KR20200012363A - 어수리 지하부 및 사상자 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 - Google Patents
어수리 지하부 및 사상자 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 어수리 지하부 및 사상자 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 어수리 지하부 및 사상자 혼합 추출물이 단독의 어수리 지하부 추출물 또는 사상자 추출물에 비해 지방세포 분화 억제 효과가 우수하며, 중성지방의 함량이 단독 추출물의 처리에 비해 현저하게 감소하는 효과가 있으므로, 이를 비만의 예방 및 개선을 위한 건강기능성식품 및 치료용 의약품으로 유용하게 사용할 수 있다.
Description
본 발명은 어수리 지하부 및 사상자 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
비만은 체내에 지방이 필요 이상으로 과도하게 쌓인 경우를 말하며, 국민건강 통계에 따르면 비만의 유병률은 1998년 26.0%에서 2011년 31.4%로, 증가 추이를 보이며, 다양한 성인병의 합병증과 관련이 있는 것으로 밝혀지고 있다.
또한, 비만환자는 정상 체중인 사람에 비하여 간경변증 질환의 경우 2배, 뇌혈관질환의 경우 1.6배 및 관상동맥질환의 경우 1.8배 정도 사망률이 높은 것으로 보고되어 있다. 현재, 비만에 대한 치료방법으로 식이요법, 운동요법 및 약물요법 등이 시도되고 있으며, 이 중 약물요법으로 사용되는 비만치료제는 식욕의 조절, 지방의 소화·흡수 방해, 에너지 소비의 증가 또는 지질대사의 조절 등을 타겟으로 개발되었으나, 다양한 부작용이 존재한다. 일례로, 로슈에서 제조하는 제니칼(Xenical)은 췌장 및 소화계에서 분리되는 리파아제 억제를 유도하여 지방흡수를 억제하지만, 겨우 2~3%의 낮은 체중감량 효과를 보이며, 잦은 설사, 지방변 등의 부작용을 동반한다.
또한, 애보트 비만치료제 리덕틸(Reductil)은 세로토닌과 노르아드레날린의 재흡수 억제를 통해 식욕을 억제시킴으로써, 5~10%의 체중감량효과가 있으나, 뇌졸증과 심근경색 등 심혈관계 질환의 부작용이 있어, 2010년 유럽 의약품 안전청(EMA)과 미국 식품의약품안전청(FDA)이 처방과 사용중지 및 자발적 회수 권고조치를 내려 시장에서 퇴출되었으며, 국내에서는 2010년 10월경 식품의약품안전청에 의해 판매가 중단되었다.
이외에도 항비만 약제로 개발된 제품 중에서 심각한 부작용으로 인해 판매가 금지된 것들이 상당수에 이른다. 예로 아미노필린은 탁월한 체지방 분해효과에도 불구하고 정신신경계, 순환기계, 소화기계에 걸쳐 폭넓은 부작용이 보고된 바 있고, 펜프루라민, 덱스펜플루라민, 토피라메이 또는 에피드린 등도 비만치료에 부적합한 약물로 판정되어 판매가 금지되었다. 이와 같이 합성의약품의 부작용과 만성질환의 극복에 서양의학이 한계를 보임에 따라 항비만 효과를 가진 천연물 식·의약품에 대한 가치가 새롭게 부각되고 있다.
한편, 어수리는 산과 들에서 자란다. 줄기는 곧게 서고 높이가 70∼150cm이며 속이 빈 원기둥 모양이고 세로로 줄이 있으며 거친 털이 있고 굵은 가지가 갈라진다. 잎은 어긋나고 3∼5개의 작은잎으로 구성된 깃꼴겹잎이며 털이 있고 줄기 위로 올라갈수록 잎자루가 짧아지며 밑 부분이 넓어 줄기를 감싼다. 끝에 달린 작은잎은 심장 모양이고 3개로 갈라지며, 옆에 달린 작은잎은 넓은 달걀 모양 또는 삼각형이고 길이가 7∼20cm이며 2∼3개로 갈라지고 가장자리에 깊이 패어 들어간 톱니가 있다. 꽃은 7∼8월에 흰색으로 피고 가지와 줄기 끝에 복산형 꽃차례를 이루며 달린다. 꽃차례는 20∼30개의 꽃자루가 다시 작은 꽃자루로 갈라져서 각각 25∼30개의 꽃이 달린 모양이고, 가장자리에 달린 꽃이 가운데에 달린 꽃보다 크다. 꽃잎은 6개이고 크기가 서로 다른데, 바깥쪽의 꽃잎이 안쪽 꽃잎보다 크다.
사상자(Torilidis Fructus)는 미나리과(Umbelliferae)의 두해살이풀인 사상자(Torilis japonica (Houtt.) DC.)의 열매로, 맵고 쓰며 따뜻한 성질이 있고 독이 없다고 알려져 있다. 한방에서는 열매를 말려 만든 생약을 사상자라 부르며, 한국, 일본, 중국, 대만, 인도, 미얀마 등지에서 분포한다. 약리효과로 항원충작용, 성호르몬 유사작용과 항알레르기 작용 등이 있고, 수렴성 소염약으로 가려움증 등에 효과가 있으며, 사상자의 주요성분은 토릴린(torilin), 토릴로론(torilolone) 등의 세스퀴테르펜(sesquiterpene)계 화합물이 함유되어 있는 것으로 보고되어 있다.
비만 관련 선행기술로서 한국등록특허 제1134251호는 사상자 추출물을 유효성분으로 하는 비만개선용 식품조성물을 개시하고 있으며, 한국등록특허 제1069418호는 글리세롤 아실트랜스퍼라제 저해활성을 갖는 사상자 추출물, 이의 용매 분획물 또는 이로부터 분리된 화합물을 포함하는 조성물을 개시하고 있고, 중국공개특허 제104857107호에 다이어트 조성물 제조방법 및 다이어트제를 개시하고 있으나, 본 발명의 어수리 지하부 및 사상자 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 대하여 개시된 바 없다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명은 어수리 지하부 및 사상자 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방, 개선 또는 치료용 조성물을 제공하고, 상기 어수리 지하부 및 사상자 혼합 추출물이 어수리 지하부 추출물 또는 사상자 추출물 단독에 비해 지방세포 분화 억제 효과가 현저하며, 중성지방의 함량을 현저하게 낮춘다는 것을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 어수리 지하부 및 사상자 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 또는 개선용 건강기능성식품 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 어수리 지하부 및 사상자 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명은 어수리 지하부 및 사상자 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 어수리 지하부 및 사상자 혼합 추출물이 단독의 어수리 지하부 추출물 또는 사상자 추출물에 비해 지방세포 분화 억제 효과가 우수하며, 중성지방의 함량이 단독 추출물의 처리에 비해 현저하게 감소하는 효과가 있으므로, 이를 비만의 예방 및 개선을 위한 건강기능성식품 및 치료용 의약품으로 유용하게 사용할 수 있다.
도 1은 25, 50, 75㎍/㎖의 어수리 지하부 추출물, 사상자 추출물 및 어수리 지하부+사상자 혼합 추출물의 처리에 따른 세포 생존률을 확인한 결과이다.
도 2는 50㎍/㎖ 또는 75㎍/㎖의 어수리 지하부 추출물, 사상자 추출물 및 어수리 지하부+사상자 혼합 추출물의 처리에 따른 지방 세포의 오일 레드 O 염색 결과 사진이다.
도 3은 25, 50, 75㎍/㎖의 어수리 지하부 추출물, 사상자 추출물 및 어수리 지하부+사상자 혼합 추출물의 처리에 따른 지방 세포 분화 억제 정도를 오일 레드 O 염색법으로 확인한 결과이다. *, **, ***는 50 또는 75㎍/㎖의 어수리 지하부 추출물 또는 사상자 추출물을 처리한 것에 비해 50 또는 75㎍/㎖의 어수리 지하부+사상자 혼합 추출물을 처리한 것이 통계적으로 유의하게 지방세포분화가 억제되었다는 것으로, *는 p<0.05이고, **는 p<0.01이며, ***은 p<0.001이다.
도 4는 75㎍/㎖의 어수리 지하부 추출물, 사상자 추출물 및 어수리 지하부+사상자 혼합 추출물이 지방 세포 내 중성 지방의 축적에 미치는 영향을 확인한 결과이다. **는 어수리 지하부 추출물에 비해 본 발명의 유효성분인 어수리 지하부+사상자 혼합 추출물의 세포 내 중성지방의 함량이 통계적으로 유의미하게 낮다는 것으로, p<0.01이고, ***는 사상자 추출물에 비해 본 발명의 유효성분인 어수리 지하부+사상자 혼합 추출물의 세포 내 중성지방의 함량이 통계적으로 유의미하게 낮다는 것으로, p<0.001이다.
도 2는 50㎍/㎖ 또는 75㎍/㎖의 어수리 지하부 추출물, 사상자 추출물 및 어수리 지하부+사상자 혼합 추출물의 처리에 따른 지방 세포의 오일 레드 O 염색 결과 사진이다.
도 3은 25, 50, 75㎍/㎖의 어수리 지하부 추출물, 사상자 추출물 및 어수리 지하부+사상자 혼합 추출물의 처리에 따른 지방 세포 분화 억제 정도를 오일 레드 O 염색법으로 확인한 결과이다. *, **, ***는 50 또는 75㎍/㎖의 어수리 지하부 추출물 또는 사상자 추출물을 처리한 것에 비해 50 또는 75㎍/㎖의 어수리 지하부+사상자 혼합 추출물을 처리한 것이 통계적으로 유의하게 지방세포분화가 억제되었다는 것으로, *는 p<0.05이고, **는 p<0.01이며, ***은 p<0.001이다.
도 4는 75㎍/㎖의 어수리 지하부 추출물, 사상자 추출물 및 어수리 지하부+사상자 혼합 추출물이 지방 세포 내 중성 지방의 축적에 미치는 영향을 확인한 결과이다. **는 어수리 지하부 추출물에 비해 본 발명의 유효성분인 어수리 지하부+사상자 혼합 추출물의 세포 내 중성지방의 함량이 통계적으로 유의미하게 낮다는 것으로, p<0.01이고, ***는 사상자 추출물에 비해 본 발명의 유효성분인 어수리 지하부+사상자 혼합 추출물의 세포 내 중성지방의 함량이 통계적으로 유의미하게 낮다는 것으로, p<0.001이다.
본 발명은 어수리 지하부 및 사상자 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 또는 개선용 건강기능성식품 조성물에 관한 것이다.
상기 어수리 지하부 및 사상자 혼합 추출물은 어수리 지하부 추출물 및 사상자 추출물을 1:0.1~10 중량비로 혼합한 혼합물인 것이 바람직하며, 더 바람직하게는 어수리 지하부 추출물 및 사상자 추출물을 1:0.3~5의 중량비로 혼합하는 것이며, 더욱더 바람직하게는 1:0.5~3의 중량비로 혼합하는 것이고, 가장 바람직하게는 1:1의 중량비로 혼합하는 것이지만 이에 한정하는 것은 아니다.
상기 어수리 지하부 추출물 또는 사상자 추출물은 하기의 단계를 포함하는 방법에 의해 제조할 수 있으나, 이에 한정하지 않는다:
(1) 어수리 지하부 또는 사상자에 추출용매를 가하여 추출하는 단계;
(2) 단계 (1)의 추출물을 여과하는 단계; 및
(3) 단계 (2)의 여과한 추출물을 농축하고 건조하여 추출물을 제조하는 단계.
상기 단계 (1)에서 추출용매는 물, C1~C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합물 중에서 선택하는 것이 바람직하며, 더 바람직하게는 에탄올 또는 메탄올이지만 이에 한정하지 않는다.
상기 제조방법에 있어서, 추출방법은 여과법, 열수 추출, 침지 추출, 환류 냉각 추출 및 초음파 추출 등의 당 업계에 공지된 모든 통상적인 방법을 이용할 수 있다. 상기 추출용매는 건조된 어수리 지하부 또는 사상자 중량의 1~20배 첨가하여 추출하는 것이 바람직하며, 더 바람직하게는 5~15배 첨가하는 것이고, 더욱더 바람직하게는 10배 첨가하는 것이다. 추출온도는 20~100℃인 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 또한, 추출시간은 1~60시간인 것이 바람직하며, 1~48시간이 더욱 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 상기 방법에 있어서, 단계 (3)의 농축은 진공 회전 농축기 또는 진공회전증발기를 이용하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 또한, 건조는 감압건조, 진공건조, 비등건조, 분무 건조 또는 동결건조하는 것이 바람직하며, 더 바람직하게는 동결건조이지만 이에 한정하지 않는다.
상기 어수리 지하부 및 사상자 혼합 추출물을 유효성분으로 하는 건강기능성식품 조성물은 음료, 환, 정제(tablet), 캡슐제(capsule) 및 산제 중에서 선택된 어느 하나로 제조하거나, 다른 식품 또는 식품의 성분에 첨가하여 제조될 수 있으며, 통상적인 방법에 따라 적절하게 제조될 수 있다.
본 발명의 어수리 지하부 및 사상자 혼합 추출물을 유효성분으로 하는 건강기능성식품 조성물을 첨가할 수 있는 식품의 일례로는 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 중에서 선택된 어느 하나의 형태일 수 있으며, 통상적인 의미에서의 건강기능성식품을 모두 포함한다.
상기 건강기능성식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 및 천연 풍미제, 착색제 및 증진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알킨산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 천연 과일 주스 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다.
본 발명의 건강기능성식품 조성물은 여러가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다.
또한, 본 발명은 어수리 지하부 및 사상자 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 또는 치료용 약학 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 약학 조성물은 어수리 지하부 및 사상자 혼합 추출물 외에 추가로 담체, 부형제 또는 희석제를 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 약학 조성물은 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 하나 이상의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한, 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용된다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성 용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성 용제 및 현탁 용제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로 젤라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 조성물은 경구 또는 비경구로 투여될 수 있으며, 비경구 투여 시 피부 외용 또는 복강 내, 직장, 정맥, 근육, 피하, 자궁 내 경막 또는 뇌혈관 내 주사 방식을 선택하는 것이 바람직하지만, 이에 한정하는 것은 아니다.
본 발명에 따른 조성물은 약제학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에 있어서, "약제학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효용량 수준은 환자의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여 부작용없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명의 조성물의 투여량은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설률 및 질환의 중증도에 따라 그 범위가 다양하게 사용할 수 있다.
이하, 실시예를 이용하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들에 의해 제한되지 않는다는 것은 당해 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어 자명한 것이다.
1.
어수리
지하부 추출물의 제조
산형과(Umbelliferae)에 속하는 어수리 지하부(Heracleum moellendorffii Hance, 분양번호: 005-066)은 식물 추출물 은행, 한국생명공학연구원(KRIBB, Daejeon, Korea)으로부터 분양받아 사용하였다. 건조 및 파쇄한 어수리 지하부를 99.9% 메탄올로 48시간 동안 실온에서 추출하였다. 어수리 지하부 추출물을 여과하였으며 감압 하에서 감압 농축기로 농축하였다. 이후, 100mg/㎖의 농도가 되도록 어수리 지하부 추출물을 DMSO에 녹여 -20℃에서 보관하였다.
2. 사상자(
Torilis
japonica
) 추출물의 제조
사상자는 경상북도 영천시 소재의 농장(생산자:우동진)에서 재배되어 8~9월에 채취된 사상자를 약초 판매원인 조은약초(Goodherb)에서 구입하였다. 사상자를 시료 분쇄기를 이용하여 분쇄한 후, 분말 g당 8배 용량의 70%(v/v) 에탄올을 첨가하여 완전히 침지한 후, 상온에서 72시간 동안 추출하였다. 사상자 추출물을 여과한 후 감압농축기(EYELA N-1200A, SB1200, A-1000S, CCA1111)를 이용하여 heating bath 40℃ 조건에서 감압농축하였다. 100mg/㎖의 농도가 되도록 사상자 추출물을 DMSO에 녹여 -20℃에서 보관하였다.
3. 세포 배양
3T3-L1 지방 전구 세포를 10% 송아지 혈청(calf serum)이 함유된 DMEM(Dulbeco's Modified Eagle's Medium) 배지를 사용하여 37℃, 5% CO₂ 조건에서 배양하였다. 이때 세포 밀도가 70%가 넘지 않도록 주기적으로 계대 배양하였다.
4.
MTT
어세이를
통한 세포독성 분석
항비만 활성 분석 수행 전 시료가 세포생존율에 미치는 영향을 확인함과 동시에 세포독성을 유발하지 않는 시료의 처리 농도를 결정하기 위해 MTT 어세이를 실시하였다.
24웰 배양 플레이트에 1×105 개의 3T3-L1 세포를 분주하여 24시간 동안 부착시킨 후 어수리 지하부 추출물 및 사상자 추출물을 각각 농도별(25, 50, 75㎍/㎖)로 처리하여 48시간 동안 배양하였다. 상기 어수리 지하부 추출물 및 사상자 추출물을 처리한 후 MTT 용액(5 mg/㎖)을 20㎕씩 넣어 세 시간 동안 반응시킨 후 플레이트에 있는 모든 배양액을 버리고 난 뒤, 150㎕의 DMSO를 웰에 첨가하였다.
이후, 플레이트를 쉐이킹하면서 5분 동안 실온에 놓아 두어 포르마잔(formazan)이 완전히 분해되도록 하였고 595nm에서 흡광도를 측정하였다.
5. 세포 분화
3T3-L1 세포를 1×105개가 되도록 24웰 배양 플레이트에 분주하여 3일 동안 배양 후 MDI 배지로 분화시켰다. MDI 배지는 10% FBS/DMEM에 0.5mM IBMX, 1μM 덱사메타손, 1㎍/㎖ 인슐린을 처리하였다. 이 시점을 분화 0일로 하여 분화 2일 후에는 1㎍/㎖의 인슐린 배지로 교체하며 2일 배양 후에는 10% FBS 배지로 8일까지 유지하였다. 어수리 지하부 추출물 및 사상자 추출물은 분화 0일과 분화 2일에 첨가하여 4일 동안 처리하였다. 이 후 4일 동안 10% FBS 배지로 배양하였다.
6. 오일
레드
O(Oil-Red-O) 염색
분화 8일 경과 후 지방 세포 분화 정도 및 추출물에 의한 분화 억제 정도를 오일 레드 O 염색을 통해 분석하였다. 지방 세포 분화 및 물질 처리(각각 25, 50, 75㎍/㎖)가 완료된 세포를 1× phosphate buffered saline(PBS)로 씻어준 다음 10% 포르말린을 넣고 1시간 동안 상온에서 고정하였다. 포르말린을 제거하고 60% 이소프로판올로 웰을 씻어낸 후 후드에서 이소프로판올을 완전히 날려주었다. 건조된 웰에 필터링한 오일 레드 O 용액을 넣고 10분 동안 방치 후 증류수로 씻어내어 현미경 촬영으로 지방 세포 분화를 확인하였다. 염색된 웰은 100% 이소프로판올을 넣고 녹여내어 500nm에서 흡광도를 측정하였다.
7. TG(
Triglyceride
)
어세이
지방 세포 내의 TG 양은 상업적으로 판매하는 TG 어세이 키트를 사용해서 측정하였다(Triglyceride Assay Kit-Quantification, ab65336). 분화 8일 째에 3T3-L1 세포는 cold PBS(phosphate-buffered saline)로 씻어준 다음 5% NP-40 용액으로 파쇄하고 파쇄된 용액 안에 있는 전체 TG 양은 키트에 동봉된 protocol에 따라 효소법으로 측정되었다.
실시예
1. 어수리 지하부 및 사상자 추출물이 3
T3
-
L1
지방 전구세포의 세포 생존율에 미치는 영향
어수리 지하부 및 사상자 추출물이 3T3-L1 지방 전구세포의 세포 생존율에 미치는 영향을 MTT 어세이를 이용하여 분석하였다.
그 결과, 도 1에 개시한 바와 같이 어수리 지하부 추출물, 사상자 추출물 및 어수리 지하부+사상자 혼합 추출물 모두 25~75㎍/㎖의 농도로 처리해도 세포 독성이 유발되지 않았다.
실시예
2. 어수리 지하부 추출물, 사상자 추출물 및 어수리 지하부+사상자 혼합 추출물이 MDI로 유도한 3
T3
-
L1
지방 전구세포의 지방 생성에 미치는 영향
어수리 지하부 추출물, 사상자 추출물 및 어수리 지하부+사상자 혼합 추출물의 항비만 활성을 확인하기 위하여, MDI로 분화를 유도한 3T3-L1 지방 전구세포의 지방 생성에 미치는 영향을 확인하였으며, 상기 실시예 1의 결과를 토대로 어수리 지하부 추출물, 사상자 추출물 및 어수리 지하부+사상자 혼합 추출물의 지방 생성 억제능의 분석을 25, 50, 75㎍/㎖의 농도에서 실시하였다.
도 2 및 도 3에 개시한 바와 같이, 어수리 지하부 또는 사상자 추출물을 단독으로 처리한 경우 대비, 본 발명의 어수리 지하부+사상자 혼합 추출물의 경우, 지방세포 분화 억제 활성이 높게 나타났으며, 특히, 75㎍/㎖의 농도로 처리한 경우, 지방세포 분화 억제활성이 단독 추출물을 처리한 것에 비해 어수리 지하부+사상자 혼합 추출물의 지방세포 분화 억제 활성이 현저하게 나타난 것을 확인할 수 있었다.
실시예
3. 어수리 지하부 추출물, 사상자 추출물 및 어수리 지하부+사상자 혼합 추출물이 지방 세포 내 중성 지방(TG) 함량에 미치는 영향
어수리 지하부 추출물, 사상자 추출물 및 어수리 지하부+사상자 혼합 추출물이 지방 세포 내 중성 지방의 축적에 어떤 영향을 미치는지 확인하기 위하여, TG ELISA 키트를 사용하여 정량 분석하였다.
그 결과, 도 4에 개시한 바와 같이 75㎍/㎖의 어수리 지하부 추출물 및 사상자 추출물을 각각 처리한 경우, 대조군(control)에 비해 그 차이가 크게 나타나지 않았으나, 1:1의 중량비로 혼합한 75㎍/㎖의 어수리 지하부+사상자 혼합 추출물에서는 TG 양이 현저하게 감소한 것을 확인하였다.
Claims (6)
- 어수리 지하부 및 사상자 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 또는 개선용 건강기능성식품 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 어수리 지하부 및 사상자 혼합 추출물은 어수리 지하부 추출물 및 사상자 추출물을 1:0.1~10 중량비로 혼합한 혼합물인 것을 특징으로 하는 비만 예방 또는 개선용 건강기능성식품 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 어수리 지하부 추출물 및 사상자 추출물은 각각 C1~C4의 저급 알코올, 물 또는 이들의 혼합물을 용매로 사용하여 추출하는 것을 특징으로 하는 비만 예방 또는 개선용 건강기능성식품 조성물.
- 어수리 지하부 및 사상자 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 제4항에 있어서, 상기 어수리 지하부 및 사상자 혼합 추출물은 어수리 지하부 추출물 및 사상자 추출물을 1:0.1~10 중량비로 혼합한 혼합물인 것을 특징으로 하는 비만의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 제4항에 있어서, 상기 어수리 지하부 및 사상자 혼합 추출물 이외에 추가로 담체, 부형제 또는 희석제를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 비만의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
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KR1020180087563A KR102099147B1 (ko) | 2018-07-27 | 2018-07-27 | 어수리 지하부 및 사상자 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 |
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KR1020180087563A KR102099147B1 (ko) | 2018-07-27 | 2018-07-27 | 어수리 지하부 및 사상자 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 |
Publications (2)
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KR20200012363A true KR20200012363A (ko) | 2020-02-05 |
KR102099147B1 KR102099147B1 (ko) | 2020-04-09 |
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Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020180087563A KR102099147B1 (ko) | 2018-07-27 | 2018-07-27 | 어수리 지하부 및 사상자 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 |
Country Status (1)
Country | Link |
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KR (1) | KR102099147B1 (ko) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2021261844A1 (ko) * | 2020-06-26 | 2021-12-30 | 한국과학기술연구원 | 흥안독활 추출물을 포함하는 항비만, 항이상지질혈증, 항산화 또는 항염 조성물 |
KR20220059016A (ko) * | 2020-11-02 | 2022-05-10 | 안동대학교 산학협력단 | 어수리 추출물을 유효성분으로 포함하는 면역증진 및 항비만용 조성물 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR101134251B1 (ko) * | 2011-05-11 | 2012-04-12 | 남종현 | 사상자 추출물을 유효성분으로 하는 비만개선용 식품조성물 |
KR20180015029A (ko) * | 2016-08-02 | 2018-02-12 | 주식회사 파마진 | 사상자 및 아출 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 항비만용 조성물 |
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2018
- 2018-07-27 KR KR1020180087563A patent/KR102099147B1/ko active IP Right Grant
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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KR101134251B1 (ko) * | 2011-05-11 | 2012-04-12 | 남종현 | 사상자 추출물을 유효성분으로 하는 비만개선용 식품조성물 |
KR20180015029A (ko) * | 2016-08-02 | 2018-02-12 | 주식회사 파마진 | 사상자 및 아출 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 항비만용 조성물 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
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권용수 등, '어수리의 성분', 약학회지 제44권 제6호 521~527면(2000) * |
박희준 등, ‘어수리 어린 잎으로부터 Peroxynitrite 소거활성을 나타내는 플라보노이드 성분의 분리 및 함량분석’, 한국자원식물학회지, 제23권 제5호, 393~398면(2010)* * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2021261844A1 (ko) * | 2020-06-26 | 2021-12-30 | 한국과학기술연구원 | 흥안독활 추출물을 포함하는 항비만, 항이상지질혈증, 항산화 또는 항염 조성물 |
KR20220059016A (ko) * | 2020-11-02 | 2022-05-10 | 안동대학교 산학협력단 | 어수리 추출물을 유효성분으로 포함하는 면역증진 및 항비만용 조성물 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
KR102099147B1 (ko) | 2020-04-09 |
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