KR20140137144A - Cosmetic composition for alleviating inflammation - Google Patents

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KR20140137144A
KR20140137144A KR1020130057657A KR20130057657A KR20140137144A KR 20140137144 A KR20140137144 A KR 20140137144A KR 1020130057657 A KR1020130057657 A KR 1020130057657A KR 20130057657 A KR20130057657 A KR 20130057657A KR 20140137144 A KR20140137144 A KR 20140137144A
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배은영
주동조
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주동조
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Abstract

The present invention relates to a cosmetic composition for alleviating inflammation on skin and, more specifically, a cosmetic composition for alleviating inflammation on skin, which includes eupafolin extracts separated from Artemisia princeps Pampanini as an active ingredient and 0.1-30 wt% of the dried eupafolin extract for the total weight of the composition. In the cosmetic composition of the present invention, the eupafolin extract as an active ingredient can be obtained in the highest yield rate compared with an existing technology.

Description

염증 완화용 화장료 조성물{Cosmetic composition for alleviating inflammation}TECHNICAL FIELD The present invention relates to a cosmetic composition for alleviating inflammation,

본 발명은 염증성 피부질환을 개선하는 효능을 갖는 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 사자발쑥으로부터 분리된 유파폴린을 유효성분으로 함유함으로써 염증을 완화시키는 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition having an effect of improving inflammatory skin diseases, and more particularly, to a cosmetic composition which alleviates inflammation by containing epopalpin isolated from lepidoptera, as an active ingredient.

민감성 피부는 일반적인 피부에 비해 상대적으로 피부 반응이 잘 유발되는 경우를 말한다. 명확하게 민감성 피부의 증상 및 원인이 밝혀져 있지는 않으나 대체로 민감성 피부는 화장품, 스트레스, 대기 오염 등 외부적 환경에 영향을 받는다. 이러한 영향은 홍반 등의 염증성 반응 및 피부 건조, 거칠어짐 등 육안적으로 확인할 수 있는 변화뿐만 아니라 따가움, 화끈거림, 가려움 등의 주관적인 느낌까지 매우 다양한 형태로 나타난다. Sensitive skin refers to the case where the skin reaction is relatively well induced compared to normal skin. Clearly, the symptoms and causes of sensitive skin are not known, but generally sensitive skin is affected by external environment such as cosmetics, stress, air pollution. These effects are not only visually recognizable changes such as inflammatory reactions such as erythema, dryness and roughness of the skin, but also a variety of subjective feelings such as burning, burning, itching, and the like.

자극반응이나 염증반응의 기전에서 사람의 각질형성 세포 및 랑게르한스 세포는 외부의 물질에 의해 다양한 싸이토카인을 만들어 방출할 수 있다. 이러한 싸이토카인은 인체 내 면역 체계 활성화 촉진물질로서 피부의 자극유발이나 국소적인 염증반응에 필수적으로 관여한다(J Appl Toxicol 16:65-70, 1996). 실제로 자극성 접촉피부염에서 인터루킨-6(Interleukin-6;IL-6), 인터루킨-1(Interleukin-1;IL-1), 종양 괴사인자-α(Tumor necrosis factor-α;TNF-α)의 증가가 보고된 바 있다(Contact Dermatitis 35:355-60, 1996, Dec).In the mechanism of stimulation or inflammation, human keratinocytes and Langerhans cells can produce and release various cytokines by external substances. These cytokines are essential for the activation of the immune system in the human body, which is essential for irritation of the skin and for local inflammatory responses (J Appl Toxicol 16: 65-70, 1996). Indeed, an increase in interleukin-6 (IL-6), interleukin-1 (IL-1), and tumor necrosis factor-α (TNF-α) (Contact Dermatitis 35: 355-60, 1996, Dec).

일반적으로 염증 반응은 조직(세포)의 손상이나 박테리아, 곰팡이, 바이러스, 여러 종류의 알레르기 유발물질 등 외부감염원에 감염되었을 때 국소 혈관과 체액 중 각종 염증 매개 인자 및 면역세포가 관련되어 효소 활성화, 염증매개물질 분비, 체액 침윤, 조직 파괴 등 일련의 복합적인 생리적 반응과 홍반, 부종, 통증 등 외적 증상이 나타낸다. 염증반응은 정상일 경우 외부감염원을 제거하고 손상된 조직을 재생하여 생명체 기능회복작용을 하지만, 항원이 제거되지 않거나 내부물질이 원인이 되어 염증반응이 과도하거나 지속적으로 일어나면 오히려 점막손상을 촉진하고, 그 결과 일부에서는 암유발 등의 질환을 유발한다(Jonathan Cohen, Nature,420, 885-891, 2002).In general, inflammation is caused by various inflammatory mediators and immune cells in the local blood vessels and body fluids when they are infected with external infectious agents such as tissue (cell) damage, bacteria, fungi, viruses and various allergens. Mediastinal secretion, fluid infiltration, tissue destruction, and other external symptoms such as erythema, edema, and pain. The inflammatory reaction is normal, but it removes the external infectious agent and regenerates the damaged tissue to regenerate the organism's function. However, if the antigen is not removed or the internal substance causes the inflammatory reaction to occur excessively or continuously, And some causes diseases such as cancer induction (Jonathan Cohen, Nature, 420, 885-891, 2002).

염증의 발생 원인은 생체에 다양한 생화학적인 현상이 관여하는 것으로, 특히 일산화질소(nitric Oxide;NO)를 발생시키는 효소인 일산화질소 합성효소(nitric oxide synthase; NOS) 및 프로스타글란딘(prostaglandin)의 생합성과 관련된 효소들이 염증 반응을 매개하는데 있어서 중요한 역할을 하고 있다. 따라서 L-아르기닌(L-Arginine)으로부터 NO를 생성시키는 효소인 NOS, 또는 아라키돈산(Arachidonic acid)으로부터 프로스타글란딘류를 합성하는데 관련된 효소인 시클로옥시게나제(cyclooxygenase;COX)는 염증을 차단하는데 있어서 주된 목표가 되고 있다. Inflammation is caused by a variety of biochemical phenomena in the living body. In particular, inflammation is related to biosynthesis of nitric oxide synthase (NOS) and prostaglandin, which are enzymes that generate nitric oxide (NO) Enzymes play an important role in mediating inflammatory responses. Thus, NOS, an enzyme that produces NO from L-arginine, or cyclooxygenase (COX), an enzyme involved in the synthesis of prostaglandins from arachidonic acid, It is becoming a goal.

최근 연구결과에서 NOS는 몇 가지 종류가 존재하는데 뇌에 존재하는 뇌 일산화질소 합성효소(brainNOS; bNOS), 신경계에 존재하는 신경 일산화질소 합성효소(neuronal NOS; nNOS), 혈관계에 존재하는 내피 일산화질소 합성효소(endothelial NOS; eNOS) 등으로 체내에 항상 일정수준으로 발현된다. 이들에 의해 소량 생성되는 NO는 신경전달이나 혈관확장 유도 등 정상적인 신체의 항상성 유지에 중요한 역할을 하는 반면, 각종 사이토카인(cytokines)이나 외부 자극물질로 유도되는 iNOS(induced NOS)로 인해 급격히 과량 발생되는 NO는 세포독성이나 각종 염증반응을 일으키며, 만성 염증은 iNOS 활성의 증가와 관련 있다고 알려지고 있다(Jon O. Lundberg, et al., Nature Reviews Drug Discovery, 2008).  Recent studies have shown that there are several types of NOS: brain NO synthase (brainNOS), neuronal NOS (nNOS) present in the nervous system, endotoxin NOS And endothelial NOS (eNOS). Although NO produced by these cells plays an important role in maintenance of normal body homeostasis, such as neurotransmission or vasodilation induction, NO is rapidly produced due to iNOS (induced NOS) induced by various cytokines or external stimulants (Jon O. Lundberg, et al., Nature Reviews Drug Discovery, 2008). It is known that NO is associated with cytotoxicity and various inflammatory responses, and chronic inflammation is associated with an increase in iNOS activity.

외부로 분비되는 박테리아 톡신(toxin)인 리포폴리사카라이드(lipopolysaccharide; LPS)는 세포의 염증반응을 자극하고, 일산화질소(NO), 사이토카인 (cytokine), 종양괴사인자(TNF-α), 프로스타글란딘E2(prostaglandin E2) 및 염증반응을 촉진하는 아이코사노이드(eicosanoid) 조절물질을 포함한 여러 가지의 염증조절물질을 분비하게 한다(Chen YC, et al., Biochem. Pharmacol., 61, 1417-1427, 2001). 일산화질소 합성효소에서 cNOS는 신경세포 및 내피세포와 같은 여러 가지의 세포에서 일정하게 존재하고 칼슘에 의존적인 칼모듈린(calmodulin)에 의해서 전사수준이 우선적으로 조절되어진다. 반면에, 혈관근육세포(smooth muscle cells), 대식세포(macropharge), 간세포(hepatocyte) 및 성상세포(astrocyte)는 염증 사이토카인과 리포폴리사카라이드 등에 반응하여 유도되어진다. 일산화질소 합성효소의 활성화는 다양한 염증질환의 질병에서 중요한 역할을 하며, 많은 양의 일산화질소 형성을 촉진한다. 그러므로 일산화질소 합성효소에 의한 일산화질소 생성은 염증의 정도를 나타내며, 염증 진행을 평가할 수 있는 지표가 된다. 특이한 세포 유전자들의 발현은 COX-2 및 유도성 일산화질소 합성효소뿐만 아니라, 인터루킨-1,인터루킨-2, 인터루킨-6 및 종양괴사인자 같은 여러 가지의 염증 전사인자들이 포함된다(Csaba Szabo, et al.,Nature Reviews Drug Discovery, 6, 662-680. 2007).Lipopolysaccharide (LPS), a bacterial toxin secreted externally, stimulates the inflammatory response of the cells and stimulates the production of nitric oxide (NO), cytokines, tumor necrosis factor (TNF-α), prostaglandins E2 (prostaglandin E2), and eicosanoid regulators that promote inflammatory responses (Chen YC, et al., Biochem. Pharmacol., 61, 1417-1427, 2001). In the nitric oxide synthase, cNOS is constantly present in various cells such as nerve cells and endothelial cells, and the level of transcription is preferentially controlled by calcium-dependent calmodulin. On the other hand, smooth muscle cells, macropharge, hepatocyte and astrocyte are induced in response to inflammatory cytokines and lipopolysaccharides. Activation of nitric oxide synthase plays an important role in diseases of various inflammatory diseases and promotes a large amount of nitrogen monoxide formation. Therefore, production of nitrogen monoxide by nitric oxide synthase is indicative of the degree of inflammation and is an indicator of the progression of inflammation. Expression of specific cellular genes includes various inflammatory transcription factors such as interleukin-1, interleukin-2, interleukin-6 and tumor necrosis factor as well as COX-2 and inducible nitric oxide synthase (Csaba Szabo, et al , Nature Reviews Drug Discovery, 6, 662-680, 2007).

저자극성 피부용 화장품들은 대부분 자극을 일으킬 여지가 있는 유효성분을 제거하여 접촉성 피부염, 알러지성 피부염 등을 일으키지 않도록 개발되어 왔다. 그러나 환경적, 심리적 요인에 의해 민감성 피부에도 유효성분들의 사용이 요구되고 있다. 이에 화장품 업계에서는 싸이토카인 및 염증성 매개물질의 조절에 의해 면역반응을 완화시키며, 피부 장벽 강화 기능, 피부 보호 기능을 통해 피부 자극을 완화시키고자 한다. 그 예로 염증성 매개물질의 조절 및 민감성 피부의 역반응 조절의 브레디키닌 길항제(bradykinin antagonist; 미국등록특허 제5,849,312호)가 있으며, 싸이토카인 중 하나인 TNF-α 저해제를 민감성 피부용 제제로 적용한 경우(미국등록특허 제 5,851,556호)가 있다. Most cosmetic products for hypoallergenic skin have been developed so as not to cause contact dermatitis, allergic dermatitis and the like by removing the active ingredient which is likely to cause irritation. However, due to environmental and psychological factors, it is required to use effective ingredients for sensitive skin. In the cosmetics industry, it is intended to alleviate the immune response by controlling cytokines and inflammatory mediators, and to alleviate skin irritation through skin barrier enhancement and skin protection. For example, there is a bradykinin antagonist (US Pat. No. 5,849,312) that regulates inflammatory mediators and regulates the response of sensitive skin. When a TNF-alpha inhibitor, one of the cytokines, is applied as a sensitive skin preparation Patent No. 5,851,556).

미국등록특허 제5,849,312호(1998.12.15)U.S. Patent No. 5,849,312 (December 15, 1998) 미국등록특허 제 5,851,556호(1998.12.22)U.S. Patent No. 5,851,556 (December 22, 1998)

Contact Dermatitis 35:355-60, 1996, DecContact Dermatitis 35: 355-60, 1996, Dec Jonathan Cohen, Nature,420, 885-891, 2002Jonathan Cohen, Nature, 420, 885-891, 2002 Jon O. Lundberg, et al., Nature Reviews Drug Discovery, 2008Jon O. Lundberg, et al., Nature Reviews Drug Discovery, 2008 Chen YC, et al., Biochem. Pharmacol., 61, 1417-1427, 2001Chen YC, et al., Biochem. Pharmacol., 61, 1417-1427, 2001 Csaba Szabo, et al.,Nature Reviews Drug Discovery, 6, 662-680. 2007Csaba Szabo, et al., Nature Reviews Drug Discovery, 6, 662-680. 2007

이에 본 발명자들은 상기 종래 기술보다 유효성분으로 유파폴린을 최대한 높은 수율로 수득할 수 있는 방법을 찾고, 이를 화장료에 적용하기 위하여 노력하였다. 그 결과, 사자발쑥으로부터 분리된 유파폴린을 유효성분으로 이용하여 산화질소(NO) 매개 염증에 대한 연구를 진행하여 RAW 264.7 세포에서 LPS로 유도된 TNF-α, IL-6, NO의 생성억제 염증 완화 효과를 나타내는 것을 확인하였다.Accordingly, the present inventors searched for a method capable of obtaining, as much as possible, the effective amount of efavirone as an effective ingredient, and tried to apply it to cosmetics. As a result, we investigated nitric oxide (NO) -mediated inflammation using efaviruline isolated from lepidoptera, and inhibited TNF-α, IL-6 and NO production induced by LPS in RAW 264.7 cells. It was confirmed that it exhibited a relaxation effect.

본 발명은 산화질소(NO) 매개 염증에 대한 염증 완화용 화장료 조성물을 제공하고자 한다.The present invention is to provide a cosmetic composition for relieving inflammation of nitrogen oxides (NO) -mediated inflammation.

상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 사자발쑥으로부터 분리된 유파폴린을 유효성분으로 함유하는 염증 완화용 화장료 조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a cosmetic composition for relieving inflammation, which contains, as an active ingredient, a filamentous fungus isolated from lepidoptera.

본 발명에 의한 화장료 조성물은 사자발쑥으로부터 분리된 유파폴린을 유효성분으로 함유하여 염증성 매개분자인 TNF-α, NO, IL-6의 발현을 억제하는 탁월한 항염 효과를 나타내므로 산화질소 매개 염증을 완화하는 화장료 조성물로 이용될 수 있다.The cosmetic composition according to the present invention exhibits an excellent anti-inflammatory effect inhibiting the expression of TNF-a, NO, and IL-6, which are inflammatory mediators, as an active ingredient and contains epopalpin isolated from lepidoptera, And the like.

도 1은 RAW 264.7 세포에서 유파폴린에 의한 cell viability(MTT assay)를 나타내는 그래프이다.
도 2는 RAW 264.7 세포에서 유파폴린에 의한 NO 생성억제효과를 나타내는 그래프이다.
도 3은 유파폴린에 의한 RAW 264.7 세포에서 IL-6생성억제효과를 나타내는 그래프이다.
도 4는 유파폴린에 의한 RAW 264.7 세포에서 TNF-a생성억제효과를 나타내는 그래프이다.
FIG. 1 is a graph showing cell viability (MTT assay) by means of propagation of RAW 264.7 cells.
FIG. 2 is a graph showing the effect of inhibiting the production of NO by daffodil in RAW 264.7 cells.
FIG. 3 is a graph showing the effect of inhibiting IL-6 production in RAW 264.7 cells by the dauphpholin.
FIG. 4 is a graph showing the inhibitory effect of RAW 264.7 cells on the production of TNF-.alpha.

본 발명은 염증성 피부질환을 개선하는 효능을 갖는 화장료에 관한 것으로, 좀 더 구체적으로는 사자발쑥(Artemisia princeps Pampanini)으로부터 분리된 유파폴린(Eupafolin) 추출물을 유효성분으로 함유하는 염증 완화용 화장료 조성물에 관한 것이다.More particularly, the present invention relates to a cosmetic composition for relieving inflammation comprising an extract of Eupafolin isolated from Artemisia princeps Pampanini as an active ingredient. .

본 발명에서 상기 유파폴린은 하기 화학식 1의 화합물인 것일 수 있다.In the present invention, the epopalone may be a compound represented by the following general formula (1).

[화학식 1][Chemical Formula 1]

Figure pat00001
Figure pat00001

본 발명에서 상기 화장료 조성물은 산화질소(NO) 매개 염증을 완화하는 것일 수 있다.In the present invention, the cosmetic composition may be one which alleviates nitric oxide (NO) mediated inflammation.

본 발명에서 상기 유파폴린 추출물은 전체 조성물 총 중량 중, 건조 중량으로 0.1 ~ 30 중량%를 포함하는 것일 수 있다.In the present invention, the propagation matter extract may comprise 0.1-30 wt% of dry weight of the total composition.

본 발명에서 상기 유파폴린 추출물은 물, 탄소수 1 내지 6개의 알코올에서 선택되는 어느 하나 또는 둘 이상의 혼합용매로 추출한 것일 수 있다.In the present invention, the ephedraein extract may be extracted with one or two or more mixed solvents selected from water and alcohols having 1 to 6 carbon atoms.

본 발명에서 상기 유파폴린 추출물은 90 ~ 100% 메탄올을 사용하여 조추출물을 수득한 후, 에틸아세테이트를 사용하여 가용 추출물을 수득한 것일 수 있다.In the present invention, the crude saponin extract may be obtained by using 90 to 100% methanol and then extracting the extract using ethyl acetate.

본 발명에서 상기 유파폴린 추출물은 In the present invention, the < RTI ID = 0.0 >

a) 건조 및 분쇄된 사자발쑥 전초를 메탄올에 담가 상온에서 조추출물을 수득하는 단계;a) obtaining a crude extract at room temperature by immersing the dried and pulverized rice bulb outpost in methanol;

b) 상기 조추출물을 물에 현탁하여 분액깔대기에 넣은 후, 에틸아세테이트를 가하여 진탕하고 감압농축기로 농축하여 에틸아세테이트 가용 추출물을 수득하는 단계;b) suspending the crude extract in water and putting it in a separating funnel, adding with ethylacetate and shaking, and concentrating with a vacuum concentrator to obtain an ethyl acetate soluble extract;

c) 상기 가용추출물을 RP-18컬럼에 넣고, 메탄올 : 물을 30:70 ~ 100: 0 부피비로 혼합한 용출용매를 사용하여 크로마토그래피를 실시하는 단계;c) placing the soluble extract in an RP-18 column, performing chromatography using an elution solvent in which methanol: water is mixed at a volume ratio of 30:70 to 100: 0;

d) 박층 크로마토그래피에서 동일한 양상을 나타내는 화합물을 합하여 농축하여 8개의 분획하는 단계;d) collecting the compounds exhibiting the same pattern in thin layer chromatography, concentrating and dividing into eight fractions;

e) 5번째 분획물을 RP-18컬럼에 넣고, 메탄올 : 물을 30:70 ~ 100: 0 부피비로 혼합한 용출용매를 사용하여 크로마토그래피를 실시하는 단계; 및e) placing the fifth fraction into an RP-18 column, performing chromatography using an elution solvent comprising methanol: water in a volume ratio of 30:70 to 100: 0; And

f) 4번째 분획물을 ODS 컬럼 크로마토그래피로부터 정제하는 단계;f) purifying the fourth fraction from ODS column chromatography;

를 포함하여 추출된 것일 수 있다.And the like.

본 발명에서 상기 화장료 조성물은 유연화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 워터, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 팩, 스프레이, 파우더의 제형을 갖는 것일 수 있다.
In the present invention, the cosmetic composition may have a formulation of a softening agent, a nutritional lotion, a nutritional cream, a massage cream, an essence, an eye cream, a cleansing water, a cleansing cream, a cleansing foam, a pack, a spray and a powder.

이하 본 발명의 화장료 조성물의 구성에 대하여 구체적으로 기재한다.Hereinafter, the composition of the cosmetic composition of the present invention will be specifically described.

상기 유파폴린은 건조한 사자발쑥 전초 중량(㎏)의 약 1 내지 15배, 바람직하게는 약 5 내지 10배의 탄소수 1 내지 6개의 알코올, 바람직하게는 메탄올에 담가 24 시간 동안 반복 정치 추출하고 여과한 후, 감압농축하고 이들을 통상의 분획 공정을 수행하여 얻을 수 있다.The propagation medium is dipped in an alcohol of about 1 to 6 carbon atoms, preferably methanol, about 1 to 15 times, preferably about 5 to 10 times, the dry lepidopteran weight (kg) , Followed by concentration under reduced pressure, and then carrying out a conventional fractionation process.

보다 구체적으로 본 발명자들은 하기의 추출방법을 이용하여 추출을 함으로써 유파폴린의 수득율을 높일 수 있음을 발견하였다.More specifically, the inventors of the present invention have found that the yield of dauphpholin can be increased by performing the extraction using the following extraction method.

구체적으로, 건조한 사자발쑥 전초를 입자의 크기가 30메시(mesh)이하가 되도록 분쇄한 후, 90% ~ 100% 메탄올 용액을 가한 다음 20 내지 100℃, 바람직하게는 20 내지 30℃ 추출온도에서 약 1시간 내지 10일, 바람직하게는 약 20시간 내지 30시간동안 냉침추출, 열수추출, 초음파 추출, 환류냉각 추출 등의 추출방법을 이용하여 1 내지 10회, 바람직하게는 2 내지 7회 반복 추출한 후 감압 농축하여 조추출물을 수득한다. 이때, 90 ~ 100% 메탄올을 사용하여 상온(15 ~ 25℃)에서 추출함으로써 수득율을 더욱 높일 수 있다. Specifically, the dried lion grass wormwood outpowder is pulverized to have a particle size of 30 mesh or less, followed by addition of a 90% to 100% methanol solution, followed by drying at 20 to 100 ° C, preferably 20 to 30 ° C Preferably 1 to 10 times, preferably about 20 to 30 hours, by 1 to 10 times, preferably 2 to 7 times, using an extraction method such as cold extraction, hot water extraction, ultrasonic extraction, And concentrated under reduced pressure to obtain crude extract. At this time, the yield can be further increased by using 90 to 100% methanol at room temperature (15 to 25 ° C).

상기의 방법으로 수득한 사자발쑥 조추출물을 물에 현탁하여 분액깔대기에 넣은 후, 여기에 에틸아세테이트를 가한 다음 진탕하여 각각의 가용부를 감압농축기로 농축하여 사자발쑥의 에틸 아세테이트가용 추출물을 수득한다. The crude Mugwort crude extract obtained by the above method was suspended in water and placed in a separating funnel. Ethyl acetate was added thereto, followed by shaking. Each soluble fraction was concentrated with a vacuum concentrator to obtain an ethyl acetate soluble extract of Mugwort wormwood.

상기의 방법으로 수득한 사자발쑥 에틸 아세테이트 가용추출물을 RP-18 컬럼에 걸고 메탄올:물(30:70 내지 100:0(v/v))을 용출용매로 사용하여 크로마토그래피를 실시함에 따라 박층 크로마토그래피에서 동일한 양상을 나타내는 것들은 합하고 농축하여 8개의 분획으로 나눈다.The lysozyme-extracted ethyl acetate extract obtained by the above method was applied to an RP-18 column and chromatographed using methanol: water (30:70 to 100: 0 (v / v)) as elution solvent, The ones that show the same pattern in the image are combined and concentrated into eight fractions.

상기 분획물 중 5번째 분획물을 메탄올:물(30 : 70 내지 100:0(v/v))을 용출용매로 사용한 RP-18 크로마토그래피로부터 다시 6개의 분획으로 나눈다. 이 중 4번째 분획물인 ODS 컬럼 크로마토그래피로부터 정제하여 유파폴린 화합물을 수득할 수 있다.The fifth fraction from the fractions was further divided into six fractions from RP-18 chromatography using methanol: water (30: 70-100: 0 (v / v)) as elution solvent. And purified from the fourth fraction, ODS column chromatography, to obtain a propagopholine compound.

상기와 같이 분리한 유파폴린은 하기 화학식 1로 표시된다.The separated farpolin is represented by the following general formula (1).

[화학식 1][Chemical Formula 1]

Figure pat00002
Figure pat00002

상기 화학식 1의 화합물(yellow amorphous powder)은 TLC에 전개시켜 관찰한 결과 UV 흡수가 뚜렷하고, 10% aq. H2SO4로 발색하였을 경우 노란색으로 발색된다.The yellow amorphous powder of the formula (1) was observed by developing on TLC. As a result, UV absorption was evident, and 10% aq. When developed with H 2 SO 4 , it is colored yellow.

또한 IR spectrum으로부터 수산기(3410 cm-1) 및 carbonyl(1662 cm-1)의 작용기를 갖는 것으로 확인되어 플라보노이드(flavonoid) 화합물로 추정된다. 상기 화합물의 NMR data는 eupatilin(1) 및 jaceosidin(2)과 매우 유사하지만, methoxy가 1개만 존재[δ C 132.61, (δ H 3.86, 3H, s)]하는 것이 다르다. 이 같은 사실은 EI/MS spectrum의 [M]+ 이온(m/z 317)으로부터 분자량이 317으로 나타나 확인할 수 있었다.It was also confirmed to have a hydroxyl group (3410 cm -1 ) and carbonyl (1662 cm -1 ) functional group from the IR spectrum and is estimated to be a flavonoid compound. The NMR data of this compound is very similar to eupatilin (1) and jaceosidine (2), but only one methoxy exists [δ C 132.61, (δ H 3.86, 3H, s)]. This was confirmed by the molecular weight of 317 from the [M] + ion (m / z 317) of the EI / MS spectrum.

또한, 1H-NMR (400 MHz, C5D5N, δH) 스펙트럼에서 7.31 (1H, s, H-2'), 7.30 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-6'), 6.85 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-5'), 6.46 (2H, s, H-3,8), 3.86 (3H, s, 6-OCH3)임을 확인하고, 13C-NMR (100 MHz, C5D5N, δc)에서 183.88 (C-4), 166.10 (C-2), 158.42 (C-9), 154.34 (C-5), 153.91 (C-7), 150.73 (C-4'), 146.75 (C-3'), 132.61 (C-6), 123.46 (C-1'), 120.16 (C-6'), 116.59 (C-5'), 113.98 (C-2'), 105.59 (C-10), 103.25 (C-3), 95.13 (C-8), 60.91 (OCH3)임을 확인하였다. 위와 같은 자료들로부터 상기 화학식 1의 화합물은 유파폴린(eupafolin, Xiaoyi et al, 2004)으로 구조를 동정할 수 있었다.In addition, 1 H-NMR (400 MHz , C 5 D 5 N, δH) in the spectrum 7.31 (1H, s, H- 2 '), 7.30 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-6'), 6.85 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-5 '), 6.46 (2H, s, H-3,8), 3.86 OK (3H, s, 6-OCH 3) that, and 13 C-NMR (100 (C-4), 166.10 (C-2), 158.42 (C-9), 154.34 (C-5), 153.91 (C-3 '), 132.61 (C-6), 123.46 (C-1'), 120.16 (C-6 '), 116.59 -10), 103.25 (C-3 ), 95.13 (C-8), 60.91 (OCH 3) was identified. From the above data, the compound of formula 1 was able to identify the structure as eupafolin (Xiaoyi et al, 2004).

상기 유파폴린 추출물은 전체 조성물 총 중량 중, 건조 중량으로 0.1 ~ 30 중량%를 포함하는 것이 바람직하다. 상기 범위 내에서 산화질소(NO) 매개 염증을 완화하는 효과가 우수하다.It is preferable that the above-mentioned propagation oil extract contains 0.1-30 wt% of dry weight of the total composition. The effect of mitigating nitric oxide (NO) mediated inflammation within the above range is excellent.

본 발명에서 상기 화장료 조성물은 유연화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 워터, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 팩, 스프레이, 파우더의 제형을 갖는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.In the present invention, the cosmetic composition may have a formulation of softening agent, nutritional lotion, nutritional cream, massage cream, essence, eye cream, cleansing water, cleansing cream, cleansing foam, pack, spray, powder, no.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, an animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, tracant, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc or zinc oxide may be used as the carrier component .

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.When the formulation of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as a carrier component. In the case of a spray, in particular, / Propane or dimethyl ether.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.When the formulation of the present invention is a solution or an emulsion, a solvent, a dissolving agent or an emulsifying agent is used as a carrier component, and examples thereof include water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, , 3-butyl glycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or sorbitan fatty acid esters.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.In the case where the formulation of the present invention is a suspension, a carrier such as water, a liquid diluent such as ethanol or propylene glycol, a suspending agent such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester, Cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tracant, etc. may be used.

본 발명의 제형이 계면활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a surfactant-containing cleansing, the carrier component may include aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, isethionate, imidazolinium derivative, methyltaurate, sarcosinate, fatty acid amide ether Alkylamido betaine, aliphatic alcohol, fatty acid glyceride, fatty acid diethanolamide, vegetable oil, lanolin derivative, or ethoxylated glycerol fatty acid ester.

본 발명의 화장료 조성물이 비누, 계면활성제 함유 클렌징 또는 계면활성제 비함유 클렌징 제형일 경우, 피부에 도포한 후 닦아내거나 떼거나 물로 씻어낼 수도 있다. 구체적인 예로서, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누이며, 상기 계면활성제 함유 클린징 제형은 클렌징폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩이며, 상기 계면활성제 비함유 클렌징 제형은 클렌징크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔이며, 이에 한정되는 것은 아니다.When the cosmetic composition of the present invention is a soap, a surfactant-containing cleansing agent, or a surfactant-free cleansing agent, it may be applied to the skin and then wiped off or removed or washed with water. The surfactant-containing cleansing formulation is a cleansing foam, a cleansing water, a cleansing towel, and a cleansing pack. The surfactant-free cleansing formulation may be a cleansing cream, , Cleansing lotion, cleansing water and cleansing gel, but is not limited thereto.

본 발명의 화장료 조성물은 염증 반응 억제용 화장료에 적용될 수 있다.The cosmetic composition of the present invention can be applied to cosmetics for inhibiting inflammation.

본 발명의 화장 방법은 본 발명의 화장료 조성물을 이용하는 모든 화장 방법을 일컫는다. 즉, 화장료 조성물을 이용하는 당업계에 공지된 모든 방법이 본 발명의 화장 방법에 속한다.The cosmetic process of the present invention refers to all cosmetic processes using the cosmetic composition of the present invention. That is, all methods known in the art using a cosmetic composition belong to the cosmetic method of the present invention.

본 발명의 화장료 조성물은 단독 또는 중복 도포하여 사용하거나, 본 발명 이외의 다른 화장료 조성물과 중복 도포하여 사용할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 혈행 개선 효과 및/또는 피부 탄력 개선 효과가 우수한 화장료 조성물은 통상적인 사용방법에 따라 사용될 수 있으며, 사용자의 피부 상태 또는 취향에 따라 그 사용횟수를 달리할 수 있다.
The cosmetic composition of the present invention may be used alone or in combination, or may be used by overlapping with other cosmetic compositions other than the present invention. Further, the cosmetic composition having excellent blood circulation improving effect and / or skin elasticity improving effect according to the present invention can be used according to a conventional method of using, and the number of times of use can be changed according to a user's skin condition or taste.

이하는 본 발명의 구체적인 설명을 위하여 실시예를 들어 설명하는 바, 본 발명이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to the following examples. However, the present invention is not limited to the following examples.

실시예 1. 사자발쑥으로부터 유파폴린의 분리Example 1. Isolation of Propalin from Lepidoptera

본 실험에 사용된 건조된 사자발쑥을 강화군 농업기술센터에서 5kg을 구입하여 분쇄기를 이용하여 입자의 크기가 30메시(mesh)이하가 되도록 분쇄하여 15ℓ의 100% 메탄올 용액을 가한 다음 상온에서 7일 동안 추출한 후, 상기 잔재를 동일한 방법으로 2회 더 추출한 후 합했다. 이 추출액을 여과 및 농축하여 사자발쑥 조추출물(150 g)을 수득하였다.5 kg of dried lemon grass wormwood used in this experiment was purchased from Kangwon National Agricultural Technology Center and ground to a size of 30 mesh or less by using a pulverizer, and then 15 liter of 100% methanol solution was added. After the extraction, the residue was extracted twice more by the same method and then added. The extract was filtered and concentrated to give a crude extract of Lomarate mugwort (150 g).

상기의 방법으로 수득한 사자발쑥 조추출물(150 g)을 물 (2ℓ)에 현탁하여 분액깔대기에 넣은 후, 여기에 에틸아세테이트(2ℓ×2회)를 가한 다음 진탕하여 각각의 가용부를 감압농축기로 농축하여 사자발쑥의 에틸 아세테이트가용 추출물(30 g)을 수득하였다. The crude extract (150 g) obtained in the above manner was suspended in water (2 L) and placed in a separating funnel. Ethyl acetate (2 L x 2) was added to the residue, and the resulting soluble fraction was dissolved in a vacuum concentrator And concentrated to obtain an ethyl acetate-soluble extract (30 g) of lemon mugwort.

상기의 방법으로 수득한 사자발쑥 에틸 아세테이트 가용추출물(30 g)을 RP-18 컬럼에 걸고 메탄올:물을 각각 30:70, 50 : 50, 80 : 20, 90 :10, 100:0(v/v)로 혼합하여 용출용매로 사용하여 크로마토그래피를 실시함에 따라 박층 크로마토그래피에서 동일한 양상을 나타내는 것들은 합하고 농축하여 8개의 분획(시료번호1 내지 8)으로 나누었다. 이를 다시 5번째 분획물(메탄올 함량 50~80%) 인 5(10 g)을 MeOH:H2O(30 : 70, 40 : 60, 50 : 50, 60 : 40, 70 : 30, 100:0(v/v))을 용출용매로 사용한 RP-18 크로마토그래피로부터 다시 6개(시료번호1 내지 6)개의 분획으로 나누었다. 이 중 4번째 분획물(메탄올 함량 60%)을 ODS 컬럼 크로마토그래피로부터 정제하여 화합물1(3 g)을 수득하였으며, 기기분석결과 하기 물성치를 갖는 유파폴린(eupafolin ; 6-methoxy 5, 7, 30, 40-tetra hydroxy flavone)임을 확인하였다.50: 50, 80: 20, 90: 10, 100: 0 (v / v) of methanol: water were added to the RP-18 column, v) and subjected to chromatography using them as elution solvents, the ones exhibiting the same pattern in thin layer chromatography were combined and concentrated and divided into eight fractions (Sample Nos. 1 to 8). 5 (10 g) of 5th fraction (methanol content 50 to 80%) was dissolved in MeOH: H 2 O (30:70, 40:60, 50:50, 60:40, 70:30, 100: 0 v / v)) was further divided into six fractions (Sample Nos. 1 to 6) from RP-18 chromatography using as an eluting solvent. The fourth fraction (methanol content 60%) was purified from ODS column chromatography to obtain Compound 1 (3 g). Esterification of eupafolin (6-methoxy 5, 7, 30, 40-tetra hydroxy flavone).

노란색 분말(Colorless powder); Yellow powder (Colorless powder);

ESI/MS m/z : 317 [M+H]+, 301, 298, 273, 167;ESI / MS m / z: 317 [M + H] < + & gt ;, 301, 298, 273, 167;

1H-NMR (400 MHz, C5D5N, δH) : 7.31 (1H, s, H-2'), 7.30 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-6'), 6.85 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-5'), 6.46 (2H, s, H-3,8), 3.86 (3H, s, 6-OCH3); 1 H-NMR (400 MHz, C 5 D 5 N, δH): 7.31 (1H, s, H-2 '), 7.30 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-6'), 6.85 (1H, d, J = 8.0 Hz, H -5 '), 6.46 (2H, s, H-3,8), 3.86 (3H, s, 6-OCH 3);

13C-NMR (100 MHz, C5D5N, δc): 183.88 (C-4), 166.10 (C-2), 158.42 (C-9), 154.34 (C-5), 153.91 (C-7), 150.73 (C-4'), 146.75 (C-3'), 132.61 (C-6), 123.46 (C-1'), 120.16 (C-6'), 116.59 (C-5'), 113.98 (C-2'), 105.59 (C-10), 103.25 (C-3), 95.13 (C-8), 60.91 (OCH3).
13 C-NMR (100 MHz, C5D5N,? C): 183.88 (C-4), 166.10 (C-2), 158.42 (C-9), 154.34 C-4 '), 146.75 (C-3'), 132.61 (C-6), 123.46 (C-1 '), 120.16 '), 105.59 (C-10 ), 103.25 (C-3), 95.13 (C-8), 60.91 (OCH 3).

이하 실험예에 사용될 재료는 아래와 같이 준비를 하였다.Materials to be used in the following experimental examples were prepared as follows.

1-1. 실험재료1-1. Experimental material

DMEM 배지(GIBCO, Grand lsland, NY, USA), 우태아 혈청(Fetal bovine serum), 페니실린 및 스트렙토마이신은 라이프 테크놀로지(Life technologies, Grand Island, NY)사에서 구입하였으며, MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide), DMSO (dimethyl sulfoxide), LPS는 시그마 케미칼(Sigma Chemical, St. Louis, MO)사에서 구입하였다. 실험에 사용되는 마우스 TNF-α, IL-1β and IL-6 은 BD 바이오사이언스(BD Biosciences, Pharmingen, San Diego, CA)사에서 구입하였다.DMEM medium (GIBCO, Grand lsland, NY, USA), fetal bovine serum, penicillin and streptomycin were purchased from Life Technologies (Grand Island, NY) DMSO and LPS were purchased from Sigma Chemical Co., St. Louis, MO. Mouse TNF-α, IL-1β and IL-6 used in the experiments were purchased from BD Biosciences (Pharmingen, San Diego, Calif.).

1-2. 세포배양1-2. Cell culture

대식세포 계열 (Murine macrophage cell line)인 RAW 264.7 세포는 한국세포주은행(KCLB; Seoul, Korea)으로부터 분양 받아 페니실린(penicillin) 100U/mL, 스트렙토마이신(streptomycin) 100 ㎍/mL과 10% fetal bovine serum(FBS)이 함유된 DMEM 배지(GIBCO, Grand lsland, NY, USA)를 사용하여 37℃, 5% CO2 항온기에서 배양하였으며, 3일에 한 번씩 계대배양을 시행하였다.
RAW 264.7 cells, a macrophage cell line, were purchased from Korean cell line bank (KCLB; Seoul, Korea) and were treated with penicillin 100 U / mL, streptomycin 100 μg / mL and 10% fetal bovine serum Were cultured in DMEM medium (GIBCO, Grand Island, NY, USA) containing 5% FBS at 37 ° C in a 5% CO2 incubator and subcultured once every 3 days.

실험예 1. 항염 활성 측정Experimental Example 1. Measurement of anti-inflammatory activity

가. MTT 분석 방법을 이용한 세포 생존능 측정end. Measurement of cell viability using MTT assay

실험예 1에서 사자발쑥으로부터 분리된 유파폴린의 대식세포인 Raw 264.7 cell에 대한 독성 효과를 측정하기 위해 MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide, 노란색) 어세이법을 이용하여 하기와 같이 실험을 수행하였다. MTT 어세이법은 살아있는 세포의 경우 미토콘드리아의 탈수소 효소작용에 의하여 수용성의 tetrazolium salt MTT(노란색)가 포마잔 크리스탈(formazan crystals; 보라색)로 환원되는 것이 기본 원리로서 즉, 살아있는 세포의 수가 많을수록 포마잔 크리스탈(formazan crystal) 생성이 증가하여 흡광도가 높게 측정된다.In Experimental Example 1, to evaluate the toxic effect of Raw 264.7 cell, a macrophage of the epopalpin isolated from Lepidoptera, on MTT (3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazolium bromide, yellow ) Assay was performed as follows. The MTT assay is based on the fact that the soluble tetrazolium salt MTT (yellow) is reduced to formazan crystals (purple) by the dehydrogenase action of mitochondria in living cells. That is, as the number of living cells increases, Increased production of formazan crystals leads to higher absorbance.

1-2의 방법으로 세포를 배양한 후 염증을 유발하는 물질인 LPS을 처리하여 염증을 유발한 후 유파폴린을 다양한 농도 (0.001, 0.005, 0.01mg/ml)로 처리한 실험군과 LPS을 처리한 것과 처리하지 않은 대조군(LPS;lipopolysaccharide)을 24시간 배양 후, 0.5 mg/ml 농도의 MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide,노란색) 시약을 넣고 2시간동안 37℃에서 배양하였다. 배양 후 상등액을 제거하고 DMSO를 첨가하여 세포를 용해 시킨 후 세포 내의 미토콘드리아에서 MTT 환원에 의해 생성된 formazan (보라색)을 ELISAmicroplate reader (SoftMax Pro5, Molecular Devices, USA)를 이용하여 570 nm에서 흡광도를 측정하였다.Cells were cultured by the method of 1-2, followed by treatment with LPS (inflammation inducing substance) to induce inflammation, and then treated with various concentrations (0.001, 0.005, 0.01 mg / ml) (LPS) was incubated for 24 hours and then MTT (3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazolium bromide, yellow) reagent at a concentration of 0.5 mg / Lt; RTI ID = 0.0 > 37 C < / RTI > After incubation, the supernatant was removed and DMSO was added to dissolve the cells. Formazan (purple) produced by MTT reduction in intracellular mitochondria was measured for absorbance at 570 nm using an ELISA microplate reader (SoftMax Pro5, Molecular Devices, USA) Respectively.

그 결과는 도 1에 도시하였다. 도 1에서 보이는 바와 같이 염증을 유발하는 물질로 알려진 LPS를 처리한 양성대조군과 LPS를 처리하지 않은 음성대조군을 대식세포에서 LPS로 염증을 유발한 후 유파폴린을 농도별로 처리한 실험군과 비교해보면, 유파폴린의 세포독성은 보이지 않았다. 따라서 염증를 유발한 대식세포에서 유파폴린은 세포 증식을 저해하지 않는 것을 알 수 있었다.
The results are shown in Fig. As shown in FIG. 1, when positive control group treated with LPS, which is known as an inflammatory substance, and negative control group not treated with LPS were infected with LPS in macrophages, There was no cytotoxicity of the epopalone. Therefore, it was found that dauphpholin did not inhibit cell proliferation in inflammatory macrophages.

나. Griess 분석 방법을 이용한 nitrite(NO) 측정I. Measurement of nitrite (NO) by Griess analysis method

LPS로 활성화된 Raw 264.7 cell에서 사자발쑥으로부터 분리된 화합물의 NO 생성 억제를 측정하기위해 분리된 화합물인 유파폴린을 0.001, 0.005, 0.01mg/ml농도로 처리한 실험군과 대조군을 24시간 세포 배양 후 Griess 분석 방법을 이용하여 nitrite를 측정하였다. 96 well plate에 세포 배양 상등액과Griess reagent를 1:1로 혼합하여 넣고 10분 동안반응 시킨 후 ELISA microplate reader (SoftMaxPro5, Molecular Devices, USA)를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하였다.To determine the NO production inhibition of LPS-activated Raw 264.7 cells isolated from L. mugwort, the experimental group treated with the isolated compound, 0.001, 0.005, and 0.01 mg / ml, and the control group were cultured for 24 hours Nitrite was measured by Griess analysis method. Cell culture supernatant and Griess reagent were mixed in a 96-well plate at a ratio of 1: 1 and reacted for 10 minutes. Absorbance was measured at 540 nm using an ELISA microplate reader (SoftMaxPro5, Molecular Devices, USA).

그 결과는 도 2에 도시하였다. 도 2에서 보이는 바와 같이 LPS로 염증을 유발한 후 유파폴린을 농도별로 처리했을때 농도의존적으로 NO 생성이 감소됨을 확인 할 수 있었다. 따라서 유파폴린이 염증을 완화하는 작용이 있음을 증명함을 알수 있다.
The results are shown in Fig. As shown in FIG. 2, it was confirmed that NO production was reduced in a concentration-dependent manner after treatment with laparotomyoprotein (LPS). Therefore, it can be seen that the epopalpine demonstrates the action of relieving the inflammation.

다. ELISA Kit을 사용한 사이토카인 측정All. Measurement of cytokines using an ELISA kit

대식세포(Raw 264.7 cell) 1.5×105cell/mL의 농도로 18시간 동안 배양 후 RG, RGP, LPS(2 ug/mL)을 처리한 후 24시간동안 배양하여, TNF-α(cat.88-7324-88), IL-6(cat.88-7064-88)의 level을 ELISA kit(eBioscience immunoassy kit)로 확인하였다.RG, RGP, and LPS (2 ug / mL) were cultured for 18 hours at a concentration of 1.5 × 10 5 cells / mL in Raw 264.7 cells and then cultured for 24 hours. TNF-α (cat.88-7324 -88) and IL-6 (cat.88-7064-88) levels were confirmed by ELISA kit (eBioscience immunoassay kit).

그 결과는 도 3 및 도 4에 도시하였다. 도 3에서 보이는 바와 같이 염증에 관련된 인자로 알려져 있는 싸이토카인 중에 하나인 IL-6을 유파폴린이 농도 의존적으로 억제함을 확인하였다. 도 4에서 보이는 바와 같이, TNF-α을 유파폴린이 또한 농도 의존적으로 억제함을 확인함으로써 유파폴린이 염증과 관련된 인자들을 감소함으로써 피부의 염증 완화하는 작용을 하는 것으로 확인하였다.
The results are shown in Fig. 3 and Fig. As shown in FIG. 3, it was confirmed that the efavirenz inhibited IL-6, one of the cytokines known to be involved in inflammation, in a concentration-dependent manner. As shown in FIG. 4, it was confirmed that the efavirenz inhibited the TNF-alpha concentration-dependently, thereby confirming that the efavirenz reduces the inflammation-related factors by reducing inflammation-related factors.

Claims (7)

사자발쑥(Artemisia princeps Pampanini)으로부터 분리된 유파폴린(Eupafolin) 추출물을 유효성분으로 함유하는 염증 완화용 화장료 조성물.A cosmetic composition for relieving inflammation comprising, as an active ingredient, an extract of Eupafolin isolated from Artemisia princeps Pampanini . 제 1항에 있어서,
상기 유파폴린은 하기 화학식 1의 화합물인 염증 완화용 화장료 조성물.
[화학식 1]
The method according to claim 1,
Wherein the epopalone is a compound represented by the following formula (1).
[Chemical Formula 1]
제1항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 산화질소(NO) 매개 염증을 완화하는 것임을 특징으로 하는 염증 완화용 화장료 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the cosmetic composition is to alleviate nitric oxide (NO) mediated inflammation.
제 1항에 있어서,
상기 유파폴린 추출물은 전체 조성물 총 중량 중, 건조 중량으로 0.1 ~ 30 중량%를 포함하는 것인 염증 완화용 화장료 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the medicinal extract comprises 0.1 to 30% by dry weight of the total weight of the composition.
제 1항에 있어서,
상기 유파폴린 추출물은 물, 탄소수 1 내지 6개의 알코올에서 선택되는 어느 하나의 용매 또는 둘 이상의 혼합용매로 추출한 것인 염증 완화용 화장료 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the medicinal plant extract is extracted with water or a solvent selected from alcohols having 1 to 6 carbon atoms or a mixture of two or more thereof.
제 5항에 있어서,
상기 유파폴린 추출물은 90 ~ 100% 메탄올을 사용하여 조추출물을 수득한 후, 에틸아세테이트를 사용하여 가용 추출물을 수득한 것인 염증 완화용 화장료 조성물.
6. The method of claim 5,
The crude ephedrine extract was obtained by extracting crude extracts using 90 to 100% methanol, and then obtaining a soluble extract using ethyl acetate.
제 1항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 유연화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 워터, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 팩, 스프레이, 파우더의 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the cosmetic composition has a formulation of softening agent, nutritional lotion, nutritional cream, massage cream, essence, eye cream, cleansing water, cleansing cream, cleansing foam, pack, spray, powder.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN113350232B (en) * 2020-03-05 2023-07-21 株式会社现代百朗德 Cosmetic composition for protecting skin and relieving irritation containing mixed extract of herba Portulacae, folium Artemisiae Argyi and radix Rhodiolae as effective components

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