KR20190138363A - Composition for preventing or treating pain comprising extracts from Jasminum microcalyx Hance as an active ingredient - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 자스민(Jasminum microcalyx Hance) 추출물 및/또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 통증 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for preventing or treating pain, which contains Jasminum microcalyx Hance extract and / or a fraction thereof as an active ingredient.
인간이 느끼는 통증은 크게 급성 통증(Acute pain)과 만성 통증(chronic pain)으로 구분할 수 있으며, 국제통증연구학회에 따르면 통증은 "실제적 또는 잠재적 조직 손상을 동반한 불쾌한 감각적이고 정서적 경험"이라 정의하고 있다.Human pain can be classified into acute pain and chronic pain. According to the International Pain Research Society, pain is defined as "unpleasant sensory and emotional experience with actual or potential tissue damage." have.
급성 통증은 질병이나 외상에 의한 조직 손상으로 인해 발생하는 침해성 자극에 의해 발생하는 통증으로, 출산 통증, 수술 후 통증, 조직손상 후 통증 등이 있으며, 일반적으로 3 내지 6개월 이내 소실되며, 여러 약물(마약성 진통제, 비스테로이드성 소염진통제)에 의해 효과적으로 치료가 된다. 그러나, 만성통증은 여러 불분명한 원인에 의해 신경손상과 이에 따른 신경계의 변화에 의해 유발되며, 원인이 된 질환이나 손상의 치유기간보다 길게 지속이 된다. 또한 통증 부위의 경계가 불분명하며, 지속적으로 무디고 깊은 통증을 보이며, 6개월 이상 지속되며, 마약성 진통제나 비스테로이드성 소염진통제의 효과가 제한적이다. 예를 들어, 편두통, 류마티스성통증, 당뇨병성통증, 및 암성 통증이 있으며, 이러한 통증은 환자의 삶의 질을 급격히 떨어뜨리고, 우울증 등을 수반할 수 있다. Acute pain is a pain caused by invasive stimulation caused by tissue damage caused by disease or trauma, and includes pain in childbirth, postoperative pain, pain after tissue damage, and is usually lost within 3 to 6 months. It is effectively treated by drugs (narcotics, NSAIDs). However, chronic pain is caused by nerve damage and subsequent changes in the nervous system due to a number of unclear causes, and lasts longer than the healing period of the cause of the disease or injury. In addition, the boundary of the pain area is unclear, persistent dull and deep pain, lasting more than 6 months, the effectiveness of narcotic analgesics or nonsteroidal anti-inflammatory drugs is limited. For example, there are migraine headaches, rheumatic pains, diabetic pains, and cancer pains, which can drastically reduce the quality of life of the patient, and can involve depression and the like.
한편, 통증을 치료하는 기존의 진통제는 크게 두 종류로 나눌 수 있다. 하나는 몰핀과 같은 마약성 진통제(narcotic analgesics)로서 코데인(codeine)과 디히드로코데인(dihydrocodeine)이 많이 사용되고 있고, 다른 하나는 비스테로이드성 항염제(NSAIDS: non-steroidal anti-inflammatory drugs)로서 아스피린(aspirin), 이브프로펜(ibuprofen), 및 인도메타친(indomethacin) 등이 대표적이다.On the other hand, the existing painkillers for treating pain can be divided into two types. One is narcotic analgesics such as morphine, and codeine and dihydrocodeine are widely used. The other is asteroid (non-steroidal anti-inflammatory drugs) and aspirin (NSAIDS). aspirin, ibuprofen, and indomethacin.
최근 개발된 새로운 통증 억제제로는 해외의 경우, 통증 치료제 전문 개발사 자벨린 파마슈티컬스(Javelin Pharmaceuticals) 비강내 모르핀 분무제 「릴로민」(Rylomine)이 후기 2상 임상에서 중등도에서 중증 수술 후 통증의 치료에 정맥주사 모르핀과 대등한 진통효과를 나타내는 뿌리는 마약성 진통제를 개발하였으며, 중국에서는 상하이 싱롱 바오테크 제약회사에서 위와 이오테크 제약회사에서 위와장(腸), 유방, 폐, 신장과 관련된 암으로 인한 통증에 효능이 있는 신약 '아킬레스'를 개발한 바 있다. 또한, 바다 달팽이 독에서 추출한 새로운 진통제 '프라이얼트(Prialt)'를 아일랜드 제약회사인 이랜(Elan)이 개발한 진통제로 영국에서 첫 시판되기도 하였다.Recently developed new pain inhibitors include pain relief developer Javelin Pharmaceuticals' intranasal morphine spray `` Rylomine '' for intravenous injection of moderate to severe postoperative pain in
국내에서는 캡사이신 길항물질을 개발하여 2004년 2월에 독일의 다국적 제약업체인 슈바르쯔 파마社가 이의 가치를 인정, 공동연구 및 라이선스 계약을 체결하였으나, 현재까지, Jasminum microcalyx Hance(이하,'J. microcalyx'이라 함) 추출물 및/또는 이의 분획물을 이용하여 통증제로 개발하거나 시도된 사례는 없다.In Korea, the German pharmaceutical company Schwarz Pharma has developed a capsaicin antagonist in February 2004, and has signed a joint research and licensing agreement with Jasminum microcalyx Hance. There have been no cases of developing or attempting pain medications using extracts and / or fractions thereof.
만성 악성 종양성 통증은 물론 사회가 고령화됨에 따라 퇴행성 관절염, 요통 관련 질환 환자는 매년 증가 추세에 있으나, 모르핀과 같은 기존의 아편제제는 일반인에게 마약작용으로 인하여 사용에 제한이 있고, 통증자체가 질병으로 여겨지며 이에 대한 관심이 어느 때보다 높고 확산되고 있어 통증완화제의 수요는 향후 훨씬 더 늘 것으로 예상된다. 아울러, 기존의 진통제에 반응하지 않는 통증에 대한 진통제 개발이 크게 요구되는 시점이다. As the society ages, as well as chronic malignant neoplastic pain, the number of patients with degenerative arthritis and low back pain is increasing every year. However, existing opiates such as morphine are limited to the general public due to narcotic action. It is considered that the demand for pain relief is expected to be much higher in future. In addition, it is time to develop a painkiller for pain that does not respond to existing painkillers.
그러나, 기존의 마약성 및 비마약성 진통제들에 반응하지 않는 통증환자가 많이 보고될 뿐만 아니라, 진통효과가 상대적으로 큰 것으로 알려진 기존의 아편유사제제 등이 마약성 및 심각한 부작용들로 인해 일반 환자가 편하게 사용할 수 없는 실정이다.However, there are many reports of pain patients who do not respond to existing narcotic and non-narcotic analgesics, and conventional opioids, which are known to have relatively high analgesic effects, have been reported by general patients due to narcotic and severe side effects The situation is not comfortable to use.
현재까지 진통제로는 아세트아미노펜, 아스피린 등이 주로 사용되어 왔으나, 이들은 성인에게 1일 약 1 내지 4g의 고용량으로 투여되어야 하고 이로 인해 위장장애, 알레르기, 간독성 등의 부작용이 문제되어 왔다. 따라서, 부작용과 독성이 없으며, 진통 효과가 우수한 천연 유래의 통증 예방 또는 치료용 조성물의 개발이 요구된다.To date, as analgesics, acetaminophen, aspirin, and the like have been mainly used, but they have to be administered to adults at high doses of about 1 to 4 g per day, which causes problems such as gastrointestinal disorders, allergies, and liver toxicity. Therefore, there is a need for the development of a composition for preventing or treating pain derived from nature having no side effects and toxicity and excellent analgesic effect.
이에 본 발명자들은 자스민(J. microcalyx) 추출물 및/또는 이의 분획물이 통증 예방 또는 치료 효과가 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하였다.The present inventors have confirmed that jasmine (J. microcalyx) extract and / or fractions thereof have a pain prevention or therapeutic effect, and completed the present invention.
본 발명은 전술한 문제점을 해결하기 위한 것으로, 자스민(J. microcalyx) 추출물 및/또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 통증 예방 또는 치료용 조성물을 제공하고자 한다. The present invention is to solve the above problems, to provide a composition for preventing or treating pain containing jasmine (J. microcalyx) extract and / or fractions thereof as an active ingredient.
상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 자스민(J. microcalyx) 추출물 및/또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 통증 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a composition for preventing or treating pain containing jasmine (J. microcalyx) extract and / or fractions thereof as an active ingredient.
본 발명의 통증 예방 또는 치료용 조성물은, 일반적인 만성 통증에 적용될 수 있다. 구체적으로 통각수용 통증, 신경병증성 통증, 복합 통증, 암성 통증일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 예를 들면, 수술 후 통증, 외상 후 통증, 분만 통증, 관절염 통증, 당뇨병성 신경병증성 통증, 대상포진 후 신경통, 삼차신경통, 척추 수술 후 통증, 척추관협착증, 손목터널증후군, 암에 의한 모든 2차적 통증 등일 수 있으며, 상기 신경병증성 통증은 항암제에 의한 신경병증성통증(CIPN)일 수 있다. The composition for preventing or treating pain of the present invention can be applied to general chronic pain. Specifically, the pain may be pain, neuropathic pain, complex pain, or cancer pain, but is not limited thereto. For example, postoperative pain, posttraumatic pain, delivery pain, arthritis pain, diabetic neuropathic pain, post shingles neuralgia, trigeminal neuralgia, pain after spinal surgery, spinal stenosis, carpal tunnel syndrome, all 2 due to cancer Secondary pain, and the neuropathic pain may be neuropathic pain (CIPN) caused by an anticancer agent.
본 발명에 따른 자스민(J. microcalyx) 추출물 및/또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 조성물은 통증 치료 효과가 우수하면서도 독성과 부작용이 없는 천연물 유래의 조성물이므로 통증 치료에 보다 안전하게 적용될 수 있다. The composition containing jasmine (J. microcalyx) extract and / or fractions thereof according to the present invention as an active ingredient is a composition derived from natural products having excellent pain treatment effect but no toxicity and side effects, and thus can be more safely applied to pain treatment.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 J. microcalyx 추출물을 박층크로마토그래피(TLC)를 이용한 성분분석 시험 결과이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 J. microcalyx 추출물을 고성능액체크로마토그래피(HPLC)를 이용한 성분분석 시험 결과이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 J. microcalyx 추출물의 진통 효능을 나타내는 포르말린 통증 시험(Formalin test) 결과이다.
도 4 내지 도 6은 본 발명의 일 실시예에 따른 J. microcalyx 추출물의 통풍(gout)으로 인한 통증 모델로 잘 알려진 monosodium urate 통증 모델, Chemotherapy-induced peripheral neuropathy(항암제에 의한 신경병증) 통증 모델 및 Diabetic Neuropathy(당뇨병성 신경병증) 통증 모델에서 진통 효능을 나타내는 이질통 시험(Von-frey test) 결과이다.1 is a component analysis test results using thin layer chromatography (TLC) of J. microcalyx extract according to an embodiment of the present invention.
Figure 2 is a component analysis test results using high performance liquid chromatography (JLC) of J. microcalyx extract according to an embodiment of the present invention.
Figure 3 is a formalin test result showing the analgesic efficacy of J. microcalyx extract according to an embodiment of the present invention (Formalin test).
4 to 6 of the J. microcalyx extract according to an embodiment of the present invention Von test for pain relief in the monosodium urate pain model, a well-known pain model due to gout, the chemotherapy-induced peripheral neuropathy pain model, and the diabetic neuropathy pain model. -frey test) result.
이하, 본 발명에 대하여 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 상세히 설명한다. Hereinafter, the present invention will be described in detail so that a person skilled in the art can easily carry out the present invention.
J. microcalyx은 자스민(Jasminum)의 속의 일종으로, 상록 관목이며 상기 J. microcalyx 이외에도 200여 종으로 이루어져 있다. 주 원산지는 아시아와 아프리카의 열대 또는 아열대 지역이며, 현재는 자스민을 생산하는 아시아 대표 국가로서 중국과 인도가 있다. J. microcalyx is a genus of jasmine (Jasminum), an evergreen shrub and consists of about 200 species in addition to the J. microcalyx. Its main origin is the tropical or subtropical regions of Asia and Africa, and is now Asia's leading producer of jasmine, China and India.
자스민 중 여러 종의 꽃은 강한 향기를 가지고 있어, 주로 향료와 차의 원료로 사용된다. 그러나, 이 가운데 일반적으로 사용되는 자스민의 종은 자스민 루 그랜드 플로랄(Jasminum grandiflorum L.)과 common jasminum으로 알려진 오피키날레 자스민(Jasminum officinale L.) 종이 있으며, 노란 꽃이 피는 약 5종의 원예종을 제외하면 모두 향기가 없거나 있더라도 미미한 수준이다. 따라서, J. microcalyx 을 비롯한 다른 기타 종은 향수로 관상용 관목으로 정원에서 주로 재배된다. 관목은 대게 5 m까지 흩어져 있으며, 가지는 털이 거의 없고, 잎은 3.5-9Х1.5-4.5 cm의 넓게 난형, 타원형, 피침형으로 끝이 뾰족하고 밑 부분이 둥글며 자른다. Several kinds of flowers of jasmine have strong scents and are mainly used as fragrances and teas. However, the commonly used species of jasmine are Jasminum grandiflorum L. and Jasminum officinale L. , also known as common jasminum. Except for the fragrance, all of them are insignificant. Thus, J. microcalyx and other species are cultivated primarily in the garden as ornamental shrubs. The shrubs are usually scattered up to 5 m, the branches have little hairs, and the leaves are broadly ovate, oval, lanceolate, 3.5-9Х1.5-4.5 cm, pointed and rounded at the bottom.
자스민의 알려진 효능으로는 피부미용, 분만촉진, 소독, 자궁강장, 진경, 진정, 최유, 최음, 통경, 신경을 진정시키는 항우울 작용 등이 있다. 이에 따라, 종래 자스민을 함유하는 피부미용 조성물 또는 우울증 약제 조성물들에 관한 연구가 주를 이뤄왔다.Known benefits of jasmine include skin care, delivery, disinfection, uterine tonic, jingyang, soothing, stimulating, aphrodisiac, painful, and anti-depressant. Accordingly, research has been focused on skin care compositions or antidepressant compositions containing jasmine.
한편, 아직까지 J. microcalyx 추출물 및/또는 이의 분획물을 이용하여 통증제로 개발하거나 시도된 사례는 없으나, 본 발명에서는 J. microcalyx 추출물 및/또는 이의 분획물이 통증 예방 또는 치료에 우수한 효과가 있음을 확인하고, 본 연구를 완성하였다.On the other hand, there has been no case of developing or attempting pain medicine using J. microcalyx extract and / or fractions thereof, but in the present invention, it was confirmed that J. microcalyx extract and / or fractions thereof have an excellent effect in preventing or treating pain. This study was completed.
본 발명에서 사용된 J. microcalyx 은 그 형태에 특별한 제한이 없으며, 본 발명의 조성물은 J. microcalyx 로부터 얻어진 추출물 및/또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 한다. J. microcalyx used in the present invention is not particularly limited in its form, and the composition of the present invention is characterized in that it contains an extract obtained from J. microcalyx and / or fractions thereof as an active ingredient.
본 발명에서 용어,“추출물”은 천연물로부터 분리된 활성 성분을 의미하며, 여기서는 상기 J. microcalyx 로부터 분리된 물질을 의미한다.As used herein, the term “extract” refers to an active ingredient separated from natural products, and here refers to a material separated from the J. microcalyx.
상기 J. microcalyx 추출물은 물 및 C1 내지 C4의 직쇄 또는 분지형 알코올 또는 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 용매를 이용하여 통상의 J. microcalyx 추출 방법으로 얻어진 것일 수 있다. The J. microcalyx extract may be obtained by a conventional J. microcalyx extraction method using one or more solvents selected from the group consisting of water and C 1 to C 4 straight or branched alcohols or mixtures thereof.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 추출물은 효과적인 통증 예방 또는 치료 효과를 달성하기 위하여, J. microcalyx(#129)을 30 내지 80 %(v/v) 에탄올로 추출하여 얻어진 에탄올 추출물일 수 있다. In one embodiment of the present invention, the extract may be an ethanol extract obtained by extracting J. microcalyx (# 129) with 30 to 80% (v / v) ethanol in order to achieve an effective pain prevention or treatment effect .
상기 추출물은 통상의 식물 추출물의 제조방법에 따라 제조된 것일 수 있으며, 바람직하게는 가온추출법, 가압추출법, 환류추출법, 온침추출법, 용매추출법, 초음파분쇄 추출법 등에 의할 수 있고, 바람직하게는 용매추출법에 의할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.The extract may be prepared according to the conventional method for producing a plant extract, preferably by a warm extraction method, pressure extraction method, reflux extraction method, warm extraction method, solvent extraction method, ultrasonic grinding extraction method, etc., preferably solvent extraction method It may be by, but is not limited to.
본 발명에서 용어, “분획물”은 추출물의 활성 성분을 분획한 것으로, 여기서는 상기 J. microcalyx 추출물을 크로마토그래피를 통해 여러 개로 분리시킨 일부분을 의미한다. As used herein, the term "fraction" refers to a fraction obtained by fractionating the active ingredient of the extract, wherein the J. microcalyx extract is separated into several pieces by chromatography.
상기 크로마토그래피는 크기, 이온, 전하(극성), 소수성 또는 친화성에 따른 분획물의 분리를 수행할 수 있는 것이면 어느 것이나 가능하나, 바람직하게는 극성에 따른 분리를 수행하는 실리카 겔 크로마토그래피이다. 실리카 겔 크로마토그래피를 사용하는 경우, 이용되는 용매는 겔 크로마토그래피에 통상적으로 사용되는 다양한 용매를 포함하며, 바람직하게는 극성 용매와 비극성 용매의 혼합용매일 수 있다. 예를 들면, 클로로포름(CHCl3)과 메탄올의 혼합 용액, n-헥산과 에틸아세테이트의 혼합 용액 및 에틸아세테이트와 메탄올의 혼합용액으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 1종의 것일 수 있다. 바람직하게는 n-헥산과 에틸 아세테이트 또는 에틸아세테이트와 메탄올의 혼합 용액일 수 있다. The chromatography may be any one capable of carrying out separation of fractions according to size, ion, charge (polarity), hydrophobicity or affinity, but is preferably silica gel chromatography performing separation according to polarity. When using silica gel chromatography, the solvent used includes various solvents conventionally used for gel chromatography, and may preferably be a mixed solvent of a polar solvent and a nonpolar solvent. For example, it may be any one selected from the group consisting of a mixed solution of chloroform (CHCl 3) and methanol, a mixed solution of n-hexane and ethyl acetate, and a mixed solution of ethyl acetate and methanol. Preferably, it may be a mixed solution of n-hexane and ethyl acetate or ethyl acetate and methanol.
아울러, 상기한 바와 같이 추출된 추출물 및/또는 이의 분획물은 이후 감압 여과 과정을 수행하거나 추가로 농축 및/또는 동결 건조를 수행하여 농축하거나 용매를 제거할 수 있다. 따라서, 본 발명에서의 추출물은 통상적 방법으로 건조된 건조물과 통상적 방법으로 농축된 농축물을 포함하는 의미로 사용된다.In addition, the extract and / or fractions thereof extracted as described above may then be concentrated or removed from the solvent by performing a filtration under reduced pressure or by further concentrating and / or lyophilizing. Thus, the extract in the present invention is used in the sense that it includes a dried product dried in a conventional manner and a concentrate concentrated in a conventional manner.
이하, 본 발명의 J. microcalyx 으로부터 얻어진 추출물 및/또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 통증 예방 또는 치료용 조성물 및 이의 제조 방법을 구체적으로 하기의 다양한 실시예를 통하여 상세히 설명한다.Hereinafter, a composition for preventing or treating pain containing the extract obtained from J. microcalyx of the present invention and / or a fraction thereof as an active ingredient and a method for preparing the same will be described in detail with reference to various examples below.
실시예 1. J. microcalyx 추출물 제조 Example 1. Preparation of J. microcalyx extract
Jasminum microcalyx Hance(J. microcalyx, #129)을 세척 및 건조시켜 준비하였다. 준비된 J. microcalyx 1 kg에 30% 에탄올 10 L를 가하여 60 ℃에서 3 시간 동안 추출한 후, 이를 여과하여 J. microcalyx 추출액을 얻었다. 상기와 같은 추출 과정을 2회 반복하여 얻어진 추출액을 45 ℃ 이하의 온도에서 감압 농축 후, 동결 건조하여 분말상의 J. microcalyx 추출물(130g, 13%)을 수득하였다. Jasminum microcalyx Hance (J. microcalyx, # 129) was prepared by washing and drying. 10 L of 30% ethanol was added to 1 kg of prepared J. microcalyx and extracted at 60 ° C. for 3 hours, followed by filtration to obtain a J. microcalyx extract. The extraction solution obtained by repeating the above extraction process twice was concentrated under reduced pressure at a temperature of 45 ° C. or lower, and then lyophilized to obtain a powdery J. microcalyx extract (130 g, 13%).
실험예 1. 박층크로마토그래피(TLC)를 이용한 성분 분석 시험 Experimental Example 1. Component analysis test using thin layer chromatography (TLC)
상기 실시예 1에서 수득한 J. microcalyx 추출물의 성분물질 분포를 확인하기 위하여, TLC(Thin layer chromatography, silica gel 60(Merk Co. USA)F254 pre-coated사용)에 상기 추출물을 190 mg/ml 농도로 메탄올에 용해한 후, 5 ul 점적하여 전개 용매(노르말-헥산:에틸아세테이트=4:1,4:2,4:3, 3:4, 2:4, 1:4)에 전개하였다. 전개 후 UV (254 nm, 366 nm) 로 촬영 후 황산 발색을 관찰하고, 이를 도 1 에 도시하였다. In order to confirm the component distribution of the J. microcalyx extract obtained in Example 1, TLC (Thin layer chromatography, silica gel 60 (using Merk Co. USA) F254 pre-coated) concentration of 190 mg / ml of the extract After dissolving in methanol, 5 ul was dropped and developed in a developing solvent (normal-hexane: ethyl acetate = 4: 1,4: 2,4: 3, 3: 4, 2: 4, 1: 4). After the development, the color development of sulfuric acid was observed after photographing with UV (254 nm, 366 nm), which is shown in FIG. 1.
분석결과, 도 1에서 보는 바와 같이, 비극성을 가지는 성분들이 주를 이루고 있으며, 극성 물질도 일부 함유하는 것을 확인할 수 있다. As a result of the analysis, as shown in Figure 1, the components having a non-polar dominant, it can be seen that also contains some polar material.
실험예 2. 고성능액체크로마토그래피(HPLC)를 이용한 성분 분석 시험Experimental Example 2 Component Analysis Test Using High Performance Liquid Chromatography (HPLC)
상기 실시예 1에서 수득한 J. microcalyx 추출물의 성분물질 분포를 확인하기 위하여, HPLC(high performance liquid chromatography)를 이용하여 분석하였다.In order to confirm the component distribution of the J. microcalyx extract obtained in Example 1, it was analyzed using HPLC (high performance liquid chromatography).
분석은 칼럼 Agilent Eclips SB-C18 (4.5uM, 4.5 * 150 mm i.d.) flow rate 0.7 mL/min, 이동상 water(0.1% Formic acid) (A)와 메탄올 (B)을 사용하여 0분 A:B=95:5, 40분 A:B=0:100, 43분 A:B=0:100, 45분 A:B=95:5, 50분 A:B=95:5로 분석하고, UV 280 nm, 254 nm에서 검출하여 피크를 확인하였다. 그 결과를 도 2에 도시하였다.The analysis was performed with column Agilent Eclips SB-C18 (4.5 uM, 4.5 * 150 mm id) flow rate 0.7 mL / min, mobile phase water (0.1% Formic acid) (A) and methanol (B) for 0 min A: B = 95: 5, 40 min A: B = 0: 100, 43 min A: B = 0: 100, 45 min A: B = 95: 5, 50 min A: B = 95: 5, UV 280 nm , Peak was confirmed by detection at 254 nm. The results are shown in FIG.
분석결과, 도 2에서 보는 바와 같이, 실시예 1에서 수득한 J. microcalyx 추출물의 경우, 280 nm 검출 크로마토그래피에서 단순한 형태를 나타내고 있고, 254 nm에서는 중간극성을 어느 정도 가지는 물질이 다량 존재함을 확인할 수 있다.As shown in FIG. 2, the J. microcalyx extract obtained in Example 1 shows a simple form in 280 nm detection chromatography, and at 254 nm, a large amount of a substance having some mesopolarity exists. You can check it.
실험예 3. 진통 효능 평가: 포르말린 통증 시험(Formalin test)Experimental Example 3. Evaluation of analgesic efficacy: formalin test
상기 실시예 1 에서 수득한 J. microcalyx 추출물의 진통 효능을 평가하기 위하여, 상기 추출물을 마우스에 투여한 후, 포르말린 통증 시험(Formalin test)을 실시하고, 그 결과를 하기 도 3에 도시하였다.In order to evaluate the analgesic efficacy of the J. microcalyx extract obtained in Example 1, after administering the extract to the mice, a formalin test was performed, and the results are shown in FIG. 3.
구체적으로, 상기 추출물을 마우스에 경구 투여한 30분 후, 5% Formalin을 마우스의 왼쪽 발바닥에 투여하여 실험을 진행하였고, 이때 대조군으로서 상기 추출물이 투여되지 않은 생쥐를 사용하여 동일하게 시험하였다.Specifically, 30 minutes after oral administration of the extract to the mouse, the experiment was conducted by administering 5% Formalin to the left foot of the mouse, in which the same test was used in mice that were not administered the extract as a control.
그 결과, 도 3에서 보는 바와 같이, 2nd phase에서 J. microcalyx 추출물의 유의적인 진통 효능을 확인할 수 있다. As a result, as shown in Figure 3, it can be confirmed that significant analgesic efficacy of J. microcalyx extract in the 2nd phase.
실험예 4. 진통 효능 평가: 이질통 시험(Von-frey test)Experimental Example 4. Evaluation of analgesic efficacy: Von-frey test
상기 실시예 1에서 수득한 J. microcalyx 추출물을 다양한 통증 모델을 이용하여 진통 효능을 평가하였다. J. microcalyx extract obtained in Example 1 was evaluated for analgesic efficacy using various pain models.
상기 추출물을 각 마우스에 투여한 후, 좌골신경 손상 후 기계적 자극에 대한 이질통 시험(Von-frey test)을 실시하고, 그 결과를 하기 도 4 내지 도 6에 도시하였다. After administration of the extract to each mouse, a sciatic nerve injury was performed after a Von-frey test for mechanical stimulation (Von-frey test), the results are shown in Figures 4 to 6 below.
상기 측정방법은 마우스를 철망 실험대 위에 설치된 아크릴 상자에 넣고 60분 이상 적응시킨 후, Von Frey Filament를 사용하여 연속적인 반응을 Up-Down method로 평가하였다. 구체적으로, Filament를 마우스의 좌측 환부 발바닥에 수직으로 접촉시키고 5~6초간 유지시켜 마우스가 신속한 회피반응을 보이거나 hairs를 떼면서 즉시 움찔하거나 발바닥을 핥으면 양성반응을 보인 것으로 간주하였다. Von Frey Filament부터 자극하여 양성반응을 보이면 약한 Filament로 자극하고, 양성반응이 없으면 강한 Filament로 자극하여 분석하였다. 이때 대조군으로서 상기 추출물이 투여되지 않은 생쥐를 사용하여 동일하게 시험하였다.In the measuring method, the mouse was placed in an acrylic box installed on a wire test bench for at least 60 minutes, and the continuous reaction was evaluated by the up-down method using Von Frey Filament. Specifically, the filament was vertically contacted with the sole of the left affected leg of the mouse and maintained for 5 to 6 seconds so that the mouse exhibited a rapid avoidance reaction or immediately jumped or licked the sole while removing hairs. If stimulation was performed from von Frey Filament, the result was positive filament. If no positive response, stimulation was performed with strong filament. At this time, the same test was used using the mice not administered the extract as a control.
그 결과, 도 4 내지 도 6에서 보는 바와 같이, 본 발명에 따른 상기 J. microcalyx 추출물은 통풍(gout)으로 인한 통증 모델로 잘 알려진 monosodium urate 통증 모델, Chemotherapy-induced peripheral neuropathy(항암제에 의한 신경병증) 통증 모델 및 Diabetic Neuropathy(당뇨병성 신경병증) 통증 모델 모두에서 용량의존적으로 나타나는 통증 완화 작용을 확인할 수 있으며, 특히, 당뇨병성 신경병증으로 인한 통증에 더 효과적임을 알 수 있다.As a result, as shown in Figures 4 to 6, the J. microcalyx extract according to the present invention is a monosodium urate pain model, Chemotherapy-induced peripheral neuropathy (an anticancer drug-induced neuropathy), which is well known as a pain model due to gout Dose-dependent pain relief and diabetic neuropathy pain models can be found, and in particular, it is more effective for pain caused by diabetic neuropathy.
이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. So far I looked at the center of the preferred embodiment for the present invention. Those skilled in the art will appreciate that the present invention can be implemented in a modified form without departing from the essential features of the present invention.
Claims (8)
Pharmaceutical composition for preventing or treating pain containing Jasminum ( Jasminum microcalyx Hance) extract as an active ingredient.
상기 추출물은 자스민에 물, C1 내지 C4의 직쇄 또는 분지형 알코올, 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 어느 1종 이상의 용매를 가하여 50 내지 70 ℃에서 2 내지 4시간 동안 추출된 것인, 통증 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
The method of claim 1,
The extract is extracted for 2 to 4 hours at 50 to 70 ℃ by adding at least one solvent selected from the group consisting of water, C 1 to C 4 straight or branched alcohol, and mixtures thereof to jasmine, Pharmaceutical compositions for preventing or treating pain.
상기 자스민 추출물의 분획물을 유효성분으로 함유하는, 통증 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
The method of claim 1,
Containing a fraction of the jasmine extract as an active ingredient, a pharmaceutical composition for preventing or treating pain.
상기 분획물은 자스민 추출물로부터 극성 용매, 비극성 용매 및 이들의 혼합 용매로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 전개 용매로 하는 크로마토그래피(Chromatography)에 의하여 분리된 것인, 통증 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
The method of claim 3, wherein
The fraction is separated from jasmine extract by chromatography (Chromatography) using one or more selected from the group consisting of a polar solvent, a non-polar solvent and a mixed solvent thereof as a developing solvent, a pharmaceutical composition for preventing or treating pain.
상기 전개 용매는 헥산:에틸아세테이트= 4~1:1~4 인 것인, 통증 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
The method of claim 4, wherein
The developing solvent is hexane: ethyl acetate = 4 to 1: 1 to 4, the pharmaceutical composition for preventing or treating pain.
상기 통증은 통각수용 통증(nociceptive pain), 신경병증성 통증(neuropathic pain), 복합 통증(mixed pain) 및 암성 통증(cancer pain)으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상의 만성 통증인, 통증 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
The method of claim 1,
The pain is any one or more chronic pain selected from the group consisting of nociceptive pain, neuropathic pain, mixed pain and cancer pain, for preventing or treating pain Pharmaceutical compositions.
상기 신경병증성 통증은 항암제에 의한 신경병증성통증(CIPN)인, 통증 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
The method of claim 6,
The neuropathic pain is neuropathic pain (CIPN) by an anticancer agent, pain prevention or treatment pharmaceutical composition.
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