KR20090113614A - 레티놀 유도체를 함유하는 화장료 조성물 - Google Patents

레티놀 유도체를 함유하는 화장료 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR20090113614A
KR20090113614A KR1020080039422A KR20080039422A KR20090113614A KR 20090113614 A KR20090113614 A KR 20090113614A KR 1020080039422 A KR1020080039422 A KR 1020080039422A KR 20080039422 A KR20080039422 A KR 20080039422A KR 20090113614 A KR20090113614 A KR 20090113614A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
skin
hyaluronic acid
formula
cosmetic composition
compound
Prior art date
Application number
KR1020080039422A
Other languages
English (en)
Inventor
김진은
김보라
김효정
김혁
이주동
Original Assignee
엔프라니 주식회사
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 엔프라니 주식회사 filed Critical 엔프라니 주식회사
Priority to KR1020080039422A priority Critical patent/KR20090113614A/ko
Publication of KR20090113614A publication Critical patent/KR20090113614A/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
    • C07C69/52—Esters of acyclic unsaturated carboxylic acids having the esterified carboxyl group bound to an acyclic carbon atom
    • C07C69/587—Monocarboxylic acid esters having at least two carbon-to-carbon double bonds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/67—Vitamins
    • A61K8/671—Vitamin A; Derivatives thereof, e.g. ester of vitamin A acid, ester of retinol, retinol, retinal
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2531/00—Catalysts comprising hydrides, coordination complexes or organic compounds
    • C07C2531/02—Catalysts comprising hydrides, coordination complexes or organic compounds containing organic compounds or metal hydrides

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

본 발명은 레티놀 유도체인 하기 화학식 1의 레티닐 레티노에이트를 함유하는 히알루론산 생성 유도제, 피부탄력 저하, 피부수분함유 저하 또는 피부노화의 개선 또는 예방용 화장료 조성물, 및 여드름 개선 또는 예방용 조성물에 관한 것이다.
[화학식 1]
Figure 112008030488791-PAT00001
레티닐 레티노에이트, 히알루론산, 히알루론산 합성효소 2, 여드름, 피지조절

Description

레티놀 유도체를 함유하는 화장료 조성물{Cosmetic composition comprising retinol derivatives}
본 발명은 레티놀 유도체인 화학식 1의 레티닐 레티노에이트를 함유하는 히알루론산 생성 유도제, 피부탄력 저하, 피부수분함유 저하 또는 피부노화의 개선 또는 예방용 화장료 조성물, 및 여드름 개선 또는 예방용 조성물에 관한 것이다.
하기 화학식 1의 레티닐 레티노에이트는 본 발명자들의 선행 출원인 한국특허공개번호 제10-2002-0061167호에 개시된 화합물로서 그 자체로도 주름개선 등의 효과가 우수한 비타민 A(레티놀)와 레티노산을 축합시켜 얻어진 신규한 레티놀 유도체이다.
Figure 112008030488791-PAT00002
상기 레티닐 레티노에이트는 기존의 레티놀, 레티노산 또는 기타 레티놀 유도체 등과 비교하여 화학적 안정성이 우수하고 세포에 대해 무독성이어서 인체 피부에 보다 안전하게 사용될 수 있으며, 특히 피부 주름을 개선하는 탁월한 효능이 있는 것으로 개시된 바 있다.
한편, 히알루론산(hyaluronic acid)은 N-아세틸-D-글루코사민-β(1→4)-D-글루쿠론산 β(1→3)으로 구성된 선형 다당류로서, β(1→4) 및 β(1→3) 연결을 통해 결합되는 UDP-N-아세틸글루코사민 및 UDP-D-글루쿠론산의 연속 첨가에 의해 혈장 막의 내측에서 합성된 다음, 세포외 공간으로 직접 분비된다(J. Biol. Chem., 272, 13997-14000, 1997). 히알루론산은 세포외 기질의 주요 구성성분으로, 수분 보유, 세포 간 간격 유지, 세포 성장인자 및 영양성분의 저장 및 확산에 관여할 뿐 아니라 세포의 분열과 분화, 이동 등에도 관여한다.
포유류의 체내에 존재하는 히알루론산의 50% 이상이 피부, 특히 표피의 세포 간 간격과 진피의 결체 조직에 분포한다고 보고되었고, 이러한 히알루론산은 주로 표피 각질형성세포와 진피 섬유아세포에 의해 합성되는 것으로 알려졌다(Skin pharmacol. Appl. Skin Physiol., 15, 175-183, 2002; Skin pharmacol. Appl. Skin Physiol., 17, 77-83, 2004). 인체 피부에서의 히알루론산 양의 감소는 노화에 따른 피부 탄력 저하 및 수분 함유량 감소의 직접적인 원인 중 하나라고 여겨지고 있다(J. Soc. Cosmet. Scientists Korea, 31, 97-102, 2005).
포유동물에서 히알루론산 합성효소 유전자는 서열상의 유사성이 높은 히알루론산 합성효소(hyaluronic acid synthase, HAS) 1, 2, 3이 존재하며, 특히 표피성장인자(epidermal growth factor)와 레티노산(retinoic acid)을 인체 각질세포에 처리시 히알루론산 합성효소 2(HAS 2)가 히알루론산을 생성하는데 있어서 가장 중요하다고 보고되었다(J. Invest. Dermatol., 280, 14363-14644, 2005).
한편, 여드름의 발병은 유전적, 환경적 요인 외에 체내 호르몬 분비의 변화로 인한 활발한 피지 생성, 모낭 피지선의 비정상적인 각질화(hyperkeratinization)로 인한 모공의 폐쇄, 여드름균의 활성화 및 여드름균에 의해 유발되는 피부 염증반응의 네 가지 주요 원인과 이들 간의 상호작용에 의한다. 따라서 피지 생성을 억제하는 항안드로겐제, 항염제로 작용하는 비스테로이드 소염제, 항균효과가 있는 레조시놀, 유황 및 벤조일 퍼옥사이드와 항생효과가 있는 테트라사이클린, 에리스로마이신, 클린다마이신 및 머크로라이드 등에 의한 여드름균 활성 억제 방법과 레티노산 등의 비타민 A 유도체를 이용한 치료법 등이 여드름 치료방법으로 이용되고 있다(Dermatology, 206, 29-36, 2003).
레티노산은 히알루론산 생성과 여드름을 개선하는 데에 있어서 효과적이라고 알려져 있으며(J. Invest. Dermatol., 280, 14363-14644, 2005; Eur. J. Dermatology, 7, 489-491, 1997), 특히 레틴알데하이드에 의한 히알루론산 생성에 대한 보고가 많이 되고 있다(J. Invest. Dermatol., 124, 284-287, 2005).
그러나 레티노산과 레틴알데하이드는 피부에 일시적 또는 주기적으로 자극을 유발할 수 있어 피부에 안전하게 사용하기가 어려워 화장료 등에 이용되기가 어려웠다(Dermatology, 199(suppl 1), 57-60, 1999).
따라서 피부보습 및 여드름 개선을 위하여 레티노산 또는 레틴알데하이드를 대신하여 피부에 비자극적이면서도 안정성이 향상된 원료의 개발이 절실히 요구되고 있다.
이에, 본 발명자들은 피부에 자극을 유발할 수 있는 레티노산 또는 레틴알데하이드를 대신하여 피부에 안전하게 사용될 수 있는 화합물에 대하여 지속적인 연구를 수행하였으며, 그 결과 화학식 1의 레티닐 레티노에이트가 히알루론산 합성효소 2 유전자의 발현을 증가시켜 히알루론산의 생성을 유도함으로써 피부탄력 저하 및 수분함유 저하로 인한 피부건조성 및 피부거칠음을 개선 또는 예방하고, 또한 피지분비 조절을 통해 여드름을 개선 또는 예방할 수 있음을 발견하고 본 발명을 완성하게 되었다.
따라서 본 발명의 목적은 화학식 1의 레티닐 레티노에이트를 유효성분으로 함유하는 히알루론산 생성 유도제를 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 화학식 1의 레티닐 레티노에이트를 유효성분으로 함유하는, 피부탄력 저하, 피부수분함유 저하 또는 피부노화의 개선 또는 예방용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 화학식 1의 레티닐 레티노에이트를 유효성분으로 함유하는 여드름 개선 또는 예방용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 화학식 1의 레티닐 레티노에이트는 히알루론산 합성효소 2의 발현을 증가시킴으로써 히알루론산의 생성을 유도하고, 이로 인해 피부탄력 저하, 피부 수분함유 저하 또는 피부노화를 효과적으로 개선 또는 예방하는데 이용될 수 있다.
또한 본 발명의 화학식 1의 레티닐 레티노에이트는 기존의 레티노산 또는 레틴알데하이드에 비해 세포독성이 낮으며, 레틴알데하이드에 비해 피부의 수분손실량이 적어 보다 안정적이라 할 수 있다.
또한 본 발명의 화학식 1의 레티닐 레티노에이트는 임상실험 결과 여드름을 개선시키는 효과를 나타내는바 여드름 개선 또는 예방용 조성물의 원료로서 유용하게 이용될 수 있다.
본 발명의 제1 측면은 하기 화학식 1의 레티닐 레티노에이트를 유효성분으로 함유하는 히알루론산 생성 유도제에 관한 것이다.
[화학식 1]
Figure 112008030488791-PAT00003
화학식 1의 레티닐 레티노에이트 및 그 제조방법은 한국특허공개번호 제10-2002-0061167호에 개시되어 있다.
구체적으로, 화학식 1의 레티닐 레티노에이트는
(a) 하기 화학식 2a의 화합물을 용매중에서 축합제 및 촉매의 존재하에 하기 화학식 3a의 화합물과 반응시키거나,
(b) 하기 화학식 2b의 화합물을 용매중에서 유기아민 촉매의 존재하에 하기 화학식 3a의 화합물과 반응시키거나,
(c) 하기 화학식 2c의 화합물을 용매중에서 유기아민 촉매의 존재하에 하기 화학식 3a의 화합물과 반응시킴을 특징으로 하여 제조할 수 있다.
Figure 112008030488791-PAT00004
Figure 112008030488791-PAT00005
Figure 112008030488791-PAT00006
Figure 112008030488791-PAT00007
상기식에서, X는 할로겐, p-톨루엔설포닐 또는 메탄설포닐을 나타낸다.
화학식 1의 레티닐 레티노에이트는 히알루론산 합성효소, 특히 히알루론산 합성효소 2(HAS 2)의 발현을 증가시킴으로써 히알루론산의 생성을 유도할 수 있다. 구체적으로, 본 발명에서는 인간 각질형성세포 및 무모 생쥐(hairless mouse)의 피부 표피를 대상으로 레티닐 레티노에이트의 히알루론산 생성 유도 효과를 확인하였 으며, 그 결과 상기 대상 모두에서 레티닐 레티노에이트가 히알루론산 합성효소 2 유전자의 발현을 유도하는 것이 관찰되었다.
히알루론산 합성효소 2 유전자의 발현에 따라 히알루론산이 생성되고, 히알루론산의 고유 기능인 수분 보유, 세포 간 간격 유지, 세포 성장인자 및 영양성분의 저장 및 확산, 및 세포의 분열과 분화, 이동에 따라, 피부탄력 저하 및 수분함유 저하로 인한 피부건조성 및 피부거칠음을 효과적으로 개선 또는 예방할 수 있다.
따라서 본 발명의 제2 측면은 화학식 1의 레티닐 레티노에이트를 유효성분으로 함유하는, 피부탄력 저하, 피부수분함유 저하 또는 피부노화의 개선 또는 예방용 화장료 조성물에 관한 것이다.
더욱이 화학식 1의 레티닐 레티노에이트는 기존의 레티노산 또는 레틴알데하이드에 비해 세포독성이 낮으며, 레틴알데하이드에 비해 피부의 수분손실량이 적어 보다 안정적이라 할 수 있다.
또한 계속된 연구에서, 화학식 1의 레티닐 레티노에이트가 피지분비 조절을 통해 여드름 병변을 개선시키는 것이 확인되었다. 여드름 개선 효과는 성인 여드름 환자를 대상으로 한 임상실험을 통해 확인되었다.
따라서 본 발명의 제 3측면은 화학식 1의 레티닐 레티노에이트를 유효성분으로 함유하는 여드름 개선 또는 예방용 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 화학식 1의 레티닐 레티노에이트를 유효성분으로 함유하는 조성물은 화장료 뿐만 아니라 동일한 효과를 가지는 의약품 또는 의약부외품으로도 사용 될 수 있으며, 이 경우 부형제, 활택제, 붕해제 등의 약학적으로 허용가능한 첨가제를 추가로 함유할 수 있다.
바람직하게는, 본 발명의 화장료 조성물은 수성 용액제, 유성 용액제, 크림제, 수성 겔제, 유성 겔제, 샴푸제, 밀크제, 에멀젼제, 마이크로에멀젼제, 나노에멀젼제, 로션제, 에어로졸제, 앰플제, 세럼제, 액상 비누, 클린징 바, 연고제, 무스제 및 무수 스틱제로 이루어진 군으로부터 선택된 형태로 제형화될 수 있다.
또한 본 발명의 의약품 또는 의약부외품 조성물은 경피 제제가 바람직하며, 담체로서 침투촉진제 또는 적당한 습윤제를 임의로 피부에 대한 자극성이 없는 적당한 첨가제와 함께 사용할 수 있다. 첨가제로는 피부를 통한 투여를 촉진시키고 목적하는 조성물을 제조하는데 도움이 되는 것을 선택한다. 경피 제제는 크림제, 점적제, 연고 또는 경피용 패취와 같은 다양한 방식으로 투여되며, 화학식 1의 레티닐 레티노에이트 함량은 통상적으로 단위 제형 당 0.01 내지 0.1% 이 바람직하나, 이에 한정되는 것은 아니다.
화학식 1의 레티닐 레티노에이트는 임상적인 목적으로 투여시에 단일용량 또는 분리용량으로 숙주에게 투여될 총 일일용량은 체중 1㎏ 당 0.5 내지 1.0㎎의 범위가 바람직하나, 특정 환자에 대한 특이 용량 수준은 환자의 체중, 성, 건강상태, 식이, 약제의 투여시간, 배설률, 약제혼합 및 질환의 중증도 등에 따라 변화될 수 있다.
이하, 본 발명을 하기 실시예에 의거하여 보다 구체적으로 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명에 대한 이해를 돕기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위를 제 한하는 것으로 해석되어서는 안된다.
실시예
실시예 1: 인간 각질형성세포에서의 히알루론산 합성효소 2의 발현 증가효과
인간 신생아 각질형성세포(케라티노사이트)(Cascade Biologicals, Portland,. OR)를 EpiLife Defined Growth Supplement(Cascade Biologicals, Portland,. OR)를 첨가한 EPiLife(Cascade Biologicals, Portland,. OR) 배지를 사용하여 37℃, 5% CO2 조건의 배양기에서 배양하였다. 세포가 100π 디쉬에서 약 70% 정도 자랐을 때, 레틴알데하이드(all trans retinal, 시그마사) 및 레티닐 레티노에이트(시료명: Ep-RetiPlus(RetiX8), (주)엔프라니)를 각각 1μM씩 첨가하고 EpiLife Defined Growth Supplement가 함유되지 않은 EPiLife 배지로 갈아주었다. 6 시간 후 Trizol(Invitrogen, Carlsbad, CA)을 이용하여 세포 내 mRNA를 분리하였다.
Takara RNA PCR kit(Takara Shuzo Co., Ltd. Shiga, Japan)를 이용하여 2μg 전체 mRNA를 혼합하여 전체 부피가 20μl 가 되도록 하여 45분간 RT를 실행하였다. PCR은 전체 20μl PCR 혼합물이 되도록 1ⅹ EX Taq 완충액, 20 pmol 유전자-특이적 프라이머, 2.5 mM 각각의 deoxy-NTP, 0.5 U TaKaRa ExTaq과 1μl의 RT product로 조성하였다.
인간 히알루론산 합성효소 2의 프라이머로는 다음을 사용하였다.
정방향: 5'-ATG TAC ACA GCC TTC AGA GC-3' (서열번호 1)
역방향: 5'-TCG CTT CGT AGG TCA TCC AC-3' (서열번호 2)
대조 유전자로서 인간 β-액틴의 프라이머로는 다음을 사용하였다.
정방향: 5'-GTG GGG CGC CCC AGG CAC CA-3' (서열번호 3)
역방향: 5'-CTC CTT AAT GTC ACG CAC GAT TTC-3' (서열번호 4)
최종 반응산물을 2% 아가로스 겔을 이용하여 100 V로 전기영동 한 뒤 자외선 램프하에서 밴드를 확인하였다. 전기영동 결과는 도 1에 나타내었다.
도 1의 결과로부터 알 수 있듯이, 레틴알데하이드 및 레티닐 레티노에이트를 각각 1μM씩 6시간 처리하였을 때 양자 모두 인간 각질형성세포에서 히알루론산 합성효소 2의 mRNA의 합성을 유도하였으며, 특히 레티닐 레티노에이트는 레틴알데하이드와 비교하여 보다 많이 히알루론산 합성효소 2의 발현을 유도하였다(레티닐 레티노에이트: 1.3 이상, 레틴알데하이드: 약 1.1).
실시예 2: 무모 생쥐 피부에서의 히알루론산 생성 유도효과
생후 6주된 암컷 무모 생쥐를 온도 22±2℃, 상대습도 40~60%의 사육조건에서 동일한 표준사료와 수분을 공급하고 1주일간 환경에 적응시킨 후 실험에 사용하였다. 레틴알데하이드 및 레티닐 레티노에이트를 용매(프로필렌 글리콜:에탄올 = 7:3)에 0.05% 가 되도록 녹인 후, 한 그룹 당 2 마리, 왼쪽 오른쪽을 나누어 50 μl의 물질을 0 시간, 24 시간에 2회 등에 발라주었다. 약물처리시간이 48시간이 지난 후 무모 생쥐를 희생시켜서 수득한 조직을 4%의 포름알데하이드에 고정시켰다. 슬라이드를 60℃에서 한 시간 반응 후 자이렌에 10분씩 2회 처리하였다. 100% 에탄올에 5 분씩 2 회, 70% 에탄올에 5 분 1회, TBS(Tris-buffered sodium) (50 mM Tris, 150 mM NaCl, pH 7.5)에 10분 방치시킨 후, 3%의 H2O2가 포함된 TBS에서 반응시켰다. TBS로 5분 3회 세척 후 Protein Block Serum-Free Ready-To-Use(Dakocytomation, Mississauga, Canada)를 사용하여 블로킹하였다.
Antibody diluent with background reducing components(Dakocytomation, Mississauga, Canada)에 바이오틴이 붙어있는 히알루론산 결합단백질(Seikagaku, Tokyo, Japan)을 조직 위에 올린 후 2시간 동안 상온에서 반응시켰다. TBS로 세척 후 Antibody diluent with background reducing components에 Horseradish 페록시다아제 스트렙트아비딘(Dakocytomation, Mississauga, Canada)을 희석하여 30 분간 상온에서 반응시켰다. TBS로 세척한 후 DAB + Substrate buffer(Dakocytomation, Mississauga, Canada) 1 ml 에 DAB + Chromogen을 넣고 잘 섞어 조직 위에 올리고 2분간 반응시켰다. 즉시 증류수에 넣어 반응을 중지시켰다. Permanent mounting medium(Dakocytomation, Mississauga, Canada)을 이용하여 슬라이드에 고정시킨 후 현미경 상에서 관찰하고 이미지를 저장하여 그 결과를 도 2에 나타내었다.
히알루론산 결합단백질은 조직상의 히알루론산과 결합한다. 조직에 갈색으로 염색된 히알루론산 결합단백질의 증가를 통해 히알루론산의 생성을 확인하였다.
도 2에서 보는 바와 같이, 레틴알데하이드 및 레티닐 레티노에이트는 양자 모두 무모 생쥐의 진피와 표피, 특히 표피에서 히알루론산의 생성을 증가시킴을 확 인할 수 있었다.
실시예 3: 무모 생쥐 피부 표피에서의 히알루론산 합성효소 2의 발현 유도효과
생후 6주된 암컷 무모 생쥐를 온도 22±2℃, 상대습도 40~60%의 사육조건에서 동일한 표준사료와 수분을 공급하고 1주일간 환경에 적응시킨 후 실험에 사용하였다. 레틴알데하이드 및 레티닐 레티노에이트를 용매(프로필렌 글리콜:에탄올 = 7:3)에 0.05% 가 되도록 녹인 후, 한 그룹 당 2 마리, 왼쪽 오른쪽을 나누어 50 μl의 물질을 0 시간, 24 시간에 2회 등에 발라주었다. 48 시간 후 무모 생쥐를 희생시켜 지방을 제거한 후 표피만을 분리하였다.
Takara RNA PCR kit(Takara Shuzo Co., Ltd. Shiga, Japan)를 이용하여 2 μg 전체 mRNA를 혼합하여 전체 부피가 20 μl 가 되도록 하여 45분간 RT를 실행하였다. PCR은 전체 20μl PCR 혼합물이 되도록 1ⅹ EX Taq 완충액, 20 pmol 유전자-특이적 프라이머, 2.5 mM 각각의 deoxy-NTP, 0.5 U TaKaRa ExTaq과 1μl의 RT product로 조성하였다.
생쥐의 히알루론산 합성효소 2의 프라이머로는 다음을 사용하고, 어닐링 온도는 60℃, 32 사이클로 설정하였다.
정방향: 5'-ACA GGC ACC TTA CCA ACA GGG TGT-3' (서열번호 5)
역방향: 5'-GCA TGC ATA GAT CAA AGT TCC CAC G-3' (서열번호 6)
대조 유전자로서 생쥐의 β-액틴의 프라이머로는 다음을 사용하고, 어닐링 온도는 60℃, 30 사이클로 설정하였다.
정방향: 5'-TGG AAT CCT GTG GCA TCC ATG AAA C-3' (서열번호 7)
역방향: 5'-TAA AAC GCA GCT CAG TAA CAG TCC G-3' (서열번호 8)
최종 반응산물을 2% 아가로스 겔을 이용하여 100 V로 전기영동 한 뒤 자외선 램프하에서 밴드를 확인하였다. 전기영동 결과는 도 3에 나타내었다.
도 3의 결과로부터 알 수 있듯이, 레틴알데하이드 및 레티닐 레티노에이트는 양자 모두 무모 생쥐의 표피에서 히알루론산 합성효소 2의 mRNA 발현을 증가시켰다.
실시예 4: 세포독성시험
의약 및 화장품에 사용되는 원료로서의 1차 안전성을 검증하고자 레티닐 레티노에이트의 세포독성시험을 레틴알데하이드 및 레티노산(all trans retinoic acid, 시그마사)과 비교하여 수행하였다. Normal human fibroblast(newborn)를 이용하여 MTT 시험법(참조: Mossman T. (1983). Rapid colorimetryc assay for cellular growth & amp;cytotoxoxity assays. Journal of Immunological Methods 65, 55~63)에 따라 세포독성을 조사하였다. 레틴알데하이드, 레티노산 및 레티닐 레티노에이트를 에탄올에 녹여 사용하였으며, 배지의 최종 에탄올 농도가 0.1%가 되게 하여 2 일간 처리하였다. 그 결과를 도 4에 나타내었다.
도 4의 결과로부터 알 수 있듯이, 레틴알데하이드(IC50 = 4.40 μM) 및 레티 노산(IC50 = 22.11 μM) 대비 레티닐 레티노에이트(IC50 = 65.05 μM)의 세포내 독성이 낮은 것을 확인할 수 있었다.
실시예 5: 피부수분손실량 측정
생후 6주된 암컷 무모 생쥐를 온도 22±2℃, 상대습도 40~60%의 사육조건에서 동일한 표준사료와 수분을 공급하고 1주일간 환경에 적응시킨 후 실험에 사용하였다. 레틴알데하이드 및 레티닐 레티노에이트를 용매(프로필렌 글리콜:에탄올 = 7:3)에 0.05% 가 되도록 녹인 후, 한 그룹 당 2 마리, 왼쪽 오른쪽을 나누어 50 μl의 물질을 0 시간, 24 시간, 2회 등에 발라주었다. 피부 각질층 장벽(barrier) 기능의 지표로서, 피부 내부로부터 피부를 통하여 외부로 유출되는 수분량인 경피수분손실(Transepidermal Water Loss: TEWL)을 측정하였다. Tewameter(Courage+Khazaka사, 독일)를 사용하여 0 시간, 24 시간, 48 시간에 TEWL을 측정하고 그 결과를 도 5에 나타내었다.
도 5에 나타난 바와 같이, 레틴알데하이드는 2회 처리시부터 확연하게 피부의 수분손실량이 증가하였으나, 레티닐 레티노에이트의 수분손실량은 용매를 처리한 군과 비슷한 양상을 보여 48시간 처리시에도 수분손실을 일으키지 않는 것을 확인할 수 있었다.
실시예 6: 여드름 개선효과
레티닐 레티노에이트의 여드름성 피부에 대한 효능을 평가하기 위하여 20명의 피험자를 대상으로 임상시험을 수행하였다. 본 실험에서 운반매체로서 사용된 일반적인 O/W 제형은 하기 방법에 따라 제조하였다.
하기 표 1에 나타낸 조성비로 1-6번 항목의 수상 파트와 7-10번 항목의 유상 파트를 각각 75-80℃까지 가열하여 완전히 용해시켰다. 수상 파트에 유상 파트를 서서히 투입한 후 75-80℃에서 호모믹서 3000rpm으로 5분간 유화시켰다. 1차 유화가 끝나면 냉각시키고 50-55℃에서 11번 항목의 레티닐 레티노에이트 및 12번 항목의 향료를 투입하고 호모믹서 3000rpm으로 3분간 2차 유화시켰다. 냉각시키고 27-30℃에서 종료하여 O/W 제형의 제품을 제조하였다.
구분 원료명 시험군 비교군
수상 파트 1. 정제수 To 100 To 100
2. 프로필렌글리콜 5.00 5.00
3. 방부제 적량 적량
4. 점증제(1) (폴리아크릴산나트륨) 적량 적량
5. EDTA-2Na 0.10 0.10
6. 유화제(2) (세테아릴 올리베이트 및 소르비탄 올리베이트) 적량 적량
유상 파트 7. 가용화제(3) (PEG-60 경화 피마자유) 적량 적량
8. 에탄올 3.50 3.50
9. 유연제(4) (PEG-12 디메치콘) 1.00 1.00
10. 유연제(5) (사이클로펜타실록산) 5.00 5.00
레티노이드 11. 레티닐 레티노에이트 0.05 -
첨가제 12. 향료 적량 적량
(1) 상품명: Cosmedia SP (Cognis사)
(2) 상품명: Olivem 1000 (B&T사)
(3) 상품명: Cremophor RH60 (Basf사)
(4) 상품명: SH3771M (Dowcorning사)
(5) 상품명: KF995 (Shinetue사)
모든 피험자는 하루에 2번 상기 제품을 8주간 사용하였다. 실험 측정은 0, 2, 4, 8주에 이루어졌으며, 전문의 평가, 기기적 평가, 피험자의 설문평가로 구성되었다. 본 시험은 레티닐 레티노에이트 조성물과 비교군 조성물로 얼굴 반반씩 이중맹검법으로 진행되었으며, 최종 피험자는 20명으로 시험 도중에도 피험자 선정 제외기준에 해당하는 자는 탈락시켰다. 피험자 선정기준은 18~40세의 신체 건강한 자, 스킨케어 제품의 일반적 사용자, 경증/경중도/여드름이 있는 자, 연구기간 동안 방문일정이 가능하고 연구지시를 따를 수 있는 자, 시험내용 등에 대해 이해하고 서면동의서에 서명한 자로서, 최근 4주 이내 전신 여드름 약물 복용한 자, 최근 2주 이내 국소 여드름 약품을 바른 경우, 임신 중이거나 수유중인 경우 등은 제외하였다. 전문의 육안평가는 0, 2, 4, 8주 차에 이루어졌으며, 평가사항은 하기 표 2의 8가지 항목으로 결정하였다. 점수가 클수록 심각한 상태를 의미한다.
육안평가 항목 점수등급
1. 전반적인 여드름 상태(Overall Acne Severity) 0~8 점
2. 전반적인 피부 상태(Overall Skin Condition/Appearance) 0~10 점
3. 여드름 병변 개수(Acne Lesion Count) 개수
4. 홍반(Erythema) 0~5 점
5. 피지분비(Sebum Secretion) 0~5 점
6. 부종(Edema) 0~5 점
7. 건조(Dryness) 0~5 점
8. 인설(Scaling) 0~5 점
20명 피험자의 평균점수의 초기값(0주)에 대비한 개선 정도를 %로 수치화하였다. 4주, 8주차 결과를 하기 표 3에 나타내었다.
육안평가 항목 4주 8주
시험군 비교군 시험군 비교군
1. 전반적인 여드름 상태 20% 13% 26% 16%
2. 전반적인 피부 상태 25% 17% 28% 14%
3. 여드름 병변 개수 15% 10% 21% 18%
4. 홍반 18% 6% 15% 9%
5. 피지분비 15% 8% 18% 8%
6. 부종 11% 8% 14% 10%
7. 건조 15% 18% 16% 18%
8. 인설 13% 15% 15% 15%
상기 표 3에서 알 수 있듯이, 본 발명의 레티닐 레티노에이트 조성물은 비교군 조성물에 비해 월등히 우수한 여드름 병변 개선 상태를 나타내었다.
도 1은 본 발명의 레티닐 레티노에이트와 비교물질인 레틴알데하이드의 인간 각질형성세포에서의 히알루론산 합성효소 2 유전자의 발현 증가효과를 비교한 것이다.
도 2는 본 발명의 레티닐 레티노에이트와 비교물질인 레틴알데하이드의 무모 생쥐 피부에서의 히알루론산 생성 유도효과를 비교한 것이다.
도 3은 본 발명의 레티닐 레티노에이트와 비교물질인 레틴알데하이드의 무도 생쥐 피부 표피에서의 히알루론산 합성효소 2 유전자의 발현 유도효과를 비교한 것이다.
도 4는 본 발명의 레티닐 레티노에이트와 비교물질인 레틴알데하이드 및 레티노산의 세포독성효과를 비교한 것이다.
도 5는 본 발명의 레티닐 레티노에이트와 비교물질인 레틴알데하이드의 피부수분손실량 측정 결과를 비교한 것이다.
<110> ENPRANI CO., LTD. <120> Cosmetic composition comprising retinol derivatives <130> PC08-0174 <160> 8 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> HH-1: forward primer for human HAS2 <400> 1 atgtacacag ccttcagagc 20 <210> 2 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> HH-2: reverse primer for human HAS2 <400> 2 tcgcttcgta ggtcatccac 20 <210> 3 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> HA-1: forward primer for human beta-actin <400> 3 gtggggcgcc ccaggcacca 20 <210> 4 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> HA-2: reverse primer for human beta-actin <400> 4 ctccttaatg tcacgcacga tttc 24 <210> 5 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> MH-1: forward primer for mouse HAS2 <400> 5 acaggcacct taccaacagg gtgt 24 <210> 6 <211> 25 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> MH-2: reverse primer for mouse HAS2 <400> 6 gcatgcatag atcaaagttc ccacg 25 <210> 7 <211> 25 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> MA-1: forward primer for mouse beta-actin <400> 7 tggaatcctg tggcatccat gaaac 25 <210> 8 <211> 25 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> MA-2: reverse primer for mouse beta-actin <400> 8 taaaacgcag ctcagtaaca gtccg 25

Claims (6)

  1. 화학식 1의 화합물을 유효성분으로 함유하는 히알루론산 생성 유도제:
    [화학식 1]
    Figure 112008030488791-PAT00008
  2. 제1항에 있어서, 히알루론산의 생성 유도가 히알루론산 합성효소 2 유전자의 발현 증가에 기인하는 히알루론산 생성 유도제.
  3. 제1항에 정의된 화학식 1의 화합물을 유효성분으로 함유하는, 피부탄력 저하, 피부수분함유 저하 또는 피부노화의 개선 또는 예방용 화장료 조성물.
  4. 제1항에 정의된 화학식 1의 화합물을 유효성분으로 함유하는 여드름 개선 또는 예방용 조성물.
  5. 제4항에 있어서, 여드름 개선 또는 예방용 화장료 조성물.
  6. 제3항 또는 제5항에 있어서, 수성 용액제, 유성 용액제, 크림제, 수성 겔제, 유성 겔제, 샴푸제, 밀크제, 에멀젼제, 마이크로에멀젼제, 나노에멀젼제, 로션제, 에어로졸제, 앰플제, 세럼제, 액상 비누, 클린징 바, 연고제, 무스제 및 무수 스틱제로 이루어진 군으로부터 선택된 형태로 제형화된 화장료 조성물.
KR1020080039422A 2008-04-28 2008-04-28 레티놀 유도체를 함유하는 화장료 조성물 KR20090113614A (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020080039422A KR20090113614A (ko) 2008-04-28 2008-04-28 레티놀 유도체를 함유하는 화장료 조성물

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020080039422A KR20090113614A (ko) 2008-04-28 2008-04-28 레티놀 유도체를 함유하는 화장료 조성물

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20090113614A true KR20090113614A (ko) 2009-11-02

Family

ID=41554920

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020080039422A KR20090113614A (ko) 2008-04-28 2008-04-28 레티놀 유도체를 함유하는 화장료 조성물

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR20090113614A (ko)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2012008767A2 (en) * 2010-07-14 2012-01-19 Paraon, Inc. Retinoid derivatives and cosmetic composition comprising the same
GB2572694A (en) * 2018-04-06 2019-10-09 Pangaea Laboratories Ltd A composition and method for stabilisation of retinoids
CN110613640A (zh) * 2019-09-05 2019-12-27 西施兰（南阳）药业股份有限公司 一种草本精华素及制备方法
CN111388348A (zh) * 2020-04-17 2020-07-10 长沙黛西生物科技有限公司 组合物及其应用、化妆品组合物及其制备方法

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2012008767A2 (en) * 2010-07-14 2012-01-19 Paraon, Inc. Retinoid derivatives and cosmetic composition comprising the same
WO2012008767A3 (en) * 2010-07-14 2012-04-26 Paraon, Inc. Retinoid derivatives and cosmetic composition comprising the same
GB2572694A (en) * 2018-04-06 2019-10-09 Pangaea Laboratories Ltd A composition and method for stabilisation of retinoids
US10864148B2 (en) 2018-04-06 2020-12-15 Pangaea Laboratories Ltd. Compositions and methods for stabilization of retinoids
GB2572694B (en) * 2018-04-06 2023-05-24 Pangaea Laboratories Ltd A composition and method for stabilisation of retinoids
CN110613640A (zh) * 2019-09-05 2019-12-27 西施兰（南阳）药业股份有限公司 一种草本精华素及制备方法
CN111388348A (zh) * 2020-04-17 2020-07-10 长沙黛西生物科技有限公司 组合物及其应用、化妆品组合物及其制备方法
CN111388348B (zh) * 2020-04-17 2022-11-25 长沙黛西生物科技有限公司 组合物及其应用、化妆品组合物及其制备方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CA2636960C (en) Pharmaceutical composition comprising a specific inhibitor of hedgehog/smoothened signaling and a corticosteroid
US8685391B2 (en) Skin care compositions
WO1999059580A1 (fr) Agents preventifs/therapeutiques pour les affections cutanees
JPWO2005044205A1 (ja) 毛髪の太毛化の方法及び組成物
KR101938548B1 (ko) 마이크로 ｒｎａ를 포함하는 색소형성유전자 발현조절용 조성물
KR20090113614A (ko) 레티놀 유도체를 함유하는 화장료 조성물
CN106794192B (zh) 包含齐墩果酸衍生物及其药学上可接受的盐的用于防止脱发或促进毛发生长的组合物
KR101057471B1 (ko) 레티노이드로 인한 피부자극 완화용 화장료 조성물
KR20100055734A (ko) 7,3&#39;,4&#39;-트리하이드록시이소플라본을 함유하는 피부 장벽 강화용 또는 보습용 피부 외용제 조성물
WO2022159967A1 (en) Skin care composition comprising vitamin b3 combined with two peptides
KR101640735B1 (ko) 주름 개선용 조성물
JPWO2020111047A1 (ja) 頭皮頭髪用組成物
CN110547975B (zh) 包含表松脂酚的化妆材料组合物
EP1080719A2 (en) Methods for potentiation of efficacy of topical actives by mono-acyl-(lyso)-glycerophosholipids
EP3796897B1 (en) Compounds for preventing and treating skin or mucosal affections having an inflammatory component
US20230092216A1 (en) Active principle comprising a particular extract of punica granatum and uses for preventing and/or treating acne
JP2017031133A (ja) フコキサンチンによるかゆみ抑制
US20190388501A1 (en) Glycopeptide Derivatives For Use In The Treatment And/Or Prevention And/Or Attenuation of Fibrosis Diseases
KR20230067034A (ko) 항산화, 미백, 항염증, 피부보호 등의 기능을 갖는 락토페린 유도체 제조방법 및 이를 포함하는 피부 치료용 연고 및 화장품 조성물
KR20200136737A (ko) Pq1 숙신산을 포함하는 피부 보습, 주름 개선 및 탄력 증진용 조성물
JP2023111535A (ja) セマフォリン３ａ発現促進剤
CN115484924A (zh) 透明质酸产生促进剂及胶原产生促进剂
US9795811B2 (en) Expression promoting agent for clock gene and hyaluronic acid synthase gene
CN113081878A (zh) 一种协同促进皮肤中透明质酸合成的组合及应用
TW202228676A (zh) 自噬活化劑

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E601 Decision to refuse application