KR20160047169A - Composition for reducing methane in ruminants and feed comprising the same - Google Patents

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Abstract

The present invention relates to a composition for reducing methane in a ruminant by including an extract of a lactic acid bacteria fermented medical plant to reduce generation of methane, and a feed composition including the same. According to the present invention, productivity of the ruminant may be improved through an effect of reducing the methane in a rumen by using the extract of the lactic acid bacteria fermented medical plant, and also, in terms of environmental aspect, an environmental pollution source may be prevented from being discharged. The composition for reducing the methane in the ruminant includes one or more lactic acid bacteria fermented extracts of any one selected from a group comprising Allium hookeri, mulberry leaves, and bellflower.

Description

반추동물의 메탄 저감용 조성물 및 이를 포함하는 사료 조성물{Composition for reducing methane in ruminants and feed comprising the same} TECHNICAL FIELD The present invention relates to a composition for reducing methane in ruminants and a feed composition comprising the same,

본 발명은 반추동물의 메탄 저감용 조성물 및 이를 포함하는 사료 조성물에 관한 것으로서, 좀더 상세하게는 유산균 발효 약용식물의 추출물을 포함함으로써, 메탄의 생성량을 저감시킬 수 있는 반추동물의 메탄 저감용 조성물 및 이를 포함하는 사료 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a composition for reducing methane in a ruminant and a feed composition containing the same, and more particularly, to a composition for reducing methane in a ruminant which can reduce an amount of methane produced by containing an extract of a lactic acid fermented medicinal plant, And a feed composition comprising the same.

우리나라 축산업에 있어서, 항생제는 가축의 생산성 및 성장 촉진을 위해 사용되어 왔으며, 모넨신과 같은 이오노포(ionophore)계 항생제, 클로로포름 및 할로겐 화합물 등이 대표적인 항생물질로 이용되어 왔다. In Korea's livestock industry, antibiotics have been used to promote livestock productivity and growth, and ionophore antibiotics such as monensin, chloroform and halogen compounds have been used as representative antibiotics.

그러나, 이와 같은 항생제나 화학 물질의 문제점이 발생하여 사용이 제한적인 실정이다,However, the use of such antibiotics or chemicals is limited due to problems,

한편, 가축의 생산성 향상 및 메탄 저감을 위한 항생제의 남용으로 항생제 내성을 유발하고 있는데 (Canadian Journal of Animal Science, 83:537-637 (2003)), 장기적 대사시험을 통해 모넨신의 메탄 저감 및 생산성 향상 효과가 일관적이지 않아, 실제 사양 환경에서의 적용성에 한계가 있을 것이라는 연구 결과가 보고된 바 있다 (jOURNAL OF aNIMAL sCIENCE, 62:1737-1741 (1986)).On the other hand, antibiotic resistance has been induced by abuse of antibiotics to improve productivity of livestock and to reduce methane (Canadian Journal of Animal Science, 83: 537-637 (2003)), Studies have been reported that the effect is not consistent and there is a limit to the applicability in the actual specification environment (jOURNAL OF aNIMAL sCIENCE, 62: 1737-1741 (1986)).

또한, 장생 도라지 추출물을 포함하는 허혈성 뇌혈관 질환의 예방 또는 개선용 조성물 (한국공개특허 제10-2009-0067490호), 뽕잎 추출물을 포함하는 숙취 예방 또는 해소용 조성물 (한국특허등록 제10-1247927호)과 같은 도라지 추출물 또는 뽕잎 추출물을 포함하는 조성물이 개시되어 있으나, 상기 종래기술들은 반추동물의 메탄 저감용 조성물과는 그 용도가 전혀 상이하다. Also disclosed is a composition for preventing or ameliorating ischemic cerebrovascular disease comprising Jang Saeng Doraji extract (Korean Patent Laid-Open No. 10-2009-0067490), a composition for prevention or elimination of hangover including mulberry leaf extract (Korean Patent Registration No. 10-1247927 A mulberry leaf extract or a mulberry leaf extract. However, the above-mentioned prior arts are completely different from the composition for reducing methane in ruminants.

따라서, 최근 반추 가축의 항생제 및 화학 물질의 대체를 위하여, 보다 안전한 물질인 천연물에서 유래된 식물 추출물에 대한 체계적인 연구가 절실히 요구되고 있다.
Therefore, in order to replace antibiotics and chemicals in ruminant livestock, systematic studies on plant extracts derived from natural materials, which are safer substances, are urgently required.

본 발명은 상기와 같은 종래기술의 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로서, 본 발명의 목적은 유산균 발효 약용식물의 추출물을 포함함으로써, 휘발성 지방산 및 건물 소화율에는 영향을 미치지 않으면서, 메탄의 생성량을 저감시킬 수 있는 반추동물의 메탄 저감용 조성물을 제공하는 것이다. Disclosure of Invention Technical Problem [8] Accordingly, the present invention has been made keeping in mind the above problems occurring in the prior art, and it is an object of the present invention to provide an extract of a lactic acid fermented medicinal plant, And to provide a composition for reducing methane in ruminants.

본 발명은 상기와 같은 목적을 달성하기 위하여, 삼채, 뽕잎 및 도라지로 이루어진 군에서 선택되는 어느 1종의 유산균 발효 추출물을 1종 이상 포함하는 반추동물의 메탄 저감용 조성물을 제공한다.In order to accomplish the above object, the present invention provides a composition for reducing methane in a ruminant animal, which comprises at least one fermented extract of lactic acid bacteria selected from the group consisting of trifoliates, mulberry leaves and bellflower.

또한, 본 발명은 상기 반추동물의 메탄 저감용 조성물을 포함하는 사료 조성물을 제공한다.The present invention also provides a feed composition comprising the composition for reducing methane of the ruminant.

본 발명에 의한 반추동물의 메탄 저감용 조성물은 반추위 메탄 저감 효과를 통하여, 반추위 동물의 생산성을 향상시킬 수 있을 뿐만 아니라, 환경적인 측면에서 환경 오염원의 배출을 방지할 수 있는 효과를 갖는다.
The composition for reducing methane of ruminant according to the present invention not only improves the productivity of rumen animal through the effect of reducing rumen methane but also has an effect of preventing the emission of environmental pollutants in terms of environment.

본 발명은 상기와 같은 목적을 달성하기 위하여, 삼채, 뽕잎 및 도라지로 이루어진 군에서 선택되는 어느 1종의 유산균 발효 추출물을 1종 이상 포함하는 반추동물의 메탄 저감용 조성물을 제공한다.In order to accomplish the above object, the present invention provides a composition for reducing methane in a ruminant animal, which comprises at least one fermented extract of lactic acid bacteria selected from the group consisting of trifoliates, mulberry leaves and bellflower.

상기 삼채((Allium hookeri)는 단맛, 쓴맛, 매운맛, 세 가지 맛이 난다고 해서 붙여진 이름으로서, 미얀마 북부 히말라야 자락 1,400M 이상 고산 지대에서 자생하는 약초이다. The Allium hookeri ) is a name derived from sweet, bitter, spicy, and three flavors. It is a herb that grows wild in the high mountains of more than 1,400M in the northern Himalayan hemisphere of Myanmar.

상기 삼채는 국내에 들어온 지 불과 2~3년 밖에 되지 않았지만, 각종 성인병에 효능이 있다고 소문나며, 건강 식품으로 각광받고 있다.Though it has been only two or three years since its arrival in Korea, it has been said that it has efficacy in various adult diseases and is attracting attention as a health food.

상기 뽕잎은 최근 들어 우리나라를 비롯한 중국, 일본 등에서 성인병 예방 및 치료효과가 밝혀지면서 기능성 식품의 재료로서 각광을 받고 있다. Recently, the mulberry leaf has recently been spotlighted as a material for functional foods as it has been found out the effects of preventing and treating adult diseases in Korea, China, and Japan.

이러한 뽕나무(Morus alba L.)는 전통적으로 뽕잎뿐만 아니라, 뿌리, 글피, 어린가지, 글피의 액즙, 잎의 흰 액즙 및 열매와 같은 부산물이 사용되고 뽕잎, 상백피, 오디의 생리 활성은 이미 과학적으로 밝혀졌다. Such a mulberry (Morus alba L.) has traditionally used not only mulberry leaves but also byproducts such as roots, grapes, juices, goby juice, white juice and fruits of leaves, and the physiological activities of mulberry leaves, lost.

상기 뽕잎에는 25종의 아미노산이 함유되어 있으며, 알라닌, 아스파르트산, 글루타민산의 함량이 많아서, 숙취를 없애주는 것으로 알려져 있다. 또한 세린과 타이로신이 함유되어 있어, 뇌의 혈액 순환과 노인성 치매를 예방해 주며, 녹차와 비교해 볼 때 각종 미네랄 중에서 뽕잎이 칼슘은 6배, 철분은 2배, 칼륨은 1.4배 높은 것으로 알려져 있다. The mulberry leaves contain 25 kinds of amino acids, and it is known that the content of alanine, aspartic acid, and glutamic acid is high, thereby eliminating hangover. It also contains serine and tyrosine to prevent brain circulation and senile dementia. Compared to green tea, mulberry leaves are known to have 6 times higher calcium, 2 times more iron and 1.4 times higher potassium than mature tea.

상기 도라지(Platycodon grandiflorum)는 길경, 도랏, 길경채, 백약,질경, 산도라지라고도 하는데, 한국·일본·중국 등지의 산과 들에 분포되어 있으며, 뿌리는 굵고 줄기는 곧게 자라며, 자르면 흰색 즙액이 나온다. The bellflower (Platycodon grandiflorum ) is also known as Gakyung, Dorat, Gil-gyeonggi, white pheasant, vinegary, and mountain bellflower. It is distributed in the mountains and branches of Korea, Japan, China and others. The root is thick and the stem grows straight.

상기 도라지의 주용 성분은 사포닌이고, 생약의 길경(桔梗)은 뿌리의 껍질을 벗기거나 그대로 말린 것이며, 한방에서는 치열(治熱), 폐열, 편도염, 설사 등에 사용한다. The main ingredient of the bellflower is saponin, and herbaceous ginseng is peeled off or dried as it is, and it is used for heat treatment, waste heat, tonsillitis, and diarrhea in herbal medicine.

본 발명에 의한 반추동물의 메탄 저감용 조성물에 있어서, 상기 유산균 발효 추출물은 상기 삼채, 뽕잎 및 도라지로 이루어진 군에서 선택되는 어느 1종을 유산균으로 발효하여 얻은 발효액의 추출물일 수 있다. In the composition for reducing methane of ruminant according to the present invention, the lactic acid fermentation extract may be an extract of a fermentation broth obtained by fermenting any one species selected from the group consisting of the above-mentioned three kinds of mulberry leaves and bellflower with lactic acid bacteria.

본 발명에 의한 반추동물의 메탄 저감용 조성물에 있어서, 상기 유산균은 락토바실러스(Lactobacillus) 속, 락토코커스(Lactococcus) 속, 류코노스톡(Leukonostoc) 속, 페디오코커스(Pdiococcus)속 및 비피도박테리아(Bifidobacteria) 속으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.In the composition for reducing methane of a ruminant according to the present invention, the lactic acid bacterium is selected from the group consisting of Lactobacillus , Lactococcus , Leukonostoc , Pdiococcus and Bifidobacterium, Bifidobacteria . ≪ / RTI >

본 발명에 의한 반추동물의 메탄 저감용 조성물에 있어서, 상기 유산균은 락토바실러스 커바투스(Lactobacillus curvatus) 및 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum)으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 또는 2종일 수 있다.In the composition for reducing methane in a ruminant according to the present invention, the lactic acid bacterium is selected from the group consisting of Lactobacillus curvatus and Lactobacillus < RTI ID = 0.0 > plantarum ), and the like.

본 발명에 의한 반추동물의 메탄 저감용 조성물에 있어서, 상기 추출물은 유기용매 추출물, 열수 추출물일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.      In the composition for reducing methane in ruminant according to the present invention, the extract may be an organic solvent extract or a hot-water extract, but is not limited thereto.

본 발명에 의한 반추동물의 메탄 저감용 조성물에 있어서, 상기 추출물은 에탄올 추출물일 수 있다.      In the composition for reducing methane of ruminant according to the present invention, the extract may be an ethanol extract.

본 발명에 의한 반추동물의 메탄 저감용 조성물의 상기 삼채의 유산균 발효 추출물에 있어서, 상기 유산균은 락토바실러스 커바투스(Lactobacillus curvatus) 및 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum)으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.In the fermented extract of Lactobacillus of the present invention for the methane-reducing composition for ruminant according to the present invention, the lactic acid bacterium is Lactobacillus curvatus) and Lactobacillus Planta room (Lactobacillus plantarum), but to be at least one selected from the group consisting of, but is not limited to such.

본 발명에 의한 반추동물의 메탄 저감용 조성물의 상기 뽕잎의 유산균 발효 추출물에 있어서, 상기 유산균은 락토바실러스 커바투스(Lactobacillus curvatus)일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. In the fermented extract of lactic acid bacteria of the mulberry leaf of the composition for reducing methane of ruminant according to the present invention, the lactic acid bacterium may be Lactobacillus curvatus , but is not limited thereto.

본 발명에 의한 반추동물의 메탄 저감용 조성물의 상기 도라지의 유산균 발효 추출물에 있어서, 상기 유산균은 락토바실러스 커바투스(Lactobacillus curvatus) 및 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum)으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. The lactic acid bacterium according to the present invention is a fermented extract of Lactobacillus of the present invention for the reduction of methane in a ruminant animal, wherein the lactic acid bacterium is selected from the group consisting of Lactobacillus curvatus and Lactobacillus plantarum But is not limited thereto.

본 발명에 의한 반추동물의 메탄 저감용 조성물에 있어서, 상기 유산균 발효 추출물은 상기 조성물의 전체 중량 대비, 0.001~100 중량%의 범위 내에서, 필요에 따라 다양하게 포함될 수 있다.In the composition for reducing methane of ruminant according to the present invention, the fermented lactic acid bacterium extract may be variously included in the range of 0.001 to 100% by weight based on the total weight of the composition.

본 발명에 의한 반추동물의 메탄 저감용 조성물에 있어서, 상기 반추동물은 소, 양, 염소 및 사슴으로 이루어진 군에서 선택될 수 있다.In the composition for reducing methane of ruminant according to the present invention, the ruminant may be selected from the group consisting of cattle, sheep, goats and deer.

또한, 본 발명은 상기 반추동물의 메탄 저감용 조성물을 포함하는 사료 조성물을 제공한다.The present invention also provides a feed composition comprising the composition for reducing methane of the ruminant.

본 발명의 상기 사료 조성물은 상기 메탄 저감용 조성물 및 기타 공지의 사료 조성물에 첨가되는 성분을 포함할 수 있고, 상기 사료 조성물은 공지의 방법에 의해 제조하는 것으로 족하므로, 이에 대한 상세한 설명은 생략하기로 한다.The feed composition of the present invention may contain components added to the methane-reducing composition and other known feed compositions, and the feed composition may be prepared by a known method, so that a detailed description thereof will be omitted. .

이하, 본 발명의 내용을 하기 실시예를 통하여 더욱 상세히 설명하지만, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예에만 한정되는 것은 아니고, 이와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 포함한다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to the following examples. However, the scope of the present invention is not limited to the following examples, but includes modifications of equivalent technical ideas.

<실시예 1>&Lt; Example 1 >

1. 연구배경1. Research Background

본 연구는 발효 약용식물을 선발하여 반추위내 메탄 저감 효과를 확인하기 위해 수행하였다. This study was conducted to identify effects of methane reduction in rumen by selecting fermented medicinal plants.

선발된 발효 약용식물 추출물 3종(삼채, 뽕잎, 도라지)을 요인으로 하여 각 요인들의 주효과 및 상호작용을 조사하여 최적의 혼합비율을 도출하기 위해, in vitro 반추위 발효 시험을 이용하여 실험을 수행하였다.Experiments were conducted using the in vitro rumen fermentation test to investigate the main effects and interactions of the three selected fermented medicinal plant extracts (triple, mulberry leaf, bellflower) Respectively.

2. 재료 및 방법2. Materials and Methods

1). 발효 조건One). Fermentation condition

Lactobacillus curvatusLactobacillus plantarum은 MRS 액체배지(Difco, USA)를 이용하여 30℃에서 150 rpm으로 교반하였고, 24 시간 동안 배양하였다. Lactobacillus curvatus and Lactobacillus Plantarum was grown in MRS liquid medium (Difco, USA) at 30 ° C at 150 rpm and cultured for 24 hours.

약용식물은 가정용 분쇄기를 이용하여 분쇄하였으며, 3g을 칭량하여 30 mL의 MRS 액체배지가 들어있는 Erlenmeyer 플라스크에 분주하고 오토클레이브를 이용하여 멸균하였다(121℃, 15 min). The medicinal plants were pulverized using a household grinder, weighed 3 g, placed in a Erlenmeyer flask containing 30 mL of MRS liquid medium, and autoclaved (121 ° C, 15 min).

앞서 준비한 균주를 멸균이 완료된 플라스크에 접종 한 후, 30℃에서 48 시간 동안 배양하였다. 배양이 완료된 배양액 중 2 mL을 분주하여 생균수 측정에 이용하고 나머지 배양액은 알루미늄 접시에 덜어낸 후, 24 시간 동안 60℃의 온도로 건조 오븐(drying oven)에서 건조하였다.The previously prepared strain was inoculated into a sterilized flask and cultured at 30 DEG C for 48 hours. 2 mL of the cultured medium was used for measurement of viable cell counts, and the remaining culture was taken out on an aluminum plate and dried in a drying oven at a temperature of 60 ° C for 24 hours.

건조가 완료된 배양액은 모터를 이용하여 분쇄하고, 1g을 칭량하여99.9 %(w/v) 에탄올이 들어있는 Erlenmeyer 플라스크에 분주하여 20 시간 동안 추출하였다. The dried culture was pulverized using a motor and 1 g was weighed and dispensed into an Erlenmeyer flask containing 99.9% (w / v) ethanol and extracted for 20 hours.

추출이 완료된 배양액을 화트만 여과지 No.1으로 여과 한 후, 로터리 이배퍼레이터(N-1110, EYELA, Japan)를 이용하여 2 mL로 농축하여 제조한 약용식물 추출물 3종(삼채, 뽕잎, 도라지)을 -20℃의 저온 냉동고에 보관하였다. The extracted culture was filtered with No. 1 filter of Hattman filter paper and then concentrated with 2 mL using a rotary evaporator (N-1110, EYELA, Japan) to obtain three kinds of medicinal plant extracts (three kinds of mulberry leaves, ) Were stored in a cold freezer at -20 占 폚.

2). 2). 공시축Disclosure axis 및 사양관리 And specification management

전라북도 김제 소재의 전라북도 축산위생연구소 한우 시험장에서 반추위 캐눌라 장착 한우 거세우(체중 400 kg ± 30 kg) 2 두를 공시하였으며, invitro 반추위 발효 시험을 위한 위액을 채취하였다. North Jeolla North Jeolla in Livestock Hygiene Institute of the Gimje site bovine rumen cannula were attached material disclosures to steer beef (weight 400 kg ± 30 kg) 2 double, invitro Gastric juice for rumen fermentation test was collected.

공시축은 하루에 2회 오전(08:00)과 오후(17:30)에 볏짚 4kg과 비육전기 배합사료 4kg을 급여하였다. 미네랄 블록 및 물은 자유 섭취하도록 하였다.The announcement axis was fed with 4 kg of rice straw and 4 kg of poultry mix feed twice a day (08:00) and afternoon (17:30). Mineral blocks and water were allowed to eat freely.

3). 시험설계 및 시료준비3). Test design and sample preparation

혼합물 실험의 기본 실험법인 mixture design을 이용하여 실험을 수행하였다. 발효 약용식물 추출물의 3가지 요인을 상기 mixture design을 적용하여 10가지 실험(run)으로 구성하였다(하기 표 1 참조). Experiments were carried out using mixture design, which is the basic experiment of mixture experiment. Three factors of the fermented medicinal plant extract were composed of 10 experiments (see Table 1 below) by applying the above mixture design.

하기 표 1에서 단위는 ㎕이고, Run 7은 삼채 추출물, 뽕잎 추출물 및 도라지 추출물의 비율이 1:1:1이다. In Table 1, the unit is μl, and Run 7 is 1: 1: 1 ratio of tubular extract, mulberry leaf extract, and bellflower extract.

시험의 기질로 사용된 오차드그라스는 2mm 체(sieve)가 장착된 실험실용 그라인더(Cutter mill, ICA MF10.1, Staufen, Germany)를 이용하여 분쇄하였으며, 실험은 24시간 동안 진행되었다. The orchardgrass used as the substrate of the test was pulverized using a laboratory grinder (Cutter mill, ICA MF10.1, Staufen, Germany) equipped with a 2 mm sieve, and the experiment was carried out for 24 hours.

Figure pat00001
Figure pat00001

4). 반추위액 준비4). Ruminant preparation

당일 오전 사료 급여 30분 전 반추위에 장착된 캐뉼라를 통해 채취하여, 채취된 위액은 4겹의 cheese cloth로 여과 후 O2-free CO2가 충진된 2 L 플라스크(39℃)에 헤드 스페이스(head space)가 없도록 하고, 산소의 침입을 차단하여 혐기 조건을 유지하였다. 30 minutes prior to the day of feeding, the rats were harvested through a cannula attached to the rumen. The collected gastric juice was filtered through a 4-ply cheese cloth and placed in a 2 L flask (39 ° C) filled with O 2 -free CO 2 space was not provided, and oxygenation was blocked to maintain anaerobic conditions.

실험 배양개시 30분 전 반추위액을 O2-free CO2로 버블링하여 pH를 6.5로 보정하고 NaHCO3 9.8g, Na2HPO4·2H2O 4.62g, KCl 0.57g, NaCl 0.47g, MgSO4·7H2O 0.12g, CaCl2(CaCl2·2H2O) 4(5.3)g/100mL로 구성된 McDougall’s buffer solution (Trolesen 과 Hanel, 1966)과 반추위액을 4:1로 혼합하여 반추위 접종원(rumen inoculum)으로 사용하였다. 30 minutes before the start of the experiment, the rumen juice was bubbled with O 2 -free CO 2 to adjust the pH to 6.5, and NaHCO 3 Consisting of 9.8g, Na 2 HPO 4 · 2H 2 O 4.62g, KCl 0.57g, NaCl 0.47g, MgSO 4 · 7H 2 O 0.12g, 4 (5.3) g / 100mL CaCl 2 (CaCl 2 · 2H 2 O) McDougall's buffer solution (Trolesen and Hanel, 1966) and rumen inoculum (4: 1) were used as rumen inoculum.

또한, 위액의 희석 및 여과 과정 동안 O2-free CO2를 분사하여 위액이 산소에 노출되지 않도록 혐기 상태를 유지하였으며, Tilley와 Terry (1963)의 방법에 따라 3 반복하여 실시하였다.In addition, O 2 -free CO 2 was injected during gastric juice dilution and filtration to maintain the anaerobic state so that gastric juice was not exposed to oxygen, and it was repeated three times according to the method of Tilley and Terry (1963).

5). 분석항목 및 분석방법5). Analysis items and analysis methods

배양시간별 총 가스 생성량은 실험용 유리 주사기를 이용하여 배양병에 있는 총 가스를 측정하였다. 측정이 완료된 가스는 수소 및 메탄 발생량 측정을 위해 고무 마개(rubber stopper)가 장착된 알루미늄 팩에 포집하였다. The total gas production in each incubation time was measured by using a glass syringe. The measured gas was collected in an aluminum pack equipped with a rubber stopper to measure hydrogen and methane emission.

발효가 종료된 배양병을 개봉한 후 pH 미터(S20 Seven Easy,Mettler-Toledo)를 이용하여 반추위액의 pH를 측정하였다. After the fermentation was completed, the pH of the rumen juice was measured using a pH meter (S20 Seven Easy , Mettler-Toledo).

반추위액의 암모니아태 질소 함량은 Chaney와 Marbach (1962)의 방법에 따라 진행되었으며, 4,000 rpm으로 15분 동안 원심 분리하여 사료 입자가 제거된 반추위액의 상등액 20㎕에 페놀 컬러 시약(phenol color reagent) 1 mL 및 알칼리-하이드로라이트 시약(alkali-hydrorite reagent) 1mL를 완전히 혼합하여 37℃에서 15분간 반응시킨 후, 스펙트로포토미터(Optizen UV2120, Mecasis, Korea)를 이용하여 광학 밀도(optical density) 630nm에서 측정하였다. The ammonia nitrogen content of the rumen juice was determined according to the method of Chaney and Marbach (1962). After centrifugation at 4,000 rpm for 15 minutes, phenol color reagent was added to 20 μl of the rumen juice- And 1 mL of an alkali-hydrorite reagent were mixed thoroughly and reacted at 37 ° C for 15 minutes. Then, an optical density of 630 nm was measured using a spectrophotometer (Optizen UV2120, Mecasis, Korea) Respectively.

휘발성 지방산은 Erwin 등(1961)의 방법에 따라 실시하였다. 사료입자가 제거된 반추위액의 상등액 1 mL에 메타포스폰산(metaphosphoric acid) 200㎕를 첨가하여 30분 동안 정치시킨 후, 13,000 rpm에서 원심분리 한 다음에, Nukol,fused silica capillary column(0.25mm i.d.ⅹ 30m length, SUPELCO, USA)이 장착된 가스 크로마토그래피(HP7890, Agilant, CA. USA)로 분석하였다. 이때, 오븐의 온도는 180℃이고, 인젝터의 온도는 220℃이었으며, 디텍터의 온도는 200℃이었다. Volatile fatty acids were prepared according to the method of Erwin et al. (1961). 200 μl of metaphosphoric acid was added to 1 mL of the supernatant of the ruminal juice from which the feed particles had been removed, and the mixture was allowed to stand for 30 minutes. Then, the mixture was centrifuged at 13,000 rpm and then passed through Nukol , a fused silica capillary column (HP7890, Agilant, CA. USA) equipped with an ultrasonic probe (idda 30m length, SUPELCO, USA). At this time, the temperature of the oven was 180 ° C, the temperature of the injector was 220 ° C, and the temperature of the detector was 200 ° C.

수소 및 메탄발생량은 Carboxen, fused silica capillary column(0.53mm i.d.ⅹ 30m length, SUPELCO, USA)가 장착된 가스 크로마토그래피(HP7890, Agilant, CA. USA)로 분석하였다. 이때, 오븐의 온도는 100℃이고, 인렛(inlet)의 온도는 150℃이었으며, 디텍터의 온도는 150℃이었다. Hydrogen and methane emissions were analyzed by Gas Chromatography (HP7890, Agilant, CA. USA) equipped with Carboxen , fused silica capillary column (0.53 mm id × 30 m length, SUPELCO, USA) At this time, the temperature of the oven was 100 캜, the temperature of the inlet was 150 캜, and the temperature of the detector was 150 캜.

6). 통계분석6). Statistical analysis

본 연구는 SPSS program (Version 18, IBM, NewYork, USA)의 General Linear Model에 따라 처리되었다. 각 시험구간 유의성 검증을 위해 ANOVA (Analysis of variance)를 실시한 후, Duncan's multiple range test를 하였고, 이때 유의 수준은 5% 이었다.This study was conducted according to the General Linear Model of the SPSS program (Version 18, IBM, New York, USA). Analysis of variance (ANOVA) was performed to verify significance of each test section, followed by Duncan's multiple range test. The significance level was 5%.

3. 결과3. Results

1) 삼채(First, AlliumAllium hookerihookeri ))

각기 다른 종균을 이용하여 발효된 삼채의 식물추출물을 이용한 반추위 발효 성상은 하기 표 2와 같다. Table 2 shows the ruminal fermentation phase using the plant extracts of the triplicate fermented using different seed bacterium.

반추위 발효 pH는 배양시간 동안 6.59~6.63 범위 내의 비슷한 생성량을 나타내었다. 또한 전체 처리구의 pH가 반추위 발효 적정 범위에 속하는 것으로 보아, 삼채 추출물의 첨가가 반추위 발효에 부(-)의 영향은 없을 것으로 판단된다.The pH of rumen fermentation showed similar amounts in the range of 6.59 ~ 6.63 during the incubation time. In addition, the pH of total treatments was within the optimum range of rumen fermentation.

반추위 미생물의 성장에 없어서는 안 될 중요한 요소 중의 하나인 암모니아태 질소 생성량은 유의적으로 에탄올이 첨가된 처리구 및 L. plantarum + 삼채가 발효된 처리구에서 높게 나타났으며, 뒤이어 발효되지 않은 삼채 단독 첨가구와 L. curvatus + 삼채가 발효된 처리구에서 높은 발생량을 보였다(p<0.05). Ammonia nitrogen production, one of the most important factors for the growth of rumen microorganisms, was significantly higher in ethanol - treated and L. plantarum + triplicate fermented plants, L. curvatus + Lambs showed high production in fermented treatments (p <0.05).

또한, 마늘 오일(garlic oil) 첨가구와 대조구에서는 가장 낮은 생성량을 나타내었다. 일반적으로, 반추위 내 암모니아태 질소의 적정량은 최소 5~8 mg/100 mL에서 최대 29 mg/100 mL로 알려져 있다(Stiles 등, 1970). Garlic oil and control group showed the lowest production. In general, the optimal amount of ammonia nitrogen in the rumen is known to be at least 5 mg / 100 mL and a maximum of 29 mg / 100 mL (Stiles et al., 1970).

본 연구 결과, 전체 처리구가 반추위 미생물체 단백질 합성에 적합한 생성량을 나타내었으며, 특히 삼채의 균주 발효가 반추위 발효에 긍정적인 영향을 준 것으로 판단된다. The results of this study showed that the total amount of the treatments was suitable for protein synthesis of rumen microbes, and that the fermentation of the rice cultivars in particular had a positive effect on rumen fermentation.

반추위 발효가 적절하게 이루어 진 것으로 판단 할 수 있는 척도로 여겨지는 휘발성 지방산(VFA)에서 총 휘발성 지방산 생성량은 식물 추출물을 첨가한 전체 처리구에서 유의적으로 높게 생성되었다(p<0.05). The total volatile fatty acid production of volatile fatty acids (VFA), which is considered to be a reasonable measure of rumen fermentation, was significantly higher in the total treatments with plant extracts (p <0.05).

반대로, 에탄올을 첨가한 처리구의 총 휘발성 지방산 생성량이 유의적으로 가장 낮게 조사되었다(p<0.05). Conversely, the total volatile fatty acid production of ethanol treated group was significantly lower than the control group (p <0.05).

아세테이트(acetate)는 삼채 단독 첨가구와 L. plantarum + 삼채발효 처리구에서 유의적으로 높았으며, 대조구와 에탄올 첨가구가 가장 낮게 조사되었다(p<0.05). Acetate was significantly higher in triplicate and L. plantarum + triplicate fermentation treatments than the control and ethanol added groups (p <0.05).

프로피오네이트(propionate)는 삼채 추출물이 첨가된 처리구에서 전반적으로 높게 나타났으며, 에탄올 첨가구에서 가장 낮은 생성량을 나타내었다. Propionate was found to be high in all treatments with tiller extract and lowest in ethanol added.

아세테이트와 프로피오네이트의 비율인 A/P ratio는 2:1 이상이 적정 비율로서, 반추위 발효가 안정적으로 이루어진 것을 미루어 짐작해 볼 수 있다. 본 실험에서는 전체 처리구의 결과로 보아, 안정적인 반추위 발효가 이루어 진 것으로 판단된다. The A / P ratio, which is the ratio of acetate to propionate, is a proper ratio of 2: 1 or more, suggesting that the rumen fermentation is stable. In the present experiment, it was judged that stable rumen fermentation was achieved as a result of the whole treatment.

반추위 발효 총 가스 생성량은 유의적으로 대조구에서 가장 높게 나타났다(p<0.05). 뒤이어 마늘 오일 첨가구가 높았으며, 전체 식물 추출물 첨가구는 전반적으로 낮은 가스 생성량을 보였다. Total production of ruminal total gas was significantly higher in the control (p <0.05). Followed by garlic oil, and overall plant extracts showed low overall gas production.

특히 L. curvatus + 삼채의 가스발생량이 유의적으로 낮게 조사된 것으로 보아(p<0.05), 균주 발효된 삼채 추출물 첨가가 적정 범위 내에서 반추위 발효가스 생성량을 감소시킨 것으로 예측할 수 있다. Especially, the gas production of L. curvatus + trilobite was significantly lower (p <0.05), and it can be predicted that the addition of the fermented tilapia extract decreased the production of ruminal fermentation gas within a suitable range.

수소 생성량은 통계적 유의성을 나타내지 않았으며(p<0.05), 수치적으로 전체 처리구가 비슷한 경향을 보였다.Hydrogen production did not show statistical significance (p <0.05), and all treatments showed similar trends numerically.

메탄 생성량은 유의적으로 에탄올이 급여된 처리구에서 가장 높게 나타났다(p<0.05). Patra 등(2006)에 의하면 에탄올로 추출된 식물 추출물 대비 에탄올만 급여한 대조구에서 높은 메탄 발생량이 나타나는 결과를 보고하였는데, 이는 본 연구 결과와 일치하였다. Methane production was the highest in ethanol treated group (p <0.05). According to Patra et al. (2006), high methane production was observed in the control group fed only ethanol compared to the ethanol extract.

식물 추출물이 접종된 처리구 중 균주 처리된 L. curvatus + 삼채 발효 처리구 및 L. plantarum + 삼채 발효 처리구가 무첨가 대조구와 균주 발효되지 않은 삼채 단독 첨가구에 비해 낮은 메탄 생성량을 나타냈다. The L. curvatus + triplicate and L. plantarum + triplicate fermentation treatments showed lower methane production than the non - fermented triplicate and unfermented triplicate.

또한, 메탄을 저감하는 효과가 보고된 마늘 오일 첨가구와 비교하여도 낮은 생성량을 나타내는 것으로 조사되었다. Also, it was investigated that the methane reduction effect was lower than that of the garlic oil added.

본 실험 결과로 보아, 균주 발효되지 않은 삼채 단독 추출물 뿐만 아니라, 균주에 의해 발효된 삼채 추출물이 메탄 저감에 효과적일 수 있다는 것을 확인하였으며, 삼채의 생물학적 활성을 향상 시킨 것이라는 예측을 해 볼수 있다As a result of this experiment, it was confirmed that not only the triple extract but also the triple extract fermented by the strain could be effective for methane reduction, and it could be predicted that it improved the biological activity of the triplex

Figure pat00002
Figure pat00002

2). 뽕잎(2). Mulberry leaves MorusMorus albaalba L.)L.)

각기 다른 종균을 이용하여 발효된 뽕잎 추출물을 이용한 반추위 발효 성상은 하기 표 3과 같다. Table 3 shows rumen fermentation characteristics of mulberry leaf extract fermented using different seed bacterium.

반추위 발효 pH는 수치적으로 6.60~6.63 사이에서 관측되었으나, 통계적 유의차는 없었다(p>0.05). 그러나 수치적으로 전체 pH가 반추위 발효 적정 범위인 5.80~7.20 범위(Hiltner와 Dehority, 1983) 내에 속하는 것으로 보아, 반추위 발효에 부(-)의 영향은 없을 것으로 판단된다.The pH of rumen fermentation was observed between 6.60 and 6.63, but there was no significant difference (p> 0.05). However, numerically, the total pH is in the range of 5.80 ~ 7.20 (Hiltner and Dehority, 1983), which is the optimal range of rumen fermentation.

암모니아태 질소는 L. curvatus + 뽕잎 발효 처리구 및 L. plantarum + 뽕잎 발효 처리구를 제외한 나머지 처리구는 대조구에 비해 높은 함량을 나타냈다. Ammonia nitrogen was higher in the treatments except L. curvatus + mulberry leaf fermentation and L. plantarum + mulberry leaf fermentation than the control.

특히, 유의적으로 에탄올을 첨가한 처리구에서 높게 나타났다(p<0.05). 식물추출물을 첨가한 처리구에서는 균주 발효되지 않은 뽕잎을 단독으로 첨가한 처리구의 암모니아태 질소 함량이 높게 나타났고, 균주처리된 나머지 추출물에서는 대조구보다 낮은 함량을 보였다. Especially, it was significantly higher in the ethanol treated group (p <0.05). In the treatments with plant extracts, the ammonia nitrogen content of the mulberry leaves treated with the mulberry leaves alone was higher than that of the control.

총 휘발성 지방산은 마늘 오일 첨가구 및 에탄올 첨가구를 제외한 전체 처리구가 대조구에 비해 유의적으로 높은 생성량을 나타내었다(p<0.05). Total volatile fatty acids were significantly higher than the control (p <0.05) except for garlic oil and ethanol.

전반적으로 식물 추출물 첨가구에서 높은 생성량을 나타냈는데, 이 중 균주 발효된 식물추출물 첨가구가 뽕잎이 단독으로 첨가된 처리구에 비해 높게 조사되었다. Overall, high yields were obtained from plant extracts, and the fermented plant extracts of the isolates were higher than those treated with mulberry leaves alone.

이로 미루어 볼 때, 식물 추출물의 첨가가 총 휘발성 지방산 생성에 긍정적인 작용을 하는 것으로 판단된다. These results suggest that the addition of plant extracts has a positive effect on total volatile fatty acid production.

아세테이트는 식물 추출물 첨가구에서 유의적으로 높은 아세테이트 함량을 나타내었으며(p<0.05), 전반적으로 총 휘발성 지방산 생성량과 유사한 패턴을 보였다. Acetate showed significantly higher acetate content in plant extracts (p <0.05) and overall pattern was similar to total volatile fatty acid production.

프로피오네이트는 아세테이트와 마찬가지로 총 휘발성 지방산 생성량과 비슷한 경향을 보였다. A/P ratio는 모든 처리구가 비슷한 비율로 나타났으며, 타 처리구 대비 대조구의 프로피오네이트 비율이 높은 것으로 조사되었다.Propionate, like acetate, showed similar tendency to total volatile fatty acid production. A / P ratios were similar in all treatments and the proportion of propionate in the control was higher than other treatments.

반추위 발효 총 가스 생성량은 전체 61~84 mL 범위 내에서 조사되었다. 전반적으로 식물 추출물을 접종한 처리구에서 유의적으로 높은 발효 가스를 생성하였다(p<0.05). Total production of ruminal fermentation gas was within the range of 61 ~ 84 mL. Overall, significantly higher fermentation gases were produced in the treatments inoculated with plant extracts (p <0.05).

특히, L. curvatus + 뽕잎 발효 처리구가 가장 높게 조사되었다. 이는 반추동물이 섭취하는 사료의 에너지 중 70~80%가 휘발성 지방산으로 전환되며, 6%는 발효열, 나머지는 이산화탄소 및 메탄으로 바뀐다. Especially, L. curvatus + mulberry leaf fermentation treatment was the highest. It converts 70-80% of the energy of ruminant feed to volatile fatty acids, 6% of fermentation heat, and the remainder to carbon dioxide and methane.

즉, 가스 생성량은 휘발성 지방산 생성량과 상관 관계를 가진다. 따라서 본 실험에서 가소화 에너지 함량이 높은 식물 추출물 첨가구가 휘발성 지방산 패턴과 유사하게 높은 발효 가스 생성량을 나타낸 것으로 예측할 수 있다.That is, the gas production amount has a correlation with the amount of volatile fatty acid production. Therefore, it can be predicted that the plant extracts with high plasticizing energy content showed high fermentation gas production similar to the volatile fatty acid pattern.

수소는 전체 처리구가 수치적으로 0.04 mL로 비슷하게 나타났지만, 통계적 유의차가 없었다(p>0.05).There was no statistically significant difference (p> 0.05) between hydrogen and total treatments, which were numerically similar to 0.04 mL.

메탄은 마늘 오일 첨가구와 L. curvatus + 뽕잎 발효 첨가구가 대조구에 비해 유의적으로 낮은 생성량이 조사되었다(p<0.05). 식물 추출물 단독 첨가구는 유의적으로 높은 메탄발 생량을 나타낸 반면(p<0.05), 균주 발효한 처리구가 메탄을 저감하는 것으로 미루어 볼 때 L. curvatus + 뽕잎 발효 처리구가 메탄을 저감하는데 균주가 직접적인 작용을 한 것으로 판단된다. Methane and L. curvatus + mulberry leaf were significantly lower than those of control (p <0.05). The L. curvatus + mulberry leaf fermentation treatment decreased the methane content of the fermented broth (p <0.05). However, the L. curvatus + .

Figure pat00003
Figure pat00003

3). 도라지(3). Bellflower( PlatycodonPlatycodon grandiflorumgrandiflorum ))

각기 다른 종균을 이용하여 발효된 도라지의 식물 추출물을 이용한 반추위 발효 성상은 하기 표 4와 같다. Table 4 shows the ruminal fermentation characteristics of the plant extracts of the seedlings fermented using different seeds.

반추위 발효 pH는 6.60~6.63 에서 조사되었으며, 전반적으로 비슷한 수치를 나타내었다. 이는 반추위 발효 적정 범위인 5.80~7.20(Hiltner와 Dehority, 1983) 내에 있는 것으로 보아, 적절한 반추위 발효가 이루어 진 것으로 판단된다.The pH of the rumen fermentation was 6.60 ~ 6.63, which was generally similar. The rumen fermentation was in the range of 5.80 ~ 7.20 (Hiltner and Dehority, 1983).

암모니아태 질소는 식물 추출물 첨가구가 대조구에 비해 유의적으로 높게 조사되었다(p<0.05). 특히 L. curvatus + 도라지 발효 처리구에서 높게 나타났으며, 균주 발효되지 않은 도라지 단독 첨가구 또한 비슷한 농도가 나타났다. Ammonia nitrogen was significantly (p <0.05) higher in plant extracts than control. Especially, L. curvatus + Doraji fermentation treatments showed a high concentration.

일반적으로 반추위 미생물체 단백질 합성을 위한 적정 암모니아태 질소의 수준은 5~8 mg/100 mL로 알려져 있는데(Stiles 등, 1970; Satter와 Slyter, 1974), 본 연구 결과와 비교하여 도라지 추출물 첨가구에서 긍정적인 범위 내의 암모니아태 질소를 생성하는 것으로 판단된다. In general, the level of adequate ammonia nitrogen for protein synthesis of rumen microbes is known to be 5 to 8 mg / 100 mL (Stiles et al., 1970; Satter and Slyter, 1974) It is believed that ammonia nitrogen is produced within the phosphorus range.

총 휘발성 지방산은 전반적으로 비슷한 수치로 조사되었으나, 통계적 유의차는 없었다(p>0.05). Total volatile fatty acids were generally similar but not statistically significant (p> 0.05).

아세테이트는 총 휘발성 지방산과 비슷한 패턴을 보이며, 도라지 첨가구가 수치적으로 높은 경향을 보였으나 통계적 유의차는 없었다(p>0.05). 프로피오네이트도 총 휘발성 지방산 및 아세테이트와 마찬가지로 통계적 유의차는 없었으나(p>0.05), 전반적으로 비슷한 패턴을 보였다. A/P ratio는 대조구를 제외한 나머지 처리구가 높은 프로피오네이트 함량을 보이는 것을 확인 할 수 있었다. Acetate showed a pattern similar to total volatile fatty acid, and the morphological characteristics of the bellflower family showed a tendency to be numerically high (p> 0.05). Propionate showed no statistically significant difference (p> 0.05) as total volatile fatty acid and acetate, but showed similar pattern overall. The A / P ratios showed higher propionate content than the control.

전반적으로 2.83~3.08 사이에서 조사되었으며, 반추위 적정 발효를 평가하는 비율인 2:1 이상으로 나타나, 긍정적인 발효가 된 것으로 예측 할 수 있다.Overall, it ranged from 2.83 to 3.08, which was more than 2: 1, which is the ratio of evaluating the optimum rumen fermentation.

총 가스 생성량은 마늘 오일 첨가구를 제외한 나머지 처리구는 대조구에 비해 낮은 발효 가스 생성량을 나타내었다. 이 중 도라지 단독 첨가구와 L. curvatus + 도라지 발효 처리구가 유의적으로 낮은 가스 생성량을 나타내었다(p<0.05). Total gas production was lower than that of the control except for garlic oil. Among these, L. curvatus + Doraji fermentation treatments showed significantly lower gas production (p <0.05).

수소는 전체 처리구가 비슷한 생성량을 나타내었으나, 통계적 유의차는 없었다(p<0.05).Hydrogen showed similar amounts of total treatments, but there was no statistically significant difference (p <0.05).

메탄 생성량은 대조구에 비해 도라지 첨가구에서 유의적으로 낮게 조사되었다(p<0.05). 균주 발효되지 않은 도라지 단독 첨가구에 비해 균주 발효된 첨가구가 메탄을 저감하는 것으로 조사되었으며, 특히 L. plantarum + 도라지 발효 첨가구가 현저히 낮은 발생량을 보였다. Methane production was significantly (p <0.05) lower in control group than in control group. The fermented seedlings decreased the methane compared to the stand - alone platycodon, especially L. plantarum + platycodon.

이를 근거로 발효되지 않은 도라지 추출물을 첨가하였을 때에도 메탄을 저감할 수 있으며, 균주와 함께 발효 되면 더욱 효과적으로 메탄을 저감할 수 있는 것으로 예측할 수 있었다. On the basis of this, methane can be reduced even when the fermented bellflower extract is added, and it can be predicted that fermentation with the strain can more effectively reduce methane.

이에 따라 도라지 균주 발효를 통해 메탄 저감에 긍정적인 효과를 나타낸 것으로 판단된다. Therefore, it is believed that the fermentation of blooming strains has a positive effect on methane reduction.

Figure pat00004
Figure pat00004

4). 추출물 혼합 효과 검증4). Verification of effect of extract mixture

4가지 분석 항목 반응값들에 대한 분산 분석을 실시한 결과를 하기 표 5 및 표 6에 나타내었다. The results of the variance analysis on the four reaction item response values are shown in Tables 5 and 6 below.

메탄 생성량에서는 각 요인들의 선형, 곡선 및 상호 관계에서 모두 유의성이 나타났으며, 적합성 결여(Lack-of-fit) 부분에서 유의차가 없는 것으로 조사되었다. The linearity, curves, and correlation of each factor were significant in the methane production, and there was no significant difference in the lack of fit (Lack-of-fit).

총 가스 생성량은 메탄 생성량 결과와 유사한 결과를 나타내었다. 총 휘발성 지방산 생성량에서는 유의차가 없었으며, 적합성 결여에도 영향을 미치지 않았다. Total gas production was similar to methane production. There was no significant difference in total volatile fatty acid production and did not affect the lack of fitness.

건물소화율 측정 결과는 전반적으로 유의성이 나타나지 않았으며, 적합성 결여 부분에서 유의성이 나타났다. The results of the digestibility of the building were not significant, and the lack of conformity was significant.

상기 결과를 바탕으로 발효 약용식물 추출물이 총 휘발성 지방산 및 건물 소화율에는 영향을 미치지 않으면서 메탄 생성량에는 영향을 미칠 수 있는 결과를 도출하였으며, 메탄 저감에도 긍정적인 효과를 나타낼 수 있을 것이라 판단된다. Based on the above results, it is concluded that the extracts of fermented medicinal plants can affect the methane production without affecting the total volatile fatty acids and digestibility of the dry matter, and may have a positive effect on methane reduction.

Figure pat00005
Figure pat00005

(주) Simplex Centroid Design (Mixture design) Simplex Centroid Design (Mixture design)

Components: 3(삼채, 도라지, 뽕잎)Components: 3 (woody, bellflower, mulberry leaf)

Design points: 10       Design points: 10

Process variables: 0       Process variables: 0

Design degree: 3       Design degree: 3

Mixture total: 5.00000
Mixture total: 5.00000

Figure pat00006
Figure pat00006

(주) Simplex Centroid Design (Mixture design)  Simplex Centroid Design (Mixture design)

Components: 3(삼채, 도라지, 뽕잎)Components: 3 (woody, bellflower, mulberry leaf)

Design points: 10       Design points: 10

Process variables: 0       Process variables: 0

Design degree: 3       Design degree: 3

Mixture total: 5.00000
Mixture total: 5.00000

<실시예 2>&Lt; Example 2 >

옥수수 59 중량%와 콩 18 중량%, 탄산칼슘 8 중량%, 옥수수 글루텐 6 중량%, 왕겨 4 중량%, 3인산 칼슘 1 중량%, 마늘 건조분말 0.3 중량%, 염화나트륨 0.2 중량%, 탄산수소나트륨 0.1 중량%, 메타오닌 0.1 중량%, 염화콜린 0.1 중량%, 비타민 0.1 중량% 및 미네랄 0.1 중량%를 배합하되, 가장 마지막에 상기 실시예 1에서 제조한 약용식물 추출물 3종(삼채, 뽕잎, 도라지)을 각 1 중량%씩 첨가하여 사료 조성물을 제조하였다. A mixture of 59 wt% of corn and 18 wt% of soybean, 8 wt% of calcium carbonate, 6 wt% of corn gluten, 4 wt% of rice hull, 1 wt% of calcium triphosphate, 0.3 wt% of garlic dried powder, 0.2 wt% (Mulberry leaf, broth) of the medicinal plant extracts prepared in Example 1 were mixed in a weight ratio of 0.1 wt%, methonine 0.1 wt%, choline chloride 0.1 wt%, vitamin 0.1 wt% and mineral 0.1 wt% Were added in an amount of 1 wt% each, to prepare a feed composition.

이상 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러 한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현 예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백 하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.Having described specific portions of the present invention in detail, those skilled in the art will appreciate that these specific embodiments are merely preferred embodiments and that the scope of the present invention is not limited thereto. Accordingly, the actual scope of the present invention will be defined by the appended claims and their equivalents.

본 발명의 반추동물의 메탄 저감용 조성물은 반추위 메탄 저감 효과를 통하여, 반추위 동물의 생산성을 향상시킬 수 있을 뿐만 아니라, 환경적인 측면에서 환경 오염원의 배출을 방지할 수 있는 효과를 발휘할 수 있기 때문에, 본 발명이 속하는 기술분야에 유용하게 적용될 수 있다. The rumen methane reduction composition of the present invention can improve the productivity of rumen animal through the effect of reducing rumen methane and can exert the effect of preventing the emission of environmental pollutants in environmental aspect, And can be applied to the technical field to which the present invention belongs.

Claims (11)

삼채, 뽕잎 및 도라지로 이루어진 군에서 선택되는 어느 1종의 유산균 발효 추출물을 1종 이상 포함하는 반추동물의 메탄 저감용 조성물.A composition for reducing methane in a ruminant animal, comprising at least one fermented extract of lactic acid bacteria selected from the group consisting of mulberry leaf, mulberry leaf, and bellflower. 제1항에 있어서, 상기 유산균 발효 추출물은 상기 삼채, 뽕잎 및 도라지로 이루어진 군에서 선택되는 어느 1종을 유산균으로 발효하여 얻은 발효액의 추출물인 것을 특징으로 하는 반추동물의 메탄 저감용 조성물.[Claim 2] The composition for reducing methane of ruminant according to claim 1, wherein the lactic acid fermentation extract is an extract of a fermentation broth obtained by fermenting one species selected from the group consisting of the above three kinds of mulberry leaves and bellflower with lactic acid bacteria. 제1항에 있어서, 상기 유산균은 락토바실러스(Lactobacillus) 속, 락토코커스(Lactococcus) 속, 류코노스톡(Leukonostoc) 속, 페디오코커스(Pdiococcus)속 및 비피도박테리아(Bifidobacteria) 속으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 반추동물의 메탄 저감용 조성물.According to claim 1, from the lactic acid bacteria are Lactobacillus bacteria (Lactobacillus) genus Lactococcus (Lactococcus), A flow Pocono stock (Leukonostoc), A Phedi O Rhodococcus (Pdiococcus) in and bifidobacteria group consisting of a genus of bacteria (Bifidobacteria) 0.0 &gt; rumen &lt; / RTI &gt; for methane reduction. 제3항에 있어서, 상기 유산균은 락토바실러스 커바투스(Lactobacillus curvatus) 및 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum)으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 또는 2종인 것을 특징으로 하는 반추동물의 메탄 저감용 조성물.[4] The composition of claim 3, wherein the lactic acid bacterium is one or two selected from the group consisting of Lactobacillus curvatus and Lactobacillus plantarum . 제1항에 있어서 , 상기 추출물은 에탄올 추출물인 것을 특징으로 하는 반추동물의 메탄 저감용 조성물. The composition of claim 1, wherein the extract is an ethanol extract. 제1항에 있어서, 상기 삼채의 유산균 발효 추출물에서, 상기 유산균은 락토바실러스 커바투스(Lactobacillus curvatus) 및 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum)으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 하는 반추동물의 메탄 저감용 조성물. The fermented extract of claim 1, wherein the lactic acid bacterium is Lactobacillus curvatus and Lactobacillus &lt; RTI ID = 0.0 &gt; plantarum ). &lt; RTI ID = 0.0 &gt; 21. &lt; / RTI &gt; 제1항에 있어서, 상기 뽕잎의 유산균 발효 추출물에서, 상기 유산균은 락토바실러스 커바투스(Lactobacillus curvatus)인 것을 특징으로 하는 반추동물의 메탄 저감용 조성물. The composition of claim 1, wherein the lactic acid bacterium is Lactobacillus curvatus in the fermented extract of lactic acid bacteria of mulberry leaves. 제1항에 있어서, 상기 도라지의 유산균 발효 추출물에서, 상기 유산균은 락토바실러스 커바투스(Lactobacillus curvatus) 및 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum)으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 하는 반추동물의 메탄 저감용 조성물. [Claim 2] The lactic acid bacteria fermented extract according to claim 1, wherein the lactic acid bacterium is Lactobacillus &lt; RTI ID = 0.0 &gt; curvatus and Lactobacillus &lt; RTI ID = 0.0 &gt; plantarum ). &lt; RTI ID = 0.0 &gt; 21. &lt; / RTI &gt; 제1항에 있어서, 상기 유산균 발효 추출물은 상기 조성물의 전체 중량 대비, 0.001~100 중량% 포함되는 것을 특징으로 하는 반추동물의 메탄 저감용 조성물. [2] The composition of claim 1, wherein the lactic acid fermentation extract is contained in an amount of 0.001 to 100% by weight based on the total weight of the composition. 제1항에 있어서, 상기 반추동물은 소, 양, 염소 및 사슴으로 이루어진 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 반추동물의 메탄 저감용 조성물. The composition of claim 1, wherein the ruminant is selected from the group consisting of cattle, sheep, goats, and deer. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 의한 반추동물의 메탄 저감용 조성물을 포함하는 사료 조성물.11. A feed composition comprising a composition for reducing methane in a ruminant according to any one of claims 1 to 10.
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