KR20190042883A - 반려동물 피모 관리용 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 돼지 방광 내피에서 추출한 세포외기질을 베이스로 하여, 천연물 복합추출물 및 해양심층암반 미네랄수를 혼합한 유효성분으로 하여 만든 반려동물 피모관리용 조성물로서, 피부보습 또는 모피 가려움증 개선에 효과가 있다.

Description

반려동물 피모 관리용 조성물 {Composition for skin and fur of companion animal}

본 발명은 반려동물의 피모 관리를 위한 조성물에 관한 것으로서, 피부 보습 인자 및 보호 장벽 개선, 모발 강화 등을 위하여 천연성분 기반으로 조성된 반려동물 피모 관린용 조성물에 관한 것이다.

생체의 외부환경에 대한 첫번째 장벽인 피부 위생은 반려동물의 건강에 있어서 매우 중요하다. 그러나 계면활성제 성분이 포함된 욕용제를 이용한 잦은 목욕 및 세정이 반려동물이 자체적으로 가지고 있는 피부 보습 인자 및 보호 장벽을 파괴하여 다양한 피부 질환이 발생할 수 있다. 또한 아토피, 건선, 접촉성 피부염, 혹은 민감성 피부질환을 보유하고 있는 동물의 경우, 목욕 후에도 건조로 인한 가려움증이 유발되어 반려동물의 건강에 위해를 끼친다. 결국 피부 위생을 위한 목욕 및 세정시 반려동물용 욕용제의 경우 계면활성제 성분이 다수 포함되어 있기 때문에 장기간 피부에 적용시 심각한 부작용을 발생시킬 염려가 있다.

이에 최근 들어 천연물을 이용한 욕용제의 개발이 대두되고 있으며 사람의 경우 이미 천연물을 이용한 욕용 보조제로서 피부 보습제 등이 개발되어 소재 발굴의 연구가 활발하게 이루어지고 있다. 이와 관련된 선행기술로서 “자생 식물 및 천연 한약재 추출물을 함유한 샴푸조성물”, “천연물 복합 발효 추출물을 유효성분으로 하는 피부 및 두피 상태 개선용 조성물” 등이 사람용 제제로서 특허 출원 되었다.

그러나, 상기 선행기술들은 오직 사람에게 적용할 목적으로 연구개발 되었고, 사람의 피부와는 다른 상태인 반려동물용 피부에 적합한 제품의 개발은 없는 실정이다.

KR 101478945 B1 KR 101373636 B1

본 발명은 상기와 같은 종래 기술의 문제점 및 반려동물 제품의 부재를 해결하기 위한 것으로서, 천연 한약재료 중 민감성, 자극성 및 반응성 등에서 피모를 안정화시킬 수 있는 성분을 조합하고, 사용자의 편의성 고려 및 반려동물의 피모에 오래 잔류할 수 있는 반려동물 피부관리용 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

본 발명의 또 다른 목적은, 천연물을 포함하는 반려동물의 피부 보습, 가려움증 개선용 조성물을 제공하는데 있다.

본 발명은 세포외기질(ECM), 베타글루칸, 실크펩타이드를 포함하는 천연복합물; 및 감초, 어성초, 자소 및 녹차 추출물을 포함하는 천연물 복합추출물;를 포함하는 반려동물 피모 관리용 조성물을 제공한다. 상기 세포외기질(ECM)은 돼지 방광 내피 조직을 차아염소산나트륨으로 탈세포 및 소독하여 추출한 것이 바람직하다.

또 다른 예로, 본 발명은 상기 조성물에 미네랄수를 더 포함된 반려동물 피모 관리용 조성물을 제공한다. 즉 상기 천연복합물, 상기 천연물 복합추출물 및 상기 미네랄수가 중량비 4 : 1 : 1로 조성된 혼합물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 한다. 상기 혼합물을 2 내지 15% 중량비로 포함하는 것이 바람직하다.

또한 본 발명에서 제공하는 조성물은 피부보습 또는 모피 가려움증 개선 효과가 있으며, 샴푸, 린스, 컨디셔너, 에센스, 로션, 트리트먼트, 클리너 및 모이스쳐라이저 등의 제형으로 제조되어 제공될 수 있다.

본 발명은 천연물의 조합에 의한 조성물을 유효성분으로 포함하고 있는 조성물로서 반려동물의 피부보습, 털의 윤기 및 탄력 강화, 모피 가려움증 개선, 피부 보습 인자 및 보호 장벽 개선 효과가 있음이 확인되었다.

또한 본 발명의 조성물은 계면활성제를 사용하지 않아 반려동물의 목욕 및 세정 후 피모 관리를 할 수 있는 컨디셔너로서 효과가 있음이 확인되었다.

또한, 본 발명은 반려동물의 피부에 적합한 천연성분을 기조로 한 피모 외용제 조성물로서 가려움증 개선, 아토피 개선 등의 효과가 있다.

도 1은 완성한 조성물을 가려움증을 유발한 마우스에게 처리하였을 때 개선된 결과를 나타낸다.
도 2는 마우스에서 분리한 복강비만세포에 조성물을 처리했을시 가려움증의 원인인 히스타민의 분비가 억제된 결과를 나타낸다.

이하, 각 유효성분에 대하여 구체적으로 설명한다.

(A) 세포외기질을 포함하는 피부보습용 천연복합물

본 발명에 따른 상기 피부보습용 천연복합물은 본 출원인에 의한 선행연구결과에 따른 것으로 출원중인 1020160151332호의 '화상 및 피부 결손 치료용 드레싱제 및 이의 제조방법'에 기재된 방법대로 추출한 세포외기질을 조성물로 포함한다. 상기 피부보습용 천연복합물에 대해 간략하게 설명하면, 세포외기질 추출액, 1%(w/v)의 베타글루칸 수용액, 1%(w/v)의 히알루론산 수용액, 1%(w/v)의 실크펩타이드 수용액 및 해양심층암반 미네랄수를 25: 10: 10: 10: 0.66의 중량비로 혼합한 혼합물을 전체 피부보습용 천연복합물 총 중량에 대하여 10 내지 12.5 중량%로 포함하여 제조한 것을 이용한다.

상기 혼합비율에 따른 피부보습용 천연복합물은 세포외기질 중 콜라겐과 엘라스틴을 주요성분으로 추출, 펩타이드화 하지 않고도 피부침투력을 향상시킬 수 있는 효과가 있다. 또한, 상기 세포외기질은 엘라스틴, 케라틴 등 피부 구성 결합조직 단백질을 포함하고 있어 콜라겐만을 단독으로 사용하는 경우보다 보습, 피부노화 방지에 더욱 효과적이며 다양한 원료의 첨가에 따라 문제되는 피모 손상의 문제를 현저하게 개선할 수 있고, 본 발명에서는 피부침투력을 극대화시켜 피모의 수분보유력을 지속적으로 유지함으로써 반려동물의 가려움증 개선 효과를 상승적으로 유도할 수 있다.

(B) 천연물 복합추출물

본 발명에 따른 반려동물 피부관리용 조성물에 있어서, 상기 천연물 복합추출물은 산수유, 홍경천, 감초, 어성초, 자소 및 녹차 추출물을 포함하는 혼합 추출물을 제조하고 농축시켜 수득되는 천연물 복합 추출농축액을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 한다. 바람직하게는, 감초, 어성초, 자소 및 녹차의 유효성분을 최대한 포함시킨다.

상기 천연물 복합추출물의 제조방법을 구체적으로 살펴보면, 건조 분쇄한 감초, 어성초, 자소, 녹차 100g을 50% 에탄올 1L를 가하여 50℃ 수조에서 24시간 1차 추출한 다음, 50% 에탄올 1L를 가하여 2차 추출을 한다. 추출된 용액은 여과 및 진공농축하여 약 25~30% 추출물을 회수한다.

최근 사람 피부에 있어서 다양한 한약재의 효능이 보고되고 있으나, 한 종류의 단일 한약재 투여에 따른 세포독성 문제는 여전히 해결되어야 할 과제로 남아 있다. 따라서 이러한 문제 해결을 위하여 최근 몇몇 한약재의 복합 처방전 개발이 큰 관심을 모으고 있으며, 이러한 접근을 통해 세포독성을 현저히 감소시킬 수 있는 장점을 가지고 있다.

본 발명에서도 상기 감초 추출물, 어성초 추출물, 자소 추출물 및 녹차 추출물을 후보군으로 선정하여 각각의 개별적인 추출물에 대한 선행 연구를 하였다. 그러나 상기 언급한 바와 같이 상기 추출물의 경우에도 각각의 개별적인 추출물을 단독으로 사용하는 경우 단일 추출물의 사용에 따른 세포독성의 문제가 있다는 것을 확인하였다. 따라서 상기 세포독성에 따른 부작용 등의 문제 때문에 상기 개별 추출물을 반려동물 피모 관리를 위한 컨디셔너 조성물로 사용하는 데에는 그 사용량이 제한적이므로 실질적으로 보습 및 가려움증 개선을 위한 개별 추출물의 함량이 제한적일 수 밖에 없다는 문제가 있었다.

따라서 상기 추출물 중 복합처방으로서, 아토피 피부염을 유발한 동물모델을 활용하여 천연물 추출물을 혼합하여 사용하는 경우 상기 각각의 개별 추출물을 단독으로 사용하는 경우에 비하여 세포독성을 낮추면서도 가려움증을 억제하는 활성이 높다는 것을 확인하였다.

즉, 본 발명의 천연물 복합추출물은 감초, 어성초, 자소 및 녹차를 전체 제품의 각각 0.2%까지 포함할 수 있다. 상기 범위로 포함되는 경우 단독 추출물 또는 다른 조합으로 사용할 때 보다 세포독성이 감소하고 항산화, 항염 및 모피 가려움증 개선효과가 상승적으로 유도될 수 있으므로 상기 범위로 사용하는 것이 바람직하다.

여기서, 본 발명의 천연물 복합추출물을 형성하는 약리학적 성분을 간략하게 살펴보면, 감초는 모든 약의 독성을 조화시켜서 약효가 잘 나타나게 하며 장부의 한열과 사기를 다스리고 모든 혈맥의 소통을 잘 시키며 근육과 뼈를 튼튼히 한다. 특히 약리작용은 해독작용, 간염, 두드러기, 피부염, 습진 등에 효과가 있고, 진해·거담, 근육이완, 이뇨작용 있으며 소화성 궤양을 억제하는데 효과가 있다는 것이 알려져 있다.

어성초는 삼백초과에 속하는 다년생 초본의 전통 야생 약초의 개화기의 지상부를 의미하는 것으로 항균작용, 면역증강작용, 항염증작용, 이뇨작용, 진해작용이 보고되었다. 특히 어성초의 주요 활성성분인 쿼시트린(Quercitrin)이 다양한생 리 활성 기능을 가지고 있다고 보고되었다.

자소는 자소엽을 의미하며, 항산화, 항염, 면역조절, 진정, 항균에 효과적인 약재로 알려져 있고, 피부에 대해 강한 항염 효과와 면역증강 효과를 나타내며 주로 화장품, 세제 등에 많이 쓰인다. 탈모와 노화방지에 대한 효과도 알려져 있다. 탈모를 유발할 수 있는 효소를 억제시켜 주어 탈모를 예방해주며, EPA(에이코사펜타에논산 ;eicosapentaenoic acid)가 함유되어 있어 면역력 강화에 도움이 되며 아토피 피부염이나 알레르기 체질을 개선하는데 탁월한 효과를 발휘하는 것으로 알려져 있다.

녹차는 녹차 잎에서 추출한 카테킨(Catechins)이라는 성분이 항 안드로겐 특성을 가져 녹차를 자주 마시면 탈모 예방에 효과가 크다는 연구 결과가 나왔으며 녹차의 성분 중에는 탈모를 유발하는 DHT 호르몬을 억제하는 효과가 있다고 밝혀졌다.

(C) 미네랄수

본 발명의 상기 미네랄수는 해양심층암반 미네랄수로서 해양심층수와 달리 미네랄이 풍부한 해양 심층 암반석에서 순수이온미네랄을 추출하여 고농도(2만배)로 농축하여 저장 후 이를 용도에 맞춰 희석하여 사용할 수 있다. 해양심층암반 미네랄수는 마그네슘, 규소, 인, 황, 칼륨, 칼슘, 바나듐, 망간, 철, 코발드, 니켈, 구리, 아연, 게르마늄, 셀렌, 몰리브덴 등 미량원소가 광천수에 비해 풍부해서 부족해지기 쉬운 미네랄 중 미량 원소를 보충해 준다. 본 발명의 반려동물의 피모관리용 또는 모피 가려움증 개선용 조성물에 있어서 상기 해양심층암반 미네랄수의 공급으로 가려움증 억제효과를 상승적으로 유도하고 피부 면역력 회복과 가려움증 억제, 자연적인 피부세정, 항균, 보습기능이 가능하게 하는 조성물을 제공할 수 있다.

본 발명의 반려동물 피모관리용 조성물을 구성하는 성분들은 비만세포의 면역반응 관련 인자인 히스타민 유리를 억제하는 것일 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 의하면, 본 발명의 조성물은 상기에서 언급한 피부보습용 천연복합물(A), 천연물 복합추출물(B) 및 미네랄수(C)를 4: 1: 1의 중량비로 함유하도록 사용한다. 상기 범위에 의하는 경우 상기 피부보습용 천연복합물, 천연물 복합추출물 및 미네랄수의 상호 작용으로 세포독성이 없는 범위 내에서 반려동물의 피모 관리 효과를 높게 지속적으로 유지하게 할 수 있다.

또한, 본 발명의 피모관리용 또는 모피 가려움증 개선용 조성물에 있어서 상기 유효성분은 조성물 총 중량을 기준으로 14.5% 로 함유하도록 사용한다. 상기 피부보습용 천연복합물(A), 천연물 복합추출물(B) 및 미네랄수(C)의 유효성분이 2% 미만으로 함유되면 그 효능을 기대하기 어렵고, 15% 초과하면 제품의 사용감에 영향을 끼칠 수 있기 때문에 상기 범위내에서 사용하는 것이 바람직하다.

본 발명의 다른 일 실시예에 의하면, 본 발명의 조성물은 비타민 B5 및 페퍼민트 오일을 추가적으로 포함할 수 있다.

본 발명의 또 다른 일 실시예에 의하면, 본 발명은 모피 가려움증 개선용 조성물을 포함하는 조성물을 포함한다.

본 발명의 조성물을 포함하는 화장료 또는 세정제용 조성물은 피부보습용 천연복합재, 천연물 복합추출물 및 미네랄수를 전체 중량에 대하여 3~4% 범위로 유지하는 것이 품질 경쟁력과 가격 경쟁력 측면에서 가장 적절하다. 이외에 모발용 화장료 베이스를 전체 중량에 대하여 96~97% 범위로 함유되고, 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하는데, 예컨대 통상적인 천연방부제인 자몽추출물, 천연점증제 및 천연 점도 조절제, 천연 pH 조절제, 천연 향료, 천연 염료, 천연 모발 컨디셔닝제 그리고 물을 포함한다.

본 발명의 상기 조성물은 샴푸, 린스, 컨디셔너, 에센스, 로션, 스프레이, 클리너, 및 모이스쳐라이저, 크림, 연고, 스틱형 등의 외용제 제형으로 제조할 수 있다. 이러한 제형에 있어 상기한 필수성분 이외에 다른 성분들은 기타 외용제 종류 또는 사 용목적 등에 따라 당업자가 어려움 없이 적합하게 선정하여 배합하여 제조될 수 있다.

최근 국내 및 해외 반려동물 인구가 성장함에 따라 요구되는 다양한 제품의 시장이 크게 성장하고 있다. 본 발명은 이러한 반려동물 인구 및 반려동물의 건강을 위하여 반려동물 전용 피모 관리를 연구 및 개발하였고, 반려동물용 제제를 개발할 때 예기치 못한 독성 및 부적합성 등을 충분히 고려해야 하고 확실한 효능이 있는 결과로 제품을 생산해야만 하므로 동물에도 해롭지 않은 한약재 유래 천연성분 및 세포외기질을 주성분으로 하여 보습 및 가려움증 완화에 도움을 줄 수 있는 조성물을 도출하여 완성하게 되었다.

주요 성분인 세포외기질(Extra-cellular Matrix; ECM)은 약 100년 전 처음 발견되었고 초기에는 단순한 세포간 연결체로서 구조적인 역할을 하는 것으로 알려졌으나, 이를 넘어서 세포의 분열과 분화, 사멸 등 여러 세포생리 조절인자로서 매우 중요한 역할을 하는 것으로 확인되었다. 특히 배아줄기세포나 성체줄기세포와 접목된 세포치료와 재생의학을 위해서 최근 그 중요성이 더욱 강조되고 있다. 세포 외 기질은 세포가 성장하고 분화화는데 필요한 생화학적 인자(biochemical factors)들을 저장하고 적절히 공급해 줌과 동시에 세포가 인식할 수 있는 물리적 환경을 제공한다.

세포외기질은 조직 내 또는 세포 외의 공간을 채우고 있는 생체고분자의 복잡한 집합체로 결합조직에 다량으로 존재하고, 모든 조직에서 소량씩이라도 존재한다. 기저막은 세포 외 기질의 일종이며, 세포에 의해 합성되고 세포 외에 분비, 축적된 분자로 구성되어 있다. 구성분자로서는 교원질, 탄력소 등의 섬유성 단백질, 프로테오글리칸, 글리코사미노글리칸이라는 복합단백질, 피브로넥틴, 라미닌, 비트로넥틴 등의 세포부착성 당단백질이있다. 현재는 교원질이나 탄력소에도 세포부착 활성이 있는 것으로 알려져 있다.

본 발명에서는 이러한 세포외기질의 특성을 만전으로 활용하기 위해 생체 조직 재건능 및 보습성이 우수한 돼지 방광을 원재료로 하여, 그 기저막이 포함된 내피에서 세포외 기질을 추출하고, 기질 섬유를 사용하였다.

본 발명에서는 상기 세포 외 기질 및 기저섬유의 추출원이 제한되지는 않지만 돼지 방광 내피에서 추출한 것이 바람직하며, 소, 양, 사슴, 염소, 등의 동물 방광 내피에서 추출하여 사용할 수도 있다.

본 발명은 반려동물 피모관리용 조성물을 제공함에 있어, 그 제형에 한정되지 않고 다양한 제형으로 가공 가능한 것을 특징으로 하는 원천 기술에 근본적인 목적을 둔다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명한다. 다만, 하기의 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것으로서 본 발명의 범위가 하기의 실시예에 한정되는 것은 아니다.

이하에서 언급하는 세포외기질 추출용 돼지 방광은 (주) 축림에서 구입하였고, 실크펩타이드, 히알루론산, 베타클루칸은 (주) 쿠시드바이오팜에서 구입한 것이며, 미네랄수 원액은 (주)프레이바이오로부터 구입한 것이다. 한약재는 (주) 지리산약초골 에서 구입하였다.

제조예 1. 세포외기질 (ECM) 제조

수거한 돼지 방광을 잘 수세 후, 3개 기준으로 500ml 10% iodine 에 5분간 담궈 소독한다. 멸균된 생리식염수로 iodine을 씻어 낸 뒤, 두께 1mm 미만의 돼지 방광 내피를 수술용 칼을 이용하여 하얀색 박막 형태로 떼어낸다. aprotonin 과 0.1% EDTA 가 포함된 Tris-HCL 용액에 세 번에 걸쳐 세척한다. 이후, 0.1% SDS with Tris-HCL 용액으로 세 번에 걸쳐 세척한다. 분리된 방광 내피를 탈세포화 및 살균을 위해 30분 간격으로 40%, 50%, 70% 차아염소산 나트륨 용액으로 순차적 처리한다.

멸균된 생리식염수로 차아염소산나트륨 잔기를 씻어낸 뒤, 탈핵 처리를 위해 deoxyribonuclease 와 ribonucleasae가 포함된 Tris-HCL 용액에 3시간 정도 반응시킨다. 고온 가압멸균이 가능한 금속 트레이에 담아 121℃, 15분 동안 건열식 고압건조멸균기에서 가공한다. 이로써 추출된 액상 세포외기질은 상온 이상에서 보관하고, 남은 방광 내피는 따로 모아 동결 건조하여 기저 섬유 가루로 파쇄한다.

실시예 2. 피부보습용 천연복합물의 제조

상기 실시예 1의 방법으로 준비된 세포외기질 추출액, 1%(w/v)의 베타글루칸 수용액, 1%(w/v)의 히알루론산 수용액, 1%(w/v)의 실크펩타이드 수용액을 준비하고, 해양심층암반 미네랄수은 감마선으로 조사하여 저분자화하여 준비하였다. 상기 성분들을 25: 10: 10: 10: 0.66의 중량비로 혼합하였다.

실시예 3. 천연물 복합 조성물의 제조

건조 분쇄한 감초, 어성초, 자소, 녹차 100g을 50% 에탄올 1L를 가하여 50℃ 수조에서 24시간 1차 추출한 다음, 50% 에탄올 1L를 가하여 2차 추출을 하였다. 추출된 용액은 여과 및 진공농축하여 약 25~30% 추출물을 회수하였다.

제조예 1

상기 실시예 1 및 2에서 준비한 천연물 복합 추출물과 세포외기질을 포함하는 천연복합물, 미네랄수를 섞어 제조하며 그 성분비는 다음 표 1과 같이 한다.

순서	원료명	전성분명	함량(%)
1	D.I Water	정제수	80.410
	Natrosol 250HR	하이드록시에틸셀룰로오스	0.100
	Allantoin	알란토인	0.900
2	D.I Water	정제수	3.000
	Novaxan 80	잔탄검	0.100
3	Ethanol	에탄올	10.000
	세포외기질(ECM)을 포함하는 천연복합물	콜라겐, 엘라스틴, 베타글루칸, 소듐하이알루로네이트, 실크아미노산	2.000
4	L-Menthol	멘톨	1.000
	VE Acetate	토코페릴아세테이트	1.000
5	EGY-820	에틸헥산디올, 글리세릴카프릴레이트	1.300
	산수유	산수유추출물	0.200
	어성초/자소엽/녹차	어성초/자소엽/녹차 추출물	0.200
	홍경천	홍경천추출물	0.200
	감초추출물	감초추출물	0.200
	비타민 B5	판토텐산	0.200
	페퍼민트 오일	페퍼민트오일	0.200
	미네랄수(해양심층수)	해수(300배 희석액)	0.200
	Salicilic acid	살리실릭애씨드	0.010
	Triethanol amine (10% sol’n)	트리에탄올아민	0.500
	Olivem 300	올리브오일 피이지-7 에스터	2.000
	C-20TX	세테아레스-20	0.200
			100

시험예 1. ' 제조예 1의 조성물'의 동물에 대한 가려움증 개선 효과 확인

수컷 ICR 마우스를 대상으로 가려움 유발물질로 가려움을 유발한 후 마우스가 피부를 긁는 횟수를 측정하였다. 구체적으로, 실험군별 ICR 마우스 5마리를 각각 투명 아크릴 케이지에 한마리씩 넣고, 안정을 위해 30분 동안 동일한 실험 환경에 방치하였다. '제조예 1의 조성물' 100 ㎕를 마우스 등 양쪽 어깨사이에 떨어뜨려 잘 스며들도록 문지른 다음, Compound 48/80 (50 ㎍/부위)를 생리식염수에 용해한 것을 마우스 등의 양쪽 어깨사이 높이에 피하주사하여, 30분 뒤 뒷발로 가려움 유발 물질이 주입된 부위를 긁는 횟수를 계수하여 평가하였다. 반대로, 가려움을 유발한 뒤 30분 후 그 부위에 복합조성물을 떨어뜨려 잘 스며들도록 문지른 다음 긁는 횟수를 측정하였다.

도 1에 나타난 바와 같이, 정상 대조군의 긁는 횟수에 비하여 Compound 48/80을 투여한 대조군에서는 그 횟수가 현저히 증가하였다 (195±21). 그러나 세포외기질(ECM) 1% 및 2%가 함유된 복합조성물을 뿌린 경우는 Compound 48/80으로 유발한 가려움 유발 모델 마우스에서 가려움 경감효과가 유의적으로 나타났다 (1%: 75±12, 2%: 72±11).

시험예 2. ' 제조예 1의 조성물'의 히스타민 유리 억제효과 확인

'제조예 1의 조성물'의 가려움증 개선효과가 비만세포 탈과립의 억제효과인지 검토하기 위하여 복강비만세포를 이용하여 히스타민 유리 억제효과를 확인하였다. BALB/c 마우스 복강에 Tyrode 완충용액 B (137 mM NaCl, 5.3 mM glucose, 12 mM NaHCO₃, 2.7 mM KCl, 0.3 mM NaH₂PO₄, pH 7.4)를 주입하고 복부를 약 2분 정도 마사지한 후 복막을 열어 파스퇴르 피펫으로 복강 내 세포가 함유된 Tyrode 완충용액 B를 수거하였다. 1500 rpm에서 10분 동안 원심 분리하여 세포를 침전시키고 침전된 세포에 Tyrode 완충용액 B를 가하여 피펫팅하며 풀어준 다음, percoll density gradient법으로 비만세포만을 회수하였다. 0.1% FBS를 포함하는 Tyrode 완충용액 A (137 mM NaCl, 1.8 mM CaCl₂, 1.1 mM MgCl₂, 12 mM NaHCO₃, 2.7 mM KCl, 0.4 mM NaH₂PO₄, 5.6 mM glucose, pH 7.4)를 가하여 2×10⁵씩 세포를 분주한 다음 37 ℃에서 20분 동안 배양하고 시료를 20분 동안 처리하였다. 제조예 1의 조성물을 양을 달리하여 처리한 다음, 1시간 후 Compound 48/80 5 ㎍/ml을 30분간 처리하였다. 30분이 지난후, 2000 rpm에서 원심분리하여 상등액과 세포를 분리하였다. 그 다음, 상기와 같이 얻은 상층액 시료를 히스타민 ELISA kit를 통해 정량하였다.

도 2에 나타난 바와 같이, 정상 복강비만세포를 컴파운드 48/80으로 처리하였을 때 159±20.2 ng/ml로 증가하였는데, 복합조성물을 5~50 ㎕/ml로 처리하였을 때 유리된 히스타민은 농도의존적으로 유의적인 감소효과를 나타내어 25 및 50 ㎕/ml의 농도에서는 약 51%, 67%의 억제율을 나타내었다.

제조예 2. ' 제조예 1의 조성물'의 스노우폼 형태 분사 확인

반려동물 피모 잔류율을 높이기 위해 스노우폼 형태로 분사하는 스프레이 타입으로 제품을 만들어 눈처럼 하얗게 퍼져나가는 점성의 스프레이로 완성되었다. 이러한 스노우폼 형태는 거품을 발생시키는 용기를 사용하여 구현하였다.

이상에서는 본 발명의 바람직한 실시예에 대해서 설명하였으나, 본 발명은 상술한 특정의 실시예에 한정되지 아니하며, 당해 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 본원 발명의 요지를 벗어남이 없이 다양한 변형 실시가 가능함은 물론이다. 따라서, 본 발명의 범위는 위의 실시예에 국한해서 해석되어서는 안되며, 후술하는 특허청구범위 뿐만 아니라 이 특허청구범위와 균등한 것들에 의해 정해져야 할 것이다.

Claims (7)

1. 세포외기질(ECM), 베타글루칸, 실크펩타이드를 포함하는 천연복합물; 및
   감초, 어성초, 자소 및 녹차 추출물을 포함하는 천연물 복합추출물;를 유효성분으로 포함하는 반려동물 피모 관리용 조성물
   
2. 제1항에 있어서, 상기 세포외기질(ECM)은 돼지 방광 내피 조직을 차아염소산나트륨으로 탈세포 및 소독하여 추출한 것을 특징으로 하는 반려동물 피모 관리용 조성물
   
3. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 미네랄수를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 반려동물 피모 관리용 조성물
   
4. 제3항에 있어서, 상기 천연복합물, 상기 천연물 복합추출물 및 상기 미네랄수는 중량비 4:1:1로 조성된 혼합물을 포함하는 것을 특징으로 하는 반려동물 피모 관리용 조성물
   
5. 제4항에 있어서, 상기 혼합물을 2 내지 15% 중량비로 포함하는 것을 특징으로 하는 반려동물 피모 관리용 조성물
   
6. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 피부보습 또는 모피 가려움증 개선용인 것을 특징으로 하는 반려동물 피모 관리용 조성물
   
7. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 샴푸, 린스, 컨디셔너, 에센스, 로션, 트리트먼트, 클리너 및 모이스쳐라이저 중에서 선택되는 제형으로 제조되는 것을 특징으로 하는 반려동물 피모 관리용 조성물
   
   
   

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