KR20170129871A - 브로모도메인 억제제로서의 벤즈이미다졸 유도체 - Google Patents
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Abstract
하기 화학식 (I)의 화합물 및 이의 염이 제공되며, 여기서 R1, R2, R3, R4는 본원에 정의되어 있다. 화학식 (I)의 화합물 및 이의 염은, 예를 들어, 아세틸화된 리신 잔기에 대한 BET 족 브로모도메인 단백질의 결합을 억제하는 것으로 밝혀졌고, 이에 따라 치료, 예를 들어, 자가면역 및 염증성 질병, 예를 들어, 류마티스 관절염, 및 암의 치료에서 사용될 수 있다:
Description
본 발명은 화합물, 이의 제조 방법, 이를 함유하는 조성물, 및 다양한 장애, 특히 염증성 및 자가면역 질병, 예를 들어, 류마티스 관절염, 및 암의 치료에서의 이의 용도에 관한 것이다.
진핵생물 유기체의 유전체는 세포의 핵 내에 고도로 조직화되어 있다. 듀플렉스 DNA의 긴 가닥은 히스톤 단백질의 옥토머(가장 일반적으로 히스톤 H2A, H2B, H3 및 H4의 2개 카피를 포함함) 주위를 감싸서 뉴클레오솜을 형성한다. 이러한 기본 단위는 이후에 뉴클레오솜의 응집 및 폴딩에 의해 추가로 압축되어 고도로 응축된 염색질 구조를 형성한다. 광범위한 상이한 응축 상태가 가능하고, 이러한 구조의 견고성은 세포 주기 동안 변하며, 세포 분열 과정 동안 가장 밀집된다. 염색질 구조는 고도로 응축된 염색질로부터 효율적으로 발생할 수 없는 유전자 전사를 조절하는데 중요한 역할을 한다. 염색질 구조는 히스톤 단백질, 특히 히스톤 H3 및 H4에 대한 일련의 번역 후 변형, 및 가장 일반적으로는 코어 뉴클레오솜 구조를 넘어 연장된 히스톤 꼬리 내에서의 일련의 번역 후 변형에 의해 조절된다. 이들 변형은 아세틸화, 메틸화, 인산화, 유비퀴틴화, 수모화(SUMOylation)를 포함한다. 이들 후성적 표시는 히스톤 꼬리 내의 특정 잔기 상에 태그를 붙임으로써 후성적 코드를 형성시키는 특정 효소에 의해 쓰여지고 지워지며, 상기 후성적 코드는 이후 유전자 발현의 조절을 허용하도록 세포에 의해 해석된다.
히스톤 아세틸화는 가장 일반적으로 유전자 전사의 활성화와 관련되는데, 이는 상기 변형이 정전기를 변화시킴으로써 DNA 및 히스톤 옥토머의 상호작용을 완화시키기 때문이다. 이러한 물리적 변화에 더하여, 특정 단백질은 히스톤 내의 아세틸화된 리신 잔기를 인지하고 이에 결합하여 후성적 코드를 판독한다. 브로모도메인은 일반적이며 히스톤의 상황에서만 존재하지는 않는 아세틸화된 리신 잔기에 결합하는 단백질 내의 작은(약 110 아미노산) 별개의 도메인이다. 브로모도메인을 함유하는 것으로 공지된 약 50종의 단백질 족이 존재하며, 이들은 세포 내에서 다양한 기능을 갖는다.
BET 족 브로모도메인 함유 단백질은 인접한 2개의 아세틸화된 리신 잔기에 결합하여, 상호작용의 특이성을 증가시킬 수 있는 탠덤 브로모도메인을 함유하는 4종의 단백질(BRD2, BRD3, BRD4 및 BRDT)을 포함한다. 각각의 BET 단백질의 N-말단으로부터 넘버링하여, 탠덤 브로모도메인은 통상적으로 결합 도메인 1(BD1) 및 결합 도메인 2(BD2)로 표지된다(Chung et al, J Med . Chem ,. 2011, 54, 3827-3838). 아세틸화된 리신 잔기에 대한 BET 단백질의 결합을 억제하는 것은 암(Dawson M.A . et al, Nature, 2011: 478(7370) :529-33; Wyce , A. et al, Oncotarget . 2013: 4(12) :2419-29), 패혈증(Nicodeme E. et al, Nature, 2010: 468(7327):1119-23), 자가면역 및 염증성 질병, 예를 들어, 류마티스 관절염 및 다발경화증(Mele D.A . et al, Journal of Experimental Medicine, 2013: 210(11):2181-90), 심장기능상실(Anand P. et al, Cell, 2013: 154(3) :569-82), 및 폐 섬유증(Tang X. et al, Molecular Pharmacology, 2013: 83(1) :.283- 293)을 포함하나 이에 제한되지는 않는 여러 질병의 진행을 개선시킬 잠재성을 갖는다.
브로모도메인의 활성을 억제하는 화합물, 특히 아세틸화된 리신 잔기에 대한 BET 단백질의 결합을 억제하고, 따라서, 예를 들어, 자가면역 및 염증성 질병, 및 암의 치료에 유용한 화합물이 필요하다.
첫번째 양태에서, 본 발명은 하기 화학식 (I)의 화합물 및 이의 염에 관한 것이다:
상기 식에서,
R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소 또는 메틸이나, 단, R1 및 R2 중 적어도 하나는 메틸이고;
R3는 C1- 6알킬, C1- 6알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 또는 -CHR5(CH2)aR6이고;
R4는 벤즈이미다졸의 5 또는 6 위치에 부착되고, 이는 
이고;
R5는 수소, C1- 3알킬, C1- 3알콕시, 또는 -(CH2)dOR9이고;
R6는 수소, C1- 3알킬, C1- 3알콕시, -(CH2)eOR10, 하이드록실, -NR11R12, 할로, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 또는 헤테로아릴이고, 상기 C1- 3알킬, C1- 3알콕시, -(CH2)eOR10, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴은 C1- 3알킬, C1- 3알콕시, 할로, -CH2OH, -COOH, 및 -COCH3로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되는 1개 또는 2개의 치환기로 선택적으로 치환될 수 있고;
R7은 수소, C1- 6알킬, -(CH2)g사이클로알킬, -(CH2)h헤테로사이클로알킬, 또는 -CR13R14R15이고;
R8은 수소, C1- 6알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 또는 -CHR16R17이고, 상기 C1- 6알킬은 C1- 3알콕시로 선택적으로 치환되고, R16은 수소 또는 C1- 3알킬이고, R17은 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬이고;
R9, R10, R11, R12, R14, R15, 및 R18은 각각 독립적으로 수소 또는 C1- 3알킬이고;
R13은 수소, 하이드록실, -CH2OR18, 할로, -COOH, -CONH2, 1H-이미다졸-4-일, -SH, -SeH, C1- 3알킬, C1- 3알콕시, 페닐, 또는 4-하이드록시페닐이고, 상기 C1- 3알킬 또는 C1- 3알콕시는 할로 또는 하이드록실, -NHC(=NH2)NH2, -NH2, -COOH, -CONH2, 또는 -SCH3로 선택적으로 치환될 수 있고;
a는 0, 1, 2 또는 3이고;
b는 0 또는 1이고;
c는 1, 2 또는 3이나, 단, b가 1인 경우, c는 2 또는 3이고;
d 및 e는 각각 독립적으로 1 또는 2이고;
g 및 h는 각각 독립적으로 0, 1 또는 2이다.
화학식 (I)의 화합물 및 이의 염은 브로모도메인 단백질의 결합, 특히, 예를 들어, 아세틸화된 리신 잔기에 대한 BET 족 브로모도메인 단백질의 결합을 억제하는 것으로 밝혀졌다. 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염은 따라서 치료, 예를 들어, 자가면역 및 염증성 질병, 예를 들어, 류마티스 관절염, 및 암의 치료에서 사용될 수 있다.
본 발명은 추가로 치료적 유효량의 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 자가면역 및 염증성 질병 및 암을 치료할 필요가 있는 대상체에 투여하는 것을 포함하는, 브로모도메인 단백질, 예를 들어, BET 족 브로모도메인 단백질의 구성원의 기능 억제를 통해 자가면역 및 염증성 질병 및 암을 치료하는 방법에 관한 것이다.
추가 양태에서, 본 발명은 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다.
정의
본원에서 사용되는 용어 "브로모도메인"은 아세틸화된 리신 잔기, 예를 들어, 히스톤의 N-말단 꼬리 상의 아세틸화된 리신 잔기에 결합하는 진화적 및 구조적으로 보존된 모듈(약 110 아미노산 길이)을 나타낸다. 이들은 훨씬 더 큰 브로모도메인 함유 단백질(BCP)의 일부로 발견되는 단백질 도메인이며, 이 중 많은 것들은 유전자 전사 및/또는 염색질 리모델링을 조절하는 역할을 한다. 인간 유전체는 적어도 57종의 브로모도메인을 인코딩한다.
본원에서 사용되는 용어 "BET"는 BRD2, BRD3, BRD4 및 BRDT를 포함하는 브로모도메인 함유 단백질의 브로모도메인 및 말단외 도메인 족을 나타낸다.
본원에서 사용되는 용어 "BET 억제제"는, 예를 들어, 아세틸화된 리신 잔기에 대한 하나 이상의 BET 족 브로모도메인 함유 단백질(예를 들어, BRD2, BRD3, BRD4 또는 BRDT)의 결합을 억제할 수 있는 화합물을 나타낸다.
본원에서 사용되는 용어 "알킬"은 특정 수의 탄소 원자를 갖는 선형이거나 분지형인 포화 탄화수소 사슬을 나타낸다. 예를 들어, C1-6 알킬은 1 내지 6개의 탄소 원자를 갖는 알킬기이다. 달리 언급하지 않는 한, 알킬기는 치환되지 않는다. 용어 "알킬"은 메틸, 에틸, 프로필(n-프로필 및 이소프로필), 부틸(n-부틸, 세크-부틸, 이소부틸 및 터트-부틸), 펜틸, 및 헥실을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
본원에서 사용되는 용어 "알콕시"는 "알킬"이 상기 정의된 바와 같은 -O-알킬기를 나타낸다.
본원에서 사용되는 용어 "사이클로알킬"은 3개(사이클로프로필), 4개(사이클로부틸), 5개(사이클로펜틸), 6개(사이클로헥실) 또는 7개(사이클로헵틸) 탄소 원자를 갖는 포화 모노사이클릭 탄화수소 고리를 나타낸다.
본원에서 사용되는 용어 "헤테로사이클로알킬"은 질소, 산소, 및 황으로부터 선택되는 1개 또는 2개의 비-탄소 원자를 함유해야 하는 포화 또는 불포화 3 내지 7원 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 고리를 나타낸다. 헤테로사이클로알킬기는 하나 이상의 C(O), S(O) 또는 SO2 기를 함유할 수 있다. 그러나, 헤테로사이클로알킬기는 방향족이 아니다. 하나 초과의 헤테로원자를 함유하는 헤테로사이클로알킬기는 상이한 헤테로원자를 함유할 수 있다. "5 또는 6원 헤테로사이클로알킬"은 질소, 산소, 및 황으로부터 선택되는 1개 또는 2개의 비-탄소 원자를 함유해야 하는 포화 또는 불포화 5 또는 6원 모노사이클릭 고리를 나타낸다. 헤테로사이클로알킬은 피롤리딘, 피페리딘, 피페라진, 옥세탄, 테트라하이드로푸란, 테트라하이드로-2H-피란, 모르폴린, 모르폴린-3-온, 피페리딘-2-온, 피리미딘-2,4(1H,3H)-디온, 티오모르폴린, 및 티오모르폴린 1,1-디옥사이드를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
본원에서 사용되는 용어 "아릴"은 모노사이클릭 또는 바이사이클릭, 탄화수소, 방향족 라디칼을 나타낸다. 아릴은, 예를 들어, 페닐 및 나프틸을 포함한다.
본원에서 사용되는 용어 "헤테로아릴"은 S, N 및 O로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 함유하는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭, 방향족 라디칼을 나타낸다. 본 발명에 유용한 헤테로아릴의 예시적 예는 푸라닐, 티에닐, 피롤릴, 이미다졸릴, 피라졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 티아졸릴, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 옥사디아졸릴, 티아디아졸릴, 이소티아졸릴, 피리디닐, 피리다지닐, 피라지닐, 피리미디닐, 트리아지닐, 벤조푸라닐, 이소벤조푸릴, 2,3-디하이드로벤조푸릴, 1,3-벤조디옥솔릴, 디하이드로벤조디옥시닐, 벤조티에닐, 인돌리지닐, 인돌릴, 이소인돌릴, 디하이드로인돌릴, 벤즈이미다졸릴, 디하이드로벤즈이미다졸릴, 벤즈옥사졸릴, 디하이드로벤즈옥사졸릴, 벤즈티아졸릴, 벤조이소티아졸릴, 디하이드로벤조이소티아졸릴, 인다졸릴, 이미다조피리디닐, 피라졸로피리디닐, 벤조트리아졸릴, 트리아졸로피리디닐, 퓨리닐, 퀴놀리닐, 테트라하이드로퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 테트라하이드로이소퀴놀리닐, 퀴녹살리닐, 신놀리닐, 프탈라지닐, 퀴나졸리닐, 1,5-나프티리디닐, 1,6-나프티리디닐, 1,7-나프티리디닐, 1,8-나프티리디닐, 및 프테리디닐을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
본원에서 사용되는 어구 "선택적으로 치환된"은 기가 본원에 정의된 바와 같은 하나 이상의 치환기로 치환되거나 비치환될 수 있음을 나타낸다. 기와 관련하여 "치환된"은 기 내의 한 구성원 원자에 부착된 수소 원자가 정의된 치환기 중 하나로 대체된 것을 나타낸다.
본원에서 사용되는 용어 "약학적으로 허용되는 염"은 대상 화합물의 원하는 생물학적 활성을 보유하고, 최소의 바람직하지 않은 독성 효과를 나타내는 염을 나타낸다. 이들 약학적으로 허용되는 염은 화합물의 최종 분리 및 정제 동안 제자리에서 제조될 수 있거나, 자유 산 또는 자유 염기 형태의 정제된 화합물과 적합한 염기 또는 산을 각각 개별적으로 반응시킴으로써 제조될 수 있다. 또한, 화학식 (I)의 화합물의 약학적으로 허용되는 염은 자유 산 또는 자유 염기의 추가 공정 동안, 예를 들어, 약학적 제형으로의 제조 동안 제자리에서 제조될 수 있다.
본원에서 사용되는 어구 "벤즈이미다졸의 5 또는 6 위치에 부착된"은 하기 구조에 표시된 바와 같은 5 또는 6 위치에서의 특정 치환기의 부착을 나타낸다:
본원에서 사용되는 용어 "치료"는 질환의 예방, 특정 질환의 개선 또는 안정화, 질환의 증상의 감소 또는 제거, 질환 진행의 늦춤 또는 제거, 및 이전에 앓았던 환자 또는 대상체에서의 질환 재발의 예방 또는 지연을 나타낸다. 한 구체예에서, 치료는 특정 질환의 개선 또는 안정화, 질환의 증상의 감소 또는 제거, 또는 질환 진행의 늦춤 또는 제거를 나타낸다.
본원에서 사용되는 용어 "치료적 유효량"은 동물 또는 인간 신체에서 원하는 생물학적 반응을 유도할 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 양을 나타낸다.
본원에서 사용되는 용어 "대상체"는 동물 또는 인간 신체를 나타낸다.
"본 발명의 화합물(들)"에 대한 본원의 언급은 자유 염기, 또는 염, 예를 들어, 약학적으로 허용되는 염으로서의 화학식 (I)의 화합물을 의미하는 것이 이해되어야 한다.
발명의 진술
첫번째 양태에서, 본 발명은 하기 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 염을 제공한다:
상기 식에서,
R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소 또는 메틸이나, 단, R1 및 R2 중 적어도 하나는 메틸이고;
R3는 C1- 6알킬, C1- 6알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 또는 -CHR5(CH2)aR6이고;
R4는 벤즈이미다졸의 5 또는 6 위치에 부착되고, 이는 
이고;
R5는 수소, C1- 3알킬, C1- 3알콕시, 또는 -(CH2)dOR9이고;
R6는 수소, C1- 3알킬, C1- 3알콕시, -(CH2)eOR10, 하이드록실, -NR11R12, 할로, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 또는 헤테로아릴이고, 상기 C1- 3알킬, C1- 3알콕시, -(CH2)eOR10, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴은 C1- 3알킬, C1- 3알콕시, 할로, -CH2OH, -COOH, 및 -COCH3로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되는 1개 또는 2개의 치환기로 선택적으로 치환될 수 있고;
R7은 수소, C1- 6알킬, -(CH2)g사이클로알킬, -(CH2)h헤테로사이클로알킬, 또는 -CR13R14R15이고;
R8은 수소, C1- 6알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 또는 -CHR16R17이고, 상기 C1- 6알킬은 C1- 3알콕시로 선택적으로 치환되고, R16은 수소 또는 C1- 3알킬이고, R17은 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬이고;
R9, R10, R11, R12, R14, R15, 및 R18은 각각 독립적으로 수소 또는 C1- 3알킬이고;
R13은 수소, 하이드록실, -CH2OR18, 할로, -COOH, -CONH2, 1H-이미다졸-4-일, -SH, -SeH, C1- 3알킬, C1- 3알콕시, 페닐, 또는 4-하이드록시페닐이고, 상기 C1- 3알킬 또는 C1- 3알콕시는 할로 또는 하이드록실, -NHC(=NH2)NH2, -NH2, -COOH, -CONH2, 또는 -SCH3로 선택적으로 치환될 수 있고;
a는 0, 1, 2 또는 3이고;
b는 0 또는 1이고;
c는 1, 2 또는 3이나, 단, b가 1인 경우, c는 2 또는 3이고;
d 및 e는 각각 독립적으로 1 또는 2이고;
g 및 h는 각각 독립적으로 0, 1 또는 2이다.
본 발명의 추가 양태에서, R1 및 R2는 각각 메틸이다.
추가 구체예에서, R3는 5 또는 6원 헤테로사이클로알킬 또는 -CHR5R6 기이고, R5는 수소 또는 C1- 3알킬이고, R6는 5 또는 6원 헤테로사이클로알킬이고, 추가로, 상기 헤테로사이클로알킬은 C1-3알킬, 또는 C(O)CH3로 선택적으로 치환될 수 있다.
추가 구체예에서, R6는 
로 구성된 군으로부터 선택된다.
본 발명의 추가 구체예에서, R6는 
이다.
본 발명의 추가 구체예에서, R3는 -CHR5R6 기이고, 여기서 R5는 수소이고, R6는 
이다.
본 발명의 추가 구체예에서, R3는 
로 구성된 군으로부터 선택되고, 여기서 Ra는 수소 또는 C1-3알킬이다.
본 발명의 추가 양태에서, R5는 수소이다.
본 발명의 추가 양태에서, R3는 -CHR5(CH2)aR6 기이고, 추가로, R5는 -(CH2)dOR9이고, a는 0이고, R6는 -(CH2)eOR10이다.
본 발명의 추가 양태에서, R5 및 R6는 각각 -CH2OCH3이다.
본 발명의 추가 양태에서, R4는 벤즈이미다졸의 5 위치에 부착된다.
본 발명의 추가 양태에서, b는 0이다.
본 발명의 추가 양태에서, c는 1이다.
본 발명의 추가 양태에서, R4는 
이다.
본 발명의 추가 양태에서, R7은 수소, 메틸, 이소프로필, 세크 -부틸, 이소부틸, -CH2-페닐, -CH2-4-하이드록시페닐, -CH2OH, -CH(CH3)OH, -CH2SH, -CH2SeH, -(CH2)2SCH3, -CH2COOH, -(CH2)2COOH, -CH2CONH2, -(CH2)2CONH2, -(CH2)4NH2, -(CH2)3NHC(=NH2)NH2, 또는 -CH2-1H-이미다졸-4-일이다.
본 발명의 추가 양태에서, R7은 이소프로필, 세크 -부틸, 또는 -CH(CH3)OH이다.
본 발명의 추가 양태에서, R7은 -CH(CH3)OH이다.
본 발명의 추가 양태에서, R7은 (R)-1-하이드록시에틸이다.
본 발명의 추가 양태에서, R8은 수소이다.
본 발명의 추가 양태에서, R8은 C1- 6알킬 또는 사이클로알킬이다.
본 발명의 추가 양태에서, R8은 이소프로필, 이소부틸 또는 사이클로펜틸이다.
본 발명의 추가 양태에서, R8은 이소프로필이다.
본 발명은 상기 본원에 언급된 치환기 군의 모든 조합을 포함한다.
추가 양태에서, 본 발명은 하기 화학식 (Ia)의 화합물을 제공한다:
상기 식에서,
R3는 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 또는 -CHR5(CH2)aR6 기이고;
R5는 수소, C1- 3알킬, 또는 C1- 3알콕시이고;
R6는 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬이고, 상기 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬은 C1- 3알킬, C1- 3알콕시, 할로, -CH2OH, -COOH, 및 -COCH3로 구성된 군으로부터 선택되는 1개 또는 2개의 치환기로 선택적으로 치환될 수 있고;
R7은 수소, C1- 6알킬, -(CH2)g사이클로알킬, -(CH2)h헤테로사이클로알킬, 또는 -CR13R14R15이고;
R8은 수소, C1- 6알킬, 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬이고, 상기 C1- 6알킬은 C1-3알콕시로 선택적으로 치환되고;
R13은 수소, 하이드록실, -CH2OR18, 할로, -COOH, -CONH2, 1H-이미다졸-4-일, -SH, -SeH, C1- 3알킬, C1- 3알콕시, 페닐, 또는 4-하이드록시페닐이고, 상기 C1- 3알킬 또는 C1- 3알콕시는 할로, 하이드록실, -NHC(=NH2)NH2, -NH2, -COOH, -CONH2, 또는 -SCH3로 선택적으로 치환될 수 있고;
R14, R15 및 R18은 각각 독립적으로 수소 또는 C1- 3알킬이고;
a, g 및 h는 각각 독립적으로 0, 1 또는 2이다.
추가 양태에서, 본 발명은 하기 화학식 (Ib)의 화합물을 제공한다:
상기 식에서,
R3는 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 또는 -CHR5(CH2)aR6 기이고;
R5는 수소, C1- 3알킬, 또는 C1- 3알콕시이고;
R6는 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬이고, 상기 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬은 C1- 3알킬, C1- 3알콕시, 할로, -CH2OH, -COOH, 및 -COCH3로 구성된 군으로부터 선택되는 1개 또는 2개의 치환기로 선택적으로 치환될 수 있고;
R7은 수소, C1- 6알킬, -(CH2)g사이클로알킬, -(CH2)h헤테로사이클로알킬, 또는 -CR13R14R15이고;
R8은 수소, C1- 6알킬, 사이클로알킬, 또는 헤테로사이클로알킬이고, 상기 C1- 6알킬은 C1- 3알콕시로 선택적으로 치환되고;
R13은 수소, 하이드록실, -CH2OR18, 할로, -COOH, -CONH2, 1H-이미다졸-4-일, -SH, -SeH, C1- 3알킬, C1- 3알콕시, 페닐, 또는 4-하이드록시페닐이고, 상기 C1- 3알킬 또는 C1- 3알콕시는 할로, 하이드록실, -NHC(=NH2)NH2, -NH2, -COOH, -CONH2, 또는 -SCH3로 선택적으로 치환될 수 있고;
R14, R15 및 R18은 각각 독립적으로 수소 또는 C1- 3알킬이고;
a, g 및 h는 각각 독립적으로 0, 1 또는 2이다.
추가 양태에서, 본 발명은 하기 화학식 (Ia)의 화합물을 제공한다:
상기 식에서,
R3는 C1- 6알킬, C1- 6알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 또는 -CHR5(CH2)aR6이고;
R5는 수소, C1- 3알킬, C1- 3알콕시, 또는 -(CH2)dOR9이고;
R6는 수소, C1- 3알킬, C1- 3알콕시, -(CH2)eOR10, 하이드록실, -NR11R12, 할로, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 또는 헤테로아릴이고, 상기 C1- 3알킬, C1- 3알콕시, -(CH2)eOR10, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴은 C1- 3알킬, C1- 3알콕시, 할로, -CH2OH, -COOH, 및 -COCH3로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되는 1개 또는 2개의 치환기로 선택적으로 치환될 수 있고;
R7은 C1- 6알킬, -CH2OH, -CH2OCH3, -(CH2)2OCH3, -CH(CH3)OH, 또는 -C(CH3)2OH이고;
R8은 수소, C1- 6알킬, 사이클로알킬, 또는 헤테로사이클로알킬이고, 상기 C1- 6알킬은 C1-3알콕시로 선택적으로 치환되고;
R9, R10, R11, 및 R12는 각각 독립적으로 수소 또는 C1- 3알킬이고;
a는 0, 1 또는 2이고;
d 및 e는 각각 독립적으로 1 또는 2이다.
추가 양태에서, 본 발명은 하기 화학식 (Ib)의 화합물을 제공한다:
상기 식에서,
R3는 C1- 6알킬, C1- 6알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 또는 -CHR5(CH2)aR6이고;
R5는 수소, C1- 3알킬, C1- 3알콕시, 또는 -(CH2)dOR9이고;
R6는 수소, C1- 3알킬, C1- 3알콕시, -(CH2)eOR10, 하이드록실, -NR11R12, 할로, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 또는 헤테로아릴이고, 상기 C1- 3알킬, C1- 3알콕시, -(CH2)eOR10, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴은 C1- 3알킬, C1- 3알콕시, 할로, -CH2OH, -COOH, 및 -COCH3로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되는 1개 또는 2개의 치환기로 선택적으로 치환될 수 있고;
R7은 C1- 6알킬, -CH2OH, -CH2OCH3, -(CH2)2OCH3, -CH(CH3)OH, 또는 -C(CH3)2OH이고;
R8은 수소, C1- 6알킬, 사이클로알킬, 또는 헤테로사이클로알킬이고, 상기 C1- 6알킬은 C1-3알콕시로 선택적으로 치환되고;
R9, R10, R11, 및 R12는 각각 독립적으로 수소 또는 C1- 3알킬이고;
a는 0, 1 또는 2이고;
d 및 e는 각각 독립적으로 1 또는 2이다.
추가 양태에서, 본 발명은 하기 화학식 (Ia)의 화합물을 제공한다:
상기 식에서,
R3는 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 또는 -CHR5(CH2)aR6이고;
R5는 수소 또는 C1- 3알킬이고;
R6는 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬이고, 상기 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬은 C1- 3알킬, C1- 3알콕시, 할로, -CH2OH, -COOH, 및 -COCH3로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되는 1개 또는 2개 치환기로 선택적으로 치환될 수 있고;
R7은 C1- 6알킬, -CH2OH, -CH2OCH3, -(CH2)2OCH3, -CH(CH3)OH, 또는 -C(CH3)2OH이고;
R8은 수소, C1- 6알킬, 사이클로알킬, 또는 헤테로사이클로알킬이고, 상기 C1- 6알킬은 C1-3알콕시로 선택적으로 치환되고;
a는 0, 1 또는 2이다.
추가 양태에서, 본 발명은 하기 화학식 (Ib)의 화합물을 제공한다:
상기 식에서,
R3는 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 또는 -CHR5(CH2)aR6이고;
R5는 수소 또는 C1- 3알킬이고;
R6는 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬이고, 상기 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬은 C1- 3알킬, C1- 3알콕시, 할로, -CH2OH, -COOH, 및 -COCH3로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되는 1개 또는 2개 치환기로 선택적으로 치환될 수 있고;
R7은 C1- 6알킬, -CH2OH, -CH2OCH3, -(CH2)2OCH3, -CH(CH3)OH, 또는 -C(CH3)2OH이고;
R8은 수소, C1- 6알킬, 사이클로알킬, 또는 헤테로사이클로알킬이고, 상기 C1- 6알킬은 C1- 3알콕시로 선택적으로 치환되고;
a는 0, 1 또는 2이다.
추가 양태에서, 본 발명은 하기 화학식 (Ia)의 화합물을 제공한다:
상기 식에서,
R3는 
로 구성된 군으로부터 선택되고, 여기서 Ra는 수소 또는 C1- 3알킬이고;
R7은 이소프로필, 세크-부틸, 또는 -CH(CH3)OH이고;
R8은 이소프로필, 이소부틸, 세크-부틸, 터트-부틸, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 또는 -CH2OCH3이다.
추가 양태에서, 본 발명은 하기 화학식 (Ib)의 화합물을 제공한다:
상기 식에서,
R3는 
로 구성된 군으로부터 선택되고, 여기서 Ra는 수소 또는 C1- 3알킬이고;
R7은 이소프로필, 세크-부틸, 또는 -CH(CH3)OH이고;
R8은 이소프로필, 이소부틸, 세크-부틸, 터트-부틸, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 또는 -CH2OCH3이다.
추가 양태에서, 본 발명은 하기 화학식 (Ic)의 화합물을 제공한다:
상기 식에서,
R6는 
로 구성된 군으로부터 선택되고;
R7은 이소프로필, 세크-부틸, 또는 -CH(CH3)OH이고;
R8은 수소, C3- 6알킬 또는 사이클로알킬이다.
추가 양태에서, 본 발명은 하기 화학식 (Id)의 화합물을 제공한다:
상기 식에서,
R6는 
로 구성된 군으로부터 선택되고;
R7은 이소프로필, 세크-부틸, 또는 -CH(CH3)OH이고;
R8은 수소, C3- 6알킬 또는 사이클로알킬이다.
추가 양태에서, 본 발명은 하기 화학식 (Ic)의 화합물을 제공한다:
상기 식에서,
R6는 
로 구성된 군으로부터 선택되고;
R7은 이소프로필, 세크-부틸, 또는 -CH(CH3)OH이고;
R8은 이소프로필, 이소부틸 또는 사이클로펜틸이다.
추가 양태에서, 본 발명은 하기 화학식 (Id)의 화합물을 제공한다:
상기 식에서,
R6는 
로 구성된 군으로부터 선택되고;
R7은 이소프로필, 세크-부틸, 또는 -CH(CH3)OH이고;
R8은 이소프로필, 이소부틸 또는 사이클로펜틸이다.
추가 구체예에서, 본 발명은 하기 화학식 (I)의 화합물 및 이의 염에 관한 것이다:
상기 식에서,
R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소 또는 메틸이나, 단, R1 및 R2 중 적어도 하나는 메틸이고;
R3는 C1- 6알킬, C1- 6알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 또는 -CHR5(CH2)aR6이고;
R4는 벤즈이미다졸의 5 또는 6 위치에 부착되고, 이는 
이고;
R5는 수소, C1- 3알킬, C1- 3알콕시, 또는 -(CH2)dOR9이고;
R6는 수소, C1- 3알킬, C1- 3알콕시, -(CH2)eOR10, 하이드록실, -NR11R12, 할로, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 또는 헤테로아릴이고, 상기 C1- 3알킬, C1- 3알콕시, -(CH2)eOR10, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴은 C1- 3알킬, C1- 3알콕시, 할로, -CH2OH, -COOH, 및 -COCH3로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되는 1개 또는 2개의 치환기로 선택적으로 치환될 수 있고;
R7은 수소, C1- 6알킬, -(CH2)g사이클로알킬, -(CH2)h헤테로사이클로알킬, 또는 -CR13R14R15이고;
R8은 C1- 6알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 또는 -CHR16R17이고, 상기 C1-6알킬은 C1- 3알콕시로 선택적으로 치환되고, R16은 수소 또는 C1- 3알킬이고, R17은 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬이고;
R9, R10, R11, R12, R14, R15, 및 R18은 각각 독립적으로 수소 또는 C1- 3알킬이고;
R13은 수소, 하이드록실, -CH2OR18, 할로, -COOH, -CONH2, 1H-이미다졸-4-일, -SH, -SeH, C1- 3알킬, C1- 3알콕시, 페닐, 또는 4-하이드록시페닐이고, 상기 C1- 3알킬 또는 C1- 3알콕시는 할로 또는 하이드록실, -NHC(=NH2)NH2, -NH2, -COOH, -CONH2, 또는 -SCH3로 선택적으로 치환될 수 있고;
a는 0, 1, 2 또는 3이고;
b는 0 또는 1이고;
c는 1, 2 또는 3이나, 단, b가 1인 경우, c는 2 또는 3이고;
d 및 e는 각각 독립적으로 1 또는 2이고;
g 및 h는 각각 독립적으로 0, 1 또는 2이다.
화학식 (I)의 화합물의 특정 예는 하기와 같다:
터트-부틸 (2S,3R)-2-{[(1-{[(3R)-1-아세틸피페리딘-3-일]메틸}-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일)메틸]아미노}-3-하이드록시부타노에이트;
터트-부틸 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
2-메틸프로필 (2S)-2-[(2-{[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]옥시}에틸)아미노]-3-하이드록시부타노에이트;
2-메틸프로필 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(3S)-옥산-3-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
터트-부틸 (2S,3R)-2-{[(1-{[(3R)-1-아세틸피페리딘-3-일]메틸}-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일)메틸]아미노}-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-{[(1-{[(3R)-1-아세틸피페리딘-3-일]메틸}-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일)메틸]아미노}-3-하이드록시부타노에이트;
2-메틸프로필 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-3-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
사이클로펜틸 (2S)-2-[(2-{[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]옥시}에틸)아미노]프로파노에이트;
프로판-2-일 (2S)-2-[(2-{[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]옥시}에틸)아미노]-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-{[(1-{[(3R)-1-아세틸피페리딘-3-일]메틸}-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일)메틸]아미노}-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(3R)-옥산-3-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
사이클로부틸 (2S,3R)-2-{[(1-{[(3R)-1-아세틸피페리딘-3-일]메틸}-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일)메틸]아미노}-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S)-2-{[(1-{[(3R)-1-아세틸피페리딘-3-일]메틸}-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일)메틸]아미노}-3-메틸부타노에이트;
사이클로펜틸 (2S)-2-[(2-{[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]옥시}에틸)아미노]-3-메톡시프로파노에이트;
2,2-디메틸프로필 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(3R)-옥산-3-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
사이클로부틸 (2S,3R)-2-[(2-{[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]옥시}에틸)아미노]-3-하이드록시부타노에이트;
사이클로펜틸 (2S)-2-[(2-{[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]옥시}에틸)아미노]프로파노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-3-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-{[(1-{[(3S)-1-아세틸피페리딘-3-일]메틸}-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일)메틸]아미노}-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(3R)-옥산-3-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(3R)-옥산-3-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
사이클로부틸 (2R,3S)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(3R)-옥산-3-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
(3S)-옥솔란-3-일 (2S,3R)-2-[(2-{[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]옥시}에틸)아미노]-3-하이드록시부타노에이트;
사이클로펜틸 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
(2S)-부탄-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
사이클로펜틸 (2S)-2-[(2-{[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]옥시}에틸)아미노]-3-메톡시프로파노에이트;
(3S)-옥솔란-3-일 (2S)-2-[(2-{[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]옥시}에틸)아미노]-3-메틸부타노에이트;
(2S)-1-메톡시프로판-2-일 (2S)-2-[(2-{[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]옥시}에틸)아미노]-3-메틸부타노에이트;
2-메틸프로필 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(3R)-옥산-3-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
2-메틸프로필 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(2S)-옥산-2-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
터트-부틸 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-2-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
2-메틸프로필 (2S,3R)-2-{[(1-{[(3S)-1-아세틸피페리딘-3-일]메틸}-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일)메틸]아미노}-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-2-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(2R)-옥산-2-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
2-메틸프로필 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(2R)-옥산-2-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
터트-부틸 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(2R)-옥산-2-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
터트-부틸 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(2R)-옥산-2-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
2-메틸프로필 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(2R)-옥산-2-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[1-(1,3-디메톡시프로판-2-일)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
사이클로부틸 (2R,3S)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(3R)-옥산-3-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
터트-부틸 (2S,3R)-2-[(2-{[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]옥시}에틸)아미노]-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(1R)-1-(옥산-4-일)에틸]-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
터트-부틸 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(1R)-1-(옥산-4-일)에틸]-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({2-[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]에틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
2,2-디메틸프로필 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
사이클로펜틸 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
2-메틸프로필 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-2-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
2-메틸프로필 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S)-2-[(2-{[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]옥시}에틸)아미노]-3-하이드록시부타노에이트;
2-하이드록시-2-메틸프로필 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-2-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
2-메틸프로필 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-2-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
터트-부틸 (2S,3R)-2-{[(1-{[(3S)-1-아세틸피페리딘-3-일]메틸}-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일)메틸]아미노}-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(2R)-옥산-2-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(2S)-옥산-2-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(2S)-옥산-2-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[1-(1,3-디메톡시프로판-2-일)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
사이클로부틸 (2S,3R)-2-({[1-(1,3-디메톡시프로판-2-일)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
터트-부틸 (2S,3R)-2-({[1-(1,3-디메톡시프로판-2-일)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
사이클로부틸 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(1-메톡시부탄-2-일)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(1-메톡시부탄-2-일)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-{[(1-{[(3S)-1-아세틸피페리딘-3-일]메틸}-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일)메틸]아미노}-3-하이드록시부타노에이트;
사이클로부틸 (2S,3R)-2-{[(1-{[(3S)-1-아세틸피페리딘-3-일]메틸}-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일)메틸]아미노}-3-하이드록시부타노에이트;
터트-부틸 (2S,3R)-2-{[(1-{[(3S)-1-아세틸피페리딘-3-일]메틸}-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일)메틸]아미노}-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S)-4-클로로-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)부타노에이트;
사이클로펜틸 (2S)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-4-메틸펜타노에이트;
2-메틸프로필 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
(3S)-옥솔란-3-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
2-메틸프로필 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-{[(2R)-4-메틸모르폴린-2-일]메틸}-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
(3S)-옥솔란-3-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
사이클로부틸 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
2-메틸프로필 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(2S)-옥산-2-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(3S)-피페리딘-3-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
(3S)-옥솔란-3-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-2-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
(3S)-옥솔란-3-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(2R)-옥산-2-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
(3S)-옥솔란-3-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(2R)-옥산-2-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
터트-부틸 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(1-메톡시부탄-2-일)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
터트-부틸 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[1-(옥산-4-일)에틸]-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
터트-부틸 (2S,3R)-2-({2-[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]에틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
사이클로펜틸 (2S)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(2S)-1-메톡시프로판-2-일]-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-메톡시프로파노에이트;
터트-부틸 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(3S)-피페리딘-3-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
2-메틸프로필 (2S)-2-[(2-{[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(2S)-1-메톡시프로판-2-일]-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]옥시}에틸)아미노]-3-메톡시프로파노에이트;
사이클로펜틸 (2S)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시프로파노에이트;
터트-부틸 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(1-메톡시부탄-2-일)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[1-(옥산-4-일)에틸]-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(3S)-옥솔란-3-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
터트-부틸 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(3S)-옥솔란-3-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
2-메틸프로필 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(4-메틸모르폴린-2-일)메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
2-메틸프로필 (2S)-2-[(2-{[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]옥시}에틸)아미노]-3-하이드록시부타노에이트;
(3S)-옥솔란-3-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-메톡시부타노에이트;
2-메틸프로필 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(2S)-1-메톡시프로판-2-일]-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-3-하이드록시-2-({[2-(5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(3R)-옥산-3-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)부타노에이트;
(3S)-옥솔란-3-일 (2S,3S)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(2S)-1-메톡시프로판-2-일]-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
터트-부틸 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(2S)-1-메톡시프로판-2-일]-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-[(2-{[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(2S)-1-메톡시프로판-2-일]-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]옥시}에틸)아미노]-3-하이드록시부타노에이트;
터트-부틸 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥솔란-3-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(1-메톡시부탄-2-일)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
사이클로부틸 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(1-메톡시부탄-2-일)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
터트-부틸 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(3R)-옥솔란-3-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(3R)-옥솔란-3-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥솔란-3-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트; 및
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(1-메톡시부탄-2-일)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트, 또는 이들의 염.
추가 구체예에서, 본 발명은 하기로 구성된 군으로부터 선택되는 화합물 또는 이의 염을 제공한다:
터트-부틸 (2S,3R)-2-{[(1-{[(3R)-1-아세틸피페리딘-3-일]메틸}-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일)메틸]아미노}-3-하이드록시부타노에이트;
터트-부틸 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
2-메틸프로필 (2S)-2-[(2-{[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]옥시}에틸)아미노]-3-하이드록시부타노에이트;
2-메틸프로필 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(3S)-옥산-3-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
터트-부틸 (2S,3R)-2-{[(1-{[(3R)-1-아세틸피페리딘-3-일]메틸}-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일)메틸]아미노}-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-{[(1-{[(3R)-1-아세틸피페리딘-3-일]메틸}-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일)메틸]아미노}-3-하이드록시부타노에이트;
2-메틸프로필 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-3-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
사이클로펜틸 (2S)-2-[(2-{[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]옥시}에틸)아미노]프로파노에이트;
프로판-2-일 (2S)-2-[(2-{[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]옥시}에틸)아미노]-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-{[(1-{[(3R)-1-아세틸피페리딘-3-일]메틸}-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일)메틸]아미노}-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(3R)-옥산-3-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
사이클로부틸 (2S,3R)-2-{[(1-{[(3R)-1-아세틸피페리딘-3-일]메틸}-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일)메틸]아미노}-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S)-2-{[(1-{[(3R)-1-아세틸피페리딘-3-일]메틸}-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일)메틸]아미노}-3-메틸부타노에이트;
사이클로펜틸 (2S)-2-[(2-{[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]옥시}에틸)아미노]-3-메톡시프로파노에이트;
2,2-디메틸프로필 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(3R)-옥산-3-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
사이클로부틸 (2S,3R)-2-[(2-{[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]옥시}에틸)아미노]-3-하이드록시부타노에이트;
사이클로펜틸 (2S)-2-[(2-{[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]옥시}에틸)아미노]프로파노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-3-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-{[(1-{[(3S)-1-아세틸피페리딘-3-일]메틸}-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일)메틸]아미노}-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(3R)-옥산-3-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(3R)-옥산-3-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
사이클로부틸 (2R,3S)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(3R)-옥산-3-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트; 및
(3S)-옥솔란-3-일 (2S,3R)-2-[(2-{[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]옥시}에틸)아미노]-3-하이드록시부타노에이트.
추가 구체예에서, 본 발명은 화학식 
의 (2S,3R)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트인 화합물 또는 이의 염을 제공한다.
추가 구체예에서, 본 발명은 화학식 
의 (2S,3R)-2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부탄산인 화합물 또는 이의 염을 제공한다.
추가 구체예에서, 본 발명은 화학식 
의 (2S,3R)-이소프로필 2-(((1-(1,3-디메톡시프로판-2-일)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트인 화합물 또는 이의 염을 제공한다.
추가 구체예에서, 본 발명은 화학식 
의 (2S,3R)-2-(((1-(1,3-디메톡시프로판-2-일)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부탄산인 화합물 또는 이의 염을 제공한다.
본 발명의 추가 구체예에서, 화학식 (I)의 화합물은 자유 염기 형태이다. 한 구체예에서, 자유 염기 형태의 화학식 (I)의 화합물은 실시예 1 내지 324의 화합물 중 어느 하나이다.
화학식 (I)의 화합물의 염은 약학적으로 허용되는 염 및 약학적으로 허용되지 않을 수 있으나 화학식 (I)의 화합물의 제조에 유용할 수 있는 염 및 이의 약학적으로 허용되는 염을 포함한다.
본 발명의 한 구체예에서, 화학식 (I)의 화합물은 약학적으로 허용되는 염의 형태이다. 한 구체예에서, 실시예 1 내지 324 중 임의의 화합물은 약학적으로 허용되는 염의 형태이다.
화학식 (I)의 화합물은 산성 또는 염기성 작용기를 함유할 수 있고, 따라서 당업자는 화학식 (I)의 화합물의 약학적으로 허용되는 염이 제조될 수 있음을 인지할 것이다. 본 발명의 화합물의 약학적으로 허용되는 염은, 예를 들어, 개선된 안정성, 용해도, 및/또는 결정성을 가질 수 있어, 약제로서의 개발을 촉진할 수 있다.
화학식 (I)의 화합물은 염기성 작용기를 함유할 수 있고, 적합한 산(무기산 또는 유기산)을 이용한 처리에 의해 약학적으로 허용되는 산 부가염을 형성시킬 수 있다. 대표적인 약학적으로 허용되는 산 부가염은 하이드로클로라이드, 하이드로브로마이드, 니트레이트, 설페이트, 바이설페이트, 설파메이트, 포스페이트, 아세테이트, 하이드록시아세테이트, 페닐아세테이트, 프로피오네이트, 부티레이트, 이소부티레이트, 발레레이트, 말레에이트, 하이드록시말레에이트, 아크릴레이트, 푸마레이트, 말레에이트, 타르트레이트, 시트레이트, 살리실레이트, p-아미노살리실레이트, 글리콜레이트, 락테이트, 헵타노에이트, 프탈레이트, 옥살레이트, 숙시네이트, 벤조에이트, o-아세톡시벤조에이트, 클로로벤조에이트, 메틸벤조에이트, 디니트로벤조에이트, 하이드록시벤조에이트, 메톡시벤조에이트, 나프토에이트, 하이드록시나프토에이트, 만델레이트, 탄네이트, 포르메이트, 스테아레이트, 아스코르베이트, 팔미테이트, 올레에이트, 피루베이트, 파모에이트, 말로네이트, 라우레이트, 글루타레이트, 글루타메이트, 에스톨레이트, 메탄설포네이트(메실레이트), 에탄설포네이트(에실레이트), 2-하이드록시에탄설포네이트, 벤젠설포네이트(베실레이트), p-아미노벤젠설포네이트, p-톨루엔설포네이트(토실레이트), 및 나프탈렌-2-설포네이트를 포함한다. 또 다른 구체예에서, 약학적으로 허용되는 염은 1,2-에탄디설폰산(에디실레이트) 염이다.
화학식 (I)의 화합물은 산성 작용기를 함유할 수 있고, 적합한 약학적으로 허용되는 염은 상기 산성 작용기의 염을 포함한다. 대표적 염은 약학적으로 허용되는 금속 염, 예를 들어, 소듐, 포타슘, 리튬, 칼슘, 마그네슘, 알루미늄, 및 아연 염; 약학적으로 허용되는 유기 일차, 이차, 및 삼차 아민, 예를 들어, 지방족 아민, 방향족 아민, 지방족 디아민, 및 하이드록시 알킬아민, 예를 들어, 메틸아민, 에틸아민, 2-하이드록시에틸아민, 디에틸아민, TEA, 에틸렌디아민, 에탄올아민, 디에탄올아민, 및 사이클로헥실아민을 포함한다.
한 구체예에서, 화학식 
의 (2S,3R)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트의 1,2-에탄디설폰산 염인 화합물이 제공된다.
한 구체예에서, (2S,3R)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트, 1,2-에탄디설폰산 염의 결정성 고체상 형태가 제공된다.
추가 구체예에서, 표 1에 제시된 2θ 값에서 유의한 회절 피크를 갖는 X-선 분말 회절(XRPD) 패턴을 특징으로 하는 (2S,3R)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트, 1,2-에탄디설폰산 염의 결정성 고체상 형태가 제공된다.
표 1: (
2S,3R
)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트의 1,2-에탄디설폰산 염에 대한 XRPD 피크 표
추가 구체예에서, 5.4, 8.8, 9.9, 11.6, 13.8, 16.9, 18.0, 16.6, 19.1, 19.4, 19.8, 20.4, 20.9, 21.3, 22.0, 22.4, 22.9, 23.4, 24.9, 및 25.1도의 2θ 값 ± 0.1° 2θ 실험 오차의 유의한 회절 피크를 갖는 X-선 분말 회절(XRPD) 패턴을 특징으로 하는 (2S,3R)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트, 1,2-에탄디설폰산 염의 결정성 고체상 형태가 제공된다.
적합한 염에 대한 개관을 위해, 문헌[Berge et al., J. Pharm . Sci ., 66:1-19 (1977)]을 참조한다. 본 발명은 이의 범위 내에 화학식 (I)의 화합물의 염의 모든 가능한 화학량론적 및 비-화학량론적 형태를 포함한다.
염은 당 분야에 널리 공지된 기술을 이용하여, 예를 들어, 용액으로부터의 침전 후 여과에 의하거나, 용매의 증발에 의해 형성될 수 있다.
많은 유기 화합물이 이들이 반응하거나, 이들이 침전되거나 결정화되는 용매와 복합체를 형성할 수 있음이 인지될 것이다. 이들 복합체는 "용매화물"로 공지되어 있다. 예를 들어, 물과의 복합체는 "수화물"로 공지되어 있다. 높은 비등점을 갖는 용매 및/또는 수소 결합을 형성하는 높은 경향을 갖는 용매, 예를 들어, 물, 에탄올, 이소-프로필 알콜, 및 N-메틸 피롤리디논이 사용되어 용매화물을 형성할 수 있다. 용매화의 확인을 위한 방법은 NMR 및 미세분석을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 염은 용매화된 형태 및 용매화되지 않은 형태로 존재할 수 있다.
본 발명의 특정 화합물은 토토머 형태로 존재할 수 있다. 본 발명은 개별적 토토머이거나 이의 혼합물이건 간에 본 발명의 화합물의 토토머 모두를 포함하는 것이 이해될 것이다.
본 발명의 화합물은 결정성 또는 무정형 형태일 수 있다. 본 발명의 화합물의 가장 열역학적으로 안정한 결정성 형태가 특히 흥미롭다.
본 발명의 화합물의 결정성 형태는 X-선 분말 회절(XRPD), 적외선 분광법(IR), 라만 분광법, 시차 주사 열량법(DSC), 열중량 분석(TGA) 및 고체상 핵 자기 공명(ssNMR)을 포함하나 이에 제한되지는 않는 다수의 통상적인 분석 기술을 이용하여 특성규명되고 구별될 수 있다.
본 발명은 또한 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 모든 적합한 동위원소 변이체를 포함한다. 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 동위원소 변이체는 적어도 하나의 원자가 동일한 원자 번호를 갖지만, 자연에서 일반적으로 발견되는 원자 질량과 상이한 원자 질량을 갖는 원자에 의해 대체된 것으로 정의된다. 본 발명의 화합물로 혼입될 수 있는 동위원소의 예는 수소, 탄소, 질소, 산소, 플루오르 및 염소의 동위원소, 예를 들어, 각각 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 17O, 18O, 18F 및 36Cl을 포함한다. 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 염 또는 용매화물의 특정한 동위원소 변이체, 예를 들어, 3H 또는 14C와 같은 방사성 동위원소가 혼입된 것이 약물 및/또는 기질 조직 분포 연구에서 유용하다. 삼중수소, 즉, 3H, 및 탄소-14, 즉, 14C 동위원소가 이들의 제조 용이성 및 검출성으로 인해 특히 바람직하다. 또한, 중수소, 즉, 2H와 같은 동위원소를 이용한 치환은 더 큰 대사적 안정성으로부터 발생하는 특정한 치료적 장점, 예를 들어, 증가된 생체내 반감기 또는 감소된 투여 요구사항을 제공할 수 있으며, 따라서 일부 환경에서 바람직할 수 있다. 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적 염의 동위원소 변이체는 일반적으로 예시적 방법과 같은 통상적인 절차에 의해, 또는 적합한 시약의 적절한 동위원소 변형을 이용하는 하기 실시예에 기재된 제법에 의해 제조될 수 있다.
화학식 (I)의 화합물 및 이의 약학적으로 허용되는 염은 하나 이상의 비대칭 중심(또한 키랄 중심으로도 언급됨)을 함유할 수 있고, 따라서 개별적 거울상 이성질체, 부분입체 이성질체, 또는 다른 입체이성질체 형태, 또는 이들의 혼합물로 존재할 수 있다. 키랄 중심, 예를 들어, 키랄 탄소 원자는 또한 알킬기와 같은 치환기에 존재할 수 있다. 화학식 (I)의 화합물 또는 본원에 예시된 임의의 화학 구조에 존재하는 키랄 중심의 입체화학이 특정되지 않은 경우, 상기 구조는 모든 개별적 입체이성질체 및 이의 모든 혼합물을 포함하는 것으로 의도된다. 따라서, 하나 이상의 키랄 중심을 함유하는 화학식 (I)의 화합물 및 이의 약학적으로 허용되는 염은 라세미 혼합물, 거울상 이성질체적으로 농축된 혼합물, 또는 거울상 이성질체적으로 순수한 개별적 입체이성질체로 사용될 수 있다.
하나 이상의 비대칭 중심을 함유하는 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 개별적 입체이성질체는 당업자에게 공지된 방법에 의해 분리될 수 있다. 예를 들어, 상기 분리는 (1) 부분입체 이성질체 염, 복합체 또는 다른 유도체의 형성에 의하거나; (2) 입체이성질체-특이적 시약과의 선택적 반응, 예를 들어, 효소적 산화 또는 환원에 의하거나; (3) 키랄 환경, 예를 들어, 결합된 키랄 리간드를 갖는 실리카와 같은 키랄 지지체 상에서 또는 키랄 용매의 존재하에서 기체-액체 또는 액체 크로마토그래피에 의해 수행될 수 있다. 당업자는 원하는 입체이성질체가 상기 기재된 분리 절차 중 하나에 의해 또 다른 화학적 존재물로 전환되는 경우, 원하는 형태를 유리시키기 위해 추가 단계가 필요함을 인지할 것이다. 대안적으로, 특정 입체이성질체는 광학적 활성 시약, 기질, 촉매 또는 용매를 이용한 비대칭 합성 또는 비대칭 전환에 의한 한 거울상 이성질체의 다른 거울상 이성질체로의 전환에 의해 합성될 수 있다.
본원에 기재된 본 발명의 특정 화합물은 세포벽을 통한 화합물의 침투를 촉진하는 알파 아미노산 에스테르를 갖는다. 세포 내부에서, 에스테르는 세포내 카르복시에스테라제에 의해 가수분해되어 모(parent) 산을 방출한다. 이의 전하로 인해, 모 산은 감소된 침투성을 갖고, 따라서 세포 내에 유지되며, 여기서 이는 더욱 농축되어 증가된 효력 및 작용 기간을 발생시킨다. 알파 아미노산 에스테르를 포함하는 본 발명의 화합물이 세포내 에스테라제에 의해 이의 상응하는 카르복실산으로 전환되더라도, 에스테르 및 이의 상응하는 산 둘 모두는 BET 족 브로모도메인 함유 단백질의 억제제로 작용한다. 한 구체예에서, 본 발명의 화합물은, 예를 들어, 아세틸화된 리신 잔기에 대한 4개의 공지된 BET 족 브로모도메인 함유 단백질(예를 들어, BRD2, BRD3, BRD4 및 BRDt) 중 하나 이상의 결합을 억제할 수 있다. 추가 구체예에서, 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염은 인지체 아세틸화 리신 잔기에 대한 BRD4의 결합을 억제할 수 있다. 본 발명의 화합물은 공지된 BET 억제제에 비해 개선된 프로파일을 가질 수 있고, 예를 들어, 특정 화합물은 하기 특성 중 하나 이상을 가질 수 있다:
(i) 효능 있는 BET 억제 활성;
(ii) BET 족 단백질 외에 다른 공지된 브로모도메인 함유 단백질에 비한 선택성;
(iii) 다른 BET 족 구성원에 비한 특정 BET 족 구성원에 대한 선택성;
(iv) 임의의 제공된 BET 족 구성원에 대해 하나의 결합 도메인(즉, BD2에 비해 BD1 또는 그 반대)에 대한 선택성;
(v) 개선된 개발성(예를 들어, 원하는 용해도 프로파일, 약동학 및 약역학); 또는
(vi) 감소된 부작용 프로파일.
또한, 본 발명의 특정 화합물은 BET 족 단백질 외의 다른 공지된 브로모도메인 함유 단백질, 예를 들어, 아연 핑거 도메인 단백질 2A(BAZ2A)에 인접한 브로모도메인을 억제할 수 있다.
본 발명의 화합물은 벤즈이미다졸 코어의 5- 또는 6-위치에 부착된 R4 치환기를 포함하며, 이는 알파 아미노산 에스테르기이며, 또한 상응하는 카르복실산을 포획한다. R4의 알파 아미노산 에스테르의 특정 구조는 에스테르가 hCE-1이 아닌 다른 카르복시에스테라제(예를 들어, hCE-2 및 hCE-3)를 함유하는 세포에 의해서가 아니라 카르복시에스테라제 hCE-1을 함유하는 세포에 의해 가수분해되는 것을 보장한다. 이러한 특성은 hCE-1을 발현하는 세포, 예를 들어, 대식세포, 단핵구 및 수지상 세포로의 본 발명의 화합물의 선택적 표적화를 가능케 한다.
카르복시에스테라제 hCE-2 및 hCE-3은 편재성 발현 패턴을 갖는 반면, hCE-1은 간, 폐 및 골수에서 고도로 발현되나, 중요하게는 특정 유형의 세포, 예를 들어, 단핵구, 대식세포 및 수지상 세포에서만 발견된다.
알파 아미노산 에스테르기의 구조, 특히 위치 R7 및 R8에서의 치환 패턴은 hCE-1을 함유하는 세포 내의 화합물의 가수분해의 속도를 결정할 수 있고, 가수분해의 원하는 속도는 선택된 투여 경로에 따라 상이할 수 있다.
hCE-1은 간세포에 존재하고, 따라서 경구 투여된 화합물에 대해 더 느린 속도의 가수분해를 갖는 에스테르기는 첫번째 통과 대사 후 충분한 양의 화합물이 혈류로 진입하는 것을 보장하는 것이 바람직하다.
본 발명의 한 구체예에서, 경구 투여되는 화합물에 대한 바람직한 가수분해 속도는 R7이 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 또는 -CR13R14R15인 경우에 획득될 수 있으며, 상기에서 R13은 수소, 하이드록실, -CH2OH, -CH2C1 - 3알킬, 할로, C1- 3알킬, 또는 C1- 3알콕시이고, 상기 C1- 3알킬 또는 C1- 3알콕시는 할로 또는 하이드록실로 선택적으로 치환될 수 있고; R14, 및 R15는 독립적으로 수소 또는 C1- 3알킬이나, 단, R13, R14 및 R15 중 적어도 2개는 수소가 아니다. 추가 구체예에서, R7은 이소프로필, -CH(CH3)OH, 세크-부틸, 터트-부틸, 터트-펜틸, 세크-펜틸, 3-펜틸 또는 사이클로알킬이다. 유사하게, R8은 -CHR16R17이고, 여기서 R16은 C1- 3알킬이고, R17은 C1- 6알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬이고, 상기 C1- 6알킬은 C1- 3알콕시로 선택적으로 치환되거나, R16 및 R17은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬을 형성한다. 추가 구체예에서, R8은 이소프로필, 세크-부틸, 세크-펜틸, 3-펜틸, 또는 사이클로알킬이다.
한 구체예에서, 본 발명은 또한 알파 아미노산 에스테르를 포함하는 예시된 공유 컨쥬게이트(즉, 알파 아미노산 에스테르를 포함하는 실시예 1 내지 324의 공유 컨쥬게이트)의 각각의 상응하는 산을 포함한다.
용도의 진술
화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염은 BET 억제제이며, 따라서 전신 또는 조직 염증, 감염 또는 저산소증에 대한 염증 반응, 세포 활성화 및 증식, 지질 대사, 섬유증과 관련된 다양한 질병 또는 질환의 치료 및 바이러스 감염의 예방 및 치료에서 치료적 유용성을 가질 수 있다.
BET 억제제는 매우 다양한 급성 또는 만성 자가면역 또는 염증성 질환, 예를 들어, 류마티스 관절염, 골관절염, 급성 통풍, 건선, 전신 홍반 루푸스, 폐동맥 고혈압(PAH), 다발경화증, 염증성 장질병(크론병 및 궤양성 대장염), 천식, 만성 폐쇄성 기도 질환, 폐렴, 심근염, 심낭염, 근염, 습진, 피부염(아토피 피부염을 포함함), 탈모증, 백반증, 수포 피부병, 신염, 혈관염, 고콜레스테롤혈증, 죽상경화증, 알츠하이머병, 우울증, 쇼그렌 증후군, 타액선염, 중심 망막 정맥 폐쇄, 분지형 망막 정맥 폐쇄, 어바인-가스 증후군(백내장 후 및 수술 후), 색소성 망막염, 주변포도막염, 버드샷 망막맥락막증(birdshot retinochoroidopathy), 망막앞막, 낭성 황반 부종, 중심오목부근 모세혈관확장증(parafoveal telengiectasis), 견인 황반병증(tractional maculopathy), 유리체황반 견인 증후군(vitreomacular traction syndrome), 망막 박리, 시신경망막염, 특발성 황반 부종, 망막염, 안구건조증(건성 각막결막염), 봄철 각막결막염, 아토피 각막결막염, 포도막염(예를 들어, 앞포도막염, 전체포도막염, 뒤포도막염, 포도막염-관련 황반 부종), 공막염, 당뇨망막병증, 당뇨 황반 부종, 연령-관련 황반 이영양증, 간염, 췌장염, 원발쓸개관간경화증, 경화담관염, 애디슨병, 뇌하수체염, 갑상샘염, 타입 I 당뇨병, 거세포 동맥염, 신장염, 예를 들어, 루푸스 신장염, 장기 관련 혈관염, 예를 들어, 사구체신염, 혈관염, 예를 들어, 거세포 혈관염, 베게너 육아종증, 결절다발 동맥염, 베체트병, 가와사키병, 다카야스 동맥염, 괴저화농피부증, 장기 관련 혈관염 및 이식 장기의 급성 거부의 치료에 유용할 수 있다. 류마티스 관절염의 치료를 위한 BET 억제제의 용도가 특히 흥미롭다.
한 구체예에서, 급성 또는 만성 자가면역 또는 염증성 질환은 APO-A1의 조절을 통한 지질 대사의 장애, 예를 들어, 고콜레스테롤혈증, 죽상경화증 및 알츠하이머병이다.
또 다른 구체예에서, 급성 또는 만성 자가면역 또는 염증성 질환은 호흡기 장애, 예를 들어, 천식 또는 만성 폐쇄성 기도 질환이다.
또 다른 구체예에서, 급성 또는 만성 자가면역 또는 염증성 질환은 전신 염증성 장애, 예를 들어, 류마티스 관절염, 골관절염, 급성 통풍, 건선, 전신 홍반 루푸스, 다발경화증 또는 염증성 장질병(크론병 및 궤양성 대장염)이다.
또 다른 구체예에서, 급성 또는 만성 자가면역 또는 염증성 질환은 다발경화증이다.
추가 구체예에서, 급성 또는 만성 자가면역 또는 염증성 질환은 타입 I 당뇨병이다.
BET 억제제는 박테리아, 바이러스, 진균, 기생충 또는 이들의 독소에 의한 감염에 대한 염증 반응을 수반하는 질병 또는 질환, 예를 들어, 패혈증, 급성 패혈증, 패혈증 증후군, 패혈 쇼크, 내독소혈증, 전신 염증 반응 증후군(SIRS), 다기관 기능이상 증후군, 독성 쇼크 증후군, 급성 폐손상, ARDS(성인 호흡 곤란 증후군), 급성신부전, 전격간염, 화상, 급성 췌장염, 수술후 증후군, 사코이드증, 헤르크스하이머 반응(Herxheimer reaction), 뇌염, 골수염, 수막염, 말라리아 및 바이러스 감염, 예를 들어, 인플루엔자, 대상포진, 단순헤르페스 및 코로나바이러스와 관련된 SIRS의 치료에 유용할 수 있다. 한 구체예에서, 박테리아, 바이러스, 진균, 기생충 또는 이들의 독소에 의한 감염에 대한 염증 반응을 수반하는 질병 또는 질환은 급성 패혈증이다.
BET 억제제는 허혈-재관류 손상과 관련된 질환, 예를 들어, 심근경색증, 뇌혈관 허혈(뇌졸중), 급성 관상동맥 증후군, 신장 재관류 손상, 장기 이식, 관상 동맥 우회술, 심폐 우회술, 폐, 신장, 간, 위장 또는 말초 사지 색전증의 치료에 유용할 수 있다.
BET 억제제는 섬유성 질환, 예를 들어, 특발성 폐섬유증, 신장 섬유증, 수술후 협착, 켈로이드 반흔 형성, 공피증(국소피부경화증을 포함함), 심장 섬유증 및 낭성섬유증의 치료에 유용할 수 있다.
BET 억제제는 바이러스 감염, 예를 들어, 단순 헤르페스 감염 및 재활성화, 입술헤르페스, 대상포진 감염 및 재활성화, 수두, 띠헤르페스, 인간 유두종 바이러스(HPV), 인간 면역결핍 바이러스(HIV), 자궁경부 신생물, 아데노바이러스 감염, 예를 들어, 급성 호흡기 질병, 폭스바이러스 감염, 예를 들어, 우두 및 천연두 및 아프리카 돼지열 바이러스의 치료에 유용할 수 있다. 한 구체예에서, 바이러스 감염은 피부 또는 자궁경부 상피의 HPV 감염이다. 또 다른 구체예에서, 바이러스 감염은 잠복성 HIV 감염이다.
BET 억제제는 암, 예를 들어, 혈액학적 암(예를 들어, 백혈병, 림프종 및 다발골수종), 상피, 예를 들어, 폐, 유방 및 결장 암종, 중간선 암종, 중간엽, 간, 신장 및 신경계 종양의 치료에 유용할 수 있다.
BET 억제제는 뇌암(신경아교종), 교모세포종, 반나얀-조나나 증후군(Bannayan-Zonana syndrome), 코덴병, 레미트-두크로스병(Lhermitte-Duclos disease), 유방암, 염증성 유방암, 결장직장암, 윌름스 종양, 유잉 육종, 횡문근육종, 뇌실막세포종, 수모세포종, 결장암, 두경부암, 신장암, 폐암, 간암, 흑색종, 편평세포 암종, 난소암, 췌장암, 전립선암, 육종암, 골육종, 뼈의 거대세포 종양, 갑상샘암, 림프모구성 T-세포 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 만성 림프성 백혈병, 털세포 백혈병, 급성 림프모구성 백혈병, 급성 골수성 백혈병, 만성 호중구성 백혈병, 급성 림프모구성 T-세포 백혈병, 형질세포종, 면역모세포 거대세포 백혈병, 외투 세포 백혈병, 다발골수종, 거대모구성 백혈병, 급성 거대모구성 백혈병, 전골수세포 백혈병, 혼합 세포계 백혈병, 적백혈병, 악성 림프종, 호지킨 림프종, 비-호지킨 림프종, 면역모구성 T-세포 림프종, 버킷림프종, 소포림프종, 신경모세포종, 방광암, 요로상피세포암, 외음부암, 자궁경부암, 자궁내막암, 신장암, 중피종, 식도암, 타액선암, 간세포암, 위암, 비인두암, 협측압, 구강암, GIST(위장관 기질 종양), NUT-중간선 암종 및 고환암으로부터 선택되는 하나 이상의 암의 치료에 유용할 수 있다.
한 구체예에서, 암은 백혈병, 예를 들어, 급성 단핵구 백혈병, 급성 골수성 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 만성 림프성 백혈병 및 혼합 세포계 백혈병(MLL)으로부터 선택되는 백혈병이다. 또 다른 구체예에서, 암은 NUT-중간선 암종이다. 또 다른 구체예에서, 암은 다발골수종이다. 또 다른 구체예에서, 암은 폐암, 예를 들어, 소세포폐암(SCLC)이다. 또 다른 구체예에서, 암은 신경모세포종이다. 또 다른 구체예에서, 암은 버킷림프종이다. 또 다른 구체예에서, 암은 자궁경부암이다. 또 다른 구체예에서, 암은 식도암이다. 또 다른 구체예에서, 암은 난소암이다. 또 다른 구체예에서, 암은 유방암이다. 또 다른 구체예에서, 암은 결장직장암이다.
한 구체예에서, BET 억제제가 지정되는 질병 또는 질환은 전신 염증성 반응 증후군과 관련된 질병, 예를 들어, 패혈증, 화상, 췌장염, 주요 외상, 출혈 및 허혈로부터 선택된다. 이러한 구체예에서, BET 억제제는 SIRS의 발병률, 쇼크, 급성 폐 손상, ARDS, 급성 신장, 간, 심장 또는 위장관 손상의 발생을 포함하는 다기관 기능이상 증후군의 발생 및 사망률을 감소시키기 위해 진단 시점에 투여될 것이다. 또 다른 구체예에서, BET 억제제는 수술 또는 패혈증, 출혈, 광범위한 조직 손상, SIRS 또는 MODS(다기관 기능이상 증후군)의 높은 위험과 관련된 다른 시술 전에 투여될 것이다. 특정 구체예에서, BET 억제제가 지정되는 질병 또는 질환은 패혈증, 패혈증 증후군, 패혈 쇼크 및 내독소혈증이다. 또 다른 구체예에서, BET 억제제는 급성 또는 만성 췌장염의 치료를 위해 지정된다. 또 다른 구체예에서, BET 억제제는 화상의 치료를 위해 지정된다.
추가 양태에서, 본 발명은 또한 치료에서 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 제공한다.
추가 양태에서, 본 발명은 치료에서 사용하기 위한 화학식 
의 (2S,3R)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 제공한다.
추가 양태에서, 본 발명은 치료에서 사용하기 위한 화학식 
의 (2S,3R)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트의 1,2-에탄디설폰산 염을 제공한다.
추가 양태에서, 본 발명은 치료에서 사용하기 위한 화학식 
의 (2S,3R)-이소프로필 2-(((1-(1,3-디메톡시프로판-2-일)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 제공한다.
추가 양태에서, 본 발명은 상기 나열된 적응증 각각 및 모두를 포함하는 브로모도메인 억제제, 특히 BET 억제제가 지정되는 질병 또는 질환의 치료에서 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 제공한다.
추가 양태에서, 본 발명은 또한 자가면역 및 염증성 질병, 및 암의 치료에서 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 제공한다.
추가 양태에서, 본 발명은 류마티스 관절염의 치료에서 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 제공한다.
추가 양태에서, 본 발명은 치료적 유효량의 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 자가면역 또는 염증성 질병 또는 암을 치료할 필요가 있는 대상체에 투여하는 것을 포함하는 자가면역 또는 염증성 질병 또는 암의 치료 방법에 관한 것이다.
또 다른 추가 양태에서, 본 발명은 치료적 유효량의 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 류마티스 관절염을 치료할 필요가 있는 대상체에 투여하는 것을 포함하는 류마티스 관절염을 치료하는 방법에 관한 것이다.
추가 양태에서, 본 발명은 자가면역 또는 염증성 질병, 또는 암의 치료에서 사용하기 위한 약제의 제조에서의 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 용도에 관한 것이다.
추가 양태에서, 본 발명은 류마티스 관절염의 치료에서 사용하기 위한 약제의 제조에서의 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 용도에 관한 것이다.
약학적 조성물/투여 경로/투여량
치료에서 사용하기 위해, 화학식 (I)의 화합물뿐만 아니라 이의 약학적으로 허용되는 염이 미가공 화학물질로서 투여되는 것이 가능하나, 활성 성분을 약학적 조성물로 제공하는 것이 일반적이다.
추가 양태에서, 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약학적 조성물이 제공된다. 추가 양태에서, 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약학적 조성물이 제공된다.
추가 양태에서, 화학식 
의 (2S,3R)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약학적 조성물이 제공된다.
추가 양태에서, 화학식 
의 (2S,3R)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트의 1,2-에탄디설폰산 염을 포함하는 약학적 조성물이 제공된다.
추가 양태에서, 화학식 
의 (2S,3R)-이소프로필 2-(((1-(1,3-디메톡시프로판-2-일)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약학적 조성물이 제공된다.
부형제(들)는 약학적으로 허용되어야 하며, 조성물의 다른 성분과 양립되어야 한다. 본 발명의 또 다른 양태에 따르면, 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염과 하나 이상의 약학적으로 허용되는 부형제를 혼합하는 것을 포함하는 약학적 조성물의 제조를 위한 방법이 또한 제공된다. 약학적 조성물은 본원에 기재된 질병 중 임의의 질병의 치료에서 사용될 수 있다.
화학식 (I)의 화합물은 약학적 조성물에서 사용하고자 하는 것이므로, 이들은 각각 바람직하게는 실질적으로 순수한 형태, 예를 들어, 적어도 85% 순수한 형태, 특히 적어도 98% 순수한 형태(중량 기준의 중량%)로 제공되는 것이 용이하게 이해될 것이다.
약학적 조성물은 단위 용량 당 소정량의 활성 성분을 함유하는 단위 용량 형태로 제공될 수 있다. 바람직한 단위 투여량 조성물은 활성 성분의 일일 용량 또는 하위-용량, 또는 이들의 적절한 분획을 함유하는 것이다. 따라서, 상기 단위 용량은 하루에 1회 초과로 투여될 수 있다.
약학적 조성물은 임의의 적절한 경로, 예를 들어, 경구(협측 또는 설하를 포함함), 직장, 흡입, 비내, 국소(협측, 설하 또는 경피를 포함함), 안구(국소, 안내, 결막하, 공막위, 테논하(sub-Tenon)를 포함함), 질내 또는 비경구(피하, 근내, 정맥내 또는 피내를 포함함) 경로에 의한 투여에 적합화될 수 있다. 상기 조성물은, 예를 들어, 활성 성분과 부형제(들)을 회합시킴으로써 약학 분야에 공지된 임의의 방법에 의해 제조될 수 있다.
한 양태에서, 약학적 조성물은 경구 투여에 적합화된다.
추가 양태에서, 본 발명의 화합물은 상기 화합물의 세포내에서의 전달을 촉진하는 방식으로 제형화될 수 있다.
경구 투여에 적합화된 약학적 조성물은 별개의 단위, 예를 들어, 정제 또는 캡슐; 분말 또는 과립; 수성 또는 비수성 액체 중 용액 또는 현탁액; 식용 포움(foam) 또는 휘프(whip); 또는 수중유 액체 에멀젼 또는 유중수 액체 에멀젼으로 제공될 수 있다.
정제 또는 캡슐에 혼입시키기에 적합한 분말은 화합물을 적합한 미세 크기로 감소(예를 들어, 미세화에 의함)시키고, 유사하게 제조된 약학적 부형제, 예를 들어, 식용 탄수화물, 예를 들어, 전분 또는 만니톨과 혼합시킴으로써 제조될 수 있다. 예를 들어, 착향제, 보존제, 분산제 및 착색제가 또한 제공될 수 있다.
캡슐은 상기 기재된 바와 같이 분말 혼합물을 제조하고, 형성된 젤라틴 껍질을 충전시킴으로써 제조될 수 있다. 활택제 및 윤활제, 예를 들어, 콜로이드 실리카, 탤크, 마그네슘 스테아레이트, 칼슘 스테아레이트 또는 고체 폴리에틸렌 글리콜이 충전 작업 전에 분말 혼합물에 첨가될 수 있다. 붕해제 또는 가용화제, 예를 들어, 아가-아가, 칼슘 카르보네이트 또는 소듐 카르보네이트가 또한 캡슐이 섭취되는 경우 약제의 이용 가능성을 개선시키기 위해 첨가될 수 있다.
또한, 요망되거나 필요한 경우, 적합한 결합제, 활택제, 윤활제, 감미제, 착향제, 붕해제 및 착색제가 또한 혼합물에 혼입될 수 있다. 적합한 결합제는 전분, 젤라틴, 천연 당, 예를 들어, 글루코스 또는 베타-락토스, 옥수수 감미제, 천연 및 합성 검, 예를 들어, 아카시아, 트래거캔쓰 또는 소듐 알기네이트, 카르복시메틸셀룰로스, 폴리에틸렌 글리콜, 왁스 등을 포함한다. 이들 투여 형태에서 사용되는 윤활제는 소듐 올레에이트, 소듐 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 소듐 벤조에이트, 소듐 아세테이트, 소듐 클로라이드 등을 포함한다. 붕해제는 전분, 메틸 셀룰로스, 아가, 벤토나이트, 잔탄 검 등을 포함한다. 정제는, 예를 들어, 분말 혼합물을 제조하고, 과립화시키거나 슬러그화시키고, 윤활제 및 붕해제를 첨가하고, 정제로 압착시킴으로써 제형화된다. 분말 혼합물은 적절하게 분쇄된 화합물과 희석제 또는 상기 기재된 바와 같은 베이스, 및 선택적으로 결합제, 예를 들어, 카르복시메틸셀룰로스, 알리기네이트(aliginate), 젤라틴, 또는 폴리비닐 피롤리돈, 용해 지연제, 예를 들어, 파라핀, 재흡수 촉진제, 예를 들어, 4차 염 및/또는 흡수제, 예를 들어, 벤토나이트, 카올린 또는 디칼슘 포스페이트를 혼합함으로써 제조된다. 분말 혼합물은 결합제, 예를 들어, 시럽, 전분 페이스트, 아카디아 점액 또는 셀룰로직(cellulosic) 또는 중합 물질의 용액으로 습윤화시키고, 스크린을 통과시킴으로써 과립화될 수 있다. 과립화에 대한 대안으로서, 분말 혼합물은 정제 기계를 통과할 수 있으며, 그 결과는 과립으로 부서지는 불완전하게 형성된 슬러그이다. 과립은 스테아르산, 스테아레이트 염, 탤크 또는 무기질유의 첨가에 의해 정제 형성 다이에 대한 점착을 방지하도록 윤활될 수 있다. 윤활된 혼합물은 이후 정제로 압착된다. 화학식 (I)의 화합물 및 이의 약학적으로 허용되는 염은 또한 자유 유동 비활성 부형제와 조합될 수 있으며, 과립화 또는 슬러그화 단계를 거치지 않고 정제로 직접 압축될 수 있다. 셸락 밀봉 코트, 당 또는 중합 물질의 코팅 및 왁스의 광택 코팅으로 구성된 투명 또는 불투명 보호 코팅이 제공될 수 있다. 상이한 단위 투여형을 구별하기 위해 이들 코팅에 염료가 첨가될 수 있다.
경구 유체, 예를 들어, 용액, 시럽 및 엘릭서는 제공된 양이 소정량의 화합물을 함유하도록 하는 투여 단위 형태로 제조될 수 있다. 시럽은 적합하게 착향된 수용액에 화합물을 용해시킴으로써 제조될 수 있는 한편, 엘릭서는 비독성 알콜성 비히클의 사용을 통해 제조된다. 현탁액은 화합물을 비독성 비히클에 분산시킴으로써 제형화될 수 있다. 가용화제 및 유화제, 예를 들어, 에톡실화 이소스테아릴 알콜 및 폴리옥시 에틸렌 소르비톨 에테르, 보존제, 착향 첨가물, 예를 들어, 페퍼민트 오일 또는 천연 감미제 또는 사카린 또는 다른 인공 감미제 등이 또한 첨가될 수 있다. 경구 투여용 조성물은 치료적 활성제의 방출을 유지하거나 달리 조절하기 위해 변형된 방출 프로파일을 제공하도록 설계될 수 있다.
적절한 경우, 경구 투여를 위한 투여 단위 조성물은 미세캡슐화될 수 있다. 조성물은, 예를 들어, 미립자 물질을 중합체, 왁스 등으로 코팅하거나 이에 포매시킴으로써 방출을 연장하거나 유지하도록 제조될 수 있다.
비내 또는 흡입 투여를 위한 약학적 조성물은 에어로졸, 용액, 현탁액, 젤 또는 건조 분말로 편리하게 제형화될 수 있다.
흡입 투여에 적합하고/하거나 흡입 투여에 적합화된 약학적 조성물에 대해, 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염이, 예를 들어, 미세화에 의해 획득되는 입자 크기 감소 형태인 것이 바람직하다. 크기 감소된(예를 들어, 미세화된) 화합물 또는 염의 바람직한 입자 크기는 약 0.5 내지 약 10 마이크론(예를 들어, 레이저 회절을 이용하여 측정됨)의 D50 값에 의해 정의된다.
흡입 투여에 적합하고/하거나 흡입 투여에 적합화된 약학적 조성물에 대해, 약학적 조성물은 건조 분말 조성물 또는 약학적으로 허용되는 수성 또는 비수성 용매 중 활성 물질의 용액 또는 미세 현탁액을 포함하는 에어로졸 제형일 수 있다. 건조 분말 조성물은 분말 베이스, 예를 들어, 락토스, 글루코스, 트레할로스, 만니톨 또는 전분, 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염(바람직하게는, 입자 크기 감소 형태, 예를 들어, 미세화 형태), 및 선택적으로 성능 개질제, 예를 들어, L-류신 또는 또 다른 아미노산 및/또는 스테아르산의 금속염, 예를 들어, 마그네슘 또는 칼슘 스테아레이트를 포함할 수 있다. 바람직하게는, 건조 분말 흡입용 조성물은 락토스, 예를 들어, 락토스 모노하이드레이트 및 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 염의 건조 분말 블렌드를 포함한다.
한 구체예에서, 흡입 투여에 적합한 건조 분말 조성물은 적합한 흡입 장치 내에 장착된 약제 팩(들)에 제공된 복수의 밀봉 용량 용기에 혼입될 수 있다. 용기는 당 분야에 공지된 바와 같이 파열성, 박리성 또는 한번에 하나씩 달리 개봉 가능한 용기일 수 있으며, 건조 분말 조성물의 용량은 흡입 장치의 마우스피스에서의 흡입에 의해 투여될 수 있다. 약제 팩은 다수의 상이한 형태, 예를 들어, 디스크-형태 또는 신장된 스트립을 취할 수 있다. 대표적 흡입 장치는 GlaxoSmithKline에 의해 시판되는 DISKHALER™ 흡입기 장치, DISKUS™ 흡입 장치, 및 ELLIPTA™ 흡입 장치이다. DISKUS™ 흡입 장치는, 예를 들어, GB 2242134A에 기재되어 있고, ELLIPTA™ 흡입 장치는, 예를 들어, WO 03/061743 A1, WO 2007/012871 A1 및/또는 WO2007/068896에 기재되어 있다.
비경구 투여에 적합화된 약학적 조성물은 항산화제, 완충제, 정균제 및 조성물이 의도된 수용자의 혈액과 등장성이 되도록 하는 용질을 함유할 수 있는 수성 및 비수성 멸균 주사 용액; 및 현탁제 및 증점제를 포함할 수 있는 수성 및 비수성 멸균 현탁액을 포함한다. 조성물은 단위-용량 또는 다중-용량 용기, 예를 들어, 밀봉된 앰풀 및 바이알에 제공될 수 있으며, 사용 직전에 멸균 액체 담체, 예를 들어, 주사용수의 첨가만을 필요로 하는 동결-건조된(동결건조된) 조건하에서 보관될 수 있다. 즉석 주사 용액 및 현탁액은 멸균 분말, 과립 및 정제로부터 제조될 수 있다.
국소 투여에 적합화된 약학적 조성물은 연고, 크림, 현탁액, 에멀젼, 로션, 분말, 용액, 페이스트, 젤, 포움, 스프레이, 에어로졸 또는 오일로 제형화될 수 있다. 상기 약학적 조성물은 보존제, 약물 침투를 돕는 용매, 공용매, 연화제, 분사제, 점도 개질제(젤화제), 계면활성제 및 담체를 포함하나, 이에 제한되지는 않는 통상적인 첨가제를 포함할 수 있다. 한 구체예에서, 조성물의 중량을 기준으로 0.01-10%, 또는 0.01-1%의 화학식 (I)-(XVI)의 화합물 또는 이들의 약학적으로 허용되는 염을 포함하는 국소 투여에 적합화된 약학적 조성물이 제공된다.
눈 또는 다른 외부 조직, 예를 들어, 입 및 피부의 치료를 위해, 조성물은 바람직하게는 국소 연고, 크림, 젤, 스프레이 또는 포움으로 적용된다. 연고로 제형화되는 경우, 활성 성분은 파라핀성 또는 수 혼화성 연고 베이스와 함께 이용될 수 있다. 대안적으로, 활성 성분은 수중유 크림 베이스 또는 유중수 베이스와 함께 크림으로 제형화될 수 있다. 눈으로의 국소 투여에 적합화된 약학적 조성물은 활성 성분이 적합한 담체, 특히 수성 용매에 용해되거나 현탁된 점안액을 포함한다.
화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 치료적 유효량은, 예를 들어, 대상체의 연령 및 체중, 치료를 필요로 하는 정확한 질환 및 이의 중증도, 제형의 특성, 및 투여 경로를 포함하는 다수의 요인에 좌우될 것이며, 궁극적으로는 담당 의사 또는 수의사의 재량일 것이다. 약학적 조성물에서, 경구 투여를 위한 각각의 투여 단위는 바람직하게는 자유 염기로서 계산된 0.01 내지 1000 mg, 더욱 바람직하게는 0.5 내지 100 mg의 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 함유한다.
화학식 (I)의 화합물 및 이의 약학적으로 허용되는 염은 단독으로 또는 다른 치료제와 조합하여 사용될 수 있다. 따라서, 본 발명에 따른 조합 요법은 화학식 (I)의 적어도 하나의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 투여, 및 적어도 하나의 다른 치료적 활성제의 사용을 포함한다. 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 다른 치료적 활성제(들)은 단일한 약학적 조성물에서 함께 또는 별도로 투여될 수 있으며, 별도로 투여되는 경우, 이는 동시에 또는 임의의 순서로 순차적으로 투여될 수 있다.
추가 양태에서, 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염과 함께 하나 이상의 다른 치료적 활성제, 및 선택적으로 하나 이상의 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 조합 생성물이 제공된다.
적절한 경우, 다른 치료 성분(들)은 치료 성분의 활성 및/또는 안정성 및/또는 물리적 특징, 예를 들어, 용해도를 최적화시키기 위해 염, 예를 들어, 알칼리 금속 또는 아민 염 또는 산 부가염, 또는 용매화물, 예를 들어, 수화물의 형태로 사용될 수 있음이 당업자에게 명백할 것이다. 적절한 경우, 치료 성분이 광학적으로 순수한 형태로 사용될 수 있음이 또한 명백할 것이다.
상기 언급된 조합물은 편리하게는 약학적 조성물의 형태로 사용하도록 제공될 수 있으며, 따라서 상기 정의된 바와 같은 조합물과 함께 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약학적 조성물의 형태로 사용하도록 제공될 수 있다.
일반 합성 경로
하기 화학식 (I)의 화합물 및 이의 염은 하기 기재되는 방법에 의해 제조될 수 있으며, 이는 본 발명의 추가 양태를 구성한다:
따라서, 하기 화학식 (II)의 화합물의 알킬화를 포함하는 화학식 (I)의 화합물의 제조를 위한 방법이 제공된다:
상기 식에서, R2, R3 및 R4는 화학식 (I)의 화합물에 대해 상기 정의된 바와 같다. 예를 들어, 화학식 (II)의 화합물은 용매, 예를 들어, N,N-디메틸포름아미드에 용해될 수 있고, 이후, 알킬 할라이드의 존재하에서 적합한 염기로 처리될 수 있고, 적절한 시간 동안 적합한 온도에서 가열되어, 정제 후에, R1, R2, R3 및 R4가 화학식 (I)의 화합물에 대해 상기 정의된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물을 생성시킬 수 있다.
하기 화학식 (III)의 화합물의 고리화를 포함하는 화학식 (I)의 화합물의 제조를 위한 방법이 제공된다:
상기 식에서, R3 및 R4는 화학식 (I)의 화합물에 대해 상기 정의된 바와 같다. 예를 들어, 화학식 (III)의 화합물은 용매 혼합물, 예를 들어, 에탄올/물에 용해될 수 있고, 이후 소듐 디티오나이트의 존재하에서 하기 화학식 (IV)의 적합한 알데하이드로 처리될 수 있고, 적절한 시간 동안 적합한 온도에서 가열되어, 정제 후에, 화학식 (I)의 화합물을 생성시킬 수 있다. 상기 언급된 알데하이드는 R1 및 R2가 화학식 (I)의 화합물에 대해 정의된 바와 같은 일반 화학식 (IV)의 알데하이드이다:
하기 화학식 (V)의 화합물의 친핵성 작용기화를 포함하는 화학식 (III)의 화합물의 제조를 위한 방법이 제공된다:
상기 식에서, R4는 화학식 (I)의 화합물에 대해 상기 정의된 바와 같다. 예를 들어, 화학식 (V)의 화합물은 용매, 예를 들어, 테트라하이드로푸란에 용해될 수 있고, 이후 적합한 염기, 예를 들어, 트리에틸아민의 존재하에서 화학식 (I)의 화합물에 대해 상기 정의된 바와 같은 R3를 함유하는 적합한 아민으로 처리될 수 있다. 이후, 혼합물은 적절한 시간 동안 적합한 온도에서 가열되어, 정제 후에, 화학식 (III)의 생성물을 생성시킬 것이다.
하기 화학식 (VI)의 화합물의 환원성 아민화를 포함하는 화학식 (V)의 화합물의 제조를 위한 방법이 제공된다:
여기서, 화학식 (VI)의 화합물은 적합한 용매, 예를 들어, 디클로로메탄에 용해되고, 여기에 적절하게 작용기화된 아민 및 첨가제, 예를 들어, 아세트산이 첨가된다. 혼합물은 환원제, 예를 들어, 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드의 첨가 전에 특정 시간 동안 적절한 온도에서 교반될 것이다. 혼합물은 적절한 시간 동안 교반되어, 정제 후에, R4가 화학식 (I)의 화합물에 대해 상기 정의된 바와 같은 화학식 (V)의 화합물을 생성시킬 것이다.
하기 화학식 (VIII)의 화합물의 작용기화를 포함하는 하기 화학식 (VII)의 화합물의 제조를 위한 방법이 제공된다:
여기서, 화학식 (VIII)의 화합물은 용매, 예를 들어, 디옥산에 용해될 수 있고, 이후 적합한 염기, 예를 들어, 트리에틸아민의 존재하에서 화학식 (I)의 화합물에 대해 상기 정의된 바와 같은 R3를 함유하는 적합한 아민으로 처리될 수 있다. 이후, 혼합물은 적절한 시간 동안 적합한 온도에서 가열되어, 정제 후에, 화학식 (VII)의 화합물을 생성시킬 것이다. 생성된 일반 화학식 (VII)의 화합물은 이후 적절한 시간 동안 적합한 온도에서 적합한 용매 혼합물, 예를 들어, 에탄올/물 중에서 소듐 디티오나이트의 존재하에서 화학식 (IV)의 알데하이드와 반응되어, 정제 후에, 하기 화학식 (IX)의 화합물을 생성시킬 수 있다:
생성된 화합물은 이후 당업자에 의해 순차적인 알킬화, 산화 및 환원성 아민화 절차를 통해 추가로 정교화되어, R1, R2, R3 및 R4가 화학식 (I)의 화합물에 대해 상기 정의된 바와 같은 일반 화학식 (I)에 적합한 추가의 작용기화 분자를 생성시킬 수 있다.
하기 화학식 (X)의 화합물의 작용기화를 포함하는 화학식 (I)의 화합물의 제조를 위한 방법이 제공된다:
상기 식에서, R1, R2 및 R3는 화학식 (I)의 화합물에 대해 상기 정의된 바와 같다. 예를 들어, 화학식 (X)의 화합물은 아세토니트릴 및 물을 포함하는 용매 혼합물에 용해될 수 있고, 이후 트리메틸설포늄 요오다이드의 존재하에서 적합한 염기로 처리될 수 있고, 적절한 시간 동안 적합한 온도에서 가열되어, 워크업(workup) 후에 작용기화된 중간체 화합물을 생성시킬 수 있다. 이들 화합물은 이후, 예를 들어, 적합한 용매, 예를 들어, 테트라하이드로푸란 중에서의 용해 및 루이스산, 예를 들어, 보론 트리플루오라이드 디에틸 에테레이트의 첨가에 의해 추가로 정교화될 수 있다. 적절한 시간 동안 적절한 온도에서의 교반 후, 작용기화된 아민, 염기 및 환원제, 예를 들어, 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드의 첨가는 적절한 반응 시간, 워크업 및 정제 후에, R1, R2, R3 및 R4가 화학식 (I)의 화합물에 대해 상기 정의된 바와 같은 일반 화학식 (I)의 화합물을 생성시킬 것이다.
하기 화학식 (XI)의 화합물의 작용기화를 포함하는 화학식 (X)의 화합물의 제조를 위한 방법이 제공된다:
상기 식에서, R1, R2 및 R3는 화학식 (I)의 화합물에 대해 상기 정의된 바와 같다. 예를 들어, 화학식 (XI)의 화합물은 용매, 예를 들어, 디클로로메탄에 용해될 수 있고, 적절한 시간 동안 적절한 산화제로 처리되어, 정제 후에, 화학식 (X)의 화합물을 생성시킬 수 있다.
하기 화학식 (XIII)의 화합물의 작용기화를 포함하는 하기 화학식 (XII)의 화합물의 제조를 위한 방법이 제공된다:
여기서, 화학식 (XIII)의 화합물은 용매, 예를 들어, 테트라하이드로푸란에 용해될 수 있고, 이후 적합한 염기, 예를 들어, 트리에틸아민의 존재하에서 화학식 (I)의 화합물에 대해 상기 정의된 바와 같은 R3를 함유하는 적합한 아민으로 처리될 수 있다. 혼합물은 이후 적절한 시간 동안 적합한 온도에서 가열되어, 정제 후에, 화학식 (XII)의 화합물을 생성시킬 것이다. 생성된 일반 화학식 (XII)의 화합물은 이후 적절한 시간 동안 적합한 온도에서 적합한 용매 혼합물, 예를 들어, 에탄올/물 중에서 소듐 디티오나이트의 존재하에서 화학식 (IV)의 알데하이드와 반응되어, 정제 후에, R1, R2 및 R3가 화학식 (I)의 화합물에 대해 상기 정의된 바와 같은 화학식 (XI)의 화합물을 생성시킬 수 있다.
상기에 더하여, R1, R2 및 R3가 화학식 (I)의 화합물에 대해 상기 정의된 바와 같은 화학식 (X)의 화합물의 작용기화를 포함하는 화학식 (I)의 화합물의 제조를 위한 방법이 제공된다. 예를 들어, 화학식 (X)의 화합물은 트리에틸아민과 같은 첨가제의 존재하에서 적절하게 작용기화된 아민으로 처리되기 전에 용매, 예를 들어, 디클로로메탄에 용해될 수 있다. 적절한 반응 시간 후, 생성된 중간체는 적절한 시간 및 온도에서 환원제, 예를 들어, 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드의 첨가 후에 환원될 수 있고, 혼합물의 이후의 워크업 및 정제는 R1, R2, R3 및 R4가 화학식 (I)의 화합물에 대해 상기 정의된 바와 같은 일반 화학식 (I)의 화합물을 생성시킬 것이다.
또한, R1, R2, R3 및 R4가 화학식 (I)의 화합물에 대해 상기 정의된 바와 같고, R4가 작용기화된 카르복실산을 함유하는 화학식 (I)의 화합물의 제조를 위한 방법이 제공된다. 예를 들어, 일반 화학식 (I)의 화합물은 용매 혼합물, 예를 들어, 테트라하이드로푸란/메탄올/물에 용해될 수 있고, 이후 적절한 시간 동안 염기, 예를 들어, 리튬 하이드록시드로 처리되어, 정제 후에, R1, R2, R3 및 R4가 화학식 (I)의 화합물에 대해 상기 정의된 바와 같은 일반 화학식 (I)의 화합물을 생성시킬 수 있다.
화합물 IV, VI, VIII, 및 XIII은, 예를 들어, Sigma Aldrich로부터 상업적으로 이용 가능하다.
실시예
따라서, 하기 실시예는 이의 제조를 예시하기 위해 제공되나, 본 발명의 범위를 어떤 식으로든 제한하는 것으로 간주되어서는 안된다.
중간체 및 실시예 제조에서, 어구 "중간체 X로부터 제조됨" 또는 "실시예 Y로부터 제조됨"의 사용은 반드시 정확한 제조가 이용되었다기보다는 사용된 화합물(예를 들어, 중간체 X 또는 실시예 Y)에 대한 예시적 제조를 어디에서 찾을 수 있는지를 나타낸다.
약어
Ac
아세틸
Bn
벤질
BOC
터트-부틸옥시카르보닐
dba
디벤질리덴아세톤
DCM
디클로로메탄
DIPEA
N,N-디이소프로필에틸아민
DMAP
4-디메틸아미노피리딘
DMF
N,N-디메틸포름아미드
DMSO
디메틸설폭시드
EDC
N-(3-디메틸아미노프로필)-N-에틸카르보디이미드
ee
거울상 이성질체 과량
Et
에틸
EtOAc
에틸 아세테이트
EtOH
에탄올
H 또는 hr
시간(들)
HATU
O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N,N-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트
HOBt
하이드록시벤조트리아졸
HPLC
고성능 액체 크로마토그래피
IC50
절반의 최대 억제 농도
IPA
이소프로필 알콜
LCMS
액체 크로마토그래피-질량 분광법
MDAP
질량-특이적 자동-분취 HPLC
Me
메틸
MPER
포유류 단백질 추출 시약
MS
질량 분광법
nBuLi
n-부틸리튬
NMP
N-메틸-2-피롤리돈
NMR
핵 자기 공명
Pd/C
탄소 상 팔라듐
Pd(PPh3)4
테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0)
Ph
페닐
ppm
백만분율
pTSA
파라-톨루엔 설폰산
rt
체류 시간
SCX
설폰산, 강한 양이온 교환
SPE
고체 상 추출
tBu
삼차 부틸
TFA
트리플루오로아세트산
tRET
체류 시간
THF
테트라하이드로푸란
UV
자외선
실험 세부사항
NMR
1H NMR 스펙트럼을 400 MHz에서 모두 작동하는 Bruker DPX 400 또는 Bruker Avance DRX, Varian Unity 400 분광계 또는 JEOL Delta에서 CDCl3 또는 DMSO-d 6로 기록하였다. 사용된 내부 표준은 테트라메틸실란 또는 CDCl3에 대해 7.25 ppm 또는 DMSO-d 6에 대해 2.50 ppm에서의 잔여 양성자화 용매였다.
LCMS
시스템 A
컬럼: 50mm x 2.1mm ID, 1.7μm Acquity UPLC BEH C18
유량: 1mL/min.
온도: 40℃
UV 검출 범위: 210 내지 350nm
질량 스펙트럼: 대체-스캔 양성 및 음성 모드 전기분무 이온화를 이용하여 질량 분광계에서 기록됨
용매:
A: 물 중 0.1% v/v 포름산
B: 아세토니트릴 중 0.1% v/v 포름산
구배:
시간(min.)
A%
B%
0
97
3
1.5
0
100
1.9
0
100
2.0
97
3
시스템 B
컬럼: 50mm x 2.1mm ID, 1.7μm Acquity UPLC BEH C18
유량: 1mL/min.
온도: 40℃
UV 검출 범위: 210 내지 350nm
질량 스펙트럼: 대체-스캔 양성 및 음성 모드 전기분무 이온화를 이용하여 질량 분광계에서 기록됨
용매:
A: 암모니아 용액을 이용하여 pH10으로 조정된 물 중 10mM 암모늄 바이카르보네이트
B: 아세토니트릴
구배:
시간(min.)
A%
B%
0
99
1
1.5
3
97
1.9
3
97
2.0
0
100
시스템 C
컬럼: 50mm x 2.1mm ID, 1.7μm Acquity UPLC CSH C18
유량: 1mL/min.
온도: 40℃
UV 검출 범위: 210 내지 350nm
질량 스펙트럼: 대체-스캔 양성 및 음성 모드 전기분무 이온화를 이용하여 질량 분광계에서 기록됨
사용된 용매는 다음과 같다:
A = 물 중 트리플루오로아세트산의 0.1% v/v 용액.
B = 아세토니트릴 중 트리플루오로아세트산의 0.1% v/v 용액.
구배:
시간(min.)
A%
B%
0
95
5
1.5
5
95
1.9
5
95
2.0
95
5
시스템 D
컬럼: 50mm x 2.1mm ID, 1.7μm Acquity UPLC CSH C18
유량: 1mL/min.
온도: 40℃
UV 검출 범위: 210 내지 350nm
질량 스펙트럼: 대체-스캔 양성 및 음성 모드 전기분무 이온화를 이용하여 질량 분광계에서 기록됨
사용된 용매는 다음과 같다:
A = 암모니아 용액을 이용하여 pH10으로 조정된 물 중 10mM 암모늄 바이카르보네이트.
B = 아세토니트릴.
구배:
시간(min.)
A%
B%
0
97
3
1.5
5
95
1.9
5
95
2.0
97
3
시스템 E
컬럼: XBridge BEH C18 (50mmx4.6mm, 2.5μm)
유량: 1.3mL/min.
온도: 35℃
용매:
A: 물 중 5mM 암모늄 바이카르보네이트(pH 10)
B: 아세토니트릴
구배:
시간(min.)
A%
B%
0
95
5
0.5
95
5
1
85
15
3.3
2
98
6.0
2
98
6.1
95
5
6.5
95
5
시스템 F
컬럼: Acquity BEH C18 (50mmx2.1mm, 1.7μm)
유량: 0.6mL/min.
온도: 35℃
용매:
A: 물 중 0.1% 포름산
B: 아세토니트릴 중 0.1% 포름산
구배:
시간(min.)
A%
B%
0
97
3
0.4
97
3
3.2
2
98
3.8
2
98
4.2
97
3
4.5
97
3
시스템 G
컬럼: Acquity BEH C18 (50mmx2.1mm, 1.7μm)
유량: 0.45mL/min.
온도: 35℃
용매:
A: 아세토니트릴 중 0.05% 포름산
B: 물 중 0.05% 포름산
구배:
시간(min.)
A%
B%
0
3
97
0.4
3
97
7.5
98
2
9.5
98
2
9.6
3
97
10
3
97
시스템 H
컬럼: XBridge BEH C18 (50mmx4.6mm, 2.5μm)
유량: 1.3mL/min.
온도: 35℃
용매:
A: 물 중 5mM 암모늄 바이카르보네이트(pH 10)
B: 아세토니트릴
구배:
시간(min.)
A%
B%
0
95
5
0.5
95
5
1
85
15
6.0
2
98
9.0
2
98
9.5
95
5
10
95
5
시스템 I
컬럼: 50mm x 2.1mm ID, 1.7μm Acquity UPLC CSH C18
유량: 1mL/min.
온도: 40℃
UV 검출 범위: 210 내지 350nm
질량 스펙트럼: 대체-스캔 양성 및 음성 모드 전기분무 이온화를 이용하여 질량 분광계에서 기록됨
용매:
A: 물 중 0.1% v/v 포름산
B: 아세토니트릴 중 0.1% v/v 포름산
구배:
시간(min.)
A%
B%
0
97
3
1.5
5
95
1.9
5
95
2.0
97
3
시스템 J
컬럼: 50mm x 2.1mm ID, 1.7μm Acquity UPLC CSH C18
유량: 1mL/min.
온도: 40℃
UV 검출 범위: 210 내지 350nm
질량 스펙트럼: 대체-스캔 양성 및 음성 모드 전기분무 이온화를 이용하여 질량 분광계에서 기록됨
용매:
A: 암모니아 용액을 이용하여 pH10으로 조정된 물 중 10mM 암모늄 바이카르보네이트
B: 아세토니트릴
구배:
시간(min.)
A%
B%
0
97
3
0.05
97
3
1.5
5
95
1.9
5
95
2.0
97
3
질량 특이적
자동분취
HPLC
(
MDAP
)
질량 특이적 자동분취 HPLC를 하기 제공되는 조건하에서 수행하였다. UV 검출은 210nm 내지 350nm의 파장으로부터의 평균 신호였고, 질량 스펙트럼은 대체-스캔 양성 및 음성 모드 전기분무 이온화를 이용하여 질량 분광계에서 기록되었다.
방법 A
방법 A를 주위 온도에서 Sunfire C18 컬럼(통상적으로, 150mm x 30mm i.d. 5μm 패킹 직경)에서 수행하였다. 사용된 용매는 다음과 같다:
A = 물 중 포름산의 0.1% v/v 용액.
B = 아세토니트릴 중 포름산의 0.1% v/v 용액.
방법 B
방법 B를 주위 온도에서 XBridge C18 컬럼(통상적으로, 100mm x 30mm i.d. 5μm 패킹 직경)에서 수행하였다. 사용된 용매는 다음과 같다:
A = 암모니아 용액을 이용하여 pH 10으로 조정된 10 mM 수성 암모늄 바이카르보네이트.
B = 아세토니트릴.
중간체 제조
중간체
1: 5
-
메틸
-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-
카르브알데하이드
5-브로모-3-메틸피리딘-2(1H)-온(예를 들어, Sigma Aldrich로부터 상업적으로 이용가능함)(1.5 g, 7.98 mmol)을 질소로 퍼징시킨 플라스크에 첨가하였다. 무수 THF(75 mL)를 첨가하고, 용액을 20분 동안 드라이아이스/아세톤 배쓰에서 질소하에서 교반하였다. 헥산 중 1.6 M n-부틸리튬(14.96 mL, 23.93 mmol)을 혼합물에 적가하고, 반응 혼합물을 3시간 동안 드라이아이스/아세톤 배쓰에서 질소하에서 교반하였다. 무수 DMF(14.83 mL, 191 mmol)를 적가하고, 반응 혼합물을 1시간 동안 드라이아이스/아세톤 배쓰에서 질소하에서 교반하였다. 이를 포화 암모늄 클로라이드 수용액(30 mL)을 이용하여 켄칭시키고, 실온으로 가온시켰다. 생성된 슬러리를 EtOAc(100 mL)와 물(100 mL) 사이에 분배시키고, 층을 분리시켰다. 유기층을 염수(50 mL)로 세척하고, 건조시키고, 감압하에서 증발시켜, 담황색 고체를 생성시켰다. 고체를 디에틸 에테르로 분쇄시키고, 표제 화합물(배치(Batch) 1, 210.8 mg)로서 여과된 고체를 수거하였다. 이전 추출로부터의 수성층을 조합하고, DCM(4 x 75 mL 및 4 x 100 mL)으로 재추출하였다. 조합된 유기층을 건조시키고, 감압하에서 증발시켜, 담황색 액체를 생성시켰다. 액체 잔여물을 톨루엔(2 x 30 mL)과 공비시키고, 용매를 감압하에서 제거하여, 황색 고체를 생성시켰다. 고체를 디에틸 에테르로 분쇄시키고, 표제 화합물(배치 2, 452.4 mg)로서 여과된 고체를 수거하였다. 반응의 전체 수율은 61%였다. 배치 1: LCMS (시스템 A): tRET = 0.41 min, MH+ = 138. 배치 2: LCMS (시스템 A): tRET = 0.41 min, MH+ = 138.
중간체
2: 1
,5-디메틸-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-
카르브알데하이드
DMF(50 mL) 중 5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(예시적 제조를 위해 중간체 1 참조, 5 g, 36.5 mmol) 및 포타슘 카르보네이트(10.08 g, 72.9 mmol)의 혼합물을 얼음/물 배쓰에서 냉각시키고, 메틸 요오다이드(5.70 mL, 91 mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 질소하에서 15분 동안 교반한 후, 실온으로 가온시키고, 추가 2.5시간 동안 교반하였다. 고체를 여과에 의해 제거하고, 생성된 용액을 감압하에서 증발시켰다. 잔여물을 EtOAc(2 x 150 mL)와 1:1의 물:포화 염수 용액(150 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 조합시키고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켰다. 샘플을 DCM에 로딩하고, 사이클로헥산 중 0-50% EtOAc의 구배를 이용한 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(100 g 컬럼)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 회백색 고체로서 표제 화합물(4.4 g, 80% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.46 min, MH+ = 152.
중간체 3: (
S
)-
사이클로펜틸
2-아미노-4-
메틸펜타노에이트
4-
메틸벤젠설포네이트
둥근 바닥 플라스크에 (S)-2-아미노-4-메틸펜탄산(5 g, 38.1 mmol), 사이클로헥산(100 mL), 토스산 모노하이드레이트(9.43 g, 49.6 mmol) 및 사이클로펜탄올(35 mL, 386 mmol)을 충전하였다. 딘-스타크 응축기(Dean-Stark condensor)를 설치하고, 혼합물을 130℃로 가온시켜, 완전히 용해시켰다. 혼합물을 주말에 걸쳐 상기 온도에서 교반한 후, 7일 동안 실온에서 방치하였다. 침전된 고체를 여과에 의해 분리하고, 사이클로헥산 및 에틸 아세테이트로 연속적으로 세척하였다. 고체를 진공하에서 건조시켜, 백색 고체로서 표제 화합물(5.56g)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, 메탄올-d4) δ 7.62-7.79 (m, 2H), 7.25 (d, J=7.83 Hz, 2H), 5.15-5.42 (m, 1H), 3.97 (t, J=6.97 Hz, 1H), 2.39 (s, 3H), 1.42-2.10 (m, 11H), 1.02 (d, J=7.09 Hz, 6H).
중간체 4: (2
S
)-
테트라하이드로푸란
-3-일 2-((
터트
-
부톡시카르보닐
)아미노)-3-메틸부타노에이트
DMF(20 mL) 중 (S)-2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3-메틸부탄산(2.5 g, 11.51 mmol), 디이소프로필에틸아민(2.97 g, 4.02 mL, 23.01 mmol), 1-하이드록시벤조트리아졸 하이드레이트(2.12g, 13.84 mmol), EDC(2.65 g, 13.81 mmol), 및 테트라하이드로푸란-3-올(10.14 g, 9.33 mL, 115 mmol)의 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(50 mL)와 포화 NaHCO3(50 mL) 사이에 분배시켰다. 유기상을 1M 염산(50 mL), 물(50 mL) 및 염수(50 mL)로 세척하였다. 유기상을 건조시키고, 증발시켜, 무색 오일로서 표제 화합물(3.19 g)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 5.34 (d, J=1.71 Hz, 1H), 4.93-5.09 (m, 1H), 4.16-4.26 (m, 1H), 3.72-3.97 (m, 4H), 2.07-2.23 (m, 2H), 1.44 (s, 9H), 0.82-1.02 (m, 6H).
중간체 5: (2
S
)-
테트라하이드로푸란
-3-일 2-아미노-3-
메틸부타노에이트
하이드로클로라이드
디옥산(5 mL) 중 (2S)-테트라하이드로푸란-3-일 2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3-메틸부타노에이트(제조를 위해 중간체 4 참조, 3.1 g, 10.79 mmol)의 용액을 디옥산 중 4M 염화수소(10 mL, 40 mmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 24시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 증발시키고, 잔여물을 톨루엔(x3)과 공비시켜, 밝은 갈색 오일로서 표제 화합물(1.81 g)을 생성시켰다. 미정제 생성물을 정제 없이 이후 단계에서 사용하였다.
중간체 6: (
2
S
,3
R
)-2-
하이드록시
-2-
메틸프로필
2-((
터트
-
부톡시카르보닐
)아미노)-3-하이드록시부타노에이트
마이크로파 바이알에서, 2,2-디메틸옥시란(2.058 mL, 23.17 mmol)을 (2S,3R)-2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3-하이드록시부탄산(1.016 g, 4.63 mmol) 및 소듐 바이카르보네이트(2.038 g, 24.26 mmol)의 혼합물에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 30분 동안 120℃에서 마이크로파 조사하에서 가열하였다. 혼합물을 용리액으로서 EtOAc를 이용하여 결합 용리액 필터 상에서 여과하였다. 휘발성 물질을 감압하에서 제거하여, 미정제 생성물로서 1.75g의 투명한 오일을 생성시켰다. 미정제 생성물을 10 컬럼 부피에 대해 사이클로헥산 중 0-100% EtOAc 구배로 용리되는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(50g 실리카 컬럼)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 휘발성 물질을 감압하에서 제거하여, 투명 오일로서 표제 화합물(0.8g)을 생성시켰다. 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에서 미정제로 사용하였다.
중간체 7: (
2
S
,3
R
)-2-
하이드록시
-2-
메틸프로필
2-아미노-3-
하이드록시부타노에이트
디옥산 중 4.0M HCl(1 mL, 32.9 mmol)을 (2S,3R)-2-하이드록시-2-메틸프로필 2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3-하이드록시부타노에이트(제조를 위해 중간체 6 참조, 85 mg, 0.292 mmol)에 첨가하고, 생성된 혼합물을 2.5시간 동안 실온에서 교반하였다. 휘발성 물질을 감압하에서 제거하고, 오일을 Et2O로 분쇄시켜, 표제 화합물(55.8mg)을 생성시켰다. 중간체를 정제 없이 후속되는 단계에서 미정제로 사용하였다.
중간체 8: (
2
S
,3
R
)-(S)-
테트라하이드로푸란
-3-일 2-((
터트
-
부톡시카르보닐
)아미노)-3-메톡시부타노에이트
(2S,3R)-2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3-메톡시부탄산(5000 mg, 21.44 mmol), EDC(4931 mg, 25.7 mmol), DMAP(262 mg, 2.144 mmol) 및 HOBt(3939 mg, 25.7 mmol)를 DIPEA(7.49 mL, 42.9 mmol) 및 DMF(25 mL)에 용해시켰다. 용액을 30분 동안 교반한 후, (S)-테트라하이드로푸란-3-올(17.39 mL, 215 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(150 mL)와 소듐 바이카르보네이트의 포화 용액(150 mL) 사이에 분배하였다. 유기 분획을 분리시키고, 수성층을 에틸 아세테이트(2x150 mL)로 2회 재추출하였다. 유기 분획을 조합하고, 소수성 프릿을 통해 통과시키고, 감압하에서 농축시켰다. 생성된 오일을 DCM(3 mL)에 용해시키고, 용액을 두개로 나누고, 차례로 실리카 컬럼(100 g 컬럼)에 로딩하였다. 생성물을 20-70%의 사이클로헥산 중 에틸 아세테이트의 구배로 용리시켰다. 적절한 분획을 조합하고, 진공 오븐에서 건조시켜, 표제 화합물(2156 mg)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d 5.84-5.99 (m, 1H), 5.25-5.33 (m, 1H), 4.11 (dd, J=4.04, 8.59 Hz, 1H), 3.72-3.89 (m, 4H), 3.68 (s, 1H), 3.26 (s, 3H), 2.12-2.26 (m, 1H), 1.86-2.00 (m, 1H), 1.38-1.46 (m, 9H), 1.11-1.16 (m, 3H).
중간체 9: (
2
S
,3
R
)-(
S
)-
테트라하이드로푸란
-3-일 2-아미노-3-
메톡시부타노에
이트 하이드로클로라이드
(2S,3R)-(S)-테트라하이드로푸란-3-일 2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3-메톡시부타노에이트(제조를 위해 중간체 8 참조, 5910 mg, 17.53 mmol)를 HCl(IPA 중 5M)(35.1 mL, 176 mmol)에 용해시키고, 반응 혼합물을 밤새 교반하였다. 용매를 감압하에서 제거하고, 생성된 오일을 밤새 진공 오븐에 두어, 오렌지색 결정성 고체로서 표제 화합물(3890 mg, 93% 수율)을 생성시키고, 이를 추가 정제 없이 이후 단계에서 사용하였다.
중간체 10: (
2
S
,3
R
)-네오펜틸 2-아미노-3-
하이드록시부타노에이트
4-
메틸벤젠설포네이트
사이클로헥산(100 mL) 중 (2S,3R)-2-아미노-3-하이드록시부탄산(2.27 g, 19.06 mmol) 및 4-메틸벤젠설폰산 모노하이드레이트(4.71 g, 24.77 mmol)의 현탁액에 2,2-디메틸프로판-1-올(13.44 g, 152 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물에 딘-스타크 응축기를 설치하고, 밤새 130℃에서 가열하였다. 실온으로 냉각시 백색 슬러리가 형성되었고, 이를 감압하에서 증발시켜, 용매를 제거하였다. 백색 고체를 최소량의 고온 EtOAc에 용해시키고, 투명한 용액을 냉각시킨 후, 얼음/물 배쓰에 두었다. 결정화가 발생하지 않았다. 용액을 감압하에서 증발시키고, 4일 밤 동안 진공 오븐에서 건조시켰다. 생성된 고체를 EtOAc로부터 재결정화시키고, 냉각시켰고, 이때 백색 고체가 형성되었다. 생성된 백색 고체를 여과에 의해 분리시키고, 약간 저온의 EtOAc로 세척하고, 진공 오븐에서 건조시켜, 백색 고체로서 표제 화합물(6.0 g)을 생성시켰다. 1H NMR (d6-DMSO, 293 K): δ 0.94 (s, 9 H) 1.22 (d, J = 6.3 Hz, 3 H) 2.29 (s, 3 H) 3.84 (d, J = 10.4 Hz, 1 H) 3.92 (d, J = 10.6 Hz, 1 H) 3.99 (d, J = 3.8 Hz, 1 H) 4.13 - 4.20 (m, 1 H) 5.61 (d, J = 4.3 Hz, 1 H) 7.11 (m, J = 7.8 Hz, 2 H) 7.48 (m, J = 8.1 Hz, 2 H) 8.22 (br.s., 3 H).
중간체 11: (
2
S
,3
R
)-이소부틸 2-아미노-3-
하이드록시부타노에이트
4-
메틸벤젠설포네이트
사이클로헥산(100 mL) 중 (2S,3R)-2-아미노-3-하이드록시부탄산(2.5 g, 20.99 mmol) 및 4-메틸벤젠설폰산 모노하이드레이트(5.19 g, 27.3 mmol)의 현탁액에 2-메틸프로판-1-올(15.50 mL, 168 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물에 딘-스타크 응축기를 설치하고, 밤새 130℃에서 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 용매를 감압하에서 제거하였다. 생성된 무색 액체를 3일 밤 동안 진공 오븐에서 건조시켰다. 처음에는, EtOAc를 이용하여 재결정화를 시도하였으나, 샘플은 용액 상태로 유지되었고, 따라서 용매를 감압하에서 제거하였다. 디에틸 에테르 중에서의 분쇄를 2회 수행하고, 생성된 백색 고체를 여과에 의해 분리시키고, 진공 오븐에서 건조시켜, 백색 고체로서 표제 화합물(2.2 g,)을 생성시켰다. 1H NMR (d6-DMSO, 293 K): δ 0.92 (d, J = 6.6 Hz, 6 H) 1.21 (d, J = 6.6 Hz, 3 H) 1.82 - 1.99 (m, 1 H) 2.29 (s, 3 H) 3.92 - 4.00 (m, 3 H) 4.11 - 4.17 (m, 1 H) 7.11 (d, J = 7.8 Hz, 2 H) 7.48 (d, J = 8.1 Hz, 2 H) 8.23 (br.s., 3 H).
중간체 12: (
S
)-이소프로필 2-아미노-3-
메틸부타노에이트
4-
메틸벤젠설포네이트
(S)-2-아미노-3-메틸부탄산(2.5 g, 21.34 mmol), 토스산(5.28 g, 27.7 mmol) 및 프로판-2-올(15 mL, 196 mmol)을 사이클로헥산(100 mL)에 용해시키고, 22시간 동안 130℃로 가열하였다. 용액을 실온으로 냉각시켰고, 이 시점에서 백색 고체가 침전되었다. 이러한 혼합물을 진공하에서 여과시키고, 고체를 헥산으로 수회 세척하였다. 이후, 고체를 3시간 동안 40℃에서 진공 오븐에 두었다. 이후, 이러한 고체를 토스산(1.76g, 9.2mmol) 및 프로판-2-올(3.94g, 5.3mmol)과 함께 사이클로헥산(100mL)에 첨가하였다. 이후, 혼합물을 20시간 동안 130℃로 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 중력하에서 여과시켰다. 이후, 백색 고체를 24시간 동안 40℃에서 진공 오븐에 두어, 표제 화합물(5.98 g)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, 메탄올-d4) δ 7.65-7.78 (m, 2H), 7.25 (d, J=7.83 Hz, 2H), 5.10-5.19 (m, 1H), 3.87 (d, J=4.40 Hz, 1H), 2.39 (s, 3H), 2.23-2.33 (m, 1H), 1.34 (d, J=6.11 Hz, 6H), 1.09 (dd, J=3.55, 6.97 Hz, 6H).
중간체 13: (
S
)-
사이클로펜틸
2-
아미노부타노에이트
4-
메틸벤젠설포네이트
(S)-2-아미노부탄산(3.0 g, 29.1 mmol), 사이클로펜탄올(20.5 g, 238 mmol) 및 4-메틸벤젠설폰산 모노하이드레이트(7.19 g, 37.8 mmol)를 사이클로헥산(100 mL)에 첨가하고, 반응 혼합물을 125℃로 가열하였고, 이때 완전한 용해가 달성되었다. 이후, 이를 24시간 동안 상기 온도에서 가열하였다. 실온으로 냉각 후, 휘발성 성분을 감압하에서 슬러리로부터 제거하여, 백색 고체를 생성시켰다. 고체를 최소량의 고온 EtOAc로부터 재결정화시켰다. 생성된 결정을 여과시키고, 약간 저온의 EtOAc로 세척하여, 백색 고체로서 표제 화합물(6.30 g, 18.35 mmol, 63% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (d6-DMSO, 293 K): δ 0.92 (t, J = 7.5 Hz, 3 H) 1.52 - 1.73 (m, 6 H) 1.73 - 1.95 (m, 4 H) 2.29 (s, 3 H) 3.90 - 4.01 (m, 1 H) 5.18 - 5.22 (m, 1 H) 7.11 (d, J = 7.8 Hz, 2 H) 7.48 (d, J = 8.1 Hz, 1 H) 8.26 (br.s., 3 H).
하기 중간체를 적절한 상업적으로 이용 가능한 아미노산 및 알콜 시작 물질을 이용하여 중간체 13과 유사한 방식으로 제조하였다:
중간체 24: (
S
)-
사이클로펜틸
2-아미노-3-
메틸부타노에이트
4-
메틸벤젠설포네이트
(S)-2-아미노-3-메틸부탄산(800 mg, 6.83 mmol), 사이클로펜탄올(5.07 ml, 55.9 mmol) 및 4-메틸벤젠설폰산 모노하이드레이트(1.689 g, 8.88 mmol)를 사이클로헥산(15 mL)에 현탁시키고, 반응 혼합물을 부착된 딘-스타크 응축기로 95℃로 가열하였다. 완전한 용해가 달성되었고, 반응 혼합물을 밤새 95℃에서 가열하였다. 딘-스타크 장치에서 물이 수거되지 않았다. 반응 혼합물의 온도를 110℃로 상승시키고, 반응 혼합물을 밤새 110℃에서 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켜, 백색 슬러리를 생성시켰다. 용매를 감압하에서 제거하여, 백색 고체를 생성시켰다. 이러한 미정제 물질을 최소 부피의 고온 EtOAc에 용해시키고, 용액을 냉각시켰다. 생성된 백색 고체를 여과시키고, 소량의 EtOAc로 세척하고, 건조시켜, 회백색 고체로서 표제 화합물(1.89 g, 5.28 mmol, 77% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (d6-DMSO, 293 K): δ 0.94 (d, J =7.1 Hz, 3 H) 0.96 (d, J = 7.1 Hz, 3 H) 1.54 - 1.76 (m, 6 H) 1.81 - 1.95 (m, 2 H) 2.05 - 2.20 (m, 1 H) 2.29 (s, 3 H) 3.85 - 3.90 (m, 1 H) 5.20 - 5.24 (m, 1 H) 7.11 (d, J = 7.8 Hz, 2 H) 7.47 (d, J = 8.1 Hz, 2 H) 8.23 (br.s., 3 H).
중간체 25: (
2
S
,3
R
)-이소부틸 2-아미노-3-
하이드록시부타노에이트
4-
메틸벤젠설포네이트
사이클로헥산(100 mL) 중 (2S,3R)-2-아미노-3-하이드록시부탄산(2.5 g, 20.99 mmol) 및 4-메틸벤젠설폰산 모노하이드레이트(5.19 g, 27.3 mmol)의 현탁액에 2-메틸프로판-1-올(15.50 ml, 168 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물에 딘-스타크 응축기를 설치하고, 밤새 130℃에서 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 용매를 감압하에서 제거하였다. 생성된 무색 액체를 3일 밤 동안 진공 오븐에서 건조시켰다. 처음에는, EtOAc를 이용하여 재결정화를 시도하였으나, 샘플은 용액 상태로 유지되었고, 따라서 용매를 감압하에서 제거하였다. 디에틸 에테르 중에서의 분쇄가 다시 성공적이지 않았고, 따라서 샘플(에테르가 여전히 존재함)을 공기 중에 개방된 채로 밤새 방치하였고, 검(gum) 내에 파스퇴르 피펫 및 주걱을 두어 결정화를 유도하도록 시도하였다. 소량의 고체가 주걱 및 피펫 주위에 형성되었고, 따라서 디에틸 에테르 중에서의 분쇄를 다시 시도하였고, 이 때는 성공적이었다. 생성된 백색 고체를 여과에 의해 분리시키고, 진공 오븐에서 건조시켜, 백색 고체로서 표제 화합물(2.2 g, 6.33 mmol, 30% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (d6-DMSO, 293 K): δ 0.92 (d, J = 6.6 Hz, 6 H) 1.21 (d, J = 6.6 Hz, 3 H) 1.82 - 1.99 (m, 1 H) 2.29 (s, 3 H) 3.92 - 4.00 (m, 3 H) 4.11 - 4.17 (m, 1 H) 7.11 (d, J = 7.8 Hz, 2 H) 7.48 (d, J = 8.1 Hz, 2 H) 8.23 (br.s., 3 H).
중간체 26:
사이클로펜틸
1-
아미노사이클로부탄카르복실레이트
4-
메틸벤젠설포네이트
1-아미노사이클로부탄카르복실산(1.66 g, 14.42 mmol), 4-메틸벤젠설폰산 모노하이드레이트(3.57 g, 18.74 mmol) 및 사이클로펜탄올(10.16 g, 118 mmol)을 사이클로헥산(100 mL)에 첨가하고, 반응 혼합물을 130℃로 가열하였다. 완전한 용해가 달성되었고, 반응 혼합물을 상기 온도에서 3일 동안 가열하였다. 응축기가 적절히 설치되지 않아 용매가 증발되었다. 생성된 담갈색 고체를 EtOAc로부터 재결정화시키고, 여과시키고, 세척하고, 건조시켜, 시작 물질 아미노산의 토스산 염을 생성시켰다. 이러한 회수된 시작 물질(3.7726 g, 13.13 mmol), 사이클로펜탄올(10.16 g, 118 mmol) 및 4-메틸벤젠설폰산 모노하이드레이트(0.823 g, 4.33 mmol)를 사이클로헥산(100 mL)에 첨가하고, 반응 혼합물을 5일 동안 130℃에서 가열하였다. 생성된 슬러리를 감압하에서 증발시키고, 진공 오븐에서 건조시켰다. 고체를 고온 EtOAc로부터 재결정화시키고, 여과시키고, 세척하고, 건조시켜, 백색 고체로서 표제 화합물(3.31 g, 9.31 mmol, 65% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (d6-DMSO, 293 K): δ 1.55 - 1.65 (m, 2 H) 1.65 - 1.77 (m, 4 H) 1.81 - 1.93 (m, 2 H) 1.97 - 2.05 (m, 2 H) 2.29 (s, 3 H) 2.30 - 2.39 (m, 2 H) 2.39 - 2.49 (m, 2 H) 5.21 - 5.25 (m, 1 H) 7.12 (d, J = 8.3 Hz, 2 H) 7.48 (d, J = 8.1 Hz, 2 H) 8.50 (br.s., 3 H).
중간체 27: (
2
S
,3
S
)-2-(((
벤질옥시
)카르보닐)아미노)-3-
하이드록시부탄산
0℃에서 물(18 mL) 중 (2S,3S)-2-아미노-3-하이드록시부탄산(1 g, 8.39 mmol) 및 포타슘 카르보네이트(2.90 g, 20.99 mmol)의 교반된 용액에 벤질 카르보노클로리데이트(1.438 mL, 10.07 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 21시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 Et2O로 세척하고, 수성상을 2M 수성 HCl의 첨가에 의해 pH 0으로 산성화시켰다. 생성된 유백색 용액을 EtOAc로 3회 추출하고, 진공하에서 농축시켜, 무색 오일을 생성시켰다. 톨루엔을 오일에 첨가하고, 진공하에서 농축시켜, 무색 오일로서 표제 화합물(1.80g)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.68 min, MH+ = 254.
중간체 28: (
2
S
,3
S
)-(
S
)-
테트라하이드로푸란
-3-일 2-(((
벤질옥시
)카르보닐)아미노)-3-하이드록시부타노에이트
DMF(5 mL) 중 (2S,3S)-2-(((벤질옥시)카르보닐)아미노)-3-하이드록시부탄산(제조를 위해 중간체 27 참조, 0.920 g, 3.45 mmol)의 교반된 용액에 (S)-테트라하이드로푸란-3-올(2.343 mL, 34.5 mmol), EDC(0.794 g, 4.14 mmol), DIPEA(1.205 mL, 6.90 mmol), DMAP(0.417 g, 3.42 mmol) 및 1-하이드록시벤조트리아졸 하이드레이트(0.634 g, 4.14 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 밤새 교반하고, 반응 혼합물을 EtOAc와 수성 포화 NaHCO3 사이에 분배하였다. 유기상을 2M HCl로 세척하고, 소수성 프릿을 통해 통과시키고, 진공하에서 농축시켜, 무색 오일을 생성시켰다. 오일을 DCM에 용해시키고, 사이클로헥산:EtOAc(15-75%)으로 용리시키는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 진공하에서 증발시켜, 무색 오일로서 표제 화합물을 생성시켰다. 반응의 전체 수율은 46%였다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.79 min, MH+ = 324.
중간체 29: (
2
S
,3
S
)-(
S
)-
테트라하이드로푸란
-3-일 2-아미노-3-
하이드록시부
타노에이트 하이드로클로라이드
에탄올(20 mL) 중 (2S,3S)-(S)-테트라하이드로푸란-3-일 2-(((벤질옥시)카르보닐)아미노)-3-하이드록시부타노에이트(제조를 위해 중간체 28 참조, 0.508 g, 1.571 mmol) 및 10% Pd/C(0.167 g, 0.157 mmol)의 진공 탈기된 흑색 현탁액에 수소 대기를 첨가하였다. 반응 혼합물을 5시간 30분 동안 교반하고, 셀라이트 카트리지를 통해 통과시키고, 진공하에서 농축시키고, 질소 스트림 하에서 건조시켜, 갈색 오일을 획득하였다. Et2O(2 mL) 및 Et2O 중 1M HCl(1.46 mL)을 갈색 오일에 첨가하고, 질소 스트림 하에서 농축시키고, 진공하에서 건조시켜, 갈색 고체로서 표제 화합물을 생성시켰다. 화합물을 이러한 순도로 사용하였다.
중간체 30: (
S
)-(
S
)-
테트라하이드로푸란
-3-일 2-아미노-4-
메틸펜타노에이트
토스산 모노하이드레이트(7.73 g, 40.6 mmol)를 사이클로헥산(105 mL) 중 L-류신(4.1 g, 31.3 mmol) 및 (S)-(+)-3-하이드록시테트라하이드로푸란(10 mL, 147 mmol)의 교반된 현탁액에 첨가하였다. 생성된 현탁액을 2일 동안 딘-스타크 장치로 110℃로 가열하고, 교반과 함께 실온으로 냉각시켰다. 생성된 고체를 추가 사이클로헥산(100 mL) 중에서 슬러리화시키고, 여과시키고, 진공하에서 갈색 고체(18 g)로 건조시켰다. 고체를 톨루엔(100 mL) 중에서 슬러리화시키고, 60℃로 가열하였다. 생성된 용액을 실온으로 냉각시키고, 여과시키고, 톨루엔 및 사이클로헥산 세척으로부터의 조합된 여과액을 여과된 고체와 조합시켰다. 생성된 현탁액을 세척(3 x 수성 포화 소듐 바이카르보네이트, 1 x 염수)하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 갈색 오일로 증발시켰다. 오일을 SPE(실리카, 100 g)에 로딩하고, DCM 중 0-5% (메탄올 중 2M 암모니아)로 용리시켰다. 투명한 생성물 함유 분획을 진공하에서 증발시켜, 밝은 갈색 오일로서 표제 화합물(2.58 g)을 생성시켰다. LCMS (시스템 C): tRET = 0.49 min, MH+ = 202
중간체 31: (
2
S
,3
R
)-이소프로필 2-아미노-3-
하이드록시부타노에이트
4-
메틸벤젠설포네이트
실온에서 사이클로헥산(100 mL) 중 (2S,3R)-2-아미노-3-하이드록시부탄산(예를 들어, Sigma Aldrich로부터 상업적으로 이용 가능함)(10 g, 84 mmol)의 현탁액에 2-프로판올(51.7 mL, 672 mmol) 및 4-메틸벤젠설폰산 하이드레이트(20.76 g, 109 mmol)를 첨가하였다. 딘-스타크 장치를 설치하고, 반응 혼합물을 4일 동안 105℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에서 증발시켜, 무색 오일(53 g)을 생성시켰다. 오일을 EtOAc(20 mL)로부터 재결정화시켜, 백색 고체(49 g)를 획득하였다. 고체를 밤새 진공 오븐에서 건조시켜, 왁스성 백색 고체로서 표제 화합물(31.9 g)을 획득하였다. 중간체는 약 85% 순도였고, 이후 반응에서 이러한 순도 수준으로 사용하였다. 1H NMR (d6-DMSO): δ 1.20 (d, J = 6.6 Hz, 3 H), 1.25 (dd, J = 3.2, 6.4 Hz, 6 H), 2.29 (s, 3 H), 3.82 - 3.92 (m, 1 H), 4.05 - 4.16 (m, 2 H), 5.02 (m, 1 H), 7.11 (d, J = 7.9 Hz, 2 H), 7.42 - 7.51 (m, 2 H), 8.20 (br. s., 3 H).
중간체 31a: (
2S,3R
)-이소프로필 2-아미노-3-
하이드록시부타노에이트
하이드로클로라이드
(2S,3R)-이소프로필 2-아미노-3-하이드록시부타노에이트 4-메틸벤젠설폰산 염(예시적 제조를 위해 중간체 31 참조)(90g)을 물(200 mL)에 용해시키고, 포화 소듐 카르보네이트 용액(200 mL)으로 염기화시킨 후, 디클로로메탄(5 x 200 mL)으로 추출하고, 유기층을 건조시키고, 진공하에서 증발시켜, 담황색 오일을 생성시켰다. 생성물을 디클로로메탄에 용해시키고, 디옥산 중 4.0M 염화수소(100 mL)를 첨가한 후, 혼합물을 1시간 동안 교반한 후, 진공하에서 증발시키고, 밤새 진공 오븐에서 건조시켜, 무색 결정성 고체로서 (2S,3R)-이소프로필 2-아미노-3-하이드록시부타노에이트 하이드로클로라이드(33.5 g, 169 mmol)를 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.44 (br s, 3H), 5.65 (d, J = 10 Hz, 1H), 4.95-5.04 (m, 1H), 4.04 - 4.13 (m, 1H), 3.80 (d, J = 10 Hz, 1H), 1.18-1.29 (m, 9H).
중간체 32: (
2
S
,3
R
)-
사이클로부틸
2-아미노-3-
하이드록시부타노에이트
4-
메틸벤젠설포네이트
(2S,3R)-2-아미노-3-하이드록시부탄산(15 g, 126 mmol), 사이클로부탄올(72.6 g, 1007 mmol) 및 p-톨루엔설폰산 모노하이드레이트(31.1 g, 164 mmol)를 사이클로헥산(480 mL) 중에서 조합시키고, 부착된 딘-스타크 장치로 4일 밤 동안 140℃로 가열하였다. 총 8.4 mL의 물을 제거하였다. 반응물을 진공하에서 농축시켰다. 잔여물을 2시간 동안 Et2O(115 mL)로 분쇄시켰다. 생성된 고체를 여과에 의해 수거하고, Et2O(약 50 mL)로 세척한 후, 진공 오븐에서 건조시켜, 백색 고체로서 표제 화합물(40.0064 g, 110 mmol)을 생성시켰다. 1H NMR (d6-DMSO): δ 1.20 (d, J = 6.6 Hz, 3 H), 1.54 - 1.71 (m, 1 H), 1.71 - 1.88 (m, 1 H), 1.98 - 2.16 (m, 2 H), 2.23 - 2.38 (m, 5 H), 3.92 (d, J = 3.9 Hz, 1 H), 4.06 - 4.21 (m, 1 H), 4.98 - 5.06 (m, 1 H), 5.63 (d, J = 4.4 Hz, 1 H), 7.11 (d, J = 7.8 Hz, 2 H), 7.41 - 7.52 (m, 2 H), 8.21 (br. s., 2 H).
중간체 33: (
2
S
,3
R
)-(
S
)-
세크
-부틸 2-((
터트
-
부톡시카르보닐
)아미노)-3-
하이드록시부타노에이트
DMF(10 mL) 중 (2S,3R)-2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3-하이드록시부탄산(2.95 g, 13.46 mmol)의 용액에 HOBT(2.473 g, 16.15 mmol), EDC(3.10 g, 16.15 mmol), DMAP(0.164 g, 1.346 mmol) 및 DIPEA(4.70 mL, 26.9 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 4일 밤 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 감압하에서 농축시키고, 잔여물을 EtOAc(2 x 150 mL)와 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액(150 mL) 사이에 분배하였다. 유기층을 조합시키고, 2M 수성 염산(150 mL) 및 염수(150 mL)로 세척하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켰다. 샘플을 DCM에 로딩하고, 사이클로헥산 중 0-100% EtOAc의 구배를 이용한 SPE(실리카, 100 g)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 무색 검으로서 표제 화합물(2.0 g, 7.26 mmol)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 1.01 min, MH+ = 276
중간체 34: (
2
S
,3
R
)-(
S
)-
세크
-부틸 2-아미노-3-
하이드록시부타노에이트
하이드로클로라이드
1,4-디옥산(16 mL) 중 (2S,3R)-(S)-세크-부틸 2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3-하이드록시부타노에이트(예시적 제조를 위해 중간체 33 참조, 2.0 g, 7.26 mmol)의 용액에 1,4-디옥산 중 4M 염산(4.41 mL, 145 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 감압하에서 증발시켰다. 물질을 1,4-디옥산(4 mL)에 용해시키고, 1,4-디옥산 중 4M 염산(4.41 mL, 145 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 3일 밤 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 감압하에서 증발시켜, 밝은 갈색 검으로서 표제 화합물(1.5 g, 7.09 mmol)을 남겼다. 1H NMR (d6-DMSO): 0.89 (t, J = 7.5 Hz, 3 H), 1.22 (s, 3H), 1.23 (s, 3 H), 1.53 - 1.65 (m, 2 H), 3.87 (d, J = 3.8 Hz, 1 H), 4.10 - 4.17 (m, 1 H), 4.81 - 4.91 (m, 1 H), 5.50 - 5.73 (br.s., 1 H), 8.36 (br.s., 3 H).
중간체 35: (2
S
)-
테트라하이드로푸란
-3-일 2-
아미노부타노에이트
하이드로클로라이드
디옥산(5 mL) 중 (2S)-테트라하이드로푸란-3-일 2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)부타노에이트(제조를 위해 중간체 36 참조, 3.0 g, 10.98 mmol)의 용액에 디옥산 중 4M 염화수소(10 mL, 40 mmol)를 처리하였다. 반응 혼합물을 24시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 증발시키고, 잔여물을 톨루엔(x3)과 공비시켜, 무색 고체로서 표제 화합물(1.87 g, 8.92 mmol, 81% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.55 (br s, 3H), 5.32-5.38 (m, 1H), 3.92-3.96 (m, 1H), 3.70-3.84 (m, 4H). 2.13-2.24 (m, 2H), 1.88-2.00 (m, 1H), 1.78-1.87 (m, 1H), 0.92 (t, J = 12.0 Hz, 3H).
중간체 36: (2
S
)-
테트라하이드로푸란
-3-일 2-((
터트
-
부톡시카르보닐
)아미노)부타노에이트
DMF(20 mL) 중 (S)-2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)부탄산(2.5 g, 12.3 mmol), 디이소프로필에틸아민(3.18 g, 4.3 mL, 24.6 mmol), 1-하이드록시벤조트리아졸 하이드레이트(2.26g, 14.76 mmol), EDC(2.83 g, 14.76 mmol), 및 테트라하이드로푸란-3-올(10.84 g, 9.97 mL, 123 mmol)의 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(50 mL)와 포화 NaHCO3(50 mL) 사이에 분배시켰다. 유기상을 1M 염산(50 mL), 물(50 mL) 및 염수(50 mL)로 세척하였다. 유기상을 건조시키고, 증발시켜, 무색 오일로서 표제 화합물(3.07 g, 11.23 mmol, 91% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 5.30-5.34 (m, 1H), 5.00-5.04 (m, 1H), 4.16-4.22 (m,1H), 3.92-3.94 (m, 1H), 2.12-2.22 (m, 1H). 1.93-2.03 (m, 1H), 1.78-1.84 (m, 1H), 1.60-1.69 (m, 1H), 1.43 (s, 9H), 0.92 (t, J = 12.0 Hz, 3H).
중간체 37: (2
S
)-1-
메톡시프로판
-2-일 2-
아미노부타노에이트
하이드로클로라이드
,
디옥산(5 mL) 중 (2S)-1-메톡시프로판-2-일 2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)부타노에이트(제조를 위해 중간체 38 참조, 2.98 g, 10.82 mmol)의 용액을 디옥산 중 4M 염화수소(10 mL, 40 mmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 24시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 증발시키고, 잔여물을 톨루엔(x3)과 공비시켜, 밝은 갈색 오일로서 (2S)-1-메톡시프로판-2-일 2-아미노부타노에이트 하이드로클로라이드(2.13 g, 10.06 mmol, 93% 수율)를 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.64 (br s, 3H), 5.04-5.13 (m, 1H), 3.89-3.93 (m, 1H), 3.56 (s, 3H), 3.25 (d, J = 10.0 Hz, 2H) 1.79-1.90 (m, 2H),1.18 (dd, J = 12 Hz, 4 Hz, 3H), 0.93 (dt, J = 10.0 Hz, 4 Hz, 3H).
중간체 38: (2
S
)-1-
메톡시프로판
-2-일 2-((
터트
-
부톡시카르보닐
)아미노)
부타노에이트
DMF(20 mL) 중 (S)-2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)부탄산(2.5 g, 12.3 mmol), 디이소프로필에틸아민(3.18 g, 4.3 mL, 24.6 mmol), 1-하이드록시벤조트리아졸 하이드레이트(HOBt)(2.26g, 14.76 mmol), EDC(2.83 g, 14.76 mmol), 및 1-메톡시-2-프로판올(11.09 g, 12.02 mL, 123 mmol)의 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(50 mL)와 포화 NaHCO3(50 mL) 사이에 분배시켰다. 유기상을 1M 염산(50 mL), 물(50 mL) 및 염수(50 mL)로 세척하였다. 유기상을 건조시키고, 증발시켜, 무색 오일로서 표제 화합물(2.98 g, 10.82 mmol, 88% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 5.05-5.15 (m, 2H), 4.20-4.30 (m, 1H), 3.37-3.48 (m,2H), 3.34 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 1.80-1.90 (m, 1H). 1.64-1.72 (m, 1H), 1.78-1.84 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 1.22-1.27 (m, 3H), 0.89-0.96 (m, 3H).
중간체 39: (
2
S
,3
R
)-(
S
)-
테트라하이드로푸란
-3-일 2-((
터트
-
부톡시카르보닐
)아미노)-3-하이드록시부타노에이트
N,N-디메틸포름아미드(22.5 mL) 중 (2S,3R)-2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3-하이드록시부탄산(5 g, 22.8 mmol)의 용액에 디이소프로필에틸아민(7.97 mL, 45.6 mmol), 1-하이드록시벤조트리아졸 하이드레이트(4.19 g, 27.4 mmol), EDC(5.25 g, 27.4 mmol), DMAP(0.28 g, 2.26 mmol) 및 (S)-테트라하이드로푸란-3-올(18.3 mL, 228 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 72시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(200 mL)와 포화 수성 소듐 하이드로겐 카르보네이트(200 mL) 사이에 분배시켰다. 유기상을 분리시키고, 2M 수성 HCl(160 mL), 물(160 mL) 및 염수(160 mL)로 세척하였다. 유기상을 건조시키고, 증발시켜, 투명한 오일로서 미정제 생성물을 생성시켰다. 오일을 디클로로메탄(2 mL)에 용해시키고, 2 x 100 g SNAP 실리카 컬럼에 로딩하였다. 실리카 상의 미정제 물질을 24 CV에 대해 사이클로헥산 중 10-50% 에틸 아세테이트의 구배를 이용한 Biotage SP4로 정제하였다. 순수한 생성물을 함유하는 분획을 수거하고, 용매를 감압하에서 제거하고, 밤새 고진공 하에서 추가로 건조시켜, 투명한 검으로서 (2S,3R)-(S)-테트라하이드로푸란-3-일 2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3-하이드록시부타노에이트(2.81 g, 9.42 mmol, 41% 수율)를 생성시켰다. 1H NMR δ(500 MHz, CDCl3) ppm: 5.38 (1H, t, J=5.4 Hz), 5.29 (1H, d, J=7.7 Hz), 4.36 - 4.27 (1H, m), 4.23 (1H, d, J=8.5 Hz), 3.98 - 3.81 (4H, m), 2.25 - 2.13 (1H, m), 2.10 - 2.01 (1H, m), 1.64 (1H, br. s), 1.46 (9H, s), 1.26 (3H, d, J=6.6 Hz).
중간체 40: (
2
S
,3
R
)-(
S
)-
테트라하이드로푸란
-3-일 2-아미노-3-
하이드록시부
타노에이트, 하이드로클로라이드
실온에서 1,4-디옥산(5.5 mL) 중 (2S,3R)-(S)-테트라하이드로푸란-3-일 2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3-하이드록시부타노에이트(제조를 위해 중간체 39 참조, 570 mg, 1.97 mmol)의 용액에 염산(디옥산 중 4M)(1.97 mL, 7.88 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응(TLC에 의해 모니터됨)은 전환을 나타내었으나, 완료되지는 않았다. 염산(디옥산 중 4M)(1.97 mL, 7.88 mmol)의 추가 부분을 첨가하고, 6시간 동안 교반하였다. 염산(디옥산 중 4M)(1.97 mL, 7.88 mmol)을 다시 첨가하고, 2시간 동안 교반하고, 밤새 방치하였다. 용매를 진공하에서 제거하고, 생성물을 진공 오븐에서 추가로 건조시켜, 황색 검으로서 (2S,3R)-(S)-테트라하이드로푸란-3-일 2-아미노-3-하이드록시부타노에이트, 하이드로클로라이드(470 mg, 1.979 mmol, 100% 수율)를 생성시켰다. 1H NMR δ(400 MHz, DMSO-d6) ppm: 8.46 (3H, br. s.), 5.66 (1H, br. s.), 5.35 (1H, td, J=4.2, 2.3 Hz), 4.17 - 4.08 (1H, m), 3.89 (1H, d, J=3.8 Hz), 3.85 - 3.69 (4H, m), 2.24 - 2.13 (1H, m), 2.00 - 1.91 (1H, m), 1.22 (3H, d, J=6.6 Hz).
중간체 41: (2
S
)-1-
메톡시프로판
-2-일 2-아미노-3-
메틸부타노에이트
하이드로클로라이드
디옥산(5 mL) 중 (2S)-1-메톡시프로판-2-일 2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3-메틸부타노에이트(제조를 위해 중간체 42 참조, 3.13 g, 10.82 mmol)의 용액에 디옥산 중 4M 염화수소(10 mL, 40 mmol)를 처리하였다. 반응 혼합물을 24시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 증발시키고, 잔여물을 톨루엔(x3)과 공비시켜, 밝은 갈색 오일로서 표제 화합물(1.84 g, 8.15 mmol, 75% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.64 (br s, 3H), 5.05-5.15 (m, 1H), 3.78-3.81 (m, 1H), 3.33-3.43 (m, 2H), 3.23-3.25 (m, 3H), 2.15-2.24 (m, 1H), 1.19 (dd, J = 12 Hz, 4 Hz, 3H), 0.98-1.02 (m, 3H), 0.94 (dd, J = 10.0 Hz, 3 Hz, 3H).
중간체 42: ((2
S
)-1-
메톡시프로판
-2-일 2-((
터트
-
부톡시카르보닐
)아미노)-3-메틸부타노에이트
DMF(20 mL) 중 (S)-2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3-메틸부탄산(2.5 g, 11.51 mmol), 디이소프로필에틸아민(2.97 g, 4.02 mL, 23.01 mmol), 1-하이드록시벤조트리아졸 하이드레이트(2.12g, 13.84 mmol), EDC(2.65 g, 13.81 mmol), 및 1-메톡시프로판-2-올(10.37 g, 11.25 mL, 115 mmol)의 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(50 mL)와 포화 NaHCO3(50 mL) 사이에 분배시켰다. 유기상을 1M 염산(50 mL), 물(50 mL) 및 염수(50 mL)로 세척하였다. 유기상을 건조시키고, 증발시켜, 무색 오일로서 표제 화합물(3.13 g, 10.82 mmol, 94% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 5.00-5.15 (m, 2H), 4.16-4.22 (m, 1H), 3.34-3.47 (m, 2H), 3.30-3.33 (m, 3H), 1.41 (s, 9H), 1.21 (d, J = 12 Hz, 3H), 0.94 (d, J = 12 Hz, 3H), 0.84-0.88 (m, 3H).
중간체 43: (2
S
)-1-
메톡시프로판
-2-일 2-아미노-3,3-
디메틸부타노에이트
하이드로클로라이드
디옥산 중 4M 염화수소(10 mL, 40 mmol)를 (2S)-1-메톡시프로판-2-일 2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3,3-디메틸부타노에이트(제조를 위해 중간체 44 참조, 2.6 g, 8.63 mmol)에 첨가하였다. 반응 혼합물을 24시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 증발시키고, 잔여물을 톨루엔(x3)과 공비시켜, 담황색 오일로서 표제 화합물(1.83 g, 7.63 mmol, 89% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.55 (br s, 3H), 5.05-5.16 (m, 1H), 3.32-3.45 (m, 3H), 3.23-3.25 (m, 3H), 1.19 (m, 3H), 1.02 (s, 9H).
중간체 44: (2
S
)-1-
메톡시프로판
-2-일 2-((
터트
-
부톡시카르보닐
)아미노)-3,3-디메틸부타노에이트
DMF(20 mL) 중 (S)-2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3,3-디메틸부탄산(2.5 g, 10.8 mmol), 디이소프로필에틸아민(2.79 g, 3.78 mL, 21.6 mmol), 1-하이드록시벤조트리아졸 하이드레이트(1.99g, 12.97 mmol), EDC(2.49 g, 12.97 mmol), 및 1-메톡시프로판-2-올(9.74 g, 10.57 mL, 108 mmol)의 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(50 mL)와 포화 NaHCO3(50 mL) 사이에 분배시켰다. 유기상을 1M 염산(50 mL), 물(50 mL) 및 염수(50 mL)로 세척하였다. 유기상을 건조시키고, 증발시켜, 무색 오일로서 표제 화합물(2.65 g, 8.73 mmol, 81% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 5.08-5.18 (m, 2H), 4.04-4.11 (m, 1H), 3.32-3.48 (m, 5H), 1.43 (s, 9H), 1.23 (d, J = 12 Hz, 3H), 0.97 (s, 9H).
중간체 45: (2
S
)-
테트라하이드로푸란
-3-일 2-아미노-3,3-
디메틸부타노에이트
하이드로클로라이드
디옥산 중 4M 염화수소(10 mL, 40 mmol)를 (2S)-테트라하이드로푸란-3-일 2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3,3-디메틸부타노에이트(제조를 위해 중간체 46 참조, 2.6 g, 8.63 mmol)에 첨가하였다. 반응 혼합물을 24시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 증발시키고, 잔여물을 톨루엔(x3)과 공비시켜, 무색의 흡습성 고체로서 표제 화합물(1.78 g, 7.49 mmol, 87% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.58 (br s, 3H), 5.33-5.37 (m, 1H), 3.65-3.84 (m, 5H), 2.12-2.22 (m, 1H), 1.94-2.03 (m, 1H), 1.01 (s, 9H).
중간체 46: (2
S
)-
테트라하이드로푸란
-3-일 2-((
터트
-
부톡시카르보닐
)아미노)-3,3-디메틸부타노에이트
DMF(20 mL) 중 (S)-2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3,3-디메틸부탄산(2.5 g, 10.8 mmol), 디이소프로필에틸아민(2.79 g, 3.78 mL, 21.6 mmol), 1-하이드록시벤조트리아졸 하이드레이트(1.99g, 12.97 mmol), EDC(2.49 g, 12.97 mmol), 및 테트라하이드로푸란-3-올(9.52 g, 8.76 mL, 123 mmol)의 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(50 mL)와 포화 NaHCO3(50 mL) 사이에 분배시켰다. 유기상을 1M 염산(50 mL), 물(50 mL) 및 염수(50 mL)로 세척하였다. 유기상을 건조시키고, 증발시켜, 무색 오일로서 표제 화합물(2.7 g, 8.96 mmol, 83% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 5.30-5.35 (m, 1H), 5.05-5.12 (m, 1H), 3.79-4.09 (m, 4H), 1.97-2.22 (m, 2H), 1.43 (s, 9H), 0.97 (s, 9H).
중간체 47: (2
S
)-
테트라하이드로푸란
-3-일 2-아미노-3-
하이드록시
-3-
메틸부타노에이트
하이드로클로라이드
디옥산(2 mL) 중 (2S)-테트라하이드로푸란-3-일 2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3-하이드록시-3-메틸부타노에이트(제조를 위해 중간체 48 참조, 320 mg, 1.05 mmol)의 용액에 디옥산 중 4M 염화수소(2 mL, 8 mmol)를 처리하였다. 반응 혼합물을 24시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 증발시켰다. 잔여물을 디에틸 에테르로 분쇄시키고, 검이 형성되었다. 상층액을 폐기하고, 잔여 용매를 증발시켜, 무색 포움(foam)으로서 표제 화합물(250 mg, 1.043 mmol, 99% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.41 (br s, 3H), 5.49-5.56 (m, 1H), 5.32-5.38 (m,1H), 3.70-3.85 (m, 5H), 2.11-2.23 (m, 1H), 1.93-2.02 (m, 1H), 1.29-1.34 (m, 3H), 1.16-1.19 (m, 3H).
중간체 48: (2
S
)-
테트라하이드로푸란
-3-일 2-((
터트
-
부톡시카르보닐
)아미노)-3-하이드록시-3-메틸부타노에이트
테트라하이드로푸란(5 mL) 중 (S)-2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3-하이드록시-3-메틸부탄산(250 mg, 1.072 mmol)의 용액에 트리페닐포스핀(309 mg, 1.18 mmol) 및 디이소프로필 아조디카르복실레이트(238 mg, 229 μL, 1.18 mmol)를 처리하였다. 혼합물을 5분 동안 실온에서 교반한 후, 테트라하이드로푸란-3-올(472 mg, 434 μL, 5.36 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 18시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 증발시켰다. 잔여물을 에틸 아세테이트(15 mL)에 용해시켰다. 용액을 물(2x10 mL) 및 염수(10 mL)로 세척하였다. 유기상을 건조시키고, 증발시켰다. 잔여물을 크로마토그래피[40% 에틸 아세테이트/헥산]하여, 무색 오일로서 표제 화합물(142 mg, 0.468 mmol, 43.7% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 5.33-5.44 (m, 2H), 4.14-4.20 (m, 1H), 3.83-3.97 (m, 4H), 2.13-2.25 (m, 1H), 2.00-2.12 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 1.26-1.29 (m, 6H).
중간체 49: (
S
)-(
S
)-
테트라하이드로푸란
-3-일 2-아미노-3-
메틸부타노에이트
하이드로클로라이드
에틸 아세테이트(5 mL) 중 (S)-(S)-테트라하이드로푸란-3-일 2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3-메틸부타노에이트(제조를 위해 중간체 50 참조, 2.73 g, 9.50 mmol)의 용액을 디옥산 중 4M 염화수소(5 mL)로 처리하였다. 반응 혼합물을 24시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 증발시켰다. 디에틸 에테르를 이용한 분쇄 시도는 고체를 생성시키지 않았다. 용매를 증발시켜, 무색 오일로서 표제 화합물(1.98 g, 8.85 mmol, 93% 수율)을 생성시켰다. 샘플을 수일 동안 실온에서 방치하여 고체화시켰다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.69 (br s, 3H), 5.32-5.37 (m, 1H), 3.70-3.84 (m, 5H), 2.12-2.24 (m, 2H), 1.93-2.02 (m, 1H), 0.99 (t, J = 12 Hz, 3H), 0.94 (t, J = 12 Hz, 3H).
중간체 50: (
S
)-(
S
)-
테트라하이드로푸란
-3-일 2-((
터트
-
부톡시카르보닐
)아미노)-3-메틸부타노에이트
DMF(20 mL) 중 (S)-2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3-메틸부탄산(2.5 g, 11.51 mmol), 디이소프로필에틸아민(2.97 g, 4.02 mL, 23.01 mmol), 1-하이드록시벤조트리아졸 하이드레이트(HOBt)(2.12g, 13.84 mmol), EDC(2.65 g, 13.81 mmol), 및 (S)-테트라하이드로푸란-3-올(5.07 g, 3.91 mL, 57.5 mmol)의 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(50 mL)와 포화 NaHCO3(50 mL) 사이에 분배시켰다. 유기상을 1M 염산(50 mL), 물(50 mL) 및 염수(50 mL)로 세척하였다. 유기상을 건조시키고, 증발시켜, 무색 오일로서 표제 화합물(2.73 g, 9.50 mmol, 83% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 5.30-5.35 (m, 1H), 4.90-5.04 (m,1H), 4.16-4.20 (m, 1H), 3.75-3.93 (m, 4H), 2.08-2.22 (m, 2H), 1.98-2.07 (m, 1H), 1.43 (s, 9H), 0.95 (t, J = 12 Hz, 3H), 0.88 (t, J = 12 Hz, 3H).
중간체 51: (
S
)-
사이클로펜틸
2-아미노-3-
하이드록시
-3-
메틸부타노에이트
하이드로클로라이드
에틸 아세테이트(2 mL) 중 (S)-사이클로펜틸 2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3-하이드록시-3-메틸 부타노에이트(제조를 위해 중간체 52 참조, 330 mg, 1.09 mmol)의 용액에 디옥산 중 4M HCl(2 mL)을 처리하였다. 반응 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 용매를 증발시켰다. 헥산/디에틸 에테르를 이용한 분쇄 시도는 순수한 생성물을 생성시키지 않았다. 화합물을 메탄올에 용해시키고, SCX 컬럼에 로딩하였다. 컬럼을 메탄올로 세척한 후, 2M 메탄올 중 암모니아로 용리시켰다. NH3/메탄올 분획을 증발시켰다. 잔여물을 디에틸 에테르(5 mL)에 용해시키고, 용액에 디에틸 에테르 중 1M 염화수소(0.5 mL)를 처리하였다. 용매를 증발시켜, 흡습성 무색 검으로서 표제 화합물(258 mg, 1.085 mmol, 99% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.33 (br s, 3H), 5.50-5.54 (m, 1H), 5.17-5.23 (m, 1H), 3.68-3.77 (m, 1H), 3.30-3.37 (m, 1H), 1.78-1.89 (m, 2H), 1.53-1.74 (m, 5H), 1.17 (s, 6H).
중간체 52: (
S
)-
사이클로펜틸
2-((
터트
-
부톡시카르보닐
)아미노)-3-
하이드록시
-3-메틸부타노에이트
테트라하이드로푸란(5 mL) 중 (S)-2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3-하이드록시-3-메틸부탄산(500 mg, 2.14 mmol)의 용액에 트리페닐포스핀(618 mg, 2.36 mmol) 및 디이소프로필아조디카르복실레이트(477 mg, 458 μL, 2.36 mmol)를 처리하였다. 반응 혼합물을 10분 동안 실온에서 교반한 후, 사이클로펜탄올(923 mg, 973 μL, 10.72 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 24시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 증발시켰다. 잔여물을 에틸 아세테이트(10 mL)에 용해시켰다. 용액을 포화 NaHCO3 용액(10 mL), 1M 염산(10 mL), 물(10 mL) 및 염수(10 mL)로 세척하였다. 유기상을 건조시키고, 증발시켰다. 잔여물을 크로마토그래피[30% 에틸 아세테이트/헥산]하여, 무색 고무질 고체로서 표제 화합물(330 mg, 1.095 mmol, 51.1% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 6.48 (br s, 1H), 5.20-5.43 (m,1H), 4.93-5.01 (m, 1H), 4.05-4.36 (m, 1H), 1.50-1.88 (m, 6H), 1.45 (s, 6H), 1.23-1.27 (m, 9H).
중간체 53: (2
S
)-1-
메톡시프로판
-2-일 2-아미노-3-
하이드록시
-3-
메틸부타노
에이트 하이드로클로라이드
에틸 아세테이트(2 mL) 중 (2S)-1-메톡시프로판-2-일 2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3-하이드록시-3-메틸부타노에이트(제조를 위해 중간체 54 참조, 480 mg, 1.57 mmol)의 용액에 디옥산 중 4M HCl(2 mL)을 처리하였다. 반응 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 용매를 증발시켰다. 화합물을 메탄올에 용해시키고, SCX 컬럼에 로딩하였다. 컬럼을 메탄올로 세척한 후, 메탄올 중 2M 암모니아로 용리시켰다. NH3/메탄올 분획을 증발시켰다. 잔여물을 디에틸 에테르(5 mL)에 용해시키고, 용액에 디에틸 에테르 중 1M 염화수소(0.5 mL)를 처리하였다. 용매를 증발시켜, 흡습성 무색 검으로서 표제 화합물(315 mg, 1.303 mmol, 83% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.27 (br s, 3H), 5.48-5.54 (m, 1H), 5.06-5.16 (m, 1H), 3.74-3.82 (m, 1H), 3.38-3.47 (m, 1H), 3.27 및 3.25 (2 x s, 3H. OMe) 1.36 및 1.32 (2 x s, 3H), 1.20 (d, J = 8 Hz, 3H), 1.17 및 1.14 (2 x s, 3H).
중간체 54: (2
S
)-1-
메톡시프로판
-2-일 2-((
터트
-
부톡시카르보닐
)아미노)-3-하이드록시-3-메틸부타노에이트
테트라하이드로푸란(5 mL) 중 (S)-2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3-하이드록시-3-메틸부탄산(500 mg, 2.14 mmol)의 용액에 트리페닐포스핀(618 mg, 2.36 mmol) 및 디이소프로필아조디카르복실레이트(477 mg, 458 μL, 2.36 mmol)를 처리하였다. 반응 혼합물을 10분 동안 실온에서 교반한 후, 1-메톡시프로판-2-올(966 mg, 1.05 mL, 10.72 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 24시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 증발시켰다. 잔여물을 에틸 아세테이트(10 mL)에 용해시켰다. 용액을 포화 NaHCO3 용액(10 mL), 1M 염산(10 mL), 물(10 mL) 및 염수(10 mL)로 세척하였다. 유기상을 건조시키고, 증발시켰다. 잔여물을 크로마토그래피[40% 에틸 아세테이트/헥산]하였다. 헥산(10 mL)을 생성물에 첨가하고, 30분 동안 교반하였다. 고체를 여과시키고, 헥산으로 세척하고, 건조시켜, 무색 고체로서 표제 화합물(487 mg, 1.595 mmol, 74.4% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 5.16-5.43 (m,1H), 4.10-4.30 (m, 1H), 2.38-2.50 (m, 2H), 3.35 및 3.37 (2 x s, 3H), 1.60 (s, 3H), 1.45 (s, 3H), 1.25-1.29 (m, 12H).
중간체 55: (
S
)-
사이클로펜틸
2-아미노-2-
사이클로프로필아세테이트
20 v/v DMF 중 피페리딘(1 mL)을 DMF(1 mL) 중 (S)-사이클로펜틸 2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-2-사이클로프로필아세테이트(제조를 위해 중간체 56 참조, 240 mg, 0.59 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 18시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(15 mL)와 물(15 mL) 사이에 분배시켰다. 유기상을 분리시키고, 물(2x10 mL)로 세척하고, 건조시키고, 증발시켰다. 잔여물을 메탄올에 용해시키고, SCX 컬럼에 로딩하였다. 컬럼을 메탄올(3CV)로 세척한 후, 메탄올 중 2M 암모니아(5CV)로 용리시켰다. 암모니아/MeOH 분획을 증발시켰다. 잔여물을 디클로로메탄(2 mL)에 용해시켰다. 디에틸 에테르 중 1.0M 염화수소(1 mL)를 첨가하였다. 용매를 증발시키고, 잔여물을 디에틸 에테르로 분쇄시켜, 고체를 생성시켰다. 고체를 에틸 아세테이트(20 mL)에 용해시키고, 용액을 포화 NaHCO3 및 염수로 세척하였다. 유기상을 건조시키고, 증발시켰다. 잔여물을 크로마토그래피[0-4% 메탄올/디클로로메탄]하여, 무색 오일로서 표제 화합물(43 mg, 0.235 mmol, 39.6% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 5.18-5.25 (m, 1H), 2.78-2.82 (m, 1H), 1.80-1.93 (m, 2H), 1.56-1.78 (m, 6H), 0.93-1.03 (m, 1H), 0.41-0.58 (m, 2H), 0.27-0.34 (m, 1H).
중간체 56: (
S
)-
사이클로펜틸
2-((((9H-
플루오렌
-9-일)
메톡시
)카르보닐)아미노)-2-사이클로프로필아세테이트
디사이클로헥실카르보디이미드(147 mg, 0.711 mmol)를 사이클로펜탄올(2 mL, 큰 과량) 중 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-2-사이클로프로필아세트산(200 mg, 0.593 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 24시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(20 mL)와 물(20 mL) 사이에 분배시켰다. 유기상을 분리시키고, 물 및 염수로 세척하였다. 건조시키고, 증발시켰다. 잔여물을 크로마토그래피[10-30% 에틸 아세테이트/헥산]하여, 무색 고체로서 표제 화합물(246 mg, 0.607 mmol, 102% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 1.42 min; MH+ 406.
중간체 57: (
S
)-
사이클로펜틸
2-아미노-3-
사이클로프로필프로파노에이트
20 v/v DMF 중 피페리딘(1 mL)을 (S)-사이클로펜틸 2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-사이클로프로필프로파노에이트(제조를 위해 중간체 58 참조, 270 mg, 0.59 mmol)에 첨가하였다. 반응 혼합물을 18시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(15 mL)와 포화 NaHCO3 용액(15 mL) 사이에 분배시켰다. 유기상을 분리시키고, 물(2x10 mL), 및 염수(10 mL)로 세척하였다. 유기상을 건조시키고, 증발시켰다. 잔여물을 크로마토그래피[0-4% 메탄올/디클로로메탄]하여, 무색 오일로서 표제 화합물(48 mg, 0.243 mmol, 37.8% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 5.11-5.18 (m, 1H), 3.42-3.46 (m, 1H), 3.24-3.28 (m, 1H), 1.76-1.86 (m, 1H), 1.45-1.77 (m, 8H), 0.65-0.75 (m, 1H), 0.38-0.46 (m, 2H), 0.04-0.08 (m, 2H).
중간체 58: (
S
)-
사이클로펜틸
2-((((9
H
-
플루오렌
-9-일)
메톡시
)카르보닐)아미노)-3-사이클로프로필프로파노에이트
사이클로펜탄올(2 mL, 큰 과량)을 (S)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-사이클로프로필프로판산(250 mg, 0.711 mmol)에 첨가하였다. 혼합물을 교반하고, N-에톡시카르보닐-2-에톡시-1,2-디하이드로퀴놀린(EEDQ)(211 mg, 0.854 mmol)을 처리하였다. 반응 혼합물을 24시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(10 mL)와 포화 NaHCO3 용액(10 mL) 사이에 분배시켰다. 유기상을 분리시키고, 물 및 염수로 세척하였다. 건조시키고, 증발시켰다. 잔여물을 크로마토그래피[10-30% 에틸 아세테이트/헥산]하여, 표제 화합물(270 mg, 0.644 mmol, 90% 수율)을 생성시켰다.
LCMS (시스템 A): tRET = 1.45 min; MH+ 420.
중간체 59: (
R
)-
사이클로펜틸
2-아미노-3-
사이클로프로필프로파노에이트
20 v/v DMF 중 피페리딘(1 mL)을 (R)-사이클로펜틸 2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-사이클로프로필프로파노에이트(제조를 위해 중간체 60 참조, 258 mg, 0.615 mmol)에 첨가하였다. 반응 혼합물을 18시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(15 mL)와 포화 NaHCO3 용액(15 mL) 사이에 분배시켰다. 유기상을 분리시키고, 물(2x10 mL), 및 염수(10 mL)로 세척하였다. 유기상을 건조시키고, 증발시켰다. 잔여물을 크로마토그래피[0-4% 메탄올/디클로로메탄]하여, 무색 오일로서 표제 화합물(59 mg, 0.299 mmol, 48.6% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 5.11-5.18 (m, 1H), 3.42-3.46 (m, 1H), 3.24-3.28 (m, 1H), 1.76-1.86 (m, 1H), 1.45-1.77 (m, 8H), 0.65-0.75 (m, 1H), 0.38-0.46 (m, 2H), 0.04-0.08 (m, 2H).
중간체 60: (
R
)-
사이클로펜틸
2-((((9
H
-
플루오렌
-9-일)
메톡시
)카르보닐)아미노)-3-사이클로프로필프로파노에이트
사이클로펜탄올(2 mL, 큰 과량)을 (R)-2-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐)아미노)-3-사이클로프로필프로판산(250 mg, 0.711 mmol)에 첨가하였다. 혼합물을 교반하고, N-에톡시카르보닐-2-에톡시-1,2-디하이드로퀴놀린(EEDQ)(211 mg, 0.854 mmol)을 처리하였다. 반응 혼합물을 24시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(10 mL)와 포화 NaHCO3 용액(10 mL) 사이에 분배시켰다. 유기상을 분리시키고, 물 및 염수로 세척하였다. 건조시키고, 증발시켰다. 잔여물을 크로마토그래피[10-30% 에틸 아세테이트/헥산]하여, 무색 오일로서 표제 화합물(258 mg, 0.615 mmol, 86% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 1.45 min; MH+ 420.
중간체 61: (
S
)-
사이클로펜틸
2-
아미노프로파노에이트
하이드로클로라이드
(S)-사이클로펜틸 2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)프로파노에이트(제조를 위해 중간체 62 참조, 4.145 g, 16.11 mmol)를 1,4-디옥산(25 mL)에 용해시킨 후, 디옥산 중 4M 염화수소(25 mL, 100 mmol)를 혼합물에 첨가하고, 플라스크를 18시간 동안 25℃에서 교반하였다. 용매를 진공하에서 제거하였다. 생성물을 에틸 아세테이트에 현탁시키고, 백색 고체가 표제 화합물(2.801 g, 14.46 mmol, 90% 수율)로 확인될 때까지 용매를 증발시켰다(x4). 1H NMR (400 MHz, 메탄올-d4) δ ppm 5.28-5.34 (m, 1H), 4.00-4.08 (q, J = 8 Hz, 1H), 1.90-2.00 (m, 1H), 1.64-1.84 (m, 6H), 1.52 (d, J = 8Hz, 3H).
중간체 62: (
S
)-
사이클로펜틸
2-((
터트
-
부톡시카르보닐
)아미노)
프로파노에이트
(S)-2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)프로판산(5 g, 26.4 mmol) 및 사이클로펜탄올(24.01 mL, 264 mmol)을 톨루엔(250 mL)에 용해시켰다. 이후, 2-(트리부틸포스포라닐리덴)아세토니트릴(14.46 mL, 52.9 mmol)을 반응 혼합물에 첨가하고, 60시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 이후, 100 mL의 에틸 아세테이트를 반응 혼합물에 첨가하였다. 이후, 이를 먼저 250 mL의 포화 소듐 바이카르보네이트 용액으로 세척하고, 두번째로 250 mL의 염수로 세척하였다. 유기층을 MgSO4 상에서 건조시키고, 이후, 용매를 진공하에서 제거하였다. 이후, 고체를 MeOH에 용해시키고, 100g SCX 컬럼을 통과시켰다. 컬럼을 먼저 메탄올로 세척한 후, MeOH 중 NH3로 세척하였다. TLC에 따르면, 본 발명자는 원하는 생성물이 첫번째 메탄올 상에 있다는 것을 발견하였다. 용매를 제거하여 담황색 오일을 획득하였고, 이를 크로마토그래피[사이클로헥산 중 0-30% 에틸 아세테이트]하였다. 적절한 분획을 조합하고, 용매를 제거하여, 담황색 오일로서 표제 화합물(4.145 g, 16.11 mmol, 61.0% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, 메탄올-d4) δ ppm 5.13-5.19 (m, 1H), 4.00-4.13 (m, 1H), 1.80-1.90 (m, 5H), 1.43 (s, 9H), 1.31 (d, J = 8Hz, 3H).
중간체 63: (
S
)-(
S
)-1-
메톡시프로판
-2-일 2-아미노-3-
메틸부타노에이트
하이드로클로라이드
(S)-(S)-1-메톡시프로판-2-일 2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3-메틸부타노에이트(제조를 위해 중간체 64 참조, 1.2 g, 4.15 mmol)를 에틸 아세테이트(2 mL)에 용해시키고, 용액에 디옥산 중 4M 염화수소(2 mL)를 처리하였다. 반응 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 용매를 증발시켜, 무색 검으로서 표제 화합물(725 mg, 3.21 mmol, 77% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8.80 (br s, 3H), 5.19-5.27 (m, 1H), 3.39-3.53 (m, 2H), 3.33 (s, 3H), 2.43-2.53 (m, 1H), 1.28 (d, J = 8 Hz, 3H), 1.13-1.18 (m, 6H).
중간체 64: (
S
)-(
S
)-1-
메톡시프로판
-2-일 2-((
터트
-
부톡시카르보닐
)아미노)-3-메틸부타노에이트
DMF(5 mL) 중 (S)-2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3-메틸부탄산(1.0 g, 4.60 mmol), 디이소프로필에틸아민(1.19 g, 1.608 mL, 9.21 mmol), 1-하이드록시벤조트리아졸 하이드레이트(846 mg, 5.52 mmol), EDC(1.06 g, 5.53 mmol), 및 (S)-1-메톡시프로판-2-올(1.037 g, 1.127 mL, 11.5 mmol)의 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(15 mL)와 포화 NaHCO3 용액(15 mL) 사이에 분배시켰다. 유기상을 1M 염산(15 mL), 물(15 mL) 및 염수(15 mL)로 세척하였다. 유기상을 건조시키고, 증발시켜, 무색 오일로서 표제 화합물(1.23 g, 4.25 mmol, 92% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 5.13-5.19 (m, 1H), 5.06-5.10 (m, 1H (NH?)), 4.19-4.23 (m, 1H), 3.36-3.46 (m, 2H), 3.33 (s, 3H), 2.10-2.18 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.23-1.27 (m, 3H), 0.88-1.02 (m, 6H).
중간체 65: (
S
)-이소프로필 2-아미노-3-
메틸부타노에이트
, 4-
메틸벤젠설포네이트
(S)-2-아미노-3-메틸부탄산(2.5 g, 21.34 mmol), 토스산(5.28 g, 27.7 mmol) 및 프로판-2-올(15 mL, 196 mmol)을 사이클로헥산(100 mL)에 용해시키고, 22시간 동안 130℃로 가열하였다. 용액을 실온으로 냉각시켰고, 이 시점에서 백색 고체로 침전되었다. 이러한 혼합물을 진공하에서 여과시키고, 고체를 헥산으로 수회 세척하였다. 이후, 고체를 3시간 동안 40℃에서 진공 오븐에 두었다. 이후, 이러한 고체를 토스산(1.76g, 9.2mmol) 및 프로판-2-올(3.94g, 65.3mmol)과 함께 사이클로헥산(100mL)에 첨가하였다. 이후, 혼합물을 20시간 동안 130℃로 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 중력하에서 여과시켰다. 이후, 백새 고체를 24시간 동안 40℃에서 진공 오븐에 두어, 표제 화합물(5.977 g, 18.09 mmol, 85% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.24 (br s, 3H), 7.48 (d, J = 12 Hz, 2H), 7.11 (d, J = 12 Hz, 2H), 4.99-5.09 (m, 1H), 3.85-3.91 (m, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.09-2.19 (m, 1H), 1.23-1.28 (m, 6H), 0.94-1.00 (m, 6H).
중간체 66: (
S
)-이소부틸 2-아미노-3-
메톡시프로파노에이트
,
하이드로클로라이드
10% 탄소 상 팔라듐, 50% 물 페이스트(350 mg, 20%wt)를 이소프로판올(50 mL) 중 (S)-이소부틸 2-(((벤질옥시)카르보닐)아미노)-3-메톡시프로파노에이트(제조를 위해 중간체 67 참조, 1.75 g, 5.66 mmol) 및 암모늄 포르메이트(1.78 g, 28.3 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 90℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, '셀라이트'를 통해 여과시켰다. 용매를 여과액으로부터 증발시켰다. 잔여물을 에틸 아세테이트(10 mL)에 용해시키고, 디에틸 에테르 중 1M 염화수소(6.0 mL, 6 mmol)를 처리하였다. 용매를 증발시키고, 잔여물을 디에틸 에테르로 분쇄시켜, 담황색 고체로서 표제 화합물(840 mg, 3.97 mmol, 70.1% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.68 (br s, 3H), 4.32 (br s, 1H), 4.01-4.06 (m, 1H), 3.88-3.94 (m, 1H), 1.92 (헵텟(heptet), J = 8 Hz, 1H), 0.91 (d, J = 8 Hz, 6H).
중간체 67: (
S
)-이소부틸 2-(((
벤질옥시
)카르보닐)아미노)-3-
메톡시프로파노에이트
디클로로메탄(20 mL) 중 (S)-2-(((벤질옥시)카르보닐)아미노)-3-메톡시프로판산(1.6 g, 6.32 mmol), N-에틸모르폴린(1.45 g, 1.60 mL, 12.64 mmol), N-하이드록시벤조트리아졸 하이드레이트(1.16 g, 7.58 mmol), EDC(1.45 g, 7.58 mmol) 및 이소부탄올(2.34 g, 2.92 mL, 31.6 mmol)의 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 용매를 증발시켰다. 잔여물을 에틸 아세테이트(25 mL)와 포화 NaHCO3(25 mL) 사이에 분배시켰다. 유기상을 분리시키고, 2M 염산, 물 및 염수로 세척하였다. 유기상을 건조시키고, 증발시켰다. 잔여물을 톨루엔과 공비시켜, 무색 오일로서 표제 화합물(1.81 g, 5.85 mmol, 93% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.15-7.40 (m, 5H), 5.6―5.65 (m, 1H, (NH?)), 5.14 (s, 2H), 4.47-4.52 (m, 1H), 3.89-4.04 (m, 2H), 3.81-3.87 (m, 1H), 3.61-3.68 (m, 1H), 1.96 (헵텟, J = 8 Hz, 1H), 0.94 (d, J = 8 Hz, 6H).
중간체 68: (
S
)-2-(((
벤질옥시
)카르보닐)아미노)-3-
메톡시프로판산
단계 i).
참조: Tetrahedron Asymmetry 9(1988)3841.
아세토니트릴(20 mL) 중 Z-Ser-OH(1.0 g, 4.18 mmol), 은(I) 옥사이드(4.84 g, 20.9 mmol) 및 요오드메탄(5.93 g, 2.61 mL, 41.8 mmol)의 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 '셀라이트'를 통해 여과시키고, 용매를 여과액으로부터 증발시켜, 밝은 황색 오일로서 단계 i) 생성물을 생성시켰다.
단계 ii).
단계 i) 생성물을 테트라하이드로푸란(5 mL) 및 메탄올(5 mL)에 용해시켰다. 용액을 1M 리튬 하이드록시드 용액(10 mL)으로 처리하였다. 반응 혼합물을 24시간 동안 실온에서 교반하였다. 메탄올 및 THF를 증발시켰다. 잔여물을 물(10 mL)로 희석시키고, 2M 염산으로 산성화시켰다. 혼합물을 에틸 아세테이트(3x20 mL)로 추출하였다. 조합된 추출물을 건조시키고, 증발시켜, 무색 검으로서 표제 화합물(869 mg, 3.43 mmol, 82% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.75 min; MH+ 254.
중간체 69: (
S
)-이소프로필 2-아미노-4-
클로로부타노에이트
티오닐 클로라이드(2.0 g, 1.23 mL, 16.8 mmol)를 이소프로판올(15 mL) 중 L-호모세린(1.0 g, 8.4 mmol)의 교반된 용액에 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 60℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 용매를 증발시켰다. 잔여물을 디에틸 에테르로 분쇄시켜, 혼합물을 생성시켰다. 고체를 에틸 아세테이트(25 mL)와 포화 NaHCO3(25 mL) 사이에 분배시켰다. 수성층을 에틸 아세테이트(2x25 mL)로 추출하였다. 조합된 유기물을 건조시키고, 증발시켜, 무색 오일로서 표제 화합물(160 mg, 0.891 mmol, 10.61% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 5.03 (헵텟, J = 8 Hz, 1H), 3.63-3.77 (m, 2H), 3.55-3.59 (m, 1H), 2.14-2.23 (m, 1H) 1.84-1.95 (m, 1H), 1.25 (d, J = 8 Hz, 3H), 1.23 (d, J = 8 Hz, 3H).
중간체 70: (4-(
에틸아미노
)-3-
니트로페닐
)메탄올
(4-플루오로-3-니트로페닐)메탄올(500 mg, 2.92 mmol), 물 중 70% 에탄아민(286 μl, 2.92 mmol) 및 DIPEA(1531 μl, 8.77 mmol)를 테트라하이드로푸란(THF)(3 mL) 중에 용해시키고, 반응 혼합물을 초기 고흡수 설정을 이용하여 Biotage Initiator 마이크로파에서 3시간 동안 120℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 DCM(25 mL)과 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 용액(25 mL) 사이에 분배시켰다. 층을 분리시키고, 수성층을 DCM(2x25 mL)으로 추출하였다. 유기층을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켰다. 미정제 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 10 컬럼 부피에 대해 메탄올 중 0-5% 디클로로메탄-2M 암모니아의 구배를 이용한 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(50 g 실리카)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 오렌지색 고체로서 표제 화합물 (4-(에틸아미노)-3-니트로페닐)메탄올(524.3 mg, 2.67 mmol, 91% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.80 min; MH+ 197. 1H NMR δ(400 MHz, D6-DMSO): 1.22, (t, J = 7 Hz, 3H), 3.34-3.42, (m, 2H), 4.39, (d, J = 5 Hz, 2H), 5.18, (t, J = 6 Hz, H), 7.03, (d, J = 9 Hz, H), 7.48, (dd, J = 6 Hz, J = 3 Hz, H), 7.98 - 8.01, (m, H), 8.02 - 8.07, (m, H).
하기 중간체를 적절한 상업적으로 이용 가능한 아민을 이용하여 중간체 70과 유사한 방식으로 제조하였다:
(표에서, 사용된 LCMS 시스템, 체류 시간(tRET), MH+, 반응 수율 및 % 수율의 세부사항이 각각의 중간체에 대해 제공된다).
중간체 84: (
S
)-
터트
-부틸 3-(((4-(
하이드록시메틸
)-2-
니트로페닐
)아미노)
메틸
)피페리딘-1-카르복실레이트
DIPEA(7.65 mL, 43.8 mmol)를 2-메틸테트라하이드로푸란(15 mL) 중 4-플루오로-3-니트로벤질 알콜(2.50 g, 14.61 mmol) 및 (3S)-3-(아미노메틸)피페리딘(4.70 g, 21.91 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 용액을 밤새 80℃로 가열하고, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 생성된 고체를 EtOAc와 포화 수성 NaHCO3 사이에 분배시켰다. 수성층을 분리시키고, 유기층을 세척하였다(1x 포화 수성 NaHCO3, 1x 염수). 유기 부분을 MgSO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 오렌지색 오일로 증발시켰다. 잔여물을 DCM에 용해시키고, 사이클로헥산:EtOAc(10-66%)로 용리시키는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물 함유 분획을 진공하에서 오렌지색 오일 포움으로 증발시켰다. 오일을 TBME에 용해시키고, 진공하에서 오렌지색 오일로 증발시켜, 오렌지색 오일로서 표제 화합물(5.52 g)을 생성시켰다. 반응의 전체 수율은 88%였다. LCMS (시스템 C): tRET = 1.27 min, MH+ = 366.
하기 중간체를 적절한 상업적으로 이용 가능한 아민을 이용하여 중간체 84와 유사한 방식으로 제조하였다:
중간체
89: 5
-(1-에틸-5-(
하이드록시메틸
)-1H-
벤조[d]이미다졸
-2-일)-3-
메틸피리딘
-2(1
H
)-온
4-(에틸아미노)-(3-니트로페닐)메탄올(제조를 위해 중간체 70 참조, 520 mg, 2.65 mmol), 5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(제조를 위해 중간체 1 참조, 363 mg, 2.65 mmol) 및 소듐 디티오나이트(1384 mg, 7.95 mmol)를 에탄올(8 mL) 및 물(4 mL)에 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로파에서 5시간 동안 100℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 DCM 용액 중 25% 프로판-2-올(25 mL)과 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 용액(25 mL) 사이에 분배시키고, 층을 분리시켰다. 수성층을 DCM 용액 중 25% 프로판-2-올(3x25 mL)로 추출하였다. 유기층을 조합시키고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켰다. 샘플을 DCM에 로딩하고, 10 컬럼 부피에 대해 메탄올 중 2-12% DCM-2M 암모니아의 구배를 이용한 후, 5 컬럼 부피에 대해 메탄올 중 12% DCM-2M 암모니아에서 유지되는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(50 g 실리카)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 백색 고체로서 표제 화합물(295.1 mg)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 060 min, MH+ = 284.
하기 중간체를 5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(중간체 1) 또는 1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(중간체 2)를 적절히 이용하여 중간체 89와 유사한 방식으로 제조하였다:
중간체 103: (
S
)-
터트
-부틸 3-((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-5-(하이드록시메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트
소듐 하이드로설파이트(7.89 g, 45.3 mmol)를 물(20 mL) 및 에탄올(40 mL)의 혼합물 중 (S)-터트-부틸 3-(((4-(하이드록시메틸)-2-니트로페닐)아미노)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트(예시적 제조를 위해 중간체 84 참조)(5.52g, 15.11 mmol) 및 1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(제조를 위해 중간체 2 참조, 2.97 g, 19.64 mmol)의 현탁액에 첨가하였다. 생성된 현탁액을 6시간 동안 80℃로 가열하고, 실온으로 냉각시키고, 1.5일 동안 방치하였다. 혼합물을 포화 수성 NaHCO3(200 mL)와 DCM:IPA(3:1, 200 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 분리시키고, 수성층을 추출하였다[2x DCM:IPA(3:1, 200 mL)]. 조합된 유기층을 MgSO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 담갈색 포움으로 증발시켰다. 잔여물을 DCM에 용해시키고, EtOAc:EtOH(12.5-25%)로 용리시키는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물 함유 분획을 진공하에서 담갈색 포움으로 증발시키고, TBME 및 사이클로헥산으로 슬러리화시켰다. 생성된 현탁액을 진공하에서 증발시켜, 백색 고체로서 표제 화합물을 생성시켰다. 반응의 전체 수율은 49%였다. LCMS (시스템 C): tRET = 0.68 min, MH+ = 467.
하기 중간체를 중간체 103과 유사한 방식으로 제조하였다:
중간체 109: (R)-5-(5-(
하이드록시메틸
)-1-(피페리딘-3-
일메틸
)-1H-
벤조[d]이미다졸
-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온
IPA 중 5M HCl의 용액(40 mL, 200 mmol)을 (S)-터트-부틸 3-((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-5-(하이드록시메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트(제조를 위해 중간체 103 참조, 1.8 g, 3.86 mmol)에 첨가하고, 현탁액을 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에서 갈색 오일로 증발시켰다. 잔여물을 MeOH에 용해시키고, 20 g SCX 카트리지에 로딩하였다. 카트리지를 MeOH(200 mL)로 용리시킨 후, 2M 메탄올성 암모니아(100 mL)로 용리시켰다. 염기성 분획을 진공하에서 증발시켜, 담황색 포움으로서 표제 화합물(1.389g)을 생성시켰다. 반응의 전체 수율은 98%였다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.61 min, MH+ = 367.
하기 중간체를 중간체 109와 유사한 방식으로 제조하였다:
중간체 111: (
S
)-5-(1-((1-
아세틸피페리딘
-3-일)
메틸
)-5-(
하이드록시메틸
)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1
H
)-온
아세트산 무수물(0.382 mL, 4.05 mmol)을 2-메틸테트라하이드로푸란(30 mL) 중 (R)-5-(5-(하이드록시메틸)-1-(피페리딘-3-일메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 109 참조, 1.35 g, 3.68 mmol)의 현탁액에 첨가하였다. 생성된 현탁액을 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 2-MeTHF(200 mL)와 포화 수성 NaHCO3(25 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 세척하고(1x 포화 수성 NaHCO3[25 mL]), MgSO4 상에서 건조시키고, 진공하에서 백색 고체(약 0.3 g)로 증발시켰다. 조합된 수성층을 추출하고(3 x DCM[50 mL]), 유기층을 2-MeTHF 증발로부터의 잔여물에 첨가하였다. 생성된 용액을 진공하에서 백색 고체로 증발시켰다. 고체를 DCM에 용해시키고, DCM:2M 메탄올성 암모니아(0-5%)로 용리되는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물 함유 분획을 진공하에서 증발시켜, 백색 고체로서 표제 화합물(1.353g)을 생성시켰다. 전체 수율은 90였다. LCMS (시스템 C): tRET = 0.44 min, MH+ = 409.
중간체 112: (
R
)-5-(1-((1-
아세틸피페리딘
-3-일)
메틸
)-5-(
하이드록시메틸
)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1
H
)-온
디클로로메탄(10 mL) 중 (S)-5-(5-(하이드록시메틸)-1-(피페리딘-3-일메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온 하이드로클로라이드(제조를 위해 중간체 109 참조, 1.49 g, 3.37 mmol)의 교반된 현탁액에 DIPEA(3.53 mL, 20.19 mmol)를 첨가하였다. 생성된 황색 용액에 아세틸 클로라이드(0.718 mL, 10.10 mmol)를 첨가하고, 1.5시간 동안 교반하였다. 2M 수성 NaOH(10 mL, 20.00 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 30분 동안 강하게 교반하고, 유기층을 분리시켰다. 수성상을 DCM으로 3회 추출하고, 조합된 유기상을 소수성 프릿을 통해 통과시키고, 진공하에서 농축시켜, 갈색 페이스트를 생성시켰다. 잔여물을 THF(10 mL)에 용해시키고, 2M 수성 NaOH(10 mL, 20.00 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물과 DCM 사이에 분배시키고, 유기층을 분리시켰다. 수성상을 DCM으로 3회 추출하였다. 포화 수성 NaHCO3 및 DCM:IPA(3:1)를 수성층에 첨가하고, 유기상을 분리시켰다. 수성층을 3회 추출하고, 조합된 유기상을 소수성 프릿을 통해 통과시키고, 농축시키고, 진공하에서 건조시켜, 황색 고체를 생성시켰다. 미정제 고체를 DCM에 용해시키고, 2M 메탄올성 암모니아:DCM(2.5-12.5%, 15 CV)로 용리되는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 진공하에서 증발시켜, 황색 고체로서 표제 화합물(1.01g)을 생성시켰다. 반응의 전체 수율은 73%였다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.47 min, MH+ = 409.
중간체
113: 1
-에틸-2-(5-
메틸
-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1
H
-
벤조[d]이미다졸
-5-카르브알데하이드
5-(1-에틸-5-(하이드록시메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-3-메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 89 참조, 290 mg, 1.024 mmol) 및 45 중량%의 2-요오드옥시벤조산(701 mg, 1.126 mmol)을 DCM(5 mL)에 첨가하고, 현탁액을 4일 동안 질소하에서 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 용액(30 mL)과 DCM(30 mL) 사이에 분배시키고, 층을 분리시켰다. 수성층을 DCM(3x30 mL)으로 추출하였다. 유기층을 조합하고, 감압하에서 농축시켰다. 이를 다시 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 용액(50 mL)과 DCM(50 mL) 사이에 분배시켰다. 층을 분리시키고, 수성층을 DCM(3x50 mL)으로 추출하였다. 조합된 유기층을 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 농축시켜, 회백색 고체로서 표제 화합물(263 mg)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.67 min, MH+ = 282
하기 중간체를 중간체 113과 유사한 방식으로 제조하였다:
중간체 118: (
S
)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-((
테트라하이드로푸란
-2-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-카르브알데하이드
DMF(5 mL) 중 (S)-2-(5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로푸란-2-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드(제조를 위해 중간체 114 참조, 500 mg, 1.260 mmol) 및 포타슘 카르보네이트(348 mg, 2.52 mmol)의 현탁액을 1.15시간 동안 교반한 후, 요오드메탄(0.095 mL, 1.512 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 주말에 걸쳐 교반하였다. 반응 혼합물을 감압하에서 농축시키고, 잔여물을 3:1의 클로로포름:이소프로판올(125 mL)과 소듐 바이카르보네이트의 포화 용액(125 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 분리시키고, 수성 분획을 3:1의 클로로포름:이소프로판올(3x125 mL)로 3회 재추출하였다. 유기 분획을 조합하고, 소수성 프릿을 통해 통과시키고, 감압하에서 농축시켰다. 잔여물을 에틸 아세테이트 중 10% 에탄올에 용해시키고, 실리카 컬럼(50 g)에 로딩하였다. 생성물을 에틸 아세테이트 중 0-30% 에탄올의 구배로 용리시켰다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 농축시켜, 밝은 갈색 고체로서 표제 화합물(121 mg)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.75min, MH+ = 352
중간체 119: (
R
)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-((
테트라하이드로푸란
-2-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드
(R)-2-(5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로푸란-2-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드(제조를 위해 중간체 115 참조, 149 mg, 0.353 mmol)를 DMF(2.5 mL)에 용해시키고, 포타슘 카르보네이트(98 mg, 0.707 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 교반한 후, 요오드메탄(0.027 mL, 0.424 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 함유하는 플라스크를 밀봉시켰다. 반응 혼합물을 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 이소프로판올로 희석시키고, 용매로 사전-컨디셔닝된 셀라이트 카트리지(2.5 g)를 통해 여과시켰다. 4 CV의 이소프로판올을 컬럼을 통해 통과시켰다. 세척액을 조합하고, 감압하에서 농축시켰다. 잔여물을 최소량의 DCM에 용해시키고, 실리카 컬럼(25 g)에 로딩하고, 에틸 아세테이트 중 0-20% 에탄올의 구배로 용리시켰다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 농축시켜, 무색 검으로서 표제 화합물(56 mg)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.75min, MH+ = 352
중간체
120: 1
-((1,4-디옥산-2-일)
메틸
)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1H-벤조[
d
]이미다졸-5-카르브알데하이드 (공지되지 않은 입체형태의 단일 거울상 이성질체)
포타슘 카르보네이트(368 mg, 2.66 mmol)를 DMF(15 mL) 중 1-((1,4-디옥산-2-일)메틸)-2-(5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드(제조를 위해 중간체 122 참조, 470 mg, 1.330 mmol)의 현탁액에 한번에 첨가하였다. 이후, 혼합물을 얼음-물 배쓰에서 냉각시키고, 요오드메탄(0.108 mL, 1.729 mmol)을 적가하였다. 첨가가 완료된 경우, 배쓰를 제거하고, 반응 혼합물을 밤새(18시간) 실온에서 교반하였다. 용매를 감압하에서 제거하였다. 이후, 고체를 NaHCO3(100 mL)와 DCM:iPrOH 3:1(100 mL) 사이에 분배시켰다. 분리된 수성상을 DCM:iPrOH 3:1(3 x 100 mL)으로 추출하였다. 조합된 유기상을 소수성 프릿을 통해 통과시키고, 증발시켜, 담황색 고체로서 표제 화합물(476 mg)을 획득하였다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.70min, MH+ = 368.
중간체
121: 2
-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-((
테트라하이드로
-2
H
-피란-4-일)메틸)-1
H
-벤조[d]이미다졸-6-카르브알데하이드
이산화망간(11 g, 108 mmol)을 실온에서 클로로포름(150 mL) 중 5-(6-(하이드록시메틸)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 94 참조, 3.3 g, 8.98 mmol)의 교반된 용액에 한번에 첨가하였다. 생성된 현탁액을 밤새(18시간) 신속히 교반하였다. 추가 이산화망간(2 g, 19.55 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 0.5시간 이상 동안 교반하였다. 20 mL의 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과시키고, 용매를 증발시켜, 무색 오일로서 표제 화합물(424 mg)을 획득하였다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.72 min, MH+ = 367
중간체
122: 1
-((1,4-디옥산-2-일)
메틸
)-2-(5-
메틸
-6-옥소-1,6-
디하이드로피
리딘-3-일)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-카르브알데하이드 (단일한 공지되지 않은 거울상 이성질체)
이산화망간(2232 mg, 21.82 mmol)을 실온에서 클로로포름(25 mL) 중 5-(1-((1,4-디옥산-2-일)메틸)-5-(하이드록시메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-3-메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 138a 참조, 554 mg, 1.559 mmol)의 교반된 현탁액에 한번에 첨가하였다. 생성된 현탁액을 4시간 동안 신속히 교반하고, 밤새 방치하였다. 현탁액을 셀라이트를 통해 여과시키고, DCM(2 x 30 mL), MeOH(5 x 30 mL) 및 DCM:iPr 3:1(2 x 30 mL)로 플러싱(flushing)시켰다. 여과액을 진공 오븐에서 1시간 동안 진공하에서 증발시켜, 담황색 고체로서 표제 화합물(470 mg)을 획득하였다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.65 min, MH+ = 354
하기 중간체를 중간체 122와 유사한 방식으로 제조하였다:
중간체 130: (
S
)-
터트
-부틸 3-((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-5-포르밀-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트
이산화망간(2.98 g, 34.3 mmol)을 클로로포름(60 mL) 중 (S)-터트-부틸 3-((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-5-(하이드록시메틸)-1H벤조[d]이미다졸-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트(1.6 g, 3.43 mmol)(예시적 제조를 위해 중간체 103 참조)의 용액에 첨가하였다. 현탁액을 3시간 동안 교반하고, 교반을 주말에 걸쳐 중단시켰다. 현탁액을 여과시키고, 진공하에서 증발시켜, 갈색 고체로서 표제 화합물(1.299g)을 생성시켰다. 반응에 대한 전체 수율은 82%였다. LCMS (시스템 C): tRET = 0.83 min, MH+ = 465.
하기 중간체를 중간체 130과 유사한 방식으로 제조하였다:
중간체 137: (
2
S
,3
R
)-
사이클로펜틸
2-아미노-3-
하이드록시부타노에이트
, 4-메틸벤젠설폰산 염
실온에서 사이클로헥산(200 mL) 중 (2S,3R)-2-아미노-3-하이드록시부탄산(20 g, 168 mmol)의 현탁액에 사이클로펜탄올(116 g, 1343 mmol) 및 4-메틸벤젠설폰산(37.6 g, 218 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 24시간 동안 100℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에서 증발시켜, 갈색 오일로서 미정제 생성물을 생성시켰다. 갈색 오일을 냉각시키고, 생성된 결정을 여과시키고, EtOAc(50 mL)로 세척하여, 백색 고체로서 (2S,3R)-사이클로펜틸 2-아미노-3-하이드록시부타노에이트, 4-메틸벤젠설폰산 염(50.06 g, 136 mmol, 81% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR δ(400 MHz, DMSO-d 6) ppm: 8.20 (3H, br. s.), 7.48 (2H, d, J=8.1 Hz), 7.12 (2H, d, J=7.8 Hz), 5.63 (1H, d, J=4.4 Hz), 5.20 (1H, t, J=5.6 Hz), 4.18 - 4.03 (1H, m), 3.89 (1H, d, J=3.4 Hz), 2.30 (3H, s), 1.94 - 1.78 (2H, m), 1.77 - 1.50 (6H, m), 1.20 (3H, d, J=6.6 Hz).
중간체 138a 및 138b: 5-(1-((1,4-디옥산-2-일)
메틸
)-5-(
하이드록시메틸
)-1
H
-벤조[d]이미다졸-2-일)-3-메틸피리딘-2(1
H
)-온
(rac)-5-(1-((1,4-디옥산-2-일)메틸)-5-(하이드록시메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-3-메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 95 참조, 1.2g)을 30mL/min의 유량, 215nm의 검출 파장에서 40% EtOH/헵탄으로 용리되는 30mm x 25cm Chiralcel OD-H 컬럼을 이용한 키랄 크로마토그래피로 이의 2개의 상응하는 거울상 이성질체로 분리시켰다.
이성질체 1: (중간체 138a) 563mg, 고체로서 획득됨
LCMS (시스템 A): tRET = 0.44 min, MH+ = 356
1.0mL/min의 유량, 215nm의 검출 파장에서 40% EtOH/헵탄으로 용리되는 4.6mmid x 25cm Chiralcel OD-H 컬럼에서 키랄 순도에 대해 분석하였다.
키랄 순도는 99.5% 초과인 것으로 밝혀졌다.
이성질체 2: (중간체 138b) 598mg, 고체로서 획득됨
LCMS (시스템 A): tRET = 0.41 min, MH+ = 356
1.0mL/분의 유량, 215nm의 검출 파장에서 40% EtOH/헵탄으로 용리되는 4.6mmid x 25cm Chiralcel OD-H 컬럼에서 키랄 순도에 대해 분석하였다.
키랄 순도는 99.1%인 것으로 밝혀졌다.
중간체 139: (
S
)-5-(6-(
하이드록시메틸
)-1-(피페리딘-3-
일메틸
)-1
H
-
벤조[
d
]이미다졸
-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1
H
)-온
IPA 중 5M HCl(15 mL)을 (R)-터트-부틸 3-((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-6-(하이드록시메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트(제조를 위해 중간체 99 참조, 850 mg, 1.82 mmol)에 첨가하였다. 생성된 용액을 3시간 동안 교반하고, 진공하에서 갈색 고체로 증발시켰다. 잔여물을 MeOH에 용해시키고, 10g SCX 카트리지에 로딩하고, MeOH로 용리시킨 후, 2M 메탄올성 암모니아로 용리시켰다. 염기성 분획을 진공하에서 증발시켜, 백색 포움으로서 표제 화합물(617mg)을 생성시켰다. LCMS (시스템 C): tRET = 0.33 min, MH+ = 367.
중간체 140: (
R
)-(1-((1-
아세틸피페리딘
-3-일)
메틸
)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1
H
-벤조[d]이미다졸-6-일)메틸 아세테이트
(S)-5-(6-(하이드록시메틸)-1-(피페리딘-3-일메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 139 참조, 617 mg, 1.68 mmol)을 DCM(5 mL)에 용해시켰다. DIPEA(0.618 mL, 3.54 mmol) 및 아세틸 클로라이드(0.253 mL, 3.54 mmol)를 첨가하고, 반응물을 3.5시간 동안 실온에서 질소하에서 교반하였다. 0.2 당량의 DIPEA(0.059 mL, 0.336 mmol) 및 0.2 당량의 아세틸 클로라이드(0.024 mL, 0.336 mmol)를 첨가하고, 반응물을 밤새(16시간) 질소하에서 교반하였다. 0.4 당량의 DIPEA(0.118 mL, 0.672 mmol) 및 0.4 당량의 아세틸 클로라이드(0.048 mL, 0.672 mmol)를 첨가하고, 반응물을 1시간 동안 질소하에서 교반하였다. 5 mL의 수성 NaOH 2M을 첨가하고, 현탁액을 30분 동안 강하게 교반하였다. 분리된 수성상을 DCM(3 x 10 mL)으로 추출하였다. 조합된 유기상을 소수성 프릿을 통해 통과시켜, 황색 페이스트로서 표제 화합물(796 mg)을 획득하였다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.62 min, MH+ = 451.
중간체 141: (
R
)-5-(1-((1-
아세틸피페리딘
-3-일)
메틸
)-6-(
하이드록시메틸
)-1
H
-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온
(R)-(1-((1-아세틸피페리딘-3-일)메틸)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-6-일)메틸 아세테이트(제조를 위해 중간체 140 참조, 796 mg, 1.77 mmol)를 테트라하이드로푸란(2 mL) 및 MeOH(2 mL)에 용해시키고, 수성 NaOH 2M(0.883 mL, 1.77 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 수성 sol. HCl 2M을 이용하여 pH=7로 중화시키고, 물(10 mL) 및 DCM:iPrOH 3:1(10 mL)로 희석시켰다. 분리된 수성상을 DCM:iPrOH 3:1(3 x 10 mL)로 추출하였다. 조합된 유기상을 소수성 프릿을 통해 통과시키고, 증발시켜, 황색 오일로서 표제 화합물(683 mg)을 획득하였다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.46 min, MH+ = 409.
중간체 142: (
S
)-5-(1-((1-
아세틸피페리딘
-3-일)
메틸
)-6-(
하이드록시메틸
)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1
H
)-온
(R)-5-(6-(하이드록시메틸)-1-(피페리딘-3-일메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 170 참조, 284 mg, 0.775 mmol)을 DCM(5 mL)에 용해시키고, 물/얼음 배쓰에서 냉각시킨 후, DIPEA(0.108 mL, 0.620 mmol)를 첨가한 후, 아세틸 클로라이드(0.044 mL, 0.620 mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 배쓰를 제거하고, 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고, 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM:iPrOH 3:1(10 mL)와 NaHCO3(10 mL) 사이에 분배시켰다. 분리된 수성상을 DCM:iPrOH 3:1(3 x 10 mL)로 추출하였다. 조합된 유기물 분획을 소수성 프릿을 통해 통과시키고, 증발시켜, 미정제 생성물, 300 mg을 획득하였다. 샘플을 MeOH 3 mL에 용해시키고, MDAP(방법 B)로 정제하였다. 용매를 건조시켜, 백색 고체로서 표제 화합물(230 mg)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.64 min, MH+ = 409.
중간체 143: (2
S
)-
사이클로펜틸
4-
메틸
-2-((4-(((4-
메틸모르폴린
-2-일)
메틸
)아미노)-3-니트로벤질)아미노)펜타노에이트
(4-메틸모르폴린-2-일)메탄아민(665 mg, 5.11 mmol) 및 DIPEA(0.892 mL, 5.11 mmol)를 테트라하이드로푸란(12 mL) 중 (S)-사이클로펜틸 2-((4-플루오로-3-니트로벤질)아미노)-4-메틸펜타노에이트(제조를 위해 중간체 144 참조, 600 mg, 1.703 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 초기 고흡수 설정을 이용하여 Biotage Initiator 마이크로파에서 전체 90분 동안 120℃로 가열하였다. DCM(30 mL) 및 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 용액(30 mL)을 첨가하고, 층을 분리시켰다. 수성층을 DCM(2x30 mL)으로 추출하고, 유기층을 조합하고, 건조시키고, 감압하에서 증발시켜, 오렌지색 액체를 생성시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 15 컬럼 부피에 대해 0-10% 디클로로메탄-메탄올의 구배를 이용한 후, 5 컬럼 부피에 대해 10% 디클로로메탄-메탄올에서 유지시키는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(50 g 실리카)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 오렌지색 검으로서 표제 화합물(693.6 mg, 1.499 mmol, 88% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.70 min, MH+ = 463
중간체 144: (S)-
사이클로펜틸
2-((4-
플루오로
-3-
니트로벤질
)아미노)-4-
메틸펜타노에이트
4-플루오로-3-니트로벤즈알데하이드(2 g, 11.83 mmol) 및 (S)-사이클로펜틸 2-아미노-4-메틸펜타노에이트 4-메틸벤젠설포네이트(제조를 위해 중간체 3 참조, 4.83 g, 13.01 mmol)를 DCM(50 mL)에 용해시키고, 여기에 아세트산(2.031 mL, 35.5 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 1.5시간 동안 질소하에서 교반하였다. 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(5.01 g, 23.65 mmol)를 나누어 첨가하고, 반응 혼합물을 밤새 질소하에서 교반하였다. 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 수용액(100 mL)을 천천히 첨가하고, 반응 혼합물을 발포가 멈출 때까지 교반하였다. 생성된 현탁액을 DCM(3x100 mL)으로 추출하였다. 조합된 유기층을 건조시키고, 감압하에서 증발시켜, 황색 오일을 생성시켰다. 미정제 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 10 컬럼 부피에 대해 0-50% 사이클로헥산-에틸 아세테이트의 구배를 이용한 후, 10 컬럼 부피에 대해 50% 사이클로헥산-에틸 아세테이트에서 유지시키는 Biotage SP4 SNAP 100 g 실리카로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 황색 오일로서 표제 화합물(2.64 g, 7.48 mmol, 63.3% 수율)을 생성시켰다.
LCMS (시스템 A): tRET = 0.97 min, MH+ = 353.
중간체 145: (2
S
)-
사이클로펜틸
2-((4-(((4-
메틸모르폴린
-2-일)
메틸
)아미노)-3-니트로벤질)아미노)프로파노에이트
(S)-사이클로펜틸 2-((4-플루오로-3-니트로벤질)아미노)프로파노에이트(제조를 위해 중간체 146 참조, 490 mg, 1.579 mmol), (4-메틸모르폴린-2-일)메탄아민(617 mg, 4.74 mmol) 및 DIPEA(0.827 mL, 4.74 mmol)를 THF(12 mL)에 용해시키고, 반응 혼합물을 초기 고흡수 설정을 이용하여 Biotage Initiator 마이크로파에서 전체 90분 동안 120℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 용액(40 mL)과 DCM(40 mL) 사이에 분배시키고, 층을 분리시켰다. 수성층을 DCM(3x40 mL)으로 세척하고, 조합된 유기층을 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켜, 오렌지색 오일을 생성시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 10 컬럼 부피에 대해 메탄올 중 0-12% 디클로로메탄-2M 암모니아의 구배를 이용한 후, 5 컬럼 부피에 대해 메탄올 중 12% 디클로로메탄-2M 암모니아에서 유지시키는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(50 g 실리카)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 오렌지색 오일로서 표제 화합물(649.8 mg, 1.545 mmol, 98% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 1.12 min, MH+ = 421
중간체 146: (
S
)-
사이클로펜틸
2-((4-
플루오로
-3-
니트로벤질
)아미노)-4-
메틸펜타노에이트
4-플루오로-3-니트로벤즈알데하이드(500 mg, 2.96 mmol) 및 (S)-사이클로펜틸 2-아미노프로파노에이트 하이드로클로라이드(제조를 위해 중간체 61 참조, 630 mg, 3.25 mmol)를 디클로로메탄(DCM)(15 mL)에 용해시키고, 이 용액에 아세트산(0.508 mL, 8.87 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 질소하에서 교반하였다. 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(1.253 g, 5.91 mmol)를 반응 혼합물에 첨가하고, 이를 밤새 실온에서 질소하에서 교반하였다. 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 용액(40 mL)을 발포가 멈출 때까지 용액에 천천히 첨가하였다. 이후, 이러한 용액을 DCM(4x40 mL)으로 추출하고, 유기층을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 용매를 감압하에서 제거하여, 황색 오일을 생성시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 10 컬럼 부피에 대해 35-65% 사이클로헥산-에틸 아세테이트의 구배를 이용한 후, 5 컬럼 부피에 대해 65% 사이클로헥산-에틸 아세테이트에서 유지시키는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(50 g 실리카)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 황색 오일로서 표제 화합물(496.5 mg, 1.600 mmol, 54.1% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.75 min, MH+ = 311
중간체 147: (2
S
)-
사이클로펜틸
3-
메틸
-2-((4-(((4-
메틸모르폴린
-2-일)
메틸
)아미노)-3-니트로벤질)아미노)부타노에이트
(4-메틸모르폴린-2-일)메탄아민(666 mg, 5.12 mmol) 및 DIPEA(0.893 mL, 5.12 mmol)를 THF(12 mL) 중 (S)-사이클로펜틸 2-((4-플루오로-3-니트로벤질)아미노)-3-메틸부타노에이트(제조를 위해 중간체 148 참조, 577 mg, 1.705 mmol)의 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 초기 고흡수 설정을 이용하여 Biotage Initiator 마이크로파에서 전체 90분 동안 120℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 DCM(40 mL)과 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 용액(40 mL) 사이에 분배시키고, 층을 분리시켰다. 수성층을 DCM(2x40 mL)으로 추출하고, 조합된 유기층을 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켜, 오렌지색 오일을 생성시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 10 컬럼 부피에 대해 메탄올 중 0-7% 디클로로메탄-2M 암모니아의 구배를 이용한 후, 5 컬럼 부피에 대해 메탄올 중 7% 디클로로메탄-2M 암모니아에서 유지시키는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(50 g 실리카)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 오렌지색 오일로서 표제 화합물(760.6 mg, 1.696 mmol, 99% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 1.33 min, MH+ = 449.
중간체 148: (
S
)-
사이클로펜틸
2-((4-
플루오로
-3-
니트로벤질
)아미노)-3-
메틸부타노에이트
4-플루오로-3-니트로벤즈알데하이드(500 mg, 2.96 mmol) 및 (S)-사이클로펜틸 2-아미노-3-메틸부타노에이트 4-메틸벤젠설포네이트(1.163 g, 3.25 mmol, 제조를 위해 중간체 24 참조)를 디클로로메탄(DCM)(20 mL)에 용해시키고, 반응 혼합물을 1시간 동안 질소하에서 교반하였다. 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(1.253 g, 5.91 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 2시간 동안 실온에서 질소하에서 교반하였다. 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 수용액(50 mL)을 발포가 멈출 때까지 나누어 반응 혼합물에 첨가하였다. 생성된 현탁액을 DCM(4x50 mL)으로 추출하고, 유기층을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켜, 담황색 오일을 생성시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 10 컬럼 부피에 대해 0-1% 디클로로메탄-메탄올의 구배를 이용한 후, 5 컬럼 부피에 대해 1% 디클로로메탄-메탄올에서 유지시키는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(50 g 실리카)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 담황색 오일로서 표제 화합물(581 mg, 1.717 mmol, 35.9% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.95 min, MH+ = 339.
중간체 149: (
S
)-
사이클로펜틸
4-
메틸
-2-((4-(((1-
메틸피페리딘
-4-일)
메틸
)아미노)-3-니트로벤질)아미노)펜타노에이트
(S)-사이클로펜틸 2-((4-플루오로-3-니트로벤질)아미노)-4-메틸펜타노에이트(제조를 위해 중간체 144 참조, 500 mg, 1.419 mmol), (1-메틸피페리딘-4-일)메탄아민(546 mg, 4.26 mmol) 및 DIPEA(0.743 mL, 4.26 mmol)를 테트라하이드로푸란(THF)(12 mL)에 첨가하고, 반응 혼합물을 초기 고흡수 설정을 이용하여 Biotage Initiator 마이크로파에서 1시간 동안 120℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 DCM(40 mL)과 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 용액(40 mL) 사이에 분배시키고, 층을 분리시켰다. 수성층을 DCM(2x40 mL)으로 추출하고, 조합된 유기층을 건조시키고, 감압하에서 증발시켜, 황색 오일을 생성시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 10 컬럼 부피에 대해 메탄올 중 0-10% 디클로로메탄-2M 암모니아의 구배를 이용한 후, 5 컬럼 부피에 대해 메탄올 중 10% 디클로로메탄-2M 암모니아에서 유지시키는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(50 g 실리카)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 오렌지색 검으로서 표제 화합물(595.5 mg, 1.293 mmol, 91% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.69 min, MH+ = 461.
중간체
150: 5
-(5-(
하이드록시메틸
)-1-((4-
메틸모르폴린
-2-일)
메틸
)-1H-
벤조[d]이미다졸
-2-일)-3-메틸피리딘-2(1H)-온
에탄올(8mL) 및 물(4 mL) 중 (4-(((4-메틸모르폴린-2-일)메틸)아미노)-3-니트로페닐)메탄올(1 g, 3.55 mmol, 제조를 위해 중간체 166 참조), 5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(504 mg, 3.68 mmol, 제조를 위해 중간체 1 참조) 및 소듐 디티오나이트(2 g, 11.5 mmol)의 3개의 동일한 혼합물을 초기 고흡수 설정을 이용하여 Biotage Initiator 마이크로파에서 5시간 동안 100℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 조합하고, 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 용액(100 mL)과 클로로포름 중 25% 프로판-2-올(100 mL) 사이에 분배시켰다. 층을 분리시키고, 수성층을 클로로포름 중 25% 프로판-2-올(4x100 mL)로 추출하였다. 유기층을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켜, 백색 고체를 생성시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 15 컬럼 부피에 대해 메탄올 중 5-15% 디클로로메탄-2M 암모니아의 구배를 이용한 후, 5 컬럼 부피에 대해 메탄올 중 15% 디클로로메탄-2M 암모니아에서 유지시키는 Biotage SP4 SNAP 2x100 g 실리카로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 회백색 고체로서 표제 화합물 5-(5-(하이드록시메틸)-1-((4-메틸모르폴린-2-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-3-메틸피리딘-2(1H)-온(1.745 g, 4.74 mmol, 44.4% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.58 min, MH+ = 369.
중간체
151: 2
-(5-
메틸
-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-((
테트라하이드로
-2
H
-피란-4-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-카르브알데하이드
5-(5-(하이드록시메틸)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-3-메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 152 참조, 1.67 g, 4.73 mmol)을 디메틸 설폭시드(DMSO)(25 mL)에 완전히 용해시킨 후, 2-요오드옥시벤조산(3.23 g, 5.20 mmol)을 첨가하고, 2시간 동안 질소하에서 교반하였다. 반응 혼합물을 물(100 mL)로 희석시키고, 침전된 백색 고체를 여과에 의해 분리시키고, 따로 보관하였다. 여과액을 에틸 아세테이트(3x100 mL)로 추출한 후, DCM 용액 중 25% 메탄올(4x100 mL)로 추출하였다. 이전 여과로 획득된 고체를 DCM 중 25% 메탄올(100 mL)에 현탁시키고, 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 용액(100 mL)을 첨가하였다. 층을 분리시키고, 수성층을 DCM 용액 중 25% 메탄올(4x100 mL)로 추출하였다. 모든 유기층을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켜, 백색 고체를 생성시키고, 이를 이후 메탄올/디클로로메탄 중 현탁액으로서 로딩하고, 10 컬럼 부피에 대해 0-10% 디클로로메탄-메탄올의 구배를 이용한 후, 10 컬럼 부피에 대해 10% 디클로로메탄-메탄올에서 유지시키는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(100 g 실리카)로 정제하였다. 순수한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 회백색 고체로서 표제 화합물(1.1487 g, 3.27 mmol, 69.2% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.68 min, MH+ = 352.
중간체
152: 5
-(5-(
하이드록시메틸
)-1-((
테트라하이드로
-2
H
-피란-4-일)
메틸
)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-2-일)-3-메틸피리딘-2(1
H
)-온
에탄올(8 mL) 및 물(4 mL) 중 (3-니트로-4-(((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)아미노)페닐)메탄올(제조를 위해 중간체 77 참조, 1.15 g, 4.3 mmol), 5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(592 mg, 4.3 mmol, 제조를 위해 중간체 1 참조) 및 소듐 디티오나이트(2.25 g, 13.0 mmol)의 4개의 동일한 혼합물을 초기 고흡수 설정을 이용하여 Biotage Initiator 마이크로파에서 5시간 동안 100℃로 가열하였다. 4개 모두의 반응 혼합물을 조합하고, 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 용액(100 mL)과 DCM 중 25% 프로판-2-올(100 mL) 사이에 분배시켰다. 층을 분리시키고, 수성층을 DCM 중 25% 프로판-2-올(3x100 mL)로 추출하였다. 유기층을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켜, 백색 고체를 생성시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 15 컬럼 부피에 대해 메탄올 중 0-10% 디클로로메탄-2M 암모니아의 구배를 이용한 후, 10 컬럼 부피에 대해 메탄올 중 10% 디클로로메탄-2M 암모니아에서 유지시키는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(2x100 g 실리카)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 회백색 고체로서 표제 화합물(1.8562 g, 5.25 mmol, 30.4% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.46 min, MH+ = 354.
중간체
153: 1
-((1-
메틸
-5-
옥소피롤리딘
-3-일)
메틸
)-2-(5-
메틸
-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-카르브알데하이드
45 중량%의 2-요오드옥시벤조산(695 mg, 1.117 mmol)을 DCM(5 mL) 중 5-(5-(하이드록시메틸)-1-((1-메틸-5-옥소피롤리딘-3-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-3-메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 154 참조, 372 mg, 1.015 mmol)의 현탁액에 나누어 첨가하고, 반응 혼합물을 3일 동안 질소하에서 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM과 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 용액 사이에 분배시켰다. 수성층을 DCM(6x40 mL)으로 추출하였다. 유기층을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켜, 회백색 고체로서 표제 화합물(272 mg, 0.746 mmol, 73.5% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.58 min, MH+ = 365
중간체
154: 5
-(5-(
하이드록시메틸
)-1-((1-
메틸
-5-
옥소피롤리딘
-3-일)
메틸
)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-2-일)-3-메틸피리딘-2(1
H
)-온
4-(((4-(하이드록시메틸)-2-니트로페닐)아미노)메틸)-1-메틸피롤리딘-2-온(제조를 위해 중간체 155 참조, 710 mg, 2.54 mmol), 5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(제조를 위해 중간체 1 참조, 349 mg, 2.54 mmol) 및 소듐 디티오나이트(1328 mg, 7.63 mmol)를 에탄올(8 mL) 및 물(4 mL)에 첨가하고, 반응 혼합물을 초기 고흡수 설정을 이용하여 Biotage Initiator 마이크로파에서 5시간 동안 100℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 용액(30 mL)과 DCM(30 mL) 사이에 분배시켰다. 수성층을 DCM(3x30 mL)으로 추출하였다. 유기층을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 15 컬럼 부피에 대해 메탄올 중 5-20% 디클로로메탄-2M 암모니아의 구배를 이용한 후, 5 컬럼 부피에 대해 메탄올 중 20% 디클로로메탄-2M 암모니아에서 유지시키는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(50 g 실리카)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 무색 검으로서 표제 화합물(378 mg, 1.032 mmol, 40.6% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.51 min, MH+ = 365.
중간체
155: 4
-(((4-(
하이드록시메틸
)-2-
니트로페닐
)아미노)
메틸
)-1-
메틸피롤리딘
-2-온
(4-플루오로-3-니트로페닐)메탄올(500 mg, 2.92 mmol), 4-(아미노메틸)-1-메틸피롤리딘-2-온(562 mg, 4.38 mmol) 및 DIPEA(1.531 mL, 8.77 mmol)를 테트라하이드로푸란(THF)(2 mL)에 첨가하고, 반응 혼합물을 초기 고흡수 설정을 이용하여 Biotage Initiator 마이크로파에서 4시간 동안 120℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 DCM(25 mL)과 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트(25 mL) 사이에 분배시켰다. 층을 분리시키고, 수성층을 DCM(3x25 mL)으로 추출하였다. 유기층을 조합시키고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 10 컬럼 부피에 대해 메탄올 중 0-10% 디클로로메탄-2M 암모니아의 구배를 이용한 후, 5 컬럼 부피에 대해 메탄올 중 10% 디클로로메탄-2M 암모니아에서 유지시키는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(50 g 실리카)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 오렌지색 고체로서 표제 화합물(713.7 mg, 2.56 mmol, 87% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.61 min, MH+ = 262.
중간체
156: 1
-((1-
아세틸피롤리딘
-3-일)
메틸
)-2-(5-
메틸
-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1
H
-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드
5-(1-((1-아세틸피롤리딘-3-일)메틸)-5-(하이드록시메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-3-메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 157 참조, 135 mg, 0.355 mmol)을 DCM(5 mL)에 현탁시키고, 45 중량%의 2-요오드옥시벤조산(243 mg, 0.390 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 40시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM(25 mL)과 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 용액(25 mL) 사이에 분배시키고, 수성층을 DCM(4x25 mL)으로 추출하였다. 조합된 유기층을 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 농축시켰다. 샘플을 다시 DCM(25 mL)과 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 용액(25 mL) 사이에 분배시키고, 수성층을 DCM(8x25 mL)으로 추출하였다. 조합된 유기층을 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 용매를 감압하에서 제거하여, 회백색 고체로서 표제 화합물(132.1 mg, 0.349 mmol, 98% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.59 min, MH+ = 264.
중간체
157: 5
-(1-((1-
아세틸피롤리딘
-3-일)
메틸
)-5-(
하이드록시메틸
)-1
H
-
벤조[
d
]이미다졸
-2-일)-3-메틸피리딘-2(1
H
)-온
DCM(5 mL) 및 피리딘(0.108 mL, 1.330 mmol) 중 5-(5-(하이드록시메틸)-1-(피롤리딘-3-일메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-3-메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 158 참조, 150 mg, 0.443 mmol)의 용액을 -5℃로 냉각시키고, 30분 동안 교반하였다. 아세틸 클로라이드(0.032 mL, 0.443 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 3일 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 물(20 mL)과 DCM(20 mL) 사이에 분배시키고, 수성층을 DCM(3x20 mL)으로 추출하였다. 조합된 유기층을 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켜, 미정제 물질(181.8 mg)을 생성시켰다. 이를 THF(2 mL) 및 메탄올 (2 mL)에 현탁시키고, 1M 리튬 하이드록시드 수용액(1.29 mL, 1.29 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 24시간 동안 62℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 물(30 mL)과 DCM 용액 중 25% 프로판-2-올(30 mL) 사이에 분배시켰다. 수성층을 DCM 용액 중 25% 프로판-2-올(3x30 mL)로 추출하였다. 조합된 유기층을 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켜, 담황색 고체로서 표제 화합물(136.9 mg, 0.360 mmol, 81% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.54 min, MH+ = 381.
중간체
158: 5
-(1-((1-
아세틸피롤리딘
-3-일)
메틸
)-5-(
하이드록시메틸
)-1
H
-
벤조[
d
]이미다졸
-2-일)-3-메틸피리딘-2(1
H
)-온
터트-부틸 3-((5-(하이드록시메틸)-2-(5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트(제조를 위해 중간체 159 참조, 420 mg, 0.958 mmol)를 DCM(7 mL)에 용해시키고, 1,4-디옥산 중 4M 염산(0.958 mL, 3.83 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 5시간 동안 질소하에서 교반하였다. 휘발성 물질을 감압하에서의 증발에 의해 제거하고, 샘플을 디클로로메탄/메탄올 중에서 SCX 10 g 카트리지에 로딩하였다. 메탄올의 용리 후, 메탄올 중 2M 암모니아 용리액을 사용하여 생성물을 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 농축 건조시켰다. 생성물을 먼저 메탄올로 세척된 SCX 10g 카트리지 상에서 다시 정제한 후, 메탄올 용액 중 33%, 50%, 66% 및 100% 2M 암모니아로 용리시켰다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 담황색 고체로서 미정제 생성물(309 mg, 0.913 mmol, 95% 수율)을 생성시켰다. 샘플을 DMSO(3x1 mL)에 용해시키고, MDAP(방법 B)에 의해 정제하였다. 용매를 감압하에서 증발시켜, 백색 고체로서 표제 화합물(163 mg, 0.482 mmol, 50.3% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.48 min, MH+ = 339.
중간체 159:
터트
-부틸 3-((5-(
하이드록시메틸
)-2-(5-
메틸
-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트
터트-부틸 3-(((4-(하이드록시메틸)-2-니트로페닐)아미노)메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트(제조를 위해 중간체 160 참조, 1.0345 g, 2.94 mmol), 5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(제조를 위해 중간체 1 참조, 0.404 g, 2.94 mmol) 및 소듐 디티오나이트(1.538 g, 8.83 mmol)를 에탄올(8 mL) 및 물(4 mL)에 첨가하였다. 반응 혼합물을 초기 고흡수 설정을 이용하여 Biotage Initiator 마이크로파에서 5시간 동안 100℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 DCM 용액 중 25% 프로판-2-올(30 mL)과 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 용액(30 mL) 사이에 분배시키고, 층을 분리시켰다. 수성층을 DCM 용액 중 25% 프로판-2-올(3x30 mL)로 추출하였다. 유기층을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 10 컬럼 부피에 대해 메탄올 중 2-12% 디클로로메탄-2M 암모니아의 구배를 이용한 후, 5 컬럼 부피에 대해 메탄올 중 12% 디클로로메탄-2M 암모니아에서 유지시키는 Biotage SP4 SNAP 50 g 실리카로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 무색 검으로서 표제 화합물(428.9 mg, 0.978 mmol, 33.2% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.78 min, MH+ = 439.
중간체 160:
터트
-부틸 3-(((4-(
하이드록시메틸
)-2-
니트로페닐
)아미노)
메틸
)피롤리딘-1-카르복실레이트
(4-플루오로-3-니트로페닐)메탄올(521 mg, 3.04 mmol), 터트-부틸 3-(아미노메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트(850 mg, 4.24 mmol) 및 DIPEA(1.595 mL, 9.13 mmol)를 테트라하이드로푸란(THF)(3 mL)에 첨가하고, 반응 혼합물을 초기 고흡수 설정을 이용하여 Biotage Initiator 마이크로파에서 3.5시간 동안 120℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 DCM(25 mL)과 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 용액(25 mL) 사이에 분배시키고, 층을 분리시켰다. 수성층을 DCM(4x25 mL)으로 추출하고, 조합된 유기층을 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 10 컬럼 부피에 대해 메탄올 중 0-3% 디클로로메탄-2M 암모니아의 구배를 이용한 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(50 g 실리카)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 오렌지색 오일로서 표제 화합물(1.0781 g, 3.07 mmol, 101% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 1.03 min, MH- = 350.
중간체
161: 2
-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-(
테트라하이드로
-2
H
-피란-4-일)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-카르브알데하이드
둥근 바닥 플라스크에 5-(5-(하이드록시메틸)-1-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 162 참조, 360 mg, 1.019 mmol), DCM(20 mL) 및 데스-마틴 페리오디난(Dess-Martin periodinane)(432 mg, 1.019 mmol)을 충전시켰다. 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 혼합물을 DCM으로 희석시키고, 포화 소듐 바이카르보네이트를 첨가한 후, 층을 혼합하고, 분리시켰다. 유기물을 염수로 세척한 후, 소수성 프릿을 통해 통과시키고, 진공하에서 농축시켜, 회백색 고체를 생성시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 15 CV에 대해 0-100% 에틸 아세테이트-사이클로헥산 및 이후 15 CV에 대해 0-10% 디클로로메탄-메탄올의 구배를 이용한 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(25g 실리카)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 진공하에서 증발시켜, 백색 고체로서 표제 화합물(345 mg, 0.884 mmol, 87% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.65 min, MH+ = 352.
중간체
162: 5
-(5-(
하이드록시메틸
)-1-(
테트라하이드로
-2
H
-피란-4-일)-1
H
-
벤조[
d
]이미다졸
-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1
H
)-온
둥근 바닥 플라스크에 1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(제조를 위해 중간체 2 참조, 574 mg, 3.23 mmol), 소듐 하이드로설파이트(1.8 g, 10.34 mmol), 물(10 mL), 및 에탄올(20 mL) 중 (3-니트로-4-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)페닐)메탄올(제조를 위해 중간체 163 참조, 740 mg, 2.93 mmol)의 용액을 충전시켰다. 용기에 공기 응축기를 설치하고, 슬러리를 밤새 100℃에서 가열하였다. 혼합물을 물 및 EtOAc로 희석시키고, 층을 혼합하고, 분리시킨 후, 유기층을 소수성 프릿을 통해 통과시키고, 진공하에서 농축시켜, 황색 오일을 생성시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 15 CV에 대해 0-100% 에틸 아세테이트-사이클로헥산 및 이후 15 CV에 대해 메탄올-디클로로메탄 중 0-10% 2M 암모니아의 구배를 이용한 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(25g 실리카)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 진공하에서 증발시켜, 무색 오일로서 표제 화합물(360 mg, 1.019 mmol, 34.7% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.47 min, MH+ = 354.
중간체 163: (3-니트로-4-((
테트라하이드로
-2
H
-피란-4-일)아미노)페닐)메탄올
동근 바닥 플라스크에 (4-플루오로-3-니트로페닐)메탄올(1 g, 5.84 mmol), 테트라하이드로-2H-피란-4-아민, 하이드로클로라이드(0.9 g, 6.54 mmol, J&W PharmLab), DMF(10 mL) 및 DIPEA(4.1 mL, 23.48 mmol)를 충전시켰다. 공기 응축기를 설치하고, 슬러리를 밤새 70℃로 가온시켰다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc로 희석시키고, 유기물을 1M HCl로 세척한 후, 염수로 세척한 후, 소수성 프릿을 통해 통과시켰다. 여과액을 진공하에서 농축시켜, 오렌지색 오일을 생성시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 15 CV에 대해 0-100% 에틸 아세테이트-사이클로헥산의 구배를 이용한 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(50g 실리카)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 진공하에서 증발시켜, 오렌지색 오일을 생성시켰다. 샘플을 EtOAc에 용해시킨 후, 10% LiCl 용액으로 세척하였다. 유기물을 소수성 프릿을 통해 통과시킨 후, 진공하에서 농축시켜, 오렌지색 고체로서 표제 화합물(740 mg, 2.93 mmol, 50.2% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.71 min, MH+ = 253.
중간체
164: 2
-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-((4-
메틸모르폴린
-2-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드
5-(5-(하이드록시메틸)-1-((4-메틸모르폴린-2-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 165 참조, 506 mg, 1.323 mmol)을 디클로로메탄(DCM)(5 mL)에 용해시키고, 데스-마틴 페리오디난(561 mg, 1.323 mmol)을 첨가하였다. 이러한 혼합물을 18시간 동안 질소하에서 교반하였다. 이후, 혼합물을 에틸 아세테이트(100mL)와 포화 소듐 바이카르보네이트(100mL) 사이에 분배시키고, 상을 분리시켰다. 이후, 수성상을 에틸 아세테이트(100mL x2)로 2회 추출하고, 유기물을 조합시켰다. 이후, 유기물을 염수(100mL)로 세척하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시켰다. 이후, 용매를 진공하에서 제거하여, 회백색 고체로서 표제 화합물(457 mg, 1.201 mmol, 91% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.68 min, MH+ = 381.
중간체
165: 5
-(5-(
하이드록시메틸
)-1-((4-
메틸모르폴린
-2-일)
메틸
)-1
H
-
벤조[
d
]이미다졸
-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1
H
)-온
(4-(((4-메틸모르폴린-2-일)메틸)아미노)-3-니트로페닐)메탄올(제조를 위해 중간체 166 참조, 1.6 g, 5.69 mmol), 1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(제조를 위해 중간체 2 참조, 0.860 g, 5.69 mmol) 및 소듐 디티오나이트(2.97 g, 17.06 mmol)를 에탄올(8 mL) 및 물(8 mL)과 함께 마이크로파 바이알에 첨가하고, 5시간 동안 100℃로 가열하였다. 이후, 샘플을 에틸 아세테이트(75mL)와 포화 소듐 카르보네이트(75mL) 사이에 분배시키고, 상을 분리시켰다. 유기상을 유지시키고, 수성상을 에틸 아세테이트(75mLx2)로 2회 추출하였다. 이후, 유기물을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시킨 후, 용매를 진공하에서 제거하였다. 이는 담황색 고체를 생성시켰다. 이를 디클로로메탄에 용해시켰다. 샘플을 Biotage SNAP 100g Silica 카트리지 상에 로딩하고, 0%-10% 메탄올성 암모니아/DCM 및 이후 10%-15% 메탄올성 암모니아/DCM의 구배를 이용하여 용리시켰다. 이후, 적절한 분획을 조합하여, 황색 오일로서 표제 화합물(506 mg, 1.323 mmol, 23.26% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.61 min, MH+ = 383.
중간체 166: (4-(((4-
메틸모르폴린
-2-일)
메틸
)아미노)-3-
니트로페닐
)메탄올
(4-플루오로-3-니트로페닐)메탄올(1.041 g, 6.08 mmol) 및 (4-메틸모르폴린-2-일)메탄아민(2.376 g, 18.25 mmol)을 THF(5 mL)에 용해시키고, N,N-디이소프로필에틸아민(3.19 mL, 18.25 mmol)으로 처리하였다. 이러한 혼합물을 1시간 동안 120℃에서 마이크로파 반응기에서 가열하였다. 이후,어두운 오렌지색 혼합물을 에틸 아세테이트(75mL)와 포화 소듐 바이카르보네이트(75mL) 사이에 분배시켰다. 이후, 상을 분리시키고, 수성상을 에틸 아세테이트(75mL x2)로 2회 추출하였다. 이후, 유기물을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시킨 후, 용매를 진공하에서 제거하였다. 이는 오렌지색 고체로서 표제 화합물(1.6 g, 5.69 mmol, 93% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.69 min, MH+ = 282.
중간체
167: 2
-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-((4-
메틸모르폴린
-3-일)메틸)-1H-벤조[
d
]이미다졸-5-카르브알데하이드
5-(5-(하이드록시메틸)-1-((4-메틸모르폴린-3-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 168 참조, 473 mg, 1.237 mmol)을 DCM에 용해시키고, 데스-마틴 페리오디난(525 mg, 1.237 mmol)을 첨가하였다. 이러한 혼합물을 20시간 동안 실온에서 교반하였다. 이후, 포화 소듐 바이카르보네이트(100mL)를 첨가하고, 혼합물을 15분 동안 교반하였다. 혼합물에 에틸 아세테이트(100mL)를 첨가하고, 상을 분리시켰다. 이후, 수성상을 에틸 아세테이트(100mL x2)로 2회 추출하였다. 이후, 유기물을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시킨 후, 진공하에서 용매를 제거하여, 황색 고체로서 미정제 표제 화합물(450 mg, 1.18 mmol, 96% 수율)을 생성시키고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.65 min, MH+ = 381.
중간체
168: 5
-(5-(
하이드록시메틸
)-1-((4-
메틸모르폴린
-3-일)
메틸
)-1
H
-
벤조[
d
]이미다졸
-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1
H
)-온
(4-(((4-메틸모르폴린-3-일)메틸)아미노)-3-니트로페닐)메탄올(제조를 위해 중간체 169 참조, 2.83 g, 10.06 mmol) 및 1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(제조를 위해 중간체 2 참조, 1.977 g, 13.08 mmol)를 소듐 디티오나이트(5.25 g, 30.2 mmol) 및 물(16 mL)과 함께 에탄올(16 mL)에 용해시켰다. 혼합물을 120℃에서 5시간 동안 마이크로파 반응기에서 가열하였다. 이후, 황색 혼합물을 에틸 아세테이트(150mL)와 포화 소듐 바이카르보네이트(150mL) 사이에 분배시키고, 상을 분리시켰다. 수성상을 에틸 아세테이트(150mL x 2)로 2회 추출하고, 유기물을 조합하였다. 이후, 유기물을 소수성 프릿을 이용하여 건조시켰다. 이후, 용매를 진공하에서 제거하여, 황색 오일을 생성시켰다. 황색 오일을 디클로로메탄에 용해시키고, biotage SNAP 100g 실리카 컬럼에 로딩하고, 0%-15% 2M 메탄올성 암모니아/DCM의 구배를 이용하여 용리시켰다. 적절한 분획을 조합하고, 용매를 진공하에서 제거하여, 황색 오일로서 표제 화합물(473 mg, 1.24 mmol, 12.3% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.58 min, MH+ = 383.
중간체 169: (4-(((4-
메틸모르폴린
-3-일)
메틸
)아미노)-3-
니트로페닐
)메탄올
(4-플루오로-3-니트로페닐)메탄올(1.77 g, 10.34 mmol, Aldrich) 및 (4-메틸모르폴린-3-일)메탄아민(4.14 mL, 31.0 mmol, Chess Fine Organics)을 테트라하이드로푸란(THF)(5 mL)에 용해시키고, N,N-디이소프로필에틸아민(5.42 mL, 31.0 mmol)으로 처리하였다. 이러한 혼합물을 1시간 동안 120℃에서 마이크로파 반응기에서 가열하였다. 이후, 어두운 오렌지색 혼합물을 에틸 아세테이트(150mL)와 포화 소듐 바이카르보네이트(150mL) 사이에 분배시켰다. 이후, 상을 분리시키고, 수성상을 에틸 아세테이트(150mL x2)로 2회 추출하였다. 이후, 유기물을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시킨 후, 용매를 진공하에서 제거하였다. 이는 어두운 적색 오일로서 표제 화합물 (4-(((4-메틸모르폴린-3-일)메틸)아미노)-3-니트로페닐)메탄올(2.83 g, 10.06 mmol, 97% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.70 min, MH+ = 282.
중간체 170: (R)-5-(6-(
하이드록시메틸
)-1-(피페리딘-3-
일메틸
)-1H-
벤조[d]이미다졸
-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온
IPA 중 HCl 5M(9 ml, 45.0 mmol)을 (S)-터트-부틸 3-((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-6-(하이드록시메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트(525 mg, 0.979 mmol, 제조를 위해 중간체 100 참조)에 첨가하고, 생성된 용액을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 이 시간 후, 용액을 감압하에서 증발시켜, 옅은 분홍색-백색 고체를 획득하였다. 고체를 MeOH에 용해시키고, SCX-2 카트리지(20 g)에 로딩하였다. 카트리지를 MeOH(3 x CV)로 플러싱시킨 후, MeOH 중 2M 암모니아(3 x CV)로 플러싱시켰다. 염기성 분획을 조합하여, 담황색 오일로서 표제 화합물 N31482-98-1(287 mg, 80% 수율)을 획득하였다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.59 min, MH+ = 367.
중간체 171: (3-((
사이클로프로필메틸
)아미노)-4-
니트로페닐
)메탄올
(3-플루오로-4-니트로페닐)메탄올(1g, 5.84mmol)을 2-메틸 테트라하이드로푸란(10mL)에 용해시키고, DIPEA(3.06mL, 17.52mmol) 및 사이클로프로필메틸아민(0.76mL, 8.76mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 밤새 80℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM과 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 수용액 사이에 분배시켰다. 수성층을 DCM으로 추출하였다. 조합된 유기물을 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 수용액으로 세척하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 진공하에서 증발시켜, 오렌지색 오일을 생성시키고, 이를 방치시켜 고형화시켰다(1.65g). 미정제 생성물을 0-50% 에틸 아세테이트/사이클로헥산 구배를 이용한 실리카(100g) 상에서의 크로마토그래피로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 증발시켜, 밝은 오렌지색 고체로서 표제 화합물(1.28g)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.98 min; MH+ = 223.
중간체
172: 5
-(1-(
사이클로프로필메틸
)-6-(
하이드록시메틸
)-1
H
-
벤조[
d
]이미다졸
-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1
H
)-온
(3-((사이클로프로필메틸)아미노)-4-니트로페닐)메탄올(제조를 위해 중간체 171 참조, 1.28g, 5.76mmol) 및 1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(제조를 위해 중간체 2 참조, N31961-84-1, 1.13g, 7.49mmol)를 에탄올(20mL) 및 물(10mL)에 용해시켰다. 소듐 디티오네이트(3.56g, 17.28mmol)를 첨가하고, 반응물을 2시간 동안 80℃에서 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트와 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액 사이에 분배시켰다. 유기층을 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액으로 세척하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 증발시켜, 베이지색 고체로서 표제 화합물(1.39g)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.49 min; MH+ = 324.
중간체
173: 1
-(
사이클로프로필메틸
)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-6-카르브알데하이드
5-(1-(사이클로프로필메틸)-6-(하이드록시메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 172 참조, 1.38g, 4.27mmol)을 클로로포름(50mL)에 용해시키고, 이산화망간(3.71g, 42.7mmol)을 첨가하였다. 생성된 현탁액을 밤새 질소하에서 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과시키고, 증발시켜, 담황색 오일로서 표제 화합물(1.38g)을 생성시키고, 이를 방치시켜 고형화시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.76min; MH+ = 322.
중간체 174: (4-니트로-3-(((
테트라하이드로
-2
H
-피란-3-일)
메틸
)아미노)페닐)메탄올
(테트라하이드로-2H-피란-3-일)메탄아민 하이드로클로라이드(1.33g, 8.77mmol, Enamine)를 2-메틸 테트라하이드로푸란(10mL) 중 (3-플루오로-4-니트로페닐)메탄올(1g, 5.84mmol, Apollo) 및 DIPEA(4.08mL, 23.36mmol)의 혼합물에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 밤새 80℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM과 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 수용액 사이에 분배시켰다. 수성층을 DCM으로 추출하였다. 조합된 유기물을 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 수용액으로 세척하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 진공하에서 증발시켜, 오렌지색 오일(1.74g)을 생성시켰다. 미정제 생성물을 0-100% 에틸 아세테이트/사이클로헥산 구배를 이용한 실리카(100g) 상에서의 크로마토그래피로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 증발시켜, 오렌지색 오일로서 표제 화합물(1.35g)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.88min; MH+ = 267.
중간체 175 및
176: 5
-(6-(
하이드록시메틸
)-1-((
테트라하이드로
-2
H
-피란-3-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1
H
)-온
(4-니트로-3-(((테트라하이드로-2H-피란-3-일)메틸)아미노)페닐)메탄올(제조를 위해 중간체 174 참조, 134g, 5.03mmol) 및 1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(제조를 위해 중간체 2 참조, 0.99g, 6.54mmol)를 에탄올(20mL) 및 물(10mL)에 용해시켰다. 소듐 디티오네이트(3.11, 15.09mmol)를 첨가하고, 반응물을 2시간 동안 80℃에서 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트와 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액 사이에 분배시켰다. 유기층을 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액으로 세척하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 증발시켜, 베이지색 고체(1.01g)를 생성시켰다. 미정제 생성물을 0-50%(디클로로메탄 중 20% 암모니아 메탄올)/디클로로메탄 구배를 이용한 실리카(100g) 상에서의 크로마토그래피로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 증발시켜, 무색 오일(0.99g)을 생성시키고, 이를 방치하여 고형화시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.47min; MH+ = 328. 이러한 물질을 분취용 키랄 HPLC로 이의 2개 성분의 거울상 이성질체로 분리시켰다. 라세미체를 에탄올에 용해시키고, 키랄 크로마토그래피(정지상: Chiralpak AD-H (250x30mm, 5마이크론), 이동상: 헥산/에탄올 (+ 0.2% v/v 이소프로필아민))로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 증발시켜, 2개의 거울상 이성질체를 생성시켰다: 중간체 175: 426mg, 황색 고체. LCMS (시스템 A): tRET = 0.47mins; MH+ = 368. 중간체 176: 488mg, 황색 고체. LCMS (시스템 A): tRET = 0.47mins; MH+ = 368. 절대 입체화학은 지정하지 않았다.
중간체 177a: 2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-((
테트라하이드로
-2
H
-피란-3-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-6-카르브알데하이드 (이성질체 1)
5-(6-(하이드록시메틸)-1-((테트라하이드로-2H-피란-3-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 175 참조 [이성질체 1], 423 mg, 1.151 mmol)을 클로로포름(10 mL)에 용해시키고, 이산화망간(1 g, 11.50 mmol)을 첨가하였다. 생성된 현탁액을 6시간 동안 질소하에서 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과시키고, 증발시켜, 담황색 고체로서 표제 화합물(400mg)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.73mins; MH+ = 366.
중간체 177b: 2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-((
테트라하이드로
-2
H
-피란-3-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-6-카르브알데하이드 (이성질체 2)
5-(6-(하이드록시메틸)-1-((테트라하이드로-2H-피란-3-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 176 참조, [이성질체 2], 484 mg, 1.317 mmol)을 클로로포름(10 mL)에 용해시키고, 이산화망간(1.14 g, 13.11 mmol)을 첨가하였다. 생성된 현탁액을 밤새 질소하에서 실온에서 교반하였다. LCMS는 약 15%의 시작 물질이 남아 있음을 나타내었다. 이산화망간의 추가 부분(0.6 g, 6.90 mmol)을 첨가하고, 반응물을 5시간 동안 질소하에서 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과시키고, 증발시켜, 황색 고체로서 표제 화합물(422mg)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.73mins; MH+ = 366.
중간체
178: 1
-(
테트라하이드로
-2H-피란-4-일)
에탄아민
,
하이드로클로라이드
에탄올(100 mL) 중 N-(4-메톡시벤질)-1-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)에탄아민(제조를 위해 중간체 179 참조, 4.95 g, 18.86 mmol) 및 10% w/w 탄소 상 팔라듐(0.401 g, 1.886 mmol)의 흑색 현탁액을 2일 동안 수소하에서 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 컬럼을 통해 통과시키고, EtOH로 헹구고, 2M 수성 HCl(10 mL)을 첨가하였다. 생성된 용액을 20분 동안 교반하고, 진공하에서 증발시켜, 백색 고체로서 표제 화합물을 생성시켰다. 반응의 전체 수율은 80%였다. 8.13 (br.s, 8.13, 3H), 3.88 (dd, J = 3.5, 11.0 Hz, 2H), 3.24 (tdd, 2.0, 4.0, 12.0 Hz, 2H), 3.06 - 2.92 (m, 1H), 1.79 - 1.66 (m, 1H), 1.66 - 1.52 (m, 2H), 1.34 - 1.19 (m, 2H), 1.16 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
중간체 179:
N
-(4-메톡시벤질)-1-(
테트라하이드로
-2H-피란-4-일)
에탄아민
DCM(50 mL) 중 1-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)에타논(3.2 g, 24.97 mmol)의 교반된 용액에 (4-메톡시페닐)메탄아민(6.87 g, 50.1 mmol)을 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 4.5시간 동안 교반하고, 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(10 g, 48.6 mmol)를 첨가하였다. 백색 현탁액을 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM과 수성 포화 NaHCO3 사이에 분배시켰다. 유기층을 분리시키고, 수성상을 DCM으로 3회 추출하였다. 조합된 유기상을 소수성 프릿을 통해 통과시키고, 진공하에서 농축시켜, 황색 오일을 생성시켰다. 오일을 DCM에 용해시키고, EtOAc:EtOH(7.5-25%)으로 용리시키는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하고, 진공하에서 증발시켜, 황색 오일로서 표제 화합물을 생성시켰다. 반응의 전체 수율은 80%였다. LCMS (시스템 A): tRET = 1.27 min, MH+ = 366.
중간체
180: 3
-((1,3-
디메톡시프로판
-2-일)아미노)-4-
니트로페닐
)메탄올
(1,4-디옥산-2-일)메탄아민(3.08 g, 26.3 mmol)을 THF(30 mL) 중 (3-플루오로-4-니트로페닐)메탄올(4.1g, 24 mmol), DIPEA(9.18 mL, 52.6 mmol)의 혼합물에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 밤새 80℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM(100mL)과 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 수용액(100mL) 사이에 분배시키고, 층을 분리시켰다. 수성층을 DCM(3x100 mL)으로 추출하고, 조합된 유기층을 상 분리기를 통해 통과시키고, 진공하에서 증발시켜, 약 10g의 표제 화합물의 미정제 혼합물을 생성시켰다. 다음 단계에서 이러한 순도로 사용하였다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.88 min, MH+ = 271.
중간체 181: (
S
)-
사이클로펜틸
4-
메틸
-2-((4-((1-
메틸피페리딘
-4-일)아미노)-3-니트로벤질)아미노)펜타노에이트
THF(9 mL) 중 (S)-사이클로펜틸 2-((4-플루오로-3-니트로벤질)아미노)-4-메틸펜타노에이트(제조를 위해 중간체 144 참조, 500 mg, 1.419 mmol)의 용액에 1-메틸피페리딘-4-아민(486 mg, 4.26 mmol) 및 DIPEA(0.743 mL, 4.26 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 마이크로파에서 전체 90분 동안 120℃로 가열하였다. 추가 1-메틸피페리딘-4-아민(486 mg, 4.26 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 120℃에서 추가 30분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 DCM(2 x 100 mL)과 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액(100 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 10 컬럼 부피에 대해 메탄올 중 0-5% DCM-2M 암모니아의 구배를 이용한 후, 5 컬럼 부피에 대해 메탄올 중 5% DCM-2M 암모니아에서 유지시키는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 오렌지색 검으로서 표제 화합물(456 mg)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.70 min, MH+ = 447.
하기 중간체를 적절한 상업적으로 이용 가능한 아민, 및 하기 표에 제시된 바와 같은 적절한 플루오로페닐 중간체를 이용하여 중간체 181과 유사한 방식으로 제조하였다:
중간체 188: (
S
)-
터트
-부틸 2-((4-
플루오로
-3-
니트로벤질
)아미노)-4-
메틸펜타노에이트
DCM(25 mL) 중 4-플루오로-3-니트로벤즈알데하이드(1 g, 5.91 mmol) 및 (S)-터트-부틸 2-아미노-4-메틸펜타노에이트 하이드로클로라이드(1.46 g, 6.50 mmol)의 용액에 아세트산(1.016 mL, 17.74 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 1시간 동안 질소하에서 교반하였다. 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(2.507 g, 11.83 mmol)를 나누어 첨가하고, 반응 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 포화된 소듐 바이카르보네이트 수용액(50 mL)을 천천히 첨가하고, 발포가 멈출때까지 교반을 계속하였다. 생성된 현탁액을 DCM(3 x 50 mL)으로 추출하였다. 유기층을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켰다. 샘플을 DCM에 로딩하고, 사이클로헥산 중 0-50% EtOAc의 구배를 이용한 SPE(실리카, 100 g)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 황색 검으로서 표제 화합물(1.66 g, 4.88 mmol)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.95 min, MH+ = 341.
중간체 189: (
S
)-
터트
-부틸 4-
메틸
-2-((4-((1-
메틸피페리딘
-4-일)아미노)-3-니트로벤질)아미노)펜타노에이트
THF(3.5 mL) 중 (S)-터트-부틸 2-((4-플루오로-3-니트로벤질)아미노)-4-메틸펜타노에이트(예시적 제조를 위해 중간체 188 참조, 250 mg, 0.734 mmol)의 용액에 1-메틸피페리딘-4-아민(252 mg, 2.203 mmol) 및 DIPEA(0.385 mL, 2.203 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 마이크로파 조건하에서 30분 동안 120℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 DCM(2 x 20 mL)과 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액(20 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 질소 스트림 하에서 취입(blown down)시켰다. 샘플을 DCM에 로딩하고, DCM 중 0-10% (MeOH 중 2M 암모니아)의 구배를 이용한 SPE(실리카, 25 g)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 표제 화합물(127 mg, 0.292 mmol)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 1.09 min, MH+ = 435.
중간체 190: (
S
)-
사이클로펜틸
4-
메틸
-2-((4-니트로-3-(((
테트라하이드로
-2
H
-피란-4-일)메틸)아미노)벤질)아미노)펜타노에이트
DCM(20 mL) 중 3-플루오로-4-니트로벤즈알데하이드(500 mg, 2.96 mmol) 및 (S)-사이클로펜틸 2-아미노-4-메틸펜타노에이트 4-메틸벤젠설포네이트(예시적 제조를 위해 중간체 3 참조, 1208 mg, 3.25 mmol)의 용액을 1.5시간 동안 질소하에서 교반하였다. 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(1253 mg, 5.91 mmol)를 나누어 첨가하고, 반응 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액(50 mL)을 천천히 첨가하고, 발포가 멈출 때까지 반응물 교반을 계속하였다. 생성된 현탁액을 DCM(3 x 50 mL)으로 추출하였다. 유기층을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 사이클로헥산 중 0-50% EtOAc의 구배를 이용한 SPE(실리카, 50 g)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 질소 스트림 하에서 취입시켜, 황색 검을 생성시켰다. THF(4 mL) 중 이러한 물질에 (테트라하이드로-2H-피란-4-일)메탄아민(260 mg, 2.257 mmol) 및 DIPEA(0.395 mL, 2.259 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 마이크로파 조건하에서 30분 동안 120℃에서 가열하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄(3 x 50 mL)과 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액(50 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 질소 스트림 하에서 취입시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, DCM 중 0-5% (MeOH 중 2M 암모니아)의 구배를 이용한 SPE(실리카, 50 g)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 질소 스트림 하에서 취입시켜, 미정제 생성물을 생성시켰다. 미정제 생성물을 다시 디클로로메탄(3 x 50 mL)과 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액(50 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 질소 스트림 하에서 취입시켜, 표제 화합물(522 mg, 1.166 mmol)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 1.49 min, MH+ = 448
중간체 191: (
S
)-네오펜틸 2-(((
벤질옥시
)카르보닐)아미노)-3-
하이드록시프로파노에이트
DMF(20 mL) 중 (S)-2-(((벤질옥시)카르보닐)아미노)-3-하이드록시프로판산(2.27 g, 9.49 mmol), EDC(2.18 g, 11.39 mmol) 및 HOBT(1.74 g, 11.39 mmol)의 용액에 DIPEA(3.31 mL, 18.98 mmol) 및 2,2-디메틸프로판-1-올(8.36 g, 95 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 밤새 실온에서 질소하에서 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(50 mL)와 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액(50 mL) 사이에 분배시켰다. 이후, 유기층을 1M 수성 염산(50 mL), 물(50 mL) 및 염수(50 mL)로 세척하였다. 이후, 유기층을 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 질소 스트림 하에서 취입시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 사이클로헥산 중 0-50% EtOAc의 구배를 이용한 SPE(실리카, 100 g)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 백색 고체로서 표제 화합물(951 mg, 3.07 mmol)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 1.06 min, MH+ = 310.
중간체 192: (
S
)-네오펜틸 2-아미노-3-
메톡시프로파노에이트
건조 아세토니트릴(20 mL) 중 (S)-네오펜틸 2-(((벤질옥시)카르보닐)아미노)-3-하이드록시프로파노에이트(예시적 제조를 위해 중간체 191 참조, 947 mg, 3.06 mmol) 및 은 옥사이드(1064 mg, 4.59 mmol)의 혼합물에 메틸 요오다이드(1.914 mL, 30.6 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 2일 밤 동안 질소하에서 90℃에서 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 고체를 여과에 의해 분리시켰다. 생성된 용액을 감압하에서 증발시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 사이클로헥산 중 0-25% EtOAc의 구배를 이용한 SPE(실리카, 50 g)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켰다. 에탄올(10 mL) 중 이러한 물질(347 mg)의 용액을 H-큐브(H-cube)(설정: 20℃, 1 bar, 1mL/min 유량) 및 촉매로서 10% Pd/C CatCart 30을 이용하여 수소화시켰다. 반응 혼합물을 질소 스트림 하에서 취입시키고, 진공 오븐에서 건조시켜, 표제 화합물(199 mg, 1.052 mmol)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.81 min, MH+ = 190, UV 발색단 없음.
중간체 193: (3-니트로-4-((
옥세탄
-3-
일메틸
)아미노)페닐)메탄올
둥근 바닥 플라스크에 (4-플루오로-3-니트로페닐)메탄올(770 mg, 4.50 mmol), 옥세탄-3-일메탄아민 하이드로클로라이드(753 mg, 6.09 mmol), THF(10 mL) 및 DIPEA(2.3 mL, 13.17 mmol)를 충전시켰다. 공기 응축기를 설치하고, 슬러리를 밤새 62℃로 가온시켰다. 혼합물을 실온으로 냉각시킨 후, DMF(2 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 4일 동안 70℃로 가온시켰다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc로 희석시키고, 유기물을 물로 세척한 후, 염수로 세척한 후, 소수성 프릿을 통해 통과시켰다. 여과액을 진공하에서 농축시켜, 오렌지색 오일을 생성시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 사이클로헥산 중 0-100% EtOAc의 구배를 이용한 SPE(실리카, 25 g)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 진공하에서 증발시켜, 오렌지색 고체로서 표제 화합물(584 mg, 2.451 mmol)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.61 min, MH+ = 239.
중간체
194: 5
-(5-(
하이드록시메틸
)-1-(
옥세탄
-3-
일메틸
)-1
H
-
벤조[
d
]이미다졸
-2-일)-3-메틸피리딘-2(1
H
)-온
마이크로파 바이알에 5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(예시적 제조를 위해 중간체 1 참조, 504 mg, 3.68 mmol), 소듐 하이드로설파이트(1.5 g, 8.62 mmol), 물(5.00 mL), 및 에탄올(10 mL) 중 (3-니트로-4-((옥세탄-3-일메틸)아미노)페닐)메탄올(예시적 제조를 위해 중간체 193 참조, 584 mg, 2.451 mmol)의 용액을 충전시켰다. 바이알의 뚜껑을 덮고, 슬러리를 5시간 동안 100℃에서 조사하였다. 혼합물을 물 및 클로로포름/IPA(3:1)로 희석시키고, 층을 혼합하고, 분리시킨 후, 유기층을 소수성 프릿을 통해 통과시키고, 진공하에서 농축시켜, 황색 오일을 생성시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 사이클로헥산 중 0-100% EtOAc의 구배를 이용한 SPE(실리카, 25 g)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 진공하에서 증발시켜, 무색 오일로서 표제 화합물(178 mg, 0.547 mmol)을 생성시키고, 이를 고형화시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.40 min, MH+ = 326.
중간체
195: 2
-(5-
메틸
-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-(
옥세탄
-3-
일메틸
)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-카르브알데하이드
DCM(15 mL) 중 5-(5-(하이드록시메틸)-1-(옥세탄-3-일메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-3-메틸피리딘-2(1H)-온(예시적 제조를 위해 중간체 194 참조, 180 mg, 0.553 mmol)의 용액에 45% 요오드옥시벤조산(벤조산 및 이소프탈산에 의해 안정화됨)(379 mg, 0.609 mmol)을 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물을 4일 밤 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄 중 10% 이소프로판올(100 mL)과 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액(3 x 100 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 소수성 프릿을 통해 통과시키고, 질소 스트림 하에서 취입시켜, 담황색 검으로서 표제 화합물(152 mg, 0.470 mmol)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.60 min, MH+ = 324.
중간체 196: (
S
)-
사이클로펜틸
2-아미노-3-
메톡시프로파노에이트
(S)-2-아미노-3-메톡시프로판산 하이드로클로라이드(3.3131 g, 21.30 mmol)를 사이클로펜탄올(30 mL)에 첨가하고, 현탁액을 드라이아이스/아세톤 배쓰를 이용하여 -5℃로 만들었다. 10분 동안 상기 온도에서 교반 후, 티오닐 클로라이드(3.57 mL, 49.0 mmol)를 적가하였다. 현탁액을 교반하고, 실온으로 가온시켰다. 반응 혼합물을 60℃로 가온시키고, 24시간 동안 상기 온도에서 교반하였다. 휘발성 물질을 감압하에서 반응 혼합물로부터 제거하였다. 고온의 EtOAc를 재결정화를 수행하려는 의도로 첨가하였다. 물질은 용해되지 않았고, 따라서 현탁액을 여과시키고, 필터 상에서 세척하고, 진공 오븐에서 건조시켜, 백색 고체로서 표제 화합물(4.49 g, 0.24 mmol)을 생성시켰다. 1H NMR (d6-DMSO, 293 K): δ 1.51 - 1.76 (m, 6 H) 1.76 - 1.92 (m, 2 H) 3.29 (s, 3 H) 3.75 (d, J = 3.4 Hz, 2 H) 4.21 (t, J = 3.4 Hz, 1 H) 5.17 - 5.21 (m, 1 H) 8.64 (br.s., 3 H).
중간체
197: 5
-(1-에틸-5-(
하이드록시메틸
)-1
H
-
벤조[
d
]이미다졸
-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1
H
)-온
1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(예시적 제조를 위해 중간체 2 참조, 1 g, 6.62 mmol) 및 소듐 하이드로설파이트(3.46 g, 19.85 mmol)의 혼합물에 에탄올(30 mL) 중 (4-(에틸아미노)-3-니트로페닐)메탄올(예시적 제조를 위해 중간체 70 참조, 1.298 g, 6.62 mmol)의 용액을 첨가한 후, 물(15 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 80℃에서 가열하였다. 반응 혼합물을 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 수용액(150 mL)과 3:1의 클로로포름:이소프로판올(3 x 150 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, DCM 중 0-12%(메탄올 중 2M 암모니아)의 구배를 이용한 SPE(실리카, 100 g) 실리카로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 회백색 포움으로서 표제 화합물(1.05 g, 3.53 mmol)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.64 min, MH+ = 298
중간체
198: 2
-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-에틸-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-카르브알데하이드
DCM(50 mL) 중 5-(1-에틸-5-(하이드록시메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(예시적 제조를 위해 중간체 197 참조, 1.05 g, 3.53 mmol)의 용액에 45% 요오드옥시벤조산(벤조산 및 이소프탈산에 의해 안정화됨)(2.417 g, 3.88 mmol)을 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물을 4일 밤 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄 중 10% 이소프로판올(250 mL)과 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액(3 x 200 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 질소 스트림 하에서 취입시켜, 담황색 고체로서 표제 화합물(856 mg, 2.90 mmol)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.72 min, MH+ = 296.
중간체 199: (4-((2-
메톡시에틸
)아미노)-3-
니트로페닐
)메탄올
둥근 바닥 플라스크에 (4-플루오로-3-니트로페닐)메탄올(3.2 g, 18.70 mmol), 2-메톡시에탄아민(2.107 g, 28.0 mmol), THF(30 mL) 및 DIPEA(9.80 mL, 56.1 mmol)를 충전시켰다. 공기 응축기를 설치하고, 슬러리를 밤새 62℃로 가온시켰다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc로 희석시켰다. 유기물을 물로 세척한 후, 소수성 프릿을 통해 통과시키고, 진공하에서 농축시켜, 오렌지색 오일을 생성시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 사이클로헥산 중 0-80% EtOAc의 구배를 이용한 SPE(실리카, 100 g)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 진공하에서 증발시켜, 오렌지색 오일로서 표제 화합물(3.48 g, 15.38 mmol)을 생성시키고, 이를 고형화시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.70 min, MH+ = 227.
중간체
200: 5
-(5-(
하이드록시메틸
)-1-(2-
메톡시에틸
)-1
H
-
벤조[
d
]이미다졸
-2-일)-3-메틸피리딘-2(1
H
)-온
둥근 바닥 플라스크에 5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(예시적 제조를 위해 중간체 1 참조, 2.53 g, 18.46 mmol), 소듐 하이드로설파이트(9.37 g, 53.8 mmol), 물(25.00 mL), 및 에탄올(50 mL) 중 (4-((2-메톡시에틸)아미노)-3-니트로페닐)메탄올(예시적 제조를 위해 중간체 199 참조, 3.48 g, 15.38 mmol)의 용액을 충전시켰다. 용기에 공기 응축기를 설치하고, 밤새 100℃로 가온시켰다. 혼합물을 물 및 클로로포름/IPA(3:1)로 희석시키고, 층을 혼합하고, 분리시킨 후, 유기층을 소수성 프릿을 통해 통과시키고, 진공하에서 농축시켜, 백색 고체를 생성시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 사이클로헥산 중 0-100% EtOAc의 구배를 이용한 SPE(실리카, 25 g)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 진공하에서 증발시켜, 무색 오일로서 표제 화합물(3.58 g, 11.42 mmol)을 생성시키고, 이를 고형화시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.44 min, MH+ = 314.
중간체
201: 1
-(2-
메톡시에틸
)-2-(5-
메틸
-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-카르브알데하이드
DCM(150 mL) 중 5-(5-(하이드록시메틸)-1-(2-메톡시에틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-3-메틸피리딘-2(1H)-온(예시적 제조를 위해 중간체 200 참조, 3.38 g, 10.79 mmol)의 용액에 45% 요오드옥시벤조산(벤조산 및 이소프탈산에 의해 안정화됨)(7.38 g, 11.87 mmol)을 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물을 4일 밤 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM(200 mL)과 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액(200 mL) 사이에 분배시켰다. 수성층은 많은 양의 고체를 함유하므로, 디클로로메탄 중 10% 이소프로판올(2 x 200 mL)로 추가로 추출하였다. 유기층을 조합하고, 소듐 바이카르보네이트 수용액(2 x 200 mL)으로 세척하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켜, 담갈색 고체로서 표제 화합물(2.7 g, 8.67 mmol)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.66 min, MH+ = 312.
중간체
202: 5
-(5-(
하이드록시메틸
)-1-(2-
메톡시에틸
)-1
H
-
벤조[
d
]이미다졸
-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1
H
)-온
1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(예시적 제조를 위해 중간체 2 참조, 1 g, 6.62 mmol) 및 소듐 하이드로설파이트(3.46 g, 19.85 mmol)의 혼합물에 에탄올(30 mL) 중 (4-((2-메톡시에틸)아미노)-3-니트로페닐)메탄올(예시적 제조를 위해 중간체 199 참조, 1.497 g, 6.62 mmol)의 용액을 첨가한 후, 물(15 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 80℃에서 가열하였다. 반응 혼합물을 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 수용액(150 mL)과 3:1의 클로로포름:이소프로판올(3 x 150 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, DCM 중 0-12%(메탄올 중 2M 암모니아)의 구배를 이용한 SPE(실리카, 100 g)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 회백색 포움으로서 표제 화합물(2.0 g, 6.11 mmol)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.62 min, MH+ = 328.
중간체
203: 2
-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-(2-
메톡시에틸
)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-카르브알데하이드
DCM(50 mL) 중 5-(5-(하이드록시메틸)-1-(2-메톡시에틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(예시적 제조를 위해 중간체 202 참조, 2.0 g, 6.11 mmol)의 용액에 45% 요오드옥시벤조산(벤조산 및 이소프탈산에 의해 안정화됨)(4.18 g, 6.72 mmol)을 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물을 2일 밤 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄 중 10% 이소프로판올(200 mL)과 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액(3 x 200 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켜, 담황색 고체로서 표제 화합물(975 mg, 3.00 mmol)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.71 min, MH+ = 326.
중간체 204: (4-((2-(디메틸아미노)에틸)아미노)-3-
니트로페닐
)메탄올
2개의 동일한 부분의 THF(20 mL) 중 (4-플루오로-3-니트로페닐)메탄올(2.5 g, 14.61 mmol), N1,N1-디메틸에탄-1,2-디아민(3.19 mL, 29.2 mmol) 및 DIPEA(7.65 mL, 43.8 mmol)의 혼합물을 30분 동안 120℃에서 마이크로파 조건(초기 고흡수 설정) 하에 두었다. 반응 혼합물을 디클로로메탄(3 x 150 mL)과 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액(150 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, SPE(실리카, 100 g)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 어두운 오렌지색 검으로서 표제 화합물(3.32 g, 13.88 mmol)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.73 min, MH+ = 240.
중간체
205: 5
-(1-(2-(디메틸아미노)에틸)-5-(
하이드록시메틸
)-1
H
-
벤조[
d
]이미다졸
-2-일)-3-메틸피리딘-2(1
H
)-온
5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(예시적 제조를 위해 중간체 1 참조, 3.3 g, 24.06 mmol) 및 소듐 하이드로설파이트(7.20 g, 41.4 mmol)의 혼합물에 에탄올(26 mL) 중 (4-((2-(디메틸아미노)에틸)아미노)-3-니트로페닐)메탄올(예시적 제조를 위해 중간체 204 참조, 3.3 g, 13.79 mmol)의 용액을 첨가한 후, 물(13 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 5시간 동안 100℃에서 마이크로파 조건(초기 고흡수 설정) 하에서 2개의 동일한 부분으로 가열하였다. 반응 혼합물을 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 수용액(100 mL)과 디클로로메탄(2 x 100 mL) 사이에 분배시킨 후, 3:1의 클로로포름:이소프로판올(3 x 100 mL)로 수성층을 추가 추출하였다. 유기층을 조합하고, 감압하에서 증발시켰다. 샘플을 메탄올/디클로로메탄(및 진공 오븐에서 건조된 컬럼)에 로딩하고, DCM 중 0-50%(메탄올 중 2M 암모니아)의 구배를 이용한 SPE(실리카, 100 g)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켰다. 샘플을 진공 오븐에서 건조시켜, 표제 화합물(1.75 g, 5.36 mmol)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.58 min, MH+ = 327.
중간체
206: 1
-(2-(디메틸아미노)에틸)-2-(5-
메틸
-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-카르브알데하이드
DCM(50 mL) 중 5-(1-(2-(디메틸아미노)에틸)-5-(하이드록시메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-3-메틸피리딘-2(1H)-온(예시적 제조를 위해 중간체 205 참조, 1.31 g, 4.01 mmol)의 용액에 45% 요오드옥시벤조산(벤조산 및 이소프탈산에 의해 안정화됨)(2.75 g, 4.41 mmol)을 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물을 5일 밤 동안 실온에서 교반하였다. 추가 45% 요오드옥시벤조산(벤조산 및 이소프탈산에 의해 안정화됨)(1.38 g, 2.21 mmol)을 첨가한 후, DMSO(10 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 추가 7일 밤 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄 중 10% 이소프로판올(150 mL)과 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액(3 x 150 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 질소 스트림 하에서 취입시켜, 회백색 고체로서 표제 화합물(758 mg, 2.337 mmol)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.66 min, MH+ = 325.
중간체
207: 5
-(5-(
하이드록시메틸
)-1-
메틸
-1
H
-
벤조[
d
]이미다졸
-2-일)-3-
메틸피리딘
-2(1
H
)-온
(4-(메틸아미노)-3-니트로페닐)메탄올(예시적 제조를 위해 중간체 1 참조, 5.32 g, 29.2 mmol), 5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(예시적 제조를 위해 중간체 71 참조, 4.00 g, 29.2 mmol) 및 소듐 디티오나이트(15.25 g, 88 mmol)를 에탄올(75 mL), 물(37.5 mL)에 용해시키고, 14시간에 걸쳐 환류시켰다. 이에 의해, 혼합물을 200 mL의 포화 소듐 바이카르보네이트 및 200 mL의 에틸 아세테이트의 첨가를 통해 분배시켰다. 유기상을 분리시키고, 수성상을 200 mL의 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 유기물을 조합하고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 용매를 제거하였다. 잔여물을 디에틸 에테르로 분쇄시키고, 여과시켜, 담황색 고체로서 표제 화합물(1.519 g, 5.64 mmol)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.39 min, MH+ = 270.
중간체
208: 1
-
메틸
-2-(5-
메틸
-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1
H
-
벤조[
d
]이미다졸
-5-카르브알데하이드
DCM(50 mL) 중 5-(5-(하이드록시메틸)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-3-메틸피리딘-2(1H)-온(예시적 제조를 위해 중간체 207 참조, 1.88 g, 6.98 mmol)의 용액에 45% 요오드옥시벤조산(벤조산 및 이소프탈산에 의해 안정화됨)(4.78 g, 7.68 mmol)을 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물을 4일 밤 동안 실온에서 교반하였다. DMSO(10 mL)를 첨가하고, 반응 혼합물을 추가 1일 밤 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄(100 mL)과 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액(3 x 100 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켜, 어두운 갈색 고체로서 표제 화합물(655 mg, 2.451 mmol)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.61 min, MH+ = 268.
중간체 209: (3-니트로-4-(((
테트라하이드로
-2
H
-피란-3-일)
메틸
)아미노)페닐)메탄올
THF(30 mL) 중 (테트라하이드로-2H-피란-3-일)메탄아민(4.11 mL, 32.1 mmol), (4-플루오로-3-니트로페닐)메탄올(2200 mg, 12.86 mmol) 및 N-에틸-N-이소프로필프로판-2-아민(11.23 mL, 64.3 mmol)의 용액을 탈기시키고, 밤새 60℃에서 질소하에서 가열하였다. 용매를 감압하에서 제거하고, 잔여물을 에틸 아세테이트(150 mL)와 소듐 바이카르보네이트의 포화 용액(150 mL) 사이에 분배시켰다. 유기 분획을 분리시키고, 수성층을 에틸 아세테이트(2 x 150 mL)로 2회 재추출하였다. 유기 분획을 조합하고, 소수성 프릿을 통해 통과시키고, 감압하에서 농축시켰다. 잔여물을 최소량의 디클로로메탄에 용해시키고, 사이클로헥산 중 0-70% EtOAc의 구배로 용리되는 SPE(실리카, 2 x 100 g)로 정제하였다. 생성물 함유 분획을 조합하고, 감압하에서 농축시켜, 오렌지색 고체로서 표제 화합물(2731 mg)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.82 min, MH+ = 267.
중간체
210: 5
-(5-(
하이드록시메틸
)-1-((
테트라하이드로
-2
H
-피란-3-일)
메틸
)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-2-일)-3-메틸피리딘-2(1H)-온
에탄올(30 mL) 및 물(15 mL) 중 (3-니트로-4-(((테트라하이드로-2H-피란-3-일)메틸)아미노)페닐)메탄올(예시적 제조를 위해 중간체 1 참조, 2600 mg, 9.76 mmol), 5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(예시적 제조를 위해 중간체 209 참조, 1339 mg, 9.76 mmol) 및 소듐 디티오나이트(5100 mg, 29.3 mmol)의 용액을 탈기시켰다. 반응 혼합물을 밤새 80℃에서 질소하에서 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 후, 3:1의 클로로포름:이소프로판올(150 mL)과 소듐 바이카르보네이트의 포화 용액(150 mL) 사이에 분배시켰다. 유기 분획을 분리시키고, 수성층을 3:1의 클로로포름:이소프로판올(2 x 150 mL)로 2회 재추출하였다. 유기 분획을 조합하고, 소수성 프릿을 통해 통과시키고, 감압하에서 농축시켰다. 잔여물을 최소량의 에틸 아세테이트 중 10% 메탄올에 용해시켰다. 용액을 2개의 SPE 컬럼(100 g, 실리카)에 로딩하고, 생성물이 로딩된 컬럼 상의 용매를 증발시켰다. 이후, 생성물을 EtOAc 중 0-30% EtOH의 구배로 용리시켰다. 생성물 함유 분획을 조합하고, 감압하에서 농축시켜, 백색 고체로서 표제 화합물(1500 mg)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.63 min, MH+ = 354.
중간체
211: 2
-(5-
메틸
-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-((
테트라하이드로
-2
H
-피란-3-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-카르브알데하이드
45% 2-요오드옥시벤조산(벤조산 및 이소나프탈산에 의해 안정화됨)(6603 mg, 10.61 mmol) 및 5-(5-(하이드록시메틸)-1-((테트라하이드로-2H-피란-3-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-3-메틸피리딘-2(1H)-온(예시적 제조를 위해 중간체 210 참조, 1500 mg, 4.24 mmol)의 현탁액을 질소하에서 3일 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 3:1의 클로로포름:이소프로판올(75 mL)과 소듐 바이카르보네이트의 포화 용액(75 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 분리시키고, 수성 분획을 3:1의 클로로포름:이소프로판올(2 x 75 mL)로 2회 재추출하였다. 유기 분획을 조합하고, 소수성 프릿을 통해 통과시키고, 감압하에서 농축시켰다. 물질을 3:1의 클로로포름:이소프로판올(75 mL)과 소듐 바이카르보네이트의 포화 용액(75 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 분리시키고, 수성 분획을 3:1의 클로로포름:이소프로판올(2 x 75 mL)로 2회 재추출하였다. 유기 분획을 조합하고, 소수성 프릿을 통해 통과시키고, 감압하에서 농축시키고, 7일 동안 진공하에서 건조시켜, 밝은 분홍색 고체로서 표제 화합물(1487 mg)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.70 min, MH+ = 352.
중간체
212: 2
-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-((
테트라하이드로
-2
H
-피란-3-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-카르브알데하이드
DMF(10 mL) 중 2-(5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-3-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드(예시적 제조를 위해 중간체 211 참조, 700 mg, 1.992 mmol)의 용액을 포타슘 카르보네이트(551 mg, 3.98 mmol)로 처리하고, 반응 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 요오드메탄(0.149 mL, 2.390 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 밤새 교반하였다. 용매를 감압하에서 제거하고, 잔여물을 3:1의 클로로포름:이소프로판올(75 mL)과 소듐 바이카르보네이트의 포화 용액(75 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 분리시키고, 수성 분획을 3:1의 클로로포름:이소프로판올(2 x 75 mL)로 2회 재추출하였다. 유기 분획을 조합하고, 소수성 프릿을 통해 통과시키고, 감압하에서 농축시켰다. 생성된 검을 최소량의 EtOAc 중 10% 메탄올에 용해시키고, SPE 컬럼(50 g, 실리카)에 로딩하였다. 생성물을 EtOAc 중 0-30% EtOH의 구배로 용리시켰다. 생성물 함유 분획을 조합하고, 감압하에서 농축시켜, 갈색 고체로서 표제 화합물(451 mg)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.73 min, MH+ = 366.
중간체 213: (
S
)-(4-((1-
메톡시프로판
-2-일)아미노)-3-
니트로페닐
)메탄올
THF(10 mL) 중 (4-플루오로-3-니트로페닐)메탄올(2 g, 11.69 mmol)의 용액에 (S)-1-메톡시프로판-2-아민(1.851 mL, 17.53 mmol) 및 DIPEA(6.12 mL, 35.1 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 30분 동안 120℃에서 마이크로파 조건(초기 고흡수 설정)하에서 가열하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄(3 x 150 mL)과 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액(150 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 사이클로헥산 중 0-25% EtOAc의 구배를 이용한 SPE(실리카, 100 g)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 오렌지색 검으로서 표제 화합물(1.4 g, 5.83 mmol)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.82 min, MH+ = 241.
중간체 214: (
S
)-5-(5-(
하이드록시메틸
)-1-(1-
메톡시프로판
-2-일)-1
H
-
벤조[
d
]이미다졸
-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1
H
)-온
1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(예시적 제조를 위해 중간체 2 참조, 0.881 g, 5.83 mmol) 및 소듐 하이드로설파이트(3.04 g, 17.48 mmol)의 혼합물에 에탄올(30 mL) 중 (S)-(4-((1-메톡시프로판-2-일)아미노)-3-니트로페닐)메탄올(예시적 제조를 위해 중간체 213 참조, 1.4 g, 5.83 mmol)의 용액을 첨가한 후, 물(15 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 80℃에서 가열하였다. 반응 혼합물을 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 수용액(150 mL)과 에틸 아세테이트(3 x 150 mL), 및 이후 3:1의 클로로포름:이소프로판올(3 x 150 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 사이클로헥산 중 0-25% EtOAc의 구배를 이용한 SPE(실리카, 100 g)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 회백색 포움으로서 표제 화합물(580 mg, 1.699 mmol)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.67 min, MH+ = 342
중간체 215: (
S
)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-(1-
메톡시프로판
-2-일)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-카르브알데하이드
DCM(25 mL) 중 (S)-5-(5-(하이드록시메틸)-1-(1-메톡시프로판-2-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(예시적 제조를 위해 중간체 214 참조, 577 mg, 1.690 mmol)의 용액에 45% 요오드옥시벤조산(벤조산 및 이소프탈산에 의해 안정화됨)(1157 mg, 1.859 mmol)을 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물을 3일 밤 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄 중 10% 이소프로판올(200 mL)과 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액(3 x 200 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켜, 회백색 포움으로서 표제 화합물(630 mg, 1.856 mmol)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.76 min, MH+ = 340.
중간체 216: (
R
)-(4-((1-
메톡시프로판
-2-일)아미노)-3-
니트로페닐
)메탄올
THF(40 mL) 중 (4-플루오로-3-니트로페닐)메탄올(5 g, 29.2 mmol)의 용액에 (R)-1-메톡시프로판-2-아민 하이드로클로라이드(5.50 g, 43.8 mmol) 및 DIPEA(22.96 mL, 131 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 밤새 60℃에서 가열하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄(3 x 250 mL)과 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액(150 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 사이클로헥산 중 0-25% EtOAc의 구배를 이용한 SPE(실리카, 2 x 100 g)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 오렌지색 검으로서 표제 화합물(1.7 g, 7.08 mmol)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.81 min, MH+ = 241.
중간체 217: (
R
)-5-(5-(
하이드록시메틸
)-1-(1-
메톡시프로판
-2-일)-1
H
-
벤조[
d
]이미다졸
-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1
H
)-온
1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(예시적 제조를 위해 중간체 2 참조, 0.629 g, 4.16 mmol) 및 소듐 하이드로설파이트(2.174 g, 12.49 mmol)의 혼합물에 에탄올(30 mL) 중 (R)-(4-((1-메톡시프로판-2-일)아미노)-3-니트로페닐)메탄올(예시적 제조를 위해 중간체 216 참조, 1 g, 4.16 mmol)의 용액을 첨가한 후, 물(15 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 6시간 동안 90℃에서 가열하였다. 반응 혼합물을 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 수용액(150 mL)과 에틸 아세테이트(3 x 150 mL), 및 이후 3:1의 클로로포름:이소프로판올(3 x 150 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 사이클로헥산 중 0-100% EtOAc의 구배 후, 사이클로헥산 중 0-100%(EtOAc 중 25% EtOH)의 구배를 이용한 SPE(실리카, 100 g)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 회백색 포움으로서 표제 화합물(393 mg, 1.151 mmol)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.67 min, MH+ = 342.
중간체 218: (
R
)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-(1-
메톡시프로판
-2-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드
DCM(25 mL) 중 (R)-5-(5-(하이드록시메틸)-1-(1-메톡시프로판-2-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(예시적 제조를 위해 중간체 217 참조, 390 mg, 1.142 mmol)의 용액에 45% 요오드옥시벤조산(벤조산 및 이소프탈산에 의해 안정화됨)(782 mg, 1.257 mmol)을 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물을 3일 밤 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 3:1의 클로로포름:IPA(200 mL)와 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액(3 x 200 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켰다. 샘플을 3:1의 클로로포름:IPA(200 mL)에 용해시키고, 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액(3 x 200 mL)으로 세척하였다. 유기층을 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켜, 약 70% 순도로 표제 화합물(554 mg, 1.632 mmol, 143% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.76 min, MH+ = 340.
중간체 219: (3-니트로-4-(((
테트라하이드로푸란
-3-일)
메틸
)아미노)페닐)메탄올
(테트라하이드로푸란-3-일)메탄아민(1.711 mL, 16.36 mmol)을 THF(5 mL)에 용해시키고, DIPEA(5.00 mL, 28.6 mmol) 및 (4-플루오로-3-니트로페닐)메탄올(1400 mg, 8.18 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 125℃에서 마이크로파 조건하에서 2.5시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 소듐 바이카르보네이트의 포화 용액(100 mL)과 에틸 아세테이트(100 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 분리시키고, 수성 분획을 에틸 아세테이트(2 x 100 mL)로 2회 추출하였다. 유기 분획을 조합하고, 소수성 프릿을 통해 통과시키고, 감압하에서 농축시켰다. 잔여물을 최소량의 DCM에 용해시키고, 사이클로헥산 중 0-65% EtOAc의 구배로 용리되는 SPE(실리카, 100 g)로 정제하였다. 가장 순수한 분획을 조합하고, 감압하에서 농축시켜, 오렌지색 검으로서 표제 화합물(1719 mg)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.78 min, MH+ = 253.
중간체
220: 5
-(5-(
하이드록시메틸
)-1-((
테트라하이드로푸란
-3-일)
메틸
)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1
H
)-온
(3-니트로-4-(((테트라하이드로푸란-3-일)메틸)아미노)페닐)메탄올(예시적 제조를 위해 중간체 219 참조, 1719 mg, 6.81 mmol)을 에탄올(16.00 mL) 및 물(8 mL)에 용해시키고, 1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(예시적 제조를 위해 중간체 2 참조, 1145 mg, 6.81 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 반응 온도(80℃)에 도달할 때까지 질소하에서 가열하고, 소듐 디티오나이트(3559 mg, 20.44 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 4시간 동안 질소하에서 교반하였다. 반응 혼합물을 감압하에서 농축시키고, 잔여물을 10% IPA/DCM(100 mL)과 소듐 바이카르보네이트의 포화 용액(100 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 분리시키고, 수성 분획을 10% IPA/DCM(2 x 100 mL)로 추출하였다. 유기 분획을 조합하고, 소수성 프릿을 통해 통과시키고, 감압하에서 농축시켰다. 잔여물을 최소량의 DCM에 용해시키고, EtOAc 중 0-25% EtOH의 구배로 용리되는 SPE(100 g, 실리카)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 농축시켜, 백색 고체로서 표제 화합물(1189 mg)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.65 min, MH+ = 354.
중간체
221: 2
-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-((
테트라하이드로푸란
-3-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-카르브알데하이드
5-(5-(하이드록시메틸)-1-((테트라하이드로푸란-3-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(예시적 제조를 위해 중간체 220 참조, 1189 mg, 3.36 mmol)을 DCM(20 mL)에 용해시켰다. IBX(45 wt%, 벤조산 및 나프탈산에 의해 안정화됨)(5234 mg, 8.41 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 3일 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 10% IPA/DCM(50 mL)과 소듐 바이카르보네이트의 포화 용액(50 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 분리시키고, 수성 분획을 10% IPA/DCM(2 x 50 mL)으로 2회 추출하였다. 유기 분획을 조합하고, 소듐 바이카르보네이트의 포화 용액(75 mL)으로 세척하였다. 유기층을 분리시키고, 소수성 프릿을 통해 통과시키고, 감압하에서 농축시켰다. 잔여물을 30분 동안 진공 오븐에 두어, 백색 고체로서 표제 화합물(1271 mg)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.73 min, MH+ = 352.
중간체 222: (4-((1,3-
디메톡시프로판
-2-일)아미노)-3-
니트로페닐
)메탄올
THF(80 mL) 중 (4-플루오로-3-니트로페닐)메탄올(16 g, 93 mmol)의 용액에 1,3-디메톡시프로판-2-아민(10 g, 84 mmol) 및 DIPEA(15 mL, 86 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 7개 부분으로 나누고, 7시간 동안 100℃에서 마이크로파 조건하에서 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 500 mL)와 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액(750 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 조합하고, 포화 염수(500 mL)로 세척하고, 감압하에서 증발시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 사이클로헥산 중 0-80% EtOAc의 구배를 이용한 SPE(실리카, 100 g)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 표제 화합물(12.0 g, 44.4 mmol)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.85 min, MH+ = 271. 덜 순수한 분획을 조합하고, 증발시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 사이클로헥산 중 0-50% EtOAc의 구배를 이용한 SPE(실리카, 100 g)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 표제 화합물(3.7 g, 13.69 mmol)을 생성시켰다. LCMS (시스템 J): tRET = 0.85 min, MH+ = 271.
중간체
223: 5
-(1-(1,3-
디메톡시프로판
-2-일)-5-(
하이드록시메틸
)-1
H
-
벤조[
d
]이미다졸
-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1
H
)-온
에탄올(160 mL) 중 (4-((1,3-디메톡시프로판-2-일)아미노)-3-니트로페닐)메탄올(예시적 제조를 위해 중간체 222 참조, 12 g, 44.4 mmol)의 용액에 소듐 하이드로설파이트(27.5 g, 133 mmol) 및 1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(예시적 제조를 위해 중간체 2 참조, 8.39 g, 55.5 mmol), 및 이후 물을 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 70℃에서 가열하였다. 반응 혼합물을 감압하에서 대략 절반의 부피로 농축시키고, 생성된 액체를 3:1의 클로로포름:이소프로판올(3 x 300 mL)과 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액(300 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켰다. 유사한 반응으로부터의 미정제 물질(추가 40% 규모)을 이 단계에서 첨가하였다. 샘플을 DCM에 로딩하고, 사이클로헥산 중 0-100%(EtOAc 중 25% EtOH)의 구배를 이용한 SPE(실리카, 3 x 340 g)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 회백색 포움으로서 표제 화합물(7.5 g, 20.19 mmol)을 생성시켰다. LCMS (시스템 J): tRET = 0.70 min, MH+ = 372.
중간체
224: 1
-(1,3-
디메톡시프로판
-2-일)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-카르브알데하이드
DCM(400 mL) 중 5-(1-(1,3-디메톡시프로판-2-일)-5-(하이드록시메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(예시적 제조를 위해 중간체 223 참조, 7.5 g, 20.19 mmol)의 용액에 45% 요오드옥시벤조산(벤조산 및 이소프탈산에 의해 안정화됨)(13.82 g, 22.21 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 3일 밤 동안 실온에서 교반하였다. 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액(400 mL)을 천천히 첨가하고, 혼합물을 버블링이 멈출때까지 교반하였다. 유기층을 분리시키고, 수성층을 3:1의 클로로포름:이소프로판올(2 x 400 mL)로 재추출하였다. 유기층을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켜, 표제 화합물(7.3 g, 19.76 mmol)을 생성시켰다. LCMS (시스템 J): tRET = 0.81 min, MH+ = 370.
중간체
225: 2
-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-((
테트라하이드로
-2
H
-피란-2-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-카르브알데하이드
5-(5-(하이드록시메틸)-1-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 226 참조)(600 mg, 1.633 mmol) 및 데스-마틴 페리오디난(693 mg, 1.633 mmol)을 DCM(5 mL)에 용해시키고, 2시간 동안 질소하에서 교반하였다. 이후, 데스-마틴 페리오디난(291mg, 0.544mmol)을 첨가하고, 혼합물을 추가 30분 동안 교반하였다. 이후, 포화 소듐 바이카르보네이트 용액(25mL)을 첨가하고, 혼합물을 25분 동안 교반한 후, 밤새 방치시켰다. 혼합물에 디클로로메탄(25mL)을 첨가하고, 상을 분리시켰다. 이후, 수성상을 디클로로메탄(25mLx2)으로 추출하고, 유기물을 조합하였다. 이후, 유기상을 염수(30mL x2)로 세척하고, 유기물을 조합하고, 소수성 프릿 상에서 건조시켰다. 이후, 용매를 진공하에서 제거하여, 회백색 고체로서 표제 화합물(550 mg, 1.505 mmol, 92% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.87 min; MH+ 366.
중간체
226: 5
-(5-(
하이드록시메틸
)-1-((
테트라하이드로
-2
H
-피란-2-일)
메틸
)-1
H
-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온
(3-니트로-4-(((테트라하이드로-2H-피란-2-일)메틸)아미노)페닐)메탄올(제조를 위해 중간체 227 참조, 2.9 g, 10.89 mmol), 1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(제조를 위해 중간체 2 참조, 2.469 g, 16.34 mmol) 및 소듐 디티오나이트(5.69 g, 32.7 mmol)를 에탄올(35 mL)과 함께 플라스크에 첨가하였다. 이러한 혼합물을 90℃로 가열하고, 15분 동안 교반하였다. 이후, 물(35 mL)을 첨가하고, 혼합물을 20시간 동안 질소하에서 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 이후, 혼합물을 3:1의 디클로로메탄:이소프로필 알콜(100mL)과 물(100mL) 사이에 분배시키고, 상을 분리시켰다. 수성상을 3:1의 디클로로메탄:이소프로필 알콜(100mL x2)로 추출하고, 유기물을 조합하였다. 이후, 유기상을 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 용매를 진공하에서 제거하여, 회백색 고체로서 표제 화합물(1.99 g, 5.42 mmol, 49.7% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.77 min; MH+ 368.
중간체 227: (3-니트로-4-(((
테트라하이드로
-2
H
-피란-2-일)
메틸
)아미노)페닐)메탄올
(4-플루오로-3-니트로페닐)메탄올(1.985 g, 11.60 mmol) 및 (테트라하이드로-2H-피란-2-일)메탄아민(4.44 mL, 34.7 mmol)을 THF(10 mL)에 용해시키고, N,N-디이소프로필에틸아민(6.08 mL, 34.8 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 120℃에서 마이크로파 반응기에서 가열하였다. 이후, 유기 혼합물을 에틸 아세테이트(100mL)와 포화 소듐 바이카르보네이트(100mL) 사이에 분배시켰다. 상을 분리시키고, 수성상을 에틸 아세테이트(100mL)로 2회 추출하였다. 이후, 유기물을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 용매를 진공하에서 제거하였다. 이는 밝은 오렌지색 고체로서 표제 화합물을 생성시켰다. 과도하게 높은 수율은 시작 물질의 잘못된 측정으로 인한 것이다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.92 min; MH+ 267.
중간체
228: 2
-((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-에틸-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)옥시)아세트알데하이드
데스-마틴 페리오디난(143 mg, 0.34 mmol)을 디클로로메탄(10 mL) 중 5-(1-에틸-5-(2-하이드록시에톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 229 참조, 100 mg, 0.31 mmol)의 교반된 용액에 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물을 4시간 동안 질소하에서 실온에서 교반하였다. 데스-마틴 페리오디난의 추가 부분(143 mg, 0.34 mmol)을 나누어 첨가하고, 반응 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 10% 소듐 티오설페이트 용액(20 mL)을 첨가하였다. 유기상을 분리시키고, 수성상을 디클로로메탄(2x10 mL)으로 추출하였다. 조합된 추출물을 포화 NaHCO3 용액으로 세척하고, 건조시키고, 증발시켰다. 잔여 표제 화합물(99 mg, 0.305 mmol, 100% 수율)을 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. 100% 수율을 나타냈다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.67 min; M+18+ 344.
중간체
229: 5
-(1-에틸-5-(2-
하이드록시에톡시
)-1
H
-
벤조[
d
]이미다졸
-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1
H
)-온
DMF(3 mL) 중 5-(1-에틸-5-하이드록시-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 230 참조, 600 mg, 2.12 mmol), 2-브로모에탄올(291 mg, 165 μL, 2.33 mmol) 및 포타슘 카르보네이트(878 mg, 6.35 mmol)의 혼합물을 3일 동안 80℃에서 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 에틸 아세테이트(25 mL)와 물(15 mL) 사이에 분배시켰다. 유기상을 분리시키고, 건조시키고, 증발시켰다. 잔여물을 크로마토그래피[0-10% 에탄올/에틸 아세테이트]하여, 회백색 고체로서 표제 화합물(105 mg, 0.321 mmol, 15.15% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.66 min; MH+ 328.
중간체
230: 5
-(1-에틸-5-
하이드록시
-1
H
-
벤조[
d
]이미다졸
-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1
H
)-온
소듐 디티오나이트(2.72 g, 15.64 mmol)를 에탄올(20 mL) 및 물(10 mL) 중 4-(에틸아미노)-3-니트로페놀(제조를 위해 중간체 231 참조, 950 mg, 5.21 mmol) 및 1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(제조를 위해 중간체 2 참조, 985 mg, 6.52 mmol)의 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 80℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 에탄올을 증발시켰다. 에틸 아세테이트(100 mL) 및 포화 NaHCO3 용액(50 mL)을 잔여물에 첨가하였다. 고체가 형성되었다. 고체를 여과시키고, 건조시켜, 무색 고체로서 표제 화합물(1.2 g, 4.24 mmol, 81% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.46 min; MH+ 284.
중간체
231: 4
-(
에틸아미노
)-3-니트로페놀 및 중간체
232: 3
-니트로-4-(((
테트라하이드로
-2
H
-피란-4-일)메틸)아미노)페놀
디클로로메탄(100 mL) 중 4-아미노-3-니트로페놀(5.06 g, 32.9 mmol), 테트라하이드로-2H-피란-4-카르브알데하이드(3.0 g, 26.3 mmol), 및 아세트산(1.97 g, 1.88 mL, 32.9 mmol)의 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(16.71 g, 79 mmol)를 5분에 걸쳐 첨가하였다. 첨가 완료 후, 반응 혼합물을 24시간 동안 실온에서 교반하였다. 포화 NaHCO3 용액(100 mL)을 조심스럽게 첨가하고(가스가 발생됨), 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반하였다. 유기상을 분리시켰다. 수성상을 디클로로메탄(3x50 mL)으로 추출하였다. 조합된 유기물을 건조시키고, 증발시켰다. 잔여물을 크로마토그래피[0-15% 에탄올/에틸 아세테이트]하여 오렌지색 고체로서 4-(에틸아미노)-3-니트로페놀(950 mg, 5.21 mmol, 19.84% 수율)(트리아세톡시보로하이드라이드와 시작 물질의 반응에 의해 형성된 아세트아닐리드의 환원으로부터의 예기치 않은 생성물)(LCMS (시스템 A): tRET = 0.87 min; MH+ 183) 및 오렌지색 고체로서 N31507-32-A3, 3-니트로-4-(((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)아미노)페놀(450 mg, 1.784 mmol, 6.79% 수율)(LCMS (시스템 A): tRET = 0.85 min; MH+ 253)을 생성시켰다.
중간체 233: (
R
)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-(1-
하이드록시프로판
-2-일)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-카르브알데하이드
(R)-5-(5-(하이드록시메틸)-1-(1-하이드록시프로판-2-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 234 참조, 500 mg, 1.527 mmol) 및 데스-마틴 페리오디난(648 mg, 1.527 mmol)에 디클로로메탄(DCM)(20 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 20시간 동안 질소하에서 교반하였고; LCMS는 시작 물질이 남아 있음을 나타내었고, 따라서 데스-마틴 페리오디난(65mg, 0.157mmol)을 첨가하고, 혼합물을 3시간 동안 교반하였다. 혼합물에 포화 소듐 바이카르보네이트(100mL)를 첨가하고, 이를 30분 동안 교반하였다. 이후, 디클로로메탄(80mL)을 첨가하고, 상을 분리시켰다. 이후, 수성상을 디클로로메탄(100mLx2)으로 추출하였다. 이후, 조합된 유기물을 염수(100mL)로 세척한 후, 소수성 프릿을 이용하여 건조시켰다. 이후, 용매를 진공하에서 제거하여, 황색 고체로서 표제 화합물(460mg, 1.414 mmol, 93%)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.65 min; MH+ 326.
중간체 234: (
R
)-5-(5-(
하이드록시메틸
)-1-(1-
하이드록시프로판
-2-일)-1
H
-
벤조[
d
]이미다졸
-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1
H
)-온
(R)-2-((4-(하이드록시메틸)-2-니트로페닐)아미노)프로판-1-올(제조를 위해 중간체 235 참조, 1.902 g, 8.41 mmol) 및 1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(제조를 위해 중간체 2 참조, 1.906 g, 12.61 mmol)를 에탄올(30 mL) 및 물(15 mL)에 용해시키고, 15분 동안 90℃로 가열하였다. 이후, 소듐 디티오나이트(4.39 g, 25.2 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 질소하에서 20시간 동안 교반하였다. 이후, 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 이후, 혼합물을 2:1의 디클로로메탄:이소프로판올(75mL)과 물(70mL) 사이에 분배시켰다. 상을 분리시키고, 수성상을 2:1의 디클로로메탄:이소프로판올(75mL x 2)로 추출하였다. 이후, 유기물을 소수성 프릿 상에서 건조시킨 후, 용매를 진공하에서 제거하였다. 이는 황색 오일을 생성시켰고, 이를 디클로로메탄에 용해시키고, SNAP 100g 실리카 컬럼에 로딩하였다. 이를 0%-30%의 에탄올/에틸 아세테이트의 구배로 작업하여 용리시켰다. 적절한 분획을 조합하고, 용매를 진공하에서 제거하여, 백색 고체로서 표제 화합물(1.139 g, 3.48 mmol, 41.4% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.58 min; MH+ 328.
중간체 235: (
R
)-2-((4-(
하이드록시메틸
)-2-
니트로페닐
)아미노)프로판-1-올
(4-플루오로-3-니트로페닐)메탄올(1.5 g, 8.77 mmol) 및 (R)-2-아미노프로판-1-올(2.047 mL, 26.3 mmol)을 테트라하이드로푸란(THF)(5 mL)에 용해시키고, N,N-디이소프로필에틸아민(4.59 mL, 26.3 mmol)을 첨가하였다. 이후, 혼합물을 1시간 동안 120℃에서 마이크로파 반응기에서 가열하였다. 이후, 오렌지색 혼합물을 에틸 아세테이트(80mL)와 포화 소듐 바이카르보네이트(80mL) 사이에 분배시키고, 상을 분리시켰다. 이후, 수성상을 에틸 아세테이트(80mL x2)로 추출하고, 유기물을 조합하였다. 이후, 유기상을 소수성 프릿을 이용하여 건조시킨 후, 용매를 진공하에서 제거하여, 오렌지색/적색 고체로서 표제 화합물(1.904 g, 8.41 mmol, 96% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.63 min; MH+ 227.
중간체 236: (
S
)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-(1-
하이드록시프로판
-2-일)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-카르브알데하이드
(S)-5-(5-(하이드록시메틸)-1-(1-하이드록시프로판-2-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 237 참조, 808 mg, 2.468 mmol) 및 데스-마틴 페리오디난(1047 mg, 2.468 mmol)을 DCM(30 mL)에 용해시키고, 혼합물을 3시간 동안 교반하였다. 데스-마틴 페리오디난(104.7 mg, 0.247 mmol)을 첨가하였다. 이후, 혼합물을 밤새 교반한 후, 소듐 하이드록시드 용액(2M, 5mL) 및 포화 소듐 바이카르보네이트 용액(20mL)을 첨가하고, 혼합물을 3시간 동안 교반하였다. 이후, 혼합물에 디클로로메탄(60mL) 및 물(60mL)을 첨가하고, 상을 분리시켰다. 이후, 수성상을 디클로로메탄(60mL)으로 3회 추출하고, 유기물을 조합하였다. 이후, 조합된 유기물을 소수성 프릿을 이용하여 건조시킨 후, 용매를 진공하에서 제거하였다. 이는 황색 고체로서 표제 화합물(592 mg, 1.82 mmol, 74%)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.64 min; MH+ 326.
중간체 237: (
S
)-5-(5-(
하이드록시메틸
)-1-(1-
하이드록시프로판
-2-일)-1
H
-
벤조[
d
]이미다졸
-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1
H
)-온
(S)-2-((4-(하이드록시메틸)-2-니트로페닐)아미노)프로판-1-올(제조를 위해 중간체 238 참조, 1.8 g, 7.96 mmol), 1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(제조를 위해 중간체 2 참조, 1.323 g, 8.75 mmol) 및 소듐 디티오나이트(4.16 g, 23.87 mmol)를 에탄올(30 mL) 및 물(15 mL)에 용해시키고, 혼합물을 20시간 동안 90℃로 가열하였다. 이후, 혼합물을 디클로로메탄:이소프로판올(2:1; 100mL)과 물(100mL) 사이에 분배시키고, 상을 분리시켰다. 이후, 수성상을 디클로로메탄:이소프로판올(2:1; 100mL)로 2회 추출하고, 유기물을 조합하고, 건조시켰다. 이후, 용매를 진공하에서 제거하였다. 이후, 잔여물을 디클로로메탄에 용해시키고, Biotage SNAP 100g 실리카 컬럼에 로딩하고, 0%-25% 에탄올/에틸 아세테이트의 구배를 이용하여 용리시켰다. 이후, 적절한 분획을 조합하고, 용매를 진공하에서 제거하였다. 이는 백색 고체로서 표제 화합물(808 mg, 2.468 mmol, 31.0% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.40 min; MH+ 328.
중간체 238: (
S
)-2-((4-(
하이드록시메틸
)-2-
니트로페닐
)아미노)프로판-1-올
4-플루오로-3-(니트로페닐)메탄올(2 g, 11.69 mmol)을 테트라하이드로푸란(5 mL)에 용해시키고, DIPEA(6.12 mL, 35.1 mmol) 및 (S)-2-아미노프로판-1-올(2.73 mL, 35.1 mmol)을 첨가하였다. 이러한 혼합물을 1시간 동안 마이크로파 반응기에서 120℃로 가열하였다. 이후, 오렌지색 혼합물을 에틸 아세테이트(80mL)와 포화 소듐 바이카르보네이트(80mL) 사이에 분배시켰다. 이후, 상을 분리시킨 후, 수성상을 에틸 아세테이트(80mL)로 2회 추출하였다. 이후, 유기물을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시킨 후, 용매를 진공하에서 제거하였다. 오일에 사이클로헥산을 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 방치시켰다. 이후, 혼합물을 2.5시간 동안 교반한 후, 용매를 폐기하였다. 이후, 혼합물을 디클로로메탄/메탄올에 용해시킨 후, 용매를 진공하에서 제거하였다. 이는 적색/오렌지색 오일로서 표제 화합물(1.8 g, 7.96 mmol, 68.1% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.63 min; MH+ 328.
중간체
239: 2
-((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-((
테트라하이드로
-2
H
-피란-4-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-6-일)옥시)아세트알데하이드
데스-마틴 페리오디난(1.12 g, 2.64 mmol)을 디클로로메탄(25 mL) 중 5-(6-(2-하이드록시에톡시)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 240 참조, 700 mg, 1.76 mmol)의 교반된 용액에 나누어 첨가하였다. 완전한 첨가 후, 반응 혼합물을 24시간 동안 실온에서 교반하였다. 10% 수성 소듐 티오설페이트 용액(25 mL)을 첨가하고, 혼합물을 15분 동안 교반하였다. 유기상을 분리시켰다. 수성상을 디클로로메탄(2x20 mL)로 추출하였다. 조합된 유기물을 포화 NaHCO3 용액(20 mL)으로 세척하였다. 유기상을 건조시키고, 증발시켜, 밝은 갈색 오일로서 표제 화합물(696 mg, 1.761 mmol, 100% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.57 min; M+18+ 414.
중간체
240: 5
-(6-(2-
하이드록시에톡시
)-1-((
테트라하이드로
-2
H
-피란-4-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온
건조 DMF(15 mL) 중 5-(6-하이드록시-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 241 참조, 2.0 g, 5.66 mmol), 2-브로모에탄올(778 mg, 442 μL, 6.22 mmol) 및 포타슘 카르보네이트(2.346 g, 16.98 mmol)의 혼합물을 24시간 동안 110℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 후, 에틸 아세테이트(50 mL)와 물(50 mL) 사이에 분배시켰다. 유기상을 분리시키고, 수성상을 에틸 아세테이트(3x25 mL)로 추출하였다. 조합된 유기물을 건조시키고, 증발시켰다. 잔여물을 크로마토그래피[5-25% 에탄올/에틸 아세테이트]하여, 무색 고체로서 표제 화합물(720 mg, 1.811 mmol, 32.0% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.63 min; MH+ 398.
중간체
241: 5
-(6-
하이드록시
-1-((
테트라하이드로
-2
H
-피란-4-일)
메틸
)-1
H
-
벤조[
d
]이미다졸
-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1
H
)-온
소듐 디티오나이트(7.04 g, 40.4 mmol)를 에탄올(50 mL) 및 물(25 mL) 중 4-니트로-3-(((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)아미노)페놀(제조를 위해 중간체 242 참조, 3.4 g. 13.48 mmol) 및 1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(제조를 위해 중간체 2 참조, 2.45 g, 16.21 mmol)의 교반된 혼합물에 나누어 첨가하였다. 완전한 첨가 후, 반응 혼합물을 4시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 에탄올을 증발시켰다. 잔여물을 에틸 아세테이트(50 mL)와 물(50 mL) 사이에 분배시켰다. 유기상을 분리시키고, 수성상을 에틸 아세테이트(3x25 mL)로 추출하였다. 조합된 유기물을 건조시키고, 증발시켰다. 잔여물을 크로마토그래피[5-20% 에탄올/에틸 아세테이트]하여, 무색 고체로서 표제 화합물(3.77 g, 10.67 mmol, 79% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.61 min; MH+ 354.
중간체
242: 4
-니트로-3-(((
테트라하이드로
-2
H
-피란-4-일)
메틸
)아미노)페놀
디옥산(50 mL) 중 3-플루오로-4-니트로페놀(3.0 g, 19.1 mmol), (테트라하이드로-2H-피란-4-일)메탄아민(3.30 g, 28.6 mmol), 및 디이소프로필에틸아민(3.70 g, 5.0 mL, 28.6 mmol)의 혼합물을 3시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 용매를 증발시켰다. 잔여물을 크로마토그래피[50-75% 에틸 아세테이트/사이클로헥산]하여, 오렌지색 고체로서 표제 화합물(3.42 g, 13.56 mmol, 71.0% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.86 min; MH+ 253.
중간체
243: 5
-(1-(2-하이드록시에틸)-5-(
하이드록시메틸
)-1
H
-
벤조[
d
]이미다졸
-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1
H
)-온
1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(제조를 위해 중간체 2 참조, 1.726 g, 11.42 mmol), 2-((4-(하이드록시메틸)-2-니트로페닐)아미노)에탄올(제조를 위해 중간체 244 참조, 2.203g, 10.38 mmol) 및 소듐 디티오나이트(5.42 g, 31.1 mmol)를 에탄올(30 mL) 및 물(15 mL)에 용해시키고, 48시간 동안 90℃에서 교반하였다. 이후, 혼합물을 실온으로 냉각시킨 후, 3:1의 DCM/이소프로판올(100mL) 및 물(100mL)을 첨가하였다. 상을 분리시킨 후, 수성상을 3:1의 DCM/이소프로판올(100mL)로 2회 추출하였다. 유기물을 조합시킨 후, 소수성 프릿을 이용하여 건조시킨 후, 용매를 진공하에서 제거하였다. 이후, 생성된 황색 잔여물을 Biotage SNAP 100g 실리카 컬럼에 로딩한 후, 0%-25% 에탄올/에틸 아세테이트로 용리시켰다. 적절한 분획을 조합하고, 용매를 진공하에서 제거하였다. 이는 백색 고체로서 표제 화합물(975 mg, 3.11 mmol, 30.0% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.57 min; MH+ 314.
중간체
244: 2
-((4-(
하이드록시메틸
)-2-
니트로페닐
)아미노)에탄올
(4-플루오로-3-니트로페닐)메탄올(2 g, 11.69 mmol)을 테트라하이드로푸란(5 mL)에 용해시킨 후, 2-아미노에탄올(2.120 mL, 35.1 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(6.12 mL, 35.1 mmol)을 첨가하였다. 이러한 혼합물을 1시간 동안 120℃에서 마이크로파 반응기에서 가열하였다. LCMS 분석은 시작 물질의 존재를 나타내었고, 샘플을 30분 동안 120℃에서 마이크로파 반응기에서 가열하였다. 이후, 혼합물을 에틸 아세테이트(75mL)와 포화 소듐 바이카르보네이트(75mL) 사이에 분배시키고, 상을 분리시켰다. 이후, 수성상을 에틸 아세테이트(75mL)로 2회 추출하고, 유기물을 조합하고, 유지시켰다. 이후, 수성상을 이소프로판올/디클로로메탄의 1:1 혼합물(75mL)로 추출하고, 유기상을 이전 유기물과 조합시켰다. 유기물을 소수성 프릿 상에서 건조시키고, 용매를 진공하에서 제거하였다. 이는 오렌지색/적색 고체로서 표제 화합물(2.203g, 10.38 mmol, 89% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.57 min; MH+ 213.
중간체
245: 2
-(5-
메틸
-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-((
테트라하이드로
-2
H
-피란-2-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-카르브알데하이드
5-(5-(하이드록시메틸)-1-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-3-메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 246 참조, 1046 mg, 2.96 mmol) 및 데스-마틴 페리오디난(1255 mg, 2.96 mmol)에 디클로로메탄(20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 20시간 동안 교반하였다. 갈색 혼합물의 LCMS 분석은 시작 물질의 존재를 나타내었고, 따라서 데스-마틴 페리오디난(126 mg, 0.296mmol)을 첨가하고, 혼합물을 3시간 동안 교반하였다. 혼합물에 포화 소듐 바이카르보네이트 용액(100mL) 및 디클로로메탄(80mL)을 첨가하고, 상을 분리시켰다. 이후, 유기물을 디클로로메탄(100mL)으로 2회 추출하고, 유기물을 조합하였다. 이후, 유기물을 염수(100mL)로 세척한 후, 소수성 프릿을 이용하여 건조시켰다. 용매를 진공하에서 제거하여, 회백색 고체로서 미정제 표제 화합물(1.2 g, 3.41 mmol, 115% 수율)을 생성시켰고, 데스-마틴 페리오디난 잔여물이 남아 있다는 일부 증거가 있었다. 생성물이 중간체이므로 정제를 시도하지 않았다. 화합물은 담갈색 고체로 나타났다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.76 min; MH+ 352.
중간체
246: 5
-(5-(
하이드록시메틸
)-1-((
테트라하이드로
-2
H
-피란-2-일)
메틸
)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-2-일)-3-메틸피리딘-2(1
H
)-온
(3-니트로-4-(((테트라하이드로-2H-피란-2-일)메틸)아미노)페닐)메탄올(제조를 위해 중간체 227 참조, 2.7 g, 10.14 mmol) 및 5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(제조를 위해 중간체 1 참조, 1.808 g, 13.18 mmol)를 에탄올(35 mL) 및 물(35.0 mL)에 용해시키고, 90℃로 가열하였다. 이후, 소듐 디티오나이트(5.30 g, 30.4 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 20시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시킨 후, 3:1의 디클로로메탄:이소프로판올(160mL)과 소듐 바이카르보네이트(160mL) 사이에 분배시키고, 상을 분리시켰다. 이후, 유기상을 3:1의 디클로로메탄:이소프로판올(160mL)로 2회 추출하였다. 이후, 유기물을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 용매를 진공하에서 제거하였다. 이는 황색 잔여물을 생성시켰고, 이를 마지막으로 공기 중에 방치한 후에 고형화시켰다. 샘플을 25% 에탄올/에틸 아세테이트에 용해시키려는 시도가 있었으나, 고체가 상당히 불용성이었다. 따라서, 혼합물을 중력하에서 여과시키고, 잔여물을 25% 에탄올/에틸 아세테이트로 세척하였다. 고체를 공기 중에서 건조시킨 후, 1시간 동안 40℃에서 진공 오븐에서 추가로 건조시켜, 회백색 고체로서 표제 화합물(1.05 g, 2.97 mmol, 29.3% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.52 min; MH+ 354.
중간체 247: (
S
)-2-((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-(1-메톡시프로판-2-일)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)옥시)아세트알데하이드
데스-마틴 페리오디난(320 mg, 0.75 mmol)을 디클로로메탄(10 mL) 중 (S)-5-(5-(2-하이드록시에톡시)-1-(1-메톡시프로판-2-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 248 참조, 140 mg, 0.38 mmol)의 교반된 용액에 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 10% 소듐 티오설페이트 용액(20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 15분 동안 교반하였다. 유기상을 분리시켰다. 수성상을 디클로로메탄(2x10 mL)으로 추출하였다. 조합된 유기물을 포화 NaHCO3(10 mL)로 세척하고, 건조시키고, 증발시켜, 무색 검으로서 표제 화합물(139 mg, 0.377 mmol, 100% 수율)을 생성시켰다. 나타난 정량적 수득량을 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.66 min; M+18+ 388.
중간체 248: (
S
)-5-(5-(2-
하이드록시에톡시
)-1-(1-
메톡시프로판
-2-일)-1
H
-
벤조[
d
]이미다졸
-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1
H
)-온
DMF(50 mL) 중 (S)-5-(5-하이드록시-1-(1-메톡시프로판-2-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 249 참조, 1.25 g, 3.82 mmol), 2-브로모에탄올(525 mg, 298 ·L, 4.2 mmol) 및 포타슘 카르보네이트(1.58 g, 11.45 mmol)의 혼합물을 48시간 동안 130℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 용매를 증발시켰다. 잔여물을 에틸 아세테이트(50 mL)에 현탁시키고, '셀라이트'를 통해 여과시켰다. 용매를 여과액으로부터 증발시켰다. 잔여물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피[10-25% 에탄올/에틸 아세테이트]로 정제하여, 황색 검으로서 표제 화합물(140 mg, 0.377 mmol, 9.87% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.75 min; MH+ 372.
중간체 249: (
S
)-5-(5-
하이드록시
-1-(1-
메톡시프로판
-2-일)-1
H
-
벤조[
d
]이미다졸
-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1
H
)-온
에탄올(30 mL) 및 물(15 mL) 중 (S)-4-((1-메톡시프로판-2-일)아미노)-3-니트로페놀(제조를 위해 중간체 250 참조, 1.3 g, 5.75 mmol) 및 1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(제조를 위해 중간체 2 참조, N-Me 피리돈 알데하이드, 1.04 g, 6.90 mmol)의 용액에 5분에 걸쳐 소듐 디티오나이트(3.00 g, 17.24 mmol)를 나누어 첨가하여 처리하였다. 완전한 첨가 후, 반응 혼합물을 4시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 에탄올을 증발시켰다. 잔여물을 에틸 아세테이트(50 mL)와 물(25 mL) 사이에 분배시켰다. 유기상을 분리시켰다. 수성상을 에틸 아세테이트(2x25 mL)로 추출하였다. 조합된 유기물을 건조시키고, 증발시켰다. 잔여물을 크로마토그래피[5-20% 에탄올/에틸 아세테이트]하여 회백색 고체로서 표제 화합물(1.27 g, 3.88 mmol, 67.5% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.46 min; MH+ 328.
중간체 250: (
S
)-4-((1-
메톡시프로판
-2-일)아미노)-3-니트로페놀
디옥산(10 mL) 중 4-플루오로-3-니트로페놀(1.0 g, 6.37 mmol), (S)-1-메톡시프로판-2-아민(1.13 g, 1.35 mL, 12.73 mmol) 및 디이소프로필에틸아민(1.65 g, 2.22 mL, 12.73 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 환류시켰다. 용매를 증발시키고, 잔여물을 N-메틸-2-피롤리돈(10 mL)에 용해시켰다. 혼합물을 4시간 동안 180℃에서 마이크로파에서 가열하였다. 냉각된 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(50 mL)와 물(25 mL) 사이에 분배시켰다. 유기상을 분리시키고, 물(2x25 mL)로 세척하고, 건조시키고, 증발시켰다. 잔여물을 크로마토그래피[10-40% 에틸 아세테이트/사이클로헥산]하여, 오렌지색 고체로서 표제 화합물(1.31 g, 5.79 mmol, 91% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.89 min; MH+ 227.
중간체
251: 2
-(5-
메틸
-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-((
테트라하이드로푸란
-3-일)메틸)-1H-벤조[
d
]이미다졸-5-카르브알데하이드 (거울상 이성질체 1, 공지되지 않은 입체형태의 단일 거울상 이성질체)
데스-마틴 페리오디난(625 mg, 1.47 mmol)을 디클로로메탄(10 mL) 중 5-(5-(하이드록시메틸)-1-((테트라하이드로푸란-3-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-3-메틸피리딘-2(1H)-온(거울상 이성질체 1, 제조를 위해 중간체 252 참조, 250 mg, 0.74 mmol)의 교반된 용액에 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 10% 소듐 티오설페이트 용액(20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 15분 동안 교반하였다. 유기상을 분리시켰다. 수성상을 디클로로메탄(2x10 mL)으로 추출하였다. 조합된 유기물을 포화 NaHCO3 용액(10 mL)으로 세척하고, 건조시키고, 증발시켜, 무색 검으로서 표제 화합물(249 mg, 0.737 mmol, 100% 수율)을 생성시켰다. 정량적 수율이 나타났다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.67 min; MH+ 338.
중간체
252: 5
-(5-(
하이드록시메틸
)-1-((
테트라하이드로푸란
-3-일)
메틸
)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-2-일)-3-메틸피리딘-2(1
H
)-온 (거울상 이성질체 1) 및 중간체 253: 5-(5-(
하이드록시메틸
)-1-((
테트라하이드로푸란
-3-일)
메틸
)-1
H
-
벤조[
d
]이미다
졸-2-일)-3-메틸피리딘-2(1
H
)-온 (거울상 이성질체 2)
중간체 254의 키랄 분리:
분석 방법: 약 0.5mg을 50% EtOH/헵탄(1mL)에 용해시키고, 20ul를 컬럼(40% EtOH/헵탄, f=1.0mL/min, 파장 215nm,4. Ref 550,100, 컬럼 4.6mmid x 25cm Chiralpak IA)에 주입하였다.
제조 방법: 약 2.25g을 12mL의 EtOH에 용해시키고, 열을 가함. 주입; 2mL의 용액을 컬럼(40% EtOH/헵탄, f=30mL/min, 파장 215nm,4. Ref 550,100, 컬럼 30mm x 25cm Chiralpak IA)에 주입하였다.
중간체 252 (거울상 이성질체 1) Rt = 11.5 min. UV에 의해 >99% ee.
중간체 253 (거울상 이성질체 2) Rt = 16.5 min. UV에 의해 >99% ee.
중간체
254: 5
-(5-(
하이드록시메틸
)-1-((
테트라하이드로푸란
-3-일)
메틸
)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-2-일)-3-메틸피리딘-2(1
H
)-온
소듐 디티오나이트(7.66 g, 44.0 mmol)를 에탄올(60 mL) 및 물(30 mL) 중 (3-니트로-4-(((테트라하이드로푸란-3-일)메틸)아미노)페닐)메탄올(제조를 위해 중간체 219 참조, 3.7 g, 14.67 mmol) 및 5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(제조를 위해 중간체 1 참조, 2.51 g, 15.56 mmol)의 현탁액에 3개의 단일 부분으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 80℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 에탄올을 증발시켰다. 혼합물을 DCM:iPrOH 3:1(150 mL)과 NaHCO3(100 mL) 사이에 분배시켰다. 분리된 수성상을 DCM:iPrOH 3:1(3 x 150 mL)로 추출하였다. 조합된 유기상을 소수성 프릿을 통해 통과시키고, 증발시켜, 담황색 오일을 획득하였다. 샘플을 20% MeOH/DCM에 로딩하고, 10-20% MeOH/DCM 구배를 이용한 SNAP 100g 실리카 컬럼 상에서의 크로마토그래피(Biotage SP4)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 건조시켜, 담황색 오일로서 표제 화합물(2.37 g, 6.98 mmol, 48%)을 생성시켰다. LCMS (시스템 C): tRET = 0.42 min; MH+ 340.
중간체
255: 2
-(5-
메틸
-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-((
테트라하이드로푸란
-3-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-카르브알데하이드 (거울상 이성질체 2)
데스-마틴 페리오디난(625 mg, 1.47 mmol)을 디클로로메탄(10 mL) 중 5-(5-(하이드록시메틸)-1-((테트라하이드로푸란-3-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-3-메틸피리딘-2(1H)-온(거울상 이성질체 2, 제조를 위해 중간체 253 참조, 250 mg, 0.74 mmol)의 교반된 용액에 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 10% 소듐 티오설페이트 용액(20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 15분 동안 교반하였다. 유기상을 분리시켰다. 수성상을 디클로로메탄(2x10 mL)으로 추출하였다. 조합된 유기물을 포화 NaHCO3 용액(10 mL)으로 세척하고, 건조시키고, 증발시켜, 무색 검으로서 표제 화합물(249 mg, 0.737 mmol, 100% 수율)을 생성시켰다. 정량적 수율이 나타났다. 다음 단계에서 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.67 min; MH+ 338.
중간체
256: 2
-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-(2-
메톡시프로필
)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-카르브알데하이드
5-(5-(하이드록시메틸)-1-(2-메톡시프로필)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 257 참조, 2.153 g, 6.31 mmol)을 디클로로메탄(15 mL)에 용해시킨 후, 데스-마틴 페리오디난(2.67 g, 6.31 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 질소하에서 교반하였다. 혼합물에 소듐 바이카르보네이트(200mL) 및 디클로로메탄(200mL)을 첨가하였다. 이러한 혼합물을 1.5시간 동안 교반한 후, 상 분리를 시도하였다. 분리로부터의 유기물을 유지시켰다. 2M HCl(100mL)을 첨가하였다. 유기상을 분리시키고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 용매를 진공하에서 제거하였다. 이는 갈색 잔여물인 미정제 표제 화합물을 생성시켰다. LC-MS 순도는 약 45%였다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.73 min; MH+ 340.
중간체
257: 5
-(5-(
하이드록시메틸
)-1-(2-
메톡시프로필
)-1H-
벤조[
d
]이미다졸
-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1
H
)-온
(4-((2-메톡시프로필)아미노)-3-니트로페닐)메탄올(제조를 위해 중간체 258 참조, 2.8152 g, 11.72 mmol) 및 1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(제조를 위해 중간체 2 참조, 1.948 g, 12.89 mmol)를 에탄올(50 mL) 및 물(25 mL)에 용해시키고, 1시간 동안 질소하에서 90℃로 가열하였다. 이후, 소듐 디티오나이트(8.16 g, 46.9 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 90℃에서 1.5시간 동안 질소하에서 교반하였다. 이후, 혼합물을 포화 소듐 바이카르보네이트(100mL)와 3:1의 디클로로메탄:이소프로판올(100mL) 사이에 분배시키고, 상을 분리시켰다. 이후, 수성상을 3:1의 디클로로메탄:이소프로판올(100mL)로 2회 추출하고, 유기물을 조합한 후, 소수성 프릿 상에서 건조시켰다. 이후, 용매를 진공하에서 제거하여, 황색 잔여물을 남겼다. 잔여물을 디클로로메탄에 용해시키고, 2개 부분으로 나누고, 2개의 Biotage SNAP 100g 실리카 컬럼에 로딩하였다. 각각의 컬럼을 0%-25% 에탄올/에틸 아세테이트의 구배로 작업하여 용리시켰다. 이후, 적절한 분획을 조합하고, 용매를 진공하에서 제거하였다. 이는 갈색 고체로서 표제 화합물(2.1253 g, 6.23 mmol, 53.1% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.48 min; MH+ 342.
중간체 258: (4-((2-
메톡시프로필
)아미노)-3-
니트로페닐
)메탄올
(4-플루오로-3-니트로페닐)메탄올(2.72 g, 15.89 mmol), 2-메톡시프로판-1-아민, 하이드로클로라이드(2.99 g, 23.84 mmol), 및 디이소프로필에틸아민(13.88 mL, 79 mmol)을 테트라하이드로푸란(10 mL)에 첨가하고, 2개의 동일한 부분으로 나누었다. 각각의 부분을 20mL 마이크로파 바이알에 두고, 마이크로파 반응기에서 1시간 동안 120℃로 가열하였다. 시작 물질이 여전히 존재하였고, 따라서 샘플을 120℃에서 30분 동안 마이크로파 반응기에서 가열하였다. 혼합물을 조합하고, 에틸 아세테이트(150mL)와 포화 소듐 바이카르보네이트(150mL) 사이에 분배시켰다. 이후, 수성상을 에틸 아세테이트(150mL)로 2회 추출하고, 유기물을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시켰다. 이후, 용매를 진공하에서 제거하여, 적색 오일을 생성시켰다. 오일을 디클로로메탄에 용해시키고, 2개의 Biotage SNAP 100g 실리카 컬럼에 로딩하였다. 각각의 컬럼을 10%-50% 에틸 아세테이트/사이클로헥산의 구배를 이용하여 용리시켰다. 적절한 분획을 조합하여, 오렌지색 고체로서 표제 화합물(2.8152 g, 11.72 mmol, 73.7% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.82 min; MH+ 241.
중간체
259: 5
-(5-
하이드록시
-1-((
테트라하이드로
-2
H
-피란-4-일)
메틸
)-1
H
-
벤조[
d
]이미다졸
-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1
H
)-온
3-니트로-4-(((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)아미노)페놀(제조를 위해 중간체 232 참조, 3.68 g, 14.59 mmol), 1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(제조를 위해 중간체 1 참조, 2.205 g, 14.59 mmol) 및 소듐 하이드로설파이트(7.62 g, 43.8 mmol)를 질소하에서 에탄올(64.8 mL) 중에서 교반하였다. 물(32.4 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 밤새 질소하에서 90℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 감압하에서 이의 부피의 1/3로 농축시켰다. 잔여물을 DCM 중에 취하고, 물로 세척하였다. 유기물을 상 분리기 상에서 건조시키고, 감압하에서 농축시켰다. 적색 고체를 에틸 아세테이트 중 0-25% EtOH로 용리되는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 분획을 감압하에서 농축시켜, 표제 화합물(3.48g)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.67 min, MH+ = 354.
중간체
260: 5
-(5-(2-
하이드록시에톡시
)-1-((
테트라하이드로
-2
H
-피란-4-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1
H
)-온
건조 DMF(7.07 mL) 중 5-(5-하이드록시-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 259 참조, 0.75 g, 2.122 mmol), 2-브로모에탄올(0.318 g, 2.55 mmol) 및 K2CO3(0.880 g, 6.37 mmol)를 질소하에서 120℃에서 교반하였다. 18시간 후, 2-브로모에탄올(0.318 g, 2.55 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 7시간 동안 120℃에서 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 물 및 에틸 아세테이트를 첨가하고, 층을 분리시켰다. 유기물을 물로 세척하고, 소수성 프릿을 통해 건조시키고, 감압하에서 농축시켰다. 잔여물을 에틸 아세테이트 중 5-25% 에탄올로 용리되는 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 백색 고체로서 표제 화합물(0.18 g)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.70 min, MH+ = 398.
중간체
261: 2
-((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-((
테트라하이드로
-2
H
-피란-4-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)옥시)아세트알데하이드
5-(5-(2-하이드록시에톡시)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 260 참조, 0.18g, 0.453 mmol)을 질소 대기하에서 DCM(8 mL)에 용해시켰다. 데스-마틴 페리오디난(0.288 g, 0.679 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 소듐 티오설페이트의 포화 용액(20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 15분 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 DCM으로 희석시키고, 층을 분리시켰다. 수성상을 DCM으로 추출하였다. 유기물을 조합하고, 포화 소듐 바이카르보네이트 용액으로 세척하고, 상 분리기를 통해 건조시키고, 농축시켜, 황색 고체로서 표제 화합물을 생성시켰다. 추가 실험을 미정제 물질에 대해 수행하였다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.65 min, MH+ = 396.
중간체 262: (
2
S
,3
R
)-이소프로필 2-(2-(4-
플루오로
-3-
니트로페닐
)
아세트아미도
)-3-하이드록시부타노에이트
에틸 아세테이트(45 mL) 중 2-(4-플루오로-3-니트로페닐)아세트산(2 g, 10.04 mmol), (2S,3R)-이소프로필 2-아미노-3-하이드록시부타노에이트, 4-메틸벤젠설폰산 염(제조를 위해 중간체 31 참조, 4.02 g, 12.05 mmol), 피리딘(2.437 mL, 30.1 mmol) 및 n-프로필포스폰산 무수물, 고리형 삼합체(8.88 mL, 15.07 mmol)를 밤새 실온에서 교반하였다. 피리딘(2.437 mL, 30.1 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 18시간 동안 실온에서 추가로 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 희석시켰다. 층을 분리시켰다. 수성상을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기물을 염수 및 이후 물로 세척하고, 상 분리기 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔여물을 에틸 아세테이트 중 0-10% 에탄올로 용리되는 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 분획을 농축시켜, 표제 화합물(31% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.90 min, MH+ = 343.
하기 중간체를 중간체 262와 유사한 방식으로 제조하였다:
중간체 264: (
2
S
,3
R
)-이소프로필 3-
하이드록시
-2-(2-(3-니트로-4-(((
테트라하이드로
-2
H
-피란-4-일)메틸)아미노)페닐)아세트아미도)부타노에이트
THF(40 mL) 중 (2S,3R)-이소프로필 2-(2-(4-플루오로-3-니트로페닐)아세트아미도)-3-하이드록시부타노에이트(제조를 위해 중간체 262 참조, 1.51 g, 4.41 mmol), DIPEA(2.311 mL, 13.23 mmol) 및 (테트라하이드로-2H-피란-4-일)메탄아민(0.762 g, 6.62 mmol)을 밤새 60℃에서 질소하에서 교반하였다. DIPEA(2.311 mL, 13.23 mmol) 및 (테트라하이드로-2H-피란-4-일)메탄아민(0.2mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 2시간 동안 60℃에서 가열하였다. 반응 혼합물을 감압하에서 농축시켰다. 잔여물을 DCM에 취하고, 물로 세척하였다. 유기물을 상 분리기 상에서 건조시키고, 농축시켜, 오렌지색 오일을 생성시켰다. 오일을 사이클로헥산 중 25-100% 에틸 아세테이트로 용리되는 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 분획을 농축시켜, 표제 화합물(58% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.95 min, MH+ = 438.
하기 중간체를 중간체 264와 유사한 방식으로 제조하였다:
중간체
266: 1
,3-디메틸-5-(5-(
옥시란
-2-일)-1-((
테트라하이드로
-2
H
-피란-4-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-2-일)피리딘-2(1
H
)-온
2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드(제조를 위해 중간체 116 참조, 0.100 g, 0.274 mmol), 트리메틸설포늄 요오다이드(0.057 g, 0.279 mmol) 및 포타슘 하이드록시드(0.092 g, 1.642 mmol)를 4시간 동안 65℃에서 질소하에서 아세토니트릴(2.72 mL) 및 물(0.014 mL) 중에서 교반하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고, 에틸 아세테이트 및 물로 희석시켰다. 유기물을 소듐 바이카르보네이트로 세척하였다. 이후, 유기물을 상 분리기 상에서 건조시키고, 감압하에서 농축시켜, 백색 고체로서 표제 화합물(49% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.79 min, MH+ = 389.
중간체 267: (
R
)-
터트
-부틸 3-((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-6-((((2
S
,3
R
)-3-하이드록시-1-이소프로폭시-1-옥소부탄-2-일)아미노)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트
소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(68 mg, 0.33 mmol)를 (R)-터트-부틸 3-((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-6-포르밀-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트(제조를 위해 중간체 126 참조, 100 mg, 0.22 mmol) 및 (2S,3R)-이소프로필 2-아미노-3-하이드록시부타노에이트 4-메틸벤젠설포네이트(제조를 위해 중간체 31 참조, 86 mg, 0.26 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 생성된 현탁액을 밤새 교반하였다. 추가의 (2S,3R)-이소프로필 2-아미노-3-하이드록시부타노에이트 4-메틸벤젠설포네이트(86 mg, 0.26 mmol) 및 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(68 mg, 0.33 mmol)를 첨가하고, 현탁액을 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 MeOH로 가용화시키고, 5 g SCX 카트리지에 로딩하였다. 카트리지를 MeOH로 용리시킨 후, 2M 메탄올성 암모니아로 용리시켰다. 염기성 분획을 진공하에서 무색 검으로 증발시키고, MDAP(방법 B)로 정제하였다. 생성물 함유 분획을 진공하에서 증발시켜, 백색 포움으로서 표제 화합물(29mg)을 생성시켰다. LCMS (시스템 C): tRET = 0.66 min, MH+ = 610.
중간체 268: (
R
)-
터트
-부틸 3-((6-((((2S,3R)-1-(터트-부톡시)-3-하이드록시-1-옥소부탄-2-일)아미노)메틸)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트
소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(46 mg, 0.22 mmol)를 (R)-터트-부틸 3-((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-6-포르밀-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트(제조를 위해 중간체 126 참조, 50 mg, 0.11 mmol) 및 (2S,3R)-터트-부틸 2-아미노-3-하이드록시부타노에이트.HCl(28 mg, 0.13 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 교반하였다. (2S,3R)-터트-부틸 2-아미노-3-하이드록시부타노에이트 하이드로클로라이드(28 mg, 0.13 mmol)를 첨가하고, 생성된 현탁액을 2시간 동안 교반하고, 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(46 mg, 0.22 mmol)를 첨가하였다. 생성된 현탁액을 1시간 동안 교반하였다. 현탁액을 MeOH로 가용화시키고, 5 g SCX 카트리지에 로딩하였다. 카트리지를 MeOH로 용리시킨 후, 2M 메탄올성 암모니아로 용리시켰다. 염기성 분획을 진공하에서 무색 검으로 증발시키고, MDAP(방법 B)로 정제하였다. 생성물 함유 분획을 진공하에서 증발시켜, 백색 포움으로서 표제 화합물(20mg)을 생성시켰다.
LCMS (시스템 C): tRET = 0.69 min, MH+ = 624.
중간체 269: (
S
)-
터트
-부틸 3-((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-6-((((S)-1-이소프로폭시-3-메틸-1-옥소부탄-2-일)아미노)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트
(S)-터트-부틸 3-((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-6-포르밀-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트(제조를 위해 중간체 128 참조, 70 mg, 0.151 mmol)를 DCM(3 mL)에 용해시키고, (S)-이소프로필 2-아미노-3-메틸부타노에이트 4-메틸벤젠설포네이트(제조를 위해 중간체 65 참조, N31501-74-A2, 100 mg, 0.301 mmol)를 첨가하였다. 현탁액을 1시간 동안 질소 흐름하에서 교반하였다. 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(63.9 mg, 0.301 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 23시간 동안 실온에서 교반하였다. (S)-이소프로필 2-아미노-3-메틸부타노에이트 4-메틸벤젠설포네이트(49.9 mg, 0.151 mmol)를 첨가하고, 30분 동안 교반한 후, 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(31.9 mg, 0.151 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 3.5시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM(20 mL)으로 희석시키고, NaHCO3(20 mL)를 첨가하였다. 분리된 수성상을 DCM(3 x 20 mL)으로 추출하였다. 조합된 유기상을 소수성 프릿을 통해 통과시키고, 증발시켜, 황색 고체로서 미정제 생성물(124 mg)을 획득하였다. 샘플을 MeOH 2 mL에 용해시키고, MDAP(방법 B)로 정제하였다. 용매를 건조시켜, 황색-오렌지색 고체로서 표제 화합물(65 mg)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 1.30 min, MH+ = 608.
중간체 270: (
S
)-
터트
-부틸 3-((5-(((1-(사이클로펜틸옥시)-4-메틸-1-옥소펜탄-2-일)아미노)메틸)-2-(5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-1-일)메틸)아제티딘-1-카르복실레이트
마이크로파 바이알에 (S)-터트-부틸 3-(((4-(((1-(사이클로펜틸옥시)-4-메틸-1-옥소펜탄-2-일)아미노)메틸)-2-니트로페닐)아미노)메틸)아제티딘-1-카르복실레이트(제조를 위해 중간체 271 참조, 355 mg, 0.684 mmol), THF(12 mL), 5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(제조를 위해 중간체 1 참조, 94 mg, 0.684 mmol) 및 물(3 mL) 중 소듐 하이드로설파이트(417 mg, 2.396 mmol)의 용액을 충전시켰다. 바이알의 뚜껑을 닫고, 혼합물을 5시간 동안 100℃까지 초기 표준을 이용하여 마이크로파에서 가열하였다. 유기 용매를 진공하에서 제거하고, 에탄올(12 mL)로 대체하였다. 바이알의 뚜껑을 닫고, 혼합물을 전체 5시간 동안 100℃까지 마이크로파에서 가열하였다. 혼합물을 EtOAc 및 물로 희석시키고, 층을 혼합하고, 분리시킨 후, 유기물을 소수성 프릿을 통해 통과시키고, 진공하에서 농축시켜, 황색 오일을 생성시켰다. 오일을 디클로로메탄에 로딩하고, 15 CV에 대해 0-100% 에틸 아세테이트-사이클로헥산 및 이후 15 CV에 대해 0-20% MeOH-DCM의 구배를 이용한 Biotage SP4 SNAP 25g 실리카로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 진공하에서 증발시켜, 황색 오일로서 표제 화합물(60 mg, 0.099 mmol, 14.47% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.88 min; MH+ 606.
중간체 271: (S)-
터트
-부틸 3-(((4-(((1-(
사이클로펜틸옥시
)-4-
메틸
-1-
옥소펜탄
-2-일)아미노)메틸)-2-니트로페닐)아미노)메틸)아제티딘-1-카르복실레이트
둥근 바닥 플라스크에 (S)-사이클로펜틸 2-((4-플루오로-3-니트로벤질)아미노)-4-메틸펜타노에이트(제조를 위해 중간체 137 참조, 230 mg, 0.653 mmol), 아세토니트릴(10 mL), 포타슘 카르보네이트(180 mg, 1.305 mmol) 및 터트-부틸 3-(아미노메틸)아제티딘-1-카르복실레이트(146 mg, 0.783 mmol)를 충전시켰다. 공기 응축기를 설치하고, 혼합물을 1주 동안 질소 블랭킷 하에서 80℃로 가온시켰다. 혼합물을 물 및 에틸 아세테이트로 희석시키고, 층을 혼합하고, 분리시킨 후, 유기물을 염수로 세척하였다. 유기물을 소수성 프릿을 통해 통과시키고, 진공하에서 농축시켜, 오렌지색 오일을 생성시켰다. 오일을 디클로로메탄에 로딩하고, 15 CV에 대해 0-40% 에틸 아세테이트-사이클로헥산의 구배를 이용한 Biotage SP4 SNAP 25g 실리카(Si)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 진공하에서 증발시켜, 오렌지색 오일로서 표제 화합물(355 mg, 0.684 mmol, 105% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 1.07 min; MH+ 519.
중간체 272: (
S
)-
터트
-부틸 3-((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-5-((((
S
)-1-이소프로폭시-3-메틸-1-옥소부탄-2-일)아미노)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트
(S)-터트-부틸 3-((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-5-포르밀-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트(예시적 제조를 위해 중간체 130 참조, 500 mg, 1.076 mmol)를 디클로로메탄(DCM)(10 mL) 중 (S)-이소프로필 2-아미노-3-메틸부타노에이트, 페닐메탄 설폰산 염(제조를 위해 중간체 65 참조, 713 mg, 2.153 mmol)의 용액에 첨가하였다. 생성된 용액을 밤새 교반하고, 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(684 mg, 3.23 mmol)를 첨가하였다. 생성된 현탁액을 1시간 동안 교반하였다. MeOH(10 mL)를 첨가하고, 생성된 용액을 10 g SCX 카트리지에 로딩하였다. 카트리지를 MeOH(50 mL)로 용리시킨 후, 2M 메탄올성 암모니아(50 mL)로 용리시켰다. 염기성 분획을 진공하에서 갈색 검으로 증발시켰다. 검을 DCM에 용해시키고, DCM:2M 메탄올성 암모니아(0-5%)로 용리시키는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물 함유 분획을 진공하에서 증발시켜, 표제 화합물을 생성시켰다. 반응의 전체 수율은 28%였다. LCMS (시스템 C): tRET = 0.75 min, MH+ = 608.
중간체
273: 2
-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-
메틸
-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드
5-(5-(하이드록시메틸)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 90 참조, 931 mg, 3.29 mmol)을 디클로로메탄(DCM)(52 mL)에 용해시켰다. 교반된 용액에 2-요오드옥시벤조산(2249 mg, 3.61 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 2.5시간 동안 실온에서 질소하에서 교반한 후, 1,1,1-트리아세톡시-1,1-디하이드로-1,2-벤즈요오독솔-3(1H)-온 1,1,1-트리아세톡시-1,1-디하이드로-1,2-벤즈요오독솔-3(1H)-온(1394 mg, 3.29 mmol)을 교반된 용액에 나누어 첨가하였다. 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 이후, 용액을 포화 소듐 바이카르보네이트(200 mL)와 디클로로메탄(100 mL) 사이에 분배시키고, 상을 분리시키고, 수성상을 디클로로메탄(100 mL x 2)으로 2회 추출하였다. 이후, 유기물을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 용매를 진공하에서 제거하였다. 잔여물에 수 mL의 디클로로메탄을 첨가한 후, 수 mL의 2M NaOH를 첨가하고, 용액을 15분 동안 교반하였다. 이후, 혼합물을 디클로로메탄(50mL)과 포화 소듐 바이카르보네이트(50 mL) 사이에 분배시키고, 임의의 침전된 고체가 유기상으로 유입되지 않도록 주의하면서 상을 분리시켰다. 이후, 수성상을 디클로로메탄(2 x 50mL)으로 2회 세척하고, 유기물을 조합하였다. 이후, 용액을 소수성 프릿으로 건조시키고, 용매를 진공하에서 제거하여, 담황색 고체로서 2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드(438 mg, 1.557 mmol, 47.4% 수율)를 생성시켰다. 침전된 고체를 여과에 의해 분리시키고, 흡인하에서 건조시켜, 밝은 갈색 고체로서 2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드(200 mg, 0.710 mmol, 21.6% 수율)의 추가 배치를 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.66 min, MH+ = 282.
중간체
274: 1
-에틸-2-(5-
메틸
-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1H-
벤조[d]이미다졸
-5-카르브알데하이드
5-(5-(하이드록시메틸)-1-이소프로필-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 91 참조, 722 mg, 2.319 mmol)을 디클로로메탄(DCM)(5 mL)에 용해시킨 후, 1,1,1-트리아세톡시-1,1-디하이드로-1,2-벤즈요오독솔-3(1H)-온(983 mg, 2.319 mmol)을 처리하였다. 용액을 질소하에서 1시간 동안 교반한 후, 2M NaOH(15 mL)를 첨가하고, 혼합물이 투명해질 때까지(15분) 용액을 교반하였다. 이후, 혼합물을 디클로로메탄(150 mL)과 포화 소듐 바이카르보네이트(150mL) 사이에 분배시키고, 상을 분리시켰다. 이후, 수성층을 포화 소듐 바이카르보네이트(150 mL x 2)로 2회 추출하고, 유기물을 조합하였다. 이후, 유기층을 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 용매를 진공하에서 제거하였다. 이후, 잔여물을 다음과 같은 방법을 이용한 자동화 크로마토그래피를 이용하여 정제하였다: 2 컬럼 부피에 대해 100% 에틸 아세테이트, 15 컬럼 부피에 대해 에틸 아세테이트 중 0%-25% 에탄올 및 이후 2 컬럼 부피에 대해 에틸 아세테이트 중 25% 에탄올. 이후, 적절한 분획을 조합하고, 용매를 진공하에서 제거하여, 백색 고체로서 2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-이소프로필-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드(718.7 mg, 2.323 mmol, 100% 수율)를 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.70 min, MH+ = 310.
중간체
275: 2
-(5-
메틸
-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-((4-
메틸모르폴린
-2-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드
디클로로메탄(2 mL) 중 옥살릴 클로라이드(0.124 ml, 1.411 mmol)의 용액을 아세톤/드라이아이스 배쓰에서 -78℃로 냉각시켰다. 여기에 디클로로메탄(3 mL) 중 DMSO(0.213 ml, 3.01 mmol)의 용액을 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 -78℃에서 교반하였다. 디클로로메탄(5 mL) 중 5-(5-(하이드록시메틸)-1-((4-메틸모르폴린-2-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-3-메틸피리딘-2(1H)-온(400 mg, 1.086 mmol, 제조를 위해 중간체 150 참조)의 현탁액을 첨가하고, 반응 혼합물을 2시간 동안 -78℃에서 교반하였다. 이후, 트리에틸아민(1.059 ml, 7.60 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온으로 가온시켰다. 이를 밤새 실온에서 질소하에서 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 용액(40 mL)과 DCM(40 mL) 사이에 분배시키고, 층을 분리시켰다. 수성층을 DCM(3x40 mL)으로 추출한 후, DCM 중 25% 메탄올(2x40 mL)로 추출하였다. 유기층을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켜, 무색 검을 생성시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 20 컬럼 부피에 대해 메탄올 중 0-20% 디클로로메탄-2M 암모니아의 구배를 이용한 후, 5 컬럼 부피에 대해 메탄올 중 20% 디클로로메탄-2M 암모니아에서 유지시키는 Biotage SP4 SNAP 25 g 실리카로 정제하였다. 순수한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 무색 검을 생성시켰다. 생성물을 함유하는 덜 순수한 분획을 개별적으로 조합하고, 용매를 감압하에서 제거하였다. 이러한 불순한 미정제 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 20 컬럼 부피에 대해 메탄올 중 4-16% 디클로로메탄-2M 암모니아의 구배를 이용한 후, 5 컬럼 부피에 대해 메탄올 중 16% 디클로로메탄-2M 암모니아에서 유지시키는 Biotage SP4 SNAP 25 g 실리카로 재정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켰다. 이를 이전 작업으로부터의 순수한 샘플과 조합하여, 담황색 고체로서 미정제 생성물 2-(5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((4-메틸모르폴린-2-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드(137.8 mg, 0.376 mmol, 34.6% 수율)를 생성시켰다. 샘플을 디클로로메탄/메탄올에 로딩하고, 20 컬럼 부피에 대해 10-25% 메탄올-클로로포름의 구배를 이용한 후, 5 컬럼 부피에 대해 25% 메탄올-클로로포름에서 유지시키는 Biotage SP4 SNAP 25 g 실리카로 재정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 백색 고체로서 표제 화합물(53.6 mg, 0.146 mmol, 13.47% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.65 min, MH+ = 367.
중간체 276: (
S
)-
사이클로펜틸
2-아미노-3-
하이드록시프로파노에이트
, 4-
메틸벤젠설폰산
염
사이클로헥산(150 mL) 중 (S)-2-아미노-3-하이드록시프로판산(15 g, 143 mmol)의 현탁액에 사이클로펜탄올(98 g, 1142 mmol) 및 4-메틸벤젠설폰산(32.0 g, 186 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 24시간 동안 100℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에서 증발시켜, 갈색 오일로서 미정제 생성물을 생성시켰다. 갈색 오일을 냉각시키고, 생성된 결정을 여과시키고, EtOAc(50 mL)로 세척하여, 백색 고체로서 (S)-사이클로펜틸 2-아미노-3-하이드록시프로파노에이트, 4-메틸벤젠설폰산 염(38 g, 110 mmol, 77% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR δ(400 MHz, DMSO-d 6) ppm: 8.28 (3H, br. s.), 7.47 (2H, d, J=8.1 Hz), 7.11 (2H, d, J=7.8 Hz), 5.55 (1H, br. s.), 5.19 (1H, t, J=5.7 Hz), 3.81 (1H, dd, J=11.4, 3.8 Hz), 3.73 (1H, dd, J=11.4, 2.8 Hz), 2.29 (3H, s), 1.93 - 1.78 (2H, m), 1.67 (4H, d, J=5.6 Hz), 1.63 - 1.50 (2H, m).
중간체 277: (
S
)-
사이클로펜틸
2-
아미노프로파노에이트
, 4-
메틸벤젠설폰산
염
둥근 바닥 플라스크에 (S)-2-아미노프로판산(20 g, 224 mmol), 사이클로헥산(101 mL), 토스산 모노하이드레이트(55.5 g, 292 mmol) 및 사이클로펜탄올(166 ml, 1836 mmol)을 충전시켰다. 딘-스타크 응축기를 설치하고, 혼합물을 48시간 동안 110℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 후, 용매를 진공하에서 증발시켜, 갈색 액체로서 미정제 생성물을 생성시켰다. 미정제 생성물을 최소 부피의 고온의 EtOAc(20mL)에 용해시켰다. 용액을 냉각시키고, 생성된 결정을 여과시키고, 소량의 EtOAc(10mLx3)로 세척하고, 오일 진공에서 건조시켜, 백색 고체로서 (S)-사이클로펜틸 2-아미노프로파노에이트, 4-메틸벤젠설폰산 염(58 g, 174 mmol, 78% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR δ(400 MHz, DMSO-d 6) ppm: 8.23 (3H, br. s.), 7.47 (2H, d, J=8.1 Hz), 7.12 (2H, d, J=7.8 Hz), 5.18 (1H, t, J=5.9 Hz), 4.05 (1H, q, J=6.7 Hz), 2.29 (3H, s), 1.92 - 1.79 (2H, m), 1.72 - 1.53 (6H, m), 1.36 (3H, d, J=7.3 Hz).
중간체
278: 2
-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-(2-하이드록시에틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드
5-(1-(2-하이드록시에틸)-5-(하이드록시메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 243 참조, 975 mg, 3.11 mmol) 및 데스-마틴 페리오디난(660 mg, 1.556 mmol)에 디클로로메탄(40 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 1.5시간 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난(660 mg, 1.556 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 추가 18시간 동안 교반하였다. 데스-마틴 페리오디난(66 mg, 0.156 mmol)을 첨가하고, 2시간 동안 교반하였다. 데스-마틴 페리오디난(66 mg, 0.156 mmol)을 첨가하고, 2시간 동안 교반하였다. 이후, 데스-마틴 페리오디난(75 mg, 0.38 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 혼합물에 2M 소듐 하이드록시드 수용액(20 mL)을 첨가하고, 혼합물이 투명해질 때까지 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 이후, 물(20 mL) 및 디클로로메탄(60 mL)을 첨가하고, 상을 분리시켰다. 이후, 수성상을 디클로로메탄(100 mL x 2)으로 추출하고, 유기상을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시켰다. 이후, 용매를 진공하에서 제거하였다. 이는 회백색 고체 2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(2-하이드록시에틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드(675 mg, 2.168 mmol, 69.7% 수율)를 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.53 min; MH+ 312.
중간체 279: (
S
)-(
R
)-1-
메톡시프로판
-2-일 2-((
터트
-
부톡시카르보닐
)아미노)-3-메틸부타노에이트
DMF(5 mL) 중 (S)-2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3-메틸부탄산(1.0 g, 4.60 mmol), 디이소프로필에틸아민(1.19 g, 1.608 mL, 9.21 mmol), 1-하이드록시벤조트리아졸 하이드레이트(HOBt)(846 mg, 5.52 mmol), EDC(1.06 g, 5.53 mmol), 및 (R)-1-메톡시프로판-2-올(1.037 g, 1.127 mL, 11.5 mmol)의 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(15 mL)와 포화 NaHCO3(15 mL) 사이에 분배시켰다. 유기상을 1M 염산(15 mL), 물(15 mL) 및 염수(15 mL)로 세척하였다. 유기상을 건조시키고, 감압하에서 증발시켜, 무색 오일로서 표제 화합물(1.2 g, 90% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (CDCl3): δ 0.89 (m, 3 H), 0.96 (m, 3 H), 1.24 (d, J = 6.6 Hz, 3 H), 1.45 (s, 9H), 2.16 (m, 1H), 3.36 (s, 3H), 3.44 (m, 2H), 4.23 (m, 1H), 5.05 (m, 1H), 5.13 (m, 1H).
중간체 280: (
S
)-(
R
)-1-
메톡시프로판
-2-일 2-아미노-3-
메틸부타노에이트
,
하이드로클로라이드
(S)-(R)-1-메톡시프로판-2-일 2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3-메틸부타노에이트(제조를 위해 중간체 279 참조, 1.15 g, 3.97 mmol)를 에틸 아세테이트(2 mL)에 용해시켰다. 용액을 디옥산 중 4M 염화수소(2 mL)로 처리하였다. 반응 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 용매를 증발시켜, 무색 검으로서 표제 화합물(425 mg, 47.4% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (CDCl3): δ 1.15 (m, 6 H), 1.29 (d, J = 6.4 Hz, 3 H), 2.47 (m, 1 H), 3.35 (s, 3 H), 3.47 (m, 2 H), 3.95(m, 1 H), 5.18 (m, 1 H), 8.79 (m, 3H).
중간체 281: (S)-
사이클로펜틸
2-
아미노펜타노에이트
하이드로클로라이드
(S)-2-아미노펜탄산(2.5 g, 21.34 mmol)을 사이클로펜탄올(30 mL)에 첨가하고, 현탁액을 드라이아이스/아세톤 배쓰를 이용하여 -5℃로 만들었다. 10분 동안 상기 온도에서 교반 후, 티오닐 클로라이드(3.58 mL, 49.1 mmol)를 적가하였다. 현탁액을 교반하고, 실온으로 가온시켰다. 이후, 이를 18시간 동안 상기 온도에서 교반하였다. 반응 혼합물을 60℃로 가온시키고, 24시간 동안 상기 온도에서 교반하였다. 반응 혼합물을 감압하에서 농축시켰다. 생성물을 에틸 아세테이트로부터 재결정화시키고, 여과시키고, 세척하고, 건조시켜, 백색 고체로서 표제 화합물(2.62 g, 86% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (d6-DMSO): δ 0.89 (t, J = 7.3 Hz, 3 H), 1.31 (m, 1 H), 1.42 (m, 1 H), 1.67 (m, 8 H), 1.86 (m, 2 H), 3.91(m, 1 H), 5.19 (m, 1 H), 8.49 (m, 3H).
중간체 282: (
S
)-(
S
)-
테트라하이드로푸란
-3-일 2-((
터트
-
부톡시카르보닐
)아미노)-3-메틸부타노에이트
DMF(20 mL) 중 (S)-2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3-메틸부탄산(2.5 g, 11.51 mmol), 디이소프로필에틸아민(2.97 g, 4.02 mL, 23.01 mmol), 1-하이드록시벤조트리아졸 하이드레이트(2.12g, 13.84 mmol), EDC(2.65 g, 13.81 mmol), 및 (S)-테트라하이드로푸란-3-올(5.07 g, 3.91 mL, 57.5 mmol)의 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(50 mL)와 포화 소듐 바이카르보네이트(50 mL) 사이에 분배시켰다. 유기상을 1M 염산(50 mL), 물(50 mL) 및 염수(50 mL)로 세척하였다. 유기상을 건조시키고, 증발시켜, 무색 오일로서 표제 화합물(2.73 g, 9.50 mmol, 83% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (CDCl3): δ 0.90 (d, J = 7.1 Hz, 3 H) 0.97 (d, J = 6.9 Hz, 3 H) 1.45 (s, 9 H) 2.01 - 2.09 (m, 1 H) 2.10 - 2.24 (m, 2 H) 3.80 (d, J = 10.8 Hz, 1 H) 3.83 - 3.97 (m, 3 H) 5.04 (d, J = 8.8 Hz, 1 H) 5.27 - 5.43 (m, 1 H).
중간체 283: (
S
)-(
S
)-
테트라하이드로푸란
-3-일 2-아미노-3-
메틸부타노에이트
하이드로클로라이드
에틸 아세테이트(5 mL) 중 (S)-(S)-테트라하이드로푸란-3-일 2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3-메틸부타노에이트(예시적 제조를 위해 중간체 282 참조, 2.73 g, 9.50 mmol)의 용액을 디옥산 중 4M 염화수소(5 mL)로 처리하였다. 반응 혼합물을 24시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 증발시켰다. 디에틸 에테르로 시도된 분쇄는 고체를 생성시키지 않았다. 용매를 증발시켜, 무색 오일로서 표제 화합물(1.98 g, 8.85 mmol, 93% 수율)을 생성시켰다. 샘플을 수일 동안 실온에서 방치하여 고형화시켰다. 1H NMR (d6-DMSO): δ 0.95 (d, J = 6.9 Hz, 2 H) 1.00 (d, J = 6.9 Hz, 3 H) 1.94 - 2.02 (m, 1 H) 2.13 - 2.25 (m, 2 H) 3.71 - 3.84 (m, 5 H) 5.33 - 5.37 (m, 1 H) 8.70 (br.s., 3 H).
중간체 284: (
S
)-3-(1-(
터트
-
부톡시카르보닐
)-1
H
-이미다졸-4-일)-2-((
터트
-부톡시카르보닐)아미노)프로판산
고체 (S)-2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3-(1H-이미다졸-4-일)프로판산(48.27 g, 189 mmol)을 물(200 mL) 및 1,4-디옥산(500 mL) 중 소듐 바이카르보네이트(15.89 g, 189 mmol)의 용액에 용해시키고, 디-터트-부틸 디카르보네이트(43.9 mL, 189 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 25℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 증발시키고, 잔여물을 물(500 mL)과 에테르(500 mL) 사이에 분배시켰다. 이후, 수성상에 포화된 KHSO4를 첨가하여 pH=4로 조정하고, 에틸 아세테이트(3 x 500 mL) 및 포화 염수(500 mL)로 추출하고, 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 진공하에서 증발시켜, 백색 고체로서 표제 화합물(40 g, 113 mmol, 60% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (CDCl3): δ 1.38, 1.60 (2 x s, 전체 18 H) 3.16, 3.25 (2 x m, 전체 2 H) 4.48 (m, 1 H) 5.54 (m, 1 H) 7.21 (s, 1 H) 8.17 (s, 1 H).
중간체 285: (
S
)-
터트
-부틸 4-(2-((
터트
-
부톡시카르보닐
)아미노)-3-(
사이클로펜틸옥시
)-3-옥소프로필)-1
H
-이미다졸-1-카르복실레이트
DCM(200 mL) 중 (S)-3-(1-(터트-부톡시카르보닐)-1H-이미다졸-4-일)-2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)프로판산(예시적 제조를 위해 중간체 284 참조, 40 g, 1126 mmol) 및 사이클로펜탄올(97 g, 1126 mmol)의 용액에 DCC(232 g, 1126 mmol) 및 DMAP(13.75 g, 113 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 25℃에서 교반하였다. 반응물을 분별 깔때기를 통해 여과시키고, 디클로로메탄(DCM)(200 mL)으로 헹구고, 여과액을 수거하였다. 여과액을 물(200 mL), 포화 염수(200 mL)로 세척하고, 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 진공하에서 증발시켜, 미정제 생성물을 생성시켰다. 미정제 생성물을 실리카 겔 컬럼에 첨가하고, Hex/EtOAc=4:1로 용리시켰다. 수거된 분획: 갈색 오일로서 표제 화합물(36 g, 851 mmol, 75.6% 수율). 1H NMR (CDCl3): δ 1.45 (s, 9 H) 1.59 - 1.71 (m, 11 H), 1.8 (m, 6 H) 3.05 (d, 2 H) 4.52 (m, 1 H) 5.21 (m, 1 H) 5.70 (d, 1 H) 7.16 (s, 1 H) 8.03 (s, 1 H).
중간체 286: (
S
)-
사이클로펜틸
2-아미노-3-(1
H
-이미다졸-4-일)
프로파노에이트
디하이드로클로라이드
고체 (S)-터트-부틸 4-(2-((터트-부톡시카르보닐)아미노)-3-(사이클로펜틸옥시)-3-옥소프로필)-1H-이미다졸-1-카르복실레이트(예시적 제조를 위해 중간체 285 참조, 36 g, 52.7 mmol)에 에틸 아세테이트 중 4M 염산(400 ml, 1600 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 24시간 동안 25℃에서 교반하였다. 또 다른 디옥산 중 염산(400 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 24시간 동안 25℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과시키고, 생성된 고체를 분별 깔때기를 통해 여과시키고, 에틸 아세테이트(25 mL)로 헹구고, 백색 고체로서 표제 화합물(14.3 g)을 수거하였고, 이는 2개의 HCl 염인 것으로 추정되었다. 여과액을 진공하에서 증발시켜, 미정제 생성물을 생성시켰다. 미정제 생성물을 에틸 아세테이트(50 mL)로 분쇄시켰다. 생성된 고체를 분별 깔때기를 통해 여과시키고, 에틸 아세테이트(25 mL)로 헹구고, 오렌지색 고체로서 표제 화합물(7.7 g)을 수거하였고, 이는 비스 하이드로클로라이드 염인 것으로 추정되었다. 1H NMR (MeOD): δ 1.61 - 1.78 (m, 6 H) 1.95 - 1.95 (m, 2 H) 3.37 (m, 2 H) 4.43 (m, 1 H) 5.30 - 5.33 (m, 1 H) 7.56 (s, 1 H) 9.00 (s, 1 H).
중간체 287: (
2
R
,3
S
)-이소프로필 2-아미노-3-
하이드록시부타노에이트
하이드로클로라이드
얼음 배쓰에서 냉각시키면서 아세틸 클로라이드(17.91 mL, 252 mmol)를 프로판-2-올(120 mL, 1557mmol)에 적가한 후, 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 그 이후, (2R,3S)-2-아미노-3-하이드록시부탄산(10 g, 84 mmol)을 반응 혼합물에 첨가한 후, 반응 혼합물을 16시간 동안 80℃에서 가열하였다. 반응 혼합물을 감압하에서 농축시키고, 생성된 잔여물을 톨루엔(2 x 50 mL)과 공비시킨 후, 에테르(50mL)로 분쇄시키고, 건조시켜, 백색 반 고체로서 표제 화합물 (2R,3S)-이소프로필 2-아미노-3-하이드록시부타노에이트 하이드로클로라이드(8g, 48.2% 수율)를 획득하였다. LCMS (시스템 G): tRET = 1.37 min; MH+ 162
중간체 288: (
2
S
,3
S
)-이소프로필 2-아미노-3-
하이드록시부타노에이트
하이드로클로라이드
얼음 배쓰에서 냉각시키면서 아세틸 클로라이드(4.48 mL, 63.0 mmol)를 iPrOH(30.0 mL, 389 mmol)에 적가한 후, 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반한 후, (2S,3S)-2-아미노-3-하이드록시부탄산(2.5 g, 20.99 mmol)을 첨가하였다. 이후, 혼합물을 80℃로 가열하여, 진한 백색 현탁액을 생성시키고, 이를 추가 가열하여 투명한 무색 용액으로 투명화시켰다. 이를 밤새 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 진공하에서 증발시켜, 백색 고체를 생성시키고, 잔여물을 톨루엔(20mL)과 공비시킨 후, 에테르(20mL)로 분쇄시켜, 백색 고체로서 미정제 표제 화합물 (2S,3S)-이소프로필 2-아미노-3-하이드록시부타노에이트 하이드로클로라이드(2.69 g, 65% 수율)를 생성시켰다. 미정제 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용하였다.
1H NMR (400 MHz, 메탄올-d4) δ 5.27-5.46 (m, 1H), 4.38-4.59 (m, 2H), 4.19-4.27 (m, 1H), 1.29-1.60 (m, 13H (원하는 화합물로부터 9H, 및 중첩 이소프로판올 불순물)) 전체 순도는 NMR에 의해 66%이다.
중간체 289: (
2
R
,3
R
)-이소프로필 2-아미노-3-
하이드록시부타노에이트
하이드로클로라이드
얼음 배쓰에서 냉각시키면서 아세틸 클로라이드(448 μL, 6.30 mmol)를 iPrOH(2999 μL, 38.9 mmol)에 적가한 후, 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반한 후, (2R,3R)-2-아미노-3-하이드록시부탄산(250 mg, 2.099 mmol)을 첨가하였다. 이후, 혼합물을 80℃로 가열하여, 진한 백색 현탁액을 생성시키고, 이를 추가 가열하여 투명한 무색 용액으로 투명화시켰다. 이를 주말에 걸쳐 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 진공하에서 증발시켜, 백색 고체를 생성시키고, 잔여물을 톨루엔(20mL)과 공비시킨 후, 에테르(20mL)로 분쇄시켜, 백색 고체로서 표제 화합물 (2R,3R)-이소프로필 2-아미노-3-하이드록시부타노에이트 하이드로클로라이드(169.9 mg, 33%)를 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) · 8.35 (br. s., 3H), 5.18 (td, J=6.24, 12.47 Hz, 1H), 4.48-4.65 (m, 1H), 4.31 (m, 1H), 1.38 (d, J=6.60 Hz, 3H), 1.33 (d, J=6.36 Hz, 6H).
중간체 290: 이소프로필 2-아미노-3-
하이드록시부타노에이트
하이드로클로라이드
얼음 배쓰에서 냉각시키면서 아세틸 클로라이드(35.8 ml, 504 mmol)를 프로판-2-올(240 ml, 3115 mmol)에 적가한 후, 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 그 이후, 2-아미노-3-하이드록시부탄산(20 g, 168 mmol)을 반응 혼합물에 첨가한 후, 반응 혼합물을 16시간 동안 80℃에서 가열하였다. 반응 혼합물을 감압하에서 농축시키고, 생성된 잔여물을 톨루엔(2 x 100 mL)과 공비시킨 후, 에테르(100mL)로 분쇄시키고, 건조시켜, 백색 반 고체로서 표제 화합물 이소프로필 2-아미노-3-하이드록시부타노에이트, 하이드로클로라이드(24g, 121 mmol, 72.3% 수율)를 획득하였다. LCMS (시스템 G): tRET = 1.39 min; MH+ 162.
중간체
291: 5
-(1-(1,3-
디메톡시프로판
-2-일)-5-(
옥시란
-2-일)-1H-
벤조[d]이미다졸
-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온
아세토니트릴(20 mL)/물(0.5 mL) 중 1-(1,3-디메톡시프로판-2-일)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드(예시적 제조를 위해 중간체 224 참조, 2.0 g, 5.41 mmol), 트리메틸 설포늄 요오다이드(1.127 g, 5.52 mmol) 및 포타슘 하이드록시드(1.823 g, 32.5 mmol)를 실온에서 질소하에서 교반하였다. 이후, 반응 혼합물을 2시간 동안 65℃에서 교반하였다. 이후, 반응을 물(20 mL)로 켄칭시키고, 에틸 아세테이트(50mL X 2)로 추출하고, 조합된 유기층을 염수로 세척하고, 건조시키고(Na2SO4), 여과시키고, 농축시켜, 표제 생성물 5-(1-(1,3-디메톡시프로판-2-일)-5-(옥시란-2-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(2.0g, 수율 92%)을 생성시켰다. 미정제 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계로 통과시켰다. LCMS (시스템 H): tRET = 4.31 min; MH+ 384.
중간체
292: 1
,3-디메틸-5-(5-(
옥시란
-2-일)-1-((
테트라하이드로
-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)피리딘-2(1H)-온
실온에서 질소하에서 교반된 아세토니트릴(15 mL) 및 물(0.075 mL) 중 2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드(제조를 위해 중간체 116 참조, 1g, 2.62 mmol), 트리메틸설포늄 요오다이드(0.536 g, 2.62 mmol)의 용액에 순수한 포타슘 하이드록시드(0.884 g, 15.75 mmol)를 실온에서 한번의 충전으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 3시간 동안 65℃에서 교반하였다. 반응물을 EtOAc(50mL)로 희석시키고, 반응 혼합물을 소수성 프릿을 통해 통과시키고, 여과액을 감압하에서 농축시켜, 미정제 잔여물을 생성시켰다. 미정제 잔여물을 포화 소듐 바이카르보네이트 용액(50 mL) 및 EtOAc(100mL)로 희석시켰다. 수성층을 분리시키고, EtOAc(2X200mL)로 재추출하였다. 조합된 유기상을 물(50mL) 및 염수 용액(50mL)으로 세척하였다. 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과시키고, 여과액을 농축시켜, 밝은 황색 고체로서 미정제 표제 화합물 1,3-디메틸-5-(5-(옥시란-2-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)피리딘-2(1H)-온(900 mg, 62.3% 수율)을 생성시켰다. 미정제 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계로 통과시켰다. LCMS (시스템 H): tRET = 3.28 min; MH+ 380.
중간체 77: (3-니트로-4-(((
테트라하이드로
-2
H
-피란-4-일)
메틸
)아미노)페닐)메탄올
테트라하이드로푸란(THF)(10 mL) 중 (테트라하이드로-2H-피란-4-일)메탄아민(5.23 mL, 40.9 mmol), (4-플루오로-3-니트로페닐)메탄올(3.5 g, 20.45 mmol) 및 N-에틸-N-이소프로필프로판-2-아민(17.86 mL, 102 mmol)의 용액을 탈기시키고, 5시간 동안 60℃에서 질소하에서 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(150 mL)와 소듐 바이카르보네이트의 포화 용액(150 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 분리시키고, 수성 분획을 에틸 아세테이트(2x150 mL)로 2회 재추출하였다. 유기 분획을 조합하고, 소수성 프릿을 통해 통과시키고, 감압하에서 농축시켰다. 잔여물을 최소량의 에틸 아세테이트에 용해시키고, 실리카 컬럼(100 g, SPE)에 로딩하였다. 생성물을 사이클로헥산 중 0-60%의 에틸 아세테이트의 구배로 용리시켰다. 생성물 함유 분획을 조합하고, 감압하에서 농축시켜, 오렌지색 고체로서 표제 화합물(4957 mg, 91% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.79 min; MH+ 267.
중간체
96: 5
-(5-(
하이드록시메틸
)-1-((
테트라하이드로
-2
H
-피란-4-일)
메틸
)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1
H
)-온
에탄올(60 mL) 중 (3-니트로-4-(((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)아미노)페닐)메탄올(예시적 제조를 위해 중간체 77 참조, 2.05 g, 7.70 mmol)의 용액에 1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(예시적 제조를 위해 중간체 2 참조, 1.455 g, 7.70 mmol) 및 소듐 하이드로설파이트(4.76 g, 23.09 mmol)를 첨가한 후, 물을 첨가하였다. 반응 혼합물을 2일 동안 90℃에서 가열하였다. 반응 혼합물을 감압하에서 대략 절반 부피로 농축시키고, 생성된 액체를 3:1의 클로로포름:이소프로판올(3 x 150 mL)과 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액(150 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 10 컬럼 부피에 대해 0-25% 사이클로헥산-(에틸 아세테이트 중 25% 에탄올)의 구배를 이용한 후, 5 컬럼 부피에 대해 25% 사이클로헥산-(에틸 아세테이트 중 25% 에탄올)에서 유지시킨 후, 10 컬럼 부피에 대해 0-100% 사이클로헥산-(에틸 아세테이트 중 25% 에탄올) 및 이후 10 컬럼 부피에 대해 에틸 아세테이트 중 25% 에탄올의 구배를 이용하는 Biotage SP4 SNAP 100 g 실리카로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 회백색 포움으로서 원하는 생성물 5-(5-(하이드록시메틸)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(1.22 g, 3.32 mmol, 43.1% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): t RET = 0.63 min; MH + 368.
중간체
116: 2
-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-((
테트라하이드로
-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드
5-(5-(하이드록시메틸)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(예시적 제조를 위해 중간체 96 참조, 7g, 19.05 mmol)을 디클로로메탄(DCM)(200mL)에 용해시키고, 이산화망간(6.62 g, 76 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 2시간 동안 환류하에서 가열한 후, 혼합물을 여과시키고, 고체를 DCM으로 세척하였다. 여과액을 진공하에서 증발시켜, 담황색 포움으로서 2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드(6.6g, 18.06 mmol, 95% 수율)를 생성시켰다. LCMS (시스템 J): tRET = 0.75 min; MH+ 366.
실시예
제조
실시예
1: (
S
)-
사이클로펜틸
4-메틸-2-(((2-(5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2
H
-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)펜타노에이트
둥근 바닥 플라스크에 5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(예시적 제조를 위해 중간체 1 참조, 203 mg, 1.482 mmol), 소듐 하이드로설파이트(821 mg, 4.72 mmol), 물(10 mL), 및 에탄올(20 mL) 중 (S)-사이클로펜틸-4-메틸-2-((3-니트로-4-(((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)아미노)벤질)아미노)펜타노에이트(예시적 제조를 위해 중간체 182 참조, 603 mg, 1.347 mmol)의 용액을 충전시켰다. 응축기를 설치하고, 슬러리를 밤새 100℃에서 환류시켰다. 혼합물을 물 및 EtOAc로 희석시시키고, 층을 혼합하고, 분리시킨 후, 유기층을 소수성 프릿을 통해 통과시키고, 진공하에서 농축시켜, 황색 오일을 생성시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 15 컬럼 부피에 대해 0-100% 에틸 아세테이트-사이클로헥산 및 이후 15 컬럼 부피에 대해 메탄올-디클로로메탄 중 0-10% 2M 암모니아의 구배를 이용한 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 진공하에서 증발시켜, 무색 오일로서 표제 화합물(140 mg)을 생성시키고, 이를 고진공 하에서 고형화시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.78 min; MH+ = 535.
하기 실시예를 실시예 1과 유사한 방식으로 제조하였다:
(표에서, 사용된 LCMS 시스템, 체류 시간(tRET), MH+, 반응 수율 및 % 수율의 세부사항이 각각의 실시예에 대해 제공된다).
실시예
7a 및 7b: (
S
)-
사이클로펜틸
4-메틸-2-(((2-(5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(((
R
)-4-메틸모르폴린-2-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)펜타노에이트 및 (
S
)-
사이클로펜틸
4-메틸-2-(((2-(5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(((
S
)-4-메틸모르폴린-2-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)펜타노에이트
실시예 7(95mg)을 에탄올(2mL)에 용해시키고, 키랄 크로마토그래피(정지상: Chiralpak AD-H 5μm 입자, 이동상: 헵탄/에탄올)(N20771-72)로 정제하였다. 순수한 이성질체 1을 함유하는 조합된 분획을 진공하에서 농축시키고, 고체 잔여물을 메탄올 및 디클로로메탄의 혼합물을 이용하여 칭량 플라스크로 옮기고, 메탄올 및 디클로로메탄을 진공하에서 제거하였다. 상기 물질을 4시간 동안 45℃ 및 24시간 동안 주위 온도에서 진공 오븐에서 건조시켜, 무색 고체로서 순수한 이성질체 1(실시예 7a)(39.8mg)을 생성시켰다. HPLC-UV: RT 16.73분, 280nM에서의 영역 HPLC에 의해 약 99.7% 이성질체 순도. LCMS (시스템 B): tRET = 1.11 min, MH+ = 550. 순수한 이성질체 2를 함유하는 조합된 분획을 진공하에서 농축시키고, 고체 잔여물을 메탄올 및 디클로로메탄의 혼합물을 이용하여 칭량 플라스크로 옮기고, 메탄올 및 디클로로메탄을 진공하에서 제거하였다. 상기 물질을 4시간 동안 45℃ 및 24시간 동안 주위 온도에서 진공 오븐에서 건조시켜, 무색 고체로서 벤즈이미다졸의 순수한 이성질체 2(실시예 7b)(41.2mg)을 생성시켰다. HPLC-UV: RT 21.09분, 280nM에서의 영역 HPLC에 의해 약 99.4% 이성질체 순도. LCMS (시스템 B): tRET = 1.12 min, MH+ = 550.
실시예
13: (2
S
)-
사이클로펜틸
2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((4-메틸모르폴린-2-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-4-메틸펜타노에이트
1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(예시적 제조를 위해 중간체 2 참조, 196 mg, 1.297 mmol) 및 소듐 디티오나이트(677 mg, 3.89 mmol)를 에탄올(10 mL) 및 물(5 mL) 중 (2S)-사이클로펜틸 4-메틸-2-((4-(((4-메틸모르폴린-2-일)메틸)아미노)-3-니트로벤질)아미노)펜타노에이트(제조를 위해 중간체 143 참조, 600 mg, 1.297 mmol)의 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 5시간 동안 마이크로파 조사에 의해 100℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 DCM(40 mL)과 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 용액(40 mL) 사이에 분배시키고, 층을 분리시켰다. 수성층을 DCM(3x40 mL)으로 추출하고, 조합된 유기층을 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켰다. 미정제 샘플을 10 컬럼 부피에 대해 메탄올 중 0-10% 디클로로메탄-2M 암모니아 및 이후 5 컬럼 부피에 대해 메탄올 중 10% 디클로로메탄-2M 암모니아의 구배를 이용한 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켰다. 이러한 미정제 샘플을 MDAP(방법 B)에 의해 2회 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 용매를 감압하에서 증발시켜, 회백색 고체로서 표제 화합물(202 mg)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 1.16 min; MH+ = 564.
하기 실시예를 실시예 13과 유사한 방식으로 제조하였다:
실시예
16: (
S
)-
사이클로펜틸
3-메틸-2-(((2-(5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2
H
-피란-4-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)부타노에이트
DCM(10 mL) 중 2-(5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드(200 mg, 0.569 mmol, 중간체 151) 및 (S)-사이클로펜틸 2-아미노-3-메틸부타노에이트 4-메틸벤젠설포네이트(407 mg, 1.138 mmol, 중간체 24)의 현탁액을 실온에서 질소하에서 교반하였다. 15분 후, 부분적 용해를 달성하였고, 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(241 mg, 1.138 mmol)를 상기에 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 실온에서 질소하에서 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM(30 mL)과 포화 소듐 하이드로겐 카르보네이트 용액(30 mL) 사이에 분배시키고, 층을 분리시켰다. 수성층을 DCM(3x30 mL)으로 추출하고, 유기층을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켜, 백색 고체를 생성시켰다. 미정제 샘플을 DMSO(3x1 mL)에 용해시키고, MDAP(방법 B)로 정제하였다. 용매를 감압하에서 증발시켜, 백색 고체로서 표제 화합물(196.1 mg, 0.377 mmol, 66.2% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 1.11 min, MH+ = 521.
실시예
17: (
S
)-4-메틸-2-(((2-(5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2
H
-피란-4-일)메틸)-1
H
-벤조[d]이미다졸-6-일)메틸)아미노)펜탄산, 하이드로클로라이드
메탄올(2 mL) 및 THF(2 mL) 중 (S)-사이클로펜틸 4-메틸-2-(((2-(5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-6-일)메틸)아미노)펜타노에이트(제조를 위해 실시예 12 참조, 35 mg, 0.065 mmol)의 용액에 1M 수성 리튬 하이드록시드(0.196 mL, 0.196 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 밤새 50℃에서 가열하였다. 반응 혼합물을 질소 스트림 하에서 취입시켰다. 샘플을 2M 수성 염산(0.1 mL) 및 메탄올(0.9 mL)에 용해시키고, MDAP(방법 B)로 정제하였다. 용매를 질소 스트림 하에서 취입시켜, 백색 검을 생성시켰다. 샘플을 테트라하이드로푸란(1 mL)에 현탁시키고, 2M 수성 염산(0.5 mL)을 첨가하여, 투명한 용액을 생성시켰다. 혼합물을 질소 스트림 하에서 취입시켜, 회백색 고체로서 표제 화합물(22 mg)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.55 min; MH+ 467.
하기 실시예를 실시예 17과 유사한 방식으로 제조하였다:
실시예
71: (
S
)-3,3-디메틸-2-(((2-(5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2
H
-피란-4-일)메틸)-1
H
-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)부탄산
1M 리튬 하이드록시드 수용액(1.0 mL)을 메탄올(0.5 mL) 및 THF(0.5 mL) 중 (2S)-테트라하이드로푸란-3-일 3,3-디메틸-2-(((2-(5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)부타노에이트(제조를 위해 실시예 239 참조, 50 mg, 0.093 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 48시간 동안 60℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 용매를 증발시키고, 잔여물을 MDAP(방법 B)로 정제하여, 무색 고체로서 표제 화합물(26 mg)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.57 min; MH+ 467
하기 실시예를 실시예 71과 유사한 방식으로 제조하였다:
실시예
86: (2
S
,3
S
)-2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2
H
-피란-4-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부탄산
에탄올(3 mL) 중 (2S,3S)-(S)-테트라하이드로푸란-3-일 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트(50.0 mg, 0.093 mmol)(예시적 제조를 위해 실시예 306 참조)의 교반된 용액에 1M 리튬 하이드록시드(0.464 mL, 0.464 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 40℃에서 밤새 교반하였다. 2M HCl(0.300 mL, 0.600 mmol)을 반응 혼합물에 첨가하고, 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 MeOH(15 CV) 및 이후 MeOH 중 2M NH3(15 CV)로 용리되는 SCX 카트리지에 로딩하였다. 염기성 분획을 농축시키고, 진공하에서 증발시켜, 백색 고체로서 표제 화합물을 생성시켰다. 반응의 전체 수율은 100%였다. LCMS (시스템 C): tRET = 0.40 min, MH+ = 469.
하기 실시예를 실시예 86과 유사한 방식으로 제조하였다:
실시예
90: (
S
)-4-메틸-2-(((2-(5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2
H
-피란-4-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)펜탄산, 소듐 염
둥근 바닥 플라스크에 (S)-사이클로펜틸 4-메틸-2-(((2-(5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)펜타노에이트(136 mg, 0.254 mmol, 실시예 1), 테트라하이드로푸란(THF)(2 mL), 메탄올(2 mL), 물(1 mL) 및 리튬 하이드록시드(15 mg, 0.626 mmol)를 충전시켰다. 공기 응축기를 설치하고, 혼합물을 밤새 50℃로 가온시켰다. 리튬 하이드록시드(15 mg, 0.626 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 밤새 50℃로 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시킨 후, 진공하에서 농축시켜, 백색 고체를 생성시켰다. 고체를 1:1 MeOH:DMSO 2 x 1 mL에 용해시키고, MDAP(방법 A)로 정제하였다. 관련 분획을 조합하고, 용매를 진공하에서 백색 고체(86 mg, 0.184 mmol)로 증발시켰다. 고체를 DCM/MeOH/THF 용액(9 mL 1:1:1)에서 슬러리화시킨 후, 소듐 하이드록시드(93 μL, 0.186 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 5분 동안 교반한 후, 진공하에서 휘발성 물질을 제거하여, 백색 고체로서 표제 화합물(96 mg, 0.19 mmol, 77% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 A): tRET = 0.49 min; MH+ 467.
실시예
91: (2
S
,3
R
)-2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2
H
-피란-2-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-6-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부탄산 - 부분입체 이성질체 1,
하이드로클로라이드
에탄올(2 mL) 중 (2S,3R)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-6-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 - 부분입체 이성질체 1(174a)(31.5 mg, 0.062 mmol)의 교반된 용액에 1M 리튬 하이드록시드(0.308 mL, 0.308 mmol)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 40℃에서 2일 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 MeOH(15 CV) 및 2M 메탄올성 암모니아(15 CV)로 용리되는 Biotage SCX 카트리지에 로딩하였다. 염기성 분획을 진공하에서 증발시켜, 백색 고체를 획득하였다. Et2O 중 잔여물(0.5 mL)의 현탁액에 Et2O 중 0.5M HCl(0.1 mL)을 첨가하였다. 현탁액을 2시간 동안 교반하고, 진공하에서 증발시켜, 백색 고체로서 표제 화합물을 생성시켰다. 반응의 전체 수율은 72%였다. LCMS (시스템 I): tRET = 0.46 min, MH+ = 469.
실시예
92: (
2
S
,3
R
)-
터트
-부틸 2-(((1-(1,3-디메톡시프로판-2-일)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-6-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트
실시예
93: (2
S
,3
R
)-2-(((1-(1,3-디메톡시프로판-2-일)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-6-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부탄산
(2S,3R)-터트-부틸 2-아미노-3-하이드록시부타노에이트 하이드로클로라이드(115 mg, 0.541 mmol)를 22시간 동안 질소 대기하에서 DCM(5 mL) 중 1-(1,3-디메톡시프로판-2-일)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-6-카르브알데하이드(134)(100 mg, 0.271 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(172 mg, 0.812 mmol)를 첨가하고, 생성된 현탁액을 1시간 동안 교반하였다. MeOH(5 mL)를 첨가하고, 용액을 5분 동안 교반하고, 5 g SCX 카트리지에 로딩하였다. 카트리지를 MeOH(25 mL)로 용리시킨 후, 2M 메탄올성 암모니아(25 mL)로 용리시켰다. 염기성 분획을 진공하에서 갈색 오일로 증발시키고, MDAP(방법 B)로 정제하였다. 2M 수성 HCl(0.5 mL)을 첨가하고, 생성물 함유 분획을 진공하에서 증발시키고, EtOH와 공비시켜, 백색 고체를 생성시켰다. 잔여물을 DMSO:MeOH(1:1, 0.9 mL)에 용해시키고, MDAP로 정제하였다. 생성물 함유 분획을 증발 건조시키고, EtOH 및 PhMe와 공비시켜, 백색 고체로서 표제 화합물을 생성시켰다. 실시예 92의 전체 수율은 25%였다. LCMS (시스템 C): tRET = 0.57 min, MH+ = 529. 실시예 93의 전체 수율은 5%였다. LCMS (시스템 C): tRET = 0.40 min, MH+ = 473.
실시예
94a: (2
S
,3
R
)-2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(1-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)에틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부탄산,
하이드로클로라이드
- 부분입체 이성질체 1
(2S,3R)-터트-부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(1-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)에틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트(182a)(12.5 mg, 0.023 mmol)를 2M 수성 HCl(2 mL, 4.00 mmol)에 용해시켰다. 반응 혼합물을 4일 동안 40℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 진공하에서 증발시켜, 백색 고체로서 표제 화합물을 생성시켰다. 반응의 전체 수율은 58%였다. LCMS (시스템 C): tRET = 0.40 min, MH+ = 483.
실시예
94b: (2
S
,3
R
)-2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(1-(테트라하이드로-2
H
-피란-4-일)에틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부탄산,
하이드로클로라이드
- 부분입체 이성질체 2
(2S,3R)-터트-부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(1-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)에틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트(182b)(12.5 mg, 0.023 mmol)를 2M 수성 HCl(2 mL, 4.00 mmol)에 용해시켰다. 반응 혼합물을 4일 동안 40℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 진공하에서 증발시켜, 백색 고체로서 표제 화합물을 생성시켰다. 반응의 전체 수율은 80%였다. LCMS (시스템 C): tRET = 0.40 min, MH+ = 483.
실시예
95: (
2
S
,3
R
)-
사이클로펜틸
2-(((1-에틸-2-(5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1
H
-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트
DCM(5 mL) 중 1-에틸-2-(5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드(제조를 위해 중간체 198 참조, 134 mg, 0.476 mmol)의 혼합물에 (2S,3R)-사이클로펜틸 2-아미노-3-하이드록시부타노에이트 4-메틸벤젠설포네이트(제조를 위해 중간체 31 참조, N27467-41-1, 342 mg, 0.953 mmol) 및 트리에틸아민(0.166 mL, 1.191 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 15분 동안 실온에서 교반하였다. 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(202 mg, 0.953 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 2.5시간 동안 실온에서 교반하였다. 포화 소듐 바이카르보네이트 용액(10 mL)을 첨가하고, 유기층을 분리시켰다. 수성층을 추가 디클로로메탄(10 mL)으로 추출하고, 유기층을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 질소 스트림 하에서 취입시켰다. 샘플을 DMSO(2 x 1 mL)에 용해시키고, MDAP(방법 B)로 2회 정제하였다. 용매를 질소 스트림 하에서 취입시켜, 회백색 고체로서 표제 화합물(126 mg)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.89 min; MH+ 453
하기 실시예를 실시예 95와 유사한 방식으로 제조하였다:
실시예
108a 및
실시예
108b: (
2
S
,3
R
)-이소프로필 3-하이드록시-2-(((2-(5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((-테트라하이드로-2
H
-피란-3-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)부타노에이트 (이성질체 1) 및 (
2
S
,3
R
)-이소프로필 3-하이드록시-2-(((2-(5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((-테트라하이드로-2
H
-피란-3-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)부타노에이트 (이성질체 2)
라세미체 (2S,3R)-이소프로필 3-하이드록시-2-(((2-(5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((-테트라하이드로-2H-피란-3-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)부타노에이트(제조를 위해 실시예 108 참조, 120 mg)를 키랄 HPLC로 분리시켰다. HPLC 정제를 Chiralcel OD-H 컬럼(Lot. No. ODH11158-01, 250 x 30 mm) 상에서 수행하였다. 정제를 30 mL/min의 유량으로 헵탄 중 30% EtOH를 이용하여 수행하였다. UV 검출을 215 nm에서 수행하였다. 첫번째 용리 거울상 이성질체를 수거하고, 분획을 감압하에서 증발시켜, 표제 화합물 "이성질체 1", 실시예 108a(41 mg)를 생성시켰다. 두번째 용리 거울상 이성질체를 수거하고, 분획을 감압하에서 증발시켜, 표제 화합물 "이성질체 2", 실시예 108b(38 mg)를 생성시켰다. 이성질체 1: LCMS (시스템 J): tRET = 0.85 min; MH+ 497. 이성질체 2: LCMS (시스템 J): tRET = 0.85 min; MH+ 497.
실시예
130a: (
2
S
,3
R
)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(1-메톡시부탄-2-일)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 (표시된 중심에서 공지되지 않은 입체형태의 단일
부분입
체 이성질체, 이성질체 1)
실시예
130b: (
2
S
,3
R
)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(1-메톡시부탄-2-일)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 (표시된 중심에서 공지되지 않은 입체형태의 단일
부분입
체 이성질체, 이성질체 2)
(rac)-(2S,3R)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(1-메톡시부탄-2-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트(제조를 위해 실시예 130 참조, 290mg)의 샘플을 30 mL/min의 유량으로 60% EtOH/헵탄으로 용리되는 30mm x 25cm Chiralcel OD-H 컬럼을 이용한 키랄 크로마토그래피로 분리시켰다. 각각의 이성질체에 대한 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 표제 화합물을 생성시켰다.
실시예
130a: 이성질체 1(107mg)
LCMS (시스템 I): tRET = 0.59 min; MH+ 499. 키랄 분석을 1 mL/min의 유량으로 60% EtOH/헵탄으로 용리되는 4.6mmid x 25cm Chiralcel OD-H 컬럼 상에서 수행하였다, 키랄 순도 >99.5%.
실시예
130b: 이성질체 2(96mg)
LCMS (시스템 I): tRET = 0.59 min; MH+ 499. 키랄 분석을 1 mL/min의 유량으로 60% EtOH/헵탄으로 용리되는 4.6mmid x 25cm Chiralcel OD-H 컬럼 상에서 수행하였다, 키랄 순도 = 98.5%.
실시예
131a: (
2
S
,3
R
)-
사이클로부틸
2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(1-메톡시부탄-2-일)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 (표시된 중심에서 공지되지 않은 입체형태의 단일 부분입체 이성질체, 이성질체 1)
실시예
131b: (
2
S
,3
R
)-
사이클로부틸
2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(1-메톡시부탄-2-일)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 (표시된 중심에서 공지되지 않은 입체형태의 단일 부분입체 이성질체, 이성질체 2)
(rac)-(2S,3R)-사이클로부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(1-메톡시부탄-2-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트(제조를 위해 실시예 131 참조, 300mg)의 샘플을 30 mL/min의 유량으로 10% EtOH/헵탄으로 용리되는 30mm x 25cm Chiralcel OD-H 컬럼을 이용한 키랄 크로마토그래피로 분리시켰다. 각각의 이성질체에 대한 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 표제 화합물을 생성시켰다.
실시예
131a: 이성질체 1(58mg)
LCMS (시스템 I): tRET = 0.61 min; MH+ 511. 키랄 분석을 1 mL/min의 유량으로 10% EtOH/헵탄으로 용리되는 4.6mmid x 25cm Chiralcel OD-H 컬럼 상에서 수행하였다, 키랄 순도 = 97.3%%.
실시예
131b: 이성질체 2(92mg)
LCMS (시스템 I): tRET = 0.61 min; MH+ 511. 키랄 분석을 1 mL/min의 유량으로 10% EtOH/헵탄으로 용리되는 4.6mmid x 25cm Chiralcel OD-H 컬럼 상에서 수행하였다, 키랄 순도 >99.5%.
실시예
132a: (
2
S
,3
R
)-
터트
-부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(1-메톡시부탄-2-일)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 (표시된 중심에서 공지되지 않은 입체형태의 단일 부분입체 이성질체, 이성질체 1)
실시예
132b: (
2
S
,3
R
)-
터트
-부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(1-메톡시부탄-2-일)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 (표시된 중심에서 공지되지 않은 입체형태의 단일 부분입체 이성질체, 이성질체 2)
(rac)-(2S,3R)-터트-부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(1-메톡시부탄-2-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트(제조를 위해 실시예 132 참조, 50mg)의 샘플을 30 mL/min의 유량으로 70% EtOH/헵탄으로 용리되는 30mm x 25cm Chiralcel OD-H 컬럼을 이용한 키랄 크로마토그래피로 분리시켰다. 각각의 이성질체에 대한 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 표제 화합물을 생성시켰다.
실시예
132a: 이성질체 1(18mg)
LCMS (시스템 I): tRET = 0.62 min; MH+ 513. 키랄 분석을 1 mL/min의 유량으로 70% EtOH/헵탄으로 용리되는 4.6mmid x 25cm Chiralcel OD-H 컬럼 상에서 수행하였다, 키랄 순도 = 97.3%.
실시예
132b: 이성질체 2(14mg)
LCMS (시스템 I): tRET = 0.62 min; MH+ 513. 키랄 분석을 1 mL/min의 유량으로 10% EtOH/헵탄으로 용리되는 4.6mmid x 25cm Chiralcel OD-H 컬럼 상에서 수행하였다, 키랄 순도 >99.5%.
실시예
133a: (
2
S
,3
R
)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로푸란-3-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-6-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 (표시된 중심에서 공지되지 않은 입체형태의 단일 부분입체 이성질체, 이성질체 1)
실시예
133b: (
2
S
,3
R
)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로푸란-3-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-6-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 (표시된 중심에서 공지되지 않은 입체형태의 단일 부분입체 이성질체, 이성질체 2)
(rac)-(2S,3R)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로푸란-3-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-6-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트(제조를 위해 실시예 133 참조, 285mg)의 샘플을 25 mL/min의 유량으로 50% EtOH/헵탄으로 용리되는 30mm x 25cm Chiralcel OD-H 컬럼을 이용한 키랄 크로마토그래피로 분리시켰다. 각각의 이성질체에 대한 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 표제 화합물을 생성시켰다.
실시예
133a: 이성질체 1(159mg)
LCMS (시스템 J): tRET = 0.84 min; MH+ 497. 키랄 분석을 1 mL/min의 유량으로 70% EtOH/헵탄으로 용리되는 4.6mmid x 25cm Chiralcel OD-H 컬럼 상에서 수행하였다, 키랄 순도 >99.5%.
실시예
133b: 이성질체 2(145mg)
LCMS (시스템 J): tRET = 0.84 min; MH+ 497. 키랄 분석을 1 mL/min의 유량으로 70% EtOH/헵탄으로 용리되는 4.6mmid x 25cm Chiralcel OD-H 컬럼 상에서 수행하였다, 키랄 순도 = 99.2%.
실시예
134a: (
2
S
,3
R
)-
터트
-부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로푸란-3-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-6-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 (표시된 중심에서 공지되지 않은 입체형태의 단일 부분입체 이성질체, 이성질체 1)
실시예
134b: (
2
S
,3
R
)-
터트
-부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로푸란-3-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-6-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 (표시된 중심에서 공지되지 않은 입체형태의 단일 부분입체 이성질체, 이성질체 2)
(rac)-(2S,3R)-터트-부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로푸란-3-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-6-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트(제조를 위해 실시예 134 참조, 200mg)의 샘플을 25 mL/min의 유량으로 50% EtOH/헵탄으로 용리되는 30mm x 25cm Chiralcel OD-H 컬럼을 이용한 키랄 크로마토그래피로 분리시켰다. 각각의 이성질체에 대한 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 표제 화합물을 생성시켰다.
실시예
134a: 이성질체 1(100mg)
LCMS (시스템 J): tRET = 0.84 min; MH+ 511. 키랄 분석을 1 mL/min의 유량으로 70% EtOH/헵탄으로 용리되는 4.6mmid x 25cm Chiralcel OD-H 컬럼 상에서 수행하였다, 키랄 순도 >99.5%.
실시예
134b: 이성질체 2(85mg)
LCMS (시스템 J): tRET = 0.91 min; MH+ 511. 키랄 분석을 1 mL/min의 유량으로 70% EtOH/헵탄으로 용리되는 4.6mmid x 25cm Chiralcel OD-H 컬럼 상에서 수행하였다, 키랄 순도 = 99.5%.
실시예
139a 및 139b: (
S
)-(
S
)-
테트라하이드로푸란
-3-일 4-메틸-2-(((2-(5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2
H
-피란-4-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)펜타노에이트 및 (
S
)-(
R
)-
테트라하이드로푸
란-3-일 4-
메틸
-2-(((2-(5-
메틸
-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-((
테트라하이드로
-2
H
-피란-4-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)펜타노에이트
실시예 139(85mg)를 에탄올/헵탄(1:1, 1mL)에 용해시키고, 키랄 크로마토그래피(정지상: Chiralpak IA, 이동상: 헵탄/에탄올)(N28112-60)로 정제하였다. 순수한 이성질체 1(실시예 139a)을 함유하는 조합된 분획을 진공하에서 농축시켜, 무색 고체로서 순수한 이성질체 1(25mg)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.92 min, MH+ = 537. 순수한 이성질체 2(실시예 139b)를 함유하는 조합된 분획을 진공하에서 농축시켜, 무색 고체로서 순수한 이성질체 2(45mg)를 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.93 min, MH+ = 537.
실시예
162a 및 162b: (
2S,3R
)-이소부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(((R)-4-메틸모르폴린-2-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 및 (
2S,3R
)-이소부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(((S)-4-메틸모르폴린-2-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트
실시예 162(26mg)를 에탄올(1mL)에 용해시키고, 키랄 크로마토그래피(정지상: Chiralcel OD-H, 이동상: 60% 헵탄/40% 에탄올)(N31661-32)로 정제하였다. 순수한 이성질체 1을 함유하는 조합된 분획을 진공하에서 농축시켜, 무색 고체로서 순수한 이성질체 1(실시예 162a)(11mg)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.88 min, MH+ = 540. 순수한 이성질체 2를 함유하는 조합된 분획을 진공하에서 농축시켜, 무색 고체로서 순수한 이성질체 2(실시예 162b)(11mg)를 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.87 min, MH+ = 540.
실시예
174a: (
2
S
,3
R
)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2
H
-피란-2-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-6-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 - 부분입체 이성질체 1 및
실시예
174b: (2
S
,3
R
)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2
H
-피란-2-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-6-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 - 부분입체 이성질체 2
실시예 174(203 mg)를 EtOH(2 mL)에 용해시키고, 키랄 크로마토그래피(정지상 Chiralpak AD-H, 이동상 40% EtOH/헵탄)로 정제하였다. 조합된 분획을 진공하에서 증발시켜, 무색 고체로서 순수한 부분입체 이성질체 1(실시예 174a)(81 mg)을 생성시켰다. HPLC-UV: RT 약 8.2분, 215 nm에서의 영역 HPLC에 의해 > 99.5% 이성질체 순도. LCMS (시스템 I): tRET = 0.57 min, MH+ = 511. 조합된 분획을 진공하에서 증발시켜, 무색 고체로서 순수한 부분입체 이성질체 2(실시예 174b)(99 mg)를 생성시켰다. HPLC-UV: RT 약 15.0분, 215 nm에서의 영역 HPLC에 의해 99.3% 이성질체 순도. LCMS (시스템 I): tRET = 0.58 min, MH+ = 511.
실시예
175: (
2
S
,3
R
)-이소부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2
H
-피란-2-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-6-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 - 부분입체 이성질체 2 및
실시예
175: (2
S
,3
R
)-이소부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2
H
-피란-2-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-6-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 - 부분입체 이성질체 1
실시예 175(220 mg)를 EtOH(2 mL)에 용해시키고, 키랄 크로마토그래피(정지상: Chiralpak AD-H, 이동상: 40% EtOH/헵탄)로 정제하였다. 순수한 부분입체 이성질체 1을 함유하는 조합된 분획을 진공하에서 농축시켜, 무색 고체로서 순수한 부분입체 이성질체 1(실시예 175a)(91 mg)을 생성시켰다. HPLC-UV: RT 약 8.3분, 215 nm에서의 영역 HPLC에 의해 > 95% 이성질체 순도. LCMS (시스템 I): tRET = 0.63 min, MH+ = 525. 순수한 부분입체 이성질체 2를 함유하는 조합된 분획을 진공하에서 농축시켜, 무색 고체로서 순수한 부분입체 이성질체 2(실시예 175b)(89 mg)를 생성시켰다. HPLC-UV: RT 약 12.4분, 215 nm에서의 영역 HPLC에 의해 > 95% 이성질체 순도. LCMS (시스템 I): tRET = 0.63 min, MH+ = 525.
실시예
178a: (
2
S
,3
R
)-
터트
-부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2
H
-피란-2-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-6-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 - 부분입체 이성질체 1 및
실시예
178b: (2
S
,3
R
)-터트-부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2
H
-피란-2-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-6-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 - 부분입체 이성질체 2
실시예 178(100 mg)을 EtOH(2 mL)에 용해시키고, 키랄 크로마토그래피(정지상: Chiralpak AD-H, 이동상: 40% EtOH/헵탄)로 정제하였다. 순수한 부분입체 이성질체 1을 함유하는 조합된 분획을 진공하에서 농축시켜, 무색 고체로서 순수한 부분입체 이성질체 1(50 mg)을 생성시켰다. HPLC-UV: RT 약 8.1분, 215 nm에서의 영역 HPLC에 의해 > 99.5% 이성질체 순도. LCMS (시스템 I): tRET = 0.61 min, MH+ = 525. 순수한 부분입체 이성질체 2를 함유하는 조합된 분획을 진공하에서 농축시켜, 무색 고체로서 순수한 부분입체 이성질체 2(41 mg)를 생성시켰다. HPLC-UV: RT 약 17.7분, 215 nm에서의 영역 HPLC에 의해 약 > 99.5% 이성질체 순도. LCMS (시스템 I): tRET = 0.61 min, MH+ = 525.
실시예
180a: (
2
S
,3
R
)-(
S
)-
테트라하이드로푸란
-3-일 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2
H
-피란-2-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-6-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 - 부분입체 이성질체 1 및
실시예
180b: (
2
S
,3
R
)-(
S
)-
테트라하이드로푸란
-3-일 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2
H
-피란-2-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-6-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 - 부분입체 이성질체 2
실시예 180(140 mg)을 EtOH(2 mL)에 용해시키고, 키랄 크로마토그래피(정지상: Chiralcel OD-H, 이동상: 30% EtOH/헵탄)로 정제하였다. 순수한 부분입체 이성질체 1(실시예 180a)을 함유하는 조합된 분획을 진공하에서 농축시켜, 무색 고체로서 순수한 부분입체 이성질체 1(64 mg)을 생성시켰다. HPLC-UV: RT 약 6.2분, 215 nm에서의 영역 HPLC에 의해 > 99.5% 이성질체 순도. LCMS (시스템 I): tRET = 0.52 min, MH+ = 539. 순수한 부분입체 이성질체 2(실시예 180b)을 함유하는 조합된 분획을 진공하에서 농축시켜, 무색 고체로서 순수한 부분입체 이성질체 2(64 mg)를 생성시켰다. HPLC-UV: RT 약 9.8분, 215 nm에서의 영역 HPLC에 의해 약 > 99.5% 이성질체 순도. LCMS (시스템 I): tRET = 0.52 min, MH+ = 539.
실시예
181a: (
2
S
,3
R
)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(1-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)에틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 - 부분입체 이성질체 1 및
실시예
181b: (
2
S
,3
R
)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(1-(테트라하이드로-2
H
-피란-4-일)에틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 - 부분입체 이성질체 2
실시예 181(107 mg)을 EtOH(2 mL)에 용해시키고, 키랄 크로마토그래피(정지상: Chiralpak AD-H, 이동상: EtOH)로 정제하였다. 순수한 이성질체 1을 함유하는 조합된 분획을 진공하에서 농축시켜, 무색 고체로서 순수한 이성질체 1(48 mg)을 생성시켰다. HPLC-UV: RT 약 8.4분, 215 nm에서의 영역 HPLC에 의해 > 99.5% 이성질체 순도. LCMS (시스템 J): tRET = 0.55 min, MH+ = 525. 순수한 이성질체 2를 함유하는 조합된 분획을 진공하에서 농축시켜, 무색 고체로서 순수한 이성질체 2(36 mg)를 생성시켰다. HPLC-UV: RT 약 11.4분, 215 nm에서의 영역 HPLC에 의해 약 99.1% 이성질체 순도. LCMS (시스템 J): tRET = 0.56 min, MH+ = 525.
실시예
182a: (
2
S
,3
R
)-
터트
-부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(1-(테트라하이드로-2
H
-피란-4-일)에틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 - 부분입체 이성질체 1 및
실시예
182b: (2
S
,3
R
)-터트-부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(1-(테트라하이드로-2
H
-피란-4-일)에틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 - 부분입체 이성질체 2
실시예 182(약 56 mg)를 EtOH(2 mL)에 용해시키고, 키랄 크로마토그래피(정지상: Chiralpak IC, 이동상: EtOH)로 정제하였다. 순수한 이성질체 1을 함유하는 조합된 분획을 진공하에서 농축시켜, 무색 고체로서 순수한 이성질체 1(27 mg)을 생성시켰다. HPLC-UV: RT 약 19.5분, 215 nm에서의 영역 HPLC에 의해 > 99.5% 이성질체 순도. LCMS (시스템 J): tRET = 0.59 min, MH+ = 539. 순수한 이성질체 2를 함유하는 조합된 분획을 진공하에서 농축시켜, 무색 고체로서 순수한 이성질체 2(29 mg)를 생성시켰다. HPLC-UV: RT 약 25.5분, 215 nm에서의 영역 HPLC에 의해 > 99.5% 이성질체 순도. LCMS (시스템 J): tRET = 0.56 min, MH+ = 539.
실시예
213a (
2
S
,3
R
)-이소부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(((
R
)-테트라하이드로-2
H
-피란-3-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 및 213b: (
2
S
,3
R
)-이소부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(((
S
)-테트라하이드로-2
H
-피란-3-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트
(2S,3R)-이소부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-3-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트(제조를 위해 실시예 213 참조, 125mg)의 샘플을 Chiralpak IA (250 x 430mm, 5 마이크론) 컬럼, 유량: 40mL/min, 검출: UV DAD (250nm (주파수폭 80nm, 참조 375nm (주파수폭 50nm))에서의 키랄 크로마토그래피로 정제하였다. 0.2% v/v 이소프로필아민을 함유하는 아세토니트릴 및 0.2% v/v 이소프로필아민을 함유하는 프로판-2-올의 50:50 혼합물로 용리시켰다. 적절한 분획을 조합하고, 질소 스트림 하에서 증발시켜, 표제 화합물을 생성시켰다.
이성질체 1,
실시예
213a: (52mg)
키랄 분석을 Chiralpak IA (250 x 4.6mm, 5 마이크론) 컬럼, 유량: 1mL/min, 검출: UV DAD (250nm (주파수폭 40nm, 참조 375nm (주파수폭 50nm))에서 수행하였다. 0.2% v/v 이소프로필아민을 함유하는 아세토니트릴 및 0.2% v/v 이소프로필아민을 함유하는 프로판-2-올의 50:50 혼합물로 용리시켰다. 키랄 순도는 >99.5%였다. LCMS (시스템 J): tRET = 0.99 min; MH+ 525
이성질체 2,
실시예
213b: (53mg)
키랄 분석을 Chiralpak IA (250 x 4.6mm, 5 마이크론) 컬럼, 유량: 1mL/min, 검출: UV DAD (250nm (주파수폭 40nm, 참조 375nm (주파수폭 50nm))에서 수행하였다. 0.2% v/v 이소프로필아민을 함유하는 아세토니트릴 및 0.2% v/v 이소프로필아민을 함유하는 프로판-2-올의 50:50 혼합물로 용리시켰다. 키랄 순도는 99.7%였다. LCMS (시스템 J): tRET = 0.99 min; MH+ 525.
실시예
225a 및
실시예
225b: (
2
S
,3
R
)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(((
R
)-테트라하이드로-2H-피란-3-일)메틸)-1H-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 "R-부분입체 이성질체" 및 (
2
S
,3
R
)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(((
S
)-테트라하이드로-2H-피란-3-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 "S-부분입체 이성질체"
라세미체 (2R,3S)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-3-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트(제조를 위해 실시예 225 참조, 2.1 g)를 키랄 HPLC로 분리시켰다. HPLC 정제를 Chiralpak ID 컬럼(Lot. No. ID12179-01, 250 x 30 mm)에서 수행하였다. 정제를 30 mL/min의 유량으로 0.2% IPA가 첨가된 사이클로헥산 중 80% EtOH를 이용하여 수행하였다. UV 검출을 215 nm에서 수행하였다. 첫번째 용리 거울상 이성질체를 수거하고, 분획을 감압하에서 증발시켜, 표제 화합물 "R-부분입체 이성질체" 실시예 225a(858 mg)를 생성시켰다. 두번째 용리 거울상 이성질체를 수거하고, 분획을 감압하에서 증발시켜, 표제 화합물 "S-부분입체 이성질 체", 실시예 225b(836 mg)를 생성시켰다. 부분입체 이성질체 1: LCMS (시스템 J): tRET = 0.91 min; MH+ 511. 부분입체 이성질체 2: LCMS (시스템 J): tRET = 0.90 min; MH+ 511.
실시예
228a 및
실시예
228b: (
2
S
,3
R
)-
사이클로부틸
2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로푸란-3-일)메틸)-1H-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 부분입체 이성질체 1 및 (2
S
,3
R
)-사이클로부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로푸란-3-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 부분입체 이성질체 2
라세미체 (2S,3R)-사이클로부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로푸란-3-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트(제조를 위해 실시예 228 참조, 250 mg)를 키랄 HPLC로 분리시켰다. HPLC 정제를 Chiralpak AD-H 컬럼(Lot. No. ADH12143-01, 250 x 30 mm)에서 수행하였다. 정제를 25 mL/min의 유량으로 100% EtOH를 이용하여 수행하였다. UV 검출을 215 nm에서 수행하였다. 첫번째 용리 거울상 이성질체를 수거하고, 분획을 감압하에서 증발시켰다. 샘플을 MDAP(방법 B)로 정제하였다. 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시키고, 밤새 진공 오븐에서 건조시켜, 표제 화합물 "부분입체 이성질체 1"(98 mg)을 생성시켰다. 두번째 용리 거울상 이성질체를 수거하고, 분획을 감압하에서 증발시켜, 표제 화합물 "부분입체 이성질체 2"(90 mg)를 생성시켰다. 부분입체 이성질체 1: LCMS (시스템 J): tRET = 0.52 min; MH+ 509. 부분입체 이성질체 2: LCMS (시스템 J): tRET = 0.52 min; MH+ 509.
실시예
229a 및
실시예
229b: (
2
S
,3
R
)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로푸란-3-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 부분입체 이성질체 1 및 (2
S
,3
R
)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로푸란-3-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 부분입체 이성질체 2
라세미체 (2S,3R)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로푸란-3-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트(제조를 위해 실시예 229 참조, 200 mg)를 키랄 HPLC로 분리시켰다. HPLC 정제를 Chiralpak AD-H 컬럼(Lot. No. ADH12143-01, 250 x 30 mm)에서 수행하였다. 정제를 25 mL/min의 유량으로 100% EtOH를 이용하여 수행하였다. UV 검출을 215 nm에서 수행하였다. 첫번째 용리 거울상 이성질체를 수거하고, 분획을 감압하에서 증발시켜, 표제 화합물 "부분입체 이성질체 1", 실시예 229a(21 mg)를 생성시켰다. 두번째 용리 거울상 이성질체를 수거하고, 분획을 감압하에서 증발시켜, 표제 화합물 "부분입체 이성질체 2", 실시예 229b(20 mg)를 생성시켰다. 부분입체 이성질체 1: LCMS (시스템 J): tRET = 0.86 min; MH+ 497. 부분입체 이성질체 2: LCMS (시스템 J): tRET = 0.86 min; MH+ 497.
실시예
232a 및
실시예
232b: (
2
S
,3
R
)-
터트
-부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로푸란-3-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 부분입체 이성질체 1 및 (2
S
,3
R
)-
터트
-부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로푸란-3-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 부분입체 이성질체 2
라세미체 (2S,3R)-터트-부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로푸란-3-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트(제조를 위해 실시예 232 참조 232, 80 mg)를 키랄 HPLC로 분리시켰다. HPLC 정제를 Chiralpak AD-H 컬럼(Lot. No. ADH12143-01, 250 x 30 mm)에서 수행하였다. 정제를 25 mL/min의 유량으로 100% EtOH를 이용하여 수행하였다. UV 검출을 215 nm에서 수행하였다. 첫번째 용리 거울상 이성질체를 수거하고, 분획을 감압하에서 증발시켜, 표제 화합물 "부분입체 이성질체 1", 실시예 232a(21 mg)를 생성시켰다. 두번째 용리 거울상 이성질체를 수거하고, 분획을 감압하에서 증발시켜, 표제 화합물 "부분입체 이성질체 2", 실시예 232b(20 mg)를 생성시켰다. 부분입체 이성질체 1: LCMS (시스템 J): tRET = 0.92 min; MH+ 511. 부분입체 이성질체 2: LCMS (시스템 J): tRET = 0.92 min; MH+ 511.
실시예
248a: (
2
S
,3
R
)-이소부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1((테트라하이드로-2
H
-피란-2-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 (거울상 이성질체 1) 및
실시예
248b: (2
S
,3
R
)-이소부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1((테트라하이드로-2
H
-피란-2-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 (거울상 이성질체 2)
거울상 이성질체를 실시예 248의 키랄 분리로 획득하였다.
분석 방법: 약 0.5mg을 50% EtOH/헵탄(1mL)에 용해시키고, 20uL를 컬럼에 주입하였다. 40% EtOH/헵탄, f=1.0mL/min, 파장 215nm,4. Ref 550,100, 컬럼 4.6mmid x 25cm Chiralcel OD-H, Lot No.ODH0CE-PD027
제조 방법: 약 110mg을 1.5mL의 EtOH에 용해시켰다. 주입; 1.5mL의 용액을 컬럼에 주입하였다. 40% EtOH/헵탄, f=30mL/min, 파장 215nm,4. Ref 550,100, 컬럼 30mm x 25cm Chiralcel OD-H, Lot No.ODH11158-01
거울상 이성질체 1 Rt = 5.0 min. UV에 의해 >99% ee.
거울상 이성질체 2 Rt = 12.0 min. UV에 의해 >99% ee.
실시예
266a: (
2
S
,3
R
)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2
H
-피란-2-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 (거울상 이성질체 1) 및
실시예
266b: (2
S
,3
R
)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2
H
-피란-2-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 (거울상 이성질체 2)
거울상 이성질체를 실시예 266의 키랄 분리에 의해 획득하였다.
양: 약 70mg.
분석 방법: 약 0.5mg을 50% EtOH/헵탄(1mL)에 용해시키고, 20ul를 컬럼에 주입하였다. 30% EtOH/헵탄, f=1.0mL/min, 파장 215nm,4. Ref 550,100, 컬럼 4.6mmid x 25cm Chiralcel OD-H, Lot No.ODH0CE-PD027
제조 방법: 약 70mg을 1mL EtOH에 용해시켰다. 주입; 1mL의 용액을 컬럼에 주입하였다. 30% EtOH/헵탄, f=30mL/min, 파장, 215nm,4. Ref 550,100, 컬럼 30mm x 25cm Chiralcel OD-H, Lot No ODH11158-01
거울상 이성질체 1 Rt = 6.0 min. UV에 의해 >99% ee.
거울상 이성질체 2 Rt = 11.5 min. UV에 의해 >99% ee.
실시예
267a: (
2
S
,3
R
)-이소프로필 3-하이드록시-2-(((2-(5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2
H
-피란-2-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)부타노에이트 (거울상 이성질체 1) 및
실시예
267b: (
2
S
,3
R
)-이소프로필 3-하이드록시-2-(((2-(5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2
H
-피란-2-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)부타노에이트 (거울상 이성질체 2)
거울상 이성질체를 실시예 267의 키랄 분리로 획득하였다.
양: 약 120mg.
분석 방법: 약 0.5mg을 50% EtOH/헵탄(1mL)에 용해시키고, 20ul를 컬럼에 주입하였다. 20% EtOH/헵탄, f=1.0mL/min, 파장 215nm,4. Ref 550,100, 컬럼 4.6mmid x 25cm Chiralcel OD-H, Lot No.ODH0CE-PD027
제조 방법: 약 120mg을 1mL EtOH에 용해시켰다. 주입; 1mL의 용액을 컬럼에 주입하였다. 20% EtOH/헵탄, f=30mL/min, 파장, 215nm,4. Ref 550,100, 컬럼 30mm x 25cm Chiralcel OD-H, Lot No ODH11158-01
거울상 이성질체 1 Rt = 8.5 min. UV에 의해 >99% ee.
거울상 이성질체 2 Rt = 12.2 min. UV에 의해 >99% ee.
실시예
270a: (
2
S
,3
R
)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(2-메톡시프로필)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 (거울상 이성질체 1) 및
실시예
270b: (
2
S
,3
R
)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(2-메톡시프로필)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 (거울상 이성질체 2)
거울상 이성질체를 실시예 270의 키랄 분리로 획득하였다.
양: 약 150mg.
분석 방법: 약 0.5mg을 50% EtOH/헵탄(1mL)에 용해시키고, 20ul를 컬럼에 주입하였다. 30% EtOH/헵탄, f=1.0mL/min, 파장 215nm,4. Ref 550,100, 컬럼 4.6mmid x 25cm Chiralcel OD-H, Lot No.ODH0CE-PD027
제조 방법: 약 150mg을 2mL EtOH에 용해시켰다. 주입; 1mL의 용액을 컬럼에 주입하였다. 30% EtOH/헵탄, f=30mL/min,파장, 215nm,4. Ref 550,100, 컬럼 30mm x 25cm Chiralcel OD-H, Lot No ODH11158-01.
거울상 이성질체 1 Rt = 6.0 min. UV에 의해 >99% ee.
거울상 이성질체 2 Rt = 11.5 min. UV에 의해 >99% ee.
실시예
271a: (
2
S
,3
R
)-네오펜틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(2-메톡시프로필)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 (표시된 중심에서 공지되지 않은 입체형태의 단일 부분입체 이성질체, 이성질체 1) 및
실시예
271b: (
2
S
,3
R
)-네오펜틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(2-메톡시프로필)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 (표시된 중심에서 공지되지 않은 입체형태의 단일 부분입체 이성질체, 이성질체 2)
(rac)-(2S,3R)-네오펜틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(2-메톡시프로필)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트(제조를 위해 실시예 271 참조, 280mg)의 샘플을 30 mL/min의 유량으로 50% EtOH/헵탄으로 용리되는 30mm x 25cm Chiralcel OD-H 컬럼을 이용한 키랄 컬럼 크로마토그래피로 분리시켰다. 각각의 이성질체 대한 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 표제 화합물을 생성시켰다.
실시예
271a: 이성질체 1(140mg)
LCMS (시스템 I): tRET = 0.66 min; MH+ 513
키랄 분석을 1 mL/min의 유량으로 50% EtOH/헵탄으로 용리되는 4.6mmid x 25cm Chiralcel OD-H 컬럼 상에서 수행하였다, 키랄 순도 >99.5%
실시예
271b: 이성질체 2(140mg)
LCMS (시스템 I): tRET = 0.65 min; MH+ 513
키랄 분석을 1 mL/min의 유량으로 50% EtOH/헵탄으로 용리되는 4.6mmid x 25cm Chiralcel OD-H 컬럼 상에서 수행하였다, 키랄 순도 >99.5%
실시예
272a: (
2
S
,3
R
)-
터트
-부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(2-메톡시프로필)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 (표시된 중심에서 공지되지 않은 입체형태의 단일 부분입체 이성질체, 이성질체 1) 및
실시예
272b: (
2
S
,3
R
)-
터트
-부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(2-메톡시프로필)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 (표시된 중심에서 공지되지 않은 입체형태의 단일 부분입체 이성질체, 이성질체 2)
(rac)-(2S,3R)-터트-부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(2-메톡시프로필)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트(제조를 위해 실시예 272 참조, 300mg)의 샘플을 30 mL/min의 유량으로 30% EtOH/헵탄으로 용리되는 30mm x 25cm Chiralcel OD-H 컬럼을 이용한 키랄 크로마토그래피로 분리시켰다. 각각의 이성질체 대한 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 표제 화합물을 생성시켰다.
실시예
272a: 이성질체 1(120mg)
LCMS (시스템 I): tRET = 0.58 min; MH+ 499
키랄 분석을 1 mL/min의 유량으로 40% EtOH/헵탄으로 용리되는 4.6mmid x 25cm Chiralcel OD-H 컬럼 상에서 수행하였다, 키랄 순도 >99.5%
실시예
272b: 이성질체 2(120mg)
LCMS (시스템 I): tRET = 0.57 min; MH+ 499
키랄 분석을 1 mL/min의 유량으로 40% EtOH/헵탄으로 용리되는 4.6mmid x 25cm Chiralcel OD-H 컬럼 상에서 수행하였다, 키랄 순도 >99.5%
실시예
273a: (
2
S
,3
R
)-
사이클로부틸
2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(2-메톡시프로필)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 (표시된 중심에서 공지되지 않은 입체형태의 단일 부분입체 이성질체, 이성질체 1) 및
실시예
273b: (
2
S
,3
R
)-
사이클로부틸
2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(2-메톡시프로필)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트 (표시된 중심에서 공지되지 않은 입체형태의 단일 부분입체 이성질체, 이성질체 2)
(rac)-(2S,3R)-사이클로부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(2-메톡시프로필)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트(제조를 위해 실시예 273 참조, 290mg)의 샘플을 30 mL/min의 유량으로 40% EtOH/헵탄으로 용리되는 30mm x 25cm Chiralcel OD-H 컬럼을 이용한 키랄 크로마토그래피로 분리시켰다. 각각의 이성질체 대한 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켜, 표제 화합물을 생성시켰다.
실시예
273a: 이성질체 1(120mg)
LCMS (시스템 I): tRET = 0.56 min; MH+ 497
키랄 분석을 1 mL/min의 유량으로 40% EtOH/헵탄으로 용리되는 4.6mmid x 25cm Chiralcel OD-H 컬럼 상에서 수행하였다, 키랄 순도 >99.5%
실시예
273b: 이성질체 2(120mg)
LCMS (시스템 I): tRET = 0.57 min; MH+ 497
키랄 분석을 1 mL/min의 유량으로 40% EtOH/헵탄으로 용리되는 4.6mmid x 25cm Chiralcel OD-H 컬럼 상에서 수행하였다, 키랄 순도 >99.5%
실시예
277: (
S
)-
사이클로펜틸
2-((2-((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2
H
-피란-4-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-6-일)옥시)에틸)아미노)-3-메톡시프로파노에이트
하이드로클로라이드
디클로로메탄(5 mL) 중 2-((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-6-일)옥시)아세트알데하이드(중간체 239, 116 mg, 0.229 mmol), (S)-사이클로펜틸 2-아미노-3-메톡시프로파노에이트 하이드로클로라이드(중간체 196, 131 mg, 0.587 mmol) 및 트리에틸아민(89 mg, 123 μL, 0.88 mmol)의 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반하였다. 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(187 mg, 0.88 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 18시간 동안 실온에서 교반하였다. 포화 NaHCO3 용액(15 mL)을 첨가하고, 혼합물을 15분 동안 교반하였다. 유기상을 분리시키고, 수성상을 디클로로메탄(2x10 mL)으로 추출하였다. 조합된 유기물을 염수로 세척하고, 건조시키고, 증발시켰다. 잔여물을 MDAP(방법 B)로 정제하였다. 생성물을 에틸 아세테이트(5 mL)에 용해시키고, 디에틸 에테르 중 1.0M 염화수소(1.0 mL)를 처리하였다. 용매를 제거하여, 무색 고체로서 표제 화합물(53 mg, 0.088 mmol, 30.0% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.97 min; MH+ 567.
하기 실시예를 실시예 277과 유사한 방식으로 제조하였다:
실시예
288: (
2
S
,3
R
)-이소부틸 2-((2-((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2
H
-피란-4-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-6-일)옥시)에틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트,
하이드로클로라이드
단계 i)
디클로로메탄(5 mL) 중 2-((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-6-일)옥시)아세트알데하이드(중간체 239)(116 mg, 0.293 mmol), (2S,3R)-이소부틸 2-아미노-3-하이드록시부타노에이트 4-메틸벤젠설폰산 염(중간체 11)(204 mg, 0.587 mmol) 및 트리에틸아민(89 mg, 123 μL, 0.88 mmol)의 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반하였다. 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(187 mg, 0.88 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 18시간 동안 실온에서 교반하였다. 포화 NaHCO3 용액(15 mL)을 첨가하고, 혼합물을 15분 동안 교반하였다. 유기상을 분리시키고, 수성상을 디클로로메탄(2x10 mL)으로 추출하였다. 조합된 유기물을 염수로 세척하고, 건조시키고, 증발시켜, 단계 i) 생성물을 생성시켰다. 예측치와 관련된 LCMS 질량 이온 [M-2]이 관찰되었다. 에나민이 형성된 것을 암시한다.
단계 ii)
단계 i) 생성물을 이소프로판올(10 mL)에 용해시켰다. 용액을 암모늄 포르메이트(92 mg, 1.47 mmol) 및 10% 탄소 상 팔라듐, 50% 물 페이스트(23 mg, 20%wt)로 처리하였다. 반응 혼합물을 4시간 동안 환류시켰다. 냉각된 반응 혼합물을 '셀라이트'를 통해 여과시켰다. 용매를 여과액으로부터 증발시키고, 잔여물을 고 pH MDAP(방법 B)로 정제하였다. 충분히 순수하지 않았으며, 포름산 MDAP(방법 A)로 재정제하였다. 생성물을 에틸 아세테이트(5 mL)에 용해시키고, 디에틸 에테르 중 1.0M 염화수소(1 mL)를 처리하였다. 용매를 제거하여, 무색 고체로서 표제 화합물(2 mg, 3.38 μmol, 1.153% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.92 min; MH+ 555.
하기 실시예를 실시예 288과 유사한 방식으로 제조하였다:
실시예
290: (
2
S
,3
R
)-이소프로필 2-((2-(2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2
H
-피란-4-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)에틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트
1,3-디메틸-5-(5-(옥시란-2-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 266 참조, 0.1 g, 0.264 mmol)을 질소하에서 THF(3 mL)에 용해시켰다. 용액을 0℃로 냉각시키고, BF3.OEt2(0.017 mL, 0.132 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 0℃에서 교반한 후, (2S,3R)-이소프로필 2-아미노-3-하이드록시부타노에이트 하이드로클로라이드(중간체 31a, 0.057 g, 0.290 mmol), 트리에틸아민(0.110 mL, 0.791 mmol) 및 p-톨루엔설폰산 모노하이드레이트(0.050 g, 0.264 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 실온에서 질소하에서 교반하였다. 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(0.223 g, 1.054 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 질소하에서 교반하였다. 반응 혼합물을 소듐 바이카르보네이트의 포화 용액과 함께 10분 동안 교반한 후, 이를 에틸 아세테이트로 희석시켰다. 층을 분리시켰다. 수성상을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기물을 조합하고, 상 분리기 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 오일을 DCM 중 0-10% MeOH로 용리되는 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 분획을 농축 건조시켰다. 잔여물을 MDAP(방법 B)로 정제하였다. 용매를 진공하에서 증발시켜, 백색 고체로서 표제 화합물(40% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 J): tRET = 0.91 min; MH+ 525.
하기 실시예를 실시예 290과 유사한 방식으로 제조하였다:
실시예
292: (
2
S
,3
R
)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2
H
-피란-4-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트
하이드로클로라이드
(2S,3R)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트(실시예 303, 400 mg, 0.788 mmol)를 에틸 아세테이트(3 mL)에 용해시키고, 디에틸 에테르 중 1.0M 염화수소(1 mL)를 처리하였다. 디에틸 에테르(20 mL)를 첨가하고, 고체를 여과시키고, 디에틸 에테르로 세척하고, 건조시켜, 무색 고체로서 표제 화합물(409 mg, 0.748 mmol)을 생성시켰다. LCMS (시스템 I): tRET = 0.51 min; MH+ 511. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) · ppm 9.78 (br s, 2H), 8.44 (s, 1H), 8.02-8.10 (m, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.67 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.88-4.97 (m, 1H), 4.38-4.49 (m, 4H), 4.08-4.14 (m, 1H), 3.70-3.77 (m, 2H), 3.61-3.67 (m, 1H), 3.58 (s, 3H), 3.07-3.16 (m, 2H), 2.13 (s, 3H), 1.93-2.06 (m, 1H), 1.15-1.32 (m, 13H).
실시예
293: (2
S
,3
R
)-2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2
H
-피란-2-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부탄산,
하이드로클로라이드
(2S,3R)-2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부탄산(실시예 82, 8 mg, 0.017 mmol)을 디에틸 에테르 중 1M 염화수소(17 mL, 0.017 mmol)로 분쇄시키고, 5시간 동안 질소하에서 교반하였다. 이후, 용매를 진공하에서 제거하고, 획득된 백색 고체를 24시간 동안 40℃에서 진공 오븐에서 건조시켜, 표제 화합물(5.6 mg, 0.011 mmol, 64.9% 수율)을 생성시켰고, 이는 백색 고체로 나타났다. LCMS (시스템 I): tRET = 0.51 min; MH+ 469.
실시예
294: (
2
S
,3
R
)-
사이클로부틸
2-(((1-(((
S
)-1-아세틸피페리딘-3-일)메틸)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트
하이드로클로라이드
(2S,3R)-사이클로부틸 2-아미노-3-하이드록시부타노에이트, 4-메틸벤젠설폰산 염(제조를 위해 중간체 32 참조, 170 mg, 0.492 mmol)을 DCM(5 mL) 중 (S)-1-((1-아세틸피페리딘-3-일)메틸)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드(중간체 135)(100 mg, 0.246 mmol)의 용액에 첨가하고, 생성된 용액을 N2 하에서 밤새 교반하였다. 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(156 mg, 0.738 mmol)를 첨가하고, 생성된 현탁액을 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 MeOH로 가용화시키고, 10 g SCX 카트리지에 로딩하였다. 카트리지를 MeOH로 용리시킨 후, 2M 메탄올성 암모니아로 용리시켰다. 염기성 분획을 진공하에서 증발 건조시키고, 잔여물을 MDAP(HPH 방법 B)로 정제하였다. 생성물 함유 분획을 진공하에서 증발시키고, EtOH와 공비시켜, 무색 오일을 생성시켰다. 잔여물을 DCM(1 mL)에 용해시키고, 교반하면서 디에틸 에테르 중 1M HCl을 첨가하였다. 생성된 현탁액을 진공하에서 증발시켜, 백색 고체로서 표제 화합물을 생성시켰다. 반응의 전체 수율은 53%였다. LCMS (시스템 C): tRET = 0.52 min, MH+ = 564
하기 실시예를 실시예 294와 유사한 방식으로 제조하였다:
실시예
300: (
S
)-
사이클로펜틸
2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-메틸-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-메톡시프로파노에이트,
하이드로클로라이드
2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드(102 mg, 0.363 mmol, 중간체 273)를 DCM(5 mL)에 용해시키고, (S)-사이클로펜틸 2-아미노-3-메톡시프로파노에이트, 하이드로클로라이드(162 mg, 0.725 mmol, 중간체 196) 및 트리에틸아민(0.151 mL, 1.088 mmol)을 처리하였다. 교반된 용액에 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(384 mg, 1.813 mmol)를 첨가하였다. 이후, 반응물을 질소하에서 18시간 동안 교반하였다. 이후, 포화 소듐 바이카르보네이트(15 mL)를 혼합물에 첨가하고, 15분 동안 교반하였다. 이후, 층을 분리시키고, 수성층을 디클로로메탄(10 mL x 2)으로 2회 추출하고, 유기물을 조합하고, 소수성 프릿으로 건조시켰다. 이후, 용매를 진공하에서 제거하였다. 잔여물을 최소량의 디클로로메탄에 용해시키고, 10g 실리카 카트리지에 로딩하고, 다음과 같은 방법을 이용하여 용리시켰다: 2 컬럼 부피에 대해 0% 에틸 아세테이트, 10 컬럼 부피에 대해 0-25% 에탄올/에틸 아세테이트 및 이후 5 컬럼 부피에 대해 25% 에탄올/에틸 아세테이트. 적절한 분획을 조합하고, 용매를 진공하에서 제거하여, 무색 오일로서 (S)-사이클로펜틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-메톡시프로파노에이트를 생성시켰다. 샘플을 최소량의 디에틸 에테르에 용해시킨 후, 몇 방울의 디에틸 에테르 중 1M 염산을 처리하고, 용매 및 HCl을 진공하에서 제거하였다. 이는 백색 고체로서 표제 화합물(68 mg, 0.139 mmol, 38.4% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.94 min, MH+ = 453.
실시예
301: (S)-
사이클로펜틸
2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-메틸-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시-3-메틸부타노에이트,
하이드로클로라이드
2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드(100mg, 0.355 mmol, 중간체 273)를 DCM(5 mL)에 용해시키고, (S)-사이클로펜틸 2-아미노-3-하이드록시-3-메틸부타노에이트, 하이드로클로라이드(110 mg, 0.463 mmol, 중간체 51) 및 트리에틸아민(0.148 mL, 1.066 mmol)을 처리하고, 2시간 동안 교반하였다. 이후, 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(377 mg, 1.777 mmol)를 첨가하고, 반응물을 밤새 교반하였다. 이 시간 후, 또 다른 3 당량의 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(377 mg, 1.777 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 혼합물에 소듐 바이카르보네이트(25 mL)를 첨가하고, 반응물을 15분 동안 교반하였다. 이후, 상을 분리시키고, 수성상을 디클로로메탄(2 x 10 mL)으로 2회 추출하고, 유기물을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시켰다. 이후, 용매를 진공하에서 제거하고, 잔여물을 최소의 디클로로메탄에 용해시켰다. 이후, 용액을 Biotage SNAP 10g 카트리지에 로딩하고, 다음과 같은 방법을 이용하여 자동화 크로마토그래피를 수행하였다: 2 컬럼 부피에 대해 0% 에틸 아세테이트, 10 컬럼 부피에 대해 에틸 아세테이트 중 0-25% 에탄올, 5 컬럼 부피에 대해 25% 에탄올. 이후, 적절한 분획을 조합하고, 용매를 진공하에서 제거하였다. 이후, 잔여물을 최소의 디클로로메탄에 용해시킨 후, Biotage SNAP 10g 카트리지에 로딩하고, 다음과 같은 방법을 이용하여 자동화 크로마토그래피를 수행하였다: 2 컬럼 부피에 대해 에틸 아세테이트 중 15% 에탄올, 10 컬럼 부피에 대해 에틸 아세테이트 중 15-40% 에탄올, 5 컬럼 부피에 대해 에틸 아세테이트 중 40% 에탄올. 이후, 잔여물을 디메틸 설폭시드(0.4mL) 및 디클로로메탄(0.4mL)에 용해시키고, 고 pH 질량 특이적 자동정제로 정제하였다. 이후, 적절한 분획을 조합하고, 용매를 진공하에서 제거하였다. 이는 황색 오일로서 (S)-사이클로펜틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시-3-메틸부타노에이트(26.5 mg, 0.057 mmol, 15.98% 수율)를 생성시켰다. 이후, 오일을 디에틸 에테르에 용해시키고, 몇 방울의 디에틸 에테르 중 1M HCl을 첨가하고, 용매를 진공하에서 제거하여, 백색 고체로서 표제 화합물(26.5 mg, 0.053 mmol, 14.82% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.95 min, MH+ = 467.
실시예
302: (
S
)-4-
메틸
-2-(((2-(5-
메틸
-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-(1-메틸피페리딘-4-일)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)펜탄산,
하이드로클로라이드
메탄올(1 mL) 및 THF(1 mL) 중 (S)-사이클로펜틸 4-메틸-2-(((2-(5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(1-메틸피페리딘-4-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)펜타노에이트(제조를 위해 실시예 2 참조, 17 mg, 0.032 mmol)의 용액에 1M 리튬 하이드록시드 수용액(0.032 mL, 0.032 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 교반을 실온에서 3일 동안 지속시켰다. 반응 혼합물을 2일 동안 50℃에서 가열하였다. 추가 1M 리튬 하이드록시드 수용액(0.16 mL, 0.16 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 밤새 50℃에서 가열하였다. 샘플을 감압하에서 증발시키고, 잔여물을 물(5 mL)에 용해시키고, isolute 103 카트리지에 로딩하였다. 카트리지를 물로 세척한 후, 메탄올로 용리시켰다. 메탄올 분획을 조합하고, 질소 스트림 하에서 취입시켜, 표제 화합물(13 mg)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.57 min; MH+ 466.
실시예
303: (
2
S
,3
R
)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2
H
-피란-4-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트
DCM(100 mL) 중 2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드(예시적 제조를 위해 중간체 116 참조, 10.0 g, 27.4 mmol), (2S,3R)-이소프로필 2-아미노-3-하이드록시부타노에이트 하이드로클로라이드(예시적 제조를 위해 중간체 31a 참조, 10.82 g, 54.7 mmol) 및 트리에틸아민(6.92 g, 9.54 mL, 68.4 mmol)의 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(17.4 g, 82 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 4시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM(100 mL)으로 희석시키고, 포화 소듐 바이카르보네이트(300 mL)에 부었다. 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반하고, 유기상을 분리시키고, 수성상을 DCM(2 x 100 mL)으로 추출하였다. 조합된 유기물을 건조시키고, 증발시켰다. 잔여물을 DCM 중 2.5-10% MeOH의 구배를 이용하여 크로마토그래피하여, 무색 포움으로서 표제 화합물(11.57 g, 22.66 mmol, 83% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 J): tRET = 0.87 min; MH+ 511. 1H NMR (d6-DMSO): δ 1.06 - 1.26 (m, 13 H), 1.90 - 2.02 (m, 1 H), 2.11 (s, 3 H), 2.20 - 2.41 (m, 1 H), 3.00 (d, J = 4.9 Hz, 1 H), 3.05 - 3.16 (m, 2 H), 3.56 (s, 3 H), 3.66 (d, J = 1.32 Hz, 1 H), 3.76 - 3.86 (m, 1 H), 3.90 (d, J = 13.2 Hz, 1 H), 4.26 (d, J = 7.3 Hz, 2 H), 4.67 (d, J = 5.4 Hz, 1 H), 4.93 (sept, J = 6.2 Hz, 1 H), 7.22 (dd, J = 8.3, 1.2 Hz, 1 H), 7.53 (s, 1 H), 7.61 (d, J = 8.3 Hz, 1 H), 7.73 (dd, J = 2.3, 1.1 Hz, 1 H), 8.12 (d, J = 2.2 Hz, 1 H).
실시예
303의 제조를 위한 대안적 방법: (
2
S
,3
R
)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2
H
-피란-4-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트
(3-니트로-4-(((
테트라하이드로
-2H-피란-4-일)
메틸
)아미노)페닐)메탄올
(4-플루오로-3-니트로페닐)메탄올(2.4 g, 14.02 mmol) 및 (테트라하이드로-2H-피란-4-일)메탄아민(2.423 g, 21.04 mmol)을 물(30ml)에 현탁시키고, 포타슘 카르보네이트(2.52 g, 18.23 mmol)를 첨가한 후, 혼합물을 24시간 동안 80℃에서 교반한 후, 교반하면서 냉각시켰다. 생성된 혼합물을 EtOAc(50ml)로 추출하고, 유기층을 물(50ml)로 세척하고, 건조시키고, 진공하에서 증발시켜, 어두운 황색 고체로서 표제 화합물(3.60g, 13.52 mmol, 96% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 D): tRET = 0.82 min; MH+ 267. 표제 화합물을 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다.
(3-아미노-4-(((
테트라하이드로
-2H-피란-4-일)
메틸
)아미노)페닐)메탄올
(3-니트로-4-(((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)아미노)페닐)메탄올(48g, 180 mmol)을 에탄올(400ml)에 용해시키고, 18시간 동안 대기압에서 Pd/C 5 중량%(3g, 28.2 mmol) 상에서 수소화시킨 후, 혼합물을 질소하에서 셀라이트를 통해 여과시키고, 여과액을 진공하에서 증발시켜, 어두운 갈색 오일로서 표제 화합물(50g, 212 mmol, 117% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 D): tRET = 0.62 min; MH+ 237. 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계로 통과시켰다.
5-(5-(
하이드록시메틸
)-1-((
테트라하이드로
-2H-피란-4-일)
메틸
)-1H-
벤조[d]이미다졸
-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2-(1H)-온
(3-아미노-4-(((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)아미노)페닐)메탄올(50g, 190 mmol)을 물(500ml)에 현탁시키고, 1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르브알데하이드(31.7 g, 209 mmol) 및 세틸피리디늄 브로마이드(14.64 g, 38.1 mmol)를 첨가한 후, 혼합물을 밤새 강하게 교반하였다. 혼합물을 DCM(3 x 300ml)으로 추출하고, 조합된 유기물을 염수(500ml)로 세척한 후, 건조시키고, 증발시켜, 어두운 갈색 고체를 생성시켰다. 이를 EtOAc(500ml)에 현탁시키고, 2시간 동안 가열 환류시킨 후, 냉각시키고, 생성물을 여과에 의해 수거하였다. 미정제물을 EtOAc(500ml)에 재현탁시키고, 다시 가열 환류시킨 후, 얼음 배쓰에서 냉각시키고, 생성물을 여과에 의해 수거하고, 에테르(300ml)로 세척하여, 갈색 고체(64g)를 생성시켰다. LCMS는 깨끗한 생성물을 나타내었으나, NMR 스펙트럼은 생성물에 남아 있는 0.2 당량의 세틸피리디늄 염의 존재를 나타낸다. 정제 없이 다음 단계로 통과시켰다. 표제 화합물은 90% Wt 순도였다. LCMS (시스템 D): tRET = 0.66 min; MH+ 368.
(
2
S
,3
R
)-이소프로필 2-아미노-3-
하이드록시부타노에이트
,
하이드로클로라이드
AcCl(96 ml, 1343 mmol)을 2-프로판올(500 ml, 6490 mmol)에 적가한 후, 혼합물을 20분 동안 교반한 후, (2S,3R)-2-아미노-3-하이드록시부탄산(40g, 336 mmol)을 첨가하였다. 생성된 현탁액을 밤새 가열 환류시킨 후, 냉각시키고, 진공하에서 증발시켜, 무색 오일을 생성시켰다. 이를 에테르(300ml)로 분쇄시키고, 생성물을 여과에 의해 수거하여, 무색 고체로서 (2S,3R)-이소프로필 2-아미노-3-하이드록시부타노에이트를 생성시켰다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.49 (br. s., 3H), 5.66 (br. s., 1H), 4.99 (td, J=6.24, 12.47 Hz, 1H), 4.09 (br. s., 1H), 3.80 (d, J=4.16 Hz, 1H), 1.17-1.29 (m, 9H)
2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-
디하이드로피리딘
-3-일)-1-((
테트라하이드로
-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드
5-(5-(하이드록시메틸)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(64g, 122 mmol)을 DCM(600 ml)에 용해시키고, 이산화망간(42.4 g, 488 mmol)을 첨가한 후, 혼합물을 18시간 동안 환류하에서 가열하였다. LCMS는 완전한 전환을 나타내었고, 혼합물을 여과시키고, 고체를 DCM으로 세척하였다. 여과액을 진공하에서 증발시켜, 갈색 검을 생성시키고, 이를 DCM(100ml)에 용해시키고, 340g 실리카 컬럼에 로딩한 후, 0-50% EtOH/EtOAc로 용리시키고, 생성물 함유 분획을 진공하에서 증발시켜, 갈색 고체를 생성시켰다. 이를 에테르(200ml)로 분쇄시키고, 고체를 여과에 의해 수거한 후, EtOAc(300ml)에 현탁시키고, 1시간 동안 가열 환류시킨 후, 얼음 배쓰에서 냉각시키고, 생성물을 여과에 의해 수거하여, 모래 색깔의 고체로서 2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드(42.5g, 116 mmol, 95% 수율)를 생성시켰다. LCMS (시스템 D): tRET = 0.74 min; MH+ 366. 여과액을 진공하에서 증발시키고, 잔여물을 30분 동안 환류하에서 EtOAc(50ml) 중에서 분쇄시킨 후, 냉각시키고, 여과시켜, 베이지색 고체로서 생성물의 추가 부분(3g)을 생성시켰고, NMR은 원하는 알데하이드와 일치하였다. 표제 화합물은 80% Wt 순도였다.
(
2
S
,3
R
)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트
2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드(42g, 115 mmol) 및 (2S,3R)-이소프로필 2-아미노-3-하이드록시부타노에이트 하이드로클로라이드(34.1 g, 172 mmol)를 DCM(500 ml)에 용해시킨 후, Et3N(48.1 ml, 345 mmol)을 첨가한 후, 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(73.1 g, 345 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 24시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 5 리터 코니컬(conical) 플라스크 중 1.5 리터의 포화 소듐 바이카르보네이트 용액에 첨가하고, 1시간 동안 강하게 교반한 후, 유기층을 분리시키고, 수성상을 DCM(500ml)으로 추출하고, 조합된 유기물을 물(500ml) 및 염수(500ml)로 세척하고, 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 진공하에서 증발시켜, 갈색 포움을 생성시켰다. 미정제 생성물을 DCM(200ml)에 용해시키고, 750g 실리카 컬럼에 로딩한 후, 0-30% EtOH/EtOAc로 용리시키고, 깨끗한 생성물 함유 분획을 진공하에서 증발시켜, 베이지색 포움으로서 (2S,3R)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트(51g, 100 mmol, 87% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 D): tRET = 0.86 min; MH+ 511.
1H NMR (d6-DMSO): δ 1.06 - 1.26 (m, 13 H), 1.90 - 2.02 (m, 1 H), 2.11 (s, 3 H), 2.20 - 2.41 (m, 1 H), 3.00 (d, J = 4.9 Hz, 1 H), 3.05 - 3.16 (m, 2 H), 3.56 (s, 3 H), 3.66 (d, J = 1.32 Hz, 1 H), 3.76 - 3.86 (m, 1 H), 3.90 (d, J = 13.2 Hz, 1 H), 4.26 (d, J = 7.3 Hz, 2 H), 4.67 (d, J = 5.4 Hz, 1 H), 4.93 (sept, J = 6.2 Hz, 1 H), 7.22 (dd, J = 8.3, 1.2 Hz, 1 H), 7.53 (s, 1 H), 7.61 (d, J = 8.3 Hz, 1 H), 7.73 (dd, J = 2.3, 1.1 Hz, 1 H), 8.12 (d, J = 2.2 Hz, 1 H).
실시예
303의
에디실레이트
염의 제조(
시딩
없음): (
2
S
,3
R
)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2
H
-피란-4-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트, 1,2-에탄디설폰산 염.
카로우셀(carousel) 튜브에 (2S,3R)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트(제조를 위해 실시예 303 참조, 100 mg, 0.196 mmol) 및 이소프로판올(1.35 mL)을 첨가하였다. 교반된 혼합물을 40℃로 가열하고, 이소프로판올(557 μL) 중 에탄-1,2-디설폰산(44.7 mg, 0.235 mmol)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 15시간 동안 40℃에서 교반하였다. 상기 시간 후, 고체가 형성되었다. 반응물을 카로우셀로부터 분리시키고, 24℃로 직접 냉각시키고, 6시간 동안 교반하였다. 상기 시간 후, 현탁액을 여과시키고, 5분 동안 진공하에서 건조시켰다. 바이알로 옮겨진 고체를 3일 동안 40℃에서 진공 오븐에서 추가로 건조시켜, 백색 결정성 고체로서 (2S,3R)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트, 1,2-에탄디설폰산 염(91 mg, 66.3% 수율)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.61 (1H, br. s.), 9.29 (1H, br. s.), 8.35 (1H, br. s.), 8.02 (1H, d, J=8.6 Hz), 7.92 (1H, s), 7.82 - 7.75 (1H, m), 7.58 (1H, d, J=8.6 Hz), 4.94 (1H, spt, J=6.2 Hz), 4.46 - 4.34 (4H, m), 4.05 (1H, quin, J=6.4 Hz), 3.77 - 3.69 (2H, m), 3.66 (1H, br. s.), 3.59 (3H, s), 3.17 - 3.08 (2H, m), 2.66 (4H, s), 2.13 (3H, s), 2.06 - 1.93 (1H, m), 1.31 - 1.16 (13H, m). LCMS (시스템 D): tRET = 0.88 min; MH+ 511.
실시예
303의
에디실레이트
염의 제조(
시딩
없음): (
2
S
,3
R
)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2
H
-피란-4-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트, 1,2-에탄디설폰산 염.
EasyMax 400 mL 반응기에 (2S,3R)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트(예시적 제조를 위해 실시예 303(대안적 방법) 참조)(10 g, 19.58 mmol) 및 이소프로판올(135 mL)을 첨가하였다. 별도의 플라스크에서, 이소프로판올(28 mL) 중 에탄-1,2-디설폰산(4.47 g, 23.50 mmol)의 용액을 제조하고, 40℃로 가온시키고, 여과시켰다. 250 rpm에서 교반된 (2S,3R)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트(예시적 제조를 위해 실시예 303(대안적 방법) 참조)의 용액에 에탄-1,2-디설폰산 용액의 40%(11.2 mL)를 첨가하였다. (2S,3R)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트(예시적 제조를 위해 상기 '실시예 303의 에디실레이트 염의 제조(시딩 없음)' 참조)(131 mg)의 시드를 첨가하고, 혼합물을 1.5시간 동안 40℃에서 교반하였다. 상기 시간 후, 남아 있는 에탄-1,2-디설폰산 용액의 60%(16.8 mL)를 6시간에 걸쳐 적가하였다. 에탄-1,2-디설폰산 용액의 완전한 첨가시, 혼합물을 3.5시간에 걸쳐 20℃로 천천히 냉각시키고, 실온에서 추가 11시간 동안 교반하였다. 생성된 현탁액을 필터 컵 및 종이 필터로 여과시켰고, 여과액이 맑게 흘렀다. 필터 케이크를 IPA(2 x 20 mL 및 10 mL)로 세척하고, 진공하에서 추가 건조시켜, 습윤 필터 케이크(24.06 g)를 생성시켰다. 고체를 수거하고, 22시간 동안 진공 오븐(44℃)에서 건조시켜, 백색 결정성 고체로서 표제 화합물(11.337 g, 16.02 mmol, 82% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 D): tRET = 0.88 min; MH+ 511.
실시예
304: (2
S
,3
R
)-2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(((
S
)-테트라하이드로푸란-2-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부탄산
(2S,3R)-(S)-테트라하이드로푸란-3-일-2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(((S)-테트라하이드로푸란-2-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트(제조를 위해 실시예 224 참조, 190 mg, 0.362 mmol)를 THF(3 mL) 및 메탄올(3 mL)에 용해시켰다. 리튬 하이드록시드(26.0 mg, 1.087 mmol)를 물(1 mL)에 용해시키고, 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 40℃에서 5시간 동안 교반하였다. 2M 염산(0.543 mL, 1.087 mmol)을 첨가하고, 용매를 감압하에서 제거하였다. 잔여물을 물(1 mL) 및 DMSO(0.8 mL)에 용해시키고, 용액을 여과시키고, MDAP(방법 B)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 농축시켰다. 잔여물을 THF(3 mL)에 현탁시키고, 2M HCl(0.2 mL)을 첨가하였다. 용매를 질소 스트림 하에서 제거하였다. 샘플을 물(0.7 mL) 및 DMSO(0.7 mL)에 용해시키고, MDAP(방법 B)로 정제하였다. 적절한 분획을 질소 스트림 하에서 취입시키고, 생성된 잔여물을 THF(4 mL) 및 2M 소듐 하이드록시드(0.04 mL)로 처리하였다. 용매를 질소 스트림 하에서 취입시켰다. 샘플을 에틸 아세테이트에 용해시키고, 여과시키고, 여과 동안 분리된 고체를 물에 용해시키고, 감압하에서 농축시켰다. 잔여물을 물(0.8 mL)에 용해시키고, MDAP(방법 B)로 정제하였다. 적절한 분획을 질소 스트림 하에서 취입시켜, 백색 고체로서 표제 화합물(16 mg)을 생성시켰다. LCMS (시스템 J): tRET = 0.54 min; MH+ 455.
실시예
305: (
2
S
,3
R
)-이소프로필 2-(((1-(1,3-디메톡시프로판-2-일)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트
디클로로메탄(DCM)(200 mL) 중 1-(1,3-디메톡시프로판-2-일)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드(예시적 제조를 위해 중간체 224 참조, 6.3 g, 17.05 mmol) 및 (2S,3R)-이소프로필 2-아미노-3-하이드록시부타노에이트 하이드로클로라이드(예시적 제조를 위해 중간체 31a 참조, 6.74 g, 34.1 mmol)의 혼합물에 트리에틸아민(5.94 mL, 42.6 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(10.84 g, 51.2 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 4시간 동안 실온에서 교반하였다. 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액(200 mL)을 첨가하고, 유기층을 분리시켰다. 수성층을 디클로로메탄(2 x 100 mL)으로 재추출하고, 유기층을 조합하고, 소수성 프릿을 이용하여 건조시키고, 감압하에서 증발시켰다. 샘플을 디클로로메탄에 로딩하고, 디클로로메탄 중 0-5% 메탄올의 구배를 이용한 컬럼 크로마토그래피(실리카)로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 감압하에서 증발시켰다. 샘플을 HPLC(Xselect CSH C18 컬럼, 0.1% 포름산 개질제를 갖는 물/아세토니트릴을 이용하여 용리됨)로 정제하고, 분획을 감압하에서 증발시켜, 분리된 물질(5.7 g)을 생성시켰다. 물질의 2.1 g을 이후 반응을 위해 분리시켰다. 무색 검인 남아 있는 물질(3.6 g)을 3일 밤 동안 진공 오븐에서 건조시켰고, 이는 긁힐 수 있는 유리가 되었다. 가능한 한 많은 물질을 플라스크로부터 분리시키고, 추가 2일 밤 동안 진공 오븐으로 복귀시켜, 표제 화합물(3.2 g, 6.22 mmol)을 생성시켰다. LCMS (시스템 J): tRET = 0.92 min; MH+ 515. 1H NMR (d6-DMSO): δ 1.11 (d, J = 6.4 Hz, 3 H), 1.19 (d, J = 6.1 Hz, 6 H), 2.09 (s, 3 H), 3.00 (d, J = 4.9 Hz, 1 H), 3.16 (d, J = 1.5 Hz, 6 H), 3.54 (s, 3 H), 3.65 (d, J = 13.2 Hz, 1 H), 3.70 - 3.86 (m, 3 H), 3.91 (d, J = 13.0 Hz, 1 H), 3.96 - 4.07 (m, 2 H), 4.70 (d, J = 5.4 Hz, 1 H), 4.78 - 4.86 (m, 1 H), 4.94 (sept, J = 6.2 Hz, 1 H), 7.18 (dd, J = 8.4, 1.3 Hz, 1 H), 7.55 (s, 1 H), 7.67 - 7.70 (s, 1 H), 7.72 (d, J = 8.6 Hz, 1 H), 8.05 (d, J = 2.2 Hz, 1 H).
실시예
306: (
2
S
,3
S
)-(
S
)-
테트라하이드로푸란
-3-일 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2
H
-피란-4-일)메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트
DCM(5 mL) 중 2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르브알데하이드(0.438 mmol, 160 mg)(예시적 제조를 위해 중간체 116 참조) 및 ((2S,3S)-(S)-테트라하이드로푸란-3-일 2-아미노-3-하이드록시부타노에이트 하이드로클로라이드(98.8 mg, 0.525 mmol)(예시적 제조를 위해 중간체 40 참조)의 교반된 용액에 트리에틸아민(0.182 mL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반하고, 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(278 mg, 1.374 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 교반하고, 밤새 방치하였다. 반응 혼합물을 DCM과 수성 포화 NaHCO3 사이에 분배시켰다. 유기층을 분리시키고, 수성상을 DCM으로 2회 추출하였다. 유기상을 조합하고, 진공하에서 농축시켜, 갈색 오일을 생성시켰다. 오일을 DCM에 용해시키고, EtOAc:EtOH(3-25%)로 용리시키는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하였다. 적절한 분획을 조합하고, 진공하에서 증발시켜, 무색 오일로서 표제 화합물을 생성시켰다. 반응의 전체 수율은 46%였다. LCMS (시스템 C): tRET = 0.45 min, MH+ = 539.
실시예
307: (
2
S
,3
R
)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((
S
)-피페리딘-3-일메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-6-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트
이소프로판올 중 5-6N HCl(0.2 mL)을 이소프로판올(1 mL) 중 (R)-터트-부틸 3-((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-6-((((2S,3R)-3-하이드록시-1-이소프로폭시-1-옥소부탄-2-일)아미노)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트(제조를 위해 중간체 267 참조, 31.4mg, 51.5mmol)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 밤새(17시간) 실온에서 교반하였다. 이소프로판올 중 5-6N HCl(0.8 mL)을 반응 혼합물에 첨가하고, 생성된 용액을 5시간 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 질소 스트림 하에서 제거하고, 혼합물을 MDAP(방법 B)로 정제하였다. 분획을 조합하고, 휘발성 물질을 감압하에서 제거하고, 미정제물을 3CV의 메탄올 및 3CV의 메탄올 중 2M 암모니아로 용리되는 2g 사전 평형화 SCX 카트리지에 로딩하였다. 염기성 분획을 조합하고, 휘발성 물질을 감압하에서 제거하여, 황색 오일을 생성시켰다. 오일을 MDAP(방법 B)로 정제하였다. 관련 분획을 조합하고, 휘발성 물질을 감압하에서 제거하여, 반투명/백색 고체로서 표제 화합물(15.5mg)을 생성시켰다.
LCMS (시스템 J): tRET = 0.79 min; MH+ 510
실시예
308: (
2
S
,3
R
)-
터트
-부틸 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((
S
)-피페리딘-3-일메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-6-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트
이소프로판올 중 5-6N HCl(0.2 mL)을 이소프로판올(1 mL) 중 (R)-터트-부틸 3-((6-((((2S,3R)-1-(터트-부톡시)-3-하이드록시-1-옥소부탄-2-일)아미노)메틸)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트(제조를 위해 중간체 268 참조, 21mg, 33.7mmol)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 밤새(17시간) 실온에서 교반하였다. 이소프로판올 중 5-6N HCl(0.8 mL)을 반응 혼합물에 첨가하고, 생성된 용액을 5시간 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 취입 유닛을 이용하여 제거하고, 혼합물을 MDAP(방법 B)로 정제하였다. 분획을 조합하고, 휘발성 물질을 감압하에서 제거하고, 미정제물을 3CV의 메탄올 및 3CV의 메탄올 중 2M 암모니아로 용리되는 2g 사전 평형화 SCX 카트리지에 로딩하였다. 염기성 분획을 조합하고, 휘발성 물질을 감압하에서 제거하여, 황색 오일을 생성시켰다. 이러한 오일을 MDAP(방법 B)로 정제하였다. 관련 분획을 조합하고, 휘발성 물질을 감압하에서 제거하여, 반투명/백색 고체로서 표제 화합물(13.5mg)을 생성시켰다. LCMS (시스템 J): tRET = 0.85 min; MH+ 524.
실시예
309: (
S
)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((
R
)-피페리딘-3-일메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-6-일)메틸)아미노)-3-메틸부타노에이트
디하이드로클로라이드
IPA 중 HCl 5M(1 mL, 5.00 mmol)을 (S)-터트-부틸 3-((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-6-((((S)-1-이소프로폭시-3-메틸-1-옥소부탄-2-일)아미노)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트(제조를 위해 중간체 269 참조, 56 mg, 0.092 mmol)에 첨가하고, 생성된 용액을 21시간 동안 실온에서 교반하였다. 용액을 감압하에서 증발시켜, 황색 고체로서 미정제 생성물(51.5 mg)을 획득하였다. 샘플을 MeOH 1 mL에 용해시키고, MDAP(방법 B)로 정제하였다. 용매를 건조시켜, 37 mg의 황색 오일을 생성시켰다. 오일을 밤새 진공 오븐에서 건조시켰다. 이후, 고체(28 mg)를 EtOH:ACN 1:1 2 mL에 현탁시키고, 80 μL의 Et2O 중 HCl 1M을 그 안에 부었다. 휘발성 물질을 진공하에서 제거하여, 황색 고체로서 표제 화합물(35 mg)을 획득하였다. LCMS (시스템 J): tRET = 1.02 min; MH+ 508.
실시예
310: (
S
)-
사이클로펜틸
2-(((1-(아제티딘-3-일메틸)-2-(5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-4-메틸펜타노에이트
둥근 바닥 플라스크에 (S)-터트-부틸 3-((5-(((1-(사이클로펜틸옥시)-4-메틸-1-옥소펜탄-2-일)아미노)메틸)-2-(5-메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)메틸)아제티딘-1-카르복실레이트(중간체 270, 60 mg, 0.099 mmol), 1,4-디옥산(10 mL) 및 TFA(0.5 mL, 6.49 mmol)를 충전시켰다. 용기의 뚜껑을 닫고, 2일 동안 실온에서 교반하였다. 휘발성 물질을 진공하에서 제거하여, 황색 오일을 생성시켰다. 오일을 DMSO(1 mL)에 용해시키고, MDAP(방법 B)로 정제하였다. 용매를 진공하에서 증발시켜, 표제 화합물(34 mg, 0.067 mmol, 67.9% 수율)을 생성시켰다. LCMS (시스템 B): tRET = 0.93 min; MH+ 506.
실시예
311: (
S
)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((
R
)-피페리딘-3-일메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-메틸부타노에이트
IPA 중 5M HCl의 용액(10 mL, 50.0 mmol)을 (S)-터트-부틸 3-((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-5-((((S)-1-이소프로폭시-3-메틸-1-옥소부탄-2-일)아미노)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트(180 mg, 0.296 mmol)(예시적 제조를 위해 중간체 272 참조)에 첨가하고, 생성된 용액을 1시간 동안 교반하고, 교반을 주말에 걸쳐 중단시켰다. 반응 혼합물을 진공하에서 갈색 검으로 증발시키고, MeOH에 용해시키고, 5 g SCX 카트리지에 로딩하였다. 카트리지를 MeOH(50 mL)로 용리시킨 후, 2M 메탄올성 암모니아(25 mL)로 용리시켰다. 염기성 분획을 진공하에서 증발 건조시키고, MDAP(N31339-85-1, 포름산 방법 A)로 정제하였다. 투명한 생성물 함유 분획에 2M 수성 HCl(5 mL)을 첨가하고, 진공하에서 백색 고체로 증발시켰다. N31339-85-A1을 MeOH에 용해시키고, 5 g SCX 카트리지에 로딩하였다. 카트리지를 MeOH(20 mL)로 용리시킨 후, 2M 메탄올성 암모니아(15 mL)로 용리시켰다. 염기성 분획을 진공하에서 증발시켜, 백색 고체로서 표제 화합물을 생성시켰다. 반응의 전체 수율은 67%였다. LCMS (시스템 C): tRET = 0.48 min, MH+ = 508.
실시예
312: (
S
)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((
R
)-피페리딘-3-일메틸)-1
H
-벤조[
d
]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-메틸부타노에이트,
디하이드로클로라이드
(S)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((R)-피페리딘-3-일메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-메틸부타노에이트(제조를 위해 실시예 311 참조)(96 mg, 0.189 mmol)를 DCM(2 mL)에 용해시키고, 디에틸 에테르 중 1M HCl(0.5 mL, 0.500 mmol)를 교반과 함께 첨가하였다. 생성된 현탁액을 진공하에서 증발시켜, 백색 고체로서 표제 화합물을 생성시켰다. 반응의 전체 수율은 97%였다. LCMS (시스템 C): tRET = 0.48 min, MH+ = 508.
하기 실시예를 실시예 17과 유사한 방식으로 제조하였다:
하기 실시예를 실시예 95와 유사한 방식으로 제조하였다:
실시예
320: (
2
S
,3
R
)-
터트
-부틸 2-((2-(1-(1,3-디메톡시프로판-2-일)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)에틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트
0℃에서 THF(13 mL) 중 5-(1-(1,3-디메톡시프로판-2-일)-5-(옥시란-2-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1,3-디메틸피리딘-2(1H)-온(제조를 위해 중간체 291 참조, 500 mg, 1.304 mmol)의 용액에 BF3.OEt2(0.165 mL, 1.304 mmol)를 첨가하고, 용액을 15분 동안 교반하였다. 이후, 트리에틸아민(0.545 mL, 3.91 mmol)을 반응 혼합물에 첨가한 후, (2S,3R)-터트-부틸 2-아미노-3-하이드록시부타노에이트 하이드로클로라이드(304 mg, 1.434 mmol) 및 TsOH(248mg, 1.304 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 이후, 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(276 mg, 1.304 mmol)를 첨가하고, 교반을 또 다른 12시간 동안 지속시켰다. 포화 NaHCO3(20 mL)를 반응 혼합물에 첨가하고, 에틸 아세테이트(30mLX2)로 추출하였다. 조합된 유기물을 염수(20 mL)로 세척하고, 건조시키고(Na2SO4), 여과시키고, 농축시켜, 미정제 생성물을 획득하였다. 미정제 생성물을 5 Mm 암모늄 바이카르보네이트(Aq)/아세토니트릴로 용리되는 kinetexc8 (150*30)mm 5μ 컬럼을 이용한 분취용 HPLC로 정제하였다. 적절한 분획을 동결건조시켜, 표제 화합물 (2S,3R)-터트-부틸 2-((2-(1-(1,3-디메톡시프로판-2-일)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)에틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트(67 mg, 9.4% 수율)을 획득하였다. LCMS (시스템 E): tRET = 1.46 min; MH+ 543.
하기 실시예를 실시예 320과 유사한 방식으로 제조하였다:
하기 실시예를 실시예 71과 유사한 방식으로 제조하였다:
생물학적 데이터
시간 분해 형광 공명 에너지 전달(TR-FRET) 검정
결합을 시간 분해 형광 공명 에너지 전달 결합 검정을 이용하여 평가하였다. 이는 공여체 형광단으로 작용하는 단백질에 대한 유로퓸의 결합을 가능케 하는 유로퓸 킬레이트(PerkinElmer AD0111)로 표지된 항-6 His 항체에 대한 에피토프로서 단백질의 N-말단에서 6 His 정제 태그를 이용한다. 소분자인 브로모도메인 BRD2, BRD3, BRD4 및 BRDT의 고 친화성 결합제를 Alexa Fluor647(참조 화합물 X)로 표지하였고, 이는 FRET 쌍에서 수용자로 작용한다.
참조 화합물 X: 4-((Z)-3-(6-((5-(2-((4S)-6-(4-클로로페닐)-8-메톡시-1-메틸-4H-벤조[f][1,2,4]트리아졸로[4,3-a][1,4]디아제핀-4-일)아세트아미도)펜틸)아미노)-6-옥소헥실)-2-((2E,4E)-5-(3,3-디메틸-5-설포-1-(4-설포부틸)-3H-인돌-1-이움-2-일)펜타-2,4-디엔-1-일리덴)-3-메틸-5-설포인돌린-1-일)부탄-1-설포네이트)
DMF(40μl) 중 N-(5-아미노펜틸)-2-((4S)-6-(4-클로로페닐)-8-메톡시-1-메틸-4H-벤조[f][1,2,4]트리아졸로[4,3-a][1,4]디아제핀-4-일)아세트아미드(제조를 위해 참조 화합물 J 참조, WO2011/054848A1, 1.7 mg, 3.53 μmol)의 용액에 또한 DMF(100μl) 중 AlexaFluor647-ONSu(2.16 mg, 1.966 μmol)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 DIPEA(1 μl, 5.73 μmol)로 염기화시키고, 볼텍스 혼합기 상에서 밤새 진탕시켰다. 반응 혼합물을 증발 건조시켰다. 고체를 아세토니트릴/물/아세트산(5/4/1, <1mL)에 용해시키고, 여과시키고, Phenomenex Jupiter C18 분취용 컬럼에 적용시키고, 다음과 같은 구배로 용리시켰다(A = 물 중 0.1% 트리플루오로아세트산, B= 0.1% TFA/90% 아세토니트릴/10% 물): 유량 = 10ml/min., AU = 20/10 (214nm): 5-35%, t=0min: B = 5%; t=10min: B = 5%; t=100min: B = 35%; t=115min: B = 100% (Sep. grad: 0.33%/min). 주요 성분은 26-28%B 범위에 걸쳐 용리되었으나, 2개의 피크로 구성되는 것으로 보였다. "둘 모두"의 성분을 함유해야 하는 중간 분획(F1.26)을 분석 HPLC(Spherisorb ODS2, 60min에 걸쳐 1 내지 35%)로 분석하였다: 단일 성분은 28%B에서 용리된다. 분획 F1.25/26&27을 조합하고, 증발 건조시켰다. DMF와 함께 옮기고, 증발 건조시키고, 건조 에테르로 분쇄시키고, 청색 고체를 <0.2mbar에서 밤새 건조시켰다: 1.54mg.
분석 HPLC(Sphersisorb ODS2, 60min에 걸쳐 1 내지 35%B): MSM10520-1: [M+H]+ (obs): M-29에 해당하는 661.8/-. 이는 M-29인 1320.984의 계산된 질량에 대한 [(M+2H)/2]+와 동일하다. 이는 Alexa Fluor 647 염료의 표준 현상이며, 질량 분광계의 조건하에서 2개의 메틸렌기의 이론적 손실을 나타낸다.
검정 원리: 경쟁 화합물의 부재하에서, 유로퓸의 여기는 공여자가 λ618nm에서 방출하도록 하며, 이는 Alexa 표지된 브로모도메인 결합 화합물을 여기시켜 λ647nM에서 측정 가능한 증가된 에너지 전달을 발생시킨다. 이들 단백질에 결합할 수 있는 충분한 농도의 화합물의 존재하에서, 상호작용이 방해되어 형광 공명 에너지 전달에서의 정량 가능한 감소를 발생시킨다.
브로모도메인 BRD2, BRD3, BRD4 및 BRDT에 대한 본 발명의 화합물의 결합을 브로모도메인 상의 결합 도메인 1(BD1) 또는 결합 도메인 2(BD2)에 대한 차별적 결합을 검출하기 위해 돌연변이된 단백질을 이용하여 평가하였다. 아세틸 리신 결합 포켓에서의 이들 단일 잔기 돌연변이는 돌연변이된 도메인(돌연변이되지 않은 도메인에 대해 >1000배 선택적)에 대한 플루오로리간드(fluoroligand)(참조 화합물 X)의 친화성을 크게 낮춘다. 따라서, 최종 검정 조건에서, 돌연변이된 도메인에 대한 플루오로리간드의 결합은 검출될 수 없으며, 이어서 검정은 단일한 돌연변이되지 않은 브로모도메인에 대한 화합물의 결합을 결정하기에 적합하다.
단백질 생성: N-말단에 6-His 태그를 갖는 재조합 인간 브로모도메인[(BRD2 (1-473) (Y113A) 및 (Y386A), BRD3 (1-435) (Y73A) 및 (Y348A) BRD4 (1-477) (Y97A) 및 (Y390A) 및 BRDT (1-397) (Y66A) 및 (Y309A)]을 E. 콜라이 세포(BRD2/3/4에 대한 pET15b 벡터 및 BRDT에 대한 pET28a 벡터 내)에서 발현시켰다. His-태깅된 브로모도메인 펠렛을 50mM HEPES(pH7.5), 300mM NaCl, 10mM 이미다졸 & 1μl/ml 프로테아제 억제제 칵테일에 재현탁시키고, 음파처리를 이용하여 E. 콜라이 세포로부터 추출하고, 니켈 세파로스 고성능 컬럼을 이용하여 정제하고, 단백질을 세척한 후, 20 컬럼 부피에 대해 완충액 50mM HEPES(pH7.5)를 갖는 0-500mM 이미다졸, 150mM NaCl, 500mM 이미다졸의 선형 구배로 용리시켰다. 최종 정제를 Superdex 200 분취 등급 크기 배제 컬럼으로 완료하였다. 정제된 단백질을 20mM HEPES pH 7.5 및 100mM NaCl 중에서 -80℃에서 보관하였다. 단백질 정체를 펩티드 질량 핑거프린팅(fingerprinting) 및 질량 분광법에 의해 확인되는 예측 분자량에 의해 확인하였다.
브로모도메인 BRD2 , 3, 4 및 T, BD1 + BD2 돌연변이체 검정에 대한 프로토콜: 모든 검정 성분을 50 mM HEPES pH7.4, 50mM NaCl, 5% 글리세롤, 1mM DTT 및 1mM CHAPS의 완충 조성물에 용해시켰다. 브로모도메인 단백질의 최종 농도는 10nM이었고, Alexa Fluor647 리간드는 Kd였다. 이들 성분을 사전 혼합하고, 이러한 반응 혼합물 중 5μl를 Greiner 384 웰 검정 저용량 미세역가 플레이트 중의 50nl의 다양한 농도의 시험 화합물 또는 DMSO 비히클(최종 0.5% DMSO)을 함유하는 모든 웰에 첨가하고, 실온에서 30분 동안 어두운 곳에서 인큐베이션하였다. 1.5nM의 최종 농도의 항-6His 유로퓸 킬레이트를 함유하는 5μl의 검출 혼합물을 모든 웰에 첨가하고, 적어도 30분의 추가의 어두운 곳에서의 인큐베이션을 수행하였다. 이후, 플레이트를 Envision 플레이트판독기에서 판독하였다(·ex = 317nm, 공여자 ·em = 615nm; 수용자 ·em = 665nm; Dichroic LANCE dual). 시간 분해 형광 강도 측정을 둘 모두의 방출 파장에서 수행하였고, 수용자/공여자의 비를 계산하고, 데이터 분석에 사용하였다. 모든 데이터를 각각의 플레이트 상의 16개의 고(억제제 대조군 - WO 2011/054846A1의 실시예 11) 및 16개의 저(DMSO) 대조군 웰의 평균으로 표준화시켰다. 이후, 하기 형태의 4개 파라미터 곡선 적합을 적용시켰다:
y = a + (( b - a) / ( 1 + ( 10 ^ x / 10 ^ c ) ^ d )
여기서, 'a'는 최소이고, 'b'는 힐(Hill) 기울기이고, 'c'는 pIC50이고, 'd'는 최대이다.
결과: 실시예 82, 92, 93, 271, 286 및 304를 제외한 모든 실시예를 상기 BRD4 검정에서 시험하였고, BRD4 BD2 검정에서 <4.3의 pIC50을 갖는 실시예 21, 24, 48, 60 및 302를 제외하고는 BRD4 BD1 검정에서 4.5 내지 8.0 범위의 평균 pIC50 및 BRD4 BD2 검정에서 4.4 내지 7.2 범위의 평균 pIC50을 갖는 것으로 밝혀졌다. 실시예 303은 BRD4 BD1 검정에서 7.3의 평균 pIC50 및 BRD4 BD2 검정에서 6.8의 평균 pIC50을 갖는 것으로 밝혀졌다. 실시예 68은 BRD4 BD1 검정에서 6.6의 평균 pIC50 및 BRD4 BD2 검정에서 6.2의 평균 pIC50을 갖는 것으로 밝혀졌다. 실시예 305는 BRD4 BD1 검정에서 7.3의 평균 pIC50 및 BRD4 BD2 검정에서 6.4의 평균 pIC50을 갖는 것으로 밝혀졌다. 실시예 66은 BRD4 BD1 검정에서 6.7의 평균 pIC50 및 BRD4 BD2 검정에서 5.9의 평균 pIC50을 갖는 것으로 밝혀졌다. 실시예 303의 에디실레이트 염은 BRD4 BD1 검정에서 7.3의 평균 pIC50 및 BRD4 BD2 검정에서 6.6의 평균 pIC50을 갖는 것으로 밝혀졌다.
인간
전혈로부터의
LPS
유도된
MCP
-1 생성의 측정
박테리아 지질다당류(LPS)와 같은 toll-유사 수용체의 효능제에 의한 단핵구 세포의 활성화는 MCP-1을 포함하는 주요 염증성 매개체의 생성을 발생시킨다. 상기 경로는 광범위한 자가면역 및 염증성 장애의 병태생리학에서 중추적인 것으로 널리 간주된다. 혈액은 소듐 헤파린(Leo Pharmaceuticals)(10 유닛의 헤파린/혈액 mL)을 함유하는 튜브에 수거된다. 100% DMSO 중 1 μL 시험 샘플을 함유하는 96-웰 화합물 플레이트(공여자 가변성으로 인해 2개의 복제물)를 제조하였다. 130 μL의 전혈을 96-웰 화합물 플레이트의 각각의 웰에 분배하고, 37℃, 5% CO2에서 30분 동안 인큐베이션하였다. PBS 중에 제조된 10 μL의 지질다당류(살모넬라 티포사(Salmonella typhosa) 유래; L6386)(200 ng/mL의 최종 검정 농도)를 화합물 플레이트의 각각의 웰에 첨가하였다. 이후, 플레이트를 37℃, 5% CO2에서 18-24시간 동안 가습된 일차 세포 인큐베이터에 두었다. 140 μL의 PBS를 혈액을 함유하는 화합물 플레이트의 모든 웰에 첨가하였다. 이후, 플레이트를 밀봉하고, 2500 rpm에서 10분 동안 원심분리하였다. 25 μL의 세포 상층액을 인간 MCP-1 포획 항체로 사전 코팅된 96-웰 MSD 플레이트에 두었다. 플레이트를 밀봉하고, 1시간(r.t) 동안 600 rpm의 진탕기에 두었다. MSD SULFO-TAG™ 시약으로 표지된 25 μL의 항-인간 MCP-1 항체를 MSD 플레이트의 각각의 웰에 첨가하였다(스톡 50X를 Diluent 100을 이용하여 1:50으로 희석시켰고, 최종 검정 농도는 1 μg/mL임). 이후, 플레이트를 재밀봉시키고, 또 다른 1시간 동안 진탕시킨 후, PBS로 세척하였다. 이후, 150 μL의 2X MSD Read Buffer T(스톡 4X MSD Read Buffer T를 탈이온수를 이용하여 50:50으로 희석시킴)를 각각의 웰에 첨가하고, 플레이트를 MSD Sector Imager 6000에서 판독하였다. 각각의 화합물에 대한 농도 반응 곡선을 데이터로부터 생성시키고, pIC50 값을 계산하였다.
결과: 모든 실시예(실시예 2-11, 13, 15-36, 38-62, 65, 67, 69-79, 81-88, 90, 91, 93-94a, 95-99, 137-143, 145, 147, 150-156, 184-190, 192-210, 234-247, 271, 285-286, 288, 293, 301-302, 304, 310, 313 및 324 제외)를 상기 검정에서 시험하였고, 4.6 내지 8.8 범위의 평균 pIC50을 갖는 것으로 밝혀졌다. 실시예 303은 7.6의 평균 pIC50을 가졌다. 실시예 68은 5.4의 평균 pIC50을 가졌다. 실시예 305는 8.0의 평균 pIC50을 가졌다. 실시예 66은 6.0의 평균 pIC50을 가졌다. 실시예 303의 에디실레이트 염은 7.5의 평균 pIC50을 가졌다.
이들 데이터는 상기 전혈 검정에서 시험된 브로모도메인 억제제가 주요 염증성 매개체 MCP-1의 생성을 억제한 것을 입증한다.
hCES
-1에 의한 가수분해
카르복실에스테라제 1(CES1)에 의한 ESM-함유 BET 억제제의 가수분해는 표적화된 분자를 전달하는 한 양태이다. 재조합 인간 CES1에 의한 본 발명의 특정 화합물의 가수분해 속도를 HPLC 검정을 이용하여 결정하였다. 인간 세포에서 발현되고, 동종으로 정제된 재조합 인간 CES1(Gly18-Glu563, C-말단에 폴리히스티딘 태그를 가짐)(카탈로그 번호 C450)을 Novoprotein, Summit, New Jersey, USA로부터 획득하였다. 반응을 20℃에서 384 웰 플레이트에서 50 mM 소듐 포스페이트 pH 7.5/100 mM NaCl의 완충액 중에서 수행하였다. 검정은 고정된 농도의 시험 화합물(50 μM) 및 CES1(50 nM)을 이용하였고, pH를 낮추기 위해 포름산을 첨가함으로써 증가하는 시간으로 샘플을 정지시킴으로써 반응의 시간 경과를 획득하였다. 이후, 정지된 샘플을 0.1% 포름산을 함유하는 물 중 아세토니트릴의 구배를 이용하여 1 ml/min의 유량으로 50 x 2 mm C18 5 μM 역상 컬럼(Phenomenex Gemini)을 이용하여 가수분해되지 않은 에스테르로부터 생성물 산을 분리시키기 위해 HPLC에 의해 분석하였다. 크로마토그래피를 300 nm 파장에서의 흡광도를 이용하여 모니터하였다. 형성된 생성물의 %를 통합된 피크 영역을 이용하여 결정하고, 반응의 초기 속도를 결정하는데 사용하였다. 이들 조건하에서의 각각의 시험 화합물에 대한 CES1의 특정 활성(μM/min/μM의 단위)을 반응의 초기 속도를 CES1 농도로 나눔으로써 획득하였다.
결과: 실시예 1, 5, 13, 14, 98, 100, 102, 104, 109a, 110, 112, 116, 119, 120, 124, 125, 127, 128, 136, 139, 139a/b, 140, 141, 143, 146, 147, 155, 157, 159, 160, 168, 173, 181a, 184, 187, 189, 211, 219-222, 225a/b, 228, 228a/b, 229a/b, 230, 250, 258-259, 263, 268, 287, 289, 303, 및 305는 상기 검정에서 0.05 내지 30.92(가수분해된 시험 화합물 μM/분/CES1 μM)의 가수분해 속도를 가졌다. 실시예 303은 상기 검정에서 0.21(n = 2)의 평균 가수분해 속도를 가졌다. 실시예 305는 상기 검정에서 0.31(n = 2)(가수분해된 시험 화합물 μM/분/CES1 μM)의 평균 가수분해 속도를 가졌다. 실시예 16, 138, 156, 212, 214, 216 및 162a를 시험하였으나, 상기 검정에서 검출 가능한 수준의 가수분해를 갖지 않았다.
Claims (35)
- 하기 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 염:
상기 식에서,
R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소 또는 메틸이나, 단, R1 및 R2 중 적어도 하나는 메틸이고;
R3는 C1- 6알킬, C1- 6알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 또는 -CHR5(CH2)aR6이고;
R4는 벤즈이미다졸의 5 또는 6 위치에 부착되고, 이는이고;
R5는 수소, C1- 3알킬, C1- 3알콕시, 또는 -(CH2)dOR9이고;
R6는 수소, C1- 3알킬, C1- 3알콕시, -(CH2)eOR10, 하이드록실, -NR11R12, 할로, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 또는 헤테로아릴이고, 상기 C1- 3알킬, C1- 3알콕시, -(CH2)eOR10, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴은 C1- 3알킬, C1- 3알콕시, 할로, -CH2OH, -COOH, 및 -COCH3로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되는 1개 또는 2개의 치환기로 선택적으로 치환될 수 있고;
R7은 수소, C1- 6알킬, -(CH2)g사이클로알킬, -(CH2)h헤테로사이클로알킬, 또는 -CR13R14R15이고;
R8은 수소, C1- 6알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 또는 -CHR16R17이고, 상기 C1- 6알킬은 C1- 3알콕시로 선택적으로 치환되고, R16은 수소 또는 C1- 3알킬이고, R17은 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬이고;
R9, R10, R11, R12, R14, R15, 및 R18은 각각 독립적으로 수소 또는 C1- 3알킬이고;
R13은 수소, 하이드록실, -CH2OR18, 할로, -COOH, -CONH2, 1H-이미다졸-4-일, -SH, -SeH, C1- 3알킬, C1- 3알콕시, 페닐, 또는 4-하이드록시페닐이고, 상기 C1- 3알킬 또는 C1- 3알콕시는 할로, 하이드록실, -NHC(=NH2)NH2, -NH2, -COOH, -CONH2, 또는 -SCH3로 선택적으로 치환될 수 있고;
a는 0, 1, 2 또는 3이고;
b는 0 또는 1이고;
c는 1, 2 또는 3이나, 단, b가 1인 경우, c는 2 또는 3이고;
d 및 e는 각각 독립적으로 1 또는 2이고;
g 및 h는 각각 독립적으로 0, 1 또는 2이다. - 제1항에 있어서, R1 및 R2가 각각 메틸인 화합물.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, R3가 5 또는 6원 헤테로사이클로알킬 또는 -CHR5R6 기이고, R5가 수소 또는 C1- 3알킬이고, R6가 5 또는 6원 헤테로사이클로알킬이고, 상기 헤테로사이클로알킬이 C1-3알킬 또는 -COCH3로 선택적으로 치환될 수 있는 화합물.
- 제3항에 있어서, R6가로 구성된 군으로부터 선택되는 화합물.
- 제3항에 있어서, R6가인 화합물.
- 제3항에 있어서, R3가로 구성된 군으로부터 선택되고, Ra가 수소 또는 C1- 3알킬인 화합물.
- 제3항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, R5가 수소인 화합물.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, R3가 -CHR5(CH2)aR6이고, R5가 -(CH2)dOR9이고, a가 0이고, R6가 -(CH2)eOR10인 화합물.
- 제8항에 있어서, R5 및 R6 둘 모두가 각각 -CH2OCH3인 화합물.
- 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, R4가 벤즈이미다졸의 5 위치에 부착되는 화합물.
- 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, b가 0인 화합물.
- 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, c가 1인 화합물.
- 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, R4가인 화합물.
- 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, R7이 수소, 메틸, 이소프로필, 세크-부틸, 이소부틸, -CH2-페닐, -CH2-4-하이드록시페닐, -CH2OH, -CH(CH3)OH, -CH2SH, -CH2SeH, -(CH2)2SCH3, -CH2COOH, -(CH2)2COOH, -CH2CONH2, -(CH2)2CONH2, -(CH2)4NH2, -(CH2)3NHC(=NH2)NH2, 또는 -CH2-1H-이미다졸-4-일인 화합물.
- 제14항에 있어서, R7이 이소프로필, 세크 -부틸, 또는 -CH(CH3)OH인 화합물.
- 제15항에 있어서, R7이 -CH(CH3)OH인 화합물.
- 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, R8이 수소인 화합물.
- 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, R8이 C1- 6알킬 또는 사이클로알킬인 화합물.
- 제18항에 있어서, R8이 이소프로필, 이소부틸 또는 사이클로펜틸인 화합물.
- 제1항에 있어서, 하기로 구성된 군으로부터 선택되는 화합물 또는 이의 염:
터트-부틸 (2S,3R)-2-{[(1-{[(3R)-1-아세틸피페리딘-3-일]메틸}-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일)메틸]아미노}-3-하이드록시부타노에이트;
터트-부틸 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
2-메틸프로필 (2S)-2-[(2-{[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]옥시}에틸)아미노]-3-하이드록시부타노에이트;
2-메틸프로필 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(3S)-옥산-3-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
터트-부틸 (2S,3R)-2-{[(1-{[(3R)-1-아세틸피페리딘-3-일]메틸}-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일)메틸]아미노}-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-{[(1-{[(3R)-1-아세틸피페리딘-3-일]메틸}-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일)메틸]아미노}-3-하이드록시부타노에이트;
2-메틸프로필 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-3-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
사이클로펜틸 (2S)-2-[(2-{[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]옥시}에틸)아미노]프로파노에이트;
프로판-2-일 (2S)-2-[(2-{[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]옥시}에틸)아미노]-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-{[(1-{[(3R)-1-아세틸피페리딘-3-일]메틸}-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일)메틸]아미노}-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(3R)-옥산-3-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
사이클로부틸 (2S,3R)-2-{[(1-{[(3R)-1-아세틸피페리딘-3-일]메틸}-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일)메틸]아미노}-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S)-2-{[(1-{[(3R)-1-아세틸피페리딘-3-일]메틸}-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일)메틸]아미노}-3-메틸부타노에이트;
사이클로펜틸 (2S)-2-[(2-{[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]옥시}에틸)아미노]-3-메톡시프로파노에이트;
2,2-디메틸프로필 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(3R)-옥산-3-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
사이클로부틸 (2S,3R)-2-[(2-{[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]옥시}에틸)아미노]-3-하이드록시부타노에이트;
사이클로펜틸 (2S)-2-[(2-{[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]옥시}에틸)아미노]프로파노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-3-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-{[(1-{[(3S)-1-아세틸피페리딘-3-일]메틸}-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-1,3-벤조디아졸-6-일)메틸]아미노}-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(3R)-옥산-3-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
프로판-2-일 (2S,3R)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(3R)-옥산-3-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트;
사이클로부틸 (2R,3S)-2-({[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-[(3R)-옥산-3-일메틸]-1H-1,3-벤조디아졸-6-일]메틸}아미노)-3-하이드록시부타노에이트; 및
(3S)-옥솔란-3-일 (2S,3R)-2-[(2-{[2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-(옥산-4-일메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-5-일]옥시}에틸)아미노]-3-하이드록시부타노에이트. - 제1항에 있어서, 화학식의 (2S,3R)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트인 화합물 또는 이의 염.
- 제1항에 있어서, 화학식의 (2S,3R)-이소프로필 2-(((1-(1,3-디메톡시프로판-2-일)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트인 화합물 또는 이의 염.
- 제1항에 있어서, 화학식의 (2S,3R)-2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부탄산인 화합물 또는 이의 염.
- 제1항에 있어서, 화학식의 (2S,3R)-2-(((1-(1,3-디메톡시프로판-2-일)-2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부탄산인 화합물 또는 이의 염.
- 제1항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서, 약학적으로 허용되는 염의 형태인 화합물.
- 제1항에 있어서, 화학식의 (2S,3R)-이소프로필 2-(((2-(1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-일)-1-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)메틸)아미노)-3-하이드록시부타노에이트의 1,2-에탄디설폰산 염인 화합물.
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- 제27항에 있어서, 5.4, 8.8, 9.9, 11.6, 13.8, 16.9, 18.0, 16.6, 19.1, 19.4, 19.8, 20.4, 20.9, 21.3, 22.0, 22.4, 22.9, 23.4, 24.9, 및 25.1도의 2θ 값 ± 0.1° 2θ 실험 오차의 유의한 X-선 분말 회절(XRPD) 피크를 가짐을 특징으로 하는 화합물.
- 제1항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서, 자유 염기 형태인 화합물.
- 제1항 내지 제29항 중 어느 한 항에 정의된 화합물, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약학적 조성물.
- 제1항 내지 제29항 중 어느 한 항에 있어서, 치료에서 사용하기 위한 화합물.
- 제1항 내지 제29항 중 어느 한 항에 있어서, 류마티스 관절염의 치료에서 사용하기 위한 화합물.
- 류마티스 관절염의 치료를 위한 약제의 제조에서의 제1항 내지 제29항 중 어느 한 항에 정의된 화합물의 용도.
- 치료적 유효량의 제1항 내지 제29항 중 어느 한 항에 정의된 화합물을 자가면역 또는 염증성 질병 또는 암을 치료할 필요가 있는 인간 대상체에 투여하는 것을 포함하는 자가면역 또는 염증성 질병 또는 암의 치료 방법.
- 치료적 유효량의 제1항 내지 제29항 중 어느 한 항에 정의된 화합물을 류마티스 관절염을 치료할 필요가 있는 인간 대상체에 투여하는 것을 포함하는 류마티스 관절염의 치료 방법.
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