KR20170094903A - 참여로, 가래나무, 도깨비 부채 및 모과나무의 복합추출물을 포함하는 항산화 또는 미백용 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 참여로(Veratrum nigrum var. ussuriense), 가래나무(Juglans mandshurica), 도깨비 부채(Rodgersia Podophylla), 및 모과나무(Chaenomeles Sinensis)의 복합 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 항산화 또는 미백용 화장료 조성물, 식품 조성물, 외약외품 조성물, 피부 외용제 조성물 및 약학 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 상기 조성물들은 DPPH 라디칼 소거 활성이 우수하고, 티로시나아제 활성을 억제하는 효율이 우수하여, 항산화 또는 미백 용도로 사용이 가능하다.

Description

참여로, 가래나무, 도깨비 부채 및 모과나무의 복합추출물을 포함하는 항산화 또는 미백용 조성물{Composition containing complex extracts including Veratrum nigrum var. ussuriense, Juglans mandshurica, Rodgersia podophylla and Chaenomeles sinensis with antioxidant activity or whitening}
본 발명은 참여로(Veratrum nigrum var. ussuriense), 가래나무(Juglans mandshurica), 도깨비 부채(Rodgersia Podophylla), 및 모과나무(Chaenomeles Sinensis)의 복합 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 항산화 또는 미백용 화장료 조성물, 식품조성물, 의약외품 조성물, 피부 외용제 조성물 및 약학 조성물에 관한 것이다.
인간을 포함한 모든 생물은 일생 동안 생장과 노화, 두 가지 생물학적 변화를 경험한다. 생장은 개체의 크기나 기능이 증가하는 것을 말하는 반면, 노화는 개체의 크기나 기능이 감소하거나 쇠퇴하는 현상을 말하는 것이며 생장과 노화는 동시에 일어날 수 있다. 그러나 시간과 나이의 증가에 따라 노화현상이 더욱 두드러지게 나타나게 되고 세포의 분열능력 및 대사활성이 점차 쇠약해지면서 생물은 병이 들거나 신체적ㆍ기능적으로 원활한 활동을 할 수 없게 된다. 노화가 일어나는 기작에 대해 유전적 프로그램설, 체세포 돌연변이설, 에러파탄설, 프리 라디칼설, 특정 호르몬작용에 의한 내분비설, 면역감시기능 저하에 의한 면역능 파탄설, 스트레스설, 리포푸신 및 과산화지질 등의 축적에 의거하는 노폐물축적설, 조직콜라겐섬유 등의 가교도 진행에 따른 가교(결합)설 등 다양한 노화관련 학설이 있지만 아직 명확하게 해명된 것은 없다.
청각, 후각, 미각 등의 쇠퇴, 폐활량의 저하, 장기의 중량감소 등의 다양한 노화현상 가운데, 일반적으로 사람들이 가장 직접적으로 느끼게 되고 신경을 쓰게 되는 노화 현상은 바로 피부의 노화 현상이다. 피부조직에서 일어나는 노화현상에 관해 가장 많은 지지를 받고 있는 학설은 자유 라디칼 이론인데, 이론에 따르면 대사 반응이나 자외선, 매연 및 환경 호르몬 등에 의해 생체 내에는 자유 라디칼이 생성되고, 이 자유 라디칼에 의해 항산화 방어막이 파괴됨으로써 피부의 주요 구성물질인 지질, 단백질, 다당류 및 핵산 등이 산화하여 결과적으로 피부 세포 및 조직의 노화 과정을 촉진하게 된다고 한다. 즉, 수퍼옥사이드 라디칼(O2-)과 하이드록시라디칼(OH)과 같은 라디칼 및 과산화수소(H2O2)와 같은 비라디칼에 의해 피부가 산화적 스트레스를 받음으로써 세포가 손상되고 피부노화 현상이 촉진되는 것이다. 특히, 단백질이 산화되면 피부의 결합 조직인 콜라겐(collagen), 히아루론산(hyaluronic acid), 엘라스틴(elastin), 프로테오글리칸(proteoglycan), 피브로넥틴(fibronectin) 등이 절단되어 심한 과다 염증 반응과 피부의 탄력 저하를 초래하고, 이것이 더 심해질 경우에는 DNA의 변이에 의해 돌연변이, 암의 유발, 면역 기능 저하의 사태에 이르게 된다. 따라서 피부노화를 방지하기 위해서는 여러 원인에 의해 발생하는 자유 라디칼을 소거함으로써 피부 손상을 방지할 필요가 있고, 이미 손상된 세포는 활발한 신진 대사를 통해 재생 및 증식시켜 회복시킬 필요가 있다.
한편, 사람의 피부색은 주로 피부 세포 속에 함유되어 있는 멜라닌(melanin) 색소의 양에 따라 크게 좌우된다. 멜라닌 색소가 많은 사람은 갈색 또는 검은색 피부를 갖는 반면, 멜라닌 색소가 극히 적은 사람은 백반증의 원인이 된다. 멜라닌 색소는 피부의 기저막에 존재하는 멜라노사이트(melanocyte)라는 색소 세포에서 티로시나아제(tyrosinase)에 의해 티로신(tyrosine)으로부터 생성된다. 멜라닌 색소는 과도한 자외선으로부터 피부를 보호함으로써 관선에 의한 피부손상, 피부암의 발생을 억제하는 중요한 역할을 한다. 그러나 일광, 호르몬변화, 염증, 약제 등에 의해 멜라닌이 과다하게 생성되는 경우 피부의 색소가 침착되며, 이로 인해 미용상 여러 가지 문제를 야기한다. 예를 들어, 피부의 과색소 질환인 기미나 주근깨 등은 멜라닌 색소의 양의 증가에 기인한 것으로, 이는 멜라닌 색소의 생성과정이 촉진되거나 멜라닌 세포의 수가 증가하였다는 것을 의미한다.
따라서, 최근에는 이러한 문제점을 예방 및 개선하기 위한 여러 미백용 화장품, 의약품 등이 개발되어 시판되고 있다. 현재 피부 미용을 위한 미백제의 개발에 있어서, 생성된 멜라닌 색소를 환원시켜 탈색하는 방법과 멜라닌 색소를 형성하는 효소인 티로시나아제의 활성을 억제하는 방법이 알려져 있다. 그러나 멜라닌 색소를 환원시키기 위해 사용되는 토코페롤(tocopherol)등을 사용한 미백제는 멜라닌 색소의 탈색효과가 미미한 것으로 알려져 있다. 따라서 티로시나아제의 활성을 저해시킴으로써 멜라닌 색소의 생성을 억제하는 저해제가 주목받고 있다.
티로시나아제는 모노페놀(monophenol)류를 산화하는 반응을 촉매하는 효소로 고등동물의 멜라닌 세포 속에 들어있다. 이 효소에 의해 티로신은 산화되어 일련의 화학반응, 산화 등을 거쳐 멜라닌 색소가 생성되게 된다. 이 멜라닌 색소는 갈색이나 흑색을 띠는 것으로 생체 내에서 과량의 빛을 흡수하게 하여 피부 미용에 나쁜 영향을 미치게 된다. 티로시나아제 효소의 활성을 억제시키면 멜라닌 색소의 생성을 억제할 수 있다는 점에 착안하여 종래의 화장품 분야에서는 천연 미백 추출물로서 천연 식물 추출물 등을 티로시나아제의 활성 저해물질로 이용하고 있다.
이러한 배경하에, 본 발명자들은 종래의 식물 추출물보다 라디칼 소거능이 우수하고 티로시나아제 활성을 효과적으로 저해할 수 있는 식물 추출물을 개발하고자 예의 노력한 결과, 참여로, 가래나무, 도깨비 부채, 및 모과나무의 복합 추출물이 라디칼 소거능이 우수하고 티로시나아제 활성을 효과적으로 저해할 수 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하였다.
대한민국 공개특허공보 제10-1998-077719(공개일 1998.11.16.)
본 발명의 하나의 목적은 참여로(Veratrum nigrum var. ussuriense), 가래나무(Juglans mandshurica), 도깨비 부채(Rodgersia Podophylla), 및 모과나무( Chaenomeles Sinensis)의 복합 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 항산화 또는 미백용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 참여로(Veratrum nigrum var. ussuriense), 가래나무(Juglans mandshurica), 도깨비 부채(Rodgersia Podophylla), 및 모과나무(Chaenomeles Sinensis)의 복합 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 항산화 또는 미백용 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 참여로(Veratrum nigrum var. ussuriense), 가래나무(Juglans mandshurica), 도깨비 부채(Rodgersia Podophylla), 및 모과나무(Chaenomeles Sinensis)의 복합 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 항산화 또는 미백용 외약외품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 참여로(Veratrum nigrum var. ussuriense), 가래나무(Juglans mandshurica), 도깨비 부채(Rodgersia Podophylla), 및 모과나무(Chaenomeles Sinensis)의 복합 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 항산화 또는 미백용 피부 외용제 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 참여로(Veratrum nigrum var. ussuriense), 가래나무(Juglans mandshurica), 도깨비 부채(Rodgersia Podophylla), 및 모과나무(Chaenomeles Sinensis)의 복합 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 항산화 또는 미백용 약학 조성물을 제공하는 것이다.
이하, 본 발명을 보다 상세하게 설명한다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 하나의 양태로서, 참여로(Veratrum nigrum var. ussuriense), 가래나무(Juglans mandshurica), 도깨비 부채(Rodgersia Podophylla), 및 모과나무(Chaenomeles Sinensis)의 복합 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 항산화 또는 미백용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 상기 화장료 조성물은 유효성분으로, 참여로(Veratrum nigrum var. ussuriense), 가래나무(Juglans mandshurica), 도깨비 부채(Rodgersia Podophylla), 및 모과나무(Chaenomeles Sinensis)를 포함한다.
상기 참여로는 한국의 북부지방과 경상북도 이북의 석회암 지대에 자생하며, 러시아, 중국에도 분포한다. 큰여로, 왕여로라고도 부르며 산지에 나무 아래에서 자라는 여러해살이풀로 학명은 Veratrum nigrum이며, 보다 구체적으로는 Veratrum nigrum var. ussuriense이다. 줄기는 높이 1-1.5cm이고 밑부분에는 오래된 묵은 잎이 그물 모양으로 생긴 섬유로 싸여 있으며, 뿌리줄기는 짧고 수염뿌리는 굵다. 잎은 줄기 아랫부분에 어긋나며 가장 아래에 있는 잎은 넓은 타원형모양으로서 길이 약 40cm, 너비 약 10cm이며, 끝은 뾰족하며, 밑으로 갈수록 좁아져서 잎집으로 연결되고 줄기를 감싸고 있으며, 또한, 위쪽으로 갈수록 작아진다. 꽃은 7-9월에 피며 화피갈래조각은 6장이고 긴 타원 모양이며 끝이 뭉툭하다. 바깥조각의 뒷면인 꽃대에는 흰색 털이 빽빽이 나 있다. 꽃은 지름 1cm로 짙은 자주색이며, 수술은 6개이고 화피길이의 1/2 정도이며, 암술머리는 3개로 갈라진다. 씨방은 달걀모양이고 아랫부분에 털이 나기도 하며, 암술대는 3갈래로 갈라지고 뒤로 젖혀진다. 열매는 세모난 타원 모양의 삭과로 자줏빛이고 길이는 약 1cm이며 3갈래로 벌어진다.
본 발명에서 상기 화장료 조성물은 참여로를 건조 및 파쇄하여 분말화한 것을 추출에 적용할 수 있고, 참여로의 잎, 줄기, 줄기껍질, 가지, 가지껍질, 뿌리, 꽃 또는 이들 모두를 포함할 수 있으며, 구체적으로는 뿌리를 제외한 참여로의 지상부에 해당하는 잎, 줄기, 줄기껍질, 가지, 가지껍질, 꽃 또는 이들 모두를 사용할 수 있다.
상기 가래나무는 추자목(楸子木)이라고도 하고 열매를 추자(楸子)라 하며, 학명은 Juglans mandshurica이다. 산기슭의 양지쪽에서 자라며 높이가 20cm정도이며 나무껍질은 암회색이며 세로로 터진다. 잎은 홀수깃꼴겹잎으로, 작은 잎은 7~17개이다. 긴 타원형 또는 달걀 모양 타원형으로 길이 7~28cm, 너비 10cm 정도이다. 잔 톱니가 있고 앞면은 잔털이 있으나 점차 없어지고, 뒷면은 털이 있거나 없는 것도 있으며 잎맥과 잎자루 위에 선모가 있다. 꽃은 단성화로서 4월에 피는데, 수꽃은 5~6월에 새잎과 함께 길이 10~25cm의 전년도의 가지 겨드랑이에서 밑으로 드리우고, 암꽃이삭은 길이 6~13cm로 가지 끝에서 곧게 위로 뻗으며, 이삭마다 7~10개의 꽃이 달린다. 열매는 핵과로서 길이 4~8cm로 난원형 또는 타원형이고, 9~10월에 익는다. 황록색의 잔털이 밀생하며 끝이 뾰족하고 몹시 단단하다. 씨에는 다량의 지방유를 함유하고 지방이 55.5~60.6% 정도 들어 있으며 영양이 풍부하며, 지방에는 불포화지방산이 들어 있다. 씨는 동맥경화증을 예방하기 위한 약으로 쓴다. 소백산, 속리산 등 우리나라 중부 지방 이북의 산지에 자생하는 낙엽 활엽 교목으로, 중국 북부, 동북부와 구소련의 시베리아에도 분포한다.
본 발명에서 상기 화장료 조성물은 가래나무를 건조 및 파쇄하여 분말화한 것을 추출에 적용할 수 있고, 가래나무의 잎, 줄기, 줄기껍질, 가지, 가지껍질, 뿌리, 꽃 또는 이들 모두를 포함할 수 있으며, 구체적으로는 뿌리를 제외한 가래나무의 지상부에 해당하는 잎, 줄기, 줄기껍질, 가지, 가지껍질, 꽃 또는 이들 모두를 포함할 수 있으며, 보다 구체적으로는 지상부 중에서 잎과 줄기를 사용할 수 있다.
상기 도깨비 부채는 산우, 작합산, 수레부채라고도 하며, 학명은 Rodgersia Podophylla이다. 중부 이북의 깊은 산 응달에서 나는 다년생 초본으로, 생육환경은 계곡물이 많이 흘러 주변습도가 높고 토양은 비옥하며 햇볕이 잘 들어오지 않는 곳에서 자란다. 키는 약 1cm이고, 잎은 손바닥 모양 겹잎으로 어긋나고 잎자루는 길며 3~6개로 갈라진다. 작은 잎은 5개가 나오며 큰 것은 지름 50cm정도이고 윗부분의 것은 1~4개의 작은 잎이 나온다. 작은 잎은 달걀을 거꾸로 세운 듯한 모양으로 가장자리에 불규칙한 톱니가 있다. 잎자루 윗부분과 뒷면 맥 위에 털이 있다. 꽃은 6월에 피고, 황백색으로 줄기 끝에 크게 달려 많은 꽃이 달린다. 꽃대의 길이는 20~40cm이고 아래에서 먼저 피고 위쪽으로 올라가면서 순차적으로 핀다. 수술은 10개이고 꽃받침보다 길며 암술머리는 2개이다. 열매는 8~10월경에 넓은 달걀 모양으로 달리며, 꽃잎은 없고 꽃받침은 5개로 깊게 갈라지며 그 조각은 긴 달걀 모양으로 흰색이다. 뿌리 줄기는 크고 굵다. 경상북도, 강원도, 평안북도, 함경남도, 함경북도, 일본 등지에 분포한다.
본 발명에서 상기 화장료 조성물은 도깨비 부채를 건조 및 파쇄하여 분말화한 것을 추출에 적용할 수 있고, 도깨비 부채의 잎, 줄기, 줄기껍질, 가지, 가지껍질, 뿌리, 꽃 또는 이들 모두를 포함할 수 있으며, 구체적으로는 뿌리를 제외한 도깨비 부채의 지상부에 해당하는 잎, 줄기, 줄기껍질, 가지, 가지껍질, 꽃 또는 이들 모두를 사용할 수 있다.
상기 모과나무는 중국이 원산지인 나무로 중부 이남의 지역에 널리 심어져 있으며, 학명은 Chaenomeles Sinensis다. 토심이 깊고 배수가 양호하며 비옥한 곳을 좋아하며, 지나친 햇볕을 받으면 줄기가 해를 입어 고사한다. 관상수, 과수 또는 분재용으로 심는다. 나무껍질은 보랏빛을 띤 갈색으로 윤기가 나며 묵은 나무껍질은 봄마다 들떠 일어나 떨어지고 떨어진 자리는 푸른빛을 띤다. 높이는 10m에 달한다. 어린 가지에 털이 있으며 두해살이 가지는 자갈색의 윤기가 있다. 잎은 어긋나고 타원상 달걀모양 또는 긴 타원형이다. 잎의 윗가장 자리에 잔 톱니가 있고 밑부분에는 선이 있으며 떡잎은 일찍 떨어진다. 꽃은 5장의 둥그스름한 꽃잎을 가지고 5월이 되면 잔가지의 끝에 1송이씩 피어나며, 연한 홍색으로 지름 2.5~3cm이며 꽃잎은 달걀을 거꾸로 세운 모양이고 끝이 오목하다. 열매는 타원형 또는 달걀을 거꾸로 세운 모양이고 길이 10~20cm, 지름 8~15cm이며 목질이 발달해 있다. 9월에 황색으로 익으며 향기가 좋으나 신맛이 강하다. 열매를 식용하여 약재로 사용하며 다량의 타닌성분을 함유하고 있다. 진해, 거담, 지사, 진통 등의 효능이 있다. 적용 질환으로는 백일해, 천식, 기관지염, 폐렴, 늑막염, 각기, 설사, 신경통, 근육통, 빈혈증으로 알려져 있다.
본 발명에서 상기 화장료 조성물은 모과나무를 건조 및 파쇄하여 분말화한 것을 추출에 적용할 수 있고, 모과나무의 잎, 줄기, 줄기껍질, 가지, 가지껍질, 뿌리, 꽃 또는 이들 모두를 포함할 수 있으며, 구체적으로는 뿌리를 제외한 모과나무의 지상부에 해당하는 잎, 줄기, 줄기껍질, 가지, 가지껍질, 꽃 또는 이들 모두를 포함할 수 있으며, 보다 구체적으로는 지상부 중에서 줄기를 사용할 수 있다.
본 발명에서 용어, "지상부"는 식물체에서 지표를 중심으로 하여 지표 상부의 부분을 의미한다. 즉, 뿌리를 제외한 지표 상부를 일컬으며, 이에는 뿌리를 제외한 잎, 줄기, 줄기껍질, 가지, 가지껍질, 꽃 또는 이들 모두를 포함하는 의미이다.
본 발명에서 용어 “복합 추출물”은 식물과 같은 천연물들을 혼합한 다음, 하나 이상의 용매로 추출하여 수득한 추출물의 형태이거나 천연물 각각을 용매로 추출하여 수득한 추출물들을 서로 혼합한 형태를 의미한다. 본 발명에서 상기 복합 추출물은 참여로, 가래나무, 도깨비 부채, 모과나무의 혼합물을 추출 용매로 추출한 것이거나, 참여로 추출물, 가래나무 추출물, 도깨비 부채 추출물 및 모과나무 추출물을 서로 혼합한 형태일 수 있다.
본 발명에서 용어, "추출물"은 추출 처리에 의하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다. 본 발명의 상기 추출물은, 상기 각각의 해당 식물의 천연, 잡종 또는 변종 식물로부터 추출될 수 있고, 식물 조직 배양물으로부터도 추출이 가능하다.
본 발명의 추출에 있어서, 상기 추출하는 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다. 상기 추출 방법의 비제한적인 예로는, 열수 추출법, 초음파 추출법, 여과법, 환류 추출법 등을 들 수 있으며, 이들은 단독으로 수행되거나 2 종 이상의 방법을 병용하여 수행될 수 있다.
본 발명에서 추출물의 건조는 채취한 식물로부터 유용한 성분들이 파괴되지 않는 범위에서 공지의 방법으로 진행될 수 있고, 예를 들어 음지에서 자연건조의 방법으로 진행될 수 있다. 또한, 파쇄는 이후 추출과정에서 식물의 유용한 성분들이 충분하게 추출될 수 있을 정도로 파쇄하면 족하며 분말화 할 수 있다. 상기 건조와 파쇄 공정은 필요에 따라서 순서를 뒤바꿔서 진행하거나 반복하여 실시할 수 있다.
본 발명에서 참여로(Veratrum nigrum var. ussuriense), 가래나무(Juglans mandshurica), 도깨비 부채(Rodgersia Podophylla), 및 모과나무(Chaenomeles Sinensis)를 추출하는 데 사용되는 추출 용매의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 본 발명에서 상기 복합 추출물은 물, C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출하여 수득될 수 있다. 또한, 상기 추출 용매의 비제한적인 예로는 물; 메탄올, 에탄올, 프로필알코올, 부틸알코올 등의 C1 내지 C4의 저급 알코올; 글리세린, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 등의 다가 알코올; 및 메틸아세테이트, 에틸아세테이트, 아세톤, 벤젠, 헥산, 디에틸에테르, 디클로로메탄 등의 탄화수소계 용매; 또는 이들의 혼합물을 사용할 수 있으며, 구체적으로, 물, 저급알코올, 1,3-부틸렌글리콜, 에틸아세테이트를 단독으로 사용하거나 2종 이상 혼합하여 사용할 수 있다.
본 발명에서는 참여로(Veratrum nigrum var. ussuriense), 가래나무(Juglans mandshurica), 도깨비 부채(Rodgersia Podophylla), 및 모과나무(Chaenomeles Sinensis)를 추출하는 용매로, 보다 구체적으로는 물, 에탄올, 메탄올을 사용할 수 있다. 상기 용매를 사용하여 참여로(Veratrum nigrum var. ussuriense), 가래나무(Juglans mandshurica), 도깨비 부채(Rodgersia Podophylla), 및 모과나무(Chaenomeles Sinensis)를 혼합한 후, 1회 이상 추출하여 복합 용매 추출물을 제조할 수 있으며, 상기 용매 추출물을 감압 증류한 후 동결건조 또는 분무 건조하여 얻은 건조 추출물을 제조할 수 있다. 본 발명의 구체적인 일 실시예에서는 추출용매로 물과 에탄올을 사용하여 참여로, 가래나무, 도깨비 부채, 모과나무의 복합 추출물을 제조하였으며, 이를 여과 및 감압 농축하여 사용하였다(실시예 1 및 2).
상기 추출은 상기 식물 건조물을 혼합한 혼합물(복합물)을 추출하는 방법으로 진행될 수 있고, 이때 참여로(Veratrum nigrum var. ussuriense), 가래나무(Juglans mandshurica), 도깨비 부채(Rodgersia Podophylla), 및 모과나무(Chaenomeles Sinensis) 각각은 1.5 내지 2.5: 1.5 내지 2.5: 0.5 내지 1.5: 0.5 내지 1.5의 중량비로 포함하는 혼합시료(혼합물)을 추출하여 복합 추출물을 제조할 수 있고, 구체적으로는 1.8 내지 2.2: 1.8 내지 2.2: 0.8 내지 1.2: 0.8 내지 1.2의 중량비로 포함하는 혼합시료(혼합물)을 추출하여 복합 추출물을 제조할 수 있으며, 이러한 경우 세포독성이 거의 없으면서 단독 추출물 등과 비교하여 항산화와 미백 활성이 동시에 향상된 복합 추출물을 얻을 수 있다.
상기 추출은 상기 식물 건조물의 부피를 기준으로 1 내지 10배 부피, 구체적으로는 1 내지 5배에 달하는 부피의 용매를 이용하여, 10 내지 80℃, 구체적으로는 15 내지 50℃의 추출 온도에서 2시간 내지 30일, 구체적으로는 12시간 내지 18일의 추출 시간 동안 추출하는 방법을 적용할 수 있으며, 상기 건조 및 파쇄물을 포함하여 1회 내지 5회 연속하여 추출하여 액상의 조추출물을 수득하는 과정을 포함할 수 있다.
본 발명에서 추출한 복합 추출물은 부유하는 고체 입자를 제거하기 위해 여과, 예를 들어 나일론, 여과지 등을 이용해 입자를 걸러내거나 냉동여과법 등을 이용해 여과한 후, 그대로 사용하거나 이를 동결건조, 열풍건조, 분무건조 등을 이용해 건조시켜 사용할 수 있다.
상기 액상의 조추출물은 감압여과 등의 방법으로 식물의 건조파쇄물과 분리된 후 농축 또는 건조의 과정을 거칠 수 있다. 예를 들어, 상기 액상의 조추출물을 진공회전농축기로 20 내지 100℃, 바람직하게는 40 내지 70℃에서 감압 농축한 농축액일 수 있고, 상기 액상의 추출물을 건조하여 분말화된 복합 추출물을 얻을 수도 있다. 이렇게 농축 또는 분말화된 복합 추출물은 필요에 따라 물, 알코올, DMSO(dimethyl sulfoxide) 또는 이들의 혼합용매에 가용하여 사용될 수 있다.
본 발명의 일실시예에서는 완전 건조시킨, 참여로, 가래나무, 도깨비 부채 및 모과나무를 2: 2: 1: 1의 중량비로 혼합한 혼합시료 1kg을 에탄올 9ℓ에 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 15 내지 37℃에서 14일간 추출하였으며, 이후 이를 여과 및 감압농축하여 건조상태의 복합 추출물을 얻었다(실시예 2).
본 발명에서 사용되는 용어, "분획물"은 여러 다양한 구성 성분들을 포함하는 혼합물로부터 특정 성분 또는 특정 성분 그룹을 분리하기 위하여 분획을 수행하여 얻어진 결과물을 의미한다.
본 발명에서 상기 분획물을 얻는 분획 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 수행될 수 있다. 상기 분획 방법의 비제한적인 예로는, 참여로(Veratrum nigrum var. ussuriense), 가래나무(Juglans mandshurica), 도깨비 부채(Rodgersia Podophylla), 및 모과나무(Chaenomeles Sinensis)을 추출하여 얻은 복합 추출물에 소정의 용매를 처리하여 상기 추출물로부터 분획물을 얻는 방법을 들 수 있다.
본 발명에서 상기 분획물을 얻는 데에 사용되는 용매의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 상기 분획 용매의 비제한적인 예로는 물, 알코올 등의 극성 용매; 헥산 (Hexane), 에틸 아세테이트 (Ethyl acetate), 클로로포름 (Chloroform), 디클로로메탄 (Dichloromethane) 등의 비극성 용매 등을 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상 혼합하여 사용될 수 있다. 상기 분획 용매 중 알코올을 사용하는 경우에는 구체적으로는 C1 내지 C4의 알코올을 사용할 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어, "항산화"는 산화를 억제하는 작용을 의미하는 것으로, 인체는 산화촉진물질(prooxidant)과 산화억제물질(antioxidant)이 균형을 이루고 있으나 여러 가지 요인들에 의하여 이런 균형상태가 불균형을 이루게 되고 산화촉진 쪽으로 기울게 되면, 산화적 스트레스(oxidative stress)가 유발되어 잠재적인 세포손상 및 병리적 질환을 일으키게 된다. 이러한 산화적 스트레스의 직접적 원인이 되는 활성 산소종(reactive oxygen species, ROS)은 불안정하고 반응성이 높아 여러 생체물질과 쉽게 반응하고, 체내 고분자들을 공격하여 세포와 조직에 비가역적인 손상을 일으키거나 돌연변이, 세포독성 및 발암 등을 초래하게 된다. NO,HNO2, ONOO-와 같은 활성 질소종(reactive nitrogen species, RNS)은 염증 반응 시 대식세포 호중구 및 다른 면역 세포들의 면역반응으로 인해 다량 생성되며, 이때 ROS도 같이 생성된다. 상기와 같은 활성산소는 체내에서 세포를 산화시켜 파괴시키며, 그에 따라 각종 질환에 노출되게 된다. 또한, 상기 항산화는 세포 내 대사 또는 자외선의 영향으로 인한 산화적 스트레스에 따라 반응성이 높은 자유 라디칼 (free radical) 또는 활성 산소종 (Reactive oxygen species, ROS)에 의한 세포의 산화를 억제하는 기능을 의미하며, 자유 라디칼 또는 활성 산소종을 제거하여 이로 인한 세포의 손상이 감소되는 것을 포함한다.
본 발명의 일실시예에서는 참여로(Veratrum nigrum var. ussuriense), 가래나무(Juglans mandshurica), 도깨비 부채(Rodgersia Podophylla), 및 모과나무(Chaenomeles Sinensis)의 에탄올 복합 추출물의 IC50(DPPH 자유 라디칼 50% 소거하는 시료의 농도)값은 11.4㎍/㎖로, 항산화 활성이 높은 것으로 알려진 양성 대조군 비타민 C와 유사한 값을 나타내어 본 발명의 복합 추출물이 항산화 활성이 우수한 것을 알 수 있었다. 또한, 복합 추출물 100㎍/㎖과 20㎍/㎖ 농도에서 양성 대조군인 비타민 C보다 DPPH 자유 라디칼 소거능이 현저하게 우수한 것을 확인하여, 본 발명의 참여로, 가래나무, 도깨비 부채 및 모과나무의 복합 추출물이 피부 노화 과정을 촉진하는 자유 라디칼의 억제를 통해 우수한 항산화 활성을 가지는 것을 확인하였다. 이에 따라, 본 발명의 복합추출물은 항산화용 화장료 조성물로 적용할 수 있음을 확인하였다. 또한, 본 발명의 참여로, 가래나무, 도깨비 부채 및 모과나무의 복합 추출물은 참여로, 가래나무, 도깨비 부채, 모과나무의 단독 추출물, 참여로와 가래나무의 복합 추출물, 참여로, 가래나무 및 도깨비 부채의 복합 추출물에 비해, 피부 노화 과정을 촉진하는 자유 라디칼을 억제하여 우수한 항산화 활성을 가지는 바, 항산화 활성에 의해 노화 과정과 피부 손상 정도를 현저하게 낮추는 효과를 나타낸다(실험예 1).
본 발명에서 사용되는 용어, "미백"은 멜라닌 등의 색소의 과다로 인하여 명도가 감소된 피부의 명도를 증가시키거나 또는 피부의 명도를 일정 수준으로 유지하는 방법, 상기 방법으로 형성된 명도가 증가된 피부 등을 포괄하여 의미하는 것으로서, 구체적으로는 피부 미백을 의미할 수 있다. 본 발명의 목적상 상기 미백은 참여로, 가래나무, 도깨비 부채, 모과나무의 에탄올 복합 추출물에 의하여 피부에서 형성되는 멜라닌의 합성을 촉진하는 티로시나아제 활성을 억제하는 수단에 의하여 수행되지만, 특별히 이에 제한되지는 않는다.
멜라닌 (Melanin)은 피부, 머리카락, 눈동자 등 생물체에 널리 분포되어 있는 색소 성분으로 인체 표피층의 멜라닌 세포 (Melanocyte) 내의 멜라노좀 (Melanosome)에서 합성되는데, 티로시나제 (Tyrosinase) 효소에 의해 티로신 (Tyrosine)을 시발 물질로 하여 DOPA (3,4-dihydroxy-phenylalanine) 또는 DOPA 퀴논 (Dopaquinone)으로 변환되는 산화 및 중합 반응으로 멜라닌이 생합성된다. 생합성된 멜라닌은 자외선과 같은 피부자극에 대해 저항력을 높여 주지만, 과도한 멜라닌 합성은 기미, 주근깨, 검버섯과 같은 색소 침착을 일으키기 때문에 티로시나아제 활성 측정은 피부 미백효과를 나타내는 하나의 중요한 지표로 받아들여지고 있다.
본 발명의 일실시예에서는 참여로, 가래나무, 도깨비 부채 및 모과나무의 복합 추출물의 IC50(Tyrosinase 활성을 50% 억제하는 시료의 농도)은 알부틴의 1/5에 미치지 못하는 수준으로 현저히 낮은 값을 나타내어, 티로시나아제의 활성을 억제하는 능력이 알부틴의 5배 정도 높은 것을 알 수 있었다. 또한, 참여로, 가래나무, 도깨비 부채 및 모과나무의 복합 추출물은 100㎍/㎖, 20㎍/㎖의 농도에서 티로시나아제 활성이 양성 대조군이 알부틴에 비해 현저히 낮은 것을 확인하였으며, 특히 상기 복합 추출물 20㎍/㎖의 농도에서 알부틴 100㎍/㎖에 비하여 현저히 낮은 티로시나아제 활성을 나타내어 티로시나아제 활성을 저해하는 효율이 현저히 높음을 확인하였다.
또한, 본 발명의 참여로, 가래나무, 도깨비 부채 및 모과나무의 복합 추출물은 가래나무, 도깨비 부채, 모과나무의 단독 추출물, 참여로와 가래나무의 복합 추출물, 참여로, 가래나무 및 도깨비 부채의 복합 추출물에 비해, 멜라닌 생합성 과정에 핵심적으로 작용하는 티로시나아제 활성을 현저히 높은 수준으로 억제하므로, 멜라닌 색소의 생성을 효과적으로 억제함으로써 피부 노화 방지 및 미백 효과를 가진다(실험예 2). 즉, 본 발명의 복합추출물은 티로시나아제의 활성 억제 효율이 우수하여, 멜라닌 생성을 효과적으로 저해할 것인바, 미백용 화장료 조성물로 적용이 가능하다.
또한, 본 발명의 참여로, 가래나무, 도깨비 부채 및 모과나무의 복합 추출물은 이들 각각의 단독 추출물과 달리, 항산화 및 미백 용도로 동시에 적용이 가능함을 확인하였다(실험예 1, 및 2)
본 발명에서 상기 화장료 조성물은 다양한 형태로 제조될 수 있는데, 예컨대, 에멀젼, 로션, 크림(수중유적형, 유중수적형, 다중상), 용액, 현탁액(무수 및 수계), 무수 생성물(오일 및 글리콜계), 젤, 마스크, 팩 또는 분말 등의 제형으로 제조될 수 있다. 본 발명의 화장료 조성물은 그 유효성분 이외에 화장료 제제에 있어서 수용가능한 담체를 포함할 수 있다. 여기서 "화장료 제제에 있어서 수용가능한 담체"란 화장료 제제에 포함될 수 있는 이미 공지되어 사용되고 있는 화합물 또는 조성물이거나 앞으로 개발될 화합물 또는 조성물로서 피부와의 접촉시 인체가 적응 가능한 이상의 독성이 없는 것을 말한다. 상기 담체는 본 발명의 조성물 전체 중량에 대하여 약 1 중량% 내지 약 99.99 중량%, 구체적으로는 조성물의 중량의 약 50 중량% 내지 약 99 중량%로 포함될 수 있다.
그러나 상기 비율은 화장료의 전술한 바의 제형에 따라 또 그것의 구체적인 적용 부위(얼굴이나 손)나 그것의 바람직한 적용량 등에 따라 달라지는 것이기 때문에, 상기 비율은 어떠한 측면으로든 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 이해되어서는 안 된다.
한편, 상기 담체로서는 알코올, 오일, 계면활성제, 지방산, 실리콘 오일, 습윤제, 보습제, 점성 변형제, 유제, 안정제, 자외선 차단제, 발색제, 향료 등이 예시될 수 있다. 상기 담체로서 사용될 수 있는 알코올, 오일, 계면활성제, 지방산, 실리콘 오일, 습윤제, 보습제, 점성 변형제, 유제, 안정제, 자외선 차단제, 발색제, 향료로 사용될 수 있는 화합물/조성물 등은 이미 당업계에 공지되어 있기 때문에 당업자라면 적절한 해당 물질/조성물을 선택하여 사용할 수 있다.
구체적으로, 상기 화장료 조성물은, 제형에 제한이 있는 것은 아니나, 용액 현탁액, 유탁액, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 클렌징, 바디워시, 클렌징 및 스프레이 중에서 선택된 제형을 갖도록 제조될 수 있다.
본 발명은 다른 하나의 양태로, 참여로(Veratrum nigrum var. ussuriense), 가래나무(Juglans mandshurica), 도깨비 부채(Rodgersia Podophylla), 및 모과나무( Chaenomeles Sinensis)의 복합 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 항산화 또는 미백용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명에서, 참여로(Veratrum nigrum var. ussuriense), 가래나무(Juglans mandshurica), 도깨비 부채(Rodgersia Podophylla), 및 모과나무(Chaenomeles Sinensis), 복합 추출물, 분획물, 항산화 및 미백은 전술한 바와 같다.
본 발명의 식품 조성물은 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 포함할 수 있으며, 식품의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더욱 포함할 수 있다.
본 발명에서 식품은 영양소를 한 가지 또는 그 이상 함유하고 있는 천연물 또는 가공품을 의미하며, 구체적으로 어느 정도의 가공 공정을 거쳐 직접 먹을 수 있는 상태가 된 것을 의미하며, 통상적인 의미로서, 각종 식품, 기능성 식품, 음료, 식품 첨가제 및 음료 첨가제를 모두 포함하는 의미로 사용된다. 상기 식품의 예로서 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 기능성 식품 등이 있다. 추가로, 본 발명의 식품에는 특수영양식품(예, 조제유류, 영,유아식 등), 식육가공품, 어육제품, 두부류, 묵류, 면류(예, 라면류, 국수류 등), 건강보조식품, 조미식품(예, 간장, 된장, 고추장, 혼합장 등), 소스류, 과자류(예, 스넥류), 유가공품(예, 발효유, 치즈 등), 기타 가공식품, 김치, 절임식품(각종 김치류, 장아찌 등), 음료(예, 과실, 채소류 음료, 두유류, 발효음료류, 아이스크림류 등), 천연조미료(예, 라면 스프 등), 비타민 복합제, 알코올 음료, 주류 및 그 밖의 건강보조식품류를 포함하나 이에 한정되지 않는다. 상기 기능성 식품, 음료, 식품첨가제 또는 음료첨가제는 통상의 제조방법으로 제조될 수 있다.
상기 “기능성 식품”이란 식품에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 식품의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 식품군이나 식품 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병 방지와 회복 등에 관한 체내조절기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 식품을 의미하며, 구체적으로는 건강 기능성 식품일 수 있다. 특히, 본 발명의 조성물의 경우 항산화 또는 미백용 식품 조성물로 적용하기에 좋다. 상기 기능성 식품에는 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 포함할 수 있으며, 기능성 식품의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더욱 포함할 수 있다.
또한, 상기 식품 조성물에서, 상기 복합 추출물의 양은 식품 조성물 총 중량의 0.00001 중량% 이상, 구체적으로 0.1 중량% 이상일 수 있고, 80 중량% 이하, 구체적으로 50 중량% 이하, 더욱 구체적으로 40 중량% 이하로 포함될 수 있으며, 상기 식품이 음료인 경우에는 식품 전체의 부피 100 ml를 기준으로 0.001 g 이상, 구체적으로 0.01 g 이상, 50 g 이하, 구체적으로 10 g 이하, 더욱 구체적으로 2g 이하의 비율로 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 식품 조성물에는 그 유효성분 이외에 감미제, 풍미제, 생리활성 성분, 미네랄 등이 포함될 수 있다. 감미제는 식품이 적당한 단맛을 나게 하는 양으로 사용될 수 있으며, 천연의 것이거나 합성된 것일 수 있다. 구체적으로는 천연 감미제를 사용하는 경우인데, 천연 감미제로서는 옥수수 시럽 고형물, 꿀, 수크로오스, 프록토오스, 락토오스, 말토오스 등의 당 감미제를 들 수 있다. 풍미제는 맛이나 향을 좋게 하기 위하여 사용될 수 있는데, 천연의 것과 합성된 것 모두 사용될 수 있다. 구체적으로는 천연의 것을 사용하는 경우이다. 천연의 것을 사용할 경우에 풍미 이외에 영양 강화의 목적도 병행할 수 있다. 천연 풍미제로서는 사과, 레몬, 감귤, 포도, 딸기, 복숭아 등에서 얻어진 것이거나 녹차잎, 둥굴레, 대잎, 계피, 국화 잎, 자스민 등에서 얻어진 것일 수 있다. 또한, 인삼(홍삼), 죽순, 알로에 베라, 은행 등에서 얻어진 것을 사용할 수 있다. 천연 풍미제는 액상의 농축액이나 고형상의 추출물일 수 있다. 경우에 따라서 합성 풍미제가 사용될 수 있는데, 합성 풍미제는 에스테르, 알콜, 알데하이드, 테르펜 등이 이용될 수 있다. 생리 활성 물질로서는 카테킨, 에피카테킨, 갈로카테킨, 에피갈로카테킨 등의 카테킨류나, 레티놀, 아스코르브산, 토코페롤, 칼시페롤, 티아민, 리보플라빈 등의 비타민류 등이 사용될 수 있다. 미네랄로서는 칼슘, 마그네슘, 크롬, 코발트, 구리, 불소화물, 게르마늄, 요오드, 철, 리튬, 마그네슘, 망간, 몰리브덴, 인, 칼륨, 셀레늄, 규소, 나트륨, 황, 바나듐, 아연 등이 사용될 수 있다.
또한, 본 발명의 식품 조성물은 상기 감미제 등 이외에도 필요에 따라 보존제, 유화제, 산미료, 점증제 등을 포함할 수 있다.
이러한 보존제, 유화제 등은 그것이 첨가되는 용도를 달성할 수 있는 한 극미량으로 첨가되어 사용되는 것이 바람직하다. 극미량이란 수치적으로 표현할 때 식품 조성물 전체 중량을 기준으로 할 때 0.0005 중량％ 내지 약 0.5 중량％ 범위를 의미한다. 사용될 수 있는 보존제로서는 소듐 소르브산칼슘, 소르브산나트륨, 소르브산칼륨, 벤조산칼슘, 벤조산나트륨, 벤조산칼륨, EDTA(에틸렌디아민테트라아세트산) 등을 들 수 있다. 사용될 수 있는 유화제로서는 아카시아검, 카르복시메틸셀룰로스, 잔탄검, 펙틴 등을 들 수 있다. 사용될 수 있는 산미료로서는 연산, 말산, 푸마르산, 아디프산, 인산, 글루콘산, 타르타르산, 아스코르브산, 아세트산, 인산 등을 들 수 있다. 이러한 산미료는 맛을 증진시키는 목적 이외에 미생물의 증식을 억제할 목적으로 식품 조성물이 적정 산도로 되도록 첨가될 수 있다. 사용될 수 있는 점증제로서는 현탁화 구현제, 침강제, 겔형성제, 팽화제 등을 들 수 있다.
본 발명은 또 다른 하나의 양태로, 참여로(Veratrum nigrum var. ussuriense), 가래나무(Juglans mandshurica), 도깨비 부채(Rodgersia Podophylla), 및 모과나무(Chaenomeles Sinensis)의 복합 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 항산화 또는 미백용 외약외품 조성물을 제공한다.
본 발명에서, 참여로(Veratrum nigrum var. ussuriense), 가래나무(Juglans mandshurica), 도깨비 부채(Rodgersia Podophylla), 및 모과나무(Chaenomeles Sinensis), 복합 추출물, 분획물, 항산화 및 미백은 전술한 바와 같다.
본 발명에서 사용되는 용어 "의약외품"은 사람이나 동물의 질병을 진단, 치료, 개선, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용되는 물품들 중 의약품보다 작용이 경미한 물품들을 의미하는 것으로, 예를 들어 약사법에 따르면 의약외품이란 의약품의 용도로 사용되는 물품을 제외한 것으로, 사람ㆍ동물의 질병 치료나 예방에 쓰이는 제품, 인체에 대한 작용이 경미하거나 직접 작용하지 않는 제품 등이 포함된다.
본 발명의 상기 의약외품 조성물은 바디 클렌저, 소독 청결제, 세정제, 주방용 세정제, 청소용 세정제, 치약, 가글제, 물티슈, 세제, 비누, 핸드 워시, 헤어세정제, 헤어 유연제, 가습기 충진제, 마스크, 연고제 및 필터 충진제로 이루어진 군에서 선택되는 제형으로 제조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명은 또 다른 하나의 양태로, 참여로(Veratrum nigrum var. ussuriense), 가래나무(Juglans mandshurica), 도깨비 부채(Rodgersia Podophylla), 및 모과나무( Chaenomeles Sinensis)의 복합 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 항산화 또는 미백용 피부 외용제 조성물을 제공한다.
본 발명에서, 참여로(Veratrum nigrum var. ussuriense), 가래나무(Juglans mandshurica), 도깨비 부채(Rodgersia Podophylla), 및 모과나무(Chaenomeles Sinensis), 복합 추출물, 분획물, 항산화 및 미백은 전술한 바와 같다.
본 발명의 용어 "외용제"는 외용으로 제공되는 제제이고, 외용산제, 외용정제, 외용액제, 연고제, 경고제, 좌제 등이 있으며, 본 발명의 피부 외용제는 특히 피부 외용에 작용하는 제제는 제한없이 포함한다.
본 발명에 따른 피부 외용제는 상용되는 무기 또는 유기의 담체, 부형제 및 희석제를 가하여 고체, 반고체 또는 액상의 형태로 제제화된 비경구 투여제일 수 있다. 상기 비경구 투여를 위한 제재로는 점적제, 연고, 로션, 겔, 크림, 패취, 스프레이, 현탁제 및 유제로 이루어진 군에서 선택되는 경피 투여형 제형일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 외용제에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 올리고당, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로즈, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.
각 제형에 의한 피부 외용제 조성물은 본 발명의 복합 추출물 이외의 다른 성분들을 기타 피부 외용제의 제형 또는 사용 목적 등에 따라 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있으며, 이 경우 다른 원료와 동시에 적용할 경우 상승효과가 일어날 수 있다.
본 발명의 피부 외용제 조성물은 총 조성물의 중량 대비 복합 추출물을 0.0001 내지 30%(w/v)로 포함할 수 있다. 만약, 0.0001%(w/v) 미만으로 포함되면, 피부의 항산화, 미백 효과를 실질적으로 기대할 수 없다. 반면, 30%(w/v)을 초과하며 포함할 경우에는 용제로의 용해성 등 조성물의 전체적인 가공성이 떨어져 제형 등 각종 용도로의 사용이 제한될 수 있다.
본 발명은 또 다른 하나의 양태로, 참여로(Veratrum nigrum var. ussuriense), 가래나무(Juglans mandshurica), 도깨비 부채(Rodgersia Podophylla), 및 모과나무( Chaenomeles Sinensis)의 복합 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 항산화 또는 미백용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명에서, 참여로(Veratrum nigrum var. ussuriense), 가래나무(Juglans mandshurica), 도깨비 부채(Rodgersia Podophylla), 및 모과나무(Chaenomeles Sinensis), 복합 추출물, 분획물, 항산화 및 미백은 전술한 바와 같다.
본 발명에서, 상기 약학 조성물은 약학적으로 허용되는 담체(carrier) 또는 첨가제를 포함할 수 있다. 본 발명에서 상기 "약학적으로 허용되는" 의미는 유효성분의 활성을 억제하지 않으면서 적용(처방) 대상이 적응 가능한 이상의 독성을 지니지 않는다는 의미이다. 상기 "담체"는 세포 또는 조직 내로의 화합물의 부가를 용이하게 하는 화합물로 정의된다.
본 발명의 추출물은 단독으로 또는 어떤 편리한 담체 등과 함께 혼합하여 투여될 수 있고, 그러한 투여 제형은 단회투여 또는 반복투여 제형일 수 있다. 상기 추출물을 포함하는 약학 조성물은 고형 제제 또는 액상 제제일 수 있다. 고형 제제는 산제, 과립제, 정제, 캅셀제, 좌제 등이 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 고형 제제에는 담체, 착향제, 결합제, 방부제, 붕해제, 활택제, 충진제 등이 포함될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. 액상 제제로는 물, 프로필렌 글리콜 용액 같은 용액제, 현탁액제, 유제 등이 있으나, 이에 한정되는 것은 아니며, 적당한 착색제, 착향제, 안정화제, 점성화제 등을 첨가하여 제조할 수 있다. 예를 들어, 산제는 본 발명의 유효 성분인 추출물과 유당, 전분, 미결정셀룰로오스 등 약제학적으로 허용되는 적당한 담체를 단순 혼합함으로써 제조될 수 있다. 과립제는 본 발명의 상기 추출물; 약학적으로 허용되는 적당한 담체; 및 폴리비닐피롤리돈, 히드록시프로필셀룰로오스 등의 약학적으로 허용되는 적당한 결합제를 혼합한 후, 물, 에탄올, 이소프로판올 등의 용매를 이용한 습식과립법 또는 압축력을 이용한 건식과립법을 이용하여 제조될 수 있다. 또한 정제는 상기 과립제를 마그네슘스테아레이트 등의 약학적으로 허용되는 적당한 활택제와 혼합한 후, 타정기를 이용하여 타정함으로써 제조될 수 있다.
본 발명의 추출물은 치료해야 할 질환 및 개체의 상태에 따라 경구제, 주사제(예를 들어, 근육주사, 복강주사, 정맥주사, 주입(infusion), 피하주사, 임플란트), 흡입제, 비강투여제, 질제, 직장투여제, 설하제, 트랜스더말제, 토피칼제 등으로 투여될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 투여 경로에 따라 통상적으로 사용되고 비독성인, 약학적으로 허용되는 운반체, 첨가제, 비히클을 포함하는 적당한 투여 유닛 제형으로 제제화될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 매일 약 0.0001 mg/kg 내지 약 10 g/kg이 투여될 수 있으며, 약 0.001 mg/kg 내지 약 1 g/kg의 1일 투여 용량으로 투여될 수 있다. 그러나 상기 투여량은 상기 혼합물의 정제 정도, 환자의 상태(연령, 성별, 체중 등), 치료하고 있는 상태의 심각성 등에 따라 다양할 수 있다. 필요에 따라 편리성을 위하여 1일 총 투여량을 하루 동안 여러 번 나누어 투여될 수 있다.
본 발명의 조성물이 약학 조성물로 사용될 경우, 상기 조성물 내의 복합 추출물의 함량은 질환의 증상, 증상의 진행 정도, 환자의 상태 등에 따라서 항염 활성을 나타낼 수 있는 유효량을 적절히 조절 가능하며, 예컨대, 상기 추출물의 양은 전체 조성물 총 중량을 기준으로 0.0001 중량% 이상, 구체적으로 0.001 중량% 이상일 수 있고, 80 중량% 이하, 구체적으로는 50 중량% 이하일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 조성물은 참여로(Veratrum nigrum var. ussuriense), 가래나무(Juglans mandshurica), 도깨비 부채(Rodgersia Podophylla), 및 모과나무( Chaenomeles Sinensis)의 복합 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하며, 항산화 활성과 미백 효과가 우수하여, 항산화 또는 미백용 화장료 조성물, 식품 조성물, 의약외품 조성물, 피부 외용제 조성물 및 약학 조성물로 활용도가 높다.
도 1은 본 발명의 참여로, 가래나무, 도깨비 부채 및 모과나무의 복합 추출물의 DPPH 라디칼 소거능 평가 결과이다.
도 2는 본 발명의 참여로, 가래나무, 도깨비 부채 및 모과나무의 복합 추출물의 티로시나아제 활성 평가 결과이다.
이하, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명의 실시예에 대하여 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다.
실시예 1: 참여로, 가래나무, 도깨비 부채 및 모과나무의 증류수 복합 추출물 제조
완전 건조시킨, 참여로, 가래나무, 도깨비 부채 및 모과나무를 2: 2: 1: 1의 중량비로 혼합한 혼합시료 1kg을 증류수 9ℓ에 넣고 열수추출을 4시간씩 2회 추출하였다. 그 추출물을 400 메쉬 여과포로 여과하고 감압 농축하여 31g(건조중량)을 얻었다.
실시예 2: 참여로, 가래나무, 도깨비 부채 및 모과나무의 에탄올 복합 추출물 제조
완전 건조시킨, 참여로, 가래나무, 도깨비부채 및 모과나무를 2: 2: 1: 1의 중량비로 혼합한 혼합시료 1kg을 에탄올 9ℓ에 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 15 내지 37℃에서 14일간 추출하여 3회 반복하였다. 그 추출물을 와트만 2번 여과지로 여과하였다. 이들 식물 추출물을 냉각 콘덴서가 달린 증류장치에서 감압 농축하여 35g(건조중량)을 얻었다.
비교예 1: 참여로, 가래나무, 도깨비 부채, 또는 모과나무의 에탄올 단독 추출물 제조
완전 건조시킨, 참여로, 가래나무, 도깨비 부채 또는 모과나무 각각 1kg을 에탄올 9ℓ에 넣고 실시예 2와 동일한 방법으로 추출, 여과 감압 농축하여 각각의 추출물을 얻었다.
비교예 2: 참여로, 및 가래나무의 에탄올 복합 추출물 제조
완전 건조시킨, 참여로, 및 가래나무를 1: 1의 중량비로 혼합한 혼합시료 1kg을 에탄올 9ℓ에 넣고 실시예 2와 동일한 방법으로 추출, 여과 감압 농축하여 복합 추출물을 얻었다.
비교예 3: 참여로, 가래나무 및 도깨비 부채의 에탄올 복합 추출물 제조
완전 건조시킨, 참여로, 가래나무, 및 도깨비 부채를 1: 1: 1의 중량비로 혼합한 혼합시료 1kg을 에탄올 9ℓ에 넣고 실시예 2와 동일한 방법으로 추출, 여과 감압 농축하여 복합 추출물을 얻었다.
실험예 1: 비교예 1 내지 3, 및 실시예 2의 추출물들의 DPPH 소거능 평가(항산화 활성)
상기 비교예 1에서 제조된 건조 상태의 참여로, 가래나무, 도깨비 부채 또는 모과나무의 단독 추출물, 비교예 2에서 제조된 건조 상태의 참여로, 및 가래나무의 에탄올 복합 추출물, 비교예 3에서 제조된 건조 상태의 참여로, 가래나무, 및 도깨비 부채의 에탄올 복합 추출물, 그리고 상기 실시예 2에서 제조된 건조 상태의 참여로, 가래나무, 도깨비 부채 및 모과나무의 복합 추출물을 메탄올에 100 ㎍/㎖의 농도로 용해하여 시료용액을 형성한 후, DMSO를 사용하여 희석하여 사용하였다.
96 well plate에 각 시료용액 100 ㎕에 5×10-4 M의 DPPH시약 (1-1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl)을 혼합하여 1분간 교반하고, 25℃의 인큐베이터에서 30분간 반응시킨 후에 마이크로 플레이트 계수기를 이용하여 517nm에서 흡광도를 측정하는 방법으로 진행하였다. 실험 대조구로는 비타민 C(100㎍/㎖)을 사용하였으며, 상기 실험은 4번 반복하였다.
비교예 1의 단독 추출물, 비교예 2, 3의 복합 추출물 및 실시예 2의 복합 추출물 시료와 대조군(Control)의 흡광도를 측정하여, DPPH 라디칼 소거능을 평가하였으며, 그 결과를 표 1과 도 1에 나타내었다.
DPPH 라디칼 소거능을 평가하기 위하여, 실험에 사용된 Blank, 대조군(Control), 실험군(추출물)의 시료 구성은 다음과 같다.
Blank (2 wells) : 100% MeOH 100 ㎕
Control(2 wells) : 100% MeOH 100 ㎕, DPPH 100 ㎕
추출물 시료 : Sample 2㎕, 100% MeOH 100 ㎕, DPPH 100 ㎕
구분 DPPH 자유 라디칼 50% 소거하는 시료의 농도 (IC 50 : ㎍/㎖)
비교예 1 참여로 >40
가래나무 12.2
도깨비 부채 12.3
모과나무 15.6
비교예 2 참여로 : 가래나무
( 1 : 1 ) 		24.9
비교예 3 참여로 : 가래나무 : 도깨비 부채
( 1 : 1 : 1 )		 22.4
실시예 2 참여로 : 가래나무 : 도깨비 부채 : 모과나무
( 2 : 2 : 1 : 1 )		 11.4
비타민 C(양성 대조군) 11.2
상기 추출물들의 항산화력은 비타민 C 표준곡선에 의해 계산하였으며 용량 반응 곡선을 기본으로 하여 IC50을 계산하였다. 시료의 흡광 제거정도는 비타민 C 표준 곡선과 상관관계를 고려해 100 mL당 ㎍ 비타민C 환산량(㎍ vitamin C equivalents per 100 mL)으로 표시하였다.
표 1에서 제시된 바와 같이, 비교예 1의 단독 추출물, 비교예 2의 복합 추출물, 비교예 3의 복합 추출물에 비해, 상기 실시예 2의 복합 추출물의 IC50값은 11.4㎍/㎖로 현저히 낮은 값을 나타내었다. 이는 항산화 활성이 높은 것으로 알려진 양성 대조군 비타민 C와 유사한 값으로, 실시예 2의 복합 추출물이 항산화 활성이 가장 우수한 것을 알 수 있었다.
또한, 도 1은 본 발명의 실시예 2에서 제조된 복합 추출물의 농도에 따른 DPPH 자유 라디칼 소거능(%)을 평가한 그래프이다. 도 2에 나타난 바와 같이, 실시예 2의 참여로, 가래나무, 도깨비 부채 및 모과나무의 복합 추출물 100㎍/㎖과 20㎍/㎖에서 양성 대조군인 비타민 C보다 DPPH 자유 라디칼 소거능이 현저하게 우수한 것을 확인하였다.
또한, 상기 비교예 1에서 제조된 참여로, 가래나무, 도깨비 부채, 모과나무의 단독 추출물, 비교예 2의 복합 추출물, 비교예 3의 복합 추출물의 경우, DPPH 라디칼을 50% 소거하는 시료의 농도가 실시예 2의 복합 추출물보다 그 값이 높은 것으로 나타나서, 실시예 2의 복합 추출물이 항산화 활성이 다른 추출물에 비해 높음을 알 수 있었다.
이에 따라, 본 발명의 참여로, 가래나무, 도깨비 부채 및 모과나무의 복합 추출물은 참여로, 가래나무, 도깨비 부채, 모과나무의 단독 추출물, 참여로와 가래나무의 복합 추출물, 참여로, 가래나무 및 도깨비 부채의 복합 추출물에 비해, 피부 노화 과정을 촉진하는 자유 라디칼을 억제하여 우수한 항산화 활성을 가지는 바, 항산화 활성에 의해 노화 과정과 피부 손상 정도를 낮추는 효과를 나타낼 수 있다.
실험예 2: 비교예 1 내지 3, 및 실시예 2의 추출물들의 티로시나아제 활성 저해 효과(미백 효과)
상기 비교예 1에서 제조된 건조 상태의 참여로, 가래나무, 도깨비 부채 또는 모과나무의 단독 추출물, 비교예 2에서 제조된 건조 상태의 참여로, 및 가래나무의 에탄올 복합 추출물, 비교예 3에서 제조된 건조 상태의 참여로, 가래나무, 및 도깨비 부채의 에탄올 복합 추출물, 그리고 상기 실시예 2에서 제조된 참여로, 가래나무, 도깨비 부채 및 모과나무의 복합 추출물에 대하여 티로시나아제 활성을 측정하였다.
티로시나아제는 감자나 버섯으로부터 정제되는 효소로서, 버섯류로부터 추출한 시그마(Sigma)사의 것을 사용하였다. 먼저 기질인 티로신을 인산나트륨 완충용액(0.1M, pH 6.8)에 용해시켜 0.3㎎/㎖의 농도를 갖는 용액으로 만들고, 그 용액 334㎕를 취해 시험관에 넣은 후, 여기에 다시 인산나트륨 완충용액(0.1M, pH 6.8)을 576㎕를 첨가하였다. 상기 비교예 1 내지 3 및 실시예 2의 건조상태의 추출물을 메탄올에 용해시켜 100㎎/㎖으로 한 후, DMSO를 사용하여 희석하여 실험군으로 사용하였다. 희석된 추출물 시료들을 각각 2㎕씩 취해 상기 시험관 내의 용액에 첨가하고 37℃ 항온조에서 10분 동안 반응시켰다.
상기 시료의 티로시나아제 활성 평가를 위해, 1M Phosphate Buffer(PB) pH 6.8를 121℃에서 20분간 멸균한 후 실온(25℃)에서 식혀서 사용하였다. 1M Phosphate Buffer(PB) pH 6.8를 1/15 M (최종농도=66.6mM)로 제조하였으며, L-DOPA를 Phosphate Buffer(pH 6.8)에 녹여서, 2.0 mM 농도로 만들었다. Tyrosinase 역시 Phosphate Buffer(pH 6.8)에 녹인 후, 46 units/ml 농도로 만들었으며, 이를 1.5 ml 튜브에 분주하여 냉동보관 후 활성 평가 시 녹여서 사용하였다.
티로시나아제 활성을 평가하기 위하여, 실험에 사용된 Blank, 대조군(Control), 비교예 1의 단독 추출물, 비교예 2, 3의 복합 추출물 및 실시예 2의 복합 추출물의 시료 구성은 다음과 같다.
Blank (2 wells) : 100% DMSO 2㎕, PB 160㎕, 처리안함
Control(2 wells) : 100% DMSO 2㎕, PB 120㎕, Tyrosinase 40㎕
추출물 시료 : Sample 2㎕, PB 120㎕, Tyrosinase 40㎕
96 well plate에 Blank로, DMSO 2㎕, PB 120㎕를 처리하였으며, Control(2wells)로 DMSO 2㎕, PB 120㎕, Tyrosinase 40㎕를 처리하였으며, 실험군은 추출물 시료 2㎕, PB 120㎕, Tyrosinase 40㎕를 처리하였으며, L-DOPA solution(2 mM) 40㎕씩 각각 well에 분주하였다. 37℃에서 10min간 반응시킨 후, 마이크로 플레이트 계수기를 이용하여 475nm에서 O.D값 (흡광도)을 측정하였다. 양성 대조군으로 사용한 알부틴의 경우, 알부틴을 DMSO에 용해시켜 농도 100㎎/㎖로 한 후, 다시 DMSO를 사용하여 희석하여 100㎍/㎖로 사용하였다.
티로시나아제 활성은 하기 수학식 1을 이용하여 계산하였으며, 그 결과를 표 2와 도 2에 나타내었다.
수학식 1
Inhibition(%)=1-(ControlO.D-SampleO.D)/(ControlO.D-BlankO.D)*100(%)
구분 Tyrosinase 활성을 50% 억제하는 시료의 농도(IC 50 : ㎍/㎖)
비교예 1 참여로 12.25
가래나무 >40
도깨비 부채 >40
모과나무 >40
비교예 2 참여로 : 가래나무
( 1 : 1 ) 		22.45
비교예 3 참여로 : 가래나무 : 도깨비 부채
( 1 : 1 : 1 )		 35.4
실시예 2 참여로 : 가래나무 : 도깨비 부채 : 모과나무
( 2 : 2 : 1 : 1 )		 15.7
알부틴(양성 대조군) 87
상기 표 2에 나타낸 바와 같이, 비교예 1의 단독 추출물, 비교예 2의 복합 추출물, 비교예 3의 복합 추출물에 비해, 실시예 2의 참여로, 가래나무, 도깨비 부채 및 모과나무의 복합 추출물의 IC50은 알부틴의 1/5에 미치지 못하는 수준으로 현저히 낮은 값을 나타내어, 티로시나아제의 활성을 억제하는 능력이 알부틴의 5배 정도 높은 것을 알 수 있었다.
도 2는 본 발명의 상기 복합 추출물의 티로시나아제 활성(%)을 나타낸 그래프이다. 도 2에 나타낸 바와 같이, 참여로, 가래나무, 도깨비 부채 및 모과나무의 복합 추출물은 100㎍/㎖, 20㎍/㎖의 농도에서 티로시나아제 활성이 양성 대조군이 알부틴에 비해 현저히 낮았다. 특히 상기 복합 추출물 20㎍/㎖의 농도에서 알부틴 100㎍/㎖에 비하여 현저히 낮은 티로시나아제 활성을 나타내어 티로시나아제 활성을 저해하는 효율이 현저히 높음을 알 수 있었다.
한편, 상기 비교예 1에서 제조된 참여로 단독 추출물의 경우, 가래나무, 도깨비 부채, 모과나무의 단독 추출물과 달리, 티로시나아제 활성을 50% 억제하는 시료의 농도가 12.25 ㎍/㎖로 실시예 2의 복합 추출물보다 그 농도가 낮았다. 하지만, 상기 참여로 단독 추출물의 경우 실험예 1에서 확인된 바와 같이, DPPH 라디칼 소거능이 낮아서 항산화 용도로 적용이 불가능한 단점이 있다. 이와 달리, 본 발명의 참여로, 가래나무, 도깨비 부채, 및 모과나무의 복합 추출물은 항산화 활성 뿐만 아니라, 미백활성도 우수한 바, 항산화 및 미백 용도로 동시에 적용이 가능한 장점이 있다.
이에, 본 발명의 참여로, 가래나무, 도깨비 부채 및 모과나무의 복합 추출물은 가래나무, 도깨비 부채, 모과나무의 단독 추출물, 참여로와 가래나무의 복합 추출물, 참여로, 가래나무 및 도깨비 부채의 복합 추출물에 비해, 멜라닌 생합성 과정에 핵심적으로 작용하는 티로시나아제 활성을 현저히 높은 수준으로 억제하는 바, 멜라닌 색소의 생성을 효과적으로 억제함으로써 피부 노화 방지 및 미백 효과를 가진다. 또한, 앞서 살펴본 바와 같이, 우수한 항산화 효과도 가진다.
이상에서 본 발명의 바람직한 실시예에 대하여 상세하게 설명하였지만 본 발명의 권리범위는 이에 한정되는 것은 아니고 다음의 청구범위에서 정의하고 있는 본 발명의 기본 개념을 이용한 당업자의 여러 변형 및 개량 형태 또한 본 발명의 권리범위에 속하는 것이다.

Claims (3)

  1. 참여로(Veratrum nigrum var. ussuriense), 가래나무(Juglans mandshurica), 도깨비 부채(Rodgersia Podophylla), 및 모과나무( Chaenomeles Sinensis)의 복합 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 항산화 또는 미백용 화장료 조성물.
  2. 참여로(Veratrum nigrum var. ussuriense), 가래나무(Juglans mandshurica), 도깨비 부채(Rodgersia Podophylla), 및 모과나무(Chaenomeles Sinensis)의 복합 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 항산화 또는 미백용 외약외품 조성물.
  3. 참여로(Veratrum nigrum var. ussuriense), 가래나무(Juglans mandshurica), 도깨비 부채(Rodgersia Podophylla), 및 모과나무(Chaenomeles Sinensis)의 복합 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 항산화 또는 미백용 피부 외용제 조성물.
KR1020160016208A 2016-02-12 2016-02-12 참여로, 가래나무, 도깨비 부채 및 모과나무의 복합추출물을 포함하는 항산화 또는 미백용 조성물 KR101828584B1 (ko)

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