KR20110087920A

KR20110087920A - Solid-type seed medium for tricholoma matsutake and method for cultivating tricholoma matsutake using the same

Info

Publication number: KR20110087920A
Application number: KR1020100007574A
Authority: KR
Inventors: 이수용; 신봉현; 박종범
Original assignee: 이수용; 박종범; 신봉현
Priority date: 2010-01-27
Filing date: 2010-01-27
Publication date: 2011-08-03
Also published as: KR101169751B1

Abstract

PURPOSE: A solid medium for cultivating tricholoma matsutake and a cultivation method of the tricholoma matsutake using thereof are provided to improve the germination rate of the tricholoma matsutake. CONSTITUTION: A cultivation method of tricholoma matsutake using a solid medium comprises the following steps: obtaining spores from the tricholoma matsutake, and cultivating the spores in a potato dextrose agar medium at 20-25deg C for 30-70days for obtaining tricholoma matsutake mycelia; injecting the tricholoma matsutake mycelia into a first liquid medium and cultivating at 20-25deg C for 30-70days to obtain a first culture product; injecting the first culture product into a second liquid medium, and cultivating at 20-25deg C for 30-70days to obtain a second culture product; injecting the second culture product to the solid medium, and cultivating at 20-25deg C for 45-120days to obtain solid spawns; and injecting the solid spawns to pine trees, and cultivating for 120-180days.

Description

송이재배용 고체종균배지 및 그를 이용한 송이의 재배방법{Solid-type Seed Medium for Tricholoma matsutake and Method for Cultivating Tricholoma matsutake Using the Same}Solid-type Seed Medium for Tricholoma matsutake and Method for Cultivating Tricholoma matsutake Using the Same}

본 발명은 송이재배용 고체종균배지 및 그를 이용한 송이의 재배방법에 관한 것이다. 좀 더 구체적으로, 본 발명은 송이재배용 고체종균배지 및 송이의 포자를 배양하여 송이 균사체를 수득하고, 이를 송이재배용 고체종균배지에 접종배양하여 고체종균을 수득한 다음, 상기 고체종균을 소나무뿌리에 이식하고 재배하는 단계를 포함하는 송이의 재배방법에 관한 것이다.
The present invention relates to a solid seed culture medium for cultivation of pine mushroom and a cultivation method of the cluster using the same. More specifically, the present invention is obtained by cultivating pine seedlings and cultivated spores of the pine seedlings to obtain the mycelium mycelium, and inoculated and cultured in the pine seedlings seedling medium to obtain a solid seed, the solid seedlings in the pine roots It relates to a method of cultivating a cluster comprising the steps of transplanting and cultivating.

송이(pine mushroom, Tricholoma matsutake)는 적송림 토양에서 생육하는 버섯으로, 맛과 향기가 뛰어나 우리나라와 중국과 일본 등지에서 선호되고 있다. 또한, 송이에 포함된 에르고스테롤(ergosterol)은 고혈압 저해, 항산화 활성 및 항암작용을 나타내는 것으로 알려져, 약리활성을 가지는 식품으로도 널리 보급되어 왔다.Pine mushroom (pine mushroom, Tricholoma matsutake) is a mushroom that grows in red pine forest, and it is preferred in Korea, China, and Japan because of its excellent taste and aroma. In addition, ergosterol contained in the cluster is known to exhibit hypertension inhibition, antioxidant activity and anticancer activity, has been widely used as a food having pharmacological activity.

송이는 포자를 이용하여 번식하는데, 소나무 근처에서 발아된 송이의 포자가 균사를 형성한 다음, 소나무의 잔뿌리에 착생하면, 균사가 착생된 소나무의 잔뿌리는 백색 또는 담황색에서 흑갈색으로 색이 변하면서 균근을 형성하게 된다. 상기 균근은 땅 속에서 방석 모양으로 생육 번식하면서 백색의 뜸(소집단)을 형성하며 고리 모양으로 둥글게 퍼져 나가는데, 땅위에서 볼때는 소나무를 중심으로 환을 형성하는 것이 육안으로 관찰되므로, 이를 균환(菌環)이라 한다. 균환의 땅속 온도가 5∼7일간 19℃ 이하로 지속되면, 균사로부터 자실체인 송이의 원기가 형성되어, 땅위로 성장하게 되고, 성장이 종료되면 상기 원기는 송이가 된다. 이때, 송이의 포자로부터 형성된 균사는 생육에 필요한 영양성분을 소나무의 뿌리로부터 공급받음과 동시에 토양으로부터 각종 무기물을 흡수하고 이를 소나무 뿌리로 전달하므로, 송이가 성장하기 위하여는 살아있는 소나무의 잔뿌리를 반드시 필요로 하여, 종래의 인공적인 버섯재배방법으로는 송이를 재배할 수 없었다. The cultivars grow using spores. When the spores germinated near pines form mycelia, and then grow on the roots of pines, the roots of pines with mycelia grow from white or pale yellow to blackish brown. Will form. The mycorrhizal grows in the shape of a cushion in the ground and forms white moxibustion (small groups) and spreads in a ring shape. I) When the ground temperature of the fungus is kept below 19 ° C. for 5 to 7 days, the roots of clusters of fruiting bodies are formed from mycelia and grow on the ground. When the growth ends, the clusters become clusters. At this time, the mycelia formed from the spores of the cluster receive nutrition from the roots of pine and at the same time absorb various minerals from the soil and transfer them to the pine roots. As a result, the mushrooms could not be grown by the conventional artificial mushroom cultivation method.

이에, 살아있는 소나무와 인용배양된 송이종균을 이용하여 송이를 인공적으로 재배하는 방법이 개발되어 왔다. 예를 들어, 특허등록 제 390048호에는 자연산 송이버섯의 자실체에서 분리된 송이균주에 펄라이트, 스페그넘 피트모스의 혼합 상토와 K-액상배지를 가하고, 소나무 종자를 무균 발아시켜 얻은 무균 발아묘를 상기 혼합 상토에 치상한 다음, 상기 송이균주와 공동 배양하여 송이균근이 형성된 소나무 묘목을 수득하는 단계를 포함하는 소나무 송이균 감염묘 형성방법 및 상기 방법으로 수득한 송이균근이 형성된 소나무 묘목을 재배하여 송이버섯을 생산하는 방법이 개시되어 있고, 특허등록 제 474136호에는 송이버섯으로부터 분리한 송이균을 배양하여 액체종균을 수득하고, 이를 소나무 주위에 관주하는 형태로 접종하는 단계를 포함하는 송이버섯 생산방법이 개시되어 있다. Therefore, a method of artificially cultivating pine clusters using live pines and cultivated pine species has been developed. For example, Patent Registration No. 390048 adds a mixed top soil of pearlite and spegnum pitmos and K-liquid medium to pine mushroom strains isolated from the fruiting bodies of wild matsutake mushrooms, and mixes the sterile germination seed obtained by aseptic germination of pine seeds. After cultivating on the topsoil, co-culturing with pine mushroom strains to obtain pine seedlings with pine roots formed, and the pine mushroom seedlings with pine mushroom seedlings obtained by the method A method for producing the same is disclosed, and Patent Registration No. 474136 discloses a method for producing a pine mushroom comprising culturing the pine mushroom isolated from the pine mushroom to obtain a liquid seed, and inoculating it in the form of irrigation around pine trees. Is disclosed.

그러나, 송이균근이 형성된 소나무 묘목을 재배할 경우에도 이로부터 송이가 발생할 확률은 15% 정도에 불과하고, 송이의 액체종균을 소나무 주위에 관주할 경우에도 이로부터 송이가 발생할 확률은 최대 35%에 불과하여, 현재까지 개발된 송이의 재배방법은 송이의 생산성이 매우 낮다는 단점이 있었는 바, 이를 해결하여 송이의 생산성을 향상시킬 수 있는 송이의 재배방법을 개발하여야 할 필요성이 끊임없이 대두되었다.
However, even when growing pine seedlings with pine mushroom roots, the probability of clustering is only 15%, and even if the liquid seedlings of the cluster are fertilized around pine trees, the probability of clustering from them is up to 35%. However, the cultivation method of the clusters developed to date has had the disadvantage that the productivity of the clusters is very low. Therefore, the necessity of developing a cultivation method of the clusters to improve the productivity of the clusters is constantly emerging.

이에, 본 발명자들은 송이의 발생율을 향상시켜서, 송이의 생산성을 향상시킬 수 있는 송이의 재배방법을 개발하기 위하여 예의 연구노력한 결과, 송이 균사체를 고체종균배지에 접종하여 수득한 송이종균을 소나무의 뿌리에 이식할 경우, 송이의 발생율이 현저하게 향상됨을 확인하고, 본 발명을 완성하게 되었다.
Accordingly, the present inventors have made intensive studies to develop a cultivation method of pine cultivation that can improve the productivity of matsutake by improving the cultivation rate of matsutake, and as a result of inoculating the pine mycelium in a solid seedling medium, the root of pine When transplanted to, it was confirmed that the incidence of clusters was significantly improved, and the present invention was completed.

결국, 본 발명의 주된 목적은 송이재배용 고체종균배지를 제공하는 것이다.After all, the main object of the present invention is to provide a solid seed culture medium for cultivation of pine.

본 발명의 다른 목적은 상기 송이재배용 고체종균배지를 이용한 송이의 재배방법을 제공하는 것이다.
Another object of the present invention is to provide a cultivation method of the cluster using the solid seed culture medium for cultivation.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명의 송이재배용 고체종균배지는 소나무 톱밥 40 내지 60%(w/w), 마사토 25 내지 40%(w/w), 분말 게르마늄 0.1 내지 1.0%(w/w), 해초건조분말 1 내지 10%(w/w), 농산물과 농산부산물의 파쇄물 1 내지 10%(w/w) 및 소나무유래 물질 0.1 내지 1.0%(w/w)를 포함한다. 이때, 상기 해초건조분말은 특별히 이에 제한되지 않으나, 김, 파래, 미역, 다시마, 우뭇가사리 및 이들의 조합으로부터 선택되는 어느 하나를 건조 및 파쇄한 것을 사용함이 바람직하고, 상기 농산물과 농산부산물의 파쇄물은 특별히 이에 제한되지 않으나, 야콘, 고구마, 감자, 미강, 대두박, 밀기울, 보릿겨 및 이들의 조합으로부터 선택되는 어느 하나를 파쇄한 것을 사용함이 바람직하며, 상기 소나무유래 물질은 특별히 이에 제한되지 않으나, 송화분, 송진, 솔방울건조분말, 솔잎건조분말 및 이들의 조합으로부터 선택되는 어느 하나를 사용함이 바람직하다.In order to achieve the above object, the solid seedling medium for cultivation of the present invention pine sawdust 40 to 60% (w / w), Masato 25 to 40% (w / w), powder germanium 0.1 to 1.0% (w / w) 1 to 10% (w / w) of seaweed dry powder, 1 to 10% (w / w) of crushed products of agricultural products and agricultural by-products, and 0.1 to 1.0% (w / w) of pine-derived materials. At this time, the seaweed dried powder is not particularly limited to this, it is preferable to use dried and crushed any one selected from laver, seaweed, seaweed, kelp, wood starfish and combinations thereof, the crushed product of the agricultural products and agricultural by-products Although not particularly limited thereto, it is preferable to use crushed any one selected from yacon, sweet potato, potato, rice bran, soybean meal, bran, barley bran and combinations thereof, and the pine-derived material is not particularly limited thereto, It is preferable to use any one selected from rosin, pine cone dry powder, pine needle dry powder and combinations thereof.

한편, 본 발명의 상기 고체종균배지를 이용한 송이의 재배방법은, (ⅰ) 송이로부터 포자를 수득하고, 이를 PDA 배지에 20 내지 25℃에서 30 내지 70일간 배양하여 송이 균사체를 수득하는 단계; (ⅱ) 상기 송이 균사체를 1차 액상배지에 접종하고 20 내지 25℃에서 30 내지 70일간 배양하여 1차 배양물을 수득하는 단계; (ⅲ) 상기 1차 배양물을 2차 액상배지에 접종하고 20 내지 25℃에서 30 내지 45일간 배양하여 2차 배양물을 수득하는 단계; (ⅳ) 상기 2차 배양물을 상기 송이재배용 고체종균배지에 접종하고 20 내지 25℃에서 45 내지 120일간 배양하여 고체종균을 수득하는 단계; 및, (ⅴ) 상기 고체종균을 소나무 뿌리에 이식하고, 120 내지 180일간 재배하는 단계를 포함한다. 이때, (ⅰ) 단계의 PDA 배지의 조성은 감자추출물 200g/L, 덱스트로스 20g/L 및 아가 20g/L이며, (ⅱ) 단계의 1차 액상배지로는 특별히 이에 제한되지 않으나, 설탕 20 내지 40g/L, 덱스트로스 20 내지 40g/L, 송화분 5 내지 15g/L 및 증류수를 포함하는 것을 사용함이 바람직하고, (ⅲ) 단계의 2차 액상배지로는 특별히 이에 제한되지 않으나, 황백당 30 내지 40g/L, 송화분 3 내지 4g/L 및 증류수를 포함하는 것을 사용함이 바람직하며, (ⅳ) 단계에서는, 송이재배용 고체종균배지를 가열멸균하고, 이를 40 내지 50℃의 무균실에서 2 내지 4일동안 숙성시킨 다음, 이에 상기 2차 배양물을 접종함이 바람직하며, 이때 가열멸균조건은 특별히 이에 제한되지 않으나, 121℃에서 2 내지 6시간 동안 멸균함이 바람직하고, (ⅴ) 단계의 재배시에 소나무 주위에 균환이 형성될 때까지 재배한 후, 균환이 형성된 토양의 수분함량을 60 내지 70%로 유지하도록 관수함이 바람직하다.
On the other hand, the method of cultivating clusters using the solid seed culture medium of the present invention, (i) obtaining spores from the clusters, and culturing them in PDA medium at 20 to 25 ℃ 30 to 70 days to obtain cluster mycelium; (Ii) inoculating the cluster mycelium on a primary liquid medium and incubating at 20 to 25 ° C. for 30 to 70 days to obtain a primary culture; (Iii) inoculating the primary culture in a secondary liquid medium and incubating at 20 to 25 ° C. for 30 to 45 days to obtain a secondary culture; (Iii) inoculating the secondary culture with the solid seed culture medium for cultivation and culturing for 45 to 120 days at 20 to 25 ° C. to obtain a solid seed; And, (iii) transplanting the solid spawn in the pine root, and cultivating for 120 to 180 days. At this time, the composition of the PDA medium of step (iii) is potato extract 200g / L, dextrose 20g / L and agar 20g / L, and (ii) the primary liquid medium of the step is not particularly limited, sugar 20 to It is preferable to use 40g / L, dextrose 20 to 40g / L, containing 5 to 15g / L of calcined water and distilled water, and as a secondary liquid medium of step (iii), is not particularly limited to 30 to 30 per sulfur white It is preferable to use 40g / L, containing 3 to 4g / L and distilled water, in step (iii), heat sterilization of solid seed culture medium for cultivation of the pine cultivation, which is for 2 to 4 days in a clean room at 40 to 50 ℃ After maturation, it is preferable to inoculate the secondary culture, wherein the heat sterilization conditions are not particularly limited, but sterilization at 121 ° C. for 2 to 6 hours is preferred. Cultivated until a fungus formed around the pine , It is preferable to irrigation to maintain the water content of the soil bacteria ring formed by 60 to 70%.

본 발명의 송이의 재배방법을 이용하면, 소나무 뿌리에 대한 송이 균사체의 균환 형성율이 향상되어, 이로부터 송이의 생산량을 현저하게 증대시킬 수 있으므로, 송이를 재배하는 농가의 소득향상에 크게 이바지할 수 있을 것이다.
By using the cultivation method of the clusters of the present invention, the rate of formation of the cluster mycelium on pine roots can be improved, and the yield of the clusters can be remarkably increased, thereby greatly improving the income of the farmers growing the clusters. Could be.

본 발명자들은 송이의 발생율을 향상시켜서, 송이의 생산성을 제고하기 위한 송이의 재배방법을 개발하기 위하여 다양한 방법을 모색하던 중, 소나무의 뿌리에 송이의 고체종균을 이식할 경우, 송이 종균의 활착율이 증가하고, 이로 인하여 송이의 발생율이 향상될 것이라고 예상하였다.The present inventors have been exploring various methods to improve the incidence of clusters and to develop a method for growing the clusters to improve the productivity of the clusters. It was expected that this would increase the incidence of clusters.

이를 확인하기 위하여, 송이로부터 포자를 수득하고, 상기 포자를 고체배지에 배양하여 균사체를 수득하였다. 그러나, 상기 포자로부터 수득할 수 있는 송이의 균사체의 양이 너무 적어, 소나무의 뿌리에 이식할 수 없었으므로, 액상배지를 이용한 계대배양을 통하여 균사체의 양을 증가시키고자 하였다.To confirm this, spores were obtained from the clusters, and the spores were cultured in a solid medium to obtain mycelium. However, since the amount of mycelium of clusters obtained from the spores was too small to be transplanted to the roots of pine trees, the amount of mycelium was increased through passage in liquid medium.

다음으로, 상기 액상배지를 이용한 계대배양을 통하여 수득한 송이 균사체를 소나무의 뿌리에 보다 효과적으로 활착시킬 수 있는 방법을 모색하기 위하여, 상기 액상배지에 배양된 송이 균사체를 그 자체로 소나무의 뿌리에 관주하거나 또는 고체배지에 접종하여 다시 배양하고 배양된 고체배지를 소나무의 뿌리에 이식한 다음, 이들을 각각 재배한 결과, 고체배지를 이식한 경우에 균환의 생성율이 증가됨을 알 수 있었다.
Next, in order to more effectively stick the pine mycelium obtained through subculture using the liquid medium to the root of pine, the pine mycelium cultured in the liquid medium is irrigated to the root of pine by itself. Or inoculated in a solid medium and cultured again and transplanted the cultured solid medium to the root of the pine, and then grown each of them, it was found that the growth rate of the bacteria was increased when the solid medium was transplanted.

본 발명자들은 균환의 생성율을 향상시킬 수 있는 고체배지를 개발하기 위하여, 고체배지에 포함되는 다양한 성분을 검색한 결과, 소나무 톱밥, 마사토, 분말 게르마늄, 해초건조분말, 농산물과 농산부산물의 파쇄물 및 소나무유래 물질을 포함하는 고체배지를 사용할 경우, 균환의 생성율을 향상시킬 수 있음을 확인하였다.The present inventors searched for various components included in the solid medium to develop a solid medium that can improve the production rate of fungal ring, pine sawdust, masato, powder germanium, seaweed dry powder, crushed products of agricultural products and agricultural by-products and pine When using a solid medium containing the derived material, it was confirmed that the production rate of the microbial ring can be improved.

이에, 균환의 생성율을 보다 효과적으로 향상시킬 수 있는 상기 고체배지에 포함된 각 구성성분의 조성비를 검색한 결과, 송이재배용 고체종균배지의 최종중량에 대하여, 소나무 톱밥 40 내지 60%(w/w), 마사토 25 내지 40%(w/w), 분말 게르마늄 0.1 내지 1.0%(w/w), 해초건조분말 1 내지 10%(w/w), 농산물과 농산부산물의 파쇄물 1 내지 10%(w/w) 및 소나무유래 물질 0.1 내지 1.0%(w/w) 임을 확인하였다.
Thus, as a result of searching the composition ratio of each component contained in the solid medium that can more effectively improve the production rate of fungal ring, pine sawdust 40 to 60% (w / w) relative to the final weight of the solid seed culture medium for cultivation , Masato 25 to 40% (w / w), powder germanium 0.1 to 1.0% (w / w), seaweed dry powder 1 to 10% (w / w), crushed products of agricultural products and agricultural by-products 1 to 10% (w / w) and the pine-derived material was found to be 0.1 to 1.0% (w / w).

한편, 본 발명자들은 상술한 조성비를 갖는 송이재배용 고체종균배지를 사용할 경우, 종래에 공지된 액체종균을 이용하여 송이를 재배하는 방법보다 송이의 생산성을 향상시킬 수 있는지를 확인한 결과, 본 발명의 송이배양용 고체종균배지를 이용하면, 종래방법을 사용할 경우보다도, 균환의 형성율 및 균환면적이 증가할 뿐만 아니라, 송이의 생산량이 증대됨을 확인하였다.
On the other hand, the inventors of the present invention, when the solid seedling medium for cultivation of the clusters having the composition ratio described above, as a result of checking whether the productivity of the clusters can be improved than the method for cultivating the clusters using a liquid seed known in the prior art, the clusters of the present invention It was confirmed that the use of the cultivation solid seedling medium not only increased the formation rate and the area of bacterial exchange but also increased the yield of clusters compared with the conventional method.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. These examples are only for illustrating the present invention in more detail, it will be apparent to those skilled in the art that the scope of the present invention is not limited by these examples in accordance with the gist of the present invention. .

실시예 1: 고체종균을 이용한 송이의 재배
Example 1 Cultivation of Matsutake Using Solid Spawn

실시예 1-1: 송이의 포자로부터 발아된 송이 균사체의 수득
Example 1-1 : Obtained Germinated Mycelium from Cluster Spores

송이의 갓이 완전히 펴지지 않은 송이를 세척하고 30분간 건조시킨 다음, 갓의 겉 표피를 제거하고 가운데로부터 밖의 갓 끝까지 편모하였다. 편모된 갓을 페트리디쉬의 뚜껑 안쪽에 갓의 주름이 위로 향하게 하여 얹은 다음, 소독된 테잎으로 움직이지 않게 고정하고, 상기 페트리디쉬의 하부에는 PDA 고체배지(감자추출물 200g/L, 덱스트로스 20g/L, 한천 20g/L, pH 5.0)를 넣고 상기 갓이 고정된 뚜껑을 씌운 다음, 뚜껑을 회전시켜서 고체 한천배지에 송이의 포자가 골고루 분포될 수 있도록 하였다. 그런 다음, 상기 뚜껑으로부터 송이의 갓을 제거하고 25℃에서 45일간 배양하여, 송이의 포자로부터 발아된 송이의 균사체를 수득하였다.
The clusters whose clusters were not fully spread were washed and dried for 30 minutes, and then the outer skin of the clusters was removed and flagged from the center to the ends of the outer caps. Place the flagellar cap on the inside of the lid of the petri dish with the wrinkle of the cap facing up, and fix it with a sterilized tape so that it does not move, and the PDA solid medium (potato extract 200g / L, dextrose 20g /) L, agar 20g / L, pH 5.0) was added and the lid was fixed to the lampshade, and the lid was rotated so that the spores of the clusters were evenly distributed on the solid agar medium. Then, the cap of the cluster was removed from the cap and incubated for 45 days at 25 ° C. to obtain the mycelium of the cluster germinated from the spores of the cluster.

실시예 1-2: 액상배지를 이용한 송이 균사체의 계대배양
Example 1-2 : Passage culture of pine mycelium using liquid medium

상기 실시예 1에서 PDA 고체배지에 배양된 송이 균사체를 PDA 고체배지에 배양된 채로 0.5mm 크기로 세절하고, 세절된 송이 균사체 4조각을 멸균된 1차 액상배지(설탕 30g/L, 덱스트로스 30g/L, 송화분 10g/L, 증류수, pH 4.0) 1L에 침지한 다음, 25℃에서 1주일간 배양하고, 동일한 조건으로 1회 계대배양하여 1차 배양물을 수득하였다. 그런 다음, 상기 1차 배양물 50ml를 멸균된 2차 액상배지(황백당 240g/7L, 송화분 25g/7L, 증류수, pH 3.5) 7L에 접종하고, 25℃에서 2주일간 배양하여 2차 배양물을 수득하였다.
In Example 1, the mycelium mycelium cultured in PDA solid medium was sliced in 0.5mm size while cultured in PDA solid medium, and 4 pieces of the sliced mycelium mycelium were sterilized in a primary liquid medium (sugar 30g / L, dextrose 30g). / L, pine tree 10g / L, distilled water, pH 4.0) 1L, then incubated for 1 week at 25 ℃, and passaged once under the same conditions to obtain a primary culture. Then, 50 ml of the primary culture was inoculated into 7 L of sterilized secondary liquid medium (240g / 7L per sulfur white, 25g / 7L pine oil, distilled water, pH 3.5) and incubated at 25 ° C. for 2 weeks to incubate the secondary culture. Obtained.

실시예 1-3: 송이 균사체 이식용 종균의 수득
Example 1-3 Obtaining Seeds for Transplanting Mycelium

상기 실시예 1-2에서 수득한 2차 배양물에 포함된 송이 균사체를 소나무 뿌리에 이식하고, 소나무에서 균환의 발생율을 측정하였다. 이때, 고체상태로 이식할 경우, 액체상태로 이식하는 것보다 균환의 발생율이 증가되는 지의 여부를 확인하기 위하여, 상기 2차 배양물을 2차 액상배지 또는 한천을 포함하여 고형화된 2차배지(황백당 240g/7L, 송화분 25g/7L, 한천 140g/7L, 증류수, pH 3.5)에 각각 접종하고, 25℃에서 60일간 배양하여 액상종균과 고체종균을 각각 수득하였다.
The pine mycelium contained in the secondary culture obtained in Example 1-2 was transplanted to the pine root, and the incidence rate of the microflora in the pine was measured. At this time, when transplanting in a solid state, in order to determine whether the incidence of bacterial growth is increased compared to transplanting in a liquid state, the secondary culture solidified secondary medium containing a secondary liquid medium or agar ( Inoculated in 240g / 7L per white sulfur, 25g / 7L pine tree, 140g / 7L agar, distilled water, pH 3.5) and incubated at 25 ℃ for 60 days to obtain a liquid spawn and a solid spawn.

실시예 1-4: 액상종균 또는 고체종균에 따른 균환 형성율의 비교
Example 1-4 : Comparison of bacterial ring formation rate according to liquid spawn or solid spawn

상기 실시예 1-3에서 수득한 액상종균 또는 고체종균을 각각 50주의 소나무의 뿌리에 관주하거나 또는 이식하고, 150일간 재배한 다음, 접종된 소나무에서 균환이 형성된 소나무를 계수하여 비율로 환산하여, 각각의 균환 형성율을 산출하였다(참조: 표 1). 이때, 대조군으로는 어떠한 종균도 접종하지 않은 50주의 소나무를 사용하였다.
The liquid spawn or solid spawn obtained in Example 1-3 was then irrigated or transplanted to the roots of 50 strains of pine, respectively, cultivated for 150 days, and then counted in the ratio by counting the pines formed with the strain in the inoculated pines, Each cycle formation rate was calculated (see Table 1). At this time, 50 weeks of pine without inoculation of any spawn was used as a control.

소나무 뿌리에 접종하는 종균의 형태에 따른 균환 형성율(단위: %)Cycle formation rate according to the type of spawn seedling inoculated on pine roots (unit:%) 대조군Control group 액상종균Liquid spawn 고체종균Solid spawn 균환 형성율Cycle formation rate 22 2323 3232

상기 표 1에서 보듯이, 송이 균사체 자체보다는 종균의 형태로 소나무 뿌리에 이식할 경우에 균환 형성율이 증가한다는 점과, 동일한 조건의 배지를 사용하여 종균을 수득하더라도 액상종균 보다는 고체종균을 사용할 경우에 균환의 형성율이 더욱 증가한다는 점을 확인할 수 있었다. 이와 같이 고체종균을 사용할 경우에 균환의 형성율이 우수한 이유는, 액체종균은 소나무 뿌리 뿐만 아니라 주변의 토양에 쉽게 흡수되어 소나무 뿌리에 잔류하는 양이 상대적으로 적은 반면, 고체종균은 주변의 토양에 쉽게 흡수되지 않아 소나무 뿌리에 잔류하는 양이 상대적으로 많기 때문인 것으로 분석되었다.
As shown in Table 1, when the seedlings are grown in the form of seedlings rather than pine mycelium itself, the growth rate is increased, and even if the seedlings are obtained using the medium under the same conditions, solid seedlings are used rather than liquid seedlings. It was confirmed that the formation rate of the fungal ring was further increased. The reason why the formation rate of the bacteria is excellent when using the solid spawn is that the liquid spawn is easily absorbed not only in the pine root but also in the surrounding soil, so that the residual amount of the solid spawn is relatively low in the pine root. It was analyzed to be due to the relatively high amount of residual pine root because it is not easily absorbed.

실시예 2: 고체배지의 조성
Example 2 Composition of Solid Medium

상기 실시예 1-4의 결과로부터, 송이 균사체를 액상종균 보다는 고체종균의 형태로 소나무 뿌리에 이식함이 바람직함을 알 수 있었으므로, 균환의 형성율을 향상시킬 수 있는 고체배지의 조성을 확정하고자 하였다.
From the results of Example 1-4, it was found that the pine mycelium is preferably transplanted to the pine roots in the form of solid spawn rather than liquid spawn, so as to determine the composition of the solid medium which can improve the formation rate of the fungus. It was.

실시예 2-1: 고체배지성분의 검색
Example 2-1 : Search for Solid Medium Components

통상적으로, 버섯의 재배시에는 액상배지보다는 고체배지를 더 많이 이용하고 있으므로, 특허등록 제 483333호 및 특허등록 제 652892호 등에 개시된 송이버섯류 재배용 고체배지의 성분으로 알려진 마사토(화강암이 풍화되어 생성된 흙), 게르마늄 및 톱밥을 기초로 하여, 균환의 형성율을 향상시킬 수 있는 추가적인 성분을 검색하고자 하였다.
In general, when cultivating mushrooms, since a solid medium is used more than a liquid medium, Masato (granite is produced by weathering granite, known as a component of a pine mushroom cultivation solid medium disclosed in Patent Registration No. 483333 and Patent No. 652892, etc.). Based on soil), germanium and sawdust, an attempt was made to search for additional components that could improve the formation rate of fungal cycles.

우선, 소나무 톱밥 600g, 마사토 348g 및 분말 게르마늄 2g을 혼합하여 기초배지를 제조하고, 이에 각 50g의 한약재류 건조분말(구기자분말, 천궁분말, 백복령분말, 산수유분말 또는 용안육분말), 허브류 건조분말(커민분말, 시나몬분말, 미나리분말, 생강분말 또는 케모마일분말), 농산물과 농산부산물의 파쇄물(미강 파쇄물, 대두박 파쇄물, 고구마 파쇄물, 야콘 파쇄물, 감자 파쇄물, 밀기울 파쇄물 또는 보릿겨 파쇄물), 해초류 건조분말(미역분말, 다시마분말, 김분말, 파래분말 또는 우뭇가사리분말) 또는 소나무유래 물질(송진, 송화분, 송피건조분말, 솔방울건조분말 또는 솔잎건조분말)을 첨가한 다음, 이들을 121℃에서 4시간동안 멸균하였으며, 이후에 45℃의 무균실에서 3일동안 숙성시켜서, 각각의 송이재배용 고체배지를 제조하였다.First, a base medium was prepared by mixing 600 g of pine sawdust, 348 g of masato and 2 g of powdered germanium, and each of the 50 g of Chinese herbal medicine dry powder (goji berry powder, Cheongung powder, Baekbokyeong powder, corn oil powder or long eye meat powder), herb dry powder ( Cumin powder, cinnamon powder, buttercup powder, ginger powder or chemomile powder), crushed products of agricultural products and agricultural by-products (rice flakes, soybean meal crushed, sweet potato crushed, yacon crushed, potato crushed, bran crushed or barley bran crushed), seaweed dry powder (seaweed) Powder, kelp powder, laver powder, green grass powder or green grass powder) or pine-derived materials (such as rosin, pine flower powder, pine dried powder, pine cone dried powder or pine needle dried powder) were added and then sterilized at 121 ° C. for 4 hours. Thereafter, aged in a sterile chamber at 45 ℃ for 3 days, to prepare each cultivation solid medium.

그런 다음, 상기 제조된 각각의 송이재배용 고체배지에 실시예 1-2에서 수득한 2차 배양물 50ml를 접종하고, 25℃에서 60일간 배양하여 각각의 고체종균을 수득하였으며, 상기 각 고체종균 400g을 각각 50주의 소나무의 뿌리에 이식하고, 150일간 재배한 다음, 접종된 소나무에서 균환이 형성된 소나무를 계수하여 비율로 환산함으로써, 각각의 균환 형성율을 산출하였다(참조: 표 2).
Then, 50 ml of the secondary culture obtained in Example 1-2 was inoculated into each of the pine cultivation solid medium prepared above, incubated at 25 ° C. for 60 days to obtain respective solid spawn, and each solid spawn 400 g Were transplanted to the roots of 50 weeks of pine, and after 150 days of cultivation, and the rate of conversion of each fungal formation was calculated by counting the pines on which the fungal rings were formed from the inoculated pines and converting them in proportion (see Table 2).

송이재배용 고체배지에 포함된 추가성분에 따른 균환 형성율(단위: %)The rate of formation of agglomerates according to additional components in solid culture medium for pine cultivation (Unit:%) 균환 형성율Cycle formation rate 균환 형성율Cycle formation rate 균환 형성율Cycle formation rate 음성 대조군*
양성 대조군**
구기자분말
천궁분말
백복령분말
산수유분말
용안육분말
커민분말
시나몬분말
미나리분말Negative Control *
Positive Control **
Goji powder
Cheongung Powder
Baekbokyeong Powder
Corn oil
Longan meat powder
Cumin Powder
Cinnamon Powder
Buttercup powder 2
40
32
38
40
30
39
36
28
412
40
32
38
40
30
39
36
28
41 생강분말
케모마일분말
미강 파쇄물
대두박 파쇄물
고구마 파쇄물
야콘 파쇄물
감자 파쇄물
밀기울 파쇄물
보릿겨 파쇄물
미역분말Ginger powder
Chamomile Powder
Rice bran shreds
Soybean Meal Crush
Sweet Potato Shreds
Yacon Shreds
Potato shreds
Bran Crush
Barley Bran Crush
Seaweed Powder 38
39
48
41
52
40
51
41
41
4938
39
48
41
52
40
51
41
41
49 다시마분말
김분말
파래분말
우뭇가사리분말
송진
송화분
송피건조분말
솔방울건조분말
솔잎건조분말
Kelp powder
Powder
Green powder
Lobster Powder
Rosin
Flower pot
Songpi dry powder
Pinecone Dry Powder
Pine needle dry powder
47
42
43
48
48
46
42
41
45
47
42
43
48
48
46
42
41
45

*: 음성 대조군은 어떠한 종균도 접종하지 않음 *: Negative controls do not inoculate any spawn

**: 양성 대조군은 기초배지만을 사용함
**: Positive control uses only basal medium

상기 표 2에서 보듯이, 한약재류 건조분말과 허브류 건조분말은 균환의 형성율을 오히려 감소시키기 때문에 적합하지 않음을 알 수 있었음에 반하여, 농산물과 농산부산물의 파쇄물, 해초류 건조분말 및 소나무유래 물질은 균환의 형성율을 향상시키는 효과를 나타냄을 확인할 수 있었다.
As shown in Table 2, it was found that the herbal powder dry powder and herb dry powder is not suitable because it reduces the rate of formation of fungal rings, while the crushed products of agricultural products and agricultural by-products, seaweed dry powder and pine-derived materials It was confirmed that the effect of improving the formation rate of the microbial ring.

실시예 2-2: 추가성분을 포함하는 송이재배용 고체배지의 효과(I)
Example 2-2 : Effect of solid medium for cultivation of pine mushroom containing additional components (I)

상술한 농산물과 농산부산물의 파쇄물, 해초류 건조분말 및 소나무유래 물질의 혼합물을 기초배지에 가하여 다양한 송이재배용 고체배지를 제조하고, 이들의 균환 형성율을 산출하고자 하였다.The above-mentioned crushed products of agricultural and agricultural by-products, a mixture of seaweed dry powder and pine-derived materials were added to the basal medium to prepare a variety of solid culture medium for pine cultivation, and to calculate their rate of formation.

구체적으로, 소나무 톱밥 550g, 마사토 298g 및 분말 게르마늄 2g을 혼합하여 기초배지를 수득하고, 50g의 농산물과 농산부산물의 파쇄물(미강 파쇄물, 대두박 파쇄물, 고구마 파쇄물, 야콘 파쇄물, 감자 파쇄물, 밀기울 파쇄물 또는 보릿겨 파쇄물), 50g의 해초류 건조분말(미역분말, 다시마분말, 김분말, 파래분말 또는 우뭇가사리분말) 및 50g의 소나무유래 물질(송진, 송화분, 송피건조분말, 솔방울건조분말 또는 솔잎건조분말)을 가한 다음, 이들을 121℃에서 4시간동안 멸균하였으며, 이후에 45℃의 무균실에서 3일동안 숙성시켜서, 각각의 송이재배용 고체배지를 제조하였다. 그런 다음, 실시예 2-1에 개시된 바와 동일한 방법으로 제조한 송이재배용 고체배지에 접종배양하여 수득한 고체종균을 이식한 후의 균환 형성율을 산출하였다(참조: 표 3).
Specifically, 550 g of pine sawdust, 298 g of masato and 2 g of powdered germanium are mixed to obtain a basal medium, and 50 g of agricultural products and agricultural by-products of crushed products (rice flakes, soybean meal crushed, sweet potato crushed, yacon crushed, potato crushed, wheat bran crushed or barley bran) Crushed), 50 g of seaweed dry powder (seaweed powder, kelp powder, laver powder, seaweed powder or urticaria powder) and 50 g of pine-derived material (pine, pine pollen, pine dried powder, pine cone dried powder or pine needle dried powder) They were sterilized at 121 ° C. for 4 hours, and then aged in a sterile chamber at 45 ° C. for 3 days to prepare respective cluster cultured solid media. Then, the rate of bacterial ring formation after transplanting the solid spawn obtained by inoculation culture in a solid culture medium for cultivation prepared in the same manner as described in Example 2-1 was calculated (see Table 3).

송이재배용 고체배지에 포함된 성분에 따른 균환 형성율(단위: %)Formation rate of bacteria ring according to the components in solid culture for pine cultivation (Unit:%) 실험군Experimental group 농산물과 농산부산물의 파쇄물Shreds of Agricultural Products and Agricultural By-products 해초류 건조분말Seaweed Dry Powder 소나무유래 물질Pine-derived material 균환 형성율Cycle formation rate 음성 대조군*
양성 대조군**
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14Negative Control *
Positive Control **
One
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14 -
-
미강 파쇄물
대두박 파쇄물
고구마 파쇄물
야콘 파쇄물
감자 파쇄물
밀기울 파쇄물
보릿겨 파쇄물
미강 파쇄물
대두박 파쇄물
고구마 파쇄물
야콘 파쇄물
감자 파쇄물
밀기울 파쇄물
보릿겨 파쇄물-
-
Rice bran shreds
Soybean Meal Crush
Sweet Potato Shreds
Yacon Shreds
Potato shreds
Bran Crush
Barley Bran Crush
Rice bran shreds
Soybean Meal Crush
Sweet Potato Shreds
Yacon Shreds
Potato shreds
Bran Crush
Barley Bran Crush -
-
미역분말
다시마분말
김분말
파래분말
우뭇가사리분말
미역분말
다시마분말
김분말
파래분말
우뭇가사리분말
다시마분말
김분말
파래분말
우뭇가사리분말-
-
Seaweed Powder
Kelp powder
Powder
Green powder
Lobster Powder
Seaweed Powder
Kelp powder
Powder
Green powder
Lobster Powder
Kelp powder
Powder
Green powder
Lobster Powder -
-
송진
송화분
송피분말
솔방울분말
솔잎건조분말
송화분
송피분말
솔방울분말
솔잎건조분말
송진
송피분말
솔방울분말
솔잎건조분말
송진-
-
Rosin
Flower pot
Songpi powder
Pinecone Powder
Pine needle dry powder
Flower pot
Songpi powder
Pinecone Powder
Pine needle dry powder
Rosin
Songpi powder
Pinecone Powder
Pine needle dry powder
Rosin 2
40
58
56
57
54
59
55
56
58
59
54
57
53
57
582
40
58
56
57
54
59
55
56
58
59
54
57
53
57
58

상기 표 3에서 보듯이, 농산물과 농산부산물의 파쇄물, 해초류 건조분말 및 소나무유래 물질의 혼합물을 포함하는 다양한 송이재배용 고체배지를 사용할 경우, 군환 형성율이 증가됨을 확인할 수 있었다.
As shown in Table 3, when using a variety of solid culture medium for cultivation including a mixture of agricultural products and agricultural by-products, seaweed dry powder and pine-derived materials, it was confirmed that the group ring formation rate is increased.

실시예 2-3: 추가성분을 포함하는 송이재배용 고체배지의 효과(II)
Example 2-3 : Effect of Solid Medium for Cluster Cultivation Containing Additional Ingredients (II)

농산물과 농산부산물의 파쇄물, 해초류 건조분말 및 소나무유래 물질을 각각 여러종류로 포함할 경우, 균환 형성율에 영향을 미치는지를 확인하고자 하였다.
The purpose of this study was to determine the effect of agglomerate formation when crushed products of agricultural and agricultural by-products, seaweed dry powder, and pine-derived materials were included.

실시예 2-3-1: 송이재배용 고체배지에 포함된 소나무유래 물질의 효과
Example 2-3-1 : Effect of Pine-derived Substances Contained in Solid Medium for Cluster Cultivation

소나무 톱밥 550g, 마사토 298g 및 분말 게르마늄 2g을 혼합하여 기초배지를 수득하고, 이에 50g의 감자 파쇄물 및 50g의 미역분말을 첨가하며, 50g의 소나무유래 물질을 각각 동량으로 조합한 혼합물을 가한 다음, 이들을 121℃에서 4시간동안 멸균하고, 이후에 45℃의 무균실에서 3일동안 숙성시켜서, 각각의 송이재배용 고체배지를 제조하였다. 이어, 실시예 2-1에 개시된 바와 동일한 방법으로 상기 제조한 각각의 송이재배용 고체배지로 각각의 고체종균을 제조하고, 상기 제조한 고체종균을 이식한 후의 균환 형성율을 산출하였다(참조: 표 4).
550 g of pine sawdust, 298 g of masato and 2 g of powdered germanium were mixed to obtain a basal medium, to which 50 g of potato shreds and 50 g of seaweed powder were added, and 50 g of pine-derived materials were added in the same amount, respectively, Each sterilized solid medium for cultivation was prepared by sterilization at 121 ° C. for 4 hours and then aged in a sterile chamber at 45 ° C. for 3 days. Subsequently, each solid spawn was prepared from each of the cultivation solid mediums prepared in the same manner as described in Example 2-1, and the cell formation rate after transplanting the prepared spawn spawn was calculated (see Table: 4).

송이재배용 고체배지에 포함된 소나무유래 물질에 따른 균환 형성율(단위: %)Formation rate of fungus ring according to pine-derived materials in solid culture for pine cultivation (Unit:%) 실험군Experimental group 소나무유래 물질Pine-derived material 균환 형성율Cycle formation rate 음성 대조군*
양성 대조군**
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31Negative Control *
Positive Control **
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31 -
-
송진
송화분
송피분말
솔방울분말
솔잎분말
송화분+송피분말+솔방울분말+솔잎분말
송진+송피분말+솔방울분말+솔잎분말
송진+송화분+솔방울분말+솔잎분말
송진+송화분+송피분말+솔잎분말
송진+송화분+송피분말+솔방울분말
송진+송화분+송피분말+솔방울분말+솔잎분말-
-
Rosin
Flower pot
Songpi powder
Pinecone Powder
Pine needle powder
Songhwa Powder + Songpi Powder + Pinecone Powder + Pine Needle Powder
Rosin + pine skin powder + pine cone powder + pine needle powder
Pine resin + songhwa powder + pine cone powder + pine needle powder
Rosin + Songhwa Powder + Songpi Powder + Pine Needle Powder
Pine resin + songhwa powder + songpi powder + pine cone powder
Pine resin + songhwa powder + songpi powder + pine cone powder + pine needle powder 2
40
53
50
49
51
50
54
59
60
58
59
612
40
53
50
49
51
50
54
59
60
58
59
61

상기 표 4에서 보듯이, 소나무유래 물질을 혼합하여 사용할 경우, 단독으로 사용할 경우보다 대체로 균환 형성율이 증가됨을 알 수 있었다. 아울러, 소나무유래 물질 중에서 다른 성분에 비하여 송진이 누락된 경우에는 상대적으로 균환 형성율이 저조함을 알 수 있었는 바, 송진이 가장 우수한 효과를 나타냄을 알 수 있었다.
As shown in Table 4, when the pine-derived materials are used in combination, it was found that the formation rate of the ring was generally increased than when used alone. In addition, when the rosin is missing from the pine-derived materials than the other components it was found that the relatively low rate of formation of the ring, the rosin showed the best effect.

실시예 2-3-2: 송이재배용 고체배지에 포함된 농산물과 농산부산물의 파쇄물의 효과
Example 2-3-2 : Effect of crushed products of agricultural products and agricultural by-products contained in solid culture for pine cultivation

소나무 톱밥 550g, 마사토 298g 및 분말 게르마늄 2g을 혼합하여 기초배지를 수득하고, 이에 50g의 송진 및 50g의 미역분말을 첨가하며, 50g의 농산물과 농산부산물의 파쇄물을 각각 동량으로 조합한 혼합물을 가한 다음, 이들을 121℃에서 4시간동안 멸균하고, 이후에 45℃의 무균실에서 3일동안 숙성시켜서, 각각의 송이재배용 고체배지를 제조하였다. 이어, 실시예 2-1에 개시된 바와 동일한 방법으로 상기 제조한 각각의 송이재배용 고체배지로 각각의 고체종균을 제조하고, 상기 제조한 고체종균을 이식한 후의 균환 형성율을 산출하였다(참조: 표 5).
550 g of pine sawdust, 298 g of masato and 2 g of powdered germanium are mixed to obtain a basal medium, to which 50 g of rosin and 50 g of seaweed powder are added, and 50 g of agricultural products and by-products of crushed products of agricultural by-products are added in the same amount. These were sterilized at 121 ° C. for 4 hours, and then aged in a sterile chamber at 45 ° C. for 3 days to prepare a solid culture medium for each cluster. Subsequently, each solid spawn was prepared from each of the cultivation solid mediums prepared in the same manner as described in Example 2-1, and the cell formation rate after transplanting the prepared spawn spawn was calculated (see Table: 5).

송이재배용 고체배지에 포함된 농산물과 농산부산물의 파쇄물에 따른 균환 형성율(단위: %)Formation rate of fungal circumference according to crushed products of agricultural products and agricultural by-products included in solid culture for pine cultivation (Unit:%) 실험군Experimental group 농산가공부산물Agricultural Processing Byproducts 균환 형성율Cycle formation rate 음성 대조군*
양성 대조군**
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55Negative Control *
Positive Control **
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55 -
-
미강
대두박
고구마
야콘
감자
밀기울
보릿겨
대두박+고구마+야콘+감자+밀기울+보릿겨
미강+고구마+야콘+감자+밀기울+보릿겨
미강+대두박+야콘+감자+밀기울+보릿겨
미강+대두박+고구마+감자+밀기울+보릿겨
미강+대두박+고구마+야콘+밀기울+보릿겨
미강+대두박+고구마+야콘+감자+보릿겨
미강+대두박+고구마+야콘+감자+밀기울
미강+대두박+고구마+야콘+감자+밀기울+보릿겨-
-
Rice bran
Soybean meal
sweet potato
Yacon
potato
bran
Barley
Soybean meal + sweet potato + yacon + potato + bran + barley
Rice bran + sweet potato + yacon + potato + bran + barley
Rice bran + Soybean meal + Yacon + Potato + Bran + Barley
Rice Bran + Soybean Meal + Sweet Potato + Potato + Bran + Barley
Rice Bran + Soybean Meal + Sweet Potato + Yacon + Bran + Barley Bran
Rice bran + soybean meal + sweet potato + yacon + potato + barley
Rice Bran + Soybean Meal + Sweet Potato + Yacon + Potato + Bran
Rice Bran + Soybean Meal + Sweet Potato + Yacon + Potato + Bran + Barley 2
40
58
51
56
53
55
52
50
59
62
59
58
59
63
64
642
40
58
51
56
53
55
52
50
59
62
59
58
59
63
64
64

상기 표 5에서 보듯이, 농산물과 농산부산물의 파쇄물을 혼합하여 사용할 경우, 단독으로 사용할 경우보다 대체로 균환 형성율이 증가됨을 알 수 있었다. 아울러, 농산물과 농산부산물의 파쇄물 중에서 다른 성분에 비하여 미강 파쇄물, 고구마 파쇄물, 야콘 파쇄물 및 감자 파쇄물이 누락된 경우에는 상대적으로 균환 형성율이 저조함을 알 수 있었는 바, 미강 파쇄물, 고구마 파쇄물, 야콘 파쇄물 및 감자 파쇄물의 혼합물이 우수한 효과를 나타냄을 알 수 있었다.
As shown in Table 5, when the mixed products of agricultural products and agricultural by-products are used in combination, it was found that the formation rate of the bacteria is generally increased than when used alone. In addition, when crushed rice bran, sweet potato crushed, yacon crushed, and potato crushed, among the crushed products of agricultural products and agricultural by-products, were found to have a relatively low rate of formation of bacterium, bran crushed, sweet potato crushed, yacon It was found that mixtures of crushed and potato crushed products showed excellent effects.

실시예 2-3-3: 송이재배용 고체배지에 포함된 해초류 건조분말의 효과
Example 2-3-3 : Effect of Seaweed Dry Powder Contained in Cluster Cultured Solid Medium

소나무 톱밥 550g, 마사토 298g 및 분말 게르마늄 2g을 혼합하여 기초배지를 수득하고, 이에 50g의 송진 및 50g의 미강 파쇄물을 첨가하며, 50g의 해초류 건조분말을 각각 동량으로 조합한 혼합물을 가한 다음, 이들을 121℃에서 4시간동안 멸균하고, 이후에 45℃의 무균실에서 3일동안 숙성시켜서, 각각의 송이재배용 고체배지를 제조하였다. 이어, 실시예 2-1에 개시된 바와 동일한 방법으로 상기 제조한 각각의 송이재배용 고체배지로 각각의 고체종균을 제조하고, 상기 제조한 고체종균을 이식한 후의 균환 형성율을 산출하였다(참조: 표 6).
550 g of pine sawdust, 298 g of masato and 2 g of powdered germanium are mixed to obtain a basal medium, to which 50 g of rosin and 50 g of rice bran are added, a mixture of 50 g of seaweed dry powder in the same amount is added, and then they are 121 Sterilized at 4 ° C. for 4 hours, and then aged for 3 days in a sterile chamber at 45 ° C. to prepare each cluster cultured solid medium. Subsequently, each solid spawn was prepared from each of the cultivation solid mediums prepared in the same manner as described in Example 2-1, and the cell formation rate after transplanting the prepared spawn spawn was calculated (see Table: 6).

송이재배용 고체배지에 포함된 해초류 건조분말에 따른 균환 형성율(단위: %)Formation rate of bacteria in dry seaweeds included in solid culture for pine cultivation (Unit:%) 실험군Experimental group 해초류Seaweed 균환 형성율Cycle formation rate 음성 대조군*
양성 대조군**
61
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71Negative Control *
Positive Control **
61
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71 -
-
미역
다시마
김
파래
우뭇가사리
다시마+김+파래+우뭇가사리
미역+김+파래+우뭇가사리
미역+다시마+파래+우뭇가사리
미역+다시마+김+우뭇가사리
미역+다시마+김+파래
미역+다시마+김+파래+우뭇가사리-
-
Seaweed
Kelp
Kim
Blue
Woodfish
Kelp + seaweed + blue + wood starfish
Seaweed, seaweed, seaweed, sea urchin
Seaweed + seaweed + blue + woodfish
Seaweed, sea bream, seaweed, sea urchin
Seaweed + seaweed + seaweed + blue
Seaweed, seaweed, seaweed, seaweed, sea urchin 2
40
58
57
54
52
56
61
62
66
66
57
662
40
58
57
54
52
56
61
62
66
66
57
66

상기 표 6에서 보듯이, 해초류 건조분말을 혼합하여 사용할 경우, 단독으로 사용할 경우보다 대체로 균환 형성율이 증가됨을 알 수 있었다. 아울러, 해초류 건조분말 중에서 다른 성분에 비하여 미역 건조분말, 다시마 건조분말 및 우뭇가사리 건조분말이 누락된 경우에는 상대적으로 균환 형성율이 저조함을 알 수 있었는 바, 미역 건조분말, 다시마 건조분말 및 우뭇가사리 건조분말의 혼합물이 우수한 효과를 나타냄을 알 수 있었다.
As shown in Table 6, when mixed with the seaweed dry powder, it can be seen that the formation rate of the bacteria generally increased than when used alone. In addition, when seaweed dried powder, kelp dried powder, and wood starch dry powder were missing compared to other components, it was found that the rate of formation of bacteria was relatively low. Thus, dried seaweed powder, kelp dried powder and urticaria were dried. It was found that the mixture of powders showed an excellent effect.

실시예 2-4: 송이재배용 고체배지에 포함된 각 성분의 함량결정
Example 2-4 : Determination of the content of each component contained in solid culture medium for cultivation

상기 실시예 2-1 내지 2-3의 결과로부터, 본 발명의 송이재배용 고체배지는 공지된 소나무 톱밥, 마사토 및 분말 게르마늄 뿐만 아니라, 농산물과 농산부산물의 파쇄물, 해초류 건조분말 및 소나무유래 물질을 추가로 포함하는 것이 바람직함을 알 수 있었는 바, 각 성분의 적정 함량을 결정하고자 하였다. 이때, 농산물과 농산부산물의 파쇄물로는 미강 파쇄물을 사용하고, 해초류 건조분말로는 미역 건조분말을 사용하며, 소나무유래 물질로는 송진을 사용하였다.From the results of Examples 2-1 to 2-3, the cultivation solid medium of the present invention added not only known pine sawdust, masato and powder germanium, but also crushed products of agricultural products and agricultural by-products, seaweed dry powder and pine-derived materials. It was found that it is preferable to include as, to determine the appropriate content of each component. At this time, crushed rice bran was used as crushed products of agricultural and agricultural by-products, seaweed dried powder was used as seaweed dry powder, and pine resin was used as pine-derived material.

구체적으로, 소나무 톱밥(1), 마사토(2), 분말 게르마늄(3), 미강 파쇄물(4), 미역 건조분말(5) 및 송진(6)을 다양한 조성으로 포함하는 각각의 송이재배용 고체배지를 제조하고, 실시예 2-1에 개시된 바와 동일한 방법으로 상기 제조한 각각의 송이재배용 고체배지로 제조한 고체종균을 이식한 후의 균환 형성율을 산출하였다(참조: 표 7).
Specifically, each pine cultivation solid medium containing pine sawdust (1), masato (2), powder germanium (3), rice bran shreds (4), seaweed dry powder (5) and rosin (6) in various compositions In the same manner as described in Example 2-1, the rate of formation of the microcirculation after transplanting the solid spawn prepared with each of the cultivated solid mediums was calculated (see Table 7).

송이재배용 고체배지에 포함된 각 성분의 함량에 따른 균환 형성율(단위: %)Formation rate of bacteria ring according to the contents of each component in solid culture for pine cultivation (Unit:%) 실험군Experimental group 1
(%, w/w)One
(%, w / w) 2
(%, w/w)2
(%, w / w) 3
(%, w/w)3
(%, w / w) 4
(%, w/w)4
(%, w / w) 5
(%, w/w)5
(%, w / w) 6
(%, w/w)6
(%, w / w) 균환 형성율Cycle formation rate 81
82
83
84
85
86
87
88
89
90
91
92
93
94
95
96
97
9881
82
83
84
85
86
87
88
89
90
91
92
93
94
95
96
97
98 30
30
40
40
40
40
40
45
45
50
55
60
60
60
65
65
70
7030
30
40
40
40
40
40
45
45
50
55
60
60
60
65
65
70
70 50
50
45
45
45
45
40
35
35
35
35
32
30
25
15
15
10
1050
50
45
45
45
45
40
35
35
35
35
32
30
25
15
15
10
10 0.1
0.5
1.0
0.1
0.5
1.0
0.5
0.1
1.0
0.1
0.5
1.0
0.1
1.0
1.0
0.1
0.5
1.00.1
0.5
1.0
0.1
0.5
1.0
0.5
0.1
1.0
0.1
0.5
1.0
0.1
1.0
1.0
0.1
0.5
1.0 4.8
8.0
7.0
13.0
4.0
1.8
10.0
10.0
2.5
9.8
7.5
1.0
5.8
4.0
11.5
18.0
3.5
9.54.8
8.0
7.0
13.0
4.0
1.8
10.0
10.0
2.5
9.8
7.5
1.0
5.8
4.0
11.5
18.0
3.5
9.5 15.0
10.5
5.0
1.8
9.5
10.2
8.5
9.8
14.5
10.0
1.0
5.0
4.0
9.0
6.5
1.8
15.0
7.515.0
10.5
5.0
1.8
9.5
10.2
8.5
9.8
14.5
10.0
1.0
5.0
4.0
9.0
6.5
1.8
15.0
7.5 0.1
1.0
2.0
0.1
1.0
2.0
1.0
0.1
2.0
0.1
1.0
1.0
0.1
1.0
2.0
0.1
1.0
2.00.1
1.0
2.0
0.1
1.0
2.0
1.0
0.1
2.0
0.1
1.0
1.0
0.1
1.0
2.0
0.1
1.0
2.0 69
71
73
70
68
69
84
82
72
83
81
81
69
84
70
68
65
6769
71
73
70
68
69
84
82
72
83
81
81
69
84
70
68
65
67

상기 표 7에서 보듯이, 실험군 87, 88, 90, 91, 92 및 94는 다른 실험군에 비하여 월등하게 우수한 균환 형성율을 나타냄을 확인할 수 있었다. 상기 우수한 균환 형성율을 나타내는 실험군 87, 88, 90, 91, 92 및 94의 송이재배용 고체배지의 조성비를 분석한 결과, 소나무 톱밥(1) 40 내지 60%(w/w), 마사토(2) 25 내지 40%(w/w), 분말 게르마늄(3) 0.1 내지 1.0%(w/w), 미강 파쇄물(4) 1 내지 10%(w/w), 미역건조분말(5) 1 내지 10%(w/w) 및 송진(6) 0.1 내지 1.0%(w/w)를 포함하는 송이재배용 고체종균배지를 사용함이 바람직함을 알 수 있었다.
As shown in Table 7, the experimental group 87, 88, 90, 91, 92, and 94 was found to exhibit a significantly higher bacterial ring formation rate than the other experimental group. As a result of analyzing the composition ratio of the cultivation solid medium of the experimental group 87, 88, 90, 91, 92 and 94 showing the excellent ring-forming rate, pine sawdust (1) 40 to 60% (w / w), Masato (2) 25 to 40% (w / w), powdered germanium (3) 0.1 to 1.0% (w / w), rice flakes (4) 1 to 10% (w / w), seaweed dry powder (5) 1 to 10% (w / w) and rosin (6) It was found that it is preferable to use a solid seed culture medium for cultivation containing 0.1 to 1.0% (w / w).

실시예 3: 송이재배용 고체종균배지를 이용한 송이의 인공재배 방법의 효과
Example 3 Effect of Artificial Cultivation Method of Matsutake Using Solid Seedling Medium for Cultivation

특허등록 제 474136호에 개시된 송이버섯으로부터 분리한 송이 균사체를 배양하여 액체종균을 수득하고, 이를 소나무 주위에 관주하는 형태로 접종하는 단계를 포함하는, 종래의 액체종균을 이용한 송이버섯 생산방법과 본 발명의 송이재배용 고체종균배지에 배양하여 수득한 고체종균을 이용한 송이버섯의 재배방법을 균환 형성율 및 균환 면적의 측면에서 비교하였다.
A method for producing a pine mushroom using a conventional liquid spawn comprising culturing the pine mycelium isolated from the pine mushroom disclosed in Patent Registration No. 474136 to obtain a liquid spawn, and inoculating it in the form of irrigation around pine trees. The cultivation method of Matsutake mushroom using the solid spawn obtained by culturing in the solid spawn medium for cultivation of the invention was compared in terms of the formation rate and the area of the conversion.

먼저, 특허등록 제 474136호에 개시된 방법에 따라 송이 균사체를 포함하는 액체종균을 소나무에 관주하여 접종하고, 평균 균환 형성율을 산출하였다. 구체적으로, 송이(Tricholoma matsutake) SJM(KCCM 10458)의 균사체를 한천고체배지에 접종하여 25℃에서 35일간 확대배양하고, 확대배양된 송이 균사체를 TMM(Tricholoma Matsutake Medium) 액체배지(글루코스 20g/L, 효모추출물 1.5g/L 및 소이톤 1.5g/L)에 접종하여 상기 확대배양과 동일한 조건으로 계대배양한 다음, 계대배양된 송이 균사체를 액체배지(황설탕 200g/L, 콩가루 3g/L 및 옥수수 기름 3㎖/L)에 접종하고, 상기 확대배양과 동일한 조건으로 배양하여 액체종균을 수득하였다. 이어, 수득한 액체종균을 접종통에 넣고, 소나무 1주당 100㎖의 액체종균의 양으로 50주의 소나무 뿌리가 뻗어나간 토양에 관주하여 접종하며, 접종구를 수수깡으로 막고 150일간 재배한 다음, 접종된 소나무에서 균환이 형성된 소나무를 계수하여 평균 균환 형성율을 산출하고, 각 소나무로부터 형성된 균환의 평균 면적을 산출하였다.
First, according to the method disclosed in Patent Registration No. 474136, the liquid spawn containing the pine mycelium was irrigated and inoculated on pine, and the average germline formation rate was calculated. Specifically, inoculate the mycelium of Trichoma matsutake SJM (KCCM 10458) to agar solid medium and incubate at 25 ° C. for 35 days, and the expanded culture of mycelium TTRI (Tricholoma Matsutake Medium) liquid medium (glucose 20 g / L) , Inoculated with 1.5g / L yeast extract and 1.5g / L soyton, and subcultured under the same conditions as the above expansion culture, and then the cultured pine mycelium was added to the liquid medium (200g / L of sugar, 3g / L of brown sugar) 3 ml / L) of corn oil was inoculated and cultured under the same conditions as those of the expansion culture to obtain a liquid seed. Subsequently, the obtained liquid spawn is placed in an inoculation container, and the inoculation is inoculated by fertilization in the soil where 50 roots of pine root are stretched out in an amount of 100 ml of liquid spawn per week. The average pine formation rate was calculated by counting the pines in which the fungi were formed from the pine trees, and the average area of the fungi formed from each pine tree was calculated.

한편, 본 발명의 송이재배용 고체종균배지를 이용하여 배양한 송이 균사체를 소나무뿌리에 이식하여 접종하고, 평균 균환 형성율을 산출하였다. 구체적으로, 송이 SJM(KCCM 10458)의 균사체를 PDA 고체배지에 접종하여 배양하고, 실시예 2에 기재된 방법에 따라, 1차 액상배지 및 2차 액상배지를 이용한 배양을 순차적으로 수행하여 최종적으로 2차 배양물을 수득하였다. 한편, 실시예 2-4에서 결정된 바에 따라, 소나무 톱밥 5kg, 마사토 3kg, 게르마늄 50g, 미강 파쇄물 950g, 미역건조분말 950g 및 송진 50g을 혼합하고, 121℃에서 4시간동안 멸균하였으며, 이후에 45℃의 무균실에서 3일동안 숙성시켜서, 송이재배용 고체배지를 수득하였다. 그런 다음, 상기 수득한 송이재배용 고체배지에 상기 수득한 2차 배양물 50ml를 접종하고, 25℃에서 60일간 배양하여 각각의 고체종균을 수득하였다. 이어, 상기 수득한 고체종균을 소나무 1주당 200g의 양으로 50주의 소나무 뿌리에 이식하여 접종하고 150일간 재배한 다음, 접종된 소나무에서 균환이 형성된 소나무를 계수하여 평균 균환 형성율을 산출하고, 각 소나무로부터 형성된 균환의 평균 면적을 산출한 다음, 종래의 액체종균을 이용하는 방법에 따라 산출된 평균 균환 형성율 및 평균 균환면적과 비교하였다(참조: 표 8).
On the other hand, the pine mycelium cultured using the pine seedling medium for cultivation of the present invention was inoculated by inoculation into pine roots, and the average bacterial ring formation rate was calculated. Specifically, inoculated and cultured mycelium of pine SJM (KCCM 10458) in PDA solid medium, and according to the method described in Example 2, the culture using the first liquid medium and the second liquid medium was carried out sequentially to finally Tea cultures were obtained. Meanwhile, as determined in Examples 2-4, pine sawdust 5kg, masato 3kg, germanium 50g, rice crushed rice 950g, seaweed dry powder 950g and rosin 50g were mixed, sterilized for 4 hours at 121 ℃, then 45 ℃ After aging for 3 days in a sterile chamber of to obtain a solid medium for cultivation of pine. Then, 50 ml of the obtained secondary culture was inoculated into the obtained pine cultivation solid medium and incubated at 25 ° C. for 60 days to obtain each solid seed. Subsequently, the obtained solid spawn was inoculated by 50 g of pine roots in an amount of 200 g per pine tree, inoculated and cultivated for 150 days, and then the average fungal formation rate was calculated by counting the pines formed with the fungal rings from the inoculated pines. The average area of the fungal rings formed from pine trees was calculated, and then compared with the average cell formation rates and the average fungal area calculated according to the conventional method using liquid spawn (see Table 8).

액체종균 또는 고체종균을 이용한 송이 균사체의 접종에 따른 균환 형성율 및 균환면적Growth Rate and Growth Area According to Inoculation of Pine Mycelium with Liquid or Solid Spawn 종 균Spawn 평균 균환 형성율(%)Average Cycle Formation Rate (%) 평균 균환면적(㎠)Average germination area (㎠) 액체종균Liquid spawn 34%34% 5858 고체종균Solid spawn 86%86% 520520

상기 표 8에서 보듯이, 동일한 송이 균사체를 사용하더라도, 종래의 액체종균을 이용하여 소나무에 접종할 경우보다는, 본 발명의 고체종균을 이용하여 소나무에 접종할 경우에 평균 균환 형성율과 평균 균환면적이 현저하게 증가함을 알 수 있었다. As shown in Table 8, even if the same pine mycelium is used, the average cell formation rate and the average cell area are inoculated when inoculating the pine tree using the solid seed of the present invention, rather than inoculating the pine tree using the conventional liquid spawn. This markedly increased.

이처럼 동일한 송이 균사체를 사용하였음에도 불구하고, 평균 균환 형성율과 평균 균환면적에 차이가 발생하는 이유는, 소나무의 뿌리에 접종된 송이 균사체 주위에 잔류하는 배지량의 차이 때문인 것으로 파악되었다. 구체적으로, 액체종균을 사용할 경우에는 액체종균에 포함된 액상배지성분의 대부분이 소나무 뿌리 주위의 토양으로 확산되어, 소나무의 뿌리에 접종된 송이 균사체 주위에 거의 잔류하지 않으므로, 외부의 환경조건으로부터 송이 균사체를 보호하지 못하고, 송이 균사체에 지속적으로 영양을 공급할 수도 없는 반면, 고체종균을 사용할 경우에는 고체종균에 포함된 고체배지성분의 대부분이 소나무 뿌리 주위의 토양으로 확산되지 않고, 소나무의 뿌리에 접종된 송이 균사체 주위에 거의 잔류하므로, 외부의 환경조건으로부터 송이 균사체를 보호할 뿐만 아니라, 송이 균사체에 지속적으로 영양을 공급할 수 있으므로, 송이 균사체의 생존성이 향상되고 이로 인하여 송이 균사체가 소나무 뿌리에 접종될 가능성이 증대되며, 토양에서 송이 균사체가 더욱 활발하게 증식하여, 결과적으로 고체종균을 사용할 경우에는 평균 균환 형성율과 평균 균환면적이 현저하게 증가하는 것으로 파악되었다.
Although the same pine mycelium was used as described above, the reason for the difference in the average cell formation rate and the average cell area was found to be due to the difference in the amount of medium remaining around the pine mycelium inoculated on the roots of pine trees. Specifically, in the case of using the liquid spawn, most of the liquid medium contained in the liquid spawn is diffused into the soil around the pine root, and the pine seed inoculated at the root of the pine hardly remains around the mycelium. While it does not protect the mycelium and cannot continuously nourish the pine mycelium, when using solid spawn, most of the solid media contained in the solid spawn do not spread to the soil around the pine root, but inoculated into the root of the pine. Since it remains almost around the mycelium mycelium, it not only protects the mycelium mycelium from the external environmental conditions, but also continually feeds the mycelium mycelium, which improves the viability of the mycelium mycelium and inoculates the pine mycelium into the roots. Are more likely to occur, and more As a result of the active growth, it was found that the average cell formation rate and average cell area increased significantly when using solid spawn.

실시예 4: 송이의 생산
Example 4 Production of Cluster

상기 실시예 3에서 보듯이, 본 발명의 고체종균을 사용할 경우에는 종래의 액체종균을 사용할 경우보다도 균환 형성율과 균환면적이 증가함을 확인하였는 바, 실질적인 송이의 생산량의 측면에서도 동일한 차이를 나타내는지를 확인하고자 하였다.
As shown in Example 3, it was confirmed that the use of the solid spawn according to the present invention increased the formation rate and the germination area of the cells compared with the conventional liquid spawn. To check.

상기 목적을 달성하고자, 상기 실시예 3에서 고체종균과 액체종균을 접종하여 각각의 균환이 형성된 소나무가 재배된 토양의 수분함량을 조절하여 송이를 생산하였다. 구체적으로, 균환이 형성된 소나무의 토양의 수분함량을 송이가 성장하기에 적합한 60 ~ 70%의 수준으로 유지하기 위하여, 14일동안 1일 3회 관수(10시 ~ 11시, 13시 ~ 14시 및 15시 ~ 15시 30분)하였다. 그 결과, 관수한지 10일이 경과한 날로부터 4일 동안 상품성이 있는 송이가 생산됨을 확인하였는 바, 생산된 송이의 총중량을 비교하였다(참조: 표 9).
In order to achieve the above object, inoculation of the solid spawn and the liquid spawn in Example 3 to produce a cluster by adjusting the moisture content of the soil in which the respective fungi were formed pine. Specifically, in order to maintain the moisture content of the soil of the pine where the fungi were formed at a level of 60 to 70% suitable for growing the cluster, watering three times a day for 14 days (10 to 11, 13 to 14 o'clock) And 15 to 15:30). As a result, it was confirmed that a cluster with a merchandise was produced for 4 days after 10 days of irrigation, and the total weight of the produced clusters was compared (see Table 9).

액체종균 또는 고체종균을 이용하여 생산된 송이의 총 중량(단위: kg)Total weight of clusters produced using liquid spawn or solid spawn in kg 종 균Spawn 송이의 총중량Gross weight 액체종균Liquid spawn 2.42.4 고체종균Solid spawn 31.631.6

상기 표 9에서 보듯이, 종래의 액체종균을 이용할 경우보다는, 본 발명의 고체종균을 이용할 경우에, 송이의 생산량이 증대됨을 알 수 있었다.As shown in Table 9, when using the solid spawn of the present invention, rather than using the conventional liquid spawn, it can be seen that the production of the cluster increases.

이처럼 고체종균을 이용할 경우에 송이의 생산량이 증대되는 이유는 실시예 3에서 파악한 바와 같이, 고체종균을 사용할 경우에는 균환 형성율과 균환면적이 현저하게 증가하고, 이처럼 균환 형성율과 균환면적의 증가로 인하여, 균환에서 생산되는 송이의 양이 증대된 것으로 파악되었다.
As described in Example 3, the reason why the production of clusters increased when using a solid spawn was markedly increased when the solid spawn was used, the formation rate and the area of exchange were remarkably increased. As a result, the amount of clusters produced in the fungus was found to have increased.

상기 실시예 3 및 4의 결과로부터, 본 발명의 송이재배용 고체종균배지에 송이 균사체를 접종배양하여 수득한 고체종균을 사용하여 송이를 인공재배할 경우, 종래의 액체종균을 사용하는 방법을 사용하는 것보다도 송이의 생산성이 우수함을 확인할 수 있었다.From the results of Examples 3 and 4, when artificially cultivating the cluster using a solid seed obtained by inoculating culture of the mycelium in the solid seed culture medium for cultivation of the present invention, using a conventional method using a liquid seed It was confirmed that the productivity of the cluster was better than that.

Claims

소나무 톱밥 40 내지 60%(w/w), 마사토 25 내지 40%(w/w), 분말 게르마늄 0.1 내지 1.0%(w/w), 해초건조분말 1 내지 10%(w/w), 농산물과 농산부산물의 파쇄물 1 내지 10%(w/w) 및 소나무유래 물질 0.1 내지 1.0%(w/w)를 포함하는 송이재배용 고체종균배지.
Pine sawdust 40 to 60% (w / w), Masato 25 to 40% (w / w), powdered germanium 0.1 to 1.0% (w / w), seaweed dry powder 1 to 10% (w / w), Solid seed culture medium for cultivation of cultivation comprising 1 to 10% (w / w) of crushed products of agricultural by-products and 0.1 to 1.0% (w / w) of pine-derived material.

제 1항에 있어서,
해초건조분말은 김, 파래, 미역, 다시마, 우뭇가사리 및 이들의 조합으로 구성된 그룹으로부터 선택되는 어느 하나를 건조하고, 이를 파쇄한 것을 특징으로 하는
송이재배용 고체종균배지.
The method of claim 1,
The seaweed dried powder is dried and crushed any one selected from the group consisting of laver, green seaweed, seaweed, kelp, seaweed and combinations thereof
Solid spawn medium for pine cultivation.

제 1항에 있어서,
농산물과 농산부산물의 파쇄물은 야콘, 고구마, 감자, 미강, 대두박, 밀기울, 보릿겨 및 이들의 조합으로 구성된 그룹으로부터 선택되는 어느 하나를 파쇄한 것을 특징으로 하는
송이재배용 고체종균배지.
The method of claim 1,
The crushed products of agricultural products and agricultural by-products are characterized in that any one selected from the group consisting of yacon, sweet potato, potato, rice bran, soybean meal, bran, barley bran and combinations thereof
Solid spawn medium for pine cultivation.

제 1항에 있어서,
소나무유래 물질은 송화분, 송진, 솔방울건조분말, 솔잎건조분말 및 이들의 조합으로 구성된 그룹으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는
송이재배용 고체종균배지.
The method of claim 1,
Pine-derived material is selected from the group consisting of pine pollen, rosin, pine cone dry powder, pine needle dry powder and combinations thereof
Solid spawn medium for pine cultivation.

(ⅰ) 송이로부터 포자를 수득하고, 이를 PDA 배지에 20 내지 25℃에서 30 내지 70일간 배양하여 송이 균사체를 수득하는 단계;
(ⅱ) 상기 송이 균사체를 1차 액상배지에 접종하고, 20 내지 25℃에서 30 내지 70일간 배양하여 1차 배양물을 수득하는 단계;
(ⅲ) 상기 1차 배양물을 2차 액상배지에 접종하고, 20 내지 25℃에서 30 내지 45일간 배양하여 2차 배양물을 수득하는 단계;
(ⅳ) 상기 2차 배양물을 제 1항에 기재된 송이재배용 고체종균배지에 접종하고, 20 내지 25℃에서 45 내지 120일간 배양하여 고체종균을 수득하는 단계; 및,
(ⅴ) 상기 고체종균을 소나무 뿌리에 이식하고, 120 내지 180일간 재배하는 단계를 포함하는 송이의 재배방법.
(Iii) obtaining spores from the clusters and culturing them in PDA medium at 20 to 25 ° C. for 30 to 70 days to obtain cluster mycelium;
(Ii) inoculating the cluster mycelium on a primary liquid medium and culturing at 20 to 25 ° C. for 30 to 70 days to obtain a primary culture;
(Iii) inoculating the primary culture in a secondary liquid medium and culturing at 20 to 25 ° C. for 30 to 45 days to obtain a secondary culture;
(Iii) inoculating the secondary culture into the seedling solid seedling medium according to claim 1, and culturing the seed at 20 to 25 ° C. for 45 to 120 days to obtain a solid seed; And,
(Iii) transplanting the solid spawn in pine roots, and cultivating a cluster comprising the step of cultivating for 120 to 180 days.

제 5항에 있어서,
(ⅱ) 단계의 1차 액상배지는 설탕 20 내지 40g/L, 덱스트로스 20 내지 40g/L, 송화분 5 내지 15g/L 및 증류수를 포함하는 것을 특징으로 하는
송이의 재배방법.
6. The method of claim 5,
The first liquid medium of step (ii) comprises 20 to 40 g / L of sugar, 20 to 40 g / L of dextrose, 5 to 15 g / L of calendula, and distilled water
How to grow matsutake.

제 5항에 있어서,
(ⅲ) 단계의 2차 액상배지는 황백당 30 내지 40g/L, 송화분 3 내지 4g/L 및 증류수를 포함하는 것을 특징으로 하는
송이의 재배방법.
6. The method of claim 5,
The secondary liquid medium of step (iii) comprises 30 to 40 g / L per sulfur white, 3 to 4 g / L calcined powder, and distilled water
How to grow matsutake.

제 5항에 있어서,
(ⅳ) 단계의 상기 2차 배양물은 송이재배용 고체종균배지를 121℃에서 2 내지 6시간 동안 멸균하고, 이를 40 내지 50℃의 무균실에서 2 내지 4일동안 숙성시킨 다음 접종하는 것을 특징으로 하는
송이의 재배방법.
6. The method of claim 5,
The secondary culture of step (iii) is sterilized solid seedling medium for 2-6 hours at 121 ℃, it is aged for 2 to 4 days in a clean room at 40 to 50 ℃ and then inoculated
How to grow matsutake.

제 5항에 있어서,
(ⅴ) 단계의 재배시에 소나무 주위에 균환이 형성될 때까지 재배한 후, 균환이 형성된 토양의 수분함량을 60 내지 70%로 유지하도록 관수하는 것을 특징으로 하는
송이의 재배방법.
6. The method of claim 5,
(Iii) after cultivation until the formation of the bacteria around the pine at the time of cultivation, characterized in that irrigation to maintain the moisture content of the soil in which the bacteria were formed at 60 to 70%
How to grow matsutake.