KR20190105443A - Producing Method for Venegar Using Aronia and Rubus coreanus Miquel, and Venegar Beverage Using This - Google Patents

Producing Method for Venegar Using Aronia and Rubus coreanus Miquel, and Venegar Beverage Using This Download PDF

Info

Publication number
KR20190105443A
KR20190105443A KR1020180026000A KR20180026000A KR20190105443A KR 20190105443 A KR20190105443 A KR 20190105443A KR 1020180026000 A KR1020180026000 A KR 1020180026000A KR 20180026000 A KR20180026000 A KR 20180026000A KR 20190105443 A KR20190105443 A KR 20190105443A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
acetic acid
aronia
bokbunja
fermentation
vinegar
Prior art date
Application number
KR1020180026000A
Other languages
Korean (ko)
Inventor
고남숙
Original Assignee
순창복분자영농조합법인
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 순창복분자영농조합법인 filed Critical 순창복분자영농조합법인
Priority to KR1020180026000A priority Critical patent/KR20190105443A/en
Publication of KR20190105443A publication Critical patent/KR20190105443A/en

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12J—VINEGAR; PREPARATION OR PURIFICATION THEREOF
    • C12J1/00—Vinegar; Preparation or purification thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
    • A23L2/02—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation containing fruit or vegetable juices
    • A23L2/04—Extraction of juices
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
    • A23L2/38—Other non-alcoholic beverages
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
    • A23L2/38—Other non-alcoholic beverages
    • A23L2/382—Other non-alcoholic beverages fermented
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
    • A23L2/52—Adding ingredients
    • A23L2/68—Acidifying substances
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
    • C12N1/16—Yeasts; Culture media therefor
    • C12N1/18—Baker's yeast; Brewer's yeast
    • C12N1/185—Saccharomyces isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2250/00—Food ingredients
    • A23V2250/02—Acid
    • A23V2250/022—Acetic acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/02—Acetobacter
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
    • C12R2001/85—Saccharomyces
    • C12R2001/865—Saccharomyces cerevisiae

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

The present invention relates to a vinegar producing method using aronia and rubus coreanus and a vinegar beverage using the same and, more specifically, to an acetic acid producing method using aronia and rubus coreanus and an acetic acid beverage using aronia and rubus coreanus produced by the method. The acetic acid producing method using aronia and rubus coreanus comprises: a step 1) of removing foreign matters from aronia fruits and rubus coreanus fruits, respectively, crushing the fruits and extracting juice from the same, and then mixing 10-20 parts by weight of rubus coreanus juice with 100 parts by weight of aronia extract juice; a step 2) of adjusting a sugar content in the extract juice with apple concentrate, adding alcohol fermentation yeast culturing and filtering the same, and performing ethanol fermentation; and an acetic acid fermentation step 3) of diluting the ethanol fermentation liquid to adjust a concentration, adjusting the concentration of acetic acid with glacial acetic acid, inoculating acetic acid, and then incubating the same at 25 to 35°C for 7 to 11 days. According to aronia acetic acid fermentation of the present invention, the initial concentration of ethanol and acetic acid should be above a proper concentration such that acetobacter is activated and thus, acetic acid fermentation smoothly occurs. The vinegar produced by the present invention has improved functionality and contains anthocyanins and polyphenols, functional components, thereby being provided as a healthy drink with an antioxidant effect, a vision recovery effect, a vascular disease prevention effect, a prevention and treatment effect of brain disease, a diabetes prevention effect, an immunity enhancement effect, and a diet effect.

Description

아로니아 및 복분자를 이용한 식초의 제조방법 및 이를 이용한 식초음료 {Producing Method for Venegar Using Aronia and Rubus coreanus Miquel, and Venegar Beverage Using This}Producing Method for Venegar Using Aronia and Rubus coreanus Miquel, and Venegar Beverage Using This}

본 발명은 아로니아 및 복분자를 이용한 식초의 제조방법 및 이를 이용한 식초음료에 관한 것이다.The present invention relates to a method for producing vinegar using aronia and bokbunja and vinegar beverage using the same.

식초는 동서양을 막론하고 예로부터 이용되어 온 발효 식품으로, 식품에 첨가되는 기초산미료이며 의약품 및 미용 재료로도 널리 사용되고 있다(Kim YT, et al. (1997) J East Asian Soc Dietary Life, 7, 301-307). 이러한 식초는 미생물을 이용하여 당류나 전분질을 함유하고 있는 여러 원료들을 알코올 및 초산 발효시켜 제조되며, 신맛을 내는 초산성분을 비롯하여 유기산과 아미노산, 에스테르 및 각종 영양물질이 함유되어 있다(Gil BI (2004) J Nat Sci, 11, 1-7 ; Jeong YJ, Lee MH (2000) Food Ind Nutr,5,7-12). 식초는 살균력이 강하여 식품의 보존에 이용될 뿐만 아니라 식욕을 증진시키고 소화액의 분비를 촉진하며 콜레스테롤 저하 및 체지방을 감소시켜 성인병 예방에 효과적이며, 젖산 분해에 따른 피로회복 및 식품성분 내의 비타민 C 보호 작용 등의 효능이 있는 것으로 보고되어 있다(Kim DH (1999) J Korean Soc Food Sci Nutr,28, 53-60 ; Jeong YJ, et al. (1998) Korean J Food Preserv, 5, 374-379).Vinegar is a fermented food that has been used for a long time in the East and West. It is a basic acid added to foods and is widely used as a medicine and a cosmetic ingredient (Kim YT, et al. (1997) J East Asian Soc Dietary Life, 7, 301-307). These vinegars are prepared by fermenting various raw materials containing sugars or starch with alcohol and acetic acid using microorganisms, and contain acidic acidic ingredients, organic acids, amino acids, esters and various nutrients (Gil BI (2004). ) J Nat Sci, 11, 1-7; Jeong YJ, Lee MH (2000) Food Ind Nutr, 5, 7-12). Vinegar is not only used for food preservation because it has strong bactericidal power, but it is also effective to prevent appetite by improving appetite, promoting digestion of digestive juice, reducing cholesterol and body fat, and recovering fatigue from lactic acid degradation and protecting vitamin C in food ingredients. (Kim DH (1999) J Korean Soc Food Sci Nutr, 28, 53-60; Jeong YJ, et al. (1998) Korean J Food Preserv, 5, 374-379).

국내 식초 산업은 1970년대에 빙초산을 희석하여 만든 저가의 합성식초가 주를 이루었으며, 80년대에는 주정을 희석하여 과즙, 무기염을 첨가한 양조식초의 소비가 증가하였다(Jeong YJ (2009) Food Sci Ind, 42, 52-59). 이후 90년대부터는 첨가물을 사용하지 않고 100% 과실을 원료로 하는 천연 양조식초의 생산이 시작되어(Yoon HN (1999) Korean J Food Sci Technol, 31, 1440-1446), 최근에는 단기간에 대량생산이 가능한 2단계 발효 및 병행복발효법을 통해 참다래, 사과, 양파 등을 이용한 다양한 천연 양조식초의 개발에 대한 연구들이 활발히 진행되고 있다.The domestic vinegar industry was mainly composed of low-priced synthetic vinegar made by diluting glacial acetic acid in the 1970s, and in the 80s, consumption of brewed vinegar added with juice and inorganic salt increased by diluting alcohol (Jeong YJ (2009) Food Sci Ind, 42, 52-59). Since then, the production of natural vinegar made from 100% fruit without additives began (Yoon HN (1999) Korean J Food Sci Technol, 31, 1440-1446). Through the possible two-stage fermentation and parallel fermentation methods, studies on the development of various natural brewed vinegar using sesame, apple, onion, etc. are being actively conducted.

최근 경제성장과 더불어 식생활 문화가 향상되면서 건강에 대한 인식이 높아지고, 더욱이 합성식초에 관한 유해론이 제기되면서 천연자원을 원료로 한 발효식초의 필요성이 커지게 되었다. 또한 식초의 건강에서의 효능이 알려지면서 발효식초의 수요가 급증함과 동시에 더욱 고급화되고 다양화 되려는 경향을 보이고 있다(Jeong YJ, et al. (1998) Korean J Food Preserv, 5, 374-379). 현재까지 감귤, 감, 매실, 배 등 천연자원을 이용한 발효식초에 관한 연구가 활발하게 이루어지고 있는 실정이다.With the recent economic growth and the improvement of dietary culture, awareness of health has increased, and as the harmful theory about synthetic vinegar has been raised, the necessity of fermented vinegar made from natural resources has increased. In addition, as the efficacy of vinegar is known, the demand for fermented vinegar is rapidly increasing and tends to be more advanced and diversified (Jeong YJ, et al. (1998) Korean J Food Preserv, 5, 374-379). . To date, research on fermented vinegar using natural resources such as tangerines, persimmons, plums and pears has been actively conducted.

한편, 아로니아(aronia)는 장미과의 다년생 관목으로 북아메리카의 동북부 지역이 원산이며, 그 열매와 잎 등을 인디언들과 초기 이민 정착인들이 전통약재로 활용했다고 한다. 1930년대 러시아의 식물학자 이반 미츄린 교수에 의해 열매의 맛과 향이 좋아 과즙을 음료로 사용하기 시작했으며, 본격적으로 재배되기 시작한 것은 1978년 폴란드가 러시아에서 도입해 상업적으로 재배되면서 부터이다. 최근 우리나라에도 폴란드산 원액이 수입되어 국내 제품과 경쟁하고 있으며, 고창군, 단양군 등에서 많은 재배가 이루어져 소비가 시급한 실정이다.Aronia, a perennial shrub of the family Rosaceae, is native to the northeastern region of North America, and its fruits and leaves have been used by Indians and early immigrant settlers as traditional medicines. In the 1930's, the Russian botanist Ivan Mithurin began to use fruit juice as a drink because of its delicious taste and aroma. It began to grow in 1978 when Poland was introduced from Russia and grown commercially. Recently, Korea's raw liquor has been imported and competes with domestic products, and it is urgent to consume it because there is much cultivation in Gochang-gun and Danyang-gun.

아로니아는 레드 초크베리, 블랙 초크베리, 퍼플 초크베리의 3가지를 합쳐서 아로니아라고 하며 킹스베리(King's Berry)로도 불린다. 아로니아 나무의 열매는 식용, 식용색소, 약용, 관상용으로도 재배된다. 아로니아는 안토시아닌의 함량이 블루베리의 4-5배 이상으로 높아서 강력한 황산화물질이 들어 있으며, 폴리페놀도 포도의 80배, 복분자의 20배, 크린베리의 13배로서 건강기능성 물질을 다량 함유하고 있다. 안토시아닌과 폴리페놀은 활성산소를 중화시키는 항산화 효과, 로돕신의 재합성을 촉진하는 시력회복 효과, 혈관의 콜레스테롤을 억제하여 혈관질환을 예방하는 효과, 카테킨과 상호작용으로 각종 뇌질환의 예방과 치료 효과, 인슐린 생성을 향상시켜 당뇨 에방 효과, 백혈구의 생성을 촉진시켜 면역력을 증진시키는 효과, 체지방을 분해하여 다이어트 효과 등이 있다고 알려져 있다.Aaronia is a combination of red chokeberry, black chokeberry and purple chokeberry called Aaronia, also called King's Berry. The fruit of the Aaronia tree is also grown for food, food coloring, medicinal and ornamental purposes. Aaronia has 4 to 5 times higher anthocyanin content than blueberries and contains strong sulfated substances. Polyphenol also contains 80 times as much grapes, 20 times as bokbunja, and 13 times as much as a berry, and contains large amounts of health functional substances. Doing. Anthocyanins and polyphenols have antioxidant properties that neutralize free radicals, restore vision to promote resynthesis of rhodopsin, prevent vascular diseases by inhibiting cholesterol in blood vessels, and prevent and treat various brain diseases by interacting with catechins. It is known to improve insulin production, diabetes prevention effect, promote the production of white blood cells to promote immunity, break down body fat and diet effect.

아로니아에 관련된 종래기술로는 한국특허등록번호 1013832760000(아로니아 음료 농축액 및 그 제조방법)은 아로니아 열매를 제분기에 넣고 분쇄하고 1차 효소를 넣고 45~60℃ 범위에서 1~2시간 범위로 예열하는 공정과 상기의 예열물을 압착시켜 여액을 얻되, 10~50메쉬 범위의 체를 통하여 예열물을 압착하여 찌거기를 분리하고 여액을 얻는 공정과 상기 여액에 2차 효소를 넣고 45~60℃ 범위에서 1~2시간 범위로 숙성시키는 공정과 상기 숙성물에 천연식물 중에서 선택되는 정화제를 넣고 부유성분을 침전시키고 여과하는 공정을 통하여 60~75 brix 범위의 농도를 갖는 아로니아 음료 농축액을 얻고, 상기 아로니아 농축액이 1~10 wt% 범위로 함유되고, 구연산나트륨, 사과산, 이산화규소, 향료 중에서 하나 이상 선택되는 식용첨가제가 1~5 wt% 범위로 포함된 후 당류가 잔량을 이루어 음료용 프리믹스 원료로 제공되는 아로니아 음료에 관한 것이다.As a related art related to Aaronia, Korean Patent Registration No. 1013832760000 (Aronia Beverage Concentrate and Manufacturing Method thereof) is used to crush the Aronia fruit in a mill and put it in a primary enzyme. The preheating process and the preheated product is compressed to obtain a filtrate, the preheated material is compressed through a sieve in the range of 10 to 50 mesh to separate the residue and the filtrate and the secondary enzyme is added to the filtrate and 45 to 60 Aronia beverage concentrates having a concentration in the range of 60 to 75 brix are obtained through a step of aging in a range of 1 to 2 hours and a step of adding a purifying agent selected from natural plants to the aging product and then precipitating and filtering suspended components. , The Aaronia concentrate is contained in the range of 1 to 10 wt%, the saccharide is included after the edible additive selected from sodium citrate, malic acid, silicon dioxide, fragrance is included in the range of 1 to 5 wt% The present invention relates to an Aaronia beverage which is provided as a premix raw material for beverages.

한국특허등록번호 1011630720000(아로니아 열매 추출물의 정제 및 분말화 방법)은 아로니아 열매의 추출원액에 대해 칼럼 크로마토그래피를 실시하되, Diaion HP20 수지를 흡착수지로 사용하고, 황산이나 구연산에 의해 산성화된 에탄올을 세척용매로 사용함으로써, 지표물질인 안토시아닌의 함량이 높고, 처리비용이 저렴한 아로니아 열매 추출물의 정제방법과 이러한 방법으로 수득된 정제물을 분말화 하는 방법에 관한 것이다.Korean Patent Registration No. 1011630720000 (method for purifying and powdering Aaronia fruit extract) is performed by column chromatography on the extract of Aaronia fruit, using Diaion HP20 resin as adsorption resin and acidified by sulfuric acid or citric acid. By using ethanol as a washing solvent, the present invention relates to a method for purifying Aaronia fruit extract having a high content of anthocyanin as an indicator and having low processing cost, and a method for powdering the purified product obtained by such a method.

일본공개특허 제 2009-065889A호(떫은 맛 성분 함유 과실 식품의 떫은 맛 제거 및 제조방법)는 탈삽방법으로 감, 아로니아등의 미탈삽의 떫은맛 성분 함유시켜 과실을 페이스트형에 가공하고, 그 페이스트에 가식성 단백질로서 두유, 우유, 생크림, 쇼즈, 다이즈, 어패류의 으깬 어묵의 1종 또는 2종 이상을 첨가한다. 또한 떫은맛 성분 함유 과실 식품의 제조 방법은 가식성 단백질로서 두유, 우유, 생크림, 쇼즈, 다이즈, 어패류의 으깬 어묵의 1종 또는 2종 이상을 첨가해 탈삽한 감, 아로니아등의 떫은맛 성분 함유 과실의 페이스트를 다른 임의의 식품 소재와 혼합하고, 혼합된 임의의 식품 소재를 가열한다.Japanese Unexamined Patent Publication No. 2009-065889A (Method for removing astringent taste of fruit food containing a mild taste component and manufacturing method) is a degreasing method, which contains the astringent taste components of undeleted shovels such as persimmon and aronia, and processes the fruit into a paste. As an edible protein, one or two or more kinds of mashed fish cakes of soy milk, milk, fresh cream, shozu, diced fish and shellfish are added. In addition, the manufacturing method of fruit food containing astringent taste component is a edible protein, which contains astringent components such as persimmon and aronia, which are added by one or two or more kinds of mashed fish paste of soymilk, milk, fresh cream, shozu, diced fish and shellfish. The fruit paste is mixed with any other food material and the mixed food material is heated.

한국특허등록번호 1013825940000(복분자 식초음료 조성물 및 이의 제조방법)은 정제수 100중량부에 대하여 복분자 식초 1∼5중량부, 복분자 착즙액 0.1∼1중량부, 구연산 0.05∼0.2중량부, 비타민 0.01∼0.1중량부, 가르시니아캄보지아 추출물 0.1∼1중량부, 과일농축액 1∼10중량부, 당류 5∼10중량부, 쥐눈이콩 분말 0.1∼1중량부를 첨가하고 혼합하는 단계를 포함하는 복분자 식초음료 조성물의 제조방법이다.Korea Patent Registration No. 1013825940000 (Bokbunja vinegar beverage composition and its manufacturing method) is 1 to 5 parts by weight of bokbunja vinegar, 0.1 to 1 parts by weight of bokbunja juice, 0.05 to 0.2 parts by weight citric acid, 0.01 to 0.1 with respect to 100 parts by weight of purified water Weight part, garcinia cambogia extract 0.1-1 parts by weight, fruit concentrate 1-10 parts by weight, saccharides 5-10 parts by weight, 0.1-1 parts by weight of snow bean powder, and the method of producing a bokbunja vinegar beverage composition comprising the step of mixing to be.

한국특허공개번호1020120122175(식초음료의 제조방법)은 발효식초 11~13중량%, 농축과즙 8~11중량%, 설탕 6~8중량%, 벌꿀 1~2중량%, 레몬즙 0.1~1중량%를 배합하여 정제수 68~73중량%d의 배합 단계; 활성탄과 극세사를 이용해 여과하는 단계; 무균시설에서 규격용기에 투입, 밀봉, 이물질 혼입여부 검사, 서늘한 창고에 보관 후 출하 단계로 구성된다.Korean Patent Publication No. 1020120122175 (Method for preparing vinegar beverage) is 11 ~ 13% by weight of fermented vinegar, 8-11% by weight of concentrated fruit juice, 6-8% by weight of sugar, 1-2% by weight of honey, 0.1-1% by weight of lemon juice Blending the blending step of purified water 68-73 wt% d; Filtration using activated carbon and microfiber; In aseptic facilities, it consists of standard containers, sealing, inspection of foreign substances, storage in a cool warehouse, and shipping.

최근 농가에서 특용작물로 아로니아와 복분자가 대량으로 생산되고 있지만, 과잉생산에 따라 수요처를 찾지 못하여 농가의 부담이 가중되고 있다. 더욱이 이들의 우수한 기능성 성분을 상품화시키지 못하여 자원의 낭비가 우려된다. 그러나 아로니아와 복분자에는 기능성 성분인 안토시아닌과 폴리페놀이 함유되어 있어 항산화, 시력회복, 혈관질환 예방, 당뇨 예방, 면역력 증진, 다이어트 등에 효과가 있으나 마땅한 가공식품으로 개발되지 못하고 있다.Recently, aronia and bokbunja are produced in large quantities as special crops in farms, but the burden on farms is increasing due to overproduction. Moreover, they fail to commercialize their superior functional ingredients, which is a waste of resources. However, Aaronia and Bokbunja contain functional ingredients anthocyanins and polyphenols, which are effective in antioxidants, visual acuity recovery, vascular disease prevention, diabetes prevention, immunity enhancement, and diet, but have not been developed as appropriate processed foods.

또한, 복분자(Rubuscoreanus Miq.)는 장미과에 속하는 산딸기의 일종으로 반구형의 검붉은색 열매를 맺는 다년생 식물이다(Kim MS, et al. J Pharm Soc Korea, 41, 1-6). 동의보감에 의하면 복분자는 신(身)과 간(肝)을 보호하고 눈을 밝게 하며, 신정(腎精) 보강 및 정력 감퇴 치료에 효과가 있는 것으로 알려져 있다(Heo J (1994) Donguibogam 1-5. Yeogang PublishingCo,Seoul, Kore, p 62, p 296, p 334, p 617, p 984, p 1085, p 2679). 복분자에는 인, 철, 칼륨, 유기산, 비타민 C 등의 영양성분과 gallic acid, tannin, catechin, quercetin 등의 유용성분이 풍부하게 함유되어 있어, 항암 활성, 면역증진 효과, 항균 효과 및 혈관신생억제 효과와 같은 다양한 생리활성을 가진다고 보고되고 있다.Bokbunja (Rubuscoreanus Miq.) Is a perennial plant that bears hemispherical dark red fruits as a kind of wild strawberry belonging to the Rosaceae family (Kim MS, et al. J Pharm Soc Korea, 41, 1-6). According to the agreement, bokbunja is known to protect god and liver, brighten the eyes, and to be effective in reinforcing the kidney and improving the energy loss (Heo J (1994) Donguibogam 1-5. Yeogang Publishing Co, Seoul, Kore, p 62, p 296, p 334, p 617, p 984, p 1085, p 2679). Bokbunja contains abundant nutrients such as phosphorus, iron, potassium, organic acid and vitamin C, and useful ingredients such as gallic acid, tannin, catechin, quercetin, and anticancer activity, immune enhancing effect, antibacterial effect and angiogenesis inhibitory effect. It is reported to have various physiological activities.

복분자는 1993년부터 재배되기 시작하여 복분자 시장의 성장과 더불어 매년 11,000톤 이상의 생과가 생산 유통되고 있어 많은 농가의 소득원이 되고 있다. 그러나 최근 홍수출하로 인한 가격폭락과 복분자의 주 소비시장을 이루고 있는 과실주의 소비 감소로 그 활용이 문제시 되고 있다. 이를 해결하기 위해 복분자를 이용한 제품의 개발이 이루어져 오고 있으나 초콜릿, 면, 떡, 식빵 등과 같은 단순 가공 수준의 제품만이 제시되고 있을 뿐 과잉으로 생산되는 복분자를 대량적으로 활용할 방안으로는 아직까지 미흡한 실정이다.Bokbunja has been cultivated since 1993, and with the growth of the Bokbunja market, more than 11,000 tons of fresh fruits are produced and distributed every year, making it a source of income for many farms. However, its utilization is problematic due to the recent price drop caused by flooding and the reduction of fruit wine consumption, which is the main consumer market of Bokbunja. In order to solve this problem, the development of products using bokbunja has been made, but only products of simple processing level such as chocolate, noodles, rice cakes, and bread have been proposed. However, there are still insufficient methods to utilize excessively produced bokbunja. It is true.

이에, 본 발명자들은 과잉산물인 아로니아와 복분자를 이용한 새로운 식품 소재를 개발하고자 노력하던 중, 단기간에 대량생산이 가능한 2단계 발효를 통한 아로니아 식초가 떫은 맛이 강하므로, 여기에 복분자를 첨가한 결과 관능성이 개선되고, 그 이화학적 성분분석 및 항산화 효과를 조사하여 기능성 식품 소재로 아로니아 및 복분자 식초를 활용 가능함을 확임함으로써 본 발명을 완성하였다.Therefore, the present inventors are trying to develop a new food material using the excess product Aaronia and bokbunja, because the scent of the Aronia vinegar through a two-step fermentation can be mass-produced in a short period of time, the addition of bokbunja As a result, the functionality was improved, and the present invention was completed by confirming that the physicochemical component analysis and the antioxidant effect were used to confirm that Aaronia and Bokbunja vinegar can be used as functional food materials.

본 발명의 목적은 항산화 효과와 같은 다양한 기능성을 갖는 아로니아 및 복분자를 이용한 초산의 제조방법 및 이를 이용한 관능성이 개선된 초산 음료를 제공하는 것이다.It is an object of the present invention to provide a method for preparing acetic acid using aronia and bokbunja having various functionalities such as an antioxidant effect, and an acetate beverage having improved functionality using the same.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 1) 아로니아 열매와 복분자 열매로부터 각각 이물을 제거하여 파쇄 및 착즙한 후, 아로니아 착즙액 100중량부에 복분자 착즙액 10~20중량부를 혼합하는 단계; 2) 상기 착즙액에 사과 농축액으로 당도를 조절한 후, 알콜발효 효모를 첨가하고 배양하여 여과한 후 에탄올 발효하는 단계; 및 3) 상기 에탄올 발효액을 희석하여 농도를 조절하고 빙초산으로 초산 농도를 조정한 후 초산균을 접종하여 25∼35℃에서 7∼11일간 배양하는 초산발효 단계;를 포함하는 아로니아와 복분자를 이용한 초산의 제조 방법을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention comprises the steps of 1) removing the foreign body from each of the Aronia fruit and bokbunja fruit crushed and juiced, and mixing 10 to 20 parts by weight of bokbunja juice solution to 100 parts by weight Aaronia juice; 2) after adjusting the sugar content with the apple concentrate to the juice, alcohol fermentation yeast is added, cultured and filtered and then ethanol fermentation; And acetic acid fermentation step of diluting the ethanol fermentation broth to adjust the concentration and adjusting the acetic acid concentration with glacial acetic acid and then inoculating acetic acid bacteria and incubating at 25-35 ° C. for 7 to 11 days. It provides a method for producing.

또한, 본 발명은 상기 방법으로 제조된 아로니아와 복분자 초산을 이용한 초산 음료를 제공한다.The present invention also provides an acetic acid beverage using aronia and bokbunja acetic acid prepared by the above method.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 1) 아로니아 열매와 복분자 열매로부터 각각 이물을 제거하여 파쇄 및 착즙한 후, 아로니아 착즙액 100중량부에 복분자 착즙액 10~20중량부를 혼합하는 단계; 2) 상기 착즙액에 사과 농축액으로 당도를 조절한 후, 알콜발효 효모를 첨가하고 배양하여 여과한 후 에탄올 발효하는 단계; 및 3) 상기 에탄올 발효액을 희석하여 농도를 조절하고 빙초산으로 초산 농도를 조정한 후 초산균을 접종하여 25∼35℃에서 7∼11일간 배양하는 초산발효 단계;를 포함하는 아로니아와 복분자를 이용한 초산의 제조 방법을 제공한다.The present invention is 1) removing the foreign body from each of the Aronia fruit and bokbunja fruit crushed and juiced, and then mixing the 10 to 20 parts by weight of bokbunja juice solution to 100 parts by weight Aaronia juice; 2) after adjusting the sugar content with the apple concentrate to the juice, alcohol fermentation yeast is added, cultured and filtered and then ethanol fermentation; And acetic acid fermentation step of diluting the ethanol fermentation broth to adjust the concentration and adjusting the acetic acid concentration with glacial acetic acid and then inoculating acetic acid bacteria and incubating at 25-35 ° C. for 7 to 11 days. It provides a method for producing.

본 발명의 아로니아와 복분자를 이용한 초산의 제조 방법에 있어서, 상기 에탄올 발효의 알콜발효 효모는 Saccharomyces cerevisiae (KCTC 7904)를 이용하는 것이 바람직하고, 상기 초산발효의 초산균은 기탁번호 KACC92089로 기탁된 아세토박터 파스테리아너누스(Acetobacter pasteurianus) 균주를 이용하는 것이 바람직하다.In the production method of acetic acid using the aronia and bokbunja of the present invention, the alcoholic fermentation yeast of the ethanol fermentation is preferably used Saccharomyces cerevisiae (KCTC 7904), the acetic acid bacteria of acetic acid fermentation acetobacter deposited under accession number KACC92089 It is preferable to use Pasteuranus strain.

또한, 본 발명의 아로니아와 복분자를 이용한 초산의 제조 방법에 있어서, 상기 2) 단계의 초기 당도는 당도는 10∼20 °Brix이고 20∼30℃에서 4~8일 동안 에탄올 발효가 이루어지는 것이 바람직하고, 상기 3) 단계는 초기 산도는 1~3%, 에탄올 농도는 4∼8%인 것이 바람직하며, 상기 1) 단계는 아로니아 착즙액 100중량부에 복분자 착즙액 14.3중량부를 혼합하는 것이 바람직하다In addition, in the production method of acetic acid using the aronia and bokbunja of the present invention, the initial sugar content of step 2) is 10 ~ 20 ° Brix sugar is preferably ethanol fermentation for 4 to 8 days at 20 ~ 30 ℃. And, in step 3), the initial acidity is preferably 1 to 3%, the ethanol concentration is 4 to 8%, and the step 1) preferably mixes 14.3 parts by weight of bokbunja juice solution to 100 parts of Aaronia juice solution. Do

또한, 본 발명은 상기 방법으로 제조된 아로니아와 복분자 초산을 이용한 여러가지 부형제를 첨가한 초산 음료를 제공한다.The present invention also provides an acetic acid beverage to which various excipients using Aaronia and Bokbunja acetic acid prepared by the above method are added.

본 발명에서 복분자와 아로니아의 중량비는 1:7인 것이 바람직한데, 상기 비율로 착즙액을 제조하고, 이것으로 식초를 제조하는 것이 바람직하다. 아로니아 만으로 제조된 식초는 떫은 맛이 강하므로, 복분자를 첨가하여 관능성을 향상시킬 수 있다.In the present invention, it is preferable that the weight ratio of bokbunbun and aronia is 1: 7, but the juice is prepared in the above ratio, and it is preferable to prepare vinegar. Since vinegar made only from aronia has a strong astringent taste, it is possible to improve sensibility by adding bokbunja.

본 발명은 과잉으로 생산되는 아로니아와 복분자의 소비 촉진과 신수요 창출을 위해 아로니아와 복분자 식초를 제조한 후 이화학적 성분분석 및 항산화 효과를 조사하였다. 알코올 발효의 최적 조건은 당도 15 °Brix, 온도 30℃, 발효기간 4일이었으며, 초산 발효의 최적 조건은 초기 알코올 함량 6%, 초기 산도 2%, 온도 30℃, 발효기간은 9일이었다. 최적 조건으로 발효된 아로니아 및 복분자 식초의 유리당은 자당, 과당 및 포도당으로 확인되었으며, 주요 유기산은 아세트산, 말산, 숙신산, 및 말로닉산으로 나타났다. 또한 유리아미노산 총 함량은 108.03 ㎍/mL로 알라닌, 글루탐산, γ-amino-N-butyric acid 및 o-phosphoethanolamine가 주된 성분으로 나타났으며, 무기성분은 K, Na, Mg, Ca과 같은 알칼리성 원소를 다량 함유한 것으로 나타났다. 아로니아 및 복분자 식초의 총 폴리페놀 및 안토시아닌의 함량은 각각 25.19, 80.71 mg/100 mL이었으며, DPPH, ABTS+ 라디칼 소거 활성, 환원력, β-carotene bleaching의 실험에서 복분자 식초는 양성 대조군과 유사한 높은 항산화 활성을 가지는 것으로 나타났다The present invention investigated the physicochemical component analysis and antioxidant effects of aronia and bokbunja vinegar prepared for the promotion of excessive production of aronia and bokbunja and the creation of new demand. The optimum conditions of alcohol fermentation were 15 ° Brix, temperature 30 ° C, and fermentation period 4 days. The optimum conditions for acetic acid fermentation were 6% initial alcohol content, 2% initial acidity, 30 ° C temperature and 9 days fermentation period. Free sugars of Aaronia and Bokbunja vinegar fermented to optimum conditions were identified as sucrose, fructose and glucose, and the main organic acids were acetic acid, malic acid, succinic acid, and malonic acid. In addition, the total content of free amino acids was 108.03 ㎍ / mL, and alanine, glutamic acid, γ-amino-N-butyric acid, and o-phosphoethanolamine were the main components.Inorganic components were alkaline elements such as K, Na, Mg, and Ca. It appeared to contain a large amount. O content of the total polyphenols and anthocyanins in Catalonia and bokbunja vinegar were 25.19, 80.71 mg / 100 mL was, DPPH, ABTS + radical scavenging activity, reducing power, experiments bokbunja vinegar in the β-carotene bleaching of high antioxidant similar to the positive control Has been shown to have activity

상기에서 살펴본 바와 같이, 본 발명의 아로니아 및 복분자 초산 발효는 초기 에탄올과 초산이 적정 농도 이상으로 함유시켜 초산균이 활성화되어 원활한 초산 발효가 일어나 유리당, 유기산 및 유리아미노산의 함량을 향상시킬 뿐만 아니라 본 발명에 의해 제조된 식초는 관능성이 향상되고 기능성 성분인 안토시아닌과 폴리페놀이 함유되어 있어 항산화 효과, 시력회복 효과, 혈관질환 예방 효과, 뇌질환의 예방과 치료 효과, 당뇨 예방 효과, 면역력 증진 효과, 다이어트 효과 등이 있으므로 건강 음료로 제공될 수 있다.As described above, the aronia and bokbunja acetic acid fermentation of the present invention contains an initial ethanol and acetic acid in an appropriate concentration or more, and the acetic acid bacteria are activated to facilitate acetic acid fermentation, thereby improving the content of free sugars, organic acids and free amino acids. The vinegar produced by the present invention is functionally enhanced and contains functional components anthocyanins and polyphenols, which have antioxidant effects, recovery of vision, prevention of vascular diseases, prevention and treatment of brain diseases, prevention of diabetes, enhancement of immunity Since there is a diet effect, etc. can be provided as a healthy drink.

이하, 본 발명에 따른 바람직한 실시예를 더욱 구체적으로 제시하여 상세하게 설명하기로 한다. 그러나, 이하의 실시예는 이 기술분야에서 통상적인 지식을 가진 자에게 본 발명이 충분히 이해되도록 제공되는 것으로서 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 상기와 같은 실시예들에 의하여 본 발명이 한정되는 것은 아니다. Hereinafter, a preferred embodiment according to the present invention will be described in more detail by presenting. However, the following embodiments are provided to those skilled in the art to fully understand the present invention, and may be modified in various forms, and the present invention is limited by the above embodiments. It is not.

<실험 재료><Experimental material>

본 발명에 사용된 아로니아는 전라북도 고창군에서 재배된 열매를 농가로부터 구입하여 냉동보관하면서 사용하였다. 복분자(Rubuscoreanus Miq)는 2008∼2009년 7월 전남 장흥군에서 수확한 것을 구입하여 사용하였으며, 분쇄기(CM-3000, Samyang Electronics Co, Ltd, Gunpo,Korea)로 파쇄한 후 착즙한 것을 원료로 사용하였다.Aaronia used in the present invention was used while frozen berries stored in the farm grown in Gochang-gun, Jeollabuk-do. Bokbunja (Rubuscoreanus Miq) was harvested and used in Jangheung-gun, Jeonnam in July 2008-2009, and was crushed with a grinder (CM-3000, Samyang Electronics Co, Ltd, Gunpo, Korea) and used as a raw material. .

<사용균주 및 배지조성><Used strain and medium composition>

본 발명에 사용된 알코올 발효 균주는 한국생명자원센터에서 분양받은 효모(ahromyces cerevisiae) (KCTC 7904)를 YPD 평판배지(YPD agar, Becton, Dickinson and Co, Le Pont de Claix, France)에 계대배양한 후, YM 액체배지(YM broth, Becton, Dickinson and Co, Le Pont de Claix, France)를 이용하여 24℃에서 24시간 정치 배양하여 사용하였다. 초산균은 한국출원 공개번호 10-2017-0031399의 기탁번호 KACC92089로 기탁된 아세토박터 파스테리아너누스(Acetobacter pasteurianus) 균주를 0.5% 효모 추출물, 0.5% 포도당, 1.0% 글리세린, 0.02% MgSO4 ·7H2O, 5.0% 에탄올, 1.0% 초산의 배지 조성으로 30℃에서 72시간 진탕 배양하여 사용하였다.The alcohol fermentation strain used in the present invention was subcultured to the YPD plate medium (YPD agar, Becton, Dickinson and Co, Le Pont de Claix, France) of the yeast (ahromyces cerevisiae) (KCTC 7904) distributed from Korea Life Resource Center Then, YM liquid medium (YM broth, Becton, Dickinson and Co, Le Pont de Claix, France) using a 24 hours stationary culture at 24 ℃ was used. Acetic acid bacterium was isolated from 0.5% yeast extract, 0.5% glucose, 1.0% glycerin, 0.02% MgSO4 · 7H2O, 5.0 from Acetobacter pasteurianus strain deposited with Korean Application Publication No. 10-2017-0031399, Accession No. KACC92089. It was used by shaking culture for 72 hours at 30 ℃ in a medium composition of% ethanol, 1.0% acetic acid.

<실시예 1> 알코올발효 및 초산 발효 1Example 1 Alcohol Fermentation and Acetic Acid Fermentation 1

아로니아 1 kg 당 복분자 143 g의 비율로 각 열매를 파쇄하여 착즙한 것에 100% 사과농축액(72 °Brix)으로 초기 당도를 15 °Brix로 조절한 후, 효모(Sarohmyces cerevisiae KCTC 7904)를 접종하여 30℃에서 48시간 정치 배양하여 주모를 제조하였다. 종초는 주모 제조시 동일 방법으로 제조된 아로니아 및 복분자 알코올 발효액을 여과한 후, 그 여액에 초산균주 아세토박터 파스테리아너누스(Acetobacter pasteurianus) 균주(기탁번호 KACC92089)를 접종하여 30℃에서 200 rpm으로 72시간 진탕 배양하여 사용하였다.After crushing each fruit at a rate of 143 g of bokbunja per 1 kg of aronia, juice was adjusted to 15 ° Brix with 100% apple concentrate (72 ° Brix), and then inoculated with yeast (Sarohmyces cerevisiae KCTC 7904). The stem cell was prepared by standing incubation for 48 hours at 30 degreeC. Seeds are filtered by fermentation of Aronia and Bokbunja alcohol fermentation broth prepared by the same method in preparation of seedlings, and then inoculated with acetic acid strain Acetobacter pasteurianus strain (Accession No. KACC92089) to the filtrate at 200 rpm at 30 ° C. 72 hours shaking culture was used.

파스테리아너누스(Acetobacter pasteurianus) 균주(기탁번호 KACC92089)는 대한민국출원 공개번호 10-2016-0082162에 기탁된 균주를 분양받아 이용하였다.Pasteuranus (Acetobacter pasteurianus) strain (Accession No. KACC92089) was used to receive the strain deposited in the Republic of Korea Application Publication No. 10-2016-0082162.

아로니아 및 복분자 착즙액 30%, 사과농축액(72 °Brix) 및 정제수로 초기 당도를 15 °Brix로 조절한 후, 주모 5% (v/v)를 접종하여 항온 배양기(HB-103MP, Hanbaek Scientific Co, Bucheon,Korea)를이용하여 6일간 배양시켰으며, 초기 당도(10∼20 °Brix)와 온도(20∼30℃)를 각각 조절한 후 알코올 및 당도의 변화를 조사하였다. 알코올 함량은 시료 100 mL를 취하여 증류한 다음 Gay-Lussac 주정환산표를 이용하여 15℃로 보정하여 측정하였다. 당도는 300 μL를 취하여 당도계(Atago Pocket PAL-3, Atago Co, Tokyo, Japan)를 사용하여 측정하였다.The initial sugar content was adjusted to 15 ° Brix with 30% Aronia and Bokbunja juice, apple concentrate (72 ° Brix) and purified water, and then inoculated with 5% (v / v) Jomo (HB-103MP, Hanbaek Scientific). Co, Bucheon, Korea) was incubated for 6 days, and after adjusting the initial sugar (10 ~ 20 ° Brix) and temperature (20 ~ 30 ℃) respectively, the changes in alcohol and sugar content were investigated. The alcohol content was measured by distilling 100 mL of the sample and calibrating to 15 ° C. using the Gay-Lussac alcohol conversion table. Sugar content was measured using a glucose meter (Atago Pocket PAL-3, Atago Co, Tokyo, Japan) taking 300 μL.

여과된 아로니아 및 복분자 알코올 발효액에 종초 10% (v/v)를 접종한 후 30℃에서 진탕 배양기(LSI-3106R, Daihan Labtech Co, Ltd, Namyang, Korea)를 이용하여 200 rpm으로 9일간 배양하였다. 초기 산도(1∼3%), 알코올 농도(4∼8%) 및 온도(25∼35℃)를 각각 조절한 후 초산 함량의 변화를 측정하였다. 총 산도는 6배로 희석한 시료 5 mL를 pH 8.3이 될 때까지 0.1 N NaOH용액으로 적정하여 아세트산의 양으로써 표시하였으며, pH는 시료 10 mL를 취하여 pH meter (pH-200L, Istek Co, Seoul, Korea)를 사용하여 측정하였다.Inoculate 10% (v / v) seed of filtered Aaronia and Bokbunja alcohol fermentation broth, and incubate at 200 rpm for 9 days using a shake incubator (LSI-3106R, Daihan Labtech Co, Ltd, Namyang, Korea) at 30 ° C. It was. The initial acidity (1-3%), alcohol concentration (4-8%) and temperature (25-35 ° C.) were adjusted, respectively, and then the change in acetic acid content was measured. The total acidity was expressed as the amount of acetic acid by titrating 5 mL of the sample diluted six-fold with 0.1 N NaOH solution until pH 8.3, and pH was measured by taking 10 mL of the sample and measuring the pH meter (pH-200L, Istek Co, Seoul, Korea).

<1-1> 알코올 발효 중 초기 당도의 영향<1-1> Effect of initial sugar content during alcohol fermentation

2단계 발효시 포도당 1 g에 대한 알코올 및 초산의 수득율은 이론상 각각 0.51 g과 0.67 g이라고 보고된 바 있어서, 아로니아 또는 복분자(6.0 °Brix) 자체만으로 총 산도 4.0% 이상의 식초 제조가 어렵다. 따라서 본 발명에서는 소비자의 선호도를 감안하여 사과농축액을 보당액으로 사용하여 당도를 높였다. 알코올 발효를 위한 최적 초기 당도를 설정하기 위해 아로니아 및 복분자 착즙액의 초기 당도를 조절하여 알코올 함량과 당도를 측정하였다. 초기 당도 10, 15 및 20°Brix에 대한 알코올 함량은 각각 4.7, 6.6, 및 8.4%로 당도가 높을수록 높게 나타났으며, 당도는 각각 3.7, 6.1, 및 7.9 °Brix로 당도가 높을수록 크게 감소했다. 따라서 본 발명에서는 알코올 함량 6.6%을 나타낸 15 °Brix를 최적 초기 당도로 선정하여 차후 실험을 진행하였다. Yields of alcohol and acetic acid for 1 g of glucose during two-stage fermentation were theoretically reported to be 0.51 g and 0.67 g, respectively, and it is difficult to produce vinegar with a total acidity of 4.0% or more by aronia or bokbunja (6.0 ° Brix) alone. Therefore, in the present invention, the sugar concentration was increased by using the apple concentrate as the supplemental sugar in consideration of the consumer's preference. In order to set the optimum initial sugar for alcohol fermentation, the initial sugar content of Aaronia and Bokbunja juice was adjusted to determine the alcohol content and sugar content. The alcohol content for initial sugar content of 10, 15, and 20 ° Brix was 4.7, 6.6, and 8.4%, respectively, and the higher the sugar content was, the higher the sugar content was: 3.7, 6.1, and 7.9 ° Brix, respectively. did. Therefore, in the present invention, 15 ° Brix having an alcohol content of 6.6% was selected as an optimal initial sugar and further experiments were performed.

<1-2> 알코올 발효 중 발효 온도의 영향<1-2> Effect of Fermentation Temperature During Alcohol Fermentation

알코올 발효를 위한 최적 온도를 설정하기 위해 아로니아 및 복분자 착즙액의 초기 온도를 조절하여 알코올 함량과 당도를 측정하였다. 초기 온도 20, 25 및 30℃에 대한 알코올 함량은 각각 5.8, 6.6 및 7.2%로 온도가 높을수록 증가하였으나, 35℃에서는 알코올 함량이 6.0%로 25℃와 30℃ 보다 감소하는 것으로 나타났다. 한편, 발효 후 당도는 온도가 높을수록 크게 감소했다. 온도가 상승함에 따라 대사속도가 빨라져 초기 발효 속도는 증가하지만 알코올 생산율은 낮아지므로 35℃ 이상에서는 오히려 알코올 함량이 감소하는 것을 알 수 있다. 따라서 아로니아 및 복분자 식초의 알코올 발효를 위한 최적 발효 온도는 30℃가 가장 이상적이라고 생각된다.In order to set the optimum temperature for alcohol fermentation, the initial temperature of the Aaronia and Bokbunja juice was adjusted to determine the alcohol content and sugar content. The alcohol content for the initial temperatures of 20, 25 and 30 ° C increased with higher temperatures of 5.8, 6.6 and 7.2%, respectively, but at 35 ° C it was found that the alcohol content was lower than 25 ° C and 30 ° C to 6.0%. On the other hand, the sugar content after fermentation decreased significantly with higher temperature. As the temperature increases, the metabolic rate increases, and thus the initial fermentation rate increases, but the alcohol production rate decreases. Therefore, the optimum fermentation temperature for alcohol fermentation of Aaronia and Bokbunja vinegar is considered to be ideal.

<1-3> 알코올 발효 중 발효 시간의 영향<1-3> Effect of Fermentation Time During Alcohol Fermentation

최적 알코올발효 시간 설정을 위하여 사과농축액(72°Brix)으로 초기 당도를 15 °Brix로 조절한 후, 주모 5%(v/v)를 접종하여 30℃에서 6일간 정치 배양시키면서 24시간 간격으로 알코올 함량변화 및 당도 변화를 측정한 결과, 알코올 함량은 발효 2일째 급격히 증가하여 4.6%로 나타났으며 4일째부터는 6.6%로 더 이상 증가하지 않았다. 당도는 2일째 7.3 °Brix로 급격하게 당도가 감소하였으며, 4일째부터는 6.2 °Brix로 더 이상 감소하지 않았다.In order to set the optimum alcohol fermentation time, the initial sugar content was adjusted to 15 ° Brix with apple concentrate (72 ° Brix), and 5% (v / v) seedlings were inoculated to incubate at 30 ° C for 6 days with alcohol. As a result of measuring the change in content and the change in sugar content, the alcohol content increased sharply on the 2nd day of fermentation and appeared as 4.6%. From the 4th day, it did not increase to 6.6%. The sugar content decreased sharply to 7.3 ° Brix on day 2 and no longer decreased to 6.2 ° Brix on day 4.

<1-4> 초산발효 중 초기 산도의 영향<1-4> Effect of Initial Acidity During Acetic Acid Fermentation

초기 산도가 초산 발효시 초산 생성량에 미치는 영향을 확인한 결과, 초기 산도 1%와 1.5%에서 초산 생성량이 가장 낮게 나타났으며, 2%에서는 발효 9일 째에 초산 생성량이 6.96%로 가장 높게 나타났다. 그러나 초기 산도 2.5%와 3%에서는 4일째부터 유도기가 길어져 2%보다 산 생성능이 저하되는 경향을 나타내었다. 따라서 초산발효를 진행하기 위한 최적 초기 산도는 2%임을 알 수 있었다.As a result of confirming the effect of the initial acidity on acetic acid production during the fermentation of acetic acid, acetic acid production was the lowest at 1% and 1.5% of the initial acidity, and the highest acetic acid production was 6.96% at 9 days of fermentation. However, in the initial acidity of 2.5% and 3%, the induction period was longer from day 4, resulting in a lower acid production capacity than 2%. Therefore, the optimum initial acidity for acetic acid fermentation was found to be 2%.

<1-5> 초산발효 중 초기 알코올 농도의 영향<1-5> Effect of Initial Alcohol Concentration during Acetic Acid Fermentation

일반적으로 초산 발효는 알코올 함량에 큰 영향을 받기 때문에 초산 발효에 요구되는 알코올의 최적 농도 설정은 매우 중요하다. 알코올 함량 4%에서는 5일 째에 산도 값이 4.4%로 나타났으나 이에는 더 이상 증가하지 않았으며, 6%일 때는 2일째부터 산도가 증가하여 9일 째에 6.96%로 가장 높게 나타났다. 한편, 알코올 함량 8%에 서는 알코올 함량 6%보다 초산 발효 속도가 지연되면서 9일째에 산도 값이 6.12%로 나타났다. 이러한 결과는 초기 알코올 농도가 6%일 때 가장 높은 수율을 얻음을 확인하였다. 초기 알코올 농도가 너무 높으면 초산 생성이 저해됨을 알 수 있다. 따라서 아로니아 및 복분자 식초의 초산 발효 최적 알코올 농도는 6%임을 확인할 수 있었다.Since acetic acid fermentation is generally strongly influenced by the alcohol content, it is very important to set the optimal concentration of alcohol required for acetic acid fermentation. In the alcohol content of 4%, the acidity value was 4.4% on the 5th day, but it did not increase any more. At 6%, the acidity increased from the 2nd day to 6.96% on the 9th day. On the other hand, in the alcohol content of 8%, the fermentation rate of acetic acid was delayed than the alcohol content of 6%, the acidity value was 6.12% at 9 days. These results confirmed that the highest yield was obtained when the initial alcohol concentration was 6%. If the initial alcohol concentration is too high it can be seen that the production of acetic acid is inhibited. Therefore, it was confirmed that the optimal alcohol concentration of acetic acid fermentation of aronia and bokbunja vinegar is 6%.

<1-6> 초산발효 중 초기 온도의 영향<1-6> Effect of initial temperature during acetic acid fermentation

초산 발효 중 초기 온도가 초산 생성량에 미치는 영향을 확인한 결과, 초기 온도 25℃에서 다른 온도보다 낮은 초산 함량을 나타냈으며, 30℃에서 2일째부터 증가하기 시작하여 가장 높은 초산 함량을 나타내었다. 한편, 35℃에서는 1일째부터 초산 함량이 높아지다가 6일째 이후부터는 30℃에서 보다 낮아졌다. 25℃에서 초산균 증식시간이 길어지고 35℃이상 에서 알코올의 손실량이 커져 초산의 수율이 떨어진 것으로 판단된다. 따라서 아로니아 및 복분자 식초의 최적 초산 발효 온도는 30℃가 가장 이상적이라고 판단된다.As a result of checking the effect of the initial temperature on the amount of acetic acid produced during the fermentation of acetic acid, the acetic acid content was lower than the other temperature at the initial temperature of 25 ℃, and started to increase from 30 days at 30 ℃ showed the highest acetic acid content. On the other hand, acetic acid content increased from day 1 at 35 ° C. and lowered from 30 ° C. after day 6. Acetic acid proliferation time was longer at 25 ℃ and alcohol loss was increased at 35 ℃ or higher. Therefore, the optimum acetic acid fermentation temperature of Aaronia and Bokbunja vinegar is considered to be ideal.

<실험예 1> 유리당 및 유기산 분석Experimental Example 1 Analysis of Free Sugar and Organic Acid

유리당 및 유기산 분석은 시료액을 원심분리 시킨 후 Sep-pak C18 cartridge (Water Associate, Maple Street/ Milford, Ma 01757, USA)로 통과시키고 0.45 ㎛ membrane filter로 여과하여 색소 및 단백질 성분을 제거한 다음 HPLC로 분석하였다. 유리당 분석 컬럼은 Zorbax Carbohydrate Analysis column (4.6 × 150 mm, 5 μm, Agilent Technologies Inc., USA), 이동상은 acetonitrile : H2O (80:20)를 사용하였고, flow rate는 1.0 mL/min, 주입양은 10 μL, 탐지기는 1200 series ELSD detector를 사용하였다. 유기산 분석 컬럼은 Inertsil ODS-3V (4.6 × 250 mm, 5 ㎛, GL Sciences Inc., Tokyo, Japan), 이동상은 0.1 M ammonium dihydrogenphosphate와 phosphoric acid (pH 2.5)를 사용하였고, flow rate는 1.0 mL/min, 주입양을 20 μL, 탐지기는 UV(210nm) detector를 사용하였다.For free sugar and organic acid analysis, the sample solution was centrifuged and passed through a Sep-pak C18 cartridge (Water Associate, Maple Street / Milford, Ma 01757, USA), filtered through a 0.45 μm membrane filter to remove pigment and protein components, followed by HPLC. Analyzed. As the free sugar analysis column, Zorbax Carbohydrate Analysis column (4.6 × 150 mm, 5 μm, Agilent Technologies Inc., USA), mobile phase used acetonitrile: H2O (80:20), flow rate 1.0 mL / min, injection volume 10 μL, detector was used 1200 series ELSD detector. Inertsil ODS-3V (4.6 × 250 mm, 5 μm, GL Sciences Inc., Tokyo, Japan) was used for the organic acid analysis column, and 0.1 M ammonium dihydrogenphosphate and phosphoric acid (pH 2.5) were used for the mobile phase. min, injection amount 20 μL, the detector was a UV (210nm) detector.

최적 조건으로 발효된 아로니아 및 복분자 식초의 유리당을 측정한 결과, 자당, 과당 및 포도당으로 나타났으며, 그 함량은 각각 952.90, 491.01 및 386.62 mg%이었다. 이러한 결과는 복분자 착즙액의 알코올 발효시 유리당이 발효에 의해 소실되어 미량으로 나타났을 것으로 판단되며, 본 발명에서 보당액으로 사용된 사과 농축액이 복분자 식초의 유리당 함량을 높이는데 기여한 것으로 생각된다.Free sugars of Aaronia and Bokbunja vinegar fermented at optimum conditions were found to be sucrose, fructose and glucose, and their contents were 952.90, 491.01 and 386.62 mg%, respectively. These results indicate that the free sugars were lost by fermentation during alcohol fermentation of the bokbunja juice, and it is believed that the apple concentrate was used as the sugar solution in the present invention to contribute to increasing the free sugar content of bokbunja vinegar.

복분자 식초의 유기산을 측정한 결과, 복분자 식초의 주요 유기산은 아세트산이었으며, 그 함량은 5,321.71 mg%로 나타났다. 이어서 말산, 숙신산 및 말로닉산이 각각 348.26, 140.91 및 105.81 mg% 로 높았으며, 그 외에는 미량으로 나타났다. 본 발명에서 보당액으로 사용된 사과농축액이 아로니아 및 복분자 식초의 유기산 함량을 높이는데 기여한 것으로 생각된다.As a result of measuring the organic acid of Bokbunja vinegar, the main organic acid of Bokbunja vinegar was acetic acid and the content was 5,321.71 mg%. The malic acid, succinic acid and malonic acid were then as high as 348.26, 140.91 and 105.81 mg%, respectively, with minor traces. It is thought that the apple concentrate used as the sugar content in the present invention contributed to increasing the organic acid content of aronia and bokbunja vinegar.

<실험예 2> 유리아미노산 분석Experimental Example 2 Analysis of Free Amino Acids

아로니아 및 복분자 식초 10 mL에 25 mg sulfosalicylicacid(Sigma-Aldrich, Co, ST Louis, MO, USA)를 첨가하여 4℃에서 4시간 동안 방치시킨 후 원심분리하여 단백질 등을 제거하고, 상징액을 0.22 ㎛ membrane filter로 여과하여 얻은 여액을 아미노산 자동분석기(Biochrom 30, Pharmacia Biotech, Stockholm, Sweden)를 이용하여 분석하였다. 컬럼은 Ultrapac Ⅱ cation exchange resin (11±2 ㎛, 220 mm)를 사용하였고, 0.2 N Na-citrate buffer용액(pH3.20, 4.25 및 10.00)의 flow rate는 25 mL/hr, ninhydrin 용액의 flow rate는 20 mL/hr이며, pH 2.80(32℃ 02:00) ~ pH 3.00(32℃, 29:15) ~ pH 3.15(40℃, 16:00) ~ pH 3.15(54℃, 01:30) ~ pH 3.50(74℃, 25:30) ~ pH 3.55(74℃ 37:00)으로 분석하였다.25 mg sulfosalicylicacid (Sigma-Aldrich, Co, ST Louis, MO, USA) was added to 10 mL of aronia and bokbunja vinegar, left at 4 ° C. for 4 hours, centrifuged to remove proteins, and the supernatant was 0.22 μm. The filtrate obtained by filtration with a membrane filter was analyzed using an amino acid automatic analyzer (Biochrom 30, Pharmacia Biotech, Stockholm, Sweden). Ultrapac II cation exchange resin (11 ± 2 μm, 220 mm) was used, and the flow rate of 0.2 N Na-citrate buffer solution (pH3.20, 4.25 and 10.00) was 25 mL / hr and the flow rate of ninhydrin solution. Is 20 mL / hr, pH 2.80 (32 ° C. 02:00) to pH 3.00 (32 ° C., 29:15) to pH 3.15 (40 ° C., 16:00) to pH 3.15 (54 ° C., 01:30) pH 3.50 (74 ° C., 25:30) to pH 3.55 (74 ° C. 37:00) were analyzed.

아로니아 및 복분자 식초의 유리아미노산을 분석한 결과, 유리아미노산 성분은 23종으로 총 함량은 104.33 ㎍/mL로 나타났다. 주요 아미노산은 알라닌, 글루탐산, γ-amino-N-butyric acid 및 o-phosphoethanolamine으로 나타났으며, 그 외에는 미량으로 나타났다. 본 발명에서 제조한 아로니아 및 복분자 식초의 유리아미노산은 발효 중 감소한 것을 확인 할 수 있었다. 한편, 다른 과실 식초와 비교할 때 식초마다 유리아미노산의 함량 및 구성성분의 차이가 있을 수 있는데, 이러한 차이는 초산균의 종류, 원료, 발효방법 및 재료 배합비의 차이 등에 의한 것으로 생각된다.As a result of analyzing free amino acids of Aaronia and Bokbunja vinegar, 23 free amino acids were found and the total content was 104.33 ㎍ / mL. The major amino acids were alanine, glutamic acid, γ-amino-N-butyric acid, and o-phosphoethanolamine. The free amino acid of aronia and bokbunja vinegar prepared in the present invention was confirmed to decrease during fermentation. On the other hand, compared with other fruit vinegar, there may be a difference in the content and components of the free amino acid for each vinegar, this difference is considered to be due to the difference in the type of acetic acid bacteria, raw materials, fermentation method and material blending ratio.

<실험예 3> 무기성분 분석Experimental Example 3 Inorganic Component Analysis

식초 용액 100 mL에 분해제(HClO4 : H2SO4 : H2O2 = 9 : 2 : 2, v/v) 25 mL를 가하여 낮은 온도에서 서서히 가열하여 완전하게 분해한 후 여과시켜 100 mL로 정용하였다. 이를 시료로 하여 Inductively coupled plasma (Aton scan 25, Thermo Jarrell Ash Co, Franklin, MA, USA)를 사용하여 분석하였다. 분석조건 중 RF power는 1,300 W이며, analysis pumpflowrate는 1.5 mL/min으로 하였고, gas flows는 plasma : 15, auxiliary:0.2, nebulizer : 0.8 L/min으로 하여 분석하였다.To 100 mL of vinegar solution, add 25 mL of the disintegrant (HClO 4 : H 2 SO 4 : H 2 O 2 = 9: 2: 2, v / v), heat slowly at low temperature, completely decompose, and filter. It was applied as. This sample was analyzed using an inductively coupled plasma (Aton scan 25, Thermo Jarrell Ash Co, Franklin, MA, USA). RF power was 1,300 W, analysis pump flow rate was 1.5 mL / min, and gas flows were analyzed as plasma: 15, auxiliary: 0.2, nebulizer: 0.8 L / min.

아로니아 및 복분자 식초의 무기성분을 측정한 결과, 무기성분은 K가 1,686.25 ppm으로 가장 높은 함량을 나타냈으며, 그 외에는 Na, Mg, Ca 및 Fe이 각각 172.50, 69.33, 65.91 및 0.19 ppm으로 나타났다. 한편, 초산과 작용하여 색을 변색시켜 식초가공식품의 가치를 저하시킬 가능성이 있다고 보고된 Fe는 미량으로 나타났다.The inorganic components of Aaronia and Bokbunja vinegar were measured to have the highest content of 1,686.25 ppm in K. Other than that, Na, Mg, Ca and Fe were 172.50, 69.33, 65.91 and 0.19 ppm, respectively. On the other hand, the amount of Fe reported to have a possibility of lowering the value of vinegar processed food by discoloring by working with acetic acid.

<실험예 4> 총 폴리페놀 및 총 안토시아닌 함량 측정Experimental Example 4 Measurement of Total Polyphenol and Total Anthocyanin Content

총 폴리페놀 함량은 시료 0.1 mL에 증류수 8.4 mL과 2 N Folin-Ciocalteu 시약(Sigma-Aldrich, Co, St Louis, MO, USA) 0.5 mL를 첨가하고 20% Na2CO3 (Junsei Chemical Co, Ltd, Japan) 1 mL를 가하여 2시간 방치하였다. 반응물의 흡광도는 725 nm에서 spectrophotometer (U-1800, Hitachi Co, Ltd, Tokyo, Japan)를 사용하여 측정하였고, gallic acid (Sigma-Aldrich, Co, St Louis, MO, USA)를 이용한 표준곡선으로 양을 환산하였다.Total polyphenol content was added to 0.1 mL of sample by adding 8.4 mL of distilled water and 0.5 mL of 2N Folin-Ciocalteu reagent (Sigma-Aldrich, Co, St Louis, MO, USA) and adding 20% Na 2 CO 3 (Junsei Chemical Co, Ltd , Japan) 1 mL was added and left for 2 hours. Absorbance of the reactants was measured using a spectrophotometer (U-1800, Hitachi Co, Ltd, Tokyo, Japan) at 725 nm, and the standard curve using gallic acid (Sigma-Aldrich, Co, St Louis, MO, USA) Was converted.

총 안토시아닌 함량은 pH-differential method를 사용하여 측정하였다. 안토시아닌은 pH의 변화에 따라 가역적인 구조적 변형을 일으켜 유색의 oxonium 형태는 pH 1.0에서, 무색의 hemiketal 형태는 pH 4.5에서 우세하며, pH-differential method는 이 반응에 기초를 두었다. 시료를 0.025 M potassium chloride (Junsei Chemical Co, Ltd, Tokyo, Japan) buffer(pH1.0)와 0.4 M sodium acetate (Sigma-Aldrich, Co, St Louis, MO, USA) buffer(pH4.5)에 각각 혼합하여 반응액의 흡광도 값을 510 nm 및 700 nm에서 측정하였다. 아로니아 및 복분자 식초의 총 안토시아닌 함량(mg/100 mL)은 cyanidin-3-glucoside의 몰흡광계수(ε=26,900 M-1cm-1)를 이용하여 다음의 식에 따라 산출하였다.Total anthocyanin content was measured using the pH-differential method. Anthocyanins undergo reversible structural modifications with changes in pH, so that the colored oxonium forms predominate at pH 1.0, the colorless hemiketal forms at pH 4.5, and the pH-differential method is based on this reaction. Samples were prepared in 0.025 M potassium chloride (Junsei Chemical Co, Ltd, Tokyo, Japan) buffer (pH 1.0) and 0.4 M sodium acetate (Sigma-Aldrich, Co, St Louis, MO, USA) buffer (pH 4.5), respectively. The absorbance values of the reaction solution were measured at 510 nm and 700 nm by mixing. The total anthocyanin content (mg / 100 mL) of Aaronia and Bokbunja vinegar was calculated using the molar extinction coefficient (ε = 26,900 M -1 cm -1 ) of cyanidin-3-glucoside according to the following equation.

Figure pat00001
Figure pat00001

A (Absorbance)=(A510 nm-A700 nm)pH 1.0 - (A510 nm-A700 nm)pH 4.5,A (Absorbance) = (A 510 nm -A 700 nm ) pH 1.0-(A 510 nm -A 700 nm ) pH 4.5,

MW (Molecular weight of cyanidine-3-glucoside) = 449.2MW (Molecular weight of cyanidine-3-glucoside) = 449.2

ε(cyanidin.3-glucoside molar absorbance) = 26,900 M-1cm-1,ε (cyanidin. 3-glucoside molar absorbance) = 26,900 M -1 cm -1 ,

V = final volume of sampleV = final volume of sample

폴리페놀과 안토시아닌은 활성산소에 노출되어 손상되는 DNA의 보호나 세포 구성 단백질 및 효소를 보호하는 역할을 하여 항산화능에 크게 기여하는 물질이다. 아로니아 및 복분자 식초의 총 폴리페놀 및 안토시아닌 함량을 측정한 결과, 총 폴리페놀 함량은 25.19 mg/100 mL로 나타났고, 총 안토시아닌 함량은 80.71 mg/100 mL로 나타났다. Polyphenols and anthocyanins are substances that contribute to antioxidant activity by protecting DNA that is exposed to free radicals and protecting cellular proteins and enzymes. The total polyphenol and anthocyanin contents of Aaronia and Bokbunja vinegar were measured. The total polyphenol content was 25.19 mg / 100 mL and the total anthocyanin content was 80.71 mg / 100 mL.

<실험예 5> 항산화 효과 측정Experimental Example 5 Antioxidant Effect Measurement

시료에 대한 DPPH 라디칼 소거능은 a,a'-diphenyl-β-picrylhydrazine (DPPH)의 환원성을 이용하여 540 nm에서 UV/Vis-spectrophotometer (U-1800, Hitachi Co, Ltd, Tokyo, Japan)로 측정하였다. 대조구로 사용한butylatedhydroxytoluene (BHT, Sigma-Aldrich, Co, St Louis, MO, USA)와 α-tocopherol (Sigma-Aldrich, Co, St Louis, MO, USA) 농도는 0.1%가 되게 조제하였으며, 시료 1 mL와 5×10-4 M DPPH 용액 3 mL를 5초 동안 혼합하고 이를 암실에서 30분간 반응시킨 후 흡광도를 측정하였다. 대조구는 시료대신 에탄올 1 mL를 첨가하였으며, DPPH 라디칼 소거능을 대조구에 대한 흡광도의 감소 비율로 나타내었다.DPPH radical scavenging ability of the samples was measured by UV / Vis-spectrophotometer (U-1800, Hitachi Co, Ltd, Tokyo, Japan) at 540 nm using the reducibility of a, a'-diphenyl-β-picrylhydrazine (DPPH). . Butylated hydroxytoluene (BHT, Sigma-Aldrich, Co, St Louis, MO, USA) and α-tocopherol (Sigma-Aldrich, Co, St Louis, MO, USA) used as controls were prepared to a concentration of 0.1% and sample 1 mL And 3 mL of 5 × 10 −4 M DPPH solution were mixed for 5 seconds and reacted in the dark for 30 minutes, and then absorbance was measured. As a control, 1 mL of ethanol was added instead of the sample, and DPPH radical scavenging ability was expressed as a decrease in absorbance for the control.

ABTS+ radical 소거활성은 7.0 mM 2,2'-azino-bis (3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonicacid) (ABTS, Sigma-Aldrich, Co, St Louis, MO, USA)와 2.45 mM potassium persulfate를 혼합한 후 23℃의 암소에서 16시간 동안 반응시켰다. ABTS+ 용액의 농도는 734 nm에서 흡광도가 0.700±0.005 정도가 되도록 조정하였다. 시료 0.1 mL와 ABTS+ 용액 3.9 mL를 혼합한 후 23℃에서 6분간 응시킨 후 734 nm에서 흡광도를 측정하였다.ABTS + radical scavenging activity was obtained by mixing 7.0 mM 2,2'-azino-bis (3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonicacid) (ABTS, Sigma-Aldrich, Co, St Louis, MO, USA) with 2.45 mM potassium persulfate. The reaction was carried out in the dark at 23 ° C. for 16 hours. The concentration of the ABTS + solution was adjusted so that the absorbance was about 0.700 ± 0.005 at 734 nm. 0.1 mL of the sample and 3.9 mL of ABTS + solution were mixed and allowed to react at 23 ° C. for 6 minutes, and then absorbance was measured at 734 nm.

시료들의 환원력은 시료 2.5 mL에 0.2 M phosphate 완충용액 (pH 6.6) 2.5 mL과 potassium ferricyanide (1%, w/v) 2.5 mL를 첨가하여 혼합한 후 50℃를 유지하면서 30분간 반응시켰다. 반응액에 trichloroacetic acid (10%, w/v) 2.5 mL를 첨가하여 섞은 후 3,000 rpm으로 10분간 원심분리하였다. 그 상징액의 1 mL를 취해 시험관에 담고 증류수 1 mL와 FeCl3(0.1%, w/v) 0.2 mL를 첨가하여 흡광도 700 nm에서 환원력을 측정하였다.The reducing power of the samples was mixed by adding 2.5 mL of 0.2 M phosphate buffer (pH 6.6) and 2.5 mL of potassium ferricyanide (1%, w / v) to 2.5 mL of the sample, and reacted for 30 minutes while maintaining 50 ° C. 2.5 mL of trichloroacetic acid (10%, w / v) was added to the reaction mixture, followed by mixing for 10 minutes at 3,000 rpm. 1 mL of the supernatant was taken into a test tube, and 1 mL of distilled water and 0.2 mL of FeCl 3 (0.1%, w / v) were added thereto, and the reducing power was measured at an absorbance of 700 nm.

β-Carotene linoleate systems을 이용한 항산화 효과의 측정은 클로로포름 10 mL에 β-carotene (Sigma-Aldrich, Co, St Louis, MO, USA) 1 mg을 용해하여 β-carotene 용액을 만든 후 β-carotene 용액 10 mL를 100 mL 둥근 플라스크에 취하고, linoleic acid (Sigma-Aldrich, Co, St Louis, MO, USA) 20 mg 및 tween 40(Sigma-Aldrich, Co, St Louis, MO, USA) 200 mg을 첨가하여 40℃ 진공회전 농축기로 클로로포름을 제거한 후 증류수 100 mL를 첨가한 다음 진탕하여 에멀전 용액을 제조하였다. 이 에멀전 용액 0.2 mL에 시료 첨가군, 에탄올(대조구) 및 양성 대조군인 0.1% α-tocopherol과 0.1% BHT 용액 8 μL를 첨가하여 50℃ 배양기(HB-103MP, Hanbaek Scientific Co, Bucheon,Korea)에서 저장하였다. 저장기간 중 0분에서 180분 동안 30분 간격으로 490 nm에서 흡광도를 측정하였다.Anti-oxidant effect was measured using β-Carotene linoleate systems to prepare β-carotene solution by dissolving 1 mg of β-carotene (Sigma-Aldrich, Co, St Louis, MO, USA) in 10 mL of chloroform and then β-carotene solution 10 Take the mL into a 100 mL round flask, add 20 mg of linoleic acid (Sigma-Aldrich, Co, St Louis, MO, USA) and 200 mg of tween 40 (Sigma-Aldrich, Co, St Louis, MO, USA) to add 40 After the chloroform was removed with a vacuum rotary concentrator, 100 mL of distilled water was added, followed by shaking to prepare an emulsion solution. 0.2 mL of this emulsion solution was added to the sample addition group, ethanol (control) and 8 μL of 0.1% α-tocopherol as a positive control and 0.1% BHT solution in a 50 ° C incubator (HB-103MP, Hanbaek Scientific Co, Bucheon, Korea). Stored. Absorbance was measured at 490 nm at 30 minute intervals for 0 to 180 minutes during storage.

제조한 아로니아 및 복분자 식초의 항산화 활성을 DPPH 및 ABTS+ 라디칼 소거활성, 환원력 및 β-carotene bleaching 측정법으로 확인하였다. DPPH 라디칼 소거활성에 사용되는 DPPH는 비교적 안정한 자유라디칼로 항산화제, 방향족 아민류 등에 의해 환원되어 탈색되는데, 이것은 다양한 천연소재로부터 항산화 물질을 검색하는데 많이 이용되고 있다. ABTS+ 라디칼 소거활성은 DPPH 라디칼 소거활성과 함께 항산화 활성을 스크리닝하는데 많이 사용되고 있다. 아로니아 및 복분자 식초의 DPPH 및 ABTS+ 라디칼 소거활성은 각각 65%와 95%로 높게 나타났으며, 특히 ABTS+ 라디칼 소거활성이 DPPH 라디칼 소거활성보다 높게 나타났다. 이러한 차이는 자유라디칼인 DPPH와 양이온 라디칼인 ABTS+ 에 결합하는 페놀물질의 종류가 다르기 때문이라고 생각된다. 총 폴리페놀 및 플라보노이드 등의 함량이 우수할수록 DPPH 및 ABTS+ 라디칼 활성이 우수하다고 알려져 있으므로, 아로니아 및 복분자 식초의 높은 항산화 활성은 폴리페놀 및 안토시아닌과 같은 항산화 성분들의 작용에 의한 것으로 사료된다.The antioxidant activity of the prepared aronia and bokbunja vinegar was confirmed by DPPH and ABTS + radical scavenging activity, reducing power and β-carotene bleaching. DPPH, which is used for DPPH radical scavenging activity, is a relatively stable free radical which is reduced and decolorized by antioxidants, aromatic amines, and the like, which is widely used to search for antioxidants from various natural materials. ABTS + radical scavenging activity is widely used to screen antioxidant activity along with DPPH radical scavenging activity. Oh DPPH and ABTS + radical scavenging activity of Catalonia and bokbunja vinegar is higher than 65% and showed as high as 95%, particularly ABTS + radical scavenging activity of DPPH radical scavenging activity, respectively. This difference is thought to be due to the different kinds of phenolic substances that bind to free radical DPPH and cationic radical ABTS +. It is known that the higher the content of total polyphenols and flavonoids, the better the DPPH and ABTS + radical activity. Therefore, the high antioxidant activity of aronia and bokbunja vinegar may be due to the action of antioxidant components such as polyphenols and anthocyanins.

환원력은 potassium ferricyanide reduction method을 사용한 화합물의 환원력을 평가하는 것으로 환원의 항산화 반응은 수소 원자를 제공함으로써 자유 라디칼 연쇄를 변환시키며, 과산화의 전구물질과 반응하여 과산화 형성을 방해한다. 환원력에서의 흡광도 수치는 그자체가 시료의 환원력을 나타내며, 높은 환원력을 가지는 물질은 흡광도 수치가 높게 나타난다. 아로니아 및 복분자 식초의 환원력은 양성 대조군인 0.1% BHT 및 α-tocopherol과 유사하게 높은 활성을 나타내었다.Reducing power evaluates the reducing power of compounds using the potassium ferricyanide reduction method. Antioxidative reactions of the reduction convert free radical chains by providing hydrogen atoms and react with precursors of peroxidation to prevent peroxidation formation. The absorbance value in the reducing power itself indicates the reducing power of the sample, and the material having the high reducing power shows a high absorbance value. The reducing power of Aaronia and Bokbunja vinegar showed high activity similar to the positive control 0.1% BHT and α-tocopherol.

β-Carotene bleaching assay는 β-carotene이 lipid peroxyl radical의 첨가에 의하여 탈색화 되는 것을 측정한 방법이다. 에탄올을 첨가한 무첨가군에서는 시간이 지남에 따라 흡광도의 감소값이 크게 나타난 반면, 0.1% BHT와 0.1% α-tocopherol이 처리된 양성 대조군은 처리시간 동안에 흡광도의 변화가 거의 없었다. 한편, 아로니아 및 복분자 식초군은 양성 대조군과 유사한 경향을 나타내어 lipid peroxyl 라디칼 소거능이 높음을 확인할 수 있었다.The β-Carotene bleaching assay is a measure of the decolorization of β-carotene by the addition of lipid peroxyl radicals. In the ethanol-added group, the absorbance decreased significantly with time, whereas the positive control treated with 0.1% BHT and 0.1% α-tocopherol showed little change in absorbance during the treatment time. On the other hand, the Aaronia and Bokbunja vinegar groups showed similar trends with the positive control group, indicating that lipid peroxyl radical scavenging ability was high.

<실시예 2> 알코올 발효 및 초산 발효 2Example 2 Alcohol Fermentation and Acetic Acid Fermentation 2

아로니아 1 kg 당 복분자 100 g의 비율로 각 열매를 파쇄하여 착즙한 점을 제외하고는 실시예 1과 동일하게 알코올 발효와 초산발효를 수행하였다.Alcohol fermentation and acetic acid fermentation were performed in the same manner as in Example 1 except that each fruit was crushed and juiced at a ratio of 100 g of bokbunja per 1 kg of aronia.

<실시예 3> 알코올 발효 및 초산 발효 3Example 3 Alcohol Fermentation and Acetic Acid Fermentation 3

아로니아 1 kg 당 복분자 200 g의 비율로 각 열매를 파쇄하여 착즙한 점을 제외하고는 실시예 1과 동일하게 알코올 발효와 초산발효를 수행하였다.Alcohol fermentation and acetic acid fermentation were carried out in the same manner as in Example 1 except that each fruit was crushed and juiced at a rate of 200 g per 1 kg of aronia.

<비교예 1> 알코올 발효 및 초산 발효Comparative Example 1 Alcohol Fermentation and Acetic Acid Fermentation

상기 실시예 1의 에탄올 발효와 초산발효에 사용된 재료에서 복분자 착즙액 결여된 아로니아 착즙액만을 이용한 점을 제외하고는 동일한 공정으로 아로니아 식초를 제조하였다.Aronia vinegar was prepared in the same process except that only Aronia juice lacking bokbunja juice was used in the ethanol fermentation and acetic acid fermentation of Example 1.

<적용예 1 내지 4> 아로니아 및 복분자 식초 음료<Application Examples 1 to 4> Aaronia and Bokbunja Vinegar Drinks

본 발명에서 얻은 아로니아 및 복분자 식초를 이용하여 다음 표 1과 같이 식초음료를 만들고자 하였다. 정제수 100중량부에 대하여 아로니아 및 복분자 식초 1∼5중량부(실시예 1 내지 3) 또는 아로니아 식초(비교예 1), 비타민은 비타민 C, 비타민 B 복합체, 비오틴, 폴산, 콜린, 이노시톨 중 에서 선택된 어느하나 이상으로 0.01∼0.1중량부, 과일농축액은 사과농축액, 배농축액, 키위농축액, 바나나농축액, 파인애플농축액, 자두농축액, 살구농축액, 복숭아농축액, 멜론농축액, 망고농축액, 포도농축액, 블루베리농축액, 오렌지농축액, 매실농축액, 레몬농축액 중에서 선택된 어느 하나 이상으로 1∼10중량부, 당류는 설탕, 포도당, 과당, 엿류, 이소말토올리고당, 프락토올리고당, 키토올리고당, 자일로올리고당, 꿀, 프로폴리스, 트레할로스, 솔비톨, 자일리톨, 만니톨, 이노시톨, 에리스리톨 중에서 어느 하나 이상 1∼10중량부, 기능성 성분의 추출물로 옥수수수염, 마가목, 감마오리자놀, 스쿠알렌, 스피룰리나, 클로렐라, 구아바잎, 녹차, 식이섬유, 히알루론산나트륨, N-아세틸 글루코사민, 이눌린, 차전자피 및 카제인가수분해물의 군으로부터 선택된 어느 하나 이상 0.5∼3중량부 및 잔부의 정제수를 혼합하고 여과 및 고온순간 살균하여 밀봉하였다.Using aronia and bokbunja vinegar obtained in the present invention was to make a vinegar drink as shown in Table 1. 1 to 5 parts by weight of Aaronia and Bokbunja vinegar (Examples 1 to 3) or Aaronia vinegar (Comparative Example 1), and vitamins in vitamin C, vitamin B complex, biotin, folic acid, choline, and inositol based on 100 parts by weight of purified water. 0.01 to 0.1 parts by weight of any one or more selected from, fruit concentrate is apple concentrate, pear concentrate, kiwi concentrate, banana concentrate, pineapple concentrate, plum concentrate, apricot concentrate, peach concentrate, melon concentrate, mango concentrate, grape concentrate, blueberry 1-10 parts by weight of any one or more selected from concentrates, orange concentrates, plum concentrates and lemon concentrates, sugars are sugar, glucose, fructose, malt, isomaltooligosaccharides, fructooligosaccharides, chitooligosaccharides, xyloligosaccharides, honey, pro 1-10 parts by weight of any one or more of polypolis, trehalose, sorbitol, xylitol, mannitol, inositol, erythritol, corn beard as an extract of the functional ingredient, 0.5-3 parts by weight and the remainder of at least one selected from the group of rowan, gamma-orizanol, squalene, spirulina, chlorella, guava leaf, green tea, dietary fiber, sodium hyaluronate, N-acetyl glucosamine, inulin, chaff blood and casein hydrolyzate Purified water was mixed and sealed by filtration and sterilization at high temperature.

구분division 적용예 1Application example 1 적용예 2Application example 2 적용예 3Application example 3 적용예 4Application example 4 식초vinegar 실시예 1Example 1 실시예 2Example 2 실시예 3Example 3 비교예 1Comparative Example 1 비타민 CVitamin c 0.110.11 0.110.11 0.110.11 0.110.11 과당fruit sugar 1010 1010 1010 1010 사과 농축액Apple concentrate 55 55 55 55 기능성 물질(스쿠알렌)Functional substance (squalene) 22 22 22 22 정제수Purified water 80.8980.89 80.8980.89 80.8980.89 80.8980.89 계system 100100 100100 100100 100100

<실험예 6> 식초음료의 관능검사Experimental Example 6 Sensory Evaluation of Vinegar Beverage

적용예 1-4와 같이 만든 아로니아 및 복분자 식초 음료를 대상으로 시중에서 판매되고 있는 식초음료(O사 제품)와 잘 훈련된 Panel로 하여금 5점척도법으로 관능검사(10대, 20대, 30대 남녀 각 2명)를 실시하여 그 결과를 다음의 표 2에 나타냈다.Aronia and Bokbunja vinegar beverages made in Application Example 1-4 were marketed for sensational testing using a five-point scale method. Two men and women each) and the results are shown in Table 2 below.

구분division 적용예 1Application example 1 적용예 2Application example 2 적용예 3Application example 3 적용에 44 on coverage 대조구Control 신맛Sour taste 4.94.9 4.44.4 4.84.8 3.83.8 3.43.4 개운한 맛Refreshing taste 4.84.8 4.14.1 4.64.6 3.43.4 2.92.9 뒷 맛Aftertaste 4.94.9 4.14.1 4.64.6 3.43.4 2.82.8 기호도Symbol 4.94.9 4.24.2 4.74.7 3.53.5 3.13.1

상기의 관능검사 결과로부터 본 발명의 아로니아 및 복분자 식초 음료가 시중에서 유통되고 있는 식초음료보다 신맛, 개운한맛, 뒷맛, 기호도 면에서 우수한 것으로 나타났다. 특히, 실시예 1에서 제조한 아로니아 : 복분자의 질량비가 7:1와 가까울수록 떫은 맛이 감소하는 등 그 관능성이 우수하였다. From the above sensory test results, the aronia and bokbunja vinegar beverages of the present invention were found to be superior in acidity, refreshment, aftertaste, and palatability than commercially available vinegar beverages. In particular, the closer the mass ratio of Aaronia to Bokbunja prepared in Example 1 to 7: 1, the lower the astringency.

이상, 바람직한 실시예를 들어 본 발명을 상세하게 설명하였으나, 본 발명은 상기 실시예에 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 기술적 사상의 범위내에서 당 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의하여 여러 가지 변형이 가능하다.The present invention has been described in detail with reference to preferred embodiments, but the present invention is not limited to the above embodiments, and various modifications may be made by those skilled in the art within the scope of the technical idea of the present invention. This is possible.

Claims (7)

1) 아로니아 열매와 복분자 열매로부터 각각 이물을 제거하여 파쇄 및 착즙한 후, 아로니아 착즙액 100중량부에 복분자 착즙액 10~20중량부를 혼합하는 단계;
2) 상기 착즙액에 사과 농축액으로 당도를 조절한 후, 알콜발효 효모를 첨가하고 배양하여 여과한 후 에탄올 발효하는 단계; 및
3) 상기 에탄올 발효액을 희석하여 농도를 조절하고 빙초산으로 초산 농도를 조정한 후 초산균을 접종하여 25∼35℃에서 7∼11일간 배양하는 초산발효 단계;를 포함하는 아로니아와 복분자를 이용한 초산의 제조 방법.
1) crushing and crushing by removing the foreign body from the fruit of Aronia and Bokbunja, respectively, and mixing 10 to 20 parts by weight of bokbunja juice to 100 parts of Aaronia juice;
2) after adjusting the sugar content with the apple concentrate to the juice, alcohol fermentation yeast is added, cultured and filtered and then ethanol fermentation; And
3) dilute the ethanol fermentation broth to adjust the concentration, and adjust the acetic acid concentration with glacial acetic acid and then inoculated acetic acid bacteria incubated for 7 to 11 days at 25 ~ 35 ℃; Aronia and acetic acid using bokbunja Manufacturing method.
제 1항에 있어서, 상기 에탄올 발효의 알콜발효 효모는 Saccharomyces cerevisiae (KCTC 7904)를 이용하는 것을 특징으로 하는 아로니아와 복분자를 이용한 초산의 제조 방법.
The method for producing acetic acid using aronia and bokbunja according to claim 1, wherein the alcoholic fermentation yeast of ethanol fermentation uses Saccharomyces cerevisiae (KCTC 7904).
제 1항에 있어서, 상기 초산발효의 초산균은 기탁번호 KACC92089로 기탁된 아세토박터 파스테리아너누스(Acetobacter pasteurianus) 균주를 이용하는 것을 특징으로 하는 아로니아와 복분자를 이용한 초산의 제조 방법.
The method of claim 1, wherein the acetic acid bacteria of fermentation of acetic acid using acetobacter pasteurianus strain deposited with accession number KACC92089.
제 1항에 있어서, 상기 2) 단계의 초기 당도는 당도는 10∼20 °Brix이고 20∼30℃에서 4~8일 동안 에탄올 발효가 이루어지는 것을 특징으로 하는 아로니아와 복분자를 이용한 초산의 제조 방법.
The method of claim 1, wherein the initial sugar content of step 2) is 10-20 ° Brix and ethanol fermentation is performed at 20-30 ° C for 4-8 days. .
제 1항에 있어서, 상기 3) 단계는 초기 산도는 1~3%, 에탄올 농도는 4∼8%인 것을 특징으로 하는 아로니아와 복분자를 이용한 초산의 제조 방법.
The method of claim 1, wherein the step 3), the initial acidity is 1 to 3%, the ethanol concentration is 4 to 8%, characterized in that the production of acetic acid using aronia and bokbunja.
제 1항에 있어서, 상기 1) 단계는 아로니아 착즙액 100중량부에 복분자 착즙액 14.3중량부를 혼합하는 것을 특징으로 하는 아로니아와 복분자를 이용한 초산의 제조 방법.
The method of claim 1, wherein the step 1) comprises mixing Aronia and Bokbunja with 14.3 parts by weight of Bokbunja juice.
제 1항의 방법으로 제조된 아로니아와 복분자 초산을 이용한 초산 음료.An acetic acid beverage using aronia and bokbunja acetic acid prepared by the method of claim 1.
KR1020180026000A 2018-03-05 2018-03-05 Producing Method for Venegar Using Aronia and Rubus coreanus Miquel, and Venegar Beverage Using This KR20190105443A (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020180026000A KR20190105443A (en) 2018-03-05 2018-03-05 Producing Method for Venegar Using Aronia and Rubus coreanus Miquel, and Venegar Beverage Using This

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020180026000A KR20190105443A (en) 2018-03-05 2018-03-05 Producing Method for Venegar Using Aronia and Rubus coreanus Miquel, and Venegar Beverage Using This

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20190105443A true KR20190105443A (en) 2019-09-17

Family

ID=68070143

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020180026000A KR20190105443A (en) 2018-03-05 2018-03-05 Producing Method for Venegar Using Aronia and Rubus coreanus Miquel, and Venegar Beverage Using This

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR20190105443A (en)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN110731436B (en) Black tiger acetic acid beverage as well as preparation method and application thereof
CN100374046C (en) Method for preparing blueberry mixed juice by using enzymatic engineering tech.
KR20130050554A (en) Manufacture of fermented schizandrae extract having gaba
KR20170093087A (en) Method for manufacturing aronia beverage
KR20130117052A (en) Fermented vinegar comprising dropwort and drinking vinegar using the same
TWI430754B (en) Process for producing γ-aminobutyric acid-rich material
US20210321643A1 (en) Method for preparation of nitrite ion-containing allium tuberosum fermentate and composition thereof
CN101480263B (en) Safflower fruit vinegar beverage and method for preparing the same
KR20140034981A (en) Method for increasing resveratrol content of peanut sprouts and foods in resveratrol of peanut sprouts
KR20190060023A (en) Process for producing beverages containing active ingredients of Omija and Aronia extract and beverages produced therefrom
JP5114625B2 (en) Method for producing high content of γ-aminobutyric acid
KR102078671B1 (en) A aronia beverage composition having the increased antioxidation, skin whitening, and anti-wrinkle effects
Ma et al. Nutritional value and processing technology of mulberry fruit products
KR20190138066A (en) kombucha manufacturing method
KR20230080923A (en) Method for producing a ferment extract of the centella asiatica and composition for antiocidative comprising the ferment extract of the centella asiatica produced by the same
KR20110012070A (en) A onion-vinegar beverage having antioxidant and antibacterial activity and preparation method thereof
KR100657028B1 (en) Functional sweet jelly compound containing yam and a method for manufacturing thereof
CN107058042A (en) A kind of yellow rose flowers and fruits vinegar and its manufacture method
KR102294897B1 (en) manufacturing method of fermented food
KR20190105443A (en) Producing Method for Venegar Using Aronia and Rubus coreanus Miquel, and Venegar Beverage Using This
KR20160082162A (en) Method for Venegar Using Aronia and Venegar Beverage Using Thereof
KR20050092155A (en) The preperation method of mulberrry liquor
KR20170051874A (en) Ice flakes with syrup manufacturing method using the Aronia
CN109486600A (en) A kind of manufacturing method of blueberry wine
KR20160099214A (en) A method for preparing beer containing blueberry

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
AMND Amendment
E601 Decision to refuse application
X091 Application refused [patent]
AMND Amendment
X701 Decision to grant (after re-examination)