KR20130013693A - A topical composition comprising acorus calamus chinensis extract for preventing or improving atopy dermatitis - Google Patents

Abstract

PURPOSE: An external use composition containing an Acorus calamus extract for preventing and treating atopic dermatitis is provided to suppress degranulation and excessive cytokine secretion. CONSTITUTION: A cosmetic composition for preventing or treating atopic dermatitis contains an Acorus calamus extract as an active ingredient. The extract is a solvent extract or essential oil. The solvent extract is prepared using water or butylenes glycol. A pharmaceutical composition for preventing or treating atopic dermatitis contains the extract as an active ingredient. An external use composition for preventing or treating atopic dermatitis contains the extract as an active ingredient. The external use composition is a cosmetic product or a medicine.

Description

창포 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 예방 및 개선용 외용 조성물{A TOPICAL COMPOSITION COMPRISING ACORUS CALAMUS CHINENSIS EXTRACT FOR PREVENTING OR IMPROVING ATOPY DERMATITIS}External composition for preventing and improving atopic dermatitis including iris extract as an active ingredient {A TOPICAL COMPOSITION COMPRISING ACORUS CALAMUS CHINENSIS EXTRACT FOR PREVENTING OR IMPROVING ATOPY DERMATITIS}

본 발명은 알레르기 질환 특히, 아토피 피부염을 개선 또는 예방하기 위한 외용 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to an external composition for improving or preventing allergic diseases, in particular, atopic dermatitis.

아토피 피부염(Atopic dermatitis)은 대표적인 알레르기성 피부 염증질환을 의미하며, 아토피란 어원상 이상하고 부적절한 반응을 의미한다. 대개 아토피 피부염은 영, 유아기, 특히 생후 2개월 전후에 시작되는데 이 중 약 50%가 생후 2세 이전에 발생하고, 거의 5세 이전에 증상이 나타나는 반면 성인에서 처음 증상이 나타나는 예는 극히 드물다. 대부분 성장과 더불어 증상이 완화되거나 사라지며 유아기 발생 환자의 절반 이상이 2세 전에 호전된다.Atopic dermatitis refers to a typical allergic skin inflammatory disease, and atopic dermatitis refers to an abnormal and inappropriate response. Atopic dermatitis usually begins around zero, infancy, and especially around two months of age, of which about 50% occurs before two years of age, and symptoms rarely occur before about five years of age, while very few cases appear first in adults. Most of the symptoms, along with growth, are alleviated or disappear, and more than half of the infantile patients develop before 2 years of age.

상기 아토피 피부염의 증상으로는 주로 가려움증을 호소하며 재발성의 염증성 피부질환이 나타나는데 연령에 따라 반응은 다양하게 나타난다. 최근 아토피 피부염은 전 세계적으로 10% 내지 20%로 추산될 정도로 흔한 질환이다. 의식주 및 생활환경의 변화 등으로 유병률은 계속 증가하고 있으며, 특히 아동기에서 발생빈도가 높고 연령이 증가할수록 유병률은 감소한다. 그러나 연령이 증가하면서 증상은 약화되지만 아토피성 체질은 대부분 평생 동안 지속되므로 환자의 삶의 질에 많은 영향을 미친다. 발병원인은 유전적인 요인 및 환경적 면역학적 요인 등이 복합적으로 작용하여 나타나는 다인자성 질환이다.As a symptom of atopic dermatitis, itching mainly complains of itching and recurrent inflammatory skin disease appears, and the reaction varies according to age. Recently, atopic dermatitis is a common disease estimated at 10% to 20% worldwide. Prevalence continues to increase due to changes in food stocks and living conditions, especially in childhood, and the prevalence decreases with increasing age. However, as age increases, symptoms weaken, but atopic constitution mostly lasts for life, which affects the quality of life of patients. The pathogenesis is a multifactorial disease caused by a combination of genetic factors and environmental immunological factors.

아토피 피부염의 유발 과정은 출생 후 초기에는 면역글로블린 E(immunoglobulin E, IgE)와 무관한 국소성 피부염으로, 유전적 요인에 의해 나타나는 아토피 피부염이다. 그러나, IgE 무관형 아토피 피부염이 계속되면서, IgE 유관형의 피부염으로 변환된다.The induction process of atopic dermatitis is atopic dermatitis, which is caused by genetic factors, is a topical dermatitis that is not associated with immunoglobulin E (IgE) in the early postnatal period. However, as IgE-independent atopic dermatitis continues, it is converted into IgE-induced dermatitis.

상기 아토피 피부염의 원인과 관련하여, IgE 무관형 아토피 피부염과 IgE 유관형 피부염 모두 아토피를 일으키는 주된 자극물은 외인성 자극물이며, 그 예로 음식, 먼지, 진드기 및 미생물 등이 있다. 그러나, 환자 중 25%는 내인성 분비물에 의해 아토피가 유발되는 것으로 보고되어 있다. 보다 구체적으로, 가려운 곳을 긁으면 피부 각질화 세포에서 두 종류의 단백질이 분비되게 되는데, 상기 단백질에 대해 IgE가 작용하여 자가 면역성 과민 반응을 일으켜 아토피를 유발하게 되는 것으로 보고되고 있다. 피부에서 이러한 자가 면역성 과민 반응이 계속되게 되면 피부의 장벽 기능이 파괴되고, 각질층이 망가져서 수분이 이탈하여 건성 피부가 되며, 궁극적으로 각종 자극물이 쉽게 침입하게 되어 상황이 악화되는 것이 아토피 피부염의 핵심 병태이다.In relation to the causes of atopic dermatitis, the main irritants that cause atopy in both IgE atopic dermatitis and IgE related dermatitis are exogenous irritants, such as food, dust, mites and microorganisms. However, 25% of patients are reported to have atopic dermatitis caused by endogenous secretions. More specifically, it is reported that scratching the itch causes two kinds of proteins to be secreted from the skin keratinocytes, and IgE acts on the protein to cause an autoimmune hypersensitivity reaction to induce atopy. If this autoimmune hypersensitivity reaction is continued in the skin, the barrier function of the skin is destroyed, the stratum corneum is broken, moisture is released, and the skin becomes dry, and ultimately, various irritants are easily invaded and the situation is worsened. It is a condition.

알러지 반응과 관련하여, IgE에 대한 반응은 다음과 같이 진행되는 것으로 알려져 있다. 우선, 체내에 있는 비만세포(mast cell)와 호염구(basophil)의 FcεRI에 결합된 IgE에 알레르겐(allergen)이 교차결합(crosslinking)하게 되며, 세포 내 신호전달(signal transduction)에 의해 세포질 과립(granule) 내에 미리 형성되어 있는 매개 물질들 일 예로, 히스타민(histamine), 헤파린(heparin), 화학주성인자(chmotactic factor), 트립테이즈(tryptase), 카이메이즈(chymase) 등이 외포작용(exocytosis)에 의해 방출되게 된다.In relation to the allergic reaction, the reaction to IgE is known to proceed as follows. First, allergens crosslink to IgE bound to mast cells and basophil FcεRI in the body, and then to intracellular signal transduction. For example, histamine, heparin, chemotactic factor, tryptase, chymase, etc. may be included in exocytosis. Will be released.

이후의 반응은 상기 알레르겐에 의한 자극 후 새롭게 합성된 매개 물질들인 프로스타글란딘 D2(prostaglandin D2), 류코트리엔 C4 또는 D4(leukotriene C4 또는 leukotriene D4), 혈소판 활성인자(platelet-activating factor) 등의 분비에 의한 초기단계 반응(early-phase reaction)과 사이토카인(cytokine)에 해당하는 IL-3, IL-4, IL-5 또는 TNF-α 등의 분비에 의한 후기단계 반응(late-phase reaction)으로 나누어 볼 수 있다. Subsequent reactions are initially initiated by secretion of newly synthesized mediators such as prostaglandin D2, leukotriene C4 or leukotriene D4, and platelet-activating factor after stimulation by the allergen. It can be divided into early-phase reaction and late-phase reaction by secretion of cytokines such as IL-3, IL-4, IL-5 or TNF-α. have.

상기 초기단계 반응에 관련되는 매개 물질들은 혈관 투과성 증가, 기관지 수축, 장 과다운동, 조직 상해, 초기 염증반응을 유도하고, 상기 후기단계 반응에 관련하는 사이토카인은 비만세포 증식 촉진, IgE 생산, TH2 세포의 활성, 후기 염증반응을 유도한다. 정상적인 사람은 TH1 세포와 TH2 세포가 균형을 이루고 있는 것과 달리, 아토피성 피부염을 갖는 환자는 TH1 세포와 TH2 세포가 비이상적으로 증가되거나 활성화 되는 특징이 있다. 보다 구체적으로, 상기 TH2 세포는 급성 아토피 증상을 유발하는 한편, TH1 세포는 만성 아토피 증상을 주관하게 된다.The mediators involved in the early stage response induce increased vascular permeability, bronchial contraction, intestinal hypermotility, tissue injury, early inflammatory response, and the cytokines involved in the late stage response promote mast cell proliferation, IgE production, TH2 Induces cell activity, late inflammatory response. In contrast to the normal human TH1 cells and TH2 cells are balanced, patients with atopic dermatitis are characterized by the non-ideal increase or activation of TH1 cells and TH2 cells. More specifically, the TH2 cells cause acute atopic symptoms, while the TH1 cells preside over chronic atopic symptoms.

현재 임상에서 사용되고 있는 아토피 피부염의 치료 방법으로는 UV광을 피부에 조사하는 광학적 방법 및 치료제로 히드록시진(hydroxyzine), 디펜히드라민, 터페나딘, 아스테미제올 등의 항히스타민제를 복용하는 방법, 세팔레신, 디클로사실린 등의 항생제를 복용하는 방법, 스테로이드제, 면역 억제제, 및 항알레르기제 그리고 피부보습제가 사용되고 있다.Treatment of atopic dermatitis, which is currently used in clinical practice, is an optical method of irradiating the skin with UV light and a method of taking antihistamines such as hydroxyzine, diphenhydramine, terpenadine, and astemizeol, Methods of taking antibiotics such as cephalesin, diclosacillin, steroids, immunosuppressants, and anti-allergic agents and skin moisturizers are used.

상기 스테로이드제는 사이토카인을 억제하여 아토피를 치료할 수 있는데 용법을 초과하여 사용하는 경우, 스테로이드 수용체가 고갈되어 내성을 일으키고, 더 많은 양을 사용함으로써 스테로이드가 피부에서 과산화물로 변질하여 아토피 자체보다 혹독한 소양감을 유발한다. 또한, 호르몬을 조절하여 치료효과를 내는 약물인 만큼 신체의 호르몬 불균형을 가지고 올 수 있다. 또한, 면역 억제제는 T세포를 억제하는 약으로서 아토피 피부염을 치료할 수 있다. 그러나, 남용하면 발암 및 감염증 유발 등의 문제를 야기할 수 있다. 또한, 소양감 개선을 위한 항히스타민제의 사용은 소양감이 개선되더라도 "소양감-긁기-아토피피부염-소양감"의 악순환으로 이어져 결국 치료가 어려워지며 아직까지 아토피 피부염에 대해서는 효과가 입증된 바 없다.The steroid can treat atopy by inhibiting cytokines. When used in excess of the dosage, steroid receptors are depleted, resulting in resistance, and by using a larger amount, the steroid degenerates into peroxides in the skin, making it more severe than the atopy itself. Cause. In addition, it is possible to bring hormonal imbalance in the body as it is a drug that produces a therapeutic effect by controlling hormones. In addition, immunosuppressants can treat atopic dermatitis as drugs that inhibit T cells. However, abuse can lead to problems such as carcinogenesis and infectious diseases. In addition, the use of antihistamines to improve pruritus leads to a vicious cycle of "pruritus-scratch-atopic dermatitis-pruritus" even if the pruritus is improved, resulting in difficult treatment and has not yet been proven effective for atopic dermatitis.

이처럼 현재의 치료방법은 치료제가 일시적 병변의 완화와 부작용이 많은 치료제들이다. 따라서 이러한 부작용이 없으면서 효능이 우수한 치료제 개발이 요구되고 있다.As such, the current treatments are those for which there is a lot of side effects. Therefore, there is a need for developing a therapeutic agent having excellent efficacy without these side effects.

이와 관련하여, 최근 다양한 식물 자원을 바탕으로 아토피 질환을 치료하고자 하는 연구가 진행되었으나, 창포 추출물을 이용하여 체계적이고 과학적인 연구를 통해 아토피 질환에 대한 예방 또는 개선효과를 확인한 연구결과는 아직 보고되지 아니하였다.In relation to this, a study to treat atopic diseases based on various plant resources has recently been conducted. However, the results of studies showing the prevention or improvement of atopic diseases through systematic and scientific studies using iris extract have not been reported yet. No.

한국등록특허 제10-0538142, 공개일자 2005년 12월 15일.Korea Patent Registration No. 10-0538142, published 15 December 2005. 한국등록특허 제10-0668290, 공개일자 2006년 10월 12일.Korean Patent No. 10-0668290, published October 12, 2006.

상기 종래 기술의 문제점을 해결하기 위하여, 본 발명의 목적은 아토피 피부염 급성단계 반응에서 탈과립과 사이토카인 분비를 조절함으로써, 아토피 피부염 완화, 개선 또는 예방에 효과가 있는 천연물질 유래 성분을 유효성분으로 함유하는 외용 조성물을 제공하는 것이다. In order to solve the problems of the prior art, an object of the present invention is to control the degranulation and cytokine secretion in the acute phase reaction of atopic dermatitis, containing a component derived from natural substances effective in alleviating, improving or preventing atopic dermatitis It is to provide an external composition.

상기 외용 조성물은 화장료 조성물 또는 의약 조성물일 수 있다.The external composition may be a cosmetic composition or a pharmaceutical composition.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 창포(Acorus calamus) 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 예방 또는 개선용 외용 조성물을 제공한다. 상기 외용 조성물은 치료용 또는 화장용으로 사용될 수 있다.In order to achieve the above object, the present invention iris (Acorus calamus ) Provides an external composition for preventing or improving atopic dermatitis comprising an extract as an active ingredient. The external composition may be used for therapeutic or cosmetic purposes.

이러한 측면에서 본 발명은 창포(Acorus calamus) 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 예방 또는 개선용 화장료 조성물 일 수 있다. 또한, 본 발명은 창포 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 치료 또는 예방용 약학 조성물일 수 있다. In this aspect, the present invention is an Acorus calamus ) may be a cosmetic composition for preventing or improving atopic dermatitis comprising the extract as an active ingredient. In addition, the present invention may be a pharmaceutical composition for the treatment or prevention of atopic dermatitis comprising iris extract as an active ingredient.

본 발명의 발명자들은 종래 부작용이 문제되거나 그 효과 자체가 미비하였던 화학물질 유래 아토피 피부염 예방 또는 개선용 외용 조성물을 대체하기 위하여, 아토피 피부염의 치료 또는 개선에 효과적인 천연 물질 유래의 유효성분에 대해 연구하던 중, 종래 입욕제나 샴푸 대용으로 사용되거나 음식으로 사용되던 창포의 추출물이 탈과립 억제능, 인터루킨-4(Interleukin-4, IL-4)와 같은 사이토카인 분비 억제능이 우수하고, 특히 부틸렌 글리콜 또는 수용매를 이용한 열수 추출물의 경우 다른 추출법에 비하여 현저하게 우수한 탈과립 억제능 및 사이토카인 분비 억제능이 있으며, 상기 수용매를 이용한 창포 열수 추출물을 이용하여 동물실험을 수행한 결과, 우수한 아토피 피부염 예방 또는 개선 효과가 있음을 확인하여 본 발명을 완성하였다.The inventors of the present invention have been studying active ingredients derived from natural substances effective for the treatment or improvement of atopic dermatitis, in order to replace the external composition for preventing or improving chemically derived atopic dermatitis, which has a conventional side effect or insufficient effect. Among them, extracts of irises that have been used as food substitutes or baths or shampoos in the past are excellent in inhibiting degranulation and cytokine secretion such as interleukin-4 (IL-4), and especially butylene glycol or water solvent In the case of the hydrothermal extract using, there is a remarkably superior degranulation inhibitory effect and cytokine secretion inhibitory activity compared to other extraction methods, and as a result of animal experiments using the iris hydrothermal extract using the above solvent, there is an excellent atopic dermatitis prevention or improvement effect It was confirmed to complete the present invention.

이하 본 발명을 상세히 설명한다. Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 창포(Acorus calamus) 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 예방 또는 개선용 외용 조성물에 관한 것이다.The present invention is an Acorus calamus ) relates to an external composition for preventing or improving atopic dermatitis comprising an extract as an active ingredient.

또한, 본 발명은 창포 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 예방 또는 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention also relates to a cosmetic composition for the prevention or improvement of atopic dermatitis comprising the iris extract as an active ingredient.

상기 창포 추출물은 용매 추출법에 의해 제조된 용매 추출물 또는 에센션 오일일 수 있고, 바람직하게는 용매 추출물일 수 있으며, 상기 용매 추출물은 물 및 부틸렌 글리콜로 이루어진 군 중에서 선택된 어느 하나의 용매, 바람직하게는 부틸렌 글리콜 용매를 이용하여 제조한 것일 수 있다.The iris extract may be a solvent extract or an essential oil prepared by a solvent extraction method, preferably a solvent extract, and the solvent extract may be any one solvent selected from the group consisting of water and butylene glycol It may be prepared using a butylene glycol solvent.

또한, 본 발명은 창포 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 치료 또는 예방용 약학 조성물에 관한 것이다..In addition, the present invention relates to a pharmaceutical composition for treating or preventing atopic dermatitis, comprising an extract of Iris.

본 명세서에 사용된 용어 "유효성분"은 피부 상태에 적용하여 예방, 개선 또는 보완 효과를 제공하는 화장료 조성물의 성분을 의미한다.As used herein, the term “active ingredient” means a component of a cosmetic composition that is applied to the skin condition to provide a prophylactic, ameliorating or complementary effect.

본 명세서에 사용된 용어 "화장료 조성물"은 인체를 청결 및 미화하여 매력을 더하고 용모를 밝게 변화시키거나 피부 및 모발의 건강을 유지 또는 증진하기 위하여 인체에 사용되는 조성물로 세정제(detergents) 및 화장제(cosmetics)를 포함하는 개념이다.The term "cosmetic composition" as used herein is a composition used in the human body to clean and beautify the human body to add charm and brighten the appearance or to maintain or promote the health of the skin and hair, detergents and cosmetics. It is a concept that includes (cosmetics).

본 명세서에서 사용된 용어 아토피(atopy)란 IgE항체와 알레르겐의 면역반응에 의한 증상을 주요 증상으로 하며 유전경향이 강한 알레르기성 질환군을 의미하며, 구체적으로 아토피 피부염, 외인성 기관지천식, 두드러기, 알레르기성 비염, 알레르기성 위장염 등의 질환을 포함하는 개념이다.As used herein, the term atopic refers to an allergic disease group having a strong genetic tendency, with symptoms caused by an immune response between an IgE antibody and an allergen, and specifically, atopic dermatitis, exogenous bronchial asthma, urticaria, and allergy. The concept includes diseases such as rhinitis, allergic gastroenteritis.

상기 아토피 피부염은 대표적인 알레르기성 피부 염증 질환으로, 아토피 질환 중 가장 빈번히 발병하는 질환이며, 아토피 체질인 사람에게 일어나는 가려움이 매우 심한 습진을 의미한다. 현재까지 그 원인이 명확하게 규명되지 않았으나, 전세계 인구의 약 15%가 아토피 피부염으로 고통받는 것으로 추정되고 있으며, 우리 나라도 그 환자 수가 늘고 있는 현실이다. 상기 아토피성 피부염은 통상 발병하는 연령대에 생후 2개월 무렵부터 만 1살까지의 유아 아토피성 피부염, 만 1살 무렵부터 만 7살까지의 유소아 아토피성피부염 및 사춘기 이후 발병하는 성인 아토피성 피부염으로 구분된다.The atopic dermatitis is a typical allergic skin inflammatory disease, which is the most frequent disease among atopic diseases, and refers to a very itchy eczema occurring in atopic dermatitis. To date, the cause has not been clearly identified, but about 15% of the world's population is estimated to suffer from atopic dermatitis, and the number of patients in Korea is increasing. The atopic dermatitis is divided into infant atopic dermatitis from about 2 months old to 1 year old, juvenile atopic dermatitis from about 1 year old to 7 years old, and adult atopic dermatitis after puberty. do.

본 발명은 창포(Acorus calamus) 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 예방 또는 개선용 외용 조성물에 관한 것이다. 상기 외용 조성물은 화장품 또는 의약용으로 사용될 수 있다.The present invention is an Acorus calamus ) relates to an external composition for preventing or improving atopic dermatitis comprising an extract as an active ingredient. The external composition may be used for cosmetics or medicine.

이러한 차원에서 본 발명은 창포(Acorus calamus) 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 예방 또는 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.In this regard, the present invention is an Acorus It relates to a cosmetic composition for preventing or improving atopic dermatitis comprising calamus ) extract as an active ingredient.

상기 창포(Acorus calamus)는 외떡잎식물 천남성목 천남성과의 여러해살이풀로, 수창, 지심, 경포로 불리운다. 상기 창포는 주로 연못가나 도랑가에 자라며 한국, 일본 및 중국에 분포하여 있다. 상기 창포는 여러해살이 초본으로 분근 번식하고, 뿌리줄기는 옆으로 길게 자라며, 육질이고 마디가 많으며, 흰색이거나 연한 홍색이고, 지상에 있는 줄기와 더불어 독특한 향기가 난다. 상기 창포의 잎은 뿌리줄기 끝에서 모여나며 좁은 선형으로 창검같이 뾰족하고 길며, 가장자리가 밋밋하고 밑 부분은 서로 얼싸안는 형태로 평행맥이 있다. 상기 창포의 꽃은 6월 내지 7월에 연한 황록색으로 피며 양성화이고 꽃줄기의 중앙부에 육수화서로 달린다. 상기 창포의 열매는 8월 내지 9월에 긴 타원형의 장과가 붉은 색으로 익는다. 상기 창포는 우리나라에서 예로부터 사용되었는 바, 민간에서는 단옷날 창포를 넣어 끓이 물로 머리를 감고 목욕을 하는 풍습이 있었으며, 눈을 맑게 하고 청력을 높여 준다고 하여 식품이나 의약품으로 사용되어 왔다. Acorus calamus ) is a perennial herb with a monocotyledonous plant, Cheonnamseong Mok, Cheonnamseong, and is called Suchang, Jisim, and Gyeongpo. The irises grow mainly in ponds or ditches and are distributed in Korea, Japan, and China. The irises multiply as perennial herbaceous roots, the rhizome grows long sideways, fleshy and nodey, white or light red, with a characteristic scent with the stem on the ground. The leaves of the irises are gathered at the end of the root stem and are narrow and linear and pointed and long like a lanceolate, and the edges are flat and the bottom part embraces each other. The flowers of the irises bloom in pale yellowish green in June to July, are bisexual, and hang in the middle of the stalk with broth inflorescences. Fruits of the irises ripen in red in long oval berries in August to September. The irises have been used in Korea since ancient times, and in the private sector, the irises were put in a short-dressed blade to boil and wash their heads with water. They have been used as foods or medicines to clear eyes and improve hearing.

상기 창포는 재배한 것 또는 시판되는 것 등 제한 없이 사용할 수 있으며, 상기 창포는 잎, 꽃 뿌리, 줄기, 가지, 껍질 및 종자로 이루어진 군 중에서 선택된 1종 이상일 수 있고, 일 예로 뿌리(근경)일 수 있다.The iris may be used without limitation, such as cultivated or commercially available, the iris may be at least one selected from the group consisting of leaves, flower roots, stems, branches, shells, and seeds, for example, root (root) Can be.

상기 창포 추출물은 용매 추출법에 의한 용매 추출물 또는 에센셜 오일 일 수 있다. 보다 구체적으로 상기 창포 추출물은 당업계에 공지된 통상의 방법, 즉 통상의 식물 추출물의 제조방법에 따라 제조될 수 있으며, 일 예로, 용매 추출법, 수증기 증류법 또는 초임계유체 추출법이나 아임계유체 추출법 등의 방법으로 제조된 것일 수 있다. 상기 에센셜 오일은 수증기 증류법 또는 초임계유체 추출법에 의해 제조된 것일 수 있다.The iris extract may be a solvent extract or an essential oil by a solvent extraction method. More specifically, the iris extract may be prepared according to a conventional method known in the art, that is, a method of preparing a conventional plant extract, for example, solvent extraction, steam distillation, or supercritical fluid extraction or subcritical fluid extraction. It may be prepared by the method of. The essential oil may be prepared by steam distillation or supercritical fluid extraction.

상기 용매 추출법은 창포, 창포의 건조물 또는 창포 건조물의 분쇄물에 추출용매를 가하여 추출함으로써 제조하거나 추출용매로 추출하여 제조한 조추출물에 분획용매를 가하여 분획하여 제조된 것일 수 있다.The solvent extraction method may be prepared by adding the extraction solvent to the extract of irises, dried irises or crushed dried irises, or may be prepared by adding the fractionation solvent to the crude extract prepared by extraction with the extraction solvent.

상기 추출용매는 물 및 유기용매로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있다. 상기 유기용매는 탄소수 1 내지 5의 알코올, 상기 알코올 희석수, 에틸아세테이트 또는 아세톤 등의 극성용매와 에테르, 클로로포름, 벤젠, 헥산, 또는 디클로로메탄의 비극성용매 또는 이들의 혼합용매일 수 있다. 상기 탄소수 1 내지 5의 알코올은 에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜 피나콜 등의 2가 알코올인 글리콜 또는 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 이소프로판올 등의 1가 알코올일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 또한, 알코올 희석수는 1가 알코올 또는 2가 알코올을 10%(v/v) 내지 99.9%(v/v)로 물에 희석한 것일 수 있다.The extraction solvent may be at least one selected from the group consisting of water and an organic solvent. The organic solvent may be a polar solvent such as alcohol having 1 to 5 carbon atoms, the alcohol dilution water, ethyl acetate or acetone, and a nonpolar solvent of ether, chloroform, benzene, hexane, or dichloromethane, or a mixed solvent thereof. The alcohol having 1 to 5 carbon atoms may be a dihydric alcohol such as ethylene glycol, propylene glycol, butylene glycol pinacol, or a monohydric alcohol such as methanol, ethanol, propanol, butanol, isopropanol, but is not limited thereto. . In addition, the alcohol diluted water may be a diluted solution of monohydric alcohol or divalent alcohol in water at 10% (v / v) to 99.9% (v / v).

상기 추출용매는 최종 제조된 창포 추출물의 항 아토피 효과, 구체적으로 탈과립 억제능 및 사이토카인 분비 억제능의 측면에서 효과가 우수한 부틸렌글리콜 및 물로 이루어진 군 중에서 선택된 어느 하나, 바람직하게는 부틸렌글리콜일 수 있다. 또한, 상기 추출용매 중 물은 화장품에 사용될 있는 안전성이 확보된 것이고, 부틸렌글리콜의 경우 화장품의 베이스로 공시된 자료에 해당하여 안전성이 확보된 것이므로, 상기 추출물은 추출용매를 제거하지 않고 곧바로 화장품에 첨가될 수 있다는 점에서 바람직한 효과를 갖는다.The extraction solvent may be any one selected from the group consisting of butylene glycol and water having an excellent effect in terms of anti-atopic effect, specifically degranulation inhibitory activity and cytokine secretion inhibitory activity of the final prepared iris extract, preferably butylene glycol. . In addition, the water of the extraction solvent is to ensure the safety that can be used in cosmetics, but in the case of butylene glycol corresponding to the data published as the base of the cosmetics, the safety is secured, the extract does not remove the extraction solvent immediately cosmetics It has a desirable effect in that it can be added to.

또한, 상기 추출용매를 이용한 창포 추출물의 제조와 관련된 본 발명의 창포 추출물은 통상의 식물 추출물의 제조방법에 따라 제조된 것일 수 있으며, 구체적으로는 냉침추출법, 온침추출법, 열 추출법, 초음파 추출법 등일 수 있으며, 통상의 추출기기, 초음파분쇄 추출기 또는 분획기를 이용할 수 있다.In addition, the iris extract of the present invention related to the preparation of iris extract using the extracting solvent may be prepared according to a conventional method of producing a plant extract, specifically, may be cold extraction, hot extraction, heat extraction, ultrasonic extraction, etc. In addition, a conventional extraction device, an ultrasonic grinding extractor or a fractionator may be used.

상기 추출용매를 부틸렌글리콜로 하는 경우, 추출과정은 일예로, 10℃ 내지 25℃, 또는 10℃ 내지 20℃, 또는 12℃ 내지 18℃에서 수행될 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다. 또한, 상기 추출시간은 특별히 한정되지는 않으나, 30분 내지 20일 또는 3시간 내지 14일 또는 3일 내지 10일일 수 있다. 상기 추출용매가 부틸렌글리콜인 경우에는, 우선 초음파분쇄 추출기를 이용한 초음파 추출법을 수행한 후, 용매 추출법을 수행할 수 있으며, 상기 초음파 추출법은 30분 내지 10시간 또는 1시간 내지 8시간 또는 3시간 내지 5시간일 수 있으며, 상기 용매 추출법은 냉침 추출법, 구체적으로 10℃ 내지 25℃, 또는 10℃ 내지 20℃, 또는 12℃ 내지 18℃에서 1일 내지 15일 또는 3일 내지 12일 또는 5일 내지 10일 동안 수행할 수 있다.When the extraction solvent is butylene glycol, the extraction process may be performed at 10 ° C to 25 ° C, or 10 ° C to 20 ° C, or 12 ° C to 18 ° C, for example, but is not limited thereto. In addition, the extraction time is not particularly limited, but may be 30 minutes to 20 days or 3 hours to 14 days or 3 days to 10 days. In the case where the extraction solvent is butylene glycol, first, after performing an ultrasonic extraction method using an ultrasonic grinding extractor, a solvent extraction method may be performed, and the ultrasonic extraction method is 30 minutes to 10 hours or 1 hour to 8 hours or 3 hours. It may be from 5 hours, the solvent extraction method is cold extraction method, specifically 10 ℃ to 25 ℃, or 10 ℃ to 20 ℃, or 1 to 15 days or 3 to 12 days or 5 days at 12 ℃ to 18 ℃ To 10 days.

또한, 상기 추출용매를 물로 하는 경우, 추출과정은 일예로, 80℃ 내지 120℃, 또는 90℃ 내지 115℃, 또는 100℃ 내지 110℃에서 수행될 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다. 또한, 상기 추출시간은 특별히 한정되지는 않으나, 30분 내지 20시간 또는 1시간 내지 10시간 또는 3시간 내지 7시간일 수 있다.In addition, in the case of using the extraction solvent as water, the extraction process may be performed at, for example, 80 ℃ to 120 ℃, or 90 ℃ to 115 ℃, or 100 ℃ to 110 ℃, but is not limited thereto. In addition, the extraction time is not particularly limited, but may be 30 minutes to 20 hours or 1 hour to 10 hours or 3 hours to 7 hours.

또한, 상기 용매로 추출한 추출물은 이후, 헥산, 메틸렌클로라이드, 아세톤, 에틸아세테이트, 에틸에테르, 클로로포름, 물 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나의 용매로 분획과정을 더욱 실시할 수 있다. 상기 분획 시 용매는 2종 이상 사용할 수 있으며, 용매의 극성에 따라 순차적으로 사용하거나 혼합하여 사용하여, 각 용매 분획물을 제조할 수 있다.In addition, the extract extracted with the solvent may be further subjected to the fractionation process with any one solvent selected from the group consisting of hexane, methylene chloride, acetone, ethyl acetate, ethyl ether, chloroform, water and mixtures thereof. Two or more kinds of solvents may be used for the fractionation, and each solvent fraction may be used sequentially or in combination according to the polarity of the solvent.

상기 제조된 추출물 또는 상기 분획과정을 수행하여 수득한 분획물은 이후 여과하거나 농축 또는 건조과정을 수행하여 용매를 제거할 수 있으며, 여과, 농축 및 건조를 모두 수행할 수 있다. 구체적으로 상기 여과는 여과지를 이용하거나 감압여과기를 이용할 수 있으며, 상기 농축은 감압 농축기, 일 예로 회전 증발기를 이용하여 감압 농축할 수 있으며, 상기 건조는 일 예로 동결건조법으로 수행할 수 있다.The thus-prepared extract or the fraction obtained by performing the fractionation process may be filtered, concentrated or dried to remove the solvent, and may be subjected to both filtration, concentration and drying. Specifically, the filtration can be performed using a filter paper or a vacuum filter, and the concentration can be reduced by using a vacuum concentrator, for example, a rotary evaporator. The drying can be performed by, for example, freeze drying.

상기 에센셜 오일은 수증기 증류법 또는 초임계유체 추출법에 의해 제조된 것일 수 있다. 상기 에센셜 오일은 통상의 식물 정유 또는 식물 에센셜 오일을 제조하는 방법에 따라 수행할 수 있으며, 일 예로 수증기 증류법 또는 초임계유체 추출법에 의해 제조될 수 있다. 상기 수증기 증류법의 경우 상기 식물을 가열한 후, 증기를 증류액으로 분리해내고, 에센셜 오일 즉, 정유만을 수득하는 방법이나 초임계 추출법으로 수행할 수 있다. 상기 초임계유체 추출법이나 아임계유체 추출법의 경우 초임계 상태의 유체 또는 아임계 상태의 유체를 이용하여 추출한 후, 상기 추출물에서 왁스성분을 제거하고 오일만 수득하는 방법으로 수행할 수 있다. 상기 초임계유체의 경우 주로 이산화탄소를 사용할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 상기 이산화탄소를 사용하는 경우, 상기 초임계유체는 25 bar 내지 35 bar, 바람직하게는 27 bar 내지 32 bar의 이산화탄소일 수 있다. 상기 25 bar 내지 35 bar, 바람직하게는 27 bar 내지 32 bar의 이산화탄소 초임계 유체를 사용하는 경우, 상기 추출법은 1시간 내지 5시간 또는 2시간 내지 4시간 동안 수행할 수 있다.The essential oil may be prepared by steam distillation or supercritical fluid extraction. The essential oil may be performed according to a conventional plant essential oil or a method for preparing plant essential oil, and may be prepared by, for example, steam distillation or supercritical fluid extraction. In the case of the steam distillation method, after heating the plant, the steam is separated into a distillate, it can be carried out by a method of obtaining only essential oil, that is, essential oil or supercritical extraction. In the case of the supercritical fluid extraction method or the subcritical fluid extraction method, after extraction using a supercritical fluid or a subcritical fluid, the wax component may be removed from the extract and oil may be obtained. In the case of the supercritical fluid, mainly carbon dioxide may be used, but is not limited thereto. When using the carbon dioxide, the supercritical fluid may be carbon dioxide of 25 bar to 35 bar, preferably 27 bar to 32 bar. When using the carbon dioxide supercritical fluid of 25 bar to 35 bar, preferably 27 bar to 32 bar, the extraction method may be performed for 1 hour to 5 hours or 2 hours to 4 hours.

상기 창포 추출물은 세포의 탈과립을 억제하고, 인터루킨-4(Interleukin-4, IL-4)와 같은 사이토카인 분비를 억제함으로써, 아토피 피부염 및 알레르기성 피부질환의 예방 및 개선에 효과적으로 이용될 수 있다. 보다 구체적으로, 상기 창포 추출물은 RBL-2H3 세포에서 탈과립 억제능 및 사이토카인 분비 억제능을 수행하고, 실험동물을 이용하여 수동 피부 과민 반응 실험을 수행한 결과, 우수한 억제능을 확인하였으므로, 상기 창포 추출물은 아토피 피부염을 포함한 알레르기성 피부질환의 개선, 치료 또는 예방의 용도로 사용될 수 있다.The iris extract can be effectively used to prevent and improve atopic dermatitis and allergic skin diseases by inhibiting cell degranulation and inhibiting cytokine secretion such as Interleukin-4 (IL-4). More specifically, the iris extract performs degranulation inhibitory activity and cytokine secretion inhibitory activity in RBL-2H3 cells, and a manual skin hypersensitivity test was performed using an experimental animal, and thus the iris extract was atopy. It can be used to ameliorate, treat or prevent allergic skin diseases including dermatitis.

이러한 측면에서 본 발명의 외용 조성물은 아토피 예방 또는 개선용 화장료 조성물일 수 있다. In this aspect, the external composition of the present invention may be a cosmetic composition for preventing or improving atopy.

상기 화장료 조성물은 상기 창포 추출물이 전체 조성물에 대하여 0.0001 내지 30중량% 또는 0.001 내지 15중량% 포함될 수 있다. 보다 구체적으로, 창포 추출물의 함량은 아토피 예방 또는 개선 효과의 달성을 위하여 최소치 이상의 함량이어야 하나, 피부자극 여부 및 과량 첨가에 따른 사용감 저하나 각종 제형에의 적용 가능성을 고려하여, 상기 범위 이내에서 자유롭게 조절될 수 있다.The cosmetic composition may contain 0.0001 to 30% by weight or 0.001 to 15% by weight of the iris extract with respect to the total composition. More specifically, the content of the iris extract should be more than the minimum value in order to achieve the effect of preventing or improving atopic dermatitis, freely within the above range in consideration of whether the skin is irritated and the feeling of use decreases due to excessive addition or its applicability to various formulations. Can be adjusted.

이때, 유효성분의 함량 및 추가 성분의 함량은 제형 또는 화장료 조성물에 함유되는 성분들의 함량에 따라 상기 범위 내에서 적절히 조절될 수 있다.At this time, the content of the active ingredient and the content of the additional component may be appropriately adjusted within the above range according to the content of the components contained in the formulation or cosmetic composition.

본 발명의 화장료 조성물은 피부 외용연고, 기초화장품, 메이크업 화장품, 바디 화장품 또는 면도용 화장품 등의 용도로 제공될 수 있으며, 상기 기초화장품의 예로는 에센스, 로션, 크림, 젤, 화장수, 팩, 마사지 크림, 유액 등이 있을 수 있고, 상기 메이크업 화장품의 예로는 파운데이션, 립스틱, 아이섀도, 아이라이너, 마스카라, 아이브로우 펜슬, 메이크업 베이스 등이 있을 수 있으며, 바디 화장품으로는 비누, 액체 세정제, 입욕제, 썬 스크린 크림, 썬 오일 등이 있을 수 있고, 면도용 화장품으로는 애프터쉐이브로션, 쉐이빙 크림 등이 있다.The cosmetic composition of the present invention may be provided for use in skin external ointments, basic cosmetics, makeup cosmetics, body cosmetics or shaving cosmetics, and the like, and examples of the basic cosmetics include essences, lotions, creams, gels, lotions, packs, massages, and the like. Creams, latexes, and the like, and examples of the makeup cosmetics may include foundation, lipstick, eye shadow, eyeliner, mascara, eyebrow pencil, makeup base, etc., and body cosmetics include soap, liquid cleaner, bath agent, Sunscreen cream, sun oil, and the like, and shaving cosmetics include aftershave and shaving cream.

본 발명의 화장료 조성물에는 유효성분으로 창포 추출물을 포함하거나, 상기 유효성분인 추출물에 추가로 아토피 개선 또는 예방 효과가 있는 기능성 물질, 항알레르기 작용을 하는 기능성 물질이나 물성 개선을 위한 부형제, 희석제 등의 물질이 추가로 포함될 수 있다. 상기 기능성 물질이나 물성 개선을 위한 물질은 본 발명의 효과를 유지하는 범위 내에서 추가될 수 있다.The cosmetic composition of the present invention includes an extract of irises as an active ingredient, or a functional substance having an atopic improvement or prevention effect in addition to the extract which is the active ingredient, a functional substance having an antiallergic effect, an excipient for improving physical properties, a diluent, and the like. Substances may be further included. The functional material or material for improving the physical properties may be added within the scope of maintaining the effects of the present invention.

일 예로, 상기 화장료 조성물에는 물성 개선을 위하여 향료, 색소, 살균제, 산화방지제, 방부제, 보습제, 점증제, 무기염류 또는 합성 고분자 물질 등이 추가로 첨가될 수 있다. 이외에 첨가해도 되는 배합 성분으로 유지 성분, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 안료, 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, pH 조정제, 알코올, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한제 또는 정제수 등일 수 있다.For example, the cosmetic composition may be additionally added to the perfume, pigments, fungicides, antioxidants, preservatives, moisturizers, thickeners, inorganic salts or synthetic polymer materials to improve physical properties. An organic pigment, an organic pigment, an ultraviolet absorber, a pH adjuster, an alcohol, a blood circulation accelerator, a cold agent, a limiting agent, or purified water may be used as a blending component that may be added.

또한, 상기 화장료 조성물은 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩타이드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군중에서 선택된 1종 이상을 더욱 포함할 수 있다.The cosmetic composition may further include at least one selected from the group consisting of water-soluble vitamins, oil-soluble vitamins, high molecular weight peptides, polymeric polysaccharides, sphingolipids and seaweed extracts.

상기 유효성분 이외의 첨가해도 되는 배합 성분은 이에 한정되지 않으며, 상기 어느 성분도 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 배합 가능하다.The compounding component which may be added other than the said active ingredient is not limited to this, Any said component can be mix | blended within the range which does not impair the objective and effect of this invention.

또한, 상기 화장료 조성물은 용액, 유화물, 점성형 혼합물 등의 형상을 취할 수 있으며, 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형, 일 예로 스프레이, 유액, 크림, 화장수, 팩, 파운데이션, 로션, 미용액, 모발화장료 등의 제형일 수 있다.In addition, the cosmetic composition may take the form of solutions, emulsions, viscous mixtures, and the like, and any formulation commonly prepared in the art, for example, spray, emulsion, cream, lotion, pack, foundation, lotion, essence, hair It may be a formulation such as cosmetics.

보다 구체적으로 본 발명의 화장료 조성물은 스프레이, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클린저, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트리젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스 및 팩의 제형을 포함할 수 있다.More specifically, the cosmetic composition of the present invention is a spray, soap, cleansing foam, cleansing lotion, cleansing cream, body lotion, body cleanser, skin lotion, skin softener, skin toner, astringent, lotion, milk lotion, moisturizing lotion, nutrition lotion , Massage creams, nutrition creams, moisturizing creams, hand creams, foundations, essences, nutritional essences and pack formulations.

일 예로, 본 발명의 제형이 스프레이 또는 파우더인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있으며, 특히 본 발명의 제형이 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.For example, when the formulation of the present invention is a spray or powder, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as the carrier component, and particularly when the formulation of the present invention is a spray It may additionally include propellants such as chlorofluorohydrocarbons, propane / butane or dimethyl ether.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, animal fiber, plant fiber, wax, paraffin, starch, tracant, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc or zinc oxide may be used as the carrier component .

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제, 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르일 수 있다.When the formulation of the present invention is a solution or an emulsion, a solvent, a solvent or an emulsifier is used as a carrier component, and examples thereof include water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, -Butyl glycol oil, glycerol aliphatic esters, polyethylene glycols or fatty acid esters of sorbitan.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a suspension, a carrier such as water, a liquid diluent such as ethanol or propylene glycol, a suspending agent such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester, Cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tracant, etc. may be used.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is an interfacial active agent-containing cleansing, the carrier component may include aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, isethionate, imidazolinium derivative, methyltaurate, sarcosinate, fatty acid amide Ether sulfates, alkylamidobetaines, aliphatic alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanolamides, vegetable oils, linolenic derivatives or ethoxylated glycerol fatty acid esters.

또 다른 측면에서 본 발명의 외용 조성물은 아토피 치료 또는 예방용 의약 조성물일 수 있다.In another aspect, the external composition of the present invention may be a pharmaceutical composition for treating or preventing atopy.

따라서, 본 발명은 창포 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 치료 또는 예방용 약학 조성물일 수 있다. 상기 약학 조성물은 피부외용 약학 조성물일 수 있다.Therefore, the present invention may be a pharmaceutical composition for the treatment or prevention of atopic dermatitis comprising the iris extract as an active ingredient. The pharmaceutical composition may be an external skin pharmaceutical composition.

상기 창포 추출물은 세포의 탈과립을 억제하고, 인터루킨-4(Interleukin-4, IL-4)와 같은 사이토카인 분비를 억제함으로써, 아토피 피부염 및 알레르기성 피부질환의 예방 및 개선에 효과적으로 이용될 수 있다. 보다 구체적으로, 상기 창포 추출물은 RBL-2H3 세포에서 탈과립 억제능 및 사이토카인 분비 억제능을 수행하고, 실험동물을 이용하여 수동 피부 과민 반응 실험을 수행한 결과, 우수한 억제능을 확인하였다.The iris extract can be effectively used to prevent and improve atopic dermatitis and allergic skin diseases by inhibiting cell degranulation and inhibiting cytokine secretion such as Interleukin-4 (IL-4). More specifically, the iris extracts perform degranulation inhibitory activity and cytokine secretion inhibitory activity in RBL-2H3 cells, and passive skin hypersensitivity experiments were performed using experimental animals.

알레르기 항원에 피부가 노출되면 랑게르한스 세포의 표면에 있는 IgE 수용체에 항원 특이 IgE가 결합하고, 이 항원의 표면에 있는 T 세포에 전달되어 T 세포가 활성화 된다. 이 경우 정상과 달리 알레르기성 피부질환, 특히, 아토피 피부염에서는 TH2가 활성화되어, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-10, IL-13 등의 사이토카인이 분비되고, 그 결과 B 세포에서 IgE의 생성이 촉진되고, 활성화된 비만세포의 탈과립을 촉진시켜 염증성 사이토카인과 히스타민이 유리된다.When the skin is exposed to allergens, antigen-specific IgE binds to the IgE receptor on the surface of Langerhans cells and is delivered to T cells on the surface of the antigen to activate T cells. In this case, unlike normal, allergic skin diseases, especially atopic dermatitis, TH2 is activated, and cytokines such as IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-10, and IL-13 are secreted. As a result, the production of IgE in B cells is promoted, and the degranulation of activated mast cells is promoted to release inflammatory cytokines and histamine.

상기한 바와 같이, 창포 추출물은 히스타민과 함께 세포에서 분비되는 과립 구성성분으로, 호염구와 비만세포의 탈과립 지표로 사용되는 β-hexosaminidase에 대한 β-hexosaminidase assay를 RBL-2H3세포를 이용하여 수행한 결과, 탈과립 억제능을 확인하였고, 사이토카인의 분비와 관련하여, IL-4에 대한 ELISA를 수행한 결과, 사이토카인 분비 억제능을 확인하여, 항알레르기 효과 및 아토피 피부염을 포함한 알레르기성 피부질환의 치료효능이 있음을 확인하였다.As described above, the iris extract is a granular component secreted from the cells together with histamine, and the result of β-hexosaminidase assay for β-hexosaminidase used as a degranulation indicator of basophils and mast cells using RBL-2H3 cells. , Degranulation inhibitory activity, and cytokine secretion, IL-4 results in the cytokine secretion inhibitory activity, anti-allergic effect and treatment of allergic skin diseases including atopic dermatitis It was confirmed that there is.

또한, BALB/c 마우스의 IgE-비만세포 의존성 수동 피부 과민(PCA) 반응 동물모델을 이용하여 항아토피 기능성을 실험을 수행한 결과, 창포 열수 추출물을 처리한 경우, 에반스 블루 색소(Evans blue dye)가 혈관으로부터 귀조직으로 유출이 억제됨을 확인하여, 동물실험을 통해서도 알레르기성 피부질환의 치료효능이 있음을 다시 한번 확인하였다.In addition, the anti-atopic functional test using an IgE- mast cell-dependent passive skin hypersensitivity (PCA) reaction animal model of BALB / c mice, Evans blue dye when treated with iris hydrothermal extract, It was confirmed that the outflow from the blood vessels to the ear tissues, and once again confirmed that there is a therapeutic effect of allergic skin diseases through animal experiments.

상기 결과로부터 창포 추출물은 아토피 피부염에 대한 치료 또는 예방 효과가 있음이 확인되었다. 따라서, 상기 창포 추출물은 알레르기성 피부질환의 치료, 예방 또는 개선을 위한 화장품, 의약품 또는 치료 보조제로 사용될 수 있으며, 상기 알레르기성 피부질환은 일 예로, 아토피 피부염, 알레르기성 피부염, 습진 또는 건선일 수 있다. 창포 추출물이 과립 구성성분 및 사이토카인의 분비를 억제한다는 상기 결과에 의하면 상기 아토피 피부염은 바람직하게는 TH2세포에 의해 유발되는 급성 아토피 피부염일 수 있다.From the above results, it was confirmed that the iris extract has a therapeutic or prophylactic effect against atopic dermatitis. Therefore, the iris extract may be used as a cosmetic, medicine or therapeutic aid for the treatment, prevention or improvement of allergic skin diseases, the allergic skin diseases may be, for example, atopic dermatitis, allergic dermatitis, eczema or psoriasis. have. According to the above result that the iris extract inhibits the secretion of granule constituents and cytokines, the atopic dermatitis may preferably be acute atopic dermatitis caused by TH2 cells.

상기 아토피 피부염 치료 또는 예방용 약학 조성물은 조성물 총 중량에 대하여 상기 유효성분을 0.1 중량% 내지 50 중량%로 포함할 수 있다.The pharmaceutical composition for treating or preventing atopic dermatitis may include 0.1 wt% to 50 wt% of the active ingredient based on the total weight of the composition.

상기 아토피 피부염 치료 또는 예방용 약학 조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더욱 포함할 수 있다.The pharmaceutical composition for treating or preventing atopic dermatitis may further include appropriate carriers, excipients and diluents commonly used in the manufacture of pharmaceutical compositions.

상기 아토피 피부염 치료 또는 예방용 약학 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 제형화될 수 있으며, 바람직하게는 크림, 젤, 패취, 분무제, 연고제, 경고제, 로션제, 리니멘트제, 파스타제 또는 카타플라스마제로 제형화될 수 있으나, 이에 한정하는 것은 아니다.The pharmaceutical composition for treating or preventing atopic dermatitis may be formulated according to a conventional method, respectively, preferably creams, gels, patches, sprays, ointments, warnings, lotions, linings, pasta or cataplasma. It may be formulated to zero, but is not limited thereto.

상기 아토피 피부염 치료 또는 예방용 약학 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 올리고당, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유 등일 수 있다.Carriers, excipients and diluents which may be included in the pharmaceutical composition for treating or preventing atopic dermatitis include lactose, dextrose, sucrose, oligosaccharide, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, acacia rubber, alginate, gelatin , Calcium phosphate, calcium silicate, cellulose, methyl cellulose, microcrystalline cellulose, polyvinyl pyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate, mineral oil and the like.

상기 아토피 피부염 치료 또는 예방용 약학 조성물이 제제화되는 경우에는 통상적으로 사용되는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제 또는 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제가 이용될 수 있다.When the pharmaceutical composition for treating or preventing atopic dermatitis is formulated, conventionally used diluents or excipients such as fillers, extenders, binders, humectants, disintegrating agents or surfactants may be used.

상기 아토피 피부염 치료 또는 예방용 약학 조성물의 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함될 수 있다.Preparations for parenteral administration of the pharmaceutical composition for treating or preventing atopic dermatitis may include sterile aqueous solutions, non-aqueous solvents, suspensions, emulsions, lyophilized preparations, suppositories.

상기 비수성용제 또는 현탁제로는 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 또한, 상기 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈 61(tween 61), 카카오지, 라우린지 또는 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.As the non-aqueous solvent or suspending agent, propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oil such as olive oil, injectable ester such as ethyl oleate, etc. may be used. In addition, as the base of the suppository, witepsol, macrogol, tween 61, cacao butter, laurin butter or glycerogelatin may be used.

상기 아토피 피부염 치료 또는 예방용 약학 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 일 예로, 본 발명의 조성물은 유효성분을 기준으로 1일 0.000001 내지 100 ㎎/㎏으로, 바람직하게는 0.001 내지 10 ㎎/㎏으로 투여할 수 있다. 그러나, 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다. 상기 아토피 피부염 치료 또는 예방용 약학 조성물의 외용투여는 하루에 한번 투여되거나 수 회 나누어 투여될 수도 있다.The preferred dosage of the pharmaceutical composition for treating or preventing atopic dermatitis depends on the condition and weight of the patient, the extent of the disease, the drug form, the route of administration and the duration, and may be appropriately selected by those skilled in the art. For example, the composition of the present invention may be administered at 0.000001 to 100 mg / kg, preferably 0.001 to 10 mg / kg, per day based on the active ingredient. However, the dosage does not limit the scope of the invention in any aspect. External administration of the pharmaceutical composition for treating or preventing atopic dermatitis may be administered once daily or divided several times.

본 발명의 창포 추출물은 과립 구성성분 및 사이토카인과 같은 아토피 체내 유발 물질의 분비를 억제함으로써 아토피 피부염 및 알레르기성 피부질환을 예방 및 개선하는 효과를 가지고 있음을 확인할 수 있었고, 특정 용매를 이용하는 경우 그 효과가 현저하게 상승됨을 확인하였다. 현재까지 뚜렷한 약물이 개발되지 않은 상태에서 독성과 부작용이 없는 것으로 확인된 창포 추출물을 아토피성 피부 및 알레르기성 피부 질환 예방 및 개선에 이용할 수 있다는 점에서 본 발명의 산업적 의의가 있다.Iris extract of the present invention was found to have the effect of preventing and improving atopic dermatitis and allergic skin diseases by inhibiting the secretion of granule components and atopic body causing substances such as cytokines, when using a specific solvent It was confirmed that the effect was significantly increased. There is an industrial significance of the present invention in that the iris extract, which has been found to have no toxicity and side effects in the state where no obvious drug has been developed, can be used for the prevention and improvement of atopic skin and allergic skin diseases.

이상 살펴본 바와 같이, 본 발명의 창포 추출물은 과립 구성성분 및 사이토카인과 같은 아토피 체내 유발 물질의 분비를 억제함으로써 아토피 피부염을 포함한 알레르기성 피부질환을 예방 및 개선하는 효과를 가지고 있을 뿐만 아니라, 상기 창포 추출물의 추출대상인 창포는 독성과 부작용이 없고, 상기 창포 추출물의 제조에 사용되는 용매 또한 일반적으로 안전성이 보장되거나 현재 화장품 등에 사용되는 등 안전성이 보장된 것이므로, 창포 추출물을 포함하는 외용 조성물은 부작용 없이 아토피 피부염을 예방 및 개선할 수 있다는 점에서 산업적 효과가 클 것으로 예상된다.As described above, the iris extract of the present invention not only has the effect of preventing and improving allergic skin diseases including atopic dermatitis by suppressing the secretion of granule components and atopic body causing substances such as cytokines, Since the irises to be extracted of the extract has no toxicity and side effects, and the solvent used in the preparation of the iris extracts is also generally guaranteed for safety or used for cosmetics, the external composition including the iris extract has no side effects. The industrial effect is expected to be large in that it can prevent and improve atopic dermatitis.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 RBL-2H3 세포에서 창포 각 추출물의 세포독성(cytotoxicity)을 측정하여 나타낸 그래프로, 상기 가로축은 추출물의 사용함량이고, 상기 세로축은 아무런 시료를 처리하지 않은 대조군 대비 세포 생존도를 나타낸 것이며, 도 1a은 열수 추출물을 처리한 실험결과를 나타낸 것이고, 도 1b는 부틸렌 글리콜 용매 추출물을 처리한 실험결과를 나타낸 것이며, 도 1c는 헥산 용매 추출물을 처리한 실험결과를 나타낸 것이고, 도 1d는 수증기 증류법에 의한 에센션 오일(정유)를 처리한 실험결과를 나타낸 것이고, 도 1e는 초임계 추출법에 의해 추출한 추출물을 처리한 실험결과를 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 RBL-2H3 세포에서 창포 각 추출물의 탈과립 억제효과를 나타낸 그래프로, 상기 가로축은 DNP-HAS의 사용여부 및 추출물의 사용함량을 나타낸 것으로, -는 미처리를 의미하고, ＋는 처리를 의미하여, 수치는 사용함량(㎍/㎖)을 의미하고, 상기 세로축은 아무런 시료를 처리하지 않은 대조군 대비 β-hexosaminidase의 상대량을 의미하며, A는 열수 추출물을 처리한 실험 결과를 나타낸 것이고, B는 부틸렌 글리콜 용매 추출물을 처리한 실험결과를 나타낸 것이며, C는 헥산 용매 추출물을 처리한 실험결과를 나타낸 것이고, D는 수증기 증류법에 의한 에센션 오일(정유)를 처리한 실험결과를 나타낸 것이고, E는 초임계 추출법에 의해 추출한 추출물을 처리한 실험결과를 나타낸 것이다.
도 3은 본 발명의 본 발명의 일 실시예에 따른 RBL-2H3 세포에서 창포 각 추출물의 IL-4 분비 억제효과를 나타낸 그래프로, 상기 가로축은 DNP-HAS의 사용여부 및 추출물의 사용함량을 나타낸 것으로, -는 미처리를 의미하고, ＋는 처리를 의미하여, 수치는 사용함량(㎍/㎖)을 의미하고, 상기 세로축은 아무런 시료를 처리하지 않은 대조군 대비 IL-4의 상대량을 의미하며, A는 열수 추출물을 처리한 실험결과를 나타낸 것이고, B는 부틸렌 글리콜 용매 추출물을 처리한 실험결과를 나타낸 것이며, C는 헥산 용매 추출물을 처리한 실험결과를 나타낸 것이고, D는 수증기 증류법에 의한 에센션 오일(정유)를 처리한 실험결과를 나타낸 것이고, E는 초임계 추출법에 의해 추출한 에센션 오일(정유)을 처리한 실험결과를 나타낸 것이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 수동 피부 과민(PCA) 반응에서 창포 추출물의 항알레르기 효과를 확인한 결과로, 도 4a는 창포 열수추출물을 실험동물에 처리한 결과를 나타낸 사진이고, 도 4b는 초임계 추출법에 의해 추출한 창포 에센션 오일(정유)을 실험동물에 처리한 결과를 나타낸 사진이며, 도 4c는 상기 창포 열수추출물을 처리한 상기 동물사진을 기초로 에반스 블루 색소(Evans blue dye)의 분출량을 그래프화한 것이고, 도 4d는 상기 초임계 추출법에 의해 추출한 창포 에센션 오일(정유)을 처리한 상기 동물사진을 기초로 에반스 블루 색소(Evans blue dye)의 분출량을 그래프화 한 것이며,상기 도 4에서 -는 미처리를 의미하고, ＋ 는 처리를 의미하며, A1은 창포 열수추출물 1% 처리한 실험군을 의미하고, A5는 창포추출물 5% 처리한 실험군을 의미하며, E1은 초임계 추출법에 의해 추출한 창포 에센션 오일(정유)를 1% 처리한 실험군을 의미하고, E5는 초임계 추출법에 의해 추출한 창포 에센션 오일(정유)를 5% 처리한 실험군을 의미 한다.1 is a graph showing the cytotoxicity (cytotoxicity) of each extract of irises in RBL-2H3 cells according to an embodiment of the present invention, the horizontal axis is the amount of the extract used, the vertical axis is not treated any sample Figure 1a shows the cell viability compared to the control group, Figure 1a shows the experimental results of the hydrothermal extract treatment, Figure 1b shows the experimental results of the butylene glycol solvent extract, Figure 1c treated with the hexane solvent extract Results are shown, Figure 1d shows the experimental results of the treatment of the essential oil (essential oil) by the steam distillation method, Figure 1e shows the experimental results of the extract extracted by the supercritical extraction method.
Figure 2 is a graph showing the degranulation inhibitory effect of each extract of irises in RBL-2H3 cells according to an embodiment of the present invention, the horizontal axis shows the use of DNP-HAS and the content of the extract,-untreated + Means the treatment, the numerical value means the amount used (㎍ / ㎖), the vertical axis means the relative amount of β-hexosaminidase compared to the control group without any sample, A is treated with hydrothermal extract One experimental result is shown, B is the experimental result of the butylene glycol solvent extract treatment, C is the experimental result of the hexane solvent extract treatment, D is the essential oil (essential oil) by steam distillation The experimental results of the treatment are shown, and E represents the experimental results of treatment of the extract extracted by the supercritical extraction method.
Figure 3 is a graph showing the inhibitory effect of IL-4 secretion of each extract of irises in RBL-2H3 cells according to an embodiment of the present invention, the horizontal axis shows the use of DNP-HAS and the content of the extract ,-Means untreated, + means treated, numerical value means the amount used (㎍ / ㎖), the vertical axis means the relative amount of IL-4 compared to the control group not treated any sample, A shows the experimental results of the hydrothermal extract treatment, B is the experimental results of the butylene glycol solvent extract treatment, C is the experimental results of the hexane solvent extract treatment, D is the essen by steam distillation The experimental results of the treatment of Sean oil (essential oil) are shown, and E represents the experimental results of treatment of the essential oil (essential oil) extracted by the supercritical extraction method.
4 is a result of confirming the anti-allergic effect of the iris extract in the manual skin hypersensitivity (PCA) reaction according to an embodiment of the present invention, Figure 4a is a photograph showing the result of processing the iris hot water extract in the experimental animal, Figure 4b Is a photograph showing the result of treating the iris essence oil (essential oil) extracted by the supercritical extraction method to the experimental animal, Figure 4c is Evans blue dye (Evans blue dye) based on the animal photograph treated with the iris hot water extract 4D is a graph showing the ejection amount of Evans blue dye on the basis of the animal photograph treated with the iris essential oil (essential oil) extracted by the supercritical extraction method. In Figure 4,-means untreated, + means the treatment, A1 means the experimental group treated with iris hydrothermal extract 1%, A5 means the experimental group treated with 5% iris extract, E1 is The experimental group treated with 1% of the iris essence oil (essential oil) extracted by the supercritical extraction method, and the E5 means the experimental group treated with 5% of the iris essence oil (essential oil) extracted by the supercritical extraction method.

이하, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시 할 수 있도록 본 발명의 실시예에 대하여 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, embodiments of the present invention will be described in detail so that those skilled in the art can easily practice the present invention. As those skilled in the art would realize, the described embodiments may be modified in various different ways, all without departing from the spirit or scope of the present invention.

실시예Example 1. 창포 추출물의 제조 1. Preparation of Iris Extract

아토피 예방용 조성물의 유효성분 특히, 아토피 예방효과 또는 알레르기 방지 효과가 우수한 최적의 추출물을 확인하기 위하여, 추출용매 및 추출법에 따른 5종의 식물 추출물을 제조하였다.In order to identify the active ingredient of the composition for preventing atopic dermatitis, in particular, the optimal extract with excellent atopic or allergic effects, five kinds of plant extracts according to the extraction solvent and the extraction method were prepared.

상기 식물 추출물의 대상은 창포(Acorus calamus) 는 대한민국 전라북도 완주군 지역에서 생산된 창포의 근경(root)을 구입하여 사용하였다. 추출물의 제조는 상시 구입한 각각의 창포를 수분함량 10% 이하로 건조시킨 후, 마쇄하여 분말을 제조하였다. 상기 창포 근경의 분말에 대해 추출용매를 가하여 추출물을 제조하였다.The target of the plant extract is Acorus calamus ) was used to purchase roots of irises produced in Wanju-gun, Jeollabuk-do, Korea. In the preparation of the extract, each irises, which were always purchased, were dried to 10% or less of water content, and then ground to prepare a powder. An extractant was added to the powder of Iris root to prepare an extract.

보다 구체적으로, 상기 창포 열수 추출물은 창포 근경을 음건하 후, 0.5 cm 이하로 분쇄한 분쇄물(분말) 600 g에 물(정제수) 4 L를 가하고, 5시간 동안 105℃에서 열수추출하여 제조하였다. 상기 창포 부틸렌 글리콜(1,3-Butylene Glycol) 추출물은 창포 근경 분쇄물(분말) 600 g에 30% 부틸렌글리콜 용액 4 kg를 가하고, 초음파 추출기(Branson 2510(Bransonic Ultrasonic))를 이용하여 42 Hz에서 4시간 동안 초음파 추출을 수행한 후, 상기 초음파 추출한 추출물을 15℃에서 7일간 침지하여 추출함으로써 초음파 추출하여 제조하였다. 상기 창포 헥산 추출물은 창포 근경 분쇄물(분말) 10 g에 200 ml의 헥산을 가한 후, 초음파 추출기(Branson 2510(Bransonic Ultrasonic))를 이용하여 42 Hz에서 4시간 동안 초음파 추출을 수행한 후, 상기 초음파 추출한 추출물을 15℃에서 24시간 동안 3회 반복 교반 추출함으로써 초음파 추출하여 제조하였다. 각 추출물을 여과지(Whatman No.2)를 이용하여 여과과정을 수행하였다. 이후, 회전진공 증발기(Rotary evaporator, Eyela N-1000)을 이용하여 감압조건 및 45℃ 조건에서 증발건조하여 제조하였다. More specifically, the irises hot water extract was prepared by drying the irises root diameter, adding 4 liters of water (purified water) to 600 g of the ground powder (powder) pulverized to 0.5 cm or less, and hot water extraction at 105 ℃ for 5 hours. . The extract of Iris butylene glycol (1,3-Butylene Glycol) was added to 600 g of Iris root pulverized powder (powder) and 4 kg of 30% butylene glycol solution, using an ultrasonic extractor (Branson 2510 (Bransonic Ultrasonic)). After performing ultrasonic extraction for 4 hours at Hz, the ultrasonic extract was prepared by ultrasonic extraction by soaking for 7 days at 15 ℃ extract. The iris extract was added 200 ml of hexane to 10 g of iris root pulverized powder (powder), and then ultrasonically extracted at 42 Hz for 4 hours using an ultrasonic extractor (Branson 2510 (Bransonic Ultrasonic)). Ultrasonic extraction extract was prepared by ultrasonic extraction by repeated stirring extraction three times at 15 ℃ for 24 hours. Each extract was filtered using filter paper (Whatman No. 2). Thereafter, using a rotary evaporator (Rotary evaporator, Eyela N-1000) was prepared by evaporation to dry under reduced pressure and 45 ℃ conditions.

상기 수증기증류법에 의한 창포 에센션 오일은 창포 근경 분쇄물(분말) 600 g에 물(정제수) 4 L를 가하고, 5시간 동안 105℃에서 추출한 후, 상기 창포 추출액을 고농 농축하여 증류액을 제거한 후, 농축액을 수득하는 방법으로 제조하였다.The steam essence oil by the steam distillation method was added 4 L of water (purified water) to 600 g of iris root pulverized powder (powder), extracted at 105 ° C. for 5 hours, and then the iris extract was concentrated in high concentration to remove distillate. It was prepared by the method of obtaining a concentrate.

상기 초임계유체를 이용한 상기 창포 근경 분쇄물(분말) 600 g을 초임계 추출기(R201, Reaction Engineering)를 이용하여 30 bar의 이산화탄소(CO₂)로 초임계 추출을 3시간 동안 수행하였다. 상기 초임계 추출을 수행한 초임계 추출액에서 왁스성분을 제거하고, 저온 여과하여 오일만 수득하였다.
The supercritical fluid 600 g of the calamus pulverized powder (powder) was subjected to supercritical extraction for 30 hours with 30 bar of carbon dioxide (CO ₂ ) using a supercritical extractor (R201, Reaction Engineering). The wax component was removed from the supercritical extract, which was subjected to the supercritical extraction, and cold filtered to obtain only oil.

<< 실시예Example 2> 창포 추출물의 효능  2> Efficacy of Iris Extract 측정1Measurement 1

상기 실시예 1에서 제조한 창포 추출물의 항 아토피 효능을 확인하기 위하여, 세포 실험(in vitro)을 통해 탈과립 억제효과 및 사이토카인 분비 억제 효과를 확인하였으며, 이러한 실험의 전 단계에서 세포 독성 실험을 수행하였다.
In order to confirm the anti-atopic efficacy of the iris extract prepared in Example 1, cell experiment ( in In vitro ), degranulation inhibitory effect and cytokine secretion inhibitory effect were confirmed, and cytotoxicity experiments were performed at all stages of the experiment.

실시예Example 2-1. 실험 재료 2-1. Experimental material

하기 세포 실험에 사용된 최소필수배지(minimum essential medium, MEM)는 Thermo scientific에서 구입하였고, anti-DNP-HSA IgE, DNP-HSA(dinitrophenyl-human serum albumin), evans blue는 Sigma Aldrich(USA)에서 구입하였으며, IL-4 ELISA kit는 BD biosciences에서 구입하였다. The minimum essential medium (MEM) used for the following cell experiments was purchased from Thermo scientific, anti-DNP-HSA IgE, DNP-HSA (dinitrophenyl-human serum albumin), and evans blue from Sigma Aldrich (USA). The IL-4 ELISA kit was purchased from BD biosciences.

세포 실험을 위해 사용된 RBL(rat basophil leukemia)-2H3 세포는 10% FBS(fetal bovine serum), 1% antibiotics가 포함된 최소필수배지를 이용하여 37℃ 및 5% CO₂조건의 인큐베이터(incubator)에서 배양하였다. 상기 RBL-2H3 세포는 1×10⁶개의 세포를 cell culture dish(100π)에 계대배양하였다.
Rat basophil leukemia (RBL) -2H3 cells used for cell experiments were incubated at 37 ° C and 5% CO ₂ with minimal essential medium containing 10% fetal bovine serum (FBS) and 1% antibiotics. Incubated at. The RBL-2H3 cells were subcultured with 1 × 10 ⁶ cells in a cell culture dish (100π).

2-2. 세포 독성 측정(2-2. Cytotoxicity measurement ( MTTMTT assayassay ))

DNP-HSA로 자극된 RBL-2H3 세포에서 창포 각 추출물 처리가 세포 생존능력에 미치는 영향을 알아보기 위해서 MTT assay를 수행하였다. 상기 MTT assay는 탈수소효소(dehydrogenase)작용에 의하여 노란색의 수용성기질인 MTT tetrazolium을 청자색을 띄는 비수용성의 MTT formazan(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazoliumbromide)으로 환원시키는 미토콘드리아의 능력을 이용하는 검사법이다.MTT assay was performed to determine the effect of iris extract on cell viability in DBL-HSA stimulated RBL-2H3 cells. The MTT assay is a water-insoluble MTT formazan (3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyl-tetrazoliumbromide that has a blue purple color of MTT tetrazolium, a yellow water-soluble substrate by dehydrogenase action). This test uses the ability of the mitochondria to reduce to).

상기 RBL-2H3 세포를 96 well plate에 1×10⁴ cells/well로 분주한 다음 4시간 동안 안정화시켰다. 각각의 sample을 용매 추출물의 경우 DMSO(ml)에 녹이고, 에센션 오일은 상기 세포 배양배지와 동일한 조성의 배지에 혼합하여 농도(㎍/ml) 별로 처리한 후, 동일한 조건으로 24시간 동안 배양하였다. 배지를 제거한 후 각 well 당 0.5 mg/ml 농도의 MTT(3-(4,5-Dimethyl-thiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide)를 100㎕씩 첨가하고 4시간 동안 배양하였다. 상기 MTT를 제거하고 DMSO 200㎕씩 첨가한 후, 세포에 생성된 MTT formazan이 잘 용해되도록 교반기를 이용하여 10분 동안 교반 시켰다. 상기 교반이 끝난 후 ELISA reader로 540nm에서 흡광도를 측정하여, 그 결과를 도 1에 나타내었다.The RBL-2H3 cells were dispensed into 1 × 10 ⁴ cells / well in 96 well plates and then stabilized for 4 hours. Each sample was dissolved in DMSO (ml) in the case of a solvent extract, and the essential oil was mixed in a medium having the same composition as the cell culture medium and treated by concentration (占 // ml), followed by incubation for 24 hours under the same conditions. . After removing the medium, 100 μl of MTT (3- (4,5-Dimethyl-thiazol-2-yl) -2,5-diphenyl-tetrazolium bromide) at a concentration of 0.5 mg / ml was added to each well and incubated for 4 hours. It was. After removing the MTT and added 200μL each of DMSO, it was stirred for 10 minutes using a stirrer to dissolve the MTT formazan produced in the cells. After the stirring was completed, the absorbance was measured at 540 nm with an ELISA reader, and the results are shown in FIG. 1.

상기 도 1에 나타낸 바와 같이, 열수 추출물의 경우, 10 ㎍/ml 이하에서 세포 독성이 없음을 확인하였고, 부틸렌 글리콘 추출물의 경우 5 ㎍/ml 이하에서 세포 독성이 없음을 확인하였으며, 헥산 추출물의 경우 25 ㎍/ml 이하에서 세포 독성이 없음을 확인하였고, 에센션 오일의 경우 10 ㎍/ml 이하에서 세포 독성이 없음을 확인하였으며, 초임계 추출물의 경우 50 ㎍/ml 이하에서 세포 독성이 없음을 확인하였다.
As shown in FIG. 1, in the case of hot water extract, it was confirmed that there was no cytotoxicity at 10 μg / ml or less, and in the case of butylene glycon extract, it was confirmed that there was no cytotoxicity at 5 μg / ml or less, and the hexane extract It was confirmed that there is no cytotoxicity at 25 ㎍ / ml or less, and no cytotoxicity at 10 ㎍ / ml or less for essential oils, and no cytotoxicity at 50 ㎍ / ml or less for supercritical extracts. It was confirmed.

2-3. 창포 추출물의 2-3. Of iris extract 탈과립Degranulation 억제능Inhibitory ability 측정 1(β- Measurement 1 (β- hexosaminidasehexosaminidase assayassay ))

호염구와 비만세포는 탈과립 유도자(degranulation inducer)나 IgE에 항원 (antigen)의 교차결합(crosslinking) 등에 의해 자극되면 탈과립을 통해 히스타민을 분비하여 즉시형 과민반응, 알레르기를 일으키게 된다. β-hexosaminidase도 히스타민과 함께 세포에서 분비되는 과립 구성성분으로 호염구와 비만세포의 탈과립 지표로 사용된다.When basophils and mast cells are stimulated by degranulation inducers or IgE by crosslinking of antigens, they secrete histamine through degranulation, causing immediate hypersensitivity and allergy. β-hexosaminidase is also a granule component secreted by cells along with histamine and is used as a degranulation indicator for basophils and mast cells.

본 실시예에서는 항아토피 피부염으로 가능성이 있는 창포 추출물을 찾기 위해 RBL-2H3 탈과립 억제효과를 β-hexosaminidase assay를 이용하여 확인하였다. 각 추출물의 농도는 세포독성 없는 농도로 처리하여 억제효과를 알아보았다.In this example, the inhibitory effect of RBL-2H3 degranulation was confirmed by β-hexosaminidase assay in order to find an extract of irises likely to be anti-atopic dermatitis. The concentration of each extract was treated with a concentration without cytotoxicity to determine the inhibitory effect.

보다 구체적으로, 상기 RBL-2H3을 최소필수배지에 현탁 시킨 후, anti-DNP-HSA IgE(70ng/ml 최종농도)를 넣고, 24 well plate에 2.5×10⁵ cell/well로 분주한 다음, 37℃ 및 5% CO₂ 조건의 인큐베이터에서 7시간 배양해 감작시켰다. 각 well의 세포들을 Siraganian buffer(NaCl 119 mM, KCl 5 mM, Glucose 5.6 mM, MgCl₂ (6H₂O) 0.4mM, PIPES 25 mM, NaOH 40 mM, CaCl₂ 1mM, pH 7.2)로 2번 세척한 다음, 각 well당 200 ㎕ Siraganian buffer와 sample을 농도 별로 처리하였다. 상기 sample은 실시예 1에서 제조된 추출물과 에센셜 오일을 용매 추출물의 경우 DMSO(ml)에 녹이고, 에센션 오일은 상기 세포 배양배지와 동일한 조성의 배지에 혼합하여 각 농도 별로 제조하였다.More specifically, after suspending the RBL-2H3 in the minimum essential medium, add anti-DNP-HSA IgE (70 ng / ml final concentration), and divided into 2.5 × 10 ⁵ cell / well in a 24 well plate, 37 The cells were incubated for 7 hours in an incubator at 5 ° C. and 5% CO ₂ . Cells in each well were washed twice with Siraganian buffer (NaCl 119 mM, KCl 5 mM, Glucose 5.6 mM, MgCl ₂ (6H ₂ O) 0.4 mM, PIPES 25 mM, NaOH 40 mM, CaCl ₂ 1 mM, pH 7.2). Next, 200 μl Siraganian buffer and sample were treated per concentration. The sample was prepared in each concentration by dissolving the extract and essential oil prepared in Example 1 in DMSO (ml) in the case of a solvent extract, the essential oil was mixed in a medium of the same composition as the cell culture medium.

상기 처리 후, 30분 동안 반응시키고, DNP-HSA(25 ng/ml 최종농도)를 사용하여 세포를 15분 동안 반응시킨 후, ice bath에서 10분간 인큐베이션(incubation)시켜 반응을 종결시켰다. 상층액 150 ㎕를 튜브로 옮겨 3000 rpm에서 3분 동안 원심분리한 후, 30 ㎕를 96 well plate로 옮기고, substrate buffer(4-p-Nitrophenyl-N-acetyl-β-D-glucosaminide 1mM, 0.1M citrate buffer, pH 4.5) 30 ㎕를 넣고 37℃에서 1시간 동안 반응 시킨 후, 각 well 당 stop solution(0.1M NaHCO₃) 250 ㎕를 첨가하여 반응을 정지시켰다. 반응을 정지시킨 후, ELISA reader를 사용하여 405 nm에서 흡광도를 측정하였다. 시료와 대조군의 흡광도 값으로 하기 계산식에 의해 탈과립 정도(degranulation percent(%))를 계산하였다. 상기 계산된 측정값을 도 2에 나타내었다.After the treatment, the reaction was performed for 30 minutes, the cells were reacted for 15 minutes using DNP-HSA (25 ng / ml final concentration), and then the reaction was terminated by incubation for 10 minutes in an ice bath. Transfer 150 μl of the supernatant to the tube, centrifuge at 3000 rpm for 3 minutes, transfer 30 μl to a 96 well plate, and remove the substrate buffer (4-p-Nitrophenyl-N-acetyl-β-D-glucosaminide 1 mM, 0.1 M). 30 μl of citrate buffer, pH 4.5) was added and reacted at 37 ° C. for 1 hour. Then, 250 μl of stop solution (0.1M NaHCO ₃ ) was added to each well to stop the reaction. After stopping the reaction, the absorbance was measured at 405 nm using an ELISA reader. Degranulation percent (%) was calculated by the following formula as absorbance values of the sample and the control group. The calculated measured value is shown in FIG. 2.

[계산식] [formula]

탈과립 퍼센트(degranulation percent(%)) = Degranulation percent (%) =

(sample 처리군 OD 값 - blank OD 값) / (control OD 값 - blank OD 값)×100(sample treatment group OD value-blank OD value) / (control OD value-blank OD value) × 100

상기 도 2에 나타낸 바와 같이, 창포 추출물의 경우, 대부분 탈과립 억제능을 가지는 것으로 확인되었다. 보다 구체적으로 창포 헥산 추출물의 경우 RBL-2H3세포에서 β-hexosaminidase 분비를 억제하지 못하는 것으로 확인된 반면, 부틸렌 글리콜의 경우, 2.5 ㎍/ml를 사용한 경우에도 다른 추출물과 달리 탈과립 억제능을 수행할 수 있는 것으로 확인하여, 다른 추출용매에 비해 부틸렌 글리콜을 사용한 경우 탈과립 억제능이 우수한 것으로 확인되었고, 열수 추출물의 경우에도 다른 용매에 비하여 탈과립 억제능이 우수한 것으로 확인되었다.
As shown in FIG. 2, in the case of the iris extract, it was confirmed that most of them have a degranulation inhibitory ability. More specifically, the extract of iris hexane did not inhibit β-hexosaminidase secretion in RBL-2H3 cells, while in the case of butylene glycol, it was possible to inhibit degranulation unlike other extracts even when using 2.5 ㎍ / ml. As a result, it was confirmed that the degranulation inhibitory ability was excellent in the case of using butylene glycol in comparison with the other extraction solvents, and also in the case of hot water extracts, it was confirmed that the degranulation inhibitory ability was superior to other solvents.

2-4. 창포추출물의 사이토카인(2-4. Cytokines from Iris Extracts ILIL -4) 분비 -4) secretion 억제능Inhibitory ability 측정 Measure

인터루킨-4(Interleukin-4, IL-4)는 주로 CD4+ T세포 중, TH2 세포에 의해 생산되는 사이토카인으로, 기능은 미감작 CD4+ 전구세포로부터 TH2 세포의 분화를 유도하며, B 세포에 의한 IgE 생산 자극 및 IFN-γ의존적 큰포식세포 기능의 억제 등이 있다.Interleukin-4 (IL-4) is a cytokine produced by TH2 cells, mainly among CD4 + T cells, and its function induces differentiation of TH2 cells from naïve CD4 + progenitor cells, and IgE by B cells. Production stimulation and inhibition of IFN- [gamma] -dependent macrophage function.

본 실시예에서 창포추출물의 사이토카인 분비 억제능은 ELISA kit를 이용하여, IL-4의 분비억제능을 확인함으로써 수행하였다.In this example, the cytokine secretion inhibitory ability of the iris extract was performed by confirming the secretion inhibitory ability of IL-4 using an ELISA kit.

보다 구체적으로, RBL-2H3 세포를 최소필수배지에 현탁 시킨 후, anti-DNP-HSA IgE(70ng/ml 최종농도)를 넣고 24 well plate에 1×10⁵ cell/well 로 분주한 다음 37℃ 및 5% CO₂ incubator에서 4시간 배양해 감작시켰다. DNP-HSA 자극 후 4시간째에 세포배양 상층액을 모아 IL-4 정량을 위한 ELISA를 시행하였다. Sandwich ELISA용 96 well plate(Nunc, Denmark)에 Rat anti-IL-4(BD biosciences)를 넣고 4℃에서 밤새 반응 시킨 후, 차단용액(5% skim milk / 0.05% Tween20)이 함유된 phosphate buffered saline(PBS)를 첨가하여 실온에서 2시간 반응시켰다. 이후, IL-4 standard와 배양 상층액을 넣고 2시간 반응 시킨 후 detection antibody(1:250) 및 Av-HRP(1:250)를 2% skim milk 포함된 PBS-T에 1시간 반응시켰다. 이후, tetramethylbenzidine substrate solution 넣고 반응 시킨 다음, 2N H₂SO₄로 반응을 정지시키고, ELISA reader로 450 nm에서 흡광도를 측정하였으며, 그 결과를 도 3에 나타내었다.More specifically, after suspending RBL-2H3 cells in the minimum essential medium, add anti-DNP-HSA IgE (70 ng / ml final concentration) and dispense in 1 × 10 ⁵ cell / well in a 24 well plate and 37 ℃ and Incubated for 4 hours in a 5% CO ₂ incubator. Four hours after DNP-HSA stimulation, cell culture supernatants were collected and subjected to ELISA for IL-4 quantification. Rat anti-IL-4 (BD biosciences) was added to a 96 well plate for sandwich ELISA (Nunc, Denmark) and reacted at 4 ° C. overnight, followed by phosphate buffered saline containing blocking solution (5% skim milk / 0.05% Tween20). (PBS) was added and reacted at room temperature for 2 hours. Thereafter, the reaction mixture was added to the IL-4 standard and the culture supernatant for 2 hours, and then reacted with detection antibody (1: 250) and Av-HRP (1: 250) to PBS-T containing 2% skim milk for 1 hour. Thereafter, the reaction was added with tetramethylbenzidine substrate solution, the reaction was stopped with 2N H ₂ SO ₄ , and the absorbance was measured at 450 nm with an ELISA reader, and the results are shown in FIG. 3.

상기 도 3에 나타낸 바와 같이, 창포 추출물의 경우, 대부분 사이토카인 분비 억제능을 나타나지 못하였다. 보다 구체적으로, 창포 헥산 추출물이나 초임계 추출물의 경우 RBL-2H3세포에서 사이토카인의 분비를 억제하지 못하는 것으로 확인된 반면, 부틸렌 글리콜의 경우, 2.5 ㎍/ml를 사용한 경우에도 다른 추출물과 달리 탈과립 억제능을 수행할 수 있는 것으로 확인하여, 다른 추출용매에 비해 부틸렌 글리콜을 사용한 경우 탈과립 억제능이 우수한 것으로 확인되었다.
As shown in FIG. 3, in the case of the iris extract, most of them did not show cytokine secretion inhibitory ability. More specifically, in the case of iris extract or supercritical extract, it was confirmed that RBL-2H3 cells did not inhibit cytokine secretion, whereas in the case of butylene glycol, degranulated unlike other extracts even when 2.5 ㎍ / ml was used It was confirmed that the inhibitory activity can be performed, and when the butylene glycol was used as compared to other extracting solvents, it was confirmed that the degranulation inhibitory ability was excellent.

<< 실시예Example 3> 창포 추출물의 효능  3> Efficacy of Iris Extract 측정2Measurement 2

상기 실시예 1에서 제조한 창포 추출물의 항 아토피 효능을 확인하기 위하여, 수동 피부 과민(passive cutaneous anaphylaxis, PCA) 반응 동물모델을 이용하여 동물 실험(in vivo)을 통해 아토피 개선 또는 예방 효과를 확인하였다.In order to confirm the anti-atopic efficacy of the iris extract prepared in Example 1, animal experiments using a passive cutaneous anaphylaxis (PCA) reaction animal model ( in In vivo ) confirmed the effect of atopy improvement or prevention.

구체적으로, 아토피 피부염 초기단계 반응에 관련되는 히스타민(histamine)이나 헤파린(heparin)등과 같은 매개 물질들은 혈관 투과성 증가, 기관지 수축, 장 과다운동, 조직 상해 또는 초기 염증반응을 유도한다. 이와 관련하여, 항원을 투여하는 경우, 항원에 의한 유도된 매개 물질이 혈관 투과성을 증가시켜, 투여된 evans blue가 혈관으로부터의 유출을 현저히 증가하게 된다. 따라서, 실험동물을 이용하여, 항원자극에 의한 귀 조직으로의 evans blue의 유출 정도를 확인함으로써, 염증반응의 억제 즉, 항아토피 활성을 확인할 수 있다. 따라서, 수동 피부 과민 반응 동물모델을 이용하여 동물 실험을 통해 아토피 개선 또는 예방 효과를 확인하였다.Specifically, mediators such as histamine or heparin, which are involved in the early stages of atopic dermatitis, induce increased vascular permeability, bronchial contraction, intestinal hypermotility, tissue injury or early inflammatory responses. In this regard, when the antigen is administered, the mediator induced by the antigen increases vascular permeability such that the administered evans blue significantly increases the outflow from the blood vessel. Therefore, by using an experimental animal, it is possible to confirm the inhibition of the inflammatory response, that is, the anti-atopic activity, by checking the degree of evans blue leakage into the ear tissue by antigen stimulation. Therefore, animal skin tests using a manual skin sensitization animal model confirmed the atopic improvement or prevention effect.

우선, 실험에 사용된 실험동물은 6 주령 내지 7 주령이고 무게가 20 g 내지 22 g인 암컷 BALB/c 마우스를 나라 바이오텍(주)로부터 공급받아 사용하였다. 상기 실험동물의 사육은 22±2℃의 온도조건, 상대습도 60±5%의 습도조건 및 12시간 주기의 명암을 유지시킨 주광조건에서 멸균된 깔집을 깔리 사육 케이지를 이용하여 사육하였고, 1주일간 적응시킨 후 실험에 사용하였다. 상기 적응기간 동안, 멸균된 고형사료와 물은 자유로이 섭취시켰다. 상기 실험동물은 동일한 조건에서 적응시킨 후, 각 실험군마다 5마리씩 구분하여 총 25마리를 이용하여 실험을 수행하였다.First, the experimental animals used for the experiment were 6 to 7 weeks old and female BALB / c mice weighing 20 g to 22 g were used from Nara Biotech Co., Ltd. The experimental animals were bred using a cage sterilized with a sterilized rug under a temperature condition of 22 ± 2 ° C., a relative humidity of 60 ± 5% and a daylight condition of 12 hours of contrast. Adapted and used for experiment. During the adaptation period, the sterilized solid feed and water were freely ingested. After adapting the experimental animals under the same conditions, the experiment was performed using a total of 25 dogs divided by 5 for each experimental group.

상기 수동 피부 과민 반응 동물모델에 대해 창포 열수 추출물 및 초임계유체 추출법에 의한 에센셜 오일이 IgE-비만세포 의존성 수동 피부 과민 반응 동물모델에서 항아토피 활성을 확인하였다. 보다 구체적으로, anti-DNP IgE를 0.5㎍/30㎕ 농도로 희석한 희석액 30㎕를 피내주사하여 국소 비만세포를 감작시키고 23시간이 경과한 후, 상기 실험 동물의 귀에 상기 추출물을 DMSO를 이용하여 1% 또는 5%로 희석한 희석액을 귀에 발라주었다. 대조군 실험동물의 경우, 항히스타민제인 Azelastine를 DMSO를 이용하여 1%로 희석한 희석액을 귀에 발라주었다. 이후, 상기 추출물 또는 항히스타민제를 발라주고 1시간이 경과한 다음, 2% evans blue 용액과 DNP-HSA를 phosphate-buffered saline(PBS)에 100㎍/㎕의 농도로 희석한 항원 용액을 1:1로 섞은 용액을 꼬리에 정맥주사하여 주입하여 수동 피부 과민 반응을 유도하였다. 상기 유도한 결과, 측정한 결과를 확인한 사진을 도 5a 및 도 5b에 나타내었다. 또한, 상기 사진 촬영 후, 희생시킨 실험동물의 귀에 반응이 일어난 부위를 동일한 크기로 잘라 200㎕ formamide를 첨가하고 64℃에서 evans blue를 추출하였다. 상기 추출된 evans blue의 양을 spetrophotometer를 이용하여 650 nm에서 흡광도를 측정하여 확인하였다. 상기 측정된 흡광도를 항히스타민제를 처리한 대조군과 비교하여 계산함으로써, evans blue 색소의 혈관으로부터의 귀조직으로 유출 정도 즉, 항아토피 활성을 확인하여 도 5c 및 도 5d에 나타내었다.Essential oils by iris hydrothermal extract and supercritical fluid extraction method were confirmed in the passive skin hypersensitivity animal model and anti-atopic activity was confirmed in IgE- mast cell dependent passive skin hypersensitivity animal model. More specifically, 30 μl of a dilution diluted with 0.5 μg / 30 μl of anti-DNP IgE was injected intravenously to sensitize local mast cells, and after 23 hours, the extract was added to the ear of the experimental animal using DMSO. Dilutions diluted to 1% or 5% were applied to the ears. In the control experimental animals, a dilution of 1% of Azelastine, an antihistamine, was applied to the ears using DMSO. Then, after applying the extract or antihistamine for 1 hour, the antigen solution diluted with 100% / μl of 2% evans blue solution and DNP-HSA in phosphate-buffered saline (PBS) 1: 1 Was injected intravenously into the tail to induce passive skin hypersensitivity. As a result of the derivation, photographs confirming the measurement results are shown in FIGS. 5A and 5B. In addition, after the photographing, the portion of the reaction occurred in the ear of the sacrificed experimental animal was cut to the same size, 200μl formamide was added, and evans blue was extracted at 64 ° C. The amount of the extracted evans blue was confirmed by measuring absorbance at 650 nm using a spetrophotometer. By measuring the measured absorbance compared to the control group treated with antihistamine, the degree of leakage of the evans blue pigment from the blood vessels to the ear tissue, that is, to confirm the anti-atopic activity is shown in Figure 5c and 5d.

상기 도 5a 내지 도 5d에 나타낸 바와 같이, 실험예 2에서 항아토피 활성이 확인된 창포 추출물을 이용한 경우 실험동물을 이용한 실험에서도 항아토피 활성이 있는 것이 확인되었다. 보다 구체적으로, 창포 열수 추출물을 사용한 도 5c 및 창포 에센션 오일을 사용한 5d 모두 농도 의존적으로 항원자극에 의한 귀 조직으로부터 evans blue의 유출량을 감소시키는 것이 확인되었으며, 각각 1%의 추출물을 사용한 경우에 약 40% 정도의 evans blue의 유출량을 감소시켜, 약 70% 정도의 evans blue의 유출량을 감소시킨 기존 항히스타민제로 사용되는 화합물인 Azelastine에 대등한 항아토피 활성이 확인되었다.
As shown in FIG. 5A to FIG. 5D, when the iris extract of which anti-atopic activity was confirmed in Experimental Example 2 was found to have anti-atopic activity even in experiments using experimental animals. More specifically, it was confirmed that both Figure 5c using the iris hydrothermal extract and 5d with the iris essence oil reduced the outflow of evans blue from the ear tissue due to antigenic stimulation, respectively, when 1% of the extract was used. The anti-atopic activity of Azelastine, a compound used as an antihistamine, reduced the evans blue effluent by about 40% and reduced the evans blue effluent by about 70%.

Claims (4)

창포(Acorus calamus) 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 예방 또는 개선용 화장료 조성물.Calamus (Acorus calamus ) Atopic dermatitis prevention or improvement cosmetic composition comprising an extract as an active ingredient. 제1항에 있어서, 상기 창포 추출물은 용매 추출법에 의해 제조된 용매 추출물인 아토피 피부염 예방 또는 개선용 화장료 조성물.The cosmetic composition for preventing or improving atopic dermatitis according to claim 1, wherein the iris extract is a solvent extract prepared by a solvent extraction method. 제2항에 있어서, 상기 용매 추출물은 물 및 부틸렌 글리콜로 이루어진 군 중에서 선택된 어느 하나의 용매를 이용하여 제조한 것인 아토피 피부염 예방 또는 개선용 화장료 조성물.The cosmetic composition for preventing or improving atopic dermatitis according to claim 2, wherein the solvent extract is prepared using any one solvent selected from the group consisting of water and butylene glycol. 창포 추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염 치료 또는 예방용 약학 조성물.
Atopic dermatitis treatment or prevention pharmaceutical composition comprising iris extract as an active ingredient.

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