KR20160042089A

KR20160042089A - 심상성 여드름 치료용 아세틸-CoA 카복실라아제 억제제의 용도

Info

Publication number: KR20160042089A
Application number: KR1020167006341A
Authority: KR
Inventors: 윌리암 폴 에슬러; 가브리엘 엘리자베스 소넨버그
Original assignee: 화이자 인코포레이티드
Priority date: 2013-09-12
Filing date: 2014-08-29
Publication date: 2016-04-18
Also published as: US20160220557A1; AU2014319990A1; CA2923884A1; SG11201600711PA; CN105530940A; WO2015036892A1; HK1217448A1; IL243969A0; RU2016106829A; AR097619A1; JP2016534091A; MX2016002479A; ZA201601084B; BR112016004118A2; EP3043800A1; TW201521722A

Abstract

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 ACC 억제제 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

Description

심상성 여드름 치료용 아세틸-CoA 카복실라아제 억제제의 용도{USE OF ACETYL-COA CARBOXYLASE INHIBITORS FOR TREATING ACNE VULGARIS}

본 발명은 아세틸-CoA 카복실라아제(ACC) 억제제 또는 상기 억제제를 함유하는 약학 조성물을 사용하여 심상성 여드름(acne vulgaris)의 진행을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

심상성 여드름은 면포(comedone), 염증성 뾰루지, 농포, 결절 및 낭포를 포함하는 피부 병변의 스펙트럼으로 이루어진다. 상기 질병은 병변 심각도 및 해부학상 병변 분포에 따라 경미, 보통 또는 심각으로 분류된다. 질병 개시는 전형적으로 사춘기에 증가된 안드로겐 수준에 의해 촉발된 높아진 피지 생성으로 인해 발생한다. 약 90%의 청소년이 여드름의 영향을 받아 15%는 의학적 치료를 추구하고; 더욱이 상기 질병은 23 내지 35%의 청장년(18 내지 28세)에서 계속해서 퍼지고 있다. 생물학적으로, 여드름은 (a) 과도한 피지 생성; (b) 도관 장애를 야기하는 비정상적인 케라틴세포 증식 및 박리; (c) 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)의 증식; 및 (d) 염증을 비롯한 여러 구별되는 특징을 갖는 모낭지선 관의 염증성 질병으로 간주된다. 이러한 특징은 종종 상호의존적이다. 예를 들면 증가된 안드로겐 수준은 상피 박리 및 여포성 방해, 뿐만 아니라 지질 형성 면포로 가득찬 차단된 모낭을 야기하는 과도한 피지 생성을 초래한다. 이어서, 이 과도한 피지는 추가 세균성 복제 및 염증을 촉진하는 유리 지방산을 방출하기 위한 피지를 대사작용하는 프로피오니박테리움 아크네스 세균에 대한 기질로서 작용한다. 많은 특징이 질환의 병인학에 기여하지만, 여드름은 프로피오니박테리움 아크네스에 대한 영양소 공급원으로서 작용하는 피지와 같은 피지 없이 발생할 수 없다(Smith and Thiboutot, 2008).

여드름을 치료하는 현재 기준은 경미한 내지 보통의 질병에 대한 국소 요법, 및 보통의 내지 심한 질병에 대한 전신 요법을 포함한다. 이러한 현재 요법은 미미하게 효과적이거나 광범위한 사용을 위해 적합한 안전 프로필이 부족하다. 국소 여드름 치료는 레티노이드, 국소 항생제, 벤조일 퍼옥사이드 및 이들의 조합을 포함한다. 전신 치료는 호르몬 요법, 경구 항생제 및 이소트레티노인(어큐테인(Accutane))을 포함한다(Dawson et al.). 경구 피임약 및 안드로겐 수용체 차단제를 비롯한 호르몬 요법은 보통의 내지 심한 여드름의 치료를 위해 적당한 효능을 갖는 여성 환자에서 사용된다. 독시사이클린, 미노사이클린, 테트라사이클린 및 에리트로마이신을 비롯한 경구 항생제는 또한 감광성 및 위장 기능장애가 이의 사용을 제한할지라도, 특히 프로피오니박테리움 아크네스 내성 패턴에 대하여 일치하는 경우, 여드름을 치료하는데 적당히 효과적이다(Gannon 2011). 이소트레티노인은 여러 심각한 부작용을 나타낸다. 상기 제제는 임부 투여 안정성 X 최기성 경고를 받고, 특정한 처방 주의사항 및 통상의 임신 시험을 요구한다. 추가로, 이소트레티노인은 완화 치료로 적절하게 관리되지 않는 경우 용량을 제한할 수 있는 심한 점막피부 관용 문제(건조한 피부, 눈, 비강, 입술 등)를 야기한다. 이소트레티노인 치료는 해로운 혈장 지질 변화(증가된 TG, LDL) 및 간 독성(치료 전 간 기능 시험을 요구하는 ALT/AST 상승)과 관련된다. 추가로, 이소트레티노인 요법은 또한 근육통(50%의 환자는 상승된 CK 수준을 갖는다), 인대의 석회화 및 해로운 시각적 효과(야간 시력의 손실, 색각의 손실 및 눈 건조)와 관련이 있다. 특수한 경우에, 이소트레티노인은 우울증, 정신병 및 자살 가능성을 비롯한 신경학적/정신적 부작용과 관련이 있다.

따라서, 여드름을 치료하기 위해 유리한 효능/안전성 프로필을 갖는 신규한 접근법에 대한 요구가 존재한다. 본 발명은 여드름을 치료하기 위해 ACC 억제제의 사용을 포함하는 신규한 치료 접근법을 제공한다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 ACC 억제제 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는,

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 ACC 억제제 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 경구로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 ACC 억제제 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 국소로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 ACC 억제제 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 치료 효과량으로 포함하는 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 환자에게 ACC 억제제 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 피지 트라이글리세리드, 피질 유리 지방산, 콜레스테롤 에스터 및 피지 왁스 에스터를 감소시키는 방법에 관한 것이다.

도 1은 피지 지질에서 팔미테이트에 대하여 및 건강한 인간 대상자에서 순환 지질(VLDL 트라이글리세리드)에 대하여 시간에 따른 드노보 합성된 팔미테이트의 기여율(%)을 도시한다.
도 2는 인간 SZ95 세보사이트 세포주에서 비히클을 기준으로 실시예 1(삼각형) 및 실시예 3(원)에 의한 드노보 지질생성의 억제를 도시한다.
도 3은 인간 SZ95 세보사이트 세포주에서 실시예 3 대 비히클에 의한 피지 지질로 ¹⁴C-아세테이트 혼입의 억제를 도시한다. 피지 지질 종을 박층 크로마토그래피에 의해 분리하고 자동방사선사진법을 사용하여 시각화하였다.
도 4는 세부미터(Sebumeter: 등록상표)를 사용하여 평가된, 14일 동안 실시예 1(200 mg BID) 또는 위약으로 처리된 건강한 인간 지원자에서 피지 생성을 도시한다. 데이타는 기준선 측정을 기준으로 나타내었다.
도 5는 14일 동안 실시예 1(200 mg BID) 또는 위약으로 처리된 건강한 인간 지원자에서 트라이아실글리세롤, 왁스 에스터 및 유리 지방산의 변화를 도시한다. 개별적인 대상자 데이타에 대하여, 실선은 실시예 1로 처리된 것을 나타내고, 파선 또는 점선은 위약으로 처리된 것을 나타낸다.
도 6은 경구로 투여된 ACC 억제제(실시예 8, 100 mg/kg) 및 국소로 투여된 ACC 억제제(실시예 3, 100 mg/ml)로 처리된 시리아 햄스터에서 귀 피부 말론일-CoA 수준의 억제를 도시한다.
도 7은 시리아 햄스터에서 시간에 따른 피지 및 순환 지질(트라이글리세리드)에 대한 DNL의 기여율(%)을 도시한다.
도 8은 경구로 투여된 ACC 억제제(실시예 8, 100 mg/kg) 및 국소로 투여된 ACC 억제제(실시예 3, 100 mg/ml)로 처리된 수컷 시리아 골드 햄스터의 귀 피부 및 간에서 드노보 지질생성의 억제를 도시한다.
도 9는 시리아 햄스터의 귀 피부 트라이글리세리드 수준에서 경구로 투여된 ACC 억제제(실시예 8, 30 mg/kg) 또는 비히클로 1일 1회 만성 처리(19일)의 영향을 도시한다.

아세틸-CoA의 말론일-CoA로의 전환을 촉진하는 ACC는 지질 신진대사를 조절하는 주요한 역할을 한다. ACC는 지방산의 드노보 합성에서 필수적인 율속 단계이고 장쇄 지방산의 산화를 조절한다. 용어 "드노보 지질생성", "DNL" 및 "드노보 지방산 합성"은 비-지질계 공급원으로부터 지방산의 합성을 설명하기 위해 사용된다. 2개의 밀접하게 관련된 이소폼(isoform), 즉, ACC1 및 ACC2가 존재한다. ACC 억제는 유형 2 진성 당뇨병 및 비만을 치료하는 잠재적인 기작으로서 관심이 되고 있다(Harwood, 2005; Corbett 2009).

ACC 억제제는 감소된 피지 함량과 일치하는 래트 및 개의 피지샘에서 형태학적 변화를 생성한다.

래트 및 개의 전임상 생체내 연구의 과정에서, 다중 ACC 억제제는 피지샘의 감소된 지질/피질 함량과 일치하는 세보사이트에서의 현미경 형태학적 변화를 유도하는 것으로 밝혀졌다. 이러한 발견에 기초하여, ACC 억제제는 지방산의 드노보 합성을 억제함으로써 래트 및 개에서 피질 지질생성을 감소시킬 수 있는 것으로 가정하였다. 피지는 트라이글리세리드(30 내지 50%), 왁스 에스터(26 내지 30%), 유리 지방산(15 내지 30%), 스쿠알렌(12 내지 20%), 콜레스테롤 에스터(3 내지 6%) 및 유리 콜레스테롤(1.5 내지 2.5%)로 구성된 지질의 복합 혼합물이다(Ottaviani et al., 2010). 이러한 지질 부류 중, 트라이글리세리드, 왁스 에스터, 유리 지방산 및 콜레스테롤 에스터는 모두 지방산을 함유하거나 이로 구성된다. 상승된 피지 생성 속도는 여드름의 개시 및 심각도와 모두 연관된다(Janiczek-Dolphin et al., 2010). 인간 피지샘은 드노보 지방산 합성을 할 수 있는 것으로 공지되었지만(Downie and Kealey, 1998), 피지 생합성을 위한 외인성 순환 지방산의 사용에 비해 세포사이트 내의 이 경로의 상대적인 중요성은 알려지지 않았다.

인간에서 피지 생합성은 세보사이트 DNL에 주로 의존한다.

인간에서 피지 생성에 대한 드노보 지방산 합성의 정량적인 중요성을 설명하기 위해, 임상 동위원소 표지 연구를 수행하였다. 질량 동위원소 분포 분석(MIDA)은 생물학적 중합체의 합성을 측정하기 위한 기법이고, 지질, 탄수화물 및 단백질의 합성을 측정하기 위해 사용되었다(문헌[Hellerstein and Neese, 1999]에 의해 검토됨). 방법은 안정한 동위원소-표지된 전구체의 도입 및 질량 분석을 사용하여 질량에서만 상이한 중합체(질량 동위원소이성질체)의 분자 종의 상대적인 존재비를 정량하는 것을 수반한다. 드노보 팔미테이트 합성을, 기재된 바와 같이 기체 크로마토그래피/질량 분석에 의해 측정된, 팔미테이트 지방산 메틸 에스터로 투여된 중수소의 혼입으로부터 계산하였다(Jones, 1996; Lee et al, 1994). 단리된 지질에서 중수소-표지된 팔미테이트의 비율을 사용하여 총 팔미테이트 풀에 대한 DNL의 부분 기여를 계산하였다.

대상자는 18 내지 49세 사이의 건강한 남성 또는 여성 지원자였다. 총 연구 기간은 14일이었다. 대상자는 총 체수분 풀의 약 1.5%까지 강화를 달성하기 위해 1일에 중수소 표지된 물(²H₂O)의 경구 도입 투여량을 받았다. 대상자는 안정 상태에서 이 강화를 유지하기 위해 14일까지 1일 1회 경구 투여량의 ²H₂O를 계속 취하였다. 4, 7, 11 및 14일에 세부테이프(Sebutape: 등록상표)를 사용하여 대상자 얼굴의 이마 및 볼의 피부로부터 피지를 수집하여 피지 지질 풀에 대한 DNL의 안정 상태 기여의 근사치를 가능하게 하였다(Kligman et al., 1986). 또한, 중수소화된 물 풍부의 측정 및 순환 지질에 대한 DNL의 기여의 평가(즉, VLDL 중 팔미테이트)를 위해 4일, 7일, 11일 및 14일에 각각의 대상자로부터 혈장을 수집하였다. 순환 지질 대 피지에 대한 DNL의 기여를 비교하여 피지샘 내에서 드노보 지방산 합성의 중요성을 설명하였다. 순환 지방산이 복합 지질 생합성을 위한 주요한 공급원으로서 사용되는 경우, 지질 풀에 대한 DNL의 기여는 순환 지방산에 대한 DNL의 기여를 반영하여야 한다. 이에 반해, 지질 풀에 대한 DNL의 기여는 장기 특이적 DNL이 중요한 역할을 하는 경우 순환 지질에 대한 기여보다 더 높아야 한다.

다른 인간 지질 풀(Hellerstein, 1999)과 대조적으로, 인간 피지 생성은 이 경로(도 1)로부터 유도된 피지에 함유된 약 80%의 지방산을 사용하여 드노보 지방산 합성에 주로 의존하는 것으로 밝혀졌다. 또한, 피지 지질에 대한 DNL의 기여는 순환 지질에 대한 DNL(VLDL)의 기여보다 현저하게 더 크고(도 1), 이는 피지샘 내의 DNL이 인간에서 피지 생합성의 주요한 기여자인 것을 설명한다. 이 관찰은 2가지 이유로 예기치 못하였다. 첫째로, DNL은 인간에서 지질 항상성에 기여하는 부수적인 역할을 하는 것으로 여겨졌고(Hellerstein, 1999), 둘째로, 세보사이트 내의 DNL은 피지 생성을 위해 가장 통상적으로 사용된 전임상 모델인 시리아 햄스터 귀 피부 모델(하기 참조)에서 피지 생합성을 위해 덜 중요한 것으로 여겨졌다.

ACC 억제제는 시험관내 인간 세보사이트 세포 DNL을 억제한다.

상승된 피지 생성 속도는 심상성 여드름의 심각도와 잘 연관되어 있다(Zouboulis, 2004). 피지 생성을 억제하는 치료는 측정된 피지 감소에 직접 비례하여 여드름 병변을 감소시키는 것으로 나타났다(Janiczek-Dolphin, 2010). 피지 지질에 대한 DNL의 높은 부분 기여를 입증하는 신규한 생물 데이타는 DNL을 억제할 수 있는 제제가 피지 생합성을 감소시킬 수 있음을 제안하였다. 인간 세보사이트에서 DNL을 조절하는 ACC 억제력을 평가하기 위해, 피지 지질로 ¹⁴C-아세테이트의 혼입을 억제하는 다중 ACC 억제제의 영향을 SZ95 인간 세보사이트 세포에서 평가하였다(Zouboulis et al., 1999). 실시예 1은 세포, 전임상 종 및 건강한 인간 지원자에서 DNL이 약물 의존적으로 억제된 선택적인 이중 ACC1/ACC2 억제제이다. 도 2는 인간 SZ95 세보사이트 세포에서 DNL의 억제시 비히클과 관련하여 실시예 1 및 실시예 3의 효과를 도시한다. 도 3은 인간 SZ95 세보사이트 세포에서 피지 지질 종으로 ¹⁴C-아세테이트의 혼입의 억제시 비히클에 대한 실시예 3의 효과를 도시한다. 지질 종을 박층 크로마토그래피로 분리하였다. 실시예 3은 지방산(콜레스테롤 에스터, 트라이글리세리드, 유리 지방산, 다이글리세리드, 모노글리세리드 및 인지질)을 함유하거나 이로 구성된 SZ95 세포 지질 종으로 ¹⁴C-아세테이트의 혼입의 분명한 억제를 야기하지만 유리 콜레스테롤로의 ¹⁴C-아세테이트의 혼입을 바꾸지 않고, 실시예 3의 작용 기작의 특이성을 입증하는 드노보 지방산 합성을 따르지 않는다(도 3).

다른 다중 ACC 억제제를 SZ95 인간 세보사이트 세포주에서 평가하였다. 표 1은 이 인간 세보사이트 세포주에서 ACC 억제제를 사용하여 DNL의 억제를 요약한다. 이 분석은 생체내 피지 생성을 억제할 것 같은 ACC 억제제를 확인하는 유용성을 가질 수 있다. 효소 IC₅₀과 세보사이트 DNL EC₅₀ 사이의 일대일 상관관계는 세포 투과성, 단백질 결합성, 및/또는 지질 용해성에 영향을 줄 수 있는 물리적 특성의 차이로 인해 본질적으로 기대되지 않는다.

실시예 1은 건강한 인간 지원자에서 피지 생성을 억제한다.

피지 생성을 200 mg BID의 실시예 1 또는 위약(PBO)으로 처리된 건강한 인간 지원자에서 평가하였다. 실시예 1의 상기 투약량은, 피지의 생성을 세부미터(Sebumeter: 등록상표)(쿠라제 플러스 카자카 일렉트로닉 게엠베하(Courage + Khazaka electronic GmbH), 독일 콜로네 소재)에 의해 측정된 바와 같이 건강한 지원자에서 기준선(PBO 조정됨)으로부터 49%까지 감소시켰다(도 4). 기준선에서 및 세부테이프(Sebutape: 등록상표)를 사용하는 연구의 끝에서 수집된 피지로부터의 특이적 지질 부류의 분석은, 피지의 주요 지질 부류인 피지 트라이글리세리드가 66%까지 감소됨(PBO 조정됨)을 입증하였다(도 5). 피지 유리 지방산 및 왁스 에스터(이들은 또한 DNL에 의존함)의 수준은 또한 실시예 1 처리된 대상자에서 감소되었다(도 5). 이에 반해, 유리 콜레스테롤(이는 DNL에 의존하지 않음)은 PBO에 비해 변화를 보이지 않았다(데이타 나타내지 않음). 스쿠알렌 수준(이는 또한 DNL에 의존하지 않음)은 PBO에 비해 2.6배 증가를 보였다. 스쿠알렌은 피지의 부수적인 성분으로서, 세부미터(등록상표)에 의해 평가된 바와 같이 총 피지의 수준은 스쿠알렌에서의 이 증가에도 불구하고 분명한 감소를 보였다(도 4). 실시예 1이 지방산 종(이는 주로 DNL에 의존하지만 DNL에 의존하지 않는 피지 지질 종은 아님)을 함유하거나 이로 이루어진 피지 지질의 수준을 선택적으로 억제한다는 관찰은 피지 생성의 억제에 대한 기작의 특이성을 입증한다.

ACC 억제는, (1) 드노보 합성된 지방산이 인간 피지 지질에서 지방산의 약 80%를 차지하고, (2) 인간 피지 지질(트라이글리세리드, 유리 지방산, 왁스 에스터 및 콜레스테롤 에스터를 포함함)의 약 75 내지 95%가 지방산을 함유하거나 이로 구성되고, (3) ACC 활성이 지방산의 드노보 합성에 필수적이고, (4) ACC 억제제가 인간 유도된 SZ95 세보사이트 세포에서 DNL을 억제하고, (5) 실시예 1이 인간 지원자에서 피지 생성을 감소한다는 관찰에 기초하여 피지 생성을 감소시킴으로써 여드름을 치료하는 신규한 기회를 제공한다.

인간에서 피지 생성시 ACC 억제의 효과는 피지 생성을 위한 가장 통상적으로 사용된 전임상 모델인 햄스터 귀 피부 모델로부터 예측되지 않는다.

시리아 햄스터 귀 모델(Plewig and Luderschmidt, 1977)은 피지샘에서 약물 효과를 측정하기 위해 가장 통상적으로 사용되는 생체내 모델이다. 이 모델은 시리아 햄스터의 귓불의 하면은 고밀도의 피지샘을 가지고 있으므로 통상적으로 사용된다. 또한, 이러한 샘은 크고 누두상 기관, 피지 도관, 다중 귓불, 및 샘으로 아래로부터 들어가는 모낭 단위가 있다는 점에서 인간 피지 모낭과 구조적으로 유사하므로 인간에 대하여 이 모델의 번역이 평가된다(Plewig and Luderschmidt, 1977). 상기 모델은 또한 경구 어큐테인(Accutane: 등록상표)을 포함하는 다중 제제로 입증되었다(Geiger, 1995).

이 모델에서 ACC 활성을 억제하는 ACC 억제제의 능력을 평가하기 위해, 귀 피부에서 말론일-CoA 수준을 억제하기 위해, 실시예 8(경구 섭식으로 투여됨) 및 실시예 3(국소로 투여됨)의 효과를, 화합물로 단일 처리하고 1 시간 후 평가하였다(도 6). 말론일-CoA는 ACC의 직접적인 효소 생성물이고, 말론일-CoA의 측정은 생체내 ACC 억제의 바이오마커로서 사용되었다(Harwood et al., 2003; Glund et al., 2012; Freeman-Cook et al., 2012). 실시예 8(경구로 투여됨) 및 실시예 3(국소로 투여됨)은 비히클 처리된 동물에 비해 햄스터 귀 피부 말론인-CoA를 79% 및 87%까지 억제하였다. 이러한 관찰은 경구로 투여된 실시예 8 및 국소로 투여된 실시예 3이 각각 이 모델에서 ACC 활성을 강력하게 억제함을 입증한다.

이 모델에서 피지 지질 생합성에 대하여 피지샘 내의 DNL의 중요성을 측정하기 위해, ²H₂O를 투여하여 중수소를 갖는 물 풀을 강화하였다. 혈장 및 귀 피부를 1, 4, 7, 14 및 20일에 수집하였다. 순환 지질 대 피부 지질에 대한 DNL 기여의 비교를 사용하여 시리아 햄스터 피지샘 내에서 드노보 지방산 합성의 중요성을 설명하였다. 순환 지방산이 복합 지질 생합성을 위한 주요한 공급원으로서 사용되는 경우, 지질 풀에 대한 DNL의 기여는 순환 지방산에 대한 DNL의 기여를 반영하여야 한다. 이에 반해, 장기 특이적 DNL이 유의미한 역할을 하는 경우에, 지질 풀에 대한 DNL의 기여는 순환 지질에 대한 기여보다 더 높아야 한다. 안정 상태에서 피지 지질에 대한 DNL의 기여율(%)은 이 모델에서 중간 정도로 높은 반면(55 내지 60%), 피지에 대한 DNL의 기여는, 인간 피지샘과 대조적으로 시리아 햄스터 피지샘이 피지 생합성을 위해 세포사이트 내에서 합성된 지방산 보다 오히려 순환 지방산을 우선적으로 이용하는 것을 나타내는 순환 트라이글리세리드와 유사하였다.

이 가설을 추가로 규명하기 위해, 피지로 DNL 유도된 지방산의 혼입의 억제시 경구로 투여된 실시예 8 대 비히클 및 국소로 투여된 실시예 3 대 비히클의 효과를 시리아 햄스터 모델에서 검사하였다. 이러한 화합물은 각각 시험된 투여량에서 (귀 피부 말론일-CoA 수준에 의해 평가되는 바와 같은) 피부의 ACC 활성을 강력하게 억제하는 것을 발견하였다(도 6). 국소로 투여된 화합물은 전신이 아니라 적용 부위에서만 DNL을 억제할 것으로 예상될 수 있는 반면, 경구로 투여된 화합물은 전신으로 DNL을 억제하는 것으로 예상될 수 있다. 그 결과로서, 피지에서 발견된 DNL 유도된 지방산이 피지샘 내에서 합성되는 경우, 경구로 투여된 화합물 및 국소로 투여된 화합물은 둘다 피지로 DNL 유도된 지방산의 혼입을 억제하는 것으로 예상될 수 있다. 이에 반해, DNL 유도된 지방산이 다른 지방생성 기관(예를 들면 간)에서 합성되고 순환을 통해 피지샘에 전달되는 경우, 국소로 적용된 화합물이 아니라 경구로 투여된 화합물만이 피지로 DNL 유도된 지방산의 혼입을 감소시키는데 기여할 수 있다.

시리아 햄스터를 단일 용량의 경구로 투여된 실시예 8 및 국소로 투여된 실시예 3으로 처리하고 이어서 ¹⁴C-표지된 아세테이트를 IP 볼루스로 처리하였다. 피지 지질로 DNL 유도된 지방산의 혼입을 억제하는 각각의 화합물의 효과를 비교하였다. 또한, 간에서 DNL에 대한 화합물의 영향을 또한 평가하였다. 경구로 투여된 실시예 8은 피부 및 간 둘다에서 드노보 합성된 지방산의 혼입을 각각 84% 및 85%까지 억제하였다(도 8). 이에 반해, 국소로 투여된 실시예 3은 피부 또는 간에서 드노보 합성된 지방산의 혼입을 억제하지 못했다(도 8).

상기 2개의 화합물은 말론일-CoA 생성에 의해 평가되는 바와 같이 ACC 활성을 피부에서 79% 이상보다 많이 억제하는 것을 나타내므로, 이러한 결과는 피지 지질에서 드노보 유도된 지방산이 다른 곳에서 합성되고 순환을 통해 피지샘에 전달된다는 것을 강력하게 시사한다. 간에서 DNL을 억제하는, 국소로 투여된 실시예 3이 아니라 경구로 투여된 실시예 8의 능력은 또한 이 가설과 일치한다. 이러한 관찰은, 종합해보면, 인간과 대조적으로 시리아 햄스터가 피지샘 내에 합성된 지방산 보다 오히려 피지 생성을 위해 순환 지방산을 우선적으로 이용한다는 가설과 일치한다.

상기 기재된 발견은, 시리아 햄스터가 피지 생합성에 대한 피지샘 DNL의 중요성 차이의 결과로서 ACC 기작에 대한 인간 피지 저하 효능을 정확하게 예측하지 않음을 제안할 수 있다. 인간에서 피지 지방산의 약 80%가 DNL로부터 유도되고 이 DNL은 피지샘에서 주로 발생하는 것으로 나타나므로, ACC 억제제를 경구로 또는 국소로 투여하는 것은 피지샘에서 DNL을 억제하여 피지 생성의 감소를 야기할 수 있다. 이에 반해, 피지 생합성을 위해 피지샘에서 합성된 지방산보다 오히려 순환 지방산에 의존하는 시리아 햄스터에서는, 경구 또는 국소 ACC 억제제를 처리하여 생체내 세보사이트에서 직접 작용을 통해 피지 생성의 억제를 보일 수 없었다.

이 가설을 시험하기 위해, 시리아 햄스터를 경구로 투여된 실시예 8 또는 비히클로 19일 동안 1일 1회 처리하였다. 귀 피부에서 트라이글리세리드 수준의 변화는 ACC 억제제-처리된 동물 또는 비히클-처리된 동물 사이에서 관찰되지 않았다. 이 관찰은 실시예 1로 처리된 인간 대상자가 피지 트라이글리세리드의 66% 감소를 보이는 관찰과 대조적이다.

피지샘 내에서 DNL 중요성의 차이 및 인간과 시리아 햄스터 사이의 피지 생합성의 억제시 ACC 억제제 영향의 두드러진 차이는, 신규한 피지 저하 기작을 평가하기 위해 가장 통상적으로 사용된 전임상 모델이 ACC 억제의 이점을 확인할 수 없음을 설명한다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 하기 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다:

[화학식 I]

상기 식에서,

R¹은 (C₁-C₆)알킬, (C₃-C₇)사이클로알킬, 테트라하이드로푸란일 또는 옥세탄일이고, 상기 (C₁-C₆)알킬은 (C₁-C₃)알콕시, 하이드록시, 할로, 페닐, 테트라하이드로푸란일 및 옥세탄일로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의적으로 치환되고;

R²는 수소, 할로, (C₁-C₃)알킬, 시아노 또는 -C(=NH)(OCH₃)이고;

R³은 각각 독립적으로 수소 또는 (C₁-C₃)알킬이고;

R⁴는 (C₆-C₁₀)아릴, 5 내지 12 원 헤테로아릴 또는 8 내지 12 원 융합된 헤테로사이클릭아릴이고, 상기 (C₆-C₁₀)아릴, 5 내지 12 원 헤테로아릴 또는 8 내지 12 원 융합된 헤테로사이클릭아릴은 각각 (C₁-C₃)알킬, (C₁-C₃)알콕시, 할로, 아미노, (C₁-C₃)알킬아미노, 다이(C₁-C₃)알킬아미노, 하이드록시, 시아노, 아미도, 페닐, 5 또는 6 원 헤테로아릴, 및 5 또는 6 원 헤테로사이클릴로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의적으로 치환된다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 경구로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 국소로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 치료 효과량으로 포함하는 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 피지 트라이글리세리드, 피지 유리 지방산, 콜레스테롤 에스터 및 피지 왁스 에스터를 감소시키는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1-이소프로필-1'-(2-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1-이소프로필-1'-(2-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 경구로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1-이소프로필-1'-(2-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 국소로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1-이소프로필-1'-(2-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 치료 효과량으로 포함하는 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 환자에게 1-이소프로필-1'-(2-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 환자에서 피지 트라이글리세리드, 피지 유리 지방산, 콜레스테롤 에스터 및 피지 왁스 에스터를 감소시키는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1'-(1H-인다졸-5-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1'-(1H-인다졸-5-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 경구로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1'-(1H-인다졸-5-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 국소로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1'-(1H-인다졸-5-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 치료 효과량으로 포함하는 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 환자에게 1'-(1H-인다졸-5-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 피지 트라이글리세리드, 피지 유리 지방산, 콜레스테롤 에스터 및 피지 왁스 에스터를 감소시키는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1-이소프로필-1'-(1H-피롤로[3,2-b]피리딘-6-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1-이소프로필-1'-(1H-피롤로[3,2-b]피리딘-6-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 경구로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1-이소프로필-1'-(1H-피롤로[3,2-b]피리딘-6-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 국소로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1-이소프로필-1'-(1H-피롤로[3,2-b]피리딘-6-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 치료 효과량으로 포함하는 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 환자에게 1-이소프로필-1'-(1H-피롤로[3,2-b]피리딘-6-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 피지 트라이글리세리드, 피지 유리 지방산, 콜레스테롤 에스터 및 피지 왁스 에스터를 감소시키는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1-(t-부틸)-1'-(1H-인다졸-6-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1-(t-부틸)-1'-(1H-인다졸-6-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 경구로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1-(t-부틸)-1'-(1H-인다졸-6-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 국소로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1-(t-부틸)-1'-(1H-인다졸-6-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 치료 효과량으로 포함하는 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 환자에게 1-(t-부틸)-1'-(1H-인다졸-6-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 피지 트라이글리세리드, 피지 유리 지방산, 콜레스테롤 에스터 및 피지 왁스 에스터를 감소시키는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 5-(1-이소프로필-7-옥소-1,4,6,7-테트라하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-1'-일카본일)-1H-인다졸-3-카보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 5-(1-이소프로필-7-옥소-1,4,6,7-테트라하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-1'-일카본일)-1H-인다졸-3-카보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 경구로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 5-(1-이소프로필-7-옥소-1,4,6,7-테트라하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-1'-일카본일)-1H-인다졸-3-카보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 국소로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 5-(1-이소프로필-7-옥소-1,4,6,7-테트라하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-1'-일카본일)-1H-인다졸-3-카보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 치료 효과량으로 포함하는 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 환자에게 5-(1-이소프로필-7-옥소-1,4,6,7-테트라하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-1'-일카본일)-1H-인다졸-3-카보니트릴 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 피지 트라이글리세리드, 피지 유리 지방산, 콜레스테롤 에스터 및 피지 왁스 에스터를 감소시키는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1-이소프로필-1'-(1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1-이소프로필-1'-(1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 경구로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1-이소프로필-1'-(1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 국소로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1-이소프로필-1'-(1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 치료 효과량으로 포함하는 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 환자에게 1-이소프로필-1'-(1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 피지 트라이글리세리드, 피지 유리 지방산, 콜레스테롤 에스터 및 피지 왁스 에스터를 감소시키는 방법에 관한 것이다.

하기 화학식 I의 화합물은 본원에 참조로서 혼입된 US 8,288,405에 기재된 바와 같이 제조될 수 있다: 1'-(1H-인다졸-5-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온; 1-이소프로필-1'-(1H-피롤로[3,2-b]피리딘-6-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온; 1-(t-부틸)-1'-(1H-인다졸-6-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온; 5-(1-이소프로필-7-옥소-1,4,6,7-테트라하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-1'-일카본일)-1H-인다졸-3-카보니트릴; 및 1-이소프로필-1'-(1H-피롤로[3,2-b]피리딘-2-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 하기 화학식 II의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다:

[화학식 II]

상기 식에서,

G는

또는

이고;

R¹은 (C₁-C₆)알킬 또는 (C₃-C₇) 사이클로알킬이고;

R²는 인돌릴, 인다졸릴, 피롤로피리딘일, 피라졸로피리딘일, 퀴놀린일 또는 벤조이미다졸릴이고, 이때 각각의 R² 기는 시아노, -L-C(O)NR⁴R⁵, -L-NR⁴R⁵, (C₁-C₃)알킬, (C₁-C₃)알콕시 및 할로로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의적으로 치환되고;

R³은 수소 또는 (C₁-C₃)알킬이고;

L은 직접 결합 또는 -X(C₁-C₃)알킬렌이고;

X는 직접 결합, O 또는 S이고;

R⁴ 및 R⁵는 각각 독립적으로 수소, (C₁-C₃)알킬, (C₃-C₇)사이클로알킬 또는 4 내지 7 원 헤테로사이클릴이고, 상기 (C₁-C₃)알킬, (C₃-C₇)사이클로알킬 또는 4 내지 7 원 헤테로사이클릴은 1 내지 3개의 플루오로 또는 (C₁-C₃)알콕시로 임의적으로 치환된다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 II의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 II의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 경구로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 II의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 국소로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 II의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 치료 효과량으로 포함하는 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 II의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 피지 트라이글리세리드, 피지 유리 지방산, 콜레스테롤 에스터 및 피지 왁스 에스터를 감소시키는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1-이소프로필-1'-(6-메톡시퀴놀린-3-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1-이소프로필-1'-(6-메톡시퀴놀린-3-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 경구로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1-이소프로필-1'-(6-메톡시퀴놀린-3-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 국소로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1-이소프로필-1'-(6-메톡시퀴놀린-3-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 치료 효과량으로 포함하는 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 환자에게 1-이소프로필-1'-(6-메톡시퀴놀린-3-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 피지 트라이글리세리드, 피지 유리 지방산, 콜레스테롤 에스터 및 피지 왁스 에스터를 감소시키는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1'-(2-(t-부틸아미노)퀴놀린-7-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1'-(2-(t-부틸아미노)퀴놀린-7-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 경구로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1'-(2-(t-부틸아미노)퀴놀린-7-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 국소로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1'-(2-(t-부틸아미노)퀴놀린-7-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 치료 효과량으로 포함하는 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1'-(2-(t-부틸아미노)퀴놀린-7-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 피지 트라이글리세리드, 피지 유리 지방산, 콜레스테롤 에스터 및 피지 왁스 에스터를 감소시키는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1'-(2-아미노퀴놀린-7-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1'-(2-아미노퀴놀린-7-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 경구로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1'-(2-아미노퀴놀린-7-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 국소로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1'-(2-아미노퀴놀린-7-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 치료 효과량으로 포함하는 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 환자에게 1'-(2-아미노퀴놀린-7-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 피지 트라이글리세리드, 피지 유리 지방산, 콜레스테롤 에스터 및 피지 왁스 에스터를 감소시키는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 환자에게 1'-(2-아미노퀴놀린-7-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 치료 효과량으로 포함하는 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 피지 트라이글리세리드, 피지 유리 지방산, 콜레스테롤 에스터 및 피지 왁스 에스터를 감소시키는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료용 약제의 제조에 있어서, 1'-(2-아미노퀴놀린-7-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 용도에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료용 약제의 제조에 있어서, 1'-(2-아미노퀴놀린-7-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약학 조성물의 용도에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 환자에서 피지 트라이글리세리드, 피지 유리 지방산, 콜레스테롤 에스터 및 피지 왁스 에스터를 감소시키는 약제의 제조에 있어서, 1'-(2-아미노퀴놀린-7-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 용도에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 환자에서 피지 트라이글리세리드, 피지 유리 지방산, 콜레스테롤 에스터 및 피지 왁스 에스터를 감소시키는 약제의 제조에 있어서, 1'-(2-아미노퀴놀린-7-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약학 조성물의 용도에 관한 것이다.

하기 화학식 II의 화합물은 참조로서 본원에 혼입된 US 8,288,405, US 2012/0108619에 기재된 바와 유사한 방법을 사용하여 제조될 수 있다: 1-이소프로필-1'-(6-메톡시퀴놀린-3-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온; 1'-(2-(t-부틸아미노)퀴놀린-7-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온; 및 1'-(2-아미노퀴놀린-7-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 하기 화학식 III의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다:

[화학식 III]

상기 식에서,

G는

또는

이고;

R¹은 (C₁-C₆)알킬 또는 (C₃-C₅) 사이클로알킬이고;

R²는 페닐, 나프틸, 5 내지 12 원 헤테로아릴 또는 8 내지 12 원 융합된 헤테로사이클릭아릴이고, 이때 각각의 R² 기는 (C₁-C₃)알킬, (C₁-C₃)알콕시 할로 및 CONH₂로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의적으로 치환되고;

R³은 수소 또는 (C₁-C₃)알킬이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 III의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 III의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 경구로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 III의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 국소로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 III의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 치료 효과량으로 포함하는 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 III의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 피지 트라이글리세리드, 피지 유리 지방산, 콜레스테롤 에스터 및 피지 왁스 에스터를 감소시키는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 2'-(t-부틸)-1-(1-메톡시이소퀴놀린-7-카본일)-4',6'-다이하이드로스피로[피페리딘-4,5'-피라졸로[3,4-c]피리딘]-7'(2'H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 2'-(t-부틸)-1-(1-메톡시이소퀴놀린-7-카본일)-4',6'-다이하이드로스피로[피페리딘-4,5'-피라졸로[3,4-c]피리딘]-7'(2'H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 경구로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 2'-(t-부틸)-1-(1-메톡시이소퀴놀린-7-카본일)-4',6'-다이하이드로스피로[피페리딘-4,5'-피라졸로[3,4-c]피리딘]-7'(2'H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 국소로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 2'-(t-부틸)-1-(1-메톡시이소퀴놀린-7-카본일)-4',6'-다이하이드로스피로[피페리딘-4,5'-피라졸로[3,4-c]피리딘]-7'(2'H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 치료 효과량으로 포함하는 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 환자에게 2'-(t-부틸)-1-(1-메톡시이소퀴놀린-7-카본일)-4',6'-다이하이드로스피로[피페리딘-4,5'-피라졸로[3,4-c]피리딘]-7'(2'H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 피지 트라이글리세리드, 피지 유리 지방산, 콜레스테롤 에스터 및 피지 왁스 에스터를 감소시키는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 2'-(t-부틸)-1-(8-메톡시-2-나프토일)-4',6'-다이하이드로스피로[피페리딘-4,5'-피라졸로[3,4-c]피리딘]-7'(2'H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 2'-(t-부틸)-1-(8-메톡시-2-나프토일)-4',6'-다이하이드로스피로[피페리딘-4,5'-피라졸로[3,4-c]피리딘]-7'(2'H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 경구로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 2'-(t-부틸)-1-(8-메톡시-2-나프토일)-4',6'-다이하이드로스피로[피페리딘-4,5'-피라졸로[3,4-c]피리딘]-7'(2'H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 국소로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 2'-(t-부틸)-1-(8-메톡시-2-나프토일)-4',6'-다이하이드로스피로[피페리딘-4,5'-피라졸로[3,4-c]피리딘]-7'(2'H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 치료 효과량으로 포함하는 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 환자에게 2'-(t-부틸)-1-(8-메톡시-2-나프토일)-4',6'-다이하이드로스피로[피페리딘-4,5'-피라졸로[3,4-c]피리딘]-7'(2'H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 피지 트라이글리세리드, 피지 유리 지방산, 콜레스테롤 에스터 및 피지 왁스 에스터를 감소시키는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 2'-(t-부틸)-1-(2-메톡시퀴놀린-7-카본일)-4',6'-다이하이드로스피로[피페리딘-4,5'-피라졸로[3,4-c]피리딘]-7'(2'H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 2'-(t-부틸)-1-(2-메톡시퀴놀린-7-카본일)-4',6'-다이하이드로스피로[피페리딘-4,5'-피라졸로[3,4-c]피리딘]-7'(2'H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 경구로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 2'-(t-부틸)-1-(2-메톡시퀴놀린-7-카본일)-4',6'-다이하이드로스피로[피페리딘-4,5'-피라졸로[3,4-c]피리딘]-7'(2'H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 국소로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 2'-(t-부틸)-1-(2-메톡시퀴놀린-7-카본일)-4',6'-다이하이드로스피로[피페리딘-4,5'-피라졸로[3,4-c]피리딘]-7'(2'H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 치료 효과량으로 포함하는 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 환자에게 2'-(t-부틸)-1-(2-메톡시퀴놀린-7-카본일)-4',6'-다이하이드로스피로[피페리딘-4,5'-피라졸로[3,4-c]피리딘]-7'(2'H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 피지 트라이글리세리드, 피지 유리 지방산, 콜레스테롤 에스터 및 피지 왁스 에스터를 감소시키는 방법에 관한 것이다.

하기 화학식 III의 화합물은 참조로서 본원에 혼입된 US 2012/0108619에 기재된 바와 같이 제조될 수 있다: 2'-(t-부틸)-1-(1-메톡시이소퀴놀린-7-카본일)-4',6'-다이하이드로스피로[피페리딘-4,5'-피라졸로[3,4-c]피리딘]-7'(2'H)-온; 2'-(t-부틸)-1-(2-메톡시퀴놀린-7-카본일)-4',6'-다이하이드로스피로[피페리딘-4,5'-피라졸로[3,4-c]피리딘]-7'(2'H)-온; 및 2'-(t-부틸)-1-(8-메톡시-2-나프토일)-4',6'-다이하이드로스피로[피페리딘-4,5'-피라졸로[3,4-c]피리딘]-7'(2'H)-온.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 하기 화학식 IV의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다:

[화학식 IV]

상기 식에서,

R¹은 (C₁-C₆)알킬, (C₃-C₇)사이클로알킬, 테트라하이드로푸란일 또 옥세탄일이고, 상기 (C₁-C₆)알킬은 (C₁-C₃)알콕시, 하이드록시, 플루오로, 페닐, 테트라하이드로푸란일 및 옥세탄일로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의적으로 치환되고;

R²는 수소, 할로, (C₁-C₃)알킬 또는 시아노이고;

R³은 각각 독립적으로 수소 또는 (C₁-C₃)알킬이고;

L은 직접 결합 또는 (C₁-C₆)알킬렌이고, 이때 (C₁-C₆)알킬렌 중 1개의 탄소는 -C(O)-, -C(O)NH-, -NHC(O), O, S, NH 또는 N(C₁-C₃)알킬에 의해 임의적으로 대체되고;

Z는 CH₂ 또는 O이고;

A¹ 및 A²는 각각 독립적으로 (C₆-C₁₀)아릴, 5 내지 12 원 헤테로아릴 또는 8 내지 12 원 융합된 헤테로사이클릭아릴이고, 상기 (C₆-C₁₀)아릴, 5 내지 12 원 헤테로아릴 또는 8 내지 12 원 융합된 헤테로사이클릭아릴은 각각 (C₁-C₃)알킬, (C₁-C₃)알콕시, 할로, 아미노, (C₁-C₃)알킬아미노, 다이(C₁-C₃)알킬아미노, 하이드록시, 시아노 및 아미도로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의적으로 치환되고, (C₁-C₃)알킬, (C₁-C₃)알콕시, (C₁-C₃)알킬아미노 및 다이(C₁-C₃)알킬아미노의 알킬 부분은 1 내지 5개의 플루오로로 임의적으로 치환되고, A¹및 A² 중 하나는 CO₂R⁴, (C₁-C₆)CO₂R⁴, 테트라졸릴 또는 (C₁-C₆)테트라졸릴로 치환되고;

R⁴는 (C₁-C₈)알킬, (C₃-C₈)사이클로알킬 또는 (C₁-C₆)알킬-(C₃-C₈)사이클로알킬이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 IV의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 IV의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 경구로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 IV의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 국소로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 IV의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 치료 효과량으로 포함하는 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 IV의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 피지 트라이글리세리드, 피지 유리 지방산, 콜레스테롤 에스터 및 피지 왁스 에스터를 감소시키는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 하기 화학식 V의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다:

[화학식 V]

상기 식에서,

R³은 각각 독립적으로 수소 또는 (C₁-C₃)알킬이고;

본 발명의 바람직한 실시양태는, R⁴가 페닐 및 나프틸로부터 선택된 (C₆-C₁₀) 아릴; 피리딘일, 피라졸릴, 피리미딘일, 트라이아졸릴, 인돌리진일, 인다졸릴, 피롤로[2,3-b]피리딘일, 피롤로[3,2-b]피리딘일, 피롤로[1,2-a]피라진일, 이미다조[1,2-a]피리딘일, 이미다조[1,5-a]피리딘일, 벤조[d]이미다졸릴, 피라졸로[3,4-b]피리딘일, 피라졸로[4,3-b]피리딘일, 피라졸로[1,5-a]피리미딘일, 벤조[d]이미다조l-2-온일, 1,6-나프티리딘일, 퀴녹살린일, 퀴놀린-4-온일 및 이소퀴놀린-1-온일로부터 선택된 5 내지 12 원 헤테로아릴; 또는 3,4-다이하이드로퀴놀린-2-온일 및 인돌린-2-온일로부터 선택된 8 내지 12 원 융합된 헤테로사이클릭아릴이고; 각각의 R⁴ 기가 (C₁-C₃)알킬, (C₁-C₃)알콕시, 할로, 아미노, (C₁-C₃)알킬아미노, 다이(C₁-C₃)알킬아미노, 하이드록시, 시아노, 아미도, 페닐, 5 또는 6 원 헤테로아릴, 및 5 또는 6 원 헤테로사이클릴로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 임의적으로 치환된, 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 V의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 V의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 경구로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 V의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 국소로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 V의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 치료 효과량으로 포함하는 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 V의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 피지 트라이글리세리드, 피지 유리 지방산, 콜레스테롤 에스터 및 피지 왁스 에스터를 감소시키는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 하기 화학식 VI의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다:

[화학식 VI]

상기 식에서,

R¹은 (C₁-C₄)알킬, (C₃-C₆)사이클로알킬, 테트라하이드로푸란일, 벤질, 피리딜, 또는 시아노 및 메톡시로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의적으로 치환된 페닐이고, 바람직하게는 R¹은 (C₁-C₄)알킬, (C₃-C₆)사이클로알킬 또는 테트라하이드로푸란일, 더욱 바람직하게는 에틸, 이소프로필 또는 t-부틸, 가장 바람직하게는 t-부틸이고;

R²는 수소, 메틸 또는 에틸이고, 바람직하게는 R²는 수소 또는 메틸, 더욱 바람직하게는 수소이고;

R³은 하기 화학식 1a 내지 1r로 이루어진 군으로부터 선택된 화학 잔기이고, 바람직하게는 R³은 하기 화학식 1a, 1c, 1d, 1f, 1i, 1j, 1k, 1l, 1m, 1n, 1o, 1p 또는 1q, 더욱 바람직하게는 하기 화학식 1a, 1c, 1d, 1f, 1j 또는 1k의 화학 잔기이고:

X는 O, S 또는 N-R^3c이고, 바람직하게는 X는 O 또는 N-R^3c, 더욱 바람직하게는 N-R^3c이고;

Y는 CH₂ 또는 O이고, 바람직하게는 Y는 CH₂이고;

R^3a는 수소 또는 메틸이고, 바람직하게는 R^3a는 수소이고;

R^3b는 수소, 메틸, 에틸, 할로, 메톡시 또는 에톡시이고, 바람직하게는 R^3b는 수소, 메틸, 메톡시, 클로로 또는 플루오로, 더욱 바람직하게는 R³이 화학식 1a, 1c, 1d 또는 1f의 화학 잔기인 경우 R^3b는 수소, 메틸 또는 클로로이고, R³이 화학식 1b, 1e, 1g, 1h, 1i, 1j, 1k, 1m, 1n 또는 1o의 화학 잔기인 경우 R^3b는 수소이고;

R^3c는 수소, 메틸, 에틸, 또는 3 내지 6 원 사이클로알킬이고, 바람직하게는 R^3c는 수소 또는 메틸이고;

R^3d는 수소, 메틸 또는 하이드록실이고, 바람직하게는 R^3d는 수소이고;

R^3e는 수소, 메틸, 에틸, 할로 또는 아미노이고, 바람직하게는 R^3e는 수소 또는 메틸, 더욱 바람직하게는 수소이고;

R^3f는 수소, 메틸 또는 메톡시이고, 바람직하게는 R^3f는 수소이고;

R^3g는 수소 또는 메톡시이고, 바람직하게는 R^3g는 수소이고;

R^3h는 수소, 메틸, 메톡시 또는 할로이고, 바람직하게는 R^3h는 수소이고;

R³ⁱ는 수소, 메틸 또는 메톡시이고, 바람직하게는 R³ⁱ는 수소이고;

R^3j는 수소 또는 메톡시이고, 바람직하게는 R³ⁱ는 수소이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 VI의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 VI의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 경구로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 VI의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 국소로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 VI의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 치료 효과량으로 포함하는 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 VI의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 피지 트라이글리세리드, 피지 유리 지방산, 콜레스테롤 에스터 및 피지 왁스 에스터를 감소시키는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 2'-(t-부틸)-1-(1H-인다졸-5-카본일)-2'H-스피로[피페리딘-4,5'-피라노[3,2-c]피라졸]-7'(6'H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 2'-(t-부틸)-1-(1H-인다졸-5-카본일)-2'H-스피로[피페리딘-4,5'-피라노[3,2-c]피라졸]-7'(6'H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 경구로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 2'-(t-부틸)-1-(1H-인다졸-5-카본일)-2'H-스피로[피페리딘-4,5'-피라노[3,2-c]피라졸]-7'(6'H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 국소로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 2'-(t-부틸)-1-(1H-인다졸-5-카본일)-2'H-스피로[피페리딘-4,5'-피라노[3,2-c]피라졸]-7'(6'H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 치료 효과량으로 포함하는 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 환자에게 2'-(t-부틸)-1-(1H-인다졸-5-카본일)-2'H-스피로[피페리딘-4,5'-피라노[3,2-c]피라졸]-7'(6'H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 피지 트라이글리세리드, 피지 유리 지방산, 콜레스테롤 에스터 및 피지 왁스 에스터를 감소시키는 방법에 관한 것이다.

2'-(t-부틸)-1-(1H-인다졸-5-카본일)-2'H-스피로[피페리딘-4,5'-피라노[3,2-c]피라졸]-7'(6'H)-온은 본원에 참조로서 혼입된 WO 2009/144555에 기재된 과정을 사용하여 제조될 수 있다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 하기 화학식 VII의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다:

[화학식 VII]

상기 식에서,

R¹은 H, OH, 할로, 시아노, C₁ _-3 알킬, C₁ _-3알콕시, C₁ _-3 할로알킬, C₁ _-3 할로알콕시, C₁ _-3 알킬설폰일-, -CO(O)H, -C(O)OC_1-3 알킬 또는 페닐이고, 상기 페닐은 1 내지 5개의 R¹⁰으로 임의적으로 치환되고;

R¹⁰은 각각 독립적으로 OH, 할로, 시아노, C₁ _-3 알킬, C₁ _-3 알콕시, C₁ _-3 할로알킬 또는 C₁ _-3 할로알콕시이고;

R² 및 R³은 각각 독립적으로 H, OH, 할로, 시아노, C₁ _-3 알킬, C₁ _-3알콕시, C₁ _-3 할로알킬, C₁ _-3 할로알콕시, C₁ _-3 알킬설폰일-, -CO(O)H, -C(O)OC_1-3 알킬, -C(O)NR¹¹R¹² 또는 페닐이고, 상기 페닐은 1 내지 5개의 R¹⁰으로 임의적으로 치환되고;

R¹¹ 및 R¹²는 각각 취해지고, 각각 독립적으로 H 또는 C₁ _-3 알킬이거나, R¹¹ 및 R¹²는 이들이 부착된 질소와 함께 4 내지 7 원 헤테로사이클로알킬을 형성하고;

R⁴는 H, 할로, 시아노, C₁ _-3 알킬 또는 C₁ _-3 할로알킬이고;

R⁶은 각각 취해지고, H, OH, 할로, C₁ _-3 알킬, C₁ _-3 알콕시, C₁ _-3 할로알킬 또는 C_1-3 할로알콕시이고;

R⁷은 각각 취해지고, H, OH, 할로, C₁ _-3 알킬, C₁ _-3 알콕시, C₁ _-3 할로알킬 또는 C_1-3 할로알콕시이고;

R⁵는 각각 취해지고, 할로, C₁ _-3 알킬, C₁ _-3 알콕시, C₁ _-3 알킬-OH, C₁ _-3 할로알킬 또는 C₁ _-3으로 임의적으로 치환된 4 내지 7 원 헤테로아릴이거나, R⁵는 R⁶ 또는 R⁷과 함께, 및 R⁵, 및 R⁶ 또는 R⁷에 부착된 페닐과 함께, 하나 이상의 질소 원자가 상기 페닐의 탄소 원자에 결합되는 질소-함유 고리를 갖는 폴리사이클릭 헤테로사이클릭 라디칼을 형성하고, 상기 질소-함유 고리는 사이클로헥센, 5,6-다이하이드로-피리딘 또는 5,6-다이하이드로-1H-피리딘-2-온에 임의적으로 융합되고, 상기 질소-함유 고리는 독립적으로 1 또는 2개의 옥소, 할로, C₁ _-3 알킬, C₁ _-3 알콕시, C₁ _-3 알킬-OH, C_1-3 할로알킬, C₁ _-3 할로알콕시, 4 내지 7 원 헤테로아릴, 4 내지 7 원 헤테로사이클로알킬 또는 페닐로 임의적으로 치환되고, 상기 페닐은 1 내지 5개의 R¹⁰으로 임의적으로 치환되되, R⁵는 R⁶과 함께 벤조트라이아졸릴 또는 벤조옥사다이아졸릴을 형성하지 않고, R⁵는 R⁷과 함께 벤조옥사다이아졸릴을 형성하지 않고;

R⁸ 및 R⁹는 독립적으로 H, OH, 할로, C₁ _-3 알킬, C₁ _-3 알콕시, C₁ _-3 할로알킬 또는 C₁ _-3 할로알콕시이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 VII의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 VII의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 경구로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 VII의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 국소로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 VII의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 치료 효과량으로 포함하는 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 환자에게 화학식 VII의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 피지 트라이글리세리드, 피지 유리 지방산, 콜레스테롤 에스터 및 피지 왁스 에스터를 감소시키는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 1-이소프로필-1'-(7-메톡시-2-나프토일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 1-이소프로필-1'-(7-메톡시-2-나프토일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1-이소프로필-1'-(7-메톡시-2-나프토일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1-이소프로필-1'-(7-메톡시-2-나프토일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 경구로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1-이소프로필-1'-(7-메톡시-2-나프토일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 국소로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 여드름 치료를 필요로 하는 환자에게 1-이소프로필-1'-(7-메톡시-2-나프토일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 치료 효과량으로 포함하는 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 여드름을 치료하고/하거나 예방하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 환자에게 1-이소프로필-1'-(7-메톡시-2-나프토일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 치료 효과량으로 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 피지 트라이글리세리드, 피지 유리 지방산, 콜레스테롤 에스터 및 피지 왁스 에스터를 감소시키는 방법에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 2개의 상이한 ACC 억제제를 포함하는 약학 조합물에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 ACC 억제제 및 항생제, 특히, 프로피오니박테리움 아크네스에 대한 항생제, 예컨대 독시사이클린, 미노사이클린, 테트라사이클린 및 에리트로마이신을 포함하는 약학 조합물에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 ACC 억제제 및 하나 이상의 항생제, 특히, 프로피오니박테리움 아크네스에 대한 항생제, 예컨대 독시사이클린, 미노사이클린, 테트라사이클린 및/또는 에리트로마이신을 포함하는 약학 조합물에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 ACC 억제제 및 경구 피임약을 포함하는 약학 조합물에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 ACC 억제제 및 안드로겐 수용체 차단제를 포함하는 약학 조합물에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 ACC 억제제 및 레티노이드를 포함하는 약학 조합물에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 ACC 억제제 및 벤조일 퍼옥사이드를 포함하는 약학 조합물에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 1-이소프로필-1'-(2-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 상이한 ACC 억제제를 포함하는 약학 조합물에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 1-이소프로필-1'-(2-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 항생제, 특히, 프로피오니박테리움 아크네스에 대한 항생제, 예컨대 독시사이클린, 미노사이클린, 테트라사이클린 및 에리트로마이신을 포함하는 약학 조합물에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 1-이소프로필-1'-(2-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 경구 피임약을 포함하는 약학 조합물에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 1-이소프로필-1'-(2-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 안드로겐 수용체 차단제를 포함하는 약학 조합물에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 1-이소프로필-1'-(2-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 레티노이드를 포함하는 약학 조합물에 관한 것이다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 1-이소프로필-1'-(2-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 벤조일 퍼옥사이드를 포함하는 약학 조합물에 관한 것이다.

본 발명은 경구 및/또는 국소 투여를 통해 환자에서 여드름을 치료하기 위해, 하기 특허 및 공개된 특허 출원에 개시된 ACC 억제제의 사용을 포함하고, 이들 특허는 각각이 참조로서 본원에 혼입되었다: WO 03072197, WO 13098375, WO 13098373, WO 13092976, US 201358004, WO 13079668, WO 13071169, WO 13061962, WO 13035827, WO 13017600, WO 12108478, WO 12104428, WO 12090219, WO 12074126, US 2012129833, WO 12056372, WO 12032014, WO 12028676, WO 12013716, WO 12001107, US 2011263562, WO 11129399, DE 102010008642, DE 102010008643, WO 11098433, WO 11067306, WO 10127208, WO 10127212, WO 10050445, US 2010113473, JP 2010043019, WO 10002010, US 2009253725, JP 2009196966, WO 09055682, WO 09023059, WO 08140828, WO 08121592, WO 08102749, JP 2008179621, WO 08090944, WO 08079610, WO 08072850, WO 08069500, WO 07119833, WO 07095603, WO 07095601, WO 07095602, WO 07013691, WO 06110775, US 2006178400, WO 06017494, US 2008026363, WO 03059886, WO 03057255, US 6485941, WO 0134202, JP 11171847 및 JP 11171848.

정의

본원에 사용된 용어 "ACC 억제제"는 ACC1 및 ACC2를 둘다 억제하는 화합물을 의미한다. 본원에 개시된 ACC1/ACC2 분석은 ACC1 및 ACC2에 대한 화합물의 억제 활성(IC₅₀)을 수립하기 위해 사용될 수 있다. ACC1 및 ACC2 분석에서 약 10 μM 미만의 IC₅₀을 갖는 화합물은 ACC 억제제로 간주된다. 바람직한 IC₅₀은 2개 분석에서 약 1 μM 미만이고, 특히 바람직한 IC₅₀은 2개 분석에서 약 0.1 μM 미만이다. 또한, 본 발명의 ACC 억제제는 다른 효소, g-단백질 커플링된 수용체 또는 이온 채널과 비교하여 ACC1 및 ACC2를 선택적으로 억제한다. 본 발명에 의해 고려된 화합물은 ACC1 및 ACC2를 억제하는데 요구되는 농도 보다 더 큰 농도에서 다른 효소를 억제하거나 수용체 또는 이온 채널에 결합한다(Ki). 바람직한 ACC 억제 활성은 다른 효소, 수용체 또는 이온 채널에 대한 IC₅₀ 또는 Ki보다 약 2 내지 10배 더 크고, 10 내지 100배가 더욱 바람직하고, 100배 초과가 특히 바람직하다.

본원에 사용된 용어 "실시예 1"은 1-이소프로필-1'-(2-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온을 의미하고, 호변이성질체 1-이소프로필-1'-(2-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-6-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 조합을 포함한다. 실시예 1은 US 8,288,405에 기재된 바와 유사한 방식으로 제조될 수 있다.

본원에 사용된 용어 "환자"는 인간을 의미한다.

본원에 사용된 용어 "약학적으로 허용되는 염"은 적합한 의료적 판단의 범주 내에서 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응 등이 없이 환자 및 하등 동물의 조직과 접촉하는데 사용하기에 적합하고 합리적인 이익/위험 비에 비례하는 그러한 염을 의미한다. 약학적으로 허용되는 염은 당해 분야에 널리 공지되어 있다. 예를 들면 베르거(S.M. Berge) 등은 문헌[Berge et al., J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66: 1-19]에 약학적으로 허용되는 염을 상세하게 기재하였다. 염은 동일 반응계에서 본 발명의 실시예 1의 최종 단리 및 정제 동안, 또는 별도로 실시예 1의 유리 염기를 적합한 유기 산 또는 무기 산과 반응시켜 제조될 수 있다. 대표적인 산 부가 염은 비제한적으로 아세테이트, 아디페이트, 알기네이트, 시트레이트, 아스파테이트, 벤조에이트, 벤젠설포네이트, 바이카보네이트, 바이설페이트, 부티레이트, 캄포레이트, 캄포르설포네이트, 시트레이트, 다이글루코네이트, 글리세로포스페이트, 헤미설페이트, 헵타노에이트, 헥사노에이트, 푸마레이트, 하이드로클로라이드, 하이드로브로마이드, 하이드로요오다이드, 2-하이드록시에탄설포네이트(이세티오네이트), 락테이트, 말레에이트, 메탄설포네이트, 니코틴에이트, 2-나프탈렌설포네이트, 옥살레이트, 팜오에이트, 펙티네이트, 퍼설페이트, 3-페닐프로피오네이트, 포스페이트, 피크레이트, 피발레이트, 프로피오네이트, 숙시네이트, 설페이트, 타르트레이트, 티오시아네이트, 및 p-톨루엔설포네이트를 포함한다.

본 발명은 또한 하나 이상의 무독성인 약학적으로 허용되는 담체와 함께 제형화된 ACC 억제제를 포함하는 약학 조성물을 제공한다. 상기 약학 조성물은 경구 투여를 위해 고체형 또는 액체형으로, 또는 국소 적용을 위해 특이적으로 제형화될 수 있다.

본원에 사용된 용어 "약학적으로 허용되는 담체"는 무독성, 불활성 고체, 반고체 또는 액체 충전제, 희석제, 캡슐화 물질 또는 임의의 유형의 제형 보조제를 의미한다. 약학적으로 허용되는 담체로서 제공될 수 있는 물질의 일부 예는 당, 예컨대 락토스, 글루코스 및 수크로스; 전분, 예컨대 옥수수 전분 및 감자 전분; 셀룰로스 및 이의 유도체, 예컨대 나트륨 카복시메틸 셀룰로스, 에틸 셀룰로스 및 셀룰로스 아세테이트; 분말화된 트래거캔트; 맥아; 젤라틴; 활석; 부형제, 예컨대 코코아 버터 및 좌제 왁스; 오일, 예컨대 땅콩유, 면실유, 홍화유, 참기름, 올리브유, 옥수수유 및 대두유; 글리콜, 예컨대 프로필렌 글리콜; 에스터, 예컨대 에틸 올레에이트 및 에틸 라우레이트; 아가; 완충제, 예컨대 마그네슘 하이드록사이드 및 알루미늄 하이드록사이드; 알긴산; 멸균 주사용수; 등장성 염수; 링거 용액; 에틸 알코올, 및 포스페이트 완충 용액, 뿐만 아니라 다른 무독성 혼화성 윤활제, 예컨대 나트륨 라우릴 설페이트 및 마그네슘 스테아레이트이고, 착색제, 방출제, 코팅제, 감미료, 향미제 및 방향제, 방부제 및 산화방지제는 또한 제조자의 판단에 따라 조성물에 존재할 수 있다. 본 발명은 하나 이상의 무독성인 약학적으로 허용되는 담체와 함께 제형화된 ACC 억제제를 포함하는 약학 조성물을 제공한다. 본 발명의 약학 조성물은 환자에게 경구로 또는 국소로(분말, 연고 또는 드롭스로) 투여될 수 있다.

비경구 주사를 위한 본 발명의 약학 조성물은 약학적으로 허용되는 멸균 수성 또는 비수성 용액, 분산액, 현탁액 또는 에멀젼, 및 멸균 주사가능한 용액 또는 분산액으로 복원하기 위한 멸균 분말을 포함한다. 적합한 수성 및 비수성 담체, 희석제, 용매 또는 비히클의 예는 물, 에탄올, 폴리올(프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 글리세롤 등), 이들의 적합한 혼합물, 식물성 오일(예컨대 올리브유) 및 주사가능한 유기 에스터, 예컨대 에틸 올레에이트를 포함한다. 적절한 유동성은 예를 들면 코팅제, 예컨대 레시틴의 사용에 의해, 분산액의 경우 요구되는 입자 크기의 유지에 의해, 및 계면활성제의 사용에 의해 유지될 수 있다.

이러한 조성물은 또한 어쥬번트, 예컨대 보존제, 습윤제, 유화제, 및 분산제를 함유할 수 있다. 미생물 작용의 보호는 다양한 항균제 및 항진균제, 예를 들면 파라벤, 클로로부탄올, 페놀, 소르브산 등에 의해 보장될 수 있다. 또한, 등장제, 예를 들면 당, 나트륨 클로라이드 등을 포함하는 것이 바람직할 수 있다. 주사가능한 약학 형태의 연장된 흡수는 지연 흡수제, 예를 들면 알루미늄 모노스테아레이트 및 젤라틴의 사용에 의해 야기될 수 있다.

바람직한 경우, 및 더욱 효과적인 분산을 위해, ACC 억제제는 느린 방출 또는 표적된 전달 시스템, 예컨대 중합체 매트릭스, 리포솜, 및 미소구체로 혼입될 수 있다. 이들은 예를 들면 세균-보유 필터를 통한 여과에 의해, 또는 멸균 고체 조성물의 형태의 안정화제 혼입에 의해 멸균될 수 있고, 이는 사용 직전에 멸균수 또는 일부 다른 멸균 주사가능한 배지에 용해될 수 있다.

ACC 억제제는 또한 적합한 경우, 상기 언급된 바와 같은 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 갖는 미소 캡슐화된 형태일 수 있다. 정제, 당의정, 캡슐, 알약 및 과립의 고체 투여 형태는 코팅제 및 셸(shell), 예컨대 장용 코팅제, 방출 제어 코팅제, 및 약학 제형 분야에 널리 공지된 다른 코팅제로 제조될 수 있다. 상기 고체 투여 형태에서, ACC 억제제는 하나 이상의 불활성 희석제, 예컨대 수크로스, 락토스 또는 전분과 혼합될 수 있다. 상기 투여 형태는 또한 정상 실시에 있는 그대로 불활성 희석제 이외의 추가 물질, 예컨대 타정 윤활제 및 다른 타정 보조제, 예컨대 마그네슘 스테아레이트 및 미세결정질 셀룰로스를 포함할 수 있다. 캡슐, 정제 및 알약의 경우, 투여 형태는 또한 완충제를 포함할 수 있다. 이들은 임의적으로 불투명화제를 함유할 수 있고, 또한 이들이 단지, 또는 우선적으로 지연된 방식으로 장관의 특정한 부분에서 활성 성분을 방출하는 상기 조성물일 수 있다. 사용될 수 있는 포매 조성물의 예는 중합성 물질 및 왁스를 포함한다.

경구 투여를 위한 고체 투여 형태는 캡슐, 정제, 알약, 분말 및 과립을 포함한다. 상기 고체 투여 형태에서, ACC 억제제는 하나 이상의 불활성인 약학적으로 허용되는 담체, 예컨대 나트륨 시트레이트 또는 칼슘 포스페이트 및/또는 (a) 충전제 또는 증량제, 예컨대 전분, 락토스, 수크로스, 글루코스, 만니톨, 및 살리실산; (b) 결합제, 예컨대 카복시메틸셀룰로스, 알기네이트, 젤라틴, 폴리비닐피롤리돈, 수크로스, 및 아카시아; (c) 보습제, 예컨대 글리세롤; d) 붕해제, 예컨대 아가-아가, 칼슘 카보네이트, 감자 또는 타피오카 전분, 알긴산, 특정한 실리케이트, 및 나트륨 카보네이트; (e) 용액 완염제, 예컨대 파라핀; (f) 흡수 촉진제, 예컨대 4차 암모늄 화합물; (g) 습윤제, 예컨대 아세틸 알코올 및 글리세롤 모노스테아레이트; (h) 흡착제, 예컨대 카올린 및 벤토나이트 점토; 및 (i) 윤활제, 예컨대 활석, 칼슘 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 고체 폴리에틸렌 글리콜, 나트륨 라우릴 설페이트, 및 이들의 혼합물과 혼합된다. 캡슐, 정제 및 알약의 경우, 투여 형태는 또한 완충제를 포함할 수 있다.

유사한 유형의 고체 조성물은 또한 락토스 또는 유당, 뿐만 아니라 고분자량의 폴리에틸렌 글리콜 등을 사용하여 연질- 및 경질-충전된 젤라틴 캡슐에 충전제로서 이용될 수 있다.

정제, 당의정, 캡슐, 알약, 및 과립의 고체 투여 형태는 코팅제 및 셸, 예컨대 장용 코팅제 및 약학 제형 분야에 널리 공지된 다른 코팅제를 사용하여 제조될 수 있다. 이들은 임의적으로 불투명화제를 함유할 수 있고, 또한 이들이 오직, 또는 우선적으로 지연된 방식으로 장관의 특정 부분에서 활성 성분을 방출하는 조성물일 수 있다. 사용될 수 있는 포매 조성물의 예는 중합성 물질 및 왁스를 포함한다.

경구 투여를 위한 액체 투여 형태는 약학적으로 허용되는 에멀젼, 마이크로에멀젼, 용액, 현탁액, 시럽 및 엘릭시르(elixir)를 포함한다. ACC 억제제 이외에, 액체 투여 형태는 당해 분야에서 통상적으로 사용된 불활성 희석제, 예컨대 물 또는 다른 용매, 가용화제 및 유화제, 예컨대 에틸 알코올, 이소프로필 알코올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸렌 글리콜, 다이메틸포름아미드, 오일(특히, 면실유, 땅콩유, 옥수수유, 배아유, 올리브유, 피마자유 및 참기름), 글리세롤, 테트라하이드로푸르푸릴 알코올, 폴리에틸렌 글리콜 및 소르비탄의 지방산 에스터, 및 이들의 혼합물을 함유할 수 있다.

불활성 희석제 이외에, 경구 조성물은 또한 어쥬번트, 예컨대 습윤제, 유화제 및 현탁제, 감미료, 향미제 및 방향제를 포함할 수 있다.

본 발명의 약학 조성물 중 ACC 억제제의 실제 투여량 수준은 특정 환자에 대한 목적한 치료 반응, 조성물, 및 투여 방식을 달성하는데 효과적인 ACC 억제제의 양을 수득하도록 달라질 수 있다. 선택된 투여량 수준은 ACC 억제제의 활성, 투여 경로, 치료될 장애의 심각도, 및 치료될 환자의 상태 및 이전 병력에 따를 것이다.

환자에게 투여된 ACC 억제제, 특히 실시예 1의 총 일일 용량은 0.3 내지 800 mg이다. 실시예 1에 대한 더욱 바람직한 용량 범위는 30 mg QD 내지 200 mg BID이다. 바람직한 경우, 효과적인 일일 용량은 투여 목적을 위해 다중 용량으로, 예를 들면 하루에 2 내지 4회의 별도 용량으로 나눠질 수 있다.

실시예 1

1-이소프로필-1'-(2- 메틸 -1H- 벤조[d]이미다졸 -5-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[ 인다졸 -5,4'-피페리딘]-7(1H)-온

t-부틸 9-옥소-3- 아자스피로[5.5]운데크 -7-엔-3- 카복실레이트

메틸 비닐 케톤(146 mL)을 테트라하이드로푸란(18 L) 중 t-부틸 4-포름일피페리딘-1-카복실레이트(375 g)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 -5℃로 냉각하고, 에탄올(3 N, 0.243 L) 중 칼륨 하이드록사이드의 용액을 10분간에 걸쳐서 적가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고 16시간 동안 교반하였다. 사이클로헥산(10 L)을 첨가하고, 용액을 포화 나트륨 클로라이드(3 x 10 L)로 세척하였다. 유기 층을 오일로 농축하였다. 이 오일을 80:20 사이클로헥산/에틸 아세테이트(2 L)에 용해하고, 셀라이트(Celite: 등록상표)를 통해 여과하여 불용성 물질을 제거하였다. 여액을 플래시 컬럼 크로마토그래피(70:30 헥산/에틸 아세테이트)를 통해 정제하여 오일로서 생성물을 수득하였다. 오일을 헥산에 마쇄하여 백색 고체로서 목적 생성물(131 g, 28%)을 수득하였다.

(E)-t-부틸 10-(( 다이메틸아미노 )메틸렌)-9-옥소-3- 아자스피로[5.5]운데크 -7-엔-3- 카복실레이트

t-부틸 9-옥소-3-아자스피로[5.5]운데크-7-엔-3-카복실레이트(101 g) 및 트리스(다이메틸아미노메탄)(133 mL)을 톨루엔(800 mL)에 용해하고, 17시간 동안 환류 가열하였다. 반응 혼합물을 최소 교반 용량까지 농축하고, 에틸 아세테이트(600 mL)를 첨가하였다. 이 혼합물을 환류 가열하고, 헵탄(1.2 L)을 20분간에 걸쳐서 첨가하였다. 뜨거운 용액을 실온으로 3시간에 걸쳐서 냉각하였다. 고체를 굵은 유리 플릿을 통해 여과하고, 헵탄(300 mL)으로 세척하였다. 생성된 고체를 진공 오븐에서 40℃에서 3시간 동안 건조하여 황색 고체로서 목적 생성물(107 g)을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ ppm 7.48(s, 1 H), 6.57(d, J=9.97 Hz, 1 H), 5.99(d, J=10.16 Hz, 1 H), 3.32-3.51(m, 4 H), 3.06(s, 6 H), 2.72(s, 2 H), 1.57-1.66(m, 2 H), 1.41-1.53(m, 11 H).

t-부틸 1-이소프로필-1,4- 다이하이드로스피로 [ 인다졸 -5,4'-피페리딘]-1'- 카복실레이트

(E)-t-부틸 10-((다이메틸아미노)메틸렌)-9-옥소-3-아자스피로[5.5]운데크-7-엔-3-카복실레이트(107 g)를 톨루엔(700 mL) 중에서 취하고, 이소프로필 하이드라진(44.4 g)을 첨가하였다. 반응 생성물을 4시간 동안 환류에서 교반하였다. 반응 생성물을 실온으로 냉각하고, 에틸 아세테이트(500 mL)를 첨가하였다. 반응 용액을 시트르산(2 x 300 mL, 10% 수성) 및 물(400 mL)로 세척하였다. 유기 층을 진공에서 농축하여 황색 고체로서 화합물 I-1A-1c(109 g)를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ ppm 7.25(s, 1 H) 6.42(dd, J=10.05, 0.49 Hz, 1 H) 5.84(d, J=9.95 Hz, 1 H) 4.42-4.52(m, 1 H) 3.36-3.53(m, 4 H) 2.62(s, 2 H) 1.56-1.68(m, 2 H) 1.45-1.55(m, 17 H).

t-부틸 1-이소프로필-7-옥소-1,4,6,7- 테트라하이드로스피로 [ 인다졸 -5,4'-피페리딘]-1'- 카복실레이트

메탄올(1 L) 중 t-부틸 1-이소프로필-1,4-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-1'-카복실레이트(109 g)의 용액에 N-브로모 숙신이미드(61.4 g)를 첨가하였다. 반응 생성물을 1시간 동안 교반하였다. 반응 생성물을 나트륨 티오설페이트(물(300 mL) 중 10 g)로 급랭한 후 500 mL의 최종 용량으로 증류하였다. 용액을 주위 온도로 냉각하고, 2-메틸 테트라하이드로푸란(1 L) 및 물(100 mL)을 첨가하였다. 유기 층을 제거하고 수성 층을 2-메틸 테트라하이드로푸란으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 수성 나트륨 하이드록사이드(1 N, 250 mL), 물 및 포화 수성 나트륨 클로라이드로 세척하였다. 유기 층을 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 주황색 오일로 농축하였다. 오일을 테트라하이드로푸란(500 mL)에 용해하고, 테트라하이드로푸란(500 mL) 중 칼륨 t-부톡사이드(76.8 g)를 첨가하였다. 용액을 60℃로 가열하고, 1시간 동안 교반하였다. 수성 염산(1 N, 1 L)을 첨가하고, 용액을 30분 동안 교반하였다. 상을 분리하고 수성 층을 에틸 아세테이트(700 mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 물(400 mL) 및 포화 수성 나트륨 클로라이드(100 mL)로 세척하였다. 유기 층을 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 진공에서 농축하여 잔사를 수득하였다. 잔사를 진공 오븐에서 40℃에서 16시간 동안 건조하여 주황색 왁스로서 표제 화합물(117 g)을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ ppm 7.35(s, 1 H), 5.32-5.42(m, 1 H), 3.29-3.51(m, 4 H), 2.73(s, 2 H), 2.51(s, 2 H), 1.47-1.57(m, 4 H), 1.42-1.46(m, 15 H); +ESI MS(M+H) = 348.5.

1-이소프로필-4,6- 다이하이드로스피로 [ 인다졸 -5,4'-피페리딘]-7(1H)-온

t-부틸 1-이소프로필-7-옥소-1,4,6,7-테트라하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-1'-카복실레이트(23.5 g)를 에틸 아세테이트(260 mL) 및 메탄올(70 mL)에 현탁하였다. 반응 용액을 2℃ 미만으로 냉각하고, 아세틸 클로라이드(33.6 mL)를 20분간에 걸쳐서 적가하였다. 반응 생성물을 실온으로 천천히 가온시키고, 4시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 0℃로 냉각하고, 침전물을 여과하였다. 침전물을 에틸 아세테이트(200 mL)로 세척하고, 진공 오븐(40℃, 10 mm Hg)에서 16시간 동안 건조하여 연황색 고체로서 표제 화합물을 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CD₃OD) δ ppm 7.43(s, 1 H), 5.32-5.42(m, 1 H), 3.15-3.25(m, 4 H), 2.89(s, 2 H), 2.64(s, 2 H), 1.69-1.90(m, 4 H), 1.37-1.45(m, 6 H); +ESI MS(M+H) = 248.4.

1-이소프로필-4,6- 다이하이드로스피로 [ 인다졸 -5,4'-피페리딘]-7(1H)-온의 다른 제조

t-부틸 9-옥소-3-아자스피로[5.5]운데크-7-엔-3-카복실레이트(250 g) 및 트리스(다이메틸아미노메탄)(325 mL)을 톨루엔(1.9 L)에 용해하고, 4시간 동안 환류 가열하였다. 혼합물을 증류하고 최소 교반 용량까지 농축한 후(110℃) 톨루엔(1.9 L)을 첨가하였다. 반응 생성물을 최소 교반 용량까지 재증류하고, 실온으로 냉각하였다. 톨루엔(1.8 L) 및 이소프로필 하이드라진 하이드로클로라이드(135 g)를 첨가하고, 용액을 5시간 동안 환류 가열하였다. 반응 생성물을 실온으로 냉각한 후, 시트르산(10% 수성, 2 x 150 mL) 및 물(200 mL)로 세척하고, 이어서 유기 층을 최소 교반 용량까지 증류하였다. 메탄올(2 L)을 첨가하고, 최소 교반 용량까지 증류하였다. 이를 메탄올(2 L)로 반복하였다. 용액을 메탄올(2.5 L)에 재용해하고, N-브로모숙신이미드(176 g)를 한번에 첨가하였다. 용액을 23℃에서 2시간 동안 교반하였다. 수성 나트륨 티오설페이트 용액(5 중량%, 0.5 L)을 첨가하고, 혼합물을 15분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 증류(45℃, 210 mm Hg)를 통해 약 0.5 L까지 농축한 후, 2-메틸 테트라하이드로푸란(2.5 L)을 첨가하였다. 15분 동안 교반한 후 수성 층을 버렸다. 유기 층을 약 0.2 L까지 농축하고, 테트라하이드로푸란(0.5 L)을 첨가하였다. 혼합물에 테트라하이드로푸란(1.9 L, 1 M 용액) 중 칼륨 t-부톡사이드 용액을 첨가하였다. 용액을 60℃로 가열하고, 1시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 수성 염산(1 N, 2.2 L)을 20분간에 걸쳐서 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반한 후, 층을 분리시켰다. 수성 층을 제거하고, 에틸 아세테이트(1.75 L)로 다시 추출하였다. 합한 유기 층을 물(1 L)로 세척하고, 유기 층을 증류를 통해 농축하였다(4 L 용매 제거됨). 에틸 아세테이트(1.8 L)를 첨가하고, 용액을 최소 교반 용량까지 농축하였다. 에틸 아세테이트(3 L) 및 메탄올(0.8 L)을 첨가하고, 용액을 0℃로 냉각하였다. 아세틸 클로라이드(401 mL)를 20분간에 걸쳐서 적가하고, 용액을 0℃에서 4시간 동안 교반하였다. 침전물을 질소하에 여과에 의해 수집하였다. 여액을 에틸 아세테이트(0.5 L)로 세척하고, 진공 오븐에서 40℃에서 건조하여 회백색 고체로서 화합물 I-1A-1e(241 g)를 수득하였다. ¹H NMR(400 MHz, CD₃OD) δ ppm 7.43(s, 1 H), 5.32-5.42(m, 1 H), 3.15-3.25(m, 4 H), 2.89(s, 2 H), 2.64(s, 2 H), 1.69-1.90(m, 4 H), 1.37-1.45(m, 6 H); +ESI(M+H) = 248.4.

2-메틸-1H-벤즈이미다졸-5-카복실산(15 g)을 테트라하이드로푸란(500 mL) 중에서 취하고, 다이메틸포름아미드(329 μL) 및 옥살릴 클로라이드(22.1 mL)를 첨가하였다. 반응 용액을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 용액을 진공에서 농축하고, 잔사를 다이클로로메탄 중에서 취하고, 감압하에 농축하였다(x 2). 생성된 산 클로라이드에 테트라하이드로푸란(500 mL), 1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온(25.9 g) 및 트라이에틸아민(71.2 mL)을 첨가하였다. 용액을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 생성물에 포화 수성 나트륨 바이카보네이트(250 mL)를 첨가하고, 용액을 5분 동안 교반하였다. 층을 분리하고, 수성 층을 1:1 에틸 아세테이트/테트라하이드로푸란으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 에틸 아세테이트(1 L)로 희석하고, 포화 수성 나트륨 바이카보네이트(200 mL) 및 포화 수성 나트륨 클로라이드로 세척하였다. 유기 층을 나트륨 설페이트로 건조하고, 여과하고 진공에서 연황색 고체로 농축하였다. 고체를 뜨거운 메탄올(300 mL)에 용해한 후 환류 가열하였다. 용액에 에틸 아세테이트(350 mL)를 첨가하고, 용매(300 mL)를 증류로 제거하였다. 추가 에틸 아세테이트를, 내부 온도가 70℃에 도달할 때까지 적가하였다. 용액을 실온으로 3시간에 걸쳐서 냉각하였다. 고체를 여과로 수집하고 진공 오븐(40℃)에서 16시간 동안 건조하여 백색 고체로서 표제 화합물(20.5 g, 59%)을 수득하였다: +ESI MS(M+H) 406.5; ¹H NMR(400 MHz, DMSO-d ₆) δ ppm 12.25-12.33(m, 1 H), 7.35-7.51(m, 3 H), 7.05-7.16(m, 1 H), 5.16-5.31(m, 1 H), 3.32-3.58(m, 4 H), 2.77(s, 2 H), 2.57(s, 2 H), 1.40-1.52(m, 4 H), 1.32(d, J=6.45 Hz, 6 H).

본 실시예에서, 이 실시예에 이용된 출발 물질, 2-메틸-1H-벤즈이미다졸-5-카복실산은 또한 이의 호변이성질체 형태, 2-메틸-1H-벤즈이미다졸-6-카복실산(또한, 2-메틸-3H-벤즈이미다졸-5-카복실산으로서 공지됨)으로서 존재하고, 각각은 동일한 CAS 번호 709-19-3으로 지정되는 것이 이해되어야 한다. 본 발명의 실시예는 2-메틸 벤즈이미다졸릴 기에 관하여 화합물의 2개의 호변이성질체 형태 중 하나로서 상기 도시되어 있고, 1-이소프로필-1'-(2-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온은 하기와 같이 도시된 호변이성질체 형태, 1-이소프로필-1'-(2-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-6-카본일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온과 동일함이 추가로 이해되어야 한다:

.

실시예 2

1-이소프로필-1'-(7- 메톡시 -2- 나프토일 )-4,6- 다이하이드로스피로 [ 인다졸 -5,4'-피페리딘]-7(1H)-온

다이클로로메탄(15 mL) 중 7-메톡시-2-나프토산(202 mg, 1.00 mmol) 및 1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온(329 mg, 1.05 mmol)의 용액에 트라이에틸아민(304 mg, 3.00 mmol)을 첨가하고 이어서 1-하이드록시벤조트라이아졸(149 mg, 1.10 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반한 후, 1-에틸-3-(3-다이메틸아미노프로필)카보다이이미드(211 mg, 1.10 mmol)를 첨가하고, 반응 생성물을 15시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 다이클로로메탄으로 희석하고, 포화 수성 나트륨 바이카보네이트 및 염수로 세척하였다. 유기 상을 마그네슘 설페이트로 건조하고, 여과하고 감압하에 농축하였다. 생성된 잔사를 플래시 크로마토그래피(에틸 아세테이트/헵탄 중 20 내지 100% 1:9 메탄올, 24 g 레디셉(RediSep: 등록상표) 골드 컬럼)로 정제하여 무색 포말로서 1-이소프로필-1'-(7-메톡시-2-나프토일)-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온(342 mg, 79%)을 수득하였다. +ESI(M+H) 432.3; ¹H NMR(600 MHz, 클로로포름-d) d ppm 1.38-1.50(m, 6 H) 1.53(br. s., 1 H) 1.60(br. s., 1 H) 1.71(br. s., 2 H) 2.60(s, 2 H) 2.81(s, 2 H) 3.47(d, J = 14.7 Hz, 2 H) 3.79(d, J = 14.1 Hz, 1 H) 3.86(br. s., 1 H) 3.92(s, 3 H) 5.37(dt, J = 13.4, 6.5 Hz, 1 H) 7.13(d, J = 2.4 Hz, 1 H) 7.19(dd, J = 9.4, 2.4 Hz, 1 H) 7.31(d, J = 9.4 Hz, 1 H) 7.38(s, 1 H) 7.74(d, J = 8.8 Hz, 1 H) 7.76-7.79(m, 2 H).

실시예 3

1'-(2- 아미노퀴놀린 -7-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[ 인다졸 -5,4'-피페리딘]-7(1H)-온

1'-(2-(t-부틸아미노)퀴놀린-7-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온

본원에 참조로서 혼입된 US 2012/0270893의 실시예 25, 단계 1에 기재된 것과 유사한 방법으로 표제 화합물을 제조하였다. +APCI(M+H) 474.6; ¹H NMR(400 MHz, CDCl₃, δ): 7.72(d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.64(s, 1 H), 7.55(d, J = 8.2 Hz, 1 H), 7.36(s, 1 H), 7.16(dd, J = 8.1, 1.3 Hz, 1 H), 6.59(d, J = 9.2 Hz, 1 H), 5.36(5중항, J = 6.6 Hz, 1 H), 3.31-3.96(m, 4 H), 2.79(s, 2 H), 2.58(s, 2 H), 1.55-1.75(m, 4 H), 1.52(s, 9 H), 1.44(d, J = 6.4 Hz, 6 H).

1'-[(2-아미노퀴놀린-7-일)카본일]-1-이소프로필-1,4-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(6H)-온 트라이플 루오로아세테이트 염

트라이플루오로아세트산(0.90 mL, 12 mmol)을 1'-(2-(t-부틸아미노)퀴놀린-7-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온(50 mg, 0.11 mmol)에 첨가하였다. 반응 생성물을 70℃로 3시간 동안 가열한 후, 실온으로 냉각하고, 밤새 교반시켰다. 반응 생성물을 건조 농축하고, 역상 HPLC로 정제하여 표제 화합물(41 mg, 93%)을 수득하였다. HPLC 체류 시간 2.11분을, 워터스 아틀란티스(Waters Atlantis) dC18 4.6 x 50 mm, 5 ㎛, 컬럼; 이동상 A: 물 중 0.05% TFA(v/v); 이동상 B: 아세토니트릴 중 0.05% TFA(v/v); 구배: 4.0분 이내에 95% A/5% B 선형 내지 5% A/95% B, 5.0분 동안 5% A/95% B에서 보유; 유속: 2.0 mL/분을 사용하여 측정하였다. +ESI(M+H) 418.2; ¹H NMR(500 MHz, CD₃OD_, δ) 8.36(d, J=9.27 Hz, 1 H), 7.97(d, J=8.05 Hz, 1 H), 7.66(s, 1 H), 7.53(dd, J=8.17, 1.34 Hz, 1 H), 7.44(s, 1 H), 7.12(d, J=9.27 Hz, 1 H), 5.39(5중항, J=13.23, 6.68 Hz, 1 H), 3.91(br. s., 1 H), 3.76(br. s., 1 H), 3.46(br. s., 2 H), 2.92(s, 2 H), 2.67(d, J=7.81 Hz, 2 H), 1.74(br. s., 2 H), 1.59(br. s., 2 H), 1.43(br. s., 6 H).

1'-[(2-아미노퀴놀린-7-일)카본일]-1-이소프로필-1,4-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(6H)-온

실시예 4

1'-(2-(t- 부틸아미노 )퀴놀린-7-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[ 인다졸 -5,4'-피페리딘]-7(1H)-온

실시예 5

1'-(1H-인다졸-5-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온

본원에 참조로서 혼입된 US 2011/0111046의 실시예 10A-1에 기재된 바와 같이 제조할 수 있다.

실시예 6

5-(1-이소프로필-7-옥소-1,4,6,7- 테트라하이드로스피로 [ 인다졸 -5,4'-피페리딘]-1'- 일카본일 )-1H- 인다졸 -3- 카보니트릴

본원에 참조로서 혼입된 US 2011/0111046의 실시예 11A-9에 기재된 바와 같이 제조할 수 있다.

실시예 7

2'-(t-부틸)-1-(1-메톡시이소퀴놀린-7-카본일)-4',6'-다이하이드로스피로[피페리딘-4,5'-피라졸로[3,4-c]피리딘]-7'(2'H)-온

본원에 참조로서 혼입된 WO 2012/056372의 실시예 55에 기재된 바와 같이 제조할 수 있다.

실시예 8

2'-(t-부틸)-1-(1H-인다졸-5-카본일)-2'H-스피로[피페리딘-4,5'- 피라노 [3,2-c]피라졸]-7'(6'H)-온

본원에 참조로서 혼입된 WO 2009/144554의 실시예 1.074에 기재된 바와 같이 제조할 수 있다.

실시예 9

소라펜(Soraphen: 등록상표)

상업적으로 구입할 수 있다.

실시예 10

1'-(1- 사이클로프로필 -4- 메톡시 -1H-인돌-6-카본일)-6-(1H- 테트라졸 -5-일) 스피로 [ 크로만 -2,4'-피페리딘]-4-온

본원에 참조로서 혼입된 US 2008/0171761에 기재된 바와 같이 제조할 수 있다.

실시예 11

5-(1-이소프로필-7-옥소-1,4,6,7-테트라하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-1'-카본일)-1H-인다졸-3-카보니트릴

본원에 참조로서 혼입된 US 2011/0111046에 기재된 바와 같이 제조할 수 있다.

실시예 12

(S)-N-(4-(4-(4- 이소프로폭시페녹시 ) 페닐 ) 부트 -3-인-2-일) 아세트아미드

본원에 참조로서 혼입된 US 2006/0178400에 기재된 바와 같이 제조할 수 있다.

실시예 13

N-(1-(4-(6-(4- 프로폭시페녹시 )피리딘-3-일) 페닐 )에틸) 아세트아미드

본원에 참조로서 혼입된 BMCL 2009, 5872, 화합물 11a/11b에 기재된 바와 같이 제조할 수 있다.

실시예 14

4'-(6-(5- 카바모일피리딘 -3-일)-4- 옥소스피로 [ 크로만 -2,4'-피페리딘]-1'-카본일)-2',6'- 다이에톡시 -[1,1'-바이페 닐 ]-3- 카복실산

본원에 참조로서 혼입된 WO 2010/002010에 기재된 바와 같이 제조할 수 있다.

실시예 15

N-(2-(2-((6-( 사이클로프로필메톡시 )피리딘-3-일) 옥시 ) 벤조 [d]티아졸-6-일)프로필) 아세트아미드

본원에 참조로서 혼입된 WO 2007/095601에 기재된 바와 같이 제조할 수 있다.

실시예 16

(1R,4S)-N-((S)-2- 하이드록시 -2- 메틸 -1- 페닐프로필 )-4-((4-( 트라이플루오로메틸 ) 페닐 ) 설폰아미도 ) 사이클로헥산 -1- 카복스아미드

본원에 참조로서 혼입된 WO 2011/0637306에 기재된 바와 같이 제조할 수 있다.

실시예 17

2,2,2- 트라이플루오로에틸 5-( 테트라데실옥시 )푸란-2- 카복실레이트

US 2012/0208807에 기재된 바와 같이 제조할 수 있다.

실시예 18

이소프로필 5-( 테트라데실옥시 )푸란-2- 카복실레이트

US 2012/0208807에 기재된 바와 같이 제조할 수 있다.

실시예 19

(5- 메틸 -2-옥소-1,3- 다이옥솔 -4-일) 메틸 -5-( 테트라데실옥시 )푸란-2- 카복실레이트

US 2012/0208807에 기재된 바와 같이 제조할 수 있다.

실시예 20

1-(3-(2-부틸-4-옥소-1,3,8- 트라이아자스피로[4.5]데크 -1-엔-8-카본일) 벤조 [b]티오펜-2-일)-3- 에틸우레아

본원에 참조로서 혼입된 US 2009/0253725에 기재된 바와 같이 제조할 수 있다.

실시예 21

(S)-N-(1-(3-(2-(4-( 사이클로프로필메톡시 ) 페녹시 )티아졸-5-일) 이속사졸 -5-일)에틸) 아세트아미드

본원에 참조로서 혼입된 WO 2007/095602에 기재된 바와 같이 제조할 수 있다.

실시예 22

N-(1-(4-(2-(4-( 사이클로프로필메톡시 ) 페녹시 )티아졸-5-일)페닐)에틸)아세트아미드

본원에 참조로서 혼입된 WO 2007/095603에 기재된 바와 같이 제조할 수 있다.

실시예 23

(S)-N-(4-(4-(4- 이소프로폭시페녹시 ) 페닐 )부탄-2-일) 아세트아미드

본원에 참조로서 혼입된 WO 2008/079610에 기재된 바와 같이 제조할 수 있다.

실시예 24

3-(4'-(N-((1S,4r)-4-((S)-3- 페닐모폴린 -4-카본일) 사이클로헥실 ) 설파모일 )-[1,1'-바이페닐]-4-일)프로판산

생물학적 프로토콜

환자에서 심상성 여드름의 치료 및/또는 예방에 있어서 본 발명의 화합물의 유용성은 하기 기재된 시험관내 및 생체내 분석에서의 활성에 의해 입증될 수 있다. 상기 분석은 또한 본 발명의 화합물의 활성이 다른 공지된 화합물의 활성과 비교할 수 있는 수단을 제공한다.

ACC1 및 ACC2 의 활성의 직접 억제

본 발명의 화합물의 ACC 억제 활성을 표준 과정에 기초한 방법에 의해 입증하였다. 본 발명의 화합물에 대하여 ACC1 및 ACC2 활성의 직접 억제를 재조합 인간 ACC1(rhACC1)(서열번호 1) 및 재조합 인간 ACC2(rhACC2)(서열번호 2)의 제조를 사용하여 측정하였다.

rhACC1 의 제조

전장 인간 ACC1 cDNA를 함유하는 재조합 배큘로바이러스로 감염된 SF9 세포(2 L)를 빙냉 용해 완충액[25 mM 트리스, pH 7.5; 150 mM NaCl; 10% 글리세롤; 5 mM 이미다졸(이엠디 바이오사이언스(EMD Bioscience), 미국 뉴저지주 깁스타운 소재); 2 mM TCEP(바이오벡트라(BioVectra), 캐나다 샬롯타운 소재); 벤조나아제 뉴클레아제(10000 U/100 g 세포 플레이트; 노바젠(Novagen), 미국 위스코신주 매디슨 소재); EDTA-무함유 프로테아제 억제제 칵테일(1 정제/50 mL; 로슈 디아그노스틱스(Roche Diagnostics), 독일 만하임 소재)]에 현탁하였다. 세포를 냉동-해동 3 사이클로 용해하고, 40,000 X g에서 40분 동안(4℃) 원심분리하였다. 상청액을 히스트랩(HisTrap) FF 조질 컬럼(지이 헬쓰케어(GE Healthcare), 미국 뉴저지주 피스카타웨이 소재) 위에 직접 로딩하고, 20 컬럼 용량(CV)에 걸쳐서 0.5 M 이하의 이미다졸 구배로 용리하였다. ACC1-함유 분획을 모으고, 25 mM 트리스(pH 7.5), 2mM TCEP, 10% 글리세롤로 1:5 희석하고, 캡토큐(CaptoQ)(지이 헬스케어) 컬럼 위에 직접 로딩하고, 20 CV에 걸쳐서 1 M 이하의 NaCl 구배로 용리하였다. λ 포스파타아제(100 U/10 μM 표적 단백질; 뉴 잉글랜드 바이오랩스(New England Biolabs), 미국 매사추세츠주 베벌리 소재)로 14시간 동안 4℃에서 항온처리하여 정제된 ACC1로부터 포스페이트 기를 제거하고, 오카다 산을 첨가하여(1 μM 최종 농도, 로슈 디아그노그틱스) 포스파타아제를 억제하였다. 정제된 ACC1을 4℃에서 6시간 투석하여 25 mM 트리스(pH 7.5), 2 mM TCEP, 10% 글리세롤, 0.5 M NaCl로 교환하였다. 분취액을 제조하고, -80℃에서 저장하였다.

rhACC1 억제의 측정

hACC1을, 50 μM ATP 반응에 대하여 제조자의 권고 조건을 사용하여 트랜스크리너(Transcreener) ADP 검출 FP 분석 키트(벨브룩 랩스(Bellbrook Labs), 미국 위스콘신주 매디슨 소재)를 사용하여 코스타(Costar) #3676(코스타(Costar), 미국 매사추세츠주 캠브릿지 소재) 384-웰 플레이트에서 분석하였다. 분석을 위한 최종 조건은 50 mM HEPES(pH 7.2), 10 mM MgCl₂, 7.5 mM 3칼륨 시트레이트, 2 mM DTT, 0.1 mg/mL BSA, 30 μM 아세틸-CoA, 50 ㎛ ATP, 및 10 mM KHCO₃이었다. 전형적으로, 반응 생성물(10 ㎕)을 120분 동안 25℃에서 작동시키고, 트랜스크리너 중지 및 검출 완충액(10 ㎕)을 첨가하고, 상기 조합을 실온에서 추가 1시간 동안 항온처리하였다. 데이타를 620 여기 Cy5 FP 일반적 이중 거울, 620 여기 Cy5 FP 필터, 688 방출(S) 및 688(P) 방출 필터를 사용하여 엔비젼(Envision) 형광 판독기(퍼킨엘머(PerkinElmer))에서 수득하였다.

rhACC2 의 제조

인간 ACC2 억제를 정제된 재조합 인간 ACC2(hrACC2)를 사용하여 측정하였다. 간단히 말하면, ACC2의 전장 사이토맥스(Cytomax) 클론을 캠브리지 바이오사이언스 리미티드(Cambridge Bioscience Limited)로부터 구입하고, 시퀀싱하고, PCDNA5 FRT TO-TOPO(인비트로겐(Invitrogen), 미국 캘리포니아주 칼스배드 소재)로 서브클로닝하였다. ACC2를 테트라사이클린 유도에 의해 CHO 세포에서 발현시키고, 1 mg/mL 테트라사이클린(인비트로겐, 미국 캘리포니아주 칼스배드 소재)을 함유하는 글루타민, 비오틴, 하이그로마이신 및 블라스티시딘을 갖는 DMEM/F12(5 L)에서 수확하였다. 이어서, ACC2를 함유하는 조건 배지를 소프트링크 소프트 방출 아비딘 컬럼(Softlink Soft Release Avidin Column)(프로메가(Promega), 미국 위스콘신주 매디슨 소재)에 적용하고, 5 mM 비오틴으로 용리하였다. ACC2(4 mg)를 95%의 추정 순도(A280에 의해 측정됨)를 갖는 0.05 mg/mL(A280에 의해 측정됨)의 농도로 용리하였다. 정제된 ACC2를 50 mM 트리스, 200 mM NaCl, 4 mM DTT, 2 mM EDTA, 및 5% 글리세롤에 투석하였다. 모아진 단백질을 냉동시키고 해동시 활성의 손실이 없도록 -80℃에서 저장하였다. ACC2 활성의 측정 및 ACC2 억제의 평가를 위해, 시험 화합물을 DMSO에 용해하고, 1%의 최종 DMSO 농도를 갖는 5x 스톡으로서 rhACC2 효소에 첨가하였다.

인간 ACC2 억제의 측정

hACC2를, 50 μM ATP 반응에 대하여 제조자의 권고 조건을 사용하여 트랜스크리너 ADP 검출 FP 분석 키트(벨브룩 랩스, 미국 위스콘신주 매디슨 소재)를 사용하여 코스타 #3676(코스타, 미국 매사추세츠주 캠브릿지 소재) 384-웰 플레이트에서 분석하였다. 분석을 위한 최종 조건은 50 mM HEPES(pH 7.2), 5 mM MgCl₂, 5 mM 3칼륨 시트레이트, 2 mM DTT, 0.1 mg/mL BSA, 30 μM 아세틸-CoA, 50 ㎛ ATP, 및 8 mM KHCO₃이었다. 전형적으로, 반응물(10 ㎕)을 50분 동안 25℃에서 작동시키고, 트랜스크리너 중지 및 검출 완충액(10 ㎕)을 첨가하고, 상기 조합을 실온에서 추가 1시간 동안 항온처리하였다. 데이타를 620 여기 Cy5 FP 일반적 이중 거울, 620 여기 Cy5 FP 필터, 688 방출(S) 및 688(P) 방출 필터를 사용하여 엔비젼) 형광 판독기(퍼킨엘머)에서 수득하였다.

상기 기재된 재조합 hACC1 및 재조합 hACC2 트랜스크리너 분석을 사용하여 결과를 하기 표 1에 요약하였다.

배양된 인간 세보사이트에서 드노보 지질생성의 억제

SZ95 세보사이트를, 10% 열-비활성화 소 태아 혈청, 1% 페니실린/스트렙토마이신, 1 mM 칼슘 클로라이드 및 5 ng/mL 재조합 인간 표피 성장 인자(라이프 테크(Life Tech), PHG0311)가 보충된 인간 세보사이트 성장 배지(HSGM)(세보메드(Sebomed: 등록상표) 배지(바이오크롬(Biochrom), F8205)에서 성장시켰다. 90% 포화상태(confluence)에서, 세포를 PBS로 3회 세척한 후 0.05% 트립신-EDTA로 분리하였다. 세포를 원심분리하고, 10% 챠콜-스트립 혈청(라이프 테크, 12676-029)을 함유하는 HSGM에서 재현탁하였다. 이어서, 세포를 0.25 x 10⁶ 세포/웰의 밀도로 24-웰 플레이트에 플레이팅하고, 밤새 항온처리하여 배양 플레이트에 세포 점착을 가능하게 하였다.

세포를 화합물의 반응 용량으로 처리하고, 각각의 용량을 3회 분석하였다. 간단히 말하면, 화합물을 DMSO 스톡에 용해하고, 챠콜-스트립 매질로 1:1000 희석하였다. 화합물이 없는 0.1% DMSO를 비히클 대조군으로서 사용하였다. 화합물 또는 비히클로 1시간 예비항온처리한 후, 0.25 μCi ¹⁴C-아세트산(아메리칸 라디오레이블드 케미칼스, ARC0158B)을 각각의 웰에 첨가하였다. 이어서, 플레이트를 추가 2시간 동안 항온처리하였다. 항온처리 기간의 끝에, 세포를 항온처리기로부터 제거하고, 얼음에 넣은 후, 빙냉 PBS로 2회 세척하여 유리 ¹⁴C-아세트산을 제거하였다. 플레이트를 밀봉하고, 분석 때까지 -20℃에서 저장하였다.

포유류 단백질 추출 시약(MPER, 피어스(Pierce), 78505)(125 ㎕)을 각각의 웰에 첨가하였다. 플레이트를 1시간 동안 실온에서 진탕하여 용해를 유도하였다. 용해물을 각각의 1.5 mL 폴리프로필렌 튜브로 옮기고, 웰을 PBS(175 ㎕)로 세척하고, 이를 용해물에 첨가하였다. 이어서, 1:1(v/v) 클로로포름:메탄올 용액(450 ㎕)을 각각의 튜브에 첨가한 후, 모든 튜브를 10초 동안 볼텍싱하고, 20,000 X g에서 5분 동안 실온에서 원심분리하여 유기 상으로부터 수성을 분리하였다. 분취액(25 ㎕)을 각각의 샘플의 바닥 유기 층으로부터 제거하고, 옵티페이스 슈퍼믹스(OptiPhase supermix)(퍼킨엘머, 1200-439) 섬광 유체(6 mL)에 첨가하였다. 지질로 혼입된 ¹⁴C의 카운트(count)를 섬광 계수로 평가하였다. DNL(지질로 혼입된¹⁴C의 카운트)을, EC₅₀ 값의 측정을 위해 세포로 처리된 비히클 대조군에서 DNL에 관하여 세포로 처리된 화합물로 나타내었다. 처리된 화합물의 부분집합을 위해, 각각의 샘플의 유기 층의 두번째 분취액(3 x 35 ㎕)을 제거하고 TLC 레인(아날테크 실리카 겔 지 플레이트(Analtech Silica Gel G Plates))에 적용하였다. 방사선표지된 지질을 2-용매 시스템을 사용하여 분해하였다. 에틸 아세테이트:이소프로필 알코올:CHCl₃:MeOH:0.25% KCl의 100:100:100:40:36 혼합물을 함유하는 용매 1 및 70:27:3의 헥산:다이에틸 에터:아세트산을 함유하는 용매 2를 혼합하였다. TLC 플레이트를 질소하에 30분 동안 건조하고, [¹⁴C]-교정기를 비어있는 레인에 첨가하였다. 밴드를, 몰레큘라 다이나믹스 스톰(Molecular Dynamics Storm) 860 포토이매저(PhosphorImager) 시스템을 사용하여 18 내지 36시간 포토이매서 스크린에 노출하여 시각화하고 정량화하였다.

상기 기재된 배양된 인간 세보사이트에서 드노보 지질생성의 억제에 대한 결과를 하기 표 1에 요약하고, 용량 반응 곡선(비히클 대조군의 %로서 플롯팅됨)을 도 2의 실시예 1 및 실시예 3에 대하여 나타내었다. 세포사이트 지질 부류에서 실시예 3 대 비히클의 효과를 TLC를 사용하여 시각화한 것을 도 4에 나타내었다.

[표 1]

¹n은 화합물이 시험된 횟수를 나타낸다.

건강한 인간 지원자에서 순환 및 피질 지질에 대한 DNL 기여의 평가

피지 및 순환 지질에 대한 DNL 기여를, 각각이 5명의 대상자로 이루어진 4개의 집단을 절차의 시기가 상이한 4개의 암(arm)으로 무작위한 병행 연구로 평가하였다. 대상자는 18 내지 50세를 포함하는 건강한 남성 또는 여성 지원자였다. "건강한"은 상세한 의료 이력, 혈압(BP) 및 맥박수 측정을 비롯한 전체 신체 검사, 12-리드 심전도(ECG), 및 임상 검사에 의해 확인된 임상적 이상이 없는 것으로서 정의된다. 체질량 지수는 18 내지 28 kg/m²를 포함하였다.

진입 기준을 충족시킨 적격한 대상자는 중수소화된 물(²H₂O)의 다중 경구 도입 투여량을 받기 위해 약 24시간 동안 0일에 임상 시험 연구 센터(CTRC)에 수용되었다. 입원환자가 CTRC에서 머무르는 동안, 대상자는 총 480 mL의 70% 중수소화된 물을 각각 60 mL씩 8개의 용량으로 나눈 도입 투여량을 받았다. 이러한 분취액을 24시간 기간에 걸쳐서 3시간마다 경구로 투여하였다. 모든 대상자는 14일까지 매일 경구 중수소화된 물 용량(60 ml의 70% ²H₂O)을 계속 취하였다. 대상자는 체수분 ²H₂O 풍부를 평가하기 위해 2일에 타액 샘플을 수득하도록 요청받았다.

모든 대상자는 5명의 외래환자 방문(후속 방문 포함함)을 위해 CTRC로 돌아왔다. 4 및 14일, 7 및 14일, 11 및 14일, 또는 14일에 발생하는 피지 수집을 위해 대상자를 무작위화하였다. 모든 외래환자 방문시, 체수분에서(혈장으로부터) 중수소화된 물의 풍부를 측정하기 위해 및 VLDL-지질의 측정을 위해 혈액 샘플을 취하였다. 14일 기간에 걸쳐서 상이한 시점에서 지질 생합성에 대한 DNL 지방산 기여로 중수소의 혼입을 평가하기 위해 혈액 및 피지 수집의 시차 시간을 허용하였다. 목표는 지방산으로 중수소의 혼입을 평가하기 위해 및 지질 생합성에 대한 DNL의 단편적인 기여를 평가하기 위해 사용된 안정 상태를 수립하는 것이다. 각각의 집단은, 시간 과정이 피지샘 분비 생성물에 대하여 아직 정의되지 않은 DNL의 이 연속체에 대한 측정점에 기여하였다.

피지 수집일에, 피지 지질을 세부테이프(등록상표)를 사용하여 수집하였다. 세부테이프(등록상표)의 적용 전에, 피부를 비누 및 물로 세척하여 파편을 씻어내고, 헥산 중에 포화된 거즈 패드로 닦아 지방을 제거하였다. 피부가 건조해지면, 세부테이프(등록상표) 시험 스트립을 탈지 포셉을 사용하여 이의 뒷면 종이를 벗겨내고 약간의 압력으로 세척된 피부에 부착하여 충분한 접착력을 확인하였다. 테이프를 다루는 사람은 수술용 장갑을 꼈다. 3개의 패치를 하기 부위에 놓았다: 양쪽 뺨(눈의 중간 라인의 꼬리)에 1개의 패치 및 이마(눈의 중간 라인의 꼬리)에 1개의 패치. 3시간 후, 패치를 제거하여 산-세척된 테플론(Teflon)-캡핑된 스크류 캡 바이알에 넣었다.

체수분 ²H₂O 풍부(전구체 풀 풍부)를 아세틸렌 방법으로 혈장 및 타액 샘플에서 측정하였다(문헌[Previs et al., 1996]). 혈장 샘플을 또한 10℃에서 50.4 Ti 베크만(Beckman) 회전기에서 30분 동안 40,000 rpm으로 초원심 분리를 2회 겪게 하여 유미지립을 제거한 후 3번째 초원심분리 단계(10℃에서 50.4 Ti 베크만 회전기에서 18시간 동안 40,000 rpm)를 겪게 하여 초저밀도 리포단백질(VLDL) 단편을 단리하였다. 이어서, VLDL을 박층 크로마토그래피(TLC)에 의해 리포단백질 트라이글리세리드(TG)의 단리를 위해 사용하였다. 총 지질을 피지 샘플로부터 클로로포름:메탄올로 추출하였다. 이어서, VLDL-TG 지방산 및 피지 총 지방산을, 기체 크로마토그래피/질량 분광계(GC/MS) 분석을 위한 제조시, 지방산 메틸 에스터로 트랜스-에스터화하였다. DB-17 또는 등가 컬럼을, 팔미트산의 M2 동위원소이성질체를 통해 MO를 나타내는 질량-대-전하 비(m/z) 270 내지 272에서 전자 충격 이온화 이온으로 지방산 메틸 에스터의 동위원소 풍부 분석을 위해 사용하였다. 과잉 M2(EM2) 및 과잉 M1(EM1) 샘플 풍부를, 샘플 풍부로부터 비표지된 기준(병렬로 실행)에서 천연 존재비 풍부를 빼서 측정하였다.

간의 드노보 지질생성으로부터 유도된(즉,아세틸-CoA 전구체로부터 "새롭게" 제조된) 조질 팔미테이트의 비율을 질량 동위원소 분포 분석(MIDA)을 사용하여 킨메드(KineMed)(미국 캘리포니아주 에머리빌 소재)에 의해 계산하였다. 간단히 말하면, EM1을 실험 데이타로부터 측정하였다. 이를 사용하여, 모든 팔미테이트가 p와 EM1 사이의 알려진 관계를 사용하여 새롭게 합성되는 경우, 알려진 n(팔미테이트에 대하여 중합체-22에서 반복 하위단위의 수) 및 측정된 p는 점근선(A*) 또는 최대 가능한 팔미테이트 풍부의 계산을 감안하였다. 하나가 결정되면, 실제 풍부와 점근선 정도를 비교하여 팔미테이트의 분획 합성을 측정하였다:

분획 팔미테이트 DNL = EM1/A* 또는 DNL(%) = EM1/A* x 100

데이타는, 지질 풀에 대한 DNL 유도된 팔미테이트의 기여율을 반영하는 값 또는 거의 안정 상태를 갖는 피지 지질 및 순환 지질(VLDL 트라이글리세리드)에 대한 드노보 합성된 팔미테이트의 시간에 따른 기여율을 나타낸다. 데이타를 도 1에 나타내었다.

건강한 인간 지원자의 피지 수준에서 실시예 1의 효과

다르게는 건강한 과체중 또는 비만 대상자를 임상 연구소에 수용하고, 실시예 1(200 mg BID) 또는 위약을 14일간 연속하여 경구로 복용시켰다. 연구일로부터 2일(전처리), 및 13 및 14일(후처리)에, 피지 생성을 세부미터(등록상표) 측정으로 평가하고, 지질 성분 확인 및 정량을 위해 피지를 수집하였다. 세부미터(등록상표) 측정 및 피지 수집이 수행될 피부 부위를 제조하기 위해, 피부 표면은 임의의 지질 및 잔해로부터 세정되어야 한다. 이마 및 볼의 표적된 부위를 오일-흡수 조직 또는 거즈를 사용하여 부드럽게 닦아내었다. 닦은 후, 70% 에탄올 용액에 미리적신 와이프 또는 거즈 패드를 사용하여 이마 및 볼을 닦았다. 세정 후, 피부를 건조시키고, 깨끗하고 교정된 세부미터(등록상표) SM 815(쿠라지 플러스 카자카(Courage + Khazaka), 독일 쾰른 소재)를 제조자의 지시에 따라 사용하여 세정 후 5분 및 3시간에 피지 측정을 수행하였다. 세부미터(등록상표)로 측정된 피지 수준을 위약 및 실시예 1로 처리된 대상자에 대한 전처리 기준선으로부터의 상대적인 변화로서 나타내고 도 4에 도시하였다.

피지 수집을 위해 세부테이프(등록상표) 기법을 사용하였다. 약 오전 9시에, 얼굴을 세정하고 5분 세정 후 세부미터 측정을 한 후, 4개의 세부테이프(등록상표) 스트립을 적용하였다: 2개의 패치를 눈의 중간 라인의 이마 두개골의 우측 및 좌측에 놓고, 2개의 패치를 눈의 중간 라인의 볼 꼬리에 놓았다. 세부테이프(등록상표)를 탈지 포셉을 사용하여 이의 뒷면 종이를 벗겨내고 약간의 압력으로 부착하여 충분한 접착력을 확인하였다. 테이프를 다루는 사람은 수술용 장갑을 꼈다. 1시간 후, 4개의 패치를 제거하고, 2개의 좌측 패치 및 2개의 우측 패치를 산-세척된 테플론-캡핑된 스크류 캡 바이알에 넣었다.

메타볼론(Metabolon)의 트루매스(TrueMass: 등록상표) 기술 플랫폼을 사용하여 세부테이프(등록상표) 샘플로부터 피지 지질 종을 정량화하였다. 이러한 피지 샘플의 분석은 각각의 피지 지질 부류에서 실시예 1 대 위약 효과의 평가를 가능하게 한다. 이러한 데이타를 위약 및 실시예 1로 처리된 대상자에 대하여 전처리 기준선으로부터 상대적인 변화로서 나타내었다. 개별적인 대상자 수준 및 신뢰 구간을 갖는 방식을 도시하는 박스 플롯을 피지 트라이글리세리드, 왁스 에스터 및 유리 지방산에 대하여 나타내었다(도 5).

시리아 햄스터의 말론일 - CoA 수준에서 ACCi 의 영향 평가

수컷 시리안 골드 햄스터를 약 10주에 표준 햄스터 사료 및 물로 임의량 유지하였다. 국소 전달을 위해 실시예 3을 100 mg/ml의 농도로 70:30 에탄올:프로필렌 글리콜로 이루어진 비히클 중 용액으로 제조하였다. 단일 용량(5 ㎕/귀)의 국소 투여를, 투여 순서에 따라 2분 간격을 고수하여 피펫(2 내지 10 μL) 끝으로 햄스터 귀에 적용하였다. 투여 시간은 우리에 동물을 돌려보내기 전에 약 1 ㎠ 면역에 걸쳐서 고르게 펼치고 흡수/건조하기 위한 제형을 감안하였다. 경구 투여와 유사하게, 광 주기로 2시간 정도 2분 간격으로 각각의 햄스터에 단일 경구 섭식으로서 100 mg/kg 실시예 8 또는 비히클(20 mM 트리스(pH 7.4) 중 1% 하이드록시프로필 메틸셀룰로스 아세테이트 숙시네이트)을 전달하기 위해 10 mL/kg의 투여 용량을 투여하였다. 용량 투여로부터 1시간 후, 동물을 CO₂ 질식으로 희생시켰다.

간단히 말하면, 귀 피부 샘플을 하기 방식으로 말론일-CoA 분석을 위해 제조하였다. 하나의 8 mm 말단 생검 펀치(동물당 2개)를 귀 연골에서 해부학상 "V" 바로 위에 뚫어 샘플 면적을 정상화하였다(8 mm 지름 Sklar Tru-punch-Sklar 기구를 사용함). 이어서, 펀치를 2개 층(전측 및 후측)으로 나눴다. 전측(앞쪽) 표면을 신속하게 냉동시키고(-80℃) 분석을 위해 보유하였다.

냉동된 조직을 2 mL 폴리프로필렌 원심분리 튜브 내에서 폴리트론을 사용하여 5% 빙냉 트라이클로로아세트산(1 mL) 중에서 균질화하였다. 중간체 내부 표준 용액의 분취액(10 ㎕)을 각각의 균질액 및 최종 교정 용액에 넣고, 간단히 말하면 볼텍싱하였다. 균질액을 14,000 rpm에서 4℃에서 5분 동안 원심분리하였다. 고체 상을 추출하기 전에, 워터스(Waters) C18 오아시스(Oasis)(30 mg) 고체 상 추출 카트리지를 워터스 유리 진공 매니폴드를 사용하여 메탄올(1 mL)로 조절한 후 물(1 mL)로 조절하였다. 상청액 및 교정 용액을 고체 상 추출 카트리지 위에 로딩한 후 물(2.5 mL)로 세척하고 13 x 100 mm 유리 시험 튜브 내에서 메탄올(1 mL)로 용리하였다. 메탄올 상청액을 1 mL 96-웰 폴리프로필렌 플레이트 위에 로딩하고 질소하에 30℃에서 증발시켰다. 샘플을 10 mM 암모늄 바이카보네이트(pH 9.5)(100 ㎕)로 재구성하고 96-웰 플레이트를 밀봉한 후 플레이트 볼텍서에서 2분 동안 볼텍싱하였다. 조직 말론일-CoA 수준을 메타볼로믹스 래보래토리 샌포드-부른함(Metabolomics Laboratory Sanford-Burnham) 의료 연구소(미국 플로리다주 올랜도 소재)에서 LCMS로 측정하였다. 햄스터 귀 피부 말론일-CoA 수준을 비히클 대조군의 %로서 나타내고 도 6에 도시하였다.

시리아 햄스터의 순환 및 피질 지질에 대한 DNL 기여의 평가

150 내지 200 g 무게의 수컷 시리안 골드 햄스터(22 내지 23주)를 표준 햄스터 사료 및 12시간 명암 주기에서 임의량 유지하였다. ²H₂O 표지의 시작시, 동물에게 아침에 8% ²H₂O 용액을 3.5 ml/kg으로 복강내 주사한 후 1, 4, 7, 14 또는 20일(n=6 매일) 동안 8% ²H₂O 임의량을 유지하였다. 적절한 표지 기간을 완료한 후, 햄스터를 CO₂ 질식으로 희생시키고 조직을 제거하고 액체 질소에서 급속 냉동하였다. 혈액(약 4 내지 5 ml)을 심장 스틱을 통해 주머니에 수득한 후 BD 진공채혈기 + 플라스틱 K₂EDTA 튜브(카탈로그 번호 368589)로 옮겼다. 혈장을 실온에서 10분 동안 1300 RCF에서 원심분리하여 혈액을 분리하고 즉시 별도의 튜브로 옮기고 드라이아이스에서 냉동하였다. 햄스터 귀를 펀치 생검으로 제거하였다(8 mm 지름 Sklar Tru-punch-Sklar 기구를 사용함). 펀치 생검을 각각의 귀의 귀 연골에서 해부학상 "V" 바로 위에 뚫어 샘플 수집 부위를 표준화하였다. 이어서, 펀치를 2개 층(전측 및 후측)으로 나눴다. 전측(앞쪽) 표면을 분석을 위해 보유하였다. 간 샘플을 위해, 두 갈래로 나뉜 내측 엽을 제거하고, 염수로 헹구고, 멸균 흡착지에 엽의 절단 끝을 놓고 모세관 작용을 사용하여 혈액을 빼냈다. 이어서, 간 엽을 액체 질소에서 급속 냉동하였다. 질량 동위원소 분포 분석(MIDA)(문헌[Hellerstein, 1999])을 사용하여 피지 및 순환 지질에 대한 DNL의 기여율을 측정하기 위해 조직 및 혈장을 킨메드(미국 캘리포니아주 에머리빌 소재)에 보냈다. 데이타는, 지질 풀에 대한 DNL 유도된 팔미테이트의 기여율을 반영하는 값 또는 거의 안정 상태를 갖는 피지 지질 및 순환 지질(VLDL 트라이글리세리드)에 대한 드노보 합성된 팔미테이트의 시간에 따른 기여율을 나타낸다. 데이타를 도 7에 나타내었다.

시리아 햄스터의 DNL 에서 경구 및 국소 ACCi 의 효과

약 10주에 수컷 시리안 골드 햄스터를 표준 햄스터 사료 및 물로 임의량 유지하였다. 실험일에 광 주기로 2시간에서, 2분 간격으로 각각의 햄스터에 단일 경구 섭식으로서 100 mg/kg 실시예 8 또는 대응 비히클(20 mM 트리스(pH 7.4) 중 1% 하이드록시프로필 메틸셀룰로스 아세테이트 숙시네이트)을 전달하기 위해 10 mL/kg의 투여 용량을 투여하였다. 국소 전달을 위해 실시예 3을 100 mg/ml의 농도로 70:30 에탄올:프로필렌 글리콜로 이루어진 비히클 중 용액으로 제조하였다. 단일 용량(5 ㎕/귀)의 국소 투여를, 투여 순서에 따라 2분 간격을 고수하여 피펫(2 내지 10 μL) 끝으로 햄스터 귀에 적용하였다. 투여 시간은 우리에 동물을 돌려보내기 전에 약 1 ㎠ 면역에 걸쳐서 고르게 펼치고 흡수/건조하기 위한 제형을 감안하였다. 투여 1 시간 후, 각각의 동물은 2분 간격 시간 포맷에 따라 ¹⁴C-표지된 아세테이트(염수에 희석된 ARC0158B)의 IP 주사를 받았다. 각각의 동물은 체중에 기초하여 개별적으로 계산된 양의 ¹⁴C-아세테이트를 받았다(2 μl/g의 투여 용량 중 0.1 μCi/g). ¹⁴C-아세테이트 주사로부터 1시간 후, 동물을 CO₂ 질식으로 희생시켰다.

드노보 지질생성 측정(지질에 대한 ¹⁴C 혼입)을 위해 간 및 귀 피부를 수집하였다. 간단히 말하면, 총 약 400 mg 간의 2개의 간 펀치를 각각의 동물의 두 갈래로 나뉜 중간 엽으로부터 수집하고(8 mm 지름 Sklar Tru-punch-Sklar 기구를 사용함), 염수로 헹구고 닦아서 건조하였다. 조직을 미리 칭량된 2.5 M NaOH(1.5 mL)를 함유하는 유리 튜브(PTFE 라인 캡이 장착된 파이렉스(Pyrex) 9826-16 x 125 mm)에 넣었다.

분석을 위해 귀 피부 샘플을 하기 방식으로 제조하였다. 하나의 8 mm 말단 생검 펀치(동물당 2개)를 귀 연골에서 해부학상 "V" 바로 위에 뚫어 샘플 면적을 정상화하였다(8 mm 지름 Sklar Tru-punch-Sklar 기구를 사용함). 이어서, 펀치를 2개 층(전측 및 후측)으로 나눴다. 전측(앞쪽) 표면을 분석을 위해 보유하였다. 전측 피부를 미리 칭량된 2.5 M NaOH(1.5 mL)를 함유하는 유리 튜브((PTFE 라인 캡이 장착된 파이렉스 826-16 x 125 mm)에 넣었다.

연구가 완료되자마자, NaOH 중 간 및 귀 피부 샘플을 칭량하고, 이 무게를 사용하여 수집된 조직의 질량을 계산하였다. 캡핑된 튜브를, 조직이 완전히 분해될 때까지(약 4 내지 6시간, 가열 동안 약하게 볼텍싱 2 내지 3회) 건조 오븐에서 가열하였다(약 60℃). 분해 후 냉각 절대 에탄올(2.5 mL)을 각각의 샘플에 첨가하였다. 튜브를 재캡핑하고, 60초 동안 격렬하게 혼합하고(볼텍싱하고), 밤새 실온에서 진정시켰다. 석유 에터(4.8 mL)를 각각의 튜브에 첨가하고, 재캡핑하고, 샘플을 격렬하게 혼합하였다(60 초). 샘플을 소르발(Sorvall) RT6000(5분 동안 1500 x g)에서 원심분리하여 유기 및 수성 상을 분리하였다. 생성된 위쪽 유기 상을 조심스러운 흡인에 의해 제거하고 버렸다. 농축된 12 M HCl(0.6 mL)을 각각의 샘플(계면 물질을 포함함)의 남아 있는 수성 상에 첨가하고, 캡핑하고 60초 동안 격렬하게 볼텍싱하였다. 산성화된 수성 상을 석유 에터(4.8 mL)로 추출한 후 소르발 RT6000(5분 동안 1500 x g)에서 원심분리하여 유기 및 수성 상을 분리하였다. 위쪽 유기 상을 제거하고/20 mL 섬광 바이알에 수집하고 캡핑하였다. 남아있는 수성 상(계면 물질을 포함함)을 다시 석유 에터(4.8 mL)로 추출하였다. 격렬하게 볼텍싱하고 60초 후, 샘플을 소르발 RT6000(5분 동안 1500 x g)에서 원심분리하여 유기 및 수성 상을 분리하였다. 위쪽 유기 상을 제거하고 20 ml 섬광 바이알에 이전 추출물과 함께 모았다. 모아진 유기 추출물을 실온에서 N₂(약 2시간)의 완류하에 건조 증발시켰다. 아쿠아솔(Aquasol)-2 섬광 유체(10 mL)(또는 다른 혼화성 섬광 유체)를 각각의 바이알에 첨가하고 볼텍싱 후 샘플을 적절한 섬광 계수기(예를 들면, 왈락 락-베타(Wallac Rack-Beta) 1409 LSC)에서 계수하였다.

추출 후 유기 상에 존재하는 ¹⁴C로의 ¹⁴C-아세테이트의 전환 계수는 DNL을 나타낸다. 데이타를 비히클 대조군에 대한 %로서 나타내고 도 8에 도시하였다.

시리아 햄스터에서 햄스터 위 트라이글리세리드 함량에 대한 ACC 억제 효과의 평가

150 내지 200 g 무게의 수컷 시리아 골드 햄스터(22 내지 23주)를 표준 햄스터 사료 및 12시간 명암 주기에서 임의량 유지하였다. 햄스터를 19일 동안 하루에 한번 30 mg/kg의 실시예 8 또는 비히클(20 mM 트리스(pH 7.4) 중 1% 하이드록시프로필 메틸셀룰로스 아세테이트 숙시네이트)로 처리하였다. 연구 기같의 끝에, 동물을 CO₂ 질식으로 안락사시켰다. 햄스터 귀를 펀치 생검으로 제거하였다(8 mm 지름 Sklar Tru-punch-Sklar 기구를 사용함). 펀치 생검을 각각의 귀의 연골에서 해부학상 "V" 바로 위를 뚫어 샘플 수집 부위를 표준화하였다. 이어서, 펀치를 2개 층(전측 및 후측)으로 나눠다. 전측(앞쪽) 표면을 분석을 위해 보유하였다. 간 샘플을 위해, 두 갈래로 나뉜 내측 엽을 제거하고, 염수로 헹구고, 멸균 흡착지에 엽의 절단 끝을 놓고 모세관 작용을 사용하여 혈액을 빼내었다. 이어서, 간엽을 액체 질소에서 급송 냉동시켰다. 2개의 퀴아젠(Qiagen) 3 mm 텅스텐 비드를 균질화 완충액(메탄올:물 = 1:1 v/v)((500 μL)과 함께 햄스터 귀 피부의 개별적인 전측 생검을 함유하는 튜브에 첨가하였다. 샘플을 5분 동안 퀴아젠 조직용해기에서 25회 빈도로 균질화하였다. 귀 피부 트라이글리세리드 함량을 LC-MS를통해 AB SCIEX Qtrap 5500에서 측정하였다. 균질화 후, 지질을 200 nM의 농도로 하기 내부 표준물을 함유하는 다이클로로메탄:이소프로판올:메탄올(25:10:65, v/v/v)을 갖는 균질액으로부터 추출하였다: 글리세릴 트라이헵타데카노에이트, 1,2-다이논아데카노인, 콜레스테릴 헵타데카노에이트, 1,2-다이라우로일-sn-글리세로-3-포스포콜린, 1-헵타데카노일-2-하이드록시-sn-글리세로-3-포스포콜린, 및 팔미토일-L-카르니틴-(N-메틸-d₃) 하이드로클로라이드. 이어서, 지질 추출물을 AB Sciex QTRAP 5500 질량 분석계가 결합된 워터스 액퀴티(Waters Acquity) UPLC를 사용하여 UPLC-MS/MS로 분석하였다. 지질 부류를 워터스 액퀴티 UPLC BEH300 C4 컬럼, 1.7 ㎛, 2.1 x 50 mm에서 역상 크로마토그래피로 분리하였다. 이어서, 지질 종을 다중 반응 모니터링(MRM) 방식으로 양이온 전자분무 이온화를 사용하여 질량 분석계에서 분석하였다. LC 크로마토그램 피크 통합을 AB 사이엑스 멀티콴트(Sciex MultiQuant) 소프트웨어를 사용하여 수행하였다. 햄스터 귀 피부 트라이글리세리드 수준(mg/g 조직)을 비히클 및 실시예 8에 대하여 도 9에 나타내었다.

약동학 약물 상호작용

7개의 주요 P450 이소폼(CYP3A, CYP1A2, CYP2B6, CYP2C8, CYP2C9, CYP2C19, 및 CYP2D6)을 억제하는 실시예 1의 능력을 환자 간 마이크로솜 및 프로브 기질을 사용하여 조사하였다. 시험관내 연구로부터 측정된 30 μM 초과의 IC₅₀ 값에 기초하여, 실시예 1은 청소율의 기본 메카니즘을 구성하는 CYP3A, CYP1A2, CYP2B6, CYP2C8, CYP2C9, CYP2C19, 또는 CYP2D6에 대한 화합물과 경쟁적 약동한 약물 상호 작용을 입증하는 것으로 예측되지 않았다.

인간 연구 논의

실시예 1을 180명의 대상자에게 투여하였고, 안전하고 일반적으로 내성이 좋음을 발견하였다. 800 mg 이하의 단일 경구 투여량(분할 투여량)을 건강한 마른 대상자 및 과체중 대상자에게 투여하고, 14일 동안 400 mg 이하의 반복 투여량(200 mg BID로서 투여됨)을 건강한 대상자, 및 2형 단백질 과체중 및 비만 대상자에게 투여하였다. 유해한 사건의 빈도에서 용량-관련된 또는 기간-관련된 증가는 관찰되지 않았고, 최대 내량은 수립되지 않았다. 실시예 1의 경구 흡수는 금식 상태에서 투여 후 약 1 내지 2시간에서 및 절식 상태에서 약 3 내지 4시간에서 발생하는 중간 Tmax로 신속하였다. 음식은 식사 시간과 무관하게 투여량을 지원하는 실시예 1의 흡수 정도가 아니라 속도를 적당히 감소시켰다. 실시예 1에 대한 말단 상 반감기는 약 10 내지 13시간이었다. 노출(AUC 및 Cmax)은 600 mg 이하의 단일 용량으로 용량-비례적으로 증가하였다.

다양한 지질 풀, 예컨대 초저밀도 리포단백질 트라이글리세리드(VLDL-TG) 및 피지에 대한 DNL의 상대적인 기여를 측정하기 위해 건강한 대상자에서 방법론 연구를 수행하였다. 상기 연구는, 환자 피지가 다른 지질 풀에 비해 국소화된 DNL에 매우 의존함을 입증하였다.

실시예 1은 위약에 비해 처리된 대상자의 기준선으로부터 피지 수준을 49% 초과로 감소시켰다. 특이적 지질 부류의 추가 분석은 피지에서 주요 지질 부류인 피지 트라이글리세리드를 위약에 비해 66%까지 감소하였다. 피지 유리 지방산 및 왁스 에스터의 수준은(이들은 또한 DNL에 의존함), 위약 처리된 대상자에 비해 실시예 1이 처리된 대상자에서 각각 약 49% 및 53%까지 감소하였다.

요약하면, 실시예 1은 피지의 생성을 80% 이하로 감소시켜 건강한 인간 지원자에서 DNL을 기준선과 비교하여 49%까지 약물-의존적으로 억제하는 이중 ACC1/ACC2 억제제이다(도 4). 특이적 지질 부류의 분석은 피지에서 주요 지질 부류인 피지 트라이글리세리드가 66%까지 감소함을 입증하였다(도 5). 피지 유리 지방산 및 왁스 에스터의 수준은(이들은 또한, DNL에 의존함) 또한 위약 처리된 대상자에 비해 실시예 1이 처리된 대상자에서 감소하였다(도 5). 이에 반해, DNL에 의존하지 않는 유리 콜레스테롤은 위약에 비해 변화를 보이지 않았다. 스쿠알렌 수준은(이는 또한 DNL에 의존하지 않음) 위약에 비해 2.6배 증가를 보였다.

방사 측정 ACC1 및 ACC2 억제 분석 설명

ACC 억제 연구를 위해, 시험 화합물을 다이메틸 설폭사이드(DMSO)에 용해하고, 10 μM 내지 0.3 nM의 최종 화합물 농도 범위를 갖는 11점 용량 반응에서 실행하기 위해 DMSO에 연속적으로 희석하였다. 분취액(1 ㎕)을 96-웰 플레이트에 두번씩 첨가하고, 동일한 용량의 DMSO를 대조군 웰에 첨가하였다. 효소 용액을 50 mM HEPES(pH 7.5), 10 mM MgCl₂, 10 mM 3칼륨 시트레이트, 6 mM DTT, 0.75 mg/mL BSA, 및 0.8 ㎍/mL ACC를 함유하는 완충액에서 30분 동안 37℃에서 활성화하였다. 10분 동안 효소-화합물 예비항온처리 후, 기질 용액(2.4 mM 아세틸-CoA, 38.4 mM KHCO₃, 1.6 mM NaH[¹⁴C]O₃, 및 8.0 mM ATP 함유)을 첨가하여 흄 후드에서 실온에서 반응을 개시하였다. 웰당 최종 분석 용량(100 ㎕)은 46 mM HEPES(pH 7.5),7.5 mM MgCl₂, 7.5 mM 3칼륨 시트레이트, 2.8 mM DTT, 0.5 mg/mLBSA, 2.0 mM ATP, 600 μM 아세틸-CoA 3리튬 염, 9.6 mM 칼륨 바이카보네이트, 0.6 ㎍/mL hACC1 또는 hACC2, 및 0.4 mM NaH[¹⁴C]O₃(58 mCi/mmol)으로 구성되었다. 20분 후, CO₂만큼 미반응된 NaHCO₃의 부수물과 함께 3 N 염산(HCl)을 첨가하여 반응을 종료하였다. 플레이트를 밤새 50℃에서 건조하여 [¹⁴C]O₂ 유리를 완료하였다. 다음날, 물(30 ㎕)을 [¹⁴C]말론일-CoA를 함유하는 건조된 웰에 첨가한 후, 옵티페이스 슈퍼믹스 액체 섬광 유체(95 ㎕)를 첨가하였다. 플레이트를 격렬하게 진탕하고, 밀봉하고, 마이크로베타(Microbeta) LSC 발광 계수기로 옮겨 각각의 분석 웰에서 ¹⁴C의 양을 정량하였다.

방사 측정 분석의 결과를 하기 표 2에 제시하였다.

[표 2]

¹n은 화합물이 시험된 횟수를 나타낸다.

참조 문헌

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Met Phe Arg Asn Glu Arg Ala 145 150 155 160 Ile Arg Phe Val Val Met Val Thr Pro Glu Asp Leu Lys Ala Asn Ala 165 170 175 Glu Tyr Ile Lys Met Ala Asp His Tyr Val Pro Val Pro Gly Gly Pro 180 185 190 Asn Asn Asn Asn Tyr Ala Asn Val Glu Leu Ile Leu Asp Ile Ala Lys 195 200 205 Arg Ile Pro Val Gln Ala Val Trp Ala Gly Trp Gly His Ala Ser Glu 210 215 220 Asn Pro Lys Leu Pro Glu Leu Leu Leu Lys Asn Gly Ile Ala Phe Met 225 230 235 240 Gly Pro Pro Ser Gln Ala Met Trp Ala Leu Gly Asp Lys Ile Ala Ser 245 250 255 Ser Ile Val Ala Gln Thr Ala Gly Ile Pro Thr Leu Pro Trp Ser Gly 260 265 270 Ser Gly Leu Arg Val Asp Trp Gln Glu Asn Asp Phe Ser Lys Arg Ile 275 280 285 Leu Asn Val Pro Gln Glu Leu Tyr Glu Lys Gly Tyr Val Lys Asp Val 290 295 300 Asp Asp Gly Leu Gln Ala Ala Glu Glu Val Gly Tyr Pro Val Met Ile 305 310 315 320 Lys Ala Ser Glu Gly Gly Gly Gly Lys Gly Ile Arg Lys Val Asn Asn 325 330 335 Ala Asp Asp Phe Pro Asn Leu Phe Arg Gln Val Gln Ala Glu Val Pro 340 345 350 Gly Ser Pro Ile Phe Val Met Arg Leu Ala Lys Gln Ser Arg His Leu 355 360 365 Glu Val Gln Ile Leu Ala Asp Gln Tyr Gly Asn Ala Ile Ser Leu Phe 370 375 380 Gly Arg Asp Cys Ser Val Gln Arg Arg His Gln Lys Ile Ile Glu Glu 385 390 395 400 Ala Pro Ala Thr Ile Ala Thr Pro Ala Val Phe Glu His Met Glu Gln 405 410 415 Cys Ala Val Lys Leu Ala Lys Met Val Gly Tyr Val Ser Ala Gly Thr 420 425 430 Val Glu Tyr Leu Tyr Ser Gln Asp Gly Ser Phe Tyr Phe Leu Glu Leu 435 440 445 Asn Pro Arg Leu Gln Val Glu His Pro Cys Thr Glu Met Val Ala Asp 450 455 460 Val Asn Leu Pro Ala Ala Gln Leu Gln Ile Ala Met Gly Ile Pro Leu 465 470 475 480 Tyr Arg Ile Lys Asp Ile Arg Met Met Tyr Gly Val Ser Pro Trp Gly 485 490 495 Asp Ser Pro Ile Asp Phe Glu Asp Ser Ala His Val Pro Cys Pro Arg 500 505 510 Gly His Val Ile Ala Ala Arg Ile Thr Ser Glu Asn Pro Asp Glu Gly 515 520 525 Phe Lys Pro Ser Ser Gly Thr Val Gln Glu Leu Asn Phe Arg Ser Asn 530 535 540 Lys Asn Val Trp Gly Tyr Phe Ser Val Ala Ala Ala Gly Gly Leu His 545 550 555 560 Glu Phe Ala Asp Ser Gln Phe Gly His Cys Phe Ser Trp Gly Glu Asn 565 570 575 Arg Glu Glu Ala Ile Ser Asn Met Val Val Ala Leu Lys Glu Leu Ser 580 585 590 Ile Arg Gly Asp Phe Arg Thr Thr Val Glu Tyr Leu Ile Lys Leu Leu 595 600 605 Glu Thr Glu Ser Phe Gln Met Asn Arg Ile Asp Thr Gly Trp Leu Asp 610 615 620 Arg Leu Ile Ala Glu Lys Val Gln Ala Glu Arg Pro Asp Thr Met Leu 625 630 635 640 Gly Val Val Cys Gly Ala Leu His Val Ala Asp Val Ser Leu Arg Asn 645 650 655 Ser Val Ser Asn Phe Leu His Ser Leu Glu Arg Gly Gln Val Leu Pro 660 665 670 Ala His Thr Leu Leu Asn Thr Val Asp Val Glu Leu Ile Tyr Glu Gly 675 680 685 Val Lys Tyr Val Leu Lys Val Thr Arg Gln Ser Pro Asn Ser Tyr Val 690 695 700 Val Ile Met Asn Gly Ser Cys Val Glu Val Asp Val His Arg Leu Ser 705 710 715 720 Asp Gly Gly Leu Leu Leu Ser Tyr Asp Gly Ser Ser Tyr Thr Thr Tyr 725 730 735 Met Lys Glu Glu Val Asp Arg Tyr Arg Ile Thr Ile Gly Asn Lys Thr 740 745 750 Cys Val Phe Glu Lys Glu Asn Asp Pro Ser Val Met Arg Ser Pro Ser 755 760 765 Ala Gly Lys Leu Ile Gln Tyr Ile Val Glu 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Ser Gly Ile Arg Gly His 980 985 990 Met Lys Ala Val Val Met Asp Leu Leu Arg Gln Tyr Leu Arg Val Glu 995 1000 1005 Thr Gln Phe Gln Asn Gly His Tyr Asp Lys Cys Val Phe Ala Leu 1010 1015 1020 Arg Glu Glu Asn Lys Ser Asp Met Asn Thr Val Leu Asn Tyr Ile 1025 1030 1035 Phe Ser His Ala Gln Val Thr Lys Lys Asn Leu Leu Val Thr Met 1040 1045 1050 Leu Ile Asp Gln Leu Cys Gly Arg Asp Pro Thr Leu Thr Asp Glu 1055 1060 1065 Leu Leu Asn Ile Leu Thr Glu Leu Thr Gln Leu Ser Lys Thr Thr 1070 1075 1080 Asn Ala Lys Val Ala Leu Arg Ala Arg Gln Val Leu Ile Ala Ser 1085 1090 1095 His Leu Pro Ser Tyr Glu Leu Arg His Asn Gln Val Glu Ser Ile 1100 1105 1110 Phe Leu Ser Ala Ile Asp Met Tyr Gly His Gln Phe Cys Ile Glu 1115 1120 1125 Asn Leu Gln Lys Leu Ile Leu Ser Glu Thr Ser Ile Phe Asp Val 1130 1135 1140 Leu Pro Asn Phe Phe Tyr His Ser Asn Gln Val Val Arg Met Ala 1145 1150 1155 Ala Leu Glu Val Tyr Val Arg Arg Ala Tyr Ile Ala Tyr Glu Leu 1160 1165 1170 Asn Ser Val Gln His Arg Gln Leu Lys Asp Asn Thr Cys Val Val 1175 1180 1185 Glu Phe Gln Phe Met Leu Pro Thr Ser His Pro Asn Arg Gly Asn 1190 1195 1200 Ile Pro Thr Leu Asn Arg Met Ser Phe Ser Ser Asn Leu Asn His 1205 1210 1215 Tyr Gly Met Thr His Val Ala Ser Val Ser Asp Val Leu Leu Asp 1220 1225 1230 Asn Ser Phe Thr Pro Pro Cys Gln Arg Met Gly Gly Met Val Ser 1235 1240 1245 Phe Arg Thr Phe Glu Asp Phe Val Arg Ile Phe Asp Glu Val Met 1250 1255 1260 Gly Cys Phe Ser Asp Ser Pro Pro Gln Ser Pro Thr Phe Pro Glu 1265 1270 1275 Ala Gly His Thr Ser Leu Tyr Asp Glu Asp Lys Val Pro Arg Asp 1280 1285 1290 Glu Pro Ile His Ile Leu Asn Val Ala Ile Lys Thr Asp Cys Asp 1295 1300 1305 Ile Glu Asp Asp Arg Leu Ala Ala Met Phe Arg Glu Phe Thr Gln 1310 1315 1320 Gln Asn Lys Ala Thr Leu Val Asp His Gly Ile Arg Arg Leu Thr 1325 1330 1335 Phe Leu Val Ala Gln Lys Asp Phe Arg Lys Gln Val Asn Tyr Glu 1340 1345 1350 Val Asp Arg Arg Phe His Arg Glu Phe Pro Lys Phe Phe Thr Phe 1355 1360 1365 Arg Ala Arg Asp Lys Phe Glu Glu Asp Arg Ile Tyr Arg His Leu 1370 1375 1380 Glu Pro 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Tyr Val Thr Lys Asp Leu Leu 1580 1585 1590 Gln Ser Lys Arg Phe Gln Ala Gln Ser Leu Gly Thr Thr Tyr Ile 1595 1600 1605 Tyr Asp Ile Pro Glu Met Phe Arg Gln Ser Leu Ile Lys Leu Trp 1610 1615 1620 Glu Ser Met Ser Thr Gln Ala Phe Leu Pro Ser Pro Pro Leu Pro 1625 1630 1635 Ser Asp Met Leu Thr Tyr Thr Glu Leu Val Leu Asp Asp Gln Gly 1640 1645 1650 Gln Leu Val His Met Asn Arg Leu Pro Gly Gly Asn Glu Ile Gly 1655 1660 1665 Met Val Ala Trp Lys Met Thr Phe Lys Ser Pro Glu Tyr Pro Glu 1670 1675 1680 Gly Arg Asp Ile Ile Val Ile Gly Asn Asp Ile Thr Tyr Arg Ile 1685 1690 1695 Gly Ser Phe Gly Pro Gln Glu Asp Leu Leu Phe Leu Arg Ala Ser 1700 1705 1710 Glu Leu Ala Arg Ala Glu Gly Ile Pro Arg Ile Tyr Val Ser Ala 1715 1720 1725 Asn Ser Gly Ala Arg Ile Gly Leu Ala Glu Glu Ile Arg His Met 1730 1735 1740 Phe His Val Ala Trp Val Asp Pro Glu Asp Pro Tyr Lys Gly Tyr 1745 1750 1755 Arg Tyr Leu Tyr Leu Thr Pro Gln Asp Tyr Lys Arg Val Ser Ala 1760 1765 1770 Leu Asn Ser Val His Cys Glu His Val Glu Asp Glu Gly Glu Ser 1775 1780 1785 Arg Tyr Lys Ile Thr Asp Ile Ile Gly Lys Glu Glu Gly Ile Gly 1790 1795 1800 Pro Glu Asn Leu Arg Gly Ser Gly Met Ile Ala Gly Glu Ser Ser 1805 1810 1815 Leu Ala Tyr Asn Glu Ile Ile Thr Ile Ser Leu Val Thr Cys Arg 1820 1825 1830 Ala Ile Gly Ile Gly Ala Tyr Leu Val Arg Leu Gly Gln Arg Thr 1835 1840 1845 Ile Gln Val Glu Asn Ser His Leu Ile Leu Thr Gly Ala Gly Ala 1850 1855 1860 Leu Asn Lys Val Leu Gly Arg Glu Val Tyr Thr Ser Asn Asn Gln 1865 1870 1875 Leu Gly Gly Ile Gln Ile Met His Asn Asn Gly Val Thr His Cys 1880 1885 1890 Thr Val Cys Asp Asp Phe Glu Gly Val Phe Thr Val Leu His Trp 1895 1900 1905 Leu Ser Tyr Met Pro Lys Ser Val His Ser Ser Val Pro Leu Leu 1910 1915 1920 Asn Ser Lys Asp Pro Ile Asp Arg Ile Ile Glu Phe Val Pro Thr 1925 1930 1935 Lys Thr Pro Tyr Asp Pro Arg Trp Met Leu Ala Gly Arg Pro His 1940 1945 1950 Pro Thr Gln Lys Gly Gln Trp Leu Ser Gly Phe Phe Asp Tyr Gly 1955 1960 1965 Ser Phe Ser Glu Ile Met Gln Pro Trp Ala Gln Thr Val Val Val 1970 1975 1980 Gly 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2455

Claims

여드름 치료용 약제의 제조에 있어서, ACC 억제제 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 용도.
여드름 치료용 약제의 제조에 있어서, ACC 억제제 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약학 조성물의 용도.
환자에서 피지 트라이글리세리드, 피지 유리 지방산, 콜레스테롤 에스터 및 피지 왁스 에스터를 감소시키기 위한 약제의 제조에 있어서, ACC 억제제 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 용도.
환자에서 피지 트라이글리세리드, 피지 유리 지방산, 콜레스테롤 에스터 및 피지 왁스 에스터를 감소시키기 위한 약제의 제조에 있어서, ACC 억제제 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약학 조성물의 용도.
여드름 치료용 약제의 제조에 있어서, 1'-(2-아미노퀴놀린-7-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 용도.
여드름 치료용 약제의 제조에 있어서, 1'-(2-아미노퀴놀린-7-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약학 조성물의 용도.
환자에서 피지 트라이글리세리드, 피지 유리 지방산, 콜레스테롤 에스터 및 피지 왁스 에스터를 감소시키기 위한 약제의 제조에 있어서, 1'-(2-아미노퀴놀린-7-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 용도.
환자에서 피지 트라이글리세리드, 피지 유리 지방산, 콜레스테롤 에스터 및 피지 왁스 에스터를 감소시키기 위한 약제의 제조에 있어서, 1'-(2-아미노퀴놀린-7-카본일)-1-이소프로필-4,6-다이하이드로스피로[인다졸-5,4'-피페리딘]-7(1H)-온 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약학 조성물의 용도.