KR20170120976A - Strain having ginsenoside bioconversion activity, Manufacturing method for fermented Panax ginseng powder using the strain and Fermented Panax ginseng powder manufactured by the method - Google Patents

Strain having ginsenoside bioconversion activity, Manufacturing method for fermented Panax ginseng powder using the strain and Fermented Panax ginseng powder manufactured by the method Download PDF

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Abstract

The present invention provides a strain of Saccharomyces servazzii, GB-07 (Deposit No.: Korean Agricultural Culture Collection, KACC93250P) having ginsenoside bioconversion activity. Additionally, the present invention provides a method of producing fermented ginseng powder, and a fermented ginseng powder produced thereby, wherein the method comprises: a reaction solution preparation step for mixing a ginseng-type target material with purified water to prepare a reaction solution; and a culture step for culturing the reaction solution inoculated with a conjugated enzyme containing one type of enzyme selected from pectinases, and the strain of Saccharomyces servazzii, GB-07 (Deposit No.: Korean Agricultural Culture Collection, KACC93250P).

Description

진세노사이드 생물전환능을 갖는 균주, 인삼발효분말의 제조방법 및 이에 의하여 제조된 인삼발효분말 {Strain having ginsenoside bioconversion activity, Manufacturing method for fermented Panax ginseng powder using the strain and Fermented Panax ginseng powder manufactured by the method}[0001] The present invention relates to a strain having ginsenoside bioconverting ability, a method for producing ginseng fermentation powder, and a ginseng fermentation powder prepared by the method, wherein the ginseng fermentation powder has a bioconversion activity, a manufacturing method for fermented ginseng powder using fermented ginseng powder, }

본 발명은 진세노사이드 생물전환능을 갖는 균주, 인삼발효분말의 제조방법 및 이에 의하여 제조된 인삼발효분말에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 특정 진세노사이드에 해당하는 컴파운드 케이(Compound K)와 같은 희귀 진세노사이드 함량이 증대될 수 있도록 하는 진세노사이드 생물전환능을 갖는 균주, 이를 이용한 인삼발효분말의 제조방법 및 이에 의하여 제조된 인삼발효분말에 관한 것이다.The present invention relates to a strain having ginsenoside bioconversion ability, a method for producing ginseng fermentation powder, and a ginseng fermentation powder produced thereby, and more particularly, to a method for producing a ginseng fermentation powder such as a compound k corresponding to a specific ginsenoside A method for producing ginseng fermentation powder using the same, and a ginseng fermentation powder prepared by the method.

인삼은 인삼속 (Panax)에 속하는 식물로, 뿌리를 약용으로 이용하고 있는데, 이러한 인삼의 효능은 인삼에 존재하는 활성성분인 진세노사이드에 기인한 것이다.Ginseng is a plant belonging to the genus Panax and its roots are medicinal. The effect of ginseng is due to ginsenoside, an active ingredient in ginseng.

진세노사이드는 진세노사이드 아글리콘 (ginsenoside aglycone)의 구조에 따라 프로토파낙사다이올계 진세노사이드 (Protopanaxadiol-type ginsenoside), 프로토파낙사트라이올계 진세노사이드 (Protopanaxatriol-type ginsenoside), 그리고 올레아난계 진세노사이드 (Oleanane-type ginsenoside)의 세 가지로 분류될 수 있다. The ginsenoside may be selected from the group consisting of protopanaxadiol-type ginsenoside, protopanaxatriol-type ginsenoside, and oleic acid according to the structure of ginsenoside aglycone, And the Oleanane-type ginsenoside.

진세노사이드 유도체들은 트리터펜 (triterpene)인 비당부 (protopanaxadiol 또는 protopanaxatriol)의 R1, R2, R3의 알콜성 OH기에 글루코스(glucose), 람노스(rhamnose), 자일로스(Xylose), 아라비노스(arabinose)와 같은 당류가 에스테르 결합된 구조를 갖는 화합물로서, 현재 알려져 있는 인삼의 주요 진세노사이드는 약 13종의 일반 진세노사이드와 이로부터 전환되는 것으로 알려진 희귀 진세노사이드 약 11종이 대표적인 진세노사이드로 알려져 있다. The ginsenoside derivatives are glucose, rhamnose, xylose, and arabinose in the alcoholic OH groups of R1, R2 and R3 of triterpene protopanaxadiol or protopanaxatriol. ), Which is known in the art, is a compound having an ester-bonded structure, and currently known major ginsenosides include about 13 common ginsenosides and about 11 rare ginsenosides known to be converted therefrom. .

인삼은 수삼(fresh ginseng)을 그대로 사용하거나, 건조시켜 백삼(white ginseng)의 형태로 제조하여 사용하거나, 또는 증숙시켜 홍삼(red ginseng)의 형태로 제조하여 사용될 수 있다.Ginseng can be used in the form of fresh ginseng, dried or in the form of white ginseng, or prepared in the form of red ginseng.

인삼 중 수삼에는 Rg1, Re, Rb1, Rb2, Rc, Rd 등의 배당체 진세노사이드가 주를 이루고 있으며, 가공 인삼의 경우 수삼에는 거의 존재하지 않는 희귀 진세노사이드인 Rg3, Rh1, Rh2, Compound K의 함량이 증가할 수 있는 것으로 알려져 있다. Rinsed ginseng is mainly composed of ginsenoside Rg1, Re, Rb1, Rb2, Rc and Rd. In case of processed ginseng, rare ginsenosides Rg3, Rh1, Rh2, Compound K Is known to be increased.

최근에는, 가공된 인삼에만 존재하는 인삼사포닌의 함량을 더욱 높이기 위한 많은 연구가 활발하게 수행되고 있다. 대표적 가공 인삼인 홍삼은 수삼을 증숙하여 제조할 수 있으며, 이 과정에서 화학구조적으로 불안정한 진세노사이드 아글리콘의 C-20위치에 결합되어 있는 배당체의 결합이 가수분해될 수 있다. In recent years, much research has been actively conducted to further increase the content of ginseng saponin present only in processed ginseng. Red ginseng, which is a typical processed ginseng, can be prepared by boiling ginseng. During this process, the bond of the glycoside bonded at the C-20 position of the chemically structurally unstable ginsenoside aglycon can be hydrolyzed.

이러한 과정을 통해 가공된 홍삼에는 진세노사이드 Rh1, Rh2, Rg2, Rg3 등이 수삼이나 백삼에 비해 많이 함유되어 있다. 다만, 희귀 진세노사이드의 일종인 진세노사이드 Rh2는 홍삼에서도 그 함량이 매우 미량으로 존재하고 있는 것으로 알려져 있다. Ginsenosides Rh1, Rh2, Rg2, and Rg3 are contained in red ginseng processed through this process more than ginseng and white ginseng. However, ginsenoside Rh2, a rare ginsenoside, is known to exist in a very small amount in red ginseng.

이러한 가공된 인삼에서 암 예방, 암 억제, 혈압강하, 뇌신경세포 보호, 항혈전, 항산화 등에서의 약리 활성 효과가 인삼의 일반 진세노사이드보다 우수하게 나타난다는 결과가 알려지면서, 가공된 인삼에 존재하는 희귀 진세노사이드를 수득하기 위한 여러 방법들이 시도되고 있다. It has been found that the pharmacological activity effect of such processed ginseng in cancer prevention, cancer suppression, blood pressure lowering, brain nerve cell protection, antithrombosis and antioxidant is superior to general ginsenoside of ginseng, Several methods for obtaining rare ginsenosides have been attempted.

한국등록특허 제10-0377546호(발명의 명칭:효소적 방법에 의한 진세노사이드 컴파운드 케이의 제조방법)Korean Patent No. 10-0377546 (entitled " Process for producing ginsenoside compound k by an enzymatic method)

본 발명의 해결하고자 하는 과제는 인삼류 분말 또는 인삼류 추출물로부터 컴파운드 케이(Compound K)를 생산할 수 있는 진세노사이드 생물전환능을 갖는 균주 사카로마이세스 세르바찌(Saccharomyces servazzii) 균주 GB-07을 제공하는 것이다. DISCLOSURE OF THE INVENTION The object of the present invention is to provide a strain Saccharomyces servazzii strain GB-07 having a ginsenoside bioconversion ability capable of producing a compound K from a ginseng powder or a ginseng extract will be.

본 발명의 해결하고자 하는 다른 과제는 진세노사이드 생물전환능을 갖는 균주 사카로마이세스 세르바찌(Saccharomyces servazzii) 균주 GB-07를 사용하여 특정 진세노사이드 예를 들어, 별도 처리하지 않은 인삼류, 인삼류 추출물에는 거의 존재하지 않는 희귀 진세노사이드 컴파운드 케이(Compound K) 함량이 증대될 수 있도록 하거나, 별도 처리하지 않은 인삼류, 인삼류 추출물에 존재하는 일반 진세노사이드를 희귀 진세노사이드 컴파운드 케이(Compound K)로 전환시킬 수 있는 효과적인 인삼발효분말(GBCK25)의 제조방법 및 이에 의하여 제조된 인삼발효분말을 제공하는 것이다.Another problem to be solved by the present invention is to use a strain Saccharomyces servazzii strain GB-07 having a ginsenoside bioconverting ability to isolate specific ginsenosides such as ginseng, To increase the content of rare Ginsenoside K (Compound K), which is rarely present in the extract, or to increase the content of Compound G, which is a rare Ginsenoside Compound K, (GBCK25) and a ginseng fermentation powder prepared by the method.

상술한 해결하고자 하는 과제를 달성하기 위하여, 본 발명은 진세노사이드 생물전환능을 갖는 사카로마이세스 세르바찌(Saccharomyces servazzii) 균주 GB-07(기탁번호: 한국농업미생물자원센터 KACC93250P)를 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides Saccharomyces servazzii strain GB-07 (accession number: KACC 93250P of Korean Agricultural Microbiology Resource Center) having ginsenoside bioconversion ability .

본 발명의 다른 실시 형태에 따르면, 본 발명은 인삼류 대상물과 정제수를 혼합하여 반응액을 제조하는 반응액 제조단계; 그리고, 펙티나아제(pectinase) 계열에서 선택된 1종의 효소와, 사카로마이세스 세르바찌(Saccharomyces servazzii) 균주 GB-07(기탁번호: 한국농업미생물자원센터 KACC93250P)를 갖는 복합효소를 상기 반응액에 접종하고, 배양하는 배양단계를 포함하는 인삼발효분말의 제조방법을 제공한다.According to another embodiment of the present invention, there is provided a method for producing a reaction solution, comprising the steps of: preparing a reaction solution for mixing a subject of ginseng with purified water to prepare a reaction solution; Then, a complex enzyme having one kind of enzyme selected from the pectinase family and Saccharomyces servazzii strain GB-07 (Accession number: KACC93250P, Korean Agricultural Microbiology Resource Center) was added to the reaction solution And a culture step of culturing the ginseng fermentation powder.

상기 펙티나아제 계열의 효소는 사이톨라제 피씨엘5(Cytolase PCL5), 피-플로(Pyr-Flo), 라피다아제 씨80맥스(Rapidase C80Max), 옵티빈 매쉬(Optivin Mash) 및 스미자임 에이씨(Sumyzyme AC)를 포함할 수 있다.The enzymes of the pectinase family include Cytolase PCL5, Pyr-Flo, Rapidase C80Max, Optivin Mash, (Sumyzyme AC).

상기 인삼류 대상물은 인삼류 분말 또는 인삼류 추출물을 포함할 수 있다.The ginseng product may include ginseng powder or ginseng extract.

상기 인삼류 분말 또는 상기 인삼류 추출물에 사용되는 인삼은 고려인삼(Panax ginseng C.A. Meyer), 화기삼(Panax quinquefolium), 전칠삼(Panax notoginsneng), 죽절삼(Panax japonicum), 삼엽삼(Panax trifolium), 히말라야삼(Panax pseudoginseng), 베트남삼(Panax vietnamensis) 중의 하나 이상을 포함하되 일반 진세노사이드를 함유할 수 있다.Panax ginseng CA Meyer, Panax quinquefolium, Panax notoginseng, Panax japonicum, Panax trifolium, Himalayan ginseng (Panax ginseng CA Meyer), Panax ginseng CA Meyer, Panax pseudoginseng, and Panax vietnamensis, but may contain common ginsenosides.

또한, 상기 인삼류 분말 또는 상기 인삼류 추출물에 사용되는 원재료는 산삼, 수삼, 홍삼, 백삼, 미삼, 인삼 잎, 인삼 열매, 홍삼추출물, 산삼줄기세포, 산삼캘러스, 인삼줄기세포, 인삼캘러스, 산삼배양근, 부정근, 장뇌삼 중 하나 이상을 포함할 수 있다.The raw materials used for the ginseng powder or the ginseng extract include ginseng, ginseng, red ginseng, white ginseng, ginseng, ginseng leaves, ginseng fruit, ginseng extract, ginseng stem cell, ginseng callus, ginseng stem cell, ginseng callus, Adventitious roots, and camphor ginseng.

상기 복합효소의 농도는 상기 반응액의 2% ~ 20% 범위 이내일 수 있다.The concentration of the complex enzyme may be within a range of 2% to 20% of the reaction solution.

상기 반응액 제조단계에서 상기 인삼류 대상물 1 중량부당 상기 정제수는 10 ~ 100 중량부를 가질 수 있다.In the reaction solution preparation step, the purified water may be 10 to 100 parts by weight per 1 part by weight of the ginseng product.

상기 배양단계에서 배양온도는 30℃ ~ 60℃ 일 수 있다.In the culturing step, the incubation temperature may be 30 ° C to 60 ° C.

상기 배양단계에서 산성도는 pH 3.5 ~ pH 5.5 일 수 있다.In the culturing step, the acidity may be from pH 3.5 to pH 5.5.

상기 배양단계에서 배양시간은 48시간 ~ 240시간 일 수 있다.The incubation time in the culturing step may be from 48 hours to 240 hours.

상기 배양단계에서 교반속도는 50rpm ~ 200rpm 일 수 있다.The stirring speed in the culturing step may be 50 rpm to 200 rpm.

본 발명의 다른 실시 형태에 의하면, 본 발명은 상술한 인삼발효분말의 제조방법에 의하여 제조되는 인삼발효분말을 제공한다.According to another embodiment of the present invention, there is provided a ginseng fermentation powder produced by the above-described method for producing ginseng fermentation powder.

본 발명에 따르면, 종래와 달리, 새롭게 분리된 신규 사카로마이세스 세르바찌 (Saccharomyces servazzii 균주 GB-07(기탁번호: 한국농업미생물자원센터 KACC93250P)은 우수한 진세노사이드 생물전환능을 갖는다.According to the present invention, the newly isolated new Saccharomyces servazzii strain GB-07 (accession number: KACC 93250P, Korea Agrobiological Resources Resource Center) has excellent ginsenoside bioconversion ability.

특히, 인삼류 또는 인삼류 추출물로부터 약리 활성이 높은 희귀 진세노사이드 컴파운드 케이(Compound K)의 함량이 증가된 인삼발효분말(GBCK25)을 단순화된 공정을 통해 효율적으로 제조할 수 있는 이점이 있다.In particular, there is an advantage that the ginseng fermentation powder (GBCK25) having an increased amount of rare ginsenoside compound K (Compound K) having a high pharmacological activity from ginseng or ginseng extract can be efficiently produced through a simplified process.

뿐만 아니라, 펙티나아제(pectinase) 계열에서 선택된 1종의 효소와, 사카로마이세스 세르바찌(Saccharomyces servazzii) 균주 GB-07(기탁번호: 한국농업미생물자원센터 KACC93250P)를 갖는 복합효소를 사용함으로써 컴파운드 케이(Compound K)의 함량이 증가된 인삼발효분말(GBCK25)을 효율적으로 얻을 수 있는 이점이 있다.In addition, by using a complex enzyme having one kind of enzyme selected from the pectinase family and Saccharomyces servazzii strain GB-07 (Accession number: KACC 93250P, Korean Agricultural Microbiology Resource Center) There is an advantage that the ginseng fermentation powder (GBCK25) having an increased content of Compound K can be efficiently obtained.

도 1은 인삼류 대상물에 사카로마이세스 세르바찌(Saccharomyces servazzii) 균주 GB-07 단독 처리 및 펙티나아제(pectinase) 계열 효소 단독 처리, 사카로마이세스 세르바찌(Saccharomyces servazzii) 균주 GB-07과 펙티나아제(pectinase) 계열 효소의 복합발효 시 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC:High Performance Liquid Chromatography)를 통해 검출된 희귀 진세노사이드 컴파운드 케이(Compound K)의 분석 결과를 나타낸 도면이다.
도 2는 인삼류 분말 또는 인삼류 추출물에 사카로마이세스 세르바찌(Saccharomyces servazzii) 균주 GB-07과 효소의 복합발효 처리 전/후 결과에 대해 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)를 통해 검출된 희귀 진세노사이드 컴파운드 케이(Compound K)의 분석 결과를 나타낸 도면이다.
도 3a ~ 도 3e는 인삼류 대상물에 사카로마이세스 세르바찌(Saccharomyces servazzii) 균주 GB-07과 펙티나아제(pectinase) 계열 효소의 복합발효 시 효소농도 스크리닝(screening) 결과에 대해 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)를 통해 검출된 희귀 진세노사이드 컴파운드 케이(Compound K)의 분석 결과를 나타낸 도면이다.
도 4는 인삼류 대상물에 사카로마이세스 세르바찌(Saccharomyces servazzii 균주 GB-07과 펙티나아제(pectinase)계열 효소의 복합발효 시 반응비율 스크리닝(screening) 결과에 대해 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)를 통해 검출된 희귀 진세노사이드 컴파운드 케이(Compound K)의 분석 결과를 나타낸 도면이다.
도 5는 인삼류 대상물에 사카로마이세스 세르바찌(Saccharomyces servazzii) 균주 GB-07과 펙티나아제(pectinase)계열 효소의 복합발효 시 배양온도 스크리닝(screening) 결과에 대해 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)를 통해 검출된 희귀 진세노사이드 컴파운드 케이(Compound K)의 분석 결과를 나타낸 도면이다.
도 6은 인삼류 대상물에 사카로마이세스 세르바찌(Saccharomyces servazzii) 균주 GB-07과 펙티나아제(pectinase)계열 효소의 복합발효 시 반응시간 스크리닝(screening) 결과에 대해 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)를 통해 검출된 희귀 진세노사이드 컴파운드 케이(Compound K)의 분석 결과를 나타낸 도면이다.
도 7은 인삼류 대상물에 사카로마이세스 세르바찌(Saccharomyces servazzii) 균주 GB-07과 펙티나아제(pectinase) 계열 효소의 복합발효 시 교반속도 스크리닝(screening) 결과에 대해 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)를 통해 검출된 희귀 진세노사이드 컴파운드 케이(Compound K)의 분석 결과를 나타낸 도면이다.
도 8는 인삼류 대상물에 사카로마이세스 세르바찌 Saccharomyces servazzii 균주 GB-07과 펙티나아제(pectinase) 계열 효소의 복합발효 시 산성도(pH) 조건 스크리닝(screening) 결과에 대해 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)를 통해 검출된 희귀 진세노사이드 컴파운드 케이(Compound K)의 분석 결과를 나타낸 도면이다.Fig. 1 is a graph showing the results of a single treatment of Saccharomyces servazzii strain GB-07 and a pectinase-based enzyme alone, a Saccharomyces servazzii strain GB-07, (Compound K) detected by high performance liquid chromatography (HPLC) during the combined fermentation of pectinase family enzymes.
Fig. 2 is a graph showing the results of the pre-fermentation process of Saccharomyces servazzii strain GB-07 and enzyme in ginseng powder or ginseng root extract, And the result of analysis of the compound K (Compound K).
FIGS. 3A to 3E are graphs showing the results of enzyme concentration screening for the combined fermentation of Saccharomyces servazzii strain GB-07 and pectinase-related enzymes in a sample of ginseng root by high performance liquid chromatography ( HPLC). The results of the analysis are shown in FIG.
FIG. 4 is a graph showing the results of screening of the reaction ratio of saccharomyces cerevisiae (Saccharomyces servazzii strain GB-07 and pectinase-related enzymes in a mixed fermentation product) with high-performance liquid chromatography (HPLC) And the result of analysis of the detected rare ginsenoside compound K (Compound K).
FIG. 5 shows the results of high performance liquid chromatography (HPLC) on the results of incubation temperature screening for the fermentation of Saccharomyces servazzii strain GB-07 and pectinase-based enzymes on the ginseng products. FIG. 2 is a graph showing the results of analysis of a rare ginsenoside compound K (Compound K)
FIG. 6 shows the results of high performance liquid chromatography (HPLC) on the reaction time screening results of the combined fermentation of Saccharomyces servazzii strain GB-07 and pectinase-family enzymes in the ginseng products. FIG. 2 is a graph showing the results of analysis of a rare ginsenoside compound K (Compound K)
7 shows high performance liquid chromatography (HPLC) on the results of stirring speed screening for the combined fermentation of Saccharomyces servazzii strain GB-07 and pectinase family enzymes in a ginseng product. FIG. 2 is a graph showing the results of analysis of a rare ginsenoside compound K (Compound K)
FIG. 8 is a graph showing the results of high performance liquid chromatography (HPLC) on the acidic (pH) screening results of complex fermentation of Saccharomyces servazzii strain GB-07 and pectinase family enzymes in a ginseng product, FIG. 2 is a graph showing the results of analysis of a rare ginsenoside compound K (compound K)

이하, 본 발명에 의한 진세노사이드 생물전환능을 갖는 균주, 인삼발효분말의 제조방법 및 이에 의하여 제조된 인삼발효분말에 대하여 본 발명의 바람직한 하나의 실시형태를 첨부된 도면을 참조하여 상세히 설명한다. 본 발명은 하기의 실시예에 의하여 보다 더 잘 이해될 수 있으며, 하기의 실시예는 본 발명의 예시목적을 위한 것이고, 첨부된 특허청구범위에 의하여 한정되는 보호범위를 제한하고자 하는 것은 아니다.BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION Hereinafter, preferred embodiments of the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings, which show a strain having ginsenoside bioconversion ability, a method for producing ginseng fermentation powder, and a ginseng fermentation powder produced thereby . The present invention may be better understood by the following examples, which are for the purpose of illustrating the present invention and are not intended to limit the scope of protection defined by the appended claims.

도 1 및 도 2를 참조하여, 본 발명에 따른 진세노사이드 생물전환능을 갖는 사카로마이세스 세르바찌(Saccharomyces servazzii) 균주 GB-07(기탁번호: 한국농업미생물자원센터 KACC93250P)를 설명하면 다음과 같다.1 and 2, description will be made of Saccharomyces servazzii strain GB-07 (accession number: KACC93250P, Korean Agro-microorganism Resource Center) having ginsenoside bioconversion ability according to the present invention. Respectively.

먼저, 사카로마이세스 세르바찌(Saccharomyces servazzii) 균주 GB-07는 맥주로부터 베타-글루코시다아제(β-glucosidase)를 생성하는 효모를 단리하고 동정한 것이다. First, Saccharomyces servazzii strain GB-07 isolates and identifies a yeast that produces beta-glucosidase from beer.

상술한 과정을 통하여 분리 동정한 사카로마이세스 세르바찌(Saccharomyces servazzii) 균주 GB-07는 MRS 배지에서 30℃, 24시간 배양 후에 사용된다.Saccharomyces servazzii strain GB-07 isolated and identified through the above procedure is used after culturing at 30 ° C for 24 hours in MRS medium.

도 1 및 도 2를 참조하면, 사카로마이세스 세르바찌(Saccharomyces servazzii) 균주 GB-07는 진세노사이드 생물전환능을 갖는 것을 확인할 수 있다.Referring to FIGS. 1 and 2, it can be confirmed that Saccharomyces servazzii strain GB-07 has a ginsenoside bioconversion ability.

희귀 진세노사이드 컴파운드 케이(Compound K) 분석에 YL 9100 HPLC system이 사용되었고, YMC-Triart C18 컬럼(길이 250mm, 내경 4.6mm)이 사용되었다. 검출기의 검출파장은 UV 230nm, 컬럼온도는 35℃에서 분석되었고, 이동상(mobile phase)은 아세토니트릴과 물을 사용하여 유속(flow rate) 0.8mL/min으로 분석되었다.A YL 9100 HPLC system was used for the analysis of the rare ginsenoside compound K and a YMC-Triart C18 column (250 mm long, 4.6 mm ID) was used. Detection wavelength of the detector was analyzed at 230 nm UV and column temperature at 35 ℃. The mobile phase was analyzed using acetonitrile and water at a flow rate of 0.8 mL / min.

일반 진세노사이드와 희귀 진세노사이드 분석은 이동상의 비율을 조절하여 분석이 진행되었고, 분석에 사용한 진세노사이드 표준품은 Tauto(China)에서 구매한 제품이고, 분석에 사용된 용매는 Acetonitrile과, Methanol이며, Burdick & Jackson, Korea사에서 구입한 제품이다. 각각의 시료는 대상에 따라 메탄올과 물 비율을 조절하여 진세노사이드 추출을 진행하였고 0.45 ㎛ 멤브레인 필터(membrane filter)로 여과한 후 분석을 진행하였다. General ginsenosides and rare ginsenosides were analyzed by controlling the proportion of mobile phases. The ginsenoside standard used in the analysis was purchased from Tauto (China). The solvents used for the analysis were acetonitrile, methanol And is purchased from Burdick & Jackson, Korea. Each sample was subjected to ginsenoside extraction by adjusting the ratio of methanol and water according to the target, and the resultant was filtered through a 0.45 ㎛ membrane filter and analyzed.

또한, 인삼발효분말은 증류수에 고려인삼(Panax ginseng C.A. Meyer) 뿌리 분말을 100:1의 비율로 넣고, 온도 60℃, 240시간 동안 발효하되, 각각 사카로마이세스 세르바찌(Saccharomyces servazzii) 균주 GB-07, 옵티빈 매쉬(Optivin Mash), 상기 사카로마이세스 세르바찌(Saccharomyces servazzii) 균주 GB-07 및 옵티빈 매쉬(Optivin Mash)를 혼합한 복합효소를 사용하여 각각 발효한 후 반응액을 식힌 후 고형분만을 회수하여 동결건조하였다.In addition, the ginseng fermentation powder was prepared by adding Korean ginseng (Panax ginseng CA Meyer) root powder to distilled water at a ratio of 100: 1 and fermenting at a temperature of 60 ° C for 240 hours, respectively, and Saccharomyces servazzii strain GB -07, Optivin Mash, Saccharomyces servazzii strain GB-07 and Optivin Mash were used for fermentation, and the reaction solution was cooled Only the post-solid content was recovered and lyophilized.

상기 사카로마이세스 세르바찌(Saccharomyces servazzii) 균주 GB-07, 상기 옵티빈 매쉬(Optivin Mash) 효소 및 상기 복합효소에 의한 생물전환능은 표1과 같다.Table 1 shows Saccharomyces servazzii strain GB-07, the Optivin Mash enzyme, and the biosynthetic ability by the complex enzyme.

균주, 효소 및 복합효소의 생물전환능Biological conversion of strains, enzymes and complex enzymes Saccharomyces servazzii 균주 GB-07Saccharomyces servazzii strain GB-07 Optivin MashOptivin Mash 복합효소
(GB-07 + Optivin Mash)Complex enzyme
(GB-07 + Optivin Mash) Rb1Rb1 0.360.36 0.40.4 00 RcRc 0.340.34 0.560.56 00 Rb2Rb2 0.480.48 0.760.76 00 RdRd 1.051.05 1.891.89 00 합계Sum 2.232.23 3.613.61 00 Compound KCompound K 15.0715.07 13.5713.57 27.727.7

여기서, 각 수치는 각각에 의하여 발효된 인삼발효분말 1g에 함유된 진세노사이드 함량(mg)을 나타낸다.Here, each value represents the content (mg) of ginsenoside contained in 1 g of the ginseng fermentation powder fermented by each.

도 1은 컴파운드 케이(Compound K) 표준품, 사카로마이세스 세르바찌(Saccharomyces servazzii) 균주 GB-07에 의하여 발효된 인삼발효분말, 펙티아나제 중의 옵티빈 매쉬(Optivin Mash)에 의하여 발효된 인삼발효분말, 사카로마이세스 세르바찌(Saccharomyces servazzii) 균주 GB-07와 옵티빈 매쉬(Optivin Mash)가 혼합된 복합효소에 의한 인삼발효분말에 대한 고성능 액체 크로마토그래피(이하, 'HPLC' 라 합니다)의 분석결과를 보여주는 것이다. Fig. 1 is a graph showing the effect of ginseng fermentation powder fermented by the compound K standard product, Saccharomyces servazzii strain GB-07, ginseng fermentation fermented by Optivin Mash in pectinase (Hereinafter referred to as "HPLC") for the ginseng fermentation powder by a complex enzyme comprising Saccharomyces servazzii strain GB-07 and Optivin Mash The results of the analysis are shown.

한편, 인삼류 분말과 인삼류 추출물이 상기 복합효소에 의하여 복합발효 되기 전후의 컴파운드 케이로 전환되는 전환여부는 표 2와 같다.Table 2 shows the conversion of ginseng powder and ginseng extract into compound k before and after compound fermentation by the complex enzyme.

발효 전후의 컴파운드 케이의 함량Content of compound k before and after fermentation
인삼류 분말Ginseng powder 인삼류 추출물Ginseng extract 발효 전Before fermentation 발효 후After fermentation 발효 전Before fermentation 발효 후After fermentation Rb1Rb1 4.394.39 00 13.4613.46 00 RcRc 1.781.78 00 5.545.54 00 Rb2Rb2 2.682.68 00 7.667.66 00 RdRd 0.570.57 00 1.121.12 00 합계Sum 9.419.41 00 27.7927.79 00 Compound KCompound K 00 27.727.7 00 17.6017.60

여기서, 각 수치는 발효되기 전의 인삼류 대상물과 발효된 인삼발효분말 1g에 함유된 진세노사이드 함량(mg)을 나타낸다.Here, each value represents the content (mg) of ginsenoside contained in 1 g of the fermented ginseng fermentation powder and the object of the ginseng before fermentation.

도 2는 컴파운드 케이(Compound K) 표준품, 발효하기 전의 인삼류 분말(또는 인삼류 추출물), 복합효소(사카로마이세스 세르바찌(Saccharomyces servazzii) 균주 GB-07와 옵티빈 매쉬(Optivin Mash)가 혼합)를 사용하여 발효한 이후의 인삼발효분말(또는 인삼류 추출물)에 대한 HLPC의 분석결과를 보여주는 것이다. Fig. 2 is a graph showing the results of a comparison between compound K standards, ginseng powder (or ginseng extract) before fermentation, complex enzyme (saccharomyces servazzii strain GB-07 and Optivin Mash) (Or extracts of ginseng) after fermentation using ginseng powder.

도 2 및 표 2를 살펴보면, 발효하기 전의 인삼류 분말에서는 컴파운드 케이가 검출되지 않았지만, 도 1 및 표 1을 살펴보면, 사카로마이세스 세르바찌(Saccharomyces servazzii) 균주 GB-07에 의하여 발효된 인삼발효분말에서 컴파운드 케이가 생성되었음을 확인할 수 있다.2 and Table 2, Compound K was not detected in the ginseng powder before fermentation. However, as shown in FIG. 1 and Table 1, the ginseng fermentation powder fermented by Saccharomyces servazzii strain GB-07 Can be confirmed that the compound K is generated.

특히, 도 1에서 컴파운드 케이의 표준품의 HLPC 패턴과, 사카로마이세스 세르바찌(Saccharomyces servazzii) 균주 GB-07에 의하여 발효된 인삼발효분말의 HLPC 패턴을 비교해보면 사카로마이세스 세르바찌(Saccharomyces servazzii) 균주에 의하여 생성된 진세노사이드는 컴파운드 케이임을 알 수 있다.In particular, in FIG. 1, the HLPC pattern of the compound K standard product and the HLPC pattern of the ginseng fermentation powder fermented by Saccharomyces servazzii strain GB-07 are compared with those of Saccharomyces servazzii ) Was found to be compound k.

또한, 도 1 및 표 1을 참조하면, 펙티아나제 중의 옵티빈 매쉬(Optivin Mash)에 의하여 발효된 인삼발효분말에서도 컴파운드 케이가 생성되었음을 확인할 수 있으며, 사카로마이세스 세르바찌(Saccharomyces servazzii) 균주 GB-07와 옵티빈 매쉬(Optivin Mash)가 혼합된 복합효소에 의한 복합발효 시에는 컴파운드 케이가 훨씬 더 월등하게 생성되었음을 알 수 있다.Also, referring to FIG. 1 and Table 1, it can be confirmed that Compound K was also produced in the ginseng fermentation powder fermented by Optivin Mash in pectiana, and Saccharomyces servazzii strain It can be seen that compound k was much superior in complex fermentation by complex enzyme mixed with GB-07 and Optivin Mash.

결과적으로, 복합효소를 사용하여 인삼류 대상물을 발효시킴으로써 컴파운드 케이의 함량이 증가된 인삼발효분말(GBCK25)을 효율적으로 얻을 수 있는 있게 된다.As a result, it is possible to efficiently obtain the ginseng fermentation powder (GBCK25) having an increased content of compound k by fermenting the object of ginseng using the complex enzyme.

또한, 도 2 및 표 2를 참조하면, 인삼류 추출물(고려인삼의 추출물)의 경우에도 복합효소에 의한 복합발효 시에는 컴파운드 케이가 생성되었음을 알 수 있다. Referring to FIG. 2 and Table 2, it can be seen that compound k was also produced in complex fermentation by complex enzyme even in the case of ginseng extract (extract of Korean ginseng).

여기서, 복합효소에 의하여 발효된 인삼발효분말은 'GBCK25'라는 원료코드를 가지며, 이는 출원인이 제조한 인삼발효분말의 원료코드이다.Here, the ginseng fermentation powder fermented by the complex enzyme has a raw material code of 'GBCK25', which is the raw material code of the ginseng fermentation powder manufactured by the applicant.

본 발명은 이에 한정되지 않고, 상기 인삼류 분말 또는 상기 인삼류 추출물에 사용되는 인삼은 고려인삼(Panax ginseng C.A. Meyer), 화기삼(Panax quinquefolium), 전칠삼(Panax notoginsneng), 죽절삼(Panax japonicum), 삼엽삼(Panax trifolium), 히말라야삼(Panax pseudoginseng), 베트남삼(Panax vietnamensis) 중의 하나 이상을 포함하되 일반 진세노사이드를 함유할 수 있다.However, the present invention is not limited thereto. The ginseng used in the ginseng powder or the ginseng extract may be selected from the group consisting of Panax ginseng CA Meyer, Panax quinquefolium, Panax notoginseng, Panax japonicum, , Panax trifolium, Panax pseudoginseng, Panax vietnamensis, and may contain common ginsenosides.

또한, 상기 인삼류 분말 또는 상기 인삼류 추출물에 사용되는 원재료는 산삼, 수삼, 홍삼, 백삼, 미삼, 인삼 잎, 인삼 열매, 홍삼추출물, 산삼줄기세포, 산삼캘러스, 인삼줄기세포, 인삼캘러스, 산삼배양근, 부정근, 장뇌삼 중 하나 이상을 포함할 수 있다. 여기서, 인삼류 추출물은 상기 원재료를 에탄올로 추출한 것을 의미한다.The raw materials used for the ginseng powder or the ginseng extract include ginseng, ginseng, red ginseng, white ginseng, ginseng, ginseng leaves, ginseng fruit, ginseng extract, ginseng stem cell, ginseng callus, ginseng stem cell, ginseng callus, Adventitious roots, and camphor ginseng. Herein, the ginseng extract means that the raw material is extracted with ethanol.

한편, 본 발명의 다른 실시 형태에 의하면, 본 발명은 인삼류 대상물과 정제수를 혼합하여 반응액을 제조하는 반응액 제조단계; 그리고, 펙티나아제(pectinase) 계열에서 선택된 1종의 효소와, 사카로마이세스 세르바찌(Saccharomyces servazzii) 균주 GB-07(기탁번호: 한국농업미생물자원센터 KACC93250P)를 갖는 복합효소를 상기 반응액에 접종하고, 배양하는 배양단계를 포함하는 인삼발효분말의 제조방법을 제공한다.According to another aspect of the present invention, there is provided a method for preparing a reaction solution, comprising the steps of: preparing a reaction solution for mixing a subject of ginseng with purified water to prepare a reaction solution; Then, a complex enzyme having one kind of enzyme selected from the pectinase family and Saccharomyces servazzii strain GB-07 (Accession number: KACC93250P, Korean Agricultural Microbiology Resource Center) was added to the reaction solution And a culture step of culturing the ginseng fermentation powder.

상기 정제수는 증류수를 포함하고, 상기 펙티나아제 계열의 효소는 사이톨라제 피씨엘5(Cytolase PCL5), 피-플로(Pyr-Flo), 라피다아제 씨80맥스(Rapidase C80Max), 옵티빈 매쉬(Optivin Mash) 및 스미자임 에이씨(Sumyzyme AC)를 포함할 수 있다.The purified water contains distilled water. The enzymes of the pectinase family include Cytolase PCL5, Pyr-Flo, Rapidase C80Max, (Optivin Mash) and Sumyzyme AC (Sumyzyme AC).

도 3a는 균주 GB-07와 사이톨라제 피씨엘5(Cytolase PCL5)이 복합효소의 성분으로 사용된 경우 효소 농도에 따른 인삼발효분말에 대한 HPLC 분석 결과이고, 도 3b는 균주 GB-07와 라피다아제 씨80맥스(Rapidase C80Max)가 복합효소의 성분으로 사용된 경우 효소 농도에 따른 인삼발효분말에 대한 HPLC 분석 결과이다.FIG. 3A shows the results of HPLC analysis of the ginseng fermentation powder according to the enzyme concentration when the strain GB-07 and Cytolase PCL5 were used as the components of the complex enzyme. FIG. 3B shows the result of HPLC analysis of the strain GB- The results of HPLC analysis of the ginseng fermentation powder according to the enzyme concentration in the case where Daijee 80 Max (Rapidase C80Max) is used as a component of the complex enzyme.

도 3c는 균주 GB-07와 스미자임 에이씨(Sumyzyme AC)가 복합효소의 성분으로 사용된 경우 효소 농도에 따른 인삼발효분말에 대한 HPLC 분석 결과이고, 도 3d는 균주 GB-07와 옵티빈 매쉬(Optivin Mash)가 복합효소의 성분으로 사용된 경우에 효소 농도에 따른 인삼발효분말에 대한 HPLC 분석 결과이고, 도 3e는 균주 GB-07와 피-플로(Pyr-Flo)가 복합효소의 성분으로 사용된 경우에 효소 농도에 따른 인삼발효분말에 대한 HPLC 분석 결과이다.FIG. 3C shows the results of HPLC analysis of the ginseng fermentation powder according to the enzyme concentration when the strain GB-07 and Sumyzyme AC were used as a component of the complex enzyme. FIG. 3D shows the result of HPLC analysis of strain GB-07 and Optibane mash Optivin Mash) was used as a component of the complex enzyme, and FIG. 3e shows the result of HPLC analysis of the ginseng fermentation powder according to the enzyme concentration. FIG. 3e shows that the strain GB-07 and Pyr- The results of HPLC analysis of ginseng fermentation powder according to enzyme concentration are shown in Fig.

결과적으로, 도 3a ~ 도 3e를 참조하면, 사이톨라제 피씨엘5(Cytolase PCL5), 피-플로(Pyr-Flo), 라피다아제 씨80맥스(Rapidase C80Max), 옵티빈 매쉬(Optivin Mash) 및 스미자임 에이씨(Sumyzyme AC)는 모두 균주 GB-07와 함께 복합효소의 성분으로 사용되어 일반 진세노사이드를 컴파운드 케이로 전환시키는 것을 확인할 수 있다. As a result, referring to FIGS. 3A to 3E, Cytolase PCL5, Pyr-Flo, Rapidase C80Max, Optivin Mash, And Sumyzyme AC were all used as a component of the complex enzyme together with the strain GB-07 to confirm conversion of common ginsenoside into compound K.

한편, 인삼류 분말 1중량부당 100 중량부의 증류수가 혼합된 반응액을 반응기에 넣고 복합효소의 농도를 상기 반응액의 1%~25%로 변화시키면서 60℃, 72시간 발효한 인삼발효분말에 함유된 컴파운드 케이의 함량은 다음의 표 3과 같다.Meanwhile, a reaction solution in which 100 parts by weight of distilled water was mixed per 1 part by weight of ginseng powder was added to the reactor, and the concentration of the complex enzyme was changed to 1% to 25% of the reaction solution. The content of compound K is shown in Table 3 below.

복합효소의 농도에 따른 컴파운드 케이의 전환율Conversion rate of compound K depending on complex enzyme concentration 1%One% 2%2% 10%10% 20%20% 25%25% GB-07 + Cytolase PCL5GB-07 + Cytolase PCL5 8.878.87 14.2214.22 21.0421.04 25.1425.14 19.9719.97 GB-07 + Rapidase C80MaxGB-07 + Rapidase C80Max 0.250.25 2.352.35 5.615.61 12.2412.24 4.594.59 GB-07 + Sumyzyme ACGB-07 + Sumyzyme AC 4.734.73 5.085.08 16.1016.10 22.6222.62 14.6814.68 GB-07 + Optivin MashGB-07 + Optivin Mash 6.996.99 9.409.40 20.1520.15 27.727.7 18.9818.98 GB-07 + Pyr-FloGB-07 + Pyr-Flo 7.777.77 9.339.33 17.1217.12 18.9818.98 15.6715.67

여기서, 각 수치는 각각에 의하여 발효된 인삼발효분말 1g에 함유된 컴파운드 케이의 함량(mg)을 나타낸다.Here, each value represents the content (mg) of the compound K contained in 1 g of the ginseng fermentation powder fermented by each.

표 3, 도 3a ~도 3e를 참조하면, 복합효소의 농도가 증가할수록 컴파운드 케이의 함량이 증가하는 것을 확인할 수 있지만, 일정 농도이상에서는 컴파운드 케이의 함량이 낮아지는 것을 확인할 수 있다. Referring to Table 3 and FIG. 3A to FIG. 3E, it can be seen that as the concentration of the complex enzyme increases, the content of the compound K increases. However, the content of the compound K decreases at a certain concentration or more.

구체적으로, 복합효소의 농도가 20%인 경우에는 농도가 10%인 경우보다 컴파운드 케이의 함량이 높을 뿐만 아니라, 농도가 25%인 경우보다도 컴파운드 케이의 함량이 높다. 또한, 복합효소의 농도가 10%인 경우는 농도가 2%인 경우보다 현저하게 컴파운드 케이의 함량이 높아진다.Specifically, when the concentration of the complex enzyme is 20%, the content of compound K is higher than that of 10%, and the content of compound K is higher than that of 25%. In addition, when the concentration of the complex enzyme is 10%, the content of the compound K becomes remarkably higher than that when the concentration is 2%.

상기 복합효소의 농도는 상기 반응액의 2% ~ 20% 범위 이내인 것이 바람직하다. 보다 바람직하게는, 상기 복합효소의 농도는 10% ~ 20%일 수 있다.The concentration of the complex enzyme is preferably within a range of 2% to 20% of the reaction solution. More preferably, the concentration of the complex enzyme may be 10% to 20%.

한편, 인삼류 분말 1중량부당 증류수를 1 ~ 150 중량부가 되도록 변화시키면서 혼합된 반응액을 반응기에 넣고 복합효소의 농도를 상기 반응액의 20%로 60℃에서 72시간 발효한 인삼발효분말에 함유된 컴파운드 케이의 함량은 다음의 표 4와 같다.Meanwhile, the mixed reaction solution was added to the reactor while changing the distilled water to 1 to 150 parts by weight per 1 part by weight of the ginseng powder, and the concentration of the complex enzyme was adjusted to 20% of the reaction solution contained in the ginseng fermentation powder fermented at 60 ° C for 72 hours The content of compound K is shown in Table 4 below.

인삼류 분말과 증류수 비율에 따른 컴파운드 케이의 전환율Conversion rate of compound K depending on ratio of ginseng powder and distilled water 발효 전Before fermentation 1:51: 5 1:101:10 1:501:50 1:1001: 100 1:1501: 150 Rb1Rb1 4.394.39 2.392.39 00 00 00 00 RcRc 1.781.78 0.470.47 00 00 00 00 Rb2Rb2 2.682.68 0.980.98 00 00 00 00 RdRd 0.570.57 1.681.68 1.981.98 1.121.12 00 0.260.26 Compound KCompound K 00 4.614.61 13.2413.24 22.3422.34 27.727.7 25.625.6 합 계Sum 9.419.41 10.1310.13 15.2215.22 23.4623.46 27.727.7 25.8625.86

여기서, 각 수치는 각각에 의하여 발효된 인삼발효분말 1g에 함유된 진세노사이드 함량(mg)을 나타낸다.Here, each value represents the content (mg) of ginsenoside contained in 1 g of the ginseng fermentation powder fermented by each.

표4 및 도 4를 참조하면, 증류수, 즉 정제수의 비율이 증가할수록 대부분의 일반 진세노사이드 함량이 낮아지면서 컴파운드 케이의 함량이 증가하는 것을 확인할 수 있다. 그러나, 일정 비율이상에서는 컴파운드 케이의 함량이 낮아지는 것을 확인할 수 있다. Referring to Table 4 and FIG. 4, it can be seen that as the ratio of distilled water, that is, purified water, increases, the content of compound k increases as the general ginsenoside content decreases. However, it can be seen that the content of the compound K is lower than a certain ratio.

구체적으로, 인삼류 분말과 증류수 비율이 1:100인 경우에는 비율이 1:50인 경우보다 컴파운드케이 함량이 높을 뿐만 아니라, 비율이 1:150인 경우보다도 컴파운드 케이의 함량이 높다. 또한, 인삼류 분말과 증류수 비율이 1:10인 경우는 비율이 1:5인 경우보다 현저하게 컴파운드 케이의 함량이 높아진다. Specifically, when the ratio of ginseng powder to distilled water is 1: 100, the content of compound k is higher than that of 1:50, and the content of compound k is higher than that of 1: 150. In addition, when the ratio of ginseng powder to distilled water is 1:10, the content of compound K is remarkably higher than that of 1: 5 ratio.

결과적으로, 상기 반응액 제조단계에서 인삼류 대상물 1 중량부당 상기 정제수는 10 ~ 100 중량부를 가지는 것이 바람직하다. 보다 바람직하게는, 인삼류 대상물 1 중량부당 상기 정제수는 100 중량부를 가질 수 있다.As a result, it is preferable that the purified water is used in an amount of 10 to 100 parts by weight per 1 part by weight of the object of the ginseng product in the step of preparing the reaction solution. More preferably, the purified water may be 100 parts by weight per 1 part by weight of the object of ginseng root.

한편, 인삼류 분말 1 중량부당 증류수를 100 중량부를 혼합된 반응액을 반응기에 넣고 온도를 25℃ ~ 80℃로 변화시키면서 복합효소의 농도 20%로 72시간 발효한 인삼발효분말에 함유된 컴파운드 케이의 함량은 다음의 표 5와 같다.Meanwhile, a reaction liquid containing 100 parts by weight of distilled water per 1 part by weight of ginseng powder was placed in a reactor, and the content of Compound K contained in the ginseng fermentation powder fermented for 72 hours at a complex enzyme concentration of 20% The contents are shown in Table 5 below.

배양온도에 따른 컴파운드 케이의 전환율Conversion rate of compound K depending on incubation temperature 발효 전Before fermentation 25 ℃25 ℃ 30 ℃30 ℃ 45 ℃45 ° C 60 ℃60 ° C 80 ℃80 ℃ Rb1Rb1 4.394.39 0.670.67 0.550.55 00 00 00 RcRc 1.781.78 0.790.79 0.690.69 0.60.6 00 00 Rb2Rb2 2.682.68 1.391.39 1.231.23 1.031.03 00 00 RdRd 0.570.57 1.671.67 1.561.56 1.121.12 00 00 Compound KCompound K 00 6.786.78 7.017.01 15.7715.77 27.727.7 0.190.19 합 계Sum 9.419.41 11.311.3 11.0411.04 18.5218.52 27.727.7 0.190.19

여기서, 각 수치는 각각에 의하여 발효된 인삼발효분말 1g에 함유된 진세노사이드 함량(mg)을 나타낸다.Here, each value represents the content (mg) of ginsenoside contained in 1 g of the ginseng fermentation powder fermented by each.

표5 및 도 5를 참조하면, 배양온도가 상승할수록 대부분의 일반 진세노사이드 함량이 낮아지면서 컴파운드 케이의 함량이 증가하는 것을 확인할 수 있다. 그러나, 일정 온도이상에서는 컴파운드 케이의 함량이 낮아지는 것을 확인할 수 있다. Referring to Table 5 and FIG. 5, it can be seen that as the incubation temperature increases, the content of compound k increases with the decrease of the most common ginsenoside content. However, it can be seen that the content of compound K is lowered at a certain temperature or higher.

구체적으로, 배양온도가 60℃인 경우에는 배양온도가 45℃인 경우보다 컴파운드케이 함량이 높을 뿐만 아니라, 배양온도가 80℃인 경우보다도 컴파운드 케이의 함량이 높다. 또한, 배양온도가 45℃인 경우는 배양온도가 30℃인 경우보다 현저하게 컴파운드 케이의 함량이 높아진다. Concretely, when the incubation temperature is 60 ° C, the compound k content is higher than that at 45 ° C, and the content of compound k is higher than that when the cultivation temperature is 80 ° C. When the incubation temperature is 45 캜, the content of the compound K is remarkably higher than that when the incubation temperature is 30 캜.

상기 배양단계에서 배양온도는 30℃ ~ 60℃ 인 것이 바람직하다. 보다 바람직하게는, 상기 배양온도는 45℃~60℃일 수 있다.In the culturing step, the culturing temperature is preferably 30 to 60 ° C. More preferably, the incubation temperature may be 45 ° C to 60 ° C.

한편, 인삼류 분말 1 중량부당 증류수를 100 중량부를 혼합된 반응액을 반응기에 넣고 60℃에서 복합효소의 농도 20%로 유지하면서 배양시간을 24시간 ~ 264시간으로 변화시키면서 발효시킨 인삼발효분말에 함유된 컴파운드 케이의 함량은 다음의 표 6과 같다.Meanwhile, the reaction mixture containing 100 parts by weight of distilled water per 1 part by weight of ginseng powder was added to the reactor and maintained at a concentration of 20% of the complex enzyme at 60 ° C., while the culture time was changed from 24 hours to 264 hours, The content of the compound K is shown in Table 6 below.

배양시간에 따른 컴파운드 케이의 전환율Conversion rate of compound K with incubation time 발효 전Before fermentation 24시간24 hours 48시간48 hours 96시간96 hours 240시간240 hours 264시간264 hours Rb1Rb1 4.394.39 0.70.7 0.600.60 00 00 00 RcRc 1.781.78 0.90.9 0.460.46 00 00 00 Rb2Rb2 2.682.68 1.61.6 1.191.19 0.80.8 00 00 RdRd 0.570.57 1.891.89 1.361.36 1.61.6 00 00 Compound KCompound K 00 7.087.08 8.548.54 16.8716.87 27.727.7 24.624.6 합 계Sum 9.419.41 12.1712.17 12.1512.15 19.2719.27 27.727.7 24.624.6

여기서, 각 수치는 각각에 의하여 발효된 인삼발효분말 1g에 함유된 진세노사이드 함량(mg)을 나타낸다.Here, each value represents the content (mg) of ginsenoside contained in 1 g of the ginseng fermentation powder fermented by each.

표6 및 도 6을 참조하면, 배양시간이 증가할수록 대부분의 일반 진세노사이드 함량이 낮아지면서 컴파운드 케이의 함량이 증가하는 것을 확인할 수 있다. 그러나, 일정 시간이상에서는 컴파운드 케이의 함량이 낮아지는 것을 확인할 수 있다. Referring to Table 6 and FIG. 6, it can be seen that as the incubation time increases, the content of compound k increases as the content of most common ginsenosides decreases. However, it can be confirmed that the content of compound k is lowered over a certain period of time.

구체적으로, 배양시간이 240시간 경우에는 배양시간이 96시간인 경우보다 컴파운드 케이의 함량이 높을 뿐만 아니라, 배양시간이 264시간인 경우보다도 컴파운드 케이의 함량이 높다. 또한, 배양시간이 96시간인 경우는 배양시간이 48시간인 경우보다 현저하게 컴파운드 케이의 함량이 높아진다. Specifically, when the incubation time is 240 hours, the content of compound K is higher than that of 96 hours, and the content of compound K is higher than that when the incubation time is 264 hours. Further, when the incubation time is 96 hours, the content of the compound K becomes remarkably higher than that when the incubation time is 48 hours.

상기 배양단계에서 배양시간은 48시간 ~ 240시간인 것이 바람직하다. 보다 바람직하게는, 상기 배양시간은 96시간 ~ 240시간일 수 있다.In the culturing step, the incubation time is preferably 48 hours to 240 hours. More preferably, the incubation time may be from 96 hours to 240 hours.

한편, 인삼류 분말 1 중량부당 증류수를 100 중량부를 혼합된 반응액을 반응기에 넣고 60℃에서 복합효소의 농도 20%, 배양시간을 72시간으로 유지하면서 반응액의 교반속도를 변화시키면서 발효시킨 인삼발효분말에 함유된 컴파운드 케이의 함량은 다음의 표 7과 같다.Meanwhile, 100 parts by weight of distilled water per 1 part by weight of ginseng powder was added to the reactor, and the concentration of the complex enzyme was maintained at 20% at 60 ° C for 72 hours. While the stirring speed of the reaction solution was changed, The content of compound k contained in the powder is shown in Table 7 below.

교반속도에 따른 컴파운드 케이의 전환율Conversion rate of compound K with stirring speed 발효 전Before fermentation 0rpm0rpm 50rpm50rpm 120rpm120rpm 200rpm200rpm 300rpm300rpm Rb1Rb1 4.394.39 1.11.1 0.400.40 00 00 00 RcRc 1.781.78 1.31.3 0.290.29 00 00 00 Rb2Rb2 2.682.68 1.771.77 0.700.70 0.570.57 00 00 RdRd 0.570.57 1.591.59 1.161.16 0.890.89 00 0.970.97 Compound KCompound K 00 5.485.48 10.610.6 20.8720.87 27.727.7 24.624.6 합 계Sum 9.419.41 11.2411.24 13.1513.15 22.3322.33 27.727.7 25.5725.57

여기서, 각 수치는 각각에 의하여 발효된 인삼발효분말 1g에 함유된 진세노사이드 함량(mg)을 나타낸다.Here, each value represents the content (mg) of ginsenoside contained in 1 g of the ginseng fermentation powder fermented by each.

표7 및 도 7을 참조하면, 교반속도가 증가할수록 대부분의 일반 진세노사이드 함량이 낮아지면서 컴파운드 케이의 함량이 증가하는 것을 확인할 수 있다. 그러나, 일정 교반속도 이상에서는 컴파운드 케이의 함량이 낮아지는 것을 확인할 수 있다. Referring to Table 7 and FIG. 7, it can be seen that as the stirring speed increases, the content of compound k increases as the general ginsenoside content decreases. However, it can be seen that the content of compound K is lowered at a certain stirring speed or more.

구체적으로, 교반속도가 200 rpm인 경우에는 교반속도가 120 rpm인 경우보다 컴파운드 케이의 함량이 높을 뿐만 아니라, 교반속도가 300 rpm인 경우보다도 컴파운드 케이의 함량이 높다. 또한, 교반속도가 120 rpm인 경우는 교반속도가 50rpm인 경우보다 현저하게 컴파운드 케이의 함량이 높아진다. Specifically, when the stirring speed is 200 rpm, the content of the compound K is higher than that of the stirring speed of 120 rpm, and the content of the compound K is higher than that of the stirring speed of 300 rpm. In addition, when the stirring speed is 120 rpm, the content of the compound K is remarkably higher than that when the stirring speed is 50 rpm.

상기 배양단계에서 교반속도는 50 rpm ~ 200rpm 인 것이 바람직하다. 보다 바람직하게는, 상기 교반속도는 120 rpm ~ 200 rpm시간일 수 있다.The stirring speed in the culturing step is preferably 50 rpm to 200 rpm. More preferably, the stirring speed may be from 120 rpm to 200 rpm.

한편, 인삼류 분말 1 중량부당 증류수를 100 중량부를 혼합된 반응액을 반응기에 넣고 60℃에서 복합효소의 농도 20%, 배양시간을 72시간으로 유지하면서 반응액의 산성도를 변화시키면서 발효시킨 인삼발효분말에 함유된 컴파운드 케이의 함량은 다음의 표 8과 같다.Meanwhile, a reaction solution containing 100 parts by weight of distilled water per 1 part by weight of ginseng powder was added to the reactor, and the fermented ginseng fermented powder while changing the acidity of the reaction solution while maintaining the complex enzyme concentration at 20% and the culturing time at 72 hours at 60 ° C The content of the compound K contained in the composition is shown in Table 8 below.

산성도에 따른 컴파운드 케이의 전환율Conversion rate of compound K depending on acidity 발효 전Before fermentation pH 3pH 3 pH 3.5pH 3.5 pH 4pH 4 pH 5.5pH 5.5 pH 6pH 6 Rb1Rb1 4.394.39 4.164.16 2.622.62 00 00 00 RcRc 1.781.78 1.571.57 1.241.24 00 00 00 Rb2Rb2 2.682.68 2.372.37 2.072.07 00 00 00 RdRd 0.570.57 0.590.59 1.01.0 0.690.69 00 0.340.34 Compound KCompound K 00 0.50.5 1.891.89 20.6920.69 27.727.7 22.422.4 합 계Sum 9.419.41 9.199.19 8.828.82 21.3821.38 27.727.7 22.7422.74

여기서, 각 수치는 각각에 의하여 발효된 인삼발효분말 1g에 함유된 진세노사이드 함량(mg)을 나타낸다.Here, each value represents the content (mg) of ginsenoside contained in 1 g of the ginseng fermentation powder fermented by each.

표8 및 도 8을 참조하면, 산성도(pH)가 증가할수록 대부분의 일반 진세노사이드 함량이 낮아지면서 컴파운드 케이의 함량이 증가하는 것을 확인할 수 있다. 그러나, 일정 산성도 이상에서는 컴파운드 케이의 함량이 낮아지는 것을 확인할 수 있다. Referring to Table 8 and FIG. 8, it can be seen that as the acidity (pH) increases, the content of compound k increases as the general ginsenoside content decreases. However, it can be confirmed that the content of compound K is lower than the predetermined acidity.

구체적으로, 산성도가 pH 5.5인 경우에는 산성도가 pH 4인 경우보다 컴파운드 케이의 함량이 높을 뿐만 아니라, 산성도가 pH 6인 경우보다도 컴파운드 케이의 함량이 높다. 또한, 산성도가 pH 4인 경우는 산성도가 pH 3.5인 경우보다 현저하게 컴파운드 케이의 함량이 높아진다. Specifically, when the acidity is pH 5.5, the compound K content is higher than the acidity of pH 4, and the compound K content is higher than that when the acidity is at pH 6. In addition, when the acidity is pH 4, the content of the compound K is remarkably higher than that when the acidity is at pH 3.5.

상기 배양단계에서 산성도는 pH 3.5 ~ pH 5.5인 것이 바람직하다. 보다 바람직하게는, 상기 산성도는 pH 4 ~ pH 5.5일 수 있다.In the culturing step, the acidity is preferably pH 3.5 to pH 5.5. More preferably, the acidity may be between pH 4 and pH 5.5.

상기 컴파운드 케이(Compound K)와 같은 진세노사이드는 희귀 진세노사이드로서, 별도 처리하지 않은 미가공의 인삼에 극미량으로 포함되거나, 거의 존재하지 않거나 또는 존재하지 않는 진세노사이드이다. Ginsenosides such as Compound K are rare ginsenosides, ginsenosides that are contained in trace amounts in raw ginseng that are not separately treated, are almost non-existent, or are not present.

그러나, 본 발명의 제조방법에 따르면, 별도 처리하지 않은 미가공의 인삼류, 인삼 추출물에 주로 포함된 진세노사이드 예를 들어, Rg1, Re, Rb1, Rb2, Rc, Rd, Gypenoside XVII 또는 F2 (이하, 일반 진세노사이드)가 복합발효 처리 공정을 통해 희귀 진세노사이드로 전환된다. However, according to the production method of the present invention, ginsenosides (for example, Rg1, Re, Rb1, Rb2, Rc, Rd, Gypenoside XVII or F2 Common ginsenosides) are converted to rare ginsenosides through a complex fermentation process.

결과적으로, 별도 처리하지 않은 미가공 (발효처리 하지 않은 미가공)의 인삼류, 인삼 추출물과 비교하였을 때 컴파운드 케이와 같은 희귀 진세노사이드의 함량이 증대된다.As a result, the content of rare ginsenosides such as compound k is increased as compared with raw (non-fermented unprocessed) ginseng and ginseng extracts which are not separately treated.

상기 컴파운드 케이의 함량 증대는 본 발명에 따른 제조방법에 의해 일반 진세노사이드로부터 희귀 진세노사이드로의 전환을 의미할 수 있으며, 본 발명에 따라 제조된 인삼발효분말(GBCK25)에서 총 진세노사이드를 기준으로 80 내지 100 중량%, 90 내지 98 중량%로 포함됨을 의미할 수 있다. The increase in the content of the compound k may mean the conversion of the general ginsenoside to the rare ginsenoside by the production method according to the present invention. In the ginseng fermentation powder (GBCK25) produced according to the present invention, the total ginsenoside Based on the total weight of the composition, 80 to 100% by weight and 90 to 98% by weight.

이때, 컴파운드 케이가 80 내지 100 중량%로 포함되는 경우, 예를 들어 Rb1, Rb2, Rc, Rd와 같은 일반 진세노사이드 함량은 20 내지 0 중량%일 수 있다.In this case, when the compound K is contained in an amount of 80 to 100% by weight, the general ginsenoside content such as Rb1, Rb2, Rc and Rd may be 20 to 0% by weight.

상기 컴파운드 케이가 진세노사이드 총 함량을 기준으로 100 중량%로 포함되는 경우, 처리 전 인삼류, 인삼추출물에 포함된 일반 진세노사이드가 전부 컴파운드 케이로 전환된 것일 수 있다. When the compound K is contained in an amount of 100% by weight based on the total ginsenoside content, the general ginsenosides contained in the ginseng and ginseng extracts before treatment may be all converted into compound k.

본 발명의 다른 실시 형태에 의하면, 본 발명은 상술한 인삼발효분말의 제조방법에 의하여 제조되는 인삼발효분말(GBCK25)을 제공한다.According to another embodiment of the present invention, there is provided a ginseng fermentation powder (GBCK25) produced by the above-described ginseng fermentation powder production method.

본 발명에 따른 제조방법으로 제조된 인삼발효분말(GBCK25) 또는 이의 추출물은 컴파운드 케이의 함량이 증가된 것을 특징으로 하며, 이러한 인삼발효분말(GBCK25) 또는 이의 추출물은 예를 들어, 기능성 식품의 형태로 제공될 수 있다. The ginseng fermentation powder (GBCK25) or its extract prepared by the method according to the present invention is characterized in that the content of the compound k is increased. The ginseng fermentation powder (GBCK25) or an extract thereof is, for example, Lt; / RTI >

상기 "기능성 식품"은 상기 인삼발효분말(GBCK25)또는 이의 추출물을 유효성분으로 포함하여 질병의 예방 또는 치료 효과를 보이는 기능을 나타내는 식품을 의미한다.The above-mentioned "functional food" means a food having the function of preventing or treating a disease by containing the ginseng fermentation powder (GBCK25) or an extract thereof as an active ingredient.

상기 기능성 식품은 예를 들어 분말, 과립, 정제, 캡슐 또는 음료인 형태일 수 있고, 기타 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올 또는 탄산화제 등을 필요에 따라 포함할 수 있다.The functional food may be in the form of, for example, a powder, a granule, a tablet, a capsule or a drink, and may be in the form of other nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), flavors such as synthetic flavors and natural flavors, An acid and its salt, an alginic acid and its salt, an organic acid, a protective colloid thickener, a pH adjusting agent, a stabilizer, a preservative, a glycerin, an alcohol or a carbonating agent.

이상에서 본 발명의 바람직한 실시예를 설명하였으나, 본 발명은 다양한 변화와 변경 및 균등물을 사용할 수 있다. 본 발명은 상기 실시예를 적절히 변형하여 동일하게 응용할 수 있음이 명확하다. 따라서 상기 기재 내용은 하기 특허청구범위의 한계에 의해 정해지는 본 발명의 범위를 한정하는 것이 아니다.While the present invention has been particularly shown and described with reference to exemplary embodiments thereof, it is to be understood that the invention is not limited to the disclosed exemplary embodiments. It is clear that the present invention can be suitably modified and applied in the same manner. Therefore, the above description does not limit the scope of the present invention, which is defined by the limitations of the following claims.

농업생명공학연구원Agricultural Biotechnology Research Institute KACC93250KACC93250 2016041920160419

Claims (11)

진세노사이드 생물전환능을 갖는 사카로마이세스 세르바찌(Saccharomyces servazzii) 균주 GB-07(기탁번호: 한국농업미생물자원센터 KACC93250P).Saccharomyces servazzii strain GB-07 (accession number: KACC93250P, Korea Agrobiological Resources Resource Center) having a ginsenoside bioconversion ability. 인삼류 대상물과 정제수를 혼합하여 반응액을 제조하는 반응액 제조단계; 그리고,
펙티나아제(pectinase) 계열에서 선택된 1종의 효소와, 사카로마이세스 세르바찌(Saccharomyces servazzii) 균주 GB-07(기탁번호: 한국농업미생물자원센터 KACC93250P)를 갖는 복합효소를 상기 반응액에 접종하고, 배양하는 배양단계를 포함하는 인삼발효분말의 제조방법.A reaction liquid preparation step of mixing the object of ginseng and purified water to prepare a reaction liquid; And,
The complex enzyme having one kind of enzyme selected from the pectinase family and Saccharomyces servazzii strain GB-07 (accession number: KACC93250P, Korea Agrobiological Resources Research Center) was inoculated into the reaction solution. And culturing the fermented ginseng powder. 제2항에 있어서,
상기 펙티나아제 계열의 효소는 사이톨라제 피씨엘5(Cytolase PCL5), 피-플로(Pyr-Flo), 라피다아제 씨80맥스(Rapidase C80Max), 옵티빈 매쉬(Optivin Mash) 및 스미자임 에이씨(Sumyzyme AC)를 포함하는 것을 특징으로 하는 인삼발효분말의 제조방법.3. The method of claim 2,
The enzymes of the pectinase family include Cytolase PCL5, Pyr-Flo, Rapidase C80Max, Optivin Mash, (Sumyzyme AC). ≪ / RTI > 제2항에 있어서,
상기 인삼류 대상물은 인삼류 분말 또는 인삼류 추출물을 포함하며,
상기 인삼류 분말 또는 상기 인삼류 추출물에 사용되는 인삼은 고려인삼(Panax ginseng C.A. Meyer), 화기삼(Panax quinquefolium), 전칠삼(Panax notoginsneng), 죽절삼(Panax japonicum), 삼엽삼(Panax trifolium), 히말라야삼(Panax pseudoginseng), 베트남삼(Panax vietnamensis) 중의 하나 이상을 포함하되 일반 진세노사이드를 함유하며,
상기 인삼류 분말 또는 상기 인삼류 추출물에 사용되는 원재료는 산삼, 수삼, 홍삼, 백삼, 미삼, 인삼 잎, 인삼 열매, 홍삼추출물, 산삼줄기세포, 산삼캘러스, 인삼줄기세포, 인삼캘러스, 산삼배양근, 부정근, 장뇌삼 중 하나 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 인삼발효분말의 제조방법.3. The method of claim 2,
The object of the ginseng treatment includes a ginseng powder or a ginseng extract,
Panax ginseng CA Meyer, Panax quinquefolium, Panax notoginseng, Panax japonicum, Panax trifolium, Himalayan ginseng (Panax ginseng CA Meyer), Panax ginseng CA Meyer, Panax pseudoginseng, and Panax vietnamensis, which contain common ginsenosides,
The raw materials used for the ginseng powder or the ginseng extract include ginseng, ginseng, red ginseng, white ginseng, ginseng leaf, ginseng fruit, ginseng extract, ginseng stem cell, ginseng callus, ginseng stem cell, ginseng callus, Wherein the ginseng comprises at least one of ginseng and ginseng. 제2항에 있어서,
상기 복합효소의 농도는 상기 반응액의 2% ~ 20% 범위 이내인 것을 특징으로 하는 인삼발효분말의 제조방법.3. The method of claim 2,
Wherein the concentration of the complex enzyme is within a range of 2% to 20% of the reaction solution. 제2항에 있어서,
상기 반응액 제조단계에서 상기 인삼류 대상물 1 중량부당 상기 정제수는 10 ~ 100 중량부를 갖는 것을 특징으로 하는 인삼발효분말의 제조방법.3. The method of claim 2,
Wherein the purified water is contained in an amount of 10 to 100 parts by weight per 1 part by weight of the ginseng product in the step of preparing the reaction solution. 제2항에 있어서,
상기 배양단계에서 배양온도는 30℃ ~ 60℃ 인 것을 특징으로 하는 인삼발효분말의 제조방법.3. The method of claim 2,
Wherein the culturing temperature is in the range of 30 ° C to 60 ° C. 제2항에 있어서,
상기 배양단계에서 산성도는 pH 3.5 ~ pH 5.5인 것을 특징으로 하는 인삼발효분말의 제조방법.3. The method of claim 2,
Wherein the acidity in the culturing step ranges from pH 3.5 to pH 5.5. 제2항에 있어서,
상기 배양단계에서 배양시간은 48시간 ~ 240시간인 것을 특징으로 하는 인삼발효분말의 제조방법.3. The method of claim 2,
Wherein the incubation time in the culturing step is from 48 hours to 240 hours. 제2항에 있어서,
상기 배양단계에서 교반속도는 50 rpm ~ 200 rpm 인 것을 특징으로 하는 인삼발효분말의 제조방법.3. The method of claim 2,
Wherein the agitation speed in the culturing step is 50 rpm to 200 rpm. 제2항 내지 제10항 중 어느 한 항에 따른 인삼발효분말의 제조방법에 의하여 제조되는 인삼발효분말.A ginseng fermentation powder produced by the process for producing ginseng fermentation powder according to any one of claims 2 to 10.
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