KR20150133792A - 형광-ｈａｐ: 세포 중의 hbv 코어를 위한 진단 염색제 - Google Patents

형광-ｈａｐ: 세포 중의 hbv 코어를 위한 진단 염색제 Download PDF

Info

Publication number
KR20150133792A
KR20150133792A KR1020157030096A KR20157030096A KR20150133792A KR 20150133792 A KR20150133792 A KR 20150133792A KR 1020157030096 A KR1020157030096 A KR 1020157030096A KR 20157030096 A KR20157030096 A KR 20157030096A KR 20150133792 A KR20150133792 A KR 20150133792A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
alkyl
carboxylic acid
amino
alkoxy
group
Prior art date
Application number
KR1020157030096A
Other languages
English (en)
Inventor
애덤 즐로트닉
리춘 리
마이클 에스. 반 니우웬쯔
윌리엄 더블유. 터너
Original Assignee
인디애나 유니버시티 리서치 앤드 테크놀로지 코포레이션
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 인디애나 유니버시티 리서치 앤드 테크놀로지 코포레이션 filed Critical 인디애나 유니버시티 리서치 앤드 테크놀로지 코포레이션
Publication of KR20150133792A publication Critical patent/KR20150133792A/ko

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
    • G01N33/56983—Viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09B—ORGANIC DYES OR CLOSELY-RELATED COMPOUNDS FOR PRODUCING DYES, e.g. PIGMENTS; MORDANTS; LAKES
    • C09B11/00—Diaryl- or thriarylmethane dyes
    • C09B11/04—Diaryl- or thriarylmethane dyes derived from triarylmethanes, i.e. central C-atom is substituted by amino, cyano, alkyl
    • C09B11/06—Hydroxy derivatives of triarylmethanes in which at least one OH group is bound to an aryl nucleus and their ethers or esters
    • C09B11/08—Phthaleins; Phenolphthaleins; Fluorescein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09B—ORGANIC DYES OR CLOSELY-RELATED COMPOUNDS FOR PRODUCING DYES, e.g. PIGMENTS; MORDANTS; LAKES
    • C09B11/00—Diaryl- or thriarylmethane dyes
    • C09B11/04—Diaryl- or thriarylmethane dyes derived from triarylmethanes, i.e. central C-atom is substituted by amino, cyano, alkyl
    • C09B11/10—Amino derivatives of triarylmethanes
    • C09B11/24—Phthaleins containing amino groups ; Phthalanes; Fluoranes; Phthalides; Rhodamine dyes; Phthaleins having heterocyclic aryl rings; Lactone or lactame forms of triarylmethane dyes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09B—ORGANIC DYES OR CLOSELY-RELATED COMPOUNDS FOR PRODUCING DYES, e.g. PIGMENTS; MORDANTS; LAKES
    • C09B23/00—Methine or polymethine dyes, e.g. cyanine dyes
    • C09B23/02—Methine or polymethine dyes, e.g. cyanine dyes the polymethine chain containing an odd number of >CH- or >C[alkyl]- groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09B—ORGANIC DYES OR CLOSELY-RELATED COMPOUNDS FOR PRODUCING DYES, e.g. PIGMENTS; MORDANTS; LAKES
    • C09B57/00—Other synthetic dyes of known constitution
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09B—ORGANIC DYES OR CLOSELY-RELATED COMPOUNDS FOR PRODUCING DYES, e.g. PIGMENTS; MORDANTS; LAKES
    • C09B57/00—Other synthetic dyes of known constitution
    • C09B57/02—Coumarine dyes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09B—ORGANIC DYES OR CLOSELY-RELATED COMPOUNDS FOR PRODUCING DYES, e.g. PIGMENTS; MORDANTS; LAKES
    • C09B57/00—Other synthetic dyes of known constitution
    • C09B57/10—Metal complexes of organic compounds not being dyes in uncomplexed form
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
    • C12Q1/18—Testing for antimicrobial activity of a material
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
    • A61K49/0013—Luminescence
    • A61K49/0017—Fluorescence in vivo
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/005—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from viruses
    • G01N2333/01—DNA viruses
    • G01N2333/02—Hepadnaviridae, e.g. hepatitis B virus
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2500/00—Screening for compounds of potential therapeutic value
    • G01N2500/02—Screening involving studying the effect of compounds C on the interaction between interacting molecules A and B (e.g. A = enzyme and B = substrate for A, or A = receptor and B = ligand for the receptor)
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2500/00—Screening for compounds of potential therapeutic value
    • G01N2500/04—Screening involving studying the effect of compounds C directly on molecule A (e.g. C are potential ligands for a receptor A, or potential substrates for an enzyme A)
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2500/00—Screening for compounds of potential therapeutic value
    • G01N2500/10—Screening for compounds of potential therapeutic value involving cells

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)

Abstract

헤테로아릴디히드로피리미딘 (HAP)-기재의 형광 염색제 (화합물), 및 이러한 염색제의 진단 시약, 바이러스-추적제, 및/또는 신약 개발 도구로서의 용도가 기재되어 있다. 본 발명은 헤테로아릴디히드로피리미딘 (HAP)-기재의 형광 염색제 (화합물), 및 이러한 염색제의 진단 시약, 바이러스-추적제, 및/또는 신약 개발 도구로서의 용도에 관한 것이다.

Description

형광-ＨＡＰ: 세포 중의 HBV 코어를 위한 진단 염색제 {FLUORESCENT-HAP: A DIAGNOSTIC STAIN FOR HBV CORES IN CELLS}
관련 출원의 상호 참조
본 출원은 35 U.S.C. § 119(e)하에 2013년 3월 20일에 출원된 미국 가출원 61/803,554를 우선권 주장하며, 이 가출원의 내용 전문은 본원에 참조로 포함된다.
기술분야
본 발명은 헤테로아릴디히드로피리미딘 (HAP)-기재의 형광 염색제 (화합물), 및 이러한 염색제의 진단 시약, 바이러스-추적제, 및/또는 신약 개발 도구로서의 용도에 관한 것이다.
B형 간염 바이러스 (HBV)는 전세계에서 발생하는데: 20억명이 HBV에 감염되었고 대략 4억명이 만성 HBV를 앓고 있다 (1). 금년에는, 약 600,000명이 HBV-관련 간세포 암종, 경변증, 및 간부전으로 사망할 것이다. 미국에서만 약 2백만명의 만성 HBV 환자가 살고 있다.
HBV는 정이십면체형 코어를 갖는 외피보유 바이러스이다. 코어는 코어 (캡시드) 단백질, 바이러스 프리게놈(pregenomic) RNA, 바이러스 역전사효소, 및 다수의 숙주 단백질로부터 세포질에서 조합된다 (C. Bourne, et al., 2008, J.Virol., 82:10262-10270). HBV는 3200개 염기쌍의 게놈으로 4개의 오픈 리딩 프레임(open reading frame)을 가지며, 그 중 하나가 183개 잔기의 단백질인 코어 단백질 (HBcAg 또는 Cp)을 코딩하고, 그의 240개 카피가 동형이합체로서 대략 구형인 캡시드로 자가-조합된다 (Bourne, et al., 2008). 바이러스 게놈 및 적절한 부속 단백질과 함께 패키징되었을 때의 전체 복합체를 바이러스 코어라 하고, 이는 (프리게놈으로부터의) 바이러스 DNA 합성 및 세포내 트래피킹(trafficking)에 있어서 필수적인 역할을 한다 (Ganem, D., and R. J. Schneider, 2001, Hepadnaviridae: the viruses and their replication, 4th ed. Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, PA). 코어 유전자에 대한 개시 코돈의 대체는 N-말단 신장, C-말단 절단을 가지며, 이합체로서 혈청으로 분비되는 것을 제외하고는, 코어 단백질과 동일한 e-항원의 발현을 초래한다.
만성 HBV는 그 증상이 다양하며 치료를 위한 요건도 다양할 수 있다. 따라서, HBV에 대한 지배적인 항바이러스성 치료법은 지금까지 바이러스 역전사효소를 공격하는 것이었다. 예상할 수 있듯이, HBV 역전사효소 억제제는 HBV (Deres, K., and H. Rubsamen-Waigmann, 1999, Infection 27(Suppl. 2):S45-S51; Tennant, B. C., et al., 1998, Hepatology 28:179-191; Zhang, et al., 2003, J. Med. Virol. 71:24-30) 및 또한 인간 면역결핍 바이러스 (Lewis-Hall, F. C, 2007, Re: Important information regarding BARACLUDE (entecavir) in patients co-infected with HIV and HBV. Food and Drug Administration MedWatch Program. Food and Drug Administration, Washington, DC)의 약물-내성 돌연변이체를 유도하였다. 일부 역전사효소 돌연변이가 HBV 백신에 의해 생성된 항체에 대하여 불응성인 표면 단백질을 유도하므로, 내성은 HBV의 광범위한 유전자 중복으로 인한 일반적인 결과를 가질 수 있다 (Torresi, J., et al., 2002, Virology 293:305-313). 치료 과정 동안에, 또한 특히 간 이식이 권고되는 경우에, HBV의 활동도를 평가함으로써 간에서의 감염 정도를 결정할 필요가 있을 수 있다. 바이러스의 활동도를 나타내는 하나의 방법은 코어 단백질 및 HBV 표면 항원 (HBsAg)에 대하여 간 생검체를 염색하는 것이다. 혈청 중의 HBV 코어, 바이러스 및 e-항원에 대해서 검사하는 것도 중요하다. 현재, 대부분의 HBV 활동도 측정 및/또는 HBV-관련 검사는 항체-기반의 분석법을 사용하여 수행된다.
헤테로아릴디히드로피리미딘 (HAP)이 넓은 농도 범위에 걸쳐서 캡시드 단백질의 육각형 집합체가 지배적인 이상 입자를 유도하는 HBV 캡시드 단백질 조합의 속도 및 수준을 향상시킨다는 것이 밝혀졌다. HAP는 또한 바이러스 코어를 안정화시킴으로써, 바이러스 게놈의 정상적인 해리 및 방출을 방지한다 (Stray, S. J., et al., 2005, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 102:8138-8143). 이러한 화합물은 HBV 조합을 방해하여, 캡시드의 형성 시기, 캡시드의 안정성, 또는 캡시드 형성의 기하학적 구조를 변경시키고, 그에 따라 바이러스 감염을 방해하는 것으로 생각된다. 따라서, 인간 상동체를 갖지 않는 HBV 캡시드 단백질의 조합체를 표적으로 하는 것은 항-HBV 치료법을 개발하기 위한 유력하고 일반적인 접근법이 될 수 있다. 소수성 그루브, 또는 "HAP 포켓"은 HBV 코어 내의 단백질-단백질 계면에서 간극으로서 존재한다 (Bourne et al. 2008). 이러한 그루브, 또는 HAP 포켓이 HAP 분자, 프로펜아미드 또는 코어 단백질 돌연변이에 의해 채워지면, 그 효과가 항바이러스성이다. 지금까지, 모든 공지된 HBV-특이적 코어 단백질 조합체 작동인자가 HAP 포켓 내에서 결합하였다. 따라서, HBV의 HAP 포켓에 대하여 높은 친화도를 갖는 형광-HAP 염색제 (화합물)의 이용가능성은 항바이러스성 후보자로서의 분자를 동정하기 위한 수단으로서 경쟁적 결합 분석법을 가능하게 할 것이다.
코어 단백질을 위한 형광-HAP 염색제 (화합물)는 또한 HBV 생물학을 연구하는 연구원들에게, 예를 들어 세포 및 기관에서 HBV 코어를 추적하는데 있어서 관심을 받을 것이다. HBV의 생활사는 잘 한정되어 있지 않다. 조합 부위의 편재화, 코어가 축적되는 부위, 및 외포작용 기관과의 코어 상호작용에 관한 수많은 의문이 존재한다. 세포로 확산되어 HBV 코어가 존재하는 부위에 축적될, 배양 배지에 첨가되는 형광-HAP 염색제 (화합물)의 이용가능성은 배양된 세포에서의 HBV 코어의 편재화 부위의 용이하게 이용할 수 있는 동정을 가능하게 할 것이다. 동물 (예를 들어, 마우스, 우드척(woodchuck), 인간)에서, 이러한 염색제는 "잠복" 감염의 경우에 예상되는 바와 같이, HBV 코어가 축적되는 간 및 가능하게는 다른 기관의 감염 영역을 동정하는데 사용될 수 있다.
활동성 HBV 감염의 특징은 혈청 중에 HBV 코어 및 코어-함유 데인(Dane) 입자 (즉, HBcAg 또는 c-항원)가 존재하는 것이다. 이들은 현재 항체를 사용하는 임상 분석법에서 검출된다. 형광-HAP 염색제 (화합물)의 이용가능성은 HBV 코어에 대하여 매우 특이적인 대체물을 제공할 것이다. 마찬가지로, e-항원, 즉 HBV 코어 항원의 상기 언급된 변이체의 존재 또는 부재는 활동성으로 복제하는 HBV에 대한 지표이다. c-항원 양성, e-항원 음성인 감염은 중증의 진행성인 만성 감염과 관련있다. e-항원에 대한 항체-기반의 분석법은 HBV 코어와의 교차-반응성 (즉, c-항원)에 있어서 어려움을 갖는다. 혈청 샘플의 상태를 조정함으로써 (예를 들어, 이온 강도의 증가), e-항원이 형광-HAP 염색제 (화합물)에 의해 용이하게 검출가능하도록 할 것이라고 예상된다.
형광-HAP 염색제 (화합물)의 이용가능성에 의해 가능해진 조직에서의 HBV 코어에 대한 신속하고 효과적인 검사는 감염 간 손상의 단계 및 등급을 정하기 위해 생검체 및 다른 조직 샘플을 검사하는데 있어서 유용할 것이고, 급성 감염의 클리어런스가 명확히 규정되지 않은 환자를 검사하는데 있어서 진단의 유용성을 가질 것이며, 감염 수준 및 다른 표적 기관에서의 HBV에 대하여 이식 후보자의 평가를 가능하게 할 것이며, 재감염의 증거에 대하여 최근의 이식 환자로부터의 샘플 검사를 가능하게 할 것이다. 따라서, 조직학적 검사와 함께 HBV 감염의 직접적인 검출은 간 손상을 갖지만, 진행중인 감염에 대해서는 최소한의 증거를 갖는 환자의 치료 옵션을 고려하는데 있어서 유용할 것이다.
항체-기반의 HBV 활동도 측정 및/또는 HBV-관련 검사가 현재 이용가능함에도 불구하고, i) 항체-기반의 HBV 진단 시약의 임상학적 대체물, ii) 효과적인 HBV-추적제, 및 iii) 항-HBV 신약 개발을 위한 신규한 도구가 여전히 필요하며, 이들은 모두 형광-HAP 염색제 (화합물)의 이용가능성에 의해 지원받을 것이다.
HBV 검출 및 진단, HBV-추적, 및 항-HBV 신약 개발에 사용하기 위한 화합물, 조성물, 방법 및 키트가 본원에 기재되어 있다. 본원에 기재된 화합물은 세포 막을 용이하게 횡단하고, HBV 캡시드와 결합함으로써, 회합된 형광단을 농축시켜 HBV-발현 세포의 선명한 형광 점상 염색을 제공하는 (HBV 캡시드 당 형광-HAP 염색제의 120개 이하의 카피가 결합됨), 넓은 여기 및 방출 범위에 걸쳐서 효율적으로 여기가능한 형광-HAP 염색제이다. 본원에 기재된 형광-HAP 염색제 (화합물)는 높은 나노몰의 친화도로 예비-조합된 HBV 코어의 HAP 포켓에 결합하고, HBV 캡시드 조합의 속도 및 수준을 향상시키며, HBV 캡시드를 안정화시키며, 이상 캡시드 조합을 유도함으로써, HAP의 중요한 성질을 보유한다. 본원에 기재된 형광-HAP 염색제 (화합물)는 HAP 포켓과 결합하는 분자를 동정하기 위한 항-HBV 신약 개발 및 혈청 중 HBV 코어, 코어-함유 데인 입자 (즉, HBcAg 또는 c-항원), 및/또는 e-항원의 존재를 검출하기 위한 현재 이용가능한 항체-기반의 HBV 진단 시약 대신에 또한/또는 그와 함께 사용될 수 있다. 또한, 기재된 조성물, 방법 및 키트에 사용하기 위한 형광-HAP 염색제 (화합물)를 제조하는 방법이 본원에 기재되어 있다.
본 발명의 예시적 실시양태에서, 하기 구조식 I을 갖는 형광-HAP 염색제 (화합물) 또는 그의 염이 기재되어 있다.
<구조식 I>
Figure pct00001
식 중:
Q는 Ar1 또는 Ak1이고;
Ar1은 아릴 또는 헤테로아릴이고;
RC는 수소이고;
Ak 및 Ak1은 독립적으로 C1-C6 알킬렌이고;
Z는
Figure pct00002
또는
Figure pct00003
이며,
여기서
n은 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6이고; y는 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12이고; z는 1, 2, 3, 또는 4이고; R은 H 또는 알킬이고;
RD는 알킬, 헤테로알킬, 알케닐, 또는 알키닐이며, 이들은 각각 임의로 치환되고;
RE는 형광단이고;
Y는 O, S, 또는 HN이고;
RA는 독립적으로 각각의 경우에, 할로이거나 또는 알킬, 헤테로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아미노 및 그의 유도체, 및 히드록실 및 그의 유도체로 이루어진 군으로부터 선택된 0 내지 3개의 치환기를 나타내며, 이들은 각각 임의로 치환되고;
RB는 독립적으로 각각의 경우에, 할로겐이거나 또는 알킬, 헤테로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아미노 및 그의 유도체, 및 히드록실 및 그의 유도체로 이루어진 군으로부터 선택된 0 내지 3개의 치환기를 나타내며, 이들은 각각 임의로 치환된다.
Q, RD, RE, Ar1, Z, Y, Ak, Ak1, R, RA, 및 RB 각각의 다양한 그룹 및 서브그룹의 모든 가능한 조합이 본원에 기재된 화합물의 추가의 예시적 실시양태를 나타낸다는 것이 이해되어야 한다. 또한, 화합물의 이러한 추가의 예시적 실시양태가 각각 본원에 기재된 임의의 조성물, 방법, 및/또는 키트에 사용될 수 있다는 것이 이해되어야 한다.
또 다른 예시적 실시양태에서, Q가 Ar1이며, 여기서 Ar1은 2-티아졸릴, 2-티에닐, 2-푸라닐, 2-(1-메틸)이미다졸릴, 2-피리미디닐, 2-나프틸, 2-피롤리디닐, 페닐, 2-피리딜, 3-피리딜, 또는 4-피리딜이며; RD, RE, Z, Y, Ak, R, RA, 및 RB가 각각 본원에 기재된 임의의 실시양태에서 정의된 바와 같은, 구조식 I을 갖는 형광-HAP 염색제 (화합물) 또는 그의 염이 기재되어 있다.
또 다른 예시적 실시양태에서, Q가 Ar1이며, 여기서 Ar1은 페닐, 2-피리딜, 3-피리딜, 또는 4-피리딜이고; RD, RE, Z, Y, Ak, R, RA, 및 RB가 각각 본원에 기재된 임의의 실시양태에서 정의된 바와 같은, 구조식 I을 갖는 형광-HAP 염색제 (화합물) 또는 그의 염이 기재되어 있다.
또 다른 예시적 실시양태에서, HBV 검출, HBV 진단, HBV-추적, 및/또는 항-HBV 신약 개발에 사용하기 위한 조성물이 기재되어 있으며, 이 조성물은 본원에 기재된 하나 이상의 형광-HAP 염색제 (화합물)를, HBV를 검출, 진단, 추적하고/거나 그와 경쟁적으로 결합하는 유효량으로 포함한다. 본원에 기재된 조성물이 다른 진단 능력을 갖는 화합물, 및/또는 하나 이상의 담체, 희석제, 부형제 등을 비제한적으로 포함하는, 다른 요소 및/또는 성분을 포함할 수 있다는 것이 이해되어야 한다.
본 발명의 또 다른 예시적 실시양태는 세포 및 조직에서 HBV를 검출, 진단, 및/또는 추적하는 방법을 제공하며, 이 방법은, 예를 들어 현재 이용가능한 항체-기반의 HBV 검출 및/또는 진단 방법과 함께 사용하기에 적합하고,
a) 세포 및 유효량의 본원에 기재된 하나 이상의 형광-HAP 염색제 (화합물) 또는 그의 조성물의 혼합물을 인큐베이션하고;
b) 상기 하나 이상의 화합물의 임의의 초과량을 세척 제거하고;
c) 형광 신호를 도출하기 위한 자극을 혼합물에 제공하고;
d) 자극된 혼합물을 분석하는 단계
를 포함한다.
또 다른 예시적 실시양태는 용액 중의 HBV 코어를 검출, 진단 및/또는 추적하는 방법을 제공하며, 이 방법은, 예를 들어 현재 이용가능한 항체-기반의 HBV 검출 및/또는 진단 방법과 함께 사용하기에 적합하고,
a) 정화된 혈청, 성장 배지, 또는 검사하려는 다른 액체 및 유효량의 본원에 기재된 하나 이상의 형광-HAP 염색제 (화합물) 또는 그의 조성물을 포함하는 용액을 인큐베이션하고;
b) 필요에 따라, e-항원 조합체를 검출하기 위해 이온 강도를 조정하여 상기 조합체를 유도하고;
c) 결합되지 않은 상기 하나 이상의 화합물을 HBV 코어에 결합된 상기 하나 이상의 화합물로부터 분리하여 결합되지 않은 상 및 결합된 상을 각각 형성하고;
d) 결합되지 않은 상 및 결합된 상과 관련된 형광을 분석하는 단계
를 포함한다.
또 다른 예시적 실시양태는 항-HBV 신약 개발을 수행하는 방법을 제공하며, 이 방법은
a) 항-HBV 신약 후보자, 예비-조합된 HBV 코어 및 유효량의 본원에 기재된 하나 이상의 형광-HAP 염색제 (화합물) 또는 그의 조성물의 혼합물을 인큐베이션하고;
b) 하나 이상의 형광-HAP 염색제 (화합물)의 형광 변화를 측정하고;
c) HBV의 HAP 포켓과의 항-HBV 신약 후보자에 의한 경쟁적 결합에 대하여 혼합물을 분석하는 단계
를 포함한다.
또 다른 예시적 실시양태는 항-HBV 신약 개발을 수행하는 방법을 제공하며, 이 방법은
a) 항-HBV 신약 후보자, 예비-조합된 HBV 코어 및 유효량의 본원에 기재된 하나 이상의 형광-HAP 염색제 (화합물) 또는 그의 조성물의 혼합물을 인큐베이션하고;
b) 결합되지 않은 상기 항-HBV 신약 후보자 및 결합되지 않은 상기 하나 이상의 형광-HAP 염색제 (화합물)를 HBV 코어와 결합된 상기 항-HBV 신약 후보자 및 상기 하나 이상의 형광-HAP 염색제 (화합물)로부터 분리하여 결합되지 않은 상 및 결합된 상을 각각 형성하고;
c) 결합되지 않은 상 및 결합된 상과 관련된 형광을 측정하고;
d) HBV의 HAP 포켓과의 항-HBV 신약 후보자에 의한 경쟁적 결합에 대하여 혼합물을 분석하는 단계
를 포함한다.
또 다른 예시적 실시양태는 HBV를 검출, 진단 및/또는 추적하고, 또한 HBV의 HAP 포켓과 경쟁적으로 결합하는 화합물을 동정하는 키트를 제공하며, 이 키트는, 예를 들어 현재 이용가능한 항체-기반의 HBV 검출 및/또는 진단 시약과 함께 사용하기에 적합하고,
a) 본원에 기재된 형광-HAP 염색제 (화합물); 및
b) 적합하 용매
를 포함한다.
또 다른 예시적 실시양태는 구조식 I을 갖는 형광-HAP 염색제를 제조하는 방법을 제공하며, 이 방법은
(a) 구조식 II 또는 II' 또는 II"의 HAP 화합물을 적합하게 활성화된 형광단과 반응시키는 것을 포함한다.
<구조식 II>
Figure pct00004
<구조식 II'>
Figure pct00005
<구조식 II">
Figure pct00006
식 중: Q는 Ak1 또는 Ar1이고; RC, RD, Ak, Ak1, Ar1, Z, Ak, R, RA, RB, n, y, z 및 형광단은 본원에 정의된 바와 같다.
Q가 Ar1이고, RC, RD, Ak, Ar1, Z, Ak, R, RA, RB, n, y, z 및 형광단이 본원에 정의된 바와 같은, 상기 방법의 또 다른 실시양태가 기재되어 있다. 본 발명의 추가의 예시적 측면, 특징 및 장점은 본원에서 이해되는 바와 같이 본 발명을 수행하기 위한 최상의 방식을 예시하는 하기의 상세한 설명을 고려할 때 통상의 기술자에게 자명할 것이다. 그러나, 상세한 설명 및 이어지는 특정 실시예가 본 발명의 바람직한 실시양태를 나타냄과 동시에, 단지 설명하는 방식으로 제공된다는 것이 이해되어야 한다. 본 발명의 취지 및 범주 내의 다양한 변화 및 수정이 통상의 기술자에게 자명할 것이라고 예상된다.
상세한 설명은 특히 첨부 도면을 참조하며, 여기서
도 1은 FL-HAP알렉사플루오르 ( AlexaFluor )® 488이 HBV 캡시드 조합 속도를 향상시킨다는 것을 보여주고;
도 2는 FL-HAP알렉사플루오르 ® 488이 조합체의 안정성을 증가시키고 HBV 캡시드와 특이적으로 결합한다는 것 (이합체가 아님)을 보여주고;
도 3은 FL-HAP알렉사플루오르 ® 488이 HBV 캡시드와 높은 친화도로 결합하고 서서히 해리된다는 것을 보여주고;
도 4는 FL-HAP알렉사플루오르 ® 488만이 HBV-생성 세포를 표지한다는 것을 보여준다.
본원에 기재된 발명이 다양한 수정 및 대체 형태가 가능하지만, 본 발명의 원리의 이해를 용이하게 하기 위해, 이제부터 다수의 예시적 실시양태를 참조할 것이고, 그를 기재하기 위해 특정 용어가 사용될 것이다. 그러나, 본 발명을 기재된 특정 형태로 제한하려는 의도는 없으며, 오히려 반대로 본 발명의 취지 및 범주 내에 포함되는 모든 수정물, 등가물 및 대체물을 포함시키고자 한다는 것이 이해되어야 한다.
본 발명은 HBV 검출 및 진단, HBV-추적, 및 항-HBV 신약 개발에 사용하기 위한 화합물, 조성물, 방법, 및 키트를 포함한다. 본원에 기재된 화합물은 세포 막을 용이하게 횡단하고, HBV 캡시드와 결합함으로써, 회합된 형광단을 농축시켜 HBV-발현 세포의 선명한 형광 점상 염색을 제공하는 (HBV 캡시드 당 형광-HAP 염색제의 120개 이하의 카피가 결합됨), 넓은 여기 및 방출 범위에 걸쳐서 효율적으로 여기가능한 형광-HAP 염색제이다. 본원에 기재된 형광-HAP 염색제 (화합물)는 높은 나노몰의 친화도로 예비-조합된 HBV 코어의 HAP 포켓에 결합하고, HBV 캡시드 조합의 속도 및 수준을 향상시키며, HBV 캡시드를 안정화시키며, 이상 캡시드 조합을 유도함으로써, HAP의 중요한 성질을 보유한다. 본원에 기재된 형광-HAP 염색제 (화합물)는 HAP 포켓과 결합하는 분자를 동정하기 위한 항-HBV 신약 개발 및 혈청 중 HBV 코어, 코어-함유 데인 입자 (즉, HBcAg 또는 c-항원), 및/또는 e-항원의 존재를 검출하기 위한 현재 이용가능한 항체-기반의 HBV 진단 시약 대신에 또한/또는 그와 함께 사용될 수 있다. 또한, 본원에 기재된 조성물, 방법 및 키트에 사용하기 위한 형광-HAP 염색제 (화합물)를 제조하는 방법이 본원에 기재되어 있다.
본 발명의 예시적 실시양태에서, 하기 구조식 I을 갖는 형광-HAP 염색제 (화합물) 또는 그의 염이 기재되어 있다.
<구조식 I>
Figure pct00007
식 중:
Q는 Ar1 또는 Ak1이고;
Ar1은 아릴 또는 헤테로아릴이고;
RC는 수소이고;
Ak 및 Ak1은 독립적으로 C1-C6 알킬렌이고;
Z는
Figure pct00008
또는
Figure pct00009
이며,
여기서
n은 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6이고; y는 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12이고; z는 1, 2, 3, 또는 4이고; R은 H 또는 알킬이고;
RD는 알킬, 헤테로알킬, 알케닐, 또는 알키닐이며, 이들은 각각 임의로 치환되고;
RE는 형광단이고;
Y는 O, S, 또는 HN이고;
RA는 독립적으로 각각의 경우에, 할로이거나 또는 알킬, 헤테로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아미노 및 그의 유도체, 및 히드록실 및 그의 유도체로 이루어진 군으로부터 선택된 0 내지 3개의 치환기를 나타내며, 이들은 각각 임의로 치환되고;
RB는 독립적으로 각각의 경우에, 할로겐이거나 또는 알킬, 헤테로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아미노 및 그의 유도체, 및 히드록실 및 그의 유도체로 이루어진 군으로부터 선택된 0 내지 3개의 치환기를 나타내며, 이들은 각각 임의로 치환된다.
RD, RE, Ar1, Z, Y, Ak, Ak1, R, RA, 및 RB 각각의 다양한 그룹 및 서브그룹의 모든 가능한 조합이 본원에 기재된 발명의 화합물의 추가의 예시적 실시양태를 나타낸다는 것이 이해되어야 한다. 또한, 화합물의 이러한 추가의 예시적 실시양태가 각각 본원에 기재된 임의의 조성물, 방법, 및/또는 키트에 사용될 수 있다는 것이 이해되어야 한다.
또 다른 예시적 실시양태에서, Q가 Ar1이며, 여기서 Ar1은 2-티아졸릴, 2-티에닐, 2-푸라닐, 2-(1-메틸)이미다졸릴, 2-피리미디닐, 2-나프틸, 2-피롤리디닐, 페닐, 2-피리딜, 3-피리딜, 또는 4-피리딜이고; RD, RE, Z, Y, Ak, R, RA, 및 RB가 각각 본원에 기재된 임의의 실시양태에서 정의된 바와 같은, 구조식 I을 갖는 형광-HAP 염색제 (화합물) 또는 그의 염이 기재되어 있다.
또 다른 예시적 실시양태에서, Ar1이 페닐, 2-피리딜, 3-피리딜, 또는 4-피리딜이고; RD, RE, Z, Y, Ak, R, RA, 및 RB가 각각 본원에 기재된 임의의 실시양태에서 정의된 바와 같은, 구조식 I을 갖는 형광-HAP 염색제 (화합물) 또는 그의 염이 기재되어 있다.
예시적 실시양태에서, 형광단이 플루오레세인, 로다민, 로돌, 로사민 및 이들의 유도체를 비제한적으로 포함하는 크산텐, 쿠마린, 아크리딘, 푸란, 인돌, 퀴놀린, 시아닌, 벤조푸란, 퀴나졸리논, 벤자졸, 붕소-디피로메텐, 및 이들의 유도체로 이루어진 군으로부터 선택된 것인, 구조식 I 또는 Ia를 갖는 형광-HAP 염색제 (화합물) 또는 그의 염이 기재되어 있다.
또 다른 예시적 실시양태에서, Q가 Ar1이며, 여기서 Ar1은 2-피리딜 또는 3-피리딜인 화학식 I의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, RB가 존재하지 않는 화학식 I의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, Y가 O 또는 S인 화학식 I 또는 Ia의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, RD가 메틸인 화학식 I 또는 Ia의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, Ak1이 C1-C4 또는 C1-C3 또는 C1-C2인 화학식 Ia의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, Ak1이 CH2인 화학식 Ia의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, Q가 Ar1이며, 여기서 Ar1은 2-피리딜이고, RB가 존재하지 않으며, Y가 O이고, RD가 메틸인, 화학식 I의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, Q가 Ar1이며, 여기서 Ar1은 2-피리딜이고, RB가 존재하지 않으며, Y가 O이며, RD가 메틸이며, 형광단이 로다민 유도체, 플루오레세인 또는 그의 유도체, 또는 붕소-디피로메텐 유도체인, 화학식 I의 화합물이 기재되어 있다.
Q, RD, RE, Ar1, Z, Ak, Ak1, R, RA, 및 RB 각각의 다양한 그룹 및 서브그룹의 모든 가능한 조합이 본원에 기재된 발명의 화합물의 추가의 예시적 실시양태를 나타낸다는 것이 이해되어야 한다. 또한, 화합물의 상기 언급된 추가의 예시적 실시양태가 각각 본원에 기재된 임의의 조성물, 방법, 및/또는 키트에 사용될 수 있다는 것이 이해되어야 한다.
상기 및 하기 실시양태 각각에서, 화학식이 화합물의 모든 제약상 및 진단학상 허용되는 염을 포함하고 나타낼 뿐만 아니라, 상기 화학식의 화합물의 모든 수화물 및/또는 용매화물을 포함한다는 것이 또한 이해되어야 한다. 특정 관능기, 예컨대 히드록시, 아미노 등의 기가 물 및/또는 다양한 용매와, 화합물의 다양한 물리적 형태로 복합체 및/또는 배위 화합물을 형성한다는 것이 이해된다. 따라서, 상기 화학식은 그러한 다양한 수화물 및/또는 용매화물을 포함하고 나타내는 것으로 이해되어야 한다. 상기 및 하기 실시양태 각각에서, 화학식이 각각 가능한 이성질체, 예컨대 입체이성질체 및 기하 이성질체를, 개별적으로 또한 모든 가능한 혼합물로 포함하고 나타낸다는 것이 또한 이해되어야 한다. 상기 및 하기 실시양태 각각에서, 화학식이 화합물의 모든 결정질 형태, 부분 결정질 형태, 및 비-결정질 및/또는 무정형 형태를 포함하고 나타낸다는 것이 또한 이해되어야 한다.
또 다른 예시적 실시양태에서, 하기 구조식 III 또는 IV를 갖는 형광-HAP 염색제 (화합물) 또는 그의 염이 기재되어 있다.
<구조식 III>
Figure pct00010
<구조식 IV>
Figure pct00011
식 중, Q는 Ak1 또는 Ar1이고, RC, RD, Ar1, Z, Ak, Ak1, RA, 및 RB는 본원에 정의된 바와 같고;
R2, R3, R4 및 R5는 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, CN; 또는 C1 - C18 알킬, 또는 C1 - C18 알콕시 (여기서, 알킬 또는 알콕시는 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 카르복실산, 카르복실산의 염, 또는 C1 - C6 알콜의 카르복실산 에스테르에 의해 추가로 치환됨); 또는 --SO3X (여기서, X는 H 또는 반대이온임)이고;
R1 및 R6은 H이거나; 또는 R1과 R2가 함께 또는 R5와 R6이 함께 또는 양자가 모두 --SO3X에 의해 임의로 1회 이상 치환된 융합 방향족 6원 고리를 형성하고;
A는 NR8R9이며, 여기서 R8 및 R9는 독립적으로 H, C1 - C6 알킬, C1 - C6 카르복시알킬, C1 - C6 술포알킬, C1 - C6 카르복시알킬의 염, 또는 C1 - C6 술포알킬의 염이고, 알킬 부분은 임의로 아미노, 히드록시, 카르복실산, 카르복실산의 염, 또는 C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르에 의해 치환되거나; 또는 R8과 R9가 함께 피페리딘, 모르폴린, 피롤리딘 또는 피페라진인 포화 5- 또는 6원 헤테로사이클을 형성하며, 이들은 각각 임의로 메틸, 카르복실산, 카르복실산의 염, 또는 C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르에 의해 치환되거나; 또는
R8과 R2가 함께 또는 R9와 R3이 함께 또는 양자가 모두 하나 이상의 C1 - C6 알킬 또는 --CH2SO3X 잔기에 의해 임의로 치환된, 포화 또는 불포화의 5- 또는 6원 고리를 형성하고;
C는 OR17 또는 NR18R19이며; 여기서
R17은 H 또는 C1 - C18 알킬이고,
R18 및 R19는 독립적으로 H, C1 - C6 알킬, C1 - C6 카르복시알킬, C1 - C6 술포알킬, C1 - C6 카르복시알킬의 염, 또는 C1 - C6 술포알킬의 염이고, 알킬 부분은 임의로 아미노, 히드록시, 카르복실산, 카르복실산의 염, 또는 C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르에 의해 치환되거나; 또는 R18과 R19가 함께 피페리딘, 모르폴린, 피롤리딘 또는 피페라진인 포화 5- 또는 6원 헤테로사이클을 형성하고, 이들은 각각 임의로 메틸, 카르복실산, 카르복실산의 염, 또는 C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르에 의해 치환되거나; 또는
R18과 R4가 함께 또는 R19와 R5가 함께 또는 양자가 모두 하나 이상의 C1 - C6 알킬 또는 --CH2SO3X 잔기에 의해 임의로 치환된, 포화 또는 불포화의 5- 또는 6원 고리를 형성하고;
B는 O 또는 N+R18R19이고;
R12, R13, R15, 및 R16은 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, --SO3X, 카르복실산, 카르복실산의 염, CN, 니트로, 히드록시, 아지도, 아미노, 히드라지노; 또는 C1 - C18 알킬, C1 - C18 알콕시, C1 - C18 알킬티오, C1 - C18 알카노일아미노, C1 - C18 알킬아미노카르보닐, C2 - C36 디알킬아미노카르보닐, C1 - C18 알킬옥시카르보닐, 또는 C6 - C18 아릴카르복스아미도이고, 이들의 알킬 또는 아릴 부분은 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알콜의 카르복실산 에스테르, --SO3X, 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노 또는 알콕시에 의해 임의로 1회 이상 치환되고, 각각의 알킬 부분은 1-6개의 탄소를 가지거나; 또는 한 쌍의 인접한 치환기 R12와 R13 또는 R15와 R16은 함께 카르복실산, 또는 카르복실산의 염에 의해 임의로 추가로 치환된 융합 6원 방향족 고리를 형성하고;
R11은 H, 히드록시, CN 또는 C1 - C6 알콕시이거나; 또는 R11과 R12가 함께 H, F 또는 CH3에 의해 임의로 독립적으로 치환된 5- 또는 6원 스피로락톤 고리 또는 5- 또는 6원 스피로술톤 고리를 형성한다.
하나의 예시적 측면에서, R2, R3, R4, 및 R5 중 적어도 하나가 --SO3X인 화학식 III 및 IV의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R8과 R2가 함께 또는 R9와 R3이 함께 또는 R18과 R4가 함께 또는 R19와 R5가 함께 탄소 원자에서 하나 이상의 --CH2SO3X 잔기에 의해 치환된, 포화 또는 불포화의 5- 또는 6원 고리를 형성하는 것인, 화학식 III 및 IV의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R3 및 R4가 각각 --SO3X인 화학식 III 및 IV의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R12가 카르복실산, 카르복실산의 염, 또는 --SO3X이고; R11이 존재하지 않는 화학식 III 및 IV의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R12, R13, R15, 및 R16 중 적어도 3개가 F 또는 Cl인 화학식 III 및 IV의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, A가 NR8R9이고, B가 O이고, C가 OR17인 화학식 III 및 IV의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 측면에서, A가 NR8R9이고, B가 N+R18R19이고, C가 NR18R19인 화학식 III 및 IV의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R3 및 R4가 각각 --SO3X인 화학식 III 및 IV의 화합물이 기재되어 있다.
또 다른 예시적 측면에서, R8이 R2와 함께 하나 이상의 C1 - C6 알킬 또는 --CH2SO3X 잔기에 의해 임의로 치환된, 포화 또는 불포화의 5- 또는 6원 고리를 형성하고; R19가 R5와 함께 하나 이상의 C1 - C6 알킬 또는 --CH2SO3X 잔기에 의해 임의로 치환된, 포화 또는 불포화의 5- 또는 6원 고리를 형성하는 것인, 화학식 III 및 IV의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R9 및 R18이 독립적으로 H, C1 - C6 카르복시알킬, C1 - C6 카르복시알킬의 염, C1 - C6 술포알킬, 또는 C1 - C6 술포알킬의 염인 화학식 III 및 IV의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R8과 R2가 함께 또한 R19와 R5가 함께 각각 포화 5- 또는 6원 고리를 형성하고; R3 및 R4가 각각 --SO3X인 화학식 III 및 IV의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R8이 R2와 함께 --CH2SO3X에 의해 치환된, 포화 또는 불포화의 5- 또는 6원 고리를 형성하고; R19가 R5와 함께 탄소 원자에서 --CH2SO3X에 의해 치환된, 포화 또는 불포화의 5- 또는 6원 고리를 형성하는 것인, 화학식 III 및 IV의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R1, R2, R5, 및 R6이 H이고; R8, R9, R18, 및 R19가 H, C1 - C6 알킬, C1 - C6 카르복시알킬, C1 - C6 술포알킬, C1 - C6 카르복시알킬의 염, 또는 C1 - C6 술포알킬의 염인, 화학식 III 및 IV의 화합물이 기재되어 있다.
또 다른 예시적 실시양태에서, 하기 구조식 V 또는 VI을 갖는 형광-HAP 염색제 (화합물) 또는 그의 염이 기재되어 있다.
<구조식 V>
Figure pct00012
<구조식 VI>
Figure pct00013
식 중: Q는 Ak1 또는 Ar1이고,
RC, RD, Ar1, Z, Ak, Ak1, RA, 및 RB는 본원에 정의된 바와 같고,
R1 및 R6은 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, C1 - C18 알킬 또는 C1-C18 알콕시이고;
R2, R3, R4 및 R5는 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, CN; 또는 C1 - C18 알킬, C1 - C18 알콕시 또는 C1 - C18 알킬티오이고, 여기서, 알킬, 알콕시 또는 알킬티오는 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 술폰산, 술폰산의 염, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르 (여기서, R18은 C1 - C4 알킬임); 또는 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노, 또는 알콕시에 의해 추가로 치환되고, 이들의 알킬 부분은 독립적으로 1-6개의 탄소를 가지거나; 또는 R3 및 R4 중 어느 하나 또는 둘 모두는 --CH2N(CH2 COOR17)2이고, 여기서 R17은 H, 생물학적으로 적합한 반대이온, 1-6개의 탄소를 갖는 선형 또는 분지형 알킬, 또는 --CH2--O--(C=O)--R18이고;
A는 OR7 또는 NR8R9이며, 여기서
R7은 각각 독립적으로 H, C1 - C18 알킬, C1 - C18 아실 (여기서, 각각의 알킬 기는 독립적으로 1-6개의 탄소를 가지며 아미노, 히드록시, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르에 의해 임의로 치환됨); 또는 트리알킬실릴 (여기서, 각각의 알킬 기는 독립적으로 1-6개의 탄소를 가짐)이고;
R8 및 R9는 독립적으로 H, C1 - C6 알킬, C1 - C6 카르복시알킬, C1 - C6 술포알킬, C1 - C6 카르복시알킬의 염, C1 - C6 술포알킬의 염, 또는 C1 - C18 아실이며, 여기서 알킬 부분은 임의로 아미노, 히드록시, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르에 의해 치환되거나; 또는 R8과 R2가 함께 또는 R9와 R3이 함께 또는 양자가 모두 하나 이상의 메틸에 의해 임의로 치환된, 포화 5- 또는 6원 고리를 형성하거나; 또는 R8이 R9와 함께 피페리딘, 모르폴린, 피롤리딘 또는 피페라진인 포화 5- 또는 6원 헤테로사이클을 형성하고, 이들은 각각 임의로 메틸, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, 또는 --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르에 의해 치환되고;
R12, R13, R15 및 R16은 독립적으로 H, F, Cl, Br, I; 또는 술폰산, 술폰산의 염, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르, CN, 니트로, 히드록시, 아지도, 아미노, 히드라지노; 또는 C1 - C18 알킬, C1 - C18 알콕시, C1 - C18 알킬티오, C1 - C18 알킬아미노, C1 - C18 알킬에스테르, C1 - C18 알킬아미도 또는 C1 - C18 아릴아미도이고, 이들의 알킬 또는 아릴 부분은 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르, 술폰산, 술폰산의 염, 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노 또는 알콕시에 의해 1회 이상 임의로 치환되고, 각각의 알킬 부분은 1-6개의 탄소를 가지거나; 또는 한 쌍의 인접한 치환기 R12 및 R13 또는 R15 및 R16은 함께 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르에 의해 임의로 추가로 치환된 융합 6원 방향족 고리를 형성하고;
R11은 H, 히드록시, CN 또는 C1 - C6 알콕시이거나; 또는 R11과 R12가 함께 임의로 독립적으로 H, F 또는 CH3에 의해 치환된 5- 또는 6원 스피로락톤 고리 또는 5- 또는 6원 스피로술톤 고리를 형성한다.
하나의 예시적 측면에서, R1, R2, R3, R4, R5, 및 R6 중 적어도 하나가 F인 화학식 V 및 VI의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R12, R13, R15 및 R16 중 적어도 3개가 F인 화학식 V 및 VI의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R2, R3, R4 또는 R5 중 적어도 하나가 F인 화학식 V 및 VI의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R2 및 R5가 F인 화학식 V 및 VI의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R12, R13, R15, 또는 R16 중 적어도 하나가 F인 화학식 V 및 VI의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R12, R13, R15, 또는 R16 중 어느 것도 F가 아닌 화학식 V 및 VI의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R13, R15, 또는 R16 중 적어도 하나가 F인 화학식 V 및 VI의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R13, R15, 및 R16이 각각 F인 화학식 V 및 VI의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R1, R2, R3, R4, R5 또는 R6 중 어느 것도 F가 아닌 화학식 V 및 VI의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, A가 OR7인 화학식 V 및 VI의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R7이 각각 H인 화학식 V 및 VI의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R1, R2, R3, R4, R5 또는 R6 중 적어도 하나가 F이고; R11이 H인 화학식 V 및 VI의 화합물이 기재되어 있다.
또 다른 예시적 측면에서, R12, R13, R15 또는 R16 중 적어도 하나가 F이고; R11이 H인 화학식 V 및 VI의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R12가 카르복실산 또는 카르복실산의 염인 화학식 V 및 VI의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, A가 NR8R9인 화학식 V 및 VI의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R1 및 R6이 독립적으로 H 또는 F인 화학식 V 및 VI의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R12가 술폰산 또는 술폰산의 염인 화학식 V 및 VI의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, 치환기 R1, R2, R3, R4, R5, R6, R13, R14, R15 및 R16이 각각 F 또는 H이고 R1, R2, R3, R4, R5, R6, R13, R14, R15 및 R16 중 적어도 하나가 F인 화학식 V 및 VI의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R1 및 R6이 H이고 R2, R3, R4, R5가 독립적으로 H, F, Cl, Br 또는 I인 화학식 V 및 VI의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, A가 OR7이고, R3 및 R4 중 어느 하나 또는 둘 모두가 --CH2N(CH2COOR17)인 화학식 V 및 VI의 화합물이 기재되어 있다.
또 다른 예시적 실시양태에서, 하기 구조식 VII을 갖는 형광-HAP 염색제 (화합물) 또는 그의 염이 기재되어 있다.
<구조식 VII>
Figure pct00014
식 중: Q는 Ak1 또는 Ar1이고,
RC, RD, Ar1, Z, Ak, Ak1, RA, 및 RB는 본원에 정의된 바와 같고,
R1, R2, R3, R4, R5, 및 R6은 각각 독립적으로 H, 할로겐, 알킬, 시클로알킬, 아릴, 아릴알킬, 아실 또는 술포이다.
하나의 예시적 측면에서, R1, R2, R3, R4, R5, 및 R6이 각각 알킬인 화학식 VII의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R1 및 R3이 알킬인 화학식 VII의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R1 및 R2가 아릴인 화학식 VII의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R1, R2, R3, R4, R5, 및 R6이 각각 H인 화학식 VII의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R3 및 R5가 아릴인 화학식 VII의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R2 및 R6이 알킬인 화학식 VII의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R2 및 R6이 아릴인 화학식 VII의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R4가 아릴인 화학식 VII의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R1 및 R3이 시클로알킬인 화학식 VII의 화합물이 기재되어 있다.
또 다른 예시적 측면에서, R4가 아릴알킬인 화학식 VII의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R1 및 R3이 할로겐인 화학식 VII의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R1 및 R2가 아실인 화학식 VII의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R3 및 R5가 술포인 화학식 VII의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R2, R3, R5 및 R6이 H인 화학식 VII의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R2, R3, R5 및 R6이 알킬인 화학식 VII의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R3 및 R5가 아실인 화학식 VII의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R4가 아릴알킬인 화학식 VII의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R3 및 R5가 시클로알킬인 화학식 VII의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R2, R3, R5 및 R6이 H인 화학식 VII의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R2, R3, R5 및 R6이 아릴인 화학식 VII의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R3 및 R5가 할로겐인 화학식 VII의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R3, R4 및 R5가 아릴알킬인 화학식 VII의 화합물이 기재되어 있다.
또 다른 실시양태에서, 일반 화학식 III, V 및 VII을 각각 대표하는 하기 예시 화합물 5, 6 및 7, 및 이들의 염이 기재되어 있다.
Figure pct00015
상기 언급된 화합물의 예시 유도체는 본원에 기재된 화합물로부터 합성적으로 제조가능한 화합물 뿐만 아니라, 본원에 기재된 것과 유사한 방식으로 출발 물질의 선택만이 상이하게 하여 제조가능한 화합물을 둘다 비제한적으로 포함한다. 또한, 이러한 화합물의 유도체가 또한 다양한 방향족 고리의 상이한 위치에서 동일하거나 상이한 관능기를 갖는 화합물도 포함한다는 것이 이해되어야 한다. 마찬가지로, 유도체는 본원에 기재된 화합물의 다른 관능기, 예컨대 Q, RC, RD, Ar1, Z, Ak, Ak1, RA, 및 RB의 동시 변화도 포함한다.
또 다른 예시적 실시양태에서, 하기 구조식 VIII 또는 IX를 갖는 형광-HAP 염색제 (화합물) 또는 그의 염이 기재되어 있다.
<구조식 VIII>
Figure pct00016
<구조식 IX>
Figure pct00017
식 중: Q는 Ak1 또는 Ar1이고,
RC, RD, Ar1, Z, Ak, Ak1, RA, 및 RB는 본원에 정의된 바와 같고,
R4는 C1 - C22 알킬 또는 C7 - C22 아릴알킬이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 N, O 및 S으로 이루어진 군으로부터 선택된, 6개 이하의 헤테로 원자를 혼입하고, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복시, 술포, 포스페이트, 아미노, 술페이트, 포스포네이트, 시아노, 니트로, 아지도, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노, 또는 C3 - C18 트리알킬암모늄으로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 1회 이상 치환되고;
R2는 C1 - C22 알킬 또는 C7 - C22 아릴알킬이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 N, O 및 S으로 이루어진 군으로부터 선택된, 6개 이하의 헤테로 원자를 혼입하고, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복시, 술포, 포스페이트, 아미노, 술페이트, 포스포네이트, 시아노, 니트로, 아지도, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, C2 - C12 디알킬아미노, 또는 C3 - C18 트리알킬암모늄에 의해 1회 이상 치환되고;
R6은 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
R7은 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
R8은 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
R9는 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
R16은 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
R17은 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
R18은 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
R19는 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되거나; 또는
R6과 R7;
R7과 R8;
R8과 R9;
R16과 R17;
R17과 R18; 및
R18과 R19
로부터 독립적으로 선택된 구성원은 이들이 결합된 원자와 함께 --CH-- 또는 --CR1--을 포함하는 방향족 고리를 형성하며, 여기서 R1은 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이고, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 치환되고;
p는 1, 2 또는 3이고;
q는 0, 1, 2 또는 3이고;
R12는 C1 - C22 알킬 또는 C7 - C22 아릴알킬이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 N, O 및 S으로 이루어진 군으로부터 선택된, 6개 이하의 헤테로 원자를 혼입하고, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복시, 술포, 포스페이트, 아미노, 술페이트, 포스포네이트, 시아노, 니트로, 아지도, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, C2 - C12 디알킬아미노, 또는 C3 - C18 트리알킬암모늄에 의해 1회 이상 치환되고;
R13은 C1 - C22 알킬 또는 C7 - C22 아릴알킬이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 N, O 및 S으로 이루어진 군으로부터 선택된, 6개 이하의 헤테로 원자를 혼입하고, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복시, 술포, 포스페이트, 아미노, 술페이트, 포스포네이트, 시아노, 니트로, 아지도, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노, 또는 C3 - C18 트리알킬암모늄에 의해 1회 이상 치환되고;
R14는 C1 - C22 알킬 또는 C7 - C22 아릴알킬이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 N, O 및 S으로부터 선택된, 6개 이하의 헤테로 원자를 혼입하고, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복시, 술포, 포스페이트, 아미노, 술페이트, 포스포네이트, 시아노, 니트로, 아지도, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노, 또는 C3 - C18 트리알킬암모늄에 의해 1회 이상 치환되거나; 또는
R13과 R14는 함께 임의로 치환된, 5- 또는 6원의 포화 또는 불포화 고리를 완성하고; 여기서
술포는 술폰산 또는 술포네이트이다.
하나의 예시적 측면에서, R2가 술포알킬인 화학식 VIII 및 IX의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R12가 알킬인 화학식 VIII 및 IX의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R12가 에틸인 화학식 VIII 및 IX의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R4가 메틸인 화학식 VIII 및 IX의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R14가 메틸인 화학식 VIII 및 IX의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, 술포알킬 기가 각각 술포프로필 기인 화학식 VIII 및 IX의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R7 및 R17이 술포인 화학식 VIII 및 IX의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, n이 1인 화학식 VIII 및 IX의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, n이 2인 화학식 VIII 및 IX의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R16이 알킬인 화학식 VIII 및 IX의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R2가 알킬 또는 술포알킬인 화학식 VIII 및 IX의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R12가 알킬 또는 술포알킬인 화학식 VIII 및 IX의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R13이 술포알킬인 화학식 VIII 및 IX의 화합물이 기재되어 있다.
또 다른 예시적 측면에서, R4, R13 및 R14가 각각 메틸인 화학식 VIII 및 IX의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R7 및 R17이 각각 술포인 화학식 VIII 및 IX의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R2 및 R12가 독립적으로 메틸 또는 술포프로필인 화학식 VIII 및 IX의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R6, R8, R9, R16, R17 및 R18이 각각 H인 화학식 VIII 및 IX의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R6, R8, R9, R16, 및 R18이 각각 H인 화학식 VIII 및 IX의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R8, R9, R16, 및 R18이 각각 H인 화학식 VIII 및 IX의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R7이 술포인 화학식 VIII 및 IX의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R17이 할로겐인 화학식 VIII 및 IX의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R6과 R7이 이들이 결합된 원자와 함께 --CH-- 또는 --CR1--을 포함하는 방향족 고리를 형성하며, 여기서 R1은 술포인 화학식 VIII 및 IX의 화합물이 기재되어 있다.
또 다른 예시적 실시양태에서, 하기 구조식 X을 갖는 형광-HAP 염색제 (화합물) 또는 그의 염이 기재되어 있다.
<구조식 X>
Figure pct00018
식 중: Q는 Ak1 또는 Ar1이고,
RC, RD, Ar1, Z, Ak, Ak1, RA, 및 RB는 본원에 정의된 바와 같고,
R1, R2, R6, R41, R42, 및 R46은 독립적으로 수소, 시아노, 할로겐, 카르복실산, 술폰산 C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, 아릴, 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되며, 여기서 상기 알킬 또는 알콕시는 임의로 카르복실산, 술폰산, 또는 할로겐에 의해 치환되고 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 임의로 C1 - C6 알킬, C1 - C6 퍼플루오로알킬, 시아노, 할로겐, 아지도, 카르복실산, 술폰산, 또는 할로메틸에 의해 1회 이상 치환되거나; 또는
R1과 R2가 함께 또는 R41과 R42가 함께 또는 양자가 모두 임의로 1회 이상 술포네이트화된 융합 방향족 또는 헤테로방향족 고리를 형성하고;
R3, R4, R43, 및 R44는 독립적으로 수소, C1 - C6 알킬, 방향족 또는 헤테로방향족 고리로 이루어진 군으로부터 선택되며, 여기서 상기 알킬은 임의로 카르복실산, 술폰산, 아미노, 히드록시, 또는 할로겐에 의해 치환되고 상기 방향족 또는 헤테로방향족 고리는 임의로 C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 퍼플루오로알킬, 시아노, 할로겐, 카르복실산, 술폰산, 또는 할로메틸에 의해 1회 이상 치환되거나; 또는
R2와 R3, R42와 R43, 또는 R3과 R4, 또는 R43과 R44, 또는 이들의 임의의 조합은 5- 또는 6원 지환족 고리를 형성하고;
R5 및 R45는 독립적으로 수소, 메틸, 카르복시메틸, C2 - C6 알킬, 또는 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되고, 여기서 상기 알킬은 임의로 카르복실산, 술폰산, 아미노, 또는 할로겐에 의해 치환되고 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 임의로 C1 - C6 알킬, C1 - C6 퍼플루오로알킬, 시아노, 할로겐, 카르복실산, 술폰산, 또는 할로메틸에 의해 1회 이상 치환되거나; 또는
R4와 R5 또는 R5와 R6 또는 R44와 R45 또는 R45와 R46, 또는 이들의 임의의 조합은 5- 또는 6원 지환족 고리를 형성하고;
E, E', X' 및 X는 O, S, 또는 NR8이나, 단 E와 X 또는 E'와 X'가 둘다 존재하지는 않으며; 여기서
R8은 독립적으로 수소, 메틸, 카르복시메틸, C2 - C6 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되며, 여기서 상기 알킬은 임의로 카르복실산, 술폰산, 아미노, 또는 할로겐에 의해 치환되고;
R30, R31, R33 및 R34는 독립적으로 수소, F, Cl, Br, I, 술폰산, 카르복실산, CN, 니트로, 히드록시, 아지도, 아미노, 히드라지노, 또는 C1 - C18 알킬, C1 - C18 알콕시, C1 - C18 알킬티오, C1 - C18 알카노일아미노, C1 - C18 알킬아미노카르보닐, C2 - C36 디알킬아미노카르보닐, C1 - C18 알킬옥시카르보닐, 또는 C7 - C18 아릴카르복스아미도로 이루어진 군으로부터 선택되며, 여기서 상기 R30, R31, R33 및 R34의 상기 알킬 또는 아릴 부분은 임의로 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복실산, C1 - C6 알콜의 카르복실산 에스테르, 술폰산, 아미노, C1 - C6 알킬아미노, C1 - C6 디알킬아미노 및 C2 - C6 알콕시로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 1회 이상 치환되거나; 또는 한 쌍의 인접한 R30과 R31 또는 R33과 R34 치환기는 함께 임의로 카르복실산에 의해 추가로 치환된 융합 6원 방향족 고리를 형성한다.
하나의 예시적 측면에서, R3, R4, R43, 및 R44가 각각 메틸인 화학식 X의 화합물이 기재된다. 또 다른 예시적 측면에서, R1 및 R41이 각각 독립적으로 H 또는 술폰산인 화학식 X의 화합물이 기재된다. 또 다른 예시적 측면에서, R6 및 R46이 H인 화학식 X의 화합물이 기재된다. 또 다른 예시적 측면에서, 술폰산에 의해 1회 이상 치환된 화학식 X의 화합물이 기재된다. 또 다른 예시적 측면에서, R3, R4, R5, R43, R44, 및 R45가 독립적으로 메틸 또는 에틸인 화학식 X의 화합물이 기재된다. 또 다른 예시적 측면에서, R30이 술폰산 또는 카르복실산인 화학식 X의 화합물이 기재된다. 또 다른 예시적 측면에서, R32 및 R33 중 어느 하나가 H, F, 또는 Cl인 화학식 X의 화합물이 기재된다. 또 다른 예시적 측면에서, X 및 X'가 둘다 S인 화학식 X의 화합물이 기재된다.
또 다른 예시적 실시양태에서, 하기 구조식 XI을 갖는 형광-HAP 염색제 (화합물) 또는 그의 염이 기재되어 있다.
<구조식 XI>
Figure pct00019
식 중: Q는 Ak1 또는 Ar1이고,
RC, RD, Ar1, Z, Ak, Ak1, RA, 및 RB는 본원에 정의된 바와 같고,
R4는 H, OH, CN, C1-C18 알킬, C1-C18 퍼플루오로알킬, 술포메틸, 술포메틸의 생물학적으로 적합한 염, 할로메틸, 또는 아릴이고;
R5는 H 또는 C1-C6 알콕시이고;
R6은 H, 메틸, 할로겐, 또는 SO3X이고;
R7은 H 또는 NR1R2이며; 여기서
R1 및 R2는 독립적으로 H, C1 - C18 알킬, C6 - C18 아릴, C1 - C18 알카노일, C7 - C18 아릴알카노일이거나; 또는
R1은 R2와 함께 피페리딘, 모르폴린, 피롤리딘 또는 피페라진인 포화 5- 또는 6원 헤테로사이클을 형성하거나; 또는
R1은 화학식
Figure pct00020
의 2-니트로벤질옥시카르보닐이며; 여기서
R9 및 R10은 H, C1 - C6 알콕시이거나, 또는 R9와 R10은 함께 --O--CH2--O--이고; R11은 H, CH3, 카르복실산 또는 카르복실산의 생물학적으로 적합한 염이고;
R8은 H, 할로겐, SO3X, C1-C6 알콕시 또는 C1-C6 알킬이고;
X는 H, 또는 생물학적으로 적합한 양이온이다.
하나의 예시적 측면에서, R3, R6 또는 R8 중 적어도 하나가 SO3X인 화학식 XI의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R4가 술포메틸, 할로메틸, C1 - C18 알킬 또는 C1 - C18 퍼플루오로알킬인 화학식 XI의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R7이 NR1R2이며, R1 및 R2가 독립적으로 H 또는 C1 - C18 알킬인 화학식 XI의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R7이 NR1R2이며, 여기서 R2는 H이고 R1은 화학식
Figure pct00021
의 2-니트로벤질옥시카르보닐이고, 여기서 R9 및 R10은 H, C1 - C6 알콕시이거나, 또는 R9와 R10이 함께 --O--CH2--O-이고; R11은 H, CH3, 카르복실산 또는 카르복실산의 생물학적으로 적합한 염인 화학식 XI의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R4가 CH3인 화학식 XI의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R7이 NH2인 화학식 XI의 화합물이 기재되어 있다. 또 다른 예시적 측면에서, R8이 H인 화학식 XI의 화합물이 기재되어 있다.
또 다른 실시양태에서, Q가 Ar1인 상기 실시양태 중 어느 하나의 화합물, 조성물, 방법 또는 키트가 기재되어 있다.
본 발명의 다수의 예시적 실시양태가 하기 항목으로 기재된다.
1. 하기 화학식 I을 갖는 화합물 또는 그의 염.
<화학식 I>
Figure pct00022
식 중:
Q는 Ar1 또는 Ak1이고;
Ar1은 아릴 또는 헤테로아릴이고;
RC는 수소이고;
Ak 및 Ak1은 독립적으로 C1-C6 알킬렌이고;
Z는
Figure pct00023
또는
Figure pct00024
이며, 여기서
n은 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6이고; y는 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12이고; z는 1, 2, 3, 또는 4이고; R은 H 또는 알킬이고;
RD는 알킬, 헤테로알킬, 알케닐, 및 알키닐로 이루어진 군으로부터 선택되며, 이들은 각각 임의로 치환되고;
RE는 형광단이고;
Y는 O, S, 또는 HN이고;
RA는 독립적으로 각각의 경우에, 할로이거나 또는 알킬, 헤테로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아미노 및 그의 유도체, 및 히드록실 및 그의 유도체로 이루어진 군으로부터 선택된 0 내지 3개의 치환기를 나타내며, 이들은 각각 임의로 치환되고;
RB는 독립적으로 각각의 경우에, 할로겐이거나 또는 알킬, 헤테로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아미노 및 그의 유도체, 및 히드록실 및 그의 유도체로 이루어진 군으로부터 선택된 0 내지 3개의 치환기를 나타내며, 이들은 각각 임의로 치환된다.
2. 제1항에 있어서, RA가 2-클로로-4-플루오로를 나타내는 것인 화합물.
3. 제1항 또는 제2항에 있어서, Q가 Ar1이며, 여기서 Ar1은 2-티아졸릴, 2-티에닐, 2-푸라닐, 2-(1-메틸)이미다졸릴, 2-피리미디닐, 2-나프틸, 2-피롤리디닐, 페닐, 2-피리딜, 3-피리딜, 또는 4-피리딜인 화합물.
3.1. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, Q가 Ar1이며, 여기서 Ar1은 페닐, 2-피리딜, 3-피리딜, 또는 4-피리딜인 화합물.
3.2. 제1항 내지 제3.1항 중 어느 한 항에 있어서, Q가 Ar1이며, 여기서 Ar1은 2-피리딜인 화합물.
3.3. 제1항 내지 제3.2항 중 어느 한 항에 있어서, Q가 Ak1이며, 여기서 Ak1은 C1-C4, 또는 C1-C3, 또는 C1-C2 알킬렌인 화합물.
3.4. 제1항 내지 제3.3항 중 어느 한 항에 있어서, Q가 Ak1이며, 여기서 Ak1은 CH2인 화합물.
4. 제1항 내지 제3.4항 중 어느 한 항에 있어서, Q가 Ar1이고 RB가 존재하지 않는 화합물.
5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, Y가 O인 화합물.
6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, RD가 메틸인 화합물.
7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, RE가
Figure pct00025
또는
Figure pct00026
인 화합물.
식 중,
R2, R3, R4 및 R5는 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, CN; 또는 C1 - C18 알킬, 또는 C1 - C18 알콕시 (여기서, 알킬 또는 알콕시는 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 카르복실산, 카르복실산의 염, 또는 C1 - C6 알콜의 카르복실산 에스테르에 의해 추가로 치환됨); 또는 --SO3X (여기서, X는 H 또는 반대이온임)이고;
R1 및 R6은 H이거나; 또는 R1과 R2가 함께 또는 R5와 R6이 함께 또는 양자가 모두 --SO3X에 의해 임의로 1회 이상 치환된 융합 방향족 6원 고리를 형성하고;
A는 NR8R9이며; 여기서 R8 및 R9는 독립적으로 H, C1 - C6 알킬, C1 - C6 카르복시알킬, C1 - C6 술포알킬, C1 - C6 카르복시알킬의 염, 또는 C1 - C6 술포알킬의 염이고, 알킬 부분은 임의로 아미노, 히드록시, 카르복실산, 카르복실산의 염, 또는 C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르에 의해 치환되거나; 또는 R8과 R9가 함께 피페리딘, 모르폴린, 피롤리딘 또는 피페라진인 포화 5- 또는 6원 헤테로사이클을 형성하며, 이들은 각각 임의로 메틸, 카르복실산, 카르복실산의 염, 또는 C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르에 의해 치환되거나; 또는
R8과 R2가 함께 또는 R9와 R3이 함께 또는 양자가 모두 하나 이상의 C1 - C6 알킬 또는 --CH2SO3X 잔기에 의해 임의로 치환된, 포화 또는 불포화의 5- 또는 6원 고리를 형성하고;
C는 OR17 또는 NR18R19이며, 여기서
R17은 H 또는 C1 - C18 알킬이고,
R18 및 R19는 독립적으로 H, C1 - C6 알킬, C1 - C6 카르복시알킬, C1 - C6 술포알킬, C1 - C6 카르복시알킬의 염, 또는 C1 - C6 술포알킬의 염이고, 알킬 부분은 임의로 아미노, 히드록시, 카르복실산, 카르복실산의 염, 또는 C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르에 의해 치환되거나; 또는 R18과 R19가 함께 피페리딘, 모르폴린, 피롤리딘 또는 피페라진인 포화 5- 또는 6원 헤테로사이클을 형성하고, 이들은 각각 임의로 메틸, 카르복실산, 카르복실산의 염, 또는 C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르에 의해 치환되거나; 또는
R18과 R4가 함께 또는 R19와 R5가 함께 또는 양자가 모두 하나 이상의 C1 - C6 알킬 또는 --CH2SO3X 잔기에 의해 임의로 치환된, 포화 또는 불포화의 5- 또는 6원 고리를 형성하고;
B는 O 또는 N+R18R19이고;
R12, R13, R15, 및 R16은 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, --SO3X, 카르복실산, 카르복실산의 염, CN, 니트로, 히드록시, 아지도, 아미노, 히드라지노; 또는 C1 - C18 알킬, C1 - C18 알콕시, C1 - C18 알킬티오, C1 - C18 알카노일아미노, C1 - C18 알킬아미노카르보닐, C2 - C36 디알킬아미노카르보닐, C1 - C18 알킬옥시카르보닐, 또는 C6 - C18 아릴카르복스아미도이고, 이들의 알킬 또는 아릴 부분은 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알콜의 카르복실산 에스테르, --SO3X, 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노 또는 알콕시에 의해 임의로 1회 이상 치환되고, 각각의 알킬 부분은 1-6개의 탄소를 가지거나; 또는 한 쌍의 인접한 치환기 R12와 R13 또는 R15와 R16은 함께 카르복실산, 또는 카르복실산의 염에 의해 임의로 추가로 치환된 융합 6원 방향족 고리를 형성하고;
R11은 H, 히드록시, CN 또는 C1 - C6 알콕시이거나; 또는 R11과 R12가 함께 H, F 또는 CH3에 의해 임의로 독립적으로 치환된 5- 또는 6원 스피로락톤 고리 또는 5- 또는 6원 스피로술톤 고리를 형성한다.
8. 제1항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물 또는 그의 염.
Figure pct00027
9. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, RE가
Figure pct00028
또는
Figure pct00029
인 화합물.
식 중,
R1 및 R6은 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, C1 - C18 알킬 또는 C1-C18 알콕시이고;
R2, R3, R4 및 R5는 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, CN; 또는 C1 - C18 알킬, C1 - C18 알콕시 또는 C1 - C18 알킬티오이고, 여기서 알킬, 알콕시 또는 알킬티오는 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 술폰산, 술폰산의 염, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르 (여기서, R18은 C1 - C4 알킬임); 또는 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노, 또는 알콕시에 의해 추가로 치환되고, 이들의 알킬 부분은 독립적으로 1-6개의 탄소를 가지거나; 또는 R3 및 R4 중 어느 하나 또는 둘 모두는 --CH2N(CH2 COOR17)2이고, 여기서 R17은 H, 생물학적으로 적합한 반대이온, 1-6개의 탄소를 갖는 선형 또는 분지형 알킬, 또는 --CH2--O--(C=O)--R18이고;
A는 OR7 또는 NR8R9이며, 여기서
R7은 각각 독립적으로 H, C1 - C18 알킬, C1 - C18 아실 (여기서, 각각의 알킬 기는 독립적으로 1-6개의 탄소를 가지며 아미노, 히드록시, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르에 의해 임의로 치환됨); 또는 트리알킬실릴 (여기서, 각각의 알킬 기는 독립적으로 1-6개의 탄소를 가짐)이고;
R8 및 R9는 독립적으로 H, C1 - C6 알킬, C1 - C6 카르복시알킬, C1 - C6 술포알킬, C1 - C6 카르복시알킬의 염, C1 - C6 술포알킬의 염, 또는 C1 - C18 아실이며, 여기서 알킬 부분은 임의로 아미노, 히드록시, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르에 의해 치환되거나; 또는 R8과 R2가 함께 또는 R9와 R3이 함께 또는 양자가 모두 하나 이상의 메틸에 의해 임의로 치환된, 포화 5- 또는 6원 고리를 형성하거나; 또는 R8이 R9와 함께 피페리딘, 모르폴린, 피롤리딘 또는 피페라진인 포화 5- 또는 6원 헤테로사이클을 형성하고, 이들은 각각 임의로 메틸, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, 또는 --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르에 의해 치환되고;
R12, R13, R15 및 R16은 독립적으로 H, F, Cl, Br, I; 또는 술폰산, 술폰산의 염, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르, CN, 니트로, 히드록시, 아지도, 아미노, 히드라지노; 또는 C1 - C18 알킬, C1 - C18 알콕시, C1 - C18 알킬티오, C1 - C18 알킬아미노, C1 - C18 알킬에스테르, C1 - C18 알킬아미도 또는 C1 - C18 아릴아미도이고, 이들의 알킬 또는 아릴 부분은 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르, 술폰산, 술폰산의 염, 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노 또는 알콕시에 의해 1회 이상 임의로 치환되고, 각각의 알킬 부분은 1-6개의 탄소를 가지거나; 또는 한 쌍의 인접한 치환기 R12와 R13 또는 R15와 R16은 함께 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르에 의해 임의로 추가로 치환된 융합 6원 방향족 고리를 형성하고;
R11은 H, 히드록시, CN 또는 C1 - C6 알콕시이거나; 또는 R11과 R12가 함께 임의로 독립적으로 H, F 또는 CH3에 의해 치환된 5- 또는 6원 스피로락톤 고리 또는 5- 또는 6원 스피로술톤 고리를 형성한다.
10. 제1항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물 또는 그의 염.
Figure pct00030
11. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, RE가
Figure pct00031
인 화합물.
식 중,
R1, R2, R3, R4, R5, 및 R6은 각각 독립적으로 H, 할로겐, 알킬, 시클로알킬, 아릴, 아릴알킬, 아실 또는 술포이다.
12. 제1항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물 또는 그의 염.
Figure pct00032
13. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, RE가
Figure pct00033
또는
Figure pct00034
인 화합물.
식 중,
R4는 C1 - C22 알킬 또는 C7 - C22 아릴알킬이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 N, O 및 S으로 이루어진 군으로부터 선택된, 6개 이하의 헤테로 원자를 혼입하고, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복시, 술포, 포스페이트, 아미노, 술페이트, 포스포네이트, 시아노, 니트로, 아지도, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노, 또는 C3 - C18 트리알킬암모늄으로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 1회 이상 치환되고;
R2는 C1 - C22 알킬 또는 C7 - C22 아릴알킬이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 N, O 및 S으로 이루어진 군으로부터 선택된, 6개 이하의 헤테로 원자를 혼입하고, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복시, 술포, 포스페이트, 아미노, 술페이트, 포스포네이트, 시아노, 니트로, 아지도, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, C2 - C12 디알킬아미노, 또는 C3 - C18 트리알킬암모늄에 의해 1회 이상 치환되고;
R6은 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
R7은 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
R8은 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
R9는 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
R16은 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
R17은 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
R18은 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
R19는 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되거나; 또는
R6과 R7;
R7과 R8;
R8과 R9;
R16과 R17;
R17과 R18; 및
R18과 R19
로부터 독립적으로 선택된 구성원은 이들이 결합된 원자와 함께 --CH-- 또는 --CR1--을 포함하는 방향족 고리를 형성하며, 여기서 R1은 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이고, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 치환되고;
p는 1, 2 또는 3이고;
q는 0, 1, 2 또는 3이고;
R12는 C1 - C22 알킬 또는 C7 - C22 아릴알킬이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 N, O 및 S으로 이루어진 군으로부터 선택된, 6개 이하의 헤테로 원자를 혼입하고, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복시, 술포, 포스페이트, 아미노, 술페이트, 포스포네이트, 시아노, 니트로, 아지도, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, C2 - C12 디알킬아미노, 또는 C3 - C18 트리알킬암모늄에 의해 1회 이상 치환되고;
R13은 C1 - C22 알킬 또는 C7 - C22 아릴알킬이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 N, O 및 S으로 이루어진 군으로부터 선택된, 6개 이하의 헤테로 원자를 혼입하고, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복시, 술포, 포스페이트, 아미노, 술페이트, 포스포네이트, 시아노, 니트로, 아지도, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노, 또는 C3 - C18 트리알킬암모늄에 의해 1회 이상 치환되고;
R14는 C1 - C22 알킬 또는 C7 - C22 아릴알킬이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 N, O 및 S으로부터 선택된, 6개 이하의 헤테로 원자를 혼입하고, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복시, 술포, 포스페이트, 아미노, 술페이트, 포스포네이트, 시아노, 니트로, 아지도, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노, 또는 C3 - C18 트리알킬암모늄에 의해 1회 이상 치환되거나; 또는
R13과 R14는 함께 임의로 치환된, 5- 또는 6원의 포화 또는 불포화 고리를 완성하고; 여기서
술포는 술폰산 또는 술포네이트이다.
14. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, RE가
Figure pct00035
인 화합물.
식 중,
R1, R2, R6, R41, R42, 및 R46은 독립적으로 수소, 시아노, 할로겐, 카르복실산, 술폰산 C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, 아릴, 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되며, 여기서 상기 알킬 또는 알콕시는 임의로 카르복실산, 술폰산, 또는 할로겐에 의해 치환되고 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 임의로 C1 - C6 알킬, C1 - C6 퍼플루오로알킬, 시아노, 할로겐, 아지도, 카르복실산, 술폰산, 또는 할로메틸에 의해 1회 이상 치환되거나; 또는
R1과 R2가 함께 또는 R41과 R42가 함께 또는 양자가 모두 임의로 1회 이상 술포네이트화된 융합 방향족 또는 헤테로방향족 고리를 형성하고;
R3, R4, R43, 및 R44는 독립적으로 수소, C1 - C6 알킬, 방향족 또는 헤테로방향족 고리로 이루어진 군으로부터 선택되며, 여기서 상기 알킬은 임의로 카르복실산, 술폰산, 아미노, 히드록시, 또는 할로겐에 의해 치환되고 상기 방향족 또는 헤테로방향족 고리는 임의로 C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 퍼플루오로알킬, 시아노, 할로겐, 카르복실산, 술폰산, 또는 할로메틸에 의해 1회 이상 치환되거나; 또는
R2와 R3, R42와 R43, 또는 R3과 R4, 또는 R43과 R44, 또는 이들의 임의의 조합은 5- 또는 6원 지환족 고리를 형성하고;
R5 및 R45는 독립적으로 수소, 메틸, 카르복시메틸, C2 - C6 알킬, 또는 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되고, 여기서 상기 알킬은 임의로 카르복실산, 술폰산, 아미노, 또는 할로겐에 의해 치환되고 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 임의로 C1 - C6 알킬, C1 - C6 퍼플루오로알킬, 시아노, 할로겐, 카르복실산, 술폰산, 또는 할로메틸에 의해 1회 이상 치환되거나; 또는
R4와 R5 또는 R5와 R6 또는 R44와 R45 또는 R45와 R46, 또는 이들의 임의의 조합은 5- 또는 6원 지환족 고리를 형성하고;
E, E', X' 및 X는 O, S, 또는 NR8이나, 단 E와 X 또는 E'와 X'가 둘다 존재하지는 않으며; 여기서
R8은 독립적으로 수소, 메틸, 카르복시메틸, C2 - C6 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되며, 여기서 상기 알킬은 임의로 카르복실산, 술폰산, 아미노, 또는 할로겐에 의해 치환되고;
R30, R31, R33 및 R34는 독립적으로 수소, F, Cl, Br, I, 술폰산, 카르복실산, CN, 니트로, 히드록시, 아지도, 아미노, 히드라지노, 또는 C1 - C18 알킬, C1 - C18 알콕시, C1 - C18 알킬티오, C1 - C18 알카노일아미노, C1 - C18 알킬아미노카르보닐, C2 - C36 디알킬아미노카르보닐, C1 - C18 알킬옥시카르보닐, 또는 C7 - C18 아릴카르복스아미도로 이루어진 군으로부터 선택되며, 여기서 상기 R30, R31, R33 및 R34의 상기 알킬 또는 아릴 부분은 임의로 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복실산, C1 - C6 알콜의 카르복실산 에스테르, 술폰산, 아미노, C1 - C6 알킬아미노, C1 - C6 디알킬아미노 및 C2 - C6 알콕시로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 1회 이상 치환되거나; 또는 한 쌍의 인접한 R30과 R31 또는 R33과 R34 치환기는 함께 임의로 카르복실산에 의해 추가로 치환된 융합 6원 방향족 고리를 형성한다.
15. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, RE가
Figure pct00036
인 화합물.
식 중,
R4는 H, OH, CN, C1-C18 알킬, C1-C18 퍼플루오로알킬, 술포메틸, 술포메틸의 생물학적으로 적합한 염, 할로메틸, 또는 아릴이고;
R5는 H 또는 C1-C6 알콕시이고;
R6은 H, 메틸, 할로겐, 또는 SO3X이고;
R7은 H 또는 NR1R2이며; 여기서
R1 및 R2는 독립적으로 H, C1 - C18 알킬, C6 - C18 아릴, C1 - C18 알카노일, C7 - C18 아릴알카노일이거나; 또는
R1은 R2와 함께 피페리딘, 모르폴린, 피롤리딘 또는 피페라진인 포화 5- 또는 6원 헤테로사이클을 형성하거나; 또는
R1은 화학식
Figure pct00037
의 2-니트로벤질옥시카르보닐이며; 여기서
R9 및 R10은 H, C1 - C6 알콕시이거나, 또는 R9와 R10은 함께 --O--CH2--O--이고; R11은 H, CH3, 카르복실산 또는 카르복실산의 생물학적으로 적합한 염이고;
R8은 H, 할로겐, SO3X, C1-C6 알콕시 또는 C1-C6 알킬이고;
X는 H, 또는 생물학적으로 적합한 양이온이다.
16. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항의 하나 이상의 화합물을, HBV를 진단, 검출, 추적하고/거나 그와 경쟁적으로 결합하는 유효량으로 포함하는 조성물.
17. 제16항에 있어서, 하나 이상의 담체, 희석제 또는 부형제, 또는 이들의 조합을 추가로 포함하는 조성물.
18. a) 세포 및 HBV를 진단, 검출 및/또는 추적하는 유효량의 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항의 하나 이상의 화합물 또는 제16항 또는 제17항의 조성물의 혼합물을 인큐베이션하고;
b) 상기 하나 이상의 화합물의 임의의 초과량을 세척 제거하고;
c) 형광 신호를 도출하기 위한 자극을 혼합물에 제공하고;
d) 자극된 혼합물을 분석하는 단계
를 포함하는, 세포 및 조직에서 HBV를 검출, 진단, 및/또는 추적하는 방법.
19. 제18항에 있어서, 세포가 조직 배양물, 채취한 직후의 생검체, 고정된 박편, 또는 다른 공급원으로부터의 세포인 방법.
20. 제18항 또는 제19항에 있어서, 분석이 벌크 형광의 검사, 개별 세포의 형광 현미경 검사, 세포 분취기, 또는 또 다른 메카니즘에 의해 수행되는 것인 방법.
21. a) 정화된 혈청, 성장 배지, 또는 검사하려는 다른 액체 및 HBV를 진단, 검출 및/또는 추적하는 유효량의 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항의 하나 이상의 화합물 또는 제16항 또는 제17항의 조성물을 포함하는 용액을 인큐베이션하고;
b) 필요에 따라, e-항원 조합체를 검출하기 위해 이온 강도를 조정하여 상기 조합체를 유도하고;
c) 결합되지 않은 상기 하나 이상의 화합물을 HBV 코어에 결합된 상기 하나 이상의 화합물로부터 분리하여 결합되지 않은 상 및 결합된 상을 각각 형성하고;
d) 결합되지 않은 상 및 결합된 상과 관련된 형광을 분석하는 단계
를 포함하는, 용액 중의 HBV 코어를 검출, 진단 및/또는 추적하는 방법.
22. 제21항에 있어서, 결합되지 않은 화합물을 HBV 코어에 결합된 화합물로부터 분리하는 것이 겔 투과 크로마토그래피, 한외여과, 원심분리, 또는 다른 기술에 의해 수행되는 것인 방법.
23. a) 항-HBV 신약 후보자, 예비-조합된 HBV 코어 및 HBV의 HAP 포켓과의 항-HBV 신약 후보자에 의한 경쟁적 결합을 검출하는 유효량의 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항의 하나 이상의 화합물 또는 제16항 또는 제17항의 조성물의 혼합물을 인큐베이션하고;
b) 상기 하나 이상의 화합물의 형광 변화를 측정하고;
c) HBV의 HAP 포켓과의 항-HBV 신약 후보자에 의한 경쟁적 결합에 대하여 혼합물을 분석하는 단계
를 포함하는, 항-HBV 신약 개발을 수행하는 방법.
24. a) 항-HBV 신약 후보자, 예비-조합된 HBV 코어 및 HBV의 HAP 포켓과의 항-HBV 신약 후보자에 의한 경쟁적 결합을 검출하는 유효량의 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항의 하나 이상의 화합물 또는 제16항 또는 제17항의 조성물의 혼합물을 인큐베이션하고;
b) 결합되지 않은 상기 항-HBV 신약 후보자 및 결합되지 않은 상기 하나 이상의 화합물을 HBV 코어와 결합된 상기 항-HBV 신약 후보자 및 상기 하나 이상의 화합물로부터 분리하여 결합되지 않은 상 및 결합된 상을 각각 형성하고;
c) 결합되지 않은 상 및 결합된 상과 관련된 형광을 측정하고;
d) HBV의 HAP 포켓과의 항-HBV 신약 후보자에 의한 경쟁적 결합에 대하여 혼합물을 분석하는 단계
를 포함하는, 항-HBV 신약 개발을 수행하는 방법.
25. 제24항에 있어서, 결합되지 않은 화합물을 HBV 코어에 결합된 화합물로부터 분리하는 것이 겔 투과 크로마토그래피, 한외여과, 원심분리, 또는 다른 기술에 의해 수행되는 것인 방법.
26. a) 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항의 하나 이상의 화합물 또는 제16항 또는 제17항의 조성물; 및
b) 용매
를 포함하는, HBV를 검출, 진단 및/또는 추적하고/거나 HBV의 HAP 포켓과 경쟁적으로 결합하는 화합물을 동정하는 키트.
27. (a) 하기 구조식 II 또는 II' 또는 II"의 화합물을 적합하게 활성화된 형광단과 반응시키는 것을 포함하는, 하기 구조식 I을 갖는 화합물 또는 그의 염을 제조하는 방법.
<구조식 I>
Figure pct00038
<구조식 II>
Figure pct00039
<구조식 II'>
Figure pct00040
<구조식 II">
Figure pct00041
식 중:
Q, RC, RD, Ar1, Z, Ak, Ak1, R, RA, RB, n, y 및 z는 제1항에서 정의된 바와 같다.
28. 제27항에 있어서, 적합하게 활성화된 형광단이
Figure pct00042
또는
Figure pct00043
인 방법.
식 중,
R2, R3, R4 및 R5는 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, CN; 또는 C1 - C18 알킬, 또는 C1 - C18 알콕시 (여기서, 알킬 또는 알콕시는 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 카르복실산, 카르복실산의 염, 또는 C1 - C6 알콜의 카르복실산 에스테르에 의해 추가로 치환됨); 또는 --SO3X (여기서, X는 H 또는 반대이온임)이고;
R1 및 R6은 H이거나; 또는 R1과 R2가 함께 또는 R5와 R6이 함께 또는 양자가 모두 --SO3X에 의해 임의로 1회 이상 치환된 융합 방향족 6원 고리를 형성하고;
A는 NR8R9이며; 여기서
R8 및 R9는 독립적으로 H, C1 - C6 알킬, C1 - C6 카르복시알킬, C1 - C6 술포알킬, C1 - C6 카르복시알킬의 염, 또는 C1 - C6 술포알킬의 염이고, 알킬 부분은 임의로 아미노, 히드록시, 카르복실산, 카르복실산의 염, 또는 C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르에 의해 치환되거나; 또는 R8과 R9가 함께 피페리딘, 모르폴린, 피롤리딘 또는 피페라진인 포화 5- 또는 6원 헤테로사이클을 형성하며, 이들은 각각 임의로 메틸, 카르복실산, 카르복실산의 염, 또는 C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르에 의해 치환되거나; 또는
R8과 R2가 함께 또는 R9와 R3이 함께 또는 양자가 모두 하나 이상의 C1 - C6 알킬 또는 --CH2SO3X 잔기에 의해 임의로 치환된, 포화 또는 불포화의 5- 또는 6원 고리를 형성하고;
C는 OR17 또는 NR18R19이며, 여기서 R17은 H 또는 C1 - C18 알킬이고;
R18 및 R19는 독립적으로 H, C1 - C6 알킬, C1 - C6 카르복시알킬, C1 - C6 술포알킬, C1 - C6 카르복시알킬의 염, 또는 C1 - C6 술포알킬의 염이고, 알킬 부분은 임의로 아미노, 히드록시, 카르복실산, 카르복실산의 염, 또는 C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르에 의해 치환되거나; 또는 R18과 R19가 함께 피페리딘, 모르폴린, 피롤리딘 또는 피페라진인 포화 5- 또는 6원 헤테로사이클을 형성하고, 이들은 각각 임의로 메틸, 카르복실산, 카르복실산의 염, 또는 C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르에 의해 치환되거나; 또는
R18과 R4가 함께 또는 R19와 R5가 함께 또는 양자가 모두 하나 이상의 C1 - C6 알킬 또는 --CH2SO3X 잔기에 의해 임의로 치환된, 포화 또는 불포화의 5- 또는 6원 고리를 형성하고;
B는 O 또는 N+R18R19이고;
R12, R13, R15, 및 R16은 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, --SO3X, 카르복실산, 카르복실산의 염, CN, 니트로, 히드록시, 아지도, 아미노, 히드라지노; 또는 C1 - C18 알킬, C1 - C18 알콕시, C1 - C18 알킬티오, C1 - C18 알카노일아미노, C1 - C18 알킬아미노카르보닐, C2 - C36 디알킬아미노카르보닐, C1 - C18 알킬옥시카르보닐, 또는 C6 - C18 아릴카르복스아미도이고, 이들의 알킬 또는 아릴 부분은 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알콜의 카르복실산 에스테르, --SO3X, 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노 또는 알콕시에 의해 임의로 1회 이상 치환되고, 각각의 알킬 부분은 1-6개의 탄소를 가지거나; 또는 한 쌍의 인접한 치환기 R12와 R13 또는 R15와 R16은 함께 카르복실산, 또는 카르복실산의 염에 의해 임의로 추가로 치환된 융합 6원 방향족 고리를 형성하고;
R11은 H, 히드록시, CN 또는 C1 - C6 알콕시이거나; 또는 R11과 R12가 함께 H, F 또는 CH3에 의해 임의로 독립적으로 치환된 5- 또는 6원 스피로락톤 고리 또는 5- 또는 6원 스피로술톤 고리를 형성하고;
Rx는 카르복실산의 활성화된 에스테르, 아실 아지드, 알데히드, 알킬 할라이드, 무수물, 술포닐 할라이드, 말레미드, 이소시아네이트, 및 이소티오시아네이트로 이루어진 군으로부터 선택된 반응기이다.
29. 제28항에 있어서, 반응기 Rx가 카르복실산의 활성화된 에스테르인 방법.
30. 제29항에 있어서, 활성화된 에스테르가 테트라플루오로페닐 에스테르인 방법.
31. 제27항에 있어서, 적합하게 활성화된 형광단이
Figure pct00044
또는
Figure pct00045
인 방법.
식 중,
R1 및 R6은 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, C1 - C18 알킬 또는 C1-C18 알콕시이고;
R2, R3, R4 및 R5는 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, CN; 또는 C1 - C18 알킬, C1 - C18 알콕시 또는 C1 - C18 알킬티오이고, 여기서, 알킬, 알콕시 또는 알킬티오는 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 술폰산, 술폰산의 염, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르 (여기서, R18은 C1 - C4 알킬임); 또는 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노, 또는 알콕시에 의해 추가로 치환되고, 이들의 알킬 부분은 독립적으로 1-6개의 탄소를 가지거나; 또는 R3 및 R4 중 어느 하나 또는 둘 모두는 --CH2N(CH2 COOR17)2이고, 여기서 R17은 H, 생물학적으로 적합한 반대이온, 1-6개의 탄소를 갖는 선형 또는 분지형 알킬, 또는 --CH2--O--(C=O)--R18이고;
A는 OR7 또는 NR8R9이며, 여기서
R7은 각각 독립적으로 H, C1 - C18 알킬, C1 - C18 아실 (여기서, 각각의 알킬 기는 독립적으로 1-6개의 탄소를 가지며 아미노, 히드록시, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르에 의해 임의로 치환됨); 또는 트리알킬실릴 (여기서, 각각의 알킬 기는 독립적으로 1-6개의 탄소를 가짐)이고;
R8 및 R9는 독립적으로 H, C1 - C6 알킬, C1 - C6 카르복시알킬, C1 - C6 술포알킬, C1 - C6 카르복시알킬의 염, C1 - C6 술포알킬의 염, 또는 C1 - C18 아실이며, 여기서 알킬 부분은 임의로 아미노, 히드록시, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르에 의해 치환되거나; 또는 R8과 R2가 함께 또는 R9와 R3이 함께 또는 양자가 모두 하나 이상의 메틸에 의해 임의로 치환된, 포화 5- 또는 6원 고리를 형성하거나; 또는 R8이 R9와 함께 피페리딘, 모르폴린, 피롤리딘 또는 피페라진인 포화 5- 또는 6원 헤테로사이클을 형성하고, 이들은 각각 임의로 메틸, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, 또는 --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르에 의해 치환되고;
R12, R13, R15 및 R16은 독립적으로 H, F, Cl, Br, I; 또는 술폰산, 술폰산의 염, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르, CN, 니트로, 히드록시, 아지도, 아미노, 히드라지노; 또는 C1 - C18 알킬, C1 - C18 알콕시, C1 - C18 알킬티오, C1 - C18 알킬아미노, C1 - C18 알킬에스테르, C1 - C18 알킬아미도 또는 C1 - C18 아릴아미도이고, 이들의 알킬 또는 아릴 부분은 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르, 술폰산, 술폰산의 염, 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노 또는 알콕시에 의해 1회 이상 임의로 치환되고, 각각의 알킬 부분은 1-6개의 탄소를 가지거나; 또는 한 쌍의 인접한 치환기 R12와 R13 또는 R15와 R16은 함께 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르에 의해 임의로 추가로 치환된 융합 6원 방향족 고리를 형성하고;
R11은 H, 히드록시, CN 또는 C1 - C6 알콕시이거나; 또는 R11과 R12가 함께 임의로 독립적으로 H, F 또는 CH3에 의해 치환된 5- 또는 6원 스피로락톤 고리 또는 5- 또는 6원 스피로술톤 고리를 형성하고;
Rx는 카르복실산의 활성화된 에스테르, 아실 아지드, 알데히드, 알킬 할라이드, 무수물, 술포닐 할라이드, 말레미드, 이소시아네이트, 및 이소티오시아네이트로 이루어진 군으로부터 선택된 반응기이다.
32. 제31항에 있어서, 반응기 Rx가 이소티오시아네이트인 방법.
33. 제27항에 있어서, 적합하게 활성화된 형광단이
Figure pct00046
인 방법.
식 중,
R1, R2, R3, R4, R5, 및 R6은 각각 독립적으로 H, 할로겐, 알킬, 시클로알킬, 아릴, 아릴알킬, 아실 또는 술포이고;
Rx는 카르복실산의 활성화된 에스테르, 아실 아지드, 알데히드, 알킬 할라이드, 무수물, 술포닐 할라이드, 말레미드, 이소시아네이트, 및 이소티오시아네이트로 이루어진 군으로부터 선택된 반응기이다.
34. 제33항에 있어서, 반응기 Rx가 카르복실산의 활성화된 에스테르인 방법.
35. 제34항에 있어서, 활성화된 에스테르가 숙신이미딜 에스테르인 방법.
36. 제27항에 있어서, 적합하게 활성화된 형광단이
Figure pct00047
또는
Figure pct00048
인 방법.
식 중,
R4는 C1 - C22 알킬 또는 C7 - C22 아릴알킬이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 N, O 및 S으로 이루어진 군으로부터 선택된, 6개 이하의 헤테로 원자를 혼입하고, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복시, 술포, 포스페이트, 아미노, 술페이트, 포스포네이트, 시아노, 니트로, 아지도, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노, 또는 C3 - C18 트리알킬암모늄으로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 1회 이상 치환되고;
R2는 C1 - C22 알킬 또는 C7 - C22 아릴알킬이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 N, O 및 S으로 이루어진 군으로부터 선택된, 6개 이하의 헤테로 원자를 혼입하고, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복시, 술포, 포스페이트, 아미노, 술페이트, 포스포네이트, 시아노, 니트로, 아지도, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, C2 - C12 디알킬아미노, 또는 C3 - C18 트리알킬암모늄에 의해 1회 이상 치환되고;
R6은 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
R7은 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
R8은 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
R9는 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
R16은 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
R17은 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
R18은 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
R19는 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되거나; 또는
R6과 R7;
R7과 R8;
R8과 R9;
R16과 R17;
R17과 R18; 및
R18과 R19
로부터 독립적으로 선택된 구성원은 이들이 결합된 원자와 함께 --CH-- 또는 --CR1--을 포함하는 방향족 고리를 형성하며, 여기서 R1은 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이고, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 치환되고;
p는 1, 2 또는 3이고;
q는 0, 1, 2 또는 3이고;
R12는 C1 - C22 알킬 또는 C7 - C22 아릴알킬이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 N, O 및 S으로 이루어진 군으로부터 선택된, 6개 이하의 헤테로 원자를 혼입하고, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복시, 술포, 포스페이트, 아미노, 술페이트, 포스포네이트, 시아노, 니트로, 아지도, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, C2 - C12 디알킬아미노, 또는 C3 - C18 트리알킬암모늄에 의해 1회 이상 치환되고;
R13은 C1 - C22 알킬 또는 C7 - C22 아릴알킬이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 N, O 및 S으로 이루어진 군으로부터 선택된, 6개 이하의 헤테로 원자를 혼입하고, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복시, 술포, 포스페이트, 아미노, 술페이트, 포스포네이트, 시아노, 니트로, 아지도, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노, 또는 C3 - C18 트리알킬암모늄에 의해 1회 이상 치환되고;
R14는 C1 - C22 알킬 또는 C7 - C22 아릴알킬이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 N, O 및 S으로부터 선택된, 6개 이하의 헤테로 원자를 혼입하고, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복시, 술포, 포스페이트, 아미노, 술페이트, 포스포네이트, 시아노, 니트로, 아지도, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노, 또는 C3 - C18 트리알킬암모늄에 의해 1회 이상 치환되거나; 또는
R13과 R14는 함께 임의로 치환된, 5- 또는 6원의 포화 또는 불포화 고리를 완성하고; 여기서
술포는 술폰산 또는 술포네이트이고;
Rx는 카르복실산의 활성화된 에스테르, 아실 아지드, 알데히드, 알킬 할라이드, 무수물, 술포닐 할라이드, 말레미드, 이소시아네이트, 및 이소티오시아네이트로 이루어진 군으로부터 선택된 반응기이다.
37. 제36항에 있어서, 반응기 Rx가 카르복실산의 활성화된 에스테르인 방법.
38. 제37항에 있어서, 활성화된 에스테르가 숙신이미딜 에스테르인 방법.
39. 제27항에 있어서, 적합하게 활성화된 형광단이
Figure pct00049
인 방법.
식 중:
R1, R2, R6, R41, R42, 및 R46은 독립적으로 수소, 시아노, 할로겐, 카르복실산, 술폰산 C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, 아릴, 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되며, 여기서 상기 알킬 또는 알콕시는 임의로 카르복실산, 술폰산, 또는 할로겐에 의해 치환되고 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 임의로 C1 - C6 알킬, C1 - C6 퍼플루오로알킬, 시아노, 할로겐, 아지도, 카르복실산, 술폰산, 또는 할로메틸에 의해 1회 이상 치환되거나; 또는
R1과 R2가 함께 또는 R41과 R42가 함께 또는 양자가 모두 임의로 1회 이상 술포네이트화된 융합 방향족 또는 헤테로방향족 고리를 형성하고;
R3, R4, R43, 및 R44는 독립적으로 수소, C1 - C6 알킬, 방향족 또는 헤테로방향족 고리로 이루어진 군으로부터 선택되며, 여기서 상기 알킬은 임의로 카르복실산, 술폰산, 아미노, 히드록시, 또는 할로겐에 의해 치환되고 상기 방향족 또는 헤테로방향족 고리는 임의로 C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 퍼플루오로알킬, 시아노, 할로겐, 카르복실산, 술폰산, 또는 할로메틸에 의해 1회 이상 치환되거나; 또는
R2와 R3, R42와 R43, 또는 R3과 R4, 또는 R43과 R44, 또는 이들의 임의의 조합은 5- 또는 6원 지환족 고리를 형성하고;
R5 및 R45는 독립적으로 수소, 메틸, 카르복시메틸, C2 - C6 알킬, 또는 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되고, 여기서 상기 알킬은 임의로 카르복실산, 술폰산, 아미노, 또는 할로겐에 의해 치환되고 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 임의로 C1 - C6 알킬, C1 - C6 퍼플루오로알킬, 시아노, 할로겐, 카르복실산, 술폰산, 또는 할로메틸에 의해 1회 이상 치환되거나; 또는
R4와 R5 또는 R5와 R6 또는 R44와 R45 또는 R45와 R46, 또는 이들의 임의의 조합은 5- 또는 6원 지환족 고리를 형성하고;
E, E', X' 및 X는 O, S, 또는 NR8이나, 단 E와 X 또는 E'와 X'가 둘다 존재하지는 않으며; 여기서
R8은 독립적으로 수소, 메틸, 카르복시메틸, C2 - C6 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되며, 여기서 상기 알킬은 임의로 카르복실산, 술폰산, 아미노, 또는 할로겐에 의해 치환되고;
R30, R31, R33 및 R34는 독립적으로 수소, F, Cl, Br, I, 술폰산, 카르복실산, CN, 니트로, 히드록시, 아지도, 아미노, 히드라지노, 또는 C1 - C18 알킬, C1 - C18 알콕시, C1 - C18 알킬티오, C1 - C18 알카노일아미노, C1 - C18 알킬아미노카르보닐, C2 - C36 디알킬아미노카르보닐, C1 - C18 알킬옥시카르보닐, 또는 C7 - C18 아릴카르복스아미도로 이루어진 군으로부터 선택되며, 여기서 상기 R30, R31, R33 및 R34의 상기 알킬 또는 아릴 부분은 임의로 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복실산, C1 - C6 알콜의 카르복실산 에스테르, 술폰산, 아미노, C1 - C6 알킬아미노, C1 - C6 디알킬아미노 및 C2 - C6 알콕시로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 1회 이상 치환되거나; 또는 한 쌍의 인접한 R30과 R31 또는 R33과 R34 치환기는 함께 임의로 카르복실산에 의해 추가로 치환된 융합 6원 방향족 고리를 형성하고;
Rx는 카르복실산의 활성화된 에스테르, 아실 아지드, 알데히드, 알킬 할라이드, 무수물, 술포닐 할라이드, 말레미드, 이소시아네이트, 및 이소티오시아네이트로 이루어진 군으로부터 선택된 반응기이다.
40. 제39항에 있어서, 반응기 Rx가 카르복실산의 활성화된 에스테르인 방법.
41. 제40항에 있어서, 활성화된 에스테르가 숙신이미딜 에스테르인 방법.
42. 제27항에 있어서, 적합하게 활성화된 형광단이
Figure pct00050
인 방법.
식 중,
R4는 H, OH, CN, C1-C18 알킬, C1-C18 퍼플루오로알킬, 술포메틸, 술포메틸의 생물학적으로 적합한 염, 할로메틸, 또는 아릴이고;
R5는 H 또는 C1-C6 알콕시이고;
R6은 H, 메틸, 할로겐, 또는 SO3X이고;
R7은 H 또는 NR1R2이며; 여기서
R1 및 R2는 독립적으로 H, C1 - C18 알킬, C6 - C18 아릴, C1 - C18 알카노일, C7 - C18 아릴알카노일이거나; 또는
R1은 R2와 함께 피페리딘, 모르폴린, 피롤리딘 또는 피페라진인 포화 5- 또는 6원 헤테로사이클을 형성하거나; 또는
R1은 화학식
Figure pct00051
의 2-니트로벤질옥시카르보닐이며; 여기서
R9 및 R10은 H, C1 - C6 알콕시이거나, 또는 R9와 R10은 함께 --O--CH2--O--이고; R11은 H, CH3, 카르복실산 또는 카르복실산의 생물학적으로 적합한 염이고;
R8은 H, 할로겐, SO3X, C1-C6 알콕시 또는 C1-C6 알킬이고;
X는 H, 또는 생물학적으로 적합한 양이온이고;
Rx는 카르복실산의 활성화된 에스테르, 아실 아지드, 알데히드, 알킬 할라이드, 무수물, 술포닐 할라이드, 말레미드, 이소시아네이트, 및 이소티오시아네이트로 이루어진 군으로부터 선택된 반응기이다.
43. 제42항에 있어서, 반응기 Rx가 카르복실산의 활성화된 에스테르인 방법.
44. 제43항에 있어서, 활성화된 에스테르가 숙신이미딜 에스테르인 방법.
45. Q가 Ar1이며, 여기서 Ar1은 페닐, 2-피리딜, 3-피리딜, 또는 4-피리딜인, 제1항 내지 제44항 중 어느 한 항의 화합물, 조성물, 방법, 키트 또는 공정.
나열된 상기 항목 모음에서, 특징의 모든 가능한 조합, 및 모든 가능한 서브그룹 및 재조합이 기재되었다는 것이 이해되어야 한다.
상기 각각의 실시양태를 포함하여, 본원에 기재된 실시양태가 본원에 기재된 실시양태의 서브세트를 만드는 모든 화학적으로 관련된 방법으로 조합될 수 있다는 것이 이해되어야 한다. 따라서, 모든 이러한 서브세트 역시 본원에 기재된 발명의 예시적 실시양태라는 것이 또한 이해되어야 한다.
본원에 기재된 화합물은 하나 이상의 키랄 중심을 함유할 수 있거나, 또는 다수의 입체이성질체로서 존재할 수 있다. 하나의 실시양태에서, 본원에 기재된 발명이 임의의 특정한 입체화학적 요건으로 제한되지 않으며, 화합물, 및 그를 포함하는 조성물, 방법, 및 키트가 광학적으로 순수할 수 있거나, 또는 라세미체 및 거울상이성질체의 다른 혼합물, 부분입체이성질체의 다른 혼합물 등을 포함하는 다양한 입체이성질체 혼합물일 수 있다는 것이 이해되어야 한다. 또한, 입체이성질체의 이러한 혼합물이 하나 이상의 키랄 중심에서 단일 입체화학적 구성을 포함할 수 있고, 하나 이상의 다른 키랄 중심에서 입체화학적 구성을 갖는 혼합물도 포함된다는 것이 이해되어야 한다.
마찬가지로, 본원에 기재된 화합물은 기하학적 중심, 예컨대 시스, 트랜스, E, 및 Z 이중 결합을 포함할 수 있다. 또 다른 실시양태에서, 본원에 기재된 발명이 임의의 특정한 기하 이성질체 요건으로 제한되지 않으며, 화합물, 및 그를 포함하는 조성물, 방법, 및 키트가 순수할 수 있거나, 또는 다양한 기하 이성질체 혼합물일 수 있다는 것이 이해되어야 한다. 또한, 기하 이성질체의 이러한 혼합물이 하나 이상의 이중 결합에서 단일 구성을 포함할 수 있고, 하나 이상의 다른 이중 결합에서 기하학적 구조를 갖는 혼합물도 포함된다는 것이 이해되어야 한다.
본원에서 사용된 용어 "알킬"은 임의로 분지되는 탄소 원자 사슬을 포함한다. 본원에서 사용된 용어 "알케닐" 및 "알키닐"은 임의로 분지되고, 각각 하나 이상의 이중 결합 또는 삼중 결합을 포함하는 탄소 원자 사슬을 포함한다. 알키닐이 또한 하나 이상의 이중 결합을 포함할 수 있다는 것이 이해되어야 한다. 특정 실시양태에서, 이들은 각각 1가 (즉, 하나의 결합을 통해 나머지 화학식에 결합됨) 또는 다가 (즉, 1개 초과의 결합을 통해 나머지 화학식에 결합됨)일 수 있다는 것이 이해되어야 한다. 또한, 특정 실시양태에서, 알킬이 유리하게는 C1-C24, C1-C12, C1-C8, C1-C6, 및 C1-C4를 포함하는 제한된 길이를 갖는다는 것이 이해되어야 한다. 또한, 특정 실시양태에서, 알케닐 및/또는 알키닐이 각각 유리하게는 C2-C24, C2-C12, C2-C8, C2-C6, 및 C2-C4를 포함하는 제한된 길이를 가질 수 있다는 것이 이해되어야 한다. 알킬, 알케닐, 및/또는 알키닐 기가 짧을수록 화합물에 친유성을 덜 부가할 수 있으므로, 그에 따라 상이한 약동학적 거동을 가질 것이라고 본원에서 이해된다. 알킬 기의 예는 비제한적으로 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, sec-부틸, tert-부틸, 펜틸, 2-펜틸, 3-펜틸, 네오펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸 등이다.
본원에서 사용된 용어 "시클로알킬"은 임의로 분지되는 탄소 원자 사슬을 포함하고, 여기서 사슬의 적어도 일부는 환형이다. 시클로알킬알킬이 시클로알킬의 서브세트라는 것이 이해되어야 한다. 시클로알킬이 다환형일 수 있다는 것이 이해되어야 한다. 시클로알킬의 예는 비제한적으로 시클로프로필, 시클로펜틸, 시클로헥실, 2-메틸시클로프로필, 시클로펜틸에트-2-일, 아다만틸 등을 포함한다. 본원에서 사용된 용어 "시클로알케닐"은 임의로 분지되고 하나 이상의 이중 결합을 포함하는 탄소 원자 사슬을 포함하고, 여기서 사슬의 적어도 일부는 환형이다. 하나 이상의 이중 결합이 시클로알케닐의 환형 부분 및/또는 시클로알케닐의 비-환형 부분에 존재할 수 있다는 것이 이해되어야 한다. 시클로알케닐알킬 및 시클로알킬알케닐이 각각 시클로알케닐의 서브세트라는 것이 이해되어야 한다. 시클로알킬이 다환형일 수 있다는 것이 이해되어야 한다. 특정 실시양태에서, 이들이 각각 1가 (즉, 하나의 결합을 통해 나머지 화학식에 결합됨) 또는 다가 (즉, 1개 초과의 결합을 통해 나머지 화학식에 결합됨)일 수 있다는 것이 이해되어야 한다. 시클로알케닐의 예는 비제한적으로 시클로펜테닐, 시클로헥실에텐-2-일, 시클로헵테닐프로페닐 등을 포함한다. 또한, 시클로알킬 및/또는 시클로알케닐을 형성하는 사슬이 유리하게는 C3-C24, C3-C12, C3-C8, C3-C6, 및 C5-C6을 포함하는 제한된 길이를 갖는다는 것이 이해되어야 한다. 시클로알킬 및/또는 시클로알케닐을 각각 형성하는 알킬 및/또는 알케닐 사슬이 짧을수록 화합물에 친유성을 덜 부가할 수 있으므로, 그에 따라 상이한 약동학적 거동을 가질 것이라고 본원에서 이해된다.
본원에서 사용된 용어 "알킬렌"은 임의로 분지되는 탄소 원자의 2가 사슬을 포함한다. 본원에서 사용된 용어 "알케닐렌" 및 "알키닐렌"은 임의로 분지되고, 각각 하나 이상의 이중 결합 또는 삼중 결합을 포함하는 탄소 원자의 2가 사슬을 포함한다. 알키닐렌이 또한 하나 이상의 이중 결합을 포함할 수 있다는 것이 이해되어야 한다. 또한, 특정 실시양태에서, 알킬렌이 유리하게는 C1-C24, C1-C12, C1-C8, C1-C6, 및 C1-C4, 및 C2-C24, C2-C12, C2-C8, C2-C6, 및 C2-C4 등을 포함하는 제한된 길이를 갖는다는 것이 이해되어야 한다. 예시적으로, C1-C8, C1-C6, 및 C1-C4, 및 C2-C8, C2-C6, 및 C2-C4 등을 포함하는 특히 제한된 길이의 알킬렌 기를 저급 알킬렌이라 할 수 있다. 또한, 특정 실시양태에서, 알케닐렌 및/또는 알키닐렌이 각각 유리하게는 C2-C24, C2-C12, C2-C8, C2-C6, 및 C2-C4, 및 C3-C24, C3-C12, C3-C8, C3-C6, 및 C3-C4 등을 포함하는 제한된 길이를 가질 수 있다는 것이 이해되어야 한다. 예시적으로, C2-C8, C2-C6, 및 C2-C4, 및 C3-C8, C3-C6, 및 C3-C4 등을 포함하는 특히 제한된 길이의 알케닐렌 및/또는 알키닐렌 기를 저급 알케닐렌 및/또는 알키닐렌이라 할 수 있다. 알킬렌, 알케닐렌, 및/또는 알키닐렌 기가 짧을수록 화합물에 친유성을 덜 부가할 수 있으므로, 그에 따라 상이한 약동학적 거동을 가질 것이라고 본원에서 이해된다. 본원에 기재된 발명의 실시양태에서, 각각의 경우에, 알킬렌, 알케닐렌, 및 알키닐렌의 인용은 본원에서 정의된 알킬렌, 알케닐렌, 및 알키닐렌, 및 임의로 저급 알킬렌, 알케닐렌, 및 알키닐렌을 나타낸다는 것이 이해되어야 한다. 알킬렌 기의 예는 비제한적으로 메틸렌, 에틸렌, n-프로필렌, 이소프로필렌, n-부틸렌, 이소부틸렌, sec-부틸렌, 펜틸렌, 1,2-펜틸렌, 1,3-펜틸렌, 헥실렌, 헵틸렌, 옥틸렌 등이다.
본원에서 사용된 용어 "헤테로알킬"은 탄소 및 하나 이상의 헤테로원자를 둘다 포함하고, 임의로 분지되는 원자 사슬을 포함한다. 헤테로원자의 예는 질소, 산소, 및 황을 포함한다. 특정 변형에서, 헤테로원자의 예는 인 및 셀레늄을 또한 포함한다. 헤테로시클릴 및 헤테로사이클을 포함하는, 본원에서 사용된 용어 "시클로헤테로알킬"은 헤테로알킬과 같이, 탄소 및 하나 이상의 헤테로원자를 둘다 포함하고, 임의로 분지되는 원자 사슬을 포함하고, 여기서 사슬의 적어도 일부는 환형이다. 헤테로원자의 예는 질소, 산소, 및 황을 포함한다. 특정 실시양태에서, 이들이 각각 1가 (즉, 하나의 결합을 통해 나머지 화학식에 결합됨) 또는 다가 (즉, 1개 초과의 결합을 통해 나머지 화학식에 결합됨)일 수 있다는 것이 이해되어야 한다. 특정 변형에서, 헤테로원자의 예는 인 및 셀레늄을 또한 포함한다. 시클로헤테로알킬의 예는 비제한적으로 테트라히드로푸릴, 피롤리디닐, 테트라히드로피라닐, 피페리디닐, 모르폴리닐, 피페라지닐, 호모피페라지닐, 퀴누클리디닐 등을 포함한다.
본원에서 사용된 용어 "아릴"은 모노시클릭 및 폴리시클릭 방향족 카르보시클릭 기를 포함하고, 이들은 각각 임의로 치환될 수 있다. 본원에 기재된 방향족 카르보시클릭 기의 예는 비제한적으로 페닐, 나프틸 등을 포함한다. 본원에서 사용된 용어 "헤테로아릴"은 방향족 헤테로시클릭 기를 포함하고, 이들은 각각 임의로 치환될 수 있다. 방향족 헤테로시클릭 기의 예는 비제한적으로 피리디닐, 피리미디닐, 피라지닐, 트리아지닐, 테트라지닐, 퀴놀리닐, 퀴나졸리닐, 퀴녹살리닐, 티에닐, 피라졸릴, 이미다졸릴, 옥사졸릴, 티아졸릴, 이속사졸릴, 이소티아졸릴, 옥사디아졸릴, 티아디아졸릴, 트리아졸릴, 벤즈이미다졸릴, 벤족사졸릴, 벤즈티아졸릴, 벤즈이속사졸릴, 벤즈이소티아졸릴 등을 포함한다.
본원에서 사용된 용어 "아미노"는 NH2, 알킬아미노, 및 디알킬아미노 기를 포함하고, 여기서 디알킬아미노의 2개의 알킬 기는 동일하거나 상이할 수 있으며, 즉 알킬알킬아미노일 수 있다. 예시적으로, 아미노는 메틸아미노, 에틸아미노, 디메틸아미노, 메틸에틸아미노 등을 포함한다. 또한, 아미노알킬 또는 아실아미노와 같이, 아미노가 수식하거나, 또는 또 다른 용어로 수식될 때, 용어 아미노의 상기 변형도 포함된다는 것이 이해되어야 한다. 예시적으로, 아미노알킬은 H2N-알킬, 메틸아미노알킬, 에틸아미노알킬, 디메틸아미노알킬, 메틸에틸아미노알킬 등을 포함한다. 예시적으로, 아실아미노는 아실메틸아미노, 아실에틸아미노 등을 포함한다.
본원에서 사용된 용어 "아미노 및 그의 유도체"는 본원에 기재된 아미노, 및 알킬아미노, 알케닐아미노, 알키닐아미노, 헤테로알킬아미노, 헤테로알케닐아미노, 헤테로알키닐아미노, 시클로알킬아미노, 시클로알케닐아미노, 시클로헤테로알킬아미노, 시클로헤테로알케닐아미노, 아릴아미노, 아릴알킬아미노, 아릴알케닐아미노, 아릴알키닐아미노, 헤테로아릴아미노, 헤테로아릴알킬아미노, 헤테로아릴알케닐아미노, 헤테로아릴알키닐아미노, 아실아미노 등을 포함하고, 이들은 각각 임의로 치환된다. 용어 "아미노 유도체"는 또한 우레아, 카르바메이트 등을 포함한다.
본원에서 사용된 용어 "히드록시 및 그의 유도체"는 OH, 및 알킬옥시, 알케닐옥시, 알키닐옥시, 헤테로알킬옥시, 헤테로알케닐옥시, 헤테로알키닐옥시, 시클로알킬옥시, 시클로알케닐옥시, 시클로헤테로알킬옥시, 시클로헤테로알케닐옥시, 아릴옥시, 아릴알킬옥시, 아릴알케닐옥시, 아릴알키닐옥시, 헤테로아릴옥시, 헤테로아릴알킬옥시, 헤테로아릴알케닐옥시, 헤테로아릴알키닐옥시, 아실옥시 등을 포함하고, 이들은 각각 임의로 치환된다. 용어 "히드록시 유도체"는 또한 카르바메이트 등을 포함한다.
본원에서 사용된 용어 "티오 및 그의 유도체"는 SH, 및 알킬티오, 알케닐티오, 알키닐티오, 헤테로알킬티오, 헤테로알케닐티오, 헤테로알키닐티오, 시클로알킬티오, 시클로알케닐티오, 시클로헤테로알킬티오, 시클로헤테로알케닐티오, 아릴티오, 아릴알킬티오, 아릴알케닐티오, 아릴알키닐티오, 헤테로아릴티오, 헤테로아릴알킬티오, 헤테로아릴알케닐티오, 헤테로아릴알키닐티오, 아실티오 등을 포함하고, 이들은 각각 임의로 치환된다. 용어 "티오 유도체"는 또한 티오카르바메이트 등을 포함한다.
본원에서 사용된 용어 "아실"은 포르밀, 및 알킬카르보닐, 알케닐카르보닐, 알키닐카르보닐, 헤테로알킬카르보닐, 헤테로알케닐카르보닐, 헤테로알키닐카르보닐, 시클로알킬카르보닐, 시클로알케닐카르보닐, 시클로헤테로알킬카르보닐, 시클로헤테로알케닐카르보닐, 아릴카르보닐, 아릴알킬카르보닐, 아릴알케닐카르보닐, 아릴알키닐카르보닐, 헤테로아릴카르보닐, 헤테로아릴알킬카르보닐, 헤테로아릴알케닐카르보닐, 헤테로아릴알키닐카르보닐, 아실카르보닐 등을 포함하고, 이들을 각각 임의로 치환된다.
본원에서 사용된 용어 "카르보닐 및 그의 유도체"는 C(O), C(S), C(NH) 기 및 이들의 치환된 아미노 유도체를 포함한다.
본원에서 사용된 용어 "카르복실레이트 및 그의 유도체"는 CO2H 기 및 그의 염, 및 그의 에스테르 및 아미드, 및 CN을 포함한다.
본원에서 사용된 용어 "술피닐 또는 그의 유도체"는 SO2H 및 그의 염, 및 그의 에스테르 및 아미드를 포함한다.
본원에서 사용된 용어 "술포닐 또는 그의 유도체"는 SO3H 및 그의 염, 및 그의 에스테르 및 아미드를 포함한다.
본원에서 사용된 용어 "포스피닐 또는 그의 유도체"는 P(R)O2H 및 그의 염, 및 그의 에스테르 및 아미드를 포함하며, 여기서 R은 알킬, 알케닐, 알키닐, 시클로알킬, 시클로알케닐, 헤테로알킬, 헤테로알케닐, 시클로헤테로알킬, 시클로헤테로알케닐, 아릴, 헤테로아릴, 아릴알킬, 또는 헤테로아릴알킬을 포함하고, 이들은 각각 임의로 치환된다.
본원에서 사용된 용어 "포스포닐 또는 그의 유도체"는 PO3H2 및 그의 염, 및 그의 에스테르 및 아미드를 포함한다.
본원에서 사용된 용어 "임의로 치환된"은 임의로 치환된 라디칼에서 수소 원자가 다른 관능기로 대체된 것을 포함한다. 예시적으로, 이러한 다른 관능기는 비제한적으로 아미노, 히드록실, 할로, 티올, 아지도, 알킬, 할로알킬, 헤테로알킬, 아릴, 아릴알킬, 아릴헤테로알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬, 헤테로아릴헤테로알킬, 니트로, 술폰산 및 그의 유도체, 카르복실산 및 그의 유도체 등을 포함한다. 예시적으로, 아미노, 히드록실, 티올, 알킬, 할로알킬, 헤테로알킬, 아릴, 아릴알킬, 아릴헤테로알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬, 헤테로아릴헤테로알킬, 및/또는 술폰산 중 임의의 것이 임의로 치환된다.
본원에서 사용된 용어 "임의로 치환된 아릴" 및 "임의로 치환된 헤테로아릴"은 임의로 치환된 아릴 또는 헤테로아릴에서 수소 원자가 다른 관능기로 대체된 것을 포함한다. 예시적으로, 이러한 다른 관능기는 비제한적으로 아미노, 아지도, 히드록시, 할로, 티오, 알킬, 할로알킬, 헤테로알킬, 아릴, 아릴알킬, 아릴헤테로알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬, 헤테로아릴헤테로알킬, 니트로, 술폰산 및 그의 유도체, 카르복실산 및 그의 유도체 등을 포함한다. 예시적으로, 아미노, 히드록시, 티오, 알킬, 할로알킬, 헤테로알킬, 아릴, 아릴알킬, 아릴헤테로알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴알킬, 헤테로아릴헤테로알킬, 및/또는 술폰산 중 임의의 것이 임의로 치환된다.
치환기의 예는 비제한적으로 라디칼 -(CH2)xZX를 포함하며, 여기서 x는 0-6의 정수이고, ZX는 할로겐, 히드록시, C1-C6 알카노일옥시를 포함하는 알카노일옥시, 임의로 치환된 아로일옥시, C1-C6 알킬을 포함하는 알킬, C1-C6 알콕시를 포함하는 알콕시, C3-C8 시클로알킬을 포함하는 시클로알킬, C3-C8 시클로알콕시를 포함하는 시클로알콕시, C2-C6 알케닐을 포함하는 알케닐, C2-C6 알키닐을 포함하는 알키닐, C1-C6 할로알킬을 포함하는 할로알킬, C1-C6 할로알콕시를 포함하는 할로알콕시, C3-C8 할로시클로알킬을 포함하는 할로시클로알킬, C3-C8 할로시클로알콕시를 포함하는 할로시클로알콕시, 아미노, C1-C6 알킬아미노, (C1-C6 알킬)(C1-C6 알킬)아미노, 알킬카르보닐아미노, N-(C1-C6 알킬)알킬카르보닐아미노, 아미노알킬, C1-C6 알킬아미노알킬, (C1-C6 알킬)(C1-C6 알킬)아미노알킬, 알킬카르보닐아미노알킬, N-(C1-C6 알킬)알킬카르보닐아미노알킬, 시아노, 아지도, 및 니트로로부터 선택되거나; 또는 ZX는 -CO2R4 및 -CONR5R6으로부터 선택되며, 여기서 R4, R5, 및 R6은 각각 독립적으로 각각의 경우에 수소, C1-C6 알킬, 아릴-C1-C6 알킬, 및 헤테로아릴-C1-C6 알킬로부터 선택된다.
본원에서 사용된 용어 "유효량"은 연구원, 수의사, 의사 또는 다른 임상의에 의해 구해지는, 조직 시스템, 세포, 생물 또는 결합 분석법, 검사 등에서 목적하는 반응을 도출하는 본원에 기재된 형광-HAP 염색제 (화합물)의 양을 나타낸다. 하나의 측면에서, 유효량은 HBV의 진단을 가능하게 할 수 있는 양이다. 또 다른 측면에서, 유효량은 HBV의 검출을 가능하게 할 수 있는 양이다. 또 다른 측면에서, 유효량은 HBV의 세포내 추적을 가능하게 할 수 있는 양이다. 또 다른 측면에서, 유효량은 HBV의 HAP 포켓과의 항-HBV 신약 후보자의 경쟁적 결합을 측정할 수 있게 하는 양이다. 본원에 기재된 화합물 중 어느 하나 또는 그의 혼합물의 유효량이 연구원, 수의사, 의사 또는 다른 임상의에 의해 공지된 기술을 사용하고/거나 유사한 환경하에서 얻어진 결과를 관찰함으로써 용이하게 결정될 수 있다는 것이 이해되어야 한다.
본원에서 사용된 용어 "FL-HAP," "Fl-HAP," 또는 "형광-HAP"는 형광 헤테로아릴디히드로피리미딘-기재의 염색제 (화합물)를 나타내고, 이 염색제는 검출 시약, 진단 시약, 바이러스-추적제, 및/또는 신약 개발 도구가 된다.
본원에서 사용된 용어 "염료"는 관찰가능하고 검출가능한 신호를 발생시키는 광을 방출하는 화합물을 나타낸다.
본원에서 사용된 용어 "형광단" 또는 "형광원"은 광의 여기시 광을 재방출할 수 있는 것으로 입증된 화합물, 조성물, 또는 화학 물질을 나타낸다. 형광단 또는 형광원 화합물, 조성물, 또는 화학 물질이 관심 생물 화합물, 표적 또는 분석물과 결합시 및/또는 효소에 의한 분열시 형광의 변화를 나타낼 수 있다는 것이 이해된다. 본원에 기재된 형광단이 치환되어 형광단의 용해도, 스펙트럼 성질 또는 물리적 성질이 변경될 수 있다는 것이 이해된다.
본원에서 사용된 용어 "조성물"은 일반적으로 특정된 성분을 특정된 양으로 포함하는 임의의 생성물 뿐만 아니라, 직접적으로 또는 간접적으로 특정된 양의 특정된 성분의 조합으로부터 초래되는 임의의 생성물을 나타낸다. 본원에 기재된 조성물이 본원에 기재된 단리 형광-HAP 화합물 (염색제) 또는 이러한 화합물의 염, 용액, 수화물, 용매화물, 및 다른 형태로부터 제조될 수 있다는 것이 이해되어야 한다. 또한, 조성물이 본원에 기재된 화합물의 다양한 무정형, 비-무정형, 부분 결정질, 결정질, 및/또는 다른 형태학상의 형태로부터 제조될 수 있다는 것이 이해되어야 한다. 따라서, 본원에 기재된 화합물을 인용하는 이러한 조성물은 이러한 화합물의 다양한 형태학상의 형태 및/또는 용매화물 또는 수화물 형태를 각각 또는 이들을 임의로 조합하여 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 예시적으로, 조성물은 하나 이상의 담체, 희석제, 및/또는 부형제를 포함할 수 있다. 본원에 기재된 화합물, 또는 그를 함유하는 조성물은 본원에 기재된 방법에 적절한 임의의 통상적인 형태로 진단 유효량으로 제형화될 수 있다.
또 다른 예시적 실시양태에서, HBV 검출, HBV 진단, HBV-추적, 및/또는 항-HBV 신약 개발에 사용하기 위한 조성물이 기재되어 있으며, 이 조성물은 본원에 기재된 화학식 I, Ia, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X 및 XI의 하나 이상의 형광-HAP 염색제 (화합물)를, HBV를 검출, 진단, 추적하고/거나 그와 경쟁적으로 결합하는 유효량으로 포함한다. 본원에 기재된 조성물이 다른 진단 능력을 갖는 화합물 및/또는 하나 이상의 담체, 희석제, 부형제 등을 비제한적으로 포함하는, 다른 요소 및/또는 성분을 포함할 수 있다는 것이 이해되어야 한다.
본 발명의 또 다른 예시적 실시양태에서, 세포 및 조직에서 HBV를 검출, 진단, 및/또는 추적하는 방법이 제공되며, 이 방법은, 예를 들어 현재 이용가능한 항체-기반의 HBV 검출 및/또는 진단 방법과 함께 사용하기에 적합하고,
a) 세포 및 HBV를 검출, 진단, 및/또는 추적하는 유효량의 본원에 기재된 화학식 I, Ia, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X 및 XI의 하나 이상의 형광-HAP 염색제 (화합물) 또는 그의 조성물의 혼합물을 인큐베이션하고;
b) 상기 하나 이상의 화합물의 임의의 초과량을 세척 제거하고;
c) 형광 신호를 도출하기 위한 자극을 혼합물에 제공하고;
d) 자극된 혼합물을 분석하는 단계
를 포함한다.
하나의 예시적 측면에서, 세포 및 조직에서 HBV를 검출, 진단 및/또는 추적하는 방법이 기재되어 있으며, 여기서 세포는 조직 배양물로부터의 세포이다. 또 다른 예시적 측면에서, 세포 및 조직에서 HBV를 검출, 진단 및/또는 추적하는 방법이 기재되어 있으며, 여기서 세포는 채취한 직후의 생검체로부터의 세포이다. 또 다른 예시적 측면에서, 세포 및 조직에서 HBV를 검출, 진단 및/또는 추적하는 방법이 기재되어 있으며, 여기서 세포는 고정된 박편으로부터의 세포이다. 또 다른 예시적 측면에서, 세포 및 조직에서 HBV를 검출, 진단 및/또는 추적하는 방법이 기재되어 있으며, 여기서 세포는 조직 배양물, 채취한 직후의 생검체, 또는 고정된 박편 이외의 다른 공급원으로부터의 세포이다.
또 다른 예시적 측면에서, 세포 및 조직에서 HBV를 검출, 진단 및/또는 추적하는 방법이 기재되어 있으며, 여기서 자극된 혼합물의 분석은 벌크 형광의 검사에 의해 수행된다. 또 다른 예시적 측면에서, 세포 및 조직에서 HBV를 검출, 진단 및/또는 추적하는 방법이 기재되어 있으며, 여기서 자극된 혼합물의 분석은 개별 세포의 형광 현미경 검사에 의해 수행된다. 또 다른 예시적 측면에서, 세포 및 조직에서 HBV를 검출, 진단 및/또는 추적하는 방법이 기재되어 있으며, 여기서 자극된 혼합물의 분석은 세포 분취기에 의해 수행된다. 또 다른 예시적 측면에서, 세포 및 조직에서 HBV를 검출, 진단 및/또는 추적하는 방법이 기재되어 있으며, 여기서 자극된 혼합물의 분석은 벌크 형광의 검사, 개별 세포의 형광 현미경 검사, 또는 세포 분취기에서의 세포 분취 이외의 다른 메카니즘에 의해 수행된다.
또 다른 예시적 실시양태는 용액 중의 HBV 코어를 검출, 진단 및/또는 추적하는 방법을 제공하며, 이 방법은
a) 정화된 혈청, 성장 배지, 또는 검사하려는 다른 액체 및 HBV를 진단, 검출, 및/또는 추적하는 유효량의 본원에 기재된 화학식 I, Ia, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X 및 XI의 하나 이상의 형광-HAP 염색제 (화합물) 또는 그의 조성물을 포함하는 용액을 인큐베이션하고;
b) 필요에 따라, e-항원 조합체를 검출하기 위해 이온 강도를 조정하여 상기 조합체를 유도하고;
c) 결합되지 않은 상기 하나 이상의 화합물을 HBV 코어에 결합된 상기 하나 이상의 화합물로부터 분리하여 결합되지 않은 상 및 결합된 상을 각각 형성하고;
d) 결합되지 않은 상 및 결합된 상과 관련된 형광을 분석하는 단계
를 포함한다.
하나의 예시적 측면에서, 용액 중의 HBV 코어를 검출, 진단 및/또는 추적하는 방법이 기재되어 있으며, 여기서 결합되지 않은 화합물을 HBV 코어에 결합된 화합물로부터 분리하는 것은 겔 투과 크로마토그래피에 의해 수행된다. 또 다른 예시적 측면에서, 용액 중의 HBV 코어를 검출, 진단 및/또는 추적하는 방법이 기재되어 있으며, 여기서 결합되지 않은 화합물을 HBV 코어에 결합된 화합물로부터 분리하는 것은 한외여과에 의해 수행된다. 또 다른 예시적 측면에서, 용액 중의 HBV 코어를 검출, 진단 및/또는 추적하는 방법이 기재되어 있으며, 여기서 결합되지 않은 화합물을 HBV 코어에 결합된 화합물로부터 분리하는 것은 원심분리에 의해 수행된다. 또 다른 예시적 측면에서, 용액 중의 HBV 코어를 검출, 진단 및/또는 추적하는 방법이 기재되어 있으며, 여기서 결합되지 않은 화합물을 HBV 코어에 결합된 화합물로부터 분리하는 것은 겔 투과 크로마토그래피, 한외여과, 또는 원심분리 이외의 다른 기술에 의해 수행된다.
또 다른 예시적 실시양태는 항-HBV 신약 개발을 수행하는 방법을 제공하며, 이 방법은
a) 항-HBV 신약 후보자, 예비-조합된 HBV 코어 및 HBV의 HAP 포켓과의 항-HBV 신약 후보자에 의한 경쟁적 결합을 검출하는 유효량의 본원에 기재된 화학식 I, Ia, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X 및 XI의 하나 이상의 형광-HAP 염색제 (화합물) 또는 그의 조성물의 혼합물을 인큐베이션하고;
b) 하나 이상의 화합물의 형광 변화를 측정하고;
c) HBV의 HAP 포켓과의 항-HBV 신약 후보자에 의한 경쟁적 결합에 대하여 혼합물을 분석하는 단계
를 포함한다.
또 다른 예시적 실시양태는 항-HBV 신약 개발을 수행하는 방법을 제공하며, 이 방법은
a) 항-HBV 신약 후보자, 예비-조합된 HBV 코어 및 HBV의 HAP 포켓과의 항-HBV 신약 후보자에 의한 경쟁적 결합을 검출하는 유효량의 본원에 기재된 화학식 I, Ia, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X 및 XI의 하나 이상의 형광-HAP 염색제 (화합물) 또는 그의 조성물의 혼합물을 인큐베이션하고;
b) 결합되지 않은 상기 항-HBV 신약 후보자 및 결합되지 않은 상기 하나 이상의 화합물을 HBV 코어와 결합된 상기 항-HBV 신약 후보자 및 상기 하나 이상의 화합물로부터 분리하여 결합되지 않은 상 및 결합된 상을 각각 형성하고;
c) 결합되지 않은 상 및 결합된 상과 관련된 형광을 측정하고;
d) HBV의 HAP 포켓과의 항-HBV 신약 후보자에 의한 경쟁적 결합에 대하여 혼합물을 분석하는 단계
를 포함한다.
하나의 예시적 측면에서, 항-HBV 신약 개발을 수행하는 방법이 기재되어 있으며, 여기서 결합되지 않은 화합물을 HBV 코어에 결합된 화합물로부터 분리하는 것은 겔 투과 크로마토그래피에 의해 수행된다. 또 다른 예시적 측면에서, 항-HBV 신약 개발을 수행하는 방법이 기재되어 있으며, 여기서 결합되지 않은 화합물을 HBV 코어에 결합된 화합물로부터 분리하는 것은 한외여과에 의해 수행된다. 또 다른 예시적 측면에서, 항-HBV 신약 개발을 수행하는 방법이 기재되어 있으며, 여기서 결합되지 않은 화합물을 HBV 코어에 결합된 화합물로부터 분리하는 것은 원심분리에 의해 수행된다. 또 다른 예시적 측면에서, 항-HBV 신약 개발을 수행하는 방법이 기재되어 있으며, 여기서 결합되지 않은 화합물을 HBV 코어에 결합된 화합물로부터 분리하는 것은 겔 투과 크로마토그래피, 한외여과, 또는 원심분리 이외의 다른 기술에 의해 수행된다.
또 다른 실시양태에서, Q가 Ar1인 상기 실시양태 중 어느 하나의 방법이 기재되어 있다.
또 다른 예시적 실시양태는 HBV를 검출, 진단 및/또는 추적하고, 또한 HBV의 HAP 포켓과 경쟁적으로 결합하는 화합물을 동정하는 키트를 제공하며, 이 키트는, 예를 들어 현재 이용가능한 항체-기반의 HBV 검출 및/또는 진단 시약과 함께 사용하기에 적합하고,
a) 본원에 기재된 화학식 I, Ia, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X 또는 XI의 형광-HAP 염색제; 및
b) 적합한 용매
를 포함한다.
또 다른 실시양태에서, Q가 Ar1인 상기 실시양태의 키트가 기재되어 있다.
또 다른 예시적 실시양태는 하기 구조식 I을 갖는 형광-HAP 염색제를 제조하는 방법을 제공하며, 이 방법은
(a) 하기 구조식 II의 HAP 화합물을 반응식 I에서 일반적으로 나타낸 적합하게 활성화된 형광단과 반응시키는 것을 포함한다.
<구조식 I>
Figure pct00052
<구조식 II>
Figure pct00053
식 중, Q, RC, RD, Ar1, Z, Ak, Ak1, RA, RB, n 및 형광단은 본원에 정의된 바와 같다. 치환된 벤즈알데히드 및 아세토아세테이트 유도체의 초기 축합이 β-아릴, α,β-불포화 1,3-디카르보닐 화합물 (a)을 제공하고, 이 화합물은 아미디노-헤테로아릴 화합물과 반응하여 헤테로아릴디히드로피리미딘 (HAP) (b)을 제공한다. Boc-피페라진을 이용하는 후속 아미노분해에 이어서, Boc 보호기의 TFA-매개된 제거가 피페라지닐-HAP (c)를 제공한다 (구조식 II' 및 II"의 HAP 화합물과 적합하게 활성화된 형광단의 반응의 경우에도 유사한 계열의 변형이 고려됨). 바람직한 Boc-보호된 아미노산의 카르보디이미드-매개된 커플링에 이어서, Boc 보호기의 TFA-매개된 제거가 아미노아실-피페라지닐-HAP (d)를 제공한다. d의 유리 산으로의 전환 후에, 적합하게 활성화된 형광단의 커플링이 형광-HAP 화합물 (e)을 생성한다.
<반응식 I>
Figure pct00054
하기 실시예가 본 발명의 구체적 실시양태를 추가로 설명하지만; 하기 예시적 실시예는 본 발명을 어떤 식으로든 제한하는 것으로 해석되어서는 안된다.
HBV를 위한 형광- HAP 염색제의 합성
HBV의 캡시드 단백질과의 특이적 결합을 나타내는, 3종의 예시적 형광단-함유 화합물을 제조하였다. 각각의 화합물은 상이한 형광단을 갖는데: 화합물 5는 알렉사플루오르® 488 (인비트로겐(Invitrogen))을 함유하고; 화합물 6은 플루오레세인을 함유하며; 화합물 7은 BODIPY® FL (인비트로겐)을 함유한다.
Figure pct00055
화합물 5의 대표적 합성 경로
Figure pct00056
화합물 1의 합성:
Figure pct00057
2-클로로-4-플루오로벤즈알데히드 (3.2 g, 20.2 mmol) 및 메틸 4-클로로아세토아세테이트 (2.31 mL, 20.0 mmol)를 50 mL의 톨루엔에 용해시키고, 딘-스타크 트랩(Dean-Stark trap)에서 4시간 동안 환류시켜 물을 제공하였다. 용매를 진공에서 제거하였다. 잔류 오일을 에테르에 용해시키고, 물로 세척하였다. 유기층을 무수 마그네슘 술페이트 상에서 건조시키고, 진공에서 환원시켜 5.2 g의 조질 생성물을 제공하였다. 이 물질을 플래시 크로마토그래피 (10% 에틸 아세테이트/헥산)에 의해 정제하여 2.05 g (수율 35%)의 화합물 1 (이성질체 혼합물)을 오일로서 제공하였다.
화합물 2의 합성:
Figure pct00058
화합물 1 (2.0 g, 6.87 mmol), 2-아미디노피리딘 히드로클로라이드 (1.08 g, 6.87 mmol), 및 소듐 아세테이트 (68 mg, 0.82 mmol, 0.12 eq)를 이소프로판올 (15 mL)에 용해시키고, 용액을 18시간 동안 환류시켰다. 용매를 진공에서 제거하고, 잔류 고형물을 에테르 및 1 N HCl 용액에 용해시켰다. 에테르 층을 추가의 HCl 용액으로 세척하였다. 합친 산성 수성층을 중탄산나트륨으로 염기성으로 만들었다. 이 수성층을 에테르 (3x)로 추출하였다. 합친 유기층을 무수 마그네슘 술페이트 상에서 건조시키고, 진공에서 환원시켜 1.07 g의 조질 생성물 오일을 제공하였다. 생성물을 플래시 컬럼 (20% 에틸 아세테이트/헥산) 상에서 정제하여 402 mg (수율 15%)의 화합물 2를 황색 오일로서 제공하였다. 오일의 일부분을 에테르/펜탄으로부터 결정화하여 223 mg의 화합물 2를 황색 결정질 고형물로서 제공하였다. mp 164-166℃. ESI 질량 스펙트럼 394.0 (M+H)+
화합물 3의 합성:
Figure pct00059
화합물 2 (55.2 mg, 0.140 mmol, 1 eq), t-부틸 피페라진-1-카르복실레이트 (130 mg, 0.7 mmol, 5 eq) 및 디이소프로필에틸아민(24.4 μL, 0.140 mmol, 1 eq)을 무수 DMF (2 mL)에 용해시켰다. 18시간 후에, 용매를 진공에서 제거하고, 조질 생성물을 플래시 크로마토그래피 (50% 에틸 아세테이트/헥산)에 의해 정제하였다. 순수한 분획을 진공에서 환원시켜 Boc-보호된 3 (69.9 mg, 수율 92%)을 포말체로서 제공하였다. 포말체를 50% 트리플루오로아세트산/DCM에 0.5시간 동안 용해시켜 Boc 보호기를 제거하였다. 용매를 진공에서 제거하고, 잔류물을 DCM에 용해시켜 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하였다. 유기층을 무수 마그네슘 술페이트 상에서 건조시키고, 진공에서 환원시켜 화합물 3 (50.4 mg, 수율 88%)을 담황색 오일로서 제공하였다.
화합물 4의 합성:
Figure pct00060
디-Boc-GABA-OH (44.7 mg, 0.147 mmol, 1.3 eq)를 건조 플라스크에서 무수 THF (2 mL)에 용해시켰다. CDI (23.9 mg, 0.147 mmol, 1.3 eq)를 첨가하고 혼합물을 2시간 동안 교반한 후에, 화합물 3 (50.3 mg, 0.113 mmol, 1.0 eq)을 첨가하였다. 18시간 후에, 용액을 진공에서 환원시키고, 조질 생성물을 50% 아세토니트릴/물에서 가용화하였다. 용액을 HPLC (이동상: 10분에 걸쳐서 30-90% ACN/물, 0.1% TFA, 1 mL/분, 증기화 광 분무 검출 (ELSD)에 의해 217 nm에서 검출)에 의해 분석하였다. 주요 생성물 (디-Boc-보호된 4)이 9.55분의 체류 시간으로 확인되었다. 생성물을 정제용 HPLC (10분에 걸쳐서 50-90% ACN, 0.1% TFA, 217 nm)에 의해 정제하였다. 순수한 분획을 진공에서 환원시켜 100.7 mg의 황색 오일을 제공하였다. 이 오일을 50% TFA/DCM (2 mL)에 1시간 동안 용해시켰다. HPLC는 4.94분에 새로운 생성물 피크로의 완전한 전환을 나타냈다. 용매를 진공에서 환원시켜 오일을 제공하였고, 이것을 가용화를 용이하게 하기 위해 소량의 메탄올이 함유된 DCM에 재용해시켰다. 용매를 다시 제거하여 잔류 TFA의 제거를 용이하게 하였다. 생성물을 고진공하에 18시간 동안 두어 112 mg의 화합물 4의 TFA 염을 황색 오일로서 제공하였다. 정확한 ESI MS: C26H31N6O3FCl (M+H)+에 대한 실측치 529.2108; 계산치 529.2130.
화합물 5의 합성:
Figure pct00061
화합물 4 (1.7 mg, 2.25 μmol, 2 eq)를 무수 DMF (0.5 mL)에 용해시켰다. DIPEA (1 μL)를 첨가하고, 생성 용액을 알렉사플루오르® 488 TFP 에스테르 (인비트로겐) (1.0 mg, 1.13 μmol, 1 eq)의 바이알에 첨가하였다. 18시간 후에, 용매를 진공에서 제거하고, 잔류물을 50% ACN/물에 용해시키고, 용액을 HPLC (이동상: 10분에 걸쳐서 30-90% ACN/물, 완충액: 0.1% TFA, 1 mL/분, 증기화 광 분무 검출 (ELSD)에 의해 217 및 495 nm에서 검출)에 의해 분석하였다. 495 nm에서 흡수된 생성물 피크가 4.94분에 확인되었다. 이 피크를 정제용 HPLC에 의해 수집하고 진공에서 환원시켜 화합물 5를 고형물로서 제공하였고, 이것을 진공하에 밤새 건조시켰다. 질량은 UV 흡광 계수에 기초하여 0.7 mg (수율 61%)인 것으로 계산되었다. ESI 질량 스펙트럼 1045.2 (M+H)+
화합물 6의 제조:
Figure pct00062
상기 기재된 대표적 경로를 사용하여, 화합물 4 (5 mg, 7.78 μmol)를 플루오레세인-5-이소티오시아네이트 (FITC '이성질체 1') (5.4 mg, 14 μmol)와 반응시켜 화합물 6 (3.2 mg, 수율 45%)을 제공하였다. 정확한 ESI MS: C47H42N7O8SClF (M+H)+에 대한 실측치 918.2460; 계산치 918.2488.
화합물 7의 제조:
Figure pct00063
상기 기재된 대표적 경로를 사용하여, 화합물 4 (5 mg, 7.78 μmol)를 BODIPY® FL 숙신이미딜 에스테르 (인비트로겐) (5.0 mg, 13 μmol)와 반응시켜 화합물 7 (1.5 mg, 수율 24%)을 제공하였다. 정확한 ESI MS: C40H44N8O4BSClF3 (M+H)+에 대한 실측치 803.3197; 계산치 803.3219.
본원에 기재된 방법에 의해 형광-HAP 염색제를 제조하는데 사용하기 위한, 이미 적합하게 활성화되었거나 또는 적합한 활성화 처리가 가능한 추가의 형광단은 비제한적으로 인비트로겐 (라이프 테크놀로지즈 코포레이션(Life Technologies Corporation)의 지사)으로부터 7-아미노-4-메틸쿠마린, 알렉사플루오르® 350, 알렉사플루오르® 405, 캐스케이드 블루(Cascade Blue)®, 캐스케이드 옐로우(Cascade Yellow)™, 단실(Dansyl), 디메틸아미노쿠마린, 마리나 블루(Marina Blue)®, 퍼시픽 블루(Pacific Blue)™, 퍼시픽 오렌지(Pacific Orange)™, 메톡시쿠마린, 히드록시쿠마린, 알렉사플루오르® 610-R-피코에리트린, 알렉사플루오르® 647-R-피코에리트린, 알렉사플루오르® 680-R-피코에리트린, Cy2, Cy3, Cy3.5, Cy5, Cy5.5, 에오신, 오르겐 그린(Orgeon Green)® 488, 로다민 그린™, 로다민 6G, R-피코에리트린, 알렉사플루오르® 546, 알렉사플루오르® 555, 알렉사플루오르® 568, 알렉사플루오르® 594, BODIPY® R6G, BODIPY® TMR, BODIPY® TR-X, 로다민 6G, 로다민 레드™, 테트라메틸로다민, 텍사스 레드(Texas Red)®, X-로다민, 알렉사플루오르® 647, 알렉사플루오르® 660, 알렉사플루오르® 680, 알렉사플루오르® 680-알로피코시아닌, 알렉사플루오르® 700, 알렉사플루오르® 700-알로피코시아닌, 알렉사플루오르® 750, 알렉사플루오르® 750-알로피코시아닌, 알렉사플루오르® 790, 및 알로피코시아닌으로서 시판되는 형광단을 포함한다.
HBV를 위한 형광-HAP 염색제의 생물학적 검사
도 1은 FL-HAP가 조합 속도를 향상시킨다는 것을 보여준다. 이 실험에서, 5 μM의 Cp를 150 mM NaCl의 첨가에 의해 조합을 유도하기 전에, FL-HAP알렉사플루오르 ® 488 (화합물 5)과 함께 또는 이 화합물 없이 인큐베이션하였다. FL-HAP알렉사플루오르 ® 488 (화합물 5)의 농도 증가는 코어 단백질 조합을 가속한다.
도 2는 FL-HAP가 조합체의 안정성을 증가시키고 캡시드와 특이적으로 결합한다는 것 (이합체가 아님)을 보여준다. 이 실험에서, 5 μM의 Cp를 FL-HAP알렉사플루오르 ® 488 (화합물 5)과 혼합한 후에, 150 mM의 NaCl로 조합을 유도하였다. 24시간 후에 반응을 수퍼로스(Superose) 6 컬럼에서 분해하였다. 캡시드는 9.5 ml에서 용리되었고, 응집체는 8 ml에서 용리되었으며, Cp 이합체는 18 ml에서 용리되었다. FL-HAP알렉사플루오르® 488 (화합물 5)의 증가는 점진적으로 거대해지는 복합체의 보다 많은 조합체를 유도하였다. 형광 분자만이 광을 흡수하는 495 nm (이하)에서 가시화하였을 때, 조합된 Cp (즉, 캡시드)만이 FL-HAP에 의해 결합된다는 것이 분명하였다.
도 3은 FL-HAP가 HBV 캡시드와 높은 친화도로 결합하고 서서히 해리된다는 것을 보여준다. 좌측: FL-HAP알렉사플루오르 ® 488 (화합물 5)로 염색된 캡시드가 수크로스 구배에서 분리되었다. 캡시드가 2개의 크기로 발생하므로, 2개의 선명한 (녹색) 밴드를 갖는다. 우측: 나열된 농도의 캡시드를 전기영동 전에 25 nM의 FL-HAP알렉사플루오르® 488 (화합물 5)로 염색하였다. 이러한 비-평형화 조건하에서도, FL-HAP알 렉사플루오르® 488 결합은 nM 농도에서 분명하였다.
도 4는 FL-HAP만이 HBV-생성 세포를 표지한다는 것을 보여준다. 좌측 패널에, FL-HAP알렉사플루오르 ® 488 (화합물 5)로 염색된 대조군 HepG2 세포를 형광 현미경 사진으로 나타내고; 카메라를 고노출로 설정하였지만, 녹색 점상이 관찰되지 않았다. RNA가 채워진 HBV 코어를 발현하는 HepG2 세포에서는 (우측 패널), 다수의 점상 및 점상의 응집체가 FL-HAP알렉사플루오르 ® 488 (화합물 5)로의 염색 후에 관찰되었다.
FL-HAP알렉사플루오르 ® 488 (화합물 5)은 HAP 분자의 다수의 중요한 성질을 보유한다. 이는 HBV 코어 단백질 이합체의 조합을 유도하고 (도 1), 조합 수준을 향상시키며 (도 2), 이상 입자의 형성을 유도한다 (도 1 및 도 2). FL-HAP가 이상 조합체를 유도한다는 것을 입증하기 위해, 광 산란도가 유리 캡시드를 초과하며 (도 1), 조합 생성물이 크기 배제 컬럼 (SEC)에서 캡시드보다 더 신속히 전개된다는 것을 (도 2) 주목할 수 있다. 또한, SEC 실험은 FL-HAP알렉사플루오르 ® 488이 첨가되었을 때 유리 HBV 이합체가 점진적으로 감소한다는 것을 나타내고, 이는 FL-HAP가 캡시드를 안정화한다는 것을 시사한다. 가장 중요한 점은, FL-HAP알렉사플루오르 ® 488 (화합물 5)이 높은 친화도로 예비-조합된 코어와 결합한다는 것이다. 이는 (i) 크기 배제 크로마토그래피 (도 2), (ii) HBV 코어 샘플의 염색 및 수크로스 구배에서의 단리 (도 3, 좌측), 및 (iii) HBV 코어의 염색에 이어서, 아가로스 겔에서의 전기영동 정제 (도 3, 우측)에 의해 입증되었다. 도 2의 크기 배제 크로마토그리피 피크에 걸쳐서 단백질 대 형광단 흡광도의 비율을 조사함으로써, FL-HAP알렉사플루오르 ® 488 (화합물 5)의 대략 120개의 카피가 HBV 캡시드와 결합한다는 것이, 즉 2개의 코어 단백질 당 1개씩 결합한다는 것이 밝혀졌다. 이러한 데이터는 HBV 캡시드가 어떻게 형광을 현저히 집중시킬 수 있는가를 기계론적으로 입증해준다. 데이터는 또한 FL-HAP가 조합된 HBV 코어를 정량화하기 위한 유력한 도구라는 것을 보여준다.
FL-HAP의 다양한 형태가 합성가능하므로, 그에 따른 형광 염색제의 용해도 성질을 변화시킬 수 있다. 보다 가용성인 형태는 용액 또는 혈청 중의 HBV 코어를 관찰하는데 특히 유용하고; 이들은 또한 세포내 HBV 코어를 연하게 염색하는데도 유용할 수 있다. 예시 FL-HAP 화합물인, FL-HAP알렉사플루오르 ® 488 (화합물 5)의 세포막을 횡단하고, HBV-발현 세포를 표지하며, 그러한 세포에서의 HBV 코어의 농축을 특이적으로 표지하는 능력이 도 4에 도시되어 있다. HBV를 발현하지 않는 세포는 FL-HAP알렉사플루오르® 488 (화합물 5)을 농축시키지 않고 표지를 나타내지 않는다 (도 4). 다른 실험에서 (데이터가 도시되지 않음), FL-HAP알렉사플루오르 ® 488 (화합물 5) 형광은 Cp-특이적 항체를 동시-편재화하는 것으로 관찰되었다. FL-HAP의 보다 소수성인 형태 (예를 들어, 화합물 6 및 화합물 7)는 조직 샘플을 신속히 염색하는데 특히 유용하다.
본 발명은 지금까지 관련 기술분야의 통상의 기술자가 본 발명을 실시할 수 있도록 하기 위해 최대한으로, 분명하고, 간결하며, 정확한 용어로 기재되었다. 상기 내용은 본 발명의 바람직한 실시양태 및 실시예를 기재하는 것이며, 청구범위에서 상술된 본 발명의 취지 또는 범주로부터 벗어나지 않으면서 이의 수정이 이루어질 수 있다는 것이 이해되어야 한다.
본원에 인용된 참고문헌 및 그러한 문헌에서 개시된 모든 방법은 각각 본원에 참조로 포함된다.

Claims (46)

  1. 하기 화학식 I을 갖는 화합물 또는 그의 염.
    <화학식 I>
    Figure pct00064

    식 중:
    Q는 Ar1 또는 Ak1이고;
    Ar1은 아릴 또는 헤테로아릴이고;
    RC는 수소이고;
    Ak 및 Ak1은 독립적으로 C1-C6 알킬렌이고;
    Z는
    Figure pct00065
    또는
    Figure pct00066

    이며, 여기서
    n은 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6이고; y는 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12이고; z는 1, 2, 3, 또는 4이고; R은 H 또는 알킬이고;
    RD는 알킬, 헤테로알킬, 알케닐, 및 알키닐로 이루어진 군으로부터 선택되며, 이들은 각각 임의로 치환되고;
    RE는 형광단이고;
    Y는 O, S, 또는 HN이고;
    RA는 독립적으로 각각의 경우에, 할로이거나 또는 알킬, 헤테로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아미노 및 그의 유도체, 및 히드록실 및 그의 유도체로 이루어진 군으로부터 선택된 0 내지 3개의 치환기를 나타내며, 이들은 각각 임의로 치환되고;
    RB는 독립적으로 각각의 경우에, 할로겐이거나 또는 알킬, 헤테로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아미노 및 그의 유도체, 및 히드록실 및 그의 유도체로 이루어진 군으로부터 선택된 0 내지 3개의 치환기를 나타내며, 이들은 각각 임의로 치환된다.
  2. 제1항에 있어서, RA가 2-클로로-4-플루오로를 나타내는 것인 화합물.
  3. 제1항에 있어서, Q가 Ar1이며, 여기서 Ar1은 2-티아졸릴, 2-티에닐, 2-푸라닐, 2-(1-메틸)이미다졸릴, 2-피리미디닐, 2-나프틸, 2-피롤리디닐, 페닐, 2-피리딜, 3-피리딜, 또는 4-피리딜인 화합물.
  4. 제1항에 있어서, Q가 Ar1이며, 여기서 Ar1은 2-피리딜인 화합물.
  5. 제1항에 있어서, Q가 Ar1이고 RB가 존재하지 않는 것인 화합물.
  6. 제1항에 있어서, Y가 O인 화합물.
  7. 제1항에 있어서, RD가 메틸인 화합물.
  8. 제1항에 있어서, RE가
    Figure pct00067
    또는
    Figure pct00068
    인 화합물.
    식 중,
    R2, R3, R4 및 R5는 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, CN; 또는 C1 - C18 알킬, 또는 C1 - C18 알콕시 (여기서, 알킬 또는 알콕시는 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 카르복실산, 카르복실산의 염, 또는 C1 - C6 알콜의 카르복실산 에스테르에 의해 추가로 치환됨); 또는 --SO3X (여기서, X는 H 또는 반대이온임)이고;
    R1 및 R6은 H이거나; 또는 R1과 R2가 함께 또는 R5와 R6이 함께 또는 양자가 모두 --SO3X에 의해 임의로 1회 이상 치환된 융합 방향족 6원 고리를 형성하고;
    A는 NR8R9이며; 여기서 R8 및 R9는 독립적으로 H, C1 - C6 알킬, C1 - C6 카르복시알킬, C1 - C6 술포알킬, C1 - C6 카르복시알킬의 염, 또는 C1 - C6 술포알킬의 염이고, 여기서 알킬 부분은 임의로 아미노, 히드록시, 카르복실산, 카르복실산의 염, 또는 C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르에 의해 치환되거나; 또는 R8과 R9가 함께 피페리딘, 모르폴린, 피롤리딘 또는 피페라진인 포화 5- 또는 6원 헤테로사이클을 형성하며, 이들은 각각 임의로 메틸, 카르복실산, 카르복실산의 염, 또는 C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르에 의해 치환되거나; 또는
    R8과 R2가 함께 또는 R9와 R3이 함께 또는 양자가 모두 하나 이상의 C1 - C6 알킬 또는 --CH2SO3X 잔기에 의해 임의로 치환된, 포화 또는 불포화의 5- 또는 6원 고리를 형성하고;
    C는 OR17 또는 NR18R19이며, 여기서
    R17은 H 또는 C1 - C18 알킬이고;
    R18 및 R19는 독립적으로 H, C1 - C6 알킬, C1 - C6 카르복시알킬, C1 - C6 술포알킬, C1 - C6 카르복시알킬의 염, 또는 C1 - C6 술포알킬의 염이고, 여기서 알킬 부분은 임의로 아미노, 히드록시, 카르복실산, 카르복실산의 염, 또는 C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르에 의해 치환되거나; 또는 R18과 R19가 함께 피페리딘, 모르폴린, 피롤리딘 또는 피페라진인 포화 5- 또는 6원 헤테로사이클을 형성하고, 이들은 각각 임의로 메틸, 카르복실산, 카르복실산의 염, 또는 C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르에 의해 치환되거나; 또는
    R18과 R4가 함께 또는 R19와 R5가 함께 또는 양자가 모두 하나 이상의 C1 - C6 알킬 또는 --CH2SO3X 잔기에 의해 임의로 치환된, 포화 또는 불포화의 5- 또는 6원 고리를 형성하고;
    B는 O 또는 N+R18R19이고;
    R12, R13, R15, 및 R16은 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, --SO3X, 카르복실산, 카르복실산의 염, CN, 니트로, 히드록시, 아지도, 아미노, 히드라지노; 또는 C1 - C18 알킬, C1 - C18 알콕시, C1 - C18 알킬티오, C1 - C18 알카노일아미노, C1 - C18 알킬아미노카르보닐, C2 - C36 디알킬아미노카르보닐, C1 - C18 알킬옥시카르보닐, 또는 C6 - C18 아릴카르복스아미도이고, 이들의 알킬 또는 아릴 부분은 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알콜의 카르복실산 에스테르, --SO3X, 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노 또는 알콕시에 의해 임의로 1회 이상 치환되고, 각각의 알킬 부분은 1-6개의 탄소를 가지거나; 또는 한 쌍의 인접한 치환기 R12와 R13 또는 R15와 R16은 함께 카르복실산, 또는 카르복실산의 염에 의해 임의로 추가로 치환된 융합 6원 방향족 고리를 형성하고;
    R11은 H, 히드록시, CN 또는 C1 - C6 알콕시이거나; 또는 R11과 R12가 함께 H, F 또는 CH3에 의해 임의로 독립적으로 치환된 5- 또는 6원 스피로락톤 고리 또는 5- 또는 6원 스피로술톤 고리를 형성한다.
  9. 제1항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물 또는 그의 염.
    Figure pct00069
  10. 제1항에 있어서, RE가
    Figure pct00070
    또는
    Figure pct00071
    인 화합물.
    식 중,
    R1 및 R6은 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, C1 - C18 알킬 또는 C1 - C18 알콕시이고;
    R2, R3, R4 및 R5는 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, CN; 또는 C1 - C18 알킬, C1 - C18 알콕시 또는 C1 - C18 알킬티오, 여기서 알킬, 알콕시 또는 알킬티오는 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 술폰산, 술폰산의 염, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르 (여기서, R18은 C1 - C4 알킬임); 또는 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노, 또는 알콕시에 의해 추가로 치환되고, 이들의 알킬 부분은 독립적으로 1-6개의 탄소를 가지거나; 또는 R3 및 R4 중 어느 하나 또는 둘 모두는 --CH2N(CH2 COOR17)2이고, 여기서 R17은 H, 생물학적으로 적합한 반대이온, 1-6개의 탄소를 갖는 선형 또는 분지형 알킬, 또는 --CH2--O--(C=O)--R18이고;
    A는 OR7 또는 NR8R9이며, 여기서
    R7은 각각 독립적으로 H, C1 - C18 알킬, C1 - C18 아실 (여기서, 각각의 알킬 기는 독립적으로 1-6개의 탄소를 가지며 아미노, 히드록시, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르에 의해 임의로 치환됨); 또는 트리알킬실릴 (여기서, 각각의 알킬 기는 독립적으로 1-6개의 탄소를 가짐)이고;
    R8 및 R9는 독립적으로 H, C1 - C6 알킬, C1 - C6 카르복시알킬, C1 - C6 술포알킬, C1 - C6 카르복시알킬의 염, C1 - C6 술포알킬의 염, 또는 C1 - C18 아실이며, 여기서 알킬 부분은 임의로 아미노, 히드록시, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르에 의해 치환되거나; 또는 R8과 R2가 함께 또는 R9와 R3이 함께 또는 양자가 모두 하나 이상의 메틸에 의해 임의로 치환된, 포화 5- 또는 6원 고리를 형성하거나; 또는 R8이 R9와 함께 피페리딘, 모르폴린, 피롤리딘 또는 피페라진인 포화 5- 또는 6원 헤테로사이클을 형성하고, 이들은 각각 임의로 메틸, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, 또는 --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르에 의해 치환되고;
    R12, R13, R15 및 R16은 독립적으로 H, F, Cl, Br, I; 또는 술폰산, 술폰산의 염, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르, CN, 니트로, 히드록시, 아지도, 아미노, 히드라지노; 또는 C1 - C18 알킬, C1 - C18 알콕시, C1 - C18 알킬티오, C1 - C18 알킬아미노, C1 - C18 알킬에스테르, C1 - C18 알킬아미도 또는 C1 - C18 아릴아미도이고, 이들의 알킬 또는 아릴 부분은 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르, 술폰산, 술폰산의 염, 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노 또는 알콕시에 의해 1회 이상 임의로 치환되고, 각각의 알킬 부분은 1-6개의 탄소를 가지거나; 또는 한 쌍의 인접한 치환기 R12와 R13 또는 R15와 R16은 함께 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르에 의해 임의로 추가로 치환된 융합 6원 방향족 고리를 형성하고;
    R11은 H, 히드록시, CN 또는 C1 - C6 알콕시이거나; 또는 R11과 R12가 함께 임의로 독립적으로 H, F 또는 CH3에 의해 치환된 5- 또는 6원 스피로락톤 고리 또는 5- 또는 6원 스피로술톤 고리를 형성한다.
  11. 제1항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물 또는 그의 염.
    Figure pct00072
  12. 제1항에 있어서, RE가
    Figure pct00073
    인 화합물.
    식 중,
    R1, R2, R3, R4, R5, 및 R6은 각각 독립적으로 H, 할로겐, 알킬, 시클로알킬, 아릴, 아릴알킬, 아실 또는 술포이다.
  13. 제1항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물 또는 그의 염.
    Figure pct00074
  14. 제1항에 있어서, RE가
    Figure pct00075
    또는
    Figure pct00076
    인 화합물.
    식 중,
    R4는 C1 - C22 알킬 또는 C7 - C22 아릴알킬이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 N, O 및 S으로 이루어진 군으로부터 선택된, 6개 이하의 헤테로 원자를 혼입하고, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복시, 술포, 포스페이트, 아미노, 술페이트, 포스포네이트, 시아노, 니트로, 아지도, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노, 또는 C3 - C18 트리알킬암모늄으로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 1회 이상 치환되고;
    R2는 C1 - C22 알킬 또는 C7 - C22 아릴알킬이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 N, O 및 S으로 이루어진 군으로부터 선택된, 6개 이하의 헤테로 원자를 혼입하고, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복시, 술포, 포스페이트, 아미노, 술페이트, 포스포네이트, 시아노, 니트로, 아지도, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, C2 - C12 디알킬아미노, 또는 C3 - C18 트리알킬암모늄에 의해 1회 이상 치환되고;
    R6은 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
    R7은 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
    R8은 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
    R9는 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
    R16은 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
    R17은 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
    R18은 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
    R19는 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되거나; 또는
    R6과 R7;
    R7과 R8;
    R8과 R9;
    R16과 R17;
    R17과 R18; 및
    R18과 R19
    로부터 독립적으로 선택된 구성원은 이들이 결합된 원자와 함께 --CH-- 또는 --CR1--을 포함하는 방향족 고리를 형성하며, 여기서 R1은 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이고, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 치환되고;
    p는 1, 2 또는 3이고;
    q는 0, 1, 2 또는 3이고;
    R12는 C1 - C22 알킬 또는 C7 - C22 아릴알킬이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 N, O 및 S으로 이루어진 군으로부터 선택된, 6개 이하의 헤테로 원자를 혼입하고, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복시, 술포, 포스페이트, 아미노, 술페이트, 포스포네이트, 시아노, 니트로, 아지도, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, C2 - C12 디알킬아미노, 또는 C3 - C18 트리알킬암모늄에 의해 1회 이상 치환되고;
    R13은 C1 - C22 알킬 또는 C7 - C22 아릴알킬이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 N, O 및 S으로 이루어진 군으로부터 선택된, 6개 이하의 헤테로 원자를 혼입하고, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복시, 술포, 포스페이트, 아미노, 술페이트, 포스포네이트, 시아노, 니트로, 아지도, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노, 또는 C3 - C18 트리알킬암모늄에 의해 1회 이상 치환되고;
    R14는 C1 - C22 알킬 또는 C7 - C22 아릴알킬이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 N, O 및 S으로부터 선택된, 6개 이하의 헤테로 원자를 혼입하고, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복시, 술포, 포스페이트, 아미노, 술페이트, 포스포네이트, 시아노, 니트로, 아지도, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노, 또는 C3 - C18 트리알킬암모늄에 의해 1회 이상 치환되거나; 또는
    R13과 R14는 함께 임의로 치환된, 5- 또는 6원의 포화 또는 불포화 고리를 완성하고; 여기서
    술포는 술폰산 또는 술포네이트이다.
  15. 제1항에 있어서, RE가
    Figure pct00077
    인 화합물.
    식 중,
    R1, R2, R6, R41, R42, 및 R46은 독립적으로 수소, 시아노, 할로겐, 카르복실산, 술폰산 C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, 아릴, 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되며, 여기서 상기 알킬 또는 알콕시는 임의로 카르복실산, 술폰산, 또는 할로겐에 의해 치환되고 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 임의로 C1 - C6 알킬, C1 - C6 퍼플루오로알킬, 시아노, 할로겐, 아지도, 카르복실산, 술폰산, 또는 할로메틸에 의해 1회 이상 치환되거나; 또는
    R1과 R2가 함께 또는 R41과 R42가 함께 또는 양자가 모두 임의로 1회 이상 술포네이트화된 융합 방향족 또는 헤테로방향족 고리를 형성하고;
    R3, R4, R43, 및 R44는 독립적으로 수소, C1 - C6 알킬, 방향족 또는 헤테로방향족 고리로 이루어진 군으로부터 선택되며, 여기서 상기 알킬은 임의로 카르복실산, 술폰산, 아미노, 히드록시, 또는 할로겐에 의해 치환되고 상기 방향족 또는 헤테로방향족 고리는 임의로 C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 퍼플루오로알킬, 시아노, 할로겐, 카르복실산, 술폰산, 또는 할로메틸에 의해 1회 이상 치환되거나; 또는
    R2와 R3, R42와 R43, 또는 R3과 R4, 또는 R43과 R44, 또는 이들의 임의의 조합은 5- 또는 6원 지환족 고리를 형성하고;
    R5 및 R45는 독립적으로 수소, 메틸, 카르복시메틸, C2 - C6 알킬, 또는 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되고, 여기서 상기 알킬은 임의로 카르복실산, 술폰산, 아미노, 또는 할로겐에 의해 치환되고 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 임의로 C1 - C6 알킬, C1 - C6 퍼플루오로알킬, 시아노, 할로겐, 카르복실산, 술폰산, 또는 할로메틸에 의해 1회 이상 치환되거나; 또는
    R4와 R5 또는 R5와 R6 또는 R44와 R45 또는 R45와 R46, 또는 이들의 임의의 조합은 5- 또는 6원 지환족 고리를 형성하고;
    E, E', X' 및 X는 O, S, 또는 NR8이나, 단 E와 X 또는 E'와 X'가 둘다 존재하지는 않으며; 여기서
    R8은 독립적으로 수소, 메틸, 카르복시메틸, C2 - C6 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되며, 여기서 상기 알킬은 임의로 카르복실산, 술폰산, 아미노, 또는 할로겐에 의해 치환되고;
    R30, R31, R33 및 R34는 독립적으로 수소, F, Cl, Br, I, 술폰산, 카르복실산, CN, 니트로, 히드록시, 아지도, 아미노, 히드라지노, 또는 C1 - C18 알킬, C1 - C18 알콕시, C1 - C18 알킬티오, C1 - C18 알카노일아미노, C1 - C18 알킬아미노카르보닐, C2 - C36 디알킬아미노카르보닐, C1 - C18 알킬옥시카르보닐, 또는 C7 - C18 아릴카르복스아미도로 이루어진 군으로부터 선택되며, 여기서 상기 R30, R31, R33 및 R34의 상기 알킬 또는 아릴 부분은 임의로 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복실산, C1 - C6 알콜의 카르복실산 에스테르, 술폰산, 아미노, C1 - C6 알킬아미노, C1 - C6 디알킬아미노 및 C2 - C6 알콕시로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 1회 이상 치환되거나; 또는 한 쌍의 인접한 R30과 R31 또는 R33과 R34 치환기는 함께 임의로 카르복실산에 의해 추가로 치환된 융합 6원 방향족 고리를 형성한다.
  16. 제1항에 있어서, RE가
    Figure pct00078
    인 화합물.
    식 중,
    R4는 H, OH, CN, C1-C18 알킬, C1-C18 퍼플루오로알킬, 술포메틸, 술포메틸의 생물학적으로 적합한 염, 할로메틸, 또는 아릴이고;
    R5는 H 또는 C1-C6 알콕시이고;
    R6은 H, 메틸, 할로겐, 또는 SO3X이고;
    R7은 H 또는 NR1R2이며; 여기서
    R1 및 R2는 독립적으로 H, C1 - C18 알킬, C6 - C18 아릴, C1 - C18 알카노일, C7 - C18 아릴알카노일이거나; 또는
    R1은 R2와 함께 피페리딘, 모르폴린, 피롤리딘 또는 피페라진인 포화 5- 또는 6원 헤테로사이클을 형성하거나; 또는
    R1은 화학식
    Figure pct00079
    의 2-니트로벤질옥시카르보닐이며; 여기서
    R9 및 R10은 H, C1 - C6 알콕시이거나, 또는 R9와 R10은 함께 --O--CH2--O--이고; R11은 H, CH3, 카르복실산 또는 카르복실산의 생물학적으로 적합한 염이고;
    R8은 H, 할로겐, SO3X, C1-C6 알콕시 또는 C1-C6 알킬이고;
    X는 H, 또는 생물학적으로 적합한 양이온이다.
  17. 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항의 하나 이상의 화합물을, HBV를 진단, 검출, 추적하고/거나 그와 경쟁적으로 결합하는 유효량으로 포함하는 조성물.
  18. 제16항에 있어서, 하나 이상의 담체, 희석제 또는 부형제, 또는 이들의 조합을 추가로 포함하는 조성물.
  19. a) 세포 및 HBV를 진단, 검출 및/또는 추적하는 유효량의 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항의 하나 이상의 화합물 또는 그의 조성물의 혼합물을 인큐베이션하고;
    b) 상기 하나 이상의 화합물의 임의의 초과량을 세척 제거하고;
    c) 형광 신호를 도출하기 위한 자극을 혼합물에 제공하고;
    d) 자극된 혼합물을 분석하는 단계
    를 포함하는, 세포 및 조직에서 HBV를 검출, 진단, 및/또는 추적하는 방법.
  20. 제19항에 있어서, 세포가 조직 배양물, 채취한 직후의 생검체, 고정된 박편, 또는 다른 공급원으로부터의 세포인 방법.
  21. 제19항에 있어서, 분석이 벌크 형광의 검사, 개별 세포의 형광 현미경 검사, 세포 분취기, 또는 또 다른 메카니즘에 의해 수행되는 것인 방법.
  22. a) 정화된 혈청, 성장 배지, 또는 검사하려는 다른 액체 및 HBV를 진단, 검출 및/또는 추적하는 유효량의 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항의 하나 이상의 화합물 또는 그의 조성물을 포함하는 용액을 인큐베이션하고;
    b) 필요에 따라, e-항원 조합체를 검출하기 위해 이온 강도를 조정하여 상기 조합체를 유도하고;
    c) 결합되지 않은 상기 하나 이상의 화합물을 HBV 코어에 결합된 상기 하나 이상의 화합물로부터 분리하여 결합되지 않은 상 및 결합된 상을 각각 형성하고;
    d) 결합되지 않은 상 및 결합된 상과 관련된 형광을 분석하는 단계
    를 포함하는, 용액 중의 HBV 코어를 검출, 진단 및/또는 추적하는 방법.
  23. 제22항에 있어서, 결합되지 않은 화합물을 HBV 코어에 결합된 화합물로부터 분리하는 것이 겔 투과 크로마토그래피, 한외여과, 원심분리, 또는 다른 기술에 의해 수행되는 것인 방법.
  24. a) 항-HBV 신약 후보자, 예비-조합된 HBV 코어 및 HBV의 HAP 포켓과의 항-HBV 신약 후보자에 의한 경쟁적 결합을 검출하는 유효량의 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항의 하나 이상의 화합물 또는 그의 조성물의 혼합물을 인큐베이션하고;
    b) 상기 하나 이상의 화합물의 형광 변화를 측정하고;
    c) HBV의 HAP 포켓과의 항-HBV 신약 후보자에 의한 경쟁적 결합에 대하여 혼합물을 분석하는 단계
    를 포함하는, 항-HBV 신약 개발을 수행하는 방법.
  25. a) 항-HBV 신약 후보자, 예비-조합된 HBV 코어 및 HBV의 HAP 포켓과의 항-HBV 신약 후보자에 의한 경쟁적 결합을 검출하는 유효량의 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항의 하나 이상의 화합물 또는 그의 조성물의 혼합물을 인큐베이션하고;
    b) 결합되지 않은 상기 항-HBV 신약 후보자 및 결합되지 않은 상기 하나 이상의 화합물을 HBV 코어와 결합된 상기 항-HBV 신약 후보자 및 상기 하나 이상의 화합물로부터 분리하여 결합되지 않은 상 및 결합된 상을 각각 형성하고;
    c) 결합되지 않은 상 및 결합된 상과 관련된 형광을 측정하고;
    d) HBV의 HAP 포켓과의 항-HBV 신약 후보자에 의한 경쟁적 결합에 대하여 혼합물을 분석하는 단계
    를 포함하는, 항-HBV 신약 개발을 수행하는 방법.
  26. 제25항에 있어서, 결합되지 않은 화합물을 HBV 코어에 결합된 화합물로부터 분리하는 것이 겔 투과 크로마토그래피, 한외여과, 원심분리, 또는 다른 기술에 의해 수행되는 것인 방법.
  27. a) 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항의 하나 이상의 화합물 또는 그의 조성물; 및
    b) 용매
    를 포함하는, HBV를 검출, 진단 및/또는 추적하고/거나 HBV의 HAP 포켓과 경쟁적으로 결합하는 화합물을 동정하는 키트.
  28. (a) 하기 구조식 II, II' 또는 II"의 화합물을 적합하게 활성화된 형광단과 반응시키는 것을 포함하는, 하기 구조식 I을 갖는 화합물 또는 그의 염을 제조하는 방법.
    <구조식 I>
    Figure pct00080

    <구조식 II>
    Figure pct00081

    <구조식 II'>
    Figure pct00082

    <구조식 II">
    Figure pct00083

    식 중:
    Q, RC, RD, Ar1, Z, Ak, Ak1, R, RA, RB, n, y 및 z는 제1항에서 정의된 바와 같다.
  29. 제28항에 있어서, 적합하게 활성화된 형광단이
    Figure pct00084
    또는
    Figure pct00085
    인 방법.
    식 중,
    R2, R3, R4 및 R5는 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, CN; 또는 C1 - C18 알킬, 또는 C1 - C18 알콕시 (여기서, 알킬 또는 알콕시는 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 카르복실산, 카르복실산의 염, 또는 C1 - C6 알콜의 카르복실산 에스테르에 의해 추가로 치환됨); 또는 --SO3X (여기서, X는 H 또는 반대이온임)이고;
    R1 및 R6은 H이거나; 또는 R1과 R2가 함께 또는 R5와 R6이 함께 또는 양자가 모두 --SO3X에 의해 임의로 1회 이상 치환된 융합 방향족 6원 고리를 형성하고;
    A는 NR8R9이며; 여기서
    R8 및 R9는 독립적으로 H, C1 - C6 알킬, C1 - C6 카르복시알킬, C1 - C6 술포알킬, C1 - C6 카르복시알킬의 염, 또는 C1 - C6 술포알킬의 염이고, 여기서 알킬 부분은 임의로 아미노, 히드록시, 카르복실산, 카르복실산의 염, 또는 C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르에 의해 치환되거나; 또는 R8과 R9가 함께 피페리딘, 모르폴린, 피롤리딘 또는 피페라진인 포화 5- 또는 6원 헤테로사이클을 형성하며, 이들은 각각 임의로 메틸, 카르복실산, 카르복실산의 염, 또는 C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르에 의해 치환되거나; 또는
    R8과 R2가 함께 또는 R9와 R3이 함께 또는 양자가 모두 하나 이상의 C1 - C6 알킬 또는 --CH2SO3X 잔기에 의해 임의로 치환된, 포화 또는 불포화의 5- 또는 6원 고리를 형성하고;
    C는 OR17 또는 NR18R19이며, 여기서 R17은 H 또는 C1 - C18 알킬이고;
    R18 및 R19는 독립적으로 H, C1 - C6 알킬, C1 - C6 카르복시알킬, C1 - C6 술포알킬, C1 - C6 카르복시알킬의 염, 또는 C1 - C6 술포알킬의 염이고, 여기서 알킬 부분은 임의로 아미노, 히드록시, 카르복실산, 카르복실산의 염, 또는 C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르에 의해 치환되거나; 또는 R18과 R19가 함께 피페리딘, 모르폴린, 피롤리딘 또는 피페라진인 포화 5- 또는 6원 헤테로사이클을 형성하고, 이들은 각각 임의로 메틸, 카르복실산, 카르복실산의 염, 또는 C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르에 의해 치환되거나; 또는
    R18과 R4가 함께 또는 R19와 R5가 함께 또는 양자가 모두 하나 이상의 C1 - C6 알킬 또는 --CH2SO3X 잔기에 의해 임의로 치환된, 포화 또는 불포화의 5- 또는 6원 고리를 형성하고;
    B는 O 또는 N+R18R19이고;
    R12, R13, R15, 및 R16은 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, --SO3X, 카르복실산, 카르복실산의 염, CN, 니트로, 히드록시, 아지도, 아미노, 히드라지노; 또는 C1 - C18 알킬, C1 - C18 알콕시, C1 - C18 알킬티오, C1 - C18 알카노일아미노, C1 - C18 알킬아미노카르보닐, C2 - C36 디알킬아미노카르보닐, C1 - C18 알킬옥시카르보닐, 또는 C6 - C18 아릴카르복스아미도이고, 이들의 알킬 또는 아릴 부분은 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알콜의 카르복실산 에스테르, --SO3X, 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노 또는 알콕시에 의해 임의로 1회 이상 치환되고, 각각의 알킬 부분은 1-6개의 탄소를 가지거나; 또는 한 쌍의 인접한 치환기 R12와 R13 또는 R15와 R16은 함께 카르복실산, 또는 카르복실산의 염에 의해 임의로 추가로 치환된 융합 6원 방향족 고리를 형성하고;
    R11은 H, 히드록시, CN 또는 C1 - C6 알콕시이거나; 또는 R11과 R12가 함께 H, F 또는 CH3에 의해 임의로 독립적으로 치환된 5- 또는 6원 스피로락톤 고리 또는 5- 또는 6원 스피로술톤 고리를 형성하고;
    Rx는 카르복실산의 활성화된 에스테르, 아실 아지드, 알데히드, 알킬 할라이드, 무수물, 술포닐 할라이드, 말레미드, 이소시아네이트, 및 이소티오시아네이트로 이루어진 군으로부터 선택된 반응기이다.
  30. 제29항에 있어서, 반응기 Rx가 카르복실산의 활성화된 에스테르인 방법.
  31. 제30항에 있어서, 활성화된 에스테르가 테트라플루오로페닐 에스테르인 방법.
  32. 제28항에 있어서, 적합하게 활성화된 형광단이
    Figure pct00086
    또는
    Figure pct00087
    인 방법.
    식 중,
    R1 및 R6은 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, C1 - C18 알킬 또는 C1 - C18 알콕시이고;
    R2, R3, R4 및 R5는 독립적으로 H, F, Cl, Br, I, CN; 또는 C1 - C18 알킬, C1 - C18 알콕시 또는 C1 - C18 알킬티오, 여기서 알킬, 알콕시 또는 알킬티오는 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 술폰산, 술폰산의 염, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르 (여기서, R18은 C1 - C4 알킬임); 또는 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노, 또는 알콕시에 의해 추가로 치환되고, 이들의 알킬 부분은 독립적으로 1-6개의 탄소를 가지거나; 또는 R3 및 R4 중 어느 하나 또는 둘 모두는 --CH2N(CH2 COOR17)2이고, 여기서 R17은 H, 생물학적으로 적합한 반대이온, 1-6개의 탄소를 갖는 선형 또는 분지형 알킬, 또는 --CH2--O--(C=O)--R18이고;
    A는 OR7 또는 NR8R9이며, 여기서
    R7은 각각 독립적으로 H, C1 - C18 알킬, C1 - C18 아실 (여기서, 각각의 알킬 기는 독립적으로 1-6개의 탄소를 가지며 아미노, 히드록시, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르에 의해 임의로 치환됨); 또는 트리알킬실릴 (여기서, 각각의 알킬 기는 독립적으로 1-6개의 탄소를 가짐)이고;
    R8 및 R9는 독립적으로 H, C1 - C6 알킬, C1 - C6 카르복시알킬, C1 - C6 술포알킬, C1 - C6 카르복시알킬의 염, C1 - C6 술포알킬의 염, 또는 C1 - C18 아실이며, 여기서 알킬 부분은 임의로 아미노, 히드록시, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르에 의해 치환되거나; 또는 R8과 R2가 함께 또는 R9와 R3이 함께 또는 양자가 모두 하나 이상의 메틸에 의해 임의로 치환된, 포화 5- 또는 6원 고리를 형성하거나; 또는 R8이 R9와 함께 피페리딘, 모르폴린, 피롤리딘 또는 피페라진인 포화 5- 또는 6원 헤테로사이클을 형성하고, 이들은 각각 임의로 메틸, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, 또는 --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르에 의해 치환되고;
    R12, R13, R15 및 R16은 독립적으로 H, F, Cl, Br, I; 또는 술폰산, 술폰산의 염, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르, CN, 니트로, 히드록시, 아지도, 아미노, 히드라지노; 또는 C1 - C18 알킬, C1 - C18 알콕시, C1 - C18 알킬티오, C1 - C18 알킬아미노, C1 - C18 알킬에스테르, C1 - C18 알킬아미도 또는 C1 - C18 아릴아미도이고, 이들의 알킬 또는 아릴 부분은 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르, 술폰산, 술폰산의 염, 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노 또는 알콕시에 의해 1회 이상 임의로 치환되고, 각각의 알킬 부분은 1-6개의 탄소를 가지거나; 또는 한 쌍의 인접한 치환기 R12와 R13 또는 R15와 R16은 함께 카르복실산, 카르복실산의 염, C1 - C6 알킬의 카르복실산 에스테르, --CH2--O--(C=O)--R18의 카르복실산 에스테르에 의해 임의로 추가로 치환된 융합 6원 방향족 고리를 형성하고;
    R11은 H, 히드록시, CN 또는 C1 - C6 알콕시이거나; 또는 R11과 R12가 함께 임의로 독립적으로 H, F 또는 CH3에 의해 치환된 5- 또는 6원 스피로락톤 고리 또는 5- 또는 6원 스피로술톤 고리를 형성하고;
    Rx는 카르복실산의 활성화된 에스테르, 아실 아지드, 알데히드, 알킬 할라이드, 무수물, 술포닐 할라이드, 말레미드, 이소시아네이트, 및 이소티오시아네이트로 이루어진 군으로부터 선택된 반응기이다.
  33. 제32항에 있어서, 반응기 Rx가 이소티오시아네이트인 방법.
  34. 제28항에 있어서, 적합하게 활성화된 형광단이
    Figure pct00088
    인 방법.
    식 중,
    R1, R2, R3, R4, R5, 및 R6은 각각 독립적으로 H, 할로겐, 알킬, 시클로알킬, 아릴, 아릴알킬, 아실 또는 술포이고;
    Rx는 카르복실산의 활성화된 에스테르, 아실 아지드, 알데히드, 알킬 할라이드, 무수물, 술포닐 할라이드, 말레미드, 이소시아네이트, 및 이소티오시아네이트로 이루어진 군으로부터 선택된 반응기이다.
  35. 제34항에 있어서, 반응기 Rx가 카르복실산의 활성화된 에스테르인 방법.
  36. 제35항에 있어서, 활성화된 에스테르가 숙신이미딜 에스테르인 방법.
  37. 제28항에 있어서, 적합하게 활성화된 형광단이
    Figure pct00089
    또는
    Figure pct00090
    인 방법.
    식 중,
    R4는 C1 - C22 알킬 또는 C7 - C22 아릴알킬이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 N, O 및 S으로 이루어진 군으로부터 선택된, 6개 이하의 헤테로 원자를 혼입하고, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복시, 술포, 포스페이트, 아미노, 술페이트, 포스포네이트, 시아노, 니트로, 아지도, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노, 또는 C3 - C18 트리알킬암모늄으로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 1회 이상 치환되고;
    R2는 C1 - C22 알킬 또는 C7 - C22 아릴알킬이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 N, O 및 S으로 이루어진 군으로부터 선택된, 6개 이하의 헤테로 원자를 혼입하고, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복시, 술포, 포스페이트, 아미노, 술페이트, 포스포네이트, 시아노, 니트로, 아지도, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, C2 - C12 디알킬아미노, 또는 C3 - C18 트리알킬암모늄에 의해 1회 이상 치환되고;
    R6은 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
    R7은 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
    R8은 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
    R9는 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
    R16은 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
    R17은 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
    R18은 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되고;
    R19는 H, 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 추가로 치환되거나; 또는
    R6과 R7;
    R7과 R8;
    R8과 R9;
    R16과 R17;
    R17과 R18; 및
    R18과 R19
    로부터 독립적으로 선택된 구성원은 이들이 결합된 원자와 함께 --CH-- 또는 --CR1--을 포함하는 방향족 고리를 형성하며, 여기서 R1은 아미노, 술포, 트리플루오로메틸, 할로겐, C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노이고, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 카르복시, 술포, 아미노, 및 히드록실로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 치환되고;
    p는 1, 2 또는 3이고;
    q는 0, 1, 2 또는 3이고;
    R12는 C1 - C22 알킬 또는 C7 - C22 아릴알킬이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 N, O 및 S으로 이루어진 군으로부터 선택된, 6개 이하의 헤테로 원자를 혼입하고, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복시, 술포, 포스페이트, 아미노, 술페이트, 포스포네이트, 시아노, 니트로, 아지도, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, C2 - C12 디알킬아미노, 또는 C3 - C18 트리알킬암모늄에 의해 1회 이상 치환되고;
    R13은 C1 - C22 알킬 또는 C7 - C22 아릴알킬이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 N, O 및 S으로 이루어진 군으로부터 선택된, 6개 이하의 헤테로 원자를 혼입하고, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복시, 술포, 포스페이트, 아미노, 술페이트, 포스포네이트, 시아노, 니트로, 아지도, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노, 또는 C3 - C18 트리알킬암모늄에 의해 1회 이상 치환되고;
    R14는 C1 - C22 알킬 또는 C7 - C22 아릴알킬이며, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 N, O 및 S으로부터 선택된, 6개 이하의 헤테로 원자를 혼입하고, 이들의 알킬 부분은 각각 임의로 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복시, 술포, 포스페이트, 아미노, 술페이트, 포스포네이트, 시아노, 니트로, 아지도, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 알킬아미노, 또는 C2 - C12 디알킬아미노, 또는 C3 - C18 트리알킬암모늄에 의해 1회 이상 치환되거나; 또는
    R13과 R14는 함께 임의로 치환된, 5- 또는 6원의 포화 또는 불포화 고리를 완성하고; 여기서
    술포는 술폰산 또는 술포네이트이고;
    Rx는 카르복실산의 활성화된 에스테르, 아실 아지드, 알데히드, 알킬 할라이드, 무수물, 술포닐 할라이드, 말레미드, 이소시아네이트, 및 이소티오시아네이트로 이루어진 군으로부터 선택된 반응기이다.
  38. 제37항에 있어서, 반응기 Rx가 카르복실산의 활성화된 에스테르인 방법.
  39. 제38항에 있어서, 활성화된 에스테르가 숙신이미딜 에스테르인 방법.
  40. 제28항에 있어서, 적합하게 활성화된 형광단이
    Figure pct00091
    인 방법.
    식 중:
    R1, R2, R6, R41, R42, 및 R46은 독립적으로 수소, 시아노, 할로겐, 카르복실산, 술폰산 C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, 아릴, 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되며, 여기서 상기 알킬 또는 알콕시는 임의로 카르복실산, 술폰산, 또는 할로겐에 의해 치환되고 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 임의로 C1 - C6 알킬, C1 - C6 퍼플루오로알킬, 시아노, 할로겐, 아지도, 카르복실산, 술폰산, 또는 할로메틸에 의해 1회 이상 치환되거나; 또는
    R1과 R2가 함께 또는 R41과 R42가 함께 또는 양자가 모두 임의로 1회 이상 술포네이트화된 융합 방향족 또는 헤테로방향족 고리를 형성하고;
    R3, R4, R43, 및 R44는 독립적으로 수소, C1 - C6 알킬, 방향족 또는 헤테로방향족 고리로 이루어진 군으로부터 선택되며, 여기서 상기 알킬은 임의로 카르복실산, 술폰산, 아미노, 히드록시, 또는 할로겐에 의해 치환되고 상기 방향족 또는 헤테로방향족 고리는 임의로 C1 - C6 알킬, C1 - C6 알콕시, C1 - C6 퍼플루오로알킬, 시아노, 할로겐, 카르복실산, 술폰산, 또는 할로메틸에 의해 1회 이상 치환되거나; 또는
    R2와 R3, R42와 R43, 또는 R3과 R4, 또는 R43과 R44, 또는 이들의 임의의 조합은 5- 또는 6원 지환족 고리를 형성하고;
    R5 및 R45는 독립적으로 수소, 메틸, 카르복시메틸, C2 - C6 알킬, 또는 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되고, 여기서 상기 알킬은 임의로 카르복실산, 술폰산, 아미노, 또는 할로겐에 의해 치환되고 상기 아릴 또는 헤테로아릴은 임의로 C1 - C6 알킬, C1 - C6 퍼플루오로알킬, 시아노, 할로겐, 카르복실산, 술폰산, 또는 할로메틸에 의해 1회 이상 치환되거나; 또는
    R4와 R5 또는 R5와 R6 또는 R44와 R45 또는 R45와 R46, 또는 이들의 임의의 조합은 5- 또는 6원 지환족 고리를 형성하고;
    E, E', X' 및 X는 O, S, 또는 NR8이나, 단 E와 X 또는 E'와 X'가 둘다 존재하지는 않으며; 여기서
    R8은 독립적으로 수소, 메틸, 카르복시메틸, C2 - C6 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되며, 여기서 상기 알킬은 임의로 카르복실산, 술폰산, 아미노, 또는 할로겐에 의해 치환되고;
    R30, R31, R33 및 R34는 독립적으로 수소, F, Cl, Br, I, 술폰산, 카르복실산, CN, 니트로, 히드록시, 아지도, 아미노, 히드라지노, 또는 C1 - C18 알킬, C1 - C18 알콕시, C1 - C18 알킬티오, C1 - C18 알카노일아미노, C1 - C18 알킬아미노카르보닐, C2 - C36 디알킬아미노카르보닐, C1 - C18 알킬옥시카르보닐, 또는 C7 - C18 아릴카르복스아미도로 이루어진 군으로부터 선택되며, 여기서 상기 R30, R31, R33 및 R34의 상기 알킬 또는 아릴 부분은 임의로 F, Cl, Br, I, 히드록시, 카르복실산, C1 - C6 알콜의 카르복실산 에스테르, 술폰산, 아미노, C1 - C6 알킬아미노, C1 - C6 디알킬아미노 및 C2 - C6 알콕시로 이루어진 군으로부터 선택된 치환기에 의해 1회 이상 치환되거나; 또는 한 쌍의 인접한 R30과 R31 또는 R33과 R34 치환기는 함께 임의로 카르복실산에 의해 추가로 치환된 융합 6원 방향족 고리를 형성하고;
    Rx는 카르복실산의 활성화된 에스테르, 아실 아지드, 알데히드, 알킬 할라이드, 무수물, 술포닐 할라이드, 말레미드, 이소시아네이트, 및 이소티오시아네이트로 이루어진 군으로부터 선택된 반응기이다.
  41. 제40항에 있어서, 반응기 Rx가 카르복실산의 활성화된 에스테르인 방법.
  42. 제41항에 있어서, 활성화된 에스테르가 숙신이미딜 에스테르인 방법.
  43. 제28항에 있어서, 적합하게 활성화된 형광단이
    Figure pct00092
    인 방법.
    식 중,
    R4는 H, OH, CN, C1-C18 알킬, C1-C18 퍼플루오로알킬, 술포메틸, 술포메틸의 생물학적으로 적합한 염, 할로메틸, 또는 아릴이고;
    R5는 H 또는 C1-C6 알콕시이고;
    R6은 H, 메틸, 할로겐, 또는 SO3X이고;
    R7은 H 또는 NR1R2이며; 여기서
    R1 및 R2는 독립적으로 H, C1 - C18 알킬, C6 - C18 아릴, C1 - C18 알카노일, C7 - C18 아릴알카노일이거나; 또는
    R1은 R2와 함께 피페리딘, 모르폴린, 피롤리딘 또는 피페라진인 포화 5- 또는 6원 헤테로사이클을 형성하거나; 또는
    R1은 화학식
    Figure pct00093
    의 2-니트로벤질옥시카르보닐이며; 여기서
    R9 및 R10은 H, C1 - C6 알콕시이거나, 또는 R9와 R10은 함께 --O--CH2--O--이고; R11은 H, CH3, 카르복실산 또는 카르복실산의 생물학적으로 적합한 염이고;
    R8은 H, 할로겐, SO3X, C1-C6 알콕시 또는 C1-C6 알킬이고;
    X는 H, 또는 생물학적으로 적합한 양이온이고;
    Rx는 카르복실산의 활성화된 에스테르, 아실 아지드, 알데히드, 알킬 할라이드, 무수물, 술포닐 할라이드, 말레미드, 이소시아네이트, 및 이소티오시아네이트로 이루어진 군으로부터 선택된 반응기이다.
  44. 제43항에 있어서, 반응기 Rx가 카르복실산의 활성화된 에스테르인 방법.
  45. 제44항에 있어서, 활성화된 에스테르가 숙신이미딜 에스테르인 방법.
  46. Q가 Ar1이며, 여기서 Ar1은 페닐, 2-피리딜, 3-피리딜, 또는 4-피리딜인, 제1항 내지 제45항 중 어느 한 항의 화합물, 조성물, 방법, 키트 또는 공정.
KR1020157030096A 2013-03-20 2014-03-20 형광-ｈａｐ: 세포 중의 hbv 코어를 위한 진단 염색제 KR20150133792A (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361803554P 2013-03-20 2013-03-20
US61/803,554 2013-03-20
PCT/US2014/031326 WO2014153459A2 (en) 2013-03-20 2014-03-20 Fluorescent-hap: a diagnostic stain for hbv cores in cells

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20150133792A true KR20150133792A (ko) 2015-11-30

Family

ID=51581802

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020157030096A KR20150133792A (ko) 2013-03-20 2014-03-20 형광-ｈａｐ: 세포 중의 hbv 코어를 위한 진단 염색제

Country Status (10)

Country Link
US (1) US10006913B2 (ko)
EP (1) EP2976083A4 (ko)
JP (1) JP2016522271A (ko)
KR (1) KR20150133792A (ko)
CN (1) CN105188703A (ko)
AU (1) AU2014235957A1 (ko)
CA (1) CA2907490A1 (ko)
MX (1) MX2015013363A (ko)
SG (1) SG11201507698QA (ko)
WO (1) WO2014153459A2 (ko)

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8178360B2 (en) 2006-05-18 2012-05-15 Illumina Cambridge Limited Dye compounds and the use of their labelled conjugates
SG11201500377UA (en) 2012-09-10 2015-02-27 Hoffmann La Roche 6-amino acid heteroaryldihydropyrimidines for the treatment and prophylaxis of hepatitis b virus infection
CA2920415A1 (en) 2013-11-19 2015-05-28 Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. Dihydropyrimidine compounds and their application in pharmaceuticals
AU2014356984B2 (en) 2013-11-27 2018-01-04 Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. Processes for preparing dihydropyrimidine derivatives and intermediates thereof
US9771358B2 (en) 2014-03-28 2017-09-26 Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. Dihydropyrimidine compounds and their application in pharmaceuticals
AU2016214799A1 (en) 2015-02-07 2017-06-15 Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. Complexes and salts of dihydropyrimidine derivatives and their application in pharmaceuticals
SG10202010180YA (en) * 2016-11-18 2020-11-27 Sichuan Kelun Biotech Biopharmaceutical Co Ltd Dihydropyrimidine compound and preparation method and use thereof
AU2018374389A1 (en) * 2017-11-30 2020-05-07 Arrakis Therapeutics, Inc. Nucleic acid-binding photoprobes and uses thereof
CN113512035B (zh) * 2021-04-26 2023-11-24 山东大学 二氢嘧啶-泊马度胺缀合物及其制备方法与应用

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE19817265A1 (de) * 1998-04-18 1999-10-21 Bayer Ag Verwendung von Dihydropyrimidinen als Arzneimittel und neue Stoffe
US7329485B2 (en) * 2005-10-12 2008-02-12 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Methods for detecting compounds that interfere with protein aggregation utilizing an in vitro fluorescence-based assay
PT2514750E (pt) * 2007-06-18 2014-01-23 Sunshine Lake Pharma Co Ltd Tiazolil dihidropirimidinas substituídas com bromo-fenilo
CN101575318B (zh) * 2009-06-25 2012-02-08 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 二氢嘧啶类化合物及其用于制备治疗和/或预防病毒性疾病的药物的用途
US9487534B2 (en) * 2011-08-02 2016-11-08 Scripps Research Institute, A Not-For-Profit Public Benefit Corporation Of California Modulators of virus assembly as antiviral agents

Also Published As

Publication number Publication date
AU2014235957A1 (en) 2015-10-01
US20160274112A1 (en) 2016-09-22
SG11201507698QA (en) 2015-10-29
CA2907490A1 (en) 2014-09-25
WO2014153459A3 (en) 2014-12-24
EP2976083A2 (en) 2016-01-27
WO2014153459A2 (en) 2014-09-25
US10006913B2 (en) 2018-06-26
MX2015013363A (es) 2016-01-08
CN105188703A (zh) 2015-12-23
JP2016522271A (ja) 2016-07-28
EP2976083A4 (en) 2016-11-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR20150133792A (ko) 형광-ｈａｐ: 세포 중의 hbv 코어를 위한 진단 염색제
CN107540608B (zh) 4-取代萘酰亚胺类化合物及其应用
CN108395443B (zh) 抑制程序性死亡受体配体1的环状化合物及其用途
SA99200059A (ar) مركبات إميدازول جديدة مستبدلة
CN103819486B (zh) 标记血清糖原磷酸化酶浓度水平的光亲和标记探针分子、其制备方法及医药用途
JP2016500107A (ja) グルタマーゼ阻害剤およびその使用方法
JP2022000421A (ja) τリン酸化を阻害する方法
JP6684831B2 (ja) 化合物
WO2012144654A1 (ja) 硫化水素測定用蛍光プローブ
JP2021536500A (ja) ケイ素置換ローダミン色素および色素コンジュゲート
EP1627224A1 (en) Differential analysis of cell surface proteins on closed membrane structures by labelling with dyes in the presence of an internal standard
TW201609668A (zh) 新穎ｄｇａｔ２抑制劑
JP2023502745A (ja) 細胞透過性環状ペプチドおよびその使用
JP7138768B2 (ja) ジメチルホスフィンオキシド化合物
JP2017509703A (ja) 化合物及びそれらの使用の方法
CN111032039B (zh) 用于预防和治疗医学障碍的化合物及其用途
JP2018145126A (ja) カルボキシペプチダーゼ活性検出用蛍光プローブ
JPWO2013183718A1 (ja) スクリーニング方法、タンパク質の不安定性及び／又は安定性を誘導する物質、及び、タンパク質の活性評価
TWI689503B (zh) 以鋅結合劑為基礎的ｅｂｎａ１專一性化合物
WO2021002771A1 (en) Conjugate of fluorescent dye for the visualization of psma expressing cells
BR112021009770A2 (pt) forma cristalina de inibidor de antígeno de superfície de hepatite b
US8715529B1 (en) Synthesis and applications of triazaborolopyridinium compounds and substituted triazaborolopyridinium compounds and methods of use
JP2007055956A (ja) 蛍光標識試薬及び疎水場検出試薬としての新規キノリン化合物
TWI746177B (zh) 一種b肝表面抗原抑制劑的晶型及其應用
Perkins et al. Synthesis of a peptide-universal nucleotide antigen: towards next-generation antibodies to detect topoisomerase I-DNA covalent complexes

Legal Events

Date Code Title Description
WITN Withdrawal due to no request for examination