KR20140133458A - 부르세라 시마루바 추출물을 포함하는 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 부르세라 시마루바 종자 추출물 및 화장품용으로 허용가능한 국소 담체를 포함하는 피부 케어 조성물에 관한 것이다. 그러한 조성물은 피부의 장벽 기능 및 보습성의 향상에 유용하며, 이외에도 피부 노화 징후의 개선에 유용하다.

Description

부르세라 시마루바 추출물을 포함하는 조성물{COMPOSITIONS COMPRISING EXTRACTS OF BURSERA SIMARUBA}

본 발명은 피부에 사용하기 위한 식물 추출물을 포함하는 조성물에 관한 것이다. 더 구체적으로, 본 발명은 피부의 상태 및 외관을 개선시키기 위한, 부르세라 시마루바(Bursera simaruba) 추출물을 포함하는 조성물에 관한 것이다.

부르세라 시마루바는 아메리카 대륙의 열대 지방, 미국 남동부로부터 우측 (플로리다주 남부), 멕시코 남부, 카리브해에서 브라질 및 베네수엘라까지 (남아메리카 북부) 자생하며, 여기서 이것은 야생으로 풍부하게 자란다. 이것은 일반적으로 관상용 식물로서 재배되며 그 나무는 고상한 습성을 가지며 내염성 및 내풍성이다. 붉게 빛나는 벗겨지는 수피는 "관광객 나무"(tourist tree)라는 이름이 주어지며, 그 이유는 이것이 관광객의 햇볕에 그을린 벗겨지는 피부를 닮았기 때문이다. 이것은 빠르게 자라며, 그 목재는 건축에서 사용될 수 있다. 이것은 일반명 "굼보 림보"(gumbo limbo)로도 공지되어 있다.

그 수액은 방향 수지를 생성한다. 흔히 가지들을 잘라서 흙에 꽂으며, 여기서 상기 가지들은 뿌리를 내려서 살아 있는 울타리를 생성할 것이다. 상기 나무의 수지는 목공용 바니시(varnish), 풀 또는 향료로서 사용될 수 있다. 조류가 그 씨를 먹으며, 이는 그 야생 집단의 분산을 돕는다. 또한 상기 수지는 통풍의 치료제로서 사용되는 반면, 그 잎은 끓여서 약차로 만든다 (문헌[Abad M J; Bermejo P; Carretero E; Martinez-Acitores C; Noguera B; Villar A; Journal of Ethnopharmacology (1996), 55(1), 63-8]). 부르세라 시마루바 잎 유래의 정유는 항암 활성을 갖는 것으로 밝혀져 있다 (문헌[Sylvestre, Muriel; Longtin, Andre Pichette Angelique; Legault, Jean; Natural Product Communications (2007), 2(12), 1273-1276]).

상기 식물의 에탄올 추출물은 치과 질환의 치료에 사용된다 (문헌[Rosas-Pinon Yazmin; Mejia Alicia; Diaz-Ruiz Gloria; Aguilar Maria Isabel; Sanchez-Nieto Sobeida; Rivero-Cruz J Fausto; Journal of Ethnopharmacology (2012), 141(3), 860-5]). 또한 상기 식물의 다양한 부분들은 항균 활성을 갖는 것으로 보고되어 있다 (문헌[Camporese A; Balick M J; Arvigo R; Esposito R G; Morsellino N; De Simone F; Tubaro A; Journal of Ethnopharmacology (2003), 87(1), 103-7]).

정글 샐브(Jungle Salve)는 굼보 림보 수피로 만들어진 국소 조성물로서, 이는 건선, 습진, 곤충 교상 및 균상종(fungus)의 치료에 유용하다고 한다 (문헌[Wagner, Point of Light Magazine, Winter 2000-2001]; http://nutrifarmacy.pdiwebdesign.com/articles/polwinter00.html).

본 발명은 부르세라 시마루바 종자 추출물이 피부용 조성물에서 사용하기에 유익하며 장벽 보호 및 피부 보습성 향상 및 노화 징후 개선을 비롯한 유의한 그리고 예기치 못한 효과를 피부에 제공한다는 본 발명자의 발견에 관한 것이다.

본 발명은 부르세라 시마루바 종자 추출물 및 화장품용으로 허용가능한 국소 담체를 포함하는 피부 케어 조성물에 관한 것이다.

또한, 본 발명은 피부의 장벽 기능 및 보습성을 향상시키는 방법을 제공하며, 본 방법은 피부 장벽 기능 및 보습성의 향상을 필요로 하는 피부에 부르세라 시마루바 종자 추출물 및 화장품용으로 허용가능한 국소 담체를 포함하는 조성물을 국소적으로 도포하는 단계를 포함한다.

피부 노화 징후를 개선시키는 방법이 개시되며, 본 방법은 피부 노화 징후들에 대한 처리를 필요로 하는 피부에 부르세라 시마루바 종자 추출물 및 화장품용으로 허용가능한 국소 담체를 포함하는 조성물을 국소적으로 도포하는 단계를 포함한다.

달리 기술되지 않으면, 본 명세서에 열거된 모든 백분율은 조성물의 총 중량을 기준으로 한 중량 백분율이다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "피부 장벽 기능 및 보습성의 향상을 필요로 하는 피부"는 보습이 결여되거나, 피지가 결여되거나, 갈라지거나, 건성이거나, 가렵거나, 인설 피부이거나, 건피성이거나, 수분 부족(dehydrated) 피부이거나, 유연성이 결여되거나, 광채가 결여되거나, 칙칙하거나 또는 지질이 결여된, 그러나 이에 한정되지 않는 피부를 의미한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "피부 노화 징후의 처리가 필요한 피부"는 처진 피부, 늘어진 피부, 느슨해진 피부, 거친 피부, 주름진 피부, 얇아진 피부 또는 고르지 못한 그러나 이에 한정되지 않는 피부를 의미한다. 피부 노화 징후의 개선은 피부 견고함(firmness)의 개선, 피부결의 개선, 피부에서의 주름살 출현의 개선, 피부톤 개선, 또는 피부에서의 외부 침범의 처리를 의미한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "피부 견고함의 개선"은 피부의 견고함 또는 탄력성의 증진, 피부의 견고함 또는 탄력성 손실의 예방, 또는 처지고 이완되고 느슨한 피부의 예방 또는 처리를 의미한다. 피부의 견고함 또는 탄력성은 피부 탄력 측정기의 사용에 의해 측정될 수 있다. 문헌[Handbook of Non-Invasive Methods and the Skin, eds. J. Serup, G. Jemec & G. Grove, Chapter 66.1 (2006)]을 참조한다. 피부 탄력성 또는 견고함의 손실은 노화, 환경적 손상, 또는 화장품의 피부에의 적용의 결과를 포함하지만 이에 한정되지 않는 많은 요인의 결과일 수 있다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "피부결의 개선"은 피부 표면 상의 범프(bump) 또는 크레바스(crevass) 중 어느 하나를 제거하기 위해 피부 표면을 매끄럽게 하는 것을 의미한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "피부에서의 주름살의 출현의 개선"은 피부에서의 주름살 및 잔주름 형성 과정의 예방, 지연, 저지, 또는 역행을 의미한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "피부에서의 외부 침범의 처리"는 피부에서의 외부 침범으로 인한 손상을 감소 또는 예방하는 것을 의미한다. 외부 침범의 예에는 세정제(예를 들어, 계면활성제를 함유하는 국소 세정제)의 사용, 화장, 면도로 인한 피부에의 손상, 뿐만 아니라 UV 광과 같은 환경적 손상(예를 들어, 햇빛으로부터의 손상 또는 UV 램프 및 태양 시뮬레이터와 같은 비-천연 공급원으로부터의 손상), 오존, 배기가스, 공해, 염소 및 염소 함유 화합물, 및 담배 연기로부터의 손상이 포함되지만, 이에 한정되지 않는다. 피부에 대한 외부 침범의 효과는 지질, 탄수화물, 펩타이드, 단백질, 핵산 및 비타민에 대한 개질 및 이에 대한 산화적 및/또는 질산화적 손상을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 피부에 대한 외부 침범의 효과는 또한, 세포 생존성의 상실, 세포 기능의 상실 또는 변경, 및 유전자 및/또는 단백질 발현의 변화를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "피부톤의 개선"은 피부 외양의 라이트닝 (예를 들어, 착색된 자국 또는 병변의 라이트닝, 피부의 누르스름함의 감소 및/또는 피부색을 고르게 함)을 의미한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "피부 외관의 라이트닝"은 일반적으로 피부톤, 피부색, 및/또는 피부 음영을 라이트닝함, 환하게 함, 미백 및/또는 고르게 함, 및/또는 누르스름함의 감소, 및/또는 착색 반점, 멜라닌 반점, 노화 반점, 일광 반점, 노인성 흑자(senile lentigo), 주근깨, 단순 흑자, 착색된 일광 각화증, 지루성 각화증, 기미, 여드름 자국, 염증후 색소과다침착, 흑자, 모반, 이들의 둘 이상의 조합 등을 포함하지만 이에 한정되지 않는 색소과다침착된 자국 및/또는 병변을 라이트닝 및/또는 페이딩하는 것을 말한다. 소정의 실시 형태에서, "피부 외관의 라이트닝"은 또한, 증가된 피부 광채, 홍조, 반투명도 및/또는 발광, 및/또는 더욱 광채가 나거나, 홍조를 띄거나, 반투명하거나 빛이 나는 피부톤 외양 또는 덜 노랗거나 누르스름한 피부톤을 수득하는 것을 말한다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, "피부 외관의 라이트닝"은 피부톤을 라이트닝하고 고르게 하고, 피부 광채를 증가시키고/시키거나 노화 반점을 밝게 하는 것을 말한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "피부 라이트닝 처리를 필요로 하는 피부"는 일반적으로 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 특성을 나타내는 피부를 말한다: 본 명세서에 참고로 포함되고 하기에 추가로 기재된, 2007년에 출간된 문헌[COLIPA GUIDELINE: GUIDELINE FOR THE COLORIMETRIC DETERMINATION OF SKIN COLOUR TYPING AND PREDICTION OF THE MINIMAL ERYTHEMAL DOSE (MED) WITHOUT UV EXPOSURE]에 따라 측정된 바와 같이41 미만의 측정된 개인 타이폴로지 앵글(Individual Typology Angle; ITA) 값을 갖는 피부, UV에 의해 어두워진 피부를 포함하는 어둡고/어둡거나 누르스름한 피부, 고르지 못한 피부톤을 갖는 피부, 또는 착색된 반점, 멜라닌 반점, 노화 반점, 일광 반점, 노인성 흑자, 주근깨, 단순 흑자, 착색된 일광 각화증, 지루 각화증, 기미, 여드름 자국, 염증후 색소과다침착, 흑자, 모반, 이들의 둘 이상의 조합을 포함하지만 이에 한정되지 않는 하나 이상의 색소과다침착된 자국 및/또는 병변을 갖는 피부 등. COLIPA 가이드라인에서, 피부색은 하기와 같이 ITA 값의 함수로서 정의된다: 매우 밝은 피부: >55; 밝은 피부: 41-55, 중간: 28-41, 및 황갈색 피부: <28. 소정의 바람직한 실시 형태에서, "피부 라이트닝이 필요한 피부"는 ITA 값이 41 미만, 예컨대 약 40 이하, 약 35 이하, 약 30 이하이거나, 보다 바람직하게는 약 28 이하인 피부를 가진 개인을 말한다. 소정의 다른 바람직한 실시 형태에서, 본 발명은 누르스름한 피부 및/또는 어두운 피부로부터 선택되는 피부 라이트닝 치료가 필요한 피부에 사용되는 조성물 및 사용 방법에 관한 것이다. 소정의 다른 바람직한 실시 형태에서, 본 발명은 노화 반점, 주근깨, 여드름 후에 남겨지는 자국, 및 이들의 둘 이상의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 피부 라이트닝 처리가 필요한 피부에 사용되는 조성물 및 사용 방법에 관한 것이다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, 소정 성분이 "본질적으로 없는" 조성물은, 그 성분을 조성물의 총 중량을 기준으로 약 2 중량% 이하의 양으로 갖는 조성물을 의미한다. 바람직하게는, 소정 성분이 본질적으로 존재하지 않는 조성물은 조성물의 총 중량을 기준으로 약 1 중량% 이하, 보다 바람직하게는 약 0.5 중량% 이하, 보다 바람직하게는 약 0.1 중량% 이하, 보다 바람직하게는 약 0.05 이하, 보다 바람직하게는 약 0.01 중량% 이하의 그 성분을 갖는다. 소정의 더욱 바람직한 실시 형태에서, 소정 성분이 본질적으로 존재하지 않는 조성물은 그 성분이 존재하지 않고, 즉, 그 성분을 함유하지 않는다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "화장품용으로/피부학적으로 허용가능한"은 지나친 독성, 불상용성, 불안정성, 자극, 알러지 반응 등이 없이 조직 (예를 들어, 피부 또는 모발)과 접촉하여 사용하기에 적합함을 의미한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "안전하고 효과적인 양"은 원하는 효과를 유발하기에 충분하지만 심각한 부작용을 피하기에 충분히 적은 양을 의미한다. 화합물, 추출물, 또는 조성물의 안전하고 효과적인 양은 예를 들어 최종 사용자의 연령, 건강 및 환경적인 노출, 치료의 지속 시간 및 유형, 이용되는 특정 추출물, 성분 또는 조성물, 이용되는 특정한, 약학적으로 허용가능한 담체 및 유사한 요인에 따라 달라질 것이다.

본 명세서에 기재된 바와 같이, 본 출원인은 부르세라 시마루바 종자 추출물 및 이를 함유하는 국소 조성물이 예기치 못하게 우수한 피부 장벽 기능, 피부 보습성, 및 피부 노화 방지 효과를 제공함을 발견하였다. 특히, 본 출원인은 부르세라 시마루바 종자 추출물이 피부에 있어서 세라마이드 수준의 유의한 증가를 제공함을 발견하였다. 또한, 본 출원인은 부르세라 시마루바 종자 추출물의 국소 도포가 내인성 하이알루론산의 수준의 향상을 제공함을 발견하였다. 실시예에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 종자 추출물은 부르세라 시마루바의 다른 추출물과 비교하여 피부 장벽 기능, 보습성 및 노화 방지 효과의 향상에 있어서 유의한 효과를 제공한다.

종자는 식물의 번식 부분, 구체적으로는 식물의 수정된, 성숙 배주이다. 종자는 특히 작물 재배를 위한 식물의 보존된 부분이다. 또한 종자는 그의 지방 및 단백질 함량, 집합적으로 영양소 함량 때문에 소비된다.

부르세라 시마루바의 종자 또는 열매는 직경이 대략 1 cm인 둥근 핵과-유사 삭(capsule)으로서, 이는 녹색에서 적색으로 익으며 건조된 때, 이것은 3개의 각을 따라서 열개되어 내배유가 결여된 단일한 다이아몬드형 파이렌-타입(pyrene-type) 종자를 방출한다. 종자는 불그스름한 지질-풍부 위가종피(pseudaril)로 덮여 있다.

수피는 목본 식물의 줄기 및 뿌리의 최외층이다. 수피는 유관속 형성층 밖의 모든 조직을 말한다. 이것은 나무 위를 덮는다. 더욱 오래된 줄기에서 살아 있는 조직인 내수피는 주피의 최내측 영역을 포함한다. 더욱 오래된 줄기에서의 외수피는 최내측 주피의 부분들을 따라서 줄기의 표면 상의 죽은 조직과, 주피의 외측 상의 모든 조직을 포함한다. 부르세라 시마루바의 내수피는 녹색을 띠며, 수지가 풍부하고 외수피는 얇고 매끄러워서 적색 시트 또는 박편으로 떨어지거나 또는 벗겨진다.

부르세라 시마루바 종자의 임의의 적합한 추출물이 사용될 수 있다. 적합한 추출물은 분쇄, 냉침, 가압, 압착, 으깸(mashing), 원심분리, 및/또는 콜드 퍼콜레이션(cold percolation), 교반/증류와 같은 과정에 의해 바이오매스(biomass)로부터 물질을 직접 추출하는 방법, 마이크로파 보조 추출, 초음파 처리, 극성 개질제가 있거나 또는 없는 상태에서의 초임계/미임계 CO₂ 압축 가스 추출, 가압 용매 추출, 가속 용매 추출, 가압 또는 정상 열수 추출, 계면활성제 보조 가압 열수 추출, 오일 추출, 막 추출, 속슬레(Soxhlet) 추출, 골드 핑거(gold finger) 증류/추출 및/또는 예를 들어, 인테그레이티드 보태니컬 테크놀로지스, 엘엘씨(Integrated Botanical Technologies, LLC)의 미국 특허 제7442391호, 제7473435호 및 제7537791호에서 개시된 과정 등을 포함하지만 이에 한정되지 않는 통상의 방법을 사용하여, 또는 용매 추출과 같은 다른 방법 등에 의해 수득될 수 있다.

극성 용매, 비극성 용매, 또는 이들의 둘 이상의 배합물을 포함하는 다양한 용매 중 임의의 용매는 용매 추출을 포함하는 방법에서 사용될 수 있다. 적합한 극성 용매는 물 등과 같은 극성 무기 용매, 알코올 및 상응하는 유기 산, 예를 들어 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올 등을 포함한 C1-C8 알코올 및 아세트산, 포름산, 프로판산 등을 포함한 유기 산과 같은 극성 유기 용매, C1-C8 폴리올/글리콜 등을 포함한 폴리올 및 글리콜, 및 이들의 둘 이상의 조합을 포함한다. 적합한 비극성 용매는 C1-C8 알칸을 포함한 알칸, C1-C8 알칸을 포함한 사이클로알칸, C1-C8 알킬 에테르를 포함한 알킬 에테르, 석유 에테르, C1-C8 케톤을 포함한 케톤, 메틸렌 클로라이드, 에틸 아세테이트, 자일렌, 톨루엔, 클로로포름, 식물유, 광유 등과 같은 비극성 유기 용매를 포함한다.

일 실시 형태에서, 부르세라 시마루바 종자 추출물은 C1-C8 알코올, C1-C8 글리콜, 액체 이산화탄소, C5-C8 탄화수소, 물 및 이들의 배합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 용매를 사용하여 추출된다.

일 실시 형태에서, 추출은 C1-C8 알코올, 물, C1-C8 폴리올/글리콜 또는 C1-C8 유기 산과 같은 극성 개질제를 이용하거나 또는 상기 개질제를 이용하지 않고서 상기에 기재된 비극성 용매에 의해 또는 초임계 유체 추출에 의해 수득될 수 있다.

소정의 바람직한 실시 형태에서, 본 발명의 추출물은 부르세라 시마루바 종자를 미분화하고, 20℃에서 1 내지 100의 유전 상수 값, 바람직하게는 20℃에서 4 내지 60의 유전 상수 값, 더욱 바람직하게는 20℃에서 4 내지 50의 유전 상수 값, 및 더욱 더 바람직하게는 20℃에서 4 내지 40의 유전 상수 값을 갖는 극성 용매를 사용하여 추출함으로써 제조된 극성 추출물이다.

바람직한 극성 용매의 예는 20℃에서 1 내지 100, 바람직하게는 4 내지 60, 및 더욱 바람직하게는 5 내지 40의 유전 상수 값을 갖는 C1-C8 알코올, C1-C8 폴리올/글리콜, C1-C8 유기 산, 물 및 이들의 둘 이상의 배합물을 포함하며, 이에는 본 명세서에 참고로 포함된 문헌[Dielectric Constants of Some Organic Solvent-Water Mixtures at Various Temperatures," Akerlof, Gosta; JACS, Vol. 54, No. 11 (Nov. 1932), pp. 4125-4139]에서 개시된 바와 같은 원하는 유전 상수 값을 갖는 그러한 용매 및 용매의 배합물이 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 극성 추출물은 하나 이상의 C1-C8 알코올, C1-C8 폴리올, C1-C8 글리콜, 및 이들의 둘 이상의 배합물을 사용해 추출된다. 소정의 더욱 바람직한 실시 형태에서, 추출물은 하나 이상의 C1-C4 알코올, C1-C4 폴리올 및/또는 C1-C4 글리콜을 사용하여 추출된다. 소정의 더욱 바람직한 실시 형태에서, 추출물은 물의 존재 또는 부재 하에 메탄올, 에탄올, 또는 그의 배합물을 포함하는 용매를 사용해 제조된다. 더욱 바람직한 실시 형태에서, 추출물은 무수 알코올 또는 시약 등급 변성 알코올(reagent grade denatured alcohol) 및 부르세라 시마루바 종자를사용하여, 실온에서 1일 동안 교반하여 제조된다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 추출물은 추가로, 목탄(활성탄이라고도 함) 처리에 의해 순화될 수 있다.

소정의 실시 형태에서, 조성물은 추가로, 부르세라 시마루바의 다른 부분, 예를 들어 수피, 잎, 줄기, 뿌리, 열매 또는 꽃 중 하나 이상으로부터의 추출물을 포함할 수 있다. 다른 실시 형태에서, 조성물에는 부르세라 시마루바의 다른 종자외(non-seed) 부분의 추출물이 본질적으로 없다.

임의의 적합한 양의 부르세라 시마루바 종자 추출물이 본 발명의 조성물에서 사용될 수 있다. 바람직하게는, 본 조성물은 안전하고 효과적인 양의 부르세라 시마루바 종자 추출물을 포함한다.

일 실시 형태에서, 본 발명의 조성물에서 사용되는 부르세라 시마루바 종자 추출물의 양은 본 명세서에 기재된 고성능 박층 크로마토그래피 (분석 5)에 의한 세라마이드 프로파일의 결정 시험에 따라 10%의 세라마이드 수준 증가를 성취하기에 효과적인 것이다.

다른 실시 형태에서, 본 발명의 조성물에서 사용되는 부르세라 시마루바 종자 추출물의 양은 본 명세서에 기재된 하이알루론산 (HA) 분비 시험 (분석 2)에 따라 측정할 때 하이알루론산 분비 증가를 제공하기에 효과적인 것, 바람직하게는 1.2배 초과의 증가를 제공하기에 효과적인 것이다.

소정의 바람직한 실시 형태에서, 본 조성물은 0% 초과 내지 약 20%의 부르세라 시마루바 종자 추출물을 포함한다. 소정의 다른 바람직한 실시 형태에서, 본 조성물은 약 0.0001 내지 약 20%, 약 0.001 내지 약 10%, 약 0.01 내지 약 5%, 약 0.1 내지 약 5%, 또는 약 0.2 내지 약 2%의 부르세라 시마루바 종자 추출물을 포함한다. 소정의 다른 바람직한 실시 형태에서, 본 조성물은 0% 초과 내지 약 1%, 약 0.0001 내지 약 1%, 약 0.001 내지 약 1%, 또는 약 0.01 내지 약 1%의 부르세라 시마루바 종자 추출물을 포함한다. 소정의 다른 바람직한 실시 형태에서, 본 조성물은 약 1 내지 약 5%, 바람직하게는 약 2 내지 약 5%의 부르세라 시마루바 종자 추출물을 포함한다.

임의의 적합한 담체가 조성물에서 사용될 수 있다. 바람직하게는, 담체는 화장품용으로 허용가능한 담체이다. 당업자에 의해 인식되는 바와 같이, 화장품용으로 허용가능한 담체는 지나친 독성, 불상용성, 불안정성, 자극, 알러지 반응 등이 없이 신체, 특히 피부와 접촉하여 사용하기에 적합한 담체를 포함한다. 담체의 안전하고 효과적인 양은 조성물의 약 50% 내지 약 99.999%, 바람직하게는 약 80% 내지 약 99.9%, 보다 바람직하게는 약 99.9% 내지 약 95%, 가장 바람직하게는 약 99.8% 내지 약 98%이다.

담체는 다양한 형태로 존재할 수 있다. 예를 들어, 수중유, 유중수, 수중유중수 및 실리콘중수중유 에멀젼을 포함하지만 이에 한정되지 않는 에멀젼 형태의 담체가 본 발명에서 유용하다. 이러한 에멀젼은 예를 들어 약 100 cp 내지 약 200,000 cp의 다양한 점도 범위를 포함할 수 있다.

화장품용으로 허용가능한 적합한 담체의 예에는 화장품용으로 허용가능한 용매 및 화장품용 용액, 현탁액, 로션, 크림, 세럼, 에센스, 겔, 토너, 스틱, 스프레이, 연고, 액상 워시 및 비누 바(bar), 샴푸, 헤어 컨디셔너, 페이스트, 폼, 무스, 분말, 면도용 크림, 와이프, 패치, 스트립, 분말화된 패치, 미세바늘 패치, 붕대, 하이드로겔, 필름 형성 제품, 페이셜 및 스킨 마스크, 메이크업, 리퀴드 드롭 등을 위한 물질이 포함된다. 이러한 제품 유형은 용액, 현탁액, 에멀젼, 예컨대 마이크로에멀젼 및 나노에멀젼, 젤, 고체, 리포솜, 다른 캡슐화 기술 등이 포함되지만 이로 제한되지 않는 다양한 유형의 화장용으로-허용가능한 담체를 함유할 수 있다.

다음은 담체의 비제한적 예이다. 다른 담체는 당업자에 의해 제형화될 수 있다.

일 실시 형태에서, 담체는 물을 함유한다. 추가의 실시 형태에서, 담체는 또한 하나 이상의 수성 용매 또는 유기 용매를 함유할 수 있다. 유기 용매의 예에는 다이메틸 아이소소르비드 아이소프로필미리스테이트 양이온성, 음이온성 및 비이온성 성질의 계면활성제 식물유 광유 왁스 검 합성 및 천연 겔화제 알칸올 글리콜 및 폴리올이 포함되지만, 이에 한정되지 않는다. 글리콜의 예에는 글리세린, 프로필렌 글리콜, 부틸렌 글리콜, 펜탈렌 글리콜, 헥실렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 폴리프로필렌 글리콜, 다이에틸렌 글리콜, 트라이에틸렌 글리콜, 카프릴 글리콜, 글리세롤, 부탄다이올 및 헥산트라이올, 및 이들의 공중합체 또는 혼합물이 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 알칸올의 예에는 약 2개의 탄소 원자 내지 약 12개의 탄소 원자 (예를 들어, 약 2개의 탄소 원자 내지 약 4개의 탄소 원자)를 갖는 것들, 예를 들어, 아이소프로판올 및 에탄올이 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 폴리올의 예에는 약 2개의 탄소 원자 내지 약 15개의 탄소 원자 (예를 들어, 약 2개의 탄소 원자 내지 약 10개의 탄소 원자)를 갖는 것들, 예를 들어, 프로필렌 글리콜이 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 유기 용매는 담체의 총 중량을 기준으로 약 1% 내지 약 99.99% (예를 들어, 약 20% 내지 약 50%)의 양으로 담체 중에 존재할 수 있다. 물은 담체의 총 중량을 기준으로 약 5% 내지 약 95% (예를 들어, 약 50% 내지 약 90%)의 양으로 (사용 전) 담체 중에 존재할 수 있다. 용액은 약 40 내지 약 99.99%를 포함하는 임의의 적합한 양의 용매를 함유할 수 있다. 소정의 바람직한 용액은 약 50 내지 약 99.9%, 약 60 내지 약 99%, 약 70 내지 약 99%, 약 80 내지 약 99%, 또는 약 90 내지 99%를 함유한다.

로션은 그러한 용액으로부터 제조될 수 있다. 로션은 전형적으로 용매 이외에 적어도 하나의 연화제를 함유한다. 로션은 약 1% 내지 약 20% (예를 들어, 약 5% 내지 약 10%)의 연화제(들) 및 약 50% 내지 약 90% (예를 들어, 약 60% 내지 약 80%)의 물을 포함할 수 있다.

용액으로부터 제형화될 수 있는 또 다른 유형의 제품은 크림이다. 크림은 전형적으로 약 5% 내지 약 50% (예를 들어, 약 10% 내지 약 20%)의 연화제(들) 및 약 45% 내지 약 85% (예를 들어, 약 50% 내지 약 75%)의 물을 함유한다.

용액으로부터 제형화될 수 있는 또 다른 유형의 제품은 연고이다. 연고는 동물유, 식물유 또는 합성유 또는 반고체 탄화수소의 단순한 베이스를 함유할 수 있다. 연고는 약 2% 내지 약 10%의 연화제(들) + 약 0.1% 내지 약 2%의 증점제(들)를 함유할 수 있다.

본 발명에 유용한 조성물은 또한 에멀젼으로 제형화될 수 있다. 담체가 에멀젼일 경우, 담체의 약 1% 내지 약 10% (예를 들어, 약 2% 내지 약 5%)가 유화제(들)를 함유한다. 유화제는 비이온성, 음이온성 또는 양이온성일 수 있다.

로션 및 크림은 에멀젼으로서 제형화될 수 있다. 전형적으로 그러한 로션은 0.5% 내지 약 5%의 유화제(들)를 함유하는 반면, 그러한 크림은 전형적으로 약 1% 내지 약 20% (예를 들어, 약 5% 내지 약 10%)의 연화제(들); 약 20% 내지 약 80% (예컨대, 30% 내지 약 70%)의 물 및 약 1% 내지 약 10% (예컨대, 약 2% 내지 약 5%)의 유화제(들)를 함유한다.

단일 에멀젼 피부 케어 제제, 예컨대 수중유 유형 및 유중수 유형의 로션 및 크림은 본 기술 분야에 널리 알려져 있으며, 본 발명에서 유용하다. 다상(multiphase) 에멀젼 조성물, 예컨대 수중유중수 유형 또는 유중수중유 유형이 또한 본 발명에 유용하다. 일반적으로, 그러한 단일 또는 다상 에멀젼은 물, 연화제, 및 유화제를 필수 성분으로서 함유한다.

본 발명의 조성물은 또한 겔 (예를 들어, 적합한 겔화제(들)를 사용하여 수성, 알코올, 알코올/물, 또는 오일 겔)로 제형화될 수 있다. 수성 및/또는 알코올성 젤에 적합한 겔화제에는 천연 고무, 아크릴산 및 아크릴레이트 중합체 및 공중합체, 및 셀룰로스 유도체(예를 들어, 하이드록시메틸 셀룰로스 및 하이드록시프로필 셀룰로스)가 포함되지만, 이에 한정되지 않는다. 오일(예컨대 광유)에 적합한 겔화제에는 수소화된 부틸렌/에틸렌/스티렌 공중합체 및 수소화된 에틸렌/프로필렌/스티렌 공중합체가 포함되지만, 이에 한정되지 않는다. 그러한 겔은 전형적으로 그러한 겔화제를 약 0.1 중량% 내지 5 중량% 함유한다.

본 발명의 조성물은 또한 고체 제형 (예를 들어, 왁스-기재 스틱, 비누 조성물, 분말 또는 와이프)으로 제형화될 수 있다. 본 발명의 조성물은 또한 고체, 반고체 또는 용해성 기재 (예를 들어, 와이프, 마스크, 패드, 글러브 또는 스트립)와 배합될 수 있다.

또한 본 발명의 조성물은 구강에서의 사용용으로, 예를 들어 크림형 치약, 겔, 린스, 용액, 패치 등으로 제형화될 수 있다. 또한 본 조성물은 눈에서의 사용용으로, 예를 들어 드롭 또는 워시 등으로 사용되는 용액, 에멀젼, 현탁액의 형태로 제형화될 수 있거나, 또는 겔, 로션, 윤활제 등을 통하는 것과 같이 질점막에서의 사용용으로 제형화될 수 있다.

본 발명의 조성물은 임의의 다양한 부가적인 화장용 활성제를 추가로 포함할 수 있다. 적합한 부가적인 활성제의 예에는 피부 라이트닝제, 다크닝제, 부가적인 노화 방지제, 트로포엘라스틴 촉진제, 콜라겐 촉진제, 항여드름제, 광택 제어제, 항미생물제, 예컨대 항효모제, 항진균제, 및 항균제, 항염증제, 항기생충제, 외용 진통제, 썬스크린, 광차단제, 산화방지제, 각질용해제, 세제/계면활성제, 보습제, 영양제, 비타민, 에너지 증강제, 발한방지제, 수렴제, 탈취제, 제모제, 발모 증강제, 발모 지연제, 퍼밍제(firming agent), 보습 부스터, 효능 부스터, 굳은살 방지제(anti-callous agent), 피부 컨디셔닝을 위한 제제, 항셀룰라이트제, 플루오라이드, 치아 미백제, 항플라크제, 플라크 용해제, 냄새 제어제, 예를 들어 냄새 차폐제 또는 pH 변화제 등이 포함된다.

다양한 적합한 부가적인 화장품용으로 허용가능한 활성제의 예에는 하이드록시산, 벤조일 퍼옥사이드, D-판텐올, UV 필터, 예컨대 아보벤존 (파르솔(Parsol) 1789), 비스다이설리졸 다이소듐 (네오 헬리오판(Neo Heliopan) AP), 다이에틸아미노 하이드록시벤조일 헥실 벤조에이트 (우비눌 A 플러스(Uvinul A Plus)), 에캄술 (멕소릴(Mexoryl) SX), 메틸 안트라닐레이트, 4-아미노벤조산 (PABA), 시녹세이트, 에틸헥실 트라이아존 (우비눌(Uvinul) T 150), 호모살레이트, 4-메틸벤질리덴 캄포르 (파르솔 5000), 옥틸 메톡시신나메이트 (옥티녹세이트(Octinoxate)), 옥틸 살리실레이트 (옥티살레이트(Octisalate)), 파디메이트 O (에스칼롤(Escalol) 507), 페닐벤즈이미다졸 설폰산 (엔설리졸(Ensulizole)), 폴리실리콘-15 (파르솔 SLX), 트롤라민 살리실레이트, 베모트라이지놀 (티노소르브(Tinosorb) S), 벤조페논 1-12, 다이옥시벤존, 드로메트라이졸 트라이실록산 (멕소릴 XL), 이스코트라이지놀 (우바소르브(Uvasorb) HEB), 옥토크릴렌, 옥시벤존 (에우솔렉스(Eusolex) 4360), 설리소벤존, 비소크트라이졸 (티노소르브 M), 이산화티타늄, 산화아연, 카로테노이드, 자유 라디칼 스캐빈저, 스핀 트랩(spin trap), 레티노이드 및 레티노이드 전구체, 예컨대 레티놀, 레틴산 및 레티닐 팔미테이트, 세라마이드, 다중불포화 지방산, 필수 지방산, 효소, 효소 억제제, 미네랄, 호르몬, 예컨대 에스트로겐, 스테로이드, 예컨대 하이드로코티손, 2-다이메틸아미노에탄올, 구리 염, 예컨대 염화구리, 구리 함유 펩티드, 예컨대 Cu:Gly-His-Lys, 코엔자임 Q10, 아미노산, 예컨대 프롤린, 비타민, 락토비온산, 아세틸-코엔자임 A, 니아신, 리보플라빈, 티아민, 리보스, 전자 수송물질, 예컨대 NADH 및 FADH2, 및 다른 보테니카(botanical) 추출물, 예컨대, 귀리, 알로에 베라, 흰꽃여름 국화(Feverfew), 콩, 표고 버섯 추출물, 및 그들의 유도체 및 혼합물이 포함되지만 이로 제한되는 것은 아니다.

소정의 바람직한 실시 형태에서, 피부 케어 조성물은 부르세라 시마루바 종자 추출물 및 적어도 하나의 부가적인 피부 보습 활성제를 포함한다.

소정의 바람직한 실시 형태에서, 피부 케어 조성물은 부르세라 시마루바 추출물 및 노화 징후의 개선을 위한 적어도 하나의 부가적인 제제를 포함한다. 노화 징후를 개선시키는, 적합한 부가적인 제제의 예에는 트로포엘라스틴 촉진제, 콜라겐 촉진제, 레티노이드, 하이알루론산, 다이메틸아미노에탄올, N,N,N',N'-테트라키스(2-하이드록시프로필)에틸렌다이아민, 알파 하이드록시산, 폴리하이드록시산, 및 이들의 둘 이상의 배합물이 포함되지만, 이에 한정되지 않는다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "트로포엘라스틴 촉진제"는 트로포엘라스틴의 생성을 향상시키는 생물학적 활성을 보유한 화합물 부류를 말한다. 본 발명에 따른 트로포엘라스틴 촉진제는 인체에서 트로포엘라스틴의 생성을 향상시킬 수 있는 모든 천연 또는 합성 화합물을 포함한다.

적합한 트로포엘라스틴 촉진제는 예를 들어 트로포엘라스틴 촉진제 분석을 이용하여 결정될 수 있다. 트로포엘라스틴 촉진제 분석은 다음과 같이 실시된다. 쥐 심장 근육모세포 H9C2 (예를 들어, 미국 버지니아주 매너서스 소재의 ATCC로부터 구매할 수 있음)를 사용한다. 10% 소 태아 혈청, 2 mM 글루타민, 100 유닛/ml의 페니실린, 및 50 ug/ml의 스트렙토마이신(미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 인비트로겐 라이프 테크놀로지스(Invitrogen LifeTechnologies))으로 보충된, 둘베코 변형 이글 배지 (DMEM, 미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 인비트로겐 라이프 테크놀로지스)에서 배양물을 유지한다. 엘라스틴 프로모터-루시퍼라아제 리포터 제작물(Elp2.2, 미국 위스콘신주 매디슨 소재의 프로메가(Promega)로부터 입수할 수 있는, 반딧불이 루시퍼라아제 유전자를 구동하는, nt -2267 내지 nt +2의 2.2 kb 엘라스틴 프로모터 단편)을 사용하여 세포 배양물을 일시적으로 트랜스펙팅한다. DNA는 퀴아젠 맥시(Qiagen Maxi) 컬럼 (미국 캘리포니아주 발렌시아 소재의 퀴아젠(Qiagen))에 의해 제조한다. 모든 트랜스펙션에서, 타이미딘 키나아제 프로모터 및 레닐라(Renilla) 루시퍼라아제 리포터 유전자(pRL-TK, 미국 위스콘신주 매디슨 소재의 프로메가)를 갖는 제작물을 내부 대조군으로서 포함시킨다. 전형적으로, 48웰 플레이트에서 성장된 세포를, 리포펙타민(Lipofectamine) 2000 (미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 인비트로겐 라이프 테크놀로지스)을 사용하여, 웰당 0.45 ㎍의 총 DNA로 트랜스펙션시킨다. 트랜스펙션 1일 후에, 대략 24시간 동안 세포를 표시된 농도의 제제로 처리한 후, 제조사의 프로토콜에 따라 프로메가(미국 위스콘신주 매디슨)로부터의 이중 루시퍼라아제 리포터 시스템(Dual-Luciferase Reporter System)을 사용하는 루시퍼라아제 분석을 위해 용해한다. 몰레큘러 디바이시즈(Molecular Devices; 미국 캘리포니아주 서니베일)로부터의 발광측정기 LMAX를 사용하여, 반딧불이 루시퍼라아제 활성(엘라스틴 촉진제 활성을 나타냄)을 우선 측정한 다음, 레닐라 루시퍼라아제(내부 대조군)를 측정한다. 이들 둘의 루시퍼라아제 활성의 비(RLU)를 사용하여 트로포엘라스틴 촉진제 활성을 평가한다.

바람직하게는 트로포엘라스틴 촉진제는 0.5 마이크로그램/밀리리터 내지 2.5 밀리그램/밀리리터 (활성물 기준)의 범위 중 적어도 하나의 농도에서, 그리고 바람직하게는 1.0 마이크로그램/밀리리터 내지 2.5 밀리그램/밀리리터 (활성물 기준)의 범위 중 적어도 하나의 농도에서, 트로포엘라스틴 촉진제의 활성이 적어도 1.1, 바람직하게는 적어도 1.25, 더욱 바람직하게는 적어도 1.3, 그리고 가장 바람직하게는 적어도 1.5이다.

적합한 트로포엘라스틴 촉진제의 예에는, 블랙베리 추출물, 코티너스 추출물, 피버퓨 추출물, 필란투스 니루리(Phyllanthus niruri) 추출물, 및 구리 및/또는 아연 구성성분을 갖는 2금속 복합물이 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 구리 및/또는 아연 구성성분을 갖는 2금속 복합물은 예를 들어 구리-아연 시트레이트, 구리-아연 옥살레이트, 구리-아연 타르타레이트, 구리-아연 말레이트, 구리-아연 석시네이트, 구리-아연 말로네이트, 구리-아연 말레에이트, 구리-아연 아스파르테이트, 구리-아연 글루타메이트, 구리-아연 글루타레이트, 구리-아연 푸마레이트, 구리-아연 글루카레이트, 구리-아연 폴리아크릴산, 구리-아연 아디페이트, 구리-아연 피멜레이트, 구리-아연 수버레이트, 구리-아연 아질레이트, 구리-아연 세바케이트, 구리-아연 도데카노에이트, 또는 이들의 조합일 수 있다. 바람직한 실시 형태에서, 트로포엘라스틴 촉진제는 블랙베리 추출물, 코티너스 추출물, 피버퓨 추출물, 및 이들의 조합으로부터 선택된다. 특히 바람직한 실시 형태에서, 트로포엘라스틴 촉진제는 블랙베리 추출물, 피버퓨 추출물, 및 이들의 배합물로부터 선택된다.

"코티너스 추출물"은 "코티너스 코기그리아(Cotinus coggygria)"의 잎의 추출물, 예를 들어, 이의 물 추출물 - 불가리아 소피아 소재의 빌코쿠프(Bilkokoop)로부터 입수가능 - 을 의미한다.

"블랙베리 추출물"은 루브스(Rubus) 속의 식물, 바람직하게는 루부스 프루티코수스(Rubus fruticosus)로부터 단리된 화합물의 블렌드를 의미한다. 일 실시 형태에서, 화합물은 식물의 꽃으로부터 단리된다. 추가 실시 형태에서, 화합물은 식물의 건조된 꽃으로부터 단리된다. 이러한 화합물은 식물의 하나 이상의 부분 (예를 들어, 전체 식물, 식물의 꽃, 종자, 뿌리, 근경, 줄기, 열매 및/또는 잎)으로부터 단리될 수 있다. 바람직한 실시 형태에서, 블랙베리 추출물은 블랙베리 잎 추출물이다. 하나의 특히 적합한 블랙베리 추출물은 루부스 프루티코수스의 잎을 물과 에탄올의 혼합물로 추출하여 제조되며, 말토덱스트린 매트릭스와 약 5% 내지 약 10%의 활성으로 배합되고, 미국 뉴저지주 테테르보로 소재의 심라이즈 인크.(Symrise Inc.)로부터 구매가능하며, 명칭 "심매트릭스(SymMatrix)"로 판매된다."

"필란투스 니루리"의 추출물은 전체 식물로서 수확 및 사용될 수 있거나, 또는 선택적으로 식물의 하나 이상의 부분(예를 들어, 식물의 꽃, 종자, 뿌리, 근경, 줄기, 열매 및/또는 잎)이 사용될 수 있다. 필란투스 니루리 식물 또는 그 부분은, 예를 들어, 분쇄 또는 밀링에 의해서 분말로 미분될 수 있다. 적합한 밀링된 형태의 필란투스 니루리는 미국 네바다주 칼슨 시티 소재의 레인트리 뉴트리션, 인크.(Raintree Nutrition, Inc.)로부터 구매가능하다. 바람직하게는, 필란투스 니루리의 저분자량 단편, 예를 들어, 분자량이 약 100,000 달톤을 초과하는 분자종이 실질적으로 없는 필란투스 니루리의 단편이 사용된다. 바람직하게는, 이러한 저분자량 단편은 필란투스 니루리 식물로부터 물 추출가능하다.

본 발명의 조성물은 전술된 것들과 같은, 화장용으로 유효한 양의 하나 이상의 트로포엘라스틴 촉진제를 포함할 수 있다. 조성물은 바람직하게는, 활성제 기준으로, 약 0.1% 내지 약 10%의 트로포엘라스틴 촉진제, 더욱 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 5%의 트로포엘라스틴 촉진제, 가장 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 2%의 트로포엘라스틴 촉진제를 포함한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "콜라겐 촉진제"는 콜라겐의 생성을 향상시키는 생물학적 활성을 보유한 화합물을 말한다. 본 발명에 따르면, "비-레티노이드 콜라겐 촉진제"는 레티노이드가 아니거나, 또는 레티노이드로부터 유래되며, 인체에서 콜라겐의 생성을 향상시킬 수 있는 모든 천연 또는 합성 화합물을 포함한다.

적합한 콜라겐 촉진제는, 예를 들어, 콜라겐 촉진제 분석(COLLAGEN PROMOTER ASSAY)을 사용하여 결정될 수 있다. 콜라겐 촉진제 분석은 다음과 같이 실시된다. ATCC(미국 버지니아주 매너서스 소재)로부터 구매될 수 있는, 쥐 심장 근육모세포 H9C2를 사용한다. 10% 소 태아 혈청, 2 mM 글루타민, 100 유닛/mL 페니실린, 및 50 ug/mL 스트렙토마이신(미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 인비트로겐 라이프 테크놀로지스(Invitrogen Life Technologies))으로 보충된, 둘베코 변형 이글 배지 (DMEM, 미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 인비트로겐 라이프 테크놀로지스) 내에 배양물을 유지한다. 예를 들어, 프레마스 바이오테크 피브이티. 리미티드(PREMAS Biotech Pvt. Ltd)(인도, 하리아나)로부터 입수할 수 있는, 반딧불이 루시퍼라아제 유전자를 구동하는, 콜라겐 1A 촉진제-루시퍼라아제 리포터 구조체를 사용하여 세포 배양물을 일시적으로 트랜스펙팅한다. 모든 트랜스펙션에서, 타이미딘 키나제 촉진제 및 레닐라(Renilla) 루시퍼라아제 리포터 유전자(pRL-TK, 미국 위스콘신주 매디슨 소재의 프로메가)를 갖는 구조체가 내부 대조군으로서 포함된다. 48 웰 플레이트에서 성장된 세포를, 리포펙타민 2000 (미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 인비트로겐 라이프 테크놀로지스)을 사용하여, 웰당 0.45 ug의 총 DNA로 트랜스펙팅한다. 트랜스펙션 1일 후에, 대략 24시간 동안 세포를 표시된 농도의 제제로 처리한 후, 제조사의 프로토콜에 따라 프로메가(미국 위스콘신 주 매디슨)로부터의 이중 루시퍼라아제 리포터 시스템(Dual-Luciferase Reporter System)을 사용하는 루시퍼라아제 분석을 위해 용해한다. 몰레큘러 디바이시즈(미국 캘리포니아주 서니베일)로부터의 발광측정기 르맥스를 사용하여, 반딧불이 루시퍼라아제 활성(콜라겐 촉진제 활성을 나타냄)을 우선 측정한 다음, 레닐라 루시퍼라아제(내부 대조군)를 측정한다. 이들 둘의 루시퍼라아제 활성의 비(RLU)를 사용하여 각각의 촉진제의 활성을 평가한다.

적합한 콜라겐 촉진제는 바람직하게는 0.5 마이크로그램/밀리리터 내지 2.5 밀리그램/밀리리터 (활성물 기준)의 범위 중 적어도 하나의 농도에서, 바람직하게는 1.0 마이크로그램/밀리리터 내지 2.5 밀리그램/밀리리터 (활성물 기준)의 범위 중 적어도 하나의 농도에서, 콜라겐 촉진제 활성이 1.2 이상, 바람직하게는 1.25 이상, 더 바람직하게는 1.3 이상이다.

적합한 비-레티노이드 콜라겐 촉진제의 예에는 다음이 포함되지만 이에 한정되지 않는다: 피버퓨 (타나세툼 파르테늄(Tanacetum parthenium))의 추출물, 센텔라 아시아티카(Centella asiatica)의 추출물, 및 시에게스벡키아 오리엔탈리스(Siegesbeckia orientalis)의 추출물 대두의 추출물 콜라겐-촉진 펩티드 우르솔산 및 아시아티코시드.

리유니온 섬에서는 바이올렛 마로네(Violette marronne), 인도에서는 코투 콜라(Gotu Kola) 또는 인디언 페니워트(Indian pennywort), 북미에서는 센텔라 레판다(Centella repanda), 그리고, 마다가스카에서는 탈라페트라카(Talapetraka)라고도 알려져 있는, 센텔라 아시아티카는 다형태 허브(polymorphous herb)이며 움벨리페라에 (Umbelliferae) (아피아세아에(Apiaceae)) 과에 속하며, 특히, 하이드로코틸레(Hydrocotyle) 아과에 속한다. 이것은 열대지방 전반에 야생에서 자라며 해발 고도 약 600 내지 1200 미터의 습하고 그늘진 지역을 선호한다. 센텔라 아시아티카는 3가지 변종, 즉 타이피카(Typica), 아비시니카(Abyssinica) 및 플로리다나(Floridana)를 갖는다. 이 허브는 그의 치유, 진정, 진통, 항우울, 항바이러스 및 항미생물 특성에 대해 알려져 있으며 사용된다. 이 허브의 생물학적 활성은 허브 내에 트라이테르펜 분자가 존재하기 때문인 것으로 여겨진다. 적합한 센텔라 아시아티카의 추출물은 스위스 바젤 소재의 바이엘 컨슈머 헬스케어(Bayer Consumer HealthCare)로부터 TECA로 입수가능하다.

"시에게스벡키아 오리엔탈리스의 추출물"은 세더마(Sederma)(미국 뉴저지주 에디슨 소재의 크로다 인터내셔널 그룹(Croda International Group))로부터 입수가능한 다루토사이드(Darutoside)를 포함하여 식물 시에게스벡키아 오리엔탈리스의 임의의 다양한 추출물을 의미한다.

적합한 콜라겐 촉진 펩티드는 다음을 포함한다:

(1) 세더마(미국 뉴저지주 에디슨 소재의 크로다 인터내셔널 그룹)로부터 매트릭실(MATRIXYL)로 입수가능한, 팔미토일 펜타펩티드, 특히, Pal-Lys-Thr-Thr-Lys-Ser-OH를 포함한, 마트리킨(matrikine) 펩티드 (즉, 세포외 기질 단백질- 콜라겐, 엘라스틴, 또는 프로테오글리칸의 분해로부터 유도된 펩티드);

(2) 미국 펜실베이니아주 몽고메리빌 소재의 포토메덱스(Photomedex)로부터 프로사이트(PROCYTE)로 입수가능한 GHK 구리 펩티드

(3) 세더마(미국 뉴저지주 에디슨 소재의 크로다 인터내셔널 그룹)로부터 바이오포엡티드(Biopoeptide) CL로 구매가능한 팔미토일 GHK 펩티드

(4) 유럽 특허 제1775306 B1호에 개시되며, 하기 화학식 I, 화학식 II 및 화학식 III으로 기재된, 펩티드 VFTRN, TRNDKL 또는 이의 화장품용으로 허용가능한 염:

[화학식 I]

R₁-A1-A2-A3-A4-A5-A6-A7-A8-A9-R₃

/

R₂

(여기서, 화학식 I은 적어도 6개의 아미노산 잔기를 함유하고

A1은 Val, Ala, Leu, Met이거나 또는 부재하고

A2는 Arg, Lys이거나 또는 부재하고

A3은 Phe, Tyr이거나 또는 부재하고

A4는Thr, Ser, Ala, 또는 Lys이고

A5는 Arg 또는 Lys이고

A6은 Asn, Asp, Gly, 또는 Gln이고

A7은 Asp, Asn, Glu이거나 또는 부재하고

A8은 Lys, Arg이거나 또는 부재하고

A9는 Leu, Met, Val, Ile, Phe이거나 또는 부재하고

단, A3은 A2가 부재할 경우 부재할 수 있을 뿐이며, A2는 A1이 부재할 경우 부재할 수 있을 뿐이며, A7은 A8이 부재할 경우에만 부재할 수 있으며, A8은 A9가 부재할 경우 부재할 수 있을 뿐이고 각각의 R₁ 및 R₂는 독립적으로 H, C_1-12 알킬, C_7-10 페닐알킬, 또는 C(=O)E1이며, 여기서 E1은 C_1-12 알킬, C_3-14 알케닐, C_{3- 14} 알키닐, 페닐, 3,4-다이하이드록시페닐알킬, 나프틸 또는 C_7-10 페닐알킬이되, 단, R₁ 또는 R₂ 중 어느 하나가 C(=O)E1일 때, 다른 하나는 H이어야 하고 R₃은 OH, NH₂, C_1-12 알콕시, C_7-10 페닐알콕시, C_11-14 나프틸알콕시, C_1-12 알킬아미노, C_7-10 페닐알킬아미노 또는 C_11-14 나프틸알킬아미노임);

[화학식 II]

R₁-A′1-A′2-A′3-A′4-A′5-A′6-A′7-A′8-A′9-A′10-A′11-R₃

/

R₂

(여기서, 화학식 II는 적어도 6개의 아미노산 잔기를 함유하고

A′1은 Val, Ala, Leu 또는 Met이고

A′2는 Arg 또는 Lys이고

A′3은 Phe 또는 Tyr이고

A′4는 Leu, Met, Val, Ile 또는 Phe이고

A′5는 His, Tyr 또는 Phe이고

A′6은 Ser, Thr, Ala 또는 Lys이고

A′7은 Tyr 또는 Phe이고

A′8은 Asp, Asn 또는 Glu이고

A′9는 Leu, Met, Val, Ile 또는 Phe이고

A′10은 Lys 또는 Arg이고

A′11은 Asn, Asp, Gly 또는 Gln이고

R₁, R₂, 및 R₃은 화학식 I에서 정의된 것들과 동일함).

[화학식 III]

R₁-A"1-A"2-A"3-A"4-A"5-A"6-A"7-A"8-A"9-A"10-R₃

/

R₂

(여기서, 화학식 III은 적어도 6개의 아미노산 잔기를 함유하고

A"1은 Cys 또는 Ser이고

A"2는 His, Tyr 또는 Phe이고

A"3은 Lys 또는 Arg이고

A"4는 Leu, Met, Val, Ile 또는 Phe이고

A"5는 Leu, Met, Val, Ile 또는 Phe이고

A"6은 His, Tyr 또는 Phe이고

A"7은 Asn, Asp, Gly 또는 Gln이고

A"8은 Val, Ala, Leu 또는 Met이고

A"9는 Asn, Asp, Gly 또는 Gln이고

A"10은 Lys 또는 Arg이고

R₁, R₂, 및 R₃은 화학식 I에서 정의된 것들과 동일함).

(5) 바이오미메틱 테트라펩티드, 예를 들어, 캐나다 퀘백주 소재의 유니펙스(Unipex)로부터 크로놀린 트라이 펩티드(Chronoline Tri Peptide)로 입수가능한 것들 및

(6) 스위스 바젤 소재의 디에스엠(DSM)으로부터 신-콜(Syn-Coll)로 입수가능한, 팔미토일 트라이펩티드.

우르솔산은 5환식 트라이테르펜산, 프루놀(Prunol), 말롤(Malol), 우르손(Urson), 베타-우르솔산 및 3-베타-하이드록시-우르스-12-엔-28-오익산으로도 공지되어 있다. 이것은 예를 들어 미국 미주리주 세인트 루이스 소재의 시그마-알드리치(Sigma-Aldrich)로부터 구매가능하다.

화학적으로 [6-[[3,4-다이하이드록시-6-(하이드록시메틸)-5-(3,4,5-트라이하이드록시-6-메틸옥산-2-일)옥시옥산-2-일]옥시메틸]-3,4,5-트라이하이드록시옥산-2-일] 10,11-다이하이드록시-9-(하이드록시메틸)-1,2,6a,6b,9,12a-헥사메틸-2,3,4,5,6,6a,7,8,8a,10,11,12,13,14b-테트라데카하이드로-1H-피센-4a-카르복실레이트)로도 알려져 있는 아시아티코사이드는, 예를 들어, 프랑스 쌩-오엔 93400 불러바드 빅토르 휴고 69 소재의 바이엘 상테 파밀리에 디비젼 세덱스(Bayer

Familiale Division Serdex)로부터 구매가능하다.

본 발명의 조성물은 화장품용으로 유효한 양의 하나 이상의 콜라겐 촉진제를 포함할 수 있다. 조성물은 바람직하게는, 활성물 기준으로, 약 0.1% 내지 약 10%의 콜라겐 촉진제, 더욱 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 5%의 콜라겐 촉진제, 그리고 가장 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 2%의 콜라겐 촉진제를 포함한다.

본 발명의 조성물은 적어도 하나의 피부 라이트닝 활성제를 추가로 포함할 수 있다. 적합한 피부 라이트닝 활성제의 예는 타이로시나아제 억제제, 멜라닌 분해제, PAR-2 길항제를 포함하는 멜라노좀 이전 억제제, 박피제(exfoliant), 썬스크린, 레티노이드, 산화방지제, 트라넥삼산, 트라넥삼산 세틸 에스테르 염산염, 피부 표백제, 리놀레산, 아데노신 모노포스페이트 다이소듐 염, 카모밀라(Chamomilla) 추출물, 알란토인, 불투명화제, 활석 및 실리카, 아연 염 등, 및 문헌[Solano et al. Pigment Cell Res. 19 (550-571)] 및 문헌[Ando et al. Int J Mol Sci 11 (2566-2575)]에 기재된 다른 제제를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

적합한 타이로시나아제 억제제의 예에는 비타민 C 및 이의 유도체, 비타민 E 및 이의 유도체, 코직산, 아르뷰틴, 레소르시놀, 하이드로퀴논, 플라본, 예를 들어 감초(Licorice) 플라보노이드, 감초 뿌리 추출물, 뽕나무(Mulberry) 뿌리 추출물, 디오스코레아 코포시타(Dioscorea Coposita) 뿌리 추출물, 바위취(Saxifraga) 추출물 등, 엘라그산, 살리실레이트 및 유도체, 글루코사민 및 유도체, 풀러렌(Fullerene), 히노키티올(Hinokitiol), 다이오익산, 아세틸 글루코사민, 5,5'-다이프로필-바이페닐-2,2'-다이올(마그노리그난(Magnolignan)), 4-(4-하이드록시페닐)-2-부탄올(4-HPB), 이들의 둘 이상의 배합물 등이 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 비타민 C 유도체의 예에는 아스코르브산 및 염, 아스코르브산-2-글루코시드, 소듐 아스코르빌 포스페이트, 마그네슘 아스코르빌 포스페이트, 및 비타민 C가 풍부한 천연 추출물이 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 비타민 E 유도체의 예에는 알파-토코페롤, 베타-토코페롤, 감마-토코페롤, 델타-토코페롤, 알파-토코트라이에놀, 베타-토코트라이에놀, 감마-토코트라이에놀, 델타-토코트라이에놀 및 그들의 혼합물, 토코페롤 아세테이트, 토코페롤 포스페이트 및 비타민 E 유도체가 풍부한 천연 추출물이 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 레소르시놀 유도체의 예에는 레소르시놀, 4-치환된 레소르시놀, 예를 들어 4-알킬레소르시놀, 예컨대 4-부티레소르시놀 (루시놀), 4-헥실레소르시놀(시노베아(Synovea) HR, 시테온(Sytheon)), 페닐에틸 레소르시놀(심화이트(Symwhite), 심라이즈(Symrise)), 1-(2,4-다이하이드록시페닐)-3-(2,4-다이메톡시-3-메틸페닐)-프로판(니비톨, 우니겐(Unigen)) 등 및 레소르시놀이 풍부한 천연 추출물이 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 살리실레이트의 예에는 4-메톡시 포타슘 살리실레이트, 살리실산, 아세틸살리실산, 4-메톡시살리실산 및 그 염이 포함되지만, 이에 한정되지 않는다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 타이로시나아제 억제제에는 4-치환된 레소르시놀, 비타민 C 유도체, 또는 비타민 E 유도체가 포함된다. 보다 바람직한 실시 형태에서, 타이로시나아제 억제제에는 페닐에틸 레소르시놀, 4-헥실 레소르시놀, 또는 아스코르빌-2-글루코시드가 포함된다.

적합한 멜라닌-분해제의 예에는 과산화물 및 효소, 예컨대 퍼옥시다아제 및 리그니나아제가 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 멜라닌-억제제에는 과산화물 또는 리그니나아제가 포함된다.

적합한 멜라노좀 이동 억제제의 예에는 PAR-2 길항제, 예컨대 콩 트립신 억제제 또는 보우만-버크(Bowman-Birk) 억제제, 비타민 B3 및 유도체, 예컨대 나이아신아미드, 에센셜 소이(Essential soy), 홀 소이(Whole Soy), 콩 추출물이 포함된다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 멜라노좀 이동 억제제에는 콩 추출물 또는 나이아신아미드가 포함된다.

박피제의 예에는 알파-하이드록시산, 예컨대 락트산, 글리콜산, 말산, 타르타르산, 시트르산, 또는 임의의 상기 물질의 임의의 조합, 베타-하이드록시산, 예컨대 살리실산, 폴리하이드록시산, 예컨대 락토비온산 및 글루콘산, 및 기계적 박피, 예컨대 미세박피(microdermabrasion)가 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 박피제는 글리콜산 또는 살리실산을 포함한다.

썬스크린제의 예에는 아보벤존 (파르솔 1789), 비스다이설리졸 다이소듐 (네오 헬리오판 AP), 다이에틸아미노 하이드록시벤조일 헥실 벤조에이트 (우비눌 A 플러스), 에캄술 (멕소릴 SX), 메틸 안트라닐레이트, 4-아미노벤조산 (PABA), 시녹세이트, 에틸헥실 트라이아존 (우비눌 T 150), 호모살레이트, 4-메틸벤질리덴 캄포르 (파르솔 5000), 옥틸 메톡시신나메이트 (옥티녹세이트), 옥틸 살리실레이트 (옥티살레이트), 파디메이트 O (에스칼롤 507), 페닐벤즈이미다졸 설폰산 (엔설리졸), 폴리실리콘-15 (파르솔 SLX), 트롤라민 살리실레이트, 베모트라이지놀 (티노소르브 S), 벤조페논 1-12, 다이옥시벤존, 드로메트라이졸 트라이실록산 (멕소릴 XL), 이스코트라이지놀 (우바소르브 HEB), 옥토크릴렌, 옥시벤존 (에우솔렉스 4360), 설리소벤존, 비소크트라이졸 (티노소르브 M), 이산화티타늄, 산화아연 등이 포함되지만 이에 한정되지 않는다.

레티노이드의 예에는 레티놀(비타민 A 알코올), 레티날(비타민 A 알데히드), 레티닐 아세테이트, 레티닐 프로피오네이트, 레티닐 리놀레에이트, 레틴산, 레티닐 팔미테이트, 아이소트레티노인, 타자로텐, 벡사로텐, 아다팔렌(Adapalene), 이들의 둘 이상의 조합 등이 포함되지만, 이에 한정되지 않는다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 레티노이드는 레티놀, 레티날, 레티닐 아세테이트, 레티닐 프로피오네이트, 레티닐 리놀레에이트, 및 이들의 둘 이상의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 소정의 더 바람직한 실시 형태에서, 레티노이드는 레티놀이다.

산화방지제의 예에는 수용성 산화방지제, 예컨대 설프하이드릴 화합물 및 그의 유도체 (예를 들어, 소듐 메타바이설파이트 및 N-아세틸-시스테인, 글루타티온), 리포산 및 다이하이드로리포산, 스틸베노이드, 예컨대 레스베라트롤 및 유도체, 락토페린, 철 및 구리 킬레이트제 및 아스코르브산 및 아스코르브산 유도체 (예를 들어, 아스코빌-2-글루코시드, 아스코르빌 팔미테이트 및 아스코르빌 폴리펩티드)가 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 본 발명의 조성물에 사용하기에 적합한 유용성 산화방지제에는 부틸화 하이드록시톨루엔, 레티노이드 (예를 들어, 레티놀 및 레티닐 팔미테이트), 토코페롤 (예를 들어, 토코페롤 아세테이트), 토코트라이에놀 및 유비퀴논이 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 본 발명의 조성물에 사용되기에 적합한 산화방지제를 함유하는 천연 추출물에는 플라보노이드 및 아이소플라보노이드 및 그들의 유도체(예를 들어, 게니스테인 및 다이아드제인)를 함유하는 추출물, 레스베라트롤을 함유하는 추출물 등이 포함되나, 이에 제한되지 않는다. 그러한 천연 추출물의 예에는 포도씨, 녹차, 홍차, 백차, 소나무 껍질, 피버퓨, 파테놀리드(parthenolide) 무함유 피버퓨, 귀리 추출물, 블랙베리 추출물, 코티너스(cotinus) 추출물, 대두 추출물, 포멜로(pomelo) 추출물, 맥아 추출물, 헤스페레딘(Hesperedin), 그레이프(Grape) 추출물, 쇠비름속(Portulaca) 추출물, 리코칼콘, 칼콘, 2,2'-다이하이드록시 칼콘, 프리물라(Primula) 추출물, 프로폴리스 등이 포함된다.

부가적인 화장품용 활성제는 임의의 적합한 양으로, 예를 들어 조성물의 약 0.0001 중량% 내지 약 20 중량%, 예를 들어, 약 0.001 중량% 내지 약 10 중량%, 예컨대 약 0.01 중량% 내지 약 5 중량%의 양으로 조성물 중에 존재할 수 있다. 소정의 바람직한 실시 형태에서는 0.1% 내지 5%의 양으로 존재하며 다른 바람직한 실시 형태에서는 1% 내지 2%로 존재한다.

본 발명의 조성물은 화장용으로 유효한 양의 하나 이상의 항염증성 화합물을 포함할 수 있다. 본 조성물은 바람직하게는 활성물 기준으로 약 0.1% 내지 약 10%, 더 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 5%의 항염증성 화합물을 포함한다.

적합한 항염증 활성제에는 하기에 개시된 항염증성 분석에서 인터류킨-2에 대하여 IC50 (화합물이 50%의 염증 억제율을 성취하는 농도)이 100 μg/ml 이하인 화합물이 포함되지만, 이에 한정되지 않는다. 바람직한 실시 형태에서, 제2 항염증 화합물의 IC50은 약 70 μg/ml 미만, 더 바람직하게는 약 50 μg/ml 미만, 더 바람직하게는 약 40 μg/ml 미만, 더 바람직하게는 약 30 μg/ml 미만이다.

항염증 분석법은 T-세포 수용체(TCR) 활성화제 피토헤마글루티닌(PHA)에 의해 자극된 인간 림프구에 의한 사이토카인의 생성을 제제가 감소시키는 능력을 평가하며, 이는 하기 방식으로 행해진다. 인간 백혈구를 건강한 성인 남자로부터 백혈구 성분 채집(leukopheresis)을 통하여 수집하고, 무혈청 림프구 성장 배지 (엑스비보(ExVivo-15), 미국 메릴랜드주 워커스빌 소재의 바이오휘태커(Biowhittaker)) 중 1×10⁶개의 세포/mL의 밀도로 조정한다. 공개된 방법에 따라 시험 샘플의 존재 또는 부재 하에 PBL을 10 μg/mL의 PHA로 자극한다 (문헌[Hamamoto Y., et al. Exp Dermatol 2:231-235, 1993]). 37℃, 5% CO₂에서 48시간 인큐베이션 후, 상청액을 제거하고, 구매가능한 다중 사이토카인 검출 키트를 이용하여 사이토카인 함량에 대해 평가한다.

적합한 항염증제의 예에는 치환된 레소르시놀, (E)-3-(4-메틸페닐설포닐)-2-프로펜니트릴(예를 들어 "베이(Bay) 11-7082", 미국 미주리주 세인트루이스 소재의 시그마-알드리치로부터 구매가능함), 테트라하이드로커큐미노이드(예를 들어 테트라하이드로커큐미노이드 CG, 미국 뉴저지주 피스카타웨이 소재의 사빈사 코포레이션(Sabinsa Corporation)으로부터 입수가능함), 및 하기로부터 유래된 추출물 및 물질이 포함된다: 펠로덴드론 아무렌세(Phellodendron amurense) 껍질 추출물(Cortex Extract) (PCE), 비변성 대두 (글라이신 맥스(Glycine max)), 피버퓨 (타나세툼 파르테늄(Tanacetum parthenium)), 생강 (징기베르 오피시날레(Zingiber officinale)), 은행 (긴코 빌로바(Ginkgo biloba)), 마데카소사이드 (센텔라 아시아티카 추출 성분), 코티너스 (코티너스 코기그리아), 머위(Butterbur) 추출물 (페타시테스 하이브리두스(Petasites hybridus)), 구기자(Goji Berry) (라이시움 바르바룸(Lycium barbarum)), 밀크 시슬(Milk Thistle) 추출물 (실리붐 마리아눔(Silybum marianum)), 인동덩굴(Honeysuckle) (로니세라 자포니카(Lonicera japonica)), 페루 발삼(Basalm of Peru) (마이록실론 페레이라에(Myroxylon pereirae)), 세이지(Sage) (살비아 오피시날리스(Salvia officinalis)), 크랜베리(Cranberry) 추출물 (바시니움 옥시코코스(Vaccinium oxycoccos)), 아마란스유(Amaranth Oil) (아마란투스 크루엔투스(Amaranthus cruentus)), 석류(Pomegranate) (푸니카 그라나툼(Punica granatum)), 예바 마테(Yerbe Mate) (일렉스 파라구아리엔시스(Ilex paraguariensis) 잎 추출물), 하얀 백합(White Lily) 꽃 추출물 (릴리움 칸디둠(Lilium candidum)), 올리브 잎 추출물 (올레아 유로파에아(Olea europaea)), 플로레틴(Phloretin) (사과 추출물), 오트 가루 (아비나 사티바(Aveena sativa)), 리페놀(Lifenol) (홉(Hop): 후물루스 루풀루스(Humulus lupulus)) 추출물, 부르간(Bugrane) P (오노니스 스피노사(Ononis spinosa)), 리코칼콘(Licochalcone) (감초: 글리시리자 인플라테(Glycyrrhiza inflate) 추출물 성분), 심릴리프(Symrelief) (비스아볼올, 그리고 생강 추출물), 이들의 둘 이상의 배합물 등.

일 실시 형태에서, 항염증제는 레소르시놀이다. 레소르시놀은 하기 구조를 갖는 다이하이드록시 페놀 화합물(즉, 1,3 다이하이드록시벤젠)이다:

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "치환된 레소르시놀"은 2, 4, 5 또는 6 위치에 적어도 하나의 치환체를 포함하는 레소르시놀을 의미한다. 따라서, 치환된 레소르시놀은 1개 내지 4개의 치환체를 가질 수 있다. 상기에 나타낸 바와 같이, 치환된 레소르시놀의 위치 1 및 위치 3은 -OH 기를 포함한다.

치환된 레소르시놀이 항염증용으로 사용되는 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀의 모든 치환체에 페닐(-C₆H₅ 방향족) 부분이 없는 것이 고도로 바람직하다. 소정의 실시 형태에서, 모든 치환체에는 방향족 부분(헤테로원자가 있거나 없음)이 없다. 소정의 이러한 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀의 모든 치환체에는 케톤 작용기(2개의 다른 탄소 원자에 결합된 카르보닐)가 없다는 것이 바람직하다. 소정의 다른 이러한 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀의 모든 치환체에는 페닐 작용기 및 케톤 작용기 둘 모두가 없다. 소정의 다른 이러한 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀은 5 내지 11개의 탄소 원자, 바람직하게는 5 내지 10개의 탄소 원자, 더욱 바람직하게는 5 내지 9개의 탄소 원자, 가장 바람직하게는 5 내지 8개의 탄소 원자를 포함하는 적어도 하나의 치환체를 포함한다. 소정의 다른 이러한 실시 형태에서, 적어도 하나의 치환체는 상기 기재된 탄소 원자의 수를 갖는 것과 같은 알킬 기를 포함한다. 알킬 기는 바람직하게는 불포화된다.

소정의 실시 형태에서, 레소르시놀의 4 위치는 치환되고, 소정의 실시 형태에서, 4 위치만 치환된다. 다른 실시 형태에서, 4 위치는 알킬 기로 치환된다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀은 알킬 기를 포함하는, 4 위치에서 단일 치환체를 포함한다. 소정의 다른 바람직한 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀은 벤젠 고리에 직접 결합된 알킬 기로 이루어진, 4 위치에서 단일 치환체를 포함한다.

특히 적합한 치환된 레소르시놀은 4-헥실 레소르시놀 및 4-옥틸레소르시놀, 특히 4-헥실 레소르시놀을 포함한다. 4-헥실레소르시놀 및 4-옥틸레소르시놀의 구조는 하기에서 보여진다:

4-헥실 레소르시놀

4-옥틸레소르시놀

4-헥실 레소르시놀은 미국 뉴저지주 링컨 파크 소재의 시테온으로부터 시노베아(SYNOVEA) HR로 구매가능하다. 4-옥틸레조르시놀은 코네티컷주 웨스트 하벤 소재의 씨티 케미컬 엘엘씨 (City Chemical LLC)로부터 상업적으로 구입할 수 있다.

소정의 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀은 2, 4, 5, 또는 6 위치에서 적어도 2개의 치환체를 포함한다. 그러한 치환체는 임의로 연결되어 고리, 예컨대, 황 또는 산소와 같은 헤테로원자를 임의로 포함하는 환형 지방족 탄화수소를 형성할 수 있다. 그러한 연결된 치환체는 5 내지 10개의 탄소 원자, 예를 들어, 8 내지 10개의 탄소 원자를 포함할 수 있고, 임의로 1 내지 3개의 헤테로원자를 포함한다. 2 및 3 위치를 결합시키는 환형 지방족 치환체를 포함하는 적합한 치환된 레소르시놀의 예는 제아랄라논(Zearalanone) 및 β-제아랄라놀(β-Zearalanol)을 포함한다:

제아랄라논

β-제아랄라놀

제아르알라논 및 β-제아르알라놀은 미국 미주리주 세인트 루이스 소재의 시그마 케미칼스(Sigma Chemicals)로부터 구매가능하다.

소정의 다른 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀은 할라이드-함유 및/또는 니트로소-함유 치환체를 포함한다. 적합한 예는 벤젠 고리에 직접 결합된 -Cl 또는 -N=O를 함유한다. 이들 치환체는 예를 들어, 2 및 4, 2 및 6, 또는 4 및 6 위치에서 존재할 수 있다. 다이할라이드-치환된 레소르시놀의 예는 2,6-다이클로로레소르시놀이다. 다이니트로소-치환된 레소르시놀의 예는 2,4-다이니트로소소르시놀이다:

2,4-다이니트로소소르시놀

2,6-다이클로로레소르시놀 및 2,4-다이니트로소소르시놀은 미국 코네티컷주 웨스트 헤이븐 소재의 시티 케미칼 엘엘씨로부터 입수가능하다.

치환된 레소르시놀은 당업계에 알려진 수단에 의해, 예를 들어, 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함된 미국 특허 제4,337,370호에서 기재된 기술을 사용해 제조된다.

치환된 레소르시놀은 임의의 적합한 분자량을 가질 수 있다. 소정의 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀의 분자량의 범위는 약 175 내지 약 300이다.

"피버퓨의 추출물"은, 발명의 명칭이 피버퓨(타나세툼 파르테늄)로부터의 파르테놀라이드 무함유 생활성 성분 및 이의 제조 방법(PARTHENOLIDE FREE BIOACTIVE INGREDIENTS FROM FEVERFEW (TANACETUM PARTHENIUM) AND PROCESSES FOR THEIR PRODUCTION)인 미국 특허 공개 제2007/0196523호에 개시된 상세한 내용에 따라 제조될 수 있는 것과 같은, 식물 "타나세툼 파르테늄"의 추출물을 의미한다. 하나의 특히 적합한 피버퓨 추출물은 미국 뉴욕주 오시닝 소재의 인테그레이티드 보태니컬 테크놀로지스(Integrated Botanical Technologies)로부터 약 20% 활성 피버퓨로서 구매가능하다.

본 발명의 피부 케어 조성물에서, 항염증성 화합물에 대한 부르세라 시마루바 종자 추출물의 양의 비는 다양할 수 있다. 예를 들어, 상기 추출물 및 항염증성 화합물은 약 0.001 내지 약 100, 바람직하게는 약 0.01 내지 약 10, 더욱 바람직하게는 약 0.25 내지 약 2의 중량비 (이는 건조 추출물의 중량 기준 양을 항염증성 화합물의 중량 기준 양으로 나누어서 결정됨)로 존재할 수 있다.

다양한 다른 물질이 또한 본 발명의 조성물 중에 존재할 수 있다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 본 조성물은 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 국소 성분을 포함한다: 계면활성제, 킬레이팅제, 연화제, 휴멕턴트, 컨디셔너, 방부제, 불투명화제, 방향제 등.

연화제가 의미하는 것은 (예를 들어 윤활제로 작용하도록 피부 표면 상에 또는 피부 각질층 내에 남아있음으로써) 부드럽고 매끄럽고 유연한 피부 외양을 유지하는 것을 돕는 화합물이다. 적합한 연화제의 예에는 문헌[Chapter 35, pages 399-415 (Skin Feel Agents, by G Zocchi), Handbook of Cosmetic Science and Technology (edited by A. Barel, M. Paye and H. Maibach, Published in 2001 by Marcel Dekker, Inc New York, NY)]에서 발견되는 것들이 포함되며, 바셀린, 헥실데실 스테아레이트, 및 식물유, 견과유, 및 야채유, 예를 들어 마카다미아 너트유, 미강유, 포도씨유, 야자유, 프림로즈유(prim rose oil), 수소화 땅콩유 및 아보카도유가 포함되지만, 이에 한정되지 않는다.

휴멕턴트가 의미하는 것은 피부의 상부 층의 수분 함량을 증가시키도록 의도된 화합물(예를 들어, 흡습성 화합물)이다. 적합한 휴멕턴트의 예에는 문헌[Chapter 35, pages 399-415 (Skin Feel Agents, by G Zocchi), Handbook of Cosmetic Science and Technology (edited by A. Barel, M. Paye and H. Maibach, Published in 2001 by Marcel Dekker, Inc New York, NY)]에서 발견되는 것들이 포함되며, 글리세린, 소르비톨 또는 트레할로스 (예를 들어, α,α- 트레할로스, β,β-트레할로스, α,β-트레할로스) 또는 이의 염 또는 에스테르 (예를 들어, 트레할로스 6-포스페이트)가 포함되지만 이에 한정되지 않는다.

계면활성제가 의미하는 것은 클렌징하도록 또는 유화시키도록 의도된 표면 활성제이다. 적합한 계면활성제의 예에는 문헌[Chapter 37, pages 431-450 (Classification of surfactants, by L. Oldenhove de Guertechin), Handbook of Cosmetic Science and Technology (edited by A. Barel, M. Paye and H. Maibach, Published in 2001 by Marcel Dekker, Inc New York, NY)]에서 발견되는 것들이 포함되며, 음이온성 계면활성제, 예를 들어 황산염, 양이온성 계면활성제, 예를 들어 베타인, 양쪽성 계면활성제, 예를 들어 소듐 코코 글리시네이트, 비이온성 계면활성제, 예를 들어 알킬 폴리글루코시드가 포함되지만, 이에 한정되지 않는다.

적합한 킬레이팅제의 예에는 본 발명의 조성물을 보호 및 보존할 수 있는 것이 포함된다. 바람직하게는, 킬레이팅제는 에틸렌다이아민 테트라세트산("EDTA")이며, 더 바람직하게는 테트라소듐 EDTA이고, 이는 미국 미시간주 미들랜드 소재의 다우 케미칼 컴퍼니(Dow Chemical Company)로부터 상표명 "베르센(Versene) 100XL"로 구매가능하다.

적합한 방부제는 예를 들어 파라벤, 4차 암모늄 화학종, 페녹시에탄올, 벤조에이트, DMDM 하이단토인, 유기 산을 포함하며, 조성물의 총 중량을 기준으로 약 0 내지 약 1% 또는 약 0.05% 내지 약 0.5%의 양으로 조성물에 존재한다.

모발에 광택과 같은 추가적인 특질을 부여하는 임의의 다양한 컨디셔너가 본 발명에서 사용하기에 적합하다. 예에는 대기압 비점이 약 220℃ 미만인 휘발성 실리콘 컨디셔닝제가 포함되지만, 이에 한정되지 않는다. 적합한 휘발성 실리콘의 예에는 비배타적으로 폴리다이메틸실록산, 폴리다이메틸사이클로실록산, 헥사메틸다이실록산, 사이클로메티콘 유체, 예를 들어 미국 미시간주 미들랜드 소재의 다우 코닝 코포레이션(Dow Corning Corporation)으로부터 상표명 "DC-345"로 구매가능한 폴리다이메틸사이클로실록산 및 이들의 혼합물이 포함되며, 바람직하게는 사이클로메티콘 유체가 포함된다. 다른 적합한 컨디셔너는 양이온성 중합체를 포함하며, 이는 폴리쿼터늄, 양이온성 구아 등을 포함한다.

임의의 다양한 구매가능한 진주 광택제 또는 불투명화제가 본 조성물에서 사용하기에 적합하다. 적합한 진주 광택제 또는 불투명화제의 예에는 (a) 약 16개 내지 약 22개의 탄소 원자를 갖는 지방산 및 (b) 에틸렌 또는 프로필렌 글리콜의 모노 또는 다이에스테르 (a) 약 16개 내지 약 22개의 탄소 원자를 갖는 지방산과 (b) 화학식 HO-(JO)_a-H (여기서, J는 약 2개 내지 약 3개의 탄소 원자를 갖는 알킬렌기이며 a는 2 또는 3임)의 폴리알킬렌 글리콜의 모노 또는 다이에스테르 약 16개 내지 약 22개의 탄소 원자를 포함하는 지방 알코올 화학식 KCOOCH₂L (여기서, K 및 L은 독립적으로 약 15개 내지 약 21개의 탄소 원자를 포함함)의 지방 에스테르 샴푸 조성물에 불용성인 무기 고형물 및 이들의 혼합물이 포함되지만, 이에 한정되지 않는다.

피부 상에 사용하기에 적합한 임의의 방향제 조성물이 본 발명에 따라 사용될 수 있다.

소정의 바람직한 실시 형태에서, 본 발명은 본 발명의 조성물을 포함하는 기재의 형태로 존재할 수 있다. 임의의 적합한 기재가 사용될 수 있다. 적합한 기재 및 기재 물질의 예는 예를 들어, 이들의 전부가 참고로 본원에 삽입되어 있는 미국 특허 공고 제2005/0226834호 및 제2009/0241242호에 개시되어 있다.

소정의 바람직한 실시 형태에서, 기재는 와이프, 글러브 또는 페이셜 마스크이다. 바람직하게는, 이러한 실시 형태는 상기 참고 문헌에 정의되어 있는 바와 같은 수불용성 기재를 포함할 수 있다. 소정의 실시 형태의 경우, 수불용성 기재는, 이것이 인간 사용자의 얼굴을 피복하여 마스크 기재로서 수불용성 기재를 사용자의 얼굴 주변에 놓기 편하도록 하기 위한 크기 및 형상을 가질 수 있다. 예를 들어, 수불용성 마스크 기재는 사용자의 입, 코, 및/또는 눈을 위한 개구부를 가질 수 있다. 대안적으로, 수불용성 기재는 이러한 개구부를 가지지 않을 수 있다. 개구부가 없는 이러한 구성은, 수불용성 기재를 얼굴이 아닌 피부 영역을 덮으려는 본 발명의 실시 형태에서 또는 수불용성 기재를 와이프로서 사용할 경우의 본 발명의 실시 형태에서 유용할 수 있다. 수불용성 기재는 다양한 형상, 예컨대 각진 형상 (예를 들어, 직사각형) 또는 아치형 형상, 예컨대 환형 또는 타원형일 수 있다. 소정의 실시 형태에 있어서, 기재는 전체적으로 본 명세서에 포함된 미국 특허 공개 제2006/0141014호에 기재된 것과 같은 글러브이다. 본 발명의 일 실시 형태에서, 제품은 상이한 형상의 복수의 수불용성 기재를 포함한다.

본 발명은 피부의 장벽 기능 및 보습성의 향상을 필요로 하는 피부에 부르세라 시마루바 추출물, 특히 부르세라 시마루바 종자 추출물을 도포함으로써 피부의 장벽 기능 및 보습성을 향상시키는 방법을 추가로 포함한다. 본 방법은 예를 들어 부르세라 시마루바 추출물을 포함하는 본 발명의 조성물을 피부의 장벽 기능 및 보습성의 향상을 필요로 하는 피부에 국소 도포하는 단계를 포함한다. 그러한 국소 도포는 신체 상의 처리를 필요로 하는 임의의 피부, 예를 들어 얼굴, 입술, 목, 가슴, 등, 팔, 겨드랑이, 손, 발 및/또는 다리의 피부에 대한 것일 수 있다.

본 발명은 피부 노화 징후의 개선을 필요로 하는 피부에 부르세라 시마루바 추출물, 특히 부르세라 시마루바 종자 추출물을 도포함으로써 피부 노화 징후를 개선시키는 방법을 추가로 포함한다. 본 방법은 예를 들어 부르세라 시마루바 추출물을 포함하는 본 발명의 조성물을 피부 노화 징후 처리를 필요로 하는 피부에 국소 도포하는 단계를 포함한다. 그러한 국소 도포는 신체 상의 처리를 필요로 하는 임의의 피부, 예를 들어 얼굴, 입술, 목, 가슴, 등, 팔, 겨드랑이, 손, 발 및/또는 다리의 피부에 대한 것일 수 있다.

필요로 하는 피부에 본 조성물을 도포하는 임의의 적합한 방법이 사용될 수 있다. 예를 들어, 본 조성물은 패키지로부터 직접 필요한 피부에, 손으로 필요한 피부에 도포될 수 있거나, 또는 와이프 또는 마스크 또는 이들의 둘 이상의 조합과 같은 기재로부터 전달될 수 있다. 다른 실시 형태에서, 조성물은 드롭퍼(dropper), 튜브, 롤러, 스프레이, 및 패치를 통해 적용될 수 있거나, 또는 욕조 또는 달리 피부에 적용될 물 등에 첨가될 수 있다.

소정의 실시 형태에서, 본 발명의 방법은 부르세라 시마루바 추출물을 소정 기간 동안 피부와 접촉하도록 남겨두는 단계를 추가로 포함한다. 예를 들어, 소정의 바람직한 실시 형태에서, 적용 후, 추출물은 약 15분 이상 동안 피부와 접촉하도록 남겨진다. 소정의 더 바람직한 실시 형태에서, 추출물은 약 20분 이상, 보다 바람직하게는 약 1시간 이상 동안 피부와 접촉하도록 남겨진다.

소정의 실시 형태에서, 본 발명의 방법은 부르세라 시마루바 추출물을 선택된 기간에 걸쳐 피부에 다회 적용하는 것을 포함하는 요법을 포함한다. 예를 들어, 소정의 실시 형태에서, 본 방법은 처리를 필요로 하는 피부에 12주 이상, 바람직하게는 8주 이상, 그리고 더 바람직하게는 2주 이상 동안 매일 1회 또는 2회 적용하는 것을 포함한다.

소정의 바람직한 실시 형태에서, 본 발명의 방법은 부르세라 시마루바 추출물을 포함하는 적어도 2가지의 상이한 조성물 또는 제품을 피부에 적용하는 단계를 포함한다. 예를 들어, 본 방법은 피부의 장벽 효능 및 보습성의 향상을 필요로 하는 피부에 부르세라 시마루바 추출물을 포함하는 제1 조성물을 적용하고, 이어서 제1 조성물과는 상이한 부르세라 시마루바 추출물을 포함하는 제2 조성물을 처리를 필요로 하는 피부에 적용하는 단계를 포함할 수 있다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 제1 조성물 및 제2 조성물은 로션, 클린저, 마스크, 와이프, 크림, 세럼, 젤 등으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택될 수 있다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 제1 조성물 및 제2 조성물 중 적어도 하나는 클린저, 로션, 크림, 에센스, 또는 세럼이고, 다른 것은 페이셜 마스크 또는 와이프이다. 소정의 다른 바람직한 실시 형태에서, 제1 조성물 및 제2 조성물 중 적어도 하나는 클린저이고, 다른 것은 로션 또는 크림이다.

본 발명의 조성물은 다양한 다른 용도에 적합할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 조성물은 피부 라이트닝, 건성 피부의 클렌징, 염증후 색소과다침착을 포함하는 염증 치료, 모공 크기 감소, 여드름 치료, 피지 생성 감소, 흉터 완화 및 임신선 출현 감소, 셀룰라이트 출현 또는 오렌지필(orange peel) 출현의 감소에 유용할 수 있다. 소정의 다른 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 미세 박피술 처리와 같은 기계적 또는 물리적 박리제, 또는 살리실산과 같은 각질 용해제 또는 화학적 박리제와 동시에 또는 이의 수시간 내에 적용될 수 있다. 소정의 다른 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 점막 또는 다른 조직, 예를 들어, 질, 구강, 또는 눈의 조직에 도포된다. 소정의 다른 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 치유를 촉진하기 위해 가벼운 상처 또는 수술 후 부위에, 벌레 물린 데, 옻 오른 데, 또는 유사한 피부 상태에, 또는 일반적으로 가려움을 완화하기 위해 도포된다. 소정의 다른 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 피부 자극을 완화시키기 위하여 도포된다. 자극은 피부 케어 제품 및 화장품 중 성분, 예를 들어 레티노이드 및 그 유도체, 벤조일 퍼옥사이드, 알파 하이드록시산 및 이의 유도체, 살리실산, 계면활성제, 천연 식물 추출물, 썬스크린 활성제, 우레아 및 방부제 등에 의해 야기되는 외부 기원의 것일 수 있다. 자극은 일광, 바람 또는 면도와 같은 다른 외부 기원의 것일 수 있다. 또한 자극은 여드름, 주사, 아토피성 피부염 및 기타 질환 상태와 같은 내재적 질환 상태에 의해 야기될 수 있다. 다른 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 잇몸 발적 감소에 유용할 수 있다. 본 추출물은 말초 혈관 확장증 또는 거미상 정맥 출현의 감소, 주사, 피부의 얼룩덜룩함 및 피부 잡티 출현의 감소에서 사용하기에 또한 적합할 수 있다. 소정의 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 모발 건강 향상을 위하여, 발모 촉진 또는 모발 손실 지연을 위하여, 비듬의 예방 또는 치료를 위하여, 지루, 지루성 두피염의 예방 또는 치료를 위하여 그리고 두피의 건강 및 보습의 향상을 위하여 모발, 두피 또는 이들 둘 모두에 적용된다. 다른 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 잇몸의 발적 또는 과민증의 예방 또는 치료를 위하여, 치주염의 감소를 위하여, 치은염의 치료 또는 예방을 위하여, 구강 건조 증상 또는 구강 건조 느낌의 감소를 위하여 구강 내에 잇몸에 적용된다. 또 다른 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 눈 충혈 또는 자극된 눈의 출현의 치료, 예방 또는 감소를 위하여, 결막염의 예방 또는 치료를 위하여, 눈의 수분의 개선을 위하여, 안구 건조 느낌의 감소를 위하여 눈에 적용된다. 다른 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 탄력성 손실, 자극 또는 건조 징후의 예방 또는 치료를 위하여 질 점막에 적용된다.

실시예

실시예에서 하기 시험 방법을 사용하였다.

분석 1: PPARδ 트랜스활성화(transactivation) 분석

인간 퍼옥시좀 증식자-활성화 수용체 델타(human peroxisome proliferator-activated receptor delta; hPPARδ) 리간드 결합 도메인으로 트랜스펙션시킨 HEK293의 대조 샘플들은, 어떠한 추출물도 첨가하지 않은 것을 제외하고는 하기에 나타낸 바와 같이 제조 및 수확하였다. 처리 시에, hPPARδ의 트랜스활성화를 측정하였다. 세포를 용해시키고, 루시퍼라아제 시그널의 발광을 측정하였다. 추출물들에 의해서 성취된 증가 배수를 비히클-처리된 대조군과 비교함으로써 추출물들의 효력을 측정하였다.

구체적으로, Gal4-루시퍼라아제 벡터, 및 효모 Gal4 DNA 결합 도메인과 융합된 인간 PPARδ 리간드 결합 도메인 (LBD)을 포함하는 플라스미드를 얀센 리서치 앤드 디벨롭먼트, 엘엘씨(Janssen Research & Development, LLC)로부터 공급받았다. 인간 HEK239 세포를 DMEM+10% FBS+1% 글루타민+1% 피루브산나트륨에서 T75 플라스크에서 약 70%의 예비융합도로 성장시켰다. 세포를 T75 플라스크에서 리포펙타민(Lipofectamin) 2000 시약 (미국 뉴욕주 그랜드 아일랜드 소재의 라이프 테크놀로지스(Life technologies))을 사용하여 두 플라스미드 (1:1의 비)로 일시적으로 트랜스펙션시켰다. T75 플라스크에 있어서의 트랜스펙션 프로토콜은 세포를 1) 10 ug의 DNA (5 ug의 각각의 벡터) + 1.25 mL의 OptiMEM; 2) 25 ul의 리포펙타민 + 1.25 mL의 OptiMEM으로 처리하고; 3) 5분 동안 인큐베이션하고; 4) 함께 혼합하고; 5) 20분 동안 인큐베이션하고; 6) P/S를 포함하지 않는 10 mL의 성장 배지를 첨가하는 것을 포함하였다. 20 내지 24시간의 트랜스펙션 후, 배지를 제거하고, 세포를 들어올리고, 계수하였다. 화합물 처리제를 0.1%의 최종 DMSO 농도를 포함하는 페놀-레드 무함유 성장 배지 (비히클) 중에 제조하고, 그 후 표기된 96웰 플레이트 내에 첨가하였다. 40,000개의 세포를 추가의 100 ul의 페놀-레드 무함유 성장 배지 중에 각각의 웰 상에 첨가하였다. 각각의 반응물의 최종 부피는 200 ul였다. 20 내지 24시간 처리 후, 배지를 제거하고, LDH 분석용으로 보관하였다. 25 ul의 1xPLB 용해 완충제를 각각의 웰 내에 첨가하고, 부드럽게 진탕시키면서 10분 동안 인큐베이션하였다. 100 ul의 루시퍼라아제 검출 완충제 (프로메가 루시퍼라아제 분석 시스템 카탈로그 번호 E1501)를 첨가하여 루시퍼라아제 활성을 측정하였다.

분석 2: PPARα 트랜스활성화 분석

hPPARα 트랜스활성화 활성을 인디고 바이오사이언시즈(INDIGO biosciences; 미국 펜실베이니아주 스테이트 칼리지 소재)로부터의 hPPARα 분석 키트 (카탈로그 번호 IB00111)를 이용하여 루시퍼라아제 분석에 의해 측정하였으며, 제조업자의 분석에 대한 설명서에 따랐다. 간략하게는, 시험 물질들을 화합물 스크리닝용 배지 (상기 키트 내에 공급됨) 중의 분석될 2배-농축 시험 물질(들)의 적절한 희석 시리즈 및 2배-농축 기준 작동제(GW590735)의 적절한 희석 시리즈로 제조하였다. 10 mL의 세포 회복 배지 (상기 키트 내에 공급됨)를 냉동 세포 펠렛 (hPPARα 세포)에 첨가하고, 수조에서 해동시켰다. 100 ul의 hPPARα 세포 및 제조한 시험 물질들을 96웰 분석 플레이트의 각각의 웰 내에 분배하였다 (최종 부피는 웰당 200 ul였다). 하룻밤 인큐베이션 후, 처리 배지를 버리고, 웰당 100 ul의 루시퍼라아제 검출 시약 (LDR, 공급됨)을 첨가하였다. 각각의 샘플 웰로부터의 발광 강도를 플레이트-판독 발광 측정기 (스펙트라맥스(SpectraMax))를 사용하여 정량화하였다.

분석 3: 유전자 발현

DNase I 절단을 이용한 퀴아젠 알엔이지(RNeasy) 키트 (카탈로그 번호 79254) (미국 캘리포니아주 발렌시아 소재)를 사용하여 24시간 동안, DMSO에 용해시킨 추출물 또는 (대조군으로서) 추출물을 포함하지 않는 DMSO로 처리한 일차 인간 케라틴 생성 세포 및 피부 등가물로부터 샘플들을 단리하였다. 높은 역량의 cDNA 키트 (라이프 테크놀로지스 카탈로그 번호 4368814)를 사용하여 역전사를 수행하였다. 40 내지 60 ng의 cDNA 샘플들을 QPCR 반응에 사용하였다. 탁맨 유전자 발현 어세이(Taqman gene expression assay)를 라이프 테크놀로지스 (미국 뉴욕주 그랜드 아일랜드 소재)로부터 구매하였다. QPCR 반응을 ABI 7500 고속 증폭기를 사용하여 수행하였다. 사용한 PCR 프라이머들이 표 1에 제시되어 있다. 모든 유전자 발현 데이터를 기준 유전자, 폴리머라아제 (RNA) II 폴리펩티드 A (POLR2A) 및/또는 리보좀 단백질, 큰 PO (RPLPO)에 의해 정규화하였다. 상대적인 유전자 발현량을 비교식 CT법에 의해 계산하였다.

카르니틴 팔미토일트랜스퍼라아제 I (CPT1)은 장쇄 지방산을 추가의 지질 산화를 위하여 카르니틴에 결합시킴으로써 막을 가로지르는 장쇄 지방산의 수송을 매개하는 카르니틴 아실트랜스퍼라아제로 칭해지는 효소 패밀리의 일부인 미토콘드리아 효소이다. ANGPTL4와 같은 다른 유전자와 함께 PPARα/δ 활성화의 표적이며 환언하면, 그 발현량은 일단 PPAR 수용체들이 그 리간드들에 의해 활성화되면 증가한다.

인볼루크린(Involucrin)은 IVL 유전자에 의해 코딩되는 인간 표피의 단백질이며, 이것은 피부에 있어서 각질 세포를 보호하는 세포 엔벨로프(envelope) 형성에 기여한다.

트랜스글루타미나아제는 글루타민의 감마-카르복스아미드 기와 자유 아민 기 사이의 결합들의 형성을 촉매하는데, 상기 결합들은 단백질 분해적 분해에 대하여 높은 내성을 나타내고 피부의 천연 장벽을 향상시킨다.

스핑고마이엘린 포스포다이에스테라아제 3은 인간에 있어서 SMPD3 유전자에 의해 코딩되고 세라마이드 합성에 연루된 효소이다. 세라마이드 글루코실트랜스퍼라아제 (UGCG)는 수송을 위하여 세라마이드를 글루코실세라마이드로 전환시킨다. 매우 긴 사슬의 지방산 4 (ELOVL4)의 신장이 매우 긴 사슬의 지방산의 합성에 요구되는데, 상기 지방산은 세라마이드의 주 성분이다.

클라우딘(Claudin) 17은 표피 세포들 사이의 세포간 공간에서 분자들의 유동을 제어하는 밀착 결합(tight junction)의 가장 중요한 성분인 단백질의 패밀리에 속한다.

분석 4: 하이알루론산 (HA) 분비

인간 피부 섬유모세포를 플라스크에서, DMEM + 10% 소 태아 혈청, 50 단위/ml의 페니실린 및 50 μg/ml의 스트렙토마이신으로 이루어진 성장 배지에서 유지하였다. 세포를 96웰 플레이트에서 웰당 20,000개의 세포로 접종하였다. 24시간의 인큐베이션 후, 세포를 DMSO에 용해시킨 시험 물품 또는 (대조군으로서) DMEM+2% FBS 중에 제조된 추출물을 포함하지 않는 DMSO로 처리하였다. 배양 배지를 처리한지 48시간 후에 수집하고, 제조업자의 프로토콜에 따라 하이알루로난(Hyaluronan) ELISA 키트 (에켈론(Echelon), 카탈로그 번호 K-1200)를 사용하여 HA (하이알루론산) 분비량에 대하여 측정하였다. 활성을 평가하기 위하여, 비색 찬스(colorimetric chance)를 405 nm에서 측정하고, 그 결과를 비처리 대조군에 대한 변화 배수로서 표현하였다.

분석 5: 하이알루로니다아제 효소 억제

하이알루로니다아제 억제 활성의 측정을 시그마로부터의 분석법 (문헌["Enzymatic Assay of HYALURONIDASE", Revised: 04/01/96, SSHYAL01])을 이용하여 실시하였으며, 이때 다음과 같이 수정하였다. 시험 샘플들이 하이알루로니다아제 효소 (EC 3.2.1.35)를 억제하는 능력은 샘플들 (25 μl, 다양한 농도)을 하이알루로니다아제 (시그마, H3506, 25 μl, 20μ/ml)와 혼합함으로써 96웰 플레이트에서 실시하고, 37℃에서 10분 동안 인큐베이션하였다. 그 후, 이 혼합물을 50 μl의 HA 기질 (시그마 제품 번호 H-7630, 0.03%)과 배합하고, 37℃에서 45분 동안 인큐베이션하였다. 그 후, 100 μl의 산성 완충제 (pH 3.75)를 상기 혼합물에 첨가하고, 10분 동안 정치시켰다. 상기 혼합물 중 비절단된 HA의 탁도를 마이크로플레이트 판독기 (베르사맥스(Versamax), 미국 캘리포니아주 서니베일 소재의 몰레큘러 디바이시즈)를 사용하여 540 nm에서 측정하였다.

하이알루로니다아제 억제 활성의 개산:

- HYAL 활성 = (투과율 (샘플/HA) - 투과율 (샘플/HYAL/HA)) / (투과율 (샘플/HA))

- HYAL-IA (%) = (1 - HYAL 활성)*100

분석 6: 세포외 매트릭스 유전자 발현

세포외 매트릭스 유전자들의 전사의 변화를 정량적 폴리머라아제 연쇄 반응 (qPCR) 분석에 의해 측정하였다. 피부 섬유모세포 및 표피 피부 등가물을 DMSO 중에 용해시킨 추출물로 또는 (대조군으로서) 배지 중에 제조한 단독의 DMSO로 24시간 동안 처리한 후 mRNA를 추출하였다. 일차 인간 피부 섬유모세포 및 표피 피부 등가물 (MatTak, Epi-FT-200)의 mRNA를 알엔이지 미니 키트(Mini Kit) (250), (퀴아젠 카탈로그 번호 74106)를 사용하여 단리하였다. 수퍼스크립트(SuperScript) III 퍼스트 스탠드(First Stand) (인비트로겐 카탈로그 번호 18080-400)를 사용하여 상기 mRNA를 상보성 DNA (cDNA)로 역전사시켰다. qPCR 분석을 파워(Power) SYBR 그린(Green) PCR 마스터 믹스(Master Mix) (어플라이드 바이오시스템즈 카탈로그 번호 4367659)를 사용하여 실시하고, 하기 조건을 이용하여 7500 실시간 PCR 시스템 (어플라이드 바이오시스템즈)에서 실행하였다: 95 ℃, 15초 60 ℃, 1분, 40 사이클.

표적 유전자들의 프라이머들이 하기 표 2에 열거되어 있다. 시험 화합물에 의해서 성취된 변화 배수를 대조군과 비교하여, 시험 화합물의 효력을 측정하였다.

분석 7 - 고성능 박층 크로마토그래피에 의한 세라마이드 프로파일의 결정

샘플 추출 및 응축

피부 등가물 또는 0.5-1x10⁶개의 세포를 2 mL의 클로로포름:메탄올 (2:1)로 균질화하고, 1 mL의 인산염 완충 염수 용액을 포함하는 바이알로 옮겼다. 균질화기를 2 ml의 클로로포름:메탄올 (2:1)의 2개의 부분으로 헹구고, 상기 헹굼액을 상기 추출물 및 PBS를 포함하는 바이알에 첨가하였다. 상기 혼합물을 와동시키고, 상들을 분리시켰다. 유기 상을 진공 하에 증발 건조시켰다. 샘플 잔사를 200 uL의 클로로포름:메탄올 (2:1)에 용해시켰다.

고성능 박층 크로마토그래피

상기 잔사를 200 uL의 클로로포름:메탄올 (2:1)에 용해시켰다. 20 마이크로리터 및 40 uL의 샘플 용액을 CAMAG 자동 TLC 샘플러(Sampler) 4를 사용하여 HPTLC 플레이트 (와트만 파티실(Whatman Partisil)) 상에 적용하고, 하기의 순차적인 전개 시스템을 사용하여 분리하였다: (1) 다이클로로메탄:에틸 아세테이트:아세톤(80:16:4), (2) 클로로포름:메탄올:아세톤(76:16:8), 및 (3) 헥산:클로로포름:아세트산:아세톤:메탄올 (6:80:0.1:10:4). 플레이트를 8% 인산 중 3% 아세트산구리로 염색하고 160℃에서 탄화시켰다(char).

정량화

샘플을 위치 보정을 위해 병렬로 적용하였으며, 유사하게 제조한 블랭크 추출물(피부 지질에 대한 노출이 없는 테이프 스트립)과 비교하였다. 밀도측정법(densitometry) (CAMAG)에 의해 공지된 양의 세라미드 III 표준물(코스모펌(Cosmoferm))에 대해 정량화를 수행하였다.

하기 실시예는 부르세라 시마루바 추출물의 제조 및 효능을 예시한다.

실시예 1: 극성 부르세라 시마루바 종자 추출물 (E1)의 제조

부르세라 시마루바 종자를 미국 플로리다주에서 수집하였다. 종 동정은 문헌[A. Gentry, A Field Guide to the Families and Genera of Woody Plants of Northwest South America; Conservation International, Washington DC; pp. 299-302]을 이용한, 총체적인 형태학적 특성을 기초로 한 것이었다. 대략 10 g의 익은, 껍질을 벗긴 종자를 10 mL의 80% 수성 메탄올을 이용하여 블렌더에서 균질화하고, 그 현탁물을 2시간 동안 일정한 움직임으로 유지하였다. 생성된 현탁물을 40℃를 초과하지 않고서 회전식 증발기를 사용하여 낮은 압력 하에서 여과 및 건조시켰다. 용해성 성분들의 추출 후 남아 있는 식물 물질을 추출 매질 중에 재현탁시키고, 일정한 움직임으로 유지하였다. 24시간 후, 상기 현탁물을 40℃를 초과하지 않고서 회전식 증발기를 사용하여 낮은 압력 하에서 여과 및 건조시켰다. 80% 수성 메탄올 추출에 의한 합해진 건조 질량은 대략 총 340 mg (E1)으로서, 이는 3.4% 수율에 대한 것이었다.

실시예 2: 비극성 부르세라 시마루바 종자 추출물 (E2)의 제조

부르세라 시마루바 종자를 실시예 1에 설명한 바와 같이 수집하였다. 대략 10 g의 익은, 껍질을 벗긴 종자를 10 mL의 순수 클로로포름을 이용하여 블렌더에서 균질화하고, 그 현탁물을 2시간 동안 일정한 움직임으로 유지하였다. 생성된 현탁물을 40℃를 초과하지 않고서 회전식 증발기를 사용하여 낮은 압력 하에서 여과 및 건조시켰다. 용해성 성분들의 추출 후 남아 있는 식물 물질을 추출 매질 중에 재현탁시키고, 일정한 움직임으로 유지하였다. 24시간 후, 상기 현탁물을 40℃를 초과하지 않고서 회전식 증발기를 사용하여 낮은 압력 하에서 여과 및 건조시켰다. 클로로포름 추출에 의한 합해진 무용매 유성 물질은 대략 총 3 g (E2)으로서, 이는 30% 수율에 대한 것이었다.

실시예 3: 부르세라 시마루바 수피 추출물들 (E3 및 E4)의 제조

부르세라 시마루바 수피를 미국 플로리다주에서 수집하였다. 대략 3 g의 적색의, 벗겨지는 외수피를 미세 분말로 분쇄하고, 30 mL의 시약 등급 물에 현탁시키고, 5시간 동안 일정한 움직임으로 유지하였다. 두 번째의 3 g의 수피 배치(batch)를 미세 분말로 분쇄하고, 30 mL의 시약 등급 메탄올에 현탁시키고, 5시간 동안 일정한 움직임으로 유지하였다. 생성된 현탁물들을 40℃를 초과하지 않고서 회전식 증발기를 사용하여 낮은 압력 하에서 별도로 여과 및 건조시켰다. 각각으로부터의 용해성 성분들의 추출 후 남아 있는 식물 물질을 각각의 추출 매질 중에 재현탁시키고, 일정한 움직임으로 유지하였다. 24시간 후, 상기 현탁물들을 40℃를 초과하지 않고서 회전식 증발기를 사용하여 낮은 압력 하에서 여과 및 건조시켰다. 물 추출에 의한 합해진 건조 질량은 대략 총 140 mg (E3)으로서, 이는 4.7%의 수율에 대한 것이었으며, 메탄올 추출에 의한 합해진 건조 질량은 대략 총 100 mg (E4)으로서, 이는 3.3%의 수율에 대한 것이었다.

실시예 4

추출물들 E1, E2, E3 및 E4의 샘플들을 분석 1의 방법을 이용하여 hPPARδ의 트랜스활성화에 대하여 비교하였다.

결과가 표 3에 나타나 있다.

실시예 5

추출물들 E1, E2, E3 및 E4의 샘플들을 분석 2의 방법을 이용하여 PPARα의 트랜스활성화에 대하여 비교하였다.

결과가 표 4에 나타나 있다.

실시예 4 및 실시예 5는 부르세라 시마루바 종자 추출물 (E1 및 E2)이 PPARα 및 PPARδ 둘 모두의 트랜스활성화를 증가시키는 능력을 나타낸다. 이들 분석을 이용하여 남아 있는 장벽-관련 분석을 위한 스크리닝 분석으로서 사용하였다. 수피 추출물들 (E3 및 E4)은 활성을 갖지 않으며, 따라서 더 분석하지 않았다.

실시예 6: 세라마이드 합성 유전자, 분화 마커, 및 PPAR 표적 유전자의 전사

추출물 E1을 상기에 설명한 분석 3의 방법에 따라 세라마이드 합성 유전자 전사, 분화 마커 및 PPAR 표적 유전자의 증가에 대하여 시험하였으며, 그 결과는 하기 표 5 내지 표 8에 주어져 있다.

이 실시예는 부르세라 시마루바 종자 추출물이 세라마이드 합성 유전자 및 피부 분화 관련 유전자의 발현을 유도하는 능력을 입증하며, 이는 피부 장벽 기능에 긍정적으로 영향을 주는 그리고 피부 보습성을 향상시키고 피부 박편 출현의 감소를 비롯하여 건성 피부 외관을 개선시킬 것으로 기대되는 생리학적 변화를 유도하는 능력을 입증한다.

실시예 7: 인간 일차 케라틴 생성 세포 중 세라마이드의 측정

추출물 E1을 상기에 설명한 분석 7의 방법을 이용하여 세라마이드 수준에 대하여 시험하였다. 그 결과가 하기 표 9에 주어져 있다.

실시예 8: 하이알루론산 (HA) 분비

추출물들 E1, E2 및 E4를 상기에 설명한 분석 4의 방법을 사용하여 하이알루론산 분비에 대하여 시험하였다. 그 결과가 하기 표 10에 주어져 있다.

실시예 9: 하이알루로니다아제 효소 억제 활성의 분석

추출물들 E1, E3 및 E4를 상기 분석 5의 방법에 따라 하이알루로니다아제 효소 억제 활성에 대하여 시험하였다. 그 결과가 하기 표 11에 주어져 있다.

실시예 10: 세포외 매트릭스 유전자의 전사

추출물들 E1 및 E2를 상기 분석 6의 방법에 따라 세포외 매트릭스 유전자의 전사의 변화에 대하여 시험하였다. 그 결과가 표 12 및 표 13에 주어져 있다.

전술한 실시예 8 내지 실시예 10은 부르세라 시마루바 종자 추출물들 (E1 및 E2)이 세포외 매트릭스 유전자의 발현, 세포외 매트릭스 발현물을 생성하는 효소, 및 하이알루론산의 생성을 유도하는 능력을 입증한다. 총체적으로, 이들 결과는 부르세라 시마루바 종자 추출물이 생물학적 효과를 유도하는 능력을 입증하는데, 상기 효과는 피부의 주름살, 잔주름, 처짐 또는 느슨한 피부 및 노화된 피부의 외관을 개선시킬 것으로 예상된다.

실시예 11: 부르세라 시마루바 추출물을 함유하는 조성물

본 발명에 따른 피부 케어 조성물을 표 14에 나타낸 성분을 사용하여 제조하였다.

표 14에 나타낸 조성물을 다음과 같이 제조하였다: 물을 공정 용기에 첨가하였다. 혼합을 시작하고, 염을 첨가하고, 용해될 때까지 혼합하였다. 85℃에 도달할 때까지 열을 가하고 혼합을 계속하였다. 그 후, 온도를 85℃로 유지하면서 혼합을 계속하면서 글리세린을 첨가하였다. 바리소프트(Varisoft) TA 100을 첨가하였으며, 바셀린 및 아이소폴(ISOFOL) 28, DC Q7-9120 20 cs., 및 아이소프로필 팔미테이트도 마찬가지로 하였다. 상기 조성물을 85℃에서 추가로 10 내지 15분 동안 혼합하였다. E1을 상기 혼합물에 첨가하였다. 그 후, 상기 조성물을 열로부터 제거하고, 계속하여 혼합하고, 냉각시켰다. 40℃에서, 벤질 알코올을 적당량의 물과 함께 첨가하고, 계속하여 혼합하고, 30 내지 35℃로 냉각시켰다. 그 후, 상기 조성물을 패키징 내에 충전시켰다.

본 발명에 따른 피부 케어 조성물을 표 15에 나타낸 성분을 사용하여 제조하였다.

표 15에 나타낸 조성물을 다음과 같이 제조하였다. 물을 공정 용기에 첨가하고, 온도를 85℃로 설정하였다. 혼합을 시작하고, 글리세린을 첨가하고, 용해될 때까지 혼합하였다. 바리소프트 TA-100 및 바셀린과, 아이소폴 28, DC Q7-9120 20 cs., 및 아이소프로필 팔미테이트를 첨가하였다. 상기 조성물을 85℃에서 추가로 10 내지 15분 동안 혼합하였다. 그 후, 상기 조성물을 가열로부터 제거하고, 레티놀 10S 및 추출물 E1을 상기 믹스에 첨가하고, 냉각시켰다. 40℃에서, 벤질 알코올을 적당량의 물과 함께 첨가하고, 계속하여 혼합하고, 30 내지 35℃로 냉각시켰다. 그 후, 상기 조성물을 패키징 내에 충전시켰다.

본 발명에 따른 피부 케어 조성물을 표 16에 나타낸 성분을 사용하여 제조하였다.

표 16에 나타낸 조성물을 다음과 같이 제조하였다. 추출물 E1을 칭량하고 하이드롤라이트 5에 용해하고 탈이온수를 첨가하여 상 A를 형성하였다. 나트룰론 OSF 및 핀솔브 TN을 혼합하여 상 B를 형성하였다. 계속적인 혼합 하에서 상 B를 상 A에 매우 서서히 첨가하였다. 균일한 에멀젼이 형성될 때까지 15분 동안 혼합을 계속하였다. 고속으로 연속하여 혼합하면서 아리스토플렉스를 에멀젼에 첨가하여 진한, 덩어리가 없는, 균질한 제형을 얻었다.

본 발명에 따른 피부 케어 조성물을 표 17에 나타낸 성분을 사용하여 제조하였다.

표 17에 나타낸 조성물을 다음과 같이 제조하였다. 핀솔브 TN을 깨끗한 유리 비커에 첨가함으로써 오일 상을 제조하였다. 교반을 시작하고 용기를 55 내지 60℃로 가열하였다. 오일 상이 55℃ 이상에 도달했을 때, 브리즈 72 및 브리즈 721을 첨가하였다. 오일 상이 55 내지 60℃에 도달했을 때, 오일 상을 그 온도에서 유지하고 15분 동안 (또는 균일해질 때까지) 혼합하였다. 그 후, 수 상에 첨가할 때까지 혼합하면서 온도를 55 내지 60℃에서 유지하였다. 깨끗한 유리 비커에 물을 첨가하여 수 상을 제조하였다. 교반을 시작하고 용기를 55 내지 60℃로 가열하였다. 다이소듐 EDTA를 첨가하였다. 55 내지 60℃에서, 성분들을 15분 동안 또는 균질해질 때까지 혼합하였다. 그 후, 상 형성(phasing)을 위해 혼합하면서 온도를 55 내지 60℃에서 유지하였다. 교반을 증가시키면서 오일 상을 수 상에 첨가하였으며, 그 후 10 내지 20분 동안 고속으로 혼합하였다. 50℃ 이하에서, 다이메티콘을 첨가하였다. 40℃ 이하에서, 페노닙 XB를 첨가하였다. 이어서 상들을 10분 동안 또는 균일할 때까지 혼합하였다. 수산화나트륨을 첨가하였다(목표 pH는 5.4였다). 이어서 조성물을 10분 동안 또는 균일할 때까지 혼합하였다. 그 후, 리스'라스틴 및 심매트릭스를 첨가하였다. 추출물 E1을 칭량하고, 글리세린에 용해시키고, 상기 혼합물에 첨가하였다. 이것을 균일해질 때까지 혼합하였다. 그 후, 물을 적당량으로 첨가하고, 그 후, 조성물을 10분 동안 혼합하였다.

Claims (12)

1. 부르세라 시마루바(Bursera simaruba) 종자 추출물 및 화장품용으로 허용가능한 국소 담체를 포함하는, 피부 케어 조성물.
2. 제1항에 있어서, 상기 화장품용으로 허용가능한 국소 담체는 계면활성제, 킬레이팅제(chelating agent), 연화제(emollient), 습윤제(humectant), 컨디셔너, 방부제, 불투명화제(opacifier), 방향제 및 이들의 배합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 국소 성분을 포함하는, 피부 케어 조성물.
3. 제1항에 있어서, 상기 화장품용으로 허용가능한 국소 담체는 에멀젼인, 피부 케어 조성물.
4. 제1항에 있어서, 상기 부르세라 시마루바 종자 추출물은 C₁-C₈ 알코올, C₁-C₈ 글리콜, 액체 이산화탄소, C5-C8 탄화수소, 물 및 이들의 배합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 용매를 사용하여 추출되는, 피부 케어 조성물.
5. 제4항에 있어서, 상기 용매는 물, 에탄올, 메탄올, 액체 이산화탄소 및 이들의 배합물로 이루어진 군으로부터 선택되는, 피부 케어 조성물.
6. 제1항에 있어서, 약 20 중량% 이하의 상기 부르세라 시마루바 종자 추출물을 포함하는, 피부 케어 조성물.
7. 제1항에 있어서, 약 0.01 내지 약 5%의 상기 부르세라 시마루바 종자 추출물을 포함하는, 피부 케어 조성물.
8. 제1항에 있어서, 용액, 현탁액, 로션, 크림, 세럼(serum), 겔, 스틱, 스프레이, 연고, 액상 워시, 비누 바(bar), 샴푸, 헤어 컨디셔너, 페이스트, 폼(foam), 분말, 무스, 면도용 크림, 하이드로겔 또는 막-형성 제품의 형태인, 피부 케어 조성물.
9. 제1항에 있어서, 피부 보습제를 추가로 포함하는, 피부 케어 조성물.
10. 제1항에 있어서, 노화 방지제를 추가로 포함하는, 피부 케어 조성물.
11. 피부의 장벽 기능 및 보습성을 향상시키는 방법으로서, 피부 장벽 기능 및 보습성의 향상을 필요로 하는 피부에 부르세라 시마루바 종자 추출물 및 화장품용으로 허용가능한 국소 담체를 포함하는 조성물을 국소적으로 도포하는 단계를 포함하는, 피부의 장벽 기능 및 보습성을 향상시키는 방법.
12. 피부 노화 징후를 개선시키는 방법으로서, 피부 노화 징후들에 대한 처리를 필요로 하는 피부에 부르세라 시마루바 종자 추출물 및 화장품용으로 허용가능한 국소 담체를 포함하는 조성물을 국소적으로 도포하는 단계를 포함하는, 피부 노화 징후를 개선시키는 방법.