KR20170106013A - 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀의 제조방법 및 이를 이용한 곤충 사육방법 - Google Patents
본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀의 제조방법 및 이를 이용한 곤충 사육방법 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀의 제조방법 및 이를 이용한 곤충 사육방법에 관한 것이다.
본 발명에 따른 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀의 제조방법에 의해 키토산 마이셀을 제조하여 곤충의 사료로 활용하게 되면, 효과적인 단백질 공급원으로서뿐만 아니라 인간의 간질환 개선, 혈액 및 혈관 기능 개선, 항비만능력, 염증 제어 및 개선, 인지 기능을 향상시키는 약학 조성물로 곤충이 활용되도록 사육하는 것을 가능하게 한다. 그러므로 상기 제조방법에 의해 제조된 키토산 마이셀을 사료로 섭취하여 사육된 곤충은 간질환 개선제, 혈액 및 혈관 기능 개선제, 염증 제어 및 개선, 인지 기능 저하 개선제, 항비만 개선제 또는 치료 예방제 등의 용도로 활용할 수 있다.
본 발명에 따른 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀의 제조방법에 의해 키토산 마이셀을 제조하여 곤충의 사료로 활용하게 되면, 효과적인 단백질 공급원으로서뿐만 아니라 인간의 간질환 개선, 혈액 및 혈관 기능 개선, 항비만능력, 염증 제어 및 개선, 인지 기능을 향상시키는 약학 조성물로 곤충이 활용되도록 사육하는 것을 가능하게 한다. 그러므로 상기 제조방법에 의해 제조된 키토산 마이셀을 사료로 섭취하여 사육된 곤충은 간질환 개선제, 혈액 및 혈관 기능 개선제, 염증 제어 및 개선, 인지 기능 저하 개선제, 항비만 개선제 또는 치료 예방제 등의 용도로 활용할 수 있다.
Description
본 발명은 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀의 제조방법 및 이를 이용한 곤충 사육방법에 관한 것이다.
키토산(Chitosan)은 화학명이 Poly (1→4) 2-amino-2-deoxy-β-D-Glucan으로 이미 알려진 대로 버섯, 새우, 게, 곤충 및 갑각류의 껍질에 키틴질로 존재하고 있다. 상기 키틴질은 용매가 없어 유효 이용율이 적어, 주로 키토산을 다른 유도체로 제조하여 제약, 의료, 식품, 화장품, 생활용품 등 상당히 다양한 범위에 활용하고 있다. 그러나 키토산 역시 몇몇 산(acid) 외에는 용해가 안되므로 활용에 많은 제약과 한계를 갖고 있고, 분자량이 클 뿐만 아니라 수친화성이 약하여 체내흡수율, 전이율, 생체이용율이 저조하며, 생체의 다양한 조건에 의해 변화하기 쉬우므로 식품이나 약품, 첨가제 등으로 섭취 및 이용할 경우 체내 필요량에 미치지 못할 뿐만 아니라, 전달능력이 적고, 그 고유 특성과 활성을 잃게 되는 한계가 있다. 하지만, 이에 불구하고 상기 키토산의 전달능력을 우수하게 향상시키면서, 그 고유 특성과 활성을 잃지 않고 체내에 전달하는 것을 가능하게 하는 연구는 많이 부족한 실정이다.
한편, 곤충(예를 들어 굼벵이 등)은 인간에게 효율적인 단백질 공급원이 될 수 있음에도 불구하고, 미감이 떨어지는 등의 이유로 식품으로 활용하기 어렵다는 문제가 있다. 이러한 곤충을 잘 활용하는 경우 인간에게 효과적인 단백질 공급원이 될 수 있음에도 불구하고 관련 연구는 많이 부족한 것이 현실이다. 또한 상기 곤충을 어떤 방식으로 사육하는지, 또는 어떤 사료를 공급하여 사육하는지에 따라 인간에 대한 단백질 공급원 이외에 효과적인 생리 활성 물질로 활용할 수 있음에도 불구하고 관련 연구가 많이 부족하다는 문제가 있다.
한편, 본 발명과 관련되는 선행기술문헌으로는 대한민국 등록특허 제10-1564668호(특허문헌 1)가 개시되어 있으며, 상기 특허문헌 1은 본초(本草)를 당과 혼합한 후, 유산균을 접종하여 발효시키고, 키토산에 발효식초를 교반하여 혼합하고 표면처리한 후 유산균 발효물과 혼합하는 본초 발효 키토산의 제조방법, 상기 방법으로 제조된 발효 키토산을 포함하는 식품, 식품첨가제, 주름개선용 화장료 또는 항균 조성물에 관한 기술이 개시되어 있다.
본 발명은 상술한 문제점을 해결하기 위해 안출된 것으로서, 본 발명의 목적은 키토산의 전달능력을 우수하게 유지시키면서 효율적인 단백질 공급원인 곤충을 인간의 생리 활성을 우수하게 향상시키는 생약성분으로 활용하도록 사육하는 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀의 제조방법을 제공하는 것이다. 또한 이러한 곤충을 이용하여 간질환 개선제, 혈액 또는 혈관 개선제, 항비만능 및 인지 기능 개선제 등을 제공하는 것이 목적이다.
위와 같은 과제를 해결하기 위한 본 발명의 한 특징에 따른 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀의 제조방법은
1) 솔잎, 하수오, 산양삼, 인삼, 숙지황, 백작약, 당귀, 천궁, 백출, 복령, 자감초, 현미, 창출, 반하, 후박, 진피, 적봉령, 감초, 생강, 대조, 초석잠, 석창포, 노루궁뎅이버섯, 칡, 택란, 결명자 및 헛개나무로 이루어지는 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 본초를 당과 혼합한 후, 유산균을 접종하여 12-60 시간 동안 발효시켜 본초발효물을 수득하는 단계; 및
2) 상기 1)단계로부터 수득된 본초발효물에 키토산 및 콜라겐을 혼합한 후, 초음파 처리하에 교반하는 단계;
를 포함한다.
본 발명의 또 다른 특징에 따른 곤충의 사육방법은
1) 곤충을 충전한 사육배지 내에 상기 제조방법에 의해 제조된 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀을 사료로 공급하여 사육하는 단계;
를 포함한다.
본 발명의 또 다른 특징에 따른 건기식 조성물은 본 발명에 따른 상기 사육방법으로 사육된 곤충 또는 이의 분쇄물을 유효성분으로 함유하는 간기능 개선용 건기식 조성물, 혈액 또는 혈관 기능 개선용 건기식 조성물, 인지 기능 개선용 건기식 조성물일 수 있다.
본 발명의 또 다른 특징에 따른 간질환 치료 또는 예방용 약학 조성물은 상기 사육방법으로 사육된 곤충 또는 이의 분쇄물을 유효성분으로 함유하는 것일 수 있다.
본 발명의 또 다른 특징에 따른 혈액 또는 혈관 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물은 상기 사육방법으로 사육된 곤충 또는 이의 분쇄물을 유효성분으로 함유하는 것일 수 있다.
본 발명의 또 다른 특징에 따른 인지 기능 저하와 관련된 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물은 상기 사육방법으로 사육된 곤충 또는 이의 분쇄물을 유효성분으로 함유하는 것일 수 있다.
본 발명에 따른 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀의 제조방법에 의해 키토산 마이셀을 제조하여 곤충의 사료로 활용하게 되면, 효과적인 단백질 공급원으로서뿐만 아니라 인간의 간질환 개선, 혈액 및 혈관 기능 개선, 인지 기능을 향상시키는 약학 조성물로 곤충이 활용되도록 사육하는 것을 가능하게 한다. 그러므로 상기 제조방법에 의해 제조된 키토산 마이셀을 사료로 섭취하여 사육된 곤충은 간질환 개선제, 혈액 및 혈관 기능 개선제, 항비만능, 염증제어, 인지 기능 저하 치료제 또는 예방제 등의 용도로 활용할 수 있다.
도 1은 자기집적화 키토산의 모식도이다.
도 2는 콜라겐의 농도를 조절하여 마이크로 캡슐화한 키토산의 TEM 사진을 나타내는 것이다.
도 2는 콜라겐의 농도를 조절하여 마이크로 캡슐화한 키토산의 TEM 사진을 나타내는 것이다.
이에 본 발명자들은 인간의 생리 활성을 여러 용도에서 효과적으로 개선시키는 굼벵이 및 이의 사료를 개발하기 위해 예의 연구 노력한 결과, 본 발명에 따른 본초 발효 자기집적 키토산의 제조방법 및 이를 이용하여 사육된 굼벵이를 발견하여 본 발명을 완성하였다.
구체적으로 본 발명에 따른 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀의 제조방법은
1) 솔잎, 하수오, 산양삼, 인삼, 숙지황, 백작약, 당귀, 천궁, 백출, 복령, 자감초, 현미, 창출, 반하, 후박, 진피, 적봉령, 감초, 생강, 대조, 초석잠, 석창포, 노루궁뎅이버섯, 칡, 택란, 결명자 및 헛개나무로 이루어지는 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 본초를 당과 혼합한 후, 유산균을 접종하여 12-60 시간 동안 발효시켜 본초발효물을 수득하는 단계; 및
2) 상기 1)단계로부터 수득된 본초발효물에 키토산 및 콜라겐을 혼합한 후, 초음파 처리하에 교반하는 단계;
를 포함한다.
본 발명에서 본초발효물은 상기 1)단계와 같이 솔잎, 하수오, 산양삼, 인삼, 숙지황, 백작약, 당귀, 천궁, 백출, 복령, 자감초, 현미, 창출, 반하, 후박, 진피, 적봉령, 감초, 생강, 대조, 초석잠, 석창포, 노루궁뎅이버섯, 칡, 택란, 결명자 및 헛개나무로 이루어지는 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 본초를 유산균에 발효시킨 것을 의미한다.
또한 본 발명에서의 키토산은 특별한 제한이 있는 것은 아니지만, 바람직하게는 대한민국 등록특허 제10-1564668호에 개시된 바와 같이 키토산에 발효식초를 교반하여 혼합하여 표면처리한 것일 수 있다.
또한 본 발명에서 콜라겐은 특별한 제한 없이 당업계에 공지된 방법으로 제조된 콜라겐일 수 있다.
상기 제조방법으로 제조된 키토산 마이셀을 곤충에게 사료로 섭취시켜 사육시킨 곤충은 인간에게 효과적인 단백질 공급원이 될 뿐만 아니라 인간의 생리 활성을 현저히 향상시키는 생약 제재로 활용할 수 있다. 특히 상기 제조방법으로 제조된 키토산 마이셀을 섭취하여 사육된 곤충은 인간의 간기능을 개선하는 효과가 있으며, 혈액 또는 혈관 기능을 개선하고, 인지 기능의 향상 및 저하를 방지하는 효과가 있다.
또한 본 발명은 상기 본초를 당과 혼합한 후, 유산균을 접종하여 12-60 시간 동안 발효시키는 단계를 포함하는 것이 바람직하다.
한편, 상기 당은 단당류, 이당류 또는 올리고당류 어느 것이나 제한 없이 사용할 수 있으나, 바람직하게는 포도당 또는 자당을 사용할 수 있다.
상기 당의 첨가량은 본초 100 중량부에 대하여 50-300 중량부, 바람직하게는 80-160 중량부를 첨가할 수 있다.
또한 상기 당과 본초의 혼합물에 필요에 따라 물을 더 첨가할 수 있고, 물이 첨가 되었을 때의 당 농도는 15-30 브릭스 정도로 조정한다.
또한 상기 당과 본초의 혼합물에 접종하는 유산균은 바람직하게는 식물성 유산균이고, 더욱 바람직하게는 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum)이며, 더더욱 바람직하게는 락토바실러스 플란타룸 KCCM11322이다.
또한 상기 유산균을 접종한 후 발효 시간은 12-60 시간, 바람직하게는 24-48 시간일 수 있다. 또한 발효 온도는 30-55 ℃, 바람직하게는 40-50 ℃일 수 있다.
한편, 상기 키토산은 초산균을 함유한 발효식초로 표면처리 된 것이 바람직하다. 또한 상기 초산균을 함유한 발효식초는 키토산 100 중량부에 대하여 1-25 중량부를 교반하여 혼합하는 것으로 표면처리 된 것이 바람직하다.
또한 상기 키토산은 특별히 한정할 필요는 없으나, 수평균 분자량은 30-100 만으로서 수불용성의 고분자 키토산일 수 있다.
상기 초산균을 함유한 발효식초는 솔잎, 하수오, 산양삼, 인삼, 숙지황, 백작약, 당귀, 천궁, 백출, 복령, 자감초, 현미, 창출, 반하, 후박, 진피, 적봉령, 감초, 생강, 대조, 초석잠, 석창포, 노루궁뎅이버섯, 칡, 택란, 결명자 및 헛개나무를 포함하는 평진탕 재료; 중에서 선택되는 본초를 당과 혼합한 후 10 내지 25 ℃에서 6 내지 12 개월 자연 발효시켜 제조된 것이 바람직하다.
상기 초산균을 함유한 발효식초의 함량은 키토산 100 중량부에 대하여 1 내지 25 중량부, 바람직하게는 5 내지 23 중량부, 더욱 바람직하게는 10 내지 20 중량부이다. 발효식초의 함량이 상기 하한치 미만인 경우 키토산 표면에 고루 발효식초가 도포되어 표면처리가 균일하게 이루어지기 어렵고, 상기 상한치를 초과할 경우 이후 유산균 발효물과 혼합되었을 때 초산균에 의한 발효가 유산균 발효보다 우세하게 되어 본초의 활성화가 충분히 이루어지지 않을 수 있다.
상기 키토산 표면처리 단계는 질소 분위기에서 키토산을 먼저 600 내지 3,000 rpm으로 교반하면서 초산균을 함유한 발효식초를 5 내지 20분, 바람직하게는 10 내지 18분 동안 분무하여 투입하고, 투입 후 1 내지 60 분, 바람직하게는 5 내지 50 분 동안 교반하는 것일 수 있다. 질소 분위기에서 발효식초를 혼합함으로써 표면처리 단계에서 강한 호기성 균인 초산균의 증식은 억제되면서 초산 및 유기산이 키토산의 표면에 균일하게 혼합될 수 있도록 한다. 또한 교반속도가 하한치 미만 또는 상한치 초과이거나 발효식초를 한꺼번에 투입하는 등 발효식초의 투입을 5 분 미만으로 투입할 경우 발효식초가 키토산의 표면에 고루 발효식초가 결합되기 어렵다.
상기 2)단계에서 키토산 및 콜라겐은 본초발효물 100 중량부에 대하여 키토산 5-60 중량부 및 콜라겐 3-20 중량부로 혼합되는 것이 바람직하다. 또한 더욱 바람직하게는 키토산 20-40 중량부 및 콜라겐 5-15 중량부로 혼합되는 것이 바람직하다. 이렇게 키토산에 콜라겐을 혼합하게 되면 본초의 자기집적화가 가능하여 마이셀 형태로 키토산을 제조하는 것이 가능하다. 이때 상기 자기집적화란 키토산의 내부에 본초를 집중시켜 포장하는 마이셀 형태가 되는 것을 말하며, 콜라겐은 키토산에 혼합되어 상기 자기집적화를 보다 용이하게 할 수 있다. 이러한 자기집적화를 통해 본초의 본래 기능을 유지하면서 곤충의 사료로 적용될 수 있어 바람직하다. 특히 상기 콜라겐이 혼합됨으로 인해 본 발명에 따른 키토산 마이셀을 사료로 하여 곤충을 사육하고, 이를 인간의 생리활성 향성을 위한 생약제로 활용하는 경우 곤충에서는 본초가 쉽게 분해되지 않고, 인체 내에서는 생체이용율을 증대시킬 수 있어 바람직하다. 이는 콜라겐이 혼합되지 않은 경우 곤충의 단백질이 아미노산 분해과정을 거치면서 생체 내에서 쉽게 분해되는 현상이 발생하게 되는데, 콜라겐이 혼합됨으로 인해 이러한 현상을 감소시키거나 방지하기 때문인 것으로 보인다. 또한 상기 2)단계에서 초음파 처리를 통해 자기집적화를 보다 용이하게 달성할 수 있다. 또한 상기 콜라겐은 본초발효물 100 중량부에 대하여 3-20 중량부로 혼합되는 것이 바람직한데, 상기 콜라겐이 3 중량부 미만으로 포함되는 경우 자기집적화가 용이하게 진행되기 어려워 바람직하지 않으며, 상기 콜라겐이 20 중량부를 초과하게 되면 키토산의 함량 비율이 지나치게 낮아져 바람직하지 않다.
또한 특별한 제한이 있는 것은 아니지만 바람직하게는 상기 2)단계 이후에 2-6 개월간 초산균 발효시키는 단계를 더 포함할 수 있다. 상기 초산균 발효 단계는 10-25 ℃의 실온에서 1-7 일에 1-3 회 교반을 실시하는 것이 바람직하다.
또한 상기 제조방법에 의하여 제조된 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀의 크기는 100-1,000 nm인 것일 수 있다.
본 발명의 또 다른 특징에 따른 곤충의 사육방법은
1) 곤충을 충전한 사육배지 내에 본 발명에 따른 상기 제조방법에 의해 제조된 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀을 사료로 공급하여 사육하는 단계;
를 포함한다.
이러한 곤충의 사육방법에서 특별한 제한이 있는 것은 아니지만 바람직하게는 본 발명에 따라 제조된 상기 키토산 마이셀을 굼벵이 사료로 배지에 공급하고, 최적의 사육 농도인 2.0×106 PIBs/mL과 최적의 바이러스 생육온도 28±1℃, 상대습도 60±5%, 광주기 16L:8D, 형광등 조도 800-1,000 룩스 광원의 실내조건에서 30 일간 곤충을 대량 사육하는 것일 수 있다.
또한 상기 곤충은 특별한 제한이 있는 것은 아니지만 식용으로 활용 가능하면서 단백질 공급원으로서도 우수한 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 유충, 굼벵이, 풍뎅이, 애벌레 및 누에가 이에 해당할 수 있다.
본 발명의 또 다른 특징에 따른 건기식 조성물은 본 발명에 따른 상기 사육방법으로 사육된 곤충 또는 이의 분쇄물을 유효성분으로 함유하는 간기능 개선용 건기식 조성물, 혈액 또는 혈관 기능 개선용 건기식 조성물, 인지 기능 개선용 건기식 조성물일 수 있다.
본 발명의 또 다른 특징에 따른 간질환 치료 또는 예방용 약학 조성물은 상기 사육방법으로 사육된 곤충 또는 이의 분쇄물을 유효성분으로 함유하는 것일 수 있다.
또한 상기 곤충 또는 이의 분쇄물은 전체 약학 조성물 100 중량부에 대하여 1-90 중량부로 함유하는 것일 수 있다.
또한 상기 간질환은 간경화, 간경변, 알코올성 지방간, 지방간, 간암, 알코올성 간염, 간괴사, 급성간염 및 만성간염으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나의 질환일 수 있다.
본 발명의 또 다른 특징에 따른 혈액 또는 혈관 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물은 상기 사육방법으로 사육된 곤충 또는 이의 분쇄물을 유효성분으로 함유하는 것일 수 있다.
또한 상기 곤충 또는 이의 분쇄물은 전체 약학 조성물 100 중량부에 대하여 1-90 중량부로 함유하는 것일 수 있다.
또한 상기 혈액 또는 혈관 질환은 동맥경화증, 관상동맥협착증, 뇌졸증, 뇌경색, 뇌출혈, 고지혈증, 동맥류, 혈전증, 색전증, 심장부전 죽상경화증, 고혈압 및 심근경색증으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나의 질환일 수 있다.
본 발명의 또 다른 특징에 따른 인지 기능 저하와 관련된 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물은 상기 사육방법으로 사육된 곤충 또는 이의 분쇄물을 유효성분으로 함유하는 것일 수 있다.
또한 상기 곤충 또는 이의 분쇄물은 전체 약학 조성물 100 중량부에 대하여 1-90 중량부로 함유하는 것일 수 있다.
또한 상기 인지 기능 저하와 관련된 질환은 치매, 노인성치매, 혈관성치매, 루이체치매, 루게릭병, 크로이츠펠트 야콥병, 픽크병, 외상후 스트레스 장애, 기억상실증, 헌팅턴치매, 알츠하이머병, 파킨슨병, 및 퇴행성 뇌질환으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나의 질환일 수 있다.
이하 본 발명을 바람직한 실시예를 참고로 하여 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예
실시예
1
1) 유산균 발효 단계
초석잠 100 중량부, 자당 100 중량부 및 물 300 중량부를 혼합하여 당농도를 25 브릭스로 조정하고, 1×107 CFU/g의 락토바실러스 플란타룸 KCCM11322를 5 중량부 접종하여 45 ℃에서 교반 없이 36 시간 유산균 발효를 실시하여 초석잠 본초발효물을 제조하였다.
2) 발효식초 제조공정
현미 100 중량부와 자당 80 중량부를 혼합한 후, 밀봉한 후 10 내지 25 ℃로 유지되는 음지에서 24 개월 자연 발효시켜 현미 발효식초를 제조하였다.
3) 키토산 표면처리 단계
질소 분위기에서 수평균분자량 40만 정도인 수불용성 키토산 100 중량부를 용기에 넣고 1,000 rpm으로 교반하면서 상기 현미 발효식초 15 중량부를 분무하면서 15분 동안 투입하고, 투입 완료 후 800 rpm으로 20분 동안 혼합하였다.
4) 자기집적화 단계
상기 1)단계를 통해 수득된 초석잠 본초발효물 100 중량부에 키토산 30 중량부, 콜라겐 15 중량부를 함께 혼합한 후 초음파 처리 200-300주울(Jule) 10-30ch, 1-5회 하면서, 이를 교반하였다. 교반하면서 본초는 키토산 및 콜라겐 혼합물의 내부로 자기집적화하여 봉입되었다. 하기 도 1은 이러한 자기집적화한 키토산의 모식도이다. 한편, 하기 도 2는 본 실시예에 의하면서 콜라겐의 농도를 조절하여 마이크로 캡슐화한 키토산의 TEM 사진을 나타내는 것이다.
5) 젤리형 굼벵이 사료 제조
상기 4)단계를 거친 후, 자기집적화한 키토산을 펩타이드 글루칸으로 한천 베이스 20 중량부, 전분 20 중량부의 범위에서 1-4 시간 동안 50-95 ℃의 온도에서 교반하여 마이셀형 소프트젤리로 만들어 굼벵이 사육 먹이로 공급하였다.
6) 굼벵이 사육단계
상기 5) 단계를 수행한 키토산 마이셀을 굼벵이 사료로 배지에 공급하고, 최적의 사육 농도인 2.0×106 PIBs/mL과 최적의 바이러스 생육온도 28±1℃, 상대습도 60±5%, 광주기 16L:8D, 형광등 조도 800-1,000 룩스광원의 실내조건에서 30 일간 굼벵이를 대량 사육하였다.
실시예
2
실시예 1의 1) 유산균 발효 단계에 초석잠 대신 석창포를 첨가하는 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하게 실시예 2의 석창포 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀을 제조하였으며, 이의 수평균분자량은 16만이었다.
실시예
3
실시예 1의 1) 유산균 발효 단계에 초석잠 대신 노루궁뎅이버섯을 첨가하는 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하게 실시예 3의 노루궁뎅이버섯 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀을 제조하였으며, 이의 수평균분자량은 16만이었다.
실시예
4
실시예 1의 1) 유산균 발효 단계에 초석잠 대신 칡을 첨가하는 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하게 실시예 4의 칡 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀을 제조하였으며, 이의 수평균분자량은 16만이었다.
실시예
5
실시예 1의 1) 유산균 발효 단계에 초석잠 대신 택란을 첨가하는 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하게 실시예 5의 택란 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀을 제조하였으며, 이의 수평균분자량은 16만이었다.
실시예
6
실시예 1의 1) 유산균 발효 단계에 초석잠 대신 결명자를 첨가하는 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하게 실시예 6의 결명자 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀을 제조하였으며, 이의 수평균분자량은 16만이었다.
실시예
7
실시예 1의 1) 유산균 발효 단계에 초석잠 대신 헛개나무를 첨가하는 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하게 실시예 7의 헛개나무 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀을 제조하였으며, 이의 수평균분자량은 16만이었다.
실시예
8
실시예 1의 1) 유산균 발효 단계에 초석잠 대신 초석잠, 석창포, 노루궁뎅이버섯을 포함하는 평진탕 재료의 1:1:1 중량비 혼합물을 첨가하는 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하게 실시예 8의 평진탕 재료 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀을 제조하였으며, 이의 수평균분자량은 16만이었다.
실시예
9
실시예 1의 1) 유산균 발효 단계에 초석잠 대신 칡, 택란, 결명자, 헛개나무를 포함하는 평진탕 재료의 1:1:1:1 중량비 혼합물을 첨가하는 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하게 실시예 9의 평진탕 재료 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀을 제조하였으며, 이의 수평균분자량은 16만이었다.
비교예
비교예
1
상기 실시에 1과는 달리 1) 유산균 발효 단계만을 거친 초석잠 본초발효물을 본 비교예 1로 하였다.
비교예
2
상기 실시에 2와는 달리 1) 유산균 발효 단계만을 거친 석창포 본초발효물을 본 비교예 2로 하였다.
비교예
3
상기 실시에 3과는 달리 1) 유산균 발효 단계만을 거친 노루궁뎅이버섯 본초발효물을 본 비교예 3으로 하였다.
비교예
4
상기 실시에 4와는 달리 1) 유산균 발효 단계만을 거친 칡 본초발효물을 본 비교예 4로 하였다.
비교예
5
상기 실시에 5와는 달리 1) 유산균 발효 단계만을 거친 택란 본초발효물을 본 비교예 5로 하였다.
비교예
6
상기 실시예 6과는 달리 1) 유산균 발효 단계만을 거친 결명자 본초발효물을 본 비교예 6으로 하였다.
비교예
7
상기 실시예 7과는 달리 1) 유산균 발효 단계만을 거친 헛개나무 본초발효물을 본 비교예 7로 하였다.
비교예
8
상기 실시예 8과는 달리 1) 유산균 발효 단계만을 거친 평진탕 본초발효물을 본 비교예 8로 하였다.
비교예
9
상기 실시예 9와는 달리 1) 유산균 발효 단계만을 거친 평진탕 본초발효물을 본 비교예 9로 하였다.
실험예
<
실험예
1: 세포독성 실험>
실시예 1 내지 실시예 9의 각 재료들을 각각 동결건조한 분말 시료로 PC-12 세포주를 사용하여 그 세포독성을 MTS assay로 측정하였다. 양성대조물로는 아지드화나트륨(NaN3, sodiumazide)을 사용하여 37 ℃, 5 % CO2 조건에서 48 시간 배양하였다. 상기 시료를 각각 0.1, 0.05, 0.001, 0.005 중량% 에 각각 아지드화나트륨을 0.2 ml씩 가하여 490 nm에서 흡광도를 측정한 결과, 어느 농도에서도 세포독성이 없었음을 확인하였다.
<
실험예
2:
생체내
안전성 실험>
실시예 1 내지 실시예 9의 먹이로 사육한 굼벵이를 건조하여 제조된 시료 1 % 용액(검액)으로 17-23 g의 숫 흰쥐를 10 마리씩 시험 체중의 체중 kg 당 50 ml씩을 주사하여 5 일 후에 관찰하여 이상 유무를 확인하여 표 1에 그 결과를 나타내었다.
피내반응시험은 검액별로 대조군과 비교하며, 체중 2.5 kg의 숫토끼의 척추를 기준으로 한쪽에만 피내주사를 하여 국소에 홍반, 부종, 출혈, 괴사 등의 이상 반응을 확인하였다. 용혈성 시험은 체중 2.5 kg 숫토끼에 제조한 액을 검액으로 10 ml에 원심분리로 혈액의 섬유질을 제거한 탈섬유혈액 0.1 ml를 넣고 37 ℃에서 24 시간 방치 후 용혈 생성 유무로 판정하였다. 조직이식시험은 대조 플라스틱과 제조한 액의 순 원료로 길이 10 mm, 폭 1 mm의 주사기를 이용 펠렛형의 검체 8 개를 만들어 중성세제, 물로 잘 씻고 멸균을 하여 시험동물 2.5 kg 이상의 숫토끼 2 마리를 사용 멸균한 게이지 주사침 속에 검체를 미리 넣어 시험동물 척추로부터 약 3.5 cm 의 거리 간격을 두고 2.5 cm의 간격으로 주사바늘의 스타일렛을 써서 이식하여 72 시간 경과 후 동물을 마취사시키고, 탈혈시킨 후 이식부위의 근육조직을 채취하여 헤마토실린(Hematoxylin)과 에오신(Eosin)으로 염색하여 광학현미경으로 관찰 조직이식부위의 피포형성과 출혈 등의 생물학적 판단 기준으로 확인하였다.
구분 |
급성독성시험 | 피내반응시험 | 용혈성시험 |
이상유무 | 홍반, 부종, 출혈, 괴사유무 | 용혈생성유무 | |
실시예 1 | 없음 | 없음 | 없음 |
실시예 2 | 없음 | 없음 | 없음 |
실시예 3 | 없음 | 없음 | 없음 |
실시예 4 | 없음 | 없음 | 없음 |
실시예 5 | 없음 | 없음 | 없음 |
실시예 6 | 없음 | 없음 | 없음 |
실시예 7 | 없음 | 없음 | 없음 |
실시예 8 | 없음 | 없음 | 없음 |
실시예 9 | 없음 | 없음 | 없음 |
상기 표 1에서 확인할 수 있는 바와 같이 실시예 1 내지 실시예 9는 급성독성시험, 피내반응시험, 용혈성시험에서 모두 안전한 것으로 확인되었다. 그러므로 생체내 안전성에서는 이상이 없는 것으로 확인되었다.
<
실험예
3: 생체 전달 분포로 확인하는
이용율과
회수율 실험>
상기 실시예 1 내지 실시예 9로 얻어진 자기집적화 키토산 마이셀을 먹이로 사육하여 얻어진 굼벵이의 단백질 추출물에 표적물질인 FITC(Fluorescein isothiocyanate)를 부착시키어 각각 동결건조한 분말 시료를 1 중량% 용액으로 제조한 후, 실험동물로서 200 g의 정상 쥐 꼬리의 정맥에 주사한 후 쥐의 간, 혈액 및 뇨에서 48 시간 뒤의 생체이용율을 비교하여 표 2에 그 결과를 나타내었다. 생체이용율은 각 시간에 배출된 FITC의 질량을 투입된 FITC의 질량으로 나눈 백분율로 계산하였다.
구분 | 간(%) | 혈액(%) |
실시예 1 | 84.4 | 96.1 |
실시예 2 | 80.5 | 92.8 |
실시예 3 | 80.1 | 91.5 |
실시예 4 | 81.3 | 92.4 |
실시예 5 | 82.1 | 93.3 |
실시예 6 | 83.6 | 96.1 |
실시예 7 | 82.6 | 94.5 |
실시예 8 | 81.3 | 94.1 |
실시예 9 | 83.3 | 93.8 |
상기 표 2에 따르면 실시예 1 내지 실시예 9에 따른 키토산 마이셀을 사료로 공급하여 사육한 굼벵이의 단백질 추출물을 주사한 쥐에서는 48 시간 후에는 모두 80 % 이상이 간에 분포되었으며, 모두 90 % 이상이 혈액에 분포되어 있음을 확인할 수 있었다. 이러한 결과로부터 본초를 자기집적화한 키토산 마이셀을 사료로 하여 굼벵이를 사육하고 이의 추출물을 주사한 경우 생체이용율이 증대됨을 확인할 수 있었다. 결국, 이러한 결과는 고분자 소재를 양쪽성을 갖게 한 마이셀로 집적화시켜 발효약재의 생체이용율 증대를 확인한 좋은 예라 할 수 있다.
<
실험예
4: 각 장기 조직에서 확인한 생체 조직 분포율>
실시예 1을 마이셀 사료로 한 굼벵이 추출물 2.5 mg/ml을 실험예 3에서와 같은 마우스에 투여하여 본 실험을 진행하였다.
생체조직 | 간(%) | 신장(%) | 비장(%) | 폐(%) | 혈액(%) |
분포율 | 84.4 | 80.2 | 70.1 | 79.4 | 96.1 |
상기 표 3에서 확인할 수 있는 바와 같이 각 장기에서 분포 차이는 있으나 평균 82.04 %(48 시간 경과 후 측정)를 보였다. 이러한 결과를 통하여 48 시간 경과 전까지는 생체조직에 고루 분포하여 각종 생리기능 향상에 이바지하는 결과를 보임을 확인할 수 있었다.
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실험예
5: 간경화 및 간 기능 관련 질환 약리효과 입증 실험>
상기 실시예 1 내지 실시예 9 및 비교예 1 내지 비교예 9로 사육된 굼벵이를 동결건조한 후 분쇄하였으며, 이를 간경화가 진행중인 마우스에 200 mg/kg을 1일 1회로 하여 3 주간 주입하여 간 해독제 역할을 하는 글루타치온 비율 및 간 효소들의 비율을 조사하였다. 이때 상기 마우스는 알코올을 200 mg/kg을 1일 1회로 하여 3 주간 주입하여 간경화가 진행 중에 있는 것을 사용하였으며, 이의 결과는 하기 표 4에 나타내었다. 하기 표 4에서 각각의 결과는 각각의 실시예 또는 비교예를 투여한 투여군과 간경화를 진행시켰을 뿐 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀 또는 본초발효물로 사육된 굼벵이 추출물을 투여하지 않은 비투여군(대조군)을 비교하여 백분율(%)로 나타낸 결과이다.
구분 | 글루타치온 | ALT | AST | GGT | ALP |
실시예 1 | 68 % 증가 | 62 % 감소 | 68 % 감소 | 72 % 감소 | 78 % 감소 |
실시예 2 | 57 % 증가 | 60 % 감소 | 62 % 감소 | 71 % 감소 | 76 % 감소 |
실시예 3 | 62 % 증가 | 64 % 감소 | 66 % 감소 | 68 % 감소 | 69 % 감소 |
실시예 4 | 59 % 증가 | 61 % 감소 | 60 % 감소 | 78 % 감소 | 68 % 감소 |
실시예 5 | 58 % 증가 | 61 % 감소 | 66 % 감소 | 66 % 감소 | 70 % 감소 |
실시예 6 | 58 % 증가 | 63 % 감소 | 64 % 감소 | 72 % 감소 | 71 % 감소 |
실시예 7 | 62 % 증가 | 61 % 감소 | 68 % 감소 | 72 % 감소 | 70 % 감소 |
실시예 8 | 68 % 증가 | 62 % 감소 | 64 % 감소 | 72 % 감소 | 71 % 감소 |
실시예 9 | 58 % 증가 | 61 % 감소 | 66 % 감소 | 68 % 감소 | 69 % 감소 |
비교예 1 | 4 % 증가 | 4 % 증가 | 2 % 증가 | 2 % 증가 | 2 % 감소 |
비교예 2 | 2 % 감소 | 2 % 감소 | 1 % 증가 | 1 % 감소 | 1 % 감소 |
비교예 3 | 2 % 감소 | 1 % 감소 | 4 % 증가 | 1 % 감소 | 2 % 증가 |
비교예 4 | 8 % 증가 | 4 % 증가 | 2 % 증가 | 2 % 감소 | 1 % 증가 |
비교예 5 | 6 % 증가 | 1 % 증가 | 2 % 감소 | 1 % 증가 | 4 % 증가 |
비교예 6 | 3 % 감소 | 4 % 감소 | 2 % 증가 | 1 % 감소 | 2 % 증가 |
비교예 7 | 4 % 감소 | 4 % 증가 | 4 % 증가 | 4 % 증가 | 2 % 감소 |
비교예 8 | 1 % 증가 | 2 % 감소 | 2 % 증가 | 2 % 감소 | 1 % 증가 |
비교예 9 | 2 % 증가 | 4 % 증가 | 1 % 감소 | 1 % 감소 | 2 % 증가 |
간 해독제 역할을 하는 글루타치온 이외에도, 통상 간 효소로는 Alanine aminotransferase(ALT, GPT), Aspartate aminotransferase(AST, GOT), γ-Glutamyltransferase(GGT), Alkaline phosphatase(ALP)등이 있는데 ALT와 AST는 간세포의 손상이나 간의 지방축적 정도를 측정하는 지표로, GGT와 ALP는 담즙성 질환 및 알코올 섭취와 관련된 지표로 활용된다. 상기 표 4에 의하면 대조군(본초발효 자기집적 키토산으로 사육된 굼벵이 추출물 비투여군)에 비해 실시예 1 내지 실시예 9가 글루타치온, ALT, AST, GGT, ALP에서 모두 우수한 결과를 보임을 확인할 수 있어 간경화, 및 간 기능 관련 질환에 대한 치료 또는 예방 효과가 있음을 확인하였다. 구체적으로 실시예 1 내지 9는 글루타치온의 비율이 대조군에 비해 60 % 가량 증가하는 결과를 보임을 확인할 수 있으며, ALT 및 AST 는 60 % 가량 감소하는 결과를 보였고, GGT 및 ALP는 70 % 가량 감소하는 결과를 보임을 확인할 수 있었다. 이러한 결과를 통해 간경화를 예방 또는 치료할 수 있으며, 각종 간 관련 질환(간세포의 손상이나 간의 지방축적 정도를 측정하는 지표인 ALT와 AST의 감소 결과를 통해 지방간 등에도 치료 또는 예방 효과가 있음을 알 수 있음)에도 예방 또는 치료 효과를 달성할 수 있음을 확인하였다. 반면에 비교예 1 내지 9는 대조군과 비교하여 거의 변동이 없는 결과를 보여 특별한 효과가 발현되지 않는 것으로 확인되었다.
<
실험예
6: 혈액 또는 혈관 관련 질환 약리효과 입증 실험>
상기 실시예 1 내지 실시예 9를 사료로 섭취시켜 사육한 굼벵이의 추출물 200 mg/kg을 1일 1회로 하여 3 주간 마우스에 투여하여 ALT, AST, 중성지방, 총콜레스테롤, 동맥경화지수 등을 측정하였다. 이는 상기 투여군(실시예 1 내지 실시예 6)과 비투여군(대조군)을 분광광도계(spectrophotometer)로 혈액을 채취하여 비교하였다. 그 결과 ALT와 AST는 비투여군에 비해 60 %까지 낮아지는 결과를 보임을 확인하였으며, 중성지방은 40 %, 총콜레스테롤 45 %, 동맥경화지수는 70 %까지 낮아지는 결과를 보임을 확인하였다(하기 표 5 참조). 이러한 결과를 통하여 실시예 1 내지 실시예 9에 따른 굼벵이 추출물 또는 분쇄물은 동맥경화증, 관상동맥협착증, 뇌졸증, 뇌경색, 뇌출혈, 고지혈증, 고혈압 및 심근경색 등의 혈액 또는 혈관 질환을 치료 또는 예방하는 것이 가능함을 확인할 수 있었다. 특히 중성지방의 측정 결과를 통해 고지혈증 등의 약리효과가 있음을 확인할 수 있으며, 총콜레스테롤 측정 결과를 통해 동맥경화증, 관상동맥협착증, 고혈압, 뇌졸증, 뇌경색, 뇌출혈, 심근경색 등의 약리효과가 있음을 확인할 수 있다. 반면에 비교예 1 내지 9는 대조군과 비교하여 거의 변동이 없는 결과를 보여 특별한 효과가 발현되지 않는 것으로 확인되었다.
구분 | ALT | AST | 중성지방 | 총콜레스테롤 | 동맥경화지수 |
실시예 1 | 62 % 감소 | 68 % 감소 | 42 % 감소 | 46 % 감소 | 70 % 감소 |
실시예 2 | 60 % 감소 | 62 % 감소 | 41 % 감소 | 46 % 감소 | 70 % 감소 |
실시예 3 | 64 % 감소 | 66 % 감소 | 42 % 감소 | 47 % 감소 | 71 % 감소 |
실시예 4 | 61 % 감소 | 60 % 감소 | 42 % 감소 | 45 % 감소 | 70 % 감소 |
실시예 5 | 61 % 감소 | 66 % 감소 | 40 % 감소 | 45 % 감소 | 70 % 감소 |
실시예 6 | 63 % 감소 | 64 % 감소 | 40 % 감소 | 46 % 감소 | 72 % 감소 |
실시예 7 | 64 % 감소 | 66 % 감소 | 42 % 감소 | 47 % 감소 | 71 % 감소 |
실시예 8 | 61 % 감소 | 64 % 감소 | 40 % 감소 | 45 % 감소 | 70 % 감소 |
실시예 9 | 60 % 감소 | 62 % 감소 | 42 % 감소 | 46 % 감소 | 71 % 감소 |
비교예 1 | 2 % 감소 | 2 % 증가 | 1 % 증가 | 3 % 증가 | 1 % 감소 |
비교예 2 | 1 % 감소 | 1 % 감소 | 1 % 감소 | 2 % 증가 | 1 % 증가 |
비교예 3 | 1 % 증가 | 1 % 증가 | 2 % 감소 | 2 % 증가 | 2 % 증가 |
비교예 4 | 3 % 증가 | 2 % 증가 | 2 % 증가 | 3 % 증가 | 1 % 감소 |
비교예 5 | 2 % 감소 | 1 % 감소 | 1 % 감소 | 2 % 감소 | 3 % 증가 |
비교예 6 | 1 % 감소 | 1 % 감소 | 3 % 증가 | 1 % 증가 | 1 % 증가 |
비교예 7 | 2 % 감소 | 1 % 증가 | 2 % 증가 | 2 % 증가 | 2 % 증가 |
비교예 8 | 1 % 증가 | 2 % 감소 | 1 % 증가 | 2 % 증가 | 2 % 증가 |
비교예 9 | 2 % 감소 | 1 % 감소 | 3 % 증가 | 2 % 증가 | 2 % 감소 |
<
실험예
7: 인지 기능 저하 관련 질환 약리효과 입증 실험>
1) 신경성장인자(NGF) 발현 측정
상기 실시예 1 내지 실시예 9를 사료로 섭취시켜 사육한 굼벵이의 추출물 200 mg/kg을 1일 1회로 하여 30 일간 투여한 실험 마우스의 뇌를 분석한 결과 기억력 중추인 해마 부위에서 신경성장인자(NGF) 발현이 투여하기 전에 비해 각 1.5-2.5 배 증가하는 것을 확인하여 기억력 향상 또는 인지 기능 향상에 기여할 수 있음을 확인하였다(하기 표 6 참조). 이에 비해 비교예 1 내지 비교예 9는 투여 전과 비교하여 큰 차이가 없음을 확인하였다.
구분 | NGF |
실시예 1 | 2.3 배 |
실시예 2 | 1.7 배 |
실시예 3 | 2.3 배 |
실시예 4 | 2.5 배 |
실시예 5 | 1.8 배 |
실시예 6 | 1.6 배 |
실시예 7 | 1.9 배 |
실시예 8 | 2.2 배 |
실시예 9 | 1.8 배 |
비교예 1 | 0.2 배 |
비교예 2 | 0.1 배 |
비교예 3 | 0.2 배 |
비교예 4 | 0.4 배 |
비교예 5 | 0.2 배 |
비교예 6 | 0.1 배 |
비교예 7 | 0.1 배 |
비교예 8 | 0.2 배 |
비교예 9 | 0.1 배 |
2) 신경세포분화 촉진 측정
또한 상기와 같이 굼벵이 추출물을 투여한 실험 마우스에서는 대조군(굼벵이 추출물 비투여군)에 비해 신경세포가 분화가 유도되어 신경돌기가 형성돼 신경세포 분화가 촉진됨을 확인하여 인지 기능 향상에 기여할 수 있음을 확인하였다.
3) 인지 거동 실험
상기 실시예 1 내지 실시예 9로 사육한 굼벵이 단백질을 추출하여 그룹당 10 마리의 인지능력이 감소된 실험쥐와 추출물 투여군으로 구분하여 목적지를 찾아가는 시간과 거리를 시험하였다(직선 거리로 30 m). 투여군에게는 1 일 1 회씩 30 일간 200 mg/kg을 투여하였다. 그 결과 실시예 1 내지 실시예 9로 사육된 굼벵이 추출물이 투여된 실험쥐는 목적지를 찾아가는 시간이 인지기능이 감소된 대조군에 비해 6-9 분 가량 줄어든 결과를 보임을 확인하였으며, 또한 거리는 43-37 m로 단축된 결과를 보임을 확인하였다(하기 표 7 참조). 이에 반하여 비교예 1 내지 비교예 9는 대조군과 크게 차이가 나지 않거나, 대조군 보다 좋지 않은 결과를 보임을 확인하였다. 이뿐만 아니라 공간 능력 향상에 영향을 준다는 프로테인 카이네이즈에이(PKA)도 비투여군과 비교하여 투여군에서 현저히 증가함을 확인하였다(하기 표 8 참조). 이에 반하여 비교예 1 내지 비교예 9는 대조군과 크게 차이가 나지 않거나, 대조군 보다 좋지 않은 결과를 보임을 확인하였다. 이러한 결과를 통해 실시예 1 내지 실시예 9를 사료로 하여 사육된 굼벵이 추출물을 실험쥐에 투여하는 경우 인지 기능의 저하를 회복하거나, 인지 기능을 향상시키는 결과를 보임을 확인하였다. 이러한 결과를 통하여 실시예 1 내지 실시예 9에 따른 키토산 마이셀을 사료로 섭취하여 사육된 굼벵이의 추출물 또는 분쇄물은 치매, 알츠하이머 등(구체적으로는 치매, 노인성치매, 혈관성치매, 루이체치매, 헌팅턴치매, 알츠하이머병, 파킨슨병, 및 퇴행성 뇌질환 등) 인지 기능 저하와 관련된 질환의 치료 또는 예방 효과가 있음을 확인하였다.
구분 | 목적지 도달 시간(분) | 목적지 도달 거리(m) |
대조군 | 12 | 68 |
실시예 1 | 3 | 35 |
실시예 2 | 4 | 41 |
실시예 3 | 6 | 38 |
실시예 4 | 3 | 35 |
실시예 5 | 3 | 40 |
실시예 6 | 6 | 39 |
실시예 7 | 3 | 37 |
실시에 8 | 6 | 36 |
실시예 9 | 4 | 37 |
비교예 1 | 14 | 72 |
비교예 2 | 11 | 66 |
비교예 3 | 12 | 69 |
비교예 4 | 13 | 70 |
비교예 5 | 13 | 70 |
비교예 6 | 16 | 85 |
비교예 7 | 13 | 72 |
비교예 8 | 16 | 83 |
비교예 9 | 14 | 73 |
구분 | PKA |
실시예 1 | 28 % 증가 |
실시예 2 | 37 % 증가 |
실시예 3 | 35 % 증가 |
실시예 4 | 33 % 증가 |
실시예 5 | 40 % 증가 |
실시예 6 | 34 % 증가 |
실시예 7 | 33 % 증가 |
실시예 8 | 35 % 증가 |
실시예 9 | 37 % 증가 |
비교예 1 | 2 % 증가 |
비교예 2 | 1 % 감소 |
비교예 3 | 2 % 증가 |
비교예 4 | 1 % 증가 |
비교예 5 | 3 % 증가 |
비교예 6 | 3 % 증가 |
비교예 7 | 2 % 감소 |
비교예 8 | 3 % 감소 |
비교예 9 | 2 % 감소 |
상기에서는 본 발명의 바람직한 실시예에 대하여 설명하였지만, 본 발명은 이에 한정되는 것은 아니고, 본 발명의 기술 사상 범위 내에서 여러 가지로 변형하여 실시하는 것이 가능하고, 이 또한 첨부된 특허 청구 범위에 속하는 것은 당연하다.
Claims (19)
1) 솔잎, 하수오, 산양삼, 인삼, 숙지황, 백작약, 당귀, 천궁, 백출, 복령, 자감초, 현미, 창출, 반하, 후박, 진피, 적봉령, 감초, 생강, 대조, 초석잠, 석창포, 노루궁뎅이버섯, 칡, 택란, 결명자 및 헛개나무로 이루어지는 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 본초를 당과 혼합한 후, 유산균을 접종하여 12-60 시간 동안 발효시켜 본초발효물을 수득하는 단계; 및
2) 상기 1)단계로부터 수득된 본초발효물에 키토산 및 콜라겐을 혼합한 후, 초음파 처리하에 교반하는 단계;
를 포함하는 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀의 제조방법.
2) 상기 1)단계로부터 수득된 본초발효물에 키토산 및 콜라겐을 혼합한 후, 초음파 처리하에 교반하는 단계;
를 포함하는 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀의 제조방법.
제1항에 있어서,
상기 2)단계에서 키토산 및 콜라겐은 본초발효물 100 중량부에 대하여 키토산 5-60 중량부 및 콜라겐 3-20 중량부로 혼합되는 것을 특징으로 하는 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀의 제조방법.
상기 2)단계에서 키토산 및 콜라겐은 본초발효물 100 중량부에 대하여 키토산 5-60 중량부 및 콜라겐 3-20 중량부로 혼합되는 것을 특징으로 하는 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀의 제조방법.
제1항에 있어서,
상기 제조방법에 의하여 제조된 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀의 크기는 100-1,000 nm인 것을 특징으로 하는 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀의 제조방법.
상기 제조방법에 의하여 제조된 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀의 크기는 100-1,000 nm인 것을 특징으로 하는 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀의 제조방법.
제1항에 있어서,
상기 키토산은 초산균을 함유한 발효식초로 표면처리 된 것을 특징으로 하며, 상기 초산균을 함유한 발효식초는 키토산 100 중량부에 대하여 1-25 중량부를 교반하여 혼합하는 것으로 표면처리 된 것을 특징으로 하는 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀의 제조방법.
상기 키토산은 초산균을 함유한 발효식초로 표면처리 된 것을 특징으로 하며, 상기 초산균을 함유한 발효식초는 키토산 100 중량부에 대하여 1-25 중량부를 교반하여 혼합하는 것으로 표면처리 된 것을 특징으로 하는 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀의 제조방법.
제4항에 있어서,
상기 키토산의 표면처리는 질소 분위기에서 키토산을 600-3,000 rpm으로 교반하면서 초산균을 함유한 발효식초를 5-20 분 동안 분무하여 투입하고, 투입 후 1-60 분 동안 교반하는 것을 특징으로 하는 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀의 제조방법.
상기 키토산의 표면처리는 질소 분위기에서 키토산을 600-3,000 rpm으로 교반하면서 초산균을 함유한 발효식초를 5-20 분 동안 분무하여 투입하고, 투입 후 1-60 분 동안 교반하는 것을 특징으로 하는 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀의 제조방법.
1) 곤충을 충전한 사육배지 내에 제1항에 따른 제조방법에 의해 제조된 본초발효물 함유 자기집적 키토산 마이셀을 사료로 공급하여 사육하는 단계;
를 포함하는 곤충의 사육방법.
를 포함하는 곤충의 사육방법.
제6항에 있어서,
상기 곤충은 유충, 굼벵이, 풍뎅이, 애벌레 및 누에인 것을 특징으로 하는 곤충의 사육방법.
상기 곤충은 유충, 굼벵이, 풍뎅이, 애벌레 및 누에인 것을 특징으로 하는 곤충의 사육방법.
제6항에 따른 사육방법으로 사육된 곤충 또는 이의 분쇄물을 유효성분으로 함유하는 간기능 개선용 건기식 조성물.
제6항에 따른 사육방법으로 사육된 곤충 또는 이의 분쇄물을 유효성분으로 함유하는 혈액 또는 혈관 기능 개선용 건기식 조성물.
제6항에 따른 사육방법으로 사육된 곤충 또는 이의 분쇄물을 유효성분으로 함유하는 인지 기능 개선용 건기식 조성물.
제6항에 따른 사육방법으로 사육된 곤충 또는 이의 분쇄물을 유효성분으로 함유하는 간질환 치료 또는 예방용 약학 조성물.
제11항에 있어서,
상기 곤충 또는 이의 분쇄물은 전체 약학 조성물 100 중량부에 대하여 1-90 중량부로 함유하는 것을 특징으로 하는 간질환 치료 또는 예방용 약학 조성물.
상기 곤충 또는 이의 분쇄물은 전체 약학 조성물 100 중량부에 대하여 1-90 중량부로 함유하는 것을 특징으로 하는 간질환 치료 또는 예방용 약학 조성물.
제11항에 있어서,
상기 간질환은 간경화, 간경변, 알코올성 지방간, 지방간, 간암, 알코올성 간염, 간괴사, 급성간염 및 만성간염으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나의 질환인 것을 특징으로 하는 간질환 치료 또는 예방용 약학 조성물.
상기 간질환은 간경화, 간경변, 알코올성 지방간, 지방간, 간암, 알코올성 간염, 간괴사, 급성간염 및 만성간염으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나의 질환인 것을 특징으로 하는 간질환 치료 또는 예방용 약학 조성물.
제6항에 따른 사육방법으로 사육된 곤충 또는 이의 분쇄물을 유효성분으로 함유하는 혈액 또는 혈관 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물.
제14항에 있어서,
상기 곤충 또는 이의 분쇄물은 전체 약학 조성물 100 중량부에 대하여 1-90 중량부로 함유하는 것을 특징으로 하는 혈액 또는 혈관 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물.
상기 곤충 또는 이의 분쇄물은 전체 약학 조성물 100 중량부에 대하여 1-90 중량부로 함유하는 것을 특징으로 하는 혈액 또는 혈관 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물.
제14항에 있어서,
상기 혈액 또는 혈관 질환은 동맥경화증, 관상동맥협착증, 뇌졸증, 뇌경색, 뇌출혈, 고지혈증, 동맥류, 혈전증, 색전증, 심장부전 죽상경화증, 고혈압 및 심근경색증으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나의 질환인 것을 특징으로 하는 혈액 또는 혈관 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물.
상기 혈액 또는 혈관 질환은 동맥경화증, 관상동맥협착증, 뇌졸증, 뇌경색, 뇌출혈, 고지혈증, 동맥류, 혈전증, 색전증, 심장부전 죽상경화증, 고혈압 및 심근경색증으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나의 질환인 것을 특징으로 하는 혈액 또는 혈관 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물.
제6항에 따른 사육방법으로 사육된 곤충 또는 이의 분쇄물을 유효성분으로 함유하는 인지 기능 저하와 관련된 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물.
제17항에 있어서,
상기 곤충 또는 이의 분쇄물은 전체 약학 조성물 100 중량부에 대하여 1-90 중량부로 함유하는 것을 특징으로 하는 인지 기능 저하와 관련된 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물.
상기 곤충 또는 이의 분쇄물은 전체 약학 조성물 100 중량부에 대하여 1-90 중량부로 함유하는 것을 특징으로 하는 인지 기능 저하와 관련된 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물.
제17항에 있어서,
상기 인지 기능 저하와 관련된 질환은 치매, 노인성치매, 혈관성치매, 루이체치매, 루게릭병, 크로이츠펠트 야콥병, 픽크병, 외상후 스트레스 장애, 기억상실증, 헌팅턴치매, 알츠하이머병, 파킨슨병, 및 퇴행성 뇌질환으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나의 질환인 것을 특징으로 하는 인지 기능 저하와 관련된 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물.
상기 인지 기능 저하와 관련된 질환은 치매, 노인성치매, 혈관성치매, 루이체치매, 루게릭병, 크로이츠펠트 야콥병, 픽크병, 외상후 스트레스 장애, 기억상실증, 헌팅턴치매, 알츠하이머병, 파킨슨병, 및 퇴행성 뇌질환으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나의 질환인 것을 특징으로 하는 인지 기능 저하와 관련된 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물.
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