KR20130064882A - 한약 추출물을 함유하는 당뇨 또는 당뇨합병증 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 당뇨 또는 당뇨합병증 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로 삼칠근 추출물, 당귀 추출물, 오가피 추출물, 지골피 추출물 및 홍화씨 추출물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 당뇨 또는 당뇨합병증 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다. 상기 조성물은 천연 유래의 물질로 안정하며 부작용이 적고 당뇨 또는 당뇨합병증 예방 또는 치료효과가 뛰어나기에, 상기 조성물을 약학 조성물, 건강식품 조성물 등으로 활용가능하다.

Description

한약 추출물을 함유하는 당뇨 또는 당뇨합병증 예방 또는 치료용 조성물 {The composition for the prevention and treatment of diabetic or diabetic complications containing the extracts of herbal medicine}

본 발명은 한약 추출물을 함유하는 당뇨 또는 당뇨합병증 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.

최근 현대인들의 생활수준의 향상과 인간수명의 증가로 인하여 건강에 대한 인식도가 증가함에 따라 급속도로 증가하고 있는 당뇨병은 전 세계적으로 주목받고 있는 만성질환이다.

당뇨병은 췌장의 베타세포에서 생성되는 인슐린 호르몬 부족 또는 인슐린 저항성의 이상과 나아가 이러한 두 가지 모두의 결함으로 발생하는 고혈당을 특징으로 하는 대사장애증후군이다. 이러한 당뇨병은 인슐린 의존형 당뇨병 (IDDM; Type I)과 인슐린 저항 및 인슐린 분비 손상에 의해 발생하는 인슐린 비의존형 당뇨병 (NIDDM;Type II)으로 나눌 수 있는데, 제Ｉ형 당뇨병은 췌장 β 세포의 파괴성 병변에 의해 인슐린이 결핍되어 생기는 반면 제Ⅱ형 당뇨병은 인슐린 분비 저하와 인슐린 저항성으로 인해 생기며, 이 두 가지 인자의 관여 정도에 따라 인슐린 분비부족 우위 당뇨병과 인슐린 저항성 우위 당뇨병으로 나뉘게 된다.

당뇨병은 고혈당이 만성으로 지속되면서 당질대사뿐만 아니라 지질 및 단백질 대사장애도 함께 일으킨다. 그 병태는 다양하며 직접 고혈당에 기인하는 것으로 망막, 신장, 신경, 심혈관계 등에서 당뇨병성 말초신경장해, 당뇨병성 망막증, 당뇨병성 신증, 당뇨병성 백내장, 각막증, 당뇨병성 동맥경화증 등이 있다. 당뇨병 환자수는 과식, 운동부족, 서구화된 식생활, 스트레스, 음주, 흡연 등 생활습관의 변화로 인해 꾸준히 증가하는 추세이다.

제I형과 제II형 당뇨병 모두에서 심장 질환, 장 질환, 안과 질환, 신경 질환, 뇌졸증 등과 같은 다양한 합병증이 발생하게 되는데 이는 장시간 동안 혈당과 인슐린 수준이 상승하여 만성신경질환과 심혈관질환이 발생하게 되고 단시간의 저혈당과 고혈당반응으로 급성 합병증을 야기시키게 되는 것이다.

당뇨의 치료법은 약물요법, 운동요법 및 식이요법이 있으며 환자의 증상에 따라 인슐린 약재와 각종 혈당제가 사용되고 있다. 그러나 당뇨병은 간에서의 당 생성 과다, 인슐린 저항성, 근육과 지방 세포 등에서 당 처리 능력 감소 등의 특징을 나타내는 복합적인 질병이므로 특정 치료법만으로는 여러 가지 부작용의 유발을 막을 수 없으며, 이 중 약물요법은 인슐린 및 화학물질을 사용하고 있어 약물 복용에 따란 부작용과 환자의 내성에 끊임없이 야기되고 있다. 또한, 현재 국내에서 널리 처방되는 치료제인 브리스톨마이어스의 '글루코파지'와 글락소스미스클라인의 '아반디아'와 같은 합성의약품은 근본적인 치료를 목적으로 하지 않고 꾸준한 관리 차원이라는 점에서 한계가 있고 특히, 약물의 지속적인 복용에 따라 인체 스스로 질병을 치유할 수 있는 능력을 감수시킬 수 있다는 문제점이 있다.

최근에는 당뇨병 치료에 있어 식이가 가능하며 부작용이 적으며, 인체의 질병을 치유할 수 있는 면역력을 증진시킬 수 있는 천연물을 이용하여 당뇨병을 치료하고, 더 나아가 당뇨병합병증의 예방 및 치료하기 위한 연구가 필요한 실정이다.

본 발명은 삼칠근 추출물, 당귀 추출물, 오가피 추출물, 지골피 추출물 및 홍화씨 추출물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 유효성분으로 함유하는 당뇨 또는 당뇨합병증 예방 또는 치료용 조성물을 제공하고자 한다.

또한, 상기 조성물을 이용한 당뇨 또는 당뇨합병증 예방 또는 치료용 약학 조성물 및 건강식품 조성물을 제공하고자 한다.

본 발명은 삼칠근 추출물, 당귀 추출물, 오가피 추출물, 지골피 추출물 및 홍화씨 추출물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 함유하는 당뇨 또는 당뇨합병증 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.

상기 추출물은 물, 탄소수 1 내지 5의 알코올 및 이의 혼합물로 이루어진 군 중에서 선택된 하나 이상을 추출용매로 추출할 수 있다.

상기 삼칠근 추출물, 당귀 추출물, 오가피 추출물, 지골피 추출물 및 홍화씨 추출물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 헥산, 메틸렌클로라이드, 에틸아세테이트 및 부탄올로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 용매로 분획하여 얻어진 분획물을 함유하는, 당뇨 또는 당뇨합병증의 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.

상기 당뇨합병증은 당뇨성 망막증, 당뇨성 백내장, 당뇨성 각막증, 당뇨성 신증, 당뇨성 신경병증, 당뇨성 말초신경장해, 아테롬성 동맥경화 및 당뇨성 혈관합병증으로 이루어진 군 중에서 선택된 어느 하나일 수 있다.

본 발명은 상기 당뇨 또는 당뇨합병즈 예방 또는 개선용 조성물을 포함하는 당뇨 또는 당뇨합병증 예방 또는 치료용 건강식품 조성물을 제공한다.

본 발명에 따른 삼칠근 추출물, 당귀 추출물, 오가피 추출물, 지골피 추출물 및 홍화씨 추출물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 추출물 또는 이의 분획물은 당뇨 또는 당뇨합병증 예방 및 치료 효과가 우수하므로 이를 함유하는 약학 조성물 및 건강식품 조성물 등으로 활용가능할 것이다.

도 1은 본 발명의 한약재인 삼칠근, 당귀, 오가피, 지골피 및 홍화씨를 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명의 추출물로 만들어진 시제품을 나타낸 것이다.

삼칠근 추출물, 당귀 추출물, 오가피 추출물, 지골피 추출물 및 홍화씨 추출물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 함유하는 당뇨 또는 당뇨합병증 예방 또는 치료용 조성물 및 이를 이용한 건강식품 조성물을 제공한다.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.

종랭 사용되는 당뇨 및 당뇨합병증 치료제로서의 약물요법은 인슐린 및 화학물질을 사용하고 있어 약물 복용에 따란 부작용과 환자의 내성에 끊임없는 문제가 되고 있기 때문에, 본 발명에서는 당뇨 및 당뇨 합병증 치료제로서 식이가 가능하며 부작용이 적은 천연물을 찾고자 노력하던 중 본 발명의 한약재 추출물을 이용하면 흡수가 어려운 펩타이드계 물질들을 효과적으로 흡수할 수 있어 당뇨병 및 당뇨합병증 예방 또는 치료효과가 우수함을 확인하고 본 발명을 완성하였다.

본 발명은 삼칠근 추출물, 당귀 추출물, 오가피 추출물, 지골피 추출물 및 홍화씨 추출물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 함유하는 당뇨 또는 당뇨합병증 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.

상기 삼칠근 추출물, 당귀 추출물, 오가피 추출물, 지골피 추출물 및/또는 홍화씨 추출물에 있어, 상기 추출방법은 특별히 한정된 것은 아니나, 바람직하게는 물, 탄소수 1 내지 5의 알코올 및 이의 혼합물로 이루어진 군 중에서 선택된 하나 이상을 추출용매로 이용하여 통상의 식물 추출방법으로 얻어진 것일 수 있다.

상기 추출물은 통상의 식물 추출물의 제조방법에 따라 제조된 것일 수 있으며, 바람직하게는 가압추출법, 열추출법, 환류추출법, 온침 추출법, 초음파 분쇄 추출법 등에 의할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

또한, 상기한 바와 같이 제조된 추출물은 이후 감압 여과과정을 수행하거나 추가로 농축 및/또는 동결건조를 수행하여 농축하거나 용매를 제거할 수 있는데, 본 발명의 추출물은 건조물과 통상적 방법으로 농축된 농축물을 포함하는 의미로 사용될 수 있다.

본 발명은 상기 한약재를 추출, 농축, 건조하여 지표성분의 함량을 조사함으로 추출효율을 극대화할 수 있다.

본 발명은 삼칠근 추출물, 당귀 추출물, 오가피 추출물, 지골피 추출물 및 홍화씨 추출물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 용매로 분획하여 얻어진 분획물을 함유하는, 당뇨 또는 당뇨합병증의 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.

상기 분획 방법은 특별히 한정된 것은 아니나, 바람직하게는 헥산, 메틸렌클로라이드, 에틸아세테이트 및 부탄올로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 용매로 분획될 수 있다.

본 발명의 상기 삼칠근 추출물, 당귀 추출물, 오가피 추출물, 지골피 추출물 및 홍화씨 추출물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 추출물과 이의 분획물은 당뇨유발원인을 제거하고 췌장을 비롯한 장기의 기능을 활성화하여 췌장의 인슐린분비기능 및 혈당조절능력을 개선시킴을 확인할 수 있었다.

상기 당뇨합병증은 당뇨병으로 인한 고혈당과 단백질의 반응이 비가역적으로 진행되어 최종당화산물이 생성되어 혈중이나 조직의 다른 단백질과 교차결합하여 유발시키는 여러 가지 합병증을 의미할 수 있다.

본 발명의 삼칠근 추출물, 당귀 추출물, 오가피 추출물, 지골피 추출물 및/또는 홍화씨 추출물 및/또는 분획물이 치료효과를 갖는 당뇨합병증은 특별히 한정된 것은 아니나, 바람직하게는 당뇨성 망막증, 당뇨성 백내장, 당뇨성 각막증, 당뇨성 신증, 당뇨성 신경병증, 당뇨성 말초신경장해, 아테롬성 동맥경화 및 당뇨성 혈관합병증으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상일 수 있다.

당뇨합병증은 혈당이 정상적으로 회복되었음에도 불구하고 발병하는 경우가 많다. 최종당화산물은 고혈당의 농도에 비례하여 조직에 축적되는 단백질 당화산물로 특이한 흡광도 및 형광을 나타내고, 특히 단백질의 아미노기가 서로 cross-link 반응을 일으키는 성질을 가지고 있다. 최종당화산물은 한번 생성되면 혈당이 정상적으로 조절되어도 분해되지 않고 조직에 축적되어 조직의 구조와 기능을 비정상적으로 변화시키며, atheroma성 동맥경화증, DNA의 돌연변이, 노화, 알츠하이머병, 당뇨합병증등에 관여한다고 알려져 있다. 기존에 최종 당화산물의 억제제로서 알려진 아미노구아니딘 (aminoguanidine)의 독성이 증가하는 것으로 나타남에 따라, 이를 대체할 수 있는 독성이 없는 안전한 천연물의 개발이 필요한 실정이다.

본 발명은 삼칠근 추출물, 당귀 추출물, 오가피 추출물, 지골피 추출물 및 홍화씨 추출물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 함유하는 당뇨 또는 당뇨합병증 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.

본 발명의 당뇨병 및 합병증의 예방 및 치료용 약학조성물은, 조성물 총 중량에 대하여 상기 삼칠근 추출물, 당귀 추출물, 오가피 추출물, 지골피 추출물 및 홍화씨 추출물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 함유하는 추출물을 0.1 내지 99 중량%로 포함할 수 있다.

본 발명의 추출물을 함유하는 약학조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.

본 발명의 조성물의 약학적 투여 형태는 이들의 약학적 허용가능한 염의 형태로도 사용될 수 있고, 또한 단독으로 또는 타 약학적 활성 화합물과 결합뿐만 아니라 적당한 집합으로 사용될 수 있다.

본 발명에 따른 삼칠근 추출물, 당귀 추출물, 오가피 추출물, 지골피 추출물 및 홍화씨 추출물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 추출물을 포함하는 약학조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 본 발명의 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트 (calcium carbonate), 수크로스 (sucrose) 또는 락토오스 (lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성 용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.

본 발명의 삼칠근 추출물, 당귀 추출물, 오가피 추출물, 지골피 추출물 및 홍화씨 추출물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 추출물을 포함한 본 발명의 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다.

본 발명의 삼칠근 추출물, 당귀 추출물, 오가피 추출물, 지골피 추출물 및 홍화씨 추출물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 함유하는 당뇨 또는 당뇨합병증 예방 또는 치료용 조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내 (intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다.

본 발명은 삼칠근 추출물, 당귀 추출물, 오가피 추출물, 지골피 추출물 및 홍화씨 추출물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 함유하는 당뇨 또는 당뇨합병증 예방 또는 개선용 건강식품 조성물을 제공한다.

본 발명은 당뇨병 및 당뇨병 합병증의 예방 및 치료의 효과를 나타내는 상기 삼칠근 추출물, 당귀 추출물, 오가피 추출물, 지골피 추출물 및 홍화씨 추출물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 추출물에 식품학적으로 허용 가능한 식품보조 첨가제를 포함하는 건강기능식품을 제공한다. 본 발명의 추출물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강 기능성 식품류 등이 있다.

또한, 당뇨병 및 당뇨병 합병증의 예방 및 치료 효과를 목적으로 식품 또는 음료에 첨가될 수 있다. 이때, 식품 또는 음료 중의 상기 상기 추출물의 양은 전체 식품 중량의 0.01 내지 70중량%로 가할 수 있다.

본 발명의 건강 기능성 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 추출물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다.

상기 외에 본 발명의 삼칠근 추출물, 당귀 추출물, 오가피 추출물, 지골피 추출물 및 홍화씨 추출물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다.

이하, 실시 예에 의하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다.

단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시 예에 한정되는 것은 아니다.

< 실시예 >

실시예 1: 한약재의 추출

삼칠근, 당귀, 오가피, 지골피 또는 홍화씨 열수 추출하여 추출물을 제조하였다.

실시예 2: 체중 변화 측정

스프라그-도울리 (Sprague-Dawely)계 140~230g 내외의 흰쥐를 오리엔트 바이오사 (성남, 한국)에서 구입하여 사료와 물을 충분히 공급하면서 1주일간 실험환경 (온도 22.2℃, 습도 55~66%, 명암주기 12시간으로 자동조절)에서 적응시킨 다음 실험에 착수하였다.

실험군은 평균체중이 유사하도록 난괴법에 의해 그룹당 7마리씩 4개군으로, 즉, 정상대조군 (Control), 당뇨대조군 (Streptozotocin; STZ), 당뇨를 유발시킨 다음 상기 실시예 1에서 제조한 본 발명의 조성물 I&H를 투여한 군 (STZ+I&H), 당뇨의 유발없이 본 발명의 조성물 I&H를 투여한 군 (I&H)으로 분류한 다음, 4주간 사육하였다.

실시예 3: 스트렙토조토신에 의한 당뇨 유발

스트렙토조토신 (Streptozotocin)에 의한 당뇨 유발은 조 등의 방법 (Cho Y.J., Bang M.A., Hypoglycemic and Antioxidative Effects of Dietary Sea-Tangle Extracts Supplementation in Streptozotocin-Induced Diabetic Rats, The Korean Nutrition Society, 37(1):5~14, 2004)에 준하여 실시하였다.

구체적으로, 4주령 웅성 흰쥐에서 스트렙토조토신을 체중(kg)당 200㎎으로 복강주사하여 당뇨를 유발시킨 다음 실험 사육하고, 4주간의 실험 사육이 끝난 후에는 실험쥐를 12시간 절식 후 에테르 마취 하에 복부를 절개하여 간문맥에서 주사기로 전혈을 채취한 후, 원심분리기를 이용하여 상등액으로부터 혈청을 분리하고, 떼어낸 비장 (Spleen)과 간 (Liver), 안구의 렌즈 (Lens)는 액체 질소로 급냉하여 실험 전까지 -70℃에 보관하면서 사용하였다.

실시예 4: 혈당 측정

혈당 측정기 (Care SensⅡ, (주)아이센스, 대한민국)를 이용하여 혈당 (glucose)을 측정하였으며, 혈당량의 함량 (㎎/㎗)은 미정맥에서 채혈 후 측정하였다.

실시예 5: 염증조절, 면역조절 및 망막병증 조절 측정

웨스턴 블랏팅 (Western Blotting)을 이용한 TNF-α 및 IFN-γ, STAT1, pSTAT1, JAK1, T-bet, IL-12p35, IL-12p40, STAT4, IL-4, STAT6, pSTAT6, GATA3, IL-6, STAT3, pSTAT3의 발현량을 측정하였다.

구체적으로, 분리한 비장과 간은 500㎕의 lysis buffer (150mM NaCl, 1% NP40, 0.5% deoxycholic acid, 0.1% sodium Dodecyl salfate, 50mM Tris, 1tablet/20mL protease inhibitor)에 넣어 얼음 위에서 10분 동안 방치하였다. 이를 12,000rpm에서 20분간 원심분리하여 완충용액 내에 녹아있는 단백질을 얻었고 BSA 단백질 어세이 키트 (protein assay kit)를 이용하여 단백질을 정량하였다. 각각의 단백질을 SDS 샘플 완충용액 (sample buffer, 4% SDS, 20% glycerol, 0.2% bromophenol blue, 2.8% 2-mercaptoethanol, 125mM Tris-HCl pH6.8)과 섞어 8%, 10%, 12%나 15%의 SDS-PAGE 겔에 전기영동하여 단백질을 분리하였다. 겔을 전기적으로 니트로셀룰로우스 멤브레인 (nitrocellulose membrane)에 트랜스퍼 (Transfer)한 다음, 이를 immuno blot에 사용하였다. 니트로셀룰로우스 상의 비 특이적 반응을 막기 위해 멤브레인을 5% 탈지분유가 함유된 TBS-T (0.5M NaCl, 20mM

Tris-HCl pH7.2 0.2% tween20)로 60 분간 블로킹 (blocking)시키고, TBS-T (0.5M NaCl, 20 mM Tris-HCl pH7.2, 0.2% tween20)로 5분씩 6회 씻어준 다음 일차항체를 1㎎/mL의 BSA가 들어 있는 TBS-T에 1㎍/ml의 농도로 희석하여 overnight하였다. 그 후 멤브레인을 TBS-T로 5분씩 6회 씻어주고 이차 항체를 1 : 1000의 비율로 2% 탈지분유가 함유된 TBS-T에 희석하여 1시간 동안 반응시킨 다음 TBS-T로 5분씩 6회 씻어주었다. ECL용액을 1 : 1로 섞어 멤브레인을 발광시킨 후, 단백질 (protein) 발현량을 측정하였다.

당뇨가 유발된 쥐에서의 백내장 발현과 망막병증을 확인하고 억제효과를 실험하기 위하여 안구의 렌즈 (Lens) 역시, 상기와 같은 웨스턴 블랏 분석 (Western Blot analysis)을 통하여 IL-6, STAT3, iNOS, TNF-α의 발현량을 측정하였다.

Claims (5)

1. 삼칠근 추출물, 당귀 추출물, 오가피 추출물, 지골피 추출물 및 홍화씨 추출물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 함유하는 당뇨 또는 당뇨합병증 예방 또는 치료용 조성물.
2. 제 1항에 있어서, 상기 추출물은 물, 탄소수 1 내지 5의 알코올 및 이의 혼합물로 이루어진 군 중에서 선택된 하나 이상을 추출용매로 추출한, 당뇨 또는 당뇨합병증 예방 또는 치료용 조성물.
3. 제 1항에 있어서, 삼칠근 추출물, 당귀 추출물, 오가피 추출물, 지골피 추출물 및 홍화씨 추출물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 헥산, 메틸렌클로라이드, 에틸아세테이트 및 부탄올로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 용매로 분획하여 얻어진 분획물을 함유하는, 당뇨 또는 당뇨합병증의 예방 또는 치료용 조성물.
4. 제 1항에 있어서, 상기 당뇨합병증은 당뇨성 망막증, 당뇨성 백내장, 당뇨성 각막증, 당뇨성 신증, 당뇨성 신경병증, 당뇨성 말초신경장해, 아테롬성 동맥경화 및 당뇨성 혈관합병증으로 이루어진 군 중에서 선택된 어느 하나인, 당뇨 또는 당뇨합병증 예방 또는 치료용 조성물.
5. 제 1항 내지 제 4항 중 어느 한 항에 따른 조성물을 포함하는 당뇨 또는 당뇨합병증 예방 또는 개선용 건강식품 조성물.
   
   
   
   
   
   
   
   
   
   
   
   
   
   
   
   
   

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