KR20160096295A - 항암 효과 물질이 증가된 귀뚜라미 및 이를 함유하는 식품 조성물 - Google Patents

항암 효과 물질이 증가된 귀뚜라미 및 이를 함유하는 식품 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 항암 효과가 증진된 귀뚜라미 및 이를 함유하는 식품 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 귀뚜라미에 함유된 성분 중 항암작용에 관여하는 유효성분의 함량이 증대되도록 귀뚜라미를 사육하고, 상기 귀뚜라미를 이용하여 식품 조성물을 제조함으로써, 항암 효과를 현저히 증진시킨 항암 효과가 증진된 귀뚜라미 및 이를 함유하는 식품 조성물에 관한 것이다.
본 발명인 항암 효과가 증진된 귀뚜라미 및 이를 함유하는 식품 조성물은 쌀겨 100 중량부에 대하여, 토마토 14~16 중량부, 마늘 14~16 중량부, 꾸지뽕 14~16 중량부, 호박 14~16 중량부, 시금치 14~16 중량부, 고구마 14~16 중량부, 청국장 14~16 중량부를 포함하는 사료를 1일 3회 귀뚜라미에 급여하되, 1회 급여시마다 각 마리당 0.005~0.02 g씩 급여하여, 비타민A 0.015~0.025 %, 비타민B군 1.7~2.3 %, 비타민C 1.2~1.5%, 비타민E 0.25~0.35 %, 베타카로틴 1~2 %, 라이코펜 0.3~0.5 %를 포함하는 항암 효과가 증진된 귀뚜라미를 사육하고, 상기 항암 효과가 증진된 귀뚜라미를 이용하여 식품 조성물을 제조하는 것을 특징으로 한다.

Description

항암 효과가 증진된 귀뚜라미 및 이를 함유하는 식품 조성물 {Crickets for improved anti-cancer and food compositions comprising the same}
본 발명은 항암 효과가 증진된 귀뚜라미 및 이를 함유하는 식품 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 귀뚜라미에 함유된 성분 중 항암작용에 관여하는 유효성분의 함량이 증대되도록 귀뚜라미를 사육하고, 상기 귀뚜라미를 이용하여 식품 조성물을 제조함으로써, 항암 효과를 현저히 증진시킨 항암 효과가 증진된 귀뚜라미 및 이를 함유하는 식품 조성물에 관한 것이다.
곤충은 주로 해충으로 인식되어 이들을 방제하는데 주력하였을 뿐 유용성 곤충에 관한 연구는 아직 미진한 실정이다. 최근 들어 곤충의 다양성과 특성을 새롭게 인식하면서 곤충의 생리활성물질을 산업적으로 이용하거나 의약품을 개발하는데 일부 곤충이 이용되고 있다.
그 중에서도 귀뚜라미는 오메가-3 계열 지방산을 포함한 불포화지방산이 풍부하며 단백질과 키틴/키토산을 높은 농도로 함유하고 있어, 귀뚜라미 추출물을 축산물 사료에 첨가하면 계육에서 다가불포화 지방산이 증가하고 육질이 향상된다고 보고되어있다.
이러한 귀뚜라미는 건강에 매우 유효한 영양성분이 있는데, 무기질, 비타민, 단백질 등을 포함하고 있으며, 단백질의 경우 17종의 아미노산을 포함하는데, 이 중에는 9가지 필수아미노산이 모두 들어있다.
구체적으로, 상기 9가지 필수아미노산은 체내에서 합성할 수 없는 아미노산으로 음식으로부터 섭취해야만 되는 것이다.
상기 류신(Leucine)은 모든 단백질구성의 주성분으로 간의 기능과 관계가 있고, 성장호르몬과 뼈 생성에 직접 관여하며, 칼슘 흡수를 촉진하고, 질소 평형 유지 작용으로 골다공증을 예방하며, 류신과 아르기닌을 함께 섭취할 경우 흡수경쟁하여 면역력을 증강시킨다. 또한 고혈당으로 인한 백내장 증상을 완화시키고, 프롤린과 함께 지질단백질의 동맥혈전 형성을 억제시키며, 항체, 효소, 호르몬의 생성에 관여하고, 콜라겐 형성에 관여하며, 근소실 억제 및 조직손상을 회복시키고, 피로회복과 활력증진 및 혈당감소의 역할을 한다. 일반적으로 햄, 치즈, 옥수수, 콩 등 식물성 음식에 많다.
상기 이소류신(Isoleucine)은 탄수화물, 지방, 단백질을 분해하여 에너지를 생성하고, 헤모글로빈을 생성하며, 혈당을 조절하고, 근육생성 및 보수에 관여하며, 영양보급 활성화 및 내분비 기능을 강화하고, 대사증후군을 개선하며, 수술후 신체기능을 회복, 촉진하는 역할을 한다. 일반적으로 연어, 닭고기, 소고기, 우유에 많이 함유되어 있다.
상기 발린(Valine) 근육 단백질의 주성분으로, 근력을 높여주고 정신적인 안정을 도우며, 근육강화 및 인슐린 분비의 균형을 잡으며, 땅콩이나 콩, 버섯이나 고기에 많이 함유되어 있다.
상기 페닐알라닌(Phenylalaine)은 신경세포와 뇌 사이 신호를 전달하는 화학물질 생산하고, 갑상선 호르몬 분비를 촉진하며, 만성 통증을 완화하고, 공복 시 통증을 감소시키며, 항우울제 작용을 하고, 배우고 기억하는 두뇌활동에 영향을 준다.
상기 트레오닌(Threonine)은 콜라겐, 엘라스틴, 에나멜 단백질의 구성요소로, 간에 지방이 축적되는 것을 막아 지방간을 예방해주고, 소화기능이 원활하도록 도움을 주며, 신진대사와 동화작용에 관여하고, 피로방지 및 면역체계에 도움을 준다.
상기 메티오닌(Methionine)은 모발, 피부의 이상을 예방해주고, 간에서 레시틴 생산을 증가시켜 혈중 콜레스테롤 수치를 저하시키므로 고혈압환자의 필수 영양소이고, 간의 지방을 감소시켜준다. 또한 암모니아 형성을 조절하고, 모낭에 영향을 주어 머리카락 성장 및 탈모를 방지해주고, 간에서 독성 노폐물 제거하고 피로방지 작용을 하며, 고기, 생선, 계란, 우유, 두부 등에 많이 함유되어 있다.
상기 트립토판(Tryptophan)은 천연이완제로 정상적인 수면을 유도하고, 스트레스와 초조감을 억제하며, 편두통의 치료에 효능이 있고, 면역 강화에 관여하며, 동맥과 심장의 경련 위험을 감소시켜주고, 콜레스테롤 수준을 감소시켜주며, 치매증에 효과가 있고, 뇌신경 발육 촉진 및 신체발육 증진에 관여한다. 일반적으로 우유, 땅콩, 생선류, 고기, 바나나에 많이 함유되어 있다.
상기 라이신(Lysine)은 피로회복, 집중력, 빈혈, 어지럼증에 관련이 있으며,
콜라겐 형성에 도움을 주고, 항체, 호르몬, 효소 생산 도움을 주며, 바이러스 성장을 감소시키는 영양소의 균형을 개선하고, 뼈, 연골조직형성, 항체강화, 소화액 분비에 효능이 있다. 일반적으로 우유, 치즈, 달걀에 많이 함유되어 있다.
상기 히스티딘(Histidine)은 지방분해를 촉진하고, 자외선으로부터 피부 손상을 막으며, 불감증 해결 및 성욕 증진 효과가 있고, 류마티스성 관절염 치료에 도움을 주며, 위산의 위액을 증가시키고 소화를 도와주고, 에이즈 예방해주며, 배란 이후 섭취하면 월경 날짜를 앞당길 수도 있고, 어린이 성장에 필수이며, 생선, 고기, 계란, 유제품 곡류 및 단백질식품 등에 많이 함유되어 있다.
다음으로 비필수 아미노산을 살펴보면, 비필수아미노산이란 체내에서 당질의 중간 대사물과 질소 또는 필수 아미노산으로부터 합성될 수 있는 아미노산들을 말한다. 그 중 귀뚜라미가 갖는 매우 중요한 아미노산은 바로 아르기닌 아미노산이다.
상기 아르기닌(arginine)은 몸속에 들어가면 산화질소로 바뀌고, 혈관확장과 혈류량을 증가시키며, 성기능개선 등 남성발기부전 치료에 효능이 있고, 정자생성 촉진시키며, 면역력과 체력증강에 효능이 있다. 따라서 웨이트 트레이닝시 헬쓰부스터라 불리기도 한다.
이러한 귀뚜라미를 이용한 식품 조성물과 관련한 선행기술문헌으로는 대한민국 등록특허 제10-0453575호에서 귀뚜라미 자체 또는 이의 추출물을 함유하는 간보호, 강장피로회복, 알코올대사 촉진, 과산화지질 생성 억제를 위한 식품조성물을 개시하고 있고, 대한민국 공개특허 제10-2013-0134097호에서 귀뚜라미 추출물을 함유하는 피부염증 예방 또는 치료용 조성물을 개시하고 있으나, 항암효과와 관련된 식품 조성물에 관한 기술은 개시되어 있지 않았다.
대한민국 등록특허 제10-0453575호(2004.10.11.) 대한민국 공개특허 제10-2013-0134097호(2013.12.10.)
본 발명은 상기와 같은 종래 기술의 문제점을 해결하기 위하여 발명된 것으로서, 귀뚜라미에 함유된 성분 중 항암작용에 관여하는 유효성분의 함량이 증대되도록 귀뚜라미를 사육하고, 상기 귀뚜라미를 이용하여 식품 조성물을 제조함으로써, 항암 효과를 현저히 증진시킨 항암 효과가 증진된 귀뚜라미 및 이를 함유하는 식품 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
상기와 같은 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 쌀겨 100 중량부에 대하여, 토마토 14~16 중량부, 마늘 14~16 중량부, 꾸지뽕 14~16 중량부, 호박 14~16 중량부, 시금치 14~16 중량부, 고구마 14~16 중량부, 청국장 14~16 중량부를 포함하는 사료를 1일 3회 귀뚜라미에 급여하되, 1회 급여시마다 각 마리당 0.005~0.02 g씩 급여하여, 비타민A 0.015~0.025 %, 비타민B군 1.7~2.3 %, 비타민C 1.2~1.5%, 비타민E 0.25~0.35 %, 베타카로틴 1~2 %, 라이코펜 0.3~0.5 %를 포함하는 항암 효과가 증진된 귀뚜라미를 사육하고, 상기 항암 효과가 증진된 귀뚜라미를 이용하여 식품 조성물을 제조하는 것을 특징으로 한다.
상기와 같이 제시된 본 발명에 의한 항암 효과가 증진된 귀뚜라미는 쌀겨, 토마토, 마늘, 꾸지뽕, 호박, 시금치, 고구마, 청국장을 포함하는 사료를 급여하여 항암작용에 관여하는 유효성분의 함량이 증대되도록 귀뚜라미를 사육함으로써, 일반 귀뚜라미에 비해 항암 효과를 현저히 증진시킬 수 있다는 효과가 있다.
이로써 상기 항암 효과가 증진된 귀뚜라미를 함유하는 식품 조성물은 항암 효과를 현저히 증진시킬 수 있다는 효과가 있다.
또한 귀뚜라미 사료의 주재료를 쌀겨로 급여함으로써, 농가부산물을 재활용할 수 있고, 자연 선순환이나 가축이나 곤충의 사료수입 방어를 할 수 있는 효과가 있다.
이하, 본 발명의 바람직한 실시예에 대하여 상세히 설명한다. 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 권리범위는 이들 실시예에만 한정되는 것은 아니다.
본 발명인 항암 효과가 증진된 귀뚜라미는 쌀겨 100 중량부에 대하여, 토마토 14~16 중량부, 마늘 14~16 중량부, 꾸지뽕 14~16 중량부, 호박 14~16 중량부, 시금치 14~16 중량부, 고구마 14~16 중량부, 청국장 14~16 중량부를 포함하는 사료를 급여하여 사육된다. 즉, 상기 사료는 쌀겨를 주재료로 하고, 특이기질을 갖는 부재료로 토마토, 마늘, 꾸지뽕, 호박, 시금치, 고구마, 청국장을 공급하는 것이다. 이때 주재료와 부재료를 1 : 0.98 ~ 1.12 중량비로 혼합할 수 있는데, 상기 부재료의 중량비가 1.12를 초과하면 특이기질을 갖는 부재료를 구성하는 각각의 재료들의 특성이 강하여 부작용을 유발할 수 있고, 0.98 미만 시 특이기질을 갖는 부재료의 효능이 저하될 수 있다는 문제점이 있다.
상기 쌀겨는 현미를 도정할 때 생기는 과피, 종피, 호분층의 분쇄혼합물로, 대부분의 많은 정미소에서 농가에 가축 사료로 쓰여 지고 있으나, 쌀겨에는 무수한 영양소가 함유되어 있다. 보통 현미에서 8%정도 쌀겨가 나오는데, 단백질, 지방, 비타민 B군, 무기질을 함유하고 있으며, 쌀겨의 표준조성은 수분 13.5%, 단백질 13.2%, 지방 18.3%, 당질 38.3%, 섬유소 7.8%, 무기질 8.9%, 비타민 A, 비타민 B1, 비타민 B6, 비타민 E, 철분, 인, 미네랄 등으로 영양성분이 매우 풍부하게 함유되어 있는 영양의 보고이다. 이러한 쌀겨를 귀뚜라미 먹이로 농가부산물을 재활용함으로써 자연 선순환이나 가축이나 곤충의 사료수입 방어를 할 수 있는 최대의 장점이 있다.
상기 토마토는 95% 정도가 수분이며, 단백질 0.9%, 지방 0.1%, 탄수화물 2.9%, 섬유소 0.4%, 회분 0.5% 등을 함유하고 있다. 특히, 토마토에는 신진대사를 도와주는 비타민 C와 지방의 분해를 돕는 비타민 B군, 엽산, 바이오틴, 나이아신 등 각종 비타민이 함유되어 있으며, 그 밖에 칼슘이나 조혈에 필수적인 철분 등 무기질을 고루 갖추었다. 다른 채소에서 잘 볼 수 없는 글루타민산 같은 천연 아미노산도 풍부하며, 비타민 A의 전구체이자 항산화효과와 항암효과가 있는 베타카로틴도 상당량 들어 있다. 토마토 1개(200g)에 들어 있는 영양을 살펴보면, 구연산, 사과산, 호박산, 아미노산, 루틴, 단백질, 당질, 회분, 칼슘, 철, 인, 비타민 A, B1, B2, C, 식이섬유 등이 함유되어 있으며, 라이코펜, 베타카로틴 등 항산화 물질이 많이 들어 있는데, 이 성분은 특히 전립샘 암에 특효가 있다고 밝혀졌다. 이러한 성분들은 귀뚜라미에게 투여했을 때 항암에 작용을 하는 특이기질을 갖는 고기능성 귀뚜라미를 생산할 수 있다.
상기 마늘은 항암과 자양강장에 효과가 탁월하며, 생리 활성 물질인 스코르디닌 성분을 함유하여 내장을 따뜻하게 하고 신진대사와 기력을 높여준다. 마늘의 주요성분은 수분 77%, 당질 20%, 단백질 1.3%, 칼륨, 유황, 규산, 염소, 소다, 인 등의 생리 물질과 비타민A, B, C, E가 들어 있고, 생체 내에서 산소이용률을 증가시키는 게르마늄이 754ppm이나 들어 있어 생강과 더불어 최고의 항암식품으로 유명하다. 이 마늘을 귀뚜라미에게 먹이면 항암에 반드시 필요한 성분을 갖고 본래의 귀뚜라미보다 30% 이상 향상된 고기능성 귀뚜라미 생산이 가능하다.
상기 꾸지뽕은 민간약재로도 오랫동안 조상들이 사용해왔으며, 꾸지뽕에는 비타민 B1, B2, C가 풍부하고, 칼슘과 무기질 함량이 높고, 플라보노이드, 가바, 루틴, 아스파라긴산, 글루타민산, 플라보플라빈 등의 생리활성물질 풍부하여 탁월한 항암효과를 갖는 약재로도 유명하다. 꾸지뽕은 4대 항암식품으로 유명한데, 특히 위암, 폐암, 간암, 식도암, 자궁암에 특효를 보이므로 이러한 꾸지뽕을 귀뚜라미에게 먹였을 때 기존의 귀뚜라미에 비하여 30% 이상 항암기능을 높일 수 있는 귀뚜라미를 생산할 수 있다.
상기 호박은 당근과 마찬가지로 배타카로틴, 알파카로틴 등 천연 카로티노이드 성분이 풍부해 암 억제 작용을 하는 항산화 효과가 뛰어나다. 비타민A로 바뀌는 베타카로틴은 세포막이나 유전자를 해치는 활성산소를 제거하며, 암 억제 유전자의 발현을 촉진하고, 세포돌연변이에 관여하는 인지질 대사를 억제하는 항산화물질로 유명하다. 단호박에는 알파카로틴도 많이 함유돼 있다. 일본 니시노 교수팀의 쥐 실험 결과에 따르면 이 물질은 폐암, 간암, 피부암에 대항하는 저항력이 베타카로틴보다 몇 배 높다.
상기 시금치는 실제로 항산화 효과가 뛰어난 비타민A 공급원인 카로티노이드(베타카로틴) 성분이 100g당 4200㎍이나 들어있다. 시금치는 최근 풍부한 루테인 성분 때문에 다시 주목받고 있는데, 루테인 역시 강력한 활성산소 제거 작용으로 피부암과 대장암을 억제하는 효과를 나타내는 항산화물질이다. 시금치에는 비타민A, 비타민B, 비타민C, 비타민D가 고르게 분포되어 있고, 시금치 100g 중에는 비타민B1 0.12㎎, 비타민B2 0.3㎎, 비타민B3 1㎎ 이 들어 있으며 비타민A는 8,000IU가 들어 있는데 성인의 경우 1일 비타민A 권장량은 5,000IU다. 비타민A라는 생리물질은 베타카로틴(β-carotene)이라는 성분에서 출발하여 생성되는 것인데 이 베타카로틴은 항암물질이다.
상기 고구마는 변비 해소 및 겨울철 다이어트 식품으로 애용되는데, 이는 어떤 버섯류나 약차보다 훌륭한 항암작용을 한다. 일본 유리노키클리닉 사마루 요시오 박사는 도쿄대 의과학연구소에서 모두 82종류의 채소를 대상으로 항암 효과를 평가하는 실험을 진행했다. 그 결과 놀랍게도 익힌 고구마의 암세포 분열 및 증식 억제율은 98.7%, 안 익힌 날 고구마는 94.4%로 각각 1, 2위에 올랐다. 그 다음으로 암세포 분열 및 증식 억제율이 높은 식품은 아스파라거스(93.7%), 파슬리(83.7%), 가지(74,8%), 셀러리(73.7%) 등이었다. 고구마의 강력한 항암 효과는 강글리오시드란 성분이 암세포의 증식을 억제하기 때문인 것으로 밝혀졌다. 고구마는 하루에 반개씩 먹으면 대장암 예방에 효과적이다. 고구마에는 항산화 물질로 알려진 베타카로틴과 비타민C 및 글루타티온이 풍부하고, 몸에 흡수가 잘되기 때문이다. 매일 고구마를 한 개씩 먹으면 하루에 필요한 베타카로틴 양의 두 배를 섭취할 수 있다. 이런 고구마를 귀뚜라미에 투여했을 때 일반 귀뚜라미 사료를 먹였을 때보다 더 항암기능이 향상된 귀뚜라미를 생산할 수 있다.
상기 청국장은 특히 몸속의 독소를 제거하며 항암작용을 해준다. 암중에서도 폐암, 직장암, 위암, 전립선암 등에 특히 효과를 볼 수 있는데, 그 이유는 청국장에 풍부하게 함유되어 있는 사포닌, 파이탁신, 제니스테인 등의 성분이 항암작용을 하여 암을 치료하거나 예방하는데 도움이 되기 때문이다. 이러한 청국장을 주사료와 함께 투여를 했을 때 항암에 대한 고기능성 귀뚜라미를 얻을 수 있다.
이러한 재료들로 구성된 상기 사료는 각각의 재료들을 그대로 혼합하여 급여하거나 또는 50~100 메쉬로 분쇄한 뒤 펠렛 형태로 제조하여 급여할 수 있다.
또한 상기 사료는 1일 3회 귀뚜라미에 급여하되, 1회 급여시마다 각 마리당 0.005~0.02 g씩 급여한다.
또한 상기 귀뚜라미는 온도가 27~32 ℃이고, 습도가 60~75 %이며, 빛은 하루 기준 10시간 조명, 14시간 암흑으로 조절하여 사육된다.
상기와 같이 사육된 귀뚜라미는 항암작용에 관여하는 비타민 A, 비타민 B군, 비타민 C, 비타민 D, 비타민 E, 베타카로틴, 라이코펜 등이 증진되는데, 특히 항암 효과에 관여하는 비타민A 0.015~0.025 %, 비타민B군 1.7~2.3 %, 비타민C 1.2~1.5%, 비타민E 0.25~0.35 %, 베타카로틴 1~2 %, 라이코펜 0.3~0.5 %를 포함한다.
이로써 상기 귀뚜라미는 항암 효과를 증진시킴으로 항암작용에 탁월한 효과가 있다.
< 실시예 1> 항암 효과가 증진된 귀뚜라미
쌀겨 100 중량부에 대하여, 토마토 15 중량부, 마늘 15 중량부, 꾸지뽕 15 중량부, 호박 15 중량부, 시금치 15 중량부, 고구마 15 중량부, 청국장 15 중량부로 구성된 사료를 1일 3회 귀뚜라미에 급여하되, 1회 급여시마다 각 마리당 0.01 g씩 급여하고, 상기 귀뚜라미는 온도 30 ℃, 습도 60 %, 빛은 하루기준 10시간 조명, 14시간 암흑으로 조절하여 30일간 사육되었다.
상기에서 사육된 귀뚜라미는 귀뚜라미 그 자체만으로도 식품으로 이용이 가능하며, 상기 귀뚜라미를 분말, 캡슐, 환, 추출물 등 다양한 형태로 제조하여 이용할 수 있음은 물론이다.
< 시험예 1> 항암 효과가 증진된 귀뚜라미의 영양성분 분석
상기 실시예 1에서 사육된 항암 효과가 증진된 귀뚜라미와 일반 귀뚜라미의 영양성분을 비교하였다.
(표 1) 귀뚜라미의 영양성분 비교
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상기 표1에서 보는 바와 같이, 항암 효과가 증진된 귀뚜라미는 쌀겨, 토마토, 마늘, 꾸지뽕, 호박, 시금치, 고구마, 청국장으로 구성된 사료를 급여함으로써, 일반 귀뚜라미에 비해 비타민 A, 비타민 B군, 비타민 C, 비타민 D, 비타민 E, 베타카로틴, 라이코펜의 성분 함량이 증진되었으며, 특히 항암 효과에 관여하는 비타민A 0.015~0.025 %, 비타민B군 1.7~2.3 %, 비타민C 1.2~1.5%, 비타민E 0.25~0.35 %, 베타카로틴 1~2 %, 라이코펜 0.3~0.5 %를 포함한다. 이로써 상기 항암 효과가 증진된 귀뚜라미는 항암 효과를 증진시킬 수 있다는 것을 알 수 있다.
< 실시예 2> 항암 효과가 증진된 귀뚜라미 추출물의 제조
상기 항암 효과가 증진된 귀뚜라미 500g을 증류수 5,000 ~ 6,000㎖ 중에서 열수추출하고, 수득된 열수추출액을 1/50 ~ 1/60의 비율로 농축한 후, 동결건조시켜서 얻어지는 추출물을 유효농도 250~350㎎/㎏로 구성될 수 있으며, 이때 상기 유효농도가 350㎎/㎏을 초과하면 증가량 대비 항암작용 증대 효과가 미미할 수 있고, 250㎎/㎏ 미만 시 항암작용 증대 효과가 저하될 수 있다는 문제점이 있다.
실시예 2는 상기 항암 효과가 증진된 귀뚜라미 500g을 증류수 5,000㎖ 중에서 열수추출하고, 수득된 열수추출액을 1/50의 비율로 농축한 후, 동결건조시켜서 얻어지는 추출물을 유효농도 300㎎/㎏로 구성한다.
이하, 상기 항암 효과가 증진된 귀뚜라미 추출물의 항암 효과 및 적정 유효농도를 산정하기 위한 시험에 대하여 설명하면 다음과 같다.
< 시험예 2> 항암 효과가 증진된 귀뚜라미 추출물의 In vitro 항암 효과 실험 (MTT assay )
상기 실시예 2에서 제조된 항암 효과가 증진된 귀뚜라미 추출물에 대하여 여러가지 암세포주에 대한 항암효과를 알아보는 실험을 실시하였다. 암세포에 대한 시료의 세포독성효과는 MTT colorimetric assay 방법으로 실시하였다.
먼저, 배양된 세포(cell)에서 배지를 제거한 후 PBS를 첨가하여 가볍게 섞은 후, PBS를 다시 제거하고 트립신/EDTA 용액(solution)을 첨가하여 37℃에서 5분간 배양하여 세포가 배양 접시(culture dish)의 바닥으로부터 완전히 분리되었는지 현미경 하에서 관찰한 후, 배양 배지를 첨가하여 잘 혼합하여 세포수를 1×104 cells/㎖로 조정하여 사용하였다. 시료는 PBS에 용해시킨 후 0.22 ㎛ 멤브린 필터(membrane filter)로 여과한 후 사용하였다. 준비된 세포를 96-웰 마이크로티터 플레이트(96-well microtiter plate)에 104 cells/well 농도로 접종하고, 시료를 처리 후, 5% CO2 인큐베이터(incubator)에서 2일간 배양하였다. MTT 시약을 각 웰(well)에 50 ㎕씩 첨가하여 MTT가 생존 암세포의 효소작용에 의해 환원되도록 4시간 더 배양하였다. 상징액을 조심스럽게 제거하고(Jurkat cell의 경우 원심분리하여 상징액을 제거하고), 하층부에 DMSO 200 ㎕와 Soerensen's buffer 25 ㎕를 첨가해 생성된 포르마잔(formazan) 결정을 용해시켜 595 nm에서 마이크로 플레이트 리더(micro plate reader)로 흡광도를 측정하였다. 이 흡광도는 MTT가 세포에 의해서 환원된 양을 나타내며, 따라서 각 웰(well)에 존재하는 생존 수와 비례한다. 각 웰(well)로부터 한 칼럼의 평균 값을 구하여 대조군(100% 생존군)의 평균 값에 대한 백분율의 값을 산출하였다. 이 백분율은 비교한 시험군의 세포 생존율에 해당하는 값으로 세포의 생존율(Cell viability)은 다음과 같은 식으로 계산하였다.
세포 생존율(%) = [T(treated cell의 OD)/C(control cell의 OD)] x 100
모든 실험은 3회 실시하여 평균을 구하였다. 측정 대상 암세포는 SNU778(자궁경부암), SNU719(위암), Hep3B(간암), A253(구강암), Jurkat-T(혈액암)이며, 한국세포주은행으로부터 분양받았고, 항암 효과가 증진된 귀뚜라미 추출물의 처리 농도를 각각 100, 200, 300, 400, 500㎎/㎏로 달리하여 실시하였다. 측정 결과는 하기 표 1 내지 표 5에 나타내었다.
(표 1) SNU778(자궁경부암)
Figure pat00002

(표 2) SNU719(위암)
Figure pat00003

(표 3) Hep3B(간암)
Figure pat00004

(표 4) A253(구강암)
Figure pat00005

(표 5) Jurkat-T(혈액암)
Figure pat00006

상기 표 1 내지 표 5에서 보는 바와 같이, 상기 항암 효과가 증진된 귀뚜라미 추출물은 SNU778(자궁경부암), SNU719(위암), Hep3B(간암), A253(구강암), Jurkat-T(혈액암) 등 5가지 암세포에 대해 뛰어난 항암 효과를 발휘하였고, 특히 간암에 대한 항암 효과가 컸다. 상기 결과에 따라, 암세포의 50%를 저해하는 농도인 IC50을 산출한 결과는 하기 표 6에 나타내었다.
(표 6) 암 세포 종류에 따른 항암 효과가 증진된 귀뚜라미 추출물의 IC50
Figure pat00007

상기 표 6에서 보는 바와 같이, 다양한 암 세포에 대해 저해 활성을 나타내기 위한 항암 효과가 증진된 귀뚜라미 추출물의 적정 농도는 250~350㎎/㎏이다.
< 실시예 3> 항암 효과가 증진된 귀뚜라미를 함유하는 식품 조성물의 제조
식품 조성물은 상기 실시예 2에서 제조된 추출물을 함유하여 제조되며, 여기서 식품 조성물은 사람이 일상적으로 섭취하는 음식물을 의미하는 것으로서, 사람이 먹고 마시는 것의 총칭이다. 따라서 본 발명에서 식품 조성물의 형태는 특별히 제한되지 않으나 음용의 편리성을 위하여 음료형태로 제조될 수 있음은 물론이다.
음료형태로 제조시 일례로 정제수 100 중량부에 대하여, 과일추출물 10~50 중량부, 타우린 0.1~5 중량부, 구연산 0.1~5중량부, 탄수화물 10~20 중량부, 상기 추출물 0.1~10 중량부를 포함하여 제조할 수 있다.
이때 상기 탄수화물은 포도당, 과당, 말토스, 슈크로스, 덱스트린, 시클로덱스트린 중 적어도 어느 하나로 구성될 수 있다.
실시예 3은 정제수 100 중량부에 대하여, 과일추출물 30 중량부, 타우린 3 중량부, 구연산 3 중량부, 포도당 10 중량부, 상기 추출물 5 중량부를 혼합하여 제조할 수 있다.

Claims (4)

  1. 쌀겨 100 중량부에 대하여, 토마토 14~16 중량부, 마늘 14~16 중량부, 꾸지뽕 14~16 중량부, 호박 14~16 중량부, 시금치 14~16 중량부, 고구마 14~16 중량부, 청국장 14~16 중량부를 포함하는 사료를 급여하여 사육된 항암 효과가 증진된 귀뚜라미.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 사료는,
    1일 3회 귀뚜라미에 급여하되, 1회 급여시마다 각 마리당 0.005~0.02 g씩 급여하는 것을 특징으로 하는 항암 효과가 증진된 귀뚜라미.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 귀뚜라미는,
    비타민A 0.015~0.025 %, 비타민B군 1.7~2.3 %, 비타민C 1.2~1.5%, 비타민E 0.25~0.35 %, 베타카로틴 1~2 %, 라이코펜 0.3~0.5 %를 포함하는 항암 효과가 증진된 귀뚜라미.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항의 항암 효과가 증진된 귀뚜라미를 함유하는 식품 조성물.
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