KR20150135231A

KR20150135231A - 인간 메타뉴모바이러스에 특이적인 인간 항체 또는 그의 항원 결합성 단편

Info

Publication number: KR20150135231A
Application number: KR1020157022452A
Authority: KR
Inventors: 겐조 타카다; 칸토우 나카지마
Original assignee: 에베크 인코포레이티드
Priority date: 2013-01-28
Filing date: 2014-01-28
Publication date: 2015-12-02
Also published as: US20150322137A1; IL240161A0; JPWO2014115893A1; CN104955839A; EP2966086A1; RU2015129655A; WO2014115893A1; MX2015009819A; AU2014208456A1; CA2899052A1; PH12015501650A1; BR112015017981A2; EP2966086A4

Abstract

본 발명은 인간 메타뉴모바이러스 (human metapneumovirus)의 F 단백질에 특이적으로 결합하고, 인간 메타뉴모바이러스를 중화시키는 신규한 인간 유래의 모노클로날 항체 및 그의 항원 결합성 단편을 제공하는 동시에, 상기 항체 또는 항원 결합성 단편을 포함하는 의약 조성물을 제공한다.

Description

인간 메타뉴모바이러스에 특이적인 인간 항체 또는 그의 항원 결합성 단편 {Human Antibody Specific To Human Metapneumovirus, or Antigen-Binding Fragment Thereof}

본 발명은 인간 메타뉴모바이러스 (human metapneumovirus)의 F 단백질에 특이적으로 결합하고, 인간 메타뉴모바이러스의 생물활성을 중화하는 모노클로날 항체 및 그의 항원 결합성 단편에 관한 것이다.

호흡기 감염증은 이환율 및 사망률의 관점에서 인류의 주요한 질환의 하나라고 할 수 있다. 특히, 5세 미만의 소아에 있어서는 호흡기 감염증이 사망원인의 상위에 랭크되어 있다. 미국에서는 폐렴, 인플루엔자 및 인플루엔자 유사 질환을 포함하면, 매년 45,000명 이상이 사망하고 있으며, 연간 의료비는 146억 달러에 이르는 것으로 보고되고 있다 (비특허문헌 1).

호흡기감염증의 원인 바이러스로서는 RS 바이러스 (respiratory syncytial virus : RSV), 파라인플루엔자 바이러스, 인플루엔자 바이러스, 코로나 바이러스, 라이노 바이러스, 아데노 바이러스 등이 알려져 있다. 최근 인간 메타뉴모바이러스 (human metapneumovirus : hMPV), SARS 코로나 바이러스 및 인간 보카 바이러스 등 호흡기 감염증을 일으키는 바이러스가 속속 발견되고 있으며, 그 중에서도 hMPV는 2001년에, 네덜란드 연구진에 의해 처음으로 분리, 동정된 바이러스이다 (비특허문헌 2). 이 hMPV는 이전부터 인간 사이에서 보편적으로 존재해온 바이러스이었지만, 바이러스 분리가 곤란하였기 때문에 지금까지 발견되지 않은 바이러스이다.

인간 메타뉴모바이러스 (hMPV)는 한가닥 (음성가닥)RNA 바이러스로, 파라 믹소 바이러스과, 뉴모바이러스 아과, 메타뉴모바이러스속으로 분류되며, N 단백질, P 단백질, M 단백질, F 단백질, M2 단백질, SH 단백질, G 단백질 및 L 단백질을 코딩하는 8개의 유전자를 갖는다 (비특허문헌 2). hMPV의 유전자 서열은 조류 뉴모바이러스 (Avian pneumovirus: APV)에 가장 유사하고, 또한 인간의 바이러스 중에서는 유전자 서열 및 임상증상의 관점에서 RSV에 유사하다 (비특허문헌 3). hMPV는 혈청학적 특징에서 A 및 B의 2가지 그룹으로 분류되며, 추가로 각각 2종의 서브그룹 (A1과 A2, 및 B1과 B2)으로 나뉘며 (비특허문헌 4), 그들 중에서도 최근의 세계적인 유행의 주류를 이루고 있는 것은 A2 균주이다 (비특허문헌 5). 그런데 바이러스 표면에는 F 단백질, G 단백질 및 SH 단백질이 존재하지만, 혈청 중에 존재하는 hMPV에 대한 주요한 중화 항체는 F 단백질에 대한 항체인 것으로 보고되고 있다 (비특허문헌 6 및 7).

Williams등의 그룹에 의한 조사에 따르면, 5세 미만의 소아의 호흡기 감염증 환자에 있어서는 하부 호흡기 감염증 환자의 20%, 상부 호흡기 감염증 환자의 15%가 hMPV에 감염되었다고 보고되고 있으며 (비특허문헌 7), 혈액중의 항체값이 낮은 6개월에서 1세까지의 젖먹이 유아, 면역능이 저하된 고령자나 면역결핍 상태의 환자에서는 중증화의 위험성이 있어 특히 주의가 필요하다.

현재 hMPV의 검사법은 확립되어 있지만, 항 바이러스 약물로 유효한 약물은 없고, 대증요법이 기본이다. hMPV의 치료. 예방약으로서 hMPV의 F 단백질에 특이적인 항체 의약품 (특허문헌 1, 2 및 비특허문헌 9) 또는 약독화 바이러스 등을 활용한 백신의 개발 등 (특허문헌 3 및 4)의 연구가 진행되고 있다. 또한 최근에는 hMPV 및 RSV 모두의 F 단백질에도 결합하는 인간항체의 보고 (특허문헌 5)가 있는데, 모두 착수하였을 뿐이라고 말할 수 있다.

[특허문헌 1] WO2006/110214 [특허문헌 2] WO2008/043052 [특허문헌 3] WO2002/057302 [특허문헌 4] WO2003/072719 [특허문헌 5] WO2013/140247

[비특허문헌 1] Clin. Micro. Reviews, 2006 (vol.19) p546 [비특허문헌 2] Nature Medicine, 2001 (vol.7) p719 [비특허문헌 3] Virology, 2002 (vol.295) p119 [비특허문헌 4] Emerg. Infect. Dis., 2004 (vol.10) p658 [비특허문헌 5] PLoS ONE, 2012 (vol.7) e34544 [비특허문헌 6] J.Virol., 2004 (vol.78) p6927 [비특허문헌 7] J.Gen.Virol., 2004 (vol.85) p1655 [비특허문헌 8] New Eng. J. Med., 2004 (vol.350) p443 [비특허문헌 9] J.Virol., 2006 (vol.80) p7799

2001년에, 호흡기 감염증의 원인 바이러스로서 밝혀진 인간 메타뉴모바이러스(hMPV)는 5세 미만의 소아 호흡기 감염증 환자에 있어서는 15 내지 20%가 상기 바이러스에 의한 질환이며, 특히, 6개월에서 1세까지의 영유아, 면역능이 저하된 고령자나 면역결핍 상태의 환자에서는 중증화의 위험성이 있다고 알려져 있다. 그런데, hMPV와 유사한 인간 바이러스로서는 RSV가 존재하고, 해당 질환 예방약으로서 RSV의 F 단백질을 특이적으로 인식하는 항체 의약품 (Synagis)이 승인을 받아 많은 나라에서 판매되고 있다. 그러나 아직까지 hMPV에 대한 치료는 대증요법 뿐이다. 그런 가운데, 약독화 바이러스 등을 활용한 바이러스의 연구 (특허문헌 3 및 4) 및 hMPV의 F 단백질에 특이적인 항체 의약품의 연구 등이 보고되어 있지만, 인간 유래 항체의 예로서는, Synagis와 마찬가지로 상기 바이러스의 F 단백질을 인식하는 인간 Fab 항체 DSλ7 등 (특허문헌 2)이 보고되어 있을 뿐이다.

그러나 항체 DSλ7등의 친화성, 중화활성 등의 관점에서 생각할 때, 아직 활성이 낮고, 의약 후보 제품으로서는 어느 것도 아직 개선의 여지가 있다. 특히 hMPV에 대한 항체 의약으로는 A1, A2, B1 및 B2 균주에 폭넓게 높은 중화활성을 갖는 항체, 가능하면 최근 유행의 주류를 이루고 있는 hMPV_A2 균주에 특히 높은 중화활성을 갖는 항체가 요구되고 있다.

또한, 바이러스의 내성화 등을 고려하면 에피토프의 다른 항체도 필요하다. 또한, 키메라 항체 및 인간화 항체는 모두 면역원성상의 과제를 안고 있어, 의약품 후보의 항 hMPV 항체로서도 완전한 인간 유래의 항체가 요망되고 있다.

그런 가운데, 보다 낮은 용량으로 지금까지와 동등 혹은 그 이상의 효과를 나타내는 인간 유래의 모노클로날 항체의 제작을 목표로 예의검토를 거듭하고, hMPV의 F 단백질에 특이적으로 결합하고, hMPV에 대하여 폭넓게 높은 중화활성을 가지며, 또한 에피토프 분류에서 몇 가지 다른 그룹으로 분류되는 복수의 항체의 제작에 성공하여, 본 발명을 완성하였다.

즉, 본 발명은 이하 [1] 내지 [41]에 기재하는 인간 메타뉴모바이러스 (hMPV)의 F 단백질에 특이적인 인간 모노클로날 항체 또는 그의 항원 결합성 단편, 그의 항체 또는 항원 결합성 단편을 코딩하는 핵산 (폴리뉴클레오티드), 그의 핵산을 함유하는 발현 벡터, 그의 벡터를 함유하는 숙주세포, 및 본 발명의 항체 또는 항원 결합성 단편을 포함하는 의약 조성물 등에 관한 것이다.

[1] 인간 메타뉴모바이러스의 F 단백질에 특이적으로 결합하고, 그의 생물활성을 중화할 수 있는 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,

(i) 중쇄의 가변영역이,

(a) 서열번호 3, 13, 23, 33, 43, 53, 63, 73, 83, 93, 103, 113 및 123의 아미노산 서열, 및 이들의 아미노산 서열 중 1 내지 수개의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입 및/또는 부가의 변이를 갖는 아미노산 서열의 군으로부터 선택되는 중쇄 CDR1의 아미노산 서열,

(b) 서열번호 4, 14, 24, 34, 44, 54, 64, 74, 84, 94, 104, 114 및 124의 아미노산 서열, 및 이들의 아미노산 서열 중 1 내지 수개의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입 및/또는 부가의 변이를 갖는 아미노산 서열의 군으로부터 선택되는 중쇄 CDR2의 아미노산 서열, 및

(c) 서열번호 5, 15, 25, 35, 45, 55, 65, 75, 85, 95, 105, 115 및 125의 아미노산 서열 및 이들의 아미노산 서열 중 1 내지 수개의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입 및/또는 부가의 변이를 갖는 아미노산 서열의 군으로부터 선택되는 중쇄 CDR3의 아미노산 서열

을 함유하고,

(ii) 경쇄 가변영역이,

(a) 서열번호 8, 18, 28, 38, 48, 58, 68, 78, 88, 98, 108, 118 및 128의 아미노산 서열, 및 이들의 아미노산 서열 중 1 내지 수 개의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입 및/또는 부가의 변이를 갖는 아미노산 서열의 군으로부터 선택되는 경쇄 CDR1의 아미노산 서열,

(b) 서열번호 9, 19, 29, 39, 49, 59, 69, 79, 89, 99, 109, 119 및 129의 아미노산 서열, 및 이들의 아미노산 서열 중 1 내지 수개의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입 및/또는 부가의 변이를 갖는 아미노산 서열의 군으로부터 선택되는 경쇄 CDR2의 아미노산 서열, 및

(c) 서열번호 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120 및 130의 아미노산 서열, 및 이들의 아미노산 서열 중 1 내지 수개의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입 및/또는 부가의 변이를 갖는 아미노산 서열의 군으로부터 선택되는 경쇄 CDR3의 아미노산 서열,

을 함유하는 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[2] 상기 [1]에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,

(i) 중쇄 가변영역이,

(a) 서열번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1의 아미노산 서열,

(b) 서열번호 4의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2의 아미노산 서열, 및,

(c) 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3의 아미노산 서열

을 함유하고,

(ii) 경쇄 가변영역이,

(a) 서열번호 8의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1의 아미노산 서열,

(b) 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2의 아미노산 서열 및,

(c) 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하는 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[3] 상기 [1]에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,

(i) 중쇄 가변영역이,

(a) 서열번호 13의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1의 아미노산 서열,

(b) 서열번호 14의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2의 아미노산 서열, 및,

(c) 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3의 아미노산 서열

을 함유하고,

(ii) 경쇄 가변영역이,

(a) 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1의 아미노산 서열,

(b) 서열번호 19의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2의 아미노산 서열 및,

(c) 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3의 아미노산 서열

을 함유하는 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[4] 상기 [1]에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,

(i) 중쇄 가변영역이,

(a) 서열번호 23의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1의 아미노산 서열,

(b) 서열번호 24의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2의 아미노산 서열, 및,

(c) 서열번호 25의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하고,

(ii) 경쇄 가변영역이,

(a) 서열번호 28의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1의 아미노산 서열,

(b) 서열번호 29의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2의 아미노산 서열 및,

(c) 서열번호 30의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[5] 상기 [1]에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,

(i) 중쇄 가변영역이,

(a) 서열번호 33의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1의 아미노산 서열,

(b) 서열번호 34의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2의 아미노산 서열 및,

(c) 서열번호 35의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하고,

(ii) 경쇄 가변영역이,

(a) 서열번호 38의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1의 아미노산 서열,

(b) 서열번호 39의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2의 아미노산 서열 및,

(c) 서열번호 40의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[6] 상기 [1]에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,

(i) 중쇄 가변영역이,

(a) 서열번호 43의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1의 아미노산 서열,

(b) 서열번호 44의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2의 아미노산 서열 및,

(c) 서열번호 45의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하고,

(ii) 경쇄 가변영역이,

(a) 서열번호 48의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1의 아미노산 서열,

(b) 서열번호 49의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2의 아미노산 서열 및,

(c) 서열번호 50의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[7] 상기 [1]에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,

(i) 중쇄 가변영역이,

(a) 서열번호 53의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1의 아미노산 서열,

(b) 서열번호 54의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2의 아미노산 서열 및,

(c) 서열번호 55의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하고,

(ii) 경쇄 가변영역이,

(a) 서열번호 58의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1의 아미노산 서열,

(b) 서열번호 59의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2의 아미노산 서열 및,

(c) 서열번호 60의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[8] 상기 [1]에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,

(i) 중쇄 가변영역이,

(a) 서열번호 63의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1의 아미노산 서열,

(b) 서열번호 64의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2의 아미노산 서열 및,

(c) 서열번호 65의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하고,

(ii) 경쇄 가변영역이,

(a) 서열번호 68의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1의 아미노산 서열,

(b) 서열번호 69의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2의 아미노산 서열 및,

(c) 서열번호 70의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[9] 상기 [1]에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,

(i) 중쇄 가변영역이,

(a) 서열번호 73의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1의 아미노산 서열,

(b) 서열번호 74의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2의 아미노산 서열 및,

(c) 서열번호 75의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하고,

(ii) 경쇄 가변영역이,

(a) 서열번호 78의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1의 아미노산 서열,

(b) 서열번호 79의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2의 아미노산 서열 및,

(c) 서열번호 80의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[10] 상기 [1]에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,

(i) 중쇄 가변영역이,

(a) 서열번호 83의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1의 아미노산 서열,

(b) 서열번호 84의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2의 아미노산 서열 및,

(c) 서열번호 85의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하고,

(ii) 경쇄 가변영역이,

(a) 서열번호 88의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1의 아미노산 서열,

(b) 서열번호 89의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2의 아미노산 서열 및,

(c) 서열번호 90의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[11] 상기 [1]에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,

(i) 중쇄 가변영역이,

(a) 서열번호 93의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1의 아미노산 서열,

(b) 서열번호 94의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2의 아미노산 서열 및,

(c) 서열번호 95의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하고,

(ii) 경쇄 가변영역이,

(a) 서열번호 98의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1의 아미노산 서열,

(b) 서열번호 99의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2의 아미노산 서열 및,

(c) 서열번호 100의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[12] 상기 [1]에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,

(i) 중쇄 가변영역이,

(a) 서열번호 103의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1의 아미노산 서열,

(b) 서열번호 104의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2의 아미노산 서열 및,

(c) 서열번호 105의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3의 아미노산 서열을함유하고,

(ii) 경쇄 가변영역이,

(a) 서열번호 108의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1의 아미노산 서열,

(b) 서열번호 109의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2의 아미노산 서열 및,

(c) 서열번호 110의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[13] 상기 [1]에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,

(i) 중쇄 가변영역이,

(a) 서열번호 113의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1의 아미노산 서열,

(b) 서열번호 114의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2의 아미노산 서열 및,

(c) 서열번호 115의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하고,

(ii) 경쇄 가변영역이,

(a) 서열번호 118의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1의 아미노산 서열,

(b) 서열번호 119의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2의 아미노산 서열 및,

(c) 서열번호 120의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[14] 상기 [1]에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,

(i) 중쇄 가변영역이,

(a) 서열번호 123의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1의 아미노산 서열,

(b) 서열번호 124의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2의 아미노산 서열 및,

(c) 서열번호 125의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하고,

(ii) 경쇄 가변영역이,

(a) 서열번호 128의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1의 아미노산 서열,

(b) 서열번호 129의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2의 아미노산 서열 및,

(c) 서열번호 130의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[15] 상기 [1] 내지 [14] 중 어느 한 항에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,

(a) 서열번호 2, 12, 22, 32, 42, 52, 62, 72, 82, 92, 102, 112 및 122의 아미노산 서열 및 이들 아미노산 서열과 95% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열의 군으로부터 선택되는 중쇄 가변영역 (VH) 및,

(b) 서열번호 7, 17, 27, 37, 47, 57, 67, 77, 87, 97, 107, 117 및 127의 아미노산 서열 및 이들 아미노산 서열과 95% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열의 군으로부터 선택되는 경쇄 가변영역 (VL)

을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[16] 상기 [15]에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,

(a) 서열번호 2의 아미노산 서열, 또는 서열번호 2의 아미노산 서열과 95% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변영역 (VH) 및

(b) 서열번호 7의 아미노산 서열, 또는 서열번호 7의 아미노산 서열과 95% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변영역 (VL)

을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[17] 상기 [15]에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,

(a) 서열번호 12의 아미노산 서열, 또는 서열번호 12의 아미노산 서열과 95% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (VH) 및

(b) 서열번호 17의 아미노산 서열, 또는 서열번호 17의 아미노산 서열과 95% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (VL)

을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[18] 상기 [15]에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,

(a) 서열번호 22의 아미노산 서열, 또는 서열번호 22의 아미노산 서열과 95% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변영역 (VH), 및

(b) 서열번호 27의 아미노산 서열, 또는 서열번호 27의 아미노산 서열과 95% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변영역 (VL)

을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[19] 상기 [15]에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,

(a) 서열번호 32의 아미노산 서열, 또는 서열번호 32의 아미노산 서열과 95% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변영역 (VH), 및

(b) 서열번호 37의 아미노산 서열, 또는 서열번호 37의 아미노산 서열과 95% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변영역 (VL)

을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[20] 상기 [15]에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,

(a) 서열번호 42의 아미노산 서열, 또는 서열번호 42의 아미노산 서열과 95% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변영역 (VH), 및

(b) 서열번호 47의 아미노산 서열, 또는 서열번호 47의 아미노산 서열과 95% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변영역 (VL)

를 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[21] 상기 [15]에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,

(a) 서열번호 52의 아미노산 서열, 또는 서열번호 52의 아미노산 서열과 95% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변영역 (VH), 및

(b) 서열번호 57의 아미노산 서열, 또는 서열번호 57의 아미노산 서열과 95% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변영역 (VL)

을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[22] 상기 [15]에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,

(a) 서열번호 62의 아미노산 서열, 또는 서열번호 62의 아미노산 서열과 95% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변영역 (VH), 및

(b) 서열번호 67의 아미노산 서열, 또는 서열번호 67의 아미노산 서열과 95% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변영역 (VL)

를 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[23] 상기 [15]에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,

(a) 서열번호 72의 아미노산 서열, 또는 서열번호 72의 아미노산 서열과 95% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변영역 (VH), 및

(b) 서열번호 77의 아미노산 서열, 또는 서열번호 77의 아미노산 서열과 95% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변영역 (VL)

을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[24] 상기 [15]에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,

(a) 서열번호 82의 아미노산 서열, 또는 서열번호 82의 아미노산 서열과 95% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변영역 (VH), 및

(b) 서열번호 87의 아미노산 서열, 또는 서열번호 87의 아미노산 서열과 95% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변영역 (VL)

을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[25] 상기 [15]에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,

(a) 서열번호 92의 아미노산 서열, 또는 서열번호 92의 아미노산 서열과 95% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변영역 (VH), 및

(b) 서열번호 97의 아미노산 서열, 또는 서열번호 97의 아미노산 서열과 95% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변영역 (VL)

을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[26] 상기 [15]에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,

(a) 서열번호 102의 아미노산 서열, 또는 서열번호 102의 아미노산 서열과 95% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변영역 (VH) 및

(b) 서열번호 107의 아미노산 서열, 또는 서열번호 107의 아미노산 서열과 95% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변영역 (VL)

을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[27] 상기 [15]에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,

(a) 서열번호 112의 아미노산 서열, 또는 서열번호 112의 아미노산 서열과 95% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변영역 (VH) 및

(b) 서열번호 117의 아미노산 서열, 또는 서열번호 117의 아미노산 서열과 95% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변영역 (VL)

을 함유하는 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[28] 상기 [15]에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,

(a) 서열번호 122의 아미노산 서열, 또는 서열번호 122의 아미노산 서열과 95% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변영역 (VH) 및

(b) 서열번호 127의 아미노산 서열, 또는 서열번호 127의 아미노산 서열과 95% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변영역 (VL)

을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[29] 상기 [1] 내지 [28] 중 어느 한 항에 기재된 항체로서,

상기 항체의 에피토프가 F 단백질의 부분적인 결실 펩타이드에 대한 결합활성으로 분류한 경우, 항 hMPV 항체 EV046115b, EV046130 및 EV046147으로 대표되는 에피토프 그룹 Group 1, 항 hMPV 항체 EV046113, EV046116, EV046141 및 EV0461142로 대표되는 에피토프 그룹 Group 2, 항 hMPV 항체 EV046124, EV046143 및 EV046150으로 대표되는 에피토프 그룹 Group 3, 항 hMPV 항체 EV046120 및 EV046135로 대표되는 에피토프 그룹 Group 4, 및 항 hMPV 항체 EV046136으로 대표되는 에피토프 그룹 Group 5 중 어느 하나의 에피토프 그룹에 속하는 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[30] 상기 [1] 내지 [28] 중 어느 한 항에 기재된 항체로서, 상기 항체의 에피토프가 F 단백질의 부분적인 결실 펩타이드에 대한 결합활성으로 분류한 경우, 항 hMPV 항체 EV046113, EV046116, EV046141 및 EV0461142로 대표되는 에피토프 그룹 Group 2, 항 hMPV 항체 EV046124, EV046143 및 EV046150으로 대표되는 에피토프 그룹 Group 3, 항 hMPV 항체 EV046120 및 EV046135로 대표되는 에피토프 그룹 Group 4, 및 항 hMPV 항체 EV046136으로 대표되는 에피토프 그룹 Group 5 중 어느 하나의 에피토프 그룹에 속하는 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[31] 상기 [1] 내지 [28] 중 어느 한 항에 기재된 항체로서,상기 항체의 에피토프가 F 단백질의 부분적인 결실 펩타이드에 대한 결합활성으로 분류한 경우, 항 hMPV 항체 EV046124, EV046143 및 EV046150으로 대표되는 에피토프 그룹 Group 3에 속하는 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[32] 상기 항체의 클래스 (서브클래스)가 IgG1 (κ) 또는 IgG1 (λ)인,

상기 [1] 내지 [31] 중 어느 한 항에 기재된 항체 또는 항원 결합성 단편.

[33] 상기 [1] 내지 [32] 중 어느 한 항에 기재된 항체로서, 인간 메타뉴모바이러스 JPS02-76 (B1형), JPS05-21 (B2형) 및 JPS03-180 (A1형) 중 어느 하나의 균주에 대한 중화활성 (IC50)도 약 1μg/mL (약 6.7 nM) 이하인 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[34] 상기 [1] 내지 [32] 중 어느 한 항에 기재된 항체로서, 인간 메타뉴모바이러스 JPS03-180 (A1형), 및 JPS03-178 (A2형), JPS02-76 (B1형) 및 JPS05-21 (B2 형) 중 어느 하나의의 균주에 대한 중화활성(IC50)도 약 1μg/mL (약 6.7nM) 이하인 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[35] 상기 [1] 내지 [32] 중 어느 한 항에 기재된 항체로서, 인간 메타뉴모바이러스 JPS03-180 (A1형), JPS03-178 (A2형), JPS02-76 (B1형) 및 JPS05-21 (B2 형) 중 어느 하나의 균주에 대한 중화활성 (IC90)도 약 2μg/mL (약 13.3 nM) 이하인 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[36] 상기 [1] 내지 [32] 중 어느 한 항에 기재된 항체로서, 인간 메타뉴모바이러스의 JPS03-178 균주 (A2형)에 대한 중화활성 (IC50)이 약 0.1μg/mL (약 0.67 nM) 이하인 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

[37] 상기 [1] 내지 [36] 중 어느 한 항에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합성 단편 및 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 의약 조성물.

[38] 인간 메타뉴모바이러스 감염증을 치료 또는 예방하기 위한 상기 [37]에 기재된 의약 조성물.

[39] 상기 [1] 내지 [36] 중 어느 한 항에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합성 단편의 아미노산 서열을 코딩하는 분리된 핵산 서열번호 1, 6, 11, 16, 21, 26 , 31, 36, 41, 46, 51, 56, 61, 66, 71, 76, 81, 86, 91, 96, 101, 106, 111, 116, 121 및 126의 아미노산 서열을 코딩하는 분리된 핵산 또는 이러한 핵산 중 어느 하나와 높은 스트린전트 조건에서 하이브리브화하는 분리된 핵산.

[40] 상기 [39]에 기재된 분리된 핵산을 도입한 재조합 발현 벡터.

[41] 상기 [40]에 기재된 재조합 발현 벡터가 도입된 숙주세포.

본 발명에 따른 인간 메타뉴모바이러스 (hMPV)의 생물활성을 중화하는 모노클로날 항체 또는 그의 항원 결합성 단편은 인간 메타뉴모바이러스 (hMPV)의 F 단백질에 특이적으로 결합하고, 그의 생물활성을 상실 (중화)시키고, hMPV 감염증을 예방 또는 치료하는 것을 기대할 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 인간 메타뉴모바이러스 (hMPV)의 F 단백질에 대한 인간 모노클로날 항체 또는 그의 항원 결합성 단편 인 실시형태에서는 면역원성을 갖지 않고, 면역반응도 발견되지 않는다는 장점이 있다. 또한, 본 발명에 따른 특히 바람직한 인간의 모노클로날 항체를 포함하는 의약 조성물은 매우 적은 양으로 효력이 있으며, 의료비용을 억제할 가능성도 기대할 수 있다.

[도 1] 본 발명에 따른 항 hMPV 항체를 생산하는 항체 생산 세포 클론 분리 절차를 플로우 차트로 나타낸 도면이다.
[도 2] Biacore T-200을 사용하여 항 MPV 항체의 경쟁분석을 실시한 결과를 나타낸 도면이다. Sensor Chip NTA에 hMPV (JPS02-76)의 FP 유전자로부터 TM 영역 (a.a.491-539)을 제거하고, His-Tag를 부가한 FP-TM(-)-His을 캡처시킨 후, Sample 1로서, 항 MPV 항체를 센서 칩에 포화수준까지 결합시키고, 다음에 Sample 2로서 다른 항 MPV 항체를 결합시켰다. 경쟁하는지 여부는 Sample 2의 항 hMPV 항체의 결합이 저해되는지 여부로 판정했다. Ab. I.D.는 아래 3 자리 숫자로 표기하였다. +는 경쟁하는 것을, -는 경합하지 않는 나타내고 있다. N.D.는 센서 칩에서의 항체 응집 반응 때문에 측정불능. 또한, 도면의 Ab. I.D.에서 338 및 210은 대조군으로서 사용한 mAb388 및 HMB3210을 각각 나타낸다.
[도 3] 항 hMPV 항체의 에피토프 맵핑을 위해 제작한 다양한 Deletion mutant (hMPV-FP deletion mutant)를 나타내는 도면이다. HA-V5-Full은 hMPV (JPS02-76) FP 유전자의 Signal Peptide (SP)의 하류에 HA-Tag (HA)을, C-tail (C)의 하류에 V5-Tag (V5)를 부가한 것이다. 각 deletion mutant는 도면에 나타낸 영역을 결손시켜 발현 벡터에 클로닝하였다. 도면 중의 기타 약어는 이하에 나타낸다. F2 domain (F2), Fusion peptide (FP), Heptad repeat 1 (HR1), F1 domain (F1), Heptad repeat 2 (HR2), Transmembrane domain (TM)
[도 4] 항 hMPV 항체 deletion mutant로의 결합 분석결과를 나타낸 도면이다. 도 3에 나타낸 각 Deletion mutant 발현 벡터는 CHO-K1 세포에 Transfection하고, 16 시간 후에 96 well plate에 파종하여 24시간 후에 고정하였다. 이 Deletion mutant 발현 CHO-K1 세포의 형광 면역염색을 실시하고, 각 항 MPV 항체의 결합을 확인하였다. 자세한 내용은 세포 형광면역 염색 스크리닝과 동일하다. 또한 HA 항체 및 V5 항체에 의한 세포형광 면역염색을 수행하고, Deletion mutant 자체의 발현을 확인하였다. Ab. I.D.는 아래 3자리로 표기하였다. + + +, + +, +는 결합을 나타내고, 형광강도의 순으로 되어 있다. -는 결합하지 않는 것을 나타낸다. Epitope group은 deletion mutant로의 결합패턴에 의해 결정하였다. 또한, 도면의 Ab. I.D.에서 338 및 210은 대조군으로서 사용한 mAb388 및 HMB3210을 각각 나타낸다.
[도 5] 항 hMPV 항체의 에피토프의 분류를 나타낸 도면이다. 도 3, 도 4의 결과를 바탕으로 항 hMPV 항체의 에피토프를 분류하였다. 원형으로 둘러싼 분류는 경쟁 분석결과, 사각형으로 둘러싼 분류는 deletion mutant 결합 분석결과이다.

1. 용어에 대한 설명

본 명세서에 있어서, 본 발명과 관련하여 사용되는 과학용어 및 전문용어는 당업자에 의해 일반적으로 이해되는 의미를 갖는다. 또한 문맥에 따라 별도로 필요하지 않는 한, 단수 용어는 복수를 포함하고, 복수 용어는 단수를 포함한다. 일반적으로, 본 명세서에 기재되어 있는 세포 및 조직배양, 분자 생물학, 면역학, 미생물학, 유전학 및 단백질과 핵산 화학 및 하이브리드화 기술과 관련하여 사용되는 명명법은 해당 분야에서 주지이며, 또한 일반적으로 사용되고 있는 것이다.

본 발명은 인간 메타뉴모바이러스(human metapneumovirus)의 F 단백질에 특이적으로 결합하고, 인간 메타뉴모바이러스의 생물활성을 중화하는 모노클로날 항체 및 그의 항원 결합성 단편에 관한 것이다. 이하, 본 발명에서 사용하는 용어의 의미를 분명하게 함으로써, 본 발명을 실시하는 형태를 상세하게 설명한다.

1) 인간 메타뉴모바이러스 (human metapneumovirus: hMPV라고도 약칭함)

2001년 네덜란드 연구진에 의해 발견된 인간의 호흡기 감염증의 원인 바이러스 중의 하나로, 파라믹소바이러스과, 뉴모바이러스 아과, 메타뉴모바이러스 속으로 분류되며, 또한 G 및 F 단백질의 뉴클레오티드 서열을 이용한 계통발생학적 분석의 결과에 기초하여, 현재는 4종의 서브그룹 (A1, A2, B1 및 B2; A1형, A2형, B1형 및 B2형으로 칭하는 경우도 있다)로 분류되고 있다 (비특허문헌 4). 또한 2006년에는 독일에서 서브그룹 A2가 hMPV_A2a와 hMPV_A2b의 2종으로 분류되고 있다 (비특허문헌 5). 유사한 바이러스로서는 조류에 감염하는 조류 뉴모바이러스 (avian pneumovirus: APV라고도 약칭함)나 인간의 RSV (respiratory syncytial virus : RSV라고도 약칭함)등이 있다. hMPV는 13.35kb의 단일 가닥 (음성가닥) RNA 바이러스로, N, P, M, F, M2, SH, G 및 L의 8개 유전자를 가지며, 바이러스 표면에는 F, G 및 SH의 3 종의 당 단백질이 발현되고 있다 (비특허문헌 1). 혈청 중에 존재하는 hMPV에 대한 중화항체 중에서도 F 단백질에 대한 항체가 중요한 비중을 차지하고 있는 것으로 보고되고 있다.

2) hMPV의 F 단백질

F 단백질 (이하, FP로 약칭하는 경우도 있음)은 hMPV의 바이러스 표면에 존재하는 당 단백질의 하나로서, hMPV의 4 종의 서브그룹 (A1, A2, B1 및 B2)의 대표균주의 F 단백질에 있어서는 모두 539개의 아미노산 잔기로 구성되어 있다. 그들의 대표적인 아미노산 서열에 관해서는 A1 (NL/1/00 균주)에 대해서는 Genbank Accession No. AF371337에, A2 (NL/17/00 균주)에 대해서는 Genbank Accession No. AY304360에, B1 (NL/1/99 균주)에 대해서는 Genbank Accession No. AY304361에, 그리고 B2 (NL/1/94 균주)에 대해서는 Genbank Accession No. AY304362에 개시되어 있다. A1의 F단백질의 아미노산 서열에 대하여 다른 바이러스와 비교하면, 조류 뉴모바이러스 C형의 F 단백질과는 81%의 동일성이 있으며, 인간 RSV의 F 단백질과는 33%의 동일성이 인정되며 (비특허문헌 3), hMPV의 F 단백질도 그들 바이러스의 F 단백질과 동일한 역할을 하고 있다고 간주되고 있다. 즉, 세포에 부착된 바이러스의 엔벨로프와 숙주세포의 세포막이 융합할 때 관여하는 융합 단백질 (fusion protein)로 간주되고 있다. 따라서, hMPV의 F단백질에 결합하는 항체 중에는, 높은 중화활성을 갖는 항체가 존재하는 것으로 보고되고 있으며 (특허문헌 1 및 2), 또한, 인간 RSV의 항 F 단백질 항체 중에는 이미 의약품으로서 사용되는 항체 (Synagis)도 있다.

한편, hMPV의 4종의 서브그룹에서 F 단백질의 아미노산 서열을 비교하면, 각 서브그룹 (A1, A2, B1 및 B2)내의 아미노산 서열에서는 모두 99 내지 100%의 동일성, 각각의 서브타입 간(A1과 A2, 또는 B1과 B2)에서는 97 내지 99%의 동일성, A그룹과 B 그룹의 비교에서 94 내지 97%의 동일성이 인정되며, hMPV의 F 단백질의 아미노산 서열이 그룹 내에서 고도로 보존되어 있다는 것이 알려져 있다 (비특허문헌 4). 본 발명에서 인간 항체의 스크리닝 평가에 사용한 JPS02-76 균주 (B1; T285I)의 F 단백질의 아미노산 서열을 전술한 대표적인 F 단백질과 비교하면, A1 (NL/1/00 균주)의 F 단백질과는 94%, A2 (NL/17/00 균주)의 F 단백질과는 94%, B1 (NL/1/99 균주)의 F 단백질과는 99%, 및 B2 (NL/1/94 균주)의 F 단백질과는 99 %로, 매우 높은 동일성이 인정되었다. 즉, 본 발명에서 사용한 JPS02-76균주의 F 단백질을 사용한 평가 시스템은 모든 서브그룹의 hMPV 균주에도 cross reactive 항체가 취득가능한 방법임을 강하게 시사하고 있다.

3) hMPV의 F 단백질에 결합하는 항체:

인간 메타뉴모바이러스 (hMPV)의 FP에 특이적으로 결합하는 항체로서, 상기 FP의 에피토프 부위, 예를 들어, 선형 에피토프, 불연속 서열 에피토프, 또는 입체 구조적 에피토프, 또는 FP 단편 등에 결합할 수 있다. 본 명세서중에서 '항 MPV 항체', 'hMPV을 중화시킬 수 있는 항체', '항 hPMV-F 단백질 항체', '인간 메타 뉴모바이러스(hMPV)의 FP에 특이적으로 결합하는 항체', 혹은 '인간 메타뉴모바이러스(hMPV)의 생물활성을 중화시킬 수 있는 항체'라 함은 인간 메타뉴모바이러스 (hMPV)의 FP에 결합함으로써 hMPV의 생물활성을 저해하는 항체를 가리키는 것으로한다. 전술한 바와 같이, hMPV의 서브타입 간의 FP의 동일성이 매우 높은 것도 있고, hMPV의 FP에 특이적으로 결합하는 항체의 스크리닝에는 hMPV의 4종의 서브그룹 (A1, A2 , B1 및 B2)의 대표균주 중 어느 하나의 FP를 항원으로서 사용하는 방법이 일반적이다. 본 발명에서는 hMPV B1 균주 (JPS02-76)로부터 FP 유전자를 클로닝하고, CHO-K1세포로 발현시킨 것을 사용하였다. 또한, 얻어진 FP 유전자의 염기서열 (GenBank Accession No. AY530089) 및 FP의 아미노산 서열 (GenBank Accession No. AAS22077)을 서열번호 131 및 132에 각각 나타낸다.

4) 항체

본 명세서에서 사용되는 '항체'라는 용어는 4개의 폴리펩티드쇄, 즉, 2개의 중 (H)쇄 및 2개의 경 (L)쇄로서, 디설파이드 결합에 의해 상호결합된 것으로 이루어진 면역 글로불린 분자를 지칭하는 것으로 한다. 본 발명의 모노클로날 항체도 각각 2개의 중쇄 (H쇄) 및 경쇄 (L쇄)를 포함하는 면역 글로불린 분자로 구성된다. 각 H쇄는 H쇄 가변부 영역 ('HCVR' 또는 'VH'라고 칭하는 경우가 있음)과 H쇄 불변부 영역 (H쇄 불변부 영역은 3개의 도메인으로 구성되며, 각각'CH1', 'CH2', 'CH3'라고 칭하는 경우가 있음 (총칭: CH))으로 구성된다. 각 L쇄는 L쇄 가변부 영역 ('LCVR' 또는 'VL'라고 칭하는 경우가 있음)과 L쇄 불변부 영역 (L쇄 불변부 영역은 하나의 도메인으로 이루어지며, 'CL'이라고 칭하는 경우가 있다)으로 구성되며, 각각의 불변부 영역 (불변영역 또는 정상영역이라고도 부른다)이 시작할 때까지를 가변부 영역 (또는 가변영역)이라고 부른다.

특히 VH 및 VL은 항체의 결합특이성에 관여하는 점에서 중요하다. 항체는 VH 및 VL의 아미노산 잔기를 주로 통해 표적항원과 상호작용하기 때문에, 가변부 영역내의 아미노산 서열은 가변부 영역 밖에 있는 서열보다 개개의 항체 간의 차이가 크다. 또한, VH 및 VL에 있어서도 각종 항체간에 더욱 일정하게 유지된 프레임워크 영역 (FR)이라고 불리우는 영역과 상보성 결정영역 (CDR)이라고 불리우는 초가변성 영역으로 더욱 세분화할 수 있다. VH 및 VL은 각각 3개의 CDR 및 4개의 FR로 구성되며, 이들은 FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4의 순서로 아미노 말단으로부터 카르복시 말단까지 배열되어 있다.

또한, 본 발명에서 항체라 함은 전체 길이의 항체 또는 그의 항원 결합성 단편을 의미한다. 가변부 영역을 나타내는 아미노산 서열이나, 상보성 결정영역 (CDR)의 아미노산 서열을 기초로 하면, 당해 기술분야에서 주지의 기술에 의해 hMPV의 F 단백질에 특이적으로 결합하고, hMPV의 생물활성을 중화시킬 수 있는 인간 모노클로날 항체, 모노클로날 항체 (키메라 항체, 인간화 항체도 포함함), 또는 그들의 항원 결합성 단편을 얻을 수 있다. 이 항체는 본 발명의 기술적 범위 내에 속하는 것이다.

5) 항체의 '항원 결합성 단편' (또는 단순히 '항체 단편')

본 명세서에서 사용되는 항체의'항원 결합성 단편' (또는 단순히 '항체 단편')이라는 용어는 항원 (hMPV의 F단백질)에 특이적으로 결합하는 능력을 가진 하나 또는 복수개의 항체 단편 (예를 들면, VH)을 가리킨다. 또한, 그의 단편에는 항원에 특이적으로 결합하는 최소한의 아미노산 서열을 갖는 펩타이드도 포함한다. 항체의 '항원 결합성 단편'이라는 용어에 포함되는 결합부분의 예로서는 (i) Fab 단편, (ii) F(ab')2 단편, (iii) VH 및 CH1 도메인으로 이루어진 Fd 단편, (iv) 항체의 단일 암의 VL 및 VH 도메인으로 이루어진 Fv 단편, (v) VH 도메인으로 이루어진 dAb 단편 (Ward et al., Nature 341 : 544-546, 1989), (vi) 특이적으로 결합하는데 충분한 프레임워크를 갖는 분리된 상보성 결정영역 (CDR), (vii) 이중특이성 항체, 및 (viii) 다특이성 항체 등을 들 수 있다. 또한, 본 명세서에서 특별히 구분하지 않고 단순히 '항체'라고 하는 경우, 전체 길이의 항체뿐만 아니라, 이와 같은 '항체 결합성 단편'도 포함하는 것으로 한다.

6) 동종형 (isotype) 및 서브클래스

중쇄는 정상영역의 차이에 따라,γ쇄,μ쇄,α쇄,δ쇄,ε쇄로 나뉘며, 이러한 차이에 따라 각각 IgG, IgM, IgA, IgD, IgE의 5종류의 클래스 (동종형)의 면역 글로불린이 형성된다. 또한 인간의 경우, IgG에는 IgG1 내지 IgG4의 4개의 서브클래스가 존재한다. 한편, 경쇄 정상영역의 차이에 따라 κ쇄, λ쇄로 나뉜다. 본 발명에 있어서 특히 바람직한 항체의 클래스 (서브클래스)는 IgG1 (κ) 또는 IgG1 (λ)이다.

2. 본 발명에 따른 항체 또는 그의 항원 결합성 단편

본 발명은 하나의 실시형태에 있어서, hMPV에 특이적으로 결합하고, hMPV의 생물활성을 중화시킬 수 있는 항체 또는 그의 항원 결합성 단편 (이하, 본 발명의 항체라고 부른다)이 제공된다. 일반적으로, 본 발명의 항체는 hMPV의 F 단백질에 특이적으로 결합하고, 상기 단백질의 생물활성을 중화시킬 수 있는 항체 또는 그의 항원 결합성 단편이다.

본 발명의 항 hMPV 항체로서는 본 명세서에 기재하는 서열번호로 표시되는 특정의 중쇄 또는 경쇄, 그의 가변영역, 혹은 그의 CDR 등의 아미노산 서열을 포함할뿐만 아니라, 이들 아미노산 서열에 대하여 실질적으로 동일한 아미노산 서열을 포함하고, 또한 hMPV의 F 단백질에 특이적으로 결합하고, hMPV의 생물활성을 중화시킬 수 있는 항 hMPV 항체가 포함된다. 여기서 '실질적으로 동일'이라는 용어는, 본 발명의 단백질의 아미노산 서열에 있어서 하나 이상의 아미노산 잔기가 결실, 치환, 삽입, 부가의 존재를 의미하고, 또는 이들 중 어느 2개 이상의 조합이 되었다는 것은 동일한 서열 중의 임의적이고 또한 하나 또는 복수개의 아미노산 서열 중의 위치에 있어서, 하나 또는 복수개의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입 또는 부가가 있다는 것을 의미하고, 결실, 치환, 삽입 및 추가 중 2종 이상이 동시에 발생할 수 있다.

그런데 자연계의 단백질을 구성하고 있는 아미노산은 그들 측쇄의 특성에 따라 군 분류가 가능하며, 예를 들어, 동일한 특성을 갖는 아미노산 군으로서는 방향족 아미노산 (티로신, 페닐알라닌, 트립토판), 염기성 아미노산 (라이신, 아르기닌, 히스티딘), 산성 아미노산 (아스파라긴산, 글루탐산), 중성 아미노산 (세린, 트레오닌, 아스파라긴, 글루타민), 탄화수소쇄를 갖는 아미노산 (알라닌, 발린, 류신, 이소류신, 프롤린), 및 기타 (글리신, 메티오닌, 시스테인)의 군 등으로 분류할 수 있다.

비천연형 아미노산을 포함하는 서로 대체 가능한 아미노산 잔기의 예로서는 다음과 같은 군의 분류도 있고, 동일 군에 포함되는 아미노산 잔기는 서로 치환 가능하다. A군: 류신, 이소류신, 노르류신, 발린, 노르발린, 알라닌, 2-아미노부탄산, 메티오닌, o-메틸세린, t-부틸 글리신, t-부틸 알라닌, 시클로 헥실알라닌; B군: 아스파라긴산, 글루타민산, 이소아스파라긴산, 이소글루타민산, 2-아미노 아디프산, 2- 아미노스베린산; C군: 아스파라긴, 글루타민; D군: 라이신, 아르기닌, 오르니틴, 2,4-디아미노부탄산, 2,3-디아미노프로피온산; E군: 프롤린, 3-하이드록시 프롤린, 4-하이드록시 프롤린; F군: 세린, 트레오닌, 호모세린; G군: 페닐알라닌, 티로신, 트립토판.

또한, 아미노산 서열 또는 염기서열의 동일성은 카린 및 아르투르에 의한 알고리즘 BLAST (PNAS, 1990 (vol.87) p2264; PNAS 1993 (vol.90) p5873)를 사용하여 결정할 수 있다. BLAST의 알고리즘에 기초한 BLASTN 또는 BLASTX라고 불리우는 프로그램이 개발되어 있다 (Altschul SF, et al : J Mol Biol, 1990 (vol.215) p403). BLASTN을 사용하여 염기서열을 분석하는 경우 파라미터는 예를 들어 score = 100 wordlength = 12로 한다. 또한, BLASTX을 사용하여 아미노산 서열을 분석하는 경우 파라미터는 예를 들어 score = 50, wordlength = 3으로 한다. BLAST와 Gapped BLAST 프로그램을 사용하는 경우에는 각 프로그램의 디폴트 파라미터(default parameter)를 사용한다. 또는 단백질의 아미노산 서열의 동일성을 구할 때, 비교하는 두 종류의 단백질의 아미노산 서열을 정렬하고, 동일 아미노산 잔기인 부분의 수를 세는 방식으로 '(동일한 아미노산 잔류기수/단백질 전장의 아미노산 잔기수) × 100(%)'에 의해 구할 수 있다.

본 발명에서 발견된 인간 유래 항 hMPV 항체, 및 그의 항원 결합성 단편과, 그들 서열목록에서의 아미노산 서열의 서열번호와의 대응관계를 표 1에 나타낸다.

[표 1]

각종 인간 항 hMPV 항체 관련 아미노산 서열의 서열번호 목록

(표 중, 각 셀 중의 번호가 각각의 서열번호를 나타낸다)

이들 얻어진 항체중에서 에피토프 그룹이 동일하고, 중화활성, CDR서열도 매우 많이 유사하였던 EV046143 (VH: 서열번호 102, VL: 서열번호 107) 및 EV046150 (VH: 서열번호 122, VL: 서열번호 127)에 대하여, 서열의 동일성을 분석하여 보면, H쇄 가변영역 (서열번호 102과 122)에 있어서는 약 73%의 동일성이 인정되었다. L 쇄 가변영역의 아미노산 서열 (서열번호 107 및 127)에 있어서는 약 82%의 동일성이 인정되었다. 각각의 FR 영역 (FR1 + FR2 + FR3 + FR4)에 있어서, VH에서는 83%의 동일성, VL에서는 약 89%의 동일성이었다. 또한 CDR의 아미노산 서열에 관해서는, H쇄 CDR1의 아미노산 서열 (서열번호 103 및 123)에서는 60% (3/5)에 있어서, 동일성이 인정되었다. H쇄 CDR2의 아미노산 서열 (서열번호 104 및 124)에서는 약 53% (9/17)의 동일성이 인정되었다. H쇄 CDR3의 아미노산 서열 (서열번호 105 및 125)를 비교하면, 37.5% (6/16)의 동일성이 인정되었다. 정리하면, H쇄의 CDR 전체에서 약 46% (18/38)의 동일성을 가지고 있었다. 한편, L쇄 CDR1의 아미노산 서열 (서열번호 108 및 128)를 비교하면 약 42% (5/12)의 동일성이 인정되었다. L쇄 CDR2의 아미노산 서열 (서열번호 109 및 129)에서는 약 87% (6/7)의 동일성이 인정되었다. 또한, L쇄 CDR3의 아미노산 서열 (서열번호 120 및 130)를 비교하면 75% (6/8)의 동일성이 인정되었다. 정리하면, L쇄의 CDR 전체에서 약 63% (17/72)의 동일성을 가지고 있었다. 따라서 이들을 종합적으로 판단하면, 상기 13종의 항체와 CDR 서열이 전체에서 50% 이상의 동일성을 갖는 항체 또는 그의 단편의 경우, 동일한 결합활성 및 hMPV의 중화활성을 가질 가능성이 있다. 더구나 60% 이상 (바람직하게는 70% 이상, 80% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상 또는 99% 이상)의 동일성이 갖는 경우, 환언하면, 각 3개의 CDR 서열 (CDR1, CDR2 및 CDR3) 전체에서 1부터 수개 (구체적으로는, 1 내지 15개, 1 내지 10개, 1 내지 9개, 1 내지 8개, 1 내지 7개, 1 내지 6개, 1 내지 5개, 1 내지 4개, 1 내지 3개, 1 내지 2개 또는 1개)의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입, 추가, 또는 이들 중 어느 2개의 이상의 조합의 변이를 갖는 아미노산 서열인 경우, 상기 13개의 항 hMPV 항체와 유사한 결합활성 및 중화활성을 가질 가능성이 있다.

따라서, 본 발명의 바람직한 항체 또는 그의 항원 결합성 단편, 예를 들어, 서열번호 3 내지 5 및 8 내지 10, 13 내지 15 및 18 내지 20, 23 내지 25 및 28 내지 30, 33 내지 35 및 38 내지 40, 43 내지 45 및 48 내지 50, 53 내지 55 및 58 내지 60, 63 내지 65 및 68 내지 70, 73 내지 75 및 78 내지 80, 83 내지 85 및 88 내지 90, 93 내지 95 및 98 내지 100, 103 내지 105 및 108 내지 110, 113 내지 115 및 118 내지 120 및 123 내지 125 및 128 내지 130의 조합 군 중에서 선택된 1개의 조합 중 6개의 아미노산 서열이 각각 중쇄의 CDR1, CDR2 및 CDR3, 및 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3에 해당하는 경우이다. 하지만 hMPV의 F 단백질에 특이적으로 결합하고, 그의 생물활성을 중화시킬 수 있는 모노클로날 항체이면, CDR 서열은 서열 번호 3 내지 5 및 8 내지 10, 13 내지 15 및 18 내지 20, 23 내지 25 및 28 내지 30, 33 내지 35 및 38 내지 40, 43 내지 45 및 48 내지 50, 53 내지 55 및 58 내지 60, 63 내지 65 및 68 내지 70, 73 내지 75 및 78 내지 80, 83 내지 85 및 88 내지 90, 93 내지 95 및 98 내지 100, 103 내지 105 및 108 내지 110, 113 내지 115 및 118 내지 120, 및, 123 내지 125 및 128 내지 130의 조합 군 중에서 선택된 한 개의 조합 중 6개의 아미노산 서열에서 1 내지 수개 (구체적으로는 1 내지 9개, 1 내지 8개, 1 내지 7개, 1 내지 6개, 1 내지 5개, 1 내지 4개, 1 내지 3개, 1 내지 2개 또는 1개) 혹은 CDR 서열 중 아미노산 잔류 기수의 50% 이하 (바람직하게는 40%, 30%, 20% 또는 10% 이하)의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입, 추가, 또는 이들 중 2개 이상의 조합의 변이를 갖는 아미노산 서열일 수 있다. 또한 CDR 이외의 아미노산 서열은 특별히 한정되지 않고, CDR 이외의 아미노산 서열이 다른 항체, 특히 다른 종의 항체 유래인 소위 CDR 이식 항체도 본 발명의 항체에 포함된다. 이 중 CDR 이외의 아미노산 서열도 인간 유래인 항체가 더 바람직하지만, 필요에 따라 프레임워크 영역 (FR)에 1 내지 수개 (구체적으로는 1 내지 30개, 1 내지 25개, 1 내지 20개, 1 내지 15개, 1 내지 10개, 1 내지 9개, 1 내지 8개, 1 내지 7개, 1 내지 6개, 1 내지 5개, 1 내지 4개, 1 내지 3개, 1 내지 2개 또는 1개)의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입, 추가, 또는 이들 중 어느 2개 이상의 조합의 변이가 있을 수 있다.

또한 경우에 따라서는 hMPV의 F 단백질에 특이적으로 결합하고, 그의 생물활성을 중화시킬 수 있는 모노클로날 항체이면 상기 항체에 포함되는 6개의 CDR 서열의 조합은 서열번호 3 내지 5 및 8 내지 10, 13 내지 15 및 18 내지 20, 23 내지 25 및 28 내지 30, 33 내지 35 및 38 내지 40, 43 내지 45 및 48 내지 50, 53 내지 55 및 58 내지 60, 63 내지 65 및 68 내지 70, 73 내지 75 및 78 내지 80, 83 내지 85 및 88 내지 90, 93 내지 95 및 98 내지 100, 103 내지 105 및 108 내지 110, 113 내지 115 및 118 내지 120 및 123 내지 125 및 128 내지130의 조합 군 중에서 선택된 1개의 조합 중 6개의 아미노산 서열 중 5개 내지 1개가 다른 6개의 조합 중 다른 아미노산 서열과 일부 치환된 경우(예를 들어, 서열번호 3 내지 5 및 8 내지 10이 각각 중쇄의 CDR1, CDR2 및 CDR3, 및, 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3에 해당하는 경우, 그 중의 중쇄의 CDR2 (서열번호 4 ) 및 CDR3 (서열번호 5)가 서열번호 13 내지 15 및 18 내지 20의 조합 중 중쇄의 CDR2 (서열번호 14) 및 CDR3 (서열번호 15)를 치환하는 경우이다)도 본 발명에 포함된다.

본 발명에 있어서, 항 hMPV 항체의 바람직한 다른 실시형태로서는, (a) 서열번호 2, 12, 22, 32, 42, 52, 62, 72, 82, 92, 102, 112 및 122의 아미노산 서열; 서열번호 2, 12, 22, 32, 42, 52, 62, 72, 82, 92, 102, 112 및 122의 아미노산 서열에서 1 내지 수개 (구체적으로는 1 내지 9개, 1 내지 8개, 1 내지 7개, 1 내지 6개, 1 내지 5개, 1 내지 4개, 1 내지 3개, 1 내지 2개 또는 1개)의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입, 추가, 또는 이들 중 어느 2개 이상의 조합의 변이를 갖는 아미노산 서열; 또는 서열번호 2, 12, 22, 32, 42, 52, 62, 72, 82, 92, 102, 112 및 122의 아미노산 서열과 60% 이상 (바람직하게는 70% 이상, 80% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97%, 98% 이상 또는 99% 이상)의 동일성을 갖는 아미노산 서열의 군으로부터 선택되는 중쇄 가변영역 (VH) 및, (b) 서열번호 7, 17, 27, 37, 47, 57, 67, 77, 87, 97, 107, 117 및 127의 아미노산 서열; 서열번호 7, 17, 27, 37, 47, 57, 67, 77, 87, 97, 107, 117 및 127의 아미노산 서열의 서열에서 1 내지 수개 (구체적으로는 1 내지 9개, 1 내지 8개, 1 내지 7개, 1 내지 6개, 1 내지 5개, 1 내지 4개, 1 내지 3개, 1 내지 2개 또는 1개)의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입, 추가, 또는 이들 중 2개 이상의 조합의 변이를 갖는 아미노산 서열; 또는 서열번호 7, 17, 27, 37, 47, 57, 67, 77, 87, 97, 107, 117 및 127의 아미노산 서열과 60% 이상 (바람직하게는 70% 이상, 80% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97%, 98% 이상 또는 99% 이상)의 동일성을 갖는 아미노산 서열의 군에서 선택되는 경쇄가변 영역 (VL)을 함유하는 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.

본 발명에 있어서, 항 hMPV 항체의 더욱 바람직한 다른 실시형태로서는, (a-1) 서열번호 2의 아미노산 서열; 서열번호 2의 아미노산 서열에 있어서, 1 내지 수 개 (구체적으로는 1 내지 9개, 1 내지 8개, 1 내지 7개, 1 내지 6개, 1 내지 5개, 1 내지 4개, 1 내지 3개, 1 내지 2개 또는 1개)의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입, 추가, 또는 이들 중 어느 2개 이상의 조합의 변이를 갖는 아미노산 서열; 또는 서열번호 2의 아미노산 서열과 60% 이상 (바람직하게는 70% 이상, 80% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상 또는 99% 이상)의 동일성을 갖는 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 가변영역 (VH)과 (b-1) 서열번호 7의 아미노산 서열; 서열번호 7의 아미노산 서열 중 1 내지 수개 (구체적인 숫자는 위와 같음)의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입, 추가, 또는 이들 중 어느 2개 이상의 조합의 변이를 갖는 아미노산 배열; 또는 서열번호 7의 아미노산 서열과 60% 이상(구체적인 %는 위와 같음)의 동일성을 갖는 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 가변영역 (VL)을 함유한다.

또는, 항 hMPV 항체의 바람직한 다른 실시형태로서는, (a-2) 서열번호 12의 아미노산 서열; 서열번호 12의 아미노산 서열에서 1 내지 수개 (구체적으로는 1 내지 9 개, 1 내지 8개, 1 내지 7개, 1 내지 6개, 1 내지 5개, 1 내지 4개, 1 내지 3개, 1 내지 2개 또는 1개)의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입, 부가 또는 이들 중 어느 2 개 이상의 조합의 변이를 갖는 아미노산 서열; 또는 서열번호 12의 아미노산 서열과 60% 이상 (바람직하게는 70% 이상, 80% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상 또는 99% 이상)의 동일성을 갖는 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 가변영역 (VH)과, (b-2) 서열번호 17의 아미노산 서열; 서열번호 17 의 아미노산 서열 중 1 내지 수개 (구체적인 숫자는 위와 같음)의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입, 추가, 또는 이들 중 어느 2개 이상의 조합의 변이를 갖는 아미노산 서열; 또는 서열번호 17의 아미노산 서열과 60% 이상 (구체적인 %는 위와 같음)의 동일성을 갖는 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 가변영역 (VL)을 함유한다.

또는, 항 hMPV 항체의 바람직한 다른 실시형태로서는, (a-3) 서열번호 22의 아미노산 서열; 서열번호 22의 아미노산 서열에 있어서 1 내지 수개 (구체적으로는 1 내지 9개, 1 내지 8개, 1 내지 7개, 1 내지 6개, 1 내지 5개, 1 내지 4개, 1 내지 3개, 1 내지 2개 또는 1개)의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입, 부가 또는 이들 중 어느 2개 이상의 조합의 변이를 갖는 아미노산 서열; 또는 서열번호 22의 아미노산 서열과 60% 이상 (바람직하게는 70% 이상, 80% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상 또는 99% 이상)의 동일성을 갖는 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 가변영역 (VH)과 (b-3)서열번호 27의 아미노산 서열; 서열번호 27 의 아미노산 서열 중 1 내지 수개 (구체적인 숫자는 위와 같음)의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입, 추가, 또는 이들 중 어느 2개 이상의 조합의 변이를 갖는 아미노산 서열; 또는 서열번호 27의 아미노산 서열과 60% 이상 (구체적인 %는 위와 같음)의 동일성을 갖는 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 가변영역 (VL)을 함유한다.

본 발명에 있어서, 항 hMPV 항체의 바람직한 다른 실시형태로서는, (a-4) 서열번호 33의 아미노산 서열; 서열번호 33의 아미노산 서열에서 1 내지 수개 (구체적으로는 1 내지 9개, 1 내지 8개, 1 내지 7개, 1 내지 6개, 1 내지 5개, 1 내지 4개, 1 내지 3개, 1 내지 2개 또는 1개)의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입 부가 또는 이들 중 어느 2개 이상의 조합의 변이를 갖는 아미노산 서열; 또는 서열번호 33의 아미노산 서열과 60% 이상 (바람직하게는 70% 이상, 80% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상 또는 99% 이상)의 동일성을 갖는 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 가변영역 (VH)과 (b-4)서열번호 38의 아미노산 서열; 서열번호 38의 아미노산 서열 중 1 내지 수개 (구체적인 숫자는 위와 같음)의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입, 추가, 또는 이들 중 어느 2개 이상의 조합의 변이를 갖는 아미노산 서열; 또는 서열번호 38의 아미노산 서열과 60% 이상 (구체적인 %는 상기와 동일함)의 동일성을 갖는 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 가변영역 (VL)을 함유한다.

또는, 항 hMPV 항체의 바람직한 다른 실시형태로서는, (a-5) 서열번호 43의 아미노산 서열; 서열번호 43의 아미노산 서열에서 1 내지 수개 (구체적으로는 1 내지 9개, 1 내지 8개, 1 내지 7개, 1 내지 6개, 1 내지 5개, 1 내지 4개, 1 내지 3개, 1 내지 2개 또는 1개)의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입, 부가 또는 이들 중 어느 2개 이상의 조합의 변이를 갖는 아미노산 서열; 또는 서열번호 43의 아미노산 서열과 60% 이상 (바람직하게는 70% 이상, 80% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상 또는 99% 이상)의 동일성을 갖는 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 가변영역 (VH)과, (b-5) 서열번호 47의 아미노산 서열; 서열번호 47의 아미노산 서열 중 1 내지 수 개 (구체적인 숫자는 위와 같음)의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입, 부가 또는이 중 2 가지 이상 조합의 변이를 갖는 아미노산 서열; 또는 서열번호 47의 아미노산 서열과 60% 이상 (구체적인 %는 위와 같음)의 동일성을 갖는 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 가변영역 (VL)을 함유한다.

또는 항 hMPV 항체의 바람직한 다른 실시형태로서는, (a-6) 서열번호 52의 아미노산 서열; 서열번호 57의 아미노산 서열에서 1 내지 수개 (구체적으로는 1 내지 9개, 1 내지 8개, 1 내지 7개, 1 내지 6개, 1 내지 5개, 1 내지 4개, 1 내지 3개, 1 내지 2개 또는 1개)의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입, 부가 또는 이들 중 어느 2개 이상의 조합의 변이를 갖는 아미노산 서열; 또는 서열번호 57의 아미노산 서열과 60% 이상 (바람직하게는 70% 이상, 80% 이상, 90% 이상, 95 % 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 또는 99% 이상)의 동일성을 갖는 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 가변영역 (VH)과, (b-6) 서열번호 62의 아미노산 서열; 서열번호 62의 아미노산 서열 중 1 내지 수 개 (구체적인 숫자는 위와 같음)의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입, 추가, 또는 이들 중 어느 2개 이상의 조합의 변이를 갖는 아미노산 서열; 또는 서열번호 62의 아미노산 서열과 60% 이상 (구체적인 %는 위와 같음)의 동일성을 갖는 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 가변영역 (VL)을 함유한다.

본 발명에 있어서, 항 hMPV 항체의 바람직한 다른 실시형태로서는, (a-7) 서열번호 62의 아미노산 서열; 서열번호 62의 아미노산 서열에서 1 내지 수개 (구체적으로는 1 내지 9개 1 내지 8개, 1 내지 7개, 1 내지 6개, 1 내지 5개, 1 내지 4개, 1 내지 3개, 1 내지 2개 또는 1개)의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입 부가 또는 이들 중 어느 2개 이상의 조합의 변이를 갖는 아미노산 서열; 또는 서열번호 62의 아미노산 서열과 60% 이상 (바람직하게는 70% 이상, 80% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상 또는 99% 이상)의 동일성을 갖는 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 가변영역 (VH)과, (b-7) 서열번호 67의 아미노산 서열; 서열번호 67의 아미노산 서열 중 1 내지 수개 (구체적인 숫자는 위와 같음)의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입, 추가, 또는 이들 중 어느 2개 이상의 조합의 변이를 갖는 아미노산 서열; 또는 서열번호 67의 아미노산 서열과 60% 이상 (구체적인 %는 상기와 같음)의 동일성을 갖는 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 가변영역 (VL)을 함유한다.

또는, 항 hMPV 항체의 바람직한 다른 실시형태로서는, (a-8) 서열번호 72의 아미노산 서열; 서열번호 72의 아미노산 서열에서 1 내지 수개 (구체적으로는 1 내지 9개, 1 내지 8개, 1 내지 7개, 1 내지 6개, 1 내지 5개, 1 내지 4개, 1 내지 3개, 1 내지 2개 또는 1개)의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입, 부가 또는 이들 중 어느 2개 이상의 조합의 변이를 갖는 아미노산 서열; 또는 서열번호 72의 아미노산 서열과 60% 이상 (바람직하게는 70% 이상, 80% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 또는 99% 이상)의 동일성을 갖는 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 가변영역 (VH)과, (b-8) 서열번호 77의 아미노산 서열; 서열번호 77의 아미노산 서열 중 1 내지 수개 (구체적인 숫자는 위와 같음)의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입, 추가, 또는 이들 중 어느 2개 이상의 조합의 변이를 갖는 아미노산 서열; 또는 서열번호 77의 아미노산 서열과 60% 이상 (구체적인 %는 위와 같음)의 동일성을 갖는 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 가변영역 (VL)을 함유한다.

또는 항 hMPV 항체의 바람직한 다른 실시형태로서는, (a-9) 서열번호 82의 아미노산 서열; 서열번호 82의 아미노산 서열에서 1 내지 수개 (구체적으로는 1 내지 9개, 1 내지 8개, 1 내지 7개, 1 내지 6개, 1 내지 5개, 1 내지 4개, 1 내지 3개, 1 내지 2개 또는 1개)의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입, 부가 또는 이들 중 어느 2개 이상의 조합의 변이를 갖는 아미노산 서열; 또는 서열번호 82의 아미노산 서열과 60% 이상 (바람직하게는 70% 이상, 80% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상 또는 99% 이상)의 동일성을 갖는 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 가변영역 (VH)과, (b-9) 서열번호 87의 아미노산 서열; 서열번호 87의 아미노산 서열 중 1 내지 수개 (구체적인 숫자는 위와 같음) 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입, 추가, 또는 이들 중 어느 2개 이상의 조합의 변이를 갖는 아미노산 서열; 또는 서열번호 87의 아미노산 서열과 60% 이상 (구체적인 %는 상기와 같음)의 동일성을 갖는 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 가변영역 (VL)을 함유한다.

본 발명에 있어서, 항 hMPV 항체의 바람직한 다른 실시형태로서는, (a-10) 서열번호 92의 아미노산 서열; 서열번호 92의 아미노산 서열에서 1 내지 수개 (구체적으로는 1 내지 9개, 1 내지 8개, 1 내지 7개, 1 내지 6개, 1 내지 5개, 1 내지 4개, 1 내지 3개, 1 내지 2개 또는 1개)의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입, 부가 또는 이들 중 어느 2개 이상의 조합의 변이를 갖는 아미노산 서열; 또는 서열번호 92의 아미노산 서열과 60% 이상 (바람직하게는 70% 이상, 80% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상 또는 99% 이상)의 동일성을 갖는 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 가변영역(VH)과, (b-10) 서열번호 97의 아미노산 서열; 배열번호 97의 아미노산 서열 중 1 내지 수개 (구체적인 숫자는 위와 같음)의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입, 추가, 또는 이들 중 어느 2개 이상의 조합의 변이를 갖는 아미노산 서열; 또는 서열번호 97의 아미노산 서열과 60% 이상 (구체적인 %는 위와 같음)의 동일성을 갖는 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 가변영역 (VL)을 함유한다.

또는, 항 hMPV 항체의 바람직한 다른 실시형태로서는, (a-11) 서열번호 102의 아미노산 서열; 서열번호 102의 아미노산 서열에서 1 내지 수개 (구체적으로는 1 내지 9개, 1 내지 8개, 1 내지 7개, 1 내지 6개, 1 내지 5개, 1 내지 4개, 1 내지 3개, 1 내지 2개 또는 1개)의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입, 부가 또는 이들 중 어느 2개 이상의 조합의 변이를 갖는 아미노산 서열; 또는 서열번호 102의 아미노산 서열과 60% 이상 (바람직하게는 70% 이상, 80% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 또는 99% 이상)의 동일성을 갖는 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 가변영역 (VH)과, (b-11) 서열번호 107의 아미노산 서열; 서열번호 107 의 아미노산 서열 중 1 내지 수개 (구체적인 숫자는 위와 같음)의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입, 추가, 또는 이들 중 어느 2개 이상의 조합의 변이를 갖는 아미노산 서열; 또는 서열번호 107의 아미노산 서열과 60% 이상 (구체적인 %는 상기와 같음)의 동일성을 갖는 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 가변영역 (VL)을 함유한다.

또는, 항 hMPV 항체의 바람직한 다른 실시형태로서는, (a-12) 서열번호 112의 아미노산 서열; 서열번호 112의 아미노산 서열에서 1 내지 수개 (구체적으로는 1 내지 9개, 1 내지 8개, 1 내지 7개, 1 내지 6개, 1 내지 5개, 1 내지 4개, 1 내지 3개, 1 내지 2개 또는 1개)의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입, 부가 또는 이들 중 어느 2개 이상의 조합의 변이를 갖는 아미노산 서열; 또는 서열번호 112의 아미노산 서열과 60% 이상 (바람직하게는 70% 이상, 80% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상 또는 99% 이상)의 동일성을 갖는 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 가변영역 (VH)과, (b-12) 서열번호 117의 아미노산 서열; 서열번호 117의 아미노산 서열 중 1 내지 수개 (구체적인 숫자는 위와 같음)의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입, 부가 또는이 중 어느 2개 이상의 조합의 변이를 갖는 아미노산 서열; 또는 서열번호 117의 아미노산 서열과 60% 이상 (구체적인 %는 위와 같음)의 동일성을 갖는 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 가변영역 (VL)을 함유한다.

또는, 항 hMPV 항체의 바람직한 다른 실시 예로서는, (a-13) 서열 번호 122의 아미노산 서열; 서열 번호 122의 아미노산 서열에서 1 내지 수개 (구체적으로는 1 내지 9 개, 1 내지 8 개, 1 내지 7 개, 1 내지 6 개, 1 내지 5 개, 1 내지 4 개, 1 내지 3 개, 1 내지 2 개 또는 1 개)의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입, 부가 또는 이들 중 어느 2개 이상의 조합의 변이 아미노산 서열; 또는 서열번호 122의 아미노산 서열과 60% 이상 (바람직하게는 70% 이상, 80% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상 또는 99% 이상)의 동일성을 갖는 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 가변영역 (VH)과, (b-13) 서열번호 127의 아미노산 서열; 서열번호 127의 아미노산 서열 중 1 내지 수개 (구체적인 숫자는 위와 같음)의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입, 추가, 또는 이들 중 어느 2개 이상의 조합의 변이를 갖는 아미노산 서열; 또는 서열번호 127의 아미노산 서열과 60% 이상 (구체적인 %는 상기와 같음)의 동일성을 갖는 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 가변영역 (VL)을 함유한다.

이들 항체의 제조방법은 공지의 방법을 사용할 수 있다(Riechmann L, et al., Reshaping human antibodies for therapy. Nature 332 : 323-327, 1988). 본 발명에서는 물론, 완전 인간 항체가 바람직하다.

3. 본 발명에 따른 항체 등을 코딩하는 핵산

본 발명의 다른 실시형태에 따르면, hMPV의 F 단백질에 특이적으로 결합하고, 그의 생물활성을 중화시킬 수 있는 항 hMPV 항체 또는 그의 항원 결합성 단편을 코딩하는 핵산(뉴클레오티드)으로서, 서열번호 4 내지 15, 18 내지 29, 및 32 내지 43으로 이루어진 군에서 선택되는 아미노산 서열을 코딩하는 핵산, 및 상기 핵산과 높은 동일성을 갖는 분리된 핵산도 본 발명에 포함된다. 여기서 '높은 동일성을 가진다'라는 것은 높은 스트린전트 조건 하에서 소정의 핵산 서열에 대하여 하이브리드화 할 수 있는 정도의 서열 동일성을 의미하며, 예를 들어, 60%, 70%, 80%, 90% 또는 95% 또는 이를 초과하는 동일성을 갖는 것을 의미한다. 높은 스트린전트 조건하에서 하이브리드화 하는 핵산으로부터 선택되는 분리된 핵산이 제공된다. 바람직하게는 상기 핵산은 DNA 또는 RNA이며, 보다 바람직하게는 DNA이다.

'높은 스트린전트 조건'은 예를 들어, 5 x SSC, 5 x 덴하루트 용액, 0.5 % SDS, 50% 포름아미드, 50℃의 조건이다. (예를 들어, J.Sambrook등의 Molecular Cloning, A Laboratory Manual 2nd ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press (1989), 특히 11.45절 "Conditions for Hybridization of Oligonucleotide Probes"참조). 이들 조건에 있어서 온도를 올릴수록 높은 동일성을 갖는 폴리뉴클레오티드 (예를 들어, DNA)가 효율적으로 얻어질 수 있다는 것을 기대할 수 있다. 단, 하이브리드화의 스트린전시에 영향을 미치는 요소로서는 온도, 프로브 농도, 프로브의 길이, 이온강도, 시간, 염농도 등 여러 요소가 고려되며, 당업자라면 이들 요소를 적절하게 선택하여 동일한 스트린전시를 실현하는 것이 가능하다.

상기 높은 스트린전트 조건에서 하이브리드화하는 핵산으로서는, 아미노산 서열을 코딩하는 핵산과, 예를 들어, 70% 이상, 80% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 97% 이상 또는 99% 이상의 동일성을 갖는 핵산이 포함된다.

염기서열의 동일성은 상술한 동일성 검색 알고리즘 등을 이용하여 결정할 수있다 (Proc. Natl. Acad. Sci. USA 872264-2268 1990; Proc Natl Acad Sci USA 90 : 5873, 1993).

또한, 본 발명의 항 hMPV 항체를 코딩하는 핵산으로서 바람직한 핵산 서열번호 3 ~ 5, 8 ~ 10, 13 ~ 15, 18 ~ 20, 23 ~ 25, 28 ~ 30, 33 ~ 35, 38 ~ 40, 43 ~ 45, 48 ~ 50, 53 ~ 55, 58 ~ 60, 63 ~ 65, 68 ~ 70, 73 ~ 75, 78 ~ 80, 83 ~ 85, 88 ~ 90, 93 ~ 95, 98 ~ 100, 103 ~ 105, 108 ~ 110, 113 ~ 115, 118 ~ 120, 123 ~ 125 및 128 ~ 130의 26종 CDR 서열의 조합 중 어느 하나의 조합 CDR 서열을 포함하는 항체의 H쇄 또는 L쇄 또는 그의 항원 결합성 단편을 코딩하는 DNA, 더욱 바람직하게는 서열번호 2, 7, 12, 17, 22, 27, 32, 37, 42, 47, 52, 57, 62, 67, 72, 77, 82, 87, 92, 97, 102, 107, 112, 117, 122 및 127 중 어느 하나의 VH 또는 VL를 포함하는 항체의 H쇄 또는 L쇄 또는 그의 항원 결합성 단편을 코딩하는 DNA, 또는 이들 핵산 (DNA) 중 어느 하나와 높은 스트린전트 조건에서 하이브리드화 하는 분리된 핵산이다.

또한 보다 바람직한 핵산 서열번호 1, 6, 11, 16, 21, 26, 31, 36, 41, 46, 51, 56, 61, 66, 71, 76, 81, 86, 91, 96, 101, 106, 111, 116, 121 또는 126의 아미노산 서열을 코딩하는 핵산, 또는 이들 핵산 중 어느 하나와 높은 스트린전트 조건에서 하이브리트화하는 분리된 핵산이다.

4. 본 발명에 따른 벡터, 숙주세포 및 항체의 제작방법

본 발명은 상기 핵산을 도입한 벡터 및 벡터가 도입된 숙주세포, 이들을 이용하는 항체의 제조방법에 관한 것이다.

본 발명의 항체는 공지의 방법을 이용한 재조합 인간 항체로도 제작할 수 있다 (Nature, 312 : 643,1984, Nature, 321 : 522,1986 등 참조). 예를 들어, 본 발명의 항체는 본 발명에 따른 벡터를 도입한 숙주세포를 배양하고, 배양 상청 등으로부터 생산된 항체를 정제하여 제조할 수 있다. 보다 구체적으로는 VH 및 VL을 코딩하는 cDNA를 동일한 세포 또는 다른 인간 세포로부터 제작한 인간 항체 CH 및/또는 인간항체 CL을 코딩하는 유전자를 함유하는 동물세포용 발현 벡터에 각각 삽입하고 인간 항체 발현 벡터를 구축하고, 동물 세포에 도입하여 발현시킴으로써 제조할 수 있다.

본 발명의 항체의 VH 또는 VL을 코딩하는 핵산을 도입하는 벡터로서는 반드시 한정되지 않지만, 단백질 유전자 등의 발현에 널리 사용되고, 특히 항체 유전자의 발현에 적합한 벡터 또는 고발현용 벡터가 바람직하다. 바람직한 예로서는, EF 프로모터 및/또는 CMV 인핸서를 함유하는 벡터를 들 수 있다. 또한 통상의 VH 또는 VL을 코딩하는 핵산을 도입하는 발현벡터를 각각 제작하여. 숙주세포에 코트랜스펙트하지만, 단일의 발현벡터에 도입할 수도 있다.

발현 벡터를 도입하는 숙주세포로서는 반드시 한정되지 않지만, 단백질 유전자 등의 발현에 널리 사용되며, 특히 항체 유전자의 발현에 적합한 세포가 바람직하다. 예를 들어, 세균 (대장균 등), 방선균, 효모, 곤충세포 (SF9 등), 포유류 세포 (COS-1, CHO, 골수종세포 등)을 들 수 있다.

재조합 항체를 공업적으로 생산하기 위해서는 일반적으로 해당 항체를 안정적으로 고생산하는 재조합 동물 세포주, 예를 들어 CHO 세포주가 이용된다. 그와 같은 재조합 세포주의 제작, 클론화 (복제), 높은 발현을 위한 유전자 증폭 및 스크리닝은 공지의 방법을 이용할 수 있다 (예를 들어, Omasa T .: J. Biosci. Bioeng., 94, 600-605 2002등 참조).

본 발명은 중쇄 2개와 경쇄 2개로 구성된 항체 외에, 본 발명의 항체의 항원 결합성 단편도 포함된다. 항원 결합성 단편으로서는, 예를 들면, Fab (Fragment of antigen binding), Fab', F(ab')2가 있으며, 항체의 활성단편을 링커 등으로 결합한 것으로서, 예를 들어 단일가닥 항체 (single chain Fv: scFv)와 디설파이드 안정화 항체(disulfide stabilized Fv : dsFv)가 있으며, 항체의 활성단편을 포함하는 펩타이드로서 예를 들어 CDR을 함유하는 펩타이드를 들 수 있다. 이들은 본 발명의 항체를 적당한 단백질 분해효소로 처리하는 방법 또는 유전자 재조합 기술 등 공지의 방법으로 제조할 수 있다.

항체의 정제는 염석법, 겔 여과법, 이온교환 크로마토그래피 법 또는 친화성 크로마토그래피 법 등의 공지의 정제수단을 사용하여 수행할 수 있다.

그 외에, 최근 개발된 유전공학 기술을 활용하여 재조합 항체 (재조합 항체)를 파지표면에 발현시키는 파지 디스플레이 항체기술에 의해 인공적으로 VH, VL 유전자를 셔플링시켜 다양화된 scFv (singlechain Fragment of variable region)항체를 파지 융합단백질로서 발현시키고, 특이 항체를 얻을 수도 있다. 이 기술은 면역을 회피할 수 있으며, 또한 세포 융합방법을 대신할 인간화 항체 제작기술로서 높이 평가되고 있다. 이 기술을 이용하여, 본원 명세서에서의 서열번호 2 ~ 6, 8 ~ 12, 14 ~ 18 및 20 ~ 24의 아미노산 서열을 참고로 제작한 특이항체 또는 그의 항원 결합성 단편이면, 본 발명의 기술적 범위에 속한다.

또한, 최근에 개발된 항체의 당쇄 부분의 수식에 의해 항체의 ADCC 활성을 크게 개선하는 포텔리전트 (Potellegent)기술을 본 발명의 항체에 응용하여 얻어진 항체 (Clin. Cancer Res., 10,6248-6255 (2004) 참조)나, CDC활성을 개선하는 컴플리전트 (Complegent)기술을 본 발명의 항체에 응용하여 얻어진 항체 (Glycobiology, 17, 104-118 (2007)참조)도, 또한 본 발명의 기술 범위에 속한다. 마찬가지로 최근 개발된 항체의 정상영역 부분의 아미노산 서열을 수식함으로써 ADCC 활성 (WO2007/039682 및 WO2007/100083)이나 CDC 활성 (WO2007/011041 및 WO2011/091078)을 변형하는 방법으로 얻어진 항체도 본 발명의 기술범위에 속한다.

또한, 상기 항체에 프로테아제 내성 능력을 부가하고, 경구투여 가능하게 하기 위해 수행하는 Fc영역의 부분적인 치환기술 (WO2006/071877 참조)을 응용하여 얻어진 항체 또는 그의 항원 결합성 단편이면, 본 발명의 기술적 범위 내에 속한다.

또한, 항체제작 방법으로서 통상적으로 마우스, 토끼, 염소 등의 실험동물을 이용하여 폴리클로날 항체나, 모노클로날 항체를 취득하는 것이 행해지고 있지만, 이렇게 하여 얻어진 항체는 이용한 동물종에 특징적인 서열을 가지고 있기 때문에, 그대로 인간에게 투여하면 인가s면역체계에 의해 이물질로 인식되고, 인간 항 동물항체 반응이 일어날 (즉, 항체의 항체를 만들어 버릴)수 있다.

본 발명에 따른 항 hMPV 모노클로날 항체 또는 그의 항원 결합성 단편은 정상인 등의 혈액유래의 항체생산 세포로부터 얻을 수 있으며, 그것은 완전 인간 항체이다. 이러한 완전 인간 항체는 항체 의약으로서 인체에 투여하더라도 면역원성을 갖지 않고 면역반응은 발견되지 않는 것으로 생각된다.

또한, 특히 본 발명의 hMPV의 F 단백질에 대한 모노클로날 항체에 있어서는 종래의 항 hMPV 항체보다 보다 더 높은 중화능을 갖기 때문에, 보다 적은 투여량으로 같은 정도의 치료효과를 기대할 수 있다.

5. 본 발명에 따른 항체를 함유하는 의약 조성물

다음으로, 본 발명은 상기 항체 또는 그의 항원 결합부분 및 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 hMPV에 의한 호흡기 질환을 예방 또는 치료하기 위한 의약 조성물을 제공한다.

특히, 본 발명에 따른 항 hMPV 항체 또는 그의 항원 결합성 단편은 hMPV의 F 단백질에 특이적으로 결합하고, 종래의 항 hMPV의 F 단백질 항체보다 높은 중화능을 갖기 때문에, hMPV가 관여하는 질환의 예방 또는 치료제로 유용하다.

본 명세서에서 사용되는 '약학적으로 허용 가능한 담체' 에는 생리학적으로 적합 가능한 임의의 또는 모든 용매, 분산매, 코팅, 등장제 및 흡수지연제 등이 포함된다.

약학적으로 허용 가능한 담체의 예로는 물, 염류용액, 인산 완충화 생리식염수, 덱스트로오스, 글리세롤, 에탄올 등의 1종 또는 복수, 및 이들의 조합이 포함된다. 주사제 등으로서 사용되는 경우, pH 조절제나 등장제, 예를 들면 당이나 만니톨, 소르비톨 등의 폴리알코올 또는 염화나트륨을 조성물 중에 포함하는 것이 바람직하다. 약학적으로 허용가능한 담체에는 추가로 습윤제나 유화제, 방부제, 완충제, 안정화제 등, 항체 또는 항체부분의 보존성 또는 효율성을 증대시키는 소량의 보조물질을 포함할 수 있다.

본 발명의 조성물은 다양한 제형으로 제조할 수 있다. 이와 같은 조성물에는 예를 들어, 용액 (예를 들어, 주사가능하고 주입가능한 용액)이나 분산액, 현탁액, 정제, 캡슐, 트로치, 알약, 분말, 리포좀, 좌약 등, 액체, 반고체, 고체 제형이 포함된다. 바람직한 형태는 의도된 투여 형태 및 치료의 적용예에 따라 다르다. 일반적으로 바람직한 조성물은 다른 항체에서 인간을 수동적으로 면역화하는데 사용되는 것과 동일한 조성물 등, 주사 가능한 또는 주입 가능한 용액의 형태인 것이다. 바람직한 투여형태는 비경구적인 것 (예를 들어, 정맥내, 피하, 복강내, 근육내에서)이다. 바람직한 실시형태에서는, 항체는 정맥 주입 또는 정맥 주사로 투여된다. 다른 바람직한 실시예에서는, 항체는 근육내 주사 또는 피하 주사에 의해 투여된다.

본 발명의 항체 및 항체 단편은 비경구 투여에 적합한 의약 조성물에 도입할 수 있다. 항체 또는 항체 부분은 단독 종류를 사용하는 경우에는 0.1 내지 250 mg/mL의 항체를 함유하는 주사 가능한 제제로서 제조하는 것이 바람직하다. 한편, 복수 종류의 항체를 혼합하여 사용하는 경우에는 0.001 내지 100 mg/mL의 항체를 함유하는 주사 가능한 제제로서 제조하는 것이 바람직하다. 또한, 그의 복수 종류의 항체 혼합 비율은 적절하게 설정할 수 있다.

주사 가능한 제제는 활성성분을 액체에 용해한 것 또는 유효성분을 동결건조시킨 것을 플린트 또는 앰버 바이알, 앰플 또는 프리필드 주사기에 넣은 것으로 구성할 수 있다. 완충제는 pH 5.0 내지 7.0 (최적의 경우 pH 6.0)의 L-히스티딘 (1 내지 50 mM), 최적의 경우 5 내지 10 mM의 L-히스티딘으로 할 수 있다. 기타 적절한 완충제에는 숙신산 나트륨, 구연산 나트륨, 인산 나트륨 또는 인산 칼륨이 포함되지만, 이에 한정되지 않는다. 농도 0 내지 300 mM의 용액 (액체 제형에 관해서는 최적의 경우 150 mM)의 삼투압을 바꾸기 위해 염화나트륨을 사용할 수 있다. 동결건조시킨 제형에는 동결 보호물질, 주로 0 내지 10% (최적의 경우 0.5 내지 5.0%)의 수크로오스를 포함할 수 있다. 기타 적절한 동결 보호물질에는 만니톨, 트레할로스 및 락토오스가 포함된다. 동결건조시킨 제형에는 증량제, 주로 1 내지 10%의 만니톨 (최적의 경우 2 내지 4%)를 포함할 수 있다. 액체 및 동결건조시킨 제형 모두에는 안정제, 주로 1 내지 50 mM (최적의 경우 5 내지 10 mM)의 L-메티오닌을 사용할 수 있다. 기타 적절한 안정제에는 글리신, 아르기닌 및 폴리소르베이트 80 등이 포함되며, 폴리소르베이트 80의 경우 0 내지 0.05% (최적의 경우 0.005 내지 0.01%)를 포함할 수 있다. 다른 계면활성제에는 폴리소르베이트 20 및 BRIJ 계면활성제가 포함되지만, 이들로 한정되지 않는다.

본 의약 조성물은 일반적으로 제조 및 저장 조건하에서 무균 또는 안정적이어해야한다. 이 조성물은 용액, 마이크로 에멀젼, 분산액, 리포좀, 또는 높은 약물농도에 적합한 다른 오더된 (ordered)구조로서 처방할 수 있다. 무균의 주사가능한 용액은 필요로 하는 양의 활성 화합물 (즉, 항체 또는 항체부분)을, 필요한 경우에는 상술한 성분 중 하나 또는 조합과 함께 적절한 용매에 혼합하고, 그 후 여과 멸균함으로써 조제할 수 있다. 일반적으로 활성 화합물을 기본적인 분산매 및 상기 열거한 것으로부터 필요로 하는 기타 성분을 함유하는 무균 비히클 (vehicle)에 혼합함으로써 분산액을 제조한다. 무균의 주사가능한 용액을 제조하기 위한 무균 분말제제의 경우, 바람직한 조제방법은 앞서 언급한 그의 멸균여과 용액의 동결진공 건조 및 분무건조이며, 이를 통해 활성성분의 분말에 더하여, 임의의 다른 원하는 성분을 포함한 조성물이 얻어진다. 용액의 적정한 유동성은 예를 들어, 레시틴 등의 코팅을 사용함으로써, 또한 분산액의 경우에는 필요로 하는 입도를 유지함으로써, 또한 계면활성제를 사용함으로써 유지할 수 있다. 주사 가능한 조성물의 장기간에 걸친 흡수는 그의 조성물 중에 흡수를 지연시키는 약제, 예를 들면, 모노스테아르산염 또는 젤라틴을 포함함으로써 수행할 수 있다.

6. 본 발명에 따른 항 hMPV 항체 및 그의 항원 결합성 단편을 취득하는 공정

다음으로, 본 발명에 따른 항 hMPV 모노클로날 항체 및 그의 항원 결합성 단편을 얻는 공정에 대하여 설명하지만, 본 발명에 따른 항체 등을 얻는 방법은 이들 기재로 인한 아무 제한도 없고, 상술한 바와 같이 당해 기술분야에서 통상의 변경이 가능하다는 것은 말할 것까지도 없다.

본 발명에 따른 항 hMPV 항체 및 그의 항원 결합성 단편은 인간의 혈액으로부터 다양한 공정을 거쳐 상기 항체를 생산하는 세포 클론을 분리하고, 항체 생산 세포 클론의 배양 상청에서 얻은 항체에 대하여, 친화성 (어피니티)정제를 수행함으로써 얻을 수 있다.

1) hMPV의 F 단백질에 대한 완전 인간 항체 생산 세포 클론의 분리

인간의 혈액으로부터 B 림프구를 분리하고, 상기 B 림프구의 증식을 유도한다. 증식유도의 방법 자체는 공지되어 있으며, 예를 들면, 암의 유발인자인 '엡스타인-바 바이러스 (EB바이러스)' (Epstein-Barr virus) (이하, EBV라고 칭함)를 이용한 트랜스폼 방법(D.Kozbor 등)을 통해 수행할 수 있다.

즉, 상기 B 림프구를 EBV에 감염시켜 증식유도하고, 증식시킨 세포를 항체 생산 세포 라이브러리로 한다.

2) 항체 생산 세포 라이브러리로부터 모노클로날 항체의 회수

증식 유도시킨 세포로부터 모노클로날 항체를 회수하는 방법은 모노클로날 항체의 제조에 있어서 널리 사용되고 있는 주지의 방법에 의해 수행할 수 있다.

상기 항체 생산 세포 라이브러리 중에서 hMPV의 F 단백질에 결합하는 항체를 생성하는 림프구 클론을 선별하고, 그의 배양 상청으로부터 항체를 취출한다. 즉, 상기 항체 생산 세포 라이브러리로부터 한계희석법에 의해 hMPV의 F 단백질에 결합하는 항체를 생산하는 세포집단 (클론)을 선택한다.

hMPV의 F 단백질과 결합하는 클론의 검출에는 상기 F 단백질을 항원으로 한 ELISA 및 표지 마우스 항 인간 IgG 항체를 사용한 ELISA를 채용하여 수행할 수 있다. 또는 F 단백질 발현 벡터를 세포에 도입하고, 그것을 발현시킨 세포를 고정한 스크리닝 플레이트를 사용하여 hMPV 항체를 검출하는 방법 (세포형광 면역염색 스크리닝법)을 이용할 수도 있다.

선택된 항체 양성 세포집단을 배양하고, 스크리닝을 반복함으로써 목적으로하는 항체만을 생산하는 세포집단 (클론)을 얻을 수 있다. 이상의 항체생산 세포 클론의 분리까지의 과정을 나타내는 흐름도를 도 1에 나타낸다.

3) Protein A 또는 G를 이용한 친화성 정제

항 hMPV 항체를 정제하는데는, 선발된 세포를, 디시(dish), 롤라병, 2 리터들이 스피너 플라스크 또는 다른 배양 시스템에서 증식시킬 수 있다.

얻어진 배양 상청을 여과하고, 농축한 후 단백질 A 또는 단백질 G- 세파로스 (GE 헬스 케어사) 등에 의한 친화성·크로마토그래피를 통하여 상기 단백질을 정제 할 수 있다. 완충액을 PBS로 교환하고, OD280 또는 바람직하게는 네필로미터 분석에 의해 농도를 판정할 수 있다. 동종형은 동종형 항원에 특이적인 방법으로 조사할 수 있다. 이렇게 하여 얻어진 항 hMPV 항체는 인간 체내에 감작된 B 림프구로부터 제작한 완전 인간 항체이기 때문에, 항체에 대한 면역반응의 가능성이 낮다.

또한, 항체 생산세포 클론 제작에 관하여, B 림프구에 감염하여 증식유도시키는 활성이 있는 EB 바이러스를 사용하고 있다는 점도 특징적이다.

EB 바이러스법의 이점은 인간의 체내에서 만들어지는 자연적인 항체를 제작할 수 있다는 점 및 친화성이 높은 항체를 얻을 수 있다는 점이다. 예를 들어, 어떤 종류의 바이러스 (예를 들어, 인간 CMV)에 대한 인간 항체는 마우스를 인공적으로 면역하여 만든 항체보다 10 내지 100배 친화성이 높다는 것이 판명되어 있다. EB 바이러스 감염에서 증식한 B림프구 집단은 항체생산 세포의 라이브러리가 된다. 이의 라이브러리로부터 특정의 항체 생산 세포클론을 분리하고 인간 항체를 얻을 수 있다.

7. In vitro에서의 활동을 평가하는 공정

항체 또는 항체 조성물의 생물학적 특성은 hMPV의 F 단백질의 생물활성을 상기 항체가 in vitro에서 억제하는 능력을 시험함으로써 평가할 수 있다. 항체의 in vitro 평가법에는 ELISA 등의 결합측정법 및 중화 측정법 등이 포함된다.

1) 결합활성

여기에서 '특이적으로 결합하는' 또는 '특이적 결합' 이라 함은 소정의 항원을 인식하여 이것에 결합하는 것을 말한다. 항체와 hMPV의 F 단백질과의 결합 친화성을 측정하는데는 공지의 방법을 사용할 수 있다. 예를 들어, 칩 위에 고정한 F 단백질을 사용하여 Biacore T200 (등록상표)과 같은 단백질 상호작용 분석장치에 의해 측정할 수 있다. 결합 친화성 (K_D값)은 상기 측정법으로 얻어진 Kd (해리상수)와 Ka (결합상수)의 비 (K_D = Kd/Ka)로 표시된다. 본 발명에 따른 인간 항 hMPV 항체 또는 그의 항원 결합성 단편은 바람직하게는 JPS02-76 (hMPV_B1 형)의 F 단백질에 대한 결합 친화성 (KD 값)이 1 × 10^-8M 이하, 바람직하게는 1 × 10^-9M 이하, 보다 바람직하게는 6 × 10^-10 M 이하이다.

2) In vitro 중화활성

본 명세서에서 사용되는 '중화', '저해효과', '저해', '억제', '저해할 수 있는등등의 용어는 항원 (hMGB1)에 기인하는 생물활성을 약 5 내지 100%, 바람직하게는 10 내지 100%, 보다 바람직하게는 20 내지 100%, 보다 바람직하게는 30 내지 100%, 보다 바람직하게는 40 내지 100%, 보다 바람직하게는 50 내지 100%, 보다 바람직하게는 60 내지 100%, 보다 바람직하게는 70 내지 100%, 보다 더 바람직하게는 80 내지 100% 저감시키는 것을 말한다.

항 hMPV 항체의 in vitro 중화능 평가에 대해서는 hMPV의 4종의 서브그룹 (A1, A2, B1 및 B2형)의 대표적인 균주를 사용하여 실시할 수 있다 (J.Vorol 2008 p8942-8946). 예를 들어, 사용하는 hMPV 균주로서는 A1형으로서 JPS03-180 균주, A2형으로 JPS03-178 균주, B1형으로서 JPS02-76 균주 및 B2형으로서 JPS05-21 균주를 사용하고, LLC-MK2 세포에의 감염능을 항 hMPV 항체의 존재 하에서 조사함으로써 상기 항체의 중화능을 평가할 수 있다.

참고로 마우스 항체이지만, 지금까지 보고된 항 hMPV 항체 중에서, hMPV의 A1, A2, B1, B2 중 어느 형태의 균주에도 높은 중화활성을 가지고 있다고 보고되어 있는 항체 mAb338 (WO2006/110214), 및 인간항체에서 RSV 및 hMPV의 모두에 높은 중화활성을 나타내는 HMB3210 (WO2013/140247)을 함께 양성 대조군으로서 사용하였다.

본 발명에 따른 항 hMPV 항체 또는 그의 항원 결합성 단편은 LLC-MK2 세포를 사용한 hMPV 감염능의 평가 시스템에서, JPS03-180 (A1형) JPS03-178 (A2형), JPS02-76 (B1형), 및 JPS05-21 (B2형)중 어느 균주에 대해서도 바람직하게는 약 2.3μg/mL (약 15 nM)이하, 보다 바람직하게는 약 1μg/mL (약 6.7 nM) 이하, 보다 더 바람직하게는 약 0.6μg/mL (약 4 nM)이하, 가장 바람직하게는 약 0.3μg/mL (약 2 nM) 이하로 50%의 감염저해 활성 (IC50)을 갖는다. 또는 JPS03-180 (A1형), JPS03-178 (A2형), JPS02-76 (B1형) 및 JPS05-21 (B2형)중 어느 균주에 대해서도 바람직하게는 약 3.5μg/mL (약 23 nM)이하, 보다 바람직하게는 약 2μg/mL (약 13.3 nM) 이하, 보다 더 바람직하게는 약 1μg/mL (약 6.7 nM)이하로, 가장 바람직하게는 약 0.7μg/mL (약 4.7 nM)이하로 90%의 감염 저해활성 (IC90)을 갖는다.

또는 JPS03-178 (A2형)을 사용한 평가 시스템에서, 약 2μg/mL (약 13.3 nM) 이하, 바람직하게는 약 1μg/mL (약 6.7 nM)이하, 보다 바람직하게는 약 0.5μg/mL (약 3.3 nM)이하에서, 보다 더 바람직하게는 약 0.2μg/mL (약 1.33 nM)이하에서, 추가로 보다 바람직하게는 약 0.1μg/mL (약 0.67 nM)이하, 가장 바람직하게는 약 0.03μg/mL (약 0.2 nM)이하에서 50%의 감염저해 활성 (IC50)을 갖는 인간 항체 또는 그의 항원 결합성 단편은 본 발명에 포함된다.

또는 JPS03-178 (A2형)을 사용한 평가 시스템에서, 약 6μg/mL (약 40nM) 이하, 바람직하게는 약 1μg/mL (약 6.7 nM)이하, 보다 바람직하게는 약 0.2μg/mL (약 1.33 nM)이하에서, 보다 더 바람직하게는 약 0.1μg/mL (약 0.67 nM)이하에서 90%의 감염 저해활성 (IC90)을 갖는 인간 항체 또는 그의 항원 결합성 단편은 본 발명에 포함된다.

3) 세포 감염 저해활성

hMPV가 세포로부터 세포로 감염하기 위해서는 FP의 개열이 필요하지만, in vitro의 hMPV 감염의 숙주세포인 LLC-MK2 세포 또는 VERO 세포는 FP를 개열하는 활성을 갖지 않는다. 그래서 FP의 개열활성을 가진 멤브레인형 세린 프로테아제 (TMPRSS2)를 LLC-MK2 세포에 도입하고, 안정적으로 TMPRSS2를 발현하는 숙주세포를 제작하고, 얻어진 TMPRSS2 안정 발현세포에 hMPV를 감염시키는 시스템에서, 항 hMPV 항체의 세포간 감염 저지활성을 평가할 수 있다. hMPV의 B1형인 JPS02-76 균주를 상기 숙주세포에 감염시키는 시스템으로 항 hMPV 항체의 세포 감염 저지활성을 평가하였을 때, 약 0.2μg/mL (약 1.33 nM) 이하, 바람직하게는 약 0.1μg/mL (약 0.67 nM) 이하, 보다 바람직하게는 약 0.05μg/mL (약 0.33 nM) 이하에서, 보다 더 바람직하게는 약 0.02μg/mL (약 0.133 nM) 이하에서 50%의 세포 감염 저해 활성(IC50)을 갖는 인간 항체 또는 그의 항원 결합성 단편은 본 발명에 포함된다.

8. 에피토프 그룹의 분류

항 hMPV 항체의 에피토프의 차이는 항체 간에서의 경쟁분석 및 F 단백질의 부분적인 결실 펩타이드를 발현하는 세포에 대한 결합활성을 각각 조사함으로써 평가할 수 있다 (실시예 12의 '에피토프 매핑' 및 도 3 및 도 4를 참조). 그 결과, 본 발명의 항 hMPV 항체는 5개의 에피토프 그룹으로 분류할 수 있다 (Group 1, Group 2, Group 3, Group 4 및 Group 5). 즉, Group 1 (FP 및 HR1 결실 변이체에 결합하고, F2, F1-1, F1-2, F1-3, F1-4, F1-5 및 F1-6 결실 돌연변이에 결합하지 않는 항체의 그룹)에는 EV046115b, EV046130 및 EV046147이 포함된다. Group 2 (FP, HR1, F1-4, F1-5 및 F1-6 결실 변이체에 결합하고 F2, F1-1, F1-2 및 F1-3 결실 변이체에 결합하지 않는 항체의 그룹)에는 mAb338, EV046113, EV046116, EV046141 및 EV046142가 포함된다. Group 3 (FP, F1-4, F1-5 및 F1-6 결실 변이체에 결합하고, F2, HR1, F1-1, F1-2 및 F1-3 결실 변이체에 결합하지 않는 항체의 그룹)에는 EV046124, EV046143 및 EV046150이 포함된다. Group 4 (FP, HR1 및 F1-6 결실 변이체에 결합하고, F2, F1-1, F1-2, F1-3, F1-4 및 F1-5 결실 변이체에 결합하지 않는 항체의 그룹)에는 EV046120 및 EV046135가 포함된다. 또한 Group 5 (FP, HR1, F1-1, F1-3, F1-4, F1-5 및 F1-6 결실 변이체에 결합하고, F2 및 F1-2 결실 변이체에 결합하지 않는 항체의 그룹)는 EV046136이 포함된다. 따라서, 본 발명의 항 hMPV 항체는 hMPV의 F 단백질에 결합하는 항체 또는 그의 항원 결합성 단편이지만, 바람직하게는 상기 Group 1, Group 2, Group 3, Group 4 또는 Group 5에서 정의된 어느 하나의 에피토프 그룹에 속하는 항체 또는 그의 항원 결합성 단편이며, 보다 바람직하게는 Group 2, Group 3, Group 4 또는 Group 5에서 정의된 하나의 에피토프 그룹에 속하는 항체 또는 그의 항원 결합성 단편이며, 보다 더 바람직하게는 Group 3, Group 4 또는 Group 5에서 정의된 하나의 에피토프 그룹에 속하는 항체 또는 그의 항원 결합성 단편이며, 또한 가장 바람직하게는 Group 3에서 정의된 에피토프 그룹에 속하는 항체 또는 그의 항원 결합성 단편이다.

그런데 에피토프 그룹의 분류에 있어서는, 지금까지 보고되어 있는 항 hMPV 항체 중에서, hMPV의 A1, A2, B1, B2중 어느 형태의 균주에도 높은 중화활성을 가지며, 에피토프 분석 보고 (F 단백질의 a.a.238-245)가 있는 마우스 항체 mAb338 (WO2006/110214), 및 인간 항체에서 hMPV 및 RSV 모두의 F단백질에 결합하는 HMB3210 (WO2013/140247)을 대조군으로서 측정하였다.

이하, 본 발명을 실시예에 의해 보다 구체적으로 설명하지만, 본 발명은 이들 실시예에 의해 제한되는 것은 아니다. 본 실시예에서 사용하는 절차는 특별히 언급하지 않는 한 Molecular Cloning: A Laboratory Manual (Third Edition) (Sambrook 등, Cold Spring Harbour Laboratory Press, 2001)에서 참조 할 수 있다.

실시예

1. hMPV 대한 완전 인간 항체 생산 세포 클론의 분리

항체 생산세포 클론 분리까지의 플로우 차트를 도 1에 나타낸다.

인간 말초혈액으로부터 B 림프구를 분리하고, EBV를 감염시켰다. 감염 세포는 96 웰 플레이트에 파종하고, 3 내지 4주간 배양한 후, 배양 상청중의 항 hMPV 항체의 1차 스크리닝을 수행하였다. 항 hMPV 항체 생산이 확인된 각 웰의 세포를 새로운 96 웰 플레이트에 파종하였다. 3 내지 4 주간 배양한 후, 항 hMPV 항체의 2차 스크리닝을 수행하였다. 얻어진 항체 양성 웰의 세포를, 새로운 96 웰 플레이트에 웰 당 1 내지 30개 파종하였다. 3 내지 5 주간 배양한 후, 항 hMPV 항체의 3차 스크리닝을 수행하였다. 이 한계희석 배양 등에 의한 클로닝 조작의 결과, 목적 항체를 생산하는 세포 클론을 얻었다.

2. 항 hMPV 항체의 세포 형광면역 염색 스크리닝

스크리닝은 hMPV의 주요한 중화표적인 Fusion Protein (FP)에 대한 항체를 대상으로 하였다. hMPV (JPS02-76)로부터 RNA를 추출하고, Random Decamers에 의해 cDNA를 합성하였다. FP유전자의 전장을 PCR에 의해 증폭하고, 발현벡터에 클로닝하였다. 클로닝한 FP 유전자의 염기서열 및 아미노산 서열을 서열번호 131 및 132에 각각 나타낸다. 클로닝한 FP유전자는 gene bank에 등록된 오리지널 시퀀스 (GenBank Accession No. AY530089)와 2개의 염기가 다르고, 1개소의 아미노산에 치환이 있었다.

FP 발현벡터는 CHO-K1 세포에 도입하고, 16시간 후에 96 웰 플레이트 또는 384 웰 플레이트에 다시 파종하였다. 유전자 도입은 리포펙타민 LTX (Invitorgen)와 플러스 시약 (Invitorgen)에 의해 제조업체의 권장조건에서 수행하였다. 그 후, 24시간 동안 배양한 CHO-K1 세포는 4% Paraformaldehyde, 0.1 M Phosphate Buffer (pH 7.4)로 고정하였다. 다음에, PBS-0099PBS(-), 0.1% Tween20으로 세척하고, 1 × PBS(-), 0.2% TritonX-100으로 투과처리를 수행하였다. 제작한 플레이트를 항 hMPV 항체 스크리닝 플레이트로서 사용하였다.

EBV 감염세포의 배양 상청을 항 hMPV 항체 스크리닝 플레이트에 첨가하고, 실온에서 1시간 반응 후, PBS-T로 3회 세척하였다. 다음에 2차 항체로서 anti-human IgG-Alexa488 (Invitorgen)을 PBS-T, 0.1% FCS로 1000배 희석하여 첨가하고, 실온에서 1시간 반응 후, PBS-T로 1회 세척하였다. 다음에 0.8μg/ml DAPI, PBS-T를 첨가하고, 실온에서 10분간 반응 후, PBS-T로 2회 세척하고, 1 × PBS(-)를 첨가하였다.

염색세포는 In Cell Analyzer2000 (GE Healthcare)으로 촬영하고 양성세포를 검출한 웰을 항체 양성 웰로 하였다.

3. 항체 동종형 및 서브클래스의 확인

분리된 항체 생산 세포 클론의 배양 상청을 사용하여, 생산하는 항체의 동종 형을 세포형광 면역 염색법에 의해 확인하였다. 즉, 항 hMPV 항체 스크리닝 플레이트를 사용하여 2차 항체로서 각각의 동종형 및 서브클래스에 특이적인 항체를 사용하였다. 얻어진 13종의 항 hMPV 항체 동종형 및 서브클래스를 아래 표 2에 나타낸다.

4. 항 hMPV 항체를 코딩하는 DNA의 클로닝

항체 생산세포의 total-RNA로부터 oligo-dT 프라이머를 사용하여 역전사하고, 얻어진 cDNA를 주형으로 하여 PCR법에 의한 항체 유전자의 증폭을 수행하였다. PCR에 사용한 프라이머는 인간 IgG 항체 H쇄 및 L쇄를 코딩하는 cDNA의 데이터베이스를 기초로 설계하였다. 전체 길이의 H쇄 cDNA 및 L쇄 cDNA를 증폭하기 위해 5'말단측 프라이머는 번역 시작점을, 3' 말단측 프라이머는 번역 종지점을 가지고 있다.

5. 염기서열을 바탕으로 한 항체의 아미노산 서열의 결정

PCR법에 의해 증폭된 각 항체의 H쇄 및 L쇄의 cDNA를 플라스미드 벡터에 삽입하고, ABI 시퀀서에 의해 각각의 염기서열을 확인하였다. 얻어진 염기서열로부터, 항체의 시그널 서열, H쇄 및 L쇄의 아미노산 서열, 가변영역의 아미노산 서열 및 상보성 결정영역 (CDR)의 아미노산 서열을 각각 결정하였다. CDR의 분석에는 Kabat 의 방법 (www.bioinf.org.uk:Dr.Andrew C.R. Martin's Group, Antibodies: General Information)을 사용하였다. 얻어진 항체의 H쇄 및 L쇄의 아미노산 서열, 가변영역의 아미노산 서열 및 상보성 결정영역 (CDR)의 아미노산 서열의 서열번호를 표 1에 각각 나타낸다.

6. 얻어진 항체 유전자가 항 hMPV 항체를 코딩하고 있는지의 확인

얻어진 H쇄 및 L쇄의 유전자를 각각 발현벡터에 삽입하고, CHO-K1 세포에 동시에 도입하였다. 유전자 도입은 리포펙타민 LTX (Invitorgen)와 플러스 시약 (Invitorgen)에 의해, 제조업체의 권장조건에서 수행하였다. 2일 후에 배양 상청을 회수하고, 항 인간 IgG 항체를 코팅한 96웰 플레이트를 사용한 ELISA법에 의해 배양 상청 중의 항체가 인간 IgG인 것을 확인하고, 항 hMPV 항체 스크리닝 플레이트를 사용한 세포 형광면역 염색법에 의해 hMPV의 FP에 결합하는 것을 확인하였다.

7. 항체 단백질의 생산

얻어진 항 hMPV 항체 발현벡터를 CHO-K1 세포에 도입하고, 선택 마커의 존재 하에서 배양함으로써 항체를 항상적으로 생산하는 CHO-K1 세포 클론을 얻었다.

상기 항체의 안정생산 CHO-K1 균주를 무혈청 배지에서 배양하고, 배양 상청을 회수하였다. 이 배양 상청을 Protein A 컬럼을 사용한 친화성 정제를 통하여 정제 항체를 얻었다. 컬럼은 HiTrap rProteinA FF (GE Healthcare)의 프리팩 컬럼을 사용하고, 정제는 제조업체의 권장 조건에서 수행하였다. 정제 후, 항체의 hMPV FP에 대한 결합성을 항 hMPV 항체 스크리닝 플레이트에 의해 확인하였다. 또한, SDS-PAGE에 의한 항체 H쇄 (약 50 kDa)항체 L쇄 (약 25 kDa)의 확인을 수행하였다.

8. 중화 활성평가

면역 염색법:

항 hMPV 항체의 유효성 평가로서 중화활성을 확인하였다. 중화활성은 LLC-MK2 세포에 대한 hMPV 감염의 항체에 의한 저지율로 평가하였다. hMPV의 Strain은 B1 균주로서 JPS02-76, B2 균주로서 JPS05-21 균주, A1 균주로서 JPS03-180 및 A2 균주로서 JPS03-178을 사용하였다.

바이러스는 다음과 같은 방법으로 제조하였다.

1 × PBS(-)로 2회 세척한 LLC-MK2 세포에 바이러스 액을 첨가하고, 1시간 배양 후, 감염배지로서 EMEM, 5 mM Sucrose, 2 mM L-glutamine, 0.5μg/ml Trypsin을 첨가하여 CPE가 나타날 때까지 배양하였다. 그 후, 감염되지 않은 LLC-ML2 세포와, 감염세포를 1 : 9로 혼합하여, 감염배지에서 CPE가 나타날 때까지 배양하고, 감염율 100%의 종감염 세포를 제조하였다. 바이러스 액은 감염되지 않은 LLC-MK2 세포와 종감염 세포를 1 : 9로 혼합하여, 감염 배지중에서 CPE가 나타날 때까지 배양한 배양 상청을 회수하였다. 그 후, 필요에 따라 원심분리 (20,000g, 4℃, 2.5 시간)에 의해 바이러스를 농축하고 분주하여 -80℃에 냉동보관한 것을 사용하였다.

중화활성 평가는 다음과 같은 방법으로 실시하였다.

정제 항 hMPV 항체는 10μg/ml로부터 4배 희석계열을 6단계 준비하였다. 0.8-1.4 × 10⁴ pfu/ml의 바이러스 액과 정제항체를 1:1로 혼합하고, 25℃에서 1시간 방치하였다. LLC-MK2 세포는 100% confluent가 되도록 전날에 96 웰 플레이트에 파종하고, 바이러스 첨가 전에 EMEM으로 2회 세척하였다. LLC-MK2 바이러스액과 정제 항체의 혼합액을 첨가하고, CO₂인큐베이터에서 1시간 배양하였다. 그 후, 세포는 EMEM으로 3회 세척하고 EMEM, 5 mM Sucrose, 2 mM L-glutamine을 첨가하여 CO₂ 인큐베이터에서 20시간 배양하였다. 감염세포를 검출하기 위해, 세포는 80% Acetone으로 고정하고, 1% BSA, 1 × PBS(-)를 첨가하여 실온에서 1시간 블로킹하였다. 다음으로, 마우스 항 hMPV 항체 (HMPV123, AbD Serotec)를 1μg/ml가 되도록 PBS-T, 0.1% Goat Serum으로 희석하여 첨가하고, 실온에서 1시간 반응시켰다. 그 후, PBS-T로 3회 세척하고, 2차 항체로서 anti-mouse IgG-Alexa488 (Invitorgen)을 3000배 희석하고, DAPI를 0.4μg/ml가 되도록 PBS-T, 0.1% Goat Serum에 희석하여 첨가하고, 실온에서 1시간 반응시켰다. 그 후, PBS-T로 3회 세척하고 1 × PBS(-)를 첨가하였다. 염색세포는 In Cell Analyzer2000으로 촬영하여 양성 세포를 계산하였다.

중화활성 평가에서 음성 대조군은 hMPV에 특이성을 갖지 않는 인간 모노클로날 항체 (hIgG)를 사용하였다. 음성 대조군의 감염세포수의 평균을 감염 저지율 0%로 하고, 각각의 항체의 각 농도에서의 감염 저지율로부터 IC50을 산출하였다 (저해율 50%를 사이에 두는 2점의 항체농도와 저해율로부터 산출) (표 2).

그런데 인간 유래 항 hMPV 항체인 DSλ7 (Fab)에 관해서는, B2 균주 및 A1 균주에 대한 중화활성 (IC60)이 각각 ＞ 59μg/mL (1180 nM) 및 9.8μg/mL (196 nM)와, 거의 중화활성이 인정되지 않는 것으로 나타났다 (WO2008/043052 및 J.Virol. 2007 (vol.81) p8315). 또한, 동시에 보고되어 있는 다른 인간 항체 (DS1, DS6, ACN044 등 (모두 Fab))에 이르러서는, A2 균주 이외의 3종류의 형태 (A1, B1 및 B2 형)에서는 중화활성이 전혀 인정되지 않다 (IC60 값 : ＞ 8μg/mL (160 nM))을 고려하면, 적어도 A1, B1 및 B2형 중 어느 것에 대해서도 IC50 값이 약 1μg/mL (약 6.7 nM)이하인 본 발명의 항체는 WO2008/043052에 개시되어 있는 인간 항체보다 현저하게 우수하다고 말할 수 있다.

[표 2]

항 hMPV 항체의 동종형과 각 hMPV strain에 대한 IC50

또한, 표 2에 나타낸 데이터를 사용하여 데이터 분석 소프트웨어 GraphPad Prism6을 이용하여 산출한 IC50, IC60 및 IC90을 표 3, 표 4 및 표 5에 각각 나타낸다. 이들 표 3, 표 4 및 표 5에서는 JPS03-178 (A2형)에 대한 중화활성도 추가 함과 동시에, 중화활성의 양성대조군으로서 특허 JP2008-538353 (WO2006/110214)에 기재된 hMPV에 대한 마우스 항체 mAb338 및 WO2013/140247에 기재된 인간항체 HMB3210을 각각의 특허에 개시되어 있는 정보를 바탕으로 제작하여 사용하였다.

상술한 바와 같이 재계산하여 얻어진 IC50 값 (표 3 참조) 및 IC60 값 (표 4 참조)을 구한 경우에도, 본 발명의 항체 모두가 A1, B1 및 B2 형에 대해서는 약 1μg/mL 이하 (약 6.7 nM 이하)의 중화활성을 나타내며, 본 발명의 항체는 모두는 WO2008/043052에서 개시되어 있는 인간 항체에 비해 현저하게 우수하다고 말할 수 있다. 또한, A2형을 포함한 IC60 값은 전체적으로 약 1 내지 3μg/mL 이하였다.

또한, 표 3의 결과로부터도 본 발명의 모든 항체가 약 2.3μg/mL (약 15 nM) 이하로 hMPV 중의 어떠한 유형의 균주에 대해서도 50% 저해효과를 나타내며, 높은 중화활성을 가지고 있다고 말할 수 있다. 또한, 표 3의 결과로부터 EV046115b, EV046130, EV046147 및 EV046141 이외의 항 hMPV 항체는 A1, A2, B1 및 B2 중 어떠한 균주에 대해서도 약 1μg/mL (약 6.7 nM) 이하에서 50% 저해효과 (IC50)를 나타냈다. 또한, hMPV의 A2형에 대해서는 EV046120, EV046124, EV046135, EV046142, EV046143 및 EV046150은 모두 약 0.1μg/mL (약 0.67 nM)이하로 50% 저해효과를 나타내며, 특히, EV046135, EV046143 및 EV046150은 약 0.03μg/mL (약 0.2 nM)이하에서 50% 저해효과를 나타내며, HMB3210 (139.3 ng/mL)과 비교해도 현저하게 우수했다.

표 5의 IC90 값에 있어서도 EV046115b를 제외한 모든 항체에 있어서, A1, A2, B1 및 B2 중의 어떠한 형태에 대해서도 약 3.5μg/mL (약 23 nM) 이하에서 90% 저해효과 (IC90)를 나타냈다. 그 중에서도 특히 EV046124 및 EV046150은, A1, A2, B1 및 B2 중의 어떠한 형태에 대해서도 약 1μg/mL (약 6.7 nM) 이하에서 90% 저해효과 (IC90)를 나타내고 있고, HMB3210 (약 3.6μg/mL 이하)와 비교해도 현저히 높은 중화활성을 가지고 있다고 말할 수 있다. 또한 EV046124, EV046143 및 EV046150은 hMPV의 A2형에 대하여 각각 188.1 ng/mL, 96.71 ng/mL 및 101.1 ng/mL로 모두 약 0.2μg/mL(약 1.33 nM) 이하이며, 매우 높은 중화활성을 나타냈다. 특히, EV046143 및 EV046150의 IC90 값은 모두 약 0.1μg/mL (약 0.67 nM)이며, HMB3210 (약 0.58μg/mL)과 비교해도 현저하게 우수했다.

[표 3]

항 hMPV항체의 각종 hMPV 균주에 대한 IC50

[표 4]

항 hMPV항체의 각종 hMPV균주에 대한 IC60

[표 5]

항 hMPV항체의 각종 hMPV균주에 대한 IC90

9. 세포간 감염저지 활성 평가

또한, 항 hMPV 항체의 유효성 평가로서 세포간 감염저지 활성에 대하여 평가하였다.

hMPV가 감염하기 위해서는 FP의 개열이 필요하지만, in vitro의 hMPV 감염의 숙주세포인 LLC-MK2 세포 또는 VERO 세포는 FP를 개열하는 활성을 갖지 않기 때문에, 배지에 Trypsin을 첨가하는 것이 일반적이다. 그러나 세포간 감염 저지활성을 평가하기 위해서 항체를 지속적으로 첨가하는 시스템에서는 Trypsin에 의해 항체가 불활성화되는 것이 염려된다. 그 때문에, FP의 절단활성을 갖는 것으로 보고되어 있는 멤브레인형 세린 프로테아제 (TMPRSS2)를 LLC-MK2세포에 도입하고, 안정적으로 TMPRSS2를 발현하는 숙주세포를 제작하였다 (Shirogane et al. 2008 J.Virol 82 : 8942-8946).

얻어진 TMPRSS2 안정발현 세포에 hMPV를 감염시키고, Trypsin을 첨가하지 않은 조건에서 hMPV 감염 확대를 시도한 결과, 감염 세포수가 증가하고, Foci을 확인할 수 있었다.

실제의 세포간 감염저지 활성의 평가는 다음과 같이 실시하였다. TMPRSS2 안정 발현세포에 hMPV를 감염시켜 4시간 경과 후, 항체를 40μg/ml에서 4배 희석계열을 6 단계로 첨가하였다. 세포는 72시간 후에 중화 활성평가와 같은 방법으로 고정하고, 감염세포를 검출하였다.

세포간 감염 저지 활성평가에서 음성 대조군은 hMPV에 특이성을 갖지 않은 인간 모노클로날 항체 (hIgG), 양성 대조군은 특허 JP2008-538353에 기재된 hMPV에 대한 항체 mAb338을 합성하여 사용하였다. 음성 대조군의 각 농도에서의 감염세포수의 평균을 세포간 감염 저지율 0%로 하고, 양성 대조군의 40μg/ml에서의 감염 세포수를 세포간 감염 저지율 100%로 하여, 각각의 항체의 각 농도에서의 감염 저지율을 산출하였다. 그들의 IC50 및 IC90 (ng/ml)을 데이터 분석 소프트웨어 GraphPad Prism6을 이용하여 산출한 결과를 표 6에 나타낸다.

[표 6]

항 hMPV 항체의 세포간 감염 저지활성

10. 친화성 분석

항 hMPV 항체의 결합활성 평가로 친화성 분석을 수행하였다.

분석에 사용되는 항원은 다음과 같이 준비하였다. hMPV (JPS02-76)의 FP 유전자로부터 Transmembrane 영역 (FP의 491 번째 위치 내지 539 번째 위치에 상당하는 아미노산 잔기 부분)을 제거하고, His-Tag를 부가한 것 (FP-TM(-)-His)을 발현벡터에 클로닝하였다. FP-TM(-)-His 발현벡터는 CHO-K1 세포에 도입하고, 선택 마커의 존재하에서 배양함으로써 FP-TM(-)-His를 안정적으로 발현하는 CHO-K1 세포클론을 얻었다. FP-TM(-)-His 안정적 발현세포의 배양상청을 회수하고, Ni-Sepharose 6 Fast Flow 담체 (GE Healthcare)를 사용하여 FP-TM(-)-His를 정제하였다. 정제 후의 FP-TM(-)-His는 젤 여과로 이미다졸을 제거하고, 정량 후에 친화성 분석에 사용하였다.

친화성 분석 Biacore T-200을 사용하여 수행하였다. human IgG capture kit (GE Healthcare)에 의해 센서 칩에 항 인간 IgG를 고정화하고, 항 hMPV 항체를 캡처시켜 리간드로 하였다. 측정물질 (analyte)은 상기 정제 FP-TM(-)-His을 사용하였다. 항 hMPV 항체의 hMPV (JPS02-76)의 FP에 대한 친화성을 표 4에 나타낸다. 모든 항 hMPV 항체도 FP에 대한 K_D값이 10 nM 이하로 매우 높은 결합활성을 나타냈다 (표 7). 또한, EV046115b 및 EV046147은 센서 칩에서의 응집반응이 강하여 측정불능 (ND)이었다.

[표 7]

항 hMPV 항체의 친화성 분석결과

(N.D.: 센서 칩 상에서의 항체의 응집반응으로 인해 해석 불가능)

11. 경쟁분석

항 hMPV 항체의 경쟁분석을 수행하였다.

분석에 사용되는 항원은 상기 친화성 분석에서 나타낸 FP-TM(-)-His 안정적 발현세포의 배양 상청을 사용하였다. 분석은 Biacore T-200을 사용하여 수행하였다. Sensor Chip NTA (GE healthcare)에 FP-TM(-)-His을 캡처시킨 후, Sample 1로서 항 hMPV 항체를 센서 칩 상에 포화 수준까지 결합시키고, 이어서 Sample 2로서 다른 항 hMPV 항체를 결합시켰다. 경쟁하는지 여부는 Sample 2의 항 hMPV 항체의 결합이 저해되는지 여부로 판정하였다. 경쟁분석 결과를 도 2에 나타낸다. 또한, EV046147은 센서 칩 상에서의 응집반응이 강하여 측정 불가능하였다.

12. 에피토프 매핑

항 hMPV 항체의 에피토프를 분류하기 위해 Deletion mutant 결합분석을 수행하였다.

제작한 Deletion mutant를 도 3에 나타낸다. HA-V5-Full은 hMPV (JPS02-76) FP 유전자의 Signal Peptide (SP)의 하류에 HA-Tag (HA: TMYPYDVPDYA)을, C-tail (C)의 하류에 링커 부분 (SLEGPRFE)과 V5-Tag (V5: GKPIPNPLLGLDST)을 부가한 것이다. 사용한 HA-V5-Full의 전장의 염기서열 및 아미노산 서열을 서열번호 133 및 134에 각각 나타낸다.

각 Deletion mutant를 발현벡터에 클로닝하고, 상기 세포형광 면역염색 스크리닝과 동일한 방법으로 항 hMPV 항체 결합을 검출하였다. 또한, 항 HA 항체 및 항 V5 항체를 사용하여 Deletion mutant 자체가 발현하고 있다는 것을 확인하였다. Deletion mutant 결합 분석결과를 도 4에 나타낸다. 또한, 경쟁분석의 결과를 포함한 에피토프의 분류결과를 도 5에 나타낸다.

또한, 상기 경쟁분석 및 에피토프 매핑에는 마우스 항 hMPV 항체 mAb338 (J.Virol. 2008 (vol.89) p3113) 및 인간 항체 HMB3210을 대조군으로 사용하였다.

이들 결과로부터, HMB3210은 본 발명의 항체 중의 어느 에피토프 그룹에도 속하지 않으며, 또한, mAb338은 본 발명의 항체의 에피토프 그룹 2에 속하는 것으로 밝혀졌다.

[산업상 이용가능성]

본 발명의 항 인간 메타뉴모바이러스 (hMPV)항체는 hMPV가 관여하는 질환을 예방 또는 치료하기 위한 의약조성물 등의 용도에 유용하다.

<110> EVEC INC. <120> Human Antibody Specific To Human Metapneumovirus, or Antigen-Binding Fragment Thereof <130> IPA150565-JP <150> JP 2013-013599 <151> 2013-01-28 <160> 134 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 457 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 1 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Arg Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Phe Met Thr Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Tyr Ile Asn Ser Ile Gly Ser Val Ile Phe Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Glu Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asp Asn Thr Met Lys Ser Leu Phe 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Thr Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ser Cys Arg Ile Ser Tyr Gly Ala Ser Gly Gly Phe Ser Cys 100 105 110 Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Pro Val Thr Val Ser Ser Ala 115 120 125 Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser 130 135 140 Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe 145 150 155 160 Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly 165 170 175 Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu 180 185 190 Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr 195 200 205 Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys 210 215 220 Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro 225 230 235 240 Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys 245 250 255 Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 260 265 270 Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr 275 280 285 Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 290 295 300 Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 305 310 315 320 Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 325 330 335 Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln 340 345 350 Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu 355 360 365 Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro 370 375 380 Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn 385 390 395 400 Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu 405 410 415 Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val 420 425 430 Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln 435 440 445 Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 450 455 <210> 2 <211> 127 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 2 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Arg Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Phe Met Thr Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Tyr Ile Asn Ser Ile Gly Ser Val Ile Phe Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Glu Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asp Asn Thr Met Lys Ser Leu Phe 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Thr Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ser Cys Arg Ile Ser Tyr Gly Ala Ser Gly Gly Phe Ser Cys 100 105 110 Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Pro Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 <210> 3 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 3 Asp Tyr Phe Met Thr 1 5 <210> 4 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 4 Tyr Ile Asn Ser Ile Gly Ser Val Ile Phe Tyr Ala Asp Ser Val Glu 1 5 10 15 Gly <210> 5 <211> 18 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 5 Ser Cys Arg Ile Ser Tyr Gly Ala Ser Gly Gly Phe Ser Cys Gly Met 1 5 10 15 Asp Val <210> 6 <211> 213 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 6 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Ser Ile Arg Glu Asn 20 25 30 Ile Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Thr Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Ala Ser Ile Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr His Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Met Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr His His Leu Ile Thr 85 90 95 Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Asp Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro 100 105 110 Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr 115 120 125 Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys 130 135 140 Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu 145 150 155 160 Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser 165 170 175 Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala 180 185 190 Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe 195 200 205 Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 7 <211> 106 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 7 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Ser Ile Arg Glu Asn 20 25 30 Ile Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Thr Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Ala Ser Ile Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr His Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Met Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr His His Leu Ile Thr 85 90 95 Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Asp Ile Lys 100 105 <210> 8 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 8 Gln Ala Ser Gln Ser Ile Arg Glu Asn Ile Asn 1 5 10 <210> 9 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 9 Asp Ala Ser Ile Leu Glu Thr 1 5 <210> 10 <211> 8 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 10 Gln Gln Tyr His His Leu Ile Thr 1 5 <210> 11 <211> 448 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 11 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Val Tyr 20 25 30 Gly Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly His Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Ser Ala Tyr Asn Gly Asp Arg Gly Tyr Ala Gln Lys Val 50 55 60 Gln Gly Arg Ile Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Thr Ser Ser Gly Val Pro Gly Ile Tyr Trp Gly Gln Gly Ser 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro 115 120 125 Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly 130 135 140 Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn 145 150 155 160 Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln 165 170 175 Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser 180 185 190 Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser 195 200 205 Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr 210 215 220 His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser 225 230 235 240 Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg 245 250 255 Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro 260 265 270 Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala 275 280 285 Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val 290 295 300 Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr 305 310 315 320 Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr 325 330 335 Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu 340 345 350 Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys 355 360 365 Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser 370 375 380 Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp 385 390 395 400 Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser 405 410 415 Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala 420 425 430 Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 12 <211> 118 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 12 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Val Tyr 20 25 30 Gly Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly His Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Ser Ala Tyr Asn Gly Asp Arg Gly Tyr Ala Gln Lys Val 50 55 60 Gln Gly Arg Ile Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Thr Ser Ser Gly Val Pro Gly Ile Tyr Trp Gly Gln Gly Ser 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 13 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 13 Val Tyr Gly Ile Ser 1 5 <210> 14 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 14 Trp Ile Ser Ala Tyr Asn Gly Asp Arg Gly Tyr Ala Gln Lys Val Gln 1 5 10 15 Gly <210> 15 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 15 Thr Ser Ser Gly Val Pro Gly Ile Tyr 1 5 <210> 16 <211> 217 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 16 Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn 20 25 30 Tyr Val Tyr Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Arg Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg 65 70 75 80 Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Asn Leu 85 90 95 Ser Gly Pro Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly 100 105 110 Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu 115 120 125 Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe 130 135 140 Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val 145 150 155 160 Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys 165 170 175 Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser 180 185 190 His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu 195 200 205 Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser 210 215 <210> 17 <211> 111 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 17 Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn 20 25 30 Tyr Val Tyr Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Arg Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg 65 70 75 80 Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Asn Leu 85 90 95 Ser Gly Pro Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 110 <210> 18 <211> 13 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 18 Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Tyr Val Tyr 1 5 10 <210> 19 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 19 Arg Asn Asn Gln Arg Pro Ser 1 5 <210> 20 <211> 12 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 20 Ala Ala Trp Asp Asp Asn Leu Ser Gly Pro Trp Val 1 5 10 <210> 21 <211> 449 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 21 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Arg Asp 20 25 30 Tyr Trp Ser Phe Ile Arg Gln Pro Ala Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Arg Ile Tyr His Asn Gly Asp Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 50 55 60 Ser Arg Val Thr Met Ser Gln Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Phe Leu 65 70 75 80 Arg Leu Arg His Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Glu Gly Ser Ala Gly Thr Phe Gly Gln Ala Asp Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Leu Val Ile Val Tyr Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe 115 120 125 Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu 130 135 140 Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp 145 150 155 160 Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu 165 170 175 Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser 180 185 190 Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro 195 200 205 Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys 210 215 220 Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro 225 230 235 240 Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser 245 250 255 Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp 260 265 270 Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 275 280 285 Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val 290 295 300 Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 305 310 315 320 Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys 325 330 335 Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr 340 345 350 Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr 355 360 365 Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu 370 375 380 Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu 385 390 395 400 Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys 405 410 415 Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 420 425 430 Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 435 440 445 Lys <210> 22 <211> 119 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 22 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Arg Asp 20 25 30 Tyr Trp Ser Phe Ile Arg Gln Pro Ala Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Arg Ile Tyr His Asn Gly Asp Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 50 55 60 Ser Arg Val Thr Met Ser Gln Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Phe Leu 65 70 75 80 Arg Leu Arg His Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Glu Gly Ser Ala Gly Thr Phe Gly Gln Ala Asp Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Leu Val Ile Val Tyr Ser 115 <210> 23 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 23 Arg Asp Tyr Trp Ser 1 5 <210> 24 <211> 16 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 24 Arg Ile Tyr His Asn Gly Asp Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser 1 5 10 15 <210> 25 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 25 Glu Gly Ser Ala Gly Thr Phe Gly Gln Ala Asp 1 5 10 <210> 26 <211> 215 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 26 Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Asn Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Gly Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Glu Asn Trp Leu Leu 85 90 95 Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala 100 105 110 Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser 115 120 125 Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu 130 135 140 Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser 145 150 155 160 Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu 165 170 175 Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val 180 185 190 Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys 195 200 205 Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 27 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 27 Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Asn Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Gly Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Glu Asn Trp Leu Leu 85 90 95 Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 28 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 28 Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Asn Asn Leu Ala 1 5 10 <210> 29 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 29 Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr 1 5 <210> 30 <211> 10 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 30 Gln Gln Tyr Glu Asn Trp Leu Leu Tyr Thr 1 5 10 <210> 31 <211> 453 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 31 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ser Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ser Ile Ser Ser Ser Ser Ser Tyr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Leu 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asp Asn Ala Lys Lys Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Val Asp Tyr Gly Thr Asn Ser Glu Val Gly Arg Phe Asp Pro 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly 115 120 125 Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly 130 135 140 Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val 145 150 155 160 Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe 165 170 175 Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val 180 185 190 Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val 195 200 205 Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys 210 215 220 Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu 225 230 235 240 Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr 245 250 255 Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val 260 265 270 Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val 275 280 285 Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser 290 295 300 Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu 305 310 315 320 Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala 325 330 335 Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro 340 345 350 Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln 355 360 365 Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala 370 375 380 Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr 385 390 395 400 Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu 405 410 415 Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser 420 425 430 Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser 435 440 445 Leu Ser Pro Gly Lys 450 <210> 32 <211> 123 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 32 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ser Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ser Ile Ser Ser Ser Ser Ser Tyr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Leu 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asp Asn Ala Lys Lys Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Val Asp Tyr Gly Thr Asn Ser Glu Val Gly Arg Phe Asp Pro 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 33 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 33 Ser Tyr Ser Met Asn 1 5 <210> 34 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 34 Ser Ile Ser Ser Ser Ser Ser Tyr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Leu Lys 1 5 10 15 Gly <210> 35 <211> 14 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 35 Val Asp Tyr Gly Thr Asn Ser Glu Val Gly Arg Phe Asp Pro 1 5 10 <210> 36 <211> 217 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 36 Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Thr Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly 20 25 30 Tyr Ala Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu 35 40 45 Leu Ile Tyr Asp Ser Ile Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe 50 55 60 Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu 65 70 75 80 Gln Thr Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys His Ser Tyr Asp Arg Ser 85 90 95 Leu Ser Gly Ser Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly 100 105 110 Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu 115 120 125 Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe 130 135 140 Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val 145 150 155 160 Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys 165 170 175 Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser 180 185 190 His Lys Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu 195 200 205 Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser 210 215 <210> 37 <211> 111 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 37 Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Thr Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly 20 25 30 Tyr Ala Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu 35 40 45 Leu Ile Tyr Asp Ser Ile Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe 50 55 60 Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu 65 70 75 80 Gln Thr Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys His Ser Tyr Asp Arg Ser 85 90 95 Leu Ser Gly Ser Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 110 <210> 38 <211> 14 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 38 Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr Ala Val His 1 5 10 <210> 39 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 39 Asp Ser Ile Asn Arg Pro Ser 1 5 <210> 40 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 40 His Ser Tyr Asp Arg Ser Leu Ser Gly Ser Val 1 5 10 <210> 41 <211> 453 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 41 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Thr Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Ser Met His Trp Leu Arg Gln Ala Pro Gly Glu Ser Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Val Asn Gly Gly Pro Leu Asp Thr Lys Tyr Ser Pro Thr Phe 50 55 60 Gln Asp Arg Val Ser Phe Ser Arg Asp Val Phe Ala Thr Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Asp Leu Ser Ser Leu Gly Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gly Trp Gly Ile Thr Ala Tyr Arg Gly Asp Ala Phe Asp Leu 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Ile Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly 115 120 125 Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly 130 135 140 Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val 145 150 155 160 Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe 165 170 175 Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val 180 185 190 Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val 195 200 205 Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys 210 215 220 Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu 225 230 235 240 Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr 245 250 255 Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val 260 265 270 Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val 275 280 285 Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser 290 295 300 Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu 305 310 315 320 Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala 325 330 335 Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro 340 345 350 Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln 355 360 365 Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala 370 375 380 Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr 385 390 395 400 Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu 405 410 415 Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser 420 425 430 Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser 435 440 445 Leu Ser Pro Gly Lys 450 <210> 42 <211> 123 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 42 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Thr Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Ser Met His Trp Leu Arg Gln Ala Pro Gly Glu Ser Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Val Asn Gly Gly Pro Leu Asp Thr Lys Tyr Ser Pro Thr Phe 50 55 60 Gln Asp Arg Val Ser Phe Ser Arg Asp Val Phe Ala Thr Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Asp Leu Ser Ser Leu Gly Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gly Trp Gly Ile Thr Ala Tyr Arg Gly Asp Ala Phe Asp Leu 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Ile Val Ser Ser 115 120 <210> 43 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 43 Asp Tyr Ser Met His 1 5 <210> 44 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 44 Trp Val Asn Gly Gly Pro Leu Asp Thr Lys Tyr Ser Pro Thr Phe Gln 1 5 10 15 Asp <210> 45 <211> 14 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 45 Gly Trp Gly Ile Thr Ala Tyr Arg Gly Asp Ala Phe Asp Leu 1 5 10 <210> 46 <211> 214 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 46 Ser Phe Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ala Pro Gly Lys 1 5 10 15 Ser Ala Arg Ile Thr Cys Gly Ala Ser Asn Ile Glu Ser Lys Ser Val 20 25 30 His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Val Val Val Tyr 35 40 45 Asp Asp Asp Asp Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Ile Ile Asn Arg Val Glu Val Gly 65 70 75 80 Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Val Trp Asp Ser Thr Ser Asp Met 85 90 95 Tyr Val Phe Gly Ala Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly Gln Pro Lys 100 105 110 Ala Asn Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu Gln 115 120 125 Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro Gly 130 135 140 Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser Pro Val Lys Ala Gly 145 150 155 160 Val Glu Thr Thr Lys Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala Ala 165 170 175 Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg Ser 180 185 190 Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr Val 195 200 205 Ala Pro Thr Glu Cys Ser 210 <210> 47 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 47 Ser Phe Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ala Pro Gly Lys 1 5 10 15 Ser Ala Arg Ile Thr Cys Gly Ala Ser Asn Ile Glu Ser Lys Ser Val 20 25 30 His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Val Val Val Tyr 35 40 45 Asp Asp Asp Asp Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Ile Ile Asn Arg Val Glu Val Gly 65 70 75 80 Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Val Trp Asp Ser Thr Ser Asp Met 85 90 95 Tyr Val Phe Gly Ala Gly Thr Lys Val Thr Val Leu 100 105 <210> 48 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 48 Gly Ala Ser Asn Ile Glu Ser Lys Ser Val His 1 5 10 <210> 49 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 49 Asp Asp Asp Asp Arg Pro Ser 1 5 <210> 50 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 50 Gln Val Trp Asp Ser Thr Ser Asp Met Tyr Val 1 5 10 <210> 51 <211> 450 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 51 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Ala Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Leu Ser Asn Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Arg Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Phe Lys Asn Thr Leu Asp 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Gln His Ala Gly Ile Thr Met Ile Glu Asp Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 115 120 125 Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 165 170 175 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 180 185 190 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys 195 200 205 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp 210 215 220 Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly 225 230 235 240 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 245 250 255 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 260 265 270 Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 275 280 285 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 290 295 300 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 305 310 315 320 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 325 330 335 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 340 345 350 Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 355 360 365 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 370 375 380 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 385 390 395 400 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp 405 410 415 Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 420 425 430 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 435 440 445 Gly Lys 450 <210> 52 <211> 120 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 52 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Ala Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Leu Ser Asn Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Arg Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Phe Lys Asn Thr Leu Asp 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Gln His Ala Gly Ile Thr Met Ile Glu Asp Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 53 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 53 Asn Tyr Gly Met His 1 5 <210> 54 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 54 Val Ile Trp Tyr Asp Gly Arg Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 55 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 55 Asp Gln His Ala Gly Ile Thr Met Ile Glu Asp 1 5 10 <210> 56 <211> 216 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 56 Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln 1 5 10 15 Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Tyr Phe 20 25 30 Lys Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 35 40 45 Leu Ile Tyr Glu Val Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe 50 55 60 Ser Gly Ser Arg Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Val Ser Gly Leu 65 70 75 80 Gln Ala Asp Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Ser Tyr Ala Gly Asn 85 90 95 Asn Asn Ile Ile Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln 100 105 110 Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu 115 120 125 Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr 130 135 140 Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys 145 150 155 160 Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr 165 170 175 Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His 180 185 190 Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys 195 200 205 Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser 210 215 <210> 57 <211> 110 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 57 Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln 1 5 10 15 Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Tyr Phe 20 25 30 Lys Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 35 40 45 Leu Ile Tyr Glu Val Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe 50 55 60 Ser Gly Ser Arg Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Val Ser Gly Leu 65 70 75 80 Gln Ala Asp Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Ser Tyr Ala Gly Asn 85 90 95 Asn Asn Ile Ile Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 110 <210> 58 <211> 14 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 58 Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Tyr Phe Lys Tyr Val Ser 1 5 10 <210> 59 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 59 Glu Val Ser Lys Arg Pro Ser 1 5 <210> 60 <211> 10 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 60 Gly Ser Tyr Ala Gly Asn Asn Asn Ile Ile 1 5 10 <210> 61 <211> 449 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 61 Gln Glu Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Ile Thr Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Leu Ser Gly Tyr 20 25 30 Ala Leu Val Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Ala Asp Ile Thr Ala Ser Ser Thr Tyr Ile Asn Tyr Ala Ala Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Gln Ser Ser Leu Phe 65 70 75 80 Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Asp Asp Thr Gly Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg Leu Pro His Leu Pro Gly Phe Phe Asp Leu Trp Gly Arg Gly 100 105 110 Thr Leu Val Ser Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe 115 120 125 Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu 130 135 140 Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp 145 150 155 160 Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu 165 170 175 Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser 180 185 190 Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro 195 200 205 Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys 210 215 220 Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro 225 230 235 240 Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser 245 250 255 Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp 260 265 270 Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 275 280 285 Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val 290 295 300 Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 305 310 315 320 Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys 325 330 335 Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr 340 345 350 Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr 355 360 365 Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu 370 375 380 Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu 385 390 395 400 Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys 405 410 415 Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 420 425 430 Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 435 440 445 Lys <210> 62 <211> 119 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 62 Gln Glu Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Ile Thr Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Leu Ser Gly Tyr 20 25 30 Ala Leu Val Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Ala Asp Ile Thr Ala Ser Ser Thr Tyr Ile Asn Tyr Ala Ala Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Gln Ser Ser Leu Phe 65 70 75 80 Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Asp Asp Thr Gly Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg Leu Pro His Leu Pro Gly Phe Phe Asp Leu Trp Gly Arg Gly 100 105 110 Thr Leu Val Ser Val Ser Ser 115 <210> 63 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 63 Gly Tyr Ala Leu Val 1 5 <210> 64 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 64 Asp Ile Thr Ala Ser Ser Thr Tyr Ile Asn Tyr Ala Ala Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 65 <211> 10 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 65 Leu Pro His Leu Pro Gly Phe Phe Asp Leu 1 5 10 <210> 66 <211> 217 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 66 Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Asn Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly 20 25 30 Tyr Asp Val Asn Trp Tyr Gln His Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu 35 40 45 Leu Ile Ser Val Asn Thr Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe 50 55 60 Ser Gly Ser Met Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu 65 70 75 80 Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Arg Arg 85 90 95 Leu Ser Gly Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly 100 105 110 Gln Pro Lys Ala Asn Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu 115 120 125 Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe 130 135 140 Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser Pro Val 145 150 155 160 Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Lys Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys 165 170 175 Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser 180 185 190 His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu 195 200 205 Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser 210 215 <210> 67 <211> 111 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 67 Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Asn Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly 20 25 30 Tyr Asp Val Asn Trp Tyr Gln His Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu 35 40 45 Leu Ile Ser Val Asn Thr Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe 50 55 60 Ser Gly Ser Met Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu 65 70 75 80 Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Arg Arg 85 90 95 Leu Ser Gly Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu 100 105 110 <210> 68 <211> 14 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 68 Thr Gly Asn Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr Asp Val Asn 1 5 10 <210> 69 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 69 Val Asn Thr Asn Arg Pro Ser 1 5 <210> 70 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 70 Gln Ser Tyr Asp Arg Arg Leu Ser Gly Tyr Val 1 5 10 <210> 71 <211> 455 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 71 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Met Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Phe Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Val Asn Pro Asn Ser Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Gly Asp Thr Ser Leu Ser Ala Ala Tyr 65 70 75 80 Val Asp Leu Ser Arg Leu Ser Ser Asp Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Arg Gly Leu Gly Ile Ser Ser Thr Arg Asn Asp Ala Phe 100 105 110 Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr 115 120 125 Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser 130 135 140 Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu 145 150 155 160 Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His 165 170 175 Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser 180 185 190 Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys 195 200 205 Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu 210 215 220 Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 225 230 235 240 Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 245 250 255 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 260 265 270 Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp 275 280 285 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr 290 295 300 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 305 310 315 320 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu 325 330 335 Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 340 345 350 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys 355 360 365 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 370 375 380 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 385 390 395 400 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 405 410 415 Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser 420 425 430 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 435 440 445 Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 450 455 <210> 72 <211> 125 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 72 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Met Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Phe Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Val Asn Pro Asn Ser Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Gly Asp Thr Ser Leu Ser Ala Ala Tyr 65 70 75 80 Val Asp Leu Ser Arg Leu Ser Ser Asp Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Arg Gly Leu Gly Ile Ser Ser Thr Arg Asn Asp Ala Phe 100 105 110 Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 <210> 73 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 73 Asp Tyr Phe Ile His 1 5 <210> 74 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 74 Trp Val Asn Pro Asn Ser Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 75 <211> 16 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 75 Asp Arg Gly Leu Gly Ile Ser Ser Thr Arg Asn Asp Ala Phe Asp Ile 1 5 10 15 <210> 76 <211> 214 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 76 Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Pro Ser Gln Gly Ile Arg Asn Phe 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Asn Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Ala Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr His Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr His Ser Leu Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 77 <211> 107 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 77 Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Pro Ser Gln Gly Ile Arg Asn Phe 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Asn Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Ala Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr His Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr His Ser Leu Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 78 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 78 Gln Pro Ser Gln Gly Ile Arg Asn Phe Leu Asn 1 5 10 <210> 79 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 79 Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr 1 5 <210> 80 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 80 Gln Gln Tyr His Ser Leu Pro Leu Thr 1 5 <210> 81 <211> 451 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 81 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ala Asp Tyr 20 25 30 Tyr Ile His Trp Leu Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Gly Arg Ile Asn Pro Ser Asn Ser Arg Thr Thr Tyr Pro Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Val Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Gly Leu Arg Met Gly Tyr Tyr Tyr Met Asp Val Trp Gly 100 105 110 Lys Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 115 120 125 Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 130 135 140 Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 145 150 155 160 Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 165 170 175 Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 180 185 190 Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 195 200 205 Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 210 215 220 Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly 225 230 235 240 Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 245 250 255 Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 260 265 270 Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 275 280 285 His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 290 295 300 Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 305 310 315 320 Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile 325 330 335 Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 340 345 350 Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 355 360 365 Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 370 375 380 Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 385 390 395 400 Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 405 410 415 Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 420 425 430 His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 435 440 445 Pro Gly Lys 450 <210> 82 <211> 121 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 82 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ala Asp Tyr 20 25 30 Tyr Ile His Trp Leu Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Gly Arg Ile Asn Pro Ser Asn Ser Arg Thr Thr Tyr Pro Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Val Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Gly Leu Arg Met Gly Tyr Tyr Tyr Met Asp Val Trp Gly 100 105 110 Lys Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 83 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 83 Asp Tyr Tyr Ile His 1 5 <210> 84 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 84 Arg Ile Asn Pro Ser Asn Ser Arg Thr Thr Tyr Pro Gln Lys Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 85 <211> 12 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 85 Asp Gly Leu Arg Met Gly Tyr Tyr Tyr Met Asp Val 1 5 10 <210> 86 <211> 217 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 86 Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly 20 25 30 Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Ile Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu 35 40 45 Leu Ile Phe Gly Asn Tyr Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe 50 55 60 Ser Ala Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu 65 70 75 80 Gln Ala Glu Asp Glu Ala His Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Thr Thr 85 90 95 Leu Asp Gly Ala Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly 100 105 110 Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu 115 120 125 Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe 130 135 140 Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val 145 150 155 160 Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys 165 170 175 Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser 180 185 190 His Lys Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu 195 200 205 Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser 210 215 <210> 87 <211> 111 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 87 Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly 20 25 30 Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Ile Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu 35 40 45 Leu Ile Phe Gly Asn Tyr Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe 50 55 60 Ser Ala Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu 65 70 75 80 Gln Ala Glu Asp Glu Ala His Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Thr Thr 85 90 95 Leu Asp Gly Ala Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 110 <210> 88 <211> 14 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 88 Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr Asp Val His 1 5 10 <210> 89 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 89 Gly Asn Tyr Asn Arg Pro Ser 1 5 <210> 90 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 90 Gln Ser Tyr Asp Thr Thr Leu Asp Gly Ala Val 1 5 10 <210> 91 <211> 454 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 91 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Arg Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Thr Tyr 20 25 30 Gly Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Arg Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Thr Val Ile Pro Thr Phe Glu Lys Thr Tyr Tyr Ala Gln Gly Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Ile Ala Ala Asp Gly Ser Lys Asn Thr Val Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Arg Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Ile Tyr Phe Cys 85 90 95 Thr Arg Phe Phe Thr Pro Tyr Cys Ser Gly Gly Ser Cys Tyr Leu Asp 100 105 110 Leu Trp Gly Pro Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys 115 120 125 Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly 130 135 140 Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro 145 150 155 160 Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr 165 170 175 Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val 180 185 190 Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn 195 200 205 Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro 210 215 220 Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu 225 230 235 240 Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 245 250 255 Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 260 265 270 Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 275 280 285 Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn 290 295 300 Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp 305 310 315 320 Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro 325 330 335 Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu 340 345 350 Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn 355 360 365 Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile 370 375 380 Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 385 390 395 400 Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys 405 410 415 Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys 420 425 430 Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu 435 440 445 Ser Leu Ser Pro Gly Lys 450 <210> 92 <211> 124 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 92 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Arg Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Thr Tyr 20 25 30 Gly Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Arg Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Thr Val Ile Pro Thr Phe Glu Lys Thr Tyr Tyr Ala Gln Gly Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Ile Ala Ala Asp Gly Ser Lys Asn Thr Val Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Arg Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Ile Tyr Phe Cys 85 90 95 Thr Arg Phe Phe Thr Pro Tyr Cys Ser Gly Gly Ser Cys Tyr Leu Asp 100 105 110 Leu Trp Gly Pro Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 93 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 93 Thr Tyr Gly Ile Asn 1 5 <210> 94 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 94 Thr Val Ile Pro Thr Phe Glu Lys Thr Tyr Tyr Ala Gln Gly Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 95 <211> 15 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 95 Phe Phe Thr Pro Tyr Cys Ser Gly Gly Ser Cys Tyr Leu Asp Leu 1 5 10 15 <210> 96 <211> 214 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 96 Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln 1 5 10 15 Ser Val Thr Ile Ser Cys Ala Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly 20 25 30 Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln His Leu Pro Gly Thr Ala Pro Arg Leu 35 40 45 Leu Ile Tyr Ser Asn Thr Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe 50 55 60 Ser Gly Ser Lys Ser Gly Ala Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu 65 70 75 80 Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser Gly 85 90 95 Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Arg Gln Pro Lys 100 105 110 Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu Gln 115 120 125 Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro Gly 130 135 140 Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys Ala Gly 145 150 155 160 Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala Ala 165 170 175 Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg Ser 180 185 190 Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr Val 195 200 205 Ala Pro Thr Glu Cys Ser 210 <210> 97 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 97 Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln 1 5 10 15 Ser Val Thr Ile Ser Cys Ala Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly 20 25 30 Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln His Leu Pro Gly Thr Ala Pro Arg Leu 35 40 45 Leu Ile Tyr Ser Asn Thr Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe 50 55 60 Ser Gly Ser Lys Ser Gly Ala Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu 65 70 75 80 Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser Gly 85 90 95 Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 <210> 98 <211> 14 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 98 Ala Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr Asp Val His 1 5 10 <210> 99 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 99 Ser Asn Thr Asn Arg Pro Ser 1 5 <210> 100 <211> 8 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 100 Gln Ser Tyr Asp Ser Gly Val Val 1 5 <210> 101 <211> 452 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 101 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Gln Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Thr Ser Gly Asp Thr Phe Asn Asn Tyr 20 25 30 Ala Leu Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Pro Glu Trp Met 35 40 45 Gly Arg Ile Ile Pro Leu Val Glu Met Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Thr Thr Ile Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Gly Tyr Gln Gly Gly Phe Pro Tyr Phe Phe Asp Ser Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro 115 120 125 Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr 130 135 140 Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr 145 150 155 160 Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro 165 170 175 Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr 180 185 190 Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn 195 200 205 His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser 210 215 220 Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu 225 230 235 240 Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu 245 250 255 Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 260 265 270 His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 275 280 285 Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr 290 295 300 Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn 305 310 315 320 Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro 325 330 335 Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln 340 345 350 Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val 355 360 365 Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val 370 375 380 Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro 385 390 395 400 Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr 405 410 415 Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val 420 425 430 Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu 435 440 445 Ser Pro Gly Lys 450 <210> 102 <211> 122 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 102 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Gln Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Thr Ser Gly Asp Thr Phe Asn Asn Tyr 20 25 30 Ala Leu Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Pro Glu Trp Met 35 40 45 Gly Arg Ile Ile Pro Leu Val Glu Met Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Thr Thr Ile Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Gly Tyr Gln Gly Gly Phe Pro Tyr Phe Phe Asp Ser Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 103 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 103 Asn Tyr Ala Leu Ser 1 5 <210> 104 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 104 Arg Ile Ile Pro Leu Val Glu Met Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 105 <211> 13 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 105 Asp Gly Tyr Gln Gly Gly Phe Pro Tyr Phe Phe Asp Ser 1 5 10 <210> 106 <211> 214 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 106 Glu Val Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Asn Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Ser Ala Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Gly Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Ala Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Phe Ser Pro Gly 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Arg Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Leu Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 107 <211> 107 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 107 Glu Val Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Asn Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Ser Ala Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Gly Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Ala Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Phe Ser Pro Gly 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Arg 100 105 <210> 108 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 108 Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Asn Tyr Leu Ala 1 5 10 <210> 109 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 109 Ala Ala Ser Ser Arg Ala Thr 1 5 <210> 110 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 110 Gln Gln Tyr Gly Phe Ser Pro Gly Thr 1 5 <210> 111 <211> 448 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 111 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Val Tyr 20 25 30 Gly Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly His Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Ser Ala Tyr Asn Gly Asp Arg Gly Tyr Ala Gln Lys Val 50 55 60 Gln Gly Arg Ile Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Thr Ser Ser Gly Val Pro Gly Ile Tyr Trp Gly Gln Gly Ser 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro 115 120 125 Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly 130 135 140 Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn 145 150 155 160 Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln 165 170 175 Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser 180 185 190 Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser 195 200 205 Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr 210 215 220 His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser 225 230 235 240 Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg 245 250 255 Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro 260 265 270 Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala 275 280 285 Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val 290 295 300 Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr 305 310 315 320 Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr 325 330 335 Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu 340 345 350 Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys 355 360 365 Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser 370 375 380 Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp 385 390 395 400 Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser 405 410 415 Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala 420 425 430 Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 112 <211> 118 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 112 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Val Tyr 20 25 30 Gly Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly His Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Ser Ala Tyr Asn Gly Asp Arg Gly Tyr Ala Gln Lys Val 50 55 60 Gln Gly Arg Ile Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Thr Thr Ser Ser Gly Val Pro Gly Ile Tyr Trp Gly Gln Gly Ser 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 113 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 113 Val Tyr Gly Ile Ser 1 5 <210> 114 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 114 Trp Ile Ser Ala Tyr Asn Gly Asp Arg Gly Tyr Ala Gln Lys Val Gln 1 5 10 15 Gly <210> 115 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 115 Thr Ser Ser Gly Val Pro Gly Ile Tyr 1 5 <210> 116 <211> 214 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 116 Ser Tyr Ala Leu Val Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ser Pro Gly Gln 1 5 10 15 Thr Ala Arg Ile Thr Cys Phe Gly Pro Ala Leu Pro Lys Lys Tyr Ala 20 25 30 Tyr Trp Tyr Gln His Lys Ser Gly Gln Ala Pro Met Leu Val Ile Tyr 35 40 45 Glu Asp Thr Lys Arg Pro Ser Gly Ile Pro Gln Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Thr Ser Gly Ala Thr Ala Thr Leu Thr Ile Arg Gly Ala Gln Val Glu 65 70 75 80 Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Tyr Ser Thr Asp Ser Ser Gly His Glu 85 90 95 Arg Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln Pro Lys 100 105 110 Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu Gln 115 120 125 Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro Gly 130 135 140 Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys Ala Gly 145 150 155 160 Val Glu Thr Thr Ala Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala Ala 165 170 175 Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Lys Ser 180 185 190 Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr Val 195 200 205 Ala Pro Thr Glu Cys Ser 210 <210> 117 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 117 Ser Tyr Ala Leu Val Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ser Pro Gly Gln 1 5 10 15 Thr Ala Arg Ile Thr Cys Phe Gly Pro Ala Leu Pro Lys Lys Tyr Ala 20 25 30 Tyr Trp Tyr Gln His Lys Ser Gly Gln Ala Pro Met Leu Val Ile Tyr 35 40 45 Glu Asp Thr Lys Arg Pro Ser Gly Ile Pro Gln Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Thr Ser Gly Ala Thr Ala Thr Leu Thr Ile Arg Gly Ala Gln Val Glu 65 70 75 80 Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Tyr Ser Thr Asp Ser Ser Gly His Glu 85 90 95 Arg Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 100 105 <210> 118 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 118 Phe Gly Pro Ala Leu Pro Lys Lys Tyr Ala Tyr 1 5 10 <210> 119 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 119 Glu Asp Thr Lys Arg Pro Ser 1 5 <210> 120 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 120 Tyr Ser Thr Asp Ser Ser Gly His Glu Arg Val 1 5 10 <210> 121 <211> 455 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 121 Arg Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Arg Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Ser Ile Ser Trp Val Arg Gln Val Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Arg Ile Ile Pro Ile Leu Pro Leu Ser Ser Tyr Pro Gln Gln Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Ala Ile Thr Ala Asp Lys Ser Ser Thr Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ile Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Ala Leu Arg Pro Glu Gly Gly Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Phe 100 105 110 Asp Val Trp Gly Thr Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr 115 120 125 Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser 130 135 140 Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu 145 150 155 160 Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His 165 170 175 Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser 180 185 190 Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys 195 200 205 Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu 210 215 220 Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 225 230 235 240 Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 245 250 255 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 260 265 270 Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp 275 280 285 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr 290 295 300 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 305 310 315 320 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu 325 330 335 Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 340 345 350 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys 355 360 365 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 370 375 380 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 385 390 395 400 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 405 410 415 Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser 420 425 430 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 435 440 445 Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 450 455 <210> 122 <211> 125 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 122 Arg Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Arg Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Ser Ile Ser Trp Val Arg Gln Val Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Arg Ile Ile Pro Ile Leu Pro Leu Ser Ser Tyr Pro Gln Gln Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Ala Ile Thr Ala Asp Lys Ser Ser Thr Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ile Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Ala Leu Arg Pro Glu Gly Gly Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Phe 100 105 110 Asp Val Trp Gly Thr Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 <210> 123 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 123 Asn Tyr Ser Ile Ser 1 5 <210> 124 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 124 Arg Ile Ile Pro Ile Leu Pro Leu Ser Ser Tyr Pro Gln Gln Phe Gln 1 5 10 15 Gly <210> 125 <211> 16 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 125 Asp Ala Leu Arg Pro Glu Gly Gly Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Phe Asp Val 1 5 10 15 <210> 126 <211> 214 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 126 Glu Ile Glu Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Asn Gln Ile Ile Gly Asp Thr 20 25 30 Ser Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 Ile Phe Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Phe Gly Ser Asp Phe Thr Leu Thr Ile Thr Ser Leu Glu 65 70 75 80 Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 127 <211> 107 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 127 Glu Ile Glu Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Asn Gln Ile Ile Gly Asp Thr 20 25 30 Ser Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 Ile Phe Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Phe Gly Ser Asp Phe Thr Leu Thr Ile Thr Ser Leu Glu 65 70 75 80 Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 128 <211> 12 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 128 Arg Ala Asn Gln Ile Ile Gly Asp Thr Ser Leu Ala 1 5 10 <210> 129 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 129 Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr 1 5 <210> 130 <211> 8 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 130 Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro Thr 1 5 <210> 131 <211> 1620 <212> DNA <213> Human Metaneumovirus <400> 131 atgtcttgga aagtgatgat catcatttcg ttactcataa caccccagca cgggctaaag 60 gagagttatt tggaagaatc atgcagtact ataactgagg gatacctcag tgttttaaga 120 acaggctggt acactaatgt cttcacatta gaagttggtg atgttgaaaa tcttacatgt 180 actgatggac ctagcttaat caaaacagaa cttgacctaa caaaaagtgc tttaagggaa 240 ctcaaaacag tctctgctga tcagttagct agagaggagc aaattgaaaa tcccagacaa 300 tcaagatttg tcctaggtgc aatagctctc ggagttgcta cagcagcagc agtcacagca 360 ggcattgcaa tagccaaaac cataaggctt gagagtgagg tgaatgcaat taaaggtgct 420 ctcaaacaaa ctaatgaagc agtatccaca ttaggaaatg gtgtgcgggt cctagccact 480 gcagtgagag agctaaaaga atttgtgagc aaaaatctga ctagtgcaat caacaggaac 540 aaatgtgaca ttgctgatct gaagatggct gtcagcttca gtcaattcaa cagaagattt 600 ctaaatgttg tgcggcagtt ttcagacaat gcagggataa caccagcaat atcattggac 660 ctaatgactg atgctgaatt ggccagagct gtatcataca tgccaacatc tgcaggacag 720 ataaaactga tgttggagaa ccgcgcaatg gtaaggagaa aaggatttgg aatcctaata 780 ggggtctacg gaagctctgt gatttacatg gttcaattgc cgatctttgg tgtcatagat 840 acaccttgtt ggataatcaa ggcagctccc tcttgctcag aaaaaaacgg gaattatgct 900 tgcctcctaa gagaggatca agggtggtat tgtaaaaatg caggatccac tgtttactac 960 ccaaatgaaa aagactgtga aacaagaggt gatcatgttt tttgtgacac agcagcaggg 1020 atcaatgttg ctgagcaatc aagagaatgc aacatcaaca tatctactac caactaccca 1080 tgcaaagtca gcacaggaag acaccctata agcatggttg cactatcacc tctcggtgct 1140 ttggtggctt gctataaagg ggtaagctgc tcgattggca gcaatcgagt tggaatcatc 1200 aaacaattac ctaaaggctg ctcatacata actaaccagg atgcagacac tgtaacaatt 1260 gacaataccg tgtatcaact aagcaaagtt gaaggtgaac agcatgtaat aaaagggaga 1320 ccagtttcaa gcagttttga tccaatcagg tttcctgagg atcagttcaa tgttgcgctt 1380 gatcaagtct tcgaaagcat tgagaacagt caggcactgg tggaacagtc aaacaaaatt 1440 ctaaacagtg cagaaaaagg aaacactggt ttcattattg taataatttt ggttgctgtt 1500 cttggtttaa ccatgatttc agtgagcatc atcatcataa tcaagaaaac aaggaagccc 1560 acaggagcac ctccagagct gaatggtgtc accaacggcg gtttcatacc acatagttag 1620 <210> 132 <211> 539 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Fusion Protein Sequence <400> 132 Met Ser Trp Lys Val Met Ile Ile Ile Ser Leu Leu Ile Thr Pro Gln 1 5 10 15 His Gly Leu Lys Glu Ser Tyr Leu Glu Glu Ser Cys Ser Thr Ile Thr 20 25 30 Glu Gly Tyr Leu Ser Val Leu Arg Thr Gly Trp Tyr Thr Asn Val Phe 35 40 45 Thr Leu Glu Val Gly Asp Val Glu Asn Leu Thr Cys Thr Asp Gly Pro 50 55 60 Ser Leu Ile Lys Thr Glu Leu Asp Leu Thr Lys Ser Ala Leu Arg Glu 65 70 75 80 Leu Lys Thr Val Ser Ala Asp Gln Leu Ala Arg Glu Glu Gln Ile Glu 85 90 95 Asn Pro Arg Gln Ser Arg Phe Val Leu Gly Ala Ile Ala Leu Gly Val 100 105 110 Ala Thr Ala Ala Ala Val Thr Ala Gly Ile Ala Ile Ala Lys Thr Ile 115 120 125 Arg Leu Glu Ser Glu Val Asn Ala Ile Lys Gly Ala Leu Lys Gln Thr 130 135 140 Asn Glu Ala Val Ser Thr Leu Gly Asn Gly Val Arg Val Leu Ala Thr 145 150 155 160 Ala Val Arg Glu Leu Lys Glu Phe Val Ser Lys Asn Leu Thr Ser Ala 165 170 175 Ile Asn Arg Asn Lys Cys Asp Ile Ala Asp Leu Lys Met Ala Val Ser 180 185 190 Phe Ser Gln Phe Asn Arg Arg Phe Leu Asn Val Val Arg Gln Phe Ser 195 200 205 Asp Asn Ala Gly Ile Thr Pro Ala Ile Ser Leu Asp Leu Met Thr Asp 210 215 220 Ala Glu Leu Ala Arg Ala Val Ser Tyr Met Pro Thr Ser Ala Gly Gln 225 230 235 240 Ile Lys Leu Met Leu Glu Asn Arg Ala Met Val Arg Arg Lys Gly Phe 245 250 255 Gly Ile Leu Ile Gly Val Tyr Gly Ser Ser Val Ile Tyr Met Val Gln 260 265 270 Leu Pro Ile Phe Gly Val Ile Asp Thr Pro Cys Trp Ile Ile Lys Ala 275 280 285 Ala Pro Ser Cys Ser Glu Lys Asn Gly Asn Tyr Ala Cys Leu Leu Arg 290 295 300 Glu Asp Gln Gly Trp Tyr Cys Lys Asn Ala Gly Ser Thr Val Tyr Tyr 305 310 315 320 Pro Asn Glu Lys Asp Cys Glu Thr Arg Gly Asp His Val Phe Cys Asp 325 330 335 Thr Ala Ala Gly Ile Asn Val Ala Glu Gln Ser Arg Glu Cys Asn Ile 340 345 350 Asn Ile Ser Thr Thr Asn Tyr Pro Cys Lys Val Ser Thr Gly Arg His 355 360 365 Pro Ile Ser Met Val Ala Leu Ser Pro Leu Gly Ala Leu Val Ala Cys 370 375 380 Tyr Lys Gly Val Ser Cys Ser Ile Gly Ser Asn Arg Val Gly Ile Ile 385 390 395 400 Lys Gln Leu Pro Lys Gly Cys Ser Tyr Ile Thr Asn Gln Asp Ala Asp 405 410 415 Thr Val Thr Ile Asp Asn Thr Val Tyr Gln Leu Ser Lys Val Glu Gly 420 425 430 Glu Gln His Val Ile Lys Gly Arg Pro Val Ser Ser Ser Phe Asp Pro 435 440 445 Ile Arg Phe Pro Glu Asp Gln Phe Asn Val Ala Leu Asp Gln Val Phe 450 455 460 Glu Ser Ile Glu Asn Ser Gln Ala Leu Val Glu Gln Ser Asn Lys Ile 465 470 475 480 Leu Asn Ser Ala Glu Lys Gly Asn Thr Gly Phe Ile Ile Val Ile Ile 485 490 495 Leu Val Ala Val Leu Gly Leu Thr Met Ile Ser Val Ser Ile Ile Ile 500 505 510 Ile Ile Lys Lys Thr Arg Lys Pro Thr Gly Ala Pro Pro Glu Leu Asn 515 520 525 Gly Val Thr Asn Gly Gly Phe Ile Pro His Ser 530 535 <210> 133 <211> 1738 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> HA-V5-Full <400> 133 aagcttgcca ccatgtcttg gaaagtgatg atcatcattt cgttactcat aacaccccag 60 cacgggacca tgtacccata cgatgttcca gattacgctc taaaggagag ttatttggaa 120 gaatcatgca gtactataac tgagggatac ctcagtgttt taagaacagg ctggtacact 180 aatgtcttca cattagaagt tggtgatgtt gaaaatctta catgtactga tggacctagc 240 ttaatcaaaa cagaacttga cctaacaaaa agtgctttaa gggaactcaa aacagtctct 300 gctgatcagt tagctagaga ggagcaaatt gaaaatccca gacaatcaag atttgtccta 360 ggtgcaatag ctctcggagt tgctacagca gcagcagtca cagcaggcat tgcaatagcc 420 aaaaccataa ggcttgagag tgaggtgaat gcaattaaag gtgctctcaa acaaactaat 480 gaagcagtat ccacattagg aaatggtgtg cgggtcctag ccactgcagt gagagagcta 540 aaagaatttg tgagcaaaaa tctgactagt gcaatcaaca ggaacaaatg tgacattgct 600 gatctgaaga tggctgtcag cttcagtcaa ttcaacagaa gatttctaaa tgttgtgcgg 660 cagttttcag acaatgcagg gataacacca gcaatatcat tggacctaat gactgatgct 720 gaattggcca gagctgtatc atacatgcca acatctgcag gacagataaa actgatgttg 780 gagaaccgcg caatggtaag gagaaaagga tttggaatcc taataggggt ctacggaagc 840 tctgtgattt acatggttca attgccgatc tttggtgtca tagatacacc ttgttggata 900 atcaaggcag ctccctcttg ctcagaaaaa aacgggaatt atgcttgcct cctaagagag 960 gatcaagggt ggtattgtaa aaatgcagga tccactgttt actacccaaa tgaaaaagac 1020 tgtgaaacaa gaggtgatca tgttttttgt gacacagcag cagggatcaa tgttgctgag 1080 caatcaagag aatgcaacat caacatatct actaccaact acccatgcaa agtcagcaca 1140 ggaagacacc ctataagcat ggttgcacta tcacctctcg gtgctttggt ggcttgctat 1200 aaaggggtaa gctgctcgat tggcagcaat cgagttggaa tcatcaaaca attacctaaa 1260 ggctgctcat acataactaa ccaggatgca gacactgtaa caattgacaa taccgtgtat 1320 caactaagca aagttgaagg tgaacagcat gtaataaaag ggagaccagt ttcaagcagt 1380 tttgatccaa tcaggtttcc tgaggatcag ttcaatgttg cgcttgatca agtcttcgaa 1440 agcattgaga acagtcaggc actggtggaa cagtcaaaca aaattctaaa cagtgcagaa 1500 aaaggaaaca ctggtttcat tattgtaata attttggttg ctgttcttgg tttaaccatg 1560 atttcagtga gcatcatcat cataatcaag aaaacaagga agcccacagg agcacctcca 1620 gagctgaatg gtgtcaccaa cggcggtttc ataccacata gtagtctaga gggcccgcgg 1680 ttcgaaggta agcctatccc taaccctctc ctcggtctcg attctacgta gcggccgc 1738 <210> 134 <211> 572 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> HA-V5-Full <400> 134 Met Ser Trp Lys Val Met Ile Ile Ile Ser Leu Leu Ile Thr Pro Gln 1 5 10 15 His Gly Thr Met Tyr Pro Tyr Asp Val Pro Asp Tyr Ala Leu Lys Glu 20 25 30 Ser Tyr Leu Glu Glu Ser Cys Ser Thr Ile Thr Glu Gly Tyr Leu Ser 35 40 45 Val Leu Arg Thr Gly Trp Tyr Thr Asn Val Phe Thr Leu Glu Val Gly 50 55 60 Asp Val Glu Asn Leu Thr Cys Thr Asp Gly Pro Ser Leu Ile Lys Thr 65 70 75 80 Glu Leu Asp Leu Thr Lys Ser Ala Leu Arg Glu Leu Lys Thr Val Ser 85 90 95 Ala Asp Gln Leu Ala Arg Glu Glu Gln Ile Glu Asn Pro Arg Gln Ser 100 105 110 Arg Phe Val Leu Gly Ala Ile Ala Leu Gly Val Ala Thr Ala Ala Ala 115 120 125 Val Thr Ala Gly Ile Ala Ile Ala Lys Thr Ile Arg Leu Glu Ser Glu 130 135 140 Val Asn Ala Ile Lys Gly Ala Leu Lys Gln Thr Asn Glu Ala Val Ser 145 150 155 160 Thr Leu Gly Asn Gly Val Arg Val Leu Ala Thr Ala Val Arg Glu Leu 165 170 175 Lys Glu Phe Val Ser Lys Asn Leu Thr Ser Ala Ile Asn Arg Asn Lys 180 185 190 Cys Asp Ile Ala Asp Leu Lys Met Ala Val Ser Phe Ser Gln Phe Asn 195 200 205 Arg Arg Phe Leu Asn Val Val Arg Gln Phe Ser Asp Asn Ala Gly Ile 210 215 220 Thr Pro Ala Ile Ser Leu Asp Leu Met Thr Asp Ala Glu Leu Ala Arg 225 230 235 240 Ala Val Ser Tyr Met Pro Thr Ser Ala Gly Gln Ile Lys Leu Met Leu 245 250 255 Glu Asn Arg Ala Met Val Arg Arg Lys Gly Phe Gly Ile Leu Ile Gly 260 265 270 Val Tyr Gly Ser Ser Val Ile Tyr Met Val Gln Leu Pro Ile Phe Gly 275 280 285 Val Ile Asp Thr Pro Cys Trp Ile Ile Lys Ala Ala Pro Ser Cys Ser 290 295 300 Glu Lys Asn Gly Asn Tyr Ala Cys Leu Leu Arg Glu Asp Gln Gly Trp 305 310 315 320 Tyr Cys Lys Asn Ala Gly Ser Thr Val Tyr Tyr Pro Asn Glu Lys Asp 325 330 335 Cys Glu Thr Arg Gly Asp His Val Phe Cys Asp Thr Ala Ala Gly Ile 340 345 350 Asn Val Ala Glu Gln Ser Arg Glu Cys Asn Ile Asn Ile Ser Thr Thr 355 360 365 Asn Tyr Pro Cys Lys Val Ser Thr Gly Arg His Pro Ile Ser Met Val 370 375 380 Ala Leu Ser Pro Leu Gly Ala Leu Val Ala Cys Tyr Lys Gly Val Ser 385 390 395 400 Cys Ser Ile Gly Ser Asn Arg Val Gly Ile Ile Lys Gln Leu Pro Lys 405 410 415 Gly Cys Ser Tyr Ile Thr Asn Gln Asp Ala Asp Thr Val Thr Ile Asp 420 425 430 Asn Thr Val Tyr Gln Leu Ser Lys Val Glu Gly Glu Gln His Val Ile 435 440 445 Lys Gly Arg Pro Val Ser Ser Ser Phe Asp Pro Ile Arg Phe Pro Glu 450 455 460 Asp Gln Phe Asn Val Ala Leu Asp Gln Val Phe Glu Ser Ile Glu Asn 465 470 475 480 Ser Gln Ala Leu Val Glu Gln Ser Asn Lys Ile Leu Asn Ser Ala Glu 485 490 495 Lys Gly Asn Thr Gly Phe Ile Ile Val Ile Ile Leu Val Ala Val Leu 500 505 510 Gly Leu Thr Met Ile Ser Val Ser Ile Ile Ile Ile Ile Lys Lys Thr 515 520 525 Arg Lys Pro Thr Gly Ala Pro Pro Glu Leu Asn Gly Val Thr Asn Gly 530 535 540 Gly Phe Ile Pro His Ser Ser Leu Glu Gly Pro Arg Phe Glu Gly Lys 545 550 555 560 Pro Ile Pro Asn Pro Leu Leu Gly Leu Asp Ser Thr 565 570

Claims

인간 메타뉴모바이러스 (human metapneumovirus)의 F 단백질에 특이적으로 결합하고, 그의 생물활성을 중화시킬 수 있는 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,
(i) 중쇄의 가변영역이,
(a) 서열번호 3, 13, 23, 33, 43, 53, 63, 73, 83, 93, 103, 113 및 123의 아미노산 서열, 및 이들의 아미노산 서열 중 1 내지 수개의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입 및/또는 부가의 변이를 갖는 아미노산 서열의 군으로부터 선택되는 중쇄 CDR1의 아미노산 서열,
(b) 서열번호 4, 14, 24, 34, 44, 54, 64, 74, 84, 94, 104, 114 및 124의 아미노산 서열, 및 이들의 아미노산 서열 중 1 내지 수개의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입 및/또는 부가의 변이를 갖는 아미노산 서열의 군으로부터 선택되는 중쇄 CDR2의 아미노산 서열, 및
(c) 서열번호 5, 15, 25, 35, 45, 55, 65, 75, 85, 95, 105, 115 및 125의 아미노산 서열, 및 이들의 아미노산 서열 중 1 내지 수개의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입 및/또는 부가의 변이를 갖는 아미노산 서열의 군으로부터 선택되는 중쇄 CDR3의 아미노산 서열,
을 함유하고,
(ii) 경쇄 가변영역이,
(a) 서열번호 8, 18, 28, 38, 48, 58, 68, 78, 88, 98, 108, 118 및 128의 아미노산 서열, 및 이들의 아미노산 서열 중 1 내지 수 개의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입 및/또는 부가의 변이를 갖는 아미노산 서열의 군으로부터 선택되는 경쇄 CDR1의 아미노산 서열,
(b) 서열번호 9, 19, 29, 39, 49, 59, 69, 79, 89, 99, 109, 119 및 129의 아미노산 서열, 및 이들의 아미노산 서열 중 1 내지 수개의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입 및/또는 부가의 변이를 갖는 아미노산 서열의 군으로부터 선택되는 경쇄 CDR2의 아미노산 서열, 및
(c) 서열번호 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120 및 130의 아미노산 서열, 및 이들의 아미노산 서열 중 1 내지 수개의 아미노산 잔기의 결실, 치환, 삽입 및/또는 부가의 변이를 갖는 아미노산 서열의 군으로부터 선택되는 경쇄 CDR3의 아미노산 서열,
을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제1항에 있어서, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,
(i) 중쇄 가변영역이,
(a) 서열번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1의 아미노산 서열,
(b) 서열번호 4의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2의 아미노산 서열, 및,
(c) 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3의 아미노산 서열,
을 함유하고,
(ii) 경쇄 가변영역이,
(a) 서열번호 8의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1의 아미노산 서열,
(b) 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2의 아미노산 서열 및,
(c) 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하는 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제1항에 있어서, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,
(i) 중쇄 가변영역이,
(a) 서열번호 13의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1의 아미노산 서열,
(b) 서열번호 14의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2의 아미노산 서열, 및,
(c) 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3의 아미노산 서열
을 함유하고,
(ii) 경쇄 가변영역이,
(a) 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1의 아미노산 서열,
(b) 서열번호 19의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2의 아미노산 서열, 및,
(c) 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3의 아미노산 서열
을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제1항에 있어서, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,
(i) 중쇄 가변영역이,
(a) 서열번호 23의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1의 아미노산 서열,
(b) 서열번호 24의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2의 아미노산 서열, 및,
(c) 서열번호 25의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하고,
(ii) 경쇄 가변영역이,
(a) 서열번호 28의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1의 아미노산 서열,
(b) 서열번호 29의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2의 아미노산 서열, 및,
(c) 서열번호 30의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제1항에 있어서, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,
(i) 중쇄 가변영역이,
(a) 서열번호 33의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1의 아미노산 서열,
(b) 서열번호 34의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2의 아미노산 서열, 및,
(c) 서열번호 35의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하고,
(ii) 경쇄 가변영역이,
(a) 서열번호 38의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1의 아미노산 서열,
(b) 서열번호 39의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2의 아미노산 서열, 및,
(c) 서열번호 40의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제1항에 있어서, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,
(i) 중쇄 가변영역이,
(a) 서열번호 43의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1의 아미노산 서열,
(b) 서열번호 44의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2의 아미노산 서열, 및,
(c) 서열번호 45의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하고,
(ii) 경쇄 가변영역이,
(a) 서열번호 48의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1의 아미노산 서열,
(b) 서열번호 49의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2의 아미노산 서열, 및,
(c) 서열번호 50의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제1항에 있어서, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,
(i) 중쇄 가변영역이,
(a) 서열번호 53의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1의 아미노산 서열,
(b) 서열번호 54의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2의 아미노산 서열, 및,
(c) 서열번호 55의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하고,
(ii) 경쇄 가변영역이,
(a) 서열번호 58의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1의 아미노산 서열,
(b) 서열번호 59의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2의 아미노산 서열, 및,
(c) 서열번호 60의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제1항에 있어서, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,
(i) 중쇄 가변영역이,
(a) 서열번호 63의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1의 아미노산 서열,
(b) 서열번호 64의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2의 아미노산 서열, 및,
(c) 서열번호 65의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하고,
(ii) 경쇄 가변영역이,
(a) 서열번호 68의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1의 아미노산 서열,
(b) 서열번호 69의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2의 아미노산 서열, 및,
(c) 서열번호 70의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제1항에 있어서, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,
(i) 중쇄 가변영역이,
(a) 서열번호 73의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1의 아미노산 서열,
(b) 서열번호 74의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2의 아미노산 서열, 및,
(c) 서열번호 75의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하고,
(ii) 경쇄 가변영역이,
(a) 서열번호 78의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1의 아미노산 서열,
(b) 서열번호 79의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2의 아미노산 서열, 및,
(c) 서열번호 80의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제1항에 있어서, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,
(i) 중쇄 가변영역이,
(a) 서열번호 83의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1의 아미노산 서열,
(b) 서열번호 84의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2의 아미노산 서열, 및,
(c) 서열번호 85의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하고,
(ii) 경쇄 가변영역이,
(a) 서열번호 88의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1의 아미노산 서열,
(b) 서열번호 89의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2의 아미노산 서열, 및,
(c) 서열번호 90의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제1항에 있어서, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,
(i) 중쇄 가변영역이,
(a) 서열번호 93의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1의 아미노산 서열,
(b) 서열번호 94의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2의 아미노산 서열, 및,
(c) 서열번호 95의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하고,
(ii) 경쇄 가변영역이,
(a) 서열번호 98의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1의 아미노산 서열,
(b) 서열번호 99의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2의 아미노산 서열, 및,
(c) 서열번호 100의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제1항에 있어서, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,
(i) 중쇄 가변영역이,
(a) 서열번호 103의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1의 아미노산 서열,
(b) 서열번호 104의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2의 아미노산 서열, 및,
(c) 서열번호 105의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3의 아미노산 서열을함유하고,
(ii) 경쇄 가변영역이,
(a) 서열번호 108의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1의 아미노산 서열,
(b) 서열번호 109의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2의 아미노산 서열, 및,
(c) 서열번호 110의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제1항에 있어서, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,
(i) 중쇄 가변영역이,
(a) 서열번호 113의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1의 아미노산 서열,
(b) 서열번호 114의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2의 아미노산 서열, 및,
(c) 서열번호 115의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하고,
(ii) 경쇄 가변영역이,
(a) 서열번호 118의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1의 아미노산 서열,
(b) 서열번호 119의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2의 아미노산 서열, 및,
(c) 서열번호 120의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제1항에 있어서, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,
(i) 중쇄 가변영역이,
(a) 서열번호 123의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR1의 아미노산 서열,
(b) 서열번호 124의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR2의 아미노산 서열 및,
(c) 서열번호 125의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하고,
(ii) 경쇄 가변영역이,
(a) 서열번호 128의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR1의 아미노산 서열,
(b) 서열번호 129의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR2의 아미노산 서열 및,
(c) 서열번호 130의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 CDR3의 아미노산 서열을 함유하는 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,
(a) 서열번호 2, 12, 22, 32, 42, 52, 62, 72, 82, 92, 102, 112 및 122의 아미노산 서열, 및 이들 아미노산 서열과 80% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열의 군으로부터 선택되는 중쇄 가변영역 (VH) 및,
(b) 서열번호 7, 17, 27, 37, 47, 57, 67, 77, 87, 97, 107, 117 및 127의 아미노산 서열, 및 이들 아미노산 서열과 80% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열의 군으로부터 선택되는 경쇄 가변영역 (VL)
을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제15항에 있어서, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,
(a) 서열번호 2의 아미노산 서열, 또는 서열번호 2의 아미노산 서열과 80% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변영역 (VH) 및
(b) 서열번호 7의 아미노산 서열, 또는 서열번호 7의 아미노산 서열과 80% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변영역 (VL)
을 함유하는 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제15항에 있어서, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,
(a) 서열번호 12의 아미노산 서열, 또는 서열번호 12의 아미노산 서열과 80% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (VH), 및
(b) 서열번호 17의 아미노산 서열, 또는 서열번호 17의 아미노산 서열과 80% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역(VL)
을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제15항에 있어서, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,
(a) 서열번호 22의 아미노산 서열, 또는 서열번호 22의 아미노산 서열과 80% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변영역 (VH), 및
(b) 서열번호 27의 아미노산 서열, 또는 서열번호 27의 아미노산 서열과 80% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변영역 (VL)
을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제15항에 있어서, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,
(a) 서열번호 32의 아미노산 서열, 또는 서열번호 32의 아미노산 서열과 80% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변영역 (VH), 및
(b) 서열번호 37의 아미노산 서열, 또는 서열번호 37의 아미노산 서열과 80% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변영역 (VL)
을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제15항에 있어서, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,
(a) 서열번호 42의 아미노산 서열, 또는 서열번호 42의 아미노산 서열과 80% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변영역 (VH), 및
(b) 서열번호 47의 아미노산 서열, 또는 서열번호 47의 아미노산 서열과 80% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변영역 (VL)
을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제15항에 있어서, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,
(a) 서열번호 52의 아미노산 서열, 또는 서열번호 52의 아미노산 서열과 80% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변영역 (VH), 및
(b) 서열번호 57의 아미노산 서열, 또는 서열번호 57의 아미노산 서열과 80% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변영역 (VL)
을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제15항에 있어서, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,
(a) 서열번호 62의 아미노산 서열, 또는 서열번호 62의 아미노산 서열과 80% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변영역 (VH), 및
(b) 서열번호 67의 아미노산 서열, 또는 서열번호 67의 아미노산 서열과 80% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변영역(VL)
을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제15항에 있어서, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,
(a) 서열번호 72의 아미노산 서열, 또는 서열번호 72의 아미노산 서열과 80% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변영역 (VH), 및
(b) 서열번호 77의 아미노산 서열, 또는 서열번호 77의 아미노산 서열과 80% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변영역 (VL)
을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제15항에 있어서, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,
(a) 서열번호 82의 아미노산 서열, 또는 서열번호 82의 아미노산 서열과 80% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변영역 (VH), 및
(b) 서열번호 87의 아미노산 서열, 또는 서열번호 87의 아미노산 서열과 80% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변영역 (VL)
을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제15항에 있어서, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,
(a) 서열번호 92의 아미노산 서열, 또는 서열번호 92의 아미노산 서열과 80% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변영역 (VH), 및
(b) 서열번호 97의 아미노산 서열, 또는 서열번호 97의 아미노산 서열과 80% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변영역 (VL)
을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제15항에 있어서, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,
(a) 서열번호 102의 아미노산 서열, 또는 서열번호 102의 아미노산 서열과 80% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변영역 (VH), 및
(b) 서열번호 107의 아미노산 서열, 또는 서열번호 107의 아미노산 서열과 80% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변영역 (VL)
을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제15항에 있어서, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,
(a) 서열번호 112의 아미노산 서열, 또는 서열번호 112의 아미노산 서열과 80% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변영역 (VH), 및
(b) 서열번호 117의 아미노산 서열, 또는 서열번호 117의 아미노산 서열과 80% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변영역 (VL)
을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제15항에 있어서, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편으로서,
(a) 서열번호 122의 아미노산 서열, 또는 서열번호 122의 아미노산 서열과 80% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변영역 (VH) 및
(b) 서열번호 127의 아미노산 서열, 또는 서열번호 127의 아미노산 서열과 80% 이상의 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변영역 (VL)
을 함유하는, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제1항 내지 제28항 중 어느 한 항에 기재된 항체로서, 상기 항체의 에피토프가 F 단백질의 부분적인 결실 펩타이드에 대한 결합활성으로 분류한 경우, 항 hMPV 항체 EV046115b, EV046130 및 EV046147으로 대표되는 에피토프 그룹 Group 1, 항 hMPV 항체 EV046113, EV046116, EV046141 및 EV0461142으로 대표되는 에피토프 그룹 Group 2, 항 hMPV 항체 EV046124, EV046143 및 EV046150으로 대표되는 에피토프 그룹 Group 3, 항 hMPV 항체 EV046120 및 EV046135으로 대표되는 에피토프 그룹 Group 4, 및 항 hMPV 항체 EV046136으로 대표되는 에피토프 그룹 Group 5 중 어느 하나의 에피토프 그룹에 속하는 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제1항 내지 제28항 중 어느 한 항에 기재된 항체로서, 상기 항체의 에피토프가 F 단백질의 부분적인 결실 펩타이드에 대한 결합활성으로 분류한 경우, 항 hMPV 항체 EV046113, EV046116, EV046141 및 EV0461142로 대표되는 에피토프 그룹 Group 2, 항 hMPV 항체 EV046124, EV046143 및 EV046150으로 대표되는 에피토프 그룹 Group 3, 항 hMPV 항체 EV046120 및 EV046135로 대표되는 에피토프 그룹 Group 4, 및 항 hMPV 항체 EV046136으로 대표되는 에피토프 그룹 Group 5 중 어느 하나의 에피토프 그룹에 속하는 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제1항 내지 제28항 중 어느 한 항에 기재된 항체로서, 상기 항체의 에피토프가 F 단백질의 부분적인 결실 펩타이드에 대한 결합활성으로 분류한 경우, 항 hMPV 항체 EV046124, EV046143 및 EV046150으로 대표되는 에피토프 그룹 Group 3에 속하는 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제1항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 항체의 클래스 (서브클래스)가 IgG1 (κ) 또는 IgG1 (λ)인, 항체 또는 항원 결합성 단편.
제1항 내지 제32항 중 어느 한 항에 기재된 항체로서, 인간 메타뉴모바이러스 JPS02-76 (B1형), JPS05-21 (B2형) 및 JPS03-180 (A1형) 중 어느 하나의 균주에 대한 중화활성 (IC50)도 약 1μg/mL (약 6.7 nM) 이하인, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제1항 내지 제32항 중 어느 한 항에 기재된 항체로서, 인간 메타뉴모바이러스 JPS03-180 (A1형), 및 JPS03-178 (A2형), JPS02-76 (B1형) 및 JPS05-21 (B2형) 중 어느 하나의 균주에 대한 중화활성 (IC50)도 약 1μg/mL (약 6.7 nM) 이하인, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제1항 내지 제32항 중 어느 한 항에 기재된 항체로서, 인간 메타뉴모바이러스 JPS03-180 (A1형), JPS03-178 (A2형), JPS02-76 (B1형) 및 JPS05-21 (B2형) 중 어느 하나의 균주에 대한 중화활성 (IC90)도 약 2μg/mL (약 13.3 nM) 이하인, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제1항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서, 항체로서, 인간 메타뉴모바이러스의 JPS03-178 균주 (A2형)에 대한 중화활성 (IC50)이 약 0.1μg/mL (약 0.67 nM) 이하인, 항체 또는 그의 항원 결합성 단편.
제1항 내지 제36항 중 어느 한 항에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합성 단편 및 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 의약 조성물.
제37항에 있어서,
인간 메타뉴모바이러스 감염증을 치료 또는 예방하기 위한 의약 조성물.
제1항 내지 제36항 중 어느 한 항에 기재된 항체 또는 그의 항원 결합성 단편의 아미노산 서열을 코딩하는 분리된 핵산, 서열번호 1, 6, 11, 16, 21, 26, 31, 36, 41, 46, 51, 56, 61, 66, 71, 76, 81, 86, 91, 96, 101, 106, 111, 116, 121 및 126의 아미노산 서열을 코딩하는 분리된 핵산, 또는 이들 핵산 중 어느 하나와 높은 스트린전트 조건에서 하이브리브화하는 분리된 핵산.
제39항에 기재된 분리된 핵산을 도입한 재조합 발현 벡터.
제40항에 기재된 재조합 발현 벡터가 도입된 숙주세포.