜 p130Cas의 여러 타이로신 잔기에 FAK/Src에 의한 인산화을 유도함으로써 Ras를 활성화 시키는 것이다.Inhibition of FAK by various methods induces cell death. Cell survival by FAK is mainly performed by PI-3 Kinase (Phosphoinositide-3 kinase). Phosphorylated Y397 of FAK combines with PI-3 kinase to synthesize the second signaling substances PI (3,4,5) P3 and PI (3,4) P2, and these are membrane membranes of PKB (protein kinase B; AKT). And phosphorylated by PDK (3'-phosphoinositide-dependent kinase). Activated PKB inhibits apoptosis by inactivating several apoptosis proteins (p21WAF, FKHR, Bad, GSK3). Another survival signal is to activate Ras by inducing phosphorylation by FAK / Src at several tyrosine residues of p130Cas by binding the SH3 domain of p130Cas to the Proline-rich motif of FAK.

FAK과 세포주기의 관계는 FAK의 Y925에 인산화가 유도되면 Grb2 (Growth factor receptor-bound protein 2)가 결합하여 Ras/Erk가 경로가 활성화됨으로 설명되고 있다. FAK의 과발현은 세포주기의 G1에서 S 단계로 전환이 촉진되며, FAK의 억제단백질인 FRNK (FAK Related Non-Kinase)의 발현은 Cyclin D1 발현을 저해하고 Cdk 저해제인 p21의 발현을 유도하여 세포주기 진행을 저해한다. 그러나 Cyclin D1을 과발현하면 FRNK에 의한 세포주기 억제가 극복된다. The relationship between the FAK and the cell cycle is explained by the phosphorylation of FAK to Y925, whereby Grb2 (Growth factor receptor-bound protein 2) is bound to activate the Ras / Erk pathway. The overexpression of FAK promotes the conversion of G1 to S phase of the cell cycle, and the expression of the FAK inhibitory protein FRNK (FAK Related Non-Kinase) inhibits Cyclin D1 expression and induces the expression of the Cdk inhibitor p21, which leads to the cell cycle. Inhibits progress. However, overexpression of Cyclin D1 overcomes cell cycle inhibition by FRNK.

FAK의 유일한 아형인 proline-rich tyrosine kinase 2 (PYK2)는 신경세포에 가장 많이 분포하는데, 최근에 소세포폐암 (Oncogene. 2008, 27(12), 1737), 전립선암 (Oncogene. 2007, 26(54), 7552), 간세포암 (Br J Cancer. 2007, 97(1), 50), 신경교종 (Neoplasia. 2005, 7(5), 435) 등의 항암제 개발의 분자표적으로서 가치가 확인되고 있는 중이다.The only subtype of FAK, proline-rich tyrosine kinase 2 (PYK2), is the most distributed in neurons, recently small cell lung cancer (Oncogene. 2008, 27 (12), 1737), prostate cancer (Oncogene. 2007, 26 (54) ), 7552), hepatocellular carcinoma (Br J Cancer. 2007, 97 (1), 50), glioma (Neoplasia. 2005, 7 (5), 435), etc. .

FAK의 domain organization은 4 개의 영역으로 구성된다. 1) FERM (band 4.1 protein, ezrin, radixin, moesin) domain; Integrin receptor, platelet-derived growth factor receptor (PDGFr) 그리고 epidermalgrowth factor receptor (EGFr) 등과 작용하는 amino-terminal domain으로, kinase domain과 직접 상호 작용을 통해서 kinase activity를 저해한다. 2) kinase domain 3) 세 개의 proline-rich (PR) 영역; 4) carboxyl-terminal에 위치한 focal adhesion targeting (FAT) domain; paxillin, talin, p190RhoGEF, a RhoA-specific GDP/GTP exchange 등과 작용한다. FAK의 선택적 스플라이싱(alternative splicing)인 FRNK (FAK-related non-kinase domain)은 PR1, PR2 그리고 FAT domain으로 구성되는데, FAK의 길항 조절 인자로 작용한다.FAK's domain organization consists of four domains. 1) FERM (band 4.1 protein, ezrin, radixin, moesin) domain; It is an amino-terminal domain that interacts with integrin receptor, platelet-derived growth factor receptor (PDGFr) and epidermalgrowth factor receptor (EGFr), and inhibits kinase activity through direct interaction with the kinase domain. 2) kinase domain 3) three proline-rich (PR) regions; 4) focal adhesion targeting (FAT) domain located in the carboxyl-terminal; It works with paxillin, talin, p190RhoGEF, and a RhoA-specific GDP / GTP exchange. FAK-related non-kinase domain (FRNK), which is an alternative splicing of FAK, is composed of PR1, PR2, and FAT domains, and acts as an antagonist of FAK.

FAK이 활성화되기 위해서 FERM과 kinase domain의 연결 부위에 위치한 Y397의 자가인산화가 필요하다. 인산화된 Y397에 Src kinase가 결합해서 Y576/577를 순차적으로 인산화시키고, 종국에 Y925가 인산화되면 Grb2를 통해서 FAK의 신호전달 체계가 작동한다. 현재 개발 중인 FAK 저해제는 kinase domain의 ATP 결합 부위를 공략해서 Y397의 자가인산화를 저해하는 기전을 갖고 있다. Y397의 자가인산화 저해 정도는 동물모델을 이용한 효능시험에서 중요한 척도 (biomarker)로 사용되고 있다.In order for FAK to be activated, autophosphorylation of Y397 located at the junction of the FERM and kinase domains is required. Src kinase binds to phosphorylated Y397 to sequentially phosphorylate Y576 / 577, and finally, when Y925 is phosphorylated, the signaling system of FAK works through Grb2. The FAK inhibitor currently being developed has a mechanism of inhibiting Y397 autophosphorylation by targeting the ATP binding site of the kinase domain. The degree of autophosphorylation inhibition of Y397 is used as an important biomarker in efficacy studies using animal models.

저분자 FAK 저해제 개발 상황은 다음과 같다. 현재 까지 약 26개의 FAK 저해제의 선도물질이 도출되었지만, Pfizer의 PF-562271화합물만 유일하게 임상 1상에서 개발이 진행 중이다. PF-562271은 ATP-competitive FAK(IC=1.5 nM)과 homology Pyk2(13 nM) 저해제로서 섬유아세포, 상피세포, 그리고 암세포의 FAK Y397 site에 자가인산화 (autophosphorylation)를 저해한다. 또한 대부분의 암세포의 이동을 저해하지만 정상세포의 성장에는 영향을 미치지 않는다. 전립선암 PC-3, 유방암 BT-474, colon LoVo, 폐암 NCI-H460, 신경교아세포종 U-87 MG 그리고 췌장암 BxPC-3 등의 인간 암 이종이식 in vivo 실험(25～100 mg/kg p.o.)에서 특별한 독성은 관찰되지 않고, 42～90%의 종양 성장 억제 또는 종양 퇴행이 관찰되었다. The development of low molecular FAK inhibitors is as follows. To date, about 26 FAK inhibitors have been identified, but only Pfizer's PF-562271 compound is being developed in Phase I clinical trials. PF-562271 is an ATP-competitive FAK (IC = 1.5 nM) and homology Pyk2 (13 nM) inhibitor and inhibits autophosphorylation at the FAK Y397 site of fibroblasts, epithelial cells, and cancer cells. It also inhibits migration of most cancer cells, but does not affect normal cell growth. Particular in prostate cancer PC-3, breast cancer BT-474, colon LoVo, lung cancer NCI-H460, glioblastoma U-87 MG and human cancer xenografts such as pancreatic cancer BxPC-3 in vivo experiment (25 ~ 100 mg / kg po ) No toxicity was observed, and tumor growth inhibition or tumor regression of 42-90% was observed.

혈관 내피 세포 성장 인자 수용체 (Vascular Endothelial Growth Factors Receptors, VEGFR)는 수용체 티로신 키나아제 (Receptor Tyrosine Kinase, RTK)로서 신생혈관생성 (angiogenesis)을 위한 중요한 조절인자이다. 혈관, 림프관의 발생과 항상성 유지에 관여하며 신경세포에도 중요한 효과를 가진다. VEGF는 저산소 상태 및 TGF, 인터루킨, PDGF와 같은 세포 성장 인자들의 자극에 의해 혈관내피세포, 조혈세포, 기질(stromal) 세포에서 주로 생성된다. VEGF는 VEGF 수용체(VEGFR)-1, -2, -3에 결합하고, 각각의 VEGF isoform은 특정 수용체에 결합하여 수용체의 동형 혹은 이형 접합체 형성을 유도한 뒤 각각의 신호전달체계를 활성화시킨다. VEGFR의 신호적 특이성은 뉴로필린(neurophilin), 황산화 헤파란(heparan sulfate), 인테그린, 캐더린(cadherin) 등과 같은 공동수용체에 의해 보다 더 미세하게 조절된다.Vascular Endothelial Growth Factors Receptors (VEGFR) are receptor tyrosine kinase (RTK) receptors that are important regulators for angiogenesis. It is involved in the development and maintenance of blood vessels and lymphatic vessels and has an important effect on nerve cells. VEGF is mainly produced in vascular endothelial cells, hematopoietic cells, and stromal cells by hypoxia and stimulation of cell growth factors such as TGF, interleukin and PDGF. VEGF binds to VEGF receptors (VEGFR) -1, -2, -3, and each VEGF isoform binds to a specific receptor to induce the formation of homozygous or heterozygotes of the receptor and then activates each signaling system. The signal specificity of VEGFR is more finely regulated by co-receptors such as neurophilin, heparan sulfate, integrin, and cadherin.

VEGF의 생물학적 기능은 type Ⅲ RTK, VEGFR-1 (Flt-1), VEGFR-2 (KDR/Flk-1), VEGFR-3(Flt-4)을 통해 매개된다. VEGFR은 Fms, Kit, PDGFR과 밀접하게 관련되어 있다. VEGF는 각각 특정 수용체에 결합하는데, VEGF-A는 VEGFR-1, -2 및 수용체 이형 중합체와 결합하는 반면, VEGF-C는 VEGF-2, -3에 결합한다. 또한, PIGF와 VEGF-B는 VEGFR-1에 배타적으로, VEGF-E는 오직 VEGFR-2와 상호 작용한다. VEGF-F variant는 VEGFR-1 혹은 -2와 상호 작용한다. VEGF-A, -B, PIGF는 혈관 형성에 우선적으로 필요한 반면, VEGF-C, -D는 림프관 형성에 필수적이다. 신생혈관은 종양에 영양분과 산소를 공급하며 암세포 전이의 통로를 제공하여 그 증식과 전이에 필수적이다. 혈관형성은 정상적인 경우 생체 내에서 혈관생성 촉진물질과 혈관생성 억제물질의 상호조절에 의해 균형을 이루고 있으나 암세포에서와 같이 그러한 균형이 깨진 경우 혈관내피세포에 가장 큰 영향을 미치는 성장인자(VEGF)에 의해 그 수용체인 VEGFR이 활성화된다. 여러 작용 기전 중에 저분자 합성물질을 이용한 이러한 VEGF의 수용체 티로신 키나아제를 억제하는 저해제가 다양하게 연구 개발되고 있으며 이들 대부분은 고형암(solid tumor)에 공통적으로 사용될 수 있는 가능성과 암세포에서만 활성화된 신생혈관형성을 억제하므로 비교적 적은 부작용으로 효과적인 약효를 기대할 수 있는 장점을 가지고 있다. The biological function of VEGF is mediated through type III RTK, VEGFR-1 (Flt-1), VEGFR-2 (KDR / Flk-1), and VEGFR-3 (Flt-4). VEGFR is closely related to Fms, Kit and PDGFR. VEGF binds to specific receptors, respectively, VEGF-A binds VEGFR-1, -2 and receptor heteropolymers, while VEGF-C binds VEGF-2, -3. In addition, PIGF and VEGF-B are exclusive to VEGFR-1, and VEGF-E only interacts with VEGFR-2. The VEGF-F variant interacts with VEGFR-1 or -2. VEGF-A, -B and PIGF are primarily required for blood vessel formation, while VEGF-C and -D are essential for lymphatic formation. New blood vessels supply nutrients and oxygen to tumors and provide a pathway for cancer cell metastasis, which is essential for their proliferation and metastasis. Angiogenesis is normally balanced by the mutual regulation of angiogenesis-promoting substances and angiogenesis inhibitors in vivo, but if such a balance is broken, as in cancer cells, the growth factor (VEGF) has the greatest effect on vascular endothelial cells. The receptor VEGFR is activated. Among the various mechanisms of action, inhibitors that inhibit the receptor tyrosine kinase of VEGF using a low-molecular-weight synthetic material have been researched and developed in a variety of ways, and most of them have the potential to be commonly used for solid tumors and have angiogenesis that is only activated in cancer cells. It has the advantage of being able to expect an effective drug with relatively few side effects.

Tie2는 수용체 타이로신 키나아제의 일종인데, 신생혈관생성과 혈관배치 (vasculature)과 연관이 깊다. Tie2의 도메인 구조는 모든 척추동물에 매우 높게 보존되어 있다 (Lyons et al., 1998). Tie2의 리간드는 엔지오포에틴 (angiopoietins, Ang)이다. Ang2는 Tie2의 자가인산화를 유발하지 않고, Ang1이 유발하는 Tie2의 활성화를 방해한다. 내피세포에서 Ang2에 의한 Tie2의 활성화는 PI3K-Akt의 활성화를 유발한다 (Jones et al., 1999). Tie2의 주 신호전달 체계인 미토젠 활성화 단백질 키나아제 (mitogen-activated protein kinase, MAPK) 신호전달 경로에서, 어댑터 단백질인 GRB2와 단백질 타이로신 포스파타제인 SHP2는 Tie2 수용체 타이로신 키나아제의 자가인산화를 통한 이합체화 과정에서 중요한 역할을 한다. Ang/Tie2와 혈관 내피 세포 성장 인자 (VEGF) 신호전달 경로는 암세포의 신생혈관생성에 중요한 역할을 한다. Tie2는 혈관내피세포에 발현하는데, 특히 암세포가 침윤하는 자리에서 발현이 극대화된다. Tie2의 과발현은 유방암 (Peters et al., 1998)에서 확인되었으며, 동시에 자궁암, 간암, 뇌암 등에서도 관찰되었다.Tie2 is a type of receptor tyrosine kinase, which is closely related to angiogenesis and vasculature. The domain structure of Tie2 is highly conserved in all vertebrates (Lyons et al., 1998). The ligand of Tie2 is angiopoietins (Ang). Ang2 does not induce autophosphorylation of Tie2, but inhibits the activation of Tie2 caused by Ang1. Activation of Tie2 by Ang2 in endothelial cells causes activation of PI3K-Akt (Jones et al., 1999). In the mitogen-activated protein kinase (MAPK) signaling pathway, the main signaling system of Tie2, the adapter protein GRB2 and the protein tyrosine phosphatase SHP2 are in the dimerization process through the autophosphorylation of the Tie2 receptor tyrosine kinase. It plays an important role. Ang / Tie2 and vascular endothelial cell growth factor (VEGF) signaling pathways play an important role in the angiogenesis of cancer cells. Tie2 is expressed on vascular endothelial cells, particularly where cancer cells infiltrate maximize expression. Overexpression of Tie2 was confirmed in breast cancer (Peters et al., 1998), and at the same time, it was also observed in uterine cancer, liver cancer, and brain cancer.

현재까지 발표된 문헌에 의하면, 티에노[3,2-d]피리미딘 구조를 모체로 하는 여러 화합물들이 합성된 바 있다. 하지만, 본 발명에서와 같이 티에노[3,2-d]피리미딘 모핵의 2- 및 7- 위치에 동시에 특정 치환체가 치환된 티에노[3,2-d]피리미딘 화합물은 문헌에 발표되지 않은 신규 화합물에 해당된다. 더욱이, 2- 및 7- 위치에 특정 치환체가 치환된 티에노[3,2-d]피리미딘 화합물에 대한 여러 단백질 키나아제의 저해활성을 확인하여 종양 치료 및 예방제로 사용할 수 있음을 예고한 문헌은 현재까지 발표되어 있지 않고 있다.According to the literature published so far, several compounds having a parent thieno [3,2- d ] pyrimidine structure have been synthesized. However, thieno [3,2- d] pyrimidin-thieno [3,2- d] pyrimidine compounds have certain substituents at the same time in the 2- and 7-position of mohaek as in the present invention is not disclosed in the literature This is a new compound. Moreover, the literature that predicts the inhibitory activity of several protein kinases on thieno [3,2- d ] pyrimidine compounds in which specific substituents are substituted at 2- and 7- positions can be used as tumor treatment and prevention agents. It has not been announced so far.

RET (Rearranged during transfaction) 키나아제는 교감, 부교감신경의 발달과 연관된 티로신 키나아제 수용체이다. 비정상적인 RET 유전자가 점 돌연변이, 염색체 자리바꿈(chromosomal translocation), 유전자 증폭(gene amplification)은 다양한 종류의 갑상선암 (MEN2A, MEN2B, FMTC, PTC 등)을 유발하는 것으로 보고된 바 있다. RET 유전자의 점 돌연변이(point mutation)에 의해 갑상선암인 MEN2A, MEN2B, FMTC가 유발되고, 염색체 자리바꿈유전자 증폭은 갑상선암 (MEN2A, MEN2B, FMTC, PTC 등)을 유발한다고 보고되었다. 또한, 최근에 RET 키나아제가 갑상선 외에 폐암을 유발하는 중요한 인자로 보고되었다. RET 유전자가 KIF5B 유전자 또는 CCDC6 유전자와 융합하여 KIF5B-RET 또는 CCDC6-RET의 형태로 발현됨으로써 비소세포성 폐암(NSCLC)를 유발한다고 보고되었으며, 비소세포 폐암 환자의 경우에 RET 유전자가 NCOA4 또는 TRIM33(tripartite motif-containing 33) 유전자와 융합된 NCOA4-RET, TRIM33-RET가 존재하는 것이 관찰되었다고 보고되었다. 따라서, 위와 같은 갑상선암 또는 비소세포성폐암의 치료를 위해 RET 키나아제를 저해할 수 있는 화합물의 개발은 매우 유용하다. RET 티로신 키나아제 저해제로 소라페닙 (Sorafenib), 수니티닙 (Sunitinib), XL184, 반데타닙 (Vandetanib), 포나티닙 (Ponatinib), 카보잔티닙 (Cabozantinib)등이 알려져 있으며, 이들은 KIF5B-RET를 발현하는 세포주에서 세포증식 저해능이 있다고 보고되어 있다.RET (Rearranged during transfaction) kinase is a tyrosine kinase receptor associated with the development of sympathetic and parasympathetic nerves. It has been reported that abnormal RET gene causes point mutation, chromosomal translocation, and gene amplification to cause various types of thyroid cancer (MEN2A, MEN2B, FMTC, PTC, etc.). It has been reported that thy2 cancer MEN2A, MEN2B and FMTC are induced by point mutation of the RET gene, and chromosome transgene amplification causes thyroid cancer (MEN2A, MEN2B, FMTC, PTC, etc.). In addition, it has recently been reported that RET kinase is an important factor causing lung cancer in addition to the thyroid. It has been reported that the RET gene fuses with the KIF5B gene or the CCDC6 gene to cause non-small cell lung cancer (NSCLC) by being expressed in the form of KIF5B-RET or CCDC6-RET, and in the case of non-small cell lung cancer patients, the RET gene is NCOA4 or TRIM33 ( It was reported that the presence of NCOA4-RET and TRIM33-RET fused with the tripartite motif-containing 33 gene was observed. Therefore, it is very useful to develop a compound capable of inhibiting RET kinase for the treatment of thyroid cancer or non-small cell lung cancer. As RET tyrosine kinase inhibitors, sorafenib, sunitinib, XL184, vandetanib, ponatinib, cabozantinib, etc. are known, and they express KIF5B-RET. The cell line has been reported to inhibit cell proliferation.

DDR1은 수용체 타이로신 키나아제의 일종으로, 세포 밖 부분에 discoidin homology domain을 가지고 있다. 이 도메인을 통하여 수용체 타이로신 키나아제 중 유일하게 콜라겐을 리간드로 결합하는 것이 특징이다. 콜라겐이 DDR1에 결합하면, DDR1이 활성화 및 자가인산화 되고, 이를 통해 세포 분화, 부착 등이 조절된다. 또한, DDR1은 MMP 의 발현과 활성을 유도함으로써 세포외 기질의 분해를 일으키는데, 이는 세포 이동, 전이를 유발한다. DDR1은 뇌, 폐, 신장, 췌장 등 다양한 조직에서 발현되어 있는데, 일반 조직에 비하여 고형 암 에서의 DDR1 발현 정도가 높다. DDR1 발현 정도의 변화와, 돌연변이는 DDR1의 활성을 비정상적으로 높이고, 궁극적으로 세포의 증식을 활발하게 함으로써 암세포 형질전환(oncogenic transformation)을 일으킬 수 있다. 췌장암, 위암, 그리고 폐암에서는 DDR의 발현 정도를 통하여 예후를 예측할 수 있는 것으로 알려져 있다. 이 때문에, DDR1 저해는 암을 선택적으로 치료할 수 있는 신규 방법이 될 수 있다.DDR1 is a type of receptor tyrosine kinase and has a discoidin homology domain in the extracellular region. This domain is characterized by the only binding of collagen as a ligand among receptor tyrosine kinases. When collagen binds to DDR1, DDR1 is activated and autophosphorylated, through which cell differentiation, adhesion, etc. are regulated. In addition, DDR1 induces the decomposition of the extracellular matrix by inducing the expression and activity of MMP, which causes cell migration and metastasis. DDR1 is expressed in various tissues such as brain, lung, kidney, and pancreas, but the expression of DDR1 in solid cancer is higher than that of general tissue. Changes in the level of DDR1 expression and mutations can cause oncogenic transformation by abnormally increasing the activity of DDR1 and ultimately promoting cell proliferation. In pancreatic cancer, gastric cancer, and lung cancer, it is known that the prognosis can be predicted through the degree of DDR expression. For this reason, DDR1 inhibition may be a novel method for selectively treating cancer.

FLT3는 주로 조혈모세포에서 발현되는 class III receptor tyrosine kinase로써, 혈액 세포의 성장에 중요한 PI3K, Erk, Jak/Stat 신호를 활성화를 유도한다. 정상적인 FLT3는 리간드(FL)에 의해 이합체화되면서, activation loop이 열리고 자가인산화(autophosphorylation)가 일어남으로써 활성화 된다. FL과 무관하게 항상 활성화되는 FLT3 돌연변이는 백혈병성 배아세포의 과다증식을 유도하는데, 실제로 전체 AML 환자의 약 35%가 FLT3의 돌연변이를 가지고 있다. 그 중 ITD 돌연변이는 juxtamembrane domain의 자가저해 기능을 막아 항상 활성화 상태를 유지한다. ITD는 전체 AML 환자의 35%를 차지하고, 질병예후 또한 매우 나빠 환자의 disease-free survival과 overall survival 기간을 상당히 줄인다. activation loop 의 점돌연변이 (D835Y)는 AML 환자의 7% 차지를 차지하는데 이러한 점 돌연변이는 기존의 FLT3 저해 약물의 내성의 원인이다.FLT3 is a class III receptor tyrosine kinase expressed mainly in hematopoietic stem cells and induces activation of PI3K, Erk, and Jak / Stat signals, which are important for blood cell growth. As normal FLT3 is dimerized by ligand (FL), activation loop is opened and autophosphorylation occurs, which is activated. The FLT3 mutation, which is always activated irrespective of FL, induces hyperproliferation of leukemia embryonic cells. In fact, about 35% of all AML patients have a mutation of FLT3. Among them, the ITD mutant blocks the self-inhibiting function of the juxtamembrane domain and remains active at all times. ITD accounts for 35% of all AML patients and the disease prognosis is also very poor, significantly reducing the patient's disease-free survival and overall survival. The point mutation (D835Y) of the activation loop accounts for 7% of AML patients, and this point mutation is a cause of resistance to existing FLT3 inhibitory drugs.

타이로신 키나아제인 Janus Kinase (JAK)는 JAK1, JAK2, JAK3 그리고 TYK2를 포함한다. JAK은 cytokine 수용체의 신호전달에 있어서 매우 중요한 역할을 한다. JAK은 FERM-SH2- JH2 (pseudokinase domain)- JH1 (kinase domain으로 이루어져 있다. Cytokine이 수용체에 결합하면, JAK family들은 이형이합체를 형성하여 서로를 인산화 시키고, 하위분자인 STATs를 끌어와 세포 내로 신호를 전달한다. cytokine의 종류에 따라 활성화 되는 JAK kinase가 다르다. 예를들어 IL-2, IL-4는 JAK1-JAK3 이형이합체를 활성화 시키고, 이 complex는 lymphocyte proliferation에 관여한다. 반면에 JAK1-JAK2는 IL-6에 의해 활성화 되고 이는 T-cell differentiation과 inflammation과 관련이 있다. 따라서 JAK 돌연변이는 류마티스 관절염, 염증성 장 질환 등의 자가면역 질환과 깊은 관련이 있다.Janus Kinase (JAK), a tyrosine kinase, includes JAK1, JAK2, JAK3 and TYK2. JAK plays a very important role in the signaling of cytokine receptors. JAK is composed of FERM-SH2- JH2 (pseudokinase domain)-JH1 (kinase domain. When Cytokine binds to the receptor, JAK families form heterodimers to phosphorylate each other, pull the submolecules STATs, and signal them into the cell. Depending on the type of cytokine, the activated JAK kinase is different, for example, IL-2 and IL-4 activate the JAK1-JAK3 heterodimer, and this complex is involved in lymphocyte proliferation, whereas JAK1-JAK2 Is activated by IL-6 and is associated with T-cell differentiation and inflammation, so JAK mutations are closely related to autoimmune diseases such as rheumatoid arthritis and inflammatory bowel disease.

한국공개특허 10-2014-0019055호Korean Patent Publication No. 10-2014-0019055

본 발명의 목적은 사이아노[3,2-d]피리미딘 모핵의 2- 및 7- 위치에 특정한 치환체를 갖는 있는, 신규의 2,7-치환된 사이아노[3,2-d]피리미딘 모핵의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공하는 것이다.The object of the present invention is a novel 2,7-substituted cyano [3,2- d ] pyrimidine with specific substituents at the 2- and 7-positions of the cyano [3,2- d ] pyrimidine parent nuclei. It is to provide a compound of the parent nucleus or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

본 발명의 다른 목적은 상기한 신규의 2,7-치환된 사이아노[3,2-d]피리미딘 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 비정상 세포 성장 질환의 예방, 경감 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to prevent and reduce abnormal cell growth disease, which contains the above-mentioned novel 2,7-substituted cyano [3,2- d ] pyrimidine compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient. Or to provide a pharmaceutical composition for treatment.

본 발명의 일측면은 하기 화학식 1로 표시되는 2, 7-치환된 사이아노[3,2-d]피리미딘 고리화된 화합물, 이의 약학적으로 허용되는 염, 이의 수화물 또는 이의 용매화물을 제공한다: One aspect of the present invention provides a 2, 7-substituted cyano [3,2- d ] pyrimidine cyclized compound represented by Formula 1 below, a pharmaceutically acceptable salt thereof, a hydrate or solvate thereof do:

[화학식 1][Formula 1]

상기 화학식 1에서,In Chemical Formula 1,

Q₁ 및 Q₂는 각각 -(CH₂)_n-, -O(CH₂)_n-, -N(CH₂)_n- 및 -NH(CH₂)_n-중 어느 하나이며, n은 정수이고;Q ₁ and Q ₂ are each _{_{- (CH 2) n -,}} -O (CH 2) n -, -N (CH 2) n - and -NH (CH ₂₎ _n -, and any one, n is an integer and ;

A 및 B는 각각 헤테로 아릴고리, 고리형 탄화수소 및 알킬기 중 어느 하나이며; A and B are each a heteroaryl ring, a cyclic hydrocarbon or an alkyl group;

M은 -CHCH-, -CH₂CH₂-, -NHCO-, -CONH-, -NMe-, -NAc-, -NMs-, -NHCONHR₁-, -NHCOR₁-, -NHSONR₁- 및 -O- 중 어느 하나이며, 이 때 R₁은 알킬기, 고리형 탄화수소, 페닐기 및 치환된 페닐기 중 어느 하나이다.M is -CHCH-, -CH ₂ CH _2- , -NHCO-, -CONH-, -NMe-, -NAc-, -NMs-, -NHCONHR _1- , -NHCOR _1- , -NHSONR ₁ -and -O Any one of-, wherein R ₁ is any one of an alkyl group, a cyclic hydrocarbon, a phenyl group, and a substituted phenyl group.

본 발명의 일측면에서, 상기 n은 0, 1, 2, 3 또는 4의 정수이며, 상기 헤테로 아릴고리는 페닐, 피리딘, 치환된 페닐 및 피라졸 중 어느 하나이며, 상기 고리형 탄화수소는 피페라진 및 시클로헥산 중 어느 하나 이상인, 화합물, 이의 약학적으로 허용되는 염, 이의 수화물 또는 이의 용매화물을 제공한다.In one aspect of the invention, n is an integer of 0, 1, 2, 3 or 4, the heteroaryl ring is any one of phenyl, pyridine, substituted phenyl and pyrazole, and the cyclic hydrocarbon is piperazine And cyclohexane, a compound, a pharmaceutically acceptable salt thereof, a hydrate or a solvate thereof.

본 발명의 일측면에서, 상기 화합물은 In one aspect of the invention, the compound is

(E)-4¹H-14-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로테트라디카펜-9-온 (화합물번호 1);(E) -4 ¹ H-14-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazolo-1 ( 1,4) -benzenecyclotetradicapen-9-one (Compound No. 1);

(Z)-1¹H-5-옥사-3,9-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-1(4,1)-피라졸로-4(1,4)-벤젠사이클로테트라디카펜-10-온 (화합물번호 2);(Z) -1 ¹ H-5-oxa-3,9-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-1 (4,1) -pyrazolo-4 ( 1,4) -benzenecyclotetradicapen-10-one (Compound No. 2);

5,15-다이옥사-3,9-다이아자-2(7,2)-사이나오[3,2-d]피리미딘-1(5,2)-피리딘-4(1,4)-벤젠사이클로펜타디카펜-10-온 (화합물번호 3);5,15-dioxa-3,9-diaza-2 (7,2) -sinao [3,2-d] pyrimidine-1 (5,2) -pyridine-4 (1,4) -benzene Cyclopentadicapen-10-one (Compound No. 3);

(E)-4¹H-14-옥사-3,10-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸-1(1,4)-벤젠사이클로테트라디카펜-9-온 (화합물번호 4);(E) -4 ¹ H-14-oxa-3,10-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazole-1 ( 1,4) -benzenecyclotetradicapen-9-one (Compound No. 4);

5,15-다이옥사-3,11-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-1,4(1,4)-다이벤젠사이클로벤타디카펜-10-온 (화합물번호 5);5,15-dioxa-3,11-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-1,4 (1,4) -dibenzenecyclobendadicapen-10 -One (Compound No. 5);

(E)-4¹H-8-옥사-3-아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-5(4,1)-피페리딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로옥테펜 (화합물번호 6);(E) -4 ¹ H-8-oxa-3-aza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-5 (4,1) -piperidine-4 (4, 1) -pyrazolo-1 (1,4) -benzenecyclooctefen (Compound No. 6);

(E)-4¹H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜 (화합물번호 7);(E) -4 ¹ H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazole-1 ( 1,4) -benzenecycloundecafen (Compound No. 7);

(E)-8-메틸-4¹H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜 (화합물번호 8);(E) -8-methyl-4 ¹ H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyra Zolo-1 (1,4) -benzenecycloundecafen (Compound No. 8);

(E)-8-에틸-4¹H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜 (화합물번호 9);(E) -8-ethyl-4 ¹ H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyra Zolo-1 (1,4) -benzenecycloundecafen (Compound No. 9);

(E)-8-프로필-4¹H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜 (화합물번호 10);(E) -8-propyl-4 ¹ H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyra Zolo-1 (1,4) -benzenecycloundecafen (Compound No. 10);

(E)-1-(4¹H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로디카펜-8-yl)에텐-1-온 (화합물번호 11);(E) -1- (4 ¹ H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazolo -1 (1,4) -benzenecyclodicapen-8-yl) ethen-1-one (Compound No. 11);

(E)-8-(메틸설포닐)-4¹H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜 (화합물번호 12);(E) -8- (methylsulfonyl) -4 ¹ H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4, 1) -pyrazolo-1 (1,4) -benzenecycloundecafen (Compound No. 12);

(E)-N-메틸-4¹H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸라-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜-8-카복사마이드 (화합물번호 13);(E) -N-methyl-4 ¹ H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyra Zola-1 (1,4) -benzenecycloundecafen-8-carboxamide (Compound No. 13);

(E)-N-(4-클로로페닐)-4¹H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜-8-카보사이오아마이드 (화합물번호 14);(E) -N- (4-chlorophenyl) -4 ¹ H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4 , 1) -Pyrazolo-1 (1,4) -benzenecycloundicapen-8-carbothioamide (Compound No. 14);

(E)-N-(3-아세틸페닐)-4¹H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜-8-카복사아마이드 (화합물번호 15);(E) -N- (3-acetylphenyl) -4 ¹ H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4 , 1) -pyrazolo-1 (1,4) -benzenecycloundicapen-8-carboxamide (Compound No. 15);

(E)-(4¹H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로디카펜-8-yl)(페닐)메텐온 (화합물번호 16);(E)-(4 ¹ H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazolo-1 (1,4) -benzenecyclodicapen-8-yl) (phenyl) methenone (Compound No. 16);

(E)-4¹H-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜 (화합물번호 17);(E) -4 ¹ H-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazolo-1 (1,4) -Benzenecycloundecafen (Compound No. 17);

(E)-1³-플루오르-4¹H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜 (화합물번호 18); (E) -1 ³ -Fluoro-4 ¹ H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1)- Pyrazolo-1 (1,4) -benzenecycloundecafen (Compound No. 18);

(4⁴E,8E)-4¹H-11-옥사-3-아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜-8-엔 (화합물번호 19);(4 ⁴ E, 8E) -4 ¹ H-11-oxa-3-aza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazole-1 (1,4) -benzenecycloundecafen-8-ene (Compound No. 19);

(E)-4¹H-10-옥사-3-아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸-8(2,3)-옥시라나-1(1,4)-벤젠사이클로디카펜 (화합물번호 20); 및(E) -4 ¹ H-10-oxa-3-aza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazole-8 (2,3 ) -Oxirana-1 (1,4) -benzenecyclodicapene (Compound No. 20); And

(E)-4¹H-11-옥사-3-아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜-8,9-다이올 (화합물번호 21);으로 이루어진 군에서 선택된, 화합물, 이의 약학적으로 허용되는 염, 이의 수화물 또는 이의 용매화물을 제공한다.(E) -4 ¹ H-11-oxa-3-aza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazole-1 (1,4 ) -Benzenecycloundecafen-8,9-diol (Compound No. 21); provides a compound selected from the group consisting of a pharmaceutically acceptable salt, hydrate or solvate thereof.

본 발명의 다른 측면은, 상기 중 어느 하나의 화합물, 이의 약학적으로 허용되는 염, 이의 수화물 또는 이의 용매화물을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.Another aspect of the present invention provides a pharmaceutical composition comprising any one of the above compounds, a pharmaceutically acceptable salt thereof, a hydrate or solvate thereof as an active ingredient.

본 발명의 다른 측면에서, 상기 조성물은 단백질 키나아제의 저해를 통해 비정상 세포 성장으로 유발되는 질환의 예방, 경감 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.In another aspect of the present invention, the composition provides a pharmaceutical composition for preventing, reducing or treating diseases caused by abnormal cell growth through inhibition of protein kinase.

본 발명의 다른 측면에서, 상기 화합물은 단백질 키나아제에 대한 1 uM에서의 저해능이 90% 이상인, 약학적 조성물을 제공한다.In another aspect of the invention, the compound provides a pharmaceutical composition, wherein the inhibitory ability at 1 uM for protein kinase is 90% or more.

본 발명의 다른 측면에서, 상기 단백질 키나아제는 ALK, ARK5, Aurora A, Aurora B, Aurora C, AXL, BLK, BMX, c-MET, c-src, CDK2, CK2a2, CLK1, CLK2, CLK4, DAPK1, DDR1, DDR2, DYRK2, DYRK3, ERk7, FER, FES, FGFR1, FGFR2, FGFR3, FGR, FLT3, FLT4, DMS, FYN, HCK, HIPK1, HIPK2, HIPK4, HPK, IGF1R, IR, IRR, JAK1, JAK2, JAAK3, KDR, LCK, LOK, LRRK2, MARk4, MELK, MLK3, MYLK4, NEK1, NEK5, NEK9, p70S6K, PDGFRa, PDGFRb, PDK1, PEAK1, PIM1, PKCd, PKCeplsilon, PKCg, PKCmu, PKCnu, PKD2, RET, ROS, RSK1, RSK2, RSK3, RSK4, SIK1, SIK2, SNARK, STK16, STK38, STK38L, TRKA, TRKB, TRKC, TXK, TYK2, TYRO3, ULK1, YES 및 ZIPK 중 어느 하나 이상인, 약학적 조성물을 제공한다.In another aspect of the invention, the protein kinase is ALK, ARK5, Aurora A, Aurora B, Aurora C, AXL, BLK, BMX, c-MET, c-src, CDK2, CK2a2, CLK1, CLK2, CLK4, DAPK1, DDR1, DDR2, DYRK2, DYRK3, ERk7, FER, FES, FGFR1, FGFR2, FGFR3, FGR, FLT3, FLT4, DMS, FYN, HCK, HIPK1, HIPK2, HIPK4, HPK, IGF1R, IR, IRR, JAK1, JAK2 JAAK3, KDR, LCK, LOK, LRRK2, MARk4, MELK, MLK3, MYLK4, NEK1, NEK5, NEK9, p70S6K, PDGFRa, PDGFRb, PDK1, PEAK1, PIM1, PKCd, PKCeplsilon, PKCg, PKCK, PKCK Provides a pharmaceutical composition, at least one of ROS, RSK1, RSK2, RSK3, RSK4, SIK1, SIK2, SNARK, STK16, STK38, STK38L, TRKA, TRKB, TRKC, TXK, TYK2, TYRO3, ULK1, YES and ZIPK. .

본 발명의 다른 측면에서, 상기 비정상 세포 성장으로 유발되는 질환은 종양 질환인, 약학적 조성물을 제공한다.In another aspect of the invention, the disease caused by abnormal cell growth is a tumor disease, provides a pharmaceutical composition.

본 발명의 다른 측면에서, 상기 종양 질환은 위암, 폐암, 간암, 대장암, 소장암, 췌장암, 뇌암, 뼈암, 흑색종, 유방암, 경화성선종, 자궁암, 자궁경부암, 두경부암, 식도암, 갑상선암, 부갑상선암, 신장암, 육종, 전립선암, 요도암, 방광암, 백혈병, 다발성골수종, 골수이형성증후군과 같은 혈액암, 호치킨병과 비호치킨림프종과 같은 림프종, 및 섬유선종로 이루어진 군으로부터 선택되는 종양 질환인, 약학적 조성물을 제공한다.In another aspect of the invention, the tumor disease is gastric cancer, lung cancer, liver cancer, colon cancer, small intestine cancer, pancreatic cancer, brain cancer, bone cancer, melanoma, breast cancer, sclerosing adenoma, uterine cancer, cervical cancer, head and neck cancer, esophageal cancer, thyroid cancer, vice versa It is a tumor disease selected from the group consisting of thyroid cancer, kidney cancer, sarcoma, prostate cancer, urethral cancer, bladder cancer, leukemia, multiple myeloma, myelodysplastic syndrome, lymphoma such as Hodgkin's disease and non-Hodgkin's lymphoma, and fibroadenoma. , To provide a pharmaceutical composition.

본 발명의 또 다른 측면은, 상기 중 어느 하나의 화합물, 이의 약학적으로 허용되는 염, 이의 수화물 또는 이의 용매화물의 제조방법에 있어서,In another aspect of the present invention, in any one of the compounds, a pharmaceutically acceptable salt thereof, a hydrate or a solvate thereof,

7-(4-(2-브로모에톡시)페닐)-N-(1-(피페니딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)사이아노[3,2-d]피리미딘-2-아민;7- (4- (2-bromoethoxy) phenyl) -N- (1- (pipenidin-4-yl) -1H-pyrazol-4-yl) cyano [3,2-d] pyrimidine -2-amine;

N-(1-(3-아미노프로필)-1H-피라졸-4-일)-7-(4-(2-브로모에톡시)페닐)사이아노[3,2-d]피리미딘-2-아민;N- (1- (3-aminopropyl) -1H-pyrazol-4-yl) -7- (4- (2-bromoethoxy) phenyl) cyano [3,2-d] pyrimidine-2- Amine;

5-(4-(2-((1-(3-아미노프로필)-1H-피라졸-4-일)아미노)사이아노[3,2-d]피리미딘-7-일)페녹시)펜텐노익 에시드;5- (4- (2-((1- (3-aminopropyl) -1H-pyrazol-4-yl) amino) cyano [3,2-d] pyrimidin-7-yl) phenoxy) pentene Noic acid;

5-(4-((7-(4-(3-아미노에톡시)페닐)사이아노[3,2-d]피리미딘-2-일)아미노)-1H-피라졸-1-일)펜텐노익 에시드;5- (4-((7- (4- (3-aminoethoxy) phenyl) cyano [3,2-d] pyrimidin-2-yl) amino) -1H-pyrazol-1-yl) pentene Noic acid;

5-((5-(2-((4-(3-아미노프로폭시)페닐)아미노)사이아노[3,2-d]피리미딘-7-일)피리미딘-2-일)옥시)펜타노익 에시드;5-((5- (2-((4- (3-aminopropoxy) phenyl) amino) cyano [3,2-d] pyrimidin-7-yl) pyrimidin-2-yl) oxy) penta Noic acid;

5-(4-((7-(4-(3-아미노프로폭시)페닐)사이아노[3,2-d]피리미딘-2-일)아미노)페녹시)펜타녹시 에시드; 및5- (4-((7- (4- (3-aminopropoxy) phenyl) cyano [3,2-d] pyrimidin-2-yl) amino) phenoxy) pentaoxy acid; And

5-(4-(2-((4-(3-아미노프로폭시)페닐)아미노)사이아노[3,2-d]피리미딘-7-일)-1H-피라졸-1-일)펜타노익 에시드; 중에서 선택된 어느 하나의 2,7 치환된 사이아노[3,2-d]피리미딘 고리화 된 화합물의 중간체 화합물을 반응시키는 단계를 포함하는, 화합물의 제조방법을 제공한다.5- (4- (2-((4- (3-aminopropoxy) phenyl) amino) cyano [3,2-d] pyrimidin-7-yl) -1H-pyrazol-1-yl) penta Noic acid; It provides a method for preparing a compound, comprising the step of reacting an intermediate compound of any one of 2,7 substituted cyano [3,2-d] pyrimidine cyclized compounds.

본 발명이 특징으로 하는 상기 화학식 1로 표시되는 2,7-치환된 사이아노[3,2-d]피리미딘 화합물, 이의 약학적으로 허용되는 염, 이의 수화물 또는 이의 용매화물은 ALK, ARK5, Aurora A, Aurora B, Aurora C, AXL, BLK, BMX, c-MET, c-src, CDK2, CK2a2, CLK1, CLK2, CLK4, DAPK1, DDR1, DDR2, DYRK2, DYRK3, ERk7, FER, FES, FGFR1, FGFR2, FGFR3, FGR, FLT3, FLT4, DMS, FYN, HCK, HIPK1, HIPK2, HIPK4, HPK, IGF1R, IR, IRR, JAK1, JAK2, JAAK3, KDR, LCK, LOK, LRRK2, MARk4, MELK, MLK3, MYLK4, NEK1, NEK5, NEK9, p70S6K, PDGFRa, PDGFRb, PDK1, PEAK1, PIM1, PKCd, PKCeplsilon, PKCg, PKCmu, PKCnu, PKD2, RET, ROS, RSK1, RSK2, RSK3, RSK4, SIK1, SIK2, SNARK, STK16, STK38, STK38L, TRKA, TRKB, TRKC, TXK, TYK2, TYRO3, ULK1, YES 및 ZIPK 중 어느 하나 이상인 키나아제의 활성을 저해하는 능력이 우수하므로 비정상적인 세포 성장으로 유발되는 질환의 예방, 경감 또는 치료제로서 유용하다.The 2,7-substituted cyano [3,2- d ] pyrimidine compound represented by Chemical Formula 1 above characterized by the present invention, its pharmaceutically acceptable salt, its hydrate or solvate thereof is ALK, ARK5, Aurora A, Aurora B, Aurora C, AXL, BLK, BMX, c-MET, c-src, CDK2, CK2a2, CLK1, CLK2, CLK4, DAPK1, DDR1, DDR2, DYRK2, DYRK3, ERk7, FER, FES, FGFR1 , FGFR2, FGFR3, FGR, FLT3, FLT4, DMS, FYN, HCK, HIPK1, HIPK2, HIPK4, HPK, IGF1R, IR, IRR, JAK1, JAK2, JAAK3, KDR, LCK, LOK, LRRK2, MARk4, MELK, MLK3 , MYLK4, NEK1, NEK5, NEK9, p70S6K, PDGFRa, PDGFRb, PDK1, PEAK1, PIM1, PKCd, PKCeplsilon, PKCg, PKCmu, PKCnu, PKD2, RET, ROS, RSK1, RSK2, RSK2, RSK3, RSK2, RSK2 , STK16, STK38, STK38L, TRKA, TRKB, TRKC, TXK, TYK2, TYRO3, ULK1, YES, and the ability to inhibit the activity of one or more of the kinase is excellent, preventing, reducing or preventing diseases caused by abnormal cell growth It is useful as a therapeutic agent.

본 발명에 따른 화합물로부터 예방 및 치료될 수 있는 비정상 세포 성장 질환은 위암, 폐암, 간암, 대장암, 소장암, 췌장암, 뇌암, 뼈암, 흑색종, 유방암, 경화성선종, 자궁암, 자궁경부암, 두경부암, 식도암, 갑상선암, 부갑상선암, 신장암, 육종, 전립선암, 요도암, 방광암, 백혈병(급성골수성백혈병), 다발성골수종, 골수이형성증후군과 같은 혈액암, 호치킨병과 비호치킨림프종과 같은 림프종, 또는 섬유선종 등으로부터 선택된 각종 종양 질환이 포함될 수 있다.Abnormal cell growth diseases that can be prevented and treated from the compounds according to the present invention include gastric cancer, lung cancer, liver cancer, colon cancer, small intestine cancer, pancreatic cancer, brain cancer, bone cancer, melanoma, breast cancer, sclerodenoma, uterine cancer, cervical cancer, head and neck cancer , Esophageal cancer, thyroid cancer, parathyroid cancer, kidney cancer, sarcoma, prostate cancer, urethral cancer, bladder cancer, leukemia (acute myelogenous leukemia), multiple myeloma, blood cancer such as myelodysplastic syndrome, lymphomas such as Hodgkin's disease and non-Hodgkin's lymphoma, or Various tumor diseases selected from fibroadenomas and the like may be included.

도 1은 본원발명 실험예 6에 따른 마우스의 종괴부피 모니터링 결과이다.1 is a result of monitoring the mass volume of a mouse according to Experimental Example 6 of the present invention.

이하, 본 발명에 대하여 구체적으로 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

[화학식 1][Formula 1]

상기 화학식 1에서,In Chemical Formula 1,

본 발명의 일측면에서, 상기 화학식 1에서, Q1 및 Q2는 각각 -(CH2)n-, -O(CH2)n-, -N(CH2)n- 및 -NH(CH2)_n-중 어느 하나이며, n은 정수이고; A 및 B는 각각 탄소수 3 내지 8개의 고리형 탄화수소, 탄소수 2 내지 7개의 헤테로 고리형 탄화수소, 탄소수 3 개 이상의 단일원소 방향족 화합물 및 탄소수 2개 이상의 이종원소 방향족 화합물 중 어느 하나이며, M은 -CHCH-, -CH₂CH₂-, -NHCO-, -CONH-, -NMe-, -NAc-, -NMs-, -NHCONHR₁-, -NHCOR₁-, -NHSONR₁- 및 -O- 중 어느 하나이며, 이 때 R₁은 탄소수 2 이상의 치환 또는 비치환된 포화 탄화수소, 탄소수 2 이상의 치환 또는 비치환된 불포화 탄화수소, 탄소수 3 내지 8개의 고리형 탄화수소, 탄소수 2 내지 7개의 헤테로 고리형 탄화수소, 탄소수 3 개 이상의 단일원소 방향족 화합물 및 탄소수 2개 이상의 이종원소 방향족 화합물 중 어느 하나일 수 있다.In one aspect of the present invention, in Formula 1, Q1 and Q2 are each of-(CH2) n-, -O (CH2) n-, -N (CH2) n- and -NH (CH2) _n- And n is an integer; A and B are each one of a cyclic hydrocarbon having 3 to 8 carbon atoms, a heterocyclic hydrocarbon having 2 to 7 carbon atoms, a single element aromatic compound having 3 or more carbon atoms, and a heterocyclic aromatic compound having 2 or more carbon atoms, and M is -CHCH -, -CH ₂ CH _2- , -NHCO-, -CONH-, -NMe-, -NAc-, -NMs-, -NHCONHR _1- , -NHCOR _1- , -NHSONR ₁ -and -O- In this case, R ₁ is a substituted or unsubstituted saturated hydrocarbon having 2 or more carbon atoms, a substituted or unsubstituted unsaturated hydrocarbon having 2 or more carbon atoms, a cyclic hydrocarbon having 3 to 8 carbon atoms, a heterocyclic hydrocarbon having 2 to 7 carbon atoms, 3 carbon atoms It may be any one of two or more mono-element aromatic compounds and heteroatoms having two or more carbon atoms.

본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 2,7-치환된 사이아노[3,2-d]피리미딘 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염은 당해 기술 분야에서 통상적인 방법에 의해 제조될 수 있다. 약학적으로 허용된 염은 인체에 독성이 낮고 모화합물의 생물학적 활성과 물리화학적 성질에 악영향을 주지 않아야 한다. 약학적으로 허용된 염은 약학적으로 사용 가능한 유리산과 화학식 1의 염기 화합물의 산부가염, 그리고 알칼리 금속염 (나트륨염 등) 과 알칼리 토금속염 (칼슘염 등), 그리고 유기염과 화학식 1의 카르복실산의 유기염기 부가염, 그리고 아미노산 부가염으로 구성된다. 약학적으로 허용된 염 제조에 사용될 수 있는 유리산은 무기산과 유기산으로 나눌 수 있다. 무기산은 염산, 황산, 질산, 인산, 과염소산, 브롬산 등이 사용될 수 있다. 유기산은 초산, 메테인설폰산, 에탄설폰산, p-톨루엔설폰산, 푸마린산, 말레산, 말론산, 프탈산, 숙신산, 젖산, 구연산, 시트르산, 글루콘산, 타타르산, 살리실산, 말산, 옥살산, 벤조산, 엠본산, 아스파르트산, 글루탐산 등이 사용될 수 있다. 유기염기 부가염 제조에 사용될 수 있는 유기염기는 트리스(하이드록시메틸)메틸아민, 다이시클로헥실아민 등이다. 아미노산 부가염 제조에 사용될 수 있는 아미노산은 알라닌, 글라이신 등의 천연 아미노산이다. The pharmaceutically acceptable salt of the 2,7-substituted cyano [3,2- d ] pyrimidine compound represented by Formula 1 according to the present invention can be prepared by a conventional method in the art. Pharmaceutically acceptable salts have low toxicity to the human body and should not adversely affect the biological activity and physicochemical properties of the parent compound. Pharmaceutically acceptable salts include acid addition salts of pharmaceutically available free acids and base compounds of Formula 1, alkali metal salts (such as sodium salts) and alkaline earth metal salts (such as calcium salts), and organic salts and carboxyls of Formula 1 It consists of an organic base addition salt of an acid and an amino acid addition salt. Free acids that can be used to prepare pharmaceutically acceptable salts can be divided into inorganic and organic acids. As the inorganic acid, hydrochloric acid, sulfuric acid, nitric acid, phosphoric acid, perchloric acid, and bromic acid may be used. Organic acids include acetic acid, methanesulfonic acid, ethanesulfonic acid, p- toluenesulfonic acid, fumaric acid, maleic acid, malonic acid, phthalic acid, succinic acid, lactic acid, citric acid, citric acid, gluconic acid, tartaric acid, salicylic acid, malic acid, oxalic acid, Benzoic acid, embonic acid, aspartic acid, glutamic acid and the like can be used. Organic bases The organic bases that can be used in the preparation of addition salts are tris (hydroxymethyl) methylamine, dicyclohexylamine, and the like. Amino acids that can be used in the production of amino acid addition salts are natural amino acids such as alanine and glycine.

본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 2,7-치환된 사이아노[3,2-d]피리미딘 화합물은 상기한 약학적으로 허용된 염과 더불어 모든 수화물 그리고 용매화물도 포함한다. 수화물 및 용매화물은 상기 화학식 1로 표기되는 2,7-치환된 사이아노[3,2-d]피리미딘 화합물을 메탄올, 에탄올, 아세톤, 1,4-다이옥세인과 같은 물과 섞일 수 있는 용매에 녹인 다음에 유리산 또는 유리염기를 가한 후에 결정화되거나 또는 재결정화될 수 있다. 그러한 경우, 용매화물(특히 수화물)이 형성될 수 있다. 따라서, 본 발명의 화합물로서 동결건조와 같은 방법으로 제조 가능한 다양한 양의 물 함유 화합물 이외에 수화물을 비롯한 화학 양론적 용매화물도 포함한다.The 2,7-substituted cyano [3,2- d ] pyrimidine compound represented by Chemical Formula 1 according to the present invention includes all hydrates and solvates in addition to the pharmaceutically acceptable salts described above. Hydrates and solvates are solvents capable of mixing 2,7-substituted cyano [3,2- d ] pyrimidine compounds represented by Chemical Formula 1 with water such as methanol, ethanol, acetone, and 1,4-dioxane. After dissolving in, it may be crystallized or recrystallized after adding free acid or free base. In such cases, solvates (especially hydrates) may be formed. Therefore, as a compound of the present invention, stoichiometric solvates including hydrates are included in addition to various amounts of water-containing compounds that can be prepared by a method such as lyophilization.

본 발명에 따른 화합물을 정의하기 위해 사용된 치환기에 대해 보다 상세히 설명하면 다음과 같다.The substituents used to define the compounds according to the present invention will be described in more detail as follows.

본 발명에서의 '할로젠 원자'라 함은 불소, 염소, 브롬, 요오드원자를 의미한다. The term "halogen atom" in the present invention means a fluorine, chlorine, bromine or iodine atom.

본 발명에서의 '알킬기'라 함은 메틸, 에틸, n-프로필, i-프로필, 사이클로프로필, n-부틸, i-부틸, t-부틸, 사이클로부틸, 사이클로프로필메틸, n-펜틸, i-펜틸, 네오펜틸, t-펜틸, 사이클로펜틸, 사이클로부틸메틸, n-헥실, i-헥실, 사이클로헥실, 사이클로펜틸메틸 등을 포함하는 1개에서 6개까지의 탄소원자를 가지는 지방족 포화 탄화수소기를 의미한다. The term 'alkyl group' in the present invention is methyl, ethyl, n -propyl, i -propyl, cyclopropyl, n -butyl, i -butyl, t -butyl, cyclobutyl, cyclopropylmethyl, n -pentyl, i- Means an aliphatic saturated hydrocarbon group having 1 to 6 carbon atoms including pentyl, neopentyl, t -pentyl, cyclopentyl, cyclobutylmethyl, n -hexyl, i -hexyl, cyclohexyl, cyclopentylmethyl, and the like. .

본 발명에서의'할로알킬기'라 함은 트라이플루오르메틸기와 같이 한개 이상의 할로젠 원자에 의해 수소원자가 치환된 알킬기를 의미한다. The term 'haloalkyl group' in the present invention means an alkyl group in which a hydrogen atom is substituted by one or more halogen atoms, such as a trifluoromethyl group.

본 발명에서의 '알콕시기'라 함은 메톡시, 에톡시, n-프로폭시, i-프로폭시, n-부톡시, i-부톡시, t-부톡시를 포함하는, C-C의 알킬기에서 선택된 치환체에 의해 수소원자가 치환된 하이드록시기를 의미한다. The term 'alkoxy group' in the present invention is selected from alkyl groups of CC, including methoxy, ethoxy, n -propoxy, i -propoxy, n -butoxy, i -butoxy, t -butoxy. Refers to a hydroxyl group in which a hydrogen atom is substituted by a substituent.

본 발명에서의 '헤테로아릴기'라 함은 피롤릴, 퓨라닐, 티오페닐, 피라졸릴, 이미다졸릴, 옥사졸릴, 아이소옥사졸릴, 티아졸릴, 아이소타이아졸릴, 트라이아졸릴, 옥사다이아졸릴, 티아다이아졸릴, 테트라졸릴, 피리디닐, 피라지닐, 피리다지닐, 피리미디닐, 트라이아졸릴, 인돌릴, 아이소인돌릴, 벤조퓨라닐, 벤조퓨라자닐, 다이벤조퓨라닐, 아이소벤조퓨라닐, 인다졸릴, 벤즈이미다졸릴, 벤즈옥사졸릴, 벤즈아이스옥사졸릴, 벤조티아졸릴, 다이벤조티오페닐, 나프티리딜, 벤즈아이소티아졸릴, 퀴놀리닐, 아이소퀴놀리닐, 퀴녹살리닐, 프탈라지닐, 치놀리닐, 퀴나졸리닐 등을 포함하여, 헤테로원자가 1개 이상 포함된 단일고리, 두고리, 또는 세고리 방향족 헤테로탄화수소기를 의미한다. In the present invention, the term 'heteroaryl group' refers to pyrrolyl, furanyl, thiophenyl, pyrazolyl, imidazolyl, oxazolyl, isooxazolyl, thiazolyl, isothiazolyl, triazolyl, oxadiazolyl , Thiadiazolyl, tetrazolyl, pyridinyl, pyrazinyl, pyridazinyl, pyrimidinyl, triazolyl, indolyl, isoindoleyl, benzofuranyl, benzofurazanyl, dibenzofuranyl, isobenzofu Ranil, indazolyl, benzimidazolyl, benzoxazolyl, benzisooxazolyl, benzothiazolyl, dibenzothiophenyl, naphthyridyl, benzisothiazolyl, quinolinyl, isoquinolinyl, quinoxalinyl, phthal It means a monocyclic, dugori, or tricyclic aromatic heterohydrocarbon group containing one or more heteroatoms, including thalazinyl, chinolinyl, quinazolinyl, and the like.

본 발명에서의 '헤테로고리기'라 함은 몰포리닐기, 피페리딘기, 피페라지닐기, N-보호된 피페라지닐기 등을 포함하여, 헤테로원자가 1개 이상 포함된 헤테로탄화수소 고리기를 의미한다.The term 'heterocyclic group' in the present invention means a heterohydrocarbon ring group containing one or more heteroatoms, including a morpholinyl group, a piperidine group, a piperazinyl group, an N -protected piperazinyl group, and the like. do.

이상에서 설명한 바와 같은 상기 화학식 1로 표시되는 2,7-치환된 사이아노[3,2-d]피리미딘 고리화된 화합물을 보다 구체적으로 예시하면 다음과 같다 : More specifically exemplifying the 2,7-substituted cyano [3,2- d ] pyrimidine cyclized compound represented by Chemical Formula 1 as described above is as follows:

(E)-4¹H-11-옥사-3-아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜-8,9-다이올 (화합물번호 21).(E) -4 ¹ H-11-oxa-3-aza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazole-1 (1,4 ) -Benzenecycloundecafen-8,9-diol (Compound No. 21).

본 발명의 약학적 조성물은 상기 화학식 1로 표시되는 2,7-치환된 사이아노[3,2-d]피리미딘 고리화된 화합물, 약학적으로 허용되는 이의 염, 이의 용매화물 또는 이의 수화물을 유효성분으로 함유하고, 여기에 통상의 무독성 약제학적으로 허용 가능한 담체, 보강제 및 부형제 등을 첨가하여 약제학적 분야에서 통상적인 제제, 예를 들면 정제, 캅셀제, 트로키제, 액제, 현탁제 등의 경구투여용 제제 또는 비경구투여용 제제로 제제화할 수 있다. The pharmaceutical composition of the present invention is a 2,7-substituted cyano [3,2- d ] pyrimidine cyclized compound represented by Chemical Formula 1, a pharmaceutically acceptable salt thereof, a solvate or hydrate thereof. It is contained as an active ingredient, and is added to a conventional non-toxic pharmaceutically acceptable carrier, adjuvant, excipient, and the like, and oral preparations such as tablets, capsules, troches, liquids, suspensions, etc. It can be formulated as a formulation for administration or a formulation for parenteral administration.

본 발명의 약제 조성물에 사용될 수 있는 부형제로는 감미제, 결합제, 용해제, 용해보조제, 습윤제, 유화제, 등장화제, 흡착제, 붕해제, 산화방지제, 방부제, 활탁제, 충진제, 방향제 등이 포함될 수 있다. 예를 들면 락토스, 덱스트로스, 슈크로스, 만니톨, 솔비톨, 셀룰로오스, 글라이신, 실리카, 탈크, 스테아린산, 스테린, 마그네슘 스테아린산염, 마그네슘 알루미늄 규산염, 녹말, 젤라틴, 트라가칸트 고무, 알지닌산, 소디움 알진산염, 메틸셀룰로오스, 소디움 카르복실메틸셀룰로오스, 아가, 물, 에탄올, 폴리에틸렌글리콜, 폴리비닐피롤리돈, 염화나트륨, 염화칼슘, 오렌지 엣센스, 딸기 엣센스, 바닐라 향 등을 들 수 있다. Excipients that can be used in the pharmaceutical compositions of the present invention may include sweeteners, binders, solubilizers, solubilizers, wetting agents, emulsifiers, isotonic agents, adsorbents, disintegrants, antioxidants, preservatives, lubricants, fillers, fragrances, and the like. Examples include lactose, dextrose, sucrose, mannitol, sorbitol, cellulose, glycine, silica, talc, stearic acid, sterin, magnesium stearate, magnesium aluminum silicate, starch, gelatin, tragacanth rubber, arginic acid, sodium And alginate, methylcellulose, sodium carboxymethylcellulose, agar, water, ethanol, polyethylene glycol, polyvinylpyrrolidone, sodium chloride, calcium chloride, orange essence, strawberry essence, and vanilla flavor.

또한, 본 발명에 따른 화합물의 인체에 대한 투여용량은 환자의 나이, 몸무게, 성별, 투여형태, 건강상태 및 질환정도에 따라 달라질 수 있으며, 몸무게가 70 kg인 성인 환자를 기준으로 할 때 일반적으로 0.01 내지 1,000 mg/day 이며, 의사 또는 약사의 판단에 따라 일정 시간간격으로 1일 1회 내지 수회로 분할 투여할 수도 있다.In addition, the dosage of the compound according to the present invention to the human body may vary depending on the patient's age, weight, sex, dosage form, health status and disease level, and is generally based on an adult patient weighing 70 kg. It is 0.01 to 1,000 mg / day, and may be dividedly administered once to several times a day at regular time intervals according to the judgment of a doctor or pharmacist.

한편, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 2,7-치환된 사이아노[3,2-d]피리미딘 고리화 된 화합물의 제조방법에 그 특징이 있는데, 그 대표적인 제조방법은 하기와 같다.On the other hand, the present invention has the characteristics of the method for preparing a 2,7-substituted cyano [3,2- d ] pyrimidine cyclized compound represented by Chemical Formula 1, and a representative manufacturing method is as follows.

상기 화학식을 가지는 화합물들은 사이아노[3,2-d]피리미딘을 골격으로 한다는 특징이 있다. 이 골격으로부터 7번 위치에 Suzuki 반응을 통해 벤젠고리와 같은 고리화 탄화수소를 도입하였다. 그 후 고리화 할 수 있는 작용기를 가진 알킬기를 연결하였다. 다음으로 2번 위치에는 고리화 할 수 있는 작용기를 가진 알킬기를 연결하였고, 아민 작용기를 가진 고리화합물을 Buchwald 반응을 통해서 치환하였다. 2번과 7번 위치에 치환기를 도입한 후에는 고리화 할 수 있는 반응들을 통해 고리화 화합물을 합성하였다.Compounds having the above formula are characterized by using cyano [3,2- d ] pyrimidine as a skeleton. Cyclic hydrocarbons such as benzene rings were introduced through the Suzuki reaction at position 7 from the backbone. Thereafter, an alkyl group having a functional group capable of cyclization was connected. Next, an alkyl group having a functional group capable of cyclization was linked to the second position, and a cyclic compound having an amine functional group was substituted through the Buchwald reaction. After introducing substituents at positions 2 and 7, cyclized compounds were synthesized through cyclizable reactions.

이상에서 설명한 바와 같은 본 발명은 하기 실시예, 제제예, 및 실험예에 의거하여 더욱 상세히 설명하겠는 바, 하기의 실시예, 제제예, 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 범위가 이들에 의해 한정되는 것은 아니다.The present invention as described above will be described in more detail on the basis of the following examples, formulation examples, and experimental examples. The following examples, formulation examples, and experimental examples are only illustrative of the invention and the scope of the invention. Is not limited by these.

[실시예][Example]

실시예 1. (E)-4Example 1. (E) -4 ^1One H-14-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로테트라디카펜-9-온 (화합물 번호 1)H-14-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazolo-1 (1,4) -benzene Cyclotetradicapen-9-one (Compound No. 1)

[화학식 2][Formula 2]

단계 1: 4-(2-클로로사이아노[3,2-d]피리미딘-7-일)페놀Step 1: 4- (2-Chlorocyano [3,2-d] pyrimidin-7-yl) phenol

7-브로모-2-클로로티에노[3,2-d]피리미딘 (5.16 g, 20.7 mmol)을 다이옥세인 (138 mL)에 녹인 후 2.0 N 탄산소듐 (62.1 mL)과 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보레-2-닐)페놀 (2 g, 14.61 mmol)을 첨가하였다. 이 혼합용액에 질소를 10분 동안 흘려 준 후 Pd(PPh)Cl (1.45 g, 2.07 mmol)과 t-ButylXphos (0.88 g, 2.07 mmol)를 넣어 주었다. 반응 혼합용액을 100 ℃에서 6 시간 교반 후 셀리트로 여과하였다. 이 여과액을 에틸아세테이트로 묽힌 뒤 소금물로 닦아 주었다. 유기층을 황산마그네슘으로 건조하여 농축하였다. 크로마토그래피방법으로 정제하여 목표화합물 (4.3 g, 81% 수율)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.52 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 7.82 (m, 2H), 6.89 (m, 2H). MS m/z : 263 [M+1].Dissolve 7-bromo-2-chlorothieno [3,2-d] pyrimidine (5.16 g, 20.7 mmol) in dioxane (138 mL), then 2.0 N sodium carbonate (62.1 mL) and 4- (4, 4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxabore-2-yl) phenol (2 g, 14.61 mmol) was added. After flowing nitrogen for 10 minutes in this mixed solution, Pd (PPh) Cl (1.45 g, 2.07 mmol) and t-ButylXphos (0.88 g, 2.07 mmol) were added. The reaction mixture solution was stirred at 100 ° C. for 6 hours, and then filtered through celite. The filtrate was diluted with ethyl acetate and then wiped with brine. The organic layer was dried over magnesium sulfate and concentrated. Purification by chromatography gave the target compound (4.3 g, 81% yield). ¹ H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 9.52 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 7.82 (m, 2H), 6.89 (m, 2H). MS m / z: 263 [M + 1].

단계 2: 에틸 5-(4-(2-클로로사이아노[3,2-d]피리미딘-7-일)페녹시)펜타노에이트Step 2: Ethyl 5- (4- (2-chlorocyano [3,2-d] pyrimidin-7-yl) phenoxy) pentanoate

4-(2-클로로사이아노[3,2-d]피리미딘-7-일)페놀 (1 g, 3.82 mmol)을 다이메틸포름아마이드 (16 mL)에 녹인후 탄산칼슘 (1.06 g, 7.64 mmol)과 에틸 5-브로모펜테노에이트 (4.2 mmol, 0.88 g)을 첨가하였다. 반응 혼합용액을 100 ℃에서 3시간 교반 후 셀리트로 여과하였다. 이 여과액을 에틸아세테이트로 묽힌 뒤 소금물로 닦아 주었다. 유기층을 황산마그네슘으로 건조하여 농축하였다. 크로마토그래피방법으로 정제하여 목표화합물 (1.12 g, 74% 수율)을 얻었다. MS m/z : 391 [M+1].Calcium carbonate (1.06 g, 7.64 mmol) after 4- (2-chlorocyano [3,2-d] pyrimidin-7-yl) phenol (1 g, 3.82 mmol) was dissolved in dimethylformamide (16 mL). ) And ethyl 5-bromopentenoate (4.2 mmol, 0.88 g). The reaction mixture solution was stirred at 100 ° C. for 3 hours, and then filtered through celite. The filtrate was diluted with ethyl acetate and then wiped with brine. The organic layer was dried over magnesium sulfate and concentrated. Purification by chromatography gave the target compound (1.12 g, 74% yield). MS m / z: 391 [M + 1].

단계 3: tert-뷰틸 (3-(4-나이트로-1H-피라조-1-일)프로필)카바메이트Step 3: tert-butyl (3- (4-nitro-1H-pyrazol-1-yl) propyl) carbamate

4-나이트로-1H-피라졸을 (3 g, 26.54 mmol)을 아세토나이트릴 (100 mL)에 녹인 후 탄산칼슘 (7.33 g, 53.08 mmol)과 tert-뷰틸 (3-브로모프로필)카바메이트 (6.96 g, 29.2 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합용액을 60 ℃에서 3시간 교반 후 셀리트로 여과하였다. 이 여과액을 에틸아세테이트로 묽힌 뒤 소금물로 닦아 주었다. 유기층을 황산마그네슘으로 건조하여 농축하여 목표화합물 (6.81 g. 95%)을 정제없이 얻었다. MS m/z : 271 [M+1].Dissolve 4-nitro-1H-pyrazole (3 g, 26.54 mmol) in acetonitrile (100 mL), then calcium carbonate (7.33 g, 53.08 mmol) and tert-butyl (3-bromopropyl) carbamate (6.96 g, 29.2 mmol) was added. The reaction mixture solution was stirred at 60 ° C. for 3 hours, and then filtered through celite. The filtrate was diluted with ethyl acetate and then wiped with brine. The organic layer was dried over magnesium sulfate and concentrated to give the target compound (6.81 g. 95%) without purification. MS m / z: 271 [M + 1].

단계 4: tert-뷰틸 (3-(4-나이트로-1H-피라조-1-일)프로필)카바메이트Step 4: tert-butyl (3- (4-nitro-1H-pyrazol-1-yl) propyl) carbamate

tert-뷰틸 (3-(4-나이트로-1H-피라조-1-일)프로필)카바메이트 (6.81 g, 17.46 mmol)을 메탄올 (105 mL)에 녹인 후 Pd ( 0.7 g)을 첨가하였다. 수소기체를 채운 풍선 압력하에 실온에서 하루 교반하였다. 이 반응 혼합용액을 셀리트로 여과하여 농축하였다. 목적화합물 (5.44 g, 91% 수율)을 정제 없이 다음 반응에 사용하였다. MS m/z : 241 [M+1].tert-Butyl (3- (4-nitro-1H-pyrazol-1-yl) propyl) carbamate (6.81 g, 17.46 mmol) was dissolved in methanol (105 mL) and then Pd (0.7 g) was added. The mixture was stirred at room temperature for one day under a balloon pressure filled with hydrogen gas. The reaction mixture solution was filtered through celite and concentrated. The target compound (5.44 g, 91% yield) was used for the next reaction without purification. MS m / z: 241 [M + 1].

단계 5: 에틸 5-(4-(2-((1-(3-((tert-뷰톡시카보닐)아미노)프로필)-1H-피라졸-4-일)아미노)사이아노[3,2-d]피리미딘-7-일)페녹시)펜토네이트Step 5: Ethyl 5- (4- (2-((1- (3-((tert-butoxycarbonyl) amino) propyl) -1H-pyrazol-4-yl) amino) cyano [3,2 -d] pyrimidin-7-yl) phenoxy) pentonate

에틸 5-(4-(2-클로로사이아노[3,2-d]피리미딘-7-일)페녹시)펜타노에이트 (1 g, 2.56 mmol)을 sec-뷰탄올 17 mL에 녹인 후, 탄산칼슘 ( 1.77 g, 12.8 mmol)과 tert-뷰틸 (3-(4-나이트로-1H-피라조-1-일)프로필)카바메이트 (0.68 g, 2.82 mmol)를 첨가하였다. 이 혼합용액에 질소를 10분 동안 흘려 준 후 Pd₂(dba)₃ (0.23 g, 0.26 mmol)과 Xphos (0.12 g, 0.26 mmol)를 넣어 주었다. 반응 혼합용액을 100 ℃에서 2 시간 교반 후 셀리트로 여과하였다. 이 여과액을 에틸아세테이트로 묽힌 뒤 소금물로 닦아 주었다. 유기층을 황산마그네슘으로 건조하여 농축하였다. 크로마토그래피방법으로 정제하여 목표화합물 (1.26 g, 83% 수율)을 얻었다. MS m/z : 595 [M+1].After dissolving ethyl 5- (4- (2-chlorocyano [3,2-d] pyrimidin-7-yl) phenoxy) pentanoate (1 g, 2.56 mmol) in 17 mL of sec-butanol, Calcium carbonate (1.77 g, 12.8 mmol) and tert-butyl (3- (4-nitro-1H-pyrazol-1-yl) propyl) carbamate (0.68 g, 2.82 mmol) were added. After flowing nitrogen for 10 minutes in this mixed solution, Pd ₂ (dba) ₃ (0.23 g, 0.26 mmol) and Xphos (0.12 g, 0.26 mmol) were added. The reaction mixture solution was stirred at 100 ° C. for 2 hours, and then filtered through celite. The filtrate was diluted with ethyl acetate and then wiped with brine. The organic layer was dried over magnesium sulfate and concentrated. Purification by chromatography gave the target compound (1.26 g, 83% yield). MS m / z: 595 [M + 1].

단계 6: 5-(4-(2-((1-(3-((tert-뷰톡시카보닐)아미노)프로필)-1H-피라조-4-일)아미노)사이아노[3,2-d]피리미딘-7-일)페녹시)펜타노익 에시드Step 6: 5- (4- (2-((1- (3-((tert-butoxycarbonyl) amino) propyl) -1H-pyrazo-4-yl) amino) cyano [3,2- d] pyrimidin-7-yl) phenoxy) pentanoic acid

에틸 5-(4-(2-((1-(3-((tert-뷰톡시카보닐)아미노)프로필)-1H-피라졸-4-일)아미노)사이아노[3,2-d]피리미딘-7-일)페녹시)펜토네이트 (1.26 g, 2.12 mmol)을 테트로하이드로퓨란 (4 mL), 메탄올 (4 mL), 물(4 mL)에 녹인 후 LiOH-H₂O (0.95 g 21.2 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합용액을 실온에서 하루 교반하였다. 반응 혼합용액을 에틸아세테이트로 묽인 후 2 N 염화수소 수용액으로 중화하여 pH 5를 만든 후 소금물로 닦아 주었다. 유기층을 황산마그네슘으로 건조하여 농축하였다. 정제 없이 목표화합물 (1.03 g, 86% 수율)을 얻었다. MS m/z : 567 [M+1].Ethyl 5- (4- (2-((1- (3-((tert-butoxycarbonyl) amino) propyl) -1H-pyrazol-4-yl) amino) cyano [3,2-d] Pyrimidin-7-yl) phenoxy) pentonate (1.26 g, 2.12 mmol) was dissolved in tetrohydrofuran (4 mL), methanol (4 mL), water (4 mL), and then LiOH-H ₂ O (0.95) g 21.2 mmol) was added. The reaction mixture solution was stirred at room temperature for one day. The reaction mixture solution was diluted with ethyl acetate, neutralized with a 2N aqueous hydrogen chloride solution, and pH 5 was produced, and then washed with brine. The organic layer was dried over magnesium sulfate and concentrated. The target compound (1.03 g, 86% yield) was obtained without purification. MS m / z: 567 [M + 1].

단계 7: 5-(4-(2-((1-(3-아미노프로필)-1H-피라조-4-일)아미노)사이아노[3,2-d]피리미딘-7-일)페녹시)펜타노익 에시드Step 7: 5- (4- (2-((1- (3-aminopropyl) -1H-pyrazo-4-yl) amino) cyano [3,2-d] pyrimidin-7-yl) phenoxy City) pentanoic acid

5-(4-(2-((1-(3-((tert-뷰톡시카보닐)아미노)프로필)-1H-피라조-4-일)아미노)사이아노[3,2-d]피리미딘-7-일)페녹시)펜타노익 에시드 (1.09 g, 1.93 mmol)을 다이옥세인 (10 mL)에 녹인 후 4 M 염화수소-다이옥세인 (10 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합용액을 실온에서 3 시간 교반하였다. 반응 혼합용액을 에틸 아세테이트로 묽인 후 소듐바이카보네이트 포화수용액을 이용하여 중화하여 pH 5를 만든 후 소금물로 닦아 주었다. 유기층을 황산마그네슘으로 건조하여 농축하였다. 정제 없이 목표화합물 (0.83 g, 93% 수율)을 얻었다. MS m/z : 467 [M+1].5- (4- (2-((1- (3-((tert-butoxycarbonyl) amino) propyl) -1H-pyrazo-4-yl) amino) cyano [3,2-d] pyri Midin-7-yl) phenoxy) pentanoic acid (1.09 g, 1.93 mmol) was dissolved in dioxane (10 mL) followed by 4 M hydrogen chloride-dioxane (10 mL). The reaction mixture solution was stirred at room temperature for 3 hours. The reaction mixture solution was diluted with ethyl acetate, neutralized with a saturated aqueous solution of sodium bicarbonate, and pH 5 was generated, and then wiped with brine. The organic layer was dried over magnesium sulfate and concentrated. The target compound (0.83 g, 93% yield) was obtained without purification. MS m / z: 467 [M + 1].

단계 8: (E)-4¹H-14-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로테트라디카펜-9-온Step 8: (E) -4 ¹ H-14-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazolo -1 (1,4) -benzenecyclotetradicapen-9-one

5-(4-(2-((1-(3-아미노프로필)-1H-피라조-4-일)아미노)사이아노[3,2-d]피리미딘-7-일)페녹시)펜타노익 에시드 (0.83 g, 1.78 mmol)을 다이메틸포름아마이드 (35 mL)에 녹인 후 TBTU (0.57 g, 1.78 mmol)과 HOBt (72 mg, 0.53 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 10분 교반 후에 트라이에틸아민 (0.49 mL, 3.56 mmol)을 천천히 첨가하였고, 하루 교반하였다. 반응 혼합용액을 에틸아세테이트로 묽인 후 소금물로 닦아 주었다. 유기층을 황산마그네슘으로 건조하여 농축하였다. 로마토그래피방법으로 정제하여 목표화합물 (0.55 g, 72% 수율)을 얻었다. MS m/z : 449 [M+1].5- (4- (2-((1- (3-aminopropyl) -1H-pyrazo-4-yl) amino) cyano [3,2-d] pyrimidin-7-yl) phenoxy) penta Noic acid (0.83 g, 1.78 mmol) was dissolved in dimethylformamide (35 mL), followed by TBTU (0.57 g, 1.78 mmol) and HOBt (72 mg, 0.53 mmol). After stirring at room temperature for 10 minutes, triethylamine (0.49 mL, 3.56 mmol) was slowly added and stirred for a day. The reaction mixture solution was diluted with ethyl acetate and wiped with brine. The organic layer was dried over magnesium sulfate and concentrated. Purification by Romantography gave the target compound (0.55 g, 72% yield). MS m / z: 449 [M + 1].

실시예 2. (Z)-1Example 2. (Z) -1 ^1One H-5-옥사-3,9-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-1(4,1)-피라졸로-4(1,4)-벤젠사이클로테트라디카펜-10-온 (화합물번호 2)H-5-oxa-3,9-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-1 (4,1) -pyrazolo-4 (1,4) -benzene Cyclotetradicapen-10-one (Compound No. 2)

[화학식 3][Formula 3]

단계 1: 2-클로로-7-(1H-피라졸-4-일)사이아노[3,2-d]피리미딘Step 1: 2-chloro-7- (1H-pyrazol-4-yl) cyano [3,2-d] pyrimidine

4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보레-2-닐)페놀 대신 tert-뷰틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보렌-2-일)-1H-피라졸-1-카복실레이트을 사용한 것을 제외하고는 실시예1의 단계1과 실험방법은 동일하다.Tert-butyl 4- (4,4,5,5-tetramethyl-1,3 instead of 4- (4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxabor-2-yl) phenol , 2-Dioxaboren-2-yl) -1H-pyrazole-1-carboxylate except that the step 1 and the experimental method of Example 1 is the same.

단계 2: 에틸 5-(4-(2-클로로사이아노[3,2-d]피리미딘-7-일)-1H-피라조-1-일)펜토네이트Step 2: Ethyl 5- (4- (2-chlorocyano [3,2-d] pyrimidin-7-yl) -1H-pyrazol-1-yl) pentonate

실시예 1의 단계 2와 실험방법은 동일하다. Step 2 of Example 1 and the experimental method are the same.

단계 3: tert-뷰틸 (3-(4-나이트로페녹시)프로필)카바메이트Step 3: tert-butyl (3- (4-nitrophenoxy) propyl) carbamate

4-nitrophenol (1 g, 7.19 mmol)을 다이메틸 포름아마이드 5 mL에 녹인 후 탄산칼슘 (1.98 g, 14.4 mmol)과 tert-뷰틸 (3-브로모프로필)카바메이트 (1.89 g, 7.91 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합용액을 100 ℃에서 3시간 교반 후 셀리트로 여과하였다. 이 여과액을 에틸아세테이트로 묽힌 뒤 소금물로 닦아 주었다. 유기층을 황산마그네슘으로 건조하여 농축하여 목표화합물 (1.87 g. 88%)을 정제없이 얻었다. MS m/z : 297 [M+1]. 4-nitrophenol (1 g, 7.19 mmol) was dissolved in 5 mL of dimethyl formamide, followed by calcium carbonate (1.98 g, 14.4 mmol) and tert-butyl (3-bromopropyl) carbamate (1.89 g, 7.91 mmol). Was added. The reaction mixture solution was stirred at 100 ° C. for 3 hours, and then filtered through celite. The filtrate was diluted with ethyl acetate and then wiped with brine. The organic layer was dried over magnesium sulfate and concentrated to give the target compound (1.87 g. 88%) without purification. MS m / z: 297 [M + 1].

단계 4: tert-뷰틸 (3-(4-아미노로페녹시)프로필)카바메이트Step 4: tert-butyl (3- (4-aminolophenoxy) propyl) carbamate

tert-뷰틸 (3-(4-나이트로페녹시)프로필)카바메이트 (1.87 g, 6.33 mmol)을 메탄올 (20 mL)에 녹인 후 Pd ( 0.2 g)을 첨가하였다. 수소기체를 채운 풍선 압력하에 실온에서 하루 교반하였다. 이 반응 혼합용액을 셀리트로 여과하여 농축하였다. 목적화합물 (1.55 g, 91% 수율)을 정제 없이 다음 반응에 사용하였다. MS m/z : 267 [M+1].tert-Butyl (3- (4-nitrophenoxy) propyl) carbamate (1.87 g, 6.33 mmol) was dissolved in methanol (20 mL) and then Pd (0.2 g) was added. The mixture was stirred at room temperature for one day under a balloon pressure filled with hydrogen gas. The reaction mixture solution was filtered through celite and concentrated. The target compound (1.55 g, 91% yield) was used for the next reaction without purification. MS m / z: 267 [M + 1].

단계 5: ethyl 5-(4-(2-((4-(3-((tert-뷰톡시카보닐)아미노)프로폭시)페닐)암노)사이아노[3,2-d]피리미딘-7-일)-1H-피라조-1-일)펜텐노에이트Step 5: ethyl 5- (4- (2-((4- (3-((tert-butoxycarbonyl) amino) propoxy) phenyl) amno) cyano [3,2-d] pyrimidine-7 -Day) -1H-pyrazo-1-yl) pentenoate

tert-뷰틸 (3-(4-나이트로-1H-피라조-1-일)프로필)카바메이트 대신 tert-뷰틸 (3-(4-아미노로페녹시)프로필)카바메이트을 사용한 것을 제외하고, 실시예 1의 단계 5와 실험방법은 동일하다. MS m/z : 595 [M+1].Conducted, except that tert-butyl (3- (4-aminorophenoxy) propyl) carbamate was used instead of tert-butyl (3- (4-nitro-1H-pyrazol-1-yl) propyl) carbamate Step 5 of Example 1 and the experimental method are the same. MS m / z: 595 [M + 1].

단계 6: 5-(4-(2-((4-(3-((tert-뷰톡시카보닐)아미노)프로폭시)페닐)아미노)사이아노[3,2-d]피리미딘-7-일)-1H-피라조-1-일)펜타노익 에시드Step 6: 5- (4- (2-((4- (3-((tert-butoxycarbonyl) amino) propoxy) phenyl) amino) cyano [3,2-d] pyrimidine-7- 1) -1H-pyrazo-1-yl) pentanoic acid

실시예 1의 단계 6과 실험방법은 동일하다. MS m/z : 567 [M+1].Step 6 of Example 1 and the experimental method are the same. MS m / z: 567 [M + 1].

단계 7: 5-(4-(2-((4-(3-아미노프로폭시)페닐)아미노)사이아노[3,2-d]피리미딘-7-일)-1H-피라졸-1-일)펜타노익 에시드Step 7: 5- (4- (2-((4- (3-aminopropoxy) phenyl) amino) cyano [3,2-d] pyrimidin-7-yl) -1H-pyrazole-1- Sun) pentanoic acid

실시예 1의 단계 7과 실험방법은 동일하다. MS m/z : 467 [M+1].Step 7 of Example 1 and the experimental method are the same. MS m / z: 467 [M + 1].

단계 8: (Z)-1¹H-5-옥사-3,9-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-1(4,1)-피라졸로-4(1,4)-벤젠사이클로테트라다카펜-10-온Step 8: (Z) -1 ¹ H-5-oxa-3,9-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-1 (4,1) -pyrazolo -4 (1,4) -benzenecyclotetradacapen-10-one

실시예 1의 단계 8과 실험방법은 동일하다. MS m/z : 449 [M+1].Step 8 of Example 1 and the experimental method are the same. MS m / z: 449 [M + 1].

실시예 3. 5,15-다이옥사-3,9-다이아자-2(7,2)-사이나오[3,2-d]피리미딘-1(5,2)-피리딘-4(1,4)-벤젠사이클로펜타디카펜-10-온 (화합물번호 3)Example 3. 5,15-Dioxa-3,9-diaza-2 (7,2) -siana [3,2-d] pyrimidine-1 (5,2) -pyridine-4 (1, 4) -benzenecyclopentadicapen-10-one (Compound No. 3)

[화학식 4][Formula 4]

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.29 (s, 1H), 9.12 (s, 1H), 8.93 (m, 1H), 8.40(s, 1H), 7.94 (m, 1H), 7.55 (m, 3H), 6.91(m, 2H), 6.50 (m, 1H), 4.00 (m, 2H), 3.87 (m, 2H), 3.27 (m, 4H), 2.11 (m, 2H), 1.88 (m, 2H), 1.55 (m, 4H). MS m/z : 476 [M+1]. ¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.29 (s, 1H), 9.12 (s, 1H), 8.93 (m, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.94 (m, 1H), 7.55 (m , 3H), 6.91 (m, 2H), 6.50 (m, 1H), 4.00 (m, 2H), 3.87 (m, 2H), 3.27 (m, 4H), 2.11 (m, 2H), 1.88 (m, 2H), 1.55 (m, 4H). MS m / z: 476 [M + 1].

단계1: 5-(2-클로로사이아노[3,2-d]피리딘-7-일)피리딘-2-올Step 1: 5- (2-chlorocyano [3,2-d] pyridin-7-yl) pyridin-2-ol

4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보레-2-닐)페놀 대신 5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보렌2-닐)피리딘-2-올을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1의 단계1과 실험방법은 동일하다. MS m/z : 364 [M+1].Instead of 4- (4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxabor-2-yl) phenol, 5- (4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2- The experiment method is the same as in Step 1 of Example 1, except that dioxaboren2-yl) pyridin-2-ol is used. MS m / z: 364 [M + 1].

단계 2: 에틸 5-((5-(2-클로로사이아노 [3,2-d]피리딘-7-일)피리미딘-2-일)옥시)펜타노에이트Step 2: Ethyl 5-((5- (2-chlorocyano [3,2-d] pyridin-7-yl) pyrimidin-2-yl) oxy) pentanoate

실시예 1의 단계 2와 실험방법은 동일하다. MS m/z : 392 [M+1].Step 2 of Example 1 and the experimental method are the same. MS m / z: 392 [M + 1].

이 후 단계부터는 실시예 2의 단계 3 - 8의 실험방법과 동일하다.From this step onwards, it is the same as the experiment method of steps 3 to 8 of Example 2.

실시예 4. (E)-4Example 4. (E) -4 ^1One H-14-옥사-3,10-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸-1(1,4)-벤젠사이클로테트라디카펜-9-온 (화합물번호 4) H-14-oxa-3,10-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazole-1 (1,4) -benzene Cyclotetradicapen-9-one (Compound No. 4)

[화학식 5][Formula 5]

단계 1: tert-뷰틸 (3-(4-(2-클로로사이아노[3,2-d]피리미딘-7-일)페녹시)프로필)카바메이트Step 1: tert-butyl (3- (4- (2-chlorocyano [3,2-d] pyrimidin-7-yl) phenoxy) propyl) carbamate

4-(2-클로로사이아노[3,2-d]피리미딘-7-일)페놀 (1 g, 3.82 mmol)을 다이메틸포름아마이드 (16 mL)에 녹인후 탄산칼슘 (1.06 g, 7.64 mmol)과 tert-뷰틸 (3-브로모프로필)카바메이트 (1.00 g, 4.20 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합용액을 100 ℃에서 3시간 교반 후 셀리트로 여과하였다. 이 여과액을 에틸아세테이트로 묽힌 뒤 소금물로 닦아 주었다. 유기층을 황산마그네슘으로 건조하여 농축하였다. 크로마토그래피방법으로 정제하여 목표화합물 (1.26 g, 79% 수율)을 얻었다. MS m/z : 391 [M+1].Calcium carbonate (1.06 g, 7.64 mmol) after 4- (2-chlorocyano [3,2-d] pyrimidin-7-yl) phenol (1 g, 3.82 mmol) was dissolved in dimethylformamide (16 mL). ) And tert-butyl (3-bromopropyl) carbamate (1.00 g, 4.20 mmol) were added. The reaction mixture solution was stirred at 100 ° C. for 3 hours, and then filtered through celite. The filtrate was diluted with ethyl acetate and then wiped with brine. The organic layer was dried over magnesium sulfate and concentrated. Purification by chromatography gave the target compound (1.26 g, 79% yield). MS m / z: 391 [M + 1].

단계 2: 에틸 5-(4-나이트로-1H-피라졸-1-일)펜테노에이트Step 2: Ethyl 5- (4-nitro-1H-pyrazol-1-yl) pentenoate

tert-뷰틸 (3-브로모프로필)카바메이트 대신 에틸 5-브로모펜텐노에이트을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1의 단계3 과 실험방법은 동일하다. MS m/z : 242 [M+1].Step 3 of Example 1 and the experimental method were the same, except that ethyl 5-bromopentennoate was used instead of tert-butyl (3-bromopropyl) carbamate. MS m / z: 242 [M + 1].

단계 3: 에틸 5-(4-아미노-1H-피라졸-1-일)펜텐노에이트Step 3: Ethyl 5- (4-amino-1H-pyrazol-1-yl) pentenoate

실험 방법은 실시예 1의 단계4와 동일하다. MS m/z : 222 [M+1].The experimental method is the same as Step 4 in Example 1. MS m / z: 222 [M + 1].

단계 4: 에틸 5-(4-((7-(4-(3-((tert-뷰톡시카보닐)아미노)프로폭시)페닐)사이아노[3,2-d]피리미딘-2-일)아미노)-1H-피라졸-1일l)펜텐노에이트Step 4: Ethyl 5- (4-((7- (4- (3-((tert-butoxycarbonyl) amino) propoxy) phenyl) cyano [3,2-d] pyrimidin-2-yl ) Amino) -1H-pyrazol-1yl l) pentene noate

tert-뷰틸 (3-(4-나이트로-1H-피라조-1-일)프로필)카바메이트 대신 에틸 5-(4-아미노-1H-피라졸-1-일)펜텐노에이트을 사용한 것을 제외하고는 실시예1 의 단계 5와 실험방법은 동일하다. MS m/z : 595 [M+1].tert-butyl (3- (4-nitro-1H-pyrazol-1-yl) propyl) carbamate instead of ethyl 5- (4-amino-1H-pyrazol-1-yl) pentenonate Step 5 of Example 1 and the experimental method are the same. MS m / z: 595 [M + 1].

이후 실험 방법은 실시예 1의 단계 6 - 8 과 동일하다.Thereafter, the experimental method is the same as steps 6-8 of Example 1.

실시예 5. 5,15-다이옥사-3,11-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-1,4(1,4)-다이벤젠사이클로벤타디카펜-10-온 (화합물번호 5)Example 5. 5,15-Dioxa-3,11-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-1,4 (1,4) -dibenzenecycloventa Dicapen-10-one (Compound No. 5)

[화학식 6][Formula 6]

단계 1: 에틸 5-(4-나이트로페녹시)펜텐노에이트Step 1: Ethyl 5- (4-nitrophenoxy) pentenoate

실험 방법은 실시예 1 의 단계 2와 동일하다. MS m/z : 268 [M+1].The experimental method is the same as in Step 2 of Example 1. MS m / z: 268 [M + 1].

단계 2: 에틸 5-(4-아미노페녹시)펜텐노에이트Step 2: Ethyl 5- (4-aminophenoxy) pentenoate

실험 방법은 실시예 1의 단계 4와 동일하다. MS m/z : 238 [M+1].The experimental method is the same as in Step 4 of Example 1. MS m / z: 238 [M + 1].

단계3: 에틸 4-(4-((7-(4-(3-((tert-뷰톡시카보닐)아미노)프로폭시)페닐)사이아노[3,2-d]피리미딘-2-일)아미노)페녹시)뷰테노에이트Step 3: Ethyl 4- (4-((7- (4- (3-((tert-butoxycarbonyl) amino) propoxy) phenyl) cyano [3,2-d] pyrimidin-2-yl ) Amino) phenoxy) butenoate

tert-뷰틸 (3-(4-나이트로-1H-피라조-1-일)프로필)카바메이트 대신 에틸 5-(4-아미노페녹시)펜텐노에이트을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1의 단계 5와 실험 방법은 동일하다. MS m/z : 607 [M+1].Step 5 of Example 1 except that ethyl 5- (4-aminophenoxy) pentenoate was used instead of tert-butyl (3- (4-nitro-1H-pyrazol-1-yl) propyl) carbamate And the experimental method is the same. MS m / z: 607 [M + 1].

이후 실험 방법은 실시예 1의 단계 6 - 8과 동일하다. Thereafter, the experimental method is the same as steps 6-8 of Example 1.

실시예 6. (E)-4Example 6. (E) -4 ^1One H-8-옥사-3-아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-5(4,1)-피페리딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로옥테펜 (화합물번호 6)H-8-oxa-3-aza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-5 (4,1) -piperidine-4 (4,1) -pyrazolo- 1 (1,4) -benzenecyclooctefen (Compound No. 6)

[화학식 7][Formula 7]

단계 1: 7-(4-(2-bromoethoxy)phenyl)-2-chlorothieno[3,2-d]pyrimidineStep 1: 7- (4- (2-bromoethoxy) phenyl) -2-chlorothieno [3,2-d] pyrimidine

4-(2-클로로사이아노[3,2-d]피리미딘-7-일)페놀 (1 g, 3.82 mmol)을 테트로하이드로퓨러란 (13 mL)에 녹인 후 트라이페닐포스핀 (1.5 g, 5.73 mmol)과 2-브로모에탄올 (0.54 mL, 7.64 mmol)를 첨가하였다. 5분 간 교반 후에 다이아이소프로필 아조이카복시레이트 (1.13 mL, 5.73 mmol)를 천천히 첨가한 후, 실온에서 하루 교반하였다. 반응액을 에틸아세테이트로 묽힌 뒤 소금물로 닦아 주었다. 유기층을 황산마그네슘으로 건조하여 농축하였다. 크로마토그래피방법으로 정제하여 목표화합물 (0.97, 69% 수율)을 얻었다. MS m/z : 369 [M+1].After dissolving 4- (2-chlorocyano [3,2-d] pyrimidin-7-yl) phenol (1 g, 3.82 mmol) in tetrohydrofuran (13 mL), triphenylphosphine (1.5 g , 5.73 mmol) and 2-bromoethanol (0.54 mL, 7.64 mmol). After stirring for 5 minutes, diisopropyl azocarboxylate (1.13 mL, 5.73 mmol) was added slowly, followed by stirring at room temperature for one day. The reaction solution was diluted with ethyl acetate and then wiped with brine. The organic layer was dried over magnesium sulfate and concentrated. Purification by chromatography gave the target compound (0.97, 69% yield). MS m / z: 369 [M + 1].

단계 2: tert-뷰틸 4-(4-((7-(4-(2-브로모에톡시)페닐)사이아노[3,2-d]피리미딘-2-일)아미노)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카복실레이트Step 2: tert-butyl 4- (4-((7- (4- (2-bromoethoxy) phenyl) cyano [3,2-d] pyrimidin-2-yl) amino) -1H-pyrazole -1-yl) piperidine-1-carboxylate

실험 방법은 실시예 1의 단계 5와 동일하다. MS m/z : 599 [M+1].The experimental method is the same as in Step 5 of Example 1. MS m / z: 599 [M + 1].

단계 3: 7-(4-(2-브로모에톡시)페닐)-N-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)사이아노[3,2-d]피리미딘-2-아민Step 3: 7- (4- (2-Bromoethoxy) phenyl) -N- (1- (piperidin-4-yl) -1H-pyrazol-4-yl) cyano [3,2-d ] Pyrimidin-2-amine

실험 방법은 실시예 1의 단계 7과 동일하다. MS m/z : 499 [M+1]. The experimental method is the same as in Step 7 of Example 1. MS m / z: 499 [M + 1].

단계 4: (E)-4¹H-8-옥사-3-아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-5(4,1)-피페리딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로옥테펜Step 4: (E) -4 ¹ H-8-oxa-3-aza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-5 (4,1) -piperidine-4 (4,1) -pyrazolo-1 (1,4) -benzenecyclooctepene

7-(4-(2-브로모에톡시)페닐)-N-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)사이아노[3,2-d]피리미딘-2-아민 (0.1 g, 0.2 mmol)을 2-에톡시메탄올 (4 mL)에 녹인 후, 트라이에틸아민 (0.05 mL, 0.4 mmol) 첨가하였다. 100 ℃에서 하루 교반하였다. 반응액을 에틸아세테이트로 묽힌 뒤 소금물로 닦아 주었다. 유기층을 황산마그네슘으로 건조하여 농축하였다. 크로마토그래피방법으로 정제하여 목표화합물 (44 mg, 53% 수율)을 얻었다. MS m/z : 419 [M+1]. 7- (4- (2-bromoethoxy) phenyl) -N- (1- (piperidin-4-yl) -1H-pyrazol-4-yl) cyano [3,2-d] pyrimidine After 2-amine (0.1 g, 0.2 mmol) was dissolved in 2-ethoxymethanol (4 mL), triethylamine (0.05 mL, 0.4 mmol) was added. Stirred at 100 ° C per day. The reaction solution was diluted with ethyl acetate and then wiped with brine. The organic layer was dried over magnesium sulfate and concentrated. Purification by chromatography gave the target compound (44 mg, 53% yield). MS m / z: 419 [M + 1].

실시예 7. (E)-4Example 7. (E) -4 ^1One H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜 (화합물번호 7)H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazole-1 (1,4) -benzene Cycloundecafen (Compound No. 7)

[화학식 8][Formula 8]

단계 1: tert-뷰틸 (3-(4-((7-(4-(2-브로모에톡시)페닐)사이아노[3,2-d]피리미딘-2-일)아미노)-1H-피라졸-1-일)프로폭시)카바메이트Step 1: tert-butyl (3- (4-((7- (4- (2-bromoethoxy) phenyl) cyano [3,2-d] pyrimidin-2-yl) amino) -1H-pyra Zol-1-yl) propoxy) carbamate

실험 방법은 실시예 1의 단계 5와 동일하다. MS m/z : 573 [M+1].The experimental method is the same as in Step 5 of Example 1. MS m / z: 573 [M + l].

단계 2: N-(1-(3-아미노프로필)-1H-피라졸-4-일)-7-(4-(2-브로모에톡시)페닐)사이아노[3,2-d]피리미딘-2-아민Step 2: N- (1- (3-aminopropyl) -1H-pyrazol-4-yl) -7- (4- (2-bromoethoxy) phenyl) cyano [3,2-d] pyrimidine -2-amine

실험 방법은 실시예 1의 단계 7과 동일하다. The experimental method is the same as in Step 7 of Example 1.

단계 3: (E)-4¹H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜Step 3: (E) -4 ¹ H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazole -1 (1,4) -benzenecycloundecafen

실험 방법은 실시예 6의 단계 4와 동일하다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.65 (s, 1H), 9.11 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.71 (m, 2H), 7.26 (m, 3H), 4.34(m, 2H), 4.10 (m, 2H), 2.69 (m, 2H), 2.62 (m, 2H), 1.69 (m, 2H). MS m/z : 393 [M+1].The experimental method is the same as Step 4 in Example 6. ¹ H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 9.65 (s, 1H), 9.11 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.71 (m, 2H), 7.26 ( m, 3H), 4.34 (m, 2H), 4.10 (m, 2H), 2.69 (m, 2H), 2.62 (m, 2H), 1.69 (m, 2H). MS m / z: 393 [M + 1].

실시예 8. (E)-8-메틸-4Example 8. (E) -8-methyl-4 ^1One H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜 (화합물번호 8)H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazolo-1 (1,4) -benzene Cycloundecafen (Compound No. 8)

[화학식 9][Formula 9]

(E)-4¹H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜 (0.1 g, 0.26 mmol)을 다이클로로메세인 (2.6 mL)에 녹인 후 아세트산 (1 방울)과 포름알데하이드드 (0.03 mL, 0.78 mmol)를 첨가하였다. 30분 간 교반한 후에 NaBH(OAc)₃ (29 mg, 0.14 mmol)을 천천히 첨가한 후 하루 교반하였다. 반응액을 다이클로로메세인으로 묽힌 후 소금물로 닦아 주었다. 유기층을 황산마그네슘으로 건조하여 농축하였다. 크로마토그래피방법으로 정제하여 목표화합물 (76 mg, 72% 수율)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.65 (s, 1H), 9.12 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.78 (m, 2H), 7.26 (m, 1H), 7.20 (m, 2H), 4.40(m, 2H), 4.10 (m, 2H), 2.42 (m, 2H), 2.21 (s, 3H), 1.73 (m, 2H). MS m/z : 406 [M+1].(E) -4 ¹ H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazole-1 ( After dissolving 1,4) -benzenecycloundecafen (0.1 g, 0.26 mmol) in dichloromethane (2.6 mL), acetic acid (1 drop) and formaldehyde (0.03 mL, 0.78 mmol) were added. After stirring for 30 minutes, NaBH (OAc) ₃ (29 mg, 0.14 mmol) was added slowly, followed by stirring for a day. The reaction solution was diluted with dichloromethane and then wiped with brine. The organic layer was dried over magnesium sulfate and concentrated. Purification by chromatography gave the target compound (76 mg, 72% yield). ¹ H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 9.65 (s, 1H), 9.12 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.78 (m, 2H), 7.26 ( m, 1H), 7.20 (m, 2H), 4.40 (m, 2H), 4.10 (m, 2H), 2.42 (m, 2H), 2.21 (s, 3H), 1.73 (m, 2H). MS m / z: 406 [M + 1].

실시예 9. (E)-8-에틸-4Example 9. (E) -8-ethyl-4 ^1One H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜 (화합물번호 9)H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazolo-1 (1,4) -benzene Cycloundecafen (Compound No. 9)

[화학식 10][Formula 10]

실험 방법은 실시예 8과 동일하다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.64 (s, 1H), 9.11 (s, 1H), 8.31 (m, 2H), 7.80 (m, 2H), 7.25 (s, 1H), 7.18 (m, 2H), 4.39 (m, 2H), 4.09 (m, 2H), 1.74 (m, 2H), 0.98 (m, 3H). MS m/z : 421 [M+1].The experimental method is the same as in Example 8. ¹ H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 9.64 (s, 1H), 9.11 (s, 1H), 8.31 (m, 2H), 7.80 (m, 2H), 7.25 (s, 1H), 7.18 ( m, 2H), 4.39 (m, 2H), 4.09 (m, 2H), 1.74 (m, 2H), 0.98 (m, 3H). MS m / z: 421 [M + 1].

실시예 10. (E)-8-프로필-4Example 10. (E) -8-propyl-4 ^1One H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜 (화합물번호 10)H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazolo-1 (1,4) -benzene Cycloundecafen (Compound No. 10)

[화학식 11][Formula 11]

실험 방법은 실시예 8과 동일하다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.89 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.81 (m, 2H), 7.30 (s, 1H), 7.15 (m, 2H), 7.01 (s, 1H), 4.42 (s, 2H), 4.18 (m, 2H), 2.69 (m, 2H), 2.53 (m, 2H), 2.35 (m, 2H), 1.93 (m, 2H), 0.94 (m, 3H). MS m/z : 434 [M+1].The experimental method is the same as in Example 8. ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 8.89 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.81 (m, 2H), 7.30 (s, 1H), 7.15 (m, 2H), 7.01 (s, 1H), 4.42 (s, 2H), 4.18 (m, 2H), 2.69 (m, 2H), 2.53 (m, 2H), 2.35 (m, 2H), 1.93 (m, 2H) ), 0.94 (m, 3H). MS m / z: 434 [M + 1].

실시예 11. (E)-1-(4Example 11. (E) -1- (4 ^1One H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로디카펜-8-yl)에텐-1-온 (화합물번호 11)H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazolo-1 (1,4) -benzene Cyclodicapen-8-yl) ethen-1-one (Compound No. 11)

[화학식 12][Formula 12]

(E)-4¹H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜 (0.1 g, 0.26 mmol)을 다이클로로메세인 (2.6 mL)에 녹인 후 아세틱언하이드라이드 (0.04 mL, 0.39 mmol)을 첨가하였다. 0 ℃에서 트라이에틸아민 (0.2 mL, 0.52 mmol)을 첨가한 후 상온에서 20 분 교반하였다. 반응액을 다이클로로메세인으로 묽힌 후 소금물로 닦아 주었다. 유기층을 황산마그네슘으로 건조하여 농축하였다. 크로마토그래피방법으로 정제하여 목표화합물 (85 mg, 76% 수율)을 얻었다. MS m/z : 435 [M+1].(E) -4 ¹ H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazole-1 ( After dissolving 1,4) -benzenecycloundecafen (0.1 g, 0.26 mmol) in dichloromethane (2.6 mL), acetic anhydride (0.04 mL, 0.39 mmol) was added. Triethylamine (0.2 mL, 0.52 mmol) was added at 0 ° C., followed by stirring at room temperature for 20 minutes. The reaction solution was diluted with dichloromethane and then wiped with brine. The organic layer was dried over magnesium sulfate and concentrated. Purification by chromatography gave the target compound (85 mg, 76% yield). MS m / z: 435 [M + 1].

실시예 12. (E)-8-(메틸설포닐)-4Example 12. (E) -8- (methylsulfonyl) -4 ^1One H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜 (화합물번호 12)H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazolo-1 (1,4) -benzene Cycloindicafen (Compound No. 12)

[화학식 13][Formula 13]

(E)-4¹H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜 (0.1 g, 0.26 mmol)을 다이클로로메세인 (2.6 mL)에 녹인 후 메탄설포닐클로라이드 (0.03 mL, 0.39 mmol)을 첨가하였다. 0 ℃에서 트라이에틸아민 (0.2 mL, 0.52 mmol)을 첨가한 후 상온에서 5 분 교반하였다. 반응액을 다이클로로메세인으로 묽힌 후 소금물로 닦아 주었다. 유기층을 황산마그네슘으로 건조하여 농축하였다. 크로마토그래피방법으로 정제하여 목표화합물 (68 mg, 56% 수율)을 얻었다. MS m/z : 471 [M+1].(E) -4 ¹ H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazole-1 ( Methanesulfonylchloride (0.03 mL, 0.39 mmol) was added after dissolving 1,4) -benzenecycloundecafen (0.1 g, 0.26 mmol) in dichloromethane (2.6 mL). Triethylamine (0.2 mL, 0.52 mmol) was added at 0 ° C., followed by stirring at room temperature for 5 minutes. The reaction solution was diluted with dichloromethane and then wiped with brine. The organic layer was dried over magnesium sulfate and concentrated. Purification by chromatography gave the target compound (68 mg, 56% yield). MS m / z: 471 [M + 1].

실시예 13. (E)-N-메틸-4Example 13. (E) -N-methyl-4 ^1One H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸라-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜-8-카복사마이드 (화합물번호 13)H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazola-1 (1,4) -benzene Cycloundecafen-8-carboxamide (Compound No. 13)

[화학식 14][Formula 14]

(E)-4¹H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜 (0.1 g, 0.26 mmol)을 테트로하이드로퓨란 (2.6 mL)에 녹인 후 메틸 아이소사이아네이트 (0.03 ml, 0.52 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 30 분 교반하였다. 반응액을 에틸아세테이트로 묽힌 후 소금물로 닦아 주었다. 유기층을 황산마그네슘으로 건조하여 농축하였다. 크로마토그래피방법으로 정제하여 목표화합물 (59 mg, 51% 수율)을 얻었다. MS m/z : 450 [M+1].(E) -4 ¹ H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazole-1 ( After dissolving 1,4) -benzenecycloundecafen (0.1 g, 0.26 mmol) in tetrohydrofuran (2.6 mL), methyl isocyanate (0.03 ml, 0.52 mmol) was added. Stir at room temperature for 30 minutes. The reaction solution was diluted with ethyl acetate and then wiped with brine. The organic layer was dried over magnesium sulfate and concentrated. Purification by chromatography gave the target compound (59 mg, 51% yield). MS m / z: 450 [M + 1].

실시예 14. (E)-N-(4-클로로페닐)-4Example 14. (E) -N- (4-chlorophenyl) -4 ^1One H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜-8-카보사이오아마이드 (화합물번호 14)H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazolo-1 (1,4) -benzene Cyclodicapen-8-carbosioamide (Compound No. 14)

[화학식 15][Formula 15]

실험방법은 실시예 13와 동일하다. MS m/z : 562 [M+1].The experimental method is the same as in Example 13. MS m / z: 562 [M + 1].

실시예 15. (E)-N-(3-아세틸페닐)-4Example 15. (E) -N- (3-acetylphenyl) -4 ^1One H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜-8-카복사아마이드 (화합물번호 15)H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazolo-1 (1,4) -benzene Cycloundecafen-8-carboxamide (Compound No. 15)

[화학식 16][Formula 16]

실험방법은 실시예 13와 동일하다. MS m/z : 554 [M+1].The experimental method is the same as in Example 13. MS m / z: 554 [M + 1].

실시예 16. (E)-(4Example 16. (E)-(4 ^1One H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로디카펜-8-yl)(페닐)메텐온 (화합물번호 16)H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazolo-1 (1,4) -benzene Cyclodicapen-8-yl) (phenyl) methenone (Compound No. 16)

[화학식 17][Formula 17]

실험방법은 실시예 12와 동일하다. MS m/z : 497 [M+1].The experimental method is the same as in Example 12. MS m / z: 497 [M + 1].

실시예 17. (E)-4Example 17. (E) -4 ^1One H-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜 (화합물번호 17)H-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazolo-1 (1,4) -benzenecycloundecafen (Compound No. 17)

[화학식 18][Formula 18]

MS m/z : 391 [M+1].MS m / z: 391 [M + 1].

단계 1: 3-(4-(2-크롤로사이아노[3,2-d]피리미딘-7-일)페닐)프로판-1-올Step 1: 3- (4- (2-Crolocyano [3,2-d] pyrimidin-7-yl) phenyl) propan-1-ol

4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보레-2-닐)페놀 대신 3-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보렌-2-일)페닐)프로판-1-올을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1의 단계1과 실험 방법은 동일하다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 9.00 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.71 (m, 2H), 7.18 (m, 2H), 3.65(m, 2H), 2.67 (m, 2H), 1.86 (m, 2H). MS m/z : 305 [M+1].3- (4- (4,4,5,5-tetramethyl-1,3) instead of 4- (4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxabor-2-yl) phenol The experiment method is the same as in Step 1 of Example 1, except that, 2-dioxaboren-2-yl) phenyl) propan-1-ol is used. ¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 9.00 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.71 (m, 2H), 7.18 (m, 2H), 3.65 (m, 2H), 2.67 (m, 2H), 1.86 (m, 2H). MS m / z: 305 [M + 1].

단계 2: 7-(4-(3-브로모프로필)페닐)-2-클로로사이아노[3,2-d]피리미딘Step 2: 7- (4- (3-bromopropyl) phenyl) -2-chlorocyano [3,2-d] pyrimidine

3-(4-(2-크롤로사이아노[3,2-d]피리미딘-7-일)페닐)프로판-1-올 (1 g, 3.28 mmol)을 다이클로로메세인 (22 mL)에 녹인 후 0 ℃에서 PBr₃ (0.62 mL, 6.56 mmol)을 천천히 첨가하였다. 1 시간 교반하였다. 반응액을 에틸아세테이트로 묽힌 후 소듐바이카보네이트 포화수용핵으로 씻어주고, 그 후소금물로 닦아 주었다. 유기층을 황산마그네슘으로 건조하여 정지없이 목표화합물 (1.09 g, 91% 수율)을 얻었다. MS m/z : 366 [M+1].3- (4- (2-Crolocyano [3,2-d] pyrimidin-7-yl) phenyl) propan-1-ol (1 g, 3.28 mmol) was added to dichloromethane (22 mL). After melting, PBr ₃ (0.62 mL, 6.56 mmol) was slowly added at 0 ° C. Stir for 1 hour. The reaction solution was diluted with ethyl acetate, washed with saturated aqueous solution of sodium bicarbonate, and then wiped with salt water. The organic layer was dried over magnesium sulfate to give the target compound (1.09 g, 91% yield) without stopping. MS m / z: 366 [M + 1].

이후의 실험 방법은 실시예 7의 단계 1 - 3 과 동일하다. The subsequent experimental method is the same as steps 1-3 of Example 7.

실시예 18. (E)-1Example 18. (E) -1 ³³ -플루오르-4-Fluor-4 ^1One H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜 (화합물번호 18)H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazolo-1 (1,4) -benzene Cycloundecafen (Compound No. 18)

[화학식 19][Formula 19]

MS m/z : 411 [M+1].MS m / z: 411 [M + 1].

단계 1: 4-(2-클로로사이아노[3,2-d]피리미딘-7-일)-2-플루오르페놀Step 1: 4- (2-Chlorocyano [3,2-d] pyrimidin-7-yl) -2-fluorophenol

4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보레-2-닐)페놀 대신 2-플루오르-4-(4,4,5,5-테르라메틸-1,3,2-다이옥사보렌-2-일)페놀을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1의 단계 1과 실험 방법이 동일하다. ¹H NMR (400 MHz, Acetone) δ 9.42 (m, 1H), 8.61(m, 1H), 7.92 (m, 1H), 7.74 (m, 1H), 7.12 (m, 1H), 5.60 (m, 1H). MS m/z : 280 [M+1].2-Fluoro-4- (4,4,5,5-terramethyl-1 instead of 4- (4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxabor-2-yl) phenol The experiment method is the same as in Step 1 of Example 1, except that 3,2-dioxaboren-2-yl) phenol is used. ¹ H NMR (400 MHz, Acetone) δ 9.42 (m, 1H), 8.61 (m, 1H), 7.92 (m, 1H), 7.74 (m, 1H), 7.12 (m, 1H), 5.60 (m, 1H ) . MS m / z: 280 [M + 1].

이후의 실험 방법은 실시예 7의 실험 방법과 동일하다.The subsequent experimental method is the same as the experimental method of Example 7.

실시예 19. (4Example 19. (4 ⁴⁴ E,8E)-4E, 8E) -4 ^1One H-11-옥사-3-아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜-8-엔 (화합물번호 19)H-11-oxa-3-aza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazole-1 (1,4) -benzenecycloundeca Pen-8-ene (Compound No. 19)

[화학식 20][Formula 20]

단계 1: 4-나이트로-1-페텐-4-엔-1-일)-1H-피라졸Step 1: 4-Nitro-1-feten-4-en-1-yl) -1H-pyrazole

tert-뷰틸 (3-브로모프로필)카바메이트 대신 5-브로모펜텐-1-엔을 사용한 것 외에는 실시예 1의 단계 3과 실험 방법이 동일하다. MS m/z : 182 [M+1].The experiment method was the same as Step 3 in Example 1 except that 5-bromopentene-1-ene was used instead of tert-butyl (3-bromopropyl) carbamate. MS m / z: 182 [M + 1].

단계 2: 1-(펜-4-텐-1-일)-1H-피라졸-4-아민Step 2: 1- (Pen-4-ten-1-yl) -1H-pyrazol-4-amine

실험 방법은 실시예 1의 단계 4와 동일하다. MS m/z : 152 [M+1].The experimental method is the same as in Step 4 of Example 1. MS m / z: 152 [M + 1].

단계 3: 4-(2-((1-(펜-4-텐-1-일)-1H-피라졸-4-일)아미노)사이아노[3,2-d]피리미딘-7-일)페놀Step 3: 4- (2-((1- (Pen-4-ten-1-yl) -1H-pyrazol-4-yl) amino) cyano [3,2-d] pyrimidin-7-yl )phenol

tert-뷰틸 (3-(4-나이트로-1H-피라조-1-일)프로필)카바메이트 대시 1-(펜-4-텐-1-일)-1H-피라졸-4-아민을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1의 단계 5와 실험 방법이 동일하다. MS m/z : 378 [M+1].tert-butyl (3- (4-nitro-1H-pyrazol-1-yl) propyl) carbamate dash 1- (phen-4-ten-1-yl) -1H-pyrazol-4-amine Experimental method is the same as Step 5 of Example 1, except that. MS m / z: 378 [M + 1].

단계 4: 7-(4-(알리록시)페닐)-N-(1-(펜-4-텐-1-일)-1H-피라졸-4-일)사이아노[3,2-d]피리미딘-2-아민Step 4: 7- (4- (alioxy) phenyl) -N- (1- (phen-4-ten-1-yl) -1H-pyrazol-4-yl) cyano [3,2-d] Pyrimidin-2-amine

4-(2-((1-(펜-4-텐-1-일)-1H-피라졸-4-일)아미노)사이아노[3,2-d]피리미딘-7-일)페놀 (0.5 g, 1.33 mmol)을 다이메틸포름아마이드 (13 mL)에 녹인 후, 탄산칼슘 (367 mg, 2.66 mmol)과 알릴브로마이드 (0.17 mL, 2.00 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 3 시간 교반하였다. 반응액을 에틸아세테이트로 묽힌 뒤 소금물로 닦아 주었다. 유기층을 황산마그네슘으로 건조하여 농축하였다. 크로마토그래피방법으로 정제하여 목표화합물 (0.4 g, 72% 수율)을 얻었다. MS m/z : 418 [M+1].4- (2-((1- (Pen-4-ten-1-yl) -1H-pyrazol-4-yl) amino) cyano [3,2-d] pyrimidin-7-yl) phenol ( 0.5 g, 1.33 mmol) was dissolved in dimethylformamide (13 mL), and calcium carbonate (367 mg, 2.66 mmol) and allylbromide (0.17 mL, 2.00 mmol) were added. It was stirred at room temperature for 3 hours. The reaction solution was diluted with ethyl acetate and then wiped with brine. The organic layer was dried over magnesium sulfate and concentrated. Purification by chromatography gave the target compound (0.4 g, 72% yield). MS m / z: 418 [M + 1].

단계 5: (4⁴E,8E)-4¹H-11-옥사-3-아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜-8-엔Step 5: (4 ⁴ E, 8E) -4 ¹ H-11-oxa-3-aza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyra Sol-1 (1,4) -benzenecycloundecafen-8-ene

7-(4-(알리록시)페닐)-N-(1-(펜-4-텐-1-일)-1H-피라졸-4-일)사이아노[3,2-d]피리미딘-2-아민 (0.3 g, 0.72 mmol)을 다이클로로에세인에 녹인 후 Grubbs 2세대 촉매 (61 mg, 0.07 mmol)를 첨가하였다. 100 ℃에서 하루 교반하였다. 반응액을 에틸아세테이트로 묽힌 뒤 소금물로 닦아 주었다. 유기층을 황산마그네슘으로 건조하여 농축하였다. 크로마토그래피방법으로 정제하여 목표화합물 (143 mg, 51% 수율)을 얻었다. MS m/z : 390 [M+1].7- (4- (allyoxy) phenyl) -N- (1- (phen-4-ten-1-yl) -1H-pyrazol-4-yl) cyano [3,2-d] pyrimidine- After dissolving 2-amine (0.3 g, 0.72 mmol) in dichloroethane, Grubbs second generation catalyst (61 mg, 0.07 mmol) was added. Stirred at 100 ° C per day. The reaction solution was diluted with ethyl acetate and then wiped with brine. The organic layer was dried over magnesium sulfate and concentrated. Purification by chromatography gave the target compound (143 mg, 51% yield). MS m / z: 390 [M + 1].

실시예 20. (E)-4Example 20. (E) -4 ^1One H-10-옥사-3-아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸-8(2,3)-옥시라나-1(1,4)-벤젠사이클로디카펜 (화합물번호 20)H-10-oxa-3-aza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazole-8 (2,3) -oxirana-1 (1,4) -benzenecyclodicapene (Compound No. 20)

[화학식 21][Formula 21]

(4⁴E,8E)-4¹H-11-옥사-3-아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜-8-엔 (0.1 g, 0.26 mmol)을 다이클로로메세인 (2.6 mL)에 녹인 후 3-클로로퍼벤조익 에시드 (122 mg, 0.26 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 1 시간 교반하였다. 반응액을 에틸아세테이트로 묽힌 뒤 소듐바이카보네이트 포화수용액으로 씻어주고, 소금물로 닦아 주었다. 유기층을 황산마그네슘으로 건조하여 농축하였다. 크로마토그래피방법으로 정제하여 목표화합물 (44 mg, 42% 수율)을 얻었다. MS m/z : 406 [M+1].(4 ⁴ E, 8E) -4 ¹ H-11-oxa-3-aza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazole-1 (1,4) -benzenecycloundecafen-8-ene (0.1 g, 0.26 mmol) was dissolved in dichloromethane (2.6 mL) and 3-chloroperbenzoic acid (122 mg, 0.26 mmol) was added. Did. Stir at room temperature for 1 hour. The reaction solution was diluted with ethyl acetate, washed with a saturated aqueous solution of sodium bicarbonate, and wiped with brine. The organic layer was dried over magnesium sulfate and concentrated. Purification by chromatography gave the target compound (44 mg, 42% yield). MS m / z: 406 [M + 1].

실시예 21. (E)-4Example 21. (E) -4 ^1One H-11-옥사-3-아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜-8,9-다이올 (화합물번호 21)H-11-oxa-3-aza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazole-1 (1,4) -benzenecycloundeca Pen-8,9-diol (Compound No. 21)

[화학식 22][Formula 22]

(4⁴E,8E)-4¹H-11-옥사-3-아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜-8-엔 (0.1 g, 0.26 mmol)을 테트로하이드로퓨란 (2.6 mL)에 녹인 후 N-메틸몰폴린 N-옥사이드 50% 수용액 (0.24 ml, 1.04 mmol)과 OsO₄ 4% 수용액 (0.1 mL) 을 첨가하였다. 실온에서 하루 교반하였다. 반응액을 에틸아세테이트로 묽힌 뒤 소금물로 닦아 주었다. 유기층을 황산마그네슘으로 건조하여 농축하였다. 크로마토그래피방법으로 정제하여 목표화합물 (55 mg, 49% 수율)을 얻었다. MS m/z : 424 [M+1].(4 ⁴ E, 8E) -4 ¹ H-11-oxa-3-aza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazole-1 Dissolve (1,4) -benzenecycloundecafen-8-ene (0.1 g, 0.26 mmol) in tetrohydrofuran (2.6 mL) and then add 50% aqueous solution of N-methylmorpholine N-oxide (0.24 ml, 1.04) mmol) and OsO ₄ 4% aqueous solution (0.1 mL). Stirred at room temperature for a day. The reaction solution was diluted with ethyl acetate and then wiped with brine. The organic layer was dried over magnesium sulfate and concentrated. Purification by chromatography gave the target compound (55 mg, 49% yield). MS m / z: 424 [M + 1].

하기 실시예는 본 발명의 제조방법에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 제조방법에 대한 일례이다. 그러나, 본 발명이 하기의 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.The following example is an example of a method for preparing a compound represented by Formula 1 or a pharmaceutically acceptable salt thereof according to the production method of the present invention. However, the present invention is not limited by the following examples.

실시예 22 : (E)-4Example 22: (E) -4 ^1One H-14-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로테트라다카펜-9-온 염화수소염 (화합물번호 22)H-14-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazolo-1 (1,4) -benzene Cyclotetradacapen-9-one hydrogen chloride salt (Compound No. 22)

(E)-41H-14-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로테트라다카펜-9-온 (300 mg, 0.589 mmol)를 테트라하이드로퓨란 (5 mL)에 녹인 후 다이옥세인에 용해되어 있는 4 M 염화수소 (147 μL)를 실온에서 첨가하였다. 30분 후 발생한 침전물을 여과하고 실온에서 건조하여 목적화합물인 (E)-41H-14-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로테트라다카펜-9-온 염화수소염(305 mg)을 얻었다. (E) -41H-14-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazolo-1 (1, 4) -benzenecyclotetradacapen-9-one (300 mg, 0.589 mmol) was dissolved in tetrahydrofuran (5 mL) and 4 M hydrogen chloride (147 μL) dissolved in dioxane was added at room temperature. The precipitate generated after 30 minutes was filtered and dried at room temperature to obtain the target compound (E) -41H-14-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine -4 (4,1) -pyrazolo-1 (1,4) -benzenecyclotetradacapen-9-one hydrogen chloride salt (305 mg) was obtained.

한편, 본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 신규 화합물은 목적에 따라 여러 형태로 제제화가 가능하다. 다음은 본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 화합물을 활성성분으로 함유시킨 몇몇 제제화 방법을 예시한 것으로 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.Meanwhile, the novel compound represented by Chemical Formula 1 according to the present invention can be formulated in various forms according to the purpose. The following are examples of some formulation methods in which the compound represented by Formula 1 according to the present invention is contained as an active ingredient, and the present invention is not limited thereto.

[제제예][Preparation example]

제제예 1 : 정제(직접 가압)Formulation Example 1: Tablet (direct pressure)

활성성분 5.0 ㎎을 체로 친 후, 락토스 14.1 ㎎, 크로스포비돈 USNF 0.8 ㎎ 및 마그네슘 스테아레이트 0.1 ㎎을 혼합하고 가압하여 정제로 만들었다.After sifting 5.0 mg of the active ingredient, 14.1 mg of lactose, 0.8 mg of crospovidone USNF and 0.1 mg of magnesium stearate were mixed and pressurized to form a tablet.

제제예 2 : 정제(습식 조립)Formulation Example 2: Tablet (wet granulation)

활성성분 5.0 ㎎을 체로 친 후, 락토스 16.0 ㎎과 녹말 4.0 ㎎을 섞었다. 폴리솔베이트 80 0.3 ㎎을 순수한 물에 녹인 후 이 용액의 적당량을 첨가한 다음, 미립화하였다. 건조 후에 미립을 체질한 후 콜로이달 실리콘 다이옥사이드 2.7 ㎎ 및 마그네슘 스테아레이트 2.0 ㎎과 섞었다. 미립을 가압하여 정제로 만들었다.After sifting 5.0 mg of the active ingredient, 16.0 mg of lactose and 4.0 mg of starch were mixed. After dissolving 0.3 mg of polysorbate 80 in pure water, an appropriate amount of this solution was added, followed by atomization. After drying, the fine particles were sieved and then mixed with 2.7 mg of colloidal silicon dioxide and 2.0 mg of magnesium stearate. The granules were compressed into tablets.

제제예 3 : 분말과 캡슐제Formulation Example 3: Powder and Capsule

활성성분 5.0 ㎎을 체로 친 후에, 락토스 14.8 ㎎, 폴리비닐 피롤리돈 10.0 ㎎, 마그네슘 스테아레이트 0.2 ㎎와 함께 섞었다. 혼합물을 적당한 장치를 사용하여 단단한 No. 5 젤라틴 캡슐에 채웠다. After sifting 5.0 mg of the active ingredient, it was mixed with 14.8 mg of lactose, 10.0 mg of polyvinyl pyrrolidone, and 0.2 mg of magnesium stearate. The mixture was prepared using a suitable device. Filled in 5 gelatin capsules.

제제예 4 : 주사제Formulation Example 4: Injection

12HO 26 mg 및 증류수 2974 mg를 함유시켜 주사제를 제조하였다.Injections were prepared containing 26 mg of 12HO and 2974 mg of distilled water.

[실험예][Experimental Example]

실험예 1. 실시예 7 및 실시예 1의 효소 활성 측정 Experimental Example 1. Measurement of enzyme activity of Example 7 and Example 1

갓 준비한 베이스 반응 완충액 (20 mM의 HEPES (PH 7.5), 10 mM의 MgCl2를, 1mM의 EGTA, 0.02 % Brij35, 0.02 ㎎ / ㎖ BSA, 0.1 mM의 Na3VO4 2 mM의 DTT, 1 % DMSO )에 기질 용액과 필수 보조 인자를 추가한다. 기질 용액에 키나아제와 화합물을 첨가하여 천천히 섞어주고 실온에서 20 분간 배양한다. 반응을 개시하기 위해 반응 혼합물에 33P-ATP 를 첨가하고, 실온에서 2 시간 동안 인큐베이션 하여 반응한다. 반응이 끝나면, 방사선 표지된 33P-ATP를 가지는 기질의 양을 측정하여, 키나아제의 활성을 평가하고, 그 값을 바탕으로 IC50값을 계산하였다.Substrate in freshly prepared base reaction buffer (20 mM HEPES (PH 7.5), 10 mM MgCl2, 1 mM EGTA, 0.02% Brij35, 0.02 mg / mL BSA, 0.1 mM Na3VO4 2 mM DTT, 1% DMSO) Add the solution and essential cofactors. Kinase and the compound are added to the substrate solution, mixed slowly, and incubated at room temperature for 20 minutes. To initiate the reaction, 33P-ATP was added to the reaction mixture, and the reaction was incubated at room temperature for 2 hours. At the end of the reaction, the amount of the substrate having the radiolabeled 33P-ATP was measured to evaluate the activity of the kinase, and the IC50 value was calculated based on the value.

실험결과는 하기와 같았다. 실시예 7은 표 1과 같았고, 실시예 1은 표 2와 같았다. 활성값은 3 단계로 표시하였다. The experimental results were as follows. Example 7 was as in Table 1, and Example 1 was as in Table 2. Activity values were expressed in three steps.

A: IC₅₀< 100 nM, A: IC ₅₀ <100 nM,

B: 100 nM < IC₅₀ < 1 μM, B: 100 nM <IC ₅₀ <1 μM,

C: IC₅₀ > 1 μMC: IC ₅₀ > 1 μM

Enzyme ICEnzyme IC _{50 50} (μM)(μM) FLT3FLT3 AA FLT3 (ITD)FLT3 (ITD) AA FLT3 (D835Y)FLT3 (D835Y) AA FLT4FLT4 AA TBK1TBK1 BB c-Kitc-Kit BB BLKBLK AA MEK1MEK1 CC ULK1ULK1 AA

Enzyme ICEnzyme IC _{50 50} (μM)(μM) FLT4 FLT4 AA GCN2 GCN2 BB

실험예 2. 실시예 1 및 비교예 1의 효소활성 측정 비교Experimental Example 2. Comparison of enzyme activity measurement of Example 1 and Comparative Example 1

96well 플레이트 각각의 well 당 10000개의 세포를 분주한다. 세포 안정화 후 1/3 연속 희석한 화합물을 0.5% DMSO가 되게 처리하고 72시간 배양 한다. Cell titer glo를 처리하면 ATP가 있는 경우에만 루시퍼레이즈가 루시페린을 분해하여 루미네센스가 나온다. 루미네센스 값을 Envision (perkinelmer 사)을 이용하여 측정 하였다. 측정한 루미네센스 값을 바탕으로 세포가 죽는 화합물 농도를 계산하여 GI50값을 구하였다.Dispense 10000 cells per well of each 96-well plate. After the cell stabilization, the compound diluted one-third continuously was treated with 0.5% DMSO and incubated for 72 hours. When treated with cell titer glo, luciferase breaks down luciferin only in the presence of ATP, resulting in luminescence. Luminescence values were measured using Envision (perkinelmer). Based on the measured luminescence value, the concentration of the compound in which cells die is calculated to obtain a GI50 value.

비교예 1로 하기 화합물을 사용하였다. (WO2014-180524). 하기 화학식 23의 화합물은 국제공개공보 WO2014-180524에 공개된 화합물인 A26이다.The following compound was used as Comparative Example 1. (WO2014-180524). The compound of Formula 23 below is A26, which is a compound disclosed in WO2014-180524.

[화학식 23][Formula 23]

상기 비교예 1과 실시예 1의 효소 및 세포 활성을 비교하였다.The enzyme and cell activity of Comparative Example 1 and Example 1 were compared.

실험결과는 하기 표 3과 같았다.The experimental results are shown in Table 3 below.

활성값은 3 단계로 표시하였다. Activity values were expressed in three steps.

A: IC₅₀< 100 nM, A: IC ₅₀ <100 nM,

B: 100 nM < IC₅₀ < 1 μM, B: 100 nM <IC ₅₀ <1 μM,

C: IC₅₀ > 1 μMC: IC ₅₀ > 1 μM

비교예 1Comparative Example 1 실시예 1Example 1 구조rescue

FLT3 (ITD)FLT3 (ITD) CC AA BaF3 (FLT3-ITD)BaF3 (FLT3-ITD) BB AA

실시예 1번 화합물이 유사한 구조의 비교예 1화합물(WO2014-180524에 공개된 화합물인 A26)보다 FLT3에서의 우수한 활성을 확인할 수 있다.It can be confirmed that the compound of Example 1 has superior activity in FLT3 than the compound of Comparative Example 1 having a similar structure (A26, which is a compound disclosed in WO2014-180524).

실험예 3. 세포에서의 효소 활성 측정Experimental Example 3. Measurement of enzyme activity in cells

실험결과는 하기 표 4와 같았다.The experimental results are shown in Table 4 below.

A: IC₅₀< 100 nM, A: IC ₅₀ <100 nM,

B: 100 nM < IC₅₀ < 1 μM, B: 100 nM <IC ₅₀ <1 μM,

C: IC₅₀ > 1 μMC: IC ₅₀ > 1 μM

BaF3 CellBaF3 Cell CellCell ParentalParental FLT (TEL)FLT (TEL) FLT3 (ITD)FLT3 (ITD) FLT3 (D835Y)FLT3 (D835Y) FLT3
(ITD-D835Y)FLT3
(ITD-D835Y) FLT3 (ITD-F691L)FLT3 (ITD-F691L) FLT3 (ITD-D835Y-F691L)FLT3 (ITD-D835Y-F691L) U2OSU2OS A375A375 실시예 7Example 7 CC AA AA AA AA AA AA BB BB 실시예 1Example 1 BB BB AA -- -- -- -- CC CC 실시예 2Example 2 -- -- BB -- -- -- -- CC CC 실시예
3Example
3 -- -- CC -- -- -- -- CC CC 실시예5Example 5 -- -- BB -- -- -- -- CC CC 실시예 4Example 4 -- -- BB -- -- -- -- CC CC 실시예
8Example
8 -- -- -- -- -- -- BB BB BB 실시예 9Example 9 -- -- -- -- -- -- BB BB BB 실시예 10Example 10 -- -- -- -- -- -- AA CC BB 실시예 11Example 11 -- -- -- -- -- -- BB CC CC 실시예 12Example 12 -- -- -- -- -- -- BB CC CC 실시예 13Example 13 -- -- -- -- -- -- BB CC CC

실험예 4. 비교예 2-3 및 실시예 7의 효소활성 측정 비교Experimental Example 4. Comparison of enzyme activity measurement of Comparative Example 2-3 and Example 7

시판되고 있는 2가지 약물인 Crizotinib (비교예 2)과 Alectinib (비교예 3)을 비교예로 하고, 실시예 7과의 효소활성을 측정 비교하였다.Two commercially available drugs, Crizotinib (Comparative Example 2) and Alectinib (Comparative Example 3) were used as comparative examples, and the enzyme activity with Example 7 was measured and compared.

각각의 세포에 대해서 96well 플레이트 각각의 well 당 10000개의 세포를 분주한다. 세포 안정화 후 1/3 연속 희석한 화합물을 0.5% 다이메틸셀폭사이드가 되게 처리하고 72시간 배양 한다. Cell titer glo를 처리하면 ATP가 있는 경우에만 루시퍼레이즈가 루시페린을 분해하여 루미네센스가 나온다. 루미네센스 값을 Envision (perkinelmer 사)을 이용하여 측정 하였다. 측정한 루미네센스 값을 바탕으로 세포가 죽는 화합물 농도를 계산하여 GI₅₀값을 구하였다. For each cell, 10000 cells are dispensed per well of each 96-well plate. After the cell stabilization, the compound diluted one-third continuously is treated to 0.5% dimethylcelloxide and cultured for 72 hours. When treated with cell titer glo, luciferase breaks down luciferin only in the presence of ATP, resulting in luminescence. Luminescence values were measured using Envision (perkinelmer). Based on the measured luminescence value, the concentration of the compound that the cell dies was calculated to obtain a GI ₅₀ value.

실험결과는 하기 표 5와 같았다.The experimental results were as shown in Table 5 below.

A: IC₅₀< 100 nM, A: IC ₅₀ <100 nM,

B: 100 nM < IC₅₀ < 1 μM, B: 100 nM <IC ₅₀ <1 μM,

C: IC₅₀ > 1 μMC: IC ₅₀ > 1 μM

Cmpd codeCmpd code Cellular activity (uM)Cellular activity (uM) Ba/F3 cellsBa / F3 cells NSCLCNSCLC ParentalParental ALK (WT)ALK (WT) ALK (L1196M)ALK (L1196M) ALK (G1202R)ALK (G1202R) SNU2535
(G1269A)SNU2535
(G1269A) Crizotinib
(비교예 2)Crizotinib
(Comparative Example 2) CC BB BB BB CC Alectinib
(비교예 3)Alectinib
(Comparative Example 3) CC BB BB CC CC 실시예 7 Example 7 CC AA BB AA CC

상기 실험결과에서와 같이, 실시예 7 화합물이 시판되고 있는 2 가지 약물(비교예 2 및 비교예 3)에 비해 ALK (WT)에서 활성이 더 우수하며, ALK(L1196M)에서 비슷한 수준으로 활성이 있고, ALK(G1202R)에서는 더 우수한 활성이 가지고 있다.As in the above experimental results, the compound of Example 7 has better activity in ALK (WT) than the two drugs on the market (Comparative Example 2 and Comparative Example 3), and similar activity in ALK (L1196M). ALK (G1202R) has better activity.

실험예 5. 실시예 7의 다양한 단백질 키나아제에 대한 1 uM에서의 저해능력Experimental Example 5. Inhibition ability at 1 uM for various protein kinases of Example 7

실시예 7을 대상을 하기 표 6에 기재된 단백질 키나아제에 대한 1 uM 농도에서의 저해능력을 측정하였다. 실험결과는 표 6과 같았다.In Example 7, subjects were measured for the inhibitory ability at 1 uM concentration for the protein kinase described in Table 6. Table 6 shows the experimental results.

저해능은 3 단계로 표시하였다. The inhibitory capacity was expressed in 3 steps.

A: 70 이상 저해, A: 70 or more inhibition,

B: 30-70 % 저해B: 30-70% inhibition

C: 30 미만 저해C: less than 30 inhibition

ABLABL AA 　 FGRFGR AA 　 PBKPBK CC ARGARG AA 　 FLT1/VEGFR1FLT1 / VEGFR1 AA 　 PDGFRaPDGFRa AA ACKACK AA 　 FLT3FLT3 AA 　 PDGFRbPDGFRb AA AKT1AKT1 BB 　 FLT4FLT4 AA 　 PDK1PDK1 AA AKT2AKT2 BB 　 FMSFMS AA 　 SgK269SgK269 AA AKT3AKT3 AA 　 FRKFRK BB 　 PHKg1PHKg1 AA ALKALK AA 　 FYNFYN AA 　 PHKg2PHKg2 CC ALK1ALK1 CC 　 GCKGCK BB 　 PIM1PIM1 AA ARAFARAF BB 　 KHS2KHS2 AA 　 PIM2PIM2 BB NuaK1NuaK1 AA 　 RHOKRHOK BB 　 PIM3PIM3 AA AurAAurA AA 　 GPRK4GPRK4 CC 　 PKAPKA AA AurBAurB AA 　 GPRK5GPRK5 CC 　 PKACbPKACb AA AurCAurC AA 　 GPRK6GPRK6 CC 　 PKACgPKACg BB AXLAXL AA 　 GPRK7GPRK7 BB 　 PKCaPKCa AA BLKBLK AA 　 GSK3AGSK3A AA 　 PKCbPKCb AA BMPR2BMPR2 AA 　 GSK3BGSK3B AA 　 PKCbPKCb AA BMXBMX AA 　 HaspinHaspin BB 　 PKCdPKCd AA BRKBRK AA 　 HCKHCK AA 　 PKCePKCe AA BRSK1BRSK1 AA 　 ZC1/HGKZC1 / HGK BB 　 PKChPKCh AA BRSK2BRSK2 AA 　 HIPK1HIPK1 AA 　 PKCgPKCg AA BTKBTK AA 　 HIPK2HIPK2 AA 　 PKCiPKCi CC KITKIT AA 　 HIPK3HIPK3 AA 　 PKD1PKD1 AA MERMER AA 　 HIPK4HIPK4 AA 　 PKD3PKD3 AA METMET AA 　 HPK1HPK1 AA 　 PKCtPKCt AA SRCSRC AA 　 IGF1RIGF1R AA 　 PKCzPKCz CC CaMK1aCaMK1a BB 　 IKKaIKKa BB 　 PKD2PKD2 AA CaMK1dCaMK1d BB 　 IKKbIKKb AA 　 PKG1PKG1 BB CaMK1gCaMK1g BB 　 IKKeIKKe BB 　 PKG1PKG1 BB CaMK2aCaMK2a AA 　 INSRINSR AA 　 PKG2PKG2 BB CaMK2bCaMK2b BB 　 IRAK1IRAK1 AA 　 PKN1PKN1 AA CaMK2dCaMK2d BB 　 IRAK4IRAK4 AA 　 PKN2PKN2 BB CaMKK1CaMKK1 CC 　 IRRIRR AA 　 PKN3PKN3 BB CaMKK2CaMKK2 CC 　 ITKITK BB 　 PLK1PLK1 AA CDK1/cyclin ACDK1 / cyclin A AA 　 JAK1JAK1 AA 　 PLK2PLK2 BB CDK1/cyclin BCDK1 / cyclin B AA 　 JAK2JAK2 AA 　 PLK3PLK3 CC CDK1/cyclin ECDK1 / cyclin E AA 　 JAK3JAK3 AA 　 PLK4PLK4 BB CDK14/cyclin Y (PFTK1)CDK14 / cyclin Y (PFTK1) AA 　 JNK1JNK1 BB 　 PRKXPRKX AA CDK16/cyclin Y (PCTAIRE)CDK16 / cyclin Y (PCTAIRE) AA 　 JNK2JNK2 BB 　 PYK2PYK2 AA CDK17/cyclin Y (PCTK2)CDK17 / cyclin Y (PCTK2) AA 　 JNK3JNK3 CC 　 RETRET AA CDK18/cyclin Y (PCTK3)CDK18 / cyclin Y (PCTK3) AA 　 KDRKDR AA 　 RIPK2RIPK2 BB CDK11CDK11 AA 　 KHS1KHS1 BB 　 ANKRD3ANKRD3 BB CDK2CDK2 AA 　 LATS1LATS1 AA 　 ROCK1ROCK1 BB CDK2CDK2 AA 　 LATS2LATS2 AA 　 ROCK2ROCK2 AA CDK2CDK2 AA 　 LCKLCK AA 　 RONRON BB CDK2CDK2 AA 　 ICKICK BB 　 ROSROS AA CDK3CDK3 AA 　 LIMK1LIMK1 AA 　 RSK1RSK1 AA CDK4CDK4 AA 　 LIMK2LIMK2 BB 　 RSK2RSK2 AA CDK4CDK4 AA 　 LKB1LKB1 AA 　 RSK3RSK3 AA CDK5CDK5 AA 　 LOKLOK AA 　 RSK4RSK4 AA CDK5CDK5 AA 　 LRRK2LRRK2 AA 　 SBKSBK AA CDK6CDK6 AA 　 LYNLYN AA 　 SGKSGK AA CDK6CDK6 AA 　 LYNBLYNB AA 　 SGK2SGK2 AA CDK7CDK7 BB 　 MAKMAK AA 　 SGK3SGK3 CC CDK9CDK9 AA 　 MARK1MARK1 AA 　 SIK1SIK1 AA CDK9CDK9 AA 　 MARK2MARK2 AA 　 QIKQIK AA CDK9CDK9 AA 　 MARK3MARK3 AA 　 Q나Q BB CHK1CHK1 AA 　 MARK4MARK4 AA 　 SLKSLK AA CHK2CHK2 AA 　 MAP2K1MAP2K1 CC 　 Nuak2Nuak2 AA CK1dCK1d BB 　 MAP2K2MAP2K2 CC 　 MPSK1MPSK1 AA CK1eCK1e CC 　 MAP2K5MAP2K5 AA 　 CRIKCRIK CC CK1g1CK1g1 CC 　 MAP3K2MAP3K2 BB 　 TSSK1TSSK1 AA CK1g2CK1g2 BB 　 MAP3K3MAP3K3 AA 　 YSK1YSK1 BB CK1g3CK1g3 CC 　 MELKMELK AA 　 YANK2YANK2 BB CK2aCK2a BB 　 ZC3/MINKZC3 / MINK BB 　 STK33STK33 AA CK2a2CK2a2 AA 　 MAP2K6MAP2K6 CC 　 NDR1NDR1 AA CLK1CLK1 AA 　 smMLCKsmMLCK AA 　 NDR2NDR2 AA CLK2CLK2 AA 　 skMLCKskMLCK AA 　 STLK3STLK3 AA CLK3CLK3 BB 　 MLK1MLK1 AA 　 SYKSYK BB CLK4CLK4 AA 　 MLK2MLK2 AA 　 TAK1TAK1 BB CSKCSK BB 　 MLK3MLK3 AA 　 TAO1TAO1 AA DAPK1DAPK1 AA 　 MNK1MNK1 CC 　 TAO2TAO2 AA DAPK2DAPK2 BB 　 MNK2MNK2 BB 　 TAO3TAO3 AA DCAMKL1DCAMKL1 CC 　 MRCKaMRCKa CC 　 TBK1TBK1 AA DCAMKL2DCAMKL2 BB 　 MRCKbMRCKb CC 　 TECTEC AA DDR1DDR1 AA 　 MSK1MSK1 AA 　 TIE2TIE2 BB DDR2DDR2 AA 　 MSK2MSK2 CC 　 TLK1TLK1 CC DLKDLK CC 　 MST1MST1 AA 　 TLK2TLK2 AA DMPK2DMPK2 AA 　 MST2MST2 AA 　 ZC2/TNIKZC2 / TNIK AA DRAK1DRAK1 AA 　 MST3MST3 BB 　 TNK1TNK1 BB DYRK1ADYRK1A BB 　 MUSKMUSK BB 　 TRKATRKA AA DYRK1BDYRK1B AA 　 caMLCKcaMLCK CC 　 TRKBTRKB AA DYRK2DYRK2 AA 　 SgK085SgK085 AA 　 TRKCTRKC AA DYRK3DYRK3 AA 　 MYO3AMYO3A CC 　 TSSK2TSSK2 CC DYRK4DYRK4 CC 　 MYO3BMYO3B CC 　 TSSK3TSSK3 CC EGFREGFR BB 　 NEK1NEK1 AA 　 TTBK1TTBK1 CC EPHA1EPHA1 BB 　 NEK11NEK11 CC 　 TTBK2TTBK2 CC EPHA2EPHA2 AA 　 NEK2NEK2 BB 　 TXKTXK AA EPHA3EPHA3 CC 　 NEK3NEK3 BB 　 LTKLTK AA EPHA4EPHA4 AA 　 NEK4NEK4 AA 　 TYK2TYK2 AA EPHA5EPHA5 BB 　 NEK5NEK5 AA 　 TYRO3TYRO3 AA EphA6EphA6 AA 　 NEK6NEK6 CC 　 ULK1ULK1 AA EphA7EphA7 AA 　 NEK7NEK7 CC 　 ULK2ULK2 BB EPHA8EPHA8 CC 　 NEK8NEK8 CC 　 ULK3ULK3 AA EphB1EphB1 AA 　 NEK9NEK9 AA 　 VRK1VRK1 BB EphB2EphB2 BB 　 NIM1NIM1 BB 　 VRK2VRK2 CC EphB3EphB3 CC 　 NLKNLK BB 　 Wee1Wee1 BB EphB4EphB4 BB 　 OSR1OSR1 CC 　 Wnk1Wnk1 CC HER2/ErbB2HER2 / ErbB2 BB 　 p38ap38a CC 　 Wnk2Wnk2 CC HER4/ErbB4HER4 / ErbB4 BB 　 p38bp38b CC 　 Wnk3Wnk3 CC Erk5Erk5 CC 　 p38dp38d BB 　 YESYES AA Erk7Erk7 AA 　 p38gp38g CC 　 MAP3K8MAP3K8 BB IRE1IRE1 AA 　 P70s6kP70s6k AA 　 ZAKZAK CC IRE2IRE2 AA 　 p70S6Kbp70S6Kb BB 　 DAPK3DAPK3 AA FAKFAK AA 　 PAK1PAK1 AA 　　　 FERFER AA 　 PAK2PAK2 BB 　　　 FESFES AA 　 PAK3PAK3 AA 　　　 FGFR1FGFR1 AA 　 PAK4PAK4 BB 　　　 FGFR2FGFR2 AA 　 PAK5PAK5 BB 　　　 FGFR3FGFR3 AA 　 PAK6PAK6 BB 　　　 FGFR4FGFR4 BB 　 PASKPASK CC 　　　

실험예 6. 실시예 7의 동물효능 (급성골수성백혈병 치료 효능) 실험 결과Experimental Example 6. Animal efficacy of Example 7 (acute myeloid leukemia treatment efficacy) experimental results

동물실험은 동물보호법 및 실험동물에 관한 법률 등 모든 정부의 법규와 규정을 따르며, 한국과학기술연구원 실험동물실의 윤리규정에 따라 진행하였다. (한국과학기술연구원 동물실험승인번호 : 2017-007)Animal experiments were conducted in accordance with all government laws and regulations, such as the Animal Protection Act and the Experimental Animal Act, and were conducted in accordance with the ethical regulations of the Laboratory Animal Lab of the Korea Advanced Institute of Science and Technology. (Korea Institute of Science and Technology, Animal Experiment Approval Number: 2017-007)

OCI-AML3 mouse xenograft model 준비Preparation of OCI-AML3 mouse xenograft model

마우스는 Balb/c nude, 6-8주령, female을 사용하였으며, 실험동물실 내에 반입 후 일주일간 순화기간을 걸친 뒤 본 실험에 사용하였다. 동물질환모델을 만들기 위하여 OCI-AML3 세포주를 사용하였으며 세포주는 10% FBS, 1 x Penicillin/streptomycin이 포함된 RPMI1640를 이용하여 3일 간격으로 계대배양하였다. 마우스에 세포를 이식하기 전에 DPBS로 2회 세척하고, 5.0 x 10e6 cells/mouse의 세포수로 matrigel과 1:1로 섞어 최종 100ul volume이 되도록 준비한다. 마취제로 Avertin을 250 mpk 용량으로 복강투여하여 완전히 마취된 것을 확인한 뒤, 마우스 오른쪽 뒷다리 부위에 OCI-AML3를 이식하었다. 통계적 유의성을 위한 최소한의 개체(n=3)를 사용하여 실험을 진행하였으며 대조군은 vehicle과 GNF-7 8 mpk, 실험군은 시험화합물(실시예 7) 30 mpk 용량으로 진행하였다.The mouse was a Balb / c nude, 6-8 weeks old, female, and was used in this experiment after a period of purification for a week after being brought into the laboratory. The OCI-AML3 cell line was used to make the animal disease model, and the cell line was passaged at 3 day intervals using RPMI1640 containing 10% FBS, 1 x Penicillin / streptomycin. Before transplanting cells into mice, wash twice with DPBS and mix 1: 1 with matrigel with a cell count of 5.0 x 10e6 cells / mouse to prepare to a final 100ul volume. After confirming complete anesthesia by intraperitoneal administration of Avertin at a dose of 250 mpk as an anesthetic, OCI-AML3 was implanted in the right hind leg of the mouse. The experiment was conducted using a minimum number of individuals (n = 3) for statistical significance, the control group was vehicle and GNF-7 8 mpk, and the experimental group was tested at a test compound (Example 7) of 30 mpk.

화합물의 경구투여를 위해 화합물을 녹이기 위한 vehicle 조성은 다음과 같다.The vehicle composition for dissolving the compound for oral administration of the compound is as follows.

5% NMP / 15% solutol / 30% PEG400 / 50% 0.05M citric acid5% NMP / 15% solutol / 30% PEG400 / 50% 0.05M citric acid

화합물의 in vivo efficacy study를 위한 경구투여Oral administration for in vivo efficacy study of compounds

OCI-AML3를 이식한 뒤에 마우스의 종괴부피가 약 150~200mm³이 되었을 때 마우스당 200ul 부피로 3주간 1회/1일, 경구투여를 실시하였다. 마우스의 상태는 매일 경구투여 시 관찰하였고, 몸무게와 종괴부피는 3일 간격으로 3주간 측정하였다. After transplantation of OCI-AML3, when the mass volume of the mouse reached about 150 to 200 mm ³ , oral administration was performed once per day for 3 weeks at a volume of 200 ul per mouse. The condition of the mouse was observed during daily oral administration, and body weight and mass volume were measured for 3 weeks at 3 day intervals.

실험결과Experiment result

실험결과는 도 1과 같았다. 도 1에서 확인할 수 있는 바와 같이 시험화합물을 투여한 실험군의 경우 종괴부피의 감소가 확연히 감소함을 확인하였다.The experimental results were as shown in FIG. 1. As can be seen in Figure 1, in the case of the experimental group administered with the test compound, it was confirmed that the reduction in mass volume was significantly reduced.

Claims

하기 화학식 1로 표시되는 2,7-치환된 사이아노[3,2-d]피리미딘 고리화된 화합물, 이의 약학적으로 허용되는 염, 이의 수화물 또는 이의 용매화물:
[화학식 1]

상기 화학식 1에서,
Q₁ 및 Q₂는 각각 -(CH₂)_n-, -O(CH₂)_n-, -N(CH₂)_n- 및 -NH(CH₂)_n-중 어느 하나이며, n은 정수이고;
A 및 B는 각각 탄소수 3 내지 8개의 고리형 탄화수소, 탄소수 2 내지 7개의 헤테로 고리형 탄화수소, 탄소수 3 개 이상의 단일원소 방향족 화합물 및 탄소수 2개 이상의 이종원소 방향족 화합물 중 어느 하나이며,
M은 -CHCH-, -CH₂CH₂-, -NHCO-, -CONH-, -NMe-, -NAc-, -NMs-, -NHCONHR₁-, -NHCOR₁-, -NHSONR₁- 및 -O- 중 어느 하나이며, 이 때 R₁은 탄소수 2 이상의 치환 또는 비치환된 포화 탄화수소, 탄소수 2 이상의 치환 또는 비치환된 불포화 탄화수소, 탄소수 3 내지 8개의 고리형 탄화수소, 탄소수 2 내지 7개의 헤테로 고리형 탄화수소, 탄소수 3 개 이상의 단일원소 방향족 화합물 및 탄소수 2개 이상의 이종원소 방향족 화합물 중 어느 하나이다.
A 2,7-substituted cyano [3,2- d ] pyrimidine cyclized compound represented by Formula 1 below, a pharmaceutically acceptable salt, hydrate or solvate thereof:
[Formula 1]

In Chemical Formula 1,
Q ₁ and Q ₂ are each _{_{- (CH 2) n -,}} -O (CH 2) n -, -N (CH 2) n - and -NH (CH ₂₎ _n -, and any one, n is an integer and ;
A and B are any one of a cyclic hydrocarbon having 3 to 8 carbon atoms, a heterocyclic hydrocarbon having 2 to 7 carbon atoms, a single element aromatic compound having 3 or more carbon atoms, and a heterocyclic aromatic compound having 2 or more carbon atoms,
M is -CHCH-, -CH ₂ CH _2- , -NHCO-, -CONH-, -NMe-, -NAc-, -NMs-, -NHCONHR _1- , -NHCOR _1- , -NHSONR ₁ -and -O -Wherein R ₁ is a substituted or unsubstituted saturated hydrocarbon having 2 or more carbon atoms, a substituted or unsubstituted unsaturated hydrocarbon having 2 or more carbon atoms, cyclic hydrocarbon having 3 to 8 carbon atoms, heterocyclic having 2 to 7 carbon atoms Hydrocarbons, monocyclic aromatic compounds having 3 or more carbon atoms, and heteroaromatic compounds having 2 or more carbon atoms.

제 1항에 있어서,
상기 n은 0, 1, 2, 3 또는 4의 정수이며,
상기 A 및 B는 페닐, 피리딘, 치환된 페닐, 피라졸, 피페라진 및 시클로헥산 중 어느 하나 이상인, 화합물, 이의 약학적으로 허용되는 염, 이의 수화물 또는 이의 용매화물.
According to claim 1,
N is an integer of 0, 1, 2, 3 or 4,
The A and B are at least one of phenyl, pyridine, substituted phenyl, pyrazole, piperazine, and cyclohexane, a compound, a pharmaceutically acceptable salt thereof, a hydrate or solvate thereof.

제 1항에 있어서,
상기 화합물은
(E)-4¹H-14-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로테트라디카펜-9-온 (화합물번호 1);
(Z)-1¹H-5-옥사-3,9-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-1(4,1)-피라졸로-4(1,4)-벤젠사이클로테트라디카펜-10-온 (화합물번호 2);
5,15-다이옥사-3,9-다이아자-2(7,2)-사이나오[3,2-d]피리미딘-1(5,2)-피리딘-4(1,4)-벤젠사이클로펜타디카펜-10-온 (화합물번호 3);
(E)-4¹H-14-옥사-3,10-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸-1(1,4)-벤젠사이클로테트라디카펜-9-온 (화합물번호 4);
5,15-다이옥사-3,11-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-1,4(1,4)-다이벤젠사이클로벤타디카펜-10-온 (화합물번호 5);
(E)-4¹H-8-옥사-3-아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-5(4,1)-피페리딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로옥테펜 (화합물번호 6);
(E)-4¹H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜 (화합물번호 7);
(E)-8-메틸-4¹H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜 (화합물번호 8);
(E)-8-에틸-4¹H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜 (화합물번호 9);
(E)-8-프로필-4¹H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜 (화합물번호 10);
(E)-1-(4¹H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로디카펜-8-yl)에텐-1-온 (화합물번호 11);
(E)-8-(메틸설포닐)-4¹H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜 (화합물번호 12);
(E)-N-메틸-4¹H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸라-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜-8-카복사마이드 (화합물번호 13);
(E)-N-(4-클로로페닐)-4¹H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜-8-카보사이오아마이드 (화합물번호 14);
(E)-N-(3-아세틸페닐)-4¹H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜-8-카복사아마이드 (화합물번호 15);
(E)-(4¹H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로디카펜-8-yl)(페닐)메텐온 (화합물번호 16);
(E)-4¹H-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜 (화합물번호 17);
(E)-1³-플루오르-4¹H-11-옥사-3,8-다이아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸로-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜 (화합물번호 18);
(4⁴E,8E)-4¹H-11-옥사-3-아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜-8-엔 (화합물번호 19);
(E)-4¹H-10-옥사-3-아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸-8(2,3)-옥시라나-1(1,4)-벤젠사이클로디카펜 (화합물번호 20); 및
(E)-4¹H-11-옥사-3-아자-2(7,2)-사이아노[3,2-d]피리미딘-4(4,1)-피라졸-1(1,4)-벤젠사이클로언디카펜-8,9-다이올 (화합물번호 21);로 이루어진 군에서 선택된, 화합물, 이의 약학적으로 허용되는 염, 이의 수화물 또는 이의 용매화물.
According to claim 1,
The compound
(E) -4 ¹ H-14-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazolo-1 ( 1,4) -benzenecyclotetradicapen-9-one (Compound No. 1);
(Z) -1 ¹ H-5-oxa-3,9-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-1 (4,1) -pyrazolo-4 ( 1,4) -benzenecyclotetradicapen-10-one (Compound No. 2);
5,15-dioxa-3,9-diaza-2 (7,2) -sinao [3,2-d] pyrimidine-1 (5,2) -pyridine-4 (1,4) -benzene Cyclopentadicapen-10-one (Compound No. 3);
(E) -4 ¹ H-14-oxa-3,10-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazole-1 ( 1,4) -benzenecyclotetradicapen-9-one (Compound No. 4);
5,15-dioxa-3,11-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-1,4 (1,4) -dibenzenecyclobendadicapen-10 -One (Compound No. 5);
(E) -4 ¹ H-8-oxa-3-aza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-5 (4,1) -piperidine-4 (4, 1) -pyrazolo-1 (1,4) -benzenecyclooctefen (Compound No. 6);
(E) -4 ¹ H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazole-1 ( 1,4) -benzenecycloundecafen (Compound No. 7);
(E) -8-methyl-4 ¹ H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyra Zolo-1 (1,4) -benzenecycloundecafen (Compound No. 8);
(E) -8-ethyl-4 ¹ H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyra Zolo-1 (1,4) -benzenecycloundecafen (Compound No. 9);
(E) -8-propyl-4 ¹ H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyra Zolo-1 (1,4) -benzenecycloundecafen (Compound No. 10);
(E) -1- (4 ¹ H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazolo -1 (1,4) -benzenecyclodicapen-8-yl) ethen-1-one (Compound No. 11);
(E) -8- (methylsulfonyl) -4 ¹ H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4, 1) -pyrazolo-1 (1,4) -benzenecycloundecafen (Compound No. 12);
(E) -N-methyl-4 ¹ H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyra Zola-1 (1,4) -benzenecycloundecafen-8-carboxamide (Compound No. 13);
(E) -N- (4-chlorophenyl) -4 ¹ H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4 , 1) -Pyrazolo-1 (1,4) -benzenecycloundicapen-8-carbothioamide (Compound No. 14);
(E) -N- (3-acetylphenyl) -4 ¹ H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4 , 1) -pyrazolo-1 (1,4) -benzenecycloundicapen-8-carboxamide (Compound No. 15);
(E)-(4 ¹ H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazolo-1 (1,4) -benzenecyclodicapen-8-yl) (phenyl) methenone (Compound No. 16);
(E) -4 ¹ H-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazolo-1 (1,4) -Benzenecycloundecafen (Compound No. 17);
(E) -1 ³ -Fluoro-4 ¹ H-11-oxa-3,8-diaza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1)- Pyrazolo-1 (1,4) -benzenecycloundecafen (Compound No. 18);
(4 ⁴ E, 8E) -4 ¹ H-11-oxa-3-aza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazole-1 (1,4) -benzenecycloundecafen-8-ene (Compound No. 19);
(E) -4 ¹ H-10-oxa-3-aza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazole-8 (2,3 ) -Oxirana-1 (1,4) -benzenecyclodicapene (Compound No. 20); And
(E) -4 ¹ H-11-oxa-3-aza-2 (7,2) -cyano [3,2-d] pyrimidine-4 (4,1) -pyrazole-1 (1,4 ) -Benzenecycloundecafen-8,9-diol (Compound No. 21); selected from the group consisting of a compound, a pharmaceutically acceptable salt thereof, a hydrate or solvate thereof.

상기 청구항 1 내지 3항 중에서 선택된 어느 한 항의 화합물, 이의 약학적으로 허용되는 염, 이의 수화물 또는 이의 용매화물을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물.
A pharmaceutical composition comprising a compound of any one of claims 1 to 3, a pharmaceutically acceptable salt thereof, a hydrate or solvate thereof as an active ingredient.

제 4항에 있어서,
상기 조성물은 단백질 키나아제의 저해를 통해 비정상 세포 성장으로 유발되는 질환의 예방, 경감 또는 치료용 약학적 조성물.
The method of claim 4,
The composition is a pharmaceutical composition for preventing, reducing or treating diseases caused by abnormal cell growth through inhibition of protein kinase.

제 5항에 있어서,
상기 화합물은 단백질 키나아제에 대한 1 uM에서의 저해능이 90% 이상인, 약학적 조성물.
The method of claim 5,
The compound has a inhibitory ability at 1 uM to protein kinase of 90% or more, pharmaceutical composition.

제 5항에 있어서,
상기 단백질 키나아제는 ALK, ARK5, Aurora A, Aurora B, Aurora C, AXL, BLK, BMX, c-MET, c-src, CDK2, CK2a2, CLK1, CLK2, CLK4, DAPK1, DDR1, DDR2, DYRK2, DYRK3, ERk7, FER, FES, FGFR1, FGFR2, FGFR3, FGR, FLT3, FLT4, DMS, FYN, HCK, HIPK1, HIPK2, HIPK4, HPK, IGF1R, IR, IRR, JAK1, JAK2, JAAK3, KDR, LCK, LOK, LRRK2, MARk4, MELK, MLK3, MYLK4, NEK1, NEK5, NEK9, p70S6K, PDGFRa, PDGFRb, PDK1, PEAK1, PIM1, PKCd, PKCeplsilon, PKCg, PKCmu, PKCnu, PKD2, RET, ROS, RSK1, RSK2, RSK3, RSK4, SIK1, SIK2, SNARK, STK16, STK38, STK38L, TRKA, TRKB, TRKC, TXK, TYK2, TYRO3, ULK1, YES 및 ZIPK 중 어느 하나 이상인, 약학적 조성물.
The method of claim 5,
The protein kinase is ALK, ARK5, Aurora A, Aurora B, Aurora C, AXL, BLK, BMX, c-MET, c-src, CDK2, CK2a2, CLK1, CLK2, CLK4, DAPK1, DDR1, DDR2, DYRK2, DYRK3 , ERk7, FER, FES, FGFR1, FGFR2, FGFR3, FGR, FLT3, FLT4, DMS, FYN, HCK, HIPK1, HIPK2, HIPK4, HPK, IGF1R, IR, IRR, JAK1, JAK2, JAAK3, KDR, LCK, LOK , LRRK2, MARk4, MELK, MLK3, MYLK4, NEK1, NEK5, NEK9, p70S6K, PDGFRa, PDGFRb, PDK1, PEAK1, PIM1, PKCd, PKCeplsilon, PKCg, PKCmu, PKCnu, PKD2, RSK, RSK , RSK4, SIK1, SIK2, SNARK, STK16, STK38, STK38L, TRKA, TRKB, TRKC, TXK, TYK2, TYRO3, ULK1, YES and ZIPK or more, pharmaceutical composition.

제 5항에 있어서,
상기 비정상 세포 성장으로 유발되는 질환은 종양 질환인, 약학적 조성물.
The method of claim 5,
The disease caused by the abnormal cell growth is a tumor disease, pharmaceutical composition.

제 8항에 있어서,
상기 종양 질환은 위암, 폐암, 간암, 대장암, 소장암, 췌장암, 뇌암, 뼈암, 흑색종, 유방암, 경화성선종, 자궁암, 자궁경부암, 두경부암, 식도암, 갑상선암, 부갑상선암, 신장암, 육종, 전립선암, 요도암, 방광암, 백혈병, 다발성골수종, 골수이형성증후군과 같은 혈액암, 호치킨병과 비호치킨림프종과 같은 림프종, 및 섬유선종로 이루어진 군으로부터 선택되는 종양 질환인, 약학적 조성물.
The method of claim 8,
The tumor diseases include gastric cancer, lung cancer, liver cancer, colon cancer, small intestine cancer, pancreatic cancer, brain cancer, bone cancer, melanoma, breast cancer, sclerosing adenoma, uterine cancer, cervical cancer, head and neck cancer, esophageal cancer, thyroid cancer, parathyroid cancer, kidney cancer, sarcoma, A pharmaceutical composition, which is a tumor disease selected from the group consisting of prostate cancer, urethral cancer, bladder cancer, leukemia, multiple myeloma, blood cancer such as myelodysplastic syndrome, lymphoma such as Hodgkin's disease and non-Hodgkin's lymphoma, and fibroadenoma.

제 1항 내지 제 3항 중 어느 한 항의 화합물, 이의 약학적으로 허용되는 염, 이의 수화물 또는 이의 용매화물의 제조방법에 있어서,
7-(4-(2-브로모에톡시)페닐)-N-(1-(피페니딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)사이아노[3,2-d]피리미딘-2-아민;
N-(1-(3-아미노프로필)-1H-피라졸-4-일)-7-(4-(2-브로모에톡시)페닐)사이아노[3,2-d]피리미딘-2-아민;
5-(4-(2-((1-(3-아미노프로필)-1H-피라졸-4-일)아미노)사이아노[3,2-d]피리미딘-7-일)페녹시)펜텐노익 에시드;
5-(4-((7-(4-(3-아미노에톡시)페닐)사이아노[3,2-d]피리미딘-2-일)아미노)-1H-피라졸-1-일)펜텐노익 에시드;
5-((5-(2-((4-(3-아미노프로폭시)페닐)아미노)사이아노[3,2-d]피리미딘-7-일)피리미딘-2-일)옥시)펜타노익 에시드;
5-(4-((7-(4-(3-아미노프로폭시)페닐)사이아노[3,2-d]피리미딘-2-일)아미노)페녹시)펜타녹시 에시드; 및
5-(4-(2-((4-(3-아미노프로폭시)페닐)아미노)사이아노[3,2-d]피리미딘-7-일)-1H-피라졸-1-일)펜타노익 에시드; 중에서 선택된 어느 하나의 2,7 치환된 사이아노[3,2-d]피리미딘 고리화 된 화합물의 중간체 화합물을 반응시키는 단계를 포함하는, 화합물, 이의 약학적으로 허용되는 염, 이의 수화물 또는 이의 용매화물의 제조방법.A method for producing a compound according to any one of claims 1 to 3, a pharmaceutically acceptable salt thereof, a hydrate or a solvate thereof,
7- (4- (2-bromoethoxy) phenyl) -N- (1- (pipenidin-4-yl) -1H-pyrazol-4-yl) cyano [3,2-d] pyrimidine -2-amine;
N- (1- (3-aminopropyl) -1H-pyrazol-4-yl) -7- (4- (2-bromoethoxy) phenyl) cyano [3,2-d] pyrimidine-2- Amine;
5- (4- (2-((1- (3-aminopropyl) -1H-pyrazol-4-yl) amino) cyano [3,2-d] pyrimidin-7-yl) phenoxy) pentene Noic acid;
5- (4-((7- (4- (3-aminoethoxy) phenyl) cyano [3,2-d] pyrimidin-2-yl) amino) -1H-pyrazol-1-yl) pentene Noic acid;
5-((5- (2-((4- (3-aminopropoxy) phenyl) amino) cyano [3,2-d] pyrimidin-7-yl) pyrimidin-2-yl) oxy) penta Noic acid;
5- (4-((7- (4- (3-aminopropoxy) phenyl) cyano [3,2-d] pyrimidin-2-yl) amino) phenoxy) pentaoxy acid; And
5- (4- (2-((4- (3-aminopropoxy) phenyl) amino) cyano [3,2-d] pyrimidin-7-yl) -1H-pyrazol-1-yl) penta Noic acid; Reacting the intermediate compound of any one of 2,7 substituted cyano [3,2-d] pyrimidine cyclized compound, a compound, a pharmaceutically acceptable salt thereof, a hydrate or Method for producing solvate.