KR20160087507A - cosmetic composition containing Phaseolus Radiatus Seed, Phaseolus Vulgaris (Kidney Bean) Seed and Black Soybean extracts by fermentation and enzyme treatment - Google Patents
cosmetic composition containing Phaseolus Radiatus Seed, Phaseolus Vulgaris (Kidney Bean) Seed and Black Soybean extracts by fermentation and enzyme treatment Download PDFInfo
- Publication number
- KR20160087507A KR20160087507A KR1020150006532A KR20150006532A KR20160087507A KR 20160087507 A KR20160087507 A KR 20160087507A KR 1020150006532 A KR1020150006532 A KR 1020150006532A KR 20150006532 A KR20150006532 A KR 20150006532A KR 20160087507 A KR20160087507 A KR 20160087507A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- bean
- fermentation
- black
- kidney
- beans
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
- A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
- A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
- A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
- A61Q19/08—Anti-ageing preparations
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Birds (AREA)
- Mycology (AREA)
- Botany (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
- Cosmetics (AREA)
Abstract
Description
녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출물로 구성된 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 녹두·강낭콩·흑콩을 효모 또는 유산균으로 배양하여 얻은 발효추출액을 단백질 분해 효소를 이용하여 2차적으로 처리하여 얻은 발효-효소 추출액을 유효 성분으로 하는 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition comprising mung bean, kidney bean, black bean fermentation-enzyme extract, and more particularly to a cosmetic composition comprising a fermented extract obtained by cultivating mung bean, kidney bean and black bean with yeast or lactic acid bacterium, - an enzyme extract as an active ingredient.
수분은 인체에 필요한 각종 생리활성 물질을 운반하는 작용을 하며 피부가 부드럽고 촉촉한 상태를 유지할 수 있도록 해준다. 피부의 표피층에서는 분화되는 과정을 통하여 수분을 함유하면서 얇은 각질층(stratum corneum)으로 발달하게 된다. 구조적으로 각질층의 세포들은 벽돌과 같은 역할을 하고, 각질세포의 세포간 지질들은 몰타르로 작용하여 피부 장벽을 구성하게 된다. 그러나 사람은 나이가 들면서 건조한 피부가 증가하는 경향을 보이며, 과도한 세안이나, 목욕 등의 생활습관적 요소, 건조한 대기, 오염물질 등의 환경적인 요인, 그리고 아토피성 피부나 노인성 피부 같은 내인성 질환 등으로 인해 쉽게 그 기능이 손실될 수 있으며, 실제적으로 여러 유해 요인들이 늘어난 최근에 들어서는 건조 피부증상 및 이로 인한 제반 장해를 호소하는 사람이 점점 증가하고 있는 추세이다.Moisture acts as a carrier of various physiologically active substances required for the human body and allows the skin to maintain a smooth and moist condition. In the epidermis of the skin, it develops into a thin stratum corneum containing water through the process of differentiation. Structurally, the cells in the stratum corneum act like bricks, and the intercellular lipids of the keratinocytes act as mortar to form the skin barrier. However, people tend to increase their dry skin as they age, and due to environmental factors such as excessive washing, lifestyle factors such as bathing, dry atmosphere, pollutants, and endogenous diseases such as atopic skin and senile skin Recently, there has been an increase in the number of people who complain of dry skin symptoms and various disorders due to the fact that the function can be easily lost and the number of harmful factors actually increased.
또한, 사람의 피부는 노화가 되면서 다양한 트러블을 경험하게 된다. 피부가 건조해고, 탄력이 떨어지며, 주름 생성이 많아지며 피부도 칙칙해진다. 또한 외부의 약한 자극에도 쉽게 민감해지며 회복에도 오랜 시간이 걸린다.In addition, human skin experiences various troubles as it ages. The skin becomes dry, the elasticity decreases, the wrinkles are increased, and the skin becomes dull. It is also susceptible to weak external stimuli and takes a long time to recover.
이와 같은 점을 해결하기 위하여, 많은 화장품 회사들이 피부 건조 및 피부 노화 방지 성분을 개발하기 위해 많은 노력을 하고 있으며, 최근에는 천연 식물 추출물을 사용하는 것 외에 천연물을 발효 시켜줌으로써 천연물의 기본적 특성과 함께 발효로 인해 생성되는 발효 산물을 이용한 소재 개발을 많이 시도하고 있다. 이러한 발효액은 미생물에 의해 자극성분들이 분해되거나 다른 물질로 전환됨으로써 피부 자극이 저하되는 장점들이 있으며, 미생물에 의한 발효 산물들이 또한 피부에 좋은 영향을 줌으로써 많이 이용되고 있다.In order to solve this problem, many cosmetic companies are making efforts to develop skin dryness and anti-aging ingredients. In recent years, besides using natural plant extracts, they have fermented natural products, It has been attempting to develop materials using fermentation products produced by fermentation. The fermentation broth has the advantages of degrading the skin irritation by decomposing the irritants by microorganisms or converting them into other substances, and the fermentation products by the microorganisms are also widely used because they have a good effect on the skin.
한국등록특허 제10-1040508호는 녹두를 효모(Saccharomyces cerevisiae) 또는 유산균(Lactobacillus)으로 배양하여 얻은 녹두 발효액을 다시 단백질 분해 효소를 처리하여 얻은 녹두 발효-효소 추출액을 유효성분으로 포함하는 피부보호용 화장료 조성물 및 화장 방법에 관한 것이다. 한국등록특허 제10-1437939호는 황기, 어성초, 은행, 의이인, 치마버섯, 황백, 비파엽, 알로에, 율피, 자작나무, 장미, 강낭콩, 느타리버섯, 능소화, 백년초, 빈랑자, 사철쑥, 예덕나무, 옥죽, 조구등, 질려자, 풍년화, 피마자, 혈갈, 호과, 호도, 호박, 호이초, 홍화, 황정 및 감잎으로 이루어지는 군으로부터 1 종 이상 선택되는 약재의 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 주름개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.Korean Patent No. 10-1040508 discloses a skin care cosmetic composition containing mung bean fermentation-enzyme extract obtained by treating mung bean with yeast (Saccharomyces cerevisiae or Lactobacillus) obtained by treating the mung bean fermentation broth with proteolytic enzyme again as an active ingredient Compositions and make-up methods. Korean Patent No. 10-1437939 discloses a process for preparing a medicinal herb that is a medicinal herb that is used in the manufacture of a medicament for the treatment of cancer, A cosmetic composition for improving wrinkles containing an effective ingredient of a fermented extract of a medicinal substance selected from the group consisting of jade, jade, jade, blooming, harvesting, castor, bamboo, hake, hodo, zucchini, ≪ / RTI >
본 발명자들은 노화로 인해 발생하는 다양한 피부 현상을 해결하기 위하여 예의 노력한 결과, 녹두·강낭콩·흑콩을 효모 또는 유산균 등을 이용하여 발효시킨 녹두·강낭콩·흑콩 발효 추출액이 노화예방 효과가 우수하며, 특히, 녹두·강낭콩·흑콩 발효 추출액을 단백질 분해효소로 2차 처리할 경우 피부 노화로 인해 발생하는 피부의 문제점, 특히 피부건조, 피부 주름 생성 등을 보다 효과적으로 개선할 수 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.As a result of intensive efforts to solve various skin phenomena caused by aging, the present inventors have found that mung beans, kidney beans, and black bean fermented extracts obtained by fermenting mung bean, kidney bean and black bean with yeast or lactic acid bacteria have excellent anti- , Mung beans, kidney beans, black bean fermentation extracts can be more effectively improved by the secondary treatment with proteinase, skin problems caused by skin aging, especially skin dryness and skin wrinkle formation. Respectively.
본 발명의 목적은 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.It is an object of the present invention to provide a cosmetic composition for preventing skin aging comprising an extract of mung bean, kidney bean, black bean fermentation-enzyme as an active ingredient.
또한, 본 발명의 목적은 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액을 유효성분으로 포함하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.It is another object of the present invention to provide a cosmetic composition for improving skin wrinkles containing an extract of mung bean, kidney bean, black bean fermentation-enzyme as an active ingredient.
또한, 본 발명의 목적은 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액을 유효성분으로 포함하는 피부 보습용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.It is also an object of the present invention to provide a cosmetic composition for skin moisturizing comprising an extract of mung bean, kidney bean, black bean fermentation-enzyme as an active ingredient.
바람직하게는, 상기 화장료 조성물에 사용되는 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액은 효모로서 사카로마이세스 세레비시애(Saccharomyces cerevisiae)를 이용하여 녹두·강낭콩·흑콩을 배양하여 수득한 발효액을 단백질 분해 효소를 이용하여 효소 분해시켜 유효성분을 제조한 것을 특징으로 한다.Preferably, the mung bean, kidney bean, and black bean fermentation-enzyme extracts used in the cosmetic composition are prepared by cultivating mung beans, kidney beans, and black beans using Saccharomyces cerevisiae as a yeast, Which is characterized in that an active ingredient is produced by enzymatic decomposition using an enzyme.
바람직하게는, 상기 화장료 조성물에 사용되는 단백질 분해효소는 펩신, 트립신, 카르복시펩티다아제, 아미노펩티다아제, 지펩티다아제 중에서 선택되는 것을 특징으로 한다.Preferably, the proteolytic enzyme used in the cosmetic composition is selected from pepsin, trypsin, carboxy peptidase, aminopeptidase, and zipeptidase.
바람직하게는, 상기 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액은 유산균으로서 락토바실러스(Lactobacillus)를 이용하여 녹두·강낭콩·흑콩을 배양하여 수득한 발효액을 단백질 분해 효소를 이용하여 효소 분해시켜 유효성분을 제조한 것을 특징으로 한다.Preferably, the mung bean, kidney bean, and black bean fermentation-enzyme extracts are obtained by cultivating mung beans, kidney beans, and black beans using Lactobacillus as a lactic acid bacterium, and enzymatically decomposing the obtained fermentation broth by proteolytic enzymes to produce an active ingredient .
바람직하게는, 상기 단백질 분해효소는 펩신, 트립신, 카르복시펩티다아제, 아미노펩티다아제, 지펩티다아제 중에서 선택되는 것을 특징으로 한다.Preferably, the protease is selected from pepsin, trypsin, carboxypeptidase, aminopeptidase, and zipeptidase.
바람직하게는, 상기 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액은 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.0001-30.0%(w/w)로 함유되는 것을 특징으로 한다.Preferably, the mung bean, kidney bean, black soybean fermentation-enzyme extract is contained in an amount of 0.0001-30.0% (w / w) based on the total weight of the cosmetic composition.
바람직하게는, 상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔,크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것을 특징으로 한다.Preferably, the cosmetic composition is in the form of a solution, suspension, emulsion, paste, gel, cream, lotion, powder, soap, surfactant-containing cleansing, oil, powder foundation, Characterized in that it has a formulation to be selected.
본 발명의 화장료 조성물에 포함된 유효성분인 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액은 녹두·강낭콩·흑콩을 효모 또는 유산균으로 배양하여 수득한 발효액을 다시 단백질 분해 효소를 이용하여 2차 처리해 줌으로써 획득될 수 있으며, 이 추출액은 세포 활성 및 콜라겐 합성을 촉진해주며, 세포 자극 완화 효과가 우수하며, 이를 함유하는 화장료의 경우, 우수한 주름 개선 효과 및 피부 보습 효과를 가지고 있어, 이를 화장료 소재로 개발할 경우 탁월한 피부 노화 방지 효과를 기대할 수 있다.The extract of mung bean, kidney bean and black bean fermentation-enzyme extract, which is an effective ingredient contained in the cosmetic composition of the present invention, is obtained by culturing mung bean, kidney bean, and black bean with yeast or lactic acid bacteria and then subjecting the fermentation broth to second treatment with protease This extract promotes cell activity and collagen synthesis, and is excellent in cell stimulation alleviating effect. The cosmetic composition containing the same has excellent wrinkle-improving effect and skin moisturizing effect, and when it is developed as a cosmetic material, The skin aging prevention effect can be expected.
상기 목적을 달성하기 위해, 본 발명은 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액을 포함하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a cosmetic composition for preventing skin aging comprising an extract of mung bean, kidney bean, black bean fermentation-enzyme.
또한, 본 발명은 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액을 포함하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a cosmetic composition for improving skin wrinkles comprising an extract of mung bean, kidney bean, black bean fermentation-enzyme.
또한, 본 발명은 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액을 포함하는 피부 보습용 화장료 조성물을 제공한다.
The present invention also provides a cosmetic composition for moisturizing the skin, which comprises a mung bean, a kidney bean, a black soybean fermentation-enzyme extract.
본 발명의 조성물에서 유효성분으로 이용되는 녹두(Phaseolus radiatus, Mung bean)는 안두 또는 길두라고도 하며, 콩과의 한해살이풀 녹두의 종자로서, 따뜻한 기후의 양토(壤土:모래와 점토가 알맞게 섞인 검은 빛의 흙)에서 잘 자라며, 높이는 30∼80cm이다. 줄기는 가늘고 세로로 난 맥이 있고 10여 개의 마디가 있으며 가지를 친다. 잎은 1쌍의 떡잎과 갓 생겨난 잎이 나온 뒤, 3개의 작은 잎으로 된 겹잎이 나온다. 이러한 녹두는 콩과의 다른 콩류와는 달리, 한방에서 피부병 치료, 해열 및 해독제로 쓰여 왔을 뿐만 아니라, 동의보감에서는 녹두분으로 만들어 얼굴에 발랐을 때 미용효과를 얻을 수 있다고 알려져 왔다. 최근까지도 녹두는 건조 분말의 형태로 또는 이를 물이나 꿀에 개어 얼굴 마사지에 사용되거나, 또는 녹두가루를 물에 섞어 만드는 녹두전과 녹두로부터 전분을 뽑아 만드는 청포묵, 빈대떡, 녹두죽, 숙주나물 등의 식품으로서 예부터 사용되어 왔을 뿐이다.The mung bean (Phaseolus radiatus, Mung bean), which is used as an active ingredient in the composition of the present invention, is a seed of an annual vegetable mung bean, also referred to as an ore or a bean curd, and has a warm climatic loam And the height is 30 to 80 cm. The stem is thin and has a vertical vein and has about 10 nodes and branches. Leaves come from a pair of cotyledons and freshly-emerged leaves, followed by three leaf-like compound leaves. Unlike other soybean legumes, these mung beans have been used as a treatment for skin diseases, antipyretic and antidote in oriental medicine, and it has been known that it can be used as mung bean powder in Dongbokgam, to obtain a cosmetic effect when applied on the face. Until recently, mung bean was used as a dry powder or as a facial massage by putting it in water or honey, or a mung bean made by mixing mung bean flour with water and a starch from mung bean, It has only been used since ancient times.
본 명세서에서 용어“녹두”는, 녹두의 다양한 기관(예: 씨앗(열매)잎, 꽃, 줄기 및 뿌리 등)을 의미하며, 바람직하게는 녹두의 씨앗(열매)을 의미한다.As used herein, the term " mung bean " means various organs (e.g., seed (fruit) leaves, flowers, stems and roots, etc.) of mung bean, and preferably means seeds (fruit) of mung bean.
강낭콩은 콩과식물로 덩굴강낭콩(운편두, 용조두, 채두; Phaseolus vulgaris L.)과 붉은 강낭콩(홍화채두, 다화채두, 강낭콩, 땅콩; Phaseolus multiflorus WILLD), 강낭콩(Phaseolus vulgaris L. var. humilis ALEF), 흰강낭콩(Phaseolus multiflorus WILLD for. albus BAIKEY)등이 있으며, 상기 강낭콩의 종자는 민간요법으로 통유, 종기, 이뇨, 단독, 부종 등에 사용되고 있다.Kidney bean is a soybean plant, which is composed of two kinds of beans (Phaseolus vulgaris L. var.) And red kidney beans (Safflower chinensis, Mulberry bean, Kidney bean, Peanut; Phaseolus multiflorus WILLD), Kidney bean (Phaseolus vulgaris L. var. humulis ALEF) and white kidney beans (Phaseolus multiflorus WILLD for albus BAIKEY). The seeds of the kidney beans are used as oil, boils, diuresis, sole, edema, etc. by folk remedy.
흑콩은 흑대두(黑大豆, Black Soybean)라고도 하고 식용작물로서 널리 재배하고 있다. 줄기는 높이가 60∼100cm이고 곧게 서며 덩굴성인 품종도 있다. 뿌리에는 많은 근류(뿌리혹)가 있다. 잎은 어긋나고 3장의 작은잎이 나온 잎이며, 작은잎은 달걀 모양 또는 타원 모양이고 가장자리가 밋밋하다. 꽃은 7∼8월에 자줏빛이 도는 붉은색 또는 흰색으로 피고, 잎겨드랑이에서 나온 짧은 꽃대에 총상꽃차례를 이루며 달린다. 꽃받침은 종 모양이고 끝이 5개로 갈라진다. 화관은 나비 모양이고, 수술은 10개이다. 열매는 협과이고 줄 모양의 편평한 타원형이며 1∼7개의 종자가 들어 있다. 완전히 익으면 꼬투리가 터져서 종자가 흩어진다. 종자는 품종에 따라 둥근 모양과 편평하고 둥근 모양 등 다양하고 크기도 매우 다양하다. 종자의 빛깔은 황색·검은색·연한 갈색·초록색 등 여러 가지가 있다.Black beans are also known as black soybeans (black soybeans) and are widely cultivated as edible crops. The stem is 60-100cm high and stands straight, and there are some varieties of vines. There are many nodules (rootstocks) in the roots. Leaves are alternate phyllotaxis with three small leaves, small leaves are ovate or elliptical, with flat edges. Flowers bloom in purplish red or white in July ~ August, and run on the short peduncle from the axil of the leaves, forming a rhombus. Calyx is bell-shaped and its tip is divided into 5 pieces. The corolla is butterfly shaped, and the operation is 10 pieces. The fruit is narrow, flat, oval in the shape of a line and contains 1 to 7 seeds. When fully ripe, the pod bursts and the seeds are scattered. Seeds vary in size and shape, including round, flat, and round shapes, depending on the variety. There are many kinds of seed color such as yellow, black, light brown, green.
흑콩이라고 부르는 콩에는 여러 종류가 있다. 흑태는 흑콩 중에서 크기가 큰 편이며, 주로 콩자반으로 만들어 먹는다. 서리태는 껍질은 검은색이지만 속은 파란색으로 미숫가루나 흑두부를 만들 때 많이 쓰이고, 최근에는 청국장의 원료로도 쓰이고 있다. 쥐의 눈처럼 생겼다고 해서 서목태, 또는 쥐눈이콩이라고 부르는 콩은 한방에서 약재로 쓰인다고 해서 '약콩'이라고도 부른다. 검은콩은 검은깨, 흑미와 함께 건강에 좋다고 알려진 '블랙푸드'의 대표적인 식품의 하나로 건강식품, 약재, 다이어트 식품 등으로 폭넓게 쓰이고 있다. 검은콩에 들어있는 '안토시아닌'과 '이소플라본' 성분은 혈액순환 개선과 노화방지에 효과가 있고, 레시틴 성분은 두뇌 영양 공급을 돕는 것으로 알려져 있다.There are many kinds of beans called black beans. Osteoporosis is the largest in black soybeans, mainly made from soybeans. Seoritae is black, but the inside is blue. It is often used to make lunis and black currants, and recently it is also used as a raw material of chungkookjang. Soy bean, which is said to look like a mouse's eye, or bean, which is called bean bean, is also called 'bean paste' because it is used as a medicinal product in one medicine. Black beans are one of the representative foods of 'Black Food' known to be good for health with black sesame and black rice, and they are widely used as health food, medicines, and diet foods. Anthocyanins and isoflavones in black beans are effective in improving blood circulation and preventing aging, and lecithin is known to help brain nutrition.
본 발명에서 용어 “녹두 발효-효소 추출액, 강낭콩 발효-효소 추출액, 흑콩 발효-효소 추출액”은 녹두, 강낭콩, 흑콩을 효모균(Sacharomyces sp) 또는 유산균(Bifidobacteriumsp)을 이용하여 배양하여 수득한 녹두 발효액을 다시 단백질 분해 효소로 처리하여 얻은 추출액을 의미하는 것으로, 발효 시 사용하는 발효균의 종류에 따라 “녹두·강낭콩·흑콩 효모 발효-효소 추출액” 또는 “녹두·강낭콩·흑콩 유산균 발효-효소 추출액”으로 나뉜다.
In the present invention, the term "mung bean fermentation-enzyme extract, kidney bean fermentation-enzyme extract, black kernel fermentation-enzyme extract" refers to a fermentation of mung bean fermentation broth obtained by cultivating mung bean, kidney bean and black bean with Sacharomyces sp or Bifidobacterium sp. Refers to an extract obtained by treatment with proteolytic enzyme again. It is classified into "mung bean, kidney bean, black soybean fermentation-enzyme extract" or "mung bean black bean fermentation-enzyme extract" depending on the type of fermenting bacteria used for fermentation .
본 발명에서 녹두, 강낭콩, 흑콩을 발효시키는데 사용되는 효모균은, 진핵미생물(핵과 세포질이 핵막에 의하여 나누어져 있는 생물)에 속하며, 세포벽, 세포막, 핵, 사립체, 과립 등 세포 소기관을 갖추고 있다. 성의 구별이 없는 이들은 주로 budding(출아법)으로 번식하는데, 분리된 많은 효모들 중에는 발효능이 없는 것, budding 대신 fission(분열) 혹은 bud-fission 방법으로 증식하는 것, 자낭포자(ascospore)가 아닌 사출포자(ballistospore)를 형성하거나 포자(spore)형성이 관찰되지 않는 것 등 다양한 그룹의 효모도 존재한다. 크기는 보통 5× 5-12 ~ 10× 5-12㎛로 세균의 5-10배 크기이며, 적정 pH는 4.5-5.5이나 1-10에서도 생존한다. pH 1에서 12시간 생존하는 효모는 박테리아보다 산에 강하므로 배지의 pH를 3.5~3.8 정도로 맞추면 박테리아의 오염을 어느 정도 억제할 수 있다.In the present invention, yeast cells used for fermenting mung bean, kidney bean, and black bean belong to eukaryotic microorganisms (organisms divided into nuclear and cytoplasmic nuclear membranes) and have cell organelles such as cell walls, cell membranes, nuclei, mitochondria, and granules. Those with no distinction of sex mainly reproduce by budding. Among many isolated yeasts, there is no efficacy, proliferation by fission instead of budding, bud-fission method, injection by non-ascospore There are also diverse groups of yeasts, including those that form spores (ballistospores) or that do not exhibit spore formation. The size usually ranges from 5 × 5-12 to 10 × 5-12 μm, 5-10 times the size of bacteria, and the optimum pH is 4.5-5.5 or even 1-10. Yeast surviving at pH 1 for 12 hours is stronger on acid than bacteria, so adjusting the pH of the medium to about 3.5 ~ 3.8 can inhibit bacterial contamination to some extent.
효모는 균종에 따라서 조금씩 차이가 있으나, 대부분 20~25℃에서 잘 자란다. 보통은 50℃이상에서는 사멸한다고 하지만 그 온도 이상에서 합성이 되지 않는 성장요소를 배지에 직접 첨가해 줌으로써 어느 정도는 극복이 가능하다. 사카로마이세스 세레비시애(Saccharomyces cerevisiae)의 경우 40℃이상에서 사멸하지만 배지에 올레산(oleic acid)와 에르고스테롤(ergosterol)을 첨가해 줌으로써 이를 방지할 수 있다. 효모 균체 자체는 단세포식물로서 단백질과 미량광물질을 다량 함유하고 있다. 본 발명의 녹두, 강낭콩, 흑콩을 발효시키는데 사용하기에 바람직한 효모는 사카로마이세스 세레비시애이다.
Yeast is slightly different depending on the species, but most of them grow well at 20 ~ 25 ℃. Normally, it is said that it will die at above 50 ℃, but it can be overcome to some extent by adding directly the growth factor which can not be synthesized above the temperature. In the case of Saccharomyces cerevisiae, it can be prevented by adding oleic acid and ergosterol to the medium at 40 ° C or higher. Yeast cells themselves are unicellular plants and contain large amounts of proteins and trace minerals. A preferred yeast for use in fermenting mung beans, kidney beans, and black beans of the present invention is Saccharomyces cerevisiae.
본 발명에서 녹두, 강낭콩, 흑콩을 발효시키는데 사용된 발효균으로 유산균은, 포도당 또는 유당과 같은 탄수화물을 분해하여 유산(젖산)이나 초산과 같은 유기산을 생성하는 인체에 매우 유익한 미생물의 일종이다. 일반적으로, 유산균이 당으로부터 유산을 만드는 것을 발효라 하며, 이러한 발효과정을 거쳐서 발효식품이 만들어 진다. 본 발명에서 사용될 수 있는 유산균은 예컨대, 비피도 박테리움, 락토 바실러스, 스트렙토 코커스, 류코노스톡, 페디오 코커스, 락토 코커스를 포함하며, 바람직하게는 비피도 박테리움(Bifidobacterium sp)이다.
In the present invention, lactic acid bacteria is a kind of microorganism which is very useful for human body which decomposes carbohydrates such as glucose or lactose to produce organic acids such as lactic acid and acetic acid, as fermenting bacteria used for fermenting mung bean, kidney bean and black bean. Generally, lactic acid bacteria make lactic acid from sugar is called fermentation, and fermented food is produced through such fermentation process. Lactic acid bacteria which can be used in the present invention include, for example, Bifidobacterium, Lactobacillus, Streptococcus, Leuconostock, Pediococcus, Lactococcus, and preferably Bifidobacterium sp.
본 발명에서 녹두·강낭콩·흑콩 발효액을 처리하는데 사용되는 단백질 분해 효소는 상기한 효모 또는 유산균에 의한 발효로도 분해 또는 전환되지 않은 성분들을 2차적으로 분해 또는 전환시키기 위하여 사용되는 것으로서, 이의 구체적인 예로는 펩신, 트립신, 카르복시펩티다아제, 아미노펩티타아제, 디펩티다아제 등이 있으며, 바람직하게는 펩신, 트립신, 카르복시펩티다아제, 가장 바람직하게는 펩신이 사용될 수 있다.
In the present invention, the proteolytic enzyme used for treating the fermentation broth of green beans, kidney beans, and black beans is used for secondary decomposition or conversion of components not decomposed or converted by fermentation by yeast or lactic acid bacteria, Such as pepsin, trypsin, carboxypeptidase, aminopeptidase, dipeptidase and the like, preferably pepsin, trypsin, carboxypeptidase, and most preferably pepsin.
본 발명의 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출물은 다음의 단계로 제조될 수 있다:The mung bean, kidney bean, black soybean fermentation-enzyme extract of the present invention can be prepared by the following steps:
a) 녹두, 강낭콩, 흑콩을 분말로 만드는 단계;a) making mung beans, kidney beans and black beans into powder;
b) 상기 단계 a)에서 제조된 분말을 정제수에 희석한 후 효모 또는 유산균을 이용하여 발효시키는 단계;b) diluting the powder prepared in step a) with purified water and fermenting it with yeast or lactic acid bacteria;
c) 상기 단계 b)의 발효에 의해 얻은 발효액을 여과하여 단백질 분해효소로 분해하는 단계; 및c) filtering the fermentation broth obtained by the fermentation of step b) and decomposing the fermentation broth into proteolytic enzymes; And
d) 상기 단계 c)의 효소 분해액을 저온 숙성 및 여과하여 발효-효소 추출액을 제조하는 단계.d) preparing a fermentation-enzyme extract by low temperature aging and filtration of the enzyme digest solution of step c).
상기 녹두 발효-효소 추출액의 제조 단계에서, 상기 단계 a)의 분말화는 100 내지 500 메쉬 크기 이하로 제조될 수 있으나, 이에 한정될 필요는 없다.In the step of preparing the mung bean fermentation-enzyme extract, the pulverization of the step a) may be performed at 100 to 500 mesh size or less, but is not limited thereto.
또한 상기 단계 b)의 발효는 콩 분말과 정제수를 1:10으로 혼합한 후 121℃에서 멸균시킨 후 유산균(Lactobacillus sp) 또는 효모균(Sacharomyces sp)을 접종하여 배양함으로써 달성된다. 또한, 발효단계에 사용된 효모 또는 유산균은 총 배양액 1L 기준으로, 1 × 104 내지 1 × 105 세포수의 양으로 접종되는 것이 바람직하며, 각 균주의 성상에 따라 통상적인 조건 및 호기적 또는 통상 혐기(anaerobic)적인 조건에서 배양될 수 있다. 또한, 발효균의 배양을 더욱 활성화시키기 위하여 추가적인 탄소원 및/또는 PH 조절제가 첨가될 수도 있다. 이때 적합한 배양조건은 30 - 37℃, pH 5-7의 호기 또는 통상 혐기적인 조건에서 약 1 내지 15일간 배양되며, 바람직하게는 1 내지 7일이며, 더욱 바람직하게는 1 내지 5일이며, 가장 바람직하게는 2 내지 4일간 배양된다.Also, the fermentation of step b) is accomplished by mixing soybean powder and purified water at a ratio of 1:10, sterilizing at 121 ° C, and inoculating lactobacillus sp. Or yeast (Sacharomyces sp). The yeast or lactic acid bacteria used in the fermentation step are preferably inoculated in an amount of 1 x 10 < 4 > to 1 x 10 < 5 > cells per liter of the total culture. Depending on the characteristics of each strain, can be cultured under anaerobic conditions. In addition, additional carbon sources and / or pH regulators may be added to further activate the culture of the fermenting bacteria. Here, suitable culture conditions are incubation for about 1 to 15 days, preferably 1 to 7 days, more preferably 1 to 5 days, at 30 to 37 ° C under aerobic or normal anaerobic conditions of pH 5-7, Preferably for 2 to 4 days.
상기 단계 c)는 단계 b)에서 얻은 발효액을 1차 여과한 후 그 여과액을 단백질 분해효소로 분해하는 단계로서, 이때 여과는 0.25 내지 0.45μm 크기의 여과막으로 여과하여, 여분의 콩분말알갱이 및 발효균을 제거할 수 있다. 1차 여과막으로 분리된 여과액은 단백질 분해효소로 분해하여 효모 또는 유산균에 의한 발효로도 분해 또는 전환되지 않은 성분들을 2차적으로 분해 또는 전환시키기 위해 실시된다. 이때, 사용되는 단백질 분해효소로는 펩신, 트립신, 카르복시펩티다아제, 아미노펩티다아제, 지펩티다아제 등이 있으며, 바람직하게는 펩신, 트립신, 카르복시펩티다아제이며, 가장 바람직하게는 펩신이다. 상기에서 단계 d)는 단백질 분해효소에 의한 생물전환 방법에 의해 얻어진 추출액을 저온 숙성하여 안정화 시킬 수 있으며, 1차 여과막에 비해 더 세밀한 여과막으로 2차 여과한 후 농축하여 보관할 수 있으며, 이 농축물을 적절히 희석하여 사용한다. 이때 상기 분해-여과-농축의 과정은 보다 유효한 효과가 있는 발효-효소 추출액을 얻기 위한 공정단계로서, 저온 숙성과정은 5 내지 10일 동안 이루어지는 것이 바람직하며, 여과막의 크기는 0.25μm 이하인 것이 바람직하다.The step c) is a step of firstly filtering the fermentation liquid obtained in step b) and then decomposing the filtrate into proteolytic enzymes. The filtration is performed by filtration through a filtration membrane having a size of 0.25 to 0.45 μm, The fermenting bacteria can be removed. The filtrate separated by the primary filtration membrane is decomposed into proteolytic enzymes and is subjected to secondary decomposition or conversion of components that have not been decomposed or converted by fermentation by yeast or lactic acid bacteria. The proteolytic enzymes used herein include pepsin, trypsin, carboxypeptidase, aminopeptidase, zipeptidase, and the like, preferably pepsin, trypsin, carboxypeptidase, and most preferably pepsin. In the above step d), the extract obtained by biotransformation by proteolytic enzymes can be stabilized by low-temperature aging. Second filtration with a finer filtration membrane than that of the first filtration membrane, followed by concentration and storage, Is appropriately diluted. At this time, the decomposition-filtration-concentration process is a process step for obtaining a fermentation-enzyme extract having a more effective effect. It is preferable that the fermentation-enzyme fermentation process is performed for 5 to 10 days, and the size of the filtration membrane is preferably 0.25 μm or less .
보다 바람직한 구현예에 따르면, 녹두, 강낭콩, 흑콩 분말을 300 메쉬 크기 이하로 분말화한 뒤 배양액에 10 g/L 첨가하고, 효모 균주 또는 유산균 등을 50,000 cfu/L로 첨가하여 각각 효모는 30℃, 유산균은 37℃에서, pH 5-7, 바람직하게는 약 pH 5.5로 호기적 또는 통성 혐기적인 조건으로 발효조에서 약 1일 내지 7일간 배양하여 발효시킨다. 배양 후 상기 발효액은 0.45μm의 여과막을 이용하여 1차 여과한 다음 이 여과액에 다시 단백질 분해효소를 처리한다. 이 처리액은 다시 10일간 저온 숙성 시킨 후 0.25μm 막으로 2차 여과하여 농축한 뒤 본 발명의 녹두 발효-효소 추출액을 제조한다. 사용하기 전에 최종 고형분의 농도를 10g/L가 되게 유지한다.According to a more preferred embodiment, mung bean, kidney bean, and black bean powder are pulverized to a size of 300 mesh or less and added to the culture solution at 10 g / L, and yeast strain or lactic acid bacterium is added at 50,000 cfu / , The lactic acid bacteria are fermented at 37 ° C, pH 5-7, preferably about pH 5.5, for about 1 to 7 days in a fermentation tank under anaerobic or aerobic conditions. After the cultivation, the fermentation broth is subjected to primary filtration using a filtration membrane having a pore size of 0.45 μm, and then the proteolytic enzyme is treated again on the filtrate. This treatment solution is further subjected to low-temperature aging for 10 days, followed by secondary filtration with a 0.25-μm membrane, followed by concentration to prepare the mung bean fermentation-enzyme extract of the present invention. Keep the final solids concentration to 10 g / L before use.
이렇게 제조된 본 발명의 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액은 콜라겐 생합성의 증진(실험예 1), 세포 활성 촉진 (실험예 2) 및 피부 세포 자극 완화 (실험예 3) 효과가 있으며, 이를 함유하는 화장료 조성물은 주름개선 효과 (실험예 4) 및 피부 보습 유지에 탁월한 효능(실험예 5)이 있다. 따라서, 본 발명의 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액을 화장료 소재로 개발하여 피부 노화를 방지 효과를 기대할 수 있다.The thus-prepared mung bean, kidney bean and black soybean fermentation-enzyme extract of the present invention has the effects of enhancing collagen biosynthesis (Experimental Example 1), promoting cell activity (Experimental Example 2) and mitigating skin cell stimulation (Experimental Example 3) (Experimental Example 4) and excellent efficacy (Example 5) for skin moisturization and maintenance. Therefore, the effect of preventing the aging of the skin can be expected by developing the extract of the mung bean, kidney bean, black soybean fermentation-enzyme of the present invention as a cosmetic material.
본 발명에서, 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액의 함량은 전체 화장료 조성물에 대하여 0.0001 - 30.0 %(w/w)이고, 보다 바람직하게는 0.001-20 %(w/w)이다. 이때, 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액의 함량이 0.0001 %(w/w) 미만일 경우에는 뚜렷한 피부주름 개선 효과 및 피부 보호 효과를 기대할 수 없고, 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액의 함량이 30.0%(w/w)를 초과하는 경우에는 함유량 증가에 따른 뚜렷한 효과의 증가가 나타나지 않으며, 피부자극을 유발하거나 제형의 안정성에 있어서 문제가 생긴다.In the present invention, the content of the mung bean, kidney bean and black bean fermentation-enzyme extract is 0.0001 to 30.0% (w / w), more preferably 0.001 to 20% (w / w) based on the total cosmetic composition. At this time, when the content of the mung bean, black bean, black bean fermentation-enzyme extract is less than 0.0001% (w / w), it can not be expected that the skin wrinkle improving effect and the skin protection effect are expected, and the content of the mung bean, If it exceeds 30.0% (w / w), there is no significant increase in the effect according to the increase of the content, and it causes skin irritation or problems in the stability of the formulation.
본 발명의 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액은 피부에 국소적으로 바르는 거나 뿌리는 것에 의해 그 효과를 달성할 수 있다. 따라서, 본 발명의 바람직한 일 양태에 따르면, 본 발명의 조성물은 크림, 로션 및 유연수 등의 화장료 조성물 또는 스프레이 및 연고 등의 약제학적 조성물 형태로 제조될 수 있다.The mung bean, kidney bean, black soybean fermentation-enzyme extract of the present invention can achieve its effect by applying or spraying it locally on the skin. Accordingly, in accordance with a preferred embodiment of the present invention, the composition of the present invention can be manufactured in the form of a cosmetic composition such as cream, lotion and softened water or a pharmaceutical composition such as a spray or ointment.
본 발명의 화장품 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서의 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액 이외에 화장품 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.The components contained in the cosmetic composition of the present invention include components commonly used in cosmetic compositions in addition to the mung bean, kidney bean, black soybean fermentation-enzyme extract as an active ingredient, and examples thereof include antioxidants, stabilizers, solubilizers, vitamins, , And a carrier.
본 발명의 화장료 조성물은 당 업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형 화 될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수(스킨), 영양 화장수(밀크로션), 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이크림, 클렌징크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.The cosmetic composition of the present invention can be prepared into any of the formulations conventionally produced in the art and can be used in the form of solutions, suspensions, emulsions, pastes, gels, creams, lotions, powders, soaps, , Oil, powder foundation, emulsion foundation, wax foundation and spray, but is not limited thereto. More specifically, it can be manufactured in the form of a flexible lotion (skin), a nutritional lotion (milk lotion), a nutritional cream, a massage cream, an essence, an eye cream, a cleansing cream, a cleansing foam, a cleansing water, a pack, a spray or a powder .
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, an animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, tracant, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc or zinc oxide may be used as the carrier component .
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.In the case where the formulation of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as a carrier component. Especially, in the case of a spray, a mixture of chlorofluorohydrocarbons, propane / Propane or dimethyl ether.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.When the formulation of the present invention is a solution or an emulsion, a solvent, a dissolving agent or an emulsifying agent is used as a carrier component, and examples thereof include water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, , 3-butyl glycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or sorbitan fatty acid esters.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.In the case where the formulation of the present invention is a suspension, a carrier such as water, a liquid diluent such as ethanol or propylene glycol, a suspending agent such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester, Cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tracant, etc. may be used.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is an interfacial active agent-containing cleansing, the carrier component may include aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, isethionate, imidazolinium derivative, methyltaurate, sarcosinate, fatty acid amide Ether sulfates, alkylamidobetaines, aliphatic alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanolamides, vegetable oils, lanolin derivatives, or ethoxylated glycerol fatty acid esters.
또한, 본 발명은 녹두 발효-효소 추출액을 포함하는 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하여 피부 노화로 인해 손상된 다양한 피부 트러블을 개선(세포활성 촉진, 콜라겐 생합성 증진, 피부세포 자극 완화, 피부 보습 유지 등)하는 것을 특징으로 하는 화장방법을 제공한다.The present invention also provides a cosmetic composition comprising a mung bean fermentation-enzyme extract, which is applied to human skin to improve various skin troubles damaged by skin aging (promotion of cell activity, promotion of collagen biosynthesis, skin cell stimulation relaxation, ) Of the cosmetic composition.
본 발명의 화장 방법은 본 발명의 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하는 모든 화장 방법을 일컫는다. 즉, 화장료 조성물을 피부에 도포하는 당업계에 공지된 모든 방법이 본 발명의 화장 방법에 속한다.The cosmetic process of the present invention refers to all the cosmetic processes for applying the cosmetic composition of the present invention to human skin. That is, all methods known in the art for applying the cosmetic composition to the skin belong to the cosmetic method of the present invention.
본 발명의 화장료 조성물은 단독 또는 중복 도포하여 사용하거나, 본 발명 이외의 다른 화장료 조성물과 중복 도포하여 사용할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 피부 보호 효과가 우수한 화장료 조성물은 통상적인 사용방법에 따라 사용될 수 있으며, 사용자의 피부 상태 또는 취향에 따라 그 사용횟수를 달리할 수 있다.The cosmetic composition of the present invention may be used alone or in combination, or may be used by overlapping with other cosmetic compositions other than the present invention. In addition, the cosmetic composition having excellent skin protection effect according to the present invention can be used according to a conventional method of use, and the number of times of use can be varied depending on the skin condition or taste of the user.
본 발명의 화장료 조성물이 비누, 계면활성제 함유 클렌징 또는 계면활성제 비 함유 클렌징 제형일 경우, 피부에 도포한 후 닦아내거나 떼거나 물로 씻어낼 수도 있다. 구체적인 예로서, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누이며, 상기 계면활성제 함유 클렌징 제형은 클렌징 폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩이며, 상기 계면활성제 비 함유 클렌징 제형은 클렌징크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔이며, 이에 한정되는 것은 아니다.When the cosmetic composition of the present invention is a soap, a surfactant-containing cleansing agent, or a surfactant-free cleansing agent, it may be applied to the skin and then wiped off or removed or washed with water. The surfactant-containing cleansing formulation may be a cleansing foam, a cleansing water, a cleansing towel and a cleansing pack. The surfactant-free cleansing formulation may be a cleansing cream, , Cleansing lotion, cleansing water and cleansing gel, but is not limited thereto.
본 발명의 녹두 발효-효소 추출액을 포함하는 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하는 화장방법을 수행하면, 피부 노화 예방, 피부 주름개선 및 피부 보습 효과를 효과적으로 개선할 수 있다.When the cosmetic composition comprising the mung bean fermentation-enzyme extract of the present invention is applied to human skin, prevention of skin aging, improvement of skin wrinkles and skin moisturizing effect can be effectively improved.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. It is to be understood by those skilled in the art that these embodiments are only for describing the present invention in more detail and that the scope of the present invention is not limited by these embodiments in accordance with the gist of the present invention .
제조예 1. 효모 발효-효소 추출액의 제조Production Example 1. Preparation of yeast fermentation-enzyme extract
정제수로 세척하고 건조시킨 녹두, 강낭콩, 흑콩을 분말화 한 후 300메시를 이용하여 미세하게 만들었다. 상기 원료와 정제수를 1:10으로 혼합하여 121℃에서 멸균시킨 후 효모를 접종하였다. 이때, 효모는 사카로마이세스 세레비시애(Saccharomyces cerevisiae)를 사용하였으며, 배양액 당 50,000 cfu/L로 첨가하였다. 배양은 5L 발효조를 이용하여 3일간, 30℃, pH 5.5로 유지하며 배양하였다. 배양 후 배양액을 원심 분리하여 배양균을 제거 한 후 0.45μm 여과막을 1차 여과 하였다. 이렇게 얻은 여과액에 다시 단백질 분해효소(펩신, 시그마, 미합중국)를 2시간 동안 처리한 후 이 액을 0.25μm 여과막을 이용하여 2차 여과하였다. 이 여과액을 다시 농축한 후 적정 용매를 이용하여 희석해서 사용하였다. 이렇게 제조한 발효-효소 추출액을 이하 '녹두·강낭콩·흑콩 효모 발효-효소 추출액'이라 통칭한다. 이하 실험예에 사용된 효모-발효 효소액은 최종 농도가 1g/100mL가 되게 유지하여 사용하였다.
The dried mung bean, kidney bean and black bean were washed and washed with purified water and powdered and made fine using 300 mesh. The raw material and purified water were mixed at 1:10, sterilized at 121 ° C, and then inoculated with yeast. At this time, Saccharomyces cerevisiae was used as a yeast and added at 50,000 cfu / L per culture. The culture was continued for 3 days at 30 ° C and pH 5.5 using a 5 L fermenter. After culturing, the culture was centrifuged to remove the culture, and then a 0.45 μm filter membrane was firstly filtered. The resulting filtrate was again treated with proteolytic enzyme (pepsin, Sigma, USA) for 2 hours, and then the solution was subjected to secondary filtration using a 0.25 μm filter membrane. The filtrate was concentrated again and then diluted with an appropriate solvent. The fermentation-enzyme extract thus prepared is referred to as "enzyme extract of mung bean, kidney bean and blackcurrant yeast fermentation". The yeast-fermenting enzyme solution used in the following Experimental Example was kept at a final concentration of 1 g / 100 mL.
제조예 2. 유산균 발효-효소 추출액의 제조Production Example 2. Preparation of lactic acid bacteria fermentation-enzyme extract
정제수로 세척하고 건조시킨 녹두, 강낭콩, 흑콩을 분말화 한 후 300메시를 이용하여 미세하게 만들었다. 상기 원료와 정제수를 1:10으로 혼합하여 121℃에서 멸균시킨 후 유산균을 접종하였다. 이때, 유산균으로는 락토바실러스(Lacobacillus sp)를 사용하였으며, 배양액 당 50,000 cfu/L로 첨가하였다. 배양은 5L 발효조를 이용하여 3일간, 37℃, pH 5.5로 유지하며 배양하였다. 배양 후 배양액을 원심 분리하여 배양균을 제거한 후 0.45μm 여과막을 1차 여과하였다. 이렇게 얻은 여과액에 다시 단백질 분해효소(펩신, 시그마, 미합중국)를 2시간 동안 처리한 후 이 액을 0.25μm 여과막을 이용하여 2차 여과하였다. 이 여과액을 다시 농축한 후 적정 용매를 이용하여 희석해서 사용하였다. 이렇게 제조한 발효-효소 추출액을 이하 '녹두·강낭콩·흑콩 유산균 발효-효소 추출액'이라 통칭한다. 이하 실험예에 사용된 유산균 발효-효소액은 최종 농도가 1g/100㎖가 되게 유지하여 사용하였다.
The dried mung bean, kidney bean and black bean were washed and washed with purified water and powdered and made fine using 300 mesh. The raw material and purified water were mixed at a ratio of 1:10, sterilized at 121 ° C, and inoculated with the lactic acid bacteria. Lactobacillus sp. Was used as the lactic acid bacteria and added at 50,000 cfu / L per culture. The cultures were incubated for 3 days at 37 ° C and pH 5.5 using a 5 L fermenter. After the culture, the culture was centrifuged to remove the culture, and then a 0.45 μm filter membrane was firstly filtered. The resulting filtrate was again treated with proteolytic enzyme (pepsin, Sigma, USA) for 2 hours, and then the solution was subjected to secondary filtration using a 0.25 μm filter membrane. The filtrate was concentrated again and then diluted with an appropriate solvent. The thus-produced fermentation-enzyme extract is hereinafter referred to as "fermentation enzyme-enzyme solution of mung bean, kidney bean, black bean lactic acid bacteria." The lactic acid bacteria fermentation-enzyme solution used in Experimental Example was used at a final concentration of 1 g / 100 ml.
비교 compare 제조예Manufacturing example 1. 녹두·강낭콩· 1. Green beans, kidney beans 흑콩Black 추출물 제조 Extract preparation
녹두, 강낭콩, 흑콩을 정제수로 세척하고 건조시켜서, 분말화 한 후 100g을 70% 에탄올 용액 0.6L에 첨가하고, 냉각콘덴서가 장착된 환류 추출기에서 4시간 동안 가열 추출하였다. 그런 다음, 수득한 추출액을 300 메쉬 여과포로 여과하고, 와트만 5번 여과지로 여과한 후 감압농축기를 이용하여 용매를 제거하고 동결 건조하여 건조 중량 5.5g을 얻었다. 이렇게 얻은 추출물을 이하 '녹두·강낭콩·흑콩 추출물'이라 통칭하며, 추출물은 최종 농도가 1g/100mL되게 사용하였다.
Green beans, kidney beans and black beans were washed with purified water, dried and powdered. 100 g of the extract was added to 0.6 L of a 70% ethanol solution, and the mixture was heated and extracted with a reflux condenser equipped with a condenser for 4 hours. Then, the obtained extract was filtered with a 300-mesh filter cloth, filtered through filter paper No. 5 of Wattman, and then the solvent was removed using a vacuum concentrator and lyophilized to obtain 5.5 g of dry weight. The extract thus obtained is hereinafter referred to as "mung bean, kidney bean, black bean extract", and the extract was used to give a final concentration of 1 g / 100 mL.
비교 compare 제조예Manufacturing example 2. 효모를 이용한 효모 발효액 제조 2. Preparation of yeast fermentation broth using yeast
정제수로 세척하고 건조시킨 녹두, 강낭콩, 흑콩을 분말화 한 후 300메시를 이용하여 미세하게 만들었다. 녹두, 강낭콩, 흑콩과 정제수를 1:10으로 혼합하여 121℃에서 멸균시킨 후 효모를 접종하였다. 이때 사용한 효모는 사카로마이세스 새리비시애(Sacharomyces cerevisiae)를 사용하였으며, 배양액 당 50,000 cfu/L로 첨가하였다. 배양은 5L 발효조를 이용하여 3일간, 30℃도, pH 5.5로 유지하며 배양하였다. 배양 후 배양액을 원심 분리하여 배양균을 1차 제거 한 후 0.25 μm 여과막을 이용하여 최종 여과하였다. 이렇게 얻은 여과액을 농축하여 얻은 액을 적정 용매를 이용하여 희석한 후 본 발명에 사용하였다. 이렇게 제조한 발효액을 이하 '녹두·강낭콩·흑콩 효모 발효액'이라 통칭한다. 이하 실험예에 사용된 효모 발효액은 최종 농도가 1g/100mL가 되게 유지하여 사용하였다.
The dried mung bean, kidney bean and black bean were washed and washed with purified water and powdered and made fine using 300 mesh. Mung beans, kidney beans, black beans, and purified water were mixed at 1:10, sterilized at 121 ° C, and then inoculated with yeast. The yeast used was Sacharomyces cerevisiae, which was added at 50,000 cfu / L per culture. The cultures were incubated for 3 days at 30 ° C and pH 5.5 using a 5 L fermenter. After culturing, the culture broth was centrifuged, and the culture was firstly removed, followed by final filtration using a 0.25 μm filter membrane. The filtrate obtained by concentrating the filtrate thus obtained was diluted with an appropriate solvent and used in the present invention. The thus prepared fermentation broth is hereinafter referred to as "fermentation broth of green beans, kidney beans, and black beans." The yeast fermentation broth used in the Experimental Example was maintained at a final concentration of 1 g / 100 mL.
비교 compare 제조예Manufacturing example 3. 3. 락토바실러스Lactobacillus (( LactobacillusLactobacillus ) 속 균주를 이용한 유산균 발효액 제조 ) Lactic acid bacteria fermentation broth
정제수로 세척하고 건조한 녹두, 강낭콩, 흑콩을 분말화 한 후 300메시를 이용하여 미세하게 만들었다. 상기원료와 정제수를 1:10으로 혼합하여 121℃에서 멸균시킨 후 유산균을 접종하였다. 이때 사용한 유산균은 락토바실러스(Lactobacillussp)를 사용하였으며, 배양액 당 50,000 cfu/L로 첨가하였다. 배양은 5L 발효조를 이용하여 3일간, 37℃도, pH 5.5로 유지하며 배양하였다. 배양 후 배양액을 원심 분리하여 배양균을 1차 제거한 후 0.25 μm 여과막을 이용하여 최종 여과하였다. 이렇게 얻은 여과액을 농축하여 얻은 액을 적정 용매를 이용하여 본 발명에 사용하였다. 이렇게 제조한 발효액을 이하 '녹두·강낭콩·흑콩 유산균 발효액'이라 통칭한다. 이하 실험예에 사용된 유산균 발효액은 최종 농도가 1g/100mL가 되게 유지하여 사용하였다.
After washing with purified water and drying, the dried mung beans, kidney beans and black beans were pulverized and finely ground using 300 mesh. The raw material and purified water were mixed at a ratio of 1:10, sterilized at 121 ° C, and inoculated with the lactic acid bacteria. Lactobacillus was used as a lactic acid bacterium and added at 50,000 cfu / L per culture. Cultures were incubated for 3 days at 37 ° C and pH 5.5 using a 5 L fermenter. After culturing, the culture was centrifuged and the culture was firstly removed, followed by final filtration using a 0.25 μm filter membrane. The filtrate obtained by concentrating the filtrate thus obtained was used in the present invention using an appropriate solvent. The thus prepared fermentation broth is collectively referred to as "fermentation broth of green beans, kidney beans and black beans". The lactic acid bacterium fermentation broth used in Experimental Example was used at a final concentration of 1 g / 100 mL.
비교 compare 제조예Manufacturing example 4. 효소 처리 후 효모를 이용한 효소-효모 발효액 제조 4. Preparation of enzyme-yeast fermentation broth using yeast after enzyme treatment
정제수로 세척하고 건조시킨 녹두, 강낭콩, 흑콩을 분말화 한 후 300메시를 이용하여 미세하게 만들었다. 상기 원료와 정제수를 1:10으로 혼합하여 121℃에서 멸균시킨 후 단백질 분해 효소(펩신, 시그마, 미합중국)를 2시간 동안 처리하였다. 처리 후 이 시료에 효모를 접종하였다. 이때 효모는 사카로마이세스 세레비시애(Saccharomyces cerevisiae)를 사용하였다(50,000 cfu/L로 첨가). 배양은 5L 발효조를 이용하여 3일간, 30℃, pH 5.5로 유지하며 배양하였으며, 배양 후 배양액을 원심 분리 및 1차 여과하여 배양균 및 찌꺼기를 제거한 후, 0.25 μm 여과막을 이용하여 2차 여과 하였다. 이렇게 얻은 여과액을 농축하여 얻은 액을 적정 용매를 이용하여 본 발명에 사용하였다. 이렇게 제조한 발효액을 이하 '녹두·강낭콩·흑콩 효소-효모 발효액'이라 통칭한다. 이하 실험예에 사용된 효소-효모 발효액은 최종 농도가 1g/100mL가 되게 유지하여 사용하였다.
The dried mung bean, kidney bean and black bean were washed and washed with purified water and powdered and made fine using 300 mesh. The raw material and purified water were mixed at 1:10, sterilized at 121 ° C, and treated with proteolytic enzyme (pepsin, Sigma, USA) for 2 hours. After the treatment, yeast was inoculated into the sample. The yeast used Saccharomyces cerevisiae (added at 50,000 cfu / L). The culture was maintained for 3 days at 30 ° C and pH 5.5 using a 5 L fermenter. After the culture, the culture was centrifuged and primary filtered to remove the culture bacteria and debris, followed by secondary filtration using a 0.25 μm filter membrane . The filtrate obtained by concentrating the filtrate thus obtained was used in the present invention using an appropriate solvent. The thus prepared fermentation broth is hereinafter referred to as "mung bean, kidney bean, black bean enzyme, yeast fermentation broth". The enzyme-yeast fermentation broth used in the Experimental Example was used at a final concentration of 1 g / 100 mL.
비교 compare 제조예Manufacturing example 5. 효소 처리 후 5. After enzyme treatment 락토바실러스Lactobacillus (( LactobacillusLactobacillus ) 속 균주를 이용한 효소-유산균 발효액 제조) Fermentation of Lactic Acid Fermentation Using Enzymes
정제수로 세척하고 건조한 녹두, 강낭콩, 흑콩을 분말화 한 후 300메시를 이용하여 미세하게 만들었다. 상기 원료와 정제수를 1:10으로 혼합하여 121℃에서 멸균시킨 후 단백질 분해 효소(펩신, 시그마, 미합중국)를 2시간 동안 처리하였다. 이 시료에 유산균을 접종하여 발효시킨 후 발효액으로 사용한다. 이때 유산균은 락토바실러스를 사용하였다(50,000 cfu/L로 첨가). 배양은 5L 발효조를 이용하여 3일간, 37℃도, pH 5.5로 유지하며 배양하였다. 배양 후 배양액을 원심 분리 및 1차 여과하여 배양균 및 찌꺼기를 제거한 후, 0.25 μm 여과막을 이용하여 2차 여과하였다. 이렇게 얻은 여과액을 농축하여 얻은 액을 적정 용매를 이용하여 본 발명에 사용하였다. 이렇게 제조한 발효액을 이하 '녹두·강낭콩·흑콩 효소-유산균 발효액'이라 통칭한다. 이하 실험예에 사용된 효소-유산균 발효액은 최종 농도가 1g/100mL가 되게 유지하여 사용하였다.
After washing with purified water and drying, the dried mung beans, kidney beans and black beans were pulverized and finely ground using 300 mesh. The raw material and purified water were mixed at 1:10, sterilized at 121 ° C, and treated with proteolytic enzyme (pepsin, Sigma, USA) for 2 hours. This sample is fermented by inoculating lactic acid bacteria and used as a fermentation broth. Lactobacillus was used for the lactic acid bacteria (added at 50,000 cfu / L). Cultures were incubated for 3 days at 37 ° C and pH 5.5 using a 5 L fermenter. After culturing, the culture broth was centrifuged and primary filtered to remove the culture bacteria and debris, followed by secondary filtration using a 0.25 μm filter membrane. The filtrate obtained by concentrating the filtrate thus obtained was used in the present invention using an appropriate solvent. The thus-prepared fermentation broth is collectively referred to as "mung bean, kidney bean, black soybean fermentation broth, lactic acid fermentation broth". The fermentation broth of the enzyme-lactic acid bacteria used in the following Experimental Example was kept at a final concentration of 1 g / 100 mL.
비교 compare 제조예Manufacturing example 6. 녹두 효모 발효-효소 추출액의 제조 6. Fermentation of Mungbean Yeast - Preparation of Enzyme Extract
정제수로 세척하고 건조시킨 녹두를 분말화 한 후 300메시를 이용하여 미세하게 만들었다. 녹두와 정제수를 1:10으로 혼합하여 121℃에서 멸균시킨 후 효모(Sacharomyces cerevisiae)를 접종하였다. 이때, 효모는 사카로마이세스 세레비시애(Saccharomyces cerevisiae)를 사용하였으며, 배양액 당 50,000 cfu/L로 첨가하였다. 배양은 5L 발효조를 이용하여 3일간, 30℃, pH 5.5로 유지하며 배양하였다. 배양 후 배양액을 원심 분리하여 배양균을 제거 한 후 0.45μm 여과막을 1차 여과 하였다. 이렇게 얻은 여과액에 다시 단백질 분해효소(펩신, 시그마, 미합중국)를 2시간동안 처리한 후 이 액을 0.25μm 여과막을 이용하여 2차 여과하였다. 이 여과액을 다시 농축한 후 적정 용매를 이용하여 희석해서 사용하였다. 이렇게 제조한 발효-효소 추출액을 이하 '녹두 효모 발효-효소 추출액'이라 통칭한다. 이하 실험예에 사용된 녹두 효모 발효 효소액은 최종농도가 1g/100mL가 되게 유지하여 사용하였다. 상기 방법은 한국등록특허 제10-1040508호에 기술되어 있다.
The mung bean was washed with purified water and dried. The dried mung bean was powdered and made fine using 300 mesh. Mung bean and purified water were mixed at 1:10, sterilized at 121 ° C, and then inoculated with yeast (Sacharomyces cerevisiae). At this time, Saccharomyces cerevisiae was used as a yeast and added at 50,000 cfu / L per culture. The culture was continued for 3 days at 30 ° C and pH 5.5 using a 5 L fermenter. After culturing, the culture was centrifuged to remove the culture, and then a 0.45 μm filter membrane was firstly filtered. The resulting filtrate was again treated with proteolytic enzyme (pepsin, Sigma, USA) for 2 hours, and then the solution was subjected to secondary filtration using a 0.25 μm filter membrane. The filtrate was concentrated again and then diluted with an appropriate solvent. The thus-produced fermentation-enzyme extract is hereinafter referred to as "fermented yeast-enzyme extract". The mung bean yeast fermentation enzyme solution used in Experimental Example was kept at a final concentration of 1 g / 100 ml. This method is described in Korean Patent No. 10-1040508.
실험예Experimental Example 1: 녹두·강낭콩· 1: Green beans, kidney beans 흑콩Black 발효-효소 추출액의 콜라겐 생합성 증진 효과 Fermentation - Enhancement of collagen biosynthesis of enzyme extract
인체 정상 섬유아세포를 48-웰 마이크로 플레이트의 각 웰에 1 x 106 세포가 되도록 접종하고, DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium) 배지에서 37℃에서 24시간 동안 배양하였다. 이어, 비교 제조예 1의 녹두·강낭콩·흑콩 추출물, 비교 제조예 2의 녹두·강낭콩·흑콩 효모 발효액, 비교 제조예 3의 녹두·강낭콩·흑콩 유산균 발효액, 비교 제조예 4의 녹두·강낭콩·흑콩 효소-효모 발효액, 비교 제조예 5의 녹두·강낭콩·흑콩 효소-유산균 발효액, 비교 제조예 6의 녹두 효모 발효-효소 추출액, 제조예 1의 녹두·강낭콩·흑콩 효모 발효-효소 추출액 및 제조예 2의 녹두·강낭콩·흑콩 유산균 발효-효소 추출액을 각각 최종 농도 1.0%로 하여 혈청이 없는 DMEM 배지로 교체한 실험군과 녹두 배양액이 포함되지 않은 혈청이 없는 DMEM 배지로 교체한 대조군을 24시간 동안 추가로 배양하였다. 배양 후, 각 웰의 상층액을 모아 프로콜라겐 (procollagen) 타입 I C-펩타이드 (PICP) 양을 키트 (Takara, 일본)를 이용하여 새로 합성된 콜라겐 양을 측정하였다. PICP 양은 ng/㎖ 환산하였으며, 양성대조군으로는 250uM의 아스코르빈산(ascrobic acid)을 사용하였다. 콜라겐 생합성 증가율은 하기 수학식 1에 따라 계산한 후 그 결과를 표 1에 나타내었다.Normal human fibroblasts were inoculated into each well of a 48-well microplate at 1 × 10 6 cells and cultured in DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) medium at 37 ° C. for 24 hours. Then, the mung bean, kidney bean and black bean extract of Comparative Preparation Example 1, the fermentation liquid of mung bean, kidney bean and black bean yeast of Comparative Preparation Example 2, the fermentation liquid of mung bean, kidney bean and black liquor of Comparative Preparation Example 3, Enzyme-fermentation broth of Comparative Production Example 5, fermentation broth of mung bean, black bean, black soybean, black soybean, fermentation-lactic acid bacteria of Comparative Production Example 5, fermentation enzyme of mung bean yeast fermentation of Comparative Preparation Example 6, fermentation enzyme of mung bean, Of the mung bean, kidney bean, and black bean fermentation-enzyme extract to a final concentration of 1.0%, respectively, were replaced with serum-free DMEM medium, and the control group, which was replaced with serum-free DMEM medium containing no mung bean culture, Lt; / RTI > After culturing, the supernatant of each well was collected and the amount of procollagen type I C-peptide (PICP) was measured using a kit (Takara, Japan). The amount of PICP was converted to ng / ml, and 250 uM of ascorbic acid was used as a positive control. The increase rate of collagen biosynthesis was calculated according to the following formula (1), and the results are shown in Table 1.
이상의 실험예 1을 통해, 본 발명의 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액인 제조예 1 및 2는 녹두·강낭콩·흑콩 추출물(비교 제조예 1)에 비해 그 효과가 훨씬 탁월했음은 물론, 녹두·강낭콩·흑콩의 단순 발효액인 녹두·강낭콩·흑콩 효모 발효액과 녹두·강낭콩·흑콩 유산균 발효액(비교 제조예 2 및 3) 및 녹두·강낭콩·흑콩 추출물을 효소 처리 후 발효시킨 녹두·강낭콩·흑콩 효소-발효액(비교 제조예 4 및 5)에 비해서도 콜라겐 생합성 증진 효과가 우수하였다. 또한, 녹두 발효-효소 추출액 단일로 사용한 경우(비교 제조예 6)보다도 콜라겐 생합성 증진 효과가 우수하였다. 게다가 양성 대조군인 아스코르빈산과 비교시에도 그 효과가 월등하였다.
Through the above Experimental Example 1, it was confirmed that Production Examples 1 and 2 of the mung bean, kidney bean and black bean fermentation-enzyme extract of the present invention were far superior to mung bean, kidney bean and black bean extract (Comparative Production Example 1) · Mung beans, kidney beans, black bean yeast fermentation broth, mung beans, kidney beans, black bean fermentation broth (Comparative Production Examples 2 and 3) and mung bean, kidney bean and black bean extract were fermented after enzyme treatment, - Compared with the fermentation broth (Comparative Production Examples 4 and 5), the effect of enhancing collagen biosynthesis was excellent. In addition, the effect of enhancing collagen biosynthesis was superior to that in the case of using a single mung bean fermentation-enzyme extract (Comparative Preparation Example 6). In addition, the effect was superior to ascorbic acid, a positive control.
실험예Experimental Example 2: 녹두·강낭콩· 2: green beans, kidney beans 흑콩Black 발효-효소 추출액의 섬유아세포 증식 효과 Effect of fermentation-enzyme extract on fibroblast proliferation
인체 정상 섬유아세포를 96-웰 마이크로 플레이트의 각 웰에 1 × 104세포가 되도록 접종하고, DMEM 배지에서 37℃에서 24시간 동안 배양하였다. 이어, 비교 제조예 1의 녹두·강낭콩·흑콩 추출물, 비교 제조예 2의 녹두·강낭콩·흑콩 효모 발효액, 비교 제조예 3의 녹두·강낭콩·흑콩 유산균 발효액, 비교 제조예 4의 녹두·강낭콩·흑콩 효소-효모 발효액, 비교 제조예 5의 녹두·강낭콩·흑콩 효소-유산균 발효액, 비교 제조예 6의 녹두 효모 발효-효소 추출액, 제조예 1의 녹두·강낭콩·흑콩 효모 발효-효소 추출액 및 제조예 2의 녹두·강낭콩·흑콩 유산균 발효-효소 추출액을 각각 1.0%로 하여 혈청이 없는 DMEM 배지로 교체한 실험군과 녹두 발효-효소 추출액이 포함되지 않은 혈청이 없는 DMEM 배지로 교체한 대조군을 24시간 동안 추가로 배양하였다. 배양 후, 세포의 생존율을 비교하기 위하여 MTT(시그마, 미합중국) 솔루션(3mg/㎖)을 첨가하여 세포 생존율을 ELISA READER(Molecular Devices, 미합중국)를 이용하여 570nm에서 흡광도를 측정하고 하기 수학식 2에 따라 섬유아세포 증식률(%)을 계산하였으며, 실험 결과는 하기 표 2에 기재하였다. 이때 양성 대조군으로 TGF-β를 사용하였다.Normal human fibroblasts were inoculated into each well of a 96-well microplate to a concentration of 1 x 10 4 cells and cultured in DMEM medium at 37 ° C for 24 hours. Then, the mung bean, kidney bean and black bean extract of Comparative Preparation Example 1, the fermentation liquid of mung bean, kidney bean and black bean yeast of Comparative Preparation Example 2, the fermentation liquid of mung bean, kidney bean and black liquor of Comparative Preparation Example 3, Enzyme-fermentation broth of Comparative Production Example 5, fermentation broth of mung bean, black bean, black soybean, black soybean, fermentation-lactic acid bacteria of Comparative Production Example 5, fermentation enzyme of mung bean yeast fermentation of Comparative Preparation Example 6, fermentation enzyme of mung bean, Of green mung beans, kidney beans, and black bean fermentation-enzyme extracts were each changed to 1.0%, and the control group was replaced with serum-free DMEM medium containing no mung bean fermentation-enzyme extract for 24 hours Lt; / RTI > After incubation, MTT (Sigma, USA) solution (3 mg / ml) was added to compare the cell survival rate, and the cell viability was measured at 570 nm using an ELISA reader (Molecular Devices, The fibroblast growth rate (%) was calculated, and the experimental results are shown in Table 2 below. At this time, TGF-β was used as a positive control.
상기 표 2의 결과에서도 알 수 있듯이, 본 발명의 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액인 제조예 1 및 2는 녹두·강낭콩·흑콩 추출물(비교 제조예 1)에 비해 그 효과가 훨씬 탁월했음은 물론, 녹두·강낭콩·흑콩의 단순 발효액인 녹두·강낭콩·흑콩 효모 발효액 및 녹두·강낭콩·흑콩 유산균 발효액(비교 제조예 2 및 3) 및 녹두·강낭콩·흑콩 추출물을 효소 처리 후 발효시킨 녹두·강낭콩·흑콩 효소-발효액(비교 제조예 4 및 5)에 비해서도 세포 생성 촉진 효과가 우수하였다. 또한, 녹두 효모 발효-효소 추출액(비교 제조예 6)보다도 세포 생성 촉진 효과가 상대적으로 우수하였다. 게다가 양성 대조군인 TGF-β 만큼 우수한 세포 생성 증가율을 보임을 알 수 있었다.
As can be seen from the results in Table 2, the production examples 1 and 2 of the mung bean, kidney bean and black bean fermentation-enzyme extract of the present invention were far superior to mung bean, kidney bean and black bean extract (Comparative Production Example 1) Of course, mung beans, kidney beans, black bean yeast fermentation broth, mung bean, kidney beans, black bean fermentation broth (Comparative Preparation Examples 2 and 3) and mung bean, kidney bean fermented after enzyme treatment with mung bean, kidney bean, The cell growth promoting effect was superior to that of the black soybean enzyme-fermentation broth (Comparative Production Examples 4 and 5). In addition, the cell growth promoting effect was relatively better than that of the fermentation-enzyme extract of mung bean yeast (Comparative Preparation Example 6). In addition, it was found that the cell growth rate was better than that of the positive control TGF-β.
실험예 3: 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액의 락트산에 의한 세포자극 완화 효과 시험Experimental Example 3: Mung bean, kidney bean and black bean fermentation - Effect of enzyme extract on lactic acid-induced cell stimulation
인간 피부 세포인 섬유아세포(한국 세포주 은행, 대한민국)를 T-75 플라스크(Falcon, 미합중국)에서 80% 정도 성장할 때까지 배양하였다. 이것을 다시 96-웰 플레이트(Falcon, 미합중국)에 3×104 cells/well이 되게 옮겨 24시간 동안 배양하였다. 배양 후 현미경을 통해 세포가 완전히 부착되어 잘 자라는지 여부를 확인하고 피부세포 자극원으로 락트산을 이용하여 실험을 진행하였다. 이때 락트산은 0.2%를 사용하였다. 즉, 96-웰의 각각에 0.2% 락트산이 함유된 DMEM(시그마, 미합중국) 배지 및 락트산 무첨가 DMEM 배지를 200㎕씩 첨가하고, 비교 제조예 1 내지 6과 제조예 1 및 2를 각각 1.0 %(w/w)로 조절하여 첨가하였다. 이때 락트산, 녹두·강낭콩·흑콩 발효액 및 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액을 모두 첨가하지 않은 것을 대조군으로 하였고, 락트산만 첨가한 것을 비교군으로 하였다. 시험물질을 첨가하고 12시간 경과 후 세포의 생존율을 비교하기 위하여 MTT(시그마, 미합중국) 솔루션(3mg/㎖)을 첨가하여 세포 생존율을 ELISA READER(Molecular Devices, 미합중국)를 이용하여 570nm에서 흡광도를 측정하고 하기 수학식 3에 따라 세포 생존율(%)을 계산하였으며, 실험 결과는 하기 표 3에 기재하였다.Human fibroblasts (Korean Cell Line Bank, Korea) were cultured in T-75 flasks (Falcon, USA) until they grew to about 80%. The cells were transferred to a 96-well plate (Falcon, USA) at 3 × 10 4 cells / well and cultured for 24 hours. After culturing, cells were completely adhered to each other through a microscope to confirm whether they were growing well. Experiments were conducted using lactic acid as a skin cell stimulating agent. At this time, 0.2% of lactic acid was used. That is, 200 쨉 l of DMEM (Sigma, USA) medium containing 0.2% lactic acid and DMEM medium containing no lactic acid were added to each of the 96-wells, and Comparative Preparation Examples 1 to 6 and Preparation Examples 1 and 2 were added to 1.0% w / w). At this time, lactic acid, mung bean, kidney bean, black rice fermentation liquid, and mung bean, kidney bean, black rice fermentation - enzyme extract were not added as a control group. MTT (Sigma, USA) solution (3 mg / ml) was added to compare cell survival rates after 12 hours of addition of the test substance, and the cell viability was measured at 570 nm using an ELISA reader (Molecular Devices, And cell viability (%) was calculated according to the following equation (3). The experimental results are shown in Table 3 below.
상기 표 3의 결과를 통해 알 수 있듯이, 락트산을 처리 및 무처리한 후 본 발명의 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액을 처리한 제조예 1-2의 실험결과는, 녹두·강낭콩·흑콩 추출물을 처리한 비교 제조예 1의 경우에 비해 락트산 처리에 의한 세포 독성을 완화해 주어 세포 생존율을 크게 증가시키는 효과가 탁월했음은 물론, 락트산 처리 및 무처리 후 녹두·강낭콩·흑콩의 단순 발효액인 녹두·강낭콩·흑콩 효모 발효액 및 녹두·강낭콩·흑콩 유산균 발효액을 처리한 비교 제조예 2 과 3 및 녹두·강낭콩·흑콩 추출물을 효소 처리 후 발효시킨 비교 제조예 4 와 5의 경우에 비해서도 세포 생존율이 훨씬 뛰어나, 세포자극 완화 효과가 뛰어남을 알 수 있었다. 녹두 효모 발효-효소 추출액 단일로 사용한 경우(비교 제조예 6)와 비교하는 경우 세포자극 완화 효과가 비슷하거나 약간 더 우수한 것으로 나타났다.
As can be seen from the results of Table 3 above, the experimental results of Production Example 1-2 in which lactic acid was treated and untreated and the present invention was treated with the extract of mung bean, kidney bean, and black bean fermentation-enzyme extract showed that mung bean, kidney bean, Compared to the case of Comparative Production Example 1 in which the cells were treated with lactic acid, the cell viability was greatly alleviated by the treatment with lactic acid and the cell survival rate was remarkably increased. Compared with Comparative Production Examples 2 and 3 in which fermented beans, black beans, black soybean fermentation broth, mung bean, black bean and black bean fermentation broth were treated, and Comparative Production Examples 4 and 5 in which the mung bean, kidney bean and black bean extract were fermented after enzyme treatment, And it was found that the cell stimulation relaxation effect was excellent. When compared with the case of using the mung bean yeast fermentation-enzyme extract singly (Comparative Production Example 6), the cell stimulation relaxation effect was similar or slightly superior.
이하 상기한 실험예의 결과를 근거로 하여 본 발명의 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액을 포함하는 화장료를 조성하여 제시한다. 그러나 본 발명의 조성물을 하기의 처방 예들로 한정하고자 하는 것은 아니다. 하기 처방 예에 사용한 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액은 녹두·강낭콩·흑콩 효모 발효 추출액이나 녹두·강낭콩·흑콩 유산균 발효 추출액 중 어느 것을 사용하여도 무방하다.
Based on the results of the above-described experimental examples, a cosmetic comprising the extract of the mung bean, kidney bean and black bean fermentation enzyme of the present invention is prepared and presented. However, the composition of the present invention is not intended to be limited to the following formulations. The mung bean, kidney bean, and black bean fermentation-enzyme extracts used in the following prescription examples may be any of mung bean, kidney bean, black bean yeast fermentation extract, or mung bean, kidney bean, or black bean lactic acid fermentation extract.
처방예 1: 유연화장수Prescription Example 1: Softening Longevity
녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액을 함유한 화장료 중 유연화장수의 처방예는 다음과 같다.Mung bean, kidney bean, black bean fermentation - Examples of prescription of softening lotion in cosmetics containing enzyme extract are as follows.
처방예 2: 영양화장수Prescription Example 2: Nourishing Lotion
녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액을 함유한 화장료중 영양화장수의 처방예는 다음과 같다.Mung bean, kidney bean, black bean fermentation - Examples of prescription of nutritional lotion among cosmetics containing enzyme extract are as follows.
처방예Prescription example 3: 영양크림 3: Nourishing cream
녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액을 함유한 화장료 중 영양크림의 처방예는 다음과 같다.Mung bean, kidney bean, black bean fermentation - Examples of prescription of nutritional cream among cosmetics containing enzyme extract are as follows.
실험예Experimental Example 4: 녹두·강낭콩· 4: Green beans, kidney beans 흑콩Black 발효-효소 추출액을 함유한 Fermentation - Containing enzyme extracts 화장료의Cosmetic 주름 개선 효과 평가 Wrinkle improvement effect evaluation
본 발명의 화장료의 주름 개선 효과를 실제 사용 테스트를 통하여 평가하였다. 제조예 2의 녹두·강낭콩·흑콩 유산균 발효-효소 추출액을 3%(w/w)를 함유하고 있는 처방예 3의 영양 크림과 처방예 3에서 녹두·강낭콩·흑콩 유산균 발효-효소 추출액을 비교 제조예 5의 녹두·강낭콩·흑콩 효소-유산균 발효액으로 대체한 크림을 비교 처방예 및 정제수로 대체한 크림을 대조예로 사용하였다. 90명의 여성을 대상으로 얼굴 양쪽면을 사용하여 6주 후의 주름 개선 효과를 육안으로 평가하여 주름 개선 정도를 확인하였다. 이 평가를 토대로 한 주름 개선 효과 결과는 하기의 표 7에 나타내었다.The wrinkle-improving effect of the cosmetic of the present invention was evaluated through practical use tests. Fermentation of mung bean, kidney bean and black bean fermentation-enzyme extract of Preparation Example 2 and preparation of Comparative Example 3 of Preparation Example 3, which contained 3% (w / w) The cream of Example 5, which was replaced with a fermented liquid of mungbean, kidney bean, black soybean, and lactobacillus, was used as a control. In 90 women, the wrinkle improvement effect after 6 weeks was visually evaluated by using both sides of the face. The results of wrinkle improvement based on this evaluation are shown in Table 7 below.
상기 표 7의 실험 결과에 의하면, 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액을 함유한 본 발명의 처방예 3의 크림 화장료는 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액 대신 비교 제조예 5의 녹두·강낭콩·흑콩 효소-유산균 발효액을 함유하는 비교 처방예 및 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액 대신 정제수를 함유하는 대조예에 비하여 아주 높은 주름개선 효과를 보여주었으며, 본 화장료를 피부에 도포한 대부분의 피검자들에게서 피부 자극을 관찰할 수 없었다.
According to the results shown in Table 7, the cream cosmetics of Formulation Example 3 of the present invention containing the mung bean, kidney bean, and black bean fermentation-enzyme extracts were prepared in the same manner as in Comparative Preparation Example 5, except for the mung bean, kidney bean, Compared to the control formulation containing the fermentation broth of black soybean enzyme-lactic acid bacteria and the control solution containing purified water instead of the fermentation enzyme extract of mung bean, black bean and black soybean, and showed a remarkably high wrinkle-reducing effect, and most of the subjects The skin irritation could not be observed.
실험예Experimental Example 5: 녹두·강낭콩· 5: Green beans, kidney beans 흑콩Black 발효-효소 추출액을 함유한 Fermentation - Containing enzyme extracts 화장료의Cosmetic 보습 평가 Moisture evaluation
본 발명의 화장료의 보습 효과를 실제 사용 테스트를 통하여 평가하였다. 제조예 2의 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액을 3%(w/w)를 함유하고 있는 처방예 3의 영양 크림과 처방예 3에서 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액을 비교 제조예 5의 녹두·강낭콩·흑콩 효소-유산균 발효액으로 대체한 크림을 비교 처방예 및 정제수로 대체한 크림을 대조예로 사용하였다. 30명의 여성을 대상으로 상박에 각각의 제품을 적용할 수 있도록 정 사각형의 제품 적용 부위를 만든 후 2주간 도포해주면서 피부 보습량 변화를 스킨 코네오메타(skin corneometer; C+K courage, 독일)를 이용하여 측정한 후 10% 이상 개선된 피검자의 숫자를 하기 표 8에 나타내었으며, 피부 보습 개선율을 계산하였다.The moisturizing effect of the cosmetic of the present invention was evaluated through practical use tests. The nutritional cream of Preparation Example 3 containing 3% (w / w) of the mung bean, green bean and black bean fermentation-enzyme extracts of Preparation Example 2 and Comparative Example 5 Of mung bean, kidney bean, black bean enzyme - lactic acid fermentation broth was used as a control. A 30-year-old woman applied a square-shaped product to the upper bamboo to apply each product. After applying for 2 weeks, the skin moisturizing amount was changed to a skin corneometer (C + K courage, Germany) The number of subjects improved by more than 10% after the measurement was shown in Table 8, and the skin moisturizing improvement ratio was calculated.
상기 표 8의 실험 결과에서도 알 수 있듯이, 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액을 함유한 본 발명의 처방예 3의 크림 화장료는 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액 대신 비교 제조예 5의 녹두·강낭콩·흑콩 효소-유산균 발효액을 함유하는 비교 처방예 및 녹두·강낭콩·흑콩 발효-효소 추출액 대신 정제수를 함유하는 대조예에 비하여 아주 높은 피부 보습 효과를 보여주었다.As can be seen from the results of the experiment in Table 8, the cream cosmetic preparation of Formulation Example 3 of the present invention containing the extract of mung bean, kidney bean and black bean fermentation-enzyme was prepared in the same manner as in Comparative Preparation Example 5, except for the mung bean, kidney bean, And showed a very high skin moisturizing effect compared with the control formulation containing purified water in place of the comparative prescription example containing the fermented liquid of kidney bean, black bean, and lactic acid bacteria, and the fermented enzyme extract of mung bean, black bean, and black bean.
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
While the present invention has been particularly shown and described with reference to exemplary embodiments thereof, it is to be understood that the same is by way of illustration and example only and is not to be construed as limiting the scope of the present invention. It is therefore intended that the scope of the invention be defined by the claims appended hereto and their equivalents.
Claims (9)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020150006532A KR20160087507A (en) | 2015-01-14 | 2015-01-14 | cosmetic composition containing Phaseolus Radiatus Seed, Phaseolus Vulgaris (Kidney Bean) Seed and Black Soybean extracts by fermentation and enzyme treatment |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020150006532A KR20160087507A (en) | 2015-01-14 | 2015-01-14 | cosmetic composition containing Phaseolus Radiatus Seed, Phaseolus Vulgaris (Kidney Bean) Seed and Black Soybean extracts by fermentation and enzyme treatment |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20160087507A true KR20160087507A (en) | 2016-07-22 |
Family
ID=56681161
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020150006532A KR20160087507A (en) | 2015-01-14 | 2015-01-14 | cosmetic composition containing Phaseolus Radiatus Seed, Phaseolus Vulgaris (Kidney Bean) Seed and Black Soybean extracts by fermentation and enzyme treatment |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR20160087507A (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20200017700A (en) * | 2018-08-09 | 2020-02-19 | 김형길 | A purple cosmetic composition for skin smoothing comprising an active ingredient of a plant complex extract |
| CN111991280A (en) * | 2020-07-15 | 2020-11-27 | 杨庆瑞 | Anti-allergy bean fermentation extract, product and preparation method thereof |
-
2015
- 2015-01-14 KR KR1020150006532A patent/KR20160087507A/en not_active IP Right Cessation
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20200017700A (en) * | 2018-08-09 | 2020-02-19 | 김형길 | A purple cosmetic composition for skin smoothing comprising an active ingredient of a plant complex extract |
| CN111991280A (en) * | 2020-07-15 | 2020-11-27 | 杨庆瑞 | Anti-allergy bean fermentation extract, product and preparation method thereof |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP2313082B1 (en) | Cosmetic composition for anti-aging of the skin comprising phaseolus radiatus seed extracts by fermentation and enzyme treatment | |
| KR20070055373A (en) | Composition for improving an atopy | |
| KR101303295B1 (en) | The cosmetic composition for promoting cell growth and recovery of distrupted skin containing the extracts of fermented Mistletoe, fermented Imperata cylindrica and fermented soybean | |
| KR101768026B1 (en) | Cosmetic Composition for Improving Skin Wrinkle Comprising the Fermented Extract of Morinda citrifolia as Active Ingredient | |
| KR101040508B1 (en) | Cosmetic Composition for Anti-aging and moisturizing of the Skin Comprising Phaseolus radiatus seed extracts by fermentation and enzyme treatment | |
| KR101914345B1 (en) | A moisturizing and anti-wrinkle cosmetic composition comprising fermented soybean, fermented rice, fermented potato, fermented ginseng and fermented adlay extract and preparation method of thereof | |
| KR101855206B1 (en) | Cosmetic Composition Comprising the Fermented Extract of Panax ginseng | |
| KR101533067B1 (en) | Composition for improving skin wrinkle and skin moisturing comprising Soybean fermented by Pichia jadinii and Aureobasidium pullulans bacteria | |
| KR102010235B1 (en) | Cosmetic composition having skin whitening effect | |
| KR20190045455A (en) | Cosmetic composition comprising Phragmites Communis Ferment Extract | |
| KR102119524B1 (en) | Cosmetic composition comprising the extract of fermented Sprout leaf/stem ginseng for skin anti-wrinkle effect and producing method thereof | |
| KR102247965B1 (en) | Cosmetic Composition for Whitening of the Skin Comprising the Extract of Fermented Zea Mays Silk | |
| KR102032116B1 (en) | Method for preparing tea fermented materials and cosmetic composition comprising the same | |
| KR20160087507A (en) | cosmetic composition containing Phaseolus Radiatus Seed, Phaseolus Vulgaris (Kidney Bean) Seed and Black Soybean extracts by fermentation and enzyme treatment | |
| KR20110105243A (en) | Cosmetic composition for the skin whitening comprising phaseolus radiatus seed extracts by fermentation and enzyme treatment | |
| KR20120119520A (en) | Composition for skin external application containing sap of bamboo fermented extracts using bacteria | |
| KR20120007170A (en) | Method for fermenting broussonetia plant or the extract thereof, the fermented extracts thereby and the cosmetic composition containing the same | |
| KR101994618B1 (en) | A composition for skin smoothing comprising an extract of fermented ponciri fructus | |
| CN113631227A (en) | Antiaging agent, antioxidant, antiinflammatory agent, whitening agent, and cosmetic | |
| KR20090081721A (en) | Cosmetic Composition for Protecting Skin Wrinkle Comprising the Fermented Extract of Phaselous radiatus | |
| KR101344826B1 (en) | Cosmetic Composition for Anti-irritation of the Skin Comprising Phaseolus radiatus seed extracts by fermentation and enzyme treatment | |
| KR20150054094A (en) | Improvement of dandruff preventing hair loss and hair composition for hair growth | |
| KR102154140B1 (en) | Composition comprising tulip leaf extract, amorphophallus paeoniifolius hydrolysis extract and parrot ferment extract | |
| KR20110117471A (en) | Cosmetic composition for the skin whitening comprising the fermented extract of mallotus japonicus | |
| KR102004149B1 (en) | Composition for improving skin beauty comprising extract of fermented rice fermented with Aspergillus cristatus strain |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| AMND | Amendment | ||
| E601 | Decision to refuse application | ||
| AMND | Amendment | ||
| X601 | Decision of rejection after re-examination |